INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le modèle selon l'invention permet de détecter et de compter exactement le nombre de micro- et macrométastases présentes dans le poumon d'un animal et, de détecter une seule micrométastase très rapidement après l'injection de cellules H460MGFP par voie sous-cutanée chez l'animal.
La présente invention a encore pour objet un procédé de détection de métastases (micro- et macrométastases) pulmonaires caractérisé en ce que :
- on injecte, par voie sous-cutanée, à un animal des cellules provenant de la lignée cellulaire telle que définie ci-dessus, notamment en une quantité d'environ 107 cellules/animal, - on récupère entre environ 13 et environ 49 jours après ladite injection, l'un au moins des organes choisis dans le groupe constitué par le foie, les intestins, le c#ur et les poumons dudit animal, - on détermine le nombre total de métastases (micro- et macrométastases) présents dans lesdits organes, à l'aide de moyens physiques appropriés.
Les moyens physiques appropriés pour déterminer le nombre total de métastases sont par exemple le microscope inversé à fluorescence.
L'invention a également pour objet un procédé de préparation d'une lignée cellulaire de carcinome pulmonaire humain telle que définie ci-dessus, caractérisé en ce que : (a) on transfecte les cellules provenant de la lignée cellulaire dénommée H460M, par un vecteur d'expression contenant une séquence nucléotidique codant la protéine fluorescente choisie dans le groupe constitué par : - la protéine fluorescente verte (GFP), la protéine fluorescente bleue (BFP), la protéine fluorescente jaune (RSGF ou EGFP), GFPUV, ou - des variants dérivés de la GFP, la BFP, la RSGF, la EGFP, la GFPUV, par addition, délétion ou substitution d'un ou plusieurs acides aminés, sous réserve que ces variants conservent la propriété de fluorescence, ou - des fragments de la GFP, la BFP, la RSGF, la EGFP, la GFPUV, ou des fragments des susdits variants, sous réserve que ces fragments conservent la propriété de fluorescence, (b) on met lesdites cellules transfectées en présence d'un milieu de sélection permettant de sélectionner les cellules ayant intégré un gène de résistance à un antibiotique, et notamment le gène de résistance à la géniticine, (c) on récupère des colonies fluorescentes environ 14 jours après l'étape a) de transfection, (d) on maintient éventuellement en culture lesdites colonies fluorescentes sous pression de sélection.
L'étape d) de maintien sous pression de sélection permet de faire exprimer le gène de résistance à l'antibiotique porté par le vecteur, afin de vérifier que le gène de la GFP est intégré dans le génome de la cellule et est transmis aux générations suivantes.
Le modèle in vivo selon l'invention est particulièrement approprié pour l'étude de la fonction des protéines de la famille des inhibiteurs de protéase dans l'invasion tumorale, la formation de métastases et le maintien de la matrice extracellulaire (MEC). Ces études contribuent à la compréhension du phénomène métastatique qui représente un objectif capital dans la recherche en cancérologie permettant de déboucher sur des méthodes diagnostiques et thérapeutiques et de cibler spécifiquement les cellules cancéreuses à potentialité métastatique.
A titre d'exemple d'inhibiteur de protéase, l'inhibiteur inter-a de la trypsine (ITI) constitue un modèle original de régulation de synthèse protéique impliqué dans la MEC et l'invasion tumorale. En effet, l'ITI est impliqué dans l'invasion tumorale, en tant qu'antiprotéase par le biais de la bikunine (possédant deux domaines inhibiteurs de protéases de type Kunitz), et comme stabilisateur de la MEC grâce à ses chaînes lourdes.
Une étude récente [15] a démontré in vitro que l'UTI ( Urinary trypsine inhibitor ), dérivé urinaire de l'ITI composé de la bikunine, bloque l'invasion tumorale en inactivant le récepteur de l'activateur du plasminogène de type urokinase (uPAR).
L'implication de l'ITI dans l'invasion tumorale est mieux comprise en utilisant le modèle in vivo selon l'invention.
Dans un premier temps, on prépare les cellules H460MGFP .
Les vecteurs exprimant les différentes chaînes (ADNc) de l'ITI sont ensuite transfectés de façon stable dans les cellules H460MGFP , sous contrôle d'un promoteur viral.
Afin d'appréhender les potentialités invasives et métastatiques des cellules tumorales et le retentissement de l'expression des différents ADNc de l'ITI sur la capacité invasive, plusieurs tests sont mis au point : ils ont pour but de mimer les interrelations tumeurs/hôte.
On obtient non seulement un TPU greffé de faible poids moléculaire, mais surtout un TPU présentant une résistance thermomécanique faible.
Face à cet inconvénient, le problème était donc de proposer un nouveau procédé permettant de greffer des organo-silanes sur des chaînes macromoléculaires de polyuréthanne thermoplastique, sans conduire à la dégradation desdites chaînes.
Pour ce faire, l'invention propose un procédé de fabrication d'un polyuréthanne thermodurcissable après transformation, à partir d'un polyuréthanne thermoplastique selon lequel on greffe à l'aide d'un agent de liaison, sur des macromolécules de polyuréthanne thermoplastique, un organo-silane hydrolysable de formule générale : avec R1, R2, R3 = alkyl aliphatique, alkyl aromatique ; n # 1 ; R4 étant un radical organique susceptible de réagir avec ledit agent de liaison, lequel comprend au moins deux fonctions isocyanate, le polyuréthanne
thermoplastique obtenu étant apte, après transformation, à s'auto-réticuler au contact de molécules d'eau de sorte à devenir thermodurcissable.
Dans une forme de réalisation préférée, R4 est choisi dans le groupe comprenant les radicaux NH2, NH, SH, OH, phénol, epoxy. Cependant, cette liste n'est pas limitative et R4 s'entend pour tout radical organique susceptible de réagir avec une fonction isocyanate.
Avantageusement, l'agent de liaison est un diisocyanate de formule générale: O = C = N - R5 - N = C = O, avec R5 = radical organique Le Demandeur a en effet constaté que de façon surprenante, la double sélection de molécules du type organosilane avec R4 = NH2, NH, SH, OH, phénol, époxy et de molécules du type isocyanate de fonctionnalité supérieure ou égale à 2, permettait de greffer efficacement les organo-silanes aux chaînes macromoléculaires de polyuréthanne thermoplastique, sans dégrader ces dernières.
Le procédé de l'invention présente un autre avantage qui est celui de pouvoir s'adapter à tous types de TPU parmi lesquels les esters, les éthers, les carbonates et les caprolactones.
De même, le TPU choisi peut être soit aliphatique soit aromatique.
Enfin, il peut se présenter sous forme amorphe ou semi-cristalline.
Dans une forme avantageuse de réalisation de l'invention, l'organo-silane est l'aminopropyltrimethoxysilane, de formule :
Dans ce cas, des réactions entre des liaisons uréthane du TPU et des fonctions isocyanates conduisent à la formation d'allophanates et de façon simultanée ou légèrement décalée dans le temps, en fonction du procédé de mélangeage, des réactions isocyanates-amine suivant le schéma réactionnel suivant :
Cette succession de réactions permet de fixer les groupements silanes hydrolysables sur la chaîne TPU sans la dégrader. Le fait de greffer plusieurs silanes sur une même chaîne TPU peut favoriser par ailleurs la réticulation ultérieure.
Après transformation, le polyuréthanne thermoplastique obtenu s'auto-réticule à l'humidité par hydrolyse et polycondensation des fonctions silanes greffées sur les différentes chaînes macro-moléculaires du TPU (réaction classique d'hydrolyse et de condensation des silanes).
En tant que diisocyanate, on peut avantageusement utiliser un diisocyanate aromatique, cycloaliphatique, aliphatique ou leurs dimères.
Parmi les diisocyanates aromatiques, on choisit avantageusement le TDI (1-3 diisocyanatométhylbenzène), le 2,4'-MDI (1 isocyanato-2(4-isocyanatophényl) méthylbenzène), le 4,4' MDI (1,1-méthylène bis (4-isocyanatobenzène)), le 2,4-TDI (2,4 diisocyanato-1-méthylbenzène) et le PPDI (1,4-diisocyanatobenzène) ou leurs dimères.
Parmi les diisocyanates cycloaliphatiques, on choisit avantageusement le H12 MDI (1,1-méthylène bis (4-isocyanatocyclohexane)). Bien entendu, la liste des
Un troisième objet de l'invention est le procédé de fabrication directe du peroxyde d'hydrogène à partir d'hydrogène et d'oxygène. Ce procédé est caractérisé en ce que l'on met en oeuvre le catalyseur précédemment décrit et préparé.
Le catalyseur peut être mis en oeuvre aussi bien dans un procédé de fabrication directe du peroxyde d'hydrogène en réacteur tubulaire, qu'en réacteur agité. Il convient tout particulièrement au procédé dans lequel, l'hydrogène et l'oxygène sont injectés dans le milieu réactionnel aqueux du réacteur agité et de l'oxygène est introduit dans la phase gazeuse continue du réacteur agité.
Le catalyseur peut être avantageusement mis en oeuvre dans un procédé de fabrication directe du peroxyde d'hydrogène selon lequel, l'hydrogène et l'oxygène sont injectés dans la partie inférieure du milieu réactionnel aqueux et, de l'oxygène est introduit dans la phase gazeuse continue du réacteur agité en quantité telle que la composition de cette phase gazeuse continue soit en dehors de la zone d'inflammabilité. Le catalyseur s'est avéré très intéressant lorsque le réacteur agité est muni de plusieurs turbines disposées le long d'un axe vertical unique. Lorsque l'hydrogène et l'oxygène sont injectés sous forme de petites bulles dans la partie inférieure du milieu réactionnel aqueux dans des proportions telles que le rapport des débits molaires hydrogène sur oxygène soient supérieurs à 0,0416, une productivité en peroxyde d'hydrogène supérieure à celle de l'art antérieur est obtenue.
Le catalyseur s'est avéré particulièrement intéressant dans un procédé continu de fabrication directe de peroxyde d'hydrogène avec recyclage des réactifs, comme l'hydrogène.
PARTIE EXPERIMENTALE Préparation des catalyseurs Exemple 1 On ajoute â température ambiante dans 50 cm' d'eau déminéralisée - 0,33 g de PdCIZ (réf. Aldrich : 20,588-5) - 0,021 g de HZPtCIs (réf. Aldrich : 25,402-9) et quelques gouttes d'HCI à 30 % en poids pour favoriser la dissolution.
- 20 g de silice microporeuse Aldrich (réf. 28,851-9) ayant les caractéristiques suivantes Taille moyenne des particules : 25 Mm Surface BET : 500 mZ/g Volume des pores : 0,75 cm3/g Diamètre moyen des pores : 60 Â sont placés dans un bécher de verre, agité par un barreau magnétique. On ajoute alors rapidement les 50 cm3 de solution de sels métalliques préparée précédemment.
Après 1'30 d'agitation à 25'C, on obtient une bouillie épaisse qui est filtrée sur un fritté NI) 3 et essoré sous vide pendant 2"30. Le gâteau de filtration est placé dans un cristallisoir sur une toile de verre et séché 48 heures à 40 C dans une étuve à vide. Le solide séché est ensuite réduit dans un courant de 60 NI/h d'HZ à 300 C pendant 1"30 puis refroidi jusqu'à la température ambiante en 6 heures. Le solide réduit est alors traité à 40 C pendant 5 heures avec 2 000 cm' de solution contenant 100 mg/1 de NaBr, 10 mg/1 de Br2 et 10 g/1 d'H3p04.
On filtre ensuite le mélange résultant et on sèche le catalyseur pendant 24 heures à l'étuve ventilée à 120 C.
Après analyse le catalyseur contient 0,7 % de Pd et 0,03 % de platine en poids.
Exemple 2 On opère comme pour l'exemple 1 avec comme seule différence que le solide réduit est utilisé directement comme catalyseur sans traitement avec la solution aqueuse bromée.
Exemple 3 Après l'imprégnation de la silice comme à l'exemple 1, au lieu de filtrer la bouillie et d'essorer la pâte filtrée, on sèche la bouillie dans un évaporateur rotatif de laboratoire (Heidolph avec un ballon en verre cannelé de 500 cm'). Le ballon tourne dans un bain d'huile à 120 C sous vide de 40 mm Hg. Après l'évaporation, le solide est réduit puis traité comme décrit à l'exemple 1.
Exemple 4 On opère comme décrit à l'exemple 3 sauf que le solide après réduction n'est pas traité par la solution aqueuse bromée.
Exemple 5 On opère comme décrit à l'exemple 3 sauf qu'après imprégnation la bouillie est laissé à l'air ambiant pendant une semaine à la place du séchage dans l'évaporateur rotatif.
Exemple 6 On opère comme décrit à l'exemple 1 sauf que le Pd est remplacé par l'Au.
Exemple 7 On opère comme décrit à l'exemple 1 sauf que le Pt est remplacé par le Ho. Exemple 8 On opère comme décrit à l'exemple 1 sauf que le Pt est remplacé par l'Au.
Préparation de la solution de peroxyde d'hydrogène Mode opératoire général Dans un réacteur cylindrique de capacité totale, 1 500 cm' muni de 2 ou 3 turbines flasquées de 45 mm de diamètre, de 4 contrepales verticales et d'un faisceau tubulaire de refroidissement, on introduit une quantité choisie de milieu réactionnel aqueux et de catalyseur.
De plus, les pions 36-2 d'insertion et de verrouillage traversent rampes et présentent des butées 37-2 latérales prévues pour venir à l'extérieur des bras 38-2 et 40-2 de l'étrier 14-2. A cet effet, les pions ont une section ovale dont le grand diamètre est sensiblement égal à la largeur de la rampe pour permettre le coulissement des pions dans ces rampes et les butées débordent à la périphérie de ces pions.
Les bras 38-2 et 40-2 portent des rampes 46-2 débouchantes et pour assurer une rigidité suffisante, il faut effectuer un pontage 47-2 latéral qui fait aussi office de protection et d'organe de préhension pour manoeuvrer en translation l'étrier.
On note que la largeur de l'ouverture 30-2 a été adaptée et réduite compte tenu qu'il s'agit de laisser simplement passer un pion 54-2 et non languette.
La mise en oeuvre est strictement identique à la précédente avec l'avantage supplémentaire de permettre un maintien de l'écartement des bras grâce aux butées 37-2 qui retiennent les bras si ceux-ci devaient s'écarter la fiche lors de la poussée exercée sur le fond 42-2 de cet étrier par exemple. Ces guidages et maintiens supplémentaires des bras par les pions suppriment tout risque de déraillement des pions surtout si la fiche est mal pré-emboîtée et qu'un effort est quand même exercé. Dans ce cas, le mouvement de translation de l'étrier est impossible. Sur les figures 3A et 3B, l'étrier porte à la fois les pions 36-3 d'insertion et de verrouillage et les éléments 52-3 de guidage à savoir les pions 54-3.
La tête 32-3 de fiche est modifiée par la présence d'une paire 58 de rails 60-3 latéraux en U renversé, orientés parallèlement au sens de déplacement de l'étrier 14-3.
Chaque rail 60-3 comprend une aile 62-3 intérieure et une aile 3 extérieure ainsi qu'un fond 66-3.
Dans ce troisième mode de réalisation, les paires 44-3 de rampes 3 sont ménagées directement sur les ailes 62-3 intérieures. Ces rampes comportent chacune une entrée 48-3 en amont par rapport au sens d'introduction 24-3 de la fiche dans l'embase et un logement 50- verrouillage en aval.
La mise en oeuvre est identique dans les phases principales mais les actions diffèrent quelque peu.
En effet, il faut tout d'abord mettre en place l'étrier sur la fiche et pour cela les pions 36-3 sont introduits sous les rails 60-3, entre les ailes 3 et 64-3, dans les entrées 48-3.
La fiche est ensuite approchée de l'embase et les pions 54-3 de guidage sont introduits dans chaque glissière 22-3. Le déplacement de l'étrier dans le sens de la flèche 56-3 provoque comme précédemment l'insertion complète de la fiche dans l'embase.
Un ultime déplacement de l'étrier assure le verrouillage par mise en place des pions 36-3 dans les logements 50-3. L'ouverture ménagée dans l'aile 64-3 extérieure est due à des contraintes de fabrication mais ne joue aucun rôle mécanique dans ce mode de réalisation.
Dans cette variante, on a également le maintien latéral des bras de l'étrier qui interdit tout écartement et donc tout risque de déraillement des pions de l'étrier hors des rampes lors des déplacements en translation.
Le mode de réalisation de la figure 4 associe aussi à la tête 32-4 de fiche une paire 58-4 de rails 60-4. Les deux paires 44-4 de rampes 46-4 sont ménagées dans les ailes 64-4 extérieures des rails 60-4. Les pions 36-4 d'insertion et de verrouillage sont disposés sur l'extérieur des bras 38-4 et 40-4 pour pouvoir coopérer avec lesdites rampes.
Les pions 54-4 des éléments 52-4 de guidage sont agencés façon identique aux précédents modes de réalisation. Ils coopèrent avec la glissière 22-4.
Dans le cinquième mode de réalisation, il est aussi prévu une paire 58-5 de rails 60-5 avec des ailes 64-5 extérieure et 62-5 intérieure.
Les rampes 46-5 sont ménagées dans les ailes 38-5 et 40-5 l'étrier, et sont débouchantes avec des pontages 48-5.
Le procédé selon 1 invention pour la réduction des nitrites et des nitrates en azote, en milieu aqueux, consiste à mettre en contact ledit milieu aqueux avec un flux d'hydrogène en présence d' catalyseur bimétallique M-M' sur support poreux, et il est caractérisé en ce que - M est un métal du groupe VIIIA, - M' est un métal ayant un potentiel d'oxydation E (M@n+/M') inférieur à 0,8 V/ERH ; et - 80% des atomes du metal M' font partie de particules bimétalliques M-M' dans lesquelles le rapport atomique M'/M est égal au rapport atomique M'/M global du catalyseur.
La quantité totale de métal M et de métal M' fixée sur le support est comprise de préférence entre 0,5 et 5% en poids, le rapport atomique M'/M étant compris de préférence entre 0,8 et 1,1. Un rapport M'/M = 1 donne un résultat optimal pour la réduction des nitrates et des nitrites.
La quantité totale de catalyseur bimétallique introduite dans le milieu réactionnel dans lequel les nitrates et nitrites seront réduits dépend de la concentration en nitrates et nitrites. Généralement, une concentration d'au moins 0,2 g est nécessaire.
La température du milieu réactionnel, la pression partielle et le débit d'hydrogène dépendent du volume d'eau à traiter, de la forme du réacteur, de la concentration en nitrates et nitrites du milieu réactionnel.
Le métal M est un métal du groupe VIIIA tel que Pt ou Pd. Le métal M' est choisi de préférence dans groupe constitué par Cu, Ag, Sn et Ge.
support poreux peut être notamment l'alumine, une silice, ou un silicoaluminate. Un catalyseur Cu sur alumine est particulièrement préféré.
catalyseur M-M' sur support utilisé dans procédé pour la réduction de nitrates et de nitrites selon la présente invention, désigné ci-après par catalyseur RC, est obtenu par réduction catalytique d'un sel du métal ' par un catalyseur monométallique M sur ledit support, ledit catalyseur monométallique étant lui-même préparé au préalable par un procédé d'imprégnation classique.
Selon un mode de réalisation particulier, le catalyseur RC est obtenu par un procédé dans lequel # on prépare un catalyseur parent "M sur support" par imprégnation du support par une solution d'un sel du métal M # on réduit in situ le catalyseur parent par l'hydrogène ; # sous atmosphère d'hydrogène, on ajoute au catalyseur parent réduit, une solution du sel du métal M', c'est-à-dire une forme oxydée du métal M'.
Selon un mode de mise en oeuvre particulier pour la pré paration d'un catalyseur Pt-Cu/A1203, on porte un catalyseur parent Pt/A1203 à une température entre 350 C et la tempéra ture de décomposition de l'alumine (500 C étant une tempé rature préférée) sous atmosphère d'hydrogène à une vitesse entre 2 et 10 C/min, et on maintient cette température sous courant d'hydrogène pendant une durée d'au moins 1 heure pour obtenir la réduction du platine. Ensuite, on refroidit le milieu réactionnel jusqu'à la température ambiante sous flux continu d'hydrogène. Puis on ajoute une solution (préalable ment dégazée sous un flux d'azote) de sel de cuivre (par exemple Cu(N03)2, 3H20) dans l'eau ultrapure et on maintient le milieu réactionnel sous un flux d'hydrogène pendant au moins heures. Le catalyseur bimétallique ainsi obtenu dans une solution aqueuse peut être utilisé tel quel pour la reduction des nitrates. Si l'on souhaite isoler le catalyseur vue de son stockage pour une utilisation ultérieure, effectue un séchage à température ambiante sous courant azote, puis à l'étuve, par exemple à 120 C.
Le procédé de préparation du catalyseur parent M support n'est pas critique. Par exemple, pour la préparation un catalyseur Pt/A1203, tout procédé par imprégnation 1 art antérieur peut être mis en oeuvre.
Le catalyseur bimétallique M-M' sur support poreux obtenu par réduction catalytique et utilisé dans le procède réduction de nitrites et de nitrates de l'invention est caractérisé par la très grande homogénéité des particules. Le dépôt du métal M' étant catalysé par le métal M fixé sur le support et réduit par l'hydrogène chimisorbé sur le métal M, le métal M' ne peut se déposer que sur le métal M, ce qui donne des particules qui présentent une grande homogénéité. Ainsi, 80% atomique du métal M' est fixé sur le support sous forme de particules M-M' dans lesquelles le rapport M'/M est égal au rapport global M'/M du catalyseur. L'homogénéité répartition des métaux M et M' dans le catalyseur bimétal lique peut être mesurée par analyse dispersive en énergie des rayons X (analyse EDX). Cette méthode est utilisée lors d'une etude en microscopie électronique pour identifier, localiser et quantifier une espèce chimique à la surface d'un échantillon.
La présente invention est décrite plus en détails ci- dessous, à l'aide d'exemples qui sont donnés à titre d'illustration, mais auxquels l'invention n'est pas limitée.
Exemple 1 Préparation du catalyseur parent Pt/A1203 On a préparé un catalyseur parent Pt/A1203 en utilisant comme support, une alumine qui est fournie par la société Procatalyse et qui présente les caractéristiques suivantes # surface spécifique : 215 M2/g # porosité : 0,547 m3/g # principale impureté : Na sous forme de Na2O (5 ppm) L'alumine a été broyée et tamisée afin de retenir les particules qui ont un diamètre compris entre 0,04 et 0,025 mm. Ces particules ont ensuite été lavees à l'eau afin d'éliminer impuretés alcalines, (essentiellement le sodium), puis soumises à une calcination sous air, puis à une réduction sous H2 dans les conditions mentionnées dans le tableau ci-apres.
Tableau 1 Calcination Réduction (H2) (air) Température ( C) 450 500 Durée (heures) 8 4 Débit des gaz (ml/min) 60 60 Montée en température( C/min) 6 6 On a préparé le catalyseur parent Pt/A1203 en ajoutant 5 ml d'eau ' 5 g d'alumine obtenue à la de l'étape de calcination décrite ci-dessus. On a ensuite 'outé 9,375 ml d'une solution aqueuse contenant 4 mg/1 de Pt(NH3)q(OH)2, on a ajusté le à 11 par addition d'environ 3 ml d'ammoniaque à 28%. Après avoir agité le milieu réactionnel pendant 12 heures, on a éliminé l'eau par évaporation au bain de sable (70 C), on a seché pendant 12 heures à 120 C dans une étuve, puis on a calciné et réduit dans les conditions indiquées dans le tableau suivant
Tableau 2 Calcination Réduction (H2) (air) Température ( 450 500 Durée (heures) 4 8 Débit des gaz (ml/min) 60 80 Montée en température( C/min) 6 3 Le catalyseur Pt/A1203 ainsi obtenu contient 0,75s en poids de Pt.
Exemple 2 Préparation d'un catalyseur bimétallique Pt-Cu/A1203 par réduction catalytique (catalyseur RC) 5 g du catalyseur Pt/A1203 obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 1 ont été introduits sur le fritté d'un réacteur, soumis à un courant d'azote pendant 15 min, puis un courant d'hydrogène à 500 C pendant 1 heure pour obtenir la reduction du platine. Le milieu réactionnel a ensuite été refroidi jusqu'à la température ambiante sous flux continu d'hydrogène. Puis on a ajouté une solution (préalablement dégazée sous un flux d'azote) de 0,047 g de sel de cuivre Cu(N03)2, 3H20 dans 25 ml d'eau ultrapure. Le milieu réaction nel a été maintenu sous un flux d'hydrogène pendant 2 heures. Le catalyseur bimétallique formé a ensuite été rincé plu sieurs fois à l'eau distillée, puis séché à température am biante sous courant d'azote pendant 12 heures, puis à l'étuve à C pendant 12 heures. Le rapport atomique Cu/Pt dans catalyseur bimétallique RC obtenu est de 1..