INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
3) Le 6, 6-diphényl-6, 7-dihydro-1 H-indole-3-carboxylate d'éthyle est préparé de la manière suivante : 0,27 g de chlorhydrate de 2-oxo-5, 5-diphényl-cyclohex-3-ènyl-amine sont dissous dans 3 cm3 de méthanol et la solution est refroidie à une température voisine de 0OC. 0,14 cm3 de 3-diméthylamino-acrylate d'éthyle sont ajoutés à la solution précédente et le mélange est agité pendant environ 60 heures, à une température voisine de 20 C. Le mélange réactionnel est alors concentré
à sec sous pression réduite (13 kPa) et le résidu est repris par 12 cm3 de tétrahydrofurane. On obtient 0,3 g de 3- (2-oxo-5, 5-diphényl-cyclohex-3- ènylamino)-acrylate d'éthyle sous forme d'une huile orange utilisée telle quelle dans les synthèses ultérieures et dont les caractéristiques sont les suivantes : - LCMS (colonne Thermo Hypersil 4, 6*50 mm ; 5 um C18 ; débit : 1 cm3/mn ; solvant : A=eau, 0, 05 % d'acide trifluoroacétique ; B=acétonitrile, 0,05 % d'acide trifluoroacétique ; gradient : 95 % à 10 % de A en 4 mn et retour aux conditions initiales en 2,5 mn ; quantité injectée 10 l d'une solution à environ 5*10-3M ; détection : UV Diode Array Detector 190 à 600 nm ; mode d'ionisation : electrospray) : [ (MHt]=362 ; tr =4,64 mn 0,3 g de 3-(2-oxo-5,5-diphényl-cyclohex-3-ènylamino)-acrylate d'éthyle est dissous dans 6 cm3 d'éthanol. La solution obtenue est refroidie à une température voisine de OOC. 2 cm3 d'une solution d'éthylate de sodium (obtenue à partir de 0,23 g de sodium dans 20 cm3 d'éthanol) sont ajoutés à la solution précédente, à une température comprise entre 0 et 5 C. Après retour à une température voisine de 20 C, le mélange résultant est agité pendant environ 18 heures. Une dizaine de grammes de glace pilée est alors ajoutée au mélange réactionnel puis ce dernier est concentré sous pression réduite (13 kPa) à la moitié de son volume. Le mélange ainsi obtenu est extrait 5 fois à l'oxyde de diéthyle (3 fois 100 cm3, 2 fois 50 cm3). Les phases organiques réunies sont lavées successivement par 100 cm3 puis 50 cm3 d'une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium puis séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (13 kPa). Le résidu est purifié par flash chromatographie sur colonne de silice [éluant : cyclohexane/acétate d'éthyle (85/15 en volumes)]. On obtient ainsi 0, 013g de 6, 6-diphényl-6, 7-dihydro-1H-indole-3-carboxylate d'éthyle sous forme d'un solide jaune, dont les caractéristiques sont les suivantes : - Rf CCM silice [éluant : cyclohexane/acétate d'éthyle (70/30 en volumes = 0,37
- spectre de R. M. N. 1H (300 MHz, (CD3) 2SO d6, 8 en ppm) : 1,24 (t, J = 7 Hz : 3H) ; 3,30 (s large : 2H) ; 4,14 (q, J = 7 Hz : 2H) ; 6,16 (d, J = 10 Hz : 1H) ; 6,88 (d, J = 10 Hz : 1H) ; de 7,15 à 7,35 (mt : 11H) ; 11,45 (mf : 1H).
Exemple X Y Z R1 Ar 42 1 N N H C6H5 C6H5 COOC2H5 2-1 N N H C6H5 C6H5 COO# 2-2 N N H C6H5 C6H5 COOMe 3-1 N N H C6H5 C6H5 CO(NH)# 3-2 N N H C6H5 C6H5 CON# 3-3 N N H CeHs CeHs CON (CH3)-OCH3 4 N N H CeHg C6H5 CN 5-1 N N H CeHs CeHs CO# 5-2 N N H C6H5 C6H5 # cor 5-3 N N H CeHs CeHs COCeHs 6-1A N N H C6H5 C6H5 # 6-1 B C (=N-OH)# 6-2A N N H C6H5 C6H5 6-2B C(=N-OH)# 6-3A N N H C6H5 C6H5 6-3B N N H C6H5 C6H5 C(=N-OMe)# 7-1 N N SO2C6H5CH3 C6H5 C6H5 NH2 7-2 N N COCH=CH2 CeHs C6H5 NH2 7-3 N N H CeHs C6H5 NH-CO# 8 N N H C6H5 C6H5 #N O-N 9-1 N N H CH3 C6H5 COOC2H5 9-2 N N H CH3 C6H5 COOC2Hs 9-3 N N H H C6H5 COOC2H5 10-1 N N H CH3OC6H5 CH3OC6H5 COOC2H5 10-2 N N H C6H5 (CH3O)2C6H5 COOC2H5 11 C N H C6Hs C6Hs COOC2Hs 12 N C H CeHs CeHs COOC2H5
Tubuline % détachement Exemples Activité à IC50 (1 #M) 1 M 25) #M (cette colonne est inutile) 1 + 1,5 20% 2-1 + 3, 7 2-2 + 1, 25 3-1 + 2 20% 3-2 + 4, 5 3-3 + 25 4 + 23 5-1 + 0, 8 28% 5-2 + 1, 1 19% 5-3 + 12, 5 6-1A + 0.6 36% 6-18 + 3 6-2A + 25 6-2B + 1 18-11% 6-3A + 0,8 31-20% 6-3B + 0,8 7-1 + 9 7-2 + 5 34% (attention non confirmé) 8 + 9 26% (attention non confirmé)
Tubuline % détachement Exemples Activité à IC50 ( M) 1 M 25 M (cette colonne est inutile) 9-1 + 18 9-2 + 15 9-3 + 25 10-1 + 17, 5 10-2 + 4,5 11 + 9 12 + 2 17%
PEPTIDES SYNTHETIQUES OU NATURELS LIANT LA PROTEINE PHOSPHATASE 2A, METHODE D'IDENTIFICATION ET UTILISATIONS L'invention a trait à de nouveaux peptides, synthétiques ou naturels utiles en particulier dans le traitement des infections virales ou parasitaires ou dans le traitement de tumeurs, lesdits peptides étant d'une taille inférieure à 30 acides aminés, de préférence 20 acides aminés, et caractérisés en ce qu'ils lient, in vitro, de manière spécifique, une holoenzyme protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sous-unités.
L'invention a aussi trait à une méthode d'identification de tels peptides, et à leurs utilisations.
Etant donné le rôle des peptides de l'invention dans la modulation de l'activité de la protéine phosphatase 2A cellulaire, il est important de rappeler en introduction les connaissances actuelles sur les protéine phosphatases 2A, leur rôle physiologique et leurs interactions avec certaines protéines cellulaires, virales ou parasitaires.
La physiologie de la cellule est contrôlée en partie par la modulation de l'état de phosphorylation des protéines. L'état de phosphorylation des protéines cellulaires dépend de l'action antagoniste des protéine kinases qui les phosphorylent et des protéine phosphatases qui les déphosphorylent.
Les protéine phosphatases sont divisées en deux groupes principaux : les tyrosine phosphatases et les sérine/thréonine phosphatases. Les sérine/thréonine phosphatases sont classées en deux catégories selon la spécificité de leur substrat et leur sensibilité à certains inhibiteurs, les phosphatases de type 1 (PP1) et les phosphatases de type 2 (PP2). Les phosphatases de type 2 se divisent encore en différentes classes, incluant la phosphatase 2A (PP2A), la phosphatase 2B ou calcineurine dont l'activité est régulée par le calcium, et la phosphatase 2C (PP2C) dont l'activité est régulée par le magnésium.
On sait maintenant que les phosphatases de type 2A sont très conservées au cours de l'évolution et sont potentiellement impliquées dans la régulation de nombreux processus biologiques. Les enzymes PP2A ont clairement été impliquées dans la régulation de la transcription, le contrôle du cycle cellulaire ou de la transformation virale. En outre, les PP2A sont la cible de différentes protéines virales ou parasitaires, suggérant un rôle des PP2A dans les interactions hôtes-pathogènes.
Les PP2A sont des complexes oligomèriques (holoenzymes) comprenant chacun, une sous-unité catalytique (C) et une ou deux sousunités régulatrices, (A) et (B). La structure de la sous-unité (A) consiste en 15 répétions imparfaites d'une séquence d'acides aminés conservée de 38 à 40 acides aminés, dont certaines interagissent avec les sous-unités (B) et (C). Les sous-unités (A) et (C), conservées au cours de l'évolution, constituent la structure de base de l'enzyme et sont exprimées constitutivement. Au contraire, les sous-unités (B) constituent une famille de protéines régulatrices non reliées par une structure commune et différentiellement exprimées (Cohen P. The structure and regulation of protein phosphatases. Annu Rev Biochem 1989 ; 58 : 453-508). Ainsi, Les protéine phosphatase 2A existent in vivo sous deux classes de forme différente : une forme dimérique (AC) et une forme trimérique (ABC). Les sous-unités (B) régulent l'activité phosphatasique et la spécificité vis-à-vis du substrat. L'existence de formes multiples de PP2A est corrélée à des fonctions distinctes et variées des PP2A in vivo, Récemment, différentes protéines non cellulaires, et en particulier des protéines virales et parasitaires ont été impliquées dans la modulation de certaines activités spécifiques des protéine phosphatase 2A.
Différentes stratégies impliquant PP2A ont été adoptées par les virus pour faciliter leur réplication et leur survie dans la cellule hôte. Par exemple, le parainfluenza virus incorpore dans sa particule virale la protéine PKC < , protéine d'origine cellulaire sous le contrôle de PP2A. Ceci lui permet de
Le peptide sur lequel se fixe l'holoenzyme protéine phosphatase de type 2A est identifié en général par le marquage direct ou indirect de la
protéine phosphatase et l'identification des spots au niveau desquels s'est fixé la protéine marquée. La fixation de la PP2A ou l'une de ses sous-unités au niveau de l'un des spots de peptides peut ainsi être révélée en particulier à l'aide d'antisérums, selon les techniques classiquement utilisées pour le Western Blot ou le test ELISA en phase solide, après incubation du support contenant le réseau de peptides avec un anticorps dirigé contre les sous-unités (A) ou (B) ou (C) ou un mélange d'anticorps dirigé contre les sous-unités (A), (B) ou (C) de PP2A.
L'application de la méthode de l'invention définie ci-dessus conduit à l'identification de peptides, notamment utiles dans le traitement de certaines infections virales ou parasitaires, d'une taille inférieure à 30 acides aminés, voire inférieure à 20 acides aminés, lesdits peptides étant capables de lier in vitro une holoenzyme protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sous-unités.
Dès lors, en utilisant ses connaissances générales dans le domaine de la synthèse peptidique, l'homme du métier peut produire des peptides, dérivés des fragments de peptides identifiés par la méthode de l'invention présentant les propriétés avantageuses décrites ci-dessus.
Par conséquent, l'invention vise un peptide, naturel ou synthétique, d'une taille inférieure à 30 acides aminés, de préférence inférieure à 20 acides aminés, caractérisé en ce qu'il lie in vitro, de manière spécifique, une holoenzyme protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sousunités, (A), (B) ou (C). Par liaison spécifique, il faut comprendre que le peptide est capable d'inhiber de manière compétitive la liaison d'une protéine d'origine virale ou parasitaire avec des PP2A.
Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le peptide de l'invention est caractérisé en ce qu'il s'agit d'un fragment d'une protéine virale, parasitaire ou cellulaire, ladite protéine liant in vitro une protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sous-unités, ou d'une séquence se distinguant du fragment de protéine précédent par substitution ou délétion
d'acides aminés, ladite séquence distincte conservant néanmoins les propriétés de liaison à une protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sous-unités.
En particulier, une séquence distincte est une séquence peptidique augmentant l'affinité de liaison à la protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sous-unités par rapport à la séquence dont elle dérive. Une autre séquence distincte telle que définie plus haut est une séquence peptidique homologue à une séquence peptidique identifiée initialement, c'est-à-dire une séquence dérivée d'une protéine d'une autre espèce que la séquence peptidique identifiée initialement, et dont la séquence primaire peut être alignée avec la séquence peptidique identifiée initialement à l'aide d'un programme d'alignement optimal classiquement utilisé, tel que le programme BESTFIT (Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, GCG). En particulier, une séquence A sera considérée comme homologue à une séquence B si lesdites séquences A et B présentent au moins 50% d'identité, de préférence 75% d'identité, après alignement des séquences à l'aide d'un programme d'alignement optimal tel que le programme BESTFIT. De manière encore préférée, deux séquences sont aussi considérées homologues si les séquences sont quasi-identiques à l'exception de quelques résidus pouvant représenter 10 à 20% de variabilité sur la séquence totale. Par ailleurs les acides aminés de même fonction chimique (telles que par exemple, Arg et Lys) sont considérés comme équivalents. Les peptides à analyser pour leur liaison avec une PP2A ou l'une de ses sous-unités, sont en général choisis parmi des fragments de protéines virales, parasitaires ou cellulaires, lesquels protéines ont été montrées interagir in vivo ou in vitro avec une protéine phosphatase de type 2A.
De telles protéines virales, parasitaires ou cellulaires sont en particulier choisies parmi l'une des protéines suivantes : antigène t de SV40 ou de polyôme, antigène moyen t de polyôme, sous unité de PP2A de type
B (B, B', B"), CK2a, CaMIV, p70S6-kinase, Pak1/Pak3, Tap42/alpha 4, PTPA, Set/I1/12-PP2A, E4orf4, tau, Vpr ou CD28, CCXR2 (récepteur de chemokine).
Un peptide de l'invention particulièrement préféré est un fragment de la protéine Vpr du virus VIH, en particulier un fragment de la protéine Vpr du virus VIH-1 ou VIH-2, ou une séquence se distinguant du fragment de protéine précédent par substitution ou délétion d'acides aminés, ladite séquence distincte conservant néanmoins les propriétés de liaison à la protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sous-unités.
De manière encore préférée, un peptide selon l'invention est caractérisé en ce qu'il est inclus dans l'une des séquences suivantes : a) VEALIRILQQLLFIHFRI (SEQ ID NO : 1), b) RHSRIGIIQQRRTRNG (SEQ ID NO : 2), ou, c) une séquence se distinguant de SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2 par substitution ou délétion d'acides aminés, ladite séquence distincte conservant néanmoins les propriétés de liaison pour la protéine phosphatase de type 2A ou l'une de ses sous-unités.
Parmi les peptides de séquences se distinguant de SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2 par substitution ou délétion d'acides aminés, et entrant dans le cadre de l'invention, on citera plus particulièrement les peptides dont la séquence est incluse dans l'une des séquences de la protéine Vpr des différents variants du type VIH-1, VIH-2 et de SIV, et correspondant aux séquences homologues chez ces variants de SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2.
On peut citer notamment les séquences VEALIRILQQLL (SEQ ID NO : 6), ALlRILQQLLFI (SEQ ID NO : 7), IRILQQLLFIHF (SEQ ID NO : 8), ILQQLLFIHFR (SEQ ID NO : 9), RHSRIGIIQQRR (SEQ ID NO : 10), SRIGIIQQRRTR (SEQ ID NO : 11) et IGIIQQRRTRNG (SEQ ID NO : 12)
correspondant aux dodécapeptides identifiés comme liant la sous-unité A de PP2A.
Un peptide préféré selon l'invention est un peptide choisi parmi l'une des séquences SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2 et caractérisé en ce que son administration induit l'apoptose des cellules tumorales.
UN MOYEN PERMET D'UTILISER DES VANTAUX NON TRANSFORMES Habituellement le mécanisme de verrouillage est réparti entre le vantail et l'huisserie. Deux mesures permettent de déporter tout le mécanisme de verrouillage au sein de l'huisserie présentant déjà un creux de sorte à laisser le vantail exempt de transformation à des fins esthétiques (la mécanisme n'est plus visible sur le vantail) et techniques tel que pour le verre difficile à travailler. Il est ainsi plus facile de changer à volonté la nature du vantail.
Les zones de dégagement de la cale se trouvent sur le même côté que le mécanisme d'entraînement.
La cale étant alors orientée vers le champ portant le mécanisme. Ce qui évite de creuser des zones de dégagement sur la menuiserie opposée.
Le mécanisme global de verrouillage ainsi constitué (élément de manoeuvre compris) est entièrement installé sur l'huisserie.
Il faut seulement remarquer qu'il demeurera deux ou trois trous de fixation pour les gonds de maintien et de la poignée de tirage. Mais là encore, nous pouvons faire appel aux colles fortes si la nature du matériau le permet puisqu'une fois verrouillée le vantail n'as pas besoin des gonds pour résister à une agression.
Pour le cas des fenêtres. Nous avons ainsi la possibilité d'envisager des fenêtres blindées caractérisées en ce que les vantail sont faits de vitres ne comportant pas de cadre. Ce qui accroît par ailleurs la luminosité de la pièce. Les vitres se joignent directement. Un joint sur le champ de cette partie peut y être collé. Le reste du joint étant présent sur l'huisserie.
CAS PARTICULIER DES PINCEMENTS DE DOIGT S'agissant d'utiliser un vantail lourd il est nécessaire d'apporter un dispositif antipince-doigt. Celui-ci consiste en la présence d'une bande accolée contre le verso du talon qui sort lors de l'ouverture de la porte en suivant l'angle de pincement du vantail. Cette bande peut suivre la courbure circulaire du talon afin de constituer une suite mobile au talon.
Elle est soit munie d'une partie ressort pour suivre l'angle de pincement du vantail dans son mouvement. De nombreuses formes de ressort sont possibles. Ou bien on peut le fixer directement sur le panneau.
Nous pouvons envisager que cette bande soit pliée au moins en deux dans le sens de la longueur sur au moins une partie. Cette partie est élastique pour faire office de ressort.
Cette partie ressort exerce une pression à un endroit quelconque pour provoquer son avancement.
Cette dite bande peut par exemple constituer la deuxième partie d'un ressort pince. Ce pincement provoquant sa fuite vers l'avant.
Pour éviter le frottement de la bande sur le vantail ainsi que faciliter le retrait de la bande, nous pouvons ajouter un crochet à l'arrière de la bande qui s'accroche sur l'angle de pincement.
CAS PARTICULIER DES DOUBLES VANTAUX Si les deux vantaux pivotent de chaque côté de l'huisserie, leurs champs qui s'opposent pénètrent par le jeu couplé orifice saillie en avançant l'un vers l'autre en direction du milieu de l'entrée.
Nous pouvons utiliser un morceaux ce profilé d'huisserie comme jonction entre les deux vantaux.
Celui est fixé sur l'un des deux vantaux.
CAS PARTICULIER DES PRESSIONS NATURELLES Ce système bien conçu contre les pressions naturelles telles qu'inondations ou couches de neige, il est utilisable pour de telles zones. Dans ce cas, le joint principal se trouve coté intérieur pour être compressé en cas de montée des eaux. Le joint doit être fait d'une seule longueur sur la partie basse.
ou qu'il soit éteint, quand le véhicule avance à une allure réduite, par exemple lors du décollage du véhicule ou en man#uvres de parking, et quand il se déplace à des vitesses de roulage ; - le registre d'état du régime moteur qui est mesuré en mesurant la vitesse de rotation de l'arbre de sortie du moteur thermique, et qui prend les valeurs quand le moteur est à l'arrêt et quand le moteur est "tournant" ; l'ensemble des valeurs prises étant, périodiquement ou de manière asynchrone en fonction des situations de conduite, scruté et analysé sur le registre d'entrée du moyen d'autorisation de changement de rapport au niveau de son registre d'entrée qui maintient un vecteur de situation de conduite.
L'invention concerne aussi un véhicule à transmission automatique du genre comportant une transmission automatique, caractérisé en ce qu'il comporte de plus : - un dispositif manuel de changement de vitesses comportant un levier à une seule position stable à commande impulsionnelle ; - un dispositif de commande d'une transmission automatique défini selon au moins l'une des revendications précédentes.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée qui suit pour la compréhension de laquelle on se reportera aux dessins annexés dans lesquels : - la figure 1 est un schéma bloc des moyens essentiels d'un mode préféré de réalisation de l'invention ; la figure 2 est un schéma bloc de la partie du dispositif de commande qui met en #uvre l'invention ; - la figure 3 est un schéma bloc d'une partie du dispositif de la Figure 1 ;
la figure 4 est un schéma bloc d'une autre partie du dispositif de la figure 1 ; - la figure 5 est un schéma bloc d'une autre partie du dispositif de la figure 1 ; - la figure 6 est un schéma bloc d'une autre partie du dispositif de la figure 1.
A la Figure 1, on a représenté un schéma bloc des moyens essentiels d'un mode préféré de réalisation de l'invention. Le véhicule comporte un moyen de motorisation 11 et son dispositif de commande de transmission automatique 10. Le moyen de motorisation comporte essentiellement un moteur thermique 1 dont l'arbre de sortie est connecté à un embrayage motorisé 2.
L'embrayage motorisé 2 comporte essentiellement un moyen moteur pour actionner le plateau d'embrayage d'un embrayage connu en fonction de la commande d'embrayage qu'il reçoit.
L'arbre de sortie de l'embrayage motorisé est connecté au primaire d'une boîte de vitesses motorisée 3. La boîte de vitesses motorisée 3 comporte essentiellement un moyen moteur pour actionner les fourchettes de manipulation des pignons de changement de rapports de boîte d'une boîte de vitesses connue en fonction de la commande de rapport qu'elle reçoit. L'arbre de sortie de la boîte de vitesses motorisée 3 est connecté par un organe de transmission mécanique aux roues motrices 4.
Le dispositif de commande de transmission automatique 10 comporte essentiellement un pilote d'embrayage 5 dont la sortie électronique de commande produit un signal de commande des actionneurs de l'embrayage motorisé 2 et un calculateur de boîte de vitesses automatisé 6 dont la sortie électronique de commande produit un signal de commande pour les actionneurs de la boîte de vitesses motorisée 3. Ces deux composants du dispositif de commande de transmission automatique 10 sont bien connus dans l'état de la technique et ne seront pas plus décrits. Selon
l'invention, le dispositif de commande de transmission automatique 10 comporte aussi une commande de mode impulsionnel 7 équipée d'un levier de changement de vitesses à une seule position stable "0" et d'un interpréteur de commande qui est connecté en entrée d'un moyen d'autorisation de changement de rapport 8.
Le moyen d'autorisation de changement de rapport 8 comporte aussi une entrée sur laquelle sont reçues des informations de détection de situations de conduite produite par un moyen de détection de situations de conduite 9. Le moyen d'autorisation de changement de rapport 8 comporte une sortie qui selon un protocole d'autorisation produit à destination du calculateur de boîte de vitesses automatisée 6 des ordres de changement de vitesses seulement si les conditions de l'environnement détecté sont autorisées.
Un avantage de cette solution consiste à éviter de faire gérer directement par la fonction émettrice, par exemple par des moyens mécaniques peu facilement contrôlables, les situations dans lesquelles une commande ne doit pas être émise.
Un exemple d'une telle situation est celle dans laquelle une man#uvre du levier de changement de vitesses impulsionnel est intempestive, par exemple lors d'une fausse man#uvre. Si le véhicule se trouve moteur arrêté, il n'est pas utile que les actionneurs de la boîte de vitesses 3 reçoivent des ordres d'activation.
A la Figure 2, on a représenté un schéma bloc de la partie du dispositif de commande 11 de la Figure 1 qui met plus particulièrement en #uvre l'invention. A la Figure 2, le moyen d'autorisation 8 de la Figure 1 est implémenté essentiellement dans une unité centrale d'un calculateur embarqué à bord du véhicule. Cette unité centrale peut, selon les modes de réalisation, être réalisée sur un contrôleur spécifique ou répartie
sur une ou plusieurs unités centrales déjà dévolues à d'autres fonctions de contrôle du véhicule.