INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
2. 2 Analyse des séquences des MLE d'hydrothermaux présentant un cadre de lecture codant une transposase complet : Les analyses des 34 séquences de MLE ont révélé que 5 d'entre elles, à savoir, Alvcmar 1.15, Alvcmar 1.16, Bytmar 1.8, Bytmar 1.11et Vensmar 1.3, présentaient un cadre ouvert de lecture codant une transposase complet, tandis que toutes les autres contenaient un gène interrompu par un ou plusieurs codons stop, des décalages de cadre de lecture, des micro-délétions ou des insertions.
Des différences ont été observées entre les cinq éléments susmentionnés, outre leurs sources biologiques différentes. Dabord, la longueur de l'élément était comprise entre 1 289 pb pour Vensmar 1.3 et 1 294 pb pour Bytmar 1.8 jusqu'à 1 295 pb pour Bytmar 1.11et Alvcmar 1 .15. Ensuite, leurs séquences nucléotidiques, ainsi que les séquences en acides aminés des transposases codées présentaient des niveaux de similitude et d'identité différents (Voir tableau Il ci-après). Ces variations entre les MLE s'étendaient jusqu'aux séquences des ITR 5' et 3'.
Le tableau Il ci-dessous donne les pourcentages de similitude et d'identité entre les séquences en nucléotides des MLE d'hydrothermaux (en grisé), et les séquences en acides aminés putatives de la transposase (sur fond blanc).
Alvcmar1-16 Alvcmar1-15 Bytmarl-8 Bytmarl-11 Vensmarl-3 Alvcmar 1-16 94,1-94,1 97,2-0*7,2 90,7-90,7 96,5-96,6 Alvcmarl-15 88-88,3 95,4-95,4 92,1-92,1 94,6-94,7 Bytmarl-8 94-94,3 90,5-90,1 91,9 - 91,9 94,4 - 98,5 Bytmarl-11 79,9-80,5 82,5-83,3 81,9-82,9 91,2 - 91,3 Vensmarl-3 89,1-91,5 89,1-87,5 95,7-94,8 79,9-79,4
Les 5 MLE d'eucaryotes hydrothermaux présentaient cependant des caractéristiques communes apparemment spécifiques de ces organismes.
D'abord, l'analyse de leurs extrémités 5' et 3' a montré que les ITR 5' et 3' étaient d'une longueur inhabituelle, respectivement de 36 et 37 pb. Ceci n'était pas dû à des UTR 5' et 3' plus courtes. En effet, ces régions avaient une taille relativement normale, par rapport à celles des MLE connus (Plasterk et al., 1999) avec une UTR 5' de 142-143 pb et une UTR 3' de 32 pb. De plus, comme dans beaucoup des MLE identifiés à ce jour, la recherche de motifs de régulation dans l'UTR 5' n'a révélé aucun promoteur putatif significatif et celle dans l'UTR 3' a permis d'identifier un signal de polyadénylation, environ 26 pb en aval du codon stop.
De manière plus surprenante, le contenu GC des 5 MLE de l'invention, était d'environ 54%, à la différence de celui de la plupart des MLE jusqu'à présent décrits, situé entre 39 et 43 % (Plasterk et al., 1999).
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La longueur sur laquelle s' étend le bobinage de chaque segment 10 peut être comprise entre 0 et 50 mm. La distance entre deux segments inductifs voisins 10 peut être comprise entre 0 (segments quasi-jointifs) et 50
mm. Les différents segments inductifs 10 peuvent avoir des caractéristiques différentes de façon à créer un spectre de pertes magnétiques avec deux ou plusieurs pics de perméabilité imaginaire.
La technique utilisée pour constituer les enroulements des segments conducteurs 10 autour de l'ensemble de filaments magnétiques 13 est apparentée à la technique de guipage, qui est une technique de finition très utilisée pour les fils textiles. Les paramètres du guipage, nombre de fils de guipage, sens de guipage (en S ou en Z), et pas de guipage sur le fil, sont des variables qui permettent de réaliser des segments inductifs 10 aux propriétés différentes. Le guipage avec, par exemple, deux fils tournant en sens contraire permet d'augmenter l'effet inductif du bobinage sans étendre sa longueur et modifie les couplages du bobinage inductif avec le champ électrique parallèle au bobinage. La fonction de maintien des filaments 13 peut être assurée par un ou plusieurs fils textiles sans propriétés magnétiques ou électriques. On peut alors ajouter une torsion importante des filaments 13 de façon à augmenter la résistance mécanique du fil 12 (si un filament est coupé, il ne diminue pas la résistance globale du fil car il est coincé par la torsion).
Sur l'installation de guipage, illustrée sur la figure 2, le fil 12 est obtenu par l'assemblage de plusieurs filaments magnétiques 13 provenant de bobines 20, après passage dans deux filières 21 et 22.
Une bobine réceptrice 23 ayant un sens de rotation 24 combinée à un peigne trancanant non représenté, ayant
un mouvement de déplacement transversal 28, permet de stocker un fil 29 constitué dudit fil 12 après passage sur une roue tournante 25, sur lequel est venu s'enrouler un fil 11 issu d'une bobine de guipage 26en rotation 27.
La réalisation des segments conducteurs 10 peut se faire soit avant le guipage par exemple en constituant au préalable un fil non conducteur qui porte ces segments conducteurs 10. Ce peut être par exemple un fil textile sur lequel on a déposé une peinture conductrice, ce fil servant à guiper les filaments 13. Les segments 10 assurent alors le maintien des filaments 13.
On peut aussi réaliser le guipage des filaments 13 à l'aide du fil conducteur 11 , conformer le fil 12 ainsi obtenu, assurer la fixation de l'ensemble par exemple en le coulant dans une résine, et sectionner le fil conducteur aux endroits désirés afin de réaliser les segments inductifs 10.
Pour sectionner l'ensemble fil conducteur 11 + filaments magnétiques 13 on peut réaliser des rainures de longueur comprise entre 0,1 et 50 mm avec des longueurs de filaments magnétiques comprises entre 0,1et 50 mm.
Dans un premier mode de réalisation de l'invention, le fil 12, réalisé comme décrit précédemment, est conformé comme matériau de blindage ou de filtrage en le bobinant sur l' âme d'un câble 32, comme illustré sur la figure 3. Suivant la spécification d'atténuation de ce câble 32 selon les bandes de fréquences utilisées, on élabore un fil de
blindage 12 dont les segments conducteurs 10 répondent à cette spécification. Le champ magnétique généré par un tel câble 32 étant orthoradial, la bonne géométrie d' utilisation du fil de blindage 12 consiste à tourner le fil de blindage autour de l'âme du câble 32 de façon à optimiser l'effet de l'absorption du champ par le fil. Ce fil 12 est ainsi bobiné autour de la structure interne 31 de ce câble 32, qui comporte également une couche externe 33.
Dans un second mode de réalisation, illustré sur la figure 4, une couche de blindage 40 selon l'invention est placée sur un boîtier 41 subissant une perturbation selon une direction 42 dans une zone 43, pour blinder celui-ci en permettant de filtrer cette perturbation. Les fil s de blindage 44, constitué de filaments magnétiques 45 , sont disposé s parallèlement au champ magnétique de la perturbation de manière à atténuer celle-ci. Huit segments inductifs 46, de 3 spires 47 chacun, sont enroulés autour de ces fils de blindage 44. La densité de ces segments inductifs 46, tels que représentés, est faible afin de préserver la clarté de la représentation. Mais elle peut atteindre des valeurs plus importantes (par exemples des motifs jointifs) en pratique. A titre d'exemple, sur la figure 4, les segments inductifs 46 sont espacés périodiquement sur le fil de blindage 44, leur répartition dans la couche de blindage 40 est elle aussi périodique. Les segments 46 sont placés à des abscisses x (parallèle au fil) identiques.
Pour augmenter l'efficacité du blindage, on peut superposer plusieurs couches de blindage. Ainsi,
comme illustré sur la figure 5, on peut utiliser un bicouche de blindage illustré sur la figure 5B à placer sur un boîtier 50 illustré sur la figure 5A, dans lequel les perturbations générées comportent des composantes dans les deux polarisations en champ magnétique. Les zones 51 et 52 sont respectivement des zones perturbées suivant la polarisation Hl et suivant la polarisation H2. Chaque couche de blindage traite une polarisation et est transparente dans l'autre, et l'autre couche traite l'autre polarisation. Pour obtenir une couche inférieure 40' transparente, les fils de blindage 44' de cette couche sont sectionnés régulièrement, par exemple à l'aide de rainure 53, pour couper l'effet réflecteur lié à la conductivité des filaments magnétiques 45' . De telles coupures peuvent être réalisées en même temps que les coupures que l'on effectue sur le fil de guipage conducteur utilisé pour réaliser les segments inductifs 46' . De telles rainures 53 permettent d'assurer la transparence de la seconde couche 40' vis-à-vis du champ électrique associé à la polarisation H2.
Des bobinages réalisés autour de matériaux magnétiques ont déjà été proposés, par exemple dans le document référencé [ 9] .
Le caractère conducteur le long de l'axe des filaments ferromagnétiques change le comportement hyperfréquence. Il en résulte une absence de résonance parasite sur la permittivité. Les possibilités d'ingénierie de la réponse en fréquence (largeur de bande, position du pic d'absorption) offertes par les segments conducteurs (pas de guipage, nombre de
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront plus clairement à la lecture de la description suivante d'un mode de réalisation préférentiel, donné à titre de simple exemple illustratif et non limitatif, et des dessins annexés, parmi lesquels la figure 1 présente un synoptique de spécification d'un protocole conforme à l'invention selon un mode particulier de réalisation.
En préliminaire de la description de la nouvelle méthode proposée, il est utile de faire un détour par les méthodes de programmation mettant l'accent sur les données, et de décrire la relation entre données et protocoles.
Les deux dernières décennies ont vu un développement important de la programmation de logiciel partant des données plutôt que des algorithmes. Ces méthodes consistent à décrire d'abord les structures de données mémorisées par le logiciel, en mettant en évidence les objets et types d'objet gérés par le logiciel.
Un objet, à ce sens, peut être un objet concret, selon le sens commun, comme un écran ou un clavier, mais aussi quelque chose de plus abstrait comme une zone de l'écran ou un fichier, ou même très abstrait comme une file d'attente. Le point important de cette approche est qu'un type d'objet ne décrit pas seulement ses attributs, mais aussi les actions dont l'objet peut être l'objet.
Cette approche de la programmation a beaucoup d'avantages. Elle amène en particulier une modularité très efficace, centrée sur les types d'objet.
Jusqu'à présent, la présentation qui est faite des structures de données dans les protocoles, sous l'influence entre autres d'ASN.l est erronée. Ce qui est décrit comme des données sont les messages et parties de message, alors que les messages sont beaucoup plus proches des actions, au sens de la programmation par les objets, que des données.
A l'instar de cette approche de la programmation, il faut chercher les données d'un protocole dans ce qui est mémorisé par chacune des entités paires,
plutôt que dans ce qui est transmis. Cette réflexion amène à mettre en avant la notion de contexte du protocole.
Nous définissons ici le contexte d'une entité comme la structure de donnée mémorisée par cette entité et contenant les données qui interviennent dans la mise en #uvre du protocole. Ces interventions sont de différents ordres : il peut s'agir de données gérées (i. e., modifiées) par l'effet de la réception d'un message du protocole, ou de données qui influencent les actions du protocole (données d'état, dont, mais pas seulement, l'état au sens de SDL).
Parmi les données apparaissant dans le contexte de chacune des entités, certaines sont identiques sémantiquement de part et d'autre, c'est-à-dire dans deux entités paires du protocole. Selon l'invention, la partie identique est appelée contexte commun . Le contexte commun peut être décrit de manière monolythique ou, au contraire, par morceaux séparés. Ces données sont les mêmes au sens qu'elles ont le même sens, et sont maintenues identiques, à l'exception de certains états transitoires. On peut présenter un protocole comme ayant pour rôle, entre autres, de maintenir l'égalité de ces données. Ainsi, une part importante de la fonction de n'importe quel protocole est la gestion de données répartie dans plusieurs dispositifs émetteurs et/ou récepteurs.
On présente, en relation avec la figure 1, un procédé de spécification de protocole selon l'invention. Ce procédé est préférentiellement mis en #uvre par un micro-ordinateur.
Ce procédé est divisé en étapes successives : - une première étape 1 de spécification d'encodage et du décodage ; - une seconde étape 2 de spécification du contexte ; et - une troisième étape 3 de spécification de messages.
L'étape 1 de spécification de l'encodage et du décodage est effectuée en CSN.lqui est connu en soi.
Le premier aspect formalisé de la spécification d'un protocole suivant la méthode décrite est la spécification formelle de la structure des chaînes de bit échangées. Il s'agit de la description du lexique selon sa forme, comme une liste
de structures de messages ou d'éléments de message. Cette description spécifie des ensembles de chaînes de bit acceptables, ainsi que la structure (syntaxe) de ces chaînes. Elle permet de générer automatiquement un logiciel d'encodage et de décodage, ce dernier incluant la détection de chaînes erronées (i. e., n'appartenant pas à l'ensemble des chaînes acceptables).
Cette spécification est faite en CSN.1mais en variante, tout autre langage formel permettant de décrire la syntaxe de toute chaîne de bit est applicable.
(II bis) dans laquelle : m représente 0 lorsque n=2 et m représente 1 lorsque n=l, X représente un groupement choisi parmi les alkyles en C2-C20, saturés ou insaturés, linéaires, ramifiés ou cycliques, les aryles en C6-C20, les aralkyles en C8-C20, sont des produits nouveaux, et constituent un autre objet de l' invention.
Les composés de formule (VI) sont déprotégés en position 3 par trans-estérification par traitement avec du méthanolate de sodium dans le méthanol.
La déprotection de l'acétal en position 17 est réalisée par traitement par une solution d'acide perchlorique et permet l'obtention de la 7a OH DHEA (4).
Selon une autre variante, les composés de formule (IV) et dont la fonction 17 est protégée(Rl, R2 représentent -O-W-O-), peuvent être réduits diastéréosélectivement par traitement par NaBH4 en présence de chlorure cérique pour conduire aux dérivés 7p hydroxylés de formule (V) (étape 5). La position 17 peut être ultérieurement déprotégée de façon connue.
Les produits répondant à la formule (V) : dans laquelle - n=l, 2 - Ri, R2 représentent =0 ou un groupement -0-W-O- dans lequel W représente un groupement alkyle en C2-C8, linéaire, ramifié ou cyclique, saturé ou insaturé ; préférentiellement W représente -CH2-CH2-, - R représente un groupement de formule (II bis) (HO)m-OC-(X)-CO-
(II bis) dans laquelle : m représente 0 lorsque n=2 et m représente 1 lorsque n=1, X représente un groupement choisi parmi les alkyles en C2C20, saturés ou insaturés, linéaires, ramifiés ou cycliques, les aryles en C6-C20, les aralkyles en C8-C20, sont des produits nouveaux, et constituent un autre objet de l' invention.
La déprotection de l'acétal en position 17 et de l'ester en position 3 conduit à la 7ss-OH-DHEA (3).
Selon encore une autre variante de l'invention, les composés de formule (V) peuvent subir une inversion de configuration pour conduire aux dérivés 7a hydroxy ou ester de formule (VI) et inversement. Pour ce faire, la présente invention propose deux voies : La première voie, selon une application de la réaction de Mitsunobu, met en oeuvre une inversion de configuration du 7p hydroxyle en 7a hydroxyle, ou l'inverse, à l'aide du système diéthyl azodicarboxylate/ triphénylphosphine et d'acide carboxylique (et plus particulièrement l'acide para nitro benzoique) ou le système N,N,N',N'-tétraméthylazodicarboxamide et la tributyl phosphine en présence d'acide para méthoxy benzoïque.
Ces systèmes sont choisis pour favoriser la réaction d'inversion.
Enfin, la déprotection ultérieure en milieu méthanolate puis acide perchlorique permet la déprotection des positions 3 et 17.
Plus généralement, l' acide para méthoxybenzoïque peut être remplacé par un acide carboxylique choisi parmi ceux répondant à la formule R5CO2H où R5 peut être choisi parmi les composés répondant à la formule R4Ph, R4 étant choisi parmi H-, N02-, CH30-, CN-, Cl-, Br-, F- et R5 peut également être choisi parmi le groupe constitué de : CH3-, C1CH2-, C12CH-, C13C-, CH3CH2-.
Une autre voie de préparation de la 7a OH DHEA par inversion de dérivés 7ss peut être employée dans le procédé de l'invention. Elle consiste à introduire un bon groupement partant en position 7 du 7ss OH, à l'aide du chlorure de méthane sulfonyl (MsCI), du chlorure de para toluène sulfonyl (TsCI) ou du chlorure de trifluorométhane sulfonyl (TfCI) puis d'effectuer une inversion de Walden par une substitution nucléophile de type SN2 en milieu basique (OH-) (étape 7).
Alternativement, le groupement partant peut être déplacé par le sel alcalin d'un acide carboxylique (césium, sodium ou potassium) pour conduire au
diester correspondant. L'acide carboxylique sera choisi parmi des composé répondant à la formule RSC02H, où R5 peut être choisi parmi les composés répondant à la formule R4Ph, dans lequel R4 pourra être choisi parmi, H-, NO2-, CH30-, CN-, Cl-, Br-, F- et R5 peut également être choisi parmi le groupe constitué de : CH3-, CICH2-, C12CH-, Cl3C-, CH3CH2-.
Dans ces conditions, la réaction pourra être conduite classiquement ou être accélérée par activation ultrasonore.
Les composés intermédiaires dans les réactions de Mitsunobu peuvent être représentés par les formules Vbis et VIbis ci-dessous : (Vlbis) dans lesquelles les groupements R, R1, R2, R5 et l'entier n ont la même signification que ci-dessus. Ce sont également des composés nouveaux qui constituent un autre objet de l'invention.
De préférence, ladite solution aqueuse de médicament et ladite solution aqueuse sans médicament de l'étape d) comprennent en outre le polymère soluble dans l'eau susmentionné, dans des quantités de 0,1-10 %, sur la base du poids du mélange desdites particules.
De préférence, l'étape a) comprend en outre le mélange du polymère biocompatible susmentionné avec lesdites particules dans une quantité de 0,5-30 %, sur la base du poids total desdites particules dans ledit milieu liquide non aqueux, ledit polymère biocompatible étant soluble dans ledit milieu liquide non aqueux, de sorte que lesdits grains d'apatite poreux formés lors de l'étape e) soient liés par ledit polymère biocompatible pour former un composite microsphérique ayant une taille de 0,5- 1000 m, De préférence, le procédé de la présente invention comprend en outre l'étape f) de séchage des grains d'apatite poreux résultant de l'étape e).
Ledit médicament de l'étape b) et ledit médicament de l'étape d) sont identiques aux médicaments mentionnés pour la forme posologique pharmaceutique de la présente invention. Un médicament soluble dans l'eau est approprié pour être piégé dans les grains poreux sous la forme d'une solution aqueuse ; il s'agit alors par exemple du gluconate de zinc, du gluconate de cuivre, des sels de zinc, des sels de cuivre, des sels de fer, de l'acide
ascorbique, d'un peptide, d'une protéine, d'une enzyme, d'un ADN, d'un ARN, d'un agent de complément nutritif, d'un anti-inflammatoire, d'un antibiotique, d'un antihistaminique, d'un antibactérien, d'un antifongique, d'un décongestionnant, d'un antidépresseur, d'un antipsychotique, d'un antiviral, d'un antioncolytique, d'un vaccin, d'un antiépileptique, d'un antiasthmatique, d'un antioxydant, de vitamines solubles dans l'eau ou d'un extrait de plante. Un médicament soluble dans le milieu liquide non aqueux de l'étape a) peut être piégé dans les grains poreux lors de étape b) ; il s'agit alors par exemple de l'ibuprofène, de l'aspirine, d'un agent de complément nutritif, d'un anti-inflammatoire, d'un antibiotique, d'un antihistaminique, d'un antibactérien, d'un antifongique, d'un décongestionnant, d'un antidépresseur, d'un antipsychotique, d'un antiviral, d'un antioncolytique, d'un antiépileptique, d'un antiasthmatique, d'un antioxydant, de vitamines solubles dans l'huile ou d'un extrait de plante.
Un autre procédé pour préparer la forme posologique pharmaceutique de la présente invention est similaire au procédé susmentionné excepté que le médicament est ajouté par la suite. Dans cette variante de procédé, on forme des grains d'apatite poreux bruts en supprimant l'étape b) et en ajoutant la solution aqueuse sans médicament dans l'étape d) aux granules résultant de l'étape c) ; un médicament sous forme de solution est ajouté aux grains d'apatite poreux bruts ; et la solution est séchée de manière à piéger ledit médicament dans les pores desdits grains.
Dans un des modes de réalisation préférés de la présente invention, le procédé développé a été mis en #uvre dans un réacteur à fluidisation conçu maison, tel que le montre schématiquement la figure 1. Ladite suspension est amenée du réservoir 02 à une chambre 03 par
un atomiseur à buse 01, la température de la chambre 03 étant contrôlée dans une plage allant de 25 à 60 degrés Celsius, par un courant d'air (via le compresseur d'air 07) chauffé (via le réchauffeur 08). Les granules de poudre développées instantanément après le retrait du milieu liquide sont recueillies dans le fond d'un condenseur 06. L'air est évacué depuis le haut du condenseur 06. Entre temps, les granules solides sont fluidisées dans la chambre 03 sous l'effet d'un courant d'air traversant le circuit de distribution d'air 09. Un filtre 10 est placé au sommet de la chambre 03 pour éviter de perdre des granules de poudre. Les granules de poudre sont maintenues dans un état fluidisé jusqu'à ce qu'elles soient sèches.
Les granules de poudre sont de forme sphérique, leur diamètre est de 1 à 300 micromètres ou, de façon davantage préférée, de 1 à 100 micromètres. Une fois lesdites granules de poudre formées, de l'eau ou de préférence une solution tamponnée par phosphates (PBS) de pH 6,8-10,5 est amenée depuis le réservoir 04 par l'intermédiaire d'un atomiseur à buse 05 pour enrober lesdites granules de poudre dans la chambre 03 d'une fine couche de film d'eau, pour mouiller uniformément les granules de poudre tout en déclenchant une réaction de neutralisation dans chaque granule de poudre individuelle. Dans cette invention, le rapport pondéral poudre : eau est compris dans une plage allant de 1 : 0,05 à 1 : 0,35, ou dans un mode de réalisation préféré, dans une plage allant de 1 : 0,05 à 1 : 0,30. Une telle quantité préférée d'eau ou de solution tamponnée par phosphates est considérablement inférieure aux quantités connues dans la technique. Pendant le procédé d'enrobage par eau ou par solution tamponnée par phosphates, la chambre 03 est maintenue à température ambiante et les granules de poudre sont en cours de fluidisation.