INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Un autre objet de la présente invention est une méthode A pour produire au moins un métabolite, un peptide ou une protéine recombinante d’intérêt comprenant les étapes de a. culture de bactéries comprenant : (i) un gène codant pour ladite protéine recombinante ou au moins un gène codant pour une enzyme impliquée dans la production dudit peptide ou dudit métabolite, (ii) des gènes codant pour les sous-unités ββ’ de l’ARN polymérase bactérienne liée de manière fonctionnelle à un premier promoteur inductible, le promoteur naturel desdits gènes étant remplacé par ledit premier promoteur inductible, et (iii) un gène codant pour la sous-unité α de l’ARN polymérase bactérienne liée de manière fonctionnelle à un deuxième promoteur inductible, le promoteur naturel du gène étant remplacé par ledit deuxième promoteur inductible dans un premier milieu de culture induisant l’expression des gènes codant pour les sous-unités ββ’ et induisant en outre l’expression du gène codant pour la sous-unité α, induisant ainsi une croissance bactérienne ; b. culture desdites bactéries dans un deuxième milieu de culture inhibant l’expression des gènes codant pour les sous-unités ββ’ et inhibant en outre l’expression du gène codant pour la sous-unité α, produisant ainsi ledit (ladite) métabolite, peptide ou protéine recombinante tout en inhibant la croissance bactérienne ; c. optionnellement itération des étapes a. et b. successivement ; et d. optionnellement récupération dudit (de ladite) métabolite, peptide ou protéine recombinante produit(e) par lesdites bactéries.
Selon un mode de réalisation de la méthode de l’invention, chaque promoteur inductible est un promoteur dépendant de l’IPTG ou un promoteur dépendant du lactose.
Selon un autre mode de réalisation de la méthode de l’invention, le premier milieu de culture de l’étape a. comprend de l’IPTG ou du lactose et le deuxième milieu de culture de l’étape b. est exempt d’IPTG ou de lactose.
Selon un autre mode de réalisation de la méthode de l’invention, le gène codant pour ladite protéine recombinante ou ledit au moins un gène codant pour une enzyme impliquée dans la production dudit peptide ou dudit métabolite est transcrit par une deuxième ARN polymérase ayant une sous-unité catalytique ou des sous-unités catalytiques qui sont différentes des sous-unités ββ’ et de la sous-unité α de l’ARN polymérase liée de manière fonctionnelle au promoteur inductible.
Selon un autre mode de réalisation de la méthode de l’invention, la deuxième ARN polymérase est la polymérase du bactériophage T7.
Selon un autre mode de réalisation de la méthode de l’invention, les bactéries sont des bactéries Escherichia coli .
D’autres caractéristiques et avantages de l’invention ressortiront et/ou deviendront clairs à la lecture de la description suivante, qui comprend des exemples spécifiques donnés de manière illustrative et non limitative, ainsi que d’après les dessins dans lesquels :
La montre une vue conceptuelle de l’invention ;
La montre la construction génétique pour le contrôle dépendant de l’IPTG de la transcription de rpoBC et rpoA de l’invention ;
La montre une séquence selon un mode de réalisation de l’invention dans laquelle rpoBC est sous le contrôle d’un promoteur dépendant de l’IPTG ;
La montre une première partie d’une séquence selon un mode de réalisation de l’invention dans laquelle rpoA est remplacé par Cm dans l’opéron de protéines ribosomales commençant par rpsM ;
La montre une deuxième partie de la séquence de la ;
La montre une première partie d’une séquence selon un mode de réalisation de l’invention dans laquelle rpoA , qui est sous le contrôle d’un promoteur dépendant de l’IPTG ;
La montre une troisième partie de la séquence de la ;
La montre une quatrième partie de la séquence de la ;
Le troisième exemple de dispositif 25 illustré sur la diffère de l’exemple illustré sur la par le fait que le substrat 30 porte un plot de contact électrique 105 en périphérie du substrat 30. Le plot de contact électrique 105 est connecté électriquement à la cathode 70. Il facilite l’alimentation électrique de la cathode 70 pour appliquer un courant électrique entre la cathode 70 et l’anode 60 1 ou 60 2 . De plus, il facilite la mesure du signal électrique produit par une des couches photosensibles 90 1 , 90 2 , 95 1 et 95 2 . Notamment, lors d’une mesure par DRS, la cathode 70 est mise en contact avec le corps diffusant et/ou absorbant ou prise en sandwich entre le corps diffusant et/ou absorbant et le substrat 30. Le plot de contact électrique 105 rend plus accessible le contact électrique avec la cathode 70 pour un appareil d’alimentation et/ou de mesure de signal électrique.
Comme cela est également représenté par la , l’émetteur optique 35 et le détecteur optique 40 ne présentent pas les mêmes hauteurs h 1 et h 2 mesurées à partir du substrat selon un axe parallèle à l’épaisseur du substrat. Il en résulte une distance d 1 entre la face 36 de l’émetteur optique 35 et la face 41 du détecteur optique 40 qui sont chacune opposées au substrat 30. De préférence, la distance d 1 est inférieure à 100 µm, afin d’assurer un bon contact optique. Par ailleurs, dans le mode de réalisation représenté par la , l’écart de planéité de la face de contact 71 est au plus égal à la distance d 1 . Une diminution de la distance d 1 entraine, avantageusement, une diminution de l’écart de planéité.
On a illustré à la un quatrième exemple de dispositif 25 qui diffère de celui illustré sur la par le fait qu’il comprend un revêtement 110 transparent pour les longueurs d’onde comprise entre 400 nm et 1700 nm. Le revêtement 110 est disposé au contact de la cathode 70 et de la cathode 72. Il recouvre l’émetteur optique 35 et le détecteur optique 40. L’émetteur optique 35 et le détecteur optique 40 sont pris en sandwich entre le substrat 30 et le revêtement 110. Le revêtement 110 protège l’émetteur optique 35 et le détecteur optique 40, ce qui est particulièrement avantageux si ces derniers sont composés au moins en partie de matériaux organiques. Lors d’une mesure par DRS, le dispositif 25 est disposé sur le corps diffusant et/ou absorbant avec le revêtement 110 en contact avec le corps diffusant et/ou absorbant. Ainsi, la face de contact du dispositif est la face 111 du revêtement 110 opposée au substrat 30.
Comme cela est également représenté par la , le revêtement 110 comprend une marche 112 causée par la distance d 1 entre la face 36 de l’émetteur optique 35 et la face 41 du détecteur optique 40. Dans le mode de réalisation illustré à la , la marche 112 présente une hauteur d 2 égale à la distance d 1 . Toutefois, il peut être avantageux de diminuer la hauteur d 2 de la marche 112 en réalisant un revêtement 110 d’épaisseur non-uniforme, afin de diminuer l’écart de planéité de la face de contact 111 du dispositif 25. Il est notamment envisageable que la hauteur d 2 de la marche 112 et l’écart de planéité de la face de contact 111 soient sensiblement égales à 0 µm.
On a illustré à la une vue du dessus d’un autre exemple de dispositif 25 selon l’invention. L’émetteur optique 35 comprend dix sources lumineuses 50 1 -50 10 disposées périodiquement sur le substrat 30 selon cinq lignes et deux colonnes. Le détecteur optique 40 comprend douze capteurs optiques 75 1 -75 12 disposés périodiquement sur le substrat 30 selon quatre lignes et trois colonnes. Les nombres et dispositions des sources lumineuses et capteurs optiques ne sont pas limitatifs. D’autres dispositions peuvent être envisagées.
Chacune des sources lumineuses 50 1 -50 10 est configurée pour émettre un rayonnement lumineux de longueur d’onde différente des autres sources lumineuses 50 1 -50 10 .
La distance e entre les sources lumineuses 50 2 , 50 4 , 50 6 , 50 8 et 50 10 et les capteurs optiques 75 1 , 75 4 , 75 7 et 75 10 les plus proches est inférieure ou égale à 8 µm. La distance e est égale à l’épaisseur de la barrière optique 45, mais dans un autre exemple non représenté, l’épaisseur de la barrière optique 45 est inférieure à la distance e.
Les avantages du dispositif 25 apparaîtront à partir des différents modes d’utilisation qui sont décrits ci-après.
On a illustré à la un exemple d’utilisation d’un dispositif 25 selon l’invention. Il diffère de celui illustré sur la par la présence en lieu et place de la source lumineuse 10, du dispositif 25. L’émetteur optique 35 émet un rayonnement lumineux dans le tissu cutané 1. Une partie du rayonnement 20 1 est mesurée, après rétrodiffusion dans l’épiderme 2 du tissu cutané 1, par le capteur optique 15 1 et permet ainsi l’étude des chromophores 4 de l’épiderme 2. Une autre partie du rayonnement 20 2 est mesurée, après rétrodiffusion dans le derme 3 du tissu cutané 1, par le capteur optique 15 2 , et permet ainsi l’étude des chromophores 5 et 6 du derme 3. Une partie 20 3 du rayonnement est réfléchie par la surface du tissu cutané 1, cette réflexion spéculaire est mesurée par le détecteur optique 40 du dispositif 25
La mesure de la partie réfléchie spéculairement 20 3 du rayonnement permet de calibrer l’émetteur optique 35 de sorte que la réflexion spéculaire influence le moins possible les mesures des chromophores 4-6 du derme et/ou de l’épiderme. Autrement dit, les mesures des parties rétrodiffusées 20 1 et 20 2 du rayonnement sont corrigées en tenant compte de la mesure de la réflexion spéculaire 20 3 du rayonnement.
On a illustré à la un autre exemple d’utilisation du dispositif 25 selon l’invention. Le dispositif est en contact optique avec un corps diffusant et/ou absorbant 1. Le corps diffusant et/ou absorbant 1 comporte une première couche 2 et une deuxième couche 3. Dans l’utilisation du dispositif 25 représentée par la , des première 50 1 et deuxième 50 2 sources lumineuses émettent des premier et deuxième rayonnements lumineux dans le corps diffusant et/ou absorbant 1 Le premier rayonnement lumineux présente une longueur d’onde différente du deuxième rayonnement lumineux.
Une partie du premier rayonnement lumineux 20 1 et une partie du deuxième 20 2 rayonnement lumineux sont ensuite diffusés dans puis réfléchis par la première couche 2 du corps diffusant et/ou absorbant 1 jusqu’à des capteurs optiques 75 1 , respectivement 75 2 . Les capteurs optiques 75 1 et 75 2 mesurent les parties rétrodiffusées 20 1 et 20 2 des premier et deuxième rayonnements lumineux. Il est ainsi possible de déterminer la longueur d’onde la plus adaptée pour l’étude d’un élément de la première couche 2.
On a illustré à la un exemple d’utilisation d’une pluralité de dispositif 25 1 -25 5 selon l’invention pour des spectroscopie par réflectance diffuse d’un corps diffusant et/ou absorbant 1. Le corps diffusant et/ou absorbant 1 comprend des première, deuxième et troisième couches respectivement 2, 3 et 8 superposées entre elles. Cinq dispositif 25 1 -25 5 selon l’invention sont mis en contact optique avec le corps diffusant 1 et espacés les uns des autres. Les dispositif 25 2 -25 4 sont espacés du premier dispositif 25 1 en fonction de la profondeur cible dans le corps diffusant et/ou absorbant 1 qu’ils sont destinés à mesurer.
L’émetteur optique 35 1 du premier dispositif 25 1 émet un rayonnement lumineux dans le corps diffusant et/ou absorbant 1.
Une partie 20 1 du rayonnement lumineux circule dans la première couche 2 puis est rétrodiffusée par celle-ci. La partie rétrodiffusée 20 1 du rayonnement lumineux est ensuite mesurée par le détecteur optique 40 2 du deuxième dispositif 25 2 .
Une partie 20 2 du rayonnement lumineux s’enfonce jusqu’à puis circule dans la deuxième couche 3 puis est rétrodiffusée par celle-ci. La partie rétrodiffusée 20 2 du rayonnement lumineux est ensuite mesurée par le détecteur optique 40 3 du troisième dispositif 25 3 .
Avantageusement, les premiers moyens de blocage et les deuxièmes moyens de blocage comprennent des dents de forme complémentaire.
Afin de permettre une grande réactivité dans le blocage en rotation du rotor du premier actionneur, les premiers moyens de blocage sont répartis radialement sur tout ou partie de la circonférence de la surface extérieure du rotor, de préférence sur toute la circonférence de la surface extérieure du rotor.
Avantageusement, le premier actionneur et/ou le deuxième actionneur est un moteur à courant continu sans balais.
L’invention se rapporte également à un système de freinage comprenant un dispositif de serrage selon l’une quelconques des variantes précédentes, une unité de commande électronique et un boitier, le premier actionneur, le deuxième actionneur et l’unité de commande électronique étant situés au sein du boitier.
L’invention se rapporte également à un procédé de freinage pour un dispositif de serrage selon l’une quelconque des variantes précédentes, le procédé de freinage comprenant les étapes suivantes :
- mise sous tension du premier actionneur, le rotor du premier actionneur étant mobile en rotation de sorte à fournir une force de serrage aux éléments de friction,
- réduction de la vitesse de rotation du rotor,
- mise sous tension du deuxième actionneur pour exercer un déplacement relatif entre les premiers moyens de blocage et les deuxièmes moyens de blocage de sorte qu’ils coopèrent les uns avec les autres afin de bloquer le rotor en rotation,
- mise hors tension des deux actionneurs.
Avantageusement, le deuxième actionneur a une vitesse de rotation comprise entre 1 et 2 tr/min.
Avantageusement, la mise sous tension du deuxième actionneur engendre la mise en rotation de la came jusqu’à ce que les dents réparties sur la crémaillère entrent en contact avec les dents réparties radialement sur la surface extérieure du rotor du premier actionneur.
la est une vue schématique illustrant un mode de réalisation du dispositif selon l’invention,
la est une vue schématique illustrant une variante de réalisation du mode de réalisation illustré à la ,
la est un ensemble de vues schématiques (figure 3a, 3b et 3b) illustrant le fonctionnement du dispositif selon le mode de réalisation illustré à la .
Description détaillée On a représenté sur les figures 1 à 3c un dispositif de serrage selon un premier mode de réalisation (figures 1 et 3a à 3c) et selon une variante de réalisation ( ), désigné par la référence générale 1.
L’étape de stabilisation 4 consiste à demander à la pile à combustible 10 de produire une densité de courant faible, égale à la valeur basse, pendant une durée prédéterminée. Au cours de cette étape, puisque la densité de courant est faible, alors la tension de cellule est relativement élevée.
Cette étape a pour principal objectif de stabiliser les conditions de fonctionnement de la pile, c’est-à-dire de stabiliser la température, le taux d’humidité et la pression régnant dans les compartiments anodique et cathodique, ainsi que la répartition des gaz réactifs au sein de ces compartiments.
L’étape de stabilisation 4 permet également, grâce à la tension de cellule élevée, d’obtenir des conditions favorables à l’oxydation de certaines impuretés de la couche catalytique cathodique 24, permettant de désorber ces impuretés.
L’étape de stabilisation 4 a une durée de préférence comprise entre 1 minute et 5 minutes. Dans l’exemple, l’étape de stabilisation 4 dure 3 minutes. En pratique, cette durée dépend essentiellement des dimensions des cellules 12, et plus particulièrement des assemblages membrane-électrode 14, car plus les dimensions des cellules sont importantes, plus la stabilisation des conditions de fonctionnement de la pile est longue.
L’étape d’appauvrissement en oxygène 5 consiste, à partir des conditions stables obtenues à l’issue de l’étape de stabilisation 4, à demander une production de courant constante à la pile à combustible 10, avec une densité de courant égale à une valeur minimale, puis à fermer partiellement ou complètement l’alimentation en air de la pile à combustible pour obtenir, dans tous les cas, un coefficient stœchiométrique cathodique strictement inférieur à 1, de préférence inférieur ou égal à 0,9.
La valeur minimale de densité de courant est inférieure ou égale à la valeur basse. De préférence, la valeur minimale est une valeur non-nulle et inférieure ou égale à 0,3 A/cm². De préférence encore, la valeur minimale est comprise entre 0,01 A/cm² et 0,3 A/cm². Dans l’exemple, la valeur minimale est égale à 0,02 A/cm².
En pratique, au début de l’étape d’appauvrissement en oxygène 5, l’entrée d’air 32 est réglée de manière à obtenir un coefficient stœchiométrique cathodique strictement inférieur à 1, de préférence inférieur ou égal à 0,9, plus préférentiellement réglée de manière à couper entièrement l’alimentation en air, par exemple à l’aide d’une vanne, de sorte que dès le démarrage de l’étape, l’alimentation en air du compartiment cathodique se trouve limitée, voire entièrement stoppée. Tout au long de cette étape, la réaction de réduction se produisant au niveau de la couche catalytique cathodique 24, qui consomme de l’oxygène pour produire des molécules d’eau, consomme donc progressivement tout l’oxygène déjà présent dans le compartiment cathodique au moment de la fermeture de l’alimentation en air, et dans les cas où l’entrée d’air 32 est réglée de manière à obtenir un coefficient stœchiométrique cathodique strictement inférieur à 1 sans être entièrement coupée, consomme aussi tout l’oxygène qui continue d’être apporté par l’alimentation en air réduite. En effet, l’oxygène n’est pas renouvelé en quantité suffisante au sein du compartiment cathodique, puisque l’air n’est pas renouvelé en quantité suffisante par rapport à la quantité qui serait nécessaire à la réaction, le coefficient stœchiométrique cathodique étant strictement inférieur à 1, ce qui implique une consommation d’oxygène plus rapide que son renouvellement. La quantité d’oxygène dans le compartiment cathodique diminue donc tout au long de l’étape d’appauvrissement en oxygène 5, ce qui conduit à réduire le nombre de réactions électrochimiques se produisant au niveau de la couche catalytique cathodique 24. Du fait de cette réduction, la puissance pouvant être fournie par la pile à combustible 10 diminue progressivement, ce qui entraîne une baisse progressive de la tension de cellule, puisque la densité de courant est imposée par la charge électrique, à un niveau égal à la valeur minimale. Ainsi, la coupure complète ou partielle de l’alimentation en air de la pile à combustible, telle que définie ci-dessus, avec un coefficient stœchiométrique cathodique strictement inférieur à 1, entraîne une diminution progressive de la tension de cellule.
Une étape d’appauvrissement en oxygène au cours de laquelle le coefficient stœchiométrique cathodique est strictement inférieur à 1 est en outre désignée comme une étape « d’appauvrissement global », également désignée en anglais sous l’expression « global starvation ».
En outre, l’étape d’appauvrissement en oxygène 5 peut également être prévue de sorte à obtenir une coupure progressive de l’alimentation en air, jusqu’à atteindre une coupure totale ou partielle. Par ailleurs, si une telle coupure progressive de l’alimentation en air est mise en œuvre, alors l’étape d’appauvrissement en oxygène 5 débute de préférence avec l’entrée d’air 32 réglée de sorte à obtenir un coefficient stœchiométrique cathodique strictement inférieur à 1, puis, au cours de l’étape 5, l’entrée d’air 32 est réglée de sorte à diminuer progressivement le coefficient stœchiométrique cathodique. Ainsi, même lorsque la coupure de l’alimentation en air est progressive, le coefficient stœchiométrique cathodique est, à chaque instant, strictement inférieur à 1. De préférence, en passant de l’étape de stabilisation 4 à l’étape d’appauvrissement en oxygène 5, on passe donc d’un coefficient stœchiométrique cathodique très nettement supérieur à 1, par exemple supérieur ou égal à 1,8, voire supérieur ou égal à 2, à un coefficient stœchiométrique cathodique strictement inférieur à 1, de préférence inférieur ou égal à 0,9. Cette modification du coefficient stœchiométrique cathodique s’effectue selon un échelon, c’est-à-dire de manière quasi-instantanée par rapport à la dynamique de la pile, c’est-à-dire par rapport à sa réaction aux changement de coefficient stœchiométrique cathodique. En d’autres termes, la modification du coefficient stœchiométrique cathodique n’est pas progressive, mais brusque. Il est à noter que le coefficient stœchiométrique cathodique très nettement supérieur à 1, par exemple supérieure ou égal à 1,8, peut être maintenu de manière constante à cette valeur pendant les étapes 1 à 4.
La diminution progressive de la tension de cellule, pendant l’étape d’appauvrissement en oxygène 5, est mieux visible sur la , où elle est représentée de manière schématique par la courbe B, pour une coupure complète de l’alimentation en air, c’est-à-dire pour un coefficient stœchiométrique cathodique égal à 0, ou sensiblement égal à 0.
Comme visible sur la courbe B de la , au cours de l’étape d’appauvrissement en oxygène 5, la tension de cellule est décroissante de manière monotone, c’est-à-dire que la tension de cellule décroit en permanence, sans aucune augmentation, même de faible durée ou de faible amplitude. En outre, la vitesse de décroissance de la tension de cellule est croissante de manière monotone, c’est-à-dire que la tension de cellule décroit de plus en plus vite au fur et à mesure de l’étape d’appauvrissement en oxygène. Ce profil de tension de cellule est provoqué par la diminution progressive de la quantité d’oxygène disponible dans le compartiment anodique, qui entraîne une chute de tension de cellule de plus en plus rapide.
À la est également représentée, par la courbe A, le profil de tension de cellule qui se produirait en cas de réduction de la sur-stœchiométrie en air avec un coefficient stœchiométrique cathodique supérieur ou égal à 1 et inférieur au coefficient cathodique nominal, comme cela est réalisé dans les techniques connues de réduction de la sur-stœchiométrie en air. Une réduction de la sur-stœchiométrie en air consiste donc à fixer le coefficient stœchiométrique cathodique à une valeur comprise entre le coefficient stœchiométrique cathodique nominal et 1, et s’obtient en réduisant le débit d’alimentation en air, par rapport au débit nominal. Cette réduction de la sur-stœchiométrie en air peut également être désignée en tant que réduction de la sur-stœchiométrie en oxygène, ou en tant que réduction de la sur-stœchiométrie cathodique. Comme cela ressort de la courbe A, une telle réduction de l’alimentation en air, c’est-à-dire une réduction de la sur-stœchiométrie en air, entraîne une diminution progressive de la tension de cellule, en moyenne, mais avec des fluctuations importantes de cette tension de cellule. Cette fluctuation provoque des dégradations de la pile à combustible, comme par exemple la dissolution du platine, et/ou la corrosion du séparateur bipolaire, et/ou la corrosion du carbone qui est généralement un des composants de la couche catalytique, et/ou une dégradation de la membrane due à l’apparition de points d’excès de chaleur.