INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Natl Acad. Sei. USA (1985) 85 : 4397-4401). Dans un autre mode de réalisation, on peut construire une grille de sondes oligonucléotidiques comprenant la séquence nucléotidique de Rdcsfl ou ses fragments pour effectuer un criblage efficace de, par exemple, mutations génétiques. Les méthodes de la technologie des grilles sont bien connues et ont un domaine d'application très général ; on peut les utiliser pour traiter diverses questions en génétique moléculaire et notamment l'expression des gènes, les liaisons génétiques, et la variabilité génétique (se reporter par exemple à M. Chee et coli., Science, Vol. 274, pages 610-613 (1996)).
Les analyses de diagnostic offrent un procédé pour le diagnostic d'une maladie ou la détermination d'une susceptibilité à cette maladie par détection d'une mutation dans le gène Rdcsfl par les méthodes décrites. En outre, de telles maladies peuvent être diagnostiquées par des méthodes comprenant la détermination, dans un échantillon obtenu chez un sujet, d'une expression anormale de Rdcsfl. L'expression peut être mesurée au niveau de l'ARN par une quelconque des méthodes bien connues dans la technique de la quantification des polynucléotides comme, par exemple, les méthodes de l'amplification des acides nucléiques, par exemple la PCR, la RT-PCR, la protection à RNase, la méthode du Northern Biot et autres méthodes d'hybridation. Les techniques d'analyse que l'on peut utiliser pour déterminer les taux d'une protéine, par exemple du polypeptide de la présente invention, dans un échantillon obtenu chez un hôte sont bien connues de l'homme de l'art. De telles méthodes d'analyse sont notamment les dosages radioimmunologiques, les analyses par fixation compétitive, l'analyse de Western Biot et les analyses ELISA.
Ainsi, selon un autre de ses aspects, la présente invention concerne un kit de diagnostic comprenant : - un polynucléotide de la présente invention, de préférence la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 1 ou un de ses fragments ; - une séquence nucléotidique complémentaire de celle de (a) ; - un polypeptide de la présente invention, de préférence le polypeptide SEQ ID ? : 2 ou un de ses fragments ; ou
- un anticorps à un polypeptide de la présente invention, de préférence au polypeptide SEQ ID ? : 2.
On notera que dans un kit quelconque de ce type, (a), (b), (c) ou (d) peut comprendre un composant substantiel. Un tel kit sera utile dans le diagnostic d'une maladie ou d'une susceptibilité à une maladie, en particulier à une rétinite pigmentaire, une dégénérescence macula ire sénile, un syndrome de Bardet-Biedel, un syndrome de Bassen-Kornzweig, une maladie de Best, un choroïdérémie, une atrophie gyrée, une amourose congénitale, un syndrome de Refsum, une maladie de Stargardt et un syndrome d'Usher. Les séquences nucléotidiques de la présente invention sont également précieuses pour la localisation des chromosomes. La localisation des chromosomes peut être obtenue par PCR sur un ADN préparé à partir d'un panel de lignées cellulaires hybrides (souris-hamster). La localisation chromosomique du gène humain peut être déduite de la localisation du gène de souris par synténie (McCarthy et coll.
(1997), Genomeresearcb, 7, 1153). La séquence est ciblée spécifiquement vers une localisation particulière d'un chromosome individuel, notamment un chromosome de souris ou d'homme, et peut s'hybrider avec cette localisation.
La cartographie des séquences pertinentes des chromosomes selon la présente invention est une première étape importante dans la corrélation de ces séquences avec la maladie associée au gène. Quand une séquence a été cartographiée et que son emplacement précis sur le chromosome est connu, on peut corréler la position physique de la séquence sur le chromosome avec les données de la carte génétique. On peut trouver de telles données par exemple, dans V. McKusick, Mendelian Inheritance in Man (données pouvant être obtenues on-line auprès de la bibliothèque médicale de l'Université ohns Hopkins, RetNet). La relation entre les gènes et les maladies qui ont été localisées dans la même zone du chromosome est ensuite identifiée par une analyse des liaisons (co-transmission héréditaire de gènes physiquement adjacents).
Les différences d'ADNc ou de séquence génomique entre des individus malades et sains peuvent également être déterminées. Si on observe une mutation chez certains individus atteints ou chez tous les individus atteints, mais jamais chez des individus normaux, il est alors probable que la mutation soit l'agent causal de la maladie.
Un autre mode de réalisation de l'invention concerne l'administration d'une composition pharmaceutique, en association avec un support pharmaceutiquement acceptable, pour un des effets thérapeutiques décrits ci-dessus.
De telles compositions pharmaceutiques peuvent consister en Rdcsfl, en produits mimétiques ou en agonistes. Les compositions peuvent être administrées seules ou en association avec au moins un autre agent, tel qu'un agent stabilisant, qui peut être administré dans un support pharmaceutique biocompatible stérile, et notamment, mais de façon non limitative, dans un soluté salin, un soluté salin tamponné, du dextrose ou de l'eau. Les compositions peuvent être administrées au patient seules, ou en association avec d'autres agents, médicaments ou hormones.
Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être administrées par plusieurs voies d'administration : par exemple se reporter à "Transcleral delivery of bioreactive protein to the choroid and retina" d'Ambati et coli. (2000) Investigative Ophthalmology and Visual Science, 41, 1186. La formulation de préparations ophtalmiques pour la voie topique, et notamment de solutions, suspensions et pommades ophtalmiques est bien connue de l'homme de l'art (se reporter à Parmaceutical Sciences de Remington 18ème édition, chapitre 86, pages 1581-1592, Mack Publishing Company, 1990). D'autres modes d'administration existent, et notamment des injections intracamérales (qui peuvent être pratiquées directement dans la chambre antérieure ou directement dans la chambre du corps vitré), des injections sous-conjonctivales et des injections rétrobulbaires et les méthodes et moyens pour la production de préparations ophtalmiques pour de tels modes d'administration sont également bien connus.
Tel qu'il est utilisé dans cette demande, le terme"extraoculaire"se rapporte à la surface oculaire et à l'espace (extérieur) entre le globe oculaire et la paupière. Le cul-de-sac oculoconjonctival, la surface conjonctivale et la surface de la cornée constituent des exemples de régions extraoculaires. Cette localisation est extérieure à tous les tissus oculaires et il n'est pas nécessaire de faire appel à une procédure invasive pour accéder à cette région. Les exemples de systèmes extraoculaires incluent les inserts et les gouttes, gels ou pommades appliqués"localement"et que l'on peut utiliser pour délivrer une matière
thérapeutique dans ces régions. Les dispositifs extraoculaires s'enlèvent en général facilement, et même le patient peut les retirer.
Les brevets suivants décrivent des systèmes extraoculaires pouvant être utilisés pour administrer des médicaments dans les régions extraoculaires.
Higuchi et coli. décrivent dans les brevets US ne 3 981 303,3 986 510 et 3 995 635 un insert oculaire biodégradable contenant un médicament.
Le renfort selon l'invention peut être divisé en trois zones A, B, C indiquées sur les figures 3,4A, 4B, 5A, 5B.
Il en va de même en ce qui concerne les figures 6 à 10 qui représentent schématiquement cinq modes de réalisation différents du renfort selon l'invention et qui montrent la structure sandwich propre aux zones B et C, et éventuellement A.
Cette structure sandwich comprend deux peaux 11 et 13 respectivement supérieure et inférieure entre lesquelles est intercalée une âme 12. La nature des matériaux constitutifs des peaux 11 et 13 et de l'âme 12 dans les cinq modes de réalisation des figures 6 à 9 sera détaillée ci-après.
Suivant une caractéristique avantageuse de l'invention, le renfort de chaussure qu'elle concerne peut être caractérisé par les raideurs en flexion longitudinale RfA, RfB, RfC des zones A, B, C.
Ainsi, conformément à une disposition préférée de l'invention, chaque zone A, B, C présente une raideur en flexion longitudinale RfA, RfB, RfC, telle que :
De manière plus préférée encore : la zone A présente une raideur RfA constante ou progressive de l'avant vers l'arrière, la zone B présente une raideur RfB constante ou progressive de l'avant vers l'arrière, la zone C présente une raideur RfC constante ou progressive de l'avant vers l'arrière.
Selon un premier mode de réalisation du renfort représenté à la figure 6 : avec RfA, RfB, RfC progressives de l'avant vers l'arrière.
Selon un deuxième mode de réalisation du renfort représenté à la figure 7 :
RfA constante RfB progressive de l'avant vers l'arrière RfC progressive de l'avant vers l'arrière.
Dans ce deuxième mode de réalisation du renfort, il est prévu deux régions de raideurs différentes, à savoir la région de raideur minimum correspondant à la zone A, et une région de raideur progressive correspondant aux zones B et C.
Selon un troisième mode de réalisation du renfort selon l'invention, représenté à la figure 8 :
RfA constante - RfB progressive de l'avant vers l'arrière RfC constante.
La figure 9 montre un quatrième mode de réalisation dans lequel la structure sandwich s'étend sur les trois zones A, B, C avec des caractéristiques de raideur en flexion longitudinale telles que : RfA constante RfB et RfC progressives de l'avant vers l'arrière.
La figure 10 correspond à un cinquième mode de réalisation dans lequel la structure sandwich s'étend sur les trois zones A, B, C et dans lequel, comme pour le troisième mode de réalisation de la figure 8, les caractéristiques de raideur en flexion longitudinale sont les suivantes : RfA RfB progressive de l'avant vers l'arrière RfC constante.
Naturellement, le contrôle de la raideur en flexion longitudinale des zones A, B et C du renfort est obtenu en jouant sur la nature des matériaux constitutifs des peaux 11 et 13 et de l'âme 12 de la structure sandwich. On peut également faire varier cette raideur en flexion longitudinale en jouant sur l'épaisseur en faisant varier progressivement cette raideur du renfort dans les zones A, B, C, comme cela ressort des figures 6 à 10.
Selon des variantes de réalisation différentes des exemples des Fig 6 à 10, les variations éventuelles d'épaisseur du renfort selon l'invention ne sont pas linéaires, sachant qu'il est préférable, qu'aux plans de raccordement d'une part, entre les zones A et B (limite postérieure LA de la zone A), et d'autre part, entre les zones B et C (limite postérieure LB de la zone B), il n'y ait pas de brusque rupture de pente.
Selon d'autres particularités de l'invention : - les éléments (3) et (4) comportent un moyen (6), du type butée, apte à limiter la course de leur déplacement relatif, ladite butée ayant une position fonction du type de moyen (1,2) utilisé ; - les éléments (3) et (4) comportent des moyens (7) du type ouvertures de passage, aptes à permettre leur fixation en un point quelconque de la ceinture (4) ; - l'un des éléments (3,4) comporte un moyen (8), du type trou, apte à permettre sa fixation, par l'intermédiaire d'une vis ou d'un boulon, en un point quelconque du siège.
Le dispositif selon l'invention peut être associé à un autre dispositif, mécanique ou électronique, apte à modifier la résistance du moyen (1,2) en fonction de la vitesse du véhicule et du poids de l'usager de manière à venir, en cas de choc frontal, toujours en limite maximale de course.
Le dispositif selon l'invention peut être également placé entre le siège et le châssis ou la carrosserie du véhicule pour agir en combinaison avec celui ou ceux placés sur la ceinture de sécurité. Dans ce cas, le siège comporte un moyen permettant son déverrouillage en cas de choc. Toutefois, il doit pouvoir se stabiliser définitivement quelque soit le niveau de déplacement qu'il aura atteint.
En cas de choc frontal, le processus d'actionnement de l'ensemble est le suivant - tension ceinture puis déverrouillage du siège ; - mise en action des divers dispositifs amortisseurs après leur déverrouillage éventuel. Les éléments (3) et (4) peuvent être du type représenté à la figure 3 et comporter chacun 4 parois orthogonales dont les parois (3A), (3B), (4A) et (4B) qui sont parallèles entre elles, la paroi (4B) étant reliée au reste de l'élément (4) par des bras (9,10) coulissant à l'intérieur d'ouvertures pratiquées sur la paroi (3B).
Selon d'autres particularités de réalisation de l'invention : - le volant et les pédales comportent un moyen apte à permettre leur déplacement en cas de choc frontal ainsi qu'éventuellement les airbags de passagers ; - le siège, le volant et les pédales comportent un moyen apte à permettre leur déplacement simultané en cas de choc frontal.
Le poids de l'usager peut être déterminé par préprogrammation ou par des capteurs placés sur le siège.
Pour que le siège puisse avancer sur une plus grande longueur, il est nécessaire que celui-ci soit le plus reculé possible avant un éventuel accident et ce quelle que soit la taille du passager. De ce fait, il est préférable que ce soit la position du volant et des pédales qui soit réglable et non la position du siège comme cela se fait habituellement.
Ce réglage peut être manuel ou préprogrammé. Le siège peut cependant être réglable sur sa hauteur.
La présente invention concerne un dispositif destiné à être utilisé comme gant ou sachet étanche dont certaines faces sont imprégnées de produits actifs déshydratés ou non.
Jusqu'à présent, ce type de poche existe sous deux versions connues principales : . une forme de poche étanche dont une des faces, située à l'intérieur ou à l'extérieur est préimprégnée d'un produit déshydraté ou non, et utilisable tel ou par retournement selon que la face préimprégnée se trouve à l'intérieur ou à l'extérieur.
Dans cette version, seule une des faces est utilisée. un tel dispositif à déjà fait l'objet d'un dépôt de brevet sous le no 9914419 déposé auprès de l'INPI le 17 11 1999.
* sous forme d'une poche étanche renfermant des lingettes Préimprégnées de prodjuits actifs sur les deux faces et ! que l'on peut utiliser après l'ouverture de la poche.
' ! Dans l'un ou l'autre cas, on constate que lorsque les Produits actifs nécessitent iun essuyage, une action pour ls étaler, les faire briller ou en enlever des excédents l'utilisateur est obligé de se munir d'un mouchoir en Papier, d'une serviette, : de coton....
Ce qui présente le double inconvénient. d'être obligé d'une Part de se munir d'un nécessaire d'essuyage < =- ! t de créer n
on peut les utiliser comme parties de techniques de diagnostic, dans lesquelles on teste les patients pour rechercher des taux anormaux de Rdcsfl ou la présence de formes anormales de Rdcsfl. Pour cela on prélève des échantillons d'humeur aqueuse ou de vitré par des méthodes bien connues de l'homme de l'art (par exemple Forster, R. K., Abbott RL, Gelender, H. (1990) Management of infectious endophthalmitis Ophthalmology87, 313-319).
Pour la production d'anticorps dirigés contre un gène exprimé différentiellement, on peut immuniser divers animaux hôtes par injection par une protéine exprimée différentiellement ou par une fraction de celle-ci ou par immunisation par un ADN. De tels animaux hôtes sont notamment, de façon non limitative, des lapins, des souris, des rats, pour en citer quelques uns. On peut utiliser divers adjuvants pour augmenter la réponse immunologique, selon l'espèce de l'hôte, et ceux-ci sont notamment, de façon non limitative, des adjuvants de Freund (complet et incomplet), des gels minéraux comme l'hydroxyde d'aluminium, des substances tensioactives comme la Iysolécithine, des polyols pluroniques, des polyanions, des peptides, des émulsions dans l'huile, l'hémocyanine de patelle, le dinitriphénol et des adjuvants potentiellement utiles chez l'homme comme le BCG (bacille de Calmette-Guérin) et Corynebacterfum parvum.
Les anticorps polyclonaux sont des populations hétérogènes de molécules d'anticorps provenant de sérums d'animaux immunisés par un antigène, tel qu'un produit de gène cible, ou un de ses dérivés fonctionnels antigéniques. Pour la production des anticorps polyclonaux, on peut immuniser des animaux hôtes comme ceux cités ci-dessus en injectant un produit de gène exprimé différentiellement additionné d'adjuvants comme cités ci-dessus également.
On peut obtenir des anticorps monoclonaux, qui sont des populations homogènes d'anticorps dirigés contre un antigène particulier, par toute technique permettant la production de molécules d'anticorps par des lignées cellu- laires continues en culture. Celles-ci sont notamment, de façon non limitative, la technique d'hybridome de Kohler et Milstein, (1975, Nature 256 : 495- 497 ; et brevet US no 4 376 110), la technique d'hybridome de lymph- , y 4 : 72 ; Cole et cytes B humains (Kosbor et coil., 1983, Immunology Todi coli., 1983,/r. M ? cj USA 80 : 2026-2030) et la technique
d'hybridome-du virus d'Epstein-Barr (EBV) (Cole et coll., 1985, Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pages 77- 96). De tels anticorps peuvent appartenir à n'importe quelle classe d'immunoglobuline et notamment IgG, IgM, IgE, IgA, IgD et à toutes leurs sous-classes. Les hybridomes produisant les mAb de cette invention peuvent être cultivés in et in vivo. La production de concentrations élevées de mAb in vivo fait que l'on préfère actuellement cette méthode de production.
En outre, on peut utiliser des techniques développées pour la production "d'anticorps chimères" (Morrison et coli. 1984, Proc. Natl. AcaJ /. USA 81 : 6851-6855 ; Neuberger et coli., 1984, Nature, 312 : 604-608 ; Takeda et coll., 1985, Nature, 314 : 452-454) par épissage des gènes d'une molécule d'anticorps de souris ayant une spécificité d'antigène appropriée avec des gènes d'une molécule d'anticorps humain ayant une activité biologique appropriée. Un anticorps chimère est une molécule contenant des fragments différents provenant d'espèces animales différentes ; il peut s'agir aussi d'une molécule ayant une région variable ou hypervariable provenant d'un mAb de souris et une région constante dérivée d'une immunoglobuline humaine.
Selon une autre possibilité, on peut adapter les techniques décrites pour la production d'anticorps monocaténaires (brevet US no 4 946 778 ; Bird, 1988, Science 242 : 423-426 ; Huston et coli., 1988,/r. M ? c Sci. USA 85 : 5879-5883 ; et Ward et coll., 1989, Nature 334 : 544- 546) pour qu'elles produisent des anticorps monocaténaires de gènes exprimés différentiellement. Les anticorps monocaténaires sont formés en reliant les fragments chaîne lourde et chaîne légère de la région Fv par un pont aminoacide, ce qui donne un polypeptide monocaténaire.
Plus préférablement, on peut adapter les techniques utilisées pour la production"d'anticorps humanisés"à la production d'anticorps aux polypeptides, aux fragments, aux dérivés et aux équivalents fonctionnels de la présente invention. De telles techniques sont décrites dans le brevet US no 5 932 448, 5 693 762, 5 693 761, 5 585 089, 5 530 101, 5 910 771, 5 569 825,5 625 126,5 633 425,5 789 650,5 545 580,5 661 016 et
5 770 429 p Les fragments d'anticorps qui reconnaissent des épitopes spécifiques peuvent être créés par des techniques connues. Par exemple, de tels fragments sont notamment, de façon non limitative, des fragments F (ab') 2 qui peuvent être produits par digestion de la molécule d'anticorps par la pepsine et les fragments Fab qui peuvent être produits par réduction des ponts disulfures des fragments F (ab') 2. On peut aussi construire des banques d'expression de Fab (Huse et coll., 1989, Science, 2 46 : 1275-1281) pour permettre une identification rapide et aisée des fragments Fab monoclonaux ayant la spécificité désirée.
On préfère en particulier, pour la facilité de détection, les analyses sandwich, dont il existe plusieurs versions, que l'on entend toutes englober dans la présente invention.
Par exemple, dans une analyse directe type, un anticorps non marqué est immobilisé sur un substrat solide et l'échantillon à tester est mis en contact avec la molécule fixée. Après une durée d'incubation appropriée, pendant une période suffisante pour permettre la formation d'un complexe binaire anticorps-antigène, on ajoute un second anticorps, marqué par une molécule reporteur capable d'induire un signal détectable et on met à incuber, en prévoyant un temps suffisant pour qu'il se forme un complexe ternaire anticorps-antigène-anticorps marqué. On élimine toutes les matières n'ayant pas réagi par lavage et on détermine la présence de l'antigène par l'observation d'un signal ou bien on peut le quantifier par comparaison à un échantillon témoin contenant des quantités d'antigène connues. Les variantes de l'analyse directe sont notamment l'analyse simultanée dans laquelle on ajoute simultanément l'échantillon et l'anticorps à l'anticorps lié, ou l'analyse inversée dans laquelle on combine d'abord l'anticorps marqué et l'échantillon à tester, on les met à incuber et on les ajoute à l'anticorps fixé sur une surface, non marqué. Ces techniques sont bien connues de l'homme de l'art et on peut facilement imaginer des variantes mineures. Telle qu'elle est utilisée ici, l'expression"analyse sandwich"englobe toutes les variantes de la technique de base à deux sites. Pour les dosages immunologiques de la présente invention, il
existe une seule restriction : les anticorps non marqués et marqués doivent être des anticorps spécifiques de Rdcsfl.
Les molécules reporteurs les plus couramment utilisées dans ce type d'analyse sont des enzymes, des molécules fluorophores ou des molécules contenant des radionucléides. Dans le cas d'un dosage immunoenzymatique, un enzyme est conjugué au second anticorps, en général au moyen du glutaraldéhyde ou d'un periodate. Comme on l'observera immédiatement, cependant, il existe une large gamme de techniques de ligature différentes, bien connues du technicien expérimenté. Les enzymes utilisées couramment sont notamment la peroxydase de raifort, la glucose oxydase, la p-galactosidase et la phosphatase alcaline. Les substrats à utiliser avec les enzymes spécifiques sont en général choisis de telle façon qu'ils produisent, par hydrolyse par l'enzyme correspondante, une variation de couleur décelable. Par exemple, le p-nitrophénylphosphate convient dans le cas où on utilise des conjugués de phosphatase alcaline ; pour les conjugués de peroxydase, on utilise couramment la 1, 2-phénylènediamine ou la toluidine. Il est également possible d'utiliser des substrats fluorogéniques, qui donnent un produit fluorescent plutôt que les substrats chromogènes cités ci-dessus. On ajoute ensuite une solution contenant le substrat approprié au complexe tertiaire anticorps-Rdcsfl-anticorps marqué. Le substrat réagit avec l'enzyme liée au second anticorps, donnant ainsi un signal visuel qualitatif, que l'on peut quantifier, en général par spectrophotométrie, pour évaluer la quantité de Rdcsfl présente dans l'échantillon de sérum.
Selon une autre possibilité, on peut coupler chimiquement des composés fluorescents, comme de la fluorescéine ou de la rhodamine, à des anticorps sans modifier leur capacité à se fixer. Quand il est activé par illumination par une lumière ayant une longueur d'onde particulière, l'anticorps marqué par le fluorochrome absorbe de l'énergie lumineuse, ce qui induit un état d'excitabilité dans la molécule aboutissant à une émission lumineuse, d'une longueur d'onde caractéristique. L'émission apparaît sous la forme d'une couleur caractéristique, que l'on détecte visuellement à l'aide d'un microscope optique. Les techniques d'immunofluorescence et d'immuno-essais enzymatiques sont toutes deux des techniques bien établies et sont particulièrement
préférées pour la présente méthode. Cependant, d'autres molécules reporteurs, comme des molécules à radioisotope, des molécules chimio- luminescentes ou bioluminescentes peuvent aussi être utilisées. Le technicien expérimenté comprendra facilement comment on peut modifier la procédure pour l'adapter à l'utilisation envisagée.