Pour distinguer les groupes entre eux, l'analyse du nombre de plaies fermées par formulation, est une analyse plus fine, qui permet de distinguer les trois groupes entre eux (1, 3 et 4). A partir de D7, le groupe 3 (formulation selon l'invention) se distingue nettement du groupe 4 (huile d'Argan seule) et présente un effet légèrement supérieur au groupe 1 (acide hyaluronique). Il en est de même à D9. A D11, les groupes 1 et 3 présentent le même nombre de plaies fermées. A D14, seules quelques plaies du groupe témoin ne sont pas cicatrisées. Au niveau macroscopique, la formulation selon l'invention présente donc un effet sur la fermeture des plaies supérieur à celui de l'acide hyaluronique seul et de l'huile d'Argan seule. Analyse histoloqique Pour apprécier plus finement la qualité de la cicatrisation, la coloration au trichrome selon Masson (coloration du collagène au Vert Lumière ou Bleu d'aniline, associé à une coloration nucléaire par l'hématoxyline, et une coloration cytoplasmique par un mélange de colorants acides - fuchsine Ponceau) a été réalisée. Ce procédé permet d'apprécier les paramètres suivants : tissu de granulation, néovascularisation et collagène. Le barème d'appréciation utilisé est le suivant : Synthèse et maturité du collagène : échelle de 1 à 4 selon l'intensité de la couleur (de plus en plus turquoise, représenté par niveau de gris sur les figures). - Néo vaisseaux : comptage du nombre de petits vaisseaux par unité de surface. Annexes : comptage du nombre de bulbes pileux par unité de surface. -14- Les résultats obtenus à D7 et D11 pour chaque groupe sont présentés dans les tableaux ci-dessous. Ces résultats sont également illustrés par les figures 2a à 2h. Tableau 1 Résultats à D7 G1 G2 G3 G4 Collagène 2 1 3 2 Néovaisseaux /mm2 15 7 18 15 Annexes (poils) /mm2 3 2 3 1 Tableau 2 Résultats à D11 G1 G2 G3 G4 Collagène 3 2 4 3 Epaisseur TG ++ + ++ ++ Annexes/mm2 2 5 6 3 Dans ces tableaux, les abréviations et symboles suivants sont utilisés : TG : Tissu de granulation. +: Epaisseur du TG inférieure à l'épaisseur du derme non lésé (non comblée). ++ : Epaisseur du tissu de granulation identique au tissu normal (comblée). Les tableaux 1 et 2 montrent la supériorité de la quantité de néovaisseaux formés et la supériorité de la maturation du collagène lors de l'utilisation de la composition selon l'invention (formulation 3) pour le traitement des plaies chez le rat Wistar, 15 comparativement aux autres formulations : sérum physiologique (formulation 2) et produits utilisés seuls (acide hyaluronique (formulation 1) et huile d'argan (formulation 4)) à la même concentration que celle de la formulation selon l'invention. La formulation selon l'invention possède donc une action significativement supérieure à l'acide hyaluronique seul et à l'huile d'argan seule sur la vitesse et la qualité de la 20 cicatrisation des plaies. 10 -15- Exemple 2 : étude de l'influence de la mase moléculaire de l'acide hyaluronique sur la culture de fibroblastes de derme humain 1. Solutions mères La solution mère des différents polymères d'acide hyaluronique est préparée à une concentration d'acide hyaluronique de 2 mg/mL dans du milieu DMEM (milieu Eagle modifié de Dulbecco, un milieu de culture cellulaire qui contient des acides aminés, des sels minéraux (KCI, MgSO4, NaCl, NaH2PO3), du glucose et des vitamines (acide folique, nicotinamide, riboflavine et vitamine B12) et les dilutions sont ensuite réalisées en milieu DMEM + 2,5% SVF (sérum de veau foetal) + antibiotique. On a utilisé un acide hyaluronique présentant une masse moléculaire comprise entre 20 et 50 kDa, et un acide hyaluronique à forte masse moléculaire de l'ordre de 2 millions de Da. 2. Culture La souche utilisée est: M228 F01, fibroblastes dermiques humains. Les fibroblastes utilisés sont ensemencés à raison de 5x103 cellules/puits dans des plaques 96 puits (passage 7 pour l'essai n°1, passage 9 pour l'essai n°2) en présence de 200 pl de milieu de culture complet (DMEM + 10% SVF + antibiotiques). 24h après l'ensemencement, les cellules sont sevrées dans du milieu DMEM sans sérum pendant 4 heures. Puis à DO, les différentes dilutions de chaque produit sont additionnées, avec 3 puits par condition de culture. 3 témoins sont aussi ajoutés (3 puits/témoin) : DMEM sans sérum, - milieu appauvri en sérum (DMEM + 2,5% SVF + antibiotique) milieu complet (DMEM + 10% SVF + antibiotique). Le milieu est renouvelé à D3 pour les cultures étudiées à D7. 3. Quantification de la prolifération La prolifération des cellules est évaluée par un test colorimétrique, dit test MU, d'une part après 3 jours et d'autre part après 7 jours de culture. Ce test est basé sur le principe d'une réduction du sel jaune de tétrazolium (MU) (bromure de 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium) [en un produit formazan bleu-violet par les réductases NADPH mitochondriales des cellules vivantes. 4. Test MTT -16- La prolifération des cellules est évaluée par le test colorimétrique : lorsque le sel de tétrazolium (MTT) 5mg/ml en PBS) est ajouté au milieu de culture, un produit formazan bleu-violet est formé par les réductases NADPH mitochondriales des cellules vivantes. Les cristaux sont ensuite dissous par un mélange éthanol 100° - DMSO (v/v). La coloration du surnageant, proportionnelle à la quantité de cellules vivantes, est mesurée par lecture de la densité optique (D.0) au spectrophotomètre à une longueur d'onde de 570 nm. Le test est effectué à D3 et à D7 (DO correspondant à l'addition des solutions à tester). 5. Analyse des résultats Les moyennes des densités optiques des 3 puits/échantillon sont représentées dans des graphes sur les figures 3a et 3b. L'évaluation statistique est réalisée par le test t de Student. La différence, par rapport au témoin DMEM + 2.5% SVF, est considérée comme significative pour p 0,05. Ainsi, la culture de fibroblastes de derme humain en présence d'acide hyaluronique de différentes masse molaire montre que l'acide hyaluronique de faible masse moléculaire est plus actif sur la culture de fibroblastes de derme humain à D3 que l'acide hyaluronique de plus haute masse molaire. Le test est statistiquement significatif par rapport au témoin (SVF à 2,5%) et par rapport à l'acide hyaluronique de forte masse moléculaire et ce à deux concentrations (0,01 et 0,1 mg/ml).