On étudie l'action des fractions butanolique et aqueuse de l'extrait de H.r. obtenues à l'exemple 1 sur la biosynthèse de la mélanine par les cellules de la peau. La concentration maximum testée pour chaque fraction a été choisie en fonction des résultats d'un essai préalable de cytotoxicité. On cultive des mélanocytes épidermiques humains normaux pendant 10 jours en absence et en présence de quantités non cytotoxiques de ces fractions. On évalue la quantité de pigments mélaniniques par extraction à la soude 0,5 N suivie d'une mesure de densité optique. a) - Effet de la fraction butanol. La fraction butanol aux concentrations de 0,0004 0,002 ; et 0,01 mg/ml n'a 20 pas entraîné de diminution significative de la quantité de mélanine produite par les mélanocytes. b) - Effet de la fraction aqueuse. La fraction aqueuse aux concentrations de 0,0002 ; 0,001 ; et 0,005 mg/ml, a entraîné une diminution significative et dose-dépendante de la quantité de mélanine 25 produite par les mélanocytes qui passe respectivement à 990/o du témoin, 94% du témoin (p inférieur à 0,01) et 87% du témoin (p inférieur à 0,01). De cet exemple, il apparaît qu'un extrait de branches de Hippophae rhamnoides a une action significative sur la production de pigments mélanine par les cellules cutanées. 30 En conséquence, on peut réaliser des compositions cosmétiques ou dermatologiques ayant pour but d'atténuer la pigmentation de la peau, des poils et des cheveux. Quelques exemples, n'ayant aucun caractère limitatif, de telles compositions seront donnés ci-après. 35 s Exemple 3. Extraction de branches d'Hippophae rhamnoides. De jeunes branches d'Hf. ont été collectées en avril (rameaux d'hiver) dans les dunes côtières aux Pays Bas. On a choisi des rameaux n'ayant pas encore de feuilles, portant des bourgeons, et pauvres en bois. Une portion de 327g de ce matériel végétal a été séchée par lyophilisation, ce qui a donné 127g de produit sec qui a été broyé en une poudre de environ 100 mesh. 126g de cette poudre ont été extraits sous ultrasonication, pendant 30 mn, Io par 630ml d'éthanol à 70%. Après filtration, une nouvelle portion de 1000ml d'éthanol à 700/0 a été rajoutée sur la poudre et laissée pendant la nuit. Après filtration, ces extraits bruts éthanoliques ont été rassemblés, et évaporés à sec à l'évaporateur rotatif, puis repris par 400ml d'eau. La suspension obtenue a alors été extraite successivement par 3 portions de 160ml de 2-butanol. 15 Ces extraits butanoliques ont été rassemblés, puis évaporés à l'évaporateur rotatif. Le résidu a été gelé, puis lyophilisé pour donner la fraction butanolique. La phase aqueuse restante a également été passée à l'évaporateur rotatif, et le résidu obtenu a été également lyophilisé pour donner la fraction aqueuse. On a ainsi obtenu 11,6 g de fraction butanolique et 16,6 g de fraction 20 aqueuse. L'extrait brut ainsi que les fractions butanolique et aqueuse ont été soumis à des analyses par chromatographie liquide HPLC sur colonne Phenomex Luna C18 avec un gradient linéaire d'acétonitrile dans une solution aqueuse de TFA à 0,010/0, ainsi que des analyses par chromatographie sur couche mince TLC éluée avec le 25 mélange acétate d'éthyle-acide acétique-acide formique-eau (70-8-8-18 en volumes). Les plaques de TLC révélées avec les UV à 254 et 366 nm ainsi que par les réactifs anisaldéhyde-acide sulfurique, chlorure ferrique-acide perchlorique (Salkowski), ninhydrine, et p-diméthylaminobenzaldéhyde (Ehrlich), montrent que les fractions butanolique et aqueuse présentent des différences dans la zone des faibles 30 Rf. Le composé principal de Rf 0,47 ainsi que d'autres bandes de Rf 0,58 ; 0,55 ; 0,41 ; révélées au FeCl3 (qui réagit avec les groupements indole), et à la ninhydrine (qui réagit avec les groupements amine) pourrait être un composé de type indoleamine.