INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Lorsque l’unité de lecture 26 vient lire les valeurs des pixels, elle effectue de préférence cette lecture en mode « global shutter » (terme anglais signifiant littéralement obturation globale), c’est-à-dire que l’ensemble des pixels présente une fenêtre d’intégration temporelle identique et que la sortie de chaque convertisseur analogique-numérique permet d’indiquer une valeur pour chaque pixel d’un macropixel correspondant à un « même instant » de relevé, même si les lectures ou autrement dit les relevés des valeurs présentes dans les pixels qui sont réalisées au moyen d’un convertisseur-analogique partagé peuvent être réalisées séquentiellement au fur et à mesure de la construction d’une trame correspondant à une image.
Bien entendu, la valeur de 4 pixels 20 n’est pas limitative et il est possible de considérer des macropixels avec un nombre différent de pixels 20. En outre, comme cela est connu en soi, il est possible que l’imageur ait différents modes de résolution, les pixels pouvant par exemple être tous lus indépendamment en haute résolution, ou moyennés au sein d’un macropixel pour sortir une unique valeur pour un macropixel pour une plus faible résolution.
Dans une variante où certains pixels 20 sont des pixels colorés, travailler avec des macropixels permet notamment de réaliser l’équivalent d’un pixel avec 4 pixels, ou « sous-pixels » présentant des filtres colorés différents. Ainsi, le macropixel de 4 pixels colorés différents permet de convertir plus aisément un pixel coloré en un niveau de gris pour faciliter la réception des données par la première chaîne de traitement 14. Cet effet est obtenu grâce à la proximité physique d’un pixel avec ses voisins, ce qui rend les informations plus aisément accessibles.
Dans l’exemple décrit, l’unité de lecture 26 présente une fréquence d’acquisition réglable, notamment comprise entre 5 Hertz (Hz) et 100 kiloHertz (kHz).
Il peut être indiqué ici que, selon la fréquence d’acquisition choisie, la durée d’intégration par pixel pourra éventuellement varier mais pas nécessairement, par exemple pour adapter la dynamique des plages de valeurs d’intensité pouvant être mesurées par le détecteur 12. La précision du convertisseur analogique-numérique pourra éventuellement être modulée pour permettre de modifier la fréquence d’acquisition, une fréquence élevée pouvant nécessiter de réduire la précision du convertisseur.
Après l’incubation de la sonde, les cellules ont été rincées avec du PBS chaud avant de recevoir le TBHP ( tert -Butyl hydroperoxid ) , qui est un composé chimique à fort pouvoir oxydant, et générateur de ROS. Les cellules ont été mises en présence ou non de TBHP à 200µM pendant 30 mins à 37 °C 5 % CO 2 , dans du milieu Epilife sans HKGS. À la fin de l’incubation, les microplaques ont été rincées 2 fois au PBS, puis la lecture de la fluorescence a été effectuée avec le FLUOstar BMG Labtech (lecture en bottom, gain = 1500, λex = 485 nm, λem = 520 nm).
Dosage BCA
Après la lecture, le PBS a été évacué et les microplaques ont été congelées à -80°C dans l’attente du dosage protéique réalisé 24h plus tard, par méthode BCA. Les réactifs pour le dosage ont été préparés extemporanément : le réactif A (Acide Bicinchoninique de chez Sigma) et le réactif B (Sulfate de Cuivre de chez Sigma) ont été mélangés au ratio 1 pour 50. Le dosage colorimétrique est basé sur la réduction du cuivre (B) par les protéines, le rendant réactif avec l’acide Bicinchoninique présent (A). Les résultats de quantification de fluorescence des ROS précédemment obtenus (RFU) ont alors été normalisés avec la quantité de protéines mesurée dans chaque puits (en µg).
L’analyse statistique des résultats a été faite à l’aide du logiciel Microsoft Excel. Cette analyse consiste en un calcul de la moyenne, de l’écart-type et de l’intervalle de confiance (α = 0,05) de la fluorescence mesurée (RFU) normalisée par la quantité de protéines par puits (µg). La significativité des différences observées entre les échantillons témoins et les échantillons traités est mesurée par le test de Student, qui est dit significatif si sa valeur est inférieure à 0,05 (* p<0,05 ; ** p<0,01 ; *** p<0,001).
5.2. Résultats Les résultats sont montrés à la .
Ils montrent la production de ROS dans les KHN (exprimée en unités de fluorescence relative) dans chacune des conditions évaluées, c’est-à-dire :
Contrôle non-stressé, Contrôle stressé au TBHP (200µM), Contrôle stressé au TBHP (200µM), traité avec de la vitamine E (contrôle positif), Contrôle stressé au TBHP (200µM), traité avec de la vitamine C (contrôle positif), Condition stressée au TBHP (200µM), traitée avec l’extrait de mangoustan fermenté à la dilution 1% (tel qu’obtenu à l’exemple 1), Condition stressée au TBHP (200µM), traitée avec l’extrait de kombuchaNépal (préparé selon le procédé décrit précédemment) à la dilution 3%, Condition stressée au TBHP (200µM), traitée avec l’association Mangoustan fermenté (tel qu’obtenu à l’exemple 1) à la dilution 1% + kombucha Népal (préparé selon le procédé décrit précédemment) à la dilution 3%.
Les résultats confirment que le TBHP, qui est un composé chimique à fort pouvoir oxydant, induit une très forte augmentation de la production de ROS dans les KHN stressés par le TBHP avec une augmentation de + 1583%, par rapport au témoin non stressé.
Les résultats confirment également que la vitamine E et la vitamine C possèdent des propriétés antioxydantes décrites dans la littérature (utilisés comme contrôles positifs). On observe pour la vitamine E testée à 25µM une diminution de de la production de ROS -65% et pour la vitamine C testée à 100µg/mL une diminution de la production de ROS de -37%, par rapport au témoin stressé au TBHP.
Concernant les extraits utilisés, on observe que l’extrait de mangoustan fermenté (testé à 1%) et le Kombucha Népal (testé à 3%), testés seuls, ne présentent pas d’effet inhibiteur sur la production des ROS.
Toutefois, et de manière surprenante, on constate que l’association de ces deux extraits (extrait de mangoustan fermenté à 1% et Kombucha Népal à 3%) permet une diminution forte et significative de la production de ROS (-36% par rapport au témoin stressé).
5.3. Conclusions Ces résultats montrent donc que l’association d’un extrait de mangoustan fermenté et d’un extrait de kombucha présente un effet protecteur équivalent à la vitamine C (contrôle positif) contre la production des ROS dans les kératinocytes humains normaux stressés par le TBHP.
Ainsi, ces résultats démontrent que l’association des extraits de mangoustan fermenté et de kombucha possède une forte activité antioxydante.
Exemple 6 : Exemples de compositions cosmétiques L’extrait fermenté d’écorces de fruits de mangoustan tel que préparé à l’exemple 1 est formulé dans les compositions illustratives et non limitatives suivantes, préparées selon les méthodes classiques de formulation en cosmétique.
6.1. Composition sous la forme d’une lotion Ingrédients % en poids Glycérine 6,0000 Butylène Glycol 5,0000 Alcool Cétylique 1,0000 Polyisobutene Hydrogéné 9,000 Extrait de mangoustan fermenté* 0,2000 Parfum, Neutralisants, Conservateurs qs Eau Purifiée qsp 100%
Selon un mode particulier, ledit extrait fermenté d’écorces de fruits de mangoustan selon l’invention, seul ou associé audit extrait de kombucha tel que décrit ci-dessus, ou ladite composition cosmétique en contenant est appliqué sur une peau âgée ou présentant des signes de vieillissement et/ou une peau exposée à un stress, et/ou fatiguée, et/ou présentant un teint terne et inhomogène.
Par « peau exposée à un stress », on entend que la peau est soumise à un stress d’origine endogène ou exogène, notamment un stress oxydant susceptible d’induire des réactions cutanées non pathologiques inesthétiques – par ex. la peau est visiblement fatiguée et/ou terne et sans éclat.
De façon avantageuse, les compositions comprenant de l’extrait fermenté d’écorces de fruits de mangoustan employées dans le cadre du procédé cosmétique de l’invention sont celles décrites ci-dessus.
Utilisation s de l’extrait fermenté d’écorces de fruits de mangoustan
Un autre objet de l’invention porte sur l’utilisation cosmétique de l’extrait fermenté d’écorces de fruits de mangoustan selon l’invention pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, en tant qu’actif cosmétique destiné à favoriser et/ou renforcer la fermeté, la densité et/ou la tension de la peau, et/ou favoriser et/ou renforcer l’élasticité, l’extensibilité et la résilience biomécanique de la peau et ainsi prévenir et/ou diminuer l’altération de la souplesse de la peau et/ou la formation de rides et ridules et/ou prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané.
Un autre objet de l’invention porte sur l’utilisation cosmétique d’au moins un extrait fermenté de fruits d’écorces de mangoustan selon l’invention et d’au moins un extrait de kombucha, tel que décrit ci-dessus, pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, comme association d’actifs cosmétiques destinée à prévenir et/ou diminuer les stress oxydant des cellules cutanées et ainsi favoriser et/ou stimuler la vitalité des cellules cutanées, et/ou favoriser et/ou stimuler l’homogénéité ou de l’éclat du teint.
EXEMPLES L'invention est illustrée par les exemples non limitatifs suivants. Les % sont exprimés en poids de matière première par rapport au poids total de la composition, sauf indication contraire.
Exemple 1 : Obtention d’ un extrait fermenté d’écorces de fruits de mangoustan selon l’invention
1.1. Matériel et méthodes Consortium de micro-organismes Les micro-organismes faisant partie du consortium comprennent :
- au moins une bactérie lactique appartenant au genre Lactobacillus ou Pediococcus ,
- au moins une levure appartenant au genre Saccharomyces , Schyzosaccharomyces ou Torulaspora , et
- au moins une bactérie acétique appartenant au genre Acetobacter , Gluconobacter ou Komagataeibacter.
Préparation des écorces de fruits de mangoustan Des fruits de mangoustan sont préalablement séchés puis les écorces sont récupérées et broyées afin d’obtenir des particules ayant une taille comprise entre 0,5mm et 1mm.
Préparation du milieu nutritif Un thé est préparé à partir de 5 g/l à 10 g/l de feuilles de thé infusées durant 10 à 60 min à 70°C à 90°C. Du saccharose est ensuite dissous dans la phase aqueuse à une concentration comprise entre 20 g/l et 100 g/l, en général de 50 g/l. Le saccharose peut notamment être remplacé par un mélange de glucose et fructose.
Procédé de fermentation Une fermentation d’écorces de fruits de mangoustan a été effectuée selon un procédé comprenant les étapes suivantes :
Il est entendu dans la présente description que : - les tensioactifs anioniques carboxylates comprennent au moins une fonction carboxylique ou carboxylate (-COOH ou -COO - ), et peuvent éventuellement comprendre en outre une ou plusieurs fonctions sulfate et/ou sulfonate; - les tensioactifs anioniques sulfonates comprennent au moins une fonction sulfonate (-SO 3 H ou -SO 3 - ), et peuvent éventuellement comprendre en outre une ou plusieurs fonctions sulfate, mais ne comprennent pas de fonction carboxylate; et - les tensioactifs anioniques sulfates comprennent au moins une fonction sulfate mais ne comprennent pas de fonction carboxylate ou sulfonate.
Les tensioactifs anioniques carboxylates susceptibles d'être utilisés comportent donc au moins une fonction carboxylique ou carboxylate (-COOH ou -COO - ).
Ils peuvent être choisis parmi les composés suivants : les acides gras, les acylglycinates, les acyllactylates, les acylsarcosinates, les acylglutamates ; les acides alkyl-D-galactoside-uroniques, les acides alkyléthercarboxyliques, les acides alkyl(aryl en C 6 -C 30 )éthercarboxyliques, les acides alkylamidoéthercarboxyliques ; ainsi que les sels de ces composés; et leurs mélanges ; les groupes alkyle et/ou acyle de ces composés comportant de 6 à 30 atomes de carbone, notamment de 12 à 28, encore mieux de 14 à 24, voire de 16 à 22, atomes de carbone ; le groupe aryle désignant de préférence un groupe phényle ou benzyle ; ces composés pouvant être polyoxyalkylénés, notamment polyoxyéthylénés et comportant alors de préférence de 1 à 50 motifs oxyde d'éthylène, mieux de 2 à 10 motifs oxyde d'éthylène.
Préférentiellement, les tensioactifs anioniques carboxylates sont choisis parmi, seuls ou en mélange : - les acides gras ; - les acylglutamates notamment en C 6 -C 24 , voire en C 12 -C 20 , tels que les stéaroylglutamates, et en particulier le stéaroylglutamate de disodium ; - les acylsarcosinates notamment en C 6 -C 24 , voire en C 12 -C 20 , tels que les palmitoylsarcosinates, et en particulier le palmitoylsarcosinate de sodium ; - les acyllactylates notamment en C 12 -C 28 , voire en C 14 -C 24 , tels que les béhénoyllactylates, et en particulier le behenoyllactylate de sodium ; - les acylglycinates en C 6 -C 24 , notamment en C 12 -C 20 ; - les alkyl(C 6 -C 24 )éthercarboxylates, et notamment les alkyl(C 12 -C 20 ) éthercarboxylates ; - les acides alkyl(C 6 -C 24 ) (amido) éther carboxyliques polyoxyalkylénés, en particulier ceux comportant de 2 à 50 groupements oxyde d'éthylène; en particulier sous forme de sels de métaux alcalins ou alcalino-terreux, d'ammonium, ou d'aminoalcool.
Parmi les tensioactifs carboxyliques ci-dessus, on peut tout particulièrement citer les tensioactifs de type acide gras, notamment en C 6 -C 30 . Ces tensioactifs sont de préférence choisis parmi les composés de formule (a) suivante : R-C(O)-OX (a) avec - X désignant un atome d’hydrogène, un ion ammonium, un ion issu d’un métal alcalin ou alcalinoterreux ou un ion issu d’une amine organique, de préférence un atome d’hydrogène, et - R désignant un groupement alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé de 5 à 29 atomes de carbone. R désigne de préférence un groupement alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé de 7 à 23 atomes de carbone, de préférence de 11 à 21 atomes de carbone.
Parmi les acides gras, on peut citer les acides laurique, palmitique, myristique, stéarique, oléique, béhénique.
Les acides gras sont avantageusement choisis parmi l’acide palmitique, l’acide myristique, l’acide stéarique et leurs mélanges.
Parmi les tensioactifs carboxyliques ci-dessus, on peut tout particulièrement citer les tensioactifs de type sarcosinate, notamment choisis parmi les alcyl(C 6 -C 30 )sarcosinates de formule (I) suivante : R-C(O)-N(CH 3 )-CH 2 -C(O)-OX (I) avec - X désignant un atome d’hydrogène, un ion ammonium, un ion issu d’un métal alcalin ou alcalinoterreux ou un ion issu d’une amine organique, de préférence un atome d’hydrogène, et - R désignant un groupement alkyle linéaire ou ramifié, de 5 à 29 atomes de carbone. R désigne de préférence un groupement alkyle linéaire ou ramifié, de 8 à 24 atomes de carbone, de préférence de 12 à 20 atomes de carbone.
Parmi les les alcyl(C 6 -C 30 )sarcosinates de formule (I) utilisables dans la présente composition, on peut citer les palmitoylsarcosinates, les stéaroylsarcosinates, les myristoylsarcosinates, les lauroylsarcosinates, et les cocoylsarcosinates, sous forme acide ou sous forme salifiée.
Le ou les tensioactifs anioniques de type sarcosinate sont avantageusement choisis parmi le lauroylsarcosinate de sodium, la stearoyl sarcosine, la myristoyl sarcosine, et leurs mélanges, de préférence parmi la stearoyl sarcosine, la myristoyl sarcosine, et leurs mélanges.
Parmi les tensioactifs carboxyliques ci-dessus, on peut également citer les acides alkyl(amido)éther carboxyliques polyoxyalkylénés et leurs sels, en particulier ceux comportant de 2 à 50 groupements oxyde d'alkylène, en particulier d'éthylène, tels que les composés proposés par la société KAO sous les dénominations AKYPO.
Les acides alkyl(amido)éther carboxyliques polyoxyalkylénés susceptibles d’être utilisés sont de préférence choisis parmi ceux de formule (II) : R1-(OC 2 H 4 ) n -OCH 2 COOA (II) dans laquelle : - R1 représente un radical alkyle ou alcényle linéaire ou ramifié en C 6 -C 24 , un radical alkyl(C 8 -C 9 )phényle, un radical R 2 CONH-CH 2 -CH 2 - avec R2 désignant un radical alkyle ou alcényle linéaire ou ramifié en C 9 -C 21 ; de préférence R1 est un radical alkyle en C 8 -C 20 , de préférence en C 8 -C 18 , et aryle désigne de préférence phényle, - n est un nombre entier ou décimal (valeur moyenne) variant de 2 à 24, de préférence de 2 à 10, - A désigne H, ammonium, Na, K, Li, Mg ou un reste monoéthanolamine ou triéthanolamine.
Exemple 1 : PHA à chaine latérale R 1 représentant un groupe n-octylènyle insaturée à 10% linéaire et R 2 représentant un groupe n-pentyle
[Chem. 24] :
Montage du mode de fermentation croissance discontinue alimenté : Le milieu de fermentation est régulé en température-pression d’oxygène dissous et pH (non représenté) Voir en annexe. Le procédé d’obtention est réalisé à l’aide de trois milieux de culture distincts. Le premier milieu de culture défini MC1 « inoculum » est utilisé pour la préparation de la préculture. Le second milieu de culture défini MC2 « bach » est utilisé pour la croissance en discontinue non alimentée du microorganisme avec les sources carbonées primaires dans les fioles de Fernbachs. Le troisième milieu de culture défini MC3 « maintenance » est utilisé pour l’alimentation discontinue, ou maintenance, de la fermentation avec les sources carbonées d’intérêt à un débit calibré en fonction de la croissance du microorganisme.
Préparation de l’exemple 1’ : Copolymère PHA à chaine latérale R 1 représentant un groupe n-octalènyle insaturée à 5% et R 2 représentant un groupe n -hexyle [Chem. 25] : Le copolymère de l’exemple 1’ (5% d’insaturation et chaine R 2 représentant n-hexyle) a été préparé selon le mode opératoire décrit pour l’exemple 1, avec la même composition de la solution de microéléments que celle décrite dans l’exemple 1 et avec les compositions de milieu de culture suivantes : Ingrédients en gramme par litre MC1 « inoculum » MC2 « batch » MC3 « maintenance » (NH 4 ) 2 SO 4 4,7 4,7 Na 2 HPO 4 ; 7H 2 O 12 9 KH 2 PO 4 2,7 2,03 MgSO 4 ; 7H 2 O 0,8 1,03 Nutrient Broth 3 / Acide nonanoïque / 0.95 950 Acide undécylènique 0.05 50 Solution Microéléments / 10 NaOH 2N QSP pH=6,8 Eau milliQ QSP 1000 g Le copolymère de PHA de l’exemple 1’ a entièrement été caractérisé par méthode spectroscopique et spectrométrique et est conforme à la structure chimique attendue, avec un taux d’insaturation est de 5%. Exemple 1’’ : Copolymère PHA à chaine latérale R 1 représentant un groupe n-octalènyle insaturée à 10% linéaire et R 2 représentant un groupe n-hexyle Le copolymère de l’exemple 1’’ (à 10% d’insaturation et chaine R 2 représentant n-hexyle) a été préparé selon le mode opératoire décrit pour l’exemple 1, avec la même composition de la solution de microéléments que celle décrite dans l’exemple 1 et avec les compositions de milieu de culture suivantes : Ingrédients En gramme par litre MC1 « inoculum » MC2 « batch » MC3 « maintenance » (NH 4 ) 2 SO 4 4,7 4,7 / Na 2 HPO 4 ; 7H 2 O 12 9 / KH 2 PO 4 2,7 2,03 / MgSO 4 ; 7H 2 O 0,8 1,03 / Nutrient Broth 3 / / Acide nonanoïque / 0.90 900 Acide undécylènique / 0.1 100 Solution Microéléments / 10 / NaOH 2N QSP pH=6,8 Eau milliQ QSP 1000 g Le PHA a entièrement été caractérisé par méthode spectroscopique et spectrométrique et est conforme à la structure chimique attendue. Exemple 1’’’ : Copolymère PHA à chaine latérale R 1 représentant un groupe n-octalènyle insaturé à 30 % linéaire et R 2 représentant un groupe n-pentyle Le copolymère de l’exemple 1’’’ (à 30% d’insaturation et chaine R 2 représentant n-pentyle) a été préparé selon le mode opératoire décrit pour l’exemple 1, avec la même composition de la solution de microéléments que celle décrite dans l’exemple 1 et avec les compositions de milieu de culture suivantes : Ingrédients En gramme par litre MC1 « inoculum » MC2 « batch » MC3 « maintenance » (NH 4 ) 2 SO 4 4,7 4,7 / Na 2 HPO 4 ; 7H 2 O 12 9 / KH 2 PO 4 2,7 2,03 / MgSO 4 ; 7H 2 O 0,8 1,03 / Nutrient Broth 3 / / Acide octanoïque / 0.70 700 Acide undécylènique / 0.3 300 Solution Microéléments / 10 / NaOH 2N QSP pH=6,8 Eau milliQ QSP 1000 g Le copolymère PHA a entièrement été caractérisé par méthode spectroscopique et spectrométrique et est conforme à la structure chimique attendue. Exemple 2: Poly(3-HydroxyOctanoate-co-Undécenoate) 10 % insaturations greffés à 100 % avec l’acide thiolactique (Composé de l’exemple 1 greffé par acide thiolactique TLA) :
Selon un mode de réalisation, R 3 est choisi parmi les groupes méthyle, éthyle, propyle, butyle et isopropyle.
Dans la formule (IIb), i indique le nombre de générations et correspond ainsi au nombre de répétitions du groupe silylalkyle.
Par exemple, lorsque le nombre de générations est égal à un, le dendrimère carbosiloxane peut être représenté par la formule générale montrée ci-dessous, dans laquelle Y, R 1 , R 2 et R 3 sont tels que définis ci-dessus, R 12 représente un atome d’hydrogène ou est identique à R 1 ; a 1 est identique à a i . De préférence, le nombre moyen total de groupes OR 3 dans une molécule est dans la plage de 0 à 7.
[Chem. 18] :
Lorsque le nombre de générations est égal à 2, le dendrimère carbosiloxane peut être représenté par la formule générale ci-dessous, dans laquelle Y, R 1 , R 2 , R 3 et R 12 sont les mêmes que définis ci-dessus ; a 1 et a 2 représentent le ai de la génération indiquée. De préférence, le nombre moyen total de groupes OR 3 dans une molécule est dans la plage de 0 à 25.
[Chem. 19] :
Dans le cas où le nombre de générations est égal à 3, le dendrimère carbosiloxane est représenté par la formule générale ci-dessous, dans laquelle Y, R 1 , R 2 , R 3 et R 12 sont les mêmes que définis ci-dessus ; a 1 , a 2 et a 3 représentent le ai de la génération indiquée. De préférence, le nombre moyen total de groupes OR 3 dans une molécule est dans la plage de 0 à 79.
[Chem. 20] :
Un polymère vinylique ayant au moins un motif dérivé de dendrimère carbosiloxane possède une chaîne moléculaire latérale contenant une structure de dendrimère carbosiloxane, et peut être issu de la polymérisation : (Ab) de 0 à 99,9 parties en poids d’un monomère vinylique ; et (Bb) de 100 à 0,1 parties en poids d’un dendrimère carbosiloxane contenant un groupe organique polymérisable par voie radicalaire, représenté par la formule générale (I) telle que définie ci-dessus.
Le monomère de type vinyle qui est le composant (Ab) dans le polymère vinylique ayant au moins un motif dérivé de dendrimère carbosiloxane est un monomère de type vinyle qui contient un groupe vinyle polymérisable à l’aide de radicaux.