INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Lorsque l'eau n'est qu'une cause indirecte, par exemple par effet d'oxydation par l'oxygène dissous, on peut travailler avec une eau dégazée. D'une manière plus générale, on peut travailler en atmosphère inerte, à la fois pour la fabrication et la conservation du produit final. Cette solution est souvent employée en agro-alimentaire, où les produits liquides enrichis en vitamines sont conditionnés soit sous vide d'air, soit sous atmosphère inerte. Malheureusement cette méthode ne permet de limiter la dégradation que jusqu'à l'ouverture du contenant. Elle n'est donc pas applicable dans le cas de produits nécessitant une longue durée de vie après ouverture.
Dans le cas des enzymes, par exemple dans les lessives liquides ou dans les crèmes cosmétiques, il n'est pas possible d'utiliser un solvant non aqueux, à la fois pour des raisons de sécurité et de coût. L'introduction d'enzymes dans ce type de produit se heurte donc à des difficultés réelles. Une solution, parfois adoptée en cosmétique consiste à utiliser un emballage sophistiqué, constitué de deux réservoirs indépendants, I'un contenant la molécule active, L'autre contenant le reste de la préparation. Le mélange est effectué extemporanément au moment de l'utilisation du produit, grâce à un système de double pompe doseuse sur le flacon.
Cette solution est assez onéreuse, et peu commode d'utilisation. Cette solution a aussi été mise en oeuvre dans le cas de la cosmétique pour proposer des produits de beauté contenant des vitamines.
Une autre méthode consiste aussi à séparer l'actif de son milieu, mais de manière microscopique en le microencapsulant dans des microsphéres de polymère, ou en l'enrobant, par exemple par une technique d'enrobage en lit fluidisé, dans une matrice polymère. Cette technique peut s'avérer intéressante, en particulier pour des produits destinés à être incorporés dans des formes sèches.
feuilles de mauve et les feuilles de camomille.
La composition de l'invention peut être ensuite conditionnée en pot ou en tube. De même, la composition peut être enduite sur un support textile, du type bande de gaz ou encore papier, de sorte à être appliquée sur la peau
pendant une durée déterminée.
La composition pourra être utilisée pour tout traitement de plaies puisqu'elle présente l'avantage de favoriser et d'accélérer la restructuration
cellulaire et partant la cicatrisation.
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La composition de l'invention présente donc l'avantage, non seulement de présenter une efficacité inattendue, mais en outre d'être susceptible d'être obtenue à partir d'un nombre de constituant limité et au moyen d'un procédé simple. On observe également que la composition obtenue est entièrement biologique en mettant en oeuvre des composants naturels et ayant prouvé
leur efficacité dans le temps. Elle ne contient aucun composant chimique.
i o Les résultats obtenus sont particulièrement efficaces puisque la composition présente l'avantage d'atténuer, voire de supprimer la douleur dans son application. Parmi les indications possibles, on peut citer: les brûlures au premier degré, - les brûlures au deuxième degré non infectées, - les érythèmes secondaires à des traitement de radiothérapie, - les congestions cutanées,
- les brûlures dues aux rayons solaires.
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signalisation à sources multiples pour véhicules automobiles, et en particulier les feux possédant comme source lumineuse un ensemble réparti de diodes électroluminescentes. De façon connue, un tel feu de signalisation à diodes électroluminescentes (DELs) possède, en association avec chaque DEL, une optique capable de répartir la lumière émise par la DEL dans un champ d'éclairement donné. Un avantage de ce type de feu est que son aspect éteint peut être totalement incolore, les DELs émettant directement un rayonnement (rouge, ambre ou
blanc de couleur réglementaire).
Le document FR 2 707 223 A et FR 2 711 215 A décrivent des feux de signalisation de ce type, chaque DEL étant associée à un réflecteur miniature individuel pour récupérer le rayonnement émis par la DEL avec une forte inclinaison par rapport à sa direction principale d'émission. Des aménagements optiques tels que des lentilles de Fresnel sont par ailleurs prévus au droit de chaque DEL pour collimater son rayonnement dans la direction principale d'émission, en général parallèle à
l'axe longitudinal du véhicule.
A l'issue de cette réaction combinée, tout ou partie du mélange de réaction est directement transformé en bactéries compétentes en utilisant l'une des techniques classiques de transformation. Les bactéries sont ensuite étalées sur un milieu solide contenant le milieu sélectif correspondant au gène de résistance du plasmide employé.
Après une période d'incubation adéquate, les colonies bactériennes sont individuellement examinées soit par minipréparation d'ADN plasmidique soit, avantageusement, par PCR sur colonies. La présence d'un insert correspondant à la taille attendue est alors détectée par migration électrophorétique de l'ADN sur gel d'agarose.
Exemple 2 : Insertion simple d'un produit de PCR.
Cet exemple correspond à l'utilisation la plus simple de la méthode de l'invention. Dans cet exemple, une grande quantité d'un vecteur plasmidique est préparée de telle sorte à pouvoir être utilisée dans le cadre de la présente technique, et pourra ainsi être utilisée pour un grand nombre d'insertion de fragment d'ADN indépendants.
Cet exemple s'adapte parfaitement à la réalisation de kits de clonage de fragment d'ADN, notamment obtenu après une amplification par PCR.
1) Préparation du vecteur. pBM.l est un vecteur plasmidique d'une taille de 4 kb.
Un microgramme de ce plasmide est simultanément digéré par les deux enzymes de restriction XhoI et EcoRI, dont des sites uniques sont présents au niveau du polylinker du plasmide, dans des conditions standard.
Ce produit de digestion est ensuite purifié en utilisant une colonne de Séphacryl, de façon éliminer du mélange les petits fragments issus de la double digestion, potentiellement nuisibles. La préparation plasmidique est ensuite ajustée à 100 ng/l.
2) Choix des oligonucléotides.
Les séquences des amorces nécessaires à l'amplification par PCR du gène à insérer dans le plasmide et les séquences des deux extrémités du plasmide pBM.1 clivé par XhoI et EcoRI étant connues, la séquence des oligonucléotides à employer dans le cadre de la présente invention peut être déterminée.
La partie 3' de ces oligonucléotides est fixée par la séquence du fragment d'ADN à insérer. Dans le présent exemple, il s'agit du gène de résistance à l'ampicilline, présent sur le plasmide SK+ (Catalogue Stratagene 97/98 p312), entre deux oligonucléotides distants d'environ 700 bases l'un de l'autre, et antiparallèles.
La partie 5' de ces oligonucléotides est fixée par la séquence des extrémités du plasmide pBM.l clivé, et est en outre définie par le fait qu'elle déborde cette extrémité (de un nucléotide dans l'exemple présent), et que
le premier nucléotide en amont du site de sa liaison sur sa séquence complémentaire est préférentiellement une thymidine. Deux parties 5' distinctes sont définies, l'une étant complémentaire de l'extrémité XhoI du vecteur, l'autre de son extrémité EcoRI.
La partie 5' XhoI a été associée à la partie 3' AmpA de façon à obtenir un oligonucléotide d'environ 40 bases, et nommé FF32. La partie 5' EcoRI a été associée à la partie 3' AmpB de façon à obtenir un oligonucléotide d'environ 40 bases, et nommé FF34.
3) Réaction de PCR.
Une réaction de PCR est réalisée en utilisant le plasmide SK+ et les oligonucléotides FF32 et FF34.
moléculaire respectif de 45 kDa et 44 kDa (données non montrées). Les deux protéines de fusion sont également reconnues en immunoblot par l'anticorps monoclonal 3921 E4 confirmant que l'épitope reconnu par cet anticorps monoclonal est localisé au niveau des motifs répétés, comme ceci apparaît tant dans le tableau 4 ci-dessus que dans la figure 5.
De la même façon que les résultats obtenus en immunoblot avec rHBHAAC contenant de 1 à 3 motifs R1 (tableau 3), les observations du tableau 4 et de la figure 5 suggèrent que l'anticorps monoclonal 3291 E4 reconnaît un épitope comprenant la séquence AAPAKKA.
Lorsque MBP + 3R1 + 2R2 et MBP + 1R1 + 2R2 sont produites par E. coli XL1-Blue, ces protéines hybrides sont rapidement dégradées en polypeptides de respectivement 41,5 kDa et 40 kDa qui sont résistants à une dégradation ultérieure mais qui ne sont plus reconnus par l'anticorps 3921 E4. Ceci confirme que les séquences riches en lysine de la HBHA sont hautement susceptibles à la protéolyse. En conséquence, l'utilisation d'une souche de E. coli déficiente en protéase est préférable pour la production stable de protéines recombinantes contenant ces motifs répétés nécessite.
La capacité des protéines de fusion MBP de se lier aux polysaccharides sulfatés a été investiguée par immunoblot et par chromatographie sur héparine-Sépharose. Comme l'indique la figure 6, un prétraitement avec le sulfate de dextrane de membrane de nitrocellulose portant MBP+3R1+2R2 empêche la reconnaissance ultérieure par l'anticorps monoclonal 3921-E4. Une telle observation suggère que le polysaccharide se lie à la protéine de fusion et masque ainsi l'épitope de l'anticorps monoclonal. Cet effet masquant semble dépendre de la sulfatation du polysaccharide puisqu'un prétraitement avec du dextrane ne modifie pas la réactivité de l'épitope avec son anticorps. En outre, la taille du polysaccharide sulfaté apparaît également importante si on en juge à l'incapacité de l'héparine de bas poids moléculaire à réduire la réactivité
entre la protéine de fusion et l'anticorps monoclonal 3921 E4 (données non montrées dans le tableau).
Pour éliminer l'hypothèse selon laquelle des polysaccharides sulfatés puissent interférer de façon non spécifique et générale avec la réactivité des anticorps, des membranes de nitrocellulose portant de la MBP et de la MBP+3R1+2R2 immobilisées furent incubées avec du sulfate de dextrane ou du dextrane puis testées en réactivité avec un sérum antiMBP. Les résultats sont indiqués dans la figure 6. Comparé à la membrane contrôle, aucune modification de réactivité n'a été observée, ce qui suggère que des polysaccharides de haut poids moléculaire non pas d'effets inhibiteurs généraux sur la reconnaissance par des anticorps.
Afin de déterminer directement que la protéine de fusion entre la MBP et les motifs répétés R1 et R2 de la HBHA se couple à l'héparine immobilisée, des lysats de cultures induites à l'IPTG de E. coli B834 (pMAL-c), E. coli B834 (pMAL+3R1+2R2) et E. coli B834 (pMAL+1 R1+2R2) ont été préparés et les fractions solubles obtenues après centrifugation chromatographiées sur héparine-Sépharose. Les trois protéines recombinantes sont produites au même niveau et sont également solubles puisque moins de 15 % du matériel recombinant est associé au culot de la centrifugation. Comme attendu, la MBP ne présente aucune affinité pour l'héparine puisqu'elle a été complètement trouvée dans la fraction exclue de la chromatographie sur colonne d'héparine-sépharose.
En revanche, la MBP +3R1 + 2R2 se lie à l'héparine immobilisée de la même façon que la rHBHA comme ceci apparaît sur la figure 7. En outre, toutes les protéines de fusion présentes dans l'échantillon restent liées à l'héparine-sépharose et leur élution requiert l'addition de 300 mM de NaCI qui a été préalablement démontrée comme étant les conditions d'élution de la HBHA native ou recombinante.
De manière intéressante, MBP+1 R1+2R2 se lie également à l'héparine-sépharose mais avec moins d'affinité puisque son élution est
réalisée par addition de 100 mM de chlorure de sodium en tampon d'équilibrage de la colonne. Tout ceci assemblé avec les observations du II. A. 4), avec la rHBHAAC contenant 1 à 3 motifs R1 (tableau III), ces résultats indiquent que : a) tous les déterminants moléculaires requis pour la liaison à l'héparine de la HBHA sont présents dans les motifs répétés du domaine carboxyterminal ; b) la délétion des motifs R1 ou R2 réduit l'affinité pour l'héparine ; c) l'activité de liaison à l'héparine de la HBHA peut être transférée à une protéine hétérologue (par label moléculaire sur la fraction carboxyterminale des motifs répétés de la HBHA).
COMMENTAIRES : L'ensemble des résultats précédents a permis de montrer que les motifs répétés riches en lysine de la partie carboxyterminale de la protéine HBHA sont responsables et seuls responsables des propriétés de fixer de la HBHA native ou recombinante aux polysaccharides polyanioniques sulfatés de type héparine. Ces résultats montrent en outre que la répétition du motif à l'extrémité C-terminale d'un polypeptide hybride permet d'augmenter l'affinité dudit polypeptide pour le polysaccharide sulfaté. Le fait que toute l'activité de liaison à l'héparine réside dans cette fraction répétée de la molécule, et que cette activité est transférable sur une protéine hétérologue, permet d'utiliser ces motifs R1 dupliqués de 1 à 5 fois de même que les motifs R2 comme nouveaux labels moléculaires pour la production de protéines recombinantes de fusion qui peuvent être ainsi aisément purifiées par chromatographie sur héparine-sépharose. Les résultats montrés ci-dessus montrent la spécificité de liaison et le haut rendement d'élution obtenu avec le gradient de NaCI.
Ceci démontre donc bien que l'utilisation de ce nouveau label moléculaire (tag) permet la purification dans des conditions douces qui sont
censées maintenir la protéine dans sa configuration native. En outre, les résultats expérimentaux ci-dessus montrent une susceptibilité de ce label moléculaire (tag) aux protéases. Cela signifie que si après la purification par chromatographie d'affinité, on souhaite enlever ce tag de la protéine de fusion, un simple traitement doux aux protéases à sérines est suffisant.
Ceci permet donc d'avoir un nouveau procédé qui à la fois permet un bon rendement de purification des conditions d'élutions douces et non dénaturantes, et d'élimination du label moléculaire si besoin est dans des conditions également non dénaturantes. L'ensemble des étapes de ce procédé, accompagné par le fait que la construction moléculaire est de la routine pour l'homme du métier, permet d'envisager un nouveau procédé industriel de production de ce type de protéines recombinantes produites notamment chez E. coli. Le procédé permet également de configurer la construction génétique de façon à choisir l'affinité entre le polypeptide hybride recombinant et son ligand en fonction de l'utilisation que l'on souhaite en faire et des modalités expérimentales que l'on souhaite appliquer. En outre, ceci est facilité par le fait que les motifs répétés sont spécifiquement les seuls sensibles à l'action protéolytique par les protéases à sérines. Lorsque le peptide recombinant est produit par des souches bactériennes notamment E. coli, il suffit donc de choisir comme souches productrices des lignées d'E. coli déficientes dans les protéases Lon ou OmpT responsables de la dégradation de la rHBHA observée dans E. coli XL1-Blue.
Les discordances observées entre les poids moléculaires observés en migration par gel en SDS-PAGE et le poids moléculaire calculé ne sont pas dues à une glycosylation préalablement observée dans la HBHA native et qui protège cette dernière contre la protéolyse (réf. 2). L'hypothèse très probable est que le fort contenu en résidus acides dans le domaine aminoterminal de la HBHA (15 résidus acides entre les acides aminés 37 et 89) peut interférer avec la liaison au SDS et ainsi induire une migration électro
phorétique aberrante (réf. 12).
CONDENSATEUR DE REPARTITION.
La présente invention se rapporte à un condensateur de répartition destiné en particulier à être associé à une chambre de coupure haute tension ou à être utilisé dans un diviseur de potentiel entre la tension et la mise à la terre.
Elle concerne plus précisément un condensateur, en particulier un condensateur de répartition, destiné à être associé à une chambre de coupure, constitué d'une superposition de lames métalliques et de lames en matière isolante.
A l'opposé du quatrième mode de réalisation préféré représenté sur la figure 26, le mode de réalisation préféré représenté sur la figure 28B est caractérisé en ce qu'un commutateur optique 2 x 2 90 (#3) et deux filtres optiques 92 (#3 et #4) sont additionnellement prévus entre les filtres optiques 92 (Ml et #2) et le commutateur optique 90 (#2). Conformément à ce mode de réalisation préféré, l'une quelconque d'une condition de montage en cascade des filtres optiques 92 (Ml et #3), d'une condition de montage en cascade des filtres optiques 92(#1 et #4), d'une condition de montage en cascade des filtres optiques 92 (X2 et #3) et d'une condition de montage en cascade des filtres optique s 92 (M2 et #4) peut être sélectionnée. Par conséquent, une compensation fine de l'erreur d'égalisation peut être réalisée tout comme dans le cas du cinquième mode de réalisation préféré représenté sur la figure 28A.
La figure 29 est un schéma fonctionnel qui représente un troisième mode de réalisation préféré du système de communication optique selon la présente invention Selon ce mode de réalisation préféré, un circuit de dérivation optique 98 permettant d'obtenir un faisceau de dérivation à partir de la lumière de signal WDM transmise au travers de la certaine longueur de fibre optique 26 et un moniteur de spectre optique ou analyseur de spectre optique 100 permettant de détecter une inclinaison de gain dans la certaine longueur de fibre optique 26 conformément au faisceau de dérivation sont prévus pour détecter l'inclinaison de gain dans la seconde station de terminal 83.
L'information concernant l'inclinaison de gain détectée est appliquée depuis le moniteur de spectre optique 100 sur une borne de commande de surveillance 84' qui à son tour active le dispositif d'émission optique 22' pour ainsi émettre un signal SV incluant l'information concernant l'inclinaison de gain détectée par l'intermédiaire de la certaine longueur de fibre optique 26' sur la première station de terminal 82. Dans la premiere station de terminal 82, le signal SV reçu est régénéré par le dispositif d'émission optique 24' et le signal SV régénéré est appliqué sur la borne de commande de surveillance 84.
Par conséquent, une commande de retour qui est telle que l'inclinaison de gain détectée dans la seconde station de terminal 83 devient plate peut être réalisée dans chaque unité d'égalisation de gain variable 36. C'est-à-dire que le signal SV transmis depuis la première station de terminal 82 sur chaque unité d'égalisation de gain variable 36 est utilisé en tant que signal de commande pour commander chaque égaliseur de gain variable 40 conformément au signal de commande.
Par ailleurs, conformément à ce mode de réalisation préféré, chaque égaliseur de gain variable 40 est commandé dans l'unité d'égalisation de gain variable correspondante 36 conformément au signal de commande, d'où l'aplatissement de l'inclinaison de gain dans la certaine longueur de fibre optique 26.
La figure 30 est un schéma fonctionnel qui représente un quatrième mode de réalisation préféré du système de communication optique selon la présente invention. Tout comme le troisième mode de réalisation préféré représenté sur la figure 29, l'inclinaison de gain dans la certaine longueur de fibre optique 26 est détectée dans la seconde station de terminal 83. A l'opposé, le quatrième mode de réalisation préféré est caractérisé en ce que l'information concernant l'inclinaison de gain détectée est transmise au travers de la certaine longueur de fibre optique 26' directement sur chaque unité d'égalisation de gain variable 36. Plus spécifiquement, chaque unité d'égalisation de gain variable 36 inclut un récepteur de SV 86' connecté à la certaine longueur de fibre optique 26'. Le récepteuF de SV 86' reçoit un signal SV transmis depuis la seconde station de terminal 83 sur chaque unité d'égalisation de gain variable 36 en tant que signal de commande.
Par conséquent, chaque égaliseur de gain variable 40 est commandé conformément au signal de commande reçu par le récepteur de SV correspondant 86', d'où ainsi l'aplatissement de l'inclinaison de gain dans la certaine longueur de fibre optique 26.
Selon une modification, la première station de terminal 82 peut etre configurée de façon similaire à la seconde station de terminal 83.
Dans ce cas, le récepteur de SV 86 prévu dans chaque unité d'égalisation de gain variable 36 est utilisé pour la certaine longueur de fibre optique 26 afin de commander chaque égaliseur de gain variable 40', d'où ainsi l'aplatissement d'une inclinaison de gain dans la certaine longueur de fibre optique 26'.
La figure 31 est un graphique permettant d'illustrer un autre mode de réalisation préféré du procédé selon la présente invention.
Tandis que l'égaliseur de gain fixe 34 est utilisé pour obtenir un gain variant sensiblement linéairement en fonction de la longueur d'onde selon chaque mode de réalisation préféré mentionné ci-avant, l'égaliseur de gain fixe 34 peut être omis lors de la mise en oeuvre de la présente invention. Par exemple, dans le cas où la caractéristique de gain en longueur d'onde de chaque amplificateur optique 38 peut être modifiée en une caractéristique représentée par un index de référence 102 et une caractéristique représentée par un index de référence 104 sur la figure 31, un gain variant sensiblement linéairement en fonction de la longueur d'onde est toujours obtenu dans une bande représentée par un index de référence 106. Par conséquent , en limitant la bande de longueurs d'onde de la lumière à appliquer sur chaque amplificateur optique 38 à la bande 106, l'égaliseur de gain fixe 34 peut être omis.
Dans le cas où chaque amplificateur optique 38 est un EDFA, la bande de longueurs d'onde de la lumière de signal à amplifier au moyen de l'EDFA est limitée à une plage d'environ 1540 nm à environ 1565 nm. Cette limitation de la bande de longueurs d'onde peut entre obtenue en établissant ou en commandant de façon appropriée les longueurs d'onde de signaux optiques à émettre en sortie depuis les emetteurs optique s 2 (# 1 à MN) représentés sur la figure 5 par exemple.
La presente invention n'est pas limitée aux détails des modes de réalisation préférés décrits ci-avant. Le cadre de l'invention est défini par les revendication annexées et toutes les variantes et modifications, pourvu qu'elles tombent dans les équivalents du cadre des revendications sont par conséquent destinées à être embrassées par l'invention.
Selon un mode de réalisation particulier, les moyens de nettoyage comprennent une ou plusieurs buses alimentées en fluide de lavage par un circuit de lavage indépendant de celui du circuit de fluide de travail et orientée vers le doigt de gant et vers la paroi intérieure de la cuve si besoin est.
Il est aussi prévu une évacuation des particules et du fluide de lavage. De préférence, les parois du doigt de gant et de la cuve sont en matériau amagnétique.
Pour des manipulations aisées, il est prévu des moyens de manoeuvre du barreau aimanté entre la première et la seconde position au sein du doigt de gant qui se prolonge hors de la cuve. La présente invention est maintenant décrite en détail selon un mode de réalisation non limitatif, en regard des dessins annexés qui représentent - figure 1, une vue schématique du dispositif selon l'invention interposé sur un circuit de fluide, en position de captage, - figure 2, une vue schématique de ce même dispositif, en position de nettoyage principal, et - figure 3, une vue schématique du dispositif en position identique à celle de la figure 2 mais avec les moyens complémentaires de nettoyage.
Sur la figure 1, on a représenté un circuit 10 de type circuit fermé de chauffage, sur lequel est interposé un dispositif 12 de captage. Le sens de circulation du fluide 14, à travers le dispositif, est indiqué sur cette figure 1 par les deux flèches 16 et 18 correspondant respectivement aux piquages 20 et 22 d'entrée et de sortie du fluide. Chacun des piquages est équipé d'une vanne 24, 26 qui permet dans une première position ouverte d'autoriser la circulation du fluide à travers le dispositif et une position fermée dans laquelle le dispositif est isolé.