INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Il est donc intéressant d’isoler les béta-xylosidases présentes dans des mélanges d’enzymes produits par des microorganismes, par exemple pour enrichir en béta-xylosidases un cocktail enzymatique donné. Et pour ce faire, différentes techniques ont déjà été proposées, notamment pour tout d’abord séparer, dans le milieu de culture, le champignon des enzymes qu’il a produites. Ainsi, le brevet US-3,398,055 enseigne la séparation et la purification de cellulases produites par le champignon Trichoderma reesei : Le champignon est séparé des enzymes par filtration avec un filtre rotatif sous vide. Les enzymes sont ensuite séparées en les faisant s’écouler dans une colonne utilisant du coton, et en les éluant avec une solution basique. Le brevet WO 2018/015228 propose de séparer les enzymes du champignon par une succession d’étapes de traitement d’un milieu de culture, dont une étape de filtration du milieu de culture par un filtre-presse, puis une étape de microfiltration tangentielle de la phase liquide obtenue. Il est par ailleurs connu de séparer la bêta-xylosidase d’un mélange d’enzymes par précipitation fractionnaire à l’éthanol, comme décrit dans la publication de V. CORTEZ and Al.« Xylanase and β-xylosidase separation by fractional precipitation », Process Biochemistry, Volume 35, Issues 3-4, 1999, Pages 277-283. C’est une technique intéressante, mais qui n’est pas dénuée d’inconvénients, dans la mesure où elle nécessite l’utilisation d’un solvant, et qu’elle impose de nombreuses étapes, ce qui la rend coûteuse et complexe à mettre en œuvre.
L’invention a alors pour but de mettre au point une technique améliorée de séparation des enzymes d’un mélange d’enzymes, et plus particulièrement, une technique de séparation des béta-xylosidases dans un mélange contenant des béta-xylosidases et d’autres types d’enzymes. Elle vise plus particulièrement une technique de séparation qui soit performante, et déployable à l’échelle industrielle.
L’invention a tout d’abord pour objet un procédé de séparation d’enzymes bêta-xylosidases à partir d’un mélange d’enzymes comprenant des enzymes bêta-xylosidases et d’autres enzymes, tel que : - les enzymes bêta-xylosidases à séparer sont dépourvues de groupement histidine, - et tel qu’on sépare lesdites enzymes bêta-xylosidases du reste du mélange d’enzymes par chromatographie d’affinité sur ions métalliques immobilisés (ci-après également désignée par son acronyme IMAC pour le terme anglo-saxon « Immobilized Metal Affinity Chromatography »).
La chromatographie de type IMAC est connue pour séparer des protéines qui possèdent des groupes d’histidine exposés à leur surface, soit naturellement, soit par modification génétique, on parle dans ce dernier cas de « tag » (étiquette en français) histidine ou de «cluster» histidine ajouté à la protéine. On pourra notamment se reporter à la publication de V. GABERC-POREKAR and Al « Perspectives of immobilized-metal affinity chromatography » J Biochem. Biophys. Methods. 2001 Oct. 30 ; 49 (1-3) 335-60.
Or, de façon tout-à-fait surprenante, il a été découvert dans le contexte de la présente invention que cette technique de chromatographie était malgré tout capable de séparer des enzymes dépourvues de groupement histidine, et tout particulièrement les bêta-xylosidases que les inventeurs cherchaient à séparer dans un cocktail enzymatique produit par des microorganismes.
Et cela est très avantageux à plusieurs titres : - on peut isoler des enzymes bêta-xylosidases par cette technique sans les avoir, au préalable, modifiées pour qu’elles aient ces « tags » ou « clusters » histidine . En évitant de les modifier, on simplifie leur mode d’obtention/de séparation, bien sûr, en supprimant une étape de modification génétique. Mais on limite également tout risque de perte de performance par modification de leur comportement/altération de leur activité du fait de la présence de ces groupes histidine (il a été décrit dans la littérature de nombreux cas d’enzymes qui ont eu leur activité altérée suite à l’ajout d’un « tag » histidine, notamment dans le cas de métalloenzymes et d’enzymes multimérique), - la technique de séparation par chromatographie de type IMAC est très performante : on peut la déployer à l’échelle industrielle, les matériaux nécessaires pour opérer ce type de chromatographie sont stables et peuvent donc être stockés sans risque de dégradation, les conditions d’élution ne sont généralement pas sévères, les réactifs employés sont généralement réutilisables, ce qui la rend économiquement intéressante, et ses résultats en termes de sélectivité dans les enzymes séparées, notamment ici les bêta-xylosidases, sont excellents. - la séparation peut être réalisée en une seule étape, d’où un procédé de mise en œuvre facilitée, plus rapide.
Généralement, les autres enzymes dudit mélange peuvent comprendre au moins une enzyme choisie parmi les cellulases, les hémicellulases, et/ou parmi les hémicellulases.
Généralement, les autres enzymes dudit mélange peuvent comprendre des bêta-glucosidases, des endoglucanases, et éventuellement des cellobiohydrolases.
Les bêta-xylosidases peuvent constituer au moins 1% poids, notamment entre 2 et 15% poids ou entre 3 et 8% poids, de l’ensemble des enzymes présentes dans le mélange. C’est la teneur généralement rencontrée dans les cocktails enzymatiques produits par Trichoderma Reseei , mais, naturellement, l’invention s’applique de la même manière à des mélanges d’enzymes contenant une plus forte proportion de béta-xylosidases.
De préférence, la chromatographie d’affinité sur ions métalliques immobilisés IMAC utilise : - une phase immobile solide qui comprend une matrice sur laquelle sont fixés des ions métalliques par des agents chélatants, - et une phase mobile liquide appelée éluant.
La matrice de la phase immobile peut avantageusement être choisie parmi au moins un des composés suivants : gel d’agarose, gel de dextrane réticulé, silice.
Les agents chélatants peuvent avantageusement être choisis parmi au moins un des composés suivants: l’acide iminodiacétique IDA, l’acide nitrolotriacétique NTA, le tris [carboxymethyl] éthylène diamine TED.
Les ions métalliques peuvent avantageusement être choisis parmi : les ions métalliques de métaux de transition, notamment choisis parmi - les ions divalents de Cu (II), Ni (II), Zn (II), Co (II), - les ions métalliques trivalents de métaux, notamment choisis parmi les ions trivalents de Fe (III), Al (III), Ga (III), - ou les ions métalliques tétravalents, notamment l’ion métallique de Zr (IV).
Selon un mode de réalisation préféré de l’invention, le mélange d’enzymes est issu d’une production d’enzymes par un microorganisme, notamment par un champignon filamenteux, par exemple du genre Trichoderma , de préférence de l’espèce Trichoderma reesei .
Le procédé de séparation selon l’invention peut comprendre une étape préliminaire de séparation d’un milieu de culture comprenant le mélange d’enzymes et un micro-organisme ayant produit ledit mélange, ladite étape préliminaire visant à séparer le microorganisme dudit mélange d’enzymes et comprenant notamment une filtration ou plusieurs filtrations successives du milieu de culture. Cette séparation préliminaire peut par exemple être réalisée comme décrit dans le brevet WO 2018/015228. On obtient ainsi, après séparation solide/liquide, le microorganisme ayant produit les enzymes (qu’on appelle aussi moût) sous forme solide/semi-solide d’une part, et les enzymes solubles en phase liquide (aqueuse) d’autre part. Cette phase liquide peut être éventuellement concentrée, puis elle va pouvoir être traitée selon l’invention.
Le procédé de séparation selon l’invention peut comprendre également une étape de traitement du moût, ayant été séparé ou non du reste du milieu de culture, ledit traitement comprenant un refroidissement du moût puis une séparation du moût et d’une phase liquide dite supplémentaire contenant une quantité supplémentaire de mélange d’enzymes, comme enseigné dans le brevet EP 3 174 979.
On aura bien compris que l’invention propose une structure de véhicule automobile, tel un véhicule automobile électrique avec une batterie électrique en soubassement, remarquable en ce que la structure comprend un empilement comprenant successivement : un longeron, des moyens de fixation de bras de suspension, une platine de maintien des moyens de fixation, un support de montage de bras de suspension, ledit support de montage reliant la platine de maintien au longeron.
Préférentiellement, les moyens de fixation sont verticalement entre la platine de maintien et le longeron.
Préférentiellement, les moyens de fixation sont verticalement à distance du longeron.
Préférentiellement, les moyens de fixation comprennent un écrou ; le dispositif de fixation comprenant une pièce de maintien dudit écrou contre la platine de maintien ; la pièce de maintien comprend des pattes de rétention s’étendant verticalement entre la platine de maintien et le support de montage.
Préférentiellement, le dispositif de fixation comprend une entretoise entre la platine de maintien et le support de montage, les moyens de fixation s’étendant verticalement entre l’entretoise et le longeron ; et les moyens de fixation comprennent des moyens de serrage, les moyens de fixation étant aptes à serrer la platine de maintien vers le support de montage.
Préférentiellement, le support de montage comprend une première plaque d’appui horizontale, et la platine de maintien comprend une deuxième plaque d’appui horizontale verticalement à distance de la première plaque d’appui horizontale.
Préférentiellement, le support de montage comprend un élément principal avec une ouverture centrale destinée à recevoir le bras de suspension ; et une coquille étanche fixée à l’élément principal et fermant de manière étanche ladite ouverture centrale.
Préférentiellement, les moyens de fixation sont entre le support de montage et le longeron.
Préférentiellement, la platine de maintien est entre le support de montage et le longeron.
Préférentiellement, les pattes de rétention s’étendent depuis la platine de maintien vers le support de montage.
Préférentiellement, l’élément principal est plus épais que la coquille étanche.
Préférentiellement, le support de montage présente une surface de fixation horizontale à distance du longeron, le longeron étant incliné par rapport à ladite surface de fixation.
Préférentiellement, le longeron est un longeron arrière, et la structure comprend en outre un longeron central.
Préférentiellement, le longeron est un longeron latéral.
Selon un autre aspect, l’invention propose un véhicule automobile comprenant une structure ; remarquable en ce que la structure est conforme à l’invention.
Préférentiellement, le véhicule automobile comprend système de suspension avec un bras de suspension comprenant une liaison pivot fixée au dispositif de fixation sous le longeron et le longeron est un longeron arrière.
Selon une caractéristique possible de l’invention, le tirant métallique est configuré pour servir de piste d’accueil à au moins un câblage du véhicule. En effet, le tirant métallique se superposant au radiateur, peut servir de passage pour des éléments allongés tels que des câblages. Ces câblages peuvent par exemple passer dans une rainure dudit tirant métallique, et/ou être fixés audit tirant métallique par le biais d’éléments de fixation tels que par exemple des rivets ou des vis.
La est une vue de face d’une face avant technique montée dans un véhicule selon l’invention, les éléments situés devant ladite face avant technique ayant été artificiellement retirés,
La est une vue du dessus de la face avant technique de la ,
La est une vue en perspective d’une face avant technique d’un véhicule selon l’invention dans laquelle a été montée un ensemble de radiateurs.
En se référant aux figures 1 et 2, un véhicule 1 selon l’invention comprend une face avant technique 2 à laquelle est accroché un ensemble de radiateurs 3 de refroidissement. La face avant technique 2 et l’ensemble de radiateurs 3 forment un ensemble qui s’étend suivant un plan transversal et vertical YZ du véhicule. Cet ensemble 2, 3 est bordé latéralement par deux longerons 4, 5 parallèles s’étendant chacun suivant un axe horizontal et longitudinal X du véhicule, et par une traverse avant 6 de véhicule placée juste devant ledit ensemble 2, 3 et s’étendant suivant un axe horizontal et transversal Y du véhicule. Cette traverse avant 6 joint des extrémités avant des deux longerons 4, 5.
Actuellement, la face avant technique 2 est confrontée à au moins deux problèmes : -elle est majoritairement réalisée en métal pour tenir les efforts s’exerçant sur elle. Or, la présence de métal en grande quantité au sein de la face avant technique a tendance à alourdir significativement le véhicule, -elle est difficile à maintenir dans une position stable le long d’un axe longitudinal X et d’un axe vertical Z du véhicule et d’optimiser son dimensionnement en raison notamment de l’avancée de la traverse avant 6.
Afin de remédier à ces deux problèmes, un véhicule selon l’invention comprend un tirant métallique 10 apte à renforcer l’arrimage de l’ensemble constitué par la face avant technique 2 et l’ensemble de radiateurs 3, au sein du véhicule.
En se référant à la , la face avant technique 2 comprend schématiquement deux segments verticaux latéraux11, 12 et un segment de liaison 13 reliant deux extrémités supérieures desdits deux segments verticaux latéraux11, 12. Le segment de liaison 13 s’étend dans une direction horizontale et transversale Y du véhicule, et relie les deux segments verticaux latéraux11, 12 entre eux en étant perpendiculaire auxdits deux segments verticaux latéraux11, 12. L’ensemble de radiateurs 3 a une forme générale parallélépipédique, et est placé dans la face avant technique 2 en étant encadré par les deux segments verticaux latéraux 11, 12 et par le segment de liaison 13. Une fois monté dans la FAT 2, l’ensemble de radiateurs 3 s’étend dans un plan vertical et transversal YZ du véhicule. Il repose sur une traverse inférieure 14, qui est une pièce allongée, plane et de faible épaisseur. Cette traverse inférieure 14 s’inscrit dans un plan horizontal XY, et relie deux extrémités inférieures des deux segments verticaux latéraux 11, 12 de la face avant technique 2. Cette traverse inférieure 14 se retrouve sous le segment de liaison 13 en s’étendant parallèlement à celui-ci et en étant au droit de celui-ci.
La face avant technique 2 est réalisée en matière plastique, mais il n’est pas exclu que subsistent quelques pièces métalliques tels que des mini inserts ou écrous de faible dimension dans ladite FAT 2, pour par exemple renforcer localement cette face avant technique 2 ou pour accrocher des éléments fonctionnels du véhicule. Ces pièces métalliques sont en nombre restreint. Préférentiellement, l’ensemble de ces pièces métalliques représente moins de 20% du poids total de la face avant technique 2, et de façon encore plus préférentielle, moins de 10% de ce poids total.
En se référant à la , le tirant métallique 10 présente une bande centrale allongée 16, une première extrémité 17 d’accrochage et une deuxième extrémité 18 d’accrochage, lesdites deux extrémités 17, 18 étant à considérer le long d’un axe longitudinal de ladite bande centrale 16. La bande centrale allongée est rectiligne, la première extrémité 17 et la deuxième extrémité 18 pouvant constituer, soit des pièces rapportées, soit des prolongations de ladite bande centrale allongée 16 de sorte qu’elles forment avec celle-ci une seule et même pièce réalisée d’un seul tenant.
La première extrémité 17 d’accrochage présente deux tronçons plans 19 et parallèles, reliés entre eux par un tronçon d’extrémité 20 plan, l’un desdits deux tronçons 19 plans et parallèles prolongeant la bande centrale 16. Le tronçon d’extrémité plan 20 relie les deux tronçons plans et parallèles 19 en étant perpendiculaire à ceux-ci. Les deux tronçons plans et parallèles 19 de la première extrémité 17 d’accrochage enserrent le segment de liaison 13 horizontal de la face avant technique 2, le tronçon d’extrémité 20 étant au contact d’une surface d’extrémité supérieure 21 dudit segment de liaison 13. La première extrémité d’accrochage 17 comprenant les deux tronçons plans et parallèles 19 ainsi que le tronçon d’extrémité 20 est plus large que la bande centrale allongée 16 du tirant métallique 10.
La deuxième extrémité 18 d’accrochage est également plus large que la bande centrale allongée 16 et comporte une première partie plane 22 prolongeant ladite bande centrale 16 et une deuxième partie plane 23 prolongeant ladite première partie plane 22 en étant perpendiculaire à celle-ci. La deuxième partie plane 23 de la deuxième extrémité 18 est placée sous la traverse inférieure 14.
Le tirant métallique 10 est monté sur la face avant technique 2 en respectant les règles suivantes : -la bande centrale allongée 16 s’étend verticalement en étant placée à égale distance des deux segments verticaux latéraux 11, 12 de la face avant technique 2, et en couvrant une zone centrale spécifique de l’ensemble de radiateurs 3, -la première extrémité 17 d’accrochage est placée autour du segment de liaison 20 horizontal, de sorte que les deux tronçons plans 19 soient placés de part et d’autre dudit segment de liaison 20 et de sorte que le tronçon d’extrémité 20 soit au contact d’une surface d’extrémité supérieure 21 dudit segment de liaison 13, -la deuxième extrémité 18 d’accrochage coopère avec la traverse inférieure 14, de manière que la deuxième partie plane 23 soit placée sous ladite traverse inférieure 14.
Puisque la première extrémité 17 d’accrochage présente une surface assez étendue et une raideur assez élevée, elle peut supporter une serrure 24 d’un capot avant 25 du véhicule et également deux avertisseurs sonores 26, 27. Pour les mêmes raisons, la deuxième extrémité d’accrochage 18 peut également supporter au moins une pièce supplémentaire de petite dimension, pouvant par exemple servir à accrocher ou à maintenir un faisceau de câbles.
Puisque la bande centrale allongée 16 recouvre partiellement l’ensemble de radiateurs 3 pour le maintenir solidement en place, elle peut également servir de surface de réception à un objet étendu tel que par exemple un câblage spécifique 28. En effet, la présence d’un tel câblage 28 léger sur ladite bande centrale 16 ne peut pas compromettre la fonction de maintien que peut exercer ladite bande centrale 16 sur l’ensemble de radiateurs 3. Préférentiellement, la bande centrale allongée 16 peut comprendre une rainure dans laquelle est inséré ledit câblage 28.
Néanmoins, une partie des rayons lumineux (tel que représenté par le rayon en trait plein sur la ) traversent le premier dioptre 231 et sont réfléchis par le second dioptre 232 vers l’intérieur de la lame 230. Ces rayons peuvent ensuite être réfléchis de nouveau par la tranche de la lame 230 puis par le premier dioptre 231. Finalement, ces rayons peuvent être transmis par le second dioptre 232 et ainsi retrouver le chemin optique classique du dispositif de génération d’image 100.
De plus, une partie des rayons lumineux (tel que représenté par le rayon en tirets sur la ) sont directement réfléchis par la tranche de la lame 230 avant d’être transmis par le second dioptre 232 et ainsi retrouver le chemin optique classique du dispositif de génération d’image 100.
Les rayons lumineux ayant suivi ces chemins optiques alternatifs ont subi un retard optique et vont créer des images parasites par rapport aux rayons lumineux ayant suivi le chemin optique classique.
Un afficheur tête-haute 100 selon un des modes de réalisation de l’invention est présenté en , en utilisation dans un véhicule automobile. Un individu 20 est placé dans le véhicule, ici à la place du conducteur. En variante, cela pourrait être un passager avant ou arrière du véhicule. L’individu 20 est symbolisé par un de ses yeux sur la .
Comme représenté sur la , l’afficheur tête-haute 100 comprend ici un dispositif de génération d’images 110 et un système optique. Le dispositif de génération d’image 110 est configuré pour générer une image. Le système optique est configuré pour transmettre, en direction d’une lame partiellement réfléchissante (ici en direction du parebrise 10), l’image générée par le dispositif de génération d’image 110.
Le système optique comprend ici un réflecteur 130 et un miroir de repliement 120.
Le dispositif de génération d’images 110 émet un faisceau lumineux (sur la , seul un rayon lumineux primaire, ou rayon lumineux principal, est représenté) en direction du miroir de repliement 120. Ce faisceau lumineux est représentatif d’une scène lumineuse, incluant les images à afficher à l’individu 20.
Les différents éléments, ici le dispositif de génération d’images 110, le miroir de repliement 120 et le réflecteur 130, sont logés dans une enveloppe extérieure 150. L’enveloppe extérieure 150 comprend ici une paroi 153 et un hublot 152.
Le réflecteur 130 est une pièce optique avec une face optiquement active et ici un substrat ayant une épaisseur non nulle qui sert de support à la face optiquement active. La face active est ici tournée vers un miroir de repliement 120 pour intercepter le faisceau lumineux réfléchi en provenance du miroir de repliement 120. Cette face active est au moins partiellement réfléchissante.
Préférentiellement, on utilise dans l’invention comme réflecteur 130 un miroir de puissance. Par exemple, le miroir de puissance peut être avoir une forme spécifiquement conçue pour produire certains effets, par exemple compenser la déformation liée à la réflexion sur le pare-brise (on utilise alors parfois dans ce cas la dénomination anglaise « freeform » pour qualifier le miroir de puissance). L’équation de surface de la face active n’est alors pas une simple sphère (miroir sphérique) mais peut s’écrire très simplement sous la forme d’une surface polynômiale (asphérique) en x et y, éventuellement additionnée d’un terme « conique », de révolution ou non. Dans d’autres modes de réalisation, les équations de surface peuvent s’écrire au moyen de polynômes de Zernike ou bien de Tchebychev.
Avantageusement, la servovalve à deux voies 30 est configurée pour être dans un état bloquant en l’absence de commande afin de placer rapidement l’actionneur 6 dans la position de repos.
Lorsque la servovalve à deux voies 30 est dans l’état passant, le premier fluide prélevé de la première source de fluide 40 est apte à circuler depuis la deuxième extrémité 34 de la deuxième conduite de fluide 24 à la première extrémité 32 de la deuxième conduite de fluide 24, puis de la première extrémité 32 de la deuxième conduite de fluide 24 à la première chambre 14. Si la pression du premier fluide est suffisante, alors le premier fluide pénètre brusquement dans la première chambre 14, la pression dans la première chambre 14 augmentant alors rapidement. La force exercée par la pression du fluide dans la première chambre 14 sur le piston 12 est alors supérieure à la somme de la force exercée par le moyen élastique de retour 26 sur le piston 12 et de l’effort externe de l’organe commandé par l’actionneur 6. Le piston 12 se déplace alors rapidement vers la première paroi 18 du vérin 8, le mouvement rapide se faisant ici à l’encontre de la force exercée par le moyen élastique de retour 26 sur le piston 12. Ce mouvement se poursuit jusqu’à un équilibre des forces sur le piston 12 dépendant au moins de la force exercée par le moyen élastique de retour 26 sur le piston 12, du débit de fluide circulant dans la première conduite de fluide 22 et du débit de fluide circulant dans la deuxième conduite de fluide 24.