INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le fluide s’écoule selon la direction X, de la gauche du schéma vers la droite du schéma.
Cette vue de coupe a été faite selon un plan transversal défini par les axes Z et X. On voit ainsi la paroi inférieure 12b et la paroi supérieure 12a du canal 6.
Chaque paroi 12a, 12b présente une surface interne 7a, 7b, dirigée vers l’intérieur du canal 6, et qui est dotée de moyens de perturbation du fluide.
Avantageusement, la machine agricole comporte un poste de commande qui comporte un siège fixé de manière amovible à la poutre latérale et un tableau de commande fixé au siège, où le siège peut être orienté vers l’avant par rapport à une direction principale d'avancement ou vers l’arrière par rapport à la direction principale d'avancement.
Avantageusement, le tableau de commande est fixé de manière amovible au siège.
Avantageusement, chaque sous-système comporte une bielle latérale dont une première extrémité est montée articulée au châssis et dont une deuxième extrémité est montée articulée à une des barres inférieure ou supérieure et la bielle latérale s’étend sur le côté et vers l’extérieur par rapport à la barre inférieure ou supérieure à laquelle elle est articulée.
Avantageusement, les premiers moyens de fixation sont constitués d’une boule d’attelage supérieure et d’une boule d’attelage inférieure disposée au-dessous par rapport à la boule d’attelage supérieure, les deuxièmes moyens de fixation comportent une tête d’attelage et un fût qui est disposé au-dessous par rapport à la tête d’attelage, et la tête d’attelage est arrangée pour s’emmancher sur la boule d’attelage supérieure et le fût est arrangé pour s’emmancher sur la boule d’attelage inférieure.
Avantageusement, le système élévateur comprend un treuil motorisé fixé à la traverse et un câble qui s’enroule sur le cylindre du treuil ou se déroule dudit cylindre en fonction du sens de rotation dudit cylindre, et où le câble est prolongé par un lien fixé en son milieu au câble et par chacune de ses extrémités à une barre supérieure du système de fixation.
Avantageusement, la traverse est configurée pour être réglable en longueur.
représente une vue en perspective d’une machine agricole selon l’invention,
est une vue en perspective d’un détail d’un système de fixation de la machine agricole selon l’invention avec un outil particulier,
est une vue en perspective similaire à celle de la sans l’outil,
est une vue en coupe du système de fixation par le plan horizontal IV de la ,
est une vue en coupe du système de fixation par la ligne V-V de la , et
est une vue en perspective de la machine agricole selon un autre point de vue.
La montre une machine agricole 100 qui est plus particulièrement destinée au maraîchage mais peut également être utilisée dans le cadre d’autres types d’agriculture. La machine agricole 100 présente une direction longitudinale X horizontale, une direction transversale Y horizontale et une direction verticale Z, ces trois directions X, Y et Z étant orthogonales entre elles. La machine agricole 100 présente une direction principale d’avancement, représentée par la flèche F, qui est parallèle à la direction longitudinale X, mais bien sûr, la machine agricole 100 peut aller en sens inverse qui est alors appelé « direction secondaire d’avancement ».
Les termes " avant " et " arrière " sont à considérer par rapport à la direction principale d'avancement F.
Encore plus particulièrement, l’invention a pour objet un procédé pour la détection dans un échantillon biologique d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un type de cellules présent dans le cerveau, ledit procédé comprenant au moins les étapes suivantes : a) Mise en présence, dans des conditions appropriées pour une amplification des acides nucléiques, de l’ADN acellulaire préalablement extrait dudit échantillon biologique et d’une paire d’amorces constituée par une amorce sens comprenant ou consistant en une séquence nucléotidique SEQ ID N°1 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°1) et une amorce antisens SEQ ID N°2 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°2), ou bien une amorce sens comprenant ou consistant en une séquence nucléotidique SEQ ID N°4 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°4) et une amorce antisens SEQ ID N°5 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°5), chacune des amorces comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique capable de s’hybrider avec une séquence nucléotidique de ladite séquence cible d’ADN acellulaire, ou bien mise en présence, dans des conditions appropriées pour une amplification des acides nucléiques, b) Réaction d’amplification de ladite séquence cible, c) Détection de la présence de la séquence amplifiée lors de l’étape b), au moyen d’une sonde comprenant, ou consistant en SEQ ID N°3 ou SEQ ID N°6, respectivement selon les paires d’amorces utilisées.
Encore plus particulièrement, l’invention a pour objet un procédé pour la détection dans un échantillon biologique d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un type de cellules présent dans le poumon, ledit procédé comprenant au moins les étapes suivantes : - Mise en présence, dans des conditions appropriées pour une amplification des acides nucléiques, de l’ADN acellulaire préalablement extrait dudit échantillon biologique et d’une paire d’amorces constituée par - une amorce sens comprenant ou consistant en une séquence nucléotidique SEQ ID N°7 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°7) et une amorce antisens SEQ ID N°8 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°8), chacune des amorces comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique capable de s’hybrider avec une séquence nucléotidique de ladite séquence cible d’ADN acellulaire, ou bien mise en présence, dans des conditions appropriées pour une amplification des acides nucléiques, b) Réaction d’amplification de ladite séquence cible, c) Détection de la présence de la séquence amplifiée lors de l’étape b), au moyen d’une sonde comprenant, ou consistant en SEQ ID N°9.
Encore plus particulièrement, l’invention a pour objet un procédé pour la détection dans un échantillon biologique d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un type de cellules présent dans le rein, ledit procédé comprenant au moins les étapes suivantes : - a) Mise en présence, dans des conditions appropriées pour une amplification des acides nucléiques, de l’ADN acellulaire préalablement extrait dudit échantillon biologique et d’une paire d’amorces constituée par - une amorce sens comprenant ou consistant en une séquence nucléotidique SEQ ID N°10 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°10) et une amorce antisens SEQ ID N°11 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°11), ou bien - une amorce sens comprenant ou consistant en une séquence nucléotidique SEQ ID N°13 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°13) et une amorce antisens SEQ ID N°14 (ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°14), chacune des amorces comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique capable de s’hybrider avec une séquence nucléotidique de ladite séquence cible d’ADN acellulaire, ou bien mise en présence, dans des conditions appropriées pour une amplification des acides nucléiques, - b) Réaction d’amplification de ladite séquence cible, - c) Détection de la présence de la séquence amplifiée lors de l’étape b), au moyen d’une sonde comprenant, ou consistant en SEQ ID N°12 ou SEQ ID N°15, respectivement selon les paires d’amorces utilisées.
Les tests diagnostiques décrits s’inscrivent dans un processus analytique composé de 2 étapes préliminaires : l’extraction de l’ADN circulant et la conversion épigénétique (par bisulfite, réaction enzymatique). Les tests diagnostiques sont compatibles avec différents kits d’extractions de l’ADN circulant tels que le QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (50) Cat. No. / ID: 55114 (Qiagen) ; EZ1&2 ccfDNA Kit (48)Cat. No. / ID: 954854 (Qiagen) ; Kit d’isolement d’ADN acellulaire MagMAX™ (Référence: A29319, Thermofisher) ; Automated High-Throughput Extraction of Cell-Free DNA from Plasma, Serum, Urine and CSF (Ref : A6030, Promega). Les ADNs acellulaires une fois extraits sont dosés par fluorimétrie Qubit 4.0™ (kit Invitrogen™ Kits de dosage d’ADN db HS Qubit™ (Référence : Q32851)) puis subissent une conversion bisulfite avec le kit Zymo Research EZ DNA Methylation-Lightning Kit (Référence D5031) ou équivalent commercial. Les échantillons sont ensuite analysés par PCR digitale en gouttelettes (System Naica (STILLA Technologies)) (compatible également avec des équivalents commerciaux tel que le QIAcuity Digital PCR System – QIAGEN et QX ONE Droplet Digital PCR (ddPCR) System - Bio-Rad).
Les tests diagnostiques décrits sont compatibles avec l’ensemble des plateformes de PCR digital sur le marché (microgouttelettes et/ou micro compartiments). Parmi elles, nous trouvons des équivalents commerciaux tel que le QIAcuity Digital PCR System – QIAGEN et QX ONE Droplet Digital PCR (ddPCR) System - Bio-Rad).
Les inventeurs déterminent les paramètres métrologiques types, notamment la répétabilité, la reproductibilité et la sensibilité du test. Pour quantifier la dégradation rénale, il faut au moins 1 des marqueurs. La détection avec deux marqueurs renforce la donnée biologique. Pour chaque cellule d’intérêt spécifique du rein, il faut au moins 1 des marqueurs. La détection avec deux marqueurs renforce la donnée biologique.
Selon un autre aspect, l’invention a également pour objet l’utilisation d’un kit ou d’un procédé selon l’invention, pour la détection spécifique de la dégradation du cerveau et/ou pour le diagnostic in vitro ou le suivi de l’évolution d’un AVC.
Selon un autre aspect, l’invention a également pour objet l’utilisation d’un kit ou d’un procédé selon l’invention, pour la détection spécifique de la dégradation du poumon et/ou pour le diagnostic in vitro ou le suivi de l’évolution d’un syndrome de détresse respiratoire ou de rejet de greffon pulmonaire.
Selon un autre aspect, l’invention a également pour objet l’utilisation d’un kit ou d’un procédé selon l’invention, pour la détection spécifique de la dégradation du rein et/ou pour le diagnostic in vitro ou le suivi de l’évolution d’une insuffisance rénale ou d’un rejet de greffon rénal.
Selon un autre aspect, l’invention a également pour objet une séquence nucléotidique choisie parmi : - une amorce sens comprenant, ou consistant en une séquence nucléotidique choisie parmi : SEQ ID N°1, SEQ ID N°4, SEQ ID N°7, SEQ ID N°10, SEQ ID N°13, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec lesdites séquences ; - une amorce antisens comprenant, ou consistant en une séquence nucléotidique choisie parmi : SEQ ID N°2, SEQ ID N°5, SEQ ID N°8, SEQ ID N°11, SEQ ID N°14, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec lesdites séquences ; et - une sonde comprenant, ou consistant en une séquence nucléotidique choisie parmi : SEQ ID N°3, SEQ ID N°6, SEQ ID N°9, SEQ ID N°12, SEQ ID N°15, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec lesdites séquences.
Selon un autre aspect, l’invention a pour objet de diagnostic, ou de suivi de la dégradation d’un organe choisi parmi le cerveau, le poumon et le rein, comprenant les étapes suivantes : - Extraction de l’ADN acellulaire méthylé d’un échantillon biologique d’un individu, - Mise en présence de l’ADN et d’une paire d’amorces appropriée dans des conditions permettant l’hybridation, - Amplification de ladite sequence, - Détection de la séquence amplifiée, au moyen de la sonde de détection appropriée.
La représente la proportion de neurones marqués lors de l’utilisation du marqueur anti-NeuN (gauche), du marqueur APC2 (centre), et du marqueur KRT33B (droite).
La représente les données normalisées de la moyenne des biomarqueurs KRT33B et APC2, sur une échelle logarithmique dans le cas de l’AIT (gauche), et de l’AVC (droite).
La représente la quantité de biomarqueurs rénaux dans le plasma (en ng/ml) dans le cas de patients à haut risque de rejet de greffe (histogrammes de gauche) ou à faible risque de rejet de greffe (histogrammes de droite), pour les marqueurs PDE4D (blanc) et PAX2 (noir).
La représente la fraction d’ADN circulant d’origine rénale, sur le total d’ADN circulant dans le plasma (en %) dans le cas de patients à haut risque de rejet de greffe (histogrammes de gauche) ou à faible risque de rejet de greffe (histogrammes de droite), pour les marqueurs PDE4D (blanc) et PAX2 (noir).
Marqueur Amorce sens Amorce antisens SEQ ID N° Séquence SEQ ID N° Séquence KRT33B 1 TCGGGTTTTCGGGTAACGT 2 CTTCGCCACGCAACAAC APC2 4 CGTAGGGTCGGAAGGAGG 5 ATCCGAACGAACGACGAA Gène LINC00336 7 GTTAGATCGTAGGTTGCGC 8 ACGCGAACTCGAACACTT PDE4D 10 GGTTTTAGCGGATGGCGA 11 GCTCCTCTACGAAACGAACA PAX2 13 GGCGAAATTCGGTGTATATAATTT 14 GAACGACAAAAACTCTACGAAA Albumine 16 GGGATGGAAAGAATTTTATGTT 17 AAACAAACTAACCCCAAATTCT
Les séquences nucléotidiques des sondes sont désignées comme indiqué dans le tableau 2 ci-dessous :
Marqueur Sonde détection SEQ ID N° Séquence KRT33B 3 TGAAGAGTTGGTAGCGT APC2 6 CGTTTAAGGTTGTATTAGTTG Gène LINC00336 9 CGCGGCGTAGGTATA PDE4D 12 TGGCGAGCGCGTT PAX2 15 TCGTTTCGTTTCGTTCG Albumine 18 AGGGTTTTTATAATTTA
Selon un autre aspect plus particulier, l’invention a pour objet un kit pour la détection dans un échantillon biologique d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un type de cellules présent dans le cerveau, ledit kit comprenant au moins : - une amorce sens comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°1, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°1 et une amorce antisens, comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°2, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°2, et/ou - une amorce sens comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°4, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°4 et une amorce antisens, comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°5, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°5.
Parmi les types cellulaires présents dans le cerveau, on peut notamment citer : les cellules neuronales, endothéliales vasculaires cérébrales, péricytes, gliales et dendritiques.
Selon un autre aspect plus particulier, l’invention a pour objet un kit pour la détection dans un échantillon biologique d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un type de cellules présent dans le poumon, ledit kit comprenant au moins une amorce sens comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°7, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°7 et une amorce antisens, comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°8, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°8.
Parmi les types cellulaires présents dans le poumon, on peut notamment citer : les cellules pneumocytaires (I et II), cellules mésenchymateuse (souches), cellules fibroblastiques pulmonaires, épithéliales pulmonaires, endothéliales et péricytes pulmonaires.
Selon un autre aspect plus particulier, l’invention a pour objet un kit pour la détection dans un échantillon biologique d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un type de cellules présent dans le rein, ledit kit comprenant au moins : une amorce sens comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°10, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°10 et une amorce antisens, comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°11, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°11, et/ou une amorce sens comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°13, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°13 et une amorce antisens, comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°14, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°14
Parmi les tissus présents dans le rein, on peut notamment citer : le tissu fibroblastique rénal, tissu interstitiel rénal, épithélial, vasculaire rénal et les cellules fibroblastiques rénales, glomérulaires, tubulaires, épithéliales rénales, endothéliales et péricytes rénaux, cellules souches rénales.
Un kit selon l’invention comprend, de façon optionnelle une ou plusieurs paires d’amorces constituées par une amorce sens et une amorce antisens, destinées à détecter la présence d’un élément contrôle dans l’échantillon biologique. Cet élément contrôle peut être tout élément approprié choisi par une personne du métier. Ledit élément contrôle peut notamment être l’albumine. Plus particulièrement, un kit selon l’invention peut comprendre une amorce sens comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°16, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°16 et une amorce antisens, comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique SEQ ID N°17, ou une séquence nucléotidique présentant au moins 80 % d’identité avec SEQ ID N°17.
Selon un deuxième aspect, l’invention a pour objet un procédé d’identification d’une séquence cible d’ADN acellulaire spécifique d’un type de cellules présent dans un premier organe choisi parmi : le poumon, le cerveau et le rein, le procédé comprenant au moins les étapes suivantes : a) Détermination, dans au moins une base de données de méthylation de l’ADN génomique, de la position et du degré de méthylation des ilots CpG de séquences spécifiques dudit type cellulaire dudit organe, b) Identification, dans l’ADN génomique dudit type cellulaire dudit organe sain, des ilots CpG spécifiquement hyperméthylés, c) Comparaison du degré de méthylation des ilots CpG hyperméthylés dudit type cellulaire dudit premier organe avec le degré de méthylation des mêmes ilots CpG d’un deuxième type cellulaire, différent du premier type cellulaire, d) Sélection des îlots CpG uniquement hypermethylés dans l’ADN génomique dudit type cellulaire dudit premier organe après comparaison réalisée en étape c), e) Comparaison du degré de méthylation des ilots CpG hyperméthylés dudit type cellulaire dudit premier organe avec le degré de méthylation des mêmes ilots CpG de l’ADN génomique des organes autres dudit premier organe, f) Comparaison du degré de méthylation des ilots CpG hyperméthylés dudit type cellulaire dudit premier organe avec le degré de méthylation des mêmes ilots CpG de l’ADN génomique des globules blancs sains, g) Comparaison du degré de méthylation des ilots CpG hyperméthylés dudit type cellulaire dudit premier organe avec le degré de méthylation des mêmes ilots CpG de l’ADN acellulaire toutes matrices biologiques confondues issus de sujets sains, h) Sélection des îlots CpG uniquement hypermethylés dans l’ADN génomique dudit type cellulaire dudit premier organe après comparaison réalisée en étape e, f et g) i) Identification d’une ou plusieurs séquences hyperméthylée cible d’ADN acellulaire spécifique dudit type cellulaire du premier organe à partir de la comparaison réalisée lors de l’étape h).
L’invention a également pour objet une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé identifiée au moyen d’un procédé selon l’invention, pour son utilisation dans la détection de la lyse d’un organe choisi parmi le cerveau, le poumon et le rein, à partir d’un échantillon biologique d’un patient.
Selon un troisième aspect, l’invention a pour objet un procédé de détection, dans un échantillon biologique, d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un organe choisi parmi : le poumon, le cerveau et le rein, ou d’un tissu présent dans le cerveau, le poumon ou le rein, ledit procédé comprenant au moins les étapes suivantes : a) Mise en présence, dans des conditions appropriées pour une amplification des acides nucléiques, de l’ADN acellulaire préalablement extrait dudit échantillon biologique et d’une paire d’amorces constituée par une amorce sens et une amorce antisens, chacune des amorces comprenant, ou consistant en, une séquence nucléotidique capable de s’hybrider avec une séquence nucléotidique de ladite séquence cible d’ADN acellulaire, b) Réaction d’amplification de ladite séquence cible, c) Détection de la présence de la séquence amplifiée lors de l’étape b).
L’ADN acellulaire est extrait en utilisant un kit commercial, bien connu de la personne du métier et nécessite la présence d’au moins 0,15 ng/mL d’ADN cible dans l’échantillon urinaire ou plasmatique.
La réaction d’amplification est réalisée au moyen de toute technique ou protocole bien connu par la personne du métier. Parmi les exemples non limitatifs de ces techniques, on peut citer : l’amplification par PCR, l’amplification par PCR digitale (dPCR), le séquençage nouvelle génération.
Plus particulièrement, l’invention a pour objet un procédé pour la détection dans un échantillon biologique d’une séquence nucléotidique cible d’ADN acellulaire méthylé, ladite séquence nucléotidique étant spécifique d’un type de cellules présent dans le cerveau.
La machine agricole 100 comporte un châssis 102 qui est monté sur des roues 104 et un système moteur qui entraîne les roues 104 en rotation. Dans le mode de réalisation de l’invention présenté ici, il y a trois roues 104 disposées aux sommets d’un triangle rectangle et chaque roue 104 est ici motorisée par un moteur électrique monté sur le côté de la roue 104. Bien sûr tout autre type de motorisation est possible. Il y a ainsi deux roues 104 arrière qui sont coaxiales autour d’un axe de rotation parallèle à la direction transversale Y et une roue 104 avant qui est alignée avec l’une des roues 104 arrière (ici la roue à bâbord) parallèlement à la direction longitudinale X.
Pour assurer les changements de direction de la machine agricole 100, certaines roues 104 sont directrices et montées mobiles en rotation autour d’un axe vertical et un moteur assure la rotation de la roue 104 autour dudit axe vertical. Bien sûr, selon le nombre de roues 104, il peut y avoir une ou plusieurs roues 104 directrices. Dans le mode de réalisation de l’invention présenté à la , la roue 104 avant est directrice.
Le châssis 102 comporte une arche 106 qui présente deux montants 108a-b verticaux, à savoir un montant tribord 108a et un montant bâbord 108b, et une traverse 110 horizontale qui relie les extrémités hautes des deux montants 108a-b entre elles. La présence de l’arche 106 permet de dégager l’espace sous l’arche 106 pour les travaux à effectuer et/ou pour l'installation d’outils qui viendraient occuper l'espace sous l'arche 106.
Dans le mode de réalisation de l’invention présenté ici, une roue 104 arrière est montée au niveau de l’extrémité basse de chaque montant 108a-b. L’arche 106 est inscrite dans un plan vertical perpendiculaire à la direction longitudinale X.