INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon une autre variante de réalisation représentée à la , le rebord 32 périphérique est continu mais il est ajouré. Les ajours 40 permettent d’assurer l’évacuation de l’eau. Il est cependant possible de conserver les orifices 36 d’évacuation de l’eau dans cette variante de réalisation.
Système de captation de particules Domaine de la divulgation L’invention concerne un système de captation de particules destiné à équiper des moyens de freinage.
Etat de la technique Le document FR 3 116 001 divulgue un système de captation de particules équipant un dispositif de freinage à friction.
Le dispositif de freinage à friction comporte un disque tournant autour d’un axe et des plaquettes destinées à venir pincer et freiner le disque par friction. Lors de la phase de freinage, l’abrasion des plaquettes provoque l’émission de particules qu’il convient de filtrer et de collecter.
Pour cela, le système de captation comporte une conduite d’aspiration équipée d’un filtre et d’un ventilateur situé en aval du filtre, ladite conduite étant reliée au dispositif de freinage. De l’air et des particules sont ainsi aspirés par la conduite, l’air étant filtré par le filtre de sorte que les particules sont collectées à la surface du filtre.
Le système de captation comporte en outre des moyens de génération de vibrations, associés au filtre, et un bac de collecte situé sous le filtre.
De cette manière, il est possible de retirer la couche de particules accumulées à la surface du filtre, par vibration du filtre, les particules se détachant du filtre étant recueillies dans le bac de collecte, par gravité.
Une telle opération de décolmatage ou de nettoyage du filtre permet d’augmenter sa durée de vie et augmente le volume d’air et de particules pouvant être à nouveau filtré.
De tels moyens de génération de vibrations peuvent cependant être relativement onéreux et complexes à mettre en œuvre.
Exposé de la divulgation Pour remédier aux problèmes précités, le présent document propose un système de captation de particules destiné à équiper des moyens de freinage, comportant au moins une conduite d’aspiration de particules, une chambre de collecte dans laquelle débouche la conduite d’aspiration, ladite chambre de collecte étant équipée d’au moins un premier filtre et d’au moins un deuxième filtre aptes chacun à filtrer les particules issues de la conduite d’aspiration et débouchant dans la chambre, au moins un premier et un deuxième dispositifs de génération d’un flux d’air, aptes à générer :
- au moins un flux d’air de l’intérieur la chambre vers l’extérieur de la chambre, au travers respectivement du premier filtre et/ou du deuxième filtre, dans un mode de fonctionnement de captation, et/ou
- au moins un flux d’air de l’extérieur de la chambre vers l’intérieur de la chambre, au travers respectivement du premier filtre ou du deuxième filtre, dans un mode de fonctionnement de décolmatage,
des moyens de commande de chaque dispositif de génération d’un flux d’air.
De cette manière, dans une phase de collecte des particules, il est possible de générer un flux d’air de la chambre vers l’extérieur de la chambre, au travers du premier filtre et/ou du deuxième filtre. Les particules sont ainsi collectées sur le premier filtre et/ou sur le deuxième filtre.
Afin d’éviter une baisse des performances d’aspiration et de captation, le système de captation permet également de décolmater efficacement chacun des filtres. Pour cela, un flux d’air est généré de l’extérieur de la chambre vers l’intérieur de la chambre, au travers de l’un au moins des filtres, de façon à ce que les particules amassées à la surface du filtre se décollent du filtre correspondant et retombent dans la chambre.
Le kit « ReliaPrep™ RNA Cell Miniprep System » (Promega) est utilisé pour extraire l’ARNm en suivant le protocole donné par le fournisseur. Les ARNm sont ensuite dosés au Nanodrop® (ND-1000).
La transcription inverse des ARNm en ADNc est réalisée avec le kit «Superscript Vilo cDNA synthesis kit» (Invitrogen). Pour chaque expérience, un pool d’ADNc pur est constitué en mélangeant 2 μL de chaque échantillon. Le pool est ensuite dilué au 1 /5e, 1 / 10e, 1 / 20e et 1 / 40e pour constituer une courbe standard. Les ADNc restants sont alors dilués au 1 /5e dans de l’eau sans RNAse/DNAse.
L’amplification des ADNc est effectuée à l’aide du kit « SYBR Green I-based real-time PCR » (Roche) dans un LightCycler® 480. Les séquences des amorces utilisées sont détaillées dans le Tableau ci-dessous. L’expression relative de chaque gène dans les échantillons est déterminée par rapport à la courbe standard et par rapport au gène de ménage ( Gapdh ).
Gène Amorce Séquence Gapdh Sens 5’ AAC-TTT-GGC-ATT-GTG-GAA-GG 3’ Antisens 5’ ACA-CAT-TGG-GGG-TAG-GAA-CA 3’ Il-10 Sens 5’ TTT-TCA-CAG-GGG-AGA-AAT-CG 3’ Antisens 5’ CCA-AGC-CTT-ATC-GGA-AAT-GA 3’ Tgf-β1 Sens 5’ AGG-TTG-GCA-TTC-CAC-TTC-AC 3’ Antisens 5’ AGG-GGC-CTC-TAA-GAG-CAG-TC 3’ Tnf-α Sens 5’ AGG-CTG-TGC-ATT-GCA-CCT-CA 3’ Antisens 5’ GGG-ACA-GTG-ACC-TGC-ACT-GT 3’ Mrc1 Sens 5’ ATG-CCA-AGT-GGG-AAA-ATC-TG 3’ Antisens 5’ TGT-AGC-AGT-GGC-CTG-CAT-AG 3’ Cd36 Sens 5’ GCA-GAA-TCA-AGG-GAG-AGC-AC 3’ Antisens 5’ GAG-CAA-CTG-GTG-GAT-GGT-TT 3’
F) Étude des marqueurs de surface par cytométrie en flux
Afin d’étudier l’expression de certains marqueurs de surface, les macrophages cultivés en puits (contrôle 2D) et ceux détachés des matrices 3D sont analysés par cytométrie en flux. Les suspensions cellulaires sont centrifugées, puis les culots cellulaires sont incubés à l’obscurité 20 minutes à 4°C dans du tampon Fc block (saturation des sites non spécifiques). Le marquage est ensuite réalisé à l’obscurité pendant 15 minutes à température ambiante avec les anticorps suivants dilués dans du tampon FACS : F4/80+ FITC Biolegend), CD206 APC (Biorad) et CD86 PE (Biolegend). Puis les suspensions cellulaires sont rincées et centrifugées, avant d’être incubées avec du Live/dead violet (miltenyibiotec). Enfin les échantillons sont repris dans du 186 tampon FACS avant leur acquisition au cytomètre BD Fortessa (BD Biosciences). Les analyses sont réalisées à partir du logiciel BD FACS DVIA™ (BD Biosciences).
Tampon Fc block : tampon FACS supplémenté par 3% de sérum de souris, 3% de sérum de rat et le couple d’anticorps anti-CD16/CD32 au ½00 e
Tampon FACS : PBS supplémenté par 5% SVF et 5 mM EDTA
G) Quantification de la production des espèces réactives de l’oxygène (ROS)
La production d’espèces réactives de l’oxygène (ROS) par les macrophages ensemencés ou non dans les matrices de PEC 40/60 a été mesurée par chimioluminescence en présence de 5-amino-2,3-dihydro-1,4- phtalazinedione (luminol) à l’aide d’un luminomètre (Envision, PerkinElmer). La génération de la chimioluminescence a été surveillée en continu pendant 30 minutes après l’incubation des cellules et/ou des matrices biopolymériques avec du luminol (66 μM) puis pendant 1 heure après stimulation à l’acétate de tétradécanoylphorbol (TPA ; 100 nM). L’analyse statistique a été effectuée à l’aide de l’aire sous la courbe exprimée en nombre x secondes.
H) Etude de l’activité de l’arginase
La mesure de l’activité de l’arginase est déterminée à partir des lysats cellulaires par dosage colorimétrique de la production d’urée.
I) Protocole expérimental in vivo
Toutes les expériences sur les souris ont été réalisées dans le respect de la règlementation en vigueur concernant l’utilisation des animaux à des fins scientifiques.
Par « pétrole », on désigne tout type d’huile, à savoir huile légère comme huile lourde, voire bitumineuse. Une huile résulte généralement de la transformation naturelle de matière organique et est composée d’un mélange d’hydrocarbures. Dans la description de l’art antérieur ou de l’invention, les termes « pétrole » et « huile » sont utilisés pour désigner la même matière, à l’exception de la mention de la composition d’une émulsion ou d’une dispersion.
L’efficacité du balayage par injection d’eau est généralement améliorée par l’addition de polymères hydrosolubles. Les bénéfices attendus et prouvés de l’utilisation de polymères, au travers de la « viscosification » des eaux injectées, sont l’amélioration du balayage et la réduction du contraste de viscosité entre les fluides pour maîtriser leur ratio de mobilité dans le champ, et ce afin de récupérer les hydrocarbures rapidement et efficacement. Ces polymères augmentent la viscosité de l’eau.
Il est connu de l’homme du métier que les polymères hydrosolubles synthétiques, en particulier les polymères à base d’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique (ATBS), sont des polymères très avantageux pour augmenter la viscosité des solutions aqueuses et sont utilisés en récupération assistée. En effet, les polymères à base d’ATBS sont connues pour être tolérants aux sels divalents ainsi qu’aux hautes températures.
En plus d’augmenter la viscosité de l’eau les polymères utilisés doivent avoir une bonne filtrabilité. Les polymères possédant une mauvaise filtrabilité ont tendance à boucher la formation et ralentir voire inhiber la production d’hydrocarbures (pétrole et/ou gaz). Or, la filtrabilité se détériore lorsque le poids moléculaire du polymère augmente. Il existe donc un compromis délicat entre poids moléculaire et filtrabilité.
Les polymères ajoutés à l’eau d’injection sont généralement soumis à de longs temps de séjour dans le gisement, entre les puits injecteurs et les puits producteurs, pouvant aller de quelques mois à quelques années. Durant ce laps de temps, ils peuvent subir une dégradation thermique se traduisant par une augmentation de leur taux d’hydrolyse par conversion d’unités acrylamide ou ATBS en acrylates, ou une dégradation chimique conduisant à une rupture de chaine (baisse du poids moléculaire) par attaque radicalaire. Dans les deux cas, ces mécanismes se traduisent généralement par une diminution de la viscosité et donc par une perte de l’efficacité de balayage de la formation souterraine par la solution aqueuse de polymère injectée. Il y a donc un réel intérêt à développer des polymères plus résistants à ces processus impliqués dans tout projet de récupération assistée d’hydrocarbures (pétrole et/ou gaz).
La Demanderesse a trouvé et mis au point un procédé de récupération assistée d’hydrocarbures (pétrole et/ou gaz) mettant en œuvre des polymères hydrosolubles contenant comme monomère une forme cristalline du sel de sodium de l’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique, lesdits polymères présentant des propriétés améliorées notamment en termes de filtrabilité et de stabilité chimique et thermique.
Les meilleures performances du fluide d’injection contenant des polymères obtenus à partir de la forme cristalline du sel de sodium de l’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique permettent la réduction de la quantité de produit nécessaire et donc la réduction de la consommation globale d’eau et des émissions de gaz à effet de serre comme le CO 2 .
Plus précisément, l’invention concerne un procédé de récupération assistée d’hydrocarbures (pétrole et/ou gaz) comprenant les étapes suivantes : a) Préparation d’un fluide d’injection comprenant au moins un polymère hydrosoluble d’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique, avec de l’eau ou de la saumure ; l’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique étant, avant polymérisation, une forme cristalline du sel de sodium de l’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique ayant un diagramme de diffraction des rayons X sur poudre comprenant des pics à 11,7° ; 12,2° ; 13,2° ; 13,5° ; 15,6° ; 16,8° ; 17,8° ; 18,5° ; 19,1° ; 20,6° ; 21,4° ; 23,3° ; 25,1° ; 25,8° ; 26,9° ; 29,1° ; 29,5° ; 31,0° ; 33,0° ; 33,6° ; 34,4° ; 35,2° ; 35,9° ; 37,1° ; 38,4° ; 39,6° ; 41,1° ; 42,9° ; 45,1° ; 46,0° ; 47,2° ; 47,6° degrés 2-thêta ; b) Injection du fluide d’injection dans une formation souterraine ; c) Balayage de la formation souterraine à l’aide du fluide injecté ; d) Récupération d’un mélange aqueux et hydrocarboné (mélange comprenant de l’eau et des hydrocarbures).
De manière tout à fait surprenante, l’utilisation d’au moins un polymère hydrosoluble obtenu à partir de la forme cristalline du sel de sodium de l’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique permet le traitement efficace de formations souterraines. C’est bien l’utilisation de la forme cristalline du sel de sodium de l’acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique, dans la préparation du polymère hydrosoluble, qui confère audit polymère des propriétés particulières, permettant d’améliorer la récupération d’hydrocarbures.
Description de l’invention Par « polymère », on désigne un homopolymère ou un copolymère. Un copolymère désigne un polymère obtenu à partir d’au moins deux monomères différents. Il peut donc s’agir d’un copolymère d’au moins deux monomères choisis parmi les monomères anioniques hydrophiles, les monomères cationiques hydrophiles, les monomères non ioniques hydrophiles, les monomères zwitterioniques hydrophiles, les monomères hydrophobes et leurs mélanges.
Ainsi, l’invention porte sur des macrophages pro-cicatrisants pour leur utilisation en médecine régénérative chez un sujet, lesdits macrophages cicatrisants étant sous une forme adaptée à leur administration audit sujet au moyen d’un biomatériau hybride selon l’invention. L’invention porte notamment sur des macrophages pro-résolutifs, éventuellement en combinaison avec des CSM, pour leur utilisation en médecine régénérative chez un sujet, lesdits macrophages pro-résolutifs étant sous une forme adaptée à leur administration audit sujet au moyen d’un biomatériau hybride selon l’invention.
Un sujet s’entend d’un mammifère, humain ou non humain, en besoin de traitement médical, tel que le traitement d’une plaie, notamment d’une plaie chronique. Préférentiellement, le sujet est un mammifère humain, enfant, adolescent ou adulte. Préférentiellement le sujet présente une maladie limitant les mécanismes de cicatrisation et/ou est un sujet âgé. Notamment, le sujet est un diabétique, préférentiellement un diabétique de type II. Par sujet âge, on entend un mammifère humain de 70 ans ou plus.
L’invention vise particulièrement des macrophages pro-résolutifs, éventuellement en combinaison avec des CSM, dans un biomatériau hybride selon l’invention, pour leur utilisation pour le traitement d’une plaie, notamment d’une plaie chronique.
L’invention vise également des macrophages pro-inflammatoires, éventuellement en combinaison avec des CSM, dans un biomatériau hybride selon l’invention, pour leur utilisation pour le traitement d’une plaie, notamment d’une plaie chronique.
Une telle utilisation est particulièrement adaptée pour les sujets présentant une maladie limitant les mécanismes de cicatrisation, telle qu’un diabète.
Lesdits macrophages pro-cicatrisants et/ou CSM peuvent être obtenus à partir de cellules dudit sujet telles que des monocytes sanguins, des CSM du tissu adipeux, de la moelle osseuse ou de cordon ombilical, des macrophages, des cellules de la moelle osseuse et/ou des iPS.
Avantageusement, le biomatériau tridimensionnel est sous la forme d’un pansement d’un patch, ou d’une matrice implantable.
L’invention vise également l’utilisation d’un biomatériau selon l’invention, notamment sous forme de pansement ou de matrice implantable, en médecine régénérative. Notamment, l’invention vise l’utilisation d’un tel biomatériau selon laquelle ledit biomatériau est mis en contact avec un tissu lésé, tel qu’une plaie.
L’invention vise également une méthode de traitement d’un tissu lésé selon laquelle un biomatériau tel que décrit ci-dessus est appliqué contre le tissu lésé pour favoriser la réparation dudit tissu. Notamment, l’invention vise une méthode de traitement d’une plaie, et particulièrement d’une plaie chronique, selon laquelle ledit biomatériau est appliqué contre la plaie pour favoriser la cicatrisation. Dans un tel cas, le biomatériau hybride contient avantageusement des macrophages pro-cicatrisants et notamment des macrophages pro-résolutifs, éventuellement en combinaison avec des CSM. Le biomatériau peut être appliqué sous la forme d’un pansement apte à être maintenu sur la plaie.
EXEMPLES MATERIEL ET METHODES A) Matrice
Les polymères utilisés sont un alginate « medium viscosity » commercialisé chez Sigma (référence A-2033 ; lot 051M0054V) et un chitosan « medium molecular weight » également fourni par Sigma (référence 448877 ; lot STBF8484V).
Pour l’alginate, un ratio M/G de 2,1 a été déterminé par la méthode décrite par Vilén et al. (Vilén et al., 2011). La masse moléculaire moyenne en masse (Mw) et en nombre (Mn) de l’alginate ont été déterminées par chromatographie d’exclusion stérique et sont respectivement de 193 100 et 126 900 g/mol avec un indice de polydispersité de 1,5.
Pour le chitosan, le degré de déacétylation (DDA) a été calculé en appliquant la méthode de Heux et al. (Heux et al., 2000) et a été estimé à 80% +/-5%. Les valeurs Mw et Mn obtenues par chromatographie d’exclusion stérique sont respectivement de 216 300 et 120 300 g/mol avec un indice de dispersité de 1,8.
Les matrices de PEC sont obtenues par mélange d’une solution d’alginate de concentration fixe de 3% (poids/volume) et d’une solution de chitosan avec 1,5% d’acide acétique et de concentration en chitosan variable selon le ratio de polymère final voulu dans les matrices.
Brièvement, les solutions d’alginate et de chitosan sont homogénéisées par agitation mécanique puis sont mélangées en proportions massiques équivalentes. Après l’ajout des deux polyélectrolytes, le mélange est également mis sous agitation mécanique. Le mélange final de PEC est alors mis en plaque de culture, congelé au moins 24 heures à -20°C, puis les matrices sont lyophilisées 24 heures. Les matrices de PEC sont gélifiées pendant 1 heure avec une solution de chlorure de calcium 0,1M. Les matrices sont ensuite rincées, congelées et de nouveau lyophilisées.
Ce protocole permet l’obtention d’une famille de matrices 3D de ratio alginate/chitosan allant de 80/20 à 20/80. La Figure 3 présente le cas du mélange pour obtenir une matrice de ratio 40/60.
Le circuit 42 comprend en outre un transistor 82 et une résistance 84. La résistance 84 est une résistance diffusée. La résistance 84 correspond à la résistance 12' dans le cas du mode de réalisation des figures 1A à 1C ou à la résistance 12 dans le mode de réalisation des figures 2A à 2D. Le transistor 82 est par exemple un transistor à effet de champ à grille isolée ou MOSFET. Le transistor 82 est par exemple un transistor à canal P.
Le transistor 82 et la résistance 84 sont reliés en série entre le noeud 48 et le noeud 50. Plus précisément, le transistor 82 est relié entre le noeud 48 et un noeud 86. La résistance 84 est reliée entre le noeud 86 et le noeud 50. Autrement dit, une borne de conduction du transistor 82, par exemple la source, est reliée, de préférence connectée, au noeud 48 et une autre borne de conduction du transistor 82, par exemple le drain, est reliée, de préférence connectée, au noeud 86. Une borne de la résistance 84, par exemple la borne B2 dans le cas de la résistance 12' des figures 1A à 1C ou la borne A2 dans le cas de la résistance 12 du mode de réalisation des figures 2A à 2D, est reliée, de préférence connectée, au noeud 86 et une autre borne de la résistance 84, par exemple la borne B1 dans le cas de la résistance 12' des figures 1A à 1C ou la borne A1 dans le cas de la résistance 12 du mode de réalisation des figures 2A à 2D, est reliée, de préférence connectée, au noeud 50.
Le transistor 82 est monté en diode. Autrement dit, la borne de commande du transistor 82, par exemple la grille, est reliée, de préférence connectée, au drain du transistor 82, c’est-à-dire par exemple reliée, de préférence connectée, au noeud 58.
La taille du transistor 82, c’est-à-dire le ratio largeur sur longueur du canal, est configurée pour que la tension aux bornes de la résistance 84 soit sensiblement égale à la tension aux bornes de la résistance 44. Autrement dit, la taille du transistor 82 est configurée pour que la différence de potentiel entre les bornes de la résistance 84 soit sensiblement égale à la différence de potentiel entre les bornes de la résistance 44. Par exemple, la taille du transistor est égale à la taille du transistor 46 multiplié par le quotient Q de la valeur de résistance de la résistante 44 sur la valeur de résistance de la résistance 84. Par exemple, le transistor 46 est composé d'un ou plusieurs transistors élémentaires, les transistors élémentaires étant identiques. Le transistor 82 est alors composé de Q fois plus de transistors élémentaires identiques que le transistor 46.
Le circuit 42 de génération de délai est configuré pour appliquer un délai T à un signal. Autrement dit, lorsque le signal IN prend une valeur à un instant t, par exemple une valeur binaire '1', le signal de sortie OUT prend ladite valeur à un instant t+T.
Lors du fonctionnement du circuit, le courant traversant le transistor 46 est égal à (VDD – VtP)/R, VtP correspondant à la tension de seuil du transistor 46 et R correspondant à la valeur de la résistance 44. Le courant traversant le transistor 60 est proportionnel au courant traversant le transistor 46 avec un ratio de 1/n, n étant un entier positif, les transistors 46 et 60 étant montés en miroir de courant.
Si le signal d'entrée IN a une valeur basse, c’est-à-dire une valeur correspondant à la valeur binaire '0', le transistor 62 est passant, et le condensateur 76 se décharge par l'intermédiaire du transistor 62, le courant traversant le transistor 62 étant plus important que le courant traversant le transistor 60.
Si le signal d'entrée IN a une valeur haute, c’est-à-dire une valeur correspondant à la valeur binaire '1', le transistor 62 est bloqué. Le condensateur 76 est donc chargé par l'intermédiaire du transistor 60. La tension V aux bornes du condensateur 76 suit l'équation suivante V(t) = t*(VDD – VtP)/(n*R*C), C étant la valeur de capacité du condensateur 76.
Au début de la charge du condensateur 76, la tension V est inférieure à VDD – VtP, le transistor 70 est ainsi passant et le signal de sortie OUT a la valeur binaire '0'. Lorsque V atteint la valeur VDD-VtP, c’est-à-dire lorsque t = T = n*R*C, le transistor 70 devient bloqué et le signal de sortie OUT prend la valeur binaire '1'.
Dans l'exemple de la , le circuit 42 est configuré pour que les potentiels sur les bornes A1 et B1 soient égaux entre eux et à la tension VDD – VtP et que les potentiels sur les bornes A2 et B2 soient égaux entre eux et à une tension nulle. Pour cela, les bornes A2 et B2 sont toutes deux reliées au noeud 50. De manière à assurer que les potentiels sur les bornes A1 etB1 soient égales, les densités de courant traversant les transistors 82 et 46 doivent être identiques. Plus précisément, si les transistors 46 et 82 correspondent chacun à une pluralité de transistors élémentaires identiques les uns aux autres, la densité de courant dans chacun des transistors élémentaires doit être la même. La différence de potentiel entre la résistance 44 et la résistance 84, qui correspond au caisson dans lequel est formé la résistance 44, est ainsi constante et nulle en tout point de l'interface entre les résistances 44 et 84.
Un avantage qu'il y a à utiliser une résistance selon les modes de réalisation décrits est que cela rend le délai généré indépendant de variation de la tension appliquée aux bornes de la résistance, et donc indépendant de la tension d'alimentation.
De manière plus générale, un mode de réalisation d'un circuit de polarisation des résistances diffusées telles que celles décrites en relation avec les figures 1A à 2D comprend une résistance telle que la résistance 12 du mode de réalisation des figures 1A à 1C ou que la résistance 32 du modes de réalisation des figures 2A à 2D reliée en série avec un transistor monté en diode, tel que le transistor 46, et une résistance telle que la résistance 12' du mode de réalisation des figures 1A à 1C ou que la résistance 12 du modes de réalisation des figures 2A à 2D reliée en série avec un transistor monté en diode, tel que le transistor 82.
La représente un autre circuit comprenant une résistance diffusée. Plus précisément, la représente un circuit permettant d'assurer que les tensions des résistances diffusées sont telles que décrites précédemment.