INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Chaque dispositif de chargement 5 est avantageusement constitué par le caisson 6 en forme de trémie, combiné à un tronçon de conduite 12 directement lié au caisson. Ce tronçon de conduite 12 est bordé de chaque côté de brides 13 pour son intégration et son assemblage aux autres éléments 20 de la conduite de refoulement 2.
En position de fermeture, le volet est adapté au contour de la conduite et ne constitue pas un obstacle saillant dans la conduite de refoulement sur lequel les produits et déchets traversant la conduite risqueraient de s'accrocher.
L'installation fonctionne de la manière suivante : Au départ, tous les dispositifs de chargement 5 sont fermés.
On met en route la machine soufflante 3 puis on ouvre le clapet 8 du dispositif de chargement 5 qui sera utilisé.
Le clapet 8 est bascule vers le bas comme cela est indiqué à gauche de la figure et vient en saillie dans la section de la conduite pour créer un point d'étranglement 14 qui génère, en aval de ce point d'étranglement, un effet d'aspiration de type venturi.
485 et 520 nm et deux filtres d'émission à 520 et 635 nm, d'un objectif (x 10), d'une platine motorisée commandée par ordinateur (Multicontrol 2000, Martzauzer) et d'une caméra à dispositif à transfert de charge (CCD) (Cohu).
Pour enregistrer la plaque, on la positionne sur la platine motorisée, on fait le point manuellement sur le premier puits et ce plan est enregistré (origine z). Le seuil de l'image morte et vivante est fixé dans le premier puits.
Le centre du premier puits est ajusté au moyen de la lumière blanche par alignement manuel du fond du premier puits sur le fond de l'image sur l'écran de l'ordinateur, puis par alignement de l'extrême droite du premier puits sur la droite de l'image sur l'écran de l'ordinateur, puis par enregistrement des deux positions. Le centre du premier puits est calculé et donne la position du centre de chaque puits de la plaque. Nous avons noté au cours de la mise au point du procédé que les cellules sont légèrement plus denses sur les bords du puits et nous avons exclu les bords des acquisitions. Il est important que l'image de chaque puits soit parfaitement centrée pour éviter tout résultat trompeur. Quand l'ajustement est réalisé, un premier balayage de la plaque enregistre les cellules mortes. La densité des cellules mortes est moins variable dans ces conditions. L'application exécute une autofocalisation en prenant des images en différents plans focaux et en choisissant la plus brillante. Cette position z est mémorisée et la platine exécute des mouvements programmés selon les axes x et y ; elle prend au total 4 images qui, quand elles sont reconstituées en une image, représentent les 2/3 de la surface du puits. Un fichier d'images des plans focaux est mémorisé pour contrôle. La platine exécute une autofocalisation et quatre acquisitions pour chaque puits de la plaque en commençant aux puits Al jusqu'à A12, puis B12 jusqu'à Bl, CI jusqu'à Cl 2, etc. A la fin, la platine se déplace pour sortir de la plaque et surexposer le dernier puits (HO. Le balayage des cellules mortes dure 30 minutes. Le second balayage (cellules vivantes) est exécuté après changement du filtre. Le second balayage utilise les positions z enregistrées pour chaque puits dans la lecture des cellules mortes. Quatre images sont prises dans chaque puits, comme pour les cellules mortes. A la fin de ce second balayage (22 minutes), les images reconstituées pour les cellules mortes et vivantes sont mémorisées dans un fichier qui se voit attribuer automatiquement un nom avec la date du jour. Les nombres de cellules (mortes et vivantes) sont
comptés automatiquement avec des paramètres morphométriques (moyens) prédéfinis et affichés sur l'écran de l'ordinateur pour que l'on puisse vérifier si l'expérience est correcte. Il est important de vérifier quotidiennement que le nombre de cellules vivantes n'est pas trop élevé. Nous avons observé que, si elles sont cultivées à une densité trop importante, les cellules de la rétine du poulet survivent plus longtemps, sans doute en produisant leur propre facteur de survie. Nous avons testé les cellules en l'absence de cet effet. Avant balayage de la seconde plaque (même expérience avec une densité de cellules double), nous ajoutons un il à la fin du nom du fichier des enregistrements de la première plaque. Les images de chaque expérience sont mémorisées sur un CD-rom. Nous avons produit une banque de plus de 250 CD-rom.
COMPTAGE DES CELLULES ET SÉLECTION DES POOLS : Nous avons déterminé le nombre des cellules (mortes et vivantes) en utilisant les images de chaque expérience stockées sur CD-rom. Nous avons d'abord chargé le fichier des enregistrements d'une expérience dans l'ordinateur (comptage en différé) et l'avons ouvert avec le logiciel Metamorph. Dans une première étape, les images correspondant aux 14 puits C (milieux conditionnés provenant de cellules Cos-1 transfectées par le vecteur vide) sont ouvertes. Après ajustement du seuil de l'image, on utilise la commande Integrated Morphometry Analysis pour mesurer la distribution des surfaces entre 10 et 250 de l'objet (nombre de cellules vivantes pour chaque surface totale) pour ces puits témoins. La distribution suit une courbe gaussienne, le nombre maximal d'objets correspondant à une cellule isolée.
Cette valeur standard (SV) est ensuite utilisée pour calculer la valeur de la surface au-dessus de laquelle un objet sera compté comme étant deux cellules (seuil de coupure d'un objet standard, SOC) grâce à notre fonction empirique : SOC = 29/20, 74 SV. La valeur SOC de chaque plaque individuelle est utilisée pour compter le nombre de cellules vivantes de la plaque. Ces nombres sont ensuite transférés dans un tableau Excel.
Pour la première étape de criblage, nous avons porté sur un graphe une valeur pour chaque pool en l'exprimant sous la forme d'une différence relative (augmentation ou diminution des nombres de cellules vivantes) par rapport à la moyenne des 14 puits témoins l'écart type. Pour éliminer les variations
provenant des différences de position dans la plaque, nous avons calculé la moyenne des différences relatives trouvées individuellement pour les 80 puits correspondant aux positions dans lesquelles les pools ont été testées et les 14 puits témoins pour 200 plaques indépendantes. En moyenne, les différences observées sont dues uniquement aux différences de position et les nombres de cellules ont été corrigés par ce coefficient. Pour différencier de façon plus rigoureuse les pools à sélectionner, nous avons considéré sur le graphe comme des témoins toutes les valeurs des différences relatives ne dépassant pas 1,3 mais dépassant 0,4. Ainsi, tous les pools dont la différence relative par rapport aux 14 puits correspondant au vecteur vide sont dans l'intervalle de 0,4 à 1,3 sont considérés comme n'ayant pas d'effet et sont utilisés comme témoins. Après correction, les différences relatives par rapport aux témoins des deux plaques ont été multipliées et le résultat trié par différence relative décroissante. Nous avons encore vérifié les pools en haut de cette liste en inspectant visuellement le graphe correspondant aux 20 pools de l'expérience (pour les deux plaques) et les images des cellules mortes et vivantes pour ne pas sélectionner de pools faussement positifs. Pour la seconde et la troisième étapes, le criblage des sous-pools des plaques comprend un témoin supplémentaire. Nous avons préparé des milieux conditionnés à partir d'explants de rétines d'animaux âgés de 5 semaines. Nous avons sélectionné des expériences où des effets positifs avaient été enregistrés pour des explants de rétine prélevés sur des souris C57BL/6@N et nous avons rejeté les autres.
Les résultats ont été exprimés par la différence trouvée par rapport aux 14 puits témoins, sans nouveau calcul pour les témoins. Les différences relatives par rapport aux témoins des deux plaques ont été multipliées et les résultats ont été triés par différence relative décroissante pour les 16 sous-pools.
L'ADNc isolé a été séquencé en utilisant une amorce T7 (S'GTAATA- CGACTCACTATAGGGC 3', SEQ ID NO 10) sur un séquenceur capillaire (CEQ2000, Beckman Coulter). La séquence de l'ADN a été comparée aux bases de données en utitisantun"Basic Locat Atignment Search Tool" (BLAST).
ANALYSE PAR RT-PCR EN TEMPS RÉEL DE L'EXPRESSION DE RDCSF1 : L'expression rétinienne de Rdcsfl par des souris C57BL/6@N et C3H/ He@N âgées de 5 semaines a été étudiée par RT-PCR en temps réel sur un
dispositif Lightcycler (Roche) avec un kit de PCR Sybergreen. Les ADNc ont été produits par amorçage avec un oligonucléotide hexamère aléatoire (pdN6, Amersham), une transcriptase inverse M-MLV (superscript 11, Life Technologies) et un ARN total de rétine de souris préparé comme dans 1).
L'ADNc a été normalisé en utilisant un messager ubiquitaire Glucose-6- phosphate déshydrogénase (G6PDH). On a amplifié 0, 2 pl de la synthèse du premier brin de l'ADNc (équivalent à 10 ng DARN total) avec 2 M des oligonucléotides de SEQ ID N : 3 et SEQ ID N : 4 en triple sous un volume total de 25 pu en utilisant le programme suivant : 30 secondes à 95 C et 35 cycles d'une séquence (1 seconde à 95'Cil 18 secondes à 55OC, 10 secondes à 72OC). L'analyse (figure 3) montre que l'expression de Rdcsfl diminue après dégénérescence des bâtonnets chez la souris rdl (C3H/He@N). Les produits ont été contrôlés par électrophorèse sur gel d'agarose. Des résultats similaires ont été obtenus avec une autre paire d'amorces spécifiques de Rdcsfl. Comme témoin positif, on a contrôlé l'expression de l'arrestine des bâtonnets (n M24086) dans les mêmes conditions avec les amorces (5' CTATTACGTCAAGCCTGTAGCC 3', SEQ ID N"11 et 5'CATCCTCA- TCTTTCTTCCCTTC 3', SEQ ID N"12). On a pu obtenir la confirmation que Rdcsfl est le facteur protecteur des cônes en ajoutant une quantité appropriée de Rdcsfl 1 à un expiant rétinien de souris rV (C3H/He@N) âgées de 5 semaines. On peut déterminer la quantité appropriée par quelques expériences de titrage initiales. La comparaison avec des témoins appropriés après 7 jours montre que le taux de survie des cônes est augmenté.
FACTEUR SPÉCIFIQUE DES BÂTONNETS L'analyse par RT-PCR en temps réel, effectuée dans des conditions standards, de l'expression de l'arrestine des bâtonnets (témoin) et de Rdcsfl dans des explants rétiniens de souris C57BL/6@N âgées de 5 semaines et de souris (C3H/He@N) âgées de 5 semaines, en utilisant comme amorces : SEQ ID No : 3 : 5'TCTATGTGTCCCAGGACCCTACAG 3' SEQ ID NO : 4 : 5 TTTATGCACAAGTAGTACCAGGACAG 3' a démontré que Rdcsfl ne s'exprime qu'en présence de bâtonnets (CSF1 obtenu à partir de bâtonnets ou Rod-derivedCSFl).
PRODUCTION D'ANTICORPS POLYCLONAUX : Les anticorps polyclonaux ont été préparés en injectant une protéine de fusion de gluthathion-S-transférase purifiée (GST-Rdcsfl) à des lapins. La cassette du produit de fusion pGST-Rdcsfl a été préparée par amplification avec les oligonucléotides de SEQ ID N : 5 et de SEQ ID N : 6 en utilisant pcDNA-Rdcsfl comme matrice dans des conditions standards. Le cadre ouvert de lecture (ORF) de Rdcsfl a été cloné dans le cadre dans pGex2TK (Pharmacia) entre les sites de restriction BamHI et EcoRI et transformé dans E. coli [BL21 (DE3) pLysS, Promega] par une procédure standard. On a cultivé une colonie unique dans 3 litres de milieu liquide LB avec 100, ug/ml d'ampicilline à 30 C, on a induit la production de la protéine par addition de 1 7g/ml d'isopropylthio-p-D-galactoside (IPTG) et on a poursuivi pendant 5 heures à 30oc. Les cellules ont été recueillies, Iysées par sonification et purifiées sur glutathion sépharose en utilisant un protocole standard. On a élué la protéine de fusion avec du glutathion réduit 10 mM à la température ambiante. On a dialysé la protéine éluée dans du PBS avant de l'injecter à des lapins. La pureté de la protéine a été contrôlée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Deux lapins ont été immunisés par injection intradermique, en 80 sites, de 100, tug de GST-Rdcsfl purifiée. On a prélevé le sérum au bout de 8 semaines.
PERFECTIONNEMENTS AU GUIDAGE TERMINAL SUR UNE CIBLE D'UNE ARME A IMAGEUR DOMAINE GENERAL ET ETAT DE LA TECHNIQUE L'invention concerne le guidage d'armes propulsées dans le cas de tirs sur coordonnées.
La figure 3 représente un ressort de centrage 31,32 en métal, qui présente 4 découpes 50 (ou saignées traversantes) qui forment autant de branches qui sont réparties régulièrement à 900 du périmètre d'une ouverture 55 et qui s'étendent depuis une extrémité interne 53 à proximité de l'ouverture centrale 55 de diamètre D, et, jusqu'à une extrémité externe 54 à proximité d'un contour externe 57 de diamètre De. Ces découpes 50 ont un profil arrondi convexe vers l'extérieur du ressort, en particulier en forme de spirale, et de préférence de spirale parabolique.
La figure 4 représente un mode de réalisation à 3 branches dont les extrémités internes 63 sont réparties à 900 sur le pourtour d'une ouverture centrale de diamètre Di et qui évoluent jusqu'à une extrémité 64 à proximité du contour externe 67 de diamètre De. Comme dans le cas précédent, le profil est avantageusement en spirale, de préférence parabolique. Il s'étend sur un peu plus d'un tour du ressort. Un tronçon
L'état de contrainte maximale est atteint pour les débattements crête.
Le mode de réalisation préféré met en oeuvre des découpes en spirale parabolique (ou selon un ou plusieurs axes de cercle approximant un profil en spirale parabolique).
Les valeurs de mP sont reportées sur un graphe à l'aide du logiciel Excel de Microsoft Inc., et/ou du logiciel Allele Caller@ développé par LJL Biosystems Inc..
En abscisse est indiquée la valeur de mP de la base marquée au Tamra, en ordonnée est indiquée la valeur de mP de la base marquée au R110.
Une forte valeur de mP indique que la base marquée avec ce fluorophore est incorporée et, inversement, une faible valeur de mP révèle l'absence d'incorporation de cette base.
On obtient jusqu'à 3 groupes homogènes de séquences
nucléotidiques ayant des génotypes différents, comme indiqué dans la Figure 10.
Les amorces du miniséquençage sont les suivantes : Amorce sens : (A) : actcatctgctacttgggaa Amorce antisens : (B) : aaatttttctaggaggctct Le miniséquençage du polymorphisme de type SNP c973a a d'abord été validé sur 16 échantillons, puis génotypé sur l'ensemble de la population d'individus composée de 239 individus et 7 blancs.
Conditions de miniséquençage testées : Condition NO 1 : Amorce sens + ddCTP-R110 + ddATP-Tamra Condition No 2 : Amorce sens + ddATP-R110 + ddCTP-Tamra Condition No 3 : Amorce antisens + ddGTP-R110 + ddTTP-Tamra Condition No 4 : Amorce antisens + ddTTP-R110 + ddGTP-Tamra Ces 4 conditions ont été testées et la condition No 3 a été retenue pour le génotypage.
B) Résultats Après la réalisation complète du processus de génotypage, la
détermination des génotypes des individus de la population d'individus pour le SNP fonctionnel étudié ici a été réalisée à l'aide du graphe représenté sur la Figure 10.
Ce génotype est en théorie soit homozygote GG, soit hétérozygote GT, soit homozygote TT chez les individus testés. En réalité et comme montré ci-dessous, le génotype homozygote TT n'est pas détecté dans la population d'individus.
Les résultats des contrôles, de la répartition des génotypes déterminés dans la population d'individus et le calcul des différentes fréquences alléliques pour ce polymorphisme de type SNP fonctionnel sont présentés dans les tableaux suivants : Nombre d'individus Nombre de blanc Pourcentage de testés génotypes testés validés réussite 239 237 7 7 99, 2
POPULATION Fréquence allélique Génotype TT Génotype TG Génotype GG N % % 95% IC N % N % N % Afro Américain 50 20, 9 0--0 0 0 0 49 100 Amérindien du Sud Ouest 5 2, 1 0--0 0 0 0 5 100 Sud Américain (Andes) 10 4, 2 0--0 0 0 0 10 100 Caribéen 10 4, 2 0--0 0 0 0 10 100 Caucasien 50 20, 9 3, 0 0, 0 6, 3 0 0 3 6, 0 47 94, 0 Chinois 10 4, 2 0--0 0 0 0 10 100 Grec 8 3, 3 6, 3 0, 0 18, 1 0 0 1 12, 5 7 87, 5 Ibérien 10 4, 2 0--00 0 0 10 100 Italien 10 4, 2 0--0 0 0 0 10 100 Japonais 10 4, 2 0--0 0 0 0 10 100 Mexicain 10 4, 2 0--0 0 0 0 9 100 Moyen-Orient 20 8, 4 0--0 0 0 0 20 100 Individus du Pacifique 7 2, 9 0--0 0 0 0 7 100 Indo-Pakistanais 9 3, 8 0--0 0 0 0 9 100 Sud Américain 10 4, 2011000010100 Asie du Sud 10 4, 2 0--0 0 0 0 10 100 Total 239 100 0, 8 0, 0 1, 7 0 0 4 1, 7 233 98 ; 3
Selon une autre caractéristique de l'invention, l'évidement possède une paroi interne ayant une géométrie de type cylindrique.
Selon une autre caractéristique de l'invention, la barquette et/ou le cadre de rigidification présentent des formes convexes qui permettent leur empilage.
Selon une autre caractéristique de l'invention, la barquette et/ou le cadre de rigidification ont leur (s) périphérie (s) disposée (s) dans un même plan pour faciliter leur (s) préhension (s) manuelle (s) ou par des robots.
Selon une autre caractéristique de l'invention, le dispositif de fermeture est une gaine formée d'un film plastique transparent de type thermorétractable.
Un cadre de rigidification, destiné à être disposé sur une barquette d'un emballage comportant un dispositif de fermeture, la barquette étant pourvue de flancs prolongés par un rebord, est également couvert par l'invention.
Selon une de ses caractéristiques, le cadre de rigidification comprend une assise destinée à reposer sur le rebord, ladite assise bordant intérieurement une paroi
externe destinée à être mise en contact, au moins partiellement, avec la face interne des flancs, le cadre de rigidification étant maintenu en contact avec la barquette par le dispositif de fermeture.
Selon une autre caractéristique de l'invention, le cadre de rigidification est pourvu d'un moyen de rigidification constitué d'une enveloppe de section trapézoïdale dont la grande base est confondue avec l'assise et dont la paroi externe forme un côté et qui est destiné essentiellement à rigidifier le cadre de rigidification 300 suivant une direction parallèle à l'assise.
Selon une autre caractéristique de l'invention, un flanc recouvre la région centrale du cadre de rigidification, le flanc étant pourvu d'au moins un évidement débouchant destiné à recouvrir la partie supérieure d'une denrée alimentaire unitaire déposée dans la barquette pour la caler dans l'emballage.
Les caractéristiques de l'invention mentionnées ci-dessus, ainsi que d'autres, apparaîtront plus clairement à la lecture de la description suivante d'un exemple de réalisation, ladite description étant faite en relation avec les dessins joints, parmi lesquels : la Fig. 1 représente une vue éclatée en perspective d'un emballage selon l'invention, la Fig. 2 représente une vue en coupe d'un emballage pourvu de son dispositif de fermeture selon l'invention, et la Fig. 3 représente une vue en perspective d'une variante de réalisation d'un emballage selon l'invention.
L'emballage 100 représenté à la Fig. 1 comprend une barquette 200 avantageusement de section transversale polygonale, un cadre de rigidification 300, ainsi qu'un dispositif de fermeture 400 destiné à fermer la barquette 200.
La barquette 200 et le cadre de rigidification 300 présentent des formes convexes qui permettent leur empilage et ont leurs périphéries disposées dans un même plan pour faciliter leurs préhensions manuelles ou par des robots.
La barquette 200 comporte un fond 210 sensiblement plan bordé à sa périphérie par des flancs 220 formant contenant. Les flancs 220 se prolongent par un rebord 230, sensiblement plan, destiné principalement à recevoir le cadre de rigidification 300. La barquette 200 est avantageusement fabriquée dans une matière cartonnée.
Le cadre de rigidification 300 est destiné à être disposé sur la barquette 200 après que soit déposée la denrée alimentaire dans celle-ci. Le cadre de rigidification 300 est de préférence fabriqué dans une matière plastique transparente.
Le cadre de rigidification 300 comporte une assise 310 sensiblement plane destinée à reposer sur le rebord 230.
A la Fig. 2, l'assise 310 est bordée intérieurement par un moyen de rigidification 312 destiné essentiellement à rigidifier le cadre de rigidification 300 suivant une direction parallèle à l'assise 310. Le moyen de rigidification 312 est constitué avantageusement d'une enveloppe de section trapézoïdale 312 dont la grande base est confondue avec l'assise 310. La petite base 340 de la section trapézoïdale est destinée à être tournée vers l'intérieur de la barquette 200 lorsque l'on dépose le cadre de rigidification 300 sur ladite barquette 200 pour ne pas créer de surépaisseur à l'emballage 100.
Avantageusement, plusieurs composés tests sont évalués en parallèle, sur plusieurs tissus reconstitués (ou chambre de culture), disposés dans des supports (plaques multipuits, boîtes, etc.).
Ce procédé d'étude des tissus reconstitués peut également permettre l'analyse des transcrits des différents types cellulaires ainsi que l'analyse de l'activité électrique, l'étude des canaux ioniques impliqués dans les échanges et/ou celle des récepteurs, par des techniques électrophysiologiques ou par des techniques de patch-clamp.
Kits La présente demande a également pour objet des kits (ou trousses) pour la mise en oeuvre des procédés de préparation et d'études des tissus reconstitués tels que décrits ci avant.
Ces kits sont caractérisés en ce qu'ils contiennent plusieurs chambres de culture selon l'invention et une ou plusieurs boîtes (boîte de Pétri par exemple), tubes, etc., ou plaques dont les puits ont une dimension suffisante pour accueillir les chambres de culture. Comme indiqué ci-avant, dans les kits de l'invention, les deux compartiments des chambres de culture peuvent être de couleur et/ou de forme différente, permettant leur reconnaissance.
La faisabilité, la réalisation et d'autres avantages de l'invention sont illustrés plus en détails dans les exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.
Légende des figures : Figure 1 : Dessin de la chambre de culture.
Figure 2 : Culture de kératinocytes dans un compartiment de la chambre.
Figure 3 : Marquage par immunofluorescence des prolongements neuritiques ; Microscopie à fluorescence.
Exemples Exemple 1 : culture de neurones sensitifs en présence d'un épiderme reconstitué à partir de kératinocytes.
A-Culture de kératinocytes humains selon le protocole de Green Préparation des cellules 3T3 Afin d'obtenir un nombre élevé de cellules proliférantes lors d'une première phase de culture, la méthode appliquée utilise un tapis nourricier de cellules fibroblastiques 3T3 sur lequel sont ensemencés les kératinocytes en primoculture. Les 3T3 sont issues d'une lignée de fibroblastes embryonnaires de tératome de souris. Elles vont synthétiser des protéines qui agissent comme des facteurs de croissance pour les kératinocytes.
Les cellules 3T3 sont cultivées dans du milieu DMEM complété avec 1% de LGlutamin 200 mM et 10 % de sérum de veau foetal dans une étuve à 37 C
contenant 5 % de CO2 saturé en humidité. Les cellules se multiplient dans ce milieu et elles peuvent être repiquées plusieurs fois quand elles sont sub- confluents. Les cellules 3T3 sont traitées avec de la mitomycine C afin de stopper leurs divisions avant d'être utilisées comme cellules nourricières pour les kératinocytes.
Les cellules 3T3 sub confluents sont traitées avec de la mitomycine C à 5 ug/ml pendant 2 h à 37 OC. Les cellules sont récupérées par dissociation enzymatique et congelées dans du DMEM 10 % de DMSO et 20 % de Sérum de Veau Foetal (SVF).
Les cellules sont décongelées et ensemencées à raison de 106 cellules par flacon de 75 cm2 dans du DMEM contenant 10 % de SVF et 1 % de LGlutamin la veille de la primo-culture de kératinocytes.
Préparation des kératinocytes Les prélèvements de peau sont grattés au scalpel pour enlever la couche graisseuse puis sont successivement placés dans plusieurs bains d'une solution de 70 % de solution physiologique et de 30 % d'alcool, puis dans un bain de PBS 1 % d'une solution 100 X de pénicilline streptomycine.