INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon un premier aspect, le polynucléotide d'intérêt dont la transcription est recherchée code pour une protéine ou un peptide. La protéine peut être de toute nature, par exemple une protéine d'intérêt thérapeutique, y compris des cytokines, des protéines de structure, des récepteurs ou encore des facteurs de transcription.
Par exemple, dans le cas où une transcription spécifiquement dans certains tissus est recherchée, comme par exemple dans des cellules du tissu hématopoïétique, c'est à dire de la rate, de la moelle osseuse, ou dans les leucocytes périphériques, l'acide nucléique régulateur de la transcription comprendra avantageusement un acide nucléique allant du nucléotide en position-1 au nucléotide en position-1111, par rapport au site d'initiation de la transcription de la séquence SEQ ID N 1 ou 2, et allant du nucléotide en position-1 au nucléotide en position-1220 SEQ ID ? 4 ou 5.
Dans ce cas, le polynucléotide d'intérêt codera pour un gène impliqué dans la lutte contre l'inflammation, tel qu'un récepteur aux cytokines ou encore pour une superoxyde dismutase. Si un effet antitumoral est recherché, on cherchera alors à stimuler le nombre et l'activation de lymphocytes T cytotoxiques spécifiques d'un antigène tumoral donné.
Dans un autre mode de réalisation, un acide nucléique régulateur selon l'invention sera utilisé en combinaison avec un polynucléotide d'intérêt codant pour la protéine ABCA7.
Egalement, le polynucléotide d'intérêt peut également peut être un oligonucléotide de type sens.
Comme déjà mentionné, le polynucléotide d'intérêt peut également produire un acide nucléique, tel qu'un acide nucléique antisens spécifique d'un gène dont on cherche à inhiber la traduction.
Selon un autre aspect, le polynucléotide d'intérêt dont la transcription est régulée par l'acide nucléique régulateur est un gène rapporteur, tel que tout gène codant pour une protéine détectable.
Parmi les gènes rapporteurs préférés, on peut citer notamment le gène de la luciférase, de la ss-galactosidase (LacZ), de la chloramphénicol acétyl transférase (CAT) ou encore tout gène codant pour une protéine conférant une résistance à un composé particulier, particulièrement à un antibiotique.
VECTEURS RECOMBINANTS Par"vecteur"au sens de la présente invention on entendra une molécule d'ADN ou d'ARN circulaire ou linéaire qui est indifféremment sous forme de simple brin ou double brin.
Selon un premier mode de réalisation, un vecteur recombinant selon l'invention est utilisé afin d'amplifier l'acide nucléique régulateur selon l'invention qui y est inséré après transformation ou transfection de l'hôte cellulaire désiré.
Après qu'un état de déconnexion d'un port est reçu (H101) par le moyen 60 d'arbitrage, toute donnée destinée au lien déconnecté est jetée ("spilled") (H102).
On notera que dans le présent algorithme, les signaux EN~cycle[i] décrit ci-dessus sont remplacés par des signaux EN-cycle [i]-int (comme cela apparaît en grisé sur la figure 5), de façon à préciser le signal réellement utilisé en interne dans le moyen 60 d'arbitrage. En bas à droite de la figure 6, on illustre la génération de chaque signal ENcycle [i] int à partir d'un signal EN~cyc1e[i] et d'un signal d'autorisation/interdiction (Enable/Disable). Ce dernier prend la valeur"interdit"pendant l'étape H102 précitée, et la valeur"autorisé"pendant l'étape H105 décrite ci-après.
Puis, un paquet de redémarrage spécifique HPP (pour"Hot Plug Packet") est envové (hui03) vers le lien déconnecté, c'est-à-dire vers la
FIFO de sortie associée au lien déconnecté. Ce paquet de redémarrage HPP est par exemple un paquet"vide"constitué uniquement d'un indicateur de fin de paquet. Dans une variante décrite par la suite en relation avec la figure 7, on utilise deux paquets de redémarrage successifs HPP1 et HPP2.
Comme illustré sur la figure 4, le paquet de redémarrage HPP est stocké dans un moyen Hl et est écrit sur le bus d'émission TxBus 70, en utilisant un composant à trois états H2 commandé par un signal de commande OpenHPPTS H3. Pendant l'étape H103, le signal d'autorisation/interdiction (Enable/Disable) est mis à la valeur"autorisé"pendant N cycles d'horloge, afin d'obtenir la valeur souhaitée du signal EN-cycle [i]-int.
Quand le lien précédemment déconnecté est à nouveau connecté (hui04), le signal d'autorisation/interdiction (Enable/Disable) est mis à la valeur"autorisé" (H105), de façon que des données puissent être transmises vers le lien (re) connecté.
On présente maintenant d'autres procédures mises en oeuvre après que la déconnexion d'un lien a été détectée.
Après détection d'une déconnexion dans le moyen d'interfaçage 104 (ou dispositif d'interface), le moyen 120 de contrôle de FIFO (CI 13) envoie un signal à la FIFO d'entrée du port correspondant (121,122, 123) et à la FIFO de sortie du port correspondant (124,125, 126) qui sont liées au lien déconnecté.
La FIFO de sortie (124,125 ou 126) correspondant au lien déconnecté jette ("spills") les données (s'il y en a) jusqu'à et y compris le prochain indicateur de fin de paquet (EOP) ou de message (EOM).
La FIFO d'entrée (121,122 ou 123) correspondant au lien déconnecté peut contenir un paquet tronqué ou incomplet (c'est-à-dire un paquet qui n'a pas été entièrement transmis du fait de la déconnexion du lien). Ce paquet tronqué est complété ("padding"), afin d'éviter un problème de mauvais alignement, et terminé avec un indicateur de fin de message (EOM). Ce paquet complété est routé comme un paquet normal.
Dans le moyen 18 de modifications d'en-tête, quand un paquet est considéré comme incorrect (format d'en-tête inconnu), ceci est signalé via les signaux 52 et les données qui suivent sont jetées ("discarded") jusqu'à et y compris le prochain indicateur de fin de paquet (EOP) ou de message (EOM). Une interruption d'erreur peut être générée pour d'autres traitements.
On décrit maintenant, en relation avec la figure 7, un mécanisme particulier selon l'invention, mis en oeuvre dans le module de commutation de la figure 4, permettant de jeter les données non-valides reçues après reconnexion du lien.
En effet, suite à la déconnexion d'un lien, il se peut qu'un paquet incomplet soit toujours présent dans la FIFO de sortie correspondante (124, 125 ou 126). Comme indiqué ci-dessus, la FIFO de sortie concernée jette les données (s'il y en a) jusqu'à et y compris le prochain indicateur de fin de paquet (EOP) ou de message (EOM). Mais la FIFO de sortie concernée n'est pas complètement vidée. Toutes données (formant un ou plusieurs paquets complet (s) ou non) qui y sont encore présentes se trouvent donc devant le paquet de redémarrage HPP qui est également inscrit dans cette FIFO de sortie concernée. Ces données sont non-valides et il convient de les éliminer.
Pour cela, on met en oeuvre une procédure en réception, c'est-à-dire à l'autre extrémité du lien, qui reçoit les données non-valides (avant le paquet de redémarrage) dès que le lien précédemment déconnecté est à nouveau connecté.
En d'autres termes, dans ce qui suit, on décrit (avec un schéma de machine à états) le fonctionnement du moyen 18 de modifications d'entête, après que le lien est (re) connecté. On suppose que l'appareil de commutation situé à l'autre extrémité du lien (re) connecté a mis en oeuvre la procédure décrite ci-dessus d'inscription d'au moins un paquet de redémarrage HPP dans la FIFO de sortie correspondant au lien (re) connecté (alors ou'il se trouvait déconnecté),
Lors de la première initialisation (branchement du système) H211, la machine à états passe d'un état de"repos" ("idle") H200 à un état d'attente de connexion ("waitConnect") H201. Toute donnée reçue H212 différente d'un premier paquet de redémarrage HPP1 fait passer la machine à états dans un état de"purge"H203, dans lequel toute donnée H213 est jetée ("deleted") jusqu'à la réception d'un premier paquet de redémarrage HPP1 (H214). A la réception d'un premier paquet de redémarrage HPP1 (H218), la machine à états reste dans l'état d'attente de connexion H201.
La figure 6 représente la grille (2) en vue de dessus.
Selon les modes particuliers de réalisation suivants : un foyer (3) de préférence en aluminium, approprié aux températures élevées (résistant à plus de 600 degrés), remplissant toutes les contraintes de sécurité demandées à un foyer contenant des braises. A l'intérieur, de préférence du bois (6) sec, nettoyé, spécial par ses caractéristiques, d'une granulométrie de 20 à 100 mm et de 3 à 8 mm d'épaisseur étudié afin qu'il se consument en produisant une braise efficace permettant de pouvoir griller sainement les aliments.
Des allume feu en bois naturel (5) disposes à des emplacements précis situés aux quatre coins du foyer (3) à une distance d'environ 70 à 80 mm des bords, afin qu'ils puissent, après les avoir allumés avec l'allumette barbecue (7) fournie, enflammer le bois.
Une grille (2) de la dimension du foyer en métal alimentaire. Un couvercle en feuilles d'aluminium (4) qui, après la braise éteinte, vient recouvrir le foyer. On peut ainsi jeter le tout en conservant les lieux propres, sans salissures de cendres ou de gras. Cet ensemble reposant sur le support foyer (1) métallique d'une conception nouvelle, étudié spécialement pour permettre au foyer d'être latéralement stable, bien soutenu de part et d'autre, mais surtout de par sa forme, permettant à l'air de circuler librement autours du foyer et ainsi avoir les caractéristiques voulues pour être aux normes requises par la profession.
Cet ensemble selon cette invention est particulièrement destiné à toutes les personnes voulant griller des aliments avec facilité, d'une façon saine et propre, quand et où ils le souhaitent (en respectant toutefois les règles d'usage de sécurité).
L'invention concerne une composition de traitement des matières kératiniques, en particulier des fibres kératiniques humaines telles que les cheveux, comprenant, dans un milieu physiologiquement et en particulier cosmétiquement acceptable, au moins un agent protecteur ou conditionneur, et en outre au moins un polymère poly (alkyl) vinyllactame cationique.
On recherche depuis de nombreuses années, dans l'industrie cosmétique des substances permettant de protéger les cheveux des dégradations engendrées par les agressions atmosphériques, telles que la lumière et la chaleur et les traitements. En particulier, on recherche des produits protégeant la couleur des fibres kératiniques colorées naturellement ou teintes artificiellement et préservant ou renforçant les propriétés mécaniques intrinsèques des fibres kératiniques (la
résistance à la traction, la charge à la rupture et l'élasticité, ou leur résistance au gonflement dans un milieu aqueux).
Les facteurs de transcription CEBP et NFkappaB qui sont exprimés dans le thymus, la rate et les lymphocytes T, sont bien connus de l'homme du métier et agissent en coopération dans la médiation de l'induction de l'expression des gènes des lymphocytes T (Runch et al., 1994) et des cellules HepB3 (Shimizu et al., Gene, (1994) 149,305-310).
Les positions des nucléotides de début, par rapport au site d'initiation de la transcription qui sont à-498 et-469 pour les sites CEBP, et à-260 pour le site NFkB, sur le module régulateur humain, et à-787 et-760, pour les sites CEBP, et à - 301 pour le site NFKB, montrent que les deux sites de régulation sont plus éloignés dans le promoteur de souris. Toutefois, il est vraisemblable que les deux sites se rapprochent dans une structure tridimensionnelle afin de permettre la coactivation par les deux facteurs CEBP et NFkB.
La présence de ces sites potentiels de fixation au CEBP et au NFkB de manière conservée chez l'homme et la souris sur les acides nucléiques régulateurs selon l'invention est compatible avec l'observation selon laquelle l'expression du gène codant pour la protéine ABCA7 humaine est prédominante dans les tissus hématopoïétiques et les lymphocytes T, et interviendrait très probablement dans la médiation cellulaire de l'immunité, notamment dans la pathogenèse de l'athérosclérose (Kaminski et al. Supra).
Comme déjà mentionné précédemment, l'invention concerne un acide nucléique comprenant un polynucléotide ayant au moins 20 nucléotides consécutifs de l'une des séquences nucléotidiques SEQ ID N 1 ou 2, et SEQ ID D ? 4 ou 5, ainsi qu'un acide nucléique de séquence complémentaire.
Sont englobés dans la définition ci-dessus les acides nucléiques comprenant un ou plusieurs fragments"biologiquement actifs"de l'une des séquences SEQ ID N 1 ou 2, et SEO ID ? 4 ou 5. L'homme du métier peut aisément obtenir des fragments biologiquement actifs de ces séquences, en se référant notamment au tableau 3 ci-dessus ainsi qu'aux figures 2 et 3 dans lesquels les différents motifs caractéristiques de la séquence régulatrice du gène ABCA7 sont présentés. L'homme du métier pourra ainsi obtenir de tels fragments biologiquement actifs par synthèse chimique totale ou partielle des polynucléotides correspondants ou encore en faisant agir des endonucléases de restriction afin d'obtenir des
fragments d'ADN recherchés, les sites de restriction présents sur les séquences SEQ ID N 1 à SEQ ID ? 5 pouvant être aisément retrouvés à partir de l'information de séquence, à l'aide de logiciels courants de cartographie de restriction tel que GCG version 9.1 module map.
L'obtention de fragments d'acides nucléiques déterminés à l'aide d'endonucléases de restriction est par exemple décrite dans l'ouvrage de SAMBROOK et al., (Molecular cloning : a laboratory manual, 2ed. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold spring Harbor, New York (1989).
L'invention est donc également relative à un acide nucléique tel que défini ci-dessus, capable de moduler la transcription d'un polynucléotide placé sous son contrôle.
Selon un premier mode de réalisation préféré, un fragment biologiquement actif d'un acide nucléique régulateur de la transcription selon l'invention comprend un premier module conservé (module 2) qui comprend le promoteur de base (boîte TATA) allant du nucléotide en position-1 au nucléotide en position-390, par rapport au site d'initiation de la transcription, le premier nucléotide transcrit étant le nucléotide en position 1112 de la séquence nucléotidique SEQ ID ? 1, ou le nucléotide en position 1221 de la séquence nucléotidique SE ID NO : 4.
Selon un second mode de réalisation, un fragment biologiquement actif d'un acide nucléique régulateur de la transcription selon l'invention comprend les modules 1 et 2 conservés (figure 1) du nucléotide en position-1 au nucléotide en position-860, par rapport au site d'initiation de la transcription, le premier nucléotide transcrit étant le nucléotide en position 1112 de la séquence nucléotidique SEQ ID Nc'l, ou le nucléotide en position 1221 de la séquence nucléotidique SE ID NO : 4.
Selon un troisième mode de réalisation, un tel fragment biologiquement actif d'un acide régulateur de la transcription selon l'invention comprend, outre le promoteur de base (core promoter) et les éléments régulateurs proximaux, également d'autres éléments régulateurs tels que les différents sites GFI1, HNF3B, CEBPB, NF1 et s'étend du nucléotide en position-1 au nucléotide en position-1111, par rapport au site d'initiation de la transcription, le premier nucléotide transcrit étant le nucléotide en position 1112 de la séquence nucléotidique SEQ ID Nol, et au nucléotide en position-1220, par rapport au site d'initiation de la transcription, le
premier nucléotide transcrit étant le nucléotide en position 1221 de la séquence nucléotidique SEQ ID N 4.
ANALYSE DE L'EXON 1 Le demandeur a également identifié les séquences nucléotidiques localisées en aval du site d'initiation de la transcription et correspondant à l'extrémité 5'de l'exon 1, des gènes humain et murin codant pour la protéine ABCA7.
Plus précisément, l'extrémité 5'de l'exon 1, d'une taille de 1210 nucléotides, débute au nucléotide en position 1112 de la séquence SEQ ID N 1 et se termine au nucléotide en position 2322 de la séquence SEQ ID N 1. L'extrémité 5'de l'exon 1 est identifiée comme la séquence SEQ ID ? 3 et la séquence complète de l'exon 1 est identifiée comme la séquence SEQ ID ? 6.
L'exon 1 contient le début de la phase ouverte de lecture du gène ABCA7 humain, le nucléotide A du codon ATG étant localisé en position 1208 des séquences SEQ ID N 3 et 6. L'exon 1 code pour le polypeptide de séquence SEQ ID NO 7.
L'exon 1 est susceptible de contenir des éléments de régulation de l'expression du gène ABCA7, notamment des éléments de type enhancer amplificateur et/ou des éléments de type silencer ou répresseur.
Ce taux de réduction peut être surveillé au cours de la réaction par la quantité de produits obtenus. On calcule alors la quantité d'oxygène équivalente. On peut aussi le suivre par l'exothermicité de la réaction.
Après la régénération, qui peut être effectuée dans des conditions de température et de pression identiques à, ou différentes de celles de la réaction rédox, la composition solide retrouve une activité initiale et peut être utilisée dans un nouveau cycle de réaction.
On peut conduire la réaction rédox (1) et la régénération dans un réacteur classique, tel qu'un réacteur à lit fixe, un réacteur à lit fluidisé ou un réacteur à lit transporté.
On peut donc conduire la réaction rédox (1) et la régénération dans un dispositif à deux étages, à savoir un réacteur et un régénérateur qui fonctionnent simultanément et dans lesquels alternent périodiquement deux charges de composition solide ; on peut également conduire la réaction rédox (1) et la régénération dans un même réacteur en alternant les périodes de réaction et de régénération.
De préférence, la réaction rédox (1) et la régénération sont effectuées dans un réacteur à lit de catalyseur transporté.
On peut utiliser un mode de fonctionnement à un seul passage ou avec recyclage.
Selon un mode de réalisation préféré, le propylène produit comme produit secondaire et/ou le propane n'ayant pas réagi sont recyclés (ou renvoyés) à l'entrée du réacteur, c'est-à-dire qu'ils sont réintroduits à l'entrée du réacteur, en mélange ou parallèlement avec le mélange de départ de propane, de vapeur d'eau et le cas échéant de gaz inerte(s).
Exemples Les exemples suivants illustrent la présente invention sans toutefois en limiter la portée.
Dans les formules indiquées dans les Exemples 1 et 2, x est la quantité d'oxygène lié aux autres éléments et dépend de leurs états d'oxydation.
Les conversions, sélectivités et rendements sont définis comme suit : Nombre de moles de propane ayant réagi Conversion(%)= x 100 du propane Nombre de moles de propane introduites
Nombre de moles d'acide acrylique formées Sélectivité(%) = x 100 en acide acrylique Nombre de moles de propane ayant réagi Nombre de moles d'acide acrylique formées Rendement (%) = ------------------------------------------- x 100 en acide acrylique Nombre de moles de propane introduites Les sélectivités et rendements relatifs aux autres composés sont calculées de manière similaire.
Exemple 1 Préparation du catalyseur A de formule MO1V0,33Nb0,11Te0,22Si1,08Ox a) Préparation d'une solution de niobium Dans un bécher de 600 ml, on introduit 80 g d'eau distillée puis 6,4 g (0,038 moles) d'acide niobique. On ajoute ensuite 12,9 g (0,102 mole) d'acide oxalique dihydraté.
Le rapport molaire acide oxyalique/niobium est donc de 2,69.
On chauffe la solution obtenue précédemment à 60 C pendant 2 heures et 19 minutes, en couvrant pour éviter l'évaporation et en agitant. On obtient ainsi une suspension blanche que l'on laisse refroidir sous agitation jusqu'à 30 C, ce qui dure environ 2 heures. b) Préparation d'une solution de Mo, V et Te Dans un bécher de 600 ml, on introduit 265 g d'eau distillée, 61 g (0,346 mole) d'heptamolybdate d'ammonium, 13,3 g (0,114 moles) de métavanadate d' ammonium NH4VO3 et 17,4 g (0,076 moles) d'acide tellurique (fournisseur : FLUKA).
On chauffe la solution obtenue précédemment à 60 C pendant 1 heure et 35 minutes, en couvrant pour éviter l'évaporation et en agitant. On obtient ainsi une solution limpide rouge que l'on laisse refroidir sous agitation jusqu'à 30 C, ce qui dure environ 2 heures. c) Introduction de la silice Dans 56 g d'eau distillée, on introduit 56 g de silice Ludox (contenant 40% en poids de silice, fournie par la société Dupont). La solution à 20% en poids de silice obtenue est ensuite introduite sous agitation dans la solution de Mo, V et Te préparée précédemment. Cette dernière conserve sa limpidité et sa coloration rouge.
On ajoute ensuite la solution de niobium préparée précédemment. On obtient ainsi un gel orange fluo au bout de quelques minutes d'agitation. On met alors cette solution à l'étuve à 130 C pendant une nuit.
Préférentiellement, on peut coupler, de manière conventionnelle, les anticorps anti-kg à la peroxydase. Les réactifs utilisés pour révéler la peroxydase conjuguée aux anticorps anti-kg contiennent de l'eau oxygénée, substrat de l'enzyme, et un chromogène approprié par exemple de l'orthophénylènediamine, la diamino-3, 3' benzidine ou la TMB (3, 3', 5, 5'-tétraméthylbenzidine) pour obtenir un produit final de réaction insoluble, ou bien l'acide parahydroxyphénylpropionique pour obtenir un produit de réaction fluorescent soluble dans le milieu. La réaction colorimétrique est arrêtée avec de l'acide sulfurique.
Un autre mode préférentiel de réalisation de l'invention est l'utilisation d'anticorps anti-immunoglobuline couplés à t'acétykhotinestérase.
L'acétylcholinestérase est couplée à l'anticorps en utilisant préférentiellement un procédé dérivé de celui décrit dans le brevet français ? 2 550 799 ou un procédé qui comporte schématiquement la préparation de fragments de l'anticorps par une technique connue, la modification de l'enzyme par réaction avec un agent hétérobifonctionnel approprié et enfin le couplage des produits ainsi obtenus.
La révélation de l'activité enzymatique est réalisée de préférence selon la technique bien connue qui emploie l'acétylthiocholine comme substrat de l'enzyme et le réactif d'Ellman, ou acide dithio-5, 5' nitro-2 benzoïque comme chromogène, selon toute variante adaptée au cas examiné, par exemple celle décrite dans Anal. Chem. 57 (1985) 1170- 1173.
Les chromogènes cités sont utilisés tels quels ou sous forme de sels soluble dans l'eau.
L'invention a également pour objet une trousse pour la mise en oeuvre du procédé décrit ci-dessus. Cette trousse comprend avantageusement : - chacun des antigènes suivants : Pal, Ole, Myr, Pl, MAD, Ach, FarCys, Aze, NO-Cys, NO-Tyr, NO-Trp, NO-His, NO2-Tyr, NO-Phe, NO- Arg, NO-Asn, NO-Met, NO-Cr, NO-SAB, Ig3, Ig5, Ig12, Ig13, Ig16, Ig17 et ! g19 ; - éventuellement au moins un anticorps anti-immunoglobuline humaine, d'isotypie A et/ou M tel que défini précédemment.
Cette trousse peut également comprendre un support solide convenable.
Ce test permet notamment : - d'établir un diagnostic précoce de la maladie, en particulier chez les personnes à risque, et donc de ne pas prendre de retard dans le traitement de la maladie ; - de suivre l'évolution de la maladie, et donc de pouvoir adapter le traitement en conséquence.
La détection des anticorps dirigés contre les antigènes suivants : Pl, Ach, Aze, NO-Cys, NO-Tyr, NO-Trp, NO2-Tyr, NO-Asn, NO-Met, Ig5 (anticorps d'isotypie A), ! g12 (anticorps d'isotypie A et d'isotypie M), Ig13 (anticorps d'isotypie A), Ig16 (anticorps d'isotypie A), tag17 (anticorps d'isotypie M) et g19 (anticorps d'isotypie A), permet en particulier d'établir le diagnostic de la SEP. La quantification des anticorps dirigés contre les antigènes suivants : NO2-Tyr, NO-Tyr, Ach et Ig16 (anticorps d'isotypie A), permet de discriminer les formes particulières de la SEP (progressive, rémittente, rémittente progressive).
De même, la détection des anticorps dirigés contre les antigènes suivants : Ole, Pl, MAD, Aze, NO-Cys, FarCys, Ig3 (anticorps d'isotypie A et d'isotypie M), Ig5 (anticorps d'isotypie A), Ig12 (anticorps d'isotypie
A et d'isotypie M), Ig13 (anticorps d'isotypie A et d'isotypie M), g16 (anticorps d'isotypie A et d'isotypie M), Ig17 (anticorps d'isotypie A et d'isotypie M), permet d'établir le diagnostic de la SLA et, en fonction du titre en anticorps, de différencier les 3 classes de cette maladie.