INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon une caractéristique de l’invention, le dispositif d’étanchéité s’étend de manière annulaire autour de l’axe et le long de la totalité d’une circonférence de la première paroi ou de la deuxième paroi. Cette extension annulaire permet donc d’assurer l’étanchéité au niveau de l’ensemble de la jonction entre la membrane et la première paroi et/ou la deuxième paroi.
Selon une caractéristique de l’invention, le demi-boitier comprend un moyen de blocage axial de l’anneau axial. Ce moyen de blocage axial peut faire partie du dispositif d’étanchéité et interagit avec l’anneau axial afin de figer mécaniquement la membrane au sein du demi-boitier. Le blocage mécanique de la membrane est indispensable afin de maintenir l’étanchéité de la zone de réception.
Selon une caractéristique de l’invention, le dispositif d’étanchéité comprend au moins un organe d’étanchéité s’interposant entre l’anneau axial de la membrane et la première face de la première paroi ou entre l’anneau axial de la membrane et la première face de la deuxième paroi. C’est l’organe d’étanchéité qui vient empêcher la fuite du fluide de refroidissement entre la membrane et l’une des parois parmi la première paroi ou la deuxième paroi. L’organe d’étanchéité peut par exemple être un joint en polymère souple. Avantageusement, l’organe d’étanchéité est apte à se déformer au moins partiellement afin d’éviter les interférences mécaniques liées à des micro imperfections de fabrication.
Selon une caractéristique de l’invention, l’anneau axial présente une section en L, une première branche du L étant solidaire de la membrane, une deuxième branche du L étant en regard de la première face de la première paroi ou de la deuxième paroi.
La première branche de l’anneau axial s’étend selon la direction radiale, au moins partiellement dans la continuité de la membrane. La première branche peut par exemple être liée à la membrane par collage. La première branche peut également être partiellement interposée entre la membrane et la première face de la première paroi ou de la deuxième paroi.
La deuxième branche est perpendiculaire à la première branche et s’étend principalement selon la direction axiale, le long de la première paroi ou de la deuxième paroi. La deuxième branche est donc orientée vers la zone de réception. L’organe d’étanchéité est quant à lui intercalé entre la deuxième branche et la première face de la première paroi ou de la deuxième paroi.
Une fois l’anneau axial mis en place, celui-ci peut ensuite être maintenu mécaniquement par le moyen de blocage axial. Ce dernier peut par exemple être une complémentarité de forme entre la deuxième branche et la première face qui empêche tout mouvement axial une fois la membrane mise en place.
Selon une caractéristique de l’invention, la deuxième branche a une gorge de réception de l’organe d’étanchéité. Cette gorge de réception s’étend de manière annulaire autour de l’axe le long de la deuxième branche. L’organe d’étanchéité peut y être inséré ou collé afin d’être maintenu mécaniquement.
Résumé Pour pallier le problème de l’état de la technique évoqué plus haut, un but de la présente invention est de proposer un procédé de détermination d’un terme source d’accident de criticité minimal, susceptible de déterminer un terme source d’accident de criticité minimal à enveloppe relative, de couvrir des termes sources d’accident de criticité dans des conditions de travail diverses et de réduire le taux de signalements manqués d’identification de criticité. Ce procédé constitue donc une condition préalable nécessaire à l’identification précise et à la notification de l’accident de criticité et garantit avantageusement la protection des membres du personnel en matière de santé et de sécurité.
Pour atteindre ce but, la présente invention propose un procédé de détermination d’un terme source d’accident de criticité minimal, comportant les étapes suivantes :
acquisition de caractéristiques globales de dispositifs dans une installation ; détermination, sur la base des caractéristiques globales, d’un nombre de fissions minimal V min et d’un nombre moyen de neutrons de fission minimal N min correspondant à un accident de criticité minimal stipulé par une norme, et d’un taux de fuite minimal des neutrons ou des photons D min de dispositifs respectifs dans l’installation ; et acquisition, selon la formule DN = V min x N min x D min , d’un nombre de neutrons ou de photons de fuite DN correspondant au titre de l’accident de criticité minimal ;
calcul d’un spectre d’énergie des neutrons ou des photons correspondant dans chaque condition juste critique (également dénommée condition juste de criticité ou condition critique) ; calcul d’une dose d’absorption de rayonnement occasionnée par un seul neutron ou photon en vertu du spectre d’énergie correspondant ; adoption du spectre d’énergie des neutrons ou des photons correspondant occasionnant une dose d’absorption de rayonnement minimale comme spectre d’énergie du terme source d’accident de criticité minimal ; et
obtention, sur la base du nombre de neutrons ou de photons de fuite DN correspondant au titre de l’accident de criticité minimal et du spectre d’énergie du terme source d’accident de criticité minimal, d’un terme source de fuite correspondant à l’accident de criticité minimal.
Éventuellement, les caractéristiques globales des dispositifs dans l’installation comportent des formes des dispositifs respectifs dans l’installation et des limites maximale et minimale de concentration d’une charge.
Éventuellement, l’étape d’acquisition des caractéristiques globales de dispositifs dans une installation ; détermination, sur la base des caractéristiques globales, d’un nombre de fissions minimal V min et d’un nombre moyen de neutrons de fission minimal N min correspondant à un accident de criticité minimal stipulé par une norme, et d’un taux de fuite minimal des neutrons ou des photons D min de dispositifs respectifs dans l’installation comporte les étapes suivantes :
calcul, sur la base des caractéristiques des formes des dispositifs dans l’installation, d’une série de valeurs de concentration juste critique (également dénommée concentration juste de criticité ou concentration critique) dans les limites de concentration de charges de U, Pu ;
calcul, sur la base de la série de valeurs de concentration juste critique, de nombres de fissions et de nombres moyens de neutrons de fission correspondant aux conditions juste critiques respectives répondant à l’accident de criticité minimal, et détermination du nombre de fissions minimal V min et du nombre moyen de neutrons de fission minimal N min ; et
analyse de taux de fuite des neutrons ou des photons des dispositifs respectifs dans l’installation, et détermination du taux de fuite minimal D min .
Éventuellement, la norme est GB/T15146.9, un débit de dose stipulé dans la norme est de 0,2 Gy/min à 2 mètres d’une surface d’un dispositif.
Éventuellement, le temps t stipulé dans la norme est de 60 s.
Éventuellement, les formes des dispositifs dans l’installation comprennent un cylindre, une sphère ou un cuboïde.
Le procédé de détermination d’un terme source d’accident de criticité minimal selon la présente invention obtient un nombre de neutrons ou de photons de fuite DN correspondant au titre de l’accident de criticité minimal par détermination respective d’un nombre de fissions minimal V min , d’un nombre moyen de neutrons de fission minimal N min et d’un taux de fuite minimal des neutrons ou des photons D min de dispositifs respectifs dans l’installation, et obtient un terme source de fuite correspondant à l’accident de criticité minimal sur la base du nombre de neutrons ou de photons de fuite DN correspondant au titre de l’accident de criticité minimal et du spectre d’énergie du terme source d’accident de criticité minimal. Il en ressort que le nombre de fissions minimal, le nombre moyen de neutrons de fission minimal et le taux de fuite minimal dans la présente invention peuvent provenir de dispositifs et de conditions de travail différents. Il s’ensuit que l’adoption du procédé de détermination d’un terme source d’accident de criticité minimal selon la présente invention permet de déterminer un terme source d’accident de criticité minimal à enveloppe relative ; le procédé est susceptible de couvrir des termes sources d’accident de criticité dans des conditions de travail diverses, de réduire le taux de signalements manqués d’identification de criticité, ce qui constitue une condition préalable nécessaire à l’identification précise et à la notification de l’accident de criticité et garantit avantageusement la protection des membres du personnel en matière de santé et de sécurité. Le procédé offre les avantages suivants : un large éventail d’applications, la couverture d’accidents de criticité dans des conditions de travail diverses, la diminution du taux de signalements manqués d’accidents de criticité et une capacité robuste à identifier des accidents de criticité.
Brève description des figures représente un organigramme illustrant un procédé de détermination d’un terme source d’accident de criticité d’un mode de réalisation de la présente invention ;
représente un graphique illustrant la distribution de concentrations juste critiques de sphères de diamètres différents obtenue par analyse des concentrations juste critiques des sphères dans une limite de concentration ;
1681 gtgtaccaga tcctgatgga ttactggact gatgtcatgc aagacgatgt gtatgcgatt
1741 atgcaggatg gctggcaagc cgccgcgcaa atccgcgagc ttcagccggt gaaaggcaaa
1801 gatggcaaaa acatctggaa agaaacgcac gatttcgagt ttaccaaacg gcgctacaag
1861 gccgatgtgc tgccccgttc gctagtggaa attcgctgtt tcccggaact gctggatgcg
1921 ctgaaccgcg cgcaggagcg cagtgaagaa gccagtcgtc agctagtgga attcatcgag
1981 gagcaggcag gggaagagga tctgctggct gaggcgaaaa acgataaaga taaggtgacg
2041 caaaagctgg tgaatgcccg tctggcacag ttgaagaaaa cccctgccga cccggatgag
2101 ctggcagtgc tgaaccgctg tctggcgctg attaaggccg aggccagtgc gaaaaaagcg
2161 ctgaaagccg cacaggaagc gttggatcga gcggtattta aacattatcc cacgctggat
2221 gaagcagcga ttaaaacgct ggtagtgcag gataagtggc tggcaacgtt gcaggcaggg
2281 atcaaagcgg agatagagcg tattacccag caactggcgt cgcgcgtaaa ggagctggaa
2341 gagcgttatg ctgaaccgtt gccagcactt gaagccgccg ttgaggcgtt gagcgagaaa
2401 gtggccgggc atttgcgggc gatggggctg gagtggtgat ggtggattta atggtgaatg
2461 agcaacggtc gggtacggtg gggaaaggtg tgcctgcggg gtataagctg actgagatgg
2521 agatgattcc tgaggattgg gttgtatcca cgatattaaa cctgacaacc aacataattg
2581 attatcgcgg cagaactccc aaaaaacttg gaatggattg gggggatggg gatatcgttg
1741 ccctgaaaaa aatacttcgg cCggtgagtt aattgttgtt gcccgaggtg ttggtggaac
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2581 tattagagcc caaaagacga tatataaaaa tttcatttat tactttgtga cctatgataa
2641 aaatatagaa gaactagcga gaattgctga tggtggagca tatcctgcta taaaacctga
Des expériences de conjugaison ont montré que le VCG a été efficacement retiré, puisque 1000 fois moins de transconjugants émergeaient sur le milieu sélectif avec induction par rapport aux plaques sans induction (~104 UFC/ml et ~107 UFC/ml, respectivement) ( ). La conjugaison du plasmide témoin vide ne montre aucune différence dans les transconjugants indépendamment de l'induction.
3.2 Test des effets hors cible des VCG autociblants
Pour tester si le VGC autociblant est retiré sans tuer l'hôte Bacteroides , nous avons cultivé bSNP2978 (pSNP1599) avec et sans rhamnose (Figure 9A, haut). A différents moments, nous avons prélevé des aliquotes, fait des dilutions en série et les avons dispersées sur des plaques de milieu solide avec et sans érythromycine (marqueur antibiotique de VGC) (Figure 9A, bas), ce qui nous a permis d'estimer les tailles de la population hébergeant le plasmide et la population totale, respectivement.
Une heure après l'induction, environ 99 % des cellules de la population ont perdu leurs VCG (Figure 9B). Cette différence est progressivement augmentée tout au long de l'expérience. Comme attendu, pour la culture non induite, le nombre de cellules a été similaire quelle que soit la sélection, suggérant que notre VCG était stable dans les Bacteroides à moins que nous ne le retirions activement en ajoutant l'inducteur.
4 Conclusions
Un nouveau VGC portant un système CRISPR/Cas autociblant (CdCas) peut efficacement était retiré de plus de 99,9 % des cellules d'une population de B. thetaiotaomicron lors de l'induction avec du rhamnose.
Il a également été démontré que la survie et la croissance des cellules de B. thetaiotaomicron n'ont pas été affectées par le VGC autociblant induit, ce qui suggère que le retrait du VGC médié par CRISPR/Cas n'a eu aucun effet hors cible.
Annexe A : Souches bactériennes utilisées dans cette étude Identifiant de la souche bactérienne Description Référence ou source bSNP2522 E. coli NEB® 10-beta. Utilisée comme souche de clonage. New England Biolabs (Catalog # C3020K) bSNP2978 Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482. Bactérie anaérobie connue pour être abondante dans l'intestin humain. Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSM No. 2079) (de l’allemand : « Collection Allemande de Microorganismes et de Cultures Cellulaires SàRL)
Annexe B : construction et clonage du VCG pSNP1599 autociblant
Conception et assemblage de la matrice CRISPR
Une matrice CRISPR a été conçue en identifiant cinq protoespaceurs de 37 pb dans le squelette du plasmide navette (détails à l' Annexe C ), chacun positionné adjacent à la séquence consensus de type I-B PAM (5'-CCW-3'). Une recherche préliminaire de similarité de séquence (BLASTn, non illustrée) n'a pas prédit de hors-cible pour l'un quelconque des cinq espaceurs choisis pour le chromosome de bSNP2978. La séquence répétée (5'- GTTTTATATTAACTAAGTGGTATGTAAAT-3') compatible avec le système CRISPR/Cas de Type I-B a été choisie.
Annexe C : pSNP1599 Basé sur un plasmide navette, contenant un opéron Cas de Type I-B de 6,6 kb de la souche 630∆erm de C. difficile (CdCas) et une matrice CRISPR de 359 pb contenant cinq espaceurs de 37 pb qui sont conçus pour cibler le VGC lui-même. Le locus entier a été régulé par un promoteur inductible par le rhamnose et la séquence consensus RBS utilisée par les Bacteroides spp.. Les cinq espaceurs sont listés ci-dessous : Gène cible : Séquence d'espaceur (5’→3’): mobB : 5’-TTCCGGGGAACTGTACCGGGACAACTGGATAGGGAAA-3’ ampR : 5’-TGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCC-3’ ermG : 5’-AACTATCAAATAGTAAATGATGATATACTGAAATTTA-3’ P_rha : 5’-TCAAAACCAATGTAATATTCCGTCCATCCGGTCTGCC-3’ pSC101 : 5’-GTTCTATTAGGTGTTACATGCTGTTCATCTGTTACAT-3’
EXEMPLE 8 : Evaluation du promoteur inductible par le xylitol de Morganella morganii
Résumé opérationnel
Un promoteur dont il a été prévu l’induction par le xylitol provenant de la bactérie Morganella morganii a été cloné et étudié dans le contexte de diverses souches d' Escherichia coli .
Il a été démontré que le promoteur est réprimé par une protéine régulatrice transcriptionnelle IZ184_04885 et que la répression pouvait être levée soit progressivement en ajoutant du xylitol au milieu de croissance, soit complètement en mutant le régulateur transcriptionnel. La sensibilité du promoteur vis-à-vis du xylitol a augmenté lorsque le système transporteur ABC du xylitol a également été inclus.
Le plasmide p1065 (contenant une sGFP, un marqueur spectinomycine, des sites de reconnaissance de restriction de type I et un site d'empaquetage COS P4 tel que décrit ci-dessus) a été utilisé pour transformer la souche d'E. coli b587 qui contient toute la machinerie génétique nécessaire pour catalyser l'empaquetage de p1065 dans des têtes de phage. Pour la méthylation de l'ADN encapsidé, le plasmide p1160 (contenant un opéron de MTases sous le contrôle du promoteur arabinose) a été cotransformé en b587.
Des cultures d'une nuit des transformants ont été mises en croissance dans du milieu LB (supplémenté avec Tet + Spec + 5 mM de CaCl 2 et 10 mM de MgCl 2 ) et incubées à 37°C, sous agitation. Le lendemain, des cultures fraîches de 10 ml ont été inoculées à DO 600 =0,1 puis cultivées à DO 600 =0,2, moment auquel les gènes d'empaquetage et de lyse, et dans le cas de p1160 l'expression des MTases, ont été induits par l'ajout d'arabinose (0,2% p/v). Les cultures ont été laissées à lyser pendant 3-4h à 37°C sous agitation. Les cultures lysées ont été centrifugées (5 minutes à 10.000xg) et le filtre surnageant a été stérilisé à l'aide d'un filtre 2uM. Pour éliminer l'ADN bactérien résiduel, le lysat a été incubé avec de la DNaseI pendant une nuit à 37°C.
Pour déterminer le titre du lysat, 100 µl de lysat ont été mélangés à 100 µl de culture d'une nuit de la souche b52 et incubés à température ambiante pendant 30 minutes. Ce mélange a été dilué en série à 1:10 dans du tampon SM, déposé sur des plaques LB + Spec et les colonies positives à la GFP ont été dénombrées pour calculer un titre en ufc ml -1 de lysat. Le titre sur les souches cliniques a été déterminé par le même procédé.
Les résultats des expériences sont illustrés dans les Figures 1 à 5
. Efficacité de conjugaison de petits plasmides conjugatifs méthylés en cis (n=3)
A. De petits plasmides conjugatifs codant pour les versions de types sauvages (p1172 et p1174) ou mutés (p1243 et p1244) de M.EcoKI et M.Eco0015 sont directement comparés quant à l'efficacité de la conjugaison dans des isolats cliniques d' E. coli . La souche b52 est utilisée en tant que témoin négatif car elle n’héberge aucun système de restriction actif. Les barres marquées d'un X sont pour des souches hébergeant le système de restriction EcoKI tandis que toutes les autres souches hébergent le système de restriction Eco0015. La ligne pointillée représente la limite de détection à 2,3 log.
B. Comparaison test-T non apparié de l'efficacité de conjugaison de p1174 (codant pour M.Eco0015 de type sauvage) et de p1244 (codant pour M.Eco0015 muté) dans des souches hébergeant le système de restriction Eco0015 (p < 0,05).
. Efficacité de conjugaison d'un grand plasmide conjugatif méthylé en cis (n = 3)
A. De grands plasmides conjugatifs basés sur pCol1B9SL1344 et codant pour les versions de type sauvage (p1284) ou muté (p1286) de M.Eco0015 respectivement sont directement comparés quant à l'efficacité de conjugaison dans des souches de collections cliniques d’ E. coli .
La souche b52 est utilisée en tant que témoin négatif car elle n’héberge aucun système de restriction actif. Les barres marquées d'un X sont pour des souches hébergeant le système de restriction EcoKI tandis que toutes les autres souches hébergent le système de restriction Eco0015.
La ligne pointillée représente la limite de détection à 2,3 log.
B. Comparaison test-T non apparié de l'efficacité de conjugaison de p1284 (codant pour M.Eco0015 de type sauvage) et de p1286 (codant pour M.Eco0015 muté) dans des souches hébergeant le système de restriction Eco0015 (p < 0,05).
. Comparaison de l'efficacité de conjugaison de petits plasmides conjugatifs méthylés en cis et en trans (n=3)
A. Le petit plasmide conjugatif (p1114) est méthylé en trans par un plasmide corésident non conjugatif codant respectivement pour les versions soit de types sauvages (p1082 et p819) soit de types mutés (p1369 et p1368) de M.EcoKI et M.Eco0015 (n=3). L'efficacité de conjugaison des plasmides trans-méthylés est tracée par rapport aux données d'efficacité de conjugaison par cis-méthylation de la (A), avec les plasmides codant pour les versions de types sauvages (p1172 et p1174) et mutés (p1243 et p1244) de M.EcoKI et M.Eco0015 respectivement. La souche b52 est utilisée en tant que témoin négatif car elle n’héberge aucun système de restriction actif. Les barres marquées d'un X sont pour des souches hébergeant le système de restriction EcoKI tandis que toutes les autres souches hébergent le système de restriction Eco0015. La ligne pointillée représente la limite de détection du test à 2,3 logs.
B. Comparaison test-T non apparié de l'efficacité de conjugaison de p1082 (codant pour M.Eco0015 en trans de type sauvage) et de p1174 (codant pour M.Eco0015 en cis de type sauvage) dans des souches hébergeant le système de restriction Eco0015 (p < 0,05).
. Efficacité de mise en culture de lysats de phages, méthylés soit en trans, soit en cis (n=3)
La modification peut également offrir un traitement indirect ou la prévention d'une maladie, dans le cas où des bactéries présentes dans un hôte affectent négativement la réponse de l'hôte à des maladies autres qu'une maladie bactérienne. Par exemple, il a été démontré que les réponses des patients à des traitements contre le cancer sont influencées par la composition de leur microbiome, voir Vancheswaran Gopalakrishnan et al, Cancer Cell (en anglais : « Cellules cancéreuses »). 9 avril 2018 ; 33(4): 570–580.
Par conséquent, la présente invention concerne également un procédé de prévention ou traitement d'une maladie, le procédé comprenant l'apport d'un(e) bactériophage, phagémide ou cellule bactérienne support comprenant un plasmide conjugatif tel que divulgué ici, ou une composition pharmaceutique divulguée ici, à un humain ou animal ayant besoin de celui-ci, l'humain ou animal comprenant une bactérie cible ayant une séquence cible dont la modification entraîne des réponses améliorées au cancer ou à une immunothérapie anticancéreuse.
Par exemple, les bactéries cibles peuvent être des Salmonella, Clostridium, Bifidobacterium , Lactobacillus, Escherichia, Pseudomonas, Caulobacter , Listeria, Proteus et Streptococcus .
Les bactéries cibles peuvent être toute bactérie répertoriée dans le Tableau 1 de WO 2017/211753 A1, laquelle liste est spécifiquement incorporée ici par référence.
Le bactériophage, le phagémide et les cellules supports et les compositions pharmaceutiques divulgué(e)s ici peuvent également être utilisés dans des procédés en combinaison avec d'autres traitements médicaux, y compris, mais sans s'y limiter,
(i) des agents anticancéreux,
(ii) des antibiotiques et
(iii) des cellules bactériennes qui sont utilisées pour repeupler le microbiote humain ou animal.
Des exemples de médicaments appropriés sont fournis dans le Tableau E
L'apport d’un bactériophage, d’un phagémide et de cellules supports et de compositions pharmaceutiques telles que divulguées peut se faire par toute voie d’apport appropriée, telle qu’intraveineuse, intradermique, sous-cutanée, intramusculaire, topique, par inhalation ou apport intranasal(e), ou apport oral.
La présente invention peut être utilisée dans le traitement de maladies ou affections telles que les suivantes :
(e) Une maladie ou affection cardiaque ou cardiovasculaire, par ex. une crise cardiaque, un accident vasculaire cérébral ou une fibrillation auriculaire ;
Les additifs correspondent à au moins une partie des impuretés de la charge plastique à traiter et que le procédé selon l’invention permet d’éliminer au moins en partie. D’autres types d’impuretés peuvent être des impuretés d’usage, comme par exemples des impuretés métalliques, des papiers/cartons, de la biomasse, des polymères autres que le polypropylène visé (comme par exemple du polyéthylène), etc.