Ainsi, une cuve de spectrophotomètre UV contenant l'extrait à tester est placée horizontalement sur une autre cuve contenant la cible de dégradation, formant une unité expérimentale. L'ensemble des unités expérimentales est placé dans un dispositif où elles sont physiquement indépendantes les unes des autres, pour permettre une irradiation exclusivement verticale et limitée aux radiations UV-B provenant du dessus. Le composé utilisé comme cible de dégradation est un dérivé synthétique de la chlorophylle (molécule se dégradant face aux UV), la chlorophylline de magnésium et de sodium (CMS), dont l'absorbance à 650 nm est mesurée avant et après exposition aux UV-B (Figure 2) dans une chambre d'irradiation. Les unités expérimentales sont exposées à une intensité de 40 W m-2 d'UV-B et de 20 W m-2 d'UV-A pendant deux heures et la capacité de l'échantillon à filtrer les radiations UV-B est ensuite basée sur une inhibition plus ou moins importante de la dégradation de la CMS. Les échantillons testés sont également évalués pour leur photostabilité par mesure de leur spectre d'absorbance dans l'UV-B avant et après irradiation. 2) Paramètres mesurés 2.2.1) Caractéristiques spectrales et photostabilité Les caractéristiques spectrales des échantillons sont déterminées par la 5 mesure de leur spectre d'absorbance dans l'UV (290-400 nm). Plusieurs paramètres sont alors calculés après intégration des aires d'absorbance des échantillons dans l'UV : - Les longueurs d'onde maximales d'absorption de l'échantillon (Àmax) - La longueur d'onde critique (Àc) 10 - La photostabilité par le ratio de l'absorbance de l'échantillon entre 290 et 320 nm avant et après 2h d'irradiation (UV-B120/UV-B0) 2.2.2) Activité photoprotectrice L'activité photoprotectrice est déterminée par la capacité de l'échantillon à 15 empêcher la dégradation de la CMS. Cette protection est calculée par le temps de demi-vie de la CMS (t112 CMS). Les échantillons ont été testés à 0.1 et 1 g L-1. Une irradiation a été réalisée au préalable avec uniquement le solvant de reprise de l'échantillon en guise de témoin. Le temps de demi-vie de la CMS est 20 calculé à chaque concentration testée tel que décrit dans la publication de Hupel et al. (2011, op. cit.). La concentration efficace en extrait nécessaire pour protéger la CMS de la dégradation pendant 120 min (EC120) est également calculée. Les critères d'évaluation de l'intensité de l'activité photoprotectrice d'extraits bruts sont décrits 25 ci dessous : Si t112 CMS > 120 min à 0.1 g L-1 d'extrait = Très forte activité photoprotectrice et pas de test des extraits à 1 g L-1 - Si t112 CMS à 0.1 g L-1 d'extrait 0.4 g L-1 = Faible activité - Si t1/2 CMS à 1 g L-1 d'extrait est 120 min = Très forte activité photoprotectrice - Si t112 CMS 0.4 g L-1 Activité photoprotectrice moyenne : t112 CMS > 120 min à 1 g L-1 et 0.2 g L-1 120 min et EC120 0.2 g L-1) Extraits Ethanol/Eau (50/50) Extraits Ethanol Àmax Àc UVB120 Àmax Àc UVB120 (nm) (nm) (nm) (nm) UVB0 UVB0 Aster 296 360 0.74 294 375 0.56 tripolium 320 330 Beta 330 370 0.93 332 382 0.84 maritima Crithmum 296 355 0.78 282 371 0.51 maritimum 323 332 Limonium 270 368 1.00 294 388 0.97 vu/gare 336 281 325 Matricaria 298 353 0.63 300 369 0.61 maritima 325 290 329 Tableau 2 Propriétés spectrales (Maximum d'absorption (4,,x), Longueur d'onde critique (Àc)) avant irradiation et photostabilité dans l'UV-B UV13120/UVB0 après 120 min d'irradiation d'extraits hydroéthanoliques (éthanol 50%) et éthanoliques de plantes halophiles. L'analyse des extraits bruts montre une influence du solvant d'extraction sur l'activité photoprotectrice, notamment en termes de durée d'efficacité (t1,2 CMS) (Tableau 1).