INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Ainsi, en cas de défaillance d’une batterie d’alimentation, celle-ci peut être remplacée par la batterie de secours. Etant donné que la batterie de secours n’est pas utilisée dans le mode d’alimentation normal, son niveau de charge est en principe maximal lorsque le système de propulsion électrique passe en mode d’alimentation de secours, de sorte que l’énergie électrique qu’elle contient est connue avec une bonne précision. En dimensionnant la batterie de secours pour permettre d’alimenter les moteurs électriques pendant une durée prédéterminée permettant d’effectuer au moins un atterrissage d’urgence, alors la marge d’énergie électrique embarquée dans le véhicule aérien peut être significativement réduite par rapport aux solutions de l’art antérieur. En effet, dans les solutions de l’art antérieur, il est nécessaire de prévoir une marge pour chaque batterie d’alimentation, du fait que chaque batterie d’alimentation peut être utilisée pour palier à une défaillance d’une autre batterie d’alimentation et à un moment où le niveau de charge, potentiellement faible, ne permet pas d’estimer précisément l’énergie électrique disponible dans chaque batterie d’alimentation. Selon la présente divulgation, la batterie de secours peut alimenter tous les moteurs électriques et, quand elle commence à être utilisée (c’est-à-dire au début de la situation d’urgence créée par la défaillance d’une batterie d’alimentation), la batterie de secours a toujours un niveau de charge maximal permettant de connaître avec précision l’énergie électrique disponible.
Dans des modes particuliers de réalisation, le système de propulsion électrique peut comporter en outre l'une ou plusieurs des caractéristiques optionnelles suivantes, prises isolément ou selon toutes les combinaisons techniquement possibles.
Dans des modes particuliers de réalisation, le système de propulsion électrique comporte un module de détection de défaillance des batteries d’alimentation et un module de commande configuré pour mettre en œuvre le mode d’alimentation normal lorsqu’aucune défaillance de batterie d’alimentation n’est détectée et pour mettre en œuvre le mode d’alimentation de secours lorsqu’une défaillance d’au moins une batterie d’alimentation est détectée.
Dans des modes particuliers de réalisation, le réseau de distribution électrique comporte des premiers moyens de commutation adaptés à connecter/déconnecter la batterie de secours des moteurs électriques, et le module de commande est configuré pour commander les premiers moyens de commutation pour :
dans le mode d’alimentation normal : déconnecter la batterie de secours des moteurs électriques, dans le mode d’alimentation de secours : connecter la batterie de secours à au moins un moteur électrique.
Dans des modes particuliers de réalisation, le réseau de distribution électrique comporte en outre des seconds moyens de commutation adaptés à connecter/déconnecter les batteries d’alimentation aux moteurs électriques, et le module de commande est configuré pour commander les seconds moyens de commutation pour :
dans le mode d’alimentation normal : connecter les batteries d’alimentation aux moteurs électriques, dans le mode d’alimentation de secours : déconnecter chaque batterie d’alimentation détectée comme défaillante par le module de détection de défaillance.
Dans des modes particuliers de réalisation, la batterie de secours est de tension nominale inférieure aux tensions nominales respectives des batteries d’alimentation.
Dans des modes particuliers de réalisation, la batterie de secours est de tension nominale inférieure aux tensions nominales respectives des batteries d’alimentation, et le réseau de distribution électrique est configuré de sorte que la batterie de secours est connectée aux moteurs électriques dans le mode d’alimentation normal et dans le mode d’alimentation de secours, et de sorte que la batterie de secours commence à alimenter un moteur électrique lorsque la tension aux bornes de la batterie d’alimentation qui alimente ledit moteur électrique devient inférieure à la tension aux bornes de la batterie de secours.
Dans des modes particuliers de réalisation, la batterie de secours est connectée à chaque moteur électrique en parallèle d’au moins une batterie d’alimentation.
Dans des modes particuliers de réalisation, le système de propulsion électrique comporte un module de détection de défaillance configuré pour détecter le passage du mode d’alimentation normal vers le mode d’alimentation de secours.
Dans l’oligonucléotide linéaire selon l’invention, la portion B1c peut comprendre de 17 à 27 nucléotides et, à titre d’exemples particuliers, 18 ou 25 nucléotides. Par ailleurs, la portion B1c présente une séquence nucléotidique complémentaire à la séquence nucléotidique de la portion B1 présente dans l’amorce BIP utilisée lors de l’amplification LAMP à deux amorces. La température de fusion (Tm) de B1-B1c est notamment supérieure à la température utilisée lors de l’amplification. La Tm de B1-B1c est supérieure à la température utilisée lors de l’amplification avantageusement d’au moins 5°C, notamment d’au moins 7°C et, en particulier, d’au moins 10°C. L’homme du métier pourra trouver des informations additionnelles quant à ces portions dans [1] .
Dans l’oligonucléotide linéaire selon l’invention, la portion B2c peut comprendre de 15 à 30 nucléotides et, à titre d’exemples particuliers, 18 ou 22 nucléotides.
Dans l’oligonucléotide linéaire selon la présente invention, lorsque Int ou Int’ représente une portion comprenant au moins un nucléotide, cette dernière peut comprendre jusqu’à 3 nucléotides, 10 nucléotides, 30 nucléotides, 50 nucléotides et voire 70 nucléotides et ne comprend aucune structure comprenant au moins une entité E apte à se lier, directement ou indirectement, à un analyte d’intérêt.
Avantageusement, l’oligonucléotide linéaire selon l’invention comprend moins de 180 nucléotides, notamment moins de 160 nucléotides, en particulier moins de 150 nucléotides, plus particulièrement moins de 140 nucléotides et tout particulièrement moins de 130 nucléotides.
Dans certains modes de réalisation, l’oligonucléotide linéaire selon l’invention peut comprendre moins de 130 nucléotides, notamment moins de 120 nucléotides, en particulier moins de 110 nucléotides, plus particulièrement moins de 100 nucléotides et tout particulièrement moins de 90 nucléotides, notamment lorsque la ou les structures ou portions comprenant au moins une entité E apte à se lier, directement ou indirectement, à un analyte d’intérêt ne présente(nt) aucun nucléotide.
Avec une telle taille, la synthèse chimique de cet oligonucléotide est facilitée et le coût de cette synthèse et, par conséquent, le coût du procédé selon l’invention sont moindres.
La structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ dans l’oligonucléotide selon l’invention peut ne comprendre qu’une entité E telle que précédemment définie. Dans cette première variante, la structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ consiste en une entité E. En d’autres termes, cette entité E est liée : - via une liaison covalente, à l’extrémité 5’ de la portion F2, ou - via une liaison covalente, à l’extrémité 3’ de la portion B2c, ou - soit via une première liaison covalente à l’extrémité 3’ de F2 et via une seconde liaison covalente à l’extrémité 5’ de F1, ou - soit via une première liaison covalente à l’extrémité 3’ de F1 et via une seconde liaison covalente à l’extrémité 5’ de B1c, ou - soit via une première liaison covalente à l’extrémité 3’ de B1c et via une seconde liaison covalente à l’extrémité 5’ de B2c.
Dans une deuxième variante, la structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ dans l’oligonucléotide selon l’invention peut comprendre, en plus d’une entité E telle que précédemment définie, au moins un autre élément permettant de lier l’entité E à l’extrémité 5’ de la portion F2, à l’extrémité 3’ de la portion F2, à l’extrémité 3’ de la portion F1, à l’extrémité 5’ de la portion F1, à l’extrémité 5’ de la portion B1c, à l’extrémité 3’ de la portion B1c, à l’extrémité 5’ de la portion B2c et/ou à l’extrémité 3’ de la portion B2c. Cet élément additionnel est connu sous l’expression « bras de liaison » et sert à améliorer l’accessibilité de l’entité E. L’homme du métier connaît différents exemples de tels éléments utilisables dans le cadre de la présente invention [5, 6] . A titre d’exemples, on peut citer une molécule nucléotidique telle que précédemment définie et notamment une séquence comprenant plusieurs bases thymine et notamment 10 bases thymine, un polymère comme, par exemple, un poly-éthylène glycol (PEG) ou une structure moléculaire streptavidine-biotine. Ces deux derniers exemples (polymère et structure moléculaire) sont notamment plus adaptés aux structures Sa, Sd, Sa’ et Sd’ dans l’oligonucléotide selon l’invention. Les liaisons mises en œuvre dans cette variante sont des liaisons non covalentes et de faible énergie telles que des liaisons hydrogène ou des liaisons de Van der Waals et/ou des liaisons de forte énergie de type liaisons covalentes.
Dans une troisième variante, la structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ dans l’oligonucléotide selon l’invention peut comprendre plusieurs entités E telles que précédemment définies, identiques ou différentes. Dans cette variante, deux entités E successives peuvent éventuellement être séparées par un bras de liaison. De même, ces entités peuvent éventuellement être liées à l’extrémité 5’ ou 3’ de la portion adjacente via un bras de liaison. Enfin, lorsque la structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ présente plusieurs bras de liaison, ces derniers peuvent être identiques ou différents.
Dans un premier mode de réalisation, la ou les entités E présente(s) au niveau de la structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ dans l’oligonucléotide selon l’invention sont aptes à se lier directement à au moins un analyte d’intérêt. Une entité E selon ce mode de réalisation peut également être désignée, dans la présente, par l’expression « entité de reconnaissance ».
Cette entité peut être toute molécule capable de former avec l’analyte à détecter une paire d’éléments formant une liaison, également désignée par l’expression « paire de liaison » ou, en anglais, « binding pair ». L’entité E et l’analyte correspondant aux deux partenaires de cette paire de liaison. Les liaisons mises en œuvre dans la liaison analyte-entité sont avantageusement des liaisons non covalentes et de faible énergie telles que des liaisons hydrogène ou des liaisons de Van der Waals et/ou des liaisons de forte énergie de type liaisons covalentes. Des liaisons non covalentes et de faible énergie seront notamment mises en œuvre lorsque l’entité E se trouve dans l’une quelconque des portions ou structures précitées et, en particulier, dans la portion Sb, Sb’, Int, Int’’, Sc ou Sc’. Des liaisons de forte énergie pourront être mises en œuvre dans les structures Sa, Sa’, Sd et Sd’. En effet, dans ces structures, des liaisons de forte énergie n’affecteront pas l’amplification LAMP.
La ou les entités de reconnaissance utilisées sont donc dépendantes du ou des analytes à détecter. En fonction de ce ou des derniers, l’homme du métier saura, sans effort inventif, choisir la ou les entités les plus adaptées. Une entité de reconnaissance peut être choisie, par exemple, dans le groupe constitué par un glucide ; un peptide tel qu’un peptide antimicrobien ou un MIP pour « MHC class I peptide » i.e. un peptide associé au CMH-1 (pour « Complexe Majeur d’Histocompatibilité-1 ») ; un antigène ; un épitope ; une protéine ; une glycoprotéine ; une enzyme ; un substrat enzymatique ; un récepteur membranaire ou nucléaire ; un agoniste ou un antagoniste d’un récepteur membranaire ou nucléaire ; une toxine ; un anticorps polyclonal ou monoclonal ; un fragment d’anticorps tel qu’un fragment Fab, F(ab’) 2 , Fv ou un domaine hypervariable (ou CDR pour « Complementarity Determining Region ») ; une molécule nucléotidique ; et un aptamère.
A noter qu’une entité formant une paire de liaisons avec un analyte d’intérêt se présente avantageusement sous forme d’une séquence nucléotidique, lorsque cette entité est comprise dans la portion Sb, Sb’, Int, Int’’, Sc ou Sc’.
L’expression « molécule nucléotidique » utilisée dans la présente est équivalente aux termes et expressions suivants : « acide nucléique », « polynucléotide », « séquence nucléotidique », « séquence polynucléotidique » et « séquence oligonucléotidique ». Par « molécule nucléotidique », on entend, dans le cadre de la présente invention, un chromosome ; un gène ; un polynucléotide régulateur ; un ADN, simple-brin ou double-brin, génomique, chromosomique, chloroplastique, plasmidique, mitochondrial, recombinant ou complémentaire ; un ARN total ; un ARN messager ; un ARN ribosomal (ou ribozyme) ; un ARN de transfert ; un micro-ARN ; un petit ARN interférent; une séquence faisant office d’aptamère ; un acide nucléique peptidique ; un acide nucléique verrouillé (ou LNA pour « Locked Nucleic Acid ») ; un morpholino ; une portion ou un fragment de ceux-ci.
Dans un second mode de réalisation notamment illustré dans la partie expérimentale ci-après, la ou les entités E présentes au niveau de la structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ sont aptes à se lier indirectement à un ou des analytes d’intérêt. Ce second mode de réalisation s’applique en particulier au cas où la ou les entités E sont présentes au niveau de la structure Sa, Sd, Sa’ ou Sd’. En d’autres termes, cette ou ces entités E sont indépendantes du ou des analytes d’intérêt à détecter et cette détection nécessite l’utilisation d’un intermédiaire de liaison apte à se lier, d’une part, à l’oligonucléotide selon ce second mode de réalisation de l’invention et, d’autre part, à ou aux analytes d’intérêt. Ce partenaire de liaison correspond à une molécule comprenant une première portion P1 apte à se lier à une entité E présente dans la structure ou portion Sa, Sb, Int, Sc, Sd, Sa’, Sb’, Int’’, Sc’ ou Sd’ de l’oligonucléotide et notamment dans la structure Sa, Sd, Sa’ ou Sd’ et une seconde portion P2 apte à se lier à au moins un analyte d’intérêt. La portion P2 de cette molécule correspond à une entité de reconnaissance telle que définie précédemment ou comprend plusieurs entités de reconnaissance telles que définies précédemment, identiques ou différentes. Ainsi, tout ce qui a été décrit ci-dessus pour l’entité ou les entités de reconnaissance s’applique mutatis mutandis à la portion P2. Dans ce partenaire de liaison, la portion P1 et la portion P2 sont couplées l’une à l’autre au moyen d’une liaison covalente. En variante, la portion P1 et la portion P2 peuvent être couplées l’une à l’autre au moyen d’un bras de liaison tel que précédemment défini.
Une entité E de ce second mode de réalisation peut être toute molécule capable de former une paire de liaison avec la portion P1 du partenaire de liaison, l’entité E et la portion P1 correspondant aux deux partenaires de cette paire de liaison. Les liaisons mises en œuvre dans la liaison entité-portion P1 sont des liaisons non covalentes et de faible énergie telles que des liaisons hydrogène ou des liaisons de Van der Waals.
Particules de polyuréthanne (PU) réticulé ; et/ou SBS ou SEBS thermoplastiques, et/ou terpolymère EPDM (d’éthylène-propylène-diène monomère)
La température de fusion de cette composition peut être comprise entre 100 et 220°C, notamment entre 120 et 190°C, de préférence entre 125 et 170 °C
De manière avantageuse, la composition a une tan δ à 23°C inférieure ou égale à 0,2, de préférence inférieure ou égale à 0,15, notamment inférieure à 0,10. La tan δ (ou facteur de perte) à 23°C correspond au rapport du module de perte E’’ sur le module d’élasticité E’ mesurés à une température de 23°C par analyse mécanique dynamique (DMA). Elle peut être mesurée selon la norme ISO 6721 datant de 2019, la mesure étant effectuée à la déformation de 0,1 % en tension, à la fréquence de 1 Hz, et à la vitesse de chauffe de 2°C/min. La tan δ permet de caractériser l’élasticité de la composition : plus la tan δ est faible, plus le retour élastique est grand. La tan δ à 23°C de la composition peut valoir de 0,05 à 0,06, ou de 0,06 à 0,07, ou de 0,07 à 0,08, ou de 0,08 à 0,09, ou de 0,09 à 0,10, ou de 0,10 à 0,11, ou de 0,10 à 0,15, de 0,15 à 0,2.
L’aptaméro-PCR, quant à elle, permet de remplacer l’anticorps secondaire par un oligonucléotide contenant une séquence d’aptamère spécifique de la cible à détecter. La détection est obtenue par l’amplification directe de cette sonde par PCR. Cette méthode permet d’atteindre une limite de détection de quelques picomolaires. Cependant, l’immuno-PCR et l’aptaméro-PCR présentent, toutes deux, les inconvénients de la PCR à savoir la nécessité de cycles de températures relativement longs et comportant différentes températures.
Enfin, une autre méthode d’amplification a été développée pour remplacer la PCR dans le cadre de l’amplification de doubles brins d’ADN. Cette méthode appelée LAMP et brevetée [1] présente l’avantage majeur d’être isotherme, l’amplification étant réalisée à une température constante typiquement comprise entre 60°C et 65°C, et permettant une détection rapide.
Cependant, le design complexe des quatre amorces indispensables à la méthode d’amplification LAMP rend ce procédé complexe et relativement long à mettre en œuvre, malgré le développement de nombreux logiciels de design des amorces LAMP comme, par exemple, LAMP designer (OPtigene) ou primer Explorer.
Enfin, une méthode de détection de micro-ARNs (mi-ARNs) par une méthode LAMP avec deux amorces a été développée [3, 4] . Cette méthode présente l’avantage d’être quantitative. Toutefois, elle ne permet de détecter que de l’ARN à partir duquel est formé un fragment d’ADN complémentaire (ADNc) au moyen d’une réaction de transcription inverse. Deux sondes d’ADN en épingle à cheveux désignées H1 et H2 dans Du et al , 2016 [4] sont conçues, la sonde H1 présentant à son extrémité 3’ une extension complémentaire à la moitié du fragment d’ADNc et la sonde H2 présentant à son extrémité 5’ une extension complémentaire à l’autre moitié du fragment d’ADNc. En présence du fragment d’ADNc, les sondes H1 et H2 s’hybrident sur ce dernier et, si aucun mésappariement n’existe entre les extensions des sondes H1 et H2 et le fragment d’ADNc, une liaison covalente entre les deux sondes d’ADN H1 et H2 peut être formée grâce à une ligase haute-fidélité comme la Taq DNA ligase. Il est donc clair que cette méthode de détection de mi-ARNs n’est pas générique puisqu’elle nécessite la préparation de deux sondes spécifiques de chaque mi-ARN à détecter. Par ailleurs, cette méthode implique plusieurs étapes avant la mise en œuvre de la technique LAMP avec une étape de transcription inverse et une étape de ligation, cette dernière pouvant être complexe avec un rendement possiblement faible et la nécessité d’utiliser une enzyme supplémentaire. Malgré cela, dans leur publication Du et al , 2016 [4] , les auteurs insistent sur le fait que cette étape est primordiale notamment pour une meilleure discrimination des mutations dans les mi-ARNs (phrase pontant les colonnes de la page 12722).
Les inventeurs ont déjà mis au point une méthode innovante permettant de réaliser une amplification LAMP avec seulement deux amorces [5 , 6 ] . Cette méthode permet de détecter des analytes d’intérêt de nature variée dans un échantillon et ne présente pas les inconvénients des méthodes de l’état de la technique. Elle met en œuvre une séquence se présentant sous forme d’un oligonucléotide à double structure tige-boucle, également désigné sous le terme « haltère », servant de matrice à l’amplification LAMP et permettant d’éliminer les premières étapes de cette amplification. Elle permet de combiner la reconnaissance d’analytes par des brins oligonucléotidiques et l’amplification LAMP à deux amorces, et donne une détection à haute sensibilité. En effet, l’oligonucléotide à double structure tige-boucle mis en œuvre intègre, au sein de sa structure [5] ou à l’une de ses extrémités [6 ] , une entité de reconnaissance de l’analyte d’intérêt.
Les inventeurs se sont donc fixé pour but de proposer un outil utile dans un procédé permettant de détecter des molécules d’intérêt de nature variée dans un échantillon, ledit procédé ne présentant pas les inconvénients des méthodes de l’état de la technique et permettant d’améliorer encore l’oligonucléotide à double structure tige-boucle décrit dans [5 , 6 ] .
Présentation de l’invention La présente invention permet de résoudre des problèmes techniques et inconvénients précédemment listés. En effet, les inventeurs ont proposé un nouvel outil oligonucléotidique notamment utile dans un procédé de détection et éventuellement de quantification d’un analyte, qui permet de profiter des avantages de l’amplification LAMP à deux amorces, à savoir méthode isotherme, quantifiable et ne nécessitant que deux amorces.
L’outil oligonucléotidique objet de la présente invention est un oligonucléotide linéaire qui se distingue clairement des oligonucléotides à double structure tige-boucle décrits dans [5, 6] . En effet, la séquence de l’oligonucléotide selon l’invention mise en œuvre est modifiée pour devenir plus courte, idéalement inférieure à 100 bases. Cela permet notamment d’envisager une synthèse chimique plus simple, plus efficace avec un rendement important et une purification plus facile et plus économe.
Plus particulièrement, les portions F1c et B1 telles que définies dans les oligonucléotides à double structure tige-boucle décrits dans [5, 6] ont été supprimées dans l’oligonucléotide selon l’invention empêchant ainsi toute hybridation et donc la formation de structures tige-boucle. Cet oligonucléotide comprenant les portions F2, F1, B1c et B2c peut alors être modifié en ajoutant une entité spécifique de l’analyte à détecter ou utilisable pour cette détection à divers endroits de la séquence, notamment en 5’ ou 3’ mais aussi entre F2 et F1, entre F1 et B1c ou entre B1c et B2c.
Ainsi, il est facile de préparer l’oligonucléotide selon l’invention à partir de la séquence de toutes amorces FIP (pour « Forward Inner Primer ») et BIP (pour « Backward Inner Primer ») décrites dans l’art antérieur. En effet, l’oligonucléotide objet de l’invention comprend une portion F2 également présente dans l’amorce FIP, une portion F1 complémentaire à la portion F1c présente dans l’amorce FIP, une portion B1c également présente dans l’amorce BIP et une portion B2c complémentaire à la portion B2 présente dans l’amorce BIP.
Dans le cadre de la présente invention, deux séquences nucléotidiques sont complémentaires l’une de l’autre, lorsqu'un nombre suffisant de nucléotides de la première séquence nucléotidique peut se lier, au moyen de liaisons hydrogène, avec les nucléotides correspondants de la deuxième séquence nucléotidique de telle sorte que l'appariement entre les deux séquences nucléotidiques peut se produire. La « complémentarité », telle qu'utilisée ici, se réfère à la capacité d'appariement entre les nucléotides d'une première séquence nucléotidique et d'une seconde séquence nucléotidique. Des nucléotides non complémentaires entre deux séquences nucléotidiques peuvent être tolérés à condition que les deux séquences nucléotidiques restent capables de s'hybrider spécifiquement l'une à l'autre. De plus, une première séquence nucléotidique peut s'hybrider sur un ou plusieurs segments d'une seconde séquence nucléotidique de telle sorte que les segments intermédiaires ou adjacents ne sont pas impliqués dans l'hybridation. Dans certaines formes de mise en œuvre de l’invention, une première séquence nucléotidique ou une partie spécifique de celle-ci, est au moins 70%, 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou 100% complémentaire à une deuxième séquence nucléotidique ou une partie spécifiée de celle-ci.