INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Théophylline libérée (%(w/w) Temps (heure) E4 E5 1 34 40 2 49 57 4 66 74 6 75 84 8 81 90 10 86 94 Conclusion De l'examen des données réunies dans le Tableau 18, il apparaît que l'application d'un enrobage protecteur sur les granules E4 n'en modifie pas de façon significative le profil de dissolution.
Exemple 7: Comprimés multiparticulaires orodispersibles comprenant de la théophylline comme principe actif Compression On utilise une machine à comprimer alternative "Manesty F3 press" équipée de poinçons POLO de 12mm de diamètre.
Les granules enrobés E4 et E5 obtenus selon l'exemple 6 sont mélangés avec des excipients de compression selon la composition du Tableau 19 et on obtient des comprimés C6 et C7, correspondant respectivement aux granulés enrobés E4 et E5 : Tableau 19
C6 C7 % en poids % en poids Granules enrobés de théophylline 35 35 Mannitol 300 26.5 26. 5 Mannitol 60 26.5 26. 5 Crospovidone 10.0 10. 0 Arôme -- -- Syloid 244FP 0.5 0. 5 Stéarate de magnésium 1.0 1.0 Aspartame -- --
Les caractéristiques des comprimés C6 et C7 sont réunies dans le Tableau 20 : Tableau 20
C6 C7 Dosage du comprimé (mg) en 100 70 substance active Poids (mg) 680. 0 583.0 Dureté (kp) 4.2 3. 3 Friabilité (%) 0. 8 0.5 Temps de désintégration en bouche 14 35 (secondes)
On établit un profil de dissolution comparatif dans les conditions de l'exemple 3, entre les comprimés orodispersibles multiparticulaires C6 et C7, contenant respectivement les granules enrobés E4 et E5 : Les résultats enregistrés sont réunis dans le Tableau 21 : Tableau 21
Théophylline libérée (%(w/w) Temps (heures) C6 (E4) C7 (E5) 1 46 (34) 48 (40) 2 65 (49) 66 (57) 4 82 (66) 83 (74) 6 90 (75) 92 (84) 8 94(81) 98 (90) 10 @ 97(86) 100(94) Conclusion De l'examen des données réunies dans le Tableau 21, il résulte que l'enrobage protecteur n'améliore pas les propriétés mécaniques du film formé par l'EudragitNE30D qui est déjà souple et déformable. Ceci est attesté par la faible variation observée entre les profils de dissolution des comprimés orodispersibles C6 et C7, contenant respectivement les granules enrobés E4 et E5.
Exemple 8 : Compression On utilise une machine à comprimer alternative "Manesty F3 press" équipée de poinçons POLO de 12mm de diamètre.
Les granules enrobés E5 obtenus selon l'exemple 6 sont mélangés avec des excipients de compression selon la composition du Tableau 22 où les comprimés mutiparticulaires obtenus sont désignés par C8 : Tableau 22
C8 % en poids Granules enrobés de théophylline 20 E5 Mannitol 300 32.8 Mannitol 60 32.8 Crospovidone 10.0 Arôme 1.0 Syloid 244FP 0.5 Stéarate de magnésium 1.0 Aspartame 2.0
Les caractéristiques des comprimés multiparticulaires orodispersibles C8 sont réunies dans le Tableau 23 : Tableau 23
ayant un fond, il est évident que la cavité peut être réalisée avec une autre forme.
On décrit maintenant une cinquième variante du mode de
La figure 9 est une vue analogue à la figure 3,
représentant un organe transparent 44 dans cette variante.
Comme l'indique la figure, dans l'organe transparent 44, une cavité 44A d'incidence de lumière a une configura30 tion différente de celle de la cavité 14A d'incidence de lumière de l'organe transparent 14 du mode de réalisation de
Dans l'organe transparent 44, la cavité 44A d'incidence de lumière est formée afin qu'elle soit en contact intime avec la résine d'étanchéité 12B de la source 12. Dans l'organe transparent 44, la lumière émise par la diode photoémissive avance directement dans l'organe transparent 44 et se déplace radialement depuis le centre luminescent O
de la source 12.
L'organe transparent 44 possède une partie de réflexion interne 44B, une partie de réfraction 44C, une partie péri5 phérique externe cylindrique 44D et une partie annulaire plate 44E dont la forme est strictement identique à celle des parties correspondantes de l'organe transparent 24 de la
troisième variante.
variante, il est aussi possible d'obtenir les mêmes fonctions et effets qu'avec la troisième variante.
Dans cette variante, comme la cavité 44A d'incidence de lumière de l'organe transparent 44 est en contact intime avec la résine d'étanchéité 12B de la source 12, l'organe transparent 44 peut être facilement formé par une opération de moulage avec prisonnier ou analogue, et la précision de
position de l'organe transparent 44 peut être accrue.
On décrit maintenant une sixième variante du mode de réalisation. La figure 10 est analogue à la figure 3 et représente
codant l'hygromycine phosphotransférase ; promoteur AtBXL1 : séquence du promoteur d'AtBXL1 ; uidA : séquence codante de la ss-glucuronidase ; TNos : terminateur de la nopaline synthase ; BG : frontière gauche de l'ADN-T ; BD : frontière droite de l'ADN-T.
2) Insertion de l'ADNc de la CCR d'Arabidopsis thaliana en orientation antisens sous contrôle du promoteur du gène AtBXLl ; L'ADNc du gène AtCCRl (n d'accès GenBank : AF320624) est inséré, en orientation antisens dans le plasmide pCAMBIA1391Xb (promAtBXL1) en remplacement de la séquence codante uidA.
La construction obtenue est schématisée sur la Figure 2.
Légende de la Figure 2 : P35S : promoteur 35S du CaMV; T35S : séquence terminatrice du CaMV ; hpt : séquence codant l'hygromycine phosphotransférase ; promoteur AtBXL1 : séquence du promoteur d'AtBXL1 ; AtCCRl : ADNc d'AtCCRI en orientation antisens ; TNos : terminateur de la nopaline synthase ; BG : frontière gauche de l'ADN-T ; BD : frontière droite de l'ADN-T.
3) Insertion de l'ADNc de la F5H de peuplier en orientation sens sous contrôle du promoteur du gène AtBXLl : L'ADNc de la F5H de peuplier (n d'accès GenBank : AJ010324) est inséré, en orientation sens dans le plasmide pCAMBIA1391Xb (promAtBXL1) en remplacement de la séquence codante uidA.
La construction obtenue est schématisée sur la Figure 3.
Légende de la Figure 3 : P35S : promoteur 35S du CaMV; T35S : séquence terminatrice du CaMV ; hpt : séquence codant l'hygromycine phosphotransférase ; promoteur AtBXLl : séquence du promoteur d'AtBXL1 ; F5H: ADNc de la F5H de peuplier en orientation sens ; TNos : terminateur
de la nopaline synthase ; BG : frontière gauche de l'ADNT ; BD : frontière droite de l'ADN-T.
Ces différentes construction sont transférées dans des bactéries de la souche C58pMP90 d'Agrobacterium tumefaciens (KONCZ et SCHELL, Mol Gen Genet 204 : 383-396, 1986) en vue de la transformation des plantes.
EXEMPLE 2 : OBTENTION DE PLANTES TRANSGENIQUES EXPRIMANT UN GENE HETEROLOGUE SOUS CONTROLE DU PROMOTEUR DU GENE ATBXL1.
La transformation des plants d'Arabidopsis thaliana est effectuée par trempage des bourgeons floraux dans la solution d'Agrobacterium tumefaciens, comme décrit par CLOUGH et BENT, (Plant J., 16,735-743, 1998).
Les transformants primaires sont sélectionnés sur milieu Arabidopsis (ESTELLE et SOMMERVILLE, Mol. Gen.
Genet. 206,200-206, 1987) contenant 50 mg/L d'hygromycine, et auto-pollinisés afin d'obtenir des individus homozygotes pour l'insertion. Les graines issues des autopollinisations sont récoltées après complet séchage des tiges. Seules les lignées ségrégeant 3:1 pour la résistance à l'hygromycine et possédant une seule insertion homozygote sont conservées pour l'analyse de l'expression du gène hétérologue par détection de son activité.
1) Expression du gène uidA L'activité (3-glucuronidase est recherchée par analyse histochimique sur des coupes de différents organes (racines, feuilles, fleurs et siliques) des plantes fraichement récoltées. La détection est effectuée comme décrit par JEFFERSON et al. (EMBO J. 6,3901-3907, 1987), en présence d'acide 5-bromo-4-chloro-3-indolyl p- D-glucuronique (XGluc, BIOSYNTH AG), dans du tampon phosphate de potassium 100mM, pH7, contenant 0,1% de Triton X100, ainsi que lOmM de K3Fe(CN)6 et lOmM de K4Fe(CN)6 pour éviter la diffusion des produits intermédiaires de la réaction.
On observe une expression spécifique de la ssglucuronidase au niveau des tissus vasculaires et des fibres de tous les organes testés, et notamment au niveau du xylème (protoxylème et métaxylème) et du cambium intrafasciculaire. Aucune expression n'est observée dans les autres tissus.
Cette répartition correspond à une expression spécifique des tissus dans lesquels s'effectue la formation de parois secondaires.
La réaction PCR s'achève par une étape d'extension en présence d'une polymérase à une température de 72 C pendant 10 minutes.
A l'issu de l'étape (a), on obtient des polynucléotides doubles brins recombinés qui comprennent à leurs extrémités 5' (brin codant) la fin de la séquence pro du facteur MF[alpha]1 de S.cerevisiae et à leurs extrémités 3' (brin codant) le début de la séquence du terminateur de transcription du gène PGK1.
3) Etape (b) du procédé.
Les polynucléotides doubles brins recombinés issus de l'étape (a) d'assemblage sont ensuite amplifiés en présence de 2 des amorces EM349 (SEQ ID NO : 98) et EM357 (SEQ ID NO : 97) (Figure 4). Ces deux amorces comprennent une séquence complémentaire respectivement de chacune des extrémités des polynucléotides doubles brins recombinés issus de l'étape (a) et une séquence de 30 nucléotides complémentaires des extrémités du vecteur d'expression de levure S. cerevisiae pEM105 linéarisé.
L'étape (b) du procédé de l'invention débute par la dénaturation à une température de 94 C pendant 3 minutes.
Les étapes suivantes sont répétées 25 fois : i) dénaturation à une température de 94 C pendant 45 secondes, ii) hybridation à une température de 60 C pendant 45 secondes, iii) extension en présence d'une polymérase à une température de 72 C pendant 45 secondes.
La réaction d'amplification s'achève par une étape d'extension en présence d'une polymérase à une température de 72 C pendant 10 minutes.
L'étape (b) du procédé conduit à la génération de polynucléotides doubles brins recombinés présentant des extensions capables de s'hybrider avec les extrémités du vecteur d'expression de levure S. cerevisiae pEM105 linéarisé.
4) Construction de la banque d'expression par cotransformation d'une souche de levure S. cerevisiae.
Le vecteur d'expression de levure S . cerevisiae pEM105 (Figure 5) porteur du promoteur constitutif fort TDH3 (glycéraldéhyde 3 phosphate déshydrogénase) fusionné aux séquences codant pour les signaux de sécrétion pré de BGL2 (Béta-1,3 glucanase) et pro du facteur MF[alpha]1 de S.cerevisiae et du terminateur de transcription du gène PGK1 (phosphoglycérate kinase) a été construit. Il porte également des séquences permettant sa réplication et sa sélection dans la levure (2 ori et URA3) et dans E.coli (ColEl ori et Ampr) ainsi que le gène KEX2 codant pour l'endoprotéase Yscf qui clive la pro séquence durant le processus de sécrétion (expression de KEX2 génomique insuffisante). Ce vecteur porte 2 sites de restriction uniques NheI et Sali permettant sa
linéarisation. Le site Nhel est localisé dans la séquence codant pour le pro de MF[alpha]1 (mutation silencieuse introduite au niveau de la séquence codant pour les résidus 51 à 52 du pro de MFal) et le site Sali est en amont du terminateur PGK1. Une souche de levure YEM1 (MATa, ura3-5, pral,prbl,prcl,cpsl) a été co-transformée par le plasmide pEM105 digéré par Sali et NheI et le pool de polynucléotides doubles brins recombinés présentant des extensions obtenus après l'étape (b) du procédé (1 g de pEM105 digéré par NheI et SalI + 115ng de fragment PCR par transformation) . La transformation a été réalisée par la méthode à l'acétate de lithium connue de l'homme du métier. Les transformants ont été sélectionnés sur milieu sélectif YNBG supplémenté de 0,5% de casamino acides. En vue de vérifier la qualité de la banque, 100 transformants ont été analysés pour la production de peptide après croissance en milieu sélectif Kapeli (14,2g KH2P04 SDS 2370017 ; 4g MgS04 SDS 460012 ; l,6mL H3P04 ; 1mL d'une solution d'oligoéléments : 16g MnS04, H20, 0,4g CuS04, 5H2O, 15g ZnS04,7H20, 2,8g CoCl2, 6H20, 2,48g Na2Mo04, 7,5g H3B03, 0,2g Acide citrique, 1g KCl, 2,5g NiS04, 6H20, 25g Trisidium citrate 2H20, qsp 200mL ; 400mL glucose à 500g/L ; 1mL FeCl3/CaCl2 ; 500mL de Casaaminoacids à 200g/L ; lOmL d'une solution de vitamines : 0,2g Thiamine HC1, 0,5g Pyridoxine HC1, 0,8g Acide nicotinique, 0,005g D-Biotine, 1g Ca-D-Pantothénate, 8g Méso Inositol, qsp 200mL; qsp 5L) . Les surnageants de culture récoltés après 48 heures de croissance ont été analysés par électrophorèse sur gel d'acrylamide (gel Tris-tricine) et coloration des protéines au nitrate d'argent. Une production de peptides a été détectée dans 65% de ces clones. 45 clones produisant des défensines d'insectes hybrides ont été analysés par séquençage nucléotidique. 45 défensines d'insectes hybrides différentes ont pu être caractérisées : 22 séquences différentes parmi les 32
possibilités ont été identifiées pour la région variable n 1, 24 séquences différentes parmi les 28 possibilités ont été identifiées pour la région variable n 2 et 20 séquences différentes parmi les 33 possibilités ont été identifiées pour la région variable n 3.
B) Criblage et sélection des défensines d'insectes hybrides présentant une activité contre les bactéries à Gram positif Staphylococcus aureus.
1) Culture et isolement.
La banque de défensines d'insectes hybrides obtenue selon le protocole précédemment décrit dans la partie A, est étalée sur des boîtes de Pétri (YNBG casamino acides agar). Le nombre de clones par boîte est choisi de manière à former des colonies isolées. Ces colonies sont piquées et mises en culture automatiquement en microplaques 384 puits, dans 60 l de milieu (YNBG, casamino acides, 13% glycérol). Les plaques sont incubées à 30 C durant 72h, puis deux copies sont stockées à -80 C, et une autre copie est conservée à 4 C avant de servir à la suite du processus.
2) Culture et production.
glycéryle, stéarate de glycéryle tel que le produit vendu sous la dénomination TEGIN M par la société GOLDSCHMIDT, laurate de glycéryle tel que le produit vendu sous la dénomination IMWITOR 312 par la société HULS,stéarate de polyglycéryl-2, tristéarate de sorbitan, ricinoléate de glycéryle ; - le mélange de cyclométhicone/diméthicone copolyol vendu sous la dénomination "Q2-3225C" par la société DOW CORNING.
La quantité en tensioactif non ionique est généralement ajustée de manière à obtenir une composition telle que définie précédemment. La détermination de cette quantité relève des compétences de l'homme de l'art.
A titre illustratif et non limitatif au domaine de l'invention, cette quantité de tensioactif non ionique de HLB supérieur ou égal à 8 peut aller de 0,01 à 40 % en poids, en particulier de 0,1 à 25 % en poids voire de 0,5 à 15 %, mieux de 0,5 à 10 % en poids par rapport au poids total de la composition.
TENSIOACTIF IONIQUE D'une manière générale, la composition revendiquée peut contenir en outre au moins un tensioactif ionique en association avec au moins un tensioactif non ionique de HLB supérieur ou égal à 8 et/ou au moins un polymère gélifiant.
A titre représentatif des tensioactifs anioniques convenant à l'invention, on peut plus particulièrement citer : - les sels d'acides gras en C16-C3o notamment ceux dérivant des amines, comme le stéarate de triéthanolamine ; - les sels d'acides gras polyoxyéthylénés notamment ceux dérivant des amines ou les sels alcalins, et leurs mélanges ; - les esters phosphoriques et leurs sels tels que le "DEA oleth-10 phosphate" (Crodafos N ION de la société CRODA) ;
les sulfosuccinates tels que le "Disodium PEG-5 citrate lauryl sulfosuccinate" et le "Disodium ricinoleamido MEA sulfosuccinate" ; - les alkyléthersulfates tels que le lauryl éther sulfate de sodium ; - les iséthionates ; - les acylglutamates tels que le "Disodium hydrogenated tallow glutamate" (AMISOFT HS-21 R commercialisé par la société AJINOMOTO) ; - et leurs mélanges.
D'une manière générale, les compositions selon l'invention peuvent contenir de 0,01 à 30 % en poids, en particulier de 0,1 à 15 % en poids voire de 0,5 à 10 % en poids de tensioactif ionique par rapport au poids total de la composition.
POLYMÈRE GÉLIFIANT Selon la présente invention, on entend par "polymère gélifiant", un polymère
apte à gélifier la phase continue, généralement aqueuse, des compositions selon l' invention.
Le polymère gélifiant utilisable selon l'invention, peut notamment être caractérisé par sa capacité à former dans l'eau, au-delà d'une certaine concentration C*, un gel caractérisé par rhéologie oscillatoire (u = 1 Hz) par un seuil d'écoulement #c au moins égal à 10 Pa. Cette concentration peut varier largement selon la nature de l'agent gélifiant considéré.
A titre illustratif cette concentration est comprise entre 1 et 2 % en poids pour un copolymère acrylamide/acrylamido-2-méthyl propane sulfonate de sodium en émulsion inverse à 40 % dans polysorbate 80/I-C16 comme celui commercialisé sous la dénomination Simulgel 600 par la société SEPPIC, et est d'environ 0,5 % en poids pour un copolymère AMPS/methacrylate de cétéaryle éthoxylé (250E) réticulé par le triméthylolpropane triacrylate (TMPA) de type ARISTOFLEX HMS.
Le polymère gélifiant peut être un polymère hydrosoluble et est donc présent dans la phase aqueuse de la composition sous forme solubilisée.
Postage vers le serveur de gestion de comptes L'interface 17 définit un certain nombre d'en-têtes HTTP et de paramètres nécessaires dans l'attenle d'une réponse du serveur 22 de gestion de comptes. L' en-tête de type de contenu est nécessaire pour toutes les requêtes de postage POST transmises au serveur. Dans un mode de réalisation, l'en-tête a la valeur suivante "application/x-www-form-urlencoded". En outre, l'en-tête de longueur de contenu doit être spécifiée et indique le nombre d'octets transmis au serveur. D'autres informations sont disponibles dans la spécification HTTP1.1 au site ftp://ftp.isi.edu/in-notes/rfc2616.txt. On indique dans la suite une liste d'autres paramètres utilisés pour le postage au serveur 22 avec une brève description. xml Nécessaire. Ce paramètre contient le document XML à transmettre au serveur de gestion de comptes. Si l'en-tête de type de contenu est "application/x-www-form-urlencoded", la valeur du paramètre doit être codée sous forme d'adresse URL.
/go//xml/XMLrequestHandler-submit ~D:/go//xml/XMLrequestHandler.submit
Nécessaires. Dans ce mode de réalisation, le serveur d'application utilise intérieurement ces paramètres. Les valeurs spécifiées pour chacun sont "blanc" (espace). contentType Eventuel. La valeur de ce paramètre peut être "text/plan" ou "text/xml" (valeur par défaut).
Exemple POST POST Isldtclxmllindex jhtml?DARGS= %2Ps%2Fdtc%Zxml%z'in.dex jhtml HTTP/1.0 Content-Length: 404 Content-Type: applicatio'n/x-www-form-urlencoded Xml=%3o%3fxm1--version J 3d%221.0%2z+ettcoding lo3d%22U1'F- 8%22%3f%3e%3cD'TCRequest-±r-xmlns /3axsi%3d%221xttp%3a%2lo2www.w3.or g%2fZ001 '/o2fXMLSchemainstarce%22±versiont%3d%221.0%22++uscmame%3d%22gototest%22±password %3d%22qblahblaht l 22"/oe±%3cActions%3e++++ / 3cGetAccountIds%2f%3t-f- %3c%zfAations%3e%3c%2fDTCRequest%3e&~nJgo2lxm1I3MLRequestlandler.s wbmit= &/go2/xFnl/XMLRequestHan,dIer.SLibmit=&contentType=textô/û2iplain ORDRE DES OPERATIONS En général, il n'existe pas d'ordre spécifique pour soumettre les commandes au serveur XML. Le serveur traite les requêtes dans l'ordre de leur réception. Cependant, il existe un ordre logique que les clients du serveur XML peuvent vouloir suivre.
Avant que des listages puissent être récupérés ou que des enchères soient ajustées, l'ordinateur client récupère l'ensemble des identificateurs de compte avec lesquels il doit travailler. Dans un mode de réalisation, le serveur donne l'identificateur de compte et le marché pour lequel le compte est valable.
Lorsque l'ordinateur client peut travailler sur la liste des identificateurs de compte dont il dispose, il peut récupérer l'ensemble des listages de ce compte. Il donne alors l'attribut important d'identification de listages
listingld qui est nécessaire pour les transactions d'établissement de listages SetListing. L'attribut listingld est statique (c'est-à-dire qu'il ne change pas) si bien que la même identité peut être utilisée indéfiniment pour se référer à un listage spécifique. Si le listage est supprimé et que son identité est utilisée, une erreur est renvoyée.
Cette fonction donne aussi l'attribut de terme de recherche searchTerm qui est nécessaire pour utiliser la fonctionnalité d'état du marché.
Lorsque l'ordinateur client dispose de l'ensemble des listages et des termes de recherche, il peut déterminer l'état actuel du marché pour les listages intéressants.
Cette fonction donne l'ensemble des listages de recherche dans l'ordre d'apparition pour une personne qui reçoit les résultats de recherche à la suite d'une requête transmise au serveur 24 de toile à moteur de recherche (figure 1).
L'ensemble des listages de recherche comprend les listages qui n'appartiennent pas à l'annonceur en cours. Le serveur désigne les listages que possède l'annonceur en cours par transmission de l'identité de listages.
D'après l'état de marché, l'ordinateur client peut établir une enchère pour chaque listage. Un mode de réalisation ne permet que des requêtes de changement de prix fixe d'enchères en une seule fois pour un listage. D'autres modes de réalisation permettent le changement de l'attribut ou du paramètre d'un listage de recherche.
AUTHENTIFICATION Dans le mode de réalisation représenté, le premier bit d'information qui doit être donné pour chaque requête est une chaîne de version, un nom d'utilisateur enregistré et un mot de passe. Ces informations doivent être données dans la balise XML au niveau de la racine DTCRequest transmise au client. Toutes les commandes transmises au serveur doivent être contenues dans cette balise au niveau de la racine. Si l'une quelconque des informations de la balise de la racine manque ou est incorrecte, la requête est rejetée et toutes les commandes contenues sont ignorées. Par exemple
La version est une chaîne qui décrit la version de l'interface XML 17. Si elle ne correspond pas à la version qu'utilise le serveur 22, une erreur est transmise et toutes les commandes contenues dans la requête DTCrequest sont ignorées.
Le nom d'utilisateur correspond à un nom d'utilisateur préexistant. Le mot de passe doit être celui que l'utilisateur utilise pour s'enregistrer sur le serveur de gestion de comptes. Si le nom d'utilisateur ou le mot de passe n'est pas transmis ou est incorrect, une réponse est immédiatement transmise et toutes les commandes contenues dans la requête DTCRequest sont ignorées. La réponse peut avoir la forme Dans des modes de réalisation qui donnent accès aux administrateurs, lorsque le nom d'utilisateur et le mot de passe donné appartiennent à un administrateur, celui-ci peut exécuter n'importe laquelle des actions indiquées dans la suite pour n'importe quel compte d'utilisateur.
Lorsque les phases d'enregistrement et de vérification de version sont satisfaisantes, une réponse satisfaisante est transmise et toutes les commandes contenues sont traitées.
5) les récepteurs membranaires couplés aux protéines tyrosine kinases (STATs, TYK2, Jak) structurellement reliés au récepteur de l'interféron y (Brisco et al., 1996 ; Ihle, 1995).
Dans le cas où la fusion est effectuée entre la EGFP et un récepteur couplé aux protéines G (groupe 1), la fusion peut être notamment effectuée : 1) du coté N-terminal du récepteur, et donc du côté C-terminal de la EGFP, 2) du coté C-terminal du récepteur et donc du côté N-terminal de la EGFP,
3) dans la séquence du récepteur, en particulier dans la première ou la troisième boucle intracellulaire, éventuellement en introduisant une ou plusieurs copies d'une séquence espaceur, notamment-GGGGS-.
Dans le cas où la fusion est effectuée entre la EGFP et un récepteur-canal (groupe 2), la fusion peut être notamment effectuée : 1) dans la région homologue à la "région immunogénique majeure" de la sousunité a du récepteur nicotinique de Torpille (résidus 67-76), éventuellement en introduisant une ou plusieurs copies d'une séquence espaceur, notamment-GGGGS-.
Dans le cas ou la fusion est effectuée entre la EGFP et un récepteur nucléaire (groupe 3), la fusion peut être notamment effectuée : 1) du coté N-terminal du récepteur, et donc du côté C-terminal de la EGFP, 2) du coté N-terminal du récepteur, tronqué dans sa partie N-terminale en amont du domaine de liaison à l'ADN, et donc du côté C-terminal de la EGFP.