INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les figures 8B et 8C présentent les résultats obtenus pour la formulation cationique MBc tPTX (incorporant du PTX et des lipides biotinylés). Cette formulation est testée sur des cellules stimulées à 24 h et 48 h. Les vitesses d’injection et de lavages sont diminuées de moitié par rapport à la figure 8A, afin de ne pas stresser trop rapidement les cellules. Lorsque les microbulles cationiques sont fonctionnalisées avec l’anticorps anti-VEGFR2, celles-ci se lient en plus grand nombre par rapport aux microbulles non fonctionnalisées pour l’anticorps (Figures 8B, 8C). Sans complexation d’acide nucléique, le nombre de MB fixées possédant l’anticorps est environs 110% plus élevée que le nombre de MB fixé sans anticorps. La complexation d’oligonucléotides CpG (Figure 8C) par les microbulles diminue la capacité de liaison au récepteur. Lorsque la microbulle possède l’anticorps et l’acide nucléique, le nombre de MB fixée est environs 60% plus élevé par rapport au contrôle sans anticorps.
3.4. Expérimentation in vivo
3.4.1. Sonoporation in vivo Afin de réaliser de la transfection par MB et FUS, les poils situés sur le crâne de la souris doivent être retirés pour permettre une transmission parfaite des US entre la peau et la sonde ultrasonore. Une fois la souris préparée, celle-ci est anesthésiée à l’aide d’un mélange oxygène/air 1,5% isoflurane (Vetflurane, France) tout au long de l’expérience. Un cathéter équipé d’une aiguille de 26G est placé dans la veine caudale afin de permettre les injections intra veineuses. Une injection de bleu Evan’s (5%, solution saline 1 mL/kg) est réalisée. Le bleu Evan’s est un colorant se liant à l’albumine circulant et ne passant pas naturellement la BHE, son extravasation est cependant visible après une ouverture via MB+FUS, nous permettant d’obtenir des informations sur la localisation de la zone ciblée par notre protocole une fois le cerveau extrait de la boite crânienne.
Ensuite, la souris est placée dans le berceau de la plateforme de sonoporation in vivo ( ). Les FUS sont appliqués à l’aide d’un transducteur ultrasonore focalisé mono élément de 54 mm de diamètre (Precision Acoustics, UK). Le transducteur est placé dans un cylindre étanche rempli d’eau dégazée et fermé par une membrane. La présence de bulles est à proscrire pour éviter une mauvaise propagation des US. Le transducteur est positionné sur une plateforme de pilotage motorisée reliée à un ordinateur, permettant son déplacement à l’aide du logiciel Repetier. Le ciblage de la zone de transfection se fait visuellement à l’aide d’un pointeur situé au niveau du transducteur. La zone choisie correspond à la moitié de la distance œil-oreille au niveau de l’hémisphère gauche (zone 2). Du gel de conduction ultrasonore est appliqué sur le crâne de la souris afin de permettre la transmission des US. Après pointage, le transducteur se positionne sur la zone pointée et il descend ensuite au contact du gel.
Par la suite, une solution de 30 µg d’ADNp dilué dans 60 µL d’HEPES 10 mM pH 7,4 et 20 µL sucrose 20% est préparée. Cette solution est mise à incuber 2 min en présence de 120 µL de MBc puis injectée par voie intraveineuse à la souris. Dix secondes après la fin de l’injection, les US sont envoyés pendant 60 s (1 MHz, 5% duty cycle, durée du pulse 1 sec). Deux pressions acoustiques ont été testées : 109 kPa et 145 kPa. Après application des US, les souris sont réveillées.
illustre schématiquement un environnement dans lequel circule un véhicule, selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif de la présente invention ;
illustre schématiquement un écran d’affichage embarqué dans le véhicule de la , selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif de la présente invention ;
- la est une vue en perspective d’une station d’accueil selon un exemple de réalisation non limitatif ;
- la est une vue en coupe de la station d’accueil et du robot mobile lorsque ce dernier est en position sur la station ;
- la est un organigramme du procédé de retour vers la station vu du robot mobile, selon un exemple de réalisation non limitatif ;
- la est un organigramme qui détaille les étapes d’une première phase du procédé, selon un exemple de réalisation non limitatif ;
- la est un schéma simplifié destiné à illustrer les déplacements du robot au début de la première phase du procédé selon un exemple de réalisation non limitatif ;
- la est un organigramme d’une seconde phase du procédé ;
- la est un schéma simplifié destiné à illustrer les déplacements du robot lors de la seconde phase du procédé selon un exemple de réalisation non limitatif ;
- la est un organigramme du procédé de retour du robot à la station, vu de la station d’accueil, selon un exemple de réalisation non limitatif.
Les diagrammes blocs et algorigrammes dans les figures illustrent l’architecture, les fonctionnalités et le fonctionnement de systèmes, dispositifs, méthodes, procédés et produits programmes d’ordinateur selon divers exemples de réalisation. Chaque bloc d’un diagramme bloc ou chaque étape d’un algorigramme peut représenter un module ou encore une portion de code logiciel comprenant des instructions pour l’implémentation d’une ou plusieurs fonctions. Selon certaines implémentations, l’ordre des blocs ou des étapes peut être changé, ou encore les fonctions correspondantes peuvent être mises en œuvre en parallèle. Les blocs ou étapes de procédé peuvent être implémentés à l’aide de matériel tel que des circuits, de logiciels ou d’une combinaison de matériel et de logiciels, et ce de façon centralisée, ou de façon distribuée, pour tout ou partie des blocs ou étapes. Tout système de traitement de données adapté peut être utilisé pour l’implémentation. Un système ou dispositif de traitement de données adapté comprend par exemple une combinaison de code logiciel et de circuits, tels un processeur, contrôleur ou autre circuit adapté pour exécuter le code logiciel. Lorsque le code logiciel est exécuté, le processeur ou contrôleur conduit le système ou dispositif à mettre en œuvre tout ou partie des fonctionnalités des blocs et/ou des étapes des procédés ou méthodes selon les exemples de réalisation. Le code logiciel peut être stocké dans une mémoire ou sur un support lisible accessible directement ou à travers un autre module par le processeur ou contrôleur.
La est un diagramme bloc d’un robot mobile selon un exemple de réalisation non limitatif. Le robot 100 comprend un processeur 101, un support de stockage court terme 102, ainsi qu’un support de stockage long terme 103. Le support de stockage court terme est par exemple une mémoire vive. Le support de stockage long terme est par exemple une mémoire ‘flash’ ou une mémoire morte. Le support de stockage long terme comporte du code logiciel qui lorsqu’il est exécuté par le processeur, conduit le robot à mettre en œuvre les méthodes et procédés décrits. Le processeur 101 et les supports de stockage 102 et 103 sont reliés par un bus de communication 104. Le processeur est également relié à d’autres éléments du robot en tant que de besoin – ces connexions sont, par souci de simplicité, toutes illustrées par le bus 104 même si selon une implémentation pratique et les composants mis en oeuvre, ces connexions peuvent être distinctes.
Le robot mobile 100 comprend un module de propulsion configuré pour permettre au robot de se déplacer sur le sol. Le module de propulsion est configuré pour permettre au processeur de changer l’orientation du robot et de faire avancer ou reculer le robot. Selon le présent exemple de réalisation, le module de propulsion comporte des moteurs électriques 111a à 111d associés respectivement à des roues 112a à 112d. Les roues sont munies d’axes respectifs 113a à 113d. Dans le présent exemple de réalisation, les roues sont actionnables individuellement et les moteurs sont configurés pour tourner dans les deux sens autour de leur axe. Ceci permet au robot de changer d’orientation et de se déplacer en avant et en arrière.
Selon un mode de réalisation particulier, les roues sont munies de capteurs de distance, par exemple de moyens odométriques configurés pour fournir une information sur la rotation de chaque roue, permettant en combinaison avec la connaissance du diamètre d’une roue d’en déduire une estimation du déplacement. Selon un mode de réalisation, le robot comporte pour chaque roue un capteur optique associé à un encodeur optique pour fournir la vitesse de rotation.
Le robot mobile comprend en outre une alimentation électrique 105 connectée à une interface de chargement 106. Selon le présent exemple de réalisation, l’alimentation comporte un ou plusieurs composants rechargeables. Ces composants rechargeables sont par exemple des batteries. Le niveau de charge de l’alimentation peut être obtenu par le processeur 101. L’interface de chargement 106 est configurée pour recharger l’alimentation lorsque l’interface de chargement 106 coopère avec une interface de chargement 206 d’une station de d’accueil 300 qui sera décrite plus loin. Selon le présent exemple de réalisation, l’interface de chargement 106 comporte une pluralité de contacts électriques, par exemple deux contacts, configurés pour coopérer avec des contacts correspondants de la station d’accueil quand le robot est en position de recharge. Selon un autre exemple de réalisation, l’interface de chargement 106 est une interface de chargement par induction configurée pour coopérer avec un chargeur par induction de la station d’accueil.
Selon le présent exemple de réalisation, le robot 100 comporte une interface de communication sans fil 107 configurée pour communiquer avec la station d’accueil. Cette interface de communication est par exemple une interface de type Bluetooth (marque déposée).
Selon le présent exemple de réalisation, le robot 100 comporte une interface de signal de distance 108. Cette interface 108 est configurée pour fournir au processeur 101 une information représentative de la distance qui sépare le robot de la station ou lui permettant de déterminer cette distance. Selon un exemple de réalisation particulier, cette interface reçoit un signal de balise de la station d’accueil, ce signal étant utilisé pour déterminer ladite distance sur la base d’un calcul du temps de trajet du signal. Pour ce faire, les horloges de la station d’accueil et du robot sont synchronisées. Selon un mode de réalisation particulier, l’interface est basée sur la technologie ‘Ultra Large Bande’ (ULB) ou ‘Ultra Wide Band’ (UWB) en langue anglaise, qui est un protocole de communication et de radiorepérage ou géolocalisation basé sur la norme IEEE 802.15.4z. La personne du métier peut choisir d’autres technologies pour l’évaluation de la distance station-robot, par exemple d’autres technologies basées sur la mesure de temps de trajet d’un signal radiofréquences.
Plus particulièrement, la concentration en phase huileuse de la composition (A) est comprise entre 1 et 50 % en poids, de préférence entre 5 et 50 % en poids, par rapport au poids total de ladite composition (A).
Selon une première variante de l’invention, la phase huileuse de la composition (A) comprend au moins une huile non volatile. De préférence, selon cette variante, la ou les huiles sont choisies parmi les huiles non volatiles hydrocarbonées polaires, de préférence parmi les huiles de type esters. A titre d’exemple particulièrement avantageux, la composition (A) comprend au moins une huile ester choisie parmi les triglycérides en C4-C36, et notamment parmi les huiles végétales. De préférence, l’huile non volatile n’est pas choisie parmi les huiles non volatiles siliconées.
Conformément à un autre mode de réalisation de l’invention, la phase huileuse comprend plus particulièrement au moins une huile volatile, de préférence hydrocarbonée. Avantageusement, la composition (A) ne comprend pas d’huile volatile siliconée. Plus particulièrement la teneur en huile volatile, de préférence hydrocarbonée, est comprise entre 1 et 30 % en poids, de préférence entre 2 et 30% en poids, par rapport au poids total de la composition (A).
Tensioactifs La composition (A) comprend de préférence au moins un tensioactif émulsionnant.
De préférence, le ou les tensioactifs sont différents des composés Y.
Si la composition (A) comprend au moins un tensioactif choisi parmi les composés Y, alors le rapport de la masse de(s) polyphénol X, exprimée de matière active, à la masse de(s) composé(s) Y, exprimée de matière active, est inférieur à 0,1.
Avantageusement, si la composition (A) comprend au moins un tensioactif choisi parmi les composés Y, alors leur teneur serait de préférence inférieure à 1,5 % en poids, de préférence inférieure à 1% en poids, par rapport au poids de la composition (A).
Additifs usuels La composition peut également comprendre tout ingrédient additionnel classique dans le domaine, comme par exemple, des cires, notamment des cires hydrocarbonées polaires ou apolaires, des composés pâteux, en particulier hydrocarbonés comme par exemple des composés tels que les beurres végétaux (par exemple beure de karite, de cacao, etc.) les composés esters dérivés de dimerdiol dimerdilinoleate (par exemple les bis-behenyl/isostearyl/phytosteryl dimer dilinoleyl dimer dilinoleate) ou encore le bis-diglyceryl polyacyladipate-2 ; des solvants organiques ; des agents épaississants de phase aqueuse, comme la gomme xanthane ; des agents épaississants de phase lipophile, comme les silice et/ou les argiles modifiées hydrophobes ou non ; des charges ; des actifs cosmétiques tels que des vitamines, des filtres UV solaires, des agents hydratants, des agents antioxydants.
COMPOSITION (B) COMPRENANT LE(S) COMPOSE(S) Y Conformément à un mode de réalisation particulier de l’invention, la teneur en composé(s) Y représente au moins 1% en poids, plus particulièrement de 1 à 75 % en poids, de préférence de 2 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition (B).
De préférence, la composition (B) se présente sous une forme liquide à température ambiante.
Phase hydrophile La composition peut comprendre une phase hydrophile.
Selon un premier mode de réalisation de l’invention, la composition (B) comprend au moins de l’eau.
La quantité d’eau est de préférence supérieure ou égale à 5% en poids, plus particulièrement supérieure ou égale à 10% en poids, et encore plus particulièrement supérieure ou égale à 25% en poids, voire supérieure à 30% en poids, et plus préférentiellement allant de 35 à 85 % en poids, par rapport au poids total de la composition (B).
La composition (B) peut éventuellement comprendre au moins un solvant, plus particulièrement choisi parmi les mono-alcool en C2-C8, plus particulièrement en C2-C5, de préférence l’éthanol, l’isopropanol ; parmi les polyols liquides (à température ambiante et pression atmosphérique) ayant de 3 à 8 atomes de carbone tels que le propylène glycol, le 1,3-butylène glycol, le caprylyl glycol, le pentylène glycol, la glycérine, le dipropylène glycol ; parmi les cétones en C3-C4, les aldéhydes en C2-C4 ; ainsi que leurs mélanges. De préférence, le ou les solvants sont choisis parmi l’éthanol, et les polyols liquides en C3-C8, en particulier le propylène glycol, le 1,3 butylèneglycol, seuls ou en mélanges.
Dans le cadre de l’invention, : - les sels des di-rhamnolipides de formule (VI) sont plus particulièrement leurs sels carboxylates avec un cation organique ou inorganique, et notamment avec un cation choisi parmi le sodium, le potassium, le calcium et l’ammonium, - les formes solvatées des di-rhamnolipides de formule (VI) sont plus particulièrement celles solvatées avec une ou plusieurs molécules d’eau ou de solvants organiques, par exemple un hydrate ou un solvate d’alcool linéaire ou ramifié tel que l’éthanol ou l’isopropanol, les atomes de carbone optiquement actifs des acides gras sont de préférence sous forme d’énantiomères R, et - le terme radical « alkyle » désigne un groupe aliphatique saturé, linéaire ou ramifié ; par exemple un groupe C 1 -C 20 -alkyle ayant une chaîne hydrocarbonée de 1 à 20 atomes de carbone, linéaire ou ramifiée, plus particulièrement un méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tertio-butyle, pentyle, hexyle, heptyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, tridécyl, tétradécyle, pentadécyle, hexadécyle, heptadécyle, octadécyle, nonadécyle, eicosyle.
De préférence, la composition selon l’invention comprend au moins un di-rhamnolipide de formule (VI) dans laquelle : - m désigne un nombre entier égal à 2, 1 ou 0; - n désigne un nombre entier égal à 1; et - R 1 et R 2 , identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux pentényle, hexènyle, heptényle, octényle, nonényle, décényle, undécényle, dodécényle, tridécényle et les radicaux de formule -(CH 2 ) o CH 3 avec o désignant un nombre entier allant de 1 à 23, en particulier de 3 à 15, et plus particulièrement de 4 à 12.
Selon un mode de réalisation préféré de l’invention, la composition selon l’invention comprend au moins un di-rhamnolipide de formule (VI) dans laquelle m est égal à 1.
Selon un mode de réalisation préféré de l’invention, la composition selon l’invention comprend un mélange d’au moins deux, de préférence au moins trois di-rhamnolipides de formule générale (VI) dans laquelle m est de préférence égal à 1.
Selon une autre mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend un mélange comprenant au moins un mono-rhamnolipide.
Plus préférentiellement, la composition selon l’invention comprend au moins un di-rhamnolipide de formule (VII) suivante : (VII) dans laquelle : - m désigne un nombre entier égal à 2, 1 ou 0, de préférence m est égal à 1, - n est égal à 1, - R 1 est un radical -(CH 2 ) p −CH 3 , avec p étant un entier variant de 1 à 23, de préférence de 4 à 12, - R 2 est un radical -(CH 2 ) q −CH 3 , avec q étant un entier variant de 1 à 23, de préférence de 4 à 12, ainsi que leurs sels, leurs solvates, et leurs isomères optiques.
A titre illustratif et non limitatif des di-rhamnolipides de formule (VII) pouvant convenir à l’invention, on peut citer notamment les composés de formule Di-RL-CXCY, tels que définis dans le tableau 1 ci-après.
Selon un mode de réalisation préféré, la composition selon l’invention comprend au moins un di-rhamnolipide de formule (VII), dans laquelle p et q sont identiques et égaux à 6 et n et m sont égaux à 1, dit encore di-RL-C10C10, ou l’un de ses sels, solvates et isomères optiques.
De préférence, le di-rhamnolipide de formule (VII) dans laquelle p et q sont identiques et égaux à 6 et n et m sont égaux à 1, est présent dans la composition selon l’invention à raison d’au moins 50 % en poids et de préférence de 51 % à 85 % en poids par rapport au poids total en rhamnolipides.
Selon un autre mode de réalisation préféré, la composition selon l’invention comprend au moins un di-rhamnolipide de formule (VII), dans laquelle n et m sont égaux à 1, p est égal à 6, q est égal à 8, ou l’un de ses sels, solvates et isomères optiques.
Selon un autre mode de réalisation préféré, la composition selon l’invention comprend au moins un di-rhamnolipide de formule (VI) dans laquelle n et m sont égaux à 1, R 1 représente un radical -(CH 2 ) o CH 3 avec o étant un entier variant de 4 à 12 et R 2 est choisi parmi les radicaux pentényle, hexényle, heptényle, octényle, nonényle, décényle, undécényle, dodécényle, tridécényle, de préférence, R 1 est un radical -(CH 2 ) 6 CH 3 et R 2 un radical nonényle, ou l’un de ses sels, solvates et isomères optiques.
Selon un autre mode de réalisation préféré, la composition selon l’invention comprend un mélange d’au moins deux, de préférence au moins trois, di-rhamnolipides de formule (VI) ou de formule (VII), telles que définies précédemment, et plus préférentiellement choisis parmi : - un di-rhamnolipide de formule (VII), dans laquelle p et q sont identiques et égaux à 6 et n et m sont égaux à 1, - un di-rhamnolipide de formule (VII) dans laquelle n et m sont égaux à 1, p est égal à 6, q est égal à 8, et - un di-rhamnolipide de formule (VI) dans laquelle n et m sont égaux à 1, R 1 représente un radical -(CH 2 ) o CH 3 avec o étant un entier variant de 4 à 12 et R 2 est choisi parmi les radicaux pentényle, hexényle, heptényle, octényle, nonényle, décényle, undécényle, dodécényle, tridécényle, et de préférence, R 1 est un radical -(CH 2 ) 6 CH 3 et R 2 est un radical nonényle.
De préférence, la composition selon l’invention comprend un mélange d’au moins deux, plus préférentiellement au moins trois, di-rhamnolipides de formule (VI) ou de formule (VII) choisis parmi : - au moins 50 % en poids, et de préférence de 51 % à 85 % en poids, d’un di-rhamnolipide de formule (VII) dans laquelle p et q sont identiques et égaux à 6 et n et m sont égaux à 1, par rapport au poids total en rhamnolipides, - de 0,5 % à 25 % en poids, de préférence de 5 % à 15 % en poids, d’un di-rhamnolipide de formule (VII) dans laquelle p est égal à 6, q est égal à 8 et n et m sont égaux à 1, par rapport au poids total en rhamnolipides, et - de 0,5 % à 15 % en poids, de préférence de 3 % à 12 % en poids, de préférence de 5 % à 10 % en poids, d’un di-rhamnolipide de formule (VI) dans laquelle n et m sont égaux à 1, R 1 représente un radical -(CH 2 ) 6 CH 3 et R 2 représente un radical nonényle, par rapport au poids total en rhamnolipides.
Les rhamnolipides sont conventionnellement préparés par des procédés connus par l’homme du métier à partir de bactéries productrices, tel que les souches Pseudomonas.
Des explants de 12±1 mm de diamètre sont préparés à partir d’une plastie prélevée sur une femme de type caucasien, phototype-II. Ils sont maintenus en survie en milieu BEM (BIO-EC’s Explants Medium) à 37°C en atmosphère humide, enrichie de 5 % de CO 2 .
Un complexe de pomme, incorporé dans un châssis formule et comprenant 6% d’eau de pomme, 0,5% d’extrait de marc de pomme et 0,2% d’huile de pomme est appliqué sur les explants de peau, en comparaison avec le châssis formule seul (placebo), à raison de 2 µl par explant (2 mg/cm2) et étalés à l’aide d’une spatule (J0). Le renouvellement du traitement est réalisé à J1, J4, J6, J8. Les explants de peau sont récupérés à J8, fixés dans le formol, inclus en paraffine puis coupés pour colorations histologiques. La viabilité cellulaire des structures épidermiques et dermiques est observée d’une part après coloration au trichrome de Masson variante de Goldner. En parallèle, les glycosaminoglycanes (GAGs) acides sont visualisés par du bleu alcian P.A.S (Periodic Acid Schiff), et les GAGs neutres par le réactif de Schiff. Une analyse semi-quantitative de la surface des marquages est ensuite effectuée par une analyse d’images. Une augmentation de 302% de la synthèse des GAGs acides est mesurée sur l’explant traité par le complexe de pomme, par rapport au placebo.
Le complexe de pomme stimule la synthèse de molécules qui captent et retiennent l’eau, notamment les GAGs acides, pour une meilleure hydratation cellulaire.
Une synergie entre les actifs du complexe de pomme est observée par rapport aux effets des actifs pris séparément.
Exemple 5 : Effet du complexe de marc de pomme, huile de pomme et eau de pomme sur la synthèse du glucose
Un complexe de pomme, incorporé dans un châssis formule et comprenant 20% d’eau de pomme, 0,5% d’extrait de marc de pomme et 0,1% d’huile de pomme, est appliqué sur les explants de peau, en comparaison avec le châssis formule seul (placebo), à raison de 2 µl par explant (2 mg/cm2) et étalés à l’aide d’une spatule (J0). Le renouvellement du traitement est réalisé à J1, J4, J6, J8. Le dosage du glucose est effectué sur les explants de peau, après broyage et extraction, et sur les surnageants de culture à J8, 3h après le dernier re-traitement. Il est réalisé à l’aide du Kit GLUC HK Gen.3 (Roche, ref 08057800190) par une méthode enzymatique colorimétrique à l'hexokinase.
Une augmentation de 32% de la synthèse du glucose est mesurée sur l’explant traité par le complexe de pomme, par rapport au placebo.
Le complexe d’actifs de pomme stimule la synthèse du glucose dans le tissu cutané, molécule à l’origine de la production d’énergie cellulaire (Tableau 1 ci-dessous).
Placebo Complexe « SOIN » Synthèse de glucose 100% 132% (SD ±8,8%)
Exemple 6 : Effet du complexe de marc de pomme, huile de pomme et eau de pomme sur la synthèse d ’ATP