INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Brève description des figures Fig. 1 Gel acrylamide pour visualiser la surexpression des enzymes réductases d’intérêt chez P seudomonas putida .
Fig. 2 Concentration totale de la frambinone (FBO) produite par les différentes souches de P seudomonas putida surexprimant les enzymes réductases d’intérêt.
Les inventeurs ont identifié et caractérisé des NADPH déshydrogénases (EC 1.6.99.1) capables chez P. putida de catalyser de façon asymétrique la réduction d’un alcène activé grâce au cofacteur NADPH. En particulier, la NADPH désyhdrogénase selon la présente divulgation est une benzalacétone réductase (BAR), appelée également benzylidenacetone reductase capable de produire un phénylbutanone ou dérivé de phénylbutanone à partir d’un phénylbutèn-2-one selon la réaction suivante :
[Schéma 1] où R1, R2 et R3 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi un hydrogène, un groupe OH ou OCH3 ; et R4 est un groupe CH3 ou aryle.
De manière tout à fait avantageuse, la Demanderesse a développé une souche de Pseudomonas putida capable d’exprimer une benzalacétone réductase et de produire efficacement un phénylbutanone ou dérivé de phénylbutanone à partir d’un phénylbutèn-2-one selon la réaction telle que décrite précédemment.
Ainsi, un premier objet de l’invention concerne une souche génétiquement modifiée de Pseudomonas putida caractérisée en ce qu’elle exprime un gène recombinant codant pour une benzalacétone réductase capable de produire un phénylbutanone ou dérivé de phénylbutanone.
De préférence, la souche de Pseudomonas putida selon la présente demande est capable de produire un phénylbutanone ou un dérivé de phénylbutanone choisi parmi le groupe constitué des produits listés dans le [Tableau 1] à partir d’un phénylbutèn-2-one correspondant choisi parmi le groupe constitué des substrats listés dans le [Tableau 1]. Substrats Produits [Chem 2] 4-(4-Hydroxy-3-méthoxyphényl)-3-butèn-2-one (vanillylidenacétone; déshydrozingérone) [Chem 3] 4-(4-hydroxy-3-méthoxyphényl)butan-2-one (zingérone) [Chem 4] 4-Phénylbut-3-en-2-one (Benzalacétone, Benzylidèneacétone, Methyl styryl ketone) [Chem 5] 4-phénylbutan-2-one (benzylacétone) [chem 6] 4-(4-hydroxyphényl)-but-3-èn-2-one (Hydroxybenzylidène acétone ; 4-hydroxybenzalacétone) (HBA) [Chem 7] 4-(4-hydroxyphényl)-2-butanone (frambinone) [Chem 8] 4-(3,4-dihydroxyphényl)-3-butèn-2-one [Chem 9] 1-(3,4-Dihydroxyphényl)butan-2-one [Chem 10] 4-(3,4-diméthoxyphényl)-3-butèn-2-one [Chem 11] 1-(3,4-Diméthoxyphényl)butan-2-one) [Chem 12] 4-(4-Méthoxyphényl)-3-butèn-2-one [Chem 13] 4-(4-méthoxyphényl)-2-butanone ; (Anisylacétone) [Chem 14] 1,3-diphénylprop-2-èn-1-one (chalcone, benzylidénacétophénone ou phénylstyrylcétone). [chem 15] 1,3-diphénylpropan-1-one ; dihydrochalcone [Chem 16] 1-(2,4-dihydroxy-6-methoxyphenyl)-3-phenylprop-2-èn-1-one (Alpinetin chalcone, Cardamonin) [Chem 17] 1-(2,4-dihydroxy-6-methoxyphenyl)-3-phenylpropan-1-one (Uvangoletin) [Chem 18] 4-(3,4,5-triméthoxyphényl)but-3-èn-2-one [Chem 19] 4-3,4,5-triméthoxyphényl)butan-2-one [Tableau 1] : Exemples de phénylbutanones ou dérivés de phénylbutanones (produits) pouvant être obtenus grâce à la souche de Pseudomonas putida telle que décrite dans la présente demande à partir du substrat correspondant.
Dans un mode de réalisation préféré, la souche de Pseudomon as putida selon la présente demande est capable de produire la frambinone à partir du 4-(4-hydroxyphényl)-but-3-en-2-one (HBA).
Dans un autre mode de réalisation préféré, la souche de Pseudomon as putida selon la présente demande est capable de produire la zingérone à partir du 4-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-buten-2-one.
En particulier, ladite souche génétiquement modifiée de Pseudomonas putida est caractérisée en ce qu’elle exprime un gène recombinant codant pour une benzalacétone réductase choisie parmi le groupe constitué de : - la 2-alcénal réductase NADPH dépendante d’ arabidopsis thaliana ( Uniprot Q39172, mise à jour le 2 juin 2021), appelée également AER et définie par la séquence SEQ ID NO : 1 , - l’ène-reductase de Zingiber officinale (Uniprot A0A096LNF0, mise à jour le 7 avril 2021) définie par la séquence SEQ ID NO : 2, - la curcumine réductase NADPH dépendante, appelée également CurA de Pseudomonas Putida (uniprot Q88K17, mise à jour le 2 décembre 2020) définie par la séquence SEQ ID NO : 3, - l’alcénal double liaison réductase NADP dépendante, appelée également DBR de Olimarabidopsis pumila (Uniprot A0A1C9CX65, mise à jour le 12 août 2020) définie par la séquence SEQ ID NO : 4, - la 2-alcénal réductase NADP(+) dépendante appelée également DBR de Nicotiana tabacum (Uniprot Q9SLN8 ; EC 1.3.1.102) définie par la séquence SEQ ID NO : 5, et - la 2-alcénal réductase (NADP(+) dépendante), appelée également Red de Capsicum annuum (Uniprot A0A1U8GFY1, mise à jour le 10 février 2021) définie par la séquence SEQ ID NO : 6.
Dans un mode de réalisation particulier, l’invention concerne une souche génétiquement modifiée de Pseudomonas putida caractérisée en ce qu’elle exprime un gène recombinant codant un variant fonctionnel d’une benzalacétone réductase décrite précédemment.
Par variant fonctionnel d’une benzalacétone réductase selon la présente divulgation, on entend une séquence polypeptidique qui est dérivée de la séquence polypeptidique d’une des enzymes benzalacétone réductases définie par une des séquences choisies parmi SEQ ID NO : 1 à 6, en particulier une séquence polypeptidique qui comprend une modification, i.e. substitution, insertion et/ou délétion d’un ou plusieurs acide aminés mais qui conserve l’activité de la benzalacétone réductase et notamment la capacité de produire dans la souche P. putida un phénylbutanone ou un dérivé de phenylbutanone à partir de phenylbutèn-2-one comme décrit précédemment.
L’activité d’un variant fonctionnel de la benzalacétone réductase peut être évaluée par toute méthode connue de l’homme du métier, en particulier comme illustrés dans les exemples en exprimant dans une souche de Pseudomonas putida un gène recombinant codant pour le variant fonctionnel de la benzalécétone réductase, de préférence cloné dans un plasmide en aval d’un promoteur permettant son expression dans la souche, et en cultivant la souche en présence d’un phénylbutanone ou d’un dérivé de phénylbutanone tel que décrit précédemment, de préférence la HBA et en dosant par HPLC la concentration totale de phenylbutèn-2-ones, de préférence la frambinone produite par la souche au bout de 24h. Dans un mode de réalisation spécifique, le variant maintient une activité benzalacétone réductase au moins égal à 50%, 60%, 70%, 80%, 90% ou au moins 95% de l’activité mesurée avec son équivalent non modifié (par exemple, l’une des séquences choisies parmi SEQ ID NO :1 à 6).
De préférence, un variant fonctionnel correspond à une séquence polypeptidique présentant au moins 80%, 85%, 90%, 95% et tout particulièrement, au moins 98% d’identité avec une des séquences choisies parmi les séquences SEQ ID NO : 1 à 6.
Au sens de la présente invention, le pourcentage d’identité fait référence au pourcentage de résidus identiques dans une séquence nucléotidique ou d’acides aminés sur un fragment donné après alignement et comparaison avec une séquence de référence. Pour la comparaison, on utilise un algorithme d’alignement et les séquences à comparer sont entrées avec les paramètres correspondants de l’algorithme. Les paramètres par défaut de l’algorithme peuvent être utilisés.
De préférence, pour une comparaison de séquence d’acide nucléique ou polypeptidique et la détermination d’un pourcentage d’identité, l’algorithme blastn ou blastp tel que décrit dans https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgiavec les paramètres par défaut est utilisé
Échantillon 1 : l’échantillon 1 est un mélange de la Charge (AR) et d’une composition de précurseur de catalyseur (CPC) qui est du 2-éthylhexanoate de molybdène dilué dans un gasoil sous vide (VGO).
La solution de CPC est obtenue en mélangeant le 2-éthylhexanoate de molybdène avec le VGO, à une température de 70°C pendant une période de temps de 30 minutes.
La teneur en molybdène dans la solution de CPC contenant du VGO est de 3 500 ppm en poids.
Échantillon 2 : l’échantillon 2 est un mélange d’Alimentation (AR) avec la même solution de CPC (2-ethylhexanoate de molybdène dilué avec le VGO) comme dans l’échantillon 1, et avec un additif organique qui est l’acide 2–éthylhexanoïque (2EHA). Le numéro CAS du 2EHA est 149-57-5.
Du fait de la capacité de production importante des lignes de recuit ou de galvanisation, le refroidissement humide dans une chambre de refroidissement consiste à projeter sur la bande en défilement des débits de pulvérisation très importants d’eau, par exemple supérieurs à 1000 m 3 /h.
Il est donc impératif de garantir que l’eau présente en quantité très abondante dans la chambre de refroidissement humide puisse être contenue dans cette chambre et qu’elle ne vienne pas polluer les chambres disposées en amont et en aval.
Une partie du liquide projeté sur la bande s’évapore au contact de celle-ci mais la grande majorité retombe en restant plaquée le long de la bande, par effet Coanda.
Pour évacuer cette eau plaquée sur la bande, celle-ci est essorée en sortie du refroidissement rapide.
Cependant, un essorage insuffisant de la bande a pour conséquence de dégrader le rouleau de renvoi situé sous la chambre de refroidissement rapide lorsque la bande circule de bas en haut. La bande étant chaude lorsqu’elle est en contact avec le rouleau de renvoi, par exemple à 750°C, le rouleau est lui aussi porté à une température élevée. L’eau de ruissellement tombant sur le rouleau génère sur celui-ci des contraintes thermomécaniques susceptibles de le détériorer.
Un essorage insuffisant de la bande peut également avoir pour conséquence de provoquer une rétention d’eau entre la bande et le rouleau de renvoi et de générer un aquaplaning de la bande sur ce rouleau de renvoi susceptible de provoquer des problèmes de guidage de bande.
Un essorage insuffisant de la bande peut également avoir pour conséquence de polluer les sections avales, sous atmosphère réductrice avec un taux d’humidité contrôlé, si les moyens de séchage de la bande n’ont pas la capacité requise pour éliminer toute l’eau présente sur la bande avant qu’elle n’entre dans une chambre aval, avec un risque de formation d’oxydes de fer et d’éléments d’addition (MnO, SiO…) à la surface de la bande.
Dans un NOWFC, où l’eau liquide utilisée pour le refroidissement de la bande est enrichie par un composé décapant, typiquement de l’acide formique, en cas d’essorage insuffisant, le film de liquide ou les gouttelettes laissées sur la bande en sortie du NOWFC vont, en s’évaporant, laisser des traces sombres qui sont des résidus du composé décapant, typiquement des formate non évaporés. Ces résidus ont pour effet de dégrader la qualité du revêtement ultérieur de bande.
Une autre contrainte à prendre en compte est la non-planéité de la bande en sortie de refroidissement humide. Celle-ci peut présenter des vagues rendant inappropriée, l’utilisation de « raclettes » pour évacuer l’eau présente sur la bande. D’ailleurs, et de manière générale, les sidérurgistes souhaitent éviter au maximum que des pièces mécaniques viennent en contact avec leur produit dans la ligne.
La température du produit en sortie de section de refroidissement pouvant être supérieure à 100°C, l’utilisation de rouleaux essoreurs revêtus de caoutchouc est également inappropriée.
Enfin, des phénomènes de vibration ou de flottement de bande apparaissent de manière spontanée et doivent être pris en compte pour le choix du système d’essorage à adopter.
L’invention apporte une solution à ces problèmes en permettant d’assurer un essorage complet de la bande après le refroidissement rapide, avant l’entrée de la bande dans la chambre de chauffage sous atmosphère réductrice disposée en aval.
Arrière-plan technique Pour séparer l’eau plaquée sur la bande de celle-ci, la technique actuelle met en œuvre successivement des rampes de couteaux de liquide et de couteaux de gaz.
En pratique, une ou deux rampes de pulvérisation de liquide à forte impulsion orientées face à la chute d’eau, ont pour effet de la décoller de la bande et de la dévier à l’arrière du couteau afin d’être canalisée et évacuée de l’enceinte de refroidissement. Les rampes sont alimentées à une pression de quelques bars, typiquement 7 bar.
L’impulsion des couteaux de liquide est suffisante pour contrer le poids et l’énergie de la chute de liquide et la quantité de liquide évacuée par l’arrière par ce moyen est importante.
Les rampes de couteaux de liquide séparent à elles seules plus de 95% de la chute de liquide, mais cela n’est pas suffisant.
L’invention offre ainsi une façon simple et peu coûteuse de s’assurer que deux éléments sont bien plaqués l’un contre l’autre, par l’intermédiaire d’une agrafe.
Bien entendu, l’invention ne se limite pas à ce seul exemple de réalisation, de sorte qu’il pourrait être envisagé des formes ainsi que des dimensions différentes des éléments décrits ci-dessus.
Elément de garnissage comprenant une pièce mobile déplaçable sur un rail masqué La présente invention concerne un élément de garnissage de véhicule du type comprenant une pièce fixe et au moins une pièce mobile montée sur la pièce fixe, la pièce fixe comprenant au moins un rail s’étendant entre au moins deux positions extrêmes, la pièce mobile comprenant un élément principal et un élément de montage, ledit élément de montage étant monté de façon coulissante sur ledit rail pour permettre le déplacement en translation de l’élément principal de la pièce mobile sur la pièce fixe entre les deux positions extrêmes.
L’invention s’applique par exemple à un élément de garnissage dans lequel la pièce fixe est une planche de bord et la pièce mobile est un dispositif d’affichage ou dans lequel la pièce fixe est un plancher de véhicule et la pièce mobile est une console centrale.
Il est connu de pouvoir déplacer la pièce mobile entre plusieurs positions en fonction de l’utilisation de la pièce mobile. Ainsi, dans le cas d’un dispositif d’affichage sur une planche de bord, il est par exemple prévu de disposer le dispositif d’affichage dans une zone centrale de la planche de bord lorsque le dispositif d’affichage doit être visible par tous les occupants du véhicule et de le déplacer dans une zone latérale de la planche de bord en regard du siège du passager avant du véhicule lorsque seul le passager avant utilise le dispositif d’affichage. Dans le cas d’une console centrale, il est par exemple prévu de pouvoir positionner celle-ci entre les sièges avant, proche des sièges arrières ou entre les sièges arrière du véhicule.
Pour permettre le déplacement de la pièce mobile entre ces positions extrêmes, la pièce mobile est par exemple montée sur un rail s’étendant sur la pièce fixe entre les positions extrêmes.
L’inconvénient d’un tel élément de garnissage est que le rail est visible en dehors de l’endroit où est disposée la pièce mobile. Dans la mesure où le rail est une pièce technique, sa visibilité dégrade l’aspect de l’élément de garnissage. Ceci est d’autant plus problématique que la distance séparant les deux positions extrêmes est grande et que le rail est long. En effet, la partie visible du rail occupe alors une grande partie de la surface externe de l’élément de garnissage alors que le reste de la surface externe est prévue pour présenter un aspect satisfaisant, par exemple en prévoyant une couche de revêtement sur la surface externe.
L’un des buts de l’invention est de pallier cet inconvénient en proposant un élément de garnissage dont une pièce mobile peut se déplacer sur une grande distance tout en présentant un aspect satisfaisant.
A cet effet, l’invention concerne un élément de garnissage du type précité, dans lequel la pièce fixe comprend un élément de revêtement s’étendant au moins en regard du rail en recouvrant ledit rail entre les deux positions extrêmes, l’élément de revêtement s’étendant localement entre l’élément de montage et l’élément principal de la pièce mobile, l’élément de montage étant agencé pour déformer localement ledit élément de revêtement et pour écarter ledit élément de revêtement du rail de sorte à permettre le déplacement de la pièce mobile le long du rail, l’élément de revêtement étant rapproché du rail en dehors de sa déformation locale par l’élément de montage.
Ainsi, l’élément de revêtement permet de masquer le rail depuis l’extérieur de l’élément de garnissage et ainsi de rendre celui-ci sensiblement invisible, y compris dans la zone où ne s’étend pas la pièce mobile, ce qui améliore l’aspect de l’élément de garnissage. En accordant l’élément de revêtement avec le reste de la surface externe de l’élément de garnissage, l’aspect de celui-ci peut encore être améliorée.
L’élément de garnissage selon l’invention peut en outre comprendre une ou plusieurs des caractéristiques suivantes, prises isolément ou selon toute combinaison techniquement envisageable :
- l’élément de garnissage comprend un dispositif de placage de l’élément de revêtement, ledit dispositif de placage étant agencé pour rapprocher l’élément de revêtement du rail, dans une zone de passage s’étendant entre les positions extrêmes, après le passage de l’élément de montage et la déformation dudit élément de revêtement par ledit élément de montage dans ladite zone de passage ;
- le dispositif de placage comprend au moins une première bande magnétique, ou métallique, s’étendant sensiblement parallèlement au rail sur la pièce fixe entre les deux positions extrêmes et au moins une deuxième bande magnétique, ou métallique, complémentaire s’étendant sur l’élément de revêtement en regard de la première bande magnétique, la première bande magnétique et la deuxième bande magnétique coopérant par attraction magnétique pour maintenir l’élément de revêtement rapproché du rail en dehors de sa déformation locale par l’élément de montage, l’élément de montage séparant la deuxième bande magnétique de la première bande magnétique dans une zone de passage, la première bande magnétique attirant la deuxième bande magnétique après le passage dudit élément de montage dans ladite zone de passage afin de rapprocher l’élément de revêtement du rail dans ladite zone de passage ;
- la pièce fixe comprend en outre au moins une couche de revêtement s’étendant au voisinage du rail, le dispositif de placage étant agencé pour plaquer l’élément de revêtement contre ladite couche de revêtement en dehors de sa déformation locale par l’élément de montage ;
- la couche de revêtement s’étend de part et d’autre du rail, l’élément de garnissage comprenant deux dispositifs de placage agencés pour plaquer l’élément de revêtement sur la couche de revêtement de part et d’autre dudit rail en dehors de sa déformation locale par l’élément de montage ;
- la pièce fixe comprend un corps, le rail s’étendant sur une partie d’une surface externe du corps, l’élément de revêtement s’étendant sur au moins une zone de la surface externe adjacente au rail et en regard dudit rail de sorte à former une partie visible de la pièce fixe en regard dudit rail et de ladite zone adjacente ;
La turbomachine 10 comprend un moyeu 12 et deux rangées annulaires de pales 18 non carénées dont une rangée annulaire amont 14, et une rangée annulaire aval 16. La rangée annulaire amont 14 et la rangée annulaire aval 16 sont espacées l’une de l’autre suivant l’axe longitudinal X. La rangée annulaire amont 14 est mobile en rotation autour de l’axe longitudinal X et la rangée annulaire aval 16 est fixe autour de l’axe longitudinal X. Autrement dit, la rangée annulaire aval 16 n’est pas entrainée en rotation autour de l’axe longitudinal X. Cela n’exclut pas que chaque pale 18 de la rangée annulaire aval 16 peut être à calage variable comme il sera vu plus loin. En outre, selon une alternative non représentée, la rangée annulaire aval 16 peut être mobile en rotation autour de l’axe longitudinal X. En d’autres termes, la rangée annulaire amont 14 est de type rotorique et la rangée annulaire est ici de type statorique. Le sens de rotation de la rangée annulaire amont n’est pas déterminant ici. La rangée annulaire amont peut être entrainée en rotation dans un horaire ou anti-horaire vu de l’amont par exemple. Dans la configuration de la , la rangée annulaire amont 14 de pales non carénées est entraînée en rotation autour de l’axe longitudinal X par la (ou les) turbine(s) 6 qui entraîne(nt) elle(s)-même(s) le(ou les) compresseur(s) 2. Au surplus, il peut être prévu un boitier de réduction de vitesse (ou « gearbox » en anglais) entre la (ou les) turbine(s) 6 et la rangée annulaire amont 14.
Les pales 18 de la rangée annulaire amont 14 et/ou de la rangée annulaire aval 16 peuvent être à calage variable. Il est ainsi possible d’adapter le calage des pales 18 de la turbomachine 10 selon le point de fonctionnement de la turbomachine 10 ou la phase de vol. Il peut être prévu un système de changement de calage intégré au moyeu afin d’adapter l’incidence des pales pour chaque phase de vol. Chaque pale peut ainsi être ajustée en rotation autour d’un axe de changement de calage respectif selon les phases et les conditions de vols. L’axe de changement de calage de chacune des pales est un axe s’étendant radialement et position longitudinalement au niveau d’une portion médiane de la pale respective. L’axe de changement de calage de chacune des pales 18 de la rangée annulaire aval 16 visibles sur la coïncide avec un axe passant par des positions angulaires à 3H et à 9H autour de l’axe longitudinal de la rangée annulaire aval.