INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS La présente invention sera mieux comprise à la lecture de la description d'exemples de réalisation donnés ci-après, à titre purement indicatif et nullement limitatif, en faisant référence aux dessins annexés sur lesquels la figure 1, déjà décrite, est une vue en perspective schématique d'une structure connue permettant le positionnement d'une fibre optique par rapport à un guide optique, la figure 2, déjà décrite, est une vue de dessus schématique de la structure de la figure 1, la figure 3, déjà décrite, est une vue de dessus schématique d'une autre structure permettant de positionner collectivement des fibres optiques par rapport à des guides optiques, la figure 4 est une vue de dessus schématique d'un dispositif conforme à l'invention comprenant une seule poutre élastique à simple encastrement, la figure 5 est une vue de dessus schématique d'un autre dispositif conforme à l'invention, qui diffère de celui de la figure 4 par l'orientation de la poutre élastique, la figure 6 est une vue de dessus schématiquement d'un autre dispositif conforme à l'invention comprenant deux poutres élastiques à simple encastrement, la figure 7 est une vue en coupe transversale schématique du dispositif de la figure 6, la figure 8 est une vue en coupe transversale schématique d'une variante de réalisation du dispositif de la figure 7, la figure 9 est une vue de dessus schématique d'un autre dispositif conforme à l'invention, comprenant une seule poutre élastique à double encastrement, la figure 10 est une vue de dessus schématique d'un autre dispositif conforme à l'invention, comprenant deux groupes de poutres élastiques à double encastrement, la figure 11 est une vue de dessus schématique d'un autre dispositif conforme à l'invention, permettant le couplage d'une fibre optique à une diode laser et comprenant pour ce faire deux groupes de poutres élastiques à double encastrement pour la fibre optique ainsi que pour la diode laser, et figure la figure 12 est une vue de dessus schématique d'un autre dispositif conforme à l'invention comprenant deux poutres élastiques à simple encastrement pour le positionnement d'une fibre optique par rapport à un guide optique intégré.
EXPOSÉ DÉTAILLÉ DE MODES DE RÉALISATION PARTICULIERS Comme on le comprendra mieux à la lecture de la description des dessins annexés qui va suivre, la présente invention, au lieu de centrer un composant optique, par exemple une fibre optique, par positionnement de ce composant dans une sorte d'entonnoir fixe (comme c' est le cas dans les documents (1) à (3)), consiste à utiliser une sorte d'entonnoir déformable qui applique des forces équivalentes sur les deux points d'appui du composant ou qui applique une force d'un côté de ce composant, l'autre côté venant en appui sur une butée parfaitement définie du substrat (cette butée appliquant au composant une force de réaction égale à la force précédente).
Dans un deuxième temps, le dispositif matériel de sécurité et le logiciel associé contrôlent l'intégrité du contenu du support d'enregistrement. A cet effet, la signature cryptée enregistrée sur le support est lue et le matériel de sécurité va la comparer avec une signature recalculée par lui-même ou par l'unité centrale de la plate-forme informatique à partir d'informations prélevées sur le support d'enregistrement, cette signature étant ensuite cryptée par le matériel de sécurité.
Si la comparaison de ces deux signatures cryptées ne donne pas un résultat satisfaisant, le matériel de sécurité en déduit que le contenu du support d'enregistrement a été modifié, c'est-à-dire qu'il n'est pas conforme à celui qui a été initialement produit. La mise en oeuvre du procédé est alors arrêtée, la plateforme informatique n'est plus sécurisée et, de préférence, le fonctionnement de la plate-forme informatique est verrouillé. Autrement dit, l'utilisateur se trouve alors obligé de remettre en route la plateforme informatique dans les conditions normales de fonctionnement mais avec impossibilité de pouvoir accéder et exploiter le support d'enregistrement, le dispositif matériel de sécurité et le logiciel associé devenant inaccessibles. Dans le cas contraire, le matériel de sécurité a reconnu l'intégrité du support d'enregistrement, c'est-à-dire que ce support est conforme à celui qui a été produit.
Dans un troisième temps, le matériel de sécurité vérifie le niveau de sécurité requis pour pouvoir exploiter les données et/ou applications du support d'enregistrement. A cet effet, le niveau de sécurité enregistré sur le support portatif de l'utilisateur est lu et comparé avec celui qui est enregistré sur le support. Si le niveau de sécurité n'est pas satisfait, la plate-forme informatique est verrouillée comme précédemment.
Dans un quatrième temps, le matériel de sécurité vérifie si l'utilisateur est autorisé à exploiter les données et/ou applications stockées sur le support d'enregistrement. A cet effet, le dispositif matériel de sécurité lit le paramètre propre à l'application qui est enregistrée sur le support portatif de l'utilisateur et le compare avec le paramètre correspondant enregistré sur le support d'enregistrement.
Cette comparaison peut se faire à l'identique ou suivant une relation prédéterminée. Si cette vérification ne donne pas un résultat satisfaisant, la plate-forme informatique est verrouillée comme précédemment.
Dans un cinquième temps, le dispositif matériel de sécurité vérifie que le logiciel de base de la plate-forme informatique n' a pas été éventuellement modifié pour détecter ainsi une éventuelle brèche dans la sécurité du procédé. Si une telle brèche est détectée, en utilisant des techniques connues, la plate-forme informatique est verrouillée comme précédemment.
Dans le cas contraire et dans une sixième temps, le dispositif matériel de sécurité et le logiciel associé vont brider le logiciel de base de la plate-forme informatique, notamment lorsque celle-ci est à architecture ouverte, c'est-à-dire que le dispositif matériel de sécurité va en quelque sorte mettre des verrous pour inhiber certaines fonctions du logiciel de base telles que celles qui pourraient normalement donner accès au support d'enregistrement, et mettre en place de nouvelles fonctions nécessaires au bon déroulement de l'exploitation des données et/ou applications à partir du support d'enregistrement, lorsque les contrôles effectués sur ce dernier et l'utilisateur ont été validés.
Avant d'entamer une seconde phase du processus d'amorçage, le dispositif matériel de sécurité et le logiciel associé vont installer, sous une forme standard et indépendante de l'implantation matérielle, une interface permettant d'accéder à l'intégralité des fonctions de sécurité qui seront notamment utilisées par le système d'exploitation lorsque ce dernier démarrera après avoir été chargé à partir du support d'enregistrement.
Jusqu'à maintenant, la première phase du processus de mise en route ou d'amorçage a permis de contrôler le support d'enregistrement et le droit d'accès de l'utilisateur, mais il faut maintenant qu'en retour des contrôles de sécurité soient effectués pour vérifier l'intégrité de la plate-forme informatique tant sur le plan matériel que logiciel.
A cet effet, un logiciel d'amorçage est chargé depuis le support d'enregistrement et est exécuté pour vérifier que les conditions de sécurité qui ont été satisfaites par le support d'enregistrement sous le contrôle de la plate-forme informatique, sont également satisfaites par la plate-forme informatique sous le contrôle du support d'enregistrement.
Ainsi, ce logiciel d'amorçage va notamment s'assurer - que le dispositif matériel de sécurité est bien implanté, - que le logiciel de base de la plate-forme informatique a bien été bridé, - que le paramètre d'identification propre au procédé et qui est enregistré dans le dispositif matériel de sécurité correspond bien à celui qui est enregistré sur le support d'enregistrement, et - que le paramètre d'authentification du contenu du support d'enregistrement correspond à celui qui est également enregistré sur le support d'enregistrement.
Une fois tous ces contrôles effectués, on peut dire en quelque sorte que la plate-forme informatique est certaine d'accéder et d'exploiter un support d'enregistrement qui est conforme à celui qui a été produit et, inversement, le support d'enregistrement est certain d'être exploité par une plate-forme informatique dûment sécurisée et par un utilisateur dûment autorisé et dans la limite des droits qu'il a acquis.
Dans ces conditions, le chargement du système d'exploitation à partir du support d'enregistrement peut être envisagé. Cependant, comme le système d'exploitation est indépendant de celui de la plate-forme informatique, notamment lorsque cette dernière est d'une architecture ouverte , il peut être nécessaire de faire appel à un logiciel de configuration qui est lu à partir du support d'enregistrement. La fonction générale de ce logiciel de configuration est de stocker dans le dispositif matériel de sécurité tous les paramètres nécessaires et suffisants pour que le logiciel d'exploitation des données et/ou applications et qui est stocké sur le support d'enregistrement puisse être exécuté par le logiciel d'exploitation de la plate-forme informatique.
Le logiciel d'exploitation peut donc être chargé à partir du support d'enregistrement pour permettre à l'utilisateur d'exploiter des données et/ou des applications en toute sécurité non seulement pour lui-même mais également pour l'éditeur des supports d'enregistrement.
Au cours de cette exploitation, la sécurité sera assurée par le logiciel d'exploitation qui a été chargé à partir du support d'enregistrement, ou par les applications elles-mêmes, et il s'appuiera pour cela sur l'interface précitée qui a été installée par le dispositif matériel de sécurité et le logiciel associé à la fin de la première phase du processus d'amorçage.
En effet, pour renforcer la sécurité du procédé, il est préférable que le système d'exploitation des données et/ou applications respecte aussi les fonctions de sécurité appliquées pendant la phase d'amorçage, comme par exemple interdire l'initialisation d'un logiciel non préalablement contrôlé ou l'accès à un périphérique non prévu par le procédé.
Avantageusement, ladite seconde protéine est aussi une protéine constituant un canal ionique activé par les protons selon l'invention. A titre d'exemple d'une telle association, on peut citer l'association de la protéine du canal ASIC1A ou ASIC2A ou DRASIC avec la protéine du canal MDEG1, permettant de former un canal hybride présentant une troisième gamme de sensibilité au pH (avec ASIC : EC5Q = 4,8). Un autre exemple d'un tel canal hybride est l'association de la protéine des canaux ASIC1A, ASIC1B, MEDG1 ou DRASIC avec la protéine du canal MDEG2.
MDEG2 est un canal qui a été cloné à partir du cerveau de rat en utilisant une séquence partielle de souris accessible dans les banques de données ("Expressed Sequence Tag avec le numéro d'accession W50528") et dont la séquence de 563 acides aminés est représentée dans la liste de séquence en annexe sous le numéro SEQ ID NO : 6.
MDEG2 est un variant d'épissage de MDEG1.
Les premier 185 amino acides sont remplacés par une nouvelle séquence de 236 amino acides qui est soulignée dans la SEQ ID NO : 6. MDEG2 est exprimé dans le cerveau et dans les neurones sensoriels des ganglions de la racine dorsale.
MDEG2 exprimé seul dans les oocytes de Xénope ou dans des cellules de mammifères ne forme pas un canal cationique activé par le proton. Néanmoins, il peut s'associer avec MDEG1 ou DRASIC pour former des canaux hétéromultimériques activés par le proton avec des propriétés modifiées - Le pH d'activation du canal formé après la co-expression de MDEG1 et MDEG2 est diffèrent. Après expression dans les cellules COS, le courant n'a pas atteint sa valeur maximale à pH 3 alors que le courant induit par MDEG1 seul sature à un pH compris entre 4,5 et 4,0.
- Les cinétiques d'inactivation et la sélectivité ionique du canal formé après la co-expression de MDEG1 et MDEG2 sont clairement différentes de celles de MDEG1 seul. Un courant s'inactivant lentement et peu sélectif pour le Na+ et le K+ apparaît.
- Le courant sodique soutenu obtenu après expression de DRASIC devient non sélectif (il ne différencie plus le sodium et le potassium) quand MDEG2 est co-exprimé avec DRASIC. Cette nouvelle propriété est similaire à celle du canal cationique activé par le proton qui a été impliqué dans la sensation de douleur prolongée causée par une acidose. I1 est très probable que DRASIC et MDEG2 fassent partie de ce canal.
Les homologies de séquences en acides aminés des protéines constituant les canaux ASIC1A, ASIC1B, cités selon l'invention sont données dans la tableau 1 cidessous.
Canaux ASIC 1B ASIC 1A MEDG2 MDEG1 DRASIC ASIC1B 100 80 56 61 52 ASIC1A 100 59 68 53 MDEG2 100 78 48 MDEG1 100 51 DRASIC ~~ 100 Des anticorps poly ou monoclonaux dirigés contre au moins une protéine constituant un canal ionique de l'invention et/ou contre un canal hybride ci-dessus, peuvent être préparés par les méthodes classiques décrites dans la littérature. Ces anticorps sont utiles pour rechercher la présence des canaux ioniques de l'invention dans différents tissus humains ou animaux, mais ils peuvent aussi trouver des applications dans le domaine thérapeutique pour inhiber ou activer in vi vo, grâce à leur spécificité, un canal ASIC et/ou ses dérivés.
La présente invention a aussi pour objet une molécule d'acide nucléique comprenant ou constituée par une séquence nucléique codant pour une protéine constituant un canal cationique neuronal sensible à llamiloride et activé par les protons. Plus particulièrement l'invention concerne une molécule d'acide nucléique comprenant au moins une séquence codant pour la protéine constituant le canal ASIC dont la séquence en acides aminés est représentée dans la liste de séquences en annexe sous le numéro SEQ ID No 1 ou pour un dérivé fonctionnellement équivalent de cette protéine.
Une molécule d'ADN comprenant la séquence codant pour la protéine ASIC est celle représentée dans la liste de séquences en annexe sous le numéro SEQ ID NO:1 ou sa séquence complémentaire. Une autre molécule d'ADN selon l'invention est celle représentée dans la liste de séquence en annexe sous le numéro SEQ ID NO : 2 ou sous le numéro SEQ ID NO : 3, ou leur séquence complémentaire.
Une molécule d'ADN comprenant la séquence codant pour la protéine ASIC1B est celle de 3647 pb représentée dans la liste de séquence en annexe sous le numéro SEQ ID NO 4 ou sa séquence complémentaire. Plus particulièrement l'invention concerne la séquence nucléique comprise entre les nucléotides 109 et 1785 de la séquence représentée dans la liste de séquence en annexe sous le numéro SEQ ID NO : 4 ou sa séquence complémentaire.
Une molécule d'ADN codant pour la protéine DRASIC est celle de 1602 pb représentée dans la liste de séquence en annexe sous le numéro SEQ ID NO : 5 ou sa séquence complémentaire.
Une molécule d'ADN comprenant la séquence codant pour la protéine MDEG2 est celle de 1602 pb représentée dans la liste de séquence en annexe sous le numéro SEQ ID NO 6 ou sa séquence complémentaire.
L'invention concerne également un vecteur comprenant au moins une molécule d'acide nucléique précédente, avantageusement associée à des séquences de contrôle adaptés, ainsi qu'un procédé de production ou d'expression dans un hôte cellulaire d'une protéine constituant un canal ionique selon l'invention. La préparation de ces vecteurs ainsi que la production ou l'expression dans un hôte des canaux de l'invention peuvent être réalisées par les techniques de biologie moléculaire et de génie génétique bien connues de l'homme du métier.
- NO et HémoDrotéines Le NO se fixe à de nombreuses hémoprotéines (Fe II) in vitro. I1 se fixe aussi parfois à leur forme ferrique (Henry et al., 1991). D'autre part, lorsqu'il est inhalé, NO est un gaz nocif du fait de sa liaison au fer ferreux des hémoprotéines (Boucher et al., 1993; Rossaint et au., 1993). L'exemple le mieux connu est celui de l'hémoglobine. NO est capable de se fixer rapidement à la désoxyhémoglobine (Hb[FeII]) , pour former le complexe [FeII]NO relativement stable (tl/2 = 12min). En effet, l'affinité de NO pour la désoxyhémoglobine est 106 fois supérieure à celle de t'oxygène. L'oxyhémoglobine (Hb[FeII]O2), quand à elle, peut être convertie par NO en méthémoglobine (tl/2 = 20h) et en nitrate (Ducrocq et al., 1994).
Par ailleurs, l'hémoglobine pourrait jouer un rôle de transporteur ou d'oxydant de NO (Henry et al., 1991; Traylor et Sharma, 1992; Boucher et al., 1993). En fait, chez l'homme, chaque sous-unité de l'hémoglobine contient un groupement héminique, et les sous-unités ss contiennent des résidus thiols très réactifs (Cys 93), formant la S-nitrosohémoglobine. Cette forme nitrosylée de l'hémoglobine a été récemment identifiée non seulement comme facteur de régulation des activités vasculaire, pulmonaire et systémique, mais aussi comme un élement de transnitrosylation (Jia et al., 1996) D'autres hémoprotéines sont activées par NO, telle que la guanylate cycIase où le recepteur de NO est atome de fer. La fixation de NO déforme le groupement Flème (qui contient l'atome de fer), et active la production du second messager le GMPc à partir du GTP, ce qui induit une vasodilatation et une inhibition de l'agrégation plaquettaire (Ignarro, 1991; Moncada et al., 1991; Schrrtidt, 1992; Snyder et Bredt, 1992). Citons aussi la prostaglandine H synthase (Salvemini et ail., 1993; Stadler et al., 1993), et d'autres qui sont plus ou moins réversiblement inhibées (Rogers et Ignarro, 1992; Assreuy et al., 1993; Rengasamy et Johns, 1993), telles que les cytochromes P-450 (Adams et al., 1992; Ducrocq et al., 1994) et les NOS elles-mêmes (Rogers et Ignarro, 1992; Assreuy et al., 1993; Rengasamy et Johns, 1993).
En conclusion, NO se présente sous différentes formes de transport; les mécanismes enzymatiques de synthèse, stockage et de transport sont effectués en fonction de ses rôles d'intermédiaire et d'effecteur (Stamler et al. , 1992a, 1994).
- NO et cancérogénèse : Dans différentes situations, NO paraît exercer plusieurs rôles, parfois même antagonistes. Ceci est vrai en ce qui conceme la cancérogénèse (Calmels et Ohshima, 1995). En contraste avec son rôle dans les défenses de l'organisme (bactéricide et cytotoxique) , NO est susceptible d'entraîner des altérations de l'ADN, favorisant ainsi le développement du cancer. Ceci cependant, a le plus souvent été mis en évidence dans des travaux in vitro souvent éloignés des conditions physiologiques.
Plusieurs rôles distincts de NO au niveau des différentes étapes de la cancérogénèse ont été observés: (i) la formation de peroxynitrite, produit naturellement cytotoxique, qui après protonation, peut galement se décomposer en OH et NO2 (Beckman et ail., 1390). Ces radicaux seraient en partie responsables de dommages oxydatifs à 1'ADN permettant alors la tr-ansformation néoplastique ultérieure des cellules touchées; (ii) la génotoxicité du NO et la déamination de ADN NO peut induire des mutations dans des lignées cellulaires lymphoblastoïdes humaines (Nguyen et al., L992); (iii) la formation de nitrosamines: le NO après oxydation est susceptible de réagir avec un substrat nitrosable pour former des nitrosamines. Ces demiers sont de puissants cancérigènes chez l'animal et sont également suspectés à l'origine de certains cancer chez l'homme (Loser et al., 1989; Jacob et Belleville, 1991).
NO peut également favoriser l'évolution du cancer par le biais d'une immunosuppression (Hoffman et al., 1990; Albina et al., 1991; Mills, 1991). Des études ont montré par exemple que sa présence semble favoriser le processus de transformation néoplasique de fibroblastes murins in vitro (Werner-Felmayer et al., 1993). Cependant, de récents travaux indiquent un effet protecteur plus ou moins controversé de NO vis-à-vis de la cytotoxicité induite par les espèces oxygénées (Wink et al., 1993) et vis-à-vis de la progression de tumeurs de la peau induites sous W chez la souris (Yuin et al., 1993; Calmels et Ohshima, 1995) . Enfin, malgré son rôle dans la cancérogénèse, NO est également un élement effecteur important vis-à-vis des cellules tumorales (Hibbs et al., 1990). De plus, NO peut également médier l'apoptose de différents types cellulaires (Sarih et al., 1993; Me,Bmer et al., 1994; Fehsel et al., 1995). Toutes ces données mettent en évidence les diverses influences de NO.
- NO et maladies inflammatoires autoimmunes Il a récemment été découvert que NO est impliqué dans certaines pathologies inflammatoires (Schmidt et Water, 1994; Moilanen et Vapaatalo, 1995). Parmi celles-ci, la sclérose en plaques (SEP) (Sherman et al., 1992) et la polyarthrite rhumatoïde (PR) (Grabowski et al. , 1996) sont les plus étudiées.
Les Inventeurs se sont intéressés à ces deux dernières pathologies pour montrer l'effet de NO et de ses dérivés nitrés ou nitrosylés dans leur évolution clinique.
Les études sont basées sur des modèles expérimentaux pour la SEP (l'encéphalite autoimmune expérimentale) et pour la PR (l'arthrite inflammatoire expérimentale).
Les mécanismes d'action du NO, direct ou par l'intermédiaire de dérivés, sont encore mal connus. Du fait de sa nature, NO peut diffuser à travers les membranes des cellules avoisinant celles où il a été synthétisé. Cette diffusion de NO peut expliquer un effet locale à très courte distance du fait de sa grande réactivité. C'est probablement ce mécanisme qui entraîne l'activation de la guanylate cyclase des cellules musculaires lisses des vaisseaux par le NO synthétisé par les cellules endothéliales. Cependant, une action à distance du NO peut également être envisagée. Cette action a distance peut être liée à l'existance de molécules capables de fixer le NO puis de le relarguer. Parmi les composés susceptibles de jouer ce rôle, les composés -nitrosothiols jouent un rôle participant important.
Ainsi des S-nitrosothiols ont été mis en évidence dans les phénomènes de vasodilatation dès 1981 (Ignarro et al.).
Plus récemment des nitrosothiols ont été également mis en évidence au niveau des cellules de système immunitaire (Dias-Da-Motta et al., 1996 ; Wagner et al., 1996; Zhao et al., 1996) . Les mécanismes de libération de NO par ces molécules sont mal connus et en particulier les réactions conduisant au passage du NO sur d'autres molécules. De plus, s'agit-il toujours de la forme NO ou les formes NO + peuvent elles être impliquées dans des mécanismes de nitrosylation ? Peut-il également y avoir intervention d'autres radicaux en particulier les dérivés de 1'02 ? Quelque soient les modes d'action du NO localement ou à distance, il peut donc exister des molécules intermédiaires douées des propriétés et de stabilité plus grande que le NO dont la fonction n'est pas encore connue.
Les anticorps de l'invention ont permis dans un premier temps d'étudier la stabilité et les propriétés de composés nitrosylés, puis ils ont été utilisés pour masquer des épi topes nitrosylés qui apparaissent dans certains états pathologiques où une surproduction de NO a ete objectivée. Une production élevée de ces dérivés nitrosylés pourrait être responsable, au moins en partie, des troubles observés.
II- PRÉPARATION D'ANTICORPS POLYCLONAUX DIRIGÉS CONTRE DES CONJUGUÉS NITROSYLÉS.
1) La réPonse immunitaire.