INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les inserts d'ADN nucléaire sont clonés dans le vecteur pBeloBAC11 qui comporte, dans sa séquence, les sites uniques Sphl, BamHI, Smal, Sacl, et EcoRI. La digestion du clone par une de ces enzymes de restriction permet de générer des fragments comportant une portion du vecteur et une portion d'insert de taille variable. Après religation de ces fragments sur eux-mêmes, l'extrémité droite peut être amplifiée par PCR inverse. Le fragment d'insert correspondant à l'extrémité gauche associée au vecteur constitue un plasmide fonctionnel comportant l'origine de réplication et le marqueur de résistance au chloramphénicol. L'extrémité gauche peut ainsi être clonée par plasmid rescue .
Cmr, résistance au chloramphénicol ; Ori, origine de réplication.
La figure 2 illustre la recherche d'ORFs dans la région délimitée par les marqueurs mi413 et MXE2RE.
(A). La portion séquencée du clone T7119 (correspondant à la portion couverte par le clone MXE2) est représentée sur ce clone. Les barres verticales noires indiquent la position des sites EcoRI.
(B) Les cosmides C7119-66 et C7119-49 couvrant la région de 18 kb comprise entre les marqueurs atpox et mi413 sont représentés en gris.
(C) La présence de deux ORFs a été détectée par le programme Genscan dans l'intervalle délimité par les marqueurs atpox et mi413. L'une correspond à la séquence codante du gène Akin11 qui code pour une protéine kinase de type SNFI ; l'autre pour une protéine de 171 acides aminés ne présentant pas d'homologies avec les séquences présentes dans les bases de données. Les carrés pleins représentent la séquence codante des deux gènes identifiés. Le premier exon comportant le codon d'initiation de la traduction est représenté.
La figure 3 illustre la structure génomique du gène Akin11 d'Arabidopsis et position de la mutation hxc-2 : Le gène Akin 11 comporte 11 exons, représentés par des rectangles gris, dont la taille est indiquée en kb.
L'exon contenant le codon d'initiation de la traduction est représenté. La position des bases limitrophes de chaque exon est indiquée sur le clone MXE2. Les fragments B, C, D, E, F, G et H amplifiés par PCR et clonés en vue du séquençage de l'allèle hxc-2 sont représentés par des traits. La mutation hxc-2, qui résulte d'une inversion C- T en position 77578 du clone MXE2, dans l'exon 8 du gène Akin11 est indiquée.
La figure 4 illustre la complémentation de la mutation hxc-2.
En haut : Cosmides utilisés pour transformer les plantes mutantes.
Les cosmides C7119-29, C7119-32, C7119-66 et C7119-49 ont été utilisés pour transformer, via Agrobacterium, des plantes mutantes.
En bas : Phénotype observé, en réponse à l'inoculation par la souche 147, chez un transformant primaire, T66, obtenu avec le clone C7119-66, comparé au mutant hxc-2,5 jours après inoculation.
La figure 5 illustre la construction d'un vecteur d'expression recombinant contenant une séquence de l'ADNc ou de l'ADN génomique codant pour le polypeptide AKIN11, ou la séquence anti-sens correspondante.
35S Pro : Promoteur 35 S du CaMV ; NOS Ter : Terminateur du gène Nopaline synthase de A. Tumefaciens ; EF : extrémités franches. NPIII :
gène de résistance à la kanamycine. AKINF : SEQ ID N 13 ; AKINR : SEQ ID N 14.
La figure 6 illustre la construction d'un vecteur d'expression recombinant contenant une séquence de l'ADNC codant pour le polypeptide AKIN11 ; ou la séquence anti-sens correspondante.
35S Pro : Promoteur 35 S du CaMV ; NOS Ter : Terminateur du gène Nopaline synthase de A. Tumefaciens ; EF : extrémités franches,.
AKIN68 : SEQ ID ? 15. AK) N1648 ; SEQ ID ? 16.
EXEMPLES EXEMPLE 1 : CLONAGE POSITIONNEL DU GENE CAUSAL DU PHENOTYPE DE SENSIBILITE DANS LA PLANTE MUTANTE HXC2 : CARTOGRAPHIE GLOBALE SUR DIFFERENT CHROMOSOMES D'ARABIDOPSIS THALIANA.
Suite à la caractérisation phénotypique du mutant hxc-2, la cartographie du locus avait été entreprise par l'analyse du phénotype de 132 plantes F2 issues du croisement entre une plante Col-gl-1-hxc-2 et l'écotype sauvage polymorphe, Ws-0. Un premier crible phénotypique avait été réalisé sur cette population en réponse à l'inoculation par la souche 147 de Xanthomonas campestris pv. campestris et 78 individus, incluant 28 plantes de phénotype mutant, avaient été sélectionnés et autofécondés.
L'analyse de la ségrégation du caractère hxc-2 dans chaque sous-famille F3 résultant de l'autofécondation avait permis de déterminer, de manière codominante, le génotype des individus F2 au locus HXC2. L'intégration, dans une carte génétique préalablement réalisée sur la même population, du génotype des plantes F2 au locus HXC2 a permis de positionner le locus en position centromérique, sur le chromosome III, entre les marqueurs RFLP mm413 et atpox (Tableau 1).
Cet intervalle, défini par la présence d'un événement de recombinaison à droite du marqueur télomérique mi413 et d'un événement de recombinaison à gauche du marqueur centromérique, atpox, représente
une distance physique d'environ 1, 2 Mb, évaluée sur la base des données de cartographie physique offertes par l'agencement de clones YACs ("Yeast Artificial Chromosomes") de la banque de Versailles dans la région. Ces données sont disponibles sur le site Web TAIR (WWW. arabidopsis. org). L'absence d'événements de recombinaison supplémentaires dans cet intervalle ne permettait pas d'envisager d'isoler le gène par une approche de clonage positionnel. La poursuite de la marche chromosomique a donc consisté, dans un premier temps, à isoler des recombinants dans l'intervalle défini par les marqueurs flanquants (mm413 et atpox), et dans un deuxième temps, à augmenter le nombre et donc la résolution des marqueurs moléculaires dans cet intervalle.
Tableau 1 : Fréquence de recombinaison qénétique entre le locus hxc2 et des marqueurs moléculaires du génome d'Arabidopsis.
Chromosome Marqueur Chromosome Nombre total de Fréquence de recombinants chromosomes recombinaison (%) Il GAPC 52 148 35 nga162 36 144 25 GAPA 12 142 8 GLI 6 148 4 mi413 1 146 1 atpox 2 146 1 t04109 3 146 2 m249 21 144 15 m457 33 144 23 PUR5 35 146 25 BGL1 58 146 40 1 nga63 59 148 40 nga128 56 148 38 m315 56 146 38 11 m246 57 140 41 GPA1 49 128 38 IV m518 58 142 41 g4539 59 144 41 DHS1 50 136 37 V ASA1 53 142 37 nga106 61 148 41 CRA-1 63 144 41
De plus, cette caractéristique n'associe pas simplement un pivot fictif à une structure parallèle mais requiert une association de pivots fictifs pour répondre aux critères spécifiques d'articulation fixés par l'application visée à savoir, autoriser la mise en mouvement et le guidage isostatique des bras constituant une structure parallèle, lesquels requièrent plus d'un degré de liberté.
L'invention concerne également l'articulation à déformation conçue pour cette machine-outil et qui peut être utilisée séparément.
Les concepts fondamentaux de l'invention venant d'être exposés ci-dessus dans leur forme la plus élémentaire, d'autres détails et caractéristiques ressortiront plus clairement à la lecture de la
description qui suit et en regard des dessins annexés, donnant, à titre d'exemple non limitatif, un mode de réalisation d'une machine-outil et d'une articulation à déformation conforme à l'invention.
BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS La figure 1 est une vue en perspective d'une machineoutil à structure parallèle de l'arrière-plan technologique, la figure 2 est une vue schématique en perspective d'un mode de réalisation d'une articulation d'une machineoutil conforme à l'invention, la figure 3 est une vue schématique en perspective éclatée d'un détail de l'articulation de la figure 2, la figure 4 est un schéma cinématique de l'articulation de la figure 2.
DESCRIPTION DES MODES DE RÉALISATION PRÉFÉRÉS Telle qu'illustrée sur le dessin de la figure 1, la machine-outil d'usinage à très grande vitesse référencée M dans son ensemble est du type de celle comprenant des barres de liaison 100 dont une première extrémité 110 est en liaison avec un organe mobile 200 assurant le support d'au moins un outil (non illustré) et dont la deuxième extrémité 120 est en liaison avec au moins un moyen de mise en mouvement 300 par rapport à un bâti référencé B.
Selon le mode de réalisation illustré, lesdites barres 100 sont au nombre de six et sont liées par leur deuxième extrémité 120, deux à deux, à des moyens de mise en mouvement 200, qui sont donc au nombre de trois. Les premières extrémités 110 sont, quant à elles, liées deux à deux à un même côté de l'organe mobile 200 lequel prend ici la forme d'un plateau triangulaire, chaque côté accueillant la première extrémité 110 de deux barres de liaison 100. Dans le cadre du mode de réalisation non limitatif de la machine outil M illustrée, l'architecture parallèle a été conçue de façon à ce que le mouvement séparé ou de concert des trois moyens de mise en mouvement
300 selon l'axe Z permette le déplacement rectiligne selon les axes X, Y et Z de l'organe mobile 200.
Selon l'invention, les liaisons 400 aux extrémités desdites barres 100 sont constituées par une association de pivots fictifs de façon à former une articulation dont les degrés de liberté autorisent la mise en mouvement de la structure parallèle.
Bien que cette caractéristique soit une caractéristique idéale, il est possible que la structure parallèle soit mixte à savoir que, seule une partie desdites liaisons 400, est réalisée au moyen d'une association de pivots fictifs. En effet, il est possible que pour atteindre la rigidité et en conséquence la précision requises, un nombre limité d'articulations 400 à pivots fictifs soit suffisant.
Comme illustrée plus en détail sur le dessin de la figure 3, chaque articulation 400 est formée par trois pivots fictifs 410,420, 430 dont les axes sont perpendiculaires les uns par rapport aux autres.
Selon une caractéristique particulièrement avantageuse de l'invention, le profil des susdites barres de liaison 100 est préformé de façon à ce qu'il accepte sans franchir sa limite élastique une déformation en torsion de sorte qu'un des pivots fictifs formant l'articulation soit réalisé par l'élasticité en torsion de la barre 100 ou l'extrémité de barre 120 ou 110 elle-même.
Ce mode de réalisation d'un pivot fictif est particulièrement utile dans le cadre du degré de liberté en rotation autour de l'axe longitudinal des barres de liaison 100 qui était jusqu'ici autorisé par des liaisons de type"cardan". Ainsi, selon le mode de réalisation non limitatif illustré, le pivot fictif 430 est constitué par la barre 100 ou l'extrémité 110 ou 120 de barre qui adopte un profil autorisant la torsion selon un nombre limité de degrés. Cette barre de liaison 100 adopte au moins sur son extrémité 110 ou 120 le profil illustré en forme de croix
particulièrement adapté à accepter des contraintes de torsions. Selon le choix technologique envisagé par la demanderesse, la barre 100 ou son extrémité sont profilées de sorte qu'elle accepte une rotation de plus ou moins un degré.
Lorsque le nombre de degrés nécessaire pour la rotation est plus important, selon un mode de réalisation illustré mais non limitatif, lesdits pivots fictifs 410, 420, sont formés par au moins un sous-ensemble déformable comprenant une croix dont les extrémités de deux premiers bras sont liées par une première platine et les extrémités des deux autres bras liées par une seconde platine. Plus précisément, le pivot fictif 410 est formé par une croix dont les extrémités de deux bras 411 et 412 sont liées par une première platine 413 et les extrémités des deux autres bras 414 et 415 liées par une seconde platine 416.
Comme illustrés sur les dessins de la figure 2 et de la figure 3, les pivots fictifs assurent la liaison pivot par paire avec l'intersection de la croix qui les constitue comme axe de rotation théorique.
Temps (mn) 0 60 120 180d 240d (colonne 1) (colonne 2) (colonne 1) (colonne 2) ! Anticorps antiFVIII adsorbés 0 4427 2297 776 938 (en UB/g de résine) Anticorps antiFVIII adsorbés 0 8500 4411 1489 1800 (en UB) Anticorps antiFVIII initiale 2000 2000 11500 7089 5600 dans le milieu (en UB) Anticorps antiFVIII restant 2000 11500 7089 5600 3800 dans le milieu (en UB) % d'anticorps anti-FVIII 0 42,5 64,6 72 81 adsorbés (rendement cumulé) Rendement de chaque étape 0 42,5 38,4 21 32,1 (en % adsorbé)
1, 1 1 1 1 ' : résine passivée puisque déjà régénérée.
Ces résultats montrent qu'après 60 minutes de passage sur la première colonne, 42% environ des anticorps anti-FVIII sont retenus. Pendant la régénération de la colonne 1, le plasma est épuré sur la colonne 2 et environ 64 % des , 1 1 c anticorps anti-FVIII totaux sont retenus. Le passage du plasma sur la colonne 1 régénérée conduit à 72% de rétention des anticorps anti-FVIII. Enfin, un dernier passage sur la colonne 2 régénérée, aboutit une déplétion d'environ 80% du plasma en ID anticorps anti-FVIII.
EXEMPLE 5 : ÉTUDE DE L'ADSORPTION D'UNE PROTÉINE DU COMPLÉMENT PAR LA RÉSINE BIOTYR 1 Le choix de l'étude s'est porté sur la protéine C3, un des composants précoces et centraux du système du complément. C'est une protéine soluble de concentration sérique normale important, de l'ordre de 1.0 à 1, 3 g'1. Une des conséquences de l'activation de C3 est sa conversion en C3c. Cette activation peut être réalisée en recalcifiant te sérum ou le plasma et en ajoutant de l'inuline qui est un activateur donnant lieu à ta fondation de C3c.
1) Plasma utilisé 6 ml d'un PPP normal sont mis en circulation sur une colonne d'épuration contenant 1 ml d'une suspension de 0,48 g de résine BIOTYR 1.
Le dosage de la protéine C3c a été effectué de manière indirecte sur 1 des échantillons prélevés aux différents temps suivant : - TO : PPP avant passage sur la colonne, 1 - Tl PPP après 15 mn de contact avec BIOTYR 1, - T2 : PPP après 30 mn de contact avec BIOTYR 1, - T3 : PPP après 45 mn de contact avec BIOTYR 1, - T4 : PPP après 60 mn de contact avec BIOTYR 1, Un échantillon sérologique de même donneur a été préparé et dosé en C3c (Témoins S, dans passage sur la colonne d'épuration).
1 2) Dosa de ! a protéine C3 Ce dosage a été réalisé de manière indirecte, c'est-à-dire après 1 activation de la protéine C3 en C3e par action de l'inuline. L'activation par l'inuline nécessite une préincubation de l'échantillon à tester pendant 5 heures à 37 C en présence d'inuline à raison de 2 g/I de plasma.
1 Le dosage de la protéine C3c a ensuite été effectué classiquement lb sur sérum par IDR. technique décrite ci-dessus pour le dosage des IgG totales, , i il tun i il ticil utilisant un anti-sérum spécifique dirigé contre la protéine C3c sur plaques NOR-PARTIGEN
3) Résultats Les résultats obtenus figurent dans le Tableau VIII ci-dessous. Chaque résultat est la moyenne de deux déterminations.
TableaVIII
échantillon Concentration en C3c (g/l) Adsorption de C3 (%) Témoin S 1,2 T0 1,2 0 T1 1,2 0 T2 1,0 18,7 T3 1,0 18,7 T14 1,0 18,7
Ces résultats montrent que la concentration de la protéine C3c est la même dans le sérum et dans le plasma à TO (1,2 g/l). ils montrent également que la concentration en protéines C3c diminue de 1,2 g/l à 1, 0 g/l après 30 mn de contact avec la résine BIOTYR 1, puis reste constante. Après 60 minutes de contact d'un plasma sain sur la résine BIOTYR 1, celui-ci est donc peu décomplémenté.
La même expérience réalisée sur un plasma HAS t après 180 minutes de contact avec la résine BIOTYR 4, met en évidence, là encore, une faible décomplémentation du plasma d'hémophile, soit de l'ordre de 12 %.
Ces taux de décomplémentation ne sont pas préjudiciables pour le patient.
En conclusion, l'ensemble de tous ces résultats montre que les résines de formule (I) conforme à l'invention permettent d'éliminer très efficacement les anticorps anti-FVIII de plasmas d'hémophiles ayant de forts taux en anticorps antiFVIII, sans observer de décomplémentation préjudiciable et sans démunir le plasma traité d'une quantité significative d'IgG.
Ces cellules sont irradiées par des UVA et UVB. La viabilité cellulaire permet d'estimer l'effet protecteur du principe actif selon présente invention.
Fibroblastes : l'activité anti-radicalaire est de 30, 68 et 86% respectivement lors de la mise en contact avec 1, 3 et 5 % de principe actif. Kératinocytes : l'activité anti-radicalaire est de 53, 90 100% respectivement lors de la mise en contact avec 1, 3 et 5% de principe actif. principe actif selon la présente invention permet d'agir à l'encontre des trois facteurs simultanément et avec des niveaux tout à fait significatifs.
Le principe actif peut être intégré dans des compositions cosmetiques à raison de 0,1 % à 10%.
Un procédé de lutte contre le vieillissement cutané consiste à disposer sur la peau une composition cosmétique intégrant entre 0,1% et 10% de principe actif selon la présente invention.
La, présente invention concerne une machine faisant partie d'un dispositif permettant de rècupèrer des nappes de fioul dispersées sur la mer et éventuellement en faible immersion.
Les systèmes de pompages actuellement employés comportent des barrages flottants retenue,longs à mettre en place et non efficaces par mer houleuse.Les pompes flottantes utilisées ne fonctionnent pas avec du fioul épais tel que celui de I'ER1$A en décembre 1999.
Le dispositif selon l'invention ne comporte pas de barrage flottant-de r 'tension.11 peut être mis en service dès son arzlwèe sur les lieux de la pollution ,nfeme par mer houleuse.Si les nappes sont dis persèes,on effectuera d'abord un ratissage de la surface de la mer pour concentrer le produit à rècupêrer avant le ramassage.
Le dispositif se présente de la façon suivante figure 1 et figure 2 .Un remorqueur (1) tire la machine de récupération (2) qui fait l'obj et de l'invention et le tanker (3) de stockage du fioul recupèrè.
La machine de récupération (2) est attelée au remorqueur (1) par une articulation (4) permettant le roulis et le tanguage relatifs des élé ments (1) et (2) et servira aussi d'appui à (2).
La machine (2) repose sur deux flotteurs latéraux (5) et(6) figure à la façon d'un CATAYARAN ainsi que sur un flotteur (7) arrière. Pour la rècupèration du fioul sur la mer ,la machine (2) est équipée de deux volets latéraux (8) et (9) manoeuvrables à l'aide de vérins hydrauliques .Ces volets sont articules sur des parois verticales (16) et (17) figure 2 , qui retiennent le fioul et le dirige dans le puit ouvert (10) qui est appuyé contre le flotteur arriéré (7).
Pour rècupèrer le.fioul en faible immersion ,on utilisera un volet(15) escamotable qui remonterait le fioul dans le puit (10) .
Le relevage du fïoul se fait à l'aide d'un ensemble de godets (11) voir figures 1-2 -3 - Le fonctionnement est le suivant . Deux chaines latérales (1) et (2) figure 3 sont reliées entres elles par les godets (11) .Leur forme permet une inclinaison d'environ 45 (figure 1) des draines de façon à obtenir une surface à peu près horizontale de partie ouverte du godet servant au ramassage figure 3.
L'entrainement des chaines est assuré par deux roues dentées (3) et (4) fixées sur un même arbre(5) lui même accouplé à un moteur hydraulique (12) à vitesse variable . Le groupe (12 bis) figure 2 fournissant l'huile hydraulique sous pression se trouvera, sur le remorqueur (1) ,ceci pour alléger la machine (2) Le fïoul ainsi récupéré par les godets (11) serait dèversè dans une cuve (13) placée à l'arrière du remorqueur .La partie supérieure de la cuve serait recouverte par une grille à grosses mailles de façon à retenir les débris qui flottent sur la mer tels que bois ,plastiques etc.... Le fioul serait rèchauffè par des serpentins dans lequels cir culerait de la vapeur (pour éviter les risques d'incendie ) de façon à le rendre pompable avec des moyens habituels . Un flexible (14) ali menté par la pompe (19) figure 2 transvaserait alors le fioul dans le tanker (3) ,remorqué à l'arriéré de la machine (2).
Un tuyau (18) équipé d'une vanne figure 1 et placé au niveau inférieur de la cuve (13) ,permettrait de purger l'eau qui ne manquerait pas de se déposer .Le fioul qui repartirait éventuellement à la mer serait pïègè par l'ensemble des volets (8) et (9) ainsi que des panneaux (16) et (17) Une application pourrait 'être la suivante pour récupérer environ 1500 tonnes de fioul par 24heures, il faudrait: -Disposer ' un remorqueur suffisament puissant tracter l'ensemble de l'installation.
- Avoir des godets de capacité unitaire de 20 litres Le moteur hydraulique (12) doit permettre une vitesse de défilement de l godet toutes les 3 secondes à 1 godet par seconde. A la vitesse maximale le débit serait de 72m2> par heure soit 1728m3 en 24 heures,ce qui corres pond approximativement à 1500 tonnes par 24 heures.
- Les godets seraient à réaliser en tôle d'acier mi-dur recouverts d'une pellicule anti-adhèsïve au fioul ou en acier inox. Ils seraient percés de trous pour éliminer une partie de l'eau .
EXEMPLE 2 : CLONAGE POSITIONNEL DU GENE CAUSAL DU PHENOTYPE DE SENSIBILITE DANS LA PLANTE MUTANTE HXC2 : RESTRICTION DE INTERVALL DEFINI PAR LES MARQUEURS mi413 et atpox.
1. Isolement de recombinants entre les marqueurs mi413 et atpox : Le positionnement d'un locus muté par une approche de clonage positionnel n'est défini que par l'existence d'événements de recombinaison génétique entre le génotype des individus F2 au locus considéré, accessible par l'analyse de la ségrégation du caractère mutant dans les lignées F3, et le génotype de ces mêmes individus pour des marqueurs moléculaires liés à la mutation. La restriction de l'intervalle physique définissant la position d'une mutation implique donc l'identification d'événements de recombinaison suffisamment proches du locus muté.
L'isolement de ces recombinants aléatoires ne peut se faire qu'en augmentant la taille de la population en ségrégation.
La cartographie du locus hxc2 avait été réalisée sur une population de taille réduite (78 individus) ; par conséquent, la nécessité d'isoler de nouveaux recombinants pour le clonage positionnel du gène a été envisagée bien avant sa localisation entre les marqueurs mi413 et atpox. L'isolement de recombinants aléatoires a donc été abordé par une approche de génétique inverse, après avoir localisé le locus HXC2 dans une fenêtre de 13 cM, entre les marqueurs GL-1 et m249.
Le mutant hxc-2 a été isolé dans un fond génétique Col-gl-1. La mutation récessive, gl-1, localisée en position centromérique sur le chromosome III est responsable de l'absence de différentiation de cellules épidermiques en trichomes et confère le phénotype glabre. Ce marqueur phénotypique, hérité du parent mutant dans la population, coségrège avec la mutation hxc-2 et constitue l'une des limites supérieure du locus. La présence de ce marqueur phénotypique a été mise à profit pour l'isolement de recombinants entre les marqueurs gl-1 et m249. Au sein d'une population F2 résultant du croisement entre une plante mutante Col-gl-1- hxc-2 et une plante sauvage Ws-0, 367 individus de phénotype glabre
(ayant hérité ce caractère du parent mutant) ont été sélectionnés. L'ADN de ces individus, présentant un génotype homozygote Col-0 au locus GL-1, a été isolé, digéré par EcoRI et soumis à une analyse RFLP par le marqueur m249 qui constituait la limite inférieure du locus HXC2. 61 individus présentant un profil homozygote Ws-0 ou hétérozygote pour ce marqueur, résultant respectivement d'un double et d'un simple événement de recombinaison entre les marqueurs gl-1 et m249 ont été sélectionnés, autofécondés et soumis à un second crible par les marqueurs mi413 et atpox. Seuls 8 individus recombinants entre ces deux derniers marqueurs ont été conservés et le phénotype des lignées F3 correspondantes a été testé en réponse à l'inoculation par la souche 147. Ce crible phénotypique a permis de déterminer le génotype de chaque individu recombinant, au locus HXC2, de manière codominante. Les événements de recombinaison de ces 8 individus, R80, R139, R148, R269, R273, R284, R287 et R313 ajoutés à ceux des lignées H25 et Wh72, issues de la population de cartographie initiale, ont été utilisés pour préciser la position du locus HXC2.
Il. Production de marqueurs moléculaires dans l'intervalle défini par les marqueurs mi 413 et atpox.
Au delà de l'identification de recombinants dans l'intervalle défini par les deux marqueurs flanquant le locus d'intérêt, le positionnement précis du locus par rapport à ces événements de recombinaison demande par ailleurs d'augmenter le nombre et donc, la résolution des marqueurs moléculaires dans cet intervalle.