INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans le moulage du second boîtier 12, tout d'abord, la résine 20 comprenant l'agent moussant est injectée dans la cavité 54 d'une manière similaire à celle du premier mode de réalisation, comme représenté sur la figure 6A. Ensuite, comme représenté sur la figure 6B, les noyaux mobiles 83 sont déplacés par les actionneurs 85 vers l'intérieur, c'est-à-dire dans un sens où le volume de la cavité 54 est réduit. Dans ce mode de réalisation, la résine 20 est injectée dans la cavité 54 maintenue à la température de moulage de 80 degrés Celsius . Les noyaux mobiles 83 sont déplacés approximativement deux secondes après l'achèvement de l'injection de résine.
Au niveau de la partie où le volume de la cavité 54 est réduit, la formation de noyaux dans la résine 20 est limitée et les mousses croissant dans celle-ci sont comprimées. Par conséquent, le taux d'expansion de la partie comprimée est inférieur à celui des autres parties.
De cette manière, le second boîtier 12, dans lequel la partie fortement moussée 21 et la partie faiblement moussée 22 sont formées d'une seule pièce, peut être produit. Dans ce mode de réalisation, l'étape représentée sur la figure 6A correspond à l'étape d'injection et l'étape représentée sur la figure 6B correspond à l'étape de moussage.
Le diagramme de principe d'un tel algorithme est représenté sur la figure 1. Il comprend une première étape de test de la valeur d'une donnée d'entrée. En fonction du résultat du test, on réalise ensuite un bloc d'instructions Iii ou un bloc d'instructions II1. L'algorithme peut ensuite se terminer, ou bien une nouvelle étape de test est réalisée sur une autre variable d'entrée. Les blocs d'instructions Ilo, rli comprennent chacun un ensemble d'instructions à exécuter.
Le nombre et /ou le type des instructions peuvent être différents d'un bloc d'instructions Ho, Il, à l'autre.
De nombreux algorithmes cryptographiques sont basés sur le diagramme de principe de la figure 1. C'est notamment le cas des algorithmes cryptographiques basés sur des calculs d'exponentiation du type Y = XD, où X, Y sont des nombres entiers le plus souvent de grande taille, et D un nombre prédéterminé.
Les nombres X, Y peuvent correspondre par exemple à un texte chiffré ou à chiffrer, une donnée signée ou à signer, une donnée vérifiée ou à vérifier, etc. Le nombre D peut correspondre à des éléments de clés, privées ou
publiques utilisées pour le chiffrage ou le déchiffrage des nombres X, Y.
A titre d'exemple des algorithmes tels que l'algorithme dit "Square-And-Multiply", l'algorithme dit "Right-To-Left binary algorithm", l'algorithme dit "(M, M3) algorithm" peuvent être utilisés pour réaliser des calculs d'exponentiation.
Un utilisateur malveillant peut éventuellement engager des attaques, visant à découvrir notamment des informations confidentielles (comme par exemple la clé D ou une donnée dérivée de cette clé) contenues et manipulées dans des traitements effectués par le dispositif de calcul exécutant une opération d'exponentiation.
Une attaque simple, dite "timing attack", contre l'algorithme de la figure 1 consiste à mesurer le temps nécessaire au dispositif pour exécuter un bloc d'instructions entre deux étapes de test. Si les temps d'exécution des blocs d'instructions IIo, II1 sont différents, alors il est facile d'identifier un bloc d'instructions 110 ou nl et d'en déduire la valeur de la variable d'entrée associée.
Pour se prémunir contre cette attaque, il est possible d'ajouter des instructions fictives dans le bloc d'instructions Ho ou 111 le plus court (dans le sens où le temps mis pour le réaliser est le plus petit) de sorte à ce que les deux blocs d'instructions Ho, 111 soient de même durée.
Une instruction est dite fictive si son exécution ne modifie pas les données manipulées par l'algorithme.
Par exemple, l'instruction i <- i - 0 est une instruction fictive.
Si cette solution est efficace contre les "timing attacks", elle n'est pas efficace contre d'autres types
d'attaques à canal caché et elle peut également pénaliser les temps d'exécution de l'algorithme.
Les attaques à canaux cachés les plus connues sont dites simples ou différentielles. On entend par attaque à canal caché une attaque basée sur une grandeur physique mesurable de l'extérieur du dispositif, et dont l'analyse directe (attaque simple) ou l'analyse selon une méthode statistique (attaque différentielle) permet de découvrir des informations contenues et manipulées dans des traitements réalisés dans le dispositif. Par exemple, dans une "timing attack", le canal caché (la grandeur physique mesurable depuis l'extérieur) est le temps.
Les attaques à canal caché peuvent permettre de découvrir des informations confidentielles. Ces attaques ont notamment été dévoilées par Paul Kocher (Advances in Cryptology - CRYPTO'99, vol. 1666 of Lecture Notes in Computer Science, pp.388-397. Springer-Verlag, 1999).
Parmi les grandeurs physiques qui peuvent être exploitées à ces fins, on peut citer le temps d'exécution, la consommation en courant, le champ électromagnétique rayonné par la partie du composant utilisée pour exécuter le calcul, etc. Ces attaques sont basées sur le fait que, au cours de l'exécution d'un algorithme, la manipulation d'un bit, c'est à dire son traitement par une instruction particulière, laisse une empreinte particulière sur la grandeur physique considérée, selon la valeur de ce bit et/ ou selon l'instruction.
PARTIE EXPERIMENTALE 1- Conditions de mise en #uvre des réactions PCR : 1-1- Mélange réactionnel : Dans un volume final compris entre environ 5 et 15 l, et de préférence égal à environ 10 l, les réactifs classiques des réactions PCR ont été ajoutés. Selon les conditions de mise en oeuvre, il s'est parfois avéré utile de rajouter du Tween20, notamment afin d'éliminer les inhibiteurs résiduels de la Taq DNA polymérase éventuellement présents dans le mélange réactionnel.
Le Tableau Il ci-dessous indique les concentrations finales des différents constituants du mix réactionnel, lequel correspond, dans le cadre de la présente invention, au mélange réactionnel avant addition de l'échantillon d'acides nucléiques.
~~~~~~~~~~~~~~~~~TABLEAU t) ~~~~~~~~~~~~~~~~~
Constituant Concentration finale Amorces et sondes associées entre 0,1 et 0,5 mole/L de chaque, de préférence 0,25 ole/L de chaque Tampon de PCR 10X 1X MgCl2 entre environ 2 et 5 mmole/L, de préférence environ 4 mmole/L Mélange dNTP au moins 200 ole/L de chaque Tween20 entre 0 et 0,01 % BSA (Serum Albumine Bovine) entre environ 0 et 0,5 % m/v Taq DNA polymérase entre environ 0,5 et 0,75 unités
Selon un mode particulier de mise en #uvre de l'invention, les réactions PCR ont été effectuées dans les conditions suivantes.
Le tampon de PCR 10X, par exemple le Qiagen PCR Buffer 10X (Qiagen, Courtaboeuf, France), avait pour composition la formule suivante : Tris-HCI, KCI, (NH4)2S04 et MgCl2, et un pH égal à 8,7 (mesuré à 20 C).
Le mélange dNTP était constitué de 10 mM de dATP, dCTP, dGTP et dTTP (Sigma-Aldrich, Lyon, France).
Le mélange réactionnel pour une réaction d'amplification avait la composition suivante : 5 l de mix réactionnel, soit : 1 l de Qiagen PCR Buffer 10X 1 l de MgCl2 à 25 mM 0,1 pl de BSA1 % 0,2 l de mélange dNTP 0, 75 unités de Taq DNA polymérase (Qiagen, supra) eau ultra pure qsp. 5 l et 5 l d'échantillon d'acides nucléiques, soit un volume final de 10 l.
I-2- Echantillons d'acides nucléiques : 1-2-1- Extraction d'ADN génomique à partir d'une culture pure : Aux fins de la lyse chimique des cellules bactériennes, 500 l d'une culture bactérienne pure ont été mélangés à 500 l d'une solution de TENS 2X - Chelex-100 15 % (Tris-HCI 100 mM pH 8,0 ; EDTA 40 mM pH 8,0 ; NaCI 200 mM ; SDS 2 % et Chelex-100 15 %) ou à 500 l d'une solution de Chelex-100 à 25 % dans l'eau.
Ce mélange a été incubé entre 60 et 100 C, pendant 10 à 20 minutes.
Le cas échéant, ce mélange a subi un deuxième traitement de lyse cellulaire, par voie mécanique.
Ce traitement mécanique, consistant en l'ultrasonication des cellules bactériennes et/ou des résidus issus de la lyse chimique, a été appliqué au mélange subséquemment à la lyse chimique, dans les mêmes conditions de tampon et température que celle-ci.
Dans certains cas, la lyse par traitement mécanique pouvait être appliquée alternativement à la lyse chimique.
De manière facultative, le lysat a été purifié et concentré à l'aide du système Nucleospin Plant L (Macherey Nagel, Düren, Allemagne).
En ce cas, les acides nucléiques ont été mélangés volume à volume avec un tampon de liaison ( C4 ) et de l'éthanol absolu. Ce mélange a été vigoureusement agité pendant 30 secondes, puis déposé sur une colonne de silice.
La colonne a été lavée successivement avec 1 et 2 ml des tampons CQW et C5 , respectivement, avant d'être séchée pendant 10 minutes par centrifugation à 5500 x g, à température ambiante.
-2- 2838668
La presente invention a pour but de remedier a ces differents
inconvenients et propose une nouvelie lame de scie.
Ainsi selon ['invention, I'outil de coupe comporte au moins un point d'alignement entre la zone de coupe et l'axe defini par les points de fixation. Selon une caracteristique complementaire de ['invention, lame de scie peut avoir differentes formes de zone de coupe Selon une autre caracteristique de ['invention, la lame de scie comporte une
denture progressive.
Selon une autre caracteristique de ['invention, la denture progressive est
couplee avec le point d'alignement de la zone de coupe.
Selon une autre caracteristique de ['invention, la lame de scie comporte un
bossage permettant d'optimiser le guidage lors de la coupe.
Les dessins annexes illustrent ['invention:
La figure 1 represente une vue de cote d'une premiere variante de ['invention.
La figure 2 represente une vue de cote d'une deuxieme variante de ['invention
La figure 3 represente une vue de cote d'une troisieme variante de ['invention.
D'autres caracteristiques et avantages de ['invention se degageront de la
description suivante. Les dessins annexes, qui ne vent donnes qu'a titre
TABLEAU Il Constituant Concentration finale Amorces et sondes associées entre 0,1 et 0,5 pmole/L de chaque, de préférence 0,25 mole/L de chaque Tampon de PCR 10X 1X MgCI2 entre environ 2 et 5 mmole/L, de préférence environ 4 mmole/L Mélange dNTP au moins 200 mole/L de chaque Tween20 entre 0 et 0,01 % Taq DNA polymérase entre environ 0,5 et 0,75 unités Selon un mode particulier de mise en #uvre de l'invention, les réactions PCR ont été effectuées dans les conditions suivantes.
Le tampon de PCR 10X, par exemple le Qiagen PCR Buffer 10X (Qiagen, Courtaboeuf, France), avait pour composition la formule suivante : Tris-HCI, KCI, (NH4)2SO4 et MgCl2, et un pH égal à 8,7 (mesuré à 20 C).
Le mélange réactionnel pour une réaction d'amplification avait la composition suivante : 5 l de mix réactionnel, soit : 1 l de Qiagen PCR Buffer 10X 1 l de MgCl2 à 25 mM 0,2 l de mélange dNTP 0,75 unités de Taq DNA polymérase (Qiagen, supra) eau ultra pure qsp. 5 l et 5 l d'échantillon d'acides nucléiques, soit un volume final de 10 l.
I-2- Echantillons d'acides nucléiques : 1-2-1- Extraction d'ADN génomique à partir d'une culture pure ; Aux fins de la lyse chimique des cellules bactériennes, 500 l d'une culture bactérienne pure ont été mélangés à 500 l d'une solution de TENS 2X - Chelex-100 15 % (Tris-HCI 100 mM pH 8,0 ; EDTA 40 mM pH 8,0 ; NaCI 200 mM ; 2 % et Chelex-100 15 %) ou à 500 l d'une solution de Chelex-100 à 25 % dans l'eau.
Alternativement, si le lysat n'était pas purifié, 200 L étaient prélevés et stockés dans la glace en vue de l'analyse par PCR.
alkyle linéaire de préférence un groupe alkyle linéaire de type (CH2)r, r variant de 1 à 20, et de préférence de 3 à 6, X2- étant tel que défini ci-dessus, et étant notamment BF4-, PF6-, NTf2-, CF3S03 , Cl-, Br , ou T, le liquide ionique A1+X1- étant notamment de la forme : (Ra)3N- , Xr (Ra)3P-Rb , Xi
Ra et Rb étant tels que définis ci-dessus, et représentant de préférence des groupes alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, X1- étant choisi parmi: BF4-, PF6-, NTf2-, Cl-, Br , CH3COO-, CF3C02 , CF3SO3 , BR4-, R étant tel que défini ci-dessus, les fonctions Fo, F1, F' 1, F2 et F'2 étant telles que définies ci-dessous : - Fo correspond à un groupe -#1H, dans lequel #1 représente un atome d'oxygène ou un groupe -NRf, Rf correspondant à un groupe alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, - F1 répond à la formule suivante : O #1# #1 étant tel que défini ci-dessus, - F2 répond à la formule suivante : )Ci l-, T1 )Ci étant tel que défini ci-dessus, 1 1 # T2 Ts / T3 T3 T
G répondant à la formule suivante : dans laquelle #2 représente soit un groupe-ORg, Rg représentant un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, soit un groupe -NRhRu, Rh et Ru représentant indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, X3 représentant un groupement partant, notamment choisi parmi les halogénures I, Cl et Br, les groupes mésylate, tosylate, triflate, sulfonate, sulfate ou phosphate, Ti, T2, T3, T4 et T5 représentant indépendamment les uns des autres un atome d'hydrogène, un groupe alkyle, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 20 atomes de carbone ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, ou un groupe fonctionnel notamment choisi parmi NO2, CN, COOR, OR, COR, NHCOR, NRR", SO2R, I, Br, R et R" représentant indépendamment l'un de l'autre un groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone,
- F'1 répond à la formule suivante : 0 x 1 I Xi et X3 étant tels que définis ci-dessus, i x3 - F'2 répond à la formule suivante : 0 xi 1 "::: Xi étant tel que défini ci-dessus, G' répondant à la formule suivante : 1 ";:> X2 étant tel que défini ci-dessus.
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus, pour la mise en oeuvre de la réaction de Baylis-Hilman, selon le schéma réactionnel suivant : estérification + ou amidation + Y-L-Fo , X ##### Y-L-Fj , - liquide ionique A1+X1- e liquide ionique I Al+Xl~ .0 M Réa ArCHO clivage par transestérification + ou transamidation + Y-L-FO Y2- + G 9( - Y-L-F2 , X2- liquide ionique A1+X1- Y± représentant un cation onium tel que défini ci-dessus, et étant de préférence un cation triméthylalkylammonium, triéthylalkylammonium ou tributylalkylphosphonium, L représentant un bras, notamment un groupe alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, ou un groupe aralkyle éventuellement fonctionnel, comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, et étant de préférence un groupe alkyle linéaire de préférence un groupe alkyle linéaire de type (CH2)r, r variant de 1 à 20, et de préférence de 3 à 6, X2- étant tel que défini ci-dessus, et étant notamment BF4-, PF6-, NTf2-, CF3S03 , Cl", Br , In, CH3COz ou CF3C02', le liquide ionique A1+X1- étant notamment de la forme : (Ra)3N-Rb , X1- (Ra)3P-Rb , X1-
Ra et Rb étant tels que définis ci-dessus, et représentant de préférence des groupes alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, XI- étant choisi parmi: BF4-, PF6-, NTf2-, Cl-, Br , CH3COO-, CF3COzy, CF3SO3-, BR4-, R étant tel que défini ci-dessus, les fonctions Fo, F1 et F2 étant telles que définies ci-dessous : - Fo représente un groupe-OH, - F1 répond à la formule suivante : - F2 répond à la formule suivante : G répondant à la formule suivante : O OH xi représentant un groupe -OH, ou un groupe \\ -ORg, Rg représentant un groupe alkyle, linéaire ou f) ramifié, comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, H Ar représentant un groupe aromatique ou hétéroaromatique, substitué ou non, ArCHO étant notamment choisi parmi :
La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus, pour la mise en #uvre du couplage de Suzuki, selon l'un des schémas réactionnels suivants : a) estérification + - ouamidation + T # Y-L-FO , X2 ####### Y-L-F, , X, liquide ionique A1+X1- liquide ionique réaction de Suzuki A1+X1- avec R3B(OR7)2 clivage par transestérification + - ou transamidation + Y-L-FO Y.2 + G 1( Y-L-F2 ' liquide ionique A1+X1- R3 étant choisi parmi les groupes aryle, hétéroaryle, éthényle, diényle, allyle, éthynyle, substitués ou non, comprenant de 2 à 30 atomes de carbone, R7 représentent un groupe alkyle, ramifié ou linéaire ou un groupe cycloalkyle comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, Y± représentant un cation onium tel que défini ci-dessus, et étant de préférence un cation triméthylalkylammonium, triéthylalkylammonium ou tributylalkylphosphonium, L représentant un bras, notamment un groupe alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, ou un groupe aralkyle éventuellement fonctionnel comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, et étant de préférence un groupe alkyle linéaire de préférence un groupe alkyle linéaire de type (CH2)r, r variant de 2 à 20, et de préférence de 3 à 6, X2- étant tel que défini ci-dessus, et étant notamment NTf2-, BF4-, PF6-, Cl-, Br , CH3COO-, CF3C02 , CF3S03 , BR4-, R étant tel que défini ci-dessus, le liquide ionique A1+X1- étant notamment de la forme : (Ra)3N-Rb, X1- (Ra)3P-Rb , X1-
Ra et Rb étant tels que définis ci-dessus, et représentant de préférence des groupes alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, X1- étant choisi parmi: BF4-, PF6-, NTf2-, CI-, Br , CH3COO-, CF3C02 , CF3S03 , BR4-, R étant tel que défini ci-dessus, les fonctions Fo, F1 et F2 étant telles que définies ci-dessous : - Fo est de la forme -#1H, #1 représentant un atome d'oxygène ou un groupe -NRf, Rf correspondant à un groupe alkyle, linéaire ou ~ramifié, comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, - F1 est de la forme -Re-#, Re représentant un groupe aromatique ou hétéroaromatique comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, x représentant un groupe partant choisi de préférence parmi Cl, Br, I, OTf, O-CO2R5 ou OS03-R5, R5 représentant un groupe alkyle comprenant de 1 à 10 atomes de carbone ou un groupe aralkyle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, F1 répondant de préférence à la formule suivante : Br - F2 est de la forme -Re-R2, Re étant tel que défini ci-dessus et R2 étant choisi parmi les groupes aryle, hétéroaryle, éthényle, diényle, allyle, éthynyle, substitués ou non, comprenant de 2 à 30 atomes de carbone, F2 répondant de préférence à la formule suivante : s11Îvante:
Ari représentant un groupe aromatique choisi de préférence parmi : la molécule G étant de la forme R2-R3, R2 et R3 étant tels que définis ci-dessus, et répond notamment à la formule suivante : dans laquelle #2 représente soit un groupe -OR., Rg représentant un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, soit un groupe -NRhRu, Rh et Ru représentant indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, Ar1 est tel que défini ci-dessus, estérification b) Y-L-Fo , + X, ou amidation , Y-L-Fl , + XZ liquide ionique A1+X1- liquide ionique réaction de Suzuki A1+X1- avec R2# clivage par transestérification ~ ou transamidation + Y-L-Fo , X2 + G # Y-L-F2, X2 liquide ionique A1+X1-
Y±, L, X2 , A1+X1- et R2 étant tels que définis ci-dessus, les fonctions Fo, Fi et F2 étant telles que définies ci-dessous : - Fo est de la forme -#1H, #1 étant tel que défini ci-dessus, - FI est de la forme -Rq-B(OR7)2, R7 étant tel que défini ci-dessus, et Rq correspondant à un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, hétéroaryle comprenant de 4 à 20 atomes de carbone, éthényle comprenant de 2 à 20 atomes de carbone, diényle comprenant de 3 à 20 atomes de carbone, allyle comprenant de 3 à 20 atomes de carbone, éthynyle comprenant de 2 à 20 atomes de carbone, substitués ou non, F1 répondant de préférence à la formule suivante :
Ar2 correspondant à un groupe aryle substitué ou non comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, F2 est de la forme -Rq-Re, Rq et Re étant tels que définis ci-dessus, F2 répondant de préférence à la formule suivante : O -O3Ar2-Ar1 Ar1 représentant un groupe aromatique choisi de préférence parmi :
la molécule G étant de la forme R2-R3, R2 et R3 étant tels que définis ci-dessus, et répondant notamment à la formule suivante : O #2#Ar2-Ar1 dans laquelle #2, Ar1 et Ar2 sont tels que définis ci-dessus, c) estérification #O Y-L-N(CH,CH,OH), , ou amidation + \ + \ - -N(CH,Cl2()H)2 amidation Y-L-N-B- + bzz"'2 '2 liquide ionique Y-L-N#B-R3, X2 A1+X1- #O liquide ionique réaction de avec clivage par lIqUIde lOmque Sjizuki transestérification I i- R2 x ou transamidation +~ L N(CH2CHzOFi)2 , XZ + R2-R3 Xyz-, L, X2 ; AiXi", R2 et R3 étant tels que définis ci-dessus, R3 étant de préférence un groupe phényle, d) liquide ionique 2 X R 3R 7R 6B 2 [X2 réaction de Suzuki avec R2# A'BR,R,X,X R2-R3
A2+ étant un cation ammonium (Ra)31V tCb ou phosphonium (Ra)3P+Rb, de préférence tétrabutylammonium et tétraméthylammonium, Ra et Rb étant tels que définis ci-dessus, X2- étant notamment choisi parmi OH-, F-, CN-, RsO-, RSS-, de préférence OBT ou F-, Rs représentant un groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, R3 et R4 étant tels que définis ci-dessus, R6 et R7 représentant indépendamment l'un de l'autre un groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone ou un groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, la molécule borée de formule R3R7R6B étant un trialkyle ou aryle borane, le groupe alkyle comprenant de 1 à 20 atomes de carbone et le groupe aryle comprenant de 6 à 30 atomes de carbone, un acide ou ester borinique, de préférence un acide ou ester boronique choisi comme étant l'acide phényl boronique, R2 et # sont tels que définis précédemment, R2# correspondant de préférence à un halogénure d'aryle choisi parmi :
La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie cidessus, pour la synthèse de banques de molécules selon 'la technique de synthèse parallèle, selon le schéma suivant : B 1 Y-L-F2 , X2 clivage > G, liquide ionique B2 Y-L-F + 2 clivage liquide + ionique Y-L-P2, X2- Y-L-FO , + X2- Ai Xi~ Y-L-PI, + X2- B3 Y+ L P3 X clivage . Gs Bn + n clivage Gn
caractérisée en ce que le sel fonctionnalisé Y±L-F1, X2- dans le liquide ionique A1+, X1- est séparé en n parties sensiblement égales, n variant de 2 à 1024, et en ce que chacune de ces parties est ensuite transformée selon une réaction de synthèse organique, de préférence une réaction de couplage de Heck ou de Suzuki, à l'aide chacune d'un réactif différent B; pour donner n solutions contenant chacune un composé défini Y±L-F2\ X2-, ?2' représentant une fonction choisie parmi les fonctions telles que définies ci-dessus, i variant de 1 à n, chaque solution étant traitée pour libérer les molécules Gi, i variant de 1 à n, qui sont chacune isolées et purifiées, constituant une banque de molécules.
La technique de synthèse parallèle consiste à préparer en parallèle et simultanément des banques de produits uniques parfaitement identifiés à raison d'un produit par réacteur ou par puits, après une séquence de réactions effectuées avec des réactifs propres à chaque produit préparé.
Ensuite, la souche probiotique B. subtilis CU1 a été transformée par le plasmide pPLUreB. Le taux de transformation de cette souche par la méthode employée est plus bas que pour la souche B. subtilis 168, seulement 0,14x102 transformants par g d'ADN ont été obtenus. Des expériences préliminaires ont été effectuées par la méthode d'électroporation mais une augmentation significative du taux de transformation pour cette souche n'a pas été obtenue.
Tous les clones analysés après la transformation de B. subtilis CU1 avec le plasmide pPLUreB possèdent le gène ureB (vérification par amplification du gène par PCR). Une extraction du plasmide suivie d'une
carte de restriction ont été aussi effectuées pour plusieurs clones. Un de ces clones a été sélectionné et la souche obtenue a été dénommée B. subtilis CUrel.