INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le polymère constituant les particules anisotropes, peut être hydrophobe, intrinsèquement hydrophile ou traité de manière à le rendre tel.
A titre purement illustratif, le polymère peut être traité chimiquement afin de greffer des fonctions acide carboxylique, anhydride, alcool, amine, oxyde d'éthylene, oxyde de propylène, etc. seules ou combinées.
Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux le polymère ' en oeuvre est choisi parmi le polyéthylène, le polypropylène, l'alcool polyvinylique, le polyamide, le polyester ainsi que leurs combinaisons, sous forme de mélanges d'homopolymères et/ou de copolymères.
De préférence, les particules anisotropes sont à base de polyamide.
Par polyamide, on entend les polymères comprenant au moins l'un des motifs suivants -NH-R1 -NHCO-R2-CO- (I), - -R3-CO- (I I), formules dans lesquelles R1, R2 et R3, identiques ou non, représentent des radicaux alkyle divalents, linéaires ou ramifiés, comprenant 2 à 18 atomes de carbone, des radicaux aryle divalents comprenant un ou plusieurs noyaux aromatiques, éventuellement substitués.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention; les radicaux R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent des radicaux, linéaires ou ramifiés, comprenant 2 à atomes de carbone et de préférence des radicaux méthylène, éventuellement porteurs d'un ou plusieurs radicaux méthyle.
Plus particulièrement, lesdits radicaux, identiques ou non, sont choisis, parmi les radicaux divalents éthyle, 1-méthyle- éthyle, propyle, 1-méthyle-propyle, butyle, pentyle, hexyle, heptyle, octyle, nonylé, décyle, undécyle, lauryle.
Une autre possibilité est constituée par des radicaux R2, R'2 et R3 identiques ou différents, représentant des radicaux aryles comprenant un ou plusieurs noyaux aromatiques, éventuellement substitués.
Dans le cas où les radicaux précités ne comprennent qu'un seul noyau aromatique, de préférence à 6 atomes de carbone, présentant des liaisons libres en position ortho, méta ou para.
Notons que dans le cas où les radicaux précités comprennent plusieurs noyaux aromatiques, de préférence deux noyaux aromatiques, ces derniers peuvent être péricondensés ou liés par des groupes inertes, tels que les liens valentiels simples, un radical alkyle comprenant 1 à 4 atomes de carbone. Parmi les radicaux comprenant deux noyaux aromatiques, on peut citer tout particulierement les radicaux napthyles divalents présentant des liaisons libres les atomes carbone 1 et 2, 1 et 4, 1 et 5, 1 et 6, 1 et 7, 2 et 7.
Selon une variante préférée de l'invention, on utilise, en tant que motifs (I) ou (II) des polyamides, des motifs permettant d'accéder notamment aux polyamides PA 4, PA 6, PA 10, PA 11, PA 12, PA 6,6, PA 4.6, PA 6.10, leurs mélanges ou copolymères. De préférence, on les motifs permettent d'accéder aux polyamides PA 6, PA 6.6, leurs mélanges ou copolymères.
2. - Préparation du composé A comprenant un polymère POS/2 de type acide par mise en #uvre du procédé (f) : Dans un réacteur en verre de 1 I, muni d'un système d'agitation et d'une ampoule de coulée, on introduit une solution d'anhydride maléique (30,67 g, soit 0,3128 mole) dans du CH2Cl2 comme solvant (400 cm3), puis la température du milieu réactionnel est abaissée, à 8 C, et on coule ensuite progressivement, sur une période de1 heure 15 minutes, le POS aminé (62,11 g) en maintenant la température du milieu réactionnel à 8 C pendant la coulée. En fin de coulée, le milieu réactionnel est abandonné 15 heures à température ambiante (23 C). Le solvant est ensuite éliminé sous pression réduite en opérant à une température qui n'excède pas 30 C.
On obtient ainsi une huile qui a été soumise à des analyses par RMN du proton et par RMN du silicium (2$Si). Les résultats de ces analyses révèlent que le produit de la réaction obtenu à l'issue du procédé (f) renferme : # 91,3 % en poids du polymère POS/2 de type acide de formule moyenne : # et 8,7 % en poids du POS monofonctionnel cyclique de formule moyenne :
EXEMPLE 4 Cet exemple illustre la préparation d'un agent de couplage ou composé A selon l'invention, comprenant un polymère POS/2 de type ester.
Ce composé A est préparé par mise en oeuvre du procédé (h) [avec méthode d'activation (2j) ] qui a été expliqué ci-avant dans le présent mémoire.
1.- Alcoolyse de l'anhydride maléique : Dans un réacteur tétracol de 2 litres, l'anhydride maléique est introduit (698,1 g, soit 7,12 moles), puis il est fondu par chauffage du réacteur à l'aide d'un bain d'huile porté à 70 C. Une fois la totalité de l'anhydride fondue, on introduit, sous agitation, du méthanol (221,4 g, soit 6,92 moles) via une ampoule de coulée. Le milieu est ensuite laissé sous agitation pendant 20 heures à 23 C, puis il est dévolatilisé en établissant une pression réduite de 10.102Pa pendant 1 heure, et enfin il est filtré sur papier-filtre. On récupère ainsi 786,9 g de monométhylester de l'acide maléique de formule (rendement de 86 %) :
2. - Préparation du dérivé ester activé selon la méthode d'activation (2i) : Dans un réacteur en verre de 2 litres, équipé d'une agitation mécanique et d'une ampoule de coulée, sont introduits : la N-hydroxysuccinimide (39,20 g, soit 0,3406 mole), du tétrahydrofuranne comme solvant (200 cm3) et le monométhylester de l'acide maléique (40,1 g, soit 0,3085 mole). Le milieu réactionnel est mis sous agitation, et la coulée de la dicyclohexylcarbodiimide (69,3 g, soit 0,3363 mole) est réalisée progressivement, à température ambiante (23 C), sur une période de 10 minutes. Le milieu devient hétérogène à cause de la précipitation de dicyclohexylurée.
Après une période de réaction de 50 minutes, le milieu réactionnel est filtré sur "büchner" et le filtrat est concentré par évaporation à une température n'excédant pas 35 C. Le milieu réactionnel résiduel est abandonné à une température de 4 C pendant 15 heures, puis il est à nouveau filtré sur un verre fritte contenant 10 cm de silice. Le second filtrat obtenu est complètement dévolatilisé sous pression réduite pour éliminer le solvant restant et le solide finalement obtenu est ensuite recristallisé dans un mélange
CH2Cl2 / éther éthylénique ; les eaux-mères de cette recristallisation sont récupérées, concentrées et une deuxième recristallisation est réalisée.
On récupère ainsi 41 g (rendement de 55 %) du dérivé ester activé de formule :
3. - Préparation du POS aminé : Dans un réacteur en verre de 4 litres muni d'une agitation mécanique et d'un réfrigérant ascendant, on introduit du y-aminopropylsilane de formule (C2HSOy CH3Si(CHz)3NHz (1700,3 g, soit 8,9 moles). La coulée de l'eau (1442,5 g, soit 80,13 moles) se fait à l'aide d'une pompe de coulée ayant un débit de10 cm3 / heure. La réaction est exothermique tout au long de la coulée et la température n'est pas régulée.
Au bout de 3 heures de réaction, un mélange eau-éthanol est éliminé sous pression réduite de 10.101 Pa, d'abord à 40 C, puis ensuite à 70 C pour éliminer complètement l'éthanol et conduire ainsi à une huile aminée intermédiaire.
Dans un autre réacteur de 1 litre, muni aussi d'une agitation mécanique et d'un réfrigérant, on introduit 350,24 g de l'huile aminée intermédiaire obtenue à l'issue de l'étape précédente, une huile polydiméthylsiloxane ct,m-dihydroxylée (230,92 g) ayant une viscosité de 50 mPa.s à 25 C et titrant 12 % en poids d'OH, ainsi que du catalyseur à base de siliconate de potassium (0,0416 g). Le milieu réactionnel est chauffé à 90 C pendant 6 heures. Au bout de ce temps, le milieu réactionnel est abandonné 15 heures à température ambiante (23 C), puis il est neutralisé à l'aide de 0,0974 g d'un mélange à base d'acide phosphorique et d'oligomères polydiméthylsiloxanes, en opérant à 90 C pendant 1 heure. Le milieu réactionnel obtenu est filtré sur un filtre microporeux de 0,5 m.
Le POS aminé obtenu a été soumis à des analyses par RMN du proton et du silicium. Les résultats de ces analyses révèlent un mélange de structures linéaire (74 % molaire) et cyclique (26 % molaire) ayant les formules moyennes suivantes :
Le POS ainsi obtenu contient 0,51 fonction amine pour 100 g de produit.
4. - Préparation du composé A comprenant un polymère POS/2 de type ester par couplage du dérivé ester activé avec le POS aminé : Le dérivé ester activé tel que préparé au point 2 ci-avant (39,83 g, soit 0,175 mole) est introduit dans un réacteur tétracol avec 200 cm3 de CH2Cl2 comme solvant. Le POS aminé tel que préparé au point 3, ci-avant (30,82 g) est solubilisé dans 200 cm3 de CH2Cl2, puis la solution est introduite dans une ampoule de coulée. La coulée est réalisée progressivement sur une période d'1 heure, sur un milieu réactionnel qui a été refroidi au préalable à 5 C par un bain d'eau glacée.
La coulée terminée, le milieu réactionnel est mis à réagir à température ambiante (23 C) pendant 15 heures. Au bout de ce temps, le milieu est transvasé dans une ampoule de décantation, puis il est lavé 4 fois de suite avec de l'eau. Le rajout d'une solution aqueuse saturée en NaCI est nécessaire pour aider à la séparation des phases.
de cette intensité. Mais cela ne permet pas de réaliser des intensités lumi-
neuses élevées dans au moins une zone de la distribution de l'intensité
lumineuse. La répartition de l'intensité lumineuse créée par une telle ins-
tallation d'éclairage est prédéfinie par son fonctionnement. Par exemple pour les clignotants avant d'un véhicule, il est prévu par la réglementation que la lumière émise doit avoir une répartition de l'intensité lumineuse avec un maximum accentué de cette intensité en son milieu. Cet effet ne peut être obtenu par les réalisations connues de cette installation d'éclairage. Avantages de l'invention
La présente invention a pour but de remédier à ces incon-
vénients et se propose de développer une installation d'éclairage permet-
tant d'obtenir une intensité lumineuse élevée, de manière déterminée dans
la répartition de l'intensité lumineuse.
A cet effet l'invention concerne une installation d'éclairage
du type défini ci-dessus, caractérisée en ce que en plus de l'élément pho-
toémetteur il est prévu au moins une source lumineuse dont la lumière
émise est combinée pour créer des valeurs d'intensité lumineuse plus éle-
vées dans au moins une zone partielle de la répartition de l'intensité lumi-
neuse créée par la lumière sortant de l'installation d'éclairage.
L'installation d'éclairage selon l'invention offre ainsi
l'avantage grâce à l'utilisation d'au moins une source lumineuse complé-
(ii) Les leucocytes doivent être soumis à un marquage double ou unique avec des Acm conjugués directement à de l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC), de la phyco- érythrine (PE) ou du RPE-Cy5.
Les marqueurs suivants peuvent être utilisés convenablement : CD34 (marqueur des cellules souches), CD19 (marqueur des lymphocytes B), CD45 (marqueur des leucocytes), CD3 (marqueur de lymphocytes T), CD33 (marqueur des myélocytes, CD71 (marqueur des globules rouges), CD61 (marqueur des mégacaryocytes), glycophorine A (marqueur des globules rouges), AC133 (marqueur des cellules souches), CD38 (marqueur des cellules souches primitives), CD90 (marqueur des cellules souches), CD10 (marqueur des cellules souches lymphoïdes), CD117 (marqueur des cellules souches pluripotentes), IgGl (témoin négatif).
(B) Morphologie : Pour l'analyse morphologique : Microscopie optique (i) Remettre en suspension les cellules énergiquement dans du milieu IMDM contenant 2 % de SVF inactivé par la chaleur en utilisant des embouts de pipettes à large orifice.
(ii) Examiner sous un microscope Leitz en utilisant une solution colorante appropriée ; par exemple, la solution colorante de May et Greenwald (BDH Chemical Ltd)
peut être utilisée pour l'analyse des cellules myéloïdes et des cellules lymphoïdes. L'homme de l'art déterminera aisément d'autres colorants convenables pour l'identification d'autres colonies, par exemple le colorant de Wright ou le colorant de Giemsa.
(iii) L'analyse morphologique des lymphocytes B-CLL peut être effectuée, respectivement, dans des frottis sanguins ou des préparations cytocentrifugées.
Microscopie confocale (i) Obtenir des lymphocytes B de la manière décrite ci-dessus (lymphocytes B-CLL ou lymphocytes B sains obtenus à partir de la couche leucocytaire de donneurs de sang sains).
(ii) Traiter les lymphocytes B avec l'anticorps monoclonal CR3/43 de la manière décrite ci-dessus.
(iii) Introduire 2 ml de suspension cellulaire dans une boîte de culture d'organes (le fond de cette boîte est modifié de manière à porter une lamelle).
(iv) Ajouter 15 l d'anticorps monoclonal au conjugué CD19-FITC et 15 l d'anticorps monoclonal au conjugué CD34 PE/Cy5 (Quantum Red).
(v) Utiliser de l'iodure de propidium pour déterminer la viabilité et du colorant de Hoechst pour colorer les noyaux.
(C) Analyse par PCR du réarrangement de gènes VDJ/JHF La région VDJ et/ou la région JHF du gène IgH ont été analysées par PCR (à cycles thermiques Perkin Elmer) en utilisant de l'ADN de matrice provenant d'échantillons de sang périphérique B-CLL et de couche leucocytaire avant et après (2 heures, 6 heures et 24 heures) traitement avec l'anticorps. Ce protocole est une adaptation du protocole de Stolc et al (American Journal of Hematology 38:1-8, 1991). Les amorces JHF sont utilisées pour la détection positive du gène de chaîne lourde d'immunoglobuline dans
une configuration de lignée germinale. L'amorce JH6 est utilisée comme témoin interne positif pour le gène de chaîne lourde d'immunoglobuline. Dans les lymphocytes B, dans les lymphocytes de sujet leucémique et également dans les lymphocytes normaux, la région JHF est toujours éliminée par délétion et, en conséquence, ne peut être amplifiée, tandis que le gène JH6, servant de témoin interne, reste intact. Le gène de P-actine est utilisé comme témoin.
(i) Isoler l'ADN génomique du sang entier en utilisant le kit d'analyse de sang Qiagen QiAmp Maxi. Utiliser le protocole de rendement maximal. Extraire la totalité de l'ADN de chaque échantillon (échantillon traité et échantillon non traité).
(ii) Analyser à l'état pur et sur des dilutions dans le rapport 1:5 d'ADN sur un gel à 1,5 % d'agarose pour déterminer la concentration et la qualité.
(iii) PCR-chauffer 2 à 3 l de matrice d'ADN génomique pure à 96 C pendant 5 minutes.
A cet égard, la figure 8 est une microphotographie de lymphocytes B différenciés avant la mise en #uvre du procédé de la présente invention. La figure 9 est une microphotographie de cellules indifférenciées formées par la rétrodifférenciation de lymphocytes B conformément à la présente invention, dans laquelle l'agent était un anticorps monoclonal contre les régions homologues de la chaîne P de l'antigène HLA-DR. Les cellules indifférenciées consistent en les amas de cellules de couleur foncée. La figure 10 est une microphotographie des mêmes cellules indifférenciées, mais à un plus faible grossissement.
Les figures 8 à 10 démontrent donc visuellement la rétrodifférenciation des lymphocytes B en cellules souches indifférenciées par le procédé de la présente invention.
La figure 11 est une microphotographie de lymphocytes B différenciés avant la mise en #uvre du procédé de la présente invention. La figure 12 est une microphotographie de cellules indifférenciées formées par la rétrodifférenciation des lymphocytes B conformément à la présente invention, dans laquelle l'agent utilisé est un anticorps monoclonal contre les régions homologues de la chaîne P de l'antigène HLA-DR. Les cellules indifférenciées sont de nouveau les amas de cellules de couleur foncée. La figure 13 est une microphotographie de la formation de granulocytes différenciés à partir de cellules indifférenciées identiques à celles de la figure 12.
Les figures 11 à 13 démontrent donc visuellement la rétro-différenciation des lymphocytes B en cellules souches indifférenciées par le procédé de la présente invention, suivie par l'engagement des cellules indifférenciées en cellules différenciées nouvelles qui sont d'une lignée différente de celle des cellules différenciées initiales.
Ces expériences de microscopie ont été également effectuées avec du sang provenant de patients souffrant de B-CLL, traités avec l'anticorps monoclonal CR3/43 de la manière décrite ci-dessus. De la manière indiquée cidessus, le sang provenant de cellules B-CLL est un moyen utile pour étudier le processus de rétrodifférenciation car le sang contient des nombres de lymphocytes B supérieurs à la normale. Ces résultats sont représentés en détail sur les figures 14 à 17.
La figure 14 représente, à deux grossissements différents, un échantillon de sang non traité provenant d'un patient souffrant de B-CLL. Les lymphocytes B non traités (cellules bleues) présentent une morphologie classique, c'est-à-dire une structure de chromatine condensée et un cytoplasme épars. Les cellules restantes sont des érythrocytes (globules rouges).
Le traitement d'échantillons de sang avec l'anticorps CR3/43 conduit initialement à un rassemblement des lymhocytes B sous forme d'agrégats (figure 15).
Les lymphocytes B sous forme d'agrégats ont perdu leur morphologie classique, caractérisée par la formation de zones cellulaires analogues à des cailloux, la décondensation de la structure de chromatine, l'apparition de nucléoles saillants, l'augmentation du volume cellulaire et une basophilie cytoplasmique caractéristique des cellules indifférenciées (figure 16). Une structure de chromatine relaxée (décondensée) est une caractéristique importante des cellules indifférenciées comparativement aux cellules différenciées. Cela doit être vraisemblablement dû à un besoin d'un accès plus poussé aux unités de
transcription pour déterminer les modifications dans l'expression de gènes requise pour l'engagement dans une lignée cellulaire donnée. A l'opposé, il est bien connu qu'une cellule plus différenciée a une structure de chromatine plus condensée puisque seule une petite quantité de chromatine doit être active du point de vue de la transcription.
L'apparition de cellules indifférenciées est toujours accompagnée par l'apparition de cellules (17A à 17J) ayant une morphologie différenciée. Il est important de noter que ces cellules n'ont pu être engendrées par prolifération, puisque (i) le temps d'incubation était trop bref pour qu'une ou plusieurs divisions cellulaires totales aient lieu, (ii) aucune figure de mitose n'est observée et (iii) le nombre absolu de leucocytes est resté le même avant et après traitement. En outre, les cellules mères moins différenciées ont été observées en association avec leurs cellules filles plus différenciées (voir le précurseur myéloïde sur la figure 17J), ce qui indique que ces cellules spécialisées sont apparues par différenciation.
Les micrographies des figures 17A à 17J représentent les types de cellules différenciées observés après traitement de lymphocytes B-CLL avec les anticorps monoclonaux CR3/43 : plaquettes (Pl) - figure 17A, cellules neutrophiles (Ne) - figure 17B, cellules éosinophiles (Eso) - figure 17C, mégacaryocytes (Meg) - figure 17D, cellules basophiles (Ba) - figure 17G, lymphocytes (Ly) - figure 17H, monocytes (Mo)- figure 171 et cellules mères myéloïdes (Mp) - figure 17J. Il a été également observé des cellules mères érythroïdes et des macrophages (résultats non présentés).
Ainsi, en résumé, ces résultats d'étude de microscopie mettent en évidence les modifications de la morphologie des lymphocytes B dans des échantillons provenant de patients souffrant de BCLL, qui avaient des taux élevés de lymphocytes B matures. Les microphotographies représentent
les modifications de la morphologie des lymphocytes B, qui subissent initialement une agrégation, suivie par l'apparition de différentes cellules avec une gamme étagée de morphologies allant des cellules mères aux cellules différenciées (cellules neutrophiles, cellules basophiles, cellules éosinophiles, mégacaryocytes, plaquettes, lymphocytes, macrophages, granulocytes, granulocytes non segmentés et cellules de type stromal).
En outre, et de manière très importante, la présence de cellules mères érythroïdes et myéloïdes est observée (figure 17J - résultats non présentés). La cellule mère myéloïde est nettement différenciable du point de vue morphologique des autres cellules, étant plus grande et avec une morphologie nucléaire distincte, et contenant également des granules cytoplasmiques.
Les résultats d'études de microscopie étayent donc du point de vue morphologique, ce qui est indiqué par les résultats de cytométrie de flux en termes de marqueurs de surface cellulaire. Ces résultats permettent de conclure que le traitement de lymphocytes B avec un anticorps contre la chaîne (3 de l'antigène HLA-DR du CMH a pour résultat une diminution des nombres de lymphocytes B et une augmentation du nombre de cellules d'autres lignées hématopoïétiques, comprenant les cellules précurseurs immatures.
La rétrodifférenciation des lymphocytes T traités avec un anticorps contre une chaîne a d'antigène du CMH de catégorie II (anticorps monoclonal TAL.1B5) en cellules souches indifférenciées par le procédé de la présente invention suivie par l'engagement des cellules indifférenciées en cellules différenciées nouvelles d'une lignée différente de celle des cellules différenciées initiales a été également suivie par microscopie (résultat non présenté).
Les courbes B, C, D illustrent respectivement pour le photosite de calibration PC et pour le premier et le deuxième photosites utiles PU considérés, le photocourant d'intensité IA puis IB, délivré par leurs détecteurs respectifs exposés à la fraction de flux photonique provenant d'un premier élément de la scène à observer puis d'un second élément de la scène à observer. On suppose que la fraction de flux du premier élément est inférieure en amplitude à celle du second élément. Sur la courbe B est représenté le photocourant Iseuil qui correspond au seuil S du comparateur 11.
Les courbes E et F montrent pour les deux photosites utiles PU, la sélection des condensateurs d'intégration dans les préamplificateurs. Cela traduit l'état des préamplificateurs. Le basculement du condensateur Cl au condensateur C2 a lieu juste avant qu'un photocourant supérieur à Iseuil n'attaque le préamplificateur concerné.
Les courbes G et H montrent l'évolution de la tension en sortie des préamplificateurs des photosites utiles PU concernés. L'amplitude de ces tensions n'est plus, comme dans le cas d'un contrôle collectif de l'état des préamplificateurs, homothétique au photocourant, car l'intégration du photocourant a été réalisée avec des condensateurs d'intégration de valeurs de capacité différentes.
Enfin les courbes I et J illustrent des échantillons de la tension en sortie des préamplificateurs à envoyer vers le dispositif de sommation retardée.
Des mesures ont montré que le contrôle collectif de la fonction de transfert limite le contraste entre deux informations à un facteur compris entre 10 et 100 selon la valeur du condensateur d'intégration utilisé, alors qu'avec le contrôle individuel, objet de l'invention, des informations dont le contraste atteint un facteur 1000 peuvent être obtenues.
On se réfère maintenant à la figure 3 qui montre un autre exemple de réalisation d'un dispositif de détection selon l'invention. A la manière de la figure 1, le dispositif de détection comporte Nv voies et chaque voie possède Nd détecteurs utiles et donc Nd photosites utiles PU.
Le dispositif de détection de flux photonique est capable de fonctionner avec un balayage
bidirectionnel. Le balayage tout en restant parallèle aux voies de détecteurs peut se faire par exemple, une fois dans un sens, une fois dans l'autre. Pour cela on utilise deux dispositifs de calibration 8. 1, 8.2 par voie V, l'un étant disposé à une extrémité de la voie et l'autre à l'autre extrémité. Chaque dispositif de calibration 8. 1, 8.2 est relié à un dispositif de distribution du stimulus 13. 1, 13.2 par l'intermédiaire de la connexion 12. Un dispositif de distribution unique, commun aux deux dispositifs de calibration 8. 1, 8.2 pourrait être utilisé.