INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Comme charges pouvant être utilisées dans la composition selon l'invention, on peut notamment citer la poudre de silice, le talc, les particules de polyamides et notamment celles vendues sous la dénomination ORGASOL par la société ATOCHEM ; les poudres de polyéthylène, les microsphères à base de copolymères acryliques, telles que celles en copolymère diméthacrylate d'éthylène glycol/méthacrylate de lauryle vendues sous la dénomination POLYTRAP par la société DOW CORNING ; les poudres expansées, telles que les microsphères creuses, et notamment, les microsphères commercialisées sous la dénomination EXPANCEL par la société KERMANORD PLAST ou les microsphères commercialisées sous la dénomination MICROPEARL F 80 ED par la société MATSUMOTO ; les poudres de matériaux organiques naturels, tels que les amidons de maïs, de blé ou de riz, réticulés ou non, telles que les poudres d'amidon réticulé par l'anhydride octénylglosuccinique, commercialisées sous la
De même que dans l'exemple 1, les caractéristiques de ces trois supports figurent dans le tableau suivant.
Glassine SCK WO 01/04418 standard Ex. Ex.
Amidon 77-929 .. de la PVOH 70-80 4-1910 Composition de la couche de surface Carboxy Méthyl 15-25 (en % en poids Cellulose sec) POS 81 81,8 Copolymère 16.6 2 16.7 méthacrylate Insolubilisant 5 8 48 2.4 Cire de 1,44 calandrage Anti-mousse 0.15 Support à base de Support 100% Support 100% Support 100% Cellulosique fibres cellulosiques Cellulosique Cellulosique 60g/m2 + grammage 60g/m2 60g/m2 Grammage de la 1-2 g/m2 1-2 g/m2 2 - 3 g/m2 couche par face 1-2 g/m2 1-2 g/m2 2-3 g/m2 Process Size press Size press Size press Size press + + + + supercalandrage Calandrage supercalandrage supercaland rage 1. SILICOLEASE 700 # (RHONE POULENC) 6. ERKOL 28/99 # (ERKOL) 2. PRIMAL HG44 (RHOM & HAAS) 7. CARBOCELL T 650 # (LAMBERTI) 3. BACOTE 20 # (MEL CHEMICAL) 8. CARTABOND TSI # (CLARIANT) 4. WAX CARTASEAL FGU (MEL CHEMICAL) 9.PENFORD GUM 290# (PENFORD CORPORATION) 5. TPE 714# (HENKEL) 10. AIRVOL 325 # (AIR PRODUCTS)
3/SILICONAGE DES SUPPORTS DES EXEMPLES 1 ET 2 PAR LTC L'aptitude des supports fabriqués selon les exemples 1 et 2 à être siliconés par LTC est déterminée par rapport au taux de réticulation (poly-test) et au taux d'accrochage (Rub-test).
Un Rub-test supérieur à 85 % signifie que l'accrochage du silicone est bon.
Un poly-test supérieur à 95 % atteste d'une réticulation satisfaisante.
Le silicone utilisé pour le siliconage LTC contient un agent de réticulation commercialisé par WACKER sous la dénomination XL V525, le système complet utilisé est le suivant : Résine D.920 : 20 g XL V525 1,432 g Cat. O. L. : 0,214 g Les conditions de réticulation sont de 80 C pendant 30 secondes.
Les résultats apparaissent dans le tableau suivant et sont représentés sur la figure 1. il Paper ----- - ~~~1- }yb Jo/2~~1 Poly test (%) ! Papier couché LTC 97,01 97,6 11 .GJassmepigmenteeJLTC, ~ ~.~~~~~9~~~ 1 ~98~,1 ~ ! Glassine LTC - ~~95 - - J 96,0^ 1~~- ~nu ----!
WO 01/04418-EX. 2 25,7 96,8 SCK 39,6 98,2
Comme le montrent les résultats, les supports de l'invention dont le revêtement contient du SBR présentent des propriétés d'accrochage du silicone LTC bien supérieures aux supports de l'art antérieur.
4/ POLYMERE DANS LA COMPOSITIONRECOUVRANT LE SUPPORT Cet exemple vise à démontrer que seuls les copolymères à base de styrène butadiène permettent d'obtenir un bon accrochage des silicones LTC, contrairement à d'autres polymères, en particulier les polymères appartenant à la famille des polymères acryliques et polyvinyl acétate.
Le protocole est le suivant : un support papier commercialisé sous la dénomination "silca white" par le Demandeur est enduit d'une composition comprenant 100 % en poids des polymères identifiés dans le tableau ci-après.
La couche est appliquée par couchage à raison de 1g/m2. Le papier couché est ensuite calandré.
Sur chaque échantillon est ensuite appliquée un silicone LTC dont la composition est la suivante : Résine D920 : 20 g Crosslinker V525 : 1,432 g Cat. O. L.. : 0,214 g Les conditions de réticulation sont de 80 C pendant 30 secondes.
Les différents polymères testés et leurs caractéristiques sont représentés dans le tableau suivant.
Ref. Fournisseurs Nature Rub-Test ' Poly-test XZ 96489 Dow Chemical Company SBR 96,8 97,6 DL920 Dow Chemical Company ACRYLONITRILE 96,5 98
Les concentrations en additif (sel, en sucre et/ou en polysaccharide) sont telles que les pressions osmotiques des phases aqueuses externe et interne sont équilibrées.
Par ailleurs, selon une caractéristique avantageuse de l'invention, on introduit dans la phase aqueuse externe de l'émulsion, au moins un agent épaississant.
Plus précisément, ledit agent épaississant est choisi parmi des polymères extraits de végétaux et éventuellement modifiés, des polymères du type des polysaccharides d'origine animale, végétale, bactérienne, des polymères synthétiques, notamment à base de polyoxyde d'éthylène et/ou de propylène; de diblocs acrylate de butyle/acide acrylique.
A titre d'illustration, on peut utiliser des polymères épaississants tels que les carraghénannes, les alginates, les carboxyméthyl celluloses, les méthylcelluloses, les hydroxypropyl celluloses, les hydroxyéthyl celluloses, les gellanes.
On peut de même employer des polymères épaississants du type des polysaccharides, la gomme xanthane, le guar et dérivés (tels que l'hydroxypropyl guar par exemple), les polydextroses, ou leurs combinaisons.
De préférence, la teneur en polymère épaississant représente entre 0,1 et 2 % en poids par rapport à la phase aqueuse externe, de préférence entre 0,1 et 0,5 % en poids par rapport à la phase aqueuse externe.
L'émulsion multiple préparée est de préférence telle que le rapport pondéral d'émulsion inverse par rapport à la phase aqueuse externe dans l'émulsion multiple est compris entre 10/90 et 90/10, plus particulièrement compris entre 30/70 et 70/30.
La préparation de l'émulsion multiple peut être réalisée selon toute méthode connue.
A titre d'exemple, on peut procéder de la manière suivante. On prépare la phase aqueuse externe en mélangeant le tensioactif et/ou le polymère amphiphile, éventuellement l'additif (sel sucre polysaccharide), éventuellement un agent initiateur, éventuellement le polymère épaississant, et l'eau.
De préférence, on mélange tout d'abord l'eau et le tensioactif et/ou le polymère amphiphile, sous agitation, puis s'ils sont présents, les autres constituants.
L'obtention de la phase aqueuse externe a de préférence lieu à une température inférieure ou égale à la température de polymérisation des monomères principaux et/ou des monomères réticulants, le cas échéant des co-monomères et/ou des initiateurs.
Avantageusement la température est voisine de la température ambiante (entre 20 et 30 C) .
On procède ensuite à la préparation de l'émulsion multiple proprement dite en ajoutant l'émulsion inverse à la phase aqueuse externe.
La préparation de l'émulsion multiple a lieu de préférence sous agitation, en ajoutant au départ l'émulsion inverse lentement.
L'agitation peut être faite au moyen d'une pale cadre. Typiquement, et sans intention de s'y limiter, la vitesse d'agitation est de l'ordre de 600 tr/minute.
L'obtention de l'émulsion multiple a de préférence lieu à une température inférieure ou égale à la température de polymérisation des monomères principaux et/ou des monomères réticulants et éventuellement des co-monomères et/ou agents initiateurs, présents dans la phase organique. De manière préférée, l'obtention de l'émulsion multiple est réalisée à température ambiante (entre 20 et 30 C).
Dans ce mode de réalisation, le profil en coupe de la section de réflexion normale 14A1 dans le plan comprenant l'axe optique Ax est réglé à une forme parabolique tel que le centre luminescent O est un foyer. Le profil en coupe de la surface de réflexion interne 14A2 dans le plan et une forme hyperbolique ayant le centre luminescent O comme foyer. Cependant, d'autres profils en coupe peuvent aussi
être utilisés.
On décrit maintenant une première variante du mode de
réalisation précédent.
La figure 6 est une vue analogue à la figure 4 et
représente un organe transparent 24 de cette variante.
Comme représenté, l'organe transparent 24 diffère de l'organe 14 en ce que la configuration de la cavité 24a d'incidence de lumière est différente de celle de la cavité
14a de l'organe transparent 14 du mode de réalisation.
Plus précisément, la cavité 24a de l'organe transparent 24 a une forme cylindrique ayant un fond. Un organe de remplissage transparent 26 est introduit entre la cavité 24a et la résine d'étanchéité 12B de la source de lumière à diode photoémissive 12. L'organe de remplissage 26 est formé d'une matière à base de résine de synthèse dont l'indice de réfraction est pratiquement égal à celui de l'organe transparent 24. La lumière de la diode photoémissive passe en ligne droite à travers l'organe transparent 24 grâce à l'organe de remplissage 26, depuis le centre luminescent de
la source de lumière 12.
La section de réflexion normale 24A1 et la section de réflexion interne 24A2 constituant toutes deux la surface avant 24A de l'organe transparent 24, et les éléments réfléchissants 24s formés à la surface arrière 24B de l'organe 24 ont une forme pratiquement identique à celle de l'organe
transparent 14 du mode de réalisation considéré.
Lorsque la configuration adoptée est celle de la variante, on peut obtenir le même effet qu'avec le mode de
réalisation considéré.
Dans la variante, l'organe de remplissage 26 dont l'indice de réfraction est pratiquement égal à celui de l'organe transparent 24 est placé entre la cavité 24a et la résine 12B d'étanchéité de la source de lumière 12 si bien qu'une réfraction et une surface limite entre l'organe de remplissage 26 et l'organe transparent 24 est pratiquement évitée. La forme de la cavité 24a de l'organe 24 peut donc être réglée arbitrairement. Dans la variante, la cavité 24a d'incidence de lumière a une forme simple, c'est-à-dire celle d'un cylindre ayant un fond. Cependant, la cavité d'incidence de lumière peut évidemment être réalisée avec
une forme différente.
formules dans lesquelles k et t sont égaux à 0 ou 1, la somme k + t étant égale à 1 ; Rg désigne un atome d'hydrogène ou un radical méthyle ; R7 et R8, indépendamment l'un de l'autre, désignent un groupement alkyle ayant de 1 à 22 atomes de carbone, un groupement hydroxyalkyle dans lequel le groupement alkyle a de préférence 1 à 5 atomes de carbone, un groupement amidoalkyle inférieur (C1-C4), ou R7 et R8 peuvent désigner conjointement avec l'atome d'azote auquel ils sont rattachés, des groupement hétérocycliques, tels que pipéridinyle ou morpholinyle ; R7 et Rg indépendamment l'un de l'autre désignent de préférence un groupement alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone ; Y- est un anion tel que bromure, chlorure, acétate, borate, citrate, tartrate, bisulfate, bisulfite, sulfate, phosphate. Ces polymères sont notamment décrits dans le brevet français 2.080.759 et dans son certificat d'addition 2.190.406.
(10) Le polymère de diammonium quaternaire contenant des motifs récurrents répondant à la formule : R10 R12 - N+ - A1 - N±B1 - (VII) R11 X ~ R13 X- formule (VII) dans laquelle : R10, R11, R12 et R13, identiques ou différents, représentent des radicaux aliphatiques, alicycliques, ou arylaliphatiques contenant de 1 à 20 atomes de carbone ou des radicaux hydroxyalkylaliphatiques inférieurs, ou bien R10, R11, R12 et R13, ensemble ou séparément, constituent avec les atomes d'azote auxquels ils sont rattachés des hétérocycles contenant éventuellement un second hétéroatome autre que l'azote ou bien R10, R11, R12 et R13 représentent un radical alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié substitué par un groupement nitrile, ester, acyle, amide ou -CO-O- R14-D ou-CO-NH- R14-D où R14 est un alkylène et D un groupement ammonium quaternaire ; A1 et B1 représentent des groupements polyméthyléniques contenant de 2 à 20 atomes de carbone pouvant être linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, et pouvant contenir, liés à ou intercalés dans la chaîne principale, un ou plusieurs cycles aromatiques, ou un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre ou des groupements sulfoxyde, sulfone, disulfure, amino, alkylamino, hydroxyle, ammonium quaternaire, uréido, amide ou ester, et X- désigne un anion dérivé d'un acide minéral ou organique;
A1, R10 et R12 peuvent former avec les deux atomes d'azote auxquels ils sont rattachés un cycle pipérazinique ; en outre si A1 désigne un radical alkylène ou hydroxyalkylène linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, B1 peut également désigner un groupement - (CH2) n-CO-D-OC-(CH2)n- dans lequel n est compris entre 1 et 100 et de préférence entre 1 et 50, et D désigne : a) un reste de glycol de formule : -O-Z-O-, où Z désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié ou un groupement répondant à l'une des formules suivantes : -(CH2-CH2-O)x-CH2-CH2- - [CH2-CH(CH3)-O]y-CH2-CH(CH3)- où x et y désignent un nombre entier de 1 à 4, représentant un degré de polymérisation défini et unique ou un nombre quelconque de 1 à 4 représentant un degré de polymérisation moyen ; b) un reste de diamine bis-secondaire tel qu'un dérivé de pipérazine ; c) un reste de diamine bis-primaire de formule : -NH-Y-NH-, où Y désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié, ou bien le radical bivalent -CH2-CH2-S-S-CH2-CH2- ; d) un groupement uréylène de formule : -NH-CO-NH- .
On peut utiliser plus particulièrement les polymères qui sont constitués de motifs récurrents répondant à la formule (VIII) suivante : R10 R12 -N(CH2)n-N-(CH2)P @ (VIII) R11 X- R13 X- dans laquelle R10, R11, R12 et R13, identiques ou différents, désignent un radical alkyle ou hydroxyalkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone environ, n et p sont des nombres
entiers variant de 2 à 20 environ et, X' est un anion dérivé d'un acide minéral ou organique.
(11) Les polymères de poly(ammonium quaternaire) constitués de motifs récurrents de formule (IX) : dans laquelle p désigne un nombre entier variant de 1 à 6 environ, D peut être nul ou peut représenter un groupement -(CH2)r -CO- dans lequel r désigne un nombre égal à 4 ou à 7, X- est un anion ; De tels polymères peuvent être préparés selon les procédés décrits dans les brevets U. S.A. n 4 157 388,4 702 906,4 719 282. Ils sont notamment décrits dans la demande de brevet EP-A-122 324.
Les polymères ou compositions polymères comprenant des structures étoiles ou H sont par exemple décrits dans les documents FR743077, FR2779730, US5959069, EP0632703, EP0682057, US6160080 et EP0832149.
Les polymères ou compositions polymères comprenant des structures arborescentes, ou arbre, sont par exemple décrits dans les documents FR2766197 et W09903909.
Les structures étoiles peuvent être obtenues par utilisation d'un composé multifonctionnel présentant au moins trois fonctions réactives, toutes les fonctions réactives pouvant être identiques ou différentes. Ce composé multifonctionnel peut être utilisé comme comonomère en présence d'autres monomères dans un procédé de polymérisation. Les structures étoiles comportent un c#ur et un certain nombre de branches polyamides, généralement au moins trois. Les branches sont liées au c#ur par une liaison covalente, par l'intermédiaire d'un groupement amide ou d'un groupement d'une autre nature. Le c#ur est un composé chimique organique ou organométallique, de préférence un composé hydrocarboné comportant éventuellement des hétéroatomes et auquel sont reliées les branches. Les branches sont des chaînes polyamides. Les chaînes polyamides constituant les branches sont de préférence du type de celles obtenues par polymérisation des lactames ou aminoacides, par exemple de type polyamide 6.
Le polyamide étoile préféré selon l'invention est un polyamide comprenant des chaînes macromoléculaires répondant aux formules suivantes: R1-[-C-X-(-Y-R2-Z-)n-R3]m (I) R4-[-Y-R2-Z-]p-R3 (II) dans lesquelles : -N- -cI Il - Y est le radical : R5 quand X et Z représentent le radical : ;
-C- -NIl - Y est le radical : 0 quand X et Z représentent le radical : R ; - C est une liaison covalente ou un radical hydrocarboné aliphatique pouvant comprendre des hétéroatomes et comprenant de 1 à 20 atomes de carbone, préférentiellement de 1 à 10 atomes de carbone ; - R1 est un radical hydrocarboné comprenant au moins 2 atomes de carbone, linéaire ou cyclique, aromatique ou aliphatique et pouvant comprendre des hétéroatomes, préférentiellement de 2 à 6 atomes de carbone ; - R2 est un radical hydrocarboné aliphatique ou aromatique ramifié ou non comprenant de 2 à 20 atomes de carbone, préférentiellement de 6 à 12 atomes de carbone ; - R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre l'hydrogène et/ou un radical hydrocarboné comprenant un groupement : - R5 représente l'hydrogène ou un radical hydrocarboné comprenant de 1 à 6 atomes de carbone ; -m représente un nombre entier compris entre 3 et 8 (bornes incluses), préférentiellement entre 3 et 4 ; -n représente un nombre entier compris entre 100 et 200 (bornes incluses), préférentiellement entre 150 et 200 ; -p représente un nombre entier compris entre 100 et 200 (bornes incluses), préférentiellement entre 150 et 200.
Ce polyamide étoile est notamment décrit dans le brevet US6160080, cité ici à titre de référence.
Le radical R1 peut être un radical choisi parmi le groupe cycloaliphatique, arylaliphatique, et aliphatique linéaire. Préférentiellement, dans ce cas là, le rapport massique entre le poids de chaînes polymériques de formule (I) et le poids total de chaînes polymériques de formules (I) et (II) est compris entre 0,10 et 1. Le radical R1 peut être un radical aromatique. Préférentiellement, dans ce cas là, le rapport massique entre le poids de chaînes polymériques de formule (I) et le poids total de chaînes polymériques de formules (I) et (II) est inférieur à 1, de préférence inférieur à 0,9.
R1 peut représenter un radical choisi parmi le radical cyclohexanontétrayle, le radical 1,1,1-triyle propane, le radical 1,2,3-triyle propane et le radical : ,l, N-CH-H2C-N 2 1-, Comme autres radicaux R1 convenables pour l'invention, on peut citer, à titre d'exemple, les radicaux trivalents de phényle et cyclohexanyle substitués ou non, les radicaux tétravalents de diaminopolyméthylène avec un nombre de groupes méthylène compris avantageusement entre 2 et 12 tels que le radical provenant de l'EDTA (acide éthylène diamino tétracétique), les radicaux octovalents de cyclohexanonyle ou cyclohexadinonyle, et les radicaux provenant de composés issus de la réaction des polyols tels que glycol, pentaérythritol, sorbitol ou mannitol avec l'acrylonitrile.
Généralement, les radicaux R2 sont des restes d'aminoacides ou de lactames. R2 peut être un radical pentaméthylénique. Dans ce mode de réalisation le polyamide a une structure type polycaproamide ou PA 6. D'autres radicaux R2 peuvent être utilisés tels que les radicaux undécaméthylénique qui conduisent à un polyamide à structure type PA 12. Il est également possible d'obtenir des polyamides présentant des radicaux R2 comprenant 8 ou 10 atomes de carbone correspondant respectivement à des polyamides de structure type PA9etPAll.
Le radical C, de préférence, est un radical méthylénique ou polyméthylénique tel que les radicaux éthyle, propyle ou butyle, ou un radical polyoxyalkylènique tel que le radical polyoxyethylènique.
Ainsi, les chaînes polymériques de formule 1 définissent un polyamide étoile comprenant des branches polyamides de type PA 6 dans un des modes de réalisation préférés de l'invention, et un noyau central constitué par un noyau cycloaliphatique.
Ces chaînes polymériques de formule (I) sont, dans un des modes préférés de l'invention, en mélange avec des chaînes polyamides linéaires de formule (II). La longueur ou le poids moléculaire des chaînes linéaires de formule (II) ou des branches du polyamide étoile peut être élevé. Ainsi, le polymère linéaire comme la chaîne de chaque branche du polymère étoile présente un Mn avantageusement supérieur à 5 000.
Préférentiellement, la composition selon l'invention comprend de 30 à 99 % en poids de polyamide branché, préférentiellement de 30 à 77 %, par rapport au poids total de la composition.
Le polyamide branché arbre préféré selon l'invention est un polyamide susceptible d'être obtenu à partir des monomères répondants aux formules suivantes : (A-R6)-R8-(R7-B)n (III) Dans lequel : - n est un nombre entier supérieur ou égal à 2, préférablement compris entre 2 et 10 (bornes comprises) ; - R6 et R7 peuvent être identiques ou différents et représenter une liaison covalente ou un radical hydrocarboné aliphatique, arylaliphatique, aromatique ou alkylaromatique ; - R8 est choisi parmi un radical aliphatique linéaire ou branché, un radical cycloaliphatique substitué ou non substitué, un radical aromatique substitué ou non substitué pouvant comprendre un ou plusieurs anneaux aromatiques et/ou hétéroatomes, et une chaîne polymérique pouvant comprendre un ou plusieurs hétéroatomes ; - A représente un groupe fonctionnel amine, sel d'amine, acide, ester, halogène d'acide ou amide; - B représente un groupe fonctionnel amine ou sel d'amine lorsque A représente un groupe fonctionnel acide, ester, halogène d'acide ou amide ; ou un groupe fonctionnel acide, ester, halogène d'acide ou amide lorsque A représente un groupe fonctionnel amine ou sel d'amine ; et au moins un des monomères di-fonctionnels suivant : A1-R9-A1 (VI) B1-R10-B1 (VII) A1-R11-B1 (VIII) Dans lesquels : - A1 représente un groupe fonctionnel choisi parmi acide, ester ou chlorure d'acide ; - B1 représente un groupe fonctionnel chois parmi amine ou sel d'amine ; et
- R9, R10 et Ru peuvent être identiques ou différents et représenter un radical hydrocarboné alkyl, arylalkyl, alkylaryl, cycloaliphatique ou aromatique, branché ou linéaire, substitué ou non substitué et/ou saturé ou insaturé.
Préférentiellement, R8 est un radical aromatique, R6 et R7 représentent une liaison covalente, B est un groupe fonctionnel acide, A est un groupe fonctionnel amine et n est égal à 2.
faible affinité pour la NKA-BO vers un état de plus haute affinité dont on détecte l'occupation.
Ainsi, le récepteur existe dans au moins deux états confonnationnels dont l'un préexiste à l'addition d'agoniste et l'autre apparaît lentement au cours du temps en présence d'agoniste.
La molécule A11, en stabilisant les états de faible affinité du récepteur, augmente la proportion de liaison rapide (de faible affinité) au détriment de la liaison lente qui reflète la stabilisation d'un état de plus haute affinité EXEMPLE 4 : par analyse de la liaison de NKA-Bo, d'autres molécules se comportant comme des effecteurs allostériques du récepteur NK2R des tachykinines.
L'identification d'autres effecteurs allostériques du récepteur NK2R des tachykinines est faite par l'analyse de la cinétique de dissociation de NKA-Bo liée au récepteur.
106 cellules HEK 293 exprimant le récepteur EGFP-NK2R sont mises en suspension dans du tampon Hepes (voir plus haut) et incubées avec de la NKA-Bo (20 nM) et l'une des molécules suivantes : 805, NP246, A11, H10, G11, F7, F3 et NP 234.
Les molécules A11et l'antagoniste compétitif connu SR 48968 sont introduits dans l'expérience comme contrôles positifs. La dissociation de NKA-Bo est enregistrée, dans une cuvette de spectrofluorimètre munie d'une agitation magnétique pendant 700 secondes, après avoir ajouté 10 M de NKA non fluorescente pour chasser la NKA-Bo liée. La cinétique de dissociation de NKA-Bo est enregistrée en présence de concentrations croissantes de chacune des molécules précitées.
La figure 7A montre une expérience typique de mesure de la vitesse de dissociation de NKA-Bo en présence de concentrations croissantes de la molécule 805.
Ces déterminations permettent de mesurer plusieurs paramètres expérimentaux : i) la vitesse de dissociation de NKA-Bo qui sera ensuite décomposée en une somme de relaxations exponentielles et ii) l'amplitude relative de chaque relaxation exponentielle qui donnera la mesure de la concentration fractionnelle de chacun des états confonnationnels détectés dans l'expérience. On détermine ainsi que la dissociation de NKA-Bo se produit en deux étapes caractérisées par des constantes de vitesse k1= 0,04 sec-1 et k2 = 0,008 sec-1et des amplitudes #1/#2 variables : #1/#2= 30/70 (sans
805) ; 11,2= 35/65 (1 uM 805) ; ?1I72= 9/31 (10 uM 805) et ,1/,2= 80/20 (50 /lM 805).