INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Point de fusion : 139-141 C Microanalyse élémentaire : C% H% N% S% calculé 48,47 4,28 5,95 6,81 trouvé 48, 60 4,30 5,91 6,90 EXEMPLE 14 : Acide 6-(anilinosulfonyl)-7-chloro-2-oxo-1,2-dihydro-3-quinolinyl phosphonique On procède comme dans l'Exemple 2 à partir du composé obtenu dans l'Exemple 13.
Point de fusion : 249-253 C Microanalyse élémentaire : C% H% N% S% ci % calculé 43,44 2,92 6,75 7,73 8,55 trouvé 43,53 2,87 6, 64 7,82 9, 06
EXEMPLE 15 : Acide 6-[(2-benzoylhydrazino)sulfonyl]-7-chloro-2-oxo-1,2-dihydro- 3-quinolinyl phosphonique diéthyl ester On procède comme dans l'Exemple 1 en remplaçant au stade F la n-propylamine par la benzoylhydrazine.
Point de fusion : 202-204 C Microanalyse élémentaire : C% H% N% S% CI % calculé 46,75 4,12 8,18 6, 24 6,90 trouvé 46, 66 4, 06 8, 01 6,18 7,41 EXEMPLE 16 : Acide 6-[(2-benzoylhydrazino)sulfonyl]-7-chloro-2-oxo-l,2-dihydro- 3-quinolinyl phosphonique On procède comme dans l'Exemple 2 à partir du composé obtenu dans l'Exemple 15.
Point de fusion : 242-244 C Microanalyse élémentaire : C% H% N% S% CI % calculé 41,98 2,86 9,18 7,00 7,74 trouvé 42,12 2,80 8,95 7,05 7,92
EXEMPLE 17 : Acide 6-[(2-acétylhydrazino)-sulfonyl]-7-chloro-2-oxo-1,2-dihydro-3- quinolinyl phosphonique diéthyl ester On procède comme dans l'Exemple 1 en remplaçant au stade F la n-propylamine par l'acétylhydrazine.
Exemple 10 Il s'agit de la structure feuilletée selon la figure 3 et l'exemple 8, avec en face 4 l'empilement A selon l'exemple 9 et en face 1 lin revêtement antireflet 3 différent de A et qui consiste en une couche en SiO,;Ny dont l'indice de réfraction décroit dans son épaisseur conformément à l'enseignement du brevet FR98/ 16118 précité, que l'on peut déposer par CVD plasma. Son épaisseur est de 260 iim environ. Exemple 10 bis C'est le même vitrage qu'à l'exemple 9, à l'exception près qu'ici le verre 6 est plus épais et fait 4.00 mm, pour obtenir un effet de filtre vis- à-vis du rayonnement solaire plus important. EXEMPLES 11 à 13 1o Ces exemples ont été effectivement réalisés, tous sur des verre-, 6 clair de type Planilux de 2 mm d'épaisseur pour les exemples 1 1 et 12 et 4 mm pour l'exemple 13. Exemple 11 Le verre, conformément à la figure 1, a été revêtu sur une de ses faces seulement de l'empilement antireflet selon l'invention suivant Verre (6) / Sn02 (1) / Si02 (2) / Sn02 (3) / SiO2 (4)
EXEMPLE 11 COUCHE (1) COUCHE (2) COUCHE (3) COUCHE (4) n; z 2.05 @ 1,46 z- 2.05 @ 1,46 ei 19 nm 17 nm 100 nm 95 nm Les couches en Si02 contiennent en fait environ 10% en poids d'oxyde d'aluminium, afin de leur conférer une meilleure durabilité, notamment chimique.
Le but de cet exemple est l'abaissement de la RL, à 60 et l'obtention de valeurs de a* et b* en réflexion négatives, et, en valeurs absolues, peu élevées en réflexion oblique (toujours côté couches).
Exemple 12 Par rapport à l'exemple 11, on a substitué les deux couches de Sn02 par deux couches de Si3N4.
On a donc la séquence Verre (6) / Si3N4 (1) / Si02 (2) / Si,N4 (3) / SiO2 (4)
EXEMPLE 12 COUCHE (1) COUCHE (2) COUCHE (3) COUCHE (4) n; 2. 0 8 1,46 2. 0 8 ; 1,46 ei 19 nm 17 nm 100 nm 95 nm Les couches en Si02 contiennent également environ 10% en poids d'oxyde d'aluminium.
La substitution du Sn02 par du Si3N4 permet de rendre l'empilement bombable/trempable. Cela signifie, au sens de l'invention, que quand le substrat revêtu subit un traitement thermique de ce type, ses propriétés optiques restent quasiment inchangées. De manière quantitative, on peut estimer qu'il n'y a pas de changement optique significatif en réflexion quand la valeur de @\E = (4L*2 + Aa*2 + 4b*2)'/2 mesurant les variations de L*, a* et b* avant et après traitemcllt thermique reste inférieure à 2,5 ou, mieux, inférieure à 2.
Exemple 13 Le vitrage selon cet exemple est traité sur ses deux faces. Il cst muni à la fois en faces 1 et 2 du même empilement, celui utilisé à l'exemple 11 (alternativement, l'une et/ou l'autre des couches en S110z peut être remplacé par du Si3N4).
Le tableau ci-dessous regroupe pour tous les exemples du présent brevet les valeurs photométriques suivantes y RL (60 ) : la réflexion lumineuse "côté couches" à 60 par rapport à la normale au vitrage, selon l'illuminant D65, en %, y a*(60 ), b*(60 ) : les valeurs colorimétriques de lai Ri- (60 ), sans unité, y RL (0 ) : la réflexion lumineuse "côté couches" à incidence normale, en %, y a*(0 ), b*(0 ) : les valeurs colorimétriques de la Ri, à incidence normale, sans unité, y TL (0 ) : la transmission lumineuse selon l'illuminant D65, en %.
EXEMPLE RL (60 ) a* (60 ) b* (60 ) RL (0 ) a* (0 ) b* (0 ) TL (0 ) 1 15,4 -0,3 -0,3 8,0 -0,2 -0,5 I 90,8 2 11,8 2,2 -4,5 5,8 3,5 -19,3 92,9 3 12,1 -1,0 -1,9 5,3 -2,2 -2,6 93,5 4 11,9 1,8 -1,9 5,0 9,8 -23,5 93,8 5 13,8 5,4 -4,3 9,1 1,2 -17,3 89,7 6 11,8 2,1 -4,8 6,2 -5,6 -6,6 92,5 7 7,9 -2,9 -6,3 2,5 -7,0 -7,0 96,3 8 13,7 -2#9 - 0@4 7,2 -2,8 0,0 78,7 9 10,0 -5,6 -1,2 4,5 -6,1 -1,9 80,7 9bis 9,1 -6,8 -1,6 4,0 -7,3 -2,0 75,0 10 7,3 -3,3 -2,9 1,8 -5,6 -6,0 83,4 10bis 6,5 -4,8 -3,2 1'7 -6 ,2 -5,7 75,0 11 11,8 -0,7 -0,8 5,3 -3,4 -0,4 92,3 12 11,6 -0,6 -0,9 5,2 -3,7 -7,1 94,0 13 7,7 -0,6 -2,1 2,3 -3,7 -7,1 95,3 Les exemples 11 et 12 ont subi un test de durabilité mécanique, le test TABER consistant à soumettre le substrat sur sa face revêtue de couches minces à un frottement circulaire par des meules abrasives chargées sous 500 grammes. Après 650 tours, la différence de flou observée OH est de 1,6 pour l'exemple 12 et n'est que de 0,5 pour l'exemple 13.
Cela confirme que les empilements selon l'invention, même déposés par pulvérisation cathodique, ont une durabilité satisfaisais te, encore accrue si on privilégie le Si3N4 plutôt que le Sn0z pour constiti ier tout ou partie des couches à haut indice.
Du tableau récapitulatif des données photométriques de l'ensemble des exemples, on peut faire les remarques suivantes y une fois les indices de réfraction sélectionnés, on peut ajuster les épaisseurs géométriques des couches selon que l'on mette plutôt l'accent sur la RL ou la colorimétrie : de la comparaison des exemple; 2 et 3, on voit que l'on peut descendre sous la barre des 12% en Ri, à 60 , mais avec un a* positif (exemple 2), pour un substrat de verre cliiir revêtu sur une seule face notamment, ou alors avoir une valeur de RL légèrement supérieure mais en contrepartie s'assurer que a* et b* à (--) 0 sont bien négatifs, y l'exemple 4 permet à la fois de descendre sous la barre des 12% en RL à 60 , et d'atteindre 5% de RL à 0 . Cela peut être intéressant quand il s'agit de verres du type comptoirs, susceptibles d'être observés sous des angles d'incidence très variés.
On peut parvenir selon l'invention en dessous des 8 /0 de RI, à incidence oblique, si on munit le verre d'empilements antireflet sur ses deux faces (exemple 7).
Les exemples comparatifs 5 et 6 montrent l'avantage d'utiliser du Sn02 ou du SisN4 plutôt que du Ti02 en couche à haut indice l'exemple 5 tente de reproduire, en épaisseur optique, l'exemple 2 (180 nm d'épaisseur optique dans les deux cas pour la couche 3), mais le résultat est moins bon : la RL à 60 est de 13,8%. L'exemple 6 montre qu'on peut parvenir à des valeurs de RL meilleures à 60 , mais au prix d'un fort épaississement de la couche 3 (264 nm d'épaisseur optique), ce qui n'est pas satisfaisant en termes de rendement de production y Les exemples en vitrage feuilleté confirment l'intérêt qu'il y a à munir des parebrise de voiture de revêtements antireflets selon l'invention.
y on gagne plus de 6% de RL à 60 pour un pare-brise traité deux faces avec l'empilement de l'invention déposé en face 4 (exemple 10) par rapport à un parebrise standard (exemple 8). Cela permet donc soit d'augmenter le niveau de transmission lumineuse, soit d'utiliser (les verres plus foncés ou plus épais, donc de mieux protéger les passagers du véhicule de la chaleur tout en passant la barre des 75% en TL ; c'est ce que montrent les exemples 10 et 10 bis d'une part, 9 ct 9 bis d'autre part.
y les exemples 11 à 13 confirment les résultats modélisés : par rapport au verre nu de l'exemple 1, on abaisse ainsi la Ri, à 60 d'au moins 3%, quasiment 4%, en parvenant à maintenir les valeurs de a* et b* correspondantes négatives et d'au plus 2,1 en valeur absolue (et même d'au plus 1 en valeur absolue pour a*). L'effet est encore plus marqué si le verre est traité sur ses deux faces, avec une chute de plus de 7% de la RL à 60 . En outre, dans tous les cas, il y a aussi un abaissement notable de la Ri, à incidence normale (d'environ 3% par face traitée), avec également des a* et b* négatifs : une personne obscivant le vitnlge dans une large plage d'angles d'incidence aura donc la vision d'iin vitrage peu réfléchissant et qui ne "bascule pas" d'une teinte à l'autre en réflexion selon la façon dont on le regarde, ce qui est très avantageux. EXEMPLE 14 Cet exemple concerne un empilement selon l'invention à trois couches seulement, les deux premières couches 1, 2 étant remplacées par une couche unique 5, comme représenté en figure 1.
Un autre objet de l'invention réside dans des anticorps ou fragments ou dérivés d'anticorps polyclonaux ou monoclonaux dirigés contre un polypeptide tel que défini ci-avant. De tels anticorps peuvent être générés par des méthodes connues de l'homme du métier. En particulier, ces anticorps peuvent être préparés par immunisation d'un animal contre un composé peptidique de l'invention (notamment un polypeptide ou un peptide comprenant tout ou partie de la séquence SEQ ID NO : 2), prélèvement du sang, et isolement des anticorps. Ces anticorps peuvent également être générés par préparation d'hybridomes selon les techniques connues de l'homme de l'art.
Plus préférentiellement, les anticorps ou fragments d'anticorps de l'invention présentent la capacité de moduler au moins partiellement l'interaction des peptides revendiqués avec la Parkine.
Par ailleurs, ces anticorps peuvent également être utilisés pour détecter et/ou doser l'expression de la PAPI dans des échantillons biologiques, et de ce fait, pour renseigner sur son état d'activation.
Les anticorps selon l'invention sont plus préférentiellement capables de lier les protéines PAP 1 comprenant la séquence SEQ ID NO : 2, notamment la région de cette protéine impliquée dans l'interaction avec la parkine. Ces anticorps (ou fragments ou dérivés) sont plus préférentiellement capables de lier un épitope présent dans la séquence comprise entre les résidus 1 et 344 de la séquence SEQ ID NO : 2.
L'invention concerne également les composés non peptidiques ou non exclusivement peptidiques utilisables comme agent pharmaceutique. Il est en effet possible, à partir des motifs protéiques actifs décrits dans la présente demande, de réaliser des molécules modulatrices de l'activité de PAP1 non exclusivement peptidiques et compatibles avec une utilisation pharmaceutique, en particulier en dupliquant les motifs actifs des peptides avec une structure non peptidique ou de nature non exclusivement peptidique.
La présente invention a également pour objet tout acide nucléique codant pour un composé peptidique selon l'invention. Il peut s'agir en particulier d'un acide nucléique comprenant tout ou partie de la séquence présentée en SEQ ID N 1 ou un de ses derivés. Par séquence dérivée, on entend au sens de la présente invention toute séquence hybridant avec la séquence présentée en SEQ ID N 1ou avec un fragment de celle-ci et codant pour un composé peptidique selon l'invention, ainsi que les séquences résultant de ces dernières par dégénérescence du code génétique. Les différentes séquences nucléotidiques de l'invention peuvent être d'origine artificielle ou non. Il peut s'agir de séquences génomiques, d'ADNc, d'ARN, de séquences hybrides ou de séquences synthétiques ou semi-synthétiques. Ces séquences peuvent être obtenues soit par criblage de banques d'ADN (banque d'ADNc, banque d'ADN génomique), soit par synthèse chimique, soit par des méthodes mixtes incluant la modification chimique ou enzymatique de séquences obtenues par criblage de banques, soit par recherche d'homologie dans des bases de données nucléiques ou protéiques. L'hybridation mentionnée ci-dessus est préférentiellement réalisée dans les conditions décrites par Sambrook et al (1989, pages 9.52-9.55).
Un acide nucléique particulier' au sens de l'invention code pour un polypeptide comprenant la séquence SEQ ID NO :2 ou un fragment ou dérivé de celle-ci, notamment pour la protéine PAPIhumaine. Il s'agit avantageusement d'un acide nucléique comprenant la séquence nucléique SEQ ID NO :1.
De tels acides nucléiques peuvent être utilisés pour la production des composés peptidiques de l'invention. La présente demande concerne ainsi un procédé de préparation de tels composés peptidiques selon lequel on cultive une cellule contenant un acide nucléique selon l'invention, dans des conditions d'expression dudit acide nucléique et on récupère le composé peptidique produit. Dans ce cas, la partie codant pour ledit composé peptidique est généralement placée sous le contrôle de signaux permettant son expression dans un hôte cellulaire. Le choix de ces signaux (promoteurs, terminateurs, séquence "leader" de sécrétion, etc) peut varier en fonction de l'hôte cellulaire utilisé. Par ailleurs, les acides nucléiques de l'invention peuvent faire partie d'un vecteur qui peut être à réplication autonome ou intégratif. Plus particulièrement, des vecteurs à réplication autonome peuvent être préparés en utilisant des séquences à réplication autonome chez l'hôte choisi. S'agissant des vecteurs intégratifs, ceux-ci peuvent être préparés par exemple en utilisant des séquences homologues à certaines régions du génome de l'hôte, permettant, par recombinaison homologue, l'intégration du vecteur. Il peut s'agir d'un vecteur de type plasmidique, épisomique, chromosomique, viral, etc.
Les hôtes cellulaires utilisables pour la production des composés peptidiques de l'invention par voie recombinante sont aussi bien des hôtes eucaryotes que procaryotes. Parmi les hôtes eucaryotes qui conviennent, on peut citer les cellules animales, les levures, ou les champignons. En particulier, s'agissant de levures, on peut citer les levures du genre Saccharomyces, Kluyveromyces, Pichia, Schwanniomyces, ou Hansenula. S'agissant de cellules animales, on peut citer les cellules COS, CHO, C127, PC12 etc. Parmi les champignons, on peut citer plus particulièrement Aspergillus ssp. ou Trichoderma ssp. Comme hôtes procaryotes, on préfère utiliser les bactéries suivantes E. coli, Bacillus, ou Streptomyces.
Les acides nucléiques selon l'invention peuvent également servir à la réalisation d'oligonucléotides antisens ou d'antisens génétiques utilisables comme agents pharmaceutiques. Les séquences antisens sont des oligonucléotides de petite taille, complémentaire du brin codant d'un gène donné, et de ce fait capables
d'hybrider spécifiquement avec l'ARNm transcrit, inhibant sa traduction en protéine. L'invention a ainsi pour objet les séquences antisens capables d'inhiber au moins partiellement l'interaction des protéines PAPIsur la Parkine. De telles séquences peuvent être constituées par tout ou partie des séquences nucléiques définies ci-avant. Il s'agit généralement de séquences ou de fragments de séquences complémentaires de séquences codant pour des peptides interagissant avec la Parkine. De tels oligonucléotides peuvent être obtenus par fragmentation, etc, ou par synthèse chimique.
Les séquences revendiquées peuvent être utilisées dans le cadre de thérapies géniques, pour le transfert et l'expression in vivo de séquences antisens ou de peptides capables de moduler l'interaction de la protéine PAP1 avec la Parkine. A cet égard, les séquences peuvent être incorporées dans des vecteurs viraux ou non viraux, permettant leur administration in vivo (Kahn et al., 1991). A titre de vecteurs viraux conformes à l'invention on peut tout particulièrement citer les vecteurs de type adénovirus, rétrovirus, virus associé à l'adénovirus (AAV) ou virus de l'herpès. La présente demande a également pour objet des virus recombinants défectifs comprenant un acide, nucléique codant pour un polypeptide selon l'invention, notamment un polypeptide ou peptide comprenant tout ou partie de la séquence SEQ ID NO : 2 ou d'un dérivé de celle-ci.
L'invention permet également la réalisation de sondes nucléotidiques, synthétiques ou non, capables de s'hybrider avec les séquences nucléotidiques définies ci-avant ou leur brin complémentaire. De telles sondes peuvent être utilisées in vitro comme outil de diagnostic, pour la détection de l'expression ou surexpression de PAP1, ou encore pour la mise en évidence d'anomalies génétiques (mauvais épissage, polymorphisme, mutations ponctuelles, etc). Ces sondes peuvent également être utilisées pour la mise en évidence et l'isolement de séquences d'acides nucléiques homologues codant pour des peptides tels que définis précédemment, à partir d'autres sources cellulaires et préférentiellement de cellules d'origines humaines. Les sondes
de l'invention comportent généralement au moins 10 bases, et elles peuvent par exemple comporter jusqu'à l'intégralité d'une des séquences précitées ou de leur brin complémentaire. Préférentiellement, ces sondes sont marquées préalablement à leur utilisation. Pour cela, différentes techniques connues de l'homme du métier peuvent être employées (marquage radioactif, fluorescent, enzymatique, chimique, etc).
Agent de pH q.s. pH 7 pH 7 Eau déminéralisée q. s.p. 100.0 g 100. 0 g
Les cheveux traités avec la composition de l'exemple 2 ou de l'exemple 3 sont doux, légers et se démêlent facilement.
DESCRIPTION La présente invention concerne le domaine des cosmétiques et concerne des préparations qui comportent une quantité efficace d'un extrait végétal ou de ses substances actives, ainsi que l'utilisation de ces substances par exemple pour le traitement de la peau Les exigences du consommateur en matière de préparations cosmétiques augmentent constamment. Il est donc absolument évident à cet égard qu'un produit conçu par exemple pour le nettoyage de la peau remplisse également ces exigences d'une façon fiable L'utilisateur est aussi en droit d'attendre que la composition du produit possède une compatibilité dermatologique optimale, de sorte que même les consommateurs sensibles ne réagissent pas par une irritation. De plus, les agents devraient également remplir d'autres fonctions, qui concernent de plus en plus le domaine des soins et particulièrement de la protection Une sollicitation particulière des fabricants des préparations cosmétiques et pharmaceutiques concerne à cet égard le développement de substances actives qui soient faciles d'accès, dont la fabrication puisse être réalisée avec une dépense économique et qui remplissent cependant toute une gamme de fonctions, par exemple prendre soin de la peau et des cheveux, en les protégeant non seulement de l'influence néfaste du rayonnement ultraviolet, mais en réparant également des dommages existants.
Il convient à ce propos de renvoyer à l'article de 0 Takemura dans Phytochemistry, 38(5), 1299 (1995), dans lequel on traite de l'inhibition de la production de superoxydes en présence de carajuflavone On connaît de par les demandes de brevet japonais JP-A1 Hei 08/291025 (Ueda) et JP-A1 Hei 10/316543 (Shiseido) des agents ou produits de traitement capillaire qui contiennent des extraits de Bigoniaceae On recherche des substances actives présentant des propriétés de capteurs de radicaux et des propriétés anti-inflammatoires,
qui activent l'activité d'enzymes spéciales de réparation et de détoxication (comme par exemple la glutathion-S-transférase), qui stimulent ou régulent la croissance cellulaire, qui inhibent les sérine-protéases et peuvent par conséquent être utilisées de façon avantageuse dans la fabrication de préparations cosmétiques et pharmaceutiques, particulièrement d'agents anti-âge ainsi que de produits de protection solaire et de produits de cosmétique de maquillage, et ce sans générer de réactions secondaires indésirables chez les utilisateurs sensibles.
L'objet de la présente invention concerne des préparations cosmétiques et/ou pharmaceutiques qui comprennent une quantité efficace d'un extrait d'Arrabidaea chica.
De façon surprenante, on a découvert que les extraits qui peuvent être obtenus à partir des feuilles, des boutons, des pousses ou des racines de l'Arrabidaea chica tropical augmentent la tonicité de la peau, contrent la formation des rides par inhibition des sénne-protéases, possèdent des propriétés anti-inflammatoires et peuvent être utilisés en tant qu'antioxydants avec effet capteur de radicaux important La présente invention contient l'enseignement selon lequel ces effets avantageux sont imputables à la présence de substances déterminées, de sorte qu'en conséquence, un autre objet de la présente invention concerne des préparations qui comprennent ces substances, à savoir le cyanidine-3glucoside, la carajurine, le cyanidine-3-rutoside et la 6,7,3',4'-tétrahydroxy- 5-méthoxyflavone, seules ou en mélanges, extraites ou non d'Arrabidaea chica.
Un autre objet de la présente invention concerne des préparations qui comprennent au moins deux substances sélectionnées parmi le groupe comprenant le cyanidine-3-glucoside, la carajurine, le cyanidine-3-rutoside et la 6,7,3',4'-tétrahydroxy-5-méthoxyflavone.
Arrabidaea chica Les plantes Arrabidaea appartiennent à la famille des Bigoniaceae. Ce genre compte environ 70 espèces, qui sont
essentiellement originaires des régions tropicales, et en particulier du bassin de l'Amazone Il s'agit concernant Arrabidaeae chica Verl (synonyme Bigonia chica HBK) par exemple d'une plante odorante présentant des racines tubulaires, qui est connue au Brésil pour ses propriétés colorantes. La décoction obtenue par les autochtones à partir des feuilles ou des fleurs est utilisée pour peindre le corps, et le produit a pendant un temps été exporté sous la désignation "American Red" En outre, la plante est utilisée dans de nombreux pays d'Amérique du sud pour célébrer des cérémonies religieuses et de magie, mais aussi en médecine naturiste par exemple contre la diarrhée, l'anémie et la leucémie L'analyse montre que les extraits contiennent essentiellement des anthocyanes, de la coumarine, des flavonoïdes, des tannins et des phytostérols. Les composants essentiels sont en particulier le cyanidine-3glucoside et la carajurine (3-désoxyanthocyanidine), cette dernière se trouvant vraisemblablement exclusivement dans les plantes Arrabidaea, et non dans d'autres plantes de la famille des Bigoniaceae. Deux autres composants essentiels sont le cyanidine-3-rutoside, ainsi qu'une nouvelle carajuflavone isolée et expliquée récemment, pour laquelle il s'agit de la 6,7,3',4'-tétrahydroxy-5-méthoxyflavone de couleur jaune pâle.
La préparation des extraits peut s'opérer d'une façon connue en soi, c'est à dire par exemple par extraction aqueuse, alcoolique ou aqueuse-alcoolique des plantes ou parties de plantes. Concernant les procédés d'extraction habituellement appropriés, tels que la macération, la remacération, la digestion, la macération dynamique, l'extraction en lit fluide, l'extraction assistée par ultrasons, l'extraction à contre-courant, la percolation, la re-percolation, l'extraction sous pression réduite, la diacolation et l'extraction liquide-solide sous reflux continu, qui est réalisée dans un extracteur Soxhlet, lesquels sont tous connus de l'homme du métier et peuvent tous en principe être utilisés, on renvoie pour des raisons de commodité par exemple à Hagers Handbuch der Pharmazeutischen Praxis (Sème édition, vol. 2, pages 1 026-1 030,