INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
3 1479 ADN Homo sapiens 3 GTCTGCAGAATTCGCCCTTGCTGCCACCTATGTACCAGCTATTCCAGATGACCAAGCCCTGCTAGAA TAAAGACTGACTTTTCATTGTGACCTCTGAAGGATGTGCAGCTCAGCTTTCACCTATCCCCACGTTC ACCCAAGCCAAAAAGAAGAATTGTTCATTCAAACTGGAAATGATCTCCAGCTTGGAAATGAGACTCC TCATGAGCTTATTCTAAGATCAGAGTCTGAAAATTATTTTCTCAAAAGTTACAAATAAATGTCTTTT AACAGTACTGTCAGACTAGTGACCAACAAGTTACTTTATGAGGATGGATGATGATATTAGAGTTCAA GCAATTGTCCAGTTTGTTTCGATGCCACAGTTTGCTTTTAAATTCCCATAGTGAGCTTCCATCTTGA GACCCACTCAACACAGAAGGATTACATAAAGGTTGATCACCCACGCTCTACAGATGAACAAATTGAG ACCCAGAGATGCTAAACTGCTCTGCAGGTCACAAACCTGAACAGCAGCATAGCCAAAATGGGAACGG AGCTCTTCTGACTTCAAGCCCCTGCACTTTTTTCTTAACCACATTAATTTTATGAATATCTATGTGG TCAAAGTCTCTTTTGTAAAATCTGAGTATAAGCTGAACTAGATCATGTCTCTGTAAGCTAAGATGGC AGAAACACATTGTCATGTTAGTTTGGAGGAGCAAACAGATATAAGTATGTGTTGTAATGTTATAGTG AGCTGTTATGTATCCCCCAGCAATGTCCAAAGTGATCAGAGCTACTAGATGACTTATTACAATGTTC AGATCCCACTCCTTCATTCCTCCTCTCTCAGTGACCTGTCTACCCCCAAGCTTTAGAACTGAGCTCT CTCCAACTTAGAACTCATTAGAGTTTGTTGCATTAGTGATTGGATCTCCTCATGAAAGTTTTTTGAC CAATGACAGTAGAGCCCCTTTAAGCTAGCCAGGCCCAAGATAGGGAAGCACTGCTGGTTTACATTTC TGCTCTTTCTAATTCAGTTGTCTATTGCATGCAGACATCCCCTGCCCGACTTCTCCATTATGGAAGG CTAAGGCCATCCTTCCTTGTCCAGTTTCTCTACCTACACACTAACATGCCTTTTCCCCATGGAGTGA ACTCTGCCAGTTGTCTTTGGACATTTTCTGCAGATGCAGGCTCAGTTCTGCTCTTTTGTTCCCACCC ACTTCTAGATCTTCCTCCATTTAATCCCTTATTCTTATAAGGAGTCTAATTTTTGTGTATTGTCCTT GATTAGGGCAGCTGACAGCTTTACACCAAAGCTGAAGTCTCTCACTTAATCCTAAGCAAGGGGCTAG GGAGAACTAAGATATCCTTCCCATATCAAGGGATATAGGTTACTAGAAGGGTGGAGGTCTCTTAACA GGCTCACTCACCTTTCAGAGTTTAAATTATGGTCAGGCTTAAGAAGCTCTCTCTTGTGACTGAGTGT ATTGC 4 5169 ADN Homo sapiens 4 CAGTTCTTTTCATTCCATCACTTTAGGTGATGGGTAAGATTTTTGAAAGCCTTATATTTTTTGATTT TGTTGTCTAGTTTAATCCTACCTTTAATAGTTGTGTTTGGTAAAATTCCCACTTGAATGTGACACTG ATAATAATTATGCTGATTTTTAGCATCTCTTATAGGAATCAAAGTTTATTAAAGTTACATAGAGGAT TGAAAAATGTATATCACTCAATTTTTATCTAAGAAGGATAGGTTATAAAGGGAGGTACCTAAATACT CAAATAATGTATATATTCTTTTTCATAACATATGGAATGCTTTAAGCAATTGTTTTGAAAAAAATCT GCGTATCTTTGACTTAATTGGCACATGACTTTTTCAAGCAGCCATTCATTCAGAGGTTTGTTTTCTC TCAGTCCTTTTGCTACATTCACTTTCTTTTCAAAGAAATGTTAATTATTACAAAAATTGACATAGAT
* ATCTTTCCCAAACTTGGGGTAAAACCCATGGTTATGTGGAACATAACTGTTCTTAAAAAGTCAATTA TAATTTGTAACTCACATCCTTTGAGCTAAACTAAATTAAAATTACAGTATTTAATAATTCTTTGGGC ATTTTTAAGAGGTCTGAATTTGTATTTTTCTTCATTTTTGAAACTTTACATTTGTTGACTTTTTTTC ATTCTCATTTAAAATATATTGTGCTATGATAACCAACCTTCTTCCAAGGAGTGACCATTACTGCCTA CATTTGCGTTGCTTTCTACATAGAGACTTGTATAATAGTATTAATAGTAGCTCATTCTCTCTAAAAA TTTACTGCCCACTGAGAGGATGTTTTGTTTCCTTGATAAAACAAATGTAAATGAGGAATTTTATTTG AATTGGAATATTGTTTTTCTAGAGGACATTCATATCTGCACTATTATCTGATGACATGTTGGTAATT TTAAAGACTGCAAGGCAGTTTAGAGAATGAAGTAAACCAATAGATACTCTTTTGATTCTCCAAAGAA ATATAATTTTGGTTTTTGTTCCTCAGAGAGAGTTTGAAAGAAATTTTCAGATGTTCTGTTCCCTATA GAGGGCCTATTCCAGGATCTAAATGAATGGGAATTTATAATTCCTTTCATAGACTCAAACCTGAAAG CAGAAATTTTTAGTAGTTGAGTTGCTTTAAGTGAATTTTAACAAATATGACACAGAAAAGGTCAGAT GCTGTTGTATAAAATTTTTTACTAGTGTGTCTTATATAATTCTTTCTTCTCATTAATTCAGTGCCTT TTTCCTCTAAGCATACTCTTGGTCCATGCCCCATGCAGTGTCAACTGATGTTTAAGCTACAGAGCAT TGTTGTAGTGGTGAGGGCCCTCTGTTGCAGGGGCATGGGGAAATGCATATATTAATCAGGGGCTGGA GGAGTATACATGATTCTTGTGTTCATGTTGTCATTTGAAACTCTTCACATAAAATTTTCTAATATTC
ADN Homo sapiens 5 CCTTCAGTGCTCAGAGGAGCAGACACAGTTGCTCACTCTCCACTCAAAGTTGGTCCAGGCCTTGTGC TAATTAAAGGAGGAAGCACTGCTGTAGCGCAGAAGGAAAAGGCCAGTCCTCCACCTGTTCAGCATGA TAATGCAGCTCCCCTGTGGTAAGGGTTGGTCGGACTACAATATCTTTGTGACTTTGATGAAAGCATC TGCAGTTATAATGTGGCAAAGAAAAGGATAATTCCAGAATTTCCCATTTCCATCATTTGAGCTTGAA ATATCTGAATAGATATTTACAAAACCTTGTGAAGAAGTCACCTTATTTCTCATGTTTCTAATGAACA TATATAAACTTCTCATTTCCAGCTCTAGGATAAGCAAACAGCAAAAAATTACCAATGAAAAGTTAGG AGTTCAAAAGAAGTAGTCTGAACTAGATAGATTAGATGTCATCCTGTGAAATAGGTTTACCACATGA TAGGGAAGAACTTTCAAACAGTACAGGGTCTATTTTCAGTTATTCACTATGAAATGAGAACATTTCA CAGTTGTTAAAGGTTGCTTTCAGAAGAAAAGCCCAACTGATGAATGTTTTTAAAAATGCACTATTGA GAGCGAACAACAGACTGGATGCCATAATTTTATAGTCAAGTTTGGGACAAGTTTTAAGAAACTGTGT TACAATTCAGAGAAAAGACAGTTGGTGAGCATATTAAGAGATATAGGGAACAGATTTAGATGATCCA ATATGCTTATTATCAGAATTCCAGAAAAAGGCATGAAATCATAAAGAAGACAGAATACCAGGCAAAA TTAATGAAAAAATATTAATCCAAACACATATAATAAAAAGTATCAATTTCAAGAATAAAAGAATTAT ATAAGCATTTAACACACATAAACATTGGTTACCTGTAAAAGGTGAAAAAAAAAAACAGGTTCAGATT TTCTGCTTAAATATCAAAGGGCAAATGGAACATTTTTACGATCACCTAAAATTCTTGAAATAGGCCA AGATTTTTCATATACAAAGGCAACAGCCTTCTTGCCACAAC 6 280 ADN Homo sapiens 6 GGGAGAGGAGGCAGAGGCCAGATCCTGAAAAACTCTTCAGTGGTGGACTGAGGTGCCTGGACTTCAG AGGCGACAGGAGGGTAGTGAGGTTTCTGGAGCAGGCTGGTCAAAGTCAGCAGCACCCTTGTTTGATA TCCATCCCATTCCCTCACCCCACATCTACCTGGGACTTGCTTCTCTGACCCTCCTGCTGTGGCAAGA TCCTGATTGTCCCAGGTGCACATGGCTCTACTTCCTGACTGCTCATCCTCACGCAGTCCTCAGCCCT CTATGACCCCCC 7 479 ADN Homo sapiens 7 AAATCAAGAACATCATTCTCTCGGTATCTTTATGGAGCAAAATGTTTATGGTAGAGACAGGTGACCT TGCAGCTAGCCTAACCACATTCTCCAAGTGTTAATTAGATGGTGCAATATTCACATAGACCTAGAGT CCACTGACTATGAAAGGCTCTGACCTTTTTGCgGCTTCTTTACCAGGAGTGTATAATCTTCCTAGTT CCTAAATCTTTCTAAGAGAACCTGACTACCTCCAGGTCTAGAGGGAGCAGCCCCTTCACTATATAAC CAATTTCCCTGACTGCACATATGGTAATTCCATCTATGGTGAATAATGAATCCATTCTAGGCCAAAT AGATACTCTTATGCAGAGCCCAGCTGGGACAGTCACGTGCAAGGAGAAAAGAGAAAGCCAGACTGCA GACATAGCTAATGCAAAGGCACGGAGATACAGACTACACAAACTAGAAGAAACGTAGAGTAAGCTGC TTTGTCTCTT 8 2599 ADN Homo sapiens 8 GAAATCCAGGGGACCAATGCATTTTATCACTAAAACTATTTTTATATAATTTTAAGAATATACCAAA AGTTGTCTGATTTAAAGTTGTAATACATGATTTCTCACTTTCATGTAAGGTTATCCACTTTTGCTGA AGATATTTTTTATTGAATCAAAGATTGAGTTACAATTATACTTTTCTTACCTAAGTGGATAAAATGT ACTTTTGATGAATCAGGGAATTTTTTTAAAGTTGGAGTTTAGTTCTAAATTGACTTTACGTATTACT GCAGTTAATTCCTTTTTTGGCTAGGGATGGTTTGATAAACCACAATTGGCTGATATTGAAAATGAAA
GAAACTTAAAAGGTGGGATGGATCATGATTACTGTCGATAACTGCAGATAAATTTGATTAGAGTAAT AATTTTGTCATTTAAAAACACAGTTGTTTATACTGCCCATCCTAGGATGCTCACCTTCCAAGATTCA ACGTGGCTAAAACATCTTCTGGTAAATTGTGCGTCCATATTCATTTTGTCAGTAGCCAGGAGAAATG GGGATGGGGGAAATACGACTTAGTGAGGCATAGACATCCCTGGTCCATCCTTTCTGTCTCCAGCTGT TTCTTGGAACCTGCTCTCCTGCTTGCTGGTCCCTGACGCAGAGACCGTTGCCTCCCCCACAGCCGTT TGACTGAAGGCTGCTCTGGAGACCTAGAGTAAAACGGCTGATGGAAGTTGTGGGACCCACTTCCATT TCCTTCAGTCATTAGAGGTGGAAGGGAGGGGTCTCCAAGTTTGGAGATTGAGCAGATGAGGCTTGGG ATGCCCCTGCTTTGACTTCAGCCATGGATGAGGAGTGGGATGGCAGCAAGGTGGCTCCTGTGGCAGT GGAGTTGTGCCAGAAACAGTGGCCAGTTGTATCGCCTATAAGACAGGGTAAGGTCTGAAGAGCTGAG CCTGTAATTCTGCTGTAATAATGATAGTGCTCAAGAAGTGCCTTGAGTTGGTGTACAGTGCCATGGC CATCAAGAATCCCAGATTTCAGGTTTTATTACAAAATGTAAGTGGTCACTTGGCGATTTTGTAGTAC ATGCATGAGTTACCTTTTTTCTCTATGTCTGAGAACTGTCAGATTAAAACAAGATGGCAAAGAGATC GTTAGAGTGCACAACAAAATCACTATCCCATTAGACACATCATCAAAAGCTTATTTTTATTCTTGCA CTGGAAGAATCGTAAGTCAACTGTTTCTTGACCATGGCAGTGTTCTGGCTCCAAATGGTAGTGATTC CAAATAATGGTTCTGTTAACACTTTGGCAGAAAATGCCAGCTCAGATATTTTGAGATACTAAGGATT ATCTTTGGACATGTACTGCAGCTTCTTGTCTCTGTTTTGGATTACTGGAATACCCATGGGCCCTCTC AAGAGTGCTGGACTTCTAGGACATTAAGATGATTGTCAGTACATTAAACTTTTCAATCCCATTATGC AATCTTGTTTGTAAATGTAAACTTCTAAAAATATGGTTAATAACATTCAACCTGTTTATTACAACTT AAAAGGAACTTCAGTGAATTTGTTTTTATTTTTTAACAAGATTTGTGAACTGAATATCATGAACCAT GTTTTGATACCCCTTTTTCACGTTGTGCCAACGGAATAGGGTGTTTGATATTTCTTCATATGTTAAG GAGATGCTTCAAAATGTCAATTGCTTTAAACTTAAATTACCTCTCAAGAGACCAAGGTACATTTACC TCATTGTGTATATAATGTTTAATATTTGTCAGAGCATTCTCCAGGTTTGCAGTTTTATTTCTATAAA GTATGGGTATTATGTTGCTCAGTTACTCAAATGGTACTGTATTGTTTATATTTGTACCCCAAATAAC ATCGTCTGTACTTTCTGTTTTCTGTATTGTATTTGTGCAGGATTCTTTAGGCTTTATCAGTGTAATC TCTGCCTTTTAAGATATGTACAGAAAATGTCCATATAAATTTCCATTGAAGTCGAATGATACTGAGA AGCCTGTAAAGAGGAGAAAAAAACATAAGCTGTGTTTCCCCATAAGTTTTTTTAAATTGTATATTGT ATTTGTAGTAATATTCCAAAAGAATGTAAATAGGAAATAGAAGAGTGATGCTTATGTTAAGTCCTAA CACTACAGTAGAAGAATGGAAGCAGTGCAAATAAATTACATTTTTCCCAAGTGCCAGTGGCATATTT TAAAATAAAGTGTATACGTTGGAATGAGTCATGCCATATGTAGTTGCTGTAGATGGCAACTAGAACC TTTGAGTTACAAGAGTCTTTAGAAGTTTTCTAACCCTGCCTAGTGCAAGTTACAATATTATAGCGTG TTCGGGGAGTGCCCTCCTGTCTGCAGGTGTGTCTCTGTGCCTGGGGGCTTTTCTCCACATGCTTAGG GGTGTGGGTCTTCCATTGGGGCATGATGGACCTGTCTACAGGTGATCTCTGTTGCCTTTGGGTCAGC ACATTTGTTAGTCTCCTGGGGGTGAAAACTTGGCTTACAAGAGAACTGGAAAAATGATGAGATGTGG TCCCCAAACCCTTGATTGACTCTGGGGAGGGGCTTTGTGAATAGGATTGCTCT 9 222 ADN Homo sapiens 9 GTAGGAGAGAAGTATGGCTACCTTTCACTTCCAAAGCCAATGGTAAGTAGAAGAATTATGTACATTG CAGAATGTTTTTATTCAGAATTCAAATTATGCTCTTGTTGCCTGTTGCTGCTCCCCTCTACCACAAA TAATTGACATGACAGAAAAAAGTTAGGATATTAATGTTGACTTCAGAGTTGTTATTCTGGGTAGCAA TCTAGTTGTGGCTTACACTCT 10 3422 ADN Homo sapiens 10 GAAGTCACTGATAATTATAATTAGTTTAAATTTATTCTTACACTACTTAAGAAAAATTTCATTTAGA AAAGGCTACCATGAGATCTTTTGACTATATGGAGTAGACTGCATACAGATCTCTTTATTTCTATTAT GAATATTTTAGCGATTATAATCAGCTATTCCACTGAGTATTAGATTTGGTCACTAAGTAACTCATGT TTTTCTTTAGTCAATCATTCATTCATTCACTAAAACATTTGTTGAGAGTTGGCTAAACTCTAGATTC TGTGCCAGGCACTGTACAGGGTGATGGAGATCACTCATAAGAAGGCCTCTTGCTCTTAGCCAGATCA TATGTAATACTAAATTTAAATTTTTTGCATTAAAAGGCTAAAAAATCATTTGTTTTTGTTAATTATA TACTGGTTGATTTATAGATGTAATTAGCACATATTCATAAGAGACAAATATATACAATGAGTTACTA
Occurrence et méthodes de synthèse envisageables pour les matières premières P.-ib, P-2b, P-4ai, P-4a2 et P.4b: P-lb : N-méthylpipérazine C5H12N2 M= 100,16 CAS 109-01-3 P-2b : acide chloro- sulfonique S03HCl M= 116,52 CAS 7790-94-5 P-4al et P-4a2 : IH-pyrazole, 1-méthyl, 3-n propyl, 4-amino, 5-cyano ou acétamido C8H12N4 ou C8Hl4N40 La synthèse du cycle 1H-pyrazole substitué peut se faire par l'intermédiaire d'une réaction de cyclisation en hydrazone à partir d'acylacétate d'éthyle et addition nucléophile de l'ion CN' sur le carbonyle de l'hydrazone cyclique.
P-4b : acide-2-éthoxy benzoïque C9H10O3 M= 166. 18 CAS 134-11-2 Les matières premières P-1b, P-2b et P-4b peuvent se trouver dans le commerce mais il est intéressant de préparer P-4al et P-4a2 au moyen des synthèses conventionnelles des cycles 1H- pyrazole. Ces synthèses font généralement appel à des hydrazines substituées du type R1-NH-NH2 et des composés a-dicarboxylés R3-CO-CH2-COR4 .
Les teneurs isotopiques des matières premières utilisables sont bien documentées dans la littérature.
Les rapports isotopiques R (i) exprimés en déviations #(i) %o par rapport à une référence internationale R(ref) au moyen de la relation : 8 (i) = ((R(i)/R(ref))-l)*1000 %o
2H et 18O : V.SMOW (Vienna-Standard Mean Océan Water) 13C : V. PDB (Vienna-Pee Dee Belemnite) N : azote atmosphérique 34S : CDT, échantillon de Troilite extrait du Canyon Diablo (USA) Les cycles benzéniques d'origine fossile (pétrole) sont caractérisés par des valeurs # 2H comprises entre-20 et - 120 %o et les chaînes latérale saturées entre 0 et-70 %o Les mesures sont réalisées par RMN (SNIF-NMR) pour les chaînes latérales et la teneur globale par Spectrométrie de Masse (SMRI).Les teneurs globales en 13C mesurées par SMRI sont généralement égales à-28.5 %o avec un écart type de l'ordre de 2 %o et les teneurs isotopiques en 13C des chaînes latérales alkylées ou fonctionnelles sont mesurées par RMN. Selon le procédé de synthèse et l'origine de la matière première des chaînes latérales, les valeurs # 13C peuvent varier entre-5 et-100 %o et offrent ainsi un potentiel de caractérisation important.
Les molécules azotées d'origine synthétique ont des valeurs 13C et 15N ,mesurées par SMRI, relativement faibles et égales respectivement à-30 %o (1. 5) et-20 # (10) mais, dans ce dernier cas, les réactions de cyclisation en pyrazoles et xanthines induisent des appauvrissements sensibles en isotopes lourds. A ce niveau, on peut considérer que les valeurs 8 15N du groupe CN ou du groupe CONH2 reflètent celles des matières premières car l'introduction dans le motif IH-pyrazole se fait sans fractionnement isotopique significatif. La teneur en 15N du groupe NH2 est d'autant plus faible par rapport à celle de la matière première que le rendement de la réaction est faible.
Les acides chlorosulfoniques commerciaux sont généralement issus de l'acide sulfurique dont la teneur en 34S peut
varier entre-25 et +25 # selon l'origine de la matière premières (S natif, pyrites) et du procédé de fabrication.
Cependant, une fois synthétisé, le groupe -SO2- est un excellent traceur naturel et la teneur en 34S est déterminée par SMRI.
Enfin, il est intéressant de noter que la cartographie isotopique de l'acide citrique est très bien définie et que l'origine du citrate de sildenafil peut être précisée par la considération de la distribution isotopique dans le fragment citrate. Ainsi, la teneur en 2H mesurée par RMN varie entre-40 à-80 %o pour des acides citriques biotechnologiques mais les valeurs 813C sont égales respectivement à -11 %o (1) ou-25 %o (1) selon que la matière première est constituée par un sucre C34 ou C3. Les acides citriques naturels extraits de fruits tels que les citrus, ananas ou fruits rouges ont des valeurs #2H très voisines de 0 %o (25).
Les gammes de variations que nous venons de situer prouvent la faisabilité de la démarche de protection d'un médicament ou produit actif. Une large possibilité de choix de valeurs isotopiques d'un (ou plusieurs) fragment(s) est offerte à la firme productrice souhaitant réaliser un marquage naturel de son produit. d) Caractérisation des différentes étapes réactionnelles par l'établissement d'un profil de fractionnement isotopique : # Etape : niveau-4 ---> niveau-3 Aucune modification des teneurs 2H et 13C du cycle benzénique n'est attendue et, de la même façon, la valeur # 18O du groupe éthoxy ne doit pas varier. La variation la plus significative se situe au niveau de la fonction NH2 de P (-4a) subit un fractionnement isotopique 15N/14N proportionnel à l'effet cinétique a de
la réaction de formation de la liaison amide et le fractionnement correspondant est mesuré par SMRI.
Il est à noter toutefois que la matière première P (-4b), acide éthoxy-2 benzoïque, peut être marquée naturellement et spécifiquement sans ajout de molécules enrichies de la façon suivante : Le groupe O-C2H5 est marqué naturellement en 2H, 13C ou 180 à partir de molécules d'éthanol convenablement choisies. Un éthanol de synthèse présente des teneurs en 2H égales respectivement à-100 et-160 # sur les deux sites CH3 et CH2 avec des teneurs 13C de l'ordre de-28 à -31 %o et des teneurs 180 égales à-5-10 #. Par ailleurs, un éthanol naturel pourra présenter des teneurs en ZH, 13C, ou 1s0 respectivement égales à -200 et-400 %o (2H), -11 %o ( 13 C) et +7/+10 (180). Ces deux types de groupe éthoxy disponibles commercialement sans ajouts enrichis sont facilement introduits dans la molécule d'acide o-hydroxybenzoïque au moyen de réactions conventionnelles pour former la matière première P(-4b). Les caractéristiques isotopiques de cette matière première, qui devient un fragment typique tel que décrit ci-dessus, se retrouvent dans la molécule finale de citrate de sildenafil.
# Etape : niveau-3 ---> niveau-2 Au cours de cette étape, on peut observer par SMRI des variations caractéristiques des teneurs # 15N des atomes d'azote du cycle pyrimidinone .
Les valeurs 5 2H et # 18 0 des sites NH et C=O ne sont pas exploitables car elles dépendent des échanges chimiques avec le milieu.
# Etape : niveau-2 ---> niveau-1 Au cours de cette étape réactionnelle, le cycle benzénique est sulfoné au moyen d'une réaction du type
On a prélevé des échantillons à 5 emplacements arbitraires sur le CGF additionné de bouillon de fermentation de sulfate de L-lysine et sur le CGF témoin, et on a analysé la concentration en L-lysine des échantillons respectifs. Les résultats de l'analyse sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous.
Tableau 3 Quantité de L-lysine (en masse de L-lysine par rapport à l'aliment) Addition de bouillon de Témoin fermentation de (addition de chlorhydrate sulfate de L-lysine de L-lysine cristallin) Echantillon 1 1,9 1,6 Echantillon 2 2J 2,2 Echantillon 3 1,8 2,6 Echantillon 4 1,9 2,3 Echantillon 5 2,0 1,8 Moyenne 1,9 2J Ecart type 0,11 1 0,4 Dans le cas où l'on ajouté le bouillon de fermentation de sulfate de L- lysine à la poudre de CGF, l'acide aminé était dispersé de manière plus homogène dans le CGF que dans le cas où l'on a ajouté du chlorhydrate de L-lysine cristallin à la poudre de CGF.
La figure 2 montre la distribution granulométrique du CGF enrichi en L-lysine. Sa masse volumique apparente et son angle de talus sont présentés dans le tableau 4.
Comme on peut le voir d'après la figure 2 et le tableau 4, le CGF enrichi en L-lysine selon la présente invention a des propriétés de manutention améliorées par rapport à l'échantillon témoin car sa teneur en très fines particules est réduite ainsi que son angle de talus. En outre, sa masse volumique apparente est supérieure à celle de l'échantillon témoin de sorte que les coûts de transport peuvent être réduits.
Tableau 4 Bouillon de fermentation de CGF seul sulfate de L-lysine-CGF anale de talus (0) 44 47 c masse volumique apparente 0,43 0,41 1 (g/CM3) 1 1 1 Exemple 3 Un milieu de culture (pH 7,0) contenant 40 g/l de saccharose, 5 gIl de sulfate d'ammonium, 2 g/l de KH,P04, 20 mgA de MnS04,7H,O, 20 m-A de FeS04,7H,O, 0,4 gIl de MgSO4,7H,O, 2 g/l d'extrait de levure et 0,6 g/l de NaCI a été ensemencé avec la souche de Escherichia coli BKI IM B-3996 décrite dans le brevet US n' 5 175 107 et cultivé à 37'C pendant 36 h pour préparer un bouillon de fermentation de L-thréonine.
On a utilisé la même poudre de CGM que dans J'exemple 1. Selon les tableaux standards des compositions alimentaires au Japon, le rapport massique de la L-thréonine aux protéines brutes dans la CGM est égal à 3,20 Puis, on a réalisé une expérience d'enrichissement de L-thréonine dans la CGM en ajoutant le bouillon de fermentation de L-thréonine à une poudre de CGM. Dans ce cas, l'enrichissement de la L-thréonine était ciblé dans une mesure telle que le rapport massique de la L-thréonine aux protéines brutes dans le gâteau de soja est devenu supérieur à 3,78. Dans cet exemple, le bouillon de fermentation de L-thréonine a été ajouté à la poudre de CGM en une quantité telle que le rapport massique de la L-thréonine aux protéines brutes était supérieur à 4 Un -ranulateur à a-itation à lit fluidisé ("SPIR-A-FLOW-m'ni", un produit de FREUND INDUSTRIAL Co., Ltd") a été utilisé pour l'addition du bouillon de fermentation de L-thréonine, le mélange et le séchage. Le bouillon de fermentation de L-thréonine a été ajouté de la manière indiquée ci-dessous. 500 de poudre de CGM ont été introduits dans le lit fluidisé puis le débit d'air entrant et le débit d'air sortant ont été ajustés de manière à former une CGM ayant un bon état fluidisé. Ensuite, le bouillon de fermentation de L-thréonine a été pulvérisé sur cette CGM avec une buse à deux fluides. La pulvérisation a été continuée jusqu'à ce que le rapport massique de la L-thréonine aux protéines brutes dans la CGM enrichie en thréonine devienne supérieur à 10 17c comme indiqué précédemment.
Les conditions opératoires pour le granulateur SPIR-A-FLOW-mini étaient les mêmes que dans l'exemple 1.
De la CGM additionnée de L-thréonine cristalline, dont la préparation a été réalisée par mélange de CGM et de L-thréonine à l'état séché et pulvérulent, a été utilisée comme échantillon témoin pour évaluer la dispersabilité, l'aptitude à l'écoulement et la masse volumique apparente de la CGM enrichie en L-thréonine que l'on a obtenue par ce moyen. On a prélevé des échantillons à 5 emplacements arbitraires sur la 7GM additionnée de bouillon de fermentation de L-thréonine et sur la CGM témoin, et la concentration en L-thréonine des échantillons respectifs a été analysée. Les résultats de l'analyse sont présentés dans le tableau 5 ci-dessous.
Tableau 5 Quantité de L-thréonine (en masse de L-thréonine par rapport à l'aliment) Addition de bouillon de Témoin fermentation (addition de L-thréonine de L-thréonine cristalline) Echantillon 1 1,9 2,6 Echantillon 2 2,9 2,8 Echantillon 3 2,8 2,2 Echantillon 4 2,6 3J Echantillon 5 2,7 2,8 Moyenne 2,8 2,7 Ecart type 0,13 0,33 Dans le cas où le bouillon de fermentation de L-thréonine a été ajouté à la poudre de CGM, l'acide aminé était dispersé de manière plus homogène dans c la CGM que dans le cas où de la L-thréonine cristalline a été ajoutée à la poudre de CGM. La figure 3 montre la distribution granulométrique de la CGM enrichie en L-thréonine. Sa masse volumique apparente et son angle de talus sont présentés dans le tableau 6 ci-dessous. Comme on peut le voir d'après la figure 3 et le tableau 6, la CGM enrichie en L-thréonine selon la présente invention a des propriétés de manutention améliorées par rapport à l'échantillon témoin car sa teneur en très fines particules est réduite ainsi que son angle de talus. En outre, sa masse volumique apparente est supérieure à celle de l'échantillon témoin de sorte que ses coûts de transport peuvent être réduits.
Tableau 6 Bouillon de fermentation de CGM seule L-thréonine-CGM angle de talus 39 46 masse volumique apparente 0,71 0,67 (g/CM3) 1 1 1
La présente invention concerne le domaine des arts ménagers et plus particulièrement les équipements pour la cuisson d'aliments. Elle vise des perfectionnements aux équipements de cuisson à feu ouvert et de plein air propres à la préparation d'aliments et notamment de produits camés grillés, désignés généralement sous l'appellation de barbecue.
L'utilisation d'appareil du type barbecue recueille la faveur des utilisateurs pour sa disponibilité et son caractère convivial et champêtre, outre les qualités organolèptiques des produits préparés notamment viandes grillées sur lit de braise.
Les conditions idéales d'une préparation d'aliments sur barbecue supposent que ces derniers soient exposés à la chaleur radiante des braises résultant en fin de combustion de la dégazéification du produit combustible, notamment le bois, dont seul subsiste l'ossature ligneuse et carbonée permettant alors une combustion en phase solide sans émission de flamme, le carbone se combinant à l'oxygène, réaction exothermique, entretenant une haute température au seiii de la masse, carbonée, température irradiée sous forme de radiations infrarouge. C'est pourquoi on utilise avantageusement dans les foyers du type barbecue du charbon de bois, privé par distillation lors de la phase initiale de pyrolyse du bois de ses fracfions gazeuses, de sorte que la combustion finale du charbon de bois portant sur la structure ligneuse se traduit rapidement en formation des braises recherchées pour les raisons ci-dessus. Il reste cependant que se produit le phénomène bien connu des utilisateurs et provenant de l'exsudation des graisses fondues gouttant sur le foyer de braises, ces graisses, composés organiques hautement inflammables, sont ]m]-nédiatement entraînées en combustion au contact des braises et génèrent imi-nédiaternent depuis leur point de chute des flammes remontant vers les aliments en cours de cuisson en position supérieure et ainsi léchés par les dites flairunes.
Ce phénomène bien connu et important notamment pour les viandes grasses (porcs, certaines pièces de b#uf ou certains poissons) parasite l'obtention de grillade de bonne qualité gustative. En effet les remontées de flamme perturbent l'exposition régulière et uniforme des pièces en cours de cuisson à l'action des radiations thermiques, en apportant localement des hausses de température brutales et excessives. Le grillage optimal des protéines, constituant l'essentiel des aliments cuits sur barbecue, doit s'effectuer par une déshydratation régulière analogue à une caramélisation limitée à une faible épaisseur en surface, respectant la structuration interne du produit alimentaire; alors qu'un excès local d'apport thermique entraîne la brutale carbonisation désagréable à la vue comme au goût.
Par ailleurs outre cette carbonisation superficielle, voire profonde du produit alimentaire, les graisses produites gouttant sur les braises sont portées instantanément à très haute température provoquant la déshydratation instantanée des corps gras ( triester du glycérol) avec production d'acroléine, composé particulièrement réactif en raison de ses deux doubles liaisons; ce composé réactif venant lécher au sein de la flamme les molécules protéiques du produit alimentaire engendre des réactions diverses aboutissant aux sous produits bieii connus du type goudron résultant de la combustion incomplète des composés carbonés, et notamment par exemple le benzopyrène, tous produits fortement carcinogènes. C'est ainsi qulil est bien connu que les produits grillés au feu de bois sur un barbecue sont généralement considérés par les autorités médicales comme cancérogènes.