INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
1.h. 3-hydroxy-3-(2-oxo-1,2-dihydro-4-pyridinyl)pentanoate de tert-butyle Une solution de diisopropylamine (35 ml, 250 mmol) dans du tétrahydrofurane anhydre (275 ml) est traitée goutte à goutte à 0 "C, sous argon, par du n-butyllithium (2,5 M dans hexane, 100 ml, 250 mmol). Le mélange résultant est agité à 0 C pendant 15 min, puis refroidi à -78 C et traité par de l'acétate de tert-butyle (33,8 ml, 250 mmol). Après agitation à -78 C pendant 15 min, le réactif lithié résultant est ajouté goutte à goutte, durant 1 h, au moyen d'une canule de transfert, sur une solution à -78 C de 1-(2-oxo1,2-dihydro-4-pyridinyl)-1-propanone (obtenue selon l.g, 15,2 g, 100 mmol) dans du tétrahydrofurane anhydre (330 ml) et le mélange résultant est maintenu à -78 C pendant 15 min, puis laissé remonter à 0 C durant 1 h. Le milieu réactionnel est hydrolysé par addition d'eau (60 ml) puis les volatiles sous évaporés sous pression réduite. Le résidu est repris à l'acétate d'éthyle et la solution résultante est lavée à l'eau, séchée et concentrée. Le résidu est suspendu dans l'éther diéthylique et filtré pour donner après séchage 21,5 g (80 %) d'un solide blanc, p.f. 167 "C.
RMN 1H (DMSO): 0,67 (t, 3H); 1,25 (s, 9H); 1,70 (q, 2H); 2,59 (dd, 2H); 4,97 (s, 1H); 6,18 (d, 1H); 6,32 (s, 1H); 7,23 (d, 1H); 11,3 (br, 1H).
1. i. 3-[1-(6-benzyloxy-7-fluoro-2-iodo-3-quinolylméthyl)-2oxo-1, 2-dihydro-4-pyridinyl]-3-hydroxypentanoate de tert-butyle Un mélange, sous atmosphère d'argon, de 6-benzyloxy-7-fluoro-2-iodo3-quinolylméthanol (obtenu selon l. f, 2,05 g, 5 mmol), de 3-hydroxy-3-(2-oxo1,2-dihydro-4-pyridinyl)pentanoate de tert-butyle (obtenu selon l. h, 1,47 g, 5,5 mmol), et de tributylphosphine (1,36 ml, 5,5 mmol) dans du tétrahydrofurane anhydre (20 ml) est traité goutte à goutte par de l'azodicarboxylate de diéthyle (1,3 ml, 7,5 mmol).
Un exemple 3 sur l'annexe 1 représente un tableau définissant des étapes d'un algorithme 1, dans un exemple de ce procédé.
Un exemple 4, sur l'annexe 3, représente un tableau définissant des étapes d'un algorithme 2.
Comme les exemples 1 à 4, les parties 1 et 2 des annexes 4 à 6, concernent aussi un procédé de calcul de coût d'applications.
Ces parties illustrent un exemple de programme source de calcul de coût d'application, en langage de programmation Pascal.
Ces sources illustrent des exemples d'algorithmes généraux dits de principe, pour un tel procédé.
Sur l'annexe 1 encore, un exemple 5 concerne un procédé de compression d'informations numériques codées et d'accès dynamique à de telles informations, sur un support tel que carte à puce.
L'exemple 5 comporte trois tableaux, respectivement désignés en 5a, 5b et 5C.
Le tableau 5a définit un ensemble d'informations avant compression.
Le tableau 5b présente un extrait de table de conversion de motifs en vue de la compression, et leur code de substitution respectif.
Et le tableau 5c représente un ensemble d'informations dans lequel une compression à été effectuée par substitution de motifs, avec un caractère de marquage.
Dans les tableaux 5a et 5c, les cases hachurées représentent des espaces mémoires inutilisés, tandis que les cases noircies représentent le gain de compression.
Et le caractère 8, à la ligne 3 colonne 2 par exemple, constitue un délimitateur d'information.
Les annexes 2 et 3 comprennent un exemple 6, avec des tableaux 6a à 6f, illustrant le contenu de mémoires d'un support tel que carte à puce, à différentes étapes d'un exemple de procédé de compression d'information de premier niveau.
Dans ces tableaux les caractères e et les cases hachurées ont la même signification que dans l'exemple 5.
Il en va de même dans l'exemple 7.
Le tableau 6a représente le contenu de trois sections de mémoire d'un tel support, avant la compression.
Le tableau 6b représente le contenu des trois sections de mémoire, après une étape de tentative de lecture de ce contenu, de copie d'une première section CP dans une deuxième section MT1, et un remplissage d'une troisième section MT2 de mémoire tampon par un algorithme de décompression.
Le tableau de l'exemple 6c représente une étape de modification d'un ensemble d'informations, dans la section de mémoire tampon MT2.
Les cases grisées (lignes 9 et 10, et les cinq premières cases de la ligne 10) représentent sur le tableau 6C, un ensemble de codes modifiés dans section MT2.
Le tableau de l'exemple 6d représente une étape d'application d'un algorithme de compression sur la section MT2 par copie d'un résultat dans la section MT1, qui est alors désignée alors en MTlbis.
Le tableau de l'exemple 6e représente une étape de localisation de différences entre les sections de mémoires MT1 et MTlbis.
Dans ce tableau 6e, les trois dernières cases de la ligne 6, la ligne 7 et les six premières cases de la ligne 8 dans la section MT1, ainsi que les mêmes cases dans la section MTlbis, illustrent les différences sélectionnées au sein des sections MT1 et la nouvelle section MTlbis.
Sur l'annexe 3, le tableau de l'exemple 6f représente après une étape d'effacement du contenu du support correspondant aux différences sélectionnées dans la section MT1, puis d'écriture de nouvelles informations disponibles dans les cases correspondantes de la section MTlbis, le contenu des sections CP, MT1 et MT2.
Notons que le code Ix désigne un code de qualification de l'information sur huit bits, préalablement désigné par I1, I2 ou I3.
L'annexe 3 comprend un exemple 7, avec des tableaux 7a, 7b et 7c, illustrant le contenu de mémoires d'un support tel que carte à puce, à différentes étapes d'un exemple de procédé de compression d'information de deuxième niveau.
Dans cet exemple, les mêmes informations que dans l'exemple 6 ont été choisies, pour plus de simplicité.
Tandis que la compression de premier niveau a été effectuée préalablement.
Le tableau 7a de l'exemple 7 illustre l'état des informations qui en découle.
Le tableau 7b illustre le résultat d'une étape de recherche de chaînes, dans l'exemple d'au moins trois caractères, répétées au mois deux fois dans le contenu d'une section de mémoire que l'on souhaite compresser.
Et le tableau 7c représente les résultats d'une étape de substitution de ces chaînes par un code de substitution illustré sur le tableau 7b.
Dans ce tableau, les seize dernières cases de la quatrième ligne représentent les modifications apportées à la section de mémoire.
D'autre part, la description détaillée de l'invention qui suit, se réfère aux dessins annexés, donnés uniquement à titre d'exemple.
Le support 9 d'informations codées, est comme on le comprend plus loin, destiné à permettre la lecture et/ou l'inscription d'informations.
Ce support 9 est équipé d'un microprocesseur apte à définir au moins deux sections de mémoire par exemple MT1, MTlbis, MT2, pour l'enregistrement et l'accès à des informations codées telles que paramètres de configuration d'application, table de conversion ou clé confidentielle d'identification.
Dans des exemples, les sections de mémoire ainsi que les informations enregistrées sont préalablement inscrites sur le dispositif 8, et selon les cas copiées sur le support 9.
Le dispositif 2 permet ainsi la mise en oeuvre d'un procédé de configuration automatique sécurisée.
Le but de ce procédé est de permettre l'accès simplifié à des applications.
Ces applications sont telles que logiciels de courrier électronique ou "E-mail", navigation sur des réseaux globaux comme internet.
Mais sont aussi visées ici des traitement de texte, tableur, gestionnaire de base de données, programme de dessin ou animation, et analogues.
Ce procédé prévoit une routine d'appel apte à présenter une structure contenant des paramètres discriminants de l'application choisie.
Dans l'exemple d'une application de courrier électronique ou"E-mail", la routine d'appel contient - le nom de l'utilisateur - son adresse de retour - le compte dit "POP" - le serveur dit "POP" ; et - le serveur dit"SMTP".
Le procédé de configuration effectue pour chacune des applications à gérer, une recherche dans une base de données de registres, si l'application à configurer est installée sur le dispositif 2, ou accessible via celui-ci depuis le serveur 3 ou le modem 7.
Dans l'affirmative, le procédé effectue alors une étape de modification de fichiers d'initialisation de l'application choisie, dits fichiers "INI".
Dans la mesure où la recherche s'avère négative, le procédé effectue la saisie automatisée ou entrée de la routine d'appel de l'application, dans la base de données de registres.
Une fonction inverse à l'étape de modification de fichiers d'initialisation de l'application choisie, permet de déconfigurer et d'effacer dans le dispositif recevant le support tel que carte à puce.
Cela assure ainsi de conserver la confidentialité pour l'utilisateur de l'application, par rapport à des utilisateurs ultérieurs du même dispositif.
Dans un premier exemple de courrier électronique appelé Eudora (R), la configuration prévoit la recherche dans la base de registre d'un chemin d'accès à un fichier d'initialisation pointé par un sous-fichier de la base dit clé "QUALCOM".
Lorsque cette clé est présente, les codes d'adresse dits "PATH" d'installation que la clé contient son saisis.
Dans ces dessins, la figure 1 représente un système en réseau comprenant des dispositifs, ici des ordinateurs de type PC, aptes à mettre en oeuvre au moins un procédé selon l'invention, tel qu'évoqué.
Les figures 2 à 4 sont des graphiques illustrant, dans un procédé de compression et d'accès dynamique, les gains obtenus.
Plus précisément, la figure 2 illustre le gain obtenu en fonction de la longueur et du nombre de répétitions, avec en abscisses la longueur (L) et en ordonnées le gain en pourcents (%).
La figure 3 illustre aussi le gain obtenu en fonction de la longueur et du nombre de répétitions, avec en abscisses la longueur (L) et en ordonnées le gain en pourcents (%).
La figure 4 est un graphique qui illustre la longueur minimale d'une chaîne en fonction du nombre de répétitions, dans un procédé de compression et d'accès dynamique, avec en ordonnées la longueur (L) et en abscisses le nombre de répétitions (N).
La figure 5 est un organigramme logique qui illustre un exemple d'algorithme dit ALGO 1 dans un procédé de calcul de coûts d'applications.
Et la figure 6 est un organigramme logique qui illustre un autre exemple d'algorithme dit ALGO 2 dans un procédé de calcul de coûts d'applications.
Sur la figure 1 un système informatique 1 en réseau comprenant plusieurs dispositifs 2, 3 et 4 tels qu'ordinateurs de type PC, sont représentés.
Ces système 1 et dispositifs 2 sont aptes à mettre en oeuvre au moins un procédé selon l'invention, tel qu'évoqué.
Le système 1 comporte aussi un réseau 5 de accès à des applications telles que courriers électronique ou navigation, notamment.
D'autres dispositifs comparables au dispositif 2 sont connectés à ce serveur 3, qui fait donc office de serveur d'adressage.
Tandis que le dispositif 4 est un serveur de gestion centralisée, notamment destiné à permettre la facturation d'applications exécutées sur le dispositif 2, ou sur d'autres dispositifs similaires non représentés.
Typiquement, le dispositif 2 est en libre-service, pour permettre à différents utilisateurs d'employer des applications.
Au moins un dispositif 2 est dans un exemple la propriété de ou loué à l'utilisateur.
Afin de pouvoir personnaliser le dispositif 2 en fonction de chaque utilisateur, et assurer une facturation proportionnelle à leur utilisation d'applications, le dispositif 2 comporte un lecteur 8 de support d'informations codées.
Sur la figure 1, ce support est une carte à puce désignée en 9.
On obtient de cette manière un coin de préhension 47 situé en zone médiane de l'un des bords du produit 41, ledit coin de préhension 47 pouvant être facilement séparé du rectangle élémentaire sous-jacent 55 par un mouvement illustré par la flèche 61 aux figures 6 et 1.
Lorsque l'on forme une pile 39 de produits d'hygiène 41 pliés comme on vient de le décrire, on veille à ce que chaque produit présente un coin de préhension 47 le long d'un même bord de la pile, en les orientant tous de la même façon ou par exemple alternativement dans un sens et dans l'autre.
Lorsque l'on place la pile dans l'étui, on fait en sorte que ce bord de la pile s'étende le long du bord d'arrêt 119 de l'étui.
Ce mode de pliage est particulièrement adapté aux étuis définissant un espace intérieur sensiblement parallélépipédique, et dont la fenêtre d'ouverture 37 est disposée le long d'un petit côté de l'étui, comme c'est le cas pour l'étui représenté aux figures 1 à 4.
Les figures 7 et 8 illustrent un second mode de réalisation de l'étui 1, également apte à recevoir des produits d'hygiène pliés suivant le premier mode de pliage, et qui ne sera décrit que par ses différences avec le premier mode de réalisation.
L'étui 2 est cette fois réalisé à partir d'une pièce 65 découpée dans une feuille de matière plastique souple.
La pièce 65 présente un axe longitudinal de symétrie 67, et une ligne de pliage 69 perpendiculaire à l'axe de symétrie 67 et partageant la pièce 65 en deux parties 71, 72 ayant des contours extérieurs sensiblement symétriques par rapport à la ligne de pliage. Elles présentent le long de ce contour un bord latéral 73 dont le contour intérieur est illustré à la figure 8 par une ligne pointillée 75.
L'étui 2 est réalisé en pliant la pièce 65 le long de la ligne de pliage 69 et en soudant l'un contre l'autre les des bords latéraux 73 respectifs des deux parties 71, 72. L'étui est fermé hermétiquement sur son pourtour par le pliage la soudure.
La ligne d'affaiblissement 23 est située sur l'une des parties 71.
Dans une première variante de ce mode de réalisation, les extrémités 25 de la ligne 23 s'étendent jusqu'à la ligne de pliage 69.
L'étiquette adhésive 27 recouvre le clapet 39 et déborde tout autour de celui-ci sur la partie 71 correspondante de l'étui 2, et soit au-delà de la ligne de pliage 69 sur l'autre partie 72 de l'étui 2 soit placée de manière à ce que le bord de l'étiquette 27 soit adjacent à la ligne de pliage 69.
Dans une seconde variante de ce mode de réalisation, la ligne de pliage 69 est localisée sur le bord de la partie 71 opposé à la ligne d'affaiblissement 23.
L'étiquette 27 est alors formée par un retour de la partie arrière 72 de l'étui sur la partie avant 71. Ce retour chevauche la ligne d'affaiblissement 23 de manière à recouvrir le clapet d'ouverture 37. Ce retour est rendu adhésif après onction par un polymère adhésif. I1 est particulièrement avantageux d'utiliser à cette fin un adhésif dont la polymérisation est contrôlable au moyen de la température. L'homme du métier est à même de déterminer à quel stade de la fabrication de l'étui il sera opportun de conférer au polymère ses propriétés adhésives.
Lors de la première utilisation de l'étui 2, la partie 71 se découpe le long de la ligne d'affaiblissement 23, dégageant une fenêtre de distribution 37 (figure 7). Le processus de découpe s'arrête de lui-même sur la ligne de pliage 69, qui constitue un bord d'arrêt.
Les moyens d'étanchéité de l'étui 2 comprennent la nature du matériau constitutif de l'étui, l'étiquette adhésive 27, la ligne de soudure 74 et la ligne de pliage 69.
Un autre mode de réalisation de l'étui 2, également apte à recevoir des produits d'hygiène pliés suivant le premier mode de pliage, et qui ne sera décrit que par ses différences avec le mode de réalisation de l'étui 2 explicité ci-dessus.
Les deux coques 3 sont disposées l'une contre l'autre, les deux cavités 5 communiquent l'une avec l'autre et les bords latéraux 7 respectifs sont soudés hermétiquement l'un à l'autre sur tout le pourtour des deux corps.
Les bords latéraux 7 sont de préférence de faible largeur devant les dimensions des cavités 5, en pratique leur largeur est la plus petite possible qui soit compatible avec une soudure efficace.
Chaque corps présente un fond 15 sensiblement plan et une paroi latérale 17 qui relie le fond 15 et le bord latéral 7. Le fond 15 est séparé de la paroi latérale 17 adjacente par quatre arêtes s'étendant selon le contour 19 du fond 15, obtenues lors du thermoformage.
Le fond 15 de l'une des coques 3, dite "avant", comporte un dispositif d'ouverture 21. Le dispositif comprend une ligne d'affaiblissement 23 pratiquée dans le fond 15 de la coque 3, par exemple une ligne prédécoupée, qui n'est pas rectiligne ni fermée, et dont les deux extrémités 25 rejoignent le contour 19 en une même arête 119 formant bord d'arrêt comme il sera expliqué plus loin.
Le dispositif d'ouverture 21 comprend également une étiquette adhésive 27 disposée sur l'extérieur de la coque 3. L'étiquette 27 recouvre entièrement un clapet 29 défini par la ligne d'affaiblissement 23 et la partie du bord d'arrêt 119 située entre les extrémités 25 de la ligne d'affaiblissement 23 formant ligne d'articulation du clapet.
En outre, l'étiquette déborde du clapet 29, d'une part sur le fond 15 en ménageant une zone de débordement 31 tout autour de la ligne d'affaiblissement 23, et d'autre part au-delà du bord d'arrêt 119 en ménageant une zone de fixation 33 sur la paroi latérale 17.
A l'opposé de la zone de fixation 33, 1' étiquette adhésive 27 est munie d'un onglet 35, prolongeant localement la zone de débordement 31. L'onglet 35 ne possède pas de revêtement adhésif.
Lors de la première utilisation de l'étui l'utilisateur prend l'onglet 35 entre deux doigts et le soulève en direction de la zone de fixation 33.
La zone de débordement 31 de l'étiquette adhésive 27 se décolle du fond 15, pendant que le clapet 29 se découpe de proche en proche le long de la ligne d'affaiblissement 23. Le clapet 29 reste collé à l'étiquette adhésive 27 et laisse apparaître une fenêtre de distribution 37 à travers le fond 15.
Le processus de découpe du fond 15 s'arrête automatiquement lorsqu'il atteint l'arête 119 aux extrémités 25 de la ligne d'affaiblissement 23, car: - il n'y a pas sur la paroi latérale 17 de ligne d'affaiblissement pour guider la découpe, - l'arête 119, séparant le plan du fond 15 et le plan de la face adjacente de la paroi latérale 17, forme alors un bord d'arrêt pour le décollage de l'étiquette adhésive 27 et pour la découpe du fond 15, car la traction exercée par l'utilisateur sur l'onglet 35 n'est pas, par rapport à la paroi latérale 17, orientée dans la direction d'un arrachement, - le même bord d'arrêt 119 constitue, comme déjà exposé une ligne d'articulation naturelle (figure 1) entre le clapet 29 séparé du fond 15 et la paroi latérale 17.
Si les extrémités 25 de la ligne d'affaiblissement 23 ne s'étendaient pas sensiblement jusqu'au contour 19, il y aurait un risque de prolongement de la découpe au-delà desdites extrémités 25, de façon irrégulière, sous forme de déchirure, jusqu'à ce que ladite déchirure rencontre ledit contour 19. La déchirure, une fois amorcée, pourrait même se prolonger au-delà. C'est pourquoi il est préféré que la ligne d'affaiblissement 23 soit voisine d'un bord d'arrêt tel que 119.
Pour refermer l'étui 1, l'utilisateur procède de façon inverse à l'ouverture: il ramène le clapet 29 sur la fenêtre de distribution 37 et réapplique la zone de débordement 31 de l'étiquette adhésive 27 sur le fond 15.
L'étiquette adhésive 27 est munie d'un revêtement adhésif qui la rend capable de se décoller et de se recoller plusieurs fois, en rétablissant à chaque fois l'étanchéité.
L'étui 1 doit être étanche à l'air et à l'eau, pour éviter toute évaporation du liquide qui imprègne les produits d'hygiène 41 lorsqu'il s'agit de lingettes humides.
A cet effet, l'étui 1 comprend des moyens d'étanchéité, parmi lesquels l'étiquette adhésive 27, les lignes des soudure 8, et la ligne d'articulation formée par une partie de l'arête 119.
Dans l'exemple représenté, les bords latéraux 7 peuvent présenter localement une largeur plus importante, par exemple pour réaliser une languette 9 pour la manipulation de l'étui 1 et son accrochage sur présentoir de vente.
Références Addison G.M. et ai., 1970, The radioimmunometric assay, In:i Radioimmunoassay Methods, K.E. Kirkham and W.M. Hunter Eds., Churchill-Livingstone, Edinburgh, UK : 447-461.
Atoda H. et al., 1989, A novel blood coagulation factor IX/factorX-binding protein with anticoagulant activity from the venom of Trimeresurus flavoridis (habu snake) isolation and characterization, J. Biochem., 106 : 808-813.
Atoda H. et al., 1991, The primary structure of coagulation factor IX/factorX-bining protein isolated from the venom of trimeresus flavoridis. J. Biochem, 266 : 14903-14911.
Atoda H. et ai., 1994, Binding properties of the coagulation factorIX/factorX-binding protein isolated from the venom of trimeresus flavoridis. Eur. J. Biochem., 224 703-708.
Avrameas, S. and Guilbert, B. (1971) Dosages enzymoimmunologiques de protéines à l'aide d'immunoadsorbants et d'antigènes marqués aux enzymes (1971) CR Acad. Sci. Paris Série D 273, 2705-2707.
Bon S. et Masoulié J., 1997, Quaternary associations of acetylcholinesterase, J. Biol. Chem., 272 : 3007-3015.
Caruelle D., Grassi J., Courty J., Groux-Muscatelli B., Pradelles P., Barritault D., Caruelle J.P., 1988, Development and testing of radio and enzyme immunoassays for acidic fibroblast growth factor (aFGF), Anal. Biochem., 173(2) : 328-339.
Cavaillon J-M. et al., 1996, J. Endoth. Res., 3 : 471-480.
Chai H., Vasudevan S.G., Porter A.G., Chua K.L., Oh S., Yap M., 1993, Glycosylation and high-level secretion of human tumour necrosis factor-beta in recombinant baculovirusinfected insect cells, Biotechnol. Appl. Biochem., 18(Pt 3) : 259-273.
Chen Y.L. et al., 1995, Functional and sequence characterization of agkicetin, a new glycoprotein Ib antagonist isolated from Agkistrodon acutus venom. Biochem.
Biophys. Res. Comm., 210 : 472-477 Choumet, V., Faure, G., Robbe-Vincent, A., Saliou, B., Mazié, J.C. & Bon, C., 1992, Immunochemicai analysis of a snake venom phosphôlipase A2 neurotoxin, crotoxin, with monoclonal antibodies. Mol. Immunol., 29, 871-882.
Choumet, V., Lafaye, P., Mazié, J.-C. and Bon, C., 1997, A monoclonal antibody directed against the non-toxic subunit of crotoxin neutralizes its toxicity. Mechanism of action and analysis of the zone of Interaction between crotoxin's subunits. manuscript in preparation.
Cousin X., Bon S., Duval N., Massoulié J. and Bon C., 1996a, Cloning and expression of acetylcholinesterase from Bungarus fasciatus venom. A new type of COOH-terminal domain ; Involvement of a positively charged residue in the peripheral site. J. Biol Chem. 271 : 15099-15108.
Cousin X., Créminon C., Grassi J., Méflah K., Cornu G., Saliou B., Bon S., Massoulié J. and Bon C., 1996b, Acetylcholinesterase from Bungarus venom : a monomeric species. FEBS Lett. 387 : 196-200.
Créminon, C., Frobert, Y., Habib, A., Maclouf, J., Patrono, C., Pradelles, P. and Grassi, J., 1993, Enzyme immunometric assay for endothelin using tandem monoclonal antibodies. J.
Immunol. Methods 162 : 179-192.
2) La phosphatase alcaline possède une activité spécifique élevée et le substrat colorimétrique le plus souvent utilisé (le p-nitrophenylphosphate) est stable et la réaction colorée se développe lentement. Cependant, la phosphatase alcaline est une enzyme coûteuse. Par ailleurs, l'existence de phosphatases endogènes dans l'échantillon peut donner lieu à des réactions faussement positives.
3) La beta-galactosidase est une enzyme tétramérique stable mais de poids moléculaire élevé (465 kDa) et peu utilisée dans des tests immunoenzymatiques.
4) L'acétylcholinestérase (AChE) de gymnote (Electrophorus electricus) est une enzyme tétramérique soluble de haut poids moléculaire (240 kDa) possédant une constante catalytique plus élevée que les trois enzymes précédemment décrites et ayant un seuil de détection très faible de l'ordre de 10-18 M. Parmi les substrats utilisés, contenant des groupes SH libres, on préfère généralement l'acétylthiocholine en présence d'acide 5,5'-dithio-bis(2-nitrobenzoique) . Ce substrat permet le développement d'une réaction colorée dont le signal augmente de façon linéaire pendant plusieurs heures, sans nécessiter un arrêt de la réaction.