INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La séquence en acides aminés déduite de la séquence nucléotidique du fragment de 231pb montre une identité de 82% avec la partie correspondante de l'enzyme malique de S. bovis et de 78% avec celle de B. stearothermophilus si l'on tient compte des remplacements conservatifs.
De cette comparaison, il ressort que le fragment amplifié appartient bien à un gène de type malE.
1.2-Clonage et analyse du gène malE Clonage du gène malE La construction de la banque d'ADN de C. glutamicum ATCC 17965 a été réalisée comme suit: L'ADN total de la souche ATCC17965 a été digéré par l'enzyme de restriction MboI. Les fragments de restriction de 6 à 12kb ont été isolés par centrifugation en gradient de saccharose puis ligaturés dans le plasmide pUN121 (Nilsson et al., 1983) préalablement ouvert par l'enzyme BclI. Le mélange de ligature a été utilisé pour transformer par électroporation la souche ED.coli DH5a. Environ 10 000 clones indépendants ont été obtenus, ce qui permet d'affirmer que n'importe quel fragment d'intérêt a plus de 99,9% de chances d'être représenté au moins une fois dans cette banque (Ausubel et al , 1987).
L'ensemble des plasmides recombinants correspondant à la banque d'ADN de C. glulaf1llCUnl ATCC 17965 a été ensuite transféré dans la souche de F'. coh
XH11(Mountain et al., 1984). La banque a été ordonnée par repiquage individuel des clones en plaques de microtitration, puis transférée sur membranes d'hybridation. Les membranes ont été traitées pour obtenir la lyse des cellules puis sont soumises à hybridation en présence de la sonde décrite précédemment marquée radioactivement.
Tous les clones positifs ont été réisolés et soumis à une deuxième hybridation de contrôle. Les clones répondant positivement deux fois ont été retenus.
Une carte de restriction sommaire (par les enzymes EcoRV et PSII) a été réalisée pour tous les plasmides extraits des clones retenus.
De cette analyse, trois plasmides pMF11, pMF12 et pMF13 ont étés obtenus et portent respectivement les inserts d'environ 2,9kb, 4,35kb et 4,4kb comme indiqué dans la FiglB.
Sachant que la sonde de 231 paires de bases utilisée pour l'hybridation devait être localisée approximativement à 500 paires de bases des extrémités 5' et 3' probables du gène malE, nous avons cherché parmi pMFll, pMF12 et pMF13 le plasmide susceptible de porter le gène malE entier.
Pour cela, une hybridation par la méthode de Southem (1975) des trois plasmides coupés par les enzymes Eco RV et Pst I, et la sonde de 231 paires de bases, a été réalisée. La zone d'hybridation a été déterminée, permettant de localiser la position de la phase ouverte de lecture de malE dans les différents inserts. Le plasmide pMF12, portant un insert (4,3 5kb) débordant largement de part et d'autre de la zone d'hybridation (FiglB) a été choisi comme clone de travail.
La vérification que le fragment d'ADN inséré dans le plasmide pMF12 provenait bien de C. glutamicum ATCC 17965 a été effectuée Ceci a été démontré par hybridation ADN/ADN (Southern, 1975) entre l'ADN chromosomique de l'organisme donneur et l'ADN de pMF12 utilisé comme sonde (Fig.2).
Maintenant, si on regarde l'influence de l'augmentation de la température entre 130'C et 150'C, on peut comparer deux à deux les essais 3 et 7, 2 et 8, B et E pour constater une baisse de la stabilité de l'iridium (toutes choses égales par ailleurs - très faible : composition, pour les essais durée) selon l'invention 100 % ---> 93 % et 100 % ---> 99 % - importante pour l'essai comparatif E 72 % ---> 40 % ce qui prouve bien l'influence et l'intérêt des "composés formyles" : acide formique et formiate de méthyle.
Exemples 9 et 10 à 150'C et en l'absence de monoxyde de carbo e - Tableau C Ces essais sont destinés à montrer l'influence positive d'une légère augmentation de la teneur en eau ainsi que la remarquable stabilité de l'iridium en l'absence totale de monoxyde de carbone, quand des "composés formyles" sont présents. _ Comparée aux essais 7 et 8 (en présence de CO) et pour 15 minutes de réaction, la stabilité de Firidium est du même ordre dans l'essai 9 réalisé en l'absence de CO (96 % contre 93 et 99 %). - L'augmentation de la température de 130'C (essai 6) à 150'C (essai 10) ne provoque pas la chute de la stabilité de l'iridium (90 % essai 6 contre 93 % essai 10), ces 2 essais étant réalisés sous air, pendant 60 minutes de réaction.
Il - Exemple de procédé complet selon l'invention Exemple 11 Réaction d'isomérisation et de carbonvlation avec recyc catalyseur Dans un autoclave en Hastelloy@ B2 contenant de la solution catalytique préparée selon la méthode décrite dans les exemples précé'dents, on injecte en continu les différents composants du mélange réactionnel : acide acétique, formiate de méthyle, méthanol, acétate de méthyle, iodure de méthyle, et éventuellement eau. Les flux sortant du réacteur sont dirigés dans une zone où une fraction contenant l'acide acétique produit est vaporisée. La fraction non vaporisée contenant le catalyseur est recyclée au réacteur. La fraction vaporisée est condensée et représente les effluents liquides.
On maintient dans cet essai, dans la fraction liquide non vaporisée issue du flash, une concentration totale en acide formique et fon-niate de méthyle de 6,5 % et une teneur en eau de 1 %.
La composition du mélange réactionnel en régime stabilisé, déterminée par dosage en chromatographie en phase vapeur d'un échantillon prélevé du milieu réactionnel, exprimée en pourcentages massiques, est la suivante:
eau : 1,3% méthanol 0,1 % acétate de méthyle 16,1 % iodure de méthyle 9,7% acide formique : 4,3 11/o formiate de méthyle 1,6% acide acétique : complément à 100 % la concentration en iridium est de 2050 mg/kg (ppm). La température est maintenue à 190'C +/- 0,5'C.
La pression totale du réacteur est maintenue à 2,4 MPa +/- 20 kPa (24 bars).
La pression partielle de monoxyde de carbone est maintenue constante à une valeur de 1,05 MPa (10,5 bars) ; le CO utilisé est de pureté supérieure à 99%.
Le calcul de la vitesse de formation de l'acide acétique par les deux réactions d'isomérisation du formiate de méthyle et de carbonylation du méthanol est effectué grâce au bilan sur les effluents liquides de la zone de vaporisation, collectés pendant une durée donnée (comprise entre 2 et 4 h), par rapport aux flux des composés injectés pendant le même laps de temps, après que le régime chimique a été stabilisé. Le calcul de la vitesse de carbonylation est fait d'après le bilan gaz sur le monoxyde de carbone consommé.
On obtient une vitesse d'isomérisation de 1,4mol.h-11-1 en acide acétique formé, et une vitesse de carbonylation de 16,4mol.h-11-1 en acide acétique formé. L'acide acétique se trouve sous la forme d'acide acétique et d'acétate de méthyle.
La présente invention concerne un nouveau polypeptide ICBP 90 et ses fragments, le clonage de l'ADNc et les polynucléotides codant pour lesdits polypeptides, des vecteurs de clonage et/ou d'expression incluant lesdits polynucléotides, des cellules transformées par lesdits vecteurs et des anticorps spécifiques dirigés contre lesdits polypeptides.
L'invention concerne également des procédés et des kits de diagnostic des cancers, un procédé et un kit de criblage de ligands du polypeptide de l'invention et des composés utilisables à titre de médicament pour la prévention et/ou le traitement des cancers.
Les ADN topoisomérases sont des protéines nucléaires hautement conservées au cours l'évolution dont le rôle principal est de contrôler la conformation et la topologie de l'ADN dans le noyau, qui sont constamment altérées par les différents processus biologiques impliquant l'ADN tels par exemple la transcription et la réplication. Les topoisomérases exercent leur action en coupant l'ADN et en reliant ces lésions après avoir réalisé le changement conformationnel adéquat.
Chez les mammifères et l'homme en particulier, il existe à l'heure actuelle au moins cinq gènes différents codant pour une topoisomérase et au moins deux pseudogènes additionnels (pour revue, voir Nitiss 1998). Ainsi, la topoisomérase I, codée par le gène TOP1 retire les supertours présents dans l'ADN en ne coupant qu'un seul brin. Les deux topoisomérases de type II existant chez l'homme appelées TopIIa et TopIIp, altèrent la topologie de l'ADN en introduisant des clivages double brin transitoires (pour revue, voir Wang 1996). Enfin, il existe deux topoisomérases de type III codées par deux gènes localisés en 17p 11.2- 12 et 22qll-12et qui agissent uniquement contre les supertours négatifs de l'ADN.
Dans les cellules tumorales, les topoisomérases de type II jouent un rôle très important ; dans ces cellules en croissance et en division rapide, il existe un grand besoin de maintenir les molécules d'ADN dans une conformation correcte puisque des taux de transcription et de
réplication élevés sont nécessaires. Ainsi, les taux de toposiomérases II sont en général plus élevés dans les cellules tumorales humaines que dans les tissus normaux de même origine. Cependant, le taux d'expression élevé de la topoisomérase II[alpha] dans les cellules tumorales peut variés entre deux tumeurs de nature différente affectant un même tissu. Par exemple, le noyau des cellules de carcinome du poumon à petites cellules présente un taux plus élevé de topoisomérase II[alpha] que le noyau des cellules de carcinomes pulmonaires à cellules de taille normale (Guinee et al., 1996). De la même manière, le taux de topoisomérase IIa dans les cellules A549 est trois fois plus élevé que dans les cellules PC3, ces deux lignées cellulaires provenant d'adénocarcinome de l'épithélium pulmonaire (Yamasaki et al., 1996).
R. M.N. 'H # (ppm) : 2,7 (s,3H) ; 3,0-3,1 (m,lH); 3,3-3,4 (m,lH); 3,4-3,7 (m,3H); 3,8-3,95 (m,lH); 4,45-4,55 (m,IH); 6,45(s,lH); 6,9(s,lH); 6,95 (s,lH); 7,4-7,6 (m,5H); 7,95-8,2 (m,3H).
I.R.: 3350,1680,1480, 1380,1300, 1240,1170, 1110,1010, 790,690.
EXEMPLE 3 (3S) 3-(2-méthyl-4-oxo-4H pyrido[3,4-d]p,yrimidin-3-yl)-9-amino-1-phényl- 6,7-dihydro-3H [1,4]diazépino[6,7,1-ht']indol-4-one. (18) [A=NH2Z=NZ1=Z2=B=CH3,X1 =H, X2 = H] Cette synthèse est une illustration du procédé direct B, où l'on ne part pas d'un acide ortho aminé protégé, mais directement d'un acide ortho aminé (V').
1 ) Synthèse de l'intermédiaire (Il) Intermédiaire 15 : 2-amino-N ((3R) 9-nitro-4-oxo-l-phényl-3,4,6,7-tétrahydro- [l,4]diazépmo[6,7,l-]mdot-3-yl)-mcotinamide.
[(A=N02Z=NZI=Z2=X1=HX2= Dans un réacteur protégé de l'humidité on dissout sous agitation 3,08 g (22,3 mmol) d'acide 2-amino-nicotinique dans 150 ml de dichlorométhane sec. On ajoute 2,51 g
(18,6 mmol) d'HOBT et 3,83 g (18,6 mmol) de DCC. Le mélange est refroidi à 0 C et on ajoute 6,0 g (18,6 mmol) de 1 dans 25 ml de dichlorométhane. Après 24 h sous agitation à 0 C, l'insoluble est filtré et le résidu est rincé par du dichlorométhane. Les phases organiques sont évaporées et le résidu est dissout dans un excès de dichlorométhane. La phase organique est lavée par une solution HKS04 0,1 N, une solution saturée en NaHC03 et enfin par de l'eau. Le solvant est évaporé sous vide à 0 C et le résidu purifié par chromatographie rapide sur colonne de silice en éluant par D/M1. On obtient 4,0 g d'un solide blanc cristallisé 15. Rdt = 48 %.
C.C.M. (D/MN5) : Rf = 0,49.
R. M.N. 'H ô (ppm) : 3,22-3,32 (m,lH); 3,4-3,55 (m.lH); 4,05-4,2 (m,lH); 4,7-4,8 (m,IH); 5,65 (d,lH); 6,4 (s, 2H,échangeables); 6,75 (m,lH); 7,4-7,5 (m, 2H); 7,5-7,6 (m, 3H); 7,85 (m,lH); 7,95 (m,lH); 8,25 (m,2H); 8,32(m,lH).
Intermédiaire 16 : acideN-[3-((3R) 9-nitro-4-oxo-l-phényl-3,4,6,7-tétrahydro-[l,4]di- azépino[6,7,1-hcindol-3-ylcarbamoyl)-pyridin-2-yl]-acétimidique méthyl ester. [(A=N02Z=NZl=Z2=B=3x1 =H, X2 = H, R = CH3] 4,0 g de 15 sont dissous dans 125 ml de triméthyl orthoacétate ; on chauffe à 40 C sous agitation, sous un vide de 0,1kPa pour éliminer le méthanol qui se forme dans la réaction. Après 6 h la réaction est complète. On évapore le solvant et utilise le produit brut directement dans la réaction suivante.
R. M.N. 'H # (ppm) : 2,1 (s,3H); 3,1-3,6 (m, 2H); 3,95-3,2 (m,lH); 4,1 (s, 3H); 4,55- 4,75 (m,IH); 5,62 (d,IH); 7,05-7,2 (m,IH); 7,25-7,55 (m,7H); 8,05-8,35 (m,2H); 8,35-8,55 (m,lH).
2 ) (3S) 3-(2~méthyl-4-oxo-4H-pyrido[3,4-dlpyrimidin-3-yl)-9-amino- 1 -phényl-6,7 dihydro-31 [1,4]diazépino[6,7,1-hi]indol-4-one. z Produit 17 : On reprend 16 dans 400 ml de dichlorométhane, ajoute 240 mg (6 % en poids) de trifluorométhanesulfonate de scandium et agite pendant 6 h à 40 C. On ajoute à nouveau 500 mg de catalyseur et agite à température ordinaire pendant 6 h et évapore à siccité. On reprend le résidu par 400 ml de dichlorométhane, ajoute encore 500 mg de catalyseur. Après 24 h, la réaction est complète. On lave par de l'eau, évapore, et obtient 5,4 g de produit brut sous forme de résine.
Produit 18 :
2,6 g (5,6 mmol) de 17 sont hydrogénés sous une pression de 800 kPa à 80 C dans 260 ml de méthanol, en présence de 2,5 g de ruthénium sur charbon à 5% pendant 90 min. On refroidit, filtre sur un lit de silice et évapore la phase organique. On obtient 2,1 g de produit brut que l'on chromatographie sur phase inverse (colonne de Cl8 Kromasil 5 juin dans un gradient linéaire d'acétonitrile dans de l'eau). On obtient 300 mg de produit 18. ee = 94,5 %.
EXEMPLE 4 (3S) 3-(2-méthyl-4-oxo-4H quinazolin-3yl)-9-méthyl-1- hényl-6,7-dihydrodiazépino[6, 7, I-hi]indol-4-one. (23) ((1);A=CH3,Z=CH,Zl=CH,Z2=CH,B=CH3,X1=H,X2=H] 1 ) Synthèse de l'intermédiaire (II) Intermédiaire (19) : (3R) 3-amino-9-méthyl-1-phényl-6,7-dihydro-3H [1,4]diazépino[6,7,1-ht']indol-4.-one. [(VI) ; A = CH3].
Une méthode de préparation de ce produit est décrite dans la demande WO 96/11690.
Intermédiaire (20): acide [2-((3R) (9-méthyl-4-oxo-1-phényl-3,4,6,7-tétrahydro-[1,4]di- azépino[6,7, I-hllindol-3-ylcarbamoyl)-phényl]-carbamique t-butyl ester.
Les mécanismes de traitement proposés sont dans la réalité mis en pauvre en tant que fonctions de logiciel d'un système d'ordinateur. Les étapes de processus que l'unité de base de PDM, le serveur de distribution et les stations de réception exécutent sont codées dans des programmes d'ordinateur qui peuvent être stockés dans un support de stockage lisible par ordinateur. Le système d'ordinateur exécute ces programmes afin de réaliser des fonctions prévues de la présente invention. Les supports de stockage lisibles par ordinateur appropriés incluent des supports de stockage magnétiques et des dispositifs de mémoire à l'état solide. Certains supports de stockage portables tels que des CD-ROM et des disques souples conviennent également à des fins de circulation de l'information. En outre, il sera possible de distribuer des programmes sur un ordinateur serveur approprié déployé sur un réseau. Les fichiers de programme délivrés aux utilisateurs sont normalement installés dans leur unité de disque dur d'ordinateur ou dans d'autres dispositifs de stockage en masse locaux de telle sorte qu'ils soient exécutés après avoir été chargés dans la mémoire principale de l'ordinateur.
La discussion présentée ci-avant sera maintenant résumée comme suit. La présente invention propose un système de délivrance de données permettant de délivrer des données qui sont stockées dans une station d'envoi à au moins une station de réception. La station d'envoi comprend de façon avantageuse : une unité d'identification d'attribut qui identifie des attributs de données destinées à être distribuées ; une unité de détermination de destination qui détermine les destinations des données en fonction des attributs identifiés par l'unité d'identification d'attribut; un émetteur qui envoie les données jusqu'aux destinations déterminées par l'unité de détermination de destination. Par ailleurs, la station de réception comprend de façon avantageuse : un récepteur qui reçoit les données qui sont envoyées depuis l'émetteur et une unité de reproduction qui restaure les données reçues selon leur format original. Ce système délivre des données créées à toutes les parties qui en ont besoin en utilisant leur information d'attribut pour les identifier. Par conséquent, l'utilisateur du côté d'envoi est libéré des tâches peu commodes et susceptibles d'erreurs constituées par la distribution des données.
En outre, la présente invention propose une station d'envoi qui délivre des données qui sont stockées dans son unité de stockage interne ou externe à au moins une station de réception. Cette station comprend de façon avantageuse: une unité d'identification d'attribut quai identifie des attributs de données destinées à être distribuées ; une unité de détermination de destination qui détermine les destinations des données en fonction des attributs identifiés par l'unité d'identification d'attribut et un émetteur qui envoie les données jusqu'aux destinations déterminées par l'unité de détermination de destination. Ce système permet à l'envoyeur de distribuer des données sur toutes les parties qui en ont besoin d'une façon fiable.
Ce qui précède est considéré comme étant illustratif seulement des principes de la présente invention. En outre, puisque de nombreuses modifications et variantes apparaîtront aisément à l'homme de l'art, il n'est pas souhaitable de limiter l'invention à la construction et aux applications exactes présentées et décrites et par conséquent, toutes les modifications et équivalents appropriés peuvent être considérés comme tombant dans le cadre de l'invention définie selon les revendications annexées et selon leurs équivalents.
DISPOSITIF OPTIQUE À SEMICONDUCTEUR, À CAVITÉ RÉSONANTE ACCORDABLE EN LONGUEUR D'ONDE, APPLICATION A LA MODULATION D'UNE INTENSITE LUMINEUSE DESCRIPTION DOMAINE TECHNIQUE La présente invention concerne un dispositif optique à semiconducteur, à cavité résonante accordable en longueur d'onde.
Ce dispositif est susceptible d'être fabriqué aussi bien sous la forme d'une source de lumière cohérente, par exemple un laser à émission verticale, également appelé VCSEL dans la suite, ou un laser à émission par la tranche ( edge émission ), que sous la forme d'une source de lumière incohérente, par exemple une diode électroluminescente ( light emitting diode ), également appelée LED dans la suite et ayant une émission verticale ou une émission par la tranche.
Le dispositif objet de l'invention est également susceptible d'être fabriqué sous la forme d'un modulateur optique fonctionnant en réflexion ou en transmission.
L'invention trouve des applications dans divers domaines tels que par exemple les télécommunications optiques, les réseaux tout-optiques ( all optical networks ), l'affichage d'informations et la spectroscopie.
ÉTAT DE LA TECHNIQUE ANTÉRIEURE On rappelle que dans une diode à émission verticale les miroirs qui délimitent la cavité résonante de la diode sont formés perpendiculairement à l'axe de croissance des couches enserrant la zone active et l'espaceur ( spacer ) qui se trouvent dans la cavité. Cet espaceur est lui-même compris entre la zone active et les miroirs de la cavité.
Cette cavité peut avoir une longueur de l'ordre de 1 um et s'appelle alors une microcavité . Dans une telle micro-cavité un seul mode optique est en général sélectionné à cause de la faible épaisseur de la micro-cavité, alors que dans une cavité résonante plus épaisse, on peut avoir plusieurs modes optiques.
Les diodes à émission verticale, qu'elles soient du genre VCSEL ou LED, offrent d'énormes potentialités pour le marché des télécommunications optiques grâce à : # leur simplicité de fabrication qui permet de former des matrices comportant un grand nombre d'émetteurs de lumière, # la qualité du mode électromagnétique de leur émission lumineuse, et # leur facilité d'intégration dans des circuits optoélectroniques.
On connaît déjà des diodes lasers à émission verticale qui sont accordables par variation de température, par le document [1] qui, comme les autres documents cités par la suite, est mentionné à la
fin de la présente description. De telles diodes ont un temps de réponse très long, de l'ordre de 1 seconde, et une faible plage d'accordabilité.
On connaît également par le document [2] une diode à émission verticale, accordable au moyen d'une membrane déformable, qui est commandée électriquement et constitue le miroir de sortie de la cavité résonante de la diode. Cette dernière est susceptible d'avoir une accordabilité de plusieurs dizaines de nanomètres. Cependant, elle est difficile à fabriquer et, de ce fait, plutôt coûteuse. En outre, l'utilisation d'une membrane déformable conduit à un temps de réponse assez long, de l'ordre de 1 us.
Dans le domaine des diodes à émission par la tranche, on connaît, par le document [3], des diodes lasers accordables par variation de température. De telles diodes ont un temps de réponse très long, de l'ordre de 1 seconde, et une plage d'accordabilité plutôt limitée.
On connaît aussi, par le document [4], des diodes lasers à émission par la tranche qui sont accordables au moyen d'un réseau ( grating ) de diffraction externe. De telles diodes ont un temps de réponse de l'ordre de 1 milliseconde et sont de plus massives et très coûteuses.
Les variations du cepstre, le cepstre d'un signal x étant la transformée de Fourier inverse du logarithme de la transformée de Fourier de x, sont souvent utilisées. On peut ainsi montrer que le cepstre permet de visualiser le phénomène de micro-retards présents dans les signaux de tirs caractérisés par une plus large variance. Le document référencé [2] note aussi cette propriété en signalant néanmoins que l'absence de cette caractéristique ne permet aucune déduction quant à la classe de l'événement.
Les rapports des amplitudes des différents types d'ondes peuvent aussi servir de discriminants. Le document référencé [3] étudie toute une série de rapports d'amplitudes (Pn/Lg, Pg/Lg, Lg/Rg) . Ces rapports sont annoncés comme pouvant permettre une bonne discrimination.
Les mêmes auteurs introduisent aussi les rapports des densités spectrales de puissance des différents types d'ondes détectés. Comme pour les rapports d'amplitudes, ces discriminants sont utilisés par toutes les études qui recherchent des discriminants dans les signaux sismiques. Pour caractériser les explosions, on a également utilisé les rapports des densités spectrales de puissance d'un type d'onde, ici S, sur des bandes de fréquences différentes, c'est-àdire le rapport de la densité spectrale de puissance de S dans la gamme 1-2 Hz à la densité spectrale de puissance de cette même phase dans la bande 7-20 Hz. Le rapport entre des densités spectrales de puissance de l'onde S avant et après 10 Hz est également présenté comme un bon séparateur des explosions des séismes.
Le document référencé [4] remarque que le temps de propagation des signaux provenant d'une mine a un temps tsg-tpg constant pour une station d'enregistrement donnée. Ce temps de propagation est présenté comme une caractéristique potentielle pour une mine, restant cependant moins fiable que les précédentes caractéristiques.
Le document référencé [5] propose d'utiliser la présence de l'onde de surface des séismes pour les discriminer des explosions nucléaires à des distances régionales. La caractérisation de la présence d'une onde de surface est effectuée indirectement en comparant les magnitudes mb et Ms. Pour deux événements sismiques de même magnitude mb, la magnitude de l'onde