INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les résultats obtenus représentés sur la . La figure 7A représente un chromatogramme obtenu à 300 nm et montrant 2 pics. Le pic majoritaire correspond au substrat, c’est-à-dire le cinnamate. Le pic minoritaire correspond au p-coumarate ou acide p-couramique formé par bioconversion dans le milieu de culture. Ce chromatogramme a été obtenu à partir du milieu de culture dans lequel ont été cultivées les bactéries recombinantes transformées avec les plasmides pAIDA1-T7-CYP73A1-ATR1 selon le point 4 ci-dessus. Le chromatogramme de la figure 7B correspond à une analyse du milieu de culture dans lequel ont été bactéries recombinantes transformées avec le plasmide pAIDA1-T7 dans la . Ce plasmide ne peut produire de protéine de fusion et représente un contrôle négatif. L’analyse du chromatogramme indique la présence de cinnamate qui a été rajouté dans le milieu de culture. Aucune métabolisation de p-coumarate n’a pu être mise en évidence.
Cet exemple démontre donc clairement qu’un exemple de protéine de fusion comprenant successivement (i) au moins un polypeptide d’adressage et d’ancrage à la membrane bactérienne, avantageusement à la membrane externe, (ii) au moins un polypeptide comprenant le domaine hydrophile d’un cytochrome P450 de plante, (iii) au moins un polypeptide de liaison comprenant au moins 47 acides aminés, de préférence comprenant 51 acides aminés, et (iv) au moins un polypeptide comprenant le domaine hydrophile d’une NADPH P450 réductase de cytochrome P450 de plante permet la bioconversion de substrat.
L’invention concerne également un aéronef, en particulier un avion de transport, comportant un fuselage intégrant un système de fixation tel que spécifié ci-dessus.
La représente une vue en perspective d’un aéronef présentant un fuselage intégrant un système de fixation auquel sont fixés deux réservoirs.
La représente une vue en perspective d’un système de fixation auquel sont fixés deux réservoirs.
La représente une vue de derrière du système de fixation.
La représente une vue en perspective d’une potence double du premier dispositif de fixation fixé sur un raidisseur d’un panneau supérieur.
La représente une vue de derrière d’un mode de réalisation de la structure supérieure d’une ossature de fixation et du premier dispositif de fixation auquel sont fixés deux réservoirs.
La représente une vue en perspective de deux ossatures de fixation d’un système de fixation auquel sont fixés deux réservoirs.
La représente une vue en perspective d’une coupe horizontale et longitudinale du caisson longitudinal du système de fixation mettant en évidence un voile central, deux voiles transversaux et les deuxièmes dispositifs de fixation d’une ossature de fixation.
La représente une vue en perspective d’un voile central et des deuxièmes dispositifs de fixation d’une ossature de fixation.
La représente une vue en perspective des troisièmes dispositifs de fixation fixés sur des raidisseurs de panneaux inférieures.
La représente une vue en perspective d’un troisième dispositif de fixation.
Description détaillée Le système de fixation 1 est destiné à être intégré dans le fuselage F d’un aéronef AC ( ). Le système de fixation 1 peut être rendu solidaire au fuselage F de l’aéronef AC.
Le système de fixation 1 représenté sur la est liée à un repère orthogonal R défini par un axe X destiné à être parallèle à un axe longitudinal A1 du corps de fuselage 3 de l’aéronef AC dans lequel le système de fixation 1 est destiné à être intégré ( ). Le repère orthogonal R est également défini par un axe Y et un axe Z. L’axe Y correspond à une direction transversale du système de fixation 1 perpendiculaire à l’axe X. L’axe Y est horizontal quand l’aéronef AC destiné à recevoir le corps de fuselage 3 intégrant le système de fixation 1 se trouve au sol. L’axe Z correspond à la direction verticale du système de fixation 1 perpendiculaire à l’axe X et à l’axe Y. On appelle « plan horizontal » un plan parallèle à l’axe X et à l’axe Y. Le système de fixation 1 comprend un plan de symétrie vertical P1. On appelle « plan de symétrie vertical P1 » le plan parallèle à l’axe X et à l’axe Z qui correspond au plan de symétrie vertical du système de fixation 1.
Les adjectifs « supérieur » et « inférieur » sont définis par rapport au sol sur lequel l’aéronef AC devant recevoir le système de fixation 1 est susceptible d’avancer. Un objet qualifié par l’adjectif « inférieur » se situe plus proche du sol qu’un objet qualifié par l’adjectif « supérieur ».
L’adjectif « latéral » qualifie une partie qui se situe d’un côté ou/et de l’autre du plan de symétrie vertical P1.
Dans ce mode de réalisation, la cinquième portion B5 de circulation comprend un dispositif d’accumulation 15 disposé entre la huitième entrée/sortie E8 du module 50 et l’échangeur de chaleur interne 8. Plus précisément, le dispositif d’accumulation 15 est disposé entre la huitième entrée/sortie E8 du module 50 et la deuxième section d’échange thermique 8b de l’échangeur de chaleur interne 8. Autrement dit, le dispositif d’accumulation 15 est dans ce mode de réalisation externe au module 5.
Le module de distribution 50 de fluide réfrigérant comporte: - un premier canal C1 de circulation de fluide réfrigérant reliant une première entrée/sortie E1 du module 50 et une deuxième entrée/sortie E2 du module 50, - un deuxième canal C2 s’étendant une troisième entrée/sortie E3 du module et une quatrième entrée/sortie E4 du module, - un troisième canal C3 s’étendant une cinquième entrée/sortie E5 du module et une sixième entrée/sortie E6 du module, - un quatrième canal C4 s’étendant une septième entrée/sortie E7 du module et une huitième entrée/sortie E8 du module, - un cinquième canal C5 reliant un premier point de raccordement R1 agencé sur le premier canal C1 à un deuxième point de raccordement R2 agencé sur le deuxième canal C2, - un sixième canal C6 reliant un troisième point de raccordement R3 agencé sur le premier canal C1 entre le premier point de raccordement R1 et la deuxième entrée/sortie E2 à un quatrième point de raccordement R4 agencé sur le troisième canal C3, - un septième canal C7 reliant un cinquième point de raccordement R5 agencé sur le premier canal C1 entre le troisième point de raccordement R3 et la deuxième entrée/sortie E2 à un sixième point de raccordement R6 disposé sur le quatrième canal C4.
L’emploi d’un module 50 pour former une partie du circuit de circulation de fluide réfrigérant permet de regrouper les différentes entrées/sorties et les différents canaux de circulation dans un ensemble compact. Le montage du système de conditionnement thermique est facilité. Le module 50 permet de plus de distribuer le fluide réfrigérant à plusieurs échangeurs de chaleur en assurant de nombreuses combinaisons différentes de circulation du fluide réfrigérant, ce qui permet de réaliser de nombreux modes de fonctionnement. Le module de distribution de fluide réfrigérant permet de réaliser un système de conditionnement thermique compact et performant thermodynamiquement.
Chaque canal du module 50 est un canal de circulation de fluide réfrigérant. Chaque canal est formé par un évidement interne du module 50. Chaque canal est entièrement contenu à l’intérieur du module 50 de distribution de fluide réfrigérant.
Chaque canal possède exactement une entrée et une sortie de fluide réfrigérant. Autrement dit, un canal n’est pas ramifié. Des portions de circuit disposées en parallèle sont formées par au moins deux canaux distincts. Sur le schéma de principe des différentes figures, les canaux de circulation sont assimilés à des éléments linéiques, c’est pourquoi on parle de points de raccordement entre les canaux. Dans la réalisation physique du module 50, les canaux sont des éléments de forme générale tubulaire, aussi la jonction entre deux canaux se fait en pratique le long d’une zone de raccordement linéique et non ponctuelle.
Chaque entrée/sortie débouche sur une surface extérieure du module. De préférence, chaque surface extérieure du module est plane. Le module possède par exemple une forme générale de parallélépipède rectangle.
Suivant le mode de fonctionnement sélectionné, chaque entrée/sortie peut être soit une entrée de fluide réfrigérant, soit une sortie de fluide réfrigérant. Chaque entrée/sortie peut également être inactive, c’est-à-dire qu’aucun débit de fluide réfrigérant ne rentre ou ne sort par cette entrée/sortie.
Dans l’exemple illustré, la quatrième entrée/sortie E4 est, suivant le mode de fonctionnement, soit une entrée de fluide réfrigérant, soit une sortie de fluide réfrigérant, soit est inactive. La deuxième entrée/sortie E2 est également, suivant le mode de fonctionnement, soit une entrée de fluide réfrigérant, soit une sortie de fluide réfrigérant, soit est inactive. La première entrée/sortie E1, la cinquième entrée/sortie E5, la septième entrée/sortie E7 sont suivant le mode de fonctionnement soit des entrées de fluide réfrigérant, soit sont inactives. La troisième entrée/sortie E3, la sixième entrée/sortie E6 sont suivant le mode de fonctionnement soit des sorties de fluide réfrigérant, soit sont inactives.
Chacun des canaux C1, C2, C3, C4 établissent une communication fluidique entre deux entrées/sorties. Le cinquième canal C5 de circulation de fluide réfrigérant établit une liaison fluidique entre le premier canal C1 et le deuxième canal C2. De même, le sixième canal C6 établit une liaison fluidique entre le premier canal C1 et troisième canal C2. Les canaux C1, C2, C3, C4 sont entièrement contenus à l’intérieur du module 50 de distribution de fluide réfrigérant.
La schématise un deuxième mode de réalisation dans lequel le système de conditionnement thermique 100 comprend des éléments supplémentaires, de même que le module 50 de circulation de fluide.
Le module de distribution 50 de fluide réfrigérant comporte un huitième canal C8 de circulation reliant un septième point de raccordement R7 agencé sur le cinquième canal C5 à un huitième point de raccordement R8 agencé sur le quatrième canal C4 entre la quatrième entrée/sortie E4 et le sixième point de raccordement R6.
Le huitième canal C8 établit une liaison fluidique entre le quatrième canal C4 et le septième canal C7. L’ajout du huitième canal C8 de circulation permet d’obtenir un mode de fonctionnement supplémentaire, comme on le détaillera ultérieurement. Dans ce deuxième mode de réalisation, la totalité du huitième canal C8 est interne au module 50, et sa présence ne modifie pas l’encombrement du module.
Le module de distribution 50 de fluide réfrigérant comporte un neuvième canal C9 reliant une onzième entrée/sortie E11 du module 50 et un neuvième point de raccordement R9 disposé sur le quatrième canal C4 entre le sixième point de raccordement R6 et la huitième entrée/sortie E8.
Le module de distribution 50 de fluide réfrigérant comporte un dixième canal C10 reliant une douzième entrée/sortie E12 du module 50 et un dixième point de raccordement R10 disposé sur le quatrième canal C4 entre le sixième point de raccordement R6 et la huitième entrée/sortie E8. Le dixième point de raccordement R10 peut être confondu avec le sixième point de raccordement R6.
Dans ce deuxième mode de réalisation, le système de conditionnement thermique 100 comporte, en plus éléments déjà listés, une première branche de dérivation C comportant un quatrième échangeur de chaleur 4 configuré pour fonctionner en évaporateur. La première branche de dérivation C relie fluidiquement la onzième entrée/sortie E11 du module 50 à un onzième point de raccordement R11 disposé sur la quatrième portion de circulation B4 entre la sixième entrée/sortie E6 du module 50 et le troisième dispositif de détente 33.
La première branche de dérivation C comprend un quatrième dispositif de détente 34 disposé entre le onzième point de raccordement R11 et le quatrième échangeur de chaleur 4. Le quatrième dispositif de détente 34 permet de contrôler la pression du fluide réfrigérant rejoignant l’entrée du quatrième échangeur de chaleur 4.
Le vecteur peut être tout chromosome artificiel de levure adapté connu de l'homme de l'art. Il peut s'agir, par exemple, d'un Chromosome Artificiel de la Levure choisi dans le groupe comprenant pYAC-RC, pYAC3(+).
Le vecteur peut être tout chromosome artificiel bactérien adapté connu de l'homme de l'art. Il peut s'agir par exemple d'un chromosome artificiel bactérien choisi dans le groupe comprenant pUvBBAC, pCC1BAC, pBAC 108L.
Le vecteur d’expression d’une protéine de fusion selon l’invention peut comprendre les éléments suivants liés de manière fonctionnelle : a) un promoteur b) une séquence codant pour une protéine de fusion selon l’invention c) des signaux de terminaison de la transcription.
Dans la présente, par « promoteur », on entend une séquence ADN agissant en cis localisée en 5’ du site d’initiation de la transcription de la séquence codant pour un polypeptide à laquelle une séquence ADN d’une ARN polymérase peut se lier et initier une transcription correcte, et comprenant éventuellement des activateurs. Il peut s’agir par exemple de tout promoteur adapté connu de l’homme du métier. Il peut s’agir par exemple d’un promoteur constitutif, d’un promoteur viral, d’un promoteur bactérien. Il peut s’agir par exemple du promoteur T7, le promoteur T7 de bactériophage, de préférence le promoteur T7.
Dans la présente, par « signaux de terminaison de la transcription », on entend une séquence ADN adaptée pour la terminaison de la transcription. Il peut s’agir de tout signal de terminaison de la transcription connu de l’homme du métier. Il peut s’agir par exemple du terminateur T7 de séquence tagcataaccccttggggcctctaaacgggtcttgaggggttttttg (SEQ ID NO 20),
Le vecteur peut être choisi en fonction de la cellule hôte sélectionnée. L'homme de l'art, compte tenu de ses connaissances techniques, adaptera le vecteur en fonction de la cellule hôte.
La cellule hôte peut être toute cellule appropriée pour l'expression d’un acide nucléique ou d’un vecteur selon l'invention. Il peut s'agir, par exemple, de bactérie, par exemple de bactéries gram négatives ou de bactéries gram positives. Il peut s’agir par exemple Escherichia coli , Pischia pastoris , Saccharomyces cerevisiae . De préférence, la cellule hôte est Escherichia coli, de manière encore plus préférée, la cellule hôte peut être la souche bactérienne Escherichia coli BL21 (DE3) pLysE .
Avantageusement, les inventeurs ont démontré que l’expression de la protéine de fusion dans des cellules hôtes, par exemple des cellules bactériennes, permet avantageusement une production de la protéine de fusion et une localisation à la surface de la membrane de la cellule hôte. Par exemple, lorsque la cellule hôte est une bactérie gram négative, l’expression de la protéine de fusion permet avantageusement une production de la protéine de fusion et une localisation à la surface de la membrane externe de la bactérie. En d’autres termes, les inventeurs ont démontré que l’expression de la protéine de fusion dans des cellules hôtes permet avantageusement une production de la protéine de fusion, une localisation à la surface de la cellule hôte et avantageusement un ancrage de la protéine de fusion à la cellule hôte via sa membrane.
La présente invention a également pour objet une cellule hôte comprenant un acide nucléique selon l’invention et/ou un vecteur selon l’invention.
La cellule hôte peut être tel que définie ci-dessus. De préférence la cellule hôte est une cellule bactérienne, par exemple une bactérie gram négative ou une bactérie gram positive, de préférence Escherichia coli , de manière encore plus préférée, la cellule hôte peut être la souche bactérienne Escherichia coli (BL21 (DE3) pLysE) .
La présente invention a également pour objet, un procédé de production d’une protéine de fusion selon l’invention comprenant la culture d’une cellule hôte selon l’invention dans des conditions appropriées pour l’expression de la protéine de fusion.
La culture de la cellule hôte selon l’invention peut être réalisée dans tout milieu de culture adapté connu de l’homme du métier. Il peut s’agir par exemple de tout milieu riche de culture adapté connu de l’homme du métier. L’homme du métier de par ces connaissances générales adaptera et/ou choisira le milieu de culture en fonction de la cellule hôte. Par exemple, lorsque la cellules hôte est une cellule bactérienne, le milieu de culture peut être un milieu SOC, un milieu bouillon lysogène (en anglais LB « lysogeny broth »), de préférence un milieu SOC.
La culture de la cellule hôte selon l’invention peut être réalisée à toute température adaptée à la cellule hôte connue de l’homme du métier. Par exemple la culture peut être réalisée à une température comprise de 20 à 30°C, par exemple à une température de 26°C.
Le temps de culture peut être tout temps adapté à la cellule hôte connu de l’homme du métier. Par exemple Le temps de culture de la cellule hôte selon l’invention peut être compris de 24 à 72 heures, par exemple 53 heures.
Avantageusement, les inventeurs ont démontré que la protéine de fusion selon l’invention est présente à la surface de la cellule hôte dans laquelle elle est exprimée et est une protéine fonctionnelle. En particulier, les inventeurs ont démontré de manière surprenante que la protéine de fusion présentait une activité biologique, en particulier une activité enzymatique du cytochrome P450 de plante et une activité réductase de la NADPH P450 réductase de cytochrome P450 de plante. En d’autres termes, la protéine de fusion possède avantageusement de manière simultanée l’activité biologique du cytochrome P450 de plante et de la NADPH P450 réductase de cytochrome P450 de plante. Les inventeurs ont également démontré de manière surprenante et inattendue que la protéine de fusion selon l’invention étant une protéine fonctionnelle et présentant l’activité biologique du cytochrome P450 de plante et une activité réductase de la NADPH P450 réductase de cytochrome P450 de plante permet une bioconversion de substrats présents dans le milieu de culture.
Les dispersions selon l’invention peuvent également être préparées selon un procédé microfluidique, notamment comme décrit dans les demandes internationales WO2012/120043, WO2015/055748 ou WO2019/145424.
Selon ce mode de réalisation, les gouttes obtenues par ces procédés microfluidiques présentent une distribution de taille uniforme. De préférence, les dispersions de l’invention sont constituées d’une population de gouttes monodispersées, notamment telles qu’elles possèdent un diamètre moyen compris de 500 µm à 3 000 µm et un coefficient de variation Cv inférieur à 10%, voire inférieur à 3%.
Dans le cadre de la présente description, on entend par "gouttes monodispersées" le fait que la population de gouttes de la dispersion selon l’invention possède une distribution de taille uniforme. Des gouttes monodispersées présentent une bonne monodispersité. A l’inverse, des gouttes présentant une mauvaise monodispersité sont dites "polydispersées".Selon un mode, le diamètre moyen des gouttes est par exemple mesuré par analyse d’une photographie d’un lot constitué de N gouttes, par un logiciel de traitement d’image (Image J). Typiquement, selon cette méthode, le diamètre est mesuré en pixel, puis rapporté en µm, en fonction de la dimension du récipient contenant les gouttes de la dispersion.
De préférence, la valeur de N est choisie supérieure ou égale à 30, de sorte que cette analyse reflète de manière statistiquement significative la distribution de diamètres des gouttes de ladite émulsion.On mesure le diamètre Di de chaque goutte, puis on obtient le diamètre moyen en calculant la moyenne arithmétique de ces valeurs :
A partir de ces valeurs D i , on peut également obtenir l’écart-type σ des diamètres des gouttes de la dispersion : L'écart-type σ d’une dispersion reflète la répartition des diamètres D i des gouttes de la dispersion autour du diamètre moyen .En connaissant le diamètre moyen et l'écart-type σ d’une dispersion, on peut déterminer que l’on trouve 95,4% de la population de gouttes dans l’intervalle de diamètres et que l’on trouve 68,2% de la population dans l’intervalle .
La présence d’agent(s) gélifiant(s) lipophile(s) et/ou d’agent(s) de texture hydrophile(s) peut nécessiter des ajustements au niveau du procédé de préparation d’une dispersion selon l’invention. En particulier, le procédé de préparation d’une dispersion selon l’invention peut comprendre une étape de chauffage (entre 40°C et 150°C, notamment entre 50°C et 90°C) de la phase grasse et/ou de la phase aqueuse avant, voire également pendant, le/la mélange/mise en contact de ladite phase grasse avec la phase aqueuse.
La présente invention concerne un procédé de préparation d’une dispersion telle que définie ci-dessus, comprenant les étapes suivantes :
- la mise en contact du fluide aqueux FE et du fluide huileux FI ; et
La platine 14 comprend, en outre, au niveau de la jambe 15 s’étendant vers l’arrière au-delà de l’axe 12.2, une portion en saillie 14.5, cette dernière étant préférentiellement perpendiculaire à ladite jambe 15 et dirigée vers la roue 6 correspondante.
Avantageusement, la portion en saillie 14.5 permet de garantir un maintien en positon d’une ou de plusieurs conduite(s) de frein 20 dans une position optimale proche du système de freinage (non représenté) du véhicule automobile, cela permet d’optimiser la distance d’écoulement du liquide de frein dans la conduite 20.
La platine 14 comprend également une patte avant 14.6 permettant de supporter un ou plusieurs faisceaux électriques 22, ces derniers peuvent permettre l’alimentation de divers composants électriques du véhicule automobile. Préférentiellement, la patte avant 14.6 est pourvue d’un clip de fixation 22.1 afin d’assurer un maintien efficace des faisceaux électriques 22 sur la platine 14.
Préférentiellement, la platine 14 est réalisée en tôle pliée, ce qui permet de lui octroyer une robustesse lui permettant de supporter les efforts éventuels exercés par les commandes de la boîte de vitesses du véhicule. De plus, la platine 14 est capable de résister à des températures relativement élevées, ce qui lui permet d’être agencée à proximité d’une ligne d'échappement du véhicule automobile.
Avantageusement, la platine 14 est un support multifonction capable d’assurer le maintien de plusieurs composants (conduites de frein, faisceaux électriques, capteurs, ou tout autre élément solidaire au châssis) sur le châssis du véhicule automobile, et cela, de manière fiable et économique, tout en étant compatible avec un montage et/ou un vissage automatisé(s).
Structure de caisse de véhicule automobile à déformation contrôlée de l’arc pavillon en cas de choc frontal La présente invention concerne d’une manière générale la structure de caisse des véhicules automobiles. Elle vise en particulier un flanc latéral d’une telle structure de caisse.
Les structures de caisse des véhicules automobiles sont formées classiquement à partir de divers éléments métalliques assemblés entre eux tels que notamment un pavillon de toit, un plancher et deux flancs latéraux.
Chaque flanc latéral comprend généralement : - un pied avant, un pied milieu, et un pied arrière ; - un longeron de soubassement reliant entre eux en partie inférieure les pieds avant, milieu et arrière ; et - un cadre latéral de pavillon reliant entre eux en partie supérieure les pieds avant, milieu et arrière.
Les éléments mentionnés ci-dessus délimitent deux ouvertures avant et arrière s’étendant de part et d’autre du pied milieu et prévues pour recevoir respectivement un ouvrant latéral avant et un ouvrant latéral arrière.
Le cadre latéral de pavillon d’un tel flanc latéral de structure de caisse est constitué classiquement par un montant de baie délimitant en partie supérieure l’ouverture avant et par un arc pavillon délimitant en partie supérieure l’ouverture arrière.
S’étendant dans le prolongement longitudinal l’un de l’autre, le montant de baie et l’arc pavillon forment chacun une structure en caisson allongée de section transversale fermée constituée d’une enveloppe externe et d’une doublure interne.