INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Ces composés sont ensuite sulfatés par le complexe pyridine.S03 (5 équivalents par fonction à sulfater) dans la pyridine pendant 16 heures à 20 C, suivies de 24 heures à 55 C. L'excès d'agent sulfatant est détruit par 16 équivalents de méthanol et le mélange directement chromatographié sur SEPHADEX# LH-20 (CH2C12/MeOH 1/1), puis sur colonne phase inverse C18 (MeOH/tampon AcOH-Net3 5 mM pH 7,0). Après échange sur résine BIORAD AG 50 W X 8 200 Na+, les oligosaccharides sulfatés sont obtenus avec des rendements allant de 80 à 95 %. La saponification est effectuée pendant 48 heures à 37 C, en présence de lithine aqueuse (26 équivalents par ester à saponifier) et d'eau oxygénée (3 équivalents par rapport à la lithine). Le pH est alors amené à 5 par addition d'acide acétique (0,75 équivalents par rapport à la lithine) et le mélange purifié par chromatographie sur colonne phase inverse C18 (MeOH/tampon AcOH-NEt3 10 mM pH
7,0). Après échange sur résine BIORAD# AG 50 W X 8 200 Na+, les oligosaccharides 32 à 34, dans lesquels respectivement n = 0,1 et 2, sont obtenus avec des rendements de 90 % à quantitatifs.
Les couplages des oligosaccharides 32 à 34 (2,5 équivalents) sur les espaceurs dithiols dérivés de polyéthylène glycol de longueurs variables : à savoir m = 5, 10 et 32, à une concentration de 0,2 M dans l'eau, s'effectuent sous irradiation ultraviolette à 365 nM ou par chauffage en présence d'un initiateur de radicaux.
Le mélange est directement traité par 8 équivalents d'oxone, c'est-à-dire par une solution à 0,2 M, amenée à pH 6 par addition de K2HP04. Après 4 heures de réaction à 20 C, l'excès d'oxydant est réduit par addition d'une solution de thiosulfate de sodium et le mélange est directement purifié par HPLC semi-préparative sur phase inverse C18 (CH3CN/tampon AcOH-NEt3 5 mM pH 7,0). Après échange sur résine BIORAD AG 50 W X 8 200 Na+, les oligosaccharides sont resolubilisés dans 100 L de tampon phosphate de sodium 40 mM pH 7 et mis sous pression atmosphérique d'hydrogène en présence d'un équivalent massique d'hydroxyde de palladium 20 % sur charbon. Après 48 heures de réaction à 20 C, les échantillons sont filtrés sur célite 545, puis dessalés sur BIOGEL 10 DG (H20) . On obtient ainsi les composés IIIa-i avec un rendement de 80 à 90 % sur ces trois étapes. Parallèlement, les oligosaccharides 32 à 34 ont été débenzylés quantitativement dans les mêmes conditions. Pour les composés la à le, n = 0, pour les composés 1d à If, n = 1, et pour les composés 1g à li, n = 2. Pour les composés la, ld et 1g : m = 5 et la longueur du bras espaceur est de
33 A, pour les composés lb, lc, lh : m = 10 et la longueur du bras espaceur est de 50 A, et pour les composés lc, lf et li : m = 32 et la longueur du bras espaceur est de 114 A.
REFERENCES 1. BILLIAU A., Adv. Immunol. 1996, 65 : 61 - 130.
2. BOUTIN C., E. NUSSBAUN, I. MONNET, J. BIGNON, R. VANDERSCHUEREN, J. C. GUERIN, 0. MENARD, P. MIGNOT, G. DABOUIS and J. Y. DOUILLARD, 1994, Cancer 74 : 2 460 - 2 467, ESCUDIER B., F. FARACE, E. ANGEVIN, F.
La figure 7 représente, une vue de dessus d'une des nombreuses applications du dispositif, laissant apparaître la zone de découpe en forme de triangle.
En référence à ces dessins, le dispositif comporte un boîtier constituer d'un socle (1), présentant un orifice à chacune de ces extrémités et d'un couvercle (2) par lequel sont introduites les tiges (3) a mouvement libre avant et arrière et dont leurs blocages s'effectuent grâce à deux vis de serrage (4) situer sur le couvercle (2). Entre la tête de la vis de serrage (4) et le couvercle (2) se trouve un ressort (7) qui permet l'ors du desserrage de la vis (4) de maintenir le couvercle (2) plaqué contre le socle (1) du boîtier permettant ainsi le mouvement libre des tiges (3). Une entretoise de guidage (5) solidaire du socle (1) est placée au quatre coins de celui-ci. Entre le socle (1) et le couvercle (2) emmanché sur chaque entretoise (5) se trouve un ressort (8) aillant pour effet de séparer le socle (1) du couvercle (2). Ainsi quand l'utilisateur débloque la tête des deux vis de serrage (4), le couvercle (2) est automatiquement soulevé et séparé du socle (1) grâce au ressort (8) emmanché sur chacune des entretoises (5). Les ressorts entre la tête de la vis de serrage (4) et le couvercle (2) ont pour effet de maintenir plaqué le couvercle (2) contre les tiges (3).
Les entretoises (5) peuvent constituer une partie du socle (1) ceci notamment dans le cas où il serait réalisé en matière plastique en une seule opération de moulage par injection.
Selon une variante non illustrée le dispositif peut être de taille réduite pour la pose de faïence beaucoup plus petite.
A titre d'exemple non limitatif, le boîtier aura des dimensions de l'ordre de 15 cm pour la largeur 40 cm pour la longueur et 1,8 cm pour la hauteur. Les tiges auront une longueur non limitative de 45 cm.
Le dispositif selon l'invention est particulièrement destiné au traçage avant la découpe des carreaux et faïences.
PROCEDE D'EXTRACTION DE LA TOPOLOGIE D'UN SYSTEME A PARTIR DE SA DESCRIPTION TEXTUELLE La présente invention concerne un procédé de production de données représentant la topologie d'un système, à partir de la description textuelle du système dans un langage orienté objet, notamment le langage SystemC.
Elle se rapporte au domaine des techniques de description de systèmes dans un langage formel, de simulation des systèmes et plus généralement de la conception de systèmes assistée par ordinateur (CAO).
Des langages formels tels que VHDL, Verilog ou SystemC permettent de décrire textuellement, avec une approche orientée objet, un système comprenant un ou plusieurs modules matériels (hardware) et/ou logiciels (software). Chaque module du système est représenté par un objet ayant un nombre déterminé de ports d'entrée et un nombre déterminé de ports de sortie, voire des ports d'entrée/sortie dans certaines applications. Les modules sont raccordés entre eux par des signaux qui relient au moins un port de sortie d'un module à au moins un port d'entrée d'un autre module, voire du même module (en cas de bouclage d'une sortie avec une entrée du module). Dans le langage de l'homme du métier et dans la suite, l'association entre un port et un signal qui lui est relié est appelée une connexion.
La description textuelle du système prend la forme d'un code (ou programme) suivant la syntaxe propre au langage formel. Le code est enregistré sur un support de mémorisation quelconque, éventuellement après une opération de compilation, et peut être chargé dans la mémoire d'un ordinateur. Il peut alors être exécuté par l'ordinateur, notamment pour simuler le fonctionnement du système.
Dans le jargon de l'homme du métier, la description textuelle du système, c'est-à-dire le code dans le langage formel, est appelée"netlist". Le concepteur d'un système fabrique la description textuelle du système en programmant dans un langage formel. Dans la suite, on considère seulement l'exemple de SystemeC, bien que l'invention ne se limite pas à ce langage formel particulier.
SystemC a été récemment introduit pour la description des systèmes.
C'est un langage unique capable de décrire les systèmes à tous les niveaux d'abstraction, qui offre de nombreuses opportunités pour utiliser les concepts
de la programmation orientée objet. SystemC est inspiré du langage C++ et en utilise avantageusement l'expressivité pour la modélisation des systèmes.
Mais SystemC est aussi une bibliothèque d'objets pré-codés (aussi appelés classes ), et un noyau de simulation, utilisables pour modéliser et simuler le fonctionnement d'un système. Chaque module du système est représenté par un objet C++ qui caractérise ses ports d'entrée et/ou de sortie, ainsi que le principe de son fonctionnement via des fonctions (aussi appelées méthodes ou processus ) qui pilotent la variation des signaux reliés aux sorties du module en fonction de la variation des signaux reliés aux entrées du module. Dit autrement, le noyau de simulation exécute le code du système.
Un objet de l'invention est de proposer une méthode permettant, de façon la plus transparente possible pour le concepteur, d'obtenir dynamiquement la topologie d'un système à partir de la netlist de ce système écrite en langage formel, notamment mais pas exclusivement SystemC. Par l'adverbe"dynamiquement", on entend"au fur et à mesure"de l'exécution du code du système. On dispose ainsi automatiquement et immédiatement de la topologie du système, pour une utilisation ultérieure.
Lorsque le dérivé de cyclodextrine répond à la formule (I) ou (II) donnée ci-dessus dans laquelle les autres R1 représentent -O-CH2-CO2H, on procède, dans un premier temps, comme précédemment, puis on fait réagir ensuite le dérivé obtenu avec un halogénure de formule X-CH2-CO2R8, pour obtenir un groupe -CH2-CO2R8, dans laquelle X représente un atome d'halogène et R8 représente H, Si(CH3)3 ou un métal alcalin. Ensuite on traite le dérivé de peranhydrocyclodextrine obtenu avec
un alcool, un milieu légèrement acide ou de l'eau pour transformer les groupes -CH2-CO2R8 en groupe -0-CH2-C02H.
Lorsque l'on veut préparer un dérivé de cyclodextrine dans lequel le(s) autre(s) R1 représentent un groupe de formule SH, SR3, NH2, NHR3, NR3R4, CONR3R4, CONHR3, CONH2, CN, COOR3, COOH, ou R3, avec R3 et R4 ayant les significations données ci-dessus, et n est égal à 6,7 ou 8, on peut effectuer les étapes suivantes en partant d'une peranhydrocyclodextrine partiellement modifiée, c'est- à-dire dans laquelle l'un au moins des R1 représente OCONHR2 et les autres R1 représentent OH, et en effectuant les étapes suivantes : 1) faire réagir cette peranhydrocyclodextrine avec un hydrure de métal alcalin pour convertir le(s) groupe(s) OH en groupe(s) OM avec M représentant un métal alcalin ; 2) faire réagir la peranhydrocyclodextrine modifiée obtenue en 1) avec un chlorure de formule C1S02R3 avec R3 ayant la signification donnée ci-dessus, pour obtenir le dérivé de formule (I) ou (II) dans laquelle l'un au moins des R1 est un groupe de formule OS02R3 ; et 3) faire réagir le dérivé obtenu dans la deuxième étape avec un ou plusieurs réactifs appropriés pour remplacer OS02R3 par le groupe R1 voulu.
Dans ce procédé on transforme tout d'abord la per(3,6-anhydro)cyclodextrine partiellement modifiée en alcoolate par action d'hydrure de métal alcalin,
puis on convertit cet alcoolate en dérivé comportant un groupe partant de formule OS02R3, que l'on fait réagir ensuite en une ou plusieurs étapes avec un ou plusieurs réactifs appropriés pour remplacer ce groupe partant par le groupe RI voulu.
Ainsi, dans le cas où R1 doit représenter NH2, on peut faire réagir N3M et le composé défini en 2). Le composé ainsi obtenu appelé azide peut subir une hydrogénation catalytique ou être traité en présence d'ammoniac NH3, afin d'obtenir le produit où R1 doit représenter NH2.
Le produit où R1 doit représenter NHR3 ou NR3R4 est obtenu en faisant réagir le composé défini en 2) sur le composé NH2R3 ou NHR3R4.
Dans le cas où RI doit représenter SH ou SR3, on peut faire réagir le composé défini en 2) avec un halogénure X-, ce qui donne le composé avec (R1 = X), que l'on fait ensuite réagir avec HS- ou R3S- pour donner un composé où R1 représentera SH ou SR3.
Lorsque R1 doit représenter un groupe 3 hydrocarboné R3, on fait réagir avec RLiCu pour donner un composé final où R3 représente alors un groupe hydrocarboné, tel que défini ci-dessus.
De même, le composé où RI représente un halogène, tel que défini dans le paragraphe précédent, peut réagir avec CN- pour donner un composé final où RI représentera CN.
De même, le composé où R1 représente CN peut par hydrolyse ménagée donner un composé où R1 représentera CONH2. Le composé où R1 représente CN peut par hydrolyse complète donner un composé où R1 représentera COOH.
Le composé où R1 représente COOH peut par estérification donner un composé où R1 représentera COOR3.
Le composé où R1 représente COOH peut réagir sur NHR3R4 ou NH2R3 en présence de DCC (dicyclohexylcarbodiimide) pour donner un composé où R1 représentera CONR3R4 ou CONHR3.
La présente invention a également pour objet un polymère obtenu par réaction d'au moins deux per(3,6-anhydro)cyclodextrines de formules (III) ou (IV) suivantes :
et d'un diisocyanate de formule OCN-(CR5R6)m-NCO, dans laquelle R5et R6, identiques ou différents représentent H ou un groupe aliphatique saturé ou insaturé, les OH n'ayant pas réagi lors de la réaction pouvant être transformés en des groupes, identiques ou différents, représentant des groupes choisis parmi les groupes suivants : OCONHR2, OH, OR3, SH, SR3, OCOR3, NH2, NHR3, NR3R4, CONH2, CONHR3, CONR3R4, CN, COOR3, OCH2COOH, COOH et R3, dans lesquelles le ou les R2 représentent un groupe aliphatique, saturé ou insaturé, R3 et R4 qui peuvent être identiques ou différents, représentent un groupe hydrocarboné, aliphatique ou aromatique, saturé ou insaturé, éventuellement substitué par des atomes d'halogène, pouvant comporter un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi 0, S et N, et n est égal à 6,7 ou 8 et m est un entier allant de 1 à 20.
Dans ce polymère, deux unités de per(3,6anhydro)cyclodextrine successives sont liées par au moins une liaison carbamate du type -O-CO-NH (CR5R6)mNH- CO-O-, cette liaison se formant par réaction de deux OH en position 2 d'une entité glucosidique de deux per(3,6-anhydro)cyclodextrines. Ce polymère peut également comporter des liaisons -O-CO-NH (CR5R6)mNH-CO- 0- formées par réaction du diisocyanate cité ci-dessus avec deux-OH de deux unités glucosidiques de la même peranhydrocyclodextrine. Enfin, ce polymère peut comprendre également des liaisons-0-CO-NH(CR5R6)mN=C=0, une extrémité ayant réagi avec un-OH d'une unité cyclodextrine, l'autre extrémité n'ayant pas réagi.
Ce feu de signalisation 10 comporte une piece optique o pleine 12 qui sert a la fois de recuperateur de flux lumineux et de diffuseur de flux lumineux pour une source lumineuse globalement
ponctuelle, constituee ici d'une diode electroluminescente 14.
La diode 14 a ete representee montee sur une platine de support 16, a l'arriere, qui permet notamment son raccordement a s un reseau d'alimentation electrique et a une unite de commande
(non representes).
Les diodes 14 vent disponibles en plusieurs couleurs, c'est a dire qu'il est possible de choisir la coloration du flux lumineux emis par la diode 14. De preference, on choisit la couleur de la diode 14 d'apres la fonction de signalisation a realiser, par exemple le rouge pour une fonction feu anti-brouillard, ou le blanc
pour une fonction feu de recur.
La piece optique 12 et la diode 14 vent agencees o coaxialement suivant un axe optique central A-A qui s'etend globalement horizontalement de la gauche vers la droite, en
considerant la figure 2.
Dans la suite de la description, on utilisera, a titre non
limitatif, une orientation axiale d'arriere en avant qui correspond a
une orientation de gauche a droite suivant l'axe optique A-A.
A titre non limitatif, on qualifiera des elements d'exterieurs ou d'interieurs suivant qu'ils vent agences radialement vers l'axe
optique A-A ou a ['oppose de cet axe.
En se referent notamment a la figure 2, on constate que la o diode 14 comporte a l'arriere un botier de connexion 18 sensiblement cylindrique et a ['avant un globe de diffusion lumineuse 20 sensibiement hemispherique centre sur l'axe
optique A-A, convexe vers ['avant.
Le botier de connexion 18 comporte des moyens de fixation et de raccordement electrique (non representes) pour le
L'invention concerne également les homopolymères de l'acide acrylique obtenus par le nouveau procédé de polymérisation ainsi que les copolymères de l'acide acrylique avec au moins un monomère éthyléniquement insaturé hydrosoluble ou dont le copolymère est hydrosoluble.
L'invention concerne enfin l'utilisation des dits homopolymères et copolymères de l'acide acrylique dans les domaines de l'industrie tels que notamment le domaine papetier et en particulier dans le couchage du papier et la charge de masse du papier, dans le domaine pétrolier, ou encore les domaines de la peinture, du traitement des eaux, de la détergence, de la céramique, des ciments ou des liants hydrauliques, des travaux publics, des encres et des vernis, de l'encollage des textiles ou encore du finissage du cuir, et plus particulièrement concerne l'application de ces polymères comme dispersant et/ou agent d'aide au broyage de matières minérales telles que le carbonate de calcium naturel, le carbonate de calcium précipité, le kaolin, le dioxyde de titane ou les argiles.
En dernier lieu, l'invention concerne les suspensions aqueuses de charges minérales contenant lesdits polymères et plus particulièrement contenant de 0,05 % à 5 % en poids sec, par rapport au poids sec total des charges minérales, dudit polymère selon l'invention.
La polymérisation radicalaire contrôlée des monomères ioniques est une voie particulière de synthèse nécessitant l'utilisation d'agents de transfert spécifiques.
Ainsi, pour polymériser le méthacrylate de sodium les travaux de Armes (Armes, Chem. Commun, 1999,1285) mettent en #uvre, dans une méthode appelée Atom Transfer Radical Polymerization (ATRP), l'acide 4-cyanopentanoique dithiobenzoate tout comme Mc Cormick (Macromolecules 2002,35, 4570-4572 et Macromolecules 2001,34, 2248) y fait appel pour polymériser, par une méthode dénommée Réversible Addition Fragmentation Transfer (RAFT), le 2-acrylamido 2méthyl propane sulfonate de sodium ou encore le 3-acrylamido 3-méthyl butanoate de sodium.
J. Claverie et son équipe (Macromolecules 2001,34(16), 5370) ainsi que la demande de brevet non publiée (FR 01 02848) décrivent que le choix des substituants pour un xanthate ou un trithiocarbonate doit être judicieusement effectué pour obtenir la polymérisation RAFT. Nous entendons par judicieusement effectué, des rendements de polymérisation élevés (supérieurs à 90%) et des indices de polymolécularité faible (inférieur à 2). Nous noterons à ce propos que l'indice de polymolécularité et les masses moléculaires sont dans la publication de Claverie et son équipe mesurés par méthode chromatographique appelée Gel Permeation Chromatography (GPC) en milieu aqueux avec des polyacrylates comme étalons, ce qui permet d'estimer très précisément la valeur des masses moléculaires et des indices de polymolécularité.
Cependant, les molécules intéressantes, c'est-à-dire les agents de transfert, ne sont pas solubles dans l'eau et il est nécessaire d'employer un solvant protique afin de réaliser les synthèses.
D'autres documents (WO 99/31144; WO 00/75207 ; WO 01/27176 ; WO 01/42312 ; WO 02/08307 ; WO 02/22688) nécessitent l'utilisation d'un milieu réactionnel de synthèse de l'agent de transfert différent de l'eau. Ces agents de transfert synthétisés en milieu solvant différent de l'eau ne permettent pas de polymériser l'acide acrylique dans le même milieu réactionnel que celui qui a permis la synthèse de l'agent de transfert.
D'autre part, les travaux de Destarac (Macromol.Rapid.Commun. 2001,22 (18), 1497-1503 ou encore WO 98/58974) concernent notamment la polymérisation de l'acide acrylique à l'aide de xanthates de structures suivantes : dont l'une des limitations est qu'elles nécessitent un également un co-solvant de réaction indispensable à la solvatation de ces dits xanthates pour obtenir un milieu homogène.
En effet, les quelques agents de transfert pouvant contrôler la polymérisation de l'acide acrylique doivent être solvatés dans un autre solvant, ce qui peut engendrer des purifications complexes ultérieures telles que des distillations. De plus, un cosolvant peut générer des réactions de transfert secondaire entrant alors en compétition avec la réaction de transfert du type RAFT.
Par agents de transfert la Demanderesse désigne dans toute la présente demande, y compris les revendications, des composés capables d'arrêter la croissance des chaînes polymères mais de manière non irréversible.
Se pose alors à l'homme du métier le problème qui consiste à la fois de disposer d'un agent de transfert hydrosoluble qui soit réellement efficace avec l'acide acrylique et de disposer d'un agent de transfert dont la synthèse ne nécessite pas d'une part l'utilisation de solvants souvent nocifs et d'autre part d'étapes de
purification telles que des extractions ou des distillations (WO 00/75207 WO 01/42312).
Il en résulte donc une difficulté de réalisation puisque l'agent de transfert doit être synthétisé en plusieurs opérations, que le polymère est obtenu dans un nouveau milieu réactionnel et qu'il doit être à nouveau purifié de toute trace de solvant pour pouvoir être mis en #uvre dans les applications industrielles aqueuses précitées.
Un autre problème connexe réside aussi dans l'obligation de rechercher, pour les applications industrielles, des molécules d'agent de transfert relativement simples et faciles à mettre en #uvre, avec un coût acceptable dans l'industrie.
Ainsi n'existait il pas jusqu'à ce jour de procédé d'homopolymérisation ou de copolymérisation de l'acide acrylique mettant en #uvre un agent de transfert capable de permettre l'homopolymérisation ou la copolymérisation radicalaire contrôlée de l'acide acrylique dans un milieu réactionnel constitué uniquement d'eau à l'exception de tout autre solvant et ne posant pas les problèmes précités.
Différentes quantités d'ODN 30 mer (EF3008AS) (20,50, 100,125, 150, et 200 g) sont mélangées avec 100 g de NP-Chitosan 5 KDa, NP-Chitosan 5-10 KDa.
Les nanoparticules chargées en ODN, de même que les ODN seuls sont centrifugés à 35 000 rpm (Beckman Optima L80, rotor TW50,1) pendant 30 minutes à 4 C. La quantité d'ODN adsorbée aux NP a été calculée en déterminant la quantité d'ODN libre dans les surnageants (figure 6).
Pour des ratios ON/NP de 0,2/1 et 0,5/1 on obtient une adsorption d'environ 100% d'ON antisens EF3008AS sur les nanoparticules de chitosan 5 KDa. Pour les nanoparticules de chitosan 5-10 KDa on obtient une adsorption de 100% pour le ratio ON/NP de 0,2/1, le pourcentage d'adsorption est de 80% quand on passe au ratio ON/NP de 0,5/1. Pour ces deux ratios ON/NP (0,2/1 et 0,5/1) l'adsorption d'ON sur les nanoparticules de CTAB se situe au maximum à 10%. Il est important de noter pour un ratio ON/NP de 1/1 on obtient un pourcentage d'adsorption d'oligonucléotide de 80% avec les nanoparticules de chitosan 5 KDa. (figure 6) .
Exemple V Etude de la protection des ODN adsorbés sur les NP.
L'intégrité de l'ODN EF3008AS seul et associé aux NP Chitosan a été déterminée dans 10% de sérum de veau nouveau né décomplémenté. Les divers complexes sont incubés dans 120 L de NaCl 150 mM avec 10% de sérum de veau nouveau-né décomplémenté. A différents temps d'incubation, des échantillons de 15 L sont prélevés, mélangés à un même volume d'une solution de formamide/eau (4/1), 0. 01% de Bleu de Bromophénol et 0. 01% de Xylène Cyanol et congelés à -20 C. Les NP sont dégradées par du NaOH à pH=12 pendant 2
heures à 37 C. Les ODN sont alors récupérés par une double extraction au phénol/chloroforme/alcool isoamylique (25/24/1) et sont ensuite précipités dans 10 volumes d'acétone contenant 2% de perchlorate de lithium pendant 30 minutes à -20 C.
Les ODN sont ensuite repris dans 5 L de solution formamide/eau (4/1), 0. 01% de bleu de Bromophénol et 0. 01% de Xylène Cyanol, chauffés 5 minutes à 95 C puis mis dans la glace. Ils sont analysés sur un gel dénaturant à 20% de polyacrylamide, 7M d'urée et TBE 1X. Le gel est scanné par un phosphoimager (Storm 840, Molecular Dynamics).
La dégradation des ODN est quantifiée en effectuant le rapport du signal des bandes correspondant aux ODN intacts et aux ODN dégradés.
La figure 7 montre qu'il y a une bonne protection de l'ODN 30 mer par les NP-Chitosan.
Exemple VI : Transfection de cellules humaines par des NP-Chitosan chargées en ODN.
1) Matériels et Méthodes. a) Préparation des cellules.
Des cellules humaines CEM4FX ont été utilisées.
500 000 cellules en suspension sont ensemencées dans des plaques 12 puits (TPP, Suisse) dans 850 l d'un milieu RPMI contenant 10% de SVF (sérum de veau f#tal) b) Transfection des cellules.
150 l de la suspension de nanoparticules préparée précédemment sont mis au contact des cellules pendant 24 heures. c) Fixation des cellules.
Les cellules sont ensuite fixées avant de pouvoir effectuer une observation en fluorescence. Au bout des 24 heures d'incubation des cellules en présence des