INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Gènes hétérologues Différents gènes hétérologues d'intérêt peuvent être exprimés dans les plantes dans lesquelles l'expression du gène SGS2 est inhibé ou inactivé. De préférence, le gène hétérologue code pour des peptides, des protéines ou des enzymes. Il peut s'agir de protéines rapporteurs, des marqueurs de sélection ou de peptides ou de protéines d'intérêt conférant à l'organisme hôte de nouvelles propriétés, plus particulièrement de nouvelles propriétés agronomiques pour les plantes transformées.
COMPOSES DERIVES DE POLYSACCHARIDES, LEURS PROCEDES D'OBTENTION ET LEURS UTILISATIONS ---------------------------------------------------------------------------------------------------------- La présente invention se rapporte à des composés dérivés de polysaccharides, leurs procédés d'obtention, et leurs utilisations, notamment pour la fabrication de films plastiques hydrophobes biodégradables. Les composés selon l'invention sont plus particulièrement des polymères.
Les matières plastiques sont par définition des matériaux organiques constitués de polymères.
Un premier groupe de matières plastiques est constitué par des polymères d'hydrocarbures insaturés tels que l'éthylène, le propylène, ou le styrène. Les polymères du styrène sont très utilisés, et sous des formes très diverses. On peut citer notamment les homopolymères transparents ou opaques, massifs ou expansés, auxquels l'industrie de l'emballage fait largement appel.
D'autres matières plastiques sont mises au point avec - des polymères du chlorure de vinyle (tuyaux rigides ou souples, panneaux, jouets, revêtements de sol), - des polyesters, obtenus par condensation d'un diacide ou de son anhydride (anhydride phtalique, anhydride maléique), avec un diol, comme l'éthylène glycol (carrosseries d'automobiles, coques de bateaux), - des résines, obtenues à partir d'urée et de formol, de phénol et de formol (propriétés adhésives et facilité à donner des produits moulés), - des polymères provenant d'éthers du propylène glycol et de toluène di- isocyanate (mousses pour éponges, ou sièges), - des copolymères d'acrylonitrile, de butadiène et de styrène, appelés résine ABS (pièces moulées chromables, pièces thermo-formables pour carrosseries).
Les matières plastiques obtenues à partir de la pétrochimie ne sont que très peu dégradables et leur recyclage pose des problèmes importants en raison de la diversité de leur nature chimique. Ainsi sur 4 millions de tonnes produites annuellement en France, plus de la moitié ne trouve aucune solution de recyclage, ni de dégradation non polluante. Une analyse des matériaux présents sur le marché montre que l'on ne dispose à ce jour que d'un très faible éventail de polymères biodégradables.
Or, les applications ne cessent de se multiplier : l'emballage, l'électroménager, la construction, les transports, les loisirs, le médical regorgent d'exemples d'application des matières plastiques. Aussi, d'autres sources de matières premières sont recherchées dans le but de faire face à des préoccupations d'ordre écologique et financier.
On connaît à ce jour des films plastiques biodégradables susceptibles d'être substitués aux matières plastiques synthétiques.
Ainsi, on peut citer des matériaux biodégradables issus d'un mélange entre un polymère et un amidon modifié en surface, décrits par exemple dans les brevets américain n US 1 485 833, US 1 487 050, US 4 021 388, US 4 125 495, ou dans le brevet européen n EP 045 621. La modification chimique de l'état de surface de l'amidon permet de créer des fonctions éthers ou esters.
Le brevet européen n EP 702 697 décrit des plastiques biodégradables réalisés à partir de polysaccharides dont les groupements carboxyliques portent des acides gras, par l'intermédiaire de fonctions amides.
Le brevet américain n US 5 430 142 décrit des plastiques biodégradables fabriqués à partir de polysaccharides riches en xylanes ; le procédé utilisé consiste à estérifier ou éthérifier les sucres.
Par ailleurs, malgré le fait que l'estérification soit un moyen habituellement utilisé pour la fixation de chaires carbonées sur des groupements alcools, l'estérification des hétéroxylanes par des acides gras n'a pas permis d'obtenir de film hydrophobe.
Dans la demande de brevet japonais n JP 93/333476, les hétéroxylanes sont utilisés en cosmétiques pour leur propriété filmogène intrinsèque. Lesdits hétéroxylanes, qui ne subissent aucune modification chimique, forment un film hydrophile. En outre les propriétés mécaniques sont très faibles par rapport aux polymères synthétiques. La perméabilité à l'eau est très forte du fait de l'hydrophilie du film.
L'oxydation periodique, à savoir l'oxydation effectuée à l'aide d'un petiodate, est utilisée à ce jour sur les polysaccharides à des fins d'analyse ou, pour l'immobilisation de certaines enzymes. La seule application connue de l'oxydation periodique d'un polysaccharide est l'oxydation periodique de l'amidon pour donner l'oxyamidon. L'oxyamidon sert d'agent d'adhésion et de tannage dans le textile.
Concernant les aminations réductrices entre un composé carbonylé et une amine, elles se font usuellement dans le méthanol, mais peuvent également se faire dans l'eau. Cependant, les aminations réductrices sont effectuées dans l'eau uniquement lors de la fixation d'un acide aminé ou d'une enzyme sur un polysaccharide.
L'un des buts de la présente invention est de fournir de nouveaux films plastiques hydrophobes, biodégradables, faciles à obtenir, et capables de se substituer aux matières plastiques polluantes, dans des domaines très variés (médical, emballage, paillage agricole, isolants etc...).
La présente invention a principalement pour objet un composé dérivé d'un polysaccharide par modification chimique d'au moins 5%, et notamment d'environ 50% à environ 100% du nombre total d'unités monomères du susdit polysaccharide, chacune des unités monomères modifiées chimiquement comprenant au plus 2 chaînes carbonées greffées de façon covalente, par l'intermédiaire d'un atome d'azote, respectivement à au plus 2 atomes de carbone initialement engagés, avant ladite modification chimique, respectivement dans 2 fonctions alcools adjacentes portées par chacune des unités monomères, lesdites unités monomères comportant initialement au moins deux fonctions alcools adjacentes.
L'invention a également pour but de fournir de nouveaux procédés de détection ou de criblage de molécules ayant un effet sur la formation du cytosquelette, notamment de molécules cytotoxiques ou de médicaments utilisables dans le cadre du traitement de pathologies liées à un développement anormal du cytosquelette.
L'invention a également pour but de fournir de nouveaux réactifs et kits pour la mise en #uvre des procédés susmentionnés.
La présente invention a pour objet l'utilisation : - de fragments peptidiques de protéines de la famille WASP chez les cellules eucaryotes, notamment les cellules humaines ou d'autres mammifères, ou les cellules d'insectes, ou de micro-organismes telles que les levures, lesdits fragments peptidiques ayant la propriété des protéines de la famille WASP de polymériser l' actine en induisant la motilité cellulaire,
- ou de séquences peptidiques dérivées des fragments peptidiques susmentionnés de protéines de la famille WASP, notamment par substitution d'un ou plusieurs acides aminés de ces fragments, lesdites séquences dérivées ayant la propriété susmentionnée des protéines de la famille WASP et desdits fragments de ces dernières, pour la préparation de réactifs utilisables dans le cadre de la mise en #uvre d'un procédé de détection ou de criblage de molécules ayant un effet d'inhibition ou de stimulation de la formation du cytosquelette d'actine, et donc un effet d'inhibition ou de stimulation de la motilité cellulaire.
Par propriété de polymérisation de l'actine en induisant la motilité cellulaire, on entend dans ce qui précède et ce qui suit la propriété des protéines de la famille WASP, ou des fragments ou séquences dérivées de ces derniers de polymériser l'actine en induisant le déplacement de cellules de l' organisme, ou de supports appropriés, telles que les microsphères décrites ci-après, in vivo ou in vitro.
L'invention a également pour objet l'utilisation des fragments peptidiques ou des séquences dérivées susmentionnés, dans le cadre de la mise en #uvre d'un procédé de détection ou de criblage de molécules susceptibles de pouvoir être utilisées en tant que médicaments dans le traitement de pathologies liées à un dysfonctionnement du processus de polymérisation de l'actine dans le cadre de la formation du cytosquelette d'actine.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation des fragments peptidiques ou des séquences dérivées susmentionnés, dans le cadre de la mise en #uvre d'un procédé de détection ou de criblage de molécules ayant un effet d'inhibition de la formation du cytosquelette d'actine, et donc un effet d'inhibition de la motilité cellulaire, lesdites molécules étant susceptibles d'être utilisées : - en tant que médicaments dans le traitement de cancers métastatiques, - ou en tant qu'antibiotiques anti-parasitaires.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation des fragments peptidiques ou des séquences dérivées susmentionnés, dans le cadre de la mise en #uvre d'un procédé de détection d'effets secondaires de molécules, notamment de médicaments ou de molécules de l'environnement, à savoir d'un procédé de détection de molécules susceptibles d'avoir un effet cytotoxique correspondant à une inhibition ou une stimulation de la formation du cytosquelette d'actine.
Par protéines de la famille WASP, on entend, dans ce qui précède et ce qui suit, la protéine produite par le gène WAS muté dans le cadre du syndrome de Wiskott-Aldrich chez l'homme, ainsi que les protéines d'origine humaine ou non, présentant au moins environ 45% d'homologie avec la protéine WASP humaine susmentionnée, et étant impliquée dans le processus de polymérisation de l'actine cellulaire, et, le cas échéant, de la motilité cellulaire.
Les protéines susmentionnées de la famille WASP possèdent également la caractéristique commune de posséder au moins trois domaines majeurs : - un domaine WH1/Scar dans la partie N-terminale ; ce domaine a des caractéristiques structurales similaires à un domaine d'homologie à la pleckstrine (ou domaine pH), et est supposé interagir avec l'actine polymérisée et avec les phospholipides, -un domaine riche en prolines, - un domaine WH2/A qui est divisé en trois sous-domaines, à savoir le sous-domaine d'homologie à la verproline, le sous-domaine d'homologie à la cofiline, et le sous-domaine acide susmentionnés.
Avantageusement, les fragments peptidiques utilisés dans le cadre de la présente invention sont choisis parmi les fragments des protéines WASP, N-WASP, Scar et Las, ou les séquences peptidiques dérivées des fragments peptidiques susmentionnés telles que définies ci-dessus.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée, de fragments peptidiques choisis parmi les fragments : - de la protéine WASP humaine, ou d'autres mammifères, notamment la protéine WASP bovine ou murine, - de la protéine N-WASP humaine, ou d'autres mammifères, notamment la protéine N-WASP bovine, ou de rat, - des protéines de la sous-famille Scar, telle que la protéine Scarl/WAVE de Dictyostellium discoideum, ou de Caenorhabditis elegans, ou de Drosophila melanogaster, de souris, ou humaine, - des protéines de la sous-famille Las des micro-organismes, notamment des levures, telle que la protéine Lasl7/Beelde Saccharomyces cerevisiae, ou la protéine homologue WASP (Wsplp) de Schizosaccharomyces pombe.
Avantageusement, les fragments peptidiques susmentionnés sont choisis parmi ceux comprenant : - le domaine d'homologie avec la verproline contenu dans les protéines de la famille WASP, ou dans une protéine dérivée de ces dernières, ou au moins une des deux séquences homologues à la verproline lorsque lesdites protéines de la famille WASP contiennent deux de ces séquences, ou une séquence peptidique dérivée du domaine susmentionné, notamment par substitution, addition ou suppression d'un ou plusieurs acides aminés, et conservant la propriété de ce domaine de se lier à l'actine, - et le domaine d'homologie avec la cofiline contenu dans les protéines de la famille WASP ou dans une protéine dérivée de ces dernières, ou une séquence peptidique dérivée du domaine susmentionné, notamment par substitution, addition ou suppression d'un ou plusieurs acides aminés, et conservant la propriété de ce domaine d'intervenir dans le cadre de la polymérisation de l'actine.
Le cas échéant, les fragments peptidiques susmentionnés utilisés dans le cadre de la présente invention, contiennent également le segment acide C-terminal desdites protéines WASP ou dérivées.
Avantageusement les fragments peptidiques susmentionnés ne contiennent pas le domaine d'homologie avec la plekstrine, et/ou le domaine de liaison à Cdc42, et/ou la région riche en proline, définis ci-dessus desdites protéines de la famille WASP.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée de fragments peptidiques des protéines de la famille WASP d'origine humaine.
Dans le cas où l'appel est concerné par le critère de préanalyse, on appliquera une ou des transformations sur ses paramètres.
L'annexe A4.1 comprend en A4.1.1 un jeu de lignes RHM d'un autocommutateur simplifié (fictif), et en A4.1.2 la traduction de ces lignes en objets commande (également simplifiés).
Les lignes RHM de critère (ici RHM1 et RHM2) contiennent des critères à appliquer, et une ou plusieurs informations sur les manipulations à effectuer. Ces manipulations peuvent modifier non seulement l'état de l'appel, mais aussi l'état du simulateur lui même.
On considère un énoncé d'appel initial ayant les paramètres donnés en A4.3. L'autocommutateur fictif compare cet énoncé d'appel aux critères contenus dans les objets commande.
RHM1 sera rejeté car 123=123 est vrai mais pas PLMN=BSS. Par contre, RHM2 sera accepté car (123=123 et PLMN=PLMN) sont vrais tous deux. Dans ce cas, le champ action contenu dans RHM2 sera pris en compte pour l'énoncé d'appel considéré. Il renvoie à un autre RHM, ici le RHM3, par le paramètre "nom de l'action".
L'énoncé d'appel va donc subir les transformations contenues dans le RHM3. On admet que le champ dicon = "+size" est interprété par l'autocommutateur fictif comme le rajout de la taille du numéro de l'appel, en tête de ce même numéro ("digit conversion"). En sortie du RHM3, l'énoncé d'appel devenu APPEL1A aura donc les nouveaux paramètres donnés en A4.1.5. Après une ou plusieurs interventions de ce genre (ou
aucune, dans certains cas), l'énoncé d'appel est prêt pour l'analyse.
Les fichiers RHM contiennent également des lignes de RHM destinées à l'analyse, comme RHM4 et RHM5 en A4.2.1 dans l'annexe 4. Le but de l'analyse est de rechercher une destination ("destination logique"). Les types de destination varient, et sont spécifiés eux aussi dans des lignes de RHM, telle RHM6 en A4.2.1. Comme pendant la phase de pré-analyse, un énoncé d'appel sera soumis à différents critères d'analyse, le but étant de déterminer les RHM qui vont concerner l'appel pour son routage futur. Le paramètre "dest" identifie une destination, dans le jeu de RHM. Il existera donc des routes liées ayant ce paramètre, et ayant d'autres paramètres spécifiant une destination physique. Ainsi, la RHM6 affecte le faisceau E90A à la destination logique 101.
L'application des conditions se fait comme en pré-analyse. Le traitement d'analyse de l'énoncé d'appel APPEL1A va donc appliquer RHM5, qui vise RHM6, d'où un aiguillage vers le faisceau "E90A".
Le processus donné en exemple peut se terminer à ce niveau, par la donnée de la numérotation transformée et du faisceau de sortie.
Dans la réalité, bien d'autres critères peuvent être examinés (tels que vérification des droits de lancer cet appel, ou de recevoir cet appel, en fonction des caractéristiques de l'abonnement, notamment), avant que le traitement d'appel par le noeud considéré soit retourné au simulateur du réseau pour passage à la machine suivante.
Dans un cas réel, les types de RHM sont nombreux pour une machine donnée ; chaque commande RHM peut faire intervenir plusieurs critères (de 1 à 20 environ) et/ou plusieurs actions. Les expressions logiques retenant un RHM, ou le rejetant pour un énoncé d'appel donné, sont donc diverses et leur complexité variée.
Plus généralement, et non limitativement, on pourra prévoir: - des RHM de configuration des paramètres de la machine, - des RHM spécifiant le partage de charge entre destinations, - des RHM précisant des priorités entre les routes, - des RHM annulant d'autres RHM, par exemple.
Une machine réelle intègre plusieurs milliers, voire plusieurs dizaines de milliers, de lignes de RHM, qui définissent de très nombreuses "premières fonctions internes" pour la pré-analyse, et "secondes fonctions internes" pour l'analyse, ainsi que d'autres informations, telles que: définition des faisceaux, gestion de la taxation, par exemple. Le simulateur objet de l'invention doit donc, pour simuler cette machine, faire de même. L'invention offre une solution avantageuse pour y arriver de façon satisfaisante, en évitant largement les risques d'erreurs liés à une telle complexité.
La préanalyse n'est pas toujours effectuée. Ainsi, dans le cas d'un appel de téléphone mobile (figure 8), l'énoncé d'appel initial EA10 est transmis à une machine XXO du type MSC ("Mobile Switching Center"), qui interroge en EAU (routage virtuel) une base de données HLR notée XY99, reçoit en retour une réponse EA12, et s'en sert pour adresser l'appel EA19, à travers le réseau, à une autre station MSC notée XX9, par un routage réel.
Dans le cas du réseau dit "intelligent" ou "IN" (figure 9), un appel initial (ou incident) EA20 arrive sur une machine XY90 (de type SSP). Celle-ci interroge en EA21 (routage virtuel) une machine XY92, du type SCP, qui donne en EA22 une réponse, laquelle est utilisée en EA25 pour un routage réel vers une autre machine SSP, notée XY95.
Ce procédé comprend la solubilisation d'un comprimé effervescent selon l'invention dans une solution aqueuse chlorée contenant au moins un principe actif sensible à l'action du chlore, ladite solution étant destinée à l'administration par voie orale dudit principe actif à l'animal.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, la solution devant être administrée à l'animal est une eau de boisson chlorée. Ce procédé est applicable quelle que soit l'espèce animale considérée. Suivant l'espèce animale considérée, la nature du colorant présent dans le comprimé doit être judicieusement choisie de façon à générer une marque visible sur l'animal.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, les animaux traités sont des porcs et mieux encore des oiseaux ou volailles, tels que des poules, dindes, cailles, pintades, oies ou canards.
Les avantages de l'invention sont principalement - le contrôle simultané de la bonne ingestion par l'animal du principe actif et de la présence du principe actif dans la solution administrable à l'animal ; - la possibilité d'utiliser comme solution administrable à l'animal, une eau de boisson comprenant du chlore et ceci, malgré la sensibilité du principe actif administré à l'action du chlore ; - la solubilisation rapide et complète du comprimé effervescent dans l'eau destinée à l'administration.
L'invention est illustrée dans la suite à la lumière des exemples 1 â 4 suivants. EXEMPLE 1 Le comprimé illustré au tableau 1 est préparé par mise en oeuvre des étapes suivantes.
Le bicarbonate de sodium, l'acide citrique, l'acide fumarique, la malto-dextrine et le bleu patenté sont intimement mélangés à sec sous la forme de poudres.
Puis on procède à une granulation humide par pulvérisation d'un mélange de polyéthylèneglycol 6000 et d'eau dans un rapport pondéral 1:1 sur le mélange précédent.
Le mélange ainsi granulé est séché à l'étuve pendant 3 à 5 heures à une température inférieure à 70 C, de préférence entre 40 et 70 C, de telle sorte que la teneur résiduelle en eau du mélange soit inférieure à 1 %.
Le mélange est ensuite refroidi pour revenir à température ambiante en environ 3 heures. Au granulé obtenu sont ajoutés le thiosulfate de sodium (préalablement séché à 35 C) et la carboxyméthylcellulose.
Après homogénéisation, on procède à la compression du mélange par application des techniques conventionnelles de compression.
TABLEAU1 Composants Teneur (% p/p) Thiosulfate de sodium 7,5 Bleu patenté 7,5 Bicarbonate de sodium 37 Acide citrique 27 Acide fumarique 7 Malto-dextrine 8 Polyéthylèneglycol 6000 3 Gomme de cellulose 3 EXEMPLE 2 En procédant comme à l'exemple 1, on prépare le comprimé illustré au tableau 2.
TABLEAU 2 Composants Teneur (% p/p) Thiosulfate de sodium 6 Vert brillant 9 Bicarbonate de sodium 36 Acide citrique 34 Mannitol 9 Polyéthyléneglycol 4000 3 Carboxyméthylcellulose réticulée 3 EXEMPLE 3 En procédant comme à l'exemple 1, on prépare de même le comprimé effervescent du tableau 3.
TABLEAU 3 Composants Teneur (% p/p) Thiosulfate de sodium 6 Bleu patenté 6,5 Bicarbonate de sodium 32 Acide citrique 23 Acide fumarique 6 Maito-dextrine 7 Polyéthylèneglycol 6000 1,5 Amidon de riz 15 Gomme de cellulose 3 EXEMPLE 4 L'efficacité d'une composition répondant à la formule décrite dans l'exemple 1 a été évaluée dans un essai in vitro selon le protocole suivant. Une préparation vaccinale destinée à un usage oral pour la vaccination des volailles contre la maladie de Newcastle, contenant une souche vaccinale atténuée, est diluée dans de l'eau maintenue â la température de 20 C. Le titre initial de la solution médicamenteuse, exprimé en logarithme décimal de la D1050/0,2 ml (Dose Infectieuse Oeuf 50 %) est voisin de 4.
Différentes concentrations de chlore sous forme libre sont ajoutées à cette solution médicamenteuse : 0, 5 et 10 ppm. L'essai est réalisé en présence ou en l'absence de la composition objet de l'invention, ajoutée à la solution médicamenteuse de telle sorte que la concentration finale en colorant et en thiosulfate de sodium soit de 15 mg/litre. Le pH des différentes solutions médicamenteuses ainsi préparées est mesuré. Des prélèvements d'eau médicamenteuse sont réalisés à 3 échéances : 1, 2 et 3 heures après mise en solution de la préparation vaccinale ; la teneur en souche vaccinale est titrée. Les résultats sont rapportés dans le tableau suivant Titre viral (exprimé en log décimal de la D1050 par 0.2 ml)
Exposition 0 ppm CI* 0 ppm CI + C** (heure) pH : 5,99 pH : 6,05 0 > 4,5 4,16 1 4,16 4,16 2 4,16 4,37 3 4,16 4,37 5 ppm CI* 5 ppm CI + C** pH : 7,62 pH : 6,06 0 0 > 4,5 1 0 4,16g 2 0 4,16 3 0 4,16 10 ppm CI* 10 ppm CI + C** pH : 8,22 pH: 6,05 0 0 > 4,5 1 0 4,16 2 0 3,83 3 0 3,83 * CI = Chlore libre ** C = composition de l'invention Les solutions médicamenteuses supplémentées avec la composition de l'invention apparaissent uniformément colorées en bleu. En l'absence de chlore, l'ajout de la composition de l'invention est bien tolérée par la souche vaccinale, le titre vaccinal étant identique à celui de la solution témoin, et ceci pendant au moins 3 heures de mise en contact.
Le bénéfice apporté par la composition de l'invention est clairement démontré dans les eaux supplémentées en chlore. Le chlore, aux concentrations de 5 et 10 ppm, détruit très rapidement la souche vaccinale tout en provoquant une élévation du pH de la solution médicamenteuse néfaste à la survie de la souche. Cet effet nuisible du chlore est antagonisé par l'ajout de la composition de l'invention laquelle assure une excellente survie de la souche vaccinale par neutralisation du chlore, mise en évidence par la stabilisation du pH des solutions médicamenteuses la contenant.