INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
De manière classique, pour agir sur une protéine endogène, on exprime dans la même cellule une séquence d'ADN exogène dont le produit de transcription ou de traduction intervient de manière positive ou négative, selon l'application envisagée, sur l'expression ou l'activité de ladite protéine. A titre d'exemples, on citera les techniques de suppression antisens ou de co-
suppression, qui sont actuellement fréquemment mises en #uvre pour moduler l'expression de divers gènes cibles.
Il est préférable, dans un grand nombre de cas, de cibler l'expression de cette séquence exogène à certaines cellules et certains tissus, afin d'éviter toute interférence avec d'autres fonctions de la plante.
Ainsi, pour agir sur des voies de biosynthèse des constituants des parois secondaires, il est souhaitable de disposer de promoteurs spécifiques de ces tissus.
Dans le cadre de travaux concernant les gènes impliqués dans la biosynthèse des parois végétales, les Inventeurs ont constaté qu'une protéine, précédemment référencée sur GenBank sous le n d'accession BAB09906 dans le cadre du séquencage complet du génome d'Arabidopsis thaliana, était une P-xylosidase spécifiquement exprimée dans la fraction pariétale. Le gène codant pour cette protéine est dénommé ci-après AtBXL1.
Les Inventeurs ont également isolé le promoteur du gène AtBXL1, et ont exprimé le gène rapporteur uidA (GUS) codant pour la P-glucuronidase sous contrôle de ce promoteur. Ils ont ainsi observé que l'expression du gène rapporteur était restreinte aux tissus (xylème et fibres lignifiées) contenant des parois secondaires en cours de formation.
La séquence de 1988 pb en amont du codon d'initiation de la traduction du gène AtBXL1, et qui comprend le promoteur dudit gène, est représentée dans la liste de séquences en annexe sous le numéro SEQ ID NO: 1.
Un promoteur possédant un profil d'expression similaire à celui du promoteur AtBXL1 a été décrit précédemment . il s'agit du promoteur du gène EgCAD (FEUILLET et al., Plant Molecular Biology, 27,651-654, 1995 ; SAMAJ et al., Planta, 204(4), 437-443,1998).
Toutefois, l'analyse des séquences de ces promoteurs montre qu'ils présentent une structure différente : le
promoteur du gène AtBXLl possède une boîte de réponse à l'éthylène (ERE, localisée en-164 en amont du codon d'initiation de la traduction) et une boîte de réponse aux gibbérellines (P-Box, en-289 en amont du codon d'initiation de la traduction) mais pas de boîte de réponse à l'auxine ; le promoteur du gène EgCAD possède des boîtes de réponse à l'auxine (AuxRR-Core, en-305 en amont du codon d'initiation de la traduction), et à l'acide abcissique (ABRE, en-157 en amont du codon d'initiation de la traduction) mais pas de boîtes de réponse à l'éthylène, ou de boites de réponse aux gibbérellines.
La présente invention a pour objet un polynucléotide constituant un promoteur spécifique des tissus végétaux impliqués dans la formation des parois secondaires, caractérisé en ce qu'il comprend les séquences de régulation de la transcription du promoteur du gène AtBXLl d'Arabidopsis thaliana.
Selon un mode de réalisation préféré d'un promoteur conforme à l'invention, il comprend le polynucléotide de séquence SEQ ID NO: 1.
au groupe acide carboxylique de l'haptène modifié par succinylation (en 5'sur le ribose) a été réalisé directement.
1. Caractérisation des anticorps.
Les antiprotéases (Saquinavir (SQV) et Nelfinavir (NFV)) et un analogue nucléosidique, la ddA, ont été couplés à la KLH par l'intermédiaire d'un bras intercalant. Les anticorps obtenus chez le lapin ont été caractérisés à l'aide d'un traceur radiomarqué à l'iode sur l'haptène préalablement modifié par le dipeptide tyrosyllysine.
Pour le Saquinavir, les anticorps produits ont été caractérisés de différentes façons : en RIA avec deux traceurs radiomarqués à l'iode 125 et en ELISA avec une forme immobilisée de l'antigène. Dans un premier temps, les anticorps anti-SQV ont été caractérisés en test RIA avec comme traceur l'hémisuccinate du Saquinavir couplé au dipeptide Glycyl-Tyrosine (SQV-HS-G-Y*). L'affinité de ces anticorps vis-à-vis du SQV s'est avérée faible (64 nM). Alors ces anticorps ont été caractérisés en test ELISA avec la forme immobilisée de l'antigène, SQV-HS-BSA sur une phase solide. Les caractéristiques de ces anticorps antiSQV, établies dans un test ELISA, sont présentées dans le tableau 1 ci-dessous.
Analogues IC 50 finale (M) Saquinavir 2,6. 10-9 SQV-HS 3. 10-10 SQV-HS-G-Y 1. 10 ijes acides aminés sont présentes en fonction de la nomenclature internationale.
* représente l'isotope 125 I.
Il est constaté que le dérivé SQV-HS-G-Y est 30 fois moins bien reconnu que l'hémisuccinate du Saquinavir (SQV-HS). Par conséquent, ce dernier a été couplé sur la chaîne latérale de la lysine du dipeptide tyrosyl-lysine afin de mimer le lien établi entre l'haptène et la protéine porteuse. Les anticorps anti-SQV ont été caractérisés en test radioimmunologique avec le SQV-HS-K-Y marqué à l'iode 125. Les caractéristiques des anticorps anti-SQV, établies dans un test RIA avec le traceur SQV-HS-K-Y*, sont présentées dans le tableau 2 ci-dessous.
Analogues IC 50 finale (M) Saquinavir 1,2. 10-8 SQV-HS 4, 4. 10-10 SQV-HS-K-Y 6. 10- SQV-HS-G-Y 1. 10 IDV nI NFV nI ni : non immunoreacni jusqu a aes conceno. auons o. e lu ivi.
Les caractéristiques des anticorps anti-SQV établies en ELISA et en RIA avec le traceur SQV-HS-K-Y* montrent que le SQV-HS-G-Y est en moyenne 30 fois moins bien reconnu que l'hémisuccinate du Saquinavir. En revanche, le SQV-HS-K-Y est aussi bien reconnu que l'hémisuccinate du Saquinavir.
Afin de généraliser cette approche à d'autres anticorps, nous avons caractérisé les anticorps dirigés contre une autre antiprotéase, le Nelfinavir à la fois avec les traceurs correspondants aux produits de couplage aux dipeptides Glycyl-Tyrosine et Tyrosyl-Lysine. Les résultats obtenus concernant les caractéristiques des anticorps anti-
NFV établies dans un test RIA avec les traceurs NFV-Ac- PAla-G-Y* et NFV-Ac-pAla-K-Y* sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous.
NFV-Ac-ssAla-G-Y* NFV-Ac-ssAla-K-Y* IC50 (M) IC50 (M) NFV 510-9 410-" NFV-Ac-pAla-COOH 2, 810'" 1, 710-9 NFV-Ac-ssAla-G-Y 3,2 10-10 6 10-10 NFV-Ac-ssAla-K-Y 3 10-l'8, 3 10-" IDV nI nI SQV nI nI nI : non immunoréactifjusqu'à des concentrations de 10 M.
Les caractéristiques des anticorps anti-NFV montrent que pour cet anticorps, les dosages immunologiques utilisant les traceurs NFV-Ac-ssAla-G-Y* et NFV-Ac-pAla-K-Y* sont équivalents en termes de sensibilité et de spécificité. De plus, ces deux molécules sont reconnues de façon identique dans chacun des tests indiquant qu'elles sont équivalentes en termes de reconnaissance par l'anticorps.
2) Estérification.
A titre d'exemples pour les réactions d'estérification, on peut citer les réactions suivantes, réactions pour lesquelles Y représente un groupe de liaison CO :
- réaction avec un acide carboxylique R-C02H : Nitrocell-OH + R-C02H # Nitrocell-O-CO-R + H20 - réaction avec un chlorure d'acide R-COCl ou transestérification par un ester R-COOR', telle que : Nitrocell-OH + R-COCI # Nitrocell-O-CO-R + HCl Nitrocell-OH + R-COO-R' # Nitrocell-O-CO-R + R'-OH - réaction avec un anhydride d'acide, par exemple : avec R8, R9 et Rio étant tels que - (CHR8) -CR9Rlo-C02H représente R.
3) Transestérification avec un carbonate.
La réaction suivante avec un carbonate R'- 0-CO-0-R peut être envisagée, réaction pour laquelle Y représente un groupe de liaison -CO-0-: Nitrocell-OH + R'-O-CO-O-R # Nitrocell-O-CO-O-R + R-OH
4) Estérification avec un chlorure de sulfonyle.
A titre d'exemples pour les réactions d'estérification avec un acide sulfonique ou un chlorure de sulfonyle, réactions pour lesquelles Y représente un groupe de liaison -SO2-, la réaction suivante peut être envisagée : Nitrocell-OH + Cl-SO2-R # Nitrocell-O-SO2-R + HCI 5) Réaction avec un isocyanate.
A titre d'exemples pour les réactions de formation de liaisons carbamates, réactions pour lesquelles Y représente un groupe de liaison -CO-NH-, la réaction suivante avec un isocyanate OCN-R peut être envisagée : Nitrocell-OH + OCN-R # Nitrocell-O-CO-NHR 6) Réaction avec un alcoxysilane.
A titre d'exemples pour les réactions de la nitrocellulose avec un alcoxysilane, réactions pour lesquelles Y représente un groupe de liaison -Si(R12)2-, la réaction suivante peut être envisagée :
Avec les R12 identiques ou différents, pouvant être une chaîne hydrocarbonée linéaire, ramifiée ou cyclique, de 1 à 500 atomes de carbone, saturée ou insaturée, pouvant comporter un ou plusieurs atomes de 0, N, S, Si et/ou P, de préférence de 1 à 10 atomes de carbone, les R12 ayant donc la même définition que les R3 définis précédemment.
Compte tenu des propriétés générales de la nitrocellulose, les conditions nécessaires aux réactions de greffage d'une chaîne hydrocarbonée de nature non polymère, doivent répondre, de préférence, à un certain nombre de critères.
En effet, la nitrocellulose de départ est un réactif dangereux, du fait de sa très forte inflammabilité et de son pouvoir explosif, ce qui impose une nécessité d'adapter les réactions citées cidessus, de faire un choix préférentiel de réactifs et d'appliquer des conditions expérimentales strictes.
Ainsi, pour obtenir un taux de greffage convenable, il est préférable de travailler en milieu solvant homogène, le solvant ou mélange de solvants devant être choisis de manière à pouvoir solubiliser, à la fois, la nitrocellulose de départ, les réactifs de greffage, et de préférence, la nitrocellulose modifiée après greffage des groupements-R.
De plus, le solvant ou mélange de solvants doit être inerte vis-à-vis de la réaction de greffage.
En effet, la réaction de greffage se faisant sur les
-OH libres de la nitrocellulose, le ou les mélanges de solvants doivent, de préférence, eux-mêmes être exempts de groupes-OH, qui pourraient co-réagir avec les réactifs de greffage, et exempts de groupes différents de-OH mais qui pourraient également réagir avec les réactifs de greffage (tels que les solvants à hydrogène labile, par exemple).
De préférence, les nitrocelluloses, selon l'invention, sont aptes à former un film ayant une déformation à la rupture #r supérieure ou égale à 5 %, notammant allant de 5 à 500 %, de préférence supérieure ou égale 15%, notamment allant de 15 à 400% et/ou une énergie à rupture par unité de volume Wr supérieure ou égale à 0,2 J/cm3, notamment allant de 0,2 à 100 J/cm3, de préférence supérieure à 1 J/cm3,notamment allant de 1 à 50 J/cm3.
La déformation à la rupture et l'énergie à rupture par unité de volume sont déterminées par des essais de traction effectués sur un film du polymèred'environ 200 um d'épaisseur. Le film est obtenu par coulage de solution du polymère sur une matrice téflonnée puis séchage sur une plaque thermostatée à 30 C pendant 7 jours, dans les conditions d'humidité ambiante.
Pour effectuer ces essais, le film est découpé en éprouvettes haltères de longueur utile 33 1 mm et de largeur utile 6 mm. La section (S) de l'éprouvette est alors définie comme : S = largeur x
épaisseur (cm2) ; cette section sera utilisée pour le calcul de la contrainte.
Les essais sont réalisés, par exemple, sur un appareil de traction commercialisé sous l'appellation Lloyd(5 LR5K. Les mesures sont réalisées à température ambiante (20 C).
Les éprouvettes sont étirées à une vitesse de déplacement de 33 mm/min, correspondant à une vitesse de 100 % d'allongement par minute.
On impose donc une vitesse de déplacement et on mesure simultanément l'allongement #L de l'éprouvette et la force F nécessaire pour imposer cet allongement. C'est à partir de ces données #L et F que l'on détermine les paramètres contraintes # et déformation #.
Il est ainsi obtenu une courbe contrainte # = (F/S) en fonction de la déformation s = (AL/Lo) x 100, l'essai étant conduit jusqu'à rupture de l'éprouvette, Lo étant la longueur initiale de l'éprouvette.
La déformation à la rupture #r est la déformation maximale de l'échantillon avant le point de rupture (en %) .
L'énergie à rupture par unité de volume Wr en J/cm3 est définie comme la surface sous cette courbe contrainte/déformation telle que :
La présente invention a également pour objet des procédés de préparation des nitrocelluloses précédemment décrites, lesdits procédés consistant à greffer dans un solvant inerte des chaînes hydrocarbonées R tels que définies ci-dessus sur tout ou partie des fonctions hydroxyle libre d'une nitrocellulose de départ.
Les nitrocelluloses de départ utilisées pour introduire les chaînes hydrocarbonées peuvent être des nitrocelluloses filmogènes utilisées habituellement dans les encres, peintures et formulations de vernis à ongles. Ces nitrocelluloses sont préparées industriellement par estérification de la cellulose par un mélange d'acide nitrique et d'acide sulfurique, ce dernier jouant le rôle de déshydratant et déplaçant l'équilibre d'estérification. Elles constituent ainsi' des nitrates de cellulose, désignés communément sous l'appellation de nitrocellulose.
De préférence, les nitrocelluloses de départ présentent un pourcentage d'azote de 10 à 13,5% en poids (une cellulose intégralement nitrée ayant un pourcentage d'azote de 14,14 %), ce qui correspond sensiblement à un taux de nitration de 2 à 2,25 groupes hydroxyles estérifiés par cycle anhydroglucose sur les 3 groupes-OH du cycle initialement disponibles pour la nitration. En d'autres termes, il reste entre 1 et 0,75
groupe-OH libre, pour le greffage de chaînes hydrocarbonées R, par cycle anhydroglucose de la nitrocellulose.
En ce qui concerne le poids moléculaire des nitrocelluloses de départ, celui-ci est exprimé généralement par la mesure de la viscosité (par chute de bille) d'une solution du polymère (ou collodion) dans un mélange de solvants à un % de polymère donné, ledit pourcentage de polymère étant généralement de 12 à 25 %. En général, le mélange de solvants utilisé pour la caractérisation est constitué de 25 % d'éthanol à 95 % dénaturé, 20 % d'acétate d'éthyle et 55 % de toluène, les pourcentages étant exprimés en poids par rapport au mélange de solvants.
De préférence, les nitrocelluloses de départ, utilisées pour préparer les nitrocelluloses modifiées selon l'invention, ont des viscosités de chute de bille allant de (1/4) à 1000 secondes, de préférence de (1/4) à 200 secondes, pour une concentration en polymère de 12,2 % dans le mélange de solvants cité ci-dessus.
La composition des granulés enrobés El figure dans le Tableau 2 : Tableau 2
%(w/w) Oxycodone HCl 65. 46 Syloid 244FP 1.96 Ethylcellulose N7 32. 60 Alcool-isopropylique
Exemple 2 : Comprimés multiparticulaires orodispersibles comprenant de l'oxycodone HCl comme principe actif.
Compression On utilise une machine à comprimer alternative "Manesty F3 press" équipée de poinçons POLO de 8 mm de diamètre.
Les granulés enrobés obtenus selon l'exemple 1 sont mélangés à des excipients de compression.
On réalise deux types de comprimés, respectivement CI et C2 comprenant des proportions relatives différentes de granulés enrobés d'oxycodone HCl.
Les comprimés Cl et C2 sont dosés respectivement à 19,8 et à 10 mg d'oxycodone HCl , selon les indications du Tableau 3 : Tableau 3
C1 C2 Constituants % en poids % en poids Granulés enrobés d'oxycodone 19,8 10.0 HCl Mannitol 300 33.2 37. 3 Mannitol 60 33.2 37. 3 Crospovidone 9.8 10. 0 Arôme orange 1.0 1.0 Syloid 244FP 1.0 0. 4 Stéarate de magnésium 2.0 2.0 Aspartame -- 2 Total 100 100
Les comprimés Cl et C2 présentent les caractéristiques indiquées au Tableau 4 :
Tableau 4 C1 C2 Proportion théorique 20% 10% granulés/comprimé Poids (mg) 156. 0 308.6 Dureté (kP) 1,5 1,5 Friabilité non déterminé non déterminé Temps de désintégration en bouche 10-15 sec. 15 sec.
On établit un profil de dissolution comparatif entre les granulés enrobés de l'exemple 1 (désignés par El) et les comprimés de formule Cl et C2 dans les conditions suivantes : - appareil : USP type II - vitesse des pales : 100 tours par minute - volume : 900 ml - température : 37.0 C 0.5 C - détection : UV directe à 244 nm - milieu de dissolution: HC1 0. 01 N (pH = 2) Les résultats enregistrés sont réunis dans le Tableau 5 : Tableau 5
Oxycodone libérée (%(w/w) Temps (heure) El C1 C2 0. 5 16 37 43 1 30 53 58 2 47 74 78 4 69 92 95 6 78 95 98 8 81 96 99 10 @ 81 96 99 Conclusion Il est possible de déduire des résultats réunis au Tableau 5, que la compression provoque une rupture du film d'éthylcellulose, ce qui entraîne une accélération de la libération du principe actif.
Il s'ensuit que les propriétés mécaniques du film d'enrobage ne sont pas adaptées à la compression sous forme de comprimé orodispersible à libération prolongée.
Exemple 3 : Granules enrobés comprenant de la théophylline comme principe actif.
Montage sur neutres On réalise l'opération dans un lit d'air fluidisé GLATT GPCG-3 équipé d'un insert Würster ( bottom spray ).
1500 grammes de théophylline sont mis en suspension dans 4500g d'isopropanol dans lequel on a préalablement solubilisé 262. 5 grammes de PVP K29 c'est-à-dire de polyvinylpyrrolidone ou povidone, K29, la valeur de K exprimant le poids moléculaire moyen des povidones calulée d'après la viscosité relative dans l'eau et définie dans la Pharmacopée Européenne (section 2. 2.1.2 et 2. 3.2.1), utilisé comme agent liant [soit 17% (w/w) rapport à la masse de théophylline].
Les diols choisis préférentiellement sont l'éthylèneglycol et le diéthylèneglycol.
Les polyesters sulfonés hydrodispersables préférés sont ceux qui ont une masse moléculaire moyenne en nombre comprise entre 10. 000 et 35. 000, un indice d'acide inférieur à 5 mg de KOH/g, un taux de soufre compris entre 0,8 et 2 % poids, de préférence entre 1,2 et 1,8 %. Comme polyesters de ce type, on peut utiliser notamment les produits commercialisés par RHODIA sous la marque GEROL PS20.
Les silanes hydroxylés et aminosalifiés qui peuvent être des éléments constitutifs du promoteur (C) sont obtenus à partir de précurseurs non salifiés, parmi lesquels on peut citer comme exemples les monoaminetrihydroxy-monosilanes, tels que le : NH2 (CH2)3-Si(OH)3 , éventuellement oligomérisé par condensation partielle des SiOH.
Ceci étant précisé, le promoteur d'adhérence hydrosoluble (C) comprend, de préférence, des POS hydroxylés, aminés et salifiés.
Ces POS aminés et salifiés constituant le promoteur (C) sont avantageusement formés de plusieurs unités récurrentes de formule moyenne (I) suivante : (R1)x(R2)y(OH)zsiO4 - (x+y+z) 2 (I) dans laquelle : # R1 représente un groupement monovalent exempt d'azote, de nature identique ou différente d'une unité récurrente à l'autre, et correspondant à un alkyle en Ci-Ce, un aryle, un alcényle en C2-C8, ou un acrylate, chacun de ces groupements étant éventuellement substitué, # R2 étant de nature identique ou différente d'une unité récurrente à l'autre et répondant à la formule suivante : - R4 - N(+) R5R6, X(-) * R4 étant un radical hydrocarboné en C1-C10, éventuellement substitué, * les groupements R5, R6sont identiques ou différents et représentent l'hydrogène ou un radical hydrocarboné en C1-C10, éventuellement substitué, ou -R4-NH3(+), X(-), * ou bien encore les groupements R5 et R6 sont différents de l'hydrogène et forment ensemble un cycle à 5-7 chaînons renfermant au moins un hétéroatome, de préférence l'azote ou l'oxygène, * et X représentant un contre-anion choisi parmi les carboxylates, les halogénures et ; # x, y et z sont des nombres entiers ou décimaux positifs inférieurs à 4 ; # et x+y+z <4 .
De préférence, le POS aminé et salifié est une résine présentant une fonctionnalité moyenne en silicium supérieure à 2, correspondant à x + y 0,1 # x # 1,1.
Cela correspond à une résine POS : # d'une part, hydroxylée et comprenant des motifs siloxyles T et éventuellement M et/ou D et/ou Q ou bien encore des motifs siloxyles Q et M et/ou D et/ou T ; # d'autre part, portant au moins un motif aminé et salifié.
Les motifs siloxyles M, D, T, Q du POS (C) sont définis comme suit : - motif M = R3 SiO1/2 - motif D = R2 Si02/2 - motif T = RSiO3/2 - motif Q = SiO4/2 Les radicaux R sont identiques ou différents et correspondent : o à un radical R1 tel que défini ci-dessus (comme par exemple un radical alkyle (e. g. méthyle, éthyle, isopropyle, tertiobutyle et n- hexyle), un hydroxyle, alcényle (e. g. vinyle, allyle) o ou bien encore un motif R2aminosalifiable ou salifié, tel que défini ci-dessus.
A titre d'exemple de résine POS hydroxylée linéaire, utilisable comme promoteur (C), on peut citer le PolyMéthylSiloxane, dont les deux extrémités comportent un hydroxyle et dont chaque atome de silicium est porteur d'un motif aminosalifiable ou salifié.
Les résines plus particulièrement sélectionnées sont celles du type T(OH), DT (OH), DQ(OH), DT (OH), MQ(OH), MDT(OH) MDQ(OH) ou les mélanges de celles-ci. Dans ces résines, chaque groupement OH est porté par un atome de silicium appartenant à un motif D, T ou Q.
Ces résines sont des produits de condensation (mono ou polycondensationhétéro ou homo condensation) de monomères, d'oligomères ou de polymères POS porteurs de groupements condensables, de préférence de nature hydroxylique.
Outre ces hydroxyles, le promoteur (C) comporte un ou plusieurs motifs aminosalifiables ou salifiés identiques ou différents entre eux.
Dans ces motifs, l'amine peut être primaire, secondaire ou tertiaire. Selon des variantes, elle peut être incluse dans un cycle ou être incluse dans des groupements isocyanurates ou HALS (type pipéridine ou autre).
Au sens de l'invention, les groupements HALS peuvent être définis comme une chaîne hydrocarbonée cyclique (HALS) de formule : dans laquelle : # les radicaux R7, identiques ou différents entre eux, sont choisis parmi les radicaux alkyles, linéaires ou ramifiés, ayant de 1 à 3 atomes de carbone, phényle et benzyle ; # R8 est choisi parmi un atome d'hydrogène, les radicaux alkyles linéaires ou ramifiés, ayant de 1 à 12 atomes de carbone, les radicaux allkylcarbonyles, où le reste alkyle est un reste linéaire ou ramifié ayant de 1 à 18 atomes de carbone, les radicaux phényle et benzyle et un radical 0 ; # t est un nombre choisi parmi 0 et 1 ; # de préférence les radicaux R7 sont des méthyles, le radical R8 est un nombre d'hydrogène ou un radical méthyle et t étant avantageusement un nombre égal à 1 .
Les motifs aminosalifiables ou salifiés sont avantageusement choisis de telle sorte qu'ils soient aptes à se lier avec le support sur lequel l'émulsion est appliquée, de manière à procurer de l'adhérence, et ce sans mettre à mal l'hydrosolubilité souhaitable pour le promoteur (C).
Pour plus de détails sur ces promoteurs (C) de type résine silicone hydrosoluble, aminosalifiable ou salifiée et hydroxylée, et sur leur obtention, on se référera au brevet FR-B- 2 753 708 ou à la demande de brevet européen EP-A- 0 675 128, dont les contenus sont intégrés par référence dans le présent exposé.
On introduit, dans le lit d'air fluidisé, 1500 grammes de neutres constitués d'amidon et de saccharose, d'une taille de l'ordre de 250-350 m.
On pulvérise sur les neutres la susdite suspension alcoolique contenant la théophylline.
Enrobage à l'éthylcellulose N7 On réalise l'opération dans un lit d'air fluidisé GLATT GPCG-3 équipé d'un insert Würster ( bottom spray ).
On enrobe 600 grammes de granules obtenus à l'étape précédente par pulvérisation d'une solution d'éthylcellulose N7 dans l'alcool isopropylique telle que préparée à l'exemple 1, contenant en outre du talc micronisé, correspondant à 10%(w/w), par rapport à la masse sèche de polymère.
On applique une quantité de polymère correspondant à 5% (w/w), en gain de poids par rapport à la masse de granules à enrober.
La répartition granulométrique des particules enrobées obtenues et désignées par E2 est indiquée dans le Tableau 6 : Tableau 6
Ouverture de maille E2 >0.500mm 6. 6% 0.425mm-0.500mm 46. 2% 0.355mm-0.425mm 38. 2% 0.250mm-0.355mm 9. 0% Surenrobage protecteur On réalise l'opération dans un lit d'air fluidisé GLATT GPCG-3 équipé d'un insert Würster ( bottom spray ).
On enrobe les granules enrobés E2, obtenus à l'étape précédente, par pulvérisation d'une solution aqueuse de PEG 4000 contenant en outre du talc micronisé correspondant à 10%(w/w), par rapport à la masse sèche de PEG.
On applique l'enrobage protecteur en une quantité correspondant à 20% (w/w), calculée en gain de poids par rapport à la masse de granules E2.