INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les données fournies ici montrent que l'inclusion d'une enzyme méthyltransférase sur un bactériophage qui est apporté à une cellule bactérienne cible augmente l'efficacité de l’infection par bactériophage par rapport à un bactériophage dépourvu de cette même méthyltransférase, dans le contexte d'une cellule bactérienne cible dans laquelle cette méthyltransférase peut protéger contre un système RM hôte.
L’invention porte également sur un procédé d'apport d'un bactériophage à une cellule bactérienne cible, le procédé comprenant la mise en contact de la cellule cible avec un bactériophage codant pour une enzyme méthyltransférase telle que divulguée ici, dans lequel la bactérie cible comprend un système de restriction modification qui clive l'ADN qui est non méthylé en un site cible de méthylation de l'enzyme méthyltransférase.
Les données fournies ici montrent également que l'expression de multiples MTases dans une souche de production peut améliorer l'infection médiée par les bactériophages des bactéries cibles par rapport à un témoin non méthylé.
Avantageusement, de multiples MTases peuvent être utilisées pour protéger le plasmide, le phagémide ou l'acide nucléique de phage, de l'action de différents systèmes RM au sein d'une cellule bactérienne cible. Ainsi, dans un mode de réalisation, le plasmide ou l'acide nucléique de phage code pour des première et seconde MTases, les MTases étant des MTases de différents systèmes RM, par ex. des systèmes RM trouvés ensemble dans une seule espèce ou souche bactérienne ou archéale.
Par conséquent, dans un autre aspect encore l'invention porte sur un procédé de méthylation d'un ADN de bactériophage ou d'un ADN de phagémide ou d'un ADN de plasmide, le procédé comprenant :
l’introduction dans une bactérie hôte de production, tel que dans le génome d'une bactérie hôte de production (i) d’une séquence nucléotidique codant pour une pluralité de méthyltransférases, ou (ii) de deux ou plus séquences nucléotidiques codant ensemble pour une pluralité de méthyltransférases,
la production, par cela, d’une bactérie hôte de production modifiée exprimant au moins 2 méthyltransférases introduites, convenablement qui se trouvent ne pas naturellement apparaître dans la cellule de bactérie hôte ;
l’infection de la bactérie hôte de production ayant une activité de méthylation altérée avec une particule de bactériophage comprenant de l'ADN de bactériophage ou de l'ADN de phagémide, ou la transformation de la bactérie avec un plasmide comprenant de l'ADN de plasmide, méthylant ainsi ledit ADN de bactériophage ou ADN de phagémide ou ADN de plasmide ; et
la production d’une particule de bactériophage comprenant de l'ADN de bactériophage ou de l'ADN de phagémide, ou la production de l'ADN de plasmide, ayant un motif de méthylation produit par des méthyltransférases dans la bactérie hôte, optionnellement l’isolation, encore, de la particule de bactériophage comprenant de l'ADN de bactériophage ou de l'ADN de phagémide, ou l’isolation de l'ADN de plasmide ou du plasmide.
Optionnellement, le procédé comprend en outre la formulation du bactériophage, du plasmide ou de l’ADN isolé avec un diluant, support ou excipient pharmaceutiquement acceptable pour produire une composition pharmaceutique.
Le procédé de méthylation d'un ADN de bactériophage ou d’un ADN de phagémide ou d’un ADN plasmidique peut également mettre en œuvre un acide nucléique de bactériophage ou de phagémide ou un ADN plasmidique tel que décrit ci-dessus qui code lui-même pour une MTase, et ce procédé combine donc une méthylation de souche de production (apportée en trans) et une méthylation par une MTase ou des MTases codées par l'ADN qui est introduit dans la bactérie cible (apportée en cis).
Le procédé selon l’invention permet ainsi d’obtenir un flux purifié de polymères thermoplastiques et plus particulièrement de polyoléfines, à partir de déchets plastiques, qui peut être utilisé dans toute application par exemple en remplacement des mêmes polymères à l’état vierge. Le flux purifié de thermoplastiques, c’est-à-dire la fraction de polymères thermoplastiques purifiés, obtenu par le procédé selon l’invention présente ainsi des teneurs en impuretés et en solvant résiduel suffisamment faibles pour pouvoir être utilisé dans toute application. De manière préférée, le flux de polymères thermoplastiques purifiés, et notamment le flux de polyoléfines purifiées, obtenu à l’issue du procédé selon l’invention comprend avantageusement moins de 5% poids d’impuretés, très avantageusement moins de 1% poids d’impuretés et très avantageusement moins de 5% poids de solvant résiduel (en particulier de solvant de dissolution), de préférence moins de 1% poids de solvant résiduel, de manière préférée moins de 0,1% poids de solvant résiduel.
Selon un mode de réalisation préféré de l’invention, le procédé de purification de la charge plastique comprend, de préférence consiste en :
a) une étape de dissolution dans un solvant de dissolution comprenant au moins un composé hydrocarboné aliphatique paraffinique, présentant une température d’ébullition comprise entre -15 et 100°C, de préférence entre 8 et 100°C, préférentiellement entre 25 et 69°C, de manière préférée entre 25 et 61°C et de manière très préférée entre 25 et 40°C, mise en œuvre à une température de dissolution comprise entre 120°C et 250°C, de préférence entre 130 et 225°C, préférentiellement entre 150°C et 210°C, de manière préférée entre 150 et 195°C, et une pression de dissolution comprise entre 1,0 et 25,0 MPa abs., de préférence entre 1,0 et 20,0 MPa abs., préférentiellement entre 3,0 et 18,0 MPa abs., de manière préférée entre 5,0 et 18,0 MPa abs., et de manière très préférée entre 6,0 et 17,0 MPa abs, pour obtenir au moins une solution polymère brute ; puis
b) une étape de purification de la solution polymère brute, comprenant :
c) une étape de séparation solvant-polymère mettant en œuvre au moins une section de séparation supercritique opérée à une température comprise entre 160 et 300°C, de préférence entre 190 et 250°C, préférentiellement entre 200 et 230°C, et à une pression (Psupercritique) comprise entre 2,7 et 10,0 MPa abs., de préférence entre 3,0 et 6,0 MPa abs., préférentiellement entre 3,0 et 5,0 MPa abs. et de manière préférée entre 3,0 et 4,0 MPa abs, suivie par au moins une section de récupération de solvant, opérée à une température comprise entre 160 et 300°C et une pression comprise entre la pression de la section de séparation supercritique (Psupercritique) et 0,000005 MPa (soit 5 Pa), pour obtenir au moins une fraction de polymères thermoplastiques purifiés.
Une charge plastique colorée sous forme de pellets de taille inférieure à 5 mm à base de polyoléfines (contenant 95% poids d’un mélange de polypropylène et de polyéthylène 50/50), issue de déchets plastiques, est introduite sous forme de paillettes dans une extrudeuse chauffée à 180°C. En sortie d’extrudeuse, la charge est au moins en partie sou forme fondue et est mélangée avec un solvant comprenant 99% de n-pentane et préalablement chauffée à 180°C, selon un ratio massique solvant/charge de 9/1. Le mélange de solvant et de charge est introduit dans un réacteur agité et chauffé à 180°C, et maintenu à 12 MPa absolu, pendant un temps de séjour de 1 heure. Une solution polymère est alors obtenue.
Avantageusement, les cellules porteuses sont destinées au traitement ou à la prévention d'une infection cellulaire cible chez un sujet humain ou animal (par exemple un chien, chat, cheval, poulet, vache, mouton, chèvre, porc, poisson ou fruit de mer).
Avantageusement, les cellules porteuses sont d'une espèce probiotique pour ledit sujet ou probiotique pour les humains ou animaux (par exemple poulets). Par exemple, les cellules porteuses sont des cellules probiotiques de Bacteriodetes (par exemple Bacteriodes ), le sujet étant par exemple un humain. Par exemple, les cellules porteuses sont des cellules probiotiques de Clostridiales , le sujet étant par exemple un humain. Par exemple, les cellules porteuses sont des cellules probiotiques E coli. Par exemple, les cellules porteuses sont des cellules probiotiques de Bacillus , le sujet étant par exemple une plante.
Avantageusement, chaque vecteur (par exemple virus ou plasmide) code pour un ou plus ARN guides ou un ou plus ARNcr capables de s'hybrider dans la cellule cible à la ou aux séquence(s) d'acide nucléique cible du vecteur respectif. Par exemple, chaque vecteur code pour 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 (ou plus de 10) ARNg différents ou ARNcr différents qui s'hybrident à une séquence cible respective, les séquences cibles étant différentes l’une de l'autre. Par exemple, 3 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 2 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 3 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 4 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 3 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 5 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 6 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 7 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 8 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 9 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 10 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 11 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 12 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur. Par exemple, 13 ARNg ou ARNcr différents sont codés par chaque vecteur.
Dans un exemple, les cellules cibles sont des cellules de Salmonella (le sujet étant par exemple un poulet). Dans un exemple, les cellules cibles sont des cellules de Campylobacter (le sujet étant par exemple un poulet). Dans un exemple, les cellules cibles sont des cellules d' Edwardsiella (le sujet étant par exemple un poisson ou un fruit de mer, par exemple un poisson-chat ou une crevette). Dans un exemple les cellules cibles sont des cellules de Bacteriodetes (par exemple Bacteriodes ). Dans un exemple les cellules cibles sont des cellules de Clostridiales . Dans un exemple, les cellules cibles sont des cellules d’ E coli .
Optionnellement, chaque plasmide comprend un module tra1 et/ou tra2 exprimable ou un homologue de celui-ci pour le transfert conjugatif du plasmide entre les cellules. Tout épisome mentionné ici peut être un plasmide.
Optionnellement, chaque plasmide comprend un opéron exprimable d’un module tra1 et/ou tra2 ou un homologue de celui-ci pour le transfert conjugatif du plasmide entre les cellules.
Optionnellement, chaque plasmide est un plasmide RK2 ou R6K modifié. La modification comprend une insertion de séquences nucléotidiques codant pour P1 et P2.
Optionnellement, chaque plasmide comprend une oriV , par exemple, oriV d'un plasmide IncI (par exemple IncI1 ou IncI2 ), RK2 ou R6K, ou un homologue de ceux-ci. Optionnellement, chaque plasmide comprend un oriV d'un plasmide IncI (par exemple IncI1 ou IncI2 ), RK2 ou R6K, ou un homologue de ceux-ci
Optionnellement, chaque plasmide comprend une oriT , par exemple oriT d'un plasmide IncI1 ou IncI2 . Optionnellement, chaque plasmide est un plasmide IncI modifié (par exemple IncI1 ou IncI2). La modification (pour les Première à Troisième Configurations, et optionnellement pour la Quatrième Configuration) comprend une insertion de séquences nucléotidiques codant pour P1 et P2.
Optionnellement, P2 comprend un ou plus composant(s) d'un système CRISPR/Cas qui est utilisable dans la cellule cible pour couper une séquence de protoespaceur comprise par le vecteur ou le génome de la cellule porteuse, la séquence de protoespaceur étant par exemple comprise par le chromosome de la cellule porteuse.
Dans un mode de réalisation, la coupe mentionnée ici tue la cellule porteuse ou provoque la dégradation du vecteur dans la cellule cible. En alternative, la coupe inhibe la croissance ou la prolifération de la cellule cible.
Optionnellement, P2 code pour un ARN guide ou un ARNcr d'un système CRISPR/Cas qui est utilisable avec une nucléase Cas dans la cellule cible pour couper une séquence de protoespaceur comprise par le vecteur.
Dans un exemple des Première à Troisième Configurations, le protoespaceur est composé d'un gène nécessaire pour la viabilité ou le maintien du vecteur dans la cellule. Dans un exemple de la Quatrième Configuration, le protoespaceur est compris par un gène requis pour la viabilité de la cellule porteuse.
Optionnellement, chaque vecteur (par exemple virus (par exemple phage) ou plasmide) comprend un gène qui code pour un produit, le produit étant essentiel à la survie ou prolifération de la cellule porteuse lorsqu'elle se trouve dans un environnement dépourvu du produit, le chromosome de la cellule porteuse ne comprenant pas de gène exprimable codant pour le produit et optionnellement l'acide nucléique du vecteur étant le seul acide nucléique épisomique compris par la cellule porteuse qui code pour le produit. Par exemple, le gène est sélectionné parmi un gène aroA, argH, hisD, leuB, lysA, metB, proC, thrC, pheA, tyrA, trpC et pflA ; ou le gène étant un gène anti-toxine et le vecteur codant optionnellement pour une toxine apparentée.
Par exemple, la cellule porteuse est une cellule d’ E coli (par exemple souche d’ E coli Nissle, F18 ou S17). Par exemple, la cellule porteuse est une cellule de Bacillus (par exemple B subtilis), d’Enterococcus ou de Lactobacillus , le sujet étant par exemple une plante.
Optionnellement, chaque cellule porteuse est destinée à une administration à un microbiote d'un sujet humain ou animal à des fins médicales.
La présente invention vise à pallier ces inconvénients et participer au recyclage des plastiques. Plus particulièrement, elle vise à proposer un procédé efficace, simple et économiquement viable, de traitement d’une charge plastique à base de polypropylène, notamment issue des déchets plastiques, afin d’éliminer au moins en partie les impuretés qu’elle contient, en particulier au moins en partie les additifs qu’elle contient et qui sont classiquement ajoutés dans les matières plastiques, de manière à pouvoir valoriser ladite charge plastique et plus particulièrement les déchets plastiques. La présente invention cherche en effet à séparer efficacement les impuretés des polymères, et en particulier du polypropylène, que les matières plastiques usagées comprennent, et à récupérer le polypropylène purifié, pour pouvoir l’utiliser par exemple comme base polymère dans la fabrication de nouveaux objets plastiques notamment à la place de résine vierge.
L’invention concerne un procédé de purification d’une charge plastique qui comprend du polypropylène, comprenant :
a) une étape de dissolution comprenant la mise en contact de la charge plastique avec un solvant de dissolution comprenant au moins un composé hydrocarboné présentant une température d’ébullition comprise entre -15°C et 100°C, à une température de dissolution comprise entre 150°C et 250°C, et une pression de dissolution entre 1,0 et 18,0 MPa absolu, pour obtenir au moins une solution polymère brute ;
c) une étape de séparation solvant-polymère, mettant en œuvre au moins une section de séparation supercritique opérée à une température entre 160 et 300°C et à une pression (Psupercritique) comprise entre 2,7 et 10,0 MPa absolu, suivie par au moins une section de récupération de solvant, pour obtenir au moins une fraction de polypropylène purifié.
L’avantage du procédé de l’invention est de proposer un procédé de traitement efficace d’une charge plastique à base de polypropylène, et en particulier des déchets plastiques à base de polypropylène notamment issus des filières de collecte et de tri, de manière à récupérer le polypropylène qu’elle contient pour pouvoir le recycler vers tout type d’applications. Le procédé selon l’invention permet en effet d’obtenir un flux de polypropylène purifié comprenant avantageusement des teneurs en impuretés, en particulier en additifs, et en solvant, en particulier en solvant de dissolution, négligeables ou au moins suffisamment faibles pour que le flux de polypropylène purifié puisse être introduit dans tout type de formulations de plastiques à la place de résine vierge de polypropylène. Par exemple, le flux de polypropylène purifié obtenu à l’issue du procédé selon l’invention comprend avantageusement moins de 5% poids d’impuretés, très avantageusement moins de 1% poids d’impuretés et très avantageusement moins de 5% poids de solvant (en particulier de solvant de dissolution), de préférence moins de 1% poids de solvant, de manière préférée moins de 0,1% poids de solvant.
Le procédé selon l’invention propose ainsi un schéma simple correspondant à un enchainement d’opérations, qui permet de débarrasser les déchets plastiques à base de polypropylène d’au moins une partie de leurs impuretés, notamment d’au moins une partie des additifs, et de récupérer du polypropylène purifié, comprenant avantageusement peu voire pas de solvant, de manière à pouvoir valoriser les déchets plastiques par recyclage du polypropylène purifié. Avantageusement, selon les conditions mises en œuvre dans les étapes du procédé, les additifs présents dans la charge plastique peuvent être solubles ou insolubles dans le solvant utilisé tout au long du procédé selon l’invention, permettant une purification et une séparation efficaces des polymères.
De plus, le procédé selon l’invention propose un enchainement d’opérations mises en œuvre dans des conditions opératoires notamment de températures et de pression optimales, pour séparer efficacement les impuretés et les solvants du polypropylène, mais raisonnables, limitant ainsi la consommation énergétique du procédé et par conséquent rendant ledit procédé économiquement intéressant.
L’invention a encore comme avantage de participer au recyclage des plastiques et à la préservation des ressources fossiles, en permettant la valorisation des déchets plastiques. Elle permet, en effet, la purification des déchets plastiques en vue d’obtenir des fractions de polypropylène purifié, à teneur réduite en impuretés, notamment des fractions de polypropylène décolorées et désodorisées, pouvant être réutilisées pour former des nouveaux objets plastiques. Les fractions de polypropylène purifié obtenues pourront ainsi être utilisées directement dans des formulations en mélange avec des additifs, par exemple des colorants, des pigments, d’autres polymères, à la place ou en mélange avec des résines vierges, en vue d’obtenir des produits plastiques avec des propriétés d’usage, esthétiques, mécaniques ou rhéologiques facilitant leur réemploi et leur valorisation.
La présente invention permet en outre de séparer efficacement, et avantageusement à moindre coût, le polypropylène du solvant utilisé (en particulier du solvant de dissolution), tout en limitant la dégradation thermique du polypropylène. Ainsi, le solvant utilisé pour traiter la charge plastique, en particulier le solvant de dissolution, est récupéré au moins en partie, et peut être recyclé vers l’une des étapes du procédé, ce qui permet d’éviter une consommation excessive de solvant, d’où l’intérêt écologique et économique du procédé.
Ainsi, la présente invention vise à purifier une charge plastique, en particulier des déchets plastiques, pour obtenir du polypropylène purifié, de manière à pouvoir l’utiliser dans toute application notamment en remplacement de résines vierges.
Plus particulièrement, la présente invention vise à proposer un procédé comprenant une étape de dissolution suivie d’au moins une étape de purification puis d’une séparation solvant / polymère optimisée, pour obtenir un flux de polypropylène purifié.
(e) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules de Salmonella (par exemple de sérotype Typhi ), par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi la ceftriaxone, l'azithromycine et la ciprofloxacine.
(f) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules de Shigella , par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi la ciprofloxacine et l'azithromycine.
(g) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules de Mycobacterium tuberculosis , par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi résistance à l'isoniazide (INH), la rifampicine (RMP), la fluoroquinolone, l'amikacine, la kanamycine et la capréomycine et l'azithromycine.
(h) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules d' Enterococcus , par exemple résistantes à la vancomycine.
(i) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules d’ Enterobacteriaceae , par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi une céphalosporine et un carbapénème.
(j) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules d’ E. coli , par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi le triméthoprime, l'itrofurantoïne, la céfalexine et l'amoxicilline.
(k) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules de Clostridium (par exemple dificile ), par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi l'antibiotique fluoroquinolone et le carbapénème.
(l) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules de Neisseria gonorrhoea, par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi le céfixime (par exemple une céphalosporine orale), la ceftriaxone (une céphalosporine injectable), l'azithromycine et la tétracycline.
(m) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules d' Acinetoebacter baumannii , par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi le bêta-lactame, le méropénème et un carbapénème.
(n) Optionnellement, les bactéries cibles sont des cellules de Campylobacter (ex. jejuni ), par exemple résistantes à un antibiotique sélectionné parmi la ciprofloxacine et l'azithromycine.
(o) Optionnellement, la ou les cellule(s) cible(s) produisent de la bêta (β)-lactamase (par exemple E. coli productrice de BLSE* ou Klebsiella productrice de BLSE). [* (β)-lactamase à Spectre Elargi]
(p) Optionnellement, la ou les cellule(s) cible(s) sont des cellules bactériennes qui sont résistantes à un antibiotique énoncé dans l'un quelconque des exemples (a) à (n).
Dans un exemple, la ou les cellule(s) cible(s) sont une cellule d'une espèce sélectionnée parmi Shigella, E. coli, Salmonella, Serratia, Klebsiella, Yersinia, Pseudomonas et Enterobacter , le sujet étant par exemple une plante. Optionnellement, la composition comprend des cellules porteuses qui sont chacune ou en combinaison capables de transfert conjugatif de l'acide nucléique du vecteur jusque dans des cellules cibles d'espèces sélectionnées parmi deux ou plus parmi Shigella, E coli, Salmonella, Serratia, Klebsiella, Yersinia, Pseudomonas et Enterobacter , par exemple le sujet étant une plante.
Dans un exemple, la réduction de la croissance ou de la prolifération des cellules cibles est d'au moins 50, 60, 70, 80, 90 ou 95 %.
Dans des modes de réalisation, le plasmide contient un gène marqueur criblable ou sélectionnable. Par exemple, le gène marqueur sélectionnable est un gène de résistance aux antibiotiques.