INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les messages ainsi engendrés de façon automatique sont susceptibles de diffusion par synthèse vocale via un programme radio FM ou autre, ou bien encore via tout mode audio (serveur téléphonique, réseau interne, site Internet, etc), ou sous forme écrite via tout mode de diffusion électronique (messages Internet, téléphoniques), par panneaux lumineux d'information, par texte radio Traffic Message Channet"ou RDS Radio Data System", etc.
1. LA PRESENTE INVENTION CONCERNE UNE MACHINE MODULAIRE, DESTINEE A RECHAUFFER ET A SERVIR DES ALIMENTS SURGELES OU FRAIS (PLATS CUISINES, SALADES, PIZZAS, ETC.) D'UNE FA CON ENTIEREME] VT A UTOMA TIQUE.
5. CETTE INVENTION PERMET : SOIT DE RECHA UFFER DES PLATS DANS UN LAPS DE TEMPS TRES COURT, PARTIR D'UN MODULE DE BASE (MODULE STANDARD) INCLUANT LE MODULE DE STOCKAGE COMPORTANT LE SYSTEME DE . DrBnOETDE rRFERrDEPLrS' RECM (/FFER.
LE MODULE CENTRAL (MODULE DE CONTROLE) COMPORTANT LE SYSTEME INFORMA TIQUE LECRAN DESTINE A VISUALISER LES PLATS A COMMANDER, LE OU LES SYSTEMES DE PAYMENT ET LE FOUR.
15. LE MODULE DE DISTRIBUTION DES COUVERTS.-DK 1000 PP SOIT DE SERVIR DES PLATS FROIDS A PARTIR DE MODULES COMPLEMENTAIRES VENANT SE VERROUILLER ET SE CONNECTER A MODULE DE BASE.
LA TEMPERATURE INTERNE DES DIFFERENTS MODULES PEUT 20. VARIER DE -250 A + 40.
CETTE INVENTION EST DONC CONCUE A PARTIR DES ELEMENTS SUIVANTS : Il LES MODULES III LE FO tJR 25. III/ LE SYSTEME DE DISTRIBUTION ET DE TRANSFERT DES PLATS IVILE DISTRIBUTEUR DE COUVERTS TOUS LES MOUVEMENTS SONT GERES PAR UN LOGICIEL ET UNE CARTE INTERFACE DONT LE COPYRIGHT APPARTIENT A LA SOCIETY DEPOSITAIRE DU BREVET.
30. LES DESSAVESEI/LUSTRENT LA PARTICUA/ 'E DE CETTE LVVEVTIO, V
1. I/ LES MODULES : SCHEMA N J LES MODULES COMPOSANT CETTE INVENTIION PEUVENT VARIER DE 1 A 6. DESSIN NO 1 TER.
5. 1 MODULE STANDARD DK 4000 NFN + DK 2000 EL, DESSIN N'i BIS COMPOSE DE DEUX PARTIES NON DISSOCIABLES- LE MODULE DE STOCKAGE-DK 4000 NFN-COMPORTANT LE SYSTEME DE DISTRIBUTION ET DE TRANSFERT DES PLATS A RECHAUFFER 10. CE E EST DIVISE EN DEUX PARTIES : LA PARTIE HAUTE QUI EST LA PLUS SPACIEUSE EST UN TPEE/GETEE/COGEETE ET"CTYEAT EE BARQUETTES. CETTE PARTIE DUMODULE PEUTETRE UTILISEE EN TANT QUE CONGELATEUR TYPE NFN QUI PERMET DE 15. STOCKER DES PLATS SURGELES OU EN TANT QUE REFRIGERATEUR TYPE NFP POUR STOCKER DES PLATS A UNE TEMPERATURE DE OO/+4OC.
puis rincée pendant 30 secondes. La mèche essorée est laissée à l'air libre jusqu'à ce qu'elle soit complètement sèche.
La force moyenne de mouillabilité sur 10 cheveux et la section des cheveux analysés permettent d'obtenir l'angle de contact du cheveu sur l'eau, selon la formule : F = P*#lv*cos# Où F est la force de mouillabilité exprimée en Newton, P le périmètre du cheveu en mètre, #lv la tension interfaciale liquide/vapeur d'eau en J/m2 et # l' angle de contact.
La silicone aminée de formule (I), (II) ou (III) est présente dans la composition en une quantité allant de préférence de 0,1 à 10%, et de préférence de 0,5 à 5% en poids du poids total de la composition.
Un cas particulier de polymères associatifs sont des polymères amphiphiles, c'est-à-dire des polymères comportant une ou plusieurs parties hydrophiles qui les rendent solubles dans l'eau et une ou plusieurs zones hydrophobes (comprenant au moins une chaîne grasse) par lesquelles les polymères interagissent et se rassemblent entre eux ou avec d'autres molécules.
Les polymères associatifs selon l'invention peuvent être choisis parmi les polymères associatifs comportant au moins une chaîne grasse.
La chaîne grasse comporte de préférence de 8 à 30 atomes de carbone, et encore plus préférentiellement de 10 à 30 atomes de carbone.
Parmi les polymères associatifs comportant au moins une chaîne grasse et de type anionique, on peut citer : -(I) ceux comportant au moins un motif hydrophile, et au moins un motif éther d'allyle à chaîne grasse, plus particulièrement ceux dont le motif hydrophile est constitué par un monomère anionique insaturé éthylénique, plus particulièrement encore par un acide carboxylique vinylique et tout particulièrement par un acide acrylique ou un acide méthacrylique ou les mélanges de ceux ci, et dont le motif éther d'allyle à chaîne grasse correspond au monomère de formule (I) suivante : CH2 = C R' CH2 O Bn R (I) dans laquelle R' désigne H ou CH3, B désigne le radical éthylèneoxy, n est nul ou désigne un entier allant de 1 à 100, R désigne un radical hydrocarboné choisi parmi les radicaux alkyl, arylalkyle, aryle, alkylaryle, cycloalkyle, comprenant de 8 à 30 atomes de carbone, de préférence 10 à 24, et plus particulièrement encore de 12 à 18 atomes de carbone. Un motif de formule (I) plus particulièrement préféré est un motif dans lequel R' désigne H, n est égal à 10, et R désigne un radical stéaryl (C18).
Parmi ces polymères associatifs anioniques à chaîne grasse, on préfère particulièrement selon l'invention, les polymères formés à partir de 20 à 60% en poids d'acide acrylique et/ou d'acide méthacrylique, de 5 à 60% en poids de (méth) acrylates d'alkyles inférieurs, de 2 à 50% en poids d'éther d'allyl à chaîne grasse de formule (I), et de 0 à 1% en poids d'un agent réticulant qui est un monomère insaturé polyéthylénique copolymérisable bien connu, comme le phtalate de diallyle, le (méth) acrylate d'allyl, le divinylbenzène, le diméthacrylate de (poly) éthylèneglycol, et le méthylène-bis-acrylamide.
Parmi ces derniers, on préfère tout particulièrement les terpolymères réticulés d' acide méthacrylique, d'acrylate d'éthyle, de polyéthylèneglycol (10 OE) éther d'alcool stéarylique (Steareth 10), notamment ceux vendus par la société ALLIED COLLOIDS sous les dénominations SALCARE SC 80 et SALCARE SC90 qui sont des émulsions aqueuses à 30% d'un terpolymère réticulé d'acide méthacrylique, d'acrylate d'éthyle et de steareth-10-allyl éther (40/50/10).
A titre d'exemples de polyéthers polyuréthanes non-ioniques à chaîne grasse utilisables dans l'invention, on peut citer le Ser-ad FX 1100 de la société SERVO DELDEN qui est un copolymère dénommé sous la désignation I.N.C.I. européenne et américaine "Steareth-1 00/PEG-136/H.M.D.I. Copolymer".
(i) Les esters d'acides carboxyliques insaturés et d'alcools gras sont choisis par exemple parmi les éthacrylates, méthacrylates et/ou acrylates d'alkyles en C10-30. de préférence en C12-22. Ils englobent par exemple l'acrylate de lauryle, l'acrylate de stéaryle, l'acrylate de décyle, l'acrylate d'isodécyle, l'acrylate de dodécyle, et les méthacrylates correspondants, à savoir le méthacrylate de lauryle, le méthacrylate de stéaryle, le méthacrylate de décyle, le méthacrylate d'isodécyle, et le méthacrylate de dodécyle.
(ii) Les éthers allyliques d'alcools gras formant les motifs hydrophobes des polymères amphiphiles anioniques de la présente invention correspondent à la formule (I) suivante : CH2 = C R' CH2 O Bn R (I) dans laquelle R' désigne H ou CH3, B désigne le radical éthylèneoxy, n est nul ou désigne un entier allant de 1 à 100, R désigne un radical hydrocarboné choisi parmi les radicaux alkyle, arylalkyle, aryle, alkylaryle, cycloalkyle, comportant de 8 à 30 atomes de carbone, de préférence 10 à 24, et plus particulièrement encore de 12 à 18 atomes de
carbone. Un motif de formule (1) plus particulièrement préféré est un motif dans lequel R' désigne H, n est égal à 10, et R désigne un radical stéaryle(C18).
atagaatatt cttcagccgc tctgagcatc cattttaagt ttcttctacc tggagtgata gtagtcgcat tagtgccatc agcaggaccg gttccgccac caatcatggt tgttacaccg cttgcaaaag ctgtagggat ttgttggggt gaaatgaagt ggatgtgtgt gtcaatacca ccagccgtta cgattaagcc ttcaccagct agcgcttcag tagcaggacc cacgctaaga ttgtttttaa cgccatcttg catgtctttg ttaccgcctt taccaatgcc agcgattttg ccgtctttaa taccaatatc cgctttataa ataccggtgt aatccacgat taaagcgtta gtgatgatca aatccagttc ttctttgcta gggttgttgg attggctcat gccttctctt agggttttac cgccaccgaa tttaagctct tcgccataaa tggtgtagtc atgttctact tcagcgatca aatctgtatc gcccaatctc actttatcgc ctgtggtagg gccatacata gaaacatatt cttttctgct aatctttttc at Pour transformer la souche Bacillus subtilis CU1 selon l'invention avec le gène ureB, le gène ureB d'une souche d'Helicobacter pylori productrice d'uréase a d'abord été amplifié par la technique PCR (Polymerase Chain Reaction) bien connue de l'homme du métier en utilisant les amorces ureB dir et ureB rev ayant les séquences SEQ ID N 2 et SEQ ID N 3, définies ci-après.
La séquence de l'amorce ureB dir est la séquence SEQ ID N 2 : 5' - ggggcgtcgacatgaaaaagattagcaga - 3' La séquence de l'amorce ureB rev est la séquence SEQ ID N 3 : 5' - ggggcgtcgactcactttattggctggtt - 3' Les amorces ureB dir et ureB rev ci-dessus ont été choisies sur la base de la séquence du gène ureB de H. pylori décrite par LABIGNE et al. 1991 (J. Bactériol. 173 : 1920-1931), à savoir la souche H. pylori déposée à l'ATCC sous le n 700824.
Le gène ureB ainsi amplifié est ensuite cloné dans un plasmide approprié, lequel sert à transformer de manière classique la souche Bacillus subtilis CU1.
Le plasmide qui convient aux fins de l'invention doit être un plasmide capable de se répliquer chez B. subtilis.
Un exemple de plasmide approprié aux fins de l'invention est le plasmide pPLSP, qui est dérivé du plasmide pPL 608 (ATCC 37108). Le plasmide pPLSP contient le gène de résistance à la kanamycine (Kmr), le promoteur et le peptide signal de l'a-amylase de B, amyloliquiefaciens.
La carte de restriction de ce plasmide est représentée sur la figure 1 sur laquelle : PS = peptide signal ; SC2 = site de clivage du peptide signal ; Pamy = promoteur de l'a-amylase de B. amyloquefaciens
ORi = origine de B. subtilis La souche recombinante CUreI peut être utilisée comme vaccin thérapeutique pour lutter contre les infections par Helicobacter pylori.
Ainsi, l'invention a également pour objet le vaccin constitué de la souche CUreI définie ci-dessus.
L'invention va être maintenant décrite plus en détail en référence aux exemples et figures ci-après.
I. Matériels et méthodes A- Souches bactériennes On a fait pousser des souches de Bacillus utilisées sur milieu Mueller Hinton (BioMérieux, Marcy de l'Etoile, France) en aérobiose à 30 C pendant 24 h. Les bactéries ont été récoltées par centrifugation (5000 x g, 10 min) et lavées trois fois avec de l'eau physiologique stérile (NaCI, 0. 15 M). Un dénombrement bactérien a ensuite été effectué. On a fait pousser Escherichia coli sur le milieu Luria et Bertani [Peptone trypsique : 10g/1, Extrait de levure : 5 g/1, NaCI : 5 g/], en aérobiose à 37 C pendant 18h.
B - Plasmides Le plasmide pPLPS dérive du plasmide pPL 608 (ATCC 37108). Ce plasmide contient le gène de résistance à la kanamicine (Kmr), le promoteur et le peptide signal du gène de l'a-amylase de B. amyloliquiefaciens, après lequel se trouve le site de clonage Sali.
C - Amplification du gène ures par PCR La technique de PCR repose sur la spécificité de l'hybridation entre les amorces oligonucléotidiques et leurs séquences cibles sur l'ADN matriciel. Les séquences nucléotidiques des amorces utilisées sont les suivantes : UreB dir : ID N 2 5' - ggggcgtcgacatgaaaaagattagcaga - 3' UreB rev : SEQ ID N 3 5' - ggggcgtcgactcactttattggctggtt - 3' En gras est représenté le site Sali dans la séquence de l'amorce.
Les amorces UreB dir et UreB rev ci-dessus ont été choisies sur la base de la séquence du gène ureB de H. pylori SS1 décrite par Labigne et al. 1991. (J. Bacteriol. 173 : 1920-1031).
D - Purification, digestion et clonage de produits d'amplification.
Purification Après PCR, les produits d'amplification ont été purifiés sur les colonnes du kit QIAquick PCR Purification (Qiagen), selon les recommandations du fournisseur.
Digestion enzymatique Les enzymes de restriction utilisées au cours du clonage du gène ureB ont été fournies par Promega. Le plasmide pPLPS, ainsi que les fragments amplifiés du gène ureB ont été digérés par l'endonucléase Sali selon le protocole proposé par le fournisseur. 25 l du mélange réactionnel contiennent : 10 000 U de Sa! I, 2. 5 l de tampon 10X de l'enzyme, 1 g de l'ADN approprié et de l'eau MilliQ pour ajuster à un volume final de 25 l. La digestion a été réalisée pendant 3 h à 37 C, L'ADN digéré a été analysé sur gel d'agarose. Ensuite les produits de digestion ont subi une précipitation avec 2 volumes d'éthanol et 1/10 de volume d'acétate de sodium 3M (pH 4,8).
L'ester d'acide gras est de préférence choisi parmi les monoesters, diesters et triesters issus de la réaction de monoacides ou
diacides linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, comportant de 8 à 30 atomes de carbone, éventuellement hydroxylés, avec des monoalcools ou des polyols saturés ou insaturés, linéaires ramifiés ou cycliques, comportant de 2 à 100 atomes de carbone et de 1 à 30 groupements hydroxyle.
Les acides considérés sont par exemple l'acide stéarique, l'acide palmitique, l'acide laurique, l'acide oléique, l'acide myristique.
Les monoalcools ou polyols considérés sont par exemple l'éthanol, l'isopropanol, l'isooctanol, le dodécanol, l'alcool stéarylique, l'éthylène glycol, le propylène glycol, le glycérol, les polyéthylène glycols, les polyproprylène glycols, le glucose, le méthyl glucose, le sorbitol, l'anhydride de sorbitol, le pentaérythrytol.
Le monoalcool ou le polyol peut être éventuellement oxyalkyléné et de préférence oxyéthyléné.
A titre d'exemples d'esters pouvant être mis en #uvre selon l'invention on peut citer le myristate d'isopropyle, le stéarate de stéaryle, les mono ou distéarate d'éthylène glycol, les mono ou distéarate de polyéthylène glycols, le monopalmitate de sorbitane, l'isostérate de glycéryl, le dipelargonate de propylèneglycol, le palmitate de 2-éhylhexyle, le tristéarate de sorbitane, le sébacate de di (2éthylhexyle), le trihydroxystérate de glycéryle.
L'oxyde métallique peut être choisi parmi les oxydes d'aluminium, de zinc, de magnésium et de titane.
L'oxyde métallique est de préférence choisi parmi les oxydes de titane et les composés mixte oxyde de titane mica.
Les oxydes de titane peuvent être enrobés ou non enrobés.
Parmi les oxydes de titane non enrobés, on peut citer notamment les produits suivants : - en poudre :
BAYERTITAN et DIOXYDE DE TITANE A proposés par la société BAYER ; 70110 CARDRE UF TI02 proposé par la société CARDRE ; - en dispersion aqueuse à 10%, 20% ou 30% et granulométrie de 15, 20 ou 60 nanomètres : SUNVEIL 1010,1020, 1030,2020, 2030,6010, 6030 proposés par la société CATALYSTS & CHEMICALS ; MICRO TITANIUM DIOXIDE- USP GRADE proposé par la société COLOR TECHNIQUES.
Parmi les oxydes de titane enrobés, on peut citer notamment les produits suivants : - ceux enrobés de polydiméthylsiloxane (CARDRE ULTRAFINE TITANIUM DIOXIDE AS proposé par la société CARDRE) ; - ceux enrobés de polyméthylhydrogénosiloxane (oxyde de titane non traité enrobé de polyméthylhydrogénosiloxane vendu sous la dénomination commerciale Cosmetic White SA-C47-051-10 par la société MYOSHI) ; - ceux enrobés de perfluoro polyméthylisopropyléther (CARDRE MICA FHC 70173 OU 70170 CARDRE UF TI02 FHC proposés par la société CARDRE) ; - ceux enrobés de silice (SPHERITAN AB proposé par la société CATALYSTS & CHEMICALS ; - ceux enrobés de polyester (EXPERIMENTAL DESOTO BEADS proposé par la société DESOTO) ; - ceux enrobés de chitosane (CT-2 TITANIUM DIOXID MT-500SA proposé par la société DAINIHON KASEI) ; - ceux enrobés de N-lauroyl-L-lysine (LL-5 TITANIUM DIOXIDE A 100 ou bien LL-3 TITANIUM DIOXIDE MT-100SA, ou bien LL-5 TITANIUM DIOXIDE CR-50, ou bien LL-5 TITANIUM DIOXIDE MT-100SA, ou bien LL-5 TITANIUM DIOXIDE MT-500SA, proposés par la société DIANIHON KASEI).
L'ester d'acide gras et/ou l'oxyde métallique est présent dans la composition dans des proportions en poids comprises de préférence
entre 0,2 et 10%, et encore de préférence entre 0,5 et 5% du poids total de la composition.
Les groupements P et P', comprenant une fonction amine peuvent représenter au moins l'une des formules suivantes : dans lesquelles : R5 et R7 ont les mêmes significations que R2 défini précédemment; R6, Rg et R9 ont les mêmes significations que R1 et R3 définis précédemment ; R10 représente un groupe alkylène, linéaire ou ramifié, éventuellement insaturé et pouvant contenir un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, 0, S et P,
et A- est un contre-ion physiologiquement acceptable.
Lorsqu'il s'agit, conformément à un mode de réalisation préféré de l'invention, d'un polymère hydrophile, on peut citer à titre d'exemple les polyéthers, les polyesters sulfonés, les polyamides sulfonés, ou un mélange de ces polymères. A titre préférentiel, le composé hydrophile est un polyéther et notamment un poly(oxyde d'éthylène) ou poly(oxyde de propylène).
Les polyuréthanes associatifs cationiques de formule (la) selon l'invention sont formés à partir de diisocyanates et de différents composés possédant des fonctions à hydrogène labile. Les fonctions à hydrogène labile peuvent être des fonctions alcool, amine primaire ou secondaire ou thiol donnant, après réaction avec les fonctions diisocyanate, respectivement des polyuréthanes, des polyurées et des polythiourées. Le terme "polyuréthanes" de la présente invention englobe ces trois types de polymères à savoir les polyuréthanes proprement dits, les polyurées et les polythiourées ainsi que des copolymères de ceux-ci.
Un premier type de composés entrant dans la préparation du polyuréthane de formule (la) est un composé comportant au moins un motif à fonction amine. Ce composé peut être multifonctionnel, mais préférentiellement le composé est difonctionnel, c'est-à-dire que selon un mode de réalisation préférentiel, ce composé comporte deux atomes d'hydrogène labile portés par exemple par une fonction hydroxyle,
amine primaire, amine secondaire ou thiol. On peut également utiliser un mélange de composés multifonctionnels et difonctionnels dans lequel le pourcentage de composés multifonctionnels est faible.
A titre d'exemple de composé à fonction amine, on peut citer la Nméthyldiéthanolamine, la N-tert-butyl-diéthanolamine, la Nsulfoéthyldiéthanolamine.
A titre d'exemple, ce composé peut être un alcool gras, tel que notamment l'alcool stéarylique, l'alcool dodécylique, l'alcool décylique. Lorsque ce composé comporte une chaîne polymérique, il peut s'agir par exemple du polybutadiène hydrogéné ~-hydroxyle.
On peut citer à titre d'exemples de polymères préférés : -les polymères réticulés d'acide acrylique et de méthacrylate d'alkyle en C10-30, tels que le CARBOPOL ETD-2020 commercialisé par la société GOODRICH; - les polymères réticulés d'acide acrylique et d'acrylate d'alkyle en Co-30' tels que les polymères commercialisés sous les dénominations CARBOPOL 1382, PEMULEN TR1, PEMULEN TR2 par la société GOODRICH; -le terpolymère acide méthacrylique/acrylate d'éthyle/méthacrylate de stéaryle oxyéthyléné (55/35/10); - le terpolymère acide (méth)acrylique/acrylate d'éthyle/méthacrylate de béhényle oxyéthyléné 25 OE, et - le terpolymère réticulé acide méthacrylique/acrylate d'éthyle/stéareth-1 0 allyl éther.
On peut notamment citer plus particulièrement parmi eux : le copolymère acide acrylamido-2-méthyl-2-propane-sulfonique(AMPS)/n- dodécylacrylamide neutralisé par la soude, le copolymère réticulé par du méthylène-bis- acrylamide constitué de 75% en poids de motifs AMPS neutralisés par NH3 et de 25% en poids de motifs acrylate de GENAPOL T-250, le copolymère réticulé par du méthacrylate d'allyle constitué de 90% en poids de motifs AMPS neutralisés par NH3 et de 10% en
poids de motifs méthacrylate de GENAPOL T-250, ou le copolymère réticulé par du méthacrylate d'allyle constitué de 80% en poids de motifs AMPS neutralisés par NH3 et de 20% en poids de motifs méthacrylate de GENAPOL T-250.
Dans les pâtes décolorantes selon l'invention, le ou les polymères amphiphiles non ioniques et/ou anioniques comportant au moins une chaîne grasse peuvent être présents à une concentration allant d'environ 0,01 à 30% et de préférence d'environ 0,01 à 15% par rapport au poids total de la poudre décolorante.
Les pâtes décolorantes selon l'invention peuvent comprendre en outre au moins un agent gélifiant choisi dans le groupe formé par les silices pyrogénées à caractère hydrophile ou hydrophobe et les polymères blocs comprenant au moins un motif alkylène ou oxyde d'alkylène.
Parmi les silices pyrogénées à caractère hydrophile utilisables selon la présente invention, on peut citer notamment celles vendues par la société DEGUSSA HÜLS sous les dénominations commerciales AEROSIL 90,130, 150,200, 300 et 380.
Parmi les polymères blocs comprenant au moins un motif alkylène ou oxyde d'alkylène, on peut citer notamment les copolymères di-, tri-, multi- ou radial blocs composés de segments de type styrène monomère et de segments de type monomère ou comonomère thermoplastique décrits dans le brevet US-5 221 534.
De tels mélanges sont par exemple vendus par la société PENRECO sous les dénominations commerciales VERSAGEL M200 et GEAHLENE 200 et VERSAGEL
M750 et GEAHLENE 750, ou par la société AIGLON sous les dénominations commerciales TRANSGEL ou SYNGEL ( 90% d'huile de paraffine, 5% de copolymère hydrogéné butylène/éthylène/styrène, 5% de copolymère hydrogéné éthylène/propylène/styrène) .
Les milieux ainsi obtenus ont été incubés 18 h à 37 C et 24 h à 30 C, respectivement, pour les enrichissements en Salmonella spp. et en L, monocytogenes.
Entre 1 et 10 ml de broyat alimentaire ont été prélevés et centrifugés 5 minutes à 500 x g afin d'éliminer les gros débris, i.e., les particules de matrice alimentaire de grande taille.
I-3- Dépôts dans le Genedisc#: Comme indiqué dans la partie descriptive, la présente invention est susceptible d'être mise en #uvre au moyen d'une cartouche à usage unique décrite dans la demande de brevet US n 09/981070 bénéficiant de la priorité de la demande de brevet français publiée le 1er février 2002 sous le numéro 2812306. Le Genedisc commercialisé par GeneSystems (Bruz, France) est un exemple d'une telle cartouche.
L'on désigne par secteur , une partie du Genedisc# constituée d'une fraction du nombre total de chambres réactionnelles portées par ledit Genedisc#, par exemple 1/3 ou 1/6 des 36 chambres, associée à un compartiment du réservoir central, ledit compartiment alimentant les chambres réactionnelles comprises dans la fraction susvisée. Par exemple, le réservoir central du Genedisc# est divisé en trois ou six compartiments en tous points identiques, chacun de ces compartiments assurant ainsi la desserte d'un tiers ou d'un sixième du nombre total de chambres réactionnelles. Le Genedisc comprend alors, selon cet exemple, trois ou six secteurs.
Pour un secteur du Genedisc, le volume de mélange réactionnel à préparer comme décrit dans le paragraphe 1-1- supra, correspondait au volume de mélange réactionnel pour une amplification (10 l) multiplié par le nombre de chambres réactionnelles incluses dans le secteur, chacune desdites chambres étant le siège d'une amplification. Par exemple, avec un Genedisc# comprenant trois secteurs, un secteur étant alors représenté par un tiers des 36 chambres, c'est-à-dire 12 chambres, le volume de mélange réactionnel à préparer pour un secteur était de 120 l.
peptide traceur biotinylé avec la molécule HLA II en l'absence de peptide compétiteur. La spécificité de liaison est contrôlée par l'addition d'un excès de peptide non biotinylé. Le bruit de fond obtenu ne diffère pas significativement de celui obtenu en incubant le peptide biotinylé sans les molécules HLA II. Les résultats sont exprimés sous la forme de la concentration de peptide compétiteur qui inhibe 50% de la liaison maximale du peptide traceur biotinylé (IC50). b) Conditions et sensibilité des tests Pour chaque test de liaison, la concentration en molécules HLA II, la concentration du peptide traceur, le pH d'incubation et le temps d'incubation ont été optimisés comme précisé dans le Tableau VII ci-après.
TABLEAU VII : Conditions des tests de liaison aux molécules HLA II
Allèles dilution Traceurs Concentration pH Temps traceur optimal d'incubation (nM) (h)
DRB1*OlOi 1/40à 1r00 HA 306-318 1 6 24 DRB1*0301 l'IOàI!40 MT2-16 200 4,5 72
DRB 1 *0401 1/20à 1/100 HA 306-318 30 6 24 DRB 1 *0701 1/20 à 1/100 YKL 10 5 24
DRBP1101 120 à l'100 HA 306-318 20 5 24 DRB I * 1301 1 ' 10 à 1 l40 Bl 21-36 200 4,5 72 DRB1*1501 110 à 1/100 A3 152-166 10 4,5 72
DRB5*0101 1/10 à 1/100 HA 306-318 10 5,5 24 DRB3*0101 1/10 à 1/100 Lol 191-120 10 5,5 24 DRB4*0101 1/10 à 1!100 E2/E168 10 5 72 DBPI*401 1/20 à 1/400 Oxy 271-287 10 24