INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon encore un autre objet de la présente invention, on prévoit une méthode d'obtention d'une plante transgénique ou d'une propagule caractérisée en ce qu'elle comprend les étapes consistant à : - transformer une cellule végétale avec un vecteur comprenant au moins un promoteur ou au moins une séquence d'acide nucléique promotrice tels que définis précédemment ; - sélectionner la cellule végétale ayant intégré le promoteur ou la séquence d'acide nucléique promotrice ; - propager la cellule végétale transformée et sélectionnée, soit en culture, soit par régénération de plantes entières chimériques ou transgéniques.
DESCRIPTION DES FIGURES L'invention sera mieux comprise par la description détaillée des différents modes de réalisation donnés ci-après à titre d'exemples non limitatifs, et en se référant au dessin en annexe, dans lequel: - les Figures I, II et III représentent de manière schématique des structures de constructions comparatives de référence, permettant de comparer les promoteurs chimériques décrits dans la présente demande. Dans la Figure I, il s'agit d'une construction contenant le gène rapporteur de la
t3-glucuronidase dépourvue de toute séquence promotrice, et servant donc de contrôle négatif. la Figure II représente de manière schématique une construction contenant le gène de la fi-giucuroni jase sous contrôle du promoteur CaMV double 35S, servant de contrôle de référence fort ; - la Figure III représente une construction servant de référence interne lors des expériences d'expression transitoire, et est composée du gène rapporteur luciférase sous contrôle du promoteur CaMV 35S ; - la Figure IV représente de manière schématique la structure de quelques exemples de promoteurs chimériques réalisés selon la présente invention. Les promoteurs chimériques MPrlll6 et MPrlll7 ont été obtenus par la technique de lb-PCR. MPrll46 et MPrll47 ont été obtenus en clonant les éléments activateurs asl et as2 du CaMV au niveau du site DraIII. Le promoteur MPrll54 a été obtenu en délétant les deux séquences "as-1 like" de CoYMV présentes en 5' de MPrll47. L'ensemble de ces promoteurs a été cloné au niveau des sites PstI et BamHI dans le vecteur pMRT1144 afin d'obtenir une fusion transcriptionnelle avec le gène rapporteur uidA ; - la Figure V représente des colorations histochimiques de feuilles de tabac transformées avec les différents promoteurs de l'invention. Les feuilles de tabac ont été transformées par biolistique à l'aide du canon PDS1000/He (BIORAD) selon les caractéristiques suivantes : disques de rupture tarés à 900 psi, 2 ug d'ADN bombardés en deux tirs successifs, projectiles constitués par des billes d'or de l'ordre de 1 um de diamètre, matériel végétal positionné à 6 puis 9 cm sous le macrocarrier. Après bombardement, les feuilles ont été incubées à l'obscurité en chambre de culture pendant 48 heures pour permettre l'expression du gène rapporteur. Les feuilles ont ensuite été incubées dans du tampon phosphate 0,1 M contenant 2 mg/ml de X-Glu à 37 C pendant 24 à 48 heures, puis dépigmentées dans un bain d'éthanol à 70%.
- la Figure VI représente un graphique comparant l'activité promotrice relative des différentes constructions après expression transitoire dans des feuilles de tabac. Trois jours après
bombardement les feuilles sont broyées puis l'extrait brut clarifié par centrifugation. L'activité 13-glucuronidase et l'activité luciférase sont mesurées par fluorimétrie sur un aliquote de L'extrait brut, puis le rapport activité GUS activité LUC est déterminé. Les histogrammes correspondent à la moyenne des rapports pour une m me construction +/- Erreur Standard à la Moyenne (SEM).
Dans ces différentes figures, certains termes et expressions ont les significations suivantes : - uidA = la séquence codant pour la f3-glucuronidase ; - IV2 = l'intron du gène de la patatine ; - nos term = le terminateur du gène de la Nopaline Synthase ; - 35S term = le terminateur de l'ARN 35S du CaMV ; - CaMV = virus de la mosaïque du chou fleur ; - as-1 = séquence activatrice 1 du promoteur 35S du CaMV ; - as-2 = séquence activatrice 2 du promoteur 35S du CaMV ; - B = le site de restriction de l'endonucléase BamHI ; - E = le site de restriction de l'endonucléase EcoRI ; - H = le site de restriction de l'endonucléase HindIII ; - P = le site de restriction de l'endonucléase PstI ; - Sp = le site de restriction de l'endonucléase SphI.
- D = le site de restriction de l'endonucléase DraIII ; - N = le site de restriction de l'endonucléase NdeI ; - S = le site de restriction de l'endonucléase SpeI ; - CoYMV = virus de la mosaïque jaune de Comellina; - CsVMV = virus de la mosaïque de cassava ; - TATA = boite TATA ; - +1 = site d'initiation de la transcription ; - "like" signifie que la séquence n'est pas 100% homologue à la séquence de référence, comme précédemment défini.
EXEMPLES Exemple 1 Constructions comparatives (témoins) Pour permettre la comparaison des promoteurs chimériques décrits
dans ce brevet, le gène uidA codant la 0-glucuronidase (Jefferson et al., 1936) contenant la séquence de 1'mirer. IV2 du gène ST-LSI de La patatine de pomme de terre (Vancanneyt et al., 1990) (uidA-IV2, a été placé sous contrôle de l'ur. des promoteurs et du terminateur du gène de la nopaline synthase (nos term) d'Agrobacterium tumefaciens dans le plasmide pGEM3Z commercialisé par Promega Corp. (Madison, USA).
Pour insérer la séquence uidAlnos term dans pGEM3Z, la séquence uidA sous contrôle du promoteur entier du gène de la plastocyanine de pois et du terminateur de la nopaline synthase, a été isolée à partir de 5 g du plasmide pGA492-PpetE. Celui-ci a été obtenu en clonant, dans le plasmide pGA492-Pem2-uidA, le promoteur petE du gène plastocyanine de pois du plasmide pKHn2 (Pwee et Gray, 1993) à la place du promoteur em2 (Gaubier et al., 1993), provenant du plasmide pBI221-Pem2. Le plasmide pBI221-Pem2 a été digéré par 20 unités de chacune des enzymes HindIII et EcoRI pendant 1 h à 37 C.
Puis, la cassette d'expression "Pem2/uidA/nos term" a été séparée par électrophorèse sur gel d'agarose 0,8%, électroéluée, précipité en présence de 1/10 volume d'acétate de sodium 3M pH 4,8 et de 2,5 volumes d'éthanol absolu à -80 C pendant 30 min, centrifugé à 12000 g pendant 30 min, lavé à l'éthanol 70%, séché, resuspendu dans l'eau et inséré aux sites HindIII et EcoRI du plasmide pGA492 (An, 1986) digéré par ces deux enzymes pendant 1 h à 37 C, précipité en présence de 1/10 volume d'acétate de sodium 3M pH 4,8 et de 2,5 volumes d'éthanol absolu à -80 C pendant 30 min, centrifugé à 12000 g pendant 30 min, lavé à l'éthanol 70%, séché puis resuspendu dans l'eau. La ligation a été effectuée en présence de 1,0 ni du tampon ADN ligase T4 10X (Amersham) et 2,5 unités d'ADN ligase T4 (Amersham) à 14 C pendant 16 h. Des
bactéries Escherichia coli DH5[alpha], rendues préalablement compétentes ont été transformées (Hannahan, 1983) . L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur milieu Luria-Bertani (LB, bac0trjpt )e 1G g/l, extrait de levure 5 gi 1, Nazi 1 g/1, Agar 15 g/1) supplémenté en tétracycline (12 mg/1), a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline (Birnboim et Doly, 1983) et analysé par digestions enzymatiques.
A partir du plasmide pGA492-Pem2-uidA obtenu, le promoteur Pem2 a été délété par double digestion par HindIII et Xbal. Le fragment plasmidique a été séparé par électrophorèse sur gel d'agarose 0,8%, électroélué, précipité en présence de 1/10 volume d'acétate de sodium 3M pH 4,8 et de 2,5 volumes d'éthanol absolu à -80 C pendant 30 min, centrifugé à 12000 g pendant 30 min, lavé à l'éthanol 70%, séché, soumis à l'action du fragment de Klenow de l'ADN polymérase I (New England Biolabs) pendant 30 min à 37 C selon les recommandations du fabriquant. Ensuite, il a été déprotéinisé par extraction avec un volume de phénol, puis un volume de phénol : chloroforme : alcool isoamylique (25:24:1 v/v/v) et enfin un volume de chloroforme : alcool isoamylique (24: 1 v/v), précipité en présence de 1/10 volume d'acétate de sodium 3M pH 4,8 et de 2,5 volumes d'éthanol absolu à -80 C pendant 30 min, puis centrifugé à 12000 g pendant 30 min, lavé à l'éthanol 70 %, séché, resuspendu dans l'eau. Puis, il a été déphosphorylé pendant 1 h à 37 C à l'aide de 10 unités de phosphatase alcaline d'intestin de veau (Boehringer Mannheim) selon les recommandations du fabricant, déprotéinisé par extraction avec un volume de phénol, puis un volume de phénol : chloroforme : alcool isoamylique (25: 24:1 v/v/v) et enfin un volume de chloroforme : alcool isoamylique (24: 1 v/v), précipité en présence de 1/10 volume d'acétate de sodium 3M pH 4,8 et de 2,5 volumes d'éthanol absolu à -80 C pendant 30 min puis centrifugé à 12000 g pendant 30 min, lavé à l'éthanol 70 %, séché puis resuspendu dans l'eau. Le plasmide résultant a été appelé pGA492APem2.
En parallèle, le promoteur petE (818 pb) qui correspond au
Une quantité de 20 ng de vecteur pBI221 BstBI/SnaBI et 80 ng du fragment de 902 pb BstBI/SnaBI provenant de pSCV1.2-GI comme décrit précédemment, ont été ligaturés pendant 1 nuit à 18 C dans un mélange réactionnel de 10 l, en présence d'1 l du tampon ADN ligase T4 10X (New England Biolabs) et de 400 unités d'enzyme ADN ligase T4 (New England Biolabs). Des bactéries Escherichia coli DH5a, rendues préalablement compétentes, ont été transformées par la moitié du mélange réactionnel de ligation. L'ADN des clones obtenus, sélectionnés sur milieu LB additionné d'ampicilline (50 mg/1), a été extrait selon la méthode de lyse alcaline et analysé par digestions enzymatiques. Le plasmide obtenu a été appelé pBI221/uidA-IV2.
Dans un deuxième temps, la séquence du promoteur 35S du CaMV présente au niveau du plasmide pBI221/uidA-IV2 a été remplacée par la séquence "CaMV D35S". Pour ce faire, le plasmide pBI221/uidA-IV2 a été digéré pendant 10h30 à 37 C par 10 unités de HindIII, puis les extrémités cohésives ont été rendues bouts-francs par l'action du fragment de Klenow de l'ADN polymérase I (New England Biolabs) pendant 30 min à 37 C selon les recommandations du fabriquant. Après purification du produit de cette réaction sur colonne d'affinité Qiaquick, l'ADN a été digéré pendant une nuit à 37 C par 10 unités de BamHI. Le fragment plasmidique, correspondant au vecteur délété du fragment promoteur CaMV 35S de 828 pb, a été isolé par électrophorèse sur gel d'agarose 0,8%, puis purifié sur colonne d'affinité Qiaquick.
CaMV D35S prom a été obtenu à partir du plasmide pJIT163A.
Celui-ci dérive du plasmide pJIT163 qui dérive lui-m me du plasmide pJIT160 (Guérineau et Mullineaux, 1993). Le plasmide pJIT163 possède un codon ATG entre les sites HindIII et SalI du
polylinker. Pour supprimer cet ATG et obtenir le plasmide pJIT163A, l'AGIT plasmidique pJIT163 a été digéré par HindIII et SalI, purifié par électrophorèse sur gel d'agarose 0,8%, électroélué, précipité en présence de 1/10 volume a'acétate de sodium 3M pH 4,8 et de 2,5 volumes d'éthanol absolu à -80 C pendant 30 min, centrifugé à 12000 g pendant 30 min, lavé à l'éthanol 70%, séché, soumis à l'action du fragment de Klenow de l'ADN polymérase I (New England Biolabs) pendant 30 min à 37 C selon les recommandations du fabriquant, déprotéinisé par extraction avec un volume de phénol, puis un volume de phénol : chloroforme : alcool isoamylique (25: 24:1 v/v/v) et enfin un volume de chloroforme : alcool isoamylique (24:1 v/v), précipité en présence de 1/10 volume d'acétate de sodium 3M pH 4,8 et de 2,5 volumes d'éthanol absolu à -80 C pendant 30 min, puis centrifugé à 12000 g pendant 30 min, lavé à l'éthanol 70 %, séché et enfin ligaturé en présence de 1,0 fil du tampon ADN ligase T4 10X (Amersham) et 2,5 unités d'ADN ligase T4 (Amersham) à 14 C pendant 16 h. Des bactéries Escherichia coli DH5a, rendues préalablement compétentes, ont été transformées. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur milieu LB supplémenté en ampicilline (50 mg/1), a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline et analysé par digestions enzymatiques.
Dix g de plasmide pJIT163A ont été digéré pendant 10h30 à 37 C par 10 unités de KpnI (site localisé en 5' du promoteur) puis les extrémités cohésives ont été rendues bouts francs par l'action de 6 unités de l'ADN polymérase T4 (New England Biolabs) pendant 30 min à 37 C selon les recommandations du fabriquant. Après purification du produit de cette réaction sur colonne d'affinité Qiaquick, l'ADN a été digéré pendant une nuit à 37 C par 10 unités de BamHI. Le fragment d'ADN résultant de 761 pb, correspondant au promoteur D35S a été isolé par électrophorèse sur gel d'agarose 1,0 %, puis purifié sur colonne d'affinité Qiaquick.
Le mélange réactionnel contenant 10 ng de vecteur plasmidique, 100 ng du fragment de 761 pb, 1,0 l du tampon ADN ligase T4 10X (New England Biolabs) et 400 unités d'ADN ligase T4 (New England
Biolabs) a été soumis à ligation dans 10 ml pendant une nuit à 18 C. Des bactéries Escherichia coliDH5[alpha], rendues préalablement compétentes, ont été transformées par la moitié du mélange réactionnel de ligation. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur milieu LB supplémenté en ampicilline (50 mg/1), a été extrait selon la méthode de lyse alcaline et analysé par digestions enzymatiques. Le plasmide obtenu a été appelé pMRT1092 (Fig. II).
Le plasmide servant de 'référence interne lors de l'expression transitoire est pCaMV35Sluc (Torrent et al., 1997) qui contient la cassette d'expression du gène rapporteur luciférase (luc) sous contrôle du promoteur et du terminateur de l'ARN 35S du CaMV (Fig. III).
Exemple 2 Construction de promoteurs chimériques combinant des éléments des promoteurs du CsVMV et du CoYMV.
Le promoteur entier de la région inter génique du CoYMV correspond à une séquence de 1038 pb allant de la position-1026 pb à la position + 12 pb (par rapport à l'extrémité 5' du transcrit CoYMV, séquence EMBL X52938, Medberry et al., 1992). Un fragment de 243 pb de ce promoteur entier (Medberry et Olszewski, 1993) a été retenu pour la construction de promoteurs chimériques (SEQ.ID01).
Sur ce fragment de 243 pb, diverses séquences potentiellement régulatrices ont été identifiées (du côté 5' au côté 3', Fig. IV): - une boîte "as-1 like" de 16 pb présentant une certaine similitude vis à vis de l'élément activateur 1 (as-1) présent au niveau du promoteur CaMV 35S, s'étendant de la position - 226 à la position-210 pb ; - une séquence de 76 pb responsable de l'expression dans les tissus vasculaires (Medberry et al., 1992), s'étendant de la position - 161 à la position - 85 pb, et désignée VT dans la figure IV ; - un élément GTAA spécifique de l'expression dans les tissus verts situé à la position-76 pb ;
- deux boites "endosperme like" présentant une certaine similitude vis à vis de boites responsables de l'expression spécifique dans l'endosperme des céréales, localisées aux positions-77 pb et -20 pb; - une boite TATA, à la position-32; - le point +1 de transcription (position 1); - une région 5' non traduite allant de la position +1 à la position 12 pb.
Le promoteur de la région inter génique du CsVMV correspond à une séquence de 515 pb allant de la position +7162 pb à la position +7677 pb (séquence EMBL U59751 , Verdaguer et al., 1996). Sur ce fragment de 515 pb (SEQ. ID02), diverses séquences potentiellement régulatrices ont été identifiées (du côté 5' au côté 3', Fig. IV): - une séquence de 104 pb, rapportée comme responsable de la forte expression conférée par ce promoteur dans les tissus verts et s'étendant de la position-220 pb à la position-116 pb, designée GT dans la figure IV; - un élément de type "as-1 like" de 16 pb présentant une certaine similitude vis à vis de l'élément activateur 1 (as-1) présent au niveau du promoteur CaMV 35S, s'étendant de la position-219 à la position-203 pb ; - 6 éléments GTAA spécifique de l'expression dans les tissus verts situés aux postions-437, -216,-144, -130, +16 et +63 pb; - 6 boîtes "endosperme like" présentant une certaine similitude vis à vis de boîtes responsable de l'expression spécifique dans l'endosperme des céréales, localisées aux positions-196, -145, -136,-130, -122, +14 et +31 pb; - une boîte TATA, à la position-33; - le point +1 d'initiation de la transcription (position +1); - une région 5' non traduite allant de la position +1 à la position 71 pb.
2. 1. Construction de MPrlll6.
72 parts de silane Bi et 20 parts de SILCOLEASE UV POLY200 A1 de viscosité 55 mPa.s dont nous venons de décrire la synthèse exp.17 avec 10 parties de silice G2. Lorsque le mélange est bien homogène et que la silice est incorporée on rajoute alors 2,5 parties de C2 soit une dilution dans l'isopropanol à 18% de photoinitiateur Rhodorsil'* Photoinitiator 2074 et on agite vigoureusement quinze minutes supplémentaires.
Exemple 17.14 On réalise la formule décrite exemple 14.
72 parts de silane Bi et 20 parts de SILCOLEASEl1) UV POLY200 AI de viscosité 55 mPa.s dont nous venons de décrire la synthèse exp.17 avec 10 parties de silice G2. Lorsque le mélange est bien homogène et que la silice est incorporée on rajoute alors 0,4 parties de pigment rouge Red22 commercialisé par Sun chemical et on agite vigoureusement jusqu'à parfaite dilution du pigment qui se traduit par l'obtention d'une formulation rouge clair transparente. On rajoute alors 2,5 parties de C2 soit une dilution dans l'isopropanol à 18% de photoinitiateur Rhodorsil Photoinitiator 2074 et on agite vigoureusement quinze minutes supplémentaires.
MATERIAU ELASTOMERE SILICONE HYDROPHILE UTILISABLE NOTAMMENT POUR LA PRISE D'EMPREINTES DENTAIRES Le domaine de la présente invention est celui des matériaux silicones comprenant une composition polyorganosiloxane (en abréviation POS) réticulable ou durcissable en élastomère silicone par des réactions de polyaddition ainsi qu'un agent mouillant permettant de conférer audit matériau un caractère hydrophile. Les applications visées par de tels systèmes sont, notamment, la prise d'empreintes et, plus particulièrement, la prise d'empreintes dentaires dans le cadre de la réalisation de prothèses. Par l'expression "prise d'empreintes", on entend définir dans le présent mémoire : non seulement les opérations de prise d'empreintes de n'importe quel objet et de n'importe quelle forme pour réaliser un modèle en particulier en plâtre ; mais encore les opérations de reproductions ou de duplications de modèles en particulier en plâtre. Par l'expression "prise d'empreintes dentaires", on entend définir dans le présent mémoire : non seulement les opérations où l'on procède à la prise d'empreintes dentaires en bouche pour obtenir des reproductions exactes de mâchoires ou de parties de mâchoires portant ou non, et en totalité ou en partie, des dents et pour former des modèles en plâtre ; mais encore les opérations de duplications où l'on procède à la reproduction de modèles de mâchoires ou de parties de mâchoires en plâtre dans un laboratoire de prothèse dentaire. Les applications visées englobent encore, en particulier, la fabrication de tampons tels que ceux utilisés dans les techniques de tampographie La présente invention a également pour objet un procédé de préparation du matériau élastomère silicone hydrophile. L'invention vise encore l'utilisation dudit matériau pour la prise d'empreintes, par exemple dentaires. Enfin, l'invention vise l'utilisation dudit matériau pour la fabrication de tampons tels que ceux utilisés dans les techniques de tampographie.
L'utilisation des matériaux silicones est largement répandue dans ces domaines Ceci est dû en partie au fait que les matériaux silicones offrent, d'une part une grande diversité de caractéristiques chimiques, mécaniques et physiques, et, d'autre part, un caractère non toxique, non irritant et non allergisant. En outre, les matériaux silicones constituent de piètres substrats de culture pour les micro-organismes, ce qui leur confère des aptitudes remarquables au regard de l'hygiène.
Les compositions POS auxquelles on s'intéresse dans le cadre de la présente invention comprennent au minimum : - un POS (1) porteur de fonctions Si-alcényles aptes à réagir par des réactions d'addition avec les fonctions réticulantes Si-H d'un POS (2),
- un POS (2) porteur de fonctions Si-H apte à réagir avec les fonctions Si-alcényles duPOS(1), - éventuellement un POS (3) non réactif, différent des POS (1) et (2), utilisable comme diluant, - un catalyseur des réactions de polyaddition, et - une charge minérale renforçante particulaire, généralement de nature siliceuse, traitée par un agent de compatibilisation à base notamment d'un organosilane ou d'un organosilazane, et éventuellement une charge semi-renforçante ou de bourrage.
On sait que de pareilles compositions POS, pouvant avantageusement se présenter sous forme de deux composants, sont réticulables ou durcissables à température ambiante et sont particulièrement intéressantes dans le domaine des prises d'empreintes, en particulier des prises d'empreintes dentaires car ces compositions sont douées de propriétés de fluidité et de filmogénéité avant réticulation, ce qui rend possible la prise d'une empreinte de n'importe quelle forme avec une excellente reproduction des détails. Par ailleurs, ces compositions peuvent réticuler par des réactions de polyaddition en quelques minutes à température ambiante ; deplus, elles sont non toxiques et satisfont aux réglementations européennes en matière pharmaceutique. La réticulation qui entraîne le durcissement de la composition silicone permet de constituer des moules en élastomères offrant des propriétés mécaniques, une stabilité dimensionnelle et une tenue thermique qui sont conformes aux spécifications souhaitées.
Toutefois, les compositions pour empreintes à base de silicone réticulant par des réactions de polyaddition sont intrinsèquement hydrophobes. Ainsi donc, lorsqu'on applique la masse de moulage mélangée à la surface humide des dents et des gencives, il peut y avoir un défaut de coulée ou bien une pénétration insuffisante dans les creux des gencives en raison de la présence de résidus de liquides ; aprèsréticulation, la reproduction est donc défectueuse. D'autre part, lorsqu'au cours des opérations de duplication du positif de l'empreinte en plâtre on est amené à couler, dans un moule en silicone hydrophobe, du plâtre réfractaire à caractère hydrophile, il peut y avoir occlusion de petites bulles d'air en raison de l'incompatibilité entre les surfaces ; cette occlusion conduit à la réalisation d'une reproduction défectueuse.
On peut pratiquement éliminer ces inconvénients en conférant aux compositions POS intrinsèquement hydrophobes, un caractère hydrophile grâce à l'emploi de différents agents tensioactifs ; ainsi que l'on propose d'utiliser : dansUS-A-4.657.959 : un polyorganosiloxane à fonctions polyéthers ; dans US-A-4.691.039 et US-A-4.752.633 : un silane éthoxylé ; dans US-A-5.064.891 : unpolyorganosiloxane à fonctions polyols ; dans
EP-A-0.480.233 : un alcool gras poly(oxyalkylé) ; dans FR-A-2.600.886 : protéine soluble dans l'eau associée éventuellement à un agent tensioactif non ionique.
Poursuivant des recherches dans ce domaine de la technique, la demanderesse a constaté : - que l'introduction d'agent (s) dans une composition POS de polyaddition, renfermant une charge constituée, en tout ou partie, par une charge minérale renforçante traitée, - conduit au développement d'un caractère thixotrope, c'est-à-dire à une augmentation significative de la viscosité du matériau silicone à l'état non réticulé comprenant comme éléments constitutifs la composition POS et le (ou les) agent (s) tensioactif (s) : le matériau silicone devient de ce fait insuffisamment coulant et cet inconvénient est de nature à gêner considérablement les opérations de prise d'empreintes et à dégrader la qualité de la reproduction des détails.
Ce phénomène de thixotropie, lié à l'introduction de tensioactif(s) dans les compositions POS à charges minérales renforçantes traitées, se manifeste de façon particulièrement néfaste pour les matériaux silicones dont la teneur en charge minérale renforçante traitée est importante, par exemple égale ou supérieure à environ 15 % par rapport au poids du matériau silicone. Cette borne d'environ 15 % peut être abaissée vers environ 10 % quand le matériau silicone renferme par ailleurs une charge semi- renforçante ou de bourrage à raison de 10 % à 30 % par rapport au poids du matériau silicone.