INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
- molécules HLA-DR dont la chaîne (3 n'est pas codée par le gène DR1 II s'agit des molécules HLA-DRB3. -DRB4 et -DRB5 dont la chaîne est codée par les allèles les plus fréquents dans la population française : HLADRB3*0101 (9. 2 %). HLA-DRB4*0101 (28,4 %). et HLA-DRB5*0101 (7,9 %). Ces molécules couvrent à elles seules 45 % de la fréquence allélique.
- molécules HLA-DP Il s'agit des molécules HLA-DP4 qui regroupent les molécules codées par les allèles DPB1 *0401 et DPBI*0402. Ces molécules DP4 sont les molécules HLA II les plus abondantes en Europe et aux Etats Unis. Leur fréquence allélique est en effet de 40 et 11% respectivement ce qui signifie qu'elles sont l'une ou l'autre trouvées chez environ 76% des individus.
Les peptides présents dans une séquence protéique et qui lient l'ensemble de ces molécules incluent donc les épitopes T CD4+de la majorité de la population. b) purification des molécules HLA II Les molécules HLA II sont purifiées par immunoaffinité à partir de différentes lignées homozygotes de lymphocytes B humains transformées par le virus Epstein Barr (EBV).
L'origine des lignées EBV et les différents allèles qui les caractérisent sont décrits dans les Tableaux V et VI ci-dessous .
Tableau V : Spécificité DR des lignées EBV
La présente invention a ainsi, en outre, pour objet une méthode de tri de lymphocytes T spécifiques du VHC. caractérisé en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes : - incubation ou mise en contact. d'une suspension de cellules à trier avec un ou plusieurs tétramères marqués formés à partir de complexes entre des peptides C et/ou NS3 tels que définis ci-dessus et des molécules HLA II solubles, et - tri des cellules marquées par les tétramères.
Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions. qui ressortiront de la description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en #uvre du procédé objet de la présente invention ainsi qu'au dessins annexés, dans lesquels : - la figure 1 illustre les séquences des peptides issus des protéines C et NS3 qui ont été étudiés. Pour simplifier les différents peptides ont été dénommés 1C à 6C et 8N à 29N.
- la figure 2 illustre l'activité de liaison d'une première série de peptides des protéines C et NS3, vis-à vis des molécules HLA II prépondérantes dans la population caucasienne. Les valeurs correspondent aux IC50- exprimées en nM. Les valeurs inférieures à 1000 nM, correspondant aux peptides présentant une bonne affinité pour les molécules HLA II. sont indiquées en gras. nd : non déterminé.
- la figure 3 illustre l'activité de liaison, vis-à vis des molécules HLA II prépondérantes dans la population caucasienne, d'une seconde série de peptide des protéines C et NS3. dérivés de la première série. Les valeurs correspondent aux IC50, exprimées en nM. Les valeurs inférieures à 1000 nM, correspondant aux peptides présentant une bonne affinité pour les molécules HLA II, sont indiquées en gras. nd : non déterminé.
- la figure 4 illustre l'immunogénicité in vivo de 3 peptides de la protéine NS3 présentant une forte affinité pour HLA-DR1 (8N 1007-1037, 15N 1174- 1195 (15N) et 28N 1524-1553. mesurée par un test de prolifération des splénocytes de souris transgéniques pour les molécules HLA-DRI humaines, prélablement immunisées par chacun des peptides (figure 4A) ou par un mélange de ces peptides (figure 4B). Les peptides 3C 93-107. 6C 148-173 et 12N 1094-1119 qui possèdent une
faible affinité pour HLA-DRI sont utilisés comme contrôle. Les valeurs correspondent à l'index de prolifération des splénocytes.
- la figure 5 illustre l'immunogénicité in vitro de 6 peptides de la protéine NS3 présentant une forte affinité pour au moins 4 molécules HLA II différentes prépondérantes dans la population caucasienne (8N 1007-1021, 8N 1019- 1033, 15N 1178-1193, 28N 1538-1552. 18N 1250-1264 et 8N 1024-1037), mesurée par un test ËLISPOT. à partir de 3 lignées de lymphocytes T CD4+ issues d'un individu séronégatif (POI4/A. P014/B et P014/C) ; les lymphocytes T ont été préalablement stimulés in vitro par des cellules dendritiques de ce même individu chargées par le mélange de peptides) puis le nombre de lymphocytes T sécréteurs d'IFN-y.a été mesuré en présence de cellules dendritiques non chargées issues du même individu et en présence de ces peptides seuls ou en mélange (mix HCV) ou bien en l'absence de peptides (- peptide). Les valeurs indiquées correspondent au nombre de lymphocytes T sécréteurs d'IFN-y.
Il doit être bien entendu. toutefois, que ces exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation.
EXEMPLE 1: DETERMINATION DES CONDITIONS DES TESTS DE LIAISON PEPTIDES/MOLECULES HLA II 1) Peptides Tous les peptides sont synthétisés selon la stratégie Fmoc en synthèse parallèle sur phase solide, purifiés par HPLC et contrôlés par spectrométrie de masse (ES-MS). a) Première série de peptides L'activité de liaison des peptides des protéines C et NS3 du VHC aux molécules HLA II. a été testée à partir de 25 fragments de grandes tailles (entre 15 et 34 acides aminés). choisis selon deux critères : - présence de plusieurs résidus aromatiques ou hydrophobes qui sont les principaux résidus d'ancrage pour les molécules HLA-DR et HLA-DP, et - bonne probabilité de pouvoir être synthétisés.
Les séquences des peptides sélectionnés, issues du génoype la, sont présentées dans le Tableau III ci-dessous.
Tableau III : de la première série de peptides
nom Séquence Taille numéro
IC 19-47 PQDVKFPGGGQIVGGVYLLPRRGPRLGVR ~29 SEQ1DNO:1~ 2C 31-57 VGGVYLLPRRGPRLGVRATRKTSERSQ 27 SQ ID NO: 3C 93.107 WAGWLLSPRGSRPSW IS SEQ IDN0:3 4C 104-133 RPSWGPTDPRRRSRNLGKYIDTL TCGFADL 30 SEQ ID NO: 5C 127-149 TAGFADLMGYIPLVGAPLGGAAR ~23 SEQ1DNO:5 6C 148-173 ARALAHGVRVLEDGVNYATGNLPGAS 26 SEQ ID NO: 6 8N 1007-1037 GRE1LLGPADGMVSKGWRLLAPITAYAQQTR 31 SEQ ID NO: 7 9N 1036-1055 TRGLLGCIITSLTGRDKNQV 20 SEQ ID NO: 8 ION 1052-1072 KNQVEGEVQIVSTA.4QTFLAT 21 SEQ ID NO: 9 11N 1076-1093 GVAWTVYHGAGTRT1ASP 18 SEQ ID NO: 10 12N 1094-1119 KGPVIQMYTNVDQDLVGWPAPQGSRS 26 SEQ ID NO: 11 13N 1127-1153 SSDLYLVTRHADV1PVRRRGDSRGSLL 27 SEQ ID NO: 12
14N 1149-1172 RGSLLSPRPISYLKGSSGGPLLAP 24 SEQ ID NO : 13 15N 1174-1195 GHAVGIFRAAVCTRGVAKAVDF 22 SEQ ID NO: 14 16N 1190-1212 AKAVDFIPVENLETTMRSPVFTD 23 SEQ ID NO: 15
17N 1206-1239 RSPVFTDNSSPPVVPQSFQVAHLHAPTGSGKSTK 34 SEQtDNO: 16 18N 1246-1275 AQGYKVLVLNPSVAATLGFGAYMSKAHG1D 30 SEQ ID NO: 17 19N 1275-1304 DPNIRTGVRT1TTGSP1TYSTYGKFLADGG ~30 SEQ ID NO: 18 22N 1362-1387 1EEVALSTTGE1PFYGKAIPLEVJKG 26 SEQ ID NO: 19 23N 1377-1403 GKAIPLEVIKGGRHLIFCHSKKKADEL 27 SEQIDN0:20 24N 1404-1432 AAKLVALGINAVAYYRGLDVSVIPTSGDV 29 SEQIDN0:21 26N 1456-1481 TAVTQTVDFSLDPTFTIET1TLPQDA 26 SEQIDN0:22 27N 1495-1513 K.PG1YRFVAPGERPSGMFD 19 SEQ ID NO: 23
Le Configurateur dispose de plusieurs procédures préprogrammées mais d'autres peuvent être ajoutées et référencées. Les procédures préprogrammées acceptent des modificateurs : # E (exclusif - le signal ne sera utilise qu'une seule fois) # T(dérivation - le signal peut être utilisé par plusieurs destinations).
# Une valeur spéciale 'filter~out~wire~name', attribué à un signal ou un groupe de signaux permet d'éliminer toute connexion sur les signaux correspondants.
- L'entrée "SelfConnect" - similaire à l'entrée "Connect" contient les définitions des connexions des signaux de Ports qui peuvent être connectés entre deux instances d'un même composant - cette définition facilite la connexion de signaux unidirectionnels sortie # entrée dans le cas particulier de connexion tête-bêche.
L'entrée "Port" - fournit la définition de l'ensemble des ports. C'est un hachage qui associe le nom de chaque port à un tableau comportant les éléments suivants : . Le nom logique du composant de type HDL.
. Le nom du module de type HDL ou un choix de modules.
. Le numéro du port (utile pour la générations du code VERILOG et C++).
- L'entrée "GenDest" (cf. 1 de A3) - est un pointeur sur la procédure qui, pour un composant désigné par un label et type, génère, pour chaque port, le label du composant auquel il se connecte. La procédure référencée doit être impérativement spécifiée par
l'utilisateur - cette procédure est également utilisée pour contrôler la cohérence de la configuration demandée - L'entrée "SysConn" - est un hachage qui associe à chaque module de type HDL contenu dans le modèle un pointeur sur la procédure de sélection et nommage des Blocs Système. La procédure référencée doit être impérativement spécifiée par l'utilisateur.
- L'entrée "GenHDLInstParam" - est un pointeur sur la procédure qui génère les paramètres supplémentaires requis par le simulateur de type HDL pour le code généré qui instancie la partie de type HDL du composant.
- L'entrée "CfgCpp" - définit les paramètres du constructeur de l'objet pour le code C++ d'identification de la Configuration, généré automatiquement, servant de filtrage pour la sélection des Composants par le système Configurateur : . Le premier paramètre est le nom de la classe de l'objet C++ - c'est un nom prédéfini associé à celui du modèle de type HDL - il est suivi par les tableaux correspondants à des groupes de paramètres associés typiquement à chaque port du composant. Le mot-clé "Own" indique un composant à modèle élémentaire.
. Ensuite viennent le nom du composant de type HDL référencé dans la partie Port et l'identifiant de type du composant tels, par exemple, DUT, modèle du circuit en projet ; transacteur.
. Pour les blocs à modèle composé, la partie paramètres est plus riche : # Elle contient le mot clé "Src" pour les composants actifs ou "Mon" pour les composants de Vérification et Monitoring # Viennent ensuite les paramètres du composant adaptateur d'interface, comprenant : le nom du composant de type HDL. l'identifiant du type du composant et sa classe suivie du nom du port correspondant.
Ces derniers paramètres sont spécifiés pour chaque port du bloc composé.
Dans le code C++ généré pour un modèle composé, les paramètres transmis au constructeur d'une classe correspondent aux pointeurs sur les instances des adaptateurs d'interface.
Tous ces paramètres servent à guider le générateur du code C++ qui les combine avec les règles contenues dans le tableau de hachage "%classCppProtoMap" - L'entrée "ProbeConnect" - associe à chaque port d'un composant Moniteur ou Vérifieur la classe C++ acceptable comme adaptateur d'interface. Ainsi le Configurateur est capable d'optimiser le code en utilisant le même adaptateur d'interface pour plusieurs composants (modèle composé).
- L'entrée "SysWrap" - est un hachage qui pour chaque partie de type HDL d'un composant définit l'expression régulière à utiliser pour mettre à un état connu les signaux restés non connectés après le câblage entre les composants.
Composition A : Dans un réacteur thermostaté en verre de 1 I, équipé d'un agitateur, d'un thermomètre, d'une ampoule à brome et d'une purge à air sec, on a introduit 0,25 g de HQME, 61,7 g de Térathane 1000,61,7 g de BAGDA et 166,5 g de cyclopentanone. On a agité le mélange à 60 C sous azote jusqu'à obtention d'une solution homogène. 10 gouttes de DBTL sont ensuite ajoutées.
Après l'homogénéité complète, 49,44 g de Desmodur W sont ajoutés et le mélange de résine est maintenu sous agitation à 60 C pendant 4 h. Sont alors dissous, sous agitation, 6,63 g de CR 173 dans le mélange. Enfin, le mélange de résine obtenu est refroidi à température ambiante.
Composition B : 100 g de composition A sont mélangés avec 0,72 g de cyclopentanone et 0,36 g d'ADVN.
Le mélange obtenu est laissé au repos, à température ambiante de façon à éliminer toute bulle. On a préalablement hydrolysé une ébauche de lentille CR 39 (polydiéthylèneglycol bis-allyl carbonate) avec une solution à 15 % en masse d'hydroxyde de sodium pendant 15 minutes à 20 C.
La lentille est revêtue ("spin-coating" à 1 000 tr/min pendant 99 s avec une accélération de 1 000 tr/min/s) de la composition B de l'invention.
La lentille revêtue est alors rapidement introduite dans une chambre équipée d'une fenêtre transparente aux infrarouges, soumise à un balayage avec de l'azote sec (20 I/min) pendant 3 minutes, puis exposée à un rayonnement infrarouge (500 W) pendant 6 minutes. Le revêtement a une épaisseur de 40 m.
(Exempter - Préparation d'une composition photochromique réticulable de l'invention (à base PU insaturé segmenté, avec partenaire de réticulation) et réticulation de celle-ci.
Composition A : Dans un réacteur thermostaté en verre de 1 I, équipé d'un agitateur, d'un thermomètre, d'une ampoule à brome et d'une purge d'air sec, on a introduit 0,216 g de HQME et 76,7 g de NMP. On a maintenu le mélange sous agitation jusqu'à la dissolution totale des composés. Après la dissolution complète, on a ajouté 13,28 g de HEMA, 105,9 g de BAGDA, 109,32 g de Térathane 1000,90 g de PEG (550)DMA 10 gouttes de DBTL. On a agité le mélange à 60 C sous air sec jusqu'à ce que l'on obtienne une solution homogène.
Après l'homogénéité complète, on a ajouté 98,46 g de Desmodur W en 1 h et on a maintenu le mélange de résine sous agitation pendant 1 h à 70 C. On a alors dissous, sous agitation, 7,66 g de CR173 dans le mélange. L'agitation a été poursuivie jusqu'à élimination de tout solide. Enfin, on a refroidi le mélange de résine obtenu à la température ambiante.
Composition B : On a dissous 0,45 g de ADVN dans 10,54 g de NMP.
Composition C : On a mélangé les produits suivants à la température ambiante pendant 1 h.
Produits Masse (grammes) Composition A 60 Composition B 11 Le mélange obtenu est laissé au repos, à température ambiante, de façon à en éliminer toute bulle.
On a préalablement hydrolysé une ébauche de lentille CR39 (polydiéthylène glycol bis allyl carbonate ) avec une solution à 15 % en
masse d'hydroxyde de sodium pendant 15 min à 20 C. Puis on a lavé soigneusement la lentille avec de l'eau déminéralisée avant de la revêtir. On a enfin revêtu la lentille traitée en surface, avec la composition C de l'invention, en mettant en oeuvre la technique du dépôt à la tournette ("spin coating") à 1 500 tr/min pendant 7 s avec une accélération de 1 000 tr/min/s.
La lentille revêtue est alors introduite dans une chambre équipée d'une fenêtre transparente aux infrarouges et soumise à un balayage avec de l'azote sec (20 I/min) pendant 3 min, puis exposée à un rayonnement infrarouge (500 W) pendant 5 min. Le revêtement obtenu est épais de 40 m et est insensible aux solvants usuels comme l'alcool éthylique, l'acétate d'éthyle et l'acétone.
Exemple 4] Les opérations sont identiques à celles décrites dans l'exemple 3, à ceci près que l'on a remplacé, en quantité égale, le Térathane# 1000 par le VP LS 236.
Le procédé de teinture selon l'invention consiste, de préférence, à appliquer la composition prête à l'emploi, réalisée extemporanément au moment de l'emploi à partir des compositions (A) et (B) décrites ci-avant, sur les fibres kératiniques sèches ou humides, et à la laisser agir pendant un temps de pause variant, de préférence, de 1 à 60 minutes, et plus préférentiellement de 10 à 45 minutes, à rincer les fibres, puis éventuellement à les laver au shampooing, puis à les rincer à nouveau, et à les sécher.
Une variante de ce procédé consiste à appliquer séquentiellement de manière décalée ou simultanée sur les fibres kératiniques sèches ou humides avec un éventuel rinçage intermédiaire une composition décrite ci-dessus et une composition comprenant un agent oxydant et à laisser agir lesdites compositions pendant un temps de pose variant de 1 à 60 minutes puis à rincer les fibres, puis éventuellement à les laver au shampooing puis à les rincer à nouveau et à les sécher.
L'exemple suivant est destiné à illustrer l'invention.
On a préparé la composition suivante (quantités exprimées en pourcentages en poids)
Mélange d'alcools linéaires en Cl 8 à C24 3 (C18/C20/C22/C24 : 7/57/30/6 -teneur en alcool> 95%) Alcool stéarylique oxyéthyléné (20E) 4,5 Alcool stéarylique oxyéthyléné (21 OE) 1,75 Acide oléique 2,6 Polyuréthane cationique obtenu par la condensation de 1,3 0,2 bis (isocyanatométhylcyclohexane), de N,Ndiméthyléthanolamine quaternisée avec le bromododécane, de N,N-diméthyléthanolamine et de polyoxyéthylène de poids moléculaire 10000 Acide polycrylique réticulé (produit commercialisé sous la 0,4 dénomination Carbopol 980 par la société Novéon) Hydroxypropyl méthyl cellulose 0,2 Monoisopropanolamide d'acides de coprah 3 Merquat 100 en solution aqueuse à 40% 1,6 (en matière active) Polymère cationique de formule (W) 2 (en matière active) Métabisulfite de sodium 0,71 EDTA (acide éthylènediamine tétra-acétique) 0,2 Ter-butyl hydroquinone 0,3 1,4-di aminobenzène 0,2 Para-aminophénol 1,2 1,3-dihydroxybenzène 0,1 l-hydroxy-3-amino-benzène 0,2 l-méthyl-2-hydroxy-4-P-hydroxyéthylamino-benzène 0,8
Monoéthanolamine 1 Ammoniaque à 20% de NH3 11 Parfum q.s Eau déminéralisée q. s.p 100 Cette composition est mélangée au moment de l' emploi à une composition oxydante sous forme d'émulsion contenant comme agent oxydant 7,5% de peroxyde d'hydrogène à raison de 1 partie en poids de composition colorante pour 1,5 parties en poids de composition oxydante. On applique le mélange obtenu sur des mèches de cheveux naturels à 90% de blancs et on laisse poser 30 minutes. Après rinçage, lavage au shampooing et séchage, on obtient des cheveux teints dans une nuance soutenue châtain clair rouge cuivré.
1 Composition de teinture d'oxydation pour fibres kératiniques comprenant un colorant d'oxydation, un polymère associatif et une silicone aminée La présente invention est relative à une composition de teinture d' oxydation des fibres kératiniques, en particulier des fibres kératiniques humaines et plus particulièrement des cheveux, comprenant au moins un colorant d' oxydation, au moins un polymère associatif et au moins une silicone aminée.
Il est connu de teindre les fibres kératiniques, et en particulier les cheveux humains, avec des compositions de teinture contenant des précurseurs de colorants d'oxydation, généralement appelés bases d'oxydation , en particulier des ortho- ou para- phénylènediamines, des ortho- ou para- aminophénols, et des bases hétérocycliques.
Les précurseurs de colorants d'oxydation sont des composés initialement peu ou pas colorés qui développent leur pouvoir tinctorial au sein du cheveu en présence d'agents oxydants en conduisant à la formation de composés colorés. La formation de ces composés colorés résulte, soit d'une condensation oxydative des bases d'oxydation sur elles-mêmes, soit d'une condensation oxydative des bases d'oxydation sur des composés modificateurs de coloration, ou coupleurs , qui sont généralement présents dans les compositions tinctoriales utilisées en teinture d'oxydation et sont représentés plus particulièrement par des métaphénylènediamines, des méta- aminophénols et des métadiphénols, et certains composés hétérocycliques.
2 La variété des molécules mises en jeu, qui sont constituées d'une part par les bases d'oxydation et d'autre part par les coupleurs , permet l'obtention d'une palette très riche en coloris.
Les compositions de teinture d'oxydation comprennent en outre généralement des polymères cationiques afin d'améliorer les propriétés cosmétiques.
Cependant, la demanderesse a constaté que les compositions tinctoriales comprenant ces polymères cationiques étaient peu stables, présentaient de propriétés cosmétiques peu satisfaisantes, et peu rémanentes aux shampooings.
Or, après d'importantes recherches menées sur la question, la demanderesse vient maintenant de découvrir que des compositions de teinture d'oxydation comprenant un colorant d'oxydation, un polymère associatif et une silicone aminée particulière présentent une bonne stabilité physico-chimique, ainsi que de bonnes propriétés cosmétiques, en particulier la douceur, le lissage, la souplesse, la légèreté.
Elle a également constaté que lesdites compositions conféraient des propriétés cosmétiques rémanentes aux shampooings. Elle a ainsi observé une très bonne rémanence de la couleur aux shampooings.
Elle a également constaté que lesdites compositions permettaient d' obtenir une sélectivité faible, c'est-à-dire des écarts de coloration faibles tout au long d'une même fibre kératinique, qui peut être différemment sensibilisée (i.e. abîmée) entre sa pointe et sa racine.
résistante, réduit l'espace du site catalytique ce qui empêche vraisemblablement l'insecticide d'interagir avec la sérine catalytique (S200).
- la figure 8 illustre la détection par PCR-RFLP de la mutation glycine # sérine dans le troisième exon codant du gène ace-1, chez des moustiques de l'espèce C. pipiens : 1 bande (520 pb) est détectée chez les individus homozygotes sensibles SS, 2 bandes (357 pb et 163 pb) sont détectées chez les individus homozygotes résistants RR et 3 bandes (520 pb, 357 pb et 163 pb) sont détectées chez les individus hétérozygotes résistants RS.
- les figures 9A et 9B illustrent la comparaison des séquences du gène ace-1 d'An. gambiae, entre une souche sensible (KISUMU) et une souche résistante (YAO) aux insecticides ; toutes les mutations sont silencieuses à l'exception de deux mutations : la première correspond au remplacement de la valine (CGT) en position 33 de la séquence de l'AChEl de la souche sensible (SEQ ID NO: 5) par une alanine (CGC) dans la souche résistante et la seconde est la même mutation glycine (GGC)- sérine (AGC) que celle trouvée chez Culex pipiens. La mutation glycine (GGC)-> sérine (AGC) entraîne l'apparition d'un second site Alu I (AGCT) dans la séquence du troisième exon codant de la souche résistante, utile pour la détection de la mutation. Les séquences codantes du gène ace-1 sont indiquées en gras et les mutations sont indiquées en grisé. Les séquences des amorces Ex3AGdir et Ex3Agrev utilisées pour détecter la mutation glycine (GGC)# sérine (AGC), ainsi que les sites Alu I du troisième exon codant sont indiqués en gras et soulignés.
- la figure 10 illustre la quantification de l'activité acétylcholinestérase des protéines recombinantes AChEl de Culex pipiens, sensibles (S-LAB, barres blanches) et résistantes (SR, barres grisées), produites en cellules d'insecte S2, par comparaison avec celle de broyats de C. pipiens de souche S-LAB (barres blanches hachurées) et de souche SR (barres grisées hachurées). L'activité acétylcholinestérase des extraits cellulaires et des broyats de moustiques a été mesurée en l'absence (C) et en présence de 10-4M et 10-2M de propoxur. L'unique mutation glycine247(119)->sérine247(119) rend l'acétylcholinestérase insensible à l'insecticide.
Tableau II: Liste des séquences
Numéro Séquence d'identification SEQ ID NO: 1 fragment de la région centrale de la protéine AChE1 Anophèles gambiae (positions 70 à 593 de la SEQ ID NO: 3).