INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La suspension ainsi obtenue est extraite par de l'acétate d'éthyle (300 g). Pour améliorer l'extraction, la masse réactionnelle est chauffée à 25-30 C environ (Consigne Double-enveloppe = 30 C). Après décantation, la phase aqueuse est contre-extraite par de l'acétate d'éthyle (2 x 225 g). Les phases organiques combinées sont ensuite concentrées sous vide par distillation partielle de l'acétate d'éthyle (consigne de température de double-enveloppe = 35 C). La masse réactionnelle est ensuite refroidie à environ 10 C pendant 1 h30 environ puis filtrée.
Lors de ce traitement, il se forme un solvat contenant entre 9 et 10 % en poids d'acétate d'éthyle. Celui-ci est décomposable à une température comprise entre 40 et 50 C.
On isole après filtration et séchage 32 g de 9-(Z)- érythromycine-oxime (I) (ratio Z : E = 96 : 4 par RMN -'H). Les jus mères isolés (97 g) peuvent être recyclés comme décrit à l'exemple 2.
EXEMPLE 2 : recyclage des jus mères Dans un réacteur homothétique de 1 litre sous atmosphère d'azote, on charge les jus-mères de filtration (97 g) puis on ajoute de l'eau distillée (500 ml). On distille sous vide l'acétate d'éthyle jusqu'à ce qu'il ne reste que 3 à 4% en poids d'acétate d'éthyle. La lithine LiOH.H20 (4,7 g, 0,109 mol) est ensuite chargée.
La suspension du mélange d'érythromycine-oximes Z et E ainsi obtenue est agitée à environ 800 tpm pendant 10 heures ou plus à une température de 16 C environ (ou à température ambiante). La consigne de température est ensuite refroidie à 10 C environ et une solution d'HCI 1 N est coulée en 1 h30 ou plus de manière à amener le pH de la masse réactionnelle à une valeur de 9,5 environ. On ajoute ensuite l'acétate d'éthyle (300 g) puis on chauffe la masse à 25-30 C environ (Consigne Double-enveloppe = 30 C). Après décantation, la phase aqueuse est contre-extraite par de l'acétate d'éthyle (2 x 225 g). La phase organique est rapidement transférée dans le réacteur puis concentrée sous vide par distillation partielle de l'acétate d'éthyle jusqu'à un volume minimal agitable (consigne de température de double-enveloppe = 35 C). La masse réactionnelle obtenue est ensuite refroidie à 10 C environ pendant 1h30 environ puis filtrée.
On isole après filtration et séchage 6 g de 9-(Z)- érythromycine-oxime (I) (ratio Z : E >_ 96 : 4 par RMN - 1H).
Rendement pondéral non optimisé = 76
OLIGOMANNOSIDES DE SYNTHESE, LEUR PREPARATION ET LEUR UTILISATION A LA DETECTION D'ANTICORPS ET A LA PREVENTION D'INFECTIONS La présente invention a pour objet des oligomannosides de synthèse, leur préparation et leur utilisation à la détection d'anticorps et à la prévention d'infections.
Chez la levure opportuniste Candida albicans, comme chez tous les champignons, une partie considérable du métabolisme est dérivée vers la synthèse des polysaccharides pariétaux dont l'organisation module finement l'adaptation de la cellule au milieu. De nombreux groupes ont établi l'importance prépondérante du mannane de C. albicans dans la physiopathologie des candidoses. Il a ainsi été montré que les diverses interactions du mannane avec les composants humoraux et cellulaires de l'hôte reposent sur une spécificité dépendante des séquences oligomannosidiques synthétisées par la levure. C'est l'anomérie de liaison des résidus mannose et la longueur de la chaîne oligomannosidique qui détermine la nature de l'interaction qui conditionne l'issue de l'infection. Les travaux de recherche concernant les propriétés biologiques et la structure de ces oligomannosides, de même que bien entendu la mise au point de méthode diagnostic ou de prévention de ces infections, nécessitent de disposer de quantités importantes d'oligomannosides. Or, la production d'oligomannosides naturels à partir de souches de C. albicans est compliquée et coûteuse. Il s'agit bien entendu de disposer des souches et de les conserver, de les cultiver en fermenteur dans des conditions très standardisées car la nature des sucres dépend étroitement du milieu, de la température, de l'oxygénation, du temps de culture, etc.... La culture en fermenteur de C. albicans nécessite une grande expertise et de nombreuses précautions
d'ordre microbiologique. Les lots de mannane doivent être ensuite récupérés de la culture et caractérisé pour leur propriétés antigéniques mais surtout chimiquement. Celle-ci nécessite une dépolymérisation du mannane et l'analyse en RMN des sucres libérés.
Ces oligomannosides naturels sont bien entendu utilisés de la préparation de tests de diagnostic immunologique des infections par C. albicans. Or, la sensibilisation des plaques avec l'antigène mannane s'effectue avec des lots de production différents et selon un protocole qui ne permet aucun contrôle de la quantitée déposée. Ainsi, plusieurs tests utilisent des mannanes naturels de levures pour le diagnostic des candidoses (Sendid, B. et al., 1999, J. Clin. Microbiol. 37(5):1510-7) et de la maladie de Crohn (Sendid, B. et al., 1996, Clin.
Diagn. Lab. Immunol. 3(2):219:26). Ces tests détectent des anticorps contre les mélanges de séquences oligomannosidiques présentes dans les mannanes de C. albicans et de S. cerevisiae.
Afin de palier les inconvénients indiqués cidessus, les Inventeurs sont maintenant parvenus à produire par synthèse chimique en grande quantité et de manière reproductible des analogues des oligomannosides des enveloppes cellulaires des levures, ci-après désignés oligomannosides de synthèse, permettant de remplacer avantageusement les mannanes naturels. En effet, les travaux de recherche réalisés avec ces oligomannosides de synthèse ont montré qu'ils miment les propriétés biologiques des sucres naturels de C. albicans notamment en ce qui concerne l'adhérence aux cellules de mammifère. Ainsi, les Inventeurs ont mis en évidence que des oligomannosides de synthèse pouvaient être utilisés avec succès pour la sensibilisation de plaques de microtitration par couplage covalent en vue de la détection d'anticorps
spécifiques de chaque structure dont la signification diagnostique et pronostique est différente (Jouault, T., 1997, Clin. Diagn. Lab. Immunol. 4(3):328-33).
En outre, les inventeurs ont mis en évidence que ces oligomannosides de synthèse présentaient des propriétés remarquables d'inhibition de la colonisation par C. albicans permettant de les utiliser pour la prévention et le traitement des candidoses.
Un ajout dans le tableau 48 est alors réalisé (étape 53) avant l'étape de consolidation 54 des résultats ici en utilisant le numéro ISBN du livre recherché pour éliminer les faux amis ou doublons.
En d'autres termes, les tableaux récupérés des custom tags sont croisés dans un tableau commun, puis triés par numéro ISBN pour former le tableau consolidé ou tableau resultat~tab,. En même temps que les tableaux récupérés sont consolidés, on compte le nombre de produits trouvés, qui constitue également le nombre de lignes dudit tableau consolidé.
Le tri du tableau Resultat~tab ou tableau consolidé 55 autorise une présentation des lignes du tableau correspondant au même produit à la suite les unes des autres.
Le tableau trié est ensuite transformé en résultat de requête (de nom consolidation) grâce au custom tag queryNew qui, à partir d'un tableau en entrée renvoie un résultat similaire à celui renvoyé par une requête SQL.
Une page XML correspondant au tableau consolidé (tag CFWDDX) est ainsi générée, et va permettre le passage à la page 56 de comparaison. Cette page XML n'est pas utilisée pour la page de consolidation 44, mais sert uniquement pour le passage des données en vue de leur affichage.
L'étape suivante est en effet l'étape 57 d'affichage.
Plus précisément et pour afficher les données, on groupe le résultat de consolidation comme pour une requête SQL sur le critère ISBN : cela retire de consolidation les lignes qui suivent celle dont le numéro ISBN est différent de la ligne précédente. Les numéros ISBN sont alors uniques dans consolidation.
Enfin, on réalise l'étape 58 d'appel de la page de comparaison, ce qui autorise la sélection par l'utilisateur.
Lorsque ce dernier choisit un produit, la fonction envoi est appelée. Elle reçoit en paramètres le numéro ISBN, le nom du livre et l'auteur.
Cette fonction envoi soumet alors un formulaire caché (placé juste après le de la page) avec les données reçues et la catégorie du site correspondant aux produits recherchés ( ici librairie). Ce formulaire appelle la page comparaison.cfm pour la mise en oeuvre de l'étape de comparaison et qui va maintenant être détaillée encore plus précisément.
# appel La page reçoit en paramètres la catégorie du produit, le numéro ISBN, l'auteur et le titre, ainsi que la page XML générée.
# classement et sélection des sites : Le fonctionnement est exactement le même que pour la page formulaire (annuaire/home.cfm), à la
différence près qu'à chaque rechargement de la page les paramètres ISBN, catégorie, titre, auteur et XML sont également passés en paramètres.
# structuration des informations Le tableau XML reçu (champ) est transformé en tableau consolidation, toujours avec le tag CFWDDX.
Il est agrégé avec les informations de la base de données dans le tableau consolidationI. en joignant sur le champ site qui correspond au web~tag de la table webmarchand.
Les colonnes correspondant à la base de données sont générées par la requête imarchand, et les colonnes correspondant aux informations produit (ISBN, etc...) sont générées grâce à l'instruction queryAddRow. La requête est au préalable groupée sur l'ISBN comme dans la phase de consolidation.
La précision de l'alignement entre la fibre et le composant est obtenue si : le centre optique (axe optique Y) du composant est parfaitement centré par rapport aux côtés 39 du moulage créé à l'aide de la résine 30 (on montrera plus loin que la précision requise est parfaitement contrôlable)
le c#ur de la fibre est parfaitement centré par rapport au pourtour de la gaine optique de cette fibre.
Après avoir inséré la fibre dans son logement, c'est-à-dire dans la cavité 38 il suffit de réticuler la colle (par exemple au moyen d'un éclair de rayonnement ultraviolet lorsqu'il s'agit d'une colle polymérisable par un tel rayonnement).
La figure 10 illustre schématiquement une septième étape du procédé conforme à l'invention, permettant d'obtenir un dispositif conforme à l'invention dans lequel la fibre optique 32 est mise en place dans la cavité 38 et rendue rigidement solidaire du composant 10.
On ajoute pour ce faire une colle de fixation 42 pour permettre une bonne rigidité de la connexion optique obtenue. Cette colle de fixation s'étend sur la résine d'enrobage 30 et autour de la fibre optique 32.
On précise que la colle polymérisable par un rayonnement ultraviolet dont il a été question plus haut permet d'éviter tout désalignement pendant la rigidification de la colle de fixation 42 que l'on a ajoutée.
On considère maintenant des conditions nécessaires à un bon alignement entre la fibre et le composant VCSEL obtenu par découpe de la tranche semiconductrice (figure 2).
C'est de la précision du trait de découpe du composant optoélectronique que résulte la précision de la valeur DL apparaissant sur les figures 2 et 8.
En effet, la résine d'enrobage 30 constitue un moule inversé du composant optoélectronique ou puce.
La largeur de la cavité 38 (valeur du côté de cette cavité) est donc égale à la largeur de cette puce après sa découpe.
On sait facilement découper une puce en respectant une spécification de DL à 5 um ou mieux, par rapport à un fiduciaire d'alignement (en anglais fiducial/alignment patterns ). On obtiendra donc une précision meilleure que 5 um sur la valeur du centrage du moule inverse par rapport à la zone optiquement active 16.
La précision de positionnement du c#ur d'une fibre optique par rapport au centre de cette fibre est meilleure que 5 um.
On peut donc conclure que l'alignement du c#ur 34 de la fibre et de la zone active 16 du composant optoélectronique a lieu à mieux que 10 um sans difficulté particulière, ce qui permet une fixation passive, à mieux que 10 um et sans banc auxiliaire d'alignement, du composant optoélectronique et de la fibre optique.
On considère maintenant des conditions nécessaires à un alignement entre une fibre optique et un composant VCSEL par gravure de ce composant optoélectronique.
La description faite précédemment fait intervenir un moulage du guide d'alignement par le composant lui-même (les faces/latérales découpées de ce composant).
Le diamètre de la fibre optique peut être égal à 125 um, ce qui conduit à une manipulation (hybridation) d'un composant optoélectronique de 125 um de côté.
Une localisation précise des événements de haute variabilité de fréquence cardiaque peut être réalisée en utilisant préalablement une transformée en ondelettes discrètes (TOD) du signal RR (figure 4, étape 4-2). La technique de transformation en ondelettes continues est décrite dans l'article de S. Mallat "A theory for multiresolution signal decomposition : the wavelet representation", IEEE transactions on pattern analysis and machine intelligence, 1989, Volume 11, pages 674-693.
La transformée des ondelettes discrètes (TOD) est décrite dans le même article de S. Mallat. Il s'agit d'une analyse par une famille de fonctions yljk créée par les dilatations et translations d'une ondelette mère y, avec Yjk(x) = 2jl2yr(2jx-k), et j,k E Z (ensemble des nombres entiers relatifs). La projection ou la transformation de chaque fonction f (signal RR) dans la base Wlk est notée : Wfj,k)= , où représente le produit scalaire dans L2(R). Pour un signal composé de 2j valeurs, cette transformation amène à série de 2j-l coefficients notés dj(k), donnant la contribution à la projection du signal à la position A à l'échelle 2j. La mise au carré des coefficients obtenus fournit la puissance du signal transformé pour chaque indice de temps d'échelle. Différentes zones temporelles sont caractérisées par une puissance calculée sur plus hautes échelles de leur TOD (faible j).
La tranformée discrète en ondelettes d'un signal discret est calculée un algorithme ' base de filtres miroirs en quadrature. De tels filtres sont donnés dans l'ouvrage de A.Cohen, Ondelettes et traitement numérique du signal, Edition Masson Paris, 1992.
A partir du signal RR numérisé, une première décomposition est réalisee, qui donne un premier niveau de détail (par filtrage passe-haut) puis un premier niveau d'approximation (par filtrage passe-bas).
Une deuxième décomposition, par filtrage passe-haut et passe-bas premier niveau d'approximation, fournit respectivement un deuxième niveau de détail puis un deuxième niveau d'approximation, qui est à son tour traité par une troisième décomposition, ..etc.
Les filtres miroirs en quadrature permettent de réaliser les différents filtrages passe-haut et passe-bas successifs.
La figure 7 représente plusieurs niveaux de la décomposition en ondelettes des intervalles RR d'un épisode de FA. Les abscisses correspondent à l'indice k et les ordonnées à l'indice j. Autrement dit, chaque ligne j donne l'ensemble des coefficients dj(k). Au centre de cette figure une haute variabilité due à un épisode de FA est identifiable.
Les périodes de forte variabilité ayant été identifiées, elles sont séparées en périodes de RS et de FA (étapes 3-3 et 4-3 des figures 3 et 4). En effet, une grande variabilité d'amplitude similaire peut aussi être trouvée chez les sujets normaux, par exemple la nuit, chez certains jeunes adultes.
A cette fin, les périodes de grande variabilité sont séparées par analyse fractale.
Le calcul, par transformée de Fourier, de la densité spectrale de puissance (DSP), montre qu'un rythme sinusal normal (RS) possède une tendance générale en 1/f, donc présente une forme linéaire de pente négative quand elle est affichée en log-log, comme illustré sur la figure 8. Sur cette figure, le pic 10 correspond à une fréquence de ventilation. La DSP de la FA, par contre, présente deux pentes différentes comme on le voit sur la figure 9 : une dans une bande de fréquences élevées (10-' - 10-2 Hz) et la seconde dans une bande de fréquences plus basses (10-3 - 104 HZ).
La pente dans la bande de haute fréquence pour une FA est plus importante ([i z 0) que la pente obtenue dans les RS ((3 z 1).
Pour modéliser la loi de puissance en l/fO, on applique le concept de mouvement Brownien fractionnaire (mBf), processus auto-similaire et non stationnaire. Ce concept est décrit, par exemple, dans B. Mandelbrot et al. " Fractional brownian motions, fractional noises and application", SIAM Review, 1968, volume 10, pages 422-437.
La propriété d'auto-similarité est caractérisée par l'exposant de Hurst H est directement relié à (3 par la relation : (3 = 2H + 1. Le calcul de H est donné par exemple dans l'article de M. Akay et al. "Fractal analysis of signals : a comparative study " paru dans Methods of information in Medecine, 1997, volume 36, pages 271-273.
L'incrément du processus du mouvement Brownien fractionnaire peut aussi être utilisé pour estimer l'exposant H de Hurst, via la TOD, var [d21 (n)] = 2 12H-1> 0-i) 6 2(2-22H-1) où les d2j sont les coefficients des détails à l'échelle j. On obtient alors l'équation suivante loge [var [d2j (n)]] = (2H - 1)j + f(H,6) où 6 est l'écart-type du signal, et f une fonction non connue.
La partie hautes-fréquences d'un signal de fibrillation auriculaire correspond à un bruit blanc, pour lequel H ge 0,5. Au contraire, un signal normal éloigne d'un bruit blanc, le coefficient de H étant supérieur à 0,5.
On fixe donc un seuil Ho, compris entre 0,5 et 1, par exemple entre 0,5 et 0,9 ou entre 0,7 et 0,85, par exemple Ho = 0,8. très bonnes valeurs de sensibilité et de spécificité de la méthode ont été obtenues pour 0,7 < _ HO < _ 0,85. En particulier, on a obtenu une sensibilité de 99,2% pour une FA permanente et de 95,82% pour une FA paroxystique, et une spécificité de 99,96% pour un RS normal et 91,55% pour un FA paroxystique.
*Plus généralement, lorsqu'il entre dans un nouvel état, un objet effectue ses actions On Entry, puis une fois celles-ci terminées, enchaînent sur les actions Activity (notées Do / ... ). Cependant, du point de vue de l'utilisateur, les objets effectuent les actions en parallèle les uns avec les autres (puisque la série d'actions Activity peut
Section 2 - Aménagement des modèles Mise sousforme canonique des objets Pour simuler le parallélisme, le mécanisme de l'invention consiste à ordonnancer les actions Activity des objets à l'aide d'une entité particulière, à savoir un Séquenceur. Pour parvenir à cet ordonnancement, les états sont transformés en une forme que l'on appelle la forme canonique , comme illustré en détail sur la figure 146, forme canonique dans laquelle ces états sont décomposés de telle sorte qu'à chaque action Activity corresponde un état. Le Séquenceur est alors chargé de piloter les transitions entre les états correspondant à des actions Activity.
. Cependant, la transformation en forme canonique doit respecter la caractère atomique des actions On Entry.
Dans le cas où l'on souhaite manipuler des composants optoélectroniques de plus grande taille et/ou obtenir un profil en forme de V du guide mécanique pour un guidage plus aisé de la fibre, on utilise le procédé conforme à l'invention décrit ciaprès.
On conserve les étapes de procédé précédemment décrites. Seule diffère la préparation du composant optoélectronique 10 que l'on voit sur la figure 2.
On remplace ce composant par le composant optoélectronique 43 qui est schématiquement représenté sur la figure 11 (en notant toutefois que, dans l'exemple de la figure 11, on a prévu un composant à pluralité de zones actives 16). Le composant de la figure 11 comprend encore le substrat 11 sur lequel est formée la couche d'arrêt de gravure 12 ainsi que la couche 14 ou couche active, qui est formée sur cette couche d'arrêt et qui contient chaque zone 16 ou zone active, destinée à émettre ou à détecter de la lumière.
Cette couche active est encore munie des plots électriquement conducteurs 20 destinés à la polarisation du composant.
On voit que le composant 43 est gravé profondément à partir de la surface libre de la couche active 14. On forme ainsi une tranchée 44 autour de chaque zone active 16 du composant.
Dans l'exemple représenté, cette tranchée 44 forme un V lorsque le composant est vu en coupe longitudinale.
Revenons sur cette gravure du composant 43.
On va expliquer la fabrication d'un tel composant ou puce optoélectronique.
Lors de la mise en #uvre d'une technologie de fabrication de telles puces sur une tranche semiconductrice, chaque tranchée profonde est réalisée.
Elle doit avoir une forme contrôlée de telle sorte que son ouverture ait un diamètre minimal interne égal à DL pour permettre ultérieurement l'alignement d'une fibre optique et de la zone active 16 du composant 43, zone qui est entourée par cette tranchée.
On fait en sorte d'obtenir une forme en V de la tranchée de manière à guider facilement la fibre à l'étape finale d'assemblage.
La profondeur de cette tranchée peut varier de 15 um à plus de 100 um suivant les conditions d'alignement requises.
La tranche réalisée est ensuite découpée en puces optoélectroniques. Chaque puce peut comporter (ce qui est le cas de la figure 11) plusieurs pixels optiques . On peut ainsi constituer des barrettes et même des matrices de pixels optiques.
On considère maintenant, en faisant référence à la figure 12, la fabrication du dispositif optoélectronique conforme à l'invention, utilisant le composant 43 de la figure 11. La fabrication est comparable à celle qui a été précédemment décrite. On hybride sur un circuit de commande 45 la puce
optoélectronique précédemment réalisée et l'on met en #uvre des étapes comparables aux deuxième à septième étapes précédemment décrites. La fabrication devient collective.
On peut également utiliser un composant comprenant une barrette ou une matrice de zones actives et le connecter à un ruban ou à une matrice de fibres optiques approximativement disposées en faisceau ( bundle ) au préalable.
La sédimentation est alors accélérée pendant 10 minutes à une température de 4 C par centrifugation à 10 000 rpm, au moyen d'un rotor à godet mobile, sans frein du type TST 2838 (KONTRON). IV - Traitement de la fraction bactérienne A l'issue de l'étape de sédimentation, on observe dans le tube ultraclear plusieurs couches successives de haut en bas # couche 1 : fraction aqueuse translucide ; # couche 2 : fraction bactérienne blanchâtre ; # couche 3 : coussin translucide de NYCODENZ ; # couche 4 : sédimentation du sol couche 4 : sédimentation du sol On récupère 4 à 5 ml de la fraction bactérienne de la couche 2 au moyen d'un cône stérile.
On inactive ensuite les nucléases par incubation de la fraction bactérienne à 65 C pendant 10 minutes. Le volume récupéré est repris par 20 ml d'eau ultrapure.
On procède ensuite à une centrifugation sur rotor à godet pour culotter les bactéries à une vitesse de 9 000 rpm à une température de 4 C pendant 20 minutes avec frein.
Le surnageant est éliminé et le culot bactérien est repris par environ 1,5 ml d'eau ultrapure.
On procède ensuite à une nouvelle centrifugation de lavage à 9 000 rpm à 4 C pendant 5 minutes.
On élimine enfin le surnageant et on conserve le culot à -20 C. V - Préparation des blocs d'agarose et lyse On répète l'exemple 1.
VI - Electrophorèse en champ alterné On répète l'exemple 1.
Sur la figure unique annexée, on a représenté le profil de migration de l'ADN extrait (piste 3). On observe que la taille du fragment d'ADN extrait est supérieure à 300 kB.
VII - Récupération de l'ADN On répète l'exemple 1. EXEMPLE 3 EXTRACTION DE LA FLORE BACTERIIENNE INTESTINALE I - Matériel de départ : on reprend 3 g de selles dans 50 ml de NaCI 0,8 II - Broyage du matériel : le broyage est effectué au moyen d'un potter téflon stérile dans un cylindre en verre borosilicaté ; a) broyage de 2-5 minutes dans la glace ; b) dans l'hypothèse où le broyage au potter ne suffirait pas, on soumet la matière à un broyage très rapide en WaringBlender (5-10 secondes) ; c) on filtre le broyât sur de la gaze stérile.
III - Réalisation de la sédimentation sur coussin de densité On prépare une solution de NYCODENZ à 55% poids/volume (55 grammes dans 100 ml finale d'eau ultrapure) correspondant à une densité de 1,29.
La sédimentation est alors accélérée pendant 30 minutes à une température de 4 par ultracentrifugation à 9 000 rpm.