INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
gazéificateur crée des pertes en charge sur la ligne d'eau, préjudiciables au rinçage cuves très hautes, ce manque de pression ne permettant plus d'atteindre le sommet la cuve(6) ou tout autre contenant. Pour pallier ce problème, un procédé automatique mise en route d'un accélérateur ou tout autre moyen d'augmentation de pression d'eau (7), placé sur la ligne d'eau, disposé en amont et faisant corps avec gazéificateur et commandée par un contacteur palette(8) ou tout autre moyen detection d'un flux d'eau en mouvement. Ce contacteur palette(8) ou tout autre moyen détection du flux d'eau permettra de synchroniser l'ouverture de l'électrovanne de et de l'accélérateur ou tout autre moyen d'augmentation de pression d'eau (7). exemple, on peut observer une perte en charge du gazéificateur de 0,8 L'augmentation de pression obtenue grâce à l'accélérateur ou tout autre moyen d'augmentation de pression d'eau (7) peut être de 1,5 bars. Les pressions hydrauliques cumulant, suivant les lois de la physique, on a rèstitué plus de pression que ce que le gazéificateur n'en consomme, permettant ainsi d'atteindre énergiquement les parties hautes de la cuve(6) ou de tout autre contenant..
Un des dispositifs selon l'invention, consiste à distribuer l'eau gazéifiée dans la cuve(6) tout autre contenant, grâce à des buses fixes ou rotatives de lavage, des canules de rinçage ou encore des canons à mousse s'adaptant au contenant ou tout moyen de mise #uvre pour le lavage des dites cuves ou contenants. Les dites buses fixes ou rotatives, canules, canons à mousse ou tout moyen de mise en #uvre pour le lavage contribuent à une bonne répartition de l'eau gazéifiée sur les parois de la cuve(6) agroalimentaire ou tout autre contenant.
Le contrôle du pH obtenu suite à la mise en #uvre du dispositif selon l'invention est aisée : il suffira d'analyser à l'aide d'un pH-mètre, l'eau gazéifiée éliminée par l'ouverture de la vanne de vidange des cuves à rincer.
Dans divers cas, on pourra avoir intérêt à optimiser la technique rinçage de cuves décrite ci-dessus. En effet, pour affiner ce travail et être plus économique en gaz, il paraît opportun de n'effectuer qu'un à deux cycles de rinçage maximum avec l'eau gazéifiée avec des dosages de C02 pouvant être différents, le ou autres cycles de rinçage suivants pouvant être faits à l'eau plate. Pour permettre quantifier le C02 instantanément, on pourra utiliser des électrovannes(3) préréglées mises en parallèle. Par exemple, il est possible d'effectuer le premier cycle rinçage avec un enrichissement maximum de C02 en ouvrant toutes les électrovannes(3) et de gérer le second cycle de rinçage en n'ouvrant que deux voir une seule ces électrovannes(3) permettant ainsi d'appauvriir le mélange par paliers.
On remarquera qu'avec de l'eau gazéifiée, on empêche la soude d'agir ce qui prouve qu'ajouter de l'eau gazéifiée pour le lavage serait incohérent.
Le dispositif objet de la présente invention présente une autre caractéristique des plus avantageuses pour cette application. En effet l'acidité de l'eau gazéifiée présente un facteur de sécurité supplémentaire pour ce qui est de lutter contre une éventuelle prolifération bactérienne. Ceci est dû aux propriétés bactériostatiques reconnues du C02 étant un gaz neutre, aucune odeur, aucun résidu ni mauvais goût ne sont à craindre une fois l'opération de rinçage terminée.
détaillé ci-après la validation technique du procédé objet de l'invention. A titre de premier exemple, il a été choisi le rinçage d'une cuve(6) à vin venant d'être lavée avec l'eau additionnée de soude à 3% du volume d'eau : la bouillie de lavage (soude alimentaire+eau) l'eau de concession utilisée pour le rinçage rinçage fait avec une gazéification de l'eau à 1,35 g de C02 par litre d'eau pH de l'eau gazéifiée Rinçage traditionnel à l'eau plate Quantité d'eau employée 4 hl 1 '> rinçage 11 2' rinçage 10.5 3" rinçage 8.4 40 rinçage 7.79 le pH initial de l'eau étant Remarques note de légères, mais visibles, auréoles ; les parois internes de la cuve légèrement grasses nécessitent un 50 rinçage Rinçage avec l'eau gazéifiée selon le procédé objet de l'invention Quantité d'eau employée 2 hl V rinçage 10 2' rinçage 9.25 3' rinçage 8.01 4' rinçage 7.2, le pH initial de l'eau étant Remarques : Les quantités d'eau gazéifiée utilisées, sont deux fois moins importantes que l'eau plate de la concession.
On ne remarque aucune auréole sur les parois de la cuve qui sont nettes Très bonne qualité de riinçage Le pH obtenu est en dessous du pH de l'eau de la concession Autre exemple d'un cas concret de rinçage de cuves avec analyses comparatives des quantités d'ions sodium libres contenus dans les effluents de rinçage et du pH de ces effluents.
Les prélèvements sont pris en fin d'écoulement à la vanne de pied cuve à chaque cycle de rinçage.
En observant comparativement les deux courbes de la figure 2, constate que le prélèvement le' cycle de rinçage avec de l'eau gazéifiée contient nettement mois d'ions sodium libres qu'à l'eau plate.
Exemple 1: Crème destinée au traitement des rougeurs, brûlures légères et érythèmes légers localisés - Triesters de glycérol oxydés à des taux de peroxydation compris entre 5 et 250 milli-équivalents par kg: 20 % copolymère acrylique anionique en dispersion dans une huile blanche: 4 % parfum: 0,5 % - parahydroxybenzoate de méthyle sodé: 0,15 % parahydroxybenzoate de propyle sodé: 0,05 % - méthylchloroisothiazolinone et méthylisothiazolinone: 0,0012 %
- eau déminéralisée: qsp 100.
Exemple 2: Crème destinée au traitement de la dermite fessière irritative du nourrisson - Triesters de glycérol oxydés à des taux de peroxydation compris entre 5 et 250 milli-équivalents par kg: 25 % - copolymère acrylique anionique en dispersion dans une huile blanche: 4 % - parfum: 0, 5 % - parahydroxybenzoate de méthyle sodé: 0,15 % - parahydroxybenzoate de propyle sodé 0,05 % - méthylchloroisothiazolinone et méthylisothiazolinone: 0,0012 %
Une étude ouverte non comparative a été menée sur 113 nourrissons âagés de 2 à 14 mois à l'aide du produit ci-dessus utilisé en monothérapie, ad libitum, pendant une à deux semaines. Cette étude a permis de montrer que l'application de la crème ci-dessus permettait d'observer la guérison ou au moins
une très nette amélioration dans 82 % des cas traités.
Exemple 3: lait destiné au traitement de l'érythème solaire Un lait présentant la composition ci-dessous - eau déminéralisée: qsp 100 triesters de glycérol oxydés avec un taux de peroxydation compris entre 5 et 100 milli-équivalents par kg - alcool cétostéarylique éthoxylé 12 2 % alcool cétostéarylique éthoxylé 20 2 % - glycérine: 1 % -parfum: 0,3 % triéthanolamine: 0,27 % - polymère acrylique réticulé: 0,2 % parahydroxybenzoate de méthyle: 0,15 % - parahydroxybenzoate de propyle: 0,05 % - méthylchloroisothiazolinone et méthylisothiazolinone: 0,0012 % a été testé dans le cadre d'une étude ouverte non comparative sur 47 sujets âgés de 2 à 62 ans dans les conditions suivantes: - mode d'application: 1 à 6 applications par jour, -critères de jugement: amélioration ou disparition du degré de sévérité (notée de 1 à 4) de l'érythème et des signes fonctionnels, acceptabilité du produit. Les résultats après 48 heures de traitement sont les suivants * Degré de sévérité de l'érythème Evolution/degré de sévérité Degré 1 Degré 2 Degrés 3 et 4 Disparition 68 % 38 % Atténuation 32 % 72 % 100 % * Signes fonctionnmels Evolution/degré de sévérité Sensation Sensation de Sensation de de chaleur picotement cuisson (burning) Disparition 74 % 75 % 61 % Atténuation 26 % 22 22 % * Incidence du type de peau des sujets Le type de peau déterminé à l'inclusion selon la classification de
FITZ PATRICK n'a pas d'influence sur les résultats.
* Tolérance et acceptabilité du produit La tolérance a été excellente dans 100 % des cas et le produit a été
jugé d'utilisation facile dans 96 % des cas et d'usage agréable dans 93 % des cas.
* Conclusion Ces résultats illustrent l'intérêt de la crème à base de triglycérides
oxydés dans le traitement de l'érythème solaire localisé.
Exemple 4: Mise en évidence de l'effet des huiles peroxydées en tant qu'adjuvant de massage Une étude a été réalisée sur 50 patients en vue de comparer une composition à base d'huile végétale peroxydée avec une huile minérale dans une large gamme de traitements de physiothérapie orientée vers une action antalgique
par massage.
Les deux produits testés sont sous la forme de baumes liquides comprenant respectivement: -produit selon l'invention: 93 % de glycérides oxydés et 7 % de matière parfumante, - produit placebo: 93 % d'huile minérale et 7 % de matière parfumante. a) Protocole du test L'efficacité et la tolérance clinique des produits de l'invention ont été testées au cours d'un essai réalisé en double aveugle en comparaison avec une
huile minérale.
(ii) les silicones volatiles linéaires ayant 2 à 9 atomes de silicium et possédant une viscosité inférieure ou égale à 5.10-6m2/s à 25 C. Il s'agit, par exemple, du décaméthyltétrasiloxane commercialisé notamment sous la dénomination "SH 200" par la société TORAY SILICONE. Des silicones entrant dans cette classe sont également décrites dans l'article publié dans Cosmetics and toiletries, Vol. 91, Jan. 76, P. 27-32 TODD & BYERS "Volatile Silicone fluids for cosmetics".
Ces silicones sont plus particulièrement choisies parmi les polyalkylsiloxanes parmi lesquels on peut citer principalement les polydiméthylsiloxanes à groupements terminaux triméthylsilyle ayant une viscosité de 5.10-6 à 2,5 m2/s à 25 C et de préférence 1.10-5 à 1 m2/s. La viscosité des silicones est par exemple mesurée à 25 C selon la norme ASTM 445 Appendice C.
Parmi ces polyalkylsiloxanes, on peut citer à titre non limitatif les produits commerciaux suivants : - les huiles SILBIONE des séries 47 et 70 047 ou les huiles MIRASIL commercialisées par RHONE POULENC telles que par exemple l'huile 70 047 V 500 000 ; - les huiles de la série MIRASIL commercialisées par la société RHONE POULENC ; - les huiles de la série 200 de la société DOW CORNING telles que plus particulièrement la DC200 de viscosité 60 000 Cst ; - les huiles VISCASIL de GENERAL ELECTRIC et certaines huiles des séries SF (SF 96, SF 18) de GENERAL ELECTRIC.
On peut également citer les polydiméthylsiloxanes à groupements terminaux diméthylsilanol (Dimethiconol selon la dénomination CTFA) tels que les huiles de la série 48 de la société RHONE POULENC .
Dans cette classe de polyalkylsiloxanes, on peut également citer les produits commercialisés sous les dénominations "ABIL WAX 9800 et 9801" par la société GOLDSCHMIDT qui sont des polyalkyl (C1-C20) siloxanes.
Les polyalkylarylsiloxanes sont particulièrement choisis parmi les polydiméthyl méthylphénylsiloxanes, les polydiméthyl diphénylsiloxanes linéaires et/ou ramifiés de viscosité de 1.10-5 à 5.10-2m2/s à 25 C.
Parmi ces polyalkylarylsiloxanes on peut citer à titre d'exemple les produits commercialisés sous les dénominations suivantes : . les huiles SILBIONE de la série 70 641 de RHONE POULENC ; . les huiles des séries RHODORSIL 70 633 et 763 de RHONE POULENC ; . l'huile DOW CORNING 556 COSMETIC GRAD FLUID de DOW CORNING ; . les silicones de la série PK de BAYER comme le produit PK20 ; . les silicones des séries PN, PH de BAYER comme les produits PN1000 et PH1000 ; . certaines huiles des séries SF de GENERAL ELECTRIC telles que SF 1023, SF 1154, SF 1250, SF 1265.
On peut plus particulièrement citer les produits suivants : - polydiméthylsiloxane - les gommes polydiméthylsiloxanes/méthylvinylsiloxane, - polydiméthylsiloxane/diphénylsiloxane, - polydiméthylsiloxane/phénylméthylsiloxane, - polydiméthylsiloxane/diphénylsiloxane/méthylvinylsiloxane.
Des produits plus particulièrement utilisables conformément à l'invention sont des mélanges tels que : . les mélanges formés à partir d'un polydiméthylsiloxane hydroxylé en bout de chaîne (dénommé diméthiconol selon la nomenclature du dictionnaire CTFA) et d'un polydiméthylsiloxane cyclique (dénommé cyclométhicone selon la nomenclature du dictionnaire CTFA) tel que le produit Q2 1401 commercialisé par la société DOW CORNING ; . les mélanges formés à partir d'une gomme polydiméthylsiloxane avec une silicone cyclique tel que le produit SF 1214 Silicone Fluid de la société GENERAL ELECTRIC, ce produit est une gomme SF 30 correspondant à une diméthicone, ayant un poids moléculaire moyen en nombre de 500 000 solubilisée dans l'huile SF 1202 Silicone Fluid correspondant au décaméthylcyclopentasiloxane ; . les mélanges de deux PDMS de viscosités différentes, et plus particulièrement d'une gomme PDMS et d'une huile PDMS, tels que le produit SF 1236 de la société GENERAL ELECTRIC. Le produit SF 1236 est le mélange d'une gomme SE 30 définie ci-dessus ayant une viscosité de 20 m2/s et d'une huile SF 96 d'une viscosité de 5.10-6m2/s. Ce produit comporte de préférence 15 % de gomme SE 30 et 85 % d'une huile SF 96.
Les résines d'organopolysiloxanes utilisables conformément à l'invention sont des systèmes siloxaniques réticulés renfermant les unités : R2SiO2/2, R3SiO1/2, RSiO3/2 et SiO4/2 dans lesquelles R représente un groupement hydrocarboné possédant 1 à 16 atomes de carbone ou un groupement phényle. Parmi ces produits, ceux particulièrement préférés sont ceux dans lesquels R désigne un radical alkyle inférieur en C1-C4, plus particulièrement méthyle, ou un radical phényle.
On peut également citer les résines du type triméthylsiloxysilicate commercialisées notamment sous les dénominations X22-4914, X21-5034 et X21-5037 par la société SHIN-ETSU.
Parmi les silicones organomodifiées, on peut citer les polyorganosiloxanes comportant : - des groupements polyéthylèneoxy et/ou polypropylèneoxy comportant éventuellement des groupements alkyle en C6-C24 tels que les produits dénommés diméthicone copolyol commercialisé par la société DOW CORNING sous la dénomination DC 1248 ou les huiles SILWET L 722, L 7500, L 77, L 711 de la société UNION CARBIDE et l'alkyl (C12) méthicone copolyol commercialisée par la société DOW CORNING sous la dénomination Q2 5200 ; - des groupements aminés substitués ou non comme les produits commercialisés sous la dénomination GP 4 Silicone Fluid et GP 7100 par la société GENESEE ou les produits commercialisés sous les dénominations Q2 8220 et DOW CORNING 929 ou 939 par la société DOW CORNING. Les groupements aminés substitués sont en particulier des groupements aminoalkyle en C1-C4 ; - des groupements thiols comme les produits commercialisés sous les dénominations "GP 72 A" et "GP 71"de GENESEE ; - des groupements alcoxylés comme le produit commercialisé sous la dénomination "SILICONE COPOLYMER F-755" par SWS SILICONES et ABIL WAX 2428,2434 et 2440 par la société GOLDSCHMIDT ; - des groupements hydroxylés comme les polyorganosiloxanes à fonction hydroxyalkyle décrits dans la demande de brevet français FR-A-85 16334 répondant à la formule (IX) :
numériques comportant au moins un type short, entier codé sur p bits, p pouvant prendre la valeur p = 16, et un type d'adresse de retour d'une instruction de saut JSR, ce type d'adresse étant noté retaddr, un type null relatif à des références d'objets nuls, un type object relatif aux objets proprement dits, un type spécifique # représentant l'intersection de tous les types et correspondant à la valeur zéro nul, un autre type spécifique T représentant l'union de tous les types et correspondant à tout type de valeurs.
En référence à la figure 3b, on indique que l'ensemble des types de variables précités vérifient une relation de sous-typage : object # T ; short,retaddr # T ; # # null,short,retaddr Un exemple plus spécifique d'un processus de vérification tel qu'illustré en figure 3a sera maintenant donné en liaison avec un premier exemple de structure de données illustré au tableau Tl joint en annexe.
L'exemple précité concerne une appliquette écrite en code Java.
Le processus de vérification accède au code du sous-programme constitutif de l'appliquette soumis à vérification par l'intermédiaire d'un pointeur sur l'instruction Ii en cours de vérification.
Le processus de vérification enregistre la taille et le type de la pile d'exécution au niveau de l'instruction courante Ii correspondant à saload sur l'exemple du tableau Tl précité.
Le processus de vérification enregistre alors la taille et le type de la pile d'exécution au niveau de l'instruction courante dans la pile des types par l'intermédiaire de son pointeur de pile des types.
Ainsi que mentionné précédemment dans la description, cette pile de types reflète l'état de la pile d'exécution de la machine virtuelle au niveau de l'instruction courante Ii. Dans l'exemple représenté au tableau Tl, lors de l'exécution future de l'instruction Ii, la pile contiendra trois entrées : une référence vers un objet de la classe C, une référence vers un tableau d'entiers codés sur p = 16 bits, le type short [], et un entier de p = 16 bits de type short. Ceci est également représenté dans la pile des types qui contient également trois entrées : C, le type des objets de la classe C, short[], le type des tableaux d'entiers p = 16 bits et short, le type des entiers p = 16 bits.
Une autre structure de données remarquable est constituée par un tableau de types de registres, ce tableau reflétant l'état des registres, c'est-à-dire des registres mémorisant les variables locales, de la machine virtuelle.
En continuant l'exemple indiqué au tableau Tl, on indique que l'entrée 0 du tableau de types de registres contient le type C, c'est-à-dire que lors de l'exécution future de l'instruction courante Il = saload, le registre 0 est assuré de contenir une référence vers un objet de la classe C.
Les différents types manipulés au cours de la vérification et stockés dans le tableau de types de
registres et dans la pile de types sont représentés en figure 3b. Ces types comprennent : - des identificateurs de classe CB correspondant aux classes d'objets spécifiques définis dans l'appliquette ; - des types de base, tels que short entier codé sur p = 16 bits, intl et int2, p bits les plus et les moins significatifs respectivement d'entiers codés sur 2p bits par exemple, ou retaddr adresse de retour d'une instruction, ainsi que mentionné précédemment ; - le type null représentant les références d'objets nuls.
En ce qui concerne la relation de sous-typage, on indique qu'un type Tl est sous-type d'un type T2 si toute valeur valide du type Tl est également une valeur valide du type T2. Le sous-typage entre identificateur de classes reflète la hiérarchie d'héritage entre classes de l'appliquette. Sur les autres types, le sous-typage est défini par le treillis représenté en figure 3b, # étant sous-type de tous les types et tous les types étant soustypes de T.
Le déroulement du processus de vérification d'un sous-programme constitutif d'une appliquette est le suivant, en référence au tableau Tl précédemment mentionné.
Le processus de vérification s'effectue indépendamment sur chaque sous-programme de l'appliquette.
Pour chaque sous-programme, le processus effectue une ou plusieurs passes de vérification sur les instructions du sous-programme considéré. Le pseudo-code du processus de vérification est donné au tableau T2 joint en annexe.
Le processus de vérification d'un sous-programme débute par l'initialisation de la pile des types et du tableau des types de registres représentés au tableau Tl, cette initialisation reflétant l'état de la machine virtuelle au début de l'exécution du sous-programme examiné.
Ces résultats montrent que les plasmides binaires synthétiques se répliquent dans Escherichia coli., et que le rendement de pMRT1119 est augmenté des facteurs 3 et 2,5 respectivement par rapport aux témoins pBinl9 et pBIOC4.
Par ailleurs, ces plasmides synthétiques se répliquent dans Agrobacterium tumefaciens souche LBA4404.
12. Evaluation des plasmides synthétiques par transgénèse 12. 1. Transformation du tabac 12. 1.1. Transformation stable du tabac La transformation du tabac (Nicotiana tabacum L. var.
PBD6) a été réalisée en infectant des disques foliaires isolés à partir de plantules de tabac in vitro âgées de 6 semaines par des agrobactéries recombinantes selon la méthode décrite par
Horsch et al. (1985).
Toutes les cultures in vitro sont réalisées dans une enceinte climatisée dont l'intensité lumineuse est de 200 uE.m-2.s-l, la photopériode de 16 heures lumière/ 8 heures obscurité et, la température de 25 C.
Hormis pour l'étape initiale de coculture, les étapes de régénération, de développement et d'enracinement ont été réalisées sur divers milieux sélectifs supplémentés en bactériostatique, à savoir l'augmentin à 400 mg/1 et en agent sélectif, à savoir la kanamycine à 200 ou 100 mg/1.
Les différentes étapes et les milieux utilisés sont les suivants : Après une préculture des agrobactéries dans 5 ml de milieu 2YT (bacto-tryptone 10 g/1, extrait de levure 5 g/1, NaCl 5 g/1, pH 7,2) supplémenté en CaCl2 6 mM final et en antibiotiques adéquats à 28 C pendant 48 heures, une culture dans 10 ml de milieu 2YT supplémenté en CaCl2 et antibiotiques est réalisée à 28 C pendant une nuit. La culture est ensuite centrifugée à 3000 g pendant 10 min. et les bactéries sont resuspendues dans 10 ml de MS30 liquide (M0404 à 4,4 g/1 commercialisé par SIGMA supplémenté en saccharose 30 g/1, pH 5,7).
La coculture est réalisée en plaçant les explants foliaires découpés à partir des feuilles des plantules in vitro d'environ 1 cm2 au contact de la suspension d'agrobactéries diluée au 1/10 dans MS30 liquide pendant 20 min. Puis, les explants ainsi traités sont séchés rapidement sur papier filtre et placés sur un milieu de coculture (MC) solide (MS30, Benzyl Amino Purine (BAP) à 1 mg/1, Acide Indole-3 Acétique (ANA) à 0,1 mg/1, agar-agar à 8 g/1) pendant 48 heures dans l'enceinte climatisée.
Les explants traités sont ensuite placés sur un milieu de régénération solide (MC solide, augmentin à 400 mg/1, kanamycine à 200 mg/1). Un repiquage des explants sur le même milieu est effectué après 2 semaines.
Après 2 semaines, les bourgeons sont repiqués sur un milieu de développement solide (M0404 à 4,4 g/1 commercialisé
par sigma supplémenté en saccharose 20 g/1, pH 5,7 (MS20 liquide), augmentin à 400 mg/1, kanamycine à 100 mg/1, agar-agar à 8 g/1).
Après 2 semaines, les plantules transformées sont repiquées sur milieu d'enracinement solide identique au milieu de développement. L'enracinement dure 2 à 3 semaines, au terme duquel les plantules sont sorties au phytotron en pots Giffy pendant 10 jours (photopériode 16 heures lumière/ 8 heures obscurité, 23 C et 70% d'hygrométrie), puis, passées en serre.
12. 1.2. Evaluation des plasmides synthétiques utilisés en transformation du tabac Les agrobactéries recombinantes (Agrobacterium tumefaciens souche LBA4404) renfermant le plasmide binaire synthétique pMRT1118 ou le plasmide binaire témoin pBinl9, ont été utilisées pour transformer le tabac Nicotiana tabacum L. var. PBD6.
Les résultats ont montré que le nombre et la croissance des plantules, qui se développent en présence de l'agent sélectif (kanamycine), sont similaires pour les deux plasmides binaires testés. Ces observations indiquent que le plasmide binaire synthétique est parfaitement fonctionnel en transgénèse du tabac.
12. 2. Transformation du maïs 12. 2.1. Transformation génétique de cals de maïs La transformation génétique du maïs, quelle que soit la méthode employée (électroporation, Agrobacterium, microfibres, canon à particules), requiert généralement l'utilisation de cellules indifférenciées en divisions rapides ayant conservé une aptitude à la régénération de plantes entières. Ce type de cellules compose le cal friable embryogène (dit de type II) de maïs.
La ligation par réaction PCR a été réalisée comme décrite précédemment en 7, avec 48 ng de plasmide pMRT1195 digéré déphosphorylé et 56 ng de fragments ADN insert digérés et traités. Les bactéries, Escherichia coli DH5a rendues préalablement compétentes, ont été transformées. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur milieu LB supplémenté en kanamycine (50 mg/1), a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline et vérifié par digestions enzymatiques et séquençage. Le plasmide résultant a été appelé pMRT1202. Il est représenté en figure 16 et sa séquence complète SEQ.ID16 est donnée dans le listage de séquences.