INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans un dispositif à semiconducteur conforme à un huitième aspect de la présente invention, la première pellicule d'oxyde d'isolation a une forme rectangulaire en une vue en plan; et la région de motif fictif a une largeur de 5% ou plus d'une longueur d'un côté court de la pre mière pellicule d'oxyde d'isolation.
Dans un dispositif à semiconducteur conforme à un neuvième aspect de la présente invention, la région de motif fictif comprend une partie de champ définie par la seconde pellicule d'oxyde d'isolation; et un rapport d'aire de la seconde pellicule d'oxyde d'isolation dans la région de motif fictif vis-à-vis de la partie de champ est fixé à environ 1:1.
clinée d'environ 15 sur l'horizontale.
coupure Cc deviendra éblouissante pour les véhicules circulant en sens inverse.
Pour éviter cette gêne, comme on l'a représenté sur la Figure 2, la solution connue consiste à coller sur une zone déterminée de la glace de protection G de chaque projecteur un adhésif opaque A, dit "cache vacancier", permettant d'occulter la partie de faisceau située sous la demi-coupure remontante Cd, et pour obtenir un faisceau globalement délimité par une
coupure à peu près plane, les deux demi-plans de coupure Ca et Cg étant sensiblement confon-
dus, ce qui permet d'éviter les problèmes d'éblouissement précités.
De manière plus précise, dans ce mode de réalisation, la répartition photométrique du faisceau émergeant du projecteur est assurée par des stries convenablement formées sur la glace de protection G, ainsi qu'on l'a représenté sur la Figure 3. Sur cette Figure, on voit que différentes parties de la glace de protection G sont munies de stries différentes, chaque partie
participant à la création d'une zone parfaitement définie dans le faisceau émergeant du pro-
jecteur. Ainsi, la partie R est utilisée pour former le faisceau de route, la partie LC pour for-
mer la largeur du faisceau de croisement, les deux sections de la partie PC pour former la por-
tion éloignée du faisceau de croisement, et les deux sections de la partie MD pour former le
2o faisceau a moyenne distance du véhicule.
Par construction, on sait déterminer sur la glace de protection, sur la surface de celle-ci qui est utilisée pour le faisceau de croisement, une première région I à travers laquelle passent les rayons lumineux correspondant à la partie du faisceau de croisement située en dessous de
l'horizontale, et une deuxième région II à travers laquelle passent des rayons lumineux corres-
pondant à la partie du faisceau de croisement située entre l'horizontale et la demi-coupur-e (Cl) située au-dessus de l'horizontale. Ainsi, sur l'exemple de la Figure 3, la première région I est constituée des parties LC, MD et d'une friaction de la partie PC, et la deuxième région Il est constituée de l'autre fraction de la partie PC, en l'occurrence de la partie supérieure de la
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide d'enveloppe cellulaire ou présent à la surface de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou pour un de ses fragments.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans la machinerie cellulaire.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le métabolisme intermédiaire central.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le métabolisme énergétique.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le métabolisme des acides gras et des phospholipides.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le métabolisme des nucléotides, des purines, des pyrimidines ou nucléosides.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans les fonctions de régulation.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le processus de réplication.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le processus de transcription.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le processus de traduction.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans le processus de transport et de liaison des protéines.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans l'adaptation aux conditions atypiques.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments dans la sensibilité aux médicaments et analogues.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans les fonctions relatives aux transposons.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide spécifique de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments.
Sous un autre aspect, de manière préférée, l'invention a pour objet un polypeptide selon l'invention, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans la biosynthèse des acides aminés.
Pour former cet assemblage avant ces zones actives, on peut placer le substrat 4 du composant optoélectronique 2 sur le support mécanique 12 avant de former les zones actives 8. L'assemblage ainsi constitué permet d'avoir une grande solidité du substrat 4 pendant la formation des zones 8 et d'éviter tout problème de casse, qui se pose avec les substrats de croissance standard par exemple en GaAs ou en InP.
Pour former l'assemblage après les zones actives 8, on peut placer le substrat 4 (généralement en forme de plaque) sur le support mécanique 12 après avoir formé les zones 8. L'assemblage ainsi constitué permet d'avoir une grande solidité pendant les opérations de montage, telles que le report de l'assemblage sur une plaque de céramique et la mise en place des fibres optiques.
En ce qui concerne la facilité du perçage du support mécanique, considérons l'exemple d'un support en silicium.
Il est connu que ce matériau est utilisé pour réaliser des assemblages de MEMS ou systèmes micro-électro-mécaniques ( micro-electro-mechanical systems ). Le perçage du silicium est donc parfaitement maîtrisé et il existe de nombreuses techniques et machines qui permettent d'obtenir une plaque formant le support mécanique tel qu'on l'a défini.
On peut en outre former, dans le silicium, des éléments complémentaires (par exemple des lentilles de collimation au fond des trous de guidage 14), susceptibles de donner à ce matériau un rôle optoélectronique actif.
Les figures 3A à 3D illustrent schématiquement des étapes d'un mode de réalisation particulier de l'invention, dans lequel on colle, avant la formation des zones actives 8 (émettrices ou réceptrices), la plaque de silicium 12, comportant des trous 14 traversant cette plaque 12, au composant optoélectronique 2.
La figure 3A montre la plaque de silicium 12, dans laquelle on a percé les trous 14, ou empreintes de fibres, par exemple par gravure chimique ou gravure par plasma ou usinage mécanique. On a également formé par l'une de ces techniques, dans cette plaque 12, de part et d'autre de l'ensemble des trous 14, des repères ou marques d'alignement 24, par exemple
constitués par des perçages identiques aux trous traversants 14.
Il convient de noter que l'on pourrait aussi utiliser de tels perçages 24 comme repères avec des trous 14 borgnes.
La figure 3B illustre le report et le collage du substrat 4, par exemple en GaAs (et muni de la couche épitaxiale 6), sur la plaque percée de silicium 12, formant le support mécanique.
Le collage est par exemple un collage moléculaire ou un collage eutectique ou un collage réalisé au moyen d'une couche adhésive appropriée (non représentée).
La figure 3C illustre schématiquement la réalisation d'un premier niveau d'alignement : on aligne (ce que l'on a symbolisé par les yeux 25) un masque de photolithographie 26 sur les marques 24 (formées à l'extérieur de la zone de collage du substrat 4 au support 12).
On réalise ensuite (en utilisant un rayonnement ultraviolet 28 et une couche de résine photosensible ( photoresist layer ) 30 préalablement formée sur le substrat 4) une photolithographie qui permet donc d'aligner le premier niveau avec les trous ou empreintes de fibres 14 sous-jacentes.
La photolithographie permet la formation des zones actives 8 (figure 3D) en regard des trous 12.
Le masque 26 comprend des perçages 32, correspondant respectivement aux zones actives 8 à former, ainsi que des repères 34, constitués de perçages dans cet exemple, tels qu'en alignant ces repères 34 avec les
repères 24, les perçages 32 du masque soient respectivement alignés avec les trous 14 du support 12.
Dans le cas d'une substitution, un ou plusieurs acide (s) aminé (s) consécutifs) ou non consécutif (s) sont remplacés par des acides aminés équivalents .
L'expression acides aminés équivalents vise ici à désigner tout acide aminé susceptible d'être substitué à l'un des acides aminés de la structure de base sans cependant modifier essentiellement les activités biologiques des peptides correspondant telles qu'elles seront définies par la suite.
Ces acides aminés équivalents peuvent être déterminés soit en s'appuyant sur leur homologie de structure avec les acides aminés auxquels ils se substituent, soit sur des résultats d'essais comparatifs d'activité biologique entre les différents polypeptides susceptibles d'être effectués.
A titre d'exemple, on mentionne les possibilités de substitution susceptibles d'être effectuées sans qu'il résulte en une modification approfondie de l'activité biologique du polypeptide modifié correspondant. On peut remplacer ainsi la leucine par la valine ou l'isoleucine, l'acide aspartique par l'acide glutamine, la glutamine par l'asparagine, l'arginine par la lysine, etc... les substitutions inverses étant naturellement envisageables dans les mêmes conditions.
Les polypeptides homologues correspondent également aux polypeptides codés par les séquences nucléotidiques homologues ou identiques, telles que définies précédemment et comprennent ainsi dans la présente définition des polypeptides mutés ou correspondant à des variations inter ou intra espèces, pouvant exister chez Listeria, et qui correspondent notamment à des troncatures, substitutions, délétions et/ou additions, d'au moins un résidu d'acides aminés.
Il est entendu que l'on calcule le pourcentage d'identité entre deux polypeptides de la même façon qu'entre deux séquences d'acides nucléiques. Ainsi, le pourcentage d'identité entre deux polypeptides est calculé après alignement optimal de ces deux séquences, sur une fenêtre d'homologie maximale. Pour définir ladite fenêtre d'homologie maximale, on peut utiliser les mêmes algorithmes que pour les séquences d'acide nucléique.
Par fragment biologiquement actif d'un polypeptide selon l'invention, on entend désigner en particulier un fragment de polypeptide, tel que défini ci-après, présentant au moins une des caractéristiques biologiques des polypeptides selon l'invention, notamment en ce qu'il est capable d'exercer de manière générale une activité même partielle, tel que par exemple : - une activité enzymatique (métabolique) ou une activité pouvant être impliquée dans la biosynthèse ou la biodégradation de composés organiques ou inorganiques ; - une activité structurelle (enveloppe cellulaire, molécule chaperonne, ribosome) ; une activité de transport (d'énergie, d'ion) ; ou dans la sécrétion de protéine ; une activité dans le processus de réplication, amplification, préparation, transcription, traduction ou maturation, notamment de l'ADN, de l'ARN ou des protéines.
Par fragment de polypeptide selon l'invention, on entend désigner un polypeptide comportant au minimum 5 acides aminés, de préférence 10,15, 25,50, 100 et 150 acides aminés.
Les fragments de polypeptides peuvent correspondre à des fragments isolés ou purifiés naturellement présents dans les souches de Listeria, ou à des fragments qui peuvent être obtenus par clivage dudit polypeptide par une enzyme protéolitique telle que la trypsine ou la chymotrypsine ou la collagénase, par un réactif chimique (bromure de cyanogène, CNBr) ou en plaçant ledit polypeptide dans un environnement très acide (par exemple à pH = 2,5). Des fragments polypeptidiques
peuvent également être préparés par synthèse chimique, à partir d'hôtes transformés par un vecteur d'expression selon l'invention qui contiennent un acide nucléique permettant l'expression dudit fragment, et placé sous le contrôle des éléments de régulation et/ou d'expression appropriés.
Par polypeptide modifié d'un polypeptide selon l'invention, on entend désigner un polypeptide obtenu par recombinaison génétique ou par synthèse chimique comme décrit plus loin, qui présente au moins une modification par rapport à la séquence normale. Ces modifications peuvent être notamment portées sur des acides aminés nécessaires pour la spécificité ou l'efficacité de l'activité, ou à l'origine de la conformation structurale, de la charge, ou de l'hydrophobicité du polypeptide selon l'invention. On peut ainsi créer des polypeptides d'activité équivalente, augmentée ou diminuée, ou de spécificité équivalente, plus étroite ou plus large. Parmi les polypeptides modifiés, il faut citer les polypeptides dans lesquels jusqu'à cinq acides aminés peuvent être modifiés, tronqués à l'extrémité N ou C-terminale, ou bien délétés, ou ajoutés.
Comme cela est indiqué, les modifications d'un polypeptide ont pour objectif notamment : de permettre sa mise en oeuvre dans des procédés de biosynthèse ou de biodégradation de composés organiques ou inorganiques, de permettre sa mise en oeuvre dans des procédés de réplication, d'amplification, de réparation et règle de transcription, de traduction, ou de maturation notamment de l'ADN, l'ARN, ou de protéines, - de permettre sa sécrétion améliorée, - de modifier sa solubilité, l'efficacité ou la spécificité de son activité, ou encore de faciliter sa purification.
La synthèse chimique présente également l'avantage de pouvoir utiliser des acides aminés non naturels ou des liaisons non peptidiques. Ainsi, il peut être intéressant d'utiliser des acides aminés non naturels, par exemple sous forme D, ou des analogues d'acides aminés, notamment des formes souffrées.
La présente invention fournit la séquence nucléotidique du génome de Listeria innocua et la séquence partielle de Listeria monocytogenes sérotype 4b, ainsi que certaines séquences polypeptidiques.
D'une manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans la biosynthèse des acides aminés.
De manière préférée, l'invention est relative à une séquence nucléotidique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle code pour un polypeptide de Listeria innocua ou monocytogenes 4b ou un de ses fragments impliqué dans la biosynthèse des cofacteurs, groupes prosthétiques et transporteurs.
PREPARATION DE CELLULES SOUCHES (INDIFFERENCIEES) DANS DES FRACTIONS DE CELLULES MONONUCLEEES OBTENUES A PARTIR D'ECHANTILLONS DE SANG PERIPHERIQUE OU DE PATIENTS SOUFFRANT DE B-CLL Suivre le protocole ci-dessus pour la séparation des cellules mononucléées (A), sauf qu'une sélection négative ne doit pas être effectuée lorsque la numération des globules blancs dépasse 20xl06/ml,plus de 50 % des globules blancs consistant en lymphocytes B.
Les modes opératoires suivants peuvent être mis en #uvre dans un dispositif conforme à la présente invention.
(B). Traitement des cellules en utilisant un anticorps monoclonal CR3/43 pur (Dako) : Après avoir réalisé la séparation des cellules mononucléées dans l'étape A (vi), mettre en #uvre les étapes suivantes : (i) Placer la poche de sang d'entrée (de l'étape A(vi) ci-dessus) sur le crochet de support.
(ii) Utiliser une chambre avec six puits, programmer le dispositif pour l'introduction de 2 ml de la suspension cellulaire provenant de la poche de sang d'entrée [de l'étape A(vi) ci-dessus] dans chaque puits de ce plateau ou de cette chambre de culture à puits multiples.
(iii) Programmer le dispositif pour traiter un nombre approprié de puits chacun avec 99 ul/ml (ou 49,5 ul/ml en ce qui concerne les échantillons de couches leucocytaires) d'anticorps CR3/43 (anticorps monoclonal pur, Dako) au moyen d'une seringue contenant le Acm CR3/43 et laisser les autres puits sans traitement (témoin négatif).
(iv) Mettre en incubation la chambre dans une atmosphère à 5 % de CO2 à 37 C (ou 33 C) dans une atmosphère humide.
(C) Purification des cellules : Divers procédés sont connus pour la séparation et la purification de cellules (voir Vettese-Dadey Scientist 13(18):21, 13 septembre 1999).
Un procédé convenable consiste en la sélection négative de lymphocytes B en utilisant des microbilles MACS (Miltenyi Biotec, le mieux consistant dans ce cas à suivre les instructions du fabricant) : (i) Obtenir des cellules mononucléées comme dans le paragraphe A ci-dessus.
(ii) Rassembler en un culot et remettre en suspension les cellules dans un volume final de 300 ul pour 108
cellules totales dans du HBSS (consistant en 2 % de SVF et 2 mM d'ETA ou 0,6 % de citrate).
(iii) Ajouter 100 l pour 108 cellules totales d'anticorps monoclonal pur contre CD2 (IgGl, DAKO).
(iv) A la même suspension cellulaire, ajouter 50 l pour 108 cellules totales d'anticorps monoclonal pur contre CD33 (IgGl, DAKO).
(v) Laisser le mélange en incubation pendant 10 minutes à température ambiante.
(vi) Laver les cellules avec HBSS (contenant 2 % de SVF et 2 mM d'EDTA) et remettre en suspension à une concentration finale de 400 l pour 108 cellules totales, avec le même tampon. Centrifuger à 400 x g pendant 10 minutes. Remettre le culot en suspension dans du HBSS (comme ci-dessus).
(vii) Ajouter 100 ul de microbilles marquées avec une IgGl de lapin anti-anticorps de souris pour 108 cellules totales (ou suivre les instructions du fabricant).
(viii) Mélanger énergiquement les cellules et mettre en incubation à une température de 6 C à 12 C (réfrigérateur) pendant 15 minutes.
Le convertisseur temps/numérique inclut également N codeurs à priorité enregistrée, dont chacun est couplé à l'un différent des registres à M bits. Chaque codeur à priorité enregistrée reçoit et exécute une fonction de priorité sur les M bits du registre, auquel il est couplé.
Le convertisseur temps/numérique inclut également un codeur de retardement approximatif couplé à chacun des N codeurs à priorité enregistrée pour déterminer l'étendue de la propagation des signaux dans les trajets de retardement approximatif et dans les trajets de retardement précis de manière à produire de ce fait des marques temporelles correspondant aux instants d'arrivée des signaux.
L'arrivée des signaux - indépendamment de l'instant d'arrivée - sont également enregistrés et'transférés à un signal de drapeau.
Un second trajet de retardement approximatif incluant N étages de retardement approximatif - qui sont également branchés en série - reçoit le signal d'horloge de référence et produit une réplique retardée du signal d'horloge. Un détecteur de phase maintient le signal d'horloge et sa réplique retardée en phase en commandant le retard dans chacun des N étages de retardement approximatif du second trajet de retardement approximatif. Le signal d'horloge est en avance sur sa réplique retardée, et ce d'un cycle complet du signal d'horloge.
Le détecteur de phase maintient également le retard dans chacun des étages de retardement approximatif
dans les premier et second trajets de retardement approximatif de manière à rendre égal à la période du signal d'horloge le retard d'un signal dans le second trajet de retardement approximatif.
Un tampon différent parmi les N tampons de retardement précis disposés entre chacun des N étages de retardement approximatif dans le premier trajet de retardement approximatif et le trajet de retardement précis associé de l'étage de retardement approximatif garantit que le retard d'un signal entre des noeuds positionnés de façon similaire, du trajet de retardement précis est sensiblement le même. Le retard dans chaque trajet de retardement précis est sensiblement similaire au retard dans l'étage de retardement approximatif.
Le convertisseur temps/numérique inclut facultativement 2N circuits de polarisation esclaves, dont chacun reçoit et délivre un signal à l'un différents des étages de retardement approximatif dans chacun des N tampons de retardement précis.
Dans certaines formes de réalisation, le convertisseur temps/numérique fonctionne de façon différentielle en utilisant des signaux élevés et faibles du point de vue différentiel, dans chacun des premier et second trajets de retardement approximatif, les trajets de retardement précis, les registres à M bits et les codeurs à priorité alignés.
Dans certaines formes de réalisation du convertisseur temps/numérique, N est égal à 32, M est égal à 8 et les instants d'arrivée sont enregistrés avec une résolution de 5 ps moyennant l'utilisation d'une horloge à 800 MHz.
De façon plus précise, l'invention concerne un convertisseur temps/numérique pour enregistrer un instant d'arrivée d'un signal (EDGE) par rapport à un signal d'horloge (CLK), caractérisé en ce qu'il comporte un trajet de retardement approximatif, qui inclut
N étages de retardement (N), les N étages de retardement approximatif étant connectés en série, le signal (EDGE) étant appliqué à une borne d'entrée du premier étage de retardement approximatif, N trajets de retardement précis, dont chacun est couplé à l'un associé des étages de retardement approximatif pour recevoir un signal de la part de cet étage, chaque trajet de retardement précis comprenant (M-1) étages de retardement précis, et M noeuds pour la propagation du signal (EDGE), le convertisseur temps/numérique enregistrant l'instant d'arrivée du signal (EDGE) par rapport au signal (CLK) moyennant l'enregistrement du nombre des M x N noeuds dans les N trajets de retardement précis, pour lesquels passe le signal (EDGE).
Selon une autre caractéristique de l'invention, le convertisseur temps/numérique comporte en outre N registres à M bits, chaque registre à M bits étant couplé à l'un associé des trajets de retardement précis, chaque borne d'entrée d'un registre à M bits étant couplée à l'un différent des M noeuds du trajet de retardement précis, qui est couplé au registre à M bits.