INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'anticorps selon l'invention peut également être utilisé en tant qu'agent de ciblage pour cibler des cellules cytotoxiques telles les cellules T humaines, les monocytes ou les cellules NK sur le lieu de la tumeur métastasée ou non. Les cellules cytotoxiques peuvent être attachées à l'anticorps via le récepteur Fc situé à la surface de ces cellules ou via un anticorps intermédiaire présentant une double spécificité par exemple ; tels anticorps bispécifiques pour le ciblage des cellules cancéreuses peuvent être produits en fusionnant une cellule immunitaire produisant l'anticorps de la présente invention ou l'hydridome de la présente invention avec une cellule produisant un anticorps dirigé contre la cellule cytotoxique à cibler. Des anticorps bispécifiques peuvent également être produits par couplage chimique de deux anticorps ayant la spécificité désirée. L'anticorps selon l'invention permet également de cibler des véhicules de délivrance d'agents antiprolifératifs, antinéoplastiques ou cytotoxiques sur le lieu de la tumeur métastasée ou non. Par véhicules de délivrance on entend désigner les liposomes et les particules virales. Dans certains cas, on pourra prévoir des éléments de ciblage assurant une expression spécifique de certains tissus ou cellules de façon à pouvoir limiter les zones d'expression des polypeptides selon l'invention.
L'invention concerne également un produit comprenant au moins un composé selon l'invention et au moins un agent anticancéreux comme produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie anticancéreuse.
Enfin, l'invention concerne une composition pour la détection, la localisation et l'imagerie des cancers, comprenant un anticorps selon l'invention, tel que l'anticorps est marqué directement ou indirectement avec un marqueur générateur de signal sélectionné parmi les isotopes radioactifs et les entités non isotopiques tels que définis précédemment.
L'invention a également pour objet une méthode de détection, de localisation et d'imagerie du cancer, comprenant (i) les étapes d'injection parentérale chez un être humain d'une composition selon l'invention ; (ii) l'accumulation après un temps suffisant au niveau des çellules cancéreuses de l'anticorps marqué puis pénétration de l'anticorps marqué à l'interieur desdites cellules, sans que ledit anticorps ne se lie de manière substantielle aux cellules normales ; et(iii) la détection du signal au moyen d'un détecteur de signal ; (iv) la conversion du signal détecté en une image des cellules cancéreuses.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaissent dans la suite de la description avec les exemples représentés ci-après. Dans ces exemples on se référera aux figures suivantes.
Figure 1 : de la protéine ICBP90 dans les cellules HeLa (cellules tumorales) et dans les fibroblastes pulmonaires humains en culture primaire (cellules non tumorales).
La détection de la protéine endogène ICBP90 a été réalisée sur des extraits totaux de protéines de cellules HeLa à confluence (piste 1) ou en prolifération (piste 2) et sur des extraits totaux de protéines de fibroblastes pulmonaires humains en culture primaire à confluence (piste 3) ou en prolifération (piste 4). Après migration sur gel de polyacrylamide 8% en présence de SDS, les protéines sont transférées sur membrane de nitrocellulose par électrotransfert. La révélation est réalisée à l'aide de l'anticorps 1RC1C-10 dilué au 1/4000 (concentration initiale 2 mg/ml) et d'un anticorps secondaire couplé à la phosphatase
alcaline et dirigé contre les chaines lourdes d'anticorps de souris. Dans les pistes correspondant aux extraits de cellules HeLa, on observe une bande majeure à 97 kDa ; pour les cellules HeLa en prolifération, des bandes supplémentaires de tailles inférieures à 97 kDa apparaissent (piste 2). Dans les fibroblastes pulmonaires humains à confluence, la protéine endogène n'est pas exprimée (piste 3) et apparaît lorsque les cellules se mettent à proliférer (piste 4). Ces observations suggèrent que la protéine endogène ICBP90 est un marqueur de prolifération cellulaire pour des cellules normales (fibroblastes) tandis que pour les cellules .tumorales elle serait un marqueur quelque soit le stade cellulaire.
Figure 2 : Immunoprécipitation de la protéine endogène L'immunoprécipitation est réalisée sur des extraits protéiques totaux de cellules MOLT-4. L'anticorps 1RC1C-10 est fixé sur des billes de protéine G sépharose, puis mis en contact avec les extraits protéiques pendant 2 heures à température ambiante. Après lavage les complexes billes/1RC1C-10/protéine sont précipités par centrifugation et analysés par migration sur gel de polyacrymalide 8% en présence de SDS, puis transfert sur membrane de nitrocellulose et révélation comme indiqué dans la figure 1. On observe une bande unique de 97 kDa, ainsi qu'une bande de 45 kDa qui correspond à la chaine lourde de 1RC1C- 10.
Des exemples préférés de second promoteur sont les promoteurs viraux, notamment le promoteur précoce du virus SV40 et le promoteur immédiat du CMV, ou des dérivés de ceux-ci.
Par ailleurs, dans un mode particulier de mise en #uvre, lorsque les éléments (a) et (b), et éventuellement (d), sont assemblés dans une même construction génétique, le second promoteur transcriptionnel (de l'élément (b)) et le promoteur inductible de l'élément (a), et éventuellement le promotteur de l'élément (d), peuvent être groupés pour ne former qu'une région promotrice commune, notamment bidirectionnelle, comme il sera expliqué en détail dans la suite du texte.
A cet effet, un autre objet de la présente invention réside dans un vecteur comprenant un élément (a) et un élément (b), et éventuellement un élément (d), tels que définis ci-avant.
Selon une première variante de l'invention, les éléments (a) et (b), et éventuellement (d), sont dans la même orientation dans le vecteur. Une telle variante est illustrée par exemple par le plasmide SV-g2-J10-C-pGL3 (figure 17).
Selon une autre variante de l'invention, les éléments (a) et (b), et éventuellement (d), sont en orientation opposée dans le vecteur. Une telle variante est illustrée par exemple par les plasmides représentés sur les figures 16, 18 et 19. Plus préférentiellement, dans cette variante de réalisation, le promoteur inductible de l'élément (a) et le promoteur transcriptionnel de l'élément (b) sont assemblés dans le vecteur pour former un promoteur bidirectionnel régulable. Un tel mode de mise en #uvre est illustré par exemple par les plasmides représentés sur les figures 18 et 19.
A cet égard, un objet particulier de l'invention réside dans un vecteur caractérisé en ce qu'il comprend, dans le sens 5'->3', un premier acide nucléique codant un PPAR, un premier promoteur transcriptionnel minimal contrôlant l'expression dudit premier acide nucléique, un ou plusieurs élément(s) de réponse à un PPAR, un deuxième promoteur transcriptionnel minimal et, sous le contrôle dudit deuxième promoteur transcriptionnel minimal, un deuxième acide nucléique codant un produit d'intérêt.
Ce type de construction est avantageux puisqu'il permet la co-expression des deux acides nucléiques dans le même plasmide, et l'amplification de cette expression par la régulation des deux acides nucléiques par les PPAR et leurs ligands.
L'expression de l'acide nucléique d'intérêt dans les compositions de l'invention est activée généralement en présence d'un ligand de PPAR (élément (c)). A cet égard, selon le PPAR utilisé, différents types de ligands peuvent être utilisés, naturels ou synthétiques.
Ainsi, les ligands activateurs des PPARa sont par exemple les fibrates tels que l'acide fibrique et ses analogues. Comme analogues de l'acide fibrique on peut mentionner notamment le gemfibrozyl (Atherosclerosis 114(1) (1995) 61), le bezafibrate (Hepatology 21 (1995) 1025), le ciprofibrate (BCE&M 9 (4) 825), le clofibrate (Drug Safety 11 (1994) 301), le fénofibrate (Fenofibrate Monograph, Oxford Clinical Communications, 1995), le clinofibrate (Kidney International. 44 (6) (1993) 1352), l'acide pirinixique (Wy-14,643) ou l'acide 5,8,11,14-eicosatetranoique (ETYA). Ces différents composés sont compatibles avec une utilisation biologique et/ou pharmacologique in vitro ou in vivo.
Les ligands activateurs des PPARy peuvent être choisis parmi les ligands naturels et synthétiques. Comme ligands naturels, on peut mentionner les acides gras et les eicosanoïdes (par exemple l'acide linoléique, l'acide linolénique, le 9HODE, le 5-HODE) et comme ligands synthétiques on peut mentionner les thiazolidinediones, telles que notamment la rosiglitazone (BRL49653), la pioglitazone ou la troglitazone (voir par exemple Krey G. et coll., Mol. Endocrinol., 11(1997) 779-791 ou Kliewer S. et Willson T., Curr. Opin. in Gen. Dev. 8 (1998) 576-581) ou le composé RG12525.
Par ailleurs, les compositions selon l'invention peuvent comporter plusieurs activateurs de PPAR en association, et en particulier un fibrate ou un analogue de fibrate associé à un rétinoïde.
L'invention a également pour objet l'utilisation d'une composition ou d'un vecteur tels que définis ci-avant pour exprimer un acide nucléique d'intérêt dans une cellule ex vivo ou in vitro.
A cet égard, l'acide nucléique peut être tout acide nucléique (ADN, ARN) codant pour un produit d'intérêt (ARN, protéine, polypeptide, peptide, etc.). Il peut s'agir d'un produit d'intérêt agroalimentaire, thérapeutique, vaccinal, d'un marqueur, etc.
L'invention concerne aussi l'utilisation d'une composition ou d'un vecteur tels que définis ci-avant pour la préparation d'un produit destiné à exprimer un acide nucléique d'intérêt dans une cellule in vivo.
L'invention a encore pour objet un procédé pour l'expression régulée d'un acide nucléique dans une cellule, comprenant la mise en contact de ladite cellule avec une composition ou un vecteur tels que définis ci-avant.
Pour un usage in vitro ou ex vivo, les cellules peuvent être mises en contact avec les compositions ou vecteurs de l'invention selon différents protocoles. Ainsi, les cellules en culture peuvent être incubées directement avec les éléments (a), (b) et (c), et éventuellement (d), de l'invention, par exemple avec un vecteur comportant les éléments (a) et (b) et en présence du ligand (c). De manière alternative, les cellules peuvent être incubées dans un premier temps avec les éléments (a) et (b) et éventuellement (d) (notamment assemblés dans un même vecteur) puis, dans un deuxième temps (après culture et éventuellement sélection des cellules modifiées), l'élément (c) peut être ajouté. Ce dernier type de protocole permet par exemple de découpler la phase de culture (ou d'expansion des cellules) de la phase d'expression de l'acide nucléique. Ces expériences peuvent être réalisées dans tout dispositif et milieu approprié, de préférence en plaque, boîte, flasque, en condition stérile. Les quantités de cellules, vecteur et ligand peuvent être aisément adaptées par l'homme du métier, sur la base des informations fournies dans les exemples et de ses connaissances générales.
Il est à noter que les blocs fonctionnels que l'on a en FIG. 3 peuvent fonctionner en mode de flux continu ou sur un tampon d'énonciation entier, selon le besoin d'avoir des opérations en temps réel. Il est également à noter que le système de règles de modification décrit ci-dessus peut, par exemple, être mis en oeuvre par utilisation de réseaux neuraux qui sont traités dans la thèse de IIHyun Nam citée cidessus.
En se référant à présent à la FIG. 4, il est représenté un schéma d'enchaînement d'étapes d'un procédé de reconnaissance et d'édition dynamiques de termes lexicaux selon un mode de réalisation illustratif de la présente invention. En particulier, le procédé illustratif comprend une synthèse vocale paramétrique, tel qu'explicitée ci-dessus, faisant partie de l'opération d'édition audio. A l'étape 60, un signal devant être transmis est reçu et son signal audio et son signal vidéo correspondants (ou des parties de ceux-ci, selon la taille de la mémoire) sont mis en tampon. Ensuite, à l'étape 62, le signal audio est subdivisé en trames. Des vecteurs de caractéristiques sont ensuite extraits des trames et décodés, par exemple comme décrit ci-dessus. Si un ou plusieurs mots cible sont détectés dans une trame, la trame est alors étiqueté (étape 64).
A l'étape 66, le signal audio ou vocal d'entrée est également analysé spectralement, par exemple comme décrit ci-dessus, pour décomposer le signal en des représentations paramétriques. Comme mentionné ci-dessus, de telles représentations paramétriques peuvent comprendre des paramètres de zone vocale et des paramètres d'excitation. Les paramètres spectraux des mots cibles détectés que l'on trouve dans les trames étiquetées sont ensuite modifiés selon des règles de modification préétablies, afin de former des mots de substitution devant remplacer les mots cible (étape 68). L'énonciation modifiée est ensuite passée par une synthèse vocale, à l'étape 70, le terme lexical de substitution issu de la synthèse remplaçant le tertre lexical cible originel. Le signal audio édité (signal vocal synthétisé) est ensuite combiné avec le signal vidéo originel pour transmission, à l'étape 72.
En se référant à présent aux FIGS. 5A et 5B, des variantes de réalisation respectives du processeur d'édition audio 24 sont représentées. Sur la FIG. 5A, l'opération d'édition audio produit l'assourdissement du signal vocal de sortie pendant ce que durent) le ou les mots dont le processeur de retouche de mots 22 a déterminé qu'il faisai(en)t partie du vocabulaire cible. Dans ce mode de réalisation, plutôt que le sous-système de reconnaissance de motif 30 fournissant les trames étiquetées au processeur d'édition audio 24,un signal de validation/invalidation est fournit au processeur 24 par le sous-système 30. Le processeur d'édition audio dans ce cas est un tampon de sortie audio 80. Le signal de validation/invalidation est généré par le sous-système de reconnaissance de motif 30 et sert à invalider le tampon de sortie audio 80 pendant la durée du mot ou des mots détectés. De manière correspondante, la partie du signal audio contenant le matériau inacceptable est assourdie pour l'émission.
La FIG. 5B représente un autre mode de réalisation illustratif du processeur d'édition audio 24. Ceci est similaire au mode de réalisation de la FIG. 5A, dans lequel le sous-système de reconnaissance de motif 30 génère un signal de validation/invalidation devant mettre en service et hors service la sortie du tampon audio de sortie 80. Cependant, le mode de réalisation de la FIG. 5B comprend également un générateur de sons 82 qui est validé par le sous-système 30 lorsque le tampon audio 80 est invalidé et vice versa. Dans ce cas, plutôt que d'assourdir la sortie lorsqu'un mot ou des mots cible sont détectés, un son ou un autre effet sonore approprié, généré par le générateur de sons 82, est inséré dans le signal audio, pendant ce que durent) le ou les mots détectés. Textes des f iclures FIGURE 1 12 SIGNAL À TRANSMETTRE 14 TAMPON AUDIO 16 TAMPON VIDÉO 18 MÉMOIRE DE DONNÉES D'APPRENTISSAGE 20 MÉMOIRE DE MODÈLES DE MOTS STATISTIQUES 24 PROCESSEUR D'ÉDITION AUDIO 22 PROCESSEUR DE RETOUCHE DE MOTS 26 SIGNAL ÉDITÉ FIGURE 2 SPEECH SIGNAL : SIGNAL VOCAL 22 PROCESSEUR DE RETOUCHE DE MOTS 28 EXTRACTION DE CARACTERISTIQUE 30 IDENTIFICATION DE MOTIF 18 MEMOIRE DE DONNËES D'APPRENTISSAGE 20 MEMOIRE DE MODELES DE MOTS STATISTIQUES LABELED FRAMES : TRAMES ETIQUETTEES FIGURE 3 32 SIGNAL VOCAL D'ENTREE 34 ANALYSE SPECTRALE VOCALE 36 PARAMETRES DE ZONE VOCALE 38 PARAMETRES D'EXCITATION 40 MODIFICATION DE ZONE VOCALE 42 MODIFICATION DE L'EXCITATION 52 SYNTHESE VOCALE 26 SIGNAL VOCAL DE SORTIE 50 SORTIE D'IDENTIFICATEUR (CIBLE) 44 BASE DE DONNEES DES REGLES DE MODIFICATION 46 DONNEES D'APPRENTISSAGE 48 ALGORITHME D'APPRENTISSAGE MACHINE CIBLE 1 : FINAL 1 CIBLE N : FINAL N FIGURE 4 60 TAMPON AUDIO ET SIGNAUX VIDEO RECUS FAISANT PARTIE DU SIGNAL A TRANSMETTRE 62 SUBDIVISION DU SIGNAL D'ENTREE AUDIO EN TRAMES, EXTRACTION DES VECTEURS CARACTÉRISTIQUES ET DECODAGE DE CHAQUE TRAME 64 SI UN OU PLUSIEURS MOTS CIBLES SONT DETECTES DANS LA TRAME, ALORS ETIQUETTER LA TRAME 66 ANALYSER SPECTRALEMENT LE SIGNAL VOCAL D'ENTREE CORRESPONDANT AUX TRAMES ETIQUETTEES 68 MODIFIER LES PARAMETRES SPECTRAUX DES MOTS CIBLES, D'APRES DES REGLES DE MODIFICATION PRÉETABLIES, AFIN DE FORMER DES MOTS DE SUBSTITUTION, DEVANT REMPLACER LES MOTS CIBLES 70 SYNTHETISER UN SIGNAL VOCAL PAR DES MOTS DE SUBSTITUTION, REMETTRE EN PLACE POUR PRODUIRE UN SIGNAL AUDIO EDITE 72 COMBINER LE SIGNAL AUDIO EDITÉ AVEC LE SIGNAL VIDEO ORIGINEL POUR LA TRANSMISSION FIGURE 5A INPUT SPEECH SIGNAL : SIGNAL VOCAL D'ENTREE OUTPUT SPEECH SIGNAL : SIGNAL VOCAL DE SORTIE ENABLE/DISABLE SIGNAL : VALIDATION/INVALIDATION DU SIGNAL FIGURE 5B INPUT SPEECH SIGNAL : SIGNAL VOCAL D'ENTREE OUTPUT SPEECH SIGNAL : SIGNAL VOCAL DE SORTIE ENABLE/DISABLE SIGNAL : VALIDATION/INVALIDATION DU SIGNAL 82 GENERATEUR DE SONS
Télécommande d'exécution d'une fonction dans un serveur La présente invention concerne de manière générale des échanges demande/réponse entre un terminal client, appelé ci-après client, et un serveur à travers un réseau de transmission à débit élevé. Plus particulièrement, elle a trait à l'exécution d'une fonction dans le serveur sous la commande du client à travers le réseau Internet.
Le réseau Internet est basé sur une structure client-serveur qui utilise je protocole de communication HTTP (Hypertext Trans-fer Protocol). Si un client demande un document au serveur, le client se connecte au réseau Internet, le document est transféré du serveur au client et le client se déconnecte du réseau. La plupart des documents Web d'un serveur HTTP sont exprimés dans le langage HTML (Hypertext Markup Language). Des balises de ce langage définissent la structure logique d'un document Web. Un navigateur Web - une interface graphique dans le terminal pour visualiser un document Web - interprète les balises HTML et effectue la présentation graphique. Les documents HTML peuvent contenir des images et d'autres éléments non-textuels. Si le navigateur trouve un tel élément dans un document HTML, il charge automatiquement les données correspondantes en faisant appel au protocole HTTP.
Les documents Web sont identifiés par un système d'adressage. Chaque document Web, ainsi que les éléments intégrés au document, sont identifiés par une adresse respective URL (Uniform Ressource Locator). Le document Web peut exister statiquement sur 1e serveur ou peut être créé dyna:niquament au momen" de La demande du document car 'Le cLïent. Cette technique est transparente pour -gin client Web. Les types de document qu'un client charge et la façon dont le client interagit avec un document dépendent de la fonctionnalité des programmes utilisés dans le navigateur.
Les applications Web sont partagées en de,,-;x catégories selon leur lieu d'exécution les applications du côté serveur et les applications du côté client. Les applications dans le serveur sont responsables de la création et la mise à disposition des données. Les applications dans le client ont pour tâches la visualisation des données et la gestion des interactions avec l'utilisateur.
La mise à disposition des données est habituellement sous la forme de fichiers statiques, installés dans les répertoires du serveur HTTP. Les applications Web donnent accès à des données qui n'existent pas encore ou qui existent dans un format autre qu'en langage HTML.
Les données peuvent être également créées dynamiquement à partir de sources d'informations très complexes telle qu'une base de données. Selon leurs fonctionnalités, plusieurs types d'applications Web dans un serveur HTTP sont différenciées les applications intégrées dans le serveur HTTP et les applications externes qui sont lancées par le serveur HTTP, mais aussi les applications qui créent un document complet et les applications qui ajoutent des morceaux à un document existant ou qui modifient un document existant. L'invention s'inscrit dans le cadre des ces dernières applications. En utilisant des applications du serveur, le navigateur dans le client ne sert que pour l'entrée et la sortie de données en mode graphique.
Pour réduire la charge du réseau et pour améliorer les délais de réponse, une partie de la gestion de données, par exemple la validation de données entrantes, est déportée dans le client. Le langage interprété HTML ne fournit pas cette fonctionnalité. Pour résoudre ce problème, des applications Web du côté client ont été développées, par exemple au moyen d'applets en langage JAVA (marque déposée), ou de contrôles en langage ActiveX (marque déposée). La dépendance de ces applications au système d'exploitation et au navigateur est importante.
La présente invention vise à améliorer l'interface entre un client et un serveur en rendant interactif des documents exprimés en langage hypermédia dans le client directement avec des fonctions appelées dans le serveur par le client pour créer, modifier ou compléter un document.
A cette fin, un procédé pour télécommander l'exécution d'une fonction dans un serveur en réponse à une requête transmise par un terminal client à travers un réseau de transmission, est caractérisé par les étapes suivantes - inclure dans la requête établie par le terminal client une adresse d'une librairie dynamique qui est contenue dans le serveur et qui contient, en outre, ladite fonction, et des champs de données dont le nombre identifie la fonction ; - compter les champs de données dans la requête reçue dans le serveur SER ; et - sélectionner 1a fonction Jans une table de foncrions mémorisée dans 'Le servelr en dépendance du nombre de champs de données comptés afin d'exécuter la fonction dans le serveur.
Le terminal client selon l'invention n'utilise aucun applet en langage JAVA ou aucun contrôle en langage ActiveX, mais seulement des documents exprimés typiquement en langage H7ML, ce qui soulage le terminal client.
De manière à ajuster le nombre de champs de données au nombre identifiant la fonction, au moins l'un des champs de données inclus dans la requête est de type caché et a des données n'apparaissant pas sur un écran du terminal client. Les données du ou des champs cachés supplémentaires sont bien souvent sans signification.
Selon encore un autre mode de réalisation, les moyens de calcul calculent en outre une grandeur de modification pour modifier par soustraction la valeur de base du premier coefficient d'amortissement virtuel des amortisseurs latéraux virtuels en fonction de l'indice de cliquètement ou de relaxation indiquant la tendance de la caisse du véhicule à être soumise au cliquètement ou à des oscillations de relation, de telle façon que la grandeur de modification fonction de l'indice de cliquètement ou de relaxation soit généralement augmentée en ce qui concerne sa valeur absolue, en fonction de l'augmentation de l'indice de cliquètement ou de relaxation, et une grandeur de modification pour modifier par soustraction la valeur de base du deuxième coefficient d'amortissement virtuel de l'amortisseur angulaire virtuel, en fonction de l'indice de cliquètement ou de relaxation, de telle façon que la grandeur de modification fonction de l'indice de cliquètement ou de relaxation soit généralement augmentée en ce qui concerne sa valeur absolue, en fonction de l'augmentation de l'indice de cliquètement ou de relaxation, et ensuite à sélectionner soit les grandeurs de modification fonction de l'indice de balancement sélectionné ou fonction de l'indice de battement, soit les grandeurs de modification fonction de l'indice de cliquètement ou de relaxation, en sélectionnant celle qui est supérieure à l'autre dans son entier en ce qui concerne leurs valeurs absolues, pour modifier par addition ou par soustraction les valeurs de base des premier et deuxième coefficients d'amortissement virtuel.
Selon un autre mode de réalisation, les moyens de calcul calculent en outre une grandeur de modification pour modifier par addition la valeur de base du premier coefficient d'amortissement virtuel de l'amortisseur latéral virtuel en fonction de la masse de la caisse du véhicule, de telle façon que la grandeur de modification
fonction de la masse de la caisse du véhicule soit généralement augmentée en fonction de l'augmentation de la masse.