INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans la pratique, I'ADN est soumis à des contraintes hydromécaniques lors de sa préparation, et également lors du peignage, ce qui conduit à de nombreuses cassures aléatoires. Ces cassures aléatoires peuvent avoir lieu au sein de la séquence cible de la sonde, ce qui donnera lieu, après peignage, à une séparation en plusieurs morceaux de ladite séquence. Lors de l'hybridation avec la sonde, ces segments seront hybridés, et après révélation, mesurés comme des fragments de taille inférieure à celle de la séquence cible.
La dilution de l'ADN (0.25 pg/ml) dans MES 50 mM (pH 5.5) est effectuée très prudemment de façon à éviter le bris des brins d'ADN. La solution est alors versée dans un réservoir de 4 ml de Teflon permettant l'introduction de 3 lames silanisées 22x22 mm pour peignage. La solution d'ADN peut également être stockée à 4 "C pendant plusieurs jours.
Peignage moléculaire Les lames silanisées sont trempées dans le réservoir de Téflon'M contenant une solution d'ADN de levure totale (0.25 g/ml dans 50 mM MES, pH 5.5), incubées à RT et extraites du réservoir après 10 minutes d'incubation en utilisant un simple dispositif mécanique. Pendant l'incubation, les molécules d'ADN s'ancrent sur la surface par leurs extrémités. En extrayant la surface du réservoir, ceci a le même effet que l'évaporation prévue dans la méthode de la goutte", le ménisque se déplace par rapport à la surface et exerce une force de traction constante sur les molécules demeurant dans le réservoir.
Les surfaces couvertes avec l > ADN peigné sont alors observées avec un microscope en épifluorescence de façon à contrôler les caractéristiques du peignage. Un enregistrement des champs représentatifs de vue pour chaque lame est effectué pour le contrôle de la posthybridation.
Les surfaces sont alors collées sur des lames de microscope (cyanocrylate) et chauffées une nuit à 60"C. Elles peuvent être stockées pendant plusieurs mois si on les protège de l'humidité à -20 "C ou à tem
Les détections des sondes marquées à la biotine et à la digoxigénine sont effectuées simultanément en utilisant le même protocole pour chaque couche de détection, chaque couche d'anticorps étant incubée 30 minutes à 37"C, les lames étant lavées après chaque couche (3 fois 5 minutes à RT dans 4xSSC / Tween 20 0.05 %).
Pour les sondes marquées à la biotine, les couches suivantes sont utilisées (50 ,al de tampon d'hybridation par lame) : (1) 40 mg/ml d'Avidin-Texas Red (Vector). (2) 5 mg/ml d'anti-avidin de chèvre biotinilée (Vector). (3) 40 mg/ml d'Avidin-Texas Red (Vector).
Pour les sondes marquées à la digoxigénine: (1) 34 mg/ml d'un congugué anti-dig de souris avec FITC (Jackson). (2) 28 mg/ml d'anti-souris d'âne-FITC (Jackson). (3) 30 mg/ml d'anti-lapin de souris-FITC(Jackson).
Après détection, les lames sont rincées rapidement dans PBS xl et montées avec un réactif (Vectashield , Vector) avant observation. Les lames peuvent être gardées des mois à 4 C dans l'obscurité.
EXEMPLE 1 Dans le cas du peignage d'ADN génomique humain, on effectue des hybridations simultanées de deux cosmides séparés par un gap de plusieurs dizaines de kb (109C8 et 180F1): environ 80 signaux couplés (cosmide 1 - gap - cosmide 2) ont pu être mesurés sur une seule lamelle de 22x22 mm, correspondant à une distance totale de 120 kb environ.
* Ce résultat permet d'assurer qu'il est possible d'observer environ une centaine d'hybridations d'un BAC entier sur un génome humain normal. Cette situation expérimentale est à comparer avec les situations théoriques envisagées dans la figure 5: les histogrammes 5d montrent en effet que pour 100 génomes diploïdes (donc 200 occurences d'une séquence clônée), et avec des paramètres particuliers, environ 10 signaux d'hybridation intacts d'un BAC de 125 kb (cas LO = 100 kb), ou 16 signaux d'hybridation intacts (cas LO = 200 kb) sont attendus. Autrement dit, les paramètres théoriques utilisés dans les simulations sont beaucoup plus pessimistes que les conditions expérimentales que l'on est actuellement capable de réaliser.
Outre la recherche de points de cassure à l'aide de BACs (ou autres sondes de taille équivalente ou inférieure) évoquée précédemment, il est également envisageable d'utiliser des YACs (disponibles pour la totalité du génome humain, et pour d'autres génomes). Des simulations similaires à celles présentées ci-dessus montrent qu'il est envisageable de détecter l'hybridation d'un YAC de 1600 kb en deux fragments distincts de 400 et 1200 kb (par exemple), sur la base de 100 génomes peignés dans des conditions correspondant à LO = 600, N = 10 dans le modèle gaussien.
Cependant, à la différence des observations de BACs ou de sondes de taille semblable ou inférieure, qui peuvent être réalisées sans difficulté à l'aide d'un microscope à épifluorescence équipé d'un objectif x 100 ou x 63 et d'une caméra (taille maximale d'un champ de vue; respectivement 123 Fm et 195 Fm environ), la mesure de fragments de plusieurs centaines de kb impose l'utilisation d'objectifs de grossissement plus faible, pour lesquels des problèmes de détectabilité des signaux peuvent éventuellement se poser: x 40: champ de vue de taille maximale 307 llm environ.
x 20: champ de vue de taille maximale 614 m environ.
EXEMPLE 2 Dosage de l'ADN phage-k dans le génome d'E.Coli De l'ADN génomique d'E. Coli (4.7 Mb) contenant un exemplaire du génome du phage A (lignée 5243, 49 kb) a été peigné sur des surfaces silanisées après avoir été contre-coloré avec une molécule fluorescente (YOYO-1) (fig. 1(A).
Le microprocesseur 148 permet également, en réponse à l'actionnement du bouton 106, d'échapper au programme d'administration mis en mémoire pour commander l'injection d'une quantité supplémentaire déterminée de solution (bolus). Cette procédure est plus particulièrement destinée aux traitements antidouleur.
La pompe est également munie de moyens permettant d'actionner l'avertisseur acoustique 107 et/ou l'affichage LCD 108 en cas de mauvais fonctionnement: non respect du programme, arrêt, obstruction de l'aiguille, fin de vie de la pile....Ces moyens ne faisant pas l'objet du présent brevet, ils ne seront pas décrits.
On se référera enfin à la figure 12 qui montre une variante de réalisation du module cassette 300 pour des traitements nécessitant l'injection d'importantes quantités de solution. La cassette peu, certes, être rallongée pour recevoir un réservoir plus grand, mais si le volume de celui-ci dépasse 20 ml, I'encombrement de la pompe risque de la rendre peu pratique. Pour cette raison, le module cassette de la figure 12 ne comporte que le plateau 305 décrit à la figure 3, les mêmes références étant utilisées pour désigner les mêmes éiéments. Le module réservoir comprend alors une poche de grand volume 206, qui n'est pas introduite dans de la cassette mais seulement reiiée à elle par un tuyau souple 202 plus iong identique à celui décrit à la figure 2.
INSTALLATION DE SECHAGE DANS UNE CABINE DE PEINTURE POUR ARTICLES METALLIQUES ET EN PARTICULIER CARROSSERIES DE VEHICULES L'invention se rattache aux secteurs techniques des installations de projection de peinture et notamment des cabines de peinture utilisées pour les véhicules automobiles et véhicules similaires et, d'une manière plus générale, à certains articles métalliques établis avec des formes volumineuses et complexes traitées par projection.
L'entretien des véhicules exige régulièrement la projection de couches de peinture sur le véhicule, après avoir réalisé des travaux de carrosserie, d'entretien et de réparation.
A l'heure actuelle, et à la connaissance du demandeur, les cabines de peinture sont agencées avec des moyens sous forme de pistolets qui permettent la projection de peinture sur les parties de carrosserie du véhicule. La projection de cette peinture s'effectue à une certaine température et il est nécessaire ensuite de procéder à une opération de séchage. Dans le cas de peintures acqueuses, les cabines sont agencées avec des systèmes de rampes diffuseurs d'air en provenance du plenum, c'est-à-dire de la zone sous plafond qui est ventilée à partir du local technique. Cette mise en oeuvre exige l'utilisation d'un compresseur supplémentaire. Ces rampes sont disposées d'une manière fixe et sont apparentes à l'intérieur de la cabine. Ladite cabine est ainsi associée avec le système de soufflerie qui a pour but de générer l'air chaud ou ventilé à une certaine température à l'intérieur de la cabine.
Le système actuel présente néanmoins un certain nombre d'inconvénients.
Le système des rampes et buses de séchage, dans le local, est relativement coûteux et nécessite des opérations de montage et présente un autre inconvénient : une difficulté de sécher certains des endroits du véhicule en fonction du positionnement de celui-ci dans la cabine. En outre, le temps de séchage est relativement long.
Le but recherché selon l'invention était donc de remédier à ces inconvénients en proposant le concept d'une nouvelle installation qui puisse limiter les surcoûts d'agencement et qui permette également une répartition très homogène et en tous endroits de l'effet de séchage.
Un autre but recherché était de permettre le traitement de pièces, composants ou ensembles métalliques de formes, volumes et dimensions divers, sans être gênés par les modalités de diffusion de l'air de séchage.
Un autre but recherché selon l'invention était de pouvoir traiter les opérations de peinture par l'installation aussi bien à partir de peintures polyurethannes que de peintures acqueuses.
Différentes possibilités pouvaient être offertes au demandeur, afin de répondre au problème posé, notamment avec l'adjonction d'éléments de soufflerie complémentaires ou de buses orientables à partir des rampes ou de moyens pouvant être commandés manuellement par l'opérateur.
L'originalité de la présente invention a été d'utiliser le local technique existant pour développer une fonction complémentaire permettant un séchage rapide du véhicule ou autre article, composant ou ensemble métallique, à l'intérieur de la cabine.
Un autre but recherché, selon l'invention, a été d'utiliser le local technique de l'installation pour développer un fonctionnement programmé et réglable de la température de séchage à l'intérieur de la cabine.
Selon une première caractéristique de l'invention, I'installation de sèchage dans une cabine de peinture d'articles métalliques, du type où la cabine réceptrice de l'article métallique à peindre est agencée avec un local technique adjacent comprenant un générateur d'air susceptible de transmettre, à travers un circuit de distribution, I'air à la cabine, à une température ambiante, pour assurer l'application de la peinture, est caractérisée en ce que le local technique est agencé avec deux circuits de distribution d'air intégrés dans ledit local, défini par une pluralité de registres mis alternativement en position fermée ou ouverte, selon les phases de fonctionnement de l'installation, lesdits registres définissant par leur position le sens de circulation d'air, et en ce que deux prises d'air extérieures par le bas et par le haut soient susceptibles d'alimenter la cabine, et en ce que un ou deux générateurs sont mis en fonctionnement, selon les phases de fonctionnement de l'installation, à savoir un générateur pendant la phase d'application de la peinture, et deux générateurs pendant la phase de séchage de la peinture en créant un effet de bloc de puissance assurant une ventilation accélérée à une température supérieure à celle durant la phase d'application.
La recherche d'événements aussi rares que les cellules foetales ou les micrométastases implique d'extrêmes qualités et efficacité de toutes les étapes du procédé. I1 faut tout d'abord que les anticorps soient très efficaces pour assurer une bonne récupération des cellules visées. Il faut éviter les pertes cellulaires lors des manipulations de rinçage et de recueil. I1 faut aussi réduire au maximum les faux positifs résultant de cellules non spécifiques, mais aussi de cristaux de colorants et de résidus variés qui en fluorescences peuvent se confondre avec des cellules.
L'analyse d'image est capable de résoudre certaines discriminations. Toutefois, dans le cas d'éléments rares de l'ordre de 1 à 50 cellules par échantillon, le nombre total d'artefact doit rester inférieur à ces valeurs, ce qui nécessitent des performances élevées de la chaîne de séparation des cellules marquées et des cellules non marquées, et une grande qualité de la récupération des cellules. Les procédures habituelles de recueil sur lame et de coloration génèrent un "bruit" qui n'est pas compatible avec de telles exigences.
Le dispositif de filtration selon l'invention permet par contre de répondre à ces exigences. I1 est constitué par une pièce (41) en silicone moulé, à usage unique. Cette pièce (41) présente une épaisseur de l'ordre de 2 millimètres et présente douze protubérances (51) d'un diamètre de 6 millimètres et d'une hauteur de 10 millimètres. Ces protubérances (51), normalement obturées, peuvent être perforées par une aiguille creuse (48) prévue à l'extrémité du tube séparateur (42).
La pièce en silicone (41) est positionnées dans une plaque perforée (43) rigide. Les perforations sont disposées de manière complémentaire aux protubérances (51) de la pièce (41). Cette plaque (43) peut être raccordée de manière étanche à un support (45) et maintenu en position par des griffes (44). Un joint torique vient compléter l'étanchéité de cet assemblage.
Le support (45) présente également des perforations disposées en regard des perforations de la plaque (43).
Le support est raccordé à une source de dépression. Une membrane de filtration microporeuse (47) est disposée entre la plaque (43) et le support (45). Il s'agit avantageusement d'une membrane microporeuse en polycarbonate dont les alvéoles présentent une section de 2 microns.
Le fonctionnement de ce module de filtration est le suivant La pièce (41) est livrée avec un film protecteur placé sous la face inférieure. On peut ouvrir une ou plusieurs protubérances. On place la plaque (41) sur le support (43) après avoir positionnée la membrane microporeuse, et on verrouille l'ensemble à l'aide des griffes (44).
Le tube de séparation (2) est livré avec un capuchon protecteur qui évite toute contamination. On retire ce capuchon et on perfore l'une des protubérances de la pièce (41).
Lors du recueil des rosettes issues du séparateur, les particules paramagnétiques isolées traversent la membrane tandis que les rosettes restent en surface. La porosité de la membrane microporeuse laisse passer les particules paramagnétiques dont la section est de l'ordre du micron, mais pas les rosettes, dont la section est de l'ordre de 5 microns.
Pour le recueil des noyaux, en l'absence de billes, la porosité peut être de 1 à 2 microns.
La coloration peut se faire avant la filtration par des colorants fluorescents de type IP ou BET (nom commerciaux) ou encore par coloration sur le filtre après que ce dernier ait été extrait du système de contention.
L'association d'un dispositif séparateur formé par un tube de section très inférieure à la longueur placé dans un gradient de champ magnétique, et d'un système de filtration tel que décrit ci-dessus, présente de nombreux avantages. Une telle association facilite tout d'abord l'automatisation de l'analyse biologique. Elle permet également de procéder à des analyses et à des utilisations à fins thérapeutiques nécessitant un haut degré de stérilité. Les billes paramagnétiques permettent un tri des cellules, et notamment une séparation des cellules recherchées et des autres cellules. Le filtre permet d'éliminer certaines cellules excédentaires, telles que des plaquettes, ainsi que les billes paramagnétiques excédentaires. Le filtre a également pour fonction la concentration des cellules rares recherchées sur une surface réduite facilitant l'analyse par imagerie. Ce filter permet également, pour des applications thérapeutiques notamment, de procéder à une culture des cellules recherchées. A cet effet, le filtre sert de support de cellules et peut etre alimenté avec un liquide nutritif propre à favoriser la mulitplication cellulaire.
L'invention sera mieux comprise dans ce qui précède à titre d'exemple non limitatif.
GRANULES COMPRENANT UNE MATIERE ACTIVE A BAS POINT DE FUSION ET A CRISTALLISATION CONTROLEE La présente invention a pour objet des granulés comprenant au moins une matière active agrochimique à bas point de fusion, au moins un composé bicyclique pouvant être d'origine terpénique et au moins un support inerte ou une matrice hydrodispersable.
La présente invention conceme de même l'utilisation de composés bicycliques de ce type comme régulateurs de cristallisation de matières actives agrochimiques à bas point de fusion.
Les matières actives agrochimiques à bas point de fusion, c'est-à-dire celles présentant un point de fusion compris entre 30 et 800C en général, et entre 30 et 60"C en particulier, présentent des problèmes de mise en forme et de stabilité qui sont la conséquence de ce bas point de fusion.
L'interface-joueur située sur le boîtier peut être l'interface-boîtier, les données de pari étant introduites dans le boîtier via les deuxième et première interfaces-station d'une station auxiliaire de validation.
L'interface-joueur peut également comporter un ensemble de touches.
Le boîtier comporte avantageusement un afficheur pour afficher les données de pari introduites.
Le boîtier peut comporter également de préférence une mémoire de validation apte à contenir ladite donnée de validation, ainsi qu'un moyen d'affichage du contenu de cette mémoire de validation. Le boîtier comporte alors des moyens de traitement-boîtier aptes à mettre à jour le contenu de la mémoire de validation après chaque prise de pari. I1 est ainsi possible pour le joueur de visualiser directement sur son boîtier le nombre d'unités de jeu qui lui reste.
Selon un mode de réalisation de l'invention, les moyens de réception comprennent au moins un serveur vocal apte à restituer en langage clair vers le haut-parleur du poste téléphonique, une partie au moins des données de pari contenues dans l'information de restitution reçue.
Selon un mode de réalisation de l'invention, l'information de restitution étant constituée d'une pluralité de bits, les moyens de restitution comportent des moyens de codage aptes à délivrer, pour un bit de ladite information de restitution ayant la valeur logique "1", un signal logique ayant l'état haut pendant une première durée prédéterminée et un état bas pendant une deuxième durée prédéterminée, et pour un bit de ladite information de restitution ayant la valeur logique "0", un signal logique ayant l'état bas pendant la totalité des première et deuxième durées, et un transducteur électro-acoustique ne délivrant aucun signal acoustique en réponse à un signal logique à l'état bas, et délivrant en réponse à un signal logique à l'état haut un signal acoustique monofréquence dont la fréquence est située sensiblement au centre de la bande passante de la ligne téléphonique.
Ceci étant, d'autres formes de codages acoustiques sont possibles.
D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront à l'examen de la description détaillée d'un mode de réalisation et de mise en oeuvre, nullement limitatif, et des dessins annexés, sur lesquels la figure 1 illustre très schématiquement un mode de réalisation d'un système selon l'invention, la figure 2 illustre très schématiquement l'architecture interne d'un boîtier autonome selon l'invention; la figure 3 illustre schématiquement l'une des faces d'un boîtier selon l'invention ; et les figures 4 et 5 illustrent un mode de transmission de l'information de restitution acoustique.
On suppose maintenant, bien que l'invention n'y soit pas limitée, que le système de validation s'applique à des prises de pari pour un jeu du type loterie.
Tel qu'illustré sur la figure 1, le système de validation SY comporte une pluralité de boîtiers BO, ou terminaux portatifs de prises de pari, dont seulement l'un d'entre eux a été représenté à des fins de simplification. Chaque boîtier est autonome du point de vue alimentation électrique notamment, et a une taille réduite lui permettant d'être aisément tenu dans une main. Chaque boîtier BO comporte une interface boîtier I1 dont on reviendra plus en détail ciaprès sur la fonction. Ce boîtier BO est apte à coopérer de façon acoustique avec le combiné d'un poste téléphonique PT relié au réseau téléphonique commuté RTC. Sur ce réseau téléphonique commuté est également connecté un dispositif principal de validation DVP comportant des moyens de réception principaux I6 aptes à recevoir un signal téléphonique émis par le poste téléphonique PT. ll est également prévu au sein de ce dispositif DVP des moyens de traitement principaux MTP associés à au moins un serveur vocal SV et à des moyens de mémoire principaux MMP. Enfin, une interface principale I7 est destinée à être reliée par l'intermédiaire d'un moyen de communication externe MCO, par exemple une liaison spécialisée de transmission de données, à un réseau de stations auxiliaires de validation SAV (une seule étant représentée).
Sur la figure 1, les différents moyens constituant le dispositif principal de validation ont été regroupés au sein d'une même station principale. Bien entendu, certains de ces moyens peuvent être matériellement séparés et localisés en des endroits différents. Ainsi, on peut concevoir que le serveur vocal SV, matériellement réalisé de façon classique par des moyens logiciels et des cartes vocales, soit relié par une liaison de transmission de données, éventuellement sécurisée, aux moyens de traitements principaux MTP, également réalisés de façon classique sous forme logicielle.
La station auxiliaire de validation SAV est articulée très schématiquement autour de moyens de traitement-station MTS réalisés de façon logicielle au sein d'un microprocesseur. A ces moyens de traitement MTS sont connectées une première interface-station I2, apte à coopérer, par exemple par un couplage électromagnétique ou capacitif, avec l'interface boîtier I1, une deuxième interface-station I3 pour l'introduction dans la station d'une donnée de validation associée au boîtier, une troisième interface-station I4 reliée au moyen de communication externe MCO, ainsi qu'une mémoire-station M5, par exemple une mémoire vive apte à contenir l'information de validation comportant l'identifiant d'un boîtier et la donnée de validation associée, et destinée à être transférée au dispositif principal de validation DVP par l'intermédiaire du moyen de communication MCO.
Comme illustré sur la figure 2, le boîtier BO contient des moyens de traitement-boîtier MTB également réalisés fonctionnellement sous forme logicielle et incorporés au sein d'un microprocesseur ou d'un micro-contrôleur. A ces moyens de traitement MTB sont connectés un écran d'affichage ECR, un ensemble de touches formant clavier CL, une mémoire M1 destinée à contenir l'identifiant de boîtier ainsi que les données de pari introduites par exemple par le joueur, au moyen du clavier CL. ll est également avantageusement prévu une mémoire de validation M2 destinée à stocker la quantité d'unités de jeu encore disponible pour le boîtier.
A ces moyens de traitement MTB sont également reliés des moyens de restitution MRS comportant des moyens de codage MCS réalisés fonctionnellement de façon logicielle et incorporés au sein d'un micro-contrôleur 4 bits ou bien directement incorporés au sein du micro-processeur formant les moyens de traitement MTB. Les moyens de restitution comportent également un transducteur électro-acoustique BZ, par exemple un buzzer, destiné à transmettre à l'extérieur du boîtier une information de restitution acoustique contenant l'identifiant de boîtier et les données de pari stockées dans le boîtier.
Ces moyens de restitution sont activés par la commande d'un organe manuel d'activation OG.