INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le fragment d'ADN de 94 pb éluait sous la forme d'un pic simple avec une absorbance maximale à 260 nm à un volume d'élution (Ve) de 11,11 ml (Figure 6A). L'ajout de faibles quantités de Hiss-EthR purifié au fragment d'ADN de 94 pb a entraîné l'élution d'un pic simple avec une absorbance maximale à 260 nm à un Ve de 10,27 ml (Figure 6 B). Comme ces résultats ont été obtenus dans les mêmes conditions salines que celles utilisées pour les analyses SPR, le volume d'élution décroissant de l'ADN en présence de His6-EthR correspond très certainement à une augmentation de la masse moléculaire du complexe d'ADN de 94 pb du fait de la liaison de l'octamère protéique au site opérateur. L'ajout de concentrations croissantes de His6-EthR au fragment d'ADN a conduit à l'apparition progressive d'un pic additionnel éluant 15,30 ml après la charge, avec une absorbance maximale à 280 nm (Figures 6C et 6D). Ce pic correspond à une molécule qui présente un rayon de Stokes pratiquement équivalent à celui du standard de masse moléculaire chymotrypsinogène A (25 000 Da) (Amersham Biosciences). Ces données ont été confirmées en déterminant le volume d'élution de HiS6-EthR en l'absence de fragment d'ADN (Figure 6E), et suggèrent fortement que, dans des conditions in vitro qui permettent à His6-EthR de se lier à son opérateur, le répresseur non lié n'adopte pas une grosse forme
multimérique, mais plutôt une forme monomérique. Cependant, étant donné que la chromatographie d'exclusion de taille est fondée sur le rayon de Stokes plutôt que sur la masse moléculaire perse, le fait que HiS6-EthR se dimérise en solution en l'absence de son site opérateur ne peut être exclu.
B.8. Oligomérisation de EthR in vivo Afin de déterminer si EthR peut se dimériser en l'absence de son ADN cible, le système double hybride bactérien (BACTH) a été utilisé (Karimova et aL, 1998). Dans ce système, l'interaction de deux protéines entraîne une complémentation fonctionnelle entre les deux domaines de l'adénylate cyclase (CyaA) de Bordetella pertussis, conduisant à la synthèse d'AMPc. En tant que molécule de régulation soluble, AMPc est ensuite capable d'activer la transcription de gènes AMPc dépendants. ethR a ainsi été cloné en phase avec la région codant le domaine de 25 kDa de CyaA, donnant pT25-EthR. ethR a ensuite été fusionné avec la région codant le domaine de 18 kDa de CyaA de manière à produire pT18-EthR. Une souche de E. coli cyclase-déficiente (DHP1) (Karimova et al., 1998), a été transformée avec des combinaisons différentes de plasmides (Figure 7). Lorsqu'elles étaient co-transformées avec pT25EthR et pT18-EthR, les colonies retrouvaient leur capacité à pousser sur milieu minimum enrichi en maltose. Aucun des clones obtenus par la cotransformation des divers plasmides contrôles n'était capable de pousser, démontrant que la complémentation fonctionnelle de T25-EthR et T18EthR était spécifiquement liée à l'interaction de deux molécules de EthR (Figure 7). Puisqu'aucun ADN homologue à l'opérateur de EthR n'a été détecté dans le génome de E. coli, ce résultat suggère que EthR est un dimère lorsqu'il n'est pas lié à son opérateur.
Il- Purification et cristallisation du répresseur His6-EthR :
A. Préparation de la protéine His6-EthR L'entièreté de l'ORF codant le répresseur EthR de M. tuberculosis a été sous-cloné dans le vecteur d'expression pET15b (Novagen) afin de permettre la production de la protéine fusionnée à un tag-Histidine6 aminoterminal. E. coli BL21 (DE3) a été transformé et les clones recombinants ont été sélectionnés sur LB contenant 100 pg/ml d'ampicilline. Cinq ml de LB contenant 100mg/ml d'ampicilline ont été inoculés avec E.coli BL21 (DE3)(pET15b-His6EthR) et mis en culture sous agitation à 37 C durant une nuit. La préculture a été utilisée pour inoculer 2 litres de milieu LB à une D0600 de 0,1. A D06oo = 0,6-0,7, l'expression de ethR a été induite par addition de 1 mM IPTG. Après 2 heures d'induction à 37 C, les bactéries ont été récupérées par centrifugation à 7500 tr/min, avec une centrifugeuse Sorval RC 5B PLUS, rotor SS-34. Le culot bactérien a ensuite été congelé à -20 C. Le culot a été resuspendu dans 10 ml de tampon A (50 mM Tris, pH 7,5,10 mM imidazole, 250 mM NaCI) puis lysé par passage à la presse de French (Bioritech) sous une pression de 6,2 x 106 Pa. Le lysat a été centrifugé 30 minutes à 4 C à 18000 tr/min dans une centrifugeuse Sorvall RC-5B PLUS, rotor SLA-3000 et le surnageant récupéré.
25 ml de résine d'affinité (chelating Sepharose Fast Flow - Amersham Biosciences) ont été lavés par 5ml d'eau bidistillée, puis chargés en Nickel par ajout de 5 volumes de NiS04 100mM. La résine a été lavée avec 5 volumes d'eau bidistillée et équilibrée avec 5 volumes de tampon A. La résine a été chargée sur une colonne jetable. Le surnageant de lyse bactérienne a été chargé sur la colonne d'affinité à un débit de 2 ml/min à l'aide d'une pompe péristaltique P-3 (Pharmacia Biosciences).
La colonne a été lavée par passage de 10 volumes de tampon 50 mM Tris pH 7,5 ; 50 mM imidazole ; 250 mM NaCI. La protéine His6-EthR a été éluée par 1,5 volume de tampon d'élution (50 mM Tris pH 7,5 ; 250 mM imidazole ; 250 mM NaCI). Les fractions récupérées ont été analysées sur gel SDS-PAGE à 12,5%. Les fractions présentant une pureté suffisante
ont été groupées et dialysées 2 fois dans 10 mM Tris pH 7,5 ; mM NaCI, à 4 C. La solution a ensuite été concentrée sur colonne Centriplus YM-3 (Amicon), puis par Macrosep 3K (Pall), afin d'atteindre une concentration finale de 50mg/ml de protéine.
Cristallisation : La cristallisation a été réalisée à 20 C,par la méthode de la goutte suspendue en diffusion de vapeur (2 l de solution de protéine, 2 l de solution de précipitant et 0,75 ml de réservoir). Des cristaux d'His6- EthR ont été obtenus en 7-10 jours avec la solution 15 du Cryokit de cristallisation pour protéines (Sigma) (0,17 M sulfate d'ammonium ; 0,085 M Na-cacodylate pH 6,5 ; 15%glycérol ; 25,5% PEG8000). Ces cristaux sont dénommés forme 2 dans la suite du protocole.
Cette réaction s'effectue dans un alcool en présence d'une base minérale telle que des carbonates de métaux alcalins et alcalinoterreux (Zh. Obshch. Kihm. (1957) 27, 2177-2181 ; Chim. Abst. (1960) 6689).
Les protocoles susmentionnés peuvent également être utilisés pour préparer les composés répondant aux formules (II), (II'), (IIbis), (IIter), ainsi que les composés répondant aux formules (III), (III'), (IIIbis), (IIIter) et les composés répondant aux formules (IV), (IV'), (IVbis), (IVter).
Plus précisément, les composés de formule (II) peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 0 CHO+ s"'y- bzz (R)), (R J), réaction avec Ra-Hal Hal Br, CI, Hat=Br,C),! X /Ra 10 N (R) 2) Méthode 2
Les composés de formule (II') peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 2) Méthode 2 i, Rj, Ra, X et Y étant tels que définis ci-dessus pour la formule (II)
Les composés de formule (III) peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 2) Méthode 2
Les composés de formule (III') peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 2) Méthode 2 i, Rj, Ra, Rb, Rc, X et Y étant tels que définis ci-dessus pour la formule (III)
Les composés de formule (IV) peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 2) Méthode 2
Les composés de formule (IV') peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 2) Méthode 2 i, Rj, Ra, Rb, X et Y étant tels que définis ci-dessus pour la formule (IV)
Les composés de formule (IIter) peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 Rj, Ra et i étant tels que définis ci-dessus pour la formule (II) 2) Méthode 2 Ruz \~~/ 0 CHO s \=X s '##\ z) (Ri)1 ; (Ilter) Rj, Ra et i étant tels que définis ci-dessus pour la formule (II)
Les composés de formule (IIIter) peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 Rj, Ra, Rb, Rc et i étant tels que définis ci-dessus pour la formule (III) 2) Méthode 2 @ Rj, Ra, Rb, Rc et i étant tels que définis ci-dessus pour la formule (III)
Les composés de formule (IVter) peuvent être obtenus selon l'un des schémas réactionnels suivants : 1) Méthode 1 Rj, Ra, Rb et i étant tels que définis ci-dessus pour la formule (IV) 2) Méthode 2 Rj, Ra, Rb et i étant tels que définis ci-dessus pour la formule (IV)
PARTIE EXPÉRIMENTALE Préparation des composés Exemples avec la méthode 1 Première étape
Dans un ballon de 125 ml on introduit séquentiellement dans 60 ml d'acide acétique: 5,19 g de 5-(4-nitro-phényl)-furan-2-carbaldéhyde ; 3,18 g de 2-thioxothiazolidin-4-one puis 1,96 g d'acétate de sodium préalablement séché sous vide. Le milieu réactionnel est ensuite porté à reflux pendant 4 heures. Durant la montée en température, le milieu réactionnel passe progressivement d'une suspension jaune à une suspension épaisse de couleur rouge orangée. Le milieu réactionnel est étendu avec de l'acétate d'éthyle puis filtré pour donner 7,62 g d'un solide rouge orangé de point de fusion supérieur à 300 C (rendement 94 %).
1H RMN (# en ppm) solvant DMSO d6 : 8,418-8,388 (doublet, J = 9 Hz, 2 H) ; 8,072-8,042 (doublet, J = 9Hz, 2H) ; 7,609-7,596 (doublet, J = 3,75 Hz, 1H) ; 7,535 (singulet, 1H) ; 7,372-7,360 (doublet, J = 3,75 Hz, 1H) 13 C RMN (8 en ppm) solvant DMSO d6 : 196,7 ;155,4 ; 151,2 ; 147,2 ; 134,7 ; 125,4 ; 125,2 ; 122,4 ; 116,9; 114,1 Remarque : Le 5- (4-nitro-phényl)-furan-2-carbaldéhyde estcommercialisé par Aldrich ou bien peut être préparé selon les références suivantes : Austr. J Chem., 26, 1973, 1059-1065 ; Org. Lett., 3, 11, 2001, 1677-1680 ; Synthesis, 11, 2001, 1681-1685.
La 2-thioxo-thiazolidin-4-one est commercialisée chez Acros, Aldrich, etc...
Deuxième étape
Depuis de nombreuses années, on s'est attaché à lutter contre les désordres touchant la croissance ou le maintien du cheveu et des structures dont il dépend. Par désordres capillaires, on entend toute modification touchant à la structure ou au fonctionnement du follicule pileux. Plus particulièrement, par désordres capillaires, on entend toute perturbation biologique entraînant la perte occasionnelle ou prolongée des cheveux. Les désordres capillaires peuvent être d'origine occasionnelle ou installée.
Les désordres capillaires peuvent avoir différentes causes d'origines internes ou externes. Par origines internes, on entend toute perturbation touchant les processus biologiques impliqués dans la croissance et le maintien du cheveu. On citera par exemple le métabolisme hormonal, le dérèglement sébacé, l'amplification enzymatique des 5-a-réductases, l'inflammation, les modifications structurales du collagène, l'intervention des facteurs de croissance, des facteurs nerveux ou des facteurs vasculaires et la composante génétique. Par origines externes, on entend, l'incidence de la flore locale du cuir
chevelu, l'action d'agents chimiques (colorations, permanentes, chimiothérapie), la pollution ou l'hygiène de vie.
Tous ces désordres, d'origines internes ou externes, ciblant le cuir chevelu, ont pour conséquence directe la perturbation et la modification du cycle pilaire conduisant à différentes formes d'alopécies. Le terme d'alopécie résume l'ensemble des pathologies atteignant le follicule pileux et le cycle de croissance de la tige pilaire et ayant pour conséquence la perte occasionnelle et réversible ou la chute définitive de tout ou partie des cheveux. On citera les 2 types d'alopécies les plus répandus, l'alopécie aérata et l'alopécie androgénétique ou androgénique.
Depuis longtemps, les scientifiques recherchent à travers différentes voies biologiques, les solutions visant à stimuler la croissance du cheveu ou à prolonger son attachement au cuir chevelu. Cette préoccupation est d'autant plus marquée dans le domaine de l'alopécie androgénique et plus particulièrement fréquente chez les sujets masculins, chez lesquels on constate une perturbation du cycle de croissance pilaire, entraînant la chute du cheveu.
Le follicule pileux constitue l'unité biologique fondamentale, directement impliquée dans le développement et le maintien du système pilaire. Il rassemble différentes entités structurales telles que la papille dermique, la glande sébacée, les gaines épithéliales, l'innervation ou la vascularisation impliquées séparément ou conjointement dans le cycle de développement des cheveux. Le lien existant entre la papille dermique et le bulbe reste déterminant dans la croissance du cheveu (cf. Olivier RF. Histological studies of whisker régénération in the hooded rat. J. Embryol. Exp. Morphol. 1966 ; 311 :560-562).
Le cycle de croissance pilaire est divisé en trois phases principales : - Une phase anagène active ou phase de croissance pendant laquelle le follicule s'enfonce dans les tissus dermiques. Les cellules du bulbe entament une mitose rapide suivie d'une différenciation. La phase anagène est reconnue aujourd'hui
comme l'étape primordiale de la croissance du cheveu, son accélération expliquant le raccourcissement de la vie du cheveu et sa rapidité de chute.
- Une phase catagène au cours de laquelle les divisions cellulaires régressent puis s'arrêtent. A ce stade, le follicule pileux amorce une remontée extradermique et une rétraction, c'est la phase la plus courte estimée à environ 3 semaines.
- Une phase de repos ou phase télogène pendant laquelle le cheveu est progressivement délogé par un nouveau cheveu anagène issu du même follicule. Le cheveu natif va provoquer la chute du cheveu mature.
Il existe une perte de cheveux normale et physiologique de l'ordre de 60 à 100 par jour pour une chevelure saine. Au-delà, la chute est dite pathologique qu'elle soit occasionnelle ou installée.
A ce jour, on a proposé différents produits pour lutter contre les deux types d'alopécies. La plupart associent plusieurs principes actifs susceptibles d'apporter une action bénéfique sur les paramètres biologiques impliqués dans la chute des cheveux. Parmi les principes actifs les plus couramment rencontrés, nous pouvons citer à titre d'exemples : . des vitamines telles que les vitamines A, E,B5, B6, C, H, PP, . des oligo-éléments tels que le zinc, le cuivre, le magnésium, le silicium, etc., . des dérivés protéiques tels que les peptides, les acides aminés soufrés (type méthionine, cystine, cystéïne ou dérivés), . des huiles essentielles ou des extraits d'origine végétale de nature lipophile ou hydrophile dont la liste n'est pas limitative, des agents antifongiques tels que la piroctonolamine, les dérivés undécyléniques, la cyclopiroxolamine, ...
. des molécules de synthèse chimique réputées pour leur action spécifique au niveau des récepteurs androgéniques ou sur la synthèse ou l'expression des 5-a-réductases.
Parmi les découvertes effectuées ces dernières années, le MINOXIDIL (ou 2,4 diamino-6-pipéridinopyrimidine 3-oxide) fait aujourd'hui référence dans le traitement de l'alopécie androgénique. En dépit des nombreuses théories évoquées sur son mécanisme d'action, ce dernier n'est pas clairement élucidé. De plus, son efficacité reste limitée même s'il est constaté une stabilisation de la chute dans de nombreux cas cliniques en raison de la reprise du processus alopéciant dès l'arrêt du traitement. Son usage journalier contraignant est vraisemblablement à l'origine d'effets secondaires indésirables relevés chez des patients l'utilisant à long terme tels que réactions cutanées localisées ou effets systémiques.
Dernièrement, on a proposé dans les demandes de brevet W096/09048 etW092/01437 une nouvelle molécule inspirée de la précédente la 2,4 diaminopyrimidine 3-oxide ou AMINEXIL. L'AMINEXIL agit contre la fibrose périfolliculaire en inhibant l'expression de la lysyl-hydroxylase, elle-même responsable de la transformation accélérée de l'hydroxylysine conduisant à la formation précoce de collagène mature. Cette surproduction de collagène et simultanément sa réticulation entraînent une régidification de la gaine conjonctive et une fibrose périfolliculaire s'opposant aux processus de formation des néo-cheveux.
Si la croissance du poil dépend de plusieurs facteurs, les facteurs susceptibles d'induire une angiogénèse sont des candidats de choix dans l'induction et le maintien de la vascularisation au niveau de la papille dermique du follicule pileux qui est la structure contrôlant la croissance pilaire se caractérisant par la présence d'un réseau vasculaire très développé en phase anagène (cf. Richard A. Ellis, Guiseppe Moretti. Vascular patterns associated with catagen hair follicules in the human scalp. Annals New York Academy of Sciences, 1959-83,448-457). Il a été démontré que les cellules de cette papille expriment durant ce stade et de façon intense, un facteur de croissance angiogénique le VEGF (vascular endothélial growth factor) (S. Lachgar-M.
dirigée contre les bactéries Gram négatif, comprenant l'association : a) d'au moins un peptide de 10 à 25 résidus d'acide aminé comprenant : i) deux domaines chargés positivement à pH neutre constitués chacun de 3 à 9 résidus d'acide aminé dont les deux tiers au moins sont des acides aminés cationiques, ii) entre lesdits domaines chargés positivement, un groupe de deux à trois résidus d'acide aminé non cationique, iii) à l'une et ou l'autre des extrémités N ou C terminales du peptide, un groupe de 0 à 10 et de préférence de 0 à 5 résidus d'acide aminé choisis dans le groupe comprenant des acides aminés non hydrophobes et des acides aminés chargés positivement, mais dans le cas d'un résidu d'acide aminé chargé positivement celui-ci n'est pas directement adjacent aux domaines chargés positivement. b) d'au moins un composé anti-bactérien.
Avantageusement, dans les peptides de l'invention cidessus, les acides aminés cationiques des deux domaines chargés positivement sont choisis dans le groupe comprenant l'arginine et la lysine.
On préfère dans les peptides de l'invention ci-dessus que les acides aminés non cationiques du groupe entre lesdits domaines chargés positivement soient des acides aminés non hydrophobes, choisis par exemple dans le groupe comprenant : l'acide glutamique, la serine, la glycine, la leucine, la glutamine.
L'orientation des séquences d'acide aminé selon l'invention est typiquement de N-terminale vers C-terminale. Cependant, selon un autre mode de réalisation, l'orientation peut être inversée, c'est-à-dire que les séquences d'acide aminés sont orientées de C-terminal vers N-terminal.
Des peptides préférés pour les compositions selon l'invention sont choisis dans le groupe comprenant les séquences suivantes (orientation N-terminal vers C-terminal) - DPV3 : Arg Lys Lys Arg Arg Arg Glu Ser Arg Lys Lys Arg Arg Arg Glu Ser (SEQ ID N0.1) - DPV3.10 : Arg Lys Lys Arg Arg Arg Glu Ser Arg Arg Ala Arg Arg Ser Pro Arg His Leu (SEQ ID N0.2) - DPV6 : Gly Arg Pro Arg Glu Ser Gly Lys Lys Arg Lys Arg Lys Arg Leu Lys Pro (SEQ ID N0.3) - DPV7 : Gly Lys Arg Lys Lys Lys Gly Lys Leu Gly Lys Lys Arg Asp Pro (SEQ ID N0.4) - DPV7b : Gly Lys Arg Lys Lys Lys Gly Lys Leu Gly Lys Lys Arg Pro Arg Ser Arg (SEQ ID N0.5) - DPV15 : Leu Arg Arg Glu Arg Gln Ser Arg Leu Arg Arg Glu Arg Gln Ser Arg (SEQ ID N0.6) - DPV15b : Gly Ala Tyr Asp Leu Arg Arg Arg Glu Arg Gln Ser Arg Leu Arg Arg Arg Glu Arg Gln Ser Arg (SEQ ID N0.7) - DPV1047 : Val Lys Arg Gly Leu Lys Leu Arg His Val Arg Pro Arg Val Thr Arg Met Asp Val (SEQ ID N0.8) - DPV11 : Ala Lys Thr Gly Lys Arg Lys Arg Ser Gly (SEQ ID N0.9) - DPV1121 : Val Lys Arg Gly Leu Lys Leu Arg Gln Lys Tyr Asn Lys Arg Ala Met Asp Tyr (SEQ ID NO.11) Parmi ceux-ci, l'invention concerne tout spécialement les peptides suivants : DPV3, DPV3. 10, DPV6, DPV7, DPV7b, DPV15 et DPV15b.
L'alignement des séquences ci-dessus met en évidence des domaines chargés positivement de séquences suivantes : - Arg Lys Lys Arg Arg Arg (SEQ ID N0.13) - Arg Pro Arg (SEQ ID N0.14) - Lys Arg Lys Lys Lys Gly Lys (SEQ ID N0.15) - Arg Arg Glu Arg (SEQ ID N0.16) - Arg Arg Arg Glu Arg (SEQ ID N0.17)
- Arg Arg Ala Arg Arg Ser Pro Arg (SEQ ID N0.18) - Lys Lys Arg Lys Arg Lys Arg Leu Lys (SEQ ID N0.19) - Lys Lys Arg (SEQ ID N0.20) - Lys Lys Arg Pro Arg Ser Arg (SEQ ID N0.21) - Arg Leu Arg Arg Glu Arg (SEQ ID N0.22) - Arg Leu Arg Arg Arg Glu Arg (SEQ ID N0.23) De préférence, les domaines de séquences SEQ ID NO. 13 à 17 sont du côté de l'extrémité N terminale du peptide, alors que les domaines de séquences SEQ ID NO. 18 à 23 sont du côté de l'extrémité C terminale du peptide.
L'alignement des séquences ci-dessus a aussi mis en évidence des groupes de deux à trois résidus d'acide aminé non cationique entre les domaines chargés positivement de séquences suivantes : Glu Ser, Glu Ser Gly, Leu Gly, Gln Ser Les composés anti-bactériens présents dans les compositions selon l'invention sont de préférence choisis parmi ceux présentant des propriétés physico-chimiques les rendant incapables de traverser la membrane des bactéries Gram négatif. Tout préférentiellement, il s'agit de composés anti-bactériens hydrophobes. A titre d'exemples de tels composés, on peut citer les antibiotiques de la famille de macrolides, des ketolides comme l'erythromycine, la clarithromycine, l'azithromycine, la télithromycine.
Les composés anti-bactériens peuvent être aussi des oligonucléotides antisens.
L'évaluation des peptides DPV ci-dessus à montrer leur capacité à traverser les membranes des bactéries Gram négatif E. coli ou P. aeruginosa et de délivrer le Bodipy dans la bactérie, alors que celui-ci est une molécule hydrophobe normalement exclue par la membrane externe des bactéries Gram négatif qui représente une barrière semi-
perméable. De plus, il apparaît que ces peptides ont la capacité de traverser la membrane externe des deux souches de bactéries Gram négatif et de s'accumuler dans le cytoplasme bactérien par un mécanisme non énergie-dépendant et non toxique pour la bactérie.
Les travaux réalisés dans le cadre de l'invention, ont mis en évidence quelques différences d'internalisation entre les deux souches de bactéries P. aeruginosa et E. coli.
Ainsi il semble que le peptide DPV7b soit plus internalisants dans P. aeruginosa que dans E. coli. Cette différence pourrait s'expliquer par des différences de structures de la membrane externe entre les deux souches de bactéries.
Ces peptides sont donc utiles pour la préparation de compositions pharmaceutiques anti-bactériennes, plus particulièrement contre les bactéries gram négatif, où ils sont associés à un ou plusieurs agents anti-bactériens.
Les compositions de l'invention sont utiles tant à titre préventif que curatif.
Les compositions selon l'invention comprennent également avantageusement un ou plusieurs véhicules, diluants ou excipients pharmaceutiquement acceptables généralement utilisés avec ce type d'agents.
Le matériau organique peut aussi être choisi parmi la cellulose et les dérivés de celle-ci comme les alkyl ou hydroxyalkyl celluloses telles que la méthylcellulose, l'éthylcellulose et l'hydroxyéthylcellulose, ou comme les esters de cellulose tels que l'acétophtalate de cellulose.
L'enveloppe, la capsule constituée par un matériau organique a généralement une épaisseur de 2 à 300 nm, de préférence de 5 à 250 ; préférence encore de 10 à 100 nm.
Selon l'invention, la capsule, enrobage ou enveloppe, est reliée au noyau ou c#ur par une liaison physique, sans liaisons covalentes. En d'autres termes, dans les particules incorporées dans les compositions de l'invention, l'interface noyau/enveloppe est définie comme ne présentant pas de liaisons covalentes.
Pour les procédés physico-chimiques et chimiques on pourra aussi se reporter au document "Microencapsulation Methods and Industrial Applications", (ISBN 0-8247-9703-S).
Parmi les divers procédés d'encapsulation utilisables, on préfère l'encapsulation par polymérisation en émulsion et encore plus spécifiquement l'encapsulation par polymérisation en
émulsion telle que décrite dans l'article "Preparation of Polymer Coated Fonctionalised Silver Nanoparticles" (J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 10642-10643).