INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Cette génération peut consister à dériver ces données personnalisées des données de pré-personnalisation 112 et/ou 124 en mémoire à l’aide de la clé de dérivation MSK n . Il s’agit donc de dériver des données spécifiques (dynamiques ou personnalisées) pour le fonctionnement de l’élément sécurisé 100 à partir des données pré-personnalisées 112, 124. Comme indiqué plus haut, ces données spécifiques peuvent inclure des justificatifs d’identification (credentials), des clés cryptographiques, des données ou profils d’abonné), des données d’opérateur (par exemple des adresses de serveurs du réseau de l’opérateur), des codes personnels d’identification (« PIN » ou « personal identification number » en anglais) d’utilisateur ou d’applications, des valeurs de données d’applications, etc.
En variante ou en combinaison, des données personnalisées, par exemple de nouvelles clés cryptographiques personnalisées, peuvent être générées par une nouvelle diversification directement de la clé de dérivation MSK n sans utiliser d’autre donnée pré-personnalisée. Il s’agit ici de simplement diversifier la clé de dérivation afin d’obtenir une ou plusieurs clés cryptographiques personnelles, i.e. spécifiques à l’élément sécurisé.
Chaque cellule 10, 12 comprend un deuxième contact conducteur, ou via, 26. Chaque contact 26 traverse l'empilement 18. Chaque contact 26 s'étend depuis une des régions 16, et est en contact, par une première extrémité, avec ladite région 16. De préférence, la surface inférieure du contact 26, en d'autres mots la surface en contact avec la région 16, est uniquement en contact avec la région 16. Les contacts 26 ne sont pas en contact avec le substrat 14, et, en particulier, ne sont pas en contact avec les régions 17. Chaque contact 26 s'étend depuis la région 16 jusqu'à la surface supérieure de l'empilement 18. Le contact 26 est séparé du contact 24 par une partie de l'empilement 18.
Chaque cellule 10, 12 comprend une couche, ou une partie, 28 en un matériau cristallin à changement de phase, par exemple en un alliage de germanium, de tellure et d'antimoine.
La couche 28 de chaque cellule recouvre au moins partiellement le contact 24. Par conséquent, le contact 24 est au moins partiellement en contact, par une deuxième extrémité, avec la couche 28. Un côté de la couche 28 est par conséquent reliée au substrat par le contact 24. La couche 28 de chaque cellule recouvre partiellement le contact 26. Par conséquent, le contact 26 est partiellement en contact, par une deuxième extrémité, avec la couche 28. Une partie de la deuxième extrémité du contact 26, en d'autres mots de la surface supérieure du contact 26, n'est pas recouverte par la couche 28. Le contact 26 n'est pas en contact avec le substrat 14.
La couche 28 de chaque cellule est de préférence recouverte par une couche de protection 30, par exemple en un matériau isolant, par exemple en nitrure de silicium. De préférence, la couche 30 recouvre la surface supérieure de la couche 28 et les surfaces latérales.
La structure précédemment décrite est recouverte par un réseau d'interconnexions. Le réseau d'interconnexions comprend un empilement de couches isolantes, chaque couche comprenant soit des pistes conductrices, soit des vias conducteurs. Le réseau d'interconnexions comprend une couche isolante M0, recouvrant la couche 30, et par conséquent la couche 28. La couche M0 recouvre de préférence également la partie du contact 26 et de l'empilement 18 qui ne sont pas recouvertes par la couche 28. Des pistes conductrices 32 sont situées dans la couche isolante M0. Les pistes conductrices 32 traversent la couche M0. En d'autres mots, les pistes conductrices 32 s'étendent depuis la surface inférieure de la couche M0, en d'autres mots la surface la plus proche du contact 26, jusqu'à la surface supérieure de la couche M0.
Chaque contact 26 est connecté, par la deuxième extrémité, avec une piste conductrice 32. En d'autres mots, une piste conductrice 32 est en contact avec chaque contact 26, plus précisément avec la partie du contact 26 non recouverte par la couche 28. La piste conductrice 32 n'est pas en contact avec la couche 28. Par conséquent, la piste conductrice 32 est séparée de la couche 28 par la couche 30 et une partie de la couche M0.
Le réseau d'interconnexions comprend en outre une couche isolante M1, comprenant des pistes conductrices 34, la couche M1 étant séparée de la couche M0 par une couche I0, comprenant des vias conducteurs 36. En d'autres mots, la couche I0 recouvre la couche M0 et la couche M1 recouvre la couche I0. Les pistes 34 sont reliées aux pistes 32 par les vias 36.
La hauteur de la couche 28 est inférieure à la hauteur de la couche M0. De préférence, la hauteur des couches 28 et 30 est inférieure à la hauteur de la couche M0.
Chaque cellule est programmée en appliquant un courant de programmation entre la région 17 et la piste conductrice 32. En d'autres mots, un courant électrique traverse la région 17, le contact 24, la couche 28, le contact 26 et la piste conductrice 32. Le courant appliqué est suffisant pour chauffer la couche 28 et créer une région amorphe 38 dans la couche 28.
La cellule 10 de la ne comprend pas la région 38 et la cellule 12 comprend la région 38. Les impédances des cellules sont suffisamment différentes pour qu'une telle différence puisse être mesurée. Par conséquent, la cellule 10 correspond à une donnée stockée correspondant à un premier nombre binaire, par exemple '0', et la cellule 12 correspond à une donnée stockée correspondant à un deuxième nombre binaire, par exemple '1'.
La représente, schématiquement, l'implantation des différentes parties du mode de réalisation de la . La est une vue de dessus des cellules 10, 12 de la situées dans une matrice mémoire, toutefois les différents éléments représentés ne sont pas tous dans le même plan.
La représente une alternance de bandes des régions 17 et 16, dans le substrat. Les bandes s'étendent selon une direction X dans le plan de la , correspondant par exemple à la direction d'une ligne de bit de la matrice mémoire.
Un contact 24 est situé sur chaque bande 17 pour chaque cellule. Un contact 26 est situé sur chaque bande 16 pour chaque cellule. Une couche 28 est située sur les contacts 24 et 26 de chaque cellule, comme cela a été décrit en relation avec la . La couche 28 s'étend dans une direction Y dans le plan de la , perpendiculaire à la direction X. La direction Y correspond par exemple à une ligne de mot de la matrice mémoire.
Les pistes 32 s'étendent dans la direction X et sont en contact avec plusieurs cellules, de préférence toutes les cellules d'une même ligne de bit.
La matrice mémoire comprend en outre des éléments de sélection 40, de préférence des transistors, formés dans les régions 17. Chaque transistor 40 comprend des régions de drain et de source, dont une, par exemple le drain, est située dans une des régions 17 sous, et en contact avec, le contact 24 et l'autre est située dans la même région 17. Par exemple, comme dans l'exemple de la , la partie de la région 17 sous chaque contact 24 constitue une région de drain (ou de source) pour deux transistors, la région de source (ou de drain) de chacun des deux transistors étant dans la région 17, de préférence d'un côté opposé du contact 24 dans la direction X.
Des vias conducteurs 42, par exemple identiques au contact 24, traversent la couche isolante 18. Un des vias 42 est en contact avec chaque région de source (ou de drain) des transistors 40 qui ne sont pas en contact avec un contact 24. Une piste conductrice 44 située dans la couche M0 est en contact avec chaque via 42. De préférence, les pistes 44 des régions de source (ou de drain) d'une même ligne de mot, en d'autres mots les pistes 44 alignées dans la direction Y, sont reliées entre elles, par exemple par des pistes conductrices.
au moins une languette qui s’étend selon une direction sensiblement circonférentielle du corps, en saillie et dans une fenêtre ménagée dans la paroi de la section de connexion, et qui est venue de matière avec ladite paroi, la languette étant élastiquement déformable selon une direction radiale du corps entre un état d’agrippement et un état d’échappement de l’extrémité de conduit ; et une bague montée sur la section de connexion pour pivoter axialement entre une position de libre déformation de la languette et une position de verrouillage dans laquelle une première surface de la bague maintient la languette dans son état d’agrippement, et entre la position de de libre déformation de la languette et une position de déconnexion dans laquelle une deuxième surface de la bague maintient la languette dans son état d’échappement.
Selon une caractéristique particulière de l’invention, la bague comprend un rebord qui, dans la position de verrouillage, a une paroi interne recouvrant au moins en partie la languette et comprenant la première surface s’opposant à une déformation de la languette vers son état d’échappement.
Selon une autre caractéristique particulière de l’invention, la bague comprend au moins un bras dont un côté comprend la deuxième surface qui, dans la position de déconnexion, coopère avec une extrémité libre de la languette pour s’opposer à une déformation de celle-ci vers son état d’agrippement, la deuxième surface formant une rampe de soulèvement de l’extrémité libre de la languette pour amener celle-ci vers son état d’échappement.
De manière particulière, la languette comporte une surface inclinée formant une rampe d’effacement de la languette lors de l’introduction de l’extrémité de conduit dans le logement.
De manière particulière, la bague comprend au moins une patte de verrouillage flexible qui coopère avec un flanc de la fenêtre pour assurer le maintien de la bague sur le corps et qui constitue un appui sans jeu contre un flanc de la languette situé en regard du flanc de la fenêtre pour interdire une déformation de ladite languette vers ledit flanc de la fenêtre.
De préférence, le dispositif comprend des moyens de maintien amovible de la bague dans sa position de verrouillage.
De manière particulière, la languette et un tronçon d’extrémité du corps sont respectivement pourvus d’un redan et d’un relief agencés pour former un renfoncement permettant d’assurer un maintien amovible de la bague dans sa position de verrouillage en recevant la première surface.
De préférence, le dispositif comprend des moyens de maintien amovible de la bague dans sa potion de libre déformation.
De manière particulière, le logement reçoit au moins un élément d’étanchéité et la bague comprend une portion tubulaire interne agencée pour retenir l’élément d’étanchéité dans le logement.
De manière particulière, les positions de verrouillage et de déconnexion de la bague sont situées de part et d’autre de la position de libre déformation.
De manière particulière, les moyens de retenue comprennent deux languettes diamétralement opposées l’une à l’autre.
De manière particulière, les positions de verrouillage et de déconnexion de la bague sont identifiables par l’apparition sélective d’un premier symbole (S1) et d’un deuxième symbole (S2).
la est une vue en perspective d’une extrémité de conduit et d’un dispositif de raccordement selon un mode de réalisation particulier de l’invention ;
la est une vue analogue à la dans laquelle le dispositif de raccordement est en service ;
la est une vue en éclaté du dispositif de raccordement illustré à la , selon un premier angle de vue ;
Enfin, la présence de fibres atrophiques est confirmée, avec une surface de section transversale des fibres musculaires réduite, qui contribuent à la fonte musculaire (Shin, Jonghyun et al. “ Wasting mechanisms in muscular dystrophy .” The international journal of biochemistry & cell biology vol. 45,10 (2013): 2266-79. doi:10.1016/j.biocel.2013.05.001). (Fig1G)
Les muscles extra-oculaires (MEO) ont également été analysés, car ils sont sélectivement épargnés dans la dystrophie musculaire de Duchenne (Kaminski, H J et al. “Extraocular muscles are spared in advanced Duchenne dystrophy .” Annals of neurology vol. 32,4 (1992): 586-8. doi:10.1002/ana.4103204181992). Les MEO sont des muscles striés complexes qui présentent des propriétés biochimiques, mécaniques et physiologiques distinctes par rapport à leurs homologues des membres (Bondi, A Y, and D J Chiarandini. “ Morphologic and electrophysiologic identification of multiply innervated fibers in rat extraocular muscles .” Investigative ophthalmology & visual science vol. 24,4 (1983): 516-9., Jacoby et al., 1990, Kono et al., 2005, Fraterman et al., 2007). Les colorations à l'hématoxyline/éosine et au rouge Sirius ont confirmé la préservation des MEO isolées d'animaux R-DMDdel52 âgés de 12 mois (Fig. H-K), sans signe d'inflammation ou de fibrose significative par rapport aux témoins (Fig. 1H-I).
Il est intéressant de noter que les MEO R-DMDdel52 présentaient un nombre élevé de myofibres à noyau central par rapport aux muscles WT (Fig. 1J), mais dans une moindre mesure par rapport aux TA (Fig.1F). En outre, l'analyse de la taille des fibres n'a pas montré de variation significative entre les MEO des rats WT et R-DMDdel52 âgés de 12 mois (Fig. 1K).
Ces résultats montrent que les R-DMDdel52 présentent une dystrophie musculaire progressive et sévère caractérisée par des caractéristiques bien décrites de la physiopathologie de la DMD, y compris le fait que les muscles extra-oculaires ne sont spécifiquement pas atteints par la maladie.
Tableau 1 : Exemple 2 :
Les muscles extra-oculaires ne présentent pas de défauts de régénération musculaire progressive dans le modèle DMD du rat
Les lésions du tissu musculaire entraînent la nécrose des fibres musculaires qui déclenchent la régénération musculaire en activant le pool de cellules satellites musculaires quiescentes situées à proximité des fibres musculaires.
Le déroulement temporel de la régénération musculaire dans le tibia antérieur des rats R-DMDdel52 a été évalué, en utilisant l'immunofluorescence pour la chaîne lourde de myosine embryonnaire (eMHC), un marqueur spécifique des myofibres en développement et en régénération sur des coupes histologiques de muscles squelettiques.
Une immunohistochimie est ainsi réalisée sur cryosections : Les muscles frais congelés ont été sectionnés avec le cryostat Leica CM3050S (Leica Biosystems) à 7µm d'épaisseur sur des lames Super Frost Plus (Thermo scientific, 10149870) et conservés à -80°C.
Les lames ont été décongelées pendant environ 20 minutes à température ambiante, réhydratées pendant 5 minutes dans du PBS 1X et ensuite fixées avec du PFA à 4% dans du PBS 1X pendant 10 minutes à 4°C. Après des lavages dans du PBS 1X, les lames ont été placées dans une solution froide d'acétone et de méthanol (1:1) pendant 6 minutes à -20°C, puis incubées avec de la BSA à 10% pendant 1 heure de blocage. Les anticorps primaires ont été ajoutés à 1% de BSA et incubés pendant la nuit (O/N) à 4°C.
Les anticorps primaires suivants ont été utilisés : Pax7 (Santa Cruz Biotechnology, sc-81648), ki67 (Abcam, sp6 ab16667), Cdkn2a (Abcam Anti-CDKN2A/p16INK4a, Ab108349), Cdkn1a (Thermofisher, bs-10129R) et γH2AX (Abcam, ab11174). Après des lavages répétés, les lames ont été incubées avec des anticorps secondaires de type Alexa fluor pendant 45minutes à température ambiante. La coloration de la laminine a été réalisée après l'incubation des anticorps secondaires, pendant 1h à 37°C en utilisant un anticorps conjugué (NB300-144AF647).
Les noyaux ont été colorés avec du Hoechst (Sigma-Aldrich, B2261). La fluorescence a été analysée avec un appareil confocal LSM800. Les immunomarquages de la chaîne lourde de la myosine embryonnaire (eMHC), de la dystrophine et du β-dystroglycane ont été réalisés sans fixation et avec une perméabilisation dans du Triton à 0,5 % dans du PBS 1X pendant 5 minutes. L'eMHC (sc-53091), la dystrophine (Leica, DYS2-CE), le β-dystroglycane (Leica, B-DG-CE) et la laminine (Sigma-Aldrich, L9393) ont été incubés à l'air libre.
L'incubation des anticorps secondaires et la coloration des noyaux ont été effectuées comme décrit ci-dessus. La fluorescence a été analysée avec un appareil confocal LSM800.
Un grand nombre de myofibres positives à l'eMHC dans les TA des rats R-DMDdel52 âgés de 3 semaines est observé, alors qu'elles étaient complètement absentes dans les muscles WT (Fig. 2A).
Une forte diminution du nombre de fibres en régénération a été observé au fil du temps (Fig. 2A-B), indiquant une réduction progressive de la régénération musculaire au cours de la progression de la dystrophie musculaire.
En revanche, bien qu'il soit légèrement augmenté chez les rats R-DMDdel52 par rapport aux rats WT, le processus de régénération est stable et limité au cours de la progression pathologique dans les muscles extra-oculaires.
Un mode de réalisation pallie tout ou partie des inconvénients des mémoires à changement de phase connues.
Un mode de réalisation prévoit une cellule mémoire comprenant un substrat comprenant une région semiconductrice et une région isolante, une première couche isolante et une deuxième couche d'un matériau à changement de phase reposant sur la première couche isolante, la première couche isolante étant traversée par des premier et deuxième vias conducteurs, le premier via conducteur étant en contact, par une extrémité, avec la première couche et, par une autre extrémité, avec la région semiconductrice, le deuxième via conducteur étant en contact, par une extrémité, avec la première couche et une piste conductrice d'un réseau d'interconnexions recouvrant la première couche et, par une autre extrémité, seulement avec la région isolante.
Un autre mode de réalisation prévoit un procédé de fabrication d'une cellule mémoire comprenant : a) la formation d'un substrat comprenant une région semiconductrice et une région isolante ; b) la formation d'une première couche isolante qui est traversée par des premier et deuxième vias conducteurs, et c) la formation d'une deuxième couche de matériau à changement de phase reposant sur la première couche isolante, le premier via conducteur étant en contact, par une extrémité, avec la première couche et, par une autre extrémité, avec la région semiconductrice, le deuxième via conducteur étant en contact, par une extrémité, avec la première couche et une piste conductrice d'un réseau d'interconnexions recouvrant la première couche et, par une autre extrémité, seulement avec la région isolante.
Selon un mode de réalisation, la région semiconductrice est une région de source ou de drain d'un transistor.
Selon un mode de réalisation, la deuxième couche est recouverte d'une troisième couche isolante.
Selon un mode de réalisation, la hauteur de la deuxième couche est inférieure à la hauteur de la piste conductrice.
Selon un mode de réalisation, la piste conductrice et la deuxième couche sont séparées par une partie d'un matériau isolant.
Selon un mode de réalisation, la deuxième couche est au moins partiellement dans un état cristallin.
Selon un mode de réalisation, le procédé comprend une étape d), qui suit l'étape c), de formation du réseau d'interconnexions sur la deuxième couche.
Selon un mode de réalisation, le procédé comprend une étape c1), entre les étapes c) et d), de formation d'une couche de protection sur la deuxième couche.
Selon un mode de réalisation, le procédé comprend, avant l'étape d), la gravure de la couche de protection afin de former des espaceurs sur les flancs de la deuxième couche.
Un autre mode de réalisation prévoit une matrice mémoire comprenant une pluralité de cellules mémoire telles que décrites précédemment.
Selon un mode de réalisation, la matrice mémoire comprend au moins une cellule ayant une deuxième couche partiellement à l'état amorphe.
la représente deux cellules mémoire à changement de phase selon un mode de réalisation ;
la représente, schématiquement, l'implantation des différentes parties du mode de réalisation de la ;
Selon un mode de réalisation particulièrement préféré de l’invention, dans la combinaison utilisée selon l’invention, l’activateur pharmacologique est la Forskoline et l’activateur génétique est un virus adéno-associé (AAV) comprenant une séquence protéique du récepteur de la thyréostimuline (TSHR) de SEQ ID NO :1 ou un variant fonctionnel ayant une séquence protéique identique à au moins 60% à la séquence SEQ ID NO :1, ou une séquence nucléotidique du TSHR de SEQ ID NO :2 ou un variant fonctionnel ayant une séquence nucléotidique identique à au moins 60% à la séquence SEQ ID NO :2, plus préférentiellement un AAV8 ou un AAV9.
Un autre objet de l’invention concerne un vecteur adénoviral comprenant une séquence protéique du récepteur de la thyréostimuline (TSHR) de SEQ ID NO :1 ou un variant fonctionnel ayant une séquence protéique identique à au moins 60% à la séquence SEQ ID NO :1, ou une séquence nucléotidique du TSHR de SEQ ID NO :2 ou un variant fonctionnel ayant une séquence nucléotidique identique à au moins 60% à la séquence SEQ ID NO :2pour son utilisation à titre de médicament.
Le vecteur adénoviral préférentiellement utilisé selon l’invention est un virus adéno-associé (AAV), préférentiellement un AAV8 ou un AAV9.
Le vecteur adénoviral est préférentiellement utilisé selon l’invention pour préserver et régénérer la structure et la fonction musculaire en bloquant la sénescence, plus préférentiellement pour prévenir et/ou traiter les myopathies, encore plus préférentiellement la DMD.
Selon un autre mode de réalisation de l’invention, le vecteur adénoviral est préférentiellement utilisé selon l’invention pour prévenir et/ou traiter la sarcopénie.
L'analyse des données a été réalisée à l'aide du logiciel GraphPad Prism, version 6.0. Les données sont exprimées en moyenne ± écart-type. Exemple1 :
Génération des rats R-DMDdel52 :
Le modèle de rat R-DMDdel52 est généré par la délétion de 188 pb (paires de bases) et la génération d’un codon stop prémature au niveau de l’exon 52 du gène de la Dystrophine (DMD) pour produire une perte de fonction de l’allèle responsable de la production de dystrophine.
La séquence de l’exon 52 du rat (ENSRNOE00000518152) et les séquences introniques autour ont été sélectionnées afin d’identifier les séquences d’ARN guides (sgRNAs) par l’algorithme BWA pour l’édition génomique par la méthode CRISPR.
Après une validation in vitro , deux sgRNAs 3’ et 5’ ont été sélectionnés et microinjéctés dans les ovocytes des rats Sprague Dawley.
Les animaux F0 ont été dépistés par génotypage par PCR de jonction. Le génotypage est réalisé sur de l'ADN extrait de biopsies de la queue ou de l'oreille.
Le mélange PCR a été préparé avec le tampon Dream Taq 10X (ThermoFisher Scientific, Cat#B65), 0.25mM de dNTP (10mM), 0.3µM de l'amorce sens ((5’-CTAACGCATTTAAAATATGCTGTCA-3’), 0.3 µM de l'amorce anti-sens (5’-GTTGGCTTAGCTCAACAACCAAGAT-3’, 100µM), 0.03U/µl DreamTaq et environ 150ng d'ADN. La PCR a été réalisée à l'aide du Thermal Cycler 2720 avec le programme thermique suivant : dénaturation initiale à 95°C pendant 5 minutes, 40 cycles de dénaturation à 95°C pendant 10 secondes, hybridation des amorces à 60°C pendant 30 secondes et élongation à 72°C pendant 45 secodes, et l'élongation finale à 72°C pendant 5 minutes.
La délétion de l'exon 52 a été détectée sur un gel d'agarose à 2%.
Les rats ont été hébergés dans une installation exempte d'agents pathogènes avec des cycles de 12 heures de lumière et de 12 heures d'obscurité, conformément à la directive européenne 2010/63/UE.
Seuls des rats mâles ont été utilisés pour les expériences car la mutation est portée sur le chromosome X.
Les animaux ont été manipulés conformément aux directives nationales et européennes, et les protocoles ont été approuvés par le comité d'éthique du ministère français (APAFIS#25606- 202005311746599).
La machine électrique auxiliaire tournante 21A est préférentiellement accouplée à la pompe à huile moteur 21 de façon qu’en fonctionnement normal, la pompe à huile principale 21 n’entraine pas la pompe électrique 21A. Une telle configuration peut notamment être obtenue au moyen d’une roue libre non figurée.