INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
- les moyens de désactivation des moyens de blocage sont constitués d'un bras commandable de déplacement du trou de blocage en dehors de la trajectoire de rotation du loquet.
- les moyens de commande des moyens de désactivation des moyens de blocage et des moyens de désactivation des moyens d'arrêt comportent un bras de commande pivotant, relié d'un côté du pivot au bras de maintien de la butée en position escamotée et, de l'autre côté du pivot, au bras de déplacement du trou de blocage, pour la désactivation alternative des moyens de blocage et des moyens d'arrêt.
Les dessins ci-joints sont donnés à titre d'exemples et ne sont pas limitatifs de l'invention. Ils représentent seulement un mode de réalisation de l'invention et permettront de la comprendre aisément.
La figure 1 est une vue générale de face du dispositif de l'invention.
La figure 2 est une illustration de certains éléments de l'invention en vue de côté.
La figure 4 est une vue partielle d'autres éléments de l'invention en vue de côté.
La figure 3 est une vue en coupe selon les lignes A-A de la figure 1.
Les figures 5 à 10 illustrent des phases successives de fonctionnement du dispositif selon l'invention dans un mode d'empilage de palettes.
Les figures 11 à 13 présentent des éléments de l'invention pour le fonctionnement en mode empilage.
Les figures 14 et 15 présentent deux phases de fonctionnement d'éléments de l'invention en mode empilage.
Les procédures font partie de la description et sont changées pour chaque projet. L'exemple typique de leur utilisation est la génération d'interconnexion entre les composants. Souvent, le tableau correspondant à toutes les interconnexions possibles serait trop grand et difficile à générer et maintenir. En revanche une procédure peut être très compacte.
La description des règles d'interconnexion des composants (TCRC) contient des paramètres globaux communs à tous les types de composants.
Elle peut se présenter sous forme d'au moins une table. Dans le mode de réalisation de la figure 6, elle se présente sous forme de sept tables associatives (hachages), dont trois ont pour entrées (%InstNameModuleMap, %SysConnectMap, %SysSpecMap) les noms désignant l'ensemble des modèles possibles pour un même composant : - La table "%InstNameModuleMap" (cf. 2 de A1), qui figure dans le fichier patent~config~defs.pm, pour décrire les Composants explicites.
Cette table représente les règles de génération de connexion entre les signaux. Elle a pour entrées Connect et SelfConnect.
- La table "%SysConnectMap" qui figure dans le fichier patent~Sysconfig~defs.pm pour les Blocs Système.
- La table "%SysSpecMap" (cf. 4 de A2) qui figure dans le fichier patent~Sysconfig~defs.pm pour les Blocs Intermédiaires.
Les deux tables de hachage %SysWrapMap et %SysPinConst (cf. 6 de A2) contiennent les règles de connexion niveau système. La table de hachage %Activity~TypeMap associe le nom d'un composant avec son type. La table de hachage %PortProbeMap a pour entrées les noms des modules de type HDL utilisée dans la description des composants.
Le système Configurateur est piloté par au moins une table de règles de cohérence de connexions (TRCOH) qui représente les règles d'interconnexion entre les composants et d'insertion des composants intermédiaires. Dans le mode de réalisation de la figure 6, les règles de cohérence de connexions sont réparties sous forme des deux tables suivantes : %HwfConnectivityMap (cf. 2 de A2) %HwifAiternateMap Le système Configurateur est piloté par au moins une table de formatage de fichiers source (TFMT) qui représente les règles de génération des instances des objets de type HLL. Dans le mode de réalisation de la figure 6, les règles de génération des instances des objets de type HLL sont réparties sous forme des deux tables suivantes :
. %moduleToCppClassMap (cf. 1 de A5) . %classCppProtoMap (cf. 2 de A5) Le rôle de chacune de ces tables de hachage est détaillé ci-après.
Parmi les entrées définies pour les tables %InstNameModuleMap, %SysConnectMap, %SysSpecMap, certaines sont obligatoires : - L'entrée "MatchExpr", dont la valeur est l'expression régulière qui permet d'accepter un nom (label) du composant dans le fichier de configuration, est utilisée pour définir les variantes de positions autorisées pour le composant.
- L'entrée "ExtrExpr", dont la valeur est l'expression régulière qui assure l'extraction des paramètres numériques à partir du nom (label), est utilisée pour l'instanciation des Blocs Intermédiaires ou des Blocs Système ou pour générer le label du composant implicite.
D'autres paramètres sont facultatifs et peuvent être ajoutés à la description des tables mais ces paramètres ne peuvent être utilisés que par le code fourni avec la description - parmi eux : - NumAdd est un paramètre auxiliaire servant de modificateur pour les paramètres extraits par ExtrExpr, exploité par la procédure GenDest (voir ci-après).
- BaseldExpr est une expression régulière qui permet de retrouver le composant actif correspondant à un composant intermédiaire ou système en cas d'ambiguïté.
Les entrées suivantes du hachage définissent le Type du composant tel que, par exemple, DUT (modèle de type HDL), XACTOR (transactor), ou autres.
A chaque Type de Composant, correspond un hachage composé à son tour des entrées suivantes : - L'entrée "ReqModule" - contient le nom du module de type HDL (VERILOG) du composant et le nom du fichier source correspondant.
- L'entrée "Connect" - est la définition de la méthode de sélection des signaux faisant partie d'un Port. Cette description est composée d'une suite d'entrés indexés par le nom du Port. À chaque nom de Port on associe un tableau d'expressions régulières et un pointeur sur une procédure de connexion des signaux qui gère l'application de ces expressions aux noms des signaux de l'interface du composant.
Tableau III : et populations de l'espèce C. pipiens analysées
Classification Nom R/S* Pays Reference C. P' BO R Burkina-Faso Isolée par les inventeurs quinque HARARE R Zimbabwe Isolée par les inventeurs fasciatus SUPERCAR R Côte d'Ivoire (F. Chandre, Thèse de Doctorat, Université Paris XII, 1998).
DJI R Mali Isolée par les inventeurs MARTINIQUE R Martinique Bourguet et al., Biochem. Genet., 1996, 34, 351-362 RECIFE R Brésil Isolée en 1995 parA.-B. Failloux, Institut Pasteur, Paris (France) PRO-R S Etats-Unis Georghiou et al., Bull. Wld Hlth Org., 1966, 35, 691-708.
S-LAB S Etats-Unis Georghiou et al., Bull. Wld Hlth Org., 1966, 35, 691-708.
TEM-R S Etats-Unis Georghiou et al., J. Econ. Entomol., 1978, 71, 201-205.
TRANS-P S Etats-Unis Priesteret al., J. Econ. Entomol., 1978, 71, 197-200 LING S Chine Weill, et al., J. American Mosquito Control Assoc ;, 2001, 17, 238-244 THAI S Tha'ilande Guillemaud et al., Heredity, 1996, 77, 535-543.
MAO S Chine Qiao et al., Biochem. Genet., 1998, 36, 417426.
MADURAI S Inde Nielsen-Leroux, et al., J. Med. Entomol., 2002, 39, 729-735 BSQ S Afrique duSud Isolée en 1991 par A. J. Cornel (Sth Afr. Inst. Med. Res., South Africa) BED S Afrique duSud Isolée en 1991 par A. J. Cornel (Sth Afr. Inst. Med. Res., South Africa BOUAKE S Côte d'Ivoire Magnin et ai., J. Med. Entomol., 1988, 25, 99-104 BRAZZA S Congo Beyssat-Arnaouty, Thèse de Doctorat, Université de Montpellier Il (1989).
BRESIL S Brésil Isolée par les inventeurs MOOREA S Polynésie N. Pasteur, et al., Genet. Res., 1995, 66, 139-146 C. p. pipiens ESPRO R Tunisie H. Ben Cheikh et al., J. Am. Mosquito Contrai Assoc., 1993, 9, 335-337 PRAIAS R Portugal Bourguet et al., J. Econ. Entomol., 1996, 89, 1060-1066 PADOVA R Italie Bourguet et al., Genetics, 1997,147, 1225-1234.
BARRIOL R France Chevillon et al., Evolution, 1995, 49, 997-1007.
BRUGES-A S Belgique Raymond et al., Genet. Res., 1996, 67, 19 -26.
BRUGES-B S Belgique Raymond et al., Genet. Res., 1996, 67, 19-26.
KILLCARE S Autralie Guillemaud et al., Proc. R. Soc. Lond. B, 1997, 264, 245-251, BLEUET S France Rioux et al., C. R. Séances Soc. Biol. Fil.,1961, 155, 343-344 HETEREN S Pays-Bas Isolée par les inventeurs C. torrentium UPPSALA , S Suède M. Raymond, Ent. Tidskr., 1995, 116, 65-66.
* R/S résistant ou sensible aux insecticides de la classe des organophosphorés et des carbamates L'analyse par PCR-RFLP de l'ensemble des moustiques du Tableau III montre qu'il existe une corrélation parfaite entre la résistance aux insecticides et le profil de restriction par PCR-RFLP, à savoir : 1 bande (520 pb) est détectée chez les individus homozygotes sensibles SS, 2 bandes (357 pb et 163 pb) sont détectées chez les individus homozygotes résistants RR et 3 bandes (520 pb, 357 pb et 163 pb) sont détectées chez les individus hétérozygotes résistants RS (figure 8).
Ces résultats ont été confirmés par le séquençage du produit PCR de 520 pb pour l'ensemble des moustiques du Tableau III analysés par PCR-RFLP.
L'alignement des séquences obtenues (SEQ ID NO: 60 à 89), illustré dans le Tableau IV ci-dessous montre que chez les moustiques de l'espèce C. pipiens, la mutation glycine # sérine, située en position 739 en référence à la séquence de l'ADNc du gène ace-1 de la souche sensible de référence (souche S-LAB), qui est responsable de la résistance aux insecticides, provient de deux groupes de mutations indépendantes, respectivement chez C. pipiens pipiens et C. pipiens quiquefasciatus.
- Cephalocordés : Branchiostoma floridae : 076998 et 076999 ; Branchiostoma lanceolatum : Q95000 et Q95001.
- Urocordés : Ciona intestinalis : SEQ ID NO : 51 ; Ciona savignyi : SEQ ID NO : 52.
- Nématodes : Caenorhabditis elegans (1 à 4) : P38433,061371, 061459 et 061372 ; Caenorhabditis briggsae (1 à 4) Q27459, 061378Q9NDG9 et Q9NDG8 ; Dictyocaulus viviparus : Q9GPLO.
- Insectes : Anopheles gambiae (1 et 2) : ID NO:3 et SEQ ID NO: 53 (BM 629847 et BM 627478); Aedes aegypti (1 et 2) : SEQ ID NO: 9 et AAB3500 ; An. stephensi :P56161 ; Culex pipiens : SEQ ID NO: 7 (ace-1) et Esther data base pour ace-2 ; Drosophila melanogaster :P07140 ; Lucilia cuprina : P91954 ; Musca domestica: AAK69132.1 ; Leptinotarsa decemlineata : Q27677 ; Apis mellifera : AAG43568 ; Nephotettix cincticeps : AF145235~1 ; Schizaphis graminum : Q9BMJ 1.
- Arachnides : Rhipicephalus appendiculatus : 062563 ; Boophilus microplus (1 et 2) : 045210 et 061864 ; Boophilus decoloratus : 061987 ; - Mollusques : Loligo opalescens : 097110. g) Clonage du fragment K et génotypage d'ace-1 chez Culex pipiens L'ADN de moustique a été extrait comme décrit dans Rogers et al., [Plant Molecular Biology manual, 1988, eds. Gelvin, S.B.1Schilperoot, R. A. (Kluwer Academic Publishers, Boston), VoIA6, pl-10]. Les oligonucléotides PkdirAGSG ( 5'ATMGWGTTYGAGTACACSGAYTGG-3', SEQ ID NO: 39) et PkrevAGSG (5'GGCAAARTTKGWCCAGTATCKCAT-3', SEQ ID NO: 40) amplifient un fragment de 320 pb (fragment K) à partir de l'ADN génomique de plusieurs moustiques. 30 cycles d'amplification PCR ont été réalisés dans les conditions suivantes : 94 C pendant 30s, 50 C pendant 30s à et 72 C pendant 30s. Les séquences ont été déterminées directement sur les produits PCR sur un séquenceur ABI prism 310, à l'aide du kit Big Dye Terminator.
Le génotypage d'ace-1 chez Culex est réalisé dans les conditions suivantes : Les fragments K obtenus comme décrit précédemment sont digérés par
EcoRI et le produit de digestion est séparé par électrophorèse sur un gel d'agarose à 2%. Les profils de restriction montrent : 1 bande (320 pb) chez les moustiques homozygotes résistants RR, 2 bandes (106 pb et 214 pb) chez les moustiques homozygotes SS et 3 bandes (103 pb, 214 pb et 320 pb) chez les moustiques hétérozygotes RS. h) Clonage de l'ADNc d'ace-1 chez les individus sensibles et résistants L'ADNc du gène ace-1 de Culex pipiens a été obtenu à partir de l'ARN extrait d'individus de la souche sensible de référence S-LAB et de la souche résistante SR, au tout premier stade de développement larvaire L1. La transcription inverse a été réalisée avec un oligonucléotide 18T et la SuperScriptIIRNaseH (IN VITROGEN), selon les conditions recommandées par le fabricant.
- souche S-LAB Deux fragments d'ADNc ont été amplifiés par PCR à l'aide d'oligonucléotides dégénérés obtenus à partir de l'alignement des séquences des gènes ace-1 d'Anopheles gambiae et de Schizaphis graminum : - un fragment b (193pb) a été amplifié à l'aide du couple d'amorces PbdirAGSG (5'GGYGCKACMATGTGGAAYCC3', SEQ ID NO: 41) et PbrevAGSG (5'ACCAMRATCACGTTYTCYTCCGAC3', SEQ ID NO: 42).
- un fragment k (320pb) a été amplifié à l'aide du couple d'amorces PkdirAGSG (5'ATMGWGTTYGAGTACACSGAYTGG3', SEQ ID NO: 39) et PkrevAGSG (5'GGCAAARTTKGWCCAGTATCKCAT3', SEQ ID NO: 40).
Les fragments b et k ainsi obtenus ont ensuite été clonés et séquences, selon les techniques classiques connues en elles-mêmes de l'Homme du métier, telles que décrites dans Current Protocols in Molecular Biology (Frederick M. A USUBEL, 2000, Wiley and son Inc, Library of Congress, USA).
Un fragment d'ADNc de plus grande taille a été amplifié par PCR, à l'aide d'amorces spécifiques de Culex pipiens déduites des séquences des fragments b et k précédemment obtenues. A savoir : - un fragment CulexA (1127 pb) a été amplifié par PCR à l'aide du couple d'amorces amorces : culex-bdirl (5'TACATCAACGTGGTCGTGCCACG3', SEQ ID NO: 43) et culex-krevl (5'GTCACGGTTGCTGTTCGGG3', SEQ ID NO: 44). Le fragment Culex A de 1127 pb ainsi obtenu a ensuite été cloné et séquence, comme ci-dessus.
Les extrémités des ADNc ont été amplifiées par la technique RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends), à l'aide d'un kit commercial (du kit Gene Racer (IN VITROGEN) selon les conditions indiquées dans le manuel d'utilisation. Ensuite elles ont été clonées puis séquencées, comme ci-dessus.
- souche SR La séquence complète de l'ADNc du gène ace-1 de la souche résistante SR a été amplifiée par PCR à l'aide des amorces culex-5'dir (5'CCACACGCCAGAAGAAAAGA-3', SEQ ID NO: 54) et culex-3'dir (5'AAAAACGGGAACGGGAAAG-3, SEQ ID NO: 55) et le fragment de 2497 pb ainsi obtenu a été cloné et séquence, comme ci-dessus. i) Clonage dugène ace-1 chez les individus sensibles et résistants L'ADN génomique de la souche KISUMU (souche sensible de référence de l'Afrique de l'Ouest) et de la souche YAO (souche résistante isolée en Côte d'ivoire) d'A.gambiae a été extrait à partir d'individus homozygotes comme décrit dans Rogers et al., [Plant Molecular Biology manual, 1988, eds. Gelvin, S.B.Schilperoot, R.A. (Kluwer Académie Publishers, Boston), VolA6, pl-10].
3 fragments chevauchants (A, B et C) ont été amplifiés dans les conditions suivantes : 94 C pendant 30s, 50 C pendant 30s à et 72 C pendant 30s (30 cycles), à l'aide d'amorces synthétisées à partir de la séquence du gène ace-1. A savoir : - le fragment A (1130pb) a été amplifié à l'aide du couple d'amorces AG1-Adir (5'CGACGCCACCTTCACA3', SEQ ID NO: 45) et AGI-Arev (5'GATGGCCCGCTGGAACAGAT3', SEQ ID NO: 46), - le fragment B (1167pb) a été amplifié à l'aide du couple d'amorces AGI-Bdir (5'GGGTGCGGGACAACATTCAC3', SEQ ID NO: 47) et AGI-Brev (5'CCCCGACCGACGAAGGA3', SEQ ID NO: 48), et - le fragment C (876pb) a été amplifié à l'aide du couple d'amorces AGl-Cdir (5'AGATGGTGGGCGACTATCAC3', SEQ ID NO: 49) et AGI-Crev (5'CTCGTCCGCCACCACTTGTT3', SEQ ID NO: 50).
Les séquences des fragments A, B et C ont été déterminées directement sur les produits PCR, à l'aide d'oligonucléotides internes, inclus dans ces fragments, en utilisant le kit Big Dye Terminator et un séquenceur ABI prism 310.
j) détection de la mutation du troisième exon codant responsable de la résistance aux insecticides chez les moustiques des espèces C. pipiens et An. zambiae L'ADN de moustique a été extrait comme décrit dans Rogers et al., précité, puis un fragment du troisième exon codant a été amplifié par PCR, séquence et la mutation dans la séquence codante du troisième exon codant a été détectée par PCR-RFLP, selon le principe tel que décrit ci-dessus pour le fragment K.
L'invention concerne aussi une composition antifongique comprenant à titre d'agent actif au moins un peptide de l'invention avantageusement associé dans ladite composition à un véhicule acceptable. La composition antifongique peut, en outre, comprendre un autre agent antifongique. Selon la présente invention, l'agent antifongique est, de préférence, choisi parmi les dérivés polyènes et, plus particulièrement l'amphotéricine B, nystatine et pimaricine ; dérivés azolés et plus particulièrement le ketoconazole, clotrimazole, miconazole, econazole, butoconazole, oxiconazole, sulconazole, tioconazole, terconazole, fluconazole et itraconazole ; allyliques-thiocarbamates et plus particulièrement le tolnaftate, naftifine et terbinafine ; 5-fluorocytosine ; echinocandins ; griseofulvine ; ciclopirox ; et haloprogine.
Par véhicule , on entend selon la présente invention, toute substance qui est ajoutée au (x) de l'invention pour favoriser le transport du ou des peptides, éviter sa dégradation substantielle dans ladite composition et préserver ses propriétés antimicrobiennes.
Le véhicule est choisi en fonction du type d'application de la composition. Notamment, lorsque la composition est appliquée à un usage pharmaceutique en santé humaine et animale, le véhicule est un véhicule pharmaceutiquement acceptable adapté à une administration du peptide de l'invention par voie topique, per os ou par injection.
Lorsque la composition est appliquée à un usage cosmétique,
le véhicule est un véhicule cosmétiquement acceptable adapté à une administration sur la peau ou les phanères. Lorsque la composition est appliquée à un usage agrochimique, le véhicule est un véhicule agrochimiquement acceptable adapté à une administration sur les plantes ou à proximité des plantes sans les dégrader.
Les peptides ou la composition de l'invention présentent également un intérêt dans l'industrie agroalimentaire. Leur utilisation permet notamment d'empêcher la contamination par les bactéries, les levures et/ou les champignons pendant la fabrication de produits alimentaires et après leur fabrication pour leur conservation.
Dans l'industrie phytosanitaire, les peptides ou la composition de l'invention peuvent également être utilisés pour la fabrication des produits phytosanitaires en lieu et place des produits usuels.
D'autres avantages et caractéristiques des peptides de l'invention apparaîtront des exemples qui suivent concernant leur préparation et leurs activités antimicrobiennes et dans lesquels il sera fait référence aux dessins en annexe dans lesquels : -la figure 1 représente le lépidoptère Caligo illioneus (famille des Nymphalidae ; des Brassolinae) à partir duquel les peptides de l'invention ont été isolés.
I. Exemple 1 Isolement des peptides ETDP1646, ETD-P1647 et ETD-P1648 à partir de l'hémolymphe prélevée chez des larves immunisées du lépidoptère Cali go illioneus.
1) Induction de la synthèse biologique de substances antimicrobiennes dans l'hémolymphe de Cali go illioneus.
Les larves matures de dernier stade du lépidoptère Caligo illioneus ont été immunisées par injection d'une solution de PBS contenant des bactéries à Gram positif (Micrococcus luteus et Staphylococcus aureus) et à Gram négatif (Pseudomonas aeruginosa), des spores de champignons filamenteux (Aspergillus fumigatus) et des levures (Candida albicans). Les bactéries sont préparées à partir de cultures réalisées en milieu de Luria-Bertani durant 12 heures à 37 C. Les levures sont préparées à partir de cultures réalisées en milieu de Sabouraud durant 12 heures à 30 C. Les spores d'A. fumigatus sont prélevées d'un stock congelé à -80 C. Les animaux ainsi infectés ont été conservés pendant 24 heures sur leur plante hôte, dans un espace ventilé. Avant le prélèvement de l'hémolymphe, les larves ont été refroidies sur de la glace.
2) Préparation du plasma.
L'hémolymphe de C. illioneus (28 ml) a été collectée par piqûre latérale au niveau de la tête suivie d'une pression manuelle et recueillie dans des tubes de microcentrifugation en polypropylène de 1,5 ml refroidis dans de la glace et contenant de l'aprotinine comme inhibiteur de protéases (20 jug/ml en concentration finale) et de la phénylthiourée comme inhibiteur de la mélanisation (concentration finale de 40 M). L'hémolymphe ainsi collectée à partir des larves immunisées a été centrifugée à 8000 rpm pendant 1 min à 4 C afin d'éliminer les hémocytes. Le surnageant de centrifugation a été alors centrifugé à 12000 rpm. L'hémolymphe dépourvue des cellules sanguines a été conservée à -80 C jusqu'à son utilisation.
3) Acidification du plasma.
Après décongélation rapide, le plasma de C. illioneus a été acidifié à pH 3 avec une solution d'acide trifluoroacétique à 1% (volume à volume) contenant de l'aprotinine (20 g/ml en concentration finale) et la phénylthiourée (concentration finale de 40 M).
L'extraction en condition acide des peptides a été réalisée pendant 30 min sous agitation légère dans un bain d'eau glacée. L'extrait obtenu a été ensuite centrifugé à 4 C pendant 30 min à 10000g.
La séquence quasi- complète (à l'exception des deux premiers exons 5' non-codants et du premier exon codant) du gène ace-1 de la souche YAO correspond à la séquence SEQ ID NO: 120.
EXEMPLE 9 : de mutation (s) dansla séquence en acides aminés de la protéine AchEl, responsable (s) de la résistance aux insecticides chez les moustiques des espèces Culex pipiens et Anopheles gambiae.
La séquence nucléotidique codant la protéine AChEl (ADNc) a été déterminée à partir de deux souches d'Anophèles gambiae (souche KISUMU sensible et souche YAO résistante) et de deux souches de Culex pipiens (souche S-LAB sensible et souche SR résistante), comme décrit à l'exemple 7.
Les séquences en acides aminés de la protéine AChEl des souches sensibles et résistantes, déduites des séquences précédentes, ont ensuite été alignées (figures 5,6 et 9).
La comparaison des séquences en acides aminés de la protéine AChEl de C. pipiens (figure 5 et 6) montre qu'il existe une seule mutation non-silencieuse entre la souche sensible (S-LAB, SEQ ID NO: 7) et la souche résistante aux insecticides (souche SR, SEQ ID NO: 57), située dans la région codée par le troisième
exon codant du gène ace-1 : la glycine (GGC) en position 247 (ou en position 119, en référence à la séquence de l'AChE du poisson torpille) de la souche sensible est remplacée par une sérine (AGC) dans la souche résistante (G247 (119) #S247(119)).
La localisation de l'acide aminé en position 247 dans la structure de l'acétylcholinestérase de C. pipiens et l'effet de la substitution glycine #sérine sur cette structure ont été analysées par modélisation moléculaire à partir de la structure de l'acétylcholinestérase du poisson torpille. Les résultats sont illustrés dans la figure 7 (A, B et C). La figure 7A montre que l'acide aminé en position 119 est proche des résidus du site catalytique (S200 et H44o). La figure 7C montre que, par comparaison avec la glycine de la souche sensible (figure 7B), l'encombrement de la chaîne latérale de la sérine de la souche résistante, réduit l'espace du site catalytique ce qui empêche vraisemblablement l'insecticide d'interagir avec la sérine catalytique (S200).
La comparaison des séquences en acides aminés de la protéine AChEl d'An. gambiae montre qu'il existe deux mutations non-silencieuses entre la souche sensible (KISUMU, SEQ ID NO: 5) et la souche résistante aux insecticides (souche YAO, SEQ ID NO: 122) : la première correspond au remplacement de la valine (CGT) en position 33 de la séquence de la souche sensible (SEQ ID NO: 5) par une alanine (CGC) dans la souche résistante et la seconde est la même mutation glycine # sérine que celle trouvée chez Culex pipiens.
Etant donnée la position externe de la valine dans la structure de l'acétylcholinestérase, cette mutation n'est certainement pas impliquée dans la résistance chez Anopheles gambiae et seule la sérine doit être responsable de la résistance aux insecticides, à la fois chez Anopheles gambiae et Culex pipiens.
EXEMPLE 10 : de la mutation dans le troisième exon codant du gène ace-1 responsable de la résistance aux insecticides chez les moustiques des espèces Culex pipiens et Anopheles gambiae.