INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La culture des sphéroïdes peut se faire dans un système de culture statique ou micro-fluidique.
Avantageusement, la culture des sphéroïdes se fait avec un milieu de culture qui est supplémenté par le sérum sanguin appauvri formant un milieu de culture de reprogrammation. Le milieu de culture de reprogrammation comprend de 30 à 60% de sérum sanguin appauvri en volume par rapport au volume total du milieu de culture de reprogrammation.
De manière avantageuse, l’utilisation d’un sérum sanguin appauvri pour supplémenter le milieu de culture des sphéroïdes permet d’obtenir des sphéroïdes dépendants du donneur et également dénommés sphéroïdes reprogrammés.
Selon une possibilité préférée, le milieu de culture de reprogrammation des sphéroïdes est le MammoCult basal, commercialisé par la société StemCell. Avantageusement, le milieu de culture est complété par l’ajout de l’héparine, d’hydrocortisone, de pénicilline et streptomycine, d’amphotéricine B et d’un mélange d’antibiotiques à large spectre, préférentiellement le Primocin commercialisé par la société Invivogen. Optionnellement, le milieu MammoCult basal peut être remplacé par tous types de milieux de culture cellulaire (à titre d’exemple DMEM, MEM ou RPMI).
À titre préféré, le milieu de culture de reprogrammation est utilisé au moins pendant 3 jours pour la culture des sphéroïdes. Préférentiellement, le milieu de reprogrammation est utilisé pour toute la culture des sphéroïdes et le maintien des sphéroïdes également. Avantageusement, le milieu de culture de reprogrammation est également utilisé lors de tests sur les sphéroïdes tels que des essais de molécules ou compositions.
Avantageusement, les sphéroïdes sont reprogrammés dans un système de culture statique ou micro-fluidique pendant 3 jours par l’ajout de 30 à 60% en volume de sang humain déplété dans un milieu de culture MammoCult Basal.
Selon un aspect, le procédé selon l’invention permet l’obtention de sphéroïdes qui peuvent être utilisés pour des tests in vitro, à titre d’exemple, des tests in vitro d’évaluation des lésions hépatiques induites par des médicaments, des produits chimiques.
Ce procédé permet avantageusement d’analyser de la toxicité ou l’efficacité thérapeutique produite par une molécule chimique de synthèse ou une molécule naturelle, sur un organe ou sur une pathologie.
Avantageusement, dans le procédé selon l’invention, le sérum est préparé à partir du sang de chaque individu puis appauvri par une filtration à travers une maille de 0,45µm. Le sérum appauvri est utilisé à hauteur de 30 à 60% en volume dans un milieu de culture pour former un milieu de culture de reprogrammation pour reprogrammer les sphéroïdes pendant au moins 3 jours. Après cette étape, les sphéroïdes reprogrammés (donneur dépendant) peuvent être utilisés par exemple pour faire une analyse de la sensibilité aux médicaments.
Selon une possibilité, les sphéroïdes reprogrammés sont utilisés pour analyser la toxicité ou l’efficacité thérapeutique induite par une molécule chimique de synthèse ou naturelle, préférentiellement après une exposition de 2 jours jusqu’à 14 jours avantageusement à des concentrations multiples. La toxicité ou l’efficacité thérapeutique est déterminée par exemple par des mesures de viabilité cellulaire, des fonctions cellulaires et de la structure cellulaire.
EXEMPLES Exemple 1 : procédé d’obtention d’un sphéroïde selon l’invention
Un prélèvement sanguin de 10ml dans un tube sec est effectué sur un individu. Le sang est laissé au repos à température ambiante pendant au moins 30min avant d’être centrifugé à 1000G pendant 10min. La phase supérieure translucide (le sérum) est collectée puis filtrée à travers d’un filtre avec une maille de 0,45µm pour obtenir le sérum appauvri qui sera conservé préférentiellement à +4°C ou à -20°C pour une conservation au-delà de deux semaines. Pour la culture des sphéroïdes et notamment la reprogrammation des sphéroïdes selon l’invention, des cellules HepG2 et TWNT-1 dans les proportions 10 :1 sont mises en culture dans des plaques à fond de type U et à faible adhérence avec un milieu de culture de reprogrammation supplémenté en volume à hauteur de 50% de ce sérum appauvri. La formation et la reprogrammation des sphéroïdes se font naturellement pendant 3 jours.
La composition selon la présente invention permet d’obtenir un bon effet d’éclaircissement des fibres kératineuses sans les endommager et sans altérer leurs propriétés cosmétiques, en particulier lorsqu’elles sont utilisées pour la décoloration.
Un sujet de l’invention est également un processus de traitement des fibres kératineuses, en particulier un processus de teinture ou de décoloration des fibres kératineuses, utilisant cette composition oxydante.
Un autre sujet de l’invention est l’utilisation de cette composition oxydante pour le traitement des fibres kératineuses, en particulier la teinture ou la décoloration des fibres kératineuses.
Dans le texte ci-dessous, sauf indication contraire, les limites des plages indiquées sont incluses dans l’invention.
Le terme « au moins un » signifie « un ou plusieurs ».
TENSIOACTIF CATIONIQUE La composition selon l'invention comprend un ou plusieurs tensioactifs cationiques de formule (I) :
dans laquelle R1 est une fraction hydrocarbonée saturée ou insaturée comprenant 11 à 23 atomes de carbone ; R2 est une fraction hydrocarbonée saturée ou insaturée comprenant 11 à 23 atomes de carbone ; et X- est un contre-ion cosmétiquement acceptable.
Par fraction hydrocarbonée insaturée, on entend que le composé hydrocarboné comprend au moins une double liaison carbone-carbone (C=C) et/ou au moins une triple liaison carbone-carbone. Elle peut bien sûr inclure plusieurs doubles et/ou triples liaisons carbone-carbone.
Par fraction hydrocarbonée saturée, on entend que le radical hydrocarboné ne comprend pas de double liaison carbone-carbone (C=C) ou de triple liaison carbone-carbone.
De préférence, R1 représente un radical hydrocarboné, saturé ou insaturé, linéaire ou ramifié, comprenant 13 à 21 atomes de carbone, notamment 15 à 19 atomes de carbone, et notamment 17 atomes de carbone. Lorsqu’il est insaturé, R1 comprend de préférence au moins une double liaison (C=C), et en particulier une seule double liaison, deux doubles liaisons ou trois doubles liaisons.
De préférence, R2 représente un radical hydrocarboné, saturé ou insaturé, linéaire ou ramifié, comprenant 13 à 21 atomes de carbone, notamment 15 à 19 atomes de carbone, et notamment 17 atomes de carbone. Lorsqu’il est insaturé, R2 comprend de préférence au moins une double liaison (C=C), et en particulier une seule double liaison, deux doubles liaisons ou trois doubles liaisons.
De préférence, R1 et R2 comprennent le même nombre d’atomes de carbone.
De préférence, R1 et R2 sont identiques.
De préférence, R2 représente un groupe oléyle.
De préférence, R1 représente un groupe oléyle, stéaryle ou isostéaryle.
Selon un mode de réalisation particulier, R1 et R2 sont tous deux l'oléyle.
Si les valeurs de distance entre les représentations vectorielles des flux temps réels et celles de référence sont supérieures à une valeur seuil, préalablement déterminée, dudit indicateur de comparaison concernant la cause de dysfonctionnement relative au déplacement d’une caméra, cela signifie que la caméra 102, 104, 106 associée à l’image initiale considérée a été déplacée.
Le dépassement d’une valeur seuil engendre la génération d’une alerte, cette alerte est donc stockée en base de données. Une demande d’enregistrement vidéo est donc émise et prise en compte par le système 216.
La génération de rapport peut être régie par une planification, ou être effectuée en temps réel si configurée comme telle. Dans tous les cas, dans un souci de consistance, le système de génération de rapport récupère directement les alertes en base de données et émet des rapports.
Le système d’analyse et d’alerte 400 génère également des données statistiques, concernant les valeurs et distance entre représentation vectorielle et leur évolution dans le temps. Ceci permet d'obtenir une vue d'ensemble sur l'évolution de l'état de la caméra dans le temps.
L ‘API transmet les rapports d’alerte générés à l’interface utilisateur associée au système d’automatisation 10, ou au système tiers de type logiciel ayant requis une demande directe d’analyse au système de demande directe d’analyse 600, ou au système tiers de type électronique ayant requis une demande directe d’analyse au système de demande directe d’analyse 600.
Système de gestion de charge Compte tenu des informations dont on dispose via la planification, le canal de traitement attribué à une demande d'analyse peut être fixé par anticipation et donc stocké dans la base de données de planification 502. Cependant, la capacité du système de gestion de charge 800 à traiter les demandes spontanées d'analyses, et donc d'optimiser la répartition de charge par canal de traitement en temps réel, rend une attribution fixée d'un canal de traitement à une analyse planifiée optionnelle.
Le système de gestion de charge 800 construit une file d'attente par canal de traitement et la remplit suite aux demandes d'analyses fournies par le système de planification 500 (même si les demande d'analyses n'ont pas de canal d'attribution, la répartition de charge se fait automatiquement en fonction du niveau de remplissage courant des files d'attente).
De plus, le système de gestion de charge 800 envoie les informations relatives à la demande d'analyse la plus ancienne d'une file d'attente (basée sur le principe FITO (First-In-First-Out) correspondant à un canal de traitement, en fonction des demandes faites par le système d’orchestration 900.
Le système de gestion de charge 800 envoie les informations relatives aux demandes d'analyses en bout de file d'attente au système 400, pour que ce dernier prépare ses procédés d'agrégation et de stabilisation qui seront utilisés lorsque le système 400 recevra les métadonnées intermédiaires de la part de 300 correspondant au flux courant traité.
Système d’orchestration Le système d'orchestration 900 est en charge de synchroniser les connecteurs d'entrée et sortie du système de traitement 200 via déconnexion / connexion du connecteur d’entrée et via déconnexion du connecteur additionnel de sortie. Le système d’orchestration 900 est donc aussi responsable d'arrêter une analyse ou de la remplacer par une autre dès lors que la durée d'analyse est écoulée au sein du système de traitement 200. Il s'appuie sur le système de gestion de charge 800 pour récupérer les informations propres à une analyse qui doit être lancée.
Système de demande directe d’analyse Le système d’automatisation 10 comprend également un système de demande directe d’analyse 600 qui peut transmettre des demandes d’analyse en provenance d’un système tiers (non montré) vers le système de gestion de charge 800 pour être exécutées ou placés dans une file d’attente. Ainsi, le système de demande directe d’analyse 600 opère comme une interface entre ledit système tiers, indépendant du système d’automatisation 10, et le système de gestion de charge 800.
Le système tiers peut comprendre un système tiers de type logiciel. Le système tiers de type logiciel permet à un système de planification tiers hébergé par une plate-forme de virtualisation telle qu’un hyperviseur ou un VMS (en anglais : Video Management System) de transmettre directement des demandes d’analyse au système de demande directe d’analyse 600. Le système tiers de type logiciel peut communiquer avec le système de demande directe d’analyse 600 sur un réseau informatique, au moyen d’une adresse IP (en langue anglaise : « Internet Protocol ») spécifique audit système tiers de type logiciel.
Le système tiers peut également comprendre un système tiers de type électronique tel qu’un système domotique, un système robotisé, un système d’alarme, un système de Gestion Technique du Bâtiment (GTB) ou un système de Gestion Technique Centralisée (GTC). Le système tiers de type électronique peut communiquer avec le système de demande directe d’analyse 600 soit au moyen de connexions électroniques utilisant des ports de type GPIO (en langue anglaise : « General Purpose Input/Output »), soit sur un réseau informatique utilisant un boîtier électronique d’acquisition tel qu’un boîtier ADAM (marque déposée) associé à un protocole de communication tel que le protocole de communication MODBUS (marque déposée) avec une architecture de type client/serveur.
Procédé d’automatisation Si l’on considère une utilisation du système d’automatisation 10, cela implique que le système d’acquisition 100, comprenant une ou plusieurs caméras 102, 104, 106, est installé au sein d’une zone géographique faisant l’objet de la vidéoprotection. De plus, le système d’automatisation 10 doit comprendre des demandes d’analyses préalablement définies dans le système de planification 500 ou des demandes directes d’analyse transmises au système de demande directe d’analyse 600.
Ensuite, lors du déclenchement d’une analyse à effectuer, le procédé d’automatisation selon l’invention comprend les étapes suivantes montrées sur la figure 3.
Ainsi, dans une première étape 700, le système d’acquisition 100 capture un flux vidéo, au moyen de la caméra 102. Ensuite le dispositif d’encodage vidéo 108, associé à la caméra 102 encode le flux vidéo capturé et associé des métadonnées initiales audit flux vidéo.
85% en poids d’un élastomère thermoplastique base ester TPE-E biodégradable disponible auprès de la société Trinseo sous la référence Apinat (marque déposée) DP1888-75 et 15% en en poids d’un thermoplastique TPC biodégradable disponible auprès de la société Trinseo sous la référence Apinat (marque déposée) DP1888/90. Un fil de 1855dtex a été réalisé, le diamètre du fil au repos étant de 479 micromètres, la vitesse de ligne d’extrusion étant de 61m/mn, la filière ayant une ouverture circulaire de diamètre 1,5mm.
Exemple B1
85% en poids d’un élastomère thermoplastique base ester TPE-E biodégradable disponible auprès de la société Trinseo sous la référence Apinat (marque déposée) DP1888-75 et 15% en en poids d’un thermoplastique TPC biodégradable disponible auprès de la société Trinseo sous la référence Apinat (marque déposée) DP1888/90. Un fil de 763dtex a été réalisé, le diamètre du fil au repos étant de 291 micromètres, la vitesse de ligne d’extrusion étant de 176m/mn et avec une filière avec une ouverture circulaire de diamètre égale à 1,5mm.
Exemple C
75% en poids d’un élastomère thermoplastique base ester TPE-E biodégradable disponible auprès de la société Trinseo sous la référence Apinat (marque déposée) DP1888-75 et 25% en en poids d’un thermoplastique TPC biodégradable disponible auprès de la société Trinseo sous la référence Apinat (marque déposée) DP1888/90. Un fil de 1821dtex a été réalisé, le diamètre du fil au repos étant de 443 micromètres, la vitesse de ligne d’extrusion étant de 60m/mn, la filière ayant une ouverture circulaire de diamètre 1,5mm.
Des fils en élasthanne ou Lycra (marque déposée) de 793dtex pour un diamètre de fil de 490 micromètres (diamètre calculé sur la base des dimensions de la section rectangulaire de l’assemblage multibrins) ont été réalisés et testés dans les mêmes conditions que les exemples ci-dessus.
100% en poids d’un thermoplastique polypropylène copolymère aléatoire disponible auprès de Lyondellbasell sous la référence Moplen RP261S. Un fil de 1750dtex a été réalisé, le diamètre du fil au repos étant de 495 micromètres, la vitesse de ligne d’extrusion étant de 61m/mn et avec une filière avec une ouverture circulaire de diamètre égale à 1mm.
Suivant l’invention, on entend par un matériau élastomère un matériau qui est tel qu’un élément réalisé en ce matériau, après avoir été étiré par une force d’étirement, revient, après relâchement de la force d’étirement, dans un état intermédiaire entre l'état étiré et l'état initial. Notamment et par exemple, l’élément, notamment filiforme, après avoir été étiré avec un allongement de 50% (sa longueur étant passée de L0 sa longueur initiale à 1,5xL0 revient, après relâchement, à une longueur inférieure ou égale à 1,4xL0. Suivant l’invention, Concernant le matériau élastomère, on peut notamment utiliser un matériau thermoplastique élastomère ou un mélange comprenant un tel matériau, notamment recyclables de type polyoléfine élastomère, (par exemple à base de Polypropylène (PP) et de Polyethylène (PE), par exemple la gamme Vistamaxx de chez Exxon, ou les gammes Infuse, Engage et versify de Dow Chemical et pouvant être associés entre eux ou à d’autres polyoléfines en fonction des performances envisagées pour l’application. Par exemple, on peut utiliser, un élastomère propylène, notamment la gamme « Vistamaxx » de chez EXXON MOBIL sous les références 6000 et/ou 6102 et/ou 6102FL et/ou 6202 et/ou 6202FL et/ou 6502, 7050BF et/ou 7810, et/ou un oléfine bloc copolymère, notamment la gamme « Infuse » de chez DOW CHEMICAL sous les références 9000 et/ou 9007 et/ou 9010 et/ou 9077 et/ou 9100 et/ou 9107, et/ou un élastomère polyoléfine, notamment la gamme « Engage » de chez DOW CHEMICAL sous les références 8402 et/ou 8401 et/ou 8411 et/ou 8407 et/ou 8137 et/ou 8200 et/ou 8207, et/ou un propylène-éthylène copolymères, notamment la gamme « Versify » de chez DOW CHEMICAL sous les références 3200 et/ou 3300 et/ou 3401 et/ou 4200, et/ou un élastomère thermoplastique (TPE-E (co-polyesters), par exemple l’APINAT DP1888-75CV ou APINAT DP1888-75 de chez TRINSEO et/ou notamment le NP-EL 208-65 de chez NaturPlast, et/ou élastomère thermoplastique uréthane (TPE-U) et/ou élastomère thermoplastique Amide (TPE-A), et/ou élastomère thermoplastique Styrénique (TPE-S) et/ou, plus largement des polyesters avec une dureté inférieure à 90 Shore A, en particulier entre 50 et 90 Shore A.
Pour mesurer le SET, par exemple à 100%, 200%, 300% et 400%, d’un élément tel qu’un fil ou un ruban, on peut procéder de la manière suivante, à l’aide d’un dynamomètre, par exemple le « Dynamomètre Zwick / Roell Z2.5 » type 2.5Kn Zwicki avec un logiciel d’utilisation « testXpert III » et une fréquence d’acquisition de point de 100Hz, une cellule de force de 100N et par exemple des mâchoires de type 8195 avec une force maximale de 100N.
Préparation de l’échantillon :
Etape 0a : On conditionne l’élément, par exemple un fil ou un ruban dans une atmosphère normale, température de 23°C (+/- 2° C) et avec une humidité relative de 50% (+/- 5%) pendant une durée de 24h.
Etape 0b : On découpe cinq échantillons de 60mm de long, pour 50mm d’entre mors.
Suivant un test, désigné ci-après par test d’hystérésis, on étire les produits à l’étirement auquel on souhaite mesurer le SET, notamment à 100%, 200%, 300% ou 400% d’allongement, par exemple à une vitesse de 508mm/mn, par déplacement vertical de la mâchoire supérieure, la mâchoire inférieure étant fixe, puis on le maintien dans la position pendant 30 secondes, puis on revient à la position initiale (50 mm entre mors, c’est-à-dire L0) à vitesse constante où on le laisse 60 secondes (fin du premier cycle), puis on l’étire de nouveau à 100%, 200%, 300% ou 400%, on le maintien pendant 30 secondes et on revient à la position initiale (50 mm entre mors, c’est-à-dire L0) (fin du deuxième cycle). On obtient alors la courbe donnant la force d'étirement en fonction de l'allongement en %, celle-ci présentant une hystérésis qui permet de déterminer la déformation rémanente par la formule de calcul suivante :
SET= L1-L0
La représente des images de microscopie confocale de sphéroïdes reprogrammés 200 de 6 individus différents montrant l’activation des cellules stellaires hépatiques de manière donneur dépendant.
La représente des images de microscopie confocale de sphéroïdes reprogrammés 200 de 3 individus différents montrant le dépôt de matrice extracellulaire (collagène) donneur dépendant.
La représente une analyse transcriptomique par RNAseq des sphéroïdes reprogrammés 200 et des sphéroïdes non reprogrammés 100.
La représente une analyse du type « Gene Ontology » qui permet de structurer, selon les fonctions cellulaires, les gènes qui sont différentiellement exprimés dans les sphéroïdes reprogrammés 200 par rapport aux sphéroïdes non reprogrammés 100.
La représente l’efficacité des sphéroïdes reprogrammés obtenus à l’exemple 1 pour détecter la toxicité hépatique médicamenteuse en comparaison avec les modèles in vitro et in vivo existants.
La représente la stratification des degrés de sévérité de la toxicité hépatique en fonction du sexe et de l’âge du donneur. Les sphéroïdes reprogrammés 200 sont suffisamment sensibles pour réaliser cette analyse.
Les dessins sont donnés à titre d'exemple et ne sont pas limitatifs de l’invention.
- Selon un exemple, la préparation du sérum sanguin appauvri comprend une phase d’obtention d’un sérum sanguin et une phase de filtration du sérum par un filtre de 0,45µm ;
- Selon un exemple, le milieu de culture de reprogrammation est utilisé pendant au moins 3 jours ;
- Selon un exemple, les cellules humaines sont issues d’au moins une lignée cellulaire humaine ou de cellules primaires humaines ;
- Selon un exemple, au moins une lignée de cellules est choisie parmi les lignées cellulaires suivantes : PANC-1, TWNT-1, THP-1, HepG2 ou un mélange de celles-ci ;
- Selon un exemple, les cellules primaires humaines sont choisies parmi les cellules primaires humaines suivantes : hépatocytes humains primaires (PHH), cellules hépatiques primaires, cellules circulantes ou cellules tumorales circulantes (CTC), cellules mononucléées sanguines périphériques (PBMC) ou un mélange de celles-ci ;
– selon un exemple, le procédé de test de l’effet d’une molécule ou d’une composition comprenant l’obtention de sphéroïdes comprend les étapes suivantes : Prélèvement sanguin d’un individu, Préparation d’un sérum sanguin appauvri à partir du prélèvement sanguin, caractérisé en ce que la culture de sphéroïdes à partir de cellules humaines est réalisée dans un milieu de culture de reprogrammation comprenant de 30 à 60% en volume du sérum sanguin appauvri, et que le procédé comprend une étape d’exposition des sphéroïdes obtenus à l’étape précédente à une molécule ou une composition à tester, l’exposition des sphéroïdes étant réalisée avec un milieu de culture de reprogrammation comprenant de 30 à 60% en volume du sérum sanguin appauvri.
Les sphéroïdes sont des agrégats de cellules croissant de manière tridimensionnelle en suspension et développant des interactions complexes entre cellules et avec avantageusement une matrice tridimensionnelle. Les sphéroïdes sont donc multi-cellulaires.
Une cohorte est un groupe d’individus sélectionnés pour un but spécial notamment pour une étude pré-clinique.
La détermination de l’orientation est effectuée en calculant la déformation d’un modèle représentatif du ou des repère(s) se superposant au(x) repère(s). Selon les cas, le modèle représentatif peut être tridimensionnel ou bidimensionnel (plan). Dans l’exemple de la , le modèle représentatif est un plan de la circonférence du couvercle 105, soit un cercle tronqué.
Une détermination d’une pose d’un modèle représentatif du ou des repère(s), voire de la zone d’identification, dans le repère de la caméra acquérant la ou les image(s) acquise(s) peut être effectuée pour chaque image acquise. La pose correspond au positionnement et à l’orientation tridimensionnels du modèle représentatif dans le repère de la caméra, afin que le modèle représentatif se superpose au(x) repère(s) visible(s) dans chaque image acquise.
Une dimension caractéristique du ou des repère(s) peut être également déterminée au cours de l’étape 530 afin de donner une échelle à la zone d’identification.
Il convient de souligner que les étapes 520 et 530 peuvent être dans certains cas effectuées concomitamment, notamment lorsqu’une détection de type deep learning est effectuée.
Une fois la détermination de l’orientation, une transformation de l’image de la zone d’identification peut être effectuée au cours d’une quatrième étape 540 du procédé 500. Le but de cette transformation est de redresser l’image afin de correspondre à une image de la zone d’identification prise de face.
Il convient de souligner que ce redressement peut s’apparenter au traitement effectué au moment de la lecture d’un QR code où trois repères délimitant le code sont identifiés et servent pour déterminer l’orientation ainsi que l’échelle du QR code.