INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon l'invention et ainsi que le montre notamment la figure 2, un élément piézo-électrique 5, ici supposé réalisé sous la forme d'une plaque destinée à travailler en flexion, cette plaque est intercalée entre la partie de maintien du dispositif 1 ici considérée et la partie du support 2 sur laquelle cette partie de maintien vient se fixer. Un intercalaire isolant, non représenté ici, est prévu entre la plaque qui constitue l'élément 5 et l'une des deux parties entre lesquelles elle est intercalée et contre lesquelles elle s'applique par chacune des deux grandes faces qu'elle comporte. L'élément 5 est ici supposé mis à la masse par son contact avec celle des deux parties contre laquelle il s'applique directement, sans interposition d'intercalaire isolant, si comme supposé ici le dispositif 1 et le support 2 sont eux-mêmes mis à la masse au moins au niveau des deux parties supposées conductrices considérées ci-dessus.
La plaque qui constitue l'élément piézo-électrique 5 est par exemple en une ou plusieurs couches d'un matériau tel que le PZT ou le PVDF, comme indiquée plus haut et elle est destinée à amortir les éventuelles flexions du dispositif au niveau où la partie de maintien de ce dispositif est immobilisée sur la partie correspondante du support.
Dans une forme de réalisation, la plaque qui constitue l'élément piézoélectrique 5 déborde par rapport à au moins l'une des deux parties l'une de maintien du dispositif 1 et l'autre du support 2 entre lesquelles elle est intercalée.
Dans l'exemple de réalisation présenté sur la figure 2 où la partie du support où vient se fixer le dispositif est supposée de type pied comportant une embase élargie, c'est par rapport à cette embase que déborde la plaque. En effet dans de nombreux cas, le dispositif 1 est susceptible d'avoir des dimensions très supérieures à celle de l'embase du support 2 sur lequel il est fixé.
Selon une variante de l'invention, non représentée, il est prévu de substituer un empilage d'éléments piézo-électriques exploités en flexion au seul élément piézo-électrique 5 présenté sur la figure 2, ceci permettant de diviser en proportion du nombre d'éléments empilés, la tension appliquée à chaque élément par rapport au cas où un seul élément est mis en oeuvre.
Selon l'invention et ainsi que le montre notamment la figure 2, il est prévu d'associer au moins un autre élément piézo-électrique 6, ici supposé réalisé sous la forme d'au moins une rondelle destinée à travailler en compression, étant entendu que le terme rondelle doit être aussi compris comme couvrant toute pièce fonctionnellement équivalente. Chaque rondelle qui correspond à un élément piézoélectrique 6 différent est ici supposée intercalée entre la partie du support 1, contre laquelle est appliqué l'élément piézo-électrique 5 tel que considéré ci-dessus, et un des moyens d'immobilisation, soit ici la vis 3 ou plus précisément la tête de cette vis 3, qui fixe le dispositif 1 au support 2. Une telle rondelle enfilée sur la tige de la vis 3 correspondante est immobilisée entre la tête de cette vis et la partie de support 2 que traverse ladite vis pour venir se visser dans un taraudage 4 ménagé pour elle dans la partie de maintien du dispositif 1, lorsqu'un vissage a immobilisé ce dispositif sur le support.
Bien entendu dans de nombreuses formes de réalisation, non représentées, plusieurs éléments piézo-électriques 6 seront susceptibles d'etre associés à un même élément piézo-électrique 5 au niveau d'un module de fixation d'une ou d'une des parties de maintien d'un dispositif sur une partie correspondante d'un support. Une telle disposition est symbolisée par la présence d'un axe disposé de manière symétrique à la vis 4 par rapport à l'axe supposé du pied de support 2, 2' et 2" sur les figures 2 à 4.
On introduit dans ledit mélange la solution de CaCl2 ou le mélange CaCl2 + APC (i.e. R3) après avoir été chacun préchauffé à 37"C.
Le "STA" détermine le temps de coagulation pour l'échantillon à tester et le pool témoin en présence et en l'absence de APC.
Les résultats obtenus sont directement exprimés sous la forme du rapport normalisé précité : n-APC-R-RS.
Exemple 5 Détermination de la zone normale A partir de 30 poches de plasmas fournies par le Centre de Transfusion Sanguine, on a déterminé (trois déterminations par essais) la valeur normale du rapport normalisé en fonction d'un pool normal de 25 hommes et de 25 femmes, ainsi que la zone pathologique sur un lot de 15 plasmas BM+ (plasmas APC-R homozygotes et hétérozygotes). On a pu constater que la valeur normale pour les plasmas BM- est telle que n-APC R-RS > 0,80 avec l'automate "STA".
Exemple 6 Reproductibilité intra-essals A partir de 2 plasmas APC-R homozygotes (BM+) et d'un pool normal intervenant comme témoin (BM-), 21 déterminations ont été effectuées en triplicata. Les résultats concernant le coefficient de variation sont donnés dans le tableau I qui suit. Ils montrent que le coefficient de variation du rapport normalisé n-APC-R-RS est inférieur à 3 %.
Coefficient de variation de n-APC-R-RS Lot Lot 005 Lot 006 Lot 007 Pool BM- 2,08 1,94 2,25 APC-R 1 (BM+) 1,64 0,96 1,32 APC-R 2 (BM +) 1,60 1,82 1,57 Exemple 7 Reproductibilite Jour-par-jour Afin d'apprécier la reproduction jour-par-jour, un plasma normal congelé (BM-) et 2 plasmas pathologiques (BM+) l'un congelé et l'autre lyophilisé ont été aliquotés puis testés pendant 10 jours avec le même lot de réactifs sur le même automate "STA". Les résultats consignés dans le tableau II montrent que le coefficient de variation de n-APC-R-RS jour-par-jour est inférieur à 5 %.
BM- BM+ congelé BM+ lyophilisé n-APC-R-RS n-APC-R-RS n-APC-R-RS Moyenne 0,93 0,51 0,56 SD 0,03 0,02 0,02 CV % 3,66 3,99 4,08 Notes : SD : écart standard par rapport à la moyenne CV % : coefficient de variation Exemple 8 Reproductibilité par lot On a testé avec l'automate "STA" un plasma normal BM- et un plasma pathologique BM + (plasma APC-R hétérozygote) aliquotés et congelés. Aussitôt après la décongélation, chaque plasma a été testé cinq fois dans une même série (un flacon), 15 séries indépendantes (15 flacons du même lot) ont été réalisées. Les résultats consignés dans le tableau III montrent que le coefficient de variation est inférieur à 5 %.
Plasma normal (BM-) | Plasma pathologique (BM+) M SD CV % M | SD CV % sans APC 41,93 0,757 1,804 38,46 0,602 1,564 avec APC 138,86 5,898 4,247 59,42 | 1,568 | 2,639 APC-R-RS 3,31 0,157 4,738 1,54 0,035 2,236 n-APC-R- 1,230 0,052 4,242 0,575 0,010 1,807 RS (médiane) Notes : M : moyenne du temps de coagulation (en secondes) SD : écart standard par rapport à la moyenne (en secondes) CV : coefficient de variation (exprimé en Exemple 9 Reoroductlblllte lot par lot 2 plasmas pathologiques notés BM+ 1 et BM + 2 (plasmas homozygotes) et un plasma normal BM- ont été décongelés et étudiés avec 3 lots différents des mêmes réactifs (moyenne de 5 mesures par essai). Un second plasma normal identique au précédent a été également testé en parallèle afin de déterminer le rapport n-APC-R-RS. Les résultats consignés dans le tableau IV montrent que le procédé selon l'invention est reproductible lot par lot.
Plasmas n-APC-R-RS testés Lot 005 Lot 006 Lot 007 A max.
BM- 1,17 1,10 1,07 0,10 BM+ 1 0,54 0,52 0,55 0,03 BM+ 2 0,55 | 0,52 | 0,54 0,03 Note : A max. : variation maximale Selon le tableau IV, A max. (en valeur absolue) est inférieur ou égal à 0,05 pour les plasmas BM+ et inférieur ou égal à 0,10 pour le plasma BM-.
Exemple 10 Influence du taux de facteur V Pour mettre en évidence la spécificité du procédé selon l'invention en ce qui concerne le facteur V, on a réalisé une série de dilutions d'un pool normal ou d'un plasma APC-R dans un PdfV, d'une part, et une série de dilutions du même plasma APC-R dans ledit pool normal, d'autre part.
Les résultats obtenus ont été consignés dans les figures 1 et 2.
Etant donné qu'un virus possédant une activité enzymatique transcriptase inverse peut être génétiquement caractérisé aussi bien sous forme d'ARN que d'ADN, il sera fait mention aussi bien de 1'ADN que de 1'ARN viral pour caractériser les séquences relatives à un virus possédant une telle activité transcriptase inverse, dit MSRV-1 selon la présente description.
Par détect de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 3 représente la séquence nucléotidique du clone dénommé CL6-3' (SEQ ID NO: 114) et trois trames de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 4 représente la séquence nucléotidique du clone dénommé C15 (SEQ ID NO: 117) et trois trames de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 5 représente la séquence nucléotidique du clone dénommé 5M6 (SEQ ID NO: 120) et trois trames de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 6 représente la séquence nucléotidique du clone dénommé CL2 (SEQ ID NO: 130) et trois trames de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 7 représente trois trames de lecture potentielles en acides aminés exprimées par pET28C-clone 2 et figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 8 représente trois trames de lecture potentielles en acides aminés exprimées par pET21C-clone 2 et figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 9 représente la séquence nucléotidique du clone dénommé LB13 (SEQ ID NO: 141) et trois trames de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 10 représente la séquence nucléotidique du clone dénommé LA15 (SEQ ID NO: 142) et trois trames de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
La Figure 11 représente la séquence nucléotidique du clone dénommé LB16 (SEQ ID NO: 124) et trois trames de lecture potentielles en acides aminés figurant sous la séquence nucléotidique.
EXEMPLE 1 : OBTENTION D'UNE REGION CL6-5' CODANT POUR L'EXTREMITE N-TERMINALE DE L'INTEGRASE ET D'UNE REGION CL6-3' CONTENANT LA SEQUENCE 3' TERMINALE DU GENOME MSRV-1 Une 3'RACE a été effectuée sur de l'ARN total extrait de plasma d'un patient atteint de SEP. Un plasma témoin sain, traité sous les mêmes conditions, a été utilisé comme contrôle négatif. La synthèse de cDNA a été réalisée avec une amorce oligo dT identifiée par SEQ ID NO: 68 (5' GAC TCG CTG CAG ATC GAT TTT TTT TTT TTT TTT T 3') et la transcriptase inverse "ExpandTM RT" de Boehringer selon les conditions préconisées par la société. Une PCR a été effectuée avec l'enzyme Klentaq (Clontech) sous les conditions suivantes : 940C 5 min puis 930C 1 min, 580C 1 min, 680C 3 min pendant 40 cycles et 680C pendant 8 min, avec un volume réactionnel final de 50 Al.
Amorces utilisées pour la PCR: - amorce 5', identifiée par SEQ ID NO: 69 5' GCC ATC AAG CCA CCC AAG AAC TCT TAA CTT 3' - amorce 3', identifiée par SEQ ID NO: 68 Une deuxième PCR dite "semi-nichée" a été réalisée avec une amorce 5' située à l'intérieur de la région déjà amplifiée. Cette deuxième PCR a été effectuée sous les mêmes conditions expérimentales que celles utilisées lors de la première PCR, en utilisant 10 ssl du produit d'amplification issu de la première PCR.
Amorces utilisées pour la PCR semi-nichée: - amorce 5', identifiée par SEQ ID NO: 70 5' CCA ATA GCC AGA CCA TTA TAT ACA CTA ATT 3' - amorce 3', identifiée par SEQ ID NO: 68 Les amorces SEQ ID NO: 69 et SEQ ID NO: 70 sont spécifiques de la région pol de MSRV-1.
IV - PRÉPARATION D'ANTICORPS MONOCLONAUX DIRIGÉS CONTRE DES CONJUGUÉS NO-CYS-GLUTARALDEHYDE COUPLÉS À UNE PROTÉINE PORTEUSE.
Comme déjà indiqué, les dérivés nitrosylés interviennent dans de très nombreux mécanismes physiologiques et physiopathologiques (inflammation, choc septique, maladies autoimmunes,. . Moncada et al., 1991; Nussler et Billiar, 1993; Stevanovic-Racic et al., 1993; Anggard, 1994) de l'organisme. I1 est donc capital d'obtenir des molécules capables de détecter et de bloquer (-es dérivés NO, qui peuvent détruire des agents pathogènes ct bloquer une fonction biologique majeure de l'organisme.
L'approche polyclonale rapporté précédemment a montré la possibilité de blocage de l'effet cytostatique et cytotoxique de NO sur les T. musculi. Néanmoins, l'hétérogénéité de la réponse immunitaire ne permet pas à ces immunsérums d'être suffisamment performants pour des des complexes où l'attention est portée sur un épitope inique. Pour confirmer l'effet de NO sur les trypanosomes er pour éviter des accrochages non spécifiques, il a également été développé une approche monoclonale. Les Inventeurs ont donc induit des Ac monoclonaux dirigés contre le conjugué NO-Cys-G-protéine. Cet Ac monoclonal a servi dans un premier temps comme outil de détection in vltuoo de certains sites de fixation de NO (tels que la cystéine) au niveau des parasites, et dans un deuxième temps d'inhibition in vivo du développement des maladies lnflammatoires telles que l'encéphalite autoimmune et l'arthrite inflammatoire expérimentales chez des rattes Lewis.
a) Synthèse de l'immunocène L'immunogène utilisé dans la production de l anticorps monoclonal est la Cys couplée par le (G) sur ta SAB ou SAH puis nitrosylée par le NaN02. conformément ail protocole décrit en détail précédemment.
b) Voie d'immunisation - Voie intrapéritenéale (IP): Des souris âgées de 5 semaines, provenant de la lignée cosanguine Balb/c (IFFA CREDO), ont été immunisées par voie IP avec 100 g d'immunogène en adjuvant complet de Freund, pour la première immunisation. Les autres injections ont été faites en utilisant l'adjuvant incomplet de Freund.
- Voie lvmphatique: coussinet plantaire (CP) A partir d'une solution de 1 mg/ml (dans le TPS) ie conjugué, des souris Balb/c ont reçu une injection dans les (CP) tous les trois jours pendant 10 jours (3 !rljections). . Certaines ont reçu une quatrième injection pour augmenter le titre et l'avidité de la réponse Ac.
c) Obtention d'Ac monoclonaux diriqés contre la NO-Cys-G conjuquée par la technique de l'hybridation lymphocytaire et sélection monoclonale Les souris ont été immunisées en alternance avec ies immunogènes NOCys-G-SAB et NO-Cys-G-SAH; lorsque le titre, l'avidité et la spécificité des Ac produits ont été trimés satisfaisants, les souris sélectionnées ont été laissées au repos pendant un mois avant de recevoir un rappel final par voie intraveineuse, 4 jours avant hybridation lymphocytaire.
Les cellules spléniques (5 x 107) et le myélome P2/O/Ay (2,5 x 107) (Shulman et al., 1978) ont été ;lslonnés avec du polyéthylène glycol 1500 selon un protocole de fusion éprouvé. La technique employée est dérivée de celle proposée par Kohler et Milstein (1975), (-lméllorée par Lane (1985), et adaptée au laboratoire pour les petites molécules (Chagnaud et al., 1987; 1989a, b; 1990). . Les cellules fusionnées sont ensuite cultivées en milieu sélectif: RPMI 1640 enrichi en L-glutamine (2 mM), en antibiotiques pénicilline/streptomycine et supplémenté en sérum de veau foetal (10%) contenant 50 M d'hypoxanthine et 10 M d'azasérine. Après dix jours de culture, les puits contenant des hybridomes ont été dénombrés : Les clones producteurs d'Ac spécifiques ont ensuite été criblés à l'aide du test ELISA et sous-clonés selon les étapes suivantes: - Pour le premier criblage, tous les clones ont été testés sur les conjugués suivants : NO-Cys-G-SAB, Cys-G-SAB et SAB-G. Les Ac de chèvre anti-Ig de souris sont utilisés à une dilution de 1/5000 pour la révélation des clones positifs et particulièrement spécifique de l'immunogène (NO-Cys-G-BSA).
- Ensuite, les clones positifs ont été sous-clonés (Sous-Clonage 1) pour obtenir une cellule/puits. Après une semaine de culture les clones ont etc retestés sur des plaques ELISA adsorbées par les conjugués cités ci-dessus; - Après le premier sous-clonage nous avons réalisé des études de la spécificité des clones positifs.
Ainsi, une étude de la dilution a été réalisée dans le but d'obtenir une DO - 1 pour effectuer les tests de compétitions selon le même procédé que celui décrit précédent; - Les clones qui ont montré une spécificité pour le conjugué NO-Cys-GSAB ont été sous-clonés pour une deuxième fois (Sous-Clonage 2) et retestés sur des conjugués nitrosylés ou non diférents : (NO-Cys-G-BSA; (?ys-G-BSA; NO-Cys-SAB; Cys-SAB; NO-Tyr-G-SAB; Tyr-G-SAB; N()-Tyr-SAB; Tyr-SAB; SAB-G; ainsi que la NO-SAB) . Les résultats de tests ELISA indirects, ainsi que des tests de ïompétition ont permis de choisir les meilleurs clones; - Après ces deux sous-clonages qui ont permis de s'assureur de la monoclonalité des hybridomes, les clones choisis ont été conservés dans de l'azote liquide. La production en masse des Ac a été effectuée en liquide d'ascites (Potter, 1976) et les Ig ont ensuite été purifiées par précipitation au sulfate d'ammonium.
* 2) Résultats.
a) Analvse spectrophotométrioue de l'immunoaène utilisé peur l'approche monoclonale La nitrosylation du groupement SH de la Cys couplée a été suivie par spectrophotométrie. La figure 9 représente l'analyse spectrométrique de l'immunogène NO Cys-G-SAB et de son homologue structural Cys-G-SAB en fonction de la longueur d'onde. La bande d'absorbance de NO pour le conjugué NO-CysG-SAB a été détectée entre les longueurs d'ondes 340 et 640 nm. Le spectre du conjugué Cys-G-SAB qui a été obtenu avant nitrosylation montre une absence d'absorbance entre ces deux longueurs d'ondes.
I1 convient aussi de remarquer que la zone d'absorbance obtenue avec le NO-Cys-GSAB est plus importante que celle du conjugué NO-Cys-SAB malgré le même rapport de couplage des deux conjugués. Ceci pourrait être dû au type de couplage et donc à l'exposition de t'haptène accessible à NO.
Le tableau 3 ci-dessous donne la structure moléculaire de t'immunogène NO-Cys-G-SAB et Cys-G-SAB Tableau 3
Cys-G-SAB SH-CH2-CH-NH- (CH2) 5-NH-SAB (cystéinylglutaraldéhyde) COOH NO-Cys-G-SAB NO-S-CH2-CH-NH- (CH2) 5-NH-SAB (NO-cystéinylglutaraldéhyde) COOH b) Evolution de l'immunisation des souris - Souris immunisée sar voie (IP) La dilution optimale de l'Ac primaire est de 1/8000. On note l'évolution de deux réponses immunes : une est importante, dirigée contre le NO-Cys-G-SAB a été obtenue après la troisième immunisation. Elle est suivie d'une 2ème qui est plus faible. C'est cette demière qui a été dirigée contre l'haptène et la protéine porteuse (Cys-G- SAB). LA figure 10 représente l'évolution au cours de l'immunisation de la réponse en anticorps chez la souris immunisée par voie intrapéritonéale. La même dilution de l'Ac primaire a été utilisée pour l'étude de l'avidité et de la spécificité.
Le certificat d'utilité FR 2 252 228 de la société AUTOMOTIVE PRODUCTS Ltd, porte sur des améliorations concernant des suspensions pour véhicules.
Comme il résulte de ce document, le but du dispositif objet de ce document de l'art antérieur est de réaliser une suspension pour véhicules telles que, lors de modifications de la charge dynamique, résultant d'une tendance au roulis, dans les virages, et d'une tendance au tangage dû à un transfert de poids de l'avant à l'arrière lors d'accélérations et de ralentissements, ladite suspension fasse varier la quantité de liquide contenu dans des cavités de bâtis remplis de liquide, par lesquels le poids du véhicule est transmis aux roues, ceci afin de maintenir le véhicule horizontal.
Une analyse de la suspension pour véhicules décrit dans ce document FR 2 252 228 est effectuée en début de description.
Comme il résulte de cette analyse, la suspension pour véhicules décrit dans ce document FR 2 252 228 assure clairement un couple de rappel anti-roulis mais présente les inconvénients majeurs ci-après.
La raideur verticale et la raideur en roulis sont couplées du fait des sections différentielles des vérins.
En effet, la raideur verticale et la raideur en roulis sont déterminées par la pression de précharge de l'accumulateur.
Les dispositifs de restriction de flux assure une fonction d'amortissement aussi bien lorsque les chambres hautes sont comprimées que détendues.
En cas de détente très rapide, la chambre haute peut caviter.
Aussi un but de l'invention est-il de concevoir un dispositif à amortissement du roulis unique de suspens ion secondaire ne présentant pas les inconvénients des dispositifs connus et intégrant les fonctions suivantes: - couple de rappel anti-roulis avec possibilité de réglage de la raideur anti-roulis sans démontage du dispositif à amortissement du roulis, - amortissement vertical, avec la possibilité de réglage de la viscance sans démontage du dispositif à amortissement du roulis, - amortissement en roulis avec la possibilité de réglage sans démontage du dispositif à amortissement du roulis et avec la possibilité d'augmenter cette amortissement sans augmenter l'amortissement vertical.
Conformément à l'invention, le dispositif à amortissement du roulis est tel que caractérisé dans les revendications.
Un avantage du dispositif à amortissement du roulis de l'invention est qu'il assure une fonction raideur antiroulis.
Les accumulateurs 3, 3' préchargés de façon identiques induisent une raideur pneumatique qui se traduit via le circuit hydraulique et le bras de levier par un couple de rappel en roulis, idéalement linéaire de la forme: Mpneum = -Ke(P0, VO, S, a) Ec, la signification des variables étant donnée en fin de description.
L'absence de section différentielle (sot=0) des vérins n'induit aucune précharge ou raideur verticale pour le dispositif.
La modification de la précharge PO des accumulateurs permet de modifier la valeur de Ke.
Un autre avantage du dispositif à amortissement du roulis de l'invention est qu'il assure une fonction amortissement vertical.
Les ensembles clapets et valves CLl/Vl, CL2/V2 et CLl'/V11, CL2'/V2' permettent de régler la caractéristique d'amortissement vertical Famz, F'amz générée par le dispositif.
L'opération 319 consiste à positionner le contenu du registre REG~FLUX 504 à la valeur '0', ce qui correspond à l'ouverture de l'interrupteur de flux.
L'opération 320 consiste à positionner le contenu du registre REG ACCESS 502 à la valeur '1' et à valider en écriture FIFO~MSG 505.
Le moyen de contrôle de communication en émission 152 fonctionne selon l'organigramme présenté en figure 34. Il est exécuté après initialisation préalable des zones mémoire EN-TETE 524 et FIFO~PAGE 520 étant donné les caractéristiques du message à diffuser.
Au cours de l'opération 811, la trame courante en écriture dans FIFO~TRAME 522 est initialisée au type SPI, puis le champ FCF2 5 ainsi que le champ FIF 6 sont initialisés à partir du champ identité du registre EN-TETE 524. FIFO~TRAME 522 est ensuite validée en écriture. L'opération 811 permet ainsi la diffusion de premiers symboles de protocole susceptibles de permettre à chaque dispositif de réception de sélectionner un mode de réception à mettre en oeuvre.