INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'implication des interactions entre les mélanocytes et les fibroblastes dans la régulation de la mélanogenèse est bien connue et étudiée de manière intensive. Bien que ces interactions ne soient pas encore parfaitement comprises, elles sont à l'origine de la "blancheur" des zones palmo-plantaires et sont désormais utilisées en cosmétique pour le développement de produits dépigmentants. Yamaguchi et collègues ( Yamagu c hi Y. e t a l ., 2004, Mesenchymal-Epithelial Interactions in the Skin: Increased Expression of Dickkopf by Palmoplantar Fibroblasts Inhibits Melanocyte Growth and Differentiation, Journal of C e ll B io l ogy 165(2): 275-285) ont démontré qu'un messager soluble produit par les fibroblastes des régions palmo-plantaires, était capable de modifier le programme de différenciation des mélanocytes de ces régions, conduisant à une diminution de la production de mélanine. Ce messager a été identifié par l'équipe comme une protéine nommée Dikkopf-1 (DKK-1).
Les voies de signalisation utilisées par DKK-1 pour produire ces résultats sont bien identifiées aujourd'hui. Grâce à son action antagoniste sur le récepteur Wnt, DKK-1 est en effet capable de "shunter" les voies de signalisation intracellulaires activées par la β-caténine, généralement responsables de la régulation des gènes impliqués dans la mélanogenèse. Yamaguchi et collègues (cf. supra) ont également démontré que DKK-3, une molécule comme DKK-1 mais sans effet sur le récepteur Wnt, pourrait jouer un rôle régulateur sur l'effet de DKK-1. En fait, plus la quantité de DKK-3 au voisinage de ce récepteur à Wnt, plus les interactions entre DKK-1 et ce récepteur sont faibles. L'augmentation de DKK3 réduit les effets inhibiteurs de DKK-1 sur la mélanogenèse. Les travaux de Yamaguchi et collègues (cf. supra) suggèrent que l'identification d'agents ayant une influence sur le rapport DKK1 / DKK3 dans des cultures de fibroblastes dermiques humains normaux d'origine non palmoplantaire permettrait de contrôler la production de mélanine à partir de mélanocytes humains normaux non palmoplantaires.
L’objectif de cette étude est d'évaluer l'effet du composé dénommé « Hydrolysat de protéines peregrina » sur la synthèse et la libération de DKK-1 dans un modèle composé de fibroblastes humains normaux en culture monocouche
Prorocole : Les cellules de fibroblastes humains sont obtenues auprès d'un donneur âgé de 68 ans. Pour réaliser les expériences, les fibroblastes sont cultivés en monocouche jusqu'à atteindre la confluence. La dexaméthasone à 100 nm a été utilisée comme inducteur de référence de la synthèse et de la libération de DKK-1. Les disques cutanés ont été incubés pendant 48 heures en absence (contrôle) ou en présence de produit de référence ou de produit à tester : « Hydrolysat de protéines peregrina »: 0.01; 0.1 et 0.5% (v/v).
À la fin de l'incubation, les milieux d'incubation ont été retirés pour effectuer la mesure de libération de DKK-1. Le composé d'essai « Hydrolysat de protéines peregrina » a été dilué directement dans le milieu d'incubation afin d'atteindre les différentes concentrations décrites ci-dessus. À la fin de la période d'incubation de 48 heures, le DKK-1 libéré dans les milieux d'incubation a été quantifié à l'aide d'un kit ELISA sensible et spécifique. À la fin de la période d'incubation, les protéines contenues dans les lysats cellulaires ont été quantifiées à l'aide d'une méthode spectro-colorimétrique (méthode Bradford). Les résultats sont exprimés en ng de DKK-1 par mg de protéines (moyenne ± S.D.). Le niveau de signification entre le « contrôle » et le « produit de référence » a été évalué à l'aide d'un test de Student (*: p Le niveau de signification entre le « Contrôle » et le « produit d'essai » a été évalué par une analyse de variance à un facteur (ANOVA unidirectionnelle) suivie d'un test de Holm-Sidak (*: p Dans nos conditions expérimentales, le produit de référence nommé « Dexamethasone », testé à 100 nm, a significativement augmenté le DKK-1 libéré de 181,8% (p <0,01) par rapport à « Contrôle ». Les résultats sur la modulation du dosage de DKK1 sont donnés ci-dessous.
Concentration Croissance cellulaire versus contrôle (%) DKK1 versus contrôle (%) Hydrolysat de protéines peregrina 0,5% +1,9 +131,50 0,1% ca. 0 +32,30 0,05% -0,6 +26,10 Etude sur DKK3 Le but de cette étude est d'évaluer l'effet de composés appelés « Hydrolysat de protéines peregrina » sur la synthèse et la libération de DKK-3 dans un modèle composé de fibroblastes humains normaux en culture monocouche. Les cellules de fibroblastes humains ont été obtenues auprès d'un donneur âgé de 68 ans. Pour réaliser les expériences, les fibroblastes ont été cultivés en monocouche jusqu'à atteindre la confluence. Les cellules de fibroblastes humains ont été obtenues d'un donneur de 68 ans. Pour réaliser les expériences, les fibroblastes ont été cultivés en monocouche jusqu'à atteindre la confluence. À la fin de la période d'incubation de 48 heures, le DKK-3 libéré dans les milieux d'incubation a été quantifié à l'aide d'un kit ELISA sensible et spécifique. À la fin de la période d'incubation, les protéines contenues dans les lysats cellulaires ont été quantifiées à l'aide d'une méthode spectro-colorimétrique (méthode Bradford). Les résultats sont exprimés en ng de DKK-3 par mg de protéines (moyenne ± S.D.). Le niveau de signification entre le « Contrôle » et le « produit de référence » a été évalué à l'aide d'un test de Student (*: p Le niveau de signification entre le « Contrôle » et le « produit d'essai » a été évalué par une analyse de variance à un facteur (ANOVA unidirectionnelle) suivie d'un test de Holm-Sidak (*: p <0.05). Les résultats sur la modulation du dosage de DKK3 sont donnés ci-après.
Concentration Croissance cellulaire versus contrôle (%) DKK3 versus contrôle (%) Hydrolysat de protéines peregrina 0.5% 101.9 -20.7 0.1% env. 100 -8 0.05% 99.4 -3.9
Conclusion : L’hydrolysat de protéines peregrina selon l’invention peut augmenter considérablement la production de DKK1 dans les cellules humaines. Il a une forte capacité à gérer les gènes impliqués dans la différentiation cellulaire grâce au principe d'inhibition palmo-plantaire, dans sa capacité à augmenter considérablement DKK1 et diminuer significativement DKK3, ce qui augmente le ratio DKK1/DKK3.
Conclusion générale de l’activité de l’hydrolysat de protéines selon l’invention :
L'activité la plus remarquable de l’hydrolysat de protéines peregrina démontrée dans les tests In Cellulo est la protection génotypique. L’hydrolysat est un protecteur cellulaire, plus particulièrement des cellules souches, ce qui en fait un très bon régénérateur cellulaire doté d'intelligence biologique. Ses propriétés offrent une très forte protection de l'ADN et de l'intégrité du matériel génétique et une résilience génétique grâce à l'inhibition des HDAC et à l'allongement des télomères. Toutes ces propriétés contribuent à une puissante activité anti-fibrotique ainsi qu'à une protection cellulaire et tissulaire, renforcée par la capacité à gérer les gènes impliqués dans la différenciation cellulaire. L’hydrolysat de protéines peregrina est également un puissant modulateur de la production de ZAG, pour un effet anti-fibrotique et anti-inflammatoire.
Exemple 11 : Tests comparatifs de l’inhibition de la furine convertase
Le but de cette étude est d'évaluer l'effet inhibiteur de l'huile de peregrina obtenu par première pression à froid des graines avec coques, puis de l'extrait de peregrina par l’éthanol (96%) concentrant environ 1.1% de matière sèche, cette matière sèche étant elle-même constituée d’environ 55% en poids de 2,5-diformylfuran, 2.5% de furfural, 1.2% de myristate d'isopropyle, 4.7% d’acide palmitique, 11.1% d’acide oléique et 25.8% de triglycérides, et enfin de l’hydrolysat de protéines peregrina selon l’invention sur l'activité de la furine.
Protocole : L'extrait de peregrina à l’éthanol (96%) et l’hydrolysat de protéines peregrina ont été conservés à + 4 ° C, à l'abri de la lumière jusqu'à leur utilisation. L'huile de peregrina a été conservée à température ambiante dans une zone sombre.
Le produit de référence Le décanoyl-Arg-Val-Lys-Arg-CMK à 100 nm a été utilisé comme inhibiteur de référence de l'activité de la furine.
Le protocole d'incubation : La furine a été pré-incubée pendant 10 minutes à température ambiante en l'absence (Contrôle) ou en présence du produit de référence ou de concentrations croissantes des composés testés : - Huile de Peregrina à 0.3, 1% et 3% (v / v). - Extrait de peregrina à l'éthanol (96%) à 0.02%, 0,2% et 2% (v / v). - Hydrolysat de protéines peregrina selon l’invention à 0.02%, 0.2% et 2% (v / v). A la fin de l'étape de pré-incubation, un substrat de furine a été ajouté et les conditions expérimentales ont été incubées à nouveau à température ambiante à l'abri de la lumière pendant 5 minutes. Toutes les expériences ont été réalisées en trois exemplaires.
Préparation des composés : L'extrait de peregrina à l'éthanol à 96% et l’hydrolysat de protéines de peregrina ont été solubilisés directement dans le tampon de dosage puis dilués afin d'atteindre la concentration à tester comme décrit ci-dessus. L'huile de peregrina a été solubilisée à 3% dans une solution de Tween20 à 0,05% dans du tampon de dosage. La solution a ensuite été diluée afin d'atteindre la concentration décrite ci-dessus.
La est une vue en coupe transversale d’une forme en variante d’un système de charnière.
description détaillée des modes de réalisation Certains modes de réalisation préférés de la présente invention seront à présent expliqués en référence aux figures 1 à 9. Sur chaque figure, le rapport d’échelle entre la largeur, la longueur, la hauteur, le diamètre ou similaire de chaque élément peut ne pas être constant et peut être différent de la réalité. Il convient de noter que sur certaines figures, certains éléments ou particularités sont dessinés plus grands ou plus petits qu’ils ne le sont réellement, pour mettre l’accent sur ceux-ci.
Tels qu’ils sont utilisés ici, les termes relatifs à la direction tels que « supérieur », « inférieur », « haut », « bas », « vers le haut », « vers le bas », « au-dessus », « en dessous », « droit », « gauche » ou similaires doivent être entendus en lien avec l’orientation de l’appareil sur les figures, qui peut concorder ou non avec l’orientation réelle en utilisation. En outre, comme cela est évident pour la personne du métier, dans le présent mémoire, le terme « proximal » ou « proximalement » désigne une position opposée à la tête d’applicateur (ou à un bout de celle-ci) pour l’application d’un produit. D’autre part, le terme « distal » ou « distalement » désigne une position plus proche de la tête d’applicateur (ou d’un bout de celle-ci). En d’autres termes, lorsqu’un utilisateur saisit l’applicateur de manière typique, la direction pointée par le bout des doigts de l’utilisateur est la direction « distale » et la direction opposée est la direction « proximale ».
Les exemples de modes de réalisation suivants de la présente invention concernent une tête d’applicateur pour cils pour l’application d’un produit cosmétique ou d’une formule cosmétique, par exemple, un sérum sur les cils d’un utilisateur lui-même ou sur les cils d’une autre personne. Par exemple, le sérum peut être une formule à base d’eau, comportant un ingrédient de soin et ayant une viscosité comprise entre 1,0 Pa･s et 6,0 Pa･s. Les exemples de modes de réalisation suivants de la présente invention concernent également un applicateur pour cils comportant une telle tête d’applicateur pour cils. Toutefois, la présente invention peut être utilisée pour l’application de divers types de produits autres qu’un produit cosmétique ou une formule cosmétique.
La montre un applicateur 1 selon un mode de réalisation de la présente invention pour l’application d’un produit cosmétique, c’est-à-dire un sérum (non montré) sur une cible, c’est-à-dire les cils de l’utilisateur lui-même ou les cils d’une autre personne. La montre également une tête d’applicateur 10 selon un mode de réalisation de la présente invention. Sur la , l’applicateur 1 est montré dans l’état où la tête d’applicateur 10 et une tige 20 qui fait également partie de l’applicateur 1 sont combinées l’une avec l’autre. Par conséquent, il peut être entendu que dans cet exemple de mode de réalisation, l’applicateur 1 comprend la tête d’applicateur 10 et la tige 20 comportant une extrémité distale 22.
La tête d’applicateur 10 est agencée sur l’extrémité distale 22 de la tige 20 de sorte que la tête d’applicateur 10 et la tige 20 soient alignées sur une ligne droite (bien que non montré, il s’agit du même axe central longitudinal X de la tête d’applicateur 10 décrite ci-dessous). La montre l’applicateur 1 dans un état où la tête d’applicateur 10 et la tige 20 sont séparées l’une de l’autre. Comme on peut le voir sur la , dans ce mode de réalisation, la tête d’applicateur 10 est montée de manière détachable sur l’extrémité distale 22 de la tige 20. Plus précisément, la tige 20 a un creux 24 à son extrémité distale 22 pour loger une extrémité proximale (expliquée en détail ci-dessous) de la tête d’applicateur 10. L’extrémité proximale de la tête d’applicateur 10 est ajustée étroitement, mais de manière détachable, dans le creux 24 de la tige 20.
Dans ce mode de réalisation, la tête d’applicateur 10 (à l’exception d’une couche de fibres de flocage décrite plus loin) et la tige 20 sont fabriquées à partir d’un matériau plastique approprié, notamment un matériau thermoplastique. En particulier, la tête d’applicateur 10 peut être fabriquée à partir d’un polyester thermoplastique tel que Hytrel® (sans s’y limiter).
Ci-après, la tête d’applicateur 10 pour l’application d’un produit sur la cible, c’est-à-dire les cils de l’utilisateur lui-même ou les cils d’une autre personne, sera décrite en détail. Comme on peut le voir sur les figures 1 et 2 ainsi que sur la , qui est une vue en perspective externe montrant la tête d’applicateur 10 mise à l’envers, la tête d’applicateur 10 comprend un axe central longitudinal X, et une première zone 110 et une seconde zone 210. La première zone 110 et la seconde zone 210 peuvent également être appelées respectivement première partie de traitement et seconde partie de traitement. La première zone 110 et la seconde zone 210 sont agencées de manière à être tournées dans des directions sensiblement opposées l’une à l’autre avec l’axe central longitudinal X entre elles. À savoir, en vue en coupe transversale de la tête d’applicateur 10, la première zone 110 occupe une plage angulaire d’environ 180˚ centrée sur l’axe central longitudinal X, tandis que la seconde zone 210 occupe une plage angulaire des environ 180˚ restants. Dans ce mode de réalisation, la première zone 110 et la seconde zone 210 sont raccordées l’une à l’autre par un système de charnière tel que décrit plus loin.
La première zone 110 comprend une pluralité de lamelles 112 espacées suivant l’axe central longitudinal X. Chaque lamelle 112 de la première zone 110 s’étend ou fait saillie radialement vers l’extérieur autour de l’axe central longitudinal X. Comme on peut le voir sur la , qui est une vue de côté de la tête d’applicateur 10, chaque lamelle 112 est orientée de sorte que chaque lamelle 112 soit approximativement orthogonale à l’axe central longitudinal X. Dans ce mode de réalisation, chaque lamelle 112 est légèrement effilée de sorte que son côté pointe ait une épaisseur (on entend ici par épaisseur la distance entre deux côtés latéraux 112a et 112b de la lamelle 112) plus petite que son côté racine (voir ; épaisseur côté pointe D1 < épaisseur côté racine D2). En outre, dans ce mode de réalisation, chaque lamelle 112 a (sans s’y limiter) une forme de segment sensiblement circulaire, c’est-à-dire une forme de D.
La seconde zone 210 comprend une surface floquée 212. La seconde zone 210 est formée par une couche composée de fibres de flocage très courtes, comme décrit en détail plus loin. Dans ce mode de réalisation, la fibre de flocage est, par exemple (sans s’y limiter), une fibre constituée de polyamide. Comme le sait bien la personne du métier, la surface floquée 212 a pour fonction de contenir le produit tel qu’un produit cosmétique ou une formule cosmétique, et donc la seconde zone 210 est destinée à être utilisée pour retirer l’excès de produit adhérant à la cible, c’est-à-dire aux cils de l’utilisateur lui-même ou aux cils d’une autre personne.
Comme indiqué précédemment, la tête d’applicateur 10 est destinée à être utilisée dans l’état où elle est agencée sur l’extrémité distale 22 de la tige 20. Par conséquent, la tête d’applicateur 10 comprend en outre une extrémité de raccordement 300 pour un raccordement à la tige 20. Dans ce mode de réalisation, l’extrémité de raccordement 300 comprend une section de transition 310 s’étendant depuis le corps principal de la tête d’applicateur 10, et un bossage 320 s’étendant depuis une surface d’extrémité de la section de transition 310. Le bossage 320 correspond à l’extrémité proximale de la tête d’applicateur 10 telle que décrite ci-dessus, qui est destinée à être logée dans le creux 24 de la tige 20.
Comme on peut le voir sur la , qui est une vue en coupe transversale de la tête d’applicateur 10 selon la ligne A-A de la , la tête d’applicateur 10 comprend en outre une rainure allongée 400. La rainure allongée 400 s’étend parallèlement à l’axe central longitudinal X et est agencée plus près de l’axe central longitudinal X que la pluralité de lamelles 112. Chaque espace 114 défini entre deux lamelles 112 adjacentes est raccordé à la rainure allongée 400. De plus, la tête d’applicateur 10 comprend en outre deux fentes de côté 500 s’étendant parallèlement à l’axe central longitudinal X. La largeur d’ouverture de ces fentes 500 est désignée par « W » sur la . Ces deux fentes 500 sont agencées à des positions opposées avec l’axe central longitudinal X entre elles de manière à définir la limite entre la première zone 110 et la seconde zone 210. Chaque fente 500 raccorde un espace intérieur 400a de la rainure allongée 400 à un extérieur de la tête d’applicateur 10. Si nécessaire, le diamètre de la seconde zone 210 peut être rendu encore plus petit que celui montré sur la , par exemple pour faciliter l’assemblage.
Dans ce mode de réalisation, la tête d’applicateur 10 est obtenue par déformation d’une pièce moulée en plastique F montrée sur les figures. 6 à 8. Les figures 6 et 7 montrent la pièce moulée en plastique F dans l’état où les premier et second demi-corps (expliqués en détail ci-dessous) constituant la tête d’applicateur 10 sont dépliés pour être droits. La montre une coupe transversale de la pièce moulée en plastique F selon la ligne B-B de la . Cette pièce moulée en plastique F linéaire est obtenue par moulage intégral d’un matériau plastique approprié, notamment un polyester thermoplastique. On notera que la pièce moulée en plastique F montrée sur les figures 6 à 8 a déjà été pourvue d’une couche composée de fibres de flocage courtes qui forment la surface floquée 212 de la seconde zone 210 de la tête d’applicateur 10. En effet, la couche composée de fibres de flocage courtes est appliquée sur la surface extérieure semi-cylindrique du second demi-corps après l’obtention de la pièce moulée en plastique F par un moulage intégral, par exemple, un moulage par injection.
Comme on peut également le voir sur les figures 6 et 7, la pièce moulée en plastique F, et donc la tête d’applicateur 10, consiste en un premier demi-corps 100 et un second demi-corps 200. Le premier demi-corps 100 s’étend suivant l’axe central longitudinal X de la tête d’applicateur 10, et comporte la première zone 110 telle que décrite ci-dessus. De même, le second demi-corps 200 s’étend suivant l’axe central longitudinal X de la tête d’applicateur 10, et comporte la seconde zone 210 telle que décrite ci-dessus. Le premier demi-corps 100 comprend une première base 120 et la pluralité de lamelles 112 disposées sur la première base 120. Dans ce mode de réalisation, la première base 120 comprend deux sections 120a, 120b s’étendant parallèlement l’une à l’autre. Ces sections 120a, 120b sont raccordées l’une à l’autre aux deux extrémités pour former une structure annulaire généralement allongée, c’est-à-dire la première base 120. Un écartement entre les deux sections 120a, 120b forme un interstice allongé 130 décrit ci-dessous. D’autre part, le second demi-corps 200 comprend une seconde base 220 et une couche de fibres de flocage 230. La seconde base 220 du second demi-corps 200 est une pièce moulée en plastique ayant une coupe transversale sensiblement en forme de D (à l’exception d’une arête décrite plus loin). La couche de fibres de flocage 230 du second demi-corps 200 couvre une surface extérieure 222 de la seconde base 220 (voir ) et forme la surface floquée 212 de la seconde zone 210. Les fibres de flocage formant la couche de fibres de flocage 230 sont fournies à la surface extérieure 222 de la seconde base 220 par un procédé approprié bien connu de la personne du métier, par exemple, par adhérence.
Comme on peut le voir au mieux sur la , le premier demi-corps 100 et le second demi-corps 200 sont raccordés l’un à l’autre par un système de charnière 600. En d’autres termes, le système de charnière 600 raccorde solidairement le premier demi-corps 100 et le second demi-corps 200. Par conséquent, comme on peut également le voir sur la , qui montre l’état dans lequel les premier et second demi-corps 100, 200 sont pliés autour du système de charnière 600, la tête d’applicateur 10 telle que décrite ci-dessus est complétée par la flexion du premier demi-corps 100 et du second demi-corps 200 autour du système de charnière 600, puis leur chevauchement mutuel. L’ajout de la couche 230 composée de fibres de flocage courtes sur la surface extérieure 222 semi-cylindrique du second demi-corps 200 peut être réalisé après ce processus de flexion. Dans un mode de réalisation en variante, une autre forme du système de charnière peut être adoptée. La montre une telle forme en variante du système de charnière. Contrairement au système de charnière 600 tel que décrit ci-dessus (c’est-à-dire une mono-charnière), le système de charnière 600’ montré sur la a deux points d’inflexion 600a, 600b. Par conséquent, le système de charnière 600’ montré sur la est appelé double charnière. Ce système est particulièrement efficace pour réduire les contraintes internes indésirables qui tentent de dilater encore la pièce moulée en plastique F lorsqu’elle est fléchie.
Le premier demi-corps 100 comprend en outre une première extension 140 s’étendant à partir d’une extrémité (c’est-à-dire une extrémité de racine) du premier demi-corps 100. De même, le second demi-corps 200 comprend en outre une seconde extension 240 s’étendant à partir d’une extrémité (c’est-à-dire une extrémité de racine) du second demi-corps 200. Ces extensions 140 et 240 sont légèrement effilées vers leurs extrémités libres. En outre, ces extensions 140 et 240 sont pourvues de décrochements 140a et 240a à proximité de leurs extrémités libres, respectivement. Ces extensions 140 et 240 forment enfin l’extrémité de raccordement 300 pour le raccordement de la tête d’applicateur 10 à la tige 20 lorsque le premier demi-corps 100 et le second demi-corps 200 sont pliés autour du système de charnière 600, puis en chevauchement mutuel. Comme il ressort clairement des descriptions ci-dessus, la structure linéaire, c’est-à-dire la pièce moulée en plastique F (à l’exception de la couche de fibres de flocage 230) comportant les extensions 140 et 240, est une structure moulée intégralement d’un matériau plastique approprié qui peut être fabriquée, par exemple, à l’aide d’une technologie de moulage par injection.
Pour limiter les transmissions de vibrations, le dispositif de découplage A est prévu dans l’assemblage du support plat SR sur le support de pose SP. Il comprend une bague de découplage B en matériau flexible et un insert de fixation IR rigide.
La bague B a une forme générale cylindrique. Elle comprend un corps central BC et un rebord périphérique BP s’étendant autour du corps central BC, en particulier au niveau d’une partie supérieure du corps central BC. Sur la , les hachures de coupe sont omises pour clarifier le dessin.