INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La présente invention est basée sur la reconnaissance du fait que, afin de réaliser un dispositif de lixiviation et/ou de fermentation, il pourrait être très avantageux d'utiliser une valve de recirculation ou de décharge comprenant un obturateur susceptible de gonfler et de dégonfler et/ou se déplacer à des instants et/ou sous des conditions prédéterminées.
Ladite valve de décharge comprend un obturateur réalisé en un matériau élastique tel que, à titre d'exemple non limitatif, une couronne ou un ballon en élastomère, relié(e) à un générateur de fluide comprimé ou sous pression tel que, par exemple, de l'air comprimé ou d'autres moyens adéquats.
Quand le dispositif de contrôle ou de temporisation active le générateur d'air comprimé et/ou une valve pneumatique, l'obturateur de la valve se gonfle, en se dilatant; une telle dilatation provoque le déplacement de l'obturateur, en particulier un déplacement radial, jusqu'au point où il rejoint une position de travail ou de fermeture, généralement en appui contre les parois internes du passage de la valve dans de telles conditions, le passage de la valve se trouve complètement obturé et le passage du fluide est interrompu.
Lors d'une phase successive, le circuit de commande désactive le générateur de fluide comprimé et/ou active une valve de décharge du fluide contenue dans l'obturateur; dans de telles conditions, I'obturateur se dégonfle et se contracte, ouvrant rapidement le conduit de passage de fluide.
L'utilisation de la valve avec l'obturateur gonflable présente en outre l'avantage de permettre une meilleure distribution du fluide de lixiviation, avec un mélange homogène du produit en fermentation en évitant la formation de dépôts et/ou de moisissures.
Ladite valve présente une structure très simple et économique, par rapport à celle d'une valve analogue avec un piston pneumatique et un obturateur rigide, et, entre autre, ne nécessite pas d'opérations complexes et coûteuses d'installation et/ou de manipulation.
Les obturateurs du type cité sont connus pour leur utilisation dans d'autres secteurs tels que, par exemple, la manutention de grandes installations industrielles; dans de telles conditions, un ballon est calé dans la tubulure à fermer et est gonflé avec de l'air comprimé de façon à isoler la section de conduit soumise à des manutentions.
Un tel dispositif est en particulier utilisé dans des systèmes de fermentation, comprenant en outre une seule valve de décharge ou de recirculation unique permettant de réaliser une lixiviation et/ou un mélange optimal et uniforme du produit.
Dans une telle optique, un but ultérieur de la présente invention consiste à proposer un dispositif dans lequel, en dessous de ladite valve, sont prévus des moyens de distribution du flux de liquide venant du récipient supérieur, ledits moyens de distribution étant aptes à diriger de façon uniforme le flux du produit contenu dans le récipient supérieur, sur tout le produit contenu dans le valve inférieure.
Un autre but de la présente invention consiste à proposer un dispositif de fermentation dans lequel au moins la valve de décharge ou de recirculation présente une structure simple, facile à installer et à remplacer en cas d'anomalie, sans nécessiter d'intervention spécialisée et/ou complexe.
Un autre but de la présente invention est de proposer un dispositif dans lequel la valve de décharge ou de recirculation comprend plusieurs éléments d'obturation et/ou plusieurs éléments de distribution aptes à orienter le produit contenu dans la valve supérieure, afin d'obtenir plusieurs flux de lixiviation plus intenses et distribués de façon plus uniforme sur le produit contenu dans la valve inférieure.
De tels buts sont réalisés selon la présente invention grâce à un dispositif pour la fermentation et/ou la macération de substances ou de produits, en particulier des substances ou des produits végétaux, comprenant au moins deux récipients qui sont mis en communication au moyen d'au moins une valve et comprenant un générateur de fluide comprimé apte à actionner cette valve et des moyens aptes à commander le dispositif et à effectuer la recirculation des produits contenus dans les récipients caractérisé en ce que ladite valve comporte au moins un obturateur susceptible de gonfler et/ou se dilater et/ou se déplacer et respectivement, de se dégonfler et/ou se contracter et/ou se déplacer en sens inverse.
Selon un mode de réalisation, l'actionnement et/ou la dilatation de l'obturateur est apte à interrompre le reflux du produit, du récipient supérieur sur le produit contenu dans le récipient inférieur.
De préférence, I'actionnement et/ou la dilatation de l'obturateur est apte à obturer le passage de la valve. La dilatation de l'obturateur est apte à provoquer une poussée et/ou une étanchéité contre les parois internes du passage de la valve.
- la figure 8 montre une vue de face du projec-
teur de la figure 7,
- la figure 9 montre une coupe longitudinale ho-
rizontale d'un cinquième exemple de réalisation d'un projec-
teur, - la figure 10 montre l'écran de mesure placé à
une certaine distance devant le projecteur.
Un projecteur pour véhicule, notamment véhicule automobile, selon les figures 1 à 9, comprend un réflecteur
avec une source lumineuse 12 prévue au sommet du réflec-
teur. Le projecteur correspond de préférence aux feux de
croisement; lorsqu'il fonctionne il émet un faisceau lumi-
neux avec une limite d'éclairement supérieure. La source lu-
mineuse 12 peut être une lampe à incandescence, une lampe à décharge de gaz ou toute autre lampe appropriée. La lumière
émise par la source lumineuse 12 est réfléchie par le réflec-
teur 10 sous la forme d'un faisceau lumineux convergent; le
réflecteur 10 peut avoir une forme ellipsoïde, une forme ana-
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La plaque est ensuite posée sur un support dans un récipient en verre de manière à faire un angle de 50,6 avec l'horizontale comme indiqué sur la figure 2 annexée où la référence (10) désigne un échantillon en élastomère silicone et la référence (11) désigne une plaque en résine époxy. L'ensemble formé par la plaque (11) sur laquelle est collé l'échantillon (10), constitue le matériau (1) comprenant l'élastomère silicone dont on a parlé ci-avant à propos de la figure 1.
Une électrode de masse est alors réalisée en enroulant du fil d'étain sur le bas de la plaque; I'ensemble est alors mis en place dans la cellule et le niveau d'eau est réglé à une distance donnée du fond. On positionne alors la pointe à l'aide de verniers. La position de la pointe pour l'essai type est de 7 mmm au dessus de la surface de l'eau et de 1,3 mm de l'échantillon en horizontal comme indiqué sur la figure 3 annexée où la distance dl = 7 mm et la distance d2 = 1,3 mm.
4.1.2.- Réglage des paramètres et lancement de l'essai La tension à vide du générateur est réglée à 7 kV.
Le système de lavage intermittent de l'échantillon est lancé. La surface de l'échantillon traitée par l'arc est rincé de manière intermittente afin d'enlever les cendres qui se forment sous l'impact de l'arc. Ce lavage consiste en un jet d'eau très fin qui est dirigé pendant 10 secondes toutes les 10 minutes. Le niveau de l'eau dans la cellule est maintenu constant par aspiration.
Une fois que tous les paramètres d'essai sont réglés, I'électrode de masse et la pointe sont reliés au montage. Le générateur peut alors être enclenché.
4.1.3.- Fin de l'essai Le circuit électrique est ouvert dès que l'énergie appliquée atteint 500 W.min.
4.2.- Mesure des volumes érodés Les échantillons sont détachés des plaques en résines époxy.
Les zones érodées sont débarrassées de toutes traces de cendres par rinçage à l'eau, les échantillons sont rincés à l'alcool puis séchés.
On prépare ensuite un mélange de résine époxy suffisamment fluide pour pouvoir être appliquée et combler les zones érodées (cf. figure 4 annexée). Après mélange la résine doit être dégazée sous une cloche à vide pendant au moins dix minutes. Une fois dégazée, la résine est employée pour combler les marques d'érosion (trous) sur la surface des échantillons, et leur redonner leurs volumes initiaux. Le contrôle visuel est alors très important. Un tranchant de lame de cutter sert à enlever le surplus de résine sur les échantillons. Après polymérisation complète (une nuit), les empreintes des érosions réalisées sont démoulées et pesées sur une balance de précision. Les masses trouvées (en mg) sont représentatives des volumes érodés. Dans la partie gauche de la figure 4 annexée, on reconnait le matériau (1) comprenant l'élastomère silicone, la pointe (2) générant l'arc électrique (12), le récipient (3) contenant l'eau (4) et le générateur de haute tension (7), dans la partie droite de la figure 4 annexée, on a représenté un échantillon en élastomère silicone (10) qui a été détaché de sa plaque support en résine époxy et qui comporte une marque d'érosion sous arc (ou trou) (13).
Le bénéfice apporté par les oxydes de fer est manifeste. On observe encore que les résultats des tests de résistance à la flamme et des tests de résistance à l'érosion sous arc sont bien correlés.
EXEMPLE 3: A) Préparation des élastomères: Des élastomères RTV ont été obtenus à partir des autres compositions monocomposantes ci-après définies 1) Composition témoin n 3 Avec un agitateur de laboratoire à turbine, on mélange à température ambiante (230C) 65 parties en poids de résine de structure MMViDDViQ contenant 0,55 % en poids de groupes vinyles et constituée de 17,5 % en poids de motifs (CH3)3SiOo 5 0,3 % en poids de motifs (CH3)2ViSiOo 5 74,5 % en poids de motifs (CH3)2SiO, 1,5 % en poids de motifs (CH3)ViSiO et 6,2 % en poids de motifs SiC2 33 parties en poids de silice naturelle (quartz) broyée, ayant un diamètre moyen de 3 pm et une surface spécifique BET de 2 m2/g; 2 ,9 parties en poids d'une huile poly(diméthyl)(hydrogénométhyle) siloxane bloquée à chacune des extrémités des chaînes par un motif (CH3)2HSiOO,S, ayant une viscosité de 25 mPa.s et contenant au total 0,7 fonction Si-H pour 100 g d'huile 0,0063 partie en poids d'une solution dans le divinyltétraméthyldisiloxane d'un complexe du platine à 12 % en poids de platine ligandé par du divinyltétraméthyldisiloxane (catalyseur de Karstedt), soit 0,00075 partie en poids de platine métal ; et 0,03 partie en poids d'inhibiteur consistant dans l'éthynyl-1 cyclohexanol-1.
2) Composition de l'exemple 3: Elle est obtenue en ajoutant au moyen d'un agitateur de type turbine, à 100 parties en poids de la composition témoin n 3, 5 parties en poids de la combinaison d'oxydes de fer engagée dans la composition de l'exemple 1.
Pour obtenir les élastomères, les compositions sont réticulées pendant 60 minutes en opérant à 1500C dans un four ventilé commercialisé par la Société HERAEUS.
B) Evaluation des propriétés des élastomères: Les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau Il suivant: Tableau II
Durée Perte de masse Elastomère DSA R/D d'extinction sous arc obtenu à partir (N/mm) (s) (mg) de la. (1) (2) (3) (4) composition témoin n 3 60 12 8 3,9 composition de l'exemple 3 50 1 10 2 2,1 Rubriques (1) à (4): cf. tableau I EXEMPLES 4 à 6: A) Préparation des élastomères: Des élastomères de type RTV ont été obtenus à partir des autres compositions monocomposantes ci-après définies 1) Composition témoin n 4 .
Avec un agitateur de laboratoire à turbine, on mélange à température ambiante (23 C): 93,4 parties en poids d'une suspension qui contient: - 70,4 parties en poids de l'huile polydiméthylsiloxane bloquée à chacune des extrémités des chaînes par un motif (CH3)2ViSiOo 5 engagée dans la composition témoin n" 1 - 23 parties en poids de la silice de pyrogénation traitée par de l'hexaméthyldisilazane engagée dans la composition témoin n" 1; 1,7 partie en poids de silice naturelle (quartz) broyée, ayant un diamètre moyen de 2 pm et une surface spécifique BET de 3 m2/g 3,0 parties en poids de l'huile polydiméthylsiloxane bloquée à chacune des extrémités des chaînes par un motif (CH3)2HSiO0,5 engagée dans la composition témoin n" 1; 1,9 parties en poids d'une huile poly(diméthyl)(hydrogénométhyl) siloxane bloquée à chacune des extrémités des chaînes par un motif (CH3)3SiOO 5, ayant une viscosité de 10 mPa.s et contenant au total 0,36 fonction Si-H pour 100 g d'huile 0,025 partie en poids d'une solution dans le divinyltétraméthyldisiloxane d'un complexe du platine à 12 % en poids de platine ligandé par du divinyltétraméthyldisiloxane (catalyseur de Karstedt), soit 0,003 partie en poids de platine métal ; et 0,08 partie en poids du tétramère cyclique de méthylvinylpolysiloxane et contenant 1,15 fonction Si-Vi pour 100 g du composé.
Des vecteurs particuliers sont par exemple des plasmides des phages, des cosmides, des phagemides, des YAC.
Un vecteur préféré est le plasmide pMTOS transfecté dans la souche TG1 de E. coli, la souche transfectée étant désignée sous le nom TGMTOS ayant été déposée à la CNCM le 19 novembre 1996 sous le numéro 1-1786 Ce plasmide possède un insert de 6 kb comprenant notamment la SEQ ID N l et la SEQ ID N 2, ainsi qu'une séquence du génome de M. titherculosis présente naturellement en amont de l'extrémité S' de la SEQ ID N"1.
I,e vecteur pMTOS ci-dessus a été construit à partir du vecteur pUC18 et de I'insert d'ADN de 6kb de Mycobacterium tuberculosis H37Rv.
Ces vecteurs sont utiles pour transformer ou transfecter des hôtes cellulaires afin de cloner ou d'exprimer les séquences nucléotidiques de l'invention.
Un hôte cellulaire recombinant selon l'invention est caractérisé en ce qu'il est modifié par une séquence nucléotidique ou un vecteur ci-dessus décrits.
De préférence, I'hôte cellulaire est modifié par cette séquence dans des conditions permettant l'expression d'un polypeptide p27 fonctionnel, s'agissant de sa reconnaissance par des anticorps le reconnaissant spécifiquement.
Un hôte cellulaire préféré selon l'invention est la souche de E. coli TGMTOS, déposée à la CNCM le 19 novembre 1996 sous le numéro I-1786.
Il est aujourd'hui facile de produire des protéines en quantité relativement importante par génie génétique en utilisant comme vecteurs d'expression des plasmides, des phages, des phagemides. Le gène p27 peut être inséré dans un vecteur d'expression approprié pour produire in vitro le polypeptide P27. Celle-ci pourra être fixée sur une microplaque pour développer un test sérologique destiné à rechercher, dans un but de diagnostic, les anticorps spécifiques chez les patients atteints de tuberculose.
Ainsi, la présente invention concerne plus particulièrement un procédé de préparation d'un polypeptide de l'invention comprenant les étapes suivantes: - le cas échéant, I'amplification préalable suivant la technique PCR de la quantité de séquences de nucléotides codant pour ledit polypeptide à l'aide de deux amorces d'ADN choisies de manière à ce que l'une de ces amorces soit identique aux 10 à 25 premiers nucléotides de la séquence nucléotidique codant pour ledit polypeptide, tandis que l'autre amorce est complémentaire des 10 à 25 derniers nucléotides (ou s'hybride avec ces 10 à 25 derniers nucléotides) de ladite séquence nucléotidique, ou inversement de manière à ce que l'une de ces amorces soit identique aux 10 à 25 derniers nucléotides de ladite séquence, tandis que l'autre amorce est complémentaire des 10 à 25 premiers nucléotides (ou s'hybride avec les 10 à 25 premiers nucléotides) de ladite séquence nucléotidique. suivie de l'introduction desdites séquences ainsi amplifiées dans un vecteur approprié, - la mise en culture, dans un milieu de culture approprié, d'un hôte cellulaire préalablement transtormé par un vecteur approprié contenant un acide nucléique selon l'invention comprenant la séquence nucléotidique codant pour ledit polypeptide, et - la séparation, à partir du susdit milieu de culture, dudit polypeptide produit par ledit hôte cellulaire transformé.
Les peptides selon l'invention peuvent également être préparés par les techniques classiques, dans le domaine de la synthèse des peptides. Cette synthèse peut être réalisée en solution homogène ou en phase solide.
Par exemple, on aura recours à la technique de synthèse en solution homogène décrite par Houbenweyl en 1974.
Cette méthode de synthèse consiste à condenser successivement deux-à-deux les aminoacyles successifs dans l'ordre requis, ou à condenser des aminoacyles et des fragments préalablement formés et contenant déjà plusieurs aminoacyles dans l'ordre approprié, ou encore plusieurs fragments préalablement ainsi préparés, étant entendu que l'on aura eu soin de protéger au préalable toutes les fonctions réactives portées par ces aminoacyles ou fragments. à l'exception des fonctions amines de l'un et carboxyles de l'autre ou vice-versa, qui doivent normalement intervenir dans la formation des liaisons peptidiques, notamment après activation de la fonction carboxyle, selon les méthodes bien connues dans la synthèse des peptides. En variante, on pourra avoir recours à des réactions de couplage mettant en jeu des réactifs de couplage classique, du type carbodiimide, tels que par exemple la l-éthyl-3-(3d i méthyl-aminopropyl)-carbodiimide.
Lorsque l'aminoacyle mis en oeuvre possède une fonction acide supplémentaire (notamment dans le cas de l'acide glutamique), ces fonctions seront protégées, par exemple par des groupes t-butylester.
Dans le cas de la synthèse progressive, acide aminé par acide aminé, la synthèse débute de préférence par la condensation de l'amino-acide C-terminal avec l'aminoacide qui correspond à l'aminoacyle voisin dans la séquence désirée et ainsi de suite, de proche en proche, jusqu'à l'acide aminé N-terminal.
Selon une autre technique préférée de l'invention, on a recours à celle décrite par Merrifield.
Pour fabriquer une chaîne peptidique selon le procédé de Merrifield, on a recours à une résine polymère très poreuse, sur laquelle on fixe le premier acide aminé C-terminal de la chaîne. Cet acide aminé est fixé sur la résine par l'intermédiaire de son groupe carboxylique et se fonction amine est protégée, par exemple par le groupe t-butyloxycarbonyle.
Les résultats obtenus sont présentés sur la figure 1 annexée. Ces résultats montrent que l'incubation des cellules endothéliales en présence de TNFa conduit à une augmentation de la production d'IL-8 dans le milieu de culture, et que le traitement des cellules par les composés BXT-51097 et BXT-51103 inhibe cet effet d'au moins 85%.
Ces résultats démontrent que de tels composés peuvent agir comme des antagonistes du TNF-a en terme de libération d'interleukine 8 par les cellules endothéliales.
EXEMPLE 7: INHIBITION DE L'EXPRESSION ENDOTHELIALE DE LA P ET DE LA E-SELECrlNE INDUITE PAR LE TNF-a Il a été démontré que la phase initiale de l'inflammation est médiée par les molécules d'adhésion de type E et/ou P sélectines (voir ALBELDA S.M. et coll., FASEB Journal, 8, 504-512, 1994).
Des cellules endothéliales humaines sont cultivées dans les mêmes conditions que celles décrites dans l'exemple 6.
Lorsque les cellules sont proches de la confluence, elles sont incubées pendant une heure en présence ou non d'un des composés suivants: BXT-51097 ou BXT-51103. Chacun de ces composés est incorporé à 10 HM dans le milieu de culture contenant 2% de sérum de veau foetal, toutes chose étant égales par ailleurs. Après élimination du milieu de culture, les cellules sont mises à incuber en présence ou non (contrôle) de TNF-a, à 1 ng/ml, dans le même milieu de culture que précédemment. Dans le cas des cellules pré-traitées par un composé, le milieu contient en outre le même composé à 10,ut. Au bout de trois heures trente d'incubation, les cellules sont lavées avec du tampon PBS et elles sont fixées avec du formaldéhyde à 2% dans ce même tampon. Les expressions de P- et de Esélectine sur les cellules sont alors mesurées par un dosage ELISA en incubant successivement les cellules en présence d'un anticorps monoclonal de souris, respectivement, anti-P-sélectine et anti-E-sélectine, et d'un anti-anticorps de lapin anti-souris marqué à la phosphatase alcaline. La révélation est effectuée par l'ajout de phosphate de paranitrophényle dont l'hydrolyse est suivie à 405 nm.
Les résultats obtenus correspondant aux mesures d'expression de P- et de E-sélectine sont présentés respectivement sur les figures 2 et 3 annexées. Ces résultats montrent que l'incubation des cellules endothéliales en présence de TNFa induit l'expression de P- et de E-sélectine, qui est dans les deux cas inhibée totalement quand les cellules sont traitées avec les composés BXT-51097 et BXT-51 103.
Ces résultats démontrent que dc tels composés sont capables d'inhiber l'expression de molécules d'adhésion cellulaire, telles que la P- et la E-sélectine, induite par le TNF-o:.
L'ensemblc de ces résultants démontrent que les composés de l'invention répondant à la formule générale I: 1/ catalysent la réduction d'hydroperoxydes en présence de glutathion; 2/ antagoniscnt l'action du TNF-c:; 3/ inhibent l'expression de molécules d'adhésion cellulaire.
Le TNF-a ainsi que l'expression de molécules d'adhésion telles les Pet E-sélcctines ayant été mises cn cause dans les pathologies liées à une surproduction d'hydroperoxydes, les molécules de la présente invention répondant à la formule générale I constituent donc de précieux principes actifs et, après formulation, de puissants médicaments permettant le traitement des pathologies correspondantes.
NOUVELLES SUBSTANCES A ACTIVITE BIOLOGIQUE, LEUR PROCEDE D'OBTENTION ET LES COMPOSITIONS EN RENFERMANT La présente invention se rapporte au domaine de la biologie, et plus précisément à des composés biologiques d'origine végétale.
La présente invention concerne de nouvelles substances à activité biologique extraites de fruits des plantes à métabolisme CAM, leur procédé d'obtention et les compositions pharmaceutiques, cosmétiques et/ou alimentaires en renfermant.
Les compositions de la présente invention sont destinées à accélérer et amplifier la synthèse des protéines de choc thermique (ou protéines de stress) des cellules des êtres vivants. En effet, les conditions de stress ou d'agression sont de nature à altérer la qualité de la synthèse des protéines. Les eucaryotes ont été amenés à développer des voies métaboliques destinées à préserver leur structure.
Les plantes à métabolisme CAM appartiennent principalement aux familles des Cactacées, des Crassulacées et des Saxifragacées, qui forment la seule entité susceptible de développer ce type de métabolisme.
Ces plantes sont particulièrement adaptées aux conditions climatiques sévères et possèdent un métabolisme chlorophyllien particulier faisant intervenir un cycle du carbone, appelé CAM ( Crassulacees Acid Metabolism ).