Culture de bactéries magnétotactiques MSR-1 : En bref, les bactéries MSR-1 ont d'abord été amplifiées en deux étapes de pré-culture (PC) avec le milieu de pré-culture déficient en fer, puis cultivées dans la dernière étape avec les conditions appropriées pour promouvoir la synthèse des magnétosomes. Pendant la PC 1, 300 µl de cryo-stock MSR-1 ont été incubés dans 50 ml de milieu de pré-culture à 29,5°c pendant 6 jours en état statique suivis d'un jour sous agitation à 110 rpm. Ensuite, la PC2 a été réalisée en transférant toutes les cellules dans un bioréacteur de 15 l (Applikon) contenant 6 l de milieu de pré-croissance et agité à 200 rpm et 29,5°c pendant 3 jours. Lors de la dernière étape de culture, les cellules PC 2 ont été transférées dans un bioréacteur de 40 l (Applikon) rempli de 26 l de milieu de croissance. Les conditions de culture telles que la concentration d'oxygène, la température et la vitesse d'agitation ont été respectivement maintenues entre 0,1 et 1%, à 29,5°c et sous 200 rpm pendant toute la fermentation. le pH a été maintenu à 6,9 par l'ajout automatique d'un milieu acide (pH = 3), appelé solution " fed -batch" . La croissance bactérienne a été suivie toutes les 24 heures en prélevant un échantillon de 5 ml de la culture pour déterminer la densité optique à 565 nm (OD 565 ) à l'aide d'un spectrophotomètre UV-visible. Les bactéries magnétotactiques MSR-1 (MTB) ont été cultivées pendant un total de 19 jours, en utilisant des milieux de croissance bactérienne composés de produits chimiques de qualité pharmaceutique, exempts de composés toxiques et de métaux lourds autres que le fer. Le milieu de pré-croissance (PGM), le milieu de croissance (GM) et le milieu fed-batch (FBM) comprennent : i) du lactate de sodium (de préférence 2,6 g/L dans le PGM, 1.3 g/L dans GM, 100 g/L dans FBM), ii) du chlorure d'ammonium (de préférence 0,4 g/L dans PGM, 0,2 g/L dans GM, 4,8 g/L dans FBM), iii) du sulfate de magnésium heptahydraté (de préférence 0,1 g/L dans PGM, 0,03 g/L dans GM, 2.4 g/L dans FBM), phosphate dipotassique (de préférence 0,5 g/L dans PGM, 0,07 g/L dans GM, 6 g/L dans FBM), chlorure de fer (III) hexahydraté (de préférence 0 g/L dans PGM, 0 g/L dans GM, 2 g/L dans FBM), élixir minéral (de préférence 0.5 ml dans PGM, 0,08 ml dans FBM, 7 ml dans FBM), élixir de vitamines (de préférence 0,1 ml dans PGM, 0,07 ml dans GM, 1 ml dans FBM). L'élixir minéral comprend 1 g/L de sulfate de fer (II) heptahydraté et 30 g/L de chlorure de calcium. Le mélange vitaminique comprend 0,002 g/L de biotine, 0,4 g/L de penthoténate de calcium, 0,002 g/L d'acide folique, 2 g/L d'inositol, 0,4 g/L d'acide nicotinique, 0,2 g/L d'acide p-aminobézoïque, 0,4 g/L de pyridoxine HCl, 0,2 g/L de riboflavine, 0,4 g/L de Thiamine HCl. Les 10 premiers jours comprennent 2 étapes de pré-culture utilisées pour amplifier les bactéries dans le milieu de pré-culture dépourvu de la source de fer. La troisième étape dure environ 9 jours. Elle consiste à favoriser la synthèse intracellulaire des magnétosomes en cultivant les bactéries MSR-1 dans leurs conditions microaérophiles optimisées et en ajoutant progressivement des sources d'ions fer via une solution fed-batch. A la fin de la culture bactérienne, 32 l de culture bactérienne ont été concentrés pour réduire le volume de liquide en utilisant une colonne de filtration tangentielle. Ensuite, le concentré MSR-1 (environ 5 l au total) a été stocké à -80°c pour les étapes suivantes de la production de magnétosomes.