INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La présente invention concerne des molécules d'ADN codant des formes modifiées du gène NIMl, telles celles qui sont décrites ci-dessus, des vecteurs d'expression contenant ces molécules d'ADN, et des végétaux et cellules végétales transformés avec elles. L'invention concerne aussi des procédés pour activer la SAR dans les végétaux, et pour conférer aux végétaux un phénotype CIM et une résistance à un large spectre de maladies, en transformant les plantes à l'aide de molécules d'ADN codant des formes modifiées du produit génique NIMl. La présente invention concerne en outre des végétaux transformés par une forme modifiée du gène NiMi.
Résistance aux maladies La surexpression du gène NIMl de type sauvage dans les végétaux et l'expression de formes modifiées du gène NiMi dans les végétaux conduisent à une immunité vis-àvis d'un large ensemble de micro-organismes phytopathogènes qui comprennent, mais sans limitation, les virus ou viroïdes, le virus de la mosaïque du tabac ou du concombre, le virus des taches annulaires ou de la nécrose, le virus de la nécrose foliaire des géraniacées, le virus des bigarrures du trèfle violet, le virus du rabougrissement buissonneux de la tomate, et les virus analogues les champignons pathogènes, par exemple Phytophthora parasitica et Peronospora tabacina ; les bactéries, Pseudomonas syringae et Pseudomonas tabaci, les insectes tels que les aphidiens, par exemple Myzus persicae, et les lépidoptères, Heliothus spp. ; et les nématodes, par exemple Meloidogyne incognita. Les vecteurs et procédés de Invention peuvent être utilisés contre un certain nombre d'organismes pathogènes, qui comprennent mais sans limitation les mildious tels que Sclerophthora macrospora, Sclerophthora rayissiae, Sclerospora graminicola, Peronosclerospora sorghi, Peronosclerospora philippinensis, Peronosclerospora sacchari et Peronosclerospora maydis ; les rouilles telles que Puccinia sorphi, Puccinia polysora et Physopella zeae ; d'autres champignons pathogènes tels que Cercospora zeae-maydis, Colletotrichum graminicola, Fusarium monoliforme, Gibberella zeae, Exserohilum turcicum, Kabatiellu zeae, Erysiphe graminis, Septoria et Bipolaris maydis ; et les bactéries, telles que Erwinia stewartii.
Les procédés de la présente invention peuvent être utilisés pour conférer une résistance aux maladies à une large gamme de végétaux, notamment les gymnospermes, les monocotylédones et les dicotylédones. Bien que la résistance aux maladies puisse être conférée à tout végétal entrant dans ces grandes catégories, elle est particulièrement utile dans les plantes de culture importantes d'un point de vue agronomique, telles que les plantes suivantes : riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. Les cellules transformées peuvent être régénérées dans des plantes entières, de sorte que le gène confère une résistance aux maladies aux plantes transgéniques intactes. Le système d'expression peut être modifié de façon que le gène de résistance à la maladie puisse être exprimé d'une manière continue ou constitutive.
Technologie de l'ADN recombinant La molécule d'ADN ou le fragment de gène NIMl qui confère une résistance aux maladies à des végétaux en permettant l'induction de l'expression du gène de la SAR, ou encore la forme modifiée du gène NIMl conférant une résistance aux maladies aux végétaux en renforçant l'expression du gène de la SAR, peut être incorporée dans des cellules végétales ou bactériennes par utilisation de la technologie classique de l'ADN recombinant. D'une manière générale, cette technique consiste à insérer la molécule d'ADN, comprise dans la séquence SEQ ID NO:1, ou un variant fonctionnel de cette dernière, ou une molécule codant l'une des formes modifiées du NIMl décrites cidessus, dans un système d'expression dont la molécule d'ADN est hétérologue (c'est-à-dire n'est normalement pas présente). La molécule d'ADN hétérologue est insérée dans le système ou le vecteur d'expression selon une orientation correcte et selon un cadre de lecture correct. Le vecteur contient les éléments nécessaires à la transcription et à la traduction des séquences insérées, codant la protéine. On peut utiliser une large gamme de systèmes de vecteurs connus dans la technique, tels que les plasmides, les virus bactériophages et d'autres virus modifiés.
Parmi les vecteurs appropriés, on peut citer, mais sans limitation, les vecteurs viraux tels que les systèmes vecteurs X, kgtll, hgtl0 et Charon 4 ; les vecteurs plasmidiques tels que pBI121, pBR322, pACYC177, pACYC184, la série pAR, pKK223-3, pUC8, pUC9, pUC18, pUC19, pLG339, pRK290, pKC37, pKC101, pCDNAII ; et d'autres systèmes analogues. La séquence codante du NIMl et les séquences codantes modifiées du NIMl décrites dans l'invention peuvent etre clonées dans le vecteur par utilisation de techniques classiques de clonage, telles que décrites par Maniatis et al., Molecular Cloning : A Laboratory Manual, Cold Spring Laboratory, Cold Spring Harbor, New York (1982).
Pour obtenir une expression efficace du gène ou du fragment génique de la présente invention, un promoteur qui va conduire à un niveau d'expression suffisant ou à une expression constitutive suffisante doit être présent dans le vecteur d'expression. L'ARN-polymérase se fixe normalement au promoteur et déclenche la transcription d'un gène. Les promoteurs varient au niveau de leur force, c'est-à-dire de leur aptitude à promouvoir la transcription. Selon le système de cellule hôte utilisé, on peut utiliser l'un quelconque d'un certain nombre de promoteurs appropriés. Les composants de la cassette d'expression peuvent être modifiés pour augmenter l'expression. Par exemple, on peut utiliser des séquences tronquées, des substitutions nucléotidiques ou d'autres modifications. Les cellules végétales transformées à l'aide de ces systèmes d'expression modifiés présentent donc une surexpression ou une expression constitutive des gènes nécessaires à l'activation de la SAR.
A. Synthèse des vecteurs de transformation de végétaux On dispose de nombreux vecteurs de transformation pour la transformation des végétaux, et les gènes de la présente invention peuvent être utilisés conjointement à un ou plusieurs quelconques de ces vecteurs. La sélection du vecteur va dépendre de la technique de transformation préférée et de l'espèce cible de la transformation. Pour certaines espèces cibles, on pourra préférer différents marqueurs de sélection antibiotiques ou herbicides. Les marqueurs de sélection utilisés en routine lors d'une transformation comprennent le gène nptil, qui confère une résistance à la kanamycine et aux antibiotiques apparentés (Messing & Vierra, Gene 19:259-268 (1982) ; Bevan et al., Nature 304:184-187 (1983)), le gène bar, qui confère une résistance à l'herbicide phosphinothricine (White et al., Nucl. Acid. Res. 18:1062 (1990), Spencer et al., Theor. Appl. Genet 79:625-631 (1990)), le gène hph, qui confère une résistance à l'antibiotique hygromycine (Blochinger & Diggelmann, Mol. Cell. Biol. 4:2929-2931), et le gène dhfr, qui confère une résistance au méthotréxate (Bourouis et al., EMBO J. 2(7):1099-1104 (1983)) ; et le gène EPSPS, qui confère une résistance au glyphosate (brevets US N" 4 940 935 et 5 188 642).
1. Vecteurs convenant à la transformation d'Agrobactérium De nombreux vecteurs existent, qui permettent une transformation par utilisation d 'Agrobacterium tumefaciens. Ils portent habituellement une séquence limite d'ADN-T et comprennent des vecteurs tels que le pBIN19 (Bevan, Nucl. Acid. Res. (1984)) et pXYZ. On va décrite ci-après la synthèse de deux vecteurs représentatifs. a. pCBI200 et pCIB2001 Les vecteurs binaires pCIB200 et pCIB2001 sont utilisés pour synthétiser des vecteurs recombinants destinés à être utilisés avec Agrobacterium, et ils sont synthétisés de la manière suivante. On crée pTJS75kan par digestion de pTJS75 par NarI (Schmidhauser & Helinski, J.
Bacteriol. 164:446-455 (1985), ce qui permet l'excision du gène de résistance à la tétracycline, puis on procède à une insertion d'un fragment AccI provenant de pUC4K portant un NPTII (Messing & Vierra, Gene 19:259-268 (1982) ; Bevan et al., Nature 304:184-187 (1983) McBride et al., Plant Molecular Biology 14:266-276 (1990)). Des lieurs XhoI sont ligaturés au fragment EcoRV du pCIB7, qui contient le bord gauche et le bord droit de l'ADN-T, un gène chimère nos/nptII sélectionnable vis-àvis d'un végétal, et le lieur multisite pUC (Rothstein et al., Gene 53:153-161 (1987)) et le fragment digéré par XhoI est cloné dans pTJS75kan digéré par SalI pour créer le pCIB200 (voir aussi le brevet EP 0 332 104, Exemple 19). Le pCIB200 contient les sites de restriction polysites uniques suivants : EcoRi, SstI, Kpni, BglII, XbaI et SalI. Le pCIB2001 est un dérivé du pCIB200, crée par insertion de sites de restriction additionnels dans le lieur multisite. Les sites de restriction unique du lieur multisite du pCIB2001 sont EcoRi, SstI, KpnI, BglII, XbaI, SalI, MluI, BclI, AvrII, ApaI, HpaI et StuI. Le pCIB2001, outre le fait qu'il contient ces sites de restriction uniques, possède aussi des bords gauche et droite d'ADN-T, assurant la sélection vis-à-vis de la kanamycine végétale et bactérienne, pour transformation médiée par Agrobacterium, la fonction trfA dérivée du RK2 pour une mobilisation entre E. coli et d'autres hôtes, et les fonctions OriT et OriV, qui proviennent elles aussi du RK2. Le lieur multisite pCIB2001 convient au clonage de cassettes d'expression de végétaux contenant leurs propres signaux régulateurs. b. Le pCIB10, et ses dérivés de sélection de l'hygromycine Le vecteur binaire pCIB10 contient un gène codant la résistance à la kanamycine pour sélection dans les végétaux, et les séquences bordantes gauche et droite d'ADN T, et comprend les séquences provenant du plasmide pRK252, qui correspond à une large gamme d'hôtes, qui en permet la réplication tant dans E. coli que dans Agrobacterium. Sa synthèse est décrite par Rothstein et al.
(Gene 53:153-161 (1987)). Différents dérivés du pCIB10 sont synthétisés, qui comprennent le gène de l'hygromycine-B-phosphotransférase, décrit par Gritz et al.
(Gene 25:179-188 (1983)). Ces dérivés permettent une sélection de cellules de plantes transgéniques, portant sur l'hygromycine seule (pCIB743) ou sur l'hygromycine et la kanamycine (pCIB715, pCIB717).
Par ailleurs, la position des reliefs 22 et des creux 23 est légèrement décalée (suivant un angle de 50) par rapport à une origine correspondant à la fermeture complète du couvercle 3 pour permettre le déplacement de celui-ci vers cette position de fermeture sous l'action du ressort 19.
L'un des bras 5 est situé entre les deux plages conductrices 6; la connexion électrique n'a pas lieu.
La figure 9 montre la position des deux bras 5, après rotation du couvercle de 450. Les deux bras 5 sont en contact avec les plages conductrices 6; la connexion électrique a lieu.
Les figures 10 et 11 montrent la position des deux bras 5, après rotation du couvercle de 1200 et 1850; dans les deux cas la connexion électrique a lieu.
Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation que l'on vient de décrire et on peut apporter à ceux-ci de nombreuses modifications sans sortir du cadre de l'invention.
Un circuit d'insertion/extraction de longueur d'onde est intercalé entre les fibres optiques 101 et 102 par lesquelles les signaux optiques MRL respectifs sur les quatre longueurs d'onde xi à #4 sont transmis.
Le circuit d'insertion/extraction de longueur d'onde est constitué du circulateur optique 103 ayant trois ports Pc1, Pc2 et Pc3 et du coupleur MRL 104 ayant le port unique P0 et les quatre ports P1 à P4. Le deuxième port Pc2 du circulateur optique 103 est optiquement connecté au port unique PO du coupleur MRL 104.
Lorsque le circulateur optique 103 reçoit des signaux optiques MRL d'entrée sur le premier port Fci, les signaux optiques MRL d'entrée apparaissent sur le deuxième port Poe et sont délivrés au coupleur MRL 104.
Lorsque les signaux optiques MRL de sortie sont reçus sur le deuxième port Poe depuis le coupleur MRL 104, ils apparaissent sur le troisième port Pc3 et sont délivrés à la ligne de transmission 102.
Le coupleur MRL 104 reçoit les signaux optiques MRL d'entrée depuis le premier port Fci du circulateur optique 103 et sépare les quatre signaux optiques sur quatre longueurs d'onde x1 à x4 qui apparaissent sur les quatre ports P1 à P4, respectivement. Inversement, lorsqu' il reçoit quatre signaux optiques sur les quatre ports P1 à P4, respectivement, le coupleur MRL 104 les combine et les envoie depuis le port unique P0 au circulateur optique 103. Le coupleur MRL 104 est constitué de guides d'ondes à quartz agencés en dispositif à réseau de phase.
Le premier port P1 du coupleur MRL 104 est optiquement connecté au premier port d'un coupleur optique 506. Le deuxième port du coupleur optique 506 est optiquement connecté à un récepteur optique 508 par l'intermédiaire d'un atténuateur optique variable 507.
Le troisième port du coupleur optique 506 est optiquement connecté à un émetteur optique 509 par l'intermédiaire d'un atténuateur optique variable 510.
L'émetteur optique 509 délivre un signal optique ayant une longueur d'onde de 1555,2 nm dans ce mode de réalisation. Par conséquent, le signal optique d'entrée sur la longueur d'onde x1 est extrait et reçu par le récepteur optique 508 tandis que le niveau du signal reçu est réglé par l'atténuateur optique variable 507.
D'autre part, le signal optique de sortie sur sensiblement la même longueur d'onde 1555,2 nm que la longueur d'onde x1 = 1555 nm est transmis de l'émetteur optique 509 à la fibre optique 102 tandis que son intensité lumineuse est réglée par l'atténuateur optique variable 510.
Les autres ports P2 à P4 du coupleur MRL 104 sont optiquement connectés à des réflecteurs optiques 511 à 513 par l'intermédiaire d'atténuateurs optiques variables 514 à 516, respectivement. Par conséquent, les signaux optiques respectifs apparaissant sur les ports P2 à P4 sont réfléchis par les réflecteurs optiques 511 à 513 et leurs intensités lumineuses sont réglées par les atténuateurs optiques variables 514 à 516. Par conséquent, les signaux optiques d'entrée sur les longueurs d'onde x2 à B4 sont transmis de la fibre optique 101 à la fibre optique 102 tandis que l'intensité lumineuse sur chaque longueur d'onde est réglée par l'atténuateur optique variable correspondant.
Comme décrit ci-dessus, un circuit d'insertion/ extraction de longueur d'onde selon la présente invention a une configuration de circuit simplifiée comprenant un élément de guide d'ondes tel qu'un circulateur, un coupleur MRL et des réflecteurs. Il est possible d'extraire et d'insérer facilement plus d'une longueur d'onde en connectant un émetteur-récepteur optique au port correspondant du coupleur MRL 104 au lieu du réflecteur optique.
En outre, un circuit d'insertion/extraction de longueur d'onde tel que représenté sur les figures 1 à 5 peut être utilisé dans une application à réseau MRL quelconque. Par conséquent, un système de réseau MRL peut être formé en intercalant au moins un circuit d'insertion/extraction de longueur d'onde selon la présente invention sur une ligne de transmission optique.
Nouvelle aoohcatlon thérapeutlque d'un dérlvé de la thinvlcvclohexvlamme La présente invention concerne l'utilisation d'une thiénylcyclohexylamine, seule ou en association avec d'autres substances à activité pharmaceutique, pour la préparation d'un médicament destiné à limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. L'invention concerne également un produit comprenant une thiénylcyclohexylamine et au moins une substance anticholinergique, anticonvulsivante ou Ttactivatrice des cholinestérases, et une composition pharmaceutique le contenant. Ce produit est particulièrement intéressant également pour son activité à limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques.
La famille des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques comprend les produits tels que les organophosphorés que l'on peut trouver, par exemple, dans les insecticides ou pesticides à usage ménager ou industriel, mais également dans les gaz de combat, comme le soman, le savin, le tabun ou le VX. Parmi les thérapies existantes telles que la polymédication pour lutter contre l'intoxication de tels composés, aucune ne prévirent totalement l'apparition de séquelles neuropathologiques.
L'invention a pour objet l'utilisation de la thiénylcyclohexylamine répondant à la formule 2-méthyl-l-(l-pipéridinyl)-l-(2-thiényl) cyclohexane, pour la préparation d'un médicament destiné à limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques chez le primate et notamment chez l'homme. Elle peut être utilisée seule ou en association avec d'autres substances à activité pharmaceutique susceptible de limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques.
La thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, est décrite dans le brevet EP 396734. Compte tenu de l'existence de 2 carbones asymétriques, cette thiénylcyclohexylamine peut être sous forme racémique, de diastéréoisomères ou d'énantiomères substantiellement purs.
De manière générale, le produit dispersant peut être constitué par un polymère de poids moléculaire inférieur à 5000.
On peut également envisager l'utilisation de produits dispersants différents des polymères qui ont été décrits ci-dessus, dans la mesure où ces produits dispersants ne renferment ni soufre ni halogène en proportion inacceptable.
L'action mécanique sur la couche déposée mise en contact avec le liquide dispersant de nettoyage peut être réalisée par des moyens différents d'une brosse ou d'un jet de liquide dispersant de nettoyage.
L'invention s'applique au nettoyage de toute couche déposée dans un circuit ou à l'intérieur d'un composant d'une centrale nucléaire. En particulier, le procédé peut être utilisé pour enlever des dépôts qui ne sont pas constitués principalement par des oxydes de fer, la nature chimique des dépôts n'ayant pas une influence directe sur la possibilité de mise en oeuvre du procédé.
PROCÉDÉ DE CERTIFICATION D'UN CUMUL DANS UN LECTEUR.
La présente invention a pour objet un procédé de certification d'un cumul dans un lecteur, ou terminal, quand ce lecteur est utilisé avec un support portable de paiement (par exemple, de préférence une carte à puce). Dans la présente demande le terme de carte à puce recouvre le terme de support portable de circuit électronique.
Par cumul, on visera principalement des opérations arithmétiques monétaires (ou portant sur des unités), la certification servant à prévenir les fraudes. Mais sous le vocable "cumul" on pourra tout aussi bien représenter des informations de nature quelconque, la certification servant à assurer l'authentification de ces informations quelconques. Bien que par la suite on parlera en permanence de cumul, pour la simplicité de la compréhension, il va de soi qu'on pourra appliquer l'invention à des certifications d'informations quelconques et en particulier simplement à la certification du montant d'une transaction.
Dans l'état de la technique, le paiement par objet portable, en pratique par carte à puce, s'effectue de la manière suivante. Un acheteur, au moment du paiement de son achat, place sa carte à puce de paiement bancaire dans un lecteur de carte à puce qui est détenu par un vendeur. Celui-ci provoque ensuite un paiement dont l'apparence, pour l'acheteur, est matérialisée par l'apparition sur l'écran du lecteur du montant de son achat et par une invitation pour cet acheteur à composer le code secret de sa carte. Lorsqu'il a composé et validé le code secret de sa carte, l'achat est terminé. En fait, au moment de cette terminaison, le lecteur effectue deux types d'opération.
Premièrement, il mémorise les coordonnées bancaires de l'acheteur (il les a prélevé au passage dans la carte de l'acheteur) en correspondance avec le montant de l'achat ainsi qu'avec d'autres données accessoires (la date, l'heure, les références du lecteur ou du vendeur). Par ailleurs, le lecteur effectue une opération de cumul consistant à additionner le montant de l'achat effectué par cet acheteur à un cumul des achats effectués par les acheteurs précédents qui se sont présentés dans le magasin, et qui ont été servis par le même lecteur. Les deux informations sont donc d'une part une information nécessaire au débit du compte courant de l'acheteur et d'autre part au crédit du compte courant du vendeur.
Le cumul ainsi enregistré a donc une valeur financière et il convient de protéger l'intégrité de cette valeur des manipulations frauduleuses. Pour y arriver, il est connu de munir le lecteur d'un circuit de sécurité, dit SAM (Secure Application Module), qui effectue une certification des cumuls. La certification revient à calculer un certificat, une chaîne de caractères binaires, qui est un résultat d'une opération de chiffrement du cumul avec un algorithme de chiffrement. L'algorithme de chiffrement est en général du type DES, du type RSA, ou autre. La particularité des algorithmes de ce type est de pouvoir être paramétrés par une clé de chiffrement. La clé de chiffrement est normalement secrète: elle est mémorisée à l'intérieur du circuit SAM. La complexité des algorithmes de chiffrement cités est telle que l'on admet, aujourd'hui, que ces algorithmes ne sont pas cassables, c'est-à-dire qu'il n'est pas possible de retrouver la clé de chiffrement à partir de la connaissance d'un montant, connu, qui a été chiffré et dont on connaît le résultat de chiffrement. Le résultat du chiffrement est justement ce certificat.
Autrement dit, on a remplacé avec ce système de sécurité une information sensible, l'information de cumul, par un couple d'informations protégées, le cumul associé à son certificat.
En fin de journée, au moment où il fait sa caisse, le vendeur connecte son lecteur à un service central: en général le service central de sa banque. Il transmet alors à sa banque les informations relatives aux acheteurs et les informations qui le concernent: le cumul des achats effectués dans son magasin et le certificat attaché à ce cumul. Dans le service central les vérifications sont faites, notamment en utilisant le certificat, et le montant du cumul est porté au crédit du compte du vendeur.
Pour l'opérateur central, le temps aidant, le nombre de lecteurs qui se connectent chaque soir peut être très important. Il peut atteindre plusieurs millions.
Actuellement, pour des raisons de prudence bien compréhensibles, il est admis qu'il est nécessaire de changer, dans tous les lecteurs, les circuits SAM périodiquement. Par exemple, la périodicité est de l'ordre de deux ou trois ans. Cette opération est d'une part onéreuse et par ailleurs très délicate à mener, compte-tenu de ce qu'elle ne peut pas être effectuée partout en même temps, qu'elle est nécessaire, et qu'elle n'est de toute façon pas pratique.
D'une manière plus générale encore, si on remplace les cartes de paiement bancaire des clients par des cartes de type porte-monnaie électronique, le problème devient encore plus crucial. En effet, dans le cas de la carte, ou du support portable, porte-monnaie électronique, il n'y a plus d'identification d'un compte courant de client. Le porte-monnaie peut être anonyme et il contient des unités monétaires. Il n'y a donc par ailleurs pas de possibilité de vérification de ce fait.
Dans ce dernier cas comme dans le premier cas, on envisage que des fraudeurs habiles pourront être tentés de falsifier ou de chercher à savoir, par des opérations très fréquentes, quel est le secret du circuit SAM.
On a aussi constaté que l'utilisation de filières dont la face supérieure est horizontale est également limitée par le problème d'accrochage du ménisque sur toute la section de cette face. Le contrôle de forme devient là encore déficient, et rend le procédé de démarrage horizontal non viable.