INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Présents en plus ou moins grandes quantités dans tous les organes de la plante, les phytoalexines ils sont inductibles au niveau des feuilles et des baies. Ce type d'induction est désigné sous le terme d'élicitation. Les facteurs d'élicitation (ou éliciteurs) peuvent avoir des origines différentes.
Il peut s'agir : - d'élicitation biotique, par exemple lors d'une agression par un pathogène comme Botrytis cinerea, agent de la Pourriture grise (Jeandet et al., 1995 ; Bavaresco et al., 1997), Plasmopara viticola, agent du Mildiou (Dercks et Creasy, 1989) ou Phomopsis viticola, responsable de l'Excoriose (Hoos et Blaich, 1990).
Le rendement d'encapsulation est de l'ordre de 85%, mais selon les conditions de fabrication il peut atteindre 97% (Péan et al 1998).
2) Enrobage des microparticules.
L'enrobage des microparticules par une association de fibronectin-like (16 ug/mL) avec de la poly-D-lysine (12 ug/mL) constitue la condition permettant d'avoir une adhérence et une différenciation optimale des cellules PC12.
Les conditions d'enrobage des microparticules (vitesse et temps d'agitation) ont été mises au point par agitation de la suspension de microsphères en présence de fibronectin-like et de poly-D-lysine. Après différents essais, nous avons choisi une vitesse d'agitation de 15 tours par minute (tpm) et une durée d'enrobage de 2 heures à 37 C.
3) Adhésion des cellules sur les microparticules.
Pour mettre au point les conditions d'adhérence des cellules sur les microcarriers , différentes vitesses et temps d'agitation des cellules en présence des microparticules ont été testés. L'adhérence des cellules PC12 a donc été maximale pour une agitation à 3 tpm pendant 4 heures à 37 C dans un incubateur à 5% CO2.
Les tests de séparation des cellules seules des cellules adhérées aux microparticules ont conduit à centrifuger la suspension microparticules/cellules à 135 g pendant 10 secondes. Ce traitement, ainsi que le passage du culot dans une seringue Hamilton 10 L, utilisée pour les greffes, ne produit pas une diminution du nombre de microparticules présentant des cellules à leur surface.
Dans ces conditions, et après comptage au microscope de la suspension microparticules/cellules il a été possible d'obtenir environ 60 - 70 % des microparticules avec des cellules adhérées à leur surface. En moyenne, on trouve 5 à 10 cellules par microcarrier . Par contre, lorsque les microsphères ne sont pas enrobées, seulement 5% d'entre elles possèdent des cellules collées à leur surface.
L'enrobage des microparticules par une association de fibronectin-like et de poly-D-lysine est donc essentiel pour que les cellules y adhèrent. Cette adhérence a été confirmée par des images de microscopie électronique à balayage (figure 2).
Exemple 3 : Résultats sur modèles animaux.
Les MPA libèrent du NGF de façon prolongée et contrôlée. En effet, les premiers résultats de la cinétique de libération in vitro, montrent que pour 200 g de NGF encapsulé, 15% sont libérés de façon continue pendant les deux premières semaines. L'implantation de 0,5 mg de MPA conduirait ainsi à la libération de 5-10 ng de NGF par jour, ce qui est en accord avec les quantités nécessaires à une action de NGF sur les cellules.
Après implantation dans le striatum dénervé de rats Parkinsoniens , les cellules PC12 restent bien adhérées sur les microparticules. Les cellules transportées expriment toujours la tyrosine hydroxylase et sont donc
capables de produire de la dopamine. Deux semaines après implantation, les microparticules ne sont pas toujours dégradées et servent encore de support aux cellules. En effet, elles sont encore sphériques et présentent un aspect assez lisse, sans pores de vacuolisation. De façon générale, les cellules adhérées aux microparticules, avec ou sans NGF, ont un aspect différencié par rapport aux cellules greffées seules dans le striatum. En observant ces cellules à fort grossissement, on remarque que sur les microparticules libérant du NGF, les prolongements sont plus longs faisant à peu près 2 à 3 fois la taille du corps cellulaire (figure 2B). Au niveau comportemental, les premiers résultats des tests de rotation induits par amphétamine, montrent que seuls les rats ayant reçu les cellules avec les microparticules libérant du NGF se sont améliorés (figure 3) . Parmi les résultats, il semble que les cellules PC12 adhérées aux microparticules ne libérant pas de NGF arrêtent de proliférer.
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES - Aloisi F., Ria F., Adorini L. Régulation of Tcell responses by CNS-presenting cells : différent for microglia and astrocytes. Immunol Today, 2000, 21 : 141- 147.
- Benoit J. P., Faisant N., Venier-Julienne M. C., Menei P. Development of microspheres for neurological disorders : from basics to clinical applications. J Control Release, 1999, 65 : 285-296 - Borlongan C. V., Saporta S., Sanberg P.R.
Intrastriatal transplantation of rat adrenal chromaffin cells seeded on microcarrier beads promote long-term functional recovery in hemiparkinsonian rats. Exp Neurol., 1998, 151 : 203-214.
A l'heure actuelle, différents types de procédés de préparation des biopuces ont déjà été proposés.
Les biopuces, et en particulier les biopuces à acides nucléiques, peuvent être fabriquées soit par synthèse in situ soit par immobilisation de sondes.
Dans le premier cas (synthèse in situ), les sondes sont des oligonucléotides qui sont synthétisés étape par étape directement sur le support et qui ont une taille généralement comprise entre 20 et 30 bases. Ce procédé de fabrication permet d'avoir accès à des puces à haute densité (McGall et al, J. Am. Chem. Soc., 1997, 119, 5081-5090).
Dans le deuxième cas (immobilisation de sondes), les sondes sont présynthétisées puis immobilisées sur le support. Deux types d'interactions avec la surface peuvent alors entrer enjeu.
L'acide nucléique sonde peut être maintenu sur la surface par des interactions électrostatiques entre les groupements phosphates du squelette chargés négativement et la surface modifiée du support chargée positivement. A titre d'exemple, ce type de biopuce peut être obtenu par recouvrement de la surface avec de la poly-L-lysine ou par silanisation avec un amino-silane (Zammatteo et al, Anal.
Biochem., 2000,280, 143-150 ; Eisen et al, Methods in Enzymol, 1999,303, 179- 205). Dans ce type d'immobilisation, la sonde est généralement couchée sur le support ce qui peut entraîner des problèmes d'accessibilité lors de l'étape d'hybridation. De plus, ce mode d'interactions ioniques n'est pas suffisamment stable pour permettre une réutilisation de la biopuce.
L'acide nucléique sonde peut également être greffé sur le support par le biais d'interactions covalentes. Généralement les liaisons entre les sondes et le support sont établies par une des extrémités 3' ou 5' de l'acide nucléique permettant une accessibilité de la sonde sur toute sa longueur d'où une meilleure qualité de la réponse en terme d'hybridation. Plusieurs combinaisons de fonctionnalisation du support et des acides nucléiques peuvent être rencontrées. Le support peut, par exemple, comporter des fonctions nucléophiles telles que des fonctions -NH2 ou -SH et l'acide nucléique à greffer comporte alors une fonction électrophile telle que par exemple une fonction-CHO, -NCS,-NHS ou encore-COOR, et inversement. Selon une autre variante, le support et l'acide nucléique peuvent être nucléophiles et un espaceur di-électrophile permettra le couplage entre les deux entités. Enfin le support et la sonde peuvent être électrophiles et le couplage sera réalisé grâce à un espaceur di-nucléophile.
Les biopuces fabriquées actuellement sont, pour une très grande majorité, réalisées en utilisant le verre comme support.
Les plus utilisées possèdent des surfaces fonctionnalisées avec un espaceur terminé par une fonction -NH2. Leur efficacité en terme d'accrochage et d'hybridation a été confirmée mais aucune réutilisation de ce type de lame n'est possible, les interactions entre les sondes et le support étant de type ionique.
D'autres lames comportant à leur surface des fonctions aldéhyde sont commercialisées. Ces fonctions sont introduites par utilisation d'un silanealdéhyde, espaceur simple, qui ne présente qu'une seule fonction d'ancrage par molécule que ce soit du côté du support ou du côté des acides nucléiques. Or il a été montré que l'ancrage par plusieurs points sur la surface est important (Zhao et al., Nucl. Acids Res., 2001,29, 955-959 ; demande internationale WO 01/51689) puisqu'il permet d'assurer une augmentation des sites de fixation des sondes sur le support ce qui entraîne une meilleure réponse en terme d'hybridation.
Une autre façon d'obtenir une meilleure sensibilité de détection est notamment reportée dans les travaux de M. Beier et J.D. Hoheisel, Nucl. Acids Res., 1999, 27, 1970-1977. Les auteurs ont construit, sur une lame de verre, des molécules ramifiées à six branches dans le but d'augmenter la densité de sondes. La nature de ces espaceurs ramifiés permet aussi de moduler la nature hydrophile ou hydrophobe de la surface. Leur procédé de préparation inclut au total huit étapes de synthèse, à partir d'une lame aminée, pour obtenir la biopuce ce qui limite fortement leur développement industriel. De plus, les molécules ramifiées sont générées in situ de façon non contrôlable, et leur structure n'est pas définie, ce qui ne permet pas de garantir une homogénéité de la surface de la biopuce ainsi obtenue. Tous les liens étant covalents, les auteurs ont montré, que leurs biopuces pouvaient être réutilisées. Il est à noter que la réutilisation des biopuces est courante dans le cas d'un support en Nylon@ et a été plus récemment décrite avec du plastique (voir demande internationale WO 00/55627).
Enfin, des travaux récents (Benters et al, Chembiochem., 2001,2, 686-694) décrivent l'utilisation de dendrimères aminés "PAMAM starbust" pour la fabrication de biopuces, en sept étapes de synthèse exigeantes en terme de conditions opératoires, et dont certaines ne peuvent être contrôlées puisqu'elles sont réalisées directement sur le verre, pour l'obtention d'un support qui n'est pas stable dans le temps. En effet, l'utilisation de ces biopuces inclut une étape d'activation préalable de la couche de dendrimères avant de réaliser le couplage avec les oligonucléotides.
Cette étape génère une surface réactive qui n'est pas stable dans le temps puisque les auteurs indiquent que les sondes doivent être greffées immédiatement après l'activation. Ceci limite fortement la commercialisation de ce type de support.
Le développement exponentiel de la génomique et de la phannacogénomique lié au séquençage non seulement du génome humain, mais également à celui d'animaux, de bactéries, de virus, de plantes, etc... amène les laboratoires de recherche académiques ou industriels à consommer de manière massive des biopuces fiables, faciles à fabriquer. La réutilisation est un critère supplémentaire qui permet de valider de manière statistique les essais biologiques. C'est donc afin de remédier à l'ensemble de ces inconvénients et de pourvoir à des biopuces réutilisables pouvant être fabriquées à moindre coût, en peu d'étapes, de manière contrôlée et reproductible et présentant une excellente stabilité et une très bonne sensibilité de détection, que les Inventeurs ont mis au point ce qui fait l'objet de l'Invention.
La présente Invention a donc pour premier objet un support solide caractérisé par le fait qu'il comprend au moins une surface fonctionnalisée de façon covalente par des dendrimères phosphorés possédant un noyau central qui contient au moins deux groupements fonctionnels et comportant à leur périphérie plusieurs fonctions aptes à permettre la fixation ou la synthèse in situ de molécules d'intérêt, lesdits dendrimères ayant une taille comprise entre 1 et 20 nm.
Dans la suite de la description, de tels supports solides fonctionnalisés par des dendrimères phosphorés sont appelés dendrilames .
Le brevet US-5.830.455 décrit une composition détergente pour le nettoyage et le démaquillage de la peau et des cheveux qui contient un polymère comportant un groupe perfluoroalkyle et un groupe alkyle dans la molécule.
Les demandes de brevet DE 1994 3436, DE 1994 3420, DE 1994 3419, DE 1994 3413, DE 1994 2721, DE 1994 3438, DE 1994 3437, DE 1994 3434, DE 1994 3433, DE 1994 3432, DE 1994 3430, DE 1994 3427, DE 1994 3426, DE 1994 3425, DE 1994 3424, DE 1994 3422 et DE 1994 3421 décrivent des préparations cosmétiques et dermatologiques incluant des polymères d'acides acryliques à greffons polyesters et comportant en plus soit des groupes fluoroalkyles ou perfluoroalkyles soit des groupes silicones. Les polymères
résultant sont hydrosolubles ou hydrodispersables. En outre, les greffons polyesters comprennent des groupes sulfoniques.
La Demanderesse a déterminé que la présence dans le polymère filmogène de tels groupes sulfoniques ou sulfonates, fortement hygroscopiques, accroît le caractère collant au toucher du dépôt final.
Le document DE 199 01 484 Al décrit une composition, en particulier pour le traitement des cheveux, qui contient un polyester ou polyuréthane fluoré. Dans le cas de compositions de coloration, les compositions renferment également des précurseurs de colorants d'oxydation.
La demande de brevet EP 1 095 959 décrit une composition cosmétique comprenant au moins un polysaccharide à greffons silicone ou groupes organosiloxanes. Ce polysaccharide est obtenu par réaction entre un polysaccharide de départ contenant au moins un groupe carboxyle et soluble dans un solvant organique, et un diorganopolysiloxane dont l'une des chaînes moléculaires se termine par le groupe 2-(3,4-époxycyclohexyl) éthyle. La réaction de greffage se fait donc par réaction entre les groupes carboxyles du polysaccharide de départ et les groupes époxydes du diorganosiloxane.
Il serait donc souhaitable de disposer de compositions cosmétiques et/ou de soin présentant une persistance accrue d'au moins un effet cosmétique et/ou de soin apporté après application de la composition, une bonne adhésion après application sur les matières kératiniques, un caractère non collant au toucher accru après application, et permettant un démaquillage rapide total et sélectif.
Par caractère non collant au toucher , on entend le caractère d'un film ou revêtement qui ne conduit pas à une impression de collant de la surface lorsqu'on met légèrement cette dernière en contact avec l'index et que l'on rompt ce contact en soulevant l'index (à l'inverse de l'impression ressentie au contact de la face adhésive d'un ruban adhésif).
Il serait également souhaitable de disposer de compositions cosmétiques et/ou de soin, en particulier de maquillage, conduisant à un dépôt cosmétique de grande rémanence pour une persistance accrue des effets apportés, et en particulier, dans le cas de compositions cosmétiques colorées, qui présentent une
constance accrue du coloris, c'est-à-dire une résistance accrue à la dégradation et/ou à l'affadissement du coloris.
Par composition cosmétique colorante ayant une constance améliorée du coloris, on entend une composition cosmétique colorante qui, après application sur un substrat kératinique, conduit à un dépôt cosmétique coloré dont le coloris ne se dégrade ni ne s'affadit, tel que déterminé visuellement, pendant une durée d'au moins 2 heures après application de la composition.
On a maintenant trouvé qu'il était possible de réaliser une composition cosmétique et/ou de soin, qui, après application sur un substrat kératinique, forme un dépôt présentant une persistance accrue des effets, en particulier une constance accrue du coloris, en ajoutant à la composition une quantité efficace d'au moins un polysaccharide à groupes fluorés, filmogène, véhiculable dans au moins un constituant de la formulation.
La présente invention concerne donc une composition cosmétique et/ou de soin qui comprend, dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d'au moins un polysaccharide tel que défini ci-dessus.
Selon l'invention, la composition cosmétique et/ou de soin comprend au moins un constituant choisi parmi - l'eau ; - les monoalcools en C1-C6 ; - les polyols choisis parmi les alkylène glycols en C2-C6, les polyalkylène glycols, les alkylène glycol monoalkyl éthers, les polyalkylène glycol monoalkyl éthers, les esters d'alkylène glycol monoalkyl éther, les esters de polyalkylène glycol monoalkyl éther, le glycérol et les dérivés de glycérol, notamment les polyglycérols ; - les cétones en C3-C6 ; - les esters en C3-C6 ; - les huiles hydrocarbonées, polaires ou non polaires, volatiles ou non volatiles ; - les huiles de silicone, volatiles ou non volatiles ; et - les huiles fluorées, volatiles ou non volatiles,
et une quantité effective d'au moins un polysaccharide filmogène comportant au moins un groupe fluoré, ledit polysaccharide étant véhiculable dans au moins l'un desdits constituants précédents.
Par véhiculable, on entend que le polysaccharide est soluble ou dispersible dans le constituant.
Actuellement, ils sont progressivement remplacés par des afficheurs plats de type matriciel qui ne présentent pas les inconvénients précédents. Plusieurs technologies de réalisation existent pour ce type d'afficheurs comme, par exemple, les matrices à cristaux liquides. L'emploi de ce type d'afficheurs est déjà généralisé aux visualisation de planches de bord dits Tête Basse.
Les afficheurs matriciels sont mal adaptés à la correction de la distorsion telle qu'elle a été décrite. Un afficheur matriciel comprend de façon
classique Pu,v pixels organisés en matrice de R lignes et de S colonnes ; u, v étant des nombres entiers variant respectivement de 1 à R, et de 1 à S.
Soit une image électronique E, provenant d'une source d'images comprenant P,, 1, pixels organisés en matrice de M, lignes et de N, colonnes ; j, k étant des nombres entiers variant respectivement de 1 à M,, et de 1 à N,, à chaque pixel est associé une valeur photométrique Luit ; pour afficher E, selon la méthode connue de correction de la distorsion, il faut appliquer aux pixels P,,j, k la fonction F-'. Bien entendu, l'application de cette fonction F-' au pixel P,,,k ne saurait correspondre, dans le cas général, exactement à un pixel Pu,v de l'afficheur. Il faudra alors nécessairement faire correspondre le résultat de calcul au pixel de l'afficheur le plus proche.
Cette méthode présente trois inconvénients : # Elle ne garantit pas que tous les pixels de l'afficheur seront adressés, ce qui donne des zones aveugles dans l'image de l'afficheur. Ce cas est particulièrement sensible lorsque les images E, contiennent une quantité de pixels inférieure ou voisine de celle de l'afficheur.
# Elle ne garantit pas que le même nombre de pixels P,,j,k seront associés à chaque pixel de l'afficheur. Ce cas est particulièrement sensible lorsque les images E, contiennent une quantité de pixels supérieure à celle de l'afficheur. On peut ainsi aboutir à des variations artificielles de la luminance des pixels de l'afficheur.
# Elle nécessite le calcul de la fontion F-1 qui n'est pas nécessairement simple à effectuer.
Elle peut donc entraîner la création d'artefacts visuels difficilement supportables par l'observateur.
Pour pallier ces différents inconvénients, le dispositif selon l'invention construit l'image de l'afficheur en suivant le processus inverse, c'est-à-dire en associant à chaque pixel Pu,v toujours le même nombre de pixels P,,I,k de chaque image électronique E,, les adresses des pixels Pi,],k étant obtenu à partir du calcul de F(Pu,v). La valeur photométrique Lu,v du pixel Pu,v est obtenue à partir des valeurs photométriques Li,j,k des P,,j,k . Cette méthode supprime, par son principe même, les inconvénients précédents.
Plus précisément, l'invention a pour objet un dispositif de correction électronique des aberrations de distorsion géométriques d'une optique de collimation et de superposition faisant partie d'un ensemble de visualisation comprenant : # un dispositif de génération d'au moins une image-source électronique E,, i nombre entier variant entre 1 et L ; # une électronique réalisant le mélange et la correction des images E, et la génération d'une image visuelle sur un afficheur, ladite image étant organisée en matrice de R lignes et de S colonnes de pixels Pu,v d'adresses (u,v) ; u, v étant des nombres entiers variant respectivement de 1 à R, et de 1 à S ; chacun desdits pixels étant associé une valeur photométrique Lu,v, cette valeur étant fonction des valeurs photométriques L,,u,v issues de chacune des images électroniques ; # ladite optique de collimation assurant la collimation de ladite image visuelle pour former une image aérienne destinée à être perçue par un utilisateur, chaque pixel de l'image ayant une image aérienne P[alpha],ss, (a, ss) étant les coordonnées angulaires des points de l'image aérienne tels que a est égal à K.Fu(u,v) et [3 est égal à K.Fv(u,v) ; K étant une constante de grandissement angulaire et Fu(u,v), Fv(u,v) étant les représentations de la fonction bidimensionnelle F de distorsion du système optique ; caractérisé en ce que l'électronique comporte un système de correction de la distorsion comprenant une unité de mémoire électronique permettant de stocker les images électroniques E,, une unité de calcul d'adresse et une unité d'interpolation et de mélange tel que, # L'unité de mémoire électronique organise chaque image en matrice de M lignes et de N colonnes de pixels Pi,j,k auxquels correspondent des adresses électroniques (i, j,k) ; j, k étant des nombres entiers variant respectivement de 1 à M,, et de 1 à Ni ; à chaque pixel P,,,k étant associé une valeur photométrique Li,j,k ; # l'unité de calcul d'adresses associe à chaque adresse (u,v) les adresses (i, j,k) des pixels Pi,j,k stockés dans la mémoire électronique, lesdites adresses voisines des points calculés (i, jr, kr), jr, kr étant des nombres réels obtenus par le calcul de K,'.Fu(u,v)
et de K,'.F,(u,v) ; K,' étant une constante de normalisation associée à chaque image électronique E, telle que, pour tout i, jr est inférieur à M, et kr est inférieur à N,.
# l'unité d'interpolation calcule la valeur photométrique Li,u,v, contribution de chaque image électronique à la valeur Lu,v à partir des valeurs photométriques Li,j,k desdits pixels d'adresses (i,j,k) fournies par l'unité de calcul d'adresses.
Dans un mode préféré, pour chaque image E, , les pixels utilisés par l'unité d'interpolation pour le calcul de la valeur photométrique Li,u,v sont au moins les quatre pixels d'adresses référencées (i, je, ke) , (i, je+1, ke), (i, je, ke+1) et (i, je+1, ke+1) avec ( je, ke) parties entières des nombres (jr, kr), Li,u,v étant une fonction d'au moins les quatre valeurs L;,je,ke , L,je+1,ke, 1 Li, le, ke+1 et LI, Je+1, rez Il est possible pour réaliser le calcul de la valeur photométrique de prendre en compte d'autres pixels que le carré de pixels entourant le point calculé. Dans ce cas, leur contribution à la valeur photométrique Li,u,v est alors pondéré en fonction de leur éloignement au point d'adresse (i, jr, kr).
Cependant, le gain apporté reste marginal au prix d'une augmentation sensible du nombre de calculs nécessaires.
Il existe différentes méthodes possibles pour obtenir la valeur photométrique L,,," . La méthode la plus simple, nécessitant le minimum de calculs est que la valeur photométrique L,,u,v soit proportionnelle à la somme des produits Llje,ke.(1+je-jr).(1+ke-kr) ; L,,e+l,ke+1.(l le).(k ke) ; Lj,je+1,ke.(jrje).(1+ke-kr) et L,,jeke+1.(1+je-jr).(krke).
Les constantes de normalisation K,' sont calculées de telle sorte que tous les pixels de l'afficheur aient des correspondants dans chaque image électronique. Avantageusement, il est intéressant de pouvoir faire varier ces constantes entre une valeur minimale et leur valeur maximale. On obtient alors un effet de zoom électronique, une partie des images électroniques initiales étant seulement représentées agrandies sur toute la surface de l'afficheur.
L'approche de localisation proposée est basée sur l'exploitation des données image, mais le problème n'est pas posé en terme de reconstruction 3D (à partir de plusieurs images 2D prises sous des incidences différentes). La structure 3D est supposée connue, par l'obtention d'un modèle descriptif des structures anatomiques.