INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Ce problème se pose de façon accrue pour les moteurs comprenant plusieurs soupapes d'admission, par exemple au nombre de deux. On pourra à cet égard se référer aux documents EP-A-O 594 462 et EP-A-O 719 916 qui décrivent des systèmes de recirculation de gaz d'échappement pour moteur pourvu de deux soupapes d'admission par cylindre. Selon les techniques décrites dans ces documents, seule l'une des soupapes peut être alimentée avec un mélange air-gaz d'échappement recirculés, l'autre soupape étant alimentée avec de l'air. Il n'est donc pas possible d'agir sur la répartition de gaz d'échappement au sein même de la chambre de combustion.
Le but de l'invention est donc de pallier ces inconvénients.
L'invention a donc pour objet un système de recirculation de gaz d'échappement pour moteur à combustion interne de véhicule automobile à allumage par compression, comprenant un circuit de recirculation de gaz d'échappement disposé de manière à récupérer une partie des gaz issus du moteur et à injecter les gaz récupérés dans la chambre de combustion des cylindres du moteur sous le contrôle d'un calculateur central.
- ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve que ledit fragment permette le transport de l'oxygène, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 60 acides aminés, et notamment d'au moins environ 160 acides aminés contigus dans la séquence SEQ ID NO : 2.
La séquence SEQ ID NO : 2 est une nouvelle séquence protéique correspondant à une chaîne de globine, notée A2 (a).
Les propriétés de transport de l'oxygène des séquences protéiques de l'invention peuvent être notamment vérifiées en mesurant leur spectre d'absorption par spectrophotométrie typique de l'oxyhémoglobine.
Une protéine préférée selon l'invention est une protéine telle que définie cidessus, caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence SEQ ID NO : 4, - ou toute séquence dérivée de la séquence SEQ ID NO : 4 ou d'un fragment défini ci-dessous, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, sous réserve sous réserve que ladite séquence dérivée permette le transport de l'oxygène, - ou toute séquence homologue de la séquence SEQ ID NO : 4 ou d'un fragment défini ci-dessous, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 75%, notamment d'au moins environ 85%, avec la séquence SEQ ID NO : 4, sous réserve que ladite séquence homologue permette le transport de l'oxygène, - ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve que ledit fragment permette le transport de l'oxygène, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 60 acides aminés, et notamment d'au moins environ 160 acides aminés contigus dans la séquence SEQ ID NO : 4.
La séquence SEQ ID NO : 4 est une nouvelle séquence protéique correspondant à une chaîne de globine, notée A2 (b).
Une protéine préférée selon l'invention est une protéine telle que définie cidessus, caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence SEQ ID NO : 6, - ou toute séquence dérivée de la séquence SEQ ID NO : 6 ou d'un fragment défini ci-dessous, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, sous réserve sous réserve que ladite séquence dérivée permette le transport de l'oxygène,
- ou toute séquence homologue de la séquence SEQ ID NO : 6 ou d'un fragment défini ci-dessous, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 75%, notamment d'au moins environ 85%, avec la séquence SEQ ID NO : 6, sous réserve que ladite séquence homologue permette le transport de l'oxygène, - ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve que ledit fragment permette le transport de l'oxygène, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 60 acides aminés, et notamment d'au moins environ 160 acides aminés contigus dans la séquence SEQ ID NO : 6.
La séquence SEQ ID NO : 6 est une nouvelle séquence protéique correspondant à une chaîne de globine, notée Al.
Une protéine préférée selon l'invention est une protéine telle que définie cidessus, caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence SEQ ID NO : 8, - ou toute séquence dérivée de la séquence SEQ ID NO : 8 ou d'un fragment défini ci-dessous, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, sous réserve que ladite séquence dérivée permette le transport de l'oxygène, - ou toute séquence homologue de la séquence SEQ ID NO : 8 ou d'un fragment défini ci-dessous, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 75%, notamment d'au moins environ 85%, avec la séquence SEQ ID NO : 8, sous réserve que ladite séquence homologue permette le transport de l'oxygène, - ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve que ledit fragment permette le transport de l'oxygène, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 60 acides aminés, et notamment d'au moins environ 160 acides aminés contigus dans la séquence SEQ ID NO : 8.
La séquence SEQ ID NO : 8 est une nouvelle séquence protéique correspondant à une chaîne de globine, notée B2.
La présente invention concerne également des séquences nucléotidiques telles qu'obtenues selon le procédé tel que défini ci-dessus.
La présente invention concerne également des séquences nucléotidiques codant pour une protéine telle que définie ci-dessus.
La présente invention concerne également une séquence nucléotidique telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 1 codant pour SEQ ID NO : 2,
- ou toute séquence nucléotidique dérivée, par dégénérescence du code génétique, de la séquence SEQ ID NO : 1, et codant pour une protéine représentée par SEQ ID NO : 2, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, de la séquence SEQ ID NO : 1 codant pour une protéine dérivée de SEQ ID NO : 2, - ou toute séquence nucléotidique homologue de SEQ ID NO : 1, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 60%, avec la séquence SEQ ID NO : 1, - ou tout fragment de la séquence nucléotidique SEQ ID NO: 1 ou des séquences nucléotidiques définies ci-dessus, ledit fragment étant de préférence constitué d'au moins environ 180 nucléotides, et notamment d'au moins environ 480 nucléotides contigus dans ladite séquence, - ou toute séquence nucléotidique complémentaire des séquences ou fragments susmentionnés, - ou toute séquence nucléotidique susceptible d'hybrider dans des conditions stringentes avec la séquence complémentaire d'une des séquences ou d'un des fragments susmentionnés.
Les conditions de stringence correspondent à des gammes de températures comprises entre 48 et 60 C et de concentrations en MgClz comprises entre 1 et 3 mM.
La présente invention concerne également une séquence nucléotidique telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 3 codant pour SEQ ID NO : 4, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, par dégénérescence du code génétique, de la séquence SEQ ID NO : 3, et codant pour une protéine représentée par SEQ ID NO : 4, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, de la séquence SEQ ID NO : 3 codant pour une protéine dérivée de SEQ ID NO : 4, - ou toute séquence nucléotidique homologue de SEQ ID NO : 3, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 60%, avec la séquence SEQ ID NO : 3, - ou tout fragment de la séquence nucléotidique SEQ ID NO 3 ou des séquences nucléotidiques définies ci-dessus, ledit fragment étant de préférence constitué
Cette phase de production du Rich-Word comprend les étapes suivantes : 1 : L'internaute consulte une page Web du site PS~i2j2.
2 : La code, inséré dans cette page au cours de la phase de développement, permet de requêter une page Web dynamique
distante searchWord.ext , en lui donnant pour valeur l'URL de la page courante.
3 : Ladite page dynamique importe la liste des mots réservés pour cette page, à l'occasion de la phase de développement.
4 : Le texte de la page Web courante est parcouru à la recherche des mots réservés, ce qui détermine une nouvelle liste, dite liste restreinte 5 : Est importé, à partir du serveur d'arbre, l'ensemble des structures arborescentes coïncidant avec les mots de la liste restreinte.
6 : Modification du DOM de la page Web courante par intégration desdites structures arborescentes.
Dans le cas de Rich-Word, l'élément est un mot.
L'idée de Rich-Word est de permettre à une agence de réserver, sur une page Web donnée, un ensemble de mots pendant une certaine période. Les pages Web sont aujourd'hui le plus souvent dynamiques, si bien que l'on ne peut prévoir le contenu de la page Web avant que les champs texte, qui font appel dynamiquement aux champs d'une table d'une base de données, ne soient remplis du texte qu'ils extraient de cette base. La figure 22 résume le principe de l'appel dynamique de texte à partir d'une base de données.
La page Web est constituée d'un certain nombre de n#uds Texte TNi. Certains de ces n#uds texte font appel, par le biais d'un marqueur , à une base de données. A cet effet peuvent être utilisées diverses technologies SSI (serveur side include): asp, php, cfm, jsp ... Le marqueur effectue donc une requête (Request) sur une base de données, requête dont le résultat (Response) est affiché à la place dudit marqueur. Ainsi, si l'élément est le mot, nous devons prendre en compte le fait que cet élément est stocké initialement dans le champ d'une table d'une base de données. Ce n'est qu'une fois que les contenus définitifs
des n#uds texte ont été intégrés, de cette façon, au contenu de la page Web, que l'on est en mesure de confronter l'ensemble des contenus des n#uds texte à l'ensemble des mots qui ont été réservés par les agences pour cette page à des fins de communication. La figure 23 en montre le principe.
A la fin du chargement de la page, et donc une fois que l'ensemble des n#uds texte TNi ont été résolus, une requête est adressée à la base de données RW afin d'obtenir l'ensemble des mots réservés par les agences pour cette page Web : liste est notée WordList. Un processus client génère ensuite une liste restreinte E qui est l'intersection de WordList et de l'ensemble des mots contenus dans les n#uds texte Ti. E est donc constitué d'un ensemble de mots ej, un mot ej ayant à la fois été réservé par une agence pour cette page Web et ayant été importé d'une base de données dans un champ d'une table à l'occasion du chargement de la page dynamique: E={e}. Cet ensemble E est envoyé en paramètre d'un processus visant à extraire, de la base de données du serveur d'arbre, l'ensemble T={tj} des structures arborescentes tj associées aux ej.
La définition de la structure arborescente se fait indépendamment du fait que l'on soit dans le cas de Rich-Word ou de Rich-Banner ou autre. Dans le cas de RichWord, l'élément est un mot. La définition de l'élément consiste en la création du texte contenant le mot-élément, texte enregistré dans le champ d'une table d'une base de données. Dans le cas de RichWord, le marqueur originel, constitué de la page Web contenant l'ensemble des tags , a un lien avec les éléments dans la mesure où ces tags permettent de charger dynamiquement les TNi qui contiennent les éléments. La différence de fond entre RichWord et RichBanner réside dans le fait que l'étape d'enrichissement consiste ici en le stockage de
l'association de l'élément (ici le mot) et de la structure arborescente (ainsi que de son moyen de déploiement). Il n'y a pas, dans le cas de Rich-Word, d'enrichissement d'un marqueur dans une phase de développement. Il n' y a qu'un tag à mettre dans la page numérique. Par contre, dans le cas de Rich-Banner, le marqueur originel contient une référence à un mécanisme de choix d'élément et l'enrichissement consiste à lui adjoindre une référence à un mécanisme de création dynamique d'arbre associé à l'élément.
La figure 24 illustre la notion d'association dans le cas du Rich-Word. Cette figure peut cependant également s'appliquer au cas où le mot est un élément d'un autre type.
Rich-Word s'applique autant aux mots contenus dans les pages Web qu'aux mots contenus dans le code source des graphismes vectoriels, dont les cartes géographiques vectorielles, puisque lesdits graphismes stockent explicitement lesdits mots dans leur code source.
Une application possible de Rich-Word concerne l'e-publicité par la faculté d'acheter un (des) mot (s) sur une page Web, ceci pour une durée déterminée, et de déployer des menus adaptés à ce (ces) mot(s) et relatifs, par exemple, à des offres de service.
Matériels et méthodes : conditions d'hybridation les oligonucléotides marqués à l'extrémité 3' de la firme Metabion ont été utilisés. La qualité des oligonucléotides a été vérifiée dans un gel à 20% de polyacrylamide, dans des conditions de dénaturation
L'hybridation des oligonucléotides marqués par fluorophore sur la puce a été réalisée dans une solution de type 2xSSC, 0. 2% SDS, 0.2 mg/ml BSA à température ambiante, pendant 12 heures. Le volume de la chambre d'hybridation était de 180 l, la concentration de chaque oligonucléotide était 0.1 M.
Le lavage post hybridation de la puce a été ensuite réalisé dans une solution 2xSSC, 0. 2% SDS pendant une minute à température ambiante.
La puce a ensuite été séchée par centrifugation pendant une minute à 500 x g en accord avec le protocole TeleChem, puis lue.
* De manière générale, cette application de l'invention comprend l'utilisation d'une puce CFTR selon l'invention pour la détection de la présence éventuelle de mutation dans la séquence du gène CFTR d'un patient, de préférence en mettant en oeuvre le lecteur selon l'invention.
Les étapes essentielles de ce procédé sont les suivantes : # Préparation de l'oliqonucléotide ou du polynucléotides cibles : L'ADN génomique, ou les ARN messagers, ou leurs fragments, sont extraits de l'échantillon biologique selon les méthodes couramment utilisées par l'homme du métier. En utilisant les technologies de l'ADN recombinant, les ARN sont éventuellement transformés en ADNc (ADN complémentaires). L'ADN ainsi isolé est ensuite fragmenté et ou soumis à une amplification par PCR pour générer des fragments oligonucléotidiques. Ceux-ci sont marqués, avant, simultanément ou après avec des marqueurs générateur de signal selon les méthodes conventionnelles. Selon un mode préféré de réalisation, l'ADN ainsi isolé est amplifié par PCR à l'aide d'amorce spécifique de la région du gène CFTR testé en utilisant des nucléotides marqués ou modifiés. Les ADNs, ADNc, ou ARNs ainsi marqués sont ensuite dénaturés pour obtenir des molécules simple brin.
# Marquage fluorescent du produit ssPCR
Un produit ssPCR exon 10 (longueur d'environ 400 nt) a été marqué 3'-end avec des marqueurs fluorescents Cy3 ou Cy5, comme suit : - 100 pmol de produit ssPCR été dissous dans 25 l d'une solution :(1x TdT tampon, 400 pmol de Cy3-UTP (ou Cy5-UTP) dans de l'eau), - 10 unités de TdT ont été ajoutées.
La réaction a été réalisée à 37 C pendant 1 heure. Les marqueurs non liés ont été supprimés avec des colonnes de QIAGEN DyeExTM Spin Kit selon le protocole de QIAGEN .
# Hybridation des ADN cibles avec les oliqonucléotides de la puce : Les ADNs, ADNc, ou ARNs ainsi marqués et dénaturés sont ensuite déposés sur la puce et, le cas échéant, se lient par hybridation spécifique dans des conditions d'hybridation de stringence définie avec les sondes oligonucléotidiques. Après un lavage pour éliminer l'excès d'ADNs, ADNc, ou ARNs marqués et/ou hybridés de manière non spécifique, les duplexes formés sont détectés en mettant en oeuvre le lecteur selon l'invention.
L'analyse des mutations du gène CFTR peut se faire selon une première méthode qui consiste à comparer les intensités des signaux d'hybridation des oligonucléotides cibles sauvage (wt) et/ou muté sur la bipuce CFTR, en utilisant une seul type d'oligonucléotide cible marqué avec un fluorophore. Un seconde approche utilise l'hybridation sur la puce CFTR d'au moins deux oligonucléotides cibles différents marqués avec des marqueurs générateur de signal distincts, l'un des oligonucléotides provenant de l'échantillon à tester, l'autre correspondant à un ologonucléotide de référence (en général, l'oligonucléotide correspondant à la séquence sauvage). hybridation
L'hybridation de sondes sur les dits oligonucléotides cibles est réalisée à une température d'environ 20 C dans le tampon d'hybridation défini ci-après et ne comprenant pas de formamide. L'homme du métier devra adapter ces conditions d'hybridations si le milieu d'hydridation utilisé contient de la formamide.
De manière préférée, le milieu d'hybridation de la dite puce CFTR selon l'invention comprend au moins du SSC 6X (1 x SSC correspond à une solution 0,15 M NaCI + 0,015 M citrate de sodium), du sodium dodécyl sulfate 0,2 %, et optionellement 0,2 mg/ml de sérum albumine bovine.
L'homme du métier pourra éventuellement modifier ces conditions avec des composés ayant une fonction analogue dans le tampon d'hybridation. Ainsi, il pourrait être envisager de remplacer la sérum albumine bovine par de la gélatine ou le tampon SSC par du tampon SSPE (5X SSPE se compose de 750 M NaCI, 50 mM Na phosphate, 5 mM EDTA, pH 7,4).
Par conditions permettant l'hybridation spécifique d'acides nucléiques cibles avec lesdites sondes oligonucléotidiques, il s'agit de préférence de conditions de forte stringence notamment telles que définies ci-après. Les conditions stringentes sont des conditions dans lesquelles une sonde va hybrider sur sa séquence cible, mais pas sur les autres séquences. Les conditions de stringences sont dépendantes de la séquence, et sont différentes en fonction des circonstances. Une variété de facteur peut influencer la stringeance d'hybridation. Parmi ceux-ci, il convient de citer la composition en base, la taille des brins complémentaires, la présence de solvants organiques et la longueur des mésappariements de bases. Pour une discussion sur les facteurs généraux qui influencent l'hybridation, on peut se référer par exemple au WO 93/02216 ou Ausubel et al. (Current Protocol in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, Inc and John Willey and Sons, Inc). En général, les conditions de stringence sont sélectionnées de sorte que la température est de 5 C inférieure à la température du point de fusion (melting point, Tm), pour une séquence spécifique à une force ionique et un pH défini. Le Tm est la température
(sous des conditions de force ionique, de pH, et de concentration en acide nucléique définies) à laquelle 50% des sondes complémentaires à une séquence cible s'hybrident à la séquence cible à l'équilibre. De manière classique, des conditions de stringence incluent une concentration en sel d'au moins environ 0,01 M jusqu'à 1 M de concentration de sodium ou d'autres sels, à un pH de 7,0 jusqu'à 8,3 et une température d'au moins environ 30 C pour les petites sondes (10 à 50 nucléotides). Des conditions de stringence peuvent également être obtenues avec l'addition d'agents déstabilisants tels que la formamide ou les sels de tétra-alkyl-ammonium.
Selon une caractéristique générale du système selon l'invention, le moteur étant pourvu d'un répartiteur d'admission équipé, pour chaque cylindre du moteur, de plusieurs conduits d'alimentation du cylindre en mélange air-carburant, le circuit de recirculation débouche, en aval, en considérant le trajet des gaz d'échappement recirculés, dans le répartiteur d'admission.
Le système comporte en outre des moyens pour faire varier indépendamment la quantité des gaz recirculés dans les conduits d'alimentation.
Il est ainsi possible d'alimenter les conduits d'alimentation avec des taux de gaz recirculés différents et, ainsi, d'obtenir une stratification des gaz recirculés dans la chambre de combustion.
Selon une autre caractéristique de l'invention, les conduits d'alimentation de chaque cylindre sont pourvus de canalisations de réglage de taux de gaz recirculés alimentés respectivement en gaz recirculés et en air.
Dans un mode de réalisation, les canalisations sont pourvues chacune d'une vanne de réglage pilotée par le calculateur central.
Selon une autre caractéristique de l'invention, chaque cylindre est pourvu de deux conduits d'alimentation équipés l'un d'une canalisation de réglage alimentée en air et, l'autre, d'une canalisation de réglage alimentée en gaz recirculés.
Selon l'invention, il est également proposé un procédé de recirculation de gaz d'échappement pour moteur à combustion interne de véhicule automobile à allumage par compression, au cours duquel on récupère une partie des gaz issus du moteur et on injecte les gaz récupérés dans la chambre de combustion des cylindres du moteur sous le contrôle d'un calculateur central, caractérisé en ce que le moteur étant pourvu d'un répartiteur d'admission équipé, pour chaque cylindre du moteur, de plusieurs conduits d'alimentation du cylindre en mélange air-carburant, on injecte les gaz d'échappement recirculés dans le répartiteur d'admission et l'on règle indépendamment la quantité de gaz recirculés dans les conduits d'alimentation.
D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description suivante, donnée uniquement 20 à titre d'exemple non limitatif, et faite en référence à l'unique figure annexée qui illustre schématiquement la structure d'un système de recirculation de gaz d'échappement conforme à l'invention.
Sur la figure annexée, on a représenté, de manière schématique, la structure générale d'un moteur 10 à combustion interne d'un 25 véhicule automobile de type Diesel, ainsi que ses circuits d'admission d'air et d'échappement.
Par souci de clarté, seul un cylindre C a été représenté. Ce cylindre C est pourvu de quatre soupapes, à savoir deux soupapes 12 et 14 d'admission et deux soupapes d'échappement 16 et 18.
Les soupapes d'admission 12 et 14 communiquent par l'intermédiaire de deux conduits d'alimentation 20 et 22 avec un répartiteur d'admission 24, lequel est alimenté, d'une part, en air frais, par l'intermédiaire d'un conduit d'alimentation correspondant 26 et, d'autre part, en gaz recirculé, par l'intermédiaire d'un conduit de recirculation de gaz d'échappement 28.
En ce qui concerne la récupération des gaz d'échappement issus de la combustion, un collecteur d'échappement 30, en communication avec les soupapes d'échappement 16 et 18 par l'intermédiaire de conduites d'échappement 32 et 34, collecte ces gaz puis les évacue vers une ligne d'échappement 36, elle-même pourvue de moyens 38 de traitement des effluents gazeux.
Le circuit de recirculation 28 récupère une partie de ces gaz d'échappement pour les réinjecter dans le répartiteur d'admission 24. Par exemple, selon un mode de réalisation, le circuit de recirculation s'étend entre le collecteur d'échappement 30 et la conduite 26 d'alimentation en air. Cependant, tout autre agencement approprié pourrait également être envisagé.
Une vanne de réglage 40, pilotée par un calculateur central 42 dûment programmé embarqué à bord du véhicule automobile, permet de régler la quantité de gaz d'échappement à injecter dans le répartiteur d'admission 24.
Par ailleurs, le circuit de recirculation est pourvu d'une branche ou ramification 44, également pourvue d'une vanne 46 pilotée par le calculateur central 42, agencée pour récupérer une partie des gaz d'échappement et les réinjecter dans l'un des conduits d'alimentation 22. Une canalisation 48, alimentée en air frais et 25 pourvue d'une vanne 50 pilotée par le calculateur 22 débouche dans l'autre conduit d'alimentation, à savoir le conduit désigné par la référence numérique 20.
Ainsi, selon l'agencement qui vient d'être décrit, chaque cylindre C du moteur est alimenté en mélange air-gaz d'échappement recirculés au moyen de deux conduits d'alimentation alimentés eux-mêmes à partir du répartiteur d'admission et qui débouchent dans la chambre de combustion du cylindre. Des canalisations de réglage de taux de gaz recirculés débouchent respectivement dans les conduits d'alimentation et sont alimentées, l'une, en air frais et l'autre, en gaz d'échappement recirculés.