INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Parmi les polyalkylsiloxanes, on peut citer principalement les polydiméthylsiloxanes linéaires de viscosité supérieure à 5.10-6 m2/s, et de préférence inférieure à 2,6 m2/s soit : - à groupements terminaux triméthylsilyle, comme par exemple, et à titre non limitatif, les huiles "SILBIONE#" de la série 70047 commercialisées par la Société RHONE POULENC, l'huile "47 V 500.000#" de RHONE POULENC ou certaines "VISCASIL" de la Société GENERAL ELECTRIC, - à groupements terminaux trihydroxysilyle, tels que les huiles de la série "48 V#" de la Société RHONE POULENC.
Dans cette classe de polyalkylsiloxanes, on peut également mentionner les polyalkylsiloxanes vendus par la Société GOLDSCHMIDT sous les dénominations "ABILWAX 9800" et "ABILWAX 9801#", qui sont des polyalkyl(Ci-C2o)siloxanes.
Parmi les polyalkylarylsiloxanes, on peut citer les polydiméthylphénylsiloxanes, les polydiméthyldiphénylsiloxanes linéaires et/ou ramifiés, de viscosité 10-5 à 5.10-2 m2/s, tels que par exemple : - l'huile "RHODORSIL" 763 de RHONE POULENC, - les huiles "SILBIONE#" de la série 70641 de RHONE POULENC, telles que les huiles "SILBIONE 70641 V30" et "SILBIONE
A titre d'exemples de polyéthers polyuréthanes non-ioniques à chaîne grasse utilisables dans l'invention, on peut aussi utiliser aussi le Rhéolate 205 à fonction urée vendu par la société RHEOX ou encore les Rhéolates 208 , 204 ou 212, ainsi que l'Acrysol RM 184, l'Aculyn 44 et l'Aculyn 46 de la société ROHM & HAAS [l'ACULYN 46 est un polycondensat de polyéthylèneglycol à 150 ou 180 moles d'oxyde d'éthylène, d'alcool stéarylique et de méthylène bis(4-cyclohexylisocyanate) (SMDI), à 15% en poids dans une matrice de maltodextrine (4%) et d'eau (81%) ; l'ACULYN 44 est un polycondensat de polyéthylèneglycol à 150 ou 180 moles d'oxyde d'éthylène, d'alcool décylique et de méthylène bis (4-cyclohexylisocyanate) à 35% en poids dans un mélange de propylèneglycol (39%) et d'eau (26%)].
On peut indiquer comme exemples d'alkylhydroxyéthyl-celluloses quaternisées à chaînes grasses en C8-C30, les hydroxyéthylcelluloses quaternisées modifiées par un groupement alkyle en C12 ou C18 tels que les produits QUATRISOFT LM 200, QUATRISOFT LM-X 529-18-A, QUATRISOFT LM-X 529-18B (alkyle en C12) et QUATRISOFT LM-X 529-8 (alkyle en CI,) commercialisés par la société AMERCHOL et les produits CRODACEL QM, CRODACEL QL (alkyle en C12) et CRODACEL QS (alkyle en C18) commercialisés par la société CRODA.
On entend par polyuréthanes "hydrodispersibles" ou "dispersibles dans l'eau" des polymères qui, lorsqu'on les met en suspension dans
l'eau, forment spontanément des globules ayant une taille moyenne, mesurée par diffusion de la lumière sur un appareil de type Coulter, comprise entre 5 nm et 600 nm, et en particulier entre 5 nm et 500 nm.
Le sel conducteur est un sel de lithium choisi généralement parmi l'hexafluorophosphate de lithium, LiPF6, LiAsF6, LiSbF6, LiBF4, LiTFSI (lithium bis(trifluorométhanesulfonyl)imide) et leurs mélanges.
L'invention concerne enfin un dispositif électrochrome comprenant le composé selon l'invention.
Dans un tel dispositif électrochrome, le composé ou un matériau comprenant le composé selon l'invention est souvent sous forme d'un dépôt sur un substrat, par exemple sur du verre. Le passage de courant, c'est-à-dire l'intercalation/désintercalation
du lithium, modifie les propriétés optiques du matériau, par exemple la couleur de celui-ci, il est ainsi possible d'obtenir une vitre dont la couleur varie. Sinon, le fonctionnement est identique à celui de l'accumulateur.
L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui va suivre, d'exemples de réalisation de l'invention, faite à titre illustratif et non limitatif, en référence aux dessins joints, dans lesquels : la figure 1 est un graphique montrant la courbe de cyclage intentiostatique du composé de l'exemple 1 (LiFeo,95BO,033P(:)4) à deux régimes différents (C/10 (0,05 mA/cm2) : courbe en traits pointillés ; C/2 (0,26 mA/cm2) : courbe en trait plein). En ordonnée, est portée la tension (en volts/Li/Li+) et en abscisse, est portée la capacité spécifique (en mAh/g) ; - la figure 2 est un graphique qui montre l'évolution de la capacité spécifique (en mAh/g) du composé de l'exemple 1 (LiFeo, ssBo, 033P4 ) en fonction du nombre de cycles et à différents régimes (dans l'ordre des nombres de cycles croissants C/10, C/1, C/3, C/2, C/1) ; - la figure 3 est un graphique montrant la courbe de cyclage intentiostatique du composé LiFeP04 non dopé.
Exemple 1 Préparation du composé selon l'invention de formule LiFeo,95BO,033PO4- On prépare de l'orthophosphate de Fe(II) en tant qu'intermédiaire réactionnel par précipitation dans une phase aqueuse à partir de FeS04.7H20 en milieu Na3P04, le précipité se forme immédiatement. 10,16 g de l'orthophosphate Fe3(P04)2,5H20 ainsi obtenus sont ensuite mélangés intimement à 2,76 g de Li3P04 et 0,23 g de BP04 dans un broyeur sous atmosphère neutre (Ar ou N2) pendant au moins 8 heures.
Le mélange résultant est ensuite traité thermiquement sous atmosphère neutre pendant 15 minutes à une température de 600 C.
On obtient une olivine dopée au bore avec un rapport atomique B/Fe = 0,035 et de formule LiFeo, 95Bo, 033P4.
Exemple 2 Préparation du composé selon l'invention de formule LiMno, 9sBo, 033P04 15,47 g de phosphate de manganèse (II) de forme hureaulite (Mns {P04) 2 (P030H) z, 4H20) sont mélangés intimement à 2,52 g de MnC03,xH20 x = 0,2, 4,92 g de Li3PO4 et 0,40 g de BP04 dans un broyeur sous atmosphère neutre (Ar ou N2) pendant au moins 8 heures.
On obtient une olivine dopée au bore avec un rapport atomique B/Mn = 0,035 et de formule Mno,95Bo,033P04.
Exemple 3 Préparation du composé selon l'invention de formule Li3Fel, 93B0, o (P04) 3 .
15,0 g de FeP04, xH20 (M = 188,04 g/mol), 6,74 g de Na3PO4 et 0,304 g de BP04 sont mélangés intimement sous air dans un broyeur planétaire pendant 20 heures. Ce mélange activé mécano-chimiquement subit alors un traitement thermique à 800 C sous air pendant 15 minutes. Un composé de structure isotype du Nasicon de formulation voisine de Na3Fe1,93B0,07(P04)3 est obtenu. Le composé final de formule Li3Fe1,g3B0,o(PO4)3 3 est alors obtenu par échange d'ions à partir de Na3Fe1,93B0,07 (P04)3 dans une solution concentrée de LiN03 dans H20 avec Lisolution/Nasolide > 10 pendant 1 jour.
Exemples 4 Exemple 4A Fabrication d'un accumulateur au lithium dont l'électrode positive comprend le composé selon l'invention préparé dans l'exemple 1.
a) Fabrication de l'électrode positive Le produit obtenu dans l'exemple 1 est mélangé à 80 % en masse à du noir d'acétylène (Super P, MMM Carbon, Belgique) (10 %) et du poly(fluorure de vinylidène) (Solef 6020, Solvay, Belgique) (10 %) dissous dans de la N-méthyl-pyrrolidone.
Le mélange est ensuite enduit sur une feuille d'aluminium, puis séché à 60 C, puis porté à 100 C sous vide. b) Fabrication de l'accumulateur L'électrode positive ainsi réalisée est introduite dans une cellule type pile bouton format 2432. L'électrode négative est constituée d'une feuille de lithium de qualité batterie (Chemetall-Foote corporation, USA). Le séparateur est constitué d'un film de polypropylène microporeux (Celgard 3200, Aventis). L'électrolyte utilisé est composé de carbonate d'éthylène, de carbonate de di-méthyle, et d'hexafluorophosphate de lithium (LiPF6) (Electrolyte Selectipur LP30, Merck, RFA). c) Essais réalisés avec l'accumulateur Comme on peut le constater sur la figure 1, à 25 C, la batterie ainsi constituée opère entre 4,5 V et 2,0 V et permet l'extraction/insertion réversible de lithium correspondant à environ 140 mAh/g de composé actif positif à un régime de C/2, c'est-à-dire avec une
Lorsqu'il s'agit d'un polymère hydrophile, on peut citer à titre d'exemple les polyéthers, les polyesters sulfonés, les polyamides sulfonés, ou un mélange de ces polymères. A titre préférentiel, le
composé hydrophile est un polyéther et notamment un poly(oxyde d'éthylène) ou poly(oxyde de propylène).
Les polymères poly (vinyllactame) selon l'invention comprennent : -a) au moins un monomère de type vinyl lactame ou alkylvinyllactame; -b) au moins un monomère de structures (Ib) ou (IIb) suivantes : dans lesquelles : X désigne un atome d'oxygène ou un radical NR6, R1 et R6 désignent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un radical alkyl linéaire ou ramifié en C1-C5,
R2 désigne un radical alkyle linéaire ou ramifié en C1-C4, R3, R4 et R5 désignent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un radical alkyle linéaire ou ramifié en C1-C30 ou un radical de formule (IIIb) : -(Y2)r-(CH2-CH(R7)-O)x-R8 (Illb) Y , Y1 et Y2 désignent, indépendamment l'un de l'autre, un radical alkylène linéaire ou ramifié en C2-C16, R7 désigne un atome d'hydrogène, ou un radical alkyle linéaire ou ramifié en C1-C4 ou un radical hydroxyalkyle linéaire ou ramifié en C1-C4, Rg désigne un atome d'hydrogène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié en C1-C30, p, q et r désignent, indépendamment l'un de l'autre, soit la valeur zéro, soit la valeur 1, m et n désignent, indépendamment l'un de l'autre, un nombre entier allant de 0 à 100, x désigne un nombre entier allant de 1 à 100, Z désigne un anion d'acide organique ou minéral, sous réserve que : - l'un au moins des substituants R3, R4 R5 ou Rg désigne un radical alkyle linéaire ou ramifié en C9-C30, - si m ou n est différent de zéro, alors q est égal à 1, - si m ou n sont égaux à zéro, alors p ou q est égal à 0.
Les polymères poly (vinyllactame) selon l'invention peuvent être réticulés ou non réticulés et peuvent aussi être des polymères blocs.
Le monomère vinyl lactame ou alkylvinyllactame est de préférence un composé de structure (IVb) : dans laquelle : s désigne un nombre entier allant de 3 à 6, R9 désigne un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C5, RIO désigne un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C5, sous réserve que l'un au moins des radicaux R9 et R10 désigne un atome d'hydrogène.
Les polymères poly (vinyllactame) selon l'invention peuvent également contenir un ou plusieurs monomères supplémentaires, de préférence cationiques ou non ioniques.
A titre de composés plus particulièrement préférés selon l'invention, on peut citer les terpolymères suivants comprenant au moins : a) -un monomère de formule (IVb), b)-un monomère de formule (Ib) dans laquelle p=l, q=0, R3 et R4 désignent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C5 et R5 désigne un radical alkyle en C9-C24 et c) -un monomère de formule (IIb) dans laquelle R3 et R4 désignent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C5.
2-Réponse humorale La réponse humorale est mesurée par la présence dans le sérum d'anticorps de type IgG dirigés contre le VEGF murin, déterminée par ELISA et exprimée en titre (inverse de la dilution donnant une densité optique supérieure à 0. 3). La figure 5 représente les titres en anticorps obtenus.
Les souris immunisées avec la préparation KLH-VEGF murin présentent des titres d'anticorps de type IgG plus importants que ceux des souris immunisées avec le VEGF murin uniquement.
L'activité neutralisante de ces anticorps a été mesurée à l'aide du test d'activité biologique du VEGF, facteur de croissance sélectif des cellules endothéliales. Des cellules endothéliales (HUVECs) sont cultivées dans des puits à fond plat d'une plaque de microculture à raison de 3000 cellules par puits. Les sérums de chaque groupe de souris ont été regroupés. Différentes dilutions de ces pools de sérums (1/100 - 1/800) prélevés à J-2 et J72 ont été pré-incubées pendant 2 heures avec 20 ng/ml de VEGF murin puis déposées sur ces cellules endothéliales. La culture cellulaire s'est poursuivie à 37 C en atmosphère humide chargée à 5 % de C02 pendant 3 jours. 18 heures avant la fin de l'incubation, 0. 5 1-1 Ci de thymidine tritiée/puits sont ajoutés. Les sérums neutralisants empêchent le VEGF murin d'induire la prolifération des cellules endothéliales, alors que les sérums non neutralisants permettent la prolifération de ces cellules. Les résultats sont
donnés en pourcentage de neutralisation. La figure 6 présente les résultats obtenus.
Les anticorps induits par le complexe ont un pouvoir neutralisant plus important que celui induit par le VEGF murin.
*Exemple 18 : Activité immunogénique de l'hétérocomplexe KLH-VEGF humain A. Matériel et méthodes L'activité immunogénique (humorale) de la préparation KLH-VEGF humain par rapport à celle du VEGF humain a été étudiée chez la souris balb c de 18-20 g.
1-immunisation Au jour 0,7, 14,21 un groupe de 8 souris reçoit une injection de 0.1 ml (10 g d'une émulsion en AIF par voie intramusculaire. Une injection de rappel de 5 g en AIF est donnée à J60.
L'absence d'immunotoxicité de l'hétérocomplexe est évaluée in vitro par un test de prolifération cellulaires réalisé sur des PBMCs cultivées en présence du complexe et stimulées par du PPD ou du Tétanos toxoïde.
B. Résultats : 1-Absence de toxicité de l'hétérocomplexe in vivo et in vitro Les souris immunisées aussi bien par la préparation de KLH-VEGF humain que par le VEGF humain uniquement ne présentent aucun signe
clinique et aucune lésion anatomique. Le test d'immunosuppression montre que des doses de 100 ng/ml à 1 g/ml de KLH-VEGF humain ne diminuent pas la prolifération des lymphocytes.
2-Réponse humorale La réponse humorale est mesurée par la présence dans le sérum d'anticorps de type IgG dirigés contre le VEGF humain, déterminée par ELISA et exprimée en titre (inverse de la dilution donnant une densité optique supérieure à 0. 3). La figure 7 représente les titres en anticorps obtenus.
(6) Les polyaminoamides solubles dans l'eau préparés en particulier par polycondensation d'un composé acide avec une polyamine ; ces polyaminoamides peuvent être réticulés par une épihalohydrine, un diépoxyde, un dianhydride, un dianhydride non saturé, un dérivé bis-
insaturé, une bis-halohydrine, un bis-azétidinium, une bishaloacyldiamine, un bis-halogénure d'alkyle ou encore par un oligomère résultant de la réaction d'un composé bifonctionnel réactif vis-à-vis d'une bis-halohydrine, d'un bis-azétidinium, d'une bis-haloacyldiamine, d'un bishalogénure d'alkyle, d'une épilhalohydrine, d'un diépoxyde ou d'un dérivé bis-insaturé ; l'agent réticulant étant utilisé dans des proportions allant de 0,025 à 0,35 mole par groupement amine du polyaminoamide ; polyaminoamides peuvent être alcoylés ou s'ils comportent une ou plusieurs fonctions amines tertiaires, quaternisées. De tels polymères sont notamment décrits dans les brevets français 2. 252.840 et 2. 368.508 .
(8) Les polymères obtenus par réaction d'une polyalkylène polyamine comportant deux groupements amine primaire et au moins un groupement amine secondaire avec un acide dicarboxylique choisi parmi l'acide diglycolique et les acides dicarboxyliques aliphatiques saturés ayant de 3 à 6 atomes de carbone. Le rapport molaire entre le polyalkylène polylamine et l'acide dicarboxylique étant compris entre 0,8 : et 1,4 : le polyaminoamide en résultant étant amené à réagir avec l'épichlorhydrine
dans un rapport molaire d'épichlorhydrine par rapport au groupement amine secondaire du polyaminoamide compris entre 0,5 : 1 et 1,8 : De tels polymères sont notamment décrits dans les brevets américains 3. 227.615 et 2.961.347.
(9) Les cyclopolymères d'alkyl diallyl amine ou de dialkyl diallyl ammonium tels que les homopolymères ou copolymères comportant comme constituant principal de la chaîne des motifs répondant aux formules (V) ou (VI) : formules dans lesquelles k et t sont égaux à 0 ou 1, la somme k + t étant égale à 1 ; R9 désigne un atome d'hydrogène ou un radical méthyle ; R7 et Rg, indépendamment l'un de l'autre, désignent un groupement alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, un groupement hydroxyalkyle dans lequel le
groupement alkyle a de préférence 1 à 5 atomes de carbone, un groupement amidoalkyle inférieur (C1-C4), ou R7 et Rg peuvent désigner conjointement avec l'atome d'azote auquel ils sont rattachés, des groupement hétérocycliques, tels que pipéridinyle ou morpholinyle ; R7 et Rg indépendamment l'un de l'autre désignent de préférence un groupement alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone ; Y- est un anion tel que bromure, chlorure, acétate, borate, citrate, tartrate, bisulfate, bisulfite, sulfate, phosphate. Ces polymères sont notamment décrits dans le brevet français 2.080.759 et dans son certificat d'addition 2.190.406.
(10) Le polymère de diammonium quaternaire contenant des motifs récurrents répondant à la formule : formule (VII) dans laquelle : R10, R11, R12 et R13, identiques ou différents, représentent des radicaux aliphatiques, alicycliques, ou arylaliphatiques contenant de 1 à 6 atomes de carbone ou des radicaux hydroxyalkylaliphatiques inférieurs, ou bien R10, R11, R12 et R13, ensemble ou séparément, constituent avec les atomes d'azote auxquels ils sont rattachés des hétérocycles contenant éventuellement un second hétéroatome autre que l'azote ou bien R10, R11,
R12 et R13 représentent un radical alkyle en Cl-C6 linéaire ou ramifié substitué par un groupement nitrile, ester, acyle, amide ou -CO-O- R14-D ou -CO-NH- R14-D où R14 est un alkylène et D un groupement ammonium quaternaire ; Al et B1 représentent des groupements polyméthyléniques contenant de 2 à 6 atomes de carbone pouvant être linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, et pouvant contenir, liés à ou intercalés dans la chaîne principale, un ou plusieurs cycles aromatiques, ou un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre ou des groupements sulfoxyde, sulfone, disulfure, amino, alkylamino, hydroxyle, ammonium quaternaire, uréido, amide ou ester, et X- désigne un anion dérivé d'un acide minéral ou organique; Al, R10 et R12 peuvent former avec les deux atomes d'azote auxquels ils sont rattachés un cycle pipérazinique ; outre si Al désigne un radical alkylène ou hydroxyalkylène linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, BV1 peut également désigner un groupement -(CH2)n-CO-D-OC-(CH2)n- dans lequel n est compris entre 1 et 100 et de préférence entre 1 et 50, et D désigne : a) un reste de glycol de formule : -O-Z-O-, où Z désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié ou un groupement répondant à l'une des formules suivantes : -(CH2-CH2-O)x-CH2-CH2- - [CH2-CH(CH3)-O]y-CH2-CH(CH3)- où x et y désignent un nombre entier de 1 à 4, représentant un degré de polymérisation défini et unique ou un nombre quelconque de 1 à 4 représentant un degré de polymérisation moyen ; b) un reste de diamine bis-secondaire tel qu'un dérivé de pipérazine ;
Lesdits polymères amphotères à chaîne grasse préférés selon l'invention comprennent, ou sont préparés en copolymérisant : 1) au moins un monomère de formule (la) ou (Ib):
dans lesquelles, RI et R2, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, R3, R4 et R5, identiques ou différents, représente un radical alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 30 atomes de carbone, Z représente un groupe NH ou un atome d'oxygène, n est un nombre entier de 2 à 5, A- est un anion issu d'un acide organique ou minéral, tel qu'un anion méthosulfate ou un halogénure tel que chlorure ou bromure; 2) au moins un monomère de formule (II) R6-CH = CR7 -COOH (II) dans laquelle, R6 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical méthyle; et 3) au moins un monomère de formule (III) : R6 - CH=CR7-COXR8 (III) dans laquelle R6 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, X désigne un atome d'oxygène ou
d'azote et Rg désigne un radical alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 30 atomes de carbone ; l'un au moins des monomères de formule (la), (Ib) ou (III) comportant au moins une chaîne grasse.
Parmi ces derniers. les peptides 26N, 8N, 28N, IC, ION, 15N, 19N, 29N, 2C, 16N,
18N, 23N. 27N. 5C, 9N, UN, 13N, 14N, 17N, 24N. 4C et 22N se lient avec une bonne affinité à au moins 4 molécules HLA II différentes.
2) Deuxième série de peptides (figures 3 et Tableau IX) Les résultats illustrés par la figure 3 et le Tableau IX permettent de préciser les zones d'interaction des peptides avec les différentes molécules HLA II.
Tableau IX: Activités de liaison des peptides 9N et 29N vis-à-vis des molécules HLA II prépondérantes dans la population caucasienne.
DR1 DR3 DR4 DR7 DR11 DR13 DR15 DRB3 DRB4 DRB5 9N 1036-1055 51 >100000 950 2600 700 >100000 5500 1000 53 9N 1036-1050 16 >100000 350 2500 1100 >100000 1550 300 2000 9N 10411055 190 62500 2900 25000 2600 >100000 525 65000 11 29N 1552-1583 170 6750 4000 750 90 27333 60 25000 333 29N 1559-1573 29 >100000 3000 18 7 >100000 305 >100000 32 29N 1563-1577 8 3900 2100 16 817 3250 13 40000 12 29N 1569-1583 950 >100000 10500 3000 22 >100000 2800 >100000 21000
EXEMPLE 3 : IMMUNOGENICITE DE PEPTIDES NS3 IN VIVO CHEZ DES SOURIS TRANSGENIQUES POUR UNE MOLECULE HLA II La capacité des peptides ayant une bonne affinité pour les molécules HLA II tels que définis ci-dessus à induire une réponse immunitaire, a été évaluée par un test de prolifération in vitro, chez des souris transgéniques pour les molécules HLA-DR1 (Wilkinson et al., Infect. Immunity. 1999,67, 1501-; Rosloniec et al., J.
Exp. Med., 1997. 185. 1113-). préalablement immunisés avec ces peptides.
Plus précisément, le protocole utilisé est le suivant : 25 g de chacun des peptides 8N 1007-1037, 15N 1174-1195. 28N 1524-1553, 3C 93-107, 6C 148-173 et 12N 1094-1119, séparément, ou bien 10 g et 25 g d'un mélange des mêmes peptides 8N. 15N et 28N ont été émulsifiés dans du montanide et injectés, par voie sous-cutanée. à un groupe de 5 souris. 15jours après, une deuxième injection a été effectuée dans les mêmes conditions. Dix jours après cette deuxième injection, les animaux ont été sacrifiés et leur rate prélevée. Les splénocytes ont été mis en culture dans du milieu HL-1(BIOWHITTAKER) supplémenté par 1% de sérum de souris, en présence de 5ug/ml de chacun des peptides utilisés pour l'injection, ou en l'absence de peptide. Après 4 jours de culture, 1 Ci de thymidine tritiée (AMERSHAM, LIFE TECHNOLOGIE) a été rajoutée pendant 16 h. L'incorporation de la thymidine tritiée a ensuite été mesurée à l'aide d'un compteur béta (microbéta 1450, PERKIN
ELMER). Les résultats sont exprimés en index de prolifération (nombre de CPM en présence de peptide/nombre de CPM en l'absence de peptide).
Les résultats montrent que les peptides 8N1007-1037, 15N 1174- 1195 et 28N 1524-1553 qui possèdent une forte capacité de liaison à la molécule HLA-DR1 (IC50 de respectivement 2, 3 et 2 nM) induisent une forte réponse immunitaire chez ces souris alors que les peptides 3C93-107. 6C148-173 et 12N1094- 1119 qui possèdent un faible capacité de liaison à cette molécule (IC50 de respectivement 6333. 10000 et > 10000 nM) n'induisent pas d'effet (figure 4A). Ces résultats montrent également que l'injection d'un mélange de peptides n'a pas d'effet délétère sur la réponse immunitaire et permet d'induire une forte réponse contre chacun des peptides du mélange (figure 4B).
Ces résultats confirment que les peptides sélectionnés par le test de liaison aux molécules HLA II sont capables d'induire une forte réponse CD4+ chez les individus immunisés. Ils indiquent donc que les peptides sélectionnés peuvent être utilisés dans des compositions immunogènes pour la vaccination contre l'hépatite C.