INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Pendant le processus inflammatoire, il est connu que la libération de TNF-a par des macrophages et des fibroblastes a un rôle important dans la signalisation entre les leucocytes et les cellules endothéliales. La réponse cellulaire à la lésion comprend l'adhésion des leucocytes à l'endothélium de vénules post-capillaires, suivie de la migration des cellules adhérentes en dehors des vaisseaux, leur déplacement vers le site extravasculaire et leur accumulation subséquente à la lésion, mécanismes qui ont été décrits comme une séquence d'interactions et de signalisations complexes entre les leucocytes et les cellules endothéliales. L'augmentation de l'expression de molécules d'adhésion, telles que ICAM-1, V-CAM et E-sélectine, est un pré-requis pour une adhésion leucocyte-endothélium stable et précède nécessairement l'extravasation des leucocytes (Quinlan et al., 1999; Fuchs et al., 2001). Ainsi, leur évaluation peut être utilisée comme modèle expérimental in vitro pour évaluer le potentiel pro- ou anti-inflammatoire de nouvelles molécules. 2 0 Exemple 8.1 L'échantillon suivant d'extrait de Passiflora alata selon la présente invention a été utilisé: Echantillon A (contenu en flavonoïdes totaux 16,54% et contenu en vitexine-2-o-r 11,02%) 25 Des cellules endothéliales de veine ombilicales humaines (Human Umbilical Vein Endothelial Celis, HUVEC) ont été incubées avec du TNF-a pour induire l'expression d'ICAM-1, qui est responsable de l'infiltration des cellules dans le processus inflammatoire. Le potentiel anti-inflammatoire de l'échantillon a été identifié par la réduction de l'expression de cette 30 molécule. 30 Matériel: Cellules endothéliales de veine ombilicales humaines (HUVEC) avec un nombre total de passages de 6 Réactifs: Milieu de culture M199; Sérum de Veau Foetal; Trypsine (Gibco). TNF-a humain (Peprotech Mexico, S.A.), anticorps anti-ICAM-1 humains (BD Biosciences Pharmingen); phosphate buffer saline (PBS), albumine sérique bovine. Préparation de cultures cellulaires Des plaques de 24 puits ont été préparées avec 5x104 cellules/puits dans un milieu de culture M199 et 10% de sérum de veau foetal. Les cellules ont été incubées dans une étuve à CO2 pendant 24 heures. Après cette période, les cellules ont été traitées avec différentes concentrations d'échantillon A pendant une incubation de 12 heures. Ensuite, les cellules ont été exposées à 10 ng/ml de TNF-a pendant une période de 6 heures pour stimuler l'expression d'ICAM-1, ce moment représentant le pic d'expression de la molécule par les cellules endothéliales en culture, comme décrit par Perfetto et al. (2003) et Jiang et al. (2004). De plus, la concentration de 10 ng/ml de TNF-a a été déterminée comme étant capable d'induire l'expression des molécules d'adhésion sans interférer avec la viabilité cellulaire (Piela-Smith et al., 1992).
Après l'incubation avec le TNF-a, les cellules ont été retirées de la plaque avec de la trypsine, lavées avec du milieu de culture avec du SFB pour retirer la trypsine contenue dans le milieu, centrifugées pendant 8 minutes à 300g et resuspendues dans 1 ml de paraformaldéhyde à 1% pendant 15 minutes pour les fixer. Ensuite, les cellules ont été centrifugées de nouveau pour retirer le paraformaldéhyde, resuspendues dans 100 �l de PBS avec 1% de albumine sérique bovine (BSA) et incubées avec 5 �l d'anticorps anti-ICAM (FITC), pendant une heure à la température de 4°C et à l'abri de la lumière. Ensuite, les cellules ont été centrifugées pendant 8 minutes à 300g et resuspendues dans du PBS pour la lecture des échantillons dans un cytomètre de flux FACS CALIBUR (BD), connecté à un ordinateur Apple (Macintosh) utilisant le logiciel Cell QuestPro�. Dix mille mille (10,000) événements ont été acquis. Le marquage de l'anticorps isotypique a été utilisé comme témoin négatif pour l'anticorps. Les données générées par le cytomètre ont été analysées à l'aide du logiciel, les valeurs étant exprimées en pourcentage de cellules marquées par l'anticorps, ce qui indique le pourcentage de cellules ayant une expression d'ICAM-1 à la surface, et également l'intensité de fluorescence moyenne de chaque échantillon, qui indique quantitativement l'expression des molécules d'adhésion avant et après le traitement avec le TNF-a et l'échantillon à différentes concentrations.
La gâche de contrôle 2 comporte sur sa plaque de base 4, un axe 12 sensiblement cylindrique réalisé dans un matériau électriquement isolant, qui est disposé perpendiculairement à cette plaque. L'axe isolant 12 reçoit sur une majeure partie de son périmètre, un secteur 16 réalisé dans un matériau électriquement conducteur qui est tourné vers le côté avant, et sur la partie complémentaire de son périmètre, un secteur 14 réalisé dans un matériau électriquement isolant qui est tourné vers le côté arrière.
Le secteur conducteur 16 comporte un contour extérieur cylindrique formant un demi-cercle complet disposé symétriquement par rapport à un plan perpendiculaire à l'axe de pivotement de la porte, de manière à couvrir la face complète tournée vers l'avant de l'axe isolant 12, qui va du point supérieur au point inférieur. Le secteur conducteur 16 est fixé sur l'axe isolant 12 de manière à isoler électriquement ce secteur par rapport à la plaque de base 4 et à la caisse du véhicule 8 qui la supporte. Le secteur isolant 14 a un contour extérieur cylindrique, qui forme avec le secteur conducteur 16 un plot comprenant un contour extérieur formant un cercle sensiblement complet.
La porte 30 comprend une découpe formant une ouverture 32 disposée dans un plan vertical, de manière symétrique par rapport à un plan perpendiculaire à l'axe de pivotement de la porte. L'ouverture 32 comporte successivement en partant du côté avant, une entrée large, puis des pentes resserrant cette ouverture vers le fond qui se termine par un demi-cercle. Le diamètre du demi-cercle du fond de l'ouverture 32 est légèrement supérieur à celui du contour extérieur du plot 10, avec un jeu J au rayon qui est dans cet exemple de Imm. Le plot 10 de la gâche de contrôle 2 est disposé sur sa plaque de base 4, de manière à ce qu'il vienne se centrer sur le demi-cercle du fond de l'ouverture 32, quand la porte 30 fixée préalablement sur la caisse par ses charnières, est disposée en position fermée suivant sa cote nominale de positionnement. Le dispositif de contrôle comporte de plus un circuit électrique comprenant une pile électrique 40, dont une des bornes est reliée par un premier fil électrique 18 au secteur conducteur 16, et l'autre à un plot d'une ampoule électrique 42. L'autre plot de l'ampoule 42 est en contact avec un deuxième fil électrique 44, comportant à son extrémité libre une pince crocodile 46, qui est serrée sur la caisse du véhicule pour établir un contact électrique. Le circuit électrique est normalement ouvert quand les bords de l'ouverture 32 de la porte 30 ne sont pas en contact avec le secteur conducteur 16, et peut être fermé quand ces deux éléments entrent en contact, ce qui laisse passer le courant et allume l'ampoule électrique 42. Le fonctionnement du dispositif de contrôle est le suivant. Après avoir fixé les ouvrants par leurs charnières sur la caisse du véhicule dans l'atelier de ferrage, la gâche de contrôle 2 est fixée sur cette caisse pour la porte 30 qui doit être contrôlée. Ensuite l'opérateur vient fermer la porte 30 en butée, de manière à ce que le plot 10 s'ajuste au fond de l'ouverture 32 de porte.
Si le positionnement de la partie de la porte 30 recevant le système de verrouillage, est dans la tolérance verticale prévue, qui est dans cet exemple de +/-lmm, le plot 10 vient au fond de l'ouverture 32 sans que le secteur conducteur 16 ne touche les bords supérieur ou inférieur de cette ouverture. En fin de fermeture, seule le secteur isolant 14 vient buter sur le fond de l'ouverture 32. On a alors comme présenté figure 2, un jeu J qui se répartit au dessus et en dessous du secteur conducteur 16, et le fond de l'ouverture 32 qui vient en butée sur le secteur isolant 14. Le circuit électrique reste ouvert, l'ampoule étant éteinte, ce qui signale que le positionnement de la porte est dans la tolérance demandée.
Pa contre, si le positionnement de la porte 30 n'est pas dans la tolérance, le secteur conducteur 16 vient buter sur une pente de l'ouverture 32 pendant la fermeture de cette porte, et reste en contact avec ce bord de l'ouverture quand la porte est complètement fermée. Le circuit électrique est fermé et l'ampoule 42 allumée, ce qui signale de manière simple et objective que le positionnement de cette porte n'est pas bon. Le circuit électrique comprenant une pile électrique 40 et une ampoule 42 constitue un moyen de signalement simple et économique. En variante, le circuit électrique peut comporter d'autres systèmes pour signaler le contact électrique, il peut par exemple être connecté à un ordinateur qui enregistre des données.
L'invention se rapporte à une composition, de préférence cosmétique ou dermatologique, comprenant un excipient approprié et un extrait de parties aériennes de Gynandropsis gynandra, plus avantageusement de feuilles. L'invention a également pour objet un procédé d'extraction d'un extrait de parties aériennes de Gynandropsis gynandra et plus avantageusement de feuilles, ainsi que l'extrait susceptible d'être obtenu par ledit procédé.
L'invention concerne également une telle composition ou un tel extrait pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des troubles ou pathologies de la peau, des muqueuses ou des phanères, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des troubles vasculaires. L'invention concerne enfin un procédé de soin cosmétique de la peau, des phanères ou des muqueuses, en vue d'améliorer leur état ou leur aspect, consistant à administrer une telle composition ou un tel extrait.
Gynandropsis gynandra est une plante de la famille des Capparacées. Ses noms botaniques sont les suivants : Gynandropsis gynandra (L.) Briq .ou Gyandropsis pentaphylla ou Cleome gynandra. Elle est également désignée sous divers noms vernaculaires, qui varient en fonction des zones géographiques. On pourra citer : ^ « wouin wouin » en Jula (sud ouest du Burkina) et Kyenebdo en Moré (centre du Burkina Faso) et nombreuses dénominations différentes dans les différents pays d'Afrique ^ Cleome, Gynandro, Mouzambe à fleurs blanches en français ^ Cat's whiskers ou spider flower en anglais ^ Senfkapper, benzoinbaun en allemand
C'est une petite plante herbacée annuelle, plante cultivée de 15 à 30 cm de hauteur, pouvant atteindre 1.5m de hauteur sous sa forme sauvage, à petites feuilles, tiges rondes, parfois rougeâtres. La floraison est constituée de petites fleurs bleues à violettes pâles. Les fruits sont des gousses allongées de 4 à 6 cm de long, qui contiennent de nombreuses graines, minuscules, noirâtres. ^ Il a été décrit que les feuilles et tiges contiennent les composés suivants :Isothiocyanate (cléomine) ^ Noyaux stéroliques (lupéol, campestérol, épi-lupéol) ^ Vitamine C (127 - 484 mg/100g) ^ 13-carotène (6,7 - 18,9 mg/100g) ^ Carbohydrates (4,4 - 6,4 %) ^ Protéines (3,1 - 7,7%) ^ Composés phénoliques (520 - 910 mg/100g) ^ Calcium (213 - 434 mg/100g) ^ Magnésium (86 mg/100g) La présence d'alcaloïdes est également mentionnée par certains auteurs mais pas par d'autres. Il a été décrit que les feuilles et tiges contiennent les composés suivants : ^ 29,5% de protéines ^ 28% lipides (59% acide linoléique et environ 20% d'acide oléique) ^ Stérols ^ Composés phénoliques (kaempférol, lutéoline)
Les parties aériennes (tige et feuilles) sont traditionnellement utilisées pour une administration par voie orale. Compte-tenu de sa réputation de plante à haute teneur en vitamines et micro-nutriments, elle le plus souvent utilisée comme plante alimentaire, aussi bien chez l'adulte que chez l'enfant et fortement recommandé chez la femme enceinte en tant que condiment pour les sauces et également en tant que légumes en soupes le plus souvent.
Les parties aériennes et les tourteaux obtenus après extraction de l'huile des graines peuvent être utilisés comme fourrage pour le bétail. Par ailleurs, des préparations de feuilles, de tiges et de graines, auraient des vertus, insecticides, vermifuges, anti-parasitaires et anti-microbiennes et anti-oxydantes lorsqu'elles sont consommées par voie orale. Le jus de feuilles serait utilisé en lavages oculaires. Les graines, consommées par voie orale, présenteraient des vertus anti- vomitives.
Dans différentes médecines traditionnelles (en particulier en Afrique ou en Inde), la plante est utilisée par voie orale essentiellement, pour le traitement des douleurs (maux de tête, liées à l'accouchement, estomac), des morsures de scorpion. Les feuilles peuvent être appliquées directement sur des plaies purulantes pour prévenir la formation de pus Des études récentes pharmacologiques ont conforté certains de ces usages traditionnels : activité analgésique chez la souris par injection intra-péritonéale d'extraits de la plante (U.R. Ghogare et Coll., Natural Product Research, 23 (4) : 327-333 (2009)) ; Effet anti-arthrite chez le rat par voie orale (R.T. Narendhirakannan et Coll., Molecular and Cellular Biochemistry, 276 : 71-80 (2005)) ; Effet bénéfique anticholestérol par voie orale (T. Johns, Journal of Ethnopharmocology, 66 : 1-10 (1999)). Enfin, la demande américaine US2004/0028643A1 décrit le screening de nombreuses plantes, dont Cleome gynandra, pour leur utilisation dans des compositions anti-âge. Les résultats donnés dans les exemples de cette demande américaine laissent apparaître que l'extrait de plante de Cleome gynandra (l'extrait méthanolique d'une partie -non définie - ou de la totalité de la plante) ne montre pas de résultats satisfaisants. En particulier, suite au test activité anti-DPPH, l'extrait n'a pas été retenu comme présentant une activité significative. Au contraire, les inventeurs ont découvert les extraits de parties aériennes (feuilles, tiges, fleurs, graines) de Gynandropsis gynandra et avantageusement des extraits de feuilles présentent des propriétés cosmétiques et dermatologiques jamais décrites jusqu'à présent. Les exemples qui suivent montrent que l'extrait selon l'invention présente une activité anti-DPPH significative. C'est la première fois que des extraits de parties aériennes de Gynandropsis 25 gynandra sont utilisés en tant que tels, pour leurs propriétés spécifiques.
L'invention a pour objet une composition comprenant à titre de principe actif un extrait de parties aériennes de Gynandropsis gynandra (ci-après dénommé extrait selon l'invention), avantageusement d'un extrait de feuilles de Gynandropsis gynandra, 30 éventuellement en association avec un excipient approprié. La composition est avantageusement une composition cosmétique ou dermatologique. La composition est avantageusement destinée à être appliquée sur la 4 peau, les phanères et/ou les muqueuses. La composition comprend avantageusement un extrait de feuilles de Gynandropsis gynandra. L'extrait selon l'invention peut se caractériser par sa teneur en polyphénols (dosage de Folin-Ciocalteu) qui est d'au moins 1% en poids exprimé en équivalent d'acide gallique par rapport au poids de l'extrait sec, et préférentiellement au moins 3% en poids. Parmi les polyphénols présents dans cet extrait, les flavonoïdes sont particulièrement intéressants. Ainsi, dans une variante avantageuse de l'invention, l'extrait selon l'invention peut se caractériser par sa teneur en en flavonoïdes (dosage au chlorure d'aluminium), qui est d'au moins 0,5% en poids de flavonoïdes exprimé en équivalent rutine par rapport au poids de l'extrait sec et préférentiellement au moins 1% en poids de flavonoïdes. Ces flavonoïdes sont préférentiellement constitués majoritairement de rutine et de ses dérivés.
La rutine est un composé de formule (I) Les dérivés de la rutine sont avantageusement les composés dans lesquels on retrouve le résidu flavonique de la rutine, résidu de formule (II): OH OH
OH O Dans les flavonoïdes contenus dans cet extrait, on retrouve avantageusement la rutine et ses dérivés dans une proportion, en poids exprimée en équivalent rutine par rapport à la teneur en poids total de flavonoïdes, d'au moins 50%, avantageusement au moins 60%, plus avantageusement au moins 70%, encore plus avantageusement au HO moins 80%.Selon une variante avantageuse de l'invention, l'extrait contient de 0% à 80%, avantageusement de 10 à 80%, plus avantageusement de 30 à 70% (les % sont exprimés en poids par rapport au poids de l'extrait sec) de sucres. L'extrait selon l'invention contient avantageusement 0 à 50% en poids, plus avantageusement 0 à 20% en poids, encore plus avantageusement 0 à 10% en poids de lipides de Gynandropsis gynandra; les % étant exprimés en poids par rapport au poids total de l'extrait sec. L'extrait selon l'invention contient avantageusement 0 à 60% en poids, plus avantageusement 0,5 à 30% en poids, encore plus avantageusement 0,5 à 10% en poids de protéines de Gynandropsis gynandra; les % étant exprimés en poids par rapport au poids total de l'extrait sec (dosage de Bradford).
Cet extrait est avantageusement obtenu par extraction solide- liquide, des parties aériennes, fraîches ou sèches, de Gynandropsis gynandra dans un solvant aqueux et/ou alcoolique et/ou glycolique. Les parties aériennes sont avantageusement les feuilles. Le solvant est avantageusement choisi dans le groupe constitué par l'eau, l'éthanol, le glycérol, un glycol comme le propanediol, et leurs mélanges, dans des proportions comprises entre 0% à 100% d'eau par rapport aux autres solvants, plus avantageusement dans des proportions comprises entre 0% à 90% d'eau par rapport aux autres solvants. Plus particulièrement, on introduira entre 0,1 et 50% en poids (en équivalent matière sèche) de parties de plante souhaitée dans le solvant d'extraction et préférentiellement entre 1 et 10% en poids et avantageusement 5% en poids (les % sont exprimés en poids de la matière sèche par rapport au poids total mis en oeuvre). La partie sèche, de Gynandropsis gynandra peut être les feuilles, les tiges, les fleurs, les graines, seules ou associées et préférentiellement les feuilles. En présence d'éthanol, on choisira une proportion comprise entre 0 et 100% d'éthanol dans l'eau et préférentiellement 10 à 80 d'éthanol et avantageusement entre 60 et 80% (les % sont exprimés en poids de l'éthanol par rapport au poids total eau+éthanol). En présence de glycérol, on choisira une proportion comprise entre 0 et 100% de glycérol dans l'eau et préférentiellement entre 30 et 80% et avantageusement 80% les % sont exprimés en poids de glycérol par rapport au poids total eau+glycérol). En présence de glycol et plus particulièrement de propanediol, on choisira une proportion comprise entre 0 et 100% de propanediol dans l'eau et préférentiellement entre 10 et 80% et avantageusement 60% (les % sont exprimés en poids de propanediol par rapport au poids total eau+propanediol) La température d'extraction est avantageusement comprise entre 4°C et 100°C et préférentiellement entre 10°C et 60°C et plus particulièrement entre 15°C et 30°C. La durée d'extraction varie avantageusement de 30 minutes à4h et préférentiellement de 30 minutes à 2h et plus avantageusement elle est d'environ 1h.
Des études épidémiologiques ont montré que la consommation régulière de flavonoïdes dans l'alimentation était associée à une diminution du risque de plusieurs cancers. Une des hypothèses mentionnées pour expliquer ce fait est que les flavonoïdes pourraient exercer leurs effets "anti-cancéreux" grâce à l'inhibition des cytochromes P450, réduisant ainsi l'activation des substrats pro-carcinogènes en substances carcinogènes. Des études in vivo et in vitro ont montré que les flavonoïdes étaient capables de stimuler ou d'inhiber l'activité des systèmes des cytochromes P450.
L'amine hétérocyclique 2-amino-3-methylimidazo[4,5-f]quinoline (IQ) est une substance pro-carcinogène présente dans l'alimentation et qui requière une activation métabolique par le CYP1A2 pour se transformer en substance carcinogène. L'objectif d'une étude était de montrer si certains flavonoïdes, tels que des prenylflavonoïdes présents dans des extraits de houblon étaient capables d'inhiber l'activation métabolique d'IQ par le CYP1A2. Le CYP1A2 active fortement IQ comme cela a été démontré dans le test Ames Salmonella. L'étude montre que les trois prenylflavonoïdes présents dans des extraits de houblon (prenylchalcone xanthohumol, prenylflavanones 8-prenylnaringenin et isoxanthohumol) inhibent fortement l'activation de IQ par le CYP1A2 dans le test Ames Salmonella. Selon les auteurs, afin d'atteindre une concentration plasmatique d'environ 1pM ou 0.354 mg/1) qui pourrait inhiber l'activation de IQ in vivo, c'est-à-dire inhiber le cytochrome CYP1A2, une personne de poids moyen (70 Kg) devrait ingérer au moins 10.6 mg de prenylflavonoïdes par jour. Ceci correspondrait à la consommation journalière de 2.6 litres de bière et les auteurs recommandent une supplémentation par des extraits de poudre de cônes de houblon.
Selon l'utilisation de l'invention, la composition est préparée en incorporant un extrait sec de cônes de houblon (inflorescences femelles d'Humulus lupulus) à des huiles végétales riches en acides gras polyinsaturés. Ainsi, la quantité d'extrait et d'huile dans la composition est telle qu'elle permet un apport journalier de : - Humulus lupulus (extrait sec de poudre de cônes de houblon) : 20 à 1000 mg et de préférence de l'ordre de 100 mg ; - Huile(s) végétale(s) riche((s) en acides gras polyinsaturés (huile de chanvre et de soja) : 400 à 3000 mg et de préférence de l'ordre de 866 mg, ce qui correspond à . . environ 300 à 2600 mg et de préférence de l'ordre de 540 mg d'acide linoléique, . environ 60 à 600 mg et de préférence de l'ordre de 160 mg d'acide alpha-linolénique. Cet apport journalier peut être réalisée à l'aide de deux prises d'une composition selon l'invention. À titre d'exemple préféré, une composition selon 25 l'invention comprend de : - 10 à 500 mg et de préférence de l'ordre de 50 mg d'extrait Humulus lupulus, et - 200 à 1500 mg et de préférence 433 mg d'huile(s) végétale(s) riche((s) en acides gras polyinsaturés (huile 30 de chanvre et de soja), ce qui correspond à : . environ 150 à 1300 mg et de préférence de l'ordre de 370 mg d'acide linoléique, . environ 30 à 300 mg et de préférence de l'ordre de 80 mg d'acide alpha-linolénique. 35 La composition de l'invention peut comprendre en outre une ou plusieurs autres substances susceptibles de compléter ou potentialiser l'action des actifs ci-dessus. On peut citer par exemple : - des substances apportant une synergie d'action sur la synthèse de mélatonine et par exemple la piperine et la piperidine, ou encore les extraits de végétaux les contenant, - des actifs connus dans les dérèglements de 10 l'horloge biologique comme la mélatonine, la N-acétyl sérotonine, la sérotonine, le tryptophane, - des actifs permettant de stimuler l'arylalkylamine-N-acétyltransférase (AA-NAT) et l'hydroxyindole-O-méthyltransférase (HIOMT) pour augmenter la synthèse de 15 mélatonine, - des actifs sédatifs, comme par exemple la valériane, des actifs anti-dépresseurs et hypnotiques, calmants ou relaxants, 20 -des vitamines et minéraux..., - des excipients adaptés aux formes galéniques diverses sous lesquelles peuvent se présenter les compositions de l'invention et favorisant par exemple la biodisponibilité des actifs ou augmentant leur efficacité. 25 Les compositions de l'invention peuvent se présenter sous tout type de formes solides (comprimé, gélule, capsule molle, cachet, sachet, poudre, granulé, etc.) et liquide (solution, sirop, gouttes, émulsion, etc.). Exemple de préparation d'une composition selon l'invention. Une composition selon l'invention est préparée en 35 incorporant un extrait sec de cônes de houblon (inflorescences femelles d'Humulus lupulus) à des huiles 30 végétales riches en acides gras polyinsaturés. Ainsi, la quantité d'extrait et d'huile dans la composition est telle qu'elle permet un apport journalier de : - Humulus lupulus (extrait sec de poudre de cônes de 5 houblon) : 100 mg ; - Huiles végétales de chanvre et de soja (riches en acides gras polyinsaturés) : 866 mg.
Scie à chaîne munie d'un dispositif de réglage de la tension de la chaîne