Lame optique (10) destinée a recevoir un échantillon biologique (E) à des fins d’imagerie microscopique à réflexion totale interne, la lame optique comprenant : - un substrat de base optiquement transparent (11) ; - un empilement de couches de matériaux diélectriques (12), la couche dudit empilement destinée a être contact avec l’échantillon étant à base d’un matériau diélectrique biocompatible ; la lame optique (10) étant caractérisée en ce que ledit empilement (12) est disposé directement sur le substrat de base (11) et formé d’une succession de couches minces alternées d’un premier matériau diélectrique et d’un deuxième matériau diélectrique apte à produire une résonance optique à un angle d’incidence et une longueur d’onde d’éclairage prédéterminés de la lame optique en régime de réflexion totale. Lame optique selon la revendication 1, dans laquelle : - le premier matériau diélectrique (MD1) présente un indice de réfraction élevé compris entre 1,8 et 3,5 ; - le deuxième matériau diélectrique (MD2) présente un indice de réfraction faible compris entre 1,2 et 1,7. Lame optique selon l’une quelconque des revendications 1 et 2, dans laquelle les couches minces présentent chacune une épaisseur qui est fonction de la longueur d’onde d’éclairage, de l’angle d’incidence et de l’indice de réfraction du matériau pour lesquels elle est constituée. Lame optique selon la revendication 3, dans laquelle l’épaisseur de chaque couche mince est comprise entre 1 et 300 nanomètres, et plus particulièrement entre 75 et 150 nanomètres, tandis que l’épaisseur du substrat de base est comprise entre 50 et 2000 micromètres. Lame optique selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle ledit empilement présente une épaisseur totale inférieure à 10 micromètres, et plus particulièrement comprise entre 0,2 et 4,0 micromètres. Lame optique selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle ledit empilement comprend un nombre de couches minces typiquement compris entre 4 et 20. Lame optique selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle ledit substrat de base est à base d’un matériau appartenant au groupe comprenant : Verre sodocalcique, Saphir, Quartz, Fluorure de calcium. Lame optique selon l’une quelconque des revendications 2 à 7, dans laquelle le premier matériau diélectrique est à base de Nb 2 O 5 et le deuxième matériau diélectrique est à base de SiO 2 . Système de microscopie à réflexion totale interne, caractérisé en ce qu’il comprend : - une lame optique (10) définie selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 ; - une source de lumière (30) configurée pour émettre un faisceau d’éclairage ; - un objectif de microscope (20) configuré pour former le faisceau d’éclairage vers la lame optique (10) ; le système étant caractérisé en ce que la lame optique et l’objectif de microscope sont configurés pour que l’angle d’incidence soit supérieur ou égal à un angle critique de réflexion totale interne. Système d’imagerie microscopique selon la revendication 9, dans lequel l’angle d’incidence est inférieur ou égal à une valeur limite définie en fonction de l’ouverture numérique de l’objectif de microscope. Système d’imagerie microscopique selon l’une quelconque des revendications 9 et 10, dans lequel l’angle d’incidence est compris entre 62 et 80 degrés. Procédé de fabrication d’une lame optique (10) destinée a recevoir un échantillon biologique (E) à des fins d’imagerie microscopique à réflexion totale interne, caractérisé en ce qu’il comprend : - une étape de dépôt sur un substrat de base optiquement transparent (11) d’une pluralité de couches minces successives et alternées d’un premier matériau diélectrique et d’un deuxième matériau diélectrique de manière à former un empilement de multicouches diélectriques (12) apte à produire une résonance optique à un angle d’incidence et une longueur d’onde d’éclairage prédéterminés de la lame optique en régime de réflexion totale, la couche dudit empilement destinée a être contact avec l’échantillon étant à base d’un matériau diélectrique biocompatible.