INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'invention met également en évidence une activité biocide à prédominance d'action neurotoxique et neurodépressive notamment sur toute une faune vivante de nuisibles dont font partie les helminthes et les arthropodes (arachnoïdes et insectes). L'invention permet également d'éradiquer tout un ensemble de germes transportés par ces espèces. La présente invention propose également, pour la première fois, de nouvelles compositions contenant un extrait du Citrus medica L. var Risso, se substituant partiellement ou totalement à des substances phytosanitaires actuelles (souvent très toxiques), ou en les associant dans une proportion moindre. 20 Un autre objet de l'invention concerne une composition comprenant un extrait de Citrus medica L var Risso seul ou associé à au moins une des autres plantes citées dans les compositions décrites ci-dessus, en combinaison avec au moins un dérivé de synthèse de type pesticide, à activité fongicide et/ou herbicide et/ou insecticide et/ou parasiticide, dans 25 le but de réduire leur usage quantitatif et donc leur toxicité liée à leurs effets induits sur l'environnement, et à leur présence dans les plantes alimentaires, notamment dans les fruits et les légumes, au moment de leur consommation.
Les produits phytosanitaires et pesticides pouvant être remplacés totalement ou 30 partiellement par des compositions selon l'invention, sans être cités de manière exhaustive sont énumérés ci-dessous à titre d'exemple : -Les fongicides15 Parmi les fongicides agissant directement sur les champignons (P. Leroux / C. R. Biologies 326 (2003) il existe ceux qui réduisent la production d'énergie cellulaire suite généralement à un effet sur les processus respiratoires. D'autres affectent la biosynthèse de composants majeurs, comme des glucides, des lipides, des mélanines, des acides aminés, des protéines ou des acides nucléiques. Quelques matières actives perturbent la formation et/ou le fonctionnement des microtubules. Enfin, une dernière catégorie de fongicides est constituée par ceux dont le mode d'action n'est pas encore élucidé. Les différents groupes de fongicides sont : - Les fongicides de contact à base de métaux, le soufre, les produits soufrés - Les fongicides systémiques, les systémiques inhibiteurs de la synthèse des stérols, les phytoalexines - Les herbicides Ils représentent environ 50% des pesticides utilisés pour l'agriculture (PG Ponta/ toxicologie pathologie professionnellel6-059 -D30, 2000). Ce sont des substances chimiques dont l'objectif est de détruire ou de limiter la croissance de certains végétaux. Les herbicides peuvent être classés : sur des critères agronomiques selon : - leur type d'utilisation - leur sélectivité - leur mode d'action - leur classe chimique - des critères biologiques Les principales familles d'herbicides sont : - Les herbicides minéraux - Les herbicides organiques, les herbicides racinaires, racinaires et foliaires, les herbicides foliaires - Les insecticides Ce sont des substances actives ou des préparations ayant la propriété de tuer les insectes, leurs larves et/ou leurs oeufs. Ils font partie de la famille des pesticides, eux-mêmes inclus dans la famille des biocides.30 Le terme générique � insecticide � inclut aussi les pesticides destinés à lutter contre des arthropodes qui ne sont pas des insectes (ex : acariens tels qu'araignées ou tiques) ainsi parfois que des répulsifs Parmi les familles d'insecticides on distingue : - Les organophosphorés - Les carbamates - Les pyréthrinoïdes de synthèse - Les organochlorés - Les benzoyl urées -Les parasiticides Ce sont des produits chimiques capables de détruire les parasites. On parle de Trypanocide dans le cas d'un produit destiné à lutter contre le Trypanosome. On trouve des parasiticides chimiques (thiabendazole) et des parasiticides naturels (staphisaire, hêtre...) - Applications bactéricides et fongicides des compositions selon l'invention chez l'homme et l'animal
Un pouvoir bactéricide et fongicide très puissant des compositions selon l'invention, comprenant un extrait de Citrus medica L. var Risso seul, ou en association avec un extrait de cannelle et/ou un autre extrait de plante (de préférence un extrait de Laurus nobilis), a également été révélé, par les inventeurs, chez l'Homme et l'animal.
Cette activité est notamment évaluée à partir de la CMI (Concentration Minimale Inhibitrice) des huiles essentielles sur les agents pathogènes présents dans les cas d'infections digestives, à savoir les bactéries Escherichia coli, Helicobacter pylori, , les Salmonelles, les Shigelles, Staphylococcus aureus, Proteus mirabilis, Entérobacteriaceae, Staphylococcus saprophyticus, Pseudomonas spp, Chlamidia trachomatis, , Campylobacter jejuni et Campylobacter coli, Clostridium perfringens, vibrio parahaemolyticus (fruit de mer), et les champignons dont Candida albicans et Candida spp, ou au niveau cutané comme les dermatophytes responsables des mycoses dermiques, dont Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans, Microsporum audouinii, Microsporum canis, Microsporum gypseum, Epidermophyton floccosum.
Les activités bactéricides et fongicides des compositions selon l'invention ont également été étudiées contre Staphylococcus, Streptococcus beta hémolytique, Gardnerella vaginalis, Candida albicans Propionibacterium acnes et Malassezia furfur, dont font partie chez l'Homme le Pityrosporum ovale et le Pityrosporum orbiculaire, et les autres types de Malassezia présents uniquement sur la peau des animaux et dont font partie Malassezia pachydermatis, Malassezia globosa, Malassezia restricta, Malassezia slooffiae, Malassezia sympodialis, Malassezia nana, Malassezia yamatoensis, Malassezia dermatis et Malassezia obtusa.
Un des caractères originaux de l'invention concerne son profil d'activité unique qui consiste à combiner une action antifongique spécifique sur les spores ainsi que sur le 15 champignon lui-même, notamment dans l'aspergillose broncho-pulmonaire.
L'activité bactéricide des compositions selon l'invention est évaluée versus le peroxyde de benzoyle, l'acide fusidique et le métronidazole et la pristinamycine (entre autres antibiotiques de référence), et l'activité antifongique versus le kétoconazole, le 20 fluconazole, l'éconazole, la ciclopiroxolamine, le ciclopirox, la piroctone olamine, la pyrithione de zinc, la terbinafine, l'amorolfine et le bifonazole (entre autres antifongiques de référence).
Les compositions selon l'invention peuvent également être utilisées pour traiter des 25 maladies provoquées par des bactéries dites zoonotiques (Campylobacter et Salmonelles). Les salmonelloses, maladies provoquées par les salmonelles, sont parmi les maladies bactériennes les plus répandues. La pullorose due à Salmonella pullorum, constitua, par exemple, une lourde menace pour l'industrie du poulet et de la dinde.
30 Selon d'autres modes de mise en oeuvre, les compositions de l'invention peuvent être utilisées pour traiter les maladies suivantes : - la leptospirose, due à une bactérie spiralée du genre Leptospira, est mortelle pour le bétail, le chien et l'homme. Les étangs, les lacs et autres points d'eau sont couramment infectés, et les rongeurs peuvent transmettre l'infection ; - la tuberculose est due à des bactéries du genre Mycobacterium, ou bacilles de Koch ; elle touche préférentiellement les animaux domestiques ou en captivité. Des dosages réguliers sont effectués chez les vaches laitières et, au moment de l'abattage, les animaux destinés à la consommation sont examinés pour déceler la présence éventuelle de ce bacille ; - les infections causées par les bactéries du genre Pasteurella, telle Pasteurella multocida chez les oiseaux, touchent la faune sauvage, la volaille domestique, les lapins et d'autres espèces encore ; - les maladies respiratoires (notamment la pleuropneumonie du bétail et les infections respiratoires chroniques des poulets), provoquées par les mycoplasmes, minuscules bactéries sans paroi (les autres bactéries ont des parois qui leur confèrent une forme fixe) ; - des maladies telles que la psittacose (pneumonie transmise par le perroquet), sont provoquées par une bactérie du genre Chlamydia. Certaines pathologies graves de l'homme et de l'animal appartiennent à ce groupe. - Applications virucides des compositions selon l'invention chez l'homme et l'animal
Un certain nombre de molécules sont connues pour avoir un effet inhibiteur sur la néo-angiogenèse, telles que la protamine, le tétrahydrocortisol, la fumagelline, les dérivés de l'acide ascorbique, les glycoprotéines animales et des facteurs cellulaires tel que l'interféron. Cependant, le manque d'efficacité de ces molécules, leur toxicité ou la difficulté d'administration, en particulier pour les facteurs protéiques, limitent leur intérêt. En outre, les utilisateurs sont de plus en plus sensibles à l'origine des produits ainsi que le mode d'administration et favorisent en particulier les produits d'origine naturelle.
Il est décrit, que les extraits de Withania Somnifera, d'Emblica Officinalis et de Bacopa Monnieri, présentent une activité antiangiogénique. Cependant, les extraits de ces plantes ne sont pas utilisés comme tels, à cause d'une toxicité élevée liée à l'obtention des extraits et en particulier de l'extrait de Withania Somnifera.
De manière surprenante, la demanderesse a trouvé qu'en associant, dans un procédé à partir de plante Withania somnifera, une étape d'extraction et une étape de fermentation par un champignon filamenteux, on pouvait agir sur la toxicité des extraits. L'invention a donc pour but de proposer un procédé d'obtention d'une composition non toxique à base d'extrait de Withania Somnifera, ayant un effet inhibiteur de la néo-vascularisation, ainsi que les compositions ainsi obtenues. La présente invention se rapporte donc à un procédé d'obtention d'une composition, comprenant au moins les étapes suivantes : - Réalisation d'un extrait de Withania Somnifera - Fermentation dudit extrait par une mise en incubation de cet extrait avec un champignon filamenteux dans un milieu adapté. L'invention porte également sur une composition susceptible d'être obtenue par le procédé de l'invention.
Un autre objet de l'invention et l'utilisation de cette composition comme complément alimentaire. Un autre l'invention est l'utilisation de cette composition comme médicament. D'autres objets, caractéristiques, aspects et avantages de l'invention apparaîtront encore plus clairement à la lecture de la description et des exemples qui suivent : - La figure 1 A représente une empreinte chromatographique de l'extrait issu de l'extraction de Withania Somnifera sans fermentation, - La figure 1B représente une empreinte chromatographique de l'extrait issu de l'extraction de Withania Somnifera non frementé sans withanolides, - La figure 2 représente une empreinte chromatographique de l'extrait issu de l'extraction de Bacopa Monierri sans fermentation, - La figure 3 représente une empreinte chromatographique de l'extrait issu de l'extraction d'Emblica Officinalis sans fermentation, - La figure 4 représente une empreinte chromatographique de l'extrait issu de l'extraction de Calendula Officinalis sans fermentation, - La figure 5 représente une empreinte chromatographique de l'extrait commercial de Punica Granatum sans fermentation, - La figure 6 représente une empreinte chromatographique de l'extrait commercial de Curcuma Longa sans fermentation, - La figure 7 représente une empreinte chromatographique de l'extrait issu de l'extraction de Piper Longum sans fermentation, - La figure 8 représente une empreinte chromatographique de la composition initiale avant l'étape de fermentation. - La figure 9 représente une empreinte chromatographique de la composition selon l'exemple 8 après 7 jours de fermentation de cette composition en présence de la souche Beauveria bassiana ATCC 7159, - La figure 10 représente une empreinte chromatographique de la composition selon l'exemple 10, - La figure 11 représente une empreinte chromatographique de la composition selon l'exemple 11, - La figure 12 représente une empreinte chromatographique de la composition selon l'exemple 12, - Les figures 13A, 13B 13C et 13D représentent des photographies de la membrane chorioallantoique d'un embryon de poulet (CAM) à respectivement 0 et 24 heures après exposition à 40 pl de la composition de l'exemple 8. - Les figures 14A, 14B 14C et 14D représentent des photographies de la membrane chorioallantoique d'un embryon de poulet (CAM) à respectivement 0, 24, 48 et 72 heures après exposition à 40 pl de la composition de l'exemple 9. La plante Withania Somnifera est obtenue de l'Inde. La racine de cette plante est commercialisée par Alp Erbo (Marseille).
La réalisation des extraits est effectuée par tous moyens connus de l'homme du métier, tel qu'une macération dans des solutions aqueuses, alcooliques ou hydroalcooliques de poudres végétales issues d'une ou des différentes parties de la plante tel que la racine, les feuilles, la tige, les branches, le fruit ou les fleurs, mais également par décoction, par un fluide supercritique, ou subcritiques, par adsorption. (Indian J Pharm Sci. 2010 Sep-Oct; 72(5): 659-663), EP2138054, thèse de l'université de Toulouse, "Étude des procédés d'extraction et de purification de produits bioactifs à partir de plantes par couplage de techniques séparatives à basses et hautes pressions" soutenue par Petko Ivanov PENCHEV, 2010. Le champignon filamenteux utilisé pour la fermentation est choisi parmi les champignons de la famille des Cordycipitaceae. De préférence, le champignon est choisi parmi les champignons appartenant au genre Beauveria. Plus préférentiellement, ledit champignon filamenteux est issu de la souche Beauveria Bassina, plus particulièrement la souche portant la référence ATCC 7159. En effet, la souche de Beauveria bassiana présente des propriétés catalytiques avantageuses et n'est pas toxique pour l'homme. Cette souche est couramment utilisée dans l'agriculture dans la lutte biologique contre les insectes, mais également comme probiotique pour les animaux. Ainsi, la fermentation contrôlée et notamment celle réalisée par la souche Beauveria bassiana ATCC 7159 (American Type Culture Collection) permet la détoxification de l'extrait de Withania Somnifera par une série de biocatalyses de différentes molécules contenues dans cet extrait et plus particulièrement, la famille chimique des withanolides aglyconées, principales responsables de la toxicité de l'extrait. On entend par « fermentation », l'action de transformation de substances végétales sous l'action de microorganismes. On entend par « milieu adapté » tous milieux connus de l'homme du métier permettant le développement de la biomasse fongique nécessaire à la fermentation. Des exemples de milieux adaptés sont le Sabouraud Dextrose Agar (SAB) (Gibco, France), Brain-Heart Infusion Agar (BHI) (Gibco, France), Malt Extra Broth (MEB) (Gibco, France), Yeast Malt extract (YM) (Gibco, France), Yeast Extract-Phosphate Medium (YEP) (Gibco, France), Dermatophyte Test Medium (DTM) (Gibco, France), Potato dextrose Agar and Broth (PDA, RDB) (Gibco, France), ou C-Medium . Préférentiellement, le milieu C de composition suivante est utilisé. Pour 1 litre d'eau, on ajoute 10 g de mélasse, 0.5 g of MgSO4, 2 g of NaNO3, 0.5 g of KC1 and 0.02 g of FeSO4 (composés obtenus chez Sigma, France). On entend par "détoxification" l'élimination par le microorganisme des molécules potentiellement toxiques dans le milieu.
Selon une caractéristique, le procédé selon l'invention comporte une étape de filtration du milieu d'incubation ayant servi lors de l'étape de fermentation, afin d'éliminer le microorganisme utilisée lors de la fermentation. Cette étape de filtration peut être réalisée par décantation ou filtration mécanique par tous moyens connus de l'homme du métier tel que du papier filtre ou des filtres. Selon une autre caractéristique, le procédé selon l'invention peut comporter une étape de stérilisation qui peut être réalisée par tous moyens connus de l'homme du métier, notamment par autoclave, par exemple à 120°C pendant 20 minutes, par ultra filtration ou par rayonnement. De préférence, le milieu d'incubation après l'étape de fermentation, de filtration et de stérilisation, est ensuite soumis à une ultrafiltration pour obtenir la solution qui constitue l'extrait de plante ((Millipore, Applied Membranes), Ultrafiltration de fluide alimentaire fortement colmatant: flux limite, flux critique et nettoyabilité d'une membrane polymère, Ndéye Wemsy Diagne, Murielle Rabiller-Baudry, IUT Rennes, Université Rennes I, UMR CNRS 6226). Dans un mode de réalisation préféré, le procédé de l'invention peut être mis en oeuvre pour d'autres plantes que Withania Somnifera. En particulier, on pourra aussi produire des extraits d'Emblica Officinalis, provenant d'Inde et commercialisé par Infrag, Bengalore) de Bacopa Monnieri (Inde) commercialisé par Alp Erbo (Marseille), de Punica Granatum (Chine) (Société Shangai Brightol international Co, Ltd (Shanghai), de Curcuma Longa (Inde)(Omnipharm, Chambery), de Piper Longum (Thailande)(Omnipharm, Chambery), ou de Calendula Officinalis (Chine) (Société Shangai Brightol international Co, Ltd (Shanghai) selon le même mode opératoire). Selon un autre mode de réalisation, le procédé de l'invention comprend l'étape d'ajouter à l'extrait de Withania Somnifera, un extrait d'Emblica Officinalis et un extrait de Bacopa Monnieri avant de réaliser la fermentation desdits extraits avec ledit champignon filamenteux dans un milieu adapté. Selon ce mode de réalisation, le procédé comporte des étapes d'extraction indépendantes pour chaque extrait de plantes utilisé pour la réalisation de ladite préparation. C'est-à-dire que les extraits de plantes sont réalisés indépendamment des un des autres. Un autre objet de l'invention porte sur la composition issue du procédé de l'invention.
Cette composition conforme à l'invention contient ainsi un extrait de Withania Somnifera. Elle peut également comprendre au moins un des extraits suivants : extraits d'Emblica Officinalis, de Bacopa Monnieri, de Punica Granatum, de Curcuma Longa, de Piper Longum, ou de Calendula Officinalis.
Avantageusement, cette composition comprend en poids entre 5 et 100 g/L de Withania Somnifera, de préférence 20 g/L- Préférentiellement, cette composition comprend de plus un des extraits suivants exprimés en poids: - entre 5 et 100 g/L de l'Emblica Officinalis, de préférence 15 g/L, - entre 5 et 100 g/L de Bacopa Monierri, de préférence 15g/L, - entre 5 et 50 g/L de Punica Granatum, de préférence 10g/L, - entre 5 et 250 g/L de Curcuma Longa, de préférence 20g/L, - entre 20 et 50 mg/L de Piper Longum, de préférence 30mg/L, - entre 5 et 50 g/L de Calendula Officinalis, de préférence 10g/L. De préférence, la composition conforme à l'invention comprend un extrait des plantes Withania Somnifera, Emblica Officinali et Bacopa Monnieri susceptible d'être obtenu par le procédé de l'invention. La composition peut être sous forme liquide, gel, émulsion, solide ou injectable. La composition selon l'invention est formulée pour une administration topique, ophtalmique, transdermique, orale, rectale ou parentérale. L'homme de l'art dans le domaine de la galénique saura mettre en oeuvre les différentes formes utiles pour l'administration des produits et/ou compléments de l'invention. La composition selon l'invention peut en outre comporter des suspensions, des émulsions, des sirops contenant des diluants inertes classiquement utilisés, et éventuellement d'autres substances comme des produits mouillants, édulcorants, conservateurs, épaississants, colorants, ou toutes autres substances connues de l'homme du métier propre à une administration orale ou oculaire en particulier ((sorbate de sodium (E201) (Sigma-Aldrich), anthocyane (E163) (FBC Industries, USA), disulfite de sodium (E223) (Sigma-Aldrich), alpha-tocophérol (E307) (FBC Industries, USA). La composition selon l'invention peut également comprendre des solvants ou autres excipients tels que l'eau, le propylène glycol, des huiles végétales ou d'autres solvants organiques convenables. On entend par «excipient» tout composé qui n'interfère pas avec l'efficacité de l'activité biologique de la composition selon l'invention et qui n'est pas toxique pour l'hôte auquel il est administré. Ladite composition selon l'invention peut également contenir des adjuvants, comme des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, des sels ou toutes autres substances connues de l'homme du métier pouvant être utilisées comme adjuvants (Polydimethylsiloxane, l'alcool polyvinylique (APV), les hydrogels (Carbopol), polyvinyl-pyrrolidone, hydroxypropylcellulose (HPC), poloxamère 188, EDTA, chlorobutanol)(Lubrizol, France, Dow Corning, USA).
Avantageusement, la composition selon l'invention peut comprendre d'autres substances dans la formulation dudit complément alimentaire ou médicament, telles que des vitamines, des sels minéraux, un vecteur pharmaceutiquement acceptable, des stabilisants, des antioxydants, ou toutes autres substances connues de l'homme du métier destinées à être intégrées dans un complément alimentaire ou médicament. On entend par « vecteur pharmaceutiquement acceptable » tout vecteur qui n'interfère pas avec l'efficacité de l'activité biologique de la composition selon l'invention et qui n'est pas toxique pour l'hôte auquel il est administré. Suite à ce procédé, la composition obtenue est utilisable chez un mammifère, et plus particulièrement un humain, pour aider au traitement ou à la prévention de désordres ou pathologies liés à la néovascularisation.
Ladite composition peut être ainsi utilisée sous la forme de complément alimentaire. Par « complément alimentaire » on entend un produit renfermant ladite composition ayant pour objet de compléter l'alimentation en apportant des nutriments bénéfiques pour la santé selon la définition donnée par la directive européenne 2002/46/CE. Par exemple un complément alimentaire peut être une gélule ou un comprimé à avaler ou une poudre ou une petite ampoule à mélanger à un aliment et présentant des effets bénéfiques pour la santé. Ladite composition peut également être utilisée comme médicament. Par « médicament », on entend un produit renfermant une dose précise de ladite préparation selon la directive européenne 65/65/CE à savoir toute substance ou composition présentée comme possédant des propriétés curatives ou préventives à l'égard des maladies humaines ou animales. Par exemple, le médicament contenant ladite préparation aux doses thérapeutiques peut être administré par voie orale sous forme de gélule ou comprimé ou injecté par voie intra-vitréenne ou toutes autres voies permettant de conférer des effets bénéfiques.
La composition selon l'invention est utilisable pour aider au traitement ou à la prévention de désordres ou pathologies liés à la néovascularisation, tels que la DMLA, la rétinopathie liée au diabète, les kératites et les glaucomes associés à une vascularisation anarchique. Elle est également utile pour le traitement de l'arthrite rhumatoïde, l'arthrose, la maladie de Crohn, l'athérosclérose, les formes d'angiomes de l'enfance ou liés à des maladies héréditaires, pour le traitement du cancer, et plus particulièrement des tumeurs solides et des métastases ainsi que pour le traitement des tumeurs bénignes telles que neurinome de l'acoustique, le neurofibrome, le trachome et des granulomes pyogènes. La dose journalière des compositions et/ou compléments selon l'invention peut varier selon les besoins et la gravité des symptômes du patient. Typiquement, la dose journalière se situe entre 10mg/mL et 300mg/mL de la solution après fermentation.
De préférence, la dose journalière pour un humain adulte est entre 30 et 100mg/mL de la solution après fermentation. La présente invention est maintenant décrite à l'aide d'exemples de réalisation, uniquement illustratifs et nullement limitatifs de la portée de l'invention.