INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Plus généralement, la première poignée 4 télescopique et la deuxième poignée 5 télescopique peuvent être bloquées à, respectivement, une première hauteur et à une deuxième hauteur par rapport à l'ouverture 25 différentes. L'inclinaison du couvercle 6 en position de support qui en résulte permet, avantageusement, de mieux exposer la face 61 interne au coiffeur. Un ajustement de l'inclinaison du couvercle 6 en position de support peut, également, permettre de compenser une inclinaison de la surface sur laquelle repose le contenant 1 transportable. Compte tenu des dimensions des moyens 7 de fixation, l'inclinaison que peut avoir le couvercle 6 peut, bien entendu, être limitée à un angle maximal prédéfini de part et d'autre de l'horizontal.
Avantageusement, une pluralité de points d'indexage (ou de hauteurs) des poignées 4 , 5 télescopiques permet d'ajuster à volonté la hauteur et/ou l'orientation du couvercle 6 en position de support. Il en résulte que le coiffeur peut disposer le couvercle 6 en position de support dans les conditions d'utilisation (hauteur et/ou orientation) qui lui sont les plus convenables. Par exemple, le couvercle 6 peut être placé en position de support de sorte que la face 61 interne du couvercle 6 soit orientée vers le coiffeur et que les outils de coiffure qui y sont posés lui soient accessibles sans qu'il a à se baisser.
Dans un mode de réalisation, au moins une des deux poignées 4 , 5 télescopiques est au moins partiellement étendue lorsque le couvercle 6 est en position de support de sorte que l'intérieur du caisson 2 de rangement soit accessible. Le couvercle 6 en position de support est maintenu à distance (surélevé) de l'ouverture 25 par les poignées 4 , 5 télescopiques au moins partiellement étendues.
Pour libérer le couvercle 6 de sa position de support, il suffit de dégager les moyens 7 de fixation, par exemple, en soulevant le couvercle 6 et/ou en libérant ou en déverrouillant les moyens 7 de fixation.
Dans un mode de réalisation illustré par la , les moyens 7 de fixation sont également aptes à maintenir le couvercle 6 en position de fermeture sur le caisson 2 de rangement. Par exemple, les moyens 7 de fixation comprennent des crochets 72 intégrant une première extrémité apte à venir en prise avec la première et/ou la deuxième poignée 4, 5 télescopique et une deuxième extrémité apte à venir en prise avec le bord de l'ouverture 25. Plus généralement, les moyens 7 de fixation sont aptes à fixer de manière amovible le couvercle 6 à l'ouverture lorsque ce couvercle 6 est en position de fermeture. Les moyens 7 de fixation peuvent être au moins partiellement reliés au couvercle 6 ou être des pièces libres qui viennent serrer le couvercle 6 contre le caisson 2 de rangement et le maintenir en position de fermeture. Dans ce cas, les moyens 7 de fixation assurent, avantageusement, une première fonction de fixation aux poignées télescopiques du couvercle 6 en position de support et une deuxième fonction de fixation à l'ouverture 25 du couvercle en position de fermeture.
Dans un autre mode de réalisation illustré par la , le contenant 1 transportable comprend des chemins 8 de guidage (montants ou rails de guidage) agencés pour permettre le déplacement du couvercle 6 entre la position de fermeture et la position de support. Le couvercle 6 est déplaçable entre la position de fermeture et la position de support par coulissement de celui-ci le long des chemins 8 de guidage. Ces chemins 8 de guidage sont montés de façon rabattable aux deux parois 23-24 latérales opposées du caisson 2 de rangement. Les chemins 8 de guidage s'étendent depuis l'ouverture 25 jusqu'à une hauteur prédéfinie à laquelle le couvercle 6 peut être maintenu en position de support par les poignées 4, 5 télescopiques. Ainsi, le couvercle 6 peut être déplacées/entrainés dans les directions définies par les chemins 8 de guidage depuis la position de fermeture vers la position de support et inversement. Par un mouvement de rotation dicté par les chemins 8 de guidage, le couvercle 6 passe d'une position à l'autre. Dans un mode de réalisation, les chemins 8 de guidage comportent des portions en forme de quart de cercle.
Dans un mode de réalisation, un ou plusieurs outils 10 de coiffure peuvent être fixés au préalable aux moyens 63 - 68 de maintien correspondants de sorte qu'ils soient déjà présents sur la face 61 interne du couvercle lorsqu'il est déplacé de sa position de fermeture à sa position de support. Le coiffeur peut, ainsi, préparer à l'avance au moins partiellement son plan de travail avant qu'il n'arrive sur le lieu d'intervention. Une fois une séance de coiffure est terminée, les outils 10 de coiffure utilisés peuvent être rangés en toute sécurité dans le caisson 2 de rangement ou maintenus sur la face 61 interne du couvercle 6 déplacé en position de fermeture.
Dans certains modes de réalisation, le couvercle 6 comprend un ou plusieurs éléments 9 d'extension ou de rallonge de la face 61 interne ou, autrement dit, du plan de travail défini par la face 61 interne. Ces éléments 9 d'extension servent de surface de travail (ou de support) supplémentaire pour recevoir des outils 10 de coiffure. Les éléments 9 d'extension sont montés mobiles sur le couvercle 6 entre une position de rangement dans laquelle l'élément 9 d'extension est intégralement rangée (ou logée) dans le couvercle 6 et une position d'utilisation dans laquelle l'élément 9 d'extension fait saillie (son côté sortant dépasse hors du couvercle 6 ) du couvercle 6 par une face latérale du couvercle 6 . L'élément 9 d'extension est, par exemple, monté mobile en rotation autour d'un axe compris dans le couvercle 6 . Dans un autre mode de réalisation, l'élément 9 d'extension est monté mobile en coulissement sur une glissière télescopique pouvant coulisser à l'intérieur d'un logement (ou une fente) aménagé dans un bord latéral du couvercle 6 . En position de rangement, l'élément 9 d'extension ne dépasse pas ou pratiquement pas du volume du couvercle 6 . En position d'utilisation, l'élément 9 d'extension dépasse du volume du couvercle 6 . Dans un mode de réalisation, des moyens de verrouillage (ou de blocage) agissant sur un élément 9 d'extension (par exemple, un bouton poussoir en combinaison avec des moyens de rappel) peuvent être prévus pour libérer/verrouiller l'élément 9 d'extension dans l'une ou l'autre de ses positions.
Les éléments 9 d'extension peuvent comprendre des profilés autorisant l'accrochage d'outils de coiffure, des ouvertures, des logements, des empreintes ou des moyens similaires aptes à recevoir des outils 10 de coiffure. Dans certains modes de réalisation, un élément 9 d'extension comprend, par exemple, un miroir de courtoisie, une balance électronique de faible épaisseur (pour peser, par exemple, le poids d'un poudre de coloration), un kit d'accessoires de tondeuse (des sabots de différentes tailles par exemple), un kit à outils de teinture, des pinceaux de teinture, des porte-gobelets (pour y poser des bols de coloration, ou des gobelets), un support pour tenir un appareil électrique (par exemple, un sèche-cheveux chaud) à distance des autres outils de coiffure, des ustensiles de coiffure sensiblement plats de type ciseaux, peignes, ou similaires. Avantageusement, de tels éléments 9 d'extension offrent au coiffeur une plus grande surface de travail, sur laquelle divers accessoires de coiffure peuvent être posés en libre accès simultané.
En cas de besoin, un élément 9 d'extension peut être déployé pour y poser ou y récupérer des outils 10 de coiffure, sans le risque d'en oublier chez le client. Pour assurer la stabilité du couvercle 6 en position de support, un premier et un deuxième éléments 9 d'extension sont prévus, respectivement, sur un premier et un deuxième bord opposés du couvercle 6 . Pour reprendre le poids du plan de travail ainsi que les charges et les efforts susceptibles d'y être appliqués, notamment, lorsque les éléments 9 d'extension sont déployés, le contenant 1 transportable peut comprendre au moins un pied et/ou des points d'ancrage rabattables pour assurer sa stabilité.
Le couvercle 6 et/ou le caisson 2 de rangement peuvent être réalisés en matériaux métalliques légers, en matériaux composites, en matière plastique dure, en bois, et/ou en tout autre matériau convenable connu de l'état de la technique.
Avantageusement, les modes de réalisation décrits ci-dessus du contenant 1 transportable permettent au coiffeur d'avoir toujours à portée de main l'ensemble des outils de coiffure qui lui sont nécessaires lors d'une séance de coiffure et offrir, ainsi, une efficacité et un confort de travail ergonomique. Ces modes de réalisation permettent également de rendre le coiffeur indépendant des circonstances du lieu de son intervention, ainsi que de réduire son temps d'intervention à domicile et de simplifier son processus de travail.
Bien que le contenant 1 transportable soit décrit ci-dessus relativement à des modes de réalisation et à des variantes, l’homme du métier comprendra que ces modes de réalisation et variantes ne sont pas limitatifs et peuvent être combinés entre eux et/ou avec tout autre mode de réalisation équivalent.
Support de scanner portable Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux, à l’étape a), l'utilisateur utilise un kit 10 comportant le scanner portable 6 et un support 14 ( ) permettant simultanément - d’écarter les lèvres de l’utilisateur pour en dégager les dents, et - de faciliter le positionnement et l’orientation du scanner portable 6 par rapport aux dents.
Le support 14 présente de préférence la forme générale d’un corps tubulaire dont une ouverture, dite « ouverture orale » Oo, est destinée à être introduite dans la bouche du patient, et dont l’ouverture opposée, dite « ouverture d’acquisition », fait face à l’objectif du scanner portable, rigidement fixé, de préférence de manière amovible, sur le support 14.
De préférence, l’ouverture d’acquisition fait également face à un flash du scanner portable, ce qui permet d’utiliser pour éclairer les dents de l'utilisateur lors de l’acquisition.
Le support 14 permet de définir un espacement entre le scanner portable et l’ouverture orale Oo ainsi qu’une orientation du scanner portable par rapport à l’ouverture orale. Avantageusement, dans la position de service, les données acquises par le scanner portable 6 à travers son objectif, l’ouverture d’acquisition et l’ouverture orale sont ainsi acquises à une distance prédéterminée des dents de l’utilisateur et selon une orientation prédéfinie. De préférence, le support est configuré pour que cet espacement et cette orientation soient constants.
De préférence, le support 14 comporte : - un espaceur tubulaire 16 qui définit l’ouverture orale Oo et comporte de préférence un rebord 22 s’étendant radialement vers l’extérieur, à la périphérie de l’ouverture orale Oo, destiné à être introduit entre les lèvres et les dents de l’utilisateur, et - un adaptateur 18 sur lequel le scanner portable 6 est fixé, par exemple serré entre deux mâchoires 24 1 et 24 2 , comme illustré sur la , l’adaptateur 18 étant fixé rigidement sur l’espaceur 16, de préférence de manière amovible, par exemple au moyen d’un clips 20, ou venu de matière avec l’espaceur, de manière que l’objectif du scanner portable puisse « voir » l’ouverture orale.
La hauteur maximale h 22 du rebord 22 est de préférence supérieure à 3 mm et inférieure à 10 mm.
Pour acquérir le modèle acquis, l'utilisateur assemble l’espaceur tubulaire 16 à l’adaptateur 18 au moyen du clips 20, puis le scanner portable sur l’adaptateur 18 de sorte que le scanner portable puis réaliser un scan à travers l’espaceur tubulaire 16 et l’adaptateur 18. Il introduit ensuite dans sa bouche l’extrémité de l’espaceur tubulaire opposée au scanner portable, en insérant le rebord 22 entre ses lèvres et les dents. Les lèvres reposent ainsi sur l’espaceur tubulaire 16, à l’extérieur de ce dernier, ce qui permet de bien dégager la vue sur les dents à travers l’ouverture orale Oo.
Dans la position de service obtenue, comme illustré sur les figures 2 et 3, les dents ne reposent pas sur le support, de sorte que l’utilisateur U peut, en tournant la tête par rapport au support, modifier les dents qui sont visibles par le scanner portable à travers l’ouverture orale. Il peut aussi modifier l’écartement entre ses arcades dentaires. En particulier, le support écarte les lèvres, mais n’appuie pas sur les dents de manière à écarter les deux mâchoires l’une de l’autre.
Le modèle acquis peut représenter totalement ou partiellement une arcade dentaire ou les deux arcades dentaires.
Découpage du modèle acquis Dans un mode de réalisation, le modèle de l’arcade acquis avec le scanner portable est découpé, de préférence pour définir au moins un modèle de dent 30. Dans un mode de réalisation, le modèle actualisé est ainsi réduit à une partie du modèle acquis, de préférence réduit à un modèle de dent.
De préférence, les étapes b) et c) sont alors mises œuvre successivement pour chaque modèle de dent.
Le découpage d’un modèle peut mettre en œuvre tout procédé de découpage connu .
La correction du modèle actualisé, éventuellement issu d’un découpage du modèle acquis, consiste à le modifier pour qu’il soit plus conforme à l’objet qu’il modélise. A cet effet, on peut notamment améliorer la résolution du modèle et/ou le compléter et/ou lui donner des couleurs plus réalistes, par exemple pour le rendre hyper réaliste, et/ou le nettoyer. Le nettoyage du modèle consiste à supprimer des parties du modèle qui ne modélisent pas l’objet visé, par exemple en supprimer la représentation d’une attache orthodontique lorsque l’objet visé est une dent ou supprimer des défauts résultant de l’opération d'acquisition, en particulier pour nettoyer des artefacts dus à la salive pendant l’acquisition.
Correction Le modèle actualisé est de préférence traité informatiquement pour être corrigé. La correction du modèle actualisé peut être effectuée après ou avant une simplification.
Dans un mode de réalisation préféré, illustré sur la , le modèle actualisé est comparé à un « modèle de correction », puis corrigé en fonction des résultats de cette comparaison.
De préférence, on procède suivant les étapes suivantes lorsque le modèle à corriger est un modèle de dent : i) création d’une bibliothèque historique comportant plus de 1 000 modèles de dent, dits « modèles de dent historiques », et attribution à chaque modèle de dent historique, d’un numéro de dent ; ii) analyse du modèle de dent à corriger, de manière à déterminer le numéro de la dent modélisé par ledit modèle de dent à corriger ; iii) recherche, dans la bibliothèque historique, d’un modèle de dent historique ayant le même numéro et présentant une proximité maximale avec ledit modèle de dent à corriger, ou « modèle de dent optimal » ; iv) modification du modèle de dent à corriger à partir d’informations relatives au modèle de dent optimal, la modification pouvant comporter un remplacement du modèle de dent à corriger par le modèle de dent optimal.
En variante toute la première partie peut être entrainée.
La première partie est par exemple le réseau de neurones décrit dans l’article :
Alexei Baevski, Yuhao Zhou, Abdelrahman-Mohamed, Michael Auli : «wav2vec 2.0 : A Framework for Self-Supervised Learning of Speech Représentations » NeurIPS 2020.
Selon un mode de réalisation, dans cette première partie, les poids, de l’encodeur convolutionnel (noté f) de l’article qui produit une représentation latente de l’entrée sont fixes durant l’étape d’entrainement. Le reste de la première partie, en particulier le transformeur (note g) est modifié lors de l’entrainement.
D’autres réseaux de neurones que celui présenté dans cet article sont bien entendu envisageables.
La donnée est par exemple un fichier audio (ou une partie d’un fichier audio) comprenant l’enregistrement audio de la première réponse (par exemple selon un format dit « wav », en Anglais pour «Waveform Audio File Format » traduit en français par l’expression format audio de forme d’onde).
Selon un mode de réalisation, la première partie est pré-entrainée à partir d’une entrée tronquée (par exemple, on a supprimé certaines partie de l’enregistrement audio ).
En variante, la première partie est entrainée à partir de données labélisées.
Ainsi, à la suite du pré-entrainement, la première partie est apte à encoder un fichier audio (ou des données audio) en entrée en un vecteur comportant une représentation de contexte.
En variante, la donnée est un fichier image, par exemple un spectrogramme obtenu à partir de la première réponse vocale. Une telle approche est par exemple présentée pour une reconnaissance vocale générale dans l’article suivant :
Zhang, Wei, et al. « Towards end-to-end speech recognition with deep multipath convolutional neural networks. » International Conference on Intelligent Robotics and Applications. Springer, Cham, 2019.
Par exemple, les étapes d’entrainement comportent l’étape suivante : Saisie, par un clavier, de la troisième chaine de caractères par l’humain, suite à l’étape d’écoute.
La saisie peut être réalisée par un clavier ou tout autre type d’interface homme-machine.
Le dispositif électronique mémorise par exemple l’enregistrement de l’expression sonore en mémoire.
La première émission acoustique de l’enregistrement d’une expression linguistique peut par exemple être réalisée par un casque audio ou un haut-parleur.
La deuxième émission acoustique de l’enregistrement d’une expression linguistique peut par exemple être également réalisée par un casque audio ou un haut parleur.
EXEMPLES Les exemples suivants illustrent l’invention.
Exemple 1 : Mise au point de la technique d’interférence par ARN ciblant la sous-unité nicotinique β2 chez le puceron du pois A. pisum comme moyen de lutte contre les insectes nuisibles
Pour cette espèce d’insecte nuisible, les inventeurs se sont focalisés sur une sous-unité nicotinique divergente, la sous-unité neuronale β2, afin de préserver les organismes non-cibles.
Modèle d’étude : le puceron Acyrthosiphon pisum Les pucerons du pois Acyrthosiphon pisum sont élevés au laboratoire SiFCIR sur des plants de féverole recouverts par un sachet cellophane perforé et fermé par un élastique dans une enceinte à une température de 20°C avec une photopériode de 16h d’éclairage et 8h d’obscurité. Afin d’assurer cet élevage, 7 larves se reproduisant par parthénogénèse sont déposées sur chaque plant de féverole tous les 10 jours. Au 21 ème jour, les pucerons adultes sont utilisés pour les expérimentations.
Extraction des ARN totaux L’extraction des ARN totaux est effectuée à l’aide du kit NucleoSpin® RNA (Macherey-Nagel) à partir de pucerons adultes. Pour ce faire, chaque puceron est broyé à l’aide d’un ultra-turrax® dans 350μL de tampon de lyse (RA1) additionné de 3,5μL de β-mercaptoéthanol puis le broyat est filtré. Les acides nucléiques contenus dans le lysat sont alors précipités avec de l’éthanol 70% (350μL) puis fixés sur une membrane de silice. Après un traitement à la DNase et différents lavages de la membrane, les ARN sont élués dans 50μL d’H 2 0. La qualité et la quantité des ARN obtenus sont évaluées par un dosage spectrophotométrique (SimpliNano).
Transcription inverse La synthèse d’ADNc à partir des ARNm est réalisée avec le kit RevertAid H Minus First strand cDNA Synthesis® (Thermoscientific). Ainsi, 500ng d’ARN totaux (H 2 O qsp 11μL) sont incubés à 65°C pendant 5 minutes avec 1μL d’amorces oligo(dT)18 (0,5μg/μL) afin de permettre l’hybridation de l’amorce à la queue poly(A) des ARNm. Ensuite, un mélange réactionnel de 8μL composé de 4μL de tampon de réaction 5X, 1μL de RiboLock RNase Inhibitor (20U/μL), 2μL de dNTP (10mM) et 1μL d’enzyme RevertAid H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase (200U/μL) est ajouté. La transcription inverse est réalisée pendant 1h à 42°C et une étape finale de 5 minutes à 70°C permettant d’inactiver la reverse transcriptase est effectuée. Enfin, les échantillons d’ADNc obtenus sont stockés à -20°C.
Amplification des séquences d’intérêt par PCR Afin d’obtenir la séquence codante de la sous-unité β2 (n° accession NCBI : XM_001945029.5 – SEQ ID NO : 18) et le fragment nucléotidique de 140pb nécessaire à la synthèse des dsRNA ciblant cette sous-unité, une amplification par PCR est effectuée à partir de l’ADNc du puceron A. pisum avec la polymérase haute-fidélité KOD Hot Start™ (Novagen) en utilisant respectivement des amorces β2-ORF spécifiques du cadre ouvert de lecture et des amorces β2-dsRNA comprenant la séquence du promoteur T7 (5’- TAATACGACTCACTATAGGG-3’) (Tableau 1). Ainsi, à partir d’un mélange réactionnel composé de 0,4μL d’ADN polymérase haute-fidélité KOD (1U/μL, Novagen), 2μL de tampon KOD (10X), 2μL de dNTP (2mM), 1,2μL de MgSO 4 (10mM), 1,2μL d’amorces sens et anti-sens (10μM), 2μL d’ADNc dilués au 1/20ème et 1,2μL d’H 2 O, les amplicons d’intérêt sont obtenus après une dénaturation initiale à 95°C pendant 2 minutes suivie de 30 cycles composés de 3 étapes (dénaturation pendant 20 secondes à 95°C, hybridation pendant 20 secondes à 60°C et élongation de 10 secondes à 70°C) puis d’une élongation finale de 5 minutes à 72°C.
En parallèle, l’amplification d’une partie de la séquence nucléotidique bactérienne codant la β-galactosidase (140pb), présente dans le plasmide pCR-Blunt, est réalisée en utilisant les amorces spécifiques LacZ-dsRNA (Tableau 1) associée à la séquence du promoteur T7. Cet amplicon sera utilisé pour la production de dsRNA témoin.
Amorces (5’-3’) Taille de l’amplicon (pb) SEQ ID NO : β2-ORF Sens : AGCATTCTGACTACAGCGAG Antisens : AACTAGTAGATAGATACACAAACATTGAT 1519 46 47 β2-dsRNA Sens : TAATACGACTCACTATAGGGTAGATGCTGCAATAACAGAC Antisens : TAATACGACTCACTATAGGGAGTGTCTATCGTAGAACCTC 140 48 49 LacZ-dsRNA Sens : TAATACGACTCACTATAGGGATGACCATGATTACGCCAAG Antisens : TAATACGACTCACTATAGGGTGGCGGCCGTTACTAGTGGA 140 50 51 β2-qPCR Sens : CGCAAAGACGAAGAGTCGAG Antisens : ACGGATAGCGTCAGGAACAC 151 52 53 RPL7-qPCR Sens : ACGTAAAGAGCGCGTGAAGA Antisens : GGTTCACACCACGAATACGCA 182 54 55
Tableau 1 : Séquences des amorces utilisées pour le clonage de la sous-unité β2, la synthèse des dsRNA et la qPCR. La séquence du promoteur T7 est encadrée.
Purification des produits de PCR Après une migration électrophorétique sur un gel d’agarose à 2%, les produits de PCR sont purifiés à l’aide du kit NucleoSpin® Gel and PCR clean-up (Macherey-Nagel). Brièvement, le morceau de gel d’agarose contenant les amplicons d’intérêt est dissout au bain-marie à 50°C dans du tampon NT1 (200μL pour 100mg de gel) contenant des sels chaotropiques permettant la fixation de l’ADN sur une membrane de silice. Après la dissolution complète du gel, les amplicons sont retenus par une membrane de silice et deux lavages avec 700μL de tampon NT3 (centrifugations de 30 secondes à 11000g) sont réalisés. Les produits de PCR sont élués dans 30μL d’H 2 O par une centrifugation d’1 minute à 11000g. La qualité et la quantité d’ADN sont enfin évaluées par spectrophotométrie (SimpliNano).
Clonage moléculaire de la sous-unité nicotinique β2
Le clonage de la sous-unité β2 est effectué à l’aide du kit Zero Blunt© PCR Cloning (Invitrogen). Pour ce faire, les amplicons purifiés correspondant à la séquence codante de la sous-unité β2 sont insérés dans le vecteur de clonage PCR-Blunt selon un rapport « insert:vecteur » de 10:1. Ainsi, 1μL de plasmide pCR-Blunt (25ng/μL), 6μL d’insert purifié, 2μL de tampon de réaction ExpressLink T4 DNA ligase (5X) et 1μL d’enzyme ExpressLink T4 DNA ligase (5U/μL) sont incubés pendant 30 minutes à température ambiante. Ensuite, 4μL du produit de ligation sont introduits dans des bactéries E. Coli One Shot© Top 10 chimio-compétentes suite à une transformation bactérienne par choc thermique (30 minutes dans la glace puis 45 secondes à 42°C et enfin 2 minutes dans la glace). Les bactéries transformées sont incubées 1h à 37°C dans 250μL de milieu SOC puis étalées sur des boîtes de Pétri contenant un milieu sélectif LB-agar additionné de kanamycine (50μg/mL). Après une incubation d’une nuit à 37°C, les clones recombinants sont sélectionnés à l’aide d’une PCR utilisant les amorces M13 spécifiques des séquences plasmidiques flanquantes de l’insert puis mis en culture durant la nuit dans 5mL de milieu LB-kanamycine à 37°C sous agitation (225 rpm). Les plasmides recombinés sont enfin purifiés à l’aide du kit NucleoSpin Plasmid® (Macherey-Nagel) et séquencés (Eurofins).