INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les dérivés d'azetidine sont synthétisés selon les méthodes générales suivantes : Les composés de formule (1) pour lesquels R représente un radical CR) R2 dans lequel RI représente un atome d'hydrogène et R2 représente un radical C (R8) (R11)(R12) dans lequel Rs représente un atome d'hydrogène, RI représente un radical-SOz-Ar ;, - S02-Hetl ou-S02alk et Rl2 représente un atome d'hydrogène ou un radical Ar, ou Het et les composés de formule (1) pour lesquels R représente un radical C=C (Rs) S02R6 ou C=C (R7) S02alk peuvent être préparés selon le schéma réactionnel suivant :
dans ces formules, soit Ra représente un radical alkyle, Het) ou Ar, et Rb représente un atome d'hydrogène ou un radical Ar, ou Hetl, soit Ra représente un radical Ar] ou Het) et Rb représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, soit Ra représente un radical alkyle et Rb représente un radical cycloalkyle, hétérocycloalkyle ou hétérocyclényle éventuellement substitué par un radical-CSO-phényle, Rc représente un atome d'hydrogène ou un radical acétyle, R3, R4, Ar) et Het, ont les mêmes significations que dans la formule (1).
La réaction de déshydratation b s'effectue généralement par toute méthode de déshydratation connue de l'homme de l'art permettant de déshydrater un alcool pour obtenir l'alcène correspondant. De préférence, on prépare le dérivé acétyloxy par action de chlorure d'acétyle, au sein d'un solvant inerte tel que la pyridine, le tétrahydrofuranne, le dioxanne, un solvant chloré (dichlorométhane, chloroforme par exemple), à une température comprise entre 5 C et 20 C puis on traite avec une base telle qu'un hydroxyde de métal alcalin (soude par exemple), un carbonate de métal alcalin (carbonate de sodium ou de potassium par exemple), une amine telle qu'une trialkylamine (triéthylamine par exemple), la 4-diméthylaminopyridine, le diaza- 1, 8-bicyclo [5. 4. 0] undécène-7, à une température comprise entre 0 C et la température d'ébullition du milieu réactionnel. L'acétyloxy intermédiaire peut être isolé ou non. L'acétyloxy peut aussi être préparé directement dans le milieu réactionnel de la réaction a.
La réduction c s'effectue généralement au sein d'un solvant inerte tel qu'un alccol aliphatique (1-4C) (méthanol par exemple), un solvant chloré (chloroforme, dichlorométhane par exemple) ou un mélange de ces solvants, en présence de
NaBH4, à une température comprise entre 0 C et la température d'ébullition du milieu réactionnel La réaction d s'effectue par action de chlorure de triméthylsilyle, au sein d'un solvant inerte tel qu'un éther (tétrahydrofuranne par exemple), en présence de n-butyllithium, à une température de-70 C.
La réaction e s'effectue généralement au sein d'un solvant inerte tel qu'un éther (tétrahydrofuranne par exemple), en présence d'une base forte telle que le tertbutyllithium, le n-butyllithium, le diisopropylamidure de lithium, le ter-butylat de potassium, à une température comprise entre-70 C et-15 C.
La réaction f s'effectue généralement au sein d'un solvant chloré (dichlorométhane, chloroforme par exemple), à une température de 0 C à la température d'ébullition du milieu réactionnel.
Concentrations en drogues Moyenne Susceptibilité Inhibiteurs utilisées Déviation géométrique détectable de RT standard IC50 maximumb Gamms / Etapes de dilution AZT 50 uM-5 nM 10 x 0, 018 uM 2,7 2700 3TC 200-0, 02 uM 10 x 1, 512 uM 2,2 130 D4T 100-0, 01 uM 10 x 0, 444 M 2,7 220 DDI 100 - 0,01 M 10 x 1, 613 uM 2,5 60 Abacavir 200-0, 8 uM 4 x 2, 229 uM 1,8 90 Effavirenz 100-0, 16 nM 5 x 0,716 nM 2,2 140 Nevirapine 50 M - 5 nM 10 x 0, 037 uM2, 01300 a-moyenne géométrique et déviation standard de 20 tests répétés pour les inhibiteurs de transcriptase inverse. b-différence maximale approximative pour les indices ICgo et IC90 entre NL43 et le virus testé qui peut être mesurée en utilisant la gamme de concentrations en drogues donnée
Pour déterminer si NL43 est un virus de référence convenable pour la comparaison avec les isolats cliniques, un panel d'échantillons pris de patients avec un traitement banal a été essayé sur 3 réplicats RVA pour leur susceptibilité aux inhibiteurs de transcriptase inverse. l'ICgo médian trouvé pour 22 virus testés tend à être légèrement supérieur à celui trouvé pour le virus NL43 avec un IR médian aux alentours de 0,92 (pour stavudine) et de 1,22 (lamivudine). Bien que l'IR soit inférieur à la limite définie de 5 sur le total d'inhibiteurs pour la plupart d'échantillons testés, la gamme d'IR semble large, en particulier pour les inhibiteurs non-nucléosides. En particulier, un indice de résistance de 11,0 pour la nevirapine a été obtenu pour un virus or, ce virus portait une mutation sur le codon 98 (A pour S) de la transcriptase inverse, qui avait été précédemment impliqué dans la résistance aux NNRTIs.
Echantillon Index de Résistance (Nombre de Génotype AZT 3TC D4T DDI Abacavir Efavirenz Nevirapine tests) MGc 1,5 1,3 1,4 1,4 1,1 1,0 2,2 R1 69N/T, 70R SDd 1,5 1,5 1,4 1,6 1,2 1,1 1,8 max/mine 2,9 2,8 2,2 2,8 1,6 1,2 3,8 n > 4/Nf 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 41L, 62V, 67N, 69N, MGc 1232, 6 > f 43, 5 26, 9 > 74, 9 > R2 75I, 77L SDd 1,6 na 2,1 1,7 na 1,7 na 115F, 116Y, 151M, 181C, (6) 184V, 190A max/mine 3,8 na 8,1 4,1 na 3,9 na n > 4/Nf 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 208Y, 215F, 219Q MGc 13,2 > 3,2 3,1 4,3 1,0 1,2 R3 184V, 215F SDd 2, 7 na 1,8 1,6 1,4 1,0 1,3 (6) max/mine 8, 9 na 5,7 3,3 2,4 1,0 1,6 n > 4/Nf 5/6 1/6 1/6 1/6 4/6 0/6 0/6 MGc 137,5 > 3,6 3,0 6,1 149,8 > 41L, 67N, 69D, 184V, R4 SDd 1,8 na 2,0 1,3 1,6 1,6 na 190A, (5) H208Y, 210W, 215Y max/mine 4,5 na 4,1 1,7 3,3 3,9 na H208Y, 210W, 215Y n > 4/Nf 5/5 5/5 3/5 5/5 3/5 5/5 5/5 MGc 3, 3 1, 8 1, 7 2, 6 1, 7 > 580,5 R5 215Y, 41L, 74V, 100I, SDd 1, 6 1,7 1,8 1,6 1,6 na 1,8 (5) 103N max/mine 3, 0 3,7 3,7 2,5 2,9 na 2,2 n > 4/Nf 1/5 0/5 0/5 0/5 0/5 5/5 5/5
4-Hydroxy-8-méthoxy-6-propényl-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 18q En remplaçant dans l'exemple 14, l'acide 4-méthoxybenzène boronique par le méthyléthylène catécholborane on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 70%. IH-RMN (200 MHz, CDCIs) : ô 9,45 (large s, 1H, OH), 7,79 (m, IH arom. ), 7,12 (m, 1H arom. ), 6,96 (m, IH arom. ), 6,45-6, 36 (m, 2H vinyliques), 4,05 (s, 3H, OCH3), 4,03 (s, 3H, OCH3), 1, 94-1,91 (d, 3H, CH3).
8-Méthoxy-5-phényl-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 18t Au départ de la 8-méthoxy-5-bromo-quinoléine-2-carboxylate de benzyle 5c et en remplaçant dans l'exemple 14, l'acide 4-méthoxybenzène boronique par l'acide benzène boronique, on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 59%.'H- RMN (300 MHz, CDCIs) : 8 8, 38 (d, 1H, Y= 9Hz, 1H arom. ), 8,19 (d, 1H, J= 9Hz, 1H arom. ), 7,56-7, 44 (m, 6H arom. ), 7,16 (d, IH, J = 8Hz, IH arom. ), 4.14 (s, 3H, OCH3), 4,07 (s, 3H, OCH3).
8-Méthoxy-4-phényl-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 9b Au départ de la 4-chloro-8-méthoxy-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 8a et en remplaçant dans l'exemple 14, l'acide 4-méthoxybenzène boronique par l'acide benzène boronique, on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 55%.'H- RMN (300 MHz, CDCIs) : 8 8,19 (m, IH arom. ), 7,55-7, 52 (m, 7H arom. ), 7,11 (m, 1H arom. ), 4,13 (s, 3H, OCH3), 4,07 (s, 3H, OCH3).
8-Méthoxy-4- (4-chlorophényl)-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 9c Au départ de la 4-chloro-8-méthoxy-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 8a et en remplaçant dans l'exemple 15, l'acide 4-méthoxybenzène boronique par l'acide 4chlorobenzène boronique, on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 87%.
'H-RMN (200 MHz, CDCIs) : 8 8,16 (s, IH arom. ), 7,56-7, 48 (m, 7H arom. ), 7,11 (m, 1H arom. ), 4,13 (s, 3H, OCH3), 4,07 (s, 3H, OCH3).
EXEMPLE 15 4-Hydroxy-8-méthoxy-6-phényléthynyl-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 20a Dissoudre 300mg (0, 96mmole) de 4-hydroxy-6-bromo-8-méthoxy-quinoléine-2carboxylate de méthyle 2k dans 8ml d'acétonitrile dégazé. Ajouter 33mg d'iodure de cuivre (0, 17mmole), 19mg de chlorure de palladium (II) (0, 107mmole, 0, 1 léq), 65mg (0,247mmole, 0,25mmole) de triphénylphosphine, 352j. ! 1 de
phénylacétylène (9,6mmoles, 10éq) et 1,84ml de triéthylamine. Chauffer 16 heures à 50 C, évaporer à sec et chromatographier éluant : CH2Cl2/AcOEt : 9/1 pour obtenir le composé titre. Rdt : 68%.'H-RMN (200 MHz, CDC) : 8 9,42 (large s, 1H, OH), 8,11 (s, IH arom. ), 7,56 (m, 2H arom. ), 7,39-7, 37 (m, 3H arom. ), 7,20 (s, IH arom. ), 6,98 (s, IH arom. ), 4,08 (s, 3H, OCH3), 4,05 (s, 3H, OCH3).
8-Benzyloxy-4-phényléthynyl-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 12a En remplaçant dans l'exemple 15, la 4-hydroxy-6-bromo-8-méthoxy-quinoléine- 2-carboxylate de méthyle 2k par le 8-benzyloxy-4-oxytriméthylsulfonylquinoléine-2-carboxylate de méthyle 11 on obtient le produit titre. Rdt : 52%. IH- RMN (200 MHz, Cd13) : 8 8,40 (s, 1H arom), 7,98 (d, IH, J= 9Hz, IH arom. ), 7,70-7, 58 (m, 5H arom. ), 7,46-7, 36 (m, 6H arom. ), 7,16 (d, IH, J = 8Hz, IH arom. ), 5,47 (s, 2H, OCH2), 4,08 (s, 3H, OCH3).
8-Benzyloxy-4- (3-tert-butoxycarbonylaminoprop-1-ynyl)-quinoléine-2- carboxylate de méthyle 12b En remplaçant dans l'exemple 15, la 4-hydroxy-6-bromo-8-méthoxy-quinoléine- 2-carboxylate de méthyle 2k par le 8-benzyloxy-4-oxytriméthylsulfonylquinoléine-2-carboxylate de méthyle 11 et en remplaçant le phénylacétylène par la N-Boc propargylamine on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 34%. 'H-RMN (200 MHz, CDC) : 8 8, 28 (m, IH arom.), 7, 85 (d, IH, J = 8Hz, 1H arom. ), 7,82-7, 34 (m, 6H arom. ), 7,13 (d, IH, J = 8Hz, IH arom. ), 5,45 (s, 2H, OCH2), 4,90 (large s, 1H, NH), 4,31 (d, 2H, J = 6Hz, CH2), 4,05 (s, 3H, OCH3), 1, 49 (s, 9H, (CH3) 3).
8-Benzyloxy-4- (3-benzyloxyprop-1-ynyl)-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 12c En remplaçant dans l'exemple 15, le 4-hydroxy-6-bromo-8-méthoxy-quinoléine- 2-carboxylate de méthyle 2k par le 8-benzyloxy-4-oxytriméthylsulfonyl-
quinoléine-2-carboxylate de méthyle 11 et en remplaçant le phénylacétylène par l'alcool propargylique O-benzylé on obtient de la même façon le produit titre.
Rdt : 68%.'H-RMN (300 MHz, CDCIs) : 8 8,32 (s, IH arom. ), 7,86 (d, IH, J = 8Hz, 1H arom. ), 7,54-7, 34 (m, 11H arom. ), 7,14 (d, IH, J = 8Hz, IH arom. ), 5,45 (s, 2H, OCH2), 4,76 (s, 2H, OCH2), 4,57 (s, 2H, OCH2), 4,06 (s, 3H, OCH3).
4-Hydroxy-8-méthoxy-6- (hept-l-ynyl)-quinoléine-2-carboxylate de méthyle 20b En remplaçant dans l'exemple 15, le phénylacétylène par le 1-heptyne on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 47%. IH-RMN (200 MHz, CDClg) : 89, 38 (large s, 1H, OH), 7,96 (m, IH arom. ), 7,07 (m, IH arom. ), 6,96 (m, IH arom. ), 4,05 (s, 3H, OCH3), 4,03 (s, 3H, OCH3), 2,42 (t, 2H, CH2), 1, 56 (m, 2H, CH2), 1, 42 (m, 4H, 2xCH2), 0, 94 (t, 3H, CH3).
8-Benzyloxy-6- (3-tert-butoxycarbonylamino-prop-1-ynyl)-4-hydroxy- quinoléine-2-carboxylate de méthyle 20c En remplaçant dans l'exemple 15, la 4-hydroxy-6-bromo-8-méthoxy-quinoléine- 2-carboxylate de méthyle 2k par le 4-hydroxy-6-bromo-8-benzyloxy-quinoléine- 2-carboxylate de méthyle 21 et en remplaçant le phénylacétylène par la N-Boc propargylamine on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 70%. IH-RMN (300 MHz, CDC13) : S 9,42 (large s, IH, OH), 7,99 (m, IH arom. ), 7,45 (m, 5H arom. ), 7,16 (m, IH arom. ), 6,96 (m, IH arom. ), 5,27 (s, 2H, OCH2), 4,18-4, 15 (s, 2H, CH2), 4,02 (s, 3H, OCH3), 1, 45 (s, 9H, (CH3) 3).
8-Benzyloxy-6- (3-benzyloxy-prop-l-ynyl)-4-hydroxy-quinoléine-2- carboxylate de méthyle 20d En remplaçant dans l'exemple 15, la 4-hydroxy-6-bromo-8-méthoxy-quinoléine- 2-carboxylate de méthyle 2k par le 4-hydroxy-6-bromo-8-benzyloxy-quinoléine- 2-carboxylate de méthyle 21 et en remplaçant le phénylacétylène par l'alcool propargylique O-benzylé on obtient de la même façon le produit titre. Rdt : 73%.
IH-RMN (300 MHz, CDCIs) : 89, 41 (large s, IH, OH), 8,04 (m, IH arom. ), 7,45- 7,38 (m, 10H arom. ), 7,19 (m, IH arom. ), 6,96 (m, IH arom. ), 5,27 (s, 2H, OCH2), 4,69 (s, 2H, OCH2), 4,42 (s, 2H, OCH2), 4,03 (s, 3H, OCH3).
L'héparine joue un rôle biologique important, notamment dans l'hémostase, et est très largement utilisée en thérapeutique, en particulier en tant qu'agent anticoagulant et antithrombotique.
Actuellement, la majeure partie de l'héparine utilisée est isolée à partir de la muqueuse intestinale du porc, d'où elle est extraite par protéolyse, suivie de purification sur résine échangeuse d'anions (pour revue sur les différents procédés de préparation de l'héparine, cf. DUCLOS, L'Héparine : fabrication, structure, propriétés, analyse ; Ed. Masson, Paris, 1984).
A l'hétérogénéité inhérente à l'héparine, s'ajoute la diversité des lots d'animaux à partir desquels elle est obtenue. Il en résulte une variabilité très importante, se traduisant notamment au niveau de l'activité biologique. En outre, il est difficile de disposer de manière régulière d'un approvisionnement suffisant en matière première.
La présente invention propose de pallier ces inconvénients et de s'affranchir des problèmes d'approvisionnement en termes de quantité et de qualité, en utilisant une source commodément disponible de matière
première homogène, et aux caractéristiques stables, facilitant l'obtention de préparations d'héparine de qualité constante.
Les Inventeurs ont constaté qu'il était possible de produire en quantité importante à partir de cultures de mastocytes, de l'héparine possédant des propriétés comparables à celles de l'héparine extraite du mucus intestinal porcin. L'utilisation de cultures cellulaires comme matière première permet en outre de contrôler les conditions de synthèse de l'héparine, et d'obtenir ainsi un produit possédant des caractéristiques reproductibles.
La présente invention a pour objet un procédé de production d'héparine, caractérisé en ce qu'il comprend la culture de mastocytes séreux et la récupération de l'héparine à partir des cultures obtenues.
De manière préférée, lesdits mastocytes sont des mastocytes de porc.
Avantageusement, lesdits mastocytes sont issus de l'une des lignées de mastocytes porcins décrites dans la Demande française intitulée Cultures de mastocytes de porc et leurs utilisations déposée au nom de l'INRA, et de l'ENVA. Parmi celles-ci, des lignées préférées pour la mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention sont : - la lignée de mastocytes issus de foie foetal de porc déposée par l'INRA (147 rue de l'Université, 75007 Paris, France) auprès de la CNCM le 17 octobre 2001, sous le numéro 1-2735 ; - la lignée de mastocytes issus de foie foetal de porc, et transfectés par l'antigène T du virus SV40 déposée par l'INRA auprès de la CNCM le 17 octobre 2001, sous le numéro 1-2736 ; - la lignée de mastocytes issus de moelle osseuse de foetus de porc et transfectés par l'antigène T du virus SV40, déposée par l'INRA auprès de la CNCM le 17 octobre 2001, sous le numéro 1-2734.
Ces mastocytes seront de préférence cultivés dans un milieu de culture défini (MEMa/DMEM, RPMI, IMDM,...) supplémenté en facteurs de croissance, utilisés en
combinaison ou de façon individuelle, tels que le SCF (Stem Cell Factor) à une concentration comprise entre 1 ng/ml et 1 ug/ml, et éventuellement l'IL3 (Interleukine 3) à une concentration comprise entre 0, 1 ng/ml et 100 ng/ml, ou la PGE2 (prostaglandine E2), à une concentration comprise entre 1 nM et 1 nM.
Les milieux peuvent également être supplémentés avec du sérum bovin, à une concentration comprise entre 0,5% et 20% (v/v).
L'addition de sérum bovin dans les milieux de culture peut être remplacée par l'utilisation d'un milieu de culture sans sérum tel que AIMV (INVITROGEN) de façon à réduire la concentration protéique du milieu et les risques associés à l'utilisation de composés d'origine animale (KAMBE et al., J. Immunol. Methods, 240,101-10, 200).
L'indépendance des cellules vis-à-vis de l'ajout de sérum et/ou de l'utilisation de facteurs de croissance, peut être obtenue par mutation du phénotype cellulaire par l'action d'agents transformants et/ou immortalisants (TSUJIMURA, Pathology International, 46,933-8, 1996 ; PIAO et BERNSTEIN, Blood, 87 (8), 3117-23,1996).
Les mastocytes peuvent être cultivés en utilisant les techniques développées pour la culture en masse de cellules eucaryotes, comme décrit par exemple par GRIFFITHS et al. (Animal Cell Biology, , Eds. Spier et Griffiths, Academic Press, Londres, vol. 3,179-220, 1986). On peut utiliser des bioréacteurs de capacité supérieure à plusieurs m3 comme décrit par PHILIPS et al. (Large Scale Mammalian Cell Culture, Eds. Feder et Tolbert, Academic Press, Orlando, U. S. A., 1985), ou par MIZRAHI (Process Biochem, Août, 9-12, 1983).
La culture peut également être réalisée en suspension ou sur micro-support selon la technique décrite par VAN MEZEL (Nature, 216,64-65, 1967).
Le dispositif de commutation 90 comprend : un micro-contrôleur 93, qui est par exemple du type MPC860, de Motorola (marque déposée). Un tel type de micro-contrôleur présente des interfaces d'entrée/sortie permettant par exemple de connecter un émetteur/récepteur infrarouge ; un moyen de stockage permanent 94 de type ROM ; un moyen de stockage temporaire 95 de type RAM, associé au microcontrôleur 93, et dans lequel est chargée une architecture logicielle à
l'initialisation ; et un moyen de stockage permanent 86 de type mémoire flash (en anglais "flash memory"), utilisée pour stocker de manière permanente certaines données (par exemple les données résultant de l'identification de manière unique d'un ncnd au sein du réseau audiovisuel domestique de l'invention).
Le moyen de stockage 95 est apte àstocker des paquets de données de différents types, notamment : des paquets asynchrones du type conforme à la nonne IEEE 1394 ; des paquets constituant des messages en mode non connecté (asynchrones), du type conforme à la norme IEEE 1355 ; des paquets de contrôle du type conforme à la norme IEEE 1355 ; des paquets stream (isochrones) du type conforme à la nonne IEEE 1355.
Les paquets de type conforme à la norme IEEE 1355 ont réellement une existence au niveau du composant 104 mais ils ne sont pas stockés sous cette forme dans le moyen de stockage RAM 95. On notera que le moyen de stockage 95 contient les informations nécessaires pour générer les paquets IEEE 1355.
Le micro-contrôleur 93 est en outre relié à un module infrarouge 80, qui comprend des moyens de réception 81 et des moyens d'émission 82 de signaux infrarouges. Un tel module 80 peut en outre réaliser une conversion analogique/numérique et une conversion numérique/analogique des signaux.
Ces quatre éléments 86, 93, 94 et 95 communiquent au moyen de bus d'adresses et de données respectifs notés 87, 96, 97 et 98.
Ils peuvent notamment échanger des données au moyen d'un bus principal 100 avec au moins un composant d'interface de bus 101. Dans le cas où le bus 100 est un bus standard PCI (PCI signifiant en terminologie anglo-saxonne "Peripheral Component Interconnect"), le composant 101 peut être un composant dénommé AMCC 5933QC commercialisé par la société APPLIED MICRO CIRCUITS CORPORATION (Marque déposée).
Le bus 100 peut également connecter entre eux d'autres éléments, non
représentés sur la figure 2, eux-mêmes pourvus d'une interface de bus et pouvant mettre en ouvre, par exemple, des fonctions de traitement de données.
Comme représenté sur la figure 2, le nosd selon l'invention comporte également deux moyens d'interfaçage 103 et 104.
Le moyen 103 est destiné à assurer l'interface entre le nend 90 et le bus de communication série prévu pour fonctionner selon la nonne IEEE 1394 auquel est rattaché ledit noeud. Il est conforme au standard"IEEE Std 1394a-2000, Standard for a High Performance Serial Bus (Supplement)".
On rappelle que la norme IEEE 1394 est décrite dans les documents de référence suivants : IEEE Std 1394-1995, Standard for High Performance Serial Bus ; IEEE Std 1394a-2000, Standard for High Performance Serial Bus.
Un troisième document "IEEE P1394. 1 Draft 0. 17 Standard for High Performance Serial Bus Bridges"décrit comment interconnecter différents bus IEEE 1394.
Le moyen d'interfàçage 103 est un ensemble de composants PHY/LINK 1394 qui est par exemple constitué d'un composant PHY TSB21LV03A et d'un composant LINK TSB12LV01A commercialisés par la société TEXAS INSTRUMENT (Marque déposée) et de connecteurs 1394, par exemple commercialisés par la société MOLEX (Marque déposée), par exemple sous la référence 53462.
Le moyen d'interfàçage 103 comporte au moins un port externe destiné à être connecté à un terminal numérique qui est rattaché au bus de communication série 1394.
Le moyen d'interfàçage 104 mentionné ci-dessus est un composant d'interface IEEE 1355 qui comporte trois ports. Il comprend notamment un composant C113 commercialisé par la société 4LINKS (Marque déposée) ainsi que trois composants d'interface LUC1141MK commercialisés par la société LUCENT (Marque déposée), eux-mêmes sliés à des connecteurs IEEE 1355, par exemple commercialisés par la société HARTING (Marque déposée). Le
~~~~~~~~~~~~~~~~~ magnétique à 16 chiffres
Code d'installation (pour des f 0-5 chiffres (le nombre réel de rubriques de carte/émetteur chiffres est limité à la limite seulement) supérieure pour le format de
~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ carte spécifique)
Code c 1-16 chiffres (le nombre réel de chiffres est limité à la longueur maximale pour le ~~~ format de carte/émetteur
spécifique) Réponse p40eeec[c]tdhhmm ou
p40eeef[f] ic[c) tdhhmm ou p40 | ee | e | c [c] 1 1 1 YYYYMMDDhhmm ou p4 0 ee e f [ f ] c [ c ] t YYYYMMDDhh
mm Type de limite de durée t 0 = effective immédiatement 1 = effective à la première utilisation Jours d 0-9 Heures hh 00-23 Minutes mm 00-59 ~~~~~~~~~~~~ Année YYYY 2000-2099 Mois MM 01-12 Jour DD 01 - nombre de jours dans "mois"
Commentaire : Pour "effective immédiatement", l'heure de fin d'utilisation est retournée.
Pour "effective à la première utilisation", si la carte a été utilisée, l'heure de fin d'utilisation sera retournée. Si la carte n'a pas été utilisée, l'information "dhhmm" saisie sera retournée.
[niveau = observation~seulement] 3. 041 ETAPE DE PROGRAMME - FIXATION DU NOMBRE D'UTILISATIONS POUR L'OPTION DE CODE LIMITE
Nombre limite d'utilisations P41\elc[c] In[n] ou P411elTlf[fllc[clln[n]
Nombre d'arguments = 4 ou 5 Type de rubrique e 0 = code de carte 1 = code d'entrée Type de carte (pour des codes T 1 = format de carte Standard à de carte/émetteur seulement) 26 bits 2 = format de carte Sentex à 30
bits 3 = format d'émetteur Chamberlain à 34 bits 4 = format de carte à piste magnétique à 16 chiffres Code d'installation (pour des f 0-5 chiffres (le nombre réel de rubriques de carte/émetteur chiffres est limité à la limite seulement) supérieure pour le format de carte spécifique) Code c 1-16 chiffres (le nombre réel de chiffres est limité à la longueur maximale pour le format de carte/émetteur
~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ spécifique) ~~~~~~~~~~~~~~~
Nombre d'utilisations n 0-1000 Réponse p41 ee e c [c] n [n] ou
n'importe quelle espèce, animale ou végétale, et d'autre part, elle apporte une augmentation conséquente du nombre de marqueurs génétiques analysés pour un effort expérimental plus faible.
Il est possible grâce à la présente invention d'analyser plusieurs centaines de marqueurs polymorphes en une seule expérimentation. Il est intéressant de noter que le fait de pouvoir éviter les migrations sur gel et de. travailler par hybridation sur une puce permet une automatisation plus poussée du procédé, et de ce fait une industrialisation.
De plus, le fait d'utiliser une puce universelle réduit considérablement les coûts et les temps de développement. Cette approche universelle permet non seulement d'effectuer des empreintes génétiques, c'est- à-dire à réaliser des identifications individuelles, mais aussi à identifier l'espèce, la race et le sexe à partir d'une ou plusieurs empreintes de référence, et ce quel que soit l'organisme dont est issu l'ADN testé.
D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront encore à l'homme du métier à la lecture des exemples qui suivent illustrant l'invention, de manière non limitative, en référence aux figures annexées.
BREVE DESCRIPTION DE LA FIGURE - La figure 1 est une représentation schématique d'un mode de réalisation du procédé de la présente invention.
EXEMPLES Exemple 1 : Extraction de l'ADN qénomique d'un individu Plusieurs échantillons sont prélevés sur différents organismes.