INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Il est à noter que les solutions de l’état de la technique utilisant un point de contrôle centralisé, telles que le logiciel « Admiral » (dans sa version 1.2), permettent de construire une configuration multi-cluster que ce point de contrôle (orchestrateur central ou contrôleur d’orchestrateurs locaux situés dans les différentes grappes) est ensuite capable de déployer. Mais contrairement à l’invention, une fois déployée, cette configuration est essentiellement gelée. Aucune information ne remonte d’une grappe vers l’orchestrateur central ou le moyen mettant en œuvre le logiciel « Admiral » pour mettre à jour dynamiquement la configuration du plan de contrôle du maillage de service. Par exemple, si une nouvelle instance d’un service A est lancée pour répondre aux contraintes de déploiement du service A sur la grappe, le maillage de services déployé n’est pas impacté. Eu contraire, avec l’invention, l’agent local est informé de cette modification et met à jour la politique du maillage de services. Là où une solution fonde sur un système d’orchestration centralisé une boucle de régulation lente, la présente invention réalise une boucle de régulation rapide.
Puisque la gestion du plan de contrôle s’effectue par des agents locaux, la présente invention est plus résiliente en cas de panne de l’un ou de l’autre agent, qu’une solution fondée sur un point de contrôle centralisé, qui cesse de fonctionner si ce point de contrôle est défaillant ou si les communications avec ce point de contrôle sont rompues.
Procédé de distribution de clefs de session dans un réseau de télécommunication, procédés associés de traitement dans un client et un serveur, module client et serveurs associés. L’invention se situe dans le domaine de la distribution des clefs dans un réseau de télécommunication comportant des serveurs de distribution de clefs et des modules clients utilisant ces clefs pour communiquer entre eux.
Elle est particulièrement utile dans les systèmes embarqués et/ou temps-réel critiques.
On désigne par « clefs de session » l’ensemble des données cryptographiques permettant d’assurer la confidentialité et/ou l’intégrité des communications entre plusieurs clients, quel que soit le type de chiffrement utilisé. Ces clefs sont valables pendant une durée prédéfinie, et donc soumises à renouvellement périodiques. Elles comportent par exemple des clefs symétriques ou asymétriques, utilisées pour chiffrer ou signer des données.
L’augmentation notable des performances des communications sans fil ainsi que le développement de protocoles standards rend possible l’utilisation massive d’objets connectés en contexte industriel (IIoT) ou grand public (IoT).
Malgré les avantages qu’ils apportent en termes de flexibilité et de connectivité, l’utilisation de ces systèmes composés majoritairement d’objets connectés de type IoT/IIoT, sont un facteur d’exposition à des risques nouveaux qui peuvent impacter fortement la cyber-sécurité et, par suite, la sûreté de fonctionnement. En effet, la dernière décade a été également marquée par l’avènement d’attaques de plus en plus complexes sur les systèmes industriels (Stuxnet en 2010, Black Energy en 2017…), ayant causé des dégâts considérables à leurs victimes.
Parmi les nombreux protocoles de communication pour l'IoT et l'IIoT, les protocoles des couches transport et supérieures dans le modèle OSI semblent particulièrement aptes à porter la sécurité, notamment les protocoles DDS, MQTT, CoaP et OPC UA. Ceux-ci supportent, pour la communication opérationnelle, des paradigmes producteur-consommateurs : le modèle publish/subscribe (PubSub) est une alternative au modèle "Client/Serveur" traditionnel. Le modèle "PubSub" dissocie le client (appelé publisher) qui envoie un message particulier, auquel les clients abonnés (appelés subscribers) ont accès. Un troisième acteur, appelé le broker, connu à la fois par le publisher et le subscriber, filtre tous les messages entrants provenant des publishers et les distribue en conséquence aux subscribers (ou les notifie de la disponibilité de nouvelles données accessibles depuis le broker) en fonction du type de message, du sujet ou du contenu et de critères indiqués par les subscribers. En conséquence, le publisher ne connaît pas la liste des subscribers appelés à recevoir les données que le publisher envoie au broker. Il est important de noter que l’authentification et la distribution des clefs peuvent relever d’autres paradigmes, par exemple client/ serveur.
L’ébauche fibreuse selon la présente invention peut notamment être utilisée pour réaliser une aube de turbomachine présentant une géométrie plus complexe que l’aube représentée sur la , comme des aubes comportant, en outre de celle de la , une ou plusieurs plateformes permettant de réaliser des fonctions comme celles d’étanchéité de veine, d’anti-basculement, etc.
Système d’habillage d’angle saillant d’une toiture métallique Le domaine de l’invention est celui de la conception et de la fabrication de d’équipements de toitures métalliques de bâtiments.
L’invention concerne plus spécifiquement un système d’habillage des angles de toitures métalliques.
Dans le domaine de l’invention, les angles saillants de toiture métallique de bâtiment doivent être habillés.
Un angle saillant correspond par exemple à un faitage, ou à un arêtier.
Classiquement, des habillages de type profilé métallique sont utilisés pour couvrir les angles saillants.
De manière basique, un profilé peut être simplement vissé sur le support de la toiture pour habiller un angle saillant.
Il est également connu des pattes de fixation spécifiques à des toitures métalliques pour la fixation d’un habillage de type profilé métallique directement sur les plaques métalliques formant le revêtement de la toiture, l’ensemble étant conçu pour également permettre une ventilation de la toiture métallique.
De telles pattes de fixation sont par exemple conçues en deux parties dont une première se couple sur l’extrémité d’une plaque métallique d’une toiture, et une deuxième partie se couple sur l’habillage. L’articulation entre les deux parties permet d’adapter des différences inclinaisons entre les rebords de la tôle et celui de l’habillage.
Ce système précédemment décrit permet de réaliser un habillage dit « ventilé ». En effet, les pattes de fixation permettent de ménager un passage d’air entre le revêtement de la toiture et l’habillage de l’angle.
Un autre type d’habillage ventilé de faîtage est réalisé à partir du regroupement de deux profilés en acier galvanisé.
Un premier profilé forme une base couplée le long de l’angle, sur le support de la toiture. Plus précisément, le premier profilé présente une section en U dont le creux est orienté vers le support de la toiture. Ce premier profilé présente alors une pluralité d’ouvertures régulièrement réparties le long de son bord supérieur pour permettre un passage d’air.
Un deuxième profilé, formant l’habillage, est alors couplé en chevauchement sur le premier profilé à l’aide de pattes de fixation. Ce couplage est configuré pour permettre un passage d’air entre les deux profilé.
Par rapport au deux solutions précédemment décrites, des alternatives plus rapides à mettre en œuvre, plus intuitives et plus polyvalentes sont recherchées.
De plus, notamment par rapport au faitage ventilé en acier galvanisé qui fait particulièrement saillie d’une toiture métallique, il est recherché un système d’habillage qui s’intègre visuellement mieux sur une toiture.
L’invention a notamment pour objectifs de répondre aux besoins de l’art antérieur, et de pallier à aux inconvénients des solutions connues.
Selon un mode de réalisation, la nucléase est choisie parmi une méganucléase, une nucléase à doigt de zinc, une nucléase effectrice de type activateur de transcription (nucléase TALE), une nickase et une nucléase Cas. L’avantage des outils de type nucléase à doigt de zinc, nucléase TALE, CRISPR/nickase ou CRISPR/Cas est qu’ils peuvent être construit à façon afin de reconnaître une séquence d'ADN particulière. Selon un mode de réalisation préféré, la nucléase est ainsi choisie parmi une nucléase à doigt de zinc, une nucléase TALE et une nucléase Cas. Avantageusement, la nucléase est une nucléase Cas, de préférence CRISPR/Cas9.
Les méganucléases sont des endodésoxyribonucléases. A titre d’exemple les méganucléases I-SceI, I-CreI, I-DmoI peuvent être utilisées. Le site de reconnaissance d’une méganucléase comprend typiquement entre 12 et 40 paires de bases.
Les nucléases à doigts de zinc ou les nucléases Tale sont des enzymes de restriction artificielles. Elles sont créées par la fusion d'un domaine de liaison à l'ADN, respectivement de type « doigt de zinc » ou TALE (Transcription activator-like effector), et d'un domaine catalytique de coupure de l'ADN (FokI ou un variant). L’utilisation d’un variant du domaine FokI peut être envisagée afin d’améliorer l’activité ou la spécificité de l’outil (e.g. Guo et al.).
Les nucléases Cas sont des nucléases associées à l’outil CRISPR. L’outil CRISPR/Cas se compose (i) d’une protéine appelée Cas doté d’une activité nucléase permettant de couper un double brin d’ADN et (ii) d’un domaine de recrutement d’un ARN spécifique dit ARN guide. Ce dernier est composé d’une séquence variable d’environ 16-23 nucléotides qui permet de pointer un locus très précis de l’ADN cible, grâce à la complémentarité entre les environ 16-23 (par exemple 20) bases de l’ARN guide et les environ 16-23 (par exemple 20) bases cibles dans le génome de l’organisme. L’ARN guide est également composé d’une séquence nucléotidique invariable permettant la liaison entre l’ARN guide et la protéine Cas. Une fois le guide en place, l’activité nucléase de la protéine Cas s’active et coupe l’ADN à l’endroit précis et déterminé à l’avance (en choisissant la séquence d’ARN guide à façon). A titre d’exemple les nucléases Cas9 et Cas12 peuvent être utilisées.
Les nickases sont également des enzymes associées à l’outil CRISPR. Il s’agit d’enzyme de type Cas dans laquelle un des deux domaines de type nucléase est non fonctionnel (par mutation ou autre modification génétique). Par exemple, une nucléase Cas9 dans laquelle un des deux domaines HNH ou RuvC est inactivé est une nickase. De préférence la nickase est une nickase Cas9.
Toutes ces nucléases permettent de couper l’ADN double brin à un site de coupure précis, identifié et connu à l’avance. Selon un mode de réalisation, l’étape de coupure du double brin d’ADN sur chaque chromosome impliqué dans la translocation est ainsi effectuée au niveau du site de reconnaissance identifié d’une nucléase.
Selon un mode de réalisation de l’invention, le site de reconnaissance de ladite nucléase comprend au moins 12 paires de base. L’expression « au moins 12 paires de bases » s’entend avantageusement de 12 paires de base consécutives. Selon un mode de réalisation de l’invention, le site de reconnaissance de ladite nucléase comprend entre 12 et 40 paires de base, par exemple entre 12 et 20. L’expression « entre 12 et 40 paires de base » s’entend de toutes les valeurs comprises entre 12 et 40, soit 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 et 40.
La région cible selon l’invention doit contenir un site de reconnaissance d’une nucléase. Le choix de ce site de reconnaissance est déterminé en fonction de l’expérience à mener, du type de translocation chromosomique à réaliser, ... A titre d’exemple, le site de reconnaissance d’une nucléase peut être choisi afin que la translocation permette d’invalider un gène, identifier la position d’un transgène, …
Selon un mode de réalisation, la séquence du site de reconnaissance de la nucléase est uniquement présente dans le génome au niveau des sites de coupure d’intérêt. Cela signifie que le site de reconnaissance est spécifique, ce qui permet de s’assurer de la spécificité de la coupure aux sites souhaités et identifiés (et donc éviter les coupures indésirables).
De préférence, la translocation chromosomique selon l’invention s’entend d’une translocation chromosomique dirigée. Elle est réalisée après identification des régions cibles à réarranger, et éventuellement insertion d’au moins une cassette contenant le site de reconnaissance de la nucléase choisie aux sites chromosomiques souhaités.
Selon un mode de réalisation, le procédé de translocation chromosomique selon l’invention est caractérisé en ce qu’il comprend, avant l’étape de coupure du double brin d’ADN, une étape d’identification du site de reconnaissance de ladite nucléase.
Selon un mode de réalisation, le procédé de translocation chromosomique selon l’invention est caractérisé en ce qu’il comprend après l’étape d’identification du site de reconnaissance de ladite nucléase une étape de vérification que la séquence n’existe pas ailleurs dans le génome. Cette étape vise à confirmer que le site de reconnaissance est unique (présent uniquement au niveau des sites de coupure d’intérêt) et n’entrainera pas de coupure indésirable de l’ADN.
Selon un mode de réalisation, le procédé de translocation chromosomique selon l’invention est caractérisé en ce qu’il comprend avant l’étape de coupure du double brin d’ADN, une étape d’identification de la région cible. Cette étape peut être concomitante, ou non, à l’identification du site de reconnaissance de la nucléase.
Selon un mode de réalisation, le procédé de translocation chromosomique selon l’invention est caractérisé en ce qu’il comprend avant l’étape de coupure du double brin d’ADN, une étape d’insertion dans le génome d’un organisme, notamment un champignon, d’un ou plusieurs site(s) de reconnaissance de ladite nucléase dans les régions chromosomiques d’intérêt (e.g. les cibles de la translocation chromosomique). Cette étape est avantageusement suivie d’une étape d’identification et/ou sélection des clones d’intérêt (e.g. ceux dans lesquels la cassette a bien été intégrée dans le génome). Avant la translocation chromosomique, chaque région cible comprend ainsi le même site de reconnaissance de la nucléase.
Selon un mode de réalisation, dans le procédé de translocation chromosomique selon l’invention, l’insertion dans le génome d’un organisme d’au moins un site de reconnaissance d’une nucléase est effectuée à l’aide d’une cassette. La cassette selon l’invention comprend tous les éléments nécessaires à son intégration dans le génome. De préférence, ladite cassette comprend au moins un site de reconnaissance de ladite nucléase et un marqueur. Ledit marqueur peut comprendre le site de reconnaissance de la nucléase. Selon un mode de réalisation, le marqueur s’entend d’un marqueur de sélection, par exemple un gène dont l’expression confère aux cellules qui le contiennent une caractéristique permettant de les sélectionner, ou un gène dont la non-expression confère aux cellules qui contiennent une version défectueuse de ce gène une caractéristique permettant de les sélectionner par rapport aux cellules contenant une version fonctionnelle de ce même gène. L’utilisation d’un marqueur de sélection permet en effet d’identifier les cellules ayant intégré une modification génétique par rapport à celles qui ne l’ont pas intégrée. Il s’agit par exemple d’un gène de résistance aux antibiotiques, ou d’un gène modifiant l’auxotrophie d’un organisme, par exemple le gène URA3 ou URA5.
Plus particulièrement, une cassette selon l’invention comprend : - une région flanquante en amont du site de reconnaissance d’une nucléase, - ledit site de reconnaissance d’une nucléase, - une région flanquante en aval du site de reconnaissance d’une nucléase.
Notamment, la deuxième sous-étape a2) est exécutée de sorte que la concentration en base forte soit comprise entre 0,1 mol/L et 0,75 mol/L, avantageusement entre 0,25 mol/L et 0,5 mol/L.
La base forte considérée peut comprendre au moins l’une des espèces choisies parmi : soude (NaOH), potasse (KOH).
Par ailleurs, la deuxième sous-étape a2) peut être exécutée à une température supérieure à 60 °C, avantageusement supérieure à 70 °C, encore plus avantageusement supérieure à 75 °C.
Par ailleurs, la deuxième sous-étape a2) peut être d’une durée supérieure à 30 min, avantageusement supérieure à 45 min encore plus avantageusement supérieure à 1 heure.
A titre d’exemple, la deuxième sous-étape a2) peut être exécutée à une température de 80 °C et être d’une durée de 2 heures.
De cette deuxième sous-étape a2) résulte, en particulier, d’une extraction des pectines, des protéines.
Les inventeurs, sans être liés par l’explication qui suit, pensent que cette deuxième sous-étape a2) est de permettre une déméthylation, par exemple par saponification, des acides galacturoniques des pectines non solubilisées lors de l’exécution de la première sous-étape a1). A l’issue de cette déméthylation lesdites pectines voient leur solubilité augmenter en milieu aqueux.
Le mélange peut contenir des ions calcium et magnésium qui sont susceptibles d’interagir avec les fonctions carboxylates des pectines et ainsi gélifier ces dernières.
Afin d’éviter la gélification des pectines, il est également possible de considérer l’ajout, au cours de l’exécution de la deuxième sous-étape a2), d’un agent chélatant destiné à former préférentiellement des complexes avec les ions calcium et magnésium et de les rendre ainsi indisponibles pour la gélification des pectines. Cet agent chélatant peut comprendre de l’acide cyclohexane diamine tétraacétique (CDTA) ou de l’acide éthylène diamine tétraacétique (EDTA).
Ains, l’exécution de ces deux sous-étapes a1) et a2) conduit à la formation d’un premier résidu liquide PRL (le surnageant) et d’un premier produit solide PPS. Le premier produit solide PPS comprenant majoritairement de l’holocellulose (c’est-à-dire un complexe cellulose Cell/xyloglucane Xg) tandis que le premier résidu liquide PRL comprend les sucres libres, les oligosaccharides et les pectines initialement présentes dans les parois primaires de cellules végétales.
Le xyloglucane Xg présente une forte affinité avec la cellulose Cell. Aussi, afin de séparer ces deux espèces, il est proposé dans la présente invention de procéder à l’exécution d’une deuxième étape b).
Notamment, la deuxième étape b) comprend le mélange du premier produit solide (« l’holocellulose ») avec une deuxième solution, la deuxième solution comprenant la base forte à une concentration comprise 1 mol/L et 3 mol/L, avantageusement comprise entre 2 mol/L et 3 mol/L, par exemple égale 2,5 mol/L. La deuxième étape conduit à la séparation de la cellulose Cell et du xyloglucane Xg contenus dans ledit premier produit solide PPS.
La deuxième étape b) peut être exécutée à une température supérieure à 20 °C, avantageusement supérieure à 35 °C, encore plus avantageusement supérieure 50°C.
La deuxième étape b) peut être d’une durée supérieure à 30 min, avantageusement supérieure à 45 min, encore plus avantageusement supérieure à 1 heure.
La pureté de la cellulose Cell ainsi obtenue est supérieure à 75 % voire supérieure à 85 %, tandis que la pureté du xyloglucane Xg est supérieure à 80 % voire supérieure à 90 %.
Par ailleurs, le rendement d’extraction du xyloglucane Xg peut atteindre des valeurs de l’ordre de 5 %, voire au-delà, par rapport à masse sèche de cellules végétales initialement considérées lors de la mise en œuvre du procédé selon la présente invention.
Selon l’invention, une « région cible » s’entend d’une région chromosomique, plus particulièrement une région chromosomique à réarranger. Chaque région cible comprend un site de reconnaissance d’une nucléase, et pour une translocation donnée, toutes les régions cibles dans le génome comprennent le même site de reconnaissance de la nucléase. Selon un mode de réalisation, la région cible comprend naturellement le site de reconnaissance d’une nucléase, et/ou la région cible comprend un site de reconnaissance qui a été intégré au génome. Selon un mode de réalisation préféré, l’organisme comprend naturellement un site de reconnaissance d’une nucléase au sein d’une région cible et au moins un site de reconnaissance qui a été intégré au sein d’une autre région cible. Selon un mode de réalisation alternatif, l’organisme comprend uniquement des sites de reconnaissance intégrés dans les au moins deux régions cibles.
Le double brin d’ADN est ainsi coupé au moins deux fois dans le procédé selon l’invention. Selon un mode de réalisation, la coupure du double brin d’ADN est réalisée par une cassure double brin ou deux cassures simple brin. A titre d’exemple, une étape de coupure du double brin d’ADN sur chaque chromosome impliqué dans la translocation peut ainsi s’entendre de deux cassures double brin (une sur chaque chromosome) ou de quatre cassures simples brin (deux sur chaque chromosome).
Selon l’invention la translocation chromosomique s’effectue entre au moins deux régions cibles. Cela signifie que seules deux régions peuvent être réarrangées, mais cela signifie également que plus de deux régions, par exemple trois ou quatre, peuvent être réarrangées. Ladite translocation peut donc être simple (entre deux régions) ou complexe (entre au moins trois régions). Selon un mode de réalisation, la translocation chromosomique s’entend d’une translocation entre deux à quatre régions. Selon un mode de réalisation préféré, la translocation chromosomique s’entend d’une translocation entre deux régions uniquement. Selon un mode de réalisation préféré, la translocation chromosomique s’entend d’une translocation entre deux régions cibles et entre deux chromosomes.
Selon un mode de réalisation de l’invention, la translocation chromosomique n’entraine pas de perte de matériel génétique et/ou ladite translocation chromosomique entraine une perte de matériel génétique.
Selon un mode de réalisation, le procédé selon l’invention comprend au moins deux étapes de coupure du double brin d’ADN sur le même chromosome. A titre d’exemple, deux coupures sur le même chromosome sont donc réalisées, ce qui permet l’obtention de trois fragments chromosomiques, et seulement deux sont réarrangés, avec perte du matériel génétique présent sur le troisième fragment.
Selon un mode de réalisation, le procédé selon l’invention comprend au moins une étape de coupure du double brin d’ADN sur chaque chromosome impliqué dans la translocation. A minima, deux coupures sur deux chromosomes sont donc réalisées : une première coupure sur un premier chromosome et une deuxième coupure sur un deuxième chromosome. A titre exemple, trois ou quatre coupures peuvent également être réalisées : par exemple une coupure sur un premier chromosome et deux autres coupures sur un deuxième chromosome, ou encore deux coupures sur un premier chromosome et deux autres coupures sur un deuxième chromosome.
Selon un mode de réalisation, le procédé selon l’invention peut comprendre à la fois des étapes de coupure du double brin d’ADN au sein du même chromosome et entre des chromosomes différents.
Selon l’invention, chaque coupure du double brin est effectuée au niveau d’un site de reconnaissance d’une nucléase. Chaque chromosome impliqué dans la translocation comprend donc au moins un site de reconnaissance d’une nucléase (qui est identique). Tous les chromosomes impliqués dans la translocation comprennent donc au moins un site de reconnaissance d’une nucléase (qui est identique).
Le site de reconnaissance d’une nucléase correspond à une séquence d’acides nucléiques qui est spécifiquement ciblée par la nucléase. Selon un mode de réalisation, le site de reconnaissance est spécifique d’une seule nucléase. Cela permet avantageusement d’assurer la spécificité de la coupure du double brin à un site spécifiquement déterminé et identifiable dans le génome de l’organisme.
Selon un mode de réalisation, l’invention concerne un procédé de translocation chromosomique entre au moins deux régions cibles chez un organisme eucaryote, ledit procédé comprenant, au moins, une étape de coupure du double brin d’ADN au niveau de deux sites de reconnaissance d’une nucléase au sein du même chromosome, et ledit procédé étant caractérisé en ce que chaque région cible comprend le même site de reconnaissance de ladite nucléase.