INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Tableau 4 : Surface de la cicatrice (en Unités °/U de la surface Arbitraires) blessée recolonisée à T48 heures TO T48 heures Contrôle 43.3 +/- 7.1 19.8 +/- 11.3 54.3 °/U Extrait de 40.4 +/- 9 2.9 +/- 6.6 92.8 °/U Globularia cordifolia Les observations visuelles ont montré que les tapis contrôles ont subi une altération profonde de leur intégrité (avec de la mortalité cellulaire) et ont beaucoup de difficulté à recoloniser les sufaces blessées. Au contraire, les tapis ayant été au contact de l'extrait de culture végétale de Globularia cordifolia présentent moins d'altération et reforment une couche dense et uniforme plus rapidement. Ce test préliminaire illustre bien le phénomène hormétique à l'oeuvre en présence de l'extrait selon l'invention. On peut penser que le pré-contact des cellules avec l'extrait a permis la mise en place d'un certain nombre de ligne de défense, antioxydante notamment, avant le stress, 22 Kératinocytes ; n=9 dont les cellules se sont servies ensuite pour contrer les effets délétères du stress et régénérer un tapis cellulaire normal. Cet effet hormétique de l'extrait de Globularia cordifolia a été démontré et quantifié in vitro par l'étude des 3 axes distincts suivants (4 à 6). 4- Préservation des progéniteurs de l'épiderme Principe L'épiderme se régénère sans cesse afin de produire une barrière cutanée efficace. Ce phénomène ralentit avec l'âge. Les cellules à l'origine de ce processus s'appellent les cellules souches ou progéniteurs. Elles sont rares mais conservent leur potentiel de régénération grâce aux liens qui les unissent à leur environnement immédiat et à la nature de cet environnement. Des traitements nocifs, comme par exemples les oxydants, vont modifier l'environnement de ces cellules, les faire évoluer vers un phénotype différent et ainsi provoquer un affaiblissement de leur capacité ultérieure à proliférer. In vitro ces cellules ayant perdu leur capacité proliférative forment des colonies de tailles modestes, voire invisibles à l'oeil nu, les cellules filles retrouvées dans ces colonies étant de taille relativement grande. A l'opposé, les cellules de type progéniteur sont capables de se multiplier fortement, afin de régénérer la peau, et donnent des colonies plus grandes, visibles à l'oeil nu, et des cellules de petites tailles. On estime ce potentiel de régénération, et donc la richesse en progéniteurs d'une population cellulaire, par la méthode de l'efficacité de clonage.
Cette méthode consiste, à partir d'un ensemencement cellulaire à faible densité et après un certain temps de culture, à compter le nombre de colonies visibles à l'oeil nu. Le nombre obtenu permet d'apprécier la vigueur progénitrice de la population cellulaire de départ. Des kératinocytes humains progéniteurs de l'épiderme à confluence ont été mis en contact d'un milieu optimisé pour forcer leur transformation vers un état de kératinocyte différencié (et ainsi leur faire perdre leur phénotype progéniteur), en présence ou en absence de l'extrait de Globularia cordifolia. A l'issue de ce contact, les cellules des 2 séries sont repiquées à raison de 1000 cellules / 25cm2 (n=5) dans le seul milieu différenciateur. Résultats Après 12 jours de culture, le nombre et la taille des colonies peuvent être estimés après fixation et coloration préalables. Les résultats montrent que les cas contrôles présentent un nombre de colonies de 5,4 +/- 1,5 / 1000 cellules ensemencées, ces colonies ont une taille modeste. En parallèle le contact avec l'extrait de Globularia cordifolia fournit 2,3 fois plus de colonies (12,6 colonies +1-4,3 / 1000 cellules ensemencées ; p<0,01) que le contrôle, ces colonies étant de plus grande taille. Ceci indique que l'extrait de Globularia cordifolia prévient le passage au stade différencié et maintient les capacités prolifératives des progéniteurs. Il préserve de la sorte la capacité de l'épiderme à se régénérer. 5- Stimulation du potentiel énergétique a. Sirtuin 1 Des phénomènes hormétiques telle la restriction calorique ou le contact avec des molécules hormétines activent l'expression d'une famille de gènes, les Sirtuins qui contribuent à augmenter la longévité de différents organismes. Les Sirtuins agissent notamment sur la déacétylation du facteur FOXO et évitent qu'il ne déclenche la fabrication de protéines apoptotiques. Les Sirtuins stimulent par ailleurs les défenses anti-oxydantes et purificatrices (détoxifiantes) de la cellule et permettent ainsi la préservation des fonctionnalités mitochondriales et donc de la production d'énergie. Ceci augmente la survie et la résistance aux stress.
Des kératinocytes humains ont été cultivés en présence ou en l'absence de l'extrait de Globularia cordifolia pendant 6 jours, puis ont été broyés, et la quantité intracellulaire de Sirtuin-1 a été évaluée par une méthode ELISA. En parallèle, un dosage protéique (BCA) a permis de normaliser les résultats (donnés dans le tableau 5 ci-après) Tableau 5 : Sirtuin-1 % Variation ; (ng/mg protéine). significativité Contrôle 2,10 ± 0,58 Référence Kératinocytes ; n=5 Extrait de Globularia 3 65 0 33 +74% cordifolia p<0, 01 Contrôle positif Trolox à 500µm : +27%, p<0, 05. En parallèle, des explants de peau abdominale (femme ; 58ans) ont reçu 1 application topique par jour pendant 6 jours d'une crème contenant l'extrait de Globularia cordifolia selon l'invention ou son placebo (test ex vivo) A l'issu de ce traitement, les explants ont été préparés et marqués à l'aide d'anticorps fluorescents pour évaluer la quantité de Sirtuin-1. La quantification a été faite à l'aide d'un système d'analyse d'image après prise de photos (50 photos / cas). Les résultats sont donnés dans le tableau 6 ci-dessous. Tableau 6 : Sirtuin-1 °/U Variation ; (Intensité significativité Fluorescence). Placebo 10,94 ± 2,40 Référence Explants de peau ; n=5 Extrait de Globularia 12 23 2 80 +12% cordifolia p<0, 03 b. Créatine kinase La créatine kinase est une enzyme ubiquitaire dont il existe deux isoformes dans la peau. Elle sert à stocker de l'énergie dans les cellules et à permettre aux tissus de faire face à une demande urgente en énergie.
La créatine est transformée par cette enzyme en phosphocréatine grâce à un ATP qui repasse sous la forme ADP. En cas de besoin, l'enzyme travaille à l'envers et restitue l'énergie. Son activité baisse avec l'âge car cette enzyme est l'une des cibles privilégiée des espèces réactives de l'oxygène. Son maintien et l'augmentation de son activité sont donc à favoriser.
Des fibroblastes humains dermiques ont été mis au contact de l'extrait de Globularia cordifolia selon l'invention pendant 3 jours puis les cellules ont été exposées, en l'absence dudit extrait, à un stress oxydant (peroxyde d'hydrogène). Après 3j de contact supplémentaire avec l'extrait de Globularia cordifolia, les cellules sont à nouveau exposées avec le même stress oxydant avant d'être broyées pour doser l'activité créatine kinase intracellulaire. Le dosage de l'activité utilise la synthèse de l'ATP à partir de phosphocréatine et d'ADP. In fine l'ATP est dosé par une réaction enzymatique aboutissant à du NADPH, lu à 340nm. Un dosage de protéines totales (BCA) a permis de normaliser les résultats (donnés dans le tableau 7 ci-après). Tableau 7 : Activité Créatine % Variation ; signifcativité kinase (U/mg protéine) Contrôle sans H2O2 0,307 ± 0,020 Référence 1 - Fibroblastes; Contrôle avec H2O2 0,247 ± 0,030 -19% ; p<0.02 Référence 2 n=5 H2O2 et extrait de - +54%; p<0,01 Globularia 0,381 ± 0,055 cordifolia Contrôle positif Trolox à 500µm : +28%, p<0, 05.
Les expiants ayant déjà été utilisés pour les Sirtuin-1 ont été marquées à l'aide d'anticorps fluorescents pour évaluer la quantité de Créatine Kinase mitochondriale épidermique. La 20 quantification a été faite à l'aide d'un système d'analyse d'image après prise de photos (50 photos / cas). Les résultats sont donnés dans le tableau 8 ci-dessous. Tableau 8 : Créatine Kinase 0/0 Variation ; mitochondriale significativité (Intensité Fluorescence). Placebo 7,62 ± 1,70 Référence Expiants ; Extrait de Globularia 0 n=5 cordifolia selon 10,81 ± 2,30 p<0,01 l'invention 15 c. Potentiel membranaire mitochondrial La mitochondrie est un site majeur de la formation des espèces oxygénées réactives qui au fil du temps perturbent le fonctionnement de la chaine respiratoire. Il en résulte une baisse du potentiel membranaire mitochondrial (A`Y) qui va entraîner une réduction de la production d'ATP.
La chute de ce potentiel membranaire est un signe avant-coureur de la sénescence et de la mort cellulaire. Il est donc primordial de préserver ce potentiel membranaire pour conserver à la mitochondrie ses capacités à fabriquer de l'ATP. Le potentiel membranaire a été estimé à l'aide d'une sonde membranaire spécifique sensible aux micro-variations protoniques mitochondriale. Elle possède deux formes, une monomérique et une polymérique, qui n'ont pas le même spectre d'émission en fluorescence. Un potentiel de membrane élevé favorise la forme polymérique. L'augmentation du ratio monomère/polymère (520nm/590nm) traduit donc une baisse de A`Y. Ainsi, une valeur élevée de ce ratio est moins favorable à la survie de la cellule qu'une valeur plus faible.
Les mêmes cultures de fibroblastes dermiques que celles utilisées pour la créatine kinase ci-dessus ont été employées. Les résultats sont donnés dans le tableau 9 ci-après. Tableau 9 : Ratio % Variation* ; significativité Contrôle sans H2O2 6,15 ± 1,33 Référence 1 Fibroblastes; Contrôle avec H2O2 8,13 ± 1,12 -32% ; p<0, 01 Référence 2 n=5 HzOz et extrait de 4 89 ± 0 57 +40%; p<0,01 Globularia cordifolia Contrôle positif Trolox à 500µm : +36%, p<0, 05. (*) Variation : % =100 x [(Contrôle - Extrait de Globularia cordifolia / Contrôle] L'amélioration du potentiel membranaire est donc très net grâce à l'extrait de Globularia cordifolia selon l'invention (+40%, p<0.01). Cette étude complète les deux études précédentes pour montrer la capacité de l'extrait de Globularia cordifolia selon l'invention en tant que prévention anti-âge. Il stimule de façon spontanée la quantité de Sirtuinl. Il maintient l'activité de la créatine kinase et protège la fabrication d'ATP, en réponse à un stress oxydatif. 6- Lutte contre les produits nocifs a. Peroxydes endogènes Un des indicateurs classiquement utilisés pour apprécier la vitalité d'une population cellulaire est son niveau de stress oxydant. Ce facteur peut être évalué de façon fiable grâce à une sonde appelée DCFH-DA, dont la particularité est de fluorescer au contact des péroxydes une fois qu'elle est entrée dans la cellule.
Des fibroblastes humains dermiques ont été mis ou non (contrôle négatif) au contact de l'extrait de Globularia cordifolia selon l'invention jusqu'à confluence. L'extrait de Globularia cordifolia est alors retiré et les cellules sont mises au contact avec le peroxyde d'hydrogène, afin de créer un vieillissement accéléré. Après cette étape, les cellules reçoivent ou non l'extrait de Globularia cordifolia pendant 3j puis sont repiquées et subissent à nouveau un stress oxydatif pour amplifier l'effet du premier stress. Les cellules sont alors broyées et l'activité résiduelle du protéasome est évaluée en suivant le clivage d'un peptide modèle fluorescent. Un dosage de protéines est effectué en parallèle pour normaliser les résultats (donnés dans le tableau 13 ci-après).30 Tableau 13 : Activité du % Variation ; protéasome significativité (UFA/µg protéines) Contrôle non peroxydé 1,138 ± 0,15 Référence 1 - Fibroblastes Contrôle HzOz 0,342 0,04 -70% Référence 2 avec p<0,01 n=5 H2O2 et extrait de Globularia cordifolia 0,538 +/- 0,11 +57% ; p<0.01 UFA : Unités de fluorescence arbitraires ; Contrôle positif Trolox à 500µm : +24%, p<0, 05. L'effet anti-gycation de l'extrait de Globularia cordifolia selon l'invention a été évalué à l'aide d'une protéine modèle, la BSA, et d'un sucre réducteur naturel : le fructose qui se lie à la protéine de façon non enzymatique. Le produit de cette liaison est fluorescent, détectable par un fluorimétre. Les résultats sont donnés dans le tableau 14 ci-dessous. Tableau 14 : Glycation o (Intensité /U Variation ; Fluorescence). significativité Protéine modèle BSA; Contrôle 21206 +/- 140 Référence n=4 Extrait de Globularia 7668 +/- 121 -64% cordifolia p<0, 01 Contrôle positif aminoguanidine à 0,03% : -85%, p<0,01. d) Glutathion En plus de son rôle antioxydant très connu, le glutathion est l'élément de désintoxication le plus important de l'organisme et le principal agent de la bonne santé de l'organisme. Il se lie à des toxines comme les métaux lourds, les solvants et les pesticides et les transforme en composés hydrosolubles susceptibles d'être facilement éliminés dans la bile ou les urines. La synthèse de glutathion a été stimulée de façon spontanée chez le kératinocyte en présence de 15 l'extrait de culture végétale de Globularia cordifolia : +49%* (p<0,01) par rapport au contrôle négatif, n'ayant pas reçu l'extrait. * Contrôle positif Trolox â 0,012% : GSH : +53% (p<0,01)
L'effet de type hormétique (« hormesis-like ») de l'extrait suivant l'invention a ainsi été montré 20 notamment dans 3 directions : - par un renforcement direct des molécules et voies métaboliques qui contribuent à rendre les cellules plus réactives face à un stress ultérieur (sirtuins, SOD, catalase, glutathion) ; 29 - par une protection directe du potentiel énergétique de la cellule et de son intégrité face à un stress oxydatif (créatine kinase, potentiel mitochondrial, protéasome, niveau de péroxydes ou de protéines glyquées) ; et - par le maintien des capacités de régénération de l'épiderme, en favorisant le phénotype progéniteur et donc prolifératif chez les cellules en charge de cette fonction. D) Galénique Ingrédient actif selon l'invention : Formule contenant l'extrait aqueux de Globularia cordifolia selon l'invention définie à l'exemple B) ci-dessus (à 33%).
SUBLISKINTM : ingrédient actif commercialisé par SEDERMA (W02009/055663) qui hydrate et lisse la peau tout en lui permettant de résister aux agressions extérieures. 3% en masse de cet ingrédient peuvent être par exemple rajoutés à la formulation dans la phase G. MATRIXYL 3000TM : ingrédient actif anti-rides à base de peptides commercialisé par SEDERMA (W02005/048968) qui aide à réparer les dommages cutanés causés par le vieillissement. 3% en masse de cet ingrédient peuvent par exemple être rajoutés à la formulation dans la phase G. Exemple 3 : forme crème de nuit pour le visage Ingrédients Noms INCI % en masse Phase A H20 Water qsp 100 Ultrez 10 Carbomer 0,40 Phase B Glycérine Glycerin 3,00 Panstat Ethyl & Methyl & Propyl parabens 0,30 Phase C Polawax GP 200 Cetearyl Alcohol & polysorbate 20 1,00 Crodacol CS 90 Cetearyl Alcohol 1,00 Crodamol STS PPG-3 Benzyl Ether Myristate 1,00 DC 200 5 cps Dimethicone 2,50 Crodamol TN Isotridecyl Isononanoate 5,00 Phase D Sorbate de potassium Potassium sorbate 0,10 Phase E NaOH 30% Sodium hydroxide 0,40 H20 Water 4,00 Phase F Ingrédient actif selon 2 00 l'invention contenant l'extrait de Globularia cordifolia Phase G Parfum Fragrance 0,10 Mode opératoire : Peser la Phase A et laisser gonfler pendant 30 minutes. Puis mettre la Phase A à chauffer au bain-marie 75C°. Chauffer la Phase B jusqu'à dissolution. Rajouter la Phase B dans la Phase A. Chauffer la Phase C au bain-marie à 75C°. Sous agitation, verser la Phase C dans la Phase (A+B). Ajouter la Phase D, bien homogénéiser. Neutraliser avec la Phase E vers 55°C. Rajouter la Phase F, puis la Phase G, bien homogénéiser. Exemples d'autres ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation de type crème dans l'une des phases ou extemporanément selon leur propriété physique hydrophobe ou hydrophole, à un certain % selon leur concentration et l'effet recherché : DERMAXYLTM : ingrédient actif anti-âge commercialisé par SEDERMA (W02004/101609) qui lisse les rides et répare la barrière cutanée. 3% en masse de cet ingrédient peuvent être par exemple ajoutés extemporanément à la phase (A+B+C). Niacinamide (vitamine B3), Rétinol, Resvératrol, DHEA : actifs anti-âge, notamment anti-rides. 0,5 % en masse de Rétinol, de Resvératrol ou de DHEA peuvent par exemple être ajoutés extemporanément à la phase (A+B+C). 10% en masse de Niacinamide à 10% dans l'eau peuvent par exemple être ajoutés à la phase G. Hexamidine : actif anti-bactérien pouvant être ajouté à la phase G de la formulation à 0,5% en masse. CHRONODYNTM : ingrédient actif commercialisé par SEDERMA (W02006/075311) qui tonifie et raffermit la peau, qui efface les marques de fatigue. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés àlaphase G. VENUCEANETM : ingrédient actif commercialisé par SEDERMA (W02002/066668) qui prévient des signes visibles du photovieilliessement (taches, rides, sécheresse...), protège les structures cellulaires des dommages engendrés par les UV et renforce l'intégrité de la peau. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase G.
REVIDRATTM : actif commercialisé par SEDERMA, qui notamment améliore la cohésion de l'épiderme et son hydratation. 2% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase C de la formulation.
EVERMATTM : actif commercialisé par SEDERMA (W02007/029187), qui diminue la sécrétion de sébum et ainsi participe au traitement des peaux grasses. 4% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase F de la formulation. HALOXYLTM : actif commercialisé par SEDERMA (W02005/102266), qui améliore le contour des 5 yeux en résorbant les cernes. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase F de la formulation. Exemple 6 : Forme Lotion Ingrédients Noms INCI % en masse Phase A H20 Water Qsp100 Phase B Butylene Glycol Butylene Glycol 5,00 Phenoxyethanol Phenoxyethanol 0,20 Phase C Crillet 1 Polysorbate 20 2,00 Crodamol STS PPG-3 Benzyl Ether Myristate 0,10 Phase D Sorbate de potassium Potassium Sorbate 0,10 Phase E Ingrédient actif selon 2 00 l'invention contenant l'extrait de Globularia cordifolia Phase F Parfum Fragrance 0,10 Mode opératoire : Peser la phase A. Peser la phase B et mélanger. Ajouter la phase B dans la phase A sous agitation pendant 30 minutes. Peser la phase C, homogénéiser jusqu'à obtenir un 10 mélange homogène. Ajouter la phase C dans la phase A+B sous agitation. Ajouter la phase D dans la phase précédente. Ajouter la phase E toujours sous agitation, bien homogénéiser. Peser la phase F, mélanger et ajouter à la phase précédente, bien homogénéiser. Exemples d'autres ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation de type lotion dans l'une des phases ou extemporanément selon leur propriété physique hydrophobe ou hydrophyte, à un 15 certain % selon leur concentration et l'effet recherché : EYELISSTM : est un actif commercialisé par SEDERMA (W02003/068141), qui aide à prévenir et lutter contre l'apparition des poches sous les yeux. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase E de la formulation. Ac-NetTM : est un actif commercialisé par SEDERMA (W02003/02828692) offrant un traitement 20 complet des peaux grasses et à tendance acnéique. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase E de la formulation.
EVERMATTM : mentionné ci-dessus. 4% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase E de la formulation. HYDRERGYTM : actif commercialisé par SEDERMA (WO2003/02828692 hydratant longue durée et qui stimule la synthèse d'ATP. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase E de la formulation. E) Évaluations in vivo Les tests ont été réalisés avec la crème de l'exemple 1 ci-dessus. Principe L'étude de l'efficacité de la crème contenant l'ingrédient actif selon l'invention a été menée sur un panel de 20 volontaires à la peau terne pour l'évaluation de l'amélioration du teint du visage ; sur un autre panel de 22 volontaires à la peau réactive pour montrer une amélioration de cet état et sur un panel de 14 volontaires présentant des signes visibles de vieillissement (rides, taches...) pour évaluer les quantités de SOD et de protéines carbonylées. Plusieurs méthodes complémentaires ont été associées durant cette étude : - Analyse de la clarté et de la rougeur du teint sur photographies standardisées. - Analyse de la transparence de la peau par le Transluderm. - Analyse de la brillance et du satinage de la peau par le Goniolux. - Évaluation de la baisse de sur-réactivité de la peau à l'aide du Neurometer. - Evaluation de la quantité de SOD et de protéines carbonylées sur adhésifs prélevés sur la joue. Protocole Critères d'inclusion particuliers aux études Pour l'étude du teint, des femmes ayant un teint terne, fatigué et hétérogène ont été incluses. Parmi ces sujets, 39% étaient fumeuses, un facteur très souvent associé au teint brouillé.
Pour l'étude de la réactivité cutanée, les volontaires ont été sélectionnées sur la base d'une réponse positive au test de stinging (test de picotement) ainsi qu'avec un questionnaire établissant un score de sensibilité suffisant. Ces volontaires devaient respecter une période de « wash-out » de 15 jours (utilisation du placebo). Pour l'étude des signes du vieillissement, les 14 volontaires étaient sélectionnés avec un âge supérieur à 45 ans et une présence de signes multiples du vieillissement : rides, taches ou rougeurs. Comme pour l'étude précédente, une période de «wash-out» a été imposée. Pour les 3 tests, Il a été demandé une constance hormonale durant les 3 mois précédant le test et pendant le test (pas de changement de traitement contraceptif, substitutif ou curatif). L'usage exclusif des produits cosmétiques fournis pendant la durée de l'étude était exigé.
Type d'études et durée Les études ont été menées en simple aveugle à l'aide de mesures non-invasives et ont porté sur : - 20 volontaires à la peau terne (âge moyen de 34 ans [20 à 48 ans]) appliquant de façon randomisée la crème contenant l'extrait de Globularia cordifolia, en hémi-visage. La crème placebo a été appliquée sur l'autre partie du visage. - 22 volontaires à la peau réactive (âge moyen de 44 ans [25 à 64 ans]) appliquant de façon randomisée la crème contenant l'extrait de Globularia cordifolia, sur un avant-bras. La crème placebo a été appliquée en controlatéral. Les crèmes pour ce panel étaient légèrement plus riches (ajout de 2% glycerine) en raison de leur peau réactive. - 14 volontaires avec des signes visibles de vieillissement (âge moyen de 57,5 ans [47 à 71 ans]) appliquant de façon randomisée la crème contenant l'extrait de Globularia cordifolia sur les joues. La crème placebo a été appliquée en controlatéral. La crème avec l'extrait de Globularia cordifolia ou la crème placebo ont été appliquées en massage biquotidien pendant 2 mois.
Le synopsis de l'étude peut se résumer selon le schéma ci-dessous. TO : Mesures Teint ; Mesures Neurometer ; SOD ; Protéines Carbonylées T 1 mois : Mesures Neurometer T 2 mois : Mesures Teint ; SOD ; Protéines Carbonylées Les études statistiques ont été effectuées à l'aide du test t de Student ou si besoin avec un test non paramétrique de Wilcoxon, dans les deux cas les tests unilatéraux ont été effectués sur séries appariées. 1.1 Etude du teint sur le visage Analyse de la Clarté et rougeur sur photographies standardisées Un banc photographique HeadScan a été utilisé pour assurer une prise de photo identique entre les 2 temps. Ce système utilisant un appareil photo numérique haute définition équipé de flashs et de filtres permet d'obtenir une lumière polarisée croisée assurant une prise de vue sans brillance. Pour chaque hémiface, 5 zones ont été automatiquement extraites avec le logiciel FrameScanTM afin de calculer les paramètres de Clarté (L*) et de Rougeur (a*). Les résultats sont donnés dans les tableaux 15 et 16 ci-après.
Tableau 15 : Variation de la clarté du teint du visage après application pendant 2 mois de la crème à l'extrait de Globularia cordifolia ; (N=20) Clarté Amélioration de la du teint L* TO T 2 mois Crème PLACEBO 29,86 ± 2,46 27,36 ± 2,17 % variation (Significativité) -8,4% (p<0.01) Crème â l'extrait de Globularia cordifolia 29,88 ± 3,79 30,12 ± 3,39 % variation (significativité) 0,8% (tins) Delta (Crème à l'extrait de Globularia cordifolia- 9,20/0 Placebo) des différences de % Variations vs. T0. Signifcativité vs. placebo p<0,01 * Echelle physiologique : les 20 premières unités de l'échelle correspondent à une surface très sombre, elles sont défalquées.