INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La préparation selon l'invention est destinée à être pulvérisée sur la zone génitale de 1 à 4 fois par jour, selon l'intensité des irritations ou des inflammations. Celles-ci peuvent être engendrées en fonction de l'agent causal qui peut être bactérien ou fongique, ou déterminé par des problèmes de pH qu'il convient d'éliminer par un médicament approprié.
Exemple I: Emulsion à pulvériser Vegetol Lys GR 464 Hydro (concentré) i0 (extrait de Lilium candidum dans le butanol) 5,0 g Montanov L 2,0 g Pemulen TR I 0,15 g Cetiol SB 45 0,5 g Myritol 318 7,5 g Sepicide HB 0,52 g Silicone Q7-9120 fluid 2,0 g Sepicalm S 3,0 g Fragrance Lys 0,15 % Na OH qsp pH 5 à 6 Glycocolle 1,5 g Eau purifiée qsp 100 0/0 Exemple II: Gel fluide à base d'extrait de Lys Vegetol Lys GR 464 Hydro 3,5 g Montanov L 1,4 g Pemulen TRI 0,4 g Myritol 318 5,0 g Huile de silicone S 3,0 g Sepicalm S 5,0 g Fragrance Lys 0,25 g Citrate de sodium 0,4g Urée 1,0 g Glycocolle 2,0g Hydroxyde de sodium qsp pH 6 Carbomère 943 0,3 g Eau purifiée qsp 100 g Exemple III: Emulsion fluide Vegetol Lys GR 464 Hydro 7,0 g Pemulen TR I 0,3 g Montanov L 2,5 g Myritol 318 12,2 g Cetiol SB 45 4,0 g Sepicide HB Silicone Sepicalm S Huile d'amandes douces Acétate de sodium qsp pH Glycocolle Alcoolat de lavande Eau purifiée qsp 0,5 g 2,5 g 3,0 g 4,0 g 5-6 1,75 g 0,5 g 100 g On obtient un lait très fluide facile à étaler par spray.
L'invention a pour objet l'utilisation d'au moins un triène d'acide gras
conjugué et éventuellement oxygéné d'origine synthétique et/ou naturelle pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement des maladies inflammatoires et/ou des désordres métaboliques consécutifs à une inflammation.
L'acide gras triénoïque le plus commun que l'on retrouve dans les plantes est l'acide a-linolénique. Plusieurs isomères conjugués de l'acide alinolénique peuvent se trouver dans certaines formules de plantes et deviennent parfois des constituants majoritaires de ces huiles végétales. On peut notamment citer les acides catalpiques de catalpa ovata, l'acide punicique de punica granatum, l'acide jacarique de jacaranda ninosisonia et l'acide calendique de calendula officinalis, le pomégranate (Punica granatum L.), le catalpa (Catalpa ovata G.), le balsam, ...
Des triènes d'acides gras conjugués, tels que l'acide a-linolénique ou l'acide calendique, ont déjà été utilisés dans des compositions pharmaceutiques destinées à traiter et/ou prévenir le cholestérol.
Le processus inflammatoire est l'ensemble des phénomènes réactionnels déclenchés, dans un organisme vivant pluricellulaire, par l'agression d'un agent pathogène quel qu'il soit. C'est un phénomène omni-tissulaire se déroulant de façon préférentielle dans le tissu conjonctif qui normalement tend à limiter et à réparer les effets de l'agression. Il prend fin avec la réparation ou la cicatrisation de la lésion.
L'inflammation peut être causée par des agressions physiques (comme le chaud, le froid, les radiations ionisantes), chimiques (occasionnées par des composés acides ou basiques, des toxines bactériennes). Elle peut être la conséquence d'une infection en rapport avec la présence dans l'organisme d'organismes vivants pathogènes tels que bactéries, virus, parasites ou champignons. Elle peut être provoquée par une réaction immunitaire secondaire à la réintroduction dans l'organisme d'un antigène. Elle peut enfin être la conséquence d'une nécrose tissulaire, elle-même secondaire à de nombreuses causes, par exemple une occlusion artérielle.
2874348 6 La figure 3 montre une scie circulaire pour scier des morceaux de bois, laquelle scie circulaire a des guides pour lame 21 qui sont fixés à des bras de fixation 22, et le bras de fixation 22 des guides pour lame 21 est fixé concentriquement avec un arbre d'entraînement 23 de la lame de scie de façon pivotante afin que le bras de fixation puisse tourner autour de l'arbre d'entraînement, et les guides pour lame sont fixés au bras de fixation 22 de façon pivotante avec un palier de fixation 24 afin de pouvoir tourner autour du palier de fixation 24. Selon la figure, lors du sciage, les guides pour lame sont dans une position verticale, suffisamment proche du morceau à scier supportant les lames de scie.
Les guides pour lame 21 peuvent être déplacés dans la direction axiale par rapport à une pièce de fixation 25.
Sur [a figure 4, le bras de fixation 22 du guide pour lame a été tourné en étant commandé par un actionneur 20, moyennant quoi les guides pour lame 21 peuvent se rapprocher du morceau à scier, donnant le meilleur support possible pour les lames de scie.
L'homme du métier sait bien que l'invention ne se limite pas aux modes de réalisation décrits ci-dessus, mais qu'elle peut varier sans pour autant sortir du cadre de l'invention.
I. PROTOCOLE DE REALISATION DE L'EXTRAIT L'extrait testé dans les études ci-après, a été réalisé selon le protocole suivant : - 1000g de fruit sont lavés, épépinés puis lyophilisés. La partie coriace est éliminée. - La matière végétale est broyée de manière à offrir le meilleur rendement d'extraction. Le diamètre des grains de la poudre varie selon la teneur en principes actif et la maturité des fruits. - La poudre ainsi formée est lavée à l'eau, additionnée éventuellement d'antiseptique, afin d'éliminer une grande partie des sucres. L'eau de lavage est extraite par le moyen le plus approprié. - La matière végétale sous forme de poudre pauvre en sucres obtenue est d'environ 5 à 50g. - Elle est mise à macérer dans 500g d'éthanol. - Le solvant est filtré. - La phase éthanolique est concentrée par évaporation sous vide. Cinq cycles de rinçage-extraction effectués sur cette matière végétale sont suffisants pour épuiser les principes actifs de la plante et effectuer l'ensemble des tests ci-après décrits. Des appareils comme le Kumagawa, ou le Soxhlet peuvent convenir pour autant qu'on opère à des températures inférieures à 80[deg]C et sur des quantités assez réduites. Les techniques modernes d'extraction de l'eau avec capture sur des pièges peuvent être envisagées.
II. ETUDE HISTOLOGIQUE COMPAREE DE L'EXPRESSION DES AQUAPORINESAQP-3 SUR DES COUPES DE PEAU JEUNE ET DE PEAU AGEE. Principe : Les immunomarquages sont effectués à l'aide d'un anticorps spécifique dirigé contre l'Aquaporine humaine type 3 (anticorps poly clonal de chèvre ; Tebu). Méthode : Des explants de peau issus d'un individu jeune âgé de 3 ans et des explants de peau âgée extraite d'un individu âgé de 53ans, conservés à -70[deg]C, sont coupés à l'aide d'un cryostat à une épaisseur de 5 Microm, à une température de -20[deg]C. Les coupes ainsi réalisées sont immédiatement fixées sur lames pendant 5 minutes à l'aide d'une solution d'acétone préalablement refroidie à -20[deg]C. Après rinçage dans un bain de tampon PBS, les lames sont prêtes pour les réactions d'immunofluorescence indirecte. La solution d'anticorps est appliquée sur les coupes de peau pendant 30 min, à température ambiante. Après rinçage dans un bain de tampon PBS, les lames sont essuyées, puis les coupes sont incubées dans une autre solution d'anticorps anti-IgG de chèvre conjugué à la fluorescéine pendant 30 min, à température ambiante, et à l'abri de la lumière. Après rinçage avec le tampon PBS, puis montage des lames, un appareil de prise de vue numérique réalise automatiquement des clichés après 2 secondes d'exposition au rayonnement U.V de la lampe. Résultats et conclusion : L'immunomarquage de AQP révèle des différences importantes au niveau de l'intensité de fluorescence entre la peau jeune et la peau âgée. Pour les explants provenant du sujet jeune, la fluorescence est très intense et délimite fortement les kératinocytes. Les cellules germinatives assises sur la jonction dermoépidermique sont les plus marquées. Les cornéocytes restituent très peu de fluorescence. Les cellules ont des contours parfaitement délimités. La qualité, la répartition et l'intensité de fluorescence reflètent une expression importante d'aquaporines caractérisant une peau jeune. Celles-ci sont donc très concentrées et très nombreuses dans les membranes des explants du sujet jeune. La peau provenant du sujet jeune, présente de nombreuses couches cellulaires. Les explants provenant du sujet âgé montre une fluorescence moins intense et plus diffuse, de plus, la fluorescence des cellules germinatives n'affecte pas l'ensemble du contour cellulaire. Les contours des cellules se distinguent mal et le marquage présente un aspect en fer à cheval ouvert vers le derme. Cette image de la fluorescence montre qu'il n'existe que peu d'aquaporines ou qu'elles sont mal exprimées. Les épitopes étant occupés par d'autres ligands empêchant la fixation de l'anticorps. Tout ceci caractérise la peau âgée. Dans les membranes des cellules des explants du sujet âgé, les aquaporines sont donc peu nombreuses voire absentes ou fixent mal les anticorps dirigés contre elles. Pour la peau provenant du sujet âgé, on observe un épiderme atrophié.
III. EFFET DE L'EXTRAIT DE GRENADE : CYTOCOMPATIBILITE Principe : Le test XTT est basé sur la transformation du sel de tétrazolium XTT [2,3-bis(2-méthoxy4nitro-5-sulfophenyl)-H-tetrazolium-5-carboxanilide sel interne] par les déshydrogénases mitochondriales des cellules vivantes en un sel de formazan jaune-orange hydrosoluble. Cette solution ainsi formée est mesurée à l'aide d'un spectrophotomètre lecteur de microplaques (Metertech) à une longueur d'onde de 450 nm. La densité optique révélée est directement proportionnelle au nombre de cellules vivantes (lorsqu'il y a une cytotoxicité plus ou moins importante) et à l'activité mitochondriale (lorsqu'il n'y a pas de cytotoxicité). Matériels : - Fibroblastes de peau humaine : FPH (préparés au laboratoire). - Extrait éthanolique de grenade - Lignée kératinocytaire humaine : HaCaT. - Milieu de culture : Milieu DMEM supplémenté avec 10% de sérum de veau f tal et des antibiotiques (pénicilline et streptomycine). - Boites de culture : Flasquettes de 25 cm et micro plaques 96 puits (Falcon). - Lecteur de micro plaques (Metertech) - XTT : solution à 1 mg/ml de tampon PBS contenant 1% de tampon PMS. - Tampon PBS stérile sans calcium ni magnésium. - Trypsine-EDTA (Life Technologies). - Compteur de cellules : Coulter-Counter ZM (Beckman/Coulter) Protocole : Les cellules en culture confluente sont trypsinées à l'aide de la solution trypsine-EDTA puis comptées au Coulter-Counter. Elles sont ensuite ensemencées à une densité de 40.000 cellules/puits dans 200Microl de milieu de culture. Après une nuit d'incubation à 37[deg]C dans une étuve à C02, les surnageants de culture sont éliminés, puis remplacés avec du milieu de culture neuf (200Microl/puits) contenant différentes concentrations d'extraits. Après 48 heures d'incubation, les surnageants sont éliminés et une quantité de 100 Microl de la solution XTT est rajoutée dans chaque puits pendant 2 heures à 37[deg]C. Les microplaques sont alors placées dans le Metertech pour la lecture des densités optiques à 450nm. Résultats : Conclusion : Les résultats montrent que, jusqu'à la concentration de lOOug/ml de milieu de culture, l'extrait alcoolique de grenade ne présente aucune toxicité sur les 2 types cellulaires humains d'origine cutanée qui sont les kératinocytes (HaCat) et les fibroblastes (FPH). Aux concentrations testées, l'extrait de grenade est donc parfaitement biocompatible et cytocompatible.
IV. EFFET DE L'AGE SUR L'EXPRESSION DES AQUAPORINES ET EFFET DE
L'EXTRAIT DE GRENADE Principe : L'intensité du signal fluorescent et l'épaisseur de la peau de sujets âgés de 33 à 59 ans ont été mesurées avant et après traitement avec de l'extrait de grenade. Résultats : Conclusion : Avec l'âge, l'expression des aquaporines diminue comme l'épaisseur de l'épiderme. L'extrait de grenade selon l'invention rétablit la fluorescence des canaux à eau lorsque celle ci est diminuée par l'âge.
V. EFFET DE LA CONCENTRATION DE L'EXTRAIT DE GRENADE SURL'EXPRESSION DES CANAUX A EAU AQP-3 PAR LES KERATINOCYTES HUMAINS. - Principe : Les canaux à eau sont objectivés à l'aide de la technique d'immunofluorescence indirecte en utilisant un anticorps spécifique anti-aquaporine type 3 (TEBU réf. Sc-9885 qui est un anticorps polyclonal de chèvre). Matériels et méthodes : Les cellules utilisées dans ce test in vitro sont des kératinocytes humains HaCat. Elles sont ensemencées dans des puits sur lame (lame à 16 puits) à une densité de 40 000 cellules dans 200Microl de milieu de culture/puits. Après une nuit d'incubation à 37[deg]C dans un incubateur à CO2, les cultures sont rincées avec du PBS stérile, puis du milieu de culture neuf contenant de l'extrait de Grenade est rajouté dans chaque puits, sauf dans le puits témoin où le milieu de culture est ajouté seul, sans aucun extrait. Quatre échantillons sont ainsi réalisés : - trois échantillons de kératinocytes traités chacun avec des concentrations croissantes d'un extrait de grenade (5ug/ml, 10Microg/ml, 15ug/ml) - un échantillon de contrôle qui constitue le témoin négatif. Après 72 heures d'incubation à 37[deg]C dans un incubateur à C02, les surnageants sont éliminés, les cultures sont rincées avec du tampon PBS stérile et les cellules sont ensuite fixées à l'aide de méthanol (200ul/puits) à -20[deg]C pendant 5 minutes. Les cellules sont alors rincées avec du PBS stérile puis placées dans le réfrigérateur à + 4[deg]C. Une quantité de 150 (il de l'anticorps en solution sont rajoutés dans chaque puits. Après 30 minutes d'incubation à température ambiante, les puits sont rincés 3 fois avec du PBS. Une quantité de 150Microl de la solution d'anticorps anti-IgG de chèvre conjugués à la fluorescéine est rajoutée dans chaque puits. Après 30 minutes d'incubation à température ambiante et à l'abri de la lumière, les puits sont rincés 3 fois avec du PBS, ensuite les lames sont montées puis observées au microscope à fluorescence. Des clichés sont pris après un temps d'exposition de 2 secondes et observés. Résultats et conclusion: On observe que le témoin négatif présente une très légère fluorescence verte au niveau du contour des kératinocytes. Les autres échantillons ayant reçu l'extrait de grenade présentent une fluorescence dont l'intensité augmente avec la concentration d'extrait reçu, traduisant une augmentation de l'expression des aquaporines. Avec un traitement contenant 5ug/ml d'extrait de grenade, l'intensité est plus marquée que le témoin. Au-delà de lOug/ml d'extrait de grenade, l'intensité de la fluorescence est beaucoup plus forte et les contours cellulaires s'observent nettement. L'utilisation de l'extrait de grenade selon l'invention stimule l'expression des aquaporines de type 3 par les kératinocytes en culture.
VI. EFFET DE L'EXTRAIT DE GRENADE SUR LA PROLIFERATION CELLULAIRE Principe : La prolifération cellulaire est évaluée par la technique de comptage direct à l'aide d'un compteur de cellules. Matériels : - Fibroblastes de peau humaine : FPH (préparés au laboratoire). - Extrait éthanolique de grenade. - Lignée kératinocytaire humaine : HaCaT. - Milieu de culture : Milieu DMEM supplémenté avec 10% de sérum de veau f tal et des antibiotiques (pénicilline et streptomycine). - Boites de culture : Flasquettes de 25 cm et plaques 24 puits (Falcon). - Tampon PBS stérile sans calcium ni magnésium. - Trypsine-EDTA (Life technologies). - Compteur de cellules : Coulter-Counter ZM (Beckman/Coulter) Protocole : Le test de prolifération cellulaire est réalisé dans des plaques à 24 puits (Falcon) avec une faible densité cellulaire de départ afin de permettre aux cellules de proliférer sans difficulté (élimination du problème d'inhibition de contact observé dans une culture confluente). Les cellules en culture confluente sont trypsinées, puis ensemencées à une densité de 40.000 cellules/puits dans 1 ml de milieu de culture. Elles sont ensuite mises en incubation à 37[deg]C dans un incubateur à CO2 pendant une nuit, pour leur permettre de bien adhérer au plastique. Après élimination des surnageants, les concentrations de l'extrait de grenade en solution dans le milieu de culture sont ajoutées. Après 72 heures de culture, les cellules sont mises en suspension par trypsination, puis numérées à l'aide du compteur de cellules. Résultats : Conclusion : Les tests de prolifération montrent que l'extrait de grenade produit un effet inhibiteur dosedépendant, aussi bien sur des cultures de kératinocytes (HaCaT) que sur des cultures de fibroblastes (FPH). Cette inhibition de la prolifération est statistiquement significative à partir d'une concentration de 10Microg/ml de milieu de culture. Il est intéressant de noter une réduction de la prolifération sans réduction de l'activité mitochondriale. Ceci signifie que le produit n'aura aucun effet excessif sur la croissance tumorale.
VII. EFFET DE L'EXTRAIT DE GRENADE SUR LA SYNTHESE DES PROTEINES PARLES FIBROBLASTES DE DERME HUMAIN EN CULTURE. Principe : Cette étude a pour objectif de déterminer l'effet direct de l'extrait de grenade sur la synthèse de protéines par les fibroblastes. Pour ce faire, les protéines des fibroblastes sont dosées après contact avec des extraits de grenade plus ou moins concentrés selon l'invention. Matériels et protocole : Le dosage des protéines est réalisé à l'aide d'un kit commercialisé sous le nom de BC Assay kit (Interchim réf.). Il s'agit d'un test colorimétrique basé sur la réduction des ions Cu2+ en Cu+ par les liaisons peptidiques des protéines. L'acide bi-cinchoninique (BC) chélate les ions Cu+ avec une très forte spécificité pour former un complexe soluble coloré en violet. La réaction est mesurée par l'absorbance du complexe Cu+ final à une longueur d'onde de 562 nm. La densité optique est directement proportionnelle à la concentration en protéines, avec une partie linéaire entre 5-20ug/ml et 1-2 mg/ml. La gamme étalon est réalisée à partir d'une solution standard de Sérum Albumine Bovine (BSA) à 2 mg/ml. La courbe étalon est tracée à l'aide de 7 points de densité optique (DO) correspondants à 7 concentrations différentes de protéines : 0,20, 100, 250, 500, 750Microg/ml et 1 et 2 mg/ml. On définit une courbe DO= f [concentration en protéines] telle que y= 0.008x + 0.0623 Les cellules utilisées dans ce test sont des fibroblastes de derme humain, préparés à partir d'un prélèvement sain de la peau de visage issue d'une chirurgie plastique effectuée sur une femme âgée de 60 ans. Les cellules ainsi obtenues sont cultivées dans un milieu de culture classique contenant 10% de sérum de veau f tal et des antibiotiques. Pour ce qui concerne le présent test, les cellules ont été utilisées en P-5. Après trypsination et comptage des cellules à l'aide du Coulter-Counter ZM, 50.000 cellules dans un volume de 200Microl sont ensemencées dans chaque puit d'une micro plaque à 96 puits. Les cellules sont alors incubées pendant 48 heures en l'absence (puits contrôle) ou en présence d'extrait de grenade. Après élimination des surnageants et rinçage des tapis cellulaires, les protéines sont dosées suivant le protocole du kit. Résultats : Les résultats en Microg de protéines/ml : Comme on peut le constater sur les résultats obtenus ci-dessous, les deux concentrations de l'extrait de grenade (5Microg/ml et 20Microg/ml) testées ne montrent aucun effet sur la synthèse des protéines par les fibroblastes en culture après 48 heures d'incubation. - Conclusion : Plusieurs hypothèses peuvent être évoquées devant ces résultats. La synthèse des protéines aquaporines n'est pas affectée par l'extrait de grenade qui n'agit ainsi que sur la conformation de la structure du canal lorsque celle-ci est affectée. Les protéines constituant les canaux à eau sont en trop petites quantités pour que leurs variations par rapport à l'activité cellulaire propre soient détectables.
VIII. EFFET DE L'EXTRAIT DE GRENADE SUR LA COMMUNICATIONINTERCELLULAIRE But : L'effet de l'extrait de grenade sur la communication cellulaire est évalué à l'aide de la technique de transfert du Jaune-Lucifer entre les cellules épidermiques en culture, à la suite d'un accrochage réalisé sur le tapis cellulaire. Méthodes : Le marqueur utilisé est le Jaune Lucifer (L.Y) : il s'agit d'un marqueur fluorescent auquel les membranes cytoplasmiques sont imperméables. Le L.Y. a été solubilisé dans le milieu de culture à une concentration de 2 mg/ml. Les kératinocytes préalablement ensemencés à confluence sur des lames à chambres (lame à 8 chambres) sont rincés avec du PBS stérile puis incubés soit en présence du milieu de culture uniquement (culture témoin) soit en présence du milieu de culture supplémenté en Extrait de grenade (10 ou 20ug/ml). Après une nuit d'incubation à 37[deg]C dans un incubateur à C02, le tapis cellulaire est coupé au milieu avec une lame stérile et immédiatement après, 100Microl de la solution de L.Y sont rajoutés par chambre.Après une minute d'incubation, les tapis cellulaires sont rincés avec du PBS stérile puis fixés grâce à une solution froide de méthanol, pendant 5 min à -20[deg]C. Après rinçage avec du PBS, les lames sont ensuite montées puis observées au microscope à fluorescence. Résultats et conclusion: Les résultats montrent que, sur des cultures non traitées par l'extrait de grenade, le LY n'a pratiquement pas diffusé dans les cellules à partir de la coupure, alors que, sur les cultures traitées avec l'extrait de grenade, on observe une fluorescence intracellulaire de part et d'autre de la coupure. Ceci signifie que le marqueur est transféré plus facilement d'une cellule à l'autre. Ainsi, il apparaît que la communication intercellulaire se fait d'une manière plus facile et plus rapide.
IX. EFFET DE DIFFERENTS LIGANDS SUR L'EXPRESSION DES AQUAPORINES DESKERATINOCYTE ET EFFET DE L'EXTRAIT DE GRENADE Principe : Cette étude in vitro a pour objectif de déterminer l'effet induit par chaque ligand sur l'expression des aquaporines AQP-3. Elle consiste à mettre les différents ligands en contact avec des kératinocytes humains et à observer l'activité des aquaporines après des temps de contacts variables. Protocole : Cette étude est effectuée selon un protocole identique à celui de l'étude V portant sur l'effet de la concentration de grenade sur l'expression des canaux à eau AQP-3 par les kératinocytes humains . Différents ligands sont ainsi testés: - un témoin négatif réalisé avec l'excipient. - l'extrait de grenade selon l'invention à la concentration de 2 et 10 Microg / ml - l'oestradiol à la concentration de 10-7 M - la testostérone à la concentration de 10-7M - un mélange d' stradiol à 10-7 et d'extrait de grenade à 10Microg par ml - un mélange de testostérone à 10-7 et d'extrait de grenade à 10 Microg par ml. Le résultat sur l'expression des aquaporines est de même observé par immunomarquage à l'aide d'un anticorps spécifique dirigé contre l'aquaporine type 3 humain (anticorps polyclonal de chèvre ; Tebu). Résultats : Les résultats sont quantifiés par fluorimétrie. Conclusion : On observe que l'oestradiol à la concentration de 10-7 M diminue l'activité des aquaporines, de manière constante, à 24h et 48h d'environ 25%. Au contraire, la testostérone active l'expression des aquaporines à 24 heures d'un facteur 2,4. Cette expression n'est plus que de 1,5 après 48 heures de contact. L'extrait de grenade induit une augmentation de l'activité des aquaporines par rapport au témoin, équivalente à celle de la testostérone 10-7 M. Au contraire de la testostérone cette amélioration persiste à 48 H. L'action combinée de l' stradiol et de l'extrait de grenade annule l'effet délétère de l'estradiol sur l'expression des aquaporines. Dans cette combinaison l'extrait de grenade maintient son activité à 48H. L'action combinée de la testostérone et de l'extrait de grenade, ne modifie en rien l'action de l'extrait seul ou de la testostérone seule. L'effet se maintient bien dans le temps. Il apparaît donc que l'extrait selon l'invention provoque une augmentation physiologique de l'activité des aquaporines, peu différentes de celle de la testostérone naturelle. L'extrait de grenade antagonise l'action bloquante de l' stradiol sur les aquaporines et rétabli leur activité, la maintenant au niveau de celle de la testostérone naturelle. Cet effet est stable et se maintient longtemps.