INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Exemple 50 Une solution d'ester tertio-butylique d'acide (benzo[1,3]dioxol-5-yloxyméthyl)-4-(4-fluorophényl)- pipéridine-1-carboxylique (4,10 g) dans du dichlorométhane a été traitée avec une solution d'acide méthanesulfonique (0,97 g) dans du dioxanne (20 ml) à 22 C. Le mélange réactionnel a été agité à cette température pendant 48 heures, puis de l'acide méthanesulfonique (1 ml) a été ajouté et le mélange réactionnel a été chauffé au reflux pendant 5 heures.
Le mélange a été refroidi à température ambiante (22 C) et laissé au repos pendant 22 heures, puis évaporé à un volume d'approximativement 10 ml sous pression réduite. Du propane- 2-ol (60 ml) a été ajouté et la solution a été ensemencée avec du méthanesulfonate de paroxétine (20 mg) et a été agitée à température ambiante pendant 1 heure. Le méthanesulfonate de paroxétine a été séparé par filtration, lavé avec du propane-2-ol froid (5 ml) et séché sous vide.
Quantité obtenue 2,38 g.
formule (VII) dans laquelle : R10, R11, R12 et R13, identiques ou différents, représentent des radicaux aliphatiques, alicycliques, ou arylaliphatiques contenant de 1 à 20 atomes de carbone ou des radicaux hydroxyalkylaliphatiques inférieurs, ou bien R10, R11, R12 et R13, ensemble ou séparément, constituent avec les atomes d'azote auxquels ils sont rattachés des hétérocycles contenant éventuellement un second hétéroatome autre que l'azote ou bien R10, R11, R12 et R13 représentent un radical alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié substitué par un groupement nitrile, ester, acyle, amide ou -CO-O- R14-D ou-CO-NH- R14-D où R14 est un alkylène et D un groupement ammonium quaternaire ; A1 et B1 représentent des groupements polyméthyléniques contenant de 2 à 20 atomes de carbone pouvant être linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, et pouvant contenir, liés à ou intercalés dans la chaîne principale, un ou plusieurs cycles aromatiques, ou un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre ou des groupements sulfoxyde, sulfone, disulfure, amino, alkylamino, hydroxyle, ammonium quaternaire, uréido, amide ou ester, et X- désigne un anion dérivé d'un acide minéral ou organique; A1, R10 et R12 peuvent former avec les deux atomes d'azote auxquels ils sont rattachés un cycle pipérazinique ; en outre si A1 désigne un radical alkylène ou hydroxyalkylène linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, B1 peut également désigner un groupement-(CH2)n-CO-D-OC-(CH2)n- dans lequel D désigne : a) un reste de glycol de formule : -O-Z-O-, où Z désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié ou un groupement répondant à l'une des formules suivantes : -(CH2-CH2-O)x-CH2-CH2- -[CH2-CH(CH3)-O]y-CH2-CH(CH3)- où x et y désignent un nombre entier de 1 à 4, représentant un degré de polymérisation défini et unique ou un nombre quelconque de 1 à 4 représentant un degré de polymérisation moyen ;
Des polymères de ce type sont notamment décrits dans les brevets français 2. 320.330, 2. 270.846, 2. 316.271, 2. 336.434 et 2. 413.907 et les brevets US 2. 273.780, 2. 375.853, 2. 388.614, 2. 454.547, 3. 206.462, 2. 261.002, 2. 271.378, 3. 874.870, 4. 001.432, 3. 929.990, 3. 966.904, 4. 005.193, 4. 025.617, 4. 025.627, 4. 025.653, 4. 026.945 et 4.027.020.
On peut utiliser plus particulièrement les polymères qui sont constitués de motifs récurrents répondant à la formule (VIII) suivante : dans laquelle Rio, R11, R12 et R13, identiques ou différents, désignent un radical alkyle ou hydroxyalkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone environ, n et p sont des nombres entiers variant de 2 à 20 environ et, X- est un anion dérivé d'un acide minéral ou organique.
formule dans laquelle : R15, R16, R17 et R18, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, éthyle, propyle, ss-hydroxyéthyle, p- hydroxypropyle ou -CH2CH2 (OCH2CH2)pOH, où p est égal à 0 ou à un nombre entier compris entre 1 et 6, sous réserve que R15, R16, R17 et R18 ne représentent pas simultanément un atome d'hydrogène, r et s, identiques ou différents, sont des nombres entiers compris entre 1 et 6, q est égal à 0 ou à un nombre entier compris entre 1 et 34, X désigne un atome d'halogène, A désigne un radical d'un dihalogénure ou représente de préférence -CH2-CH2O-CH2-CH2-.
Référence de Conversion Mn polymolécularité l' échantillon Temps (h) (g/mole) 1-1 1 0 - 1-2 2 0,05 6000 1,6 1-3 3 0,15 14500 1,5 1-4 4 0,34 27000 1,4 1-5 5 0,46 30500 1,4 1-6 6 0,58 34400 1,4 1-7 7 0, 66 37200 1, 4 1-8 8 0,73 39000 1,35 1-9 9 0,82 42500 1,35
Le polymère obtenu apparaît monomodal par GPC EXEMPLE 2 (COMPARATIF) . Synthèse de polystyrène par polymérisation radicalaire contrôlée en présence de radicaux stables et de monomère multifonctionnel introduit dès le départ de la polymérisation.
Dans un réacteur en verre de 1 litre chauffé par circulation d'huile au sein d'une double enveloppe, sont introduits à température ambiante : 210 g d'éthylbenzène, 490 g de styrène, 0,6615 g de peroxyde de dicumyle, 0,843 g de 4 hydroxy-(2,2',6,6' tetraméthyl)pipéridinyloxy et 22,96 g de triméthylolpropane triméthacrylate . La température de la double enveloppe est portée à 130 C afin d'avoir une température matière de 120 C Le mélange réactionnel, sous balayage d'azote, est agité par l'intermédiaire d'une ancre tournant avec une vitesse de rotation de 200 révolutions par min Après 5 heures de polymérisation, le milieu de polymérisation est insoluble Le polymère est réticulé. Un prélèvement est mis en solution dans du THF seuls trois pourcent de la masse du prélèvement sont solubles et sont analysés par GPC. L'analyse montre que la fraction soluble correspond à des oligomères (masse moléculaire moyenne en nombre inférieure à 2000 g/mol) EXEMPLE 3 : Synthèse de polystyrène par polymérisation radicalaire contrôlée en présence de radicaux stables et d'agent de couplage introduit au cours de la polymérisation: rapport molaire FAC (AC)/(CM) = 4.
Dans un réacteur en verre de 1 litre chauffé par circulation d'huile au sein d'une double enveloppe, sont introduits à température ambiante : 210 g d'éthylbenzène, 490 g de styrène, 0,6615 g de peroxyde de dicumyle et 0,843 g de 4 hydroxy-(2,2',6,6' tetraméthyl)pipéridinyloxy. La température de la double enveloppe est portée à 130 C afin d'avoir une température matière de 125 C. Le mélange réactionnel, sous balayage d'azote, est agité par l'intermédiaire d'une ancre tournant avec une vitesse de rotation de 200 révolutions par min.
Après 8 heures de polymérisation, une conversion de 0,71 est obtenue, et 4,32 g de triméthylolpropane triméthacrylate dilués dans 5g d'éthylbenzène sont alors introduits à chaud dans le mélange réactionnel sans que la réaction de polymérisation ne soit interrompue. La réaction de polymérisation continue à 125 C pendant 10 heures.
Les résultats pour l'exemple 3 sont donnés dans le tableau suivant :
Référence de Temps (h) Conversion Mn (g/mole) polymolécularité l' échantillon 3-1 4 0,34 26800 1.4 3-2 5 0,47 31100 1 4 3-3 6h30 0,58 36200 1.4 3-4 7 0,63 37000 1.4 3-5 8 0,71 37500 1.4 3-6 18 0,85 47000 2
La courbe GPC apparaît bimodale en raison d'un épaulement sur le flan du pic principal.
EXEMPLE 4 : Synthèse de polystyrène bimodal par polymérisation radicalaire contrôlée en présence de radicaux stables et d'agent de couplage introduit au cours de la polymérisation- rapport molaire FAC.(AC)/(CM) = 10 Dans un réacteur en verre de 1 litre chauffé par circulation d'huile au sein d'une double enveloppe, sont introduits à température ambiante : 210 g d'éthylbenzène, 490 g de styrène, 0,6615 g de peroxyde de dicumyle et 0,843 g de 4 hydroxy-(2,2',6,6' tetraméthyl)pipéridinyloxy. La température de la double enveloppe est portée à 130 C afin d'avoir une température matière de 125 C. Le mélange réactionnel, sous balayage d'azote, est agité par
l'intermédiaire d'une ancre tournant avec une vitesse de rotation de 200 révolutions par min.
Après 8,50 heures de polymérisation, une conversion de 0,72 est obtenue et 10,71 g de triméthylolpropane triméthacrylate dilués dans 5g d'éthylbenzène sont alors introduits à chaud dans le mélange réactionnel.
La réaction de polymérisation continue à 125 C pendant 15 heures.
Les résultats pour l'exemple 4 sont donnés dans le tableau suivant
Référence de Temps (h) Conversion Mn (glmole) polymolécularité l' échantillon 4-1 2h20 0,17 18200 1. 4 4-2 3h40 0,30 26500 1. 35 4-3 4h30 0,44 33300 1.35 4-4 6 0,55 35400 1.4 4-5 7 0,63 38800 1. 4 4-6 8h30 0,69 38600 1. 4 4-7 23 0,80 63600 5.35
Pour l'échantillon 4-7, l'analyse GPC montre la présence de deux populations, une de masse moléculaire similaire à celle de l'échantillon 4-6 (Mn = 38600 et Mw = 55200 g/mol) et une autre de haut poids moléculaire (Mn = 710000 et Mw = 930000 g/mol) la prise en compte des deux populations donne une Mn de 63600 et une Mw de 339400 g/mol. La courbe GPC présente deux maximums.
EXEMPLE 5 : Synthèse de polystyrène bimodale par polymérisation radicalaire contrôlée en présence de radicaux stables et d'agent de couplage introduit au cours de la polymérisation: rapport molaire FAC (AC)/(CM) = 20.
Le substrat à base d'Alizarine permet de détecter une activité pour sept (7) espèces sur huit (8) testées, alors que le 6-Chloro-3-indolyl-P-D-glucoside ne permet de détecter une activité que pour six (6) de ces espèces. D'autre part, pour deux souches (Bacillus thuringiensis et Listeria seeligeri) l'activité est détectée plus précocement avec le substrat à base d'Alizarine. Ces substrats sont donc, d'une part, utilisables en milieu liquide et, d'autre part, plus sensibles que les substrats à base d'Indoxyl.
Exemple 7 : de l'Alizarine-1-ss-D-glucoside et de l'Alizarine- 2--D-glucoside en milieu solide.
Dans le milieu, contenant base Columbia à une concentration de 46,37 g/l, a été ajouté soit * de l'Alizarine-2-ss-D-glucoside à 0,05 g/1 et du Citrate de Fer Ammoniacal à 0,05 g/1, * de l'Alizarine-1-ss-D-glucoside à 0,05 g/1 ou 0,1 g/1 et, pour ces deux concentrations, du Citrate de Fer Ammoniacal à 0,05 g/1, * du 6-Chloro-3-indolyl-p-D-glucoside à 0,15 g/1 sans Citrate de Fer Ammoniacal.
Ces quatre milieux ont été répartis en boîtes de Pétri à raison de 20 ml de milieu par boîte. Des micro-organismes ont été ensemencés sur ce milieu par isolement en trois cadrans à partir d'une suspension à 0,5 McFarland. Les boîtes ont été incubées à 37 C pendant 48 heures.
Les colonies formées ont été examinées visuellement après 18, 24 et 48 heures d'incubation. La coloration de ces colonies ainsi que l'intensité de cette coloration ont été notées. Les résultats sont présentés dans le tableau 7 ci-dessous :
Temps 6-Chloro-3-indolyl-p-D-glucoside 2 -Alizarine-p-D-glucoside
Souches d'Incubation Couleur Intensité Couleur Intensité Escherichia coli 18 H 24 H - 115 48 H - - Citrobacter koseri 18 H Rose 0. 5 Mauve 2 24 H Rose 1 Mauve 3 059 48 H Rose 2 Mauve 3.5 Enterococcusfaecalis 18 H Rose 1.5 Pourpre 3. 5 24 H Rose 2 Pourpre 4 117 48 H Rose 2.5 Pourpre 4 Klebsiella 18 H Rose 2 Pourpre 3.5 pneumoniae 24 H Rose 2. 5 Pourpre 4 023 48 H Rose 3 Pourpre 4 Proteus mirabilis 18 H - - 24 H - - 008 48 H Staphylococcus 18 H epidermidis 24 H 024 48 H - -
Temps 1 -Alizarinc-p-D-glucoside à 0.05 g/1 1-Alizarine-p-D-glucoside à 0.1 g/1
Souches d'incubation Couleur Intensité Couleur Intensité Escherichia 18 H coli 24 H - - 115 48 H - - Citrobacter 18 H Mauve 1.5 Mauve 2.5 koseri 24 H Mauve 2 Mauve 3 059 48 H Mauve 2.5 Mauve 4 Enterococcus 18 H Pourpre 3. 5 Pourpre 3. 5 faecalis 24 H Pourpre 4 Pourpre 4 117 48 H Pourpre 4 Pourpre 4 Klebsiella 18 H Pourpre 2.5 Pourpre 3 pneumoniae 24 H Pourpre 3 Pourpre 4 023 48 H Pourpre 3.5 Pourpre 4 Proteus 18 H - - - mirabilis 24 H- 008 48 H- - Staphylococcus 18 H epidermidis 24 H 024 48 H - -
Tableau 7 : Comparaison de l'Alizarine-1-ss-D-glucoside et de l'Alizarine-2- ss-D-glucoside en milieu solide Le symbole - dans ce tableau 7 signifie une absence de coloration. Les souches ainsi testées, n'ayant que des résultats négatifs, font office de contrôle négatif.
A la même concentration 0,05 g/l, les deux substrats ne permettent pas d'obtenir les mêmes intensités de coloration pour deux (2) souches sur trois (3) présentant une activité. L'Alizarine-2-ss-D-glucoside est légèrement plus sensible que l'Alizarine- 1-p-D-glucoside. Mais à 0,1 g/1 l'Alizarine-1-p-D-glucoside permet d'obtenir des intensités de coloration supérieures à celles observées avec l'Alizarine- 2-p-D-glucoside.
D'après ce tableau il est aussi possible de remarquer que les intensités obtenues avec l'Alizarine-1-p-D-glucoside à 0,05 g/1 sont, pour toutes les souches testées, supérieures à celles observées avec le 6-Chloro-3-indolyl--D-glucoside dont la concentration est trois fois supérieure à celle de l'Alizarine-1-ss-D-glucoside.
Les substrats à base d'Alizarine sont donc plus sensibles que les substrats à base d'Indoxyl.
Le choix entre l'Alizarine-1-p-D-glucoside et l'Alizarine-2--D-glucoside pourra être dicté par d'autres critères, tels que le coût de synthèse, la spécificité dans l'application, la stabilité, etc.
POINTS PARTICULIERS Une méthode de visualisation et donc d'identification d'espèces bactériennes, en colonies, s'effectue sur un milieu à base d'agar par incorporation d'au moins un substrat tel que synthétisé ci-dessus en présence de faibles quantités d'au moins un cation idoine. Les colonies révélées forment alors des entités très colorées (rouge, pourpre, bleu, etc. ) selon le choix du substrat et du cation qui y est associé. Lorsque ce
ratio entre le substrat et le cation existe, il est compris entre 1/100 et 100/1, préférentiellement entre 1/10 et 10/1, et encore plus préférentiellement entre 1/2 et 2/1.
Ex25 N'N -0 285,3 286 332,7
Ex26 5 Br 368,2 368 364,6
##N Ex27 N#N#O# 258,2 259 nd ##N
Exemples Formule Masse Masse #max moléculaire molaire (éthanol) théorique obtenue O# Ex28 N#N# 241,3 242 337,5
0-" N Ex29 N JJP 237,3 238 308 cf 7. ~
Ex30 N#N 224,3 225 293 ##N Ex31 N#N 239,3 240 326 ##N ### Ex32 N#N 237,3 238 312 O+N#O Ex33 N# 268,3 269 342 N#
EXEMPLES 34 A 53 : Tous les composés des exemples 34 à 53 qui sont décrits dans le tableau ci-dessous ont été synthétisés selon le mode opératoire décrit dans l'exemple 1 en partant de l'éthyl-4hydroxybenzimidate . Les masses moléculaires des différents composés ont été déterminées à partir des spectres de masse des ions positifs enregistrés en ionisation electrospray sur un spectromètre de masse PLATFORM # (Micromass).. Leurs spectres d'absorption ont été réalisés dans les mêmes conditions que l'exemple 1.
Exemples Formule Masse Masse A.max moléculaire molaire (éthanol) théorique obtenue
N fi\\-, R Ex34 N 0 308,3 339,8 Ex35 N, IV i N 229,2 230 320,8 N fiN Ex36 oeo N N) 229,2 230 320,8 Ex37 0 lf'' 6" 341,4 342 354,2
Eux38 N "r- J=\ 353,8 354 323,2 Ex38 . N' ' ( 353,8 354 323,2
O# CI N #N
Ex39 'IV 292,3 293 344,6
N #
Ex40 oe N N N 228,3 229 342,2 0 Ex41 N N 292,3 293 344,6 Ex41 IV , 292,3 293 344,6
Le dispositif des figures 2A et 2B permet ainsi de mesurer, pour section quelconque dans le plan de Fourier P1, les caractéristiques de répartition spatiale et spectrale même temps. Dans l'exemple considéré, cette section est une section d'azimut constant. Lorsque les moyens de sélection permettent de sélectionner une section droite de l'image du plan P1, cette section droite passant par l'axe optique Z du dispositif (ce qui est de l'exemple considéré), il est possible de faire tourner l'objet et donc la zone de mesure 4 autour axe optique Z de façon à pouvoir étudier différentes sections droites de l'image contenue dans le plan P1, correspondant à différents azimuts, et ainsi reconstruire la réponse de la zone de mesure 4 dans tout le demi-espace d'analyse.
Ceci est schématiquement illustre sur la figure 3 où l'on voit l'objet 2 disposé sur support 34 muni de moyens qui sont symbolisés par la flèche 36 permettent de faire tourner l'objet 2 et donc la zone de mesure 4 autour de l'axe optique Z du dispositif de mesure 38 que l'on a décrit en faisant reférence aux figures 2A et 2B.
I1 est également possible de déplacer les moyens de sélection 16 dans le plan de Fourier P1 ou dans le plan P2 mentionné plus haut, de façon à reconstruire par balayage le comportement de la zone de mesure pour tous les angles 6 et cp.
De préférence, ce déplacement est une rotation, autour de l'axe optique Z, de la fente 16 qui placée, comme on l'a vu, dans le plan P1 ou dans le plan P2.
Comme on l'a symbolisé sur la figure 2A, cette fente est alors mise en rotation par des moyens mécaniques adaptés 40, comprenant par exemple un moteur ainsi que des moyens d'entraînement mécaniques de la fente en rotation et des moyens électroniques de commande associés. Pour garantir que la dispersion de la lumière se fait orthogonalement à la section droite, les moyens de dispersion 18 doivent alors être liés en rotation (ce qui est réalisable par l'homme du métier) avec les moyens de sélection (la fente 16 dans l'exemple considéré). De préférence, afin de simplifier l'analyse dans le plan du capteur 14, on ajoute au dispositif des figures et 2B un dispositif dé-rotateur 42 que l'on place le chemin optique de la lumière de façon que l'on puisse conserver une même orientation des données recueillies par le capteur 14 quelle que soit la position angulaire de la fente 16.
On insère ce dispositif dé-rotateur 42 après cette fente 16 afin que ce dispositif dé-rotateur puisse jouer son rôle.
Lorsque les moyens de sélection (la fente 16 dans l'exemple considéré) sont disposés au niveau du plan P1, on place le dispositif dé-rotateur 42 entre l'objectif 8 et l'objectif 12 ou entre cet objectif 12 et les moyens de dispersion 18. Lorsque ces moyens de sélection sont placés au niveau du plan P2, on place le dispositif rotateur 42 entre ces moyens de sélection et les moyens de dispersion 18. Dans le cas où l'on utilise ce dispositif dé-rotateur 42, il n'est plus nécessaire de lier rotation ces moyens de dispersion avec les moyens de sélection (la fente 16 dans l'exemple considéré) car ces moyens de dispersion gardent une position fixe par rapport au capteur 14 du fait de la dé-rotation.
Ces moyens de dispersion de lumière 18 peuvent être fondés sur l'utilisation d'un ou de plusieurs réseaux de diffraction ou d'un ou de plusieurs prismes.
Un exemple de tels moyens de dispersion de lumière est schématiquement représenté sur la figure 4 et comprend successivement un objectif convergent , réseau de diffraction 46 et un autre objectif convergent 48. On voit sur cette figure 4 l'axe optique Z dispositif de mesure utilisant cet exemple moyens de dispersion. On notera que, dans cet exemple, le capteur 14 ne se trouve pas sur l'axe Z.
On précise que la figure 4 montre l'exemple des moyens de dispersion dans le plan où l'on observe la dispersion. Ce plan est perpendiculaire au plan de sélection considéré â la sortie du dispositif dé- rotateur, lorsque ce dernier est utilisé, ou considéré la sortie de la fente 16 lorsque ce dispositif dé- rotateur n'est pas utilisé.
On voit que l'image 50 de la fente 16 est limatée (le faisceau divergent issu de cette fente étant transformé en un faisceau de rayons parallèles) par l'objectif convergent 44.
Ce faisceau de rayons parallèles est envoyé au réseau de diffraction 46 (mais un prisme en matériau dispersif pourrait être utilisé à la place de ce réseau de diffraction). Le faisceau de rayons parallèles est alors dispersé en une multiplicité de faisceaux dont les longueurs d'onde sont différentes.
Ces faisceaux de longueurs d'onde différentes sont focalisés grâce à l'autre objectif convergent 48, les rayons lumineux de même longueur d'onde étant focalisés en un même point. L'image ainsi obtenue est alors recueillie par le capteur 14.
On revient maintenant sur le dispositif dé- rotateur 42. L'objectif de ce dispositif dé-rotateur est d'effectuer une rotation de l'axe d'une image autour de son axe optique. Son utilisation dans le dispositif de mesure décrit en faisant référence aux figures et 2B permet de réaligner les axes de l'image obtenue sur le capteur 14 quelle que soit la position angulaire des moyens de sélection 16.
En pratique, pour fabriquer tel dispositif dé-rotateur, on utilise des prismes des miroirs.
On connaît divers dispositifs dé-rotateurs. A ce sujet on consultera par exemple le livre W.J. Smith intitulé Modern Optical Engineering ). A titre purement indicatif et nullement limitatif, pour réaliser un tel dispositif dé-rotateur on peut utiliser des prismes de type Dove, Abbe sans toit ( Roofless- Abbe ou Pechan.
sélénium _ 10 %; soit 23,5 mg/gélules.
Exemple 3: Effets de la composition sur la protection vis-à-vis de xénobiotiques et du renforcement des défenses immunitaires de la peau démontré dans une
étude clinique en double aveugle contre placebo.
2 groupes de 20 volontaires sains incluant des sujets à peau sensible (minimum 8) ont
été inclus après avoir signé un consentement libre, éclairé et express.
ler groupe (20 volontaires): prise de 2 capsules contenant les actifs per os par jour
pendant 90 jours consécutifs (3 mois).
2ème groupe (20 volontaires): prise de 2 capsules per os par jour du placebo (sans
1 5 ingrédients actifs) pendant 90 jours (3 mois).
Mesures La Dose Erythermale Minimale (DEM), ou plus faible rougeur perceptible avec des bords bien nets, a été déterminée sur le dos des volontaires participant à l'étude selon les recommandations du Colipa, avant, 1 mois et 3 mois après le début de la
supplémentation orale.
La capacité conférée par cette dernière à renforcer la protection apportée par une crème anti-solaire (Facteur de Protection Solaire 16) a de plus été évaluée avant ainsi qu'après les trois mois de traitement et comparée à l'efficacité de la crème anti-solaire
seule.
Biopsies Des prélèvements cutanés superficiels ont été réalisés sur le bas du dos de 10 volontaires de chaque groupe à l'aide d'un bistouri circulaire (punch) de 4 mm de
diamètre, 24 heures après irradiation à I DEM.
Les biopsies ont ensuite été fixées au Bouin, inclues en paraffine, puis coupées en série afin d'être traitées par immunohistochimie pour mettre en évidence les cellules de Langerhans (utilisation de l'anticorps monoclonal IgGl clone 010 de souris, du laboratoire Immunotech, qui reconnaît un marqueur de membrane spécifique de la
Mesure de l'effet soft-focus : Un film de chaque formule, d'épaisseur contrôlée, à savoir 10 m, a été étalé sur une lame de quartz à creuset. a ) mesure de Th : Th est la transmittance hémisphérique : elle est définie par le rapport entre l'intensité lumineuse reçue par l'échantillon testé et l'intensité lumineuse transmise par cette échantillon et restituée par cet échantillon dans toutes les directions.
Elle est mesurée à l'aide d'un spectrophotomètre VARIAN Cary 300 et d'une sphère d'intégration de marque Labsphere placée derrière l'échantillon, selon le protocole suivant : on utilise le spectrophotomètre en mode de transmission diffuse, pour un spectre de 400 à 700 nm. On se place en mode transmission %T, à une vitesse de balayage à 240 nm/mn, en double reverse . On fait une baseline correction en faisant la mesure d'une lame vide de référence. Ceci donne la valeur maximale de l'intensité qui peut être transmise. On place la lame de quartz contenant l'échantillon dans le compartiment de mesure. On mesure Th. b ) mesure de Td : Td est la transmittance directe : elle est définie par le rapport entre l'intensité lumineuse reçue par l'échantillon et l'intensité lumineuse restituée par cet échantillon dans le même axe. Td est donc une partie de Th.
Elle a été mesurée à l'aide du même spectrophotomètre que pour Th selon le protocole décrit suivant : on utilise le spectrophotomètre en mode de transmission directe, pour un spectre de 400 à 700 nm. On se place en mode transmission %T, à une vitesse de balayage 240 nm, en mode double. On place une lame de quartz vide dans le compartiment de référence et la lame de quartz contenant l'échantillon dans le compartiment de mesure. On mesure Td.
Les quantités Th et Td sont les moyennes des valeurs spectrales mesurées.
Plus le rapport Th/Td se rapproche d'une valeur comprise entre 1 et 3, tout en tendant vers 2, avec une valeur pour Th proche de 100%, meilleur est l'effet softfocus et plus transparente est la composition.