INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
1997] . L'activation de FAK peut aussi induire la voie de signalisation jun NH2-terminal kinase (JNK) et résulter dans la progression des cellules vers la phase Gl du cycle cellulaire [Oktay et al., J. Cell. Biol.145 : 1461- 1469. 1999]. Phosphatidylinositol-3-OH kinase (PI3-
kinase) se lie aussi à FAK sur la tyrosine 397 et cette interaction pourrait être nécessaire à l'activation de PI3-kinase [Chen and Guan, Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 91: 10148-10152. 1994 ; Ling et al. J. Cell. Biochem. 73 : 533-544. 1999]. Le complexe FAK/Src phosphoryle différents substrats comme la paxilline et pl30CAS dans les fibroblastes [Vuori et al. Mol. Cell. Biol. 16 : 2606-2613. 1996] .
Les résultats de nombreuses études soutiennent l'hypothèse que les inhibiteurs de FAK pourraient être utiles dans le traitement du cancer. Des études ont suggéré que FAK pourrait jouer un rôle important dans la prolifération et/ou la survie cellulaires in vitro. Par exemple, dans les cellules CHO, certains auteurs ont démontré que la surexpression de pl25FAK conduit à une accélération de la transition Gl à S, suggérant que pl25FAK favorise la prolifération cellulaire [Zhao J.-H et al. J. Cell Biol. 143:1997-2008. 1998]. D'autres auteurs ont montré que des cellules tumorales traitées avec des oligonucléotides anti-sens de FAK perdent leur adhésion et entrent en apoptose (Xu et al, Cell Growth Differ. 4 :413-418. Il a également été démontré que FAK promeut la migration des cellules in vitro. Ainsi, des fibroblastes déficients pour l'expression de FAK (souris knockout pour FAK) présentent une morphologie arrondie, des déficiences de migration cellulaire en réponse à des signaux chimiotactiques et ces défauts sont supprimés par une réexpression de FAK [DJ. Sieg et al., J. Cell Science. 112 : 2677-91, 1999]. La surexpression du domaine C-terminal de FAK (FRNK) bloque l'étirement des cellules adhérentes et réduit la migration cellulaire in vitro [Richardson A. and Parsons J.T. Nature. 380 : 538-540, 1996]. La surexpression de FAK dans des cellules CHO, COS ou dans des cellules d'astrocytome humain favorise la migration des cellules. L'implication de FAK dans la promotion de la prolifération et de la migration
des cellules dans de nombreux types cellulaires in vitro, suggère le rôle potentiel de FAK dans les processus néoplasiques. Une étude récente a effectivement démontré l'augmentation de la prolifération des cellules tumorales in vivo après induction de l'expression de FAK dans des cellules d'astrocytome humain [Cary L.A. et al. J. Cell Sci. 109 : 1787-94, 1996 ; Wang D et al. J. Cell Sci. 113 4221-4230, 2000]. De plus, des études immunohistochimiques de biopsies humaines ont démontré que FAK était surexprimé dans les cancers de la prostate, du sein, de la thyroïde, du colon, du mélanome, du cerveau et du poumon, le niveau d'expression de FAK étant directement corrélé aux tumeurs présentant le phénotype le plus agressif [Weiner TM, et al. Lancet 342(8878) : 1024-1025.1993 ; Owens et al. Cancer Research 55 : 2752- 2755,1995 ; Maung K. et al. Oncogene 18 : 6824-6828, 1999 ; Wang D et al. J. Cell Sci. 113 : 4221-4230, 2000].
L'étude des mécanismes moléculaires qui contrôlent le cycle cellulaire a permis de mettre en évidence le rôle des cdk ainsi définies : ces Cdk sont des régulateurs essentiels du cycle de division cellulaire les cdk sont des protéines constituées d'au moins deux sous-unités, une sous-unité catalytique (dont cdc2 est le prototype) et une sous-unité régulatrice (cycline). On connaît ainsi un certain nombre de cdk. Les cdk forment donc des complexes protéiques dont chacun est impliqué dans une phase du cycle cellulaire.
De nombreux documents de la littérature décrivent l'existence et le rôle des cdk et à titre d'exemple, on peut citer notamment le document WO 97/20842.
Plusieurs inhibiteurs de kinases ont été décrits comme la butyrolactone, le flavopiridol et la 2(2hydroxyéthylamino)-6-benzylamino-9-méthylpurine appelée olomoucine).
De telles protéines kinases activatrices de Cdk sont notamment celles de champignons pathogènes qui causent
des maladies infectieuses dans l'organisme humain.
Comme champignons pathogènes, dans le cadre de la présente invention, on peut citer Candida albicans mais par exemple et tout aussi bien : Candida stellatoidea, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Candida krusei, Candida pseudotropicalis, Candida quillermondii, Candida glabrata, Candida lusianiae ou Candida rugosa ou encore des mycètes du type Saccharomyces cerevisiae, du type Aspergillus ou Cryptococcus et notamment, par exemple, Aspergillus fumigatus, Coccidioides immitis, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliens et Sporothrix schenckii ou encore des mycètes des classes des phycomycètes or eumycètes en particulier les sous-classes de basidiomycètes, ascomycètes, mehiascomycétales (levure) et plectascales, gymnascales (champignon de la peau et des cheveux) ou de la classe des hyphomycètes, notamment les sous-classes conidiosporales et thallosporales parmi lesquels les espèces suivantes : mucor, rhizopus, coccidioides, paracoccidioides (blastomyces, brasiliensis), endomyces (blastomyces), aspergillus, menicilium (scopulariopsis), trichophyton, epidermophton, microsporon, piedraia, hormodendron, phialophora, sporotrichon, cryptococcus, candida, geotrichum, trichosporon ou encore toropsulosis, pityriasis Versicolor ou Erythrasma.
Parmi de tels champignons pathogènes, on peut citer tout particulièrement Candida albicans.
On peut noter que les premières kinases activatrices de Cdk de champignons ont été identifiées chez Saccharomycès cerevisiae et Schizosaccharomycès pombe.
L'activation des Cdk nécessite à la fois la fixation d'une molécule de cycline et la phosphorylation de la Cdk sur un résidu thréonine conservé, situé dans une région appelée 'boucle T'. Il a été montré que cette phosphorylation est effectuée par une kinase appelée
Les sels d'ammonium quaternaires sont par exemple : - ceux qui présentent la formule générale (XV) suivante :
dans laquelle les radicaux R1 à R4, qui peuvent être identiques ou différents, représentent un radical aliphatique, linéaire ou ramifié, comportant de 1 à 30 atomes de carbone, ou un radical aromatique tel que aryle ou alkylaryle. Les radicaux aliphatiques peuvent comporter des hétéroatomes tels que notamment l'oxygène, l'azote, le soufre, les halogènes. Les radicaux aliphatiques sont par exemple choisis parmi les radicaux alkyle, alcoxy, polyoxyalkylène(C2-C6), alkylamide, alkyl(C12-C22)amido alkyle(C2-C6), alkyl(C12-C22)acétate, hydroxyalkyle, comportant environ de 1 à 30 atomes de carbone ; est un anion choisi dans le groupe des halogénures, phosphates, acétates, lactates, alkyl(C2C6)sulfates, alkyl-ou-alkylarylsulfonates, - les sels d'ammonium quaternaire de l'imidazolinium, comme par exemple celui de formule (XVI) suivante : dans laquelle R5 représente un radical alcényle ou alkyle comportant de 8 à 30 atomes de carbone par exemple dérivés des acides gras du suif, R6 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en C1-C4 ou un radical alcényle ou alkyle comportant de 8 à 30 atomes de carbone, R7 représente un radical alkyle en C1C4 , Rs représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en C1-C4, X est un anion choisi dans le groupe des halogénures, phosphates, acétates, lactates, alkylsulfates, alkyl-ou-alkylarylsulfonates. De préférence, R5 et R6 désignent un mélange de radicaux alcényle ou alkyle comportant de 12 à 21 atomes de carbone par exemple dérivés des acides gras du suif, R7 désigne méthyle, R8 désigne hydrogène. Un tel produit est par exemple commercialisé sous la dénomination REWOQUAT W 75 par la société DEGUSSA, - les sels de diammonium quaternaire de formule (XVII) :
dans laquelle Rg désigne un radical aliphatique comportant environ de 16 à 30 atomes de carbone, Rio, R11, R12, R13 et R14 , identiques ou différents sont choisis parmi l'hydrogène ou un radical alkyle comportant de 1 à 4 atomes de carbone, et X est un anion choisi dans le groupe des halogénures, acétates, phosphates, nitrates et méthylsulfates. De tels sels de diammonium quaternaire comprennent notamment le dichlorure de propanesuif diammonium.
- les sels d'ammonium quaternaire contenant au moins une fonction ester Les sels d'ammonium quaternaire contenant au moins une fonction ester utilisables selon l'invention sont par exemple ceux de formule (XVIII ) suivante : dans laquelle : - R15 est choisi parmi les radicaux alkyles en C-Cg et les radicaux hydroxyalkyles ou dihydroxyalkyles en C-Cg ; -R16 est choisi parmi : - les radicaux R20 hydrocarbonés en C1-C22 linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, - l'atome d'hydrogène, - R18 est choisi parmi :
- les radicaux R22 hydrocarbonés en C1-C6 linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, - l'atome d'hydrogène, - R17, R19 et R21, identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux hydrocarbonés en C7-C21, linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés ; - n, p et r, identiques ou différents, sont des entiers valant de 2 à 6 ; - y est un entier valant de 1 à 10 ; - x et z, identiques ou différents, sont des entiers valant de 0 à 10 ; - X- est un anion simple ou complexe, organique ou inorganique ; sous réserve que la somme x + y + z vaut de 1 à 15 , que lorsque x vaut 0 alors R16 désigne R20 et que lorsque z vaut 0 alors R18 désigne R22.
L'invention ne vise cependant pas ce type de dispositifs à mouvement louvoyant, qui posent de nombreux problèmes, notamment en termes d'étanchéité et d'esthétique, du fait que le jeu entre le panneau mobile et l'ouverture dans l'ensemble fixe doit être important à l'arrière.
L'invention concerne donc les dispositifs dans lesquels la cinématique est 20 décomposée en deux mouvements, le panneau mobile restant en permanence sensiblement parallèle " à lui-même ", ou, plus exactement, au plan défini par la baie En d'autres termes, le panneau mobile passe dans une pluralité de plans, tous sensiblement parallèles.
Le terme " sensiblement " signifie qu'il peut y avoir des jeux, des 25 décalages ou des déplacements qui ne sont pas parfaitement rectilignes, du fait de la structure et de la forme de la baie et du véhicule, des matériaux, des tolérances, de l'usure, Il n'englobe pas en revanche le cas d'un panneau " en travers " dans un dispositif louvoyant.
On notera par ailleurs que le terme " plan " doit ici s'entendre dans une 30 acception élargie: le plan formé par la baie est généralement courbe, selon une, voire deux, directions (cela peut justifier également, dans certains cas, le terme " sensiblement ").
Plus précisément, l'invention a pour objectif de proposer un dispositif d'obturation d'une baie intégrant un panneau mobile, restant en permanence sensiblement parallèle au plan formé par la baie, et dont la manoeuvre est automatisée. L'invention a également pour objectif de fournir un tel dispositif 10 d'obturation d'une baie qui assure un enchâssement complet et simultané du panneau dans la baie lors d'une manoeuvre de fermeture.
L'invention a aussi pour objectif de fournir un tel dispositif d'obturation d'une baie, qui évite, ou à tout le moins limite les risques d'être ouvert de façon non autorisée.
Un autre objectif de l'invention est de fournir un tel dispositif d'obturation d'une baie qui conserve l'ensemble des avantages des "baies flush" déjà 20 développées par le titulaire de la présente demande, et notamment: aspect esthétique affleurant; aspects aérodynamiques; facilité et cot réduit de fabrication; facilité et cot réduit de montage.
Ces objectifs, ainsi que d'autres qui apparaîtront par la suite, sont atteints à l'aide d'un dispositif d'obturation d'une baie ménagée dans la carrosserie d'un véhicule automobile, comprenant un ensemble fixe et un panneau mobile par rapport audit ensemble fixe, monté sur au moins un élément de support et/ou de guidage de façon à pouvoir coulisser selon un axe de coulissement, dans un plan 30 de coulissement sensiblement parallèle au plan défini par ledit ensemble fixe, et pouvant venir obturer ou libérer une ouverture ménagée dans ledit ensemble fixe, ledit panneau mobile se plaçant dans ledit plan défini par ledit ensemble fixe, en position d'obturation Selon l'invention, le dispositif comprend au moins un patin de coulissement circulant dans un rail formé dans un desdits éléments de support et/ou de guidage et présentant: une portion de coulissement sensiblement parallèle audit axe de coulissement; et une portion d'obturation/ouverture formant un angle avec ladite portion de coulissement, de façon à commander le passage dudit 10 panneau mobile dudit plan de coulissement vers ledit plan défini par le panneau fixe, et réciproquement, ledit patin étant mobile en translation par rapport audit panneau mobile, de façon que, dans ladite portion d'obturation/ouverture, ledit panneau mobile reste immobile parallèlement audit axe de coulissement, pendant que ledit patin se 15 décale parallèlement audit plan de coulissement, provoquant un déplacement dudit panneau mobile sensiblement perpendiculaire audit plan de coulissement.
Un rail de guidage présentant de telles portions successives permet de déplacer le panneau mobile entre sa position d'obturation (dans le plan formé par l'ensemble fixe) et sa position d'ouverture (dans un plan parallèle au plan 20 d'obturation), et inversement, en le maintenant sensiblement parallèle au plan formé par l'ensemble fixe.
En d'autres termes, on évite de faire louvoyer le panneau mobile selon une cinématique telle que décrite précédemment (au cours de laquelle le panneau se retrouve " en travers "), les dispositifs à mouvement louvoyant posant 25 notamment des problèmes d'étanchéité et d'esthétique.
Selon une solution préférée, ledit rail présente également une portion de verrouillage, s'étendant parallèlement à ladite portion de coulissement, dans le prolongement de ladite portion d'obturation/ouverture, dans laquelle ledit patin peut s'inscrire alors que ledit panneau mobile est en position d'obturation.
Dans ce cas, ledit patin est avantageusement solidarisé audit panneau par l'intermédiaire d'une coulisse s'étendant parallèlement à ladite portion de verrouillage et le long de laquelle il peut se déplacer entre deux butées.
Préférentiellement, le dispositif comprend des moyens de rappel tendant à ramener ledit patin vers ladite portion de coulissement, lesdits moyens de rappel comprenant avantageusement un ressort monté sur ladite tige.
Selon une solution préférée, au moins un desdits éléments de support et/ou de guidage porte au moins deux patins de coulissement.
Selon un premier aspect, l'invention concerne une composition comprenant des particules magnétiques acides (p) à base d'un composé du fer, lesdites particules magnétiques acides (p) étant chacune complexée par un ou plusieurs composés gem-bisphosphonates, de formule (I) : X-L-CH(P03H2)2 (I) dans laquelle : # L représente un groupement organique reliant la fonction X à la fonction gembisphosphonate -CH(P03H2)2 ;
# X représente une fonction chimique susceptible de réagir avec un biovecteur ; lesdites fonctions X desdites particules (p) étant éventuellement couplées en tout ou partie à un biovecteur.
PARTICULE MAGNÉTIQUE (P) Par "particules à base d'un composé du fer", on entend, au sens de la présente description, des particules constituées en tout ou partie par un dérivé du fer, comprenant généralement du fer (III), généralement un oxyde ou un hydroxyde de fer.
En règle générale, les particules magnétiques acides (p) sont composées en tout ou partie d'hydroxyde de fer ; d'oxyde de fer hydraté ; de ferrites ; d'oxydes de fer mixtes tels que des oxydes de fer mixtes de cobalt, de nickel, de manganèse, de béryllium, de magnésium, de calcium, de baryum, de strontium, de cuivre, de zinc ou de platine ; ou d'un mélange de ceux-ci.
Au sens de la présente invention, le terme de "ferrite" désigne les oxydes de fer de formule générale [x Fe203, y MOz], où M désigne un métal magnétisable sous l'effet d'un champ magnétique tel que Fe, Co, Ru, Mg, Mn, le métal magnétisable pouvant être éventuellement radioactif.
De façon préférentielle, les particules magnétiques acides (p) des compositions de l'invention comprennent une ferrite, notamment la maghémite (y Fe203) et la magnétite (Fe304), ou encore les ferrites mixtes de cobalt (Fe2Co04) ou de manganèse (Fe2Mn04).
Dans ce cadre, on préfère tout particulièrement les particules magnétiques acides (p) composées en tout ou partie, et de préférence essentiellement, de maghémite ou de magnétite ou d'un mélange de ceux-ci.
Les particules magnétiques acides (p) des compositions selon l'invention présentent en surface des sites hydroxyles protonés en milieu acide, qui correspondent plus précisément à l'espèce Fe-OH2+ résultant d'une interaction très forte entre un ion Fe3+ à la surface de la particule et une molécule d'eau acide (H30+). Ces protons peuvent être considérés comme constitutifs de la particule d'après les travaux de J. Lyklema et al., Materials Science Research, 1984, 17, p. 1-24.
Selon une variante particulièrement préférée, les particules acides (p) sont superparamagnétiques.
Les particules magnétiques (p) possèdent alors, de préférence, un diamètre hydrodynamique compris entre 5 et 200 nm, mieux encore entre 5 et 60 nm.
De préférence, la composition de l'invention est une suspension de particules magnétiques acides (p) qui présente avantageusement, le cas échéant, une concentration adaptée à la formation d'une solution colloïdale stable, à savoir, en général, une concentration en particules magnétiques (p) allant de 2 moles L-1 à 4 moles L-1, exprimée en nombre de moles d'ions métalliques total.
COMPOSÉS DE FORMULE (I) Les composés de formule (I) selon l'invention comportent une fonction gembisphosphonate qui assure la fixation du composé de formule (1) à la surface de la particule magnétique acide.
Plus précisément, les inventeurs ont mis en évidence que chaque fonction gem-bisphosphonate interagit avec un seul site hydroxyle protoné à la surface de la particule acide.
Les composés de formule (1) de l'invention sont constitués également d'un linker (L) permettant de relier et/ou d'espacer la fonction gem-bisphosphonate et l'entité réactive X capable d'assurer le greffage covalent d'un biovecteur.
A titre préféré, le linker L représente un groupement divalent.
De préférence, le linker L est choisi parmi un groupe aliphatique ; alicyclique ; alicyclique-aliphatique ; aromatique ; aromatique-aliphatique, lesdits groupes aliphatiques, alicycliques et aromatiques pouvant être éventuellement substitués par un groupe méthyle, hydroxy, méthoxy, acétoxy, amido, ou un atome de chlore, iode ou de brome ; ou bien un groupement -L1-NHCO-L2 où L1 et L2 sont soit identiques, soit différents et représentent un groupe aliphatique ; alicyclique ; aromatique ; alicyclique-aliphatique ou aromatique-aliphatique, lesdits groupes pouvant être éventuellement substitués par un groupe méthyle, hydroxy, méthoxy, acétoxy, amido ou un atome de chlore, d'iode ou de brome.
Roger W. BEUERMAN et Lia PEDROSA ont décrit, par le détail, l'ultra-structure de la cornée humaine, dans un article intitulé Ultra-structure of the human cornea , dans le journal Microscopy Research and Technique , 33 : (1996), et on s'y référera en tant que de besoin.
A partir de la structure naturelle, O. DOUCET et al. ont proposé et décrit un épithélium de cornée humaine, tridimensionnel, reconstruit, en particulier pour effectuer différents essais in vitro de toxicité ; cf. l'article ayant pour titre A new in vitro human epithelium model for assessing the eye irritation potential of formulated cosmetic products , paru dans In vitro and MolecularToxicology , 11, 4 : 273-283 (1998).
Cet épithélium de cornée reconstruit, ou modèle, est obtenu par culture de cellules épithéliales de cornée, par exemple la lignée HCE, disponible et commercialisée par LSU Eye Center, Louisiana State University School of Medicine, New Orleans, Louisiana, 70112 USA. Les cellules épithéliales sont cultivées à l'interface air/liquide dans un milieu défini, et elles forment un tissu épithélial cornéen, dépourvu de stratum corneum, s'approchant de l'épithélium cornéen in vivo.
L'étude est réalisée sur de tels épithéliums cornéens reconstruits, tels qu'obtenus au 5ème jour de culture (taille : 0,5 cm2), le contrôle qualité des différents épithéliums aux différents stade de culture étant assuré par la Société SKINETHIC LABORATORIES, précitée, conformément à la publication dernière citée.
Le principe du test consiste à appliquer la composition trophique directement au contact de l'épithélium cornéen reconstruit, 15 minutes trois fois par jour sur une période de 7 jours. On réalise en parallèle un témoin épithélium cornéen non traité. Chaque condition (à l'exception du témoin non traité) est réalisée en double. Aux 2ème, 4ème et 7ème jours d'expérimentation, la viabilité cellulaire (test au MTT) est évaluée pour chacune des conditions.
En pratique, 30 l des compositions trophiques à tester sont déposés 3 fois par jour (à 9 h, 13 h et à 17 h), directement à la surface des équivalents cornéens, pendant 15 minutes. Après cette période de contact, les compositions en excès sont éliminées et les épithéliums maintenus en incubation à 37 C sous atmosphère humide, 5 % C02. Cette opération est répétée tous les jours pendant 7 jours. Aux 2ème, 4ème et 7ème jours
d'expérimentation, les épithéliums reconstruits sont prélevés pour effectuer le test de viabilité cellulaire.
Aux 2ème, 4ème et 7ème jours d'expérimentation, les épithéliums prélevés sont rincés au PBS et placés dans 300 l de MTT (0,5 mg/ml). Après 3 heures d'incubation à 37 C, 5 % C02, les épithéliums sont transférés dans 1,5 ml d'isopropanol. L'extraction du produit de clivage du MTT est réalisée sous légère agitation, pendant 2 heures à température ambiante. La densité optique à 570 nm est ensuite mesurée sur 200 l de solution, d'extraction. Les résultats sont exprimés en pourcentage de viabilité par rapport au témoin (non traité) : % viabilité = [DO (570 nm produit testé)/ DO (570 nm témoin)] X 100 Dans les conditions expérimentales ainsi définies, on observe un maintien total de la viabilité in vitro des épithéliums de cornée humain reconstruits, après application topique de chacune des compositions trophiques précitées. La présence du conservateur et de l'acide hyaluronique aux concentrations d'utilisation ainsi définies n'influe pas sur la viabilité cellulaire des épithéliums qui est maintenue.
Etude n 2 Par mise en culture d'un épithélium de cornée humain reconstitué, dans les compositions trophiques précédemment définies, on compare les résultats obtenus par rapport à ceux obtenus par mise en culture dans une solution saline tamponnée.
Le modèle d'épithélium cornéen retenu est à l'identique de celui décrit et défini dans l'Etude n 1, mis en culture pendant 72 heures dans la composition trophique étudiée.
Une seule composition trophique est retenue pour cette étude, à savoir celle définie par le Tableau 2, appelée EVE 4 dans l'Etude n 1.
Dès réception des épithéliums, le milieu nutritif de transport SKINETHIC est éliminé et remplacé, pour un des épithéliums, par 1 ml de la composition trophique étudiée. Un second épithélium est placé, pour comparaison, dans une solution saline tamponnée (Phosphate Buffered Saline, PBS, enrichi en Ca2+ et Mg2+). La cytocompatibilité de la composition trophique étudiée a été préalablement vérifiée (absence d'effet cytotoxique, cf.
Etude précédente n 1). Les épithéliums sont maintenus en incubation à 37 C
sous atmosphère humide, 5 % C02. Les milieux sont renouvelés tous les jours. Après 3 jours de culture, les 2 épithéliums reconstruits sont prélevés pour effectuer une analyse histologique. Ils sont fixés par une solution de formaldéhyde à 10 % puis inclus dans la paraffine. L'histologie des coupes colorées à l'hematoxylineléosine est évaluée en microscopie optique.
L'interprétation histopathologique des coupes prend en compte l'épaisseur et la régularité du tissu épithélial ainsi que la morphologie, la cohésion et la capacité des cellules à proliférer.