INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'unité à lampe 12B a neuf sources lumineuses 20B qui comportent chacune neuf diodes photoémissives qui sont disposées verticalement et horizontalement, par exemple sous forme d'un carré de 3 x 3 diodes. Une diode rouge 32R occupe la position centrale de la source et huit diodes jaunes 32U entourent la diode rouge 32R. Dans chaque source lumineuse 20B, la diode rouge 32R constituant le premier groupe est allumée en mode d'éclairage de lanterne. En outre, dans chaque source lumineuse 20B, les huit diodes jaunes 32U qui forment un second groupe de diodes sont éclairées en mode
Les figures 4 à 7 sont des vues en élévation de la
lampe de véhicule 10 dans ce mode de réalisation de l'inven-
tion, fonctionnant dans divers modes d'éclairage. Comme l'indique la figure 4, seules les diodes rouges
24R1 et 32R placées au centre des sources lumineuses respec-
tives 20A et 20B des deux unités 12A et 12B à lampes sont allumées en mode de lanterne. Ainsi, les unités à lampes 12A et 12B de la lampe 10 sont rouges et constituent des lanternes. Comme l'indique la figure 5, les diodes jaunes 32U de chacune des sources 20B de l'unité 12B restent éteintes en mode d'éclairage de lanterne. Les diodes rouges 32R placées au centre de la source 20B de l'unité à lampe 12B continuent
à fonctionner en mode d'éclairage de lanterne-feu de stop.
Les huit diodes rouges 24R2 placées autour de la diode rouge 24R1, ainsi que la diode rouge 24R1, dans chacune des sources 20A de l'unité à lampe 12A, sont allumées en mode d'éclairage de lanterne-feu de stop. Ainsi, la lampe 10 a les fonctions à la fois d'une lanterne et d'un feu de stop, l'unité à lampe 12A étant allumée en mode d'éclairage de feu de stop et l'unité à lampe 12B maintenant le mode
d'éclairage de lanterne.
Comme l'indique la figure 6, les diodes rouges 24R1 placées au centre des sources lumineuses 20A de l'unité à lampe 12A restent allumées en mode d'éclairage de lanterne et de clignotant. La diode rouge 32R placée dans la position centrale de chaque source lumineuse 20B de l'unité à lampe
12B est éteinte en mode d'éclairage de clignotant. Cepen-
dant, les huit diodes jaunes 32U placées autour de la diode
DESCRIPTION La présente invention, concerne en un premier temps, la construction d'une navette à coque résistante, capable de supporter de très fortes pressions, fixée sur le pont d'un sous-marin, pouvant embarquer un équipage complet.
La présente invention, concerne en un deuxième temps, le système d'amarrage de la navette sur le pont du sous-marin.
En un troisième temps, l'invention concerne l'aide au décollage, et le système de remontée rapide.
En un quatrième temps, l'invention, concerne le système de freinage prés de la surface.
La coque de la navette, pourrait être réalisée avec une armature métallique, noyée dans de la fibre de carbone, ou en fibre de verre sur résine époxy, par enroulement de plusieurs couches croisées. Cette méthode permet de supporter des pressions égales à 300 bars, ce qui correspondrait à une profondeur de 2990 m.
Elle sera arrimée sur le pont de ce dernier, comme la montre la figure 1. Pour cette présentation, nous avons volontairement disposé trois navettes, et escamoté le gouvernail de plongée avant tribord, pour la présentation de la navette devant le massif Quant à sa forme, sa taille, son poids, le nombre, et les emplacements, des modifications peuvent être apportées sur la navette, ceci dans le but de ne pas perturber l'aérodynamique du sous-marin, ni sa signature.
La coque de la navette figure 2a, sera équipée de deux portes étanches 4 et 5, une donnant accès depuis l'intérieur du sous - marin, l'autre permettant à l'équipage de sortir à l'air libre, en fin de remontée.
Le toit de cette coque possédera un emplacement 2 destiné à recevoir le système d'aide au décollage, et à la remontée rapide, ainsi qu'une balise de détresse 3, figure 2 et 2a.
La coque de la navette sera équipée à chaque extrémité, avec des anneaux de levage 6, permettant son transbordement sur le pont d'un bâtiment de surface, à l'aide de grues, figure 2.
A l'arrière, la navette possédera un tablier 15 de maintien, qui viendra en butée sous un taquet 16, fixé sur le pont du sousmarin. Ce taquet 16, sera articulé.
La navette sera équipée d'un plancher 7, figure 2 et 2a, destiné à emmagasiner les réserves d'air nécessaires, pour la respiration de l'équipage, pour le déclenchement de l'aide au décollage, pour le déclenchement de la remontée rapide, et pour le système de freinage, en fin de remontée.
Sous le plancher 7, sera fixé le système de freinage, dans un coffre 8, figure 2 et 2a L'habitacle de la navette, sera aménagé, de manière à prévoir une place debout à chacun, matérialisée par un harnais de revoir une p a sécurité réglable, et des cale-pieds, capables d'assurer une parfaite stabilité, quelles que soient les circonstances. La position debout limitera le volume nécessaire pour embarquer un équipage complet.
A chaque harnais sera associé un détendeur deux étages air respirable, directement relié à la réserve d'air, par tuyaux souples haute pression, interchangeables, sur prises à raccords rapides. La respiration sous détendeur évitera la pressurisation de la navette. Ce détendeur type détendeur plongée, devrait avoir un premier étage réglé entre 8 et 12 bars.
Des emplacements couchés, pour d'éventuels blessés peuvent être prévus, aux mêmes conditions que citées précédemment.
Le poste de commande se trouvera à l'avant de la navette.
Toutes les commandes seront actionnées à partir de ce poste, à savoir, la commande du désarrimage, la commande de la remontée rapide, la commande du système de freinage, les contrôles des manomètres de pressions air respirable, , du contrôle de la profondeur, du temps, de la vitesse de remontée.
La Figure 1 illustre une vue partielle de dessus d'une baie apte à être obstruée par un volet. Le volet comprend un battant 10 qui est monté à rotation sur le bord de la baie selon un axe de rotation 12, perpendiculaire au plan du dessin. De manière classique, le battant comporte des charnières aptes à coopérer avec des gonds fixés dans le bord de la baie.
Le battant 10 est disposé en position fermée et coopère avec un deuxième battant 16 de façon à obstruer complètement la baie.
Le dispositif comprend un bras 18 dont la première extrémité 20 est montée pivotante sur un arbre moteur 22 situé dans la baie. L'arbre moteur 22 fait saillie sensiblement verticalement en dehors d'un boîtier 24 dans lequel est installé un mécanisme d'entraînement de l'arbre moteur 22. Ainsi, l'arbre moteur 22 est apte à entraîner le bras 18 dans un plan sensiblement horizontal.
Le bras 18 présente une seconde extrémité 26 sur laquelle une biellette 28 est montée à pivotement. Ladite biellette 28 est apte à pivoter autour de sa première extrémité 30 et sa seconde extrémité 32 est montée coulissante dans une glissière 34 qui est solidaire de la paroi interne du battant 10.
Dans la position illustrée où le battant 10 est en position fermée, la biellette 18 est inclinée au minimum d'un angle 36 correspondant à l'angle que fait la biellette 28 avec la perpendiculaire au battant 10. Afin que cet angle ne soit pas inférieur à la limite fixée qui est supérieure à 0 , l'extrémité 26 du bras 18 comporte un ergot non représenté contre lequel la biellette 28 est apte à venir en butée.
La glissière 34 solidaire du battant 10 est formé d'un profilé dans lequel est ménagé une lumière 38 sur toute sa longueur. La seconde extrémité 32 de la biellette 28 présente un axe vertical non représenté, terminé par un téton engagé dans la lumière 38 de la glissière 34, de façon à guider en translation ladite seconde extrémité 32.
Tout autre moyen de guidage pourrait convenir pour guider la seconde extrémité 32 de la biellette 28.
Le dispositif conforme à l'invention comprend des moyens de verrouillage 40 solidaire de la paroi interne du battant 10. Selon un mode particulier de réalisation, ils comprennent une pièce longitudinal 42 dont l'extrémité aiguë forme un crochet et qui est articulée selon un plan horizontal sur le bord interne supérieur 44 dudit volet 10. La pièce longitudinale 42 est engagée dans un point fixe 46 solidaire du bord supérieur de la baie de façon à bloquer le déplacement en rotation du battant 10. En outre, elle comporte des moyens de rappel non représentés, montés sur son axe de pivotement 48 destinés à la maintenir engagée dans le point fixe 46. Par ailleurs, des moyens de butée empêchent la pièce longitudinale 42 de pivoter vers le battant 10 en-dessous d'un angle de 90 .
Avantageusement, l'organe de verrouillage est solidaire d'un arbre vertical coaxial à l'axe de pivotement dudit organe et entraîne en
pivotement des pièces longitudinales formant crochets aux extrémités supérieures et inférieures dudit battant, lesdites pièces longitudinales formant crochet étant aptes à être engagées dans des points d'arrêt fixes situés dans le bord inférieur et dans le bord supérieur de la baie.
Le dispositif, selon ce mode particulier de réalisation, comprend également une tige de commande 50 articulée sur la pièce longitudinale 42 dont l'extrémité 52 est montée à coulissement dans la glissière 34. L'extrémité 52 comprend, tout comme la seconde extrémité 32 de la biellette 28, un axe vertical terminé par un téton engagé dans la lumière 38 apte à guider en translation ladite extrémité 52 parallèlement au battant 10.
Conformément à l'invention, lorsque le bras 18 est entraîné en rotation dans le sens des aiguilles d'une montre pour entraîner en rotation le battant 10 et ouvrir le volet, la seconde extrémité 26 du bras 18, dans un premier temps, se rapproche du battant 10 et provoque le coulissement de la seconde extrémité 32 de la biellette 28 dans la glissière 34 vers l'extrémité 52 de la tige de commande 50.
On comprend que le coulissement de l'extrémité 32 de la biellette 28 dans la glissière 34 dès la mise en rotation du bras 18 n'est techniquement possible que si ladite biellette 28 présente un angle 36 suffisamment ouvert. En effet, si la biellette 28 est perpendiculaire à la glissière 34, l'intégralité de la force du bras est appliquée perpendiculairement sur le battant 10, ce qui peut détériorer le dispositif.
Lorsque la seconde extrémité 32 de la biellette 28 coulisse dans la glissière 34 elle vient en butée contre l'extrémité 52 de la tige de commande 50 qui est située à proximité dans la glissière et la déplace en translation colinéairement, contre les moyens de rappel, jusqu'à ce que l'extrémité 26 du bras 18 vienne en butée contre la paroi interne du battant 10, conformément à la Figure 2.
On retrouve sur la Figure 2 le bras 18 dont l'extrémité 26 fait contact avec la paroi interne du battant 10, et la biellette 28 disposée parallèlement à la glissière 34.
Lorsque l'extrémité 52 de la tige de commande 50 est déplacée en translation, elle entraîne la pièce longitudinale 42 formant crochet en rotation autour de son axe 48, ce qui a pour effet de dégager la partie crochue du point d'arrêt fixe 46 et de libérer les moyens de verrouillage 40 dudit point d'arrêt fixe 46.
116 : 342-348 31) Jaffrezou JP, Chen G, Duran GE, Muller C, Bordier C, Laurent G, Sikic BI et Levade T (1995). Inhibition of lysosomal acid sphingomyelinase by agents which reverse multidrug resistance. Biochim. Biophys. Acta.
1266 : 1-8 32) Kahn HA et Hiller R (1974). Blindness caused by diabetic retinopathy. Am. J. Ophthalmol. 78 : 58- 67 33) Karesh JW (1987). Polytetrafluoroethylene as a graft material in ophthalmic plastic and reconstructive surgery. An experimental and clinical study.
Ophthal. Plast. Recenser. Surg. 3 : 179-185
34) Kuwabara T et Cogan DG (1963). Retinal vascular patterns VI. Mural cells of the retinal capillaries. Archs. Ophthal. 69 : 492-502 35) Lai CM, Shen WY, Constable I et Rakoczy PE (2000). The use of adenovirus-mediated gene transfer to develop a rat model for photoreceptor degeneration. Invest.
Ophthalmol. Vis. Sei. 41 : 580-584 36) Lander HM, Tauras JM, Ogiste JS, Hori 0, Moss RA, et Schmidt AM (1997). Activation of the receptor for advanced glycation end products triggers a p21rasdependent mitogen-activated protein kinase pathway regulated by oxidant stress. J. Biol. Chem. 272 : 17810- 17814 37) Leahey AB, Gottsch JD et Syark WJ (1993).
Clinical experience with N-butyl cyanoacrylate (Nexacryl) tissue adhesive. Ophthalmol. 100 : 173-180 38) Lecomte M, Paget C, Ruggiero D, Wiernsperger N, et Lagarde M (1996). Docosahexaenoïc acid is a major n-3 polyunsaturated fatty acid in bovine retinal microvessels. J. Neurochem. 66 : 2160-2167 39) Leeds JM, Henry SP, Bistner S, Scherill S, Williams K et Levin AA (1998). Pharmacokinetics of an antisense oligonucleotide injected intravitreally in monkeys. Drug Metab. Dispos. 26 : 670-675 40) Li W, Liu X, Yanoff M, Cohen S et Ye X (1996). Cultured Retinal Capillary Pericytes Die by Apoptosis After an Abrupt Fluctuation from High to Low Glucose Levels : a Comparative Study With Retinal Capillary Endothelial Cells. Diabetologia 39 : 537-547 41) Li W, Liu X, He Z, Yanoff M, Jian B et Ye X (1998). Expression of Regulatory genes by Retinal Pericytes After Rapid Glucose Reduction. Invest. Ophtamol. vis.
Sci. 39 : 1535-1543
42) Li W, Yanoff M, Jian B et He Z (1999).
Altered mRNA levels of antioxidant enzymes in pre-apoptotic pericytes from human diabetic retinas. Cell. Mol. Biol.
(Noisy-le-grand) 45 : 59-66 43) Li W, Shen S, Khatami M, et Rockey JH (1984). Stimulation of retinal capillary pericyte protein and collagen synthesis in culture by high glucose concentration. Diabetes 33 : 785-789 44) Li W, Yanoff M, Liu X et Ye X (1997).
Retinal Capillary Pericytes Apoptosis in Early Diabetic Retinopathy. Chin. Med. J (Engl) 110 : 659-663 45) Lo TWC, Westwodd ME, McLellan AC, Selwoll T, et Thornalley PJ (1994). Binding and modification of proteins by methylglyoxal under physiological conditions. A kinetic and mechanistic study with Na-acetylarginine, Na- acetylcysteine, Na-acetyllysine, and bovine serum albumin.
J. Biol. Chem. 269 : p32299-32305 46) Maillard LC. Action des acides aminés sur les sucres : formation des mélanoïdines par voie méthodique 1912. CR Hebd Sei, Aead Sei Paris, vol 154, p 66-68 47) Mandarino LJ, Sundarraj N, Finlayson J et Hassel JR (1993). Regulation of fibronectin and laminin synthesis by retinal capillary endothelial cells and pericytes in vitro. Exp. Eye Res. 57 : 609-621 48) Mathias S, Pena LA et Kolesnick RN (1998).
Signal transduction of stress via ceramides. Biochem. J.
335 : 465-480 49) McLellan AC, Thornalley PJ, Benn J et Sonksen PH (1994). Glyoxalase System in Clinical Diabetes Mellitus and Correlation with Diabetic Complications. Clin.
Sei. 7 : 21-29 50) Mizutani M, Kern TS et Lorenzy M (1996).
Accelerated Death of Retinal Microvascular Cells in Human
Par convention indiquée plus haut dans le présent document, on définit la droite support du fond de filet dans le cas des filets triangulaires comme étant la droite parallèle à l'axe de l'assemblage passant par le fond F2 du filet.
En PRF2, la tangente 62 à l'arc de cercle principal 24 fait un angle D positif avec le flanc porteur 14. L'angle D vaut par exemple 30 .
La zone comprend aussi un arc de cercle secondaire 26 de rayon rS2 dont extrémité tangente à l'extrémité de l'arc de cercle principal 24 et dont l'autre extrémité tangente au flanc porteur 14.
Le rayon rP2 de l'arc de cercle principal 24 est de ce fait supérieur au rayon r,,2 cercle standard tangent en PRF2 au flanc porteur et en F2 à la droite support du fond de filet et induit ainsi des caractéristiques anti-fatigue au raccordement du fond de filet au flanc porteur. Le rayon rS2 est inférieur au rayon rP2 et est compris préférentiellement entre 0,1 et 0,4 fois rP2.
La zone 52 comprend un arc de cercle principal 54 de rayon rp4 qui tangent en F2 à la droite support de fond de filet. Le cercle support de l'arc 54 coupe en PRF4 la droite support du flanc d'engagement 16.
En PRF4, la tangente 68 à l'arc de cercle principal 24 fait un angle F positif avec le flanc d'engagement 16. L'angle F vaut par exemple 15 .
La zone 52 comprend aussi un arc de cercle secondaire 56 de rayon dont une extrémité est tangente à l'extrémité de l'arc de cercle principal 54 et dont l'autre extrémité est tangente au flanc d'engagement 16.
Le rayon rP4 de l'arc de cercle principal 54 est de ce fait supérieur rayon r,,4 du cercle standard tangent en PRF4 au flanc d'engagement 16 et en à la droite support du fond de filet et induit ainsi des caractéristiques anti fatigue au raccordement du fond de filet au flanc porteur.
Le rayon rs4 est inférieur au rayon rP4 et est compris préférentiellement entre 0,1 et 0,4 fois rp4.
De cette manière, le dessin de l'élément fileté vise à améliorer la tenue fatigue de l'ensemble du fond de filet lorsque les deux flancs 14 et 16 sont soumis à des charges cycliques mais que le flanc porteur est davantage sollicite, ce qui est généralement le cas des colonnes de tubes travaillant alternativement traction et en compression.
La figure 10A représente un filet mâle 11 adapté à être vissé dans le filet femelle 12 de la figure 9A.
Ce filet mâle 11 comprend un sommet de filet S1, un fond de filet , un flanc porteur 13 et un flanc d'engagement 15. flancs 13, 15 sont raccordés aux sommets S1 et fonds F1 de filet par des zones raccordement 21, 31, 41, 51.
Les zones 31, 41 de sommet de filet montrées à la figure 10B sont constituées de cercle de rayon r,., et sont semblables à celles 32, 42 de la figure 9C.
zones 21, 51 de fond de filet montrées à la figure 10C sont à rayons multiples elles sont semblables à celles 22, 52 de la figure 9B et font leur pendant.
La figure 11A représente le filet mâle 11 de la figure 10A et le filet femelle 12 de figure 9A assemblés par vissage pour constituer le joint fileté tubulaire de la figure Les filets 11, 12 sont en contact sous pression de contact par leurs deux flancs : le flanc porteur mâle 13 est en contact avec le flanc porteur femelle 14 et le flanc d'engagement mâle 15 est un contact avec le flanc d'engagement femelle 16.
Il existe par contre un jeu entre sommets et fonds de filets conjugués (F1/S2 et F2/S1) et entre zones de raccordement correspondantes (21I42, 51132, 41I52, 31122) : voir figures 11 B et 11 C.
La technique employée permet donc bien d'observer et de quantifier le rHBsAg libre dans une formulation.
Dans les formulations aux ratios pondéraux rHBsAg/BVSMTM KY de 1/72 et 1/40, le nombre de"sites" disponibles sur les BVSMTM KY semble être très supérieur au nombre de"sites"nécessaires à l'association de la totalité du rHBsAg.
Ces études ont permis de montrer que l'antigène rHBsAg peut être formulé avec les BVSMTM KY. Les taux d'association déterminés par résonance plasmonique de surface dans des formulations rHBsAg/BVSMTM KY présentant des rapports pondéraux de 1/40 et 1/72 sont supérieurs à 95% et restent inchangés après 45 jours de conservation à 4 C.
Exemple 3 : Stimulation in vitro de lymphocytes T CD8+ spécifiques de IE1 ou de pp65.
Des souris femelles CBA (haplotype H-2K) (élevage Janvier) ont été immunisées à J0 et éventuellement J15 avec des canarypox recombinant ALVAC-IE1 ou ALVAC-pp65 (Virogenetics). La dose administrée en intrapéritonéale (IP) par souris est de 2x108pfu diluée dans un volume final de 100ul par souris.
15 jours après chaque immunisation, la rate est prélevée puis déposée dans un tube stérile de 45ml (Falcon) maintenu dans la glace et contenant du milieu de culture : RPMI 1640 (Gibco), 5% Sérum Veau Foetal (SVF), 2. 10-5M 2-mercaptoethanol, 10mM Hépés, 2mM glutamin, Pénicilline, streptomycine, Pyruvate de Sodium.
Les splénocytes sont extraits stérilement, purifiés et repris à une concentration de 2. 5x106 splénocytes/ml. Les splénocytes ainsi récupérés sont utilisés pour un test de cytotoxicité (relargage de chrome 51 par les cellules cibles).
Les cellules présentatrices d'antigènes feeders utilisées sont des splénocytes naïfs prélevés sur des souris CBA non immunisées. Après extraction et purification, ces splénocytes naïfs sont incubés (5x106 splénocytes/puits) pendant 90mn dans 500ut de milieu sans SVF en présence : - soit de vaccine-IE1 (Virogenetics) ; - soit de vaccine-pp65 (Virogenetics) ; - soit de chimère soluble IEl-pp65 Une solution est préparée : 67nM (lOug/ml) en tampon PBS (Phosphate Buffered Saline de composition 2.5 mM de NaH2PO4 et Na2HPO4, 30 mM NaCl, 0,7 mM de KCl, pH 7,4) + 10% glycérol ; - soit avec la formulation IEl-pp65/BVSM : Les formulations IEl-pp65/BVSM à un rapport IEl-pp65/NPS de 1/1 (w/w) à 67nM (10pg/ml) en protéine sont formées par association de BVSM cationiques (type KY) et de l'antigène IEl-pp65 en tampon PBS (Phosphate Buffered Saline de
composition 2. 5 mM de NaH2PO4 et Na2HPO4, 30 mM NaCl, 0, 7 mM de KCl, pH 7, 4) + 10% glycérol ; Après l'incubation, 500ut de milieu sont enlevés et remplacés par 2ml/puits de milieu avec SVF. On incube pendant 18h à 37 C et 5% CO2. Les splénocytes sont récoltés puis ils sont irradiés à 4000R.
La stimulation est réalisée en mélangeant par puits splenocytes/ml avec 1, 25x106 feeders/ml. L'incubation se déroule pendant 5 jours à 37 C et 5% de CO2.
L'activité cytotoxique des cellules non adhérentes est testée par un test de relargage de 5'cor. Pour ce test, les cellules cibles utilisées sont soit des L929 (H-2K) soit des P815 (H-2d) utilisées comme contrôle infectées par la vaccine-IE1, ou la vaccine-pp65 ou la vaccine-WT à une moi de 2,5 pendant 4h. Après lavage dans du milieu de culture, elles sont marquées au chrome (lOOuCi) pendant lh. Ces cellules chromées sont lavées 3 fois dans du milieu de culture, puis mélangées avec les cellules effectrices à différents rapports effecteurs/cibles en réalisant des triplicates. L'incubation de 4h est réalisée à 37 C et 5% CO2. La radioactivité contenue dans le surnageant prélevé est comptée dans un compteur-cobra (Packard).
Le pourcentage de lyse spécifique correspond au rapport [cpm relargage expérimental-cpm relargage spontané/cpm relargage total - cpm relargage spontané]xl00.
La radioactivité totale a été comptée sur la suspension de cellules cibles incubées seules.
Le relargage spontané a été mesuré dans le surnageant des cellules cibles incubées seules. La déviation standard (SD) des triplicates est inférieure à 10% et le relargage spontané est inférieur à 25%.
Résultats Réduction du cytochrome c : détection et caractérisation de la réponse d'élicitation La réponse d'élicitation est évaluée d'après la réduction du cytochrome c mesurée par la variation de l'absorbance à 340 nm ; la valeur de référence 100% correspond au taux de réduction dans les contrôles (suspensions de protoplastes non élicités).
La figure 3 indique que la réponse est optimale à : 50 nM (200%) pour le composé A (2'-fucosyl lactose) 15 nM (159%) pour le composé B (XXFGol)
Le 2'-fucosyl lactose comme signal inducteur d'un"burst"oxydatif est plus performant que l'oligomère de xyloglucane (187% au lieu de 160% à 10 nM). Par contre, la dose optimale du 2'- -fucosyl lactose est de 50 nM contre 15 nM pour l'oligomère de xyloglucane.
III) Réponse d'adaptation au stress oxydant : Elicitation d'une activité glutathionreductase Méthodologie Préparation des protoplastes de Rubus fruticosus L. selon Vargas-Rechia et al (1998). Le rendement en protoplastes est de l'ordre 70 à 85% du nombre initial de cellules utilisées ; la viabilité des protoplastes, de l'ordre de 90 à 95 %, a été contrôlée en utilisant l'indicateur bleu d'Evans.
Dosage de l'activité glutathion-reductase (GR) selon Jahnke LS et al. (1991) : GSSG (glutathion sous forme oxydée) est réduit en GSH (glutathion sous forme réduite) par l'enzyme glutathion-reductase (EC 1.6. 4.2) ; la réaction est couplée avec l'oxydation de NADPH en NADP dans le cycle catalytique (glutathion, glutathionreductase, NADPH). L'activité glutathion-reductase se mesure en évaluant la formation de NADP dans le milieu, ce qui s'effectue en suivant la décroissance de l'absorbance à 340 nm.