INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon une autre particularité, le huitième ensemble de tableaux comprend un groupe de tables contenant la liste de tous les identifiants des chansons diffusées sur chaque dispositif de reproduction d'informations audiovisuelles, la mise à jour de ce tableau étant effectuée par serveur lors de la réception d'un fichier de compte rendu, par un dispositif reproduction d'informations audiovisuelles déterminé et contenant la liste chansons diffusées sur le juke-box. Selon une autre particularité, un neuvième ensemble de tableaux comprend informations nécessaires pour le calcul des redevances et pour calcul de cout de location de chaque juke-box.
Une étape de recherche 43, dans la page dite de consolidation 44 des sites marchands est ensuite réalisée, ces derniers étant étiquetés et classés en catégories.
Puis une étape 45 de sélection des sites marchands étiquetés est effectuée.
Pour ce faire, on recharge la page (par la fonction javascript changer()) en passant en paramètre un nom correspondant à la catégorie cochée. La liste des sites affichés est alors actualisée suivant ce paramètre.
Par exemple # Pour la nationalité française : le paramètre est Nfrancaise, qui correspond à : Web Nationalite est l'ID de la France dans la table Pays .
# Avec sites en français : le paramètre est LFrancais, qui correspond à : Web~lg~Francais est vrai dans la table WebMarchand .
# Avec paiement sécurisé : paramètre est TSecurise, qui correspond à : Web Transaction securise est vrai dans la table WebMarchand .
# Avec paiement par chèque : le paramètre est PCheque, qui correspond à : Web~Pai~Cheque est vrai dans la table WebMarchand .
L'actualisation est faite dans la requête Tri Web Marchand.
Les étapes suivantes sont les étapes d'appel et d'interrogation 46 des sites marchands étiquetés.
Ces étapes constituent le début d'une boucle 47 consistant à récupérer les résultats des sites affectés avantageusement d'un ou plusieurs programmes étiquettes, (également parfois appelés ci-après custom tags ).
Pour ce faire, on identifie l'ensemble des Custom tags correspondant à un site marchand.
On retire de l'ensemble les sites correspondant aux programmes étiquettes ayant renvoyé une erreur (si le site correspondant est arrêté par exemple), et on conserve les tableaux 48 renvoyés par les pages 49 de sites étiquetés, remplissant les critères de sélection du produit (étape 50), en passant par l'affichage 51 des pages HTML, et leur analyse 52.
Dans le mode de réalisation plus particulièrement décrit ici à titre d'exemple, on recherche ainsi tous les custom tags de la base de données (champ Web~tag de la table webmarchand) grâce à la requête LWeb. Ces étiquettes sont alors stockées dans un tableau liste erreur.
Pour chacun de ces sites, il y a alors essai d'appel de l'étiquette trouvée. Si ce n'est pas possible, le site marchand correspondant est retiré de la liste liste erreur.
La méthode de test de l'existence des custom tags est donc d'essayer de les appeler, et de
capturer l'erreur si c'est impossible d'obtenir une réponse positive (tag / ).
La sédimentation différentielle s'établit au fond du tube pour les particules très denses et de façon ordonnée sur le coussin pour les autres. Comme déjà , cette sédimentation peut être accélérée par centrifugation.
Selon une caractéristique avantageuse du procédé de l'invention, fraction contenant les organismes récupérés à l'issue de l'étape de sédimentation est soumise à deux étapes de centrifugation ultérieures successives de lavage par l'eau, à vitesse comprise entre 6 000 et 10 000 rpm et une température comprise entre et 5 C, avantageusement 4 C.
Par ailleurs, pour permettre d'extraire le maximum d'ADN, le mélange constitué par les organismes cultivables et non cultivables inclus dans un bloc d'agarose à l'issue des deux étapes ultérieures de centrifugation est soumis à deux lyses successives # tout d'abord une première lyse dans un tampon à base de lysosyme et d'achromopeptidase ; # puis, une seconde lyse dans un tampon à base de lauryl-sarcosyl à 1 % et de protéinase. Pour permettre la séparation des fragments d'ADN, le bloc d'agarose incorporant les organismes lysés est soumis â une électrophorèse en gel d'agarose en champ alterné.
En pratique, le gel d'agarose est un gel low melting point ' une concentration de 0,8%. La migration électrophorétique est conduite sous une tension de 150V pendant 22 heures. Des impulsions de 10 à 25 secondes permettent d'obtenir deux champs électriques alternés.
Dans une dernière étape du procédé, on récupère les fragments d'ADN soit par electroélution soit par digestion de l'agarose, soit par l'utilisation kits commercialisés et connus de Momme du métier.
Comme déjà dit, l'invention concerne également l'ADN susceptible d'être obtenu par le procédé ci-avant décrit.
Elle se rapporte enfin à une librairie d'ADN constituée par les fragments d'ADN obtenus par procédé précédemment décrit.
L'invention et les avantages qui en découlent ressortiront mieux des exemples de réalisation suivants à l'appui de la figure unique annexée représentant les profils de migration d'ADN bactérien.
EXEMPLE 1 EXTRACTION D'ADN DE BACTERIES ENDOSYMBIOTES DU TYPE WOLBACIIIA A PARTIR D'OEUFS DE DROSOPHILES 1 - Matériel de départ : 10 à 20 000 oeufs non fécondés de femelles vierges de Drosophila simulans sont mis en solution dans environ 500 p1 de NaCl 0,8 %. L'utilisation d'oeufs non fécondés est essentielle dans la mesure où elle permet d'extraire majoritairement de l'ADN bactérien avec une charge minimale d'ADN nucléaire.
II - Broyage du matériel : le broyage est effectué de façon ménagée dans un microtube de 1,5 ml au moyen d'un piston stérile en polypropylène avec ajout de sable de Fontainebleau stérile. Le broyage comprend les étapes suivantes a) broyage de minutes dans la glace ; b) brève centrifugation à 4 000 rpm à une température de 4 C ; c) récupération du surnageant trouble dans un tube Ultraclear 38 Kontron ; d) remise en suspension du culot par 500 p1 de NaCI 0,8 % ; e) on répète étapes a) à d) sur le même échantillon ; f) les surnageants des 3 broyages sont repris dans un tube ultraclear.
g) le dernier culot de broyât est' repris et filtré sur coton stérile du NaCI 0,8 qsp 20 ml ; h) on récupère filtrat qu'on ajoute au surnageant de f/ III - Réalisation de l'étape de sédimentation sur gradient de densité On prépare solution de NYCODENZ à 50 % poids/volume (25 g dans 50 ml d'eau ultrapure) correspondant à une densité de l'ordre de 1,26.
La sédimentation est alors accélérée pendant 30 minutes à une température de 4 C par centrifugation à 9 000 rpm au moyen d'un rotor à godet mobiles, avec frein, du type TST 2838 (KONTRON). IV - Traitement de la fraction bactérienne A l'issue de l'étape de sédimentation, on observe par microscopie optique dans le tube ultraclear plusieurs couches successives de haut en bas # couche 1 : fraction trouble avec débris fins en suspension et ponctuations visibles au microscope correspondant à des bactéries et des mitochondries ; # couche 2 : fraction translucide avec ponctuations visibles au microscope ; # couche 3 : fraction blanchâtre avec de très nombreuses ponctuations comprenant des bactéries en majorité, ainsi que des mitochondries ; # couche 4 : plusieurs couches contenant de très nombreux débris correspondant aux enveloppes des oeufs, des ponctuations (bactéries, mitochondries) et des noyaux des cellules de drosophiles ; # couche 5 : fraction translucide sans aucune structure visible au microscope correspondant au coussin dense de NYCODENZ ; # couche 6: faible culot comportant en mélange sable de Fontainebleau et quelques débris denses.
4 à 5 ml de la fraction bactérienne sont récupérés à partir de la couche 3 au moyen d'un cône stérile. Le volume récupéré est ensuite repris par 20 ml d'eau ultrapure. On procède alors à une nouvelle centrifugation à une vitesse de 9 rpm à une température de 4 C pendant 15 minutes avec frein, pour culotter les bactéries.
On observe que les ponctuations contenues dans les couches 1 et 2 peuvent être culottées, ce qui suggère qu'elles comprennent des bactéries et mitochondries dégradées. Le surnageant obtenu à l'issue de la première étape de centrifugation est éliminé et le culot bactérien est repris par environ 1,5 ml d'eau ultrapure.
On procède ensuite à une nouvelle centrifugation de lavage à 9 000 rpm à 4 C pendant 5 minutes. élimine enfin le surnageant, puis on conserve le culot à -20 C.
Code Groupe Route Formule administrée (nombre de souris) Quantité/dose
C Contrôle naïf (6) i.n. 20 l PBS 80mOsm/kg FA Ag + BVSM i.n. 3,6 g HA + 320,4 g BVSM AS Ag s.c. s.c. 3,6 g HA AN Ag i.n. i.n. 3, 6 HA FMPL Ag + BVSM + MPL i . n . 3 , 6 g HA + 320,4 g BVSM + 5 g MPL AMPL Ag + MPL i.n. 3 g HA + 5 g MPL
Pour chaque groupe, on réalise les prélèvements sanguins et les prélèvements de sécrétions nasales comme décrit dans la partie méthodes.
L'analyse des sérums et des sécrétions nasale est réalisée par test ELISA.
La figure 8 résume les résultats obtenus en titration spécifique du split B/Harbin des pools de sérums (IgG) et des sécrétions nasales (IgA) de souris administrés avec les formulations adjuvantées par le MPL. Ces résulats ont été confirmés par l'analyse de la réponse individuelle contre les split B/Harbin et A/Nanchang.
Les split influenza virus associés au BVSM ou au MPL administrés par voie nasale induisent une réponse IgG sérique nettement plus élevés que l'antigène libre administré par la même voie (augmentation respective de 22,4X et 7,3X). Parallèlement ces formulations induisent une forte immunité mucosale.
La formulation associée à l'adjuvant MPL induit une réponse IgG spécifique similaire à la formulation de référence. A l'inverse, pour cet adjuvant il existe un effet de synergie important entre le MPL et les BVSMTM.
Ainsi les taux d'IgA obtenus sont multipliés par un facteur de 2. 7 par rapport à la formulation de réf. (Ag/BVSM) (FA).
Ainsi, à l'inverse de la réponse IgG, un fort potentiel de synergie entre la MPL et les BVSM peut être démontré pour la réponse mucosale.
V - Exemple 4 : des Oligonucleotides sur la réponse immunologique des formulations BVSM/Influenza.
Une formulation trivalente et le contrôle correspondant sont préparés à 250 ug d'HA/ml (83,3 ug/souche)/de split Influenza Une solution d'oligonucléotide (ODN) est ajoutée sur chacune de ces préparations afin d'obtenir les formulations et contrôles correspondants adjuvantes.
42 souris femelles BALB/cJ/Rj (âgées de 10 semaines au début de l'étude) sont divisés en 7 groupes à raison de 6 souris par groupe. Pour chaque groupe le traitement est réalisé comme décrit dans la partie Matériel et méthodes . Le tableau 3 résume le traitement de chaque groupe.
* * Chapitre IV - Modèle d'exécution déterministe (Figures 135 à 169) On va dans ce chapitre introduire un modèle d'exécution qui sera utilisé notamment dans le cadre du partage d'aplications sur l'Internet que nous présenterons dans le chapitre VI.
Les trois séquences v1, v2 et v3 sont fournies à un circuit modulateur 50 qui effectue des traitements classiques de modulation, de filtrage et de cartographie (en anglais mapping ), et éventuellement une modulation en bande transposée. Le signal résultant est émis sur un canal de transmission l'intermédiaire d'une antenne 51.
On a considéré ici des turbocodes parallèles, mais l'invention s'applique avec des adaptations à la portée de l'homme du métier, turbocodes séries et aux turbocodes hybrides (comportant une partie de turbocodage série et une partie de turbocodage parallèle).
Le premier codeur 32 utilisé ici est un codeur systématique, c'est dire que la séquence v, est identique à la séquence a.
Le codeur 32 utilise un polynôme f(x) comme polynôme multiplicateur, codeur 34 utilise un polynôme h(x) comme polynôme multiplicateur, les codeurs 32 et 34 utilisent tous les deux un polynôme g(x) comme polynôme diviseur.
Selon l'invention, une interface de régulation 40 lit une taille totale souhaitée du fichier codé. La taille souhaitée RT est par exemple définie l'utilisateur au moment où il effectue la commande de codage.
En variante, la taille souhaitée RT n'est pas définie par l'utilisateur mais est définie automatiquement. Par exemple, le dispositif qui recevra l'image fixe une taille mémoire maximale, qui est transmise au codeur et qui détermine la taille souhaitée RT. Cette variante s'applique notamment dans le cas où dispositif récepteur est un téléphone mobile dont la mémoire d'affichage limitée.
L'interface de régulation 40 interroge alors l'entrelaceur par l'intermédiaire d'un module d'acquisition de longueur 41, pour connaître la longueur S de l'entrelacement. En variante, la longueur S peut être lue en mémoire.
Pour optimiser la ressource réseau qui sera utilisée pour transmettre les données, il est nécessaire de faire en sorte que la taille réelle R de fichier compressé soit un multiple entier de la longueur S de l'entrelaceur, soit R = k.S, où k est un entier.
En outre, la taille réelle R de fichier compressé doit être aussi proche que possible de la taille désirée RT. Pour cela, il est possible d'arrondir soit au multiple inférieur, soit au multiple supérieur. Pour choisir le type d'arrondi, un mode de référence prédéterminé, et de préférence changeable d'un codage au suivant par l'utilisateur, est mémorisé dans une mémoire 42. L'interface de régulation interroge la mémoire 42 par l'intermédiaire d'un module d'acquisition de mode 43.
Lorsque le mode de référence est arrondi au multiple supérieur la taille réelle = k.S sera telle que k vérifie la condition : (k-1).S < RT _ < k.S. Lorsque le mode de référence est arrondi au multiple inférieur la taille réelle = k.S sera telle que k vérifie la condition : k.S < RT s (k+1).S. pratique, ces deux modes d'arrondi correspondent à deux applications différentes.
Dans le cas de l'arrondi au multiple superieur, les impératifs techniques liés à l'utilisation du turbo-codeur font des ressources supplémentaires vont être utilisées, en cas d'extension signal avec des échantillons nuls, pour correspondre au multiple de longueur S de l'entrelaceur. Dans cette configuration, il y a intérêt à exploiter au maximum cette ressource qui sera de toute façon utilisée. La taille du fichier compressé est par conséquent augmentée à partir de la taille souhaitée RT jusqu'à la valeur maximale, avec pour avantage une qualité améliorée de l'image au décodage.
L'arrondi au multiple inférieur correspond au cas où la taille demandée ne peut en aucun cas être dépassée, par exemple si on souhaite stocker le fichier compressé dans une zone mémoire de taille limitée.
Lorsque l'interface de régulation 40 a calcule la taille réelle R du fichier compressé, cette taille est transmise à un module contrôle de débit 26 qui est relié aux deux modules de codage entropique 24 et 25. Le codage de l'image est effectué par le circuit de codage 2 qui fournit alors un fichier compressé taille R au turbo-codeur 3.
turbo-codeur 3 code le fichier compressé pour le protéger contre les erreurs transmission, et les données en résultant sont par exemple modulées pour être ensuite transmises sur le canal de transmission. II est à noter que le rendement de turbo-codage est de 1I3, c'est-à-dire que si l'entier n représente nombre de bits de padding , la taille du fichier en sortie du turbo-codeur 3x(R + n).
variante, la longueur S de l'entrelaceur 33 est paramétrable. Elle est par exemple choisie parmi une gamme prédéterminée de valeurs. Selon une autre variante, l'interface de régulation ne permet à l'utilisateur que choisir taille parmi des valeurs multiples de la longueur d'entrelaceur S. n'est alors nécessaire d'effectuer un calcul d'arrondi.
référence à la figure 3, un système dans lequel est mise oeuvre l'invention comporte la source de signal 1, le module de codage de source 2, le module de codage de canal 3 et le module de régulation 4, dont un exemple de réalisation vient d'être exposé.
Un autre objectif de l'invention est de proposer un proce qui permette d'extraire et de séparer l'ADN cible exempt de toute contamination d'ADN notamment eucaryote. Un autre problème que se propose de résoudre l'invention est de pouvoir appliquer le procédé développé sur d'autres échantillons environnementaux, et notamment mais de façon non limitative, les végétaux, les insectes, par exemple les arthropodes, les mollusques, les éponges, les crustacés, les plathelmintes, les nématodes, les bioréacteurs tels que les biofilms, fermenteurs, boues activées et plus généralement les milieux aquatiques mais également des échantillons biologiques animaux (par exemple le lisier de porc, bol alimentaire du rumen) ou humains.
S'agissant de ce dernier environnement, le document EP-A-0 939 118 décrit une méthode d'extraction d'ADN et d'ARN à partir de fèces, selon laquelle la matière est mélangée en milieu détergent avant d'être soumise à l'extraction proprement dite de l'ADN et de TARN dans un solvant approprié. Aucune indication n'est donnée concernant la taille de l'ADN extrait mais on peut s'attendre à extraire de petits fragments. En outre et de même que précédemment, on assiste à une contamination de l'ADN cible par de l'ADN eucaryote.
Par ailleurs, l'étape de broyage comprend successivement un premier broyage énergique de l'échantillon ; une centrifugation de lavage; * la reprise du culot dans une solution tampon physiologique; deux broyages énergiques complémentaires.
Bien entendu, les conditions de broyage et de centrifugation sont dépendantes de la masse de matériel de départ mise en oeuvre. S'agissant plus particulièrement de la centrifugation, elle est conduite à une vitesse comprise entre 5 et 10 000 rpm, avantageusement 6 000 rpm, pendant 5 à 15 minutes, avantageusement 10 minutes.
Le Demandeur a constaté que de façon tout-à-fait surprenante, cet enchamement d'étapes permettait d'optimiser la séparation ultérieure des organismes non cultivables du reste du broyât.
Dans un second mode d'exécution, le broyage de l'échantillon de sol est effectué dans une solution tampon de NaCI à 0,8%.
Dans une seconde forme de réalisation, l'échantillon environnemental est un insecte. En effet, parmi les organismes non cultivables présentant un intérêt potentiel, sont également connues les bactéries endosymbiotes, et notamment celles du genre Wolbachia.
Ce type d'endosymbiotes est présent chez bon nombre d'invertébrés et notamment d'arthropodes, en particulier chez les drosophiles. On retrouve également ces bactéries chez les mollusques.
Pour extraire exclusivement l'ADN bactérien plutôt que l'ADN nucléaire, le procédé de l'invention est conduit à partir d'oeufs non fécondés de drosophiles donc de femelles vierges.
Par ailleurs, le Demandeur a constaté qu'un broyage ménagé suivi d'une filtration puis d'une centrifugation permettait d'optimiser la séparation ultérieure de la fraction majoritairement bactérienne du reste du broyât. Dans une troisième forme de réalisation, l'échantillon environnemental présente sous forme échantillon biologique humain ou animal.
Dans mode de réalisation avantageux, l'échantillon biologique est constitué par des fèces d'origine humaine.
Pour permettre de séparer la flore intestinale de la matière solide, le broyage est suivi d'une étape de filtration.
S'agissant des milieux aquatiques, une concentration préalable de l'échantillon pourra être rendue nécessaire en fonction de son volume initial.
Pour tous ces échantillons environnementaux décrits de façon non limitative, la séparation des organismes non cultivables du reste du broyât est effectuée par sédimentation sur coussin de densité supérieur à 1, avantageusement de l'ordre 1,3.
En pratique, on utilise au choix une solution de Nycodenz, Percoll, Ficoll, 1Vletrizamide, Iodixanol, que l'on positionne au fond d'un tube sous le broyât.
Le composé vinylique peut être également un sel de dialkyldiallylammonium tel que le chlorure de diméthyldiallylammonium. Les copolymères d'acide acrylique et de ce dernier monomère sont proposés sous les appelations MERQUAT 280, MERQUAT 295 et MERQUAT PLUS 3330 par la société CALGON.
Les acrylamides ou méthacrylamides N-substitués plus particulièrement préférés selon l'invention sont les groupements dont les radicaux alkyle contiennent de 2 à 12 atomes de carbone et plus particulièrement le N-éthylacrylamide, le N-tertiobutyl-acrylamide, le N-tertiooctyl-acrylamide, le N-octylacrylamide, le N-décylacrylamide, le Ndodécylacrylamide ainsi que les méthacrylamides correspondants.
(3) Les polyaminoamides réticulés et alcoylés partiellement ou totalement dérivant de polyaminoamides de formule générale : - dans laquelle R19 représente un radical divalent dérivé d'un acide dicarboxylique saturé, d'un acide aliphatique mono ou dicarboxylique à double liaison éthylénique, d'un ester d'un alcanol inférieur ayant 1 à 6 atomes de carbone de ces acides ou d'un radical dérivant de l'addition de l'un quelconque desdits acides avec une amine bis primaire ou bis secondaire, et Z désigne un radical d'une polyalkylène-polyamine bisprimaire, mono ou bis-secondaire et de préférence représente : a) dans les proportions de 60 à 100 moles %, le radical où x=2 et p=2 ou 3, ou bien x=3 et p=2 ce radical dérivant de la diéthylène triamine, de la triéthylène tétraamine ou de la dipropylène triamine ; b) dans les proportions de 0 à 40 moles % le radical (XI) ci-dessus, dans lequel x=2 et p=1 et qui dérive de l'éthylènediamine, ou le radical dérivant de la pipérazine :
c) dans les proportions de 0 à 20 moles % le radical -NH-(CH2)6-NH- dérivant de l'hexaméthylènediamine, ces polyaminoamines étant réticulées par addition d'un agent réticulant bifonctionnel choisi parmi les épihalohydrines, les diépoxydes, les dianhydrides, les dérivés bis insaturés, au moyen de 0,025 à 0,35 mole d'agent réticulant par groupement amine du polyaminoamide et alcoylés par action d'acide acrylique, d'acide chloracétique ou d'une alcane sultone ou de leurs sels.
(4) -Les polymères comportant des motifs zwittérioniques de formule : dans laquelle R20 désigne un groupement insaturé polymérisable tel qu'un groupement acrylate, méthacrylate, acrylamide ou méthacrylamide, y et z représentent un nombre entier de 1 à 3, R21 et R22 représentent un atome d'hydrogène, méthyle, éthyle ou propyle, R23 et R24 représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle de telle façon que la somme des atomes de carbone dans R23 et R24 ne dépasse pas 10.
A titre d'exemple, on peut citer le copolymère de méthacrylate de méthyle / diméthylcarboxyméthylammonio-éthylméthacrylate de méthyle tel que le produit vendu sous la dénomination DIAFORMER Z301 par la société SANDOZ.
(7) Les polymères répondant à la formule générale (XI) tels que ceux décrits par exemple dans le brevet français 1 400 366 : dans laquelle R29 représente un atome d'hydrogène, un radical CH30, CH3CH20, phényle, R30 désigne l'hydrogène ou un radical alkyle inférieur tel que méthyle, éthyle, R31désigne l'hydrogène ou un radical alkyle inférieur tel que méthyle, éthyle, R32 désigne un radical alkyle inférieur tel que méthyle, éthyle ou un radical répondant à la formule : -R33-N(R31 )2, R33 représentant un groupement -CH2-CH2- , -CH2-CH2-CH2- , -CH2-CH(CH3)- , R31 ayant les significations mentionnées cidessus, ainsi que les homologues supérieurs de ces radicaux et contenant jusqu'à 6 atomes de carbone.
Section 3 - Mécanisme de réplication Comme nous l'avons vu, des utilisateurs d'une application peuvent partager certaines instances d'objets permanents partagés. Les utilisateurs peuvent interagir avec ces objets, mais chacun à leur tour grâce à un mécanisme d'exclusion mutuelle explicité plus loin. Quand un utilisateur modifie un objet, étant donné que la même instance peut être partagée avec certains autres utilisateurs, ces derniers doivent être notifiés de cette modification. Ainsi la figure 198 illustre le cas où deux utilisateurs User et User! manipulent différents objets (objets noirs pour Userl, objets blancs pour User2).
La suspension de 9-(E)-érythromycine-oxime ainsi obtenue est agitée à 800 tpm pendant 9 heures ou plus à une température de 16 C environ (ou à température ambiante). La consigne de température est ensuite refroidie à 10 C environ et une solution d'HCI 1 N est coulée en 1 h30 ou plus de manière à amener le pH de la masse réactionnelle à une valeur de 9,5 environ.