INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon une caractéristique de l'invention, les moyens 23 pour associer le corps de prothèse 22 avec la portion d'os restante 20 sont constitués par une patte 24, des moyens 25 pour solidariser cette patte 24 avec la portion d'os restante 20, une tige sensiblement cylindrique 26 solidaire de la patte 24, un logement 27 réalisé dans le corps de prothèse 22, ce logement ayant une section transversale sensiblement complémentaire de celle de la tige sensiblement cylindrique 26, cette tige sensiblement cylindrique 26 étant montée coulissante en translation dans le logement 27, le logement étant en outre réalisé dans le corps de prothèse 22 de
façon que le corps de prothèse soit apte à venir, par une surface de portée 28, en appui contre la surface de coupe 21 quand la patte 24 est solidaire de la portion d'os restante 20.
Il est possible de donner à la patte 24 différentes formes en fonction notamment de la partie osseuse sur laquelle cette patte doit être fixée ou des préférences du chirurgien. Sur les figures 3 à 6, sont illustrés deux modes de réalisation possibles de cette patte 24.
(14) Les polymères réticulés de sels de méthacryloyloxyalkyl(C1-C4) trialkyl(C1- C4)ammonium tels que les polymères obtenus par homopolymérisation du diméthylaminoéthylméthacrylate quaternisé par le chlorure de méthyle, ou par copolymérisation de l'acrylamide avec le diméthylaminoéthylméthacrylate quaternisé par le chlorure de méthyle, l'homo ou la copolymérisation étant suivie d'une réticulation par un composé à insaturation oléfinique, en particulier le méthylène bis acrylamide. On peut plus particulièrement utiliser un copolymère réticulé acrylamide/chlorure de méthacryloyloxyéthyl triméthylammonium (20/80 en poids) sous forme de dispersion contenant 50 % en poids dudit copolymère dans de l'huile minérale. Cette dispersion est commercialisée sous le nom de " SALCARE SC 92 " par la Société ALLIED COLLOIDS. On peut également utiliser un homopolymère réticulé du chlorure de méthacryloyloxyéthyl triméthylammonium contenant environ 50 % en poids de
l'homopolymère dans de l'huile minérale ou dans un ester liquide. Ces dispersions sont commercialisées sous les noms de " SALCARE SC 95 " et " SALCARE SC 96 " par la Société ALLIED COLLOIDS.
Parmi tous les polymères cationiques susceptibles d'être utilisés dans le cadre de la présente invention, on préfère mettre en oeuvre les polymères des familles (1), (9), (10), (11), (12) et (14) et encore plus préférentiellement les polymères aux motifs récurrents de formules (W) et (U) suivantes : et notamment ceux dont le poids moléculaire, déterminé par chromatographie par perméation de gel, est compris entre 9500 et 9900; et notamment ceux dont le poids moléculaire, déterminé par chromatographie par perméation de gel, est d'environ 1200.
chaîne polymère, où K désigne un motif dérivant d'un monomère comportant au moins un atome d'azote basique et M désigne un motif dérivant d'un monomère acide comportant un ou plusieurs groupements carboxyliques ou sulfoniques, ou bien K et M peuvent désigner des groupements dérivant de monomères zwittérioniques de carboxybétaïnes ou de sulfobétaïnes; K et M peuvent également désigner une chaîne polymère cationique comportant des groupements amine primaire, secondaire, tertiaire ou quaternaire, dans laquelle au moins l'un des groupements amine porte un groupement carboxylique ou sulfonique relié par l'intermédiaire d'un radical hydrocarboné, ou bien K et M font partie d'une chaîne d'un polymère à motif éthylène [alpha],ss-dicarboxylique dont l'un des groupements carboxyliques a été amené à réagir avec une polyamine comportant un ou plusieurs groupements amine primaire ou secondaire.
Les polymères amphotères répondant à la définition donnée ci-dessus plus particulièrement préférés sont choisis parmi les polymères suivants : (1) Les polymères résultant de la copolymérisation d'un monomère dérivé d'un composé vinylique portant un groupement carboxylique tel que plus particulièrement l'acide acrylique, l'acide méthacrylique, l'acide maléique, l'acide alpha-chloracrylique, et d'un monomère basique dérivé d'un composé vinylique substitué contenant au moins un atome basique tel que plus particulièrement les dialkylaminoalkylméthacrylate et acrylate, les dialkylaminoalkylméthacrylamide et acrylarnide. De tels composés sont décrits dans le brevet américain n 3 836 537.
Les acrylamides ou méthacrylamides N-substitués plus particulièrement préférés selon l'invention sont les groupements dont les radicaux alkyle contiennent de 2 à 12 atomes de carbone et plus particulièrement le N-éthylacrylamide, le N-tertiobutyl-acrylamide, le N-tertiooctyl-acrylamide, le N-octylacrylamide, le N-décylacrylamide, le Ndodécylacrylamide ainsi que~les méthacrylamides correspondants.
Les comonornères acides sont choisis plus particulièrement parmi les acides acrylique, méthacrylique, crotonique, itaconique, maléique, fumarique ainsi que les monoesters d'alkyle ayant 1 à 4 atomes de carbone des acides ou des anhydrides maléique ou fumarique.
On utilise particulièrement les copolymères dont la dénomination CTFA (4ème Ed., 1991) est Octylacrylamide/acrylates/butylaminoethylmethacrylate copolymer tels que les produits vendus sous la dénomination AMPHOMER ou LOVOCRYL@ 47 par la société NATIONAL STARCH.
Un second exemple de réalisation d'un tel système de présentation est constitué par une ou plusieurs substance (s) porteuse (s) associée (s) à un ou plusieurs exemplaire des peptides de l'ensemble ou du sous-ensemble.
A titre d'exemples de molécules porteuses, on peut citer la multimérisation grâce à des supports synthétiques de type polylysines, la fusion avec des protéines (toxines), la microencapsulation des peptides dans des microsphères biodégradables, le couplage lipopeptidique, ou tout autre système synthétique qui favorise la réponse humorale contre les peptides sans entraîner de réactions cytotoxiques.
Pour les préparations entièrement synthétiques, il existe de nombreuses possibilités par exemple le couplage à la toxine diphtérique ou tétanique plus un adjuvant clinique à base d'aluns.
La composition de l'invention peut comprendre outre le peptide, l'ensemble ou le sous-ensemble de peptides, et avantageusement l'adjuvant, un ou plusieurs
antigènes capables d'induire une réponse immunitaire pour vacciner contre des agents infectieux divers.
Le ou les peptides des compositions de l'invention peuvent être issus d'une séquence peptidique de l'exon 1 d'un récepteur à la FSH d'une espèce différente ou de la même espèce de celle à laquelle est administrée la composition de l'invention. Ainsi, une composition pharmaceutique contraceptive pour l'homme peut comprendre un ensemble ou un sous-ensemble de peptides issus d'une séquence peptidique de l'exon 1 du récepteur à la FSH de singe.
L'invention a donc aussi pour objet l'utilisation d'un peptide, d'un ensemble ou d'un sousensemble de peptides issus d'une séquence peptidique codée par l'exon 1 d'un récepteur à la FSH, comme défini précédemment, pour la préparation d'un vaccin contraceptif destiné à être administré à un individu mâle d'une espèce différente de celle de ladite séquence peptidique codée par l'exon 1.
D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront de l'étude qui suit concernant la contraception de singes mâles adultes par un vaccin antirécepteur de la FSH, et dans laquelle il sera fait référence aux dessins en annexe dans lesquels : La figure 1 représente l'immunité moyenne des singes mâles contre les vaccins peptidiques anti-récepteur de la FSH, mesurée à 2, 4,6 et 8 mois de la primoinjection.
La figure 2 représente la mesure des taux moyens circulants de testostérone matinale et vespérale chez les singes mâles vaccinés.
La figure 3 représente l'évolution de la production de spermatozoïdes. Phases de vaccination 1 et 2, rappels bimensuels.
L'étude ci-dessous rapporte les travaux réalisés sur cinq singes mâles de l'espèce Macaca radiata qui ont été immunisés avec un mélange de trois phages recombinants exprimant à leur surface des décapeptides du domaine N-terminal du récepteur humain de la folliculostimuline (FSH).
Pendant une première phase de vaccination de sept mois, des injections de rappel (3 à 5 mg d'antigène par injection sous-cutanée) ont été effectuées deux fois par mois. Les injections ont ensuite cessé pendant cinq mois, et repris avec la même fréquence (phase 2). Le niveau des réponses immunes contre les vecteurs phages a été suivi régulièrement pendant la phase 1, laissant apparaître des différences individuelles.
L'analyse des taux de testostérone circulants dans le sérum des animaux vaccinés ne montre aucune influence des vaccins anti-RFSH, puisqu'ils suivent un rythme circadien régulier et identique tout au long de l'expérience, quels que soient la phase et le taux d'anticorps.
La production de sperme est fortement inhibée par le vaccin pour quatre singes sur cinq, jusqu 1 à l'interruption totale. La durée et la vitesse d'inhibition est aussi variable selon les individus. Après l'arrêt du traitement, on observe la reprise de la spermatogenèse jusqu'à des taux contrôles avec des cinétiques variables.
La ré-immunisation pour la phase 2 ré-induit la stérilité.
Tous les mâles vaccinés ont été accouplés pendant une semaine avec trois femelles cycliques : aucune des quinze femelles n'a été fécondée pendant ces accouplements, alors qu'aucune modification du comportement sexuel n'a été notée.
conduit à un ombrage important. Le fait de réaliser des micro-concentrateurs, permet d'éviter un tel ombrage.
La figure 1 illustre ainsi deux contacts en métal de section triangulaire 10 disposés sur un substrat en semi-conducteur 11, qui permettent de concentrer les rayons lumineux 12.
Un bon fonctionnement des cellules à concentration nécessite que les pistes métalliques soient aussi proches que possible les unes des autres, typiquement à moins de 100 micromètres. Les microconcentrateurs doivent alors avoir des sections triangulaires, avec des angles importants, des valeurs typiques étant 12 micromètres pour la base et 20 micromètres pour la hauteur, et être très pointues. De telles hauteurs et de telles formes sont inhabituelles en micro-électronique.
En microélectronique il est, en effet, connu de réaliser des micro-pointes pour des écrans plats comme décrit dans les documents référencés [1] et [2] en fin de description.
En réalisant une évaporation d'un métal à travers une ouverture dans un oxyde, sous incidence, on peut obtenir une micro-pointe. Mais une telle méthode s'applique mal à la réalisation de micro-pointes présentant un facteur de forme (rapport hauteur sur base) élevé. La pente de telles micro-pointes, qui dépend des paramètres machines (distance source/substrat), n'est pas facilement contrôlable.
La réalisation d'épaisseurs de métal importantes, de l'ordre de plusieurs dizaines de micromètres, par un dépôt pleine plaque est compatible
avec la réalisation de micro-concentrateurs mais il faut alors réaliser les micro-pointes par une gravure, qui peut être une gravure par voie chimique ou par voie sèche. Une gravure chimique, qui est isotrope, ne permet pas d'obtenir le profil voulu. Une gravure sèche, qui permet un meilleur contrôle de l'angle des micro-pointes, conduit à des surfaces rugueuses qui n'ont pas les propriétés optiques requises, et ne permet pas d'obtenir des micro-pointes.
L'invention a pour objectif de proposer un procédé de réalisation de métallisations de section triangulaire en microélectronique permettant de résoudre les problèmes énoncés ci-dessus.
EXPOSÉ DE L'INVENTION L'invention concerne un procédé de réalisation de métallisation de section triangulaire en microélectronique, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : - une étape de dépôt d'une couche de résine sur un substrat en semi-conducteur, - une étape de lithographie de cette couche de résine, - une étape de mise en forme de plots de métal trapézoïdaux ayant une pente déterminée, - une étape de gravure humide permettant de former la pointe de ces plots en métal, - une étape d'élimination de la résine.
Dans un premier mode de réalisation, l'étape de mise en forme de plots de métal comprend une étape de aravure sèche.
On a alors les étapes suivantes : - une étape de dépôts pleine plaque d'une couche de métal et d'une couche de résine sur un substrat en semi-conducteur, - une étape de lithographie de la couche de résine qui permet d'obtenir des plots de résine pointus, - une étape de gravure sèche réalisée à travers le masque de résine ainsi formé qui permet d'obtenir des plots de métal de forme trapézoïdale, situés sous les plots de résine, - une étape de gravure humide qui permet de lisser les flancs des plots de métal et de former la pointe de ceux-ci, - une étape d'élimination de la résine.
Dans un second mode de réalisation, l'étape de mise en forme du métal comprend une étape de dépôt électrolytique de métal.
On a alors les étapes suivantes : - une étape de dépôt pleine plaque d'une couche d'une première résine sur un substrat en semiconducteur, - une étape d'insolation et de développement de cette couche d'une première résine pour former un moule pour un dépôt métallique ultérieur, la pente dans cette première résine étant obtenue par lithographie, - une étape de dépôt de métal, par électrolyse, le métal remplissant le moule formé précédemment par la première résine, en formant des plots métalliques trapézoïdaux,
- une étape de dépôt d'une seconde résine et de lithographie pour que cette seconde résine recouvre le haut des plots métalliques trapézoïdaux, - une étape de retrait de la première résine, - une étape de gravure humide des plots en métal permettant de former la pointe de ceux-ci, - une étape de retrait de la seconde résine.
Avantageusement le procédé de l'invention peut être utilisé pour fabriquer une cellule photovoltaïque à concentration.
BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS - La figure 1 illustre une cellule à concentration de l'art connu, - Les figures 2A à 2E illustrent les étapes d'un premier mode de réalisation du procédé de l'invention, - Les figures 3A à 3G illustrent les étapes d'un second mode de réalisation du procédé de l'invention.
Le gène Cbg constitue donc un candidat de position pour ce QTL chez le porc.
Par ailleurs, le porc Meishan qui est hypercortisolémique est également obèse et montre un retard de croissance par rapport au Large White ce qui pourrait être une conséquence de ses taux élevés de cortisol. En faveur de cette hypothèse, une corrélation positive a été trouvée chez les individus F2 entre les taux de cortisol et l'épaisseur de lard dorsal. Cette relation a été retrouvée dans une population F2 Duroc x Large White entre cortisol urinaire, lard dorsal et proportion de viande maigre dans la carcasse (Mormède P. non publié). Suite à ces résultats une nouvelle analyse statistique a permis de mettre en évidence une liaison génétique entre l'épaisseur de lard dorsal et le locus du chromosome 7 dans la population de porcs F2 (Meishan x large White). La figure 5 illustre la liaison génétique entre l'épaisseur de lard dorsal et le QTL d'hypercortisolémie. Le gène cbg se trouve en position 1,35 Morgan du chromosome 7, au pic du second QTL présenté sur cette figure. Cortisolémie et dépôt de gras convergent donc vers ce locus contenant le gène de la transcortine.
Le porc Meishan représente donc un excellent modèle pour l'étude de la variabilité génétique de l'axe corticotrope et ses conséquences physiopathologiques, pour l'obésité en particulier.
Il convient en outre de rappeler que chez la souris, un locus génomique associé à l'obésité a été mis en évidence en 1995 par Warden (Warden et al., 1995). Avec les données actuelles sur le génome de la souris, il est possible de voir que la CBG est au pic de l'intervalle de confiance de ce QTL et constitue de nouveau dans ce modèle un bon candidat de position.
Ces résultats sont remarquables car aucun marqueur de cortisolémie constitutive n'est disponible à ce jour. Un tel marqueur permet de déterminer à partir d'un échantillon de sang, et dès la naissance, la cortisolémie d'un individu. Cette cortisolémie va influencer la vulnérabilité à l'obésité, aux réactions auto-immunes et inflammatoires, la vitesse de croissance, le vieillissement, la toxicomanie. L'invention trouve donc
des applications dans le domaine de la sélection d'animaux d'élevage, comme le porc, portant des allèles favorables du gène de la transcortine, ainsi que pour le diagnostic génétique chez l'homme de prédisposition à l'hypercortisolémie constitutive et ses conséquences pathologiques ci-dessus. Enfin, l'invention permet de disposer d'un nouvel outil de criblage de substances utiles pour traiter ces pathologies liées à un dysfonctionnement de l'axe corticotrope.
On entend par individus tant des sujets humains que des animaux. Avantageusement, lesdites séquences d'acide nucléique sont des séquences d'ADN génomiques comprenant une partie du gène Cbg ou une séquence 3'ou 5'adjacente éloignée préférentiellement au plus de 100kb.
On peut également sélectionner, à l'aide de ce milieu, des souches ne possédant (naturellement ou après mutation) qu'une faible capacité à transporter le citrate, qui peuvent également être utilisées pour la mise en oeuvre de la présente invention. Ces souches forment des colonies ne possédant qu'une très faible coloration bleue.
On peut également cribler les mutants sur la base de l'absence ou de l'altération du gène citrate perméase, par les techniques classiques d'hybridation ou d'amplification PCR, à l'aide de sondes d'acide nucléique ou d'amorces obtenues à partir de la séquence de ce gène.
Des souches dépourvues d'activité citrate perméase peuvent également être trouvées parmi des mutants spontanés CitP-de bactéries lactiques capables de fermenter le citrate. Il peut s'agir notamment de mutants spontanés CitP-de L. lactis subsp. diacetylactis qui ont été classés comme L. lactis subsp. lactis bien qu'ils possèdent une activité citrate-lyase (COLLINS et HARVEY, Journal of Dairy Sciences, 42,32-35, 1962).
Dans ce cas, le criblage de ces souches peut se faire à partir de bactéries lactiques ne fermentant pas le citrate, en détectant la présence des gènes codant pour les sous-unités de la citrate lyase, par les techniques classiques de biologie moléculaire, ou bien en détectant la production de citrate lyase, par exemple par des techniques immunologiques (DAVID et al., Appl. Microbiol. Biotechnol., 44,68-74, 1995), ou bien en détectant la capacité de cellules provenant d'une culture à utiliser le citrate après perméabilisation des cellules (par exemple, traitement au toluène/acétone ou à l'éthanol).
Les souches possédant une activité citrate-lyase et ne possédant que peu ou pas d'activité citrate perméase, obtenues par l'une ou l'autre des stratégies indiquées cidessus, possèdent dans la plupart des cas une activité aspartate aminotransférase, cette activité étant très répandue chez les bactéries lactiques.
Avantageusement, on pourra toutefois effectuer une étape de criblage supplémentaire, permettant de sélectionner les souches capables de produire une quantité d'a-cétoglutarate appropriée pour le type d'utilisation souhaitée.
Cette étape s'effectue en déterminant la quantité d'a-cétoglutarate produit par la souche à tester à partir du glutamate et en présence de citrate.
Cette détermination peut s'effectuer selon les méthodes classiques, de dosage d'activité enzymatique, en incubant les bactéries à tester dans un milieu réactionnel contenant du citrate et du glutamate, ainsi que les cofacteurs nécessaires à l'activité aminotransférase et à l'activité citrate-lyase.
Les produits de la réaction de transamination peuvent être dosés par des techniques classiques de chromatographie. Les souches possédant le niveau souhaité de production d'a-cétoglutarate seront sélectionnées.
Généralement, on sélectionnera de préférence des souches capable de produire au moins 0,5 umoles/ml d'a- cétoglutarate pour une concentration bactérienne de 1010 ufc (unités formant colonies) /ml après 10 heures d'incubation à 37 C dans du tampon phosphate 100 mM à pH 5, 2 contenant 50 uM de phosphate de pyridoxal, 3 mM de MgCl2, 10 mM de citrate et 10 mM de glutamate.
La présente invention sera mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, qui illustre l'obtention de mutants citrate perméase négatifs à partir de bactéries capables de fermenter le citrate, et l'utilisation de ces mutants pour la production d'a- cétoglutarate et l'augmentation de la production de composés d'arômes par des bactéries lactiques.
EXEMPLE 1 : ISOLEMENT DE MUTANTS CITRATE PERMEASE NEGATIFS A PARTIR DE SOUCHES DE L. LACTIS DIACETYLACTIS Des mutants CitP-ont été isolés à partir de 3 souches de L. lactis diacetylactis désignées ci-après A, B, C, en les cultivant en présence d'acridine orangé qui inhibe sélectivement la réplication de l'ADN plasmidique. Chaque souche est d'abord cultivée dans un milieu M17-lactose (TERZAGHI et SANDINE, Applied Microbiology, 29,80-813, 1975). Les cultures en fin de phase exponentielle de croissance sont diluées à 103 cellules par ml dans le même milieu contenant de 0 à 25 ug d'acridine orangé par ml. Pour chaque souche, la culture ayant poussé, après 24 à 48 h, avec la plus forte concentration en acridine orangé, est diluée et étalée sur des boites contenant le milieu de sélection de KEMPLER et McKAY (Applied and Environmental Microbiology, 39, 926-927,1980). Après 48 h d'incubation à 30 C, les colonies blanches sont isolées et repiquées sur milieu M17-lactose.
Le génotype CitP-de ces clones a ensuite été vérifié : la perte du plasmide de 5,5 Kb portant le gène CitP a été vérifiée par électrophorèse de l'ADN plasmidique extrait en utilisant le kit KIAprep Spin, miniprep (QUIAGEN S. A., France). L'absence d'amplification par PCR à l'aide d'amorces dérivées de la séquence du gène CitP (5'-ATG-ATG-AAT-CAC-CCG-3'et 5'-ACT-TCA-ATG-TGA-C-3') montre également que le gène CitP est absent dans ces mutants.
EXEMPLE 2 : UTILISATION DU CITRATE PAR LES 3 SOUCHES DE L. LACTIS DIACETYLACTIS ET LEURS SOUCHES DERIVEES CitP-AU COURS DE LEUR CROISSANCE SUR LAIT Pour cette étude, une souche de L. lactis subsp. lactis TIL 46 (ne possédant pas l'activité citrate-lyase) et sa souche dérivée CitP+ ont été utilisées comme contrôles. La souche dérivée CitP+ a été obtenue par électroporation du plasmide pFL3 contenant le gène CitP (MAGNI et al., FEMS Microbiology Letters, 118,75-82, 1994) dans la souche TIL 46.
Les 3 souches initiales de L. lactis diacetylactis (A, B et C) et les 3 souches dérivées CitPobtenues à l'exemple 1, ainsi que les 2 souches contrôles sont cultivées dans du lait. Pour cela, 50 ml de lait reconstitué à 10% à partir de poudre de lait NILAC (NIZO, Ede, The Netherlands) et stérilisé 10 min à 1100C sont ensemencés à 2% avec des précultures cultivées également sur lait. Ces précultures sont obtenues en inoculant une série de tubes de lait NILAC à des concentrations de 0,5, 1, 2 et 4% avec une préculture cultivée sur milieu M17-lactose. La préculture sur lait la plus développée mais non coagulée est utilisée pour inoculer la culture. La croissance des souches est suivie par mesure de la densité optique à 480 nm après avoir effectué une dilution au 1/10ème avec une solution d'EDTA à 5 mM pH 12, et par mesure du pH. La densité optique et le pH sont mesurés toutes les 2 heures jusqu'à coagulation. En même temps un prélèvement de 1 ml est effectué pour doser le citrate résiduel. Dans ce prélèvement, les cellules bactériennes sont éliminées par centrifugation 5 min à 8000 rpm, puis les protéines sont précipitées par addition d'acide trichloroacétique à une concentration finale de 10%. Après centrifugation pendant 5 min à 13500 rpm, le citrate est dosé dans le surnageant par HPLC. Dix pl de surnageant sont injectés sur une colonne AMINEX (300 mm x 9,6 mm, BIORAD) équilibrée avec une solution d'H2SO4 10 mM et maintenue à 30 C. L'élution est réalisée en condition isocratique avec la solution d'H2SO4 10 mM à un débit de 0.8 ml/min et la détection est effectuée par mesure de l'absorbance à 210 nm. Une gamme étalon est réalisée par injection de quantités croissantes d'une solution standard de citrate de sodium (50 à 100 nmoles).