INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Sauf indication contraire, les proportions données dans les exemples de compositions sont exprimées en pourcentage cn poids Exemple 1 Préparation d'un extrait selon l'invention 1 g de feuilles dc la plante Barringtonia asiatica préalablement séchés et broyés est introduit dans 200 ml de solvant. La suspcnsion est laissée, à température ambiante sous agitation modérée, pcndant 4 heures. On filtre ensuite le mélange, puis on évaporc le solvant du filtrat ainsi obtenu sous pression réduite.
On récupère alors l'extrait sec. Pour préparer les compositions selon l'invention, il est possible d'utiliser soit la solution d'extrait de plante, éventuellement concentrée, dans le solvant d'extraction, soit l'extrait sec.
Des extraits ont été réalisés cn utilisant 2 solvants différents : I'eau et le méthanol.
Exemple 2 Mise en évidence de l'activité inhibitrice des extraits sur différentes enzymes 2.1 Extrait utilisés Les tests d'inhibition enzymatiques étant menés en milieu aqueux, il est nécessaire d'utiliscr des solvants d'extraction miscibles avec l'eau.
Ainsi, cn procédant comme décrit dans l'exemple 1, on a réalisé trois extraits différents en utilisant ici non pas les feuilles mais les fruits de Barringtonia asiatica, avec rcspectivement de l'eau, du méthanol ct du DMSO. La concentration de ces extraits est ensuite ajustée à 0,5 Sa en extrait sec de plante, soit par ajout soit par évaporation du solvant d'extraction.
2.2. Inhibition de l'élastase a) Principe du test: Les techniques de mise en évidence de l'inhibition de l'élastase ont été décrites par différents auteurs (BAUMSTARK, J.S. et al., Biochim. Biophys. Acta (1963), 77, 676 ; BIETH, B. et al., Biochem. Mcd., (1974), il, 350; C. FRANCK, I. BYRJALSEN, Biol. Chem. Hoppe Seyler, (1988) 369 (8) 677-82).
Selon un mode de réalisation de la présente invention, chaque étage de commande comporte un moyen pour placer le transistor de sortie auquel il est associé dans un état de haute impédance.
La présente invention prévoit également un procédé de commande d'un amplificateur de sortie numérique comprenant, en série entre deux lignes d'alimentation, deux transistors MOS dont le point milieu constitue une borne de sortie de l'amplificateur, ce procédé consistant à moduler individuellement les tensions de grille desdits transistors lors de leur commutation à la fermeture.
Selon un mode de réalisation de la présente invention, le procédé consiste à provoquer lors de la fermeture d'un premier transistor de sortie connecté à une ligne d'alimentation plus positive, une décharge de sa capacité de grille à courant constant ; et lors de la fermeture d'un deuxième transistor connecté à une ligne d'alimentation plus négative, une charge de sa capacité de grille à courant constant.
Ces objets, caractéristiques et avantages, ainsi que d'autres de la présente invention seront exposés en détail dans la description suivante de modes de réalisation particuliers faite à titre non-limitatif en relation avec les figures jointes parmi lesquelles les figures 1 à 5 décrites précédemment sont destinées à exposer l'état de la technique et le problème posé la figure 6 représente un mode de réalisation d'un amplificateur de sortie numérique selon la présente invention la figure 7 illustre, sous forme de chronogrammes, le fonctionnement d'un amplificateur de sortie numérique selon la présente invention ; et la figure 8 représente une variante de réalisation d'un amplificateur de sortie numérique selon la présente invention.
Les mêmes éléments ont été désignés par les mêmes références aux différentes figures. Pour des raisons de clarté, les chronogrammes des figures 3, 5 et 7 ne sont pas à l'échelle, et seuls les éléments nécessaires à la compréhension de l'invention ont été représentés aux figures et seront décrits par la suite.
La figure 6 représente un mode de réalisation d'un amplificateur de sortie numérique selon la présente invention.
Cet amplificateur comporte, comme l'amplificateur classique représenté à la figure 2, deux transistors P, N de types opposés, montés en série entre un potentiel positif NVdd d'alimentation de la région de sortie (3", figure 1) du bloc numérique du circuit intégré et la masse NGND de ce bloc numérique. Le point milieu de cette association en série est relié à un plot 11 de sortie de l'amplificateur.
Selon la présente invention, les grilles respectives des transistors P et N sont reliées aux sorties respectives 12, 13 d'étages de commande 14, 15. Chaque étage 14, 15 est essentiellement constitué d'un transistor P', N' de même type que le transistor de sortie P, N auquel il est associé. Ce transistor P', N' est monté en série avec une source de courant, respectivement 17, 18 et le point milieu de cette association en série constitue la borne 12, 13 de sortie de l'étage de commande. Dans l'étage 14, le transistor P' est connecté entre la ligne d'alimentation positive NVdd et la borne 12 et reçoit, sur sa grille, un signal de commande Vlh. Dans l'étage 15, le transistor N' est connecté entre la borne 13 et la masse NGND et reçoit, sur sa grille, un signal de commande V'1.
Les sources de courant 17 et 18 sont dimensionnées en fonction de la pente du courant de sortie souhaitée pour les fronts de commutation de l'amplificateur de sortie.
Selon la présente invention, les signaux de commande V'h et V'1 sont, de préférence, issus d'un circuit logique (non représenté) retraitant les signaux de sortie (Vh et V1, figure 2) du coeur numérique (3', figure 1) ou de la région de sortie (3", figure 1) du circuit intégré, pour les adapter aux étages de commande 14 et 15.
La figure 7 illustre le fonctionnement de l'amplificateur de sortie numérique représenté à la figure 6. Cette figure représente, sous forme de chronogrammes, les allures des signaux de commande V'h et V'1, des tensions grille/source Vgs(P) et Vgs(N) des transistors P et N, et de la tension de sortie V11.
A un instant tl où l'amplificateur de sortie doit commuter vers son état haut, le signal V'h passe à l'état haut, ce qui bloque le transistor P' et provoque la décharge de la capacité de grille du transistor P, à courant constant, par la source de courant 17. La diminution de la tension grille/source du transistor P est donc progressive, de même que la croissance du courant de sortie. Le signal V'1 présente la même allure que le signal V'h et provoque, à l'instant tl, la mise en conduction brusque du transistor N' et, par ce biais, le blocage immédiat du transistor N. La mise en conduction du transistor P est rendue plus progressive grâce à la commande linéaire et continue de sa tension grille/source. Ainsi, le terme en L.di/dt de la tension de bruit est plus faible. L'ouverture du transistor N à l'instant tl peut toutefois s'effectuer brusquement dans la mesure où la capacité externe (C, figure 6), liée à la charge à laquelle est connecté l'amplificateur de sortie, est complètement déchargée.
Ainsi, le courant qui parcourt le transistor N est nul et le terme en L.di/dt de la tension de bruit introduite par la commutation de ce transistor est également nul.
Un avantage de prévoir un blocage (ouverture) brusque du transistor N, et du transistor P comme on le verra par la suite, est que cela évite d'avoir une conduction directe entre les transistors P et N et minimise ainsi le risque d'injection de bruit, dans le substrat, lors des commutations.
A un instant t'l où l'amplificateur de sortie doit commuter vers son état bas, les signaux de commande V'h et V'1 sont brusquement commutés à la masse. Côté étage de commande 15, le transistor N' se bloque et la capacité de grille du transistor N se charge donc à courant constant fixé par la source 18. La tension grille/source du transistor N augmente progressivement et le courant de sortie (vers la masse) augmente donc progressivement.
Le transistor P est quant à lui bloqué brusquement à l'instant t'l par la mise en conduction du transistor P' qui annule la tension grille/source du transistor P. Comme pour la mise en conduction du transistor P, la mise en conduction progressive du transistor N réduit le terme en L.di/dt de la tension de bruit. De plus, lors de l'ouverture du transistor P à l'instant t'l, la capacité externe C a fini de se charger et le courant qui parcourt ce transistor est donc nul, de même que le terme en L.di/dt de la tension de bruit introduite par cette commutation.
La purification et la connaissance des polypeptides impliqués dans la cohésion intercornéocytaire est une des voies qui pourrait permettre l'élaboration de produits destinés à lutter contre les effets d'un excès ou d'un défaut en polypeptides de ce type en particulier à la surface de la peau.
Un des objets de l'invention est de fournir un polypeptide impliqué dans la cohésion intercornéocytaire sous forme purifiée.
Après de longs et laborieux travaux du fait de sa faible représentation parmi les protéines de l'épiderme, de sa grande instabilité et de sa sensibilité élevée aux protéases, la demanderesse a mis en évidence, isolé et purifié par des techniques biochimiques à partir d'épiderme humain, un polypeptide spécifique des épithéliums cornifiés. Ce polypeptide, que l'on nommera également par ailleurs dans le texte "cornéodesmosine" est exprimé dans la couche cornée de l'épiderme et est impliqué dans la cohésion intercornéocytaire. La demanderesse en a déterminé la séquence primaire en acides aminés.
L'invention a donc pour objet un polypeptide purifié, caractérisé par le fait qu'il répond à la séquence d'acides aminés: 1MGSSRAPWMGRVGGHGMM ALLLAGL 26 L L P G T L A K S I G T F S D P C K D P T R I T S 51 P N D P C L T G K G D S S G F S S Y S G S S S S G 76 S S I S S A R S S G G G S S G S S S G S S I A QG 101 G S A G S F k P G T G Y S Q V S Y S S G S G S S L 126 Q G A S G S S Q L G S S S S H S G S S G S H S G S 151 S S S H S S S S S S F Q F S S S S F Q V G N G S A 176 L P T N D N S Y R G I L N P S Q P G Q S S S S S Q 201 T S GV S S S G QSV S S N Q R P C S S D I P D S 226 P C S G G P I V S H S G P Y I P S S H S V S G G Q 251 R P V V V V V D Q H G S GA P GV V Q G P P C S N 276 G G L P G K P C P P I T S V D K S Y G G Y E V V G 301 G S S D S Y L V P G M T Y S k G k I Y P V G Y F T 326 K E N P V K G S P G V P S F A A G P P I S E G K Y 351 F S S N P I I P S QS A A S S A I A F Q P V GT G 376 G V Q L C G G G S T G S K G P C S P S S S R V P S 401 S S S I S S S A G S P Y H P C G S A S Q S P C S P 426 P G T G S F S S S S S S Q S S G K I I L Q P C G S 451 K S S S S G H P C MS V S S L T L T G G P D G S P 476 H P D P S A G A K P C G S S S A G K I P C R S I R 501 D I L A Q V k P L G P Q L A D P E V F L P Q G E L 526 L D S P La séquence primaire en acides aminés du polypeptide est présentée ici sous une forme qui utilise le code à une lettre couramment utilisé dans l'art antérieur et dont on peut trouver une explication dans "Principes de biochimie" Lehninger A.
L., Flammarion éditeur, 1985. La numérotation commence du côté aminoterminal du polypeptide et se poursuit jusqu'à l'extrémité carboxyterminale de celui-ci.
Le polypeptide de l'invention peut être d'origine naturelle ou synthétique. Par synthétique on entend ici tout polypeptide obtenu chimiquement ou par production dans un organisme après introduction dans cet organisme des éléments nécessaires à cette production.
Le polypeptide de l'invention peut être issu de toute origine possible à savoir soit animale, en particulier de mammifères et encore plus particulièrement humaine, soit végétale, soit de micro-organismes (virus, phages, bactéries entre autres) ou encore de champignons, sans préjuger du fait qu'il soit présent de manière naturelle ou non dans ledit organisme d'origine.
Préférentiellement, le polypeptide de l'invention est d'origine naturelle, purifié à partir de tissus de mammifères, particulièrement à partir de peau de mammifères.
Préférentiellement, le polypeptide de l'invention est purifié à partir de peau humaine et encore plus préférentiellement à partir d'épiderme humain.
Comme indiqué précédemment, la cohésion intercornéocytaire est apparemment due entre autres à l'existence dans la couche cornée de polypeptides spécifiques des structures impliquées dans la jonction intercornéocytaire.
Ainsi, le polypeptide de l'invention est spécifique de la couche cornée et de la couche granuleuse et, préférentiellement, le polypeptide selon l'invention est spécifique des structures impliquées dans la jonction intercornéocytaire, particulièrement des cornéodesmosomes.
On sait qu'en général les polypeptides matures que l'on trouve dans les cellules proviennent de la maturation de précurseurs qui contiennent dans leur séquence la séquence du polypeptide mature.
Ainsi, l'invention concerne également tout polypeptide dont la séquence est en partie constituée par la séquence du polypeptide de l'invention.
II est connu également que les polypeptides peuvent subir des modifications posttraductionnelles comme la formation de liaisons disulfure, les clivages protéolytiques spécifiques, l'addition de glucides (glycosylation), la phosphorylation en particulier au niveau des sérines et/ou des thréonines et/ou des tyrosines, et/ou l'association à des lipides.
L'invention concerne donc le polypeptide de l'invention ayant subi ou non des modifications post-traductionnelles.
Le polypeptide de l'invention peut avoir subi une ou plusieurs modifications posttraductionnelles.
Obtention des microsphères et des traceurs de dosage.
Pour chaque analyte à doser (par exemple l'lL4 ou l'lFNy) on utilise un couple d'anticorps, reconnaissant chacun un épitope distinct du même analyte.
Un premier anticorps anti-lL4 est sélectionné pour être immobilisé sur les microsphères de dosage N"1. L'anticorps est alors biotinylé en faisant réagir de la biotine-NHS, en tampon borate, avec un rapport de 1 mole d'anticorps pour 13 moles de biotine-NHS. La biotine n'ayant pas réagi est séparée par chromatographie sur SephadexB G25 (Pharmacia, Uppsala Suède). L'anticorps biotinylé anti-lL4 est alors immobilisé sur les microsphères de dosage 1 en incubant, en phosphate-BSA, l'anticorps à 1 pg par mg de microsphères. Après 18 heures d'incubation sous agitation, les microsphères sont lavées et diluées à 106 microsphères par mil dans ce même tampon.
Le second anticorps anti-lL4 est couplé à la phycoérythrine selon le protocole décrit plus haut pour l'anticorps anti-DNP.
On procède de même pour les anticorps anti- l'lFNy On effectue les opérations ci-dessus pour l'lL4 et l'lFNy. On obtient ainsi 4 réactifs immunologiques - un anticorps spécifique de l'lL4, dirigé contre un premier épitope de cette molécule et couplé à des microsphères marquées à la fluorescéine, - un anticorps spécifique de l'lL4, dirigé contre un second épitope de cette molécule et couplé à la phycoérythrine, - un anticorps spécifique de l'lFNy', dirigé contre un premier épitope de cette molécule et couplé à des microsphères marquées à la fluorescéine, - un anticorps spécifique de l'lFNy, dirigé contre un second épitope de cette molécule et couplé à la phycoérythrine.
Exemple 2 : Dosage de l'lL4 et de l'IFNX dans un échantillon A. Procédure Les microsphères de calibration et les microsphères de dosage (N" 1 et NO 2) sont mélangées de manière à obtenir une concentration de microsphères d'environ 15 000 microsphères par catégorie dans 10 pi de tampon phosphate-BSA. Les traceurs anti-DNP, anti-lL4, anti-lFNy sont mélangés de manière à ce que chaque traceur soit à la concentration de 25 ng dans 50 ul de tampon phosphate-BSA. Les concentrations respectives de traceurs et de microsphères peuvent être ajustées en fonction des caractéristiques de dosage souhaitées.
Cinquante microlitres de l'échantillon sont déposés dans un puits de microplaque à fond filtrant (NUNC, Roskilde, Denmark). Dix microlitres du mélange des microsphères sont ajoutés puis 50 p du mélange des traceurs. Le milieu réactionnel est maintenu sous agitation forte pendant deux heures à température ambiante.
A l'issue de l'incubation, le milieu réactionnel est filtré et les microsphères sont reprises dans un liquide de lavage contenant 0,15 moles/l de NaCI et 0,05% de Tween 20. Cette étape est renouvelée deux fois.
Puis, les microsphères sont reprises dans du tampon phosphate 50 mmoles/l, pH 7,8 et sont injectées sur un cytomètre de flux (Epics XL, Coulter Corp., Miami, USA). L'acquisition est stoppée lorsqu'environ 500 microsphères par catégorie ont été enregistrées. Les photomultiplicateurs de discrimination (520 nm) et de détection (675 nm) sont réglés de façon à discriminer les trois populations de microsphères de calibration et les microsphères de dosage 1 et 2 selon leurs intensités de fluorescence respectives à 520 nm (émission de la fluorescéine) et de façon à avoir le plus grand rapport signal de mesure sur bruit de fond à 675 nm (émission de la phycoérythrine-Cy5).
B . Résultats Dans une série d'expérimentations, dans laquelle on a dosé des solutions étalons d'lL4 et d'lFNy selon le protocole décrit ci-dessus, on a déterminé les correspondances entre les valeurs d'intensités des souscatégories de microsphères de calibration et les concentrations en cytokines IL4 et IFNy. Les résultats sont montrés dans le tableau 1 ci-dessous.
Microsphères de Concentration associée Concentration associée calibration en lL4 en lFNy (pg/ml) (pg/ml) Cal.1 0,00 0,00 Cal. 2 31,47 42,00 Cal. 3 183,00 248,00 Cal.4 4 1110,01 1758,00 Ce tableau de correspondance permet de réaliser l'étalonnage de chaque système de dosage, IL4 et IFNy. Les valeurs correspondantes en pg/ml sont utilisées pour déterminer la concentration des cytokines lL4 et lFNy dans un échantillon inconnu.
C. Exemple de dosage de l'IL4 et de l'lFNy Dans une autre série d'expérimentations, on a dosé, selon le protocole décrit précédemment, des échantillons constitués par des surnageants de culture de lymphocytes stimulés. Les concentrations en cytokines IL4 et lFNy ont été déterminées avec, soit les microsphères de calibration, soit avec une gamme de solutions étalons. Les résultats sont donnés dans les tableaux 2 et 3 ci-dessous: Tableau 2
Concentration en 1L4 Concentration en lL4 SURNAGEANT N" (Présente invention) (Art antérieur) (pg/ml) (pglml) 1 5,68 7,68 2 31,72 31,77 3 61,72 67,16 4 109,51 121,93 Tableau 3
Concentration en IFNy Concentration en IFNy SURNAGEANT N" (Présente invention) (Art antérieur) (pglml) (pg/ml) 1 27,6 32,3 2 90,9 100,6 3 237,8 239,4 4 254,3 256,3 La Figure 1 est un histogramme d'acquisition typique obtenu à l'aide d'un cytomètre COULTER XL illustrant les résultats d'un dosage simultané de l'lL4 et de l'lFNy', ainsi que le système d'étalonnage selon les conditions décrites dans l'exemple ci-dessus. Le canal T contient les 4 sous-catégories de microsphères de calibration engendrant 4 points. Elles sont réparties, en abscisse, sur l'ensemble de l'échelle de mesure. Les canaux U et V montrent respectivement la population de microsphères du système de dosage de l'IL4 et de l'lFNy (microsphères de dosage N" 1 et 2). Leur position en abscisse est proportionnelle à la quantité d'lL4 et d'lFNy. Les valeurs moyennes correspondant à l'ensemble des populations de microsphères individualisées sur le schéma sont obtenus par le logiciel d'analyse de l'instrument.
Légende : abscisse, FL4 : fluorescence à 675 nm; ordonnée, FLI: fluorescence à 520 nm
technique du problème de la présente invention.
Ainsi, la présente invention a pour but de déve-
lopper un type d'outil pour le sciage par fusion de profilés creux, à l'état froid, mais également pour scier par fusion
avec des points de coupures chauds, comme cela est principa-
lement le cas dans le domaine de l'acier et la marche des la-
minoirs, et qui vis-à-vis de l'état de la technique, présentent une possibilité d'application diversifiée, un meilleur comportement en puissance et puissent se réaliser avec des moyens techniques relativement simples et ainsi de
façon peu coûteuse.
Ce problème est résolu par une lame de scie par fusion du type défini cidessus, caractérisée en ce que les
dents de scie sont munies d'un alliage de matière très résis-
tante à l'usure et à la température, sur leur face avant ain-
si qu'à la zone des zones de surface des flancs de dents
adjacents à la face avant, ou sont blindées avec cette ma-
tière et le blindage des lames de scie est assuré par le sou-
dage d'apport au plasma.
Suivant d'autres caractéristiques avantageuses de l'invention: * comme type de matière pour le blindage des dents on utilise un alliage Co-Cr-WC, e comme type de matière pour le blindage des dents de scie, on utilise un acier très rapide appliqué par soudage,
e le corps de la lame de scie est fabriqué en acier réfrac-
L'invention concerne les couvertures de sécurité composée de particules isothermes piscines de tous les types et de toutes les formes.
Les piscines construites à l'intérieur d'un bâtiment et les piscines installées en plein air sont généralement équipées d'une couverture contre l'évaporation et les pertes calorifiques par une bâche isotherme flottant à la surface de l'eau. En ce qui concerne la sécurité pour les couvertures flottantes, le rideau à lames rigides est la technique la plus employée. Les couvertures flottantes connues se composent donc, soit d'une bâche de mousse plastique d'épaisseur comprise entre 2 et 10 mm, soit d'une bâche à bulles d'air maintenue entre deux couches de plastique souple, soit d'un rideau composé de lames de plastique rigides creuses bouchées aux extrémités et reliées entre elles par un système de crochets tout comme les lames de certains stores.
Les couvertures isothermes à bâche flottante en mousse ou à bulles d'air entre deux films plastiques ainsi que les rideaux à lames rigides sont destinés aux piscines de formes rectangulaires ou de formes à géométrie simple, allant d'un large côté vers un côté plus étroit, étant donné que les bâches ou les rideaux de lames rigides doivent être enroulés sur un axe afin de découvrir la piscine et d'être stockés hors du bassin de natation pendant la baignade.
Les piscines de forme libre, les piscines avec des bords sinueux ou encore les piscines comportant une île, ne peuvent être couvertes par une couverture à bâche flottante traditionnelle. Pour couvrir une piscine de forme libre de nombreux fabriquants proposent des couvertures non flottantes qui viennent se positionner au dessus des margelles. Ces couvertures sont efficaces mais sont de forme généralement rectangulaire ne reflétant donc pas la forme libre de la piscine.
Certains constructeurs proposent aussi des dômes gonflables ou des abris pour piscine de type véranda où nous pouvons nous baigner en laissant la piscine couverte. Mais les dômes sont peu esthétiques et sont bien souvent mal retenus au sol, ainsi que ce soit par des fixations vissées ou par des boudins lestés d'eau, le dôme reste fragile en cas de vent fort et même dangereux en cas de tempête car il arrive qu'il puisse partir bien loin de son emplacement désiré. Les abris du genre véranda sont plus ou moins escamotables ou mobiles offrant par le fait la possibilité de se baigner avec ou sans un toit sur la tête. Pour les dômes et pour les abris véranda, le problème de déshumidification doit être pris en compte sous peine de rendre l'air irrespirable et de provoquer une condensation très importante.
Les bâches à bulles d'air entre deux films plastique ont une seule qualité: leur prix. Mais elles ont un mauvais pouvoir d'isolation thermique car l'isolation n'est effective qu'au niveau des bulles d'air; en effet, entre chaque bulle d'air, les films plastique font pont thermique entre l'eau chaude et l'air froid, car sans aucun pouvoir isolant. Précisons que les bulles dans ce genre de bâche ne recouvrent que la moitié de la surface. En revanche, toute la surface de la bâche empêche l'évaporation de l'eau. Cette bâche n'offre qu'une très faible résistance mécanique, un enfant qui viendrait à chuter dessus court de gros risques de noyade. Ce type de bâche n'offre de ce fait aucune sécurité au propriétaire de la piscine.