INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Lorsque le nombre M est en variante égal à 1, comme cela sera décrit plus en détail par la suite en regard des figures 4 à 6, l’homme du métier comprendra également que l’écriture d’une valeur donnée dans le memristor 20 de la cellule mémoire 10 est obtenue notamment via l’ouverture du commutateur primaire 22 qui est agencé en parallèle dudit memristor 20, et qu’il n’y a alors aucun éventuel autre commutateur primaire 22 à fermer dans ce cas.
L’homme du métier observera alors que la cellule mémoire 10 selon l’invention est une cellule de type 2T1R dans le cas où M est égal à 1, et comporte alors un memristor en moins que la cellule mémoire de type 2T2R de l’état de la technique.
L’homme du métier notera plus généralement que dans l’exemple de la , pour M supérieur à 1, la cellule mémoire 10 de type (M+1)TMR selon l’invention permet d’écrire M valeurs distincte(s), puis de lire et/ou inférer ces valeurs, chacune des M sous-cellules 25 étant associée à une valeur respective ; et que la cellule mémoire 10 est donc comparable à M cellules mémoire de type 2T2R de l’état de la technique, chaque sous-cellule 25 de type 1T1R selon l’invention étant comparable à la cellule mémoire de type 2T2R de l’état de la technique. L’homme du métier comprendra alors que la cellule mémoire 10 selon le premier mode de réalisation de l’invention comporte M memristors en moins, ainsi que (M-1) commutateur(s) en moins que les M cellules mémoire de type 2T2R correspondantes de l’état de la technique, ou encore que chaque sous-cellule 25 de type 1T1R selon le premier mode de réalisation comporte un memristor et un commutateur en moins que la cellule mémoire de type 2T2R de l’état de la technique.
Chaque memristor 20 est un composant électronique passif dont la valeur de sa résistance électrique change, de façon permanente, lorsqu’un courant est appliqué. Autrement dit, chaque memristor 20 est un composant résistif, et plus précisément un composant mémoire résistif. Ainsi, une donnée peut être enregistrée et réécrite par un courant de contrôle. Un tel comportement est notamment observé dans les matériaux à changement de phase, les jonctions tunnel ferroélectriques ou les mémoires redox à base d’oxydes, tels que le HfO x ou TiO 2-x .
Chaque memristor 20 est un composant de mémoire non-volatile, la valeur de sa résistance électrique changeant avec l’application d’une tension pendant une certaine durée et restant à cette valeur en l’absence de tension.
Le changement de conductance du memristor 20 dépend de l'amplitude et de la durée des impulsions de tension appliquées à travers le memristor 20, ainsi que de la valeur maximale de courant pouvant passer dans le memristor 20, par exemple pour une opération de « SET », c’est-à-dire le passage d’une résistance forte à une résistance faible. Une opération inverse de « RESET » correspond au passage d’une résistance faible à une résistance forte.
Le memristor 20 est susceptible de présenter deux états, à savoir un état haut et un état bas.
L’état haut correspond à une forte résistance et est généralement désigné par l’abréviation HRS (de l’anglais High Resistive State ) qui signifie littéralement état fortement résistif. L’état haut est, de ce fait, dénommé état haut HRS par la suite.
L’état bas correspond à une faible résistance et est généralement désigné par l’abréviation LRS (de l’anglais Low Resistive State ) qui signifie littéralement état faiblement résistif. L’état bas est, de ce fait, dénommé état bas LRS par la suite.
Le memristor 20 est par exemple un composant mémoire résistif choisi parmi le groupe consistant en : un composant PCRAM (de l’anglais Phase-Change Random Access Memory ), un composant OxRAM (de l’anglais hafnium-oxide RRAM , i.e. hafnium-oxide Resistive Random Access Memory ), un composant MRAM (de l’anglais Magnetic Random Access Memory ), et un composant CBRAM (de l’anglais Conductive Bridging Random Access Memory ).
L’homme du métier notera que le composant PCRAM est également connu sous les dénominations équivalentes suivantes : composant PCM (de l’anglais Phase Change Memory ), composant PRAM (de l’anglais Phase-change Random Access Memory ), composant OUM (de l’anglais Ovonic Unified Memory ), et composant C-RAM ou CRAM (de l’anglais Chalcogenide Random Access Memory ).
De manière inattendue, le microcompartiment propose un microenvironnement favorable au développement d’un microtissu hépatique. En effet, durant la différenciation au sein du microcompartiment, les cellules s’organisent pour former une structure similaire à un bourgeon hépatique. Ce bourgeon hépatique est retrouvé au cours de l’organogénèse hépatique in vivo, c’est cette structure particulière qui donne naissance aux hépatocytes et aux cholangiocytes. La présence d’une structure similaire d’un bourgeon hépatique lors de la formation du microtissu hépatique est un indicateur de la bonne qualité du tissu.
Ainsi, le microtissu hépatique selon l’invention est préférentiellement obtenu après la formation d’une structure similaire à un bourgeon hépatique dans un unique microcompartiment clos en trois dimensions.
Le microcompartiment selon l’invention permet d’isoler les cellules souches pluripotentes induites des contraintes mécaniques présentes au sein du biorécateur. Cette isolation mécanique permet au microtissu de mettre en place et de maintenir une topologie qui se rapproche de l’organisation spatiale et structurelle de l’organogénèse hépatique existant in vivo.
De façon inattendue, après au moins 20 jours, préférentiellement 30 jours, de différenciation au sein du microcompartiment les cellules conservent leur conformation permettant ainsi d’avoir une meilleur prolifération tout en maintenant un phénotype fonctionnel. Par conséquent cela permet de réduire le nombre de passages et de réduire le temps en culture nécessaire pour atteindre le nombre de cellules hépatiques final nécessaire.
Les cellules présentes dans le microcompartiment selon l’invention ont été préférentiellement obtenues après au moins deux cycles de division cellulaire après l’encapsulation dans une couche externe d’hydrogel de 1 à 200 cellules souches pluripotentes induites, préférentiellement entre 5 et 150, notamment entre 15 et 80.
De façon préférée, les cellules présentes dans le microcompartiment selon l’invention ont été obtenus après au moins 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 28, 30 cycles de division cellulaire après l’encapsulation dans une couche externe d’hydrogel, préférentiellement au moins 5, encore plus préférentiellement au moins 6, pour obtenir jusqu’à 8000 hépatocytes matures par microcompartiment. Par exemple, les hépatocytes matures présents dans le microcompartiment ont été obtenus après au moins six cycles de division cellulaire après l’encapsulation des cellules dans la couche externe en hydrogel.
Préférentiellement, le microcompartiment selon l’invention a été obtenu en moins de 30 jours après l’encapsulation, encore plus préférentiellement en moins de 20 jours après encapsulation d’au moins 1 cellule souche pluripotente induite dans la partie interne définie par la couche externe en hydrogel préférentiellement 5, 20 et jusqu’à 100.
Le microcompartiment selon l’invention peut contenir entre 100 et 14000 cellules, préférentiellement entre 300 et 10000 cellules, encore plus préférentiellement entre 300 et 5000, plus particulièrement au moins 50 hépatocytes matures et au moins 20 cholangiocytes.
Avantageusement, le microcompartiment selon l’invention protège les cellules souches pluripotentes induites du stress mécanique permettant ainsi d’obtenir un taux d’expansion particulièrement adapté à la culture à grande échelle.
Le microcompartiment selon l’invention peut se présenter sous toute forme en trois dimensions, c’est-à-dire qu’il peut avoir la forme de tout objet de l’espace. Le microcompartiment peut avoir n’importe quelle forme compatible avec l’encapsulation de cellules. Préférentiellement le microcompartiment selon l’invention se présente sous une forme sphérique ou allongée ou ellipsoïdale ou sensiblement sphérique ou allongée. Il peut avoir la forme d’un ovoïde, d’un cylindre, d’un sphéroïde ou d’une sphère ou sensiblement cette forme.
C’est la couche externe du microcompartiment, c’est-à-dire la couche d’hydrogel, qui confère sa taille et sa forme au microcompartiment selon l’invention. Préférentiellement la plus petite dimension du microcompartiment selon l’invention est comprise entre 150 µm et 500 µm, notamment entre 300µm et 400µm, préférentiellement entre 200 µm et 450 µm.Sa plus grande dimension est préférentiellement supérieure à 350 µm, plus préférentiellement comprise entre 350 µm et 600 µm.
L’invention a également pour objet plusieurs microcompartiments selon l’invention utilisés ensemble.
Selon un aspect de l’invention, le procédé d’élaboration dynamique comprend alternativement à la réception d’un message d’accord, la réception d’un message de désaccord, ledit message comprenant une donnée indiquant un motif relatif aux paramètres et/ou au critère de conformité inclus dans la demande de déploiement.
En lieu et place du message d’accord, l’entité sollicitée peut émettre un message de désaccord ou de refus au dispositif de gestion des services, comprenant une cause indiquant pourquoi le dispositif d’orchestration ne peut proposer de ressource, cette cause étant plus spécifiquement liée au critère de conformité lié à l’espace virtuel de données et/ou aux paramètres requis pour le service. Cette information peut ainsi être prise en compte pour que le dispositif de gestion modifie la demande, par exemple en accord avec le client, ou bien révoque l’entité, ou bien encore sollicite une autre entité.
Selon un mode de réalisation, une protéine apte à s’autoassembler en fibres amyloïdes n’est pas la protéine HET-s issue du champignon filamenteux Podospora anserina , ou son domaine HET-s(218-289).
Les protéines convenant à l’invention peuvent être obtenues par toute méthode connue dans le domaine, telle que l’extraction à partir d’une source biologique exprimant naturellement cette protéine ou sous forme de protéines recombinantes obtenues par expression hétérologue dans une cellule hôte, par exemple Escherichia coli ou les cellules CHO, et amplification de la cellule hôte dans un bio-incubateur. Les protéines recombinantes ainsi obtenues sont ensuite purifiées par toute méthode connue dans le domaine.
Selon un mode de réalisation, une protéine convenant à l’invention est l’α-lactalbumine.
L’α-lactalbumine est un sous-produit des produits laitiers, qui est produite à l’échelle industrielle dans l’industrie fromagère et peut être obtenue à faible coût. Cette protéine est présente dans le lactosérum ou petit-lait.
L’α-lactalbumine peut être extraite à l’état de monomère, à partir du lactosérum. Elle est présente dans le lait de vache à raison de 1,2 g/L. Alternativement, elle peut être produite sous-forme de protéine recombinante.
Les fibres amyloïdes sont des nanostructures fibrillaires très stables formées par autoassemblage de protéines organisées en feuillets β. Les mécanismes de formation des fibres amyloïdes suivent un processus de nucléation-élongation. Ainsi, une protéine acquiert une structure secondaire riche en brins-β qui s’associent via des liaisons hydrogène pour former des feuillets-β. Les sous-unités protéiques s’autoassemblent par empilements successifs perpendiculairement à l’axe d’élongation de la fibre. La structure est stabilisée par un réseau dense de liaisons-H ayant une orientation parallèle à l’axe fibrillaire.
La formation de fibres amyloïdes peut être dépendante de différents paramètres tel le pH, la force ionique du tampon, la concentration de protéines, la présence d’autres molécules, la température, ou la vitesse d’agitation qui peuvent conduire à des cinétiques de fibrillation et organisations différentes. Il relève de la pratique de l’homme de l’art d’adapter les conditions opératoires selon la nature des protéines utilisées.
Les fibres amyloïdes peuvent être obtenus sous forme d’un hydrogel de fibres de protéines préparé comme décrit dans WO 2012/136909.
Un hydrogel de fibres amyloïdes, notamment d’α-lactalbumine, peut être préparé en utilisant une solution aqueuse comprenant au moins environ 5 g/L de protéines. La concentration de protéines dans une solution aqueuse peut varier d’environ 5 g/L à la limite de solubilité de la protéine dans la solution. Par exemple, la concentration de protéine dans la solution peut varier d’environ 10 g/L à environ 60 g/L, d’environ 20 g/L à environ 50 g/L, et être, par exemple, d’environ 40 g/L. La concentration d’une protéine dans une solution destinée à préparer un hydrogel de fibres amyloïdes peut être d’environ 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 35, 40, 45, 50, 55, ou environ 60 g/L.
Selon un mode de réalisation, une solution aqueuse d’α-lactalbumine destinée à préparer un hydrogel de fibres amyloïdes peut comprendre environ 40 g/L de protéines.
Selon un mode de réalisation, une solution aqueuse de protéines destinée à préparer un hydrogel de fibres amyloïdes peut être une solution saline. Une solution aqueuse convenant à la présente divulgation peut présenter une force ionique inférieure ou égale à environ 60 mM, par exemple inférieure à environ 50 mM, voire étant environ de 30 mM.
La force ionique d’une solution aqueuse de protéines mise en œuvre pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes peut varier d’environ 0 mM à environ 60 mM, par exemple d’environ 20 mM à environ 50 mM, et par exemple être à environ 30 mM. La force ionique d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes peut être d’environ 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, ou d’environ 60 mM.
La force ionique peut être obtenue et/ou ajustée par ajout d’un sel pouvant être choisi parmi les halogénures de métal alcalin ou alcalinoterreux, tels que par exemple NaCl, KC1, MgCl 2 , CaCl 2 ... ; les carbonates de métal alcalin ou alcalinoterreux ou leur mélange ; les phosphates, tels que par exemple le phosphate de sodium ou de potassium ou encore les sulfates tels que par exemple, le sulfate de sodium ou de magnésium.
Selon un mode de réalisation, la force ionique d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes, par exemple une solution aqueuse d’α-lactalbumine, peut être ajustée par ajout de NaCl.
Selon un mode de réalisation, la force ionique d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes, par exemple une solution aqueuse d’α-lactalbumine peut être environ de 30 mM.
Le pH d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes peut être un pH acide. Par exemple, le pH peut être inférieur à 3. Par exemple, le pH d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes peut varier d’environ 1,0 à environ 2,9, par exemple d’environ 1,5 à environ 2,5, voire d’environ 1,8 à environ 2,2, voire encore peut être à environ 2,0. Le pH d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes peut être d’environ 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,2, 2,4, 2,6, 2,8, 3,0, 3,2 ou d’environ 3,5. Le pH d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes peut être d’environ 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, ou d’environ 2,5. Le pH d’une solution aqueuse de protéines pour la préparation d’un hydrogel de fibres amyloïdes peut être inférieur à 2.5. Le pH acide de la solution aqueuse peut être ajusté au moyen d’un acide fort, par exemple HCl.
Avantageusement, le plot 134 est prévu radialement à l’intérieur de la partie quasi-annulaire 101, à l’opposé, par rapport à l’axe A100, de la zone de passage des tuyaux flexibles 97 et 99, afin de ne pas interférer avec ces tuyaux.
Lors de la fabrication du pulvérisateur 8 ou lors d’une opération de maintenance, s’il est nécessaire de monter pour la première fois ou de changer l’un des tuyaux 96 ou 98, l’opérateur introduit le nouveau tuyau flexible dans une des embouchures 104 ou 114 et le pousse à travers l’une des zones de maintien 106 ou 116 jusqu’à le faire ressortir du guide de conformation 100 par l’un des débouchés 110 ou 120. Cette opération a pour effet de conformer automatiquement un tronçon du tuyau en question qui se situe dans la portion de maintien 106 ou 116, avec un rayon de courbure imposé par cette portion de maintien et compatible avec une circulation bien maitrisée du fluide dans ce tuyau. Ce fluide peut être un produit de revêtement liquide ou sous la forme d’un mélange d’air et de poudre ou un produit de nettoyage liquide ou diphasique.
De même, lors de la fabrication du pulvérisateur 8, ou lors d’une opération de maintenance s’il est nécessaire de monter pour la première fois ou de changer l’un des tuyaux 97 ou 99, l’opérateur introduit le nouveau tuyau flexible dans l’un des éléments tubulaires 124 ou 128, en les disposant, radialement à l’axe A100, à l’intérieur de la partie quasi-annulaire 101, avec une orientation globalement parallèle à l’axe A100.
Une fois les différents tuyaux montés sur le guide de conformation 100, celui-ci peut être mis en place sur le corps central 92, en écartant les bords de la fente 122, comme expliqué ci-dessus, puis en engageant le plot 134 dans le logement correspondant prévu sur le corps central 92.
En pratique, le guide de conformation 100 est, de préférence, installé autour du corps secondaire avant montage des tuyaux 96 à 99 sur le guide de conformation.
Quel que soit l’ordre choisi, au terme du montage, les axes A86 et A100 sont alors parallèles ou confondus et le guide de conformation 100 est orienté autour de l’axe A86 grâce à la coopération du plot 134 et du logement correspondant du corps central 92, de telle sorte que ces embouchures 104 et 114 sont correctement positionnées par rapport aux raccords 94, alors que les débouchés 110, 120, 126 et 130 sont correctement positionnés par rapport aux orifices 92A, 92B et équivalents.
En particulier, chaque tuyau flexible 96 et 98 a une trajectoire bien définie avec des rayons de courbure imposés minimum, définis par le guide de conformation 100, compatibles avec l’écoulement du fluide. Les tuyau flexible 97 et 99 ont également une trajectoire bien définie entre les raccords sur lesquels ils sont branchés.
En particulier, le diamètre interne de chaque tuyau flexible 96 ou 98 est conservé sur toute la longueur de ces tuyaux, puisqu’il n’y a pas de risque de pincement des tuyaux grâce à la forme imposée par le guide de conformation 100. La circulation du fluide est ainsi fiabilisée.
Dans le deuxième mode de réalisation de l’invention représenté à la , les éléments analogues à ceux du premier mode de réalisation portent la même référence. Si une partie du guide de conformation 100 de ce deuxième mode de réalisation est mentionnée dans la description sans être représentée sur les figures, il s’agit de la même partie que celle mentionnée pour le premier mode de réalisation. À l’inverse, si une partie est référencée à la sans être mentionnée dans description, il s’agit de la même partie que celle portant la même référence dans le premier mode de réalisation. Dans ce qui suit, on décrit principalement ce qui différencie le deuxième mode de réalisation du premier mode de réalisation.
Dans ce deuxième mode de réalisation, la fente longitudinale 122 n’est pas parallèle à l’axe longitudinal A100 du guide de conformation mais orientée obliquement par rapport à celui-ci. Cette fente annulaire s’étend sur toute la longueur de la partie quasi-annulaire 101 formée des portions de maintien 106 et 116. Elle divise en quatre segments 106A, 106B, 106C et 106D la première portion de maintien 106 et en trois segments 116A, 116B et 116C la deuxième portion de maintien 116.
Un coude 102 avec une embouchure 104 est prévu à l’entrée de la première portion de maintien 116. L’embouchure 114 est prévue directement à l’entrée de la portion de maintien 116, sans utilisation d’un tube d’entrée comparable au tube 112 du premier mode de réalisation.
La première portion de maintien 106 est à section en U avec son ouverture orientée selon une direction centrifuge par rapport à l’axe A100, comme dans le premier mode de réalisation. La deuxième portion de maintien 116 est à section en C, avec son ouverture orientée selon une direction centripète par rapport à l’axe A100.
Il n’est pas prévu d’élément tubulaire comparable aux éléments tubulaires 124 et 128 du premier mode de réalisation. En d’autres termes, si des tuyaux flexibles circulent radialement à l’intérieur des portions de maintien 106 et 116, autour du corps central 92, ils ne sont pas maintenus en position par le guide de conformation 100.
Le guide de conformation 100 est dépourvu de bride. Les extrémités libres des coudes 108 et 118 qui définissent les débouchés 110 et 120 peuvent donc être librement positionnées, l’une par rapport à l’autre et vis-à-vis du corps central 92, notamment de ses orifices 92A et 92B. Un renfort de rigidification 138 est prévu entre les bases respectives des coudes 108 et 118.
Dans les deux modes de réalisation représentés, en coupe transversale, c’est-à-dire en coupe dans un plan radial à l’axe A100, chaque portion de maintien 106 et 116 présente une forme intérieure concave qui entoure le tuyau 96 ou 98 sur plus de la moitié de sa circonférence. Ceci peut être obtenu par une forme en arc de cercle ou en U, qui s’étend sur un secteur angulaire d’angle au sommet supérieur ou égal à 185°.
Quel que soit le mode de réalisation, en configuration de repos, c’est-à-dire en l’absence d’effort extérieur exercé sur le guide de conformation 100, la fente 122 a une largeur inférieure ou égale à 8 mm, de préférence inférieure ou égale à 5 mm, de sorte qu’elle s’étend sur un secteur angulaire, par rapport à l’axe A100, d’angle au sommet α inférieur à 5°. Ainsi, dans cet exemple, les deux portions de maintien 106 et 116 entourent l’axe A100 sur un secteur angulaire d’angle au sommet supérieur ou égal à 355º. En pratique, en jouant sur la largeur de la fente 122, on peut concevoir le guide de conformation 100 de telle sorte que, en configuration de repos, les portions de maintien 106 et 116 entourent l’axe A100 sur au moins 330°, de préférence sur au moins 345°, de préférence encore sur au moins 351°, ce qui évite que les tuyaux flexibles suivent des trajectoires non-circulaires et/ou non-tangentes aux première et deuxième portions de maintien 106 et 116.
En variante non représenté, les reliefs 73 portés par une ailette 38 peuvent faire saillie en direction de l’autre ailette 38 d’un angle compris entre 10 et 80° par rapport à une droite axiale.
Dans l’exemple de la , les extrémités axiales 73a et 73b sont décalées de manière circonférentielle de manière à ce que le côté 73c reliant ces deux extrémités forme avec une droite axiale passant par une extrémité axiale de ce côté 73c un angle compris entre 5 et 45 degrés.
Deux reliefs 73 consécutifs d’une même ailette de refroidissement 38 sont espacés d’une distance a comprise entre deux et cinq fois la hauteur radiale h cr de la chambre de refroidissement 31.
Les reliefs 73 portés par chaque ailette de refroidissement 38 sont régulièrement répartis sur la circonférence de ces ailettes de refroidissement 38.
Le nombre de reliefs 73 portés par chaque ailette de refroidissement 38 est identique. En variante, chaque ailette de refroidissement 38 peut avoir un nombre de reliefs 73 indépendant des autres ailettes 38.
Les reliefs 73 présentent une forme choisie parmi les formes en losange, triangulaire, ronde et trapèze. Les reliefs 73 peuvent avoir une forme identique ou indépendante les unes des autres.
A partir de la , nous pouvons voir que le fluide de refroidissement s’écoule dans la chambre 31 de refroidissement entre une entrée 61 et une sortie 62 décalées circonférentiellement l’une par rapport à l’autre d’un angle mesuré depuis l’axe de rotation X d’environ 180°. En variante l’angle peut être supérieur à 180° et aller jusqu’à 350°.