INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les spectres des trois échantillons font apparaitre la présence de curcumine (absorbant entre 400 nm et 430 nm) et d’autres composés issus du procédé (absorbant entre 450 nm et 500 nm). La teneur en curcumine semble être équivalente dans le surnageant de curcuma fermenté (Curcuma-F-jus) et le curcuma natif (Curcuma-H2O) montrant que la fermentation n’a pas dégradé ce composé. De plus, la poudre fermentée de curcuma (Curcuma-F-poudre) présente des pics en curcumine et des composés de métabolisation très marqués, environ quatre fois plus importants que ceux du curcuma natif. Le procédé d’extraction-fermentation a permis de libérer 4 fois plus de curcumine qu’une simple extraction à l’eau et donc rend la curcumine plus accessible. Ces résultats montrent que la curcumine n’est pas dégradée par la fermentation et que la poudre fermentée séchée est enrichie en une forme de curcumine biodisponible et extractible à l’eau. EXEMPLE 7 : Propriétés biologiques d'extraits de pastel et de coproduits de pastel
présente l'influence de cet extrait E3 sur différentes activités.
donne les spectres d'absorption d'extraits de Curcuma selon l'invention.
présente le taux de fibroblastes vivants à différentes concentrations de l'extrait E6 (feuilles de pastel issues de décoction) selon l'invention.
présente le taux de kératinocytes vivants à différentes concentrations du même extrait.
montre le taux de fibroblastes vivants à différentes concentrations de l'extrait E7 (jus coproduit du pastel) selon l'invention.
présente le taux de kératinocytes vivants à différentes concentrations du même extrait E7.
présente le taux de fibroblastes vivants à différentes concentrations de l'extrait E8 (feuilles natives de pastel) selon l'invention.
présente le taux de kératinocytes vivants à différentes concentrations du même extrait E8.
montre l'influence de l'extrait E6 sur différentes activités.
présente l'influence de l'extrait E7 sur différentes activités.
présente l'influence de l'extrait E8 sur différentes activités.
donne les spectres d'absorption d'un milieu fermentaire de spiruline selon l'invention.
représente l'effet d'extraits selon l'invention sur des cellules végétales. EXEMPLE 1 : Élaboration d'une composition de micro-organismes
Les micro-organismes choisis sont introduits sous forme sèche ou humide dans du thé noir sucré constituant le milieu nutritif. Le thé est préparé à partir de 2 g/l à 50 g/l de feuilles sèches infusées dans de l'eau à une température de 70°C à 90°C durant 10 mn à 60 mn. Communément, on utilise 5 g/l à 10 g/l de feuilles de thé infusées 15 mn à 80°C. L'infusion peut être utilisée en l'état avec les feuilles, ou de manière plus commode la phase aqueuse est filtrée. Le saccharose est ensuite dissous dans la phase aqueuse à une concentration, comprise entre 20 g/l et 100 g/l, en général de 50 g/l. Le saccharose peut être remplacé par un mélange de glucose et fructose. Le taux d’inoculation est compris entre 10 3 CFU/g et 10 6 CFU/g de milieu selon les groupes de microorganismes. Les bactéries acétiques sont apportées par une quantité de vinaigre non pasteurisé telle que le pH du milieu nutritif reste dans un intervalle de 4 à 5. Les microorganismes se développent facilement dans les conditions définies. La suspension microbienne est incubée entre 25°C et 30°C pendant 6 à 21 jours, en conditions non-aseptiques dans un réacteur ouvert, avantageusement de forme cylindrique, de sorte que le système est dynamique et qu'une autorégulation s'opère. Après une quinzaine de jours, un biofilm se forme indiquant la création du consortium. Le consortium est entretenu dans le milieu nutritif en respectant un rapport massique consortium/milieu allant de 50/50 à 20/80. Au bout d'environ 3 semaines, le pH et le degré Brix ont diminué indiquant que les sucres sont consommés. Un repiquage sur milieu nutritif frais est alors réalisé selon les techniques conventionnelles connues dans l'état de l'art.
Des compositions de micro-organismes ont été élaborées selon cette procédure.
Composition C1 : La composition C1 est élaborée selon l’exemple 1 en utilisant deux souches alimentaires de bactéries lactiques, Lactobacillus plantarum et Lactobacillus acidophilus , deux souches de levures de boulangerie, Saccharomyces cerevisiae et Torulaspora delbrueckii et du vinaigre de vin non pasteurisé à 5% d'acidité, dans une infusion de thé noir préparée avec 8 g/l de feuilles infusées 15 mn à 85°C puis filtrée, et additionnée de 50 g/l de saccharose. Le biofilm du consortium se forme à partir de 15 jours.
Composition C2 : La composition C2 est élaborée selon l’exemple 1 en utilisant deux souches alimentaires de bactéries lactiques, Lactobacillus plantarum et Lactobacillus acidophilus , deux souches de levures de boulangerie, Saccharomyces cerevisiae et Torulaspora delbrueckii et du vinaigre de cidre non pasteurisé à 5% d'acidité. Les ferments sont introduits dans une infusion préparée avec 10 g/l de feuilles de thé infusées 20 mn à 80°C puis filtrée, et additionnée de 70 g/l de saccharose. Le biofilm du consortium se forme à partir de 15 jours, bien qu'un peu moins important que dans la composition C1.
Formation du consortium : Un dénombrement microbiologique des flores viables a été effectué après 5 jours de culture. Il indique la présence d'une flore totale comprise entre 10 6 CFU/g et 10 7 CFU/g, avec une représentation similaire de chaque groupe microbien. À titre de comparaison, chaque micro-organisme de la composition C1 a été mis en culture individuellement dans les mêmes conditions: milieu de culture de thé sucré, un taux d’inoculation voisin de 10 6 CFU/g, réacteurs en conditions non-aseptiques, température de 25°C à 30°C. Au bout de 5 jours, les lactobacilles n’ont pas survécu et les levures ont été contaminées. L’essai avec le vinaigre seul n’a fait apparaitre aucune évolution: ni contamination, ni croissance des bactéries acétiques. Par ailleurs, du thé noir sucré identique au milieu nutritif de la composition C1 a été incubé dans les mêmes conditions. Il a présenté une contamination par des moisissures au bout de 5 jours. Aucun des essais n’a montré la formation de biofilm.
EXEMPLE 2 : Élaboration d'extraits végétaux
Extrait E1 Une poudre d’ortie ( Urtica dioïca ) est mélangée à de l’eau déchlorée chauffée à 80°C à hauteur de 50 g/kg de milieu. Du saccharose est ensuite ajouté à hauteur de 50 g/kg de milieu et laissé à refroidir. La composition C2 préparée selon l’exemple 1 est ajoutée à raison de 1% et le tout est incubé à 28°C pendant 11 jours. On obtient l'extrait d'ortie E1, avec le résidu de poudre d'ortie. Les fractions solide et liquide peuvent ensuite être séparées par filtration, centrifugation ou autre technique connue en soi, selon les applications envisagées.
Extrait E2 Une poudre d’ortie ( Urtica dioïca ) est mélangée à de l’eau déchlorée chauffée à 80°C à hauteur de 50 g/kg de milieu. Le milieu est ensuite sucré à hauteur de 50 g/kg de milieu et laissé à refroidir. La composition C2 préparée selon l’exemple 1 est ajoutée dans les proportions de 2% à la suspension aqueuse d’ortie non filtrée. Le mélange d’ortie avec le résidu de poudre est incubé pendant 11 jours. Le surnageant de l’essai est prélevé puis soumis à une première filtration pour éliminer les résidus de plantes et à une seconde filtration stérilisante sur 0,2 µm pour éliminer les ferments. On obtient l'extrait E2.
Des extraits de romarin ( Rosmarinus officinalis ), de rose de Damas ( Rosa damascena ) et de feuilles de jujubier ( Ziziphus zizyphus ) ont été préparés selon un protocole identique.
Extrait E3 Du Ginkgo biloba sous forme de 50 g/kg de poudre de feuilles est mis dans de l’eau déchlorée chauffée à 80°C. Du saccharose est ajouté à hauteur de 50 g/kg. La composition C2 préparée selon l’exemple 1 est ajoutée à la suspension aqueuse de Ginkgo à hauteur de 2%. Le tout est incubé pendant 13 jours à 28°C. Le surnageant de l’essai est prélevé puis filtré pour éliminer les résidus de plantes et stérilement pour éliminer les ferments.
Extrait E4 Le Curcuma ( Curcuma longa , poudre de racines) est mis à 200 g/kg dans l’eau sucrée à 50 g/kg chauffée à 80°C pendant 15 min. Le milieu est brassé et mis à refroidir avant l’ajout des ferments de la composition C2 préparée selon l’exemple 1, à 2%. L’essai est incubé pendant 15 jours à 28°C. À la fin de l’extraction/fermentation, la poudre fermentée est récupérée et séchée. Un échantillon est prélevé et repris dans de l’eau à 200 g/kg pour le caractériser. Il est comparé à de la poudre de Curcuma non-fermentée et reprise dans de l’eau à hauteur de 200 g/kg.
L’observation visuelle des deux échantillons montre une différence nette de comportement: le surnageant de l’extrait fermenté de Curcuma est de couleur jaune et trouble, indiquant la solubilisation de composés tels que la curcumine ou autres molécules colorées, alors que le Curcuma dans l’eau est translucide avec un dépôt important après décantation, indiquant très peu de composés solubilisés.
Extrait E5 Un extrait fermenté de thé noir ( Camellia sinensis ) a été préparé en infusant 8 g/l de feuilles dans de l’eau à 80°C, puis du saccharose a été ajouté à hauteur de 50 g/l. Après refroidissement à température ambiante, la composition C1 préparée à l'exemple 1 est ajoutée à hauteur de 2%. L’ensemble est mis à incuber à 25°C pendant 14 jours. La phase liquide acidifiée à hauteur de 2% (acidité totale en équivalent acide acétique) est prélevée puis filtrée sur filtre 0,2 µm.
Extrait E6 L’extraction du pigment bleu pastel tiré de la plante du même nom ( Isatis tinctoria ) demande de traiter une grande quantité de feuilles en décoction dans l’eau. Le rendement en pigment est faible puisqu’avec 1 tonne de feuilles fraiches, on extrait 1 kg de pigment. Le procédé d’extraction ciblé sur le pastel génère donc des coproduits en grande quantité, qui peuvent contenir des composés intéressants pour d’autres applications. L’obtention du pigment met en œuvre des outils enzymatiques issus de la flore endogène de la plante, indiquant son caractère fermentescible. Cependant, la fermentation des feuilles d’Isatis sans contrôle donne lieu au développement de flores putrides dégageant des odeurs pestilentielles lors de l’épandage ou du stockage de ces déchets. Nous nous sommes intéressés à trois coproduits, à savoir les feuilles fraîches après décoction dans l’eau (extrait E6), la phase liquide issue de l’extraction du pastel obtenue après précipitation et décantation du pigment de pastel (extrait E7) et le jus issu de la décoction des feuilles fraîches (extrait E8).
Des feuilles d’Isatis ayant subi une première extraction par décoction ont servi à préparer l'extrait fermenté E6. Pour ce faire, 8,5 kg de feuilles entières humides (contenant environ 15% de matière sèche) sont d'abord soumises à une décoction dans 20 kg d’eau sucrée à 50 g/kg à 60°C. Puis, 30 kg d’eau froide déchlorée sont ajoutés pour compléter et refroidir la préparation. Lorsque celle-ci atteint 30°C, on ajoute la composition C2 préparée selon l’exemple 1, à hauteur de 2%. Le tout est incubé pendant 10 jours à 28°C. Le surnageant de fermentation est prélevé puis filtré pour éliminer les résidus de plantes, puis stérilement sur 0,2 µm pour éliminer les ferments.
L’extrait obtenu a une odeur fraiche et végétale, caractéristique de l’Isatis, alors que la charge microbienne initiale des feuilles humides était élevée puisqu’elle était supérieure à 3.10 7 CFU/g. La fermentation contrôlée et orchestrée par le consortium de micro-organismes de la composition C2 a donc permis de surmonter la flore endogène des feuilles d’Isatis. Les minéraux libérés lors de la fermentation ont été dosés par spectrométrie à plasma à couplage inductif (ICP-OES) ou par spectrométrie de masse à couplage inductif (ICP-MS). Le taux de calcium libéré est de 218,0 mg/kg, celui de magnésium de 31,4 mg/kg et celui de fer de 9,15 mg/kg. Ces concentrations en minéraux sont significatives et démontrent l’intérêt de fermenter les feuilles humides issus de la décoction pour leur décomplexation et leur libération.
Extrait E7 Un extrait fermenté d'un jus restant après précipitation et décantation du pigment de pastel a été préparé. L'objectif est de valoriser ce coproduit qui est actuellement jeté, en le traitant par fermentation. Le jus a été chauffé à 80°C et, à cette température, du saccharose est ajouté à hauteur de 50 g/l et maintenu à cette température pendant 15 mn afin de diminuer la charge microbienne endogène qui s'élève à 5.10 7 CFU/g. Lorsque le milieu est refroidi, la composition C2 est ajoutée à hauteur de 2% au milieu et le tout est incubé à 28°C pendant 10 jours. Le pH initial du milieu est de 5,6 ce qui est propice au développement du consortium. Au bout de 10 jours, la fermentation est arrêtée par filtration stérilisante. L’extrait obtenu est de couleur brune avec une plaisante odeur végétale caractéristique.
Extrait E8 Le jus obtenu par décoction des feuilles natives d’Isatis à 200 g/l dans de l’eau à 70°C avant précipitation et décantation du pigment de pastel a été fermenté. Pour ce faire, le jus est chauffé pendant 15 mn à 80°C, puis du saccharose est ajouté à hauteur de 50 g/l. Le jus sucré est maintenu à cette température pendant 15 mn. Après refroidissement, la composition C2 est ajoutée à hauteur de 2% au milieu et le tout est incubé à 28°C pendant 10 jours. Le pH initial du milieu est de 4,5 ce qui est propice au développement du consortium. Au bout de 10 jours, la fermentation est arrêtée par filtration stérilisante.
L’extrait obtenu est de couleur brun-vert avec une odeur végétale caractéristique, et moussant. Les minéraux libérés durant la fermentation ont été dosés par spectrométrie à plasma à couplage inductif (ICP-OES) ou par spectrométrie de masse à couplage inductif (ICP-MS). Le taux de calcium libéré est de 321,0 mg/kg, celui de magnésium de 63,0 mg/kg et celui de fer de 15,2 mg/kg. Ces concentrations en minéraux sont significatives et intéressantes pour des applications cosmétiques. Le pouvoir moussant de l’extrait E8 peut être exploité pour des produits nettoyants doux. On remarque en outre que l'extrait E6 obtenu à partir de feuilles issues de la production du pastel a permis d'accéder à des quantités de minéraux allant de 50% à 70% de celles tirées des feuilles natives (extrait E8). Le procédé selon l'invention montre qu'une valorisation des coproduits du pastel est à considérer.
Avantageusement, le circuit intégré est un circuit de pilotage, par exemple un circuit élémentaire d'un circuit de pilotage à matrice active de l'arrangement matriciel. De la sorte, une étape de montage d'un tel circuit à matrice active sur le support formant arrangement matriciel est évité. En particulier, il est souvent demandé que les dispositifs de signalisation prennent des formes variées, or la fabrication de supports comprenant des circuits de pilotage des sources lumineuses à matrice active nécessite des investissements élevés pour chaque modèle, ce qui rend chère la réalisation de modèles aux dimensions variées.
Avantageusement, l’au moins un élément électroluminescent est enterré dans le substrat, de sorte que la distance de la surface émettrice de l'au moins un élément électroluminescent à un dioptre de sortie de l'optique de conformation des rayons lumineux issus de l’au moins un élément électroluminescent est augmentée. Ainsi, une hauteur de la source lumineuse est réduite, une dispersion de la chaleur de l'au moins un élément électroluminescent est améliorée, et les coûts de production sont diminués. De plus, un éloignement de l'au moins un élément électroluminescent de la surface de sortie de l’optique de conformation des rayons lumineux issus dudit au moins un élément électroluminescent permet d’améliorer une intensité lumineuse dans une direction d'intensité maximale de la lumière émise par de la source lumineuse.
Avantageusement, l’au moins un élément électroluminescent est disposé de sorte que sa surface émettrice affleure de la face supérieure du substrat. Cela est avantageusement obtenu par un procédé, de préférence sur wafer, comprenant la constitution d’un substrat collectif selon un procédé comportant les étapes suivantes :
- disposition de éléments électroluminescents sur une surface plane d’un plateau de maintien temporaire,
- optionnellement disposition de circuits intégrés de contrôle sur le plateau de maintien temporaire,
- recouvrement de la surface plane et des éléments électroluminescents par une couche de résine de type diélectrique,
- constitution d’un réseau d’interconnexion dans ladite couche de résine, notamment par ablation laser de parties de la couche de résine, ledit réseau permettant d’alimenter les éléments électroluminescents,
- optionnellement, ajout de couches de résine supplémentaires et de réseaux d’interconnexion supplémentaires ; le réseau pouvant alors comporter une ou plusieurs couches,
- constitution de contacts sur la dernière couche de résine.
Au terme de ce procédé, le substrat collectif est constitué, l’ensemble peut alors être retourné et le plateau de maintien temporaire peut être retiré. De la sorte, on a obtenu un substrat collectif.
Des optiques de conformation des rayons lumineux peuvent alors être associées à des éléments électroluminescents. De la sorte, le procédé reste collectif jusqu'à la singulation de sources lumineuses selon l’invention.
Avantageusement, la source lumineuse comporte un seul élément électroluminescent.
Alternativement, la source lumineuse comporte une pluralité d’éléments électroluminescents
Avantageusement, chacun des éléments électroluminescents coopère avec l'optique de conformation des rayons lumineux. De la sorte, un nombre de sources lumineuses pour assurer une contribution donnée à une fonction de signalisation est réduit, un nombre d'opérations de fabrication de sources lumineuses (en particulier des opérations de singulation et de qualification) et un nombre de composants à monter sur le support pour réaliser l'arrangement matriciel est réduit. Ainsi, le coût de fabrication et la complexité de l'arrangement matriciel est particulièrement réduit.
Alternativement, au moins un des éléments électroluminescents ne coopère pas avec une portion transparente de l'optique de conformation des rayons lumineux de sorte qu'une empreinte de l'au moins un élément électroluminescent sur le substrat est réduit. Il est alors possible d'ajouter des éléments électroluminescents en conservant une empreinte de la source lumineuse, ou en l'augmentant peu, du moins en conservant une empreinte significativement moindre que lorsque tous les éléments électroluminescents ont un élément optique dédié à l'au moins une source lumineuse. Par exemple, au moins un élément électroluminescent est placé dans une zone centrale du substrat et coopère avec une partie transparente de l'optique de conformation des rayons lumineux, et l'élément électroluminescent est placé dans une zone périphérique du substrat et ne coopère pas avec la partie transparente de l'optique de conformation des rayons lumineux, c’est-à-dire que les rayons émis par l'élément électroluminescent dirigés vers l'extérieur du dispositif lumineux de véhicule automobile ne traversent pas la partie transparente.
Avantageusement, chaque élément électroluminescent correspond à une portion optique de conformation des rayons lumineux lui assurant une distribution lumineuse identique ou au moins similaire à celle des autres éléments électroluminescents de la source lumineuse. De la sorte, une perception des éléments électroluminescents de la source lumineuse est homogène. De préférence, l'espacement des éléments électroluminescents de l'arrangement matriciel est sensiblement identique, peu importe si lesdits éléments électroluminescents appartiennent à des sources lumineuses différentes. De la sorte, une perception des éléments électroluminescents de l'arrangement matriciel entier est homogène.
Le procédé qui vient d'être décrit constitue un gain de temps important et réduit les opérations faisant intervenir des opérateurs. Il répond aux exigences actuelles en termes d’éco-responsabilité: pas d’intrant de synthèse, conditions de culture en système ouvert peu énergivores et sans asepsie, autonomie de fonctionnement durant le processus. Il est industrialisable et rentable économiquement. On souligne qu'il permet d'accéder à des composés qui sont rarement extraits par des méthodes classiques par solvant ou même par des méthodes enzymatiques ciblées. On attribue cette faculté au fait que le consortium à l'œuvre offre une grande diversité d’outils biochimiques, dont certains sont capables de casser des structures supramoléculaires de la plante, de simplifier des macro-composés pour les rendre solubles et ainsi les libérer. Dès lors, le procédé peut être qualifié de procédé d’extraction-fermentation-transformation (tout en un).
Un extrait végétal contenant des composés actifs, obtenu par un procédé tel que décrit ci-dessus est également objet de la présente invention. Comme exposé plus haut, cet extrait peut être produit à partir d'une multitude de végétaux, le végétal pouvant être choisi parmi les végétaux supérieurs, les végétaux inférieurs ou les organismes du phytoplancton. Peut être notamment concerné un extrait végétal produit à partir d'un substrat choisi parmi les plantes à fleur, les plantes aromatiques, les céréales, les plantes fourragères, les protéagineux, les oléagineux, et en particulier l'ortie, le pastel, la rose de Damas, le jujubier, le ginkgo biloba, le romarin, la lavande, la camomille, la bruyère, le gingembre, le curcuma, le café, le thé, le cacao, la spiruline.
Comme exposé plus haut, les extraits végétaux obtenus à l'aide de la composition de micro-organismes par le procédé d'extraction selon l'invention sont caractérisés par une grande diversité de composés obtenus, et de manière corollaire une grande variété d'activités biologiques, de propriétés physico-chimiques et de propriétés organoleptiques, notamment olfactives, avec dans certains cas, des synergies intéressantes. Ils sont donc particulièrement indiqués pour être utilisés dans des compositions élaborées en vue de la mise en œuvre de ces activités. Ils peuvent en particulier être formulés dans des compositions, qui font également l'objet de la présente invention, telles que des crèmes, des lotions, des gels ou d'autres formes, destinés à diverses utilisations. C'est le cas d'une composition comprenant un extrait végétal fermenté selon l'invention, ou susceptible d'être obtenue par un procédé selon l'invention, et au moins un composé choisi parmi : un excipient, un additif naturel, un additif de synthèse, un épaississant, un stabilisant, un émulsifiant, un adjuvant, ou un mélange de ceux-ci.
Quelle qu'en soit la formulation spécifique, les extraits végétaux selon l'invention sont des ingrédients qui peuvent être utilisés dans des applications nombreuses et variées, notamment pour la fabrication d'un produit pharmaceutique, notamment dermatologique, d'un produit cosmétique, d'un parfum, d'un complément alimentaire ou d'un produit de traitement des plantes.
Selon un mode de réalisation, un extrait végétal objet de l'invention peut être utilisé pour la fabrication d'un produit à visée cosmétique ou thérapeutique pour une application cutanée, notamment une crème. Cette crème peut par exemple comprendre un ou plusieurs extraits végétaux fermentés tels qu'un extrait d'ortie, un extrait de ginkgo biloba, un extrait de pastel, ou autres.
Un extrait végétal selon l'invention peut également être utilisé pour la fabrication d'un parfum comprenant un ou plusieurs extraits végétaux fermentés, par exemple un extrait de jujube, un extrait de thé, ou tout autre extrait odorant que l'expert imaginera d'assembler.
Selon un autre mode de réalisation, un extrait végétal selon l'invention peut être utilisé pour la fabrication d'un complément alimentaire, par exemple comprenant un extrait de spiruline fermenté riche en phycocyanine libre, obtenu après filtration du milieu fermentaire, ou obtenu par déshydratation et broyage en présence du milieu fermentaire.