INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le bloc 216 convertit l'information provenant des capteurs du référentiel attaché au corps en des coordonnées inertielles afin de permettre une détermination de l'attitude inertielle de l'engin spatial. L'information fournie par le circuit logique 216 de détermination d'attitude est appliquée à un circuit logique d'ajustement d'orbite, représenté par le bloc 218, qui reçoit aussi, sur une ligne 240, une information concernant l'attitude souhaitée ou commandée de l'engin spatial. Le circuit logi- que 218 calcule des erreurs d'attitude et des erreurs de variati()u d'attitude. L'information d'erreur d'attitude et celle d'erreur dc variation d'attitude sont respectivement appliquées, par les ligncs 2 1 et 21802, à un autre processeur représenté comme un régulateur 22() à action proportionnelle, intégrale et dérivée qui, d'une façon connue traite les signaux d'erreur avec une caractéristique de transfert choisie pour stabiliser la boucle de commande d'attitude. L'homme du métier comprendra que les valeurs des différents composants ou éléments du régulateur 220 vont dépendre des caractéristiques du système général ct que la valeur d'un composant particulier peut être nulle. La sortie du régulateur PID 220 se présente sous la forme de signaux dc dem'tnde de couple, qui sont appliqués par une borne d'entrée non inverseuse d'un élément de sommation 222, à un circuit logique de commande de propulseur représenté par le bloc 224. Le bloc logique 224 de commande de propulseur excite certains sélectionnés des propulscurs de commande d'attitude 20 et module en i~onction des besoins leur temps de fonctionnement afin de produire les impulsions de couple représentées par les signaux de demande de couple. Les signaux de commande des propulseurs sont appliqués sur un bus de données 22( aux différents propulseurs 20 de la figure I. Un système dc commands d'attitude tel que celui décrit jusqu'ici en liaison avec la figure 2 tend à maintenir le corps de l'engin spatial dans une orientation spècilèe grâce à l'attitude commandée qui est appliquée sur la ligne 24(). S'il ny a pas d'erreur d'attitude, le corps 12 de l'engin spatial 1() est aligné par le système de commande d'attitude, dc sorte que l'axe nominal de poussée du propulseur de modification de vitesse est pointé exactement dans la direction de la modification de vitesse souhaitée.
L'homme du métier sait que des boucles de commande d'attitude telles que celle décrite jusqu'ici en liaison avec la figure 2 ont une bande passante qui est limitée au moins par les exigences de stahilité décrites à propos du régulateur PID 220. La figure 3a présente une courbe 30 amplitude-temps de l'erreur d'attitude provoquée par le íonctionnement du propulseur 22 de modification de vitesse en présence d'une boucle de commande d'attitude comme celle décrite jusqu'ici en référence à la figure 2. Le propulseur de modification de vitesse est mis en marche à l'instant t0, le couple non souhaité apparaît immédia- tement et commence à dévier l'attitude de l'engin spatial dans la même direction que le couple, ce qui signifie qu'une variation d'attitude est immédiatement produite, cette variation étant représentée sur la Ligure 3a par la pente initiale 32 en trait pointillé de la courbe 3(). A l'inst'tnt tl, le système de commande d'attitude commence à corriger l'attitude.
mais l'erreur d'attitude continue à augmenter jusqu'à un instant ulté- rieur t2. La correction appliquée par le système de commande d'attitude de l'engin spatial continue à augmenter après t2 et l'erreur d'attitude s'annule finalement près de l'instant t3 ou après cet instant. Touteíois.
pendant tout l'intervalle transitoire qui va de l'instant t() à l'instant t.
la direction dans laquelle l'engin spatial est "pointé", ou dans laquelle le propulseur 22 accélère l'engin, dévie par rapport à la direction d'accélération voulue. C'est-à-dire que pendant l'intervalle t()-t , l'engin spatial est pointé dans la "mauvaise" direction ct le propulseur de modification de vitesse accélère l'engin spatial dans cette mauvaise direction. En général, l'erreur d'attitude n'est que de quelques degrés, de sorte que la plus grande partie de l'accélération ou de la modifica- tion de vitesse est dans la direction souhaitée, mais la modification de vitesse globale contient une composante non souhaitée, dans une direction orthogonale à la direction souhaitée. Cette erreur de modi1~i- cation de vitesse est reliée à l'intégrale du produit de l'erreur d'attitude instantanée, représentée par la courbe 3(), par l'accélération instantanée.
I1 faut remarquer que si l'engin spatial tourne autour de l'axe de poussée du propulseur de modification dc vitesse, cette intègrati('n doit être effectuée dans un référentiel inertiel qui ne tourne pas avec le corps 12 de l'engin spatial 10. L'erreur d'attitude intégrée seule n'est pas exactement proportionnelle à la modification de vitesse place que la poussée du propulseur peut changer d'un instant à un autre et, même si la poussée est invariante, la masse de l'engin spatial diminue à mesure que du propergol est con l'erreur de modification de vitesse attribuable au transitoire d'attitude représenté sur la figure 3a conduit à une réduction de l'erreur de mo(li- fication de vitesse. Autrement dit, quand la partie de la modification de vitesse dans la direction souhaitée devient plus longue, une erreur de modification de vitesse de taillc fixée devient proportionncllcmcnt plus petite. La figure 3b représente un vecteur 310 de modification de vitesse souhaitée et 312 représente l'erreur de modification de vitesse attribuable à un transitoire d'attitude. La somme ou vecteur résultant est représentée en 314 et ce vecteur dévie par rapport au vecteur souhaité 310. Si la modification de vitesse souhaitée était supérieure à 310, comme par exemple la somme des vecteurs 310 ct 316. la valeur du transitoire d'attitude serait la même, à savoir 312. La résultante des vecteurs 310, 312 et 316 est le vecteur 318 de la figure 3b. Une comparaison de la direction du vecteur 314 et du vecteur 3 1 8 montre que le vecteur 318 a une direction plus proche de la direction souhaitée 310, 316 que le vecteur 314. Cela veut dirc que la proportion d'erreur de modification de vitesse est plus grande dans le cas de courtes mises à feu des propulseurs que dans le cas de longues mises à Ibu des propulseurs.
Si on revient de nouveau à la figure 2, un circuit de commlnde du ciblage de la modification de vitesse comme celui représenté en 228 reçoit des quaternions inertiels du circuit logique 216 de détermination d'attitude, par une ligne de signal 232. Ces quaternions repré- sentent la transformation de coordonnées inertielles en coordonnées rapportées au corps, comme déterminées par les capteurs 212 et 214, et par le traitement effectué par le circuit logique 216. Le (lispositil de commande 228 reçoit aussi, par une ligne de signal 23(), une informa- tion concernant la direction souhaitée ou l'orientation de l'axe de poussée du propulseur de modification de vitesse (LAE). L'information concernant l'axe du propulseur LAE peut être envoyée du sol à l'engin spatial avant la manoeuvre de modification de vitesse et être c(nservèe dans une mémoire temporaire jusqu'à ce que le dispositif de commandc 228 en ait besoin. Le dispositif de commande 228 traite l'information pour produire un deuxième signal de demande de couple sur la ligne de signal 236, destiné à être appliqué à une deuxième bornc d'entrée non inverseuse du sommateur 222, lequcl fait la somme des dieux signaux de demande de couple pour produire des signaux somme de demande de couple commandés en gain. En général, le dispositif de commande 228 détermine une quantité proportionnelle à la composante intégrée de la poussée du LAE qui est perpendiculaire, ou orthogonale dans un référentiel inertiel, à la direction de poussée souhaitée et transforme ensuite les données dans le référentiel du corps. Comme mentionné précédemment, le référentiel du corps peut tourner lentement dans le référentiel inertiel. L'erreur de pointage intégrée est suppose reprc- senter l'erreur de modification de vitesse ou erreur dc AV perpendicu- lairement à la direction AV souhaitée. On peut comprendre le traite ment si on imagine de petits intervalles de temps discrets. Donc, au premier instant de la mise à feu du LAE, il n'y a pas d'erreur puisque le couple non souhaité n'a pas cncore fait tourner l'engin spatial à l'écart de la direction de pointage souhaitée. Pendant Ic deuxième instant, la direction de pointage est légèrement décalée dc la direction souhaitée et une première petite composante de la poussée apparaît dans la direction non souhaitée. Pendant le troisième instant. l'erreur angulaire augmente, de sorte qu'une deuxième composante de vitesse.
plus importante, apparaît dans la mauvaisc direction ct cette deuxième composante plus importante est ajoutée à la première petite composlllte.
Pendant chaque instant qui suit, et jusqu'à ce que l'erreur d'attitude soit corrigée, les erreurs de pointage de la direction de poussée s accu- mulent pour former un signal représentant la valeur totale dc la modification de vitesse (312 sur la figure 3b) dans la mauvaisc elirection.
L'intégrale représentant l'erreur de modification de vitesse cumulée est rapportée au référentiel du corps et est traitée pour produire un signal de demande de couple.
La figure 4 est un schéma synoptique plus détaillé du circuit logique 218 d'ajustement d'orbite, du régulateur PID 22(), du somme teur 222 et du dispositif 228 de commande du pointage AV dc la ligure 2. Sur la figure 4, les quaternions inertiels représentant la transfirma- tion de l'attitude détectée de l'engin spatial du référentiel inertiel au référentiel du corps qui tourne lentement sont appliqués par une ligne de signal 232 à un circuit logique 410. Les coordonnées de l'axe de poussée dans le référentiel du corps de l'engin spatial (une valeur iixe déterminée par l'alignement de l'axe nominal de poussée du LAE avec le référentiel du corps de l'engin au moment de l'assemblage de l'engin spatial) sont appliquées sur une ligne de signal 402) à un circuit logi- que 410. Cette information peut être mémorisée dans une mémoire embarquée, ou téléchargée depuis une station terrestre quand elle est nécessaire. L'information d'orientation de l'axe de poussée ou de commande du corps est transformée dans le référentiel inertiel par le circuit 410. Le circuit logique 410 représente la transiormation vers le référentiel inertiel de l'axe nominal de poussée du propulseur de modi- fication de vitesse, qui doit être aligné avec la direction souhaite de modification de vitesse, pour éliminer ainsi les effets de la rotatioll de I'engin, si bien qu'on peut déterminer l'erreur de pointage entre l'axe de commande du corps et le vecteur cible dans le référentiel inertiel.
Les signaux transformés fournis par le circuit 410 sont appliqués à un circuit 412, en même temps que des données inertielles d'axe cible (axe AV souhaité) appliquées sur une ligne 411. S'il n'y a pas d'erreur de pointage, cet axe de poussée est dirigé suivant l'axe cible inertiel.
Le bloc 412 représente la détermination de l'erreur inertielle instantLnèe de pointage (correspondant à l'erreur instantanée d'attitude ou de pointage de la courbe 30 de la figure 3a) et l'intégration de l'erreur de pointage instantanée, pour former ainsi un signal qui représente en coordonnées inertielles l'erreur de direction de AV. Le signal représente tatif de l'erreur de direction de AV intégrée est appliqué à un autre bloc 414, qui représente la transformation de l'information dans le référentiel du corps, de sorte que les actions ultérieures peuvent être effectuées par rapport à l'engin spatial. Les signaux de référentiel (lu corps ainsi obtenus sont appliqués sur une ligne de signal 41 6a à un circuit d'amplification 420 et, sur une ligne 416b, à un autre intégrale teur représenté par le bloc 418. Le circuit 420 multiplie le signal qui le traverse par une fonction d'amplification constante. Comme la fonction d'amplification du circuit 420 est appliquée au signal AV intégré initialement produit par le circuit 414, le circuit 42() est appelé "amplificateur d'intégrale de AV". L'intégrateur 418 intègre une seconde mis le signal d'erreur de direction de AV transformé et intégré. pour produire des signaux représentatifs de l'intégrale double du signal d'erreur de direction de AV. Le bloc 422 représente un circuit amplifi- cateur pour le signal d'erreur de AV doublement intégré. Les signaux d'erreur de AV doublement intégré et intégré puis ajusté en gain sent additionnés dans un circuit de sommation 424, et leur somme représente un signal de demande de couple qui est appliqué sur une ligne de signal 236 au sommateur 222. La composante de signal intégrée fournie par le circuit 420 commande, ou "fournit", un couple propor- tionnel à la valeur de l'erreur de AV et la composante intégrale double provenant du circuit 422 tend à produire un couple qui dévie le corps de l'engin spatial d'une manière qui fait tourner le corps de l'engin pour annuler toute légère rémanence de l'erreur de direction de AV.
Dans le cas de la co-infection avec un baculovirus exprimant la protéine Gag, on observe en outre dans le surnageant la présence de particules présentant la morphologie des particules Gag, et reconnues par un anticorps anti-Gag ; cependant, contrairement aux baculovirus extracellulaires, ces particules Gag ne sont que très faiblement reconnues par les anticorps anti-c-myc et anti-B2AR.
La présence du récepteur ss2AR a également été vérifiée dans les préparations de baculovirus recombinant c-myc'BAR purifiées sur gradient de saccharose, comme décrit à l'exemple 1 b) ci-dessus..
L'activité BAZAR a été déterminée selon le protocole décrit à l'Exemple 2 ci dessus, sur les différentes fractions du gradient.
Parallèlement, la détection des antigènes vp80, gp67, et vp39 du baculovirus AcMNPV, en utilisant un anticorps polyclonal dirigé contre ces antigènes, a été effectuée sur les mêmes fractions. Les résultats obtenus montrent que l'activité Q2AR co-sédimente avec les particules virales.
L'ensemble des résultats obtenus ci-dessus montre que non seulement des molécules du récepteur sont exprimées dans les baculovirus extracellulaires recombinants, mais encore qu'il s'agit de molécules actives.
La quantification de l'activité ss2AR dans les préparations de baculovirus extracellulaires recombinants purifiées sur gradient de saccharose permet d'évaluer la densité du récepteur actif à environ 25 pmol/mg de protéines totales.
EXEMPLE 3 : COMPARAISON DES FORMES DU RECEPTEUR ss2AR PRESENTES DANS DES PREPARATIONS DE MEMBRANES CELLULAIRES ET DANS LES BACULOVIRUS EXTRACELLULAIRES Des cellules Sf9 infectées avec le baculovirus recombinant c-myc-ss2AR sont récoltées 72 heures après l'infection. Les baculovirus extracellulaires c-myc-ss2AR sont récoltés à partir du surnageant de culture de ces cellules, et les particules virales sont purifiées comme décrit à l'exemple 1 b).
Les membranes des cellules Sf9 sont préparées comme suit : les cellules sont centrifugées à 500 x g pendant 5 minutes à 40C, rincées une fois avec du tampon PBS à 4 0C, et resuspendues dans du tampon de lyse (20 mM Tris-HCl, 5 mM EDTA, pH7,4 contenant 5Rg/ml leupeptine, 5 Rg/ml d'inhibiteur de trypsine et 10 10Rg/ml de benzamidine) à 40C. Les cellules sont alors lysées par sonication, les lysats sont centrifugés 5 min à 500xg à 40C et les surnageants centrifugés à 45,000xg pendant 20 mm à 40C. Les culots sont resuspendus à 40C dans du tampon de réaction (75 mM Tris-HC1 (pH 7,4), 12,5 mM chlorure de magnésium, 2 mM EDTA), en présence d'inhibiteurs de protéases.
6 mg de la préparation de membranes cellulaires, ou bien de la préparation de baculovirus purifiés sont ajoutés à 5 ml de tampon de solubilisation (10 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 2 mM EDTA, pH 7,4, 0,3% ndodécyl maltoside (BOEHRINGER MANNHEIM) en présence d'inhibiteurs de protéases. La solubilisation est effectuée pendant 90 min à 4 0C.
Les récepteurs solubilisés sont purifiés par chromatographie d'affinité comme décrit ci-dessous. La matrice d'affinité ALPRENOLOL-SEPHAROSE est synthétisée selon la méthode de BENOVIC et al.[J. Biol. Chem., 262 :9026-9032, (1987)] . Cette matrice est utilisée pour purifier le c-myc-ss2AR selon le protocole décrit par MOUILLAC et al. [J. Biol. Chem., 267 :21733-21737, (1992)] . Tous les tampons comprennent du n-dodécyl maltoside (0,05%).
Les préparations obtenues après chromatographie d'affinité sont concentrées en utilisant des cartouches CENTRIPREP et CENTRICON (AMICON) et la quantité de c-myc-ss2AR dans chaque échantillon est déterminée en utilisant du [125I]-iodocyanopindolol ([l25I]ICYP) comme décrit par MOUILLAC et al. [J. Biol.
Chem., 267 :21733-21737, (1992)] .Les préparations de particules virales, de membranes, ou de ss2AR purifiée par chromatographie d'affinité sont soumises à une électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS (SDS-PAGE), en conditions non-réductrices, sur des plaques de gel à 10%. Les protéines séparées sur les gels sont transférées sur nitrocellulose et révélées avec un anticorps monoclonal de souris anti-c-rnyc, et un second anticorps anti-souris couplé à la phosphatase alcaline ou à la peroxydase de raifort. Les résultats sont illustrés par la Figure 2.
Le transfert de Western de la préparation de membranes cellulaires (Figure 2, piste 1) montre la présence de plusieurs bandes immunoréactives, entre 40 et 50 kDa.
Le transfert de Western des préparations de ss2AR purifiée par chromatographie d'affinité (Figure 2, piste 2) montre une seule et large bande immunoréactive, entre 46 et 50 kDa, qui représente la forme mature, biologiquement active, du récepteurss2AR.
Le transfert de Western de la préparation de baculovirus extracellulaires purifiés (Figure 2, piste 3) montre également la présence d'une seule et large bande immunoréactive entre 46 et 50 kDa.
Ces résultats montrent que les molécules de récepteur ss2AR présentes dans les baculovirus extracellulaires représentent uniquement la forme biologiquement active, contrairement aux molécules de récepteur ss2AR présentes dans les préparations de membranes cellulaires, qui représentent un mélange de formes actives et inactives.
(B) Lorsque X est un atome d'halogène, de préférence le chlore, m est égal à 0 et n est égal à 2, on fait réagir le N-halogénosuccinimide approprié sur un composé de formule 2 dans laquelle R a les significations définies ci-dessus, en présence d'un générateur de radicaux libres comme le 2,2'-azobisisobutyronitrile.
La réaction est réalisée de préférence dans un solvant, par exemple un hydrocarbure halogéné tel que le tétrachlorure de carbone porté à reflux.
(C) Lorsque X est un atome d'hydrogène, m est égal à 1 et n est égal à 2, on fait réagir un sulfonylisocyanate de formule R-SO2-N=C=0, R ayant les significations définies ci-dessus, sur la 3, 5-diméthyl-4(nitrométhyl)sulfonyl] aniline.
La réaction est réalisée de préférence dans un solvant, par exemple un hydrocarbure halogéné tel que le chlorure de méthylène à une température voisine de la température ambiante.
(D) Lorsque X est un atome d'hydrogène, m et n sont égaux à 0, on fait réagir un chlorure de sulfonyle de formule RSO2CI, R ayant les significations définies ci-dessus, sur la 3,5-diméthyl-4[(nitrométhyl)thio] aniline, en présence d'une base appropriée.
La réaction est réalisée de préférence dans un solvant, par exemple un solvant aprotique polaire tel que le tétrahydrofurane à une température voisine de la température ambiante. Une base particulièrement appropriée est, par exemple, le carbonate de calcium.
(E) Lorsque X est un atome d'hydrogène, m est égal à 0 et n est égal à 1, on fait réagir un agent oxydant tel que l'acide m-chloroperbenzoïque sur un composé de formule 3.
dans lequel R a les significations définies ci-dessus.
Le procédé est exécuté de préférence dans un solvant, par exemple le chloroforme, à une température voisine de la température ambiante.
Le composé intermédiaire 3,5-diméthyl-4-[(nitrométhyl)sulfonyl] aniline est obtenu comme décrit dans le brevet WO 90/08761 par hydrolyse basique du N [3,5-diméthyl-4-[(nitrométhyl)sulfonyl] phényl] acétamide 6. Ce dernier composé a été préparé selon la méthode suivante, mettant en oeuvre en particulier la réaction originale du nitrométhane sodé sur le thiocyanate d'aryle 4 donnant le composé 5:
Le composé intermédiaire 3,5-diméthyl-4-[(nitrométhyl)thio] aniline 7 est obtenu par hydrolyse basique du N-[3,5-diméthyl-4-[(nitrométhyl)thio]phényl] acétamide 5.
L'inhibition de l'enzyme aldose réductase et la réduction de l'accumulation de sorbitol peuvent être mises en évidence au cours d'épreuves de laboratoire normalisées ci-après: 1) Etude in vitro: inhibition de l'aldose réductase L'aldose réductase utilisée est obtenue à partir de cristallins de rats Wistar mâles selon une modification de la méthode de S. HAYMAN et coll. (Joumal of Biological Chemistry 240, p. 877, 1965). L'extrait enzymatique est dilué dans un tampon phosphate en présence de NADPH et de différentes concentrations des produits à tester. La réaction est déclenchée par le L-glycéraldéhyde et la vitesse de réaction est mesurée en suivant la disparition du NADPH par spectrophotométrie à 340 nm. La vitesse de réaction est calculée pour chaque concentration de produits puis la concentration nécessaire pour une réduction de 50 % de la vitesse de réaction (Clso) est évaluée par interpolation linéaire.
2) Etude in vivo: réduction de l'accumulation de sorbitol Des rats Wistar mâles de 200 à 250 g sont rendus diabétiques par injection intraveineuse de streptozotocine (60 mg/kg). Ils reçoivent ensuite un traitement oral des produits à tester, sous la forme d'une suspension, 4 heures, 30 heures et 52 heures après l'injection de streptozotocine. Dix huit heures après le demier traitement oral, les rats sont assommés et décapités puis leurs nerfs sciatiques sont prélevés. Après extraction, le taux de sorbitol des nerfs est mesuré selon la méthode enzymatique décrite par H.U. BERGMEYER (Methods of enzymatic analysis. H.U. BERGMEYER ed., Academic Press New York 3, p 1323, 1974). Le pourcentage de protection est calculé pour chaque produit par rapport au lot d'animaux diabétiques en tenant compte du taux de sorbitol dans les nerfs sciatiques de rat non-diabétique.
A titre d'exemple, les résultats obtenus pour certains des produits testés sont donnés dans le tableau suivant:
Produits Inhibition de l'aldose Protection contre Exemple N" réductase in vitro I'augmentation Cl (nM) de sorbitol (%) (5 mg/kglj p.o.) 1 8 65 10 7 66 13 8 70 14 7 70 24 8 80 25 7 85 26 6 104 29 7 71 30 8 87 34 9 69 Les composés de l'invention peuvent être utilisés à titre de médicaments en tant qu'inhibiteurs de l'aldose réductase, et notamment dans le traitement des complications du diabète telles que la cataracte, les rétinopathies, les neuropathies, les néphropathies et certaines maladies vasculaires.
Ces médicaments peuvent être administrés par voie orale sous forme de comprimés, de gélules ou de granules à libération immédiate ou à libération contrôlée, par voie intraveineuse sous forme de solution injectable, par voie transdermique sous forme de dispositif transdermique adhésif, par voie topique sous forme de collyre, solution, crème ou gel.
Après absorption complète de l'engrais liquide, on sèche le mélange dans un séchoir à air chaud soufflé à 90"C jusqu'à ce que la quantité d'eau retenue dans le mélange se soit abaissée à 6 % en poids de gel sec. On obtient 100 kg à l'état sec de substance hydrophile enrichie en NPK selon l'invention.