INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
De préférence, les broches ont un diamètre compris entre 0,5 mm et 2,5 mmafin d'effectuer un niveau de mise en prise avec les produits qui permet la capture fiable, mais sans endommager l'intégrité des produits. De manière avantageuse, lorsque lesdits produits sont des morceaux de viande découpés en tranche, le diamètre de la broche est d'environ 1 mm.
De manière avantageuse, les broches sont disposées dans une pluralité de rangées de broches sensiblement parallèles, dans lesquelles les broches individuelles sont espacées à distance régulière. Une configuration particulièrement avantageuse pour la capture des morceaux de viande découpés en tranche est deux ou plusieurs rangées de neuf broches, dans laquelle les broches dans les rangées sont espacées selon une distance comprise entre environ 5 mm et 15 mm, de préférence environ 10 mm, et dans laquelle les rangées sont espacées selon une distance comprise entre environ 15 mm et 35 mm, de préférence environ 25 mm.
Dans le cas d'une évaporation complète, on obtient un extrait lipidique sec. Dans le cas d'une évaporation partielle, on obtient un extrait lipidique pâteux ou liquide contenant 0,1 % à 20 % en poids de matière sèche.
La présente invention a également pour objet les compositions comprenant l'extrait. De préférence, ces compositions sont cosmétiques ou pharmaceutiques et à usage topique.
Avantageusement, les compositions selon la présente invention contiennent 0,0001 à 1 % en poids de matière sèche de l'extrait lipidique.
L'extrait sec, pâteux ou liquide peut être solubilisé dans un solvant cosmétiquement et ou pharmaceutiquement acceptable, en particulier une huile, le butylène glycol ou le propylène glycol.
L'extrait peut aussi être présent dans les compositions pharmaceutiques selon la présente invention sous forme de liposomes. De 30 manière avantageuse, ces liposomes se forment spontanément en solution aqueuse lorsqu'on ajoute de l'eau pendant ou avant l'évaporation complète du solvant de la solution d'extraction du procédé objet de la présente invention.
La présente invention a également pour objet l'utilisation de l'extrait comme médicament ou comme agent cosmétique, notamment pour 5 restaurer la fonction barrière épidermique. En particulier, cet extrait peut être utilisé en tant qu'agent anti-inflammatoire ou comme agent pour protéger la peau d'agressions physiques ou chimiques.
La peau constitue l'organe le plus exposé aux agressions environnementales. La complexité structurale du tissu cutané lui confère 10 diverses fonctions: l'hypoderme joue un rôle d'isolant thermique, le derme contribue à la résistance et l'élasticité, tandis que l'épithélium de revêtement, pavimenteux stratifié et cornifié, est responsable de l'étanchéité donc de la fonction barrière. Le Stratum cornéum, partie la plus superficielle de l'épiderme, est constitué de cellules non vivantes, remplissant des fonctions 15 de protection, de régulation de la différentiation et multiplication des kérantinocytes. En conséquence il joue un rôle primordial dans le contrôle de l'homéostasie cutanée. En effet, la couche cornée empêche les déperditions hydriques et s'oppose aux agressions physiques et chimiques ainsi qu'à la pénétration des microorganismes.
Lors d'une perturbation aiguë ou subaiguë de la peau par des tensioactifs, des solvants organiques ou une altération mécanique, une phase de récupération de la barrière de plusieurs heures se met en place. La cinétique de réparation, variable d'un sujet à l'autre, est fonction de l'âge du sujet, de l'intensité et de l'étendue de la lésion. Cette récupération est en 25 relation directe avec une série de réponses métaboliques incluant les biosynthèses lipidiques protéiques et nucléiques. Ces diverses réponses métaboliques sont mises en place suite à des signaux biologiques qui accompagnent la rupture de la fonction barrière. Parmi la cascade d'évènements moléculaires et cellulaires intervenant lors d'une altération du 30 stratum cornéum, est relevée une augmentation des cytokines kératinocytaires, telles ILla et des molécules d'adhésion inter kératinocytaires tel ICAM1 (Intra Cellular Adhesion Molecule-1) au niveau des compartiments épidermiques et dermiques du système cutané (Nickoloff BJ, Naidu Y, Perturbation of epidermal barrier function correlates with initiation of cytokine cascade in human skin. J. Am Acad Dermatol. 1994 Apr; 5 30 (4): 535-546 - Elias PM, Wood LC, Feingold KR. Epidermal pathogenesis of inflammatory dermatoses. AM. Contact Dermat., 1999 Sept; 10 (3) = 119126 - Elias PM, Feingold KR,. Coordinate regulation of Epidermal Differentiation and barrier Homeostasis. Skin Pharmacol Appl Skin Physiol 2001; 14 (suppl 1): 28-34).
Ces évènements moléculaires mis en place lors d'un stress physique et/ou chimique du stratum cornéum précèdent tout mouvement de cellules inflammatoires de la circulation vers le derme et l'épiderme, induisant ainsi un foyer inflammatoire cutané. La couche cornée de l'épiderme est donc un biocapteur régulateur de l'homéostasie cutanée, suite à des stress exogènes 15 Des tests qui sont développés plus loin dans la description ont mis en évidence la restauration de la fonction barrière par application topique d'un extrait lipidique de fruits selon la présente invention prévenant ainsi la mise en place des marqueurs inflammatoires ICAM et ILla, suite à une agression chimique inductrice des perturbations métaboliques cellulaires. 20 Exemples de procédé de préparation d'un extrait lipidique de fruit pauvre en gqlycérides:
100 kg de flocons de framboises séchés sont extraits par 700 I d'isopropanol à reflux pendant 2 h et sous agitation. Après retour à température ambiante, on sépare les fruits extraits de la solution d'extraction par filtration. La solution recueillie est concentrée. On détermine la matière sèche. Puis on rajoute une quantité d'eau 50 fois supérieure à la matière 30 sèche. Puis on reconcentre jusqu'à obtenir une solution aqueuse liposomée dont la matière sèche est de 5 % en poids. L'extrait obtenu est analysé en chromatographie sur couche mince afin d'identifier les molécules présentes.
Ainsi, on identifie des phospholipides, céramides, cérébrosides, stérols, glycolsystérols et glycolipides. On procède également au dosage des phospholipides et, des céramides et des triglycérides. La quantité de lipides 5 polaires totaux est de 45 % en poids par rapport à la matière sèche totale. La teneur totale en phospholipides est de 25 % en poids par rapport à la matière sèche totale. La teneur totale en céramides de 3,5 % en poids par rapport à la matière sèche totale. La teneur en triglycérides est de 5 % en poids par rapport à la matière sèche totale.
500 kg d'un mélange de groseilles, framboises et myrtilles séchées (1/3, 1/3, 1/3) est extrait avec 5 tonnes d'éthanol à 500C pendant 5 heures sous agitation à température ambiante. On sépare par filtration les résidus 15 d'extraction de la solution. Cette dernière est totalement évaporée, jusqu'à l'obtention d'un extrait pâteux.
L'analyse chromatographique sur couche mince permet d'identifier les molécules suivantes: phospholipides, céramides, cérébrosides, stérols, glycostérols et glycolipides. La teneur en lipides polaires totaux est de 15 % 20 en poids par rapport à la matière sèche totale. Les phospholipides totaux sont dosés à 11 % en poids par rapport à la matière sèche totale et les céramides à 2 % en poids par rapport à la matière sèche totale. La teneur en triglycérides est de 10 % en poids par rapport à la matière sèche totale.
Cette cavité a approximativement la forme d'une portion de sphère, et accueille une tête de diode 7 On comprend que le pourtour de l'écran est muni d'une pluralité de ces 20 cavités 9, chacune étant destinée à loger une diode 7 Bien sr, il est aussi possible de ne prévoir qu'une cavité continue, par exemple ayant la forme d'une portion de cylindre pour accueillir plusieurs diodes alignées Les dimensions/formes respectives des cavités et des têtes de 25 diode sont de préférence complémentaires, avec suffisamment de jeu pour que les diodes puissent être facilement logées dans les cavités Par ailleurs, on prévoit un renflement de l'écran sur ce pourtour actif, venant entourer les cavités 9 La combinaison des cavités 9 et du renflement (un renflement par cavité quant il y a plusieurs cavités, un renflement continu quand il n'y a qu'une seule cavité logeant plusieurs diodes) permet de récupérer toute ou quasiment toute l'énergie lumineuse des diodes sur un cône émissif qui peut atteindre 180 .
Les figures 5 a-5 f montrent une troisième modification de la section de l'écran 6 au niveau des zones " actives ": la figure Sa représente vu d'en bas la cavité 9, le renflement, mais aussi une embase 11, qui est une zone plane 10 approximativement perpendiculaire au plan de l'écran.
Cette zone plane 11 va permettre de fixer la plaque support 12 des diodes 7 On voit à la figure 5 c que la largeur de l'embase 11 concide avec celle de la plaque support 12.
Quand on vient placer la plaque support 12 sur l'embase 15 11, les diodes 7 se trouvent placées dans les cavités 9 Pour fixer la plaque 12 à l'embase, différentes solutions mécaniques sont possibles, dont le collage, le vissage ou encore le clippage Les figures 5 d-5 f montrent une troisième solution: le boutrollage: Les bouterolles 13 se trouvent sur 20 l'embase (là encore, moulées avec l'écran) en figure 5 d, elles sont écrasées en figure 5 f afin de riveter les deux pièces l'une à l'autre, et de bloquer en position les diodes 7.
La figure 3 symbolise deux trajets de deux rayons émis par une des diodes 7: on voit qu'ils cheminent dans 25 l'épaisseur de l'écran 6 par réflexions successives sur les faces de l'écran Comme détaillé à la figure 4, ces réflexions successives sont interrompues quand les rayons rencontrent des foyers de diffusion 10 crées selon l'invention à la surface de l'une des faces de l'écran ces rayons qui se trouvent au voisinage de la face ainsi modifiée (les rayons rasants) vont diffuser dans toutes les directions (symbolisés par les flèches) Ces foyers 10 sont des motifs creux diffusants qui se trouvent sur la surface 5 polie optique de l'écran 6 Chaque foyer 10 se comporte alors comme une source optique secondaire On peut ensuite avoir toutes sortes de répartition de ces " creux " diffusants en fonction de l'effet recherché: les figures 6 a à 6 d donnent ainsi des exemples de répartition, ces représentations n'étant pas à l'échelle pour être plus claires Les dimensions de ces creux sont de surface apparente de 0 1 à 1 ou 2 mm, ils ont des profondeurs variables de quelques dixièmes de millimètres à un millimètre, leur forme peut être évolutive, notamment de 15 ronde à rectangulaire, leur état de surface est diffusant 'Si l'on veut, au contraire, créer des foyers réfléchissants, leur état de surface sera plutôt poli optique Leur répartition peut être homogène, régulière ou évolutive selon une direction donnée (figure 6 c ou 6 d) La " pixélisation ", c'est20 à-dire le mode de répartition des foyers, peut être organisée selon un tramage prédéfini ou aléatoire La distance entre deux foyers est variable, par exemple entre 1 mm et 10 à 20 mm La répartition peut permettre de surligner une fonction optique primaire (figure 6 a ou 6 b) Ces foyers 10 25 sont obtenus directement lors du moulage de l'écran, en munissant le moule des reliefs appropriés On peut ainsi obtenir un effet d'écran illuminé sur une partie de sa surface, ou sur toute sa surface: l'observateur verra toute la surface du feu éclairée, on obtient un trompe l'oeil qui donne l'impression d'un feu en trois dimensions mettant en valeur le style du véhicule on conserve ainsi la signature du feu, qu'il soit allumé ou éteint Les figures 7 a-7 c montrent les différentes façons de traiter les pourtours "passifs " de l'écran 6: la figure 7 a ' montre l'écran 6 dont le chant est recouvert d'un revêtement métallique/réfléchissant 14 (métallisation sous vide du chant): les rayons " repartent " dans l'épaisseur de l'écran La figure 7 b montre un résultat identique, obtenu 10 par un chant biseauté selon deux côtés (forme qu'on peut obtenir lors du moulage) La figure 7 c montre un chant biseauté selon un côté seulement: dans ce cas, le rayon part dans une direction déterminée par la façon dont le chant est biseauté, ici approximativement perpendiculairement à l'écran à travers la glace 5.
La figure 8 montre une variante consistant à munir la face de l'écran déjà munie de foyers de diffusion d'un autre type de foyer: des foyers réfléchissants 15 Ce ou ces motifs peuvent être obtenus comme les foyers diffusants 20 10 Le trajet des rayons frappant ces foyers 15 (par exemple constitués de motifs similaires aux motifs diffusants, mais aux parois lisses, polies, traitées pour être réfléchissantes) est symbolisé par les flèches: au moins une partie des rayons (selon leur angle d'incidence) va partir hors de 25 l'écran, notamment au travers de la glace 5: ce ou ces foyers peuvent être disposés dans une zone spécifique pour concentrer spatialement la lumière (au niveau de la fonction stop par exemple).
L'invention ouvre donc de nouvelles perspectives en termes de style, tout en restant faisable industriellement.
On peut ajuster au mieux la nature, la répartition des foyers diffusants au sens de l'invention, ceux ci pouvant en 5 eux même être aussi partiellement réfléchissant (par exemple sous fore de creux "à facettes", avec des parois localement réfléchissantes et localement diffusantes): on a alors des foyers "hybrides" réfléchissants/diffusants.
A noter aussi que l'on peut combiner dans un même 10 feu ou un même projecteur plusieurs écrans traités selon l'invention, soit en les juxtaposant, soit en les superposant, chaque écran pouvant avoir sa répartition distincte/son type distinct de foyers diffusants et/ou réfléchissants.
Contexte général La présente invention concerne de manière générale la lecture et l'interprétation de puces et plus particulièrement la détection d'hybrides marqués par des molécules génératrices de signal, telles les fluorophores, et formés entre les molécules constituant ces puces et des molécules ou cellules provenant d'échantillons biologiques ou chimiques.
L'invention concerne ainsi selon un premier aspect un dispositif de lecture et analyse de puces (ou lecteur de puces), comprenant : # Une table pour recevoir une puce destinée à caractériser au moins un échantillon, # Des moyens d'excitation des molécules ou des cellules de la puce, après réaction avec d'autres molécules, # Des moyens de lecture et d'analyse des molécules soumises à excitation.
Plus particulièrement, l'invention fournit en outre un moyen de contrôle de la température des puces, permettant ainsi de développer des applications impliquant des changements de température de la puce.
Dans une application particulière, la puce est une puce à ADN ou d'oligonucléotides, et le contrôle de la température permet de définir avec précision la température d'hybridation de sondes oligonucléotidiques sur ladite puce.
L'invention concerne également des procédés de mise en #uvre d'un tel lecteur, notamment pour la détection de mutations génétiques.
Définitions Avant de présenter les buts et caractéristiques de l'invention, on va dans un premier temps définir certains termes qui seront employés dans ce texte.
Par réseau, micro-réseau, array, micro-array, puce, chip , termes qui seront employés indifféremment dans le présent texte, on entend définir un réseau de cellules ou de molécules biologiques ou chimiques disposées sur un support solide en des emplacements particuliers (formant par exemple une matrice).
kg d'un mélange de citron, mandarine et orange séchés (1/3, 1/3, 1/3) sont extraits par 200 kg d'isopropanol à température ambiante statistiquement par lixiviation. La solution obtenue est concentrée jusqu'à 2 kg. On détermine la teneur en matière sèche du concentrat et on ajoute une 30 quantité de butylène glycol 50 fois supérieure à la matière sèche. Le reste de solvant volatile est évaporé. On obtient donc un extrait de butylène glycol contenant 2 % en poids de matière sèche. Les molécules présentes dans l'extrait sont contrôlées par chromatographie sur couche mince. On identifie des phospholipides, des céramides, des cérébrosides, des stérols, des glycosylstérols et des glycolipides.
Les lipides polaires sont déterminés à 20 % en poids par rapport au poids de matière sèche totale, les phospholipides à 16 % en poids par rapport à la matière sèche totale et les céramides à 1,5 % en poids par rapport à la matière sèche totale. La teneur en triglycérides est de 11 % en poids par rapport à la matière sèche totale.
Evaluation de la restauration de la fonction barrière épidermique par application topique d'un extrait lipidique de fruit pauvre en lipides.
Les tests sont effectués sur expiant cutané provenant de plasties 15 mammaires maintenues en survie dans un milieu adéquat.
Les tests sont effectués sur un expiant cutané servant de témoin absolu, sur un expiant délipidé par un mélange éther/acétone puis stressé par un stress chimique induit par application topique d'une solution de lauryl sulfate ou SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) et sur une peau délipidée, traitée 20 par l'extrait de fruits préparé selon l'exemple 1, à raison de 500 pJg/ml et traitée par un agent de stress chimique.
Le protocole de test est décrit par Williams ML, Elias PM, From besket weave to barrier. Arch Dermatol 1993; 129: 626-629.
Des prélèvements d'explants cutanés ayant subi ces préparations 25 sont réalisés afin d'étudier les divers paramètres proposés: - Contrôle de la viabilité et de l'activité métabolique des cellules à l'aide de test MiT (ref. Mosmann Tim. 1993 - Journal of immunological methods 65: 55-63).
- Détection d'un signal cytosoluble inflammatoire: immunomarquage de la 30 protéine ICAMi.
- Détection d'un signal membranaire inflammatoire: quel que soit le marqueur à révéler, le principe de la technique d'immunomarquage est la même, on utilise un kit spécial immunomarquage.
Sur des cryocoupes fixées à l'acétone, les sites aspécifiques sont saturés à l'aide d'une solution de BSA à 3%.
L'anticorps primaire reconnaissant la protéine à identifier est appliqué sur la coupe, les échantillons sont ensuite rincés à l'aide du tampon phosphate (PBS).
L'anticorps secondaire biomarqué dirigé contre l'espèce ayant produit la protéine d'intérêt, est alors appliqué. Les coupes sont à nouveau rincées 10 au PBS et mises en contact avec la streptavidine peroxydase protéine couplée à un marqueur enzymatique.
Cette enzyme est alors visualisée par un substrat chromogène spécifique la DAB. Les coupes sont ensuite montées au Gel/Mount et observées 24 h après en lumière blanche.
L'observation au microscope optique droit en lumière blanche et au confocal conduit aux résultats suivants.
Evaluation de la viabilité des explants après métabolisation du MTT.
Le témoin absolu entraîne une forte métabolisation du MTT, se traduisant par la présence de cristaux de formazan bleu-poupre au niveau de l'épiderme et dans le derme.
La partie constituée de lipides polaires comprend des phospholipides, des stérols, des glycostérols, des céramides, des cérébrosides et des glycolipides.
Avantageusement, les phospholipides représentent 0,5 à 30 % en 25 poids par rapport la matière sèche totale de l'extrait.
Avantageusement, les phospholipides comprennent des phosphoéthanolamines, des phosphatidylinositol, des lysophosphatidyléthanolamines, des acides phosphatidiques, des phosphatidylcholine et des lysophosphatidylcholines.
Avantageusement, les céramides représentent 0,1 à 10 % en poids par rapport la matière sèche totale de l'extrait.
La présente invention a également pour objet le procédé de préparation de l'extrait comprenant les étapes consistant à: - séparer la pulpe de fruit de ses graines ou de son noyau, - sécher la pulpe de fruit ainsi obtenue de façon à obtenir une teneur en eau inférieure à environ 10 % en poids, effectuer l'extraction de la pulpe séchée au moyen d'un solvant de polarité intermédiaire, avec un rapport massique solvant/pulpe séchée compris entre environ 4/1 et environ 20/1, et à une température comprise entre la température ambiante et la température d'ébullition, 10 effectuer une séparation liquide/solide de façon à recueillir une solution d'extraction, - évaporer le solvant de ladite solution d'extraction pour obtenir ledit extrait.
Ainsi, selon la procédé objet de la présente invention, les fruits sont 15 d'abord débarrassés de leur noyau ou de leur graine, puis la pulpe ainsi obtenue est séchée.
La pulpe de fruit est séchée de façon à obtenir une teneur en eau inférieure à environ 10 % en poids, de préférence inférieure à 5 % en poids.
Plus la teneur en eau est faible, meilleur est le rendement d'extraction des 20 lipides polaires.
Avantageusement, le séchage de la pulpe est effectué par lyophilisation, atomisation ou sur rouleaux de façon à obtenir une poudre ou des flocons de fruits. Le séchage peut également être effectué sur des supports tel que le lactose ou la maltodextrine.
Une fois séchée, la pulpe de fruit est extraite avec des solvants de polarité intermédiaire avec un rapport massique solvant/pulpe compris entre environ 4/1 et 20/1 et à une température comprise entre la température ambiante et la température d'ébullition.
Dans l'échelle de polarité, les solvants de polarité intermédiaire se 30 situent entre le méthanol et l'acétate d'éthyle. Avantageusement, le solvant de polarité intermédiaire est choisi parmi un alcool comprenant 1 à 4 atomes de carbone, une cétone, un mélange eau/alcool comprenant 1 à 4 atomes de carbone et un mélange eau/cétone. De préférence, le solvant choisi est un alcool tel que l'éthanol ou l'isopropanol.
Avantageusement, l'extraction est faite sous agitation ou de façon statique pendant une durée comprise entre 1 et 24 h environ.
Une fois l'extraction réalisée, on effectue une séparation solide/liquide de façon à recueillir une solution d'extraction. Les étapes d'extraction et de séparation peuvent être effectuées plusieurs fois de suite, de préférence 2 fois, et les solutions d'extraction ainsi obtenues sont ensuite réunies.
Les étapes d'extraction et de séparation peuvent être réalisées en une seule étape comme lors d'une lixiviation.
On évapore ensuite le solvant de ladite solution d'extraction ainsi obtenue pour obtenir un extrait lipidique.
Avantageusement, le solvant de ladite solution d'extraction est 15 évaporé, complètement ou partiellement, sous pression réduite et à température d'ébullition du solvant sous cette pression.
Le problème technique à la base de l'invention est la réalisation d'un feu arrière de recul permettant également un éclairage au sol pour une aide à la manoeuvre lors d'une marche arrière du véhicule.
A cet effet, l'invention concerne un feu arrière de recul pour véhicule automobile, du type comportant un bloc optique contenant une ampoule alimentée électriquement lorsque la marche arrière du véhicule est enclenchée, ce bloc étant fermé du côté arrière par une glace comportant des stries destinées à diffuser de la lumière dans une plage définie tant verticalement qu'horizontalement, caractérisé en ce que la glace comporte une zone lisse entourant au moins partiellement la zone striée et le bloc contient un réflecteur dont la forme est définie pour diriger les rayons lumineux vers la zone lisse de la glace.
Ainsi, lors d'une marche arrière du véhicule, un faisceau de lumière est projeté sur le sol, derrière le véhicule et dans des zones situées de part et d'autre du véhicule afin d'éclairer les obstacles présents et les rendre visibles au conducteur par l'intermédiaire, par exemple, de l'ensemble des rétroviseurs.
Dans un mode de réalisation de l'invention, la zone lisse de la glace est transparente.
Avantageusement, dans la mesure où la zone striée diffuse de la lumière dans un plan horizontal suivant une plage d'angle au centre de l'ordre de 45 , centrée sur l'axe optique, le réflecteur est conformé pour envoyer des rayons lumineux latéralement et au moins du côté de l'extérieur du véhicule, suivant un faisceau limité par une droite formant avec l'axe optique un angle supérieur à 45 .