INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
d'homogénéité d'un milieu sondé et de discerner quand les grandeurs de concentration moyenne d'absorbeurs et/ou de diffuseurs ont un sens pour le volume d'intérêt (volume considéré du milieu).
L'invention exploite en particulier les photons hyperdiffusifs non absorbés sur un large domaine spectral, allant de l'ultraviolet à l'infrarouge, pour détecter une singularité d'absorption et/ou de diffusion dans un volume constitué de matériaux par exemple granulaires, poreux ou fracturés.
Les événements rares de comptage de tels photons, constituant des photons ergodiques, portent une information importante de valeur moyenne volumique.
Clonage des produits d'amplification La ligation entre le fragment de l'ADN amplifié et le vecteur pPLPS, préalablement digéré par l'endonucléase Sali, a été réalisée grâce à l'ADN ligase du phage T4 d'E coli (PROMEGA, France). Les réactions de ligation ont été menées pendant 18h à 16 C, dans un volume réactionnel final de 10 l. La réaction a été réalisée dans le tampon d'activité de l'enzyme, recommandé par le fournisseur. La ligase a ensuite été inactivée par incubation à 65 C pendant 5 min.
E - Transformation de souches de B. subtilis, Préparation des cellules compétentes Une ou deux colonies de B, subtilis CU1, cultivées sur LB agar (Peptone trypsique : 10 g/1, Extrait de levure : 5 g/1, NaCI : 5 g/1, agar bactériologique : 15 g/1) durant 18 h à 37 C, ont été inoculées dans un tube à essai contenant 2 ml du milieu LB liquide et incubées 3 h à 37 C sous agitation de 220 tpm. Ensuite, 5 ml du milieu MNGE (K2HP04 :
9,85 g/1, KH2P04 : 5,52 g/1, citrate trisodique : 0,92g/1, glucose : 20 g/1 ; tryptophane : 50 mg/l, citrate d'ammonium ferrique : 11 mg/l, Glutamate de potassium : 2 g/1, MgS04 : 0,74 g/1) ont été ensemencés avec 0,25 ml de la culture obtenue, et incubés 3 h à 37 C sous agitation de 220 tpm. La suspension des bactéries obtenue constituait les cellules compétentes qui ont été utilisées pour la transformation.
Transformation 300 l de cellules compétentes, ont été mélangées avec de l'ADN plasmidique (0. 2 à 1 g) et incubées 30 min à 37 C sous une agitation de 220 tpm. Ensuite 100 l du milieu LB ont été ajoutés et le mélange a été incubé 40 min dans les mêmes conditions. Ensuite les cellules ont été étalées sur milieu LB gelosé supplémenté avec de la kanamycine (50 pg/ml) et cultivées en aérobiose à 37 C pendant 24-48 h.
La sélection des transformants a été effectuée par criblage par PCR, avec les amorces appropriées mentionnées ci-dessus.
F - Séquence de l'ADN Après clonage, les séquences du gène ureB et des parties adjacentes au site de clonage du plasmide pPLPS ont été comparées avec celles du départ. Le séquençage de l'ADN plasmidique a été réalisée par la société Génome Express (Grenoble, France) en utilisant le kit Taq Dye Deoxy terminator cycle séquence (Perkin-Elmer, Foster City, Calif., USA) et le protocole recommandé par le fournisseur. Les réactions de séquençage ont été analysées dans le séquenceur automatique 373A (Applied Biosystems, Foster City, Calif., USA).
G - Immunodétection des protéines séparées sur SDS-PAGE (WESTERN-BLOT).
Electrotransfert des protéines sur membrane de nitrocellulose Les protéines sont séparées par électrophorèse en fonction de leur taille en gel de polyacrylamide, dans les conditions dénaturantes décrites précédemment. Les protéines sont ensuite transférées sur une membrane de nitrocellulose (Schleicher & Schuell PROTRAN BA83,
0. 2 pm) par electrotransfert en phase liquide dans un tampon approprié [Tris: 25 mM; Glycine: 192 mM; méthanol 20% (v/v) ], en utilisant le système Mini Trans-Blot Transfer Cell (BioRad), à voltage constant 80 V, durant 1 heure.
Le transfert des protéines est contrôlé par la coloration de la membrane au Rouge Ponceau.
H - Expérimentation in vivo chez la souris.
Animaux L'ensemble des expérimentations ont été effectuées sur des souris de souche BALB/c femelles, âgées de 6-8 semaines. Des lots homogènes d'animaux ont été constitués. Chaque lot, constitué de 15 animaux, a reçu un traitement approprié.
Modèle murin de l'infection à H. pylori La souche de H. pyloriSS1 (J99), ATCC n 700824 adaptée à la colonisation des souris, a été utilisée dans notre étude. Selon le type d'expérience (immunisation thérapeutique ou prophylactique) les animaux ont été infectés avant (3 semaines) ou après (5 semaines) l'immunisation.
La suspension de la souche H. pylori SS1 (environ 108 UFC/dose) a été administrée par voie orale chez les souris, trois fois durant une semaine avec des intervalles de deux jours.
Traitement Immunisation prophylactique Les animaux de cinq lots ont subi une immunisation orale prophylactique durant 14 jours selon le protocole présenté dans le Tableau I, figurant dans la partie II intitulée Résultats . Cinq semaines après la dernière immunisation tous les lots (à l'exception du lot Témoin non infecté ) ont été infectés, par voie orale, par la souche de H. pylori SS1, selon le protocole décrit ci-dessus.
Les animaux ont été sacrifiés par dislocation cérébrale quatre semaines après la fin de l'inoculation de H. pylori. La présence de H. pylori a été recherchée dans les biopsies de l'estomac par les tests suivants :
0,380 mg de protéine gp160 sont dissous dans 0,380 ml de tampon phosphate 10 mM pH 8,5. A cette solution sont ajoutés 1 mg de protéine IFN# humaine dissous dans 1 ml du même tampon.
L'excès de glutaraldéhyde est ensuite éliminé par 3 dialyses successives de 2 heures chacune dans un boudin de dialyse dont le seuil de coupure est de 3 kDa, à 4 C, contre 200 ml de tampon phosphate pH 7,6 10 mM.
Exemple 7 : préparation d'un hétérocomplexe qp160-Tat toxoïde. (La protéine Tat est inactivée de manière biochimique) Cet hétérocomplexe représente le principe actif d'un vaccin propre à induire chez le vacciné la production d'anticorps qui neutralisent à la fois la protéine de structure gp160 du virus HIV-1 et la protéine Tat extracellulaire du VIH-1. De plus ce complexe doit permettre d'induire réaction cellulaire (chimiokines, T auxiliaire, CTL) dirigée contre les cellules infectées exprimant la gp160.
0,550 mg de protéine gp120 sont dissous dans 0,550 ml de tampon phosphate 10 mM pH 8,5. A cette solution sont ajoutés 1 mg de protéine Tat toxoïde dissous dans 1 ml du même tampon.
Puis la réaction est bloquée par addition de glycine 0. 1 M finale pendant 1 heure à température ambiante L'excès de glycine est ensuite éliminé par 3 dialyses successives de 2 heures chacune dans un boudin de dialyse dont le seuil de coupure est de 3 kDa, à 4 C, contre 200 ml de tampon phosphate pH 7,6 10 mM.
Exemple 8: préparation d'un hétérocomplexe gp160-Tat GM. (La protéine Tat est inactivée de manière génétique) Cet hétérocomplexe représente le principe actif d'un vaccin propre à induire chez le vacciné la production d'anticorps qui neutralisent à la fois la protéine de structure gp160 du virus HIV-1 et la protéine Tat de régulation du VIH-1. De plus cet hétérocomplexe doit permettre d'induire réaction cellulaire (chimiokines, T auxiliaire, CTL) dirigée contre les cellules infectées exprimant la gp160.
0,550 mg de protéine gp160 sont dissous dans 0,550 ml de tampon phosphate 10 mM pH 8,5. A cette solution sont ajoutés 1 mg de protéine Tat GM dissous dans 1 ml du même tampon.
Puis la réaction est bloquée par addition de glycine 0. 1 M finale pendant 1 heure à température ambiante. L'excès de glycine est ensuite éliminé par 3 dialyses successives de 2 heures chacune dans un boudin de dialyse dont le seuil de coupure est de 3 kDa, à 4 C, contre 200 ml de tampon phosphate pH 7,6 10 mM.
Exemples de caractérisations biochimiques des hétérocomplexes A. Matériel et Méthodes des exemples 9 à16.
Les caractérisations biochimiques des hétérocomplexes ont été effectuées à l'aide des techniques suivantes : 1.Test d'antigénicité : L'étude de l'antigénicité d'un hétérocomplexe par rapport à l'antigénicité des protéines qui le composent est effectuée par un ELISA indirect classique. Cette technique permet de mesurer quantitativement une protéine par reconnaissance spécifique d'un anticorps contre un antigène.
Ce test consiste à déposer des dilutions d'un échantillon contenant la protéine recherchée dans des puits d'une plaque de microtitration. Un anticorps polyclonal spécifique réagit avec la protéine immobilisée. Un deuxième anticorps, conjugué à la peroxydase de raifort, spécifique du premier est ensuite ajouté. Le complexe formé est révélé par incubation avec de l'OPD. La couleur jaune obtenue est directement proportionnelle à la quantité de protéines fixées. L'absorbance (DO) de chaque puits est mesurée à l'aide d'un lecteur de microplaques. La quantité de protéine présente dans l'échantillon est déterminée alors à l'aide d'une gamme d'étalonnage.
l'un à l'autre au moyen d'une unique vis ou par un moyen de clipsage du 10 module complémentaire sur l'élément projecteur.
- I'unique vis est une vis auto-taraudeuse destinée à être passée dans un élément de fixation situé sur une partie inférieure du module
complémentaire pour être enfoncée dans l'élément projecteur.
- le module complémentaire et l'élément projecteur sont solidarisés 15 l'un à l'autre au moyen d'un ressort faisant pression sur une partie arrière du module complémentaire pour maintenir le connecteur et la contre-partie du
connecteur emboîtés l'un dans l'autre.
- le connecteur ou la contre-partie du connecteur comporte des moyens coopérant pour centrer le connecteur par rapport à sa contre-partie, 20 par exemple des pions de guidage pour que, respectivement, le connecteur
ou la contre-partie du connecteur s'emboîtent correctement.
- le dispositif projecteur comporte un premier joint disposé dans l'évidement pour venir envelopper une extrémité de connexion du module
complémentaire et rendre ainsi étanche le dispositif projecteur. 25 - le premier joint est du type joint à lèvre.
- le dispositif projecteur comporte un deuxième joint disposé dans l'évidement pour venir envelopper partiellement la contre-partie du connecteur et rendre ainsi étanche la jonction entre l'élément projecteur et le
module complémentaire.
- le dispositif projecteur comporte un troisième joint disposé entre un drain thermique, constituant une partie inférieure du module
complémentaire, et un capot du module complémentaire.
- Le dispositif peut également être conçu de façon à rendre le passage des fils étanche au niveau des contacts électriques entre le module 35 et le projecteur - le dispositif projecteur comporte une entrée d'alimentation unique pour recevoir un ensemble de signaux depuis l'extérieur du dispositif projecteur, lesdits signaux étant transmis, via une première liaison conductrice, à la contre-partie du connecteur, une deuxième liaison 5 conductrice interne à l'élément projecteur assurant la transmission de signaux entre la contre-partie du connecteur et un module haute tension
associé à la source lumineuse.
- la première liaison conductrice est un faisceau non blindé et la
Spectre RMN 19F (282 MHz, Acétone D6) : -136,40 (multiplet).
Spectre RMN "B (96,25 MHz, Acétone D6) : 4,66 (D, JB-F = 27,2Hz)(56%) ; 28,5 (44%).
E/ Synthèse de la triéthylamine supportée (TEAS)(12) : Dans un ballon monocol, on introduit 3 g (6,1 mmol) de (3b), 12 mL d'éthanol et 13 g (18 mmol) de diéthylamine. On adapte un réfrigérant et on porte ensuite le mélange réactionnel à reflux durant environ 14 heures. Après quoi, l'éthanol et l'excès de diéthylamine sont évaporés. L'huile obtenue est dissoute dans le dichlorométhane et
la solution lavée avec 2 fois 5 mL de K2C03 dilué. On sépare la phase organique, on sèche sur MgS04 et on évapore le solvant à sec.
Huile visqueuse orangée Rdt = 83% Spectre RMN 1H (200 MHz, Acétone D6) : 1,05 (t, J = 7,1 Hz, 2H) ; 1,40 - 1,70 (m, 2H) ; 1,90-2,10 (m, 4H) ; 2,50 - 2,70 (m, 6H) ; 3,35(s, 9H) ; 3,50 - 3,70 (m, 2H).
Spectre RMN 13C (50MHz, Acétone) : 12,34 ; 23,813 ; 25,08 ; 27,48 ; 48,140 ; 53,543 ; 54,04 (t, JC-N = 4,02 Hz) ; 67,93 ; 124,594 (q, J = 319,9 Hz) EXEMPLES Les différents sels fonctionnalisés utilisés ont été préparés selon les procédures décrites dans la littérature.
Pour illustrer ce principe, nous avons choisi de supporter : - un ester acrylique par l'intermédiaire d'un sel d'ammonium dont la préparation est décrite dans le schéma ci-dessous ; ce sel a été ensuite engagé dans trois exemples de réactions de grand intérêt en chimie organique ; - un ester arylique substitué par un halogène préparé selon le schéma réactionnel ci-dessous, qui a été testé dans deux exemples de réactions de couplages ; - un ester d'acide arylboronique sous forme de boratrane (fonctionnalisation de la partie cationique) ou sous forme de borate (fonctionnalisation de la partie anionique du sel fonctionnalisé).
La synthèse de sels fonctionnalisés et de substrats ioniques est décrite en détail dans la partie expérimentale qui suit.
EXEMPLE 1 : RÉACTION DE HECK La formation de liaisons carbone-carbone est une opération fondamentale en chimie organique. Parmi le grand nombre de réactions possibles, les méthodes utilisant des catalyseurs organométalliques sont extrêmement importantes. En particulier, nous avons appliqué le principe de l'invention de synthèse organique supportée sur liquide ionique (SOSLI) dans le couplage d'alcènes catalysé par le palladium avec les iodures d'aryle connu sous le nom de couplage de Heck.
Cette réaction a fait l'objet de plusieurs travaux utilisant les liquides ioniques comme solvants (Abbott et al., 2002 ; et al., 2000 ; et al., 2001 ; Visser et al., 2002 ; et al., 2001). En 1999, Xiao J. et al, ont montré la possibilité du recyclage du système catalytique et l'effet de l'anion sur la cinétique et la sélectivité de la réaction (Jeffery et al., 1996 ; Howarth et al., 2000 ; et al., 1991).
Dans cet exemple on utilise l'ester acrylique, et un ester arylique substitué par un atome d'iode comme substrats séparément.
1 - Ester acrylique : L'acrylate (6) a été engagé dans Heck en présence d'acétate de palladium comme catalyseur, de bicarbonate de potassium comme base et d'un iodure d'aryle en large excès comme réactif (voir schéma ci-après).
Toutes les réactions de couplage ont été effectuées à 80 C avec comme matrice liquide A1+X1- = Me3N+ Bu, -NTf2. Le suivi des réactions a été effectué par RMN du proton à 200MHz et la figure 1 montre l'exemple de la réaction du sel 6 (X2- = NTf2-)
en solution dans le triflimidure de triméthylbutylammonium avec le 1-iodonaphtalène (essai 10 dans le tableau I ci-dessous).
D'après la Figure 1, on constate qu'il est possible et simple de suivre la réaction par RMN 1H. En effet, on constate la disparition totale des signaux entre 5,9 et 6,5 ppm correspondant aux trois protons de la double liaison du substrat 6, et l'apparition des signaux de la double liaison du produit résultant du couplage de Heck 12.
Ce type de suivi est impossible dans le cas de l'utilisation d'un support solide insoluble et moins évident dans le cas du support soluble (PEG) décrit dans la littérature en raison de signaux de RMN élargis.
RMN 1H (200 MHz, Acétone D6) : 2,64 - 2,83 (m, 2H) ; 3,59 (s, 9H) ; 4,06 (m, 2H) ; 4,71 (t, 2H, J = 6,76 Hz) ; (d, 2H, J = 8,9 Hz) ; (dd, 2H, J = 8,9Hz ). RMN 13C (SO MHz, Acétone D6) : 23,96 ; 54,24 (t, Jc-N = 4,2 Hz) ; 63,09 ; 65,35 (t, JC-N = 4,0 Hz) ; 121,46 (q, JC-F = 322,0 Hz) ; 128,95 ; 130,42 ; 132,58 ; 133,12 ; 166,34.
Spectrométrie de masse (FAB) pour C15 H19 F6N2 06 S2 Masse Théorique calculée pour (2C+, A-) : 880,03713 Masse Trouvée : 880,0375 * 8c : A une solution de 1 g (2,98 mmol) de (8a) dans 3 ml d'eau on ajoute 0,5 ml (5,7 mmol) de HPF6 à 60% dans l'eau. Le mélange réactionnel est laissé agiter deux heures à température ambiante pour que l'échange soit total. Le solide blanc obtenu après filtration est lavé à l'eau puis deux fois par 30 ml d'éther et enfin séché sous vide.
Solide blanc Rdt = 96% Pf =154-156 C RMN 1H (200 MHz, Acétone D6) : 2,45 - 2,59 (m, 2H) ; (s, 9H) ; 3,79 - 3,85 (m, 2H) ; (t, 2H, J = 5,96 Hz), 7,55 (dd, 2H, J1 = 1,91 Hz, J2 = 7,73 Hz) ; (dd, 2H, J1 = 1,91 Hz, J2 =7,74 Hz) RMN 13C (50 MHz, Acétone D6) : 22,96 ; 53,23 (t, J = 4,01 Hz) ; 62,31 ; 64,34 ; 128,06 ; 129,48 ; 131,79 ; 132,25 ; 165,63 RMN 19F (282MHz, Acétone D6) : -71,6 (d, J = 707,3 Hz ; P-F) RMN31P(Acétohe,121,5 Mhz) 8 : -142 (m, J = 0,7 Hz, P-F6) Spectrométrie de masse (FAB) pour C15 H19 F6NO2P, Masse Théorique calculée pour (2C+, A-): 747,0822 Masse Trouvée : 747,0824 * 8d: A une solution de 1 g (2,98 mmol) de (La) dans 3 ml d'eau on ajoute 1 ml de HBF4 en solution dans l'eau à 40%. Après l'ajout de ce dernier, on observe la formation d'un solide blanc. Le mélange réactionnel est laissé agiter deux heures à température ambiante. Le solide blanc obtenu après filtration est lavé par l'eau (pour éliminer l'excès de HBF4) puis deux fois par 30 ml d'éther et enfin séché sous vide.
Solide blanc Rdt = 98% Tf =154-156 C RMN1H (200 MHz, Acétone D6): 2,39 - 2,57 (m, 2H) ; 3,35 (s, 9H) ; 3,70 - 3,87 (m, 2H) ; 4,50 (t, 2H, J = 5,91 Hz) ; (dd, 2H, J1 = 1,97 Hz, J2 = 6,77 Hz) ; 8,02 (dd, 2H, JI = 1,77 Hz, J2 = 6,47 Hz) RMN 13C (50 MHz, Acétone D6) : 22,96 ; 53,14 (4,1 Hz) ; 62,35 ; 64,29 ; 128,01 ; 129,52; 131,85 ; 132,24; 165,61.
RMN 19F (282 MHz, Acétone D6) : -150,16 (s, B-F) Spectrométriede masse (FAB) pour C15 H19F4N02B Masse Théorique calculée pour (2C+, A-): 689,1214 Masse Trouvée : 689,1211 D/ Boratrane 9 : 1/Greffage sur le cation :
9a X2 = NTf2 9b X2 = BF4 9c X2 = PF6 Dans un ballon monocol de 150mL, on introduit 2 g de Sa à 5c) et un barreau aimanté. Le ballon est placé sous vide poussé durant environ 3 heures à une température de 50 C. Le ballon est ensuite placé sous Argon, et on ajoute environ 2,8 ml d'isopropanol pour solubiliser le sel. Dans un autre ballon et sous argon, dissoudre 1 g de l'acide phénylboronique dans 60 mL de chloroforme. On ajoute ensuite cette solution sur la première. Et enfin, on additionne 43 mL d'éther anhydre et on laisse agiter 18 heures à température ambiante.
Le milieu devient biphasique, on élimine la phase supérieure et on lave 3 fois par 20 ml d'éther anhydre la pâte blanche.
* 9a: Huile visqueusejaune claire.
RMN 1H (200 MHz, Acétone D : 1,40-2,20 (m, 6H) ; 3,30 (s, 9H) ; 3,35-3,70 (m, 6H) ; 3,95-4,10 (m, 6H) ; 7,25-7,5 (m, 3H) ; 7,70-7,90 (m, 2H) RMN 13C (50 MHz, Acétone D6) : 24,14 ; 26,58 ; 30,24 ; 56,7 ; 57,05 ; 60,7 ; 64,04 ; 66,8 ; 67,3 ; 67,8 ; 128,97 ; 135,45 Spectre RMN 11B (96,25 MHz, Acétone) : 13,06 * 9b: Pâte blanche RMN 1H (200 MHz, Acétone. D6) : 1,42 - 2,25 (m, 6H) ; 3,01 (s, 9H) ; 3,29 - 3,62 (m, 6H) ; 4,1 (m, 6H) ; 7,23 - 7,58 (m, 3H) ; 7,91 (m, 2H) RMN 11B (96,25 MHz, Acétone): 29,96 (60%) ; 4,40 (40%) * 9c : Pâte blanche RMN 1H (200 MHz, Acétone) : 2,21 (m, 6H) ; 3,16 (s, 9H) ; 3,34-3,73 (m, 6H) ; 3,91-4,12 (m, 6H) ; 7,25-7,51 (m, 3H) ; 7,72-7,89 (m, 2H) 2/ Greffage sur l'anion : a- Quaternarisation par un hydroxyle
0,1 g (0,38 mmol) de l'hydroxyde de tétrabutylammonium est dissous dans 0,6 g du bis-trifluorométhanesulfonamidure de N,N',N"-triméthylbutylammonium comme matrice dans un ballon de 5 ml. A cette solution on ajoute 47 mg (0,38 mmol) d'acide phénylboronique et enfin 0,5 mL de THF (anhydre). On laisse agiter la solution durant 2 heures à température ambiante. On évapore ensuite THF à sec et on sèche la solution sous vide.
Huile visqueuse teintée.
RMN 1H (200 MHz, Acétone D6) : 0,9-1,05 (m, 12H) ; 1,21-1,52 (m, 8H) ; 1,5- 1,8 (m, 8H) ; 3,0 (singulet élargi, 8H) ; 6,90-7,30 (m, 3H) ; 7,60-7,70 (m, 2H).
RMN 13C (50 MHz, Acétone D6) : 14,21 ; 20,50 ; 24,78 ; 25,75 ; 26,56 ; 53,78 ; 59,67 ; 67,45 ; 68,56 ; 127,94 ; 134,60 Spectre RMN 11B (96,25MHz, Acétone) : 3,97 b- Quaternarisation par le fluorure :
Dans un ballon monocol de 10 mL, on introduit 0,1 g (2,1 mmol) de fluorure de tétraméthylammonium anhydre, puis on ajoute 1 mL de THF (anhydre) et on homogénéise la solution en chauffant si nécessaire. Enfin on introduit 0,13 g d'acide phénylboronique (2,1 mmol). On laisse agiter durant environ 2 heures à température ambiante.
Après 2 heures d'agitation, on ajoute de l'éther anhydre pour une meilleure cristallisation et on filtre le solide sur verre fritté. Le solide est lavé 2 à 3 fois par 20 ml d'éther. Et pour finir, le solide est placé sous vide pour le sécher.
Solide blanc Rdt = 82% Pf= 162-164 C RMN 1H (200 MHz, Acétone D6) : 3,15 (s, 12H) ; 7,4 (m, 3H) ; 7,50 - 7,70 (m, 2H) RMN 13C (50 MHz, Acétone D6) : 56,19 (t, Jc-N = 3,97 Hz) ; 127,47 ; 128,36 ; 130,91 ; 132,98 ; 135,96.
De façon précise, la présente invention a pour objet un procédé de spectrophotométrie, pour analyser un milieu non limpide, ce procédé étant caractérisé en ce que : - on éclaire le milieu non limpide par au moins une impulsion lumineuse à large spectre, - on acquiert à travers au moins un collecteur de lumière, à partir du milieu ainsi éclairé, au moins une image spectro-temporelle de transmission, sans balayage spectral, et - on traite cette image pour acquérir des informations sur le milieu non limpide.
Selon un mode de mise en #uvre préféré du procédé objet de l'invention, on exploite, en vue de qualifier le degré d'homogénéisation du milieu sondé ou
de détecter une singularité d'absorption et/ou de diffusion, les photons diffusifs et ergodiques non absorbés sur un large domaine spectral par le milieu, ces photons diffusifs et ergodiques étant émis par le milieu lors de l'éclairement de celui-ci.
De préférence, on utilise conjointement le temps de vol de l'impulsion lumineuse à large spectre et des données spectrales pour établir une carte d'identité spectro-temporelle du milieu non limpide.
L'exploitation judicieuse de la nature statistique de cette carte d'identité permet de qualifier les échelles et les modes d'homogénéisation du milieu sondé vis-à-vis des teneurs en absorbeurs et diffuseurs.
Selon un mode de mise en #uvre particulier du procédé objet de l'invention, on éclaire le collecteur sans sonder le milieu et en même temps le milieu non limpide par une ou plusieurs impulsions lumineuses à large spectre autorisant une imagerie spectro-temporelle à deux pics simulant un double faisceau.
On propose en outre un procédé de spectrophotométrie conforme au procédé objet de l'invention et permettant l'établissement d'une véritable carte d'identité optique du volume sondé, c'est-à-dire d'une fidèle signature de la nature statistique du milieu vis-à-vis des teneurs plus ou moins homogènes des diffuseurs et des absorbeurs, cette carte d'identité optique étant sous la forme d'une ou plusieurs images spectro-temporelles permettant d'avoir accès simultanément aux distributions temporelles pour
une fenêtre spectrale donnée, aux distributions spectrales pour un intervalle de temps donné, aux dérivées partielles de ces deux distributions ainsi qu'à leurs intégrales.
On propose aussi un procédé de spectrophotométrie et tomographie conforme au procédé objet de l'invention, dans lequel on utilise conjointement les images spectro-temporelles et des modes monopoints avec balayage spatial ou des modes multipoints commutés des zones d'injection et/ou des zones de collection de la lumière, ce procédé de tomographie avec image spectro-temporelle permettant, d'une part, un repérage d'une singularité de la concentration d'absorbeurs et/ou diffuseurs et, d'autre part, une identification moléculaire de ces absorbeurs.
Les injections et collections de la lumière peuvent être réalisées soit à la surface soit au sein du volume.
On propose également un procédé de spectrophotométrie conforme au procédé objet de l'invention, dans lequel on utilise conjointement l'imagerie spectro-temporelle de transmittance et le mode de comptage par binarisation de l'image puis détection d'une zone de pixel attribuable à un photo- électron et réduction de cette zone à un seul pixel allumé, ou à une échelle subpixel, afin d'augmenter la dynamique et de qualifier la mesure en photo-électron unique.
Dans l'invention, on peut exploiter, en vue de mesurer de très faibles variations d'absorbeur, les
photons ergodiques diffusés par le milieu lors de l'éclairement de celui-ci.
On peut aussi exploiter, en vue de mesurer ou d'homogénéiser des teneurs d'absorbeurs et/ou diffuseurs, l'imagerie spectro-temporelle et les opérateurs #2/#t## jusqu'aux ordres supérieurs.