Les plantes à parfums, aromatiques et médicinales (PPAM) sont connues pour contenir des molécules d'intérêt à fort potentiel car elles produisent des métabolites secondaires répartis en trois catégories : les alcaloïdes, les composés phénoliques et les terpènes. Les PPAM sont principalement utilisées pour en extraire : - soit des composés volatils, en particulier des terpènes : ces extraits se présentent généralement sous forme d'huiles essentielles ou sous forme d'hydrolats ou eaux florales ; - soit des composés phénoliques : des macérâts comprenant des composés phénoliques non volatils. Les huiles essentielles sont considérées comme un mélange naturel complexe de molécules volatiles. Elles sont obtenues à partir d'une PPAM soit par entraînement à la vapeur, soit par des procédés mécaniques à partir de l'épicarpe des Citrus, soit par distillation sèche, puis séparation de la phase aqueuse par des procédés physiques. Elles sont dotées de nombreuses propriétés, notamment parfumantes, antimicrobiennes, anti-inflammatoires, relaxantes, expectorantes, immunostimulantes, sédatives et digestives, exploitables dans le domaine de la parfumerie, de la pharmacie, de la cosmétique, de l'agro-alimentaire et de l'aromathérapie. Les hydrolats et eaux florales sont des phases aqueuses dans lesquelles sont dissoutes des molécules volatiles présentant une bonne affinité avec l'eau. Elles sont constituées par la phase vapeur recondensée et séparées de l'huile essentielle lorsqu'il y en a. Elles sont largement utilisées en cosmétique et agroalimentaire. Toutefois, les composés volatils présents dans les hydrolats et eaux florales et leurs concentrations ne sont pas les mêmes que dans les huiles essentielles, et leur efficacité est moins importante. 2 Les terpènes sont des composés qui possèdent un squelette avec au moins une unité isoprénique à 5 atomes de carbone appelée unité isoprène (2-méthylbut-1,3-adiène). On distingue ainsi selon le nombre d'atomes de carbone constituant les molécules de ce groupe: les hémiterpènes (1 unité: C5), les monoterpènes (2 unités: C10), les sesquiterpènes (3 unités: 5 C15), les diterpènes (4 unités: C20), les sesterpènes (5 unités: C25), les triterpènes (6 unités: C30), les tétraterpènes (8 unités: C40) et les polyisoprènes (n unités: C5n). Les composés phénoliques constituent un ensemble très diversifié de plusieurs milliers de molécules classées en fonction de leur structure chimique et de leur voie de biosynthèse. On distingue les phénols simples, les acides phénoliques, les coumarines, les flavonoïdes, les 10 isoflavonoïdes, les xanthones, les stilbènes, les tannins, les lignanes et les quinones. L'élément structural fondamental commun est un noyau benzénique auquel est directement lié au moins un groupe hydroxyle, libre ou engagé dans une autre fonction généralement oxyde ou ester. Ils sont généralement obtenus par macération de PPAM, dans des solutions hydroalcooliques. Les composés phénoliques sont des métabolites secondaires végétaux connus 15 pour leurs propriétés anti-oxydantes importantes et ils sont utilisés dans les domaines pharmaceutique et cosmétique. De nombreuses méthodes comme l'extraction à l'eau, la macération, l'hydrodistillation, la lixiviation, la décoction et l'extraction par solvants organiques ont été utilisées pour préparer des extraits de plantes. L'extraction des huiles essentielles, des hydrolats et des composés 20 phénoliques fait appel à des procédés différents, qui sont énergivores, longs et coûteux et qui ont un impact écologique négatif. Parmi ces procédés, ceux mettant en oeuvre de l'eau, de l'alcool ou des mélanges hydro-alcooliques permettent d'obtenir des molécules essentiellement hydrophiles (ou fortement polaires). D'autres solvants comme le glycérol et les dérivés du glycol, utilisés notamment en cosmétique, ont un très faible pouvoir solvant, 25 rendant les extraits obtenus pauvres en molécules actives. Parmi les solvants organiques classiquement mis en oeuvre, on peut citer les éthers de glycol, l'hexane, l'éther, l'acétone, le chlorure de méthylène, les solvants chlorés et fluorés par exemple. Ces solvants permettent d'obtenir des molécules lipophiles (ou fortement apolaires) avec des rendements satisfaisants mais ils présentent de nombreux inconvénients. Ils sont notamment très inflammables, dangereux ou extrêmement toxiques pour l'homme et son environnement. L'extraction par CO2 supercritique s'est développée à partir des années 1970, car celui-ci est non-inflammable, non toxique, disponible, peu coûteux et recyclable. Cependant, en raison 3 des propriétés de solubilisation du CO2 supercritique, l'extraction est sélective aux composés hydrophobes tels que les lipides, les composés volatils, les caroténoïdes. L'extraction de molécules plus polaires de type composés phénoliques est possible uniquement par l'ajout de co-solvant tel que l'éthanol, le méthanol ou l'eau. 5 Etant donné les propriétés biologiques des composés volatils, d'une part, et des composés phénoliques d'autre part, il est regrettable de ne pouvoir disposer de compositions groupant à la fois des composés volatils et des composés phénoliques issus de PPAM, et ce en quantités suffisantes. L'extraction de molécules volatiles et non volatiles de façon simultanée est difficile car ces deux familles de composés ont des structures chimiques très différentes et de ce fait 10 des polarités différentes. Le mélange d'une huile essentielle avec un hydrolat et un extrait polyphénolique ne conduit pas à une solution satisfaisante, en particulier du fait de l'instabilité des hydrolats dans le temps et de la richesse insuffisante en composés phénoliques dans les extraits obtenus à partir de PPAM. L'objectif de l'invention est de pallier ces inconvénients et manques. A cet effet, elle a pour 15 objet un extrait obtenu à partir d'au moins une plante choisie parmi les plantes à parfums, aromatiques et médicinales, comprenant à la fois des composés volatils et des composés phénoliques (non volatils). En particulier, l'invention a pour objet un extrait obtenu à partir d'au moins une plante choisie parmi les plantes à parfum, aromatiques et médicinales, comprenant entre 0,1 % et 5 % de composés volatils en poids de matière sèche de l'extrait et 20 entre 0,5 % et 40 % de composés phénoliques en poids de matière sèche de l'extrait. En plus d'être peu énergivore et respectueux de l'environnement, le procédé selon l'invention permet d'obtenir des extraits riches en molécules hydrosolubles à caractère polaire - des composés phénoliques - mais de façon surprenante et inattendue, il permet également l'extraction simultanée de molécules à caractère apolaire - des composés volatils. Pour y 25 parvenir, l'invention propose un procédé qui consiste en une extraction à l'eau subcritique à partir d'au moins une plante choisie parmi les plantes à parfums, aromatiques et médicinales, réalisée au moins avec les trois conditions suivantes : - un mode "dynamique" par percolation, et - une température comprise entre 150 et 175°C, et 30 - un temps de passage de l'eau subcritique de 15 minutes. Dans ces conditions précises, l'eau à l'état subcritique acquiert des propriétés nettement améliorées permettant ainsi l'extraction d'un plus grand nombre de composés. L'extraction à 4 l'eau subcritique de substances naturelles contenues dans des plantes a déjà été décrite, mais dans des conditions qui ne permettent pas d'obtenir un extrait selon l'invention. Elle décrit, dans la majorité des cas, l'extraction des composés phénoliques d'une plante et de manière moins fréquente l'extraction des composés volatils. Des travaux récents comme par 5 exemple ceux de Vladie et al., (Optimization of Satureja montana subcritical water extraction process and chemical characterization of volatile fraction of extracts. 2017. J. of Supercritical Fluids 120, 86-94). ont montré qu'il était possible d'extraire des composés aromatiques de PPAM en utilisant l'eau subcritique à l'aide d'un procédé de type "batch", mais ces travaux ne mentionnent pas la présence simultanée de composés volatils et de composés phénoliques 10 dans les extraits. Par ailleurs, les travaux de Z. Zekovic et al., (Chemical characterization of polyphenols and volatile fraction of coriander (Coriandrum sativum L.) extracts obtained by subcritical water extraction. 2016. Industrial Crops and Products 87, 54-63) mentionnent l'extraction de composés volatils et de composés phénoliques à partir de graines de coriandre, par un 15 procédé à l'eau subcritique en mode "batch". Les conditions opératoires, notamment 150°C / 60 bars / 20 minutes ou 100°C / 60 bars / 30 minutes ne permettent pas d'extraire les composés phénoliques des graines de coriandre, et notamment le composant principal (l'acide 3,4-diméthoxycinnamique), en raison d'une dégradation des composés lors de l'extraction. En effet, dans le mode "batch", les composés solubilisés dans l'eau à l'état 20 subcritique demeurent en permanence à haute température et pression élevée pendant toute la durée du processus d'extraction. A l'inverse, dans le mode "dynamique" par percolation selon l'invention, l'eau à l'état subcritique circule à travers la plante en entraînant avec elle les composés solubilisés, et ce pendant un temps très court. On définit ainsi le temps de passage (t) à l'aide de la formule 25 suivante: t=V/Q V: Volume du cylindre (réservoir d'extraction) Q: débit d'eau circulant Le temps de passage des composés extraits dans le procédé selon l'invention est ainsi de 15 30 minutes, soit une durée de contact plus faible que dans le procédé "batch" décrit dans la littérature, où le temps de contact est de 20 à 30 minutes. 5 Avantageusement, le procédé selon l'invention en mode dynamique permet une extraction concomitante des composés volatils et des composés phénoliques dans des proportions importantes au sein du même extrait aqueux, avec un bon rendement. Il permet particulièrement d'extraire certains composés volatils qui ne sont pas présents dans les 5 hydrolats ou les huiles essentielles et/ou d'éliminer certains composants gênants présents dans les huiles essentielles, en particulier les allergènes. Les extraits aqueux ainsi obtenus présentent un caractère aromatique et des propriétés antimicrobiennes liés à leur fraction volatile, et simultanément des propriétés anti-oxydantes du fait de leur richesse en composés phénoliques. Ils peuvent être utilisés dans des 10 compositions, telles que notamment des compositions parfumantes, des compositions alimentaires, des compositions cosmétiques, des produits vétérinaires, des produits de nettoyage, des médicaments. L'invention a par conséquent également pour objet une composition comprenant au moins 0,1 % d'un extrait selon l'invention, ainsi que l'utilisation dudit extrait seul ou dans une 15 composition, comme principe actif cosmétique ou pharmaceutique ou vétérinaire, parfum, additif ou conservateur. L'invention est à présent décrite en détails. DEFINITIONS Dans la présente demande, la forme singulière d'un mot comprend le pluriel, et inversement, 20 à moins que le contexte indique clairement le contraire. Ainsi, les références " un", "une", et "le", "la" comprennent les pluriels de ces termes. Par exemple, la référence à "un extrait" ou "une composition" comprend une pluralité de ces "extraits" ou "compositions". Par "eau subcritique" au sens de l'invention on entend de l'eau portée à des températures supérieures ou égales à 100°C et inférieures ou égales au point critique (374°C) et à des 25 pressions inférieures à 221 bar. Par « composés allergènes » au sens de l'invention on entend des substances reconnues comme pouvant provoquer des allergies chez l'homme. Il s'agit en particulier des substances indiquées dans la liste des ingrédients mentionnés au 8° de l'article R.5131-4 du code de la santé publique français. Ces substances font partie d'une liste de 26 substances, identifiées 30 comme susceptibles d'entraîner des réactions allergiques de contact chez des personnes sensibilisées (allergènes de contact probables). 6 Par « composés phénoliques » au sens de l'invention on entend l'ensemble des substances chimiques comprenant au moins un noyau aromatique, portant un ou plusieurs groupes hydroxyles, en plus d'autres groupements fonctionnels. Les composés phénoliques sont des molécules non volatiles. 5 Par « composés volatils » au sens de l'invention on entend l'ensemble des composés aromatiques des huiles essentielles, y compris les terpènes. Les composés aromatiques des huiles essentielles sont principalement des dérivés du phénylpropane C6-C3. Ils peuvent comprendre des phénols (ex: eugénol), des aldéhydes (ex: cinnamaldéhyde), des alcools (ex: alcool cinnamique), des dérivés méthoxylés (ex: anéthol, estragol) ou benzodioxole (ex: 10 myristicine, safrole). Ils sont cependant beaucoup moins présents que les terpènes. Par « extrait d'au moins une plante choisie parmi les plantes à parfums, aromatiques et médicinales » au sens de l'invention on entend un ensemble de molécules obtenues à partir de tout ou partie d'une ou plusieurs plante(s) choisie(s) parmi les plantes à parfums, aromatiques et médicinales. 15 Par « plantes à parfums, aromatique et médicinale » ou « PPAM » au sens de l'invention, on entend un ensemble de plantes regroupant les plantes à parfums, les plantes aromatiques et les plantes médicinales. Par « principe actif cosmétique » au sens de l'invention on entend une substance présentant un effet sur la peau permettant d'améliorer son aspect et/ou ses fonctions et/ou de la 20 protéger. Par « terpènes » au sens de l'invention on entend des composés qui possèdent un squelette avec au moins une unité isoprénique à 5 atomes de carbone appelée unité isoprène (2- méthylbut-1,3-adiène). Par « terpénoïde » au sens de l'invention on entend les dérivés oxygénés des terpènes. Une 25 grande variété de structures caractérisent les terpénoïdes selon le nombre de carbones présents, le caractère saturé ou insaturé des liaisons, la configuration spatiale et la nature du groupe fonctionnel. Ils sont constitués de différentes fonctions : - Phénol: C6H5-OH (ex: thymol), - Alcool: R-OH (ex: menthol), 30 - Aldéhyde: R-COH (ex: citronellal), - Cétone: R1-CO-R2 (ex: verbénone), - Ester: R1-COO-R2 (ex: acétate de linalyle), 7 - Oxyde: R1-0-R2 (ex: eucalyptol), - Péroxyde: R1-0-0-R2 (ex: ascaridol) DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION L'invention a donc pour objet un extrait à l'eau subcritique obtenu à partir d'au moins une 5 plante choisie parmi les plantes à parfums, aromatiques et médicinales, comprenant à la fois des composés volatils et des composés phénoliques. Les composés volatils sont présents entre 0,1 % à 5 % en poids de matière sèche de l'extrait, préférentiellement entre 0,5 et 3 %. Préférentiellement, les composés volatils présents dans l'extrait selon l'invention sont au 10 moins pour partie des terpènes. Les terpènes peuvent être au moins en partie des terpènes oxygénés et/ou au moins en partie des terpènes hydrocarbonés. De façon préférée, la part relative des terpènes oxygénés dans l'extrait selon l'invention est d'au moins 95% des terpènes. Les terpènes oxygénés sont préférentiellement des alcools 15 et/ou des cétones et/ou des esters. Selon un mode de réalisation adapté : - la part relative des alcools est comprise entre 5 % et 50% des terpènes oxygénés, et/ou - la part relative des cétones est comprise entre 5 % et 75% des terpènes oxygénés, et/ou 20 - la part relative des esters est inférieure à 1 % des terpènes oxygénés. Les terpènes oxygénés présents dans les extraits selon l'invention sont préférentiellement choisis parmi un ou plusieurs des terpènes oxygénés suivants : l'a-terpinéol, le linalol, le géraniol, le citronellol, le menthol, l'eucalyptol, la verbénone, les italidiones, la Rdamascenone, la cryptone, le nérol, le carvacrol, le thymol, le bornéol, l'eugénol, l'acétate de 25 linalyle, le camphre, le benzoate de benzyle. En particulier, ils sont choisis parmi : - l'a-terpinéol, par exemple extrait du Laurier noble - le menthol, par exemple extrait de la Menthe poivrée - l'eucalyptol, par exemple extrait du Myrte - le camphre, par exemple extrait du Camphrier 30 - la verbénone, par exemple extraite du Romarin - les italidiones (R-dicétones), par exemple extraites de l'Immortelle d'Italie 8 - la cryptone, par exemple extraite de l'Eucalyptus - la R-damascenone, par exemple extrait de la Rose de Damas - le carvacrol, le thymol, le bornéol par exemple extraits du Thym - l'eugénol, par exemple extrait du Clou de girofle 5 - l'acétate de linalyle, par exemple extrait de la Lavande - le benzoate de benzyle, par exemple extrait de l'Ylang-Ylang Avantageusement, ces molécules sont connues pour leurs propriétés anti-oxydantes, anti-inflammatoires et antibactériennes et leur présence en quantité importante dans les extraits selon l'invention permet d'augmenter l'efficacité desdits extraits dans les compositions 10 cosmétiques ou pharmaceutiques. Concernant les terpènes hydrocarbonés, lorsqu'ils sont présents, leur part relative dans l'extrait selon l'invention représente préférentiellement moins de 5% des terpènes totaux. Les composés phénoliques sont présents entre 0,5 % et 40 % en poids de matière sèche de l'extrait, préférentiellement entre 3 % et 20 %. 15 Préférentiellement, ils sont choisis parmi au moins un des composés phénoliques suivants : les phénols simples, les acides phénoliques, les stilbènoïdes et les flavonoïdes. Notamment, il peut s'agir de composés phénoliques choisis parmi au moins un des composés phénoliques suivants : la quercétine, la myricétine, le kaempférol et leurs dérivés glycosylés, la catéchine, l'épicatéchine et leurs oligomères proanthocyanidoliques, les anthocyanidines et leurs dérivés 20 glycosylés, l'arbutine, l'acide gallique, l'acide quinique, l'acide p-coumarique, l'acide caféique, les acides caféoylquiniques et di-O-caféoylquiniques, l'acide rosmarinique, le resvératrol et ses dérivés glycosylés. Avantageusement, ces molécules sont connues pour leurs propriétés anti-oxydantes et anti-inflammatoires, et leur présence en quantité importante dans les extraits selon l'invention 25 permet d'augmenter l'efficacité desdits extraits dans les compositions cosmétiques ou pharmaceutiques. Très préférentiellement, l'extrait selon l'invention contient peu ou pas de composés allergènes, c'est-à-dire moins de 0,002 % en poids de matière sèche de l'extrait. Les extraits selon l'invention sont obtenus à partir d'une ou plusieurs plante(s) choisie(s) parmi 30 les plantes à parfums, aromatiques et médicinales appartenant aux genres botaniques suivants : Helichrysum, Rosmarinus, Eucalyptus, lnula, Laurus, Rosa, Thymus, Mentha, Citrus, 9 Lavandula, Cupressus, Salvia, Picea, Pinus, Jasminum, Anthemis, Lippia, Myrtus, Lilium, Arnica, Cinnamomum, Crocus, Cananga, Pelargonium. En effet, ces plantes présentent les avantages de produire des quantités importantes de composés volatils et de composés phénoliques. 5 Les extraits selon l'invention possèdent une richesse tant quantitative que qualitative de molécules : composés volatils et composés phénoliques. De plus, ils sont obtenus à partir d'un solvant aqueux qui, contrairement aux extraits obtenus avec des solvants organiques, ne contient pas de traces de résidus toxiques et cancérigènes. Les extraits selon l'invention sont préférentiellement obtenus par extraction à l'eau 10 subcritique. Ils peuvent être obtenus en particulier par la mise en oeuvre d'un procédé d'extraction à l'eau subcritique en mode "dynamique" par percolation. Le procédé d'extraction à l'eau subcritique est réalisé de façon préférée dans un dispositif dédié constitué notamment d'un réservoir d'extraction cylindrique, d'un système de chauffage, d'un système de réglage de la température, d'un système de pompage de l'eau, 15 d'un système de réglage de la pression. L'extraction à l'eau subcritique en mode dynamique comprend préférentiellement les étapes suivantes : - remplissage du réservoir d'extraction avec la matière première (PPAM) sèche ou fraîche, broyée ou non, 20 - mise en température du système de chauffage du réservoir d'extraction, - pompage de l'eau à travers le réservoir d'extraction et mise en température et sous pression de l'eau circulant, - refroidissement de l'eau et retour à une pression atmosphérique, - collecte de l'extrait. 25 Le procédé selon l'invention est particulier de par les paramètres sélectionnés. Il s'agit d'un procédé d'extraction à l'eau subcritique, caractérisé par les paramètres suivants : - un mode « dynamique » par percolation, c'est-à-dire que de l'eau à l'état subcritique circule à travers la plante en continu, jusqu'à épuisement de la plante en composés actifs; 30 - une température comprise entre 150 et 175°C, et - un temps de passage de l'eau subcritique de 15 minutes. 10 Préférentiellement, le procédé selon l'invention est également caractérisé par un ou plusieurs des paramètres suivants : - une durée totale du procédé comprise entre 25 et 100 minutes, - un débit de pompage de l'eau circulante compris entre 1 et 4 ml/min, 5 - un rapport matière première/extrait compris entre 1/2 et 1/30 (poids/volume), - une mise en pression de l'eau entre 20 et 60 bars. Ainsi, le procédé selon l'invention peut comprendre la mise en oeuvre des étapes suivantes : - remplissage d'un réservoir avec une ou plusieurs PPAM broyée(s) ou non, préférentiellement broyée(s), 10 - mise en température du système de chauffage à une température comprise entre 100 et 150°C, - pompage de l'eau à travers le réservoir, préférentiellement à un débit compris entre 1 et 4 ml/min, et mise en température entre 150°C et 175°C, préférentiellement 150°C et sous pression entre 20 et 60 bars, préférentiellement 15 30 bars de l'eau circulant, - refroidissement de l'eau préférentiellement à 20°C, par exemple à l'aide d'un bain refroidissant, et retour à une pression atmosphérique (1 bar) en sortie du réservoir d'extraction, - collecte de l'extrait. 20 Le procédé selon l'invention permet d'extraire de façon sélective, à la fois des composés volatils et des composés phénoliques dans le même extrait. Il apporte ainsi une véritable originalité en termes de constituants moléculaires vis-à-vis des hydrolats et des huiles essentielles des PPAM, et ce avec des rendements importants et l'utilisation d'un solvant 25 respectueux de l'environnement. Les extraits selon l'invention, susceptibles d'être obtenus par ce procédé, peuvent être utilisés seuls ou dans des compositions. L'invention a donc également pour objet des compositions comprenant au moins 0,1 % d'un extrait selon l'invention. Ces compositions, en fonction de l'utilisation envisagée, peuvent 30 contenir des excipients adaptés et éventuellement un ou plusieurs autre(s) extrait(s) ou principe(s) actif(s). Les compositions selon l'invention peuvent notamment se présenter sous forme de crème, d'huile, de pommade, de gel, de poudre, de lotion, de sérum ou de savon. 11 Du fait des molécules qui constituent les extraits selon l'invention, ils présentent de nombreux effets. En particulier, les cétones sont connues pour leur pouvoir cicatrisant et régénérant des tissus cutanés et des muqueuses dans le cas de brûlures ou de plaies, elles sont également 5 mucolytiques. Les alcools terpéniques et en particulier ceux possédant un groupement alcool allylique (nérol, géraniol) présentent des activités anti-oxydantes. L'a-terpinéol, quant à lui, présente des propriétés antibactériennes et anti-cancéreuses. Le bornéol est analgésiant et anesthésiant. Il augmente la sensibilité des récepteurs GABA (acide gamma-aminobutyrique) à leur ligand 10 naturel et améliore l'activité de faibles doses de GABA. Le GABA diminue l'activité des autres neurotransmetteurs. Il module donc l'activité du système nerveux central en général. Les composés phénoliques sont connus pour présenter des activités anti-oxydante, anticollagénase, anti-élastase et anti-inflammatoire. En particulier parmi les flavonoïdes, la myricitrine présente des propriétés analgésique, anxiolytique, antiallergique et hépato- 15 protectrice. De même, l'hyperoside présente des propriétés antivirales notamment contre le virus de l'hépatite B, antifongiques et antimicrobiennes. Par ailleurs, les acides phénoliques présentent également des propriétés importantes, notamment : - L'acide quinique possède une activité inhibitrice de la réplication du virus de l'hépatite B, 20 - L'acide rosmarinique possède des propriétés anti-oxydantes, astringentes, anti- inflammatoires, antimutagènes, antibactériennes et antivirales, - Les acides caféoylquiniques et di-O-caféoylquiniques sont connus pour leurs propriétés amincissantes, anti-oxydantes, éclaircissantes de la peau, antibactériennes, antivirales, d'inhibition de la réplication du virus HIV. 25 Ainsi, les extraits selon l'invention peuvent être utilisés, seuls ou dans une composition, comme principe actif cosmétique, parfum, arôme alimentaire, conservateur ou médicament. L'invention a donc également pour objet : - l'utilisation d'un extrait selon l'invention seul ou dans une composition, comme principe actif cosmétique anti-âge, raffermissant, antiperspirant, antitaches, 30 antioxydant, antimicrobien, astringent, antipelliculaire, anti séborrhéique, purifiant, apaisant, hydratant, amincissant, cicatrisant, anti-rides, anti-pollution, etc.. 12 - l'utilisation d'un extrait selon l'invention seul ou dans une composition, comme ingrédient en parfumerie, pour leurs caractéristiques odorantes (parfums solides, crèmes, lotions), - l'utilisation d'un extrait selon l'invention seul ou dans une composition, comme 5 arôme alimentaire, dans des préparations aromatisantes naturelles pour conférer une odeur et un goût aux denrées alimentaires (alcools, boissons non alcoolisées, confiseries, produits laitiers, produits carnés, sauces, soupes, snacks, produits de boulangerie), - l'utilisation d'un extrait selon l'invention seul ou dans une composition 10 cosmétique, comme agent conservateur pouvant augmenter la durée de vie d'un produit grâce à ses propriétés anti-oxydantes et antimicrobiennes, - l'utilisation d'un extrait selon l'invention seul ou dans une composition alimentaire en tant qu'agent conservateur, comme alternative aux additifs artificiels, d'une part, pour conserver les aliments et diminuer leur altération et d'autre part pour 15 prévenir et contrôler la croissance des micro-organismes, - l'utilisation d'un extrait selon l'invention seul ou dans une composition d'aromathérapie pour soigner, atténuer ou prévenir les infections par inhalation ou bien par application sur la peau à travers des massages pour le traitement du stress, des crampes, du rhumatisme, de la douleur, de la circulation sanguine, de 20 la cellulite, etc.. - l'extrait selon l'invention pour une utilisation dans une composition pharmaceutique, notamment comme médicament antibactérien et/ou antiviral et/ou analgésique et/ou anxiolytique et/ou antiallergique et/ou hépatoprotecteur, et/ou pour le traitement d'aphtes, de gingivite, de névralgie dentaire, 25 maux de gorge ou pour combattre la mauvaise haleine. L'invention est à présent illustrée par des exemples de procédés et d'extraits selon l'invention, et par des résultats d'essais démontrant certaines de leurs efficacités. Les exemples ci-dessous peuvent être appliqués à de nombreuses autres PPAM sans que cette liste soit limitative. 13 Exemple 1 : Préparation des extraits de PPAM par hydrodistillation et extraction à l'eau subcritique Matériel et Méthodes : Les quatre espèces de PPAM étudiées sont l'Immortelle d'Italie (Helichrysum italicum), le 5 Myrte (Myrtus communis), le Romarin (Rosmarinus officinalis), et l'Eucalyptus (Eucalyptus camaldulensis). Le matériel végétal a été récolté à l'état sauvage en Corse. Hydrodistillation : Pour toutes les PPAM étudiées, 100 g de végétal ont été soumis à une hydrodistillation dans un volume d'eau de 3 I pendant 4h30 à l'aide d'un appareil de type Clevenger dans le respect 10 du procédé validé par la Pharmacopée Européenne. Au cours de l'hydrodistillation, 300 ml d'hydrolat sont récupérés. Cet hydrolat est extrait avec 50 ml d'oxyde de diéthyle dans une ampoule à décanter. L'opération est renouvelée 2 fois. La phase organique est ensuite évaporée à l'aide d'un évaporateur rotatif. Les composés volatils contenus dans les huiles essentielles et les hydrolats ont été analysés qualitativement et quantitativement à l'aide des 15 méthodes chromatographiques et spectroscopiques bien connues de l'homme du métier (CPG-FID et CPG/SM). Extraction à l'eau subcritique en mode dynamique : Pour l'extraction à l'eau subcritique, le réacteur d'extraction (volume 34 ml) est rempli avec 5 g de plante séchée et broyée. La température de l'eau est réglée à 150°C, le débit à 2 ml/min 20 et la pression à 30 bars. Un volume total de 150 ml d'extrait est récolté, soit une durée d'extraction de 75 minutes. Les composés volatils contenus dans les extraits à l'eau subcritique ont été analysés de la manière suivante: après 3 extractions successives liquide/liquide avec 25 ml d'oxyde de diéthyle (C411100) puis évaporation du solvant à l'air libre, les composés volatils ont été analysés qualitativement et quantitativement par CPG-FID et CPG/SM. Les 25 composés phénoliques ont été analysés par HPLC-DAD et LC-MS/MS. Résultats : Les concentrations en composés volatils et composés phénoliques dans les extraits à l'eau subcritique des 4 PPAM sont présentées dans le Tableau 1 ci-dessous: 14 PPAM Composés volatils Composés phénoliques TOTAUX (mg/1) (mg/1) (mg/1) Romarin 90,7 1725 1816 Myrte 51,3 1734 1785 Immortelle d'Italie 53,3 900 953 Eucalyptus 48,7 324 373 Tableau 1: Concentrations en composés volatils et composés phénoliques dans les extraits à l'eau subcritique (mg/1 d'extrait aqueux). 5 Une analyse détaillée a été réalisée afin de comparer les constituants des extraits à l'eau subcritique avec ceux des deux matrices produites par hydrodistillation (huiles essentielles (HE) et hydrolats (HY)) et des extraits à l'eau subcritique (ESC). Ils sont regroupés par familles chimiques et leurs pourcentages relatifs sont indiqués dans le Tableau 2. Tableau 2: Pourcentages relatifs standardisés (%) des familles chimiques dans les produits de 10 l'hydrodistillation (HE: huile essentielle et HY: hydrolat) et dans les extraits à l'eau subcritique (ESC) Huiles essentielles : Les HE de Myrte et Romarin sont majoritairement représentées par des composés hydrocarbonés (74 % et 69,6 % respectivement) tandis que les HE d'Immortelle d'Italie et d'Eucalyptus contiennent plutôt des composés oxygénés. Dans les HE de Myrte et Romarin, 15 les composés oxygénés représentent respectivement 25,2 % et 29,6 % avec néanmoins une distribution différente des familles chimiques. L'HE de Myrte contient 17,0 % d'oxydes vs. 0 % dans celle de Romarin, qui contient en proportions voisines des alcools (9,4 %), des cétones \.11'rh leniwo 6.-11c e3-, dr Pr!, I\ssMi, gILtifiiht Tutti 1 ,:orupo.ies Tilla I ON ) (ICS TOU I akook Toia I cétonei Total aklélr^ilt-s Total Tou I ph- rut. pire III 11\' 1 11)' 0,5 74,0 0.3 52.4 X8,5 49.7 25.2 86.0 65.1 09 0.4 20,1 36,1 22.2 44.9 2 12,0 45,3 15.3 Ih,l_N,3 33.4 43,3 ra Ide de l'exil:JI or},-...0 12.2 11,4 15 (9,3 %) et des esters (10,7 %) vs. respectivement 2,9 %, 0,8 % et 3,8 % dans l'HE de Myrte. L'HE d'Eucalyptus est caractérisée par une proportion plus importante en composés oxygénés (52,4 %), majoritairement représentés par des alcools (28,9 %) et des aldéhydes (8,4 %). Enfin, l'HE d'Immortelle d'Italie est essentiellement constituée de composés oxygénés (73,4 %) et en 5 particulier des cétones (33,4 %) et des esters (27,1 %). Les compositions chimiques des HE obtenues à partir de ces 4 PPAM sont en accord avec celles relevées dans la littérature. Hydrolats : Les compositions en composés volatils dans les hydrolats des 4 espèces diffèrent totalement de celles des HE respectives. Très logiquement, des proportions très faibles en composés 10 hydrocarbonés (0 à 0,4 %) ont été mesurées, ainsi les composés oxygénés (76,3 % - 97,8 %) sont prédominants dans ces solutions. Ces derniers sont essentiellement représentés par des alcools (21,2 % - 66,1 %) et des cétones (3,2 % - 74,8 %) et par des oxydes (Myrte, 20,1 %). Les proportions d'alcools et de cétones sont systématiquement plus élevées dans les hydrolats que dans les HE correspondantes. En revanche, les esters sont moins bien représentés dans 15 les hydrolats de Romarin, d'Immortelle d'Italie et de Myrte que dans les HE. Il en est de même pour les aldéhydes de l'Eucalyptus. Extraits à l'eau subcritique selon l'invention : Les compositions chimiques des fractions volatiles des extraits obtenus à l'eau subcritique selon l'invention sont clairement plus proches de celles des hydrolats que de celles des HE. 20 Cependant, les analyses mettent en lumière une véritable originalité en termes de constituants moléculaires des extraits selon l'invention vis-à-vis des HY et des HE. Dans les extraits selon l'invention, les composés volatils sont essentiellement constitués de composés oxygénés, la part des composés hydrocarbonés étant négligeable (0 % - 0,5 %). Parmi les composés oxygénés, les alcools (5,1 % - 47,3 %) et les cétones (5,3 % - 72,0 %) sont les familles 25 prédominantes. On remarque que les extraits selon l'invention sont appauvris en oxydes, notamment dans l'extrait de Myrte où la proportion (9,8 %) est plus faible que dans l'HY (20,1 %) et dans l'HE (17 %). De plus, les proportions en esters (0 % - 1,7 %) sont inférieures à celles retrouvées dans les HE (3,8 %- 27,1 %). Enfin, les pourcentages en aldéhydes de l'extrait d'Eucalyptus selon l'invention sont plus faibles (1,2 %) que dans l'HE (8,4 %) et l'HY (4,5 %). 16 Ces résultats ont montré une véritable sélectivité du procédé à l'eau subcritique pour l'extraction des terpènes oxygénés, notamment les cétones et alcools volatils. Exemple 2 : Extraction simultanée des cétones terpéniques et de l'acide rosmarinique du Romarin 5 On extrait 5 g de feuilles de romarin (Rosmarinus officinalis L.) séchées et broyées selon le procédé à l'eau subcritique en mode dynamique, durant 75 minutes à 150°C et 60 bars. On extrait parallèlement 100 g de végétal par hydrodistillation dans un volume d'eau de 3 I pendant 4h30 à l'aide d'un appareil de type Clevenger. Une composition détaillée des constituants volatils des 2 extraits, exprimée en mg pour 100 g 10 de plante mise en oeuvre, est présentée dans le Tableau 3 : No Composés Hydrodistillation Extraction eau subcritique Huile essentielle Hydrolat Total hydrodistillation 150°C 2 a-pinène 615,5 615,5 18 Linalol 68,9 7,7 76,6 10,6 ± 1,3 22 Bornéol 10,4 10,4 35,8 ± 3,7 24 Terpinène-4-ol 8,9 2,9 11,8 5,6 ± 0,4 25 a- Telpinéol 11,9 6,8 18,7 13,0 ± 1,8 29 Géraniol 1,6 1,6 34 Camphre 48,1 8,8 56,9 29,8 ± 0,5 37 Verbénone 57,5 117,3 174,8 188,4 ± 5,8 44 Acétate de bornyle 166,4 2,6 169,1 5,0 ± 0,3 Total composés quantifiés 977,2 158,1 1135,4 288,2 Total hydrocarbonés 615,5 615,5 Total oxygénés 361,7 158,1 519,9 288,2 Total alcools 89,7 29,4 119,1 65,0 Total cétones 105,6 126,1 231,7 218,2 Total esters 166,4 2,6 169,1 5,0 Tableau 3: Composition en composés volatils des extraits de Romarin issus de l'hydrodistillation et de l'extraction à l'eau subcritique (mq composé/100 q de végétal) L'huile essentielle de romarin a la particularité de présenter une teneur élevée en cétones 15 terpéniques (verbénone et camphre) et en ester (acétate de bornyle). Le procédé selon l'invention permet d'extraire 2 fois plus de cétones (verbénone et camphre) et 30 fois moins d'ester (acétate de bornyle) que dans l'HE issue de l'hydrodistillation. De plus, le procédé selon l'invention permet d'extraire du bornéol (35,8 mg/100 g de végétal), un alcool monoterpénique bicyclique que l'on ne retrouve pas dans l'HE issue de l'hydrodistillation. 17 L'analyse quantitative par HPLC-DAD a permis de montrer que la concentration en acide rosmarinique, molécule d'intérêt présente dans le romarin, est multipliée par 43 lors de l'extraction à l'eau subcritique par rapport à la méthode d'extraction par macération hydroalcoolique (Tableau 4). Procédé d'extraction Macération hydro-alcoolique Eau subcritique Acide rosmarinique (mg/1) 13,7 ± 3,6 591,6 ± 13,1 5 Tableau 4: Concentration en acide rosmarinique des extraits de Romarin issus de la macération hydro- alcoolique et de l'extraction à l'eau subcritique (mq/l d'extrait liquide) Le procédé selon l'invention permet donc d'extraire sélectivement et de concentrer des composés volatils (cétones terpéniques) et des composés phénoliques (acide rosmarinique) dans un même extrait aqueux. 10 Exemple 3 : Extraction simultanée des cétones et flavonols-glucosides de l'Eucalyptus On extrait 5 g de feuilles d'Eucalyptus (Eucalyptus camaldulensis L.) séchées et broyées selon le procédé à l'eau subcritique en mode dynamique, durant 75 minutes à 150°C et 60 bars. Parallèlement, 100 g de végétal dans un volume d'eau de 3 L sont soumis à une hydrodistillation pendant 4h30 à l'aide d'un appareil de type Clevenger. Une composition 15 détaillée des constituants volatils dans les 2 extraits, exprimée en mg pour 100 g de plante mise en oeuvre, est présentée dans le Tableau 5 : 18 Hydrodistillation Extraction eau subcritique No Composés Huile essentielle Hydrolat Total hydrodistillation 150°C 1 a-thujène 11,1 0.1 11,2 8 p-cymène 140,8 0,1 140,9 0,7 16 1,8-cinéolel 38,2 38,2 20 Linalol 5,2 0,5 5,7 1,6 Cryptone 26,5 26,6 53,1 71,6 ± 9,3 23 p-cymène-8-ol 3,3 2,0 5,3 5,9 ± 1,4 41 Cuminakléhyde 20,9 1,4 22,3 8,3 ± 0,1 42 Phellandral 19,9 1,6 21,5 11,8 ± 1,8 24 Terpinène-4-ol 19,2 6,8 26,0 7,9 ± 2,6 25 a- Terpinéol 4,5 2,8 7,3 9,0 ± 1,4 26 p-cymène-7-ol 2,5 3,5 6,0 19,0 ± 2,2 28 Spathulénol 109,6 4,4 114,0 10,4 ± 0,8 45 Carvacrol 3,3 0,5 3,8 11,0 ± 1,4 Total composés quantifiés 405,0 50,3 455,3 157,2 Total hydrocarbonés 151,9 0,2 152,1 0,7 Total oxygénés 253,1 50,1 303,2 156,5 Total alcools 144,3 20,0 164,3 53,8 Total oxydes 38,2 - 38,2 - Total cétones 26,5 26,6 53,1 71,6 Total phénols 3,3 0,5 3,8 11 Total aldéhydes 40,8 43,8 43,8 20,1 Tableau 5: Composition en composés volatils des extraits d'Eucalyptus issus de l'hydrodistillation et de l'extraction à l'eau subcritique (mq composé/100 q de végétal) L'huile essentielle d'Eucalyptus camaldulensis est marquée par la présence d'alcools 5 (spathulénol), de cétones (cryptone) et d'aldéhydes (phellandral et cuminaldéhyde). Le procédé selon l'invention permet d'extraire 3 fois plus de phénol volatil (carvacrol, 11,0 mg/100 g) comparé à l'hydrodistillation (3,8 mg/100 g). De plus, le procédé selon l'invention permet d'extraire 2,7 fois plus de cétone (cryptone), 2 fois moins d'aldéhydes et 10 fois moins d'alcool (spathulénol) que lors de la production d'HE par hydrodistillation. 10 En ce qui concerne le linalol, sa teneur est réduite dans l'extrait selon l'invention (3,2 fois moins extrait que dans l'HE), ce qui est très favorable dans la mesure où ce composé fait partie des composés allergènes dont la teneur dans les produits cosmétiques est règlementée. L'analyse quantitative par HPLC-DAD a permis de montrer que le kaempférol 3-0-glucoside, composé de la famille des flavonol-glucosides, est 5 fois mieux extraite par le procédé ESC (5,1 15 mg/L) que par la méthode par macération hydro-alcoolique (1,0 mg/L). 19 Exemple 4 : Extraction simultanée de l'a-terpinéol et de la myricitrine du Myrte On extrait 5 g de feuilles de Myrte (Myrtus communis L.) séchées et broyées selon le procédé à l'eau subcritique en mode dynamique durant 75 minutes à 150°C et 60 bars. Parallèlement 100 g de végétal dans un volume d'eau de 3 L sont soumis à une hydrodistillation pendant 5 4h30 à l'aide d'un appareil de type Clevenger. Une composition détaillée des constituants volatils dans les 2 extraits, exprimée en mg pour 100 g de plante mise en oeuvre, est présentée dans le Tableau 6 : Hydrodistillation Extraction eau subcritique No Composés Huile essentielle Hydrolat Total hydrodistillation 150°C 1 a-Pinène 526,8 526,8 - 11 1,8-cinéolel 146,8 12,8 159,6 25,2 ± 1,2 14 Linalol 4,3 2,7 7,0 0,9 ± 0,05 20 Bornéo' 2,3 0,5 2,8 1,5 ± 0,1 21 Terpinène-4-o1 1,0 1,0 2,0 1,4 ± 0,1 23 a-Terpinéol 12,8 22,2 35,0 66,1 ± 3,6 27 Géraniol - 1,0 1,0 tr 30 Dione 6,4 9,2 15,6 77,6 ± 4,2 48 Méthyl eugénol 7,5 3,5 11,0 6,8 ± 0,7 Total composés quantifiés 707,9 52,9 760,8 179,5 Total hydrocarbonés 526,8 526,8 Total oxygénés 181,1 52,9 234,0 179,5 Total oxyde 146,8 12,8 159,6 25,2 Total cétone 6,4 9,2 15,6 77,6 Total alcools 20,4 27,4 47,8 69,9 Total phénylpropanoïde 7,5 3,5 11,0 6,8 Tableau 6: Composition en composés volatils des extraits de Myrte issus de l'hydrodistillation et de 10 l'extraction à l'eau subcritique (mq composé/100 q de végétal) Le myrte vert (Myrtus communis) est une plante dont l'huile essentielle de feuilles renferme des monoterpènes hydrocarbonés (a-pinène) ainsi que des oxydes comme le 1,8-cinéole. Alors que l'huile essentielle possède de nombreuses propriétés (astringente, laxative, analgésique et tonique), son hydrolat aussi appelé «eau d'ange» est fortement apprécié pour 15 son odeur fraîche et ses propriétés astringentes. L'extrait de Myrte selon l'invention contient 1,5 fois plus d'alcools que l'HE et l'HY. Parmi les alcools, ceux qui possèdent un cycle aromatique (p-cymène-8-ol et 7-ol) ainsi que l'a-terpinéol sont mieux extraits par le procédé selon l'invention que par hydrodistillation. Plus spécifiquement, l'a-terpinéol semble présenter une affinité élevée avec l'eau subcritique. 20 En ce qui concerne les allergènes dans l'extrait selon l'invention, le linalol (4,7 fois moins extrait que dans l'HE) et le géraniol (à l'état de traces), leurs teneurs très réduites dans l'extrait 20 selon l'invention est un avantage très favorable dans la mesure où ces composés font partie des composés allergènes dont les teneurs dans les produits cosmétiques sont règlementées. L'analyse quantitative par HPLC-DAD a permis de montrer que la myricitrine, composée majoritaire des feuilles de myrte, est 2 fois mieux extraite par le procédé ESC (801,0 mg/L) que 5 par la méthode par macération hydro-alcoolique (390,2 mg/L). Exemple 5 : Extraction simultanée des I3-dicétones et des acides chlorogéniques de l'Immortelle d'Italie On extrait 5 g de sommités fleuries d'Immortelle d'Italie (Helichrysum italicum L.) séchées et broyées selon le procédé à l'eau subcritique en mode dynamique durant 75 minutes à 150°C 10 et 60 bars. Parallèlement 100 g de végétal dans un volume d'eau de 3 L sont soumis à une hydrodistillation pendant 4h30 à l'aide d'un appareil de type Clevenger. Une composition détaillée des constituants volatils dans les 2 extraits, exprimée en mg pour 100 g de plante mise en oeuvre, est présentée dans le Tableau 7 : No Composés Hydrodistillation Extraction eau subcritique Huile essentielle Hydrolat Total hydrodistillation 150°C 18 Linalol 12,8 1,3 14,1 5,7 ± 0,01 20 a-terpinéol 4,9 2,4 7,3 19,7 + 1,4 21 Nérol 9,0 3,4 12,4 7,5 ± 1,0 34 2,4-dimethylheptan-3,5-dione 1,6 0,7 2,3 3,5 ± 0,4 36 4,6-dimethyloctan-3,5-dione 4,5 1,4 5,9 9,9 + 1,2 37 4,6,9-trimethyklec-8-en-3,5-dione 30,4 2,9 33,3 76,4± 19,0 38+39 2,4,6,9-tetrnmethyldec-8-en-3,5-dione A + B 55,5 2,7 58,2 32,9 ± 13,6 5,7,10-trimethylurKlec-9-en-4,6-dione 6,0 0,5 6,5 14,3 ± 1,6 41+42 3,5,7,10-tétramethybKlec-9-en-4,6-dione A +B 12,3 0,2 12,5 Acétate de néryle 79 0,6 79,6 2,4 ± 1,1 47 Propionate de néryle 18,6 - 18,6 Total composés quantifiés 234,6 16,1 250,7 172,3 Total alcools 26,7 7,1 33,8 32,9 Total 5-di-cétones 110,3 8,4 118,7 137,0 Total esters 97,6 0,6 98,2 15 Tableau 7: Composition en composés volatils des extraits d'immortelle d'Italie issus de l'hydrodistillation et de l'extraction à l'eau subcritique (mq composé/100 q de végétal) L'Immortelle d'Italie (Helichrysum italicum) est une plante emblématique du maquis Corse dont l'huile essentielle est très appréciée dans les secteurs de la parfumerie et de la cosmétique. Elle présente une vraie originalité vis-à-vis des huiles essentielles produites dans 20 le bassin Méditerranéen puisqu'elle est riche en esters (acétate et propionate de néryle), en alcools (nérol), ainsi qu'en 13-dicétones aussi appelées italidiones. 21 L'extrait d'Immortelle d'Italie selon l'invention contient une quantité importante de composés volatils dissous (53,3 mg/L), et la quantité de R-di-cétones (italidiones) extraite selon le procédé de l'invention (137,0 mg/100 g) est supérieure à celle de l'huile essentielle obtenue par hydrodistillation (110,3 mg/100 g). 5 L'a-terpinéol est également mieux extrait (19,7 mg/100g) que dans l'huile essentielle (4,9 mg/100 g). Par contre, l'extrait selon l'invention ne contient pas d'esters (acétate et propionate de néryle), contrairement à l'huile essentielle. A nouveau, la teneur en linalol est réduite dans l'extrait selon l'invention, ce qui est très favorable au regard de la réglementation cosmétique vis-à-vis des allergènes. 10 Par ailleurs, l'analyse par HPLC-DAD de l'extrait de sommités fleuries d'Immortelle d'Italie par le procédé selon l'invention (Tableau 8) a montré que ce procédé favorise l'extraction spécifique des acides caféoylquiniques et des flavonoïdes glycosylés (isoquercitrine). Procédé d'extraction Eau subcritique Macération hydro-alcoolique Phénols simples (mg/1) 11,1 4,5 Flavonoïdes totaux (mg/1) 144,6 85,3 Flavonoïdes aglycones 2,2 0,7 Flavonoïdes methoxylés 4,1 4,5 Flavonoïdes glycosylés 138,3 80,1 Acides caféoylquiniques (mg/1) 694,9 442,7 Totaux (mg/1) 995,2 617,8 Tableau 8: Concentration en composés phénoliques des extraits d'immortelle d'Italie issus de la macération hydro-alcoolique et de l'extraction à l'eau subcritique (mq/L d'extrait liquide) 15 Ce résultat est très avantageux puisque ces derniers présentent des propriétés biologiques particulièrement intéressantes dans le domaine cosmétique et nutraceutique (anti-inflammatoires, anti-oxydantes). 22 Exemple 6: Activité antioxvdante des extraits selon l'invention Les extraits selon l'invention ont été testés pour leurs propriétés anti radicalaires à l'aide de deux méthodes différentes, et les résultats ont été comparés à des extraits obtenus par macération hydro-alcoolique. 5 Matériel et Méthodes: Préparation des extraits: Pour l'extraction à l'eau subcritique selon l'invention, on extrait 5 g de matériel végétal durant 75 minutes à 150°C et 60 bars. Pour l'extraction hydro-alcoolique, la macération du matériel végétal (masse entre 1 et 8 g) a 10 été réalisée dans un volume de 30 à 40 ml d'un mélange eau/éthanol (50 :50) à l'aide d'un agitateur orbital pendant 6 à 8 heures suivant le matériel végétal. Tests anti-radicalaires: Le test DPPH (2,2-diphényl-1-picrylhydrazyle) permet d'estimer le potentiel antioxydant d'extraits végétaux, basé sur leur capacité à piéger le radical libre DPPH. L'activité anti 15 radicalaire des extraits a été déterminée à l'aide du test (DPPH). Ce test définit la capacité d'un extrait à donner un radical H" à un radical DPPH de couleur violette pour le réduire sous la forme DPPH-H de couleur jaune. ill de solution d'extrait à tester sont ajoutés à 150 ill de solution méthanolique de DPPH (Sigma-Aldrich, 100 I.J.M). Après 30 minutes d'incubation à 37°C, à l'obscurité, l'absorbance est 20 mesurée à 520 nm à l'aide d'un spectophotomètre à lecteur de microplaques. Les essais sont réalisés en triplicat sur 5 dilutions. Un blanc est également analysé dans les mêmes conditions. Le test ORAC permet d'estimer le potentiel antioxydant d'extraits végétaux, basé sur leur capacité à piéger les radicaux libres. La méthode ORAC est basée sur la capacité des antioxydants d'un extrait végétal à limiter l'oxydation d'un substrat oxydable par les radicaux 25 libres. Ce test met en présence une molécule fluorescente (la fluorescéine), oxydable par des radicaux peroxyles générés par une molécule oxydante (AAPH). Cette réaction s'accompagne d'un changement de fluorescence (Ex : 485 nm et Em : 530 nm). La présence d'antioxydants dans le milieu réactionnel permet de limiter pendant un temps cette oxydation. La capacité 23 antioxydante est exprimée en concentration équivalente de Trolox où une unité ORAC équivaut à 1 iimole de Trolox.g-1. La réaction est réalisée en microplaques noires dans du tampon phosphate (Sigma-Aldrich, 75 mM, pH 7,4). Une solution de fluoréscéine (Sigma-Aldrich, 117 nM) est ajoutée à 30 d'extrait 5 préalablement dilué dans du tampon phosphate, et l'ensemble est incubé 25 minutes à 37°C. 140 µl d'une solution d'AAPH (Sigma-Aldrich, 40 mM) sont ajoutés dans chaque puits et la fluorescence est mesurée pendant 90 minutes. Un blanc (tampon phosphate) ainsi qu'une gamme étalon de Trolox (Sigma-Aldrich, concentrations de 10 à 125 iiM) sont analysés dans les mêmes conditions. L'aire sous la courbe (AUC) de chaque échantillon est calculée par le 10 logiciel par intégration de la courbe de fluorescence relative Résultats : Les extraits de PPAM selon l'invention inhibent le radical DPPH de manière beaucoup significative que ne le font les extraits de PPAM obtenus par macération hydro-alcoolique et les valeurs des tests ORAC confirment les valeurs du test DPPH" (Tableau 9). PPAM Procédé d'extraction Test DPPH re Test ORAC (mM Trolox equ.) Romarin ESC 42,8 ± 1,8b 52,5 ± 4,3 Macération 1,6 ± 0,1b 6,3 ± 0,7 Myrte ESC 75,4 ± 3,1` 82,5 ± 3,2 Macération 50,5 ± 1,9b 22,4 ± 0,3 Eucalyptus ESC 62,8 ± 7,5b 41,2 ± 0,8 Macération 58,2 ± 3,2b 39,1 ± 3,5 Immortelle d'Italie ESC 37,6 ± 1,1b 48,6 ± 4,1 Macération 26,5 ± 1,6b 32,3 ± 1,8 a Pourcentage d'inhibition du radical DPPH b Dilution de l'extrait au 1/800 Dilution de l'extrait au 1/600 Tableau 9: Comparaison des activités antiradicalaires des extraits selon l'invention avec les extraits obtenus par macération hydroalcoolique 15 Ainsi, l'extrait de Romarin selon l'invention dilué 600 fois présente un pourcentage d'inhibition 27 fois plus élevé que l'extrait hydro-alcoolique. De même l'extrait de Myrte selon l'invention, pourtant dilué au 1/600ème, révèle un pourcentage d'inhibition supérieur (75,4 %) à celui de 24 l'extrait hydro-alcoolique dilué au 800ème (50,5 %). Les valeurs des tests ORAC exprimées en équivalent Trolox® sont supérieures (41,2 - 82,5 mM Eq. Trolox®) aux valeurs calculées pour les extraits hydro-alcooliques (6,3 - 39,1 mM Eq. Trolox®). Exemple 7 : Extrait de Rose de Damas à teneur réduite en allergènes 5 Certaines plantes contiennent peu de molécules aromatiques, ce qui rend difficile l'obtention d'une huile essentielle. En outre, les composés odorants peuvent être sensibles et modifiés sous l'action de la chaleur lors de la distillation. C'est souvent le cas des fleurs (jasmin, rose, fleur d'oranger) où le rendement en huiles essentielles est très faible ou de qualité odorante décevante par rapport au parfum de la fleur. L'extraction sous forme d'absolue par exemple 10 permet de retrouver le parfum de ces fleurs de façon plus fidèle et plus efficace. Pour cela, deux méthodes sont utilisées, l'enfleurage et l'extraction aux solvants. On extrait 4 g de pétales de rose de Damas séchées (Rosa damascena) selon le procédé à l'eau subcritique en mode dynamique durant 25 minutes à 150°C et 60 bars. L'huile essentielle de Rose est connue pour contenir 6 allergènes : citral, citronellol, eugénol, 15 farnésol, géraniol, linalol. De manière inattendue, l'extrait de Rose de Damas selon l'invention ne contient aucun des 6 allergènes (Tableau 10). N° Composés % relatif 1 Alcool benzylique 1,78 2 Phenyl-2-ethanol 37,71 3 Carvacrol 1,75 4 NI 0.67 5 NI 0,93 6 NI 1,05 7 NI 0,66 8 NI 0,54 NI: Non identifié Tableau 10: Composition en composés volatils de l'extrait de rose de Damas issu de l'extraction à l'eau subcritique Par ailleurs, l'activité anti-oxydante de l'extrait de Rose de Damas selon l'invention a été confirmée par le test ORAC, et possède une valeur ORAC de 9200 p.mole Trolox 20 equivalent/100 g d'extrait