INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans le mode particulier de réalisation d'un polypeptide de fusion dans lequel le récepteur protéique possède une structure dérivée d'un anticorps, en particulier d'un anticorps monoclonal, et donc dans le cas où le procédé de détection précédemment décrit revêt toutes les caractéristiques d'un test de détection immunoenzymatique, l'homme du métier pourra avantageusement se référer, pour sa mise en oeuvre, à l'ouvrage de D. Wild (1994), à l'ouvrage de S.S. Desphande (1996) ou encore à l'ouvrage de M. Terpstra (1992), l'enseignement contenu dans ces ouvrages, en tant qu'il se rapporte à des techniques immunoenzymatiques, étant ici incorporé par référence.
Fait aussi partie de l'invention un procédé de détection immunoenzymatique (ELISA) d'une molécule ligand susceptible d'être p.résente au sein d'un échantillon à tester.
Un tel procédé comprendra, par exemple, les étapes suivantes a) dépôt.d'une fraction aliquote d'un échantillon à tester, ou d'une dilution d'un échantillon à tester, dans les puits d'une plaque de microtitration b) lavage des puits de la microplaque afin d'éliminer la partie de l'échantillon non adsorbée sur les puits d) incubation des puits de la. microplaque avec un polypeptide de fusion selon l'invention, dirigé contre l'antigène recherché e) détection, le cas échéant en comparaison avec un témoin de contrôle positif et/ou un témoin de contrôle négatif, de la quantité de substrat hydolysé par l'acétyl- cholinestérase du polypeptide de fusion complexé à l'antigène recherché.
Fait également partie de l'invention un procédé de détection de type sandwich , dans lequel un anticorps de spécificité donnée -dit molécule de capture- est préalablement immobilisé sur un support avant incubation avec ltéchantillon à analyser, la détection des complexes récepteur protéique-molécule ligand étant alors réalisée par une seconde incubation avec un polypeptide de fusion selon l'invention. Dans ce mode de réalisation particulier de l'invention, l'anticorps immobilisé et la partie récepteur protéique constitutif du polypeptide de fusion doivent reconnaître des épitopes différents de la molécule analyte dont la présence est recherchée dans l'échantillon.
NI : non induit.
Le témoin est constitué par des feuilles prélevées sur 41B non transformé. PCT 55-2 et 55-3 représentent deux transformants ayant intégré l'insert de 13 kb comprenant deux gènes de stilbène synthase complets (vstl et vst2).
Figure 9 : Inhibition de croissance du mycélium de Botrytis cinerea, souche 916T, après 7 jours à 200C.
La culture du mycélium est réalisée sur milieu maltglucose contenant les différentes concentrations de resvératrol.
Figure 10 : Planche photo 1 Observations macroscopiques caractéristiques des différentes variétés de vigne en interaction avec Botrytis cinerea 5 jours après inoculation des feuilles de vitroplants par une suspension de conidies - Plantes non transformées.
En haut - Gauche : Cépage Folle blanche, clone 280 sensible.
- Droite : Cépage Pinot noir, clone 386 moyennement tolérant.
En bas - Gauche : Cépage Ugni-blanc, clone 479 tolérant.
- Droite : Porte-greffe 41B tolérant.
Figure 11 : Planche photo 2 Observations macroscopiques caractéristiques de clones de porte-greffe 41B, transformés par différentes constructions (145 Promoteur PMs PR10-1 - gène vstl 55 : insert de 13 kb comprenant deux gènes vstl et vst2 sous contrôle de leurs propres promoteurs), en interaction avec Botrytis cinerea, 5 jours après inoculation de feuilles de vitroplants par une suspension de conidies.
En haut - Gauche : Clone 145-2.
- Droite : Clone 145-5.
En bas - Gauche : Clone 145-6.
- Droite : Clone 55-3.
Figure 12 : Planche photo 3 Observations caractéristiques, en microscopie à fluorescence, de différentes variétés de vigne en interaction avec Botrytis cinerea, 5 jours après inoculation de feuilles de vitroplants par une suspension de conidies.
Fluorescence : bloc de filtres A (excitation de 340 à 380 nm ; filtre d'arrêt à 425 nm). Le resvératrol émet une lumière de fluorescence en blanc bleuté et bleu (selon sa concentration), la chlorophylle en rouge. La zone noire correspond à la zone d'infection par le champignon ou à des zones nécrotiques lorsqu'elles sont petites.
Certains convertisseurs de puissance sont limités dans la gamme de tension de sortie qu'ils peuvent produire. Par exemple. un convertisseur survolteur ne peut produire que des tensions supérieures à la tension d'eiitrée. Par conséquent, le mappage de l'enveloppe à alimenter doit avoir une limite inférieure égale à la tension d'entrée. Si une l mite inférieure importante est imposée aux sorties mappées, des transitions brutales sont créées à la sortie du mappage de l'enveloppe à alimenter. Ceci donne naissance à des composantes de fréquence élevées, ce qui est indésirable.
Ce problème peut être résolu en utilisant un mappage polynomial tel que celui présenté ci-dessous.
Un mappage linéaire idéal de l'enveloppe à alimenter est choisi. La limite inférieure est alors reproduite dans cette fonction de mappage. Ceci résulte en une fonction linéaire pièce par pièce. Un estimateur des plus petits carrés est utilisé pour effectuer une approximation de la fonction linéaire pièce par pièce grâce à un polynôme régulier de l'enveloppe en bande de base. On obtient alors un polynôme (I2+Q2).
Ce procédé permet l'utilisation de convertisseurs survolteurs pour des applications de suivi d'enveloppe.
Les téléphones cellulaires et d'autres systèmes de communication portables se sont rabattus sur des batteries à tension inférieure. Dans le futur, on va éviter un autre abaissement de cette tension puisqu'un système de batterie à cellule unique est envisagé. Dans ce contexte, il est très avantageux de savoir utiliser un convertisseur survolteur simple pour le suivi d'enveloppe. L'amplificateur de puissance RF peut alors être activé à une tension d'alimentation supérieure à celle de la batterie. Ceci pourrait permettre l'utilisation d'amplificateurs de puissance RF à tension supérieure meilleur marché et présentant une efficacité supérieure et ceux-ci sont déjà disponibles à l'heure actuelle.
La linéarité d'un amplificateur de puissance RF linéaire peut être caractérisée par sa variation de phase et de gain en réponse aux variations d'amplitude.
Ainsi, si un amplificateur présente une variation de phase et de gain faible en réponse à toute la gamme d'amplitude appliquée, il présente une linéarité élevée. Ceci résulte en un spectre dans lequel il y a peu d'interférences avec les voies adjacentes. Dans la plupart des systèmes radio, il existe des limites strictes concernant la quantité permise d'interférences avec la voie adjacente, ce qui entraîne des limitations strictes des variations de phase et de gain permises dans un amplificateur de puissance RF.
Pour tout amplificateur de puissance RF, la linéarité est un problème crucial. Une fois la modulation choisie, on peut améliorer la linéarité en améliorant l'amplificateur de puissance RF. D'autres procédés permettant d'améliorer la linéarité comprennent la prédistorsion et la linéarisation de rétroaction. Malheureusement, tous ces procédés augmentent la consommation de puissance et abaissent l'efficacité. Dans le contexte d'un système de suivi d'enveloppe, le choix du mappage de l'enveloppe à alimenter peut affecter la variation de phase et de gain. Par exemple, la variation de phase est considérablement accrue si la tension d'alimentation est proche de zéro. L'enveloppe du signal RF dans de nombreux systèmes de modulation atteint périodiquement zéro. Si l'alimentation est exactement proportionnelle à l'enveloppe, ceci peut entraîner de grandes variations de phase. Ceci entraînerait un manque de linéarité considérable et des interférences avec les voies adjacentes. Pour éviter ce scénario, des techniques évitant d'atteindre une valeur nulle ont été conçues et empêchent l'enveloppe RF d'atteindre une valeur nulle. Ceci résout le problème de linéarité mais augmente considérablement la complexité du système.
L'amélioration du mappage de l'enveloppe à alimenter, telle que décrite ci-dessus pour un convertisseur survolteur, peut permettre de ne jamais atteindre une valeur nulle sans modifier l'enveloppe du signal RF. Dans ce cas, on permet à l'enveloppe du signal RF d'atteindre zéro mais on empêche l'alimentation d'atteindre zéro. I1 s'agit effectivement d'une stratégie évitant d'atteindre zéro pour des systèmes de suivi d'enveloppe. I1 y a une différence négligeable en ce qui concerne la consommation d'énergie pour l'amplificateur de puissance RF associé à la méthode consistant à éviter d'atteindre zéro. Ainsi, l'amélioration de la linéarité obtenue ne se fait pas au détriment de la consommation d'énergie.
Il est également possible de limiter les variations de gain en utilisant d'autres mappages appropriés de l'enveloppe à alimenter. Le gain de l'amplificateur de puissance RF est fonction de l'enveloppe du signal RF d'entrée et de la tension d'alimentation. Considérons un système de coordonnées cartésiennes avec comme axes l'enveloppe de signal et la tension d'alimentation. Dans ce plan, un lieu des points est représenté pour un gain constant. Ce tracé peut être interprété comme étant une fonction linéaire pièce par pièce pour le mappage de l'enveloppe à alimenter. Ici encore, cette fonction linéaire pièce par pièce peut subir une approximation en tant que polynôme de l'enveloppe élevé au carré.
Dans un mode de réalisation, le dispositif de la présente invention peut être utilisé dans un radiotéléphone multi-mode ayant un système permettant de fournir un amplificateur de puissance linéaire efficace qui génère au moins un signal RF à enveloppe variable. Le système comporte A) une unité de suivi d'enveloppe efficace 202, couplée de façon à recevoir un signal en bande de base, pour sortir une tension d'alimentation selon : une enveloppe variable du signal en bande de base ou une enveloppe constante du signal en bande de base ; B) un générateur de signaux RF 204, couplé de façon à recevoir le signal en bande de base et un signal de référence RF, permettant de fournir un signal d'entrée RF ayant des informations de phase et d'amplitude à un amplificateur de puissance RF linéaire ; et C) l'amplificateur de puissance RF linéaire 206, couplé à l'unité de suivi d'enveloppe efficace 202 et au générateur de signaux RF 204, pour sortir l'un des éléments suivants : un signal RF à enveloppe variable à puissance amplifiée de facon efficace ayant sensiblement les mêmes informations d'amplitude et de phase que le signal d'entrée RF en fonction de l'enveloppe variable de signal en bande de base ; ou un signal RF d'enveloppe constante à puissance amplifiée de façon efficace ayant les mêmes informations de phase et d'amplitude que le signal d'entrée RF en fonction de l'enveloppe constante du signal en bande de base. Clairement, ce mode de réalisation de l'invention assure une souplesse pour utiliser le radiotéléphone multi-mode dans l'un quelconque d'une pluralité de modes, en fonction du choix de l'utilisateur. Le choix peut être fondé sur la disponibilité d'un mode particulier ou, selon une autre solution, sur une différence de prix des sélections de modes.
Sur la figure 8, numéro 800, le mappage de l'enveloppe à alimenter 802 incorporant une limite de tension pour un convertisseur survolteur et un gain constant pour l'amplificateur de puissance RF MHW920 est représenté graphiquement. Le mappage est obtenu comme un ajustement de courbe de points de données de gain égaux 804. I1 s'agit d'un amplificateur de puissance RF conçu pour fonctionner à une alimentation nominale de 6 V. Un convertisseur survolteur utilisant le mappage d'enveloppe à alimenter représenté peut être utilisé pour faire fonctionner cet amplificateur de puissance à partir d'une batterie de 3,6 V. Ceci peut entraîner des économies d'énergie significatives tout en permettant l'utilisation d'une batterie à tension inférieure. Ici, un polynôme d'ordre inférieur a été choisi pour le mappage, ce qui limite en outre l'exigence de la largeur de bande d'alimentation.
Le suivi d'enveloppe est censé affecter la linéarité de l'amplificateur de puissance RF. Les données contenues dans les tableaux suivants ont été prises pour assurer une détérioration minime de la qualité du signal qui doit se trouver dans un éventail de données acceptable. Le tableau 1, représenté cidessous, montre le niveau de puissance de voies adjacentes et d'autres voies avec et sans la modulation d'alimentation. I1 faut remarquer que ces données ont été prises avec une alimentation à découpage fournissant la modulation d'alimentation. L'enveloppe a été générée en détectant le signal RF et ceci a introduit un retard de 2 à 4 us entre l'enveloppe et l'alimentation. Ce retard dans la restauration et l'élimination d'enveloppe (EER) serait inacceptable.
Ceci illustre la robustesse de l'approche de suivi d'enveloppe.
Suivi d'enveloppe Alimentation fixe Etat Supérieur Inférieur Supérieure Inférieure Puissance de voie adjacente -31.6 dB -32.5 dB -34.7dB -33.5 dB Modulation Puissance de l'autre voie -47.5 dB -49.1 dB -50.5 dB -50.9 dB uniquement Puissance de voie adjacente .31.6du -32.5 dB -34,7 dB -33.5 dB Modulation Puissance de l'autre voie -47.5 dB -48.4 dB -50.0 dB -50.0 dB et transiloirc Puissance de voie adjacente -27.4 dB -27.4dB -31,6 dB -31.3 dB Déséquilibre de charge Puissance de l'autre voie 48.6 dB -43.8 dB 47.7 dB 48.2 dB Pire des cas TABLEAU 1 DONNEES DE PUISSANCE COUPLEES A LA VOIE ADJACENTE Un autre problème est le fait que le suivi d'enveloppe peut affecter le signal démodulé. Les données expérimentales contenues dans le tableau 2 (représenté ci-dessous) indiquent qu'il y a une faible détérioration du signal. I1 était possible d'utiliser une enveloppe très agressive qui maximisait des économies d'énergie et la détérioration du signal dans la bande passante était toujours insignifiante.
Toutefois, ceci a détérioré les interférences avec les voies adjacentes, ce qui peut ne pas être acceptable dans certains systèmes radio.
Le dispositif 222 est en général mis en oeuvre dans un téléphone cellulaire, un téléphone par satellite, un radiotéléphone mobile, un radiotéléphone, une station de base ou similaire.
La figure 3 (numéro 300), est un organigramme d'un mode de réalisation des étapes d'un procédé permettant de fournir un amplificateur de puissance linéaire efficace qui génère un signal RF à enveloppe variable selon la présente invention. Les étapes comportent A) l'utilisation 302 d'une unité de suivi d'enveloppe efficace pour sortir une tension d'alimentation selon une enveloppe variable d'un signal en bande de base d'entrée ; B) la fourniture 304, par un générateur de signaux RF, en fonction du signal en bande de base d'entrée, d'un signal d'entrée RF ayant des informations de phase et d'amplitude à un amplificateur de puissance RF linéaire ; et C) l'utilisation 306 d'un amplificateur de puissance RF linéaire qui est couplé à l'unité de suivi d'enveloppe efficace et au générateur de signaux RF pour sortir un signal RF à enveloppe variable à puissance amplifiée de façon efficace avec sensiblement les mêmes informations de phase et d'amplitude que celles du signal d'entrée RF.
Comme le montre la figure 4, numéro 400, dans un autre mode de réalisation du procédé de la présente invention, le procédé comporte les étapes de A) détermination 402 d'un signal asservi et de précompensation selon un système prédéterminé en utilisant un signal de référence et au moins un signal de rétroaction ; B) modification 404 d'un rapport cyclique pour fournir un signal de commutation ; et C) fourniture 406 du signal de sortie dynamique variable.
En général, le système prédéterminé peut comporter l'utilisation d'une estimation d'un courant de charge en fonction du signal de référence pour déterminer le signal asservi de précompensation ou l'utilisation du signal de référence et des dérivées du signal de référence pour déterminer le signal asservi de précompensation. Le signal de référence est en général disponible sous forme numérique et les dérivées du signal de référence sont calculées en utilisant un matériel numérique.
Le signal de rétroaction peut être fourni à l'unité asservie et de précompensation par le convertisseur de puissance ou, selon une autre solution, un détecteur d'enveloppe couplé à la sortie de l'amplificateur de puissance RF linéaire peut fournir un signal de rétroaction à l'unité asservie et de précompensation. Dans un autre mode de réalisation, les deux signaux de rétroaction peuvent être utilises.
Tel que cela a été énoncé pour le dispositif, dans le procédé, le convertisseur de puissance de poursuite d'enveloppe peut en général comprendre un filtre d'un ordre supérieur à 2.
Le suivi d'enveloppe est caractérisé par une alimentation variable fournie à l'amplificateur de puissance RF, et par un signal d'entrée RF qui n'est pas modifié et qui présente des informations d'amplitude et de phase. Puisque l'alimentation ne détermine pas directement l'amplitude de sortie, la tension d'alimentation peut être choisie de façon à optimiser la performance.
La première étape de la création de la tension de commande par le convertisseur de puissance consiste à créer le signal d'enveloppe à partir des signaux en bande de base (I, Q). L'enveloppe idéale est simplement I2+Q2. Il s'agit d'un signal ayant une largeur de bande de petit signal extrêmement grande. De plus, le calcul de la fonction de racine carrée demande une grande charge de calcul. Ainsi, on a besoin d'autres procédés permettant de créer le signal d'enveloppe.
Sur la figure 5, numéro 500, une racine carrée approximative 504 utilisée pour le mappage d'alimentation d'enveloppe est comparée à la fonction de racine carrée idéale 502. Le paragraphe suivant montre l'analyse d'une fonction de mappage polynomiale qui mappe la fonction de racine carrée idéale avec la racine carrée approximative.
L'enveloppe est définie en fonction des signaux en bande de base (I,Q).
Enveloppe = AI(I2+Q2) = x (1) On définit l'alimentation de RF PA comme étant égale à y. Le calcul d'une racine carrée est une opération compliquée. Ainsi, l'alimentation peut être calculée en fonction de l'enveloppe élevée au carré.
Alimentation = y =f(x2) (2) Considérons une fonction de mappage polynomiale du quatrième ordre de l'enveloppe élevée au carré. Puisque les signaux en bande de base (I,Q) sont limités en bande à Fois, la largeur de bande d'alimentation sera dans ce cas limitée à 8 (voie) Y = a0+Nx2+a4x'+a6x6+a8xs (3) Le polynôme s'approche de la racine carrée.
Toutefois, la petite différence entre les deux signaux entraîne une grande différence dans la largeur de bande des signaux. Cette différence est montrée clairement dans les représentations graphiques de enveloppe idéale et des spectres mappés polynomiaux 602 sur la figure 6, numéro o00, et sur la figure 7, numéro 700, respectivement. Le signal utilisé ici est un signal QPSK de 25 ksps utilisé dans une applicatton téléphonique d'abonné par satellite.
Ici, la puissance d'erreur a été reduite au minimum. D'autres fonctions peuvent être réduites 3- minimum en utilisant le même algorithme. Evide1Tjr.ent, ceci donnerai différents coefficients polynomiau > :.
Toutefois, l'algorithme présente ici peut être utilisé sans qu'aucun changement ne soit effectué. Il est intéressant de remarcr'er que le terme linéaire proportionnel à l'enveloppe a été complètement éliminé.
Ceci constitue une innovation significative par rapport à la technique antérieure qui utilise le terme linéaire uniquement pour l'alimentation et la modulation par la grille.
EXEMPLE 2 : ETUDE DE LA DISTRIBUTION GENOMIOUE DE ZAM 1) Nombre de coties de ZAM et variabilité selon les souches La distribution génomique de Z4M a été étudiée par des expériences de Southern blot sur diverses souches de D. melanogaster. Des résultats typiques sont obtenus en sondant d'égales quantités d'ADN traité par les enzymes PstI BglII avec la sonde BH (figure 3B). De nombreuses bandes hybridées ont été visualisées. Ce résultat démontre qu'il existe plusieurs copies de 141V dans le génome de Drosophila melanogaster. Cependant, le nombre de copies de 141V varie selon les souches. La majorité d'entre elles (on a testé plus de 15 souches indépendantes y compris toutes les souches utilisées pour ou isolées suite à la mutagenèse PM) comporte un faible nombre de copies (souches LCN, low copy number). Deux exceptions furent notées : la ligné portant l'allèle WlR6Rev et la lignée Charolles possédant de nombreuses copies de 141V dans leur génome (souches HCN, high copy number). La souche Su78, à partir de laquelle fut obtenu un mâle portant l'allèle WIR6ReV, a un nombre intermédiaire de copies de ZAM (inférieur à WlR6Rv mais supérieur à WiR6). Une faible empreinte de bandes communes est observée pour toutes les souches examinées, alors que des bandes additionnelles qui diffèrent d'une souche à l'autre sont présentes. L'empreinte des bandes, observées pour WIR6RV et son parent WiR6, indique clairement que ZAM a été mobilisé et que son nombre de copies a augmenté récemment.
2) Etude de la distribution génomique de ZAM nar hybridation in situ.
La localisation génomique des copies de ZAM a été étudiée dans différentes souches par hybridation in situ sur les chromosomes polyténes des larves de troisième stade. Les images présentées (Figure 3) montrent des résultats typiques lorsque les chromosomes ont été hybridés avec la sonde HpaI-PstI contenant l'élément ZAM complet encadré par les séquences en amont de white.
La souche Charolles à haut nombre de copies (A) comporte 15 signaux d'hybridation dispersés sur les bras des chromosomes et entourant les centres des chromosomes. Un faible signal d'hybridation peut être vu dans la région hétérochromatique du génome. Tout comme Charolles, la souche WlR6ReV (B) possède environ 15 signaux d'hybridation, mais ils sont localisés principalement sur le chromosome X. En revanche, la souche Canton S à faible nombre de copies (C) exhibe seulement quelques faibles signaux dans la région hétérochromatique et aucun signal sur les bras des chromosomes. La souche WiR6 (D) a la même empreinte de signal d'hybridation que Canton S sauf pour deux signaux localisés respectivement sur les chromosomes X et trois.
EXEMPLE 3 : MISE EN EVIDENCE DE LA SPECTFICITE D'INSERTION Mise en évidence du site spécifique d'insertion de ZAM Le premier site d'insertion (séquence dupliquée) de ZAM a d'abord été mis en évidence lors du clonage de l'élément par la technique de PCR telle que décrite dans l'exemple I. Le clonage d'un élément 141V indépendant (souche différente) a montré que la même séquence est dupliquée aux bornes de l'élément.
L'analyse de ces séquences dupliquées a montré l'existence d'un site de coupure par l'endonucléase de restriction HhaI. L'élément MM présente trois sites internes HhaI en plus des sites localisés dans ces séquences flanquantes.
Ainsi, dans le but d'identifier s'il existe une spécificité d'insertion de l'élément ZAM, 1'ADN génomique de différentes souches a été traité par l'enzyme de restriction HhaI. Les fragments obtenus ont été séparés sur gel d'agarose, transférés sur membrane de nylon et hybridés avec une sonde de ZAM marquée au cx[P 32]dCTP.
Quatre fragments marqués de taille (0,5 ; 3,4 ; 1,4 et 3,2 kilobases) ont été observés. Ces quatre éléments correspondent à des fragments internes de ZAM.
Ces résultats démontrent qu'un site HhaI se trouve aux bornes de chaque élément ZAM, quel que soit le lieu d'insertion ou quelle que soit la souche testée.
Une conclusion peut donc être tirée de cette expérience, à savoir : I'intégrase de ZAM génère des insertions préférentielles en des sites coupés par l'enzyme Hhal.
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- Bowerman, B., Brown,P.O., Bishop,J.M. and Varmus,H.E. (1989) A nucleoprotein complex mediates the integration of retroviral DNA. Genes Dev., 3, 469-478.