INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
de base ga. Par exemple, lorsque ga = 2, un facteur doit être congru à 3 (mod 8) et l'autre à 7 (mod 8) : un nombre de Williams. Par exemple encore, lorsque ga = 3, un facteur doit être congru à 1 (mod 3) et l'autre à 2 (mod 3), sachant qu'ils sont bien sûr tous deux congrus à 3 (mod 4). On notera également le symbole de Legendre du deuxième facteur par rapport aux l nombres de base ga, gb, ... et on commencera à établir les 2'-1 profils.
Le troisième facteur doit prendre en compte le deuxième nombre de base gb (par exemple, gb = 3 après ga = 2). Deux cas se présentent, selon que les deux premiers facteurs premiers sont équivalents ou complémentaires au regard du nombre gb.
- Lorsque les deux premiers facteurs premiers sont équivalents au regard du nombre gb, le nouveau facteur doit être complémentaire au regard du nombre gb.
- S'ils sont complémentaires, alors par rapport au premier facteur, le nouveau facteur doit être équivalent au regard de l'un des deux nombres ga ou gb et complémentaire au regard de l'autre.
On notera encore le symbole de Legendre du troisième facteur par rapport aux l nombres de base ga, gb, ... et on commencera à établir les 2'-1 profils. Ainsi, avec trois facteurs, pour les deux nombres de base, il y a trois profils possibles : 100, 110 et 101. La construction assure un profil différent pour chacun des trois nombres ga, gb et ga fois gb.
Le quatrième facteur doit prendre en compte le troisième nombre de base gc (par exemple, gc = 5 après gb = 3 et ga = 2). Deux cas se présentent, selon que les trois premiers facteurs sont équivalents ou pas au regard du nombre gc.
- Lorsque les trois premiers facteurs premiers sont équivalents au regard du nombre gc, le nouveau facteur doit être complémentaire au regard du nombre gc.
- S'ils ne sont pas équivalents, ils reproduisent le profil de l'un des trois nombres ga, gb ou ga fois gb (par exemple, 2,3 ou 6), soit g ce nombre. Par rapport au premier facteur, le nouveau facteur doit être équivalent au regard de l'un des deux nombres g ou gc et complémentaire au regard de l' autre.
On notera encore le symbole de Legendre du quatrième facteur par rapport aux nombres de base ga, gb, ... et on continuera à établir les 2'-1 profils. Ainsi, avec quatre facteurs premiers, pour trois nombres de base, il y a sept profils possibles: 1000,1100, 1010,1001, 1110,1101 et 1011. La construction assure un profil différent pour chacun des sept nombres suivants : les trois nombres de base : ga, gb, gc et leurs quatre combinaisons multiplicatives ga.gb, ga.gc, gb.gc et ga.gb.gc.
Ensuite, la procédure se généralise aisément de la manière suivante.
Lorsque j facteurs sont déjà construits, le 7+1 ième facteur doit prendre en compte un j ième nombre de base ; appelons g' ce nombre, par exemple, le j ième nombre premier après les j-1 premiers nombres premiers. Deux cas se présentent, selon que les j premiers facteurs sont équivalents ou pas au regard du nombre g'.
- Lorsque les j premiers facteurs premiers sont équivalents au regard du nombre g', le nouveau facteur doit être complémentaire au regard du nombre g'.
- S'ils ne sont pas équivalents, ils reproduisent le profil de l'un des j-1 nombres ga, gb, ... ou de l'une de leurs combinaisons multiplicatives ga fois gb, ... ; appelons g ce nombre. Par rapport au premier facteur, le nouveau facteur doit être équivalent au regard de l'un des deux nombres g ou g' et complémentaire au regard de l'autre.
On notera encore le symbole de Legendre du j+1 ième facteur par rapport aux l nombres de base ga, gb, ... et on continuera à établir les 2'-1 profils.
3. 2.2. Utilisation cryptographique des nombres GQ2 Voici deux motifs d'intérêt cryptographique pour les nombres GQ2.
Le matériau des coiffes selon l'invention peut tre choisi parmi des feuilles ou bandes d'Al ou alliage d'Al, de Sn ou alliage de Sn, de film plastique rétractable, de complexes multicouches AI/PO/AI, Al/PO/Papier, PO/Alu/PO, PO/Alu/POchargé, où Al désigne une couche d'aluminium, PO une couche de polyoléfine, de préférence le PE, pouvant contenir une charge typiquement minérale.
Ledit matériau en feuille ou en bande peut avoir une épaisseur allant de 25 à 50 um quand le matériau est de l'aluminium ou alliage, une épaisseur allant de 110 à 150 um quand le matériau est de l'étain ou alliage, une épaisseur allant de 60 à 100 um quand le matériau est un film plastique rétractable, et une épaisseur allant de 60 à 110 im quand le matériau est un complexe multicouches, typiquement en Al/PO/AI.
Un autre objet de l'invention est constitué par un procédé de fabrication de coiffes (1) selon l'invention, procédé qui comprend -le découpage dans ledit matériau en film ou feuille, d'une ébauche de développé (6) de la dit jupe, de hauteur H', avec formation de ladite ligne d'affaiblissement basse (44) à une distance H"du bord inférieur (voir figure 11) et, éventuellement de ladite ligne d'affaiblissement haute (43) et desdites encoches (460,461) sur une bordure axiale (60), -la dépose éventuelle d'un filet radial d'adhésif activable à chaud ou par pression (63), typiquement sur l'autre bordure axiale (61) dudit développé, sauf sur la partie correspondant à ou en regard de ladite languette (46), -la dépose sur ladite partie basse (65) d'un moyen de renfort bas (67) ou d'une couche adhésive activable (66), -la dépose éventuelle sur ladite partie haute d'un moyen de renfort haut (47), -et dans lequel, on roule sur mandrin ledit développé (6), en rabattant la bordure axiale (60) sur l'autre bordure axiale (61), on dépose un filet d'adhésif entre les deux bordures, ou éventuellement on active ledit filet radial d'adhésif déjà déposé, pour former ladite jupe (4) en pressant les bordures (60,61) 1'une contre l'autre et en formant éventuellement lesdites cannelures (9), et on assemble ou forme une tete (5), éventuellement en rapportant un élément de tte et en le fixant par thermocollage au rebord supérieur (64) de ladite jupe, éventuellement rétreint et plissé.
Dans le procédé selon l'invention, la dépose dudit moyen de renfort haut ou bas peut tre effectuée soit par collage d'une bandelette ou d'une portion de bande, aux caractéristiques mécaniques requises et ayant la forme géométrique requise typiquement d'élément de secteur annulaire, soit par dépôt, à I'aide d'un pistolet, d'un cordon de matière plastique fondue, adhérent et durcissant lors du dépôt.
Les caractéristiques mécaniques requises dudit moyen de renfort sont principalement la tenue à la déchirure et la résistance à la traction. Elles sont choisies au niveau nécessaire pour résoudre le problème posé, mais sans excès de manière à ce que la coiffe selon l'invention puisse etre appliquée, avec les dispositifs classiques, contre le goulot de la bouteille et épouser sa forme lors de l'opération de surbouchage.
Le procédé est mis en oeuvre de manière à garantir le parallélisme"parfait"et la faible distance constante, typiquement inférieure à 2 mm, entre la ligne d'affaiblissement basse (44) et la couche adhésive (66) sur ladite partie basse (65), ou les renforts bas (66), ou les renforts hauts (47).
Ainsi, les coiffes selon l'invention peuvent tre fabriquées en ne modifiant que légèrement le procédé de fabrication par roulage, et donc sans surcoût par rapport aux coiffes de l'état de la technique. Elles sont mme plus économiques que celles fonctionnant avec un"tircell", car plus simples à fabriquer.
EXEMPLES DE REALISATION On a fabriqué des coiffes coniques (1) comme représenté à la figure 6, par roulage de développés comme représentés aux figures 15a (essai 1) et 15b (essai 2), selon le procédé indiqué précédemment.
La coiffe selon la figure 6 est formée d'une jupe (4) et d'une tte (5), avec deux lignes d'affaiblissement, une ligne haute (43) et une ligne basse (44) séparées d'une distance L égale à 30 mm, la ligne basse (44) délimitant la partie haute ou séparabte (10) de coiffe et la partie basse ou fixe (11) de la coiffe. Cette coiffe est formée par roulage d'un développé (6) de jupe et thermocollage ou collage d'un bord axial (60) sur l'autre (61) (non visible sur la figure 6). On a représenté en pointillés le filet d'adhésif (63) assurant le scellage d'un bord sur l'autre.
Avant roulage, on forme sur ledit développé les lignes d'affaiblissement (43,44), et les encoches (460,461) qui délimitent ladite languette (46), le fond de chaque encoche (460,461) étant situé sur la ligne d'affaiblissement correspondante (43,44). Comme cela apparaît sur la figure 6, ladite languette (46) est guillochée, c'est à dire pourvue d'un treillis de petits reliefs obtenus par estampage lors du découpage dudit développé et desdites encoches, de manière à différencier la languette visuellement et esthétiquement, et à renforcer le contraste visuel entre languette et le reste de la capsule pour que le consommateur, d'emblée, soit incité à utiliser ladite languette (46) en vue de l'ouverture.
La partie haute (10) de la jupe est munie d'une succession de cannelures (9) qui ont à la fois une fonction esthétique et une technique dans la mesure où elles peuvent contribuer à obtenir une rupture nette de la ligne d'affaiblissement (44), sans déchirement intempestif de la partie basse (11) de la jupe.
La partie basse (11) est recouverte sur sa surface intérieure d'une couche annulaire d'adhésif (66), activable lors de la pose de la coiffe sur le goulot, et représentée sur la figure 6 en pointillés sur une hauteur Hl.
Les dimensions des coiffes fabriquées sont portées sur la figure 6, avec notamment * L égat à 30 mm, * H égal à 43 mm, La languette, guillochée comme représenté sur la figure 6, avait une largeur L, égale à 25 mm.
Cette expérience a été faite dans le but de prouver que la mutation observée est causée par l'insertion de l'élément Ds dans un gène nécessaire au bon fonctionnement de la plante et à son aspect sauvage.
L'élément transposable, ou transposon, Ds est construit de façon a porter un gène de résistance a l'antibiotique hygromycine (décrit dans les références précédentes). On a fait pousser la descendance de 35 plantes hétérozygotes qui portent la mutation albinos sur un milieu gélosé contenant une dose létale d'hygromycine, toutes les plantes qui portent la mutation sont aussi résistantes à l'hygromycine. On en tire la conclusion que
la mutation est liée au gène de résistance porté par le transposon.
On a isolé une portion d'ADN de plante résistante à l'antibiotique hygromycine, jouxtant le transposon. Ceci a été fait selon la méthode IPCR ou PCR-inverse décrite dans les références précédentes.
Par expérience dite de "Southern blot", on a remarqué que les lignées qui portent la mutation ont une altération de l'ADN génomique. Cette altération est révélée lorsque l'on utilise comme "sonde" la portion d'ADN isolée jouxtant le transposon.
3- Isolement du gène On a, en utilisant une méthode de criblage de banque d'ADN génomique, isolé un clone contenant un fragment d'ADN génomique pouvant contenir la version sauvage inaltérée du gène interrompu chez le mutant.
La banque d'ADN criblée a été construite par d'autres, elle est decrite dans publication de Whitelam, G. C., Johnson, E., Peng, J., Carol P., Anderson, M. L., Cowl, J. S. & Harberd, N. P. (1993) Phytochrome A null mutants of Arabidopsis display a wild-type phenotype in white light. The Plant Cell 5,757-768.
Nous avons déterminé la séquence totale d'un fragment de restriction obtenu par digestion enzymatique du clone d'ADN génomique par l'enzyme EcoR I. La séquence obtenue couvre 3000 paires de bases. Parmi ces 3000 paires de base, on trouve une partie identique à la séquence du fragment bordure préalablement isolé, confirmant l'identité entre l'ADN isolé et le gène interrompu par le transposon.
4- Isolement et caractérisation de la séquence codante.
Nous avons utilisé une banque d'ADNc, qui est une banque commerciale vendue par CLONTECH Laboratories, Inc..
Il s'agit d'une banque d'ADNc faite à partir d'ARNm
extrait d'Arabidopsis thaliana, transformés en ADNc, puis clonés dans le vecteur plasmidique pGADIO.
A partir de cette banque de données d'ADNc, et selon les techniques habituelles, utilisant le gène identifié précédemment comme sonde, nous avons isolé plusieurs clones contenant un ADNc d'une taille d'environ 1400 paires de bases.
Nous avons déterminé la séquence totale de l'ADNc et avons montré qu'il est entièrement compris dans le fragment d'ADN génomique préalablement identifié. Nous avons placé la partie codante (ou exons) et la partie non codante (introns) du gène sur la séquence du gène. Le gène porte 9 exons et 8 introns. L'insertion du transposon Ds est identifiée au début du deuxième exon et vient donc interrompre la partie codante du gène.
La séquence de l'ADNc présente un potentiel codon de départ suivi par un cadre de lecture ouvert de 350 acides aminés, codant pour une protéine potentielle de 39 kDa que nous avons nommé OTBC. Une recherche d'homologie en utilisant le programme blastp Altshul et al. (1997), Gapped BLAST and PSI-BLAST : a new generation of protein database search programs Nucleics Acids Res. 25,3389- 3402) a révélé une homologie faible mais significative avec des polypeptides appartenant à la famille des protéines oxydase alternative ou terminale oxydase de mitochondries (AOX). Aucune autre homologie significative n'a été trouvée. L'homologie commence à l'acide aminé 111 et présente 29% d'identité (45% de similarité) avec l'oxydase de soja. Malgré la faible identité avec la protéine AOX, une recherche par ordinateur de structures secondaires et des domaines potentiels de la signification biologique ont révélé une similarité structurale entre la protéine OTBC et AOX. Des domaines en hélice transmembranaire trouvés dans AOX sont situés à des positions similaires sur la séquence peptidique de l'OTBC, suggérant une localisation membranaire de OTBC et
également une configuration similaire à AOX dans la membrane. De plus, un motif de liaison du fer se trouve conservé entre OTBC et AOX. L'alignement des séquences entre les protéines OTBC et AOX montre une insertion de 19 acides aminés dans la protéine OTBC qui correspond à une partie des exons 7 et 8.
Ainsi, les Inventeurs ont trouvé que seulement certains peptides ont une activité de liaison vis-à-vis de plusieurs des allèles les plus fréquents dans la population caucasienne conformément au Tableau III.
La présente invention a également pour objet des compositions désensibilisantes pour les allergies au venin d'abeille, caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une phospholipase A2 de venin d'abeille modifiée, dans laquelle les zones comprenant les peptides tels que définis ci-dessus sont conservées et les zones en dehors des zones précitées sont modifiées, de telle sorte qu'elles ne présentent plus de réactivité aux IgE et au moins un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
Lesdites zones sont notamment modifiées par mutation ponctuelle ou délétion. La PLA2 de venin d'abeille est en effet capable d'accueillir de
nombreuses mutations et délétions (53,54). Il est donc possible d'obtenir des mutants n'ayant plus de réactivité aux IgE, comme ceux obtenus pour Bet VI (55). Par exemple, le mutant de PLA2 d'abeille dans lequel la lysine en position 25 a été subs- tituée est beaucoup moins antigénique pour des sérums d'apiculteurs que la molécule native (55).
La présente invention a également pour objet l'utilisation d'une phospholipase A2 de venin d'abeille modifiée, dans laquelle les zones comprenant les peptides tels que définis ci-dessus sont conservées et les zones en dehors des zones précitées sont modifiées, de telle sorte qu'elles ne présentent plus de réactivité aux IgE, pour la préparation d'une une composition désensibilisantes pour les allergies au venin d'abeille.
La présente invention a également pour objet un procédé de sélection de peptides aptes à être inclus dans une composition désensibilisante pour les allergies au venin d'abeille, caractérisé en ce qu'il comprend : (i) l'incubation des molécules HLA-DR purifiées sélectionnées parmi celles concernant soit moins de 5 % d'une population donnée, c'est-à-dire celles constituées par d'autres HLA-DR que les molécules HLA DR1, DR3, DR4, DR7, DR11, DR13 et DR2, soit des molécules HLA-DR d'un patient donné, simultanément avec différentes concentrations de fragments de 13à 18acides aminés chevauchants et couvrant entièrement la séquence de l'API ml et avec un réactif RI constitué d'un fragment peptidique associé à un marqueur non radioactif, tel que la biotine et dont la séquence est différente des peptides, tels que définis ci-dessus (groupes A à D) et est choisie de manière à ce qu'il présente une affinité vis-à-vis de la molécule HLA-DR choisie, telle qu'il puisse être utilisé à une concentration < 200 nM, (ii) le transfert des complexes obtenus sur une plaque de microtitration, préalablement sensibilisée avec un anticorps spécifique de toutes les molécules HLA-DR, (iii) la révélation des complexes molécules HLA-DR/réactif RI, fixés au fond de la plaque au moyen de conjugués convenables, tels que streptavidine-phosphatase et d'un substrat fluorescent, (iv) la sélection des peptides comprenant des épitopes différents, c'est-à-dire les plus représentatifs des différentes zones d'interaction entre l'allergène majeur du venin d'abeille et les molécules HLA-DR étudiées et (v) le choix des peptides les plus
adaptés, en fonction de la fréquence des allèles vis-à-vis desquels ils présentent une activité de liaison < 1000 nM, correspondant à la concentration de ce peptide qui inhibe 50 % de la liaison du réactif RI (ICso).
Les conditions d'incubation sont propres à chaque molécule HLADR (temps d'incubation, pH, réactif RI, concentration en HLA-DR ou en peptide).
Le réactif RI est sélectionné dans le groupe constitué par les séquences suivantes : PKYVKQNTLKLAT, spécifique des allèles DRBI *0101, DRB 1*0401, DRBI * 1101, EAEQLRAYLDGTGVE,spécifique de l'allèle DRB 1 * 1501, AKTIAYDEEARGLE, spécifique de l'allèle DRB 1 *0301, AAYAAAKAAALAA, spécifique de l'allèle DRB 1 *0701 et TERVRLVTRHIYNREE, spécifique de l'allèle DRB1*1301.
D'autres réactifs RI peuvent être utilisés, notamment ceux décrits dans Southwood et al. (52).
De manière surprenante, le procédé de sélection selon l'invention est adapté à n'importe quelle molécule d'HLA-DR.
La présente invention a également pour objet un kit de sélection de peptides aptes à désensibiliser un sujet allergique au venin d'abeille, caractérisé en ce qu'il comprend différentes concentrations de fragments de 13 à 18 acides aminés chevauchants et couvrant entièrement la séquence de l'API ml, un ensemble de réactifs RI constitués chacun d'un fragment peptidique associé à un marqueur non radioactif, tel que la biotine et dont la séquence est différente des peptides tels que définis ci-dessus (groupes A à D) et est choisie de manière à ce qu'il présente une affinité vis-à-vis de la molécule HLA-DR choisie, telle qu'il puisse être utilisé à une concentration < 200 nM et un anticorps spécifique de toutes les molécules HLA-DR.
Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la présente invention, ainsi qu'aux dessins annexés, dans lesquels : - la figure 1 représente la séquence protéique de la phospholipase A2 (API ml) du venin d'abeille, déduite de celle de l'ADN complémentaire,
- la figure 2 illustre l'activité de liaison aux molécules HLA-DR des peptides de treize acides aminés qui couvrent la séquence 15-37 de l'allergène majeur du venin d'abeille. Les résultats sont exprimés sous la forme de l/IC50. L'unité est la M-1 ; - la figure 3 illustre l'activité de liaison des peptides de treize acides aminés qui couvrent la séquence 107-134 de l'allergène majeur du venin d'abeille aux molécules HLA-DR. Les résultats sont exprimés sous la forme l/IC50. L'unité est la M-1 ; - la figure 4 illustre les fréquences des déterminants de API mldans la population caucasienne. Cette représentation est basée sur les fréquences des allèles étudiés dans la population française. Dans d'autres populations caucasiennes, on retrouve sensiblement le même profil.
Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples sont donnés à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation.
EXEMPLE 1 : des tests de liaison.
Applicabilité des principes GQ2 dans les anneaux d'entiers modulo Pour que l'équation (1), respectivement (2), n'ait pas de solution en x dans l'anneau des entiers modulo n, il faut et il suffit que, pour au moins un des facteurs premiers p, de p, à Pi' l'équation (l.a), respectivement (2.a), n'ait pas de solution en x dans CG(p).
Pour que l'équation (3) ait des solutions en x dans l'anneau des entiers modulo n, il faut et il suffit que, pour chacun des facteurs premiers p, de/?, pf, l'équation (3.a) ait des solutions en x dans CG(p).
L'équation (3) interdit tout facteur premier p congru à 1 (mod 4) dès que pour l'un des nombres de base g, de g, à g, : ou bien, le symbole de Legendre de g par rapport à p est égal à -1 ; ou bien, le symbole de Legendre de g par rapport à p est égal à +1avec la condition : u positif et supérieur à t-k. Pour qu'un facteur premier p congru à 1 (mod 4) soit possible, il doit remplir l'une des deux conditions suivantes pour chacun des nombres de base g, de g, à gm, selon les deux nombres entiers t et u
définis ci-dessus. Ou bien, le rang de G =g2 est impair dans CG (p), dire, u = 0, quelle que soit la valeur de k. Ou bien, le rang de G =g2 est pair dans CG (p), c'est-à-dire,u > 0, et il satisfait la condition : u + k# t.
Un produit de facteurs premiers congrus à 1 (mod 4) ne peut assurer l'ensemble des principes de la technologie GQ2. Chaque module GQ2 doit avoir au moins deux facteurs premiers congrus à 3 (mod 4) tels que, pour chaque nombre de base g, le symbole de Legendre de g par rapport à l'un diffère du symbole de Legendre de g par rapport à l'autre. Lorsque tous les facteurs premiers sont congrus à 3 (mod 4), on dira que le module GQ2 est basique. Lorsqu'en plus d'au moins deux facteurs premiers congrus à 3 (mod 4), le module inclut un ou plusieurs facteurs premiers congrus à 1 (mod 4), on dira que le module GQ2 est mixte.
Construction systématique de modules GQ2 Au départ, il faut fixer les contraintes globales à imposer au module n : une taille en bits (par exemple, 512 ou 1024 bits) ainsi qu'un nombre de bits successifs à 1 en poids forts (au moins un bien sûr, typiquement 16 ou 32 bits), un nombre f de facteurs premiers et un nombre e (pouvant être nul) de facteurs premiers devant être congrus à 1 (mod 4) ; les autres facteurs premiers, soitf-e facteurs, au moins deux, doivent être congrus à 3 (mod 4).
Le module n sera le produit de f facteurs premiers de tailles voisines.
Lorsque e = 0, on obtient un module GQ2 basique ; lorsque e > 0, on obtient un module GQ2 mixte. Un module basique est le produit de facteurs premiers tous congrus à 3 (mod 4). Un module GQ2 mixte apparaît donc comme le produit d'un module GQ2 basique par un ou plusieurs autres facteurs premiers congrus à 1 (mod 4). On produit d'abord des facteurs premiers congrus à 3 (mod 4). Ensuite, si e > 0, on produit des facteurs premiers congrus à 1 (mod 4).
Pour l'efficacité de la construction de modules GQ2, il vaut bien mieux sélectionner chaque candidat avant de chercher à savoir s'il est premier.
Notés par g, g2 ... , les nombres de base figurent typiquement parmi les premiers nombres premiers : 2,3, 5,7, ... Faute d'indication contraire, les m nombres de base sont les m premiers nombres premiers : g, = 2, g2 3, g3 = 5, g4 = 7, ... Toutefois, notons les remarques suivantes : il faut éviter 2 si l'on escompte un facteur congru à 5 (mod 8) ; faut éviter 3 si l'on doit utiliser la clé publique (3, n) comme clé publique de vérification RSA.