INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
RT-PCR quantitative L'ARN total a été extrait des kératinocytes à l'aide du kit RNeasy Micro (Qiagen, Hilden, Allemagne) selon le protocole du fabricant avec un traitement supplémentaire par DNAse (Rnase-Free Dnase Set, Qiagen). La concentration d'ARN a été déterminée à l'aide d'un NanodropTM (Nanodrop 1000, Thermo Scientific). iScript cDNA Synthesis (Biorad) a été utilisé pour synthétiser l'ADNc. Les niveaux d'ARNm ont été mesurés avec le système StepOnePlusTM Real-Time PCR (Applied Biosystems™) et le SYBR Green Master Mix (Biorad). Les données de la PCR quantitative (qPCR) ont été analysées en utilisant la méthode de quantification 2-ΔΔCt avec GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate deshydrogenase) pour les cellules eucaryotes et GyrB (DNA gyrase subunit B) pour le staphylocoque comme contrôle endogène. Les amorces pour FLG, IVL, KLK7, DSG1, CDSN, Ki67, DEFB4, STAT6, OVOL1, OVOL2 ont été fournies par Biorad, les autres séquences d'amorces sont présentées dans les suivantes : Gène cible GyrB Se : amorce sens (5’-3’) de séquence SEQ ID NO : 1 : GTTGTAATTGAGAAAGACAATTG ( SEQ ID NO : 1) et amorce antisens (3’-5’) de séquence SEQ ID NO : 1 : TACAGTTAAGATAACTTCGACAG (SEQ ID NO : 2).
Quantification des métabolites / ligands de l'AhR Préparation : Acide 5-Hydroxyindole acétique-d5, Sérotonine-d4, Acide Indole-3-acétique-d4, Acide Kynurénique-d5, Mélatonine-d4, Acide Piconilique-d3, Tryptamine-d4, et Acide Xanthurénique-d4, ont été achetés auprès de Santa Cruz Biotechnology. L'acide 3-Hydroxyanthranilique-d4, la 3-Hydroxykynurénine-13C2-15N, le 5-Hydroxytryptophane-d4, l'Indole-3-acétamide-d5, la Kynurénine-d4 et le Tryptophane-d5 ont été achetés auprès de Toronto Research Chemicals.
Les solutions mères des analytes marqués ont été préparées dans de l'eau avec 0,1% d'acide formique et les concentrations finales ont été choisies pour correspondre aux concentrations estimées des métabolites endogènes.
Extraction des métabolites: Les métabolites ont été extraits de 50 μL de milieu de coculture obtenu comme décrit ci-dessus. Après ajout des préparations indiquées ci-dessus (100 μL) et de 300 μL de MeOH, les échantillons ont été mélangés pendant 15 s et homogénéisés à -20 °C, pendant 30 min. Après centrifugation à 5 000 rpm 10 min à -4°C, 350 μL de surnageant ont été collectés et concentrés sous flux de N2. Les résidus ont été reconstitués dans 100 μL de MeOH/H2O (1:9) et transférés dans une plaque 96 puits pour l'analyse LC-HRMS.
Instrumentation : Les analyses ont été réalisées comme décrit précédemment dans Lefèvre, A. et al. . Talanta 195, 593–598 (2019). En bref, 2 μL ont été injectés dans le LC-MS (XEVO-TQ-XS, Waters®). Une colonne Kinetex C18 xb (1,7 μm x 150 mmx 2,1 mm, température 55 °C) associée à un gradient de deux phases mobiles (Phase A : Eau + 0,5% d'acide formique ; Phase B : MeOH + 0,5% d'acide formique) à un débit de 0,4 mL/min ont été utilisés.
Pour chaque métabolite, des courbes d'étalonnage ont été utilisées pour déterminer les concentrations de chaque métabolite dans les échantillons.
Analyse statistique Toutes les expériences ont été réalisées avec au moins trois réplicats biologiques. Les données sont présentées sous forme de moyenne ± SEM. GraphPad Prism (version 7.0 ; GraphPad Software, La Jolla, Californie). Les données ont été analysées avec le test de Kruskal-Wallis suivi du test de Dunn. Les résultats sont considérés comme statistiquement significatifs lorsque p < 0,05.
Exemple 1 : Sélection de 8 souches vivantes de Staphylococcus epidermidis + la souche de référence ATCC12228, isolées de la peau humaine
Avantageusement, le matériau de la matrice 42 est adapté pour être mis en forme par un procédé de vulcanisation après une incorporation des inclusions 41. Un tel procédé permet une fixation de la position des inclusions 41.
Un autre avantage d’une telle mise en forme par vulcanisation est la possibilité de réaliser une co-vulcanisation avec un autre matériau d’une couche adjacente, par exemple la couche chauffante 3 avec laquelle un contact étroit est nécessaire.
Dans le mode réalisation dans lequel la couche chauffante 3 est réalisée à partir des pistes métalliques ou des fils chauffants, ces derniers sont avantageusement enduits d’un primaire susceptible d’assurer une liaison avec la matrice 42.
Par ailleurs, il est tout à fait envisageable d’avoir différents modes de liaisons entre les différentes couches de la structure multicouche du tapis de protection au givre 1, tels que, par exemple, le collage, la co-vulcansiation ou de façon plus générale la cocuisson.
La matrice 42 comporte des inclusions 41. En particulier, les inclusions 41 sont en un matériau présentant une résistivité volumique électrique élevée, notamment supérieure à 1E9 Ω.m, de préférence supérieure à 1E10 Ω.m.
Une telle résistivité électrique des inclusions 41 permet d’obtenir un matériau dont la résistivité électrique globale correspond aux exigences d’isolation électrique de la couche intermédiaire 4 agencé en contact direct avec la couche chauffante 3.
Par ailleurs, les inclusions 41 présentent une conductivité thermique supérieure à 1,5 W/m.K à température ambiante, en particulier supérieure à 20 W / m K.
Une telle conductivité thermique des inclusions 41 permet d’augmenter la conductivité thermique de la couche intermédiaire 4. Une telle configuration permet ainsi une meilleure transmission du flux de chaleur généré par la couche chauffante 3 vers la surface à dégivrer.
En augmentant la transmission du flux de chaleur, il est possible de réaliser des économies en énergie nécessaire pour assurer la fonction de dégivrage et/ou d’antigivrage pour la pièce BA à protéger.
Par ailleurs, une bonne conductivité thermique de la couche intermédiaire 4 permet de réduire un effet d’accumulation du flux de chaleur au niveau de la couche chauffante 3. Il est ainsi possible de baisser la température à laquelle la couche intermédiaire 4 est exposée à proximité de la zone de contact avec la couche chauffante 3. Une telle baisse de la température dans une telle zone de contact évite, à un certain dégrée, la dégradation du matériau de la matrice 42.
La conductivité thermique améliorée permet ainsi donc d’augmenter une durée de vie de la couche chauffante 3 et/ou d’utiliser d’autres matériaux pour la réalisation de la matrice 42 présentant une moins bonne tenue aux températures élevées pour autant que la température en surface de la pièce BA à protéger reste dans un domaine raisonnable.
Avantageusement, le matériau des inclusions 41 est une céramique présentant une bonne conductivité thermique et des propriétés d’isolation électrique.
De préférence, les inclusions 41 sont en nitrure de bore, en nitrure d’aluminium, en alumine ou en un couplage de telles charges.
D’autres céramiques présentant des paramètres de résistivité électrique et de conductivité thermique peuvent être utilisées.
Selon un mode particulier de réalisation, les inclusions 41 présentent un taux volumique dans la matrice 42 typiquement compris entre 10% et 70% en volume, notamment compris entre 20 et 50% en volume, en particulier compris entre 30% et 50% en volume.
Un tel taux volumique permet de maintenir les propriétés mécaniques de la matrice 42 pour une mise en forme et une utilisation de la couche intermédiaire 4 tout en permettant d’utiliser des propriétés thermiques des inclusions 41 pour améliorer la conductivité thermique du matériau dans sa globalité.
Toutefois, ces émaux colorés obtenus après cuisson des encres se composent d’un mélange d’oxydes de silice, de bore, d’alumine, d’alcalins et d’alcalino-terreux et d’oxydes d’éléments traces métalliques (ETM) colorants, qui sont dissous dans la matrice vitreuse (titane, vanadium, chrome, manganèse, fer, cobalt, nickel, cuivre, cadmium, terres rares…) ou piégés dans des pigments minéraux (CdS, CdSe, CoAl 2 O 4 , ZrSiO 4 …). Or, ces éléments métalliques ont tendance à être libérés lors de l’utilisation des articles décorés, ce qui peut être dans la durée nocif pour la santé des utilisateurs lorsque les articles sont au contact de denrées alimentaires. C’est pourquoi il est déposé au-dessus du décor couleur, la couverte qui joue le rôle de couche barrière afin de limiter la libération de tels éléments métalliques dans les aliments. Cependant, l’intégrité de la couverte (et des couches de décor) se révèle souvent dégradée.
Par ailleurs, les normes européennes vont être renforcées à l’égard du risque des ETM libérés par des matériaux céramiques qui sont en contact avec des produits alimentaires. Déjà en 2004, le règlement européen CE n°1935/2004 précisait que « les matériaux et objets mis ou destinés à être mis au contact des denrées alimentaires doivent être inertes vis-à-vis des denrées alimentaires ». Et depuis 2012, la Commission Européenne prépare une évolution législative visant en particulier à revoir drastiquement à la baisse les seuils de libération en plomb et cadmium des objets en porcelaine décorée et à cibler en plus d’autres éléments chimiques tels que le cobalt, le chrome, le baryum, l’aluminium, le nickel, l’arsenic, etc.
Ainsi, aujourd’hui, les articles décorés en porcelaine destinés au contact alimentaire sont susceptibles de ne plus répondre aux futures normes européennes.
Pour pallier cet inconvénient de relargage des ETM, le brevet français FR3104570 propose une solution en intégrant lors du procédé de fabrication de l’article en porcelaine l’incorporation d’une couche intermédiaire entre le support en porcelaine émaillée et la couche de décor, dont le coefficient de dilatation thermique est compris entre les deux coefficients de dilatation thermique des couches sous-jacente d’émail transparent et sus-jacente de décor, ce qui procure un amortisseur de gradient de dilatation thermique permettant de réduire les contraintes thermomécaniques entre le support en porcelaine et le décor et de réduire l’apparition de fissures dans le décor jusque dans la couverte.
Cependant, cette solution impose de modifier le procédé traditionnel de fabrication de la porcelaine décorée, en ajoutant des étapes intermédiaires de dépôt et de cuisson et en nécessitant de se procurer un matériau spécifique quant au coefficient de dilatation thermique recherché.
La présente invention a donc pour but de proposer une autre solution pour diminuer drastiquement le relargage d’ETM d’une porcelaine décorée, en particulier d’un article en porcelaine dure décorée, qui permette par ailleurs non seulement de conserver le procédé traditionnel de fabrication d’une porcelaine décorée mais encore d’être simple de mise en œuvre.
Selon l’invention, le procédé de traitement d’un article en porcelaine décorée comprenant une couche de couverte au-dessus d’un décor, comporte après fabrication dudit article en porcelaine décorée, au moins une étape de trempe chimique. Plus particulièrement, l’article en porcelaine comprend un support, un émail recouvrant au moins une face du support, un décor déposé sur l’émail et une couverte recouvrant le décor. Le procédé de traitement de l’invention améliore la fonction de couche barrière de la couverte. La trempe chimique se fait par recouvrement au moins de la couverte d’une composition de trempe chimique (sous forme liquide ou sous forme pâteuse à la manière d’une barbotine). Le procédé pourrait comprendre plusieurs étapes de trempe chimique sur le même article.
De manière surprenante, la trempe chimique appliquée à une porcelaine décorée permet de diminuer le relargage d’ETM et cela sans abîmer ou dégrader la couverte ni le décor.
De manière inattendue, l’inventeur a mis en évidence une nouvelle utilisation de la trempe chimique, celle de diminuer la libération d’ETM depuis la couverte d’une porcelaine décorée, et cela dès que le procédé de l’invention a été mis en œuvre, indépendamment de l’usage de l’article en porcelaine au cours du temps et de sa résistance aux fissures au cours du temps.
Si la trempe chimique est connue pour renforcer de la céramique émaillée (mais non décorée) telle que de la « Bone China » qui présente un coefficient de dilatation entre 20°C et 300°C supérieur à 60 10 -7 K -1 , il n’était pas évident d’effectuer d’emblée une trempe chimique sur de la porcelaine qui présente un coefficient de dilatation bien inférieur et qui plus est, sur de la porcelaine décorée, au risque d’abîmer le décor. En effet, la couverte d’un article en porcelaine décorée ne fait que quelques microns par rapport à l’émail transparent de plusieurs centaines de microns qui recouvre une céramique et en outre non décorée. Or, contre toute attente, on obtient une couverte qui présente une fonction de couche barrière qui est bien plus performante, les tests montrant une diminution de la libération des ETM au moins d’un facteur proche de deux, voire plus.
De plus, le procédé de l’invention a l’avantage d’être mis en œuvre après le procédé de fabrication usuel d’une porcelaine décorée (il n’y a donc pas besoin de modifier les étapes de fabrication traditionnelle). Par ailleurs, la tempe chimique est une opération simple et maîtrisée par l’homme de l’art. Enfin, le procédé de l’invention a l’autre avantage de pouvoir être mis en œuvre aussi bien en sortie même de la fabrication qu’à un moment ultérieur même après usage. Ainsi, le procédé de traitement de l’invention peut être mise en œuvre sur des porcelaines décorées qui ont été stockées ou déjà utilisées et qu’il conviendrait de traiter pour répondre aux nouvelles normes.
De préférence, le procédé comporte préalablement à la trempe chimique, une étape de traitement thermique (au moins de la couverte, de préférence de l’ensemble de l’article) à une température qui est supérieure à la température de transition vitreuse de la couverte. L’inventeur a mis en évidence de manière inattendue que la trempe chimique combinée à un pré-traitement thermique à une température appropriée qui se trouve être, non pas en dessous de la température de transition vitreuse de la couverte mais au-dessus de la température de transition vitreuse de la couverte, diminue drastiquement le relargage d’ETM. Les tests ont montré une diminution de la libération d’ETM jusqu’à un facteur 45.
Selon une caractéristique, la trempe chimique est réalisée à partir de l’application, au moins sur la couverte de l’article, d’une composition liquide ou pâteuse de trempe chimique à base de sels aptes à conduire à un échange ionique au niveau de la couverte, cette trempe chimique étant réalisée à une température de traitement comprise entre la température de fusion des sels de la composition de trempe chimique et la température de transition vitreuse de la couverte, en particulier à une température de traitement comprise entre 350 et 550°C. La température de transition vitreuse est ici considérée comme la température séparant un comportement de solide du matériau et un comportement de liquide visqueux. Cette température est révélée lors d’une mesure de dilatométrie sur un échantillon massif du matériau vitreux, à une vitesse de chauffe de 5°C/mn, par une brusque augmentation de l’expansion thermique du matériau. Cette température de transition vitreuse est ici définie comme l’intersection des tangentes de l’expansion du solide et de l’expansion du liquide lors de cette discontinuité.
Avantageusement, la composition de trempe chimique comporte des sels d’alcalins tels que des nitrates et/ou sulfates et/ou chlorures et/ou phosphates et/ou borates et/ou carbonates, choisis parmi du sodium et/ou du potassium et/ou du rubidium et/ou du césium.
Selon un mode de réalisation, la trempe chimique se fait par immersion de l’article dans un bain d’une composition liquide de trempe chimique. La composition est directement à la température de traitement ou est au moins à la température de fusion des sels et est augmentée jusqu’à la température de traitement.
Selon un autre mode de réalisation, la trempe chimique se fait par dépôt sur au moins la couverte de l’article, d’une composition pâteuse de trempe chimique sous la forme d’une barbotine, en particulier la barbotine étant apte à être pulvérisée ou appliquée au pinceau, puis par chauffage, au moins de la couverte, de préférence de l’ensemble de l’article, à une température de trempe chimique ; il s’agit d’un chauffage jusqu’à une température correspondant à celle du traitement de trempe chimique ou d’un chauffage par mise en contact avec une atmosphère qui est directement à la température de traitement de trempe chimique.
Les éléments de liaison 51, 52, 53 peuvent être constitués de matériau composite ou de métal. Ils peuvent aussi comprendre à la fois un matériau composite et du métal. Ils peuvent notamment comprendre un tube métallique agencé à l'intérieur d'une structure en matériau composite.
Chaque élément de liaison 51, 52, 53 comprend deux extrémités opposées au niveau des deux parois opposées qu'il relie. En raison du caractère creux des éléments de liaison, le réservoir comprend, pour chaque élément de liaison, une ouverture 56 traversant le réservoir de part en part. Ces ouvertures 56 ne communiquent pas avec le volume de stockage de fluide énergétique. Ces ouvertures 56 ne sont donc pas utiles pour délivrer un fluide énergétique, notamment pour délivrer de l'hydrogène sous pression à la pile à combustible 3.
En revanche, les ouvertures 56 peuvent être utilisées pour le passage de fils électriques et/ou de conduits hydrauliques. On peut ainsi économiser l'espace prévu à l'extérieur du réservoir pour le passage de ces fils électriques et/ou de ces conduits hydrauliques tout en leur offrant un moyen de maintien en position.
Les ouvertures 56 peuvent également être utilisées pour permettre l'évacuation d'un liquide hors du véhicule, voire même pour réaliser des aérations visant à refroidir ou à réchauffer l'habitacle.
Avantageusement, et comme expliqué ci-après, les ouvertures 56 peuvent être utilisées pour fixer différents équipements du véhicule. En particulier, les ouvertures 56 sont utilisées pour fixer les sièges 12, les moyens d'ancrage 21, 22 des dispositifs de sécurité, le cadre 28 de carrosserie, le dispositif d'absorption de chocs 30, les éléments 41A, 41B des trains de roues, et le carter de protection 44 tels que décrits précédemment.
A cet effet, le réservoir 2 comprend un ensemble d'interfaces de fixation 57, chacune agencée à une extrémité d'au moins un élément de liaison 51, 52, 53, notamment agencée dans une extrémité d'une ouverture 56. Comme illustré sur la , tout ou partie des interfaces de fixation 57 peut comprendre un insert destiné à coopérer avec une vis de fixation 58, par exemple une vis de fixation de type M8 ou M10. L'insert peut être formé dans le tube métallique équipant la face interne 55 des éléments de liaison ou être un élément additionnel emmanché contre la face interne 55 des éléments de liaison, par exemple une cheville en plastique. L'insert peut par exemple comprendre une longueur comprise entre 20mm et 60mm inclus. L'insert peut être taraudé ou non taraudé. L'insert fourni ainsi un moyen de fixation s'étendant profondément dans le volume du réservoir. Un tel moyen de fixation est particulièrement robuste et permet d'envisager la fixation de charges importantes.
Comme illustré sur la , tout ou partie des interfaces de fixation 57 peut comprendre un insert destiné à coopérer avec une agrafe 59. L'agrafe 59 peut comprendre des ailettes radiales en interférence avec l'insert tubulaire et être emmanchée en force dans cet insert. En variante, l'agrafe 59 pourrait comprendre toute autre forme. Elle pourrait par exemple être destinée à être emmanchée en force et à être dévissée pour être retirée. En complément, de la colle ou du mastic peuvent être appliqués dans une ouverture 56 pour améliorer la tenue de la vis de fixation 58 ou de l'agrafe 59. L'utilisation d'agrafes 59 pourra être préférée à l'utilisation de vis de fixation pour fixer des équipements présentant une masse modérée et autres que des dispositifs de sécurité, par exemple pour fixer le carter de protection 44.
Chaque interface de fixation 57 permet de fixer un équipement du véhicule contre une paroi du réservoir. Une interface de fixation 57 peut être agencée à l'extrémité de l'ouverture 56 située du côté de la paroi contre laquelle l'équipement est fixé. Alternativement, une interface de fixation 57 pourrait aussi être agencée à l'extrémité de l'ouverture 56 située du côté opposé de la paroi contre laquelle l'équipement est fixé. Dans ce cas, un axe ou un câble reliant l'interface de fixation 57 à l'équipement pourrait s'étendre à l'intérieur de l'ouverture 56 le long de celle-ci. Un tel agencement permettrait par exemple de prévoir des interfaces de fixation au niveau de la paroi inférieure 9B pour fixer des équipements contre la paroi supérieure 9A, ce qui faciliterait les opérations d'assemblage du véhicule ou de maintenance.
De préférence, on utilise une ou plusieurs interfaces de fixation agencées sur les parois latérales 8A et 8B pour fixer respectivement les longerons 11A et 11B. On utilise une ou plusieurs interfaces de fixation agencées sur la paroi supérieure 9A pour fixer le siège 12 et/ou les moyens d'ancrage 21, 22 et/ou le cadre 28 de carrosserie. On utilise une ou plusieurs interfaces de fixation agencées sur la paroi arrière 7B pour fixer le dispositif d'absorption des chocs 30. On utilise une ou plusieurs interfaces de fixation agencées sur la paroi inférieur 9B pour fixer le carter de protection 44.
Avantageusement, de telles interfaces de fixation 57 peuvent être prévues aux extrémités de chaque ouverture 56 du réservoir. Chaque élément de liaison 51, 52, 53 peut ainsi supporter deux interfaces de fixation 57 agencées sur deux faces opposées du réservoir. Le réservoir peut ainsi être pourvu d'une multitude d'interfaces de fixation 57 permettant de fixer divers équipements en des positions très variées.
Un même équipement peut même être fixé au réservoir 2 en utilisant deux interfaces de fixations ou même davantage, de manière à bien sécuriser sa fixation. Un même équipement peut aussi facilement être fixé en des positions différentes du réservoir, sans devoir être modifié.
Un même réservoir 2 peut aussi être facilement réutilisé pour différents modèles de véhicule car la multitude d'interfaces de fixation fournit de nombreuses possibilités pour fixer des équipements.
Les ouvertures 56 qui ne sont pas destinées à fixer un équipement du véhicule peuvent être bouchées avec un moyen d'obturation de manière à éviter l'accumulation de boue, sable, terre, cailloux ou toutes autres particules. En particulier, les ouvertures 56 inutilisées peuvent être obturées avec des bouchons individuels ou avec un film entourant l'ensemble du réservoir ou tout autre dispositif de protection. Les ouvertures 56 inutilisées peuvent éventuellement être utilisées au cours de la vie du véhicule par exemple pour fixer un nouvel équipement ou un nouvel accessoire. Dans le cadre d'une opération de maintenance, on peut envisager de démonter un équipement, par exemple le dispositif d'absorption de chocs 30, et de le remplacer par un nouvel équipement neuf qui serait fixé en utilisant des interfaces de fixation jusqu'alors inutilisées.
Avantageusement, les éléments de liaison 51, 52, 53 sont répartis selon un pas régulier, par exemple un pas compris entre 5 cm et 30 cm inclus, notamment entre 10cm et 20 cm inclus. Par conséquent, les interfaces de fixation 57 sont réparties sur les parois du réservoir selon un pas régulier. Les interfaces de fixation 57 sont ainsi agencées selon un quadrillage en surface du réservoir 2. Ceci facilite encore la réutilisation d'un même réservoir et d'un même équipement pour différents modèles de véhicule car ce même équipement peut être fixé en plusieurs endroit du réservoir sans nécessiter de pièce d'adaptation. Le réservoir forme ainsi une structure modulaire, comme une brique de Lego®, sur laquelle de nombreux équipements peuvent être fixés. L'invention permet donc d'envisager une grande liberté de conception des véhicules automobiles tout en réalisant des économies d'échelle.