INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
* par synthèse chimique ou chemoenzymatique, notamment par endotransglycosylation selon la méthode décrite dans York WS, Hawkins R Glycobiology (2000) 10,2, 193-201, * par fermentation de souches bactériennes génétiquement modifiées ou non, * par hydrolyse de polymères renfermant du xyloglucane (ou des motifs structuraux du xyloglucane), ou de glycanes représentant la partie glycane de glycoprotéines, à l'aide d'enzymes appropriées telles que : - des cellulases, et plus particulièrement d'endo-P-l, 4-glucanases de Trichoderma, telle que celle de Trichoderma viride, ou de T reesei, ou celle d'Aspergillus, telle que celle d'A. niger, et d'exo cellulases d'Irpex lacteus, ces enzymes étant des enzymes d'extraction ou recombinantes, notamment selon les méthodes d'isolement utilisant des endoglucanases d'extraction décrites dans Renard CMGC, Searle-can Leewen MJF, Voragen AGJ, Thibault JF, Pilnik W (1991) Carbohydrate Polymers 14,295-314 ; Renard CMGC, Searle-can Leewen MJF, Voragen AGJ, Thibault JF, Pilnik W (1991) Carbohydrate Polymers 15,13-32 ; ou selon les méthodes d'isolement utilisant des cellobiohydrolases d'extraction décrites dans Amano Y, Shiroishi M, Nisizawa K, Hoshino E, Kanda T (1996) J Biochem (Tokyo) 120 (6) : 1123-9 ; ou selon les méthodes utilisant des endoglucanases recombinantes décrites dans Pauly M, Andersen LN, Kauppinen S, Kofod LV, York WS, Albersheim P, Darvill A (1999) Glycobiology 9 (1) 93-100, - des glycosidases telles que P-D-glucosidase, a-L-fucosidase, a-L- xylosidase, P-D-xylosidase, a-D-fucosidase, ces enzymes étant des enzymes d'extraction ou recombinantes, notamment selon la méthode décrite dans York WS, Harvey LK, Guillen R, Alberheim P, Darville A (1993) Carbohydrate Research, 248, 285-301, ledit traitement enzymatique étant suivi de plusieurs étapes de purification des oligomères de xyloglucane obtenus, notamment par chromatographie selon la méthode décrite dans Mc Dougall GJ, Fry SC (1990) Plant Physiol 93,1042-1048 ; Hisamatsu M, York WS, Darvill AG, Albersheim P (1992) Carbohydrate Research 227,45-71.
Selon un mode de réalisation de la présente invention, la source de tension variable délivre, en l'absence de correction
par un des amplificateurs d'erreur, une tension nominale prédéterminée.
Selon un mode de réalisation de la présente invention, le convertisseur comporte des moyens pour inhiber le fonctionnement du deuxième amplificateur d'erreur tant qu'une tension d'alimentation locale du circuit de commande n'a pas atteint une valeur prédéterminée.
Selon un mode de réalisation de la présente invention, les amplificateurs d'erreur analogiques sont des amplificateurs à hystérésis.
Ces objets, caractéristiques et avantages, ainsi que d'autres de la présente invention seront exposés en détail dans la description suivante de modes de réalisation particuliers faite à titre non-limitatif en relation avec les figures jointes parmi lesquelles : les figures 1 et 2 qui ont été décrites précédemment sont destinées à exposer l'état de la technique et le problème posé ; la figure 3 représente un mode de réalisation d'un convertisseur selon l'invention ; la figure 4 représente, de façon très schématique, un mode de réalisation d'un générateur de référence variable d'un convertisseur selon la présente invention ; et les figures 5A à 5G illustrent, sous forme de chronogrammes, le fonctionnement d'un convertisseur selon l'invention.
Les mêmes éléments ont été désignés par les mêmes références aux différentes figures. Les chronogrammes des figures 5 ne sont pas à l'échelle. Pour des raisons de clarté, seuls les éléments d'un convertisseur de tension qui sont utiles à la compréhension de l'invention ont été représentés aux figures et seront décrits par la suite. En particulier, les constitutions des circuits de génération de tensions de référence fixes, des amplificateurs, des comparateurs et de la bascule n'ont pas été détaillées et ne font pas l'objet de la présente invention.
Une caractéristique de la présente invention est d'utiliser une image de la tension aux bornes de l'enroulement secondaire fournissant la tension de sortie pour moduler la tension de référence du comparateur conditionnant la durée de conduction de l'interrupteur de découpage. En d'autres termes, on prévoit de rendre variable la tension de référence utilisée pour provoquer l'ouverture de l'interrupteur de découpage de la tension d'alimentation, et de rendre cette variation fonction de la tension de sortie. On obtient ainsi une régulation de cette tension de sortie.
Pour protéger le convertisseur contre des surcharges ou court-circuit au secondaire, une autre caractéristique de la présente invention est de prévoir une régulation en tension (maintien d'une tension approximativement constante) tant qu'une surcharge n'a pas été détectée, et une régulation en courant (maintient d'un courant approximativement constant) quand on détecte une surcharge. Pour cela, on surveille la tension aux bornes de l'enroulement auxiliaire par rapport à deux seuils encadrant une tension nominale souhaitée et on s'assure que la tension reste entre ces deux seuils. Un premier seuil correspond à une valeur maximale de tension en fonctionnement normal. Un deuxième seuil (inférieur au premier) traduit un trop fort appel de courant (écroulement de la tension de sortie). Entre les deux seuils, la fréquence de découpage n'est pas modifiée et la tension de référence variable est maintenue à une valeur nominale.
Une autre caractéristique de la présente invention est d'obtenir l'image de la tension de sortie sans utiliser de moyen d'isolement galvanique supplémentaire. Pour cela, on tire profit de l'existence de l'enroulement auxiliaire servant à l'alimentation locale du circuit de commande de l'interrupteur à découpage.
La tension aux bornes de l'enroulement auxiliaire qui, pour la mise en oeuvre de l'invention, est en relation de phase directe avec l'enroulement secondaire, donne une image de la tension de sortie.
La figure 3 représente un mode de réalisation d'un conver- tisseur de tension selon la présente invention. Cette figure est à rapprocher de celle de la figure 2 et illustre les modifiations à apporter par rapport au convertisseur classique.
Comme précédemment, un interrupteur de découpage 6 (par exemple, un transistor MOS à canal N) d'une tension d'alimentation est connecté en série avec un enroulement primaire 5 d'un transformateur 4. un enroulement secondaire 7 du transformateur 4 charge un condensateur C2 par l'intermédiaire d'une diode D2, la tension de sortie Vout étant prélevée aux bornes du condensateur C2. Les enroulements 5 et 7 ont des points de phase inversés.
L'interrupteur 6 est commandé par la sortie (Q) d'une bascule RS 15 (en pratique, en traversant un amplificateur 16) d'un circuit de commande 30. L'entrée de mise à un (S) de la bascule 15 est commandée par un comparateur 17 détectant la démagnétisation aux bornes d'un enroulement auxiliaire 8 du transformateur. Une diode D4 relie le point de phase de l'enroulement 8 à la borne négative du comparateur 17. La borne positive du comparateur 17 reçoit une référence de tension fixe VRV, fournie par un élément 18. Un condensateur C3 fournit une tension Vdd d'alimentation locale du circuit de commande 30. L'électrode 12 du condensateur C3 est reliée, par une diode D3 en série avec une résistance R7, au point de phase de l'enroulement 8 et, par résistance RI, à la borne positive 2 d'application de la tension à découper. Par exemple, cette tension correspond à une tension redressée fournie par un pont de diodes 1 alimenté par une tension alternative Vac.
Un condensateur Cl relie la borne 2 de sortie redressée du pont 1 à une borne de masse 3 pour lisser la tension redressée.
L'entrée de réinitialisation R de la bascule 15 est reliée en sortie d'un comparateur 13 dont l'entrée positive reçoit une mesure du courant dans l'interrupteur 6. Par exemple, l'entrée positive du comparateur 13 est reliée à une borne 12 d'entrée du circuit 30 qui mesure une tension fonction du courant dans l'interrupteur 6. Une résistance Rll sert, de façon classique, de convertisseur courant-tension.
Selon l'invention, l'entrée négative du comparateur 13 reçoit une tension de référence variable VRR fournie par un générateur 20. Fonctionnellement, la modification essentielle à apporter au circuit de la figure 2 pour la mise en oeuvre de l'invention est de remplacer le générateur (14, figure 2) de tension de référence fixe, d'entrée du comparateur de réinitialisation de la bascule RS, par le générateur 20.
Différents oligoméres antisens de tailles différentes,
entre 6 et 25 nucléotides de longueur, dirigés contre la caspase 2, 3, 9 ou 10 ou contre la PC-PLC, ou encore contre la sphingomyélinase acide sont synthétisés et utilisés seuls ou en combinaisons.
Ces oligonucléotides antisens sont définis dans les séquences des caspases proches du N-ou C-terminus de ces enzymes, pour éviter les réactions croisées et être le plus spécifique possible. Les oligonucléotides de PC-PLC sont définis soit dans la partie C-terminale ou dans la partie N-terminale, proche d'histidines conservées dans le site actif, telles que H69 et H118 de la protéine de Listeria monocytogenes (Zuckert WR et al, 1998).
Des oligonucléotides de sphingomyélinase acide sont définis dans la partie N-terminale ou C-terminale de l'enzyme humaine (Schuchman et al., 1991) pour être le plus spécifique possible et éviter les réactions croisées.
Les oligonucléotides sont mélangés à une concentration comprise entre 1 et 10 uM en présence d'un copolymère de polyoxyéthylène-polyspermine ou de microsphères de fibrinogène (Oganesian et al, 1999), sur un morceau de membrane de polytétrafluoroéthylène (PTFE) (Karesh, 1987) ou de polyuréthane (Nuyts et al, 1999), et ce patch peut alors être appliqué à l'intérieur de l'oeil, dans la cavité vitréenne et dans l'espace situé sous la rétine par une technique microchirurgicale du pars plana (l'espace de 2 mm situé à 4-5 mm latéralement de la jonction cornéo-sclérale) (Algvere et al, 1999) et éventuellement maintenu en place à l'aide d'une colle ciment à base de N-butylcyanoacrylate (Nexacryl) (Leahey et al, 1993), afin de permettre une diffusion contrôlée lente et étalée dans le temps de ces inhibiteurs.
Les oligonucléotides antisens peuvent être aussi injectés tels quels, ou encore encapsulés dans des liposomes, après émulsion avec différentes graisses ou
huiles, qui sont ensuite recouverts de l'enveloppe virale du virus hémaglutinant du Japon inactivé (virus de Sendai) après fusion, et ensuite injecté dans l'espace sous rétinien par le pars plana (Hangai et al, 1998). Les doses injectées, pour être actives, se situent avantageusement dans une fourchette comprise entre 10 et 200 ug par oeil (Leeds et al, 1998).
L'invention envisage également la mise en oeuvre d'une stratégie de gène antisens pour les caspases-2,3, 9 ou 10 dans une méthode de traitement et/ou de prévention de la rétinopathie diabétique. En effet, les gènes antisens de ces caspases sont introduits dans un adénovirus, comme indiqué ci-dessous, qui est injecté dans l'espace sous rétinien, après injection par le pars plana comme décrit ci-dessus (Lai et al, 2000).
L'invention envisage encore l'utilisation de peptides cycliques ou linéaires, de deux ou trois acides aminés à cinq ou six, inhibiteurs compétitifs des caspases, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement et/ou à la prévention de la rétinopathie diabétique.
Il s'agit par exemple de peptides tels que, VAD, inhibiteur général de caspases, DEVD, inhibiteur spécifique de caspase 3, AEVD, inhibiteur spécifique de caspase 10, VDVAD, inhibiteur spécifique de caspase 2, ou LEHD, inhibiteur spécifique de caspase-9. Ces peptides linéaires sont protégés chimiquement du côté N-terminal par un dérivé d'un groupement acétyle ou benzyle, tel que mais pas limité à un groupement benzyleoxycarbonyle (z ou BOC), et du côté C-terminal par un groupement méthyl cétone, tel que mais pas limité à un groupement fluoro-ou chlorométhylcétone ou encore à un groupement 2,6 diméthyl ou dichloro benzoyloxyméthylcétone, et dont les chaînes latérales d'acides aminés acides aspartiques (D) sont 0-
méthylées. Ces peptides peuvent aussi être couplés à des peptides de 16 acides aminés provenant de la séquence hydrophobe du peptide signal du facteur de croissance des fibroblastes (FGF) de Kaposi, améliorant leur perméabilité aux cellules (NH2-AAVALLPAVLLALLAP-COOH). Des dérivés de l'aspartate seul, protégé par un groupement benzyle et un groupement fluorométhyl cétone sont aussi envisageables dans cette invention. Ces peptides pouvant être administrés par injection, par voie s. c., i. p. ou i. v., ou en application topique dans le cul-de-sac conjonctival, préférentiellement par voie i. v. ou topique, et dans une formulation qui permette une infusion lente et contrôlée pour réduire la fréquence des injections dans le cadre d'un traitement préventif. De telles solutions existent et sont constituées de préparations de polymères biodégradables contenant le peptide et contrôlant sa diffusion, tel que, mais pas limité à, un poly (DL-lactide-co-glycolide) (PLGA), injectable sous forme (a) soit de microsphères ayant approximativement de 1 à 100 um de diamètre, ou (b) un implant unique, cylindrique, de taille approximative entre 0,8 mm et 1,5 mm de diamètre, appelé un"minicylindre" (Zhu et al, 2000). La stabilisation des peptides incorporés en présence d'un anti-acide tel que Mg (OH) 2 lors de l'encapsulation dans le polymère est aussi envisagée dans le cadre de la présente invention. (Zhu et al, 2000).
L'invention concerne aussi l'utilisation d'une molécule d'acide nucléique comprenant au moins une séquence polynucléotidique codant pour un peptide de 2 à 10 acides aminés inhibiteur compétitif d'une caspase pour la préparation d'un médicament destiné au traitement et/ou à la prévention de la rétinopathie diabétique.
En effet, l'invention envisage également une méthode de traitement et/ou de prévention de la
rétinopathie diabétique consistant à produire localement et en continu au niveau intravitréen et sub-rétinien, in situ, ces petits peptides. Il s'agit alors avantageusement d'une stratégie d'expression génique de ces petits peptides inhibiteurs de caspases, dans le cadre d'un protocole de thérapie génique avec les vecteurs couramment utilisés lors d'une telle approche. Par exemple, les oligoméres de désoxyribonucléotides correspondant aux séquences peptidiques de VAD, DEVD, VDVAD ou AEVD, peuvent être synthétisés par des machines automatiques accessibles à l'homme de l'art. Dans le cas de AEVD, il s'agirait de produire deux oligomères complémentaires de séquences suivantes, l'oligomère codant, 5'-G A T C C (G ou A) (T, C, A ou G) (T, C, A ou G) A T G G C (T, C, A ou G) G A (A ou G) G T (T, C, A ou G) G A (T ou C) T A A G-3'et le non-codant 5'-A A T T C T T A (A ou G) T C (T, C, A ou G) A C (T ou C) T C (T, C, A ou G) G C C A T (T, C, A ou G) (T, C, A ou G) G-3'. Les deux oligomères une fois synthétisés sont ensuite phosphorylés par la kinase du bactériophage T4, et hybridés, pour obtenir la séquence d'ADN double brin correspondante à la séquence peptidique AEVD, qui peut être alors clonée dans le site polylinker contenant les sites de coupures d'enzymes de restriction adéquats (BamHI et EcoRI, dans le cas décrit) d'un vecteur d'expression de type pAC, qui peut alors produire des adénovirus recombinants exprimant le petit peptide désiré par la stratégie suivante. Le vecteur pACCMVpLpA est produit par insertion du promoteur/enhancer de gènes précoces constitutif du cytomégalovirus (CMV), le polylinker (pL) de sites de restriction du vecteur pUC 18, et un fragment du génome du virus simien SV 40 qui inclus l'antigène petit-T (t) et le signal de polyadénylation (pA), dans le vecteur pAC (Gluzman et al, 1982). L'ADN double brin correspondant à la séquence AEVD est alors
introduite dans le vecteur linéarisé avec les enzymes de restriction correspondant aux sites de restriction flanquant la séquence AEVD, dans l'exemple décrit BamHl et Eco RI. Le plasmide correspondant est ensuite produit par des techniques classiques de clonage bactérien, et l'insertion vérifiée par séquençage en utilisant la séquence flanquante du polylinker. Le plasmide résultant est ensuite co-transfecté avec pJM17 (McGrory et al, 1988) dans des cellules 293 (cellules embryonnaires rénales humaines transfectées par l'adénovirus AdEA) (Graham et al., 1977) par coprécipitation d'ADN avec le phosphate de calcium. pJM17 code pour un adénovirus 5 de séquence génomique complète interrompu par un plasmide bactérien pBRX à la position 3.7 unité de la carte génétique de l'adénovirus, excédant donc les limites d'empaquetage pour l'adénovirus. La recombinaison homologue entre le plasmide recombinant pACCMVpLpA et pJM17 dans les cellules 293 génère un génome de taille empaquetable, dans lequel la région précoce 1 est remplacée par le gène chimérique cloné, rendant le virus recombinant défectif pour la réplication. Le virus résultant est nommé AdCMV-AEVD. La présence de l'insertion correspondant au peptide AEVD est confirmée par PCR en utilisant des primers flanquant la séquence AEVD et en séquençant le produit de PCR obtenu. Les plaques virales appropriées sont alors amplifiées en stocks contenant 5-50 x 107 plaque forming unit (pfu)/ml et stockées dans le DMEM supplémenté avec 10% de sérum de veau foetal. L'adénovirus recombinant peut alors être utilisé et encapsulé, par une des techniques décrites cidessus et injecté par le pars-plana dans l'espace subrétinien dans la cavité intravitréenne, afin d'avoir in si tu une production soutenue et étalée dans le temps d'inhibiteurs de caspases, permettant de prévenir la perte des péricytes par apoptose.
D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront de la description qui suit rapportant : 1) Les effets des AGE-méthylglyoxal sur les péricytes rétiniens de boeuf.
formation and prevents hyperglycemia-induced increases in macromolecular endocytosis. J. Clin. Invest. 101 : 1142-1147 74) Soulis T, Thallas V, Youssef S, Gilbert RE, McWilliam BG, Murray-McItosh RP et Cooper ME (1997).
Advanced glycation end products and their receptors colocalise in rat organs susceptible to diabetic microvascular injury. Diabetologia 40 : 619-628 75) Stennicke HR et Salvesen GS (1998).
Properties of the caspases. Biochim. Biophys. Acta. 1387 : 17-31 76) Stitt AW, Li YM, Gardiner TA, Bucala R, Archer DB et Vlassara H (1997). Advanced Glycation End Products (AGEs) Co-localize With AGE Receptors in the Retinal Vasculature of Diabetic and AGE-infused Rats. Am.
J. Pathol. 150 : 523-535 77) Su T et Gillies MC (1992). A simple method for the in vitro culture of human retinal capillary endothelial cells. Invest. Ophthalmol. Vis. Sei. 33 : 2809- 2813 78) Thornalley PJ (1998). Cell activation by glycated proteins. AGE receptors, receptor recognition factors and functional classifications of AGEs. Cell. Mol.
Bill. (Noisy-le-grand) 44 : 1013-1023 79) Thornalley PJ (1999). The clinical significance of glycation. Clin. Lab. 45 : 261-273 80) Thornberry NA, Rano TA, Peterson ER, Rasper DM, Timkey T, Garcia-Calvo M, Houtzager VM, Nordstrom PA, Roy S, Vaillancourt JP, Chapman KT et Nicholson DW (1997).
A combinatorial Approach Defines Specificities of Members of the Caspase Family and Granzymes B. J. Biol. Chem. 272 : 17907-17911 81) UKPDS (a)- UK Prospective Diabetes Study Group. Intensive blood-glucose control with sulphonylureas or insulin compared with conventional treatment and risk of
complications in patients with type 2 diabetes (UKPDS 33) Lancet 1998, vol 352 (9131), p 837-853 82) UKPDS (b)- UK Prospective Diabetes Study Group. Effect of intensive blood-glucose control with metformin on complications in overweight patients with type 2 diabetes (UKPDS 34) Lancet 1998, vol 352 (9131), p 854- 865 83) Vandervoort J et Ludwig A (1999).
Evaluation of pilocarpine loaded gelatin particles for topical ophthalmic use. J. Pharm. Belg. 54 : 85-86 84) Vlassara H, Li Y-M, Imani F, Wojciechowicz D, Yang Z, Liu FT et Cerami A (1995). Identification of galectin-3 as a high-affinity binding protein for advanced glycation end products (AGE) : a new member of the AGEreceptor complex. Mol. Med. 1 : 634-646 85) Wang E, Norred WP, Bacon CW, Riley RT et Mirrill AH Jr (1991). Inhibition of Sphingolipid Biosynthesis by Fumonisins. Implication for Diseases Associated with Fusarium Monoliforme. J. Biol. Chem. 266 : 14486-14490 86) Westwood ME et Thornalley PJ (1995).
Molecular characteristics of methylglyoxal-modified bovine and human serum albumins. Comparison with glucose-derived advanced glycation endproducts-modified serum albumins. J.
Protein Chem. 14 : 359-372 87) Wilkins MR, Occleston NL, Kotecha A, Waters L et Khaw PT (2000). Sponge delivery variables and tissues levels of 5-fluorouracil. Br. J. Ophthalmol. 84 : 92-97 88) Yamagishi S, Hsu CC, Taniguchi M Harada S, Yamamoto Y, Ohsawa K, Kobayashi K et Yamamoto H (1995). Receptor mediated Toxicity to Pericytes of Advanced Glycosylation End Products : a Possible Mechanism of Pericyte Loss in Diabetic Microangiopathy. Bioc. he. m.
Biophys. Res. Commun. 213 : 681-687
89) Yan SD, Schmidt AM, Anderson GM, Zhang J, Brett J, Zou YS, Pinsky D et Stern D (1994). Enhanced cellular oxidant stress by the interaction of advanced glycation end producys with their receptors/binding proteins. J. Biol. Chem. 269 : 9889-9897 90) Yang BZ, Makita Z, Horii Y, Brunelle S, Cerami A, Sehajpal P, Suthanthiran M et Vlassara H (1991). Two novel rat liver membrane proteins that bind advanced glycosylation end products : relationship to macrophage receptor for glucose-modified proteins. J. Exp. Med. 174 : 515-524 91) Zhu G, Mallery SR et Schwendeman SP (2000).
Stabilization of proteins encapsulated in injectable poly (lactide-co-glycolide). Nature Biotechnol. 18 : 52-57 92) Zuckert WR, Marquis H et Goldfine H (1998).
Modulation of enzymatic activity and biological function of Listeria monocytogenes broad-range phospholipase C by amino acid substitution and by replacement with the Bacillus cereus ortholog. Infect. Immun. 66 : 4823-4831 93) Zurowska-Pryczkowska K, Sznitowska M et Janicki S (1999). Studies on the effect of pilocarpine incorporation into a submicron emulsion on the stability of the drug and the vehicle. Eur. J. Pharm. Biopharm. 47 : 255- 260
j 2815589
DISPOSITIF D'ECLAIRAGE OU DE SIGNALISATION
Une analyse des différents isotypes d'anticorps sériques produits en réponse à l'immunisation contre ces trois antigènes en présence de FHA ou de FHA44 a montré que le rapport quantitatif entre les différents isotypes d'IgG n'était pas significativement différent selon que l'antigène était administré simultanément à la FHA ou à la FHA44.
Par ailleurs, l'analyse des isotypes d'anticorps sériques montre une prédominance d'isotypes IgG1 et IgG2a en réponse à l'administration de la Sm28GST ou de la KLH en présence de FHA ou de FHA44, alors qu'une prédominance anticorps sériques d'isotypes IgGI est observée en réponse à l'antigène Sh28GST en présence de FHA ou de FHA44, indiquant une polarisation de la réponse immunitaire vers le type Th2.
Ces résultats indiquent que le profil isotypique des anticorps spécifiques produits dépend essentiellement de l'antigène utilisé, la FHA ou la FHA44 n'induisant pas, par elle-même, de polarisation.
L'ensemble des résultats obtenus et exposés en détail dans la partie expérimentale démontre que la FHA ou une partie de la protéine FHA peut être utilisée comme adjuvant en tant que tel, quel que soit l'haplotype d'histocompatibilité de l'individu à immuniser, et quelle que soit la nature de l'antigène ou de l'immunogène à l'encontre duquel une réponse immunitaire de type mucosal et/ou systémique est recherchée.
Un tel polypeptide pourra être obtenu par recombinaison génétique conformément à l'enseignement de Brown et al. (2), de Relman et al, (3) ou encore de Delisse-Gathoye (4).
Dans un mode particulier de réalisation de la protéine FHA ou d'une partie de la protéine FHA selon l'invention, un polynucléotide codant la FHA ou la partie de FHA désirée est inséré dans un vecteur d'expression comprenant au moins un promoteur et un terminateur nécessaires à l'expression du polynucléotide dans une cellule hôte appropriée.