INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Des particules composites préférées sont des particules multicouches comprenant un c#ur ou noyau interne formant substrat constitué par un métal, alliage ou mélange de métal recouvert au moins partiellement par une première couche en un métal, alliage de métal ou mélange de métaux ou alliage différent de celui constituant le c#ur ou noyau interne, et éventuellement par une ou plusieurs autres couches, chacune de ces couches recouvrant au moins partiellement la couche précédente et chaque couche étant constituée par un métal, alliage ou mélange de métal différent de la couche suivante (si celle-ci existe) et de la couche précédente.
Outre ledit métal ou lesdits métaux, la particule peut comprendre en outre des impuretés inévitables, et des stabilisants de toute sorte.
La particule peut aussi comprendre par exemple en outre des composés métalliques autres que des métaux tels que des oxydes de métaux.
Ainsi, dans le cas de l'aluminium, la particule peut comprendre de l'alumine A1203 dans une proportion par exemple de 10%, pour 90% de Al métal.
Le métal qui constitue en majorité des particules est choisi de préférence parmi les métaux de transitions, les métaux des terres rares et leurs alliages et mélanges.
En effet, selon l'invention, la perte de brillance, due très probablement à l'oxydation superficielle de la fine couche d'argent déposée à la surface d'une fibre kératinique est évitée grâce à la passivation, protection, stabilisation, procurée par exemple par un acide gras. Cette passivation protection, stabilisation est accrue lorsqu'on met en #uvre comme décrit plus loin des particules enrobées, comportant une enveloppe entourant un c#ur formé par la particule passivée.
La présente invention se propose de combattre et d'empêcher cette absence de sécrétion salivaire.
A cette fin, la Demanderesse a trouvé qu'il était possible de maintenir, et même d'augmenter, la sécrétion salivaire en adminis- trant à des sujets présentant des troubles de la sécrétion salivaire une préparation contenant de l'huile d'onagre (Oenothera lamarckiana L). L'huile d'onagre est administrée telle quelle ou dispersée dans un véhicule liquide ou solide de façon a ce que son ingestion ou son administration soit facilitée.
L'invention concerne donc des compositions pharmaceutiques destinées à la sphère bucco-pharyngée renfermant de l'huile d'onagre, associée ou non à des huiles végétales riches en acides gras poly-insaturés. On pourra citer à cet effet: l'huile de jojoba, - l'huile de bourrache, l'huile de noisette, l'huile de pépin de cassis ou de groseilles, l'huile de pépins de kiwis, qui chacune renferme de 10 à 30 % ou plus d'acides gras poly-30 insaturés.
La forme préférée d'administration est la présentation en capsules molles contenant de 400 à 800 mg d'huile d'onagre et de préférence 500 mg. L'huile d'onagre peut également être absorbée sur des supports solides comme une argile telle que la bentonite ou sur de la silice colloïdale comme Aérosil 200 ou Aérosil 400.
Si nécessaire, les capsules peuvent être enduites d'un revêtement gastrorésistant.
L'huile d'onagre peut également être dispersée dans un véhicule liquide additionné ou non d'agent émulsionnant comme des phospholipides d'oeuf. Ainsi, on pourra administrer l'huile d'onagre sous forme de lait, d'émulsions eau dans l'huile ou huile dans l'eau. Une telle émulsion peut être édulcorée, aromatisée ou additionnée d'agent de sapidité. Un agent édulcorant utile peut être par exemple l'acésulfame ou le sorbitol. Un agent d'aromatisation sera par exemple le baume de To- lu, le Benjoin ou la teinture de Cannelle, l'essence d'orange, de mandarine, ou de citron, de manière à conférer à cette émulsion un arôme discret mais perceptible. L'agent de sapidité pourra être la naringine, l'hespéridine.
Les émulsions pourront, en cas de besoin, être colorées et 15 les colorants d'origine naturelle tels que les flavones, l'alizarine ou le rouge de betterave, l'huile de bixine, sont préférés.
L'administration se fera à raison de 800 à 1 200 mg d'huile d'onagre par jour en une à trois administration(s). La dose optimale est de deux capsules par jour contenant chacune 500 mg d'huile d'onagre.
La durée du traitement est d'un mois environ et son efficacité est contrôlée par la mesure de la sécrétion salivaire. La mesure de la sécrétion salivaire se fera au début de l'administration puis au bout de quinze jours et enfin au terme (28 jours) de l'administration.
L'appréciation de l'efficacité du traitement se fera égale-ment par des critères subjectifs, notamment en déterminant les sensations des patients.
Les résultats obtenus montrent que, déjà, au bout de dix jours, la sécrétion salivaire est notablement augmentée. Au bout d'un 30 mois, elle peut, en moyenne, doubler passant ainsi d'une sécrétion de 1,08 ml à 2,22 ml (soit 105,55 %).
En définitive, les préparations selon l'invention sont efficaces pour combattre le syndrome de la bouche sèche.
Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toute-fois la limiter:
Capsules molles d'huile d'onagre Huile d'onagre 100 g Huile de paraffine fluide 10 g Pour 200 capsules contenant chacune 0,500 g d'huile d'onagre
Les tests de voltampérométrie sont réalisés, de façon classique, sur les films LB de nanoparticules greffées sans traitement électrochimique préalable de ces films et après saturation en 02 de la solution acide.
A titre d'exemple, la figure 4 représente les voltampérogrammes, enregistrés à une vitesse de balayage de 20 mV/s, pour deux films de nanoparticules greffées différentes, composés respectivement de nanoparticules greffées par la réaction illustrée sur la figure 2A (courbe 1) et de nanoparticules greffées
par la réaction de greffage illustrée sur la figure 2B (courbe 2). Sur cette figure, les potentiels sont exprimés en mV par rapport à une électrode standard à hydrogène (ESH).
La figure 4 montre que les activités électrochimiques des deux types de nanoparticules greffées sont extrêmement proches l'une de l'autre, la densité de courant électrique du pic de réduction se situant, pour les deux films, entre 230 et 240 A/cm2.
Le processus de réduction disparaît lorsqu'on désoxygène la solution acide par un courant d'azote.
Exemple 5 : Activité électrochimique de nanoparticules greffées vis-à-vis de la réduction de l'oxygène en milieu basique L'activité électrochimique de nanoparticules greffées vis-à-vis de la réduction de l'oxygène en milieu basique est appréciée en soumettant des films LB de nanoparticules greffées, préparés comme décrit dans l'exemple 4, à des tests de voltampérométrie cyclique que l'on réalise dans les mêmes conditions que celles de l'exemple 4, à ceci près que la solution utilisée ne contient pas de l'acide sulfurique, mais de la soude 1M.
A titre d'exemple, la figure 5 représente les voltampérogrammes, enregistrés à une vitesse de balayage de 20 mV/s, pour deux films de nanoparticules greffées différentes, composés respectivement de nanoparticules greffées par la réaction illustrée sur la figure 2C (courbe 1) et de nanoparticules greffées par la réaction illustrée sur la figure 2D (courbe 2).
Comme précédemment, les potentiels sont exprimés sur cette figure en mV par rapport à une électrode standard à hydrogène (ESH).
Au cours des premiers cycles, la densité de courant électrique du pic de réduction est similaire à celle observée en milieu H2SO4. Lorsque l'on prolonge l'expérience, cette densité de courant électrique augmente puis se stabilise aux valeurs montrées sur la figure 5.
Là également, la figure 5 montre que les activités électrochimiques des deux types de nanoparticules greffées sont extrêmement proches l'une de l'autre, la densité de courant électrique du pic de réduction se situant, pour les deux films, entre 570 et 580 A/cm2. Par ailleurs, le processus de réduction disparaît lorsqu'on désoxygène la solution basique par un courant d'azote.
Exemple 6 : Activité électrochimique de nanoparticules greffées vis-à-vis de l'oxydation de l'hydrogène en milieu acide L'activité électrochimique de nanoparticules greffées vis-à-vis de l'oxydation de l'hydrogène en milieu acide est appréciée en soumettant des films LB de nanoparticules greffées, préparés comme décrit dans l'exemple 4, à des tests de voltampérométrie cyclique que l'on réalise dans les mêmes conditions que celles de l'exemple 4, à ceci près que l'on utilise une solution acide initialement saturée en H2.
A titre d'exemple, la figure 6 représente le voltampérogramme, enregistré à une vitesse de balayage de 20 mV/s, pour un film composé de nanoparticules greffées par la réaction illustrée sur la figure 2A. Comme précédemment, les potentiels sont exprimés sur cette figure en mV par rapport à une électrode standard à hydrogène (ESH).
Exemple 7 : Stabilité de l'activité électrochimique de nanoparticules greffées La stabilité de l'activité électrochimique de nanoparticules greffées vis-à-vis de la réduction de l'oxygène en milieux acide et basique est vérifiée en soumettant des films LB de nanoparticules greffées, préparés comme décrit dans l'exemple 4, à des tests voltampérométriques qui sont réalisés dans les mêmes conditions que celles des exemples 4 et 5, mais, d'une part, en faisant varier l'âge des suspensions de nanoparticules greffées à partir desquelles sont réalisés les films, et, d'autre part, en soumettant ou non préalablement lesdits films à des cycles électrochimiques.
Ces cycles électrochimiques sont effectués à la vitesse de 50 mV/s sous atmosphère d'oxygène, entre 800 et -50 mV/ESH en milieu acide (H2SO4 1M) et entre 200 et -850 mV/ESH en milieu basique (NaOH 1M).
Le tableau 2 ci-après présente les densités de courant électrique du pic de réduction de l'oxygène enregistrées, à une vitesse de balayage de 20 mV/s, pour des films de nanoparticules greffées par la réaction illustrée sur la figure 2A.
Dans ce tableau, les densités de courant électrique présentées pour la soude sont celles observées après immersion des films pendant 30 mn dans ce milieu sans polarisation.
Dans l'exposé qui suit, la présente invention est illustrée de manière non limitative pour l'obtention d'une couche de germination de cuivre sur une couche barrière de TiN, TiN(Si) ou TaN pour l'interconnexion cuivre en micro-électronique. Il apparaîtra clairement à l'homme du métier que cette restriction ne nuit pas à la généralisation de l'invention, ni au cas de couches de germinations métalliques sur toute surface, avec si nécessaire une couche barrière conductrice ou semi-conductrice de l'électricité, ni à l'obtention de couches métalliques homogènes - et notamment conformes - ayant d'autres fonctions que la couche barrière, dans les autres domaines d'applications de la présente invention.
BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS Sur ces figures, g représente un greffage (film organique sur une surface) ; eg électrogreffé ; h l'épaisseur du film organique ; Tr (%) la transmission en % ; No (cm-1) le nombre d'onde en cm-1 ; F (Hz) la fréquence en Hertz ; Im (Q) l'impédance en Ohms ; E(eV) l'énergie en eV ; ref référence ; prot protocole ; t d trempé diazo.
- La figure 1 représente un mode de réalisation du procédé de la présente invention comprenant : une étape (a) de dépôt d'un film organique FO sur une surface S gravée d'un creux CR ( L indique la largeur de la gravure), la surface gravée comportant une couche barrière CB ; une
étape (b) d'insertion d'un précurseur d'un matériau métallique pM au sein du film organique FO ; une étape (c) de transformation du précurseur pM en ledit matériau métallique au sein dudit film organique pour constituer le film de germination (FG) selon l'invention ; et une étape (d) de remplissage du creux par ledit matériau métallique pour obtenir une couche métallique (CM) .
- Les figures 2a et 2b représentent un agrandissement schématique des étapes (b) et (c) représentées sur la figure 1 lorsque le film organique (FO) est greffé sur la surface S. Sur la figure 2a, le film organique est déjà greffé sur la surface (les points noirs indiquent les points de greffage du film sur la surface) et le précurseur du matériau métallique (pM) est inséré au sein de ce film organique. La profondeur de pénétration des précurseurs au sein du film est ici arbitrairement représentée comme totale, c'est-à-dire que les précurseurs sont enfouis dans la film jusqu'à toucher la surface. En fait, le remplissage peut n'être que partiel (si par exemple le solvant de remplissage n'est qu'un gonflant médiocre du film électro-greffé). Sur la figure 2b, le précurseur du matériau métallique a été transformé en ledit matériau métallique au sein dudit film organique pour former le film de germination FG de la présente invention sur la surface S. De la même manière, la proportion effective du volume du film électro-greffée finalement occupée par la couche métallique dépendra de la quantité d'ions précurseurs qui ont été accrochés et/ou insérés dans ledit film.
Les figures 3a et 3b représentent un agrandissement schématique des étapes (b) et (c) représentées sur la figure 1 lorsque le film organique (FO) est déposé sur la surface S. Sur la figure 3a, le film organique est déjà déposé sur la surface et le précurseur du matériau métallique (pM) est inséré au sein de ce film organique. Sur la figure 3b, le précurseur du matériau métallique a été transformé en ledit matériau métallique au sein dudit film organique pour former le film de germination FG de la présente invention sur la surface S. La profondeur de pénétration effective des précurseurs dans le film est ici arbitraitement fixée à l'épaisseur du film déposé, mais les situations intermédiaires où la pénétration n'est que partielle (voire même lorsqu'il n'y a d'accrochage qu'en surface du film) sont également acceptables pour la présente invention, puisqu'elles exploitent de même la conformité du film organique.
- La figure 4 représente le détail moléculaire d'un mode de réalisation de la présente invention suivant le procédé représenté sur la figure 2 (film organique greffé). L'épaisseur (h) du film organique (FO) greffé est de 100nm, la surface est une surface d'inox 316L, g indique les points de greffage des molécules consituant le film organique. Le précurseur du matériau métallique (pM) est ici sous la forme d'ions du cuivre, pour obtenir un film de germination de cuivre. Le film étant un film de P4VP, il pourra être intégralement rempli d'ions cuivriques en milieu aqueux, et incomplètement en milieu organique (acétonitrile...) ou en milieu aqueux très acide.
Les figures 5a, 5b et 5c représentent des spectres infrarouges (IRRAS) de films de P4VP ayant une épaisseur de 100 nm sur nickel avant (5a) et après (5b) trempage 10 minutes dans une solution aqueuse à 5 g/1 en sulfate de cuivre. Le dédoublement du pic à 1617 cm-1 est caractéristique de la formation de complexes cuivre/pyridine prouvant la pénétration de la solution dans le film. La figure 5c représente un spectre après traitement du film en milieu acide.
- Les figures 6a, 6b et 6c représentent des spectres IRRAS d'une lame obtenue respectivement selon le même protocole que celui de la figures 5a (Figure 6a), chargée en ions cuivriques selon le même protocole que celui de la figure 5b (Figure 6b), puis d'une lame selon la figure 6b traitée pendant 5 minutes dans une solution d'hydroxyde d'ammonium à 9 mol/1 (Figure 6c).
- La figure 7 est une photographie de trois lames obtenues par fixation de cuivre sur une surface d'inox 316L grâce à un film organique constitué de P4VP électro-greffé conformément au procédé de la présente invention. Le cuivre déposé à partir de son précurseur dans le film est obtenu par une électrodéposition potentiostatique de durée variable. De gauche à droite, on observe le résultat d'une électrodéposition pendant 50 (lame (a)), 120 (lame (b)) et 240 (lame (c)) secondes, respectivement.
- La figure 8 rend compte des spectres de photoélectrons X (XPS) des lames de la Figure 6, dans la région des orbitales 2p du cuivre. Le spectre (a) est celui obtenu après trempage des lames d'inox recouvertes du film de P4VP électro-greffé dans la
solution d'ions cuivriques (voir exemple n 1) ; les spectres (b), (c) et (d) sont ceux obtenus après électrodéposition du précurseur du cuivre en cuivre dans les films de P4VP, montrant la conversion progressive des ions cuivriques du film en atomes de cuivre.
- Les figures 9a et 9b sont des spectres infrarouges de lames obtenues notamment lors des différentes étapes du procédé de l'invention. Pour obtenir ces spectres, un film de P4VP est déposé sur une lame (surface) d'or par centrifugation. Les spectres (a) et (d) correspondent au film P4VP vierge ; les spectres (b) et (e) ) au film P4VP dans lequel on a inséré un précurseur de cuivre par trempage de la lame dans une solution concentrée en cuivre (+CuS04) ; le spectre (c) correspond au film P4VP dans lequel on a inséré comme précédemment puis transformé le précurseur du cuivre en cuivre et rincé le film de germination ainsi obtenu (m+r) ; le spectre (f) correspond au film P4VP dans lequel on a inséré le précurseur de cuivre comme précédemment puis rincé (r), la transformation du précurseur n'ayant pas été réalisée.
- La figure 10 représente un graphique de mesures d'impédances (Im), en Ohms, dans la gamme de fréquences comprise entre 0,5 Hz et 100 kHz obtenues entre deux points d'une lame de silicium de 2 x 10 cm, recouverte par dépôt chimique en phase vapeur (CVD, Chemical Vapor Deposition, en anglais) d'une couche de TiN d'épaisseur environ de 20 nm. Un premier contact électrique est établi à l'aide d'une pince crocodile à une extrémité de la lame et un second contact est pris
de la même façon à des distances croissantes du premier, de 5 à 45 mm, avec une précision de l'ordre du mm.
- Les figures 11 et 12 représentent des spectres d'analyse de surface en spectroscopie de photoélectrons X (XPS) effectués sur une lame obtenue par greffage d'un film organique sur TiN par électroréduction de sels de diazonium. En pointillés, TiN seul, et en trait continu, TiN greffé diazo (TiN g diazo) .
Le choix des séquences des oligonucléotides immobilisés sur la surface solide est d'une grande importance à l'obtention d'une bonne distinction entre les hybrides avec mismatch et sans mismatch. Ainsi, un des paramètres importants réside dans la conception des sondes de manière à éviter la probabilité de formation de structures intramoléculaires secondaires ainsi que la probabilité de formation de complexes intermoléculaires par les sondes immobilisées, car ces structures diminuent de façon importante l'efficacité d'hybridation de la cible sur la sonde, ainsi que la distinction entre les hybrides avec ou sans mismatch. Ainsi, les exigences relatives aux caractéristiques de l'oligonucléotides sont atteintes par le choix de la séquence nucléique de l'oligonucléotides, notamment de sa longueur et de sa composition en base, et/ou par l'adjonction de nucléotides additionnels pour modifier le Tm ou la possibilité de formation de structures intramoléculaires et de complexes intermoléculaires. Ces exigences difficiles à satisfaire justifient l'activité inventive de la présente invention.
La puce CFTR selon l'invention revêtue de paires de sondes oligonucléotidiques, est caractérisée en ce que lesdites sondes oligonucléotidiques sont déposées sous la forme d'emplacements ou de spots dont le diamètre moyen est compris entre 20 m et 500 m, de préférence entre 50 m et 200 m.
La distance moyenne entre le centre de chacun des emplacements de sondes oligonucléotidiques est variable et dépend de la puce, mais ils sont définis de sorte à ne pas affecter les réactions d'hybridation sur deux emplacements voisins. Néanmoins, de préférence cette distance est comprise entre 50 m et 80 m, entre 1 000 m et 2 500 m, ou entre 100 m et 500 pm.Au niveau de chaque emplacement, de préférence de multiples copies d'un même oligonucléotide sont déposées. Ainsi, chaque emplacement comprend de préférence au moins 1, au moins 2, ou de façon fréquente au moins 16, d'un même oligonucléotide.
Le nombre d'emplacements sur la puce selon l'invention est variable et dépend du nombre de paires d'oligonucléotides déposées sur la surface solide. De préférence, il s'agit d'un réseau moyenne densité, c'est-à-dire avec un nombre d'emplacements restreints. Ainsi, le nombre desdits emplacements est d'au moins 2 par cm2, d'au moins 4 par cm2, d'au moins 6 par cm2, d'au moins 8 par cm2, d'au moins 10 par cm2, d'au moins 50 par cm2, d'au moins 100 par cm2, d'au moins 500 par cm2, d'au moins 1000 par cm2, d'au moins 10 000 par cm2, d'au moins 50 000 par cm2, d'au moins 100 000 parent.
Le support solide de la puce CFTR selon l'invention est choisi parmi les supports solides en verre, en plastique, en Nylon, en Kevlar, en silicone, en silicium ou en polyoses. De préférence, le support solide est une lame de verre, de manière plus préférée une lame de verre de microscope.
De préférence il s'agit d'une lame fonctionnalisée avec un aldéhyde.
A titre d'exemple de lame de verre 2D disponibles dans le commerce La puce selon l'invention est de préférence choisie parmi le type 2D microréseau ou 3D-micro-réseau. Selon un premier mode de réalisation il s'agit de puce 2D dont les sondes sont fixées de préférence par une chimie amino- et aldéhyde selon les méthodes connues de l'homme de l'art. De l'ADN non modifié et de l'ADN amino-modifié peuvent ainsi respectivement hybridés sur ces substrats par liaison covalente.
On peut citer les lames de type substrat SuperAldehyde pour 'immobilisation d'ADN amino-modifiée ou de type substrat SuperAmine pour l'immobilisation d'ADN non modifié, (par exemple les lames TeleChem Array It - marque déposée).
Le principe général de l'immobilisation de l'ADN amino-modifié sur lame fonctionnalisée avec un aldéhyde du commerce est illustré sur la figure 5 Les figures 6 et 7 illustrent l'effet de modification du protocole, de manière à réaliser un couplage de l'AND avec une surface de
SuperAldehyde sous haute humidité (humidité dans une boîte de plastique fermée d'un volume d'environ 700 cm3 remplie par un demi-volume d'eau).
Cette modification permet une augmentation de l'efficacité d'immobilisation et du ratio signal/bruit.
Selon un second mode de réalisation il s'agit de puce 3D à base d'hydrogel, telles que les 3D-link activated slidesTM (Motorola) qui présentent l'avantage (i) d'une plus grande efficacité d'immobilisation des sondes, et ainsi une meilleure intensité du signal d'hybridation ; (ii) d'une meilleure distinction entre les hybrides avec ou sans mismatches (Livshits et Mirzabekov, 1996, Theoretical analysis of the kinetics of DNA hybridization with gel-immobilized oligonucleotides. Biophys. J. Nov. ; 71 (5) 2795-2801).
De préférence les oligonucléotides de la puce CFTR décrits cidessus sont déposés et liés à la surface solide sous la forme d'ADN monobrin par l'une des extrémités de l'oligonucléotides. De préférence il s'agit de l'extrémité 3'.
Mise en oeuvre de la puce CFTR Procédure Matériels et méthodes : conditions d'hybridation Hybridation d'olégonucléotides et puce Un échantillon réalisé à partir d'un mélange de : # oligonucléotides non mutés ( wild type ou wt ), marqués avec un fluorophore Cy3, et # oligonucléotides mutés ( mutated ou mut ), marqués avec un fluorophore Cy5 a été hybridé sur une puce : AAATATCATCTTTGGTGTTTCCTA-Cy3 (AF508-wt)
AAAATATCATTGGTGTTTCCTATG-Cy5 (AF508-mut) CATTCTGTTCTCAGTTTTCCT-Cy3 (Q493X-wt) CATTCTGTTCTTAGTTTTCCT-Cy5 (Q493X-mut) AATATACTTGGAGAAGGT-Cy3 (G542X-wt) ACCTTCTCAAAGTATATT-Cy5 (G542X-mut) AGGTCAACGAGCAAGAA-Cy3 (R552X-wt) AGGTCAATGAGCAAGAA-Cy5 (R552X -mut) TGAGTGGAGGTCAACGA-Cy3 (G551 D-wt) TGAGTGGAGATCAACGA-Cy5 (G551 D-mut) La figure 8 montre les images d'hybridation correspondent à l'hybridation des oligonucléotides AF508-wt, AF508-mut, Q493-wt et Q493X-mut sur la puce.
On observe une discrimination match/mismatch pour toutes les mutations.
d'au moins environ 180 nucléotides, et notamment d'au moins environ 480 nucléotides contigus dans ladite séquence, - ou toute séquence nucléotidique complémentaire des séquences ou fragments susmentionnés, - ou toute séquence nucléotidique susceptible d'hybrider dans des conditions stringentes avec la séquence complémentaire d'une des séquences ou d'un des fragments susmentionnés.