INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
De préférence lesdites cellules sont des lymphocytes, des monocytes périphériques, des cellules de Langehrans, des cellules dendritiques, des cellules présentatrices, des cellules souches, des adipocytes, des cellules immunitaires, éventuellement triées, telles que des cellules CD4+ ou CD8+.
Selon un troisième mode de réalisation, le dosage du dérivé ddNTP est un dosage de type histologique sur une coupe de tissu, tel que le tissu ganglionnaire ou sur un étalement de cellules. La visualisation de l'anticorps direct ou indirectement marqué permet alors d'observer la localisation et la distribution du dérivé ddNTP dans le tissu cible.
La révélation des antiviraux se fait alors après fixation des cellules par différents réactifs visant à immobiliser les molécules à révéler au site cellulaire où ils sont localisés. Ces fixateurs peuvent être de plusieurs types comme les vapeurs d'anhydride succinique, le paraformaldéhyde, la glutaraldéhyde ou les carbodiimides.
Le procédé de dosage d'un dérivé ddNTP de l'invention est applicable au dosage desdits dérivés chez un patient ayant fait l'objet d'une thérapie antivirale avec des analogues nucléosidiques, notamment dans le cadre des thérapies anti-VIH, mais il peut être également utilisé pour le dosage d'un dérivé ddNTP formé chez un individu soumis à des traitements anti-cancéreux qui utilisent aussi des dérivés nucléosidiques en tant qu'agents actifs.
L'invention est illustrée à l'aide des travaux expérimentaux qui décrivent la mise en oeuvre de l'invention pour un analogue nucléosidique, le ddATP.
Bien entendu, il est possible d'adapter cette méthodologie pour la production d'anticorps susceptibles de détecter n'importe quel analogue nucléosidique triphosphorylé et de concevoir un procédé de dosage immunologique les mettant en oeuvre.
Comme il est ressort du Tableau IX ci-dessus, m (LnRf) n'était pas toujours égale à 0 correspondant à m (Rf) =1], bien qu'il n'existât pas de DA.
Cela était dû à des biais d'amplifications, c'est-à-dire l'amplification préférentielle d'un allèle plutôt que l'autre lors de la réaction de PCR.
Ce mode de détermination des DA avait pour inconvénient de reposer sur le cumul des risques de première espèce a. En effet, si le risque a était fixe pour un marqueur informatif, il augmentait néanmoins avec le nombre de marqueurs informatifs. Pour pallier cet inconvénient, il
fallait déterminer un risque a corrélé au nombre de marqueurs informatifs, ceci afin que le risque a cumulé soit identique d'un patient à l'autre.
Dans cette optique, le calcul d'un score unique prenant en compte l'ensemble des marqueurs testés pour un patient a été mis au point.
11-1-2) Calcul d'un score global Le principe reposait sur le calcul de la distance de Ri aux valeurs moyennes de Rf pour chaque marqueur, d'en faire la somme des carrés après transformation logarithmique et de tester le score ainsi obtenu selon une loi du khi-deux.
Là encore, en raison des fluctuations expérimentales, les hauteurs des pics à partir desquelles étaient calculées Ri et Rf pouvaient être considérées comme des variables aléatoires dont les mesures expérimentales à partir d'une réaction de PCR étaient des estimations.
Pour un résultat expérimental Ri donné, a-t-on pu calculer le carré de la distance de LnR, à la moyenne m (LnRf) rapporté à l'écart-type s (LnRf) : d@2 = {[LnR1-m(LnRf)]/s(LnRf)}2 Pour N marqueurs informatifs, on a établi la somme des carrés des distances appelée score global E dj2. Ledit score se distribuait selon une loi du khi-deux à N degrés de liberté. La probabilité que : d 2 Soit supérieure à une valeur donnée pouvait donc être aisément déterminée à l'aide des abaques.
Une limite supérieure à Z d, a été fixée, correspondant à un risque a donné, déterminant la spécificité du test, pour N marqueurs informatifs. En choisissant par exemple a égal à 5 %, la distribution du khi-deux pour N degrés de libertés permettait de fixer E dmax, tel que lorsque, pour un 2 2 échantillon d'urines, l'on obtenait : d supérieur à E dmax, l'on était en mesure de conclure objectivement que les urines considérées étaient pathologiques, avec un risque d'erreur de 5 %.
11-2-Résultats du test 11-2-1) Résultats globaux Pour caractériser les performances du procédé de détection selon l'invention et tel que mis en oeuvre dans le cas des TV, l'on définit les paramètres de sensibilité et spécificité comme suit.
La sensibilité correspond à la probabilité que le test soit positif en cas d'anomalie. Idéalement, cette probabilité vaut 1.
La spécificité , déjà définie précédemment, désigne la probabilité que le test soit négatif en l'absence d'anomalies. Là encore, idéalement, cette probabilité est égale à 1.
S'agissant du calcul par marqueur, il a été défini un intervalle de confiance à 0,1 %. En cas de DA sur un ou plusieurs marqueurs, le test était considéré comme positif. Ce mode de calcul a fourni les résultats suivants : une sensibilité de 76,19 % (48 patients sur 63 présentaient au moins un DA) pour une spécificité de 95 % (1 témoins sur 17 présentait au moins un DA).
La détermination de DA par score a révélé une sensibilité de 68,25 % (43 patients sur 63 présentaient au moins un DA) pour une spécificité de 95 % (1 témoin sur 17 présentait au moins un DA).
11-2-2) Résultats rappelés aux stade et grade tumoraux Le tableau X ci-dessous fournit les sensibilités en fonction du mode de calcul, du stade et du grade histologique.
Tableau X
En fin de course de fermeture du vantail baant V1 sur le vantail battu V2,
l'extrémité Re (fig 4, 5 et 6) s'appule sur une excroissance Cyl du vantail battu V2.
Cette pression est transmise par le profilé R au coulisseau C dont une partie CR, avantageusement munie d'au moins un ressort? se déporte du plan du vantail V1 entra^nant l'extrémité Re du profilé longitudinal R sur une distance nécessaire et suff;sante à la libération de l'excroissance Fx dudit profilé R? condition nécessaire au coulissement du profilé R horizontalement sur le vantail V2 dans une gâche G prévue
à cet effiet.
En phase d'ouverhre du vantail V1, le tirage exercé par l'organe de man_uvre sur le profilé R provoque une translation horizontale de celuici du vantail V1 vers le vantail V2, entrânant le désaccouplement du profilé longitudinal R de la gache G. Cette translation horizontale est stoppée par une butée d'arrét disposée dans le proflé longitudinal R qui vient prendre appui sur le coulisseau C, permettant ainsi à l'organe
de man_uvre du moteur Mg, notamment une manivelle Ma? d'ouvrir le vantail V1.
Bien entendu, l'invention n'est nullement limitée aux modes de réalisation décrits et représentés qu; n?ont été donnés qu'à titre d'exemple. L'invention comprend tous les équ*alents techniques des moyens décrits ainsi que leurs combinaisons, si celles-ci
sont exécutées suivant son esprit et mises en _uvre dans le cadre des revendications
qui suivent.
REV1iNI)ICATIONS 2838473 1) Dispositif de rigidification, en position fermeture, des deux vantaux battants (V1) et (V2) d'un portail, actionnés chacun par une motorisation (Mg) notamment une motorisation dite " à compas ", dont le bras de poussée, communément appelé la manivelle (Ma3, forme un angle aigu (Aa) avec la face interne du vantail (V1) en position portail fermé, dispositif caractérisé par un profilé longitudinal (:), fixé coulissant horizontal par au moins un coulisseau (C) sur la face interne du vantail (V1) battant du portail et accouplé par une de ces extrémités à la manivelle (Ma)de la motorisation par une articulation (A11) autour d'un axe vertical (Xy), profilé longitudinal (R) qui opère une translation vers et sur le vantail opposé (V2) appelé battu, par l'action de 1'organe de man_uvre notamment une manivelle (Ma), dont l' angle aigu (Aa) qu'elle forme avec la face interne du vantail (V1) tend à diminuer
au fur et à mesure de la translation horizontale du profilé longitudinal (R).
2) Dispositif selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'extrémité (Re) du profilé longitudinal (R) situee à la jonction entre les deux vantaux (71) et (V2), est re,cue par une gâche () fixée sur le vantail battu (V2) lors de la translation horizontale du profilé longitudinal (R), contribuant ainsi à la rigidification des deux vantaux (V1) et (V2). 3) Dispositif selon l'invention caractérisé par le blocage de la translation horizontale du profilé longitudinal(R) par rapport au vantail battant (V1) par un moyen de blocage, pendant toute la course de fermeture du vantail battant (V1), jusqu'au contact de la partie (Re) du profilé longitudinal(R), en débord du vantail battant (V1) sur le vantail battu V2, avec une partie excroissante (Cyl) du plan du vantail battu (V2), contact qui libère le moyen de blocage pour permettre la translation horizontale
du profilé longitudinal(R) sur le vantail battu (V2) dans la gâche (C0.
4) Dispositif selon la revendication 3 caractérisé en ce que le moyen de blocage est constitué par une partie excroissante (Rx) intérieure du profilé longitudinal(R) dont la face e) vient en contact avec la face QJc) du coulisseau (C) lors de la translation horizontale du profilé longitudinal(R), immobilisant le profilé longitudinal(R) par
rapport au coulisseau (C) pendant la man_uvre de fermeture du vantail battant (V1).
En fait, l'ARN génomique viral cumule au moins trois fonctions qui impliquent des voies métaboliques différentes et potentiellement exclusives.
Après transcription, une partie des ARN viraux va être prise en charge par la machinerie d'épissage et va donner l'ARNm env alors qu'une autre partie des ARN génomiques va directement sortir du noyau sans subir d'épissage. Dans le cytoplasme, les ARN non épissés vont avoir à nouveau deux devenirs : soit être pris en charge par la machinerie de traduction et conduire à la synthèse des protéines Gag et Pol, soit être dirigés à la membrane plasmique et être encapsidés dans les nouvelles particules virales.
Or, les Inventeurs ont récemment montré un événement d'épissage alternatif dans le MLV, qui génère un ARN subgénomique de 4,4 Kb (Déjardin, J. et al, 2000, A novel subgenomic Murine Leukemia Virus RNA transcript results from Alernative splicing, J. Virol., vol. 74, No.
8, 3709-3714). Cet ARN dérive d'un épissage mettant en jeu un site d'épissage alternatif donneur, à l'intérieur de la séquence du gène gag codant pour la capside, qui a été désigné SD' et le site accepteur canonique de l'enveloppe. La conservation du site SD' chez tous les rétrovirus simples de mammifères suggère fortement que la séquence SD' et/ou l'ARN résultant de l'épissage a un rôle dans la réplication virale. En effet, une réduction du pouvoir infectieux de deux virus MLV prototypes (Friend et Moloney-MLV) a été observée après une mutagenèse dirigée du site destinée à entraîner une inactivation du site SD' sans changer la séquence en acides aminés du gène gag (Déjardin et al, 2000). De plus, de telles mutations étendent les propriétés leucémogènes du virus Moloney-MLV in vivo. Alors que le virus Moloney-MLV sauvage induit exclusivement le
développement de lymphomes T lorsqu'il est inoculé à des souriceaux nouveau-nés, le virus mutant SD' peut induire le développement rapide d'un large spectre de types cellulaires leucémiques comme des lignées thymiques, érythroïdes et myélomonocytaires (Audit, M. et al, 1999, Introduction of a cis-acting mutation in the capsidcoding gene of Moloney Murine Leukemia Virus extends its leukemogenic Properties. J. Virol., vol. 73, No. 12, 10472-10479).
Les travaux antérieurs des Inventeurs portant sur la mutagenèse dirigée du site SD' chez un virus MLV capable de réplication, pour inactiver ce site sans changer la séquence en acides aminés de gag, a montré une réduction dans le pouvoir infectieux du mutant MLV (Déjardin et al, 2000). Bien que ces résultats évoquent un rôle de SD' dans la capacité de réplication, de multiples interprétations existent à cause des multiples effets observés. Plus particulièrement, l'inactivation par mutation du site SD' réduit la formation non seulement du nouvel ARN SD' subgénomique mais aussi de l'ARNm du gène env. En outre, cette mutation active la production d'un autre ARN subgénomique, désigné SD'' utilisant un site d'épissage cryptique en amont (SD'').
Ainsi, la mise en évidence d'un épissage alternatif chez les MLV offrait plusieurs interprétations notamment en raison de la multitude des sites sousoptimaux d'épissage chez ces ARN probablement détectables par RT-PCR ciblée, comme par exemple avec le site SD").
Cet ARN SD' pouvait être le produit d'un intermédiaire d'épissage ou pire d'une erreur d'épissage. Dans tous les cas, l'inactivation du site SD' entraînait un déséquilibre de la production de l'ARN épissé canonique codant pour l'enveloppe virale (Déjardin et al, 2000, J.
Virol, 74,3709-3714).
Les travaux réalisés dans le cadre de la présente ont visé à déterminer la fonction de l'ARN SD' pendant les phases précoces et tardives du cycle de réplication d'un virus. Pour démontrer le rôle de ce transcrit subgénomique de 4,4 Kb dans le pouvoir infectieux, l'expression d'un ARN pré-épissé a été testé pour son pouvoir de complémenter en trans un virus SD' mutant de manière à rendre à ce mutant un titre infectieux normal. Il a ainsi maintenant été mis en évidence que l'ARN SD' ayant subi un épissage alternatif est incorporé dans les particules MLV, ce qui signifie que l'ARN génomique non épissé n'est pas l'unique composant ARN contenu dans le virion.
En outre, les résultats obtenus dans le cadre de la présente invention indiquent que l'ARN SD' pourrait agir comme un rétrovirus défectif puisqu'il a subi une transcription inverse et que son ADN copie a été intégrée dans le génome de l'hôte.
Enfin, l'étude de la capacité de codage de l'ARN SD' a révélé qu'il codait pour une polyprotéine Gag-intégrase susceptible d'agir comme une protéine régulatrice.
La mise en évidence de la protéine SD', sa localisation cellulaire (noyau/cytoplasme), sa présence dans les virions et la présence de signaux fonctionnels dans la séquence primaire de la protéine SD', offrent de nouvelles perspectives concernant la réplication des rétrovirus dits simples, comme MLV, qui jusqu'à la présente invention étaient caractérisés par l'absence de toute protéine régulatrice.
La présente invention a donc tout d'abord pour objet un acide nucléique isolé contenant une séquence d'acide nucléique issue d'un épissage alternatif dans la région gagpol d'un MLV (Virus Leucémogènes
Murins) et codant une protéine capable d'augmenter le pouvoir infectieux de vecteurs viraux. Plus particulièrement, ladite séquence d'acide nucléique est issue d'un épissage alternatif qui recrute un site donneur d'épissage situé dans le domaine de la capside d'un MLV et le site accepteur qui est recruté pour la production d'ARNm d'enveloppe dudit MLV. Encore plus particulièrement, ladite séquence d'acide nucléique est issue d'un épissage alternatif de la séquence nucléotidique située entre le codon CUG ou le codon AUG du gène gag d'un MLV et le codon stop du gène pol du domaine de l'intégrase d'un MLV.
Les travaux de recherche effectués par les inventeurs sur l'ARN dérivant de cet épissage leur ont permis de cloner l'ADN correspondant à l'ARN SD' et de préparer la protéine SD' sans passer par l'épissage alternatif de l'ARN génomique viral.
Un autre objet de l'invention concerne les fils de verre ensimés, en particulier sous forme de verranne, au moyen de la composition définie au paragraphe précédent, lesdits fils ayant, du fait d'un certain degré d'élasticité, une meilleure résistance à la rupture en traction ce qui autorise leur tissage à une vitesse plus élevée pour former notamment un revêtement mural du type toile à peindre.
La composition d'ensimage conforme à l'invention est constituée d'une solution qui se caractérise par le fait qu'elle contient au moins un acide gras renfermant au moins deux liaisons éthyléniques.
Dans la présente invention, on entend par composition d'ensimage une composition apte à être déposée sur des filaments de verre. et à les protéger lors de leur élaboration, en particulier en vue d'obtenir une verranne. De manière générale, une telle composition se présente sous la forme d'une solution de viscosité inférieure ou égale à 120 x 10-3 Pa. s (120 cP) et elle comprend au moins un agent lubrifiant et éventuellement d'autres additifs par exemple un agent de couplage avec le verre, un agent textile ou un tensioactif. Dans le contexte de l'invention, la composition d'ensimage est substantiellement exempte d'eau c'est- à-dire qu'elle contient moins de 5 % d'eau, de préférence moins de 1 % et mieux encore n'en contient pas. En revanche, la composition peut contenir un ou plusieurs solvants organiques susceptibles d'être mis en #uvre pour solubiliser tout ou partie des composants entrant dans la composition de l'ensimage.
L'acide gras est choisi parmi les acides gras insaturés renfermant 10 à 24 atomes de carbone, et de préférence 14 à 22 atomes de carbone. Les acides gras à chaîne linéaire sont préférés.
Les acides gras insaturés répondent avantageusement à la formule générale suivante : dans laquelle A et B représentent une chaîne hydrocarbonée, et le nombre total d'atomes de carbone dans les chaînes A et B varie de 2 à 16.
Les acides gras particulièrement préférés renferment 18 à 22 atomes de carbone et satisfont à la formule ci-dessus dans laquelle : A = -(CH2)x-, x étant un nombre entier variant de 0 à 6, de préférence égal à 0,3 ou 6, B = -(CH2)y-,y étant un nombre entier variant de 2 à 11.
A titre d'exemples, on peut citer l'acide linoléique (acide cis,cis-9,12octadécadiénoïque), l'acide linolélaïdique (acide trans,trans-9,12octadécadiénoïque), l'acide y-linolénique (acide 6,9,12-octadécatriénoïque), l'acide linolénique (acide trans,trans,trans-9,12,15-octadécatriénoïque), l'acide a-éléostéarique (acide cis,trans,trans-9,12,15-octadécatriénoïque), l'acide ss-éléostéarique (acide trans,trans,trans-9,12,15-octadécatriénoïque), l'acide cis,cis-11,14-éicosa- diénoïque, l'acide cis,cis,cis-5,8,11-éicosatriénoïque, l'acide cis,cis,cis-8,11,
14-éicosatriénoïque, l'acide cis,cis,cis-11,14,17-éicosatriénoïque, l'acide cis,cis,cis,cis-5,8,11,14,17-éicosapentaénoïque l'acide arachidonique (acide 5,8,11,14-éicosatétraénoïque), l'acide cis,cis-13,16-docosadiénoïque, l'acide cis,cis,cis-13,16,19-docosatriénoïque, l'acide cis,cis,cis,cis-7,10,13,16-docosatétraénoïque, l'acide clupanodonique (acide 4,8,12,15,19-docosapentaénoïque) l'acide cis,cis,cis,cis,cis-7,10,13,16,19-docosapentaénoïque, l'acide cis, cis,cis,cis,cis,cis-4,7,10,13,16,19-docosahexaénoïque et les mélanges de ces composés.
A titre d'exemple de tels mélanges, on peut citer les acides gras naturels, en particulier l'acide linoléique et l'acide linolénique. On préfère l'acide linoléique.
Sans être lié par une quelconque explication, on pense que les doubles liaisons de l'acide gras réagissent avec l'oxygène de l'air et forment des produits de masse moléculaire plus élevée dotés de propriétés collantes permettant de faire adhérer les filaments entre eux et donc de donner de la cohésion à la mèche.
De manière générale, la teneur en acide gras insaturé dans la composition d'ensimage est supérieure ou égale à 5 %, de préférence supérieure ou égale à 8 %. Avantageusement, elle n'excède pas 60 % en poids et de préférence 40 %. De manière particulièrement préférée, la teneur en acide gras est comprise entre 10 et 30 %.
Selon une réalisation de l'invention, la composition d'ensimage comprend en outre au moins un polymère portant une ou plusieurs fonctions réactives hydroxy, époxy et/ou amine, et plus particulièrement ayant une masse moléculaire au moins égale à 300 et de préférence inférieure à 3000.
De préférence, les polymères précités renferment également une ou plusieurs doubles liaisons. La présence d'insaturations apporte le caractère élastomérique qui permet à la verranne d'avoir une certaine élasticité et donc d'avoir une meilleure résistance à la rupture en traction.
De manière avantageuse, on utilise les polymères renfermant une ou plusieurs fonctions réactives hydroxy ou époxy, de préférence en position terminale, par exemple les poly Bd# à terminaisons hydroxyles commercialisé par Atofina, et les polymères renfermant une ou plusieurs fonctions réactives amine, de préférence en position terminale, par exemple le poly Bd# diamine commercialisé par Atofina. Toutefois, il est à noter que ce dernier polymère donne une légère coloration jaune à la verranne et qu'il est aussi plus délicat à manipuler car plus sensible au gaz carbonique de l'air que les autres polymères.
Conformément à l'invention, la teneur en polymère précité peut représenter jusqu'à 40 % en poids de la composition d'ensimage, et de préférence elle varie de 5 à 30 %, et mieux encore de 8 à 25 %.
Selon le mode de réalisation préféré de l'invention, la composition d'ensimage comprend l'association d'acide linoléique et de polybutadiène renfermant des fonctions réactives hydroxy, de préférence en position terminale.
Ainsi, on utilise des plaques de chromatographie sur lesquelles sont fixés, respectivement des ions acétyle COO- (intitulé Ac sur la figure 1) , PO43-, N03-, Cr20/-, Cl-, S04 2- FiC03-, B03-, WO42-, Mn04-, CrO42-, AsO42-, A102-.
Dans chaque essai, on introduit sur la plaque le composé de l'exemple 1, qui s'il complexe les ions, sera retenu sur la plaque. On développe ensuite les plaques quatre fois dans l'eau, en raison de la faible solubilité dans l'eau, puis on détermine le facteur de rétention Rf, qui correspond au rapport (distance parcourue par le dérivé de cyclodextrine/distance parcourue par le solvant). Plus le Rf, pour un ion donné, est faible, plus l'ion en question va se complexer avec le composé de cyclodextrine.
Les résultats obtenus sont représentés sur la figure 1.
On constate, ainsi, que la cyclodextrine préparé selon l'exemple 1, présente un fort taux de complexation pour les ions de chrome tels que les ions Cr2O72- et CrO42- et les ions manganèse Mn04-.
De ce fait, les composés de cyclodextrine selon l'invention et en particulier celui préparé selon l'exemple 1, sont particulièrement intéressants dans le domaine de la décontamination de l'environnement et dans le domaine de la décontamination humaine.
D'une manière similaire, on a réalisé des essais pour voir, si les dérivés selon l'invention
étaient aptes à complexer des cations. Des essais ont été réalisés avec les ions suivants : Na+, K+, Cs+, NH4+, Ca2+ Ba2+, Al3+, Fe3+, Co2+ Ni2+ Cu2+ Ag2+, Zn2+, Hg2+, Pb2+, La3+, Gd3+, UO22+. D'après les résultats regroupés sur la figure 2, aucun de ces cations ne se complexe efficacement avec la peranhydrocyclodextrine préparée selon l'exemple 1.
EXEMPLE 4 Préparation d'un polymère obtenu par réaction d'une per (3, 6-anhydro) - cyclomaltohexaose et de diisocyanate d'hexyle.
A 2,5 g de per(3,6anhydro)cyclomaltohexaose séché à la pompe pendant 2 heures, on ajoute 5 mL de diméthylformamide (DMF) anhydre et 0,934 mL de diisocyanate d'hexyle (2 équivalents pour 1 mmol d'ahnydro). On chauffe à 90 C sous agitation et on laisse réagir pendant une nuit. Le produit est alors additionné de méthanol (20 mL) et on laisse réagir pendant 1 heure. Par grattage, on récupère une poudre, qui est centrifugée puis séchée).
On récupère après séchage à l'air à température ambiante 3,21 g de polymère. Ce polymère est caractérisé par sa microanalyse et par RMN du solide.
EXEMPLE 5 : Préparation de complexes de polymère.
On pèse 820 mg de polymère préparé dans l'exemple 4, auquel on ajoute une solution contenant 312 mg de dichromate de potassium et 10 mL d'eau. Le produit est laissé une nuit sous agitation. Il est ensuite centrifugé et lavé avec 50 mL d'eau et
recentrifugé. Cette dernière opération est répétée quatre fois. Le produit récupéré (800 mg) est analysé par microanalyse et RMN du solide. L'on constate que le chrome est complexé sous sa forme bichromate et chromate. La microanalyse montre que un site sur deux est occupé par le chrome et que le produit ne s'oxyde pas dans le temps.
EXEMPLE COMPARATIF : Préparation de complexes à base d'inositol.
On pèse 5 g de myo-inositol puis on les sèche à la pompe à palettes pendant 2 heures. On ajoute ensuite sous agitation 40 mL de diméthylsulfoxyde (DMSO) et 4,85 mL de diisocynate d'hexyle. Le mélange réactionnel est maintenu à 100 C pendant une nuit.