INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Matériau composite Modules élastiques en torsion x 10 MPa à 50 C à 200 C A 53 19 B 37 8 C 7 4 F 13 4 G 8 2 H 49 20 I 52 27 2 - La thermostabilité de ces matériaux composites est constatée en observant les modules à 200 C et leur valeur élevée.
3 - Les propriétés isolantes des matériaux composites ont été déterminées en mesurant la permitivité et le facteur de dissipation sous une tension de 250 mV à différentes fréquences :
Composition 1 MHz 100 MHz 1 GHz A 3,8886 3,5835 3,5061 Er' 0,068 0,017 0,025 Tg# B 4,1606 3,7155 3,6401 Er' 0,074 0,022 0,031 Tg# Mesure de la résistivité superficielle en (M.ohms)
Composition Etat naturel Après 24 heures dans l'eau à 23 C A 2,6.109 3,1.107 B 2,8.109 3,6.106 Mesure de la résistivité transversale en (M.ohms/Cm)
Composition Etat naturel Après 24 heures dans l'eau à 23 C A 8,4.1010- 3,1.108 B 2,7.1010 3,5.107
ALLIAGE DE CUIVRE POUR UNE UTILISATION DANS DES PIECES ELECTRIQUES ET ELECTRONIQUES Cette invention a trait à un alliage de cuivre pour une utilisation dans des pièces électriques et électroniques utilisées, par exemple, dans des grilles de connexion de semi-conducteurs, des bornes, des connecteurs et des barres de bus et, plus particulièrement, elle a trait à un alliage de cuivre disponible à un coût réduit et ayant une conductivité de 50 % IACS ou plus tout en ayant une résistance mécanique élevée essentiellement comparable avec celle de l'alliage 42, aussi bien qu'ayant une résistance à l'adoucissement, une capacité à la mise en forme par cisaillement, une capacité de mise en forme par courbure, une propriété de plaquage d'argent et une mouillabilité au soudage favorables.
Jusqu'à présent, comme grilles de connexion pour une utilisation dans les semi-conducteurs, on a utilisé des matériaux ferreux représentés par les alliages 42 et les matériaux cuivreux tels que les alliages de la série Cu-Ni-Si, les alliages de la série Cu-Sn, les alliages de la série Cu-Cr, les alliages de la série Cu-Fe-P. Les matériaux cuivreux possèdent une conductivité supérieure comparée aux matériaux ferreux et, en conséquence, possèdent une particularité avantageuse d'excellente dissipation thermique. En outre, puisque la tendance récente d'utiliser du Pd (palladium) pour le plaquage extérieur de circuits intégrés ou de circuits intégrés à grande intégration aboutit à un problème de détachement dû à une dégradation au vieillissement du plaquage dans les matériaux ferreux, les matériaux cuivreux ont été utilisés encore plus. Au contraire, puisque les matériaux cuivreux possèdent une résistance mécanique faible, diverses améliorations ont été faites pour
améliorer la composition ou le procédé de fabrication pour augmenter la résistance mécanique. Ceci a été considéré comme extrêmement important, en particulier, dans l'étape antérieure où les boîtiers de circuit à haute densité d'intégration (LSI) utilisant des grilles de connexion représentées par QFP (boîtier plat à quatre rangées de broches) dans lesquels le nombre de sorties dépasse 200 broches ont été développés vigoureusement.
Ces dernières années, les boîtiers de type à zone de montage représentés par BGA (matrice à billes) ont été développés et tout particulièrement les LSI dépassant 200 broches ont été maintenant remplacés progressivement par de tels boîtiers. Toutefois, de tels boîtiers de type à zone de montage ne sont pas appropriés dans une situation où la quantité de chaleur engendrée par des puces à semi-conducteur est en augmentation avec l'augmentation du degré d'intégration et des vitesses de fonctionnement des LSI. Par conséquent, il est nécessaire de fixer des plaques de dissipation de chaleur ou des dissipateurs de chaleur pour améliorer la dissipation de chaleur, ce qui rend compliqué l'emballage.
Comme décrit ci-dessus, un procédé de dissipation de chaleur raisonnable est un des objets, dans les boîtiers intégrant des puces engendrant de grandes quantités de chaleur et des boîtiers utilisant les premières grilles de connexion, qui ont maintenant été ré-estimés. Dans les boîtiers utilisant les grilles de connexions, la plupart de la chaleur est dissipée en suivant le chemin des broches vers le substrat.
Dans ce cas, une conductivité thermique élevée due au matériau de la broche elle-même possède un effet sur la dissipation thermique du boîtier entier. Puisque - la conductivité thermique est en relation linéaire avec l'électroconductivité, en d'autres termes, un matériau
Des techniques de cytométrie de flux pour trier les cellules souches sur la base d'autres caractéristiques physiques sont également disponibles. Par exemple, Visser et al., 1980, Blood Cells 6 :391-407 que des cellules souches peuvent être isolées sur la base de leur dimension et de leur degré de structuration. Grogan et al.,
1980, Blood Cells, 6:625-44 révèlent également que "des cellules souches viables peuvent être triées en les séparant de tissus hématopoïétiques simples en une grande pureté vérifiable".
Outre la sélection de cellules sur la base de la présence d'un marqueur de surface cellulaire ou d'une autre propriété physique (sélection positive), des populations cellulaires peuvent être enrichies et purifiées en utilisant des critères négatifs. Par exemple, des cellules qui possèdent des marqueurs spécifiques de lignées tels que les marqueurs CD4, CD8, CD42 et CD3 peuvent être séparées de la population cellulaire par cytométrie de flux ou chromatographie d'affinité.
Une technique très utile pour purifier des cellules comprend l'utilisation d'anticorps ou d'autres ligands d'affinité liés à des billes magnétiques. Les billes sont mises en incubation avec la population cellulaire et les cellules qui portent un marqueur de surface cellulaire, par exemple CD34, auquel se lie un ligand d'affinité, sont capturées. Le tube d'échantillon contenant les cellules est placé dans un concentrateur d'échantillon magnétique dans lequel les billes sont attirées aux faces du tube. Après une ou plusieurs étapes de lavage, les cellules intéressantes ont été purifiées partiellement ou pratiquement totalement en les séparant des autres cellules. Lors de l'utilisation dans un format de sélection négative, au lieu de laver les cellules liées aux billes en rejetant la phase liquide, la phase liquide est conservée et ensuite les cellules liées aux billes sont séparées efficacement de la population cellulaire.
Ces procédés de purification basés sur l'utilisation de ligands d'affinité peuvent être utilisés avec n'importe quel type cellulaire pour lequel des marqueurs convenables ont été caractérisés ou peuvent être caractérisés.
Urbankova et al., 1996, (J. Chromatogr B Biomed Appl.
687:449-52) font connaître la micropréparation de cellules
souches hématopoïétiques à partir d'une suspension de moelle osseuse de souris par fractionnement par écoulement en champ de gravitation. Urbankova et al., 1996, indiquent en outre que le procédé est utilisé pour la caractérisation de cellules souches de moelle osseuse de souris car ces cellules sont plus volumineuses que les autres cellules dans la moelle osseuse et il est donc possible de les séparer du mélange. Ainsi, des paramètres physiques autres que des marqueurs de surface cellulaire peuvent être utilisés pour la purification/l'enrichissement des cellules souches.
Des populations cellulaires comprenant des cellules indifférenciées et des cellules indifférenciées purifiées produites par les procédés de la présente invention peuvent être maintenues in vitro en utilisant des techniques connues. Habituellement, un milieu minimal de croissance tel que le milieu de Hanks, le milieu RPMI 1640, le milieu essentiel minimal de Dulbecco (DMEM) ou le milieu de Dulbecco modifié selon Iscove est utilisé, en étant supplémenté avec du sérum de mammifère tel que du sérum bovin f#tal (SBF) et, facultativement, du plasma autologue, pour fournir un environnement convenable de croissance pour les cellules. Dans une forme de réalisation préférée, des cellules souches sont cultivées sur des couches nourricières telles que des couches de cellules stromales (voir Deryugina et al., 1993, Crit Rev. Immunology, vol 13:115-150). Il est considéré que les cellules stromales sécrètent des facteurs qui maintiennent les cellules mères à l'état indifférencié. Un système de culture à long terme de cellules souches est décrit par Dexter et al., 1977 (J.
Cell Physiol, vol 9:335) et Dexter et al., 1979 (Acta.
Haematol., vol 62:299).
Par exemple, Lebkowski et al., 1992 (Transplantation 53(5):1011-9) révèlent que des cellules hématopoïétiques CD34+ humaines peuvent être purifiées en utilisant une technologie basée sur l'utilisation d'anticorps monoclonaux
qui sont immobilisés par covalence sur des surfaces de polystyrène et que les cellules CD34+ purifiées par ce procédé peuvent être maintenues avec une viabilité supérieure à 85 %. Lebkowski et al., 1993 (J. Hematother, 2(3):339-42) révèlent également la manière d'isoler et de cultiver des cellules CD34+ humaines. Voir également Haylock et al., 1994 (Immunomethods, vol 5 (3):217-25) un passage en revue de divers procédés.
La confirmation de l'identité des cellules souches peut être effectuée en utilisant un certain nombre d'essais in vitro tels que les essais de CFC (voir également les exemples). Des cellules souches hématopoïétiques très primitives sont souvent dosées en utilisant l'analyse de cellules à déclenchement de culture à long terme (LTC-IC) (Eaves et al, 1991, J. Tiss. Cuit. Meth. Vol 13:55-62).
L'analyse LTC-IC maintient l'hématopoïèse pendant 5 à 12 semaines.
Les populations cellulaires comprenant des cellules indifférenciées et des préparations purifiées comprenant des cellules indifférenciées peuvent être congelées à des fins d'utilisation ultérieure. Des techniques convenables pour la congélation de cellules et ensuite la réviviscence de ces cellules sont connues dans ce domaine. Un dispositif conforme à la présente invention peut comprendre en outre facultativement un moyen de congélation pour congeler des populations cellulaires comprenant des cellules indifférenciées et/ou des préparations purifiées comprenant des cellules indifférenciées.
Or, la demanderesse vient maintenant de découvrir qu'il est possible d'obtenir de nouvelles teintures, capables de conduire à des colorations intenses en associant au moins une base d'oxydation choisie parmi les 1-(4-aminophényl)-pyrrolidines à un système oxydant enzymatique comprenant au moins une enzyme de type oxydo-réductase à 2 électrons ou à 4 électrons ou peroxydase.
Il devient également possible de diminuer la sélectivité de la teinture par rapport à la teinture obtenue notamment avec des compositions associant une base d'oxydation tertiaire des plus connues de l'art antérieur tels que la N,N-bis(p- hydroxyéthyl)-paraphénylènediamine (largement utilisé dans les produits commerciaux de la coloration capillaire), à au moins une enzyme du type décrit cidessus.
L'invention a donc pour premier objet une composition prête à l'emploi, pour la teinture d'oxydation des fibres kératiniques et en particulier des fibres kératiniques humaines telles que les cheveux, comprenant dans un milieu approprié pour la teinture, un système oxydant enzymatique comprenant au moins une enzyme de
type oxydo-réductase à 2 électrons ou à 4 électrons ou peroxydase, au moins un précurseur de colorant d'oxydation, caractérisée par le fait que le précurseur de colorant d'oxydation est choisi parmi les 1-(4-aminophényl)-pyrrolidines de formule (I) suivante : dans laquelle, R1 désigne un atome d'hydrogène, un radical alkyle en C1-C6, ou monohydroxyalkyle en C-C5, ou polyhydroxyalkyle en C2-C5 ; R2 désigne un atome d'hydrogène, un radical -CONH2, ou monohydroxyalkyle en C1-C5, ou polyhydroxyalkyle en C2-C5 ; R3 désigne un atome d'hydrogène, ou un radical OH ; et leurs sels d'addition avec un acide.
Les sels d'addition avec un acide des 1-(4-aminophényl)-pyrrolidines de formule (I) sont notamment choisis parmi les chlorhydrates, les phosphates, les bromhydrates, les sulfates et les tartrates, les lactates et les acétates.
L'invention a également pour objet un procédé de teinture d'oxydation des fibres kératiniques mettant en oeuvre cette composition tinctoriale prête à l'emploi.
Le ou les 1-(4-aminophényl)-pyrrolidines de formule (I) selon l'invention sont des composés bien connus de l'homme de l'art et notamment décrits et préparés dans les brevets américains N - 5851237,5876464, et 5993491, dans lesquels ils sont
également proposés en teinture capillaire d'oxydation classique avec le peroxyde d'hydrogène comme oxydant.
Selon la présente invention, on préfère tout particulièrement utiliser des 1-(4aminophényl)-pyrrolidines de formule (1) pour laquelle : - R-l, R2 et R3 désignent un atome d'hydrogène; le composé de formule (I) est alors la 1-(4-aminophényl)-pyrrolidine, ou, - R1 et R3 désignent un atome d'hydrogène et R2 désigne le radical -CH20H; le composé de formule (I) est alors le 1-(4-aminophényl)-2-pyrrolidineméthanol, ou, - R1 désigne un atome d'hydrogène, R2 désigne le radical -CH20H et R3 désigne le radical OH ; le composé de formule (I). est alors le 1-(4-aminophényl)-4-hydroxy- 2-pyrrolidineméthanol, ou, - R1 et R3 désignent un atome d'hydrogène et R2 désigne le radical -CONH2; le composé de formule (I) est alors la N-(4-aminophényl)-prolineamide.
Le ou les 1-(4-aminophényl)-pyrrolidines de formule (I) utilisés conformément à l'invention représentent de préférence de 0,001 à 10 % en poids environ du poids total de la composition conforme à l'invention et encore plus préférentiellement de 0,01 à 8% environ de ce poids.
Système oxydant enzymatique La ou les oxydo-réductases à 2 électrons utilisées dans la composition tinctoriale prête à l'emploi conforme à l'invention, sont utilisées en présence d'un donneur pour la ou lesdites enzymes, et peuvent notamment être choisies parmi les pyranose oxydases, les glucose oxydases, les glycérol oxydases, les lactate oxydases, les pyruvate oxydases, les uricases, les choline oxydases, les sarcosine oxydases, les bilirubine oxydases et les aminoacides oxydases.
Selon l'invention, l'oxydo-réductase à 2 électrons est de préférence choisie parmi les uricases d'origine animale, microbiologique ou biotechnologique.
A titre d'exemple, on peut notamment citer l'uricase extraite de foie de sanglier, l'uricase d'Arthrobacter globiformis, ainsi que l'uricase d'Aspergillus flavus.
Potocnik et al., 1994 (EMBO J., vol 13(22):5274-83) ont même démontré la différenciation de cellules ES en cellules hématopoïétiques en utilisant des conditions de basse teneur en oxygène (5 %).
Ainsi, dans une forme préférée de réalisation de la présente invention, la cellule indifférenciée est ensuite transformée en une cellule réengagée, telle qu'une cellule différenciée. La cellule réengagée peut être de la même lignée que la cellule plus engagée de laquelle la cellule indifférenciée a été dérivée. En variante, la cellule réengagée peut être de lignée différente de celle de la cellule plus engagée de laquelle la cellule indifférenciée était dérivée. Par exemple, un lymphocyte B peut être rétrodifférencié en une cellule souche CD34+, CD38-, HLA-DR-. La cellule souche peut être ensuite réengagée dans une ligne de lymphocytes B (la même lignée) ou une lignée lymphoïde (lignée différente).
L'engagement de la cellule indifférenciée en une cellule réengagée, telle qu'une cellule différenciée, peut être effectué de différentes manières connues de l'homme de l'art. Notamment, en cultivant des cellules indifférenciées d'une manière particulière et dans un milieu particulier, il est possible de parvenir à la différenciation en cellules choisies.
* A titre d'exemple seulement, les cellules indifférenciées peuvent être différenciées en myocytes cardiaques en suivant le régime de culture souligné : Jour 1 : Passage des cellules indifférenciées à densité normale sur une plaque gélatinisée pour débarrasser la culture des fibroblastes contaminants.
Traiter les cellules à la trypsine comme pour le passage normal jusqu'au soulèvement des colonies. Manipuler doucement afin de maintenir ensemble les amas étroitement
connectés de cellules. Puis étaler directement les cellules dans le rapport 1:3 dans des boîtes de Pétri de qualité pour culture bactérienne dans du milieu de culture cellulaire dépourvu de LIF (voir ci-dessous).
Jour 3 : Aspirer le milieu avec précaution. Eviter d'aspirer une trop grande quantité des agrégats. Puis ajouter du milieu nouveau.
Jour 5 : Effectuer une aspiration comme au jour 3 et remplacer le milieu.
Jour 7 : Etaler les cellules dans une plaque de qualité pour culture de tissu à 24 puits.
Jour 9 : Remplacer la moitié du milieu et observer les battements.
Jour 11 : Remplacer la moitié du milieu et observer les battements.
A titre d'exemple supplémentaire, les cellules indifférenciées peuvent être différenciées en cellules gliales et neurones en suivant le mode opératoire souligné : Jour 1 : Passer les cellules indifférenciées à densité normale sur une plaque gélatinisée pour débarrasser la culture des fibroblastes contaminants.
Traiter les cellules à la trypsine comme pour le passage normal jusqu'au soulèvement des colonies. Manipuler doucement afin de maintenir ensemble les amas étroitement connectés de cellules. Puis étaler directement les cellules dans le rapport 1:3 dans des boîtes de Pétri de qualité pour culture bactérienne dans du milieu dépourvu de LIF contenant 1 M d'acide rétinoïque totalement à configuration trans (disponible auprès de Sigma).
Jour 3 : Recueillir les agrégats cellulaires et réétaler dans des boîtes de culture de tissu (approximativement 25 agrégats cellulaires par boîte de culture de tissu de 6 cm) dans du milieu de culture de cellules ES sans LIF ou RA. Aspirer le milieu avec précaution.
Jour 8 : Remplacer la moitié du milieu. A partir de ce jour, au moins 10 % des cellules présentent les phénotypes neuronaux. Ces cellules sont colorées spécifiquement avec du violet de crésyle et donnent une réponse fortement positive pour l'antigène N-CAM.
L'homme de l'art connaît parfaitement des modes opératoires convenables pour effectuer l'engagement d'une cellule indifférenciée en n'importe quelle cellule différenciée choisie.
Microbiol., 29 : 1910-1914 ; KARCH et al., 1989, J. Clin.
Microbiol., 27 : 2751-2757 ; LIN et al., 1993, Microbiol.
Immunol., 37 : 543-548 ; POLLARD et al., J. Clin. Microbiol., 1990, 28 : 540-545 ; POLLARD, 1990, J. Infect. Dis., 162, 1195-1198 ; READ et al., 1992, Mol. Cell. Probes, 6 : 153- 161), - le gène de l'intimine (eae) porté par le locus LEE (SANDHU et al., 1996, Epidemiol. Infect., 116 : 1-7 ; WILLSHAW et al., 1994, J. Clin. Microbiol., 32 : 897-902), - le gène de l'hémolysine codé par le plasmide de 90 kb (E-hlya), (SCHMIDT et al., 1995, précité), - des gènes impliqués dans la biosynthèse de l'antigène 0 (locus rfb), (DESMARCHELIER et al., 1998, J.
Clin. Microbiol., 36 : 1801-1804 ; MAURER et al., 1999, Appl.
Environ. Microbiol., 65 : 2954-2960) et - le gène codant l'antigène flagellaire H7 (fliCh7), (FIELDS et al., J. Clin. Microbiol., 1997, 35 : 1066-1070).
Ces méthodes sont plus sensibles et plus spécifiques que les méthodes biochimiques ou immunologiques.
Cependant, les STEC 0157 ne peuvent pas être identifiés à l'aide d'une seule réaction PCR ciblant l'un de ces gènes. En effet, les antigènes somatiques 0157 et flagellaire H7, qui peuvent être portés par des souches d'E. coli non pathogènes ne constituent pas à eux seuls des marqueurs de pathogénicité. En outre, les gènes de vérotoxines sont par définition portés par toutes les souches de STEC ; les facteurs de virulence décrits sur le plasmide de 90 kb, (entérohémolysine, catalase péroxydase, sérine protéase) sont présents chez des STEC de différents sérotypes (BONNET et al., précité) et un homologue du locus LEE est présent à la fois chez les STEC de différents sérotypes (PRADEL et al., précité) et chez les EPEC (PERNA et al., précité). Par conséquent, la mise en évidence d'un seul de ces gènes de virulence ne suffit pas à identifier un STEC de sérotype 0157.
Des tests permettant l'amplification simultanée de plusieurs gènes en une seule réaction (PCR-multiplex) ont été proposés (CEBULA et al., 1995, J. Clin. Microbiol., 33 : 1048 ; DENG et al., 1996, J. Food Prot., 59 : 570-576 ; FRATAMICO et al., 1995, J. Clin. Microbiol., 33 : 2188-2191 ; GANNON et al., 1997, J. Clin. Microbiol., 35 : 656-662 ; NAGANO et al., 1998, Microbiol. Immunol., 42 : 371-376 ; PATON et al., 1998, J. Clin. Microbiol., 36 : 598-602).
Ces techniques qui sont adaptées à la détection d'une souche bactérienne isolée ne sont pas utilisables pour l'analyse d'échantillons biologiques complexes, tels que des aliments ou des selles, qui sont susceptibles de contenir un mélange de bactéries. En effet, comme rapporté par DENG et al. (précité), la PCR-multiplex ne permet pas de conclure si les signaux correspondants aux différents gènes détectés proviennent d'une seule souche bactérienne, ou bien de l'effet additif de gènes présents dans des souches différentes de bactéries. Cet inconvénient majeur, qui implique l'isolement systématique de chaque souche afin de vérifier que les différents gènes amplifiés par PCR sont bien présents dans la même souche, n'est pas adapté au diagnostic
de routine en laboratoire d'hygiène alimentaire ou d'analyses médicales.
La comparaison de la séquence nucléotidique de certains gènes communs aux STEC de sérotype 0157 et à d'autres E. coli pathogènes a permis d'identifier des mutations ponctuelles. Ainsi certains auteurs ont proposé des amorces spécifiques ciblant les gènes portés par les STEC 0157 qui permettent leur détection en une seule réaction PCR. Ainsi, l'amplification des régions suivantes a été rapportée : la région 3' du gène eae (LOUIE et al., 1994, Epidemiol. Infect., 112 : 449-461), la région immédiatement adjacente à la région 5' du gène eae (MENG et al., 1996, Int.
J. Food Microbiol., 32, 103-113 ; MENG et al'., 1997, Lett.
Appl. Microbiol., 24 : 172-176 ; ZHAO et al., 1995, FEMS Microbiol. Lett., 133 : 35-39) ou le gène H7 (WANG et al., 2000, J. Clin. Microbiol., 38 : 1786-1790).
Il apparaît donc qu'on ne dispose à l'heure actuelle que de très peu de marqueurs spécifiques et faciles à mettre en #uvre pour détecter les E. coli pathogènes, et notamment les STEC de sérotype 0157.
Les Inventeurs ont identifié dans des souches d'E. coli pathogènes, notamment dans tous les colibacilles pathogènes de sérotype 0157 producteurs de shiga-toxines, la présence d'un insert d'acide nucléique représentant un nouveau locus, absent des souches non-pathogènes. Ce locus est inséré entre les positions 93848 et 93849 de la séquence du génome d'E.coli K12 (GenBank U82664) ; site d'insertion est précisément situé entre les codons stop de deux phases ouvertes de lecture (Genbank AAB40241 et Genbank AAB40242) en orientation opposée, qui dans la séquence génomique des souches d'E. coli non-pathogènes comme la souche type K12 sont directement adjacentes.
Les Inventeurs ont également constaté la présence d'un locus similaire, inséré à la même position, chez des souches d'E.coli pathogènes, appartenant à des sérotypes autres que 0157. En revanche, ils n'ont observé aucune insertion à cette position chez l'ensemble des souches nonpathogènes qui ont été testées.