INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le vecteur pSPORTl-GUS a été utilisé comme contrôle négatif.
Ces différentes constructions ont été transférées par bombardement selon le protocole décrit par FAUQUET et al. (Proc. Third. Int. Rice Genet. Symp., Ed. G.S. Khush, 153-165,1996), dans de jeunes cals embryogènes de riz (var. japonica IRAT 349) dérivant de la prolifération du scutellum de l'embryon mature. Toutes les constructions testées ont été co-transférées avec le vecteur pILTAB227 (FAUQUET et al., 1997), qui confère la résistance à l'hygromycine et qui permet la sélection des cellules transformées.
Un mélange du vecteur portant la construction à tester, et du vecteur pILTAB227 (rapport molaire : vecteur à tester/pILTAB227 = 4/1) est utilisé pour enrober des microparticules d'or, à raison de 5 ug d'ADN total (3 ug d'ADN à tester + 2 ug de pILTAB227) à une concentration de 1 ug/ul, pour 3 mg d'un mélange en quantité égale de microparticules d'or de diamètres 1,0 um et 1,6 um, en suspension dans 50 ul d'eau distillée.
Le bombardement est effectué à l'aide d'un canon à particules PDS-1000/He (PARTICULE DELIVERY SYSTEM, BIORAD).
Les cals embryogènes bombardés sont ensuite criblés sur un milieu de sélection contenant de l'hygromycine. Les cals résistants à l'hygromycine sont sélectionnés et placés sur milieu de régénération
dépourvu d'hygromycine. Les plants régénérés (génération FO) ont ensuite été transférés dans des pots, et, après acclimatation en phytotron, sont cultivés en serre.
L'expression du gène gus a été recherchée dans les organes végétatifs et dans les graines des riz des générations TO et Tl. Seules les plantes fertiles et présentant un phénotype normal, ont été retenues pour l'analyse. L'intégration du transgène dans les plantes analysées a été vérifiée par ACP et transfert de Southern.
La détection de l'activité -glucuronidase a été effectuée par test histochimique, en détectant la coloration bleue résultant de l'hydrolyse de l'acide 5-bromo-4-chloro-3-indolyl P-D-glucuronique (X-GLU), et sa quantification a été effectuée par test fluorométrique, en mesurant la 4-méthylumbélliférone (MU) formée à partir d'acide 4-méthylumbélliréfyl ssglucuronique, selon les protocoles décrits par JEFFERSON et al. (Plant Mol. Biol. Report 5,387-405, 1987).
1. Expression du gène gus dans les organes végétatifs L'analyse a été effectuée sur les racines, les chaumes, et les feuilles.
Dans le cas des plants de riz non-transformés, ou de ceux transformés avec le vecteur pSPORTl-GUS, l'analyse histochimique ne révèle pas d'activité GUS, et les mesures fluorimétriques ne font apparaître qu'une activité très faible voire nulle.
Dans le cas des plants de riz transformés avec le vecteur pUGCI, on observe une activité GUS élevée (supérieure à 500 pmol MU/min/mg de protéine) dans tous les organes végétatifs testés.
Dans le cas des plants de riz transformés avec les constructions P1, P2, P3, P4 ou P5, on n'observe aucune coloration dans les organes végétatifs incubés en présence de X-GLU, et l'activité GUS mesurée par fluorométrie n'est pas significativement différente de
celles mesurée pour les plantes transformées avec le vecteur pSPORTl-GUS ou les plantes non transformées. Ces résultats montrent que le promoteur du gène TaTrxh2 ne permet pas l'expression du gène gus dans les organes végétatifs.
On peut imaginer un mode de réalisation du dispositif selon l'invention dans lequel l'actionneur pneumatique 27 serait alimenté en fluide moteur de pincement par une source indépendante du circuit des suspensions mais où la pression du fluide serait calculée en fonction de paramètres relatifs à ce circuit.
On peut aussi imaginer d'utiliser une autre énergie ou un autre fluide que l'air comprimé comme moyen moteur de pincement par exemple un fluide hydraulique ou une énergie électrique.
De nombreuses autres variantes sont envisageables. On peut par exemple introduire un réglage supplémentaire de la pression du fluide de pincement piloté par l'utilisateur ou bien dépendant de caractéristiques particulières instantanées des paramètres de roulage et notamment de l'amplitude des lacets en plus des valeurs de la vitesse.
La loi de l'effort de pincement peut être telle que l'intensité de la force appliquée soit inversement proportionnelle à l'écart angulaire par rapport à la direction d'alignement de l'axe longitudinal du véhicule à moteur et celui de la remorque.
Bien entendu, dans ce cas, il s'avère préférable que cette force n'entre pas en action dans les virages pour laisser le timon totalement libre en mouvement.
A cet effet, on peut imaginer une forme de réalisation selon laquelle l'épaisseur de la piste d'amortissement 4 est variable, par exemple plus forte dans sa partie centrale pour diminuer vers ses extrémités. L'alternative inverse à savoir une épaisseur plus faible au centre peut également être utilisée.
Diverses variantes constructives et technologiques peuvent également être imaginées pour la réalisation de la piste d'amortissement 4, du dispositif de friction 17 et du montage de l'ensemble au niveau de l'extrémité avant 16 du timon 2.
On peut envisager en particulier de constituer un tout mécanique fonctionnel sous la forme d'un bloc constructif unique selon lequel sont rassemblés au niveau de l'extrémité avant 16 du timon 2, la piste 4 d'amortissement et ses prolongations 5 et 6 terminées chacune par une articulation de liaison 9 et 10, ou une liaison directe de fixation et le dispositif de friction 17 fixé ou à fixer sur l'extrémité avant 16 du timon 2.
Selon une variante additionnelle, les articulations de liaison 9 et 10 sont réunies entre elles par une traverse de liaison (non représentée) qui porte des moyens de fixation, par exemple amovibles, sur une partie fixe à l'arrière du véhicule à moteur.
Ainsi, en prévoyant une fixation amovible de cette traverse de liaison avec le châssis du véhicule à moteur ou avec une plaque solidaire de ce châssis, on peut monter, attacher, accrocher, en appui ou autrement relié, le dispositif selon l'invention déjà monté sur l'extrémité avant du timon à l'arrière du véhicule à moteur à chaque fois et en même temps que l'on accouple la remorque.
En ce qui concerne la lame en arc de cercle constituant sur une partie de sa longueur la piste d'amortissement 4, celle-ci présentera de préférence les caractéristiques suivantes.
Le rayon de l'arc de cercle est choisi techniquement le plus grand possible procurant ainsi les avantages d'une force de friction moindre pour un même couple d'amortissement. Cette moindre force de friction permet de diminuer l'usure des surfaces de friction engendrant de plus faibles frais de maintenance et prolongeant la période d'efficacité du dispositif de friction. Des considérations relatives à l'esthétique et à la position du dispositif de friction sur le timon peuvent également entrer en ligne de compte dans le choix de ce rayon.
De préférence, la lame est d'épaisseur réduite pour lui conférer plus de souplesse et donc d'aptitude à la déformation par exemple par torsion.
Par ailleurs, la lame doit pouvoir débattre radialement, c'est-à-dire pouvoir se déplacer longitudinalement par rapport au timon 2 lors des ruptures de pente de la route et occuper des positions éloignées ou rapprochées correspondant aux pentes montantes ou descendantes.
Ceci peut se traduire par de plus grandes dimensions longitudinales des mâchoires du dispositif de friction 17. Le dispositif par exemple pneumatique d'amortissement des mouvements de lacet selon l'invention forme un ensemble de moyens apportant une sécurité supplémentaire en cas de rupture d'attelage au niveau du crochet d'attelage.
En effet, si la liaison mécanique est rompue au niveau du crochet d'attelage, la piste curviligne d'amortissement 4 dont le support est monté pivotant à l'arrière du véhicule moteur, assure momentanément la liaison mécanique entre le véhicule à moteur et la remorque.
EXEMPLE 6 : de l'activité finale des promoteurs inductibles.
6. 1. Construction d'une cassette d'expression inductible comprenant l'intron de hEF1 a. Construction du plasmide Jx10AS-CMV-EF-pGL3.
Un fragment d'ADN, contenant le premier intron du gène codant pour hEF1 a (de la position +16 à la position +984 par rapport au site d'initiation de la transcription ; numéro d'accès à Genbank : a été amplifié par ACP en utilisant les oligonucléotides 25RDA35 (5' AGT CAC TAG TAA GCT TTT TGC CGC CAG AAC ACA GG 3' ; SEQ ID NO: 14) et 26RDA36 (5' AGT CAC TAG TCC ATG GCT GCC CAG TGC CTC ACG ACC 3' ; SEQ ID NO: 15) comme amorces.
Ce fragment a été digéré par Hindlll et Ncol puis a été clone dans le plasmide Jx10AS-CMV-pGL3 préalablement digéré par Hindlll et Ncol pour obtenir le plasmide Jx10AS-CMV-EF-pGL3. Une représentation schématique du plasmide Jx10AS-CMV-EF-pGL3 est présentée dans la figure 14.
6. 2. Activité du plasmide Jx10AS-CMV-EF-pGL3.
Dans le but d'augmenter l'activité finale du système, une séquence enhancer, située dans le premier intron du gène hEF1a, a été clonée au voisinage du promoteur inductible. Les résultats présentés dans la figure 15 montrent que la présence de la région enhancer augmente l'activité induite du système et ceci quelle que soit la quantité de régulateur transcriptionnel utilisée.
EXEMPLE 7 : de plasmides comprenant à la fois une cassette d'expression du régulateur transcriptionnel et une cassette d'expression inductible.
7. 1. Plasmide Jx5AS-TK-luc-hPPARg2.
Le plasmide pSG5-hPPARa(Koz) a été digéré par MM et Scal pour isoler le fragment Mlul-Scal de 1229 pb contenant la région 3' de l'ADN complémentaire de hPPARa. Ce fragment a été inséré dans le plasmide pSL301 préalablement digéré par Mlul et Smal pour donner le plasmide pSL-3'hPPARa.
Le plasmide pSG5-hPPARa(Koz) a été digéré par Sali et Mlul pour isoler le fragment Sall-Mlul de 1406 pb contenant le promoteur précoce du virus SV40 et la région 5' de l'ADN complémentaire de hPPARa. Ce fragment a été inséré dans le plasmide pSL-3'hPPARa préalablement digéré par Xhol et Mlul pour donner le plasmide pSL-hPPARa.
Le plasmide pSL-hPPARa a été digéré par Spel et Sali pour isoler le fragment Spel-Sall de 2664 pb contenant le promoteur précoce du virus SV40 et l'ADN complémentaire de hPPARa. Ce fragment a été inséré dans le plasmide pBluescript Il SK+ préalablement digéré par Spel et Sali pour donner le plasmide pBS-hPPARa.
Le plasmide pSG5-hPPARg2 a été digéré par Avril et Sacl pour isoler le fragment Avrll-Sacl de 2070 pb, noté C, contenant la région 5' de l'ADN complémentaire de hPPARg2. Un fragment d'ADN, noté D, contenant la région 3' de l'ADN complémentaire de hPPARg2, a été amplifié par ACP en utilisant le plasmide pSG5-hPPARg2 comme matrice et les oligonucléotides 10RDA21 (5' CAG GTT TGC TGA ATG TGA AGC 3' ; SEQ ID NO: 16) et 11 RDA40 (5' TGA CGT GTC GAC CTA GTA CAA GTC CTT GTA GAT CTC CTG C 3' ; SEQ ID NO: 17) comme amorces. Le fragment C et le fragment D, digéré par Sacl et Sali, ont été clonés ensemble dans le plasmide pBS-hPPARa préalablement digéré par Avril et Sali pour obtenir le plasmide pBS-hPPARg2.
Le plasmide Jx5AS-TK-pGL3 a été digéré par Kpnl et Sali pour isoler le fragment Kpnl-Sall de 2324 pb contenant le gène luc+ sous contrôle d'un promoteur inductible. Ce fragment a été inséré dans le plasmide pBS-hPPARg2 préalablement digéré par Kpnl et Sall pour donner le plasmide Jx5AS-TK-luchPPARg2. Une représentation schématique du plasmide Jx5AS-TK-luc-hPPARg2 est présentée dans la figure 16.
7. 2. Plasmide SV-g2-J10-C-pGL3.
Le plasmide pBS-hPPARg2 a été digéré par Notl et Sali pour isoler le fragment Notl-Sall de 2622 pb, noté E, contenant l'ADN complémentaire de hPPARg2 sous contrôle du promoteur précoce de SV40. Un fragment d'ADN, noté F, contenant le site de polyadénylation du virus SV40, a été amplifié par ACP en utilisant le plasmide FTK-pGL3 comme matrice et les oligonucléotides 18RDA31 (5' AGT CGT CGA CGC TTC GAG CAG ACA TGA TAA G 3' ; SEQ ID NO: 18) et 19RDA35 (5' AGT CGC TAG CGA CGG ATC CTT ATC GAT TTT ACC AC 3' ; SEQ ID NO: 19) comme amorces. Le fragment E et le fragment F, digéré par Sali et Nhel, ont été clonés ensemble dans le plasmide Jx10AS-CMV-pGL3 préalablement digéré par Notl et Nhel pour obtenir le plasmide SV-g2-J10-C-pGL3.
Une représentation schématique du plasmide SV-g2-J10-C-pGL3 est présentée dans la figure 17.
Dans ce mode de réalisation préféré, le couvercle de chaîne 91 a une structure d-un seul tenant, constituée d'une partie de couvercle de pignon à chaîne d'entraînement 92A devant couvrir principalement le pignon à chaîne d'entraînement 84, une partie de couvercle de chaîne 92B, pour couvrir principalement la partie étirée de la chaîne 82, et une partie de couvercle de pignon à chaîne de pédalier 92C pour couvrir principalement une moitié supérieure du pignon à chaîne de pédalier 80. Avec cette structure, la chaîne et chaque pignon à chaîne monté sur une bicyclette à assistance motorisée ainsi configurée (modifiée) pour introduire la puissance d'assistance dans la ligne de transmission par chaîne, peuvent être couverts de façon simple et fiable, sans avoir à augmenter le nombre de pièces.
Cependant, dans la structure de couverture ci-dessus, dans laquelle le couvercle de chaîne unique 91 couvre la totalité des éléments que sont la chaîne 82 et les pignons à chaîne 80 et 84, il y a risque que la forme du couvercle à chaîne 91 apparaisse étrange, différente d'une forme familière classique, donnant un mauvais aspect.
Pour résoudre ce problème, la partie de couvercle de pignon à chaîne d'entraînement 92A devant couvrir le pignon à chaîne d'entraînement 84 est réalisée sous la forme d'une partie circulaire qui est d'une coloration spéciale et dont on a rendu la surface rugueuse pour qu'elle corresponde à la forme extérieure du pignon à chaîne d'entraînement 84, et cette partie circulaire est utilisée efficacement comme un type d'ornement, améliorant de cette manière le mauvais aspect mentionné ci-dessus. La FIG. 4 est une vue en perspective de la batterie 2, et la FIG. 5 est une vue en élévation avant de la batterie 2. La batterie 2 comporte une pluralité de cellules de batterie (non représentées) et un réceptacle à batterie 26 logeant les cellules de batterie. Le réceptacle à batterie 26 est constitué de deux composants de réceptacle 26R et 26L tournés chacun l'un vers l'autre sur une surface 27 qui s'étend dans la direction longitudinale de la batterie 2. Les composants de réceptacle 26R et 26L sont symétriques par rapport à la surface 27.
Une paires de bornes 28 et 29 reliées respectivement à une anode et à une cathode de l'unité des cellules de batterie sont exposées à la surface avant de la batterie 2, de manière à être symétriques par rapport à la surface 27. La surface supérieure du réceptacle à batterie 26, près de sa surface d'extrémité avant, est dotée d'une encoche 30 destinée à mettre en prise un dispositif de verrouillage prévu dans une fente 4 décrite ci-après. En outre, la surface inférieure du réceptacle à batterie 26 sur les côtés opposés est constituée de deux nervures 41 parallèles qui s'étendent dans la direction longitudinale de la batterie 2, de manière à assurer à la fois la possibilité de coulissement de la batterie 2 sur une paroi intérieure de la forme 4, l'insertion de la batterie 2 dans la f ente 4, et la stabilité de cette batterie 2, une fois insérée dans la fente 4.
Les composants de batterie 26R et 26L peuvent être intégrés ensemble à l'aide de boulons (non représenté) mis en prise dans des trous taraudés 42 et 43. Chaque surface latérale du réceptacle à batterie 26 est dotée de gorges 44 permettant de faciliter la manipulation et le transport de la batterie 2, pour contribuer de cette manière à améliorer l'opération de saisie. En outre, la taille du réceptacle à batterie 26 a une section transversale ayant ce que l'on appelle la taille de la paume d"une main, pour qu'un opérateur puisse aisément saisir la batterie 2. Par exemple, comme représenté sur la FIG. 5, la hauteur h est fixée à environ 80 mm et la largeur d est fixée à environ 55 mm, correspondant à la taille de la paume.
Le réceptacle à batterie 26 est, en outre, doté d'un trou traversant 45 qui s'étend sur la largeur. Le trou traversant 45 est utilisé pour faire passer un fil ou une corde en tant que partie de moyens de verrouillage de batterie à travers lui, lors du montage de la batterie 2 sur le support à batterie 87. En outre, une cavité 46 est formée sur l'angle arrière supérieur du réceptacle à batterie 26, tel qu'observé sur la FIG. 4. La cavité 46 sert de prise à utiliser lors de la fixation de la batterie 2 sur le cadre de bicyclette, après le montage de la batterie 2 sur le support à batterie 87.
La FIG. 6 est une vue en perspective du support à batterie 87, la FIG. 7 est une vue de côté du support à batterie 87 dans l'état dans lequel la batterie 2 n'est pas montée sur lui, et la FIG. 8 est une vue de côté du support à batterie 87 dans l'état dans lequel la batterie 2 est montée sur lui.
Le support à batterie 87 de ce mode de réalisation comprend une partie de plaque inférieure 871 pour recevoir la batterie 2, une partie de plaque arrière 872 s'étendant vers le haut depuis une surface latérale arrière de la partie de plaque inférieure 871, une paire de parties de plaque latérales droite et gauche 873 formées par découpage et pliage de parties latérales opposées de la partie de plaque arrière 872 près de son extrémité supérieure pour positionner la batterie 2 dans sa direction latérale, une paire de parties de premiers rebords droit et gauche 874 pliées en direction opposée à celles des parties de plaque latérales 873 pour maintenir le pilier de' selle 71 dans sa direction radiale, et une paire de deuxièmes partie de rebords droit et gauche 875 s'étendant depuis les surfaces latérales opposées de la partie de plaque inférieure 871, au delà de la partie de plaque arrière 872, pour maintenir le pilier de selle 71 dans sa direction radiale, en une position située au-dessus des premières parties de rebord 874. Le support, à batterie 87 est fixé sur le pilier de selle 71 par fixation des premier et deuxième rebords 874 et 875 sur les bossages 71A et 71B (voir FIG. 3) formés sur le pilier de selle 71 au moyen de boulons 95 et 96, respectivement.
Une boucle 88 est prévue sur le côté opposé de la partie de plaque inférieure 871 (sur le côté arrière lorsqu'on observe sur la FIG. 6), par rapport au pilier de selle 71 pour être supportée à pivotement sur les premières parties de rebord 874, par un arbre de pivotement latéral 93. Un anneau de blocage 89, sensiblement en forme de U, est supporté de ses extrémités opposées sur la boucle 88, en une position 92 décalée de l'arbre de pivotement 93. Une paire d'électrodes cylindriques circulaires 108 et 109 adaptées pour venir en contact électrique avec les bornes 28 et 29 de la batterie 2, respectivement, sont exposées à la surface supérieure de la partie de plaque inférieure 871.
Lors du montage de la batterie 2 dans le support à batterie 87, la surface d'extrémité de la batterie 2 à laquelle les bornes 28 et 29 sont formées est placée sur la partie de plaque inférieure 871 de manière que la batterie 2 soit positionnée par rapport au support à batterie 87, et les bornes 28 et 29 de la batterie 2 sont mises en contact électrique avec les électrodes 108 et 109 se trouvant sur la partie de plaque inférieure 871. Une unité d'alimentation 70, reliée aux électrodes 108 et 1091 est prévue sous la partie de plaque inférieure 871 pour alimenter en puissance, par une ligne d'alimentation 110, vers l'unité de puissance 86.
Comme représenté sur la FIG. 8, la batterie 2 est fixée de façon sure sur le pilier de selle 71 en commençant par mettre en prise l'anneau de blocage 89 avec le cran 46 creusé formé sur une partie d'extrémité supérieure de la batterie 2, tel que l'on voit sur la FIG. 8, puis, en tournant la boucle 88 autour de l'arbre de pivotement 93 depuis une position supérieure représentée sur la FIG. 7 à une position inférieure représentée sur la FIG. 8. En outre, une paire de trous 97 alignés sont formés dans les parois latérales opposées de la partie de plaque inférieure 871, si bien que, lorsque la batterie 2 est montée sur le support à batterie 97 comme représenté sur la FIG. 8, le trou traversant 45 du réceptacle à batterie 26 est aligné avec les trous 97. Comme représenté sur la FIG. 9 un fil de verrouillage 53 est laissé passé à travers les trous 97 du support à batterie 87 et le trou traversant 45 du support à batterie 26 et également laissé passé par la roue arrière 78, de manière à empêcher tout vol, non seulement de la bicyclette à assistance motorisée elle-même, mais également de la batterie 2.
La forme des électrodes 108 et 109, exposées à la surface supérieure de la partie de plaque inférieure 871, est donnée à titre uniquement illustratif et l'on peut adopter toute forme quelconque. Par exemple, les électrodes 118 et 119 représentées sur la FIG. 10 sont des électrodes plates d'usage général qui ont des spécifications similaires à celles d'une prise pour courant alternatif adaptée pour être montée dans une sortie de prise domestique pour un courant alternatif de tension 100 V.
La FIG. 11 est une vue de côté d'une bicyclette à assistance motorisée selon un deuxième mode de réalisation préféré de la présente invention. Sur la FIG. 11, les mêmes numéros de référence que ceux représentés sur la FIG. 1 désignent des parties identiques ou analogues.
Comme pour le premier mode de réalisation préféré représenté sur la FIG. 1, la bicyclette à assistance motorisée représentée sur la FIG. 11 a également une structure F/F telle que la batterie 2 est montée sur le côté avant (F) du pilier à batterie 71 et la puissance d'assistance, générée par l'unité de puissance 86, est introduite dans la ligne de transmission à chaine en une position située sur le côté avant (F) du pédalier 83. Le deuxième mode de réalisation préféré est légèrement différent du premier mode de réalisation préféré au niveau de la structure du cadre de bicyclette 67 et de la forme du couvercle à chaine 91.
La FIG. 12 est une vue de côté à plus grande échelle représentant un procédé de fixation de l'unité de puissance 86 sur le cadre de bicyclette 67 dans le deuxième mode de réalisation préféré, et la FIG. 13 est une vue de côté à plus grande échelle analogue, telle que représentée du côté arrière de la FIG. 11.
Egalement, dans ce mode de réalisation préféré, le cadre de - bicyclette 67 est' un cadre de bicyclette existant, qui est conçu et f abriqué . pour une bicyclette usuelle. C'est-à-dire que, comme représenté sur la FIG. 12, les pattes 35A et 35B sont fixées après coup sur le tube support 66 et le tube descendant 69 du cadre de bicyclette 67, respectivement. L'unité de puissance 86 est fixée en position et en attitude sur le cadre de bicyclette 87 par boulonnage des deux bossages 34A et 34B formés au niveau des espaces 33A et 33B parmi les trois espaces de formage de bossage 33A, 33B et 33C sur les pattes 35A et 35B, respectivement, de manière que le pignon à chaîne d'entraînement 84 s'engrène avec la chaîne 82 en une position se trouvant sur le côté avant du pédalier 83.
Dans la méthode préférée, les anticorps de la présente invention sont des anticorps monoclonaux. De tels anticorps monoclonaux peuvent être préparés en utilisant la technique d'hybridome. (Kôhler et al, Nature 256 :495 (1975) ; Kôhler et al, Eur. J. Immunol. 6 :511 (1976) ; Kôhler et al, Eur. J Immunol. 6 :292 (1976); Hammeling et al., in: Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas, Elsevier, N.Y., pp. 563-681 51981). En général, de telles méthodes impliquent d'immuniser l'animal (préférentiellement une souris) avec un polypeptide ou, mieux encore, avec une cellule exprimant le polypeptide. Ces cellules peuvent être mises en culture dans un milieu de culture tissulaire adéquat. Cependant, il est préferable de cultiver les cellules dans un milieu Eagle (Earle modifié) supplementé avec 10% de serum bovin foetal (inactivé à 56 C) et additionné d'environ 10 g Il d'acides aminés non essentiels, de 1000 U/ml de pénicilline et d'environ 100 g/ml de streptomycine.
Les splenocytes de ces souris sont extraits et fusionnés avec une lignée cellulaire de myelome adéquate. Cependant, il est préférable d'utiliser la lignée cellulaire de myelome parentale (SP20) disponible à l'ATCC. Après fusion, les cellules d'hybridomes résultantes sont