INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Blair et al. ( American Society For Microbiology Journal , 2016 , 7, 4 , 1-6) ont décrit plusieurs méthodes pour quantifier le taux d’efflux au sein de différentes souches bactériennes, mettant en œuvre des composés fluorescents tels que le bromure de 3,8-diamino-1-éthyl-6-phénylphénanthridinium (également appelé bromure d’éthidium), le trichlorhydrate du 2'-(4-éthoxyphényl)-5-(4-méthyl-1-pipérazinyl)-2,5'-bi-1 H -benzimidazole (également connu sous la référence « Hoechst 33342 »), le 9-(diéthylamino)-5 H -benzo[ a ]phénoxazin-5-one (également connu sous la référence « Nile Red »), le 1,2-dinaphthylamine, la doxorubicine, ou certaines fluoroquinolones comme la ciprofloxacine (CIP).
Une première méthode de mesure dite « directe » consiste à mettre en contact un des composés fluorescents précités (sonde), en concentration élevée, avec des cellules bactériennes en présence d’un inhibiteur d’efflux qui inhibe la source d’énergie de la pompe (e.g. carbonyl cyanide m-chlorophénylhydrazone ou CCCP) ; laver les cellules pour enlever l’excès de composé fluorescent et/ou d’inhibiteur dans le milieu ; mesurer la fluorescence de la sonde dans les cellules ; ajouter du glucose pour réactiver l’efflux ; et mesurer la fluorescence de la sonde dans les cellules au cours du temps et à intervalle réguliers. Au cours de la première étape, le composé fluorescent s’accumule dans les cellules. La fluorescence mesurée au cours de la troisième étape correspond à la quantité de composé fluorescent accumulé qui n’a pas pu être expulsé. Puis, la quatrième étape permet de restaurer l’efflux et d’expulser le composé fluorescent. La mesure de la fluorescence au cours de la cinquième étape permet de rendre compte d’un changement de fluorescence lié à l’expulsion du composé fluorescent. Le taux d’efflux peut par conséquent être mesuré sur plusieurs souches bactériennes, et par exemple comparé selon que la souche testée présente ou non une surexpression des pompes à efflux AcrAB-TolC.
Une deuxième méthode de mesure dite « indirecte » consiste à mesurer la fluorescence de cellules bactériennes, mettre en contact un des composés fluorescents précités avec les cellules bactériennes, et mesurer la fluorescence des cellules. La mesure de la fluorescence au cours de la première étape permet d’établir un contrôle de la fluorescence initiale sans ajout de composé fluorescent. Au cours de la deuxième étape, le composé fluorescent est expulsé des cellules bactériennes. La mesure de la fluorescence au cours de la troisième étape permet de rendre compte d’un changement de fluorescence lié à l’expulsion du composé fluorescent. Le taux d’efflux peut par conséquent être mesuré sur plusieurs souches bactériennes, et par exemple comparé selon que la souche testée exprime beaucoup, de manière basale, peu ou pas les pompes à efflux AcrAB-TolC. L’accumulation d’un composé fluorescent dans les cellules bactériennes rend compte d’un faible taux d’efflux.
Les méthodes précitées présentent les inconvénients suivants : les composés fluorescents mis en œuvre dans ces méthodes posent des problèmes de coût (e.g. pour la doxorubicine), de toxicité et/ou de sécurité lors de leur manipulation (e.g. bromure d’éthidium, « Hoechst 33342 »), et/ou de faisabilité lorsque les bactéries ne fermentent pas le glucose ou dans le cas de bactéries sauvages lorsqu’elles ne permettent pas une bonne reproductibilité des résultats de la méthode directe ; les rendant inadaptés pour une utilisation dans le diagnostic de l’efflux en routine clinique. Par ailleurs, certains composés fluorescents comme le bromure d’éthidium ont un influx qui implique la présence de porines, rendant les méthodes précitées inappropriées pour tester des souches cliniques dans lesquelles les porines sont sous-exprimées par résistance innée ou acquise.
D’autres méthodes comme les « Western-blot » (également appelé transfert de protéines ou technique des immuno-empreintes) ou les RT-PCR (bien connus sous l’anglicisme « R everse Transcriptase Polymerase Chain Reaction » pour Réaction en Chaîne par Polymérase après Transcription Inverse) peuvent permettre de quantifier les niveaux d’efflux au sein de différentes souches. Cependant, la purification de protéines membranaires reste à ce jour complexe et ne peut être utilisée de manière systématique en routine. De plus, le taux de transcription d’ARNm calculé n’est pas forcément représentatif des protéines fonctionnelles correspondantes adressées à la membrane bactérienne.
Par conséquent, il existe un besoin en une méthode de diagnostic précoce, de routine, et en temps réel, pour identifier et quantifier la résistance par efflux chez un patient ou un animal en vue ou en cours d’un traitement antibiotique, et permettre un traitement personnalisé des infections, dans le but de limiter les multirésistances aux antibiotiques.
Le but de la présente invention est par conséquent de pallier les inconvénients de l’art antérieur et de fournir un outil de diagnostic in vitro ou ex vivo de l’efflux bactérien utilisable en routine clinique, révélant le niveau d’efflux en temps réel de différentes bactéries, facile à mettre en œuvre, et précoce.
La présente invention a donc pour premier objet l’utilisation d’un dérivé coumarinique répondant à la formule (I) suivante :
dans laquelle : - R 1 représente un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, un groupe acide carboxylique -CO 2 H, un groupe ester -CO 2 R 7 dans lequel R 7 est un groupe alkyle, un groupe nitrile -CΞN, un groupe fluoroalkyle, un groupe nitro -NO 2 , ou un groupe sulfonate -OSO 2 R 8 dans lequel R 8 est un groupe alkyle ; - R 2 représente un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, un groupe alkyle, un groupe hydroxyle -OH, un groupe fluoroalkyle, un groupe acide carboxylique -CO 2 H, un groupe ester -CO 2 R 9 dans lequel R 9 est un groupe alkyle, ou un groupe alkoxy -OR 10 dans lequel R 10 est choisi parmi les groupes alkyle, halogénoalkyle et alcényle ; - R 3 représente un atome d’hydrogène, un groupe alkyle, un groupe alkoxy -OR 11 dans lequel R 11 est un groupe alkyle ; - R 4 représente un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, un groupe alkyle, un groupe hydroxyle -OH, un groupe fluoroalkyle, un groupe alkoxy -OR 12 dans lequel R 12 est un groupe alkyle, un groupe amine -NR 13 R 14 dans lequel R 13 et R 14 , identiques ou différents, sont choisis parmi un atome d’hydrogène et un groupe alkyle, un groupe sulfonate -OSO 2 R 15 dans lequel R 15 est un groupe alkyle, ou un groupe acyle -OCOR 16 dans lequel R 16 est un groupe alkyle ; - R 5 représente un groupe alkyle, un groupe alcényle, ou un groupe alkyle substitué par un groupe fonctionnel choisi parmi un groupe aryle, un groupe hétéroaryle, un atome d’halogène, un groupe alkoxy -OR 17 dans lequel R 17 est un groupe alkyle ou halogénoalkyle, un groupe ester -OC(=O)R 18 dans lequel R 18 est un groupe alkyle, un groupe thioéther -SR 19 dans lequel R 19 est un groupe alkyle, un groupe nitrile -CΞN, un groupe amine -NR 20 R 21 dans lequel R 20 et R 21 , identiques ou différents, sont choisis parmi un atome d’hydrogène et un groupe alkyle, ou forment ensemble avec l’atome d’azote un hétérocycle azoté, un groupe succinimide, un groupe pyrrole, un groupe pyrazole, un groupe triazole, un groupe imidazole, un groupe thiazole, un groupe oxazole, un groupe amide -NHC(=O)R 22 dans lequel R 22 est un groupe alkyle, et un groupe sélénié -SeR 23 dans lequel R 23 est un atome d’hydrogène ou un groupe alkyle ; et - R 6 représente un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, ou un groupe alkyle, en tant qu’outil de diagnostic in vitro ou ex vivo de l’efflux de bactéries.
De manière surprenante, les inventeurs ont découvert que des dérivés coumariniques particuliers de formule (I) peuvent être utilisés comme outils de détection de la résistance par efflux de bactéries. Ces dérivés coumariniques de formule (I) possèdent un groupe -OR 5 particulier en position 7 qui leur permet à la fois d’être de très bons substrats des pompes à efflux et d’avoir des propriétés de fluorescence appropriées pour permettre leur détection quantitative dans les bactéries et établir une corrélation entre leur accumulation dans les cellules bactériennes et le niveau d’expression de l’efflux par les pompes desdites cellules bactériennes.
Le groupe R 1
L’atome d’halogène en tant que groupe R 1 peut être un atome de chlore ou de fluor, et de préférence un atome de chlore.
Le groupe alkyle en tant que groupe R 7 peut être un groupe alkyle linéaire ou ramifié, cyclique ou non cyclique.
Le groupe alkyle est de préférence linéaire non cyclique. Le groupe alkyle comprend de préférence de 1 à 5 atomes de carbone, et de façon particulièrement préférée de 1 à 3 atomes de carbone. Le groupe alkyle est avantageusement un groupe méthyle ou éthyle.
Le groupe fluoroalkyle en tant que groupe R 1 peut être un groupe fluoroalkyle linéaire ou ramifié, cyclique ou non cyclique.
Le groupe fluoroalkyle peut comprendre de 1 à 5 atomes de carbone, de préférence de 1 à 3 atomes de carbone, et de façon particulièrement préférée de 1 à 2 atomes de carbone. Le groupe fluoroalkyle est avantageusement un groupe trifluorométhyle CF 3 .
- d’attaques par canaux auxiliaires (analyse de la consommation électrique, du rayonnement électromagnétique, du temps de calcul, ou tout autre grandeur physique mesurable corrélée à la valeur d’un secret que l’attaquant cherche à découvrir), ou encore
- d’attaques par injection de fautes au laser ou au moyen de pointes de test (notamment injection de signaux parasites ou «glitches» sur des lignes d’alimentation, des lignes d’horloge ou des bus de données).
- Mesure de la viscosité :
La viscosité d’un fluide se manifeste par sa résistance à la déformation ou bien au glissement relatif de ses couches. Au cours de l’écoulement d’un fluide visqueux dans un tube capillaire par exemple, la vitesse des molécules (v) est maximale dans l’axe du tube et diminue jusqu'à s’annuler à la paroi tandis qu’entre les couches se développe un glissement relatif ; d’où l’apparition de forces tangentielles de frottement. Les forces tangentielles, dans les fluides, dépendent de la nature du fluide considéré et du régime de son écoulement.
Le viscosimètre utilisé est de type Ubbelhode, il est placé dans un thermostat maintenu à température constante (25 °C dans notre cas d’étude). On mesure le temps d’écoulement d’un volume constant V défini par deux traits de repères (M1 et M2) situés de part et d’autre d’un petit réservoir surmontant le capillaire.
- Mesure des performances Photovoltaïques à l’intérieur :
L’étude du vieillissement des modules réalisés sous éclairage permanant est réalisée à travers un banc de caractérisation en intérieur. Ce banc de caractérisation comprend une enceinte fermée opaque (pour éviter toute lumière venant de l’extérieur) équipée d’une source d’éclairage type LED (en particulier une Source-mètre Keithley 2450) et un ordinateur avec un programme en LabVIEW permettant de mesurer d’une façon automatique les performances des modules (détermination des paramètres photovoltaïques) avec une fréquence bien défini (par exemple 10 fois par jour). Les modules photovoltaïques sont éclairés en permanence par une source d’éclairage sous une intensité lumineuse environ égale à 1000 lux mesurée par un luxmètre (en particulier par le luxmètre Chauvin Arnoux Ca 1110) compatible avec une grande variété de sources de lumière, y compris avec la lumière LED et fluorescente jusqu'à 200 000 lux en étant en conformité avec la classe C de la norme NF C 42-710.
La source d’éclairage utilisée pour effectuer les mesures intérieures ainsi que les mesures des performances est une Dalle LED Philips 60x60 cm 2 - 4385K avec un spectre d’émission dans le visible (voir le spectre indiqué à la ).
- Caractérisation de la morphologie :
Mesures AFM (acronyme anglais pour « Atomic Force Microscope » : microscope à force atomique) pour reproduire la topographie de surface et TEM (acronyme anglais pour « Transmission Electron Microscopy » : microscope électronique en transmission) pour valider le caractère cristallin des matériaux ainsi que les tailles de nanoparticules présentes au niveau des couches.
EXEMPLE 1 : obtention d’exemples de première composition d’encre E10 pour la réalisation de la première couche 210A de l’électrode inférieure bicouche.
Cette première composition d’encre E10 pour la réalisation de la première couche d’électrode inférieure est obtenue comme suit : - on filtre la solution PEDOT:PSS (IJ1005) initialement stockée dans un frigo avec un filtre 0.45 µm ; - on mélange 30 µl de Triton X-100 avec 10 ml de la solution filtrée du PEDOT :PSS, - on met le mélange ainsi obtenu sous agitation magnétique à température ambiante sur un agitateur magnétique pendant 16 heures. - on dégaze la solution finale ainsi obtenue E10 pendant 3 à 5 minutes dans un bain ultrason avant l’impression.
EXEMPLE 2 : obtention d’un exemple de deuxième composition d’encre E12A et E12B pour la réalisation de la deuxième couche 210B de l’électrode inférieure 210.
Selon que l’on utilise le PEI ou le PEIE, on obtient respectivement les compositions d’encre E12A et E12B, dont les compositions sont détaillées ci-après :
La préparation de la formulation d’encre E12A s’effectue en deux étapes :
Étape 1 : Préparation de la solution mère : - Peser 0.35 g de PEI (polymère de la couche intermédiaire) - Rajouter 5 ml d’eau d’ionisée à ces 0.35 g du PEI - Agitation à une température de 60°C durant au moins 4h pour obtenir la solution mère.
Étape 2 : Préparation de la formulation d’encre E12A : - Prélever un volume de 250 µL de la solution mère, - Rajouter 9 ml de Butanol, - Rajouter 400 µL d’éthylène Glycol, - Mettre le mélange sous agitation à température ambiante pendant 24H pour obtenir la formulation E12A.
La formulation E12A est filtrée avant toute impression en utilisant un filtre AC présentant un seuil de coupure environ égal à 0, 2 µm.
Le conteneur 12 s’étend principalement selon une direction axiale A.
Le conteneur 12 est de préférence en métal, avantageusement un métal conducteur électriquement. Par exemple, le métal est l’aluminium ou l’acier nickelé ou l’acier inox.
Dans le premier mode de réalisation représenté sur la , le conteneur 12 comprend une paroi latérale 32 cylindrique s’étendant autour de la direction axiale A et un fond 34 relié à la paroi latérale 32.
Par « cylindrique », on entend dans la présente demande « cylindrique circulaire droit », c’est-à-dire qu’une section de la paroi latérale 32 dans un plan sensiblement perpendiculaire à la direction axiale A présente une forme circulaire.
Le fond 34 est par exemple venu de matière avec la paroi latérale 32, c’est-à-dire que le fond 34 et la paroi latérale 32 sont d’un seul tenant et fait du même matériau.
En variante, le fond 34 et la paroi latérale 32 sont deux objets distincts assemblés entre eux par exemple par collage ou soudage.
La paroi latérale 32 cylindrique et le fond 34 délimitent ensemble un volume intérieur 36 recevant le faisceau électrochimique 14.
Le couvercle 20 ferme le conteneur 12. Il s’étend dans un plan sensiblement parallèle au plan dans lequel s’étend le fond 34. Le couvercle 20 est traversé par la borne 16 qui s’étend à l’extérieur du conteneur 12 en saillie par rapport au plan dans lequel s’étend le couvercle 20.
La paroi latérale 32 cylindrique définit une surface interne 38 orientée vers le volume intérieur 36 et une surface externe 40 à l’opposé de la surface interne 38 selon une direction d’appui R sensiblement perpendiculaire à la direction axiale A. dans ce mode de réalisation, la direction d’appui R est une direction radiale.
De préférence, l’épaisseur de la paroi latérale 32, c’est-à-dire la distance entre la surface interne 38 et la surface externe 40 selon la direction d’appui R, est comprise entre 0,2 mm et 0,5 mm.
Selon l’invention, la paroi latérale 32 définit au moins une protubérance 42 venue de matière avec ladite paroi latérale 32 et située face au faisceau électrochimique 14 selon la direction d’appui R. Chaque protubérance 42 s’étend en saillie vers le faisceau électrochimique 14 et est en contact avec le faisceau électrochimique 14 de sorte à bloquer selon la direction axiale A et la direction d’appui R le déplacement du faisceau électrochimique 14 par rapport au conteneur 12. En particulier dans l’exemple illustré, chaque protubérance 42 est en contact avec l’électrode de deuxième polarité 26.
Dans l’exemple illustré, la paroi latérale du conteneur 12 forme la borne de deuxième polarité 18. La liaison électrique entre l’électrode de deuxième polarité 26 et le conteneur 12 est par exemple assurée par une connexion dédiée (non représentée).
De préférence, la paroi latérale 32 définit une pluralité de protubérances 42 venues de matière avec ladite paroi latérale 32 et situées face au faisceau électrochimique 14 selon la direction d’appui R.
De préférence, comme illustré sur la , la paroi latérale 32 comprend au moins une déformation 44 plastique, définissant la protubérance 42 du côté de la surface interne 38 de la paroi latérale 32 et un creux 46 du côté de la surface externe 40 de la paroi latérale 32.
Dans l’exemple illustré sur la , la paroi latérale 32 définit une première déformation 48 définissant une première protubérance 50 du côté de la surface interne 38 de la paroi latérale 32 et un premier creux 52 du côté de la surface externe 40 de la paroi latérale 32, une deuxième déformation 49 définissant une deuxième protubérance 54 du côté de la surface interne 38 de la paroi latérale 32 et un deuxième creux 56 du côté de la surface externe 40 de la paroi latérale 32, et une troisième déformation 51 définissant une troisième protubérance 58 du côté de la surface interne 38 de la paroi latérale 32 et un troisième creux 60 du côté de la surface externe 40 de la paroi latérale 32.
Avantageusement, pour assurer un bon maintien du faisceau électrochimique 14 à l’intérieur du conteneur 12, chaque protubérance 42 est une protubérance 42 continue s’étendant le long d’un lacet 64 autour de la direction axiale A. Par « lacet », on entend une boucle fermée autour de la direction axiale A.
sont des vues en perspectives d’un dispositif de distribution de boisson de l’ensemble,
est une vue en perspective d’un bouchon définissant une came, correspondant à une position de fermeture,
est une vue en coupe du dispositif de distribution de boisson correspondant à la position de fermeture,
est une autre vue en perspective du bouchon, correspondant à une position d’ouverture,
est une vue en coupe du dispositif de distribution de boisson correspondant à la position d’ouverture,
est une vue en perspective d’un dispositif de distribution selon un second mode de réalisation de l’invention,
est une vue en coupe du dispositif de distribution de la .
Description détaillée de l’invention Les figures 1 et 2 illustrent un ensemble 1 de distribution de boisson selon une forme de réalisation de l’invention.
Ledit ensemble 1 comporte une cuve 2 destinée à loger un réservoir 3 du commerce, par exemple un fut cylindrique 3 contenant de la bière.
La cuve 2 comporte une paroi latérale 4 cylindrique et un fond 5. La paroi latérale 4 et le fond 5 comportent, dans leur épaisseur, un matériau formant un isolant thermique.
Les termes axial, radial et circonférentiel sont définis par rapport à un axe central de la cuve 2.
Des blocs de matériau caloporteur 7, 8, comportant une enveloppe ou un réservoir contenant un liquide caloporteur tel que de l’eau, sont logés dans la cuve 2. Les blocs 7, 8 sont préalablement refroidis avant insertion dans la cuve 2.
En particulier, un bloc 7 de forme générale circulaire est monté en fond de cuve 2, le fond du réservoir 3 venant en appui sur la surface supérieure du bloc circulaire 7.
Par ailleurs, des blocs périphériques 8 de forme concave sont montés dans la cuve 2, entre la paroi latérale 4 de la cuve 2 et la paroi latérale du réservoir 3.
La paroi latérale 4 de la cuve 2 est équipée d’une anse 9 fixée sur des plots 10 de la cuve 2. L’anse 9 permet de faciliter le transport de l’ensemble 1.
L’ensemble 1 comporte également un couvercle 11 permettant de refermer l’extrémité supérieure ouverte de la cuve 2. Le couvercle 11 comporte deux zones latérales de préhension 12 ou poignées, formées ici par des zones en creux 12 diamétralement opposées du couvercle 11. Le couvercle 11 comporte un logement ou une ouverture circulaire centrale 13 orientée axialement. Des orifices 14 sont formés autour de l’ouverture centrale 13, les orifices débouchant 14 dans le volume interne 15 de la cuve 2.
ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIQUE DE L’INVENTION Dans la navigation d’aéronefs, la fonction de « detect and avoid » (pour « détecter et éviter ») est réalisée en se basant sur des mesures de distance entre l’aéronef et un obstacle à éviter sur la trajectoire de l’aéronef.
Une telle fonction permet de percevoir ou de détecter (« detect ») un futur conflit de trafic aérien pouvant mener à une collision et de prendre les mesures appropriées pour éviter la survenance dudit conflit (« avoid »).
Des systèmes actifs existent, tels que des radars à extrêmement haute fréquence (en anglais « Millimeter-Wave radar » ou « MMW radar ») ou des radars laser (en anglais « laser radar » ou « LADAR »). Ces systèmes actifs sont encombrants et chers, ce qui n’est pas souhaitable pour l’embarquement dans des aéronefs légers tels que des drones ou dans des aéronefs pour lesquels on cherche à réduire la masse comme les avions de tourisme.
Des systèmes de détection d’obstacles passifs ont donc été développés, en utilisant par exemple des capteurs EO/IR (pour « Electro-Optique/Infra-Rouge »). Parmi les systèmes passifs, certains permettent d’obtenir une distance entre l’aéronef et l’obstacle, tandis que d’autres permettent d’obtenir un « temps avant collision » entre l’aéronef et l’obstacle. Le « temps avant collision », aussi abrégé « TTC » de l’anglais « Time-To-Collision », porte aussi les noms, en fonction du contexte, de « temps de trajectoire », abrégé « TTG » de l’anglais « Time-To-Go », et « Temps avant arrivée », abrégé « TTA » pour « Time-To-Arrival ».
Le « temps avant collision » est défini comme le temps restant avant qu’une collision entre l’aéronef et l’obstacle ne se produise si leurs deux trajectoires et vitesses ne sont pas modifiées.
La distance peut par exemple être obtenue par : Une estimation par intelligence artificielle par analyse d’images, comme décrit dans FR3094081A1 « Procédé d’estimation passive du temps avant collision pour un aéronef ou de tout objet volant pouvant être guidé, procédé de navigation associé », dans lequel le temps avant collision est estimé par analyse d’images provenant d’une caméra embarquée, l’analyse étant réalisée par un réseau de neurones entraîné pour estimer le temps avant collision à partir de la taille de l’obstacle en pixels. La distance peut être estimée à chaque image. Un inconvénient de cette technique est que le temps avant collision et la distance entre l’aéronef et l’obstacle obtenus sont imprécis. de la télémétrie passive, aussi appelée “passive ranging” en anglais. Par exemple, une méthode de type « azimétrie » peut être utilisée, telle que présentée dans [« Utilization of modified polar coordinates for bearings-only tracking » - V.J. AIDALA, S.E. HAMMEL, IEEE, 2007, pp.741-752, doi: 10.1109/9780470544198.ch74]. L’azimétrie reconstitue la trajectoire de l’obstacle à partir de mesures d’azimut réalisées par l’aéronef. une utilisation de banques de filtres RPEKF (de l’anglais « range-parameterized extended Kalman filter » pour « filtre de Kalman étendu paramétré en distance » en français) initialisés sur des distances a priori, tel que présenté dans [« Recursive Bayesian Estimation - Bearings-only Applications » - R. KARLSSON, F. GUSTAFSSON, IEEE, Novembre 2005, DOI:10.1049/ip-rsn:20045073]. Le RPEKF peut donner de bons résultats si la distance est observable, car l’obstacle n’est suivi qu’en angulaire, et si les métadonnées sont de très bonnes qualités, car on veut alors obtenir une information en trois dimensions en n’ayant que deux informations angulaires et en observant la trajectoire de l’obstacle projetée dans le plan image du senseur optronique.