Cell Rep. 7 : 379-384 (1988) ; Shimamoto et al., Nature 338 : 274-277 (1989) ; Datta et al., Biotechnology 8 736-740 (1990)). Les deux types peuvent être aussi transformés en routine par utilisation d'un bombardement particulaire (Christou et al., Biotechnology 9 : 957-962 (1991)) La demande de brevet EP 0 332 581 (au nom de Ciba Geigy) décrit des techniques pour la production, la transformation et la régénération de protoplastes de Pooideae. Ces techniques permettent la transformation de Dactylis et du blé. En outre, la transformation du blé est décrite par Vasil et al. (Biotechnology 10 : 667-674 (1992)) par utilisation d'un bombardement particulaire dans des cellules d'un callus régénérable à long terme du type C, et aussi par Vasil et al. (Biotechnology 11 1553-1558 (1993)) et Weeks et al. (Plant Physiol. 102 1077-1084 (1993)) par bombardement particulaire d'embryons immatures et d'un callus dérivé d'un embryon immature. Une technique préférée pour transformer le blé met cependant en jeu la transformation du blé par bombardement particulaire d'embryons immatures, et comprend une étape à haute teneur en saccharose ou une étape à haute teneur en maltose avant la libération du gène. Avant le bombardement, un nombre quelconque d'embryons (ayant une longueur de 0,75 à 1 mm) sont plaqués sur un milieu MS contenant 3 % de saccharose (Murashiga & Skoog, Physiologia Plantarum 15 : 473-497 (1962)) et 3 mg/l de 2,4-D pour induction d'embryons somatiques, et on laisse l'opération se dérouler à l'obscurité. Le jour choisi pour le bombardement, les embryons sont retirés du milieu d'induction et placés sur le milieu osmotique (c'est-à-dire un milieu d'induction auquel on a ajouté du saccharose et du maltose à la concentration voulue, habituellement 15 %). On laisse les embryons subir une plasmolyse pendant 2 à 3 heures, puis on les bombarde. Habituellement, on utilise 20 embryons par plaque cible, ce chiffre ne présentant aucun caractère critique. Un plasmide approprié portant le gène (tel que pCIB3064 ou pCG35) est mis à précipiter sur des particules d'or, de grosseur micrométrique, par utilisation de techniques classiques. Chaque plaque d'embryons reçoit un tir, effectué par un dispositif à hélium DuPont BiolisticsX, la pression de rafale étant d'environ 7 MPa (environ 1000 psi), auquel cas on utilise un tamis ayant une ouverture de maille de 177 um (80 mesh). Après le bombardement, les embryons sont placés de nouveau à l'obscurité, pour récupération pendant environ 24 heures (toujours sur le milieu osmotique). Au bout de 24 heures, on retire les embryons du milieu osmotique et on les place de nouveau sur le milieu d'induction, où on les abandonne pendant un mois avant régénération. Environ un mois plus tard, des explants d'embryons présentant un callus embryogène en développement sont transférés sur le milieu de régénération (MS + 1 mg/l de NAA, 5 mg/l de GA), qui contient en outre l'agent de sélection approprié (10 mg/l de basta dans le cas du pCIB3064 et 2 mg/l de méthotrexate dans le cas du pSOG35). Au bout d'environ 1 mois, les pousses développées sont transférées dans des récipients stériles plus grands, connus sous le nom de "GA7", qui contiennent du MS ayant une force deux fois inférieure à la force maximale, 2 % de saccharose, et la même concentration de l'agent de sélection. La demande de brevet 08/147 161 décrit des procédés permettant de transformer le blé et est donc incorporée ici à titre de référence.