INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le surnageant obtenu est chargé sur une colonne par chromatographie d'affinité sur ions métalliques immobilisés, appelée aussi IMAC (acronyme pour le terme anglais correspondant « Immobilized Metal Affinity Chromatography »). Ce type de chromatographie par d'affinité repose sur le mécanisme de la chélation de cations métalliques immobilisés. Elle permet généralement de purifier des protéines possédant un « tag » histidine à partir du surnageant contenant un mélange complexe de différentes protéines d’origine biologique.
La chélation de l’ion métallique (généralement divalent) est un processus qui permet la formation d’un complexe entre un cation métallique et un ligand fixé sur une phase solide. Grâce à cette chélation, les ions métalliques restent immobilisés dans une colonne, dans laquelle on écoule le mélange d’enzymes que l’on souhaite fractionner ou purifier. Les liaisons entre l’ion métallique et le ligand se forment généralement dans une gamme de pH comprise entre 7 et 8. Afin de maintenir ce pH, la colonne est préalablement équilibrée à l’aide d’une solution tampon.
Si on procède à cette séparation supplémentaire sur le moût déjà séparé, on peut alors mélanger la phase liquide obtenue après la séparation solide/liquide décrite plus haut, avec cette phase liquide supplémentaire, et opérer le procédé selon l’invention sur le mélange de ces deux phases liquides.
Le procédé selon l’invention peut naturellement être opéré sur une phase liquide contenant le mélange d’enzymes qui a été préalablement concentrée.
Selon une première variante du procédé de séparation de l’invention, la chromatographie est réalisée en continu dans une colonne de chromatographie contenant une phase immobile, solide et apte à être traversée en continu par une phase mobile liquide appelée éluant.
Selon une autre variante, la séparation par chromatographie selon l’invention est réalisée par batch, en mettant en contact une phase immobile de chromatographie avec le mélange comprenant des enzymes bêta-xylosidases et d’autres enzymes, en milieu liquide, pour constituer un milieu réactionnel dans un contenant pendant une durée donnée, puis en éluant la partie solide dudit milieu réactionnel afin d’en extraire les bêta-xylosidases.
Dans cette variante, la séparation peut comprendre une étape de mélange de la phase immobile avec le mélange d’enzymes en solution, puis une étape de décantation optionnelle, puis une étape d’isolation de la phase solide du milieu réactionnel, puis une étape optionnelle de lavage, puis une étape d’élution de la phase solide isolée pour en extraire les bêta-xylosidases.
La séparation par chromatographie selon l’invention fixe les bêta-xylosidases sur la phase immobile de préférence à un pH compris entre 6,5 et 9, et les bêta-xylosidases sont de préférence éluées en changeant la nature, la composition ou la concentration de l’éluant, ce qui permet, notamment, de changer le pH de la phase immobile.
L’invention a également pour objet l’enzyme bêta-xylosidase, notamment produite par un champignon comme Aspergillus ou Trichoderma , et notamment obtenue par le procédé de séparation tel que décrit plus haut, et qui présente une activité spécifique d’au moins 10 µmoles de p-nitrophenol.min -1 . mg -1 d’enzyme, notamment d’au moins 20 ou au moins 30 ou au moins 35 µmoles de p-nitrophenol.min -1 . mg -1 d’enzyme. C’est une activité spécifique élevée, qui démontre une séparation efficace résultant d’une pureté élevée de l’enzyme bêta-xylosidase ainsi séparée. La méthode de mesure de l’activité spécifique, connue de l’homme de l’art, consiste à mettre l’enzyme purifiée en présence de PNP-Xylose (p-nitrophényl-β-D-xylopyranoside). Sous l’action de la bêta-xylosidase, le PNP libéré est suivi par spectroscopie et l’activité spécifique est calculée en utilisant une gamme étalon de PNP.
Un exemple de bêta-xylosidase vise par la présente invention est une protéine Xylan 1,4 bêta-xylosidase obtenue à partir de Trichoderma reesei de référence XP_006964075.1 dans NCBI (acronyme pour National Center for Biotechnology Information) et décrite dans la base Uniprot sous la référence Q92458_HYPJE (EC : 3.2.1.37 ; identifiant taxonomique 51453 NCBI ; séquence version 2 du 01/06/1998, : Gene :bxl1 , - Organisme: Hypocrea jecorina ( Trichoderma reesei )). Sont également visées toutes les bêta-xylosidases avec des séquences ayant au moins 50% d’identité avec cette bêta-xylosidase, notamment au moins 60 % ou au moins 65% ou au moins 80% ou au moins 85% ou au moins 90% ou au moins 95% ou au moins 98 ou 99% avec cette bêta-xylosidase.
L’invention vise de manière plus générale toute bêta-xylosidase, pouvant être notamment obtenue avec un champignon de genre Trichoderma , notamment l’espèce Trichoderma reesei ou citrinoviride ou orientale ou longibrachiatum ou arundinaceum , ou avec un champignon de genre Aspergillu s, notamment l’espèce Aspergillus niger, japonicus, oryzae, clavatus,aculeatus,awamori, flavus.
L’invention a également pour objet que l'enzyme bêta-xylosidase, notamment obtenue par le procédé de séparation décrit plus haut, et qui présente une pureté supérieure ou égale à 90 %, généralement supérieure ou égale à 95 % ou 97 %. La pureté a été évaluée, de façon connue, par électrophorèse sur gel SDS-PAGE (un gel de polyacrylamide contenant du dodécylsulfate de sodium), puis analysée avec le logiciel Image-Lab, disponible auprès de la société BIO-RAD.
On obtient donc une enzyme très pure, ce qui la rend hautement valorisable. C’est un résultat d’autant plus remarquable que la séparation selon l’invention peut être opérée sur des cocktails enzymatiques pouvant contenir des dizaines, voire une centaine, d’enzymes différentes, comme ceux produits par des microorganismes comme Trichoderma par exemple.
L’invention a également pour objet l’utilisation des enzymes bêta-xylosidases, notamment obtenues selon le procédé décrit plus haut, pour enrichir en enzymes bêta-xylosidases un mélange d’enzymes produit par un micro-organisme.
On peut ainsi les ajouter, de façon contrôlée, dans un procédé de conversion de différents types de biomasse lignocellulosique en sucre(s) (saccharification incluant une hydrolyse enzymatique de la biomasse) ou en alcool (saccharification et fermentation) ayant des récalcitrances différentes en sucres ou en alcool (type éthanol).
Une autre utilisation consiste à valoriser ces enzymes bêta-xylosidases en tant que telles, pour des applications qui font spécifiquement appel à une activité bêta-xylosidase.
La bêta-xylosidase peut être purifiée et vendue pure pour des applications biotechnologiques, que ce soit pour dégrader ou pour produire des xylo-oligosacharides.
La bêta-xylosidase peut être supplémentée à un cocktail enzymatique pauvre en bêta-xylosidase pour des applications industrielles dans le domaine de la dégradation de la biomasse lignocellulosique dans le but de produire des sucres valorisables dans des bioproduits ou pour la production d’alcools dont notamment le bioéthanol.
Selon un mode de réalisation, le résonateur comprend en outre une pointe fixée à la périphérie externe du disque, de l'anneau ou de la boucle fermée.
Selon un mode de réalisation, la deuxième partie du résonateur comprend la pointe, la pointe s'étendant en longueur dans une direction parallèle à la face avant du substrat et, de préférence, orthogonale à l'intersection dudit bord du substrat avec la face avant du substrat.
Selon un mode de réalisation, le résonateur est un résonateur optique ou opto-mécanique et le dispositif comprend en outre un guide d'onde défini dans la même couche que le résonateur, une portion du guide d'onde étant couplée optiquement au résonateur.
Selon un mode de réalisation, la portion du guide d'onde est suspendue entre la deuxième partie de la première couche et un plan comprenant la face avant du substrat, de préférence par des bras de maintien définis dans la même couche que le résonateur optique et s'étendant chacun depuis ladite portion du guide d'onde jusqu'à un plot d'ancrage fixé au substrat ou à la deuxième partie de la première couche.
la , décrite précédemment, représente, par une vue de dessus, un exemple idéal d'un circuit photonique ;
la , décrite précédemment, représente une vue en coupe schématique prise dans un plan AA de la ;
la , décrite précédemment, représente une vue en coupe schématique illustrant une étape de fabrication du circuit des figures 1 et 2 ;
la représente, par une vue de dessus schématique, un mode de réalisation d'un circuit photonique ;
la représente une vue en coupe schématique prise dans le plan AA de la ;
la représente une vue en coupe schématique prise dans le plan BB de la ;
la représente une vue en coupe schématique prise dans le plan BB de la selon une variante de réalisation ;
la représente, par une vue de dessus schématique, une autre variante de réalisation du circuit photonique des figures 4 à 7 ;
la représente, par une vue de dessus schématique, encore une autre variante de réalisation du circuit photonique des figures 4 à 7 ;
la représente, par une vue de dessus schématique, encore une autre variante de réalisation du circuit photonique des figures 4 à 7 ; et
Brève description des figures D'autres caractéristiques et avantages vont apparaître dans la description détaillée qui suit, faite en liaison avec les figures listées ci-dessous : Les figures 1A et 1B représentent le système de détection de l'invention, respectivement selon deux variantes de réalisation de son dispositif de mesure ; La montre des exemples de courbes de déformée de l'oscillateur du dispositif de la et de la selon différents modes de vibration ; La montre une première configuration de fonctionnement du système de l'invention ; La montre une deuxième configuration de fonctionnement du système de l'invention ; La illustre une autre configuration de fonctionnement du système de l'invention ; La représente un tableau reprenant les performances attendues pour différents oscillateurs ;
L'invention vise à détecter plusieurs cibles de manière simultanée en utilisant des particules fonctionnalisées, en utilisant un même oscillateur.
Les particules sont préférentiellement des entités suffisamment rigides. On utilise avantageusement des billes dont la surface externe est fonctionnalisée par une ou plusieurs sondes choisies pour capturer des cibles présentes dans un liquide L. De manière non limitative, dans la suite de la description, on pourra parler de billes ou de particules fonctionnalisées.
L'invention vise notamment la détection de cibles telles que protéines, exosomes, ARN circulant, ADN circulant, virus, présents dans le liquide injecté dans le circuit fluidique et captés par la surface fonctionnalisée des particules.
Les figures 1A et 1B montrent le système de détection pouvant être utilisé dans la mise en œuvre du procédé de caractérisation de l'invention.
Le système de détection comporte un dispositif de mesure 1_A, 1_B mécanique et fluidique, des moyens d'excitation M_Exc et des moyens de mesure M_Fr.
Le dispositif de mesure 1 comporte un circuit fluidique 10_A, 10_B dans lequel vont être injectées les particules.
Le dispositif de mesure 1_A, 1_B comporte également un oscillateur 11_A, 11_B, connu également sous le nom de résonateur, de type SMR ou SNR (désigné ci-après "oscillateur") le circuit fluidique 10_A, 10_B étant intégré à l'oscillateur.
L'oscillateur 11_A, 11_B comporte une poutre fixée en porte-à-faux de manière à présenter une extrémité libre. La poutre est agencée pour osciller à l'intérieur d'une cavité, préférentiellement une cavité sous vide afin de réduire l’amortissement de la poutre en vibration par les molécules d’air. La poutre est capable d'être excitée selon plusieurs modes de vibration, chacun de ces modes se traduisant par une déformation de la poutre présentant localement des nœuds et ventres de vibration (ou ci-après anti-nœuds) à différents endroits prédéterminés par les lois de la mécanique et dynamique des structures.
Le circuit fluidique 10_A, 10_B est intégré à la poutre de l'oscillateur.
Le principe de base repose sur le piégeage de plusieurs particules fonctionnalisées à l'intérieur de l'oscillateur 11_A, 11_B.
Selon une première variante de réalisation représentée sur la , le circuit fluidique 10_A comporte un canal principal 100_A et un canal intermédiaire 101_A. Le circuit fluidique 10_A est arrangé de manière à présenter plusieurs pièges fluidiques 102_A, destinés chacun à pouvoir piéger une particule distincte.
Chaque piège fluidique 102_A est réalisé sous la forme d'une intersection entre le canal principal 100_A et le canal intermédiaire 101_A. Un piège fluidique comporte une cavité débouchant d'un côté sur le canal principal 100_A et de l'autre côté sur le canal intermédiaire 101_A. Du côté du canal principal, la cavité comporte une partie élargie 103_A pour accueillir la particule et, du côté du canal intermédiaire, elle comporte une restriction 104_A ou un étranglement.
On applique un gradient de pression entre le canal principal 100_A et le canal intermédiaire 101_A, de sorte qu’une fraction du flux principal est aspirée dans le canal intermédiaire, via chaque piège fluidique.
Le gradient de pression permet de capturer (par aspiration) toute particule suffisamment rigide (ou entité biologique plus ou moins rigide également) circulant dans le canal principal 100_A et dont le diamètre est supérieur à la restriction créée dans le piège fluidique considéré. La rigidité de la particule l'empêche de traverser la restriction. Par extension de ce principe, en disposant de N pièges fluidiques, il est possible de capturer N particules. Les particules ou billes fonctionnalisées vont ainsi pouvoir être piégées dans chaque piège fluidique.
Ces panneaux d’atténuation acoustique sont généralement réalisés sous la forme de sandwiches comportant au moins une première paroi de peau externe, une seconde paroi de peau interne, et une âme emprisonnée entre ces première et seconde parois de peau. L’âme comporte une pluralité de cellules polygonales tubulaires qui ont chacune une orientation inclinée par rapport aux première et deuxième parois de peau ou perpendiculaire aux première et deuxième parois de peau. Ces âmes sont généralement réalisées sous la forme d’une plaque de matériau en nid d’abeille à cellules hexagonales. Ces cellules sont creuses sur toute leur hauteur.
La hauteur des cellules est un paramètre essentiel qui détermine la capacité du panneau à absorber les ondes sonores. On a en effet démontré que l’absorption des ondes sonores était optimale pour un panneau conventionnel lorsque les cellules ont une hauteur correspondant sensiblement au quart de la longueur d’onde λ de l’onde sonore à traiter.
Actuellement, pour des raisons d’intégration et de compacité, il est souhaitable de réaliser des panneaux d’atténuation acoustique plus minces que les panneaux conventionnels. Or, il n’est pas possible de réduire la hauteur des cellules sans que cela entraîne une perte de la capacité du panneau à absorber les ondes sonores.
Or, on a par ailleurs constaté que la capacité d’une cellule à absorber une onde acoustique de longueur d’onde λ était directement tributaire de la longueur du chemin parcouru par l’onde acoustique dans la cellule, c’est-à-dire, d’après ce qui précède, une longueur correspondant au quart de la longueur d’onde, soit λ/4. Toutefois, on a aussi constaté que la longueur de ce chemin ne doit pas nécessairement être suivant un chemin rectiligne. En d’autres termes, l’onde acoustique peut être efficacement absorbée tant que le chemin parcouru est d’une longueur totale proche de λ/4, mais cette longueur peut être répartie suivant un chemin non rectiligne.
Les brevets FR-3 070 529-B1 et FR-3 070 530-B1 proposent un panneau acoustique qui présente une épaisseur limitée tout en étant adapté pour atténuer les basses fréquences. Ledit panneau acoustique comporte notamment des cellules logeant au moins un obstacle partiel qui s’étend transversalement à l’axe principal de la cellule concernée pour augmenter la longueur du chemin parcouru par les ondes sonores à travers la cellule. Chaque obstacle présente un bord d’extrémité libre qui délimite un passage avec une partie de la paroi de la cellule en vis-à-vis.
Un tel panneau acoustique permet, à hauteur égale et sans perte de surface traitée acoustique, d’atténuer des fréquences de bruit plus basses et par conséquent, de limiter l’encombrement du panneau acoustique ainsi que sa masse.
Les brevets FR-3 070 529-B1 et FR-3 070 530-B1 proposent également des procédés particulièrement adaptés à la fabrication de tels panneaux acoustiques. Notamment, un obstacle dans une cellule est formé à partir d’un ruban fixé entre deux plaques. Le ruban est conformé notamment par pliage selon des lignes de plis entre les deux plaques destinées à former des parois périphériques des cellules d’une âme. Le formage de l’obstacle est réalisé par un effort de traction sur les plaques fixées l’une à l’autre tendant à écarter les plaques l’une de l’autre. Cet effort de traction, compte tenu de l'encollage des plaques par des parties nodales et des zones de plis prévues sur les plaques, permet de conformer les plaques pour constituer les cellules de l'âme alvéolaire.
Toutefois, le nombre de chicanes créées par les pliages entre les obstacles dans une cavité mentionné dans ces brevets est trop faible et limite la capacité de réduction de la hauteur de l’âme alvéolaire.
Il existe donc un réel besoin pour un panneau d’atténuation acoustique plus mince qu’un panneau conventionnel et conservant toutefois le même niveau d’atténuation acoustique, voire l’améliorant.
L’objectif de la présente invention est ainsi de proposer une âme alvéolaire et un panneau d’atténuation acoustique la comprenant permettant de palier à au moins certains de ces inconvénients.
À cet effet, l’invention concerne une âme alvéolaire pour panneau d’atténuation acoustique s’étendant entre une première et une seconde face d’extrémités, ladite âme comportant une pluralité de cellules polygonales tubulaires ayant un axe principal d’extension entre les faces d’extrémité, chaque cellule comportant une cavité interne délimitée par des parois latérales s’étendant entre les première et deuxième faces d’extrémité et débouchant dans chacune des deux faces d’extrémité, les cellules étant expansibles suivant une direction parallèle aux faces d’extrémités, chaque cellule polygonale comportant des septums s’étendant transversalement par rapport à l'axe principal de la cellule associée et étant décalés suivant l’axe principal.
Selon l’invention, chaque septum est replié en forme de W au moins entre une des parois latérales et une autre des parois latérales et présente un orifice traversant, les orifices de deux septums consécutifs étant décalés radialement par rapport à l’axe principal pour former une chicane.
Ainsi, l’invention permet d’intégrer plus d’obstacles transversaux partiels dans une même hauteur d’âme alvéolaire et par conséquent d’augmenter la longueur du chemin parcouru par les ondes sonores à travers la cellule.
En effet, l’invention permet de réduire la distance entre deux cloisons transversales successives grâce au pliage en forme de W de chaque septum ou cloisons partielles transversales munies d’un orifice traversant qui présente une hauteur réduite par rapport à un pliage en forme de V.
L’invention permet ainsi, à hauteur égale, de créer un chemin de passage d’air plus long que la simple hauteur de l’âme, et en associant l’âme à deux peaux d’atténuer des fréquences de bruit plus basses ou de réduire la hauteur des cellules tout en atténuant les mêmes fréquences cibles efficacement. Par conséquent, l’invention permet de limiter l’encombrement du panneau acoustique ainsi que sa masse.
L’âme alvéolaire selon l’invention peut comprendre une ou plusieurs des caractéristiques suivantes, prises isolément les unes des autres ou en combinaison les unes avec les autres selon toute combinaison techniquement possible : - chaque cellule polygonale est formée à partir d’une première plaque et d’une deuxième plaque fixées ensemble par des parties nodales, et les septums s’étendent chacun au travers des parties nodales de la première et de la deuxième plaques ; - deux septums consécutifs sont indépendants les uns des autres ; - chaque septum comporte une première patte de fixation fixée à une partie non-nodale de la première plaque et une deuxième patte de fixation fixée à une partie non-nodale de la deuxième plaque, la première et la deuxième pattes de fixation s’étendant chacune en direction d’une extrémité de la cellule associée ; - chaque septum s’étend transversalement entre sa première patte de fixation et sa deuxième patte de fixation ; - chaque septum est décalé suivant l’axe principal par rapport à ses première et deuxième pattes de fixation ; - l’âme comprend un ruban additionnel agencé entre la première et la deuxième plaques, fixé à la première et à la deuxième plaques et conformé pour former au moins deux septums consécutifs ; - deux septums consécutifs sont formés à partir d’un ruban additionnel, ledit ruban additionnel comportant : une première partie collée à la première plaque et formant une première patte de fixation d’un premier des septums à une partie non-nodale de la première plaque, une première partie adjacente repliée suivant trois lignes de pli, une deuxième partie collée à la deuxième plaque et formant continument une deuxième patte de fixation du premier septum et une première patte de fixation du deuxième des septums à une partie non-nodale de la deuxième plaque, une deuxième partie adjacente repliée suivant trois lignes de pli, et une troisième partie collée à la première plaque et formant une deuxième patte de fixation du deuxième septum à une partie non-nodale de la première plaque ; - le ruban additionnel est conformé pour former en continu des septums consécutifs, le ruban additionnel comportant une succession de parties collées alternativement à la première plaque ou à la deuxième plaque et des parties repliées suivant trois lignes de pli ; - au moins un des septums comporte au moins une portion en matériau acoustiquement perméable.
Actuellement, on définit pour chaque écart de niveau un déflecteur dédié, ce qui nécessite de concevoir à chaque fois un moule dédié et/ou un processus de fabrication (découpe et emboutissage) dédié. Cela s’avère onéreux et chronophage et donc augmente le coût des véhicules. En outre, cela complexifie la gestion des stocks et augmente l’encombrement sur certains postes de chaîne de montage.
Présentation de l’invention Elle propose notamment à cet effet un déflecteur, d’une part, destiné à équiper un véhicule comprenant une structure comportant un soubassement ayant une première face inférieure à laquelle est solidarisée une batterie ayant une seconde face inférieure, et, d’autre part, comprenant des première et deuxième parties propres à être solidarisées fixement et respectivement aux première et seconde faces inférieures.
Ce déflecteur se caractérise par le fait qu’il comprend une troisième partie intercalée entre les première et deuxième parties, et déformable de manière à instaurer un écart de niveau entre ces première et deuxième parties qui est égal à un écart de niveau entre les première et seconde faces inférieures.
Ainsi, il est désormais possible de faire varier l’agencement du déflecteur, via sa troisième partie, pour l’adapter aux besoins en matière d’écart de niveaux entre les première et seconde faces inférieures du véhicule qu’il doit équiper, ce qui permet d’éviter d’avoir à concevoir plusieurs moules dédiés et/ou processus de fabrication.
- sa troisième partie peut avoir une forme en plis d’accordéon ;
- en présence de la dernière option, sa troisième partie peut comprendre au moins deux plis d’accordéon ;
- en présence de la dernière sous-option, sa troisième partie peut comprendre trois plis d’accordéon.
L’invention propose également un véhicule comprenant, d’une part, une structure comportant un soubassement ayant une première face inférieure à laquelle est solidarisée une batterie ayant une seconde face inférieure, et, d’autre part, un déflecteur du type de celui présenté ci-avant et solidarisé fixement à la première face inférieure du soubassement par sa première partie et à la seconde face inférieure de la batterie par sa deuxième partie.