INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Une RT-PCR ( reverse-transcriptase-polymerase chain reaction ") a été effectuée à partir de l'ARN total extrait de virions, provenant de surnageants de cellules lymphocytaires B des patients atteints de sclérose en plaques, concentrés par ultracentrifugations. La synthèse de cDNA a été realisée avec une amorce spécifique SEQ NO XXX et la transcriptase inverse u ExpandT RT n de BOEHRINGER MANNHEIM selon les conditions preconisées par la société.
Amorce utilisée pour la synthèse du cDNA, identifiée par SEQ ID NO: 138: 5' CTT GGA GGG TGC ATA ACC AGG GAA T 3' Une amplification par PCR a été réalisée avec la Taq polymérase (Perkin Elmer, France) sous les conditions suivantes: 940C 1 min, 550C 1 min, 720C 2 min pendant 35 cycles et 720C pendant 7 min et avec un volume réactionnel final de 100 41.
Amorces utilisées pour l'amplification par PCR: - amorce 5', identifiée par SEQ ID NO: 139 5' TGT CCG CTG TGC TCC TGA TC 3' - amorce 3', identifiée par SEQ ID NO: 138 5' CTT GGA GGG TGC ATA ACC AGG GAA T 3' Une deuxième amplification par PCR dite seminichée " a été réalisée avec une amorce 3' située à l'intérieur de la région déjà amplifiée. Cette deuxième amplification a été effectuée sous les mêmes contitions expérimentales que celles utilisées lors de la première amplification, en utilisant 10 41 du produit d'amplification issu de la première PCR.
Amorces utilisées por l'amplification par PCR " seminichée - amorce 5', identifiée par SEQ ID NO: 139 5' TGT CCG CTG TGC TCC TGA TC 3' - amorce 3', identifiée par SEQ ID NO: 140 5' CTA TGT CCT TTT GGA CTG TTT GGG T 3' Les amorces SEQ ID NO: 138 et SEQ ID NO: 140 sont spécifiques de la région gag, clone 2 position nucléotidique nO 373-397 et nO 433-456. Les amorces utilisées dans la région 5' ont été définies sur des séquences des clones obtenus lors d'essais préalables.
Un produit d'amplification de 764 pb a été obtenu et cloné de la façon suivante: L'ADN amplifié a été inséré dans un plasmide à l'aide du kit TA CloningTM. Les 2 41 tampon de ligation 10 fois concentré "10X LIGATION BUFFER", 2 41 de "pCRTM VECTOR" (25 ng/ml) et 1 41 de "T4 DNA LIGASE". Ce mélange a été incubé une nuit à 140C. Les étapes suivantes ont été réalisées conformément au instructions du kit TA Clonings (Invitrogen). Le mélange a été étalé après transformation de la ligation dans des bactéries E. coli INVaF'. A la fin de la procédure, les colonies blanches de bactéries recombinantes ont été repiquées pour être cultivées et permettre l'extraction des plasmides incorporés selon la procédure dite de "minipréparation d'ADN" (17). La préparation de plasmide de chaque colonie recombinante a été coupée par l'enzyme de restriction Eco RI et analysée sur gel d'agarose. Les plasmides possédant un insert détecté sous lumière W après marquage du gel au bromure d'éthidium, ont été sélectionnés pour le séquençage de l'insert, après hybridation avec une amorce complémentaire du promoteur T7 présent sur le plasmide de clonage du TA cloning kits. La réaction préalable au séquençage a ensuite été effectuée selon la méthode préconisée pour l'utilisation du kit de séquençage 11PRISMTM Ready Reaction Amplitaqs FS, TM DyeDeoxy Terminator" (Applied Biosystems, ref. 402119) et le séquençage automatique a été réalisé sur les appareils 373 A et 377 Applied Biosystems, selon les instructions du fabricant.
Société "Efrat", 1994, page 184 ). Le nombre d'employés de cette société atteint 10 000 d'hommes dont la plupart est chargée de vérifier les coupons. De plus, quelques milles d'employés de la poste qui sont chargés de desservir le tirage de la loterie ont la possibilité de mettre un coupon avec les résultats corrects dans une enveloppe après la publication-dW'un décompte d'un match de foot bail. Les mesures ordinaires de la sécurité sont : les vérifications soudaines des employés, quatre sceaux Cc- dés différents mis sur chacun des coupons reçus, le changemment des codes des sceaux dans les intervalles de temps choisis par hasard, la surveillance personnelle de toutes les expéditions postales et des receptions réalisée par une garde spécialement formée des anciens policiers lt inspection et le scellage des lettres et des portes dans chacun des départements nombreux de la compagnie où 1' on réalise la vérification immédiatement après la reception des résultats d'un match suivant de football, 1' interdiction de toutes les communications par télé- phone dans les locaux où sont vérifiés les coupons après le début d'un match et le contrôle obligatoire de cette opération de la part du service de sécurité, la vérification en secret des agents de la securité par un service secret indépendant de contré e de la compagnie ainsi que l'interdiction totale d'utiliser tous moyens de la radiocommunication et de la' télécommunication dans les édifices de la compagnie. De plus, tous les coupons sont stockés et gardés dans des sacs scellés enfermés dans des locaux soumis à une surveillance particulière. Chaque coupon reçu après les delais fixés est soumis à une vérification minucieuse et à un examen particulier indépendamment du cas où un possesr seur n'exige pas le paiement du lot. Les participants qui qnt réussi à gagner successivement deux fois et plus un lot sont soumis à une sureveillance particu- culière0 Tous les coupons originaux gagnants sônt soumis à une vérification particulièrement minucieuse.
Si un vainqueur de la loterie est un nouveau joueur qui participe la première fois a la loterie ou si un joueur a modifié son système traditionnel du jeu qu'il utilise sait précedemment ainsi que s'il a envoyé son coupon plus tard qu'habituellement on le soumet à une vérification particulièrement sévère. Tous les ccupons et les enveloppes dans lesquelles iTs ont été envoyés pendant l'année courante sont enrégistrés et stockés dans des dossiers appropriés. Les coupons des joueurs particulièrement heureux sont soumis à une analyse en détails pour détecter des écarts et des particularités suspectes. Ces mesures nombreuses de la sécurité qui eont entreprises pour vaincre les tentatives de la fraude est une particularité inséparable de toute loterie importante.
Selon les autres procédés et; les dispositifs connus on propose pour supprimer certains inconvénients susmentionnés d'utiliser une ligne de communication téléphonique pour transmettre , par celle-ci, par exemple, les marches supposées des échecs. Ainsi, selon l1inven- tion décrite dans une demande internationale PCT tWO) 93/05483, cl. 5 G 07 C 15/00 ( antériorité), pour supprimer les cartes dans une loterie, son participant pourra gagner un lot en chiffrant un numéro de téléphone indiqué dans une liste appropriée0 Aux postes terminaux > les participants de la loterie sont alors instruits par voix dans le but d'obtenir des données numériques, par exemple, un numéro de téléphone, l'âge, le numéro d'un ps2e d'assurance ou d'un permis de conduire. De plus, on enregistre le numéro d'ordre d'un joueur , la date et le temps de l'appel. Toutes ces données sont enregistrées dans un centre de stockage des données et sont utilisées poar le traitement ultérieur. Les données d'identification des joueurs sont confirmées par de différenteaprocédés à l'aide d'un prétraitement d'une information. Les joueurs peuvent autre repartis suivant certaines catégories en conformité avec des règles et d'un ordre successif. Selon certaines règles du jeu le vainqueur pourra & tre selectionné par détermination d'un numéro d'une succession Bccasionnelle des lots ou d'un numéro Gagnant, reçu d' un générateur de numéros aléatoires. Selon une autre variante , les données d'indentification sont obtenues au dernier instant de temps pour déterminer un possesseur d'un grand prix, en utilisant , à cet effet, de différents de traitement des données à l'aide d'un calculateur approprié.
L'inconvenient de cette invention ainsi que d'autres inventions analogues réside en un nombre limité de participants à une ou à une autre mesure par suite d'une faible capacité de transmission d'un canal de communication téléphonique0 En outre, un participant d'une mesure sportive éprouve de grands inconvients du fait qutil ne peut pas transmettre slm..,tanément les données supposées par le réseau téléphonique ( par exemple, les marches des' échecs ) et il ne réussit pas à suveiller attentivement le déroulement d'une compétition en se trouvant sur la place de sa réalisation.
Description de l'invention Le but de la présente invention est de créer un tel procédé d'organisation :de différentes mesures, liées à la réalisation des loteries ou des totalisateurs sportifs la réalisation pratique desquels ne necessite pas.:, en premier lie, d'utiliser de différents billets spéciaux et, en deuxième lieu, d'utiliser les canaux de cômmunications utilisés auparavant en qualité des moyens de transmission des données au centre d'acquisition de données d'une information supposées.
Le but visé de la présente invention est atteint par un procédé qui consiste en ce que chaque participant ou plusieurs participants utilisent au moins une mémoire interne et un'dispositif d'introduction et d'extraction d'information, en ce qu'ils mémorise dans la mémoire interne les données du temps, provenant d'un.
compte-temps au moment où un participant fournit une informat ion supposée, qui est aussi mémorisée dans la mémoire interne par action d'un participant sur le dispositif d'introduction d'information et en ce que lors de ladite comparaison avec 11 information vraie ils utilisent seulement une telle partie de l'information supposée extraite depuis la mémoire qui a été introduite dans sa mémoire interne avant l'instant de 1' apparition d'une information vraie.
De plus, en utilisant ce procédé il est possible de déterminer l'instant de l'enrégistrement d'une information dans la mémoire interne de l'ensemble de mémoire en calculant une somme algébrique entre le temps courant de la lecture de l'information de la mémoire interne, les données avec le signe moins de la valeur du temps du compte-temps, qu'il a à l'instant de la lecture de cette information et les données du compte-temps, qui ont étd enregistrées dans la mémoire interne à l'instant de 1' écriture de l'information. En utilisant le système pour la réalisation dtuna loterie, d'un totalisateur sportif ainsi que d'autres mesures pendant lesquelles les participants à ces mesures doivent deviner une information vraie qui contient une source d'information vraie et, au moins un centre d'acquisition des données, comprenant des moyens de prétraitement de l'information, reliés à un compteur, destiné à traiter les résultats de l'information supposées par les participants, système, qui est caractérisé en ce que les participants possèdent un ensemble de mémoire , qui comporte , chacun, un'e.mé- moire interne ainSi qu'un compte-temps (25) relié a celle-ci, branchés sur un organe de commande et sur un ou plusieurs dispositifs d'introduction et d'extraction d'information (27), (29), en ce qui le centre d'acquisition des données comprend un moyen d'extraction de la mémoire interne des ensembles de mémoire.
En outre, le système peut & tre encore muni d'un ou de plusieurs capteurs d'information vraie et d'un mésureur de temps, branchés sur un ensemble centrale de mémoire relié au moyen de prétraitement d'information.
L'avantage du procédé exposé de réalisation d'une loterie et du système pour sa mise en oeuvre réside en ce qu'on a supprimé la nécessité d'utiliser des cartes, des coupons ainsi que d'autres moyens similaires dans une ou dans une autre mesure des jeux. l'autre avantage de la présente invention réside en ce que les participants aux mesures des jeux ne dépendent plus absolument des moyens de communication qu'on utilisait auparavant pour transmettre une information supposée au centre d? acquisition des donnée s0 Brève description des dessins L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description explicative qui va suivre de différents modes de réalisation donnés uniquement à titre d'exemples non limitatifs avec références aux dessins dans lesquels - la figure 1 représente un schéma général d'un système pour la réalisation des loteries et des totalisateurs; - la figure 2 représente un schéma fonctionnel d'un ensemble de mémoire portatif; - la figure 3 représente l'une des variantes de 1' aspect extérieur de l'ensemble de mémoire; - la figure 4 représente un bloc-diagramme de l'algo- rithme de la réalisation d'une loterie ou d'un totalisateur sportif.
Meilleurs modes de réalisation de l'invention Une terminologie concrétisée utilisée dans un domaine limité a été utilisée pour décrire le mode de.
réalisation du procédé revendiqué de la réalisation des loteries représenté sur les dessins. Toutefoia, l'interne tion n'est pas limitée par les termes utilisés et il est à prendre en considération que chaque terme embrasse tous les éléments équivalents qui fonctionnent de la manière analogue et sont utilisés pour résoudre les mêmes problèmes qui concrent l'organisation d'un totalisateur , en particulier, un totalisateur sportif ainsi que d'autres mesures nécessitant de déviner les évenements. I1 est à noter aussi:.que par notion n utilisateur" 3'on aous entend un participant ou un groupe de participants possèdent un dispositif de mémoire individuel pendant le processus de jeu de loterie Sur la figure 1, on a désigné par la référence 1 une source d'information Vraie qui constitue un ensemble d* actions ou de mesures, un résultat d'une mesure i ou d' une action i étant déterminé à un instant de temps T(i).
Les instants du début et de la fin d'une mesure ou d'une action i soront désignés respectivement Tl(i) et T2(i).
Le comparateur 7 fait partie des terminaux 11, dont chacun sert d'un poste d!abonnd.( utilisateur ) destiné à traiter et à fournir les résultats de la comparaison des informations provenant dans celui-ci depuis le dispositif de mémoire portatif 4 et du centre d'acquisition des données 9. Chaque terminal 11 comprend un comparateur 7 en qualité duquel peut titre utilisé un microordinateur et les dispositifs d'extraction 12 en qualité duquel peuvent titre utilisés des printers, des bancomats, des adapteurs de la ligne de communication etc. Le centre d'acquisition des données 9 comprend un mesureur de précision de temps 13 dont la sortie peut être reliée à un formateur de signal de l'heure précise et au dispositif central de mémoire 14 à l'entrée duquel parvient un signal depuis l'un ou de plusieurs capteurs d'information vraie 15e La sortie du formateur de signal de 1' heure précise ( non représenté sur le dessin ) peut être rélié à un sélecteur de code ( non représenté sur le dessin ) ( par exemple, avec un sélecteur de code numérique) et avec un convertisseur de code en signal fourni à 1' entrée des canaux de communication 2.A l'aide d'un moyen de prétraitement 16 d'une information les données nécessaires stockées dans le dispositif central de mémoire 14 peuvent être envoyées à l'entrée d'un calculateur 17 rn qublité duquel il est possible d'utiliser un ordinateur. Il convient de noter qu'il est possible de monter l'un des terminaux 11 à l'intérieur du centre d'acquisition des données 9. Tous les éléments qui font partie dudit systèmes décrit ci-dessus sont bien connus ou standardisés. Ainsi, il est possible d utiliser en qualité des capteurs d'information vraie 15 une caméra de télévision de prise de vue , en qualité du dispositif central de mémoire 14 un vidéomagnétoscope, en qualité du dispositif de prétraitement d'information 16 , un homme-opérateurv La réalisation standardisée d'autres éléments est exposée dans le texte qui va suivre. De plus, comme l'on a déjà mentionné , le capteur d'information vraie 15 peut titre une partie constitutive d'un ou de plusieurs canaux de communication 2.
La figure 2 représente uncircuit fonctionnel du dispositif de mémoire portatif. Le circuit fonctionnel du dispositif de mémoire portatif 4 est réalisé à la base d'un circuit fonctionnel type d'un microordinateur.
La Figure 7 présente la charge bactérienne mesurée au niveau de la muqueuse stomacale, après que les souris soumises aux protocoles d'immunisation décrits dans l'Exemple 3, aient été sacrifiées. Les groupes sont tels que décrits pour la Figure 4.
Exemple 1: Etudes d'immunisation chez la souris 1A - Matériel et méthodes Souris Des souris femelles Swiss de 6/8 semaines ont été fournies par Janvier (France).
Protocole d'administration Lors de chaque expérience, les souris ont reçues 3 doses du même produit ; chaque dose à 28 jours d'intervalle (les jours 0, 28 et 56). L'administration du produit a été effectuée par voie nasale (jusqu'à 50 Ill sur les souris éveillées), par voie orale (300 p I en 0,2 M NaHCO3 par gavage gastrique), ou par voie sous-cutanée (300 p1 sous la peau du cou ou sous la peau du côté gauche de la région lombaire). Dans certains cas, une inoculation intramusculaire a été effectuée (50 cul1) dans les muscles dorsolombaires des souris anesthésiées. 10 pg d'uréase ont été administrés par voie nasale, sous cutanée ou intramusculaire, et 40 llg par voie orale. En ce qui concerne la préparation bactérienne inactivée, 400 pg de cellules ont été administrés par voie sous cutanée ou par voie orale.
Des liposomes DC-chol contenant de l'uréase sont préparés comme suit : Tout d'abord, afin d'obtenir un film lipidique sec contenant 100 mg de DC-chol (R-Gene Therapeutics) et 100 mg de DOPC (dioleylphosphatidylcholine) (Avanti Polar Lipids), on mélange ces produits sous forme de poudre dans environ 5 ml de chloroforme. On laisse la solution s'évaporer sous vide à l'aide d'un évaporateur rotatif. Le film ainsi obtenu sur les parois du récipient est séché sous vide poussé pendant au moins 4 hrs. En parallèle, 20 mg d'un lyophilisat d'uréase et 100 mg de sucrose sont dilués dans 13.33 ml de tampon Hepes 20 mM pH 7.2. Dix ml de cette préparation (qui contient 1.5 mg d'uréase et 0.75 % de sucrose) est filtrée sur filtre Millex 0.220 pm, puis utilisée pour réhydrater le film lipidique. La suspension est mise sous agitation pendant 4 hrs puis soit extrudée (10 passages sur membrane de polycarbonate 0.2 llm) ou microfluidisée (10 passages sous une pression de 500 kPa dans un microfluidiseur Y10 de Microfluidics Co). Dans la suspension de liposomes ainsi obtenue le taux d'uréase encapsulée est de 10 à 60 %. Cette suspension est lyophilisée après avoir ajusté la concentration en sucrose à 5 % (on ajoute 425 mg de sucrose pour 10 ml). Avant utilisation, le lyophilisat est repris par un volume d'eau ou de tampon approprié et la suspension est purifiée sur un gradient discontinu de sucrose (paliers de 0, 30 et 60 %) de manière à obtenir une préparation dans laquelle la quantité d'uréase encapsulée est supérieure à 70 % environ par rapport à la quantité totale d'uréase.
La toxine cholérique est utilisée comme adjuvant mucosal à raison de 10 pg / dose d'uréase ou de préparation bactérienne.
Le QS-21 (Cambridge Biosciences) est utilisé comme adjuvant à raison de 15 pg / dose d'uréase.
Le polyphosphazène (PCPP) (Virus Research Institute) est utilisé comme adjuvant à raison de 100 Hg / dose duréase.
Epreuve Deux semaines après le deuxième rappel, les souris ont été soumises à un gavage gastrique avec 300 pI d'une suspension d'une souche d'H. pylori adaptée à la souris, la souche ORV2002 (1 x 107 bactéries vivantes dans 200 Cil de PBS ; DO550 de 0.5 environ). Un groupe n'ayant reçu aucune dos d'antigène et servant de contrôle est éprouvé de même.
Analyse de l'épreuve Quatre semaines après l'épreuve, les souris ont été sacrifiées par rupture des vertèbres cervicales. Les estomacs ont été prélevés pour évaluer l'activité uréase et faire des analyses histologiques. L'activité uréase a été évaluée après 4 et 24 heures (DO à 550 nm) avec le Jatrox test, Procter & Gamble) et après 24 heures le nombre de souris encore négatives (DO inférieure à 0,1) a été relevé.
Mesure de réponse anticorps locale par ELISPOT (glandes salivaires et estomac).
Les ELISPOT ont été exécutés conformément à Mega et al, J. Immunol. (1992)148 2030. Les plaques ont été enduites d'un extrait de protéines d'H. pylori à une concentration de 50 ,ug/ml.
Pour tester la réponse anticorps au niveau de l'estomac nous avons modifié la méthode comme suit: La moitié de l'estomac a été coupée en morceau de 1 mu2 avec un appareil automatique pour couper les tissus humains (Mc Illwain Laboratories, Gilford, UK) et la digestion effectuée avec de la Dispase (2 mg/ml, Boeringher Mannheim) dans 2 ml d'une solution de Joklil modifiée à laquelle ont été ajoutés 10% de sérum de cheval (Gibco), de la glutamine et des antibiotiques. Quatre digestions d'une 1/2 heure ont été exécutées à 37 C avec brassage doux. Les cellules ainsi digérées ont été filtrées après chaque étape à l'aide de filtres 70 pm (Falcon), puis lavées 3 fois dans une solution de RPMI 1640 (Gibco) complémentée à 5 % de de sérum de veau foetal (FCS), et incubées dans la même solution pendant au moins 4 heures dans des plaques recouvertes de nitrocellulose (Millipore) (100 pl/puits, 4 puits). Par moitié d'estomac, on obtient entre I et 3,1 OS cellules (les cellules de grande taille et les macrophages n'ont pas été comptées).
L'lgA biotinylée et le complexe streptavidine - péroxydase biotinylée provenaient d'Amersham. Les spots ont été révélés sous l'action du substrat AEC (Sigma) et dès que les plaques sont sèches, ils ont été comptés sous un microscope (grossissement 16 ou 40X). Les valeurs moyennes correspondant au nombre de taches (spots) d'aga dans quatre puits ont été calculées et exprimées comme le nombre de taches/106 cellules.
Analyse de la réponse par ELISA Les analyses par ELISA ont été exécutées conformément au protocole standard (les conjugués biotinylés et la streptavidine péroxydase provenaient de chez Amersham et le substrat OPD (O-phenyldiamine dihydrochloride) de chez Sigma). Les plaques étaient enduites d'extraits H. pylori (5pg/ml) dans du tampon carbonate. Un sérum de contrôle de souris dirigé contre l'extrait d'H. pylori a été introduit dans chaque expérience. Le titre correspond à l'inverse de la dilution donnant une DO de 1,5 à 490 nm.
Au cours de l'opération 823, le champ FCF2 5 de la trame courante en écriture dans FIFO~TRAME 522 est affecté au type EOP, avant de valider en écriture FIFO TRAME 522.
Le biostimulant selon l'invention peut être une préparation standardisée, telle que, par exemple, poudre, granules, comprimés, dragées, pilules, etc.
La préparation du biostimulant sous forme de comprimés est effectuée par exemple de la façon suivante. On ajoute dans la masse sèche homogène obtenue de biostimulant, une quantité déterminée, par exemple, de cellulose, on maintient l'ensemble jusqu'à la saturation en eau naturelle durant 12 à 24 heures en agitant périodiquement. Ensuite, on procède à la compression de cette masse sur le matériel standardisé à une température de 130 à 1500C, à une pression de 60 à 80 MPa durant 1 minute en y obtenant des comprimés de 0,5 à 5 g.
Les exemples ci-dessous servent à mieux expliciter la présente invention.
1. Un biostimulant n" 1 sous forme de granules a la composition suivante en pourcentage en poids: - zéolithe 50 % - son de froment 25 % - son de seigle 20 % eau 5% 2. Un biostimulant n0 2 sous forme de comprimés a la composition suivante: - montmorillonite 0,5 g - Laminaria japonica Aresh 0,45 g eau 0,05 g 1,0 g 3. Un biostimulant n0 3 sous forme de granules a la composition suivante: - zéolithe 30 % - montmorillonite 30 % - avoine 35 % eau 5% 4. Un biostimulant n" 4 sous forme de granules a la composition suivante: - zéolithe 15 % - montmorillonite 20 % - racine de Rubia tinctorum 60 % eau 5% 5. Un biostimulant n" 5 sous forme de granules a la composition suivante: - zéolithe 15 % - montmorillonite 20 % - Inonotus obliquus 60 % - eau 5% ESSAIS CLINIQUES EXEMPLE 1. Biostimulant n" 2 Le remède est utilisé sous forme de comprimés, 2 à 3 comprimés par jour; le poids d'un comprimé étant de 1 g.
Le remède proposé a été essayé sur 40 volontaires (20 femmes et 20 hommes âgés de 42 à 64 ans), la durée de traitement a été de 45 jours. On a obtenu les résultats suivants: 1. Diminution du taux de cholestérol de 9 à 13 % chez 80 % des patients.
Taux de cholestérol avant le traitement: 7,2 à 7,8 %; après traitement: 5,9 à 6,7 S,.