INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans le mode de réalisation représenté aux figures 5 et 6, la lentille 42a comporte des parois latérales arrières 48 de support transparentes formant un logement pour la diode 30 secondaire 44, et qui sont reliés au support 46. Les parois transparentes 48 sont réalisées de manière que les rayons lumineux RI émis par la diode les traversent sans être réfractés, c'est-à-dire en ligne droite, ou en étant peu réfractés, les rayons lumineux RI les traversant alors sensiblement en ligne droite..
Lors du fonctionnement du dispositif d'éclairage ou de signalisation, la diode 30 émet des rayons lumineux Rc qui pénètrent dans le guide de lumière par son extrémité 14. Les rayons lumineux Rc sont canalisés dans le guide de lumière 32. 5 Comme expliqué en préambule de cette description, une partie de ces rayons Rc est diffusée par la ligne de diffusion 26, et projetée vers l'avant à travers la face avant 23 du guide de lumière sous la forme des rayons Re comme expliqué en préambule et représenté à la figure 3.
Ainsi, un observateur situé à l'avant du guide de lumière et le regardant selon la direction transversale T voit les tronçons de diffusion 34 illuminés de manière similaire à des néons.
Lorsque les diodes secondaires 44 sont illuminées, elles émettent des rayons lumineux Ra et RI qui sont concentrés vers 15 la ligne de foyers objets principaux 26a par le système de concentration 42. Les rayons lumineux traversent ensuite le guide lumineux en ligne droite depuis la ligne de foyers objets principaux 26a jusqu'à ce qu'ils atteignent la face avant 23, Les rayons Re sont alors réfractés par la face avant 23, et ils 20 émergent selon une direction sensiblement transversale.
L'observateur situé devant le guide de lumière 32 observe ainsi que les tronçons de transmission 36 du guide de lumière 32 sont aussi illuminés à la façon de néons. La diode est choisie de manière que les tronçons de transmission 36 éclairent de façon 25 plus intense que les tronçons de diffusion 34, notamment de manière que le dispositif d'éclairage ou de signalisation respecte les normes photométriques désirées.
Selon un second mode de réalisation du dispositif d'éclairage ou de signalisation représenté à la figure 7, le 30 système de concentration 42 est réalisé venu de matière avec le guide de lumière 32.
On a représenté à la figure 7 une section transversale verticale 16a d'un tronçon de transmission 36 du guide de lumière 32. Le foyer objet principal 26a est ici transversalement située entre la portion périphérique avant 22 et la portion périphérique arrière 24, à l'intérieur de la section élémentaire 16a.
La face arrière 25 comporte ici un logement 50 dans lequel est reçue la diode secondaire 44. Comme représenté à la figure 7, 5 le logement comporte un fond transversal vertical 24a et des parois transversales inférieure 52 et supérieure 54. Le support 46 de la diode secondaire 44 obture le logement 50.
La portion périphérique arrière 24 a ici une forme globalement ellipsodale dont le premier foyer est agencé sur la 10 ligne de foyers objets principaux 26a, et dont le second foyer est agencé sur la diode secondaire 44.
Le fond 24a du logement 50 forme ici un dioptre convergent qui est destiné à concentrer les rayons lumineux Ra émis par la diode secondaire 44 vers le foyer objet principal 26a. 15 Les rayons lumineux RI traversant les parois 52 et 54 du logement 50 ne sont pas réfractés.
Ainsi, dans ce mode de réalisation, la portion périphérique arrière 24 forme le réflecteur 42b qui concentre les rayons lumineux RI, tandis que les rayons lumineux Ra sont concentrés 20 sur la ligne de foyers objets principaux 26a par le fond 24a du logement 50 qui forme ici lentille 42a.
De façon que les sections 16 des tronçons de diffusion 34, et les section élémentaires 16a des tronçons de transmission 36 soient de forme globalement identiques, il est nécessaire que la 25 ligne de diffusion 26 soit située à l'intérieur de la section transversale verticale 16 de façon à être confondue avec la ligne de foyers objets principaux 26a, par exemple au moyen d'une encoche 52 réalisée dans la face périphérique arrière 24 du guide de lumière 32, comme représenté à la figure 8.
Selon une variante de l'invention, la ligne directrice 18 a une forme curviligne.
L'invention concerne les capteurs miniatures de champ magnétique.
Ces méthodologies en phase-liquide évitent les difficultés de la synthèse en phase solide, par exemple le comportement cinétique non linéaire, la distribution (l'accès inégal aux sites d'interaction), les problèmes de solvatation liés à la nature du support, et les conditions opératoires qui ne sont pas transposables de manière triviale entre les réactions organiques standards en solution et la phase solide. Cependant, en remplaçant les résines réticulées insolubles par des supports polymères solubles, les avantages du support solide sont préservés : conditions de réactions classiques en milieu homogène
mais aussi purification aisée des produits. De plus, les supports solubles présentent la possibilité d'analyse par les moyens classiques utilisés en chimie organique tels que les spectroscopies UV-visible, IRTF, et RMN aussi bien que la spectrométrie de masse à haute résolution. En outre, la chromatographie sur couches minces peut être employée pour le suivi des réactions sans exiger le clivage préliminaire du support (Mütter et al., 1979 ; Han et al., 1995 ; 1992), ce qui est un avantage de cette technologie. Une caractérisation rapide et efficace du support est un outil important, particulièrement pour les synthèses parallèle, combinatoire ou multiétape.
De la même façon qu'en phase solide, les supports solubles peuvent être séparés des molécules de faible poids moléculaire après chaque étape par ultrafiltration, dialyse, chromatographie préparative par exclusion (SEC), ou précipitation. Même si l'automatisation de ces techniques n'est pas aussi avancée qu'avec les résines, des progrès importants ont été faits ces dernières années. Les polymères utilisables comme supports solubles doivent être commercialement accessibles ou facilement préparés, être chimiquement stables, être correctement fonctionnalisés pour pouvoir accrocher une partie organique et être très solubles dans les solvants usuels. En général les polymères sont un mélange de molécules de différentes tailles qui ont des propriétés différentes.
Les supports solubles devront avoir une polydispersité aussi proche de 1 que possible et une masse moléculaire assez élevée pour être cristallisés à la température ambiante. La plupart des polymères solubles utilisés ont des squelettes hydrocarbonés (polymères de Janda) ou alkyle polyéthers et plus particulièrement les polyéthylènes glycols (PEGs).
Jusqu'à maintenant, le polymère le plus utilisé comme support soluble en synthèse organique est le polyéthylène glycol monométhylé (MPEG 5000) ne contenant qu'une fonction OH ou diol et de ce fait a une faible charge spécifique (0,2 mmol OH/g)(Mutter et al., 1974 ; Mutter et al., 1975 ; et al., 1997 ; Toy et al., 2000).
Plus récemment, des PEGs de plus grande charge spécifique ont été préparés, pouvant être purifiés par précipitation. Ces PEGs en forme d'étoile (Chang et al., 1999 ; Knischka et al., 2000 ; et al., 2000) ou ramifiés (Benaglia et al., 1998 ; et al., 2000) sur les positions terminales peuvent atteindre des charges spécifiques de 1 mmol de OH/g de polymère mais sont longs à préparer.
Les polymères linéaires portant des groupes fonctionnels sur chaque unité monomère, comme l'alcool polyvinylique (Elias, 1997), les polyacrylamides (Wellings et al., 1987 ; Ranucci et al., 1994) et les polymères préparés par ROMP ("ring opening metathesis polymerisation")(Barrett et al., 1999 ; Barrett et al., 2000 ; Barrett et al.,
2000) ont aussi été utilisés en SPOS. Ces polymères à forte charge spécifique sont d'utilisation problématique dans certains cas à cause de leur solubilité et stabilité limitées (Meier et al., 2001).
Aussi, des dendrimères parfaits (polyamidoamine, polysilane, polyester) ont-ils été utilisés comme supports en synthèse combinatoire. Ces supports solubles polymériques de grande charge spécifique théorique sont fragiles, de poids moléculaires relativement faibles et sont préparés par voie multiétape, ce qui limite leur utilisation en chimie combinatoire (Burgath et al., 2000).
Les polyéthers dendritiques aliphatiques (analogues ramifiés des PEGs) sont par contre chimiquement stables dans beaucoup de conditions de réaction et donc devraient être utiles comme supports polymères en synthèse organique. De plus, les propriétés chimiques de ces matériaux sont idéales pour la synthèse supportée en solution. Par ailleurs, la forme globulaire de ces polymères dendritiques peut favoriser leur purification par les techniques de membranes (dialyse et ultrafiltration) Les polyéthers aliphatiques dendrimériques contenant des unités 1-3 diol et 1-2 diol ont été préparés récemment en 6-7 étapes. Ils ont des charges spécifiques de 6-7 mmol de OH/g mais ils sont longs à préparer et de poids moléculaires relativement faibles (Jayaraman et al., 1998 ; Grayson et al., 1999 ; Haag et al., 2000).
Haag a rapporté récemment la synthèse contrôlée de polyglycérols dendritiques.
Ces polyéthers polyols aliphatiques ont un squelette stable et sont facilement préparés en une étape à l'échelle de 1 kg (Haag et al., 2002). Ils ont des poids moléculaires pouvant atteindre 30 000 g/mole avec une polydispersité Mw/Mn-1,5. La structure dendrimérique contient statistiquement des unités glycérol incorporées linéairement (OH primaires et secondaires) et des 1,2 diols terminaux. La densité totale de groupes fonctionnels atteint 13,5 mmol de OH/g de polymère dont environ 30% (4,1 mmol/g) sont des 1,2 diols terminaux facilement accessibles et qui peuvent être utilisés directement pour greffage d'aldéhydes ou de cétones sur ces polymères sous forme d'acétals. Ces polyglycérols dendritiques ont été utilisés en SPOS pour l'aménagement fonctionnel de cétones w-halogénées et pour le couplage de Suzuki. Un autre problème vient de leur structure : les fonctions OH à la périphérie utilisables pour la synthèse ne sont pas identiques, dans la mesure où il y a un mélange de OH secondaires et primaires qui n'auront pas la même réactivité et entraîneront donc des problèmes de sélectivité et probablement de réactivité secondaire.
Malgré les différents avantages présentés par les supports polymères solubles actuellement utilisés, les inconvénients liés à leur poids moléculaire élevé et à leur charge spécifique utilisable limitée sont de sévères handicaps à une utilisation généralisée. En effet, les PEGs les plus souvent utilisés pour la synthèse organique et la chimie combinatoire sur supports solubles ont des poids moléculaires compris entre 2000 et 10000 daltons et ne présentent qu'une charge spécifique comprise entre 0,1et 1 mmol/g de polymère. L'analyse par spectroscopies RMN IH et 13C de ces polymères en solution est réalisable mais présente des difficultés car les signaux correspondant aux protons et aux carbones des PEGs ont une forte intensité par rapport aux signaux relatifs aux protons et carbones du substrat supporté. Des problèmes de viscosité des solutions sont aussi rencontrés à forte concentration. Les problèmes de purification de ces polymères sont aussi une sévère limitation à leur utilisation et à leur recyclage, en particulier dans une optique d'automatisation des synthèses.
Depuis quelques années, certains sels d'onium sous l'appellation "liquides ioniques" (Welton et al., 1999 ; Wasserscheid et al., 2000 ; et Welton, 2003), moyennant un choix approprié des anions, sont de plus en plus utilisés en synthèse organique et en catalyse car ils présentent un certain nombre de propriétés physico-chimiques intéressantes et importantes telles que leur grande stabilité thermique, leur faible volatilité et leur tension de vapeur très faible, leur faible inflammabilité, leur fort pouvoir de solubilisation aussi bien des sels que des molécules organiques neutres et des polymères et enfin la possibilité d'un recyclage aisé.
Cependant, les sels d'onium décrits dans la littérature sont généralement synthétisés et utilisés en tant que tels pour leurs propriétés biologiques ou physiques (tensioactifs par exemple).
La présente invention a pour but de fournir une nouvelle utilisation des sels d'onium en tant que supports solubles pour la synthèse organique en phase homogène en présence d'au moins un solvant organique.
fractionnement habituelle, notamment précipitation au sulfate d'ammonium, chromatographie d'affinité pour la protéine A ou G. On mesure l'activité neutralisante des immunoglobulines par n'importe quel test décrit (liaison du VEGF iodé, prolifération, migration, adhésion cellulaire). Un lot d'immunoglobulines sera dit neutralisant quand il aura la capacité d'inhiber l'interaction de NOV avec le VEGF.
Dans un deuxième temps on prépare des anticorps anti-idiotypiques de NOV en injectant à des souris par voie sous-cutanée 1-100 g de la préparation des immunoglobulines neutralisant l'activité de NOV précédemment décrites en association avec 100 l d'adjuvant, notamment de l'adjuvant complet de Freund (Sigma). L'injection est répétée 15,30 et 45 jours après. Cinquante-cinq jours après la première injection, on injecte à des souris 10 g du même anticorps par voie intrapéritonéale.
Cinquante-huit jours après la première injection, les souris sont sacrifiées et leurs rates sont prélevées et dilacérées dans du milieu ISCOVE pour libérer les splénocytes. Les splénocytes sont fusionnés avec des cellules de myélome de souris, notamment des cellules AG8X 63 (Kearney et al., 1979), et incubés à raison de 100 000 cellules/puits.
La fusion s'effectue par ajout de 20 fois 50 l de polyéthylène glycol (PEG) à 30 secondes d'intervalle. Quatre ml de milieu ISCOVE préchauffé à 37 C sont alors ajoutés goutte à goutte sur la suspension cellulaire, puis après une période d'incubation de 4 minutes à 37 C, 4 ml sont ajoutés. La suspension est centrifugée puis le culot cellulaire est alors repris dans 100 ml de milieu ISCOVE complémenté avec 20% de sérum de veau foetal et du HAT IX (50X : Hypoxanthine 5 mM, Aminoptérine 20 M et Thymidine 0,8 mM) et distribuées à raison de 100 l par puits sur les macrophages.
Après 5 jours, 100 l de milieu HAT sont ajoutés, et entre 8 et 14 jours le milieu conditionné de chaque hybridome est prélevé pour mesurer par ELISA les anticorps dirigés contre les anticorps ayant servi d'agent immunogène, c'est à dire les anticorps anti-NOV. On mesure alors l'activité des anticorps anti-idiotypiques par un test ELISA : Les fragments Fab des immunoglobulines anti NOV, préparés par toute technique conventionnelle, notamment une digestion à la papaïne, sont immobilisés sur des plaques de microtitration (0,1-20 ug/ml dans du tampon carbonate 50 mM pH 9,6).
Après saturation des sites non spécifiques par une solution de sérum albumine diluée à 5 mg/ml dans le même tampon, les surnageants de cultures d'hybridomes sont ajoutés dilués pour moitié dans du tampon PBS contenant 0,05% de Tween 20. Après rinçages, les anticorps anti-idiotypiques sont révélés par adjonction d'une concentration appropriée d'anticorps anti-Fc de souris couplé à la peroxydase. La quantité d'anticorps
anti-idiotypique fixé est alors mesurée par révélation de la peroxydase et est proportionnelle à l'intensité de la réaction colorimétrique.
Les hybridomes sélectionnés par leur capacité à sécréter des anticorps dirigés contre des anticorps anti-NOV sont alors clonés, c'est-à-dire que les cellules sont ensemencées en condition de dilution limite (5 cellules/ml) sous un volume de 0,1 ml par puits. Le milieu est changé après 10jours. Après 15jours, certains puits contiennent des foyers de cellules qui se sont multipliées à partir de la cellule ensemencée au départ, donc toutes ces cellules sont identiques et sont- issues du même clone. Quand la surface occupée par les cellules représente au moins la moitié de la surface totale du puits, le milieu est prélevé et analysé comme précédemment par un ELISA sur Fab anti-NOV. A ce stade on peut sélectionner les clones producteurs d'anticorps et connaître leur spécificité.
Une fois les clones identifiés, leur nature monoclonale est affirmée par l'opération classique consistant à ensemencer une plaque de 96 puits avec des cellules issues du même clone diluées en conditions limites comme précédemment. Les clones sécréteurs doivent donc tous sécréter un anticorps de même spécificité pour que l'on déclare cet anticorps monoclonal. Un troisième clonage est alors effectué exactement dans les mêmes conditions pour s'assurer que les clones sont bien monoclonaux.
Les anticorps anti-idiotypiques sont criblés par une batterie de tests, notamment par un test ELISA sur VEGF immobilisé. Du VEGF est immobilisé (0,1-10 g/ml) dans du tampon carbonate comme précédemment et toutes les étapes de cet ELISA sont identiques à celles décrites dans l'ELISA sur Fab anti-NOV. Ce test permet de cribler parmi tous les anticorps anti-idiotypiques ceux qui miment les fonctions de la protéine NOV (SEQ ID NO : 2) ou des fragments de type TSP-1 (SEQ ID NO : 8), c'est-à-dire des anticorps reconnaissant le VEGF.
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Les compositions de l'invention permettent en particulier un effet de fluorescence accru et d'éclaircissement supérieur à celui obtenu avec le colorant fluorescent utilisé seul.
Comme cela a été indiqué auparavant, la composition selon l'invention comprend au moins un colorant fluorescent et au moins un agent séquestrant particulier.
Par colorant fluorescent, on entend au sens de la présente invention un colorant qui est une molécule qui colore par elle-même, et donc absorbe la lumière du spectre visible et éventuellement de l'ultraviolet (longueurs d'onde allant de 360 à 760 nanomètres) mais
qui, contrairement à un colorant classique, transforme l'énergie absorbée en lumière fluorescente de plus grande longueur d'onde émise dans la partie visible du spectre.
Enfin, le colorant fluorescent mis en #uvre dans la composition est soluble dans le milieu de la composition. Précisons que le colorant fluorescent est différent en cela d'un pigment fluorescent qui lui, n'est pas soluble dans le milieu de la composition.
Conformément à un mode de réalisation encore plus particulier de l'invention, la composition ne comprend pas, à titre de colorant fluorescent, de composé choisi parmi les colorants fluorescents hétérocycliques monocationiques azoïques, azométhiniques ou méthiniques.
De préférence, les colorants fluorescents de l'invention conduisent à un maximum de réflectance se situant dans la gamme de longueur d'onde allant de 500 à 650
nanomètres, et de préférence dans la gamme de longueur d'onde allant de 550 à 620 nanomètres.
Certains des colorants fluorescents selon la présente invention sont des composés connus en eux-mêmes.
Les molécules chimiques responsables de l'action de l'Isatis tinctoria sont : la Tryptanthrine responsable de l'effet antibiotique, des glucosinolates qui limitent la prolifération cellulaire anarchique, des composés indoliques antiseptiques et modulateurs des réactions inflammatoires, des sitostérols anti-inflammatoires, des acides aminés permettant de renforcer le système immunitaire (Scovill J et al ; Antimicr Agents Chemother, 2002,46(3) :882 ; Logan JC et al ; J Gen Virol, 1975,28 :271).
L'Isatis tinctoria L. est connu en France sous le nom de pastel, aux USA et dans les pays anglo-saxons sous le nom de Woad, en Chine soit BanLanGen pour les racines soit DaQingYe pour les feuilles.
Propolis C'est une substance naturelle résineuse, recueillie par les abeilles sur les bourgeons et écorces de végétaux, puis digérée et modifiée par leurs enzymes, afin d'élaborer des murs de défense pour la ruche, d'encapsuler les insectes ou autres animaux qui pourraient pénétrer dans leur domaine.
La propolis est une résine de couleur vert-sombre à brunnoir, solide à 15 C, molle et malléable à 60-70 C, et ayant un point de fusion qui se situe entre 80 et 104 C.
La propolis est soluble dans l'alcool, l'éther et autres solvants organiques, mais elle est facilement réduite en poudre sans solvants en la réfrigérant avant broyage.
La propolis est également appelée Beewax.