INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
1/ Greffage de l’AMFA1 sur l es chaîne s oligosaccharidique s de la partie glycosidique d'un anticorps chimérique anti-TNF-alpha Le couplage de l’AMFA1 a été testé sur un anticorps monoclonal chimérique souris-humain commercial dirigé contre le TNF-alpha humain, l'infliximab, défini comme mAb1. Un conjugué de formule (I) est formé qui peut indifféremment être représenté dans la demande par « mAb1-AMFA1 » ou « AMFA1-mAb1 ». Ce conjugué comprend une partie (mAb1) qui se lie à une cible spécifique (comme un antigène extracellulaire ou membranaire) et une partie (AMFA1) qui se lie au RM6P-CI. L'anticorps mAb1 a été choisi comme modèle dans la présente demande car il présente des chaînes oligosaccharidiques sur les régions constantes qui sont très similaires à celles produites chez l'homme. Le couplage entre l'AMFA1 et l'anticorps mAb1 est effectué selon le protocole décrit ci-dessous. Dans une première étape, l'anticorps mAb1 est oxydé. Plus particulièrement, l'anticorps mAb1 et une solution de méta-périodate de sodium 1 mM (NaIO4) sont mis à réagir dans un tampon phosphate 25,5 mM pH 6,25 pendant 30 min à 4°C dans l'obscurité. Du glycérol (20 µL/mL) est ajouté et incubé pendant 10 min à 4°C pour arrêter la réaction. Les composés de faible poids moléculaire sont éliminés à l'aide d'une colonne de dessalage PD-10 pré-remplie de résine Sephadex G-25. Dans une deuxième étape, l'AMFA1 est ajouté à la solution d’anticorps oxydé obtenu précédemment et le mélange est laissé à réagir sous agitation pendant 2 h à 37°C. Enfin, les échantillons sont dialysés pendant une nuit contre un tampon phosphate. La première étape du protocole ci-dessus conduit à l'oxydation des chaînes oligosaccharidiques de l’anticorps mAb1 et génère des groupes aldéhydes qui interagissent de manière covalente avec les groupes oxy-amines de l’AMFA1 pour former une liaison oxime. De plus, seules les chaînes oligosaccharidiques de l’anticorps mAb1 sont remodelées. En effet, la partie peptidique de l’anticorps mAb1 n’est pas affectée par les conditions utilisées pour le greffage de l’AMFA1.
2 / Greffage de l’AMFA1 sur l es chaîne s oligosaccharidique s de la partie glycosidique d'un anticorps a nti-TNF-alpha humanisé L’anticorps anti-TNF-alpha, l’adalimumab, défini comme mAb2, a été testé et soumis à la même procédure que celle décrite dans le point 1/ ci-dessus afin de greffer l'AMFA1 sur les chaînes oligosaccharidiques de la partie glycosidique de l’anticorps mAb2. Un conjugué de formule (I) est formé, qui peut indifféremment être représenté dans la demande par « mAb2-AMFA1 » ou « AMFA1-mAb2 ». Ce conjugué comprend une partie (mAb2) qui se lie à une cible spécifique (comme un antigène extracellulaire ou membranaire) et une partie (AMFA1) qui se lie au RM6P-CI.
3 / Greffage de l’AMFA1 sur l es chaîne s oligosaccharidique s de la partie glycosidique d'un anticorps anti-VEGF humanisé L’anticorps anti-VEGF, le bevacizumab, défini comme mAb3, a été testé et soumis à la même procédure que celle décrite dans le point 1/ ci-dessus afin de greffer l'AMFA1 sur les chaînes oligosaccharidiques de l’anticorps mAb3. Un conjugué de formule (I) est formé, qui peut indifféremment être représenté dans la demande par « mAb3-AMFA1 » ou « AMFA1-mAb3 ». Ce conjugué comprend une partie (mAb3) qui se lie à une cible spécifique (comme un antigène extracellulaire ou membranaire) et une partie (AMFA1) qui se lie au RM6P-CI.
4/ Greffage de l’AMFA1 sur l es chaîne s oligosaccharidique s de la partie glycosidique d'un anticorps anti-HER2 humanisé L’anticorps anti-HER2, le trastuzumab, défini comme mAb4, a été testé et soumis à la même procédure que celle décrite dans le point 1/ ci-dessus afin de greffer l'AMFA1 sur les chaînes oligosaccharidiques de l’anticorps mAb4. Un conjugué de formule (I) est formé, qui peut indifféremment être représenté dans la demande par « mAb4-AMFA1 » ou « AMFA1-mAb4 ». Ce conjugué comprend une partie (mAb4) qui se lie à une cible spécifique (comme un antigène extracellulaire ou membranaire) et une partie (AMFA1) qui se lie au RM6P-CI.
5/ Greffage de l’AMFA1 sur l es chaîne s oligosaccharidique s de la partie glycosidique d'un anticorps anti-GFP L’anticorps anti-GFP, défini comme Ab, a été testé et soumis à la même procédure que celle décrite dans le point 1/ ci-dessus afin de greffer l'AMFA1 sur les chaînes oligosaccharidiques de l’anticorps Ab. Un conjugué de formule (I) est formé, qui peut indifféremment être représenté par « Ab-AMFA1 » ou « AMFA1-Ab ». Ce conjugué comprend une partie (Ab) qui se lie à une cible spécifique (comme un antigène extracellulaire ou membranaire) et une partie (AMFA1) qui se lie au RM6P-CI.
6 / Greffage de l’AMFA4 sur la fonction amine d e résidu s lysine de la partie peptidique d'un anticorps anti-VEGF humanisé Le couplage entre l'AMFA4 et l'anticorps mAb3 (bevacizumab) est effectué au niveau de la chaîne peptidique du mAb3, en particulier au niveau des résidus lysine selon le protocole décrit ci-dessous. La solution d'anticorps mAb3 et l'AMFA4 sont mis à réagir dans une solution tampon phosphate pendant 24 h à 37 °C sous agitation légère. Les échantillons sont dialysés pendant une nuit contre un tampon phosphate. Un conjugué de formule (I) est formé, qui peut indifféremment être représenté par « mAb3-AMFA4 » ou « AMFA4-mAb3 ». Ce conjugué comprend une partie (mAb3) qui se lie à une cible spécifique (comme un antigène extracellulaire ou membranaire) et une partie (AMFA4) qui se lie au RM6P-CI.
E xemple 3 : Etude des conjugués (I) et de leurs propriétés biologiques
1/ Etude du nombre d’AMFA 1 ou d’AMFA4 liés à une molécule d’anticorps mAb1, mAb2 ou mAb3 Les conjugués AMFA1-mAb1, AMFA1-mAb2, AMFA1-mAb3 et AMFA4-mAb3 ont été analysés par spectrométrie de masse MALDI-TOF en utilisant un spectromètre de masse RapifleX (Bruker) en mode linéaire, afin de quantifier le nombre d'AMFA1 liés à une molécule d’anticorps, selon la méthode adaptée et décrite dans Zhou, Q et al. 2013. Les poids moléculaires de chaque anticorps mAb1, mAb2 et mAb3, ont été mesurés avant et après le couplage avec l’AMFA1 ou l’AMFA4. Les échantillons et les standards ont été dilués à 1 : 5 dans de l'acide formique à 0,1 % dans de l’eau, puis dilués à 1 : 1 dans de l'acide sinapique saturé dans 50 % d'acétonitrile / 0,1 % de TFA. Un μL (microlitre) de ce mélange a été appliqué sur une cible. Les échantillons, les références correspondantes et le contrôle d'étalonnage BSA ont été analysés en double. Un étalonnage en deux points a été réalisé avec les ions [M+H] + et les ions dimères de BSA. Le nombre d’AMFA1 ou d’AMFA4 greffés aux anticorps mAb1, mAb2 ou mAb3 pour obtenir les conjugués de l’invention a été calculé sur la base de la différence des poids moléculaires entre le conjugué « AMFA-Anticorps » et son « Anticorps » témoin correspondant, puis en divisant la différence par le poids moléculaire de chaque AMFA.
Le tableau 1 ci-après présente les données de l'analyse MALDI-TOF de différents lots de conjugués AMFA1-mAb1, AMFA1-mAb2 et AMFA1-mAb3 tels qu’obtenus à l’exemple 2 (points 1/ à 3/).
Lot Métapériodate de sodium Moyenne du nombre d’AMFA par rapport à l’Anticorps ± DS (déviation standard) (de 4 à 7 évaluations) AMFA1-mAb1 1, 2 1 mM 3,3 ± 0,01 AMFA1-mAb1 2, 3 0,2 mM 1 ± 0,1 AMFA1-mAb2 1,2,3 1 mM 2,8 ± 0,3 AMFA1-mAb3 1,2 1 mM 5,8 ± 1
Le tableau 2 ci-après présente les données de l'analyse MALDI-TOF de différents lots de conjugués AMFA4-mAb3 tels qu’obtenus à l’exemple 2 (point 6/).
Lot Méthode de couplage Moyenne du nombre d’AMFA par rapport à l’Anticorps ± DS (4 évaluations) AMFA4-mAb3 1, 2 Lysine-squarate 1,9 ± 0,7
Remarques et c onclusion L'augmentation des masses moléculaires après le greffage de l’AMFA1 ou de l’AMFA4 est une indication du nombre d'AMFA couplés par anticorps. La reproductibilité de la réaction de greffage est indiquée par le faible écart-type du nombre d'AMFA greffés entre les différents essais. Les données des tableaux 1 et 2 démontrent que l’AMFA1 et l’AMFA4 peuvent être facilement greffés sur l'anticorps mAb1, mAb2 ou mAb3, avec des standards de reproductibilité élevés, et que le nombre d'AMFA1 ou d’AMFA4 greffés sur chaque anticorps est maîtrisé en modulant les conditions de réaction. Des concentrations plus faibles de l'agent oxydant, le métapériodate de sodium, permettent un taux de greffage plus faible de l’AMFA1. Le greffage des AMFA de l’invention est reproductible et facilement maîtrisable selon les conditions de réaction.
La variation de la est similaire à celle de la , mais des portions de fermeture 34b en forme de croissant vers l’extérieur sont formées au lieu des portions de fermeture 34b en forme de croissant vers l’intérieur de la . Un premier domaine de fermeture 32a est un ensemble de 10 portions de fermeture 34a, qui forment le motif en forme de Y. Un deuxième domaine de fermeture 32b est une portion de fermeture 34b en forme de croissant. L’aire de fermeture et la densité de fermeture dans la région extérieure 22b sont plus grandes que celles dans la région intérieure 22a. En conséquence, l’aire de fermeture des domaines de fermeture 32 est plus grande dans une portion extérieure du substrat en feuille 22 que dans une portion intérieure du substrat en feuille 22.
La variation de la présente un motif de fermeture 30 composé de portions de fermeture 34 en forme de goutte. Les portions de fermeture 34 ont la même taille les unes que les autres et sont disposées radialement sur le substrat en feuille 22. La portion de fermeture 34 a une extrémité intérieure (une pointe supérieure de la goutte) dirigée ou orientée vers le centre 26 du substrat en feuille 22 et une extrémité extérieure (une pointe inférieure de la goutte) dirigée ou orientée vers l’extrémité périphérique 28 du substrat en feuille 22. Si la portion de fermeture 34 en forme de goutte est divisée en une portion intérieure 34a qui est plus proche de l’extrémité intérieure que de l’extrémité externe et une portion extérieure 34b qui est plus proche de l’extrémité extérieure que de l’extrémité intérieure, l’aire de la portion extérieure 34b de la portion de fermeture 34 est plus grande que l’aire de la portion intérieure 34a de la portion de fermeture 34.
Un domaine de fermeture 32 est une portion de fermeture 34. Comme indiqué ci-dessus, l’aire de fermeture de la portion extérieure du domaine de fermeture 32 (la portion extérieure 34b) est plus grande que celle de la portion intérieure du domaine de fermeture 32 (la portion intérieure 34a). En conséquence, l’aire de fermeture des domaines de fermeture 32 est plus grande dans une portion extérieure du substrat en feuille 22 que dans une portion intérieure du substrat en feuille 22. De plus, l’aire de fermeture et la densité de fermeture dans la région extérieure 22b sont plus grandes que celles dans la région intérieure 22a.
La variation de la présente un motif de fermeture 30 composé de portions de fermeture 34a, 34b en forme de goutte. Les portions de fermeture 34b sont formées en forme de goutte comme les portions de fermeture 34 de la , tandis que les portions de fermeture 34a ont également une forme de goutte, mais seulement comme un contour de goutte. En d’autres termes, les portions de fermeture 34b ferment toutes les ouvertures 24 entourées par le contour de la goutte alors que les portions de fermeture 34a ferment seulement les ouvertures 24 sur le contour de la goutte, mais ne ferment pas les ouvertures 24 entourées par le contour de la goutte. Les portions de fermeture 34a sont plus proches du centre 26 du substrat en feuille 22 que les portions de fermeture 34b.
Les portions de fermeture 34a ont la même taille les unes que les autres et sont disposées radialement sur le substrat en feuille 22. Les portions de fermeture 34b ont également la même taille les unes que les autres et sont disposées radialement sur le substrat en feuille 22. Comme pour les portions de fermeture 34 de la , chacune des portions de fermeture 34a, 34b a une extrémité intérieure et une extrémité extérieure. Si les portions de fermeture 34a, 34b sont divisées en une portion intérieure qui est plus proche de l’extrémité intérieure que de l’extrémité extérieure et une portion extérieure qui est plus proche de l’extrémité extérieure que de l’extrémité intérieure, l’aire de la portion extérieure des portions de fermeture 34a, 34b est plus grande que l’aire de la portion intérieure des portions de fermeture 34a, 34b.
Un premier domaine de fermeture 32a est une portion de fermeture 34a. Un deuxième domaine de fermeture 32b est une portion de fermeture 34b. Comme indiqué ci-dessus, l’aire de fermeture de la portion extérieure des domaines de fermeture 32a, 32b (la portion extérieure des portions de fermeture 34a, 34b) est plus grande que celle de la portion intérieure des domaines de fermeture 32a, 32b (la portion intérieure des portions de fermeture 34a, 34b). En conséquence, l’aire de fermeture des domaines de fermeture 32 est plus grande dans une portion extérieure du substrat en feuille 22 que dans une portion intérieure du substrat en feuille 22. De plus, l’aire de fermeture et la densité de fermeture dans la région extérieure 22b sont plus grandes que celles dans la région intérieure 22a.
La variation de la présente un motif de fermeture 30 composé d’une portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvrant la portion extérieure du substrat en feuille 22. Puisque la portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvre la totalité de la portion extérieure du substrat en feuille 22, le motif de fermeture 30 peut réduire remarquablement le débordement de la composition cosmétique C à la périphérie du tamis 20. Par exemple, la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord intérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau peut être de 27,8 mm, et la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord extérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau (c’est-à-dire le rayon du substrat en feuille 22) peut être de 54,4 mm.
La variation de la présente un motif de fermeture 30 composé d’une portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvrant la portion extérieure du substrat en feuille 22, comme pour la variation de la . Puisque la portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvre la totalité de la portion extérieure du substrat en feuille 22, le motif de fermeture 30 peut réduire remarquablement le débordement de la composition cosmétique C à la périphérie du tamis 20. Par exemple, la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord intérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau peut être de 29 mm, et la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord extérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau (c’est-à-dire le rayon du substrat en feuille 22) peut être de 49 mm.
La variation de la présente un motif de fermeture 30 composé d’une portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvrant partiellement la portion extérieure du substrat en feuille 22. La portion en forme d’anneau la plus extérieure du substrat en feuille 22 n’est pas pourvue de la portion de fermeture 32. Puisque la portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvre la majeure partie de la portion extérieure du substrat en feuille 22, le motif de fermeture 30 peut réduire remarquablement le débordement de la composition cosmétique C à la périphérie du tamis 20. Par exemple, la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord intérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau peut être de 27,8 mm, la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord extérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau peut être de 51,6 mm, et le rayon du substrat en feuille 22 peut être de 56,2 mm.
La variation de la présente un motif de fermeture 30 composé d’une portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvrant la portion extérieure du substrat en feuille 22, comme pour la variation des figures 16 et 17. Puisque la portion de fermeture 32 en forme d’anneau couvre la totalité de la portion extérieure du substrat en feuille 22, le motif de fermeture 30 peut réduire remarquablement le débordement de la composition cosmétique C à la périphérie du tamis 20. Par exemple, la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord intérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau peut être de 31,6 mm, et la distance entre le centre 26 du substrat en feuille 22 et le bord extérieur de la portion de fermeture 32 en forme d’anneau (c’est-à-dire le rayon du substrat en feuille 22) peut être de 51,6 mm.
Effets Selon au moins l’un des modes de réalisation décrits ci-dessus, la portion extérieure du tamis est davantage couverte par le domaine de fermeture que la portion intérieure du tamis. Par conséquent, il est possible de réduire le débordement au niveau de la portion extérieure du tamis du contenant cosmétique.
Un essai a été réalisé en utilisant un contenant cosmétique comprenant un tamis avec le domaine de fermeture tel que montré sur la et un contenant cosmétique comparatif comprenant un tamis sans domaine de fermeture. En poussant le centre du tamis sans motif de fermeture, la composition cosmétique a débordé par la périphérie du tamis. En revanche, aucun débordement (ou un débordement très limité) n’a été constaté à la périphérie du tamis avec le motif de fermeture, sans impact sur le résultat du maquillage
APPLICATEUR COSMÉTIQUE AVEC ESSUYEUR RÉVERSIBLE RÉSUMÉ Les modes de réalisation de la présente divulgation concernent l’application de compositions cosmétiques sur des fibres kératineuses. Dans certains modes de réalisation, un applicateur avec une tête réversible est décrit.
Conformément à un aspect de la présente divulgation, un emballage pour une composition cosmétique à appliquer sur des fibres kératineuses est proposé. L’emballage inclut un applicateur avec une tête associée à une première extrémité d’une tige. La tête est mobile entre un premier état, dans lequel la tête s’étend loin de la tige, et un second état, dans lequel la tête est inversée. L’emballage inclut en outre un contenant définissant un espace interne au moins partiellement rempli de la composition cosmétique et une ouverture dimensionnée et configurée pour recevoir la tête. L’insertion de l’applicateur dans le contenant déplace la tête du premier état au second état, et le retrait de la tête du contenant déplace la tête du second état au premier état.
Conformément à un autre aspect de la présente divulgation, un procédé d’application d’une composition cosmétique sur des fibres kératineuses est fourni. Dans un mode de réalisation, le procédé inclut l’étape d’insertion d’un applicateur ayant une tête dans un contenant au moins partiellement rempli de la composition cosmétique, dans lequel la tête d’applicateur s’engage avec le contenant pour se déplacer d’un premier état à un second état, la tête d’applicateur étant inversée dans le second état. Le procédé inclut en outre les étapes de retrait l’applicateur du contenant, retrait pendant lequel la tête d’applicateur s’engage avec le contenant pour se déplacer du second état au premier état, et de passage de l’applicateur sur les fibres kératineuses. Les fibres kératineuses s’engagent avec les fentes formées dans la tête d’applicateur et sont revêtues de la composition cosmétique disposée à l’intérieur de la cavité.
Dans tout mode de réalisation, le contenant inclut un essuyeur positionné à proximité de l’ouverture, l’essuyeur s’engageant de manière coulissante avec une surface extérieure de la tête lorsque la tête est retirée du contenant.
Où est une consigne de débit d’air dans le conduit 10, est la constante des gaz parfaits, est la température en amont de la vanne EGR 16 mesurée par un capteur de température T3 disposé dans le conduit d’échappement haute pression 7, et est la section maximale corrigée et fournie en entrée du bloc 27 et du sous-bloc 29 par le bloc de réception 25.
Ainsi, la détermination du terme d’augmentation minimale relatif à la perméabilité du conduit 10 de recirculation partielle utilise la bijection réciproque de la fonction de calcul du coefficient de Barré Saint-Venant.
Le bloc 27 comprend de plus un bloc de sélection 30 configuré pour sélectionner la valeur maximale entre le terme d’augmentation minimale relatif à la précision de capteurs de données d’état déterminé par le sous-bloc 28 et le terme d’augmentation minimale relatif à la perméabilité du conduit 10 de recirculation partielle déterminé par le sous-bloc 29. En résultat, le bloc de sélection 30 délivre le terme d’augmentation minimale de la pression amont .
Le module d’élaboration 21 comprend un bloc 31 de calcul d’une pression amont augmentée minimale en fonction du terme d’augmentation minimale déterminé. La pression P2 en sortie de la vanne 15 correspondant sur l’exemple illustré à la pression aval , et cette pression P2 devant rester constante car identique à la pression dans le collecteur 6 devant elle aussi rester constante, la consigne de pression dans le collecteur d’admission 6 en sortie de la vanne 15 est une consigne de pression aval . Il est ainsi possible de déterminer la pression amont augmentée minimale , la pression aval étant fixée à la valeur de la consigne de pression de collecteur d’admission 6. Le bloc 31 de calcul détermine donc la pression amont augmentée minimale telle que :
Le module d’élaboration 21 comprend en outre un bloc 32 de détermination du ratio de détente minimale de la turbine 9 en fonction d’une pression en entrée minimale de la turbine. La pression amont mesurée par le capteur P3 étant identique sur l’exemple illustré à la pression en entrée de la turbine 9, la pression en entrée minimale de la turbine est identique à la pression amont augmentée minimale . Le bloc 32 détermine donc le ratio tel que :
Où la pression en sortie de la turbine est fournie en entrée du bloc 32 par le bloc 25 de réception. Cette pression en sortie de la turbine est constante, les débits ne devant pas changer.
Le bloc 32 envoie le ratio de détente minimal déterminé d’une part en sortie du module d’élaboration 21 et d’autre part dans un bloc 33 de détermination d’un ratio de compression minimal .
Le bloc 33 détermine le ratio de compression minimale , défini comme le rapport entre une pression de sortie minimale du compresseur , c’est-à-dire la pression de suralimentation minimale, et la pression d’entrée du compresseur , qui correspond dans l’exemple illustré à la pression P1. En utilisant le principe de la conservation de la puissance selon lequel la puissance développée par la turbine 9 est égale à la puissance développée par le compresseur 4, la turbine 9 étant entrainée par un arbre commun avec le compresseur 4, le bloc 33 détermine le ratio de compression minimale par exemple par la formule suivante :
Où est la température en entrée de la turbine 9, est le rendement de la turbine 9, est le rendement du compresseur 4, est la température en entrée du compresseur 4 correspondant à la température T1, est le débit gazeux traversant la turbine 9, est le débit gazeux traversant le compresseur 4, est le coefficient adiabatique (coefficient de Laplace) des gaz dans la turbine 9, est le coefficient adiabatique (coefficient de Laplace) des gaz dans le compresseur 4, est la capacité thermique massique des gaz dans la turbine 9 et est la capacité thermique massique des gaz dans le compresseur 4.
Le module d’élaboration 21 comprend enfin un bloc 34 de détermination du ratio de pression de la vanne 15 de réglage de débit des gaz d’admission d’air, défini comme le rapport entre une pression d’entrée minimale de la vanne 15 qui correspond à la pression de sortie minimale du compresseur 4 (pression de suralimentation minimale) et la pression de sortie P2 de la vanne 15 désirée, qui correspond à la consigne de pression dans le collecteur d’admission . Le bloc 34 détermine donc le ratio de pression de la vanne 15 tel que :
Le module d’élaboration 21 envoie en sortie les ratios de pression de la vanne 15 de réglage de débit des gaz d’admission et de détente minimale de la turbine 9, qui sont appliqués par le dispositif 20 par l’intermédiaire des moyens d’actionnement 22 et 23.