INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les figures 7a à 7c illustrent les étapes d'un changement de vitesse automatisé, effectué au moyen du dispositif 200, qui consiste plus particulièrement en un passage de la 4e à la 5e. Au cours de cette manoeuvre, un changement de rainure a lieu dans la position neutre N, donc un mouvement de sélection correspondant à l'avance d'une rainure en direction de 5/AR. Pour atteindre la rainure d'enclenchement 5/AR, les butées M1 et M2 sont amenées à la position de repos en haut. Pendant le dégagement de la 4e, le ressort F1 est tendu. Plus exactement, l'accumulateur d'énergie au complet est poussé de la rainure 1/2 à la rainure 3/4, où il vient s'appliquer par la pièce de pression D1 contre l'axe WS1. La position de cet axe est ensuite maintenue encore par la coulisse KUL. Par la poursuite de son mouvement, le levier H1 charge l'accumulateur d'énergie - qui n'est plus déplaçable à présent - d'une quantité d'énergie pour couvrir la distance à la rainure voisine (déplacement d'une rainure, charge d'une rainure). Quand la coulisse permet ensuite la sélection, Fl se détend et pousse D1 contre WS1 puis au-delà, jusqu'à la butée de sélection droite de la coulisse, pendant que F2 est comprimé. L'accumulateur a délivré à ce moment toute l'énergie à l'exception de sa précontrainte de base. Pendant l'enclenchement de la vitesse, il est tiré à la position de repos dans la rainure 1/2. La force de F2 est supportée par la coulisse.
Les figures 8a à 8c illustrent les étapes d'un changement de vitesse automatisé, effectué au moyen du dispositif 200, consistant en un passage de la ire à la marche arrière AR. Au cours de cette manoeuvre, un changement de rainure a lieu dans la position neutre N, plus exactement un mouvement de sélection correspondant à une avance de deux rainures en direction de 5/AR. Pour atteindre la rainure 5/AR à partir de la rainure 1/2, les deux butées M1 et M2 sont amenées à la position de repos en haut. Tout le chemin pour la pièce de pression D1 est ainsi libre. Au dégagement de la ire, le ressort F1 est tendu par une course correspondant au double de la distance entre deux rainures voisines, l'axe WS1, en butée dans la coulisse, empêchant un mouvement par le point de contact avec Di. Quand la coulisse autorise une sélection, F1 se détend et pousse Dl et par suite également WSl jusqu'à la position correspondant à la rainure (5/AR). La marche arrière peut ensuite être engagée. Fi ne restitue pas d'énergie puisqu'un mouvement de sélection sur deux rainures a eu lieu. La force de F2 est supportée par la coulisse.
Les figures 9a à 9c illustrent les étapes d'un changement de vitesse automatisé, effectué au moyen du dispositif 200, consistant en un passage de la marche arrière AR à la ivre. Au cours de cette manoeuvre, un changement de rainure a lieu, à la position neutre N, plus exactement un mouvement de sélection sur deux rainures en direction de la rainure 1-2. Les butées Mi et M2 restent à la position de repos en bas, de sorte que Dl doit conserver sa position initiale. Au dégagement de la marche arrière, F1 est tendu, mais D1 ne peut pas se déplacer parce qu'elle est appliquée contre M1. Quand la coulisse autorise la sélection, WS1 est poussé par la détente de F2 dans la rainure 1-2. A l'engagement de la lyre, le ressort F1 se détend, de sorte que l'énergie accumulée pour l'engagement de la vitesse est récupérée.
De préférence, une acétylcholinestérase répondant aux buts de la présente invention est une acétylcholinestérase qui, lorsqu'elle est produite naturellement, se présente sous une forme monomérique et soluble. Entre dans cette catégorie, les acétylcholinestérases retrouvées dans les venins de serpent.
Avantageusement, une acétylcholinesérase constitutive d'un polypeptide de fusion selon l'invention est codée par un polynucléotide hybridant, dans des conditions d'hybridation stringentes, avec le polynucléotide de séquence SEQ ID N03 selon l'invention.
De manière tout à fait préférée, une telle acétylcholinestérase monomérique est définie de telle sorte que le polynucléotide codant celle-ci hybride, dans des conditions. d'hybridation fortement stringentes, avec au moins l'un quelconque des oligonucléotides suivants a) un oligonucléotide codant pour l'un des peptides suivants - SEQ ID N08 : SEDCLY - SEQ ID N09 : SEDCLYLN - SEQ ID N010 : FGESAG les peptides de séquences SEQ ID N08, SEQ ID N09 et SEQ ID N010 étant compris dans le polypeptide de séquence SEQ ID N01 constitutif d'un polypeptide de fusion selon l'invention b) un oligonucléotide comprenant l'une des séquences nucléotidiques suivantes - SEQ ID Noll : DSHGARGAYTGYYTNTAY, dans laquelle D représente A, T ou G, S représente G ou C H représente C, A ou T R représente G ou A Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C - SEQ ID N012 : DSHGARGAYTGYYTNTAYHTNAAY, dans laquelle D représente A, T ou G S représente G ou C H représente C, A ou T R représente G ou A Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C c) un oligonucléotide comprenant la séquence SEQ ID N013 suivante TTYGGDGARWSDGCNGG, dans laquelle D représente A, T ou G S représente G ou C R représente G ou A W représente A ou T Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C d) un oligonucléotide particulier, répondant à la définition selon a), b) ou c) ci-dessus, comprenant l'une des séquences suivantes SEQ ID N05 : AGC GAG GAC TGC CTC TAC SEQ ID-N06 : AGC GAG GAC TGC CTC TAC CTC AAC ; et SEQ ID N07 : TTT GGG GAG AGT GCC GGG les oligonucléotides de séquences SEQ ID N05, SEQ ID N06 et SEQ ID N07 étant compris dans le polynucléotide de séquence SEQ ID N03 codant pour l'acétylcholinestérase monomérique retrouvée dans le venin du serpent Bungarus fasciatus.
Les conditions d'hybridation de forte stringence au sens de la présente invention sont définies à partir du calcul de la température Tm (ou température de fusion), qui représente la température. à laquelle les deux brins d'un homoduplex -ADN/ADN ou un hétéroduplex ADN/ARN se trouve à 50 W sous forme dissociée ou dénaturée.
Avantageusement, les polynucléotides codant pour une acétylcholinestérase monomérique constitutive d'un polypeptide de fusion selon l'invention hybrident avec l'une quelconque des séquences. SEQ ID N03, SEQ ID N05, SEQ ID N06, SEQ ID N07, SEQ ID Roll, SEQ ID N012 et SEQ ID N013 dans un intervalle de température allant de (Tm - 150C) à (Tm - 200C) A titre illustratif, les conditions de stringence de l'étape d'hybridation aux fins de définir les fragments polynucléotidiques décrits ci-dessus. sont avantageusement les suivantes l'hybridation est réalisée à une température préférentielle de 650C, en présence de tampon 6 x SSC, 5 x de solution de Denhardt, 0,5 k SDS et 100 yg/ml d'ADN de sperme de saumon.
1 x SSC correspond à 0,15 M NaCl et 0,05 M citrate de Na et une solution de 1 x Denhardt correspond à 0,02 W Ficoll, 0,02 W de polyvinylpyrrolidone et 0,02 k de sérum albumine bovine.
Les étapes de lavage peuvent, par exemple, être les suivantes - deux lavages de 5 min, préférentiellement à 650C, dans un tampon 2 x SSC et 0,1 W SDS - un lavage de 30 min, préférentiellement à 65"C, dans un tampon 2 x SSC et 0,1 W SDS - un lavage de 10 min, préférentiellement à 650C, dans un tampon de 1 x SSC et 0,7 k SDS.
L'AChE monomérique sélectionnée par les inventeurs en tant que mode de réalisation particulier du polypeptide de fusion selon l'invention est originaire du venin du serpent Bungarus fasciatus et a récemment été caractérisée (Cousin et al., 1996a ; Frobert et al., 1997). I1 s'agit d'une protéine soluble monomère, à la différence des AChE précédemment décrites qui sont des homodimères liés aux membranes via des glycolipides, ou encore des structures oligomériques reliées par des ponts disulfures, et comprenant des homo-oligomères (dimères et tétramères) et des hétéro-oligomères liés au collagène ou à des sousunités hydrophobes (Massoulié et al., 1993).
La constante catalytique de l'AChE de B. fasciatus est de 7000/s (7000 molécules de substrat hydrolysées par une molécule d'enzyme en une seconde) . Cette constante catalytique est deux fois plus faible que celle de l'AChE tétramérique du gymnote, mais supérieure à celle de la péroxydase de raifort (1000/s) ou encore celle de la phosphatase alcaline (2000/s) et de la beta-galactosidase (250-500/s) (Vigny et al., 1978 ; Grassi et al.., 1987).
L'une des difficultés attendues de mise en oeuvre d'une AChE monomérique pour la réalisation d'un traceur enzymatique est inhérente au fait qu'il s'agit d'une protéine de -petite taille, d'un poids moléculaire de 72 kDa. Le couplage d'une AChE monomérique de ce type avec un récepteur protéique spécifique de la molécule ligand à rechercher dans un échantillon est fortement susceptible d'affecter la conformation dans l'espace de l'enzyme et ainsi de réduire significativement, voire abolir son activité catalytique.
De manière surprenante, les inventeurs ont découvert qu'un polypeptide de fusion entre une AChE monomérique et un récepteur protéique conserve l'activité catalytique de l'AChE à un niveau comparable à celui de l'enzyme libre.
Cette découverte a permis aux inventeurs de réaliser un traceur enzymatique comprenant un premier polypeptide constitué d!une acétylcholinestérase monomérique, ou d'un variant biologiquement actif de cette dernière, et un second polypeptide constitué d'un récepteur protéique reconnaissant spécifiquement une molécule ligand à rechercher dans un échantillon.
Par variant biologiquement actif d'une acétylcholinestérase monomérique selon la présente invention, on entend un polypeptide présentant, par rapport au polypeptide initial, une o plusieurs additions, substitutions et/ou délétions d'acides aminés, étant entendu que le variant biologiquement actif doit, d'une part, conserver qualitativement l'activité catalytique caractérisant les acétylcholinestérases et, d'autre part, posséder un niveau d'activité catalytique au moins du même ordre que l'enzyme libre native, c'est-à-dire d'au moins la moitié du niveau d'activité catalytique de l'enzyme native.
L'activité catalytique d'un variant biologiquement actif d'une acétylcholinestérase, tel que defini ci-dessus, peut être aisément quantifiée, par exemple en mettant en oeuvre la technique décrite à l'Exemple 3 de la présente description.
Une délétion de 15 acides aminés du côté C-terminal de la séquence peptidique de l'acétylcholinestérase du venin de Bungarus fasciatus peut par exemple être pratiquée sans affecter aucunement l'activité catalytique du polypeptide résultant. Un tel peptide tronqué est, par exemple, représenté par le polypeptide de séquence SEQ ID N01, constitutif d'un polypeptide de fusion selon l'invention.
Ainsi, une délétion sera préférentiellement pratiquée du côté C-terminal de la région du polypeptide de fusion correspondant à l'acétylcholinestérase, la taille de cette délétion étant avantageusement de 1 à 20 acides aminés.
L'accumulateur délivre à chaque fois seulement la quantité d'énergie nécessaire pour assurer une course d'un élément de sélection ou de dégagement/engagement de vitesse jusqu'à une position distincte désirée. Si davantage d'énergie que cette quantité d'énergie nécessaire avait au départ été emmagasinée dans l'accumulateur, l'énergie excédentaire est restituée à la source, ce qui veut dire que l'énergie est de nouveau mise à disposition pour une manoeuvre.
L'énergie pour l'exécution de la fonction annexe et/ou pour armer ou charger l'accumulateur de force, est tirée de l'entraînement de la fonction principale. I1 est cependant possible aussi, si désiré, de prélever l'énergie d'une autre source.
On peut ainsi réaliser un actionneur de commande pour deux fonctions par seulement un entraînement, sans les inconvénients des rapports angulaires fixes connus des fonctions.
Le dispositif prévoit des butées définissant des positions distinctes pouvant être occupées par un élément 120 dont la position est variable. Selon un exemple de réalisation avantageux, ces butées peuvent être mobiles.
On peut prévoir autant de positions distinctes qu'il y a de positions à établir et le nombre de butées peut être accordé en conséquence. Le nombre de butées correspondra au nombre de positions ou alors, en cas de combinaison de butées et de positions, à un plus petit nombre.
La position visée, par exemple pour passer d'une rainure d'enclenchement à une autre lors d'une sélection, est définie par le positionnement des butées. La position de repos des butées peut être en haut ou en bas.
Si des butées à plusieurs échelons ou gradins sont utilisées, des éléments de commande adéquats, prévus pour un fonctionnement à échelons, permettent de réduire le nombre de ces éléments de commande.
Comme éléments de commande pour les butées, on peut envisager, par exemple, un aimant à plusieurs échelons ou positions pour une butée à gradins, des aimants de commutation, un moteur électrique, comportant par exemple une tige extensible au moyen d'un filetage sous l'effet de la rotation de l'arbre du moteur, la tige actionnant par l'intermédiaire d'un mécanisme quelconque un dispositif réalisé comme une butée pour les rainures d'enclenchement concernées, ou une commande hydraulique ou pneumatique. Des combinaisons de composants comme ceux mentionnés ci-dessus sont possibles aussi.
Le couplage entre l'entraînement de la fonction principale et l'accumulateur d'énergie peut comporter des étages d'engrenages de surmultiplication ou de réduction.
Les directions de mouvement peuvent ainsi être choisies librement.
Les exemples décrits ci-après comportent un actionneur de commande pour l'automatisation d'une boîte de vitesses conçue initialement pour une commande manuelle et présentant trois rainures d'enclenchement (1 - 2, 3 4, 5 - AR), étant entendu que des boîtes pourvues de plus de trois rainures d'enclenchement peuvent également être commandées de façon analogue.
Les fonctions dégagement/engagement (mouvement avant/arrière ou inversement dans une rainure d'enclenchement) et sélection (mouvement de sélection droite/gauche ou inversement entre des rainures d'enclenchement) sont chacune indépendantes de la direction de l'autre fonction. Il n'y a pas de dépendance directionnelle de la fonction principale qui est en l'occurrence le dégagement/engagement. L'actionneur serait utilisable aussi au cas où le dégagement/engagement et la sélection avaient les sens de mouvement intervertis par rapport à ceux indiqués ci-dessus.
Les figures 3a et 3b montrent schématiquement deux exemples de réalisation avantageux de dispositifs désignés respectivement par 200 et 300.
Le dispositif 200 selon la figure 3a comporte notamment deux tiges de butée M1, M2, pouvant être commandées et correspondant aux verrous décrits précdenment, qui déterminent la position de fin de course de l'élément 120 lors de la sélection.
Le dispositif comporte en outre un accumulateur d'énergie 201, disposé mobile, contenant un ressort accumulateur Fl précontraint, formant un accumulateur de force, qui est armé et détendu par un mécanisme à levier H1, tandis que l'entraînement 202 de ce mécanisme, par la rotation de Hla et H1 et le déplacement de l'élément WF1 pour le dégagement/engagement, élément qui est formé ou porté par exemple par un axe central de changement de vitesse, assure sa fonction principale de commande d'un axe central pour les manoeuvres de changement de vitesse. Le ressort F1, formant l'accumulateur d'énergie 201, s'appuie d'un côté sur une pièce de pression D1 à laquelle est coordonnée, du côté du mécanisme à levier, une butée pour l'autre côté du ressort, ce qui garantit une précontrainte de base de l'accumulateur d'énergie. La précontrainte est produite dans cet exemple par un élément d'emprisonnement représenté schématiquement par une agrafe S1.
Plus exactement, l'exemple montré par la figure 3a comporte en plus un ressort de rappel F2 relié de manière fixe à un axe central de changement de vitesse WS1 portant un doigt de guidage et indicateur WF1 dont la projection est visible dans la coulisse de changement de vitesse K1.
Lorsqu'une commande est émise par un terminal, le programme correspondant à un code d'identification est exécuté.
Concernant les applications, par exemple le document US-A-4.965.066 décrit un traitement de texte.
Tandis que des procédés, dispositifs ou systèmes numériques de traitement d'informations tels que les ordinateurs personnels dits "PC" ou modulateurs/démodulateurs dits "modems", sont décrits dans de nombreux documents.
Le vocabulaire spécifique à ces ordinateurs, est par exemple expliqué dans "Dictionnaire d'informatique", publié par Hermann et édité par Lavoisier.
Quant à la traduction en langue française de ce vocabulaire, il est fait référence au "Glossaire des termes officiels de l'informatique", publié par le Journal officiel de la république française, et édité par 1'AFNOR.
Ainsi, les codes standards américains pour l'échange d'information, dits "ASCII", sont employés sur de nombreuses machines, prévoient des codes sur sept bits sans recommandation de parité, fournissant des profils binaires de caractères.
Le terme "compactage" décrit un procédé de réduction de l'espace mémoire inutilisé.
Le terme "compression" signifie un procédé de codage de données afin de tirer parti de redondances, en vue de réduire la taille des données, par exemple pour leur transmission ou leur emmagasinage ou "stockage".
Les techniques connues présentent des inconvénients.
Ainsi, elles ne permettent pas d'utiliser un support d'information transportable, tel que carte à puce, afin de personnaliser et de simplifier l'accès à au moins un service ou application accessible à l'aide d'un dispositif et/ou système informatique.
En effet, il est nécessaire pour accéder et utiliser ces applications, de maîtriser certaines connaissances dans le domaine informatique.
Outre ces limitations de taille de mémoire, les supports tels que carte à puce, posent des problèmes de lenteur d'accès aux informations qu'ils contiennent.
Par ailleurs, un tel support ne permet pas actuellement de mémoriser, préalablement à une première utilisation du support notamment, des procédures d'accès automatisées à des applications d'intérêt pour le porteur autorisé du support, en toute confidentialité et sécurité.
Tandis que les techniques actuelles ne proposent pas dans la pratique, de permettre la sauvegarde de telles procédures d'accès sur un support transportable, en toute confidentialité et sécurité, de manière à ce que le porteur d'un support puisse après avoir interrompu son utilisation de l'application, y accéder sans avoir à réitérer ces procédures.
Tel est le cas des cartes à puce, du fait des limitations de capacité de mémoire et de temps d'accès évoquées.
Par ailleurs, les techniques actuelles ne sont pas satisfaisantes pour assurer de façon simple et économique, un stockage sélectif d'informations et leur transmission à un système de gestion en réseau, en vue de traitements tels que facturation détaillée, analyse commerciale ou analogues.
Le procédé comprend les étapes prévoyant de - de détecter, de manière répétitive par exemple à intervalles de temps réguliers de l'ordre de 10 secondes, chaque application en mémoire d'un dispositif tel qu'ordinateur - de définir une durée constante et forfaitaire de facturation, par exemple de l'ordre de 30 secondes, et un taux de facturation de cette durée - d'associer une unité de temps de référence propre à chaque application, correspondant à un multiple entier, par exemple compris entre 0 et 3, la durée forfaitaire - de mesurer un temps réel d'utilisation de l'application, par exemple égal à "n" unités de temps comptées à intervalles de temps régulier et/ou à l'issue de l'utilisation de l'application - de déterminer par une fonction, un coût égal au taux de facturation multiplié par le nombre d'unités dans le temps réel; - d'enregistrement sélectif de ce coût sur le support d'information, et d'adressage via un réseau d'un message de débit correspondant, à un dispositif serveur de gestion centralisée ; et - d'opération d'un débit en fonction d'au moins un coût ainsi déterminé.
Selon une caractéristique, l'étape de détermination prévoit que - l'utilisation d'au moins une application est forfaitaire, voire gratuite lorsque plusieurs applications exécutées en même temps en mémoire du dispositif, celle dont l'unité de référence est la plus élévée, est considérée dominante - lorsqu'au moins une nouvelle application non gratuite est détectée en mémoire, une unité est débitée - lorsqu'au moins une application n'est pas initialement associée à une unité de référence, elle est considérée forfaitaire, par exemple d'une unité par minute.
Selon une autre caractéristique, le dispositif serveur en réseau dit de gestion d'adressage tient à jour une table de coûts d'application dite table d'administrateur redéfinissable.
Selon encore une autre caractéristique, destinée à une application d'exploitation dite "multitâche", pouvant avoir plusieurs sous-applications exécutables simultanément en mémoire, l'étape de détection comprend une phase de comparaison des applications détectées avec liste d'exclusion consignant toutes les applications déjà en mémoire, pour que l'utilisateur ne soit pas débité d'une manière forfaitaire pour l'utilisation d'applications qu'il n'a pas lancé.
Un quatrième objet de l'invention est un dispositif automatique permettant la mise en oeuvre de l'un au moins des procédés évoqués plus haut.
Ce dispositif tel qu'ordinateur de type PC, est apte à mettre en oeuvre au moins un procédé selon l'invention, tel qu'évoqué.
Selon une caractéristique, le dispositif comporte un lecteur de support d'informations codées, tel que une carte à puce.
Selon une autre caractéristique, le dispositif comporte un modulateur/démodulateur apte à le relier à un réseau, par exemple à un dispositif dit "serveur" de manière à pouvoir lui donner accès à des applications telles que courriers électroniques ou navigation et/ou le dispositif est en libre-service, pour permettre à différents utilisateurs d'employer des applications.
Un cinquième objet de l'invention est un système comportant en réseau de tels dispositifs et/ou apte à mettre en oeuvre l'un des procédés évoqués plus haut.
Le système comporte au moins deux dispositifs reliés par exemple via un réseau de communication tel que internet, au moins un dispositif étant un serveur de gestion centralisée, notamment destiné à permettre la facturation d'applications exécutées sur un autre dispositif du réseau.
Un sixième objet de l'invention est un support d'informations codées, destiné à permettre la lecture et/ou l'inscription de telles informations, dans un tel dispositif et/ou système, et/ou selon l'un au moins des procédés évoqués plus haut.
Ce support est équipé d'un microprocesseur comportant apte à définir au moins deux sections de mémoire, pour l'enregistrement et l'accès à des informations codées telles que paramètres de configuration d'application, table de conversion ou clé confidentielle d'identification.
L'invention ressort mieux de la description détaillée qui suit de modes de réalisation donnés à titre d'exemple.
D'une part, cette description se réfère aux annexes 1 à 6, qui comprennent des exemples de modes de réalisation.
L'annexe 1 comprend en exemple 1, un tableau des noms et temps de variables d'entrée dans un procédé de calcul de coût d'applications, selon l'invention.
Un exemple 2 sur l'annexe 1 représente un tableau des noms d'applications à lancer, dans un exemple de ce procédé.
L'invention vise à résoudre ces inconvénients, notamment.
A cet effet, un premier objet de l'invention est un procédé automatique de configuration sécurisée d'au moins un dispositif tel qu'ordinateur, pour l'exécution d'au moins une application.
L'application est par exemple un programme informatique de courrier électronique, de traitement de données tel que tableur, ou analogues.