INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L’acide nucléique d’intérêt tel que décrit dans le cadre de la présente invention est de préférence capable de supprimer ladite séquence cible du génome de la bactérie ou de modifier son expression, par exemple de la moduler/ réguler, en particulier de l’inhiber, de préférence de la modifier de manière à rendre ladite bactérie incapable d’exprimer une protéine (typiquement une protéine AraR ou XylR), en particulier une protéine fonctionnelle, à partir de ladite séquence. Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, l’acide nucléique d’intérêt est capable de modifier la bactérie de manière à la rendre incapable d’exprimer l’une et/ou l’autre des protéines AraR et XylR.
L’introduction dans la bactérie de tout acide nucléique d’intérêt peut être réalisée par toute méthode, directe ou indirecte, connue de l’homme du métier, par exemple par transformation, conjugaison, microinjection, transfection, électroporation, etc., de préférence par électroporation (Mermelstein et al , 1993).
Par ailleurs, ces acides nucléiques d’intérêt (par exemple les fragments d’ADN, fragments d’ARN, cassettes d’expression ou vecteurs d’expression) peuvent être intégrés au sein du génome bactérien par des techniques elles-aussi bien connues de l’homme du métier.
Dans un mode de réalisation particulier, le procédé pour transformer, et de préférence modifier génétiquement, une bactérie telle que décrite dans le présent texte, comprend une étape de transformation de la bactérie par introduction dans ladite bactérie d’un acide nucléique d’intérêt selon l’invention tel que décrit plus haut et fait intervenir un outil de modification génétique par exemple un outil de modification génétique sélectionné parmi un outil CRISPR, un outil de mutagénèse insertionnelle, par exemple basé sur l’utilisation d’introns de type II (par exemple l’outil Targetron® ou l’outil ClosTron®) et un outil d’échange allélique (par exemple l’outil ACE®).
Le procédé pour transformer, et de préférence en outre modifier génétiquement, une bactérie Clostridium peut comprendre en outre une étape d’obtention, de récupération, de sélection ou d’isolement de la bactérie transformée, i.e. de la bactérie présentant la ou les recombinaisons/modifications/optimisations recherchées.
Dans un mode de réalisation particulier, le procédé selon l’invention est basé sur l’utilisation de (met en œuvre) la technologie / l’outil génétique CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats), en particulier l’outil génétique CRISPR/Cas (CRISPR-associated protein). La présente invention peut être mise en œuvre à l’aide d’un outil génétique CRISPR/Cas classique utilisant un unique plasmide comprenant une nucléase, un ARNg et une matrice de réparation tel que décrit par Wang et al. (2015). L’homme du métier peut aisément définir la séquence et la structure des ARNg selon la région chromosomique ou l’élément génétique mobile à cibler en utilisant des techniques bien connues (voir par exemple l’article de DiCarlo et al. , 2013). Les inventeurs ont autrement mis au point et décrit un outil génétique de modification de bactéries, adapté aux bactéries du genre Clostridium, utilisable dans le contexte de la présente invention, basé sur l’utilisation de deux plasmides (cf. WO2017/064439, Wasels et al. , 2017).
Dans un autre mode de réalisation, le procédé selon l’invention est basé sur l’utilisation d’outil de mutagénèse insertionnelle, par exemple l’utilisation d’introns de type II, et met par exemple en œuvre la technologie / l’outil génétique ClosTron® ou l’outil génétique Targetron®.
La technologie Targetron® repose sur l’utilisation d’un intron de groupe II (basé sur l’intron Ll.ltrB de Lactococcus lactis ) reprogrammable, capable d’intégrer le génome bactérien rapidement à un locus désiré (Chen et al. , 2005, Wang et al. , 2013), typiquement dans le but d’inactiver un gène ciblé. Les mécanismes de reconnaissance de la zone éditée ainsi que d’insertion dans le génome par rétro-épissage sont basés sur une homologie entre l’intron et ladite zone d’une part, et sur l’activité d’une protéine (ltrA) d’autre part.
La technologie ClosTron® repose sur une approche similaire, complétée par l’ajout d’un marqueur de sélection dans la séquence de l’intron (Heap et al. , 2007). Ce marqueur permet de sélectionner l’intégration de l’intron dans le génome, et facilite donc l’obtention des mutants désirés. Ce système génétique exploite également les introns de type I. En effet, le marqueur de sélection (appelé RAM pour retrotransposition-activated marker ) est interrompu par un tel élément génétique, qui empêche son expression depuis le plasmide (une description plus précise du système : Zhong et al. ). L’épissage de cet élément génétique se produit avant intégration dans le génome, ce qui permet l’obtention d’un chromosome présentant une forme active du gène de résistance. Une version optimisée du système comprend des sites FLP/FRT en amont et en aval de ce gène, ce qui permet d’utiliser la recombinase FRT pour éliminer le gène de résistance (Heap et al. , 2010).
Dans un autre mode de réalisation, le procédé selon l’invention est basé sur l’utilisation d’un outil d’échange allélique, et met par exemple en œuvre la technologie / l’outil génétique ACE®.
La technologie ACE® repose sur l’utilisation d’un mutant auxotrophe (pour l’uracile chez C. acetobutylicum ATCC 824 par délétion du gène pyrE , qui provoque également une résistance à l’acide 5- fluoroorotique (A-5-FO) ; Heap et al. , 2012). Le système utilise le mécanisme d’échange allélique, bien connu de l’homme de métier. Suite à une transformation avec un vecteur pseudo-suicide (à très faibles copies), l’intégration de ce dernier dans le chromosome bactérien par un premier évènement d’échange allélique peut être vérifiée grâce au gène de résistance présent initialement sur le plasmide. L’étape d’intégration peut être réalisée de deux manières différentes, soit au sein du locus pyrE soit au sein d’un autre locus. Dans le cas de l’intégration au locus pyrE , le gène pyrE est également placé sur le plasmide, sans toutefois être exprimé (pas de promoteur fonctionnel). La deuxième recombinaison restaure un gène pyrE fonctionnel et peut alors être sélectionnée par auxotrophie (milieu minimum, ne contenant pas d’uracile). Le gène pyrE non-fonctionnel présentant également un caractère sélectionnable (sensibilité au A-5-FO), d’autres intégrations sont ensuite envisageables sur le même modèle, en alternant successivement l’état de pyrE entre fonctionnel et non-fonctionnel. Dans le cas de l’intégration à un autre locus, une zone génomique permettant une expression du marqueur de contre-sélection après recombinaison est ciblée (typiquement, en opéron après un autre gène, de préférence un gène fortement exprimé). Cette deuxième recombinaison est alors sélectionnée par auxotrophie (milieu minimum ne contenant pas d’uracile).
Dans les modes de réalisation décrits basés sur l’utilisation d’introns de type II, et mettant par exemple en œuvre la technologie / l’outil génétique ClosTron® ou l’outil génétique Targetron®, ou basés sur l’utilisation d’un outil d’échange allélique, et mettant par exemple en œuvre la technologie / l’outil génétique ACE®, la séquence ciblée est typiquement l’une des séquences décrites dans le présent texte.
L’invention concerne par ailleurs un kit (trousse) pour transformer et/ou modifier génétiquement une bactérie du genre Clostridium comprenant au moins un acide nucléique d’intérêt tel que décrit dans le présent texte (par exemple deux acides nucléiques d’intérêt, typiquement fragment d’ADN, reconnaissant chacun une séquence cible) pour transformer et de préférence modifier génétiquement une bactérie du genre Clostridium , et éventuellement une ou plusieurs molécules de sélection. Un kit particulier comprend les éléments essentiels au fonctionnement d’un outil CRISPR (typiquement au moins un acide nucléique utilisable en tant qu’ARNg, un acide nucléique utilisable en tant que matrice de réparation, au moins une paire d’amorces, et un inducteur permettant l’expression d’une nucléase de type Cas9 ou MAD7), les éléments essentiels au fonctionnement d’un outil basé sur l’utilisation d’introns de type II (typiquement au moins un intron de type II, au moins une paire d’amorces et un inducteur permettant l’expression d’un rétrotranscriptase, par exemple type LtrA RT ou Tel4c RT), ou les éléments essentiels au fonctionnement d’un outil d’échange allélique (typiquement au moins deux acides nucléiques utilisables en tant que matrice de recombinaison homologue, et au moins un couple d’amorces).
Les kits selon l’invention peuvent en outre comprendre un ou plusieurs consommables tels qu’un milieu de culture, au moins une bactérie compétente du genre Clostridium (i.e. conditionnée en vue de la transformation), ou encore une notice explicative.
- réception, via l’entrée d’alimentation électrique, d’une tension électrique alternative d’entrée fournie par une source d’alimentation électrique externe,
- conversion, par le convertisseur alternatif-continu, de ladite tension électrique alternative d’entrée en une tension électrique continue,
- réception, par le module de stockage, de ladite tension électrique continue,
- stockage, par le module de stockage, de l’énergie électrique délivrée par ladite tension électrique continue reçue.
L’invention concerne également un procédé d’alimentation électrique par un module d’alimentation électrique tel que présenté précédemment adapté pour alimenter électriquement un premier équipement électrique fonctionnant à partir d’une tension alternative et un deuxième équipement électrique comportant une batterie, ledit procédé comprenant les étapes de :
- réception, via l’entrée d’alimentation électrique, d’une tension électrique alternative d’entrée,
- fourniture, par le convertisseur alternatif-continu, de ladite tension électrique continue de charge sur la deuxième sortie d’alimentation électrique.
De préférence, le procédé comprend une étape de charge électrique de la batterie du deuxième équipement électrique à partir de la tension électrique continue fournie sur la deuxième sortie d’alimentation électrique.
Avantageusement, le procédé comprend, simultanément à la fourniture par le convertisseur alternatif-continu d’une tension électrique continue sur la deuxième sortie d’alimentation électrique, une étape de fourniture, par le module de stockage, au convertisseur continu-alternatif, d’une tension électrique continue générée à partir d’énergie électrique stockée dans ledit module de stockage, une étape de conversion, par le convertisseur continu-alternatif, de la tension électrique continue reçue du module de stockage en une tension électrique alternative, une étape de fourniture par le convertisseur continu-alternatif de la tension électrique alternative sur la première sortie d’alimentation électrique et, de préférence, une étape d’alimentation électrique du premier équipement électrique à partir de la tension électrique alternative fournie sur la première sortie d’alimentation électrique.
La illustre schématiquement une forme de réalisation de l’unité de puissance au sol selon l’invention.
On a représenté à la un exemple de système 1 selon l’invention. Le système 1 comprend un module d’alimentation électrique se présentant dans cet exemple sous la forme d’une unité de puissance au sol 10, un premier équipement électrique fonctionnant à partir d’une tension électrique alternative et se présentant sous la forme d’un aéronef 20, et un deuxième équipement électrique 30 à batterie. Dans une autre forme de réalisation, le premier équipement électrique pourrait être tout type d’équipement fonctionnant à partir d’une tension électrique alternative, par exemple en monophasé 50 Hz.
Cette détermination de la tension des muscles faciaux de l’utilisateur 16 est par exemple effectuée via la mise en œuvre de l’algorithme d’intelligence artificielle, cet algorithme d’intelligence artificielle comportant de préférence un modèle biomécanique desdits muscles faciaux. L’algorithme d’intelligence artificielle est par exemple en forme d’un réseau de neurones artificiels.
Le dispositif d’assistance 30 propose ensuite, lors d’une étape suivante 110 et via son module d’activation 44, une activation de l’indication d’au moins un exercice facial 34 à réaliser par l’utilisateur 16, cette activation étant proposée en fonction de la tension des muscles faciaux déterminée lors de l’étape de détermination 100.
L’activation de l’indication d’au moins un exercice facial 34 est par exemple proposée si la tension des muscles faciaux, déterminée lors de l’étape de détermination 100, est supérieure au seuil de déclenchement. Autrement dit, si le module d’activation 44 détecte, via le module de détermination 42, que la tension des muscles faciaux est trop importante, ce qui correspond à une situation de stress potentiel de l’utilisateur 16, alors il propose à l’utilisateur 16 d’effectuer au moins un exercice facial 34, afin de l’aider à se détendre et à diminuer son stress. Lorsque l’utilisateur 16 est le conducteur du véhicule 10, la réalisation de cet exercice facial lui permet d’être ensuite dans un meilleur état de sensation physique pour la conduite du véhicule 10, ce qui améliore alors la sécurité à bord du véhicule 10.
L’homme du métier comprendra bien entendu que le module de détermination 42 détermine, de manière récurrente, ou encore régulièrement, la tension des muscles faciaux de l’utilisateur 16, et ce même en l’absence de la réalisation d’exercice facial par l’utilisateur 16, afin de pouvoir détecter un éventuel dépassement dudit seuil de déclenchement.
Lors d’une étape suivante 120, le dispositif d’assistance 30 teste, via son module d’activation 44, si l’utilisateur 16 a accepté ou non la proposition faite lors de l’étape 110 précédente.
Si l’utilisateur 16 a accepté la proposition d’activation de l’indication d’au moins un exercice facial 34, alors le module activation 44 active le module d’entraînement 40, et le dispositif d’assistance 30 passe à l’étape suivante 130 pour indiquer à l’utilisateur 16 l’au moins un exercice facial 34 à réaliser.
Sinon, si l’utilisateur 16 n’a pas accepté cette proposition d’exercice facial 34 à réaliser, alors le dispositif d’assistance 30 retourne à l’étape initiale 100.
Lors de l’étape d’indication 130, le dispositif d’assistance 30 indique, via son module d’entrainement 40 et sur le dispositif de restitution 21, au moins un exercice facial 34 à réaliser par l’utilisateur 16.
En variante, l’au moins un exercice facial 34 est par exemple indiqué sur requête de l’utilisateur 16, ou encore en un instant temporel correspondant à un agenda d’exercice spécifique.
Lors de l’étape d’indication 130 et de la réalisation de l’exercice facial 34 par l’utilisateur 16, le dispositif d’assistance 30 détermine également, via son module de détermination 42, la tension des muscles faciaux de l’utilisateur 16 à partir d’au moins une image de l’utilisateur 16 prise par le capteur d’image(s) 24 pendant que l’utilisateur 16 réalise l’exercice facial 34 respectif.
Lors de l’étape suivante 140, le dispositif d’assistance 30 évalue, via son module d’évaluation 46, la réalisation de l’au moins un exercice facial 34 effectué par l’utilisateur 16, ceci en fonction de la tension des muscles faciaux déterminée pendant la réalisation de l’au moins un exercice facial 34.
Cette évaluation de chaque réalisation d’un exercice facial 34 respectif est par exemple effectuée via la comparaison, au seuil d’atteinte respectif associé audit exercice facial 34, de la tension des muscles faciaux déterminée lors de ladite réalisation de l’exercice facial 34. Chaque réalisation d’un exercice facial respectif est typiquement évaluée comme correcte si ladite tension des muscles faciaux est supérieure ou égale au seuil d’atteinte respectif.
En variante ou en complément, cette évaluation de chaque réalisation d’un exercice facial 34 respectif est effectuée en comparant une matrice de valeurs calculées des distances entre points caractéristiques 60 avec la matrice de valeurs cibles desdites distances associée à l’exercice facial 34 respectif, les valeurs calculées desdites distances étant celles obtenues lors de la réalisation de l’exercice facial 34 respectif. Plus les valeurs calculées desdites distances sont proches des valeurs cibles, plus la réalisation de l’exercice facial 34 est évaluée positivement.
À l’issue de l’étape d’évaluation 140, le dispositif d’assistance 30 teste, lors de l’étape suivante 150, si un exercice facial 34 est à proposer, et retourne, le cas échéant, à l’étape de proposition 110 afin de proposer ledit exercice facial 34, par exemple s’il reste un exercice facial 34 suivant à réaliser par l’utilisateur 16, ou encore si l’exercice facial 34 courant est à réaliser à nouveau par l’utilisateur 16 dans le cas d’une évaluation incorrecte de la réalisation précédemment effectuée par l’utilisateur 16.
En l’absence de nouvel exercice facial 34 à proposer, c’est-à-dire si le test de l’étape 150 est négatif, le procédé d’assistance retourne à l'étape initiale 100 pour détecter l’apparition d’un nouvel événement déclencheur d’une nouvelle occurrence du procédé d’assistance. Comme décrit précédemment, un tel événement déclencheur est le dépassement du seuil de déclenchement par la tension des muscles faciaux de l’utilisateur 16, ou une requête de l’utilisateur 16, ou encore l’atteinte d’un instant temporel particulier.
Ainsi, le système électronique d’assistance 20 selon l’invention, et en particulier le dispositif électronique d’assistance 30, permet d’offrir une fonctionnalité supplémentaire à l’utilisateur 16 du véhicule 10, en lui permettant de réaliser un ou plusieurs exercices faciaux 34 pendant qu’il est à bord du véhicule 10.
// the angle between phase-to-phase to phase-to-phase vectors (e.g. U12 to U13) is nominally 60° ((180°-Aref)/2) if considering perfectly balanced voltage levels
// Alow is the lowest angle between phase-to-phase to phase-to-phase vectors, considering initial tolerances on Line Voltages
// Alow is the lowest forecasted measurable angle in case of a neutral loss (phases remaining all connected)
Ahigh = 2.acos((((1-Tol_low).Vn)²-((1+Tol_high).Vn).((1-Tol_low).Vn).cos(Aref))/(((1-Tol_low).Vn).SQRT(((1+Tol_high).Vn)²+((1-Tol_low).Vn)²-2.((1+Tol_high).Vn).((1-Tol_low).Vn).cos(Aref))))
// Ahigh is the highest angle between phase-to-phase to phase-to-phase vectors, considering initial tolerances on Line Voltages
// Hypothesis : 4-wire network (3P+N) with fixed and constant angles between the phases at Aref (120°)
// V[i] = RMS voltage measured between phase_i & neutral during last second
// A[i] = angle measured between phase_i & phase_j during last second, value within the range ]-180°;180°]
// NB: "if" statements should be implemented with the margins on thresholds (i.e. those set in comment below)
loop (every_second)
PhaseConnectStatus[] = [UNKNOWN;UNKNOWN;UNKNOWN]
PhaseVoltageStatus[] = [UNKNOWN;UNKNOWN;UNKNOWN]
ConnectDirection = UNKNOWN
// Patch in case there is no AC input voltage (e.g. during network power cut or micro-cut, meter running on its internal energy reserve, or some R&D lab conditions)
D’une manière générale dans le cadre de cette première approche, aucune autre pièce n’est nécessaire que le premier et le deuxième élément optique et, éventuellement, la ou les cales, pour former la cavité multipassage 1. En particulier, il n’est pas nécessaire de prévoir de support.
Dans un mode de réalisation conforme à cette première approche, on peut prévoir que l’une au moins des entretoises soit configurée pour que sa dimension s’étendant de l’une à l’autre des surfaces réfléchissantes soit ajustable. Il peut s’agir par exemple de munir l’une au moins des entretoises d’un élément chauffant, tel qu’une résistance, ou de former cette entretoise d’un matériau piézoélectrique muni d’électrodes de commande. On peut, en commandant la tension appliquée à la résistance ou aux électrodes, ajuster finement la dimension de l’entretoise séparant les deux éléments optiques, pour les rapprocher de la géométrie déterminée.
Deuxième approche. Dans une deuxième approche, visant à proposer une cavité multipassage 1 robuste et dont des modes de réalisation sont représentés aux figures 6 et 7, on prévoit un support 7 présentant une surface d’accueil sur laquelle est solidarisé (c’est-à-dire assemblé sans aucun degré de liberté) le second élément optique 3’. Cet assemblage peut être réalisé directement ou par l’intermédiaire d’un cube 4, permettant d’orienter le second élément optique 3’ vis-à-vis du support 7, comme cela est le cas sur la .
Une cale 8 comprenant deux pièces d’assemblage est également retenue solidairement sur la face principale 3a du premier élément optique 3. Il peut s’agir d’une cale en forme de U ou en forme de O, comme cela a déjà été présenté dans un mode de mise en œuvre conforme à la première approche. Le premier élément optique 3 présente une surface réfléchissante microstructurée. Les pièces d’assemblage de la cale 8 sont assemblées de préférence de part et d’autre, et symétriquement, de la surface réfléchissante microstructurée 3b du premier élément optique 3. Elles peuvent s’étendre selon la direction générale de progression P. Elles tendent à rigidifier le premier élément optique 3 du côté de sa surface réfléchissante 3b, ce qui prévient la déformation de cette surface sous l’application d’efforts.
La cale 8, portant le premier élément optique 3, est également solidaire de la surface d’accueil du support 7 dans un agencement définissant la géométrie déterminée entre les deux surfaces réfléchissantes.
Tout comme dans la première approche, des efforts importants appliqués à la cavité 1 conforme à la deuxième approche peuvent amener à déformer certaines pièces qui la composent, et notamment le premier élément optique 3. Mais ces déformations ne se manifestent préférentiellement pas au niveau des surfaces réfléchissantes si bien que la géométrie déterminée peut être préservée.
Comme cela est visible sur la , il n’est pas nécessaire que le support 7 soit en contact avec toute l’étendue d’un côté de la cale 8 et d’un côté du deuxième élément optique 3’. Il peut s’agir d’un élément formant un pont entre ces deux pièces, en contact sur une partie seulement de leurs côtés.
Bien entendu l'invention n'est pas limitée aux deux approches et aux modes de mise en œuvre décrits et on peut y apporter des variantes de réalisation sans sortir du cadre de l'invention tel que défini par les revendications.
Ainsi, le dispositif optique peut éventuellement comprendre un étage d’entrée et/ou un étage de sortie assemblé à la cavité, permettant respectivement de guider l’injection du rayonnement lumineux incident et l’extraction du rayonnement transformé. Ces étages peuvent correspondre à une fibre optique ou un réseau de fibres optiques (cette ou ces fibres pouvant être lentillée(s) ou non), ou comprendre une source laser, un élément optique tel qu’un dichroïque, une lentille, un miroir concave, un élément à contrôle de polarisation, un MEMs, un miroir de contrôle tip/tilt, une matrice SLM, un réseau de diffraction, un diaphragme, une vitre avec traitement de surface. Ces étages peuvent être notamment fixés sur l’une au moins des tranches des éléments optiques ou sur l’une au moins des entretoises.