INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'invention concerne selon un autre aspect une cassette d'expression comprenant une séquence promoteur liée de manière opérationnelle dans la plante transformée à une séquence nucléotidique selon l'invention codant pour une toxine insecticide, et à une région de terminaison de la transcription. La préparation d'une cassette d'expression ADN peut être réalisée de différentes manières appropriées par l'homme du métier. Brièvement, au moins une séquence nucléotidique à expression insecticide telle que définie précédemment, peut être clonée en aval du promoteur en utilisant des enzymes de restriction pour assurer son insertion dans une orientation appropriée au regard du promoteur de manière qu'il soit exprimé. Une fois cette séquence liée opérationnellement au promoteur, la cassette d'expression ainsi formée peut être clonée dans un plasmide ou autre vecteur. La séquence promoteur contrôle la transcription en un ARN messager fonctionnel codant pour d'une protéine insecticide. La cassette d'expression peut être chimérique ou naturelle, mais typiquement elle est hétérologue vis-à-vis de l'hôte, ce qui implique l'introduction dans l'hôte par une transformation. On connaît un grand nombre de promoteurs de plantes, rappelés notamment dans le document WO01/70778. On peut utiliser un promoteur constitutif ou inductible, un promoteur spécifique d'un tissu, d'un organe, d'un stade de développement, par exemple spécifique du phloème afin de lutter contre des insectes qui prélèvent la sève élaborée.
Selon un mode de réalisation l'expression du gène d'intérêt est régulée, en plus de par la séquence promoteur, par l'utilisation de séquences appropriées capables de renforcer l'activité de cette séquence promoteur, telles que des introns, par exemple l'intron de l'actine 1 ou 2, l'intron DSV de la mosaïque jaune du tabac (Morris et al.
(1992), Virology, 187 :633), des séquences enhancers , par exemple certains éléments du promoteur CaMV35S et de gènes de l'octopine synthase (US 5 290 924), des séquences leaders (typiquement des séquences situées entre le site
d'initiation de la transcription et le début de la séquence codante, en particulier des séquences leader consensus qui stabilisent l'ARNm et empêchent une initiation inappropriée de la transcription), par exemple le leader EMCV (Leroy-Stein et al., 1989, PNAS USA, 86 : 6126-6130), le leader TMV (Gallie et al., 1989, Molecular Biology of RNA, pages 237-256). Parmi les séquences terminateurs, on peut citer le terminateur nos (réf: Bevan et al.,1983, Nucleic Acids Res. 11 (2), et le terminateur de gène d'histone (EPO 633 317).
Selon une variante, la cassette d'expression contient des séquences d'adressage subcellulaire, en particulier une séquence codant pour un peptide signal permettant la sécrétion de la protéine, ou une séquence codant pour un peptide de transit adressant la toxine dans les chloroplastes (par exemple le peptide de transit optimisé décrit EP 0 508 909).
Selon un autre aspect l'invention concerne un vecteur de clonage et/ou d'expression comprenant une cassette d'expression telle que décrite précédemment. Selon une réalisation le vecteur est un type virus et comprend dans son génome une séquence polynucléotidique selon l'invention, liée opérationnellement à un promoteur inductible ou constitutif approprié.
Selon un autre aspect l'invention concerne une cellule hôte transformée avec les séquences nucléiques décrites ci-dessus.
Selon un autre aspect l'invention concerne une cellule hôte comprenant une telle cassette d'expression. Typiquement l'organisme hôte est une bactérie, une levure, une cellule de plante, un champignon.
Selon un autre aspect l'invention concerne un procédé de préparation d'un polypeptide mettant en #uvre au moins un vecteur ou une cellule tels que décrits précédemment. L'invention concerne aussi un polypeptide recombinant susceptible d'être obtenu par ce procédé.
Selon un autre aspect l'invention concerne un procédé de préparation d'un polypeptide synthétique utilisant une séquence d'acides aminés d'un polypeptide insecticide tel que défini précédemment.
Selon un autre aspect l'invention concerne l'utilisation d'une séquence nucléotidique, d'un vecteur, d'une cellule hôte tels que décrit précédemment pour la
biosynthèse de polypeptides insecticides. Le terme une fait bien entendu référence à au moins une .
Selon un autre aspect l'invention concerne les séquences nucléotidiques selon l'invention, enregistrées sur un support, dénommé support d'enregistrement, dont la forme et la nature facilitent la lecture, l'analyse et l'exploitation desdites séquences.
On pourra préférer parmi ces supports des supports lisibles par un ordinateur, tels que les supports magnétiques, optiques, électriques ou hybrides comme par exemple les disquettes ou disques floppy , les CD ROM ou les cassettes d'enregistrement.
Selon un autre aspect l'invention concerne les cellules végétales transformées par un vecteur tel que défini précédemment.
réduit à un ensemble de variables liées entre elles par des équations. L'atout principal de cette approche analytique réside dans le fait qu'elle ne nécessite pas d'outil de support sophistiqué lors des phases de modélisation et de résolution du problème, ce qui convient particulièrement aux phases amont de la conception d'une application. Avec cette approche, il suffit d'appliquer la formule pour déterminer les quantités recherchées et surtout pour connaître l'influence relative des différents paramètres. Cette approche, qui requiert couramment de fortes hypothèses (indépendance des événements, conservativité des serveurs, etc. ), s'avère praticable pour des systèmes à l'architecture fonctionnelle relativement simple tels que par exemple l'étude des systèmes de commutation des réseaux de transport. En outre, la méthode analytique s'avère bien adaptée à l'étude des pires cas de comportement du système, en faisant des approximations simplificatrices et pessimistes.
Cependant, les systèmes logiciels se prêtent beaucoup moins bien aux méthodes analytiques, car ils présentent beaucoup de variantes de comportement. En effet, le comportement du système d'exploitation dépend fortement de l'architecture de la machine, sur laquelle on ne dispose souvent que de très peu d'informations.
Aussi, les interactions entre les différents processus peuvent être très complexes et difficiles à caractériser par des lois probabilistes.
Dans les systèmes répartis, des complications supplémentaires apparaissent du fait de la coopération entre des systèmes hétérogènes où seule une vue
partielle de l'état du système est disponible au niveau de chaque composant. Dans le cas des services de télécommunication, il est également difficile de caractériser le comportement des clients qui génèrent le trafic des requêtes.
A l'opposé de la méthode analytique, l'approche par tests réels consiste, moyennant une infrastructure d'observation (sondes), à faire des mesures directement sur le système réel. L'observation se fait généralement soit au niveau logiciel, soit au niveau du système exploitation, soit aux deux niveaux en même temps.
Cette approche a pour avantage l'obtention de résultats réels, notamment pour la capacité de traitement limite du système (montée en charge).
La mesure des performances sur un système réel nécessite de disposer d'une implantation complète du système à tester (matériels et logiciels), par conséquent l'étude ne peut être menée qu'a posteriori, et peut impliquer des achats de matériels coûteux. La réalisation d'une sonde pour inspecter le système est une tâche difficile car l'instrumentation ne doit pas perturber de manière significative ce que l'on mesure. En particulier, La répartition des machines nécessite une synchronisation d'horloges satisfaisante. De plus, toute modification logicielle ou matérielle entraîne un surcoût de mise en oeuvre en termes d'interopérabilité et de portabilité, de reconfiguration, et de réglages.
En outre, les programmes de tests doivent être développés et eux-mêmes testés et sont fortement liés au code réel de l'application ce qui est d'autant plus contraignant que les processus de développement et de
mise en exploitation d'une application sont courts. Il faut donc souvent développer en parallèle l'application et les programmes de tests, ce qui induit de fortes contraintes de synchronisation au niveau de l'organisation du développement. Enfin, les tests réels souffrent d'une limitation qui provient du fait que seules des configurations simples peuvent être considérées. Par exemple, la capacité de traitement est évaluée en testant le comportement du système lorsque des demandes de service arrivent simultanément. Par contre, pour connaître l'évolution du temps de réponse (temps maximum, temps moyen, répartition...), de l'occupation des tampons et du taux de pertes, il faut générer un très grand nombre de requêtes pour que les résultats statistiques des tests soient représentatifs. D'autre part, il faut aussi générer des flux d'arrivée de ces requêtes selon des scenarii représentatifs du comportement des utilisateurs. Ces flux sont caractérisés notamment par le taux d'arrivée moyen et le rythme (déterministe, en rafale, aléatoire sur une durée, exponentiel...). Ces contraintes imposent de disposer de plusieurs machines clientes, car le nombre de processus actifs par CPU est souvent limité à quelques centaines. Il faut également pouvoir les synchroniser pour que le comportement des utilisateurs généré soit proche de la réalité, ce qui est très difficile à mettre en #uvre.
L'approche par simulation semble de loin la plus utilisée pour l'évaluation des performances de toutes sortes de systèmes et consiste à modéliser le comportement du système, le plus souvent à l'aide d'un
système à files d'attente ou d'un réseau de Petri, puis à expérimenter le modèle en faisant varier un ensemble de paramètres correspondant aux différentes configurations du système. Par exemple, pour des systèmes logiciels, les paramètres peuvent être la vitesse de calcul des processeurs, le débit de transmission des réseaux, la politique d'ordonnancement des processus, le nombre et la topologie des machines, le taux et le rythme d'arrivée des requêtes, etc.. La simulation est plus aisée à appréhender, et plus puissante que la méthode analytique. En effet, la formulation du modèle à simuler ne s'exprime pas sous forme d'équations mais de programmes, ce qui permet de construire un modèle aussi proche que possible du système réel étudié. Elle est beaucoup moins coûteuse en matériel et en logiciel que l'approche par tests car elle exploite un modèle (une abstraction, une représentation virtuelle) au lieu d'un système réel.
Cette approche fournit un outil puissant pour la prédiction des performances depuis la conception du système à étudier jusqu'à sa réalisation.
Des simulateurs logiciels généralistes sont apparus depuis 1980 et on peut citer par exemple QNAP [http:/www.hyperformix.com], SIMSCRIPT [http:/www.caci.com/index~main.shtml], OPNET [http:/www.opnet.com], et SES/Workench [http:/www.hyperformix.com].
Contrairement aux campagnes de tests, le temps d'exécutions d'une simulation n'est pas lié aux temps réels des traitements de l'application. Ainsi, l'approche par simulation permet de réaliser un plus
grand nombre de scénarii en faisant simplement varier les paramètres du modèle. La mise au point d'un modèle permet souvent d'énoncer des conjectures sur le système considéré et de pressentir plus facilement certains éléments de réponses au problème de la performance. Les simulations permettront de confirmer ou d'infirmer ces conjectures. D'autres éléments, tels que la distribution du temps de réponse de bout en bout ou du taux de perte, sont le plus souvent très difficiles à quantifier et seule la simulation permet de les mettre en évidence.
Le polymère fixant hydrosoluble ou hydrodispersible est notamment présent en une quantité comprise entre 0,05 et 30 % en poids, de préférence entre 0,1 et 30 % en poids, et encore plus préférentiellement entre 0,5 et 15 % en poids par rapport au poids total de la composition de coiffage.
La composition de coiffage contenue dans le dispositif selon l'invention présente une teneur en eau comprise de préférence entre 30 et 99,9 % en poids, mieux encore entre 50 et 99 % en poids, et encore plus préférentiellement entre 75 et 98 % en poids par rapport au poids total de ladite composition.
La composition de coiffage peut comprendre en outre des additifs tels que des silicones sous forme soluble, dispersée, microdispersée, des actifs traitants, des hydratants comme le glycérol, des filtres UV, des acides, des bases, des agents plastifiants, des agents solubilisants, des agents conservateurs, des vitamines et des provitamines, des colorants, des pigments, des agents tensioactifs anioniques, cationiques, non ioniques ou amphotères, des parfums, des agents anti-corrosion, et leurs mélanges.
Les exemples suivants sont donnés à titre illustratif de la présente invention.
% en poids Polymère acide diméthylol-propionique/diisocyanate/ 5 MA* néopentylglycol/polyesterdiols à 37 % dans de l'eau Eau déminéralisée qsp 100 * Matière active
On a introduit la composition préparée ci-dessus dans un dispositif de distribution aérosol commercialisé sous le nom EP SPRAY par la société EP SPRAY SYSTEM S. A. décrit ci-dessus. Une valve de référence 6001 format D6 est fixée sur un bidon aérosol classique, et le diffuseur est un diffuseur à buse tourbillonnaire.
La poche est remplie avec la composition comme indiqué cidessus. De l'air comprimé est introduit entre la poche et le bidon.
On a vaporisé la composition sur des cheveux secs. La pulvérisation se fait sous forme d'un spray doux.
On obtient après séchage, une chevelure présentant un bon maintien.
Exemple 2 On a préparé une deuxième composition de coiffage à partir des ingrédients suivants :
Par la suite, nous avons directement utilisé ce dipeptide pour produire un traceur afin de caractériser les anticorps dirigés contre la ddA.
Les caractéristiques de ces anticorps anti-ddA établies dans un test RIA avec le traceur ddA-HS-K-Y* sont présentées dans le tableau 4 ci-dessous.
Analogues IC50 (M) SEM DdA-HS 4, 1 0, 7. 10-11 (n=5) DdA-HS-K-Y 1, 4. 10-10 ddA 3, 4 0, 4. 10-9 (n=14) ddI 1. 10-7 3TC 6, 4. 10-4 AZT nI d4T nI ddC 4. 10-5
nI : non immunoréactif jusqu'à des concentrations de 10-'M.
Comme pour les anticorps précédents, le ddA-HSK-Y est aussi bien reconnu que l'haptène.
La spécificité des anticorps anti-SQV, anti-NFV et anti-ddA est excellente puisque aucune réactivité croisée n'est observée vis-à-vis des autres antiviraux utilisés en thérapie anti-VIH. La sensibilité des tests et l'absence d'interférence avec des composants des milieux biologiques tels que les protéines plasmatiques, le contenu intracellulaire, ou le milieu de culture dans les tests in vitro, autorise le dosage brut sans purification préalable des échantillons.
2. Applications cliniques.
On peut constater que les résultats des dosages RIA sont comparables à ceux obtenus par HPLC et permettent la quantification du SQV plasmatique.
Les résultats des dosages par ELISA sont très différents de ceux obtenus par HPLC. Le test ELISA étant plus sensible aux interférences protéiques que le dosage RIA, une façon de s'affranchir de ces interférences serait d'extraire le SQV des échantillons biologiques.
Aussi, puisque l'étude de la spécificité des anticorps montre que l'hémisuccinate du Saquinavir est 100 fois mieux reconnu, l'optimisation du test pourrait passer par la succinylation du SQV des échantillons biologiques.
3. Conclusions.
Les travaux expérimentaux réalisés dans le cadre de la présente invention et les résultats des tests immunologiques mentionnés dans l'exemple ci-dessous permettent de conclure que le traceur conçu par la demanderesse, comportant le motif KY permet la réalisation d'un dosage immunologique ayant une bonne sensibilité.
Ces résultats confirment que le traceur immunologique conçu dans le cadre de la présente invention, qui tient compte de la reconnaissance de l'épitope par l'anticorps, présente la meilleure adéquation avec l'immunogène.
En effet, la comparaison des structures de l'isostère du ddATP et de l'hémisuccinate de la ddA montre des analogies confirmées par la modélisation moléculaire.
Cette analogie structurale a été démontrée expérimentalement par le fait que le dérivé ddA-HS-K-IY est parfaitement reconnu par les anticorps anti-isostère du ddATP, de même que le dérivé non radiomarqué.
Au niveau d'un bloc 2104, une opération de bouclage démarre.
Au niveau d'un bloc 2106, les valeurs des quatre variables que sont cliquages/offre/coût/profit sont établies de manière à être égales aux valeurs qui sont retournées par la procédure de combinaison courante.
Un mode de réalisation de cette procédure est décrit ci-avant en conjonction avec la figure 17. Au niveau d'un bloc 2108, il est déterminé si l'offre courante est supérieure au CPC maximum C ou si le coût est supérieur à la variable de "budget restant" ou si la procédure "index maximum ?" retourne la valeur logique "vrai". Un mode de réalisation de la procédure "index maximum ?" est décrit ciavant en conjonction avec la figure 18. Si le test du bloc 2108 est "vrai", au niveau d'un bloc 2110, la procédure retourne la valeur de la variable "meilleur index" et la procédure se termine au niveau d'un bloc 2112. Sinon, au niveau d'un bloc 2114, il est déterminé si la variable "meilleur index" stocke une valeur vide ou si la valeur qui est retournée par la procédure "meilleur" présente une valeur "vrai". Un mode de réalisation de la procédure "meilleur" est décrit ci-avant en conjonction avec la figure 14. Si le test du bloc 2114 est "vrai", au niveau d'un bloc 2116, la valeur de la variable "meilleur index" est établie de manière à être égale à la valeur de la variable "index". Au niveau d'un bloc 2118, la valeur de la variable "meilleurs cliquages" est établie de manière à être égale à la valeur de la variable "cliquages". Au niveau d'un bloc 2120, la valeur de la variable "meilleur profit" est établie de manière à être égale à la valeur de la variable "profit". Si le test du bloc 2114 n'est pas "vrai" ou après traitement du bloc 2120, au niveau d'un bloc 2112, la valeur de la variable "index" est établie de manière à être égale à la valeur qui est retournée par la procédure "extension d'offre minimum".
Un mode de réalisation de cette procédure est décrit ci-après en conjonction avec la figure 22. La procédure de bouclage se termine au
niveau d'un bloc 2124, et la commande est retournée sur un bloc 2104.
Un autre mode de réalisation de la procédure de génération d'une campagne guidée est présenté selon le pseudo-code ci-après.
Procédure de génération de campagne guidée (termes) Initialisation des paramètres de calcul ; Boucle ; Assignation de "cliquages/off re/coût/prof it" = combinaison courante(index) ; Si offre > C ou coût > budget restant ou index maximum ? (index) ; Retour de "meilleur index" ; Fin de Si ; Si "meilleur index" = () ou "meilleur(cliquages, profit)" ; Assignation de "meilleur index" = index ; Assignation de "meilleurs cliquages" = cliquages ; Assignation de "meilleur profit" = profit ; Fin de Si ; Assignation de index = extension d'offre minimum(index) ; Fin de Boucle ; Fin de Procédure ; La différence essentielle entre la gestion de campagne guidée et la gestion de campagne optimum se situe au niveau de la génération de la "combinaison courante" suivante. Pour la gestion de campagne optimum, nous considérons toutes les combinaisons. Pour la gestion de campagne guidée, nous considérons la combinaison courante et nous voyons comment améliorer le rang de l'un des termes ou de l'une des expressions de telle sorte que l'offre moyenne soit augmentée de la valeur la plus faible. Ceci est réalisé au moyen de la procédure d'extension d'offre minimum.
La combinaison courante est définie au moyen du rang et de l'offre de chaque terme ou expression {T1, T2, ..., Tk}. Chaque terme ou expression T, dispose d'une liste de doublets qui est triée depuis l'offre la plus basse jusqu'à l'offre la plus élevée. Le doublet qui
est sélectionné pour T, est défini au moyen de la valeur de index (T,). Si cette valeur est à 0, alors l'offre est à 0 pour T,. Si cette valeur est égale à l'unité, alors il s'agit de la première combinaison rang/offre (offre minimum et pire rang).
La procédure d'extension d'offre minimum démarre en initialisant les variables "index d'offre la plus basse" (l'index de la combinaison explorée qui aboutit à l'offre moyenne la plus basse) et "offre la plus basse" (l'offre moyenne de la combinaison explorée qui aboutit à l'offre moyenne la plus basse).
La procédure entre ensuite dans une boucle au niveau de laquelle chaque itération de la boucle considère l'amélioration du rang de l'un des termes ou de l'une des expressions {T1, T2, ..., Tk}. Ceci est réalisé en incrémentant l'index du terme ou de l'expression sélectionné(e) d'une unité. Chaque itération calcule le nombre de cliquages total, l'offre moyenne, le coût total et le profit total pour la nouvelle combinaison qui est en train d'être considérée. Si l'offre moyenne de la combinaison courante est inférieure à la meilleure offre moyenne considérée lors d'une quelconque itération précédente, alors la meilleure extension est remplacée par la combinaison courante.
La procédure sort de la boucle lorsque toutes les extensions ont été considérées et elle retourne la nouvelle combinaison qui incrémente l'offre moyenne du montant le plus faible.
La figure 22 est un organigramme qui représente un mode de réalisation d'une procédure d'extension d'offre minimum. La procédure commence au niveau d'un bloc 2200. Au niveau d'un bloc 2202, la variable "index d'offre la plus faible" est initialisée à 0 et au niveau d'un bloc 2204, la variable "offre la plus basse" est initialisée à 0.
Une opération de bouclage démarre au niveau d'un bloc 2206 en bouclant sur tous les termes ou toutes les expressions de recherche du publicitaire. Au niveau d'un bloc 2208, il est déterminé si l'index d'un terme ou d'une expression de recherche courant(e) est inférieur au nombre de rangs du terme ou de l'expression de recherche. Si ce n'est pas le cas, la fin de la boucle est atteinte et la commande passe à un bloc 2222. Sinon, au niveau d'un bloc 2210, la valeur de la variable
"index" est incrémentée d'une unité et au niveau d'un bloc 2212, les valeurs des quatre variables que sont cliquages/offre/coût/profit sont établies de manière à être égales aux quatre valeurs retournées par la procédure de combinaison courante. Un mode de réalisation de cette procédure est décrit ci-avant en conjonction avec la figure 17.
Au niveau d'un bloc 2214, il est déterminé si la valeur de la variable "index d'offre la plus basse" est égale à 0 ou si l'offre courante est inférieure à la valeur de la variable "offre la plus basse". Si ce n'est pas le cas, la commande passe à un bloc 2220. Sinon, au niveau d'un bloc 2216, la variable "index d'offre la plus basse" est établie de manière à être égale à la valeur courante de la variable "index", au niveau d'un bloc 2218 la variable "offre la plus basse" est établie de manière à être égale à l'offre courante pour le terme ou l'expression de recherche courant (e) au niveau d'un bloc 2220, l'index pour le terme ou l'expression de recherche courant(e) est décrémenté d'une unité.
optique Ax.
Lorsque les réflecteurs 46 et 56 sont observés par l'avant alors que la source de lumière 12 à diode photoémissive est en fonctionnement, les parties centrales pratiquement des éléments réfléchissants 46s et 56s constituant les surfaces réfléchissantes 46a et 56a peuvent être observées sous forme de parties brillantes B. Comme les éléments réfléchissants 46s et 56s sont disposés différemment de ceux du mode de réalisation, les variantes peuvent donner des impressions visuelles différentes de celles du mode de
On décrit maintenant une neuvième variante du mode de réalisation. Les figures 13 et 14 représentent un organe transparent 84 qui est analogue à celui du mode de réalisation des
figures 1 et 3.
Cependant, ce mode de réalisation se distingue de l'organe transparent 14 représenté sur les figures 1 et 3 en ce qu'une partie 84F d'irradiation directe est formée sur
l'organe transparent 84.