INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le rapport CaO/MgO selon la relation (e) assez élevé permet d'augmenter au mieux cette résistance hydrolytique, I'oxyde de calcium jouant vis-à-vis de cette propriété un rôle très favorable. II n'est cependant pas inutile de prévoir également la présence, même en des teneurs bien plus faibles que CaO, d'oxyde de magnésium MgO. En effet, accepter une certaine teneur en MgO dans la composition des fibres autorise l'utilisation d'un taux important de calcin dans les matières vitrifiables utilisées, ce qui va évidemment dans le sens d'une réduction des coûts de production, et notamment concernant les matières premières. On peut noter à ce propos que l'on comprend ici par calcin du verre recyclé, qui peut être d'origines diverses, notamment qui peut provenir de fibres de verre, du verre plat ou du verre creux.
En ce qui concerne le taux en oxydes alcalins R20, comprenant généralement majoritairement du Na2O, et minoritairement du K2O, défini par la relation (c), celui-ci joue plutôt pour compléter les teneurs en oxyde de bore et en oxydes alcalino-terreux CaO, MgO et BaO afin d'atteindre la valeur d'indice Kl de 40. Bien sûr, un taux minimum en alcalins est requis pour jouer le rôle bien connu de fondant ; ce taux d'au moins 14,2% caractérise en fait souvent la laine dite de verre par rapport à la laine dite de roche. A noter par ailleurs que la limite supérieure en oxydes alcalins a été choisie également en fonction de la durabilité visée pour la laine minérale : il a été en effet constaté que des teneurs excessives en Na20 pouvaient conduire à abaisser assez significativement, notamment, la résistance hydrolytique de la laine minérale.
Le rapport de la somme des oxydes alcalino-terreux et de la somme des oxydes alcalins RO/R2O tel que sélectionné dans la relation (d) est avantageux à plusieurs titres : ce rapport est encadré par deux valeurs qui permettent d'ajuster au mieux la part des oxydes alcalino-terreux RO par rapport à celle des oxydes alcalins R20 dans l'indice KI. La valeur maximale de 0,95 est importante dans ce sens où elle garantit que les matières vitrifiables pourront être aisément fibrées par centrifugation interne : un ratio qui dépasserait ce seuil tendrait à augmenter dans des conditions trop importantes la température de liquidus et à trop diminuer le palier de travail , qui est en fait la plage de températures où il est possible de fibrer par centrifugation interne, palier de travail AT que l'on peut définir conventionnellement par la différence entre la température Ti0g 2,5 à laquelle la masse fondue des matières vitrifiables atteint une viscosité, en poises, correspondant à log 2,5 et la température de liquidus Tljq. La valeur minimale de 0,70 peut aussi se justifier à la fois pour des raisons de coûts et de faisabilité industrielle : c'est un bon compromis en ce sens qu'on conserve un palier de travail suffisant, sans avoir une proportion trop importante en alcalins par rapport aux alcalino-terreux, ce qui serait pénalisant en termes de coût de matières premières.
Le taux en alumine Al203 est, de préférence, selon la relation (g), cantonné à des valeurs faibles voire nulles, d'abord parce qu'il tend à abaisser la valeur de l'indice KI : plus on augmente le taux d'alumine, plus on doit, parallèlement, augmenter deux fois plus le taux en oxydes alcalins et/ou en oxydes alcalino-terreux et/ou en oxyde de bore pour maintenir l'indice Kl constant. Cela tend, en outre, à diminuer d'autant les taux des autres constituants non mentionnés dans le calcul de l'indice Kl, et tout particulièrement la silice, ce qui influe directement sur la viscosité des matières vitrifiables, en tendant à l'abaisser jusqu'à une fluidification telle qu'elle peut empêcher le fibrage par centrifugation interne. Cependant, un taux modéré en alumine n'est pas forcément dénué d'avantages : d'abord, I'alumine peut être présente en des taux très faibles, en tant qu'impureté apportée par exemple par la matière première porteuse de silice. En outre, ajouter un peu d'alumine tend à avoir un effet favorable sur la durabilité de la laine minérale, notamment sur sa résistance hydrolytique.
Quant au taux de silice, c'est bien sûr un composant essentiel de la laine minérale, il est ici variable dans une plage de valeurs finalement assez peu élevées, ce qui est notamment dû à la forte teneur, par ailleurs, de la laine minérale en oxydes alcalino-terreux RO et au choix d'un indice KI supérieur à 30 et notamment d'au moins 40.
Avantageusement, l'indice Kl explicité plus haut est choisi, si on souhaite qu'il soit d'au moins 40, compris entre 40 et 42, notamment entre 40,2 et 41.
L'invention a sélectionné des domaines préférés de teneurs dans les plages précédemment définies.
Ainsi, de préférence, la somme des teneurs en oxydes alcalino-terreux RO est ajustée entre 14 et 17% notamment entre 1 5 et 16%.
De même, la somme des teneurs en oxydes alcalins R2O peut être choisie entre 15 et 22%, notamment entre 17 et 20%.
La présente invention a donc pour principal objet un procédé de présulfuration de catalyseurs à base d'oxydes métalliques, caractérisé en ce que l'agent sulfurant est constitué par ou comprend au moins un mercaptan tertiaire.
La présente invention s'applique aux différentes techniques de présulfuration de catalyseurs qui sont utilisées en "in-situ" et en "ex-situ".
Dans les présulfurations "in-situ", les composés soufrés sont introduits pendant le traitement des catalyseurs en présence d'hydrogène pour la transformation des oxydes métalliques en sulfures métalliques. Selon la présente invention, les mercaptans tertiaires peuvent être incorporés aux catalyseurs avant leur traitement par des composés sulfurés en présence d'hydrogène, ou peuvent être introduits en même temps que l'addition des composés soufrés qui sont généralement utilisés pour générer, en présence d'hydrogène, l'hydrogène sulfuré qui assure la transformation des oxydes métalliques en sulfures métalliques. L'utilisation de mercaptans tertiaires selon la présente invention a pour effet d'accroître l'activité des catalyseurs.
Elle permet, de plus, de diminuer les durées des présulfurations "in-situ". Il a en effet été observé dans le cadre de la présente invention que les mercaptans tertiaires libèrent l'hydrogène sulfuré à des températures beaucoup plus basses que tous les autres composés soufrés utilisés pour la présulfuration "in-situ" et dans des conditions endothermiques qui permettent d'accélérer les étapes de la sulfuration des catalyseurs en opérant avec des montées en températures plus rapides et avec des paliers de températures plus courts. Par exemple, en opérant avec du tertiododécylmercaptan, la formation d'hydrogène sulfuré commence dès 100"C avec des catalyseurs habituels d'hydrotraitement (Co-Mo, Ni-Mo, Ni-W, sur alumines). Avec des supports tels que des zéolithes, la formation d'hydrogène sulfuré peut se produire au-dessous de 100"C.
Dans les présulfurations "ex-situ", les composés soufrés sont incorporés aux catalyseurs avant leur traitement pour la transformation des oxydes métalliques en sulfures métalliques. Selon la présente invention, les mercaptans tertiaires sont généralement incorporés aux catalyseurs, soit seuls, soit en mélanges avec des composés sulfurés de différentes natures, mais ils peuvent aussi être introduits, soit avant l'incorporation des composés sulfurés, soit après l'incorporation des composés sulfurés. L'utilisation de mercaptans tertiaires selon la présente invention a pour effet d'accroître l'activité des catalyseurs. Elle permet, de plus, d'améliorer la présulfuration "ex-situ" des catalyseurs en libérant l'hydrogène sulfuré à basse température dans des conditions endothermiques telles que la présulfuration s'effectue sans exothermicité. Ainsi, avec des catalyseurs habituels d'hydrotraitement (Co-Mo, Ni Mo, Ni-W, sur alumines), la formation d'hydrogène sulfuré commence dès 100 C accompagnée de la transformation des oxydes métalliques. Avec des supports tels que zéolithes, la formation d'hydrogène sulfuré peut se produire au dessous de 100"C.
Les mercaptans tertiaires relatifs à la présente invention répondent à la formule générale: dans laquelle les symboles R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8, identiques ou différents, représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, linéaire ou ramifié, aryle, alkylaryle ou aralkyle, ces radicaux pouvant contenir un ou plusieurs hétéroatomes tels que l'oxygène et/ou le soufre.
Les mercaptans préférés de l'invention sont des mercaptans tertiaires de formule brute CnH2n+1-SH contenant de 4 à 16 atomes de carbone. De tels mercaptans sont fabriqués industriellement à partir d'hydrogène sulfuré et d'oléfines par des procédés catalytiques tels que ceux décrits notamment dans les brevets US 4 102 931, EP 101 356 et EP 329 521. On fabrique ainsi le tertiobutylmercaptan (TBM)à partir de l'isobutène, le tertiononylmercaptan (TNM) à partir du tripropylène et le tertiododécylmercaptan (TDM) à partir du tétrapropylène ou du triisobutyléne.
La proportion de mercaptan tertiaire qui peut être utilisé en mélange avec des composés soufrés de différentes natures est de 1 % à 99 % du poids de soufre total nécessaire à la présulfuration du catalyseur. Ce soufre apporté par le mercaptan tertiaire a un effet particulièrement sensible à partir de 10 % en poids du soufre total nécessaire à la présulfuration du catalyseur.
1. Cas de la présuffuration "in-situ" Dans la présulfuration "in-situ", l'agent de sulfuration est introduit, progressivement, en continu pendant l'opération de sulfuration du catalyseur qui est effectuée sous courant d'hydrogène. Les composés soufrés qui sont utilisés comme agents de sulfuration sont de natures différentes : sulfure de carbone, mercaptans légers (éthylmercaptan, n-butylmercaptan), diméthylsulfure, diméthyldisulfure, et éventuellement des polysulfures comme le ditertiononylpolysulfure ou encore le ditertiobutylpolysulfure ; peuvent aussi être utilisés des polysulfures obtenus à partir de soufre et d'oléfines.
L'incorporation d'un mercaptan tertiaire selon la présente invention pour la présulfuration des catalyseurs peut être effectuée avant ou pendant l'introduction des agents de sulfuration habituellement utilisés.
Dans le cas ou le mercaptan tertiaire est incorporé préalablement aux agents de sulfuration habituels, cette opération peut être réalisée soit avant le chargement du catalyseur dans le réacteur de présulfuration, soit directement dans le réacteur de présulfuration.
Dans le cas où le mercaptan tertiaire est incorporé pendant l'introduction des agents de sulfuration habituels, l'injection complémentaire de mercaptan tertiaire peut être effectuée soit de manière continue, soit dans la première partie de l'opération de sulfuration du catalyseur, soit suivant des cycles d'injection déterminés.
2. Cas de la présulfuration "ex-situ" Les agents de sulfuration utilisés en présulfuration "ex-situ" doivent être non volatils et avoir des points d'ébullition suffisamment élevés pour rester fixés dans la porosité des catalyseurs pendant les opérations d'imprégnation et ensuite d'activation thermique avant d'être chargés dans les réacteurs d'hydrotraitement.
Des composés soufrés de type polysulfures organiques sont particulièrement bien adaptés, du fait de leurs propriétés physico-chimiques. Certains sulfoxydes comme le diméthylsulfoxyde, le méthyléthylsulfoxyde, le diéthylsulfoxyde, les sulfones correspondantes et le sulfolane peuvent aussi être utilisés pour la présulfuration "ex-situ". Dans le cas où le soufre est le composé soufré incorporé directement au catalyseur, les oléfines mises en oeuvre avec le soufre sont des oléfines à point d'ébullition élevé.
Le mercaptan tertiaire qui est incorporé aux catalyseurs avec ces différents composés soufrés, éventuellement sous forme de mélanges, doit avoir un point d'ébullition suffisamment élevé pour ne pas être entraîné au cours des différentes opérations qu'ont à subir les catalyseurs à des températures pouvant atteindre et éventuellement dépasser 150 C; il doit donc avoir une température d'ébullition supérieure à 1500C, et de préférence supérieure à 1800C.
Les mercaptans tertiaires préférés sont notamment le tertiononylmercaptan (Eb760 = 189-210"C) et le tertiododécylmercaptan (Eb760 = 228-246"C).
Après deux rinçages dans le tampon HBSS, les cellules kératinocytaires sont comptées à l'aide d'un Coulter Counter (Coultronics) puis mises en culture dans le milieu KMK (SIGMA).
Protocole exPérimental .
Les kératinocytes fraîchement isolés sont ensemencés à raison d'un million par boîte dans le milieu de culture KMK. Les cultures de kératinocytes sont traitées la veille avec 1 % d'une solution éthanolique contenant (boîtes essais) ou pas (boîtes témoins) le principe actif.
Le lendemain, les boîtes de culture sont mises dans un bain-marie à la température de 43" pendant 30 minutes. Elles sont ensuite transférées dans l'incubateur à CO2 à 37 C pendant encore 2 heures. Les cellules sont alors lysées par un tampon X 100 et la protéine BAX contenue dans le lysat cellulaire est dosée par la technique ELISA sandwich.
ELISA Sandwich . Dilution au 1/200 de l'anticorps monoclonal anti-bax dans un tampon carbonate bicarbonate, pH : 9,6.
. Distribution de la solution d'anticorps dans une microplaque (96 puits) à raison de 100 l/puits.
Incubation une nuit à 4 C (ou une heure à 37 C).
. Elimination du surnageant.
. Addition du lysat cellulaire (100 l/puits) contenant la protéine BAX.
Incubation à température ambiante pendant une heure.
Rinçage des puits 3 fois avec 200 pI du tampon PBS contenant 0,1 % de Tween 20.
. Addition de la solution d'anticorps anti-bax (100 l/puits).
Incubation une heure à température ambiante.
Rinçage 3 fois avec 200 pI du tampon PBS contenant 0,1 % de Tween 20.
. Addition d'une solution du second anticorps anti-lgG de lapin couplé à la peroxydase (50 l/puits).
logue à celle d'un ellipsoïde ou toute autre forme, par exem-
ple définie de manière numérique. Le faisceau de lumière convergente réfléchi par le réflecteur 10 dans la direction de sortie de la lumière 14 traverse une lentille 16 en verre ou en matière plastique; celle-ci dévie la lumière pour que le faisceau de croisement sortant du projecteur présente les caractéristiques appropriées. L'orifice de sortie de la lumière du projecteur est recouvert par une vitre 17 transpa- rente, en verre ou en matière plastique; cette vitre est lisse et ne comporte pas d'éléments optiques qui pourraient dévier la lumière qui la traverse. Le réflecteur 10 et la lentille 16 peuvent être montés dans un boîtier non représen- té qui porte la vitre de recouvrement 17. Le réflecteur 10 peut être en matière plastique ou en métal. La lentille 16 est une lentille collectrice, elle présente par exemple une face plane 18 du côté tourné vers le
réflecteur 10 et une face 19 à courbure convexe du côté oppo-
sé au réflecteur 10; la face convexe peut être sphérique ou asphérique; elle peut être subdivisée en plusieurs surfaces partielles. Entre le réflecteur 10 et la lentille 16 on peut
prévoir un diaphragme 20 opaque prévu principalement en des-
sous de l'axe optique 11 du réflecteur 10. Le diaphragme 20 ne permet le passage que d'une partie du faisceau lumineux réfléchi par le réflecteur 10 donnant ainsi la limite
d'éclairement définie par la forme du bord supérieur du dia-
phragme 20. En variante, on peut également supprimer le dia-
phragme 20 si la forme du réflecteur 10 est définie pour que le faisceau lumineux réfléchi par le réflecteur présente de
lui-même la limite d'éclairement exigée.
La figure 10 montre un écran de mesure 70 placé à une certaine distance devant le projecteur pour recevoir la
lumière émise par le projecteur. L'écran de mesure 10 repré-
sente la projection d'une chaussée située devant le projec-
teur. Le plan vertical médian de l'écran de mesure 70 porte
la référence VV; son plan horizontal médian porte la réfé-
rence HH. La lumière réfléchie par le réflecteur 10 et sépa-
Dans ce dernier cas, on pourra aussi utiliser l'une des méthodes de marquage décrites dans les brevets FR 2 422 956 et FR 2 518 755. La technique d'hybridation peut être réalisée dc manières diverses (Matthews et al., 1988). La méthode la plus générale consiste à immobiliser l'acide nucléique extrait des cellules de mycobactéries sur un support (nitrocellulose, nylon, polystyrène, ...) et à incuber, dans des conditions bien définies, I'acide nucléique cible immobilisé avec la sonde. Après l'hybridation, l'excès de sonde est éliminé et les molécules hybrides formées sont détectées par la méthode appropriée (mesure de la radioactivité, de la fluorescence ou de l'activité enzymatique liée à la sonde).
Avantageusement, les sondes nucléotidiques marquées selon l'invention peuvent avoir une structure telle qu'elles rendent possible une amplification du signal radioactif ou nonradioactif. Un système d'amplification répondant à la définition ci-dessus comprendra des sondes de détection sous la forme d'un ADN ramifié, branché ( branched DNA ) telles que celles décrites par Urdea et al. en 1991. Selon cette technique, on utilisera avantageusement plusieurs types de sondes notamment une sonde de capture, afin d'immobiliser l'ADN ou l ARN cible sur un support, et une sonde de détection. La sonde de détection lie un ADN branché > > présentant une structure ramifiée. L'ADN branché, à son tour, est capable de fixer des sondes oligonucléotidiques qui sont elles-mêmes couplées à des molécules de phosphatase alcaline. Puis l'activité de cette enzyme est mise en évidence grâce à un substrat chimioluminescent, par exemple un dérivé du dioxétane-phosphate.
Selon un autre mode avantageux de mise en oeuvre des sondes nucléiques selon I'invention, ces dernières peuvent être utilisées comme sondes de capture. Dans ce cas, une sonde, dite sonde de capture , est immobilisée sur un support et sert à capturer par hybridation spécifique l'acide nucléique cible obtenu à partir de l'échantillon biologique à tester. Si nécessaire, le support solide est séparé de l'échantillon et le duplex formé entre la sonde de capture et l'acide nucléique cible est ensuite détecté grâce à une seconde sonde, dite < ( sonde de détection , marquée par un élément facilement détectable.
Les fragments oligonucléotidiques peuvent être obtenus à partir des séquences selon I'invention. par coupure avec des enzymes de restriction, ou par synthèse chimique selon les méthodes classiques, par exemple selon la méthode décrite dans le brevet européen NO EP0305929 (Millipore Corporation) ou encore par d'autres procédés.
Un mode de préparation approprié des acides nucléiques de l'invention comportant au maximum 200 nucléotides (ou 200 pb s'il s'agit d'acides nucléiques bicaténaires) comprend les étapes suivantes la synthèse d'ADN en utilisant la méthode automatisée des béta-cyanethylphosphoramidite décrite en 1986, - le clonage des acides nucléiques ainsi obtenus dans un vecteur approprié et la récupération de acide nucléique par hybridation avec une sonde appropriée.
Un mode de préparation, par voie chimique, d'acides nucléiques selon l'invention de longueur supérieure à 200 nucléotides (ou 200 pb lorsqu'il s'agit d'acides nucléiques bicaténaires) comprend les étapes suivantes - I'assemblage d'oligonucléotides synthétisés chimiquement, pourvus à leur extrémité de sites de restrictions différents, dont les séquences sont compatibles avec l'enchaînement en acides aminés du polypeptide naturel selon le principe décrit en 1983, - le clonage des acides nucléiques ainsi obtenus dans un vecteur approprié et la récupération de l'acide nucléique recherché par hybridation avec une sonde appropriée.
Les sondes nucléotidiques utilisées pour la récupération de l'acide nucléique recherché dans les procédés sus-mentionnés, sont constituées généralement de 8 à 200 nucléotides de la séquence SEQ ID N l ou SEQ ID N"2 ou des séquences complémentaires des SEQ ID N l ou SEQ ID N"2 et sont susceptibles de s'hybrider avec l'acide nucléique recherché dans les conditions d'hybridation définies précédemment. La synthèse de ces sondes peut être effectuée selon la méthode automatisée des béta cyanethylphosphoramidites décrite en 1986.
Les sondes oligonucléotidiques selon l'invention peuvent être mises en oeuvre au sein d'un dispositif de détection comprenant une banque matricielle d'oligonucléotides. Un exemple de réalisation d'une telle banque matricielle peut consister en une matrice d'oligonuléotides sondes fixés sur un support, la séquence de chaque sonde d'une longueur donnée étant située en décalage d'une ou plusieurs bases par rapport à la sonde précédente, chacune des sondes de l'arrangement matriciel étant ainsi complémentaire d'une séquence distincte de l'ADN ou l'ARN cible à détecter et chaque sonde de séquence connue étant fixée en une position prédéterminée du support. La séquence cible à détecter peut être avantageusement marquée radioactivement ou non radioactivement. Lorsque la séquence cible marquée est mise en contact avec le dispositif matriciel, celle-ci forme des hybrides avec les sondes de séquences complémentaires. Un traitement à la nucléase, suivi d'un lavage, permet d'éliminer les hybrides sondes-séquence cible qui ne sont pas parfaitement complémentaires.
Du fait de la connaissance précise de la séquence d'une sonde à une position déterminée de la matrice, il est alors possible de déduire la séquence nucléotidique de la séquence d'ADN ou d'ARN cible. Cette technique est particulièrement efficace lorsque sont utilisées des matrices de sondes oligonucléotidiques de grande taille.
Une alternative à l'utilisation d'une séquence cible marquée peut consister en l utilisation d'un support permettant une détection bioélectronique > > de l'hybndation de la séquence cible sur les sondes du support matrice, lorsque que ledit support est constitué ou comprend un matériau capable d'agir, par exemple, en tant que donneur d'électrons aux positions de la matrice auxquelles un hybride a été formé. Un tel matériau donneur d'électron est par exemple de l'or. La détection de la séquence nucléotidique de l'ADN ou ARN cible est alors déterminée par un dispositif électronique.
Un exemple de réalisation d'un biocapteur, tel que défini ci-dessus, est décrit dans la demande de brevet européen N EP-0721 016 au nom de AQymax technologies N.V. ou encore dans le brevet américain N US 5.202.231 au nom de Drmanac.
L'invention a aussi pour objet les polynucléotides hybrides résultant - soit de la formation d'une molécule hybride entre un ARN ou un ADN (ADN génomique ou ADNc) provenant d'un échantillon biologique avec une sonde ou une amorce selon I' invention.
- soit de la formation d'une molécule hybride entre un ARN ou un ADN (ADN génomique ou ADNc) provenant d'un échantillon biologique avec un fragment nucléotidique amplifié à l'aide d'un couple d'amorces selon l'invention.
Par ADNc au sens de la présente invention, on entend une molécule d'ADN obtenue en faisant agir une enzyme de type transcriptase inverse sur une molécule d'ARN, en particulier une molécule d'ARN messager (ARNm), selon les techniques décites dans Sambrook et al. en 1989.
La présente invention a également pour objet une famille de plasmides recombinés, caractérisés en ce qu'ils contiennent au moins une séquence nucléotidique conforme à l'invention. Selon un mode de réalisation avantageux dudit plasmide, il comprend la séquence nucléotidique SEQ ID N"1 ou un fragment de celle-ci, par exemple le fragment de séquence SEQ ID N"2. Selon une disposition préférée dudit mode de réalisation, ledit plasmide comprend ladite séquence associée à un vecteur pUC. Un plasmide recombiné particulier, répondant à la définition ci-dessus, a été dénommé pMTOS par les inventeurs.
Un autre objet de la présente invention est un vecteur approprié pour le clonage et/ou I'expression et/ou l'insertion d'une séquence, caractérisé en ce qu'il comprend une séquence nucléotidique ci-dessus décrite en un site non essentiel pour sa réplication, le cas échéant sous le contrôle d'éléments de régulation susceptibles d'intervenir dans l'expression du polypeptide de 27 kD, chez un hôte déterminé.
gênée, la lentille 16. La forme extérieure du réflecteur com-
plémentaire 22 peut être ronde comme cela est indiqué à la figure 2; elle peut également avoir toute autre forme, par exemple une forme rectangulaire. On peut également répartir