INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le pas A4 règle les valeurs de commande de tension finales U** et V** sur -1 (qui correspond au nombre à 8 bits "0"). I1 en résulte que le pourcentage de modification des signaux MID de la phase U et de la phase V est réglé à une valeur égale à 0 % et que également le taux d'impulsions de ces signaux est réglé à 0 %. Par conséquent les transistors IGBT 1, 2, 3 et 4 pour la phase U et la phase V n'exécutent aucune commutation. Le pas A4 calcule la valeur de commande de tension finale W** à partir des valeurs de commande de tension de base U*, V* et W* conformément à l'équation suivante W** = W* - (U* + V*)/2 - 1 Cette équation est conçue de manière à réduire les différences de tension entre lignes, à savoir les différences de tension de la phase W par rapport à la phase U et la phase V. De façon spécifique cette équation règle la valeur de commande de tension finale W** à une valeur moyenne entre les différences de tension entre lignes de la phase W par rapport à la phase U et à la phase V. Après le pas , le programme avance à un pas A15.
Le pas A5 règle les valeurs de commande de tension finale U** et V** sur +1 (qui correspond au nombre à 8 bits "255"). I1 en résulte que le pourcentage de modulation des signaux MID de la phase U et de la phase V est réglé égal à 100 % et que également leur taux d'impulsions est réglé à 100 %. Par conséquent les transistors IGBT 1, 2, 3 et 4 pour la phase U et la phase V n'exécutent aucune commutation. Le pas A5 calcule la valeur de commande de tension finale W** à partir des valeurs de commande de tension de base U*, V* et W* conformément à l'équation suivante W** = W* - (U* + V*)/2 + 1 Cette équation est conçue pour réduire les différences de tension entre lignes à savoir les différences de tension de la phase W par rapport à la phase U et à la phase V. De façon spécifique, cette équation règle la valeur de commande de tension finale W** à une moyenne entre les differences de tension entre lignes de la phase par rapport à la phase U et à la phase V. Après le pas A5, le programme avance au pas A15.
Le pas A6 soustrait la valeur de commande de tension de base W* de la valeur de commande de tension de base V*. Le pas A6 calcule la valeur absolue du résultat de la soustraction. Par conséquent le pas A6 calcule "IV* - W*1". Le pas A6 compare la valeur absolue calculée "IV* - W*1" à la valeur de référence prédéterminée "x". Lorsque la valeur absolue "IV*-W*I" est inférieure la valeur de référence prédéterminée "x", le programme avance du pas A6 au pas A7. Sinon le programme avance du pas A6 à un pas A10.
ii) les radicaux R1 et R2, qui peuvent être identiques ou différents, représentent un radical aliphatique, linéaire ou ramifié, comportant de 1 à 4 atomes de carbone, ou un radical aromatique tel que aryle ou alkylaryle. Les radicaux aliphatiques peuvent comporter des hétéroatomes tels que notamment l'oxygène, l'azote, le soufre, les halogènes. Les radicaux aliphatiques sont par exemple choisis parmi les radicaux alkyle, alcoxy, alkylamide et hydroxyalkyle, comportant environ de 1 à 4 atomes de carbone; R3 et R4, identiques ou différents, désignent un radical alkyle, linéaire ou ramifié, comportant de 12 à 30 atomes de carbone, ledit radical comprenant au moins une fonction ester ou amide.
B) - les sels d'ammonium quaternaire de l'imidazolinium, comme par exemple celui de formule (V) suivante : @ dans laquelle R5 représente un radical alcényle ou alkyle comportant de 8 à 30 atomes de carbone par exemple dérivés des acides gras du suif, R6 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en C,-C4 ou un radical alcényle ou alkyle comportant de 8 à 30 atomes de carbone, R7 représente un radical alkyle en C1-C4, RB représente un atomé d'hydrogène, un radical alkyle en Ci-C4, X est un anion choisi dans le groupe des halogénures, phosphates, acétates, lactates, alkylsulfates, alkyl-ou-alkylarylsulfonates. De préférence, R5 et R6 désignent un mélange de radicaux alcényle ou alkyle comportant de 12 à 21 atomes de carbone par exemple dérivés des acides gras du suif, R7 désigne méthyle, R8 désigne hydrogène. Un tel produit est par exemple le Quaternium-27(CTFA 1997) ou le Quaternium-83 (CTFA 1997) commercialisés sous les dénominations "REWOQUAT" W 75, W90, W75PG, W75HPG par la société WITCO, C)- les sels de diammonium quaternaire de formule (VI) :
dans laquelle R9 désigne un radical aliphatique comportant environ de 16 à 30 atomes de carbone, R10, R11, R12, R13 et R14 , identiques ou différents sont choisis parmi l'hydrogène ou un radical alkyle comportant de 1 à 4 atomes de carbone, et X est un anion choisi dans le groupe des halogénures, acétates, phosphates, nitrates et méthylsulfates. De tels sels de diammonium quaternaire comprennent notamment le dichlorure de propanesuif diammonium.
D)- les sels d'ammonium quaternaire contenant au moins une fonction ester de formule (VII ) suivante : dans laquelle : r - R15 est choisi parmi les radicaux alkyles en C1-C6 et les radicaux hydroxyalkyles ou dihydroxyalkyles en Ci-Ce ; - R16 est choisi parmi : 0 - le radical R9 C- - les radicaux R20 hydrocarbonés en C1-C22 linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, - l'atome d'hydrogène, - R18 est choisi parmi : 0 Il -le radical R2jC- - les radicaux R22 hydrocarbonés en C1-C6 linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés,
- l'atome d'hydrogène, - R17, R19 et R21, identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux hydrocarbonés en C7-C21, linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés ; - n, p et r, identiques ou différents, sont des entiers valant de 2 à 6 ; - y est un entier valant de 1 à 10 ; - x et z, identiques ou différents, sont des entiers valant de 0 à 10 ; - X- est un anion simple ou complexe, organique ou inorganique ; sous réserve que la somme x + y + z vaut de 1 à 15 , que lorsque x vaut 0 alors R16 désigne R20 et que lorsque z vaut 0 alors R18 désigne R22- On utilise plus particulièrement les sels d'ammonium de formule (VII) dans laquelle : - R15 désigne un radical méthyle ou éthyle, - x et y sont égaux à 1 ; - z est égal à 0 ou 1 ; - n, p et r sont égaux à 2 ; - R16 est choisi parmi : 0 il - le radical Ri9C- - les radicaux méthyle, éthyle ou hydrocarbonés en C14-C22 r - l'atome d'hydrogène ; - R17, R19 et R21, identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux hydrocarbonés en C7-C21, linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés ; - R18 est choisi parmi : n - le radical R:2'1C- - l'atome d'hydrogène ; De tels composés sont par exemple commercialisés sous les dénominations DEHYQUART par la société HENKEL, STEPANQUAT par la société STEPAN, NOXAMIUM par la société CECA, REWOQUAT WE 18 par la société REWO-WITCO.
Parmi les sels d'ammonium quaternaire on préfère le chlorure de béhényltriméthylammonium, ou encore, le chlorure de stéaramidopropyldiméthyl (myristyl acétate) ammonium commercialisé sous la dénomination CERAPHYL 70 par la
société VAN DYK, le Quaternium-27 ou le Quaternium-83 commercialisés par la société WITCO.
La composition de l'invention peut également contenir au moins un additif choisi parmi les épaississants, les parfums, les agents nacrants, les conservateurs, les filtres solaires siliconés ou non, les vitamines, les provitamines, les polymères cationiques, amphotères, anioniques ou non ioniques, les protéines, les hydrolysats de protéine, l'acide méthyl-18 eicosanoique, les hydroxyacides, le panthénol, les silicones volatiles ou non volatiles, cycliques ou linéaires ou réticulés, modifiées ou non, et tout autre additif classiquement utilisé dans le domaine cosmétique qui n'affecte pas les propriétés des compositions selon l'invention.
Ces additifs sont présents dans la composition selon l'invention dans des proportions pouvant aller de 0 à 20% en poids par rapport au poids total de la composition. La quantité précise de chaque additif est déterminée facilement par l'homme du métier selon sa nature et sa fonction. r Les compositions conformes à l'invention peuvent être plus particulièrement utilisées pour le lavage ou le traitement des matières kératiniques telles que les cheveux, la peau, les cils, les sourcils, les ongles, les lèvres, le cuir chevelu et plus particulièrement les cheveux.
Les compositions selon l'invention peuvent être des compositions détergentes telles que des shampooings, des gels-douche, des bains moussants et peuvent être également des démaquillants. Dans ce mode de réalisation de l'invention, les compositions comprennent une base lavante, généralement aqueuse.
On préfère particulièrement des composés de formule I ou II, où Ri représente des groupes alcanoyle en C1-C12, benzoyle ou (alkoxy en CZ-C6) carbonyle ; Ari représente des groupes R4S-phényle ou NR5R6-phényle, dont chacun est facultativement substitué par des
substituants alkyle en C1-C8, OR) ou SR4 ; ou Ar1 3 2 3 représente groupe OR représente un groupe W -)4 , 6 5 facultativement substitué par un substituant OR3 ; ou Ar1 représente des groupes 1-naphtyle ou 2-naphtyle dont chacun est facultativement substitué par des substituants OR3, SR4 ou NR5R6 ; ou Ar1 représente un groupe 3,4,5-triméthoxyphényle ou phénoxyphényle ; ou Ari représente un groupe biphénylyle, facultativement substitué par des substituants alkyle en C1-C12, OR3 et/ou NR5R6 où les substituants alkyle en C1-C12, OR3, SR4 ou NR5R6 facultativement forment des cycles à 5 ou 6 chaînons par l'intermédiaire des radicaux alkyle en C1-C12, R3, R4, R5 et/ou R6 avec d'autres substituants sur le cycle phényle ou avec un des atomes de carbone du cycle phényle ; 0 c II représente des groupes cl, R --C> ou Arl représente des groupes ##\\ // ou 0 Il / 1 o 8 les deux étant facultativement substitués par des substituants OR3 ou SR4, où les substituants OR3 ou SR4 facultativement forment des cycles à 5 ou 6 chaînons par l'intermédiaire des radicaux R3 et/ou avec d'autres substituants sur le cycle phényle ou avec un des atomes de carbone du cycle phényle ou avec le substituant R8 ; ou Ar1 représente des groupes thiényle ou 1-méthyl- 2-pyrrolyle ; à condition que Ri représente un groupe acétyle ; x vaut 2 ;
mi représente un groupe 0-M 1" ' qui est facultativement substitué par un groupe OR3 ; M4 représente une liaison directe, des groupes -0-, -S-,-SS- ou (alkylène en C2-Cl2)dioxy ; R3 représente des groupes alkyle en C1-C8, phényle ou phénylalkyle en C1-C3 ; R3' représente des groupes alkyle en C1-C8, alcényle en C3-Cl2 ou phénylalkyle en Cl-C3 ; R4 représente des groupes alkyle en C1-C20, phénylalkyle en Cl-C3, benzoyle ; ou représente des groupes phényle ou naphtyle, les deux étant non substitués ou substitués par des substituants alkyle en C1-C12, phénylalkoxy en C1-C3, --(CO)R7 ou -(CO)OR7 ; R5 et R6 représentent, indépendamment l'un de l'autre, des atomes d'hydrogène, des groupes phénylalkyle en C1-C3, alcanoyle en C2-C8 ou phényle ; R7 représente des groupes alkyle en Cl-C20 ou phényle ; R8 représente un groupe phényle facultativement substitué par un groupe OR3.
Par ailleurs, on donne la préférence aux composés de formule III, IV ou V, où Ri représente des groupes (alkoxy en C2-C6) carbonyle ou benzyloxycarbonyle ; alcanoyle en C1-C12 qui est non substitué ou substitué par un ou plusieurs substituants halogène ou phényle ; ou R1 représente un groupe alcénoyle en C4-C6, à condition que la double liaison ne soit pas conjuguée au groupe carbonyle ; ou R1 représente un groupe benzoyle qui est non substitué ou substitué par un ou plusieurs substituants alkyle en Cl-C6 ou halogène ; R2 représente un groupe phényle qui est non substitué ou substitué par un ou plusieurs substituants alkyle en Ci-Ce, phényle, halogène, OR3, SR4 ou
NR5R6 ; ou R2 représente un groupe alkyle en C1-C20, facultativement interrompu par un ou plusieurs atomes de -0- et/ou facultativement substitué par un ou plusieurs substituants halogène, OH, OR) ; phényle ou phényle substitué par des substituants OR3, SR4 ou NR5R6 ; R3, 2 3 Ar2 représente des groupes (DR3 4 , naphtyle ou 6 5 naphtoyle, dont chacun est non substitué ou substitué 1 à 9 fois par des substituants halogène, alkyle en C1-C12, phényle, OR3, SR4 ou NR5R6, où les substituants OR3, SR4 ou NR5R6 facultativement forment des cycles à 5 ou 6 chaînons par l'intermédiaire des radicaux R3, R4, R5 et/ou R6 avec d'autres substituants sur le cycle aromatique condensé ou avec un des atomes de carbone du cycle naphtyle ; M2 représente des groupes f ! -)#M-f- Yt ou -CO N\ jJL!) , dont chacun / Ma dont chacun est facultativement substitué 1 à 8 fois par des substituants halogène, alkyle en C1-C12, phényle, OR3, SR4 ou NR5R6 ; et M3 représente des groupes alkylène en C1-C12 ou phénylène.
Une autre réalisation préférée est représentée par des composés de formule III, où R1 représente un groupe alcanoyle en C1-C6 ou benzoyle ;
R2 représente un groupe alkyle en C1-C20 ou alkyle en C2-C20 ; R3'0 3 Ar représente des groupes OR3 4 , naphtyle ou 6 5 naphtoyle, dont chacun est non substitué ou substitué par des substituants OR3 ou SR4 ; R3 et R3' représentent un groupe alkyle en C1-C20 ; et R4 représente un groupe phényle.
On préfère en particulier des composés conformes à la présente invention sont l'O-acétate de 4- phénylsulfanyl-benzaldoxime, l'0-acétate de 2,5-diéthoxy- benzaldoxime, l'0-acétate de 2,6-diméthoxy-benzaldoxime, l'O-acétate de 2,4,6-trométhoxy-benzaldoxime, l'O-acétate de 2,3,4-triméthoxy-benzaldoxime, l'O-acétate de 3- benzylsulfanyl-benzaldoxime, l'O-acétate de 3-phényl- sulfanyl-benzaldoxime, l'O-acétate de 4-méthylsulfanyl- benzaldoxime, l'O-acétate de 4-(5-tert-butyl-2-méthyl- phénylsulfanyl)-benzaldoxime, l'0-acétate de 4-(4- benzoyl-phényl-sulfanyl)-benzaldoxime, l'O-acétate de 2- éthoxy-4-méthyl-5-méthylsulfanyl-benzaldoxime, l'O- acétate de 2-octyloxy-4-méthyl-5-méthylsulfanyl- benzaldoxime, l'O-acétate de 4-méthoxy-3-phénylsulfanyl- benzaldoxime, l'O-acétate de 3-phénoxy-4-phénylsulfanyl- benzaldoxime, l'O-acétate de 3,4-bis-méthylsulfanyl- benzaldoxime, l'0-acétate de 3-benzylsulfanyl- benzaldoxime, l'O-acétate de 4,8-diméthoxy-naphthalène-1- carbaldoxime, l'O-acétate de 4-phénylsulfanyl-naphtalène- 1-cabraldoxime, l'O-acétate de 6-méthoxy-biphénylyl-3- carbaldoxime, l'0-acétate de 4-méthoxy-biphénylyl-3- carbaldoxime, l'0-acétate de 2-méthoxy-5-(4- méthoxybenzoyl)-benzaldoxime, l'O-acétate de 4-octyloxy- biphénylyl-3-carbaldoxime, l'O-acétate de 4-diphényl- amino-benzaldoxime, l'O-acétate de 9-oxo-9.H.-thio- xanthène-2-carbaldoxime, 110-acétate de 9.H.-fluorène-2-
carbaldoxime, l'O-acétate de 2,4-bis-pentyloxy- benzaldoxime, l'0-acétate de 2,4,5-triméthoxy- benzaldoxime, l'O-acétate de 4-(4-benzyloxy- phénylsulfanyl)-benzaldoxime, l'acétate de 4-naphtalène- 2-ylsulfanyl)benzaldoxime, l'acétate de 2-méthoxy-4- méthylsulfanyl-benzaldoxime, l'acétate de thianthrène-2- carbaldoxime, l'acétate de 2-octyloxy-naphtalène-l- carbaldoxime, l'acétate de 5,5'-thiobis(2-benzyloxybenzaldoxime, l'O-acétate de 5,5'-thiobis(2-méthoxy- benzaldoxime, l'0,0'-diacétate de 4,4'-diéthoxy- biphénylyl-3,3'-dicarbaldéhyde dioxime.
Des composés préférés de formules I et II sont caractérisés en ce qu'ils contiennent au moins un substituant alkylthio ou arylthio (SR4), un substituant alkylamino ou arylamino (NR5R6), un substituant aryle, un substituant alkanoyle ou aroyle ou au moins deux substituants alkoxy ou aryloxy (OR3, OR3') et en même temps un cycle aromatique condensé sur le groupe aryle lié à l'atome de carbone du groupe oximino.
On prépare des esters d'oximes de formules I, II, III, IV et V par des méthodes décrites par la littérature, par exemple, par réaction des oximes correspondants avec un chlorure d'acyle ou un anhydride dans un solvant inerte, par exemple, l'éther tert- butylméthylique, le tétrahydrofuranne (THF) ou le diméthylformamide en présence d'une base, par exemple, la triéthylamine ou la pyridine ou dans un solvant basique tel que la pyridine.
De telles réactions sont bien connues de l'homme du méteir et généralement mises en oeuvre à des températures de-15 à +50 C, de préférence de 0 à 25 C.
On peut obtenir les composés de formules II, IV et V de façon analogue en utilisant les oximes appropriés comme matières de départ:
R1, Ari, Ml-M3, R2, x et Ar2 possèdent les mêmes significations que celles données ci-dessus.
On peut obtenir les oximes requis comme matière de départ par différentes méthodes décrites par les manuels de chimie courants (par exemple par J. March, Advanced Organique Chemistry, 4ème édition, Wiley Interscience, 1992) ou par des monographies spécialisées, par exemple, S. R. Sandler & W. Karo, Organique functional group preparations, Vol. 3, Academic Press.
Une des méthodes la plus appropriée est, par exemple, la réaction des aldéhydes ou cétones avec l'hydroxylamine ou son sel dans des solvants polaires, comme l'éthanol ou l'éthanol aqueux. Dans ce cas, on ajoute une base telle que l'acétate de sodium ou la pyridine en vue de contrôler le pH du mélange réactionnel. Il est bien connu que le taux de la réaction dépend du pH et qu'on peut ajouter la base au début ou en continu au cours de la réaction. On peut aussi utiliser des solvants basiques comme la pyridine en tant que base et/ou solvant ou cosolvant. La température réactionnelle est généralement la température de reflux du mélange, usuellement d'environ 60 à 120 C.
dans laquelle, Ri désigne H ou CH3 ou C2H5, c'est-à-dire des motifs acide acrylique, acide méthacrylique ou acide éthacrylique, et dont le motif hydrophobe de type ester d'alkyl (C10-C30) d'acide carboxylique insaturé correspond au monomère de formule (III) suivante : dans laquelle, R2 désigne H ou CH3 ou C2H5 (c'est-à-dire des motifs acrylates, méthacrylates ou éthacrylates) et de préférence H (motifs acrylates) ou CH3 (motifs méthacrylates), R3 désignant un radical alkyle en C10-C30, et de préférence en C12-C22.
Parmi ce type de polymères épaississants anioniques à chaîne grasse, on utilisera plus particulièrement ceux constitués de 95 à 60% en poids d'acide acrylique (motif hydrophile), 4 à 40% en poids d'acrylate d'alkyles en C10-C30 (motif hydrophobe), et 0 à 6% en poids de monomère polymérisable réticulant, ou bien ceux constitués de 98 à 96% en poids d'acide acrylique (motif hydrophile), 1 à 4%
en poids d'acrylate d'alkyles en C10-C30 (motif hydrophobe), et 0,1à 0,6% en poids de monomère polymérisable réticulant tel que ceux décrits précedemment.
-(III) les terpolymères d'anhydride maléique/a-oléfine en C3o-C3s/ maléate d'alkyle tel que le produit (copolymère anhydride maléique/a-oléfine en C30-C38/maléate d'isopropyle) vendu sous le nom PERFORMA V 1608 par la société NEWPHASE TECHNOLOGIES.
-(IV) les terpolymères acryliques comprenant : (a) environ 20% à 70% en poids d'un acide carboxylique à insaturation a,p- monoéthylénique, (b) environ 20 à 80% en poids d'un monomère à insaturation [alpha],ss-monoéthylénique non-tensio-actif différent de (a), (c) environ 0,5 à 60% en poids d'un mono-uréthane non-ionique qui est le produit de réaction d'un tensio-actif monohydrique avec un monoisocyanate à insaturation monoéthylénique, tels que ceux décrits dans la demande de brevet EP-A-0173109 et plus particulièrement celui décrit dans l'exemple 3, à savoir, un terpolymère acide méthacrylique /acrylate de méthyle/diméthyl métaisopropényl benzyl isocyanate d'alcool béhényle éthoxylé (400E) en dispersion aqueuse à 25%.
- (V) les copolymères comportant parmi leurs monomères un acide carboxylique à insaturation a,p-monoéthylénique et un ester d'acide carboxylique à insaturation a,p-monoéthylénique et d'un alcool gras oxyalkyléné Préférentiellement ces composés comprennent également comme monomère un ester d'acide carboxylique à insaturation a,p-monoéthylénique et d'alcool en C1C4.
Les polymères épaississants à chaîne grasse de type non ionique, utilisés selon l'invention, sont choisis de préférence parmi : -(1) les celluloses modifiées par des groupements comportant au moins une chaîne grasse ; on peut citer à titre d'exemple : - les hydroxyéthylcelluloses modifiées par des groupements comportant au moins une chaîne grasse tels que des groupes alkyle, arylalkyle, alkylaryle, ou leurs mélanges, et dans lesquels les groupes alkyle sont de préférence en C8-C22, comme le produit NATROSOL PLUS GRADE 330 CS (alkyles en C16) vendu par la société AQUALON, ou le produit BERMOCOLL EHM 100 vendu par la société BEROL NOBEL, - celles modifiées par des groupes polyalkylène glycol éther d'alkyl phénol, tel que le produit AMERCELL POLYMER HM-1500 (polyéthylène glycol (15) éther de nonyl phénol) vendu par la société AMERCHOL.
- les produits ANTARON V220 ou GANEX V220 (copolymère vinylpyrrolidone / eicosène) vendu par la société I.S P.
-(4) les copolymères de méthacrylates ou d'acrylates d'alkyles en Ci-Ce et de monomères amphiphiles comportant au moins une chaîne grasse tels que par
Etape 5/ La cassette Hygromycine isolée de pHP45Qhyg (BlondeletRouault et al., 1997) sur un fragment Hindlll-Hindlll a été clonée au site Hindlll situé en amont du promoteur TipA.
Etape 6/ Le site Hindlll situé entre la cassette QHyg et le promoteur TipA a été supprimé par traitement Klenow après digestion partielle Hindlll.
Etape7/ Le plasmide obtenu à l'issue de l'étape précédente permet d'isoler un fragment unique HindlII-BamHI, portant tous les éléments QHyg/TipA/int attP, qui a été cloné après traitement Klenow au site EcoRV du cosmide pWED1. Le cosmide pWED1, représenté à la Figure 9, dérive du cosmide pWE15, représenté à la Figure 10 (Wahl GM, et al.. Proc Natl Acad Sci U S A 1987 84 :2160-4) pardélétion d'un fragment Hpal-Hpal portant le gène Neomycine et l'origine SV40.
Une carte du vecteur pOS 7001 est représentée à la Figure 11.
Exemple 5 : Construction du cosmide conjugatif et intégratif chez Streptomyces, le vecteur pOSV 303.
Etant donné que l'empaquetage sélectionne les clones ayant une taille supérieure à 30kb, seuls 10 à 15% des clones ne contiennent pas d'insert, il n'est donc pas vraiment nécessaire d'avoir un système de sélection des recombinants, ce qui permet de construire un vecteur plus petit.
Construction : Etape 1 : le vecteur pOSV001 Clonage d'un fragment Pstl-Pstl de 800 paires de bases portant l'origine de transfert OriT du réplicon RK2 (Guiney et al., 1983), dans le plasmide pUC19 ouvert par Pstl. Cette étape de clonage permet d'obtenir un vecteur transférable de E. coli à Streptomyces par conjugaison.
Etape 2 : le vecteur pOSV002 Insertion du marqueur Hygromycine (cassette hyg), et sélectionnable chez Streptomyces, de sorte que le gène conférant la résistance à l'hygromycine soit transféré en dernier ce qui permet de s'assurer du transfert complet du BAC avec l'insert d'ADN du sol.
Etape 3 : le vecteur pOSV010 Le fragment Xbal-Hindlll isolé du plasmide pOSV002 et contenant le marqueur de résistance à l'hygromycine et l'origine de transfert est cloné dans le plasmide pOSint1 digéré par Xbal et Hindlll. L'orientaion des sites est telle que le marqueur hygromycine sera toujours transféré en dernier.
Etape 4 : insertion du site " cos Le principe est d'insérer un site " cos " dans le plasmide pOSV010 permettant l'empaquetage dans le plasmide pOSV010, représenté à la Figure 12.
L'obtention du fragment " cos " est représentée à la Figure 13.
Ce besoin est, comme cela sera décrit ci-après, en partie comblé selon la présente invention.
DESCRIPTION DE L'INVENTION L'invention concerne tout d'abord un procédé pour la construction de banques d'ADN provenant d'un échantillon de l'environnement, un tel échantillon pouvant être indifféremment un milieu aquatique (eau douce ou marine), un échantillon de sol (couche superficielle du sol, sous-sol ou sédiments), ou encore un échantillon d'organismes eucaryotes contenant une microflore associée, tel que par exemple un échantillon provenant de plantes, d'insectes ou encore d'organismes marins et possédant une microflore associée.
La mise au point d'un procédé de construction d'une banque d'ADN d'un échantillon de l'environnement, et tout particulièrement d'un échantillon de sol, comprend des étapes critiques dont la mise en oeuvre doit être nécessairement optimisée pour l'obtention d'une banque d'ADN
dont le contenu en acides nucléiques d'intérêt répond aux objectifs initialement fixés.