Tableau 5 Résultats de l'essai de survie in vitro pour une inhibition des cellules du cancer de la prostate Échantillons ICso ( g/ml ) Groupe de contrôle 11,491 (extraits totaux d'Antrodia camphorata) LNCaP 41,392 DU-145 Groupe expérimental (formule 2) 2,378 LNCaP DU-145 1,812 D'après le résultat du tableau 5, la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy-5(3,7,11-triméthyl-dodéca-2,6,10-triényl) -cyclohex-2-énone est un puissant inhibiteur de la croissance des lignées cellulaires du cancer de la prostate humain. Les valeurs IC50 de la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy-5(3,7,11-triméthyl-dodéca-2,6,10-triényl) -cyclohex-2-énone envers LNCaP et DU-145 sont de 2,378 g/ml et 1,812 g/ml respectivement, valeurs qui sont significativement plus faibles que celles des extraits totaux d'Antrodia camphorata. Par conséquent, la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy-5(3,7,11-triméthyldodéca-2,6,10-triényl) -cyclohex-2-énone d'Antrodia camphorata peut être utilisée afin d'inhiber la croissance des cellules du cancer de la prostate. Example 7 Étude complémentaire in vitro pour une thérapie adjuvante des cellules du cancer de la prostate L'expérience a également été réalisée selon le modèle in vitro de criblage de médicaments anti-cancéreux du NCI. Les cellules du cancer de la prostate humain, LNCaP et DU-145, ont été séparément cultivées dans un milieu contenant du sérum de veau foetal pendant 24 heures. Les cellules ayant proliféré ont été lavées une fois avec du PBS, puis ont été traitées avec de la trypsine-EDTA lx et ont été centrifugées à 1200 tpm pendant 5 minutes. Le surnageant a été éliminé et le culot cellulaire a été remis en suspension dans 10 ml de milieu de culture frais en agitant délicatement. Les cellules LNCaP ont été traitées avec 0,0017 g/ml de Taxol pendant 72 heures et les cellules DU-145 ont été traitées avec 0,0043 p.g/ml de Taxol pendant 72 heures avant d'être placées dans une plaque à 96 puits. La 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy-5(3,7,11-triméthyl-dodéca-2,6,10-triényl) -cyclohex-2-énone obtenue dans l'exemple 1 a été respectivement ajoutée à chacun des 96 puits selon les concentrations suivantes : 0 g/ml (le groupe de contrôle) ; 30, 10, 3, 1, 0,3, 0,1 et 0,03 gg/ml (le groupe expérimental). Les cellules ont été incubées à 37 C dans un incubateur à co à 5 % pendant 48 heures. Du MTT a été ajouté à chaque puits en une concentration de 2,5 mg/ml dans l'obscurité et a réagi pendant 4 heures, suivi par un ajout de 100 l de tampon de lyse afin d'arrêter la réaction. Les plaques ont été lues sur un lecteur ELISA à une longueur d'onde de 570 nm afin de déterminer les taux de survie. Les valeurs de la concentration de demi inhibition (IC50) ont également été calculées et listées dans le tableau 6. Tableau 6 Résultats du traitement complémentaire au Taxol in vitro sur les cellules du cancer de la prostate Échantillons Résultats Groupe de contrôle Taux de survie cellulaire LNCaP (0.0017 g/ml de Taxol) (%) DU-145 (0.0044g/ml de Taxol) 56 3 70 2 Experiment group IC50 ( g/ml) LNCaP (0.0017 g/ml de Taxol + 0,961 formule 2) 0,515 DU-145 (0.0043 g/ml de Taxol + formule 2) D'après le résultat du tableau 6, les valeurs IC50 de la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy-5(3,7,11-triméthyl-dodéca-2,6,10-triényl) -cyclohex-2-énone envers LNCaP et DU-145 diminuaient à 0,961 g/ml et 0,515 .tg/m1 respectivement après une combinaison avec le Taxol. Par conséquent, ces résultats confirment que l'activité inhibitrice de la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy-5(3,7,11-triméthyl-dodéca-2,6,10-triényl) -cyclohex-2-énone d'Antrodia camphorata peut être utilisée pour inhiber la croissance des cellules du cancer de la prostate, et elle a montré une meilleure activité synergistique antitumorale pour les tumeurs lorsqu'elle était combinée au Taxol. Example 8 Étude d'activité anti-oxydante in vitro La lipoprotéine de basse densité (LDL) oxydée avec un ion cuivre (Cu2+) est largement utilisée afin d'évaluer les activités anti-oxydantes des échantillons devant être analysés. L'activité anti-oxydante d'un échantillon est déterminée par le contenu en diènes du LDL après une oxydation et est exprimée en équivalents Trolox en utilisant une courbe de concordance calculée à partir des standards du Trolox, un analogue de la vitamine E hydrosoluble (la valeur de la capacité anti-oxydante 1 est exprimée en termes de 2 M de Trolox). Les solutions suivantes ont tout d'abord été préparées : de l'eau doublement distillée (le groupe de contrôle négatif), un tampon de phosphate de sodium 5 mM (SPB) une solution de Trolox 1 pM et 2 M (le groupe de contrôle positif), et 40 pg/ml de 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy-5(3,7,11-triméthyl-dodéca-2,6,10-triényl) -cyclohex-2- énone isolée dans l'exemple 1. La concentration de cholestérol LDL (LDL-C) a été déterminée au moyen d'un procédé de réaction enzymatique, qui a été dilué à 0,1-0,25 mg/ml avec du SPB 5 mM. Cent pl de LDL a été ajouté à chaque puits d'une plaque en quartz à 96 puits, suivi par un ajout du Trolox mentionné ci-dessus et du composé isolé dans l'exemple 1. L'agent oxydant standardisé CuSO4 a été ajouté pour induire une oxydation à une concentration finale de 5 pM dans chaque puits de 250 pl. La plaque a été lue sur un lecteur ELISA à une longueur d'onde de 232 nm à 37 C pendant 12 heures. Le temps d'échantillonnage était de 15 minutes. Les résultats sont présentés dans le tableau 7.