INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Elle fournit une méthode de préparation, en l’absence de composé tensio-actif sulfaté, d’une composition aqueuse ne comprenant pas de composé tensio-actif sulfaté, dont la viscosité Brookfield mesurée à 25°C à une vitesse de 6 tour/min est supérieure à 500 mPa.s, comprenant l’addition dans une phase aqueuse : * d’au moins un polymère P préparé en l’absence de composé sulfaté organique, par au moins une réaction de polymérisation conduite en présence d’au moins un composé sulfoné E non-sulfaté et non-polymérisable : - d’au moins un monomère anionique (a1) comprenant au moins une insaturation oléfinique polymérisable et au moins une fonction acide carboxylique ou l’un de ses sels et - d’au moins un ester (a2) en C 1 -C 8 d’un composé dérivé d’un acide choisi parmi l’acide acrylique, l’acide méthacrylique, l’acide maléique, l’acide itaconique et l’acide crotonique, ou bien d’acétate de vinyle et * d’au moins un composé tensio-actif non-sulfaté.
Les figures 2A et 2B sont des vues schématiques et partielles d’un système imageur LIDAR à détection hétérodyne de type FMCW, selon des variantes de réalisation, où l’une correspond à un système imageur de type ‘mono-point’, et l’autre à un système imageur de type ‘flash’. Les figures sont très schématiques : la scène est ici plane mais dans les faits elle peut évidemment ne pas l’être.
D’une manière générale, le système imageur 1 comporte a minima : une source de lumière cohérence 10, adaptée à émettre un signal primaire S p , cohérent, continu et modulé en fréquence ; un dispositif optique de séparation et recombinaison 20, comportant : au moins un élément optique séparateur 21 adapté à séparer le signal primaire S p en un signal de référence S r dirigé vers un photodétecteur 50 et en un signal objet S o dirigé vers la scène 2, laquelle rétrodiffuse une partie du signal objet S o appelée signal objet rétrodiffusé S or ; au moins un élément optique recombineur 23 adapté à diriger vers le photodétecteur 50 suivant un même axe optique le signal de référence S r ainsi qu’une partie S or,c du signal objet rétrodiffusé S or collectée ou destinée à être collectée par un élément optique de collection 41 ; un élément optique de collection 41, adapté à collecter la partie S or,c du signal objet rétrodiffusé S or ; le photodétecteur 50, destiné à recevoir le signal de référence S r et la partie collectée S or,c du signal objet rétrodiffusé S or , lesquels interfèrent pour former un signal hétérodyne S h ; une unité de traitement 60, adaptée à déterminer une distance z sc de la scène 2 à partir d’une fréquence de battement du signal hétérodyne S h .
Pour améliorer la résolution en distance du système imageur 1, celui-ci comporte en outre un réflecteur 42 adapté à réfléchir en direction de la scène 2 une partie S or,nc du signal objet rétrodiffusé S or non collectée par l’élément optique de collection 41. Aussi, la partie collectée S or,c du signal objet rétrodiffusé S or est formée de premiers faisceaux lumineux S or,c(1) du signal objet rétrodiffusé S or n’ayant pas été réfléchis par le réflecteur 42 et de deuxièmes faisceaux lumineux S or,c(2) du signal objet rétrodiffusé S or ayant été réfléchis par le réflecteur 42. Il en résulte que le signal hétérodyne S h présente une composante principale S h(1) associée aux premiers faisceaux lumineux S or,c(1) , ainsi qu’une composante secondaire S h(2) associée aux deuxièmes faisceaux lumineux S or,c(2) . La composante principale S h(1) présente une fréquence de battement f b(1) , et la composante secondaire S h(2) présente une fréquence de battement f b(2) différente de f b(1) .
De plus, l’unité de traitement 60 est adaptée à déterminer la distance z sc de la scène 2 à partir de la fréquence de battement f b(2) de la composante secondaire S h(2) du signal hétérodyne S h . Ce faisant, comme décrit en détail plus loin, la distance z sc est déterminée avec une résolution en distance Δz sc améliorée d’un facteur 2 par rapport à la situation classique où la distance z sc serait déterminée à partir de la seule fréquence de battement f b(1) .
La illustre un système imageur 1 selon un mode de réalisation de type ‘mono-point’. Aussi, le signal objet S o n’éclaire qu’un point de la scène 2 à chaque instant, et le photodétecteur 50 peut être une photodiode. Le système imageur 1 est donc adapté à déterminer la distance z sc du point éclairé de la scène 2. Notons que le système imageur 1 peut être adapté à balayer spatialement la scène 2 par le signal objet S o , point par point.
Le système imageur 1 comporte une source optique 10 d’un signal dit primaire S p , cohérent continu et modulé en fréquence. La source optique 10 est de préférence une source laser émettant le signal primaire S p . A titre d’exemple, le signal primaire S p peut présenter une fréquence optique située dans l’infrarouge. De plus, le signal primaire S p est modulé en fréquence, par exemple ici de manière linéaire, à partir d’une fréquence de départ f 0 sur une période de répétition T avec une largeur de bande B ( chirp ). Le signal est ici un signal chirpé , c’est-à-dire une onde sinusoïdale dont la fréquence instantanée évolue linéairement au cours du temps.
La source optique 10 présente une longueur de cohérence typiquement supérieure à la différence de chemin optique entre la voie de référence et la voie objet. La voie de référence est le trajet suivi par le signal de référence S r entre la source optique 10 et le photodétecteur 50. La voie objet est le trajet suivi par le signal objet S o à partir de la source optique 10 jusqu’à la scène 2, et le trajet suivi par le signal objet rétrodiffusé S or par la scène jusqu’au photodétecteur 50. Cette différence de chemin optique peut correspondre, au premier ordre, à deux fois la distance maximale entre le système imageur 1 et la scène 2.
La source optique 10 peut ainsi comporter, dans le cas d’une émission dans le domaine du proche infrarouge (entre 0.7 et 2µm), une source laser 11 de type à cavité verticale émettant par la surface (VCSEL, pour Vertical-Cavity Surface Emitting Laser , en anglais) qui a généralement une longueur de cohérence de l’ordre du mètre, voire une source laser du type à émission par la tranche (EEL, pour Edge Emitting Laser , en anglais) qui peut avoir une longueur de cohérence de l’ordre de la dizaine voire centaine de mètres.
Le système imageur 1 comporte un dispositif optique de séparation/recombinaison 20. Celui-ci comporte au moins un élément optique séparateur 21 adapté à séparer le signal primaire S p en un signal objet S o d’une part et en un signal de référence S r d’autre part. Le signal de référence S r correspond, dans le cadre de la détection hétérodyne, au signal d’un oscillateur local (LO, pour Local Oscillator en anglais). Il comporte également au moins un élément optique recombineur 23 adapté à diriger vers le photodétecteur 50 suivant un même axe optique, en les superposant spatialement au moins en partie, le signal de référence S r et une partie collectée S or,c du signal objet rétrodiffusé S or .
L’élément optique séparateur 21 peut être, par exemple, une lame semi-réfléchissante ou un cube séparateur. Ici, une lame semi-réfléchissante 21 transmet une partie du signal primaire S p , qui devient le signal objet S o , et réfléchit une partie du signal primaire S p qui devient le signal de référence S r . La répartition en intensité du signal objet S o et du signal de référence S r est de préférence non égalitaire, et peut ainsi être de 90% pour le signal objet S o et de 10% pour le signal de référence S p .
L’élément optique recombineur 23 est adapté donc à diriger en direction du photodétecteur 50 suivant le même axe optique le signal objet rétrodiffusé S or et le signal de référence S r . Il peut s’agir d’une lame semi-réfléchissante ou d’un cube combineur. Ici, une lame-semi-réfléchissante 23 réfléchit le signal de référence S r en direction du photodétecteur 50 suivant un axe optique passant par le centre de la lame semi-réfléchissante 23 et par le centre du photodétecteur 50, et transmet le signal objet rétrodiffusé S or,c suivant ce même axe optique. Les deux signaux optiques se propagent donc en direction du photodétecteur matriciel 50 sur une voie commune, suivant le même axe optique.
Le dispositif optique 20 est adapté à assurer une superposition spatiale (au moins en partie) des deux signaux optiques S r et S or suivant le même axe optique, améliorant ainsi la combinaison des deux signaux optiques par interférence, ce qui permet d’améliorer l’intensité du signal hétérodyne S h . Pour cela, des éléments optiques de mise en forme des signaux optiques (non représentés ici) peuvent être prévus, comme le décrit le document WO2021/144357A1 mentionné précédemment.
Le système imageur 1 comporte au moins un élément optique de collection 41 d’une partie S or,c du signal objet rétrodiffusé S or , cette partie S or,c étant ensuite reçue par le photodétecteur 50. Il peut être un élément optique en espace libre, et il peut s’agir d’un diaphragme d’ouverture qui définit la pupille physique. Le diaphragme d’ouverture peut être défini par le contour d’une lentille de focalisation. L’élément optique de collection peut, par ailleurs, être formé de plusieurs lentilles entre lesquelles est disposé le diaphragme d’ouverture. L’élément optique de collection 41 peut être situé en amont ou en aval de l’élément optique recombineur 23. En variante, l’élément optique de collection 41 peut ne pas être un objet optique dédié, mais être défini par la surface sensible du photodétecteur 50, notamment dans le cas d’un système imageur 1 de type mono-point.
Selon l’invention, le système imageur 1 comporte un réflecteur 42 adapté à réfléchir en direction de la scène 2 une partie notée S or,nc du signal objet rétrodiffusé S or qui n’a pas été collectée par l’élément optique de collection 41. Le réflecteur 42 est ici un réflecteur spéculaire, dans le sens où il réfléchit les faisceaux lumineux de manière non diffuse ou quasiment non diffuse. Le réflecteur 42 peut être situé au niveau de l’élément optique de collection 41, par exemple en étant coplanaire à celui-ci, ou être situé en amont ou en aval. Comme décrit plus loin, il peut être situé au niveau du photodétecteur 50.
Comme décrit plus loin, le réflecteur 42 peut être simplement réfléchissant, c’est-à-dire qu’il réfléchit les faisceaux lumineux incidents suivant la loi de réflexion de Snell-Descartes, ou être rétroréfléchissant, c’est-à-dire que les faisceaux lumineux sont réfléchis suivant un axe de réflexion identique à l’axe d’incidence. A ce titre, le réflecteur 42 peut être un miroir à coins de cube ou une couche de microbilles, comme décrit notamment dans le document WO2015/158999A1.
L’élément optique recombineur 23 peut être situé en amont ou en aval de l’élément optique de collection 41 et du réflecteur 42. Dans le cas où il est situé en amont, le signal de référence S r est orienté de préférence de manière à ne traverser que l’élément optique de collection 41 et ne pas être incident sur le réflecteur 42. On évite ainsi qu’il soit réfléchi par le réflecteur 42, ce qui pourrait induire des interférences supplémentaires avec un signal objet rétrodiffusé S or à des fréquences de battement différentes des fréquences f b(1) et f b(2) . Par ailleurs, le fait de placer l’élément optique recombineur 23 en amont permet de placer l’élément optique de collection 41 et le réflecteur 42 au plus près du photodétecteur 50, ce qui augmente le champ de vue du système imageur 1.
On crée alors une matrice Q qui est de la forme suivante pour calculer les coordonnées cartésiennes non-homogènes de chaque pixel par produit matriciel :
Tx étant la baseline , f étant la focale, et (Cx, Cy), (Cx’, Cy’) étant les coordonnées des centres optiques des caméras en pixels.
L’unité de traitement 6 produit ainsi des coordonnées en trois dimensions de pixels d’une image reconstruite en trois dimensions représentative de l’environnement de l’hélicoptère 1. Les coordonnées en trois dimensions des pixels sont définies dans un repère géographique local associé à l’hélicoptère 1 et corrigé en lacet (grâce aux données de navigation).
Les coordonnées en trois dimensions des pixels sont alors projetées de manière à produire des images en deux dimensions I2D des coordonnées en trois dimensions de chaque pixel reconstruit.
En parallèle, l’unité de traitement 6 analyse les images stéréos segmentées rectifiées Iser et sélectionne la classe de chaque pixel en fonction de sa réponse à l’algorithme de segmentation sémantique.
L’unité de traitement 6 réalise alors une instanciation de chaque obstacle et produit une liste d’instances d’obstacles prédéfinis Obst présentes dans l’environnement de l’hélicoptère 1 à partir des images stéréos segmentées rectifiées Iser.
L’unité de traitement 6 détermine qu’un groupe de pixels d’une image stéréo segmentée rectifiée Iser forme une instance d’obstacle prédéfini Obst lorsque lesdits pixels sont connectés entre eux. On considère ici que deux pixels sont connectés entre eux si l’un des deux pixels appartient au voisinage de l’autre et si les deux pixels appartiennent à une même classe.
Le voisinage d’un pixel particulier est défini ici comme comprenant huit pixels voisins « primaires » autour dudit pixel particulier.
L’unité de traitement 6 alloue un identifiant spécifique pour chaque groupe de pixels qui sont voisins entre eux afin de pouvoir classifier chaque obstacle.
L’unité de traitement 6 produit alors un flux comprenant les images labellisées Ilab ainsi que les coordonnées de toutes les instances d’obstacles prédéfinis Obst.
L’unité de traitement 6 intègre alors, en utilisant les coordonnées en trois dimensions, les instances d’obstacles prédéfinis Obst dans des images intermédiaires obtenues à partir des images stéréos rectifiées Isr, pour produire des images augmentées Ia destinées à fournir une assistance au pilotage de l’hélicoptère 1.
Les images intermédiaires sont ici les images stéréos rectifiées Isr elles-mêmes, c’est-à-dire que les instances d’obstacles prédéfinis Obst sont intégrées dans les images stéréos rectifiées Isr pour produire les images augmentées Ia.
Pour cela, l’unité de traitement 6 met tout d’abord en œuvre un algorithme de calcul pour extraire des caractéristiques globales sur la taille de chaque instance d’obstacle prédéfini en hauteur et largeur en mesurant l’écart-type des positions 3D des pixels composant ladite instance d’obstacle prédéfini.
L’algorithme de calcul acquiert ainsi les coordonnées de chaque instance d’obstacle prédéfini Obst et utilise les images en deux dimensions I2D des coordonnées en trois dimensions des pixels reconstruits pour calculer, pour chaque instance d’obstacle prédéfini Obst, la distance moyenne entre ladite instance d’obstacle prédéfini et l’hélicoptère, ainsi que la largeur et la hauteur de ladite instance d’obstacle prédéfini.
L’unité de traitement 6 connaît en effet les pixels appartenant à un même obstacle grâce à la segmentation, la reconstruction 3D de chaque pixel ayant une disparité valide, et peut donc en déduire les caractéristiques dans le repère géographique local centré sur l’hélicoptère 1 et corrigé en lacet.
Puis, on effectue une étape 46 de mise en place du dispositif 6 de collecte de gaz dans le gant de protection 4. Préalablement, si le gant est enfilé autour d’une main d’un opérateur, l’opérateur se lave les mains à l’eau savonneuse, un gel hydroalcoolique n’étant pas indiqué car pouvant fausser la détection.
On effectue ensuite, une étape 48 d’étanchéification du poignet du gant de protection de manière à éviter une infiltration de composé chimique directe.
Puis, l’opérateur effectue une étape 50 de manipulation de composés chimiques jusqu’à émission d’un signal par le détecteur de gaz 8 lors d’une étape 52, ou jusqu’à la fin de la manipulation si aucun signal n’est émis par le détecteur de gaz 8.
On effectue ensuite une étape 54 de retrait du dispositif 6 de collecte de gaz en dehors du gant de protection 4 dans un environnement propre à distance des composés chimiques.
Finalement, on effectue une étape 56 de nettoyage du système de détection 2, par exemple par passage dans une étuve.
METHODE DE DETECTION, DE QUANTIFICATION ET DE DISCRIMINATION DES LEVURES BRETTANOMYCES SPP ET DES AUTRES LEVURES CONTENUES DANS UN SUBSTRAT LIQUIDE ORGANIQUE CONTENANT DES SUCRES FERMENTESCIBLES La présente invention concerne une méthode permettant avec un même échantillon et un seul passage dans un cytomère, la détection, la quantification et la discrimination des levures Brettanomyces et des autres levures, notamment Saccharomyces spp contenues dans un substrat liquide organique contenant des sucres fermentescibles.
Art antérieur Les levures du genre Brettanomyces sont capables de produire des composés produisant entre autres, des odeurs d’écurie. Brettanomyces est relativement résistante à l’alcool et à des pH bas. Dans la majorité des cas, elle est sensible au SO 2 , certaines souches peuvent y être particulièrement résistantes. Les levures Brettanomyces sont de plus petite taille comparées à Saccharomyces cerevisiae mais elles restent difficiles à identifier du fait d’un important polymorphisme. De plus, dans un milieu complexe comme le vin, le vinaigre, ou un moût, par exemple, leur discrimination est encore plus compliquée du fait des interactions avec le milieu.
La plus commune des levures Brettanomyces est Brettanomyces bruxellensis qui comprend un genre sporulant appelé Dekkera bruxellensis . Ces levures produisent notamment du 4-éthyl-phénol, lequel est stable dans le vin et lui donne une odeur d’écurie qu’il est souhaitable d’éviter. Le même phénomène peut apparaître dans d’autres jus fermentés et éventuellement alcoolisés comme le cidre, la bière, la téquila, le kombucha, le kéfir, par exemple. Brettanomyces spp étant présente dans le milieu environnant, elle est susceptible de contaminer n’importe quel substrat liquide contenant des sucres fermentescibles dans lequel elle peut se développer.
Les levures Brettanomyces peuvent se présenter sous plusieurs états : vivante (donc active et produisant le composé précité), morte (non inactive et ne produisant pas le composé précité) ou latente. Les cellules latentes sont susceptibles de redevenir active et donc de produire entre autres, du 4-éthyl-phénol lors du vieillissement du vin, par exemple. Les cellules à l’état latent ne sont détectables par mise en culture du substrat ce qui signifie que la mise en culture d’un échantillon de substrat ne permet pas de garantir dans le futur l’absence de fragrances indésirables.
La publication intitulée « The application of flow cytometry in microbiological monitoring during winemaking: two case studies » de R. Guzzon & al et publiée dans la revue Ann Microbiol ((2015) 65/1865-1878) indique qu’il est possible de différentier par cytométrie en flux une cellule vivante d’une cellule morte dans une culture de S. cerevisiae pure ou dans un vin dans lequel on a ajouté un mélange de sucre et de S. cerevisiae . La méthode appliquée au le vin avant ajout du mélange précité pour une seconde fermentation ne donne aucun résultat. Un mélange de marqueurs est utilisé dans cette méthode : le mélange cFDA combiné à l’iodure de propidium.
La publication intitulée « Rapid detection of viable yeasts and bacteria in wine by flow cytometry » de Malacrino & al publiée dans la revue Journal of Microbiological Methods (45 (2001) 127–134) indique qu’il est possible de déterminer le nombre de levures et de bactéries malolactiques dans du jus de Pinot noir dans lequel on a jouté des levures pré cultivées dans un milieu particulier (1% d’extrait de levure +2% de peptone +2% de dextrose) par cytométrie en flux. Le meilleur marqueur est le mélange fluorescéine cFDA. La même méthode appliquée sur un échantillon de vin ne donne pas des résultats cohérents avec les résultats obtenus par comptage sur des cultures. Le vin doit donc être préalablement lavé avant la mesure. La publication suggère que cette méthode pourrait être utilisée pour la détection de levures non désirables telles que Brettanomyces spp .
La publication intitulée « Survival and metabolism of hydroxycinnamic acids by Dekkera bruxellensis in monovarietal wines » de Nine de Lima, publiée dans la revue Food microbiology en février 2021 (volume 93) indique qu’il est possible de mesurer la population de Dekkera bruxellensis dans du vin préalablement inoculé avec une souche de Dekkera bruxellensis par cytométrie en flux. Deux marqueurs ont été utilisés en combinaison : l’iodure de propidium et SYTO 9 ®.
La publication intitulée « Specific Identification and Quantification of the Spoilage Microorganism Brettanomyces in Wine by Flow Cytometry: A Useful Tool for Winemakers », de H. Alexandre & al, publiée en ligne le 11 février 2010 dans la revue Wiley Interscience décrit une méthode d’identification et de quantification de Brettanomyces dans le vin par spectrométrie de flux par utilisation de la méthode d’hybridation de fluorescence in situ. Le marqueur fluorescents utilisé (Alexa Fluor® 488) cible des séquences particulières d’acides aminés qui correspondent à l’ARN de Brettanomyces. La membrane de Brettaomyces contenue dans le vin est d’abord perméabilisée ce qui ne permet pas de différencier les cellules mortes des vivantes ou latentes. Le seuil de détection est de 102 cellules /mL.
Problème Technique
Un but de la présente invention est de proposer une méthode par cytométrie en flux qui permet de déterminer, de quantifier et de discriminer les levures Brettanomyces spp des autres levures et notamment des levures Saccharomyces spp dans un substrat liquide contenant des sucres fermentescibles et éventuellement des particules fines de la taille des bactéries ou levures.
Un autre but de la présente invention est de proposer une méthode par cytométrie en flux qui permet de discriminer et de quantifier les cellules vivantes des levures Brettanomyces spp , les cellules mortes des levures Brettanomyces spp et les cellules latentes de levures Brettanomyces spp .
En référence à la , il va maintenant être présenté un mode de réalisation du procédé selon l’invention, mis en œuvre par le module d’adaptation 30 et l’unité de contrôle 50 tels que décrits précédemment. Le procédé est décrit dans le cas où la batterie du module d’alimentation 20 fournit l’énergie électrique. Mais, le procédé peut également être mis en œuvre de la même façon dans le cas où c’est la machine électrique qui fournit l’énergie électrique.
Par exemple, le procédé sera décrit dans le cas où à l’état initial le module d’adaptation 30 fonctionne selon la première configuration, dans laquelle la première résistance R1 est connectée en série avec la deuxième résistance R2.
Le procédé comprend une étape de réception d’une demande d’activation d’une configuration E1 du module d’adaptation 30. Par exemple, lors de cette étape, l’unité de contrôle 50 envoie une demande d’activation de la quatrième configuration du module d’adaptation 30, autrement dit une demande d’augmentation de la puissance fournie par le module d’adaptation 30 à 100%.
Le procédé comprend ensuite une étape de déconnexion E2 du dispositif de chauffage 11 de la batterie. Pour cela, l’interrupteur de sécurité 40 est ouvert. L’ouverture est commandée par l’unité de contrôle 50 qui envoie un signal de commande d’ouverture à l’interrupteur de sécurité 40.
Le procédé comprend donc une étape d’adaptation E3 de la puissance fournie par la batterie au dispositif de chauffage 11.
Par exemple, lorsque le module d’adaptation 30 correspond à la première forme de réalisation, à l’état initial, le premier relais Re1 relie le point haut PH à la batterie, le deuxième relais Re2 ne relie pas la batterie au point milieu PM et le troisième relais Re3 relie la masse au point bas PB.
L’unité de contrôle 50 envoie donc un signal de commande au premier relais Re1 afin que le premier relais Re1 relie le point haut PH à la masse (et non plus à la batterie) et un signal de commande au deuxième relais Re2, afin que celui-ci relie le point milieu PM à la batterie.
Ainsi, le premier relais Re1 relie le point haut PH à la masse, le deuxième relais Re2 relie la batterie au point milieu PM et le troisième relais Re3 relie la masse au point bas PB.