INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le besoin se fait donc sentir dans de nombreuses applications de pouvoir disposer de sceaux de garantie très économiques - notamment pouvant facilement et à moindre coût être adaptés à l'application qui en est faite et pouvant être utilisés dans de nombreuses applications différentes-, qui confèrent une protection renforcée à l'encontre des fraudes, y compris à l'encontre des fraudeurs spécialisés, et dont l'utilisation est simple et économique.
L'invention vise donc de façon générale à satisfaire ce besoin.
L'invention vise en particulier à proposer un sceau de garantie qui soit simple à poser. L'invention vise également à proposer un sceau de garantie dont le procédé de pose ne nécessite pas d'outillage spécifique, et puisse être mis en oeuvre de la même façon dans de nombreuses applications différentes.
L'invention vise aussi à proposer un sceau de garantie qui puisse être utilisé sur une grande variété de pièces, par exemple à titre de scellés judiciaires ou industriels, sans qu'il soit en général nécessaire de connaître à l'avance la forme et/ou les dimensions de ces pièces (seule la forme et/ou les dimensions générales de l'ouverture à protéger et les caractéristiques générales de la matière constitutive de la (des) pièce (s) délimitant l'ouverture pouvant être connues).
L'invention vise également à proposer un sceau de garantie qui présente un faible encombrement et se présente sous la forme d'un produit unitaire, d'un seul tenant, prêt à l'emploi, pouvant être utilisé par simples manipulations.
Le registre 50 PtR est un registre à 14 bits contenant l'information utile pour positionner le pointeur de lecture de la FIFO.
Le registre 50 PtR est constitué de 2 champs séparés : les trois bits les plus significatifs (MSB) contiennent une valeur 50a d'index dans la table 20 de numéros de page ; et les onze bits les moins significatifs (LSB) contiennent une valeur 50b d'offset.
Grâce à cette information, la position du pointeur d'écriture PtR de la FIFO est pertinente : - le champ d'index 50a (compris entre 0 et 7) permet de déterminer un numéro de pages (entre 0 et 31) ; et - le champ d'offset 50b permet de déterminer l'adresse (entre 0 et 2047) à l'intérieur de la page dont le numéro est identifié par l'index.
Le registre 60 de seuil est un registre à 11 bits codant le nombre de mots écrits dans la FIFO avant de permettre un premier traitement de lecture de la FIFO. Le registre 60 permet d'initialiser un seuil de remplissage autour duquel la gigue sera absorbée. L'amplitude maximum de la gigue qui peut être absorbée dépend de la taille de la FIFO.
Le compteur 70 Cpt est un compteur à 11 bits utilisé pour compter le nombre de mots écrits dans la FIFO jusqu'à ce que le seuil de la FIFO soit atteint.
La figure 4 décrit un algorithme de requête de modification de taille d'une FIFO ei fonction de l'intégration de l'espace restant selon la première variante de modification de contexte mentionnée en regard de la figure 2.
Lors d'une première étape d'initialisation 500, les différentes variables et paramètres nécessaires au fonctionnement de l'algorithme de requête de modification de taille de la FIFO concernée sont initialisés : - le registre 30 de taille et le compteur 70 associé à la FIFO sont initialisés à une valeur nulle ; et
- le registre 60 de seuil associé à la FIFO est initialisé à une valeur prédéfinie.
Ensuite au cours d'une étape 501, l'espace restant de la FIFO est continuellement analysé et intégré dans le temps jusqu'à ce qu'une valeur limite de temps d'intégration soit atteinte.
Ensuite, lors d'un test 502, on compare l'espace résiduel intégré dans le temps dans la FIFO avec une valeur de premier seuil Si prédéfinie.
Si l'espace résiduel est plus grand que le seuil SI, alors au cours d'une étape 503, une réduction de la taille de la FIFO est requise. Cette réduction dépend de l'écart entre l'espace résiduel et le seuil SI.
Ceci est notamment illustré en figure 2 lorsque, entre les instants tl et t2, cinq pages vides (4,27, 0, 30 et 31) sont retirées de la FIFO 1.
Si l'espace restant est plus petit que ou égal au seuil SI lors d1 test 502, alors au cours d'un test 504, l'espace restant intégré dans le temps de la FIFO est comparé avec un second seuil S2 prédéfini.
Si l'espace restant dans la même mémoire est plus petit que le seuil S2 alors, au cours d'une étape 505, une augmentation de la taille de la FIFO est requise. Cette augmentation dépend de l'écart entre l'espace résiduel et le seuil S2.
Ainsi, tel qu'illustré en figure 2, trois pages disponibles (0,30 et 31) sont ajoutées àla FIFO 1 entre les instants tO et tl,.
Après me étape 504 ou 502 ou un résultat négatif au test 503, l'étape 501 est réitérée.
Selon un second mode de réalisation particulier, le ou les composé (s) candidat (s) sont initialement contenus dans le Iysat cellulaire d'une culture de cellules eucaryotes, de préférence des cellules humaines.
Selon un troisième mode de réalisation, le composé candidat est le produit d'expression d'un phage constitutif d'une collection combinatoires de clones de phages ( phage display ).
L'invention est également relative à un procédé pour cribler des composés candidats se liant à un polypeptide à boîte F, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) cultiver une cellule hôte recombinante telle que définie ci-dessus dans un milieu de culture approprié, de telle manière à ce que ladite cellule hôte produise un polypeptide à boîte F selon l'invention ; b) détecter les complexes éventuellement formés entre le polypeptide à boîte F et d'autres composés produits par la cellule hôte.
Selon un mode particulier de réalisation du procédé de criblage ci-dessus, ledit procédé est caractérisé en ce qu'il s'agit d'un système double-hybride dans lequel la cellule hôte transfectée à l'étape a) est transfectée avec un acide nucléique codant pour un polypeptide à boîte F, un fragment ou un variant de ce polypeptide qui est fusionné avec un polypeptide hétérologue, ledit polypeptide hétérologue consistant en un premier partenaire protéique lequel, lorsqu'il interagit spécifiquement avec un second partenaire protéique, a la capacité de se fixer sur un motif d'acide nucléique régulant la transcription d'un gène rapporteur, pour une utilisation dans des systèmes de détection d'interactions du type double-hybride bien connus de l'homme du métier. Un tel polypeptide peut être, par exemple, la protéine GAL4 ou la protéine LexA.
Selon ce même mode de réalisation particulier du procédé de criblage cidessus, la cellule hôte recombinante est en outre co-transfectée avec un acide nucléique codant le composé candidat sous une forme fusionnée avec le second partenaire protéique mentionné ci-dessus. De cette manière, l'interaction entre le polypeptide à boîte F, ou son fragment ou son variant, et le composé candidat est détecté par visualisation de l'activation ou au contraire de l'inhibition du gène rapporteur également contenu dans la cellule hôte recombinante co-transfectée.
L'invention concerne aussi un composé se liant à un polypeptide à boîte F tel que décrit ci-dessus, caractérisé en ce qu'il est susceptible d'être obtenu par l'un des procédés de criblages ci-dessus.
Identification de composés qui modulent l'interaction des protéines Fbox avec d'autres protéines L'invention est également relative à des procédés de criblage de composés modulant l'interaction entre un polypeptide à boîte F et une protéine appartenant à un complexe SCF.
Une fois qu'un substrat d'une protéine Fbox ou qu'une protéine capable d'interagir avec cette protéine Fbox est identifiée, la recherche de modulateurs de l'interaction peut alors être entreprise. La présente invention présente des méthodes pour identifier des drogues qui sont soit des agonistes soit des antagonistes de la fonction cellulaire normale des protéines Fbox, ou du rôle des protéines Fbox dans la pathogenèse de la prolifération et/ou différenciation cellulaire normale ou anormale provoquée par l'ubiquitination d'une protéine par un processus dépendant d'une protéine Fbox. Les tests évaluent l'habilité d'un composé à moduler l'association et/oul'ubiquitination d'une protéine cible (cellulaire ou virale) par un complexe E3 de type SCF. De tels modulateurs peuvent être utilisés par exemple dans le traitement de désordre prolifératifs ou différenciatifs, pour moduler l'apoptose et dans le traitement d'infections virales.
Une variété de méthodologies est applicable à ces études. Les méthodologies qui permettent l'ubiquitination d'une protéine cible par une voie dépendante des protéines Fbox incluent les systèmes cellulaires, utilisant par exemple des protéines purifiées ou des Iysats, ainsi que des systèmes cellulaires utilisant des cellules intactes (cellules de mammifères, humaines, d'insecte ou de levure). Des expériences de simple liaison peuvent aussi être utilisées pour détecter les agents qui empêchent l'ubiquitination en se liant par exemple au substrat ou à la protéine Fbox. Les agents testés pour être des inhibiteurs
peuvent être produits par des bactéries, des levures ou d'autres organismes (produits naturels) ou produits chimiquement (petites molécules nucléiques ou chimiques).
Dans de nombreux programmes de criblage de drogues qui testent des banques de composés, des expériences à grande échelle (high throughput assays) sont préférables afin de maximiser le nombre de composés testés dans une période de temps donnée.
Tests dans des systèmes cellulaires Ces méthodes peuvent être utilisées pour identifier des composés capables d'interagir avec une protéine Fbox ou un de ses partenaires pour modifier l'activité de la protéine Fbox ou de son partenaire. Un tel composé peut par exemple modifier la structure d'une protéine Fbox ou de son partenaire et donc en affecter l'activité. Ces tests peuvent également être utilisés pour identifier des composés qui modulent l'interaction de la protéine Fbox et d'un partenaire de cette protéine.
Ces tests consistent essentiellement en un mélange réactionnel comprenant la protéine Fbox, le composé à tester ou une banque de composés en présence ou non du partenaire de liaison. Les composés testés peuvent être un dérivé du partenaire de la protéine Fbox, par exemple un peptide cible inactif, ou une petite molécule chimique ou nucléique (aptamères). Un exemple de criblage de cette invention pourrait consister à détecter la formation d'un complexe entre une protéine Fbox de l'invention et un de ses partenaires en présence d'un composé ou d'une banque de composés. Pour la détection, la molécule peut être marquée avec un marqueur spécifique, et le ou les composés (s) par un marqueur différent. L'interaction du composé avec la protéine Fbox ou le partenaire de la protéine Fbox peut être détecté en déterminant le niveau des deux marquages après une étape d'incubation et de lavage. Si les deux marquages sont présents cela signifie qu'il y a eu interaction.
Une interaction entre deux molécules peut également être déterminée en utilisant l'analyse d'interaction biomoléculaire (BIA) en temps réel qui détecte la résonance plasmonique de surface, un phénomène optique. La détection dépend des changements dans la concentration de masse des macromolécules sur l'interface, et ne requiert aucun marquage préalable. Une banque de composés à tester peut être immobilisée sur une surface sensible. Une solution contenant la
protéine Fbox ou un partenaire de cette protéine est alors versée en continue sur cette surface. Un changement dans l'angle de résonance détectable grâce à un enregistrement des signaux indique qu'une interaction s'est produite. Cette technique est décrite dans le livre BlAtechnology de Pharmacia.
Un autre exemple d'expérience de criblage de la présente invention inclut les étapes de : (a) réaliser un mélange réactionnel comprenant, une protéine Fbox, un partenaire de cette Fbox, et un composé à tester ; (b) détecter l'interaction entre la protéine Fbox et son partenaire. Cette protéine Fbox et son partenaire peuvent être produites par une technologie recombinante, être purifiées ou synthétisées chimiquement. Un changement statistique significatif (activation ou inhibition) dans l'interaction de la protéine Fbox et de son partenaire en présence d'un composé indique un agoniste potentiel (mimétique ou activateur) ou antagoniste (inhibiteur). L'efficacité du composé peut être testée en effectuant des études de dose-réponse en utilisant différentes concentrations du composé.
Dans le système Il selon le tableau 3, le système d'expression contient deux cassettes d'expression, respectivement : (i) une première cassette d'expression comprenant un acide nucléique codant pour un polypeptide ISUM2A, placé sous le contrôle d'une région régulatrice dont l'activité est constitutive parce qu'elle est induite en présence d'un composé activateur produit de manière constitutive ; (ii) une seconde cassette d'expression comprenant un acide nucléique codant pour le composé activateur actif sur la région régulatrice de la cassette d'expression (i) ci-dessus, ledit acide nucléique codant pour le composé activateur étant placé sous le contrôle d'un promoteur constitutif, préférentiellement un promoteur constitutif fort, ou encore un promoteur actif spécifiquement dans les cellules de l'embryon de la graine.
Dans le système i),) le composé activateur perd sa fonction d'activation de la région régulatrice contrôlant l'expression de l'acide nucléique codant pour un polypeptide ISUM2A, lorsque ce composé activateur est mis en présence d'un ligand spécifique, qui est ici désigné composé inducteur répresseur.
Ainsi, en l'absence du ligand spécifique constituant le composé inducteur répresseur, le composé activateur est exprimé de manière constitutive et active l'expression d'un polypeptide ISUM2A.
En revanche, lorsque le composé activateur est mis en présence du composé inducteur répresseur avec lequel il se lie, le composé activateur est désactivé et ne se fixe plus sur la région régulatrice contrôlant l'expression de l'acide nucléique codant pour un polypeptide ISUM2A.
Dans cette situation, le polypeptide ISUM2A n'est plus exprimé.
L'exemple 2 illustre un mode de réalisation particulier d'un système Il tel que défini ci-dessus. Le système Il présenté à l'exemple 2 comprend respectivement : (i) une première cassette d'expression comprenant un acide nucléique codant pour le composé activateur tTA, placé sous le contrôle d'un promoteur constitutif fort, le promoteur du gène de l'actine 1 du riz ; et (ii) une seconde cassette d'expression comprenant un acide nucléique codant pour un polypeptide ISUM2A placé sous le contrôle d'un promoteur contenant un motif TRE, le promoteur étant activé lorsque l'activateur tTA se fixe sur l'élément TRE.
Ainsi, en l'absence de tout composé inducteur répresseur, le composé activateur tTA est produit de manière constitutive et active le promoteur contrôlant la séquence codant pour un polypeptide ISUM2A.
En revanche, en présence du composé inducteur répresseur, qui dans ce cas est la tétracycline ou un dérivé de la tétracycline, l'activateur tTA est désactivé et ne se fixe plus sur le motif TRE du promoteur contrôlant l'acide nucléique codant pour un polypeptide ISUM2A. Dans cette situation, en présence de tétracycline, le polypeptide ISUM2A n'est plus exprimé.
Le signal inducteur répresseur est l'absence de fixation du complexe composé activateur/composé inducteur répresseur (activateur tTA/tétracycline) sur le polynucléotide régulateur répresseur (promoteur contenant le motif TRE).
Préférentiellement, un système d'expression Il tel que défini cidessus sera utilisé dans un hôte cellulaire végétal ou dans une plante pour laquelle les deux copies du gène isum2A sont mutées ou inactivées.
*Système d'expression // Le système d'expression lil, qui est résumé dans le tableau 3, est très similaire, au regard des éléments de régulation de l'expression des cassettes d'expression qu'il contient, au système d'expression 1 ci-dessus.
Avec le système d'expression lil, il est possible de contrôler l'expression d'un polynucléotide antisens susceptible d'inhiber la production d'un polypeptide ISUM2A dans une plante comprenant au moins une copie fonctionnelle du gène isum2A, préférentiellement dans une plante comprenant les deux copies du gène isum2A fonctionnelles.
Le système lil d'expression comprend deux cassettes d'expression, respectivement : (i) une cassette d'expression contenant un acide nucléique codant pour un polynucléotide antisens ou RNAi inhibant la traduction du polypeptide ISUM2A, cet acide nucléique étant placé sous le contrôle d'un promoteur qui est activé par un composé activateur donné lorsque ce composé activateur est lié à un composé inducteur ; et (ii) une cassette d'expression comprenant un acide nucléique codant pour le composé activateur, cet acide nucléique étant placé sous le contrôle d'un promoteur constitutif ou spécifique de l'embryon, préférentiellement un promoteur fort.
Selon le système d'expression lil, en l'absence de liaison du composé activateur avec le composé inducteur, le promoteur contrôlant l'expression du polynucléotide antisens ou RNAi est inactif et le polynucléotide antisens n'est pas produit.
En revanche, en présence du composé inducteur capable d'activer le composé activateur, par exemple en se complexant avec celui-ci, le composé activateur activé se fixe sur le promoteur contrôlant l'expression du polynucléotide antisens isum2A ce qui active l'expression du polynucléotide antisens entraînant une inhibition de la traduction du gène isum2A.
Grâce au système d'expression lit, la synthèse du polypeptide ISUM2A est donc inhibée en présence du composé inducteur activant le composé activateur.
AVERTISSEMENTS Le Demandeur tient à préciser que la figure unique représente un mode de réalisation de l'objet selon l'invention, mais qu'il peut exister d'autres modes de réalisation qui répondent à la définition de cette invention.
Il précise aussi que, si le mode de réalisation de l'objet selon l'invention tel qu'illustrés comportent plusieurs éléments de fonction identique et que si, dans la description, il n'est pas spécifié que l'objet selon cette invention doit obligatoirement comporter un nombre particulier de ces éléments, l'objet de l'invention pourra être défini comme comportant"au moins un"de ces éléments.
DESCRIPTION D'UN MODE DE REALISATION PREFERE DE L'OBJET SELON L'INVENTION La plaque longitudinale d'ostéosynthèse de liaison entre au moins deux os, par exemple deux vertèbres, comporte au moins deux parties 1,2, chaque partie de plaque comportant des moyens d'emboîtement respectivement femelles 3 et mâles 4 associables les uns dans les autres selon une direction donnée 43 et des moyens pour solidariser les parties de plaque respectivement avec les deux vertèbres, par exemple des fentes aptes à coopérer, de façon connue en ellemême, avec des têtes de vis ou analogues.
Il est précisé que, par "plaque", on entend tout élément oblong, qu'il soit une plaque proprement dite, ou bien une tige, etc.
Dans ce mode de réalisation, les moyens d'emboîtement respectivement femelles 3 et mâles 4 sont constitués par un filetage dit "femelle" 5 situé sur la paroi d'un logement en creux 6 réalisée dans l'une 1 des deux parties de plaque 1,2 et par un filetage dit "mâle" 7 réalisé sur une tige en saillie 8 solidaire de l'autre partie de plaque 2, ce filetage mâle 7 étant complémentaire du filetage femelle 5 pour qu'il puisse s'y visser.
Avantageusement, la longueur du filetage femelle est supérieure à la longueur de la tige en saillie pour que l'on puisse obtenir, en bout de course du vissage de la tige en saillie dans le logement en creux, un blocage complet des deux parties de plaque l'une dans l'autre, comme décrit dans la Demande Internationale référencée ci-avant.
Selon des caractéristiques essentielles de l'invention, la paroi du logement en creux 6 sur laquelle est situé le filetage femelle 5 est de forme cylindrique de révolution et le filetage mâle 7 est réalisé sur une portion 9 de la tige en saillie 8, cette portion 9 de tige en saillie étant de forme sensiblement tronconique dont la petite base 21 est située vers la seconde extrémité 22 de la tige en saillie 8 opposée à la première extrémité 23 qui est solidaire de la seconde partie de plaque 2.
Comme illustré schématiquement sur la figure unique, la forme sensiblement tronconique de la portion de tige 9 présente une valeur d'angle au sommet a relativement faible par exemple sensiblement égale à cinq dixièmes de degré.
La plaque d'ostéosynthèse comporte en outre des moyens de rappel élastiques 30 pour tendre à maintenir les première et seconde parties de plaque 1,2 l'une par rapport à l'autre dans une position angulaire déterminée, par exemple centrées sur l'axe 43 mentionné ci-avant.
Dans une réalisation avantageuse, les moyens de rappel élastiques 30 pour tendre à maintenir les première et seconde parties de plaque l'une par rapport à l'autre dans une position angulaire déterminée, sont constitués par une barre élastique 31 solidaire, par une de ses deux extrémités, de la seconde extrémité 22 de la tige en saillie 8, son autre extrémité étant montée coulissante dans une percée 32 réalisée dans le fond 33 du logement en creux 6.
Pour augmenter l'élasticité de la barre élastique 31, cette dernière peut comporter au moins une fente longitudinale 34, ou analogue comme un trou, une succession de trous, une rainure, etc.
Dans une réalisation préférentielle, la plaque d'ostéosynthèse comporte au moins une gorge 40 réalisée sur la tige en saillie 8, entre sa première extrémité 23 et la portion 9 de tige en saillie comportant le filetage mâle 7, un orifice traversant taraudé 41 réalisé dans la paroi du logement en creux 6, l'axe 42 de l'orifice traversant 41 faisant un angle non nul, par exemple égal à quatre-vingt-dix degrés, avec la direction de vissage 43 des deux filetages femelle et mâle 5,7 et de façon que cet axe soit apte à passer dans la gorge 40, et des moyens de blocage 50 aptes à coopérer avec l'orifice traversant taraudé 41 et la gorge 40.
Avantageusement, les moyens de blocage 50 aptes à coopérer avec l'orifice traversant taraudé 41 et la gorge 40 sont constitués par exemple par une pièce 51 comportant une partie 52 à deux première et seconde extrémités, la partie de pièce 52 comportant un filetage complémentaire de celui de l'orifice taraudé 41, une partie de maintien 53, et des moyens 54 pour solidariser la partie de maintien 53 avec la première extrémité de la partie de pièce 52.
Les moyens 54 pour solidariser la partie de maintien 53 avec la première extrémité de la partie de pièce 52 sont constitués par une liaison à point de faiblesse cassable 55.
Les moyens de blocage 50 comportent en outre des moyens 57 pour limiter le vissage de la partie de pièce 52 dans l'orifice taraudé 41 et un ergot 56 solidaire de la seconde extrémité de la partie de pièce 52, cet ergot étant apte à coopérer avec la gorge 40 comme décrit ci-après.
La figure 4 représente la détection de mutation dans la séquence génomique de Cbg. Les flèches indiquent le nucléotide pour lequel le porc Fl#9110045 et sa mère Meishan sont hétérozygote (T/G) alors que le père LW est homozygote (G/G).
1-Matériel et Méthodes.
1) Cartographie sur hybrides irradiés.
Les réactions ont été réalisées indépendamment en double sur un panel ImpRH (Yerle et al., 1998). Les
produits de PCR ont été analysés sur des gels d'agarose 2% en tampon IX TBE après coloration au bromure d'éthidium.
Une troisième amplification a été effectuée sur les clones pour lesquels des résultats discordants avaient été obtenus. Les vecteurs des résultats d'amplification ont été soumis à la banque ImpRH (Milan et al. 2000).
2) Cartographie FISH.
Les chromosomes en métaphase ont été obtenus à partir de cultures de lymphocytes de sang périphérique.
Pour identifier les chromosomes, les métaphases ont été marquées en bandes G en utilisant une technique G-T-G avant hybridation, et les images des meilleures métaphases ont été prises avec une imprimante vidéo comme décrit antérieurement (Yerle et al., 1992).
Les expériences d'hybridation in situ ont été réalisées conformément à Yerle et al. (Yerle et al., 1992). Avec quelques modifications (Sun et al., 1999).
3) Analyse de liaisons génétiques.