INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
On définit la période comme le plus petit intervalle de temps AT au bout duquel chacune des entrées et sorties a été décalée d'une colonne ou tronçon de colonne, le décalage n'ayant pas lieu simultanément pour toutes les entrées et sorties. Il est à noter qu'au bout d'un temps de cycle Nc x AT, le système a retrouvé sa position initiale.
Le terme adsorbant est utilisé dans son sens le plus général. Il peut être un adsorbant comme un tamis moléculaire, zéolithique par exemple, utilisé dans les procédés d'adsorption, ou un adsorbant comme une résine échangeuse d'ions. Il peut aussi être une phase stationnaire sur base de silice, un adsorbant phase inverse et une phase chirale.
(2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 16:
(xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 16:
Thr Ser Ser Ser Gln Lys Asn Ile Thr
(2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 17:
(xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 17:
Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Ser Leu
(2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 18:
(xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 18:
Val Pro Val Ala Leu Met Ser Ala
(2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 19:
La composition énantiomérique de cet acide a été déterminée par HPLC chirale sur une colonne Chiralcel OD-H (250*4 mm, 5 m, DAICEL japon) avec comme conditions d'analyse: hexane/iPrOH/CF3COOH . 98/1,95/0,05, 0,8 ml/min, , = 230 nm. On obtient 2 pics à Rt = 30,43 min (55,3 %) et Rt = 32,75 min (44,7 %).
Pouvoir rotatoire : [a]20 = -3,3 (# = 436 nm, c = 2g/dm3, CHC13).
EXEMPLE 49 : HYDROLYSE DE L'IBUPROFENATE DE CELLULOSE (DS=2,73, EXEMPLE 18) : En opérant comme dans l'exemple 35, avec 0,102g de phase, 0,61g de LiOH monohydrate, 50 ml de THF et 72h d'hydrolyse, on obtient 0,035g (0,17 mmol) de kétoprofen.
Le rendement de l'hydrolyse est de 50 % et l'acide récupéré est analysé par RMN
'H-RMN (CDC13, 200 MHz) 8 (ppm) : 1,2 (d, 6H, (CH3)2-CH), 1,4 (d, 3H, a-CH3), 1,8 (sept, 1H, (CH3)2-CH), 2,4 (d, 2H, CH2-CH3), 3,7 (q, 1H, H benzyliques), 7-7,25 (m, 4H, H aromatiques), 9 -10 ( m, 1H, H acide).
La phase hydrolysée récupérée est analysée par IR solide (KBr) : on observe la présence d'une forte bande OH mais également de la bande C=O à 1760 cm-1 qui confirme que l'hydrolyse n'a été que partielle.
On obtient 2 pics à Rt = 11,66 min (63,3 %) et Rt = 13,99 min (36,7 %).
Pouvoir rotatoire :[a]20 = -10,1 (# = 589 nm, c = 7 g/dm3, CHC13).
EXEMPLE 50 : HYDROLYSE DE L'a-(3,5-DiMETHYLPHENYL) PROPIONATE DE CELLULOSE (DS = 1,74, EXEMPLE 20) : En opérant comme dans l'exemple 35, avec 0,148g de phase, 0,101g de LiOH monohydrate, 60 ml de THF et 72h d'hydrolyse, on obtient 0,117g (0,66 mmol) d'acide 3,5-diméthylphényl propionique.
'H-RMN (CDC13, 200 MHz) 8 (ppm) : 1,48 (d, 3H, [alpha]-CH3), 2,29 (s, 6H, CH3-Ar), 3,67 (q, 1H, H benzyliques), 6,92 (s, 3H, H aromatiques), 9,5 -11(m, 1H, H acide).
La figure 13A représente le schéma de construction du plasmide pCIVA.
La figure 14A représente le schéma de construction du plasmide pCV#.
La figure 14B représente une carte de restriction du plasmide pCV#.
La figure 15 représente l'analyse par Southern blot des souches mutantes BII92, CIII68, CII62, BIV87, BV88, CIV89 et CV90, comparativement à la souche sauvage "red variant" notée Wt. Pour chaque mutant, l'enzyme de restriction utilisée est indiquée en-dessous de chaque blot et la taille des bandes détectées devant chaque blot est estimée par rapport aux marqueurs de poids moléculaire #-HindIII et X-BstEII (non détectables par auto-radiographie).
La figure 16 représente l'analyse par PCR des souches mutantes BII91, CIII68, CII62, BIV87, BV88, CIV89 et CV90, comparativement à la souche sauvage "red variant" notée Wt et aux plasmides pBII#, pCIUA, pCIlA, pBIVA, pBV#, PCIVA et pCV# utilisés respectivement pour obtenir le mutant par recombinaison homologue. Les tailles des bandes détectées par coloration au bromure d'éthydium sont estimées par rapport aux marqueurs de poids moléculaire #X174-HaeIII ou X-BstEII.
La figure 17 représente l'analyse par CCM des métabolites produits par les souches mutantes BII92, CIII68, CII62, BIV87, BV88, CIV89 et CV90, comparativement aux produits standards érythromycine A (Er A), érythronolide B (EB) et
3-a-mycarosyl érythronolide B (MEB).
La figure 18 représente l'analyse par SDS-PAGE de la purification de la protéine EryCIII successivement après extraction à l'urée 7M (ligne 2), chromatographie Q Sépharose (ligne 3), chromatographie Superdex (ligne 4), chromatographie Q source (ligne 6) avec des marqueurs standard de poids moléculaire (lignes 1 et 5); La figure 19 représente l'analyse par CMM du test d'activité biologique de la protéine EryCIII, par incubation avec d-TDP-D-désosamine (ligne 2) ou avec d-TDP-D-désosamine et 3-a-mycarosyl érythronolide B (MEB) (ligne 3) comparativement au contrôle MEB (ligne 1) et au contrôle érythromycine A (ligne 4). Les pointillés marquent les zones montrant une activité antibiotique par autobiogramme sur B. pumilus.
La figure 20 représente la localisation des six cosmides (cosAB35, cosAB76, cosAB87, cosAB67, cosAB63 et cosAB61) couvrant l'ensemble du cluster des gènes de la biosynthèse de l'oléandomycine. Les fragments de restriction BamHI (noté B) hybridant avec les sondes notées str M, D, E et les fragments BamHI (3,5 kb et 2,7 kb) hybridant avec la sonde eryCIII sont montrés.
La figure 21 représente l'organisation de la partie droite du cluster des gènes de la biosynthèse de l'oléandromycine chez S. antibioticus dont les différentes ORFs (notées olePl, oleGl, oleG2, oleM, oleY, oleP et oleB) sont indiquées par des flèches ainsi qu'une carte de restriction du plasmide pC035-S et l'insert du plasmide pC03 généré à partir du pC035-S. La double flèche indique l'insert correspondant à la séquence de la figure 22 (abréviations des enzymes de restriction : B, BamHI ; Bg,BglII ; K, KpnI ; S, SacI ; Sh, SphI ; l'étoile indique qu'il ne s'agit pas d'un site unique) .
La figure 22représente la séquence nucléotidique (séquence de SEQ ID N 15) de la région couvrant les gènes olePl, oleGl, oleG2, oleM et oleY de la biosynthèse de l'oléandomycine et leurs séquences protéiques déduites.
EXEMPLE 1 : clonage et séquençage de la région eryG-eryAIII du cluster de gènes de la biosynthèse de l'érythromycine.
Un fragment d'ADN génomique de Sac. erythraea NRRL 2338 ayant > 20 kb en aval du gène ermE couvrant notamment les ORFs 3 à 9 et correspondant au clone XSE5.5 ainsi que la séquence nucléotidique d'un fragment de 4,5 kb correspondant à la région du cluster ery comprise entre 3,7 kb et 8,0 kb à partir de l'extrémité 3' du gène ermE et comprenant les ORFs 3,4, 5 et 6 ont été décrits par Haydock et al. (1991).
A titre de comparaison, un guide avec la même ouverture numérique de 0,26 (on rappelle que l'ouverture numérique est la racine carrée de la différence entre le carré de l'indice optique du guide dopé avec les ions actifs et le carré de l'indice optique du substrat) et ne possédant qu'une couche guidante de 10 um ne serait pas monomode et posséderait donc un moins grande qualité de faisceau.
Il est important que l'amplificateur ait un guide multimode épais. Cela permet de focaliser plus facilement le faisceau de pompe 4 sur la tranche de l'empilement des couches 14,16 et 18 et de rendre le montage plus compact.
L'amplificateur de la figure 2 diffère de celui de la figure 1 par le fait que le couche 14 est supprimée. La couche 16, référencée 16a sur la figure 2, repose directement sur le substrat 6. De plus la couche 18, référencée-18a sur la figure 2, a une épaisseur supérieure à l'épaisseur qu'elle avait dans le cas de la figure 1. Dans le cas de la figure 2, le guide monomode est formé par la couche 16a tandis que le guide multimode est constitué par l'ensemble des couches 16a et 18a.
Dans l'exemple représenté, les indices ni, n3, n4 et n5 conservent les valeurs qu'ils avaient dans le cas de la figure 1, l'épaisseur de la couche 18a est le double de l'épaisseur de la couche 18 de la figure 1 et l'on obtient encore une épaisseur de 10 um pour le guide multimode.
La figure 3 est une vue en perspective schématique d'un laser de puissance conforme à l'invention. Ce laser de puissance comprend un amplificateur 22 conforme à l'invention (l'amplificateur de la figure 2 dans l'exemple représenté) ainsi qu'une source laser 24 (un microlaser dans l'exemple représenté) destinée à fournir le faisceau 2 que l'on veut amplifier et une source 26 de lumière de pompage (une barrette de diodes lasers de puissance dans l'exemple représenté) qui fournit plusieurs faisceaux lasers de pompage qui ont la référence collective 28.
Il s'agit encore d'un pompage transverse et la,barrette de diodes lasers de puissance est disposée de façon que les faisceaux de pompage issus des différentes diodes de cette barrette soient perperdiculaires à l'axe du faisceau à amplifier 2.
Le laser de puissance comprend aussi une lentille cylindrique 30 prévue pour collimater les faisceaux de pompage et une lentille cylindrique de couplage 32 qui reçoit ces faisceaux collimatés et les focalise sur la tranche du guide multimode (couches 16a et 18a) .
Qn voit également le faisceau laser 34 qui a été amplifié grâce au pompage optique et qui sort par la tranche du guide monomode (couche 16a), par une face latérale 36 du guide planaire, adjacente à la face 10 qui reçoit les faisceauxde pompage.
A titre purement indicatif et nullement limitatif, on utilise une barrette de diodes lasers de puissance de 20 W, émettant à une longueur d'onde de 807 à 808 nm.
La face latérale 12 du guide planaire (face opposée à celle par laquelle pénètrent les faisceaux de pompage) est avantageusement recouverte d'une couche hautement ou totalement réfléchissante 38 vis-à-vis de ces faisceaux de pompage.
De préférence, cette couche 38 est également anti-reflet vis-à-vis du faisceau à amplifier 2 et une autre couche 40 anti-reflet vis-à-vis du faisceau à amplifier 2, recouvre également la face latérale 36 du guide planaire (face opposée à la face latérale d'entrée du faisceau à amplifier).
Ces couches 38 et 40 sont des dépôts multidiélectriques qui permettent : - d'optimiser les dimensions transverses du guide planaire tout en assurant une bonne uniformité du pompage dans l'amplificateur, - d'éviter les oscillations parasites qui contribuent à dégrader les performances de l'amplificateur et - d'éliminer les pertes d'injection dans la structure guidante et les retours de la lumière dans les diodes de pompe ou dans le micro-laser 24 (oscillateur maître), qui perturberaient le fonctionnement de ceux-ci.
Au lieu d'utiliser de telles couches, on peut biseauter, comme cela est schématiquement illustré par la figure 4 en vue de dessus, les faces latérales 12 et 36 du guide planaire.
On voit que la face 12 est biseautée avec un angle a et que la face 36 est biseautée avec un angle ss. Ces angles a et (3 sont de l'ordre de 0,5 à 1 . Ces biseaux remplacent donc les traitements diélectriques destinés à lutter contre les oscillations parasites (effet laser indésirable).
S'il n'y a pas la couche 38, on peut prévoir, en regard de la face latérale 12, un autre ensemble de pompage optique pour envoyer des faisceaux de pompage 28a dans la tranche du guide multimode, cet autre ensemble comprenant successivement une barrette 26a de diodes lasers de puissance, une lentille de collimation 30a (homologue de la lentille 30) et une lentille de focalisation 32a (homologue de la lentille 32).
La structure planaire d'un amplificateur conforme à l'invention facilite : - la régulation en température ainsi que la minimisation des effets de distorsion thermo-optique (biréfringence thermo-induite), qui permettent de forts gains avec de fortes puissances de sortie - le passage d'une amplification d'un seul faisceau à une amplification de plusieurs faisceaux, grâce au pompage étant un pompage transverse effectué sur toute la largeur 1 (figure 3) du guide planaire et - l'utilisation de microtechniques optiques et mécaniques pour réaliser des sources lasers de puissance, que l'on peut intégrer dans des micro- systèmes.
# Analyse Elémentaire : % calculé : C 66,33 %, H 5,53 % (pour une monosubstitution), % obtenu : C 66,30 %, H 5,35%.
EXEMPLE 18: SYNTHESE DE L'IBUPROFENATE DE CELLULOSE DANS LA PYRIDINE : On opère comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant l'acide a-phényl propionique par de l'ibuprofen ; avec 0,383g de cellulose, 5g (9,5 équivalents) de chlorure d'ibuprofen racémique, 40 ml de pyridine et un reflux à 115 C. On obtient alors 1,207g (rdt = 70,3 % sur la base d'une trisubstitution) d'un polymère chiral d'ibuprofénate de cellulose avec un degré de substitution de 2,73 déterminé par analyse élémentaire.
ANALYSES : #IR(KBr) Vmax (crri 1) : 3500 (OH), 3000-2800 et 1420 (-CH3, -CH2), 1760 (C=O ester), 1500/820 (C=C aromatiques), 1480 (#as -CH3), 1170 et 1090 (C=O/C-O).
# 'H-RMN (CDCl3, 200 MHz) 8 (ppm) : 0,8(m, (CH3)2-CH), 1,1-1,4 (m, a-CH3), 1,9 (m, (CH3)2-CH), 2,4 (m, CH2-CH), 3,1-5 (m, H cellulosiques + H benzyliques), 6,8-7,2 (m, H aromatiques).
# Analyse Elémentaire : % calculé : C 74,38 %, H 7,99 % (pour une trisubstitution).
% obtenu : C 73,73 %, H 8,10 % #Pouvoir rotatoire : [a]20 = -81,0 (X = 436 nm, c = 1 gldm3, CHC]3)- EXEMPLE 19 : SYNTHESE DE L'IBUPROFENATE DE P-CYCLODEXTRINE DANS LA PYRIDINE : On opère comme dans l'exemple 10, mais en remplaçant l'acide a-(p-chlorophényl) propionique par de l'ibuprofen et la cellulose par de la de P-cyclodextrine; avec 0,5g de P-cyclodextrine, 4g (5,8 équivalents) de chlorure d'ibuprofen racémique, 40 ml de pyridine et un reflux à 120 C pendant 18 h. On obtient alors 0,48g (rdt = 1,5 % sur la base d'une trisubstitution) d'un polymère chiral d'ibuprofénate de P-cyclodextrine avec un degré de substitution de 2,9 déterminé par analyse élémentaire.
ANALYSES : IR(KBr) v (crri 1) : 3000-2800 et 1390 (-CH3,-CH2), 1760 (C=O ester), 1530/820 (C=C aromatiques), 1480 (8as -CH3), 1170 et 1090 (C=O/C-O).
# 'H-RMN (CDC13, 200 MHz) # (ppm) : 0,9 (m, (CH3) 2-CH), 1,1-1,6 (m, a-CH3), 1,9 (m, (CH3) 2-CH), 2,4 (m, CH2-CH), 2,9-5,5 (m, H cellulosiques + H benzyliques), 6,5-7,3 (m, H aromatiques).
% obtenu : C 73,30 %, H 8,05 %.
# Pouvoir rotatoire : [a]20 = +158,2 (# = 436 nm, c = 3,3 g/dm3, CHC13).
EXEMPLE 20 : SYNTHESE DE L'a-(3,5-DIMETHYLPHENYL)-PROPIONATE DE CELLULOSE DANS LA PYRIDINE : On opère comme dans l'exemple 14, mais en remplaçant le kétoprofen par l'acide 3,5-diméthylphényl propionique ; avec 0,25g de cellulose, 2,73g (9équivalents) de chlorure d'acide 3,5-diméthylphényl propionique racémique, 40 ml de pyridine, chauffage 24h à 90 C puis 20h à 120 C et agitation ultrasonique lors de la
dissolution de la phase dans le dichlorométhane au moment de la purification. On obtient alors 0,447g (rdt = 45,1% sur la base d'une trisubstitution) d'un polymère chiral 3,5-diméthylphényl propionate de cellulose avec un degré de substitution de 1,74 déterminé par analyse élémentaire.
ANALYSES : # IR(KBr) vmax (cm-1) : 3500-3400 (OH), 3000-2900 (-CH3), 1760 (C=O ester), 1600/800 (C=C aromatiques trisubstitués symétriques), 1470 (8as -CH3), 1170 et 1090 (C=O/C-O).
# 'H-RMN (Pyridine d5,200 MHz) 8 (ppm) : 1,1-2 (m, a-CH3), 2,1-2,8 (m, 2*CH3- Ar), 3-6 (m, H cellulosiques + H benzyliques), 6,8-7,5 (m, H aromatiques).
Y est de préférence-R"-, -R"-CO-, où R" est un groupe alkylène divalent comme par exemple l'éthylène, le propylène ou le butylène ou un groupe arylène divalent comme C6H4-, -C6H4-C6H4-, -C6H4-CH2-C6H4-, -C6H4-C(CH3)2-C6H4-.
Encore plus préférentiellement, Y représente un radical alkylène divalent, plus particulièrement le radical -CH2-CH2-CH2- ou le radical C4H8.
La préparation des copolymères blocs mis en oeuvre dans le cadre de la présente invention est décrite dans la demande européenne EP 0 492 657 A1, dont l'enseignement est inclus à titre de référence dans la présente description.
Les polymères à squelette organique non-siliconé greffé par des monomères contenant un polysiloxane, conformes à l'invention, sont choisis plus préférentiellement parmi ceux décrits dans les brevets US 4,693,935, US 4,728,571 et US 4,972,037 et les demandes de brevet EP-A-0 412 704, EP-A-0 412 707, EP-A-0 640 105 et WO 95/00578 dont les enseignements sont totalement inclus dans la présente description à titre de références non limitatives. Il s'agit de copolymères obtenus par polymérisation radicalaire à partir de monomères à insaturation éthylénique et de macromères siliconés ayant un groupe vinylique terminal ou bien des copolymères obtenus par réaction d'une polyoléfine comprenant des groupes fonctionnalisés et d'un macromère polysiloxane ayant une fonction terminale réactive avec lesdits groupes fonctionnalisés.
Des exemples de polymères à squelette polysiloxanique greffé par des monomères organiques non siliconés convenant à la mise en oeuvre de la présente invention, ainsi que leur mode particulier de préparation, sont notamment décrits dans les demandes
de brevets EP-A- 0 582 152, WO 93/23009 et WO 95/03776 dont les enseignements sont totalement inclus dans la présente description à titre de références non limitatives Selon l'invention, toutes les silicones peuvent également être utilisées sous forme d'émulsions ou de microémulsions.
Les silicones particulièrement préférées conformément à l'invention sont : - les silicones non volatiles choisies dans la famille des polyalkylsiloxanes à groupements terminaux triméthylsilyle telles que les huiles ayant une viscosité comprise entre 0,2 et 2,5 m2/s à 25 C telles que les huiles de la séries DC200 de DOW CORNING en particulier celle de viscosité 60 000 Cst, des séries SILBIONE 70047 et 47 et plus particulièrement l'huile 70 047 V 500 000 commercialisées par la société RHONE POULENC, les polyalkylsiloxanes à groupements terminaux diméthylsilanol tels que les diméthiconol ou les polyalkylarylsiloxanes tels que l'huile SILBIONE# 70641 V 200 commercialisée par la société RHONE POULENC ; - les mélanges d'organopolysiloxanes et de silicones cycliques tels que le produit Q2 1401 commercialisé par la société DOW CORNING, et le produit SF 1214 commercialisé par la société GENERAL ELECTRIC ; - les mélanges de deux PDMS de viscosités différentes notamment d'une gomme et d'une huile tels que le produit SF 1236 commercialisé par la société GENERAL ELECTRIC , - la résine d'organopolysiloxane commercialisée sous la dénomination DOW CORNING 593 ; - les polysiloxane à groupements aminés tels que les amodiméthicone ou les triméthylsilylamodiméthicone ; Selon l'invention, la ou les silicone peuvent représenter de 0,05 % à 10 % en poids, de préférence de 0,1 % à 5 % en poids, et encore plus préférentiellement de 0,5 % à 3 % en poids, du poids total de la composition finale.
Les polymères cationiques contenant des groupements ammonium quaternaires dans la chaîne principale peuvent être choisis parmi : - (1) les polymères de diammonium quaternaire contenant des motifs récurants répondant à la formule : formule (I) dans laquelle : R1, R2, R3 et R4, identiques ou différents, représentent des radicaux aliphatiques, alicycliques, ou arylaliphatiques contenant de 1 à 20 atomes de carbone ou des radicaux hydroxyalkylaliphatiques inférieurs, ou bien R1, R2, R3 et R4, ensemble ou séparément, constituent avec les atomes d'azote auxquels ils sont rattachés des hétérocycles contenant éventuellement un second hétéroatome autre que l'azote ou bien R1, R2, R3 et R4, représentent un radical alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié substitué par un groupement nitrile, ester, acyle, amide ou -CO-O-R5-D ou CO-NH-R5-D où R5 est un alkylène et D un groupement ammonium quaternaire ; A1 et B1 représentent des groupements polyméthyléniques contenant de 2 à 20 atomes de carbone pouvant être linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, et pouvant contenir, liés à ou intercalés dans la chaîne principale, un ou plusieurs cycles aromatiques, ou un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre ou des groupements sulfoxyde, sulfone, disulfure, amino, alkylamino, hydroxyle, ammonium quaternaire, uréido, amide ou ester, et X' désigne un anion dérivé d'un acide minéral ou organique; A1, R1 et R3 peuvent former avec les deux atomes d'azote auxquels ils sont rattachés un cycle pipérazinique ;en outre si A1 désigne un radical alkylène ou hydroxyalkylène linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, B1 peut également désigner un groupement (CH2)n-CO-D-OC-(CH2)n- dans lequel D désigne : a) un reste de glycol de formule : -O-Z-O-, où Z désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié ou un groupement répondant à l'une des formules suivantes :
où x et y désignent un nombre entier de 1 à 4, représentant un degré de polymérisation défini et unique ou un nombre quelconque de 1 à 4 représentant un degré de polymérisation moyen ; b) un reste de diamine bis-secondaire tel qu'un dérivé de pipérazine ; c) un reste de diamine bis-primaire de formule : -NH-Y-NH-, où Y désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié, ou bien le radical bivalent -CH2-CH2-S-S-CH2-CH2- ; d) un groupement uréylène de formule : -NH-CO-NH- ; De préférence, X' est un anion tel que le chlorure ou le bromure.
Ces polymères ont une masse moléculaire moyenne en nombre généralement comprise entre 1000 et 1000000.
Des polymères de ce type sont notamment décrits dans les brevets français 2.320.330, 2. 270.846, 2.316.271, 2. 336.434 et 2. 413.907 et les brevets US 2.273.780, 2. 375.853, 2 388.614, 2. 454.547, 3. 206.462, 2. 261.002, 2.271.378, 3.874.870, 4.001 432, 3 929.990, 3. 966.904, 4. 005.193, 4.025.617, 4. 025.627, 4.025.653, 4. 026.945 et 4. 027 020.
On peut utiliser particulièrement les polymères qui sont constitués de motifs récurrents répondant à la formule : dans laquelle R1, R2, R3 et R4, identiques ou différents, désignent un radical alkyle ou hydroxyalkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone environ, n et p sont des nombres entiers variant de 2 à 20 environ et, X- est un anion dérivé d'un acide minéral ou organique Un composé de formule (a) particulièrement préféré est celui pour lequel R1, R2, R3 et R4, représentent un radical méthyle et n = 3, p = 6 et X = CI, dénommé Hexadimethrine chloride selon la nomenclature INCI (CTFA).
(2) les polymères de polyammonium quaternaires constitués de motifs de formule (Il).
(Il) formule dans laquelle : Rg, R7, R8 et Rg, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, éthyle, propyle, ss-hydroxyéthyle, j3-hydroxypropyle ou CH2CH2(OCH2CH2)pOH, où p est égal à 0 ou à un nombre entier compris entre 1 et 6, sous réserve que R6, R7, R8 et Rg ne représentent pas simultanément un atome d'hydrogène, r et s, identiques ou différents, sont des nombres entiers compris entre 1 et 6, q est égal à 0 ou à un nombre entier compris entre 1 et 34, X désigne un atome d'halogène, A désigne un radical d'un dihalogénure ou représente de préférence -CH2-CH2- 0-CH2-CH2-.
De tels composés sont notamment décrits dans la demande de brevet EP-A-122 324.
On peut par exemple citer parmi ceux-ci, les produits "MIRAPOL A 15", "MIRAPOL AD1", "MIRAPOL AZ1" et "MIRAPOL 175" vendus par la société MIRANOL.
Par électrophorèse, un PM apparent de 46 kDa a été déterminé en accord avec le PM calculé de 45929.
L'analyse par RP-HPLC couplée à la spectrométrie de masse (HPLC : ESI-SM) donne une masse de 45934 uma. c) Séquence en acide aminés N-terminale La séquence N-terminale a été déterminée par microséquençage sur un microséquenceur de protéine Model A492 couplé à un analyseur HPLC de PTH-aminoacides (Applied Biosystems).
Aucune séquence secondaire n'a été décelée pour les 10 premiers résidus qui est en accord avec la séquence en acides aminés décrite à la figure 2 (séquence de SEQ ID N 5). d) Activité biologique L'activité désosaminyl transférase de la protéine EryCIII a été déterminée in vitro par la mise en évidence de la formation d'érythromycine D à partir de dTDP-D-désosamine, dont la préparation est décrite plus loin et de 3-a-mycarosyl érythronolide B (MEB) dont la préparation est décrite cidessus dans Matériels et Méthodes générales.