INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
(75>-l-[2-(1fert-ButoxycarbonyIamino)-3-phenyl-propyl]-3-phenyl-urea (Boc- F"CH2-Ph, (VI)c). Le carbamate (I) d (500 mg, 1. 28 mmol) est traité avec PhNH2 (119 mg, 1. 28 mmol) suivant la procédure générale. Une recristallisation dans CH2Cl2/hexane donne (VI) c (412 mg, 87%) qui est un solide blanc. fp. 154 C; [[alpha]]Dr t+ 10. 3 (c 1.03, MeOH); HPLC tR 15. 23 min (gradient linéaire, 20-80% B, 20 min); H- NMR (400 MHz, CD30D): 1 .35 (s, 9H), 2.70 (dd, J= 8.0, 13.7 Hz, 1H), 2.80 (dd, J = 7.8, 13.7 Hz, 1 H), 3 .16 (dd, J = 8.6, 13.6 Hz, 1 H), 3.33 (dd, J = 4.6, 17.1 Hz, 1 H), 3 .81- 3. 85 (m, 1H), 7.16-7.34 (m, 10H). 13C-NMR (400 MHz, CD30D): 1 5 8.8, 158.6, 141. 3, 140.1, 130.8, 130.2, 129.8, 127. 7, 123. 9, 120. 7, 80. 4, 54. 6, 44. 8, 40. 3, 29. 1, 28. 8.
MS (MALDI-TOF) m/z 408 [M + K]+, 392 [M + Na]+, 370 [M + 1]+. Analyse calculée pour C2lH27N303: C, 68.27; H, 7.37; N, 11.37. Trouvée : C, 68.19; H, 7.32; N, 11.47.
Boc-F"CH2-Pro-NH2, (VI)d. Le carbamate (I)d (1. 16g, 3 mmol) est traité avec HCl-H-Pro-NH2 (540 mg, 3.6 mmol) suivant la procédure générale. Une chromatographie (CHCl3/MeOH 10:1) donne (VI) d (1. 16g, 88%) qui est un solide blanc ; pf. 96-98 C; [[alpha]]Dr t - 20. 4 (c 1.02, MeOH); HPLC tR 10. 02 min (gradient linéaire, 20-80% B, 20 min); IH-NMR (200 MHz, CD30D): 1 . 36 (s, 9H), 1.88-2.17 (m, 4H), 2.59-2.83 (m, 2H), 2. 96 (dd, J = 9. 4, 13.6 Hz, 1H), 3.21-3.50 (m, 3H), 3.89- 3. 99 (m, 1H), 4.29 (dd, J= 3.2, 8.1 Hz, 1H), 7. 11-7.29 (m, 5H). 13 C-NMR (200 MHz,
CDCh): 24. 7, 28. 4, 28. 8, 39. 0, 45. 7, 46.3, 51. 6, 60. 1, 79.6, 126.6, 128. 6, 129. 2, 137. 4, 156. 6, 157. 8, 175. 4. MS (MALDI-TOF) m/z 429 [M + K]+, 413 [M + Na]+, 391 [M + 1 ]+. Analyse calculée pour C20H3ON404: C, 61.52; H, 7.74. Trouvée : C, 61.78 H, 7.77.
Boc-AUCH2-AUCH2-/-Pr, (VI)e. Le produit (VI)b (650 mg, 2.5 mmol) est dissout dans CF3COOH (0. 25M) at 0 . Après agitation à température ambiante pendant 30 min et concentration sous pression réduite, le sel de trifluoroacetate est séché sous vide sous KOH et utilisé sans autre purification.
Le carbamate (I) b est traité avec une solution du sel de trifluoroacetate suivant la procédure générale. Une recristallisation dans EtOH/hexane donne (VI) e (630 mg, 70%) qui est un solide blanc. fp. 184-185 C, [[alpha]]Dr t+ 9. 3 (c 0.88, MeOH); HPLC tR 8. 52 min (gradient linéaire, 20-80% B, 20 min); IH-NMR (200 MHz, CD30D): 1 .05-1.12 (m, 12H), 1. 42 (s, 9H), 2. 92-3.24 (m, 4H), .3.56-3.84 (m, 2H); C-NMR (100 MHz, CD30D): 160. 9, 160. 7, 158. 2, 80. 0, 48. 2, 47.8, 46.8, 46. 4, 42. 9, 28.5, 23. 6, 23. 5, 19.1, 18.6. Analyse calculée pour C16H33N5O4: C, 53.46 ; 9.25 ; 19.48. Trouvée : C, 53.62 ; 9.29; N, 19.43.
Boc-AuCH2-AuCH2-AuCH2-i-Pr, (VI) f. Le produit (VI)e (440 mg, 1. 22 mmol) est dissout dans CF3COOH (0. 25M) à 0 . Après agitation à température ambiante zt concentration sous pression réduite le sel de trifluoroacetate qui précipité par adjonction d'Et20 est collecté par filtration, séché sous vide sur KOH est utilisé sans purification ultérieure.
A une solution de ce sel dans le DMF sont ajouté successivement (I) b and de la base de Hunig (637 1, 3. 66 mmol). Le mélange réactionnel est agité pendant 20 min et du NaHC03 saturé est ajouté. Le précipité qui se forme est filtré, lavé avec NaHC03 sat. eau, et Et2O et séché sous vide sur P2O5 pour donner (VI)f (350 mg, 62%) qui est un solide blanc. fp. 210-211 C, [[alpha]]Dr t63.6 (c 1.00, MeOH); HPLC tR 8.53 min (gradient linéaire, 20-80% B, 20 min); H-NMR (200 MHz, CD30D): 1 .03-1.12 (m, 15H), 1.44 13 (s, 9H), 2. 55-2.85 (m, 3H), .3.21-3.39 (m, 3H), 3.61-3.95 (m, 4H); C-NMR (100 MHz, CD30D): 161. 2, 161. 1, 160. 9, 158. 7, 80. 3, 48. 2, 47. 6, 47. 5, 47. 2, 47. 1, 46. 8, 43. 0, 29. 0, 23.8, 23.7, 19.5, 19.0, 18.7. MS (MALDI-TOF) m/z 499 [M + K]+, 483
Le fonctionnement du dispositif D pour une irrigation du type vers l'intérieur est simple et le suivant.
Classiquement, le chariot 110 est amené en extrémité de la surface à arroser, le tuyau T s'étant dérouté au fur et à mesure de l'enrouleur 200. Le canon est orienté vers l'intérieur. Comme illustré sur le dessin de la figure 2, le dispositif est placé en position de départ avec l'obstacle O sur le parcours du jet d'eau afin que le jet soit brisé le plus efficacement possible en début de cycle d'arrosage. Le bras de levier 500, le pignon 350 et la roue d'entée 410 sur laquelle il s'engrène sont disposés l'un par rapport à l'autre de façon à ce que le pignon soit disposé en bas de ladite roue dentée 410.
L'eau est ensuite envoyée dans le tuyau T provoquant la rotation du tube-support de buse 120 en aller-retour sur le secteur angulaire défini pour sa course, à chaque passage du pignon 350 sur la roue dentée 410 dans le sens d'entraînement, c'est à dire une fois sur deux, ledit pignon 350 adopte un mouvement axial vers le haut assurant sa progression sur la tige filetée 351 mais aussi par rapport à la susdite roue dentée 410 (la rotation du pignon 350 étant définie par le nombre réglable de dents de ladite roue dentée 410 avec lesquelles il est en contact). La translation vers le haut du pignon 350 au fur et à mesure de sa rotation sur la tige filetée 351 provoque la remontée progressive de la fourchette de commande 511 dans un mouvement de rotation autour de t'axe de rotation du levier de commande 500 en entraînant donc la descente de t'extrémité 520 qui, au moyen de la biellette de réglage 600, transmet ce mouvement au support de l'obstacle brise jet qui pivote autour de son axe 310 éloignant ainsi progressivement l'obstacle O du jet d'eau.
Une telle cinématique a pour avantage de permettre le débrayage du moyen d'entraînement du support mobile comme illustré sur le dessin de la figure 3, sur lequel le pignon 350 dans son mouvement de translation vers le haut n'est plus en contact avec la roue dentée 410, l'obstacle est alors en dehors de la trajectoire du jet d'eau et le canon à eau arrose normalement. Dans le cas où une temporisation lors du départ du cycle d'arrosage est prévue, la temporisation se termine et le chariot amorce son retour lent vers l'enrouleur 200.
Dans le cas d'une irrigation en sens inverse ou vers I'avant, le fonctionnement est inversé, à savoir : -le pignon 350 dont la liaison hélicoïdale a été inversée (soit en inversant ledit pignon, soit au moyen du cliquet) est placé tout en haut de la position de la roue dentée de façon à ce que l'obstacle O soit en dehors de la trajectoire. Ladite roue dentée 410 est avantageusement débrayée à savoir qu'elle est maintenue par un moyen quelconque dans une position telle quelle ne puisse pas tre en contact avec le pignon 350 se déplaçant devant.
Selon un mode préféré mais non limitatif de réalisation, ce maintien en position débrayée du secteur angulaire de roue dentée 410 est assuré au moyen du susdit ressort associé à la liaison pivot réglable dudit secteur angulaire de roue dentée 410.
Arrivé aux abords de l'enrouleur 200, un dispositif adéquat libère le moyen maintenant en position débrayée ladite roue dentée qui vient alors en contact avec le pignon 350 qui cette fois ci descend le long de la tige filetée 351 et de la roue dentée de façon à ce qu'il fasse descendre la fourchette de commande 511 qui amène une rotation vers le haut de l'extrémité 520 qui fait remonter ainsi progressivement l'obstacle O vers le jet d'eau. Le pignon se débraye ensuite de la roue dentée en descendant au delà de l'épaisseur de la roue dentée. L'obstacle reste maintenu dans cette position jusqu'à l'arrt du cycle d'arrosage.
On comprend que le dispositif permettant de mettre en oeuvre le procédé d'arrosage de l'invention qui vient d'tre ci-dessus décrit et représenté, I'a été en vue d'une divulgation plutôt que d'une limitation. Bien entendu, divers aménagements, modifications et améliorations pourront tre apportés à 1'exemple ci-dessus, sans pour autant sortir du cadre de l'invention pris dans ses aspects et dans son esprit les plus larges.
Ainsi, par exemple, le contrepoids 330 pourra tre supprimé en réalisant une surépaisseur des barres 320 constituant le support mobile 300 ou par un tout autre dispositif permettant d'équilibrer le dispositif D.
D'autre part, le poids du dispositif D pourra tre diminué par l'utilisation de matériaux légers.
Il est à noter que lorsque des temporisations de départ pour une irrigation vers l'intérieur ou de fin pour une irrigation vers l'avant sont prévues, la durée de cycle du fonctionnement du dispositif de l'invention s'inscrit pendant ces temporisations.
BOUCLE DU TYPE A INSERTION POUR COURROIE, COMPRENANT UN ELEMENT FEMELLE ET UN ELEMENT MALE La présente invention concerne une boucle du type à insertion comprenant des éléments femelle et mâle, c'est-à-dire, un corps principal de boucle et un corps d'insertion, et en particulier une boucle destinée à fixer une courroie qui est utilisée de manière générale pour un vtement, un sac, un casque, une poussette, un équipement de sport ou équivalent.
De façon classique, ce type de boucle constituée d'un corps principal de boucle et d'un corps d'insertion a une structure comme celle représentée sur la figure 11, le corps principal de boucle de forme plate comprenant une plaque supérieure, une plaque inférieure et des parois latérales, est muni d'une ouverture d'insertion à une extrémité, d'une partie de montage de courroie sur l'autre extrémité et de parties ouvertes dans les deux parois latérales, et est muni de deux nervures de guidage sur les surfaces intérieures de la plaque supérieure et de la plaque inférieure, et le corps d'insertion est muni d'une partie de montage de courroie dépassant d'une de ses extrémités, de tiges de manoeuvre dépassant des deux côtés de son autre extrémité et d'une tige de guidage dépassant de son milieu. Dans la boucle ayant la structure mentionnée cidessus, une partie de manoeuvre élargie pouvant s'adapter à la partie ouverte est prévue à une extrémité avant de chacune des tiges de manoeuvre de manière à former une partie d'engagement, une mince pièce élastique s'étend d'une partie de base de la partie de montage de courroie à la partie de manoeuvre de manière à procurer une flexibilité, une nervure est placée sur un côté intérieur de la partie de manoeuvre de manière à servir de renforcement, et la tige de guidage est placée et insérée entre les nervures de guidage de la plaque supérieure et de la plaque inférieure. Ce type de boucle est décrit dans la publication de brevet japonais No. 7-250704.
La boucle du type à insertion représentée sur la figure 12 est constituée d'un corps principal de boucle comprenant une plaque supérieure et une plaque inférieure reliées entre elles par une pièce de guidage placée dans une direction verticale en leur milieu, une ouverture d'insertion et une partie de montage de courroie sont situées respectivement à l'une et l'autre extrémité, des parties ouvertes allant jusqu'A l'ouverture d'insertion sont formées dans les deux surfaces latérales, des rainures profondes sont formées dans les surfaces intérieures de la plaque supérieure et de la plaque inférieure le long de la pièce de guidage depuis l'ouverture d'insertion, et des parties en forme de crochet vers l'intérieur destinées à tre engagées sont prévues dans les deux côtés d'une manière symétrique verticalement, et d'un corps d'insertion comprenant une partie de montage de courroie à une de ses extrémités, des branches d'insertion flexibles des deux côtés d'une partie de base de la partie de montage de courroie à son autre extrémité, une paire de courtes saillies de grande hauteur au milieu de la partie de base de manière à former une fente entre elles, des parties de manoeuvre étant formées sur les surfaces latérales extérieures des branches d'insertion courbées. Les parties de manoeuvre sont formées de façon continue depuis la partie de base avec une épaisseur sensiblement égale et des parties d'engagement en forme de crochet vers l'extérieur sont prévues sur les côtés intérieurs des extrémités avant des branches d'insertion d'une manière symétrique verticalement. Dans cette structure, la branche d'insertion du corps d'insertion est insérée par l'ouverture d'insertion du corps principal de boucle de manière à engager la partie d'engagement avec la partie à engager. Ce type de boucle est décrit dans la publication de brevet japonais No. 7-289310.
Dans la boucle représentée sur la figure 11, au moment d'insérer le corps d'insertion dans le corps principal de boucle de manière à engager la partie d'engagement avec la partie à engager en vue d'une utilisation, quand une importante force de traction est appliquée entre le corps principal de boucle et le corps d'insertion, il y a un risque qu'une force de cisaillement soit appliquée entre la partie élastique et la partie de manoeuvre dans la tige de manoeuvre et une fissure peut se produire, et il y a également un risque de rupture de la mince partie élastique. En outre, le problème est qu'il est difficile de maintenir la partie élastique de la tige de manoeuvre contre les parois latérales du corps principal de boucle dans un état stable au moment de l'engagement.
Dans la boucle représentée sur la figure 12, comme le corps principal de boucle n'a pas de moyen pour guider de façon sûre la branche d'insertion au moment d'insérer le corps d'insertion dans le corps principal de boucle et comme la paire de saillies de la pièce de guidage ont une courte longueur, une opération d'insertion du corps d'insertion est très instable et pénible. En outre, comme la surface intérieure du corps principal de boucle et le corps d'insertion sont formés de manière symétrique à l'intérieur et à l'extérieur, il est possible d'insérer le corps d'insertion dans le corps principal de boucle en position inversée, si bien que le problème est que la courroie fixée au corps d'insertion risque d'tre tordue au lieu d'tre dans un état normal.
Le shéma 1 (en annexe) montre les principaux exemples de congénaires de l'harringtonine (R = CTX), lesquels présentent tous à des degrés divers une activité cytostatique significative. Aucun des esters de céphalotaxine analogues artificiels synthétisés jusqu'à présent dans la littérature ne présente au minimum la sous-structure 3b et sont dépourvus d'activité cytostatique significative.
II est remarquable de constater que bien qu'étant botaniquement très proches des Céphalotaxacées, les Taxacées renferment des alcaloïdes triterpèniques (taxines), accompagnés de triterpènes non alcaloïdiques, les taxanes également de structure unique dans la nature. Tout en ayant des structures chimiques et un mécanisme d'activité anticancéreuse complètement différents des taxanes, les harringtonines présentent avec ces demières substances une analogie à plus d'un titre: -elles possèdent des propriétés cytostatiques, -elles sont constituées d'un squelette polycyclique, précurseur biosynthétique inactif de la structure complète, sur lequel est greffée une chaîne latérale présentant une combinaison semblable des substituants hydrophiles et hydrophobes, -la partie polycyclique des taxanes (baccatines au sens large) et des harringtonines (céphalotaxines) est relativement abondante dans des parties renouvelables de la plante, tandis que les molécules actives (harringtonines et taxanes y sont dix à cent fois moins abondantes), -I'if à prunes (Cephalotaxus) est un arbre rare, encore plus rare que l'if à baies (Taxus).
Il résulte des éléments ci-dessus qu'à l'instar de l'hémisynthèse des taxanes par adjonction d'une chaîne synthétique sur une 10-désacétylbaccatine III d'origine extractive, I'hémisynthèse asymétrique des harringtonines par estérification d'une céphalotaxine d'origine naturelle présente un intérêt médical et économique important. De plus, la population actuelle de Cephalotaxus est relativement réduite même dans leur habitat d'origine. Ainsi lors de son importation en Europe à des fins ornementales au siècle dernier, Cephalotaxus harringtonia n'était déjà plus présent à l'état spontané en Chine orientale et au Japon septentrional. L'utilisation d'un précurseur présent dans une partie renouvelable de l'arbre (la feuille) en vue de préparer l'homoharringtonine par hémisynthèse revêt donc un intérêt environnemental considérable et ce d'autant plus que la synthèse totale de la céphalotaxine optiquement active n'a pas été réalisée jusqu'à présent en dépis des très nombreux travaux de synthèse dont elle a fait l'objet (quelques synthèses laborieuses de la céphalotaxine racémique comportant 10 à 15 étapes ont cependant été réalisées).
Si l'on considère qu'il faudrait extraire au moins cent tonnes par an de cet arbre rare et à pousse très lente (encore plus lente que Taxus sp.) pour satisfaire les besoins actuels du marché en homoharringtonine (quelques kilogrammes par an), tandis que l'hémisynthèse ne consommerait que quelques tonnes de feuilles. De plus, I'HHT d'origine naturelle actuellement disponible sur le marché des principes actifs est contaminée par ses congénères, lesquels de part leur parenté structurale sont très difficiles à purifier, même par chromatographie liquide à haute performance préparative .
Préalablement, il convient de noter que l'intérêt intrinsèque de la céphalotaxine en elle-même comme source d'hémisynthèse n'ayant pas encore été élevé aucun procédé d'extraction sélectif de cette substance n'a été décrit jusqu'à présent. D'autre part, parmi les composés actifs, seule l'harringtonine et l'isoharringtonine ont fait l'objet d'une demande de brevet de préparation par extraction. Quant à la préparation de l'homoharringtonine, elle a seulement fait l'objet de travaux de synthèse mais aucune demande de brevet n'a été effectuée concernant un procédé spécifique d'extraction, même non sélectif.
Un autre aspect qui donne à la présente invention un intérêt encore plus grand est que la céphalotaxine peut servir de tremplin à la synthèse de céphalotaxoïdes et d'harringtoïdes utiles pour les chimiothérapies antitumorales (tumeurs cancéreuses et non cancéreuses), antiparasitaires, antifongiques, antivirales, antibactériennes.
Les harringtonines sont constituées d'un alcool polycyclique alcaloïdique complexe (la céphalotaxine), estérifié par une chaîne latérale ne présentant isolément pas plus que la cépahalotaxine d'activité biologique, mais indispensable à l'activité biologique de l'ensemble. La saponification de la chaîne latérale dans des conditions forcées conduit à la céphalotaxine base libre et aux acides harringtoniques. La fixation des chaînes latérales intervient en fin de biosynthèse. II a été démontré que le catabolisme conduisant à cette réaction pouvait être déclenché in vivo sous l'influence d'un stress environnemental ou physiologique exercé sur la plante.
La céphalotaxine, partie polycyclique constituée de 5 cycles accolés, présente un agencement original, unique dans la nature, soit une benzodioxoazépine sur laquelle est accolé un système spiropyrolidinopentènediol. La céphalotaxine comporte 4 centres d'asymétrie: 2 carbones asymétriques , un azote aminique tertiaire hétérocyclique et un centre d'atropoisomérie, ce dernier expliquant le pouvoir rotatoire élevé. La seule fonction réactive est un alcool secondaire situé en 3, L'éther d'énol méthylique situé en 2 étant sensible à l'attaque protonique. L'ensemble forme une structure pseudohélicoïdale encageant l'hydroxyle dans le tuboïde formé par la tétrahydrazépine. La céphalotaxine base forme facilement des sels stables (par exemple des chlorhydrates et perchlorhydrates) très cristallogènes.
Ce composé qui a fait l'objet de nombreuses tentatives de synthèse totale est biologiquement inactif.
Cet alcaloïde est peu sensible aux milieux basiques. Par contre, plusieurs auteurs décrivent une certaine sensibilité aux acides aboutissant à une racémisation par inversion simultanée des 4 centres d'asymétrie. Un séjour de plusieurs jours en solution à pH 1-4 à 20"C laisse cependant cette structure intacte (observation personnelle).
Toutes les chaînes latérales des harringtonines, présentant une activité biologique significative, présentent en commun le motif 2-alkyl-2carbométoxyméthyl-2-hydroxy-acétyl. La chaîne alkyl, de longueur variable présente sur l'extrémité distale soit une ramification constituant un isopropyle porteur (HT et HHT) ou non (DHT) d'un alcool tertiaire, soit un radical phényl (par exemple la série plus récemment isolée des néoHT). Dans le cas des anhydroharringtonines la chaîne peut être refermée par déshydratation entre ses deux alcools tertiaires, formant par exemple un cycle tétrahydropyranique substitué. Le carboxyl tertiaire de ce diester complexe est porté par l'unique hydroxyle de la céphalotaxine. Le seul centre de chiralité de la chaîne latérale est situé en a de la jonction ester. II comporte, outre la première chaîne secondaire, un hydroxyle qui de part son caractère tertiaire ne présente pas de possibilité d'épimérisation.
Le schéma 2 en annexe présente de façon synthétique les procédés de préparation connues des harringtonines.
Plusieurs hémisynthèses d'esters naturels de la céphalotaxine ainsi que plusieurs séries d'analogues, présentant des chaînes simplifiées mais conférant à ces derniers une activité cytotoxique très amoindrie, ont été décrites jusqu'à présent, notamment celles ce de la désoxyharringtonine et de l'isoharringtonine.
La plupart d'entre elles concernent des esters plus simples et moins fonctionnalisés que ceux constituant l'HT et l'H HT, les esters les plus utiles en chimiothérapie (par exemple, la désoxyharringtonine, I'isoharringtonine...).
Tous les auteurs mentionnent jusqu'à présent comme irréalisable l'estérification de l'hydroxyle secondaire stériquement très encombré de la céphalotaxine 2e par le carboxyle tertiaire de la chaîne alkanoyle 3c totalement préformée pour donner une harringtonine 4a, soit, la transformation 2e + 3c - > 4a telle que décrite dans l'exemple figurant sur le schéma ci-après:
La plupart des synthèses décrites jusqu'à présent font donc appel à une fixation de la chaîne secondaire par la réaction de Réformasky entre le bromoacétate de méthyle et le carbonyle (réel ou potentiel) de la chaîne latérale préalablement fixée sur la céphalotaxine.
- La purification éventuelle des produits PCR peut être menée par l'automate BioRobot 9600.
- La réaction EPIV des étapes (d) et (e) peut être entièrement gérée par le robot MultiProbe. Les tests des propriétés des transcrits obtenus à l'étape (d) peuvent être effectués sur le Multiprobe et la lecture des résultats est obtenue sur un lecteur correspondant. Si la réaction de transcription est découplée de la réaction de traduction, la purification des ARNm peut être réalisée par le BioRobot 9600.
- Les tests d'activité des protéines synthétisées à l'étape (e) sont effectués par le
MultiProbe, et la lecture des résultats est obtenue sur un lecteur (spectrophotométrie, colorimétrie, fluorimétrie, etc... en fonction du test réalisé) de micro plaques ou par tout autre moyen approprié.
En conséquence, l'invention concerne aussi un dispositif comprenant un agencement d'un ou plusieurs supports, de robots et d'un lecteur desdits supports pour la réalisation des étapes du procédé de l'invention et de ses variantes.
Tout vecteur présentant les caractéristiques définies précédemment peut être utilisé dans le procédé de l'invention. On peut citer à titre d'exemple, un vecteur représenté à la figure 2 et construit de la façon suivante : - Une origine de réplication plasmidique .