INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Mesure de la quantité intracellulaire d'AMP cyclique pour les cellules MCF-7 Des cellules MCF-7 (2.104 cellules/puits) ensemencées en plaques de 24 puits, sont mises en culture durant 5 jours dans le milieu de Eagle modifié par Dulbecco (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France) complété avec 10% de sérum foetal de veau inactivé par chauffage (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France ), 50000 unités/1 de pénicilline et 50 mg/1 streptomycine (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France), et 2 mM de glutamine (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France). Le milieu de culture est remplacé après deux lavages avec un milieu sans sérum complété ou non avec les agents spécifiés pour un temps indiqué dans les différentes figures. Des agents activant la production d'AMPcycliqueyclique sont ensuite ajoutés à 37 C. La réaction est stoppée au bout de 30 minutes par suppression du milieu et addition rapide de 100 l de solution HCl 0,1N. Ces extraits sont congelés à -80 C jusqu'à ce qu'ils soient utilisés. La concentration d' AMPc est mesurée en utilisant un kit commercial de mesure (référence NEK033 de NEN, Les Ulis, France) en suivant les instructions du fabricant. La radioactivité est déterminée par un compteur Gamma (Gamma Master-1277, LKB, Turku, Finland ).
Mesure de laprolifération cellulaire in vitro Les cellules MCF-7 (3000 cellules/puits) sont cultivées en plaques 96 puits dans 80 )il de milieu de Eagle modifié par Dulbecco (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France) complété avec 10% de sérum foetal de veau inactivé par chauffage (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France), 50000 unités/1 de pénicilline et 50 mg/1 streptomycine (Gibco-Brl, CergyPontoise, France), et 2 mM de glutamine (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France) ont été ensemencées sur une plaque de 96 puits au jour 0. Les cellules ont été traitées au jour 1 pendant 96 heures avec des concentrations croissantes allant jusqu'à 50 M de chacun des composés à tester. A la fin de cette période, la quantification de la prolifération cellulaire est évaluée par test colorimétrique en se basant sur le clivage du sel de tétrazolium WST1 par les déhydrogénases mitochondriales dans les cellules viables conduisant à la formation de formazan (Boehringer Mannheim, Meylan, France). Ces tests sont effectués en double avec 8 déterminations par concentration testée. Pour chaque composé à tester, les valeurs incluses dans la partie linéaire de la sigmoïde ont été retenues pour une analyse en régression linéaire et utilisées pour estimer la concentration inhibitrice (CI~50).
Mesure de l'activité de la MAP kinase Des cellules MCF7 (5. 105 cellules/puits) sont cultivées en plaques 6 puits dans le milieu de Eagle modifié par Dulbecco (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France) complété avec 10% de sérum de veau foetal inactivé par la chaleur (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France), un mélange d'antibiotiques : 50000 unités/1 de pénicilline et 50 mg/1 de streptomycine (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France) et 2 mM de glutamine (Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France).Après 24 heures de culture, les cellules sont incubées pendant 48 heures dans du milieu ne contenant pas de sérum pour amener les cellules à l'état de repos. Les cellules sont alors traitées pendant 1 heure soit par le composé 1 soit par le PD98059 (Calbiochem,France Biochem, Meudon, France), un inhibiteur spécifique de l'activation de la MAP kinase. Les cellules sont ensuite stimulées (ou non) pendant 5 minutes par 12. 5 ng/ml de facteur de croissance épidermique (EGF). La réaction est stoppée par deux lavages avec du PBS(Gibco-Brl, Cergy-Pontoise, France), à 4 C ne contenant ni calcium ni magnésium et par addition de 150 l de tampon de lyse à 4 C dont la composition est la suivante : 10 mM de tris, 150 mM de NaCl, 2 mM d'EGTA, 2 mM de dithiothreitol, 1 mM de PMSF,2 mM d'orthovanadate, 10 g/ml de leupeptine et 10 g/ml d'aprotinine.
Un dosage des protéines contenues dans les extraits est réalisé par la méthode de Bradford (réactifs Biorad,Ivry-Sur-Seine, France). Ces extraits sont congelés à -80 C jusqu'à ce qu'ils soient utilisés. L'activité de la MAP kinase est mesurée à l'aide d'un kit commercial de mesure (référence RPN 84, Amersham, Life Science, Les Ulis, France)
en suivant les instructions du fabricant. La radioactivité est déterminée à l'aide d'un compteur à scintillation Packard (Tricarb 5000CA).
Matériel Le peptide vaso-intestinal (VIP) a été acquis chez Bachem (Voisins le Bretonneux, France). La toxine cholérique, la forskoline, l'isoprotérénol, la prostaglandine E2 et le PD 98059 ont été acquis chez Calbiochem (France Biochem, Meodon, France). Les composés de formules (I) , (II) (III) et (IV) ont été fournis par Biomeasure Inc. (Milford, MA, USA). Tous ces composés ont été utilisés en suivant les recommandations de leurs fabricants.
Résultats La figure 1 montre que l'activation de l'adénylate cyclase par la toxine cholérique (200 ng/ml) ou par la forskoline (10 M) conduit à une élévation très importante du taux d'AMP cyclique. Un prétraitement des cellules pendant 30 minutes avec 30 M de composé (I) ne modifie pas la production d'AMP cyclique induite par l'activateur direct de l'adénylate cyclase, la forskoline. En revanche, la production d'AMP cyclique stimulée par l'activateur direct de la sous-unité, la toxine cholérique, est fortement inhibée par le composé (I). Ceci montre que l'adénylate cyclase, elle-même, n'est pas modifiée par le composé (I) et que celui-ci empêche la formation du complexe hétérotrimérique.
Le VIP a été présenté comme un ligand extra-cellulaire d'un récepteur couplé à la protéine G qui stimule la synthèse d'AMP cyclique dans des cellules humaines de cancer du sein. La figure 2 montre que le traitement par le VIP de cellules humaines de cancer du sein MCF-7 augmente la quantité intracellulaire d'AMP cyclique de façon concentrationdépendante. La concentration de VIP de 10 nM qui offre une production d'AMP cyclique quasi-optimale sera utilisée pour les tests suivants. Cette concentration est en accord avec les données déjà publiées concernant la lignée de cellules humaines de cancer du sein T47D.
La figure 3 montre qu'un prétraitement de 30 minutes des cellules MCF-7 issues de cultures in vitro par le composé de formule (I) est suffisant pour inhiber de façon dépendante de la concentration, l'accumulation d'AMP cyclique stimulée par le VIP. Une inhibition presque complète a été obtenue à une concentration de 100 M du composé de formule (I). Ces résultats montrent qu'un traitement par le composé (I) est suffisant pour bloquer la transduction du signal dont la voie utilise les protéines G hétérotrimériques comme médiateurs.
La figure 4 montre qu'un traitement d'une heure par le composé de formule (I) est suffisant pour modifier la réponse au VIP. Des traitements d'une durée plus longue (8 heures et 24 heures) continuent d'inhiber la production d'AMP cyclique mais le principal effet est obtenu très rapidement.
Le composé (I) est aussi capable d'inhiber la formation d'AMP cyclique induite par d'autres agents qui stimulent les récepteurs à sept domaines transmembranaires. Dans les cellules MCF7, par exemple, l'activité de l'adénylate cyclase très fortement augmentée par la prostaglandine E2 est inhibée par un traitement de 30 minutes par le composé (I).
Ceci suggère que le traitement des cellules par le composé (I) modifie la forme hétérotrimérique des protéines G en dissociant la sous-unité du dimère ss/[gamma].
L'inhibition de la stimulation par le VIP n'est pas restreinte à des composés de structure analogue à celle du composé de formule (I) .Comme le montre la figure 6, les composés (H), (Ill) et (IV) testés dans le même modèle, sont aussi capables de réduire la quantité d'AMP cyclique induite par le VIP.
Dans ce qui suit ou ce qui précède, sauf mention contraire, les pourcentages sont exprimés en poids. Les exemples suivants illustrent l'invention sans présenter un caractère limitatif.
EXEMPLE 1: Composition de teinture On a préparé la composition tinctoriale prête à l'emploi suivante (teneurs en grammes) - Laccase issue de Rhus vernicifera à 180 1,8 g unités / mg, commercialisée par la société SIGMA - Alkyl (C8-C,0) polyglucoside en solution aqueuse à 60 % de matière active (M.A.) vendu sous la dénomination ORAMIX CG110 par la société SEPPIC 16,5 g - Paraphénylènediamine 0,254 g - Dichlorhydrate de 2,4-diaminophénoxyéthanol 0,260 g - Myristate d'isopropyle 0,7 g - Agent de pH qs pH 6,5 - Eau déminéralisée qsp 100 g Cette composition tinctoriale prête à l'emploi a été appliquée sur des mèches de cheveux gris naturels à 90 % de blancs pendant 40 minutes à 30"C. Les cheveux ont ensuite été rincés, lavés avec un shampooing standard, puis séchés. On obtient des mèches de cheveux teintes en gris bleuté.
Dans cet exemple, 1,8 g de laccase issue de Rhus vernicifera à 180 unités/mg peut être remplacé par îg de laccase issue de Pyricularia Orizae à 100 unités/mg vendue par la société I.C.N.
EXEMPLE 2: Composition de teinture On a préparé la composition tinctoriale prête à l'emploi suivante (teneurs en grammes): - Laccase issue de Rhus vernicifera à 180 unités/mg commercialisée par la société SIGMA 1,89 - Alkyl (C8-C10) polyglucoside en solution aqueuse à 60 % de matière active (M.A.) vendu sous la dénomination ORAMIX CG110 par la société SEPPIC 16,5 g - Paraphénylènediamine 0,254 g - Dichlorhydrate de 2,4-diaminophénoxyéthanol 0,260 g - Diméthicone vendue sous le nom MIRASIL DM 500000 par la société RHONE POULENC 0,5 g - Ethanol 20,0 g - Agent de pH qs pH 6,5 - Eau déminéralisée qsp 100g Cette composition tinctoriale prête à l'emploi a été appliquée sur des mèches de cheveux gris naturels à 90 % de blancs pendant 40 minutes à 30"C. Les cheveux ont ensuite été rincés, lavés avec un shampooing standard, puis séchés.
Dans cet exemple, 1,8 g de laccase issue de Rhus vernicifera à 180 unités/mg peut être remplacé par lg de laccase issue de Pyricularia Orizae à 100 unités/mg vendue par la société l.C.N.
La présente invention concerne l'utilisation d'extraits bruts aqueux,
hydroalcooliques et acétoniques de géraniums pour la préparation de médicaments
analgésiques de type central non morphinique.
L'invention concerne également l'utilisation de la géraniine ou de composés apparentés pour la préparation de médicaments analgésiques de type
central non morphinique.
Il est connu que la géraniine et ses dérivés présentent de nombreuses propriétés pharmacologiques. Ces propriétés comprennent par exemple l'inhibition d'enzymes telles que l'ADN-topoisomérase et la protéinekinase, une activité
antitumorale, un effet sur la motilité intestinale et un effet sur la douleur.
Miguel et al. dans Planta Med., 1996, 62(2), 146-149 montrent que la géraniine et la furosine, extraites à l'éthanol des feuilles et tiges de l'euphorbe Phyllanthus sellowianus, inhibent, chez la souris, la constriction abdominale induite par l'acide acétique, de sorte qu'elles sont utiles en tant qu'analgésique de type périphérique. Filho et al. dans J. Pharm. Pharmacol., 1996, 48: 1231-1236 montrent la même activité avec l'extrait hydroalcoolique de l'euphorbe Phyllantus caroliniensis. Récemment, Zhu et al. dans Phytochemistry, 1977, 44(3): 441-447 ont testé in vitro des composés phénoliques, dont la géraniine, pour leur capacité à inhiber la liaison de radioligands spécifiques à des récepteurs du système nerveux central tels que les récepteurs opiacés. Ils en déduisent que la géraniine a une faible
affinité pour les récepteurs opiacés.
Comme le système S, le système S'est modulaire et comprend quatre modules principaux : un module 10 de stockage des épingles analogue à celui décrit précédemment, ce module étant ici mis en oeuvre pour fournir des épingles vides et stocker des épingles portant les bretelles ayant été ramassées par le système S', * un module 50 de relevage des bretelles sur le terrain, * un module 60 de regroupement des bretelles de capteurs sur leurs épingles de stockage respectives. Comme on le verra, ce module 60 de regroupement est une variante du module 30 d'alimentation décrit précédemment. et un module 40 de transport, constitué comme le module de transport du système S d'un automoteur portant les autres modules du système S'.
Alors que le système S de la figure 1 est destiné à effectuer la pose et 1'enfouissage automatiques de capteurs en des endroits désirés, le système S'de ramassage est destiné à tre utilisé en complément de ce système S pour ramasser les bretelles de capteurs sur le terrain après I'activation des sources sismiques et le recueil de la réponse des capteurs déployés sur le terrain.
Tout comme le système S, le système S'comporte un ordinateur de bord (non représenté) pour rassembler les informations issues des différents capteurs et détecteurs embarqués et pour commander des automatismes asservis.
On va maintenant décrire en référence à la figure 9 le module 50 de relevage des bretelles du système S' : Sur cette figure 9, le module 50 qui est représenté schématiquement, est sur l'automoteur 40, la liaison entre les deux modules 40 et 50 qui est de type classique fixe n'étant pas représentée sur la figure par souci de clarté.
Le module 50 comprend deux tapis convoyeur ondulés 51 et 52, le tapis 51 tournant en boucle autour de deux axes 510 et 51 1, parallèles à Y, le tapis 52 tournant de mme en boucle de manière synchronisée et, dans un sens contra-rotatif au sens de rotation du tapis 51, autour de deux axe 520 et 521 également parallèles à Y.
Les extrémités avant des deux tapis 51 et 52 sont placées sensiblement en regard l'une de l'autre, alors que l'extrémité arrière du tapis 52 s'étend en dessous et en arrière de l'extrémité arrière du tapis 51 afin d'offrir à la bretelle en cours de relevage une première surface de contact.
Les tapis 51 et 52 qui forment deux boucles allongées parallèles s'étendent ainsi selon une direct avants plus hautes que leurs extrémités arrières étant situées au dessus de l'arrière de I'automoteur 40, où la bretelle ramassée est comme on va le voir dirigée vers le module de regroupement 60. Les extrémités arrières des deux tapis dépassent de l'arrière de l'automoteur et surplombent quant à elles le terrain.
La surface de chacun de ces deux tapis est ondulée et comprend une alternance de dents D et deux creux C de géométrie complémentaires, les dents de chaque tapis engrenant avec les creux de l'autre tapis qui est placé en vis à vis de manière à définir une zone de contact entre les surfaces coopérantes des deux tapis. Cette zone de contact fait intervenir la surface se trouvant en dessous du tapis supérieur 51 et la surface se trouvant au-dessus du tapis inférieur 52.
Pour relever comme on va le voir la bretelle déployée sur le terrain, le tapis supérieur 51 tourne de manière à ce que sa surface inférieure soit animée d'un mouvement dont la projection selon X est dirigée vers I'avant, le tapis 52 inférieur tournant comme on I'a dit dans l'autre sens et de manière synchronisée, de manière à ce que sa surface supérieure soit animée d'un mouvement dont la projection selon X est égaiement dirigée vers l'avant.
La surface des deux tapis est réalisée en élastomère relativement souple, ce qui permet ainsi d'absorber dans la zone de contact mutuelle des tapis des corps durs d'un certain volume (boitiers de capteurs de la bretelle à ramasser, ainsi que des connecteurs lui étant associés), en mme temps que le câble de la bretelle et ses anneaux, De plus, t'état de surface rugueux de l'élastomère des tapis 51 et 52, associé à un dimensionnement adapté des dents et des creux de ces tapis, permet d'exercer sur le câble de la bretelle une traction continue suffisante pour effectuer le ramassage de ladite bretelle sur le terrain et pour désenfouir les capteurs géophysiques qui lui sont reliés. Le module 50 relève ainsi la bretelle par l'arrière de l'automoteur.
Les vitesses de rotation des deux tapis qui sont comme on I'a dit synchronisées entre elles sont également synchronisées avec la vitesse d'avance de l'automoteur grâce à un asservissement commandé par l'ordinateur de bord.
Par ailleurs, le cible de la bretelle déployée sur le terrain n'est pas tendu entre deux capteurs : étant donnée D1 la longueur standard de câble de bretelle entre deux capteurs successifs de la bretelle, la distance entre deux capteurs sur le terrain sera D2 = K*D1, K étant un coefficient constant inférieur à 1.
Pour assurer le ramassage du câble de la bretelle selon un rythme continu, les vitesses de rotation des deux tapis 51 et 52 sont donc également asservies 6 ce coefficient K qui dépend du plan de pose correspondant à la bretelle à relever.
II est ainsi possible de ramasser la bretelle sur le terrain de manière continue alors que le système de ramassage S'progresse à une vitesse constante sur le terrain en chevauchant la bretelle, ladite vitesse pouvant tre sensiblement deux fois plus importante que la vitesse d'avance du système S de pose automatique, donc de l'ordre de quatre mètres par seconde.
D'autre part, pour éviter que le câble de la bretelle se retrouve soumis à une surtension du câble de la bretelle en cours de ramassage, le module 50 comporte un palpeur 53.
Ce palpeur, qui comprend un capteur dynamométrique reliéà l'ordinateur de bord, détecte ainsi toute surtension de la portion du câble de bretelle se trouvant entre l'arrière des tapis 51 et 52 et le terrain.
% obtenu : C 71,48 %, H 5,57 % pour DS = 2,7.
% obtenu : C 71,81 %, H 5,78 % pour DS = 2,8 #Pouvoir rotatoire : [a]20 = -37,0 (A = 436 nm, c = 1 g/dm3, CHCI3). EXEMPLE 28 : SYNTHESE DU NAPROXENATE DE CELLULOSE A PARTIR DU NAPROXEN RACEMIQUE (6 EQ.), DANS LE MELANGE PYRII7INE/TRIETHYLAMINE/DMAP : En opérant dans les mêmes conditions qu'avec le chlorure de naproxen S (+) 27), 1,0g (6,18 mmole) de cellulose est mis à réagir cette fois avec 9,32 g (6 éq. ) de chlorure de naproxen S, R dissous dans 40 ml.
On récupère après le même traitement, 1g (Rdt = 50 % sur la base d'une trisubstitution) d'ester cellulosique brut d'un DS = 2,6 déterminé par analyse élémentaire.
ANALYSES : # Les spectres IR et RMN sont identiques à ceux obtenus avec le chlorure de naproxen S(+).
% obtenu : C 71,43 %, H 5,80 %.
#Pouvoir rotatoire : [a]20 -30,0 (7 = 436 nm, c = 1 gldm3, CHC13). EXEMPLE 29 : SYNTHESE DU NAPROXENATE DE CELLULOSE A PARTIR DU NAPROXEN RACEMIQUE (2,1 EQ.), DANS LE MELANGE PYRllINE/DMAP . La réaction est menée dans les mêmes conditions que dans l'exemple 27, mais cette fois sans triéthylamine, dans 30 ml de pyridine avec une quantité catalytique de DMAP.
1,0g (6,18 mmole) de cellulose est mis à réagir avec 3,22g (2,1 éq. ) de chlorure de naproxen S, R dissous dans 20 ml. Le mélange est porté à 100 C pendant 48 h.
Après le traitement habituel, on récupère 2,85g d'ester cellulosique de DS = 1,7 (Rdt = 89 % sur la base d'une disubstitution) déterminé par analyse élémentaire.
ANALYSES : IR (KBr) v,,.(cm-1) : 3437 (5 O-H), 2937 (0 C-H), 1742 (5 C=O), 1607 et 1506 (#as et 5, C=C), 1268 (#as CH3-O-Aryle), 1153-1070 (5 (C=O)-O).
# RMN 'H (pyridine d5,200 MHz) # (ppm) : 1,2-2,4 (m, a-CH3) ; 3,3-4,4 (m, 0- CH3 + H cellulosiques + H benzyliques) ; 4,8-5,4 (m, H cellulosiques) ; (m, H aromatiques).
# Analyse Elémentaire : % calculé : C 69,62 %, H 5,63 % pour une disubstitution.
% obtenu : C 68,41 %, H 5,43 % .
EXEMPLE 30: SYNTHESE DU NAPROXENATE DE CELLULOSE A PARTIR DU NAPROXEN RACEMIQUE (1,5 EQ.), DANS LE MELANGE PYRIDINE/DMAP : Dans les conditions décrites pour l'addition du chlorure de naproxen racémique (2,1 éq.) sur la cellulose (exemple 29), 0,75g (4,63 mmole) de cellulose sont mis à réagir avec 1,72g (1,5 éq.) de chlorure de naproxen S,R.
Après le traitement habituel, on récupère 1,59g d'ester cellulosique de DSmoycn = 0,71 (Rdt = 92 % sur la base d'une monosubstitution) déterminé par analyse élémentaire ANALYSES : IR (KBr) v.,,(cm-1) : 3344 (5 O-H), 2937 et 2904 (8 C-H), 1740 (5 C=O), 1607 et 1506 (8 et 5. C=C), 1266 (8, CH3-O-Aryle), 1162-1060 (5 (C=O)-O).
Les anticorps ont été produits à partir des polypeptides humains, de souris ou de rat. Des anticorps reconnaissant spécifiquement IIP-1 ou IIP-10 sont englobés par l'invention. Ces anticorps sont suscités au moyen de
techniques immunologiques classiques. Les anticorps peuvent être polyclonaux ou monoclonaux, ou peuvent être produits par recombinaison, par exemple pour un anticorps humanisé. On fournit également un fragment d'anticorps qui conserve l'aptitude à entrer en interaction avec IIP-1 ou IIP-10. Un tel fragment peut être produit par coupure protéolytique d'un anticorps complet, ou peut être produit par des techniques d'ADN recombinant. Les anticorps de l'invention sont utiles dans des applications de diagnostic et des applications thérapeutiques. On les utilise pour détecter et déterminer quantitativement IIP-1 ou IIP-10 dans des échantillons biologiques, en particulier des échantillons de tissus et des liquides corporels. On les utilise également pour moduler l'activité d'IIP-1 ou IIP-10, par une action d'agoniste ou d'antagoniste.
Les exemples descriptifs et non limitatifs ciaprès, références, listes des séquences et dessins sont donnés pour faciliter la compréhension de la présente invention.
Description des figures et séquences Figure 1 Structure de domaines de leurres bihybrides de levure qui ont été utilisés pour cribler des banques d'ADNc à la recherche de pro- téines de liaison cytoplasmique du récepteur d'IGF-1. Le domaine de liaison à l'ADN LexA a été fusionné avec le domaine cytoplasmique (cp) (nucléotides 2923 à 4154) du récepteur d'IGF-l de type sauvage (a) du mutant kinase- inactif (mutation K/A au niveau de l'amino- acide 1003) (b) [Ullrich A. et coll., EMBO J.
5 (1986), 2503-2512 ; M. et coll., Nature 384 (1996), 173-176]. La séquence nucléotidique et la séquence d'aminoacides de deux lieurs différents insérés entre le domaine de liaison à l'ADN LexA et le domaine
de récepteur sont indiquées ci-dessous. Les produits de construction Il (récepteur d'IGF-1 de type sauvage) et Kl (récepteur d'IGF-1 mutant kinase-inactif) contiennent un résidu proline et un résidu glycine supplé- mentaires, par comparaison avec les produits de construction 12 et K2.
Figure 2 Modification du produit de construction leurre LexA/récepteur d'IGF-1 bihydride de levure. a) Illustration schématique des sites de liaison cytoplasmique de récepteur d'IGF-1.
Les sous-unités a du récepteur d'IGF-1 sont reliées aux chaînes 9 par des ponts disul- fure. La partie cytoplasmique de la chaîne (3 contient des sites de liaison pour des sub- strats dans le domaine juxtamembranaire et le domaine C-terminal. b) Structure de domaines du leurre bihydride ne contenant que les sites de liaison du récepteur d'IGF-1 juxtamembranaire. Le domaine juxtamembranaire du récepteur d'IGF-1 (nucléotides 2923 à 3051) [Ullrich A. et coll., EMBO J. 5 (1986), 2503-2512] a été fusionné avec le domaine kinase de tprmet (nucléotides 3456 à 4229) (numéro de dépôt GenBank : HSU19348). c) Structure de domaines du leurre bihydride contenant seulement les sites de liaison C-terminaux du récepteur d'IGF-1. Le domaine C-terminal du récepteur d'IGF-1 (nucléotides 3823 à 4149) [Ullrich A. et coll., EMBO J. 5 (1986), 2503-2512] a été fusionné avec le domaine kinase de tprmet (nucléotides 3456 à 4229) (numéro de dépôt GenBank: HSU19348).
Figure 3 Isoformes d'IIP-1. a) Délimitation des séquences d'ADNc d'IIP-1 et IIP-2 (p26). Les nucléotides sont numéro- tés au-dessus des séquences. Le site poten- tiel d'initiation de traduction dans l'ADNc d'IIP-1 se trouve à la position 63. Le pre- mier codon ATG, en tant que site potentiel d'initiation de traduction dans le variant d'épissage alternatif IIP-1 (p26) est à la position 353. Les deux ADNc contiennent un codon d'arrêt à la position 1062. b) Structure de domaines d'IIP-1 et IIP-1 (p26). Les positions d'aminoacides sont indi- quées au-dessus des séquences. Par comparai- son avec IIP-1 (p26), IIP-1 contient 97 aminoacides supplémentaires à l'extrémité N-terminale. Les deux isoformes d'IIP-1 con- tiennent un domaine PDZ couvrant une région entre les aminoacides 129 et 213.
Figure 4 Délimitation du domaine de liaison au récep- teur d'IGF-1 d'IIP-1.