INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les deux éléments moteurs 112, 113 associés au moyen de préhension 111 sont agencés en chaîne cinématique ouverte et sont pilotés par l'automate programmable de la machine. Le moyen de préhension 111 est fixé à l'élément moteur terminal 112 et comprend en extrémité d'une platine horizontale 114 solidaire de l'élément terminal 112, deux mâchoires 115 de préhension actionnées chacune en serrage par un organe moteur 116 vers la face supérieure de la platine 114.
Ces mâchoires sont destinées à coopérer en serrage avec deux segments de marge contigus et permettent d'appliquer fermement l'emballage, par ces deux segments de marge, contre la face supérieure de la platine afin d'assurer le maintien de l'emballage. La face supérieure de la platine 114 est située sensiblement au même niveau de hauteur que l'embouchure supérieure de l'alésage traversant du contre-poinçon.
Chaque mâchoires 115 se présente sous la forme d'un tampon circulaire et l'organe moteur 116 associé à la mâchoire est constitué par exemple par un vérin pneumatique simple effet alimenté en air comprimé par à une électrovanne du type une voie deux orifices pilotée par l'automate programmable. La mâchoire est fixée en extrémité de la tige de ce vérin pneumatique.
Chaque vérin sera fixé par son corps à un support solidaire de la face supérieure de la platine.
L'élément moteur terminal 112, dans sa forme préférée de réalisation, comprend selon un même plan horizontal sur un bâti, deux glissières cylindriques 117, parallèles, de guidage en translation d'un chariot mobile 119 auquel est fixé d'une part la platine support 114 et d'autre part, le brin supérieur horizontal d'une courroie sans fin 120 montée en tension entre une poulie menée 121 et une poulie menante 122 accouplée à l'arbre de sortie d'un moteur asservi 123 monté en fixation sur le châssis de l'élément moteur terminal 112 et piloté par l'automate programmable.
Le chariot 119 est prévu avec deux alésages de guidages traversants engagés sur les glissières 117.
Le bâti de l'élément terminal moteur 112 est fixé au premier élément moteur 113. Cet élément moteur comprend un bâti supportant dans un même plan horizontal, perpendiculairement aux glissières 117, deux glissières 124, cylindriques, parallèles, de guidage en translation, avec lesquelles coopère en guidage, par deux alésages de guidage 125 un chariot mobile 126 auquel est fixé d'une part, le bâti du premier élément moteur 112 et d'autre part, le brin supérieur horizontal d'une courroie sans fin 127 montée en tension entre une poulie menée 128 et une poulie menante 129 accouplée à l'arbre de sortie d'un moteur asservi 130 piloté par l'automate programmable et monté en fixation sur le châssis de l'élément moteur 113. Ainsi, par activation des deux organes moteurs asservis, le moyen de préhension est déplacé selon deux axes perpendiculaires l'un à l'autre et positionne tour à tour chacune des cellules de l'emballage entre le poinçon et le contrepoinçon en vue du déconditionnement.
La machine de déconditionnement telle que décrite comprend de plus sur la table 104A, un magasin vertical 134 dans lequel les emballages 105 sont empilés à l'horizontale les uns sur les autres selon une pile, leur feuilles d'obturation étant tournées vers le bas. Ce magasin 134 comporte une ouverture de chargement supérieure des emballages 105 et une ouverture inférieure de distribution des emballages 105 en regard de laquelle, dans le magasin est disposé l'emballage inférieur de la pile. Dans l'axe du magasin, la table 104A comporte une ouverture circulaire 140 traversante.
Par ailleurs, est prévu un second moyen de préhension 135, monté sous le magasin, dans l'axe de ce dernier et dans l'axe de l'ouverture traversante, sur une structure solidaire de la face inférieure de la table 104A. Ce moyen de préhension est actionné selon un axe vertical par un organe moteur 136 entre une position inférieure d'effacement sous la trajectoire du premier moyen et de préférence sous la table, dans l'axe de l'ouverture traversante, et une position supérieure de préhension selon laquelle il vient saisir le dernier emballage de la pile, ledit dernier emballage étant extrait du magasin par mouvement de l'organe de préhension 135 de sa position supérieure vers une position intermédiaire selon laquelle il maintien ledit emballage 105 dans le plan horizontal d'évolution du premier moyen de préhension 111. Ainsi l'emballage est placé dans une position selon laquelle il peut être saisi par le premier moyen 111. Le moyen de préhension 111 est alors déplacé vers l'emballage, et est engagé par la face supérieure de la platine 114 et des mâchoires 115 de part et d'autre de deux segments de marge de l'emballage. Ensuite les vérins 116 sont activés en sorte que les mâchoires soient amenées en pression contre l'emballage et le second organe de préhension désactivé en sorte l'emballage 105 soit libéré de l'emprise dudit second organe 135.
Le second moyen de préhension 135 se développe verticalement et est constitué par une ventouse montée en extrémité d'une conduite verticale d'aspiration d'air 137 connectée à une électrovanne elle même connectée à une source à dépression, cette électrovanne étant piloté par l'automate programmable de la machine. La conduite d'aspiration 137 est porté par l'organe moteur 136. Cet organe moteur est constitué de préférence par un vérin pneumatique double effet, comportant deux tiges, axialement alignées, disposées en opposition l'une par rapport à l'autre. La conduite d'aspiration 137 est formée dans la tige supérieure du vérin. En extrémité de la conduite d'aspiration 137 est fixé un capteur de présence 139. La tige inférieure du vérin coopère avec une butée rétractable formée par la tige d'un second vérin 136A disposé sous le précédent de manière axialement alignée avec ce dernier. Ces deux vérins sont fixés par leur corps à la structure porteuse.
Chaque vérin est connecté à une source d'air comprinié via une électrovanne du type une voie deux orifices, pilotée par l'automate programmable de la machine.
Selon un mode de réalisation préféré, la température à laquelle on effectue le traitement thermique est comprise entre 200 et 400"C. De préférence, cette température est comprise entre 250 et 3500C.
En outre, il est préférable que ledit traitement thermique soit mis en oeuvre sous une atmosphère contrôlée. Plus spécialement, I'atmosphère est dépourvue d'oxygène.
Ainsi, de manière avantageuse, le traitement thermique est réalisé sous azote ou sous un gaz rare, comme l'argon, I'hélium, le néon, ces gaz pouvant être employés seuls ou en mélange.
Généralement, le traitement thermique est mis en oeuvre sous une pression réduite, c'est-à-dire inférieure ou égale à 100 hPa, voire de préférence inférieure ou égale à 50 hPa. Bien entendu. on ne sortirait pas du cadre de la présente invention en mettant en oeuvre ledit traitement thermique sous une pression supérieure ou égaie à la pression atmosphérique.
Le traitement thermique peut être réalisé avec ou sans catalyseur.
Selon cette première possibilité, on peut utiliser des catalyseurs homogènes ou hétérogènes. Parmi les catalyseurs homogènes convenables, on peut nommer par exemple l'anthraquinone, I'anhydride sulfureux, les sels solubles de nickel. Parmi les catalyseurs hétérogènes, on peut citer sans intention de se limiter, les zeolites, les résines échangeuses d'ions sous forme acide. II est à noter que si un catalyseur est employé, on préfère le choisir dans la catégorie des catalyseurs hétérogènes.
Mais de préférence, le traitement thermique est effectué de manière avantageuse, en l'absence de toute substance catalytique.
La durée du traitement thermique selon l'invention dépend d'une part des conditions de température, de la présence ou non d'un catalyseur et d'autre part, du niveau de viscosité que l'on souhaite obtenir pour le polymère résultant. II est fait remarquer que l'homme du métier est tout à fait à même de déterminer la durée nécessaire du traitement thermique, sachant que les niveaux de viscosité sont fonction de l'application ultérieure du polymère stabilisé selon l'invention.
Par exemple, dans le cas d'applications en tant que lubrifiant, les niveaux de viscosité sont définis par une norme ISO VG (ISO 3448).
Selon cette norme, on obtient des viscosités cinématiques allant de 5 à 1500 mais, mesurées à 40"C.
Une fois la viscosité souhaitée atteinte, le traitement thermique est arrêté. Ceci consiste à baisser la température du mélange réactionnel en dessous du seuil ou la polymérisation a lieu. A titre purement indicatif, I'écart de température est de l'ordre de 10 à 50"C.
Cette opération peut avoir lieu par tout moyen connu de l'homme du métier. Ainsi, on peut soumettre le mélange réactionnel à un flux gazeux inerte, ou bien mettre le produit sous vide.
A l'issue du traitement thermique, on obtient un polymère présentant un niveau de viscosité approprié, et pouvant comprendre encore des insaturations.
Le polymère résultant de cette première étape comprend de même des fonctions carboxyliques. Le nombre de ces fonctions, qui est proportionnel à l'indice d'acide, est déterminé grace, par exemple, à une mesure titrimétrique correspondant à la norme NF T 60.204.
Le polymère ainsi obtenu subit ensuite une étape de traitement chimique.
Cette étape consiste à mettre en contact le polymère issu de l'étape précédente avec au moins un agent réagissant avec les fonctions acides carboxyliques présentes dans ledit produit.
Dans le cas (i), la mesure des longueurs des sondes fluorescentes est comparable à celle qui serait obtenue avec la même sonde hybridée sur un ADN génomique non pathologique de même nature (c'est-à-dire essentiellement, de même taille et préparé dans les mêmes conditions).
Dans le cas (ii), au contraire, la sonde étant systématiquement hybridée sur deux morceaux (ou davantage) séparés dans l'ADN génomique peigné (par définition de l'existence d'un point de cassure), la mesure des longueurs des sondes fluorescentes hybridées se distingue du résultat obtenu par hybridation sur un ADN génomique non pathologique. De surcroît, la taille des fragments hybridés sur l'ADN pathologique permet d'estimer la position du point de cassure au sein du clone avec une précision de quelques kb, voire davantage, si une technique plus résolutive est utilisée.
De ce fait, il ne reste alors plus qu'à rechercher le gène dans ce clone.
Pratiquement, il s'agira de répéter ces mesures pour l'ensemble des clones susceptibles de recouvrir partiellement la zone correspondant au gène. Le nombre de lames d'hybridations pourra être réduit en hybridant simultanément plusieurs sondes marquées différemment, ou en utilisant une méthode de codage par combinaison de couleurs, comme cela sera décrit ci-après.
Cette technique permet de déterminer la position des éventuels points de cassure de la région du génome impliquée dans une pathologie génétique par hybridation d'ADN génomique cloné sur de l'ADN génomique peigné provenant de patients. Cette technique s'applique donc à la recherche de régions du génome responsables de pathologies dues à: - la délétion d'une partie ou de la totalité de cette région du génome, - la translocation de toute ou partie de cette région du génome, - la duplication ou présence de plusieurs copies de toute ou partie de cette région du génome en son sein ou en tout autre endroit du génome, - l'insertion de toute séquence génétique à l'intérieur de cette région du génome.
Dans un second mode de mise en oeuvre et dans certains cas particuliers, notamment lorsque l'anomalie génétique recherchée comporte des délétions importantes ou des duplications (cas des trisomies par exemple), le procédé objet de la présente invention peut être modifié puisqu'il s'agit alors de doser les gènes ou une séquence particulière.
Plus particulièrement, la présente invention concerne un procédé de dosage d'une séquence génomique déterminée dans un génome, caractérisé en ce que: (a) on fixe et on peigne une certaine quantité dudit génome sur une surface de peignage, (b) on hybride le produit de peignage avec une sonde témoin marquée de longueur It correspondant à une séquence génomique dite témoin, c'est-à-dire dont on connaît le nombre de copies dans le génome, et avec une sonde spécifique marquée de longueur lc correspondant à la séquence génomique à doser, de sorte que lesdites sondes pourront être identifiées séparément, (c) on mesure alors la longueur totale des signaux d'hybridation pour les deux sondes, soit Lc et Lt, (d) on calcule pour chacune le nombre de copies de la séquence correspondant par le rapport Lt Lc Nt ~~~~~~ = et Nc It Ic et on en déduit le nombre de copies de la séquence à doser par rapport à la séquence témoin.
Dans le cas du diagnostic prénatal de la trisomie 21, la méthode pourra consister en l'hybridation d'une sonde cosmidique spécifique d'un chromosome témoin (chromosome 1, par exemple- sonde de longueur It) marquée avec des nucléotides biotinilés, et l'hybridation d'une sonde cosmidique spécifique du chromosome 21 (sonde de longueur Ic) marquée à la digoxygénine sur de l'ADN génomique peigné extrait de prélèvements amniotiques, ou de tout autre prélèvement contenant des cellules d'origine foetale.
Par exemple, on pourra utiliser un système de révélation avidine-Texas Red (couleur rouge) pour la sonde témoin et antidigoxygénine-FlTC (couleur verte) pour la sonde spécifique: la longueur totale des signaux d'hybridation rouges observés dans une zone donnée de la surface, LT, et la longueur totale des signaux d'hybridation verts observés dans la même zone, ou dans une zone équivalente de la surface, LC, conduisent donc aux nombres Nt et Nc définis ci-dessus.
Le rapport Nc/Nt proche de 1 signalera un génotype normal (2 chromosomes 21 pour 2 chromosomes 1), alors qu'un rapport proche de 1,5 signalera un génotype trisomique (3 chromosomes 21 pour 2 chromosomes 1).
De façon générale, une différence significative entre Nc et la valeur attendue pour le nombre de génomes présents déduit de Nt est l'indication de la présence d'une anomalie génique.
Dans le cas du diagnostic d'oncogènes ou proto-oncogènes, la même méthode pourra être employée: une sonde témoin sera hybridée et révélée en rouge par exemple et une sonde correspondant au gène ou à une partie du gène recherché sera hybridée et révélée en vert par exemple. Après les mesures effectuées comme ci-dessus, le rapport Nc/Nt donnera l'abondance relative du gène par rapport à la fréquence de deux copies par génome diploïde.
La méthylation aberrante des ilôts GpC observée fréquemment dans de nombreux cancers (92% des cancers du colon) peut aussi être détectée par le procédé selon l'invention par réaction entre l'ADN peigné et des anticorps fluorescents dirigés contre les cytosines méthylées.
En effet, la perte de l'hétérozygotie sur le chromosome 9p21 est l'une des altérations génétiques les plus fréquentes identifiées dans les cancers humains. Le gène suppresseur de tumeur CDKN2/pl6/MTS1 localisé dans cette région est fréquemment inactivé dans beaucoup de cancers humains par délétion homozygote. Toutefois, on a rapporté un autre mode d'inactivation qui implique la perte de la transcription associée avec une méthylation de novo des ilôts 5' GpC de CDKN2/p16 dans les cancers des poumons, les gliomes et les carcinomes à desquamation de la tête et du cou. Ces méthylations aberrantes des ilôts GpC arrivent également fréquemment dans des lignées cellulaires de cancers du sein (33%), de la prostate (60%), du rein (23%) et du colon (92%) (Herman J.G. et al. (1995) Cancer Res., Oct. 15, 55(20) 4525-30 ; Wales M.M.
et al. (1995) Nature Med., Jun., 1(6): 570-607).
La localisation précise des aires de méthylation sur un gène est d'une très grande importance pour la compréhension du mécanisme du développement du cancer et pour un test de "screening" possible. Le peignage moléculaire peut détecter avec une précision de quelques kb la localisation de tels ilôts GpC impliqués dans le développement du cancer.
A titre de composés insolubles dans le mélange réactionnel, on peut mentionner les résines échangeuses d'ions, les zeolites, par exemple.
Le traitement chimique est effectué généralement à une température comprise entre 150 et 250"C. De préférence, la température est comprise entre 190 et 210"C. II est cependant à noter que de telles valeurs ne sont données qu'à titre indicatif car elles dépendent notamment de la présence ou non et de la nature du catalyseur employé dans la réaction.
Dans le cas où un solvant formant un azéotrope avec l'eau est utilisé, la température dudit traitement chimique est voisine de celle de l'azéotrope.
La durée de cette étape de traitement thermique peut être déterminée de manière simple pour l'homme de l'art, car il suffit de constater que le solvant ne distille plus, ou bien encore de contrôler l'évolution de l'indice d'acide du produit obtenu.
De manière habituelle, la durée du traitement chimique est comprise entre 30 minutes et 15 heures.
Lorsqu'un solvant est employé, il est préférable de procéder à une élimination de toute trace de solvant restant dans le mélange. Cette opération est effectuée par tout moyen connu, comme par exemple la distillation.
Lorsque la réaction est terminée, on peut procéder à une étape de séchage du polymère obtenu. Cette étape a lieu de manière connue comme par exemple une distillation sous vide, ou bien encore l'emploi de composés dessiccatifs du type des sulfates de sodium, de magnésium, de calcium, des carbonates de sodium, de potassium, ou bien de chlorure de calcium.
On procède en général de manière à conserver une teneur en eau dans le polymère voisine ou inférieure à 500 ppm. Bien entendu cela peut être adapté en fonction des applications ultérieures dudit polymère.
Préalablement à cette étape de séchage, on peut effectuer, si nécessaire, une désodorisation du polymère obtenu.
La désodorisation peut avoir lieu notamment par entrainement à la vapeur d'eau dans le mélange réactionnel.
Cette opération est mise en oeuvre généralement à une température comprise entre 100 et 250"C.
La durée de la désodorisation est habituellement comprise entre 10 et 180 minutes.
Le polymère obtenu est ensuite filtré.
Un autre objet de la présente invention est constitué par des polymères susceptibles d'être obtenus en mettant en oeuvre le procédé qui vient d'être décrit.
Ces polymères présentent de manière avantageuse une viscosité contrôlée et modulable. En effet, le procédé selon l'invention permet, à partir d'un même réactif, de produire plusieurs produits présentant divers niveaux de viscosités ainsi que des valeurs d'indice d'acide très faibles.
En effet, les polymères selon l'invention présentent plus particulièrement un indice d'acide inférieur ou égal à 1,5. De préférence, cet indice d'acide est inférieur ou égal à 1 et de manière encore plus avantageuse, il est inférieur ou égal à 0,5. Cette caractéristique fait que les polymères susceptibles d'être obtenus selon le procédé de l'invention sont particulièrement stables, plus particulièrement vis-à-vis de réactions d'hydrolyse, et de dégradation thermique. En outre, les difficultés liées à la corrosivité des polymères sont considérablement diminuées.
Des études montrent, par ailleurs, qu'il n'existe pas encore de méthodes immunologiques permettant la détection de marqueurs foetaux dans le sang maternel permettant un diagnostic indubitable de la trisomie 21 ou d'autres anomalies (voir, par exemple, Wald N.J. et al., 1996, Br. J. Obstet. Gynaecol., 103 407-412 pour le syndrome de Down lié à la trisomie 21).
Les diagnostics prénataux actuels ont donc de nombreux désavantages ils ne peuvent être effectués qu'à un stade relativement tardif du développement de l'embryon; ils ne sont pas totalement dénués de risque pour le foetus ou pour la mère; les résultats sont souvent obtenus après un temps assez long (environ 1 à 3 semaines suivant la technique) et sont coûteux. Enfin, un certain nombre d'anomalies chromosomiques passent inaperçues.
Diagnostic de sathologies à composante génétique - De nombreuses maladies ont une composante génétique reconnue (diabète, hypertension, obésité, etc.) qui est le résultat de délétions, insertions et/ou remaniements chromosomiques de tailles variables. La mise en culture de cellules ne pose pas de problème à ce stade, mais les techniques de FISH, décrites par Lichter G.D.
et al. (1993), Genomics, 16 320-324 ; Brandritt B. et al. (1991), Genomics, 10, 75-82 et Van den Hengh G. et al. (1992), Science, 257, 1410-1412), ont une résolution limitée et font appel à un personnel très qualifié, rendant ces tests peu accessibles.
Enfin, nombre de tumeurs sont caractérisées par des remaniements chromosomiques tels que translocations, délétions, trisomies partielles ou complètes, etc.
L'intérêt de la technique apparaît tout particulièrement dans le cas où le matériel génétique provient de cellules qui ne se divisent plus ou ne peuvent être mises en culture, voire de cellules mortes dans lesquelles l'ADN n'est pas significativement dégradé.
Dans le cas du diagnostic prénatal, il en est ainsi après extraction des cellules foetales circulant dans le sang maternel (Cheung et al., 1996, Nature Genetics 14 264-268). Il en est de même dans le cas de cellules cancéreuses provenant de certaines tumeurs.
La recherche de gènes impliqués dans des pathologies (humaines ou autres) est aujourd'hui effectuée en général en plusieurs étapes (i) Etablissement d'une population cible d'individus atteints par la pathologies, de leurs descendants, ascendants et collatéraux, et prélèvement d'échantillon sanguins et/ou cellulaires en vue du stockage de matériel génétique (sous forme d'ADN ou de souches cellulaires).
(ii) Localisation génétique par analyse de probabilité de co-ségrégation avec des marqueurs génétiques (linkage analysis). A ce stade de l'étude, on dispose de quelques marqueurs proches localisés sur un (ou plusieurs) chromosome(s) donné(s) qui permettent de passer à l'étape de localisation physique.
(iii) Cartographie physique : à partir des marqueurs génétiques obtenus à I'étape précédente, un criblage de banques de clones d'ADN humain (YACs; BACs, cosmides ou autres) spécifiques de la ou des régions déterminées à l'étape précédente est effectué. On obtient ainsi un certain nombre de clones contenant les marqueurs précédents. La zone d'intérêt peut être alors cartographiée précisément en utilisant des clones de taille décroissante. Un clonage de la partie du génome considérée peut également être effectuée à nouveau à partir de l'ADN humain.
(iv) Recherche du gène : plusieurs techniques peuvent être utilisées à ce stade: exon "trapping" (utilisation de librairies de cDNA (ADN couplémentaires obtenus à partir d'ARN messager)), ilôts CpG, conservation de séquences interspécifiques, etc, qui permettent d'assigner une séquence codante à l'un (ou plusieurs) des clones sélectionnés aux étapes précédentes.
Le 6-bromométhyl-1,1,4,4,7-pentaméthyl- 1,2,3, 4-tétrahydronaphtalène brut (8,80 g, environ 32 mmol) préparé précédemment est mélangé avec de la triphénylphosphine (10,1 g, 38,4 mmol) en solution dans 50 ml de dichlorométhane pendant 24 h, puis dilué à l'éther éthylique (200 ml). Le bromure de [(5,6,7,8tétrahydro-3,5,5,8,8-pentaméthyl-2-naphtalényl)méthyl] triphénylphosphonium précipite, est filtré et lavé abondamment à l'éther. On obtient 10,72 g de cristaux blancs, le bromure de (5,6,7,8-tétrahydro-3,5,5,8,8- pentaméthyl-2-naphtalényl) -méthyl-triphénylphosphonium (Rdt = 60%) après séchager.
RMN1H 200MHz (CDC13) : 0,74 (s, 6H, 5-CH3); 1,15 (s, 6H, 8-CH3); 1,52 (s large, 2H, 6-CH2); 1,56 (s large, 2H, 7-CH2); 1,56 (s, 3H, ArMe); 4,98 (d, 2H, -CH2 P J 16,8Hz); 6,77 (s, 1H, ArH J 2,8Hz); 6,84 (s, 1H, ArH); 7,78-7,46 (m, 15H, ArH).
e) PréDaration des (E) et (Z) 4-[1-(5,6,7,8- tétrahydro-3,5,5,8,8-pentaméthyl-2-naphtalényl)-2prosénYllbenzonitriles de formules