INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
De préférence, le poids moléculaire du silane ou de l'oligomère de silane est compris entre 100 et 500 g et dans la formule (IV) : - R', identiques ou différents, sont des radicaux organiques monovalents, notamment alkyle ou alkényle linéaire ou ramifié en Ci à C15 éventuellement substitués par un groupement halogène (F, CI, Br) un groupement époxydé, un groupement aminé, ces groupements R' étant de préférence un groupement méthyle, vinyle et/ou octyle, et - u est égal à 1 ou 0.
Le silane ou l'oligomère de silane (c) peut être en solution dans une phase liquide.
Cette phase liquide est de préférence un solvant organique, qui peut être choisi parmi les solvants des polymères silicones, tels que ceux définis ci-dessus. Le choix de la phase liquide se fait en fonction de sa compatibilité avec le silane. On peut ainsi jouer sur la transparence du revêtement final. Dans ce cas, un catalyseur de réticulation peut être ajouté au silane ou l'oligomère de silane (c). Ce catalyseur de réticulation peut être
choisi parmi les composés organiques du titane ou de l'étain, notamment les titanates d'alkyle et le dicarboxylate de dialkyl-étain.
Selon une mise en #uvre préférée de l'invention, le silane ou l'oligomère de silane (c) se présente sous la forme d'une émulsion en phase aqueuse. Cette émulsion aqueuse comprend préférentiellement : # au moins un silane ou oligomère de silane de formule (IV), # le produit (Z) de la réaction entre : - (Za) au moins de l'ammoniac et/ou une amine aromatique et/ou aliphatique polyfonctionnelle soluble dans l'eau contenant de 2 à 25 atomes de carbone, - (Zb) au moins un acide ou anhydride carboxylique contenant de 3 à 22 atomes.
Les amines aromatiques et/ou aliphatiques, les acides ou anhydrides carboxyliques et les agents de réticulation sont identiques à ceux définis précédemment dans le cadre de l'émulsion aqueuse de polyorganosiloxane.
L'émulsion aqueuse de silane peut également comprendre au moins un tensioactif choisi parmi les tensioactifs (Ya), (Yb) ou (Yc) définis ci-dessus.
Pour une description en détails des silanes, on peut se référer notamment aux documents US-A- 3 294 725 ; 584 341 ; US-A-4 618 642 ; US-A-4 608 412 ; US-A-4 525 565 ; EP-A-340 120 ; EP-A-364 375 ; 248 826 ; FR - 1 023477. Plus précisément, à titre d'exemples on peut citer les alcoxysilanes suivants: Si(OC2H5)4 ; CH3Si(OCH3)3 ; CH3Si(OC2H5)3 ; (C2H5O)3Si(OCH3) ;CH2=CHSi(OCH3)3 CH3(CH2=CH)Si(OCH3)2 CH2=CHSi(OC2H5)3 CH2=CHSi[ON=C(CH3)C2H5]3; CH3Si[ON=C(CH3)2]3 CH3Si[-C(CH3)=CH2]3 CoH21 Si(OCH3)3; le méthyltri(N-méthylacétamidosilane) ; le méthyltris(cyclohéxylaminosilane) ; isOC4HgSi(OCH3)3 ' isoC4HgSi(OC2H5)3 ' C8H Si(OCH3)3 ; CaH17Si(OC2H5)3 ' C2H5Si(OCH3)3 ; C2H5Si(OC2H5)3 ; C4HgSi(OCH3)3 ; C4HgSi(OC2H5)3 et (CH3)2Si(OCH3)2.
L'émulsion aqueuse de silane ou d'oligomère de silane (c) peut également comprendre : - au moins un agent tensioactif (Y) de type (Ya), (Yb) ou (Yc), et/ou - au moins un agent de réticulation qui est un métal hydroluble, et/ou - au moins un composé métallique de durcissement.
Ces composés sont identiques à ceux définis précédemment pour les émulsions aqueuses de polyorganosiloxanes.
De préférence, l'émulsion comprend de 10 à 60 % en poids de silane ou d'oligomère de silane de formule (IV), le restant étant en général le produit (Z), l'eau et en option l'agent tensioactif (Y). La quantité de produit (Z) au sein de l'émulsion est généralement comprise entre 0,1 et 15 % en poids, et de préférence entre 0,25 et 5 % en poids, par rapport au poids total de l'émulsion. Si présent, la quantité de tensioactif
(Y) au sein de l'émulsion est comprise entre 0,1 et 15 % en poids, et de préférence entre 0,25 et 5 % en poids, par rapport au poids total de l'émulsion.
Le produit (Z) est préparé, comme indiqué ci-dessus, dans le cadre de l'émulsion de polyorganosiloxane.
L'émulsion aqueuse de silane ou d'oligomère de silane (c) peut être réalisée de différentes façons, par exemple par inversion de phase ou par la méthode directe qui consiste à couler le silane dans un mélange de produit (Z), de tensio-actif (Y) et de l'eau sous cisaillement. Dans ces deux cas, on utilise les technologies classiques de mise en émulsion discontinue telles que les mélangeurs cisaillants, ou de mise en émulsion continue telles qu'un broyeur colloïdal ou homogénéisateur à haute pression, par exemple, homogénéisateur Manton Gaulin. Au choix, le silane peut être émulsifié avec le produit (Z) ou le tensioactif (Y) dans un premier temps, puis, on ajoute le tensioactif (Y) ou le produit (Z) selon le cas à l'émulsion déjà faite. On peut également préparer l'émulsion en présence simultanée du produit (Z) et du tensioactif (Y). Il est à noter qu'au cas où l'acide carboxylique utilisé est solide, par exemple l'acide stéarique, il convient de le fondre lors de son ajout dans la préparation de l'émulsion.
Selon le procédé de l'invention, il est également possible d'utiliser à titre de composé du silicone une émulsion aqueuse comprenant un mélange des composés siliconés (b) et (c). Cette émulsion peut être réalisée : - soit par mélange d'une émulsion aqueuse de polyorganosiloxane (b) de formule (II) ou (III), préférentiellement défini selon le troisième mode de la formule (III), et d'une émulsion aqueuse de silane ou d'oligomère de silane (c) de formule (IV), - soit par mélange d'au moins un polyorganosiloxane (b) de formule (II) ou (III), préférentiellement défini selon le troisième mode de la formule (III), et d'au moins un silane ou oligomère de silane (c) de formule (IV), puis émulsification du mélange obtenu selon les procédés d'émulsification définis ci-dessus.
Dans tous les cas, l'émulsion comprend de préférence de 10 à 60 % en poids du mélange de polyorganosiloxane et du silane, le reste étant en général le produit de la réaction (Z), de l'eau et l'agent tensioactif (Y) si présent. Le rapport en poids polyorganosiloxane/silane est généralement compris entre 0 et 20 et de préférence entre 0,1 et 9. Les quantités du produit (Z) et de tensioactif (Y) sont telles que définies précédemment.
Au sens de la présente invention la dénomination formes oncogéniques ou forme mutées oncogéniques de p53 désigne les mutants dominant-oncogéniques, dont le produit est une protéine qui a perdu la capacité de se lier à l'ADN et qui participe activement à la transformation néoplasique. Les mutants de cette catégorie ont perdu leur capacité transactivatrice et sont plus stables que la protéine sauvage.
Les représentants de cette catégorie de mutants de p53 sont notamment les formes mutantes H 175, G281, W248, et A 143.
Un autre objet de la présente invention concerne un procédé de préparation des polypeptides selon l'invention selon lequel on cultive une cellule contenant une
séquence nucléotidique selon l'invention, dans des conditions d'expression de ladite séquence et on récupère le polypeptide produit. Dans ce cas, la partie codant pour ledit polypeptide est généralement placée sous le contrôle de signaux permettant son expression dans un hôte cellulaire. Le choix de ces signaux (promoteurs, terminateurs, séquence leader de sécrétion, etc. ) peut varier en fonction de l'hôte cellulaire utilisé. Par ailleurs, les séquences nucléotidiques de l'invention peuvent faire partie d'un vecteur qui peut être à réplication autonome ou intégratif. Plus particulièrement, des vecteurs à réplication autonome peuvent être préparés en utilisant des séquences à réplication autonome chez l'hôte choisi. S'agissant de vecteurs intégratifs, ceux-ci peuvent être préparés, par exemple, en utilisant des séquences homologues à certaines régions du génome de l'hôte, permettant, par recombinaison homologue, l'intégration du vecteur.
La présente invention a également pour objet des cellules hôtes transformées avec un acide nucléique comportant une séquence nucléotidique selon l'invention.
Les hôtes cellulaires utilisables pour la production des peptides de l'invention par voie recombinante sont aussi bien des hôtes eucaryotes que procaryotes. Parmi les hôtes eucaryotes qui conviennent, on peut citer les cellules animales, les levures, ou les champignons. En particulier, s'agissant de levures, on peut citer les levures du genre Saccharomyces, Kluyveromyces, Pichia, Schwanniomyces, ou Hansenula.
S'agissant de cellules animales, on peut citer les cellules d'insectes (SF9 ou SF21), les cellules COS, CHO, C127, de neuroblastomes humains etc. Parmi les champignons, on peut citer plus particulièrement Aspergillus ssp. ou Trichoderma ssp. Comme hôtes procaryotes, on préfère utiliser les bactéries suivantes E.coli, Bacillus, ou Streptomyces.
Selon un mode préféré, les cellules hôtes sont avantageusement représentées par des souches de levures recombinantes pour l'expression des acides nucléiques de l'invention ainsi que la production des protéines dérivées de ceux-ci.
Préférentiellement, les cellules hôtes comprennent au moins une séquence ou un fragment de séquence choisis parmi les séquences nucléotidiques SEQ ID N 16, N 21, N 9, N 15 et N 26 pour la production des polypeptides selon l'invention.
Une autre application des séquences d'acides nucléiques selon l'invention est la réalisation d'oligonucléotides antisens ou d'antisens génétiques utilisables comme agents pharmaceutiques. Les séquences antisens sont des oligonucléotides de petite taille, complémentaires du brin codant d'un gène donné, et de ce fait capables d'hybrider spécifiquement avec l'ARNm transcrit, inhibant la traduction en protéine.
L'invention a ainsi pour objet les séquences antisens capables d'inhiber, au moins partiellement , l'expression de polypeptides capables d'interagir avec la p53 comme la protéine MBP1ou la fibuline2. De telles séquences peuvent être constituées par tout ou partie des séquences nucléotidiques définies ci-avant et peuvent être obtenus par fragmentation, etc. ou par synthèse chimique.
Les séquences nucléotidiques selon l'invention peuvent être utilisées pour le transfert et la production in vitro, in vivo ou ex vivo de séquences antisens ou pour l'expression de protéines ou de polypeptides capables d'interagir avec la protéine p53.
A cet égard les séquences nucléotidiques selon l'invention peuvent être incorporées dans des vecteurs viraux ou non viraux, permettant leur administration in vitro, in vivo ou ex vivo.
Un autre objet de l'invention concerne en outre tout vecteur comprenant une séquence nucléotidique définie ci-avant. Le vecteur de l'invention peut être par exemple un plasmide, un cosmide ou tout ADN non encapsidé par un virus, un phage, un chromosome artificiel, un virus recombinant etc. Il s'agit de préférence d'un plasmide ou d'un virus recombinant.
A titre de vecteurs viraux conformes à l'invention on peut tout particulièrement citer les vecteurs de type adénovirus, rétrovirus, virus adéno- associés, virus de l'herpès ou virus de la vaccine. La présente demande a également pour objet des virus recombinants défectifs comprenant une séquence nucléique hétérologue codant pour un polypeptide selon l'invention.
L'invention permet également la réalisation de sondes nucléotidiques, synthétiques ou non, capables de s'hybrider avec les séquences nucléotidiques définies ci-avant ou des ARNm correspondants. De telles sondes peuvent être utilisées in vitro comme outil de diagnostic, pour la détection des polypeptides selon l'invention et notamment de la protéine MBP1humaine ou de la fibuline 2. Ces sondes peuvent également être utilisées pour la mise en évidence d'anomalies génétiques (mauvais épissage, polymorphisme, mutations ponctuelles, etc). Ces sondes peuvent ausi être utilisées pour la mise en évidence et l'isolement de séquences d'acides nucléiques homologues codant pour les polypeptides tels que définis précédemment, à partir d'autres sources cellulaires et préférentiellement de cellules d'origines humaines. Les sondes de l'invention comportent généralement au moins 10 nucléotides, de préférence au moins 15 nucléotides, et de préférence encore au moins 20 nucléotides. Préférentiellement, ces sondes sont marquées préalablement à leur utilisation. Pour cela, différentes techniques connues de l'homme du métier peuvent être employées (marquage radioactif, enzymatique, etc).
Selon un deuxième mode de réalisation particulier de l'invention, le matériau est électriquement isolant ou fortement résistif, le bloc est un empilement de couches de ce matériau ou est fait de ce matériau à l'état massif, ce bloc comprenant en outre des première et deuxième couches ou grilles qui sont électriquement conductrices et respectivement formées au niveau de la première face et au niveau d'une deuxième face du bloc, qui est opposée à la première face et sur laquelle débouchent les fentes, le champ électrique étant créé en portant la première couche ou grille à un premier potentiel électrique et la deuxième couche ou grille à un deuxième potentiel électrique qui est supérieur au premier potentiel pour permettre l'extraction (dérive) des troisièmes particules (électrons d'ionisation) créées par l'ionisation du milieu fluide.
Selon un autre mode de réalisation particulier de l'invention, le bloc est un empilement de lames faites d'un matériau convertisseur isolant ou fortement résistif et espacées les unes des autres par des cales prévues pour définir les fentes parallèles du bloc, ce bloc comprenant en outre des première et deuxième couches ou grilles qui sont électriquement conductrices et respectivement formées au niveau de la première face et au niveau d'une deuxième face du bloc,
qui est opposée à la première face et sur laquelle débouchent les fentes, le champ électrique étant créé en portant la première couche ou grille à un premier potentiel électrique et la deuxième couche ou grille à un deuxième potentiel électrique qui est supérieur au premier potentiel.
La présente invention concerne aussi un procédé de fabrication du détecteur objet de l'invention.
Selon ce procédé on forme le bloc et l'on forme ensuite les fentes par une technique choisie dans le groupe comprenant : - la découpe par jet d'eau, - la découpe par étincellage, et - la découpe par un fil tendu déroulant.
Selon un mode de mise en oeuvre particulier du procédé objet de l'invention, utilisable pour la fabrication d'un détecteur conforme au premier ou au deuxième mode de réalisation particulier de l'invention (utilisation d'un matériau conducteur ou d'un matériau isolant ou fortement résistif), les couches utilisées sont collées les unes aux autres.
Avant de former chaque fente, on peut former dans le bloc un avant-trou à partir duquel on forme ensuite cette fente.
BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS La présente invention sera mieux comprise à la lecture de la description d'exemples de réalisation donnés ci-après, à titre purement indicatif et nullement limitatif, en faisant référence aux dessins annexés sur lesauels :
# la figure 1 est une vue en perspective schématique d'un mode de réalisation particulier du détecteur objet de l'invention, # la figure 2 est une vue en coupe transversale schématique du détecteur de la figure 1, selon un plan P indiqué sur celle-ci, # la figure 3 est une vue en perspective schématique d'un autre détecteur conforme à l'invention, # la figure 4 est une vue en coupe transversale schématique et partielle d'un autre détecteur conforme à l'invention, et # la figure 5 illustre schématiquement un autre détecteur conforme à l'invention.
EXPOSÉ DÉTAILLÉ DE MODES DE RÉALISATION PARTICULIERS Le détecteur bidimensionnel de rayonnement ionisant conforme à l'invention, qui est schématiquement représenté sur la figure 1, comprend un bloc 2 formé à partir d'un matériau convertisseur, matériau ayant une haute section efficace d'interaction vis-à-vis de ce rayonnement ionisant.
Dans le cas de la figure 1, ce matériau est électriquement conducteur et, comme on le voit sur la figure 2, le bloc est un empilement de couches 4 de ce matériau, ces couches 4 alternant avec des couches électriquement isolantes 6.
L'empilement commence par l' une des couches 4 en la première face 7 du bloc, face par laquelle le rayonnement ionisant pénètre dans le bloc 2, et se termine également par l'une de ces couches 4 en la
deuxième face 8 du bloc, face qui est opposée à la première face.
Dans l'exemple représenté, le détecteur est destiné à détecter des photons X qui ont par exemple une énergie de 5 MeV.
Un photon X incident dont la trajectoire a la référence 9 sur les figures 1 et 2 interagit avec le matériau de l'une des couches 4 pour produire, par effet Compton ou création de paires (électron, positron), un électron de grande énergie cinétique, dont la trajectoire est représentée par la flèche 10 sur la figure 2.
On a également représenté par une flèche 12 la trajectoire du photon d'énergie inférieure à celle du photon X incident, qui résulte de l'interaction de ce dernier avec le matériau.
L'organe de verrouillage 124 comprend une partie cylindrique 160 avec une fente longitudinale 136 pour lui permettre de se déformer élastiquement. La partie cylindrique se prolonge axialement et d'un côté par deux parties d'extrémité 162a, 162b diamétralement opposées.
Chaque partie d'extrémité 162a, 162b forme un bossage semi-circulaire 164a, 164b qui s'étend radialement vers l'extérieur en délimitant une gorge interne 166a, 166b semi-circulaire, puis est repliée vers l'intérieur pour former une patte d'encliquetage 155a, 155b comme dans les modes de réalisation précédents.
Au montage de l'organe de verrouillage 124 autour de la douille 114, la saillie 130 de la douille 114, qui est formée par une collerette à l'extrémité de celle-ci, vient se loger dans les gorges 166a, 166b de l'organe de verrouillage 124 pour immobiliser ce dernier.
On notera que les deux pattes 142a et 142b de l'organe de verrouillage 124 sont délimitées par deux encoches 170 situées de part et d'autre de la fente 136.
On a représenté sur les figures 27 et 29 encore une dernière forme de réalisation e
Plus précisément, la douille 114 presente par exemple deux ouvertures diamétralement opposées 170a, 170b (figure 27) , et l'organe de verrouillage 124 présente des pattes 172a, 172b repliées vers l'intérieur et formées aux extrémités libres de l'organe de verrouillage 124 qui sont situées entre les deux pattes d'encliquetage 155a et 155b (figure 28) pour venir s'engager dans les ouvertures 170a, 170b de la douille 114 (figure 29).
La prèsente invention concerne une technique de fabrication permettant de réaliser un tube conique fermé à l'une de ses extrémités imitant le corps des insectes naturels dans leurs formes évolutives.
A partir de ce tube, on peut réaliser selon son inspiration des leurres ou encore, appelées, au sens large du terme des mouches artificielles qui sont utilisées principalement dans la pratique de la pêche sportive à la mouche.
MATERIEL UTILISE Une aiguille (1) dont le diamètre varie en fonction de la taille du tube que l'on veut obtenir, fixé sur un manche(2).
Fibres synthétiques et/ou naturelles appelées dubbing(3); la selection des fibres dépend de la couleur et de l'aspect final que l'on veut donner au tube.
Silicone translucide(4).
MODE PARTICULIER DE REALISATION 1 temps L'aiguille (1) est préalablement enduite d'une petite quantité de silicone translucide. Les fibres sont déposées sur le silicone permettant ainsi l'accroche et l'imprégnation de celles-ci.
2eme temps Une main fait tourner l'aiguille (1) l'autre main entre pouce et index (6) répartit le dubbing qui s'enroule sur la longueur et l'épaisseur souhaités. Un petit apport final de silicone translucide, toujours réparti entre pouce et index permet de coller les fibres externes et de modeler la forme définitive du tube.
3eme temps fi ne reste plus qu'à retirer(7) le tube de l'aiguille.
Après un temps de séchage de quelques minutes, on obtient un tube creux conique fermé à l'une de ses extrémités, flexible, souple, hydrophobe qui imite le corps des insectes naturels (8).
En cours de réalisation du tube, on peut répartir et incorporer des fibres de telle façon que celles-ci imitent des pattes, des cerques, des exuvies prèsents sur les corps naturels des insectes.
préparée à partir des séquences données dans la présente demande, par coupures enzymatiques, ligature, clonage, etc, selon les techniques connues de l'homme du métier, ou par criblage de banques d'ADN avec des sondes élaborées à partir de ces séquences.
Un autre objet de la présente invention concerne les séquences nucléotidiques codant pour les séquences polypeptidiques présentées dans les séquences SEQ ID N 22, ou SEQ ID N 23 ou SEQ ID N 9.
Selon un mode particulier de l'invention, les séquences nucléotidiques comprennent tout ou partie de la séquence SEQ ID N 16 ou SEQ ID N 21 ou de leurs dérivées.
Selon un autre mode de l'invention, les séquences nucléotidiques comprennent tout ou partie de la séquence nucléotidique SEQ ID N 9 ou de ses dérivées.
Selon encore un autre mode, les séquences nucléotidiques comprennent la séquence SEQ ID N 15, ou la séquence SEQ ID N 26.
Selon un mode préféré, la séquence nucléotidique est représentée par la séquence SEQ ID N 21ou ses dérivées.
Au sens de la présente invention, le terme séquence nucléotidique dérivée désigne toute séquence différant de la séquence considérée en raison de la dégénérescence du code génétique, obtenue par une ou plusieurs modifications de nature génétique et/ou chimique, ainsi que toute séquence hybridant avec ces séquences ou des fragments de celles-ci et codant pour un polypeptide selon l'invention. Par modification de nature génétique et/ou chimique, on peut entendre toute mutation, substitution, délétion, addition et/ou modification d'un ou plusieurs résidus.
Le terme séquence nucléotidique dérivée comprend également les séquences homologues à la séquence considérée, issues d'autres sources cellulaires et notamment de cellules d'origine humaine, ou d'autres organismes.
A cet égard la présente invention concerne toute séquence nucléotidique qui présente au moins 70 % d'identité et de préférence au moins 85 % d'identité avec la séquence nucléotidique SEQ ID N 23 ou la séquence nucléotidique SED ID N 22 ou la séquence nucléotidique SEQ ID N 9.
De préférence, la séquence nucléotidique selon l'invention présente au moins 90 % et de préférence encore au moins 93 % d'identité avec la séquence nucléotidique SEQ ID N 23 ou la séquence nucléotidique SED ID N 22 ou la séquence nucléotidique SEQ ID N 9.
De manière plus particulièrement préférée, les séquences selon l'invention présentent au moins 95 % et de préférence encore 97 %, voire 98 % ou même 99 % d'identité avec la séquence nucléotidique SEQ ID N 23 ou la séquence nucléotidique SED ID N 22 ou la séquence nucléotidique SEQ ID N 9.
De telles séquences homologues peuvent être obtenues par des expériences d'hybridation. Les hybridations peuvent être réalisées à partir de banques d'acides nucléiques, en utilisant comme sonde, la séquence native ou un fragment de celle-ci, dans des conditions variables d'hybridation.
Un autre objet de l'invention concerne des séquences nucléotidiques capables de s'hybrider dans des conditions de stringence élevée avec les séquences nucléotidiques définies ci-avant.
A cet égard, le terme condition de stringence élevée signifie que l'hybridation se produit si les séquences nucléotidiques présentent au moins 95 % et préféretiellement au moins 97 % d'identité.
Comme indiqué ci-avant, de telles séquences peuvent être notamment utilisées comme sondes de détection avec du RNA ou du cDNA ou du DNA génomique pour isoler des séquences nucléotidiques codant pour des polypeptides selon l'invention. De telles sondes ont généralement au moins 15 bases. De préférence, ces sondes font au moins 30 bases et peuvent avoir plus de 50 bases. De manière préférée, ces sondes ont entre 30 et 50 bases.