INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
D'une part, des macromolécules modifiées possédant un atome de sélénium introduit chimiquement telles que la sélénosubtilisine (voir Z.P.Wu et D.Hilvert, J.Am.Chem.Soc., (1990), 112, 5647-5648) ou encore un séléno abzyme (voir G.M.Luo et coll., Biochem.Biophys.Res.Comm., 1994, 198, 3, 1240-1247). Cependant l'utilisation de protéines dans un but thérapeutique est difficile à envisager pour les raisons suivantes: * leur biostabilité est souvent insuffisante; * il n'existe pas de méthode efficace pour assurer leur ciblage intracellulaire; * elles ne peuvent être administrées par voie orale.
D'autre part, des molécules synthétiques de faible poids moléculaire ont été synthétisées, dont la 2-phényl-1,2-benzisosélénazolin-3-one (ebselen) (voir H.Sies, Free Rad.Biol.Med., (1993), 14, 313-323) qui a été le premier composé décrit comme possédant une activité glutathion peroxydasique. Des homologues dudit ebselen : 2H-3,4-dihydro-1,2-benzosélénazin-3-ones ont également été décrits par Pierre V. Jacquernin et al. dans Tetrahedron Letters, (1992), Vol. 33, No. 27, 3863-3866. Plusieurs dérivés organoséléniés ont en fait été décrits en tant que mimes de glutathion peroxydase, c'est-à-dire capables de réduire les hydroperoxydes en présence d'un thiol biologique tel que le glutathion ou l'acide lipoique (voir IA.Cotgreave et coll., Biochem.Pharmacol., (1992), 43, 793-802 et C.M.Andersson et coll., Free Rad.Biol.Med., (1994), 16, 17-28 et S.R.Wilson et coll., J.Am.Chem.Soc., (1989), 111, 5936-5939 et V.Galet et coll., J.Med.Chem., (1994), 37, 2903-2911). La demande de brevet WO-A-95/27706 décrit des composés de structure benzisosélénazoline et benzisosélénazine présentant une activité glutathion peroxydasique entre autres.
Ces composés organoséléniés, mimes de glutathion peroxydase, produisent invariablement des intermédiaires catalytiques du type sélénol et/ou disélénure.
Parmi ceux-ci, la 2-phényl-1,2-benzisosélénazolin-3-one (ebselen) et certains dc ses dérivés ne semblent pas avoir d'effet toxique majeur (voir A.
Wendel et coll.; Biochem. Pharmacol.; (1984); 33; 3241-3245 et S.D. Mercurio et G.F. Combs; Biochem. Pharmacol.; (1986); 35; 4505-4509). La 2-phényl-1,2benzisosélénazolin-3-one (ebselen) est cependant très peu soluble dans l'eau, même en présence d'un excès de glutathion GSH, ce qui limite ses applications pharmacologiques.
Les propriétés biochimiques ct pharmacologiques des composés organoséléniés qui ont été synthétisés et étudiés ont été revues récemment ( voir MJ. Parnham et E. Graf; Progress in Drug Res.; (1991); 36; 9-47 et M.J.Parnham, Exp.Opin.lnvest.Drugs, (1996), 5, 7, 861-570).
L'un des buts de la présente invention est de concevoir des composés organoséléniés possédant une activité catalytique du type glutathion peroxydase en présence de concentrations physiologiques de glutathion GSH.
Ces buts sont atteints grâce à la présente invention qui repose sur la conception de nouveaux composés organoséléniés cycliques, dont les activités antioxydantes et cytoprotectrices ont été mises en évidence par la Demanderesse et sont présentées ci-après.
DESCRI-IONDE L'INVENTION: La présente invention a pour but: 1) de résoudre le nouveau problème technique consistant en la foumiture de nouveaux composés hétéroarylséléniés cycliques présentant une très bonne activité antioxydante et cytoprotectrice, constituant ainsi des principes actifs précieux de compositions pharmaceutiques; 2) de résoudre le nouveau problème technique ci-dessus selon une solution qui englobe un procédé de préparation de ces nouveaux composés, aisé à mettre en oeuvre.
Les problèmes techniques énoncés ci-dessus sont résolus, pour la première fois, d'une manière simultanée, par la présente invention de façon simple; le procédé de préparatioq desdits nouveaux composés étant relativement aisé à mettre en oeuvre et fournissant de bons rcndcments.
Selon son premier aspect, la présente invention conceme donc de nouveaux composés organoséléniés cycliques, qui répondent à la formule générale (I) ci-après dans laquelle: R1 = hydrogène ; alkyle inférieur ; aryle éventuellement substitué ; aralkyle inférieur éventuellement substitué; R2 = hydrogène; alkyle inférieur ; aryle éventuellement substitué ; aralkyle inférieur éventuellement substitué; A = CO; (CR3R4)m; B = NR5 ; 0 ; S; Ar = phényle éventuellement substitué ou un radical éventuellement substitué de formule: dans laquelle Z=O;S;NRs; R3 = hydrogène ; alkyle inférieur ; aryle éventuellement substitué ; aralkyle inférieur éventuellement substitué; R4 = hydrogène ; alkyle inférieure ; aryle éventuellement substitué ; aralkyle inférieur éventuellement substitué; R5 = hydrogène ; alkyle inférieur ; aryle éventuellement substitué ; aralkyle inférieur éventuellement substitué ; hétéroaryle éventuellement substitué hétéroaralkyle inférieur éventuellement substitué ; CO(alkyle inférieur) CO(aryle); SO2 (alkyle inférieur); SO2(aryle); R6 = hydrogène ; alkylc inférieur ; aryle éventuellement substitué ; aralkyle inférieur éventuellement substitué ; hétéroaryle éventuellement substitué hétéroaralkyle éventuellement substitué ; trifluorométhyle m =Oou l; n = O ou 1; X+ représente le cation d'unc base pharmaceutiquement acceptable; et leurs sels d'acides ou de bases pharmaceutiquement acceptables; à la condition que: lorsque B = NR5 avec R5 = hydrogène, alkyle inférieur, aralkyle inférieur éventuellement substitué, CO(alkyle inférieur), et A = CO ou (-CH2-)m alors Ar est différent d'un phényl éventuellement substitué.
Les fractions 9 et 10 ont été rassemblées et rechromatographiées par gel filtration (Colonne : 1,3 m x 2,5 cm. Support Sephadex LH 20 Pharmacia, particules de taille entre 25-100 Am, conditionné dans du méthanol.
Phase mobile : méthanol délivré à 2 ml/mn par une pompe Gilson 301. Détection : détecteur WICORD LKB, longueur d'onde = 254 nm. Collecteur de fractions Foxy, isco).
Cinquante six tubes (13 mm x 100 mm) de 7 ml chacun ont été collectés. Après contrôle en CCM, tous les tubes ont été rassemblés en 6 fractions. L'activité biologique a été mise en évidence dans la fraction 4, qui a alors été soumise à une HPLC préparative en phase inverse (Waters 600, multi solvent delivery system; Injector U6K; Detector Waters 990, photodiode array detector; Colonne ,U-BONDAPAK C18 Water's (30 cm x 7,5 mm; taille des particules 10 Rm; température de la colonne : 450C); Computer NEC, APCIII; Plotter : Waters 990). Les conditions isocratiques étaient de débit de 3,7 ml/mn; phase mobile MeOH/H2O (74/26, v/v). Chaque pic a été collecté manuellement.
2) Insectes et acariens.
Tous les insectes (Aphis gossypii (Glov), Myzus persicae (Sulz), Drosophila melanogaster (Meig), Spodoptera littoralis (Boisd), Sitophilus granarius L.
et l'acarien Tetranychus urticae (Koch) sont des souches sensibles. Ils sont élevées dans des conditions contrôlées (20 + 20C, 60 + 10 96 R.H. et 8 h/16 h de nuit/lumière). A. gossypii a été élevé sur des plantules de concombre, M. persicae sur des fèves, Drosophila sur un milieu semi-synthétique, S. granarius sur du blé, S. littoralis sur un régime semi-synthétique et T. urticae sur des haricots.
3) Tests biologiques.
a) Activité contre A. aossy7aii et M.
Persicae.
Ces tests ont été effectués dans des boîtes de 2,7 cm de diamètre. Ces boîtes ont été remplies d'un gel semi-solide agar-agar. Des disques de feuilles de concombre (de fève dans le cas de M. persicae) ont été placés sur l'agar. Deux à trois heures avant le traitement, quinze aptères adultes ont été placés dans chaque boîte pour s'adapter. Deux boîtes ont été utilisées pour chaque dose. De l'eau déionisée et de l'acétone (80/20, v/v) ont été utilisés pour la préparation de cinq dilutions (en progression géométrique) pour chaque produit. 0,5 ml de chaque dose a été directement pulvérisé sur les deux boîtes en utilisant un micropulvérisateur (acétone/eau dans le cas du contrôle) , puis les boîtes ont été placées dans les conditions contrôlées décrites précédemment.
Les pucerons morts ont été comptés après 24 heures (A. gossypii) ou 48 heures (M. persicae) après l'application. Les insectes ont été considérés morts si ils se présentaient sur le côté ou sur le dos, avaient leurs pattes repliées sur la surface ventrale, montraient des signes de dessiccation, et/ou ne répondaient pas à un coup de pinceau (11). Les pourcentages de mortalité, y compris dans les tests cidessous, ont été corrigés par la formule d'Abbott et les valeurs CL50 ont été calculées par la méthode d'analyse des probits (12) en utilisant un logiciel spécial (13).
b) Activité contre la Drosophile.
- Incorporation au milieu.
Le test de toxicité globale a été effectué dans de petits flacons de 7 cm de hauteur et 4,2 cm de diamètre. 35 grammes de milieu semi-synthétique (2,2 1 de son; 260 ml de sucre; 130 ml de levure de bière ; 70 ml de vinaigre ; 20 ml de nipagine; 580 ml d'eau) ont été placés et pressés dans chaque flacon.
Chaque traitement a été effectué en double. Dans chaque flacon, 1 ml de chaque concentration a été incorporé dans le milieu (acétone et eau dans le cas du contrôle).
Deux à trois heures après le traitement (temps d'évaporation de l'acétone), 15 adultes de 0 à 3 jours (10 femelles et 5 mâles) ont été placés dans chaque flacon. Les flacons ont été bouchés avec un coton et remis dans les conditions de culture. Les adultes ont été enlevés des flacons lorsque dans le témoin quelques larves se sont transformées en pupes (environ après 13 jours). Le nombre d'adultes a été compté tous les deux jours pendant deux semaines (7 lectures) . Le pourcentage d'émergence a été calculé par rapport au témoin et les valeurs CL50 ont été calculées par la méthode indiquée précédemment.
L'activité stimulante des peptides respectivement à 0,1 % à 0,3 % et à 1 % a été objectivée à la fois sur lignée fibroblastique et sur lignée épithéliale.
Cette propriété de stimulation cellulaire a été confirmée par un test in vivo en pharmacologie animale, par suivi de l'évolution de l'indice mitotique chez le cobaye après application quotidienne, pendant deux semaines, d'une préparation renfermant 1 % de peptides d'Argan.
2) Oxygraphie Ce test a été réalisé in vitro sur culture de fibroblastes. A des concentrations de 0,1 % et de 0,3 % en peptides l'oxygraphie sur culture de fibroblastes a révélé des améliorations considérables de la vitesse de consommation de l'oxygène.
3) Activité anti-collagénase Les peptides d'Argan protègent les fibres de collagène des attaques enzymatiques. Ceci a été objectivé in vitro sur gel d'agarose. La CI 50 obtenue avec les peptides d'Argan est de 0,1 % et la CI 100 est de 0,5 %.
Dans le cadre de la présente invention, il a été mis en évidence, de manière fortuite, une potentialisation de l'activité proliférative des peptides par l'huile d'Argan. Cette propriété a été démontrée in vitro sur culture de fibroblastes d'origine murine (lignée L 929). Le principe du test est basé sur la transformation enzymatique d'un sel de tétrazolium, le XTT en un produit coloré : le formazan.
Le XTT est réduit par les déshydrogénases mitochondriales des cellules vivantes en présence d'un agent couplant d'électrons, le coenzyme Q en un composé hydrosoluble jaune/orangé, le formazan dosable par spectrophotométrie à 450 nm.
A to - 18 h, les cellules sont ensemencées avec du S.V.F.
A to, le milieu de culture est éliminé et les actifs (peptides et/ou huile) sont introduits à différentes concentrations (dilution dans le milieu de culture).
A to + 48 h, une solution de XTT est introduite en présence du coenzyme Q, Après 3 h d'incubation, on arrête la métabolisation du XTT en ajoutant une solution de SDS.
La lecture de la densité optique est réalisée à 450 nm. Elle est proportionnelle à la population cellulaire vivante. Le pourcentage d'activité est calculé ainsi D.O. témoin - D.O. traité x x 100 D.O. témoin Les résultats sont représentés dans le graphe de la figure annexée ainsi que dans le tableau ci-dessous: Potentialisation de l'activité des peptides par l'huile enrichie % d'activité/Témoin SVF Huile enrichie Peptides Peptides(1 %) (0,003%) (1%) + Huite enrichie(0,003%)
Huile enrichie (0,003%) 6% Peptides (1%) 76% Peptides (1%) + Huile enrichie(0,003%) 96% On observe ainsi que l'huile d'Argan s'est avérée potentialiser l'activité stimulante des peptides d'Argan sur culture de cellules. Cette synergie d'action, ainsi que les complémentarités de ces deux actifs sur les autres paramètres du vieillissement, font de cette association un traitement efficace adapté à la lutte contre le vieillissement cutané.
Les propriétés précédentes sont avantageusement mises à profit lors de l'utilisation de cette association ou des compositions la contenant, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des troubles cutanés liés au vieillissement.
Ces compositions peuvent être d'usage cosmétique ou pharmaceutique, sous forme de crèmes, émulsions, lotions, masques, ou encore de gélules par voie orale, dont des exemples sont donnés ci-après.
On pourra, en particulier, les associer à des compositions, utiles en particulier à titre de médicaments, comme les hormones et en particulier les oestrogènes, dans le traitement des troubles cutanés de la ménopause.
EXEMPLE 1 : Crème de jour hydratante base de maquillage Huile d'Argan enrichie 0,5 à 2 Peptides d'Argan 0,03 à 2 Acide pyrrolidone carboxylique 0,2 à 0,5 % Hydrolysat de collagène marin 1 à 3 Huile de ricin hydrogénée, éthoxylée 1 à 5 Huile de paraffine fluide 1 à 5 Huile cyclopentasiloxane 5 à 12 Squalane 1 à 5 Polymère carboxyvinylique 0,1 à 0,5 % Triéthanolamine 0,2 à 0,5 % Glycérine 2 à 4 Conservateur q.s.
Parfum q.s.
Dans EP-A-694 664, on a déjà décrit un ensemble de ce type, l'ouverture de ladite serrure étant assurée électriquement par la manoeuvre d'un moteur alimenté par la batterie du véhicule, ladite serrure étant, en cas de dysfonctionnement de l'alimentation électrique fournie par ladite batterie, susceptible d'être ouverte grâce à l'alimentation électrique fournie par une source d'énergie de secours, qui assure la charge d'un condensateur jusqu'à une tension (Uc)i définie de façon que le stockage d'énergie soit suffisant pour la manoeuvre dudit moteur.
Dans un tel dispositif, le condensateur est chargé à une tension (Uc)i qui, pour assurer un stockage d'énergie suffisant, est nettement supérieure à la tension nominale Un du moteur.
Généralement, le moteur comporte un rotor bobiné qui joue le rôle d'induit, l'inducteur étant constitué par des aimants permanents portés par le stator. Lorsque l'on démarre le moteur, le système mécanique qui est associé au moteur, est prévu pour qu'au début de sa rotation, le moteur n'ait à vaincre aucun couple résistant significatif sauf celui qui résulte de l'inertie des pièces en mouvement. Il en résulte qu'il n'est pas nécessaire d'appliquer au rotor un couple moteur élevé pour atteindre rapidement la vitesse nominale. Si l'on branche directement le condensateur chargé aux bornes du moteur, le courant qui va passer dans le rotor va être très élevé en raison de la valeur importante de (Uc)i et ce courant sera inutilement consommé en pertes thermiques dans le bobinage rotorique. La charge du condensateur provenant d'une pile de secours dont la capacité énergétique est limitée, il est important d'économiser au mieux l'énergie que le condensateur fournit au moteur à chaque séquence de décharge du condensateur et, dans ce but, selon l'invention, on propose de limiter la tension fournie au moteur par le condensateur de façon à éviter les pertes thermiques excessives dans le rotor du moteur.
La présente invention a, en conséquence, pour objet un ensemble constitué d'une serrure électrique de portière de véhicule automobile associée à ses moyens de commande et d'alimentation, l'ouverture de ladite serrure étant assurée électriquement par la manoeuvre d'un moteur alimenté par la batterie du véhicule, ladite serrure étant en cas de dysfonctionnement de l'alimentation électrique fournie par ladite batterie, susceptible d'être ouverte grâce à l'alimentation électrique fournie par une source d'énergie de secours, qui assure la charge d'un condensateur jusqu'à ce que sa tension Uc atteigne une valeur initiale (UC)j supérieure à la tension nominale Un d'utilisation du moteur, de façon que le stockage d'énergie soit suffisant pour la manoeuvre dudit moteur, caractérisé par le fait que, pour réduire les pertes thermiques du moteur en alimentation de secours, il comprend un circuit permettant de hacher la tension Uc fournie par le condensateur avec un rapport cyclique variable, la fréquence choisie pour le hachage assurant le lissage du courant d'alimentation correspondant par la self du bobinage du moteur, la valeur du rapport cyclique limitant la tension d'alimentation moyenne U du moteur de façon que U s Un tant que Uc 1 Un et étant maintenue égale à 1 pour Uc < Un.
Selon un mode préféré de réalisation, la tension d'alimentation U est coupée dès que U < Umin avec 0 < Umin < Un. On arrête ainsi la décharge du condensateur à un niveau de tension au dessous duquel le transfert d'énergie vers le moteur ne serait que de faible importance ; en général, la tension Umin est d'environ 7 volts pour une tension Un de 12 volts.
Avantageusement, pour obtenir le hachage de la tension Uc, le circuit comporte un comparateur recevant d'une part un signal en dents de scie de valeur moyenne Ug et, d'autre part, un signal proportionnel à Uc, le coefficient de proportionnalité étant égal à Uo/(UC)i, la tension de sortie du comparateur pilotant l'ouverture et la fermeture d'un transistor disposé en série sur l'alimentation du moteur, dès lors que le pilotage dudit transistor est autorisé par un microprocesseur.
On peut prévoir, pour éviter qu'en fin de course, le rotor du moteur ne soit entraîné par inertie, que le moteur soit associé à un organe mécanique qui, à chaque fin de course, provoque la manoeuvre d'un contact assurant la mise en court-circuit du bobinage du moteur après que son alimentation ait été coupée la mise en court-circuit peut être supprimée après un temps donné grâce à une commande issue d'un microprocesseur, sans modifier la position du contact manoeuvré par l'organe mécanique. De préférence, le démarrage du moteur s'effectue au travers d'une résistance soit à partir de la batterie, soit à partir du condensateur jusqu'à la modification de la position de contact manoeuvré par l'organe mécanique.
Sur ce dessin - la figure 1 représente, schématiquement, un circuit d'alimentation de secours d'un moteur associé à une serrure électrique selon l'invention - la figure 2 représente la courbe de variation de la tension moyenne U aux bornes du moteur, que l'on veut imposer pendant la décharge du condensateur, qui constitue la source de l'alimentation de secours du moteur - la figure 3 représente la tension instantanée U aux bornes du moteur en fonction du temps lorsque l'on réalise le hachage de l'alimentation de secours, ainsi que la courbe correspondante du courant i dans le rotor du moteur - la figure 4 représente un circuit permettant, en association avec un microprocesseur, de réaliser un ensemble selon l'invention.
En se référant au dessin, on voit que l'on a désigné par 2 le moteur électrique associé à l'ensemble selon l'invention. Le moteur 2 est susceptible d'être alimenté par la batterie I du véhicule, et en cas de disfonctionnement de l'alimentation normale, le moteur 2 peut être alimenté par une source de secours constituée par une pile 7. La pile 7 permet la charge d'un condensateur 9 par l'intermédiaire d'un circuit qui comprend une diode 5, une self 6 et un transistor 8. La charge progressive du condensateur 9 est effectuée en commandant la charge du transistor 8 par un microprocesseur 3, de sorte qu'à chaque fois que le transistor 8 se bloque, la bobine 6 se décharge à travers la diode 5 dans le condensateur 9. Une telle alimentation de secours a déjà été décrite en détail dans une demande de brevet français déposée par la même société demanderesse le même jour que la présente demande.
Le condensateur 9 est chargé à 25 volts pour pouvoir stocker une quantité d'énergie suffisante pour assurer l'entraînement du moteur 2 sur toute la course nécessaire à la manoeuvre de la serrure électrique. La tension nominale Un du moteur 2 est de 12 volts. Si, en cas de disfonctionnement de l'alimentation normale fournie par la batterie 1, on branchait directement le condensateur 9 aux bornes du moteur 2, il s'en suivrait une dissipation de l'énergie sous forme d'effet Joule dans le bobinage rotorique du moteur étant donné qu'à son démarrage le moteur n'a pas à vaincre de couple résistant et que la montée en vitesse est simplement limitée par les forces d'inertie ; le système mécanique associé au moteur 2 est ainsi fait que le couple résistant n'est appliqué au rotor qu'après la phase de démarrage du moteur.
On désire donc que la tension moyenne U appliquée aux bornes du moteur ait au cours de la décharge du condensateur 9 une courbe de variation telle que celle représentée sur la figure 2 : sur le segment AB, on constate que la tension s'établit à partir de la valeur O sur le segment BC, on a un palier correspondant à la tension nominale Un du moteur, et ce palier est maintenu tant que la tension Uc aux bornes du condensateur 9 reste supérieure à la tension Un. Sur le même graphique de la figure 2, on a tracé en pointillés la tension U qui serait obtenue en branchant directement le condensateur 9 aux bornes du moteur 2 la partie montante de cette courbe correspond à l'établissement de l'alimentation et la partie descendante correspond à la décharge du condensateur. Lorsque le condensateur 9 s'est progressivement déchargé dans le moteur 2, la tension aux bornes du condensateur arrive à être égale à la tension Un et à partir de ce moment, on fait en sorte que la tension U aux bornes du moteur soit égale à la tension aux bornes du condensateur, ce qui correspond au segment de courbe CD sur la figure 2. Quand on arrive à la fin de la décharge du condensateur, la quantité d'énergie transférée au moteur est, de toutes façons, faible et, par conséquent, on décide, si la tension U atteint une valeur minimum Umin, de couper l'alimentation du moteur 2, étant entendu que le condensateur est dimensionné de façon suffisante pour que cette coupure n'intervienne genéralement pas avant que le moteur 2 n'ait complètement rempli sa fonction dans la serrure.
En d'autres termes, on désire. en déchargeant le condensateur 9, imposer aux bornes du moteur 2 une courbe de tension U correspondant au tracé A-B-C-D-E représenté sur la figure 2.
Pour atteindre ce but, selon l'invention, on procède à un hachage de la tension fournie par le condensateur 9 et l'on choisit la fréquence de hachage de façon que les variations de tension n'entraînent dans le bobinage rotorique qu'une faible variation du courant instantané i autour d'une valeur moyenne im en raison de la grande valeur selfique du bobinage du rotor. Lorsqu'on fait varier le rapport cyclique du hachage de la tension Uc fournie par le condensateur, on fait varier la tension moyenne U aux bornes du moteur. Tant que la tension instantanée du condensateur Uc est supérieure à la tension nominale Un du moteur, on maintient U < Un en agissant sur le rapport cyclique. Lorsque Uc < Un, on maintient le rapport cyclique égal à 1 et lorsque U < Umin, on considère que l'échange énergétique ultérieur est négligeable et on arrête la décharge du condensateur, ce qui correspond au segment DE de la figure 2. Au point A du graphique, le rapport cyclique est nul. Au point B, il est égal au rapport Un/Uc, c'est-à-dire, dans l'exemple décrit, approximativement à 0,5. On peut agir sur la pente du segment AB en agissant sur la vitesse de variation du rapport cyclique entre 0 et 1/2.
Sur le segment de courbe CD, le rapport cyclique est égal à 1.