INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Etapes de la mise en place et du lancement du logiciel Conception d'une maquette Voir figure 2. Cette étape consiste à utiliser un logiciel de traitement de textes pour établir le contenu de la maquette. N'importe quel traitement de textes du marché peut a priori convenir, pourvu qu'il sauvegarde le fichier résultat au format XML, et que ce format soit public. En l'occurrence, il n'existe qu'un seul logiciel aujourd'hui répondant à ce critère : il s'agit de OpenOffice, suite bureautique OpenSource (cf www.openoffice.org). Donc la conception de la maquette doit se faire sous OpenOffice, du moins tant qu'OpenOffice n'aura pas de concurrent équivalent. Une maquette n'est rien d'autre qu'un document contenant des textes fixes, des champs référençant des données, des tableaux, etc (voir figure 3).
Ecriture d'un module producteur d'un flux de données primaire Ici, on intervient dans l'application d'extraction des données afin de lui adjoindre un ou plusieurs modules, écrits dans un langage de programmation quelconque, généralement Java,
qui vont permettre d'obtenir un flux ayant une forme standard indépendante des maquettes conçues par ailleurs. Voir figure 4.
Lancement du générateur L'exécution du générateur permet d'obtenir deux programmes écrits dans le langage XSLT : de flux et la transformation XSLT de génération du document final.
Ce générateur est lui même écrit en XSLT.
L'adaptateur de flux permet de transformer (adapter) le flux primaire en un flux secondaire conforme à ce que réclame le générateur de document, étant donnée la maquette à laquelle le document à produire est assujetti. Voir figure 6 et l'exemple de flux secondaire décrit ci-après en annexe.
Lancement de la génération de document Le système est désormais prêt pour la production de document : on lance l'application d'extraction avec les paramètres adéquats, ce qui provoque la production d'un flux primaire, transformé en flux secondaire par l'adaptateur XSLT (voir figure 6), puis fusionné avec la maquette par la transformation XSLT de génération de document (voir figure 7).
On aboutit suivant les options choisies : - à un document XSL-FO, qui doit ensuite être traduit en un document PDF, ou autre format intéressant comme par ex. RTF ou PS, par un processeur standard disponible en OpenSource sur Internet (xml.apache.org). Dans le cas où l'on choisit une génération en XSL-FO, il est nécessaire de concevoir des modules de traduction des structures présentes dans le document XML représentant la maquette. Ces modules sont appelés plugin dans la figure 1.
- ou directement à un document XML/OpenOffice visualisable sous OpenOffice (voir figure 8) que l'on peut ensuite imprimer ou convertir en PDF pour l'envoyer par mail ou en faire toute autre chose que l'on juge pertinente.
Elle a également pour objet une voie de synthèse de ces composés ainsi qui leur utilisation dans des procédés de cycloadditions, notamment de cycloadditions 3+2.
Au cours de la dernière décennie, les composés porteurs de groupe fluoroalcoylés ont pris beaucoup d'ampleur, notamment dans l'agrochimie # les produits pharmaceutiques.
En particulier, les hétérocycles, notamment azotés et notamment ; 5 chaînons, sont devenus relativement fréquents quand ils portent de groupements (-CF2). Toutefois, la synthèse de tels composés est difficile e nécessite souvent une séquence d'étapes élevée.
Aussi, un des buts de la présente invention est de fournir une famille d précurseur des ces hétérocycles azotés. L'utilisation de ces précurseur: devant être aisée, ne doit pas nécessiter de nombreuses étapes.
Un autre but de la présente invention est de fournir un procédé de synthès desdits précurseurs.
Un autre but de la présente invention est de fournir une technique d'utilisatioi de ces précurseurs.
Ces buts, et d'autres qui apparaîtront par la suite, sont atteints au moyen dE composés de formule (I) :
dans laquelle : # Rf est un radical porteur d'un groupe perfluorométhylène lequel groupe assure la liaison avec le reste de la molécule : # R1 et R3, qui peuvent être les mêmes ou différents, sont choisis parmi l'hydrogène et les radicaux alcoyles ou aryles ; # est un groupe électroattracteur tel que T-O-H soit un acide dont le pKa (dans l'eau) est au plus égal à 8, avantageusement à 6, de préférence à 5.
Selon la présente invention, il est souhaitable que le groupe #-O-H constitue un acide dont le pKa est au moins égal à 1, avantageusement à 2. En effet, il est souhaitable que le groupe #-O- ne constitue pas un bon groupe partant, et ce, tant pour l'utilisation comme précurseur de cycloaddition que pour sa synthèse.
Il est souhaitable que R1 et R3 n'encombrent pas trop la molécule, aussi convient-il d'éviter que R1 et/ou R3 soient attachés à la double-liaison par un carbone tertiaire, voire secondaire.
Ainsi, il est préférable qu'au moins un des R1 et R3 soit un alcoyle léger (léger, c'est-à-dire d'au plus 4 carbones) ou mieux encore, un hydrogène.
Ainsi, il est préféré que R1 soit hydrogène ; il est également préféré que R3 soit hydrogène ; et il est encore plus préféré que R1 et R3 soient hydrogènes.
Avantageusement Rf est de formule (II) GEA -(CX2)p où : - les X, semblables (c'est-à-dire qu'ils sont identiques) ou différents, représentent un chlore, un fluor ou un radical de formule CnF2n+1 avec n entier au plus égal à 5, de préférence à 2, avec la condition que les X du groupement méthylène porteur de la liaison ouverte ne soient pas chlore et que l'un d'entre eux au moins soit un atome de fluor, avantageusement les X du méthylène porteur de la liaison ouverte sont ou bien des atomes de fluor ou bien un atome de fluor et un radical de formule CnF2n+1 (de tels radicaux sont en effet considérés comme étant électroniquement voisins des atomes de fluor),
- GEA est un groupe hydrocarboné ou électro-attracteur (c'est à dire que la constante de Hammett #p (sigma p) est >0, avantageusement au moins égal à, 0,2), de préférence inerte, avantageusement, quand p est égal à 1, un groupe électroattracteur(cf. lignes précédentes) ; - p est un entier positif, c'est-à-dire qu'il ne peut comprendre la valeur 0.
GEA est avantageusement fluor surtout quand p est inférieur ou égal à 2.
Les X sont avantageusement tous des fluors surtout quand p est inférieur ou égal à 2.
1 Syntaxe de module Un module est composé d'un en-tête, suivi d'une liste de description de type d'objet, de descriptions autonomes d'actions et de descriptions autonomes de structure de transfert.
1. 1 En-tête de module L'en-tête de module comporte son nom, le scope par défaut.
2 Descriptions de types d'objet Une description comporte au minimum: - une description abstraite; - zéro, une ou plusieurs descriptions de transfert ; - zéro, une ou plusieurs descriptions de commandes.
Une description de transfert décrit une structure de chaîne binaire qui peut représenter correctement la structure abstraite (voir le chapitre sur le sujet).
Une action (message) associée au type d'objet décrit des modifications pouvant être demandées à une instance dudit type d'objet.
3 Descriptions abstraites de types d'objet Une description abstraite de type d'objet se présente usuellement comme un ensemble de composants. Chaque composant est caractérisé par : - un nom de composant, - des informations de présence, et - une description de type.
3. 1 Informations de présence Un composant peut être muni d'un index (tableau). Par défaut un composant n'a qu'une copie, un index permet d'avoir un nombre variable de copies, distinguées par une valeur d'index. Différents cas sont distinguables pour le nombre de copies.
3. 1.1 Nombre fixe de copies Le nombre de copies est spécifié par un entier. Le cas par défaut, une seule copie, est un cas particulier de nombre fixe de copies.
3. 1.2 Nombre variable libre Le nombre de copies, possible est alors typiquement indiqué par un intervalle d'entiers. Un cas particulier est un nombre quelconque de copies (intervalle de 0 à l'infini).
3. 1.3 Nombre variable conditionnel Le nombre de copies, acceptable dépend des valeurs d'autres éléments de la structure.
3. 2 Description de type Cette description indique la structure du composant lui-même. Différentes descriptions sont possibles.
3.2.1 Composants élémentaires Cela inclut au minimum: - un composant de type entier, au sens mathématique du terme; - un composant de type énuméré : la liste des valeurs possibles est donnée explicitement, commune liste de symboles abstraits ; et - un composant de type chaîne de bits.
3. 2.2 Structure Une structure se présente comme une liste de composants.
3. 2.3 Union Une union est une écriture abrégée pour un ensemble de composants de présence exclusive, i.e., au plus un des composants est présent dans une instance de l'union.
3. 2.4 Référence Une référence est une structure dont le contenu est défini par référence à un autre type d'objet.
3. 2.5 Index Un composant de type index indique une instance particulière parmi un ensemble d'objets de même type. La définition d'un composant de type index doit inclure la référence à un composant indexé d'un objet particulier. Cela peut être soit un composant inclus dans la structure dans laquelle est défini le composant de type index, soit un composant inclus dans un contexte, un objet unique commun à l'émetteur et le récepteur.
En outre, dans le cas de la 7-a-hydroxy-DHEA et de la 7-(3-hydroxy-DHEA, on souhaite pouvoir obtenir l'un ou l'autre produit avec une diastéréosélectivité satisfaisante, ne nécessitant pas d'étape d'élimination du diastéréoisomère minoritaire.
C'est le but de la présente invention qui a pour objet de nouveaux procédés de synthèse de dérivés de la DHEA, ces procédés utilisant comme produit de départ la DHEA.
La figure 1 illustre un procédé qui permet d'obtenir la 7-oxo-DHEA en quatre étapes à partir de la DHEA : (1) Dans une première étape facultative, on protège éventuellement la fonction cétone en position 17 de la DHEA par un groupement protecteur approprié.
On obtient le composé de formule (I) : dans laquelle RI, R2 pris ensemble représentent un groupement =0 (cas où l'on ne protège pas la fonction cétone) ou R1, R2 pris ensemble représentent un groupement -0-W-O-, dans lequel W représente un groupement alkyle en C2-C8, linéaire ramifié ou cyclique, saturé ou insaturé, (2) Dans une seconde étape, on prépare l'hémiester (n=l) ou le diester (n=2) entre l'alcool en position 3 du composé (I) et un diacide choisi parmi ceux répondant à la formule (II) : HOOC-X-COOH (II) dans laquelle X représente un groupement choisi parmi les alkyles en C2-C20, saturés ou insaturés, linéaires, ramifiés ou cycliques, les aryles en C6-C20, les aralkyles en C8-C20. Cet ester (hémi- ou di-) répond à la formule (III) :
dans laquelle n, RI et R2 ont la même signification que ci-dessus et soit R représente-OC-X-CO- (cas où n=2), soit R représente HOOC-X-CO (cas où n=l); (3) Dans une troisième étape, on effectue une oxydation allylique sur le carbone en position 7 de façon à obtenir la cétone de formule (IV) : dans laquelle n, R1, R2 et R ont la même signification que ci-dessus ; (4) Dans une quatrième étape, on ôte les groupes protecteurs de la cétone en position 17 (éventuellement) et de l'alcool en position 3 pour obtenir la 7oxo-DHEA (2).
Lorsque l'on souhaite simplement obtenir la 7-oxo-DHEA, la protection de la cétone en position 17 (étape 1), et sa déprotection subséquente (étape 4), ne sont pas nécessaires.
Le procédé de l'invention se distingue des procédés de l'art antérieur notamment en ce que l'on utilise un hémiester ou un di-ester (III) d'un diacide de formule (II) et de la DHEA.
L'utilisation des ces esters (III) présente plusieurs avantages par rapport aux composés de l'art antérieur : - de meilleurs rendements d' oxydation
des produits intermédiaires plus faciles à purifier, ces produits étant généralement obtenus par recristallisation. l'allongement de la chaîne en position 3 encombre la face (3 et permet d'augmenter la diastérosélectivité de la réduction de dérivés 7-oxo en 7ss hydroxy par NaBH4 sans nécessairement ajouter du chlorure cérique (CeCl3).
- Lorsque R représente HOOC-X-CO, dans le cadre d'une stratégie de synthèses supportées, ce groupement peut aisément être fixé sur un support solide. Cette méthodologie présente l'avantage de favoriser l'élimination des réactifs en excès et donc de faciliter l'étape de purification.
Selon l'invention, la DHEA (1) est tout d'abord protégée facultativement en position 17, de préférence sous forme d'un acétal cyclique.
Par exemple R1, R2=-O-CH2-CH2-O- Avantageusement, la DHEA (1) est traitée par de l'éthylène glycol, à reflux du toluène, en présence d'acide paratoluène sulfonique en utilisant un dispositif de Dean Stark. Le produit protégé est obtenu par recristallisation dans une solution alcoolique (méthanol ou éthanol par exemple).
Selon une autre variante de l'invention, l'acétalisation en position 17 de la DHEA peut être omise. Dans ce cas R1, R2 pris ensemble représentent =0. C'est le cas en particulier lorsque la synthèse s'arrête à l'oxydation en position 7 de la DHEA.
De façon générale, la seconde étape du procédé représenté par la figure 1 se fait dans le cas où n=l par traitement d'un composé de formule (I) par un équivalent molaire d'un acide dicarboxylique, sous forme d'acide ou sous une forme activée telle que chlorure d'acide ou anhydride d'acide.
Parmi les acides di-carboxyliques utilisables dans la présente invention, on peut citer par exemple : L'acide succinique, l'acide glutarique, l'acide subérique, l'acide maléique, l'acide phtalique, qui sont avantageusement employés sous forme d' anhydrides ; L'acide isophtalique, l'acide téréphtalique, l'acide 1,2-phénylène diacétique, l'acide 1,3-phénylène diacétique, l'acide 1,4-phénylène diacétique, qui sont avantageusement employés sous forme de mono chlorure d'acide.
Lorsque n=2, on procède de la même façon en utilisant 2 équivalents molaires de dérivé de DHEA (I) par mole de diacide (II).
L'hybridation est effectuée pendant 16 h à 37 C en tampon phosphate 20 mM, avec 50% de formamide désionisé, 2 x SSC, 5mM EDTA, 2. 5 x de solution Denhardt, 200 pg/ml d'ADN de sperme de hareng dénaturé, 10% de dextrane sulfate, avec ou sans la sonde préalablement dénaturée pendant 5 min dans un bain-marie d'eau bouillante. Après l'hybridation, les coupes sont lavées à 20 C (ou 37 C pour le collagène) en 2 x SSC/ 50 % formamide, 1 x SSC/ 50 % formamide, 1 x SSC, et 0,5 x SSC. Après déshydratation, les hybrides marqués avec la digoxigénine sont détectés avec un anticorps anti-DIG conjugué avec la péroxydase de raifort (Roche). La détection finale des
complexes est effectuée en utilisant le kit d'amplification TSA+ (NEN). Les signaux positifs correspondent à l'activité de la phosphatase alcaline liée à la procédure d'amplification du kit TSA, après 2 h d'activité à température ambiante, et définie par la précipitation des sels de tétrazolium formés (en utilisant les substrats Nitrobleu de tétrazolium bromochlorylindolophosphate (NBT/BCIP)).
L'invention démontre que les gènes LOXL et LOX peuvent être activés par l'addition de kératinocytes dans un modèle de peau reconstruite (Mimeskin, Coletica, Lyon, France), comme le démontre le suivi de l'expression des ARNm par hybridation in situ (figure 11).
L'induction de la synthèse de LOXL est concomitante à celle de la tropoélastine (6 jours après l'addition de kératinocytes sur le derme équivalent).
Le gène LOX est aussi activé après l'addition des kératinocytes, en même temps que le gène du collagène I[alpha]1 (CollAl).
Exemple 9 : Mise en évidence d'une baisse du niveau d'expression du gène LOXL dans les fibroblastes adultes Les inventeurs ont utilisé 5 souches de fibroblastes de prépuce (FP) (issus de jeunes enfants) et 6 souches de fibroblastes adultes (FA, 3 de 20 ans en moyenne et 3 de 60 ans en moyenne) issus de chirurgie plastique au niveau de l'abdomen. L'expression des trois gènes d'intérêt ainsi que de l'actine a été analysée par RT-PCR en temps réel (reverse transcriptase polymerase chain reaction quantitative, figure 12). Cette technique permet de quantifier précisément l'expression d'un gène en la rapportant à celle de l'actine (considérée comme constante). On peut donc quantifier la régulation du niveau d'expression de ce gène.
Les résultats présentés dans la figure 12 montrent tout d'abord que la synthèse d'ARNm de LOXL chute de façon spectaculaire et statistiquement
significative dans les fibroblastes d'adultes, et ceci dès l'âge de 20 ans, avec une baisse de près de 70% par rapport aux fibroblastes de prépuce, tandis que l'ARNm de l'élastine ne varie pas de façon significative en fonction de l'âge.
Cette donnée est en accord avec la littérature sur l'élastine : si le tissu élastique se détériore et n'est pas remplacé, cela ne semble pas dû à une inhibition de l'activité du gène de l'élastine.
La synthèse d'ARNm de LOX diminue en moyenne de 40% dans les FA par rapport aux FP. Mais avec la variabilité individuelle, cet écart est peu significatif.
Les ARN totaux sont purifiés avec le kit SV 96Total RNA Isolation System (Promega, Charbonnières, France). Les ARN purifiés sont élués en 100 l d'eau RNase-free (Promega, Charbonnières, France), dosés et répartis en plaques (96 puits, 10 l d'ARN totaux à Sng/pl par PCR). Les amorces sélectionnées pour la réalisation de ce travail sont les suivantes et font l'objet du tableau I : Tableau I :
Gène Nom Taille Séquence humaine Position sur le Température (nucléotides) gène humain de fusion ~~~~~~~~~~~~~~~ (TM) ELN 1 Ela 20 GTA TAT ACC CAG Sens : +443 62 C GTG GCG TG 2 Ela 21 CGA ACT TTG CTG Antisens : 52 C CTG CTT TAG +799
LOX Ox 64 21 ACG TAC GTG CAG Sens : +676 52 C AAG ATG TCC Ox 65 21 GGC TGG GTA AGA Antisens : 51 C AAT CTG ATG +841 LOXL 30 L1 19 GAC TTC GGC AAC Sens : +1480 60 C CTC AAG C 30 L2 20 TGT TGC AGA AAC Antisens : 60 C GTA GCG AC +1701 ACTI Actine U 20 GTG GGG CGC CCC 72 C NE sens AGG CAC CA Actine D 24 CTC CTT AAT GTC 57 C antisens ACG CAC GAT TTC
La technique de RT-PCR en temps réel est réalisée avec le kit Quanti Tect SYBR Green RT-PCR (Qiagen, France) sur les puits contenant l'ARNm, dans un thermocycleur OPTICON, qui réalise les cycles d'amplification. La rétrotranscription (RT) s'effectue 30 minutes à 50 C, suivie de 15 minutes à 95 C pour inhiber la réverse transcriptase, activer la polymérase et dénaturer l'ADN complémentaire (ADNc) obtenu. 50 cycles de polymérisation en chaîne (PCR) sont effectués (15 secondes à 94 C, 30 secondes à 60 C, 30 à 72 C). A chaque fin de cycle, la fluorescence, qui est proportionnelle au nombre de fragments amplifiés est lue. Le niveau d'expression est défini par le rapport d'expression de chaque gène par rapport à l'actine.
Comme les travaux précédents démontrent l'implication de LOXL dans l'élastogenèse et sa disparition dans les peaux adultes, le point suivant de
l'invention a porté sur les niveaux d'expression des gènes LOXL, de LOX et de l'élastine dans des fibroblastes de différents âges.
L'instruction met le nombre de copies à zéro.
5. 4 Instruction d'ajout (ADD) Une instruction d'ajout inclut un nom de composant indexé et une valeur.
Cette instruction demande l'ajout d'une nouvelle copie au composant, ayant la valeur indiquée (dans son intégrité, ce qui peut être un sous-arbre assez important). Il y a plusieurs manières dont la nouvelle valeur peut être indiquée, comme dans le cas de l'instruction d'affectation.
5. 5 Instruction d'envoi (SEND) Une instruction d'envoi indique l'inclusion d'un paramètre dont la valeur est la valeur courante du composant du côté de la source. L'action du côté du récepteur est de vérifier la cohérence, mais la conséquence d'une détection d'incohérence n'est pas précisée.
5. 6 Instruction de choix (CHOICE) Une instruction de choix indique qu'une et une seule des actions est demandée pour chaque occurrence de l'action.
5. 7 Instruction d'exécution d'une action (DO) Une instruction d'exécution permet d'exécuter une action compatible avec le type de composant courant.
5. 8 Instructions liées au retour en arrière Une modification de données peut être demandée à l'essai et refusée éventuellement par le récepteur. Ceci est géré par des instructions spécifiques de préparation (PREPARE), d'acceptation de modifications associées à une préparation (COMMIT) et de refus de modifications (UNDO).
5. 8.1 L'instruction de préparation (PREPARE) Cette instruction indique que les modifications qui la suivent et applicables au n#ud courant peuvent être annulées.
5. 8.2 L'instruction d'acceptation (COMMIT) Cette instruction indique l'acceptation des modifications sujettes à une préparation (PREPARE) sur le n#ud courant.
5. 8.3 L'instruction de refus de modification (UNDO) Cette instruction indique le refus des modifications sujettes à une préparation (PREPARE) sur le n#ud courant.
6 Description de transfert La description de transfert est à la base CSN.l version 2. 2, avec les adaptations suivantes.
6. 1 En-tête Quand la description de transfert est unique pour un type d'objet, le nom de structure CSN.lpeut être omis, et est alors le même que le nom de type.
Plus généralement, les règles de correspondance entre une description de transfert et une description abstraite (de type d'objet ou de message) font l'objet du chapitre 9.
Les esters de cellulose de départ utilisés pour greffer des chaînes hydrocarbonées R sont des dérivés de cellulose présentant un taux d'estérification suffisant pour conférer aux dérivés résultants une solubilité dans la phase organique de compositions de vernis à ongles, notamment lorsque celle-ci comprend un ou plusieurs solvants esters.
Que l'on travaille avec comme réactif de base des nitrocelluloses ou des esters de cellulose tels que définis précédemment, la réaction de greffage
de groupes -Y-R tels que définis précédemment diffère selon que R est d'origine polymérique ou non.
Lorsque R est un groupe d'origine non polymérique (c'est-à-dire lorsque R répond aux définitions a) , b) , d) et e) ) , la réaction de greffage peut s'effectuer dans un solvant inerte par une réaction choisie parmi les réactions d'ethérification, estérification avec un acide carboxylique ou ses dérivés, transestérification avec un ester ou un carbonate, estérification avec un acide sulfonique ou ses dérivés, réaction avec un isocyanate, réaction avec un alcoxysilane.
Pour les parties qui suivent, dans l'exposé des méthodes de préparation des dérivés de cellulose (nitrocellulose ou ester de cellulose) modifiés selon l'invention, on utilisera les abréviations suivantes : - Cell-OH pour le dérivé de cellulose de départ non modifié (nitrocellulose ou ester de cellulose), un seul OH, étant pris en compte, pour la clarté de l'exposé ; R pour la chaîne hydrocarbonée à greffer sur la nitrocellulose, répondant aux définitions données précédemment.
Dans la partie ci-après, on va décrire différentes réactions utilisables pour le greffage de chaînes R de nature non polymérique (c'est-à-dire répondant aux définitions a), c), d) et e).
Pour l'étherification, les réactions suivantes peuvent être envisagées, réactions pour lesquelles le radical Y faisant la jonction entre les chaînes R et la nitrocellulose est une simple liaison : - réaction avec un halogénure d'alkyle R-X (X représentant un halogène), en milieu basique (par exemple, en présence d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium) : Cell-OH+R-X Cell-OR+HX avec X étant un halogène choisi parmi le chlore, le brome ou l'iode.
- réaction avec un époxyde : avec R4 représentant une chaîne rentrant dans la constitution de la chaîne R définie précédemment, ladite chaîne R étant représentée ici par le groupe - CH2-(CHOH)-R4 ; des réactifs époxydes appropriés peuvent être le 1,2-époxyoctane, le 1,2-époxynonane, le 1,2- époxydécane, le 1,2-époxynéodécane, le 1,2- époxycyclodécane, le 1,2-époxycyclododécane, le 1,2- époxycyclohexane, le 1,2-époxy-3-phénoxypropane.
- réaction avec un aldéhyde en milieu réducteur (tel que le triéthylsilane en présence de platine) : avec R5 représentant une chaîne rentrant dans la constitution de la chaîne R, ladite chaîne R étant représentée ici par le groupe -CH2-R5.
Selon une variante, cette réaction peut se dérouler en deux étapes, avec pour première étape une réaction préliminaire de l'aldéhyde avec un diol, tel que le glycol, pour former un acétal cyclique :