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Parmi tous les polymères cationiques susceptibles d'être utilisés dans le cadre de la présente invention, on préfère mettre en oeuvre les polymères des familles (1), (6), (7) (8) et (11) et encore plus préférentiellement les polymères aux motifs récurrents de formules (W) et (U) suivantes : et notamment ceux dont le poids moléculaire, déterminé par chromatographie par perméation de gel, est compris entre 9500 et 9900 ;
Le composé vinylique substitué contenant au moins un atome basique peut être également un sel de dialkyldiallylammonium tel que le chlorure de diméthyidiallylammonium. Les copolymères d'acide acrylique et de ce dernier monomère sont proposés sous les appellations MERQUAT 280, MERQUAT 295 et MERQUAT PLUS 3330 par la société CALGON.
La présente invention a encore pour but principal de résoudre le nouveau problème technique consistant en la fourniture d'un procédé de test qui permette de trouver de nouvelles substances actives dans le domaine de la lipolyse, présentant une grande efficacité et qui puisse être utilisé pour la préparation de i nouvelles compositions cosmétiques, ou même des compositions pharmaceutique, mettant en oeuvre une telle activité lipolytique, notamment dans le cadre d'une activité de diminution, retard ou résorption de dépôts graisseux, ou d'une activité
Résumé de l' invention La présente invention permet d' atteindre si multanément l 'en s emble des but s précédemment énoncés d'une man ière p articulièrement in attendue, n on
0 Ainsi, la présente invention fournit un nouveau procédé de test d'une substance éventuellement active dans le domaine de la lipolyse, qui est basé sur la capacité d'inhibition de l'enzyme lipoprotéine lipase par une substance
L'enzyme lipoprotéine lipase ou LPL est une enzyme produite par les adipocytes et sécrétée par exocytose vers les cellules endothéliales des capillaires sanguins, qui présente la capacité d'hydrolyser les liaisons esters en position 1,3 des triacylglycérols portés par les Chylomicrons et les lipoprotéines de très faibles densités VLDL circulant dans la lumière des vaisseaux sanguins comme décrit par Goldbreg I.J. dans l'article "Lipoprotein lipase and lipolysis: central roles in lipoprotein metabolism and atherogenesis" publié dans le Journal of Lipid Research, 37, 693-707, (1996), pour libérer des acides gras qui sont ensuite captés par des adipocytes. On notera que les Chylomicrons et les VLDL sont des lipoprotéines plasmatiques humaines qui véhiculent les lipides vers les tissus, voir Quinn D. et al, dans l'article "Lipoprotein lipase: mechanism of action and role in
lipoprotein metabolism" publié dans Prog. Lipid Res. 22, 35-78 (1982).
D'autre part, on notera aussi que les acides gras transférés à travers la membrane plasmique de la cellule adipeuse, seront pris en charge par des systèmes biochimiques internes de l'adipocyte pour être stockés à nouveau sous forme de triacylglycérols comme mis en évidence par Féve B. dans l'article "L'adipocyte, une cellule très active que l'on commence à savoir contrôler" publié dans
Ainsi, la présente invention est basce sur le nouveau concept qui est d'une part de mettre au point un procédé de test d'une substance éventuellement active dans le domaine de la lipolyse, de préférence qui soit capable d'agir sur l'inhibition de la lipoprotéine lipase, et d'autre part d'utiliser toute substance présentant une telle activité dans le domaine de la lipolyse, et en particulier capable d'inhiber b l'activité de la lipoprotéine lipase, comme nouvelle voie d'action pour limiter le
Ainsi, sous un premier aspect, la présente invention fournit un procédé de test d'une substance éventuellement active dans le domaine de la lipolyse, s caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: a) on prépare un substrat contenant au moins un triacylglycérol, b) on met ce substrat en contact avec une substance éventuellement active dans le domaine de la lipolyse, et avec une lipoprotéine lipase, en présence d'un co-facteur de lipoprotéine lipase, pendant un temps suffisant pour libérer au moins o en partie l'acide gras du triacylglycérol, et c) on dose la capacité d'inhibition de la libération de l'acide gras résultant de l'activité de la lipoprotéine lipase, sous l'action de ladite substance éventuel lement active et on évalue les résultat s de l 'inhibition que l 'on compare au résultat obtenu en l'absence de la substance testée éventuellement active ou relativement au résultat obtenu en présence d'un inhibiteur connu servant de référence. Ainsi, l'homme de l'art comprend aisément que lorsque les résultats d'inhibition de la substance éventuellement active sont signifcativement supérieurs au témoin, c'est-à-dire sans substance active, ou similaires ou significativement supérieurs à un inhibiteur de référence, l'activité de la substance
dans le domaine lipolytique peut être caractérisée, c'est-à-dire confirmoe ou non.
ainsi que les produits d'oxydation et/ou de quaternisation de ces polymères. De tels polymères sont notamment décrits dans les brevets français 2.162. 025 et 2.280. 361.
(3) Les polyaminoamide solubles dans l'eau préparés en particulier par polycondensation d'un composé acide avec une polyamine ; ces polyaminoamide peuvent être réticulés par une épihalohydrine, un diépoxyde, un dianhydride, un dianhydride non saturé, un dérivé bis-insaturé, une bis-halohydrine, un bis-azétidinium, une bis-haloacyldiamine, un bis-halogénure d'alkyle ou encore par un oligomère résultant de la réaction d'un composé bifonctionnel réactif vis-à-vis d'une bis-halohydrine, d'un bisazétidinium, d'une bis-haloacyldiamine, d'un bis-halogénure d'alkyle, d'une épilhalohydrine, d'un diépoxyde ou d'un dérivé bis-insaturé ; l'agent réticulant étant utilisé dans des proportions allant de 0,025 à 0,35 mole par groupement amine du polyaminoamide ; ces polyaminoamide peuvent être alcoylés ou s'ils comportent une ou plusieurs fonctions amines tertiaires, quaternisées. De tels polymères sont notamment décrits dans les brevets français 2. 252. 840 et 2.368. 508.
(4) Les dérivés de polyaminoamide résultant de la condensation de polyalcoylènes polyamines avec des acides polycarboxyliques suivie d'une alcoylation-par des agents bifonctionnels. On peut citer par exemple les polymères acide adipique- diacoylaminohydroxyalcoyldialoylène triamine dans lesquels le radical alcoyle comporte de 1 à 4 atomes de carbone et désigne de préférence méthyle, éthyle, propyl. De tels polymères sont notamment décrits dans le brevet français 1.583. 363.
(5) Les polymères obtenus par réaction d'une polyalkylène polyamine comportant deux groupements amine primaire et au moins un groupement amine secondaire avec un acide dicarboxylique choisi parmi l'acide diglycolique et les acides dicarboxyliques aliphatiques saturés ayant de 3 à 8 atomes de carbone. Le rapport molaire entre le polyalkylène polyamine et l'acide dicarboxylique étant compris entre 0,8 : 1 et 1,4 : 1 ; le polyaminoamide en résultant étant amené à réagir avec l'épichlorhydrine dans un rapport molaire d'épichlorhydrine par rapport au groupement amine secondaire du polyaminoamide compris entre 0,5 : 1 et 1,8 : 1. De tels polymères sont notamment décrits dans les brevets américains 3.227. 615 et 2.961. 347.
"Delsette 101"par la société Hercules dans le cas du copolymère d'acide adipique/époxypropyl/diéthylène-triamine.
(6) Les cyclopolymères d'alkyl diallyl amine ou de dialkyl diallyl ammonium tels que les homopolymères ou copolymères comportant comme constituant principal de la chaîne des motifs répondant aux formules (V) ou (VI) : formules dans lesquelles k et t sont égaux à 0 ou 1, la somme k + t étant égale à 1 ; Rg désigne un atome d'hydrogène ou un radical méthyle ; R7 et Rg, indépendamment l'un de l'autre, désignent un groupement alkyle ayant de 1 à 22 atomes de carbone, un groupement hydroxyalkyle dans lequel le groupement alkyle a de préférence 1 à 5 atomes de carbone, un groupement amidoalkyle inférieur (C1-C4), ou R7 et Rg peuvent désigner conjointement avec l'atome d'azote auquel ils sont rattachés, des groupement hétérocycliques, tels que pipéridinyle ou morpholinyl ; R7 et Rg indépendamment l'un de l'autre désignent de préférence un groupement alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone ; Y'est un anion tel que bromure, chlorure, acétate, borate, citrate, tartrate, bisulfate, bisulfite, sulfate, phosphate. Ces polymères sont notamment décrits dans le brevet français 2. 080. 759 et dans son certificat d'addition 2.190. 406.
(7) Le polymère de diammonium quaternaire contenant des motifs récurrents répondant à la formule : formule (VII) dans laquelle : R10, R11, R12 et R13, identiques ou différents, représentent des radicaux aliphatiques, alicycliques, ou arylaliphatiques contenant de 1 à 20 atomes de carbone ou des radicaux hydroxyalkylaliphatiques inférieurs, ou bien Rio. P1, R12 et R13, ensemble ou séparément, constituent avec les atomes d'azote auxquels ils sont rattachés des hétérocycles contenant éventuellement un second hétéroatome autre que l'azote ou bien Rlo, Rll, R12 et R13 représentent un radical alkyle en Ci-Cg linéaire ou ramifié substitué par un groupement nitrile, ester, acyle, amide ou -CO-O- R14-D ou -CO-NH- R14-D où R14 est un alkylène et D un groupement ammonium quaternaire ; A1 et 81 représentent des groupements polyméthyléniques contenant de 2 à 20 atomes de carbone pouvant être linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, et pouvant contenir, liés à ou intercalés dans la chaîne principale, un ou plusieurs cycles aromatiques, ou un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre ou des groupements sulfoxyde, sulfone, disulfure, amino, alkylamino, hydroxyle, ammonium quaternaire, uréido, amide ou ester, et X'désigne un anion dérivé d'un acide minéral ou organique ; A 1, R10 et R12 peuvent former avec les deux atomes d'azote auxquels ils sont rattachés un cycle pipérazinique ; en outre si A 1 désigne un radical alkylène ou hydroxyalkylène linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, 81 peut également désigner un groupement- (CH2) n-CO-D-OC- (CH2) n- dans lequel n est compris entre 1 et 100 et de préférence entre 1 et 50, et D désigne : a) un reste de glycol de formule :-0-Z-O-, où Z désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié ou un groupement répondant à l'une des formules suivantes : où x et y désignent un nombre entier de 1 à 4, représentant un degré de polymérisation défini et unique ou un nombre quelconque de 1 à 4 représentant un degré de polymérisation moyen ; b) un reste de diamine bis-secondaire tel qu'un dérivé de pipérazine ;
c) un reste de diamine bis-primaire de formule :-NH-Y-NH-, où Y désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié, ou bien le radical bivalent - CH2-CH2-S-S-CH2-CH2- ; d) un groupement uréylène de formule :-NH-CO-NH-.
De préférence, X'est un anion tel que le chlorure ou le bromure. Ces polymères ont une masse moléculaire moyenne en nombre généralement comprise entre 1000 et 100000.
Des polymères de ce type sont notamment décrits dans les brevets français 2.320. 330, 2.270. 846,2. 316.271, 2.336. 434 et 2.413. 907 et les brevets US 2.273. 780, 2.375. 853, 2.388. 614,2. 454. 547, 3.206. 462,2. 261.002, 2.271. 378,3. 874.870, 4.001. 432, 3.929. 990, 3.966. 904,4. 005. 193, 4.025. 617,4. 025.627, 4.025. 653,4. 026.945 et 4.027. 020.
(8) Les polymères de polyammonium quaternaire constitués de motifs de formule (IX) dans laquelle : p désigne un nombre entier variant de 1 à 6 environ, D peut être nul ou peut représenter un groupement (CH) r-CO-dans lequel r désigne un nombre égal à 4 ou à 7, et
X- est un anion dérivé d'un acide minéral ou organique.
Ces deux réseaux sont globalement identiques excepté en ce qui concerne leurs sensibilités spectrales (relatives à la grandeur à mesurer) qui sont légèrement différentes l'une de l'autre. Une analyse conjointe des deux réseaux permet ainsi une mesure différentielle qui ne nécessite pas une analyse spectrale précise.
Le système objet de l'invention permet de mesurer indifféremment plusieurs sortes de grandeurs physiques, en particulier des températures, des contraintes et des pressions et ce, de façon moins coûteuse que les techniques connues, mentionnées plus haut.
En particulier, ce système est susceptible d'utiliser des réseaux apodisés, plus faciles à fabriquer que les réseaux chirpés, utilisés dans la technique divulguée par le document [2], et beaucoup moins sensibles que ces derniers à des déformations spectrales.
De façon précise, la présente invention a pour objet un système de mesure d'au moins un paramètre, ce système comprenant au moins un capteur optique, ce, système étant caractérisé en ce que chaque capteur comprend deux réseaux de Bragg, ces réseaux de Bragg ayant des sensibilités respectives qui sont ajustées de manière que les spectres respectifs des deux réseaux présentent un décalage spectral relatif qui est fonction du ou des paramètres à mesurer, ces réseaux de Bragg étant respectivement inscrits dans deux guides optiques, le système comprenant en outre
une source optique prévue pour fournir une lumière aux deux guides optiques afin d'interroger ceux-ci.
Les guides optiques peuvent être avantageusement les coeurs respectifs de fibres optiques ayant chacune un seul coeur ou les coeurs d'une fibre optique multicoeurs.
Selon un mode de réalisation préféré du système objet de l'invention, ce système comprend en outre un circulateur qui relie la source optique aux deux guides optiques.
De préférence, le système comprend en outre un premier coupleur optique et des premier et deuxième dispositifs de séparation spectrale, le premier coupleur optique étant connecté entre le circulateur et l'un des deux guides optiques pour permettre l'analyse, respectivement par les premier et deuxième dispositifs de séparation spectrale, du signal réfléchi par l'un des deux réseaux de Bragg et du signal réfléchi par ces deux réseaux de Bragg.
Le système peut comprendre en outre un commutateur 2x2 qui est couplé, d'un côté, au premier coupleur optique et au circulateur et, de l'autre côté, aux deux guides optiques.
Le système peut comprendre aussi un deuxième coupleur optique et un troisième dispositif de séparation spectrale qui est relié à la source optique par l'intermédiaire de ce deuxième coupleur optique pour analyser la lumière émise par la source optique.
Les réseaux de Bragg sont de préférence des réseaux apodisés.
Selon un mode de réalisation particulier du système objet de l'invention, le paramètre est une déformation et les axes longitudinaux respectifs des deux réseaux de Bragg forment des angles différents avec l'axe de la déformation.
Selon un autre mode de-réalisation particulier, le paramètre est une déformation et le système comprend en outre un support comportant deux parties dont les sections respectives sont différentes, les deux réseaux de Bragg étant respectivement disposés dans ces deux parties.
Selon un autre mode de réalisation particulier, les deux réseaux de Bragg sont respectivement inscrits dans les deux coeurs d'une fibre optique à deux coeurs, ces deux coeurs étant différents l'un de l'autre de façon à donner des sensibilités de mesure différentes aux réseaux de Bragg inscrits dans ces coeurs.
Dans ce cas, les deux coeurs peuvent avoir des dopages différents ou des diamètres différents.
Selon un autre mode de réalisation particulier, les deux réseaux de Bragg ont des revêtements différents permettant d'ajuster leur sensibilité par rapport à chaque paramètre à mesurer.
Tss : temps de grillage, temps nécessaire à une température donnée pour que le couple augmente de 5 unités Mooney.
La densité de réticulation (MH) et le temps de réticulation (tgo) du mélange obtenu ont été mesurés à 180 C à l'aide d'un rhéomètre Monsanto ODR 2000 E (Alpha Technologies, arc d'oscillation 30, fréquence d'oscillation 100 cycles/min).
Le temps de grillage a été mesuré à 145OC à l'aide d'un viscosimètre Mooney MV 2000 (Alpha Technologies).
Exemple 1 (non conforme à l'invention) : 1000 g de polyéthylène basse densité (Mitene commercialisé par Ashland), 25 g de peroxyde de dicumyle (Luperox DC) et 3 g de 2,2, 6,6 tétraméthylpipéridinyloxy (TEMPO) ont été mélangés dans un turbo mélangeur à 800 C pendant 15 minutes (vitesse d'agitation = 930 tours/min).
Exemple 2 (non conforme à l'invention) : L'exemple 1 a été reproduit sans l'utilisation de 2,2, 6,6 tétraméthylpipéridinyl-oxy. Les résultats sont donnés dans le tableau 1. La comparaison des exemples 1 et 2 montre que le temps de grillage plus élevé avec le TEMPO est accompagné d'une diminution importante de la densité de réticulation et une légère augmentation du temps de réticulation.
Exemple 3 : On opère comme décrit dans l'exemple 1 sauf que l'on remplace les 3g de 2,2, 6,6 tétraméthylpipéridinyloxy par 4,4g de NT1 (methacrylate 2,2, 6,6
tétraméthyl-4-pipéridinyloxy) de sorte à effectuer une comparaison à concentration équivalente de fonction nitroxyde.
La comparaison des résultats avec ceux obtenus dans les exemples précédents montrent sans ambiguïté que ce nitroxyde permet d'augmenter le temps de grillage tout en augmentant la densité de réticulation.
Additif Couple Temps de Temps de Maximal à grillage à réticulation 180 C (MH) 145 C (Ts5) à 180 C (N. m) (min : s) (T90) (min:s) Exemple 1 TEMPO 10,7 19 : 00 7 : 10 Exemple 2-17, 2 8 : 40 6 : 50 Exemple 3 NT1 21,4 14 : 10 6 : 20 Tableau 1
LISTERIA INNOCUA, GENOME ET APPLICATIONS L'invention a pour objet la séquence génomique et des séquences nucléotidiques codant pour des polypeptides de Listeria innocua, tels que des polypeptides d'enveloppe cellulaire, sécrétés ou spécifiques, ou impliqués dans le métabolisme et dans le processus de réplication, ainsi que des vecteurs incluant lesdites séquences et des cellules ou animaux transformés par ces vecteurs.
L'invention concerne aussi la comparaison de ces séquences nucléotidiques avec celles codant pour les polypeptides de Listeria monocytogenes. L'invention concerne également des procédés de détection de ces acides nucléiques ou polypeptides et des kits de diagnostic de contamination par des bactéries du genre Listeria et des kits de typage de souches contaminantes. L'invention vise aussi une méthode de sélection de composés capables de moduler l'infection bactérienne engendrée par d'autres Listeria et un procédé de biosynthèse ou de biodégradation de molécules d'intérêt utilisant lesdites séquences nucléotidiques ou lesdits polypeptides. L'invention comprend enfin des compositions pharmaceutiques, notamment vaccinales, pour la prévention et/ou le traitement d'infections bactériennes, en particulier par Listeria, notamment monocytogenes, et des compositions contenant des anticorps dirigés contre des polypeptides spécifiques de L. innocua ou de L. monocytogenes..
Dans les infections à Listeria, Listeria monocytogenes est la plus fréquente et la plus dangereuse. Listeria monocytogenes est un pathogène intracellulaire facultatif. Il s'agit de l'agent étiologique de la listériose, une infection liée à la nourriture posant des problèmes de santé publique de plus en plus importants, avec un impact économique important pour l'industrie alimentaire. La listériose est l'infection liée aux aliments la plus léthale (mortalité d'environ 30 %). Listeria monocytogenes possède la propriété inhabituelle d'être capable de traverser trois barrières : La barrière intestinale, la barrière hémato-encéphalique et la barrière placentaire. Les manifestations cliniques de la listériose incluent les méningites, méningo-encéphalites, avortements et septicémies. Cette infection est opportuniste et affecte principalement les femmes enceintes, les bébés, les personnes âgées et les personnes immuno-déprimées en particulier les personnes atteintes du SIDA. Cette
maladie affecte également les individus sains et est responsable d'un nombre important d'épidémies en raison de produits alimentaires contaminés. Listeria monocytogenes est également d'une importance vétérinaire avec un risque principal pour les ovins (moutons) et les bovins. Listeria monocytogenes est particulièrement résistante au stress ou aux conditions extrêmes et il est important de rechercher sa présence avec soin non seulement pour des problèmes de sécurité alimentaire mais également pour des problèmes de sécurité environnementale.
Suite à la découverte d'une contamination, le typage de la ou les souches isolées est nécessaire pour identifier l'origine de la contamination. Par ailleurs, lorsqu'une même installation est contaminée par deux évènements successifs il est important de montrer avec certitude si ce sont deux contaminations indépendantes ou si une même souche est responsable de ces deux évènements. La méthode la plus performante actuellement utilisée, le profil de migration en gel en champs pulsé (PFGE) après digestion de l'ADN chromosomique est une méthode très lourde qui ne peut être mise en oeuvre de manière systématique. Une méthode alternative, moins performante mais automatisée, le ribotypage, présente un coût, par analyse, élevé qui limite son utilisation.
Il faut aussi souligner que le risque de listériose est très variable en fonction de la souche de Listeria contaminante. A l'extrême, certaines souches pourraient être considérées comme dangereuses et d'autres inoffensives (comme Listeria innocua). Ainsi, alors que des contaminations par les Listeria sont très fréquentes, le nombre de cas décrits est faible. Dans cette perspective, la disponibilité d'un outil permettant d'identifier le risque lié à une contamination (en fonction du type génomique de la souche et du nombre de bactéries par gramme d'aliment) permettrait aux industriels de réagir en fonction de ce risque.
d'hygiène, de rigidité, de pérennité, etc. Pour des raisons de sécurité, ce verre est généralement trempé, en particulier dans le cas d'un panneau monolithique. Le panneau est habituellement plein, mais peut aussi comprendre un ou des reliefs et/ou évidements et/ou trous (par exemple pour la circulation d'air) et/ou avoir subi un ou des traitements de surface tels que sablage, stries, etc.
La structure plastique (ou support ou entourage plastique) permet le support du panneau et le revêtement de ses arêtes vives pour une manipulation plus confortable et sûre de l'étagère. Généralement, elle se présente sous la forme d'un cadre, ce cadre présentant une surface porteuse (formée d'une ou plusieurs parties approximativement horizontales en position d'utilisation et délimitant une zone dont les dimensions correspondent approximativement aux dimensions de la face inférieure du panneau) pour le support du panneau (par exemple une surface porteuse en forme de cadre soutenant le panneau à sa périphérie) et des parois entourant le chant (ou l'épaisseur ou les chants si l'on considère chacun des côtés séparément) du panneau, une ou plusieurs parois sur l'un et/ou l'autre des côtés pouvant s'élever au dessus du plan du panneau et/ou dépasser du plan du panneau par le dessous (l'étagère étant considérée dans sa position d'utilisation).
Les bords ou parois de la structure plastique peuvent être droits (verticaux en position d'utilisation) ou de forme plus complexe, notamment peuvent présenter des parties ou extensions périphériques dans des buts fonctionnels ou esthétiques. Par exemple, la structure peut avoir une extension formant une poignée sur son bord avant (ou sur un côté de l'étagère destiné à rester libre) et/ou peut présenter un dosseret, par exemple sur son bord arrière, servant notamment de butée pour empêcher que les produits entreposés sur l'étagère viennent au contact de la paroi d'un meuble réfrigéré la renfermant et/ou peut avoir des parois ou extensions latérales prolongées le cas échéant par des ailettes ou tétons ou saillies et aptes à glisser entre des rails ou sur des supports ménagés dans les parois latérales d'un meuble. Des éléments de renforcement, de fixation, etc. peuvent également être rapportés ou prévus
dans la structure plastique, tels que des éléments d'assemblage métalliques comme explicité ultérieurement, ou des nervures de renforcement ou des moyens d'accrochage, etc. On peut également prévoir au moins un canal, pour la récupération de liquides en cas de besoin ou pour l'écoulement des liquides.