INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La présente demande concerne une cellule recombinante permettant l'encapsidation d'ARNs rétroviraux recombinants par transcomplémentation (cellules recombinantes transcomplémentantes), caractérisée en ce qu'il s'agit d'une cellule telle que définie précédemment, transfectée avec - d'une part, un premier vecteur d'expression pour la transcomplémentation d'un vecteur rétroviral permettant le transfert et/ou l'intégration au sein du génome d'une cellule cible d'une séquence de nucléotides choisie (dite "séquence transgénique"), comprenant les séquences complémentantes suivantes a) une séquence de nucléotides dite séquence gag codant pour un polypeptide dérivé d'une nucléoprotéine (polypeptide GAG) d'un rétrovirus du type du rétrovirus de Friend, b) une séquence de nucléotides dite séquence pol codant pour un polypeptide dérivé d'une transcriptase inverse (polypeptide POL) d'un rétrovirus du type du rétrovirus de Friend, c) des signaux régulateurs de transcription contrôlant l'expression des séquences gag et pol, ledit vecteur d'expression pour la transcomplémentation étant dépourvu du signal d'encapsidation, et, - d'autre part, un deuxième vecteur pour la transcomplémentation en protéines env.
Les différentes lignées sont fabriquées par transfections successives sur le principe des lignées de troisième génération , c'est-å-dire, avec fragmentation en deux parties des séquences codant pour les protéines GAG, POL et ENV de complémentation. Cette construction limite les probabilités de recombinaisons génétiques susceptibles de générer des particules virales compétentes pour la réplication.
Les cellules d'encapsidation selon l'invention sont en d'autres termes caractérisées en ce qu'elles comprennent a) une séquence de nucléotides dite séquence gag codant pour un polypeptide dérivé d'une nucléoprotéine (polypeptide GAG) d'un rétrovirus du type du rétrovirus de Friend, b) une séquence de nucléotides dite séquence pol codant pour un polypeptide dérivé d'une transcriptase inverse (polypeptide POL) d'un rétrovirus du type du rétrovirus de Friend, c) des signaux régulateurs de transcription contrôlant l'expression des séquences gag et pol, et d) une séquence de nucléotides dite séquence env, codant pour un polypeptide dérivé de l'enveloppe (polypeptide ENV) d'un rétrovirus de la famille des spumavirus, le polypeptide ENV permettant l'encapsidation d'ARN rétroviraux, e) des signaux régulateurs de transcription contrôlant l'expression de la séquence env.
Les cellules d'encapsidation décrites ci-dessus sont destinées en outre à être transfectées par un vecteur rétroviral portant une séquence transgénique que l'on souhaite voir exprimer dans une cellule cible ultérieurement infectée par le surnageant des cellules d 'encapsidation.
Les cellules d'encapsidation de l'invention ont l'avantage d'être dépourvues de virus helper et dépourvues de virus endogènes, offrant ainsi des conditions de sécurité améliorées.
Une cellule particulièrement intéressante selon l'invention est caractérisée en ce qu'il s'agit de la cellule DOGOM 1 déposée à la CNCM sous le numéro I-1496, recombinée d'une part avec les séquences nucléotidiques gag et pol de la souche FB29 du rétrovirus de Friend, sous le contrôle des signaux de transcription contenus dans la séquence LTR de la souche FB29 du rétrovirus de Friend et recombinée d'autre part avec la séquence de nucléotides env d'un rétrovirus du type spumavirus sous le contrôle d'un promoteur inductible, par exemple le promoteur RARE.
Le contrôle de l'enveloppe de spumavirus par un promoteur inductible doit permettre de prévenir un effet lytique éventuel de l'expression de séquences de spumavirus, sur les cellules transfectées.
Une autre cellule recombinante transcomplémentante intéressante dans le cadre de l'invention, est caractérisée en ce que les signaux de transcription contenus dans la séquence LTR de la souche FB29 du rétrovirus de Friend contrôlant l'expression des séquences gag et pol, sont remplacés par un promoteur non viral suivi par la séquence de polyadénylation du virus SV40 ou par une autre séquence de polyadénylation.
Les séquences gag et pol peuvent ainsi être par exemple placées sous le contrôle du promoteur inductible RAR-8.
Dans un autre mode de réalisation, l'invention a pour objet des cellules recombinantes transcomplémentantes pour 1 'encapsidation d'ARN rétroviral, caractérisé en ce qu'elles comprennent les séquences gag et pol dont question ci-dessus, sous le contrôle d'un promoteur inductible ou conditionnel et une séquence env amphotrope, par exemple dérivée de la séquence env 4070A du virus de Moloney également sous le contrôle d'un promoteur inductible ou conditionnel.
Les cellules recombinantes ainsi obtenues sont en outre transfectées par un vecteur rétroviral pour l'expression et/ou le transfert et/ou l'intégration au sein du génome d'une cellule cible, d'une séquence de nucléotides choisie ("séquence transgénique"), ce vecteur rétroviral étant avantageusement construit à partir de la souche FB29 du rétrovirus de Friend.
Ainsi, le vecteur rétroviral peut être construit en plaçant sous le contrôle de la séquence LTR, la séquence transgénique à exprimer, les séquences codant pour les gènes qaq, env, pol étant délétées au moins en partie et la séquence d'encapsidation du rétrovirus étant présente au sein du vecteur.
Un vecteur rétroviral ainsi utilisable pour transfecter les cellules transcomplémentaires dont question ci-dessus, est le vecteur pFOCH29 représenté à la figure 1 et déposé à la CNCM sous le n I-1326, le 30 Juin 1993. La séquence transgénique à exprimer dans les cellules cibles est incorporée dans le vecteur pFOCH29 en un site non essentiel pour sa réplication.
La suspens ion ne subit aucune modification chimique (absence de dégradation de la matière active) et physique (la taille des particules et la densité optique restent identiques) après 4 mois de conservation à 40C et 250C.
Le tert-butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-(2R,3S) de diacétoxy-4a,10 benzoyloxy-2a époxy-5ss,20 hydroxy-113 méthylène 713,813 oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13a peut être préparé comme décrit dans la demande de brevet WO 94/13654.
Exemple7 750 mg (15 mg/ml théorique) d'un co-polymère dibloc constitué de l'association d'un poly(acide d,l-lactique) de masse 30 kD et d'un polyethylène glycol de masse 2 kD (PLA-PEG) sont dissous dans 20 ml d'acétate d'éthyle (solution A). 175 mg de lécithine E80 et 90 mg d'oléate de sodium sont dispersés dans 50 ml de solution glucosée à 5 % p/v (solution B). La solution A est émulsionnée dans la solution B par un Ultra-turrax puis la pré-émulsion est ensuite introduite dans un homogénéisateur de type Microfluidizer 110 S# pendant 10 minutes à 100C. Le volume d'émulsion récupéré est d'environ 70 ml (70 g).L'acétate d'éthyle est éliminé à l'aide d'un évaporateur rotatif sous pression réduite (100 mm de mercure) jusqu'à un volume de suspension d'environ 45 ml (45 g). La suspension est filtrée sur deux filtres en série de porosité décroissante (1,2 pm Minisart NML + 0,22 uni SLGS#). La suspension filtrée est stérile.
Le diamètre moyen des particules mesuré par diffusion de lumière sur un appareil Brookhaven# est d'environ 63 nm.
La densité optique à 405 nm de la suspension avant et après la dernière filtration sur 0,22 uni est 1,6.
La suspension ne subit aucune modification physique (la taille des particules et la densité optique restent identiques) après 4 mois de conservation à 40C et 250C.
Exemple 8 750 mg (15 mg/ml théorique) d'un co-polymère dibloc constitué de l'association d'un poly(acide d,l-lactique) de masse 30 kD et d'un polyethylène glycol de masse 2 kD (PLA-PEG) et 250 mg (5 mg/ml théorique) de tert-butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-(2R,3S) de diacétoxy-4a,10ss benzoyloxy-2a époxy-5ss,20 hydroxy-113 méthylène-7ss,8ss oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13a sont dissous dans 10 ml d'acétate d'éthyle (solution A). 175 mg de lécithine E80 et 45 mg d'oléate de sodium sont dispersés dans 50 ml de solution glucosée à 5 % p/v (solution B). La solution A est émulsionnée dans la solution B par un Ultra-turrax puis la préémulsion est ensuite introduite dans un homogénéisateur de type Microfluidizer 110 S# pendant 10 minutes à 100C. Le volume d'émulsion récupéré est d'environ 60 ml (60 g). L'acétate d'éthyle est éliminé à l'aide d'un évaporateur rotatif sous pression réduite (100 mm de mercure) jusqu'à un volume de suspension d'environ 36 ml (36 g). La suspension est filtrée sur deux filtres en série de porosité décroissante (1,2 uni Minisart NML# + 0,22 uni SLGS#). La suspension filtrée est stérile.
Le diamètre moyen des particules mesuré par diffusion de lumière sur un appareil Brookhaven# est d'environ 64 nm.
La densité optique à 405 nm de la suspens ion avant et après la dernière filtration sur 0,22 uni est 1,5.
Le rendement de fabrication, exprimé par le rapport de la concentration en tert-butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-(2R,3S) de diacétoxy-4a,10ss benzoyloxy-2a époxy-5ss,20 hydroxy-113 méthylène-7ss,8ss oxo-9 nor-19 taxène-il yle-13a finale après filtration, sur la concentration théorique initiale (5 mg/ml), est supérieure à 90 %.
La proportion de tert-butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-(2R,3S) de diacétoxy-4α,10ss bonzoyloxy-2a époxy-5ss,20 hydroxy-113 méthylène-7ss,8ss oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13a encapsulée dans les nanoparticules, mesuré par dosage du surnageant après ultracentrifugation (65000 G, 2 h), est de l'ordre de 98 %.
La concentration en PLA-PEG (calculée par rapport au rendement en tert-butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-(2R,3S) de diacétoxy-4a,10ss benzoyloxy-2a époxy-5ss,20 hydroxy-1 13 méthylène-7ss,8ss oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13a est 14 mg/ml.
Le tert-butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-(2R,3S) de diacétoxy-4a,10ss benzoyloxy-2a époxy-5ss,20 hydroxy-113 méthylène 713,813 oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13a peut être préparé comme décrit dans la demande de brevet WO 94/13654.
Exemple 9 3.0 g (15 mg/ml théorique) d'un co-polymère dibloc constitué de l'association d'un poly(acide d,l-lactique) de masse 30 kD et d'un polyethylène glycol de masse 2 kD (PLA-PEG) sont dissous dans 80 ml d'acétate d'éthyle (solution A). 700 mg de lécithine E80 et 180 mg d'oléate de sodium sont dispersés dans 200 ml d'eau pour préparation injectable (solution B). La solution A est émulsionnée dans la solution B par un Ultra-turrax puis la pré-émulsion est ensuite introduite dans un homogénéisateur de type Microfluidizer 110 pendant 10 minutes à 100C. Le volume d'émulsion récupéré est d'environ 230 ml (230 g). L'acétate d'éthyle est éliminé à l'aide d'un évaporateur rotatif sous pression réduite (100 mm de mercure) jusqu'à un volume de suspension d'environ 186 ml (186 g). Le volume de la suspension est ajusté à un volume de 200 ml par de l'eau pour préparation injectable. La suspension est filtrée sur deux filtres en série de porosité décroissante (1,2 uni Minisart NML# + 0,22 uni SLGS#). La suspension filtrée, stérile, est lyophilisée en présence de 20 % p/v de saccharose.
Le diamètre moyen des particules mesuré par diffusion de lumière sur un appareil Brookhaven# avant la lyophilisation et après reprise du lyophilisat par le même volume d'eau pour préparation injectable, est compris entre 70 et 100 nm.
PERFECTIONNEMENT DE L'INTRODUCTION DE BARRES PROFILEES DANS UN DISPOSITIF TOURNANT. EN PARTICULIER SUR TOUR A DECOLLETER La présente invention concerne un perfectionnement pour tour à décolleter destiné à faciliter l'introduction d'une barre de forme profilée, plus particulièrement une douille d'orientation destinée à positionner en orientation ladite barre lors de son introduction.
- d'un support de dilution tel que solution hydro-alcoolique, par exemple - et d'agents ou substances destinés à accroître la tolérance cutanée du mélange Toutes les méthodes d'imprégnation possibles peuvent être utilisées. Ce peut être par exemple: le trempage dans le cas de tissus ou de fibres, la pulvérisation sous forme liquide ou solide, le mélange avant polymérisation ou solidification du matériau constitutif de l'article 1 à traiter, l'application par adhérence, adsorption ou effet électrostatique d'une couche 2 de produit actif (figure 1), etc.
La profondeur d'imprégnation est fonction du support et est déterminée de manière à consommer le strict minimum de produit actif. On peut ainsi assurer une protection anti-transpiration de longue durée sans avoir à renouveler l'application de préparation active.
En doublant l'intérieur de l'article de protection 1 par un support 3 perméable à la préparation active et à la sueur, on favorise la rencontre de ces deux éléments nécessaires à l'obtention de l'effet antitranspirant (figure 2). Dès la toute première émission de sueur au niveau d'un pore sudoripare, la combinaison de sueur et de matière active crée un bouchon superficiel 4.
D'une part, très peu de matière active se dépose sur la peau 5, et d'autre part la matière active ne descend pas dans le canal sudoripare 6. La consommation de matière active est donc minimale, ce qui permet d'obtenir un effet de longue durée sans avoir à renouveler les applications de matière active.
Pour des articles de protection ayant une très longue durée de vie, le support 3 est choisi pour que sa réceptivité à la préparation anti-transpirante permette de le régénérer aisément et efficacement par de nouvelles imprégnations.
Les résultats directement obtenus par cette invention sont les suivants - économies sur la quantité de préparation anti-transpirante utilisée, - gains de temps engendrés par le fait de n'avoir pas à faire des applications de produit antitranspirant avant chaque séance de travail.
- simplification qui en résulte pour le client final.
On sait que certaines matières imperméables utilisées pour la protection de la peau (latex par exemple) ont une agressivité cutanée accrue par la présence de sueur. L'effet anti-transpirant de longue durée obtenu grâce à l'innovation proposée permet de réduire considérablement cet inconvénient.
Un autre avantage réside dans le fait que la matière active ne descend pas vers les glandes sudoripares 7, donc vers les couches profondes de la peau 5. De ce fait les risques d'effets secondaires en profondeur sont très limités. Cela est très important pour une mise en oeuvre prévoyant un temps de contact relativement long entre la peau 5 et la matière active.
PROCEDE DE PRODUCTION D'ARTICLES COLORES EN POLYAMIDE La présente invention concerne un procédé de production d'articles colorés en polyamide ou en un matériau contenant un polyamide (appelé ci-après en abrégé "article coloré en polyamide"), procédé qui permette d'obtenir un article coloré en polyamide dont la couleur est très solide, même quand on utilise un colorant dispersé pour l'opération de teinture.
Dans le cadre de la production d'articles colorés en polyamide par teinture d'articles en polyamide mis en forme, comme des pièces moulées en résine de polyamide ou des fibres de polyamide, lorsque l'on utilise un colorant dispersé pour teindre les articles en polyamide mis en forme, la solidité de la couleur des articles colorés en polyamide ainsi obtenus est assez faible. Par conséquent, dans la teinture d'articles en polyamide mis en forme, ce n'est en général que dans le cas ou l'on veut obtenir une couleur claire que l'on utilise des colorants dispersés.
Pour obtenir des articles colorés en polyamide par teinture d'articles en polyamide mis en forme comme ceux que l'on a indiqués ci-dessus, il est donc jusqu'à présent habituel de teindre ces articles en polyamide mis en forme en utilisant un colorant acide.
I1 existe à présent des tissus mélangés, des tissus mi-laine et des articles composites en combinaisons de polyamide et d'autres résines synthétiques comme des polyesters. On produit également des articles colorés en polyamide, par teinture de ces combinaisons de polyamide et d'autres résines synthétiques comme des polyesters.
Dans la teinture d'articles en combinaisons de polyamide et d'autres résines synthétiques comme des polyesters, lorsque l'on effectue cette teinture en utilisant seulement un colorant dispersé, la couleur des articles colorés en polyamide ainsi obtenus n'est pas très solide, comme on l'a fait remarquer plus haut. I1 est par conséquent habituel de teindre d'abord l'article en utilisant un colorant dispersé, de décolorer ensuite le composant polyamide de l'article en en enlevant le colorant dispersé, et de teindre à nouveau le composant polyamide à l'aide d'un colorant acide.
Toutefois, ce mode opératoire nécessite deux opérations de teinture des articles, ce qui est gênant et très coûteux. I1 est tout à fait reconnu qu'il est souhaitable de pouvoir produire aisément, en n'utilisant qu'un colorant dispersé, des articles colorés en polyamide dont la couleur soit très solide.
Figure 7 : A) Coloration au bleu de Comassie : Gel SDS-Page des protéines de fusion secrétées et purifiées par affinité sur colonne Albumine des différentes constructions: - puits 1: S xylosus [pSE'G2delBB] (34,28 Kda).
- puits 2 : S.xylosus (pSE'G2subBB] (35,23 Kda).
- puits HW : Marqueurs de taille moléculaire (en Kda).
B) Immunoblot des protéines de fusion secrétées et purifiées par affinité sur colonne Albumine des différentes constructions avec anticorps polyclonal lapin anti-G1(VRS).
- puits 1: S.xylosus [pSE'G2delB8] (34,28 Kda).
- puits 2 : S.xylosus [pSE'G2subBB] (35,23 Kda).
- puits HW: Marqueurs de taille moléculaire précolorés (en Kda).
CONVERTISSEUR iIYDROCINElIQUE DE COUPLE PONTABLE La présente invention concerne un convertisseur hydrocinétique de couple, utilisé notamment dans une transmission automatique de véhicule automobile. Plus précisément, elle concerne un convertisseur pontable, c'est-à-dire capable d'assurer une transmission strictement mécanique du mouvement, sur certains rapports de la transmission, grâce à la suppression de tout glissement hydraulique entre ses éléments.
Par la publication FR 2 478 770, au nom de la demanderesse, on connaît un convertisseur hydrocinétique de couple pontable, muni d'un piston de pontage solidaire de la turbine, dont le serrage contre un élément solidaire de la cloche, ou coquille, du convertisseur, permet de supprimer de façon temporaire le glissement à l'intérieur de celuici. Selon une disposition classique, illustrée par cette publication, le piston de pontage délimite avec la coquille du convertisseur une chambre, dite "chambre de pontage", isolée de l'enceinte du convertisseur lors du pontage. Le piston est alors serré contre un disque de friction prévu à cet effet sur la coquille. On parle dans ce cas de système de pontage "monoface".Cependant, dans certains convertisseurs, le piston peut être lié non pas à la turbine mais à la coquille, tandis que le disque de friction, fixé sur une pièce s'étendant entre le piston et la coquille est pris entre ces deux éléments lors du pontage. Dans ce cas, on parle de convertisseur pontable, "biface".
La chambre de commande du pontage, ou chambre de pontage est le plus souvent alimentée sous une pression supérieure à la pression interne du convertisseur en situation dépointée, et mise à la bâche lors du pontage par la manoeuvre d'un tiroir de commande. En mode dépointé, lorsque le véhicule est en situation de tirage (le convertisseur et le véhicule étant "tirés" par le moteur), le piston est en déséquilibre sous l'effet des pressions internes et externes à la chambre de commande, et il conserve un faible jeu vis-à-vis des garnitures du disque de friction. En revanche, la situation dite de "tro" (moteur "ti" par le véhicule lors d'une décélération) en mode dépointé, provoque un déséquilibre des pressions s'exerçant sur les deux faces du piston.Ce déséquilibre se traduit par le repoussement du piston en bute vers l'extérieur de la chambre de pontage, et par un jeu important entre le piston et les garnitures de friction. Par suite, en situation de rétro", la mise à la bâche de la chambre de pontage peut ne pas créer à l'intérieur de celle ci, une dépression suffisante pour assurer le pontage dans de bonnes conditions.
La pressente invention a pour but de garantir le pontage d'un convertisseur hydrocinétique de couple, même lorsque celui-ci n'est pas entraîné par le moteur du véhicule.
Elle concerne un convertisseur hydrocinétique de couple pontable, notamment pour transmission automatique à rapports étagés, comportant une coquille liée au moteur d'entraînement de la transmission, un impulseur solidaire de la coquille, couplé de façon hydraulique à une turbine elle-même liée au mécanisme de la transmission, et un piston de pontage fixé sur la turbine, délimitant avec la coquille une chambre de pontage dont la mise à la bâche permet le pontage du convertisseur par immobilisation du piston visà-vis de la coquille. Ce convertisseur est caractérisé en ce qu'il est pourvu de moyens générant une perte de charge à l'intérieur de la chambre de pontage lors de la mise à la bâche de celle-ci, en vue de faciliter le pontage.
L'invention concerne également un convertisseur hydrocinétique de couple pontable, notamment pour transmission automatique à rapports étagés, comportant une coquille liée au moteur d'entraînement de la transmission, un impulseur solidaire de la coquille, couplé de façon hydraulique à une turbine elle-même liée au mecanisme de la transmission, et un piston de pontage fixé sur la coquille, délimitant avec la coquille une chambre de pontage dont la mise à la bâche permet le pontage du convertisseur par immobilisation du piston vis-à-vis de la turbine. Ce convertisseur est caractérisé en ce qu'il est pourvu de moyens générant une perte de charge à l'intérieur de la chambre de pontage, lors de la mise à la bâche de celle-ci, en vue de faciliter le pontage.
Selon un mode de réalisation de l'invention, les moyens de perte de charge sont constitués par une lèvre souple.
Selon un mode de réalisation de l'invention, la lèvre souple est circulaire.
Ainsi que cela est montré aux figures 4 et 5, le cadre 27 de la vitre est rendu solidaire du pivot 21 qui sera décrit ci-après et ledit pivot peutêtre démonté conjointement avec la vitre.
A cet effet le pivot 21 est essentiellement constitué par: - un boîtier d'articulation de liaison et de montage 30 susceptible d'être solidarisé avec le montant support 14 ainsi que nous le verrons ci-après, - un logement 31 de la rotule 29, - un pivot d'entraînement 32 dudit logement de rotule.
Les figures 2 et 3 montrent plus en détail la structure des moyens d'immobilisation du pivot 21 sur son support 14 et plus généralement la fixation de la vitre 20 sur ledit support.
Le montant support 14 possède ainsi que cela est bien connu une section en U qui constitue une gouttière d'écoulement latérale 33 en bordure du pare-brise 12. Une paroi 34i de la gouttière porte une clavette de retenue 35 à talon du boîtier 30 et est solidaire de ladite paroi par des rivets 36. La paroi opposée 34e porte un orifice 37 de passage d'un plot élastique 38 d'immobilisation au contact dudit orifice intégré à la matière constitutive d'une paroi du boîtier 30, qui prend appui sur le bord de l'orifice 37, lorsque le boîtier 30 est encastré dans la gouttière 33 et immobilisé par la clavette 35. A cet effet la face du boîtier opposée au plot élastique 38, porte une rainure 40 en queue d'aronde destinée à coiffer la clavette 35 à la suite d'un déplacement axial du boîtier 30 comme représenté à la figure 3.
Selon l'exemple de réalisation représenté aux figures 4 et 5, le pivot d'entrrinement 32 prolonge axialement la tête 41 porteuse du logement 31 de la rotule 29.
Le pivot 32 est constitué sous la forme d'un cylindre creux momé à coulissement et à rotation dans un palier fixe 41 à circulation de billes et immobilisé axialement dans le boîtier 30. Un ressort de rappel 42 est disposé concentriquement dans le pivot 32 et est monté en tension entre un axe d'accrochage 43 porté par le fond du boîtier 30 et un axe d'accrochage 44 porté par le pivot 32.
A l'ouverture de la vitre par pivotement, la rampe 128 prend appui sur le bord du pare-brise 12. Le pivot d'articulation 32 se déplace axialement en translation sous l'effet de l'effort de réaction exercé sur la rampe 128 en tendant le ressort 42 ainsi que cela est montré par les figures 4 et 5.