INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Au cours de l'élaboration de cette structure, on a déposé au verso de la feuille support 1' des petits volumes opaques 3'. Lesdits petits volumes opaques 3' se révèlent gênants à l'insolation et généralement disparaissent pendant celle-ci.
L'invention est également illustrée par les exemples 1 à 3 ci-après. On a montré dans les exemples 4 et 5, dits comparatifs, que l'introduction des petits volumes opaques à d'autres niveaux de la structure du film (que ceux préconisés dans le cadre de la présente invention) ne donnait pas satisfaction.
Exemple 1 Pre~palation et mise en place du cylindre d.'héliogravure On utilise un cylindre d'héliogravure recouvert de cuivre et d'une couche réserve photosensible. On insole ladite couche réserve photosensible avec un film transparent, présentant des points opaques, répartis d'une manière aléatoire. La surface de chacun desdits points est d'environ 900 pm2. Au total, lesdits points couvrent environ 10 % de la surface du film. L'insolation est mise en oeuvre dans des conditions telles qu'aucune partie de la couche réserve photosensible n'échappe à celle-ci.
Après développement et séchage, une morsure chimique à base de perchlorure de fer attaque et creuse le cuivre dans toutes les parties de ladite couche <RTI ID= mm d'épaisseur, en polyester revêtu au recto (sur sa face destinée à recevoir la couche photosensible) d'une sous-couche d'adhérence et au verso d'une couche anti-cintrage renfermant un agent anti-halo.
Impression d'un support de film en polyester On traite en continu, selon l'invention, une bobine d'un tel support de film. En déroulant la bobine, le fabricant (de films) effectue en continu un traitement corona de la face recto revêtue de la sous-couche d'adhérence, en vue de renforcer l'adhérence des petits volumes d'encre, puis dépose par impression lesdits petits volumes d'encre sur ladite face recto plus précisément sur ladite sous-couche d'adhérence.
L'impression se fait à la vitesse de 10 mètres à la minute (la bobine défilant entre le cylindre d'héliogravure et un rouleau presseur) de sorte que l'on obtient ensuite, dans un tunnel de séchage, disposé en aval du cylindre d'héliogravure un séchage complet de l'encre déposée sous forme de petits volumes opaques, répartis d'une manière aléatoire.
Pr.éparation. d'un film négatif allégé , - à partir dudit - support de film ira impriméx utilisation de celui-ci La face recto du support de film ainsi imprimée subit un nouveau traitement corona et est enduite d'une couche photosensible d'environ 5 llm d'épaisseur. Ladite couche photosensible renferme environ 50 % en poids de sels d'argent dans de la gélatine. Il s'agit d'un matériau commercialisé par la société Bergger (FR).
La bobine de film photosensible obtenue est séchée avec les précautions habituelles. Elle peut ensuite être recouverte, de façon connue en soi, d'une pellicule protectrice.
Cette bobine est découpée en films de 240 mm x 300 mm.
Les films obtenus sont du type de ceux schématisés sur la figure 2 annexée.
L'un de ces films est exposé de manière à présenter, après développement et fixage, des parties encrophiles transparentes représentant des traits, des textes à l'aplat et des images, en trame 120.
En examinant le film à la loupe, on observe qu'il renferme dans ses parties transparentes de milliers de petits points opaques.
Une plaque offset est réalisée en utilisant ledit film.
Ladite plaque négative est insolée avec ledit film. Elle est ensuite développée, rincée et séchée de manière conventionnelle. Les points opaques ont arrêté la lumière pendant l'insolation. Aux emplacements correspondants, il n'y a pas de couche encrophile ; celle-ci étant partie au développement.
Mise sur machine, ladite plaque procure à l'imprimeur les avantages reconnus des petites surfaces non encrophiles dans les parties encrophiles.
D' autres grands répertoires ont été plus récemment identifiés. I1 s'agit du répertoire en récepteurs NKR de type immunoglobuline et du répertoire en récepteurs NKR de type lectine. Les recepteurs NKR de type immunoglobuline comprennent les récepteurs KIR (Killer cell Inhibitory Receptor) tels que notamment les récepteurs p58.l, p58.2, p70. INH, pl40. INH. Les récepteurs NKR de type lectine comprennent les récepteurs inhibiteurs NKG2 tels que notamment les récepteurs NKG2A et NKG2B L'ensemble de ces récepteurs NKR sont à fonction inhibitrice. Des récepteurs qui leur sont hautement homologues, en particulier au niveau extracytoplasmique, assurent toutefois des fonctions activatrices, ou à tout le moins non inhibitrices : il s'agit des récepteurs KAR (Killer cell Activatory Receptor) homologues aux récepteurs KIR, et des récepteurs NKG2C, NKG2D, NKG2E et NKG2F homologues aux récepteurs NKG2A et NKG2 B Les récepteurs contreparties activatrices, ou à tout le moins non inhibitrices, de récepteurs inhibiteurs NKR sont ci-après désignés, par souci de fluidité, contreparties de NKR Les récepteurs NKR et les récepteurs contreparties de NKR sont naturellement exprimés par les cellules NK et par des sous-populations de cellules T. Plusieurs de ces récepteurs peuvent être exprimés par une même cellule. Tous ces récepteurs, qu'ils soient inhibiteurs (i.e. NKR) ou qu ils soient activateurs ou non inhibiteurs (î.e. contreparties de NKR), ont en commun d'avoir pour ligand des molécules qui ne sont pas dérivées d'antigène : les ligands des récepteurs NKR et des récepteurs contreparties de NKR sont des molécules du CMH de classe I.
La reconnaissance de son ligand par un récepteur NKR déclenche la transduction à la cellule d'un message visant à inhiber son activité, e.g. diminution ou arrêt de la cytolyse, de la sécrétion de cytokines, alors que la reconnaissance de son ligand par un récepteur contrepartie de NKR y induit un message activateur, ou à tout le moins non inhibiteur. A la résultante entre récepteurs NKR et récepteurs contreparties de NKR ainsi activés par leurs ligands, correspond un signal, globalement négatif ou positif, d'activation des cellules NK et/ou T qui les exp riment.
Les récepteurs NKR et leurs contreparties participent ainsi au contrôle, positif ou négatif, des réactions allogéniques d'un système immunitaire donné vis-à-vis de ce qu'il considère alors comme non-soi par exemple, des cellules cancéreuses ou infectées, ou bien encore des cellules de greffe ou transplantation allo- ou xénogénétique.
Les récepteurs NKR et leurs contreparties participent en effet aux réactions entre hôte et greffon lors d'une greffe (ou transplantation) de cellules, tissu ou organe qui présente < nt) un certain degré d'incompatibilité antigénique avec l'hôte. L'implication de récepteurs NKR et de leurs contreparties dans la tolérance envers des greffes incompatibles, et dans l'effet sélectif de lyse de cellules malignes parfois observé après greffe de moelle osseuse, ou effet GVL (Graft Versus Leukemia), a en effet été démontrée in vivo (cf. Cambiaggi et al. 1997, Proc. Natl. Acad. Sci.
USA, vol. 94, p. 8088-8092 ; Albi et al. 1996, Sood, vol.
87, n09, p. 3993-4000).
Or, les moyens pouvant actuellement être mis en oeuvre dans un contexte médical ne permettent pas de documenter l'ensemble des répertoires d'un patient, d'un organe, d'un tissu ou de cellules.
C'est ainsi qu'actuellement, seule la compatibilité des molécules HLA-A, HLA-B et HLA-DR du donneur et du receveur est vérifiée préalablement à une greffe ou transplantation allo- ou xéno-génique. Ces critères de compatibilité n' apparaissent toutefois pas comme suffisants. Des traitements immunosuppresseurs (par exemple, à base de cyclosporine) doivent compléter ces procédures de greffe ou transplantation de manière à inhiber le système immunitaire du patient. De tels traitements sont à hauts risques pour le patient qui est alors susceptible de développer des infections opportunistes. Ces traitements immunosuppresseurs doivent de plus être maintenus à un certain niveau pendant plusieurs années, et le patient doit alors résister aux effets délétères des médicaments. Finalement, la réussite de telles procédures de greffe ou transplantation reste incertaine. En effet, des rejets de greffe de la part du receveur, ou bien encore, dans le cas de greffes comprenant des cellules immuno-compétentes, des réactions du greffon contre l'hôte (effet GVH, Graft Versus Host) sont malgré tout observés. De telles réactions de rejet ou de GVH conduisent généralement à de très sévères lésions; actuellement, elles ne peuvent toutefois être totalement écartées, et donc prévenues.
Des effets bénéfiques inattendus de greffes allogéniques ont par ailleurs parfois été observés : des greffes allogéniques de moelle osseuse sur des patients leucémiques aplasiques ont parfois conduit à un effet thérapeutique anti-tumoral par lyse des cellules malignes du receveur et préservation de ses cellules saines. Cet effet thérapeutique sélectif, dans lequel sont impliquées les cellules NK et T, est désigné par GVL (Graft Versus Leukemia). Potentiellement, une greffe (ou une transplantation) de tissu hématopoïétique en général, et de moelle osseuse en particulier, peut conduire à un effet thérapeutique dans le cadre de malignités hématologiques telles qu'une leucémie, par lyse sélective de celles des cellules du receveur qui ne présentent plus les antigènes d'histocompatibilité présentés par les cellules saines. Les moyens actuellement disponibles pour le milieu médical ne permettent toutefois pas de prédire si l'organe ou le tissu considéré exercera un effet sélectif GVL pour le receveur considéré. en que connu, l'effet sélectif GVL ne peut donc actuellement être mis à profit dans le cadre d'une thérapie anti-cancéreuse.
Les moyens actuellement développés dans le cadre de recherches expérimentales afin de documenter les différents répertoires de cellules humaines ou animales ne permettent par ailleurs pas de documenter précisément le répertoire en récepteurs NKR et en récepteurs contreparties de NKR l'identité précise de chaque récepteur NKR ou contrepartie de NKR ne peut être déterminée. Du fait de la forte homologie, en particulier au niveau extracytoplasmique, entre un récepteur NKR et un récepteur contrepartie de ce NKR (e.g. jusqu'à 96% d'homologie entre KIR et KAR), l'utilisation d'anticorps ne permet en effet souvent pas de discriminer entre des NKR qui sont inhibiteurs et leurs contreparties à fonctions activatrices, ou à tout le moins non inhibitrices. Les amorces oligonucléotidiques actuellement disponibles ne permettent quant à elles pas la mise en oeuvre d'une amplification en chaîne par polymérase capable de discriminer entre par exemple un NKR p58. 1 et un NKR p58. 2, ou entre un NKR p70. INH et un NKR p140. INM.
Finalement, pour documenter précisément le répertoire en immunorécepteurs NKR et en leurs contreparties, il faut actuellement avoir recours après une étape de purification des récepteurs visés (e.g. par FACScan), à une étape de séquençage nucléotidique. La documentation du répertoire NKR /contreparties de NKR n'est donc actuellement pas réalisable en routine dans un contexte de type médical. Le niveau de stimulation et d'inhibition des programmes d'activation des cellules NK et T, et donc le potentiel de résistance d'un individu vis-à-vis du développement d'infections microbiennes ou parasitaires, de maladies auto-immunes, ou bien encore de cellules malignes, ne peut donc être mesuré. Il résulte également de cette absence de moyens adaptés pour la documentation des répertoi res NKR/contreparties de NKR que les effets sélectifs de type GVL ne peuvent être utilisés en thérapie, et que les réactions GVH ou de rejets lors de greffes ou de transplantations allo- ou xéno-géniques ne peuvent être complètement écartées.
La présente invention propose donc des moyens permettant de documenter, pour un échantillon biologique donné, les répertoires en immunorécepteurs NKR et en immunorécepteurs contreparties activatrices ou à tout le moins non inhibitrices de récepteurs NKR Ces moyens permettent notamment de distinguer aisément entre un récepteur NKR et sa contrepartie activatrice ou non inhibitrice, ainsi que de distinguer entre différents récepteurs NKR, ou entre différentes contreparties de NKR Elle vise également les applications biologiques, et en particulier médicales et vétérinaires, de ces moyens.
Les moyens selon l'invention présentent notamment 1' avantage d'être aisément utilisables dans un contexte médical ou vétérinaire, par exemple en hôpital ou clinique.
La présente invention a pour objet une méthode in vitro de documentation d'un répertoire en immunorécepteur(s) NKR comprenant notamment les récepteurs KIR p58.l, p58.2, p70.INH, pl40.INH, et les récepteurs NKG2A et NKG2B et/ou d'un répertoire en immunorécepteur(s) contrepartie(s) de NKR, comprenant notamment les récepteurs KAR p50.l, p50.2, p70.ACT, pl40.ACT, et les récepteurs NKG2C, NKG2D, NKG2E, NKG2F, ces immunorécepteurs étant ci-après désigné(s) récepteur(s) cible(s), caractérisée en ce qu'elle comprend i. l'utilisation d'au moins une paire d'oligonucléotides, l'un étant désigné oligonucléotide 3' et l'autre oligonucléotide 5', les oligonucléotides 3' et 5' d'une même dite paire étant tous deux capables, dans des conditions d'hybridation correspondant à une incubation pendant 1 min dans un tampon [T ris -HCl 20mM pH8,4; KCl 50mM; MgCl2 2,5mM] à une température comprise entre 50"C et 650C environ, de s'hybrider à l'ADN ou à l'ADNc d'un récepteur cible NKR, ou contrepartie de NKR, mais ne s'hybridant pas, dans les mêmes conditions d'hybridation, avec l'ADN ou l'ADNc d'un récepteur contrepartie de NKR, ou respectivement d' un récepteur NKR, contrepartie fonctionnelle dudit récepteur cible, ii. la mise en contact de populations ADN ou ADNc d'un échantillon biologique d'origine humaine ou animale pour lequel on souhaite documenter le répertoire en immunorécepteur(s) cible(s), avec un excès d'au moins une paire d'oligonucléotides 3' et 5' selon i. dans des conditions favorables à l'hybridation de cette paire oligonucléotides 3' et 5' sur les ADN ou sur les ADNc de l'échantillon biologique, et iii. la détection des hybrides éventuellement formés entre ces ADN ou ADNc et la ou les paire(s) d'oligonucléotides 3' et 5'.
Par contrepartie fonctionnelle d'un récepteur, nous entendons dans la présente demande un récepteur à structure homologue, en particulier au niveau extracytoplasmique, mais à fonction différente : par exemple, une contrepartie fonctionnelle du récepteur NKR p58.l est le récepteur contrepartie de NKR p50.l, et réciproquement; de même le récepteur NKR p58.2 et le récepteur contrepartie de NKR p50.2 sont l'un pour l'autre des contreparties fonctionnelles.
La présente méthode permet donc notamment de distinguer un récepteur NKR (ou contrepartie de NKR) d'un récepteur contrepartie fonctionnelle de ce récepteur.
Cette distribution est effectuée à partir des différents conditionnements de volume et dimensions variables à l'aide de moyens matériels et équipements qui sont intégrés dans l'installation automatisée telle que définie par l'invention.
Dans la suite de la description, on va décrire une installation dans une mise en oeuvre avantageuse permettant le traitement et la sélection et distribution de différents types de produits sous diverses formes de conditionnements, ladite installation étant commandée par le procédé de l'invention.
En se référant au choix particulier de l'installation et par là de sa mise en oeuvre, celle-ci est agencée de la manière suivante.
La dite installation comprend tout d'abord une première zone (Z1) qui est constituée par une cabine technique (1) agencée pour recevoir le terminal de commande et de paiement (2), l'automate programmable (3). Le terminal a un écran de visualisation (2a) et un clavier (2b) permettant la conception et la visualisation de la commande, ce terminal pouvant être place à l'extérieur de la cabine..
Près de la cabine, se trouvent les différents mécanismes qui sont susceptibles d'assurer les prélèvements et acheminement des différents composants, matériaux, ciments, agrégats, adjuvants (poudres ou liquides) qui seront susceptibles ensuite d'être prélevés, dosés, mélangés et mouillés en vue de la constitution du produit à obtenir, c'est-à-dire un mortier et/ou un béton, selon une unité de fabrication dénommée gâchée par les professionnels.
Ainsi, des zones de stockage de ces agrégats (At - A2 - A3) sont disposées autour d'un ensemble de moyens qui seront susceptibles de les recevoir après dosage en vue de leur mélange pour la réalisation du mortier et/ou du béton à cet effet. Dans un exemple non limitatif, les différentes zones de réception et de stockage des composants de ce produit sont disposées autour de la machine de fabrication du Produit. On a représenté par les zones Z2 et Z3 l'endroit de stockage en vrac du sable et des graviers et par une zone Z4 celle relative au stockage du ciment pur.
Avantageusement, la zone de stockage du ciment pur est définie par un silo (4) agencé de toute manière appropriée pour la réception et la distribution de ce matériau. Les zones Z2-Z3 de réception des agrégats sont avantageusement balayées radialement et angulairement par des moyens (5) qui sont susceptibles de prélever des quantités d'agrégats en vue de les transporter et les acheminer vers la machine de traitement (6), de dosage et de mélange en vue de la fabrication du produit final à obtenir.
Avantageusement, le prélèvement de ces agrégats peut s'effectuer par des chaînes (Sa) sans fin, racleuses comprenant une pluralité de godets (5b), ces chaînes étant conformées pour prélever et translater en élévation les différentes doses d'agrégats prélevés vers des moyens (7) de mesure et de contrôle du dosage des agrégats prélevés en vue de leur distribution dans la machine de fabrication (6) du produit, celle-ci étant un appareil malaxeur.
Dans une mise en oeuvre non limitative, les chaînes de prélèvement (Sa) sont constituées d'une structure support (5c) conformée par exemple en présentant des moyens (5d) dans la partie basse en regard du sol qui permettent le roulement ou déplacement angulaire de la chaîne. Chacune des structures porteuses support des godets racleurs est fixée à un bâti (8) vertical de grande hauteur supportant les moyens (7) assurant le dosage, le contrôle des composants et la machine de fabrication (6) du produit. Dans une mise en oeuvre avantageuse, lesdites chaînes racleuses sont susceptibles d'être déplacées radialement sur environ 90 degrés afin de pouvoir balayer les zones Z2 ou Z3 de stockage des agrégats.
Le silo (4) de stockage du ciment, et la ou les chaînes (Sa) racleuses en fonction du nombre de variétés d'agrégats, sont solidarisés de toute manière appropriée audit bâti (8) porteur de la machine de fabrication du produit. Le bâti comprend ainsi successivement de haut en bas des moyens permettant la réception, le dosage et l'écoulement des agrégats prélevés: sable, ciment, graviers et autres, dans une trémie (20) située au dessus de l'appareil malaxeur (6a) mis en fonctionnement par tout mécanisme bien connu.
Ledit bâti est constitué par exemple et non limitativement d'une structure comprenant des montants verticaux (8a) selon une configuration en carré, à titre d'exemple seulement, régulièrement entrecroisés, et réceptionnant les moyens (9) supports et d'articulation de la ou des chaînes racleuses (5a) ainsi que le tunnel d'arrivée (4a) et de distribution du ciment en provenance de son silo (4) de stockage. Les réceptacles de dosagesont prévus avantageusement dans une position intermédiaire à la trémie de distribution (20) 'arrivée dans le malaxeur (6a) et les chaînes racleuses (sua), ces réceptacles de dosage sont associés à des moyens de pesage permettant de valider les doses et quantités commandées.
Au-dessus de l'ensemble trémie/malaxeur, est également prévu un moyen (21au plusieurs moyens de distribution d'adjuvants (poudres ou liquides) de toute nature et pouvant être par exemple des agents retardateurs qui sont destinés à être introduits dans les doses de mortier et de béton en traitement. Ces adjuvants sont réceptionnés et stockés dans des réceptacles qui sont disposés en regard du bâti support précité. Ces réceptacles sont en nombre correspondant à celui des adjuvants pouvant être ajoutés au mélange précité. Les adjuvants peuvent être prélevés à partir de zones de stockage environnant la machine, et être transportés par des moyens appropriés vers l'ensemble trémie-malaxeur.
Le système de commande en fonctionnement du malaxeur est de tout type connu.
Selon une disposition importante de l'invention, les produits qui ont été introduits et mélangés dans le malaxeur sont ensuite évacués et acheminés par des moyens transporteurs en vue de leur conditionnement final en vue de leur livraison à l'utilisateur.
Différentes possibilités sont ainsi offertes dans le mode de conditionnement des produits distribués, le conditionnement pouvant être unique ou variable en fonction de la nature et de l'importance de l'installation et des formes de mise en oeuvre du procédé.
On a représenté aux dessins un exemple avantageux de mise en oeuvre de l'invention qui combine plusieurs possibilités de distribution des produits mélangés selon les besoins qui ont été définis et commandés par l'utilisateur. Dans cet exemple représenté aux dessins, il est prévu un premier dispositif convoyeur (10) de grande longueur établi sous forme d'un tapis roulant dont une première extrémité (lova) est disposée sous le malaxeur (6a) en regard de sa vanne d'ouverture, tandis que l'autre extrémité (lOb) est susceptible par exemple de déboucher dans une zone éloignée du bâti (8) à l'extérieur de l'installation en général pour permettre la distribution des produits collectés dans des bennes (11) préalablement posées au sol ou constituant une plate-forme d'un camion transporteur ou d'un camion malaxeur. Ce tapis convoyeur (10) de grande longueur est avantageusement susceptible d'être élevé par rapport à son extrémité initiale située à l'endroit du malaxeur pour permettre son élévation et la distribution par le haut des produits dans les bennes de camions ou similaires. Un moyen élévateur (11), du type vérin hydraulique, associé à des bras de liaison (22a) permet ainsi le relèvement dudit tapis sur une hauteur appropriée, cette hauteur pouvant être variable selon les besoins. Dans cette mise en oeuvre, le malaxeur est susceptible de présenter un couvercle à sa partie inférieure susceptible d'orienter et de distribuer le produit mélangé sur le tapis convoyeur.
L'invention a plus particulièrement pour objet une séquence d'ADN isolée représentée à la figure 2 choisie parmi la séquence eryBII correspondant à l'ORF7, la séquence eryCIII correspondant à l'ORF8 ou la séquence eryCII correspondant à l'oRF9 et les séquences qui hybrident et/ou présentent des homologies significatives avec cette séquence ou des fragments de celle-ci et ayant la même fonction.
L'invention a tout particulièrement pour objet la séquence d'ADN isolée eryCIII représentée à la figure 2 correspondant à l'ORF8 et codant pour une désosaminyltransférase.
La séquence eryBII correspondant à l'ORF7 code pour un polypeptide ayant 333 acides aminés, la séquence eryCIII correspondant à l'ORF8 code pour un polypeptide ayant 421 acides aminés et la séquence eryCII correspondant à l'ORF9 code pour un polypeptide ayant 361 acides aminés.
La mise en évidence des activités enzymatiques respect in ves indiquées ci-dessus a été réalisée par introduction d'une délétion interne au gène correspondant telle qu'illustrée plus loin dans la partie expérimentale.
Par séquences qui hybrident et ayant la même fonction, on inclut les séquences d'ADN qui hybrident avec l'une des séquences d'ADN ci-dessus sous des conditions standards de stringence élevée ou moyenne décrites par Sambrook et al.