INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans cet exemple, l'application A1, tournant sur l'équipement d'utilisateur UE1, d'adresse internet IP1, envoie des données à destination de l'équipement d'utilisateur UE2, d'adresse internet IP2, en utilisant le protocole Internet IP. A cette application A1 est associé le traitement suivant : Sécuriser sur la liaison satellite entre les stations ST1 et ST2 . Les données peuvent commencer à être émises sans sécurité et être sécurisées en cours de transmission, ou être bloquées par l'équipement UE1 tant qu'il n'y a pas eu confirmation de la sécurité du lien (comme dans l'exemple illustré).
Un paquet RSVP PATH à destination de l'équipement d'utilisateur UE2 est donc construit par l'équipement d'utilisateur UE1. Ce paquet contient la description du flux IP et des extensions précisant le traitement à lui appliquer. Ce paquet est envoyé vers la station ST1 en respectant le protocole de routage IP (flèche F1).
La station ST1 interprète les extensions RSVP du message PATH, et y ajoute éventuellement des informations sur son adresse satellite. Puis, elle fait suivre le message vers la station ST2 en utilisant le réseau satellite (flèche F2).
La station ST2 interprète les extensions RSVP du message PATH, et y ajoute éventuellement des informations sur son adresse satellite. Puis, elle fait suivre le message vers l'équipement UE2 (flèche F3).
La partie de l'équipement UE2 chargée de RSVP interprète le message RSVP PATH, et renvoie vers la station ST2 un message RSVP RESV qui reprend les informations du message PATH (flèche F4).
La station ST2 interprète les extensions RSVP du message RESV, et initialise la sécurisation du lien satellite entre ST1 et ST2. Puis, elle fait suivre le message vers la station ST1 (flèche F5).
La station ST1 interprète les extensions RSVP du message RESV, y ajoute la confirmation de la sécurisation du lien satellite avec la station ST2, et fait suivre le message à l'équipement UE1 (flèche F6).
Le nombre de moles d'a-picoline est en général voisin de 2 pour une mole de réactif comprenant les groupes partant.
En outre, la réaction est habituellement mise en oeuvre au reflux du réactif et/ou du solvant s'il est présent.
Le produit issu de cette première étape est ensuite contacté avec un aldéhyde correspondant de formule suivante : dans laquelle R1, R2 et Re ont les mêmes significations que précédemment indiquées.
Là encore, la réaction peut être effectuée en présence d'un solvant approprié, de préférence au reflux.
Il est à noter que les radicaux R1 et R2 de l'aldéhyde peuvent avoir la signification indiquée dans la formule générale détaillée auparavant.
Il est aussi possible de mettre en #uvre un aldéhyde pour lequel lesdits radicaux représentent des atomes d'hydrogène et effectuer conformément à des méthodes classiques, la substitution de ces atomes d'hydrogène par des radicaux appropriés tels que décrits dans la formule générale une fois la deuxième étape terminée.
On pourra notamment se référer à des synthèses telles que décrites dans US 4256458.
Le ou les colorants fluorescents présents dans la composition selon l'invention représentent avantageusement de 0,01 à 20 % en poids, plus particulièrement de 0,05 à 10 % en poids, et de préférence de 0,1à 5% en poids, du poids total de la composition.
La composition comprend en outre, à titre de composé essentiel de la composition, au moins un composé à fonction~acide particulier.
Plus précisément, ce composé à fonction acide est choisi parmi ceux dont le poids moléculaire est inférieur à 500 g/mol, et choisi parmi les composés minéraux et les composés organiques comprenant au moins une fonction carboxylique ou sulfonique, au moins un radical hydrocarboné, linéaire ou ramifié, saturé ou non, comprenant 1 à 30 atomes de carbone, ou aromatique comprenant 6 à 30 atomes de carbone, ledit radical hydrocarboné pouvant être substitué ou interrompu par un ou plusieurs hétéroatomes ou groupement comprenant au moins un hétéroatome, ou par un ou plusieurs atomes d'halogène.
En ce qui concerne les composés minéraux, on peut tout particulièrement citer les acides forts tels que l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique, l'acide orthophosphorique, seul ou en mélange.
Pour ce qui a trait au composé acide organique, celui-ci est plus particulièrement choisi parmi composés comprenant au moins une fonction carboxylique ou sufonique, au moins un radical hydrocarboné, linéaire ou ramifié, saturé ou non, comprenant 1 à 30 atomes de carbone, ou aromatique comprenant 6 à 30 atomes de carbone, ledit radical hydrocarboné pouvant être substitué et/ou interrompu par un ou plusieurs groupements choisis parmi-OH, -NH2, NHR, -OR avec R représentant un radical alkyle en C1-C4, atomes d'halogène comme le chlore, le fluor, ainsi que leurs mélanges.
A titre d'exemples de composés organiques convenables, conviennent notamment les acides monocarboxyliques comme les acides acétique, lactique, tartrique, benzoïque, anisidique, les acides aminés d'origine naturelle ou de synthèse, sous leur forme L, D, ou racémique, comme tout particulièrement la taurine, la lysine, l'arginine, l'acide aspartique, ainsi que les polyacides comme les acides citrique, succinique, maléique, adipique, et leurs mélanges.
La teneur en composé à fonction acide représente avantageusement 0,001 à 25 % en poids par rapport au poids de la composition, de préférence de 0,01 à 10 % en poids par rapport au poids de la composition.
Il est à noter que le pH de la composition est en outre plus particulièrement compris entre 3 et 12 environ, et de préférence entre 5 et 11environ.
Si nécessaire, il peut être avantageux pour régler le pH de la composition d'ajouter un agent alcalinisant choisi par exemple parmi l'ammoniaque, les carbonates alcalins, les alcanolamines telles que les mono-, di- et triéthanolamines ainsi que leurs dérivés, les hydroxydes de sodium ou de potassium et les composés de formule (E) suivante : dans laquelle W est un reste propylène éventuellement substitué par un groupement hydroxyle ou un radical alkyle en C1-C6 ; Ri, R2, R3 et R4, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle en Ci-Ce ou hydroxyalkyle en C1C6.
De préférence, on peut obtenir de tels polymères en mettant en oeuvre un procédé de préparation par activation thermique de copolymères hybrides silicones et organiques comprenant des motifs (I) : RxUySiO[4-(x+y)]/2 (I) dans lesquels: - x est égal à 0,1, 2 ou 3, y est égal à 0,1, 2 ou 3 avec 2 # (x+y) 3 et y est différent de 0 pour au moins un des motifs du copolymère hybride,
les symboles R, identiques ou différents, représentent : un radical alkyle linéaire ou ramifié contenant 1 à 8 atomes de carbone, éventuellement substitué par au moins un halogène, de préférence le fluor, les radicaux alkyle étant de préférence méthyle, éthyle, propyle, octyle et 3,3,3-trifluoropropyle, un radical cycloalkyle contenant entre 5 et 8 atomes de carbone cycliques, éventuellement substitué, un radical aryle contenant entre 6 et 12 atomes de carbone pouvant être substitué, de préférence phényle ou dichlorophényle, une partie aralkyle ayant une partie alkyle contenant entre 5 et 14 atomes de carbone et une partie aryle contenant entre 6 et 12 atomes de carbone, substituée éventuellement sur la partie aryle par des halogènes, des alkyles et/ou des alkoxyles contenant 1 à 3 atomes de carbone, les symboles U, identiques ou différents, représentent (II) : dans lequel : - x' = 1, 2,3 ou 4 en fonction de la valence de Z, - Z, identiques ou différents, représentent un atome de carbone, soufre, oxygène, phosphore, azote et/ou une valence libre, - R1, identiques ou différents, représentent : - un groupe (i) alkyle, acyle, aryle, alcène ou alcyne éventuellement substitué, - un cycle (ii) carboné, saturé ou non, éventuellement substitué et/ou aromatique, et/ou - un hétérocycle (iii), saturé ou non, éventuellement substitué, - ces radicaux (i), (ii) et (iii) pouvant être substitués avantageusement par: des groupes phényles substitués, des groupes aromatiques substitués, ou des groupes : alkoxycarbonyle, aryloxycarbonyle (-COOR ), carboxy (- COOH), acyloxy (-O2CR5), carbamoyle (-CONR 5 2), cyano (-CN), alkylcarbonyle, alkylarylcarbonyle, arylcarbonyle, arylalkylcarbonyle, phtalimido, maleïmido, succinimido, amidino, guanidimo, hydroxy (-OH),
18 amino (-NR52), halogène, allyle, époxy, alkoxy (-OR 5 ), S-alkyle, S-aryle, des groupes présentant un caractère hydrophile ou ionique tels que les sels alcalins d'acides carboxyliques, les sels alcalins d'acide sulfonique, les chaînes polyoxyde d'alkylène (POE, POP), les substituants cationiques (sels d'ammonium quaternaires), R , identiques ou différents, représentant un groupe alkyle ou aryle, et/ou une chaîne polymère, - un groupement (iv) de formule -CnF(2n+i) avec n compris entre 1 et 20, - un groupement (v) de formule suivante : dans laquelle : - R6, R7, identiques ou non, sont choisis parmi un groupe halogène, -N02, -SO3R10, -NCO, -CN, -OR' , -SR10, -N(R' )2, -COOR'o, -O2CR10, -CON(R10)2, -NCO(R10)2 et -CnF(2n+i) avec n compris entre 1 et 20, de préférence égal à 1; - avec R10 représentant : * un atome d'hydrogène, * ou un radical alkyle, alcényle, alcynyle, cycloacényle, cycloalcynyle, alkaryle, aralkyle, hétéroaryle ou aryle éventuellement condensé à un hétérocycle aromatique ou non ; radicaux pouvant éventuellement être substitués par : . un ou plusieurs groupes identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'halogènes, =0, =S,-OH, alcoxy, SH, thioalcoxy, NH2, mono ou di-alkylamino, CN, COOH, ester, amide, CnF(2n+i) et/ou éventuellement interrompu par un ou plusieurs atomes choisis parmi O,S,N,P; . ou un groupe hétérocyclique éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes tels que définis précédemment ; . ou R6 et R7 forment ensemble avec l'atome de carbone auquel ils sont attachés, un groupe =0, =S, un cycle hydrocarboné ou un hétérocycle ; - et R8 et R9, identiques ou différents, représentent un groupe tel que défini ci-dessus pour R10; ou forment ensemble une chaîne
hydrocarbonée en C2-C4, éventuellement interrompue par un hétéroatome choisi parmi 0, S et N ; - V et V', identiques ou différents, représentent : H, un groupe alkyle ou un halogène, - X et X', identiques ou différents, représentent H, un halogène ou un groupe R4, OR4, 02COR4, NHCOH, OH, NH2, NHR4, N(R4)2, (R4)2N+O-, NHCOR4, C02H, C02R4, CN, CONH2, CONHR4 ou CONR42, dans lesquels R4 est choisi parmi les groupes alkyle, aryle, aralkyle, alkaryle, alcène ou organosilyle, éventuellement perfluorés et éventuellement substitués par un ou plusieurs groupes carboxyle, époxy, hydroxyle, alkoxy, amino, halogène ou sulfonique, -R2 et R 3, identiques ou différents, représentent : - un groupe (i) alkyle, acyle, aryle, alcène ou alcyne éventuellement substitué, - un cycle (ii) carboné, saturé ou non, éventuellement substitué et/ou aromatique, - un hétérocycle (iii), saturé ou non, éventuellement substitué, - un atome d'hydrogène, des groupes : alkoxycarbonyle, aryloxycarbonyle (-COOR ), carboxy (-COOH), acyloxy (-O2CR5), carbamoyle (-CONR52), cyano (-CN), alkylcarbonyle, alkylarylcarbonyle, arylcarbonyle, arylalkylcarbonyle, phtalimido, maleïmido, succinimido, amidino, guanidimo, hydroxy (-OH), amino (-NR52), halogène, allyle, époxy, alkoxy (-OR 5 ), S-alkyle, S-aryle, des groupes présentant un caractère hydrophile ou ionique tels que les sels alcalins d'acides carboxyliques, les sels alcalins d'acide sulfonique, les chaînes polyoxyde d'alkylène (POE, POP), les substituants cationiques (sels d'ammonium quaternaires), R , identiques ou différents, représentant un groupe alkyle ou aryle, et/ou une chaîne polymère, - les radicaux (i), (ii) et (iii) pouvant être substitués avantageusement par: des groupes phényles substitués, des groupes aromatiques substitués, ou des groupes : alkoxycarbonyle, aryloxycarbonyle (-COOR ), carboxy (- COOH), acyloxy (-O2CR5), carbamoyle (-CONR 2), cyano (-CN), alkylcarbonyle, alkylarylcarbonyle, arylcarbonyle, arylalkylcarbonyle, phtalimido, maleïmido, succinimido, amidino, guanidimo, hydroxy (-OH), amino (-NR52), halogène, allyle, époxy, alkoxy (-OR5), S-alkyle, S-aryle, des groupes présentant un caractère hydrophile ou ionique tels que les sels alcalins d'acides carboxyliques, les sels alcalins d'acide sulfonique, les chaînes polyoxyde d'alkylène (POE, POP), les substituants cationiques (sels
d'ammonium quaternaires), R ,identiques ou différents, représentant un groupe alkyle ou aryle, et/ou une chaîne polymère, - W, identiques ou différents, représentent un radical divalent choisi parmi -O-, -NR4-, -NH-, -S-, - Sp, identiques ou différents, représentent une rotule constituée d'un radical divalent organique de formule -(CH2)x"'- dans lequel x"' est compris entre 1 et 20, ce radical pouvant être substitué et/ou contenir au moins un hétéroatome, - a = 0 ou 1, - m # 1, et lorsque m > 1 les motifs unitaires répétitifs d'indice m sont identiques ou différents, procédé dans lequel on met en contact : - au moins un monomère éthyléniquement insaturé de formule (III): CXX' (= CV - CV')a = CH2, - un composé silicone précurseur comprenant des motifs, identiques ou différents de formule (IV): RxU'ySiO[4-(x+y)]/2 dans lequel : - R, x et y correspondent aux valeurs données précédemment, et le radical monovalent U' est selon la formule suivante (V) : - et un initiateur de polymérisation radicalaire.
L'initiateur de polymérisation radicalaire peut être choisi parmi les initiateurs classiquement utilisés en polymérisation radicalaire. Il peut s'agir par exemple d'un des initiateurs suivants : - les peroxydes d'hydrogène, tels que l'hydroperoxyde de butyle tertiaire, l'hydroperoxyde de cumène, le t-butyl-peroxyacétate, le t-butylperoxybenzoate, le tbutylperoxyoctoate, le t-butylperoxynéodécanoate, le t-butylperoxyisobutarate, le peroxyde de lauroyle, le t-amylperoxypivalte, le t-butylperoxypivalate, le peroxyde de dicumyl, le peroxyde de benzoyle, le persulfate de potassium, le persulfate d'ammonium, - les composés azoïques tels que : le 2-2'-azobis(isobutyronitrile), le 2,2'-azobis(2butanenitrile), le 4,4'-azobis(4-acide pentanoïque), le 1,1'-azobis(cyclohexane-
carbonitrile), le 2-(t-butylazo)-2-cyanopropane, le 2,2'-azobis[2-méthyl-N-(1,1)bis(hydroxyméthyl)-2-hydroxyéthyl] propionamide, le 2,2'-azobis(2-méthyl-Nhydroxyéthyl]-propionamide, le dichlorure de 2,2'-azobis(N,N'-diméthylène isobutyramidine), le dichlorure de 2,2'-azobis (2-amidinopropane), le 2,2'-azobis (N, N'diméthylèneisobutyramide), le 2,2'-azobis(2-méthyl-N-[1,1-bis (hydroxyméthyl)-2hydroxyéthyl] propionamide), le 2,2'-azobis(2-méthyl-N-[1,1-bis (hydroxyméthyl)éthyl] propionamide), le 2,2'-azobis[2-méthyl-N-(2-hydroxyéthyl) propionamide], le 2,2'azobis (isobutyramide) dihydrate, - les systèmes redox comportant des combinaisons telles que : les mélanges de peroxyde d'hydrogène, d'alkyle, peresters, percarbonates et similaires et de n'importe lequel des sels de fer, de sels titaneux, formaldéhyde sulfoxylate de zinc ou formaldéhyde sulfoxylate de sodium, et des sucres réducteurs ; les persulfates, perborate ou perchlorate de métaux alcalins ou d'ammonium en association avec un bisulfite de métal alcalin, tel que le métabisulfite de sodium, et des sucres réducteurs ; les persulfates de métal alcalin en association avec un acide arylphosphinique, tel que l'acide benzène phosphonique et autres similaires, et des sucres réducteurs.
La quantité d'initiateur à utiliser est déterminée de manière à ce que la quantité de radicaux générés soit d'au plus 20 % en mole par rapport à la quantité de composé précurseur silicone (IV), de préférence d'au plus 5 % en mole.
Comme monomère éthyléniquement insaturé, on utilise ceux qui ont été cités précédemment pour définir la fraction du copolymère soluble dans la phase interne.
Précisons en outre que le butadiène et le chloroprène correspondent au cas où a = 1 dans la formule (I) et (III), Pour la préparation des copolymères hybrides de formule (I) pour lesquels X = H et X' = NH2, on utilise de préférence à titre de monomères éthyléniquement insaturés les amides de la vinylamine, par exemple le vinylformamide ou le vinylacétamide. Puis le copolymère obtenu est hydrolysé à pH acide ou basique.
Pour la préparation des copolymères hybrides de formule (1) pour lesquels X = H et X' = OH, on utilise de préférence à titre de monomères éthyléniquement insaturés les esters vinyliques d'acide carboxylique, comme par exemple l'acétate de vinyle. Puis le copolymère obtenu est hydrolysé à pH acide ou basique.
Les types et quantités de monomères copolymérisables mis en oeuvre selon la présente invention varient en fonction de l'application finale particulière à laquelle est destiné le copolymère hybride.
Selon une première variante préférée, le copolymère hybride silicone et organique est constitué d'un squelette silicone linéaire comprenant de 1 à 300 motifs de formule (1), de préférence 1 à 200, et portant de 1 à 50 radicaux U, de préférence 1 à 10.
Selon une deuxième variante, au moins un des radicaux monovalents U' est de préférence de formule (VI) : dans laquelle R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe cyano, allkoxycarbonyle, alkyle, acyle, aryle, alcène ou alcyne éventuellement substitué ; et W est de définition identique à celle donnée précédemment, et de préférence est égal à un atome d'oxygène. A titre d'exemples, on citera les précurseurs silicones dans lesquelles U' correspond à :
Selon une troisième variante de l'invention, au moins une partie des radicaux monovalents U' de (s) précurseur(s)silicone(s) (IV) et donc au moins une partie des groupements U du copolymère hybride obtenu sont tels que Z soit un atome d'oxygène et/ou un atome de soufre.
Selon une quatrième variante, outre des motifs de formule (1), le copolymère hybride silicone et organique selon l'invention peut comprendre des motifs RxUyFzSiO[4- (x+y+z)]/2 (XIV) dans lesquels :
II. Résultats Il. 1. Expression fonctionnelle de la protéine tronquée mGlu5#S : Après transfection du plasmide construit conformément à la procédure décrite en partie I, dans les cellules HEK293, l'expression d'une protéine reconnue par un anticorps anti-HA a pu être vérifiée par western blot ainsi que par immunohistochimie (résultats non montrés). En outre, les cellules transfectées ont été marquées par l'anticorps anti-HA même si elles n'étaient pas perméabilisées. Du fait que l'épitope HA est placé à l'extrémité N-terminale de la protéine mGlu5AS (voir Figure 2), et se situe donc au niveau extracellulaire, il a été prouvé par immunohistochimie que la protéine était correctement adressée au niveau de la membrane plasmique.
L'analyse du couplage du récepteur sauvage mGlu5 à la voie de production des inositols phosphates (IP) dans les cellules HEK293 a montré que ce récepteur était partiellement actif même en absence de glutamate (Joly et al., 1995). Selon le modèle de fonctionnement des mGlus, il avait été proposé que cette activité constitutive du récepteur
provenait d'un équilibre dynamique entre des états inactifs et des états actifs du domaine heptahélice du récepteur (Parmentier et al., 2002). En accord avec cette hypothèse, l'expression de la protéine mGlu5AS dans les cellules HEK293 a conduit à une production basale d' IP plus importante que celle mesurée dans les cellules contrôles. Conformément au fait que le glutamate se fixe au niveau du domaine externe du récepteur, ce dernier stimulait la production d'IP dans les cellules exprimant le récepteur sauvage mGlu5, mais pas dans les cellules exprimant la protéine mGlu5AS (Figure 3).
11.2. Effet des régulateurs allostériques sur la fonction de la protéine tronquée mGlu5#S : La production basale d'IP dans les cellules exprimant le récepteur mGlu5 sauvage (témoin de l'activité constitutive du récepteur) pouvait être inhibée par le régulateur allostérique négatif MPEP (Pagano et al., 2000) avec un Cl50 (concentration en régulateur allostérique négatif nécessaire pour obtenir 50% de son effet maximal) de 5,7 0,6 M (n=4) (Figure 4).
Cet effet du MPEP était également observé sur les cellules exprimant la protéine mGlu5AS, avec un C150 de 9,8 2,5 pM (n=3) (Figure 4), non différent significativement de la valeur déterminée sur le récepteur sauvage. Ceci a confirmé que le MPEP agit au niveau du domaine heptahélice du récepteur, et que le domaine extracellulaire n'a pas d'influence sur son affinité apparente. Ce résultat a également démontré que l'activité basale de production d'IP dans les cellules HEK293 exprimant la protéine mGlu5AS, résulte bien de la capacité de cette protéine à activer la voie intracellulaire de façon constitutive.
Le DFB a récemment été décrit comme un régulateur allostérique positif du récepteur mGlu5 (Williams et al., 2002). Afin de tester son effet sur la protéine mGlu5AS, du DFB a été synthétisé par F. Acher (UMR Université R. Descartes, rue des Saints Pères, Paris 5). En accord avec les données publiées, le DFB n'activait pas de façon significative le
récepteur mGlu5 sauvage dans des conditions où la concentration de glutamate dans le milieu d'incubation était maintenue au plus bas par la co-expression du transporteur du glutamate EAAC1, et par l'ajout de l'enzyme GPT (qui dégrade le glutamate en présence de pyruvate (2mM)) dans le milieu d'incubation (Figure 5). En revanche, le DFB potentialisait l'effet des agonistes glutamate et quisqualate, en abaissant la valeur de leur CE50 (concentration d'agoniste nécessaire pour obtenir 50% de son effet maximal) d'un facteur supérieur à 2 (Tableau 1 et Figure 5). En présence d'une faible concentration d'agoniste, le DFB augmentait la production d'IP de façon "dose-dépendante" avec un CE50 de 1,81 1,04 M.
Le tableau 1 ci-dessous montre la potentialisation de l'effet du glutamate et du quisqualate sur mGlu5 par le DFB. Les valeurs de CE50 ont été déterminées à partir d'expériences d'effet dose du glutamate et du quisqualate en présence ou en absence de DFB, similaires à l'expérience décrite dans la figure 5. Les données correspondent à la moyenne écart type à la moyenne de (n) expériences.
Tableau 1 Glutamate Quisqualate Base 47,6 10,1 M (5) 20,3 1,0 M (1) 100M DFB 25,8 5,7 M (4) 5,6 1,3 M (1)
Sur les cellules exprimant la protéine mGlu5AS, le DFB stimulait la production d'IP, et se comportait donc comme un agoniste (Figure 6A). Cet effet du DFB dépendait de la concentration de DFB utilisée, avec une CE50 de 8,0 3,0 M (n=3), peu différente de la CE50 mesurée pour la potentialisation de l'effet du glutamate sur le récepteur sauvage, confirmant que le DFB agit au niveau du domaine heptahélice du
récepteur. D'autre part, l'effet du DFB était inhibé par le MPEP, tant sur le récepteur sauvage (données non montrées) que sur la protéine mGlu5#S (Figure 6B), ce qui a confirmé que l'effet du DFB résultait de son action sur la protéine mGiu5AS.
En conséquence, le domaine heptahélice du récepteur mGlu5 (mGlu5AS) est seul capable d'activer les protéines G, dans la mesure où cette partie du récepteur mGlu5 est seule capable d'atteindre un état conformationnel actif. En outre, le régulateur allostérique négatif (antagoniste non-compétitif doué d'activité agoniste inverse) MPEP inhibe l'activité basale de cette protéine mGlu5AS, et le DFB est capable d'activer cette protéine. Aussi ces molécules n'ont-elles pas besoin du domaine externe pour agir. Des protéines correspondant au domaine heptahélice des récepteurs RCPG-III constituent donc de bons outils pour identifier des régulateurs allostériques de ces récepteurs.
REFERENCES Bockaert J and Pin J-P (1999) Molecular tinkering of G-protein coupled receptors : an evolutionary success. EMBO J 18:1723-1729.
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Duthey B, Caudron S, Perroy J, Bettler B, Fagni L, Pin J-P and Prézeau L (2002) A single subunit (GB2) is required for G-protein activation by the heterodimeric GABAB receptor. J Biol Chem 277:3236-3241.
Avant emploi, le pH du substrat aqueux peut être ajusté à la valeur désirée à l'aide de tout agent alcalinisant classiquement utilisé par l'homme du métier tel que par exemple la soude ou la potasse.