INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les composés selon l'invention sont destinés à être appliqués sur la peau d'individus présentant des taches de pigmentation brunâtres, des taches de sénescence, ou sur la peau d'individus désirant combattre l'apparition d'une couleur brunâtre provenant de la mélanogénèse, par exemple à la suite d'une exposition aux rayonnements ultra-violet. Rien ne laissait penser à l'homme du métier que des composés de structure voisines de ceux divulgués dans le document JP-10 175 854, et piégeant le fer, pourraient avoir des propriétés inhibitrices de la mélanogénèse, et pourraient ainsi être utilisés sur la peau de groupes d'individus différents.
La présente invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation cosmétique d'au moins un composé de formule (I) : dans laquelle, n et m représentent indépendamment un entier compris entre 0 et 5, R, R1, et R2 représentent indépendamment un atome d'hydrogène, ou un groupement choisi parmi les groupements alkyle C1-C12 linéaire ou ramifié, cycloalkyle C3-Cg, alkényle C2-C12 linéaire ou ramifié, cycloalkényle C3-C8, alkynyle C2-C12 linéaire ou ramifié, R3-CO-, R40-CO-, et R4NH-CO-, R3 représente un groupement alkyle Ci-C24 linéaire ou ramifié, cycloalkyle C3-C8, ou aryle éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements -OR4, -SR4, -COOR4, -NR4R4, aryle, ou hétéroaryle, R4 représente un atome d'hydrogène, ou un groupement choisi parmi les groupements alkyle C1-C12 linéaire ou ramifié, cycloalkyle C3-Cg, hétéroalkyle linéaire ou ramifié, hétérocycloalkyle, et arylalkyle, chacun de ces groupements pouvant être
éventuellement substitué par un ou plusieurs atome d'halogène, ou groupements -OR$, -COORs, ou -NR5R5, R5 représente un atome d'hydrogène ou un groupement alkyle Ci -Cilinéaire ou ramifié, ou cycloalkyle C3-Cg, dans une composition, comme agent pour éliminer les taches pigmentaires brunâtres, les taches de sénescence, et/ou en tant qu'agent anti-brunissement de la peau, étant entendu que le terme aryle désigne un groupement phényle ou naphtyle, le terme hétéroaryle désigne un groupement mono ou bicyclique, contenant au moins un cycle aromatique, de 5 à 11 chaînons, contenant de 1 à 5 hétéroatomes choisis parmi azote, oxygène et soufre, le terme hétéroalkyle désigne un groupement alkyle C1-C12 dont un atome de carbone a été remplacé par un hétéroatome choisi parmi azote, oxygène et soufre, le terme hétérocycloalkyle désigne un groupement cyclique saturé de 5 à 8 chaînons contenant de 1 à 3 hétéroatomes choisis parmi azote, oxygène et soufre, et que dans les groupements -NR4R4 ou -NR5R5, les radicaux R4 ou R5 sont identiques ou différents.
Un aspect avantageux de l'invention concerne les composés de formule (I) pour lesquels n et m sont choisis indépendamment parmi les entiers 0 et 1, et ne peuvent simultanément représenter 0.
On pèse 10 mg (0,0108 mmole) de mono-2-0- carboxyméthyle-per-(3,6-anhydro)cyclomaltohexaose fraîchement lyophilisée auxquels on ajoute 8 mg (0,039 mmole) de dicyclohexylcarbodiimide (DCC) recristallisée. On dissout ces deux produits dans 3 mL de DMF anhydre. On laisse sous agitation et sous courant d'azote sec pendant 15 minutes avant d'ajouter 4 mg (5.10-4 mmole soit 0,019.10-3 fonctions-NH2 en moyenne) de PLL. On retire le courant d'azote, on bouche le ballon réactionnel et on laisse la solution sous agitation pendant 48 heures.
Le solvant est évaporé sous vide et le résidu d'évaporation est repris par de l'eau. Le produit est ensuite dialysé contre HCl 10-3 M pendant 48 heures à l'aide d'une membrane d'ester de cellulose (Spectra/Por CE, seuil de coupure 1000) et lyophilisé.
Le produit final est ensuite caractérisé par chromatographie sur couche mince et par RMN.
Sur plaque de silice et en utilisant le mélange de solvants suivant : Butanol/DMF/eau (1/1/1), on met en évidence un produit dont le Rf est de 0,64 et différent de la cyclodextrine non greffée dont la valeur est de 0,44 et de la PLL libre qui ne migre pas.
Sur la figure 3 sont représentés les spectres RMN du proton (200 MHz, 298 K, D20) de la PLL libre (5 mM) (partie A) et du produit final de la réaction (figure B), chacun après dialyse dans les mêmes conditions que précédemment. Le spectre de la partie B représente bien le spectre de la cyclodextrine couplée à la PLL, la 3,6-cyclodextrine libre ayant traversé la membrane. Un test simple permet de confirmer le passage de la 3,6-cyclodextrine libre à l'extérieur de la membrane et le maintien de la PLL à l'intérieur de la membrane. En effet, si l'on dialyse un mélange équimolaire de PLL libre et de mono-2-0carboxyméthyle-per-(3,6-anhydro)cyclomaltohexaose non couplée en ayant soin de prendre un Spectra/Por de seuil de coupure de 1000, le résidu après dialyse ne contient que la PLL libre.
Le produit brut obtenu après lyophilisation et ensuite réticulé en ajoutant deux équivalents de glutaraldéhyde et deux équivalents de NaBH4 dans le DMF pour un équivalent de cyclodextrine couplée à la PLL.
Après évaporation du solvant, le produit obtenu est insoluble dans l'eau ce qui suffit à montrer qu'il y a bien réticulation de la PLL.
Dans cet exemple, il s'agit de montrer les propriétés de complexation des composés préparés dans les exemples 1 et 2 vis-à-vis de cations utilisés en médecine nucléaire.
Pour évaluer la complexation, on utilise des plaques de chromatographie sur couche mince chargée en ions qui permettent une évaluation rapide de la complexation de ces ions par les espèces à évaluer. Dans le cas présent, des plaques de type Polygram Ionex 25-SA-Na (Macherey-Nagel, réf : 80613) chargées en divers contre-ions ont été utilisés. Dans chaque essai, on introduit sur la plaque le composé à tester qui, s'il complexe les ions seront retenus sur la plaque. On développe ensuite les plaques quatre fois dans l'eau, en raison de la faible migration des dérivés de cyclodextrine, puis on détermine le degré de complexation par la valeur 1/Rf, où Rf représente le rapport : (distance parcourue par le dérivé de cyclodextrine/distance parcourue par le solvant).
Des mesures de degré de complexation du plomb (sous forme Pb2+) et de l'erbium sous forme (Er3+) ont été effectuées pour les trois composés suivants : - la cyclodextrine de base mono-2-0carboxyméthyle-per-(3,6-anhydro)cyclomaltohexaose (noté (1) sur la figure 4); - une cyclodextrine conforme à l'invention préparé dans le cadre de l'exemple 1 (noté (2) sur la figure 4) ;
- une cyclodextrine conforme à l'invention préparé dans le cadre de l'exemple 2 (noté (3) sur la figure 4).
La figure 4 montre que les propriétés de complexation du plomb et de l'erbium par les composés préparés dans les exemples 1 et 2, et notamment du composé préparé dans le cadre de l'exemple 2, sont particulièrement intéressantes.
En ce qui concerne l'erbium, la figure 3 montre notamment que les composés préparés dans l'exemple 1 et 2 complexent l'erbium alors que la 3 , 6- peranhydrocyclodextrine non couplée ne complexe pas l'erbium.
Les composés préparés dans le cadre de l'invention peuvent présenter ainsi un intérêt dans la décontamination humaine (en cas de contamination par le plomb) et dans la médecine nucléaire, dans la mesure où l'erbium est un émetteur de rayonnement ss- utilisé en radiothérapie et sont particulièrement intéressants, car ils sont biocompatibles, du fait de la présence dans leur structure de radicaux de nature peptidique ou de biopolymère.
RÉFÉRENCES CITÉES [1] D. Duchêne "Pharmaceutical application of cyclodextrins" dans "Cyclodextrins and their industrial uses". D. Duchêne Ed., Editions de Santé, Paris, 1987, pages 213-257.
La couleur de chaque composition A, B, C et Y est donnée dans le tableau suivant :
Composition L* a* b* C* h( ) A 37,94 18,58 37,34 41,71 63,55 B 43,53 20,58 31,07 37,27 56,49 C 56,82 14,96 19,53 24,61 52,54 Y 38,46 13,83 32,12 34,97 66,70
Pour mesurer la couleur d'une composition, on a procédé à une mesure de couleur dans la masse du produit, comme suit.
On a rempli une coupelle métallique de quelques centimètres de côté avec la composition, l'épaisseur de cette dernière étant de l'ordre d'un centimètre. Puis on a appliqué sur la composition une lame de verre en prenant soin d'éviter les bulles d'air sous la lame. On a effectué une mesure de couleur avec un spectrocolorimètre CM3700d de marque MINOLTA en mode réflexion, spéculaire exclus, UV inclus, et avec une petite ouverture d/8.
On a également effectué une mesure de réflectance spectrale, dans la masse.
La figure 1 représente les spectres de réflectance des compositions A, B, C et Y présentes dans les mêmes coupelles que ci-dessus.
On remarque que pour la région de longueurs d'onde comprise entre 600 et 680 nm, la réflectance est comprise entre 10 et 45 %, plus précisément entre 12 et 40 %, pour les quatre compositions testées.
La réflectance est inférieure à 20 % dans l'intervalle allant de 450 à 500 nm.
La présente invention se rapporte à une composition cosmétique de maquillage ou de soin de la peau, y compris du cuir chevelu, aussi bien du visage que du corps humain, des lèvres ou des phanères des êtres humains, comme les cheveux, les cils, les sourcils ou les ongles, comprenant un milieu cosmétiquement acceptable contenant un ester aliphatique d'ester particulier. Cette composition est exempte de lanoline et elle contient un ou plusieurs esters issus de l'estérification totale ou partielle d'un composé aliphatique hydroxylé avec un acide aromatique. Cette composition possède des propriétés cosmétiques remarquables et confère en particulier au maquillage ou au soin des propriétés de brillance, de glissant à l'application, et de confort et de non collant.
La composition de l'invention peut en particulier constituer un produit de maquillage du corps, des lèvres ou des phanères d'êtres humains ayant en particulier des propriétés de soin et/ou de traitement non thérapeutique. Elle constitue notamment un rouge à lèvres ou un brillant à lèvres, un fard à joues ou à paupières, un produit pour tatouage, un mascara, un eye-liner, un vernis à ongles, un produit de bronzage artificiel de la peau, un produit de coloration ou de soin des cheveux.
Il existe de nombreuses compositions cosmétiques pour lesquelles les propriétés de brillance du film déposé, après application sur les matières kératiniques (peau, lèvres, phanères), sont souhaitables. On peut citer par exemple les rouges à lèvres, les vernis à ongles ou encore certains produits capillaires. Dans cette optique, le formulateur dispose de plusieurs types de matières premières et notamment des lanolines utilisées en association avec des huiles dites brillantes , comme des polymères huileux tels que a) les polybutènes qui ont une viscosité élevée (typiquement supérieure à 2 819 Pa. s à 23 C mesurée avec un viscosimètre Brookfield RV équipé d'une aiguille n 1 tournant à 0,5 tr/min), b) des esters d'acide ou d'alcool gras dont le nombre de carbone est élevé (typiquement supérieur à 16), ou encore c) certaines huiles végétales.
Les esters résultants de l'estérification partielle ou totale d'un composé aliphatique hydroxylé avec un acide aromatique, comme décrit dans la demande de brevet EP 1 097 699, confèrent aux produits cosmétiques de bonnes propriétés d'application, de brillance et de dispersion des pigments. Les formules décrites dans ce document contiennent toutes de la lanoline pour apporter à ces compositions de l'onctuosité et du confort. Les lanolines présentent cependant l'inconvénient d'être sensibles à la chaleur et aux ultraviolets, et ont tendance à s'oxyder dans le temps avec un dégagement d'odeur désagréable, ce qui limite leur utilisation dans les compositions cosmétiques. De plus, lorsque les lanolines sont associées avec des huiles couramment utilisées dans le domaine cosmétique, les compositions obtenues présentent des problèmes de collant, qui sont d'autant plus prononcés que l'huile utilisée possède une viscosité élevée.
L'invention a justement pour objet une composition cosmétique de soin ou de maquillage des matières kératiniques et notamment de la peau et/ou des lèvres et/ou des phanères permettant de remédier aux inconvénients cités ci-dessus.
De façon surprenante, les inventeurs ont trouvé qu'il était possible d'obtenir une composition contenant un ou plusieurs esters issus de l'estérification totale ou partielle d'un composé aliphatique hydroxylé avec un acide aromatique, qui est brillante, confortable et non collante et qui ne contient pas de lanoline.
Cette composition présente en outre une bonne dispersion des pigments et/ou des charges présents dans la composition, elle n'exsude pas lorsqu'elle est sous forme de stick, elle présente de bonnes propriétés d'étalement et de glissant et confère, en outre, au film déposé des propriétés de brillance, de confort, de bonne tenue dans le temps
(non virage de couleur pendant au moins 3 heures, disparition du maquillage de façon homogène), de non collant et de non gras. Elle est, en outre, stable notamment plusieurs mois à température ambiante (25 C pendant plus d'un an), mais aussi à la chaleur (47 C pendant 2 mois) et aux ultraviolets, sans dégradation de l'odeur au cours du temps.
Dans ce qui suit, on désignera par le terme "lignane" aussi bien les lignanes vrais que les composés apparentés mentionnés précédemment.
Certains de ces produits sont déjà décrits comme des inhibiteurs d'enzymes, en particulier de la phosphodiestérase de la PMC, notamment le matairésinol ou bien comme inhibiteurs spécifiques du PAF, notamment la Kadsurénone (2).
La présente invention concerne spécifiquement l'utilisation des composés de formule 1 :
dans laquelle # A représente: - soit un groupe - soit un groupe où Ri représente : - un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) identique(s)oudifférent(s) choisi(s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; - ou un groupe - ou un groupe
R5 étant un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) ou différent(s) choisi (s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; # R2 représente un groupe -CH20H; # R3 représente un groupe ou ou et # R4 représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy, en tant qu'agents inhibiteurs des cathepsines.
Les composés I sont optiquement actifs et peuvent exister sous forme de racémates, d'énantiomères purs ou de mélanges d'énantiomères, qui font tous partie de l'invention.
Ils peuvent être utilisés sous forme de sels pharmaceutiquement acceptables.
Les lignanes selon la présente invention sont en général des produits qui peuvent être obtenus par extraction à partir d'un certain nombre de plantes ou éventuellement par hémisynthèse.
Parmi les composés de formule I, il faut plus particulièrement citer les produits obtenus par extraction à partir de graines de Pangium edule, notamment de coques de graines. Ces composés sont décrits notamment dans les exemples ci-après. Certains sont nouveaux, d'autres sont des composés connus, notamment les Américanines, les Américanols et l'Isoaméricanol.
D'autres composés de type lignane peuvent être utilisés, il s'agit notamment de l'Eusidérine, du Matairésinol et du Secoisolariciresinol.
La présente invention concerne également l'utilisation de fractions riches en lignanes, notamment les fractions alcooliques obtenues à partir de produits contenant les lignanes, par exemple les fractions isolées à partir des coques de graines de Pangium edule utiles comme inhibiteurs des cathepsines.
Les cathepsines sont des protéases qui interviennent dans un certain nombre de mécanismes physiologiques chez l'homme, notamment dans le cancer et la formation des métastases, la maladie d'Alzheimer et les phénomènes inflammatoires.
Ces cathepsines interviennent également dans les nécroses tissulaires qui peuvent survenir soit sous l'action de privation d'oxygène ou sous l'action de toxiques.
Ainsi, les produits selon la présente invention peuvent être utilisés dans le traitement de certaines plaies chroniques ou d'ulcères mais également sous forme purifiée dans les accidents vasculaires cérébraux, les infarctus, de même ils peuvent être utilisés pour la protection du foie contre les effets toxiques de l'alcool et dans le traitement des cancers, notamment dans l'inhibition des métastases.
Ces produits sont également actifs dans les nécroses de tissus tels que la chair de poisson mais également celle des organes lors de leur transport, par exemple dans le cas de transplantation.
Ainsi, la présente invention concerne les compositions suivantes : - composition pharmaceutique pour le traitement des cancers, notamment l'inhibition des métastases et la protection hépatique contre les toxiques contenant à titre de principe actif un lignane, en particulier un lignane de formule 1 ; - composition destinée au traitement des organes humains ou animaux aux fins de transport ou de conservation contenant au moins un lignane, en particulier un lignane de formule 1 ;
Le comptage sous microscope des cellules présentes dans le surnageant et des cellules présentes dans le culot magnétique révèle l'efficacité du tri.
III/ PROCEDE DE MISE EN CONTACT SUIVANT L'ART ANTERIEUR 3.1- Conditions générales Une étape cruciale de la mise en #uvre de ces méthodes de tri est le mode de mise en contact des particules avec les cellules à trier. Il faut mélanger efficacement, de façon à permettre la formation du lien moléculaire entre les particules et les cellules sans toutefois endommager les cellules.
Aujourd'hui plusieurs modes d'agitation douce sont appliqués. Le plus répandu et le plus efficace est l'agitation rotative. Les tubes contenant les particules et les cellules sont clampés, sur un disque tournant, perpendiculairement à l'axe de rotation. Ceci permet d'inverser le liquide dans le tube deux fois par tour.
3. 2- Taux d'association au récepteur CD19 Les lymphocytes B (2.105 cell. /ml), préalablement repérés par un anticorps anti-CD19 biotinylé sont mis en contact avec les particules (10 particules/ cellule) dans un milieu physiologique de maintien des cellules. La suspension de cellules et de particules est mise à incuber sur l'agitateur rotatif à une vitesse de 5 rpm et à température ambiante.
Après une heure l'échantillon est repris pour être analysé en cytométrie en flux. Cette analyse, illustrée par la figure 5, montre que seulement une fraction des cellules mises en contact avec les particules a un signal caractéristique de cellules porteuses de particules. Une incubation supplémentaire de une heure n'augmente pas la fraction de cellules recrutées. Cette fraction représente environ 40 % des cellules totales.
La figure 5 représente un diagramme de cytométrie d'une suspension de cellules marquées par des anti-CD19 biotinylés et de particules couvertes de streptavidine.
Cette suspension a été agitée pendant une heure sur l'agitateur rotatif muni de tubes tel que
présenté plus haut. On voit se distinguer une fraction de cellules associées à des particules représentant environ 40 % de la population totale.
3. 3- Cinétique de l'association L'association des particules aux cellules est suivie en fonction du temps de mise en contact. On constate que le plateau de l'association est obtenu à 30 min comme illustré par la figure 6.
La figure 6 représente la cinétique de fixation des particules greffées par la streptavidine sur les cellules LB biotinylées. Le plateau est obtenu à 30 min. Il correspond à la fixation de particules sur seulement 40 % des cellules.
3. 4- Influence de la vitesse de rotation L'augmentation de la vitesse de rotation de l'agitateur jusqu'à 15 rpm permet d'augmenter la fraction de cellules recrutées jusqu'à 50 % comme illustré sur la figure 7. Néanmoins, au-delà de 15 rpm la viabilité cellulaire est largement entamée. La cinétique réalisée à 20 rpm doit être interrompue rapidement car les cellules sont abîmées (bulles, éclatement...).
La figure 7 représente les cinétiques d'association obtenues à 5 et 15 rpm. Les autres conditions sont identiques à celles employées au point 3.3.
IV/ PROCEDE DE MISE EN CONTACT SELON L'INVENTION 4.1- Géométrie et procédé de mise en contact La méthode de mise en contact des cellules avec les particules illustrée ici permet de recruter plus de 95 % des cellules ciblées en moins de cinq minutes. De plus ce procédé n'affecte aucunement la viabilité des cellules. Il s'agit d'appliquer un cisaillement contrôlé sur la suspension. La géométrie qui permet d'appliquer ce cisaillement est présentée sur la figure 8.
La figure 8 représente la géométrie de cisaillement cône-plan employée dans la mise en #uvre expérimentale de l'invention.
Une goutte (volume Vt=164.8 l) du milieu à agiter est placée sur un plan fixe. Un cône tronqué d'axe perpendiculaire au plan est amené en contact avec cette goutte, la base du cône se trouvant à 50 m du plan environ. L'axe du cône étant relié à un moteur on lui applique un mouvement de rotation pendant un temps donné à une vitesse donnée. Le mouvement peut aussi optionnellement être appliqué au plan alors que le cône est fixe.
4. 2- Taux d'association au récepteur CD19 : effet du cisaillement, cinétique Les résultats obtenus dans la configuration décrite au point 4. 1 sont présentés sur la figure 9.
Parmi les molécules magnétiques commerciales utilisables dans la présente invention on peut citer celles commercialisées sous la marque Dynabead par la Société DYNAL.
Le procédé de l'invention est d'une grande utilité dans le domaine de l'investigation clinique et du diagnostic. Il peut en effet contribuer à l'isolement d'une sous-population de cellules caractéristiques d'une pathologie au sein d'un mélange de cellules saines, ou la présence d'un type cellulaire déplacé dans un tissu donné, exemple : la présence des cellules endothéliales dans le sang, marqueur de thromboses.
Le procédé de l'invention se distingue des procédés de tri cellulaire de l'art antérieur par sa grande rapidité et ses rendements élevés, il est donc particulièrement utile dans la recherche et l'isolement de sous-populations cellulaires présentes en très petites quantités. Il trouve des applications notamment dans le diagnostic ante-natal, l'isolement de cellules dendritiques, le diagnostic du cancer, du SIDA, etc...
PARTIE EXPERIMENTALE Les figures la, lb et lereprésentent respectivement des dispositifs de cisaillement cône-plan, plan-plan et cylindrique, ce dernier étant également dénommé système Couette, susceptibles d'être utilisés dans le procédé de l'invention pour l'application d'un cisaillement contrôlé, notamment rotatif. On peut aussi appliquer un flux contrôlé dans un micro-canal.
La figure 2a représente un système de cisaillement cône-plan dont les cotes sont ajustées de façon à fournir un taux de cisaillement uniforme dans la totalité du milieu. Le dispositif représenté sur la figure 2a comporte un plan P sur lequel peut être déposé un échantillon. Il comporte un cône tronqué dont la base est parallèle au plan P et dont l'axe x est perpendiculaire au plan P. d définit la distance du plan P à la base du cône et # définit l'angle que fait le côté du cône avec le plan P. En tout point du plan P, r définit la distance à l'axe x et e définit la distance au côté du cône. Le dispositif de la figure 2a se caractérise par le fait qu'en tout point du plan le rapport r/e est constant. La force de cisaillement appliquée, qui dépend de la vitesse de rotation #, est la même en tout point du dispositif. Dans le cas où l'échantillon à traiter est d'une taille supérieure à celle d'une goutte, on prévoit de remplacer le plan P par un récipient à fond plat. Généralement # est petit, de préférence c'est un angle de 1 à 5 degrés, généralement 1 à 2 degrés. Dans ce système, le cisaillement est y = co.r/e.
La figure 2b représente un système de cisaillement plan-plan constitué d'un plan fixe et d'un plan mobile, parallèles, séparés par une distance e, le fluide étant placé entre ces deux plans. Lorsque le plan mobile se déplace parallèlement au plan fixe, il imprime au fluide un mouvement de cisaillement. Si l'on définit par v (x,t) vitesse d'un point du fluide situé à une distance x du plan fixe à un instant t, le cisaillement appliqué en ce point est y =dv(x,t)/dx.
La figure 2c représente un système de cisaillement du type micro canal, dans lequel le fluide est contraint de traverser un canal de faible diamètre e, dans sa