INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le plasmide obtenu est transformé dans la souche d'Agrobacterium GV3101, et les colonies positives sont sélectionnées sur kanamycine. On utilise une amplification PCR pour vérifier que la colonie sélectionnée contient le plasmide. Des plants niml-l sensibles à la kanamycine subissent une infiltration par cette bactérie, comme on l'a déjà décrit. La semence obtenue est récoltée sur une gélose GM contenant 50 wug/ml de kanamycine. Les plants survivants à la sélection sont transférés sur un sol et soumis à un essai de complémentation. Les plants trans formés et les plants Ws et niml témoin reçoivent une pulvérisation d'INA 300 WM. Deux jours plus tard, les feuilles sont récoltées pour extraction de l'ARN et analyse de l'expression du PR-1. Les plants sont ensuite pulvérisés par Peronospora parasitica (isolat Emwa), et on les cultive comme on l'a dit ci-dessus. Dix jours après l'infection fongique, on évalue les plants et on leur donne une note positive ou négative vis-à-vis de la prolifération fongique. Les 15 plants transformés, ainsi que les témoins Ws, sont négatifs vis-à-vis de la prolifération fongique après traitement par 1 'INA, tandis que les témoins niml sont positifs vis-à-vis de la prolifération fongique. L'ARN est extrait et analysé comme décrit cidessus pour ces transformants et témoins. Les témoins Ws et les 15 transformants présentent une induction du gène du PR-1 après traitement par l'INA, tandis que les témoins niml ne présentent pas d'induction du PR-1 par 1 'INA.
Exemple 15 : Isolement d'un ADNc de NIMl On dépose sur plaque une banque d'ADNc d'Arabidopsis, réalisée dans un vecteur d'expression IYES (Elledge et al., 1991, PNAS 88, 1731-1735), et on procède à des transferts de plage. Les filtres sont hybridés avec un produit amplification PCR marqué au 32p, obtenu à partir de la région 2 du gène (Figure 5D). 14 positifs sont identifiés à partir d'un criblage d'environ 150 000 plages. Chaque plage est purifiée, et 1'ADN plasmidique est récupéré. Les inserts d'ADNc sont extraits du vecteur par digestion par EcoRI, purifiés sur gel d'agarose et séquencés. La séquence obtenue à partir de l'ADNc le plus long est indiquée sur la séquence SEQ ID NO:2 et sur la Figure 6. Pour confirmer que l'extrémité 5' de l'ADNc a été obtenue, on utilise une trousse Gibco BRL 5' RACE en suivant les instructions du fabriquant. Les produits RACE obtenus (par amplification rapide des extrémités de l'ADNc) sont séquencés et se révèlent comporter les bases additionnelles indiquées sur la Figure 6. La région transcrite présente dans les deux clones d'ADNc et détectée par l'amplification RACE est indiquée en majuscules sur la Figure 6. Les changements dans les allèles sont présentés au-dessus du brin d'ADN. Les majuscules indiquent la présence de la séquence dans un clone d'ADNc, ou sa détection après amplification RACE PCR.
Les mêmes échantillons d'ARN que ceux qui sont produits dans les études d'induction (Figure 3) sont sondés avec le gène NIMl par utilisation, en tant que sonde, d'un clone d'ADNc complet. Sur la Figure 7, on peut voir que 1'INA induit le gène NIMl dans l'allèle Ws de type sauvage. Cependant, l'allèle mutant niml-l présente un niveau de base de l'expression inférieur à celui du gène NIMl, et ne peut être induit par l'INA. Ce résultat est analogue à ce que l'on observe dans l'allèle niml-3 et l'allèle nimi-6. L'allèle niml-2 présente des niveaux approximativement normaux dans l'échantillon non traité et présente une induction analogue à celle de l'échantillon de type sauvage, tout comme l'allèle nimi-4.
L'allèle niml-5 semble présenter un niveau d'expression de base plus élevé que celui du gène NIMi, et une expression beaucoup plus forte après induction par des inducteurs chimiques.
D. Homologues du NIMl Exemple 16 : Recherche BLAST avec la séquence NIM1 On synthétise un alignement de séquences multiples par utilisation du Clustal V (Higgins, Desmond G, et Paul M. Sharp (1989), Fast and sensitive multiple sequence alignements on a microcomputer, CABIOS 5:151-153) en tant qu'élément du progiciel pour Macintosh (1994) Lasergene Biocomputing Software de DNA* (1228 South Park Street, Madison Wisconsin, 53715). Certaines régions de la protéine NIMl sont homologues, pour ce qui est de leur séquence d'acides aminés, de 4 protéines d'ADNc différentes du riz. Les homologies sont identifiées par utilisation des séquences NSMl dans une recherche BLAST de Gen Bank. Des comparaisons des régions d'homologie du NIMI et des produits d'ADNc du riz sont présentées sur la Figure 8 (voir aussi les séquences SEQ ID NO:3 et SEQ ID NO:4 à 11). Les fragments de protéine NIMl présentent des séquences d'acides aminés ayant un taux d'identification de 36 à 48 % avec les 4 produits de riz.
Exemple 17 : Isolement de gènes homologues à partir d'autres plantes En utilisant en tant que sonde l'ADNc du NIAI, des homologues du NiMi d'Arabidopsis sont identifiés par criblage de génothèques ou de banques d'ADNc provenant de différentes cultures, telles par exemple, mais sans limitation, celles qui sont mentionnées ci-dessous dans 1 'Exemple 22. Parmi les techniques classiques permettant d'y arriver, on peut citer le criblage par hybridation de banques d'ADN sur plaque (plages ou colonies ; voir par exemple Sambrook et al., Molecular Cloning, eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989)), et amplification par PCR par utilisation d'amorces oligonucléotidiques (voir par exemple Innis et al., PCR Protocols, a Guide to Methods and Applications, eds., Academic Press (1990)).
Les homologues identifiés sont traités par génie génétique dans les vecteurs d'expression selon l'invention, et transformés dans les cultures ci-dessus. Les transformants font l'objet d'une évaluation de leur résistance améliorée aux maladies par utilisation de micro-organismes pathogènes appropriés de la plante de culture faisant l'objet de l'essai.
Les homologues du NIMl dans les génomes du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs et de l'orge sont détectés par analyse par transfert d'ADN. L'ADN génomique est isolé du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs, du blé et de l'orge, soumis à une digestion par les enzymes de restriction BamHI, HindIII, XbaI ou SalI, soumis à séparation électrophorétique sur des gels d'agarose à 0,8 % et transféré sur une membrane en nylon par transfert capillaire. Après réticulation aux UV pour fixer l'ADN, la membrane est hybridée dans des conditions peu stringentes [BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM) à 55"C pendant 18 à 24 heures] à l'aide de l'ADNc du NIM1 d'Arabidopsis thaliana radiomarqué au 32P. Après hybridation, les transferts sont lavés dans des conditions peu stringentes [6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C ; lXSSC représente NaCl 0,15 M, citrate de Na 15 mM (pH 7,0)], et on les expose à un film radiographique pour visualiser les bandes qui correspondent à NIMl.
En outre, des marqueurs de séquence exprimée (EST), identifiés par analogie avec le gène NIMl, notamment les EST du riz décrits dans l'Exemple 16, peuvent eux aussi être utilisés pour isoler des homologues. Les EST du riz peuvent être utilisés en particulier pour isoler les homologues du NiMi d'avec d'autres monocotylédones.
Les homologues peuvent être obtenus par amplification PCR. Dans ce procédé, on procède à des comparaisons entre des homologues connus (par exemple le riz et Arabidopsis) . Puis on utilise pour fabriquer des amorces pour amplification PCR les régions ayant une grande similitude ou identité avec les acides aminés et l'ADN. Les régions riches en M et en W sont au mieux suivies par des régions riches en F, Y, C, H, Q, K et E, car ces acides aminés sont codés par un nombre limité de codons. Une fois qu'une région appropriée a été identifiée, on prépare des amorces pour cette région, avec une diversité de substitutions sur la position du troisième codon. Cette diversité de substitution sur la troisième position peut être limitée en fonction de l'espèce ciblée. Par exemple, comme le maïs est riche en GC, on met au point des amorces qui utilisent si possible un G ou un C sur la troisième position.
La réaction d'amplification PCR est réalisée à partir d'ADNc ou d'ADN génomique dans de nombreuses conditions standard. Quand une bande est apparente, on la clone et/ou on la séquence pour déterminer s'il s'agit d'un homologue du NIAI.
E. Un niveau élevé d'expression du NIMi confère aux végétaux une résistance aux maladies Un niveau élevé d'expression du gène NIMl dans les plantes transgéniques, destiné à conférer un phénotype CIX, est de même décrit dans la demande de brevet US déposée par la demanderesse sous le numéro de série 08/773 554 le 27 décembre 1996, ce document étant incorporé ici à titre de référence dans sa totalité.
Exemple 18 : Niveau élevé d'expression du NIMl en raison de l'effet du site d'insertion Pour déterminer si l'un quelconque des transformants décrits ci-dessus dans l'Exemple 10 et le Tableau 4 possède un niveau d'expression du NiMi en raison de l'effet du site d'insertion, on soumet à une autofécondation des transformants primaires contenant les cosmides D7, D5 ou El (contenant le gène NOM), et on recueille la semence T2. Les semences d'une lignée El, de quatre lignées D5 et de 95 lignées D7 sont semées sur le sol, et on les cultive comme décrit ci-dessus. Quand les plants T2 sont arrivés au moins à quatre feuilles vraies, on récolte séparément pour chaque plante une feuille unique. On extrait l'ARN de ce tissu, et on l'analyse pour ce qui est de l'expression du PR-1 et du NIMl. Les plantes sont ensuite ensemencées par P. parasitica (Emwa), on détermine la prolifération fongique au bout de 3 à 14 jours, de préférence 7 à 12 jours après l'infection. Les plantes présentant une expression du NIM1 et du PR-1 plus grande que la normale, avec une résistance fongique, montrent qu'un niveau élevé d'expression du NIMi confère un phénotype CIM.
Le Tableau 6 présente les résultats des essais de différents transformants, portant sur la résistance à l'infection fongique. Comme il ressort du tableau, un certain nombre de transformants présentent une prolifération fongique inférieure à la normale, et plusieurs d'entre eux ne présentent aucune prolifération fongique visible. L'ARN est préparé à partir d'échantillons collectés, et on l'analyse comme décrit ci-dessus (Delaney et al., 1995). Les transferts sont hybridés sur le PR-1 de la sonde génique d'Arabidopsis (Uknes et al., 1992).
Les lignées D7-74, D5-6 et El-l présentent une induction précoce de l'expression du gène du PR-1, tandis que l'ARNm du PR-1 est manifeste 24 ou 48 heures après traitement contre les champignons. Ces trois lignées mettent aussi en évidence une résistance à l'infection fongique.
Selon un premier mode de réalisation particulier du procédé objet de l'invention, l'un des premiers et deuxième plots est segmenté et l'autre est continu.
Selon un mode de réalisation particulier, dans le cas où l'un des plots est continu, on dépose également sur le plot continu un élément de brasure si ce plot continu a une longueur inférieure à 10 fois sa largeur.
Cette variante permet d'obtenir un cordon de brasure de hauteur totale plus importante.
Selon un deuxième mode de réalisation particulier, chacun des premier et deuxième plots est segmenté et les segments sont disposés de façon que dans l'étape d'assemblage des première et deuxième structures chaque segment de l'une de celles-ci se trouve en face d'un intervalle séparant deux segments adjacents de l'autre structure.
La deuxième structure peut être une diode laser à émission latérale comprenant un ruban laser disposé d'un côté de cette diode laser, le deuxième plot se trouvant de ce côté, la première structure étant un substrat destiné à la connexion électrique de cette diode laser.
Les extrémités de l'un des premier et deuxième plots peuvent être en retrait par rapport aux bords de la structure correspondante. il est possible de mettre en oeuvre le procédé objet de l'invention en utilisant des premier et deuxième plots qui s'étendent chacun le long d'un circuit fermé (en particulier dans des applications à des capteurs) Selon un autre exemple d'application, la deuxième structure peut être un capot de blindage électrique ou une protection mécanique ou les deux et être rapportée, par un cordon de brasure, sur la première structure, celle-ci important des capteurs ou des structures hyperfréquences.
Les largeurs respectives des premier et deuxième plots peuvent être sensiblement égales l'une à l'autre.
La longueur de l'intervalle entre deux segments adjacents de chaque plot segmenté peut être inférieure ou sensiblement égale à la distance que l'on veut avoir entre les premier et deuxième plots lorsque les structures sont assemblées.
De préférence, pour former chaque plot segmenté, on dépose une couche métallique à la surface de la structure correspondante et on délimite chaque segment de ce plot segmenté par une photolithographie puis une gravure de cette couche métallique.
BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS La présente invention sera mieux comprise à la lecture de la description d'exemples de réalisation donnés ci-après, à titre purement indicatif et nullement limitatif, en faisant référence aux dessins annexés sur lesquels la figure 1A, déjà décrite, est une vue schématique d'une diode laser à émission latérale que l'on veut hybrider à un substrat, la figure 1B, déjà décrite, montre cette diode laser après hybridation flip-chip de celle-ci avec le substrat, les figures 2A et 2B, déjà décrites, sont respectivement une vue de profil et une vue de face qui illustrent schématiquement la formation d'une bille de brasure décentrée aléatoirement lors de la refusion de la brasure, la figure 3, déjà décrite, illustre schématiquement le risque de chute de la diode après mise en place de celle-ci sur la brasure avant la deuxième refusion de celleci les figures 4A et 4B sont respectivement une vue de profil et une vue de face qui illustrent schématiquement la formation de deux billes de brasure sur un plot d'accrochage segmenté conformément à la présente invention, les figures 5A et 5B sont respectivement une vue de profil et une vue de face qui illustrent schématiquement la mise en place de la diode sur ces deux billes de brasure après un préalignement et avant la deuxième refusion de la brasure, les figures 6A et 6B sont respectivement une vue de profil et une vue de face qui illustrent schématiquement la deuxième refusion de la brasure et la formation d'un cordon de brasure uniforme par mouillabilité, les figures 7A à llA sont des vues de profil et les figures 7B à llB sont des vues de face qui illustrent schématiquement diverses étapes d'un procédé d'assemblage conforme à l'invention, la figure 12A est une vue schématique d'une diode laser à émission latérale, munie d'un plot de connexion qui est délimité uniquement par le clivage des faces de la diode laser, la figure 12B illustre schématiquement l'hybridation de cette diode laser à un substrat, la figure 13A illustre schématiquement une diode laser à émission latérale, munie d'un plot de connexion qui est délimité par photolithographie, le clivage de la diode laser étant décalé, la figure 13B illustre schématiquement l'hybridation de cette diode laser de la figure 13A à un substrat, les figures 14A et 14B sont respectivement une vue de profil et une vue de face qui illustrent schématiquement un composant et un substrat ayant chacun un plot de connexion segmenté avec une bille et représentés après la mise en place du composant sur le substrat, avant la deuxième refusion de la brasure, les figures 15A et 15B sont respectivement une vue de profil et une vue de face qui illustrent schématiquement ce composant et ce substrat des figures 14A et 14B après refusion de la brasure, et les figures 16A et 16B sont respectivement une vue en coupe transversale partielle et une vue de dessus qui illustrent schématiquement l'hybridation d'un composant à un substrat avec un cordon de brasure formant un circuit fermé.
EXPOSÉ DÉTAILLÉ DE MODES DE RÉALISATION PARTICULIERS On commencera par décrire quelques caractéristiques importantes et avantages de l'invention en faisant référence à certaines des figures après quoi on décrira plus en détail ces figures.
Conformément à l'invention, pour l'hybridation flip-chip d'un composant électronique ou optique sur un substrat, on peut utiliser un plot de connexion segmenté, formé sur le substrat et composé de deux ou plusieurs segments de connexion.
Ceci permet de réduire le facteur de forme de ce plot, c'est-à-dire le rapport de la longueur à la largeur de ce plot qui a une forme allongée, sensiblement rectangulaire.
Compte tenu des forces de mouillabilité et des forces de tension superficielle de la brasure liquide utilisée pour l'hybridation, il se forme une bille ovoide parfaitement centrée sur chacun des segments après avoir formé puis porté à l'état liquide des éléments de brasure sur ces segments.
Ceci est schématiquement illustré par les figures 4A et 4B.
A titre purement indicatif et nullement limitatif - le plot segmenté du substrat a une longueur totale L, - ce plot comprend deux segments sensiblement rectangulaires de même longueur L1 et de même largeur 11, - le rapport L1/ll est égal à 3,75, - la distance H entre le plot du composant et le plot segmenté du substrat après hybridation est au moins égale à 1,5x11, - la longueur de l'intervalle L2 séparant les deux segments du plot du substrat est de l'ordre de grandeur de H et - la largeur 12 du plot sensiblement rectangulaire formé sur le composant est égale à 1,2 ll et sa longueur est égale à L.
Le but de l'invention est de proposer une pochette perfectionnée et plus sûre.
Dans sa forme le plus générale, l'invention se caractérise en ce que le moyen d'accrochage est constitué par une patte d'accrochage repliable issue d'un côté de la première face de la pochette.
De manière avantageuse, la patte d'accrochage est dentelée (ou crénelée, ou pourvue de moyens spécifiques s'opposant au glissement) à sa partie supérieure, à moins que la fragilité des articles à emballer ne s'y oppose.
De préférence, la patte d'accrochage coopère avec une patte de blocage inférieure repliable qui lui est parallèle et contiguë. Quand la pochette est repliée, L'article est coincé dans la fente étroite séparant les deux pattes rabattues.
Avantageusement, la patte d'accrochage est formée de deux parties repliables l'une sur l'autre. La présence de ces deux parties et de la patte de blocage rend possible de nombreux arrangements de l'article sur et autour de ces éléments pour parvenir à une immobilisation satisfaisante.
La pochette de l'invention est facile à fabriquer à partir de flans en carton découpés et rainurés.
D'autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description suivante d'un mode de réalisation de l'invention. On se référera aux dessins annexés sur lesquels - la figure 1 est une vue en plan du flan d'une cartonnette conforme à l'invention, - la figure 2 est une vue en perspective de la cartonnette montrant son pliage partiel après mise en place d'un bas ou analogue, et la figure 2A montre en coupe partielle schématique le pliage du bas autour des pattes d'accrochage et de blocage, - la figure 3 montre la cartonnette repliée de face, - la figure 4 montre la même cartonnette de dos, - la figure 5 est une vue analogue à la figure 2, dans une variante de mise en place du bas ou analogue, et la figure SA montre en coupe partielle schématique le pliage du bas autour des pattes d'accrochage et de blocage, - la figure 6 est une autre vue analogue à la figure 2, dans une autre variante de mise en place du bas ou analogue, et la figure 6A montre en coupe partielle schématique le pliage du bas autour des pattes d'accrochage et de blocage, - la figure 7 est encore une autre vue analogue à la figure 2 d'une pochette modifiée, et la figure 7A montre en coupe partielle schématique le pliage du bas autour des pattes d'accrochage et de blocage.
La cartonnette 1 comporte essentiellement une première face 2 et une seconde face 3 contiguë séparée par un rainage 4, permettant à la seconde face 3 de se rabattre sur la première face. Un rabat de fermeture 5 est attenant à la seconde face 3, dont il est séparé par un rainage 6, qui lui permet de se replier derrière la première face 2 après que la seconde face 3 a elle-même été repliée sur la première face 2 et d'y être fixée au moyen d'un moyen de fixation 7, tel qu'un ruban adhésif (cf. figures 2 et 4).
La première face 2 comporte à sa partie supérieure un prolongement 8 replié sur lui-même, dans la double épaisseur duquel est pratiquée une ouverture 9 destinée à suspendre la cartonnette sur la branche d'un présentoir.
Du bas du côté 10 de la première face 2, opposé au rainage 4, partent deux pattes parallèles 1 1 et 12, rattachées audit côté par un rainage 13, 14.
La patte inférieure 12 a une longueur sensiblement égale ou légèrement inférieure à la largeur de la première face 2, de manière à s'y replier et permettre de rabattre la seconde face 3.
La patte supérieure 1 1 a une longueur sensiblement double de la patte 12, et est formée de deux parties 1 la, 1 lb séparées par un rainage 15.
Le bord supérieur 16 de la patte supérieure 1 1 est crénelé ou dentelé.
Après avoir replié la patte inférieure 12 sur la première face 2 (cf.
figure 2 et 2A), l'article 17 (tel qu'une paire de mi-bas) à présenter dans la cartonnette est placé à cheval sur la partie 1 la de la patte 11, puis on replie la partie llb sur la partie i la, ce qui bloque partiellement l'article 17. On rabat complètement la patte d'accrochage repliée 11 sur la première face 2, au-dessus de la patte inférieure repliée 12. Puis on vient rabattre la seconde face 3 sur la première face 2, et on ferme le rabat 5 à l'arrière par le moyen de fixation 7.
L'article 17 est parfaitement immobilisé dans la cartonnette fermée 1 du fait qu'il est pris sur les dents 16 de la patte d'accrochage 11, et coincé entre les deux parties de celle-ci.
De plus, les serveurs vociemail et email sur le PC de bureau ont désormais la possibilité d'indiquer qu'ils contiennent des messages en attente grâce au clignotement d'un voyant sur le téléphone sans fil.
Browsers portables - un petit dispositif, similaire aux dispositifs actuels WinCE et Pilot, peut être utilisé pour accéder sans fil aux informations locales et d'Internet. Il est possible de revoir le contenu des informations, les programmes de divertissements diffusés et d'agir de manière interactive en tout point de l'habitation. Etant donné que les informations sont présentées de manière agréable et appropriée, l'utilisation de services d'informations personnalisés peut augmenter considérablement. La complexité du système étant réduite, des browsers avec fonction spéciale peuvent être créés. Des livres de cuisine nu jeu éducatif peut poser des questions basées sur des thèmes d'actualité du moment ou peut être relié à un programme diffusé récemment. Lorsque la curiosité de l'enfant se déplace, le dispositif peut utiliser différentes approches pour distraire et éduquer.
Environnements multimédia - une connectivité sans fil aux haut-parleurs, imprimantes, sources audio permet également la création de nouveaux produits comme des chaînes stéréophoniques numériques ayant accès au contenu numérique sur Internet. La possibilité de commander des imprimantes sans fil à partir d'un dispositif sans fil quelconque dans ce réseau, par exemple des browsers portables, des jeux pour enfants, des caméras numériques, et autres dispositifs. apporte une facilité d'utilisation et un certain confort en éliminant les différents câbles actuellement requis.
Le fonctionnement dans la bande ISM 2,4 GHz offre l'avantage de permettre la fabrication et la commercialisation de produits à l'échelle mondiale, avec seulement quelques restrictions concernant le niveau de puissance et les procédés d'accès aux voies. Cependant, un fonctionnement dans cette bande librement disponible n'est pas sans conséquences. Les fours à micro-ondes grand public émettent une quantité considérable d'énergie dans cette bande. En conséquence, les protocoles sans fil efficaces pour cette bande doivent tenir compte de ce fait.