INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les moyens de déplacement 13 et 14 sont commandés, contrôlés et synchronisés à l'aide de moyens informatiques à commande par programme 15, également reliés, d'une part, à des moyens 16 de pilotage de la puissance du laser 12 et de focalisation du faisceau de la tête 10 et, d'autre part, à des moyens symbolisés en 17 de commande du balayage du faisceau laser.
Avantageusement, en dessous de la table 9, qui est une grille métallique par exemple, est disposé un système 18 d'aspiration des gaz et résidus de la pyrolyse générés par le brûlage de la résine du matériau composite.
Le procédé de l'invention comporte une phase préalable de détermination des paramètres opératoires d'usinage, à savoir la puissance instantanée du laser, la focalisation du faisceau, éventuellement le balayage du faisceau lorsque le diamètre du faisceau est inférieur à la taille de la perforation à réaliser et la durée d'illumination du matériau composite par le faisceau laser.
A cet effet, aux lieu et place de la peau 8, on va mettre sur la table 9 un échantillon de la peau et on va effectuer une série d'essais jusqu'à l'obtention de perforations remplissant les conditions, à savoir élimination complète localement de la résine sans atteinte de l'intégrité physique des fibres présentes.
Les paramètres utiles étant enregistrés pour chaque essai, on prendra en compte ceux correspondant aux essais concluants et on programmera ces paramètres dans le système informatique 15, de même que les déplacements de la table 9 et de la tête 10 pour réaliser le nombre de perforations nécessaires dans la peau 8, fonction des gammes de fréquences sonores à amortir.
Selon l'invention et afin de contrôler, lors de la mise en service du circuit de mesure, que les transformateurs d'intensité installés 1,2, 3 sont les bons (bon rapport de transformation), que les circuits magnétiques 4,5, 6 sont bien fermés (il s'agit de tores magnétiques connus, coupés en deux permettant de les placer autour des câbles sans avoir à les déconnecter, la
fermeture de chaque tore étant réalisée d'une façon connue au moyen d'une grenouillère), et que les bobines secondaires 7,8, 9 sont bien connectées au circuit de mesure, le circuit de mesure comprend en outre des moyens pour injecter une impulsion électrique dans la bobine de chaque circuit magnétique et des moyens pour sélectionner le circuit magnétique et la bobine à contrôler. Le signal de sortie Vs est alors analysé pour en tirer les conclusions.
Dans l'exemple représenté, on utilise pour générer cette impulsion la décharge d'un condensateur.
Un condensateur 20 chargé par une alimentation 21 à travers une résistance 22 est ainsi monté avec un interrupteur de décharge 23 entre le point commun 24 des bobines 7,8, 9 et la borne commune W des trois shunts de mesure 10,11 et 12.
De façon à sélectionner le transformateur d'intensité 1,2 ou 3 pour lequel on souhaite analyser le signal de sortie Vs suite à une décharge du condensateur 20 par la fermeture de l'interrupteur 23, le circuit est équipé en outre de moyens de sélection qui, dans l'exemple représenté, sont trois interrupteurs 25,26 et 27 permettant de court-circuiter pour chaque shunt de mesure 10,11 ou 12, la tension d'entrée vers le circuit sommateur 14.
La vérification est faite de la façon suivante, la ligne étant hors charge : lors de la mise en service du circuit de mesure et pour vérifier les bonnes connexions des bobines 7,8 et 9, la bonne fermeture des circuits magnétiques 4,5, 6 et que l'on a placé sur les phases les transformateurs d'intensité ayant le bon rapport de transformation, on contrôle séparément chaque transformateur d'intensité : 1,2 ou 3. Pour vérifier le T. I. 1, on ferme d'abord les interrupteurs 26 et 27 puis l'interrupteur de décharge 23.
Pour vérifier le T. I. 2, on ferme les interrupteurs 25 et 27 puis l'interrupteur de décharge 23.
Enfin, pour vérifier le T. I. 3, on ferme les interrupteurs 25 et 26 puis l'interrupteur de décharge 23.
Dans le cas où tout est correct, pour un T. I. déterminé, le signal de sortie Vs est conforme à celui représenté Fig. 2 : le signal est d'amplitude modéré et relativement long.
Si la bobine du T. I. n'est pas raccordée au circuit de mesure, l'impédance est infinie et il n'y a pas de signal de sortie Vs.
Si la bobine est en court-circuit, le signal de sortie est bref et de grande amplitude comme représenté Fig. 3.
Si le circuit magnétique n'est pas fermé, l'inductance est plus faible et le signal de sortie est plus court et d'amplitude plus forte que dans le cas normal, on a alors un signal tel que représenté Fig. 4.
Enfin, si le rapport de transformation du T. I. n'est pas correct et par exemple de 500/1 au lieu de 2200/1, l'impédance est plus faible, le signal de sortie est plus court et d'amplitude plus forte que dans le cas normal : la fig. 5 montre un tel signal.
STRUCTURE OPTIQUE INTÉGRÉE EN PARTICULIER DE MULTIPLEXAGE/DÉMULTIPLEXAGE D'UNE ONDE OPTIQUE ET UN PROCÉDÉ POUR SA FABRICATION La présente invention concerne une structure optique intégrée en particulier de multiplexage/démultiplexage d'une onde optique et un procédé pour sa fabrication.
Les structures optiques intégrées de multiplexage/ démultiplexage comprennent en général, dans une couche de la structure et successivement, un micro-guide optique d'entrée, un élément de couplage optique d'entrée, un réseau de micro-guides optiques intermédiaires présentant des longueurs différentes de façon à constituer un élément dispersif, un élément de couplage optique de sortie et des micro-guides de sortie.
De façon simplifiée, une telle structure fonctionne de la manière suivante.
Selon un mode de réalisation, les pochons sont du type doypack et sont placés tête-bêche dans la boîte.
Selon un mode de réalisation, la boîte est à ouverture sur le dessus.
Selon un mode de réalisation, la boîte est à ouverture sur le côté.
Selon un mode de réalisation, la boîte est obtenue par pliage au mandrin, le mandrin ayant les mêmes largeur et longueur que la boîte.
L'invention a encore pour objet un procédé de fabrication d'une palette selon l'invention, comprenant les étapes suivantes : (i) fourniture de boîtes contenant des pochons ; (ii) orientation desdites boîtes de sorte à obtenir les pochons à plat par rapport à la palette ; et
(iii) palettisation desdites boîtes.
L'invention a encore pour objet un procédé de fabrication d'une boîte selon l'invention, comprenant les étapes suivantes : (i) fourniture d'une boîte vide ayant au moins deux dimensions correspondant à des dimensions sous-multiples de 400x600mm ; (ii) chargement de ladite boîte avec des pochons, le plan des pochons correspondant au plan définissant lesdites au moins deux dimensions ; et (iii) fermeture de la boîte.
Selon un mode de réalisation, l'étape (i) comprend une étape de pliage au mandrin, le mandrin ayant les mêmes au moins deux dimensions que la boîte.
Selon un mode de réalisation, l'étape (ii) comprend un chargement des pochons horizontalement.
L'invention a encore pour objet un dispositif pour la mise en oeuvre du procédé de fabrication d'une boîte selon l'invention, comprenant : (i) un tapis d'amenée de boîtes vides, les boîtes étant disposées sur le tapis dans un plan contenant lesdites au moins deux dimensions ; (ii) au moins un tapis d'amenée de pochons, disposé sensiblement perpendiculairement au tapis d'amenée de boîtes vides, lesdits pochons étant disposés à plat sur ledit tapis d'amenée de pochons ; (iii) un bras disposé au-dessus desdits tapis et comprenant à son extrémité un dispositif préhenseur, ledit bras alternant entre une position de préhension des pochons et une position de chargement de la boîte ; et (iv) un dispositif de fermeture de la boîte.
L'invention est maintenant décrite plus en détails dans la description qui suit et en référence aux dessins annexés, dans lesquels : la figure 1 représente une boîte selon un premier mode de réalisation de l'invention ; les figures 2a et 2b représentent un plan de chargement de palette ; la figure 3 représente une vue en coupe d'une boîte selon l'invention ; la figure 4 représente la feuille avant pliage en la boîte selon le premier mode de réalisation ; la figure 5 représente un dispositif de chargement de la boîte selon l'invention ; la figure 6 représente une boîte selon un second mode de réalisation de l'invention ; la figure 7 représente la feuille avant pliage en la boîte selon le second mode de réalisation.
La figure 1 décrit un emballage selon un premier mode de réalisation. L'emballage est une boîte cartonnée 1 contenant une pluralité de pochons 2a, 2b, 2c, etc. Ceux-ci sont disposés horizontalement dans la boîte. Celle-ci présente donc une largeur et une longueur qui sont fixées par les caractéristiques du pochon, et restent donc fixes quels que soient le nombre de pochons dans la boîte.
Alternativement, une fois choisies les dimensions de la boîte il est possible d'adapter celles du pochon. Cette boîte peut donc être de dimensions"au sol"ou sur palette identiques, qui peuvent notamment correspondre à des dimensions sous-multiples de 400x600mm. Les dimensions sont sous-multiples de 400x600mm quand elles résultent de la division du rectangle 400x600mm. Ainsi, les dimensions suivantes sont des sous-multiples : 300x400mm (division par 2) ; 200x400mm (division par 3) ; 200x300mm (division par 4) ; 130x300mm (division par 6) ; 200x200mm (division par 6) ; 150x200mm (division par 8) ; 100x300mm (division par 8) ; 130x200mm (division par 9) ; 130xl50mm (division par 12) ; 100x200mm (division par 12) ; 100xl50mm (division par 16).
Ces dimensions permettent un remplissage de la palette à la couche optimisé, puisqu'il est toujours possible de reconstituer un bloc de base de 400x600mm. Un plan de palettisation est représenté dans les figures 2a et 2b, correspondant respectivement à 800xl200mm et 1000xl200mm, avec un"module de base"de 400x600mm.
Une telle boîte avec des pochons à plat lorsqu'elle est palettisée offre donc des avantages en terme de palettisation. Comme on l'a vu précédemment, elle est adaptée aux deux standards actuels. Un nombre variable de pochons ne fait varier que la hauteur de la boîte mais pas le plan au sol de la palettisation ou à la couche qui reste le même. Une variation de hauteur de boîte ne change que le nombre de couches (qui au demeurant est déjà variable d'un pays à un autre, les hauteurs maximales admissibles de palettes variant de 2m à 1, 60m). La palettisation automatique est ainsi facile à mettre en oeuvre, aucun réglage n'étant plus nécessaire mais seulement de la programmation du nombre de couches. La logistique se trouve donc améliorée.
Les pochons se trouvant dans la boîte sont de type conventionnel. Ils peuvent être du type plat uniforme ou dé préférence du type"doypack" (à savoir un pochon en coin ayant une surface formant fond et permettant au pochon de tenir debout). On préférera les pochons du type doypack. En référence à la figure 3, on décrit une vue en coupe d'un emballage selon l'invention. Les pochons doypacks sont toujours référencés 2a, 2b, 2c, etc. Ils sont disposés en alternance,"tête-bêche". Ceci permet une meilleure utilisation du volume disponible dans la boîte. En effet, la superposition au moins partielle des pochons doypacks permet d'augmenter le nombre de pochons par boîte (des pochons plats uniformes perdant un peu de volume utile au niveau des quatre bords) et donc in fine le nombre de pochons par palette. La superposition partielle des pochons permet aussi l'adaptation de la boîte avec la longueur des pochons, permettant ainsi de respecter des dimensions caractéristiques par exemple de 130x200mm (ou tout autre
Avantageusement, l'amplification de l'étape (b) avec une paire d'amorces encadrant une séquence d'acide nucléique susceptible de porter au moins une mutation dans le gène codant pour la protéine d'enveloppe est effectuée avec une paire d'amorces ayant une taille comprise entre 10 et 50 oligonucléotides, comprenant les séquences : EOO : 5'TAGAAAGAGCAGAAGACAGTGGCAATGA3' (SEQ ID No : 19) et ES8B : 5'CACTTCTCCAATTGTCCCTCA3' (SEQ ID No : 20), ou constitués par des fragments de celles-ci, ou encore par des séquences analogues de celles-ci portant des mutations d'un ou plusieurs nucléotides qui ne modifient pas de manière essentielle leur capacité à hybrider la région du gène de l'enveloppe portant au moins une mutation, suivie d'une deuxième étape d'amplification, avec une paire d'amorces ayant une
taille comprise entre 10 et 50 oligonucléotides comprenant les séquences : E20 : 5'GGGCCACACATGCCTGTGTACCCACAG3' (SEQ ID No : 21) et E115 : 5'AGAAAAATTCCCCTCCACAATTAA3' (SEQ ID No : 22), ou encore par des séquences analogues de celles-ci portant des mutations d'un ou plusieurs nucléotides qui ne modifient pas de manière essentielle leur capacité à hybrider la région du gène de la protéase portant au moins une mutation.
Tout préférentiellement, l'amplification de l'étape (b) avec une paire d'amorces encadrant une séquence d'acide nucléique susceptible de porter au moins une mutation dans le gène codant pour la protéine d'enveloppe est effectuée avec une paire d'amorces : EOO : 5'TAGAAAGAGCAGAAGACAGTGGCAATGA3' (SEQ ID No : 19) et ES8B : 5'CACTTCTCCAATTGTCCCTCA3' (SEQ ID No : 20), suivie d'une deuxième étape d'amplification, avec la paire d'amorces : E20 : 5'GGGCCACACATGCCTGTGTACCCACAG3' (SEQ ID No : 21) et E115 : 5'AGAAAAATTCCCCTCCACAATTAA3' (SEQ ID No : 22), pour obtenir un segment d'ADN de 938 paires de bases s'étendant des résidus 6426 à 7364 inclus et le vecteur de l'étape (c) est un vecteur retroviral délété de la région, codant pour les domaines allant de la boucle V1 à la boucle V3 de l'enveloppe du VIH-1 s'étendant de 6617 à 7250 inclus et comporte un site de restriction unique NheI.
L'invention concerne également une méthode d'analyse pour déterminer la susceptibilité d'un virus VIH à un composé inhibiteur de fusion ciblant la protéine gp41 du VIH-1, consistant à effectuer l'amplification de l'étape (b) soit avec la paire d'amorces SEQ ID No : 13, SEQ ID No : 14 suivie d'une deuxième amplification avec la paire d'amorces SEQ ID No : 15 SEQ ID No : 16, soit avec la paire d'amorces SEQ ID No : 17 SEQ ID No : 18 suivie d'une deuxième amplification avec la paire d'amorces SEQ ID No : 18, SEQ ID No : 16, à ajouter ou non ledit composé inhibiteur de fusion, éventuellement à des concentrations différentes, durant la culture de l'hôte cellulaire obtenu à l'étape (e), avant l'étape (f) et comprenant à l'étape (g) la comparaison de l'expression du gène marqueur avec et sans composé inhibiteur de fusion ciblant la gp41 du VIH-1.
L'invention concerne également une méthode d'analyse pour déterminer la susceptibilité d'un virus VIH à l'action inhibitrice des anticorps, consistant à
effectuer l'amplification de l'étape (b) avec la paire d'amorces SEQ ID No : 17 SEQ ID No : 18 suivie d'une deuxième amplification avec la paire d'amorces SEQ ID No : 18, SEQ ID No : 16, à ajouter ou non lesdits anticorps durant l'étape (e) de culture, éventuellement à des concentrations différentes et comprenant à l'étape (g) la comparaison de l'expression du gène marqueur avec et sans anticorps.
L'invention concerne également une méthode d'analyse pour déterminer le tropisme d'un virus VIH pour un récepteur cellulaire, consistant à effectuer l'amplification de l'étape (b) avec la paire d'amorces SEQ ID No : 17 SEQ ID No : 18 suivie d'une deuxième amplification avec la paire d'amorces SEQ ID No : 18, SEQ ID No : 16, à effectuer l'infection de l'étape (f) avec les particules virales obtenues à l'étape (e) sur deux hôtes cellulaires distincts et comprenant à l'étape (g) la comparaison de l'expression du gène marqueur par chacun des deux hôtes cellulaires distincts.
Avantageusement les hôtes cellulaires utilisés pour l'infection de l'étape (f) selon la méthode d'analyse de l'invention sont choisis parmi des hôtes cellulaires exprimant le récepteur CCRS ou le récepteur CXCR4.
L'invention concerne également une méthode d'analyse pour déterminer la susceptibilité d'un virus VIH à un composé inhibiteur ciblant les corécepteurs du VIH-1, consistant à effectuer l'amplification de l'étape (b) avec la paire d'amorces SEQ ID No : 17 SEQ ID No : 18 suivie d'une deuxième amplification avec la paire d'amorces SEQ ID No : 18, SEQ ID No : 16, à ajouter ou
non ledit composé inhibiteur ciblant les corécepteurs du VIH-1, éventuellement à des concentrations différentes, durant l'étape (e) de culture, l'infection de l'étape (f) étant effectuée sur deux hôtes cellulaires distincts et comprenant à l'étape (g) la comparaison de l'expression du gène marqueur par chacun des deux hôtes cellulaires distincts.
L'invention concerne également une méthode d'analyse pour déterminer la virulence d'un virus VIH consistant à effectuer l'amplification de l'étape (b) soit avec la paire d'amorces SEQ ID No : 13, SEQ ID No : 14 suivie d'une deuxième amplification avec la paire d'amorces SEQ ID No : 15 SEQ ID No : 16, soit avec la paire d'amorces SEQ ID No : 17 SEQ ID No : 18 suivie d'une deuxième amplification avec la paire d'amorces SEQ ID No : 18, SEQ ID No : 16, et à mesurer, lors de l'infection de l'étape (f), l'effet cytopathogène produit sur le second hôte cellulaire.
La formation d'un complexe entre une protéine Fbox et son partenaire peut être détectée par une variété de techniques. La modulation de la formation des complexes peut être quantifiée en utilisant par exemple des protéines marquées détectables grâce à un radiomarquage, un marquage fluorescent ou enzymatique.
Typiquement, il est souhaitable d'immobiliser la protéine Fbox ou son partenaire pour faciliter la séparation des complexes des formes non complexées et faciliter l'automatisation de l'expérience. La liaison peut être réalisée dans des plaques de microtitration, des tubes à essais, des microtubes, toute vaisselle permettant de contenir les différents réactifs. Une protéine de fusion peut être produite qui permet la liaison de la, protéine à une matrice. Par exemple, des protéines de fusion Fbox/GST (glutathione S transferase) peuvent être adsorbées sur des billes de sépharose qui sont ensuite mis en présence du partenaire marqué au 35S et du composé testé. Ce mélange est incubé dans des conditions favorables à la formation du complexe, des conditions physiologiques en terme de sel et de pH par exemple. Apres cette incubation, les billes sont lavées pour retirer tout matériel non fixé, la matrice immobilisée et la radioactivité déterminée directement (les billes sont placées dans du liquide à scintillation par exemple), ou dans le surnageant après dissociation des complexes. Les complexes peuvent également être dissociés de la matrice, séparés par une électrophorèse de type SDS-PAGE, et le niveau de protéine Fbox ou de partenaire trouvé dans
la fraction de bille quantifié sur gel en utilisant les techniques d'électrophorèse standard.
L'interaction entre deux molécules peut également être déterminée en utilisant la technique de FRET (Fluorescence résonance energy transfer). Le principe est basé sur le fait que le transfert d'énergie qui se produit entre deux fluorophores quand ils sont proches ( < 10nm), et que le spectre d'émission du premier fluorophore (le donneur) recouvre le spectre d'excitation du second (l'accepteur).
Une association étroite entre deux fluorophores adaptés et l'excitation du donneur, se traduit donc par une augmentation de la fluorescence de l'accepteur et/ou une diminution de la fluorescence du donneur par FRET (Herman, 1989).
Cette technique peut notamment être appliquée à l'étude de l'interaction entre des protéines Fbox et leurs substrat et être utilisée pour identifier des inhibiteurs ou des activateurs de l'interaction. Comme le FRET est une méthode spectroscopique non destructive pour mesurer les interactions moléculaires, elle peut se faire sur des cellules vivantes.
L'invention est donc aussi relative à un procédé pour cribler des composés modulant l'interaction entre un polypeptide à boîte F et une protéine appartenant à un complexe SCF, comprenant les étapes suivantes : a) mettre en contact un polypeptide à boîte F tel que défini ci-dessus, une protéine appartenant à un complexe SCF et le composé candidat à tester ; b) détecter les complexes éventuellement formés entre le polypeptide à boîte F et la protéine appartenant au complexe SCF.
Test dans des systèmes cellulaires L'invention fournit également des méthodes expérimentales cellulaires pour identifier des agents agonistes ou antagonistes modulant l'activité des protéines Fbox. L'effet d'un composé sur l'expression d'un gène codant une protéine Fbox peut être déterminé par des expériences de transfection en utilisant un gène rapporteur. Ce gène rapporteur peut être n'importe quel gène codant une protéine quantifiable, par exemple la luciférase ou le gène CAT. Le niveau d'expression de ce gène rapporteur est alors déterminé en présence ou en l'absence du composé.
Une autre application des méthodes cellulaires est le double hybride chez la levure (Gyuris et al., 1993), adapté à l'isolement de peptides naturels
(provenant par exemple d'une banque d'expression d'ADNc), ou synthétiques (d'une banque d'expression de cadres de lecture au hasard), interagissant avec un polypeptide de l'invention. Ce polypeptide interactant peut ensuite être utilisé pour détecter une augmentation ou une diminution de son interaction avec la protéine Fbox, permettant donc l'identification d'agonistes ou d'antagonistes.
Le système de conjugaison peut être effectué dans des cellules entières, tirant avantage des techniques de culture cellulaire. Par exemple, le système de conjugaison peut être constitué dans un système de cellules eucaryotes en culture, y compris les cellules de mammifères et de levure. Les avantages d'effectuer l'expérimentation dans une cellule intacte incluent la possibilité de détecter des inhibiteurs qui sont fonctionnels dans un environnement plus proche de celui que l'utilisation thérapeutique de l'inhibiteur nécessitera, incluant la capacité de l'agent de rentrer dans la cellule. De plus, certaines des expériences in vivo sont compatibles avec une analyse à grande échelle, comme cela est indiqué plus bas.
Les composants du système de conjugaison de l'ubiquitine peuvent être endogènes à la cellule sélectionnée pour effectuer l'expérience. Autrement, certains ou tous les composants peuvent provenir de sources exogènes. Par exemple, des protéines de fusion peuvent être introduites dans la cellule par des techniques recombinantes (comme l'utilisation d'un vecteur d'expression), ou en microinjectant dans la cellule la protéine de fusion elle-même ou l'ARNm codant cette protéine.
Dans tous les cas, la cellule n'est manipulée qu'après incubation avec un inhibiteur candidat afin de faciliter la détection de l'ubiquitination ou la dégradation de la cible. Comme décrit plus haut, pour des expériences réalisées avec des mélanges reconstitués de protéines ou des Iysats, l'efficacité du candidat inhibiteur est évaluée en mesurant des caractéristiques directes de la protéine cible, tel que le changement de poids moléculaire par des méthodes électrophorétiques, ou par détection dans un test de liaison. Dans ce cas, la cellule doit être Iysée à la fin de l'incubation avec l'agent candidat, et le Iysat manipulé dans une étape de détection de la même manière que précédemment.
Dans ces expériences utilisant des cellules entières, l'utilisation d'un gène rapporteur peut également s'avérer judicieuse. Un gène rapporteur comprend tout gène qui exprime un produit détectable, sous forme d'ARN ou de protéine.
Les gènes rapporteurs privilégiés sont ceux qui sont détectables directement. Ce gène rapporteur peut être inclus dans une construction sous la forme d'un gène de fusion avec la protéine cible d'intérêt.