INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L’unité de surveillance 46 est propre à déterminer l’état du fonctionnement en utilisant les associations mémorisées.
Le fonctionnement du système de surveillance 46 est maintenant décrit en référence à un exemple de mise en œuvre d’un procédé de surveillance du fonctionnement du calculateur 10, le procédé de surveillance comportant plusieurs étapes qui sont explicitées dans ce qui suit.
L’unité d’ordonnancement 22 ordonne l’exécution d’une première tâche en lui attribuant un identifiant.
A cet effet, l'invention propose une carte d’analyse pour l'analyse d'un échantillon biologique au moyen d'un instrument de diagnostic in vitro, la carte d’analyse comprenant une pluralité de puits formés dans une plaque, des puits contenant au moins un réactif, la carte d’analyse comprenant un canal d’amenée d’un échantillon liquide au puits, caractérisée en ce que chaque puits forme dans ladite plaque un espace interne défini par une surface latérale, ladite surface latérale comprenant au moins une paroi, et en ce que le réactif d'un puits est déposé et séché uniquement sur la surface latérale dudit puits.
Chaque puits traverse la plaque d’une face à une autre face de ladite plaque.
Chaque puits présente plusieurs réactifs différents déposés, préférentiellement uniquement, sur sa surface latérale, lesdits réactifs différents comprenant un premier réactif et un deuxième réactif.
Le premier réactif est susceptible d’être activé par le deuxième réactif puis de réagir avec l’échantillon liquide.
Chaque puits comprend une pluralité de lobes et une pluralité de jonctions connectant les lobes.
Chaque puits présente plusieurs réactifs différents déposés uniquement sur sa surface latérale, lesdits réactifs différents comprenant un premier réactif et un deuxième réactif, et dans laquelle un puits contient au moins le premier réactif déposé sur une paroi d’un premier lobe dudit puits et le deuxième réactif déposé sur une paroi d’un deuxième lobe dudit puits.
Les lobes d’un puits ont une forme elliptique et les jonctions d’un puits sont rectilignes selon une direction de jonction.
Une jonction connecte seulement deux lobes d'un puits et l’ensemble des lobes et des jonctions d’un puits forme une chaîne ouverte.
La carte d’analyse est associée à une orientation d'analyse imposée à la carte d’analyse lors de l'analyse de l'échantillon biologique au moyen de l'instrument de diagnostic in vitro, cette orientation d'analyse étant caractérisée en ce que les faces de la plaque s’étendent dans la direction déterminée, préférentiellement une direction verticale, et dans laquelle un premier lobe d'un puits est connecté à un deuxième lobe dudit puits par une jonction selon une direction de jonction et l’angle entre la direction déterminée et ladite direction de jonction est de préférence supérieur à 10°.
Le diamètre des lobes des puits est supérieur à 0,1 mm, la largeur des jonctions est inférieure à 1 mm et la longueur des jonctions est supérieure à 0,05 mm.
Chaque face de la plaque est recouverte d'un film transparent au moins sur une face destinée à permettre l’analyse de la carte d’analyse.
Les réactifs d'analyse sont aptes à causer une réaction de luminescence en présence d'endotoxines.
L'invention concerne également un procédé de fabrication d'une carte d’analyse comprenant les étapes suivantes : a) fourniture d'une plaque pourvue d'une pluralité de puits, b) disposition de la plaque dans une orientation d'analyse dans laquelle les faces de la plaque s’étendent dans la direction déterminée, c) dépose d'au moins une goutte de liquide de réactif en contact avec surface latérale une paroi de la surface latérale du puits, d) séchage de la au moins une goutte de de réactif et obtention de réactif déposé sur la paroi de la surface latérale du puits.
Ce procédé de fabrication est avantageusement complété par les différentes caractéristiques suivantes prises seules ou selon leurs différentes combinaisons possibles : Le procédé de fabrication comprend une étape e) d’insertion de la plaque entre deux films, et adhésion des films sur la plaque. L'étape c) de dépose de la goutte de réactif comprend des étapes de : c1) mise en place d'une aiguille avec une extrémité de l’aiguille dans l'espace interne d'un puits, c2) formation d'une goutte à l'extrémité de l'aiguille, jusqu'à contact avec une paroi de la surface latérale, c3) retrait de l'aiguille.
L'invention concerne également un procédé de contrôle qualité d’une plaque pourvue d'une pluralité de puits, chaque puits formant dans ladite plaque un espace interne défini par une surface latérale, des puits présentant une pluralité de dépôts de réactifs liquides déposés séparément sur sa surface latérale, comprenant des étapes de : Q1) acquisition d’une image de ladite plaque, Q2) vérification d’absence de liquide entre des dépôts de réactif liquide.
FT-IR (ATR, pur) : 3025 (w), 2869 (m), 1729 (vs), 1303 (m), 1288 (m), 1247 (m), 1222 (s), 1166 (s), 1099 (vs), 1064 (s), 1039 (s), 952 (m), 919 (m), 878 (m), 650 (s). Synthèse d’un hexaalcène issu du Polyol R6405 par estérification directe
Le Polyol R6405 de Perstorp (515,2 g, 622,97 mmol), l’acide 3-cyclohexène-1-carboxylique (565,8 g, 4,485 mol) et du toluène (2 500 mL) sont combinés dans un récipient de réaction équipé d’un condenseur et d’un piège Dean-Stark. Le récipient de réaction est rincé avec de l’azote, de l’acide méthanesulfonique (4,2 g) est ajouté sous agitation et le mélange réactionnel est chauffé au reflux (température interne 114–116 °C).
De l’eau est éliminée de la réaction par distillation azéotropique pendant 16,5 h (le toluène collecté est remplacé). Le mélange réactionnel est refroidi à 20 °C et extrait avec une solution d’hydrogénocarbonate de sodium (100 g) dans de l’eau (1 500 mL). Davantage de toluène (1 000 mL) et de l’eau (400 mL) sont ajoutés et on laisse les phases du mélange se séparer. La phase organique est séparée et lavée avec une solution aqueuse à 1 % d’hydrogénocarbonate de sodium (2 x 1 000 mL), puis avec de l’eau (2 x 750 mL).
La phase organique est collectée et tous les composés volatils sont éliminés sous vide.
Le produit liquide est ensuite séché jusqu’à poids constant sous vide (12 mbars, 55 °C). Ceci fournit le produit d’hexaalcène souhaité (933,5 g). Synthèse d’un hexaépoxyde issu du Polyol R6405 (E3)
Un récipient de réaction est chargé avec l’hexaalcène de Polyol R6405 (500,0 g, 338,75 mmole) et du dichlorométhane (2 500 mL) est ajouté. Le mélange réactionnel est refroidi jusqu’à une température interne de 6 °C et de l’acide 3–chloroperbenzoïque (70,2 % actif, 532,96 g, 2,168 mmole) est ajouté en 5 h avec agitation vigoureuse, tout en maintenant la température interne à 4–6 °C. Le mélange trouble est agité vigoureusement pendant 18 h et laissé à réchauffer jusqu’à 20 °C. La masse de réaction est ensuite filtrée et le solide blanc est lavé avec du dichlorométhane (350 mL). Une solution de sulfite de sodium (100 g) dans de l’eau (1 500 mL) est ajoutée au filtrat obtenu et le mélange biphasique est agité pendant 30 min. On procède à une séparation de phases du mélange et la phase organique est lavée avec de l’eau (2 x 500 mL). La phase organique est collectée et tous les composés volatils sont éliminés sous vide.
Le produit liquide est ensuite séché jusqu’à poids constant sous vide (30 mbars, 40 °C). Ceci fournit le produit d’hexaépoxyde souhaité E3 (492,1 g, 92,5 % de la théorie).
1 H NMR (400 MHz, CDCl 3 ): 4.21-4.00 (m, 12H), 3.66-3.30 (m, 56H), 3.21-3.09 (m, 12H), 2.54-2.43 (m, 3H), 2.27-1.31 (m, 39H).
FT-IR (ATR, pur) : 2868 (m), 1727 (vs), 1305 (m), 1255 (m), 1231 (m), 1215 (m), 1173 (s), 1100 (vs), 1058 (s), 1015 (m), 991 (m), 974 (m), 936 (m), 904 (m), 874 (m), 859 (m), 837 (m), 796 (m), 786 (m).
Exemple Comparatif 1 Pour la comparaison, la résine époxy UviCure S105E et l’oxétane UviCure S130 disponibles dans le commerce (disponibles auprès de Sartomer) ont été utilisés.
L’époxyde cycloaliphatique difonctionnel, vendu comme UviCure® S105 possède la structure suivante :
Expériences de Durcissement L’exemple suivant illustre la vitesse de durcissement par des UV des résines époxy de la présente invention. Pour tous les tests de durcissement ci-dessous, le photoinitiateur SpeedCure 938 (Sartomer) a été utilisé.
Les formulations ont été durcies à des épaisseurs de film de 100 µm sous une lampe Hg en utilisant un instrument de durcissement à bande (Jenton International Ltd., modèle n° JA2000VPXI-0000) avec une vitesse de bande de 15 m/min et une intensité de lampe de 50 % (dose d’UV pour 1 passage : UVV : 58 mJ/cm 2 , UVA : 108 mJ/cm 2 , UVB : 108 mJ/cm 2 , UVC : 20 mJ/cm 2 ). Le substrat utilisé était un papier noir et blanc standard (formulaire Lèneta 3N-31). Les mesures de viscosité ont été réalisées sur un viscosimètre Brookfield (broche n° 31, 25 °C).
Chaque résine époxy testée E1, E2 ou E3 a été mélangée avec de l’UviCure S130 à différents rapports en poids de 0 à 100 % en poids. Les données obtenues pour les mélanges de UviCure S105E et UviCure S130 ont été utilisées comme référence. Le photoinitiateur SpeedCure 938 (Sartomer) a été utilisé à un dosage de 1 % en poids dans les mélanges de résine testés.
La vitesse de durcissement a été évaluée par le nombre de passages sous la lampe requis pour donner un revêtement « non collant » (TF) durci en surface (tel que déterminé lorsque la surface du revêtement ne semble plus collante lorsqu’elle est légèrement touchée) ou la profondeur de durcissement telle que déterminée par le test de « torsion du pouce » (TT) (c’est-à-dire jusqu’à ce qu’aucune marque visible ne soit faite lorsqu’un pouce est pressé vers le bas fermement sur le revêtement avec un mouvement de torsion).
La résistance aux solvants a été testée sur les échantillons durcis en utilisant un test de double frottement avec de la MEK selon la norme ASTM D4752.
la est un schéma du système de contrôle,
la est une représentation de la plaque de la carte d’analyse, après dépôt de gouttes de réactif,
la est une image acquise à l’étape Q0 du procédé de contrôle selon l’invention,
la est une image acquise à l’étape Q1 du procédé de contrôle selon l’invention,
la est une image représentant l’Identification algorithmique de régions d’intérêt des lobes pour chaque puit, où sera vérifié la présence de liquide,
la est une image représentant l’Identification algorithmique de régions d’intérêt des jonctions pour chaque puit, où sera vérifié la présence de liquide dans ces jonctions,
la représente l’extraction des régions d’intérêt des lobes et la vérification algorithmique de la présence de liquide,
la représente l’extraction des régions d’intérêt des jonctions et la vérification algorithmique de la présence de liquide.
Description détaillée Carte d’analyse En référence à la , la carte d’analyse 1 comporte une pluralité de puits 2 pouvant être utilisés pour la mise en place d’un ou de plusieurs réactifs 4. Typiquement, une carte d’analyse comporte plus de 20 puits 2. Dans l'exemple illustré, la carte d'analyse 1 comprend 35 puits 2. Les puits 2 sont formés dans une plaque 3 et chaque puits 2 traverse la plaque 3 d’une première face 3a à une seconde face 3b opposée à la première face 3a. Une plaque 3 est définie généralement comme un élément de surface plane et peu épais. En d’autres termes, une plaque 3 comprend au moins deux faces 3a, 3b planes opposées l’une à l’autre et séparées par une épaisseur peu importante, i.e. l’épaisseur est au moins 10 fois inférieure aux largeurs et longueurs des faces 3a, 3b. Les longueurs et largeurs des faces 3a, 3b de la plaque 3 de la carte d’analyse 1 sont de préférence supérieures à 2 cm, et de préférence inférieures à 10 cm. L’épaisseur de la plaque 3 est de préférence inférieure à 5 mm, de préférence encore, inférieure à 3 mm, et l'épaisseur de la plaque 3 est de préférence supérieure à 1 mm. De préférence, l'épaisseur de la plaque 3 est constante sur la carte d'analyse 1, sauf en présence d'un puits 2 ou d'autres éléments fonctionnels qui creusent la plaque 3.
La plaque 3 peut être réalisée dans des matériaux comme Polypropylène, Polyéthylène, Polystyrène, Polycarbonate, PMMA, COP, POM, ABS, par exemple ou tout thermoplastiques pouvant être fabriqués par procédé de moulage par injection. De préférence, les puits 2 sont régulièrement réparties sur les faces 3a, 3b de la plaque 3, formant un réseau, et par exemple peuvent être alignés en différentes lignes et colonnes, ici par exemple cinq colonnes dans le sens de la largeur de la plaque 3 et sept lignes dans le sens de la longueur de la plaque 3. Une répartition angulaire des puits réactionnelle est également possible. La carte d’analyse 1 comprend également des canaux d'amenée 5a à 5d configurés pour alimenter les puits 2 en échantillon biologique liquide ou en un autre liquide tel qu'un fluide de référence utilisé par exemple pour des puits témoins, afin de remplir les puits 2 de liquide.
Chaque puits 2 présente au moins un réactif 4. Au moins certains réactifs 4 sont aptes à causer une réaction de luminescence en présence d'analytes, et en particulier en présence d'endotoxines. La carte d'analyse 1 peut ainsi être utilisée pour détecter la présence d'endotoxines dans l'échantillon biologique. Même si l’on s’intéresse plus particulièrement à l’analyse d’échantillon biologique pour y détecter une éventuelle présence d'endotoxines, l’invention peut concerner l’analyse d'échantillons biologiques pour détecter d'autres analytes comme par exemple le dosage d’analytes en biochimie ou en immunologie, le dosage de quantité d’ARNs ou d’ADNs en biologie moléculaire, la détection de présence de microorganismes en micro-volume, l’analyse d’antibiogramme en micro-volumes, le détection et quantification de microorganismes pour les applications agroalimentaire, cosmétique, pharmaceutique ou vétérinaire.
En référence à la , chaque puits 2 forme dans la plaque 3 un espace interne 6 défini par une surface latérale 7. La surface latérale 7 s'étend depuis la première face 3a vers la seconde face 3b, le long du puits 2. La surface latérale 7 forme l'interface entre la matière de la plaque 3 et l'espace interne 6. La surface latérale 7 comprend au moins une paroi 8. Dans le cas illustré en , l'espace interne 6 est de section ovale, la surface latérale 7 comprend donc une seule paroi 8. Une surface latérale 7 peut aussi être composée de plusieurs parois 8 comme cela sera illustré plus tard dans un autre mode de réalisation. Ces parois 8 sont rencontrées successivement lorsqu'on parcourt la surface latérale 7. On définit donc une paroi 8 comme une partie de surface latérale 7. Si la surface latérale 7 comprend plusieurs parois 8, ces parois 8 sont séparées des autres parois 8 par des arêtes. Une arête est une ligne d’intersection entre deux parois 8 et marque une discontinuité. Par exemple, l’arête marque une discontinuité angulaire ou de forme. Par exemple, l’arête peut marquer l’intersection entre une paroi 8 circulaire et une paroi 8 rectiligne. Encore par exemple, l’arête peut marquer l’intersection entre deux parois 8 circulaires qui se rejoignent, on peut alors imaginer un espace interne en forme de 8 vide, et donc une surface latérale 7 en forme de ruban formant un chiffre huit.
Chaque puits 2 présente au moins un réactif 4a, 4b ou 4c déposé sur sa surface latérale 7. De préférence, le réactif 4 une fois déposé est sec (déshydraté) et n’est donc pas sous forme liquide. Un réactif 4 forme ainsi un dépôt de matière sèche sur la surface latérale 7. Une carte d’analyse 1 dans laquelle les réactifs 4 sont déposés sur la surface latérale 7 des puits 2 présente plusieurs avantages. Tout d’abord, cela permet de mieux maitriser la position des réactifs 4 dans chaque puits 2. En effet, les réactifs 4 sont plus précisément localisés sur la surface latérale 7 des puits 2 par comparaison à des réactifs qui seraient déposés dans le fond des puits 2 et qui auraient une certaine propension à s’étaler car il n’existe alors pas de paroi angulaire permettant de maintenir les gouttes de réactifs par effet capillaire. Ainsi, il est possible de disposer les réactifs 4 de manière à s'assurer de l'interaction entre réactifs 4 et échantillon biologique même en présence de bulles d'air, par exemple en disposant les réactifs 4 en un endroit de la surface latérale 7 opposé à la direction de propagation des bulles d'air. De surcroît, cette meilleure maitrise de la position des réactifs 4 implique une meilleure interaction entre l’échantillon biologique et le réactif 4 puisque le réactif 4 est concentré sur une partie de la surface latérale 7 d’un puits 2. En outre, comme la position d’un réactif 4 sur la surface latérale 7 d’un puits 2 est connue, il est possible de savoir si l’échantillon biologique a été en contact avec le réactif 4 en vérifiant où l’échantillon biologique est positionné dans le puits 2.
Enfin, dans le cas où plusieurs réactifs 4 sont présents dans chaque puits 2, le fait que les réactifs 4 soient déposés sur la surface latérale 7 des puits 2 permet d’éviter le mélange entre les réactifs 4. En effet, si les réactifs 4 d’un même puits sont déposés sur le fond du puits 2, les réactifs 4 peuvent s’étaler jusqu’à entrer en contact durant l’opération de dépose ou durant la durée du séchage avant déshydratation complète, tandis que déposer sur la surface latérale 7 du puits 2 peut permettre d’empêcher cela. Tout d'abord, la surface latérale 7 du puits 2 présente une longueur bien plus importante que le diamètre (plus grande longueur) du fonds d'un puits 2, permettant d'éloigner beaucoup plus les réactifs les uns des autres. Cet aspect est d'autant plus important que les réactifs 4 sont généralement déposés sous forme de gouttes liquides avant d'être séchés, et ces gouttes ont tendance à s'étaler, risquant de se mélanger si elles sont trop proches. La séparation des réactifs est d'autant plus efficace lorsque deux réactifs 4 sont déposés sur deux parois 8 différentes d'une même surface latérale. Prenons comme exemple un puits 2 dont la surface latérale 7 est composée de deux parois 8 circulaires communicantes, une première paroi 8 et une deuxième paroi 8, de telle sorte que l'espace interne 6 prenne la forme du chiffre 8. Si un premier réactif 4 est déposé en forme de goutte (avant séchage) sur la première paroi 8 et un deuxième réactif 4 est déposé en forme de goutte (avant séchage) sur la deuxième paroi 8, les gouttes de réactifs 4 ne se mélangeront pas, étant séparées par une arête délimitant les deux parois 8. A l'inverse, si les réactifs étaient disposés au fond du puits 2, ils se seraient plus proches, non séparés par une arête, et donc probablement mélangés.
Le fait de déposer le réactif 4 sur la surface latérale 7 d’un puits 2 implique aussi que chaque puits 2 de la plaque 3 ne nécessite pas de fond lors de la dépose du réactif 4 dans chaque puits 2 de la carte d’analyse 1. Cela permet d'abord de relâcher une contrainte importante sur l'agencement respectifs en profondeur de la carte d'analyse 1 et de l'outil utilisé pour la dépose. Cela permet également de faciliter le contrôle qualité d’une plaque 3 remplie de réactifs 4 par ombroscopie, comme cela sera décrit plus tard, puisqu’aucune couche n’empêche le passage de rayons lumineux dans les espaces vides de l’espace interne 6 des puits 2. Une plaque 3 d’une carte d’analyse 1 sans fond permet également une réduction des coûts puisque la carte d’analyse 1 peut directement être insérée entre deux films transparents. Avantageusement, pour protéger les réactifs 4 des puits 2, chaque face 3a, 3b de la plaque 3 de la carte d’analyse 1 est recouverte d’un film transparent sur chaque face ou inséré dans un consommable comportant déjà les deux films après le dépôt et le séchage des réactifs 4 dans les puits 2. En conclusion, la présence de réactifs 4 sur une surface latérale 7 des puits 2 simplifie significativement le procédé de fabrication de la carte d’analyse 1 et le coût de la carte d’analyse 1.
Dans une variante de réalisation non représentée, il est possible de déposer le réactif sur la surface latérale d’un puits bien que la plaque soit pourvue d’un fond. Dans ce cas, l’outil utilisé pour la dépose s’insère partiellement dans le puits 2 sans toucher le fond et le réactif est déposé uniquement sur la surface latérale du puits, il est possible que selon la viscosité du dépôt, le réactif touche le fond de la plaque mais seulement de manière négligeable. Avantageusement, le fond de la plaque peut être opaque ou transparent. Lorsque le fond est opaque, l’analyse de luminescence est réalisée sur la face de la carte d’analyse opposée à celle sur laquelle le fond de la plaque est positionné. Le reste des caractéristiques décrites précédemment sur la plaque ou la carte d’analyse restent inchangées pour cette variante de réalisation, seule la caractéristique selon laquelle la plaque est pourvue d’un fond, diffère des autres modes de réalisation décrits et la méthode de dépose est identique.
Une des étapes courantes d’un traitement de spectre est la détection de chaque pic. Sur la , on a représenté différents pics. L’axe des abscisses correspond aux canaux d’amplitude tandis que l’axe des ordonnées correspond au nombre d’impulsion détectées dans chaque canal. L’unité de traitement peut ensuite déterminer un canal caractéristique de chaque pic, par exemple le canal central autour duquel le pic est centré. Le canal central est usuellement le canal comportant le plus grand nombre d’impulsions détectées.
Chaque pic est délimité par deux canaux, constituant respectivement les bornes inférieures et supérieures de chaque pic. Par la suite, chaque pic est assigné à un ordre , par ordre d’amplitude croissante. Chaque pic d’ordre est identifié par le canal de rang de son canal central, ce dernier étant disposé entre la borne inférieure et la borne supérieure du pic.
Selon une possibilité, on peut délimiter manuellement chaque pic. La détection et la délimitation de chaque pic peuvent également être effectuées de façon automatique, en mettant par exemple en œuvre un opérateur de différenciation d’ordre 2, noté . La figure 3 représente une partie d’un spectre correspondant à un pic. Sur la figure 3, on a également représenté un opérateur de différenciation d’ordre 2 appliqué au spectre , noté . La ligne verticale, qui correspond à un minimum local de , permet d’identifier le canal de rang correspondant au centre du pic. L’opérateur de différenciation peut être un filtre de Savitzky et Golay d’ordre 3 et de largeur de fenêtre 11
La schématise les principales étapes d’un procédé de détermination d’une fonction de calibration, ces étapes étant décrites ci-après.
Etape 100 : acquisition du spectre de calibration . Au cours de cette étape, le détecteur est exposé à un objet de calibration. L’objet de calibration comporte généralement un ou plusieurs isotopes de calibration dont les énergies d’émission sont connues.
Etape 110 : détection des pics du spectre de calibration et assignation d’un canal à chaque pic détecté. On note les rangs des canaux assignés à chaque pic détecté sur le spectre de calibration. désigne le nombre de pics détectés sur le spectre de calibration , qui correspondent respectivement à des énergies d’émission des isotopes de calibration.
Chaque pic du spectre de calibration s’étend selon une largeur à mi-hauteur . Un exemple de largeur à mi-hauteur est représenté sur la .
La largeur à mi-hauteur est également déterminée lors de la détection des pics par des moyens usuels. Par exemple, lorsque la détection des pics est effectuée en appliquant un filtre de Savitsky et Golay tel que décrit en lien avec la figure 3, la largeur à mi-hauteur de chaque pic peut être estimée en déterminant le nombre de canaux entre deux passages par zéro de la fonction de part et d’autre du minimum local correspondant au pic. Sur la figure 3, on a représenté une largeur à mi-hauteur . La largeur à mi-hauteur peut être déterminée par d’autres moyens usuels de logiciels de spectrométrie, suite à une délimitation manuelle des pics.
Etape 120 : prise en compte d’un modèle analytique de la fonction de calibration . Au cours de cette étape, on définit un modèle analytique de la fonction de calibration, par exemple une fonction linéaire ou un polynôme de degré prédéterminé. Le modèle est paramétré par un ensemble de paramètres .