INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La réaction e s'effectue généralement au sein d'un solvant inerte tel qu'un éther (tétrahydrofuranne par exemple), en présence d'une base forte telle que le tert-butyllithium, le n-butyllithium, le diisopropylamidure de lithium, le tert-butylate de potassium, à une température comprise entre -70 C et -15 C. La réaction f s'effectue généralement au sein d'un solvant chloré (dichlorométhane, chloroforme par exemple), à une température de 0 C à la température d'ébullition du milieu réactionnel.
L'hydrolyse g s'effectue au sein d'un solvant inerte tel qu'un éther (dioxane par exemple), au moyen d'acide chlorhydrique, à une température voisine de 20 C.
Les réactions h et j s'effectuent de préférence au sein d'un solvant inerte tel que l'acétonitrile, en présence d'une base tel qu'un carbonate de métal alcalin (carbonate de potassium par exemple), à la température d'ébullition du milieu réactionnel.
La réaction i s'effectue sous atmosphère d'hydrogène, en présence d'un catalyseur tel que le palladium ou l'un de ses dérivés, au sein d'un solvant inerte tel que le méthanol ou l'éthanol, à une température comprise entre 15 C et 60 C.
La réaction k s'effectue au sein d'un solvant inerte tel qu'un solvant chloré (dichlorométhane, chloroforme par exemple), à une température comprise entre 0 C et la température d'ébullition du mélange réactionnel.
Les dérivés R3CH(Br)R4 sont commercialisés ou peuvent être obtenus par application ou adaptation de la méthode décrite par BACHMANN W. E., J.
Ces régions permettent l'insertion de séquences peptidiques constituant par exemple : des ligands pour des récepteurs cellulaires, afin de moduler le ciblage des particules pseudovirales, des épitopes qui permettent notamment d'élargir les propriétés antigéniques desdites particules, ou des motifs facilitant leur purification.
Des particules pseudovirales conformes à l'invention peuvent comprendre en outre des sous-unités VP7 et VP4.
La présente invention a également pour objet : - les séquences d'acide nucléique codant des protéines chimériques conformes à l'invention ; - les cassettes d'expression, dans lesquelles une séquence d'acide nucléique codant une protéine chimérique conforme à l'invention est associée à des éléments appropriés de contrôle de la transcription, et éventuellement de la traduction ; - les vecteurs recombinants comprenant au moins une séquence d'acide nucléique conforme à l'invention ; - les cellules-hôtes transformées par au moins une séquence d'acide nucléique conforme à l'invention, et capables d'exprimer ladite séquence.
Des séquences d'acide nucléique, les cassettes d'expression, et les vecteurs recombinants conformes à l'invention peuvent être obtenus par les techniques classiques du génie génétique, telles que celles décrites par SAMBROOK et: al., [MOLECULAR CLONING, A LABORATORY MANUAL, 2nd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., (1989) ]. Des éléments de contrôle de la
transcription et de la traduction, ainsi que les vecteurs utilisables pour la construction de cassettes d'expression et de vecteurs recombinants conformes à l'invention seront choisis notamment en fonction de la cellule-hôte que l'on souhaite utiliser.
Des cellules-hôtes utilisables pour l'expression de protéines chimériques et la production de particules pseudovirales conformes à l'invention, sont en particulier des cellules eucaryotes, et notamment des cellules d'insectes, par exemple des cellules de Spodoptera frugiperda.
Des vecteurs utilisables dans ces cellules d'insectes sont notamment des vecteurs dérivés de baculovirus. Des méthodes de clonage et d'expression de protéines recombinantes dans un système baculovirus/cellules d'insectes, et des vecteurs utilisables pour la mise en #uvre de ces méthodes sont connus de l'homme de l'art, et sont décrits par exemple dans BACULOVIRUS EXPRESSION VECTORS : A LABORATORY MANUAL Freeman and Cie, New York, (1992). D'autres méthodes et d'autres vecteurs également utilisables sont décrits par exemple dans la Demande EP 0 345 152, dans la Demande EP 0 651 815, ou dans la Demande EP 0 638 647 aux noms de l'INSTITUT NATIONAL DE LA RECHERCHE AGRONOMIQUE et du CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE ainsi que dans la Demande PCT WO 95/20672.
Les mêmes vecteurs sont aussi utilisables pour la production d'ARN dans la cellule-hôte, mais on peut aussi envisager d'utiliser des vecteurs qui comportent le promoteur de l'ARN polymérase du phage T7 ( ou de tout autre phage de même type, e. g. T3, SP6). Dans ce dernier cas il conviendra d'utiliser des cellules hôtes où le gène codant cette polymérase virale a été introduit et peut être exprimé conditionnellement ou constitutivement [POLKINGHORNE et ROY, Nucleic Acids Res., 23(1), 188-191, (1995)].
La présente invention a également pour objet un procédé d'obtention de particules pseudovirales conformes à l'invention, caractérisé en ce qu'il comprend la mise en culture d'une cellule-hôte exprimant une séquence d'acide nucléique codant une sous-unité VP2 conforme à l'invention,
et la récupération des particules pseudovirales à partir de la culture.
Selon un mode de mise en #uvre préféré de la présente invention, ladite cellule-hôte exprime en outre au moins une séquence d'acide nucléique choisie(s) parmi : - une séquence d'acide nucléique codant une sousunité VP2 native ; - une séquence d'acide nucléique codant une sousunité VP6 native ; - une séquence d'acide nucléique codant une sousunité VP6 comprenant une séquence hétérologue au niveau de la région correspondant aux acides aminés 200-203, et/ou au niveau de la région correspondant aux acides aminés 309-313 de la VP6 native.
Selon une disposition préférée de ce mode de réalisation, ladite cellule-hôte exprime en outre au moins une séquence d'acide nucléique choisie(s) parmi : - une séquence d'acide nucléique codant une sous-unité VP7 native ; - une séquence d'acide nucléique codant une sous-unité VP4 native.
Avantageusement, dans le cas où ladite cellule-hôte exprime une séquence d'acide nucléique codant une sous-unité VP2 conforme à l'invention comprenant un domaine peptidique de liaison à un acide nucléique, elle est en outre infectée par baculovirus recombinant contenant une séquence d'acide nucléique pouvant être transcrite en une molécule d'ARN comprenant une séquence-cible reconnue par ledit domaine peptidique de liaison.
Des particules pseudovirales conformes à l'invention peuvent notamment être utilisées pour la préparation de médicaments, notamment en tant que vecteurs d'antigènes, dans le cadre de l'obtention de vaccins, ou bien pour transporter des molécules d'acides nucléiques utilisables par exemple en thérapie génique.
Elles permettent en effet d'administrer et de véhiculer in vivo des protéines ou des acides nucléiques, en les mettant à l'abri de la dégradation dans les fluides
biologiques, et de les cibler sur les cellules souhaitées, notamment les cellules capables de multiplier les rotavirus.
Pro Pro Pro Thr Pro Arg Gly Pro Pro Pro Pro Gly Arg Gly Gly Pro 370 375 380 Pro Pro Pro Pro Pro Pro Ala Thr Gly Arg Ser Gly Pro Pro Pro Pro 385 390 395 400 Pro Leu Pro Gly Ala Gly Gly Pro Pro Ala Pro Pro Pro Pro Pro Pro 405 410 415 Pro Pro Pro Pro Pro Pro Cys Pro Gly Ser Gly Pro Ala Pro Pro Pro 420 425 430 Leu Pro Pro Thr Pro Val Ser Gly Gly Ser Pro Ala Pro Gly Gly Gly 435 440 445 Arg Gly Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn Lys 450 455 460 Thr Pro Gly Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin Gin 465 470 475 480 Ser Glu Gly Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg Ser 485 490 495 Arg Val Ile His Ser Ser Asp Glu Gly Glu Asp Gin Thr Gly Glu Asp 500 505 510 Glu Glu Asp Asp Glu Trp Asp Asp 515 520 37 303 ADN Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine WASP murine CDS (1)..(303) 37 cet cca ccc tgc cet ggg agt gga ccc gcc cet ccc ccg ctc cet cet 48 Pro Pro Pro Cys Pro Gly Ser Gly Pro Ala Pro Pro Pro Leu Pro Pro 1 5 10 15 act cca gtg tct ggg ggg agc cca gca cet ggt ggg ggc cgg ggt gca 96 Thr Pro Val Ser Gly Gly Ser Pro Ala Pro Gly Gly Gly Arg Gly Ala 20 25 30 ctt ttg gac caa atc cgg cag gga att cag ctg aac aag acc cet gga 144 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn Lys Thr Pro Gly 35 40 45 gct cta gag aac tca gta cag caa cca ccc gcg cag cag tca gaa ggc 192 Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin Gin Ser Glu Gly 50 55 60
cta gta ggt gcc ctg atg cat gtc atg cag aag agg agt aga gtc atc 240 Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg Ser Arg Val Ile 65 70 75 80 cat tcc tca gat gaa ggg gag gat cag acc ggc gag gat gaa gag gat 288 His Ser Ser Asp Glu Gly Glu Asp Gin Thr Gly Glu Asp Glu Glu Asp 85 90 95 gat gaa tgg gat gac 303 Asp Glu Trp Asp Asp 100 38 101 PRT Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine WASP murine 38 Pro Pro Pro Cys Pro Gly Ser Gly Pro Ala Pro Pro Pro Leu Pro Pro 1 5 10 15 Thr Pro Val Ser Gly Gly Ser Pro Ala Pro Gly Gly Gly Arg Gly Ala 20 25 30 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn Lys Thr Pro Gly 35 40 45 Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin Gin Ser Glu Gly 50 55 60 Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg Ser Arg Val Ile 65 70 75 80 His Ser Ser Asp Glu Gly Glu Asp Gin Thr Gly Glu Asp Glu Glu Asp 85 90 95 Asp Glu Trp Asp Asp 100 39 258 ADN Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine WASP murine CDS (1)..(258)
39 cet cca ccc tgc cet ggg agt gga ccc gcc cct ccc ccg ctc cct cct 48 Pro Pro Pro Cys Pro Gly Ser Gly Pro Ala Pro Pro Pro Leu Pro Pro 1 5 10 15 act cca gtg tct ggg ggg agc cca gca cct ggt ggg ggc cgg ggt gca 96 Thr Pro Val Ser Gly Gly Ser Pro Ala Pro Gly Gly Gly Arg Gly Ala 20 25 30 ctt ttg gac caa atc cgg cag gga att cag ctg aac aag acc cct gga 144 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn Lys Thr Pro Gly 35 40 45 gct cta gag aac tca gta cag caa cca ccc gcg cag cag tca gaa ggc 192 Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin Gin Ser Glu Gly 50 55 60 cta gta ggt gcc ctg atg cat gtc atg cag aag agg agt aga gtc atc 240 Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg Ser Arg Val Ile 65 70 75 80 cat tcc tca gat gaa ggg 258 His Ser Ser Asp Glu Gly 85 40 86 PRT Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine WASP murine 40 Pro Pro Pro Cys Pro Gly Ser Gly Pro Ala Pro Pro Pro Leu Pro Pro 1 5 10 15 Thr Pro Val Ser Gly Gly Ser Pro Ala Pro Gly Gly Gly Arg Gly Ala 20 25 30 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn Lys Thr Pro Gly 35 40 45 Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin Gin Ser Glu Gly 50 55 60 Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg Ser Arg Val Ile 65 70 75 80 His Ser Ser Asp Glu Gly 85 41 219 ADN Séquence artificielle Description de la séquence artificielle :
de la protéine WASP murine CDS (1)..(219) 41 ggc cgg ggt gca ctt ttg gac caa atc cgg cag gga att cag ctg aac 48 Gly Arg Gly Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn 1 5 10 15 aag acc cct gga gct cta gag aac tca gta cag caa cca ccc gcg cag 96 Lys Thr Pro Gly Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin 20 25 30 cag tca gaa ggc cta gta ggt gcc ctg atg cat gtc atg cag aag agg 144 Gin Ser Glu Gly Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg 35 40 45 agt aga gtc atc cat tcc tca gat gaa ggg gag gat cag acc ggc gag 192 Ser Arg Val Ile His Ser Ser Asp Glu Gly Glu Asp Gin Thr Gly Glu 50 55 60 gat gaa gag gat gat gaa tgg gat gac 219 Asp Glu Glu Asp Asp Glu Trp Asp Asp 65 70 42 73 PRT Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine WASP murine 42 Gly Arg Gly Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn 1 5 10 15 Lys Thr Pro Gly Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gln 20 25 30 Gin Ser Glu Gly Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg 35 40 45 Ser Arg Val Ile His Ser Ser Asp Glu Gly Glu Asp Gin Thr Gly Glu 50 55 60 Asp Glu Glu Asp Asp Glu Trp Asp Asp 65 70 43 174 ADN Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine WASP murine
CDS (1)..(174) 43 ggc cgg ggt gca ctt ttg gac caa atc cgg cag gga att cag ctg aac 48 Gly Arg Gly Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn 1 5 10 15 aag acc cct gga gct cta gag aac tca gta cag caa cca ccc gcg cag 96 Lys Thr Pro Gly Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin 20 25 30 cag tca gaa ggc cta gta ggt gcc ctg atg cat gtc atg cag aag agg 144 Gin Ser Glu Gly Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg 35 40 45 agt aga gtc atc cat tcc tca gat gaa ggg 174 Ser Arg Val Ile His Ser Ser Asp Glu Gly 50 55 44 58 PRT Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine WASP murine 44 Gly Arg Gly Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Asn 1 5 10 15 Lys Thr Pro Gly Ala Leu Glu Asn Ser Val Gin Gin Pro Pro Ala Gin 20 25 30 Gin Ser Glu Gly Leu Val Gly Ala Leu Met His Val Met Gin Lys Arg 35 40 45 Ser Arg Val Ile His Ser Ser Asp Glu Gly 50 55 45 1588 ADN Rattus rattus CDS (72)..(1574) 45 cggagtggga ccgagtgctc gcccaccacc agaagagacg gccctggaca ctccacccca 60 ccggcgacac c atg agc tcg ggc cag cag ccc ccg cgg agg gtc acc aac 110 Met Ser Ser Gly Gin Gin Pro Pro Arg Arg Val Thr Asn 1 5 10
gtg ggc tcc ctg ctg ctc acc ccg caa gaa aac gag tct ctt ttc tcc 158 Val Gly Ser Leu Leu Leu Thr Pro Gin Glu Asn Glu Ser Leu Phe Ser 15 20 25 ttc ctc ggc aag aaa tgt gtg act atg tct tca gca gtg gtg cag tta 206 Phe Leu Gly Lys Lys Cys Val Thr Met Ser Ser Ala Val Val Gin Leu 30 35 40 45 tat gca gct gat cgg aac tgt atg tgg tca aag aag tgc agt ggt gtt 254 Tyr Ala Ala Asp Arg Asn Cys Met Trp Ser Lys Lys Cys Ser Gly Val 50 55 60 gct tgt ctt gtt aag gac aat cet cag aga tct tat ttt tta aga ata 302 Ala Cys Leu Val Lys Asp Asn Pro Gin Arg Ser Tyr Phe Leu Arg Ile 65 70 75 ttt gac att aag gat ggg aaa tta ctg tgg gaa caa gag cta tac aat 350 Phe Asp Ile Lys Asp Gly Lys Leu Leu Trp Glu Gin Glu Leu Tyr Asn 80 85 90 aac ttt gta tat aat agt cet aga gga tat ttt cat acc ttt gct gga 398 Asn Phe Val Tyr Asn Ser Pro Arg Gly Tyr Phe His Thr Phe Ala Gly 95 100 105 gat act tgt caa gta gct ctt aat ttt gcc aat gaa gaa gaa gca aaa 446 Asp Thr Cys Gin Val Ala Leu Asn Phe Ala Asn Glu Glu Glu Ala Lys 110 115 120 125 aag ttc cga aaa gca gtt aca gac ctg ttg ggt cga cga caa agg aaa 494 Lys Phe Arg Lys Ala Val Thr Asp Leu Leu Gly Arg Arg Gin Arg Lys 130 135 140 tct gaa aaa aga cga gat gct cca aat ggt ccc aat cta ccc atg gct 542 Ser Glu Lys Arg Arg Asp Ala Pro Asn Gly Pro Asn Leu Pro Met Ala 145 150 155 aca gtt gac ata aaa aat cca gaa atc aca aca aac agg ttt tat agt 590 Thr Val Asp Ile Lys Asn Pro Glu Ile Thr Thr Asn Arg Phe Tyr Ser 160 165 170 tca caa gtc aac aac atc tcc cac acc aaa gaa aag aag aaa gga aaa 638 Ser Gin Val Asn Asn Ile Ser His Thr Lys Glu Lys Lys Lys Gly Lys 175 180 185 gct aaa aag aag aga tta acc aag gca gat att gga aca cca agt aat 686 Ala Lys Lys Lys Arg Leu Thr Lys Ala Asp Ile Gly Thr Pro Ser Asn 190 195 200 205 ttc cag cac att gga cat gtt ggt tgg gat cca aat aca ggt ttt gat 734 Phe Gin His Ile Gly His Val Gly Trp Asp Pro Asn Thr Gly Phe Asp 210 215 220 cta aat aat ttg gat cca gaa ttg aag aat ctt ttt gat atg tgt ggg 782 Leu Asn Asn Leu Asp Pro Glu Leu Lys Asn Leu Phe Asp Met Cys Gly 225 230 235 atc tct gag gcc cag ctt aaa gac aga gaa aca tca aaa gtt att tat 830 Ile Ser Glu Ala Gin Leu Lys Asp Arg Glu Thr Ser Lys Val Ile Tyr 240 245 250
gac ttt att gaa aaa aca gga ggt gta gaa gct gtt aaa aat gaa ctc 878 Asp Phe Ile Glu Lys Thr Gly Gly Val Glu Ala Val Lys Asn Glu Leu 255 260 265 cga agg caa gca cca cca cet cet cca ccc tca aga gga gga cet ccc 926 Arg Arg Gin Ala Pro Pro Pro Pro Pro Pro Ser Arg Gly Gly Pro Pro 270 275 280 285 cet cet cet ccc cet cet cac agc tca ggc cet cet ccc cet cet gcc 974 Pro Pro Pro Pro Pro Pro His Ser Ser Gly Pro Pro Pro Pro Pro Ala 290 295 300 cgt gga agg ggg gct cet ccc ccg cca cca tca aga gct cet act gct 1022 Arg Gly Arg Gly Ala Pro Pro Pro Pro Pro Ser Arg Ala Pro Thr Ala 305 310 315 gca cet cca cet cca cet cet tct agg cet ggt gtt gtc gtt cet cca 1070 Ala Pro Pro Pro Pro Pro Pro Ser Arg Pro Gly Val Val Val Pro Pro 320 325 330 cet cet cca aac agg atg tac cet cet cca cca cca gcc ctg cet tcc 1118 Pro Pro Pro Asn Arg Met Tyr Pro Pro Pro Pro Pro Ala Leu Pro Ser 335 340 345 tca gca cet tca ggc cca cca cca cet ccg cet ctg tct atg gca ggg 1166 Ser Ala Pro Ser Gly Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Ser Met Ala Gly 350 355 360 365 tcc aca gca cca cca cet cet cca cca cet ccc cet cca cca ggg cca 1214 Ser Thr Ala Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Gly Pro 370 375 380 cca cet ccc cet ggc ctg cet tct gat ggt gac cat caa gtt cca gct 1262 Pro Pro Pro Pro Gly Leu Pro Ser Asp Gly Asp His Gin Val Pro Ala 385 390 395 tct tca gga aac aaa gca gct ctt ttg gat caa att aga gag ggt gct 1310 Ser Ser Gly Asn Lys Ala Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Glu Gly Ala 400 405 410 cag cta aaa aaa gtg gag cag aat agt cgg ccc gtg tcc tgc tca gga 1358 Gin Leu Lys Lys Val Glu Gin Asn Ser Arg Pro Val Ser Cys Ser Gly 415 420 425 agg gat gca ctt cta gac cag ata cga cag ggc att cag ttg aaa tcc 1406 Arg Asp Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys Ser 430 435 440 445 gtg tct gat ggc caa gag tcc aca cca cca acc ccc gcg ccc act tca 1454 Val Ser Asp Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ser 450 455 460 gga att gtg ggt gcg ctg atg gaa gtg atg cag aaa agg age aaa gcc 1502 Gly Ile Val Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys Ala 465 470 475 att cat tcc tca gat gaa gat gaa gat gat gat gat gaa gaa gat ttt 1550 Ile His Ser Ser Asp Glu Asp Glu Asp Asp Asp Asp Glu Glu Asp Phe 480 485 490
cag gat gat gat gag tgg gaa gac tgatctatat tatt 1588 Gin Asp Asp Asp Glu Trp Glu Asp 495 500 46 501 PRT Rattus rattus 46 Met Ser Ser Gly Gin Gin Pro Pro Arg Arg Val Thr Asn Val Gly Ser 1 5 10 15 Leu Leu Leu Thr Pro Gin Glu Asn Glu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Gly 20 25 30 Lys Lys Cys Val Thr Met Ser Ser Ala Val Val Gin Leu Tyr Ala Ala 35 40 45 Asp Arg Asn Cys Met Trp Ser Lys Lys Cys Ser Gly Val Ala Cys Leu 50 55 60 Val Lys Asp Asn Pro Gin Arg Ser Tyr Phe Leu Arg Ile Phe Asp Ile 65 70 75 80 Lys Asp Gly Lys Leu Leu Trp Glu Gin Glu Leu Tyr Asn Asn Phe Val 85 90 95 Tyr Asn Ser Pro Arg Gly Tyr Phe His Thr Phe Ala Gly Asp Thr Cys 100 105 110 Gin Val Ala Leu Asn Phe Ala Asn Glu Glu Glu Ala Lys Lys Phe Arg 115 120 125 Lys Ala Val Thr Asp Leu Leu Gly Arg Arg Gin Arg Lys Ser Glu Lys 130 135 140 Arg Arg Asp Ala Pro Asn Gly Pro Asn Leu Pro Met Ala Thr Val Asp 145 150 155 160 Ile Lys Asn Pro Glu Ile Thr Thr Asn Arg Phe Tyr Ser Ser Gin Val 165 170 175 Asn Asn Ile Ser His Thr Lys Glu Lys Lys Lys Gly Lys Ala Lys Lys 180 185 190 Lys Arg Leu Thr Lys Ala Asp Ile Gly Thr Pro Ser Asn Phe Gin His 195 200 205 Ile Gly His Val Gly Trp Asp Pro Asn Thr Gly Phe Asp Leu Asn Asn 210 215 220 Leu Asp Pro Glu Leu Lys Asn Leu Phe Asp Met Cys Gly Ile Ser Glu 225 230 235 240 Ala Gin Leu Lys Asp Arg Glu Thr Ser Lys Val Ile Tyr Asp Phe Ile 245 250 255 Glu Lys Thr Gly Gly Val Glu Ala Val Lys Asn Glu Leu Arg Arg Gin 260 265 270
Ala Pro Pro Pro Pro Pro Pro Ser Arg Gly Gly Pro Pro Pro Pro Pro 275 280 285 Pro Pro Pro His Ser Ser Gly Pro Pro Pro Pro Pro Ala Arg Gly Arg 290 295 300 Gly Ala Pro Pro Pro Pro Pro Ser Arg Ala Pro Thr Ala Ala Pro Pro 305 310 315 320 Pro Pro Pro Pro Ser Arg Pro Gly Val Val Val Pro Pro Pro Pro Pro 325 330 335 Asn Arg Met Tyr Pro Pro Pro Pro Pro Ala Leu Pro Ser Ser Ala Pro 340 345 350 Ser Gly Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Ser Met Ala Gly Ser Thr Ala 355 360 365 Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Gly Pro Pro Pro Pro 370 375 380 Pro Gly Leu Pro Ser Asp Gly Asp His Gin Val Pro Ala Ser Ser Gly 385 390 395 400 Asn Lys Ala Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Glu Gly Ala Gin Leu Lys 405 410 415 Lys Val Glu Gin Asn Ser Arg Pro Val Ser Cys Ser Gly Arg Asp Ala 420 425 430 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys Ser Val Ser Asp 435 440 445 Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ser Gly Ile Val 450 455 460 Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys Ala Ile His Ser 465 470 475 480 Ser Asp Glu Asp Glu Asp Asp Asp Asp Glu Glu Asp Phe Gin Asp Asp 485 490 495 Asp Glu Trp Glu Asp 500 47 303 ADN Séquence artificielle Description de la séquence artificielle: Fragment de la protéine N-WASP de rat CDS (1)..(303)
47 aac aaa gca gct ctt ttg gat caa att aga gag ggt gct cag cta aaa 48 Asn Lys Ala Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Glu Gly Ala Gin Leu Lys 1 5 10 15 aaa gtg gag cag aat agt cgg ccc gtg tcc tgc tca gga agg gat gca 96 Lys Val Glu Gin Asn Ser Arg Pro Val Ser Cys Ser Gly Arg Asp Ala 20 25 30 ctt cta gac cag ata cga cag ggc att cag ttg aaa tcc gtg tct gat 144 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys Ser Val Ser Asp 35 40 45 ggc caa gag tcc aca cca cca acc ccc gcg ccc act tca gga att gtg 192 Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ser Gly Ile Val 50 55 60 ggt gcg ctg atg gaa gtg atg cag aaa agg age aaa gcc att cat tcc 240 Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys Ala Ile His Ser 65 70 75 80 tca gat gaa gat gaa gat gat gat gat gaa gaa gat ttt cag gat gat 288 Ser Asp Glu Asp Glu Asp Asp Asp Asp Glu Glu AspPhe Gin Asp Asp 85 90 95 gat gag tgg gaa gac 303 Asp Glu Trp Glu Asp 100 48 101 PRT Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine N-WASP de rat 48 Asn Lys Ala Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Glu Gly Ala Gin Leu Lys 1 5 10 15 Lys Val Glu Gin Asn Ser Arg Pro Val Ser Cys Ser Gly Arg Asp Ala 20 25 30 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys Ser Val Ser Asp 35 40 45 Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ser Gly Ile Val 50 55 60 Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys Ala Ile His Ser 65 70 75 80 Ser Asp Glu Asp Glu Asp Asp Asp Asp Glu Glu Asp Phe Gin Asp Asp 85 90 95 Asp Glu Trp Glu Asp 100
49 252 ADN Séquence artificielle Description de la séquence artificielle :
* de la protéine N-WASP de rat CDS (1)..(252) 49 aac aaa gca gct ctt ttg gat caa att aga gag ggt gct cag cta aaa 48 Asn Lys Ala Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Glu Gly Ala Gin Leu Lys 1 5 10 15 aaa gtg gag cag aat agt cgg ccc gtg tcc tgc tca gga agg gat gca 96 Lys Val Glu Gin Asn Ser Arg Pro Val Ser Cys Ser Gly Arg Asp Ala 20 25 30 ctt cta gac cag ata cga cag ggc att cag ttg aaa tcc gtg tct gat 144 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys Ser Val Ser Asp 35 40 45 ggc caa gag tcc aca cca cca acc ccc gcg ccc act tca gga att gtg 192 Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ser Gly Ile Val 50 55 60 ggt gcg ctg atg gaa gtg atg cag aaa agg age aaa gcc att cat tcc 240 Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys Ala Ile His Ser 65 70 75 80 tca gat gaa gat 252 Ser Asp Glu Asp 50 84 PRT Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine N-WASP de rat 50 Asn Lys Ala Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Glu Gly Ala Gin Leu Lys 1 5 10 15 Lys Val Glu Gin Asn Ser Arg Pro Val Ser Cys Ser Gly Arg Asp Ala 20 25 30 Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys Ser Val Ser Asp 35 40 45 Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ser Gly Ile Val 50 55 60 Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys Ala Ile His Ser 65 70 75 80
Ser Asp Glu Asp 51 219 ADN Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine N-WASP de rat CDS (1)..(219) 51 gga agg gat gca ctt cta gac cag ata cga cag ggc att cag ttg aaa 48 Gly Arg Asp Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys 1 5 10 15 tcc gtg tct gat ggc caa gag tcc aca cca cca acc ccc gcg ccc act 96 Ser Val Ser Asp Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr 20 25 30 tca gga att gtg ggt gcg ctg atg gaa gtg atg cag aaa agg agc aaa 144 Ser Gly Ile Val Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys 35 40 45 gcc att cat tcc tca gat gaa gat gaa gat gat gat gat gaa gaa gat 192 Ala Ile His Ser Ser Asp Glu Asp Glu Asp Asp Asp Asp Glu Glu Asp 50 55 60 ttt cag gat gat gat gag tgg gaa gac 219 Phe Gin Asp Asp Asp Glu Trp Glu Asp 65 70 52 73 PRT Séquence artificielle Description de la séquence artificielle : de la protéine N-WASP de rat 52 Gly Arg Asp Ala Leu Leu Asp Gin Ile Arg Gin Gly Ile Gin Leu Lys 1 5 10 15 Ser Val Ser Asp Gly Gin Glu Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr 20 25 30 Ser Gly Ile Val Gly Ala Leu Met Glu Val Met Gin Lys Arg Ser Lys 35 40 45 Ala Ile His Ser Ser Asp Glu Asp Glu Asp Asp Asp Asp Glu Glu Asp 50 55 60