INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
haute énergie d'activation - groupes protecteurs ayant une énergie d'activation élevée) nécessitent en général un chauffage pour la dissociation complète des groupes protecteurs en présence d'un acide après l'exposition. On peut aussi utiliser des systèmes hybrides dans lesquels des groupes protecteurs à énergie d'activation élevée et des groupes protecteurs à faible énergie d'activation sont présents dans le même polymère. On connaît aussi des groupes protecteurs dits "à deux modes de fonctionnement" qui combinent en eux-mêmes une liaison se coupant facilement, par exemple dans un groupe acétal, et une liaison plus difficile à couper, par exemple dans un groupe ester de tert-butyle, de la manière décrite par exemple dans "Proceedings of SPIE", Advances in Resist Technology and Processing XVII, vol.
3999, partie 1, pages 579-590,28 février - 1er mars 2000. On peut aussi utiliser des mélanges de polymères ayant des groupes protecteurs de type chimique différent dans les compositions photosensibles selon l'invention.
Des polymères préférés ayant des groupes protecteurs labiles en milieu acide sont des polymères et des copolymères comprenant les différents types de monomères suivants: 1) des monomères contenant des groupes labiles en milieu acide qui se décomposent en présence d'un acide et qui augmentent la solubilité dans une solution de révélateur aqueuse basique, et 2) des monomères ne contenant pas de groupes labiles en milieu acide, ni de groupes qui favorisent la solubilité dans une solution basique, et/ou 3) des monomères qui favorisent la solubilité du polymère en milieu aqueux basique.
Des exemples de monomères de type 1) sont ceux déjà décrits ci-dessus comme constituant (a2) approprié.
Des exemples de comonomères de type 2) sont: des monomères vinyliques aromatiques comme le styrène, l'a-méthylstyrène, l'acétoxystyrène, l'améthylnaphtalène, l'acénaphtalène, des éthers vinyliques comme l'éther d'éthyle et de vinyle et le 3,4-dihydro-2H-pyrane, l'éther de cyclohexyle et de vinyle, des cyclooléfines comme le norbornène, le 2-hydroxy-5-norbornène, le 2hydroxyéthylcarboxylate de 2-norbornén-5-yle, des composés vinyliques alicycliques comme le vinylnorbornane, le vinyladamantane, le vinylcyclohexane, des (méth) acrylates d'alkyle comme le méthacrylate de méthyle, l'acrylonitrile, le vinylcyclohexanol et l'anhydride maléique.
N N
66 N , , N'-[(E)-(5-methyl-2-furyl)methylidene]-2N Y"N pyrazinecarbohydrazonamide N 67 N ci N'-(E)-[5-(3-chlorophenyl)-2-furyl]methylideneN Y' v" 0 0 2-pyrazinecarbohydrazonamide
#N O#N#O
68 N,, i v N'-{(E)-[5-(2-nitrophenyl)-2-furyl]methylideneN'fV"' 0 \.d 2pyrazinecarbohydrazonamide
#N
N'-{(E)-[5-(3-nitrophenyl)-2-furyl]methylidene} 69 N v , N'-{(E)-[5-(3-nitrophenyl)-2-furyl]methylidene}N -,Y-"NN 1 0 \ / \ 2pyrazinecarbohydrazonamide
N N #O
70 N N , N'-[(E)-3-furylmethylidene]-2N pyrazinecarbohydrazonamide N rr\\ .0-1 [5-((E)-(2Z)-2-[amino(2- 71 Ny'J 0 pyrazine)methylene]hydrazono}methyl)-2-
#N furyl]methyl acetate N #
72 N"/'NO\LyBr N'-{(E)-[5-(4-bromophenyl)-2-furyl]methylidene]N 2-pyrazinecarbohydrazonamide 73 N"N'0' N'-[(E)-(5-nitro-2-furyl)methylidene]-2- '
N ## N'-[(E)-(5-ethyl-2-furyl)methylidene]-2-
74 Nrh)'"'0 pyrazinecarbohydrazonamide
Composé Formule Nom N Br N O# N'-[(E)-(5-bromo-2-furyl)methylidene]-2- 75 N##N#N## pyrazinecarbohydrazonamide
, N '0 N'-[(E)-3-methylphenyimethylidene]- 76 )f N'-[()-3-methylpheny!methylidene]-
A titre d'exemple de substituants du radical hydrocarboné, on compte les fonctions aminées du type : # -Ra-NR1R2 dans lequel Ra ne représente rien ou représente un radical divalent hydrocarboné aliphatique, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé en C1-C20, de préférence en Cl-Clo, et par exemple (C,-C1Q)alkylène ; et R, et R2 représentent indépendamment H ; un groupe (C,C20)alkyle, de préférence (C1-C10)alkyle ; un groupe (C3-Ca)cycloalkyle ; ou un groupe (C6-C10)aryle, de préférence phényle ; # -Rb-NH-Rc-NR1R2 dans lequel Rb et Rc,identiques ou différents, sont tels que définis pour Ra ci-dessus ; et R, et R2 sont tels que définis ci- dessus ; R3 "~\. Ra dans lequel R3 représente alkyle en C1-CZO' mieux R3 Rs
encore (C,-C,o)alkyle, par exemple (C1-C3)alkyle et notamment méthyle ; aryle en (C,-C2.), mieux encore (C,,-C,,)aryle, par exemple phényle ; ou arylalkyle dans lequel les parties aryle et alkyle sont telles que définies cidessus ; R4 représente un atome d'hydrogène ; alkyle en C1-C20, mieux encore (C1-C12)alkyle, par exemple méthyle ; alkylcarbonyle en C2-C21, mieux encore (C2-Cl3)alkylcarbonyle,; aryle en (C6-C2.), mieux encore (C6- C10)aryle par exemple phényle ; ou arylalkyle et préférablement (C6- C,o)aryl-(C,-C,2)alkyle ; ou bien encore R4 représente 0 ; et 0 R3 dans lequel R3 et R4 sont tels que définis ci-dessus.
N 1 R3 R4 Arylalkyle est préférablement benzyle.
Il est cependant préférable que la concentration en groupements -OR', O-CO-R', aminés, amidés, epoxydés ou uréido, lorsqu'ils sont présents dans la résine soit limitée, de façon à ne pas dépasser le seuil de tolérance au-delà duquel la stabilité de l'émulsion serait compromise.
Les résines silicones (b) sont des polymères organopolysiloxanes ramifiés bien connus dont les procédés de préparation sont décrits dans de nombreux brevets. Comme exemples concrets de résines utilisables, on peut citer les résines MQ, MDQ, DQ, DT et MDT hydroxylées et des mélanges de celles-ci.
Dans ces résines, chaque groupement OH est porté par un atome de silicium appartenant à un motif M, D ou T.
De préférence, comme exemples de résines utilisables, on peut citer les résines organopolysiloxanes hydroxylées ne comprenant pas, dans leur structure, de motif Q. De manière plus préférentielle, on peut citer les résines DT et MDT hydroxylées comprenant au moins 20% en poids de motifs T et ayant une teneur pondérale en groupement hydroxyle allant de 0,1 à 10% et, mieux, de
0,2 à 5%. Dans ce groupe de résines plus préférentielles, celles où le nombre moyen de substituants Ro pour un atome de silicium est compris, par molécule, entre 1,2 et 1,8, conviennent plus particulièrement. De manière encore plus avantageuse, on utilise des résines de ce type, dans la structure desquelles au moins 80% en nombre des substituants Ro sont des radicaux méthyle.
La résine (b) est liquide à température ambiante. De manière préférée, la résine présente une viscosité dynamique à 25 C comprise entre 0,2 et 200 Pa.s.
La résine est incorporée dans la composition lubrifiante à raison de 0,5 à 50 parties en poids pour cent parties en poids de la somme des constituants (a), (b), (c) et (d), de préférence à raison de 3 à 30, mieux de 5 à 15 parties en poids.
Le réticulant (c) soluble dans la phase silicone comprend au moins deux fonctions capables de réagir avec la résine (b) de façon à provoquer une réticulation de ladite résine. De manière avantageuse, lesdites fonctions réactives du réticulant (c) réagissent avec la résine (b) dans les conditions de préparation de l'émulsion.
Le réticulant (c) a de préférence pour formule : dans laquelle : a est 1 ou 2 ; Y est un groupe monovalent organique ; et les groupes Zi, identiques ou différents, sont choisis parmi -OXa-O-C-Xb et -O-N=CX1X2 dans lesquels Xa, Xb, X1 et X2 sont indépendamment des radicaux hydrocarbonés aliphatiques, linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, de préférence en C1-C20 (par exemple en C1-C10); étant entendu que X, et X2 peuvent en outre représenter hydrogène et que Xa est un radical éventuellement substitué par (C1-C10)alcoxy.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, a représente 1, de telle sorte que le réticulant (c) a pour formule : YSi(Zi)3.
De préférence encore, les groupes Zi sont identiques entre eux.
Un groupe préféré de réticulant (c) est formé par l'ensemble des organotrialcoxysilanes, des organotriacyloxysilanes, des organotrioximosilanes et des tétraalkylsilicates.
Plus généralement, s'agissant du symbole Y, l'expression "groupe monovalent organique" englobe notamment les radicaux aliphatiques, saturés ou insaturés, linéaires ou ramifiés en C,-C3o ; les radicaux carbocycliques, mono- ou polycycliques, saturés, insaturés ou aromatiques en C6-C30 ; ainsi que les radicaux présentant à la fois une partie aliphatique telle que définie ci-dessus et une partie carbocyclique telle que définie ci-dessus ; chacun de ces radicaux étant éventuellement substitué par une fonction amino, époxy, thiol ou ester.
En fait, les conditions actuelles ne sont pas extrapolables à l'échelle industrielle.
Ce procédé implique en effet, des concentrations à sec de la masse réactionnelle dans l'éthanol et de celle dans l'acétate d'éthyle. II implique également l'utilisation de solvants chlorés indésirables du point de vue de la protection de l'environnement.
Enfin, le produit isolé contient encore de l'isomère (E) et plusieurs reprises dans un milieu contenant de l'acétate d'éthyle et du chlorure de méthylène sont nécessaires afin de cristalliser (par "battage") l'isomère (Z) désiré et de l'isoler avec une pureté isomérique acceptable.
L'objectif de la présente invention est de fournir une alternative efficace au procédé connu permettant de remédier aux inconvénients précités.
L'invention a ainsi pour objectif de fournir un procédé simplifié, facile à mettre en oeuvre à l'échelle industrielle et permettant d'obtenir l'oxime-9(Z) avec une pureté isomérique satisfaisante.
L'objectif de l'invention est d'éviter notamment l'emploi de solvants chlorés néfastes du point de vue de l'environnement ainsi que la purification laborieuse par battage dans un mélange acétate d'éthyle/chlorure de méthylène.
La présente invention a pour objet un procédé pour la préparation de la 9-déoxo-9(Z)-hydroxyiminoérythromycine A répondant à la formule (I) suivante comprenant successivement les étapes consistant à - faire réagir dans l'eau, la 9-déoxo-9(E)- hydroxyiminoérythromycine A répondant à la formule (II) suivante avec une base, - acidifier le mélange réactionnel jusqu'à un pH compris entre 8et10; - extraire ledit mélange par un solvant organique ; - concentrer sous vide la phase organique résultante ; - isoler la 9(Z)-érythromycine-oxime désirée.
Les inventeurs ont mis en évidence, de manière inattendue, que l'on pouvait isomériser la 9-(E)-érythromycine-oxime en suspension dans l'eau, sans la présence d'un solvant alcoolique, puis extraire directement après neutralisation du sel, l'isomère désiré à partir de la suspension réactionnelle et l'isoler avec une pureté satisfaisante.
Ils ont ainsi mis en évidence que l'on pouvait extraire l'isomère (Z) désiré de la suspension réactionnelle par un solvant organique tel que l'acétate d'éthyle et obtenir sa cristallisation par simple concentration dans le solvant d'extraction, sans ajout d'un autre solvant dans le milieu. Celui-ci peut être capable de former un solvat insoluble ou peu soluble avec la 9(Z)-oxime. II ne nécessite pas de cristallisations subséquentes. Selon un mode de réalisation préféré, l'invention s'étend ainsi à l'utilisation de tout solvant organique capable de former, comme l'acétate d'éthyle, un solvat avec la 9(Z)-oxime cristallisable, notamment par concentration, dans ledit solvant d'extraction, alors que l'isomère (E) reste majoritairement en solution dans le milieu d'extraction.
Les inventeurs ont ainsi mis au point un procédé simplifié permettant de s'affranchir de la précipitation au chlorure de méthylène ainsi que de la purification multi-étapes nécessaire dans le procédé connu.
Les inventeurs ont également mis en évidence que l'on pouvait avantageusement recycler les jus-mères (contenant un mélange des isomères E et Z) recueillis après concentration de la phase organique d'extraction et isolation de l'isomère (Z) cristallisé, en reformant une suspension aqueuse du mélange d'isomères qu'ils contiennent après élimination de la majeure partie du solvant d'extraction.
Le procédé selon l'invention va être décrit plus en détails ci- après Celui-ci consiste tout d'abord à traiter la 9(E)-érythromycine- oxime, en suspension dans l'eau, par une base de préférence hydrosoluble. On peut citer à titre d'exemples, les hydroxydes de métal alcalin ou alcalino-terreux, les ammoniums, les carbonates, les alcoxydes. Celle-ci consiste préférentiellement en de la lithine.
La base est utilisée en une quantité de préférence comprise entre 1 et 10 équivalents, de préférence 2 équivalents molaires par rapport à la 9(E)-oxime.
La réaction est généralement conduite sous atmosphère inerte. Le rapport ZIE est température-dépendant et on préfère effectuer la réaction à une température comprise entre 10 et 25 C, plus préférentiellement voisine de 20 C.
Le milieu réactionnel est de préférence agité pendant 6 à 24 heures, plus préférentiellement environ 11 heures. L'isomère (Z) désiré est ensuite extrait avec un solvant organique, en particulier avec de l'acétate d'éthyle ou autre solvant équivalent.
Pour ce faire, le mélange réactionnel est tout d'abord acidifiée jusqu'à un pH de préférence de l'ordre de 9,5.
La production des invertébrés transgéniques est effectuée par exemple dans le cas de Drosophila melanogaster par transfert génétique sous la médiation de l'élément P (Hay et al., 1997) ou chez Caenorhabditis elegans par transfert génétique sous la médiation de- transposons (par exemple par Tcl ; Plasterk, 1996).
L'objet de l'invention réside donc également dans des invertébrés transgéniques qui contiennent au moins l'un des acides nucléiques conformes à l'invention, de préférence des invertébrés transgéniques des espèces Drosophila melanogaster ou Caenorhabditis elegans, ainsi que leurs descendants transgéniques. Les invertébrés transgéniques contiennent de préférence les polypeptides conformes à l'invention sous une forme s'écartant du type sauvage.
L'objet de la présente invention réside en outre dans un procédé de production des polypeptides conformes à l'invention. Pour la production des polypeptides qui sont codés par les acides nucléiques conformes à l'invention, on peut cultiver dans des conditions appropriées des celluleshôtes qui contiennent l'un des acides nucléiques conformes à l'invention. L'acide nucléique à exprimer peut alors être adapté au "Codon Usage" des cellules-hôtes. Les polypeptides voulus peuvent ensuite être isolés d'une manière clas-
sique des cellules ou du milieu de culture. Les polypeptides peuvent aussi être produits dans des systèmes in vitro.
Un procédé rapide d'isolement des polypeptides conformes à l'invention qui sont synthétisés par les cellules-hôtes avec utilisation d'un acide nucléique conforme à l'invention débute par l'expression d'une protéine de fusion dont le partenaire de fusion peut être purifié par affinité d'une manière simple. Le partenaire de fusion peut par exemple être la glutathion S-transférase.
La protéine de fusion peut ensuite être purifiée sur une colonne de chromatographie d'affinité vis-à-vis du glutathion. Le partenaire de fusion peut être séparé par coupure protéolytique partielle par exemple sur des linkers entre le partenaire de fusion et le polypeptide de l'invention à purifier. Le linker peut se présenter de façon telle qu'il comprend des amino-acides-cibles, tels que des restes d'arginine et de lysine, qui définissent des sites de coupure par la trypsine. Pour produire de tels linkers, on peut utiliser des techniques classiques de clonage faisant intervenir des oligonucléotides.
D'autres procédés classiques de purification sont basés sur l'électrophorèse préparative, la FPLC, la HPLC (par exemple avec utilisation de colonnes de filtration sur gel, d'inversion de phase ou de colonnes légèrement hydrophobes), filtration sur gel, précipitation différentielle, chromatographie par échange ionique et chromatographie d'affinité.
Etant donné que les récepteurs B du GABA sont des protéines membranaires, on effectue de préférence, dans les opérations de purification, des extractions au détergent, par exemple en utilisant des détergents qui n'influent pas ou n'influent que peu sur les structures secondaires et tertiaires des polypeptides, comme des détergents non ioniques.
La purification des polypeptides conformes à l'invention peut comprendre l'isolement de membranes à
partir de cellules-hôtes qui expriment les acides nucléiques conformes à l'invention. Ces cellules expriment de préférence les polypeptides conformes à l'invention en un nombre suffisant de copies, de manière que la quantité de polypeptides dans une fraction de membrane soit au moins dix fois supérieure à celle que l'on rencontre dans des membranes comparables de cellules qui expriment naturel- lement les récepteurs B du GABA ; laquantité est très avantageusement au moins cent fois supérieure et de façon tout particulièrement appréciée au moins mille fois supérieure.
Les termes "isolement ou purification", au sens où on les utilise ici, signifient que les polypeptides conformes à l'invention sont séparés d'autres protéines ou d'autres macromolécules de la cellule ou du tissu. Une composition contenant les polypeptides conformes à l'invention, en ce qui concerne sa teneur en protéine par rapport à une préparation obtenue à partir des cellules-hôtes, est enrichie d'un facteur au moins égal à dix et notamment d'un facteur au moins égal à cent.
Les polypeptides conformes à l'invention peuvent aussi être purifiés par affinité sans partenaire de fusion, à l'aide d'anticorps qui se fixent aux polypeptides.
L'objet de la présente invention réside aussi dans des procédés de production des acides nucléiques conformes à l'invention. Les acides nucléiques de l'invention peuvent être produits d'une façon simple. Par exemple, les molécules d'acides nucléiques peuvent être synthétisées par voie entièrement chimique. On peut aussi ne synthétiser chimiquement que de courts tronçons des séquences conformes à l'invention et marquer ces oligonucléotides par la radioactivité ou avec un colorant fluorescent. Les oligonucléotides marqués peuvent être utilisés pour explorer des banques d'ADNc établies à partir d'ARNm d'insectes ou des banques génomiques établies à partir d'ADN génomique d'insectes. Des clones auxquels s'hybrident les oligo-
nucléotides marqués sont choisis en vue de l'isolement de l'ADN concerné. Après caractérisation de l'ADN isolé, on obtient de façon simple les acides nucléiques conformes à l'invention.
Les acides nucléiques conformes à l'invention peuvent aussi être produits par le procédé PCR avec utilisation d'oligonucléotides synthétisés chimiquement.
Le terme "oligonucléotide(s)", au sens où on l'utilise ici, désigne des molécules d'ADN qui sont constituées de 10 à 50 nucléotides, de préférence de 15 à 30 nucléotides. Ces molécules sont synthétisées par voie chimique et peuvent être utilisées comme sondes.
dans lesquelles: R3 , identiques ou différents, désignent un atome d'hydrogène ou un radical CH3 ; A, identiques ou différents, représentent un groupe alkyle, linéaire ou ramifié, de 1 à 6 atomes de carbone, de préférence 2 ou 3 atomes de carbone ou un groupe hydroxyalkyle de 1 à 4 atomes de carbone ; R4, R5, R6, identiques ou différents, représentent un groupe alkyle ayant de 1 à 18 atomes de carbone ou un radical benzyle et de préférence un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone; R1 et R2 , identiques ou différents, représentent hydrogène ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone et de préférence méthyle ou éthyle; X désigne un anion dérivé d'un acide minéral ou organique tel qu'un anion méthosulfate ou un halogénure tel que chlorure ou bromure.
Ainsi, parmi ces polymères de la famille (1), on peut citer : - les copolymères d'acrylamide et de diméthylaminoéthyl méthacrylate quaternisé au sulfate de diméthyle ou avec un hologénure de diméthyle, tel que celui vendu sous la dénomination HERCOFLOC par la société HERCULES,
- les copolymères d'acrylamide et de chlorure de méthacryloyloxyéthyltriméthylammonium décrits par exemple dans la demande de brevet EP-A-080976 et vendus sous la dénomination BINA QUAT P 100 par la société CIBA GEIGY, - le copolymère d'acrylamide et de méthosulfate de méthacryloyloxyéthyltriméthylammonium vendu sous la dénomination RETEN par la société HERCULES, - les copolymères vinylpyrrolidone / acrylate ou méthacrylate de dialkylaminoalkyle quaternisés ou non, tels que les produits vendus sous la dénomination "GAFQUAT" par la société ISP comme par exemple "GAFQUAT 734" ou "GAFQUAT 755" ou bien les produits dénommés "COPOLYMER 845, 958 et 937". Ces polymères sont décrits en détail dans les brevets français 2. 077.143 et 2.393.573, - les terpolymères méthacrylate de diméthyl amino éthyle/ vinylcaprolactame/ vinylpyrrolidone tel que le produit vendu sous la dénomination GAFFIX VC 713 par la société ISP, - les copolymère vinylpyrrolidone / méthacrylamidopropyl dimethylamine commercialisés notamment sous la dénomination STYLEZE CC 10 par ISP, - et les copolymères vinylpyrrolidone / méthacrylamide de diméthylaminopropyle quaternisés tel que le produit vendu sous la dénomination "GAFQUAT HS 100" par la société ISP .
(2) Les dérivés d'éthers de cellulose comportant des groupements ammonium quaternaire décrits dans le brevet français 1 492 597, et en particulier les polymères commercialisés sous les dénominations "JR" (JR 400, JR 125, JR 30M) ou "LR" (LR 400, LR 30M) par la Société Union Carbide Corporation. Ces polymères sont également définis dans le dictionnaire CTFA comme des ammonium quaternaires d'hydroxyéthylcellulose ayant réagi avec un époxyde substitué par un groupement triméthylammonium .
(3) Les dérivés de cellulose cationiques tels que les copolymères de cellulose ou les dérivés de cellulose greffés avec un monomère hydrosoluble d'ammonium quaternaire, et décrits notamment dans le brevet US 4 131 576, tels que les hydroxyalkyl celluloses, comme les hydroxyméthyl-, hydroxyéthyl- ou hydroxypropyl celluloses greffées notamment avec un sel de méthacryloyléthyl
triméthylammonium, de méthacrylmidopropyl triméthylammonium, de diméthyldiallylammonium.
(6) Les polyaminoamides solubles dans l'eau préparés en particulier par polycondensation d'un composé acide avec une polyamine ; ces polyaminoamides peuvent être réticulés par une épihalohydrine, un diépoxyde, un dianhydride, un dianhydride non saturé, un dérivé bis-insaturé, une bishalohydrine, un bis-azétidinium, une bis-haloacyldiamine, un bis-halogénure d'alkyle ou encore par un oligomère résultant de la réaction d'un composé bifonctionnel réactif vis-à-vis d'une bis-halohydrine, d'un bis-azétidinium, d'une bis-haloacyldiamine, d'un bis-halogénure d'alkyle, d'une épilhalohydrine, d'un diépoxyde ou d'un dérivé bis-insaturé ; l'agent réticulant étant utilisé dans des proportions allant de 0,025 à 0,35 mole par groupement amine du polyaminoamide ; ces polyaminoamides peuvent être alcoylés ou s'ils comportent
une ou plusieurs fonctions amines tertiaires, quaternisées. De tels polymères sont notamment décrits dans les brevets français 2 252. 840 et 2. 368.508 .
Les roues arrière sont ainsi entraînées par le moto/générateur arrière RMG 70 avec une force d'entraînement relativement faible qui est suffisante pour entraîner le véhicule dans le mode d'entraînement à quatre roues motrices, sur une surface de roulement plane présentant un coefficient de frottement relativement élevé. Dans ce cas le moto/générateur arrière RMG 70 est actionné avec une charge relativement faible, qui ne nécessite qu'une quantité relativement faible de consommation d'énergie électrique.