INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
À cet effet, une banque de cellules maître de Schantz préalablement établie (MCB) est utilisée pour créer une banque de cellules de recherche APF (RCB) à partir de laquelle une nouvelle banque de cellules maîtres APF (MCB) et une banque de cellules actives ultérieure (WCB) sont générées. Une banque de cellules de recherche (RCB) est réalisée à partir d’une colonie issue de MCB de Schantz (NAPF). Pour éliminer la protéine dérivée animale du flacon MCB, les cellules sont lavées deux fois dans du milieu APF contenant 2 % p/v de SPTII (peptone de soja de type II), 1 % p/v d’extrait de levure, et 1 % p/v de glucose. Les cellules sont plaquées sur milieu APF dans des conditions anaérobies strictes en utilisant une chambre anaérobie de système commandé à l’atmosphère modulaire (MACS). Une colonie isolée est en outre étendue et stockée dans du milieu APF contenant environ 20 % de glycérol en dessous de -135 °C.
L’APF-MCB est faite dans des conditions de GMP en élargissant le RCB en milieu APF sans oxygène (200 mL, réduit pendant un minimum de 12 heures dans une chambre anaérobie) et en culture dans une chambre anaérobie MACS à 34,5 °C ±1 °C (agitée à 60 tr/min) jusqu’à ce que la OD540 de la culture atteigne 2,5 ± 1,0 AU. Du glycérol stérile est ajouté à la culture résultante à une concentration finale d’environ 20 % après quoi le mélange est transféré dans des cryoflacons à 1 mL/flacon (flacons APF-MCB). Les flacons sont surgelés dans de l’azote liquide, puis stockés en dessous de -135 °C. Une APF-WCB est réalisée en conditions GMP par extension comme ci-dessus. Les banques de cellules APF résultantes sont caractérisées pour une identité, une pureté, une viabilité et une stabilité génétique.
6.6.2. Étapes en amont (culture et fermentation) Les procédés de l’exemple 6 présentent deux étages généraux : un étage amont et un étage aval. L’étage amont comporte l’expansion d’une lignée cellulaire de départ (croissance et reproduction de bactéries de Clostridium botulinum dans un milieu de culture sensiblement APF), fermentation, récolte (élimination des débris cellulaires) pour fournir une culture clarifiée, récoltée puis concentrée et diluée. Ainsi, dans cet exemple, les étapes d’un procédé à trois colonnes donné à titre d’exemple peuvent comporter une culture, une fermentation, une filtration de récolte, une concentration, une HIC, une chromatographie de capture (anion), une chromatographie de polissage (cation), un échange de tampon, une réduction de biocharge et un remplissage de flacon.
L’étage amont comporte l’utilisation d’un milieu de culture dans une bouteille de 1 L contenant 400 mL de milieu de culture d’APF de semences (chambre anaérobie) réduite (2 % p/v de SPTII, 1 % p/v d’extrait de levure, (ajusté à pH 7,3 avec de l’hydroxyde de sodium 1 N et/ou de l’acide chlorhydrique 1 N avant autoclavage)) 1 % p/v de glucose stérile post-autoclavage de milieux de culture). Le milieu de culture (semence) est inoculé avec 400 µL d’une WCB de Clostridium botulinum décongelée. L’incubation/culture se fait à 34,5 °C ± 1,0 °C sous agitation 150 tr/min dans une chambre anaérobie.
Lorsque la densité optique du milieu de culture à 540 nm est de 1,8 ± 1,0 AU, le contenu entier de la bouteille de 1 L (environ 400 mL) est transféré vers un fermenteur de production de 20 L contenant un milieu de fermentation APF ajusté avec une stérilisation d’hydroxyde de sodium 1 N et/ou de lʼacide chlorhydrique 1 N post-vapeur à pH 7,3, un milieu de fermentation composé de 3,25 % p/v de SPTII, d’extrait de levure à 1,2 % p/v, 1,5 % p/v de glucose stérile (ajouté après stérilisation ; stérilisation, par ex. à environ 122 °C pendant 0,5 heure). La température et l’agitation sont contrôlées respectivement à 35 °C ± 1 °C et 70 tr/min. Le recouvrement d’azote est fixé à 12 slpm et la pression d’espace de tête réglée à 5 psig pour maintenir un environnement anaérobie pour la croissance cellulaire. Le pH de fermentation et la densité cellulaire sont surveillés par des sondes de turbidité à pH et en ligne, respectivement. Les trois phases de la fermentation de production comportent des phases de croissance exponentielle, stationnaire et autolyse. L’autolyse cellulaire, qui libère le complexe BoNT/A actif dans le milieu de culture, est observée de manière constante entre 35 heures et la fin de la fermentation. À la fin de la fermentation, la culture est refroidie à 25 °C pour la récolte.
Une fois que le milieu de fermentation est refroidi à 25 °C, les débris cellulaires sont séparés du complexe de neurotoxine botulique de type A contenant du lysat par filtration en profondeur, d’abord par un pré-filtre à gradient nominal de rétention de 5 à 0,9 µm pour éliminer les débris cellulaires, puis par un gradient nominal de rétention chargé positivement de 0,8 à 0,2 µm pour éliminer l’ADN (élimination jusqu’à environ 80 %). Les deux filtres sont rincés ensemble avec 20 L d’eau pour injection (WFI) avant utilisation. Un minimum de 15 L du filtrat est nécessaire pour un traitement ultérieur, et tout excès de matière est décontaminé après l’achèvement pendant le procédé du prélèvement. Le filtrat est stocké à 4 °C si non immédiatement traité par ultrafiltration.
Au sein d’une armoire de biosécurité (BSC) le filtrat issu de l’étape de récolte est concentré de 15 L à 5 ± 0,5 L en utilisant une membrane à fibre creuse, filtration à flux tangentiel (TFF) de GE Healthcare. Le matériau ultrafiltré est ensuite dilué avec du tampon phosphate de sodium à 10 mM pH 6,5 à un volume final de 20 L. Ce matériau est purifié par utilisation d’une colonne de chromatographie, deux colonnes de chromatographie ou trois colonnes de chromatographie ( voir la section Étapes en aval). Le matériau de récolte ultrafiltré dilué est stocké à 4 °C si non immédiatement traité par purification.
Il en résulte, en cas de choc violent de la tête d’un occupant du siège sur l’appui-tête, un risque de déboitement des tiges de l’entretoise et également un risque de rotation axiale desdites tiges pouvant nuire au verrouillage du boitier dans sa position de réglage en hauteur, ce qui est dangereux pour ledit occupant.
L’invention a pour but de sécuriser l’accrochage des tiges sur l’entretoise afin d’assurer au passager une sécurité optimale.
A cet effet, et selon un premier aspect, l’invention propose un appui-tête de siège de véhicule automobile, ledit appui-tête comprenant : deux tiges métalliques tubulaires parallèles s’étendant verticalement destinées à être montées en haut de dossier dudit siège, un boitier d’absorption d’énergie en matériau plastique moulé, lesdites tiges étant montées dans ledit boitier de manière à pouvoir coulisser au moins verticalement, afin de permettre un réglage en hauteur dudit boitier, une entretoise en matériau plastique moulé s’étendant transversalement, ladite entretoise présentant des parties latérales saillant vers le bas, lesdites parties latérales s’emboitant dans les extrémités supérieures desdites tiges,
ledit boitier présentant un espace de logement de ladite entretoise, ledit logement s’étendant en hauteur pour permettre à ladite entretoise de coulisser dans ledit boitier lors de son réglage, ledit appui-tête présentant en outre les caractéristiques suivantes : chacune desdites parties latérales présente deux harpons diamétralement opposés, lesdits harpons étant élastiquement déformables de manière à pouvoir être rapprochés l’un de l’autre, les extrémités libres desdits harpons formant des crochets saillant radialement vers l’extérieur, le diamètre intérieur de la tige correspondante étant dimensionné de sorte que l’emboitement de ladite partie latérale dans l’extrémité supérieure de ladite tige se fait avec rapprochement temporaire desdits harpons l’un de l’autre puis retour élastique dans leur position nominale permettant une insertion desdits crochets dans deux orifices respectifs prévus dans ladite extrémité supérieure, ladite entretoise est pourvue de deux éléments de blocage s’insérant respectivement entre lesdits harpons de chacune desdites parties latérales, de manière à les bloquer dans leur position nominale et à empêcher le dégagement desdits crochets desdits orifices.
Dans cette description, les termes de positionnement dans l’espace (bas, haut, transversal, vertical, latéral, supérieur, …) sont pris en référence au véhicule dans lequel est disposé l’appui-tête, ledit véhicule s’étendant longitudinalement selon sa longueur, transversalement selon sa largeur et verticalement selon sa hauteur.
Les termes relatifs à un repère circulaire (axial, diamétralement, radialement, …) sont considérés relativement à l’axe général d’extension d’une tige.
Avec l’agencement proposé, on minimise le risque de déboitement des tiges de l’entretoise et également un risque de rotation axiale desdites tiges pouvant nuire au verrouillage du boitier dans sa position de réglage en hauteur, ce qui est favorable à la sécurité de l’occupant du siège.
D’autres particularités et avantages de l’invention apparaîtront dans la description qui suit, faite en référence à :
qui est une représentation schématique partielle en coupe, selon un plan vertical transversal, d’un appui-tête selon une réalisation,
qui est une représentation schématique partielle en perspective semi-éclatée d’un appui-tête selon une autre réalisation,
est une vue agrandie de détail de la .
En référence aux figures, on décrit un appui-tête 1 de siège de véhicule automobile, ledit appui-tête comprenant : deux tiges 2 métalliques tubulaires parallèles s’étendant verticalement destinées à être montées en haut de dossier dudit siège, un boitier 3 d’absorption d’énergie en matériau plastique moulé, lesdites tiges étant montées dans ledit boitier de manière à pouvoir coulisser au moins verticalement, afin de permettre un réglage en hauteur dudit boitier, une entretoise 4 en matériau plastique moulé s’étendant transversalement, ladite entretoise présentant des parties latérales 5 saillant vers le bas, lesdites parties latérales s’emboitant dans les extrémités supérieures 6 desdites tiges,
ledit boitier présentant un espace 7 de logement de ladite entretoise, ledit logement s’étendant en hauteur pour permettre à ladite entretoise de coulisser dans ledit boitier lors de son réglage, ledit appui-tête présentant en outre les caractéristiques suivantes : chacune desdites parties latérales présente deux harpons 8 diamétralement opposés, lesdits harpons étant élastiquement déformables de manière à pouvoir être rapprochés l’un de l’autre, les extrémités libres desdits harpons formant des crochets 9 saillant radialement vers l’extérieur, le diamètre intérieur de la tige 2 correspondante étant dimensionné de sorte que l’emboitement de ladite partie latérale dans l’extrémité supérieure 6 de ladite tige se fait avec rapprochement temporaire desdits harpons l’un de l’autre puis retour élastique dans leur position nominale permettant une insertion desdits crochets dans deux orifices 10 respectifs prévus dans ladite extrémité supérieure, ladite entretoise est pourvue de deux éléments de blocage 13 s’insérant respectivement entre lesdits harpons de chacune desdites parties latérales, de manière à les bloquer dans leur position nominale et à empêcher le dégagement desdits crochets desdits orifices.
Selon une réalisation non représentée, le boitier 3 est garni d’un coussin.
Selon la réalisation représentée en , les éléments de blocage 13 sont sous forme de chevilles métalliques ou en matériau plastique enfoncées en force, ou encore sous forme de vis.
Ce faisant, il est possible d’assurer l’orientation angulaire souhaitée au mât (4) par le canal de ce fût fixe (7), et donc corollairement au grappin (12) selon des degrés angulaires réduits sur une plage continue de 330 degrés.
Selon une caractéristique de l’invention, des butées (20, 21) sont fixés contre les parois latérales définissant lesdits fûts. Plus précisément, ces butées se présentent sous la forme de cornières usinées, et sont solidarisées par vissage, typiquement à raison de deux butées par fût au niveau d’angles opposés en partie basse et deux butées par fût en partie haute.
Ces butées ont vocation à permettre le déploiement et le reploiement individualisé des fûts, par coopération desdites butées deux à deux : étant fixées sur l’extérieur des fûts en partie haute et sur l’intérieur des fûts en partie basse, elles permettent la dépose d’un fût sur l’autre au déploiement du mât. Leur épaisseur est adaptée au faible espace inter-fûts.
Le déploiement et le reploiement des fûts est assuré par des câbles de levage fixés à leur extrémité sur le fût intérieur, et s’enroulant à leur autre extrémité sur un treuil de levage.
Par ailleurs, et afin de favoriser le coulissement desdits fûts l’un par rapport à l’autre sans affecter le guidage, il est mis en œuvre des patins (22, 23), en l’espèce fixés par vissage sur la paroi interne des fûts en partie basse du fût, et externe en partie haute du fût, à raison de quatre patins par niveau et à l’exception du fût le plus interne (11). Dans l’exemple décrit, ces patins sont fixés sur deux parois consécutives aux angles des tubes, lesdits patins étant orientés à 90° d’un tube à l’autre pour éviter les interférences entre fûts.
Typiquement, ces patins sont réalisés en polyéthylène très haute densité, notamment connu sous la référence UHMW-PE, c’est-à-dire un polyéthylène de masse molaire supérieure à 10 6 g/mol.
Ce choix particulier de matériau constitutif des patins permet d’optimiser la résistance à l’usure desdits patins et donc corollairement du mât télescopique, y compris en suite de leur évolution dans l’eau et hors d’eau, et tenant compte en outre de leur soumission aux radiations ionisantes, de sorte que les opérations de maintenance sur le tube télescopique de l’invention s’en trouvent espacées.
Corollairement, en raison de la mise en œuvre de tels patins, on assure une réduction maximum du jeu entre les fûts, optimisant de facto la précision de positionnement du grappin et, corollairement, celle de la manutention des assemblages de combustible nucléaire. On évite en outre l’usinage en volume des tubes.
De sorte que combiné à la rotation possible du fût supérieur fixe (7), on aboutit à une machine de chargement alliant à la fois précision et optimisation du nombre de degrés de liberté en termes de manutention des assemblages de combustible nucléaire.
L’invention trouve également application pour les machines de chargement susceptibles d’être utilisées dans les nouveaux réacteurs dits SMR pour l’anglicisme « Small Modular Reactor ». Dans cette technologie, le débattement du mât de la machine de chargement est plus important, et peut typiquement atteindre 30 mètres. Dans ce cas de figure, le mât télescopique précédemment décrit est identique, à la réserve près qu’on ajoute deux fûts supplémentaires, là encore également munis des patins de guidage et des butées de même conception que ceux évoqués ci-dessus, et localisés également de manière identique.
En raison de la conception d’un tel mât, et même pour une telle longueur de débattement, on dispose toujours de la précision recherchée et de la modularité en termes de degré de liberté.
Câble électrique protégé contre la corrosion La présente invention a trait à des câbles pour le transport de l’électricité, comprenant un conducteur de neutre à base d’aluminium en contact avec un écran métallique. Elle concerne plus spécifiquement l’inhibition des phénomènes de corrosion au sein de tels câbles.
L’invention trouve en particulier des applications intéressantes dans le domaine des câbles dits "basse tension" (BT), qui sont typiquement employés pour le transport d’électricité avec une tension d’au plus 1000 V en régime alternatif et d’au plus 1500 V en régime continu. L’invention est notamment intéressante pour des câbles de ce type destinées à être employés à titre de câbles souterrains.
Les câbles électriques conçus pour le transport de l'électricité, notamment pour la basse tension, comprennent typiquement un assemblage d’au moins un conducteur de phase (et typiquement trois conducteurs de phases) et d'un conducteur de neutre. Chacun des conducteurs de phases, ainsi que le conducteur de neutre, est un élément allongé électriquement conducteur, typiquement constitué d'un fil métallique électriquement conducteur ou bien d’un ensemble de fils conducteur (par exemple réunis en toron), les conducteurs de phase étant gainés d’une enveloppe électriquement isolante.
La présente invention concerne des câbles de ce type comprenant spécifiquement un écran métallique qui entoure les conducteurs de phase et le conducteur de neutre, et où le conducteur de neutre est physiquement en contact avec cet écran métallique.
L’écran métallique est typiquement formé par un feuillard métallique, formé d’un ruban métallique conducteur enroulé autour des conducteurs sur toute leur longueur.
6. Analyse des données LC-MS/MS
Les fichiers de données LTQ-FT Xcalibur (.raw) ont été soumis au Mascot Daemon version 2.1.5 (disponible sur le World Wide Web at mascot/mascot) pour la recherche de base de données. Les paramètres de recherche utilisés pour l'analyse de la base de données sont fournis dans le tableau 10.
Tableau 10 Paramètres de recherche de base de données Mascot
Paramètre Valeur Base de données NG_SProt Enzyme trypsine Max de clivages manqués 0 Modifications fixes aucune Modifications variables Carbamidométhyl (C), déamidé (N, q), dioxydation (C), dioxydation (W), oxydation (HW), oxydation (M), trioxydation (C) 1 Masse mono-isotopique oui Tolérance des peptides ± 7 ppm Charge Peptide +1, +2, et +3 Recherche d’ions MS/MS oui Tolérance MS/MS ± 1 Da Format de données Mascot générique Instrument ESI-FTICR
1 C = cystéine, N = asparagine, Q = glutamine, W = tryptophane, M = méthionine
Pour la quantification de l'oxydation en pourcentage relative à chaque site, la zone du pic de chromatogramme d'ions extrait de chaque peptide oxydé et non oxydé correspondant a été utilisée avec la formule suivante :
Les pourcentages d'augmentation de l'oxydation de chaque échantillon (à différents résidus d'acides aminés) par rapport à la commande respective et sont calculés selon la formule suivante : % d’augmentation de l'oxydation (site n) = % d'oxydation (siten) (échantillon traité) - % d'oxydation (siten) (échantillon témoin)
R é sul ta ts et Discussion
Une étude a été effectuée pour déterminer les effets de puissance et les niveaux d'oxydation à divers acides aminés lors du traitement avec des quantités plus élevées de peroxyde d'hydrogène. Les résultats de l'analyse de la puissance des échantillons BoNT/A DS oxydés avec H 2 O 2 à des taux de 10 ppm, 50 ppm et 100 ppm (puissance relative, par rapport au témoin non oxydé) sont représentés dans la .
Les résultats CBPA de cette étude ont montré une perte en puissance en réponse au traitement avec 10 ppm de H 2 O 2 (environ 30 % de perte). Une perte supplémentaire de puissance a été observée lors du traitement avec des quantités plus élevées de H 2 O 2 avec une perte totale d'environ 70 % et 85 % de puissance après traitement avec 50 ppm de H 2 O 2 et 100 ppm de H 2 O 2 , respectivement.
Pour déterminer les sites et des quantités d’oxydation induite par H 2 O 2 de la sous-unité NT de 150 kDa du complexe de BoNT/A, les échantillons de témoin négatif et oxydés ont été digérés et les peptides obtenus ont été analysés par LC-MS/MS. Les résultats des analyses LC-MS/MS sont présentés dans la .
L'analyse par spectrométrie de masse a identifié six sites d'oxydation de méthionine primaire sur la NT de 150 kDa (ayant un pourcentage d'augmentation de l'oxydation > 20 %) : M411, M531, M602, M968, M1004 et M1144.
Les résultats de ces études démontrent que la puissance de complexe de BoNT/A peut être affectée négativement par oxydation par H 2 O 2 . La voie d'oxydation de la sous-unité NT de 150 kDa de BoNT/A par H 2 O 2 a été déterminée et comporte principalement six résidus de thionine aux positions 411, 531, 602, 968, 1004 et 1144. La montre la localisation des six résidus de méthionine les plus sujets à l'oxydation sur la 150 kDa NT.
Les résidus M411 font partie de la chaîne légère et tous les autres résidus résident dans la chaîne lourde : M531 sur la région de boucle de la chaîne lourde, M602 sur le domaine de trans-localisation de membrane, et M968, M1004, M1144 sur le domaine de liaison à la membrane.
La structure cristalline du domaine de liaison au récepteur BoNT/A en complexe avec le récepteur SV2C a été résolue (Benit et al. (2017) Sci Rep. 7:43588). Il a été démontré que l'interaction comporte des acides aminés Thr1145, Thr1146 et Ser1294 sur BoNT/A. Comme M1144 est juste avant deux de ces acides aminés, son oxydation peut provoquer une diminution de la liaison des récepteurs et donc une perte de puissance.
L’étendue de l'augmentation d'oxydation lors du traitement avec H 2 O 2 était similaire pour les six sites d'oxydation primaires ( ). Le tracé de l’augmentation moyenne en pourcentage d'oxydation des six sites d'oxydation primaires par rapport au pourcentage de perte de puissance montre une relation linéaire ( ), avec une pente de 1.1.
La fenêtre de détection FD est alors typiquement située à l’intérieur du profilé femelle 3.
De préférence et dans cet objectif, le capteur de position 4 est fixé à proximité d’une des deux extrémités longitudinales du profilé male 2 et comprend une connectique électrique 403, en particulier femelle, interne au profilé mâle, ladite connectique électrique 403 orientée vers ladite extrémité longitudinale.
La connexion électrique 403 est configurée pour la connexion d’une fiche électrique liée électriquement un câble électrique ressortant par une embouchure terminale du profilé mâle. L’embouchure terminale du profilé mâle est délimitée à l’extrémité distale du profilé mâle, entre la paroi principale 20, d’une part, et la première paroi latérale 21 et le deuxième paroi latérale 22, d'autre part.
La présente divulgation est encore relative à un siège de véhicule comprenant une glissière selon la présente divulgation dont le profilé mâle 2 est fixé à une assise du siège et le profilé femelle 3 est fixé à un plancher du véhicule. Les positions peuvent toutefois être inversées, à savoir que le profilé mâle peut être fixé au plancher et le profilé femelle à ladite assise.