INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
En théorie, dans le cas d’une réduction de la sur-stœchiométrie en air, la pile à combustible dispose de suffisamment d’oxygène pour atteindre la production de densité de courant recherchée en un point de fonctionnement stable, c’est-à-dire en délivrant une tension stable aux bornes de la pile à combustible, puisque le coefficient stœchiométrique est supérieur ou égal à 1. Ce point de fonctionnement stable serait déterminé, en fonction de la production de densité de courant recherché, par la courbe de polarisation des cellules 12 de la pile à combustible. Cependant, en pratique, lorsque le coefficient stœchiométrique cathodique est inférieur au coefficient stœchiométrique cathodique nominal, et a fortiori, proche de 1, alors des manques locaux de molécules de dioxygène sont observés au niveau des sites actifs de la couche catalytique cathodique. En effet, pour atteindre les sites actifs, les molécules de dioxygène doivent traverser la couche de diffusion de gaz 18 puis pénétrer au sein de la couche catalytique cathodique 24, ce qui nécessite un certain temps de trajet. Ainsi, on observe qu’au moment où une molécule de dioxygène atteint un site actif, elle est immédiatement consommée dans une réaction de réduction, ce qui génère une aspiration entraînant d’autres molécules de dioxygène vers le site actif, mais que, du fait de l’absence de suralimentation en oxygène, ces autres molécules de dioxygène n’atteignent le site actif qu’au bout d’une certaine durée, pendant laquelle un manque de réactif est alors observé, c’est-à-dire que, pendant cette durée, aucune réaction de réduction n’a lieu au niveau du site actif. Pour chaque site actif, on observe alors une alternance de périodes où des réactions de réduction se produisent, et des périodes où aucune réaction de réduction n’a lieu. Au niveau d’une cellule 12, et au niveau de la pile à combustible 10, cette alternance entraîne des fluctuations dans la tension de cellule, comme montré sur la courbe A. En pratique, choisir un coefficient stœchiométrique nominal supérieur à 1, par exemple égal à 1,8, contribue également à éviter ces fluctuations, car la surabondance d’oxygène assure une alimentation permanente des sites actifs en oxygène.
En outre, on observe, sur la courbe A, une diminution progressive de la tension de cellule, une fois les fluctuations moyennées. Cette diminution progressive au fur et à mesure de réduction de la sur-stœchiométrie en air est causée par des dégradations réversibles et/ou irréversibles se produisant dans la pile combustible. Ces dégradations sont une conséquence des fluctuations de tension de cellule, et sont notamment causées par des manques locaux d’hydratation de la membrane échangeuse de protons 20 de chaque cellule 12, ce manque d’hydratation étant lui-même causé par les manques répétés de réactions de réduction, localement au niveau des sites actifs. En outre, du fait des fluctuations de tension de cellule se produisant, on observe une fluctuation du rendement de la pile à combustible 10 et, par conséquent, une fluctuation de la température de la pile à combustible. Ces fluctuations éloignent la pile à combustible de ses paramètres de fonctionnement optimaux, ce qui génère également les dégradations observées. Par ailleurs, on constate que la tension de cellule moyenne observée sur la courbe A tend à diminuer puis à se stabiliser à une valeur supérieure à 0V. En pratique, plus le coefficient stœchiométrique cathodique est proche de 1, en étant supérieur à 1, alors plus la tension de cellule moyenne observée sur la courbe A, moyennée sur un intervalle de temps couvrant plusieurs fluctuations, tend à se stabiliser à une valeur asymptotique qui diminue quand le coefficient stœchiométrique cathodique s’approche de 1 en restant supérieur à 1, sans pour autant devenir nulle. Dans le même temps, plus le coefficient stœchiométrique cathodique est proche de 1, en étant supérieur à 1, alors plus la tension de cellule va fluctuer, autour de cette valeur moyenne, avec une amplitude de fluctuation qui augmente quand le coefficient stœchiométrique cathodique s’approche de 1 en restant supérieur à 1. Enfin, plus le coefficient stœchiométrique cathodique est proche de 1, en étant supérieur à 1, alors plus la tension de cellule minimale observée lors d’une fluctuation de la courbe A tend à se rapprocher de 0V.
Il est à noter que ce phénomène de fluctuation ne s’observe pas sur la courbe B, lorsque la coupure de l’alimentation en air est complète, car, puisqu’aucune nouvelle molécule de dioxygène n’est fournie au compartiment cathodique, alors l’aspiration générée au niveau de chaque site actif n’est pas en mesure d’entraîner de nouvelles molécules de dioxygène vers le site actif. Sur la courbe B, la tension de cellule diminue donc progressivement, au fur et à mesure de la consommation par chaque site actif des molécules de dioxygène.
À la , est également représentée de manière schématique par la courbe C la diminution de tension de cellule observée dans le cas d’une coupure partielle de l’alimentation en air, avec un coefficient stœchiométrique cathodique strictement compris entre 0 et 1. Dans l’exemple de la courbe C, le coefficient stœchiométrique cathodique est égal à 0,5. Du fait de la coupure partielle de l’alimentation en air, un apport partiel en air est maintenu, mais cet apport est insuffisant pour maintenir la tension de cellule. En pratique, les molécules de dioxygène apportées par l’entrée d’air 32 sont consommées de plus en plus vite, au fur et à mesure que le dioxygène présent dans le compartiment cathodique au début de l’étape 5 est consommé. Ainsi, les molécules de dioxygène sont consommées par des sites actifs de plus en plus proches de l’entrée d’air 32 et n’ont donc pas la possibilité d’atteindre des sites actifs plus éloignés de l’entrée d’air. On observe donc, pour chaque cellule 12, une zone sans production de courant de plus en plus importante. En pratique, dans le cas d’une coupure partielle de l’alimentation en air, la diminution de tension de cellule est plus longue que dans le cas d’une coupure totale. En d’autres termes, la diminution de tension de cellule est ralentie, du fait de l’alimentation partielle en air qui est maintenue. Par ailleurs, des fluctuations pourront également être observées, d’amplitude inférieure aux fluctuations observées sur la courbe A. Ces fluctuations étant moins marquées, leur impact ne provoque pas, ou peu, de dégradations de la pile à combustible.
- chacune des encoches a une forme générale en V ou en coin et comprend une extrémité fine et une extrémité élargie qui est située du côté d’une extrémité libre de la branche correspondante ;
- chacune des encoches comprend une première partie qui débouche à l’intérieur du raccord femelle, et une seconde partie qui définit une marche, cette marche étant configurée pour coopérer par appui radial avec une extrémité libre de la branche correspondante, afin de maintenir l’épingle dans sa position non fonctionnelle ;
- ladite marche comprend un coin saillant du côté de la lumière correspondante, ce coin saillant comportant un ergot de retenue de l’épingle dans sa position non fonctionnelle ;
- ladite marche est reliée, du côté opposé à l’ergot, à une butée d’arrêt de l’épingle ;
- les marches du raccord femelle comprennent des surfaces parallèles de glissement des extrémités libres des branches ;
- dans sa position fonctionnelle, l’épingle est apte à se déplacer dans un plan perpendiculaire audit premier axe, et dans sa position non fonctionnelle, l’épingle est apte à se déplacer dans un plan différent, qui est de préférence incliné par rapport audit premier axe ;
- ladite partie du raccord mâle est une partie tronconique qui comprend une extrémité amont de plus petit diamètre et une extrémité aval de plus grand diamètre, cette partie coopérant par appui avec lesdites portions dans des zones qui sont plus proches de son extrémité aval que de son extrémité aval ;
- le raccord femelle comprend des renfoncements qui sont sensiblement diamétralement opposés par rapport audit premier axe, et qui sont configurés pour accueillir des extrémités libres pliées desdites branches lorsque l’épingle est déplacée depuis sa position fonctionnelle à une position de démontage dans laquelle l’épingle a ladite configuration écartée ;
La présente invention concerne également un circuit de fluide pour un véhicule automobile, comportant au moins un connecteur tel que décrit ci-dessus.
La présente invention concerne également un procédé d’assemblage d’un connecteur fluidique tel que décrit ci-dessus, comprenant les étapes de :
- montage de l’épingle sur le raccord femelle, l’épingle étant dans sa position non fonctionnelle, et
- engagement du raccord mâle dans le raccord femelle, cet engagement provoquant le déplacement de l’épingle de sa position non fonctionnelle à sa position fonctionnelle dans laquelle lesdites portions sont situées au niveau de ladite au moins une lumière et se logent dans la gorge du raccord mâle par retour élastique.
la est une vue schématique en perspective d’un raccord femelle et d’une épingle pour un connecteur selon l’invention ;
la est une vue schématique en perspective d’un raccord mâle pour un connecteur selon l’invention ;
la est une vue schématique de face du raccord mâle de la ;
La sous-unité α est présente dans deux copies par molécule d’ARN polymérase : α I et α II , également appelée α 2 . Chaque sous-unité α contient deux domaines : αNTD (domaine N-terminal) et αCTD (domaine C-terminal). αNTD contient des déterminants pour l’assemblage de l’ARN polymérase. αCTD contient des déterminants pour l’interaction avec l’ADN promoteur, à savoir le domaine C-terminal de la sous-unité α reconnaît des éléments de promoteur en amont.
La sous-unité α est produite en excès pendant la croissance cellulaire. Étant donné l’abondance de la sous-unité α de l’ARN polymérase, les résultats de l’invention sont absolument surprenants en ce qu’un commutateur de contrôle situé dans la zone rpoA peut radicalement augmenter la stabilité génétique du commutateur de contrôle connu tout en préservant sa capacité de production métabolique. La stabilité génétique combinée à la capacité de production métabolique à haut débit de l’invention est une amélioration drastique comparativement aux systèmes de l’état de l’art.
La montre la construction génétique pour le contrôle dépendant de l’IPTG de la transcription de rpoBC et rpoA de l’invention.
La figure 2A montre le contrôle de l’expression de rpoBC par l’intermédiaire du promoteur T5 inductible par IPTG (tel que divulgué et abordé dans l’EP 3 047 031). Plus particulièrement, la séquence en amont de rpoBC a été modifiée par insertion du promoteur T5 inductible par IPTG (T5p) avec deux sites de liaison à lacO et un marqueur de sélection avec le gène de résistance à la spectinomycine et son promoteur spcRp. L’insertion de cette séquence par recombinaison homologue permet la régulation de l’expression de rpoBC par ajustement de la concentration d’IPTG dans le milieu (cf. Lutz R, Bujard H. 1997, Independent and tight regulation of transcriptional units in Escherichia coli via the LacR/O, the TetR/O and AraC/I1-I2 regulatory elements, Nucleic Acids Res 25:2003–20) . En l’absence de l’inducteur, la protéine LacI se lie aux sites lacO et empêche la liaison à l’ARN polymérase.
La figure 2B montre le contrôle de l’expression de rpoA par l’intermédiaire du même système régulateur. Elle montre la réalisation du contrôle génétique de rpoA de l’invention au niveau des séquences. La sous-unité α de l’ARN est codée par le gène rpoA . Le locus rpoA d’origine sur le génome de E. coli a été modifié par recombinaison homologue (Sharan, S.K., Thomason, L.C., Kuznetsov, S.G., et Court, D.L. (2009). Recombineering: a homologous recombination-based method of genetic engineering. Nat Protoc 4 , 206–223), en remplaçant la région de codage de rpoA par la région de codage d’un marqueur de sélection conférant une résistance au chloramphénicol (cmR). L’introduction du gène codant pour la résistance au chloramphénicol fournit une sélection idéale des recombinants concluants. Selon l’invention, le gène rpoA , comportant le promoteur inductible, a été déplacé de son emplacement naturel sur le chromosome à un autre emplacement, la séquence sokA-insKJ-hokA . Cette séquence a été choisie puisqu’elle se trouve approximativement à la même distance de l’origine de la réplication que l’opéron rpoBC . Les gènes sokA-insKJ-hokA ne sont pas essentiels à la croissance de la bactérie et ont été supprimés par la procédure de clonage. Selon l’invention, l’expression de rpoBC et de rpoA peut être contrôlée en ajustant la concentration d’IPTG dans le milieu.
La figure 2C montre l’emplacement des gènes sur le chromosome de E. coli. Elle résume les changements résultants sur le chromosome de E. coli dus aux modifications ci-dessus.
La montre une séquence selon un mode de réalisation de l’invention dans laquelle rpoBC est sous le contrôle d’un promoteur dépendant de l’IPTG. Tous les éléments de promoteur et les gènes sont indiqués.
La et la montrent une séquence selon un mode de réalisation de l’invention dans laquelle rpoA est remplacé par Cm dans l’opéron de protéines ribosomales commençant par rpsM . Ce mode de réalisation est destiné à éviter l’expression de rpoA dans les conditions naturelles et à conférer une résistance au chloramphénicol (cmR). Tous les gènes pertinents sont annotés sur la figure selon la nomenclature standard.
La , la , la et la montrent une séquence selon un mode de réalisation de l’invention dans laquelle rpoA , qui est sous le contrôle d’un promoteur dépendant de l’IPTG, est inséré au niveau de la position et en remplacement de la séquence sokA-insKJ-hokA. Tous les gènes pertinents sont annotés sur la figure selon la nomenclature standard.
En conséquence, un mode de réalisation de la bactérie (ou d’une souche bactérienne) de la présente invention comprend une séquence nucléotidique ayant au moins 80 %, préférentiellement 90 %, et plus préférentiellement 100 % d’identité avec la séquence de la (SEQ ID : 1).
Un autre mode de réalisation de la bactérie de la présente invention comprend une séquence nucléotidique ayant au moins 80 %, préférentiellement 90 %, et plus préférentiellement 100 % d’identité avec la séquence des figures 4 et 5 (SEQ ID : 2).
Un autre mode de réalisation de la bactérie de la présente invention comprend une séquence nucléotidique ayant au moins 80 %, préférentiellement 90 %, et plus préférentiellement 100 % d’identité avec la séquence des figures 6, 7, 8 et 9 (SEQ ID : 3).
Préférentiellement, la bactérie de la présente invention comprend une séquence nucléotidique ayant au moins 80 %, préférentiellement 90 %, et plus préférentiellement 100 % d’identité avec les séquences des figures 3 à 9 (SEQ ID : 1, SEQ ID : 2 et SEQ ID : 3).
La procédure pour augmenter les rendements de production dans les bioréacteurs en utilisant la nouvelle souche est la même que pour la souche précédente, voir EP 3 047 031. Des tests ont montré que la nouvelle souche préserve l’aptitude à déclencher et interrompre la croissance en apportant l’IPTG au milieu et en le supprimant du milieu, respectivement. Les résultats démontrent également que le rendement de production de glycérol à partir du glucose après arrêt de la croissance est préservé. De plus, les résultats montrent que la stabilité génétique de la souche améliorée est supérieure à celle de la souche d’origine.
La montre la stabilité génétique accrue de la souche avec le contrôle de l’expression des sous-unités ββ’ et de la sous-unité α comparativement au contrôle de l’expression des sous-unités ββ’ seulement.
Sur la figure 10A, la souche, dans laquelle l’expression des gènes rpoBC est sous le contrôle d’un promoteur inductible par l’IPTG, a été précultivée dans un milieu minimal M9 avec du glucose à 0,2 % auquel a été ajouté de l’IPTG (250 µM) dans 40 réplicats biologiques. Ensuite, chaque culture répliquée a été lavée, diluée et remise en suspension dans le même milieu sans IPTG, empêchant ainsi la synthèse de nouvelles sous-unités ββ’ d’ARN polymérase. En tant que témoin, trois réplicats ont été lavés, dilués et remis en suspension dans le même milieu avec de l’IPTG. En partant d’une densité optique faible de 0,005, la croissance a alors été surveillée à 24 h et 96 h après le début de la culture. Alors qu’aucune des cultures ne s’était échappée après 24 h, 33 des 40 cultures s’étaient échappées après 96 h, tel qu’indiqué par une densité optique proche de la densité optique des témoins.
En outre, la surface Su LT (en m²) de la section transversale caractéristique du dispositif de transmission acoustique 5 est définie selon l’équation suivante :
où P0 est la pression atmosphérique (en Pa), Pr HP est la pression maximale (en Pa) exercée sur l’air par la membrane du haut-parleur 3, Vo HP est le volume d’air maximal (en m 3 ) déplacé par la membrane du haut-parleur 3, et Lo LT est la longueur caractéristique (en m) du dispositif de transmission acoustique 5.
Si l’on se réfère à la , on peut voir qu’il y est représenté une enceinte acoustique 7 selon un deuxième mode de réalisation de la présente invention.
Les éléments communs entre le premier mode de réalisation de l’invention sur la et ce deuxième mode de réalisation de l’invention portent le même chiffre de référence, et ne seront pas décrits plus en détail ici lorsqu’ils sont de structures identiques.
L’enceinte acoustique 7 selon le deuxième mode de réalisation est identique à l’enceinte acoustique 1 selon le premier mode de réalisation, à l’exception du fait qu’elle comprend en outre :
- un second haut-parleur 8 disposé dans une seconde chambre 9 de la boîte 2 et dont la partie avant obture une seconde ouverture 2b formée dans la boîte 2 ;
- un second évent 10 débouchant sur l’extérieur ; et
- un second dispositif de transmission acoustique 11 sous la forme d’une ligne de transmission acoustique s’étendant entre une extrémité d’entrée 11a, formée dans la seconde chambre 9 et configurée pour recevoir les ondes sonores émises depuis l’arrière du second haut-parleur 8, et une extrémité de sortie 11b débouchant dans le second évent 10.
Le second dispositif de transmission acoustique 11 est configuré pour propager les ondes sonores émises depuis l’arrière du second haut-parleur 8 vers le second évent 10. Le second dispositif de transmission acoustique 11 possède une longueur caractéristique et une section transversale caractéristique constante, ladite longueur caractéristique et ladite section transversale caractéristique étant dimensionnées de telle sorte que la résistance acoustique du second dispositif de transmission acoustique 11 est identique à la résistance acoustique du second haut-parleur 8.
Il est à noter que l’enceinte acoustique 7 pourrait également comprendre un nombre quelconque de haut-parleurs, chacun associé à un évent distinct et à un dispositif de transmission acoustique distinct, sans s’écarter du cadre de la présente invention.
Si l’on se réfère à la , on peut voir qu’il y est représenté une enceinte acoustique 12 selon un troisième mode de réalisation de la présente invention.
Les éléments communs entre le deuxième mode de réalisation de l’invention sur la et ce troisième mode de réalisation de l’invention portent le même chiffre de référence, et ne seront pas décrits plus en détail ici lorsqu’ils sont de structures identiques.
L’enceinte acoustique 12 selon le troisième mode de réalisation est identique à l’enceinte acoustique 7 selon le deuxième mode de réalisation, à l’exception du fait que :
- les deux haut-parleurs 3 et 8 sont identiques, adjacents et disposés dans une chambre commune 6 de la boîte 2 ;
- l’enceinte acoustique 12 possède une ouverture commune 2a pour les deux haut-parleurs 3 et 8 ;
A titre d’exemple indicatif, il peut également être envisagé que l’antenne de réception auxiliaire 20 soit une antenne patch de petites dimensions accolées directement sur les antennes des différents émetteurs perturbateurs 4. En variante, un dispositif aérien de petites dimensions, tel qu’un drone par exemple, positionné en vis-à-vis, c’est-à-dire à distance, de l’émetteur perturbateur 4 apte à détecter le signal perturbateur peut être disposé à faible distance de l’émetteur perturbateur 4 de manière à être dans le champ proche de l’émetteur perturbateur 4.
L’utilisation d’un dispositif aérien à distance présente l’avantage de pouvoir recevoir plusieurs signaux perturbateurs de différents émetteurs perturbateurs en même temps ce qui diminue le nombre d’antenne de réception auxiliaires 20 nécessaires. Néanmoins, un tel dispositif aérien peut être difficile à mettre en place, notamment à cause de l’impact de l’environnement et peut parfois perturber le fonctionnement de l’émetteur perturbateur 4.
Afin de permettre la transmission du signal perturbateur reçu par l’antenne de réception auxiliaire 20 jusqu’au convertisseur analogique-numérique 220 de la voie de réception auxiliaire 22, la voie de réception auxiliaire 22 comprend un système de transmission 222 du signal perturbateur en provenance de l’émetteur perturbateur 4 et reçu par l’antenne de réception auxiliaire 20 depuis cette dernière jusqu’à la voie de réception auxiliaire 22.
Selon un premier mode de configuration représenté en , le système de transmission 222 comprend un ensemble de câbles hyperfréquences 222’.
Chaque antenne de réception auxiliaire 20 est déportée par l’intermédiaire des câbles hyperfréquences 222’. Dès lors, chaque signal perturbateur reçu par une antenne de réception auxiliaire 20 est envoyé vers les composants de traitement de la voie de réception auxiliaire 22, comme le convertisseur analogique-numérique 220.
Selon une première variante, représentée en , le dispositif de réception électromagnétique 1 comprend autant d’antennes de réception auxiliaire 20 que de convertisseurs analogiques-numériques 220de sorte qu’une antenne de réception auxiliaire 20a est connectée à un seul et unique convertisseur analogique-numérique 220a et donc que le convertisseur analogique numérique 220a est uniquement connectée à cette antenne de réception auxiliaire 20a générant alors une voie exclusive 22a par connexion entre l’antenne de réception auxiliaire 20a et le convertisseur analogique numérique 222a, la connexion se faisant par le biais des câbles hyperfréquences 222’. De plus, l’antenne de réception auxiliaire 20a est disposée de sorte à ne recevoir que le signal perturbateur en provenance de l’émetteur perturbateur 4a. Autrement dit, chaque voie exclusive, et donc chaque convertisseur analogique numérique 220 et chaque antenne de réception auxiliaire 20 interconnectés, est dédiée à la réception d’un signal perturbateur respectif en provenance d’un émetteur perturbateur 4.
Dès lors, il est également possible d’observer une deuxième antenne de réception auxiliaire 20b qui est disposée de sorte à ne recevoir que le signal perturbateur en provenance d’un deuxième émetteur perturbateur 4b et qui est connectée à un seul et unique deuxième convertisseur analogique-numérique 220b générant alors une deuxième voie exclusive 22b par connexion entre la deuxième antenne de réception auxiliaire 20b et le deuxième convertisseur analogique numérique 220b et d’observer une troisième antenne de réception auxiliaire 20c qui est disposée de sorte à ne recevoir que le signal perturbateur en provenance d’un troisième émetteur perturbateur 4c et qui est connectée à un seul et unique troisième convertisseur analogique-numérique 220c générant alors une troisième voie exclusive 22c par connexion entre la troisième antenne de réception auxiliaire 20c et le troisième convertisseur analogique numérique 220c. Chaque convertisseur analogique-numérique 220 des voies exclusives est ainsi connecté au bloc de comparaison de signal et de suppression du signal perturbateur 30 afin de transmettre à ce dernier le spectre de perturbation traité à partir du signal perturbateur détecté. Le bloc de comparaison de signal et de suppression du signal perturbateur 30 effectue alors la comparaison par rapport au spectre de fréquence du signal incident reçu par l’antenne de réception principale 10 et traité par la voie de réception principale 12.