Les résultats montrent que l'étape de purification d'un extrait brut alcoolique à 50% d'éthanol de Matricaria maritima par chromatographie d'adsorption permet d'obtenir des extraits purifiés actifs à faible concentration (0.1 g L-1), notamment pour les extraits obtenus avec un solvant d'élution composé de 40 à 80% d'alcool (Tableau 3). Chez Matricaria maritima, l'extrait purifié obtenu avec un solvant d'élution composé de 60% d'alcool a une activité photoprotectrice équivalente à 0.1 g L-1 à celle de l'extrait brut alcoolique à 50% d'éthanol à 1 g L-1 ( t112 CMS = 396-399 min). Il est donc possible d'obtenir des extraits purifiés photoprotecteurs utilisables à des concentrations 10 fois plus faibles que l'extrait brut pour la même activité. L'analyse des caractéristiques spectrales des différents extraits purifiés montre une faible absorption dans l'UV des extraits obtenus avec 100% d'eau et 100% d'alcool, compatibles avec leur faible activité. Cela est logique puisque l'extrait à 100% d'eau contient essentiellement des sucres et l'extrait à 100% d'alcool essentiellement des pigments photosynthétiques, molécules n'ayant pas d'activité photoprotectrice connue. Les extraits les plus actifs (20% à 80% d'alcool) absorbent fortement dans l'UV, majoritairement dans l'UV-B pour les extraits à 20 et 40% d'alcool (À, = 347-350 nm) et à la fois dans l'UV-B et l'UV-A pour les extraits à 40 et 60% d'alcool (À, > 370 nm) (Tableau 4 et Figure 3). Les extraits à 20 et 40 % d'alcool ont le même profil d'absorption (Àmax = 291/319 nm) et la même photostabilité (0.76-0.77). Les extraits les plus actifs à 60% et 80% d'alcool ont respectivement un maximum d'absorption à 341 et 329 nm et des photostabilité proches (0.67-0.73) (Tableau 4 et Figure 3). 3) Activité photoprotectrice de mélanges d'extraits alcooliques ou hydroalcooliques 5 Influence du mélange d'extraits sur l'efficacité photoprotectrice Pour le mélange d'extrait de plantes halophiles, il a été choisi de garder les extraits alcooliques pur (méthanol et éthanol) et à 50% d'éthanol qui sont les plus actifs en termes de durée d'efficacité (t112 CMS) et/ou de concentration efficace (ECi20). Les résultats de l'activité photoprotectrice et des caractéristiques 10 spectrales des mélanges d'extraits alcooliques purs (éthanol ou méthanol) ou à 50% d'éthanol sont présentés en Tableau 5 et Figure 4. Le mélange d'extraits éthanoliques de Matricaria maritima et Crithmum maritimum est le plus performant en termes de durée potentielle d'efficacité (t112 CMS jusqu'à 698 min) (Figure 4) et il y a un effet synergique par rapport à 15 l'utilisation des extraits des deux plantes seuls (Tableau 1). De façon surprenante, et contrairement à ce qui aurait pu être attendu à la vue des résultats de Hupel et al, le mélanges d'extraits méthanoliques de Matricaria maritima et Crithmum maritimum a un effet inhibiteur sur l'activité photoprotectrice par rapport à l'utilisation d'un des deux extraits seuls (Tableau 1 et 20 Figure 4). Un tel effet inhibiteur n'est pas observé pour les mélanges d'extraits hydroéthanoliques ou éthanoliques, où on observe un effet synergique du mélange sur l'activité photoprotectrice par rapports aux extraits seuls (Figure 4). Ces résultats montrent bien l'importance du solvant d'extraction pour l'obtention d'un effet photoprotecteur pour des mélanges d'extraits de plantes 25 halophiles. Ainsi, le méthanol en tant que solvant d'extraction, semble avoir un effet inhibiteur sur l'activité photoprotectrice lors du mélanges d'extraits, ce qui n'était pas le cas pour les extraits seuls (Tableau 1). 30 Cet effet inhibiteur semble également confirmé pour les mélanges d'extraits méthanoliques de Matricaria maritima, Aster tripolium ou Crithmum maritimum avec Limonium vulgare comparativement aux mélanges à base d'extraits éthanoliques (Figure 4). Les mélanges d'un extrait éthanolique (pur ou à 50%) de Matricaria 35 maritima ou Crithmum maritimum ou Aster tripolium avec un même extrait de Limonium vulgare ou Beta maritima donnent des activités photoprotectrices supérieures aux deux extraits seuls (Crithmum maritimum + Limonium vulgare) ou au moins équivalentes à l'extrait le plus actif seul (Figure 4). Les mélanges d'extrait de Matricaria maritima ou Crithmum maritimum avec un même extrait d'Aster tripolium donnent des activités photoprotectrices au moins équivalentes à un des deux extraits seul. L'ensemble des mélanges cités ont une forte activité photoprotectrice bien qu'il soit préférable d'utiliser les mélanges d'extraits éthanoliques purs plutôt que les mélanges d' extraits éthanoliques à 50% d'éthanol qui donnent une durée d'efficacité maximum (Figure 4). En termes d'efficacité photoprotectrice, le mélange d'extraits éthanoliques de Crithmum maritimum et de Matricaria maritima sera préféré. Influence du mélange d'extraits sur le spectre d'action et la photostabilité L'analyse de l'ensemble des données obtenues sur des extraits bruts seuls de plantes halophiles à également suggéré que l'association d'extrait éthanolique de Matricaria maritima ou Crithmum maritimum ou Aster tripolium (forte activité photoprotectrice, absorption majoritaire dans l'UV-B, faible photostabilité) avec un extrait éthanolique de Limonium vulgare ou Beta maritima (activité photoprotectrice globalement plus faible mais absorption plus importante dans l'UV-A et meilleure photostabilité) pourrait donner une composition photoprotectrice efficace notamment en termes d'amélioration de la photostabilité et du spectre d'action (activité photoprotectrice dans les UV-A). Les résultats montrent que le mélanges d'extraits éthanoliques purs ou à 50% d'éthanol de Matricaria maritima, Aster tripolium ou Crithmum maritimum avec Beta maritima ou Limonium vulgare donnent des photostabilités meilleures par rapport aux extraits seuls (Tableaux 2 et 5) (ce qui est également le cas lors de l'association deux à deux d'extraits de Matricaria maritima, Aster tripolium et Crithmum maritimum). Les photostabilités les plus fortes sont obtenues pour les mélanges d'extraits éthanoliques à 50% (photostabilité entre 0.9 et 1), ainsi que pour le mélange d'extraits éthanoliques purs de Matricaria maritima ou Aster tripolium avec Beta maritima (photostabilité égale à 0.96 et 0.91, respectivement) (Tableau 5). Les autres mélanges d'extraits éthanoliques ont cependant une très bonne photostabilité (0.77 à 0.85).35 Ethanol/Eau (50/50) Ethanol Mélange Àmax Àc UVBi20 Àmax Àc UVBi20 (0.5 g L-1+ 0.5 g L-1) UVB0 UVB0 Matricaria maritima + 297 355 0. 300 375 Aster tripolium 325 0.99 329 0.77 Matricaria maritima 299 353 1. 286 378 0.83 + Crithmum maritimum 324 1.00 328 Matricaria maritima 298 356 0.91 310 380 0.96 + Beta maritima 325 296 330 Matricaria maritima 291 354 1. 297 385 0.85 + Limonium vulgare 322 1.00 328 Crithmum maritimum + 296 358 0.92 0. 293 379 0.85 Aster tripolium 324 329 Crithmum maritimum 289 363 0.97 0. 287 383 0.84 + Beta maritima 323 330 Crithmum maritimum 280 360 0.96 0. 280 385 0.83 + Limonium vulgare 322 328 Aster tripolium + 283 368 0. 98 282 385 0.91 Beta maritima 326 334 Aster tripolium + 282 368 0. 98 292 384 0.84 Limonium vulgare 326 329 Tableau 5 : Propriétés spectrales (Maximum d'absorption (Àmax), Longueur d'onde critique (Àc)) avant irradiation et photostabilité (UVB120/UVB0) après 120 min d'irradiation d'extraits hydroalcooliques et alcooliques de quelques halophytes.