INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon une autre variante, tout ou partie des atomes de silicium des motifs siloxyle D de la chaîne peuvent être porteur de 2 radicaux fonctionnels Y, de 2 radicaux fonctionnels W ou d'un radical fonctionnel Y et d'un radical fonctionnel W, les radicaux W, d'une part, et les radicaux Y, d'autre part, étant identiques ou différents entre eux respectivement.
De même, les siliciums des motifs terminaux M[alpha], M" des chaînes de POS peuvent être substitués par 1, 2, ou 3 radicaux fonctionnels W et/ou Y ; W terminaux étant identiques ou différents entre eux, de même pour les Y.
Par ailleurs, chaque radical fonctionnel W ou Y peut comprendre une ou plusieurs fonctions organophiles lubrifiantes et une ou plusieurs unités d'accrochage Uac, respectivement. Chaque unité d'accrochage Uac peut elle aussi être porteuse d'une ou plusieurs fonctions d'accrochage Fac.
Selon un mode préféré de réalisation de l'invention, le POS ne comporte idéalement que des radicaux fonctionnels W et Y dans la chaîne et aux extrémités ainsi que des radicaux R aux extrémités seulement.
Le gel n 3 a été incubé en présence d'un anticorps anti-fucose.
Le gel n 4 a été incubé en présence de concanavaline A.
Figure 2. Chromatogrammes HPAEC-PAD des N-glycannes libérés des graines sauvages (A) et du mutant atgcs1 (B) par traitement à l'Endo H.
Les nombres 5 à 9 réfèrent aux structures des N-glycans oligomannosidiques Man5GlcNAc à MangGIcNAc représentées dans le Tableau I.
Figure 3 : de masse MALDI-TOF des N-glycannes isolés des graines sauvages (Fig. 3A) et des graines portant le gène AtGCS1 muté (Fig 3B). En abscisse, valeur m/z représentant le rapport masse/charge.
Exemple 1 : Isolement de l'ADNc codant pour la glucosidase 1 de Arabidopsis thaliana 1. Extraction d'ARN de différents tissus végétaux Les ARN totaux de plantules âgées de 8 jours sont extraits grâce au kit RNeasy Plant Minikit de QUIAGEN (Allemagne), selon le protocole fourni par le fabricant. Une étape de dégradation de l'ADN a été réalisée systématiquement sur la colonne d'extraction (RNase free DNase, QIAGEN, Allemagne), selon les instructions du fabricant. Toutes les manipulations sont effectuées avec du matériel exempt de Rnase et de l'eau DEPC est utilisée (0,1% de diéthyl pyrocarbonate autoclavé après une agitation de 12 heures).
Des plantules agées de 8 jours cultivées in vitro sont prélevées et directement mises dans de l'azote liquide et conservés à -80 C, jusqu'à l'extraction. Les pipettes et le matériel utilisé pour l'extraction des ARNs sont préalablement traités à la soude 0,4M pour détruire les éventuelles RNases.
L'eau est traitée au DEPC (1 ml de DEPC dans 1I d'eau, homogénéisation toute la nuit sous une Sorbonne), puis autoclavée pour éliminer cet agent. Les centrifugations en colonne plus tube collecteur s'effectuent en centrifugeuse de type " Micro Centaure " (MSE, UK).
Le matériel végétal est broyé dans l'azote liquide, dans des Eppendorfs stériles à l'aide d'un broyeur électrique. Le broyat est immédiatement plongé dans l'azote liquide après broyage. L'extraction proprement dite s'effectue avec le kit " RNAeasy Plant Mini Extraction Kit ", (QIAGEN, Allemagne). Brièvement, 450 l du tampon de lyse " RLT " additionné de p-mercaptoéthanol (10 l/1ml) sont vortexés avec 100 mg de tissus broyé.
Les étapes suivantes sont exactement celles décrites dans le manuel du kit fournit par QUIAGEN. Le lysat, placé dans une colonne et son tube collecteur de 2 ml, est centrifugé 2 min.
Le filtrat est récupéré et lavé avec 0,5 volume d'éthanol 96-100%.
L'échantillon est ensuite déposé sur une colonne et son tube collecteur de 2 ml pour être centrifugé 15 sec à 10. 000 rpm, les ARNs sont retenus par la colonne. 350 l de tampon de lavage RW1 sont ajoutés sur cette colonne pour laver les ARNs par une centrifugation de 15sec à 10. 000 rpm. Un
traitement à la DNase est ensuite effectué (10 l de Dnase et 70 l de tampon, QIAGEN) pendant 15min à température ambiante. Du tampon de lavage RW1 (350 l) est de nouveau appliqué pour terminer le lavage. La colonne est ensuite installée dans un nouveau tube collecteur de 2ml et deux lavages successifs sont effectués avec 500 l du tampon de lavage RPE additionné d'éthanol. Pour finir, les ARNs sont élués de la colonne par 30 à 50 l d'eau traitée au DEPC après une centrifugation 1 min à 10.000rpm.
*Les ARNs sont conservé à -80 C.
2. PCR inverse (Reverse Transcriptase-PCR) Les ADNc, simples brins, ainsi que les produits d'amplifications sont obtenus avec le système " Enhanced avian RT-PCR kit " (SIGMA, USA).
La rétrotranscription a lieu dans les conditions suivantes : - 10 l de l'extraction d'ARN - 1 NI d'un mélange de déoxynucléotides - lui d'oligonucléotide dT - 4,5 l H2O (qsp 16,5 l) pendant 10min à 70 C, pour dénaturer les ARNs, y sont ensuite ajoutés : - 2 l de tampon 10X AMV-RT - 1 l de l'enzyme Enhancer avian RT - 0,5 l d'inhibiteur de Rnase Le mélange est incubé 15min à 25 C pour permettre l'hybridation de l'oligonucléotide dT, et ensuite la rétrotranscription se fait pendant 50min à 42 C. Les ADNc synthétisés sont ensuite amplifiés par PCR.
L'homme du métier est capable de mettre en oeuvre de nombreux procédés de l'état de la technique afin d'obtenir des plantes transformées avec un acide nucléique du gène AtGCS1 selon l'invention.
L'homme du métier pourra se référer avantageusement à la technique décrite par BECHTOLD et al. (1993) afin de transformer une plante à l'aide de la bactérie Agrobacterium tumefaciens.
Les techniques utilisées dans d'autres types de vecteurs peuvent également être utilisées telles que les techniques décrites par BOUCHEZ et al. (1993) ou encore par HORSCH et al. (1984).
L'homme du métier peut encore se référer à la technique décrite par Gomord et al. (1998).
L'invention concerne également une semence de plante dont une partie ou la totalité des cellules constitutives comprennent un acide nucléique du gène AtGCS1 selon l'invention qui a été artificiellement inséré dans leur génome.
L'invention a encore pour objet une semence d'une plante transgénique telle que définie ci-avant.
L'invention concerne aussi une cellule végétale comprenant un acide nucléique du gène AtGCS1. De préférence, l'acide nucléique du gène AtGC1 se présente sous une forme intégrée au génome de ladite cellule végétale.
L'invention concerne également un tissu végétal constitué d'un ensemble de cellules végétales transformées telles que définies ci-dessus.
Un autre objet de l'invention consiste en l'utilisation d'un acide nucléique du gène AtGCSt selon l'invention pour l'expression in vitro ou in vivo, de préférence in planta, de la glucosidase # selon l'invention ou d'un fragment peptidique de celle-ci.
L'invention concerne aussi l'utilisation d'un acide nucléique antisens, selon l'invention pour inhiber ou pour bloquer l'expression du gène codant pour la glucosidase # selon l'invention.
L'invention concerne aussi l'utilisation d'un acide nucléique antisens selon l'invention pour inhiber ou pour bloquer l'expression in vitro ou in vivo du gène codant pour la glucosidase # selon l'invention, et tout particulièrement la glucosidase 1 ayant la séquence en acides aminés SEQ ID N 1.
L'acide nucléique antisens ou l'acide nucléique homopurine ou homopyrimidine est préférentiellement utilisé pour inhiber ou bloquer l'expression du gène AtGCS1 in vivo, dans la plante transformée avec un tel acide nucléique.
La glucosidase # selon l'invention ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID N 1 a une longueur de 852 acides aminés. Cette protéine a un poids moléculaire calculé de 97,5 kDa. Après analyse de la séquence, le
demandeur a identifié une région hydrophile contenant plusieurs arginines dont la partie N-terminale du polypeptide de séquence SEQ ID N 1, cette région hydrophile contenant le signal consensus de rétention dans le réticulum endoplasmique des protéines membranaires de type II, dont l'extrémité C-terminale se trouve dans le lumen.
Le rideau souple 6 comporte des fourreaux 9 dont chacun reçoit dans sa partie interne des traverses horizontales de renfort 10.
Certains fourreaux 9 du rideau souple 6 présentent des ouvertures 11 pour permettre, par l'intermédiaire de passes sangles 12, de relier chaque sangle de traction 8 à la traverse horizontale 10 correspondante.
Le rideau souple 6 comporte dans sa partie inférieure et à l'intérieur d'un fourreau 9, une traverse horizontale 13 qui est reliée par un dispositif de fixation 14 aux sangles de traction 8.
Chaque montant vertical 2, 3 comporte un dispositif de guidage 15 permettant de guider le rideau souple 6 et les traverses horizontales 10, 13 lors des déplacements verticaux dudit rideau.
Par exemple, le dispositif de guidage 15 prévu sur chaque montant 2, 3 présente deux lames semi-rigides 16, 17 disposées l'une en face de l'autre, comme cela a été décrit dans les demandes de brevets FR 0000719 et FR 0000721 appartenant au demandeur. En figures 3 et 4 on a représenté en détail la constitution du montant vertical 2 de la porte de manutention 1, sachant que le montant opposé 3 est identique.
Ainsi, chaque montant vertical 2, 3 comprend un demi montant arrière 18 et un demi montant avant 19 qui sont assemblés l'un à l'autre sur toute la hauteur du montant 2, 3 par des vis de fixation 20.
Le demi montant arrière 18 est réalisé dans un profilé en forme de C comprenant une paroi verticale 21 se prolongeant à chaque extrémité par deux voiles verticaux 22 et 23 disposés l'un en face de l'autre dans deux plans parallèles et perpendiculairement à celui contenant la paroi 21.
Le demi montant avant 19 est réalisé dans un profilé en forme de C comprenant une paroi verticale 24 se prolongeant à chaque extrémité par deux voiles verticaux 25 et 26 disposés l'un en face de l'autre dans deux plans parallèles et perpendiculairement à celui contenant la paroi 24.
Dans cet exemple de réalisation, on note que le demi montant 18 présente une dimension entre ses deux voiles 22, 23 qui est supérieure à celle prévue entre les deux voiles 25, 26 du demi montant 19. Cette configuration n'est pas obligatoire pour la réalisation des montants verticaux 2 et 3 et ne change en rien l'objet de la présente invention.
En ce qui concerne le montant vertical 2, on constate que le voile 22 permet la fixation du demi montant 18 contre la paroi verticale 4 formant la cloison, afin que la paroi verticale 21 se trouve dans le même plan vertical que celui contenant le bord 50 de l'ouverture 5.
La paroi verticale 21 du demi montant 18 formant le montant 2, est solidaire sur sa face externe, et perpendiculairement à cette dernière, de la lame semi-rigide 17 du dispositif de guidage 15. La lame semi-rigide 17 est disposée de manière à s'étendre dans une direction opposée à celle des voiles 22 et 23 du demi montant 18.
Le montant vertical 2 comporte un demi montant 19 qui est fixé dans le prolongement de celui 18.
Le demi montant 19 est disposé de manière que son voile vertical 25 vienne en face de celui 23, et sa paroi verticale 24 dans le prolongement de celle 21 du demi montant 18.
La paroi verticale 24 du demi montant 19 formant le montant 2, est solidaire sur sa face externe, et perpendiculairement à cette dernière, de la lame semi-rigide 16 du dispositif de guidage 15. La lame semi-rigide 16 est disposée de manière à s'étendre dans une direction opposée à celle des voiles 25 et 26 du demi montant 19. Avant la fixation des demi montants 18, 19 entre eux, des moyens d'isolations 27 sont placés entre les voiles verticaux 23 et 25 pour réaliser une isolation du montant vertical 2 par rapport aux différences de température prévues entre les espaces A et B.
La fixation des demi montants 18 et 19 entre eux est réalisée par l'intermédiaire de vis de fixation 20 qui traversent les voiles 23 et 25 et les moyens d'isolation 27, et qui sont réparties sur toute la hauteur du montant vertical 2.
En ce qui concerne le montant vertical 3, on constate que le voile 23 permet la fixation du demi montant 18 contre la paroi verticale 4, formant la cloison, afin que la paroi verticale 21 se trouve dans le même plan vertical que celui contenant le bord 51 opposé à celui 50 de l'ouverture 5.
*En lui proposant un ensemble de répertoires proches, le système permet à l'utilisateur de visiter les toiles personnelles d'un ensemble d'autres utilisateurs, avec qui il peut par ailleurs se mettre en contact, comme déjà décrit dans le section Détection de Répertoires Proches .
CONTENTID="45" CATEGORY="url3"l> Exemple informations texte exemple informations texte <B name="Andre" CONTAINERNUMBER="1" CONTAINERID="88" CONTENTID="49"
L'élément DIV (introduit en 3e ligne) est un élément de dérivation auquel est associé le composant BEHAVIOR:url( ... /system.dragndrop.htc) , dont l'allure est présentée en Annexe. Ce composant permet une gestion du glisser-déposer des éléments pour la dérivation de contenants qu'il communiquera au système.
Pour le critère #1 de u1, c8 est classé par rapport aux Contenus communs à u1et u36, il est donc placé avant c4 et c12. Bien sûr, ul est libre de replacer c8 s'il le juge mal classé en regard du critère utilisé. Un raisonnement symétrique est appliqué pour u36.
De l'utilisation du système résulte donc un graphe de dérivation dynamique, dont le noeuds sont les Profils et les arcs (orientés) sont les dérivations entre Profils effectuées par les Utilisateurs. Il peut s'agir de dérivations de Profils (dérivation d'un Classeur ou d'une Page, si l'on se place au Niveau 4) ou dérivation de Contenus.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront plus clairement à la lecture de la description détaillée ci-après, qui est donnée à titre d'exemple non limitatif, et "en référence à l'unique figure annexée représentant un synoptique d'une variante de réalisation perfectionnée d'un banc d'essai selon l'invention: En référence à la figure 1 annexée, dans une variante de réalisation perfectionnée, le banc d'essai de l'invention comprend une source d'air comprimé réalisée à partir d'un compresseur 1 et d'un réservoir de stockage d'air sous pression 2 alimentant un réseau principal 4 de canalisations via un détendeur 3. En pratique, dans un exemple précis de réalisation donné à titre indicatif, la pression dans le réseau principal 4 était contrôlée en sorte d'être maintenue entre et 11 bar. Le réseau 4 permet d'alimenter en air sous pression un premier circuit pneumatique secondaire constitué d'un modulateur de pression MEP1, d'un distributeur D1 à commande pneumatique, de deux électrovannes EV1 et EV5, d'un capteur de pression CP1. Le modulateur de pression MEP1 est raccordé en entrée au réseau principal 4, et de manière connue soi pour fonction de délivrer en sortie, à partir de la pression d'alimentation d'entrée, une pression pneumatique, qui est fonction de la valeur signal de consigne électrique 6a. Dans l'exemple préféré de réalisation illustré sur la figure annexée, la sortie du modulateur de pression MEP1 est raccordée à deux canalisations sortie : une première canalisation (sortie directe A), qui est par exemple réalisée au moyen d'un raccord flexible dont l'extrémité libre est équipee d'un raccord rapide, une deuxième sortie qui est raccordée à l'entrée du distributeur à commande pneumatique D1.
distributeur D1, pour sa commande pneumatique, est raccordé au réseau principal 4, via une électrovanne EV1. L'électrovanne EV1 est commandée pour son ouverture/ fermeture via un signal électrique de commande 7a. En fonctionnement, en commandant l'ouverture de l'électrovanne EV1 associée au distributeur D1, on commande l'ouverture de ce distributeur, et l'air sous pression, délivré par le modulateur de pression MEP1 à une valeur donnée, est acheminé en sortie du distributeur. A l'inverse, en commandant la fermeture de l'électrovanne associée au distributeur, on ferme le distributeur et l'air sous pression délivré en sortie par le modulateur de pression est disponible sur la sortie directe A du modulateur MEP1.
La sortie du distributeur D1 est raccordée à l'entrée de l'électrovanne EV5, dont la sortie est équipée d'une canalisation de sortie (sortie E) réalisée sous la forme par exemple d'un conduit souple dont l'extrémité libre est équipée d'un raccord rapide. L'ouverture / fermeture de l'électrovanne EV5 est commandée par un signal de commande 7e. Lorsque l'électrovanne EV5 est ouverte, l'air sous pression délivré en sortie du distributeur D1 est disponible sur la sortie E. L'électrovanne EV5 est en outre équipée d'un capteur de pression CP1, qui permet de mesurer en continu la pression passant à travers l'électrovanne EV5, c'est-à-dire la pression d'air disponible sur la sortie E de cette électrovanne. Ce capteur de pression CP1 délivre en sortie un signal de mesure analogique 5a (par exemple une tension continue) dont valeur est fonction du niveau de pression instantané mesuré.
Le banc d'essai comprend un second circuit pneumatique secondaire, deux sorties B et F, qui est identique au premier circuit secondaire qui vient d'être décrit, et qui est réalisé à partir d'un modulateur de pression MEP2, d'une électrovanne EV2, d'un distributeur D2, d'une électrovanne EV6 et d'un capteur de pression CP2, le modulateur pression MEP2 et l'électrovanne EV2 étant alimentés en air sous pression par le réseau principal 4, le modulateur de pression MEP2 étant commandé par un signal de consigne 6b, l'électrovanne EV2 étant commandée pour son ouverture/ fermeture par un signal de commande 7b, et l'électrovanne EV6 étant commandée pour son ouverture/fermeture via un signal électrique de commande 7f.
Outre les deux circuits pneumatiques secondaires qui viennent d'être décrits, le banc d'essai de la figure 1 comprend également deux électrovannes EV3 et EV4, qui sont raccordées respectivement pour leur alimentation air sous pression au réseau principal 4, et qui sont chacune équipées d'une canalisation de sortie sous la forme par exemple d'un conduit flexible équipé d'un raccord rapide (sorties C et Ces électrovannes EV3 et EV4 sont commandées pour leur ouverture/ fermeture via respectivement des signaux de commande 7c et 7d.
Le banc d'essai de la figure 1 comprend enfin deux électrovannes supplémentaires EV7 et EV8 dont les entrées sont respectivement équipées d'une canalisation pneumatique d'alimentation réalisée sous la forme d'un conduit flexible dont l'extrémité libre est équipée d'un raccord rapide (entrées G et H), et qui sont commandées pour leur ouverture/fermeture via des signaux électrijues de commande 7_q, 7h. Les électrovannes EV7 et EV8 sont en outre équipées respectivement de capteurs de pression (capteurs CP3 et CP4) qui permettent de mesurer la pression à l'entrée (G, H) des électrovannes EV7 et EV8 lorsque ces électrovannes sont ouvertes, et qui délivrent respectivement des signaux de mesure analogique 5c et 5d. Pour la gestion des signaux électriques, le banc d'essai comprend une unité de traitement programmable (UT) qui est par exemple réalisée au moyen d'un micro ordinateur ( unité centrale) et qui gère de manière usuelle plusieurs périphériques (non représentés) dont : un écran, un clavier, et une imprimante permettant l'édition de certificats de test.
L'unité de traitement (UT) reçoit en entrée les signaux de mesure analogiques 5a à 5d, et est à cet effet équipée de manière usuelle d'une carte d'acquisition analogique lui permettant de réaliser de maniere automatique un échantillonnage des signaux de mesure 5a à 5d pour l'acquisition périodique des valeurs de pression indiquées par les capteurs à CP4. En sortie, l'unité de traitement UT délivre les deux signaux analogiques 6a et 6b correspondant aux signaux de consigne pour la commande des modulateurs de pression MEP1 et MEP2. Egalement, cette unité de traitement comprend dix sorties numériques (S0 à permettant de commander respectivement dix commutateurs puissance (représentés de manière schématique sur le synoptique de la figure 1 par le bloc 7). Huit de ces neuf commutateurs sont utilisés pour délivrer les signaux de commande 7a à 7h respectivement des électrovannes EV1 à EV8. Les deux autres commutateurs sont utilisés pour délivrer des signaux de commande de puissance 7f et 7g, (sorties I et J sur la figure 1). Dans un exemple précis de réalisation, chaque commutateur était constitué par un relais 24 volts.
L'unité de traitement UT est programmée (programme principal) pour afficher initialement à l'écran un menu permettant à un opérateur de choisir le type d'organe à tester et/ou régler. En fonction du choix fait par l'utilisateur au moyen du clavier, l'unité de traitement déroule un sous- programme spécifique au type d'organe sélectionné par l'opérateur, en sorte de gérer automatiquement les signaux de mesure 5a à 5d délivrés par les capteurs de pression et les signaux de commande 6a, 6b, 7a à 7i. Chaque sous-programme est spécifique" de la procédure de test/ou réglage du type d'organe sélectionné, et un exemple de gestion des signaux par l'unité de programme, pour chaque type d'organe, sera détaillée ultérieurement. D'une manière générale, pour chaque sous- programme de test/réglage d'un organe, l'unité de traitement est programmée pour afficher à l'écran la ou les valeurs de pression mesurées (capteurs CP1 à CP4). Les principaux organes du circuit de freinage de véhicules industriels type poids lourds qui peuvent être testés et/ou réglés avec banc d'essai qui vient d'être décrit sont : valve relais simple pilotage, valve relais double pilotage, robinet de frein au pied, robinet de frein à main valve de protection, correcteur de freinage à commande mécanique, correcteur de freinage à commande pneumatique, valve de relais d'urgence, valve de réduction (pilotée ou non), valve de commande de remorque, régulateur, dessiccateur, détendeur, cylindre de frein, valve de desserrage, valve à diaphragme, électrovalve ABS.
DESCRIPTION DES ORGANES DU CIRCUIT DE FREINAGE Valve relais simple pilotage La valve relais est employée lorsque l'on doit remplir de grandes capacités au bout de très longues conduites et que les temps remplissage doivent être les plus courts possibles.
En fonctionnement, l'entrée usuellement référencée 1 de cette valve reliée à un réservoir d'air comprimé qui constitue une réserve d'énergie. La sortie usuelle référencée 2 de cette valve est reliée cylindres de freins. L'entrée de pilotage usuelle référencée 4 est reliée à la sortie du robinet de frein de service.
Lorsque le chauffeur actionne la pédale de frein, il déclenche la valve relais. La pression à l'entrée de pilotage est alors la même qu'à sortie la valve. Ce procédé permet d'avoir une meilleure réponse lors du freinage : le temps de réaction est réduit. En effet, l'air passe directement de la bouteille aux cylindres avec pour seul intermédiaire valve relais simple.
Valve relais double pilotage La valve relais à double pilotage est utilisée dans les installations de freinage avec des cylindres doubles à ressort afin d'éviter l'addition des efforts du frein de service d'une part, et du frein de stationnement d'autre part. Robinet de frein au pied Cet appareil permet de produire à ses sorties des pressions d'air modulables suivant l'effort applique sur la pédale de frein. II possède deux sorties : une pour le circuit de frein avant, l'autre pour le circuit de frein arrière. La présence de deux circuits isolés présente une sécurité : si l'un des deux circuits venait à fuir, l'autre resterait intact, permettant ainsi de continuer à freiner le véhicule.
Robinet de frein à main Ce robinet commande mise en frein de stationnement du véhicule (ou frein de secours). position route, la partie arrière du cylindre à ressort, est alimentée air afin de comprimer le ressort. Le ressort n'intervient alors plus sur tige de poussée du cylindre, laissant libre le piston pendant le freinage de service. Si le robinet passe en position de frein de stationnement l'air contenu dans la partie arrière du cylindre est libéré et le ressort se décomprime. Le piston du cylindre est à nouveau bloqué et le frein serré.
Valve de protection Le stockage de l'air comprimé dans les réservoirs du véhicule est toujours réalisé au travers d'une valve de protection appelée également valve 4 voies.