INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans le cadre de raquette selon l'invention, la feuille viscoélastique formée d'un matériau viscoélastique et utilisée comme organe d'absorption de vibrations placé entre les couches de résine armée de fibres a un coefficient de pertes (tg8) qui n'est pas inférieur à 1,0 à une fréquence de 10 Hz et une température de 6 C et une épaisseur qui n'est pas inférieure à 0,1 mm. L'organe d'absorption de vibrations ayant un coefficient de pertes (tg8) et une épaisseur dans les plages précitées accroît suffisamment les performances d'amortissement de vibrations du cadre. L'épaisseur de la feuille viscoélastique n'est pas grande car elle ne dépasse pas 0,6 mm. Ainsi, la feuille viscoélastique placée entre les couches de résine armée de fibres n'a pas un grand volume et n'augmente donc pas beaucoup le poids du cadre de raquette, au point que le joueur de tennis ait des difficultés à balancer sa raquette, et la résistance mécanique du cadre de raquette n'est pas abaissée excessivement.
Lorsque la feuille viscoélastique a un coefficient de pertes (tg8) inférieur à 1,0, le matériau viscoélastique ne peut pas présenter l'effet voulu d'amortissement de vibrations lorsque la feuille viscoélastique a une épaisseur qui ne dépasse pas 0,6 mm. A ce point de vue, le coefficient de pertes (tg8) est avantageusement au moins égal à 1,2 et plus avantageusement encore au moins égal à 1,5. Plus le coefficient de pertes (tg8) est élevé et plus les performances d'amortissement de vibrations sont importantes. En conséquence, selon l'invention, il n'est pas nécessaire de spécifier la limite supérieure du coefficient de pertes (tg8) à une valeur particulière. Cependant, pour des questions de disponibilité du matériau de l'organe d'absorption de vibrations utilisé dans le cadre de raquette, le coefficient de pertes (tg8) ne dépasse pas 4,0, avantageusement 3,0 et très avantageusement 2,0.
Le coefficient de pertes (tg8) de l'organe d'absorption de vibrations est mesuré avec un appareil de mesure de viscoélasticité (spectromètre perfectionné de viscoélasti- cité "DVA200" fabriqué par Shimadzu Seisakusho Corp.). Le coefficient de pertes (tg8) est mesuré dans les conditions suivantes : la fréquence est égale à 10 Hz, la température est égale à 6 C, un dispositif de montage applique une force de traction à l'organe d'absorption de vibrations, la vitesse d'élévation de température est égale à 2 C/min, la déformation initiale est égale à 2 mm, et l'amplitude de déplacement est égale à 12,5 ym. La dimension de chaque éprouvette (en haltère) est la suivante la largeur, l'épaisseur et la longueur sont de 4,0, 1,66 et 30,0 mm respectivement. Les éprouvettes sont serrées sur une longueur de 5 mm aux deux extrémités. La longueur d'éprouvette utile est donc de 20,0 mm.
II est avantageux d'utiliser un matériau viscoélastique dans l'organe d'absorption de vibrations dont la température de ramollissement n'est pas inférieure à 80 C et avantageusement à 100 C et très avantageusement à 140 C pour une vitesse d'élévation de température de 10 C/min dans l'essai précité. Si la température de ramollissement du matériau
viscoélastique est faible, sa fluidité est élevée. I1 existe dans le commerce, comme matériau viscoélastique avantageux ayant une température de ramollissement dans la plage précitée, un film "Dipole Gee" produit par CCI Corp. (température de ramollissement 150 C).
Lorsque l'épaisseur de la feuille viscoélastique ne dépasse pas 0,1 mm, il est difficile d'obtenir l'augmentation nécessaire des performances d'amortissement de vibrations. L'épaisseur de la feuille ne doit donc pas être inférieure à 0,1 mm. Lorsque l'épaisseur de la feuille dépasse 0,6 mm, le poids de la feuille est trop grand pour le poids du cadre de raquette. En conséquence, les joueurs de tennis ont des difficultés à balancer leur raquette, le degré de réduction de résistance mécanique du cadre devient trop élevé pour être négligeable, et en outre il est impossible de prévoir une augmentation supplémentaire des performances d'amortissement de vibrations. I1 est donc avantageux que l'épaisseur de la feuille viscoélastique ne dépasse pas 0,6 mm.
Avec le cadre de raquette selon l'invention, il est avantageux que les couches de résine armée de fibres soient formées de plusieurs couches préalablement imprégnées armées de fibres placées les unes sur les autres, et que la feuille viscoélastique soit insérée dans un espace compris entre les couches de la résine armée de fibres. De cette manière, il est possible d'empêcher une séparation de la feuille viscoélastique des couches de résine armée de fibres. A la place de l'insertion de la feuille viscoélastique dans l'espace formé entre les couches de résine armée de fibres, la feuille peut être enrobée dans une ou plusieurs couches de résine armée de fibres.
Il peut être souhaitable de sélectionner préalablement des agents qui se lient, par exemple, à des récepteurs de surface cellulaire, tels que des récepteurs de CMH de catégorie I ou de catégorie II. N'importe quels agents identifiés en tant qu'agents se liant à des récepteurs de surface cellulaire servant de cibles peuvent être ensuite utilisés dans l'analyse précitée pour déterminer leur effet sur la rétrodifférenciation. A titre d'exemple particulier, des banques de présentation de phages qui expriment des domaines de liaison d'anticorps peuvent être utilisées pour identifier des fragments d'anticorps (habituellement scFvs) qui se lient à un marqueur de surface cellulaire cible, par exemple la région homologue de la chaîne ss des récepteurs de CMH de catégorie II. Des analyses de liaison convenables sont connues dans ce domaine, tout comme la production et la sélection de banques de présentation de phages. Des analyses peuvent également être utilisées pour identifier des anticorps ou fragments d'anticorps optimisés, par exemple pour sélectionner une banque mutagénisée de dérivés d'un anticorps qui s'est déjà révélé provoquer la rétrodifférenciation.
IX Utilisations La présente invention propose des procédés et un dispositif pour la rétrodifférenciation de cellules engagées en cellules indifférenciées. En particulier, la présente invention propose un procédé et un dispositif pour la préparation d'une cellule souche à partir d'une cellule plus différenciée. Les implications cliniques sont considérables puisque les cellules souches sont utilisées dans une large gamme d'applications thérapeutiques mais, jusqu'à présent, étaient difficiles, laborieuses et parfois problématiques du point de vue éthique, à obtenir.
Les cellules souches produites conformément à la présente invention peuvent être utilisées pour renouveler des populations de cellules spécifiques chez un patient, telles qu'une population de cellules hématopoïétiques ou une sous-population de ces cellules hématopoïétiques, par exemple des lymphocytes T CD4. Les cellules plus engagées utilisées pour produire les cellules souches peuvent provenir du même patient ou bien d'un donneur apparié. Ainsi, les cellules souches produites conformément à la présente invention peuvent être utilisées pour guérir et reconstituer des tissus et organes à cellules spécialisées.
Par exemple, des cellules indifférenciées pourraient être utilisées pour produire des cellules réengagées telles que les cellules garnissant les alvéoles des poumons, en créant ainsi un mécanisme permettant de remplacer ou de réparer le tissu pulmonaire altéré ou pathologique (voir Le Page, New Scientist, 19 décembre 2000, page 20).
Ainsi, les cellules souches produites conformément à la présente invention peuvent être introduites dans le patient pour le renouvellement des cellules dans l'organisme. De manière convenable, les cellules souches se greffent tout d'abord et assurent ensuite le renouvellement.
De manière convenable, les cellules souches peuvent être introduites in vivo en utilisant un transfert liposomal.
Ainsi, la présente invention concerne également un médicament comprenant une cellule indifférenciée préparée par l'un quelconque de ces modes opératoires ou par le dispositif, en mélange avec un diluant, support ou excipient convenable.
Dans une forme de réalisation, le médicament comprenant la cellule indifférenciée peut être utilisé pour produire une cellule plus engagée bénéfique, telle qu'une cellule ayant une structure génomique correcte, afin de soulager n'importe quels symptômes ou états engendrés par, ou associés à, une cellule plus engagée ayant une structure génomique incorrecte. Ainsi, la présente invention propose également un procédé pour supprimer une mutation acquise d'une cellule plus engagée, dans lequel le mode opératoire comprend la formation d'une cellule indifférenciée par le procédé conforme à la présente invention, l'engagement de la cellule indifférenciée en une cellule réengagée, ce qui permet de supprimer l'arrangement ou le réarrangement du génome et/ou du noyau de la cellule qui est la cause de la mutation.
De préférence, le gène est inséré dans la région d'immunoglobuline ou la région de TCR du génome.
La présente invention propose également une méthode pour le traitement d'un patient souffrant d'une maladie ou d'une affection résultant d'une cellule défective ou d'une cellule indésirable, méthode qui comprend la préparation d'une cellule indifférenciée en mettant en contact une cellule plus engagée avec un agent qui provoque la rétrodifférenciation de la cellule plus engagée en la cellule indifférenciée, et ensuite, facultativement, l'engagement de la cellule indifférenciée en une cellule réengagée ; dans laquelle la cellule indifférenciée, ou la cellule réengagée, affecte la cellule défective ou la cellule
indésirable pour soulager les symptômes de la maladie ou de l'affection ou pour guérir le patient de cette maladie ou affection.
En variante, la cellule indifférenciée peut être utilisée pour produire une cellule plus engagée qui produit une entité qui guérit n'importe quels symptômes ou états provoqués par, ou associés à, une cellule plus engagée ayant une structure génomique incorrecte.
Par exemple, la présente invention peut être utilisée pour préparer des anticorps ou des récepteurs de lymphocytes T contre un antigène qui est exprimé par la cellule plus engagée qui a subi une rétrodifférenciation à la cellule indifférenciée. A cet égard, l'antigène peut être un antigène fetospécifique ou un antigène fetospécifique à réactivité croisée.
La présente invention comprend également un procédé et un dispositif pour ajuster les quantités de cellules indifférenciées et de cellules plus engagées. Par exemple, la présente invention comprend un procédé comprenant la formation d'une cellule indifférenciée par le procédé conforme à la présente invention et ensuite l'activation d'un gène d'apoptose pour affecter la cellule indifférenciée, par exemple pour provoquer sa mort.
Dans une forme de réalisation préférée, la présente invention concerne un procédé pour l'introduction d'un gène dans le génome d'une cellule indifférenciée, ledit procédé comprenant l'introduction du gène dans une cellule plus engagée, et ensuite la préparation d'une cellule indifférenciée par le procédé conforme à la présente invention, le gène étant ainsi présent dans la cellule indifférenciée.
Dans une forme de réalisation plus appréciée, la présente invention concerne un procédé pour introduire un gène dans le génome d'une cellule indifférenciée, ledit procédé comprenant l'insertion du gène dans le génome d'une cellule plus engagée et ensuite la préparation d'une
Point de fusion : 118-120 C (MK) PREPARATION 5 : 4-Cyano-4,5-dihydrocyclobuta[e]indole Le produit est obtenu selon le procédé de la préparation 2, en utilisant comme substrat le produit de la préparation 4.
Point de fusion : 132-134 C (MK) PREPARATION 6 : 4-Cyano-2,3,4,5-tétrahydrocyclobuta[e]indole Le produit est obtenu selon le procédé de la préparation 3, en utilisant comme substrat le produit de la préparation 5.
PREPARATION 7 : 5-Cyano-5,b-dihydrocyclobuta[f]benzothiophène Stade 1 : 1-Cyano-4-thiométhylbenzocyclobutane Dans 3,5 1 d'ammoniac liquide à reflux contenant des quantités catalytiques de
ferrycyanure de potassium et de trinitrate de fer monohydrate, sont introduits en 2 heures 50,8 g de sodium, puis en 5 minutes, 153 g de 3-(2-chloro-5-thiométhylphényl) propionitrile. On laisse réagir 1 heure à -33 C puis on introduit 118,2 g de chlorure d'ammonium solide. Après évaporation de l'ammoniac, le résidu est repris par de l'éther, les sels sont filtrés et le filtrat est évaporé à sec permettant de conduire au produit attendu.
Stade 2 : l-Cyano-4-méthylsulfinylbenzocyclobutane 11g de produit du stade 1 précédent sont dissous dans 70 ml de dichlorométhane. Sur la solution refroidie à -5 C est coulée une solution de 15,8 g d'acide m-chloroperbenzoïque dans 80 ml de dichlorométhane. Après 10 minutes d'agitation, le milieu réactionnel est versé sur 100 ml d'eau et 100 ml de soude IN. On décante, extrait à nouveau la phase aqueuse au dichlorométhane. Les phases organiques réunies sont lavées à l'hydrogénosulfate de sodium, puis à la soude IN, au bicarbonate de sodium et enfin à l'eau jusqu'à neutralité. La phase organique est séchée et concentrée pour conduire au produit attendu.
Stade 3 : l-Cyano-4-mercaptobenzocyclobutane Sur une solution de 11 g de produit obtenu au stade précédent dans 100 ml de dichlorométhane sont ajoutés 9,76 ml d'acide trifluoroacétique dissous dans 20 ml de dichlorométhane. L'addition dure 45 minutes durant laquelle la température est maintenue à 25 C. Le milieu réactionnel est encore agité 1 h 30 à cette température, puis évaporé à sec. Le résidu est repris 10 minutes sous agitation en présence d'un mélange 50/50 de triéthylamine et de méthanol. Après évaporation, on dilue au dichlorométhane, lave par une solution saturée de chlorure d'ammonium puis à l'eau, sèche et concentre pour obtenir le produit attendu sous forme d'une huile.
Stade 4 : 1-Cyano-4-f2,2-diëthoxyéthylsulfanyl)benzocyclabutane Sur une solution de 9,1 g du produit obtenu au stade 3 précédent dans 20 ml de tétrahydrofurane et 140 ml d'éthanol sont additionnés, à 20 C et par portions 3,65 g de
borohydrure de sodium. Après 1 heure à 50 C, 2,14 g de borohydrure de sodium solide sont à nouveau ajoutés. Le milieu réactionnel est ensuite porté à 80 C et à cette température on coule en 1 heure, 39 ml de diéthylacétal du bromoacétaldéhyde. Le chauffage est encore maintenu pendant 12 heures, puis le milieu réactionnel refroidi est versé sur 1 litre d'eau glacée. Le mélange obtenu est extrait à l'éther et la phase organique est lavée avec une solution de bicarbonate de sodium à 10 % puis à l'eau. La phase étherée est séchée et concentrée sous vide pour conduire au produit attendu sous forme d'huile.
Stade 5 : S-Cyano-5,6-dihydrocyclobuta%fJbenzothiophène 10 g d'acide polyphosphorique, 8,5 g du produit obtenu au stade 4 précédent dans 500 ml de chlorobenzène sont portés à 130 C pendant 4 heures. Après refroidissement, le surnageant est soutiré et le résidu est rincé au dichlorométhane. Le surnageant et la phase dichlorométhane sont réunies et neutralisées en rajoutant du bicarbonate de sodium en poudre. Après 15 minutes d'agitation, on filtre et évapore à sec. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane/dichlorométhane : 50/50) permettant d'obtenir le produit attendu ainsi qu'un produit secondaire.
Point de fusion : 102-103 C (MK) PREPARATION 8 : 6-Cyano-5,6-dihydrocyclobuta [f]benzothiophène Le produit est obtenu selon le procédé de la préparation 7 des stades 1 à 5 mais en utilisant au stade 1 le 3- (3-bromo-4-thiométhylphényl)propionitrile la place du 3-(2-chloro-5- thiométhylphényl)propionitrile.
PREPARATION 9 : 5-Cyano-5,6-dihydrocyclobuta[f]ben2ofurane Stade 1: l-Cyano-4-(2,2-diéthoxyéthoxy)benzocyclobutane Une solution de 16,5 g de l-cyano-4-hydroxybenzocyclobutane dans 205 ml de
diméthylformamide est coulée sur une suspension de 67,8 mmol d'hydrure de sodium dans 160 ml de diméthylformamide. Le milieu réactionnel est agité 30 minutes puis une solution de 10,2 ml de l-bromo-2,2-diéthoxyéthane dans 40 ml est additionnée en 15 minutes et la température est ensuite portée à 60 C pendant 6 heures. On laisse encore 12 heures sous agitation, évapore le diméthylformamide, reprend à l'eau, extrait au dichlorométhane, sèche et concentre sous vide. Le résidu est chromatographié sur gel de silice (CH2Cl2/AcOEt : 95/5) permettant d'isoler le produit attendu.
Stade 2 : S-Cyano-5,6-dihydrocyclobuta(fJbenzofurane Le produit est obtenu comme au stade 3 de la préparation 1 mais en utilisant le produit du stade 1 précédent. Au cours d'une chromatographie sur gel de silice (CH2Cl2/cyclohexane : 80/20), on isole le produit attendu ainsi qu'un produit secondaire.
PREPARATION 10 : 6-Cano-5,6-dihydrocyclobuta [ f ] benzofu ran e Le produit est obtenu comme le produit de la préparation 9 mais en utilisant au stade 1 le 1-cyano-5-hydroxybenzocyclobutane et au stade 2 comme éluant dans la séparation des régioisomères le mélange CH2Cl2/cyclohexane : 75/25. Le produit attendu est isolé sous forme d'une huile.
PREPARATION 11 : 5-Cyano-4,5-dihydrocyclobuta[e]benzothiophène Le produit secondaire obtenu au stade 5 de la préparation 7 correspond au produit attendu.
PREPARATION 12 : 4-Cy ano-4,5-dihydrocyclobuta [e\ benzothiophène Le produit est obtenu au cours du stade 5 de la préparation 8.
Selon le procédé de l'invention, l'oxydation du métal ou de l'alliage est limitée à un taux faible, en maintenant le jet de métal ou d'alliage en fusion sous une atmosphère de gaz inerte, tel que de l'argon, généralement à hygrométrie contrôlée, lors de la fusion et en entourant le jet de métal ou d'alliage, depuis la fusion, jusqu'au début effectif de l'atomisation par une enveloppe, une gaine de ce même gaz inerte.
L'oxydation est également limitée à un taux faible en appliquant, dès le début de l'atomisation, une vitesse de trempe ultra rapide, généralement de 105 à 106 K/s sur les particules créées.
L'enveloppe de gaz inerte est facilement formée en éjectant le gaz inerte par un orifice entourant l'orifice de la buse, simultanément à l'éjection, du jet du métal ou de l'alliage par cette buse.
En outre, l'utilisation pour la trempe rapide d'une quantité de fluide de trempe, de préférence d'eau, faible, finie, typiquement inférieure ou égale à 2 litres, est sans effet sur les risques de criticité, tandis que la séparation de la zone de fusion et de la zone d'atomisation joue un rôle fondamental pour interdire, dans toutes les situations, aussi bien en fonctionnement, normal, qu'accidentel, la chute d'une quantité significative de métal ou d'alliage dans le fluide de trempe, tel que l'eau.
En d'autres termes, le procédé de l'invention permet de préparer des particules de métal ou d'alliage nucléaire, tel que l'UMo, notamment sous la forme d'une poudre, convenant, en particulier, pour l'élaboration de combustible nucléaire, en répondant pleinement aux contraintes spécifiques liées à la manipulation de matière nucléaire.
Ainsi, entre autres avantages, le procédé de l'invention permet-il de préparer des particules, en particulier une poudre, avec un spectre granulométrique étroit, de telles tailles des particules facilitant les étapes ultérieures de préparation d'un combustible nucléaire.
Le procédé de l'invention se caractérise par une absence totale de rétention de matière nucléaire, une adéquation complète de la capacité de production avec les besoins nucléaires, une mise en oeuvre facile, fiable, et peu coûteuse, et, enfin, une quantité d'effluents très faible.
Par métal ou alliage nucléaire selon l'invention, on entend généralement tout métal ou alliage susceptible d'être employé, incorporé dans un combustible nucléaire.
Ce métal ou cet alliage sera donc généralement choisi parmi les actinides, tels que l'uranium, les lanthanides, et leurs alliages.
Parmi les alliages d'uranium, ses alliages avec le molybdène sont préférés.
L'invention concerne également un dispositif de préparation de particules de métal ou d'alliage nucléaire comprenant :
- des moyens pour préparer par fusion une masse fluide du métal ou de l'alliage ; - des moyens pour mettre la masse fluide du métal ou de l'alliage de métal sous la forme d'un jet du métal ou de l'alliage en fusion ; des moyens pour animer un fluide de trempe d'un mouvement de rotation centrifuge et réaliser l'atomisation en particules du jet du métal ou de l'alliage de métal en fusion, et la trempe rapide des particules ; - des moyens pour réaliser la fusion du métal ou de l'alliage de métal nucléaire sous atmosphère de gaz inerte, et des moyens pour entourer le jet du métal ou de l'alliage de métal en fusion d'une enveloppe de gaz inerte jusqu'à la trempe.
Avantageusement, le dispositif selon l'invention comprend, en outre, des moyens pour séparer physiquement la zone dans laquelle se produit la fusion de la zone dans laquelle se produit l'atomisation.
L'invention va maintenant être décrite plus en détail dans la description qui va suivre, donnée à titre illustratif et non limitatif, en référence au dessin joint, dans lequel : la figure 1 est une vue en coupe schématique d'un dispositif selon l'invention.
Le dispositif selon l'invention est décrit sur la figure 1.
Ce dispositif est pour certains de ses aspects analogue à un dispositif classique de préparation de particules par trempe rapide et atomisation. Un tel dispositif est, par exemple, décrit
exemple d'informations de toutes sortes exemple informations texte exemple informations texte On notera que : - Hubert est dans un container (CONTAINERNUMBER= "1 ") différent de celui d' Antoine , Edouard et Raymond (CONTAINERNUMBER= "2").
L'approche que nous présentons consiste à permettre de spécifier la macrostructure explicitement dans les documents, c'est-à-dire de choisir la granularité des contenus qui peuvent être partagés. Ainsi, lors de la spécification d'un contenu, celui-ci est, par la même occasion, localisé dans un contenant qui peut regrouper plusieurs contenus. Comme les contenus auraient pu être calqués sur la structure des éléments du document, les contenants auraient pu être calqués sur la structure des contenus (tous les contenus enfants d'un même parent auraient alors été mis dans un contenant). On a préféré ici spécifier explicitement quels contenus sont situés dans quelscontenants.
Une cellule souche indifférenciée de la présente invention peut être cultivée en utilisant n'importe quelle technique usuelle de culture de cellules souches embryonnaires (ES). A titre d'exemple seulement, un milieu convenable pour la culture de cellules indifférenciées ou cellules ES est décrit en détail ci-dessous.
Pour préparer 100 ml de milieu :
DMEM (N de catalogue GIBCO 11965-062 80 ml SVF à 15 % 15 ml Pen/Strep 1 ml L-glutamine 1 ml Amino-acides non essentiels MEM (N de catalogue GIBCO 11140-050 1 ml Lif (105 U/ml) ~~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ 1 ml BME (0,1 M) 0 , 2 ml
Le Lif est fourni en ampoules de 1 ml en tant que LIF ESGRO AMRAD à 107 U/ml, ce liquide peut être dilué dans 100 ml de DMEM et 10 % de SVF et stocké par portions aliquotes de 5 ml à -20 C.
En ce qui concerne le BME, un volume de 0,1 ml de BME (14,4 M) peut être ajouté à 14,3 ml de SBF, le mélange peut être filtré à travers un acrodisque de 0,2 micromètre et stocké à -20 C pendant un temps allant jusqu'à 1 mois.
Un milieu convenable supplémentaire peut être, par exemple, le milieu PMEF dont 100 ml sont préparés de la manière décrite en détail ci-dessous :
DMEM (N de catalogue GIBCO 11965-062 88 ml SVF à 10 % 10 ml Pen/Strep 1 ml L-glutamine 1 ml BME (0, 1 M) 0, 2 ml
D'autres milieux convenables pour les cultures de cellules ES seront manifestes pour l'homme de l'art.