INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
On sait imprimer par sérigraphie en une seule étape des motifs électroconducteurs d’épaisseur différente entre la partie centrale et les parties latérales, en utilisant un seul et même tissu (ou tamis) d’impression, dont la taille des mailles est variable selon les zones et permet d’imprimer des motifs d’épaisseur différente. Ces tissus permettent notamment de déposer sur les parties latérales des vitrages des épaisseurs de pâtes plus élevées au niveau des bandes collectrices, tout en gardant dans la partie centrale des pistes électroconductrices peu épaisses et peu visibles. Ainsi, l’épaisseur est suffisamment importante aux endroits où les connexions et soudures sont réalisées, mais suffisamment faible dans la partie centrale pour ne pas gêner la visibilité. Ce type de tissu à taille de mailles variables ne permet toutefois pas d’obtenir de manière simultanée, dans la partie centrale du vitrage, des motifs fins et des motifs plus épais. Or, certains points de soudure, notamment au niveau des boutons d’antenne sont souvent positionnés au centre des réseaux chauffants imprimés, dans les zones inférieures ou supérieures de la partie centrale du vitrage. Pour obtenir un motif électroconducteur d’une épaisseur plus importante au niveau de certaines zones de la partie centrale du vitrage, il est possible de procéder à une double sérigraphie puisque les tamis à taille de maille variable ne permettent d’obtenir de fortes épaisseurs que dans des parties latérales, sur les bords des vitrages. Ainsi, pour obtenir des épaisseurs plus importantes dans la partie centrale des vitrages, on effectue une première passe d’impression par sérigraphie de la pâte électroconductrice, puis la pâte est séchée avant de réaliser une seconde passe d’impression identique à la première au niveau d’un second poste d’impression. Cette technologie nécessite par conséquent de lourds investissements, puisqu’il faut au minimum un dispositif de séchage IR et un deuxième poste d’impression. Dans certains cas, si l’épaisseur requise est encore plus importante, il peut être nécessaire de faire une troisième étape de sérigraphie, avec également un séchage intermédiaire.
On cherche donc à mettre au point un procédé simplifié, moins onéreux, permettant de réaliser des motifs électroconducteurs épais à tout emplacement désiré et en particulier, dans la partie centrale d’un substrat, à distance des bandes collectrices.
Une solution, proposée par la demande WO2018/229449, consiste à utiliser un écran de sérigraphie comprenant un tamis principal et sur une zone, située dans la partie centrale, au moins un tamis secondaire fixé sur une face dudit tamis principal, la maille du tamis secondaire étant plus large que la maille du tamis principal dans ladite partie centrale, et la maille du tamis secondaire formant avec la maille du tamis principal un angle α compris entre 1 et 89°. Un tel écran permet d’obtenir en une seule passe de sérigraphie des vitrages possédant dans leur partie centrale des pistes électroconductrices de faible épaisseur et, au niveau de la zone double tamis, donc également dans la partie centrale du vitrage, des motifs électroconducteurs, par exemple des zones de soudure pour boutons d’antennes, particulièrement épais.
Cette solution n’est toutefois pas dénuée d’inconvénient, en particulier en ce qu’elle ne permet pas d’obtenir en outre une surépaisseur dans certaines zones spécifiques des parties latérales. Elle ne permet en outre pas de régler de manière totalement indépendante l’épaisseur des pistes électroconductrices dans les zones de soudure et dans les autres zones. Il n’est ainsi pas toujours possible d’atteindre les épaisseurs désirées dans les zones de soudure tout en respectant les spécifications en termes de résistance du réseau.
La demande WO2019206592 propose quant à elle d’utiliser pour l’impression dans les zones de soudure, au niveau des bandes collectrices, un écran de sérigraphie présentant dans ces zones des parties obturées sous forme de réseaux de points ou de lignes. La fabrication de l’écran met en œuvre, dans ces zones, une deuxième enduction par de la résine photoréticulable et une deuxième étape d’insolation, ce qui complexifie le procédé. Il a en outre été observé que la surépaisseur d’enduction était progressivement réduite lors de l’utilisation de l’écran du fait de la pression exercée par le racle. La durée de vie de l’écran est alors diminuée.
L’invention a pour but d’obvier à ces inconvénients.
A cet effet, l’invention a pour objet un procédé de fabrication d’un écran de sérigraphie pour l’obtention de vitrages munis de motifs électroconducteurs, comprenant les étapes suivantes : a) l’enduction d’un tamis par une émulsion photoréticulable, puis b) le séchage du tamis ainsi enduit, puis c) l’application d’un film autosupporté photoréticulable sur au moins une zone, dite zone de film, d’une face du tamis enduit, puis d) l’insolation du tamis enduit afin de réticuler l’émulsion photoréticulable et le ou chaque film autosupporté photoréticulable dans des zones prédéterminées appelées zones de réticulation, les zones de réticulation dans au moins une partie de la ou de chaque zone de film se présentant sous la forme d’un réseau de points ou de lignes, puis e) le lavage du tamis enduit afin d’éliminer l’émulsion et le ou chaque film autosupporté dans les zones autres que les zones de réticulation.
Un autre objet de l’invention est un écran de sérigraphie, pour l’obtention de vitrages munis de motifs électroconducteurs, notamment obtenu par ce procédé. Cet écran comprend un tamis dont une partie des mailles sont obturées par de la matière photoréticulée dans des zones dites zones de réticulation, ledit tamis comprenant au moins une zone dite zone de film telle que les zones de réticulation situées dans la ou chaque zone de film se présentent sous la forme d’un réseau de points ou de lignes, et l’épaisseur de matière photoréticulée obturant les mailles du tamis est plus élevée dans les zones de réticulation situées dans la ou chaque zone de film que dans les zones de réticulation situées en dehors des zones de film.
Un autre objet de l’invention est un procédé d’obtention d’un vitrage, comprenant une feuille de verre revêtue sur une de ses faces de motifs électroconducteurs présentant dans au moins une zone, dite zone de surépaisseur, une épaisseur plus élevée que dans les autres zones, ledit procédé comprenant l’impression par sérigraphie desdits motifs électroconducteurs en une seule passe, selon les étapes suivantes : - le positionnement d’un écran de sérigraphie selon l’invention en regard d’une feuille de verre, de façon à ce que la ou chaque zone de film dudit écran de sérigraphie soit en regard d’une zone de la feuille de verre destinée à devenir une zone de surépaisseur, puis - le dépôt, notamment à l’aide d’un racle, sur l’écran de sérigraphie, d’une pâte électroconductrice, puis - un traitement thermique de cuisson.
L’invention a enfin pour objet un vitrage obtenu, ou susceptible d’être obtenu, par le procédé précédemment décrit. Ce vitrage comprend une feuille de verre revêtue sur une de ses faces de motifs électroconducteurs présentant dans au moins une zone, dite zone de surépaisseur, une épaisseur plus élevée que dans les autres zones.
L’écran obtenu selon l’invention permet d’obtenir, dans les zones du vitrage correspondant aux zones de film de l’écran, des motifs électroconducteurs plus épais. Le procédé de fabrication de l’écran est en outre simplifié, car il ne nécessite pas une deuxième insolation, et l’écran obtenu est plus durable, car la zone de film (et donc la surépaisseur de matière photoréticulée) étant placée en regard du vitrage lors de la sérigraphie, elle n’est pas susceptible d’être dégradée par le racle.
L’écran permet ainsi notamment d’obtenir un vitrage comprenant des motifs comprenant des pistes électroconductrices de faible épaisseur, par exemple un réseau de fils chauffants (notamment au niveau de la zone caméra), un réseau d’alarme, des antennes ou des bandes collectrices, et des zones de soudure d’épaisseur plus importantes pouvant être situées aussi bien en partie centrale que dans les parties latérales du vitrage, par exemple des zones de soudure pour bouton d’antenne situées dans la partie centrale et des zones de soudure de réseau chauffant situées dans la partie latérale en contact avec les bandes collectrices.
Les zones de surépaisseur ne sont pas nécessairement limitées aux zones de soudure. L’invention permet également, de manière avantageuse, d’épaissir certaines zones des bandes collectrices, notamment à proximité des zones de soudure, en particulier pour éviter un échauffement indésirable.
Le tamis de l’écran peut être en toute matière connue pour la réalisation d’écrans de sérigraphie, par exemple en polyester ou en polyamide.
Un écran de sérigraphie est traditionnellement obtenu par enduction d’une émulsion photoréticulable sur au moins une partie de la surface d’un tamis, séchage du tamis, insolation du tamis afin de réticuler l’émulsion photoréticulable dans des zones prédéterminées, puis lavage et séchage de l’écran.
Parmi les exemples de bis(phényl)alkylènediamines, on peut inclure N,N’-bis(β-hydroxyéthyl)-N,N’-bis(4’-aminophényl)-1,3-diaminopropanol, N,N’-bis(β-hydroxyéthyl)-N,N’-bis(4’-aminophényl)éthylènediamine, N,N’-bis(4-aminophényl)tétraméthylènediamine, N,N’-bis(β-hydroxyéthyl)-N,N’-bis(4-aminophényl)tétraméthylènediamine, N,N’-bis(4-méthylaminophényl)tétraméthylènediamine, N,N’-bis(éthyl)-N,N’-bis(4’-amino-3’-méthylphényl)éthylènediamine, 1,8-bis(2,5-diaminophénoxy)-3,6-dioxaoctane et les sels d’addition de ceux-ci.
Parmi les para-aminophénols, on préfère un para-aminophénol non substitué ou un para-aminophénol substitué par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 . Parmi d’autres exemples, on peut inclure para-aminophénol, 4-amino-3-méthylphénol et 4-amino-2-méthylphénol. D’autres para-phénylènediamines peuvent également être utilisées, par exemple 4-amino-3-fluorophénol, 4-amino-3-chlorophénol, 4-amino-3-hydroxyméthylphénol, 4-amino-2-hydroxyméthylphénol, 4-amino-2-méthoxyméthylphénol, 4-amino-2-aminométhylphénol, 4-amino-2-(β-hydroxyéthyl-aminométhyl)phénol et 4-amino-2-fluorophénol, ainsi que les sels d’addition de ceux-ci avec un acide.
Parmi les exemples d’ortho-aminophénols, on peut inclure 2-aminophénol, 2-amino-5-méthylphénol, 2-amino-6-méthylphénol et 5-acétamido-2-aminophénol, ainsi que les sels d’addition de ceux-ci.
Parmi les bases hétérocycliques, des exemples qui peuvent être mentionnés incluent les dérivés de la pyridine, et les dérivés de la pyrimidine. Selon un mode de réalisation de la présente invention, il est en outre préféré qu’aucun dérivé de pyrazole ne soit utilisé comme teinte oxydante.
Parmi les dérivés de pyridine qui peuvent être mentionnés, on peut citer les composés décrits par exemple dans les brevets GB 1 026 978 et GB 1 153 196, par exemple 2,5-diaminopyridine, 2-(4-méthoxyphényl)amino-3-aminopyridine et 3,4-diaminopyridine, et les sels d’addition de ceux-ci.
Parmi les dérivés de la pyrimidine, on peut citer les composés décrits, par exemple, dans les brevets DE 2359399 ; JP 88-169571 ; JP 05-63124 ; EP 0770375 ou la demande de brevet WO 96/15765, tels que 2,4,5,6-tétraaminopyrimidine, 4-hydroxy-2,5,6-triaminopyrimidine, 2-hydroxy-4,5,6-triaminopyrimidine, 2,4-dihydroxy-5,6-diaminopyrimidine, 2,5,6-triaminopyrimidine et les sels d’addition de celles-ci et les formes tautomères de celles-ci, lorsqu’un équilibre tautomérique existe.
Le(s) teinte(s) oxydante(s) peut(vent) également comprendre un ou plusieurs coupleurs, qui peuvent être choisis parmi ceux classiquement utilisés pour la teinture des fibres kératineuses.
Parmi ces coupleurs, on peut citer notamment méta-phénylènediamines, méta-aminophénols, méta-diphénols, coupleurs à base de naphtalène, coupleurs hétérocycliques, ainsi que les sels d’addition de ceux-ci, et des mélanges de ceux-ci. En particulier, on peut utiliser de préférence le méta-aminophénol non substitué ou un méta-aminophénol substitué par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 , le méta-diphénol non substitué ou un méta-diphénol substitué par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 , les diamino-phénols, ou les hydroxyindoles non substitués, une hydroxypyridine substituée par un amino, ou l’hydroxybenzomorpholine.
Les exemples qui peuvent être mentionnés incluent 1-hydroxy-3-aminobenzène, 1-méthyl-2-hydroxy-4-aminobenzène, 1,3-dihydroxybenzène, 1,3-dihydroxy-2-méthylbenzène, 5-amino-6-chloro-o-méthylphénol, 2-méthyl-5-hydroxyéthylaminophénol, 4-chloro-1,3-dihydroxybenzène, 2,4-diamino-1-(β-hydroxyéthyloxy)benzène, 2-amino-4-(β-hydroxyéthylamino)-1-méthoxybenzène, 1,3-diaminobenzène, 1,3-bis(2,4-diaminophénoxy)propane, 3-uréidoaniline, 3-uréido-1-diméthylaminobenzène, sésamol, 1-β-hydroxyéthylamino-3, 4-méthylènedioxybenzène, α-naphtol, 2-méthyl-1-naphtol, 6-hydroxyindole, 4-hydroxyindole, 4-hydroxy-N-méthylindole, 2-amino-3-hydroxypyridine, 6-hydroxybenzomorpholine, 3,5-diamino-2,6-diméthoxypyridine, 1-N-(β-hydroxyéthyl)amino-3,4-méthylènedioxybenzène, 2,6-bis(β-hydroxyéthylamino)toluène, 6-hydroxyindoline, 2,6-dihydroxy-4-méthylpyridine, les sels d’addition de ceux-ci avec un acide, et des mélanges de ceux-ci, tels que le chlorhydrate ou dichlorhydrate de ceux-ci, par exemple, le dichlorhydrate de 1-bêta-hydroxyéthyloxy-2,4-diamino-benzène (2,4-diaminophénoxyéthanol HCl).
De manière générale, les sels d’addition des bases d’oxydation et des coupleurs pouvant être utilisés dans le cadre de l’invention sont notamment choisis parmi les sels d’addition avec un acide tels que chlorhydrates, bromhydrates, sulfates, citrates, succinates, tartrates, lactates, tosylates, benzènesulfonates, phosphates et acétates.
Dans un premier mode de réalisation exemplaire pour la base d’oxydation, les exemples comprennent la para-phénylènediamine non substituée ou une para-phénylènediamine substituée par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 .
Dans un deuxième mode de réalisation exemplaire de la base d’oxydation, les exemples comprennent un para-aminophénol non substitué ou un para-aminophénol substitué par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 , en particulier un para-aminophénol non substitué.
Pour la base d’oxydation, le para-aminophénol non substitué ou un para-aminophénol substitué par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 est particulièrement mentionné.
En particulier, pour le coupleur, on peut utiliser de préférence le méta-aminophénol non substitué ou un méta-aminophénol substitué par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 , le méta-diphénol non substitué ou un méta-diphénol substitué par 1 ou 2 alkyles en C 1 -C 4 , les diamino-phénols, ou les hydroxyindoles non substitués, une hydroxypyridine amino-substituée, ou l’hydroxybenzomorpholine.
Lorsque des hydroxyindoles non substitués, une hydroxypyridine amino-substituée ou une hydroxybenzomorpholine sont utilisés comme coupleur, ils sont de préférence utilisés en combinaison avec la base d’oxydation selon le deuxième mode de réalisation exemplaire.
Lorsqu’une base d’oxydation selon le troisième mode de réalisation exemplaire pour base d’oxydation est utilisée, elle est de préférence utilisée en combinaison avec une hydroxypyridine amino substituée comme coupleur.
Exemple 8 : Effet de l’ extrait peregrina selon l’invention pour stimuler l’activité de la tyrosinase
L’objectif de cette étude est d’évaluer l’activité sur l’enzyme Tyrosinase de l’extrait peregrina selon l’invention dans un modèle in v i t r o acellulaire faisant appel à une enzyme tyrosinase d’origine fongique (Sigma Aldrich réf. T3824), à son substrat L- Tyrosine (Sigma Aldrich réf. T3754) et un inhibiteur de référence l’hydroquinone (Sigma Aldrich réf.H17902, Inhibiteur = Hydroquinone 2,5 mM). Une solution tamponnée de Tyrosinase réagit avec un substrat L Tyrosine 2,5 mM pendant 60 minutes à 23°C et le transforme pour former un composé coloré. L’activité maximum de la Tyrosinase peut ainsi être évaluée par mesure de l’absorbance à 475 nm. L’extrait peregrina selon l’invention ou le produit de référence « Hydroquinone » sont mis en contact avec la solution de Tyrosinase en même temps que le substrat de l’enzyme pendant 60 minutes à 23°C, le substrat transformé par l’enzyme est naturellement coloré. L’activité de la Tyrosinase en présence de l’actif est alors évaluée par mesure de l’absorbance à 475 nm. La modulation de cette activité est exprimée en pourcentage d’inhibition ou d’activation de l’activité maximum de la Tyrosinase en absence d’actif, c’est-à-dire uniquement en présence du substrat de l’enzyme (L Tyrosine).
Protocole : Une solution d’enzyme Tyrosinase est incubée dans son substrat L Tyrosine pendant 60 minutes en absence (contrôle) ou présence du produit de référence, ou de concentrations croissantes de l’extrait peregrina selon l’invention / concentrations ; 2% ; 1% ; 0.1% (V/V). A la fin de la période d’incubation, l’activité de l’enzyme Tyrosinase avec et sans produit à l’essai ou de référence a été évaluée par mesure de l’absorbance des milieux réactionnels à 475 nm. Pour chaque concentration testée, la modulation de l’activité de l’enzyme Tyrosinase par le produit à l’essai est calculée selon la formule suivante : Pourcentage de modulation de l’activité de l’enzyme Tyrosinase = 100 x [(DO475 produit à l’essai ou de référence) – (DO475 Tyrosinase seule)] /DO475 Tyrosinase seule.
Si le résultat est négatif, le pourcentage est exprimé en inhibition de l’enzyme ; si le résultat est positif, le pourcentage est exprimé en activation de l’enzyme. Les résultats de stimulation sur l’activité de la tyrosinase sont donnés ci-dessous.
Activation Versus Contrôle (%) Extrait peregrina selon l’invention 2% 65 1% 37 0.10% 8
Conclusion: L’extrait peregrina selon l’invention est capable d’abaisser le taux d’activité basale de la tyrosinase, ce qui permet d’indiquer que cet extrait a la capacité d’augmenter une des protections naturelles de la peau, la protection contre les rayons ultraviolets.
Exemple 9 : Effet de l’ extrait peregrina selon l’invention pour inhiber la production de mélanine
L’objectif de cette étude sur cultures cellulaires humaines est de regrouper l'ensemble des données utilisées, ainsi que les résultats obtenus, pour la réalisation du test de modulation de la mélanine sur les mélanocytes humains après exposition pendant 5 jours à l’extrait peregrina selon l’invention. Protocole : Les mélanocytes humains sont mis en culture dans les plaques 96 et 24 puits. Il s'agit de laisser agir l’extrait peregrina selon l’invention à des concentrations de 5% ; 2% ; 1% et 0.1% sur les mélanocytes à confluence pendant 5 jours. Un pré-test de viabilité au MTT après 24 heures permet d’évaluer la cytotoxicité et de choisir les concentrations pour le test de modulation de la mélanine. Cette modulation est évaluée par le dosage de la mélanine dans les lysats cellulaires après 5 jours d’exposition aux extraits. Le contrôle négatif est réalisé à l'aide des cellules en milieu de culture sans traitement. Le contrôle positif pour le test de viabilité est le SDS à 0.5%. Pour le test de la modulation de la mélanine des milieux avec et sans α–MSH sont utilisés comme contrôles négatifs. Toutes les conditions sont préparées dans des milieux de culture, et les cellules sont ensuite incubées à 36.5°C / 5% CO2 pendant 24 heures pour le test de cytotoxicité et 5 jours pour le dosage de mélanine. a) Application des solutions à tester sur les mélanocytes : Les concentrations à tester sont mises en contact avec les mélanocytes en confluence dans les plaques 96 (test de cytotoxicité) et 24 (dosage de mélanine) puits. Pour chaque concentration le test est réalisé sur 3 puits. Les plaques sont incubées pendant 24 ± 1 heures et 5 jours à 36.5°C / 5% CO2. b) Test de viabilité : La viabilité cellulaire est évaluée par la méthode MTT sur les cellules après 24 heures d’incubation avec les produits. Après 24 heures d'incubation, les puits prévus sont rincés 1 fois avec 200 μL de PBS. Dans chaque puits 50 μl de solution de MTT à 0,5 mg/ml sont ajoutés et l’incubation est effectuée pendant 3 heures à 36.5°C / 5% CO2. Dans chaque puits 150 μl d'isopropanol sont ajoutés. Après homogénéisation, une lecture de l'absorbance est réalisée à 550 nm. Pour chaque condition, le rapport de la moyenne des densités optiques des cellules sur la moyenne des densités optiques des contrôles négatifs déterminera le taux de viabilité. Une valeur seuil de viabilité à 70 % par rapport à la valeur du contrôle négatif est utilisée pour classifier les substances testées comme cytotoxiques ou non cytotoxiques. Une classification « non cytotoxique » est donnée sur les résultats in vitro pour une viabilité > 70% et une classification « cytotoxique » pour une viabilité ≤ 70%. La concentration à 5% de l’extrait selon l’invention s’est montrée cytotoxique à 5% dans les conditions du test. Les concentrations 2%, 1% et 0.1% sont donc utilisées pour le test de modulation de la mélanine. La quantité de mélanine présente dans les cellules est dosée après la lyse cellulaire. Les résultats sur l’inhibition de la production de mélanine sont donnés ci-dessous.
Extrait concentration Croissance cellulaire versus contrôle (%) Inhibition Mélanine versus contrôle (%) Contenu en Mélanine ( µg/ml) Extrait peregrina selon l’invention 2% -3,41 +16.50 152 1.0% +13.46 +65.90 62 0.10% +13.29 +71.40 52
Conclusion : l’extrait peregrina selon l’invention inhibe la production de mélanine in cellulo ce qui lui confère une propriété protectrice de la peau. Cette inhibition montre également un effet relaxant sur les mélanocytes car le taux basal est inférieur au témoin (absence d’extrait selon l’invention dans le milieu de culture) ; nous rappelons que la production de mélanine est une réponse à un stress cellulaire. Ainsi, l’extrait peregrina selon l’invention démontre pouvoir prévenir les tâches du vieillissement.
Exemple 10 : Caractérisation analytique de l’ extrait peregrina selon l’invention versus l’ extrait o leifera avec un procédé d’extraction identique Sur la base du tourteau de Moringa peregrina et de celui de Moringa oleifera , le procédé d’extraction selon l’invention décrit à l’exemple 1 a été appliqué. Il est donné ci-après la composition comparative des ingrédients extraits sur la base de la matière sèche. Composés Oleifera (%) Peregrina (%) Acide acétique 1.431 - 1-hydroxy-2-propanone 1.962 - Furfural 6.140 2.528 2,5-Furandicarboxaldéhyde (DFF) 0.823 55.660 Myristate d’isopropyle 0.128 1.175 Palmitate de méthyle 0.230 _ Acide palmitique 10.356 4.713 Palmitate d’éthyle 0.399 _ Linoléate de méthyle 0.428 _ Oléate de méthyle 2.443 _ Acide oléique 47.844 11.093 Oléate d’éthyle 2.675 _ Acide stéarique 5.064 _ Hexanedioate de bis 2-éthyl hexyle 1.688 _ 7-oxo-déhydroabiétate de méthyle 0.327 _ 1,4-téréphtalate de 2-ethyl-hexyle 0.655 _ Total 84.317 74.169 Il apparaît que les deux extraits présentent un profil moléculaire très différent. L’extrait de Moringa oleifera contient moins de 1% de DFF alors que l’extrait de Moringa peregrina en contient plus de 50%.
Exemple 11 : Test comparatif avec Moringa oleifera pour test in tubo collagénase
L’objectif de cette étude est d’évaluer la modulation de l’activité anti-Métalloprotéase par l’extrait peregrina selon l’invention dans un modèle in v i t r o acellulaire faisant appel à une collagénase de type I et une hyaluronidase, un complexe de substrat et un chromophore, Ninhydrine. Une solution tamponnée de Collagénase de type I et hyaluronidase réagit avec un complexe de substrat spécifique et le transforme pour former un composé capable d’activer un chromophore par incubation à 80°C pendant 15 mn. L’activité de la collagénase et de la hyaluronidase peuvent ainsi être évaluées par mesure de l’absorbance à 565 nm. L’échantillon est mis en contact avec la solution de Collagénase et Hyaluronidase en même temps que le complexe de substrat des enzymes à 37°C pendant 5 minutes. Le substrat transformé par les enzymes est capable d’activer le chromophore par incubation à 80°C pendant 15 minutes. L’activité de la Collagénase et Hyaluronidase en présence/absence de l’échantillon est alors évaluée par mesure de l’absorbance à 565 nm. La modulation de cette activité est exprimée en pourcentage d’inhibition ou d’activation de l’activité de la Collagénase et Hyaluronidase en absence d’actif, c’est-à-dire uniquement en présence du substrat de l’enzyme.