Les molécules caractérisées sont préparées par dissolution dans un solvant avantageusement DMSO, éthanol, glycol, et en particulier DMSO à une concentration de 0.1%. Les principes actifs sont testés sur kératinocytes après dilution dans milieu de culture avantageusement entre 0.1% et 2% (v/v) pour les végétaux et hydrolysats biotechnologiques et en particulier de 0.5 % à 1% et avantageusement entre 0.001% à o.ol% pour les molécules caractérisées. Les résultats présentés sont obtenus avec 1 % dans le milieu de culture pour les extraits végétaux et les hydrolysats IO biotechnologiques, et avec 0.01 % pour les molécules caractérisées. Les kératinocytes extraits de plastie chirurgicale d'adultes normaux par digestion enzymatique ont été amplifiés en milieu spécifique pour kératinocytes puis ont été ensemencés, par exemple à 50 000 par cm2 en plaque 24 puits et cultivés en monocouche dans un milieu défini sans 15 sérum. A confluence, les cellules sont mises en contact avec les actifs dilués dans le milieu de culture avantageusement pendant 24h. En parallèle, un témoin non traité (milieu seul) et 3 témoins positifs (TGFp à ing/ml, IL-la à 50 pg/ml et TNF-a à 100 ng/mL) sont avantageusement réalisés, par exemple sur la même plaque de culture. Le TGF-p à lng/ml, TNF-a à 100 ng/mL et l'IL-1a à 50 pg/ml ont été testés au préalable et la stimulation de la synthèse d'ARNm des 3 récepteurs induite par ces 3 cytokines à ces concentrations a été vérifiée par une analyse des ARNm, par exemple par RT-PCR quantitative (x2 ou x0.8 pour les 3 inducteurs). 25 Après le temps de mise en contact des actifs avec les cellules, par exemple 24h, les milieux sont éliminés et les cellules sont conservées par exemple par congélation à sec à -80 C après un rinçage en tampon phosphate pH 7,4. Les ARN totaux sont extraits par exemple à l'aide d'un kit d'extraction en 96 puits sur colonnes de silice et dosés sur un spectrophotomètre 96 puits à 260nm (indicateur de pureté : dosage des protéines à 280nm). Les ARN sont dilués par exemple à 5ng/gl. La RT-PCR qualitative en 1 étape est réalisée par exemple sur 50 ng d'ARN initial sur plaque de 96 puits, sur les gènes de l'actine, de MCR1, MCR2, g opioïde, et POMC. Les amorces spécifiques de chaque gène sont utilisées par exemple à 0,5gM spécifiées dans le tableau I ci-dessus. Les paramètres d'amplification ont été avantageusement les suivants : La technique de RT-PCR en temps réel est réalisée avec le kit Quanti Tect SYBR Green RT-PCR (Qiagen, France) sur les puits contenant l'ARNm, dans un thermocycleur OPTICON, qui réalise les cycles d'amplification. La rétrotranscription (RT) s'effectue 30 minutes à 50 C, suivie de 15 minutes à 95 C pour inhiber la réverse transcriptase, activer la polymérase et dénaturer l'ADN complémentaire (ADNc) obtenu. 50 cycles de polymérisation en chaîne (PCR) sont effectués (15 secondes à 95 C, 30 secondes à 60 C, 30 secondes à 72 C). A chaque fin de cycle, la fluorescence, qui est proportionnelle au nombre de fragments amplifiés est lue. Le niveau d'expression est défini par le rapport d'expression de chaque gène par rapport à l'actine. Le niveau d'expression des gènes de 11CR1, MCR2, g opioïde et POMC ont été exprimés en pourcentage de variation par rapport à ceux obtenus pour le témoin négatif (sans traitement). Ces actifs sont les suivants et font l'objet du tableau 5 Tableau II Nom (Latin) Partie de MCR1 MCR2 1,t opioïde R POMC la plante Témoin Témoin Témoin Témoin multiplié multiplié multiplié multiplié par par : par : par Achillea millefolium plante 2.73 3.0 23.0 3.38 Galeopsis ochroleuca plante 2.9 1.0 1.0 1 Colocasia esculenta tubercule 2.0 1.0 24.0 1 Prunus cerasus tige 1. 0 1.0 5.3 2.6 Oenothera biennis graine 0.67 1.0 1.0 0.36 Prunus spinosa fruit 1.0 2.3 6.0 1 (Z)-decahydro-6 ,8a- Molecule 1.0 18.5 1.0 1 dihydroxy-1 -isopropyl-3a, caractérisée 6-dimethylazulen-5-yl 2-methylbut-2-enoate Phenyl-acetic acid 3,6,9- Molecule 20.0 20.0 1.0 1 trimethyl-2,7-dioxo- caractérisée 2,3,3a,4,5,7,9a,9b-octahydro-azuleno[4,5- bjfuran-4-yl Mangue Lactobacillus Fruit 1.0 10 3 0.4 plantarum Datte lactobacillus Fruit 1.0 1 60 1 Planctarum Papaye Bactéries lactiques Fruit 1.1 4 5 0.6 Banane Bactéries lactiques Fruit 1.2 10 42 0.4 Conclusion : 12 actifs parmi 960 sont capables d'augmenter significativement, dans les conditions considérées, le taux d'ARNm des gènes codant MCR1 ou MCR2 ou g, opioïde dans les kératinocytes. De plus, 4 actifs en particulier inhibent l'expression du gène POMC.