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La grande ortie (Urtica dioica L.) encore appelée ortie dioïque ou ortie commune, est une plante herbacée, vivace, de la famille des urticaceae et du genre Urtica. L'ortie se compose essentiellement de polyphénols, polysaccharides et minéraux (glucosides et rutinosides de quercétine, kaempférol et isorhamnetin, acide caffeoylmalique, acide chlorogénique, acide néochlorogénique, acide caféique, scopolétine (cumarine), sitostérol (-3-0-glucoside)). Cette plante est généralement utilisée pour des applications : alimentaires (salade, légume) aussi bien chez l'homme que l'animal, agricoles (purin de feuilles d'ortie pour tuer ou repousser les insectes et comme fertilisant), industriels (fibres largement utilisées pour fabriquer des cordages, des fils et des vêtements), ou encore médicinales. Concernant les usages médicinaux de l'ortie, beaucoup d'études ont mis en évidence le bénéfice de sa racine pour la prostate, dans le cas notamment de l'hyperplasie bénigne. En revanche, l'usage des parties aériennes de la plante est supporté par un nombre moins important d'études. Les feuilles sont notamment utilisées pour des applications très diverses en tant que diurétique, pour l'arthrose, la prostatite, les rhumatismes, l'arthrite rhumatoïde, la pression sanguine élevée ou encore la rhinite allergique. Ascophyllum nodosum, ou Ascophylle noueuse, est une grande algue brune de la famille des Fucaceae. Ascophyllum est usuellement cultivée ou récoltée pour ses alginates, pour en faire de l'engrais et pour la fabrication de nourriture animale et humaine. Ascophyllum contient des fucanes ainsi que des polyphénols composés d'unité phloroglucinol et ayant une activité antioxydante. L'effet antioxydant d'un extrait d'ascophyllum est corrélé au contenu en composés phénoliques dans les thalles. Malpighia punicifolia synonyme de Malpighia glabra, ou Acérola, est un arbre de la famille des Malpighiaceae dont la baie est utilisée pour sa teneur en vitamine C. La vitamine C (ou acide L-ascorbique) est une vitamine hydrosoluble. Elle peut être apportée par différentes sources, les plus connues étant 1'acérola (Malpighia punicifolia), le Cynnorhodon (Rosa canina), 1' ortho siphon (Orthosiphon stamineus, O. aristatus, O. spicatus), le camu camu (Myrciaria dubia), la goyave (Psidium guava), le Kiwi (Actinidia chinensis) ou encore les fruits du genre des Citrus.
Cette vitamine dont le rôle majeur est de protéger les cellules de l'organisme contre les dommages induits par les radicaux libres est essentielle pour le bon fonctionnement métabolique de l'organisme. En tant qu'antioxydant, la vitamine C piège les radicaux libres comme les espèces réactives de l'oxygène (anion superoxyde, radical hydroperoxyl, radical peroxyl, oxygène singulet, ozone) et de l'azote (peroxynitrite, dioxyde d'azote, radical nitroxide), protégeant ainsi d'autres substrats, tels que les protéines, les lipides et l'ADN contre les dommages oxydatifs. La vitamine C peut être apportée par voie orale ou topique. Ainsi, plusieurs études ont mis en évidence que l'acide ascorbique apporté sous forme de produit cosmétique a des effets anti-âge sur la peau. De préférence, la composition anti-oxydante comprend, en poids, par rapport à son poids total, 0,1% à 85% d'extrait de parties aériennes d'ortie, 0,1% à 85% d'extrait d'ascophyllum, 0,1% à 85% d'extrait d'acérola et 0,1% à 85% d'acide ascorbique.
De manière encore plus préférée, la composition anti-oxydante comprend en poids, par rapport à son poids total, 30% à 70% d'extrait d'ortie, 05% à 25% d'extrait d'ascophyllum, 5% à 15% d'extrait d'acérola et 30% à 70% d'acide ascorbique. Un but de la présente invention concerne également un alicament 15 ou produit cosmétique comprenant ladite composition anti-oxydante telle que décrite ci-dessus. On entend par alicament un aliment combinant la notion d'aliment et de médicament dans le cadre d'une alimentation fonctionnelle. Cet aliment peut être sous la frome d'un complément alimentaire ou un 20 aliment fortifié Un complément alimentaire est par définition une denrée alimentaire dont le but est de compléter un régime normal et qui constitue une source concentrée de nutriments ou d'autres substances ayant un effet nutritionnel ou physiologique, seul ou combiné, 25 commercialisé sous forme de doses. Par dose, on entend toute les formes classiques : gélules, pastilles, comprimés, ampoules, ou encore sachets. Sont considérées comme des denrées alimentaires destinées à une alimentation particulière les denrées alimentaires qui, du fait de leur composition particulière ou du procédé particulier de leur fabrication, se 30 distinguent nettement des denrées alimentaires de consommation courante, conviennent à l'objectif nutritionnel indiqué et sont commercialisées de manière à indiquer qu'elles répondent à cet objectif Tandis que les aliments fortifiés sont par définition des produits auxquels on a rajouté des substances nutritives, tels que des yaourts ou 35 des boissons, dans lesquels on a dissous la composition anti-oxydante selon l'invention.
Un cosmétique est une substance ou une préparation destinée à être mise en contact avec diverses parties superficielles du corps humain, notamment l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les ongles, les lèvres, les organes génitaux externes, les dents et les muqueuses buccales, en vue, exclusivement ou principalement, de les nettoyer, protéger, parfumer, maintenir en bon état, de modifier leur aspect ou leur odeur. De préférence, l'alicament ou produit cosmétique comprend, en poids, par rapport au poids total dudit alicament ou dudit produit cosmétique, de 0,1% à 85% de ladite composition anti-oxydante. De manière encore plus préférée, 1' alicament ou produit cosmétique comprend, en poids, par rapport au poids total dudit alicament ou dudit produit cosmétique, de 3,0% à 65% de ladite composition anti-oxydante.
Avantageusement, l'alicament ou produit cosmétique comprend en outre au moins un des actifs ou extraits choisis parmi : des vitamines comme la vitamine E ; des caroténoïdes comme la bêta-carotène et la lutéine ; la coenzyme Q10; l'acide alpha-lipoïque ; d e s oligoéléments/minéraux comme le sélénium ; l'extrait de romarin ; l'extrait de thym ; l'extrait de mélisse ; l'extrait de basilic ; l'extrait de thé ; l'extrait de baies ; l'extrait d'orthosiphon, ; l'extrait de camu camu ; 1' extrait d'orthosiphon, des polyphénols, ou un de leurs mélanges. D'autres agents acceptables sur les plans pharmaceutique et/ou alimentaire et/ou cosmétique peuvent être rajoutés à la composition, tels que des agents de charge, des fluidisants, des extraits naturels, des vitamines, des minéraux, des oligoéléments, des acides aminés, des acides gras, des anti-agglomérants, des huiles naturelles, des arômes, des colorants, des acidifiants, des épaississants, des conservateurs, des édulcorants, des adjuvants, des colorants, des émulsifiants, des tensioactifs, des agents de contrôle de la viscosité. Les charges sont avantageusement la cellulose microcristalline, la maltodextrine de pomme de terre ou de maïs. L'épaississant utilisé de préférence est l'amidon de pomme de terre, l'hydroxypropylméthylcellulose, la pectine de citrus, la gomme de guar, de caroube, agar-agar, konjac, les huiles hydrogénées, la cire d'abeille.
Les fluidisants peuvent être du silicate de magnésium, du stéarate de magnésium, de la silice colloïdale. Les anti-agglomérants sont ceux utilisés usuellement dans l'industrie alimentaire, tels que le stéarate de magnésium, la silice colloïdale. Les vitamines sont choisies parmi, entre autres, les vitamines E, B6, B1, B2, B3, B5, B8. En tant qu'acidifiant, de l'acide citrique peut être utilisé dans la composition selon la présente invention.
Les stabilisants employés dans la fabrication de ladite composition sont ceux usuellement utilisés dans les industries alimentaires et cosmétiques, dérivés de sucre et de céréale, tels que le sorbitol. Les arômes qui peuvent être utilisés sont variés, tels que l'arôme de café, de citron, de pomme, de pêche, de chocolat, de vanille, de fraise.
Les coupes sont déparaffinées puis les sites antigéniques sont démasqués dans une solution de tampon citrate pH6 (DAKO, S1700). Après lavage en PBS-T, les coupes sont incubées avec une solution de peroxyde d'hydrogène 3% durant 5 minutes. Après lavage, les coupes sont ensuite incubées à température ambiante pendant 1 heure avec l'anticorps primaire (anti-TGK, SC-25786; anti-KRT10, SC-23877; anti-filaggrine, SC-66192; tous de chez Santa-Cruz Biotech). Après lavage, le marquage est révélé avec un kit de détection streptavidine-peroxydase (DAKO, réf.
Dosages ELISA Les milieux de culture des RHE à 48h sont prélevés et congelés à -80°C. Le contenu en IL-8 a été dosé à l'aide d'un kit ELISA spécifique (R&D Systems DY208), selon le protocole préconisé par le fournisseur. 2) Résultats L'influence de l'extrait EX1OMF1046 à 20 ig/mi est étudiée sur l'expression des transcrits des marqueurs KRT1, KRT10, filaggrine et loricrine, par les cultures de kératinocytes stimulées (ou non (Ctrl-) par un mélange de cytokines (IL-17, OSM, TNFot à 3 ng/ml, mix PSO). Les traitements sont de 48 h au total, l'analyse est réalisée par RT-qPCR. Les résultats sont représentés sur la figure 3. Ils montrent que l'extrait EX1OMF1046 protège l'épiderme des effets de l'inflammation en restaurant l'expression des marqueurs de différenciation tardive, filaggrine et loricrine, et que cet extrait induit une forte surexpression des kératines KRT1 et KRT10 dans ces conditions. L'extrait EX1OMF1046 protège donc potentiellement des défauts de différenciation de l'épiderme induits par l'inflammation. L'expression de KRT10 par des épidermes reconstruits (RHE analyse à J13) 25 stimulés par le mélange de cytokines IL-17, OSM, TNFot est observée sur les images numériques représentées à la figure 4. Cette figure montre une restauration partielle mais nette de l'expression de la protéine KRT10 par le traitement avec l'extrait EX1OMF1046 dans les RHE traités par le mélange pro-inflammatoire. 30 La figure 5 montre l'effet inhibiteur de l'extrait EX1OMF1046 (à 201.1g/m1) de l'expression de chimiokines induite par l'inflammation des kératinocytes. Cet effet résulte de l'interruption de la boucle inflammatoire en empêchant le recrutement de leucocytes au niveau de la peau lésionnelle. Cet effet s'ajoute aux effets sur la différenciation (figure 3) pour contribuer au retour à une homéostasie normale de la 35 peau (résolution de l'inflammation).
D'autre part, comme cela a été vu au niveau des transcrits (figure 5), EX1OMF1046 inhibe très fortement l'expression/libération de chimiokines et notamment l'IL-8 au niveau de la protéine (figure 6), confirmant son effet inhibiteur potentiel du recrutement de leucocytes (polynucléaires dans le cas de l'IL-8) au niveau des lésions cutanées (en plus de l'effet positif sur ces mêmes lésions). Ces effets 1) protecteurs des lésions cutanées et 2) limitant l'infiltration leucocytaire dans la peau sont résumés dans la figure 7 qui représente schématiquement une boucle d'inflammation chronique de la peau (psoriasis...). EX1OMF1046 protège donc des effets délétères (lésions cutanées) des 10 cytokines produites par les leucocytes (1), tout en bloquant le recrutement des infiltrats leucocytaires et cassant ainsi le cercle vicieux de l'inflammation chronique (2). Exemple 5 : Effets sur le renforcement du cheveu 15 1) Matériels et méthodes Cultures de follicules de cheveu humain in vitro Les bulbes de cheveux sont microdisséqués à partir d'un lifting et placés dès l'isolement en milieu de culture (Milieu E de William complémenté ; Invitrogen) 20 contenant ou non (témoin), l'extrait à l'essai puis incubés pendant 72 heures. Pour chaque condition, un excès de bulbes est préparé afin d'atteindre la valeur cible de 6 cheveux/condition sélectionnés en final. En fin d'incubation, les cheveux sont congelés à sec en azote liquide et stockés à -80°C jusqu'à l'extraction d'ARN. 25 Extrait testé Extrait EX1OMF1046, testé à 20 ug/ml, dans le milieu de culture des RHE. Analyse des transcrit, RT-qPCR L'isolement et le contrôle qualité des ARN sont réalisés comme dans l'exemple 2. 30 L'amplification des ARN et la synthèse des analogues d'ARN biotinylés (ARNa) sont réalisés à l'aide du kit « GeneChip 3'IVT Express» (Affymetrie). L'hybridation et le marquage sont réalisés à l'aide du kit « GeneAtlasTM hybridization, wash and stain kit for 3'IVT arrays » (Affymetrix). L'hybridation des ARNa fragmentés sur la puce Affymetrix® HG-U219 est réalisée sur la station d'hybridation « GeneAtlasTm 35 fluidics station » (Affymetrix®) pendant 20 heures à 45°C. Toutes les procédures expérimentales et de normalisation sont réalisées selon les directives du fournisseur.
L'analyse est effectuée par microarray full transcriptome sur puce Affymetrix® HG-U219. 2) Résultats Les kératines sont des composants majeurs de la tige pilaire. Une augmentation de ces kératines aura potentiellement un impact positif sur le développement/renforcement capillaire. L'effet de l'extrait EX1OMF1046 par rapport au témoin est illustré dans le tableau 5 suivant qui donne l'expression de transcrits de marqueurs de différenciation 10 dans des follicules de cheveu humain maintenus en survie in vitro. Tableau 5 Affy U219 Témoin Salicaire Nom du gène Abréviation Probe Set ID RE1 RE2 Facteur de modulation 11723952_at 120.1177 441.5676 3.68 keratin 1 KRT1 11757401_a_at 1557.519 3385.916 2.17 keratin 10 KRT10 11731852_at 54.47806 114.4569 2.10 loricrin LOR 11738505_at 1956.021 3712.088 1.90 keratin associated protein 13-1 KRTAP13-1 11757905_x_at 295.5005 513.2589 1.74 keratin 18 KRT18 11759172_at 40.7767 70.12949 1.72 keratin associated protein 19-4 KRTAP19-4 11759392_at 59.00863 100.2564 1.70 keratin associated protein 21-2 KRTAP21-2 11731500_a_at 264.1598 431.7103 1.63 keratin 19 KRT19 11738284_at 2832.61 4332.157 1.53 keratin associated protein 13-2 KRTAP13-2 15 Cette expérience montre que les transcrits de certaines kératines et protéines associées ont une tendance nette à l'augmentation d'expression, comme la KRT1, la KRT10 et la loricrine. On retrouve en cela les effets sur les kératinocytes. Les effets sont moins visibles que dans les exemples précédents du fait 1) que le follicule 20 est moins sensible aux traitements car « protégé » par les feuillets internes et externes (les kératinocytes ne sont pas en contact direct avec le milieu) et par son propre volume (accessibilité aux kératinocytes internes au follicule) et 2) que la méthode utilisée par microarrays est moins sensible que la qPCR.
BIBLIOGRAPHIQUES 1) Mcheik JN, Barrault C, Pedretti N, Garnier J, Juchaux F, Levard G, Morel F, Lecron JC, Bernard FX. Foreskin-isolated keratinocytes provide successful extemporaneous autologous paediatric skin grafts. J Tissue Eng Regen Med. 2013 Mar 14. doi: 10.1002/term.1690. [Epub ahead of print] Boniface K, Bernard FX, Garcia M, Gurney AL, Lecron JC, Morel F. IL-22 inhibits epidermal differentiation and induces proinflammatory gene expression and migration of human keratinocytes. J Immunol. 2005 Mar 15;174(6):3695-702. Boniface K, Diveu C, Morel F, Pedretti N, FrogerJ, Rayon E, Garcia M, Venereau E, Preisser L, Guignouard E, Guillet G, Dagregorio G, Pène J, Moles JP, Yssel H, Chevalier S, Bernard FX, Gascan H, Lecron JC. Oncostatin M secreted by skin infiltrating T lymphocytes is a potent keratinocyte activator involved in skin inflammation. J Immunol. 2007 Apr 1;178(7):4615-22. Guenou H, Nissan X, Larcher F, Feteira J, Lemaitre G, Saidani M, Del Rio M, Barrault CC, Bernard FX, Peschanski M, Baldeschi C, Waksman G. Human embryonic stem-cell derivatives for full reconstruction of the pluristratified epidermis: a preclinical study. Lancet. 2009 Nov 21;374(9703)1745-53 Guilloteau K, Paris I, Pedretti N, Boniface K, Juchaux F, Huguier V, Guillet G, Bernard FX, Lecron JC, Morel F.Skin Inflammation Induced by the Synergistic Action of IL-17A, IL-22, Oncostatin M, IL-1 alpha, and TNF-alpha Recapitulates Some Features of Psoriasis. J Immunol. 2010 Mar 24. [Epub ahead of print] Bernard FX, Morel F, Camus M, Pedretti N, Barrault C, Garnier J, Lecron JC. Keratinocytes under Fire of Proinflammatory Cytokines: Bona Fide Innate Immune Cells Involved in the Physiopathology of Chronic Atopic Dermatitis and Psoriasis. J Allergy (Cairo). 2012;2012:718725. doi: 10.1155/2012/718725. Epub 2012 Nov 5. U52012142755A1 2) 3) 4) 5) 6) 7)
Module lumineux pour feu diurne de véhicule automobile La présente invention a trait au domaine de l'éclairage et/ou de la signalisation d'un véhicule automobile et elle concerne plus particulièrement la 5 conception de modules lumineux aptes à émettre des feux diurnes. Ces dernières années, il a été demandé aux constructeurs automobiles d'équiper la face avant de leurs véhicules de feux diurnes (dispositif connu également sous l'acronyme anglais DRL pour " Daytime Running Light "). Ces feux diurnes sont constamment allumés dès lors que les feux de route ou les feux 10 de croisement ne sont pas allumés. Ces feux diurnes sont réglementés quant à la couleur qu'ils doivent émettre, à savoir une couleur blanche. Comme tout type d'éclairage et/ou de signalisation de véhicule automobile, la fonction de feux diurnes doit répondre à des normes réglementaires, notamment dans ce cas à des normes relatives d'une part à la 15 photométrie et d'autre part à la surface minimale d'éclairage. En d'autres termes, il convient d'une part que l'intensité et la direction des rayons lumineux émis par les feux diurnes soient correctement calibrées et il convient d'autre part que la surface utilisée pour réaliser cette fonction de feux diurnes soit supérieure à un seuil minimal réglementaire. 20 On comprend que cette question de surface minimale d'éclairage peut être problématique alors que les designs des projecteurs de véhicule automobile comportant de tels modules lumineux sont particulièrement soignés. La présente invention s'inscrit dans ce contexte, et elle propose un module lumineux comportant un moyen support d'au moins un collecteur de rayons 25 lumineux au voisinage duquel est disposé un guide de lumière apte à guider les rayons émis par une source lumineuse depuis une face d'entrée vers au moins deux faces de sortie distinctes. On prévoit ainsi une face de sortie principale, à travers laquelle les rayons passent selon une première direction, et au moins une face de sortie additionnelle qui est orientée de sorte que les rayons lumineux 30 sortant du guide à travers cette face additionnelle sont dirigés vers le collecteur, selon une deuxième direction distincte de la première direction.
Selon différentes caractéristiques de l'invention, - la face de sortie additionnelle est perpendiculaire à ladite face de sortie principale ; - le guide de lumière est réalisé dans un matériau apte à être traversé par la lumière, tel qu'un matériau transparent, notamment du polyméthacrylate de méthyle ou du polycarbonate ; - la face de sortie principale et/ou les faces de sortie additionnelles comprennent des tores prenant la forme de coussinets, des éléments prismatiques, de stries, ou du grainage ; - la face de sortie principale est munie de tores prenant la forme de coussinets, tandis que les faces de sortie additionnelles sont munies d'éléments prismatiques ; - le guide de lumière et la source lumineuse sont respectivement fixés sur le moyen support de sorte que la source lumineuse est disposée en regard de la face d'entrée dudit guide de lumière ; - le guide de lumière est fixé sur le moyen support par l'intermédiaire d'une platine de fixation ; - la platine de fixation comporte une zone d'ancrage porteuse des moyens de fixation de la platine sur le moyen support, ainsi qu'une zone de fixation du guide de lumière ; - un élément porteur intermédiaire est disposé entre la platine et le guide de lumière. On pourra envisager une première application dans laquelle le module lumineux comporte un unique collecteur apte à dévier la lumière émise par une source lumineuse primaire. Dans ce cas, on prévoit un système optique additionnel disposé sur un côté du collecteur et qui comporte le guide de lumière, le guide de lumière comportant deux faces de sortie, l'une de ces faces de sortie étant orientée vers ce collecteur unique.
On pourra également envisager dans une autre application que le moyen support porte deux collecteurs aptes à dévier sensiblement parallèlement à l'axe optique la lumière émise par une source lumineuse primaire respectivement associée à chacun des collecteurs. Dans ce cas, on prévoit un système optique additionnel disposé entre les collecteurs et qui comporte une source lumineuse secondaire apte à émettre des rayons dans le guide de lumière, le guide de lumière comportant trois faces de sortie, parmi lesquelles une face de sortie principale sensiblement perpendiculaire à l'axe optique et deux faces de sortie additionnelles opposées et respectivement orientées vers chacun des collecteurs. Dans ce dernier cas d'application à deux collecteurs, selon différents mode réalisations : - le guide de lumière s'étend sensiblement sur toute la hauteur du collecteur et prend une forme tubulaire, la source lumineuse étant disposée sous le collecteur en regard de la face d'entrée du guide de lumière formée à une extrémité axiale dudit guide et le système optique additionnel comporte en outre une platine de fixation par l'intermédiaire de laquelle le guide de lumière est fixé sur le moyen support. La platine de fixation peut comporter alors une zone d'ancrage porteuse des moyens de fixation de la platine sur le moyen support, ainsi qu'une zone de fixation du guide de lumière, et la zone de fixation peut être agencée pour permettre l'insertion du guide de lumière latéralement dans la platine, en présentant des moyens d'encliquetage coopérants avec des moyens d'encliquetage complémentaires portés par le guide de lumière pour le maintien en position de ce dernier dans la platine de fixation. - le guide de lumière s'étend sensiblement à mi-hauteur du collecteur et comporte une tête porteuse des faces de sortie et un corps tubulaire prolongeant ladite tête sensiblement selon l'axe optique, la source lumineuse étant disposée en regard de la face d'entrée disposée à l'extrémité du corps opposée à ladite tête et le système optique additionnel comporte en outre une platine de fixation et un carénage intermédiaire par l'intermédiaire de laquelle le guide de lumière est fixé sur le moyen support, le carénage intermédiaire étant adapté à porter le guide de lumière et à être fixé sur ladite platine, elle-même fixée sur le moyen support. L'invention concerne également un véhicule automobile dans lequel un module lumineux tel qu'il a été décrit précédemment est mis en place pour l'éclairage et/ou la signalisation du véhicule automobile.