INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
l'activité des canaux à chlorure était enregistrée uniquement dans le sens entrant grâce au remplacement des ions chlorure du milieu pipette par du TCA (acide trichloracétique). Le contrôle du potentiel de membrane cellulaire à une valeur proche de zéro mV se faisait en utilisant un milieu extracellulaire KCI. Ainsi le potentiel du fragment de membrane enregistré correspond à l'opposé du potentiel imposé dans la pipette d'enregistrement. Dans ces conditions les solutions d'enregistrement avaient la composition suivante : (en mM) : NMDG/Cl (ou TCA) 140, KCI 2, Mg) 2 1, HEPES 10, TEA/CI 15, pour le milieu pipette et NaCI, KCI 141, CaCz 0.5, HEPES 10, EGTA 5, pour le bain, le pH était ajusté dans les deux cas à 7.4 avec respectivement du TRIS base et KOH.
Les produits chimiques provenaient de chez Sigma (Saint Quentin Fallavier, France).
Après réalisation d'un'gigaseal'avec des pipettes d'une résistance comprise entre 4 et 7 MO, les courants ioniques étaient mesurés grâce à un amplificateur de patch-clamp (EPC-7 amplifier, List-Medical, Darmstadt, RFA ou Axopatch B200, Axon Instruments, CA). L'acquisition du signal se faisait ensuite (Fréquence d'acquisition de 1 à 5 kHz) à l'aide d'une carte interface (Scientific Instruments, OH) et du logiciel pClamp 6 (Axons Instruments, CA). Les produits étaient dilués à la concentration voulue dans le milieu extracellulaire. L'application se faisait par gravité à travers un système de perfusion multivoies chacune d'elles ayant un diamètre interne de 300 um.. Le changement de solution s'opérait en plaçant après ouverture du robinet la voie correspondante en face de la cellule enregistrée.
Résultats Les cellules NCB-20 expriment un site de liaison qui reconnaît spécifiquement l'acide xanthurénique. Le but de ces expériences fonctionnelles était de détecter tout phénomène membranaire électrogénique pouvant être activé par le (s) récepteur (s) de l'acide xanthurénique. Certains arguments laissaient à penser que ce récepteur est couplé aux protéines G et donc qu'un effet membranaire passerait
par un relais intracellulaire. Nous avons en conséquence prospecté une éventuelle action sur les perméabilités cationiques et chlorures dont l'activation dépend à la fois du potentiel de membrane et de facteurs cytosoliques (essentiellement l'ion calcium et les protéines kinases ; Evans and Marty, 1987 ; Taleb et al., 1988 ; Leech et al., 1996). Ces deux types de canaux ioniques ont donc été enregistrés de manière isolée (voir méthodes) et selon la mise en jeu de l'une ou l'autre des deux perméabilités. Le potentiel d'inversion de la réponse serait compris entre-49. 5 ou- 11.8 mV respectivement pour une réponse cationique (cations monovalents) ou chlorure. Dans ces conditions tout changement au niveau des facteurs cytoplasmiques sera révélé par les paramètres de la relation courant potentiel (Figure 23).
Les cellules étaient enregistrées en cellule-attachée. Le courant traversant les canaux insérés dans la membrane sous la pipette était enregistré de manière isolée. Le potentiel de la membrane cellulaire était imposé à 0 mV par une concentration de KCI dans le bain équivalente à celle du milieu cytoplasmique. Dans ces conditions le potentiel du fragment de membrane sous la pipette est opposé à celui de la pipette.
Effet de l'acide xanthurénique sur l'activation du courant cationique Le fragment de membrane enregistré était périodiquement stimulé (fréquence 0.2 Hz) par une rampe de potentiel de-70 à 100 mV (voir protocole dans la Fig. 24 A, trace du bas). Dans les conditions contrôles utilisant un milieu pipette pauvre en ion chlorure (substitués par du TCA), le courant enregistré était stable et avait une amplitude de-0. 4 : t 0. 1 et 8.6 0. 2 pA (n = 30) aux potentiels respectifs de-70 et 100 mV. Ce courant s'inversait à un potentiel de-48. 3 3. 5 mV (n = 3). Cette valeur proche du potentiel d'inversion des cations monovalents (-49.5 mV, si on estime que la concentration intracellulaire des ions K+ et Na+ est respectivement de 140 et 2 mM) montre dans ces conditions d'enregistrement, qu'il y a une perméabilité
Concentrations en drogues Moyenne Susceptibilité Inhibiteurs utilisées Déviation de RT géométrique détectable standard IC50 maximumb Gamms / Etapes du dilution AZT 50 M - 5 nM 10 x 0,018 M 2,7 2700 3TC 200-0, 02 uM 10 x 1, 512 uM 2,2 130 D4T 100-0, 01 uM 10 x 0, 444 uM 2,7 220 DDI 100-0, 01 uM 10 x 1, 613 uM 2,5 60 Abacavir 200 - 0,8 M 4 x 2, 229 uM 1,8 90 Effavirenz 100-0, 16 nM 5 x 0,716 nM 2,2 140 Nevirapine 50 M - 5 nM 10 x 0,037 M 2,0 1300 a-moyenne géométrique et déviation standard de 20 tests répétés pour les inhibiteurs de transcriptase inverse. b-différence maximale approximative pour les indices ICso et ICgo entre NL43 et le virus testé qui peut être mesurée en utilisant la gamme de concentrations en drogues donnée
IV-Reproductibilité La reproductibilité de la méthode de détermination de la susceptibilité du virus recombinant (RVA) aux inhibiteurs de transcriptase inverse (RTI) a été évaluée par une série de tests sur 5 échantillons, choisis de manière à représenter une large gamme de profils de susceptibilité, entre 4 et 8 tests par échantillon, en utilisant des préparations d'ARN et des réactions PCR séparées.
Echantillon Index de Résistanceb (Nombre de Génotype (Nombre AZT 3TC D4T DDI Abacavir Efavirenz Nevirapine tests MGc 1,5 1,3 1,4 1,41,11,0 2,2R1 69N/T 70R SDd 1,5 1, 5 1,4 1, 6 1, 2 1, 1 1, 8 (6) max/min 2, 9 2, 8 2, 2 2, 8 1, 6 1, 2 3, 8 n > 4/Nf 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 41L, 62V, 67N, 69N, MGc 1232, 6 > f 43, 5 26, 9 > 74, 9 > 75I, 77L sdd 1,6 na 2,1 1,7 na 1,7 na R2 115F,116Y,151M, 181C, max/mine 3,8 na 8,1 4,1 na 3,9 (6) 184V 190A n > 4 N/f 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 208Y, 215F, 219Q MGc 13,2 > 3,2 3,1 4,3 1,0 1,2 R3 184V. 215F SDd 2, 7 na 1,8 1,6 1,4 1,0 1,3 (6) max/mine 8,9 na 5,7 3,3 2,4 1,0 1,6 n > 4/Nf 5/6 1/6 1/6 1/6 4/6 0/6 0/6 MGc 137,5 > 3,6 3,0 6,1 149,8 > 41L, 67N, 69D, 184V, SDd 1,8 na 2,0 1,3 1,6 1,6 na R4 190A, (5) max/mine 4,5 na 4,1 1,7 3,3 3,9 na H208Y, 210W, 215Y n > 4/Nf 5/5 5/5 3/5 5/5 3/5 5/5 5/5 MGc 3, 3 1,8 1,7 2,6 1,7 > 580,5 R5 215Y, 41L, 74V, 1001, SOd 1,6 1,7 1,8 1,6 1,6 na 1,8 (5) 103N max/mine 3, 0 3,7 3,7 2,5 2,9 na 2,2 n > 4/Nf 1/5 0/5 0/5 0/5 0/5 5/5 5/5
(b) L'Index de Résistance est le rapport de l'ICgo dans l'échantillon par rapport à celui de NL43 déterminé en parallèle.
Selon le procédé de la présente invention, il est possible de réutiliser une puce de la présente invention sur laquelle une empreinte a été formée selon l'invention, ceci après traitement et lavage de la puce pour en retirer les fragments hybridés.
La présente invention, se rapporte également à une empreinte génétique obtenue par un procédé selon la présente invention. Cette empreinte génétique peut être obtenue à partir de l'ADN d'un organisme choisi parmi un animal, un végétal, un insecte ou un microorganisme.
Par exemple, la matrice de sondes ordonnées de la puce de la présente invention étant standardisée par exemple pour être universelle, ou pour être spécifique pour un marqueur génétique, par exemple un caractère génétiquement détectable, le sexe, la race, l'espèce, la variété, etc choisi, l'empreinte formée selon le procédé de la présente peut servir de témoin ou de standard pour détecter ou non chez d'autres organismes ou produits dérivés l'ADN ayant servi à former l'empreinte, le marqueur génétique ou le caractère génétiquement détectable, le sexe, la race, l'espèce, ou la variété.
Aussi, la présente invention fournit également un procédé d'identification d'un organisme comprenant de l'ADN ou d'un échantillon comprenant de l'ADN, ledit procédé comprenant les étapes suivantes :
- a) la fabrication d'une première empreinte génétique d'un organisme référence par un protocole suivant un premier procédé de la présente invention, ladite première empreinte constituant l'empreinte génétique dudit organisme référence associée au protocole utilisé, - b) la fabrication d'une deuxième empreinte génétique à partir d'un organisme à identifier ou d'un échantillon à identifier suivant le même premier procédé que dans l'étape a), et - c) la comparaison de la première empreinte obtenue à l'étape a) avec la deuxième empreinte obtenue à l'étape b), une identité de la première et de la deuxième empreintes révélant le cas échéant que l'organisme, ou l'échantillon à identifier, présente la même identité que, ou provient de, l'organisme référence.
Pour que deux empreintes de la présente invention puissent être comparées, bien entendu, le même procédé de fabrication de ces empreintes doit être utilisé, c'est à dire les mêmes concentrations d'ADN, le ou les mêmes enzymes de restriction (s), le même adaptateur le cas échéant, et les mêmes conditions d'hybridation.
Les empreintes peuvent être comparées directement ou photographiées pour ensuite être comparées.
L'organisme référence peut être un animal, et l'organisme ou l'échantillon à identifier un animal ou un échantillon d'animal à identifier.
Par exemple, l'organisme référence peut être un animal destiné à produire de la viande pour
l'alimentation humaine, et l'échantillon à identifier un morceau de viande destiné à la vente.
Selon la présente invention, l'organisme référence peut être une plante, et l'organisme ou l'échantillon à identifier une plante ou un échantillon de plante à identifier.
Par exemple, l'individu référence peut être un cépage de vigne référence, et l'échantillon à identifier. un échantillon de raisin.
Selon la présente invention, l'individu référence peut être un suspect, et l'échantillon à identifier un tissus ou échantillon humain, par exemple prélevé sur le lieu d'un crime, susceptible de provenir dudit suspect.
La présente invention se rapporte également à l'utilisation d'une puce selon la présente invention, dans un procédé d'identification d'un organisme ou d'un produit issu de cet organisme, du sexe, de la race ou de la variété ou de l'espèce dudit organisme à partir d'un échantillon de son ADN, par exemple à des fins de traçabilité individuelle des animaux ou des plantes et des produits dérivés de ceux-ci.
Elle se rapporte aussi à l'utilisation d'une puce selon l'invention pour détecter en micro-organisme.
L'invention apporte d'une part une simplification des protocoles opératoires par rapport aux techniques de l'art antérieur car elle permet par exemple en une seule opération d'obtenir une empreinte génétique d'un individu, sans aucun développement préalable pour
Les isomères Z et E de la cyclopropyl- (6, 6-diphényl-6, 7-dihydro-1H- indazol-3-yl) -méthanone oxime sont préparés de la manière suivante : Un mélange de 0,34 g de cyclopropyl- (6, 6-diphényi-6, 7-dihydro-1H-indazol-3- yl)-méthanone, 0,278 g de chlorhydrate d'hydroxylamine, 0,328 g d'acétate de sodium et 2 cm3 d'eau dans 32 cm3 d'éthanol est porté au reflux pendant environ 18 heures. Le mélange réactionnel est versé dans 100 cm3 d'eau et refroidi pendant environ 1 heure à une température voisine de 0OC. Le solide est essoré et lavé par 3 fois 5 cm3 d'eau glacée. Les deux isomères Z et E sont séparés sur colonne de silice [éluant : dichlorométhane/méthanol (98/2 en volumes en fractionnant par 50 cm3.
Les fractions 34 à 46 sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est repris par 5 cm3 d'oxyde de diisopropyl, lavé par 2 fois 1 cm3 d'oxyde de diisopropyl puis séché sous pression réduite à une température d'environ 25 C. On obtient 0,113 g de l'isomère A de la cyclopropyl-(6,6-diphényl-6,7-dihydro-1H-indazol-3-yl)-méthanone oxime sous forme d'une poudre blanche, dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : fondant à 183 C (Banc-Köfler) - spectre de R. M. N. 1H (300 MHz, (CD3) 2SO d6, 8 en ppm) : de 0,70 à 0,90 (mt : 4H) ; 1,79 (mt : 1H) ; 3,39 (s : 2H) ; 6,30 (d large, J = 10 Hz : 1H) ; 6,95 (d large, J = 10 Hz : 1H) ; de 7,15 à 7,35 (mt : 10H) ; de 11,25 à 11,55 (mf étalé : 1 H) ; de 12,50 à 12,80 (mf étalé : 1H).
Les fractions 48 à 68 sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est repris par 5 cm3 de pentane, essoré, lavé par 2 fois 2 cm3 de pentane puis séché sous pression réduite (13 kPa) à une température d'environ 25 C. On obtient 0,09 g de l'isomère B de la cyclopropyl- (6, 6-diphényl-6, 7 -dihydro-1 H-indazol-3-yl) -méthanone oxime sous forme d'une poudre blanche, dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : fondant à 100 C (Banc-Köfler) - spectre de R. M. N. 1H (300 MHz, (CD3) 2SO d6, avec ajout de quelques gouttes de CD3COOD d4, 8 en ppm) : 0,80 (mt : 2H) ; 0,91 (mt : 2H) ; 2, 25 (mt : 1H) ; 3,37 (s : 2H) ; 6,16 (d, J = 10 Hz : 1H) ; 6,72 (d, J = 10 Hz : 1H) ; de 7,10 à 7,35 (mt : 10H).
EXEMPLE 6-2
Les isomères Z et E de la cyclobutyl-(6,6-diphényl-6,7-dihydro-1H- indazol-3-yl) -méthanone oxime sont préparés comme dans l'exemple 6-1 ; mais à partir de 0,345 g de cyclobutyl-(6,6-diphényl-6,7-dihydro-1H-indazole-3- yt)-méthanone, 0,278 g de chlorhydrate d'hydroxylamine et 0,328 g d'acétate de sodium. Le mélange des isomères Z et E est séparé par flash chromatographie sur colonne de silice [éluant : dichlorométhane/méthanol (98/2 en volumes)] en fractionnant par 60cm3.
Les fractions 35 à 60 sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est repris par 10 cm3 d'oxyde de diisopropyle, lavé par 2 fois 5 cm3 d'oxyde de diisopropyle puis séché sous pression réduite à une température d'environ 50 C. On obtient ainsi 0,21 g de l'isomére A de la
diisopropyle, oxime sous forme d'un solide, dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : fondant à 185 C (Banc-Köfler) - spectre de R. M. N. 1H (300 MHz, (CD3) 2SO d6, en ppm) : de 1,65 à 2, 20 (mt : 6H) ; 3, 38 (s : 2H) ; 3, 54 (mt : 1H) ; 6, 28 (d très large, J = 10Hz : 1H) ; 6, 80 (d, J = 10 Hz : 1H) ; de 7, 15 à 7, 35 (mt : 10H) ; 11, 50 (mf : 1H) ; 12,53 (mf : 1 H).
Les fractions 62 à 110 sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est repris par 5 cm3 d'oxyde de cyclobutyl-(6,6-diphényl-6,7-dihydro-1H-indazol-3-yl)-méthanone lavé par 3 fois 1 cm3 d'oxyde de diisopropyl puis séché sous pression réduite (13 kpa), à une température voisine de 50 C. On obtient ainsi 0, 08 g de l'isomére B de la cyclobutyl-(6,6-diphényl-6,7-dihydro-1H-indazol-3-yl)méthanone oxime sous forme d'un solide, dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : fondant à 170 C (Banc-Köfler) - spectre de R. M. N. 1H (300 MHz, (CD3) 2SO d6, ô en ppm) : de 1,60 à 2, 30 (mt : 6H) ; de 3, 35 à 3, 50 (mf : 2H) ; 3, 79 (mf : 1 H) ; 6, 15 (d large, J = 10Hz : 1H) ; 6, 68 (mf : 1H) ; de 7, 15 à 7, 35 (mt : 10H) ; 11, 10 (mf : 1H) ; de 12,30 à 12,85 (mf très étalé : 1 H).
EXEMPLE 6-3
Les isomères Z et E de la cyclopropyl- (6, 6-diphényl-6, 7-dihydro-2H- indazol-3-yl) -méthanone O-méthyl-oxime sont préparés comme dans l'exemple 6-1 mais à partir de 0,34 g de cyclopropyl- (6, 6-diphényl-6, 7- dihydro-1 H-indazol-3-yl)-méthanone, 0,334 g de chlorhydrate de
méthoxylamine et 0,328 g d'acétate de sodium. Le mélange des isomères Z et E est séparé par flash chromatographie sur colonne de silice [éluant : dichlorométhane] en fractionnant par 50 cm3.
Les fractions 66 à 90 sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est repris par 4 cm3 de pentane, essoré, lavé par 2 fois 1 cm3 de pentane puis séché sous pression réduite (13 kPa), à une température voisine de 35 C. On obtient ainsi l'isomère A de la cyclopropyl- (6, 6-diphényl-6, 7-dihydro-2H-indazol-3-yl)-méthanone O-méthyl-oxime sous forme d'un solide, dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : fondant à 134 C (Banc-Köfler) - spectre de R. M. N. 1H (300 MHz, (CD3) 2SO d6, 8 en ppm) : 0,77 et 0,84 (2 mts : 4H en totalité) ; 1,79 (mt : 1 H) ; 3,39 (s large : 2H) ; 3, 80 (s large : 3H) ; 6,34 (d large, J = 10 Hz : 1H) ; 6,92 (d large, J = 10 Hz : 1H) ; de 7,15 à 7,35 (mt : 10H) ; 12,66 (mf : 1H).
Les fractions 120 à 156 sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est repris par 3 cm3 de pentane, essoré, lavé par 2 fois 1 cm3 de pentane puis séché sous pression réduite (13 kPa), à une température voisine de 35 C. On obtient ainsi l'isomère B de la cyclopropyl- (6, 6-diphényl-6, 7-dihydro-2H-indazol-3-yl)-méthanone O-méthyl-oxime sous forme d'un solide, dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : fondant à 162 C (Banc-Köfler) - spectre de R. M. N. 1H (400 MHz, (CD3) 2SO d6 avec ajout de quelques gouttes de CD3COOD d4, 8 en ppm) : 0,82 (mt : 2H) ; 1,02 (mt : 2H) ; 2,03 (mt : 1H) ; 3,35 (s : 2H) ; 3,85 (s : 3H) ; 6,19 (d, J = 10 Hz : 1H) ; 6,74 (d, J = 10 Hz : 1H) ; de 7,10 à 7,25 (mt : 6H) ; 7,27 (t large, J = 7,5 Hz : 4H).
EXEMPLE 7-1
1) L'acide 6, 6-diphényl-1- (toluène-4-sulfonyl) -6, 7-dihydro-1 H- indazole-3-carboxylique est préparé de la manière suivante : A une solution de 1 g d'acide 6, 6-diphényl-6, 7 -dihydro-1 H-indazole-3- carboxylique dans 10 cm3 d'eau et 10cm3 d'une solution aqueuse normale d'hydroxyde de sodium, est ajoutée, à une température voisine de 20 C, une solution de 1 g de chlorure de p-toluènesulfonyle dans 10 cm3 d'oxyde de diéthyle. Le mélange réactionnel, pris en masse après environ 10 minutes de forte agitation, est dilué par 10 cm3 d'eau. Après agitation pendant environ 18 heures à une température voisine de 20 C, le mélange réactionnel est filtré. Le solide est lavé par 3 fois 20 cm3 d'eau puis mis en suspension dans 20 cm3 d'eau. 10 cm3 d'une solution aqueuse normale d'acide chlorhydrique sont ajoutés. Le mélange est extrait par 3 fois 50 cm3 d'acétate 3 trois fois 70 cm3 d'eau, 1 fois 70 cm3 d'une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium puis séchées sur sulfate de magnésium, filtrées et concentrées sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est purifié par flash chromatographie sur colonne de silice [éluant : dichlorométhane/méthanol (95/5 en volumes)]. On obtient ainsi 0,94 g d'acide 6, 6-diphényl-1- (toluène-4-sulfonyl)-6, 7-dihydro- 1H-indazole-3-carboxylique sous forme d'un solide, dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : fondant à 246 C (Banc-Köfler) - spectre de R. M. N. 1H (300 MHz, (CD3) 2SO d6, 8 en ppm) : 2,44 (s : 3H) ; 3,84 (s : 2H) ; 6,43 (d large, J = 10 Hz : 1H) ; 6,87 (d, J = 10 Hz : 1H) ;
7,17 (d mt, J = 8 Hz : 4H) ; de 7, 20 à 7, 35 (mt : 6H) ; 7,49 (d, J = 8 Hz : 2H) ; 7,83 (d, J = 8 Hz : 2H) ; de 13,00 à 14,00 (mf très étalé : 1H).
Pour permettre l'expression d'un acide nucléique codant pour un polypeptide ISUM2A selon l'invention placé sous le contrôle d'une séquence régulatrice appropriée, les acides nucléiques ou les vecteurs recombinants définis dans la présente description doivent être introduits dans une cellule hôte. L'introduction des polynucléotides selon l'invention dans une cellule hôte peut être réalisée in vitro, selon les techniques bien connues de l'homme du métier.
Avantageusement, la cellule hôte transformée est une cellule de plante ou encore un protoplaste de plante.
Parmi les cellules susceptibles d'être transformées selon le procédé de l'invention, on peut citer à titre d'exemples des cellules de plantes de grandes cultures (maïs, blé, colza, tournesol, pois, soja, orge..).
Préférentiellement, on peut choisir des plantes connues pour contenir de grandes réserves (protéiques, glucidiques et lipidiques), notamment les plantes céréalières ou les plantes oléagineuses.
Préférentiellement, il s'agit d'une cellule ou d'un protoplaste d'une plante céréalière. La cellule ou le protoplaste est préférentiellement originaire du maïs, du blé, de l'orge, du sorgho, du millet, du seigle ou du riz.
De manière tout à fait préférée, il s'agit d'une cellule originaire du maïs.
L'invention a également pour objet l'utilisation d'un acide nucléique comprenant un polynucléotide codant pour un polypeptide ISUM2A, le cas échéant sous la forme d'une construction d'acide nucléique telle que définie ci-dessus, pour fabriquer une plante transformée capable de produire des graines à développement du germe affecté.
L'invention est également relative à l'utilisation d'un vecteur recombinant tel que défini dans la présente description pour fabriquer une plante transformée capable de produire des graines à développement du germe affecté.
L'invention concerne aussi l'utilisation d'un hôte cellulaire transformé par un acide nucléique comprenant un polynucléotide codant pour un
polypeptide ISUM2A, le cas échéant sous la forme d'une construction d'acide nucléique ou cassette d'expression telle que définie ci-dessus, pour fabriquer une plante transformée capable de produire des graines à développement du germe affecté.
L'invention concerne aussi une plante transformée comprenant une pluralité de cellules hôtes telles que définies ci-dessus.
PLANTES TRANSFORMEES PAR UN ACIDE NUCLEIQUE PERMETTANT LA SYNTHESE DU POLYPEPTIDE ISUM2A ET PROCEDES POUR LEUR OBTENTION.
en particulier contre le photo-vieillissement, mais également dans des compositions blanchissantes ou dépigmentantes .
Par "pollution", on entend aussi bien la pollution "extérieure", due par exemple aux particules de diesel, à l'ozone ou aux métaux lourds, que la pollution "intérieure" qui peut notamment être due aux émissions de solvants de peinture, de colles de moquette, d'isolants ou de papiers peints (tels que toluène, styrène, xylène ou benzaldéhyde), ou bien à la fumée de cigarette. Tous ces polluants sont en effet susceptibles de générer, directement ou indirectement, des radicaux libres.
L'acide pantéthéine sulfonique et ses sels ont notamment été décrits comme agents favorisant la repousse des cheveux (JP-09 110 645), comme agents destinés à blanchir la peau (JP-09 059 142), notamment par inhibition de l'activité de la tyrosinase (FR-2 532 175), et à augmenter le renouvellement cellulaire, en particulier dans des compositions anti-âge contenant par ailleurs un hydroxy-acide (JP-08 259 420). Il a également été suggéré de les utiliser pour inhiber l'irritation de la peau (JP-03 054 081 ).
Toutefois, à la connaissance de la Demanderesse, il n'a encore jamais été suggéré que l'acide pantéthéine sulfonique et/ou ses sels pouvaient posséder des propriétés anti-radicalaires.
La présente invention a donc pour premier objet l'utilisation cosmétique de l'acide pantéthéine sulfonique et/ou de l'un de ses sels dans une composition renfermant un milieu physiologiquement acceptable, en tant qu'agent anti-radicalaire.
La présente invention a pour second objet l'utilisation cosmétique de l'acide pantéthéine sulfonique et/ou de l'un de ses sels dans une composition renfermant un milieu physiologiquement acceptable, pour prévenir ou lutter contre les effets néfastes des UV et/ou de la pollution sur la peau.
La présente invention a pour troisième objet l'utilisation de l'acide pantéthéine sulfonique et/ou de l'un de ses sels pour fabriquer une préparation destinée à prévenir ou lutter contre les effets néfastes des UV et/ou de la pollution sur la peau.
Bien que tout sel alcalin ou alcalino-terreux d'acide pantéthéine sulfonique convienne à une utilisation dans la présente invention, on préfère utiliser le sel de calcium de l'acide pantéthéine sulfonique.
La composition selon l'invention est de préférence adaptée à une application topique sur la peau et comprend donc généralement un milieu physiologiquement acceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau et/ou ses phanères.
La quantité d'acide pantéthéine sulfonique ou de son sel dans la composition selon l'invention est fonction de l'effet recherché et peut par exemple aller de 0,001 à 10% en poids, et de préférence de 0,01 à 5% en poids, par rapport au poids total de la composition.
La composition renfermant l'acide pantéthéine sulfonique ou son sel peut notamment être destinée à prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané, en particulier du photo-vieillissement et plus particulier la perte de fermeté et/ou d'élasticité de la peau.
L'invention a donc aussi pour objet un procédé de traitement cosmétique de la perte de fermeté et/ou d'élasticité de la peau, comprenant l'application sur la peau d'une composition renfermant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un composé choisi parmi l'acide pantéthéine sulfonique et ses sels.