INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
De ces différentes mises en œuvre de l’invention, on en voit tous les avantages : L’hydrolysat de sucres lignocellulosiques composé d’un mélange de sucres à 6 et 5 atomes de carbone est purifié en un hydrolysat contenant des sucres en C5/ C6 à haute teneur en sucre monomérique/faible teneur en sucre oligomérique: L’utilisation de ce mélange traité de sucres C5/C6 est bénéfique pour de nombreuses applications de conversion chimique (conversion du xylose en xylitol par catalyse) ou biochimiques (propagation de levures, induction de champignon pour la production d’enzymes par exemple). A noter que le traitement de jus sucrée par hydrolyse enzymatique s’effectue sur un milieu clair, il est facile de séparer les enzymes par une séparation par tamisage, par différence de taille entre les composants à séparer et celle des pores de la membrane, par exemple des membranes d’ultrafiltration, pour retirer et recycler les micro-organismes.
On peut concentrer le jus sucré traité selon l’invention, si nécessaire, jusqu’à une teneur de par exemple 50 g/kg, ce qui est d’autant plus avantageux que ce jus de sucres est utilisé pour la production des enzymes et propagation des levures. L’étape de traitement de jus est donc parfaitement intégrée à la production d’éthanol et/ou de sucres 2G.
6.2. Exemple 2 : Des variants de troncature C-terminale de la chaîne légère de BoNT /A ont été réduits dans des échantillons obtenus à partir de Conditions de Fermentation avec des Concentrations de CO2 plus élevées
Des échantillons obtenus à partir de cultures de fermentation avec des concentrations différentes de CO2 ont été analysés avec une AEX-HPLC. Deux pics correspondant à BoNT/A de 150 kDa ayant une chaîne légère pleine longueur (SEQ ID NO. 2) et BoNT/A de 150 kDa ayant une chaîne légère à extrémité C-terminale tronquée (SEQ ID NO. 4), respectivement, ont été observés ( ) et sont désignés dans cette description comme le pic de 150 kDa de pleine longueur et le pic de 150 kDa tronqué, respectivement. Le pic de 150 kDa tronqué a été élué à un instant légèrement postérieur au pic de 150 kDa pleine longueur. Les zones de pic relatives pour les deux pics sont indiquées ci-dessous dans le tableau 7.
Tableau 7. Résumé de données AEX d’étude de CO2 (%Aire), UV220 nm
150 kDa pleine longueur 150 kDa tronquée Total 150 kDa Rapport de 150 kDa (tronqué:pleine longueur) 150 kDa tronquée (% du Total 150 kDa) Fermentation de témoin de référence 3,1 12,0 15,1 3,9 79,5 % Fermentation à 25 % de CO 2 7,5 7,2 14,7 1,0 49,0 % Fermentation à 50 % de CO 2 9,4 6,1 15,5 0,6 39,4 % Fermentation à 75 % de CO 2 9,9 4,4 14,3 0,4 30,8 % Fermentation à 100 % de CO 2 10,1 3,7 13,8 0,4 26,8 %
Le tableau 5 montre que la zone de pic de 150 kDa tronquée a été diminuée tandis que la zone de pic de 150 kDa pleine longueur a été augmentée dans des échantillons obtenus à partir de cultures de fermentation avec une concentration en CO2 plus élevée. Ainsi, le rapport entre l’abondance de 150 kDa tronquée et l’abondance de 150 kDa pleine longueur, et le pourcentage de l’abondance de 150 kDa tronquée parmi l’abondance du 150 kDa total (c’est-à-dire la somme de l’abondance de 150 kDa pleine longueur et l’abondance de 150 kDa tronquée) étaient tous deux réduits dans des échantillons obtenus à partir de cultures de fermentation avec des concentrations de CO 2 supérieures.
Des échantillons obtenus à partir de cultures de fermentation avec différentes concentrations en CO 2 ont également été analysés avec LC-MS. La chaîne légère pleine longueur (SEQ ID NO. 2, poids moléculaire de ~50025) et la chaîne légère à extrémité C-terminale tronquée (SEQ ID NO. 4, poids moléculaire de ~49810) de BoNT/A ont été identifiées (Figures 2A-2E). Il a été montré que l’augmentation de la concentration en CO 2 lors de la fermentation a conduit à un taux diminué de chaîne légère à extrémité C-terminale tronquée (LC) et un niveau accru de chaîne légère pleine longueur dans les échantillons de BoNT/A produits.
Exemple 3 : Des v ariants de troncature C-terminale de la chaîne légère de BoNT /A ont été réduits dans des échantillons à partir de fermentations à basse température ou à choc à froid
Des échantillons obtenus à partir de cultures de fermentation avec des températures de fermentation différentes ont été analysés avec la AEX-HPLC. Les deux mêmes pics (150 kDa pleine longueur et 150 kDa tronquée) correspondant à 150 kDa BoNT/A ayant une chaîne légère pleine longueur (SEQ ID NO. 2) et 150 kDa BoNT/A ayant une chaîne légère à extrémité C-terminale tronquée (SEQ ID NO. 4), respectivement, ont été observés ( ). La zone de pic relative pour les deux pics est indiquée ci-dessous dans le tableau 8.
Tableau 8. Résumé de données d’étude thermique AEX (%Aire), UV220 nm
150 kDa pleine longueur 150 kDa tronquée Total 150 kDa Rapport de 150 kDa (tronqué:pleine longueur) 150 kDa tronquée (% du total 150 kDa) Fermentation de témoin de référence 3,1 12,0 15,1 3,9 79,5 % Choc à froid à 20 °C 5,7 8,7 14,4 1,5 60,4 % Choc à froid à 15 °C 6,7 8,0 14,7 1,2 54,4 % Fermentation à 25 °C 10,0 4,9 14,9 0,5 32,9 %
Le tableau 6 montre que la zone de pic de 150 kDa tronquée a été diminuée tandis que la zone de pic de 150 kDa pleine longueur a été augmentée dans des échantillons obtenus à partir de cultures de fermentation avec une température de choc à froid ou basse continue. Ainsi, le rapport entre l’abondance de 150 kDa tronquée et l’abondance de 150 kDa pleine longueur, et le pourcentage de l’abondance de 150 kDa tronquée parmi l’abondance du 150 kDa total (c’est-à-dire la somme de l’abondance de 150 kDa pleine longueur et l’abondance de 150 kDa tronquée) étaient tous deux réduits dans des échantillons obtenus à partir de cultures de fermentation avec une température de choc à froid ou basse continue.
Des échantillons obtenus à partir de cultures avec des températures de fermentation différentes ont également été analysés avec la LC-MS. La chaîne légère pleine longueur (SEQ ID NO. 2, poids moléculaire de ~50025) et la chaîne légère à extrémité C-terminale tronquée (SEQ ID NO. 4, poids moléculaire de ~49810) de BoNT/A ont été identifiées ( ). Il a été montré que la température de choc à froid ou basse continue lors de la fermentation a conduit à un taux diminué de chaîne légère à extrémité C-terminale tronquée (LC) et un niveau accru de chaîne légère pleine longueur dans les échantillons de BoNT/A produits.
6.4. Exemple 4 : Analyse SEC-HPLC d’échantillons à partir de fermentations à basse température ou de choc à froid
Des échantillons ont été équilibrés à température ambiante pendant au moins 20 minutes. 100 µL de chaque échantillon ont été transférés vers un flacon HPLC en polypropylène de 0,3 mL pour injection directe. L’analyse SEC-HPLC a été réalisée en utilisant un HPLC Waters® avec détecteur UV suivant les conditions de l’instrument fournies dans le tableau 9.
Table au 9. Conditions expérimentales SEC-HPLC
Colonne Sepax SRT SEC-500, 7,8x300 mm, 5 microns (PN 215500-7830) Température de colonne 30 °C Phase Mobile Phosphate de sodium à 40 mM + Sulfate d’ammonium à 200 mM, pH 6,5 Débit 0,8 mL/min Détection UV 220 nm Volume d’injection Régler le volume d’injection sur la base de la concentration en UV pour injecter 20 pg Température d’échantillonneur automatique 5 °C Temps d’exécution 20 minutes
Lorsque la densité optique du milieu de culture à 540 nm est de 1,8 ± 1,0 AU, le contenu entier de la bouteille de 1 L (environ 400 mL) est transféré vers un fermenteur de production de 20 L contenant un milieu de fermentation APF ajusté avec une stérilisation d’hydroxyde de sodium 1 N et/ou de lʼacide chlorhydrique 1 N post-vapeur à pH 7.3, un milieu de fermentation composé de 3,25 % p/v de SPTII, d’extrait de levure à 1,2 % p/v, 1,5 % p/v de glucose stérile (ajouté après stérilisation ; stérilisation, par exemple à environ 122 °C pendant 0,5 heure). La température et l’agitation sont contrôlées respectivement à 35 °C ± 1 °C et 70 tr/min. Le recouvrement d’azote est fixé à 12 slpm et la pression d’espace de tête réglée à 5 psig pour maintenir un environnement anaérobie pour la croissance cellulaire. Le pH de fermentation et la densité cellulaire sont surveillés par des sondes de turbidité à pH et en ligne, respectivement. Les trois phases de la fermentation de production comportent des phases de croissance exponentielle, stationnaire et autolyse. L’autolyse cellulaire, qui libère le complexe BoNT/A actif dans le milieu de culture, est observée de manière constante entre 35 heures et la fin de la fermentation. À la fin de la fermentation, la culture est refroidie à 25 °C pour la récolte.
6.6.3. Étapes en aval (Purification) Les étapes en aval comportent la purification par une colonne de chromatographie, deux colonnes de chromatographie, ou trois colonnes de chromatographie (par exemple, capture de la neurotoxine botulinum sur colonne d’échange d’anions, élution de la colonne et séparation ultérieure des impuretés par polissage sur une colonne d’échange de cations, et de préférence (dans le procédé trois colonnes), passage d’éluant contenant de la neurotoxine botulique souhaitée à travers une troisième colonne, de préférence une colonne d’interaction hydrophobe ( par exemple chromatographie), avant (de préférence) ou après le procédé à deux colonnes), suivie dʼune concentration et dʼun échange de tampon en utilisant une filtration à flux tangentiel (TFF), et une réduction de la biocharge ( par exemple par filtration supplémentaire en utilisant un filtre de 0,2 µm) à un complexe de neurotoxine botulique de type A pour le stockage à froid, de préférence le gel, et un éventuel mélange en une composition pharmaceutique de complexe de neurotoxine botulique de type A. La séquence des étapes de chromatographie et de filtration est destinée à éliminer les impuretés liées au procédé et au produit, à éliminer les agents fortuits potentiels et à contrôler la concentration de complexe de neurotoxine botulinum de type A et une matrice tampon de la neurotoxine botulinum de type A finale pour fournir une substance médicamenteuse plus stable.
Dans ce premier mode de réalisation de l’exemple de procédé en aval à trois colonnes, la première étape de chromatographie du procédé aval utilise une résine de chromatographie d’échange d’anions POROS® 50HQ conditionnée dans une colonne de diamètre intérieur d’environ 8 cm et une hauteur de colonne d’environ 15 cm. L’ensemble de l’opération de colonne POROS® 50HQ est complété à température ambiante, et le flux est dans la direction descendante. Le complexe de neutoroxine botulinum de type A est élué de la colonne d’anions en utilisant un changement d’étape de pH où les composants plus chargés négativement tels que les acides nucléiques (par exemple, les ADN et les ARN) et d’autres protéines de cellules hôtes restent liées à la colonne d’échange d’anions.
Des caractéristiques de l’étape d’échange d’anions sont : utilisation de la colonne POROS® 50HQ à l’aide d’hydroxyde de sodium 0,1 N pendant un temps de contact minimum de 30 minutes (au moins environ 3 volumes de colonnes, à 230 cm/heure). La colonne est ensuite équilibrée avec un tampon phosphate de sodium 50 mM, pH 6,5 (au moins 5 volumes de colonne). Ensuite, le matériau ultra-filtré et dilué clarifié (à savoir le lysat traité de matériau de fermentation APF) est chargé à 230 cm/heure sur la colonne d'échange d’anions POROS® 50HQ, suivi d’un lavage avec au moins environ 20 volumes de colonnes de phosphate de sodium 50 mM, pH 6,5 à 230 cm/heure jusqu’à ce que l’absorbance à 280 nm d’effluent colonne diminue à 0,10 AU, puis en éluant avec 50 mM d’acétate de sodium pH 4,8 à 230 cm/heure. Le regroupement de produit est collecté, lorsque l’absorbance à 280 nm (A 280 ) augmente à au moins environ 0,15 AU et à travers le maximum de pic à égale ou inférieure à environ 0,2 AU sur le bord de fuite, dans un récipient contenant 1 volume de colonne de 50 mM d’acétate de sodium, pH 4,8. Ce regroupement d’élution est stocké à environ 2 °C à environ 8 °C jusqu’à 48 heures.
Des caractéristiques de l’étape d’échange de cations sont : utilisation de la colonne POROS® 20HS à l’aide d’une solution d’hydroxyde de sodium 0,1 N pendant un temps de contact minimum de 30 minutes (au moins environ 3 volumes de colonnes, à 230 cm/heure). La colonne est ensuite équilibrée avec un tampon acétate de sodium 50 mM, pH 4,8 (au moins environ 5 volumes de colonne). Ensuite le regroupement de produit POROS® 50HQ (collecté comme décrit ci-dessus, fraîche ou de réfrigération) est chargé sur la colonne POROS® 20HS. La colonne est ensuite lavée avec un tampon acétate de sodium 50 mM pH 4,8 (au moins environ 3 volumes de colonnes) puis lavée à nouveau avec un tampon acétate de sodium 50 mM, chlorure de sodium 150 mM, pH 4,8. Le complexe de neurotoxine botulinum de type A est élué de la colonne POROS® 20HS avec un tampon acétate de sodium 50 mM, chlorure de sodium 250 mM, pH 4,8 à 200 mL/min, l’éluat est dévié dans un sac de collecte de bioprocédé (contenant 1 volume de colonne de 50 mM NaH 3 C 2 O 2 , pH 4,8) lorsque l’A 280 augmente jusqu’à environ ≥ 0,1 AU par le maximum de pic jusqu’à ce que l’A 280 du bord de fuite du pic d’élution diminue à une valeur de bord de fuite ≤ 0,1 AU. Le regroupement de produit POROS® 20HS est stocké dans le sac de collecte à température ambiante jusqu’à environ 6 heures.
Le patin peut présenter en particulier une forme aéraulique. Ceci permet, par des phénomènes de dépression et de surpression de part et d’autre du patin, l’augmentation d’un jeu entre la virole cylindrique et le joint annulaire hydrostatique lorsqu’ils se rapprochent l’un de l’autre, et à l’inverse, la diminution du jeu entre la virole cylindrique et le joint annulaire hydrostatique lorsqu’ils s’éloignent l’un de l’autre.
Le joint annulaire hydrostatique est de préférence réalisé dans un matériau métallique.
Le premier matériau peut également présenter une résistance à l’abrasion supérieure à la résistance à l’abrasion du matériau de l’extrémité radialement interne 823 du joint annulaire hydrostatique 822 en vis-à-vis de la couche annulaire 812.
Une partie 814 de la virole cylindrique 811 s’étendant longitudinalement depuis l’une jusqu’à l’autre des deux rangées annulaires d’aubes mobiles 810 est notamment réalisée dans un premier matériau présentant une dureté supérieure à la dureté du second matériau. Autrement dit, la partie 814 de la virole cylindrique 811 réalisée dans le second matériau relie les deux rangées annulaires d’aubes mobiles. Le second matériau peut notamment être adapté pour assurer la transmission mécanique d’un couple entre les deux rangées annulaires d’aubes mobiles 810.
Le second matériau peut présenter une résistance à l’abrasion inférieure à la résistance à l’abrasion du premier matériau.
Le second matériau peut notamment être un acier, un alliage base nickel ou à base cobalt.
Le premier matériau et le deuxième matériau présentent en particulier des caractéristiques de résistance mécanique et de tenue en température cohérentes avec les conditions thermomécaniques de fonctionnement de la turbomachine.
La couche annulaire 812 peut présenter une dimension longitudinale L1 supérieure à une dimension longitudinale L2 du joint annulaire hydrostatique 822 selon l’axe longitudinal X. Une telle caractéristique permet d’assurer que le joint annulaire hydrostatique 822 puisse être en vis-à-vis radial de la couche annulaire 812 même en cas de mouvement longitudinal relatif entre la virole cylindrique 811 et la rangée annulaire d’aubes statoriques 820. Ce mouvement longitudinal relatif est couramment désigné chariotage. Le chariotage peut se produire dans différentes phases de fonctionnement de la turbomachine.
En référence à la , la virole cylindrique 811 peut présenter un évidement annulaire 813 destiné à recevoir la couche annulaire 812. En particulier, l’évidement annulaire 813 et la couche annulaire 812 peuvent être de même épaisseur. Autrement dit, la couche annulaire 812 peut ne pas rajouter de surépaisseur à la virole cylindrique 811.
En référence à la , la couche annulaire 812 peut former une saillie par rapport à une première surface radialement externe 815 de la virole cylindrique 811. La première surface radialement externe 815 de la virole cylindrique 811 peut notamment correspondre à une surface la plus radialement à l’intérieur d’une périphérie radialement externe de la virole cylindrique 811. Par exemple, la couche annulaire 812 peut former un anneau c’est-à-dire s’étendre sur 360°. La couche pourrait être partiellement logé dans la virole et partiellement formée en saillie par rapport à la surface externe de la virole.
La couche annulaire 812 peut présenter une épaisseur radiale h de manière à offrir une résistance mécanique suffisante à la couche annulaire en cas de contact entre la virole cylindrique et le joint annulaire hydrostatique.
Selon un autre aspect, il est décrit un procédé de fabrication de l’ensemble 100 tel que précédemment décrit. Le procédé comprenant les étapes suivantes : - la mise en place de la couche annulaire 812 sur la virole cylindrique 811, - l’usinage d’une face radialement externe 816 de la couche annulaire 812.
Le procédé permet alors de s’assurer que la couche annulaire 812 respecte les contraintes dimensionnelles, de tolérances géométriques, et d’état de surface de la virole cylindrique 811.
Il est maintenant fait référence à la représentant schématiquement une coupe partielle d’un ensemble 900 pour turbomachine d’axe longitudinal selon le présent document, et deux vues agrandies de l’ensemble. De préférence, un tel ensemble est mis en œuvre dans une turbine, notamment une turbine basse pression, d’une turbomachine telle que précédemment décrit en référence à la . Le présent document concerne aussi tout type de turbomachine comprenant une telle turbine, par exemple un turbopropulseur ou un turboréacteur pour avion.
L’ensemble 900 comprend une virole 931 destinée à être entrainée en rotation autour de l’axe longitudinal X et un étage statorique 920 s’étendant autour de l’axe longitudinal X et radialement à l’extérieur de la virole 931. La virole 931 peut notamment présenter une forme cylindrique, au moins sur une portion longitudinale de la virole. La virole 931 est en particulier dépourvue de léchettes. L’ensemble 900 peut aussi comprendre deux rangées annulaires d’aubes mobiles 930 destinées à être entrainées en rotation autour de l’axe longitudinal X, les deux rangées annulaires d’aubes mobiles 930 étant disposées longitudinalement de part et d’autre de la rangée annulaire d’aubes statoriques 920 et reliées entre elles par la virole 931.
L’étage statorique 920 comporte une rangée annulaire d’aubes statoriques 921. Plus précisément, la rangée annulaire d’aubes statoriques 921 comprend une plateforme annulaire radialement externe et une plateforme annulaire radialement interne 922 entre lesquelles s’étendent une pluralité de pales. La rangée annulaire d’aubes statoriques 921 comporte une cloison radiale 923 laquelle s’étend radialement vers l’intérieur depuis la plateforme annulaire radialement interne 922.
Exemple 2 : Rendement de dépôt de l’aérosol dans les voies respiratoires
Dans cet exemple, l’efficacité de dépôt de l’aérosol (rendement de nébulisation) dans les voies respiratoires en utilisant un système selon l’invention est mesurée. Le liquide à nébuliser est une solution radioactive.
Le système de l’invention utilisé est le même que dans l’exemple 1.
Le système est utilisé sur un modèle durant 10 minutes. A la fin de la séance de nébulisation, l’efficacité de dépôt de l’aérosol dans les voies respiratoires du modèle est mesurée par imagerie scintigraphique.
La montre un dépôt satisfaisant dans les voies respiratoires. Ainsi, cela montre que l’aérosol est bien délivré dans les voies respiratoires.
REFERENCES NUMERIQUES 100 – Dispositif de nébulisation // 111 – Réservoir // 113 – Buse de gaz // 113o – Première ouverture // 120 – Distributeur // 130 – Buse de nébulisation // 130o – Deuxième ouverture // 131 – Zone de nébulisation // 132 – Canal gaz // 134 – Canal liquide // 137 – Déflecteur // 200 – Source de gaz humide // 210 – Dispositif d’humidification // 215 – Tuyau // 217 – Tuyau // 220 – Source de gaz // 420 – Flux de gaz // 440 – Flux de gaz humide d’humidité contrôlée // 460 – Aspiration du liquide par effet Venturi // A – Angle du distributeur // Z – Axe de nébulisation
Titre de l’invention Installation de tri de colis avec des sorties de tri équipées de toboggans
L’invention se place dans le domaine du tri de colis et concerne plus particulièrement une installation de tri comprenant un convoyeur de tri pour colis conçu pour convoyer les colis en série selon une certaine direction de convoyage et des sorties de tri réparties sous le convoyeur de tri conçues pour recevoir chacune un réceptacle de tri dans une position de chargement dans laquelle les colis peuvent être déchargés par gravité depuis le convoyeur de tri en fonction d’une certaine information de tri.
De nombreuses installations de tri de colis utilisent aujourd’hui des convoyeurs de tri capables de convoyer et trier les colis à très haute vitesse.
Parmi ces installations de tri certaines comprennent des sorties de tri agencées sous le convoyeur de tri chacune équipée d’un réceptacle de tri dans lequel les colis triés depuis le convoyeur de tri chutent par gravité.
Pour cela, les convoyeurs de tri de colis s’étendent entre de 2 et 4 mètres de hauteur par rapport au sol avec des réceptacles de tri qui sont quant à eux situés à hauteur ergonomique pour faciliter la manutention par les opérateurs, généralement à 1 mètre de hauteur.
La hauteur de chute des colis dans les réceptacles de tri est donc importante et provoque régulièrement la détérioration des colis lorsqu’ils entrent en contact avec le réceptacle de tri.
Dans le but de préserver l’intégrité des colis, le document FR3112703 décrit l’utilisation de réceptacles de tri à fond élastique permettant d’amortir la chute des colis.
Toutefois, ce type de solution est dédiée à des réceptacles de tri avec une grande embase par rapport à la taille des colis.
Ces réceptacles sont donc volumineux et occupent de fait un espace important lorsqu’ils ne sont pas en position de chargement sous les sorties de tri. En effet, les réceptacles vides sont stockés temporairement à proximité des sorties de tri ce qui augmente fortement l’emprise au sol de l’installation de tri.
Les données de chromatographie ont été traitées avec le logiciel Waters® Empower 3. L’espèce de poids moléculaire plus élevée a été éluée plus tôt que les plus basses. Tous les pics non présents dans l’analyse du tampon ont été intégrés. L’aire de pic relative de chaque pic a été rapportée.
Les données SEC (%Aire) à UV220 nm sont montrées ci-dessous dans le Tableau 10.
HCP ( Fermentation de témoin de référence AEC 15,2 Choc à froid à 20 °C 0,0 Choc à froid à 15 °C 1,5 Fermentation à 25 °C 31,3 Fermentation de témoin de référence CEC 0,0 Choc à froid à 20 °C 0,0 Choc à froid à 15 °C 0,0 Fermentation à 25 °C 3,6
Le Tableau 10 montre que le pourcentage de la protéine de cellule hôte (HCP) a été réduit à la fois dans des conditions de choc à froid de 20 °C et 15 °C par comparaison avec la condition de fermentation de témoin de référence après la purification de colonne d’échange d’anions (AEC) unique, alors que la condition de fermentation à froid continue de 25 °C avait un pourcentage plus élevé de HCP par comparaison avec le témoin de référence. Après le procédé de purification à deux colonnes (à savoir AEC suivi du CEC), HCP dans la condition de fermentation à froid continue à 25 °C est supérieure à 3 % alors qu’elle est indétectable à la fois dans le témoin de référence et dans les conditions de choc à froid.
6. 5. Exemple 5 : Procédé Non APF ( Schantz ) pour obtenir une toxine Botulinum