INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans d'autres têtes, l'élément magnétorésistant est placé dans la couche magnétique arrière ou même dans l'entrefer. Par le document WO 90/11594, on connaît une tête magnétique de lecture à magnétorésistance qui est illustrée sur les figures 2A (en coupe) et 2B (en vue de dessus). Cette tête fonctionne en enregistrement dit perpendiculaire. Elle comprend une couche magnétique arrière 50, 51, 52 interrompue par deux intervalles dans lesquels est placé un élément magnétorésistant en forme de U, avec deux rubans 34, 35, une branche arrière 36 et deux plots de connexion 38, 40. lia tete comprend encore un enroulement conducteur spiralé 54 avec deux plots de connexion 61, 62. Un pôle magnétique 56 est enterré dans une couche isolante 53 définissant un plan de vol et affleure sur le plan de vol. Ce pôle magnétique se prolonge par un pied, lequel est en contact avec la partie centrale 50 de la couche magnétique arrière.
L'ensemble est disposé dans un caisson pratiqué dans une couche isolante 20.
De telles têtes ne présentent qu'un seul entrefer, (elles sont dites parfois "monogap") lequel sert aussi bien à l'écriture qu'à la lecture. Bien que présentant l'avantage de la simplicité, cette solution se heurte néanmoins à un inconvénient qui est celui de la faiblesse du signal de lecture, faiblesse incompatible avec les circuits intégrés classiques.
Quant à la tête illustrée sur les figures 2A et 23, elle présente, en outre, l'inconvénient d'une résolution trop faible en enregistrement longitudinal. lia présente invention a justement pour but de remédier à ces inconvénients.
Exposé de l'invention A cette fin, l'invention préconise de séparer les moyens d'écriture et de lecture et d'utiliser des moyens particuliers pour remplir ces fonctions, ces moyens se combinant de manière avantageuse.
De façon précise, l'invention a pour objet une tête magnétique comprenant A) une partie lecture, comprenant - une couche mince magnétique de blindage avec une ouverture, - une couche magnétique sonde disposée perpendiculairement à la couche de blindage, et affleurant dans ladite ouverture, cette couche sonde se prolongeant par un pied magnétique, - un élément magnétorésistant: en forme de U avec deux. rubans magnétorésistants disposés parallèlement a la couche de blindage et Si -uas de part et d'autre du pied , ces deux rubans magnétorésistants étant du type magnétorésistance à vannes de spin, B) une partie écriture, placée à côté de la partie lecture et comprenant - deux pièces polaires séparées par un entrefer amagnétique, - un circuit magnétique de fermeture du flux reliant les deux pièces polaires, ce circuit magnétique étant asymétrique et s'étendant du côté opposé à la partie lecture, - un enroulement conducteur d'écriture entourant une partie du circuit magnétique du côté opposé à la partie lecture.
La réalisation d'une partie lecture, dédiée uniquement à cette fin, permet d'accroître le signal de lecture. L'utilisation de magnétorésistance à vannes de spin, dans la configuration particulière du double ruban, permet d'accroître encore le signal de lecture.
C'est ainsi que dans la demande de brevet français NO 83 20861, il est indiqué une composition et son mode d'administration par voie orale en vue de réhydrater un enfant atteint d'une gastro-entérite, notamment aiguë, d'origine virale, ou infecté par le choléra lors d'une épidémie, ce qui supprime, pour de nombreux cas, les besoins d'hospitalisation.
On sait que la diarrhée aiguë peut se définir à partir de notions physiopathologiques, à savoir une malabsorption de l'eau qui entre chaque jour en grande quantité dans l'intestin, à laquelle vient s'ajouter les sécrétions d'origine digestive, stimulées par l'ingestion des aliments.
Ce volume de liquides est ré-absorbé par l'intestin grêle et le colon ne laissant dans les selles, en régime normal, qu'un faible volume desdits liquides.
La diarrhée est un excès d'eau fécale lié à une mauvaise ré-absorption ou une sécrétion anormale.
Des traitements étiologiques, comme la soupe de carottes ont été longtemps administrés sans que la preuve puisse être faite de l'efficacité mais de tels traitements ont plutôt tendance à masquer les conséquences.
Néanmoins, compte tenu des difficultés d'administration de solutés par voie intraveineuse en milieu hospitalier, la voie du traitement nutritionnel paraît la plus adaptée.
Le glucose notamment paraît agir sur la toxine cholérique tout en améliorant le système d'absorption du sodium dont on sait qu'il est lié aux mouvements de l'eau dans le corps.
Aussi, des solutés pour une administration par voie orale ont été mis au point et notamment dans la demande de brevet ci-dessus mentionnée, la composition d'un tel soluté comprenant - 10 à 20 g de glucose, - 10 à 40 g de saccharose, - 5 à 40 méq de citrate, - 20 à 75 méq de chlorure, - 0 à 50 méq de potassium, et - 40 à 75 méq de sodium, I'ensemble ayant de préférence une osmolalité comprise entre 280 et 320 m.osmol.
Une telle composition permet d'obtenir de bons effets de réhydratation et en plus, le goût n'est pas rendu désagréable par la forte teneur en bicarbonate, si bien que l'acceptabilité de la part des nourrissons est améliorée, ce qui est un progrès important quand on sait que de tels solutés sont les seuls moyens d'agir pour certaines populations. Le tampon par le citrate permet de remplacer le bicarbonate en évitant de la même façon l'acidose.
On peut noter que chez l'adulte, les problèmes de réhydratation sont aussi importants mais les conséquences sont moins significatives si bien que la réhydratation est rarement prise en compte et cette thérapeutique de réhydratation est rarement proposée ou imposée aux adultes.
Néanmoins, les symptômes généraux présentés sont identiques à ceux du nourrisson et montrent qu'il y a bien déshydratation, plus particulièrement dans le cas de la diarrhée du voyageur.
La présente invention propose une composition de traitement de gastroentérites combinant une solution de réhydratation avec au moins un composé ayant une action de synergie, choisi notamment parmi les antiseptiques intestinaux et/ou les probiotiques et/ou les modificateurs du transit intestinal et/ou les terres incluant les argiles.
1/ Dans le cas d'un antiseptique intestinal, on sait qu'il a une action sur l'agent étiologique et un effet curatif mais que, utilisé seul, il a un effet moins complet puisque la réhydratation nécessaire qui doit être associée au traitement curatif n'est bien souvent pas mise en oeuvre ou au contraire mise en oeuvre en milieu hospitalier par intraveineuse avec le chapelet de contraintes qu'il engendre. On comprend que, dans le cas où l'antiseptique est combiné avec la solution de réhydratation, on supprime les inconvénients liés à la prise supplémentaire d'un traitement séparé, à la non prescription soit de l'antiseptique soit du traitement de réhydratation suivant qu'il s'agit d'un nourrisson ou d'un adulte et à l'étalement dans le temps des actions des différents composés, supprimant l'effet de synergie.
Un tel antiseptique intestinal peut être du Nifuroxazide.
La posologie est alors liée à la fréquence des prises de la solution de réhydratation et adaptée en conséquence.
Une composition particulièrement convenable comprend par exemple pour un adulte - 909,2 mg de Nifuroxazide, - 10 à 20 g de glucose, - 10 à 40 g de saccharose, - 5à 40 méq de citrate, - 20 à 75 méq de chlorure, - 0 à 50 méq de potassium, et - 40 à 75 méq de sodium, I'osmolalité étant comprise entre 1 50 et 350 m.osml.
On peut ainsi définir avec précision, la position de fermeture complète du couvercle, et celle située à la position optimale d'utilisation.
De préférence, chaque relief comprend un sommet, une rampe montante et une rampe descendante disposées symétriquement de part et d'autre de ce sommet.
Les rampes montante et descendante des reliefs permettent une rotation facile du couvercle, tout en assurant un positionnement précis de celui-ci dans différentes positions privilégiées.
De préférence également, les deux surfaces en contact comprennent trois reliefs et trois creux décalés l'un de l'autre suivant un angle de 1200.
Ce décalage angulaire de 1200, permet de basculer le couvercle entre une position fermée et une position décalée de 1200 dans laquelle le microphone du couvercle occupe un emplacement optimal pour l'utilisation du téléphone.
De préférence, les deux surfaces en contact peuvent être déboîtées l'une de l'autre.
il est ainsi facile d'enlever le couvercle pour le remplacer par un couvercle neuf.
Selon une version avantageuse de l'invention, les reliefs et les creux coopèrent les uns avec les autres pour définir une position dans laquelle le couvercle est complètement rabattu sur le boîtier et où les contacts tournants incorporés dans l'autre articulation n'établissent pas la liaison électrique entre le circuit électrique et le microphone à la position ci-dessus et jusqu'à une première position angulaire du couvercle et établissent cette liaison électrique lorsque la position angulaire du couvercle est située au-delà de la première position ci-dessus.
Aux dessins annexés donnés à titre d'exemples non limitatifs: - la figure 1 est une vue en perspective à échelle agrandie de l'articulation du boîtier d'un téléphone mobile selon l'invention, montrant les bras des contacts tournants incorporés dans cette articulation, - la figure 2 est une vue en perspective de l'articulation du couvercle du téléphone mobile, montrant les plages conductrices destinées à coopérer avec les bras de contact représentés à la figure 1, - la figure 3 est une vue en coupe axiale des deux articulations reliant le boîtier et le couvercle du téléphone mobile, - la figure 4 est une vue en coupe axiale de l'articulation incorporant les contacts tournants, - la figure 5 est une vue en plan du bloc isolant portant les plages conductrices, - la figure 6 est une vue analogue à la figure 5 montrant en outre les deux bras de contact en contact respectivement sur une plage conductrice et une zone non conductrice, - la figure 7 est une vue en perspective d'une plage conductrice, - les figures 8, 9, 10 et 11 sont différentes vues schématiques en plan, montrant la position des bras de contact par rapport aux plages conductrices pour différentes positions du couvercle, - la figure 12 est une vue en plan de la surface munie de reliefs et de creux de l'une des articulations du boîtier au couvercle.
Dans la réalisation des figures 1 à 4, le téléphone mobile comprend un boîtier 1 renfermant un circuit électrique 2 et portant un couvercle 3 fixé de façon articulée à ce boîtier 1 et comportant un microphone (non représenté). Des contacts tournants sont incorporés dans l'une 4a, 4b des deux articulations reliant le couvercle 3 au boîtier 1, pour établir des connexions électriques entre le circuit électrique 2 et le microphone.
Conformément à l'invention, l'articulation 4b du boîtier 1 au couvercle 3 comprend deux contacts solidaires du boîtier 1 comportant chacun un bras de contact 5.
Les extrémités 5a des deux bras de contact 5 prennent appui élastiquement sur deux plages conductrices 6 séparées par une matière isolante 7 et incorporées dans la partie 4b de l'articulation du couvercle 3. De ce fait, lors de la rotation du couvercle 3, les extrémités 5a des deux bras de contact 5 décrivent sur les plages conductrices 6 deux trajets circulaires.
Dans l'exemple représenté, les deux bras de contact 5a et les deux plages de contact 6 sont symétriques par rapport à l'axe X-X' de l'articulation 4a, 4b.
La position des plages conductrices 6 par rapport aux bras de contact 5 est telle que lorsque le couvercle 3 est rabattu sur le boîtier 1, l'extrémité 5a de l'un des bras de contact 5 prend appui sur la matière isolante 7 comprise entre les deux plages conductrices 6, comme indiqué sur les figures 6 et 8.
Comme on le voit sur les figures 1 et 4, chaque contact est constitué par une pièce 8 découpée dans une feuille de métal élastique et bon conducteur et comprend trois bras 5, 9, 10. L'un d'eux constitue le bras de contact 5, le deuxième 9 comporte une extrémité 9a emboîtée dans un bloc 11 en matière isolante incorporée dans l'articulation 4a du boîtier 1 et le troisième bras 10 situé à l'opposé du premier est en contact par son extrémité 10a avec la carte de circuit imprimé constituant le circuit électrique 2 du boîtier 1.
Le chemin du pDNA après une administration systémique présente de nombreuses étapes, chacune d'elles représentant une barrière potentielle à l'expression transgénique - le transport dans la circulation sanguine depuis le site d'injection intraveineuse aux tissus/cellules ciblés, - la diffusion du compartiment intravasculaire au compartiment extravasculaire, aussi désigné l'extravasion dans les tissus, et l'entrée dans les cellules, - le relargage des particules vecteur synthétique/pDNA ou du pDNA libre dans le compartiment cytoplasmique, - la dissociation du pDNA des vecteurs synthétiques, - le transit du cytoplasme au noyau.
- la pénétration dans le noyau.
- l'expression du transgène.
Les travaux de recherche effectués par la Demanderesse ont permis de définir les caractéristiques d'un système de transport optimal pour le transfert de gène - L'obtention de particules vecteur synthétique/DNA homogènes de faibles tailles permettant la compaction d'ADN.
- La protection de l'ADN vis-à-vis des nucléases.
- L'obtention de particules dont la demi-vie plasmatique est améliorée, par diminution des interactions avec les éléments figurés du sang ou les protéines plasmatiques - Le transport dans la cellule cible de 1 'ADN.
- Le relargage de l'ADN dans le cytoplasme et le nucléoplasme.
- La capacité de ciblage cellulaire.
Parmi les vecteurs synthétiques, les vecteurs lipidiques comme les liposomes semblent, vis-àvis des vecteurs polypeptidiques, présenter l'avantage d'être potentiellement moins immunogeniques et, pour l'instant, d'être plus performants. L'utilisation de liposomes conventionnels pour la délivrance d'ADN est cependant très limitée du fait du faible taux d'encapsulation d'une part et d'autre part, leur incapacité à compacter ces molécules de grande taille.
La formation de complexes d'ADN avec des lipides cationiques a été récemment étudiée par de nombreux laboratoires (Felgner et al, PNAS 84, 7413-7417 (1987); Gao et al, Biochem. Biophys. Res. Commun. 179, 280-285, (1991) ; Behr et al., Bioconj. Chem. 5, 382-389 (1994)).
Ces complexes ADN-lipides cationiques sont aussi désignés dans l'art antérieur sous la dénomination lipoplexes (P. Felgner et al., Hum. Genet. Ther., 8, 511-512, 1997). Les lipides cationiques permettent la formation de complexes électrostatiques avec 1'ADN, qui est une molécule de nature polyanionique.
Cette approche s'est montrée efficace pour le transport de pDNA en culture cellulaire. Cependant l'application in vivo de ces complexes, particulièrement après administration systémique, pour le transfert de gène est pauvrement documentée (Zhu et al, Science 249, 209-211(1993); Thierry et al, PNAS 92 , 9742-9746 (1995) Hofland et al, J. Biol. Chem. 93,7305-7309 (1996)) bien que ce type d'administration soit d'un intérêt essentiel pour les applications médicales. Ceci s'explique par la difficulté d'obtenir des complexes de structure et de taille homogène et relativement stables vis-à-vis de leur biodégradation. La demande de brevet WO 9603977, par exemple, revendique des liposomes utiles pour la délivrance d'ADN in vivo, constitués de lipides cationiques et de lipides neutres. Cependant, le caractère globalement cationique de ces liposomes combinés au pDNA constitue une importante limitation à ce type de système.
Il était jusqu'à ce jour impossible d'obtenir des lipoplexes stables et homogènes de charge globale neutre ou négative et qui soient efficaces pour la transfection cellulaire. Cette difficulté est liée exclusivement à des problèmes galéniques de formulation.
En effet, les réactions mises en jeu lors de la formation des lipoplexes impliquent la formation de liaisons électrostatiques entre des constituants polyanioniques qui sont délicates à contrôler.
Or, il est reconnu que des particules positives se lient efficacement et de façon nonspecifique avec des protéines sériques qui sont majoritairement de charge globale négative, ce qui conduit à leur inactivation et à une rapide élimination plasmatique, et induit une toxicité accrue et potentiellement une réaction inflammatoire. De plus des particules chargées positivement interagissent avec les matrices extracellulaires et ont, par conséquent, une faible extravasation de l'espace vasculaire à l'espace interstitiel.
Ainsi, le caractère cationique des lipoplexes développés dans l'art antérieur constitue une sévère limitation à leur utilisation pour une administration systémique. Ceci explique en partie la grande divergence entre les résultats d'efficacité obtenus in vitro et ceux obtenus in vive.
La dexaméthasone, contenue éventuellement dans le produit de drainage, a pour but d'augmenter le stress cellulaire et l'exocytose des exosomes hors de la cellule tumorale.
Le surnageant d'un explant tumoral dissocié in vitro est obtenu de la façon suivante - on procède à la dissociation mécanique de la tumeur conduisant à une suspens ion unicellulaire contenant des cellules tumorales et des cellules du stroma tumoral et des cellules du système immunitaire ; cette suspension peut être irradiée et récupérée pour les ultracentrifugations différentielles.
Un procédé avantageux de préparation selon l'invention d'exosomes dérivés de cellules tumorales est effectué * soit à partir de cultures de cellules tumorales et comprenant une irradiation, à une intensité suffisante pour provoquer l'action cytostatique des cellules tumorales et ne dépassant pas 15.000 rads avantageusement à environ 10.000 rads, des cellules tumorales avant, pendant ou après leur mise en culture, ou un traitement, pendant la culture, des cellules tumorales, à l'aide de stéroïdes, par exemple dexaméthasone, ou d'agents cytotoxiques, par exemple 5fluorouracile (5 Fu) ou cis-platinum, docetaxel, anthracycline, poison du fuseau, antipyrimidique, ou d'interleukine par exemple IL10, IL2, IL15, GM-CSF, IFNy, IL-6, un traitement avec un agent susceptible d'augmenter la quantité d'endosomes multivésiculaires, par exemple le nocodazole (Gruenberg J. et al. (1989) "Characterization of the Early Endosome and Putative Endocytic Carrier Vesicles In Vivo and with an Assay of Vesicle Fusion In Vitro" The Journal of Cell Biology 108:1301-1316) et donc d'augmenter la production d'exosomes, * soit à partir d'un prélèvement de sérum physiologique drainant un organe excisé chirurgicalement et traité ex vivo par circuit isolé-perfusé pour le drainage de la tumeur qu'il porte, ou * soit à partir du surnageant d'un explant tumoral dissocié in vitro et comprenant un traitement à l'aide de stéroldes, par exemple dexamethasone, ou d'agents cytotoxiques, par exemple 5-fluorouracile (5 Fu), cis-platinum, taxanes, ou d'interleukine par exemple IL-lO, IL-2, GM.CSF, etc...
S'agissant de l'irradiation, elle doit être suffisante pour provoquer l'action cytostatique des cellules tumorales.
L'irradiation des cellules tumorales peut être faite avant la mise en culture des cellules, ou pendant ou après la mise en culture des cellules tumorales.
Il faut irradier quand les cellules tumorales sont vivantes, c'est-à-dire - soit sur l'organe excisé porteur de tumeur avant la perfusion, - soit sur les cellules en culture, - soit sur la suspension cellulaire dissociée mécaniquement ; mais, dans tous les cas, avant souffrance cellulaire tumorale pour cause d'hypoxie/nécrose vasculaire/déshydratation.
S'agissant du traitement à l'aide de stéroïdes, il permet de provoquer une activation cellulaire conduisant à 1' exocytose des exosomes.
S'agissant du traitement à l'aide d'agents cytotoxiques, il permet de - modifier le cytosquelette et réarranger les compartiments intracellulaires pour dérégler les phénomènes d'internalisation et d'exocytose (ler cas), - dépolymériser les microtubules (2ème cas).
S'agissant du traitement avec un agent susceptible d'augmenter la quantité d'endosomes multivésiculaires, il a lieu pendant la mise en culture des cellules, comme agent on peut citer le nocodazole (ler cas), (drogue permettant de dépolymériser les microtubules), la bafilomycine (2ème cas) (drogue inhibant les ATpases vacuolaires)("Bafilomycins: A class of inhibitors of membrane ATPases from microorganisms, animal cells, and plant cells" (1988) Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 85:7972-7976), L'invention a notamment pour objet un procédé de préparation d'exosomes de cellules tumorales tel que défini ci-dessus, comprenant - soit la modification génétique des cellules tumorales par des gènes exogènes codant pour des molécules de classe I et/ou de classe II du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH), et/ou des gènes codant pour des antigènes caractérisés de tumeurs et/ou des gènes codant pour des molécules de co-stimulation/adhésion ou des chemokines attractantes, les produits de ces gènes exogènes pouvant se trouver exprimés à la surface des exosomes et/ou être séquestrés à l'intérieur des exosomes, - soit la modification in vitro des exosomes produits par les cellules tumorales, telle que l'introduction (par électroporation, par fusion avec un liposome synthétique, par virus recombinant ou par méthode chimique), de protéines ou d'acides nucléiques ou médicaments pharmaceutiquement définis dans et/ou avec les exosomes.
Les exosomes des cellules tumorales transfectées comme indiqué ci-dessus sont recueillis et utilisés comme vaccins tumoraux.
Les exosomes modifiés in vitro comme indiqué ci-dessus sont destinés à délivrer le matériel exogène à une cellule cible in vitro ou in vivo.
S'agissant de la fusion avec un liposome synthétique, ce procédé est réalisé comme indiqué dans Nabel et al. (1996), ou dans Walker et al. (1997. Nature X, pages 61 et suivantes).
L'invention concerne également des cellules présentatrices d' antigènes, notamment lymphocytes B, macrophages, monocytes ou cellules dendritiques, chargées en exosomes dérivés de cellules tumorales tels que définis cidessus.
Dans ce qui suit, on utilisera l'expression "cellules présentatrices d'antigènes chargées en exosomes dérivées de cellules tumorales" ou "cellules présentatrices d'antigènes sensibilisées par des exosomes dérivées de cellules tumorales".
Les cellules présentatrices d'antigènes de l'invention ont notamment les caractéristiques suivantes - dans des modèles de tumeurs qui n'expriment pas des molécules de classe I et qui, par conséquent, n'ont pas la capacité de stimuler des cellules T CD8+, des cellules dendritiques chargées avec des exosomes de cellules tumorales, peuvent présenter ces peptides tumoraux à des cellules T cytotoxiques dans le contexte des molécules de classe I du CMH, (caractéristique n" 1) - des cellules dendritiques chargées d'exosomes de cellules tumorales injectées en intraveineuse ou en sous-cutanée sont également très efficaces (caractéristique n" 2) Un test permettant de mettre en évidence la caractéristique n" 1 est le suivant.
3ème étape : Formation des complexes primaires.
Elle correspond à la fixation des Ac primaires potentiellement contenus dans le sérum à tester à une dilution optimale de 1/20 000 (pour le lapin "T" et "C") sur les conjugués déposés au fond des puits.
4ème étape : Formation des complexes secondaires. Elle correspond à l'addition des Ac secondaires de chèvre anti-Ig de lapin (Diagnostic Pasteur) marqués à la péroxydase dilués au 1/8000 dans le tampon TPS-Tween-SAB.
5ème étape : Visualisation des complexes secondaires. Elle se fait par l'utilisation du substrat spécifique de la péroxydase (H202, Prolabo), en présence d'un chromogène, l'orthophénylène diamine (OPD, Sigma). La visualisation est réalisée par l'oxydation de l'OPD qui passe de l'état réduit incolore à l'état oxydé jaune. La réaction est ensuite stoppée par addition d'une solution d'acide sulfurique (H2SO4, 4N) dans chaque puits. Les DO sont lues à 492 nm à l'aide d'un spectrophotomètre multiscan informatisé (EL 312e, Bio-Tek Instruments). La valeur expérimentale obtenue est celle mesurée sur les puits ayant le conjugué (haptène-nitrosylé-protéine) ou protéine nitrosylée soustraite de celle lue sur les puits contrôles contenant le conjugué non nitrosylé ou de la SAB.