INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
périphérique interne de chaque partie cylindrique 18b.
L'émission de lumière suivante est réalisée dans chaque
unité d'émission de lumière 12.
Comme l'indique le trait plein de la figure 5, la lumière de chacune des diodes photoémissives 28 constituant la source lumineuse 20 traverse la lentille de Fresnel 32 qui se trouve devant la source lumineuse 20 et forme de la lumière parallèle. La lumière traverse alors la lentille 24 de diffusion et est diffusée. La lumière qui a diffusé passe dans la lentille 26 formant condenseur et est concentrée, puis la lumière est émise vers l'avant de l'unité d'émission de lumière 12. La lumière est diffusée verticalement et horizontalement avec un angle prédéterminé, et est centrée
sur l'axe optique Axl.
Comme indiqué par les traits mixtes à deux points de la figure 5, la lumière provenant de chaque diode 28 et tombant sur la lentille de Fresnel 22 placée obliquement devant la diode 28 est émise par l'unité 12 d'émission de
L'émission de lumière de chaque unité 12 de la lampe
est effectuée de la manière suivante.
Comme indiqué en trait plein sur la figure 2 et en trait mixte à deux points sur la figure 3, la lumière tombant sur la lentille de Fresnel 32 placée devant chaque diode 38 dans chaque unité d'émission de lumière 12 forme de la lumière émise vers l'avant. Cette lumière passe direc- tement dans chaque partie d'ouverture 18a du panneau 18 en
forme de dôme et est émise vers l'avant.
D'autre part, comme indiqué en trait plein sur la figure 3, la lumière provenant de chaque diode 28 et tombant sur la lentille de Fresnel 32 placée obliquement devant la diode 28 est émise en avant de l'unité 12 d'émission de
Les perçages 8 permettent d'aligner de façon précise les portions des coeurs ( cores ) des fibres, qui sont contenues dans ces extrémités 10, les unes par rapport aux autres.
Les axes de ces portions de coeur sont coplanaires et parallèles.
De plus, le corps 6 de connecteur comprend deux broches de guidage 12. Ces deux broches de guidage sont respectivement placées de part et d'autre de l'ensemble des extrémités 10 des fibres optiques et les axes de ces broches de guidage sont parallèles l'un à l'autre ainsi qu'aux axes des portions de coeur et sont situées dans le même plan que ces derniers.
Toutes les extrémités 10 des fibres (ou, plus précisément, toutes les portions de coeur situées au niveau de ces extrémités) sont alignées de façon précise par rapport aux deux broches de guidage (ou, plus précisément, par rapport aux axes de ces broches).
Ce genre de connecteur mâle est connu par le document [2] dans lequel un tel connecteur est appelé connecteur MT.
On souhaite connecter l'ensemble ou réseau ( array ) des fibres optiques 4 à un ensemble ou réseau 14 d'éléments optoélectroniques (émetteurs ou récepteurs), par exemple des VCSEL, sans avoir à aligner optiquement le connecteur 2 et l'ensemble de ces éléments optoélectroniques l'un par rapport à l'autre.
Dans l'exemple de la figure 2, le réseau 14 des VCSEL est aminci et hybridé sur un substrat 16 formant par exemple un circuit de lecture (lorsque les VCSEL sont des photodétecteurs). Ce circuit 16 est par exemple en silicium tandis que le réseau 14 est par exemple en GaAs.
L'hybridation utilise des billes de brasure ( solder balls ) 18 qui relient le réseau 14 au circuit 16 par l'intermédiaire de plots ( pads ) non représentés. Les diverses lignes électriques de connexion que comportent le réseau 14 et le circuit de lecture 16 ne sont pas non plus représentés.
Au sujet d'une hybridation entre un réseau de VCSEL et un circuit de lecture on se reportera par exemple au document [1].
Pour la mise en oeuvre de la présente invention, le circuit de lecture 16 a subi une découpe de précision sur son périmètre extérieur. Les VCSEL 20 sont parfaitement référencés par rapport à cette découpe de précision. Sur la figure 2, on voit deux faces opposées L1 du circuit 16 qui résultent de cette découpe de précision. Ces faces sont séparées l'une de l'autre par une distance Dl.
Comme on le voit sur la figure 3, on dispose aussi d'une pièce intermédiaire 22 formant une plaque auxiliaire d'alignement. Cette pièce 22 est percée de trois trous.
Parmi ces trois trous, deux trous 24 sont destinés à recevoir et à guider les broches de guidage 12 du connecteur 2. Les axes des deux trous 24 sont parallèles et coplanaires.
Le troisième trou 26 se trouve entre les deux trous 24. Les dimensions de ce trou 26 sont légèrement supérieures à celles du pourtour du circuit de lecture 16 (que l'on a découpé avec précision).
Le trou 26 est destiné à recevoir ce circuit de lecture (portant le réseau de VCSEL) et constitue ce que l'on appelle l'empreinte de positionnement de la puce électronique formée'par le réseau de VCSEL qui est hybridé sur son circuit de lecture 16.
Deux parois opposées L2 du trou 26 sont destinées à se trouver en regard des faces L1 du circuit 16 et sont séparées l'une de l'autre par une distance D2.
On précise que les deux trous 24 et le trou 26 sont parfaitement référencés les uns par rapport aux autres. Leurs positions relatives sont déterminées de façon à correspondre aux positions relatives des extrémités 10 des fibres et des broches de guidage 12 et à permettre ainsi la mise en coïncidence des extrémités 10 et des VCSEL 20.
De manière avantageuse, la quantité d'agent de couplage, choisie dans les zones générale et préférentielles précitées, est déterminée de manière à ce qu'elle représente de 1 % à 20 %, de préférence de 2 à 15 %, plus préférentiellement de 3 à 8 %, par rapport au poids de la charge blanche renforçante.
Nous allons revenir dans ce qui suit sur les définitions, tour à tour, du composé B consistant dans au moins un élastomère isoprénique, et du composé C consistant dans une charge blanche renforçante.
Par élastomères isopréniques qui sont mis en #uvre pour les compositions conformes au second objet de l'invention, on entend plus précisément : (1) les polyisoprènes de synthèse obtenus par homopolymérisation de l'isoprène ou méthyl-2 butadiène-1,3 ; (2) les polyisoprènes de synthèse obtenus par copolymérisation de l'isoprène avec un ou plusieurs monomères insaturés éthyléniquement choisis parmi :
- (2.1) les monomères diènes conjuguées, autres que l'isoprène, ayant de 4 à 22 atomes de carbone, comme par exemple :le butadiène-1,3, le diméthyl-2,3 butadiène-1,3, le chloro-2 butadiène-1,3 (ou chloroprène), le phényl-1 butadiène-1,3, le pentadiène-1,3, l'hexadiène-2,4 ; - (2.2) les monomères vinyles aromatiques ayant de 8 à 20 atomes de carbone, comme par exemple : le styrène, l'ortho-, méta- ou paraméthylstyrène, le mélange commercial "vinyl-toluène", le paratertiobutylstyrène, les méthoxystyrènes, les chlorostyrènes, le vinylmésitylène, le divinylbenzène, le vinylnaphtalène ; - (2.3) les monomères nitriles vinyliques ayant de 3 à 12 atomes de carbone, comme par exemple l'acrylonitrile, le méthacrylonitrile ; - (2.4) les monomères esters acryliques dérivés de l'acide acrylique ou de l'acide méthacrylique avec des alcanols ayant de 1 à 12 atomes de carbone, comme par exemple l'acrylate de méthyle, l'acrylate d'éthyle, l'acrylate de propyle, l'acrylate de n-butyle, l'acrylate d'isobutyle, l'acrylate d'éthyl-2 hexyle, le méthacrylate de méthyle, le méthacrylate d'éthyle, le méthacrylate de n-butyle, le méthacrylate d'isobutyle ; - (2. 5) un mélange de plusieurs des monomères précités (2. 1) à (2. 4) entre eux ; les polyisoprènes copolymères contenant entre 99 % et 20 % en poids d'unités isopréniques et entre 1 % et 80 % en poids d'unités diéniques, vinyles aromatiques, nitriles vinyliques et/ou esters acryliques, et consistant par exemple dans le poly(isoprène-butadiène), le poly(isoprène-styrène) et le poly(isoprène-butadiènestyrène) ; (3) le caoutchouc naturel ; (4) les copolymères obtenus par copolymérisation d'isobutène et d'isoprène (caoutchouc butyle), ainsi que les versions halogénées, en particulier chlorées ou bromée, de ces copolymères ; (5) un mélange de plusieurs des élastomères précités (1) à (4) entre eux ; (6) un mélange contenant une quantité majoritaire (allant de 51 % à 99,5 % et, de préférence, de 70 % à 99 % en poids) d'élastomère précité (1) ou (3) et une quantité minoritaire (allant de 49 % à 0,5 % et, de préférence, de 30 % à 1 % en poids) d'un ou plusieurs élastomères diéniques autres qu'isopréniques.
Par élastomère diénique autre qu'isoprénique, on entend de manière connue en soi : les homopolymères obtenus par polymérisation d'un des monomères diènes conjugués définis ci-avant au point (2. 1), comme par exemple le polybutadiène et le polychloroprène ; les copolymères obtenus par copolymérisation d'au moins deux des diènes conjugués précités (2. 1) entre eux ou par copolymérisation d'un ou plusieurs des diènes conjugués précités (2. 1) avec un ou plusieurs monomères insaturés précités (2.2),
(2. 3) et/ou (2.4), comme par exemple le poly(butadiène-styrène) et le poly(butadièneacrylonitrile).
A tire préférenctiel, on fait appel à un ou plusieurs élastomères isopréniques choisis parmi : (1) les polyisoprènes de synthèse homopolymères ; (2) les polyisoprènes de synthèse copolymères consistant dans le poly(isoprène-butadiène), le poly(isoprènestyrène) et le poly(isoprène-butadiène-styrène) ; (3) le caoutchouc naturel , (4) le caoutcouc butyle ; (5) un mélange des élastomères précités (1) à (4) entre eux ;(6) un mélange contenant une quantité majoritaire d'élastomère précité (1) ou (3) et une quantité minoritaire d'élastomère diénique autre qu'isoprénique consistant dans le polybutadiène, le potychloroprène, le poly(butadiène-styrène) et le poly(butadiène- acrylonitrile).
A titre plus préférentiel, on fait appel à un ou plusieurs élastomères isopréniques choisis parmi : (1) les polyisoprènes de synthèse homopolymères ; (3) le caoutchouc naturel ; (5) un mélange des élastomères précités (1) et (3) ; (6) un mélange contenant une quantité majoritaire d'élastomère précité (1) ou (3) et une quantité minoritaire d'élastomère diénique autre qu'isoprénique consistant dans le polybutadiène et le poly(butadiène-styrène).
L'état physique sous lequel se présente la charge blanche renforçante est indifférent, c'est-à-dire que ladite charge peut se présenter sous forme de poudre, de micro perles, de granulés ou de billes.
De manière préférentielle, la charge blanche renforçante ou composé C consiste dans la silice, l'alumine ou un mélange de ces deux espèces.
A titre de silice susceptible d'être mise en #uvre dans l'invention conviennent toutes les silices précipitées ou pyrogénées connues de l'homme de Part présentant une surface spécifique BET 5 à 450 m2lg. On préfère les silices de précipitation, celles-ci pouvant être classiques ou hautement dispersibles.
Par silice hautement dispersible, on entend toute silice ayant une aptitude à la désagglomération et à la dispersion dans une matrice polymérique très importante observable par microscopie électronique ou optique, sur coupes fines. Comme exemples non limitatifs de silices hautement dispersibles on peut citer celles ayant une surface spécifique CTAB égale ou inférieure à 450 m2/g et particulièrement celles décrites dans
le brevet US-A-5 403 570 et les demandes de brevets WO-A-95/09127 et WO-A-95/09128 dont le contenu est incorporé ici. Conviennent aussi les silices précipitées traitées telles que par exemple les silices "dopées" à l'aluminium décrite dans la demande de brevet EP-A-0 735 088 dont le contenu est également incorporé ici.
A titre plus préférentiel, conviennent bien les silices de précipitation ayant : - une surface spécifique CTAB allant de 100 à 240 m2/g, de préférence de 100 à 180 m2/g, - une surface spécifique BET allant de 100 à 250 m2/g, de préférence de 100 à 190 m2/g, - une prise d'huile DOP inférieure à 300ml/100 g, de préférence allant de 200 à 295 ml/100 g, - un rapport spécifique BET/surface spécifique CTAB allant de 1,0 à 1,6.
Le lecteur pourra se référer à la figure 4 et/ou à la demande de brevet PCT/FR98/02348 pour mieux connaître des exemples d'étapes mises en oeuvre au cours des opérations 7 et 8. Au cours de l'opération 8, l'utilisateur commun du poste utilisateur 100 et du récepteur 150 saisie le sceau secret et ce sceau secret est transmis au serveur de sécurité 170 où le sceau est vérifié, opération 9.
En variante, les opérations 7 à 9 sont remplacées par une opération de signature basée sur l'utilisation d'une carte à mémoire ("carte à puce") ou d'une mesure de biométrie.
Enfin, au cours de l'opération 11, les données transmises, certifiées et signées par clé privée sont transmises à la mémoire de stockage 130 avec une date de telle manière qu'elles sont horodatées, archivées et notarisée.
Dans une application de la présente invention à une remise en main propre des données transmises, un destinataire est, à la suite de l'opération 11, averti de la mise à sa disposition des données à transmettre et des opérations similaires aux opérations exposées ci-dessus sont mises en oeuvre pour effectuer une copie certifiée conforme sur
le poste utilisateur du destinataire après avoir recueilli de sa part une signature. Par exemple, une signature telle qu'exposée dans la demande de brevet PCT/FR98/02348 peut, de nouveau être mise en oeuvre pour authentifier le destinataire. Un exemple d'une succession d'opérations mises en oeuvre pour cette remise en main propre est donné en figure 2.
En figure 2 sont représentés un poste utilisateur destinataire ou système informatique destinataire 200, l'application Internet 110, la salle blanche 120, la mémoire de stockage 130, le deuxième réseau de communication 140 et un récepteur 250 sur le deuxième réseau de communication 140. Les opérations effectuées dans le mode de réalisation particulier illustré en figure 2 sont représentées dans des rectangles et numérotées de 13 à 25. Ces opérations peuvent suivre les opérations 1 à 12 illustrées en figure 1 et effectuées en relation avec un poste utilisateur 100 généralement différent du poste utilisateur 200.
Le poste utilisateur destinataire 200 est, par exemple, un ordinateur personnel (PC), un ordinateur de réseau (NC) ou un assistant numérique personnel (en anglais Personal Digital Assistant ou PDA). Le poste utilisateur destinataire 200 est doté d'un logiciel de communication à distance pour mettre en oeuvre l'application Internet 110, conjointement avec le serveur de sécurité 170. Ce logiciel de communication à distance peut être un logiciel de navigation ou un logiciel de courrier électronique, par exemple.
L'application Internet 110 permet la communication entre le poste utilisateur 200 et le serveur de sécurité 170 et la transmission de données depuis le poste utilisateur 200 vers la mémoire de stockage 130, par exemple par l'intermédiaire du serveur de sécurité 170.
Le récepteur 250 sur le deuxième réseau 140 peut, selon le type de deuxième réseau 140, être un téléphone mobile, un pageur ou un récepteur quelconque.
Le récepteur 250 permet à l'utilisateur du poste utilisateur destinataire 200 de prendre connaissance d'informations transmises par le serveur de sécurité 170.
Le poste utilisateur destinataire 200 et le serveur de sécurité 170 sont conjointement adaptés à mettre en oeuvre les opérations indiquées ci-dessous. Par exemple, le serveur de sécurité 170 est adapté à fournir des routines applicatives ou "applets"au poste utilisateur destinataire 200.
Au début du processus de certification, on suppose que des données sont à transmettre de manière certifiée et signée depuis la mémoire de stockage 130 jusqu'au poste utilisateur destinataire 200.
L'utilisateur du poste utilisateur destinataire 200 se connecte initialement au premier réseau, par exemple pour consulter des courriers électroniques.
Au cours de l'opération 13, l'application Internet 110 émet à destination du poste utilisateur destinataire 200 un courrier électronique (e-mail) qui indique que de l'information est mise à disposition de l'utilisateur du poste 200.
La présence d'un insert à cette position constitue donc un nouveau marqueur génétique de virulence utile pour la détection de souches d'E.coli pathogènes.
Les séquences d'acide nucléiques issues d'un tel insert constituent également des marqueurs utiles pour la détection de souches d'E.coli pathogènes, et en particulier pour la détection spécifique des souches de bactéries pathogènes portant ledit insert ; exemple, des séquences d'acide nucléiques issues de l'insert présent dans une souche de sérotype 0157 productrice de shiga-toxines permettent un détection spécifique de l'ensemble des E.coli de sérotype 0157 produisant des shiga-toxines.
En conséquence, la présente invention a pour objet une molécule d'acide nucléique issue d'une souche pathogène d'E. coli, caractérisée en ce qu'elle est sélectionnée dans le groupe constitué par : a) une molécule d'acide nucléique représentant un locus inséré dans le génome de ladite souche pathogène, à l'emplacement dudit génome correspondant à celui situé chez E.coli K12, entre les positions 93848 et 93849 de la séquence GenBank U82664 ; b) une molécule d'acide nucléique comprenant la molécule a) définie ci-dessus, et entre 1 et 2500 pb de la séquence en amont du site d'insertion de ladite molécule, et/ou entre 1 et 2500 pb en aval du site d'insertion de ladite molécule. c) une molécule d'acide nucléique constituant un fragment d'au moins 15 pb, de préférence d'au moins 25 à 30 pb, de la molécule a) ci-dessus ; d) une molécule d'acide nucléique constituant un fragment d'au moins 15 pb, de préférence d'au moins 25 à 30 pb, de la molécule b) ci-dessus, ledit fragment comprenant au moins une portion de la molécule a) et au moins une portion de la séquence en amont du site d'insertion de ladite molécule a), ou au moins une portion de la séquence en aval du site d'insertion de ladite molécule a).
Des molécules d'acide nucléique conformes à l'invention peuvent en particulier être issues du génome
d'une bactérie pathogène de l'espèce Escherichia coli, choisie parmi les E.coli STEC de sérotype 0157,077, 079, ou 0145, les Escherichia coli STEC ou EPEC de sérotype 055, et les Escherichia coli EPEC de sérotype 0127.
Par exemple, des molécules d'acide nucléique conformes à l'invention issues du génome d'E.coli 0157:H7, sont représentées dans la liste de séquences en annexe sous respectivement les numéros SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 11 à 17, SEQ 19, SEQ ID No : 21 et SEQ ID NO : 23.
La présente invention a également pour objet des molécules d'acide nucléique capables de s'hybrider spécifiquement, en conditions stringentes, avec l'une quelconque des molécules a) à d) ci-dessus.
Ceci englobe notamment des oligonucléotides utilisables comme amorces d'amplification pour l'obtention d'une séquence d'acide nucléique conforme à l'invention, ou comme sondes pour la détection de ladite séquence, et en particulier les oligonucléotides P388L, P388M, P388G, P388D, P388F, P388C et P388P, correspondant respectivement aux séquences SEQ ID NO :3 à 9 dans la liste de séquences en annexe. Les oligonucléotides P388M, P388G, P388D, P388F et P388C sont en particulier utilisables comme sondes d'hybridation moléculaire, utiles pour la détection, d'une molécule d'acide nucléique a) conforme à l'invention issue du génome d'une bactérie E. coli STEC de sérotype 0157.
La présente invention englobe en particulier les couples d'amorces utilisables pour l'amplification d'une molécule d'acide nucléique a) b) c) ou d) conforme à l'invention.
La présente invention a en outre pour objet les vecteurs recombinants, et notamment les plasmides recombinants contenant une molécule d'acide nucléique conforme à l'invention.
Des molécules d'acide nucléique conformes à l'invention peuvent par exemple être obtenues par amplification en chaîne par polymérase, à partir de l'ADN d'une souche E.coli pathogène comprenant le locus défini cidessus. Notamment ':
- une molécule d'acide nucléique a) conforme à l'invention peut être obtenue en utilisant un couple d'amorces d'amplification dont l'une s'hybride comprenant une amorce s'hybridant à chacune des extrémités de la molécule a) - une molécule d'acide nucléique b) conforme à l'invention peut être obtenue en utilisant un couple d'amorces d'amplification comprenant une amorce s'hybridant en amont du site d'insertion de la molécule a) et une amorce s'hybridant en aval du site d'insertion de la molécule a) ; des amorces appropriées peuvent être choisies par l'homme de l'art, respectivement à partir de la séquence de 2500 pb en amont de la position 93848 de la séquence GenBank U82664, et de la séquence de 2500 pb en aval de la position 93849.
On utilisera, bien entendu des conditions d'amplification permettant d'amplifier des fragments de grande taille, et comprenant notamment une étape d'extension d'amorces de durée suffisante.
Avantageusement, on peut utiliser le couple d'amorces P388L/P388P, qui s'hybride de part et d'autre du site d'insertion d'une molécule a) conforme à l'invention.
Ce couple amplifie un fragment de 682 pb lorsque l'amplification est effectuée à partir du génome de la souche type E.coli non pathogène K12, alors qu'il amplifie un fragment de plus grande taille avec des E.coli pathogènes ; il amplifie notamment un fragment de 3316 pb (SEQ ID NO : 11) avec tous les E.coli producteurs de shiga-toxines de sérotype 0157.
Une molécule d'acide nucléique c) conforme à l'invention peut être obtenue en utilisant un couple d'amorces s'hybridant avec des séquences internes de la molécule a) Une molécule d'acide nucléique d) conforme à l'invention peut être obtenue en utilisant un couple d'amorces comprenant une amorce s'hybridant avec une séquence interne de la molécule a) et une amorce s'hybridant avec une séquence située en amont du site d'insertion de la molécule a) ou une amorce s'hybridant avec une séquence située en aval du site d'insertion de la molécule a).
La figure 4 illustre la quantité de protéine ESM-1 circulante retrouvée dans le sérum de volontaires sains ou de patients atteints de sepsis de gravité clinique croissante. La concentration de protéine ESM-1 sérique, exprimée en nanogramme par ml, est représentée en ordonnée.
En abscisse sont représentées les différentes populations d'individus testés, respectivement les sujets sains (CTRL), les patients atteints de sepsis, de sepsis sévère ou de choc sceptique, selon la définition clinique publiée dans Crit. Care Med., 1992, vol. 20 : 864-874.
La figure 5 illustre la quantification de trois marqueurs du sepsis chez des populations de patients sains, ou de patients atteints de sepsis, de sepsis sévère ou de choc sceptique.
La figure 5A illustre la quantification de protéine ICAM-1 soluble dans le sérum, exprimée en nanogramme par ml.
La figure 5B illustre la quantification de protéine C-réactive, exprimée en milligramme par ml.
La figure 5C illustre la quantification de procalcitonine sérique, exprimée en nanogramme par ml.
La figure 6 illustre une comparaison entre les niveaux de protéine ESM-1 circulante, et de chacun des trois marqueurs classiques du sepsis, respectivement la protéine ICAM-1 soluble, la protéine C-réactive et la procalcitonine au jour 0 d'hospitalisation des patients, respectivement chez les patients ayant survécu et chez les patients ayant décédé.
La figure 6A illustre le niveau sérique de protéine ESM-1, exprimé en nanogramme par ml.
La figure 6B illustre le niveau sérique de protéine ICAM-1 soluble, exprimé en nanogramme par ml.
La figure 6C illustre le niveau de protéine C-réactive, exprimé en nanogramme par mi.
La figure 6D illustre le niveau de procalcitonine, exprimé en nanogramme par ml.
La figure 7 illustre la valeur pronostic de la quantité de protéine ESM-1 ou de la protéine soluble ICAM-1 chez des patients au jour 0 et au jour 1 après l'hospitalisation, vis-à-vis de leur mortalité.
La figure 7A illustre le niveau de protéine ESM-1, exprimé en nanogramme par ml retrouvé respectivement chez les patients ayant survécu (cercle plein) et les patients ayant décédé (cercle vide), respectivement au jour 0 et au jour 1 après l'hospitalisation.
La figure 7B illustre le niveau de protéine soluble ICAM-1 sérique chez les mêmes patients.
La figure 8 illustre la valeur pronostic de mortalité du niveau de protéine ESM-1 et ICAM-1 soluble mesurée au jour 0 et au jour 1 après l'hospitalisation.