INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Un produit d'amplification d'environ 760 pb a été obtenu uniquement dans l'essai avec RT et a été cloné de la façon suivante l'ADN amplifié a été inséré dans un plasmide à l'aide du kit TA Cloninge. Les différentes étapes ont été réalisées conformément aux instructions du kit TA Cloninge (Invitrogen). A la fin de la procédure, les colonies blanches de bactéries recombinantes (white) ont été repiquées pour être cultivées et permettre l'extraction des plasmides incorporés selon la procédure dite de "miniprep". La préparation de plasmide de chaque colonie recombinante a été coupée par une enzyme de restriction appropriée et analysée sur gel d'agarose. Les plasmides possédant un insert détecté sous lumière UV après marquage du gel au bromure d'éthidium, ont été sélectionnés pour le séquençage de l'insert, après hybridation avec une amorce complémentaire du promoteur T7 présent sur le plasmide de clonage du TA cloning kit@. La réaction préalable au séquençage a ensuite été effectuée selon la méthode préconisée pour l'utilisation du kit de séquençage "PRISMTM Ready Reaction AmpliTaqs FS, DyeDeoxyTM Terminator" (Applied Biosystems, ref. 402119) et le séquençage automatique a été réalisé sur les appareils 373 A et 377 Applied Biosystems, selon les instructions du fabricant.
Le clone LB16 obtenu, contient les séquences correspondant à l'intégrase. La séquence nucléotidique de ce clone est identifiée par SEQ ID NO: 124 sur la figure 11, trois trames de lecture sont déterminées.
EXEMPLE 5: OBTENTION D'UN CLONE 2, CL2, CONTENANT EN 3' UNE PARTIE HOMOLOGUE AU GENE POL, CORRESPONDANT AU GENE PROTEASE, ET AU GENE GAG (GM3) CORRESPONDANT A LA NUCLEOCAPSIDE, ET UNE NOUvELLE REGION 5'CODANTE, CORRESPONDANT AU GENE GAG PLUS SPECIFIQUEMENT LA MATRICE ET LA CAPSIDE de MSRV-1.
Une amplification par PCR a été effectuée sur de 1'ARN total extrait à partir de 100 ssl de plasma d'un patient atteint de SEP. Un témoin eau, traité sous les mêmes conditions, a été utilisé comme contrôle négatif. La synthèse de cDNA a été réalisée avec 300 pmole d'une amorce aléatoire (GIBCO-BRL, France) et la transcriptase inverse "Expand RT" (BOEHRINGER MANNHEIM, France) selon les conditions préconisées par la société. Une amplification par PCR (" polymerase chain reaction ") a été effectuée avec l'enzyme Taq polymerase (Perkin Elmer, France) en utilisant 10 ssl de cDNA sous les conditions suivantes: 940C 2 min, 550C 1 min, 720C 2 min puis 94"C 1 min, 550C 1 min, 720C 2 min pendant 30 cycles et 720C pendant 7 min et avec un volume réactionnel final de 50 1.
Amorces utilisées pour l'amplification par PCR: - amorce 5', identifiée par SEQ ID NO: 126 5' CGG ACA TCC AAA GTG ATG GGA AAC G 3' - amorce 3', identifiée par SEQ ID NO: 127 5' GGA CAG GAA AGT AAG ACT GAG AAG GC 3' Une deuxième amplification par PCR dite "seminichée" a été réalisée avec une amorce 5' située à l'intérieur de la région déjà amplifiée. Cette deuxième PCR a été effectuée sous les mêmes conditions expérimentales que celles utilisées lors de la première PCR, en utilisant 10 pl du produit d'amplification issu de la première PCR.
Amorces utilisées pour l'amplification par PCR seminichée: - amorce 5', identifiée par SEQ ID NO: 128 5' CCT AGA ACG TAT TCT GGA GAA TTG GG 3' - amorce 3', identifiée par SEQ ID NO: 129 5' TGG CTC TCA ATG GTC AAA CAT ACC CG 3' Les amorces SEQ ID NO: et SEQ ID NO: sont spécifiques de la région pol, clone G+E+A, plus spécifiquement la région E: position nucleotidique nO 423 à nO 448. Les amorces utilisées dans la région 5' ont été définies sur des séquences de clones obtenus lors d'essais préalables.
Un produit d'amplification de 1511 pb a été obtenu à partir de l'ARN extrait du plasma de patient SEP.
Le fragment correspondant n'a pas été observé pour le témoin eau. Ce produit d'amplification a été cloné de la façon suivante.
L'ADN amplifié a été inséré dans un plasmide à l'aide du kit TA CloningTM. Les 2 ssl de solution d'ADN ont été mélangés avec 5 ssl d'eau distillée stérile, 1 Ul d'un tampon de ligation 10 fois concentré "10X LIGATION BUFFER", 2 tel de ((pCRTM VECTOR" (25 ng/ml) et 1 41 de "T4 DNA LIGASE". Ce mélange a été incubé une nuit à 140C. Les étapes suivantes ont été réalisées conformément au instructions du kit TA Cloninge (Invitrogen). Le mélange a été étalé après transformation de la ligation dans des bactéries E. coli INVaF'. A la fin de la procédure, les colonies blanches de bactéries recombinantes ont été repiquées pour être cultivées et permettre l'extraction des plasmides incorporés selon la procédure dite de "minipréparation d'ADN" (17). La préparation de plasmide de chaque colonie recombinante a été coupée par l'enzyme de restriction Eco RI et analysée sur gel d'agarose. Les plasmides possédant un insert détecté sous lumière W après marquage du gel au bromure d'éthidium, ont été sélectionnés pour le séquençage de l'insert, après hybridation avec une amorce complémentaire du promoteur T7 présent sur le plasmide de clonage du TA cloning kits. La réaction préalable au séquençage a ensuite été effectuée selon la méthode préconisée pour l'utilisation du kit de séquençage "PRISE Ready Reaction Amplitaqs FS, TM DyeDeoxy M Terminator" (Applied Biosystems, ref. 402119) et le séquençage automatique a été réalisé sur les appareils 373 A et 377 Applied Biosystems, selon les instructions du fabricant.
Le clone obtenu, dénommé CL2, contient une région C-terminale similaire à la région 5' terminale des clones G+E+A de MSRV-1, qui permet de définir la région Cterminale du gène gag et une nouvelle région correspondante à la région N-terminale du gène gag MSRV-1.
CL2 permet de définir une région de 1511 pb présentant une phase ouverte de lecture dans la région Nterminale de 1077 pb codante pour 359 acides aminés et une phase non-ouverte de lecture, de 454 pb, correspondant à la région C-terminale du gène gag MSRV-1.
La séquence nucléotidique de CL2 est identifiée par SEQ ID NO: 130. Elle est représentée à la figure XX3,1, avec les trames de lecture potentielles en aminoacide.
Le fragment de 1077 pb de CL2 codant pour 359 acides aminés a été amplifié par PCR avec l'enzyme Pwo (5U/pl)(Boehringer Mannheim, France) en utilisant 1 41 de la minipréparation de l'ADN du clone 2 sous les conditions suivantes : 950C 1 min, 6O0C 1 min, 720C 2 min pendant 25 cycles et avec un volume réactionnel final de 50 41 à l'aide des amorces: - amorce 5'(Bam HI), identifié par SEQ ID NO: 132 5' TGC TGG AAT TCG GGA TCC TAG AAC GTA TTC 3' (30 mer), et - amorce 3' (Hind III), identifié par SEQ ID NO: 133 5 AGT TCT GCT CCG AAC CTT AGG CAG ACT TTT 3' (30 mer) correspondant, respectivement, à la séquence nucléotidique du clone 2 en position -9 à 21 et 1066 à 1095.
Une composition telle que la composition C permet d'atteindre rapidement une première coloration puis, après la révélation de la DHA, d'obtenir une coloration durable très proche de celle conférée par un bronzage naturel.
FORME PHARMLCIUTIQUZ MULTIPARTICULAIRE, SES PARTICULE8 CONSTITUTIVE8, PROCÉDÉ ET INSTALLATION POUR LIEUR FABRICATION L'invention a pour objet une forme pharmaceutique multiparticulaire, notamment un comprimé multiparticulaire du genre de ceux qui sont à base d'une pluralité de particules individuelles obtenues par extrusion à chaud et contenant individuellement la matière active.
Elle vise également, en tant que produit industriel nouveau, les particules constitutives de la susdite forme pharmaceutique multiparticulaire.
Elle vise enfin un procédé et une installation pour la préparation desdites particules constitutives.
On connaît déjà des formes pharmaceutiques solides préparées à partir d'un mélange fondu sans solvant de substances actives et de matières thermoplastiques, notamment par le brevet US-A-3 432 592 selon lequel la mise en forme a lieu par moulage par injection et par le brevet EP-A-O 190 255 selon lequel la masse fondue est traitée soit par moulage par injection, soit par extrusion.
On connaît également, par les documents WO-A-9614058 et WO-A-9614059, des comprimés du genre en question qui sont préparés par compression d'un ensemble de particules individuelles constituées d'une matrice en matériau thermoplastique au sein duquel est dispersée une substance active, ces particules étant obtenues par découpage du fil sortant de la filière d'une extrudeuse à l'intérieur de laquelle le mélange du matériau thermoplastique et de la substance active a auparavant été soumis aux conditions d'une extrusion à chaud; il est à noter qu'avant l'étape de compression les particules obtenues à la sortie de la filière peuvent être soumises à une sphéronisation afin de leur conférer des contours arrondis.
L'inconvénient principal de ces comprimés réside notamment dans leur faible vitesse de délitement qui rend très difficile la dispersion des particules individuelles dans le tractus digestif.
On connaît enfin, par le document EP-A-0 548 356, des comprimés du genre en question préparés par compression d'un mélange comprenant, d'une part, des particules individuelles obtenues par extrusion-sphéronisation d'une substance active et pourvues d'un enrobage de masquage du goût et, d'autre part, un excipient à base d'au moins un agent désintégrant et/ou d'au moins un agent gonflant.
Ces comprimés se distinguent par une très grande vitesse de délitement conduisant, au niveau de la cavité buccale, à la dispersion des particules individuelles, ce qui est rendu acceptable grâce à la présence de leur enrobage.
L'invention a pour but, surtout, de fournir une forme pharmaceutique multiparticulaire, notamment un comprimé multiparticulaire du genre en question, qui soit douée d'une vitesse de délitement telle que son délitement et, par conséquent, la dispersion des particules constitutives individuelles, se produisent en moins de 15 minutes dans un désagrégomètre standard, en d'autres termes dans la partie haute du tube digestif.
Et il est du mérite de la Société Demanderesse d'avoir trouvé, à l'issue de recherches approfondies, que ce but était atteint dès lors que les particules individuelles constitutives de ladite forme pharmaceutique multiparticulaire comportent un revêtement à base d'au moins un agent liant, d'au moins un agent désintégrant et éventuellement d'au moins un principe actif.
I1 s'ensuit que la forme pharmaceutique multiparticulaire conforme à l'invention est caractérisée par le fait qu'elle est constituée par une pluralité de particules, de préférence de sphéroïdes comportant un enrobage à base d'au moins un agent désintégrant et éventuellement d'au moins un agent liant et éventuellement d'au moins une substance active et solidarisés les uns avec les autres par compression directe lesdits particules ou sphéroïdes dans lesquels une substance active est répartie au sein d'un matériau thermoplastique ayant été obtenus par extrusion à chaud du mélange de la substance active avec le matériau thermoplastique et découpage du fil ou profilé sortant de la filière d'extrusion.
Les particules, de préférence les sphéroïdes conformes à l'invention, constitutives de la forme pharmaceutique multiparticulaire conforme à l'invention, sont caractérisées par le fait qu'elles sont le résultat du découpage du fil ou profilé obtenu par extrusion à chaud du mélange d'une substance active et d'un matériau thermoplastique et de l'enrobage des particules résultant du découpage par un revêtement comportant au moins un agent liant et au moins un agent désintégrant.
C'est en raison de l'extraction progressive de la substance active hors de la matrice constituée par le matériau thermoplastique --extraction qui fait passer la substance active dans le milieu environnant-- que les formes pharmaceutiques multiparticulaires, notamment les comprimés multiparticulaires conformes à l'invention constituent une forme pharmaceutique à libération modifiée et contrôlée.
La courbe traduisant la libération in vitro exprimée en % de la substance active en fonction du temps est une caractéristique essentielle prédéterminée de la forme pharmaceutique et doit se reproduire d'un comprimé à l'autre.
Elle est le résultat du choix judicieux des caractéristiques constitutives de la matrice.
- L'accent est porté sur les effets d'amortissement en roulis et vertical.
- Les sections différentielles des vérins couplent la raideur verticale et la raideur angulaire en roulis, en effet, ces deux raideurs sont déterminés par la pression de précharge de l'accumulateur. C'est un inconvénient du système.
La figure unique représente un schéma de principe du dispositif à amortissement du roulis conforme à l'invention.
Le dispositif à amortissement du roulis comprend un premier Al et un second Al' amortisseur.
Chaque amortisseur comporte un corps 11, 11' dans lequel coulisse un piston 12, 12' plein muni d'une tige 13, 13' l'ensemble constituant un vérin 114, 114'.
La tige 13, 13' traverse le piston 12, 12' de part en part.
Le piston 12, 12' délimite une première chambre 1, 1' dite chambre de compression et une seconde chambre 2, 2' dite chambre de détente.
Le corps 12, 12' est rempli d'un fluide 16, 16', par exemple d'huile hydraulique.
L'amortisseur comprend également un premier clapet anti-retour CL1, CL1' dit clapet de compression et un second clapet anti-retour CL2, CL2' dit clapet de détente.
Une première valve hydraulique V2, V2' dite valve de compression et une seconde valve hydraulique V1, V1' dite valve de détente peuvent être pilotées électriquement.
L'amortisseur semi-actif comprend également un accumulateur 3, 3' oléopneumatique préchargé constitué d'une chambre.
Un tel accumulateur 3, 3' oléopneumatique forme un volume fixe comprenant un gaz inerte sous pression et de l'huile hydraulique à laquelle le gaz communique sa pression.
Les deux fluides sont généralement séparés physiquement par une membrane ou une vessies.
La fonction de cet accumulateur consiste, d'une part, à absorber le volume d'huile correspondant au volume de la tige lorsque l'amortisseur est complètement comprimé et, d'autre part, à assurer une pression minimale dans le circuit hydraulique.
Le clapet de compression CL1, CL1' et la valve de détente V1, V1' sont montés en parallèle.
Le clapet de compression CL1 et la valve de détente V1 sont disposés entre la chambre de détente 1 et un point intermédiaire A.
Le clapet de compression CL1' et la valve de détente V1' sont disposés entre la chambre de détente 1' et un point intermédiaire A'.
Le clapet de détente CL2, CL2' et la valve de compression V2, V2 sont montés en parallèle.
Le clapet de détente CL2 et la valve de compression V2 sont disposés entre la chambre de compression 2 et le point intermédiaire A'.
Le clapet de détente CL2' et la valve de compression V2 sont disposés entre la chambre de compression 2' et le point intermédiaire A.
Un clapet CL3, CL3' et une valve V3, V3' sont montés en parallèle.
Le clapet CL3 et la valve V3 sont disposés entre le point intermédiaire A et la chambre de l'accumulateur 3.
Le clapet CL3' et la valve V3' sont disposés entre le point intermédiaire A' et la chambre de l'accumulateur 3'.
L'orientation des clapets est telle que représentée à la figure unique.
Les vérins 114, 114' sont disposés verticalement dans un plan transversal, de plus, dans le cas d'une application ferroviaire, entre un bogie 14 de véhicule ferroviaire et la caisse 15 du véhicule.
L'une des extrémités des vérins 114, 114' est solidaire du bogie 14 de véhicule ferroviaire et l'autre extrémité des vérins 114, 114' est solidaire de la caisse 15 du véhicule.
La description ci-après porte sur une analyse du dispositif à amortissement du roulis conforme à l'invention laquelle reprend l'analyse du document FR 2 252 228 dans le cas particulier où St = 0, S1 = S2 = S.
On introduit les pressions aux points intermédiaires A et A'.
Après calcul, il vient F = [(P2-PB)-(P1-PA)]S + [(PB-P3')-(PA-P3)]S + (P3'-P3)S F' = [(P2'-PA)-(P1'-PB)]S + [(PA-P3) + (PB-P3')]S + (P3 P3')S On note Famz = [(P2-PB)-(P1-PA)]S F'amz = [(P2'-PA)-(P1'-PB)]S FamO = [(PA-P3)-(PB-P3')]S Alors R = F + F' = Famz + F'amz Mo = (F'-F)a = (F'amz-F'amz)a + 2FamOa + 2(P3-P3')Sa On obtient - Un couple de rappel en roulis Mpneum = 2 (P3-P3')Sa Mpneum z K0(P0,V0,S,a)0c La raideur angulaire KO est fonction de la précharge et du volume des accumulateurs (Po,V0), de la somme des sections de poussée (S) et du bras de levier (a). En cas de déplacement simultané des vérins, le volume de gaz des accumulateurs reste identique, les pressions des accumulateurs restent identiques, il n'y a pas de couple de rappel. Par contre lorsque les pistons se déplace en sens inverse (roulis), i y a réduction du volume de gaz dans un accumulateur et augmentation dans l'autre, on crée donc une différence de pression entre les accumulateurs ce qui se traduit par un couple de rappel.
- Un effort d'amortissement vertical Ram = Famz + F'amz Famz et F'amz induisent également un couple d'amortissement Mam = (F'amz-Famz)a Comme le montre les expressions de Famz et F'amz en fonction des pertes de charges. Ces efforts sont déterminés par les ensembles clapet/valve (CLl/Vl, CL2/V2, CLl'/Vl', CL2'/V2') - Un couple d'amortissement en roulis MamO = 2 Zamia = 2 [(PA-P3) - (PB-P3')]Sa Ce couple est sans effet sur l'amortissement vertical.
Il est déterminé par les pertes de charge (PA-P3) et (PB P3') donc par les ensembles clapet/valve (CL3/V3, CL3'/V3').
PA-P3 est lié au débit de fluide QA3 de A vers la chambre de l'accumulateur 3. En traduisant la conservation de débit, il vient QA3 = SZ-SZ l TS (zc-aOc)-S(zc+aOc) = -2S a Oc.
Est connu l'usage de la montmorillonite ou de la clinoptilolite, minéraux naturels, en qualité d'entérosorbant pour la sortie des composants toxiques et pathogènes de l'organisme des animaux à sang chaud (brevet FR n" 2 016 574, A 61 K33/00). A cette fin, les minéraux naturels sont soumis au préalable à une purification. La matière minérale obtenue est introduite dans l'intestin. La dose optimale journalière de minéral naturel introduite est de 0,1 à 1,0 g/kg de masse corporelle.
L'effet de tous les remèdes sus-indiqués est basé sur les propriétés d'échange d'ions et de sorption des tufs zéolithîfères et des montmorillonites.
Cependant, les remèdes connus ne permettent pas de profiter totalement de toutes les possibilités sus-indiquées des minéraux naturels comprenant une large gamme de macro- et microéléments.
L'objectif de l'invention est la création de nouveaux biostimulants sur la base d'usage commun des minéraux naturels possédant des propriétés d'échange d'ions et de sorption, et d'une matière végétale biologiquement active.
Le biostimulant selon la présente invention est caractérisé en ce qu'il comprend à titre de minéraux naturels une zéolithe à clinoptilolite et hélandite contenant 92 % en poids de clinoptilolite au moins et/ou une argile montmorillonitique contenant 92 % en poids de montmorillonite au moins, et une matière végétale biologiquement active, par exemple, des céréales telles qu'avoine, leurs déchets tels que son de froment et de seigle; des algues marines: Laminaria japonica Aresh: des plantes herbacées supérieures: racines de Rubia tinctorum; des champignons supérieurs tels que Iononotus obliquus.
L'essence de la présente invention est de pouvoir faire l'emploi le plus total possible des propriétés des minéraux naturels en tant que fournisseurs des macro- et des microéléments à l'organisme humain, des sorbants et des échangeurs d'ions aptes à restituer la composition normale minérale de l'organisme et de ce fait à favoriser la normalisation de tous les processus d'échange. Ceci est atteint grâce à l'usage de matière minérale de pureté maximum comprenant au moins 92 % en poids de clinoptilolite et/ou de montmorillonite. I1 a été découvert contre toute attente que la combinaison de zéolithe et/ou de montmorillonite de cette qualité et de matière végétale biologiquement active assure efficacement le maintien du bilan de sel minéral dans l'organisme. En se retrouvant dans le canal digestif, les minéraux naturels se mettent en réactions d'échange avec les produits de digestion. Il se produit alors. d'une part, la fragmentation des minéraux, l'augmentation de leur surface active et. d'autre part, l'échange d'ions du système "minéral-organisme". Les micro- et macroéléments présents dans les minéraux se diffusent dans l'organisme; les liaisons libres du minéral étant substituées par celles des éléments qui sont en excès dans l'organisme.
L'usage de difïérentes compositions à base des minéraux naturels sus-indiqués et de matière végétale active renforce les propriétés spécifiques de cette matière végétale. Les substances utiles dont la matière végétale dispose deviennent les plus efficaces dans l'organisme humain en cas de proportion appropriée des micro- et macroéléments indispensables aussi bien pour le processus d'entrée de ces substances de l'intestin à l'organisme, ce qui est impossible lorsque le bilan des micro- et macroéléments n'y est pas, pour assurer l'entraînement des substances présentes dans la matière végétale dans les processus échangeurs ayant lieu dans l'organisme.
L'efficacité du biostimulant selon l'invention contenant de la clinoptilolite et/ou de la montmorillonite purifiée à 92 % en poids au moins, en combinaison avec ulule matière végétale biologiquement active, dépasse en moyenne de 60 à 70 % l'effet des préparations comprenant séparément une matière minérale ou séparément une matière végétale biologiquement active. Cette haute efficacité du remède proposé est due au mécanisme synergétique dans le cas de combinaison d'une matière minérlle et d'une matière végétale qui renforcent mutuellement l'activité l'une de l'autre. En outre, I'action indirecte de la matière minérale sur le mécanisme de régulation d'homéostase est renforcée en ce que l'organisme acquiert la possibilité d'utiliser efficacement au maximum le potentiel thérapeutique de la matière végétale biologi- quement active. Cette matière végétale biologiquement active accélère à son tour les processus d'effet positif de la matière minérale sur l'organisme humain, grâce aux substances actives dont la matière végétale dispose.
Pour la préparation du biostimulant selon l'invention, on utilise des minéraux naturels (par exemple, du gisement Kholimskoe de roches zéolithifères): zéolithes à clinoptilolite et hélandite et argile montmorillonite purifiées au préalable jusqu'à ce que la teneur en clinoptilolite ou en montmorillonite fasse au moins 92 % en poids.
Pour la préparation du stimulant selon l'invention, on utilise également une matière végétale biologiquement active de préférence sèche, par exemple, du son de froment et de seigle, de l'avoine, Laminaria japonica Aresh, de la racine de Rubia tinctorum, Inonotus obliquus.