INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans le FtD constri.iit comme décrit ci-dessus, @'agencement du substrat d'anode 5 et du substrat de cathode 1, tout en maintenant entre eux un intervalle @ésire de que@ques c@ntaines de microns, est réalisé en maintenant entre eux ces éléments appropries tels que des p@a@ues @a @aterales des bourrelets d e verre, des tibres de verre ou l'analogue au moyen d'ne fritte de verre à bas point de @usion, tout en les positionnant au niveau de leur périphérie.Malheureusement, la formation d'un vide élevé dans l'enceinte constituée par le substrat d'anode 5 e t le substrat de cathode 1 fait que l'enc@inte se déforme vers l'intérieur du fait de la pression atmosphérique qui lui est appliquée de l'extérieur, d'où il résulte que l'intervalle entre les substrats est réduit, Afin de résoudre ce problème, on dispose entre @e substrat d'anode 9 2t le substrat de cathode 1 une multiplicité d'entretoises 3 pour garanti@ ainsi que l'intervalle dés@ré @st uniformément maintenu entre eux dans toute l'enceinte.
Une extremite de chaque entretoise @ est soudée sur la surface intérieure du substrat d'anode 5 au moyen d@ verre de scellement @ constitué principalement par une fritte de verre 3 bas point de fusion. De même, l'autre extrémit@ de chaque entreto@se @ est soudée sur le substrat de cathode 1 par le verre de scellement 4.
Ce revêtement 5 est un ensemble composite qui est constitué, selon un exemple de réalisation - d'une couche inférieure 7 en un matériau cellulaire tel que du PVC présentant de bonnes propriétés d'isolation acoustique, - d'une couche intermédiaire de liaison 9 en un matériau plus dense que le matériau précédent, comme par exemple du PVC compact, et - d'une couche 11 en matière plastique qui constitue la face supérieure du revêtement 5.
Le revêtement 5 est fixé sur le support rigide 2 par un collage à froid au moyen d'un film de colle 13 en polyuréthanne.
Enfin, sur la face inférieure du support rigide 2, on peut rapporter un revêtement d'appoint 15 sous la forme d'une couche plastique fixée également par collage à froid au moyen d'un film de colle 13 en polyuréthanne.
Un tel revêtement 5 peut avoir une épaisseur de l'ordre de 2 à 3 mm.
Selon un mode de réalisation préférentiel de l'invention, le support rigide 2 du plateau 1 est avantageusement constitué en un matériau ayant également de bonnes propriétés d'isolation acoustique, comme un matériau cellulaire. Ce matériau peut être un aggloméré de bois et avoir une épaisseur de l'ordre de 25 mm, par exemple.
D'une manière générale, la couche 11 qui constitue la face supérieure du revêtement 5 est choisie de préférence dans un matériau ayant une bonne résistance aux attaques mécaniques et chimiques et le revêtement 5, dans son ensemble, peut subir avantageusement un traitement fongistatique et bactériostatique.
D'une manière générale, l'invention n'est pas limitée à l'exemple de réalisation décrit précédemment.
En particulier, le revêtement 5 peut être constitué par des revêtements, connus en soi, comme des revêtements de sol.
Bien entendu, les plateaux conçus selon l'invention peuvent avoir des formes et des dimensions quelconques, être scindés en un ou plusieurs éléments, notamment en fonction de la nature et de la destination de la table.
La présente invention concerne un instrument permettant de jouer à la balle.
Le jeu de balle est traditionnellement pratiqué à l'aide de raquettes ( FIG. 1 ).
Ces raquettes, le plus souvent en bois ou en plastique, sont généralement constituées de deux parties: -Le cornus ( 1 ), rond ou ovoïde de dimensions variables.
-Le manche ( 2 ) dont la longueur est sensiblement égale à celle du corps.
Cet ensemble Corps-Manche représente un encombrement important pour le transport ( sac de plage, de sport, à dos etc...) et pour la maniabilité en cours d'utilisation.
De plus, il engendre, à la jonction des deux parties ( Corps-Manche ) une zone fragile ( 3 ) sujette à cassure.
L'instrument selon l'invention permet de remédier à ces inconvénients ( FIG.
Par conséquent, un objet de la présente invention consiste à proposer un appareil de coupe peu coûteux de construction simplifiée destiné à une utilisation lors de la fabrication de
vêtements faits sur mesure.
Un autre objet de l'invention consiste à proposer un appareil de ce type dans lequel des pièces sont arrangées au moyen d'un marquage d'une manière qui rende efficiente l'utilisation de chaque segment d'un matériau en feuille à partir
duquel les pièces sont coupées.
Encore un autre objet de l'invention consiste à proposer un procédé de découpe de pièces en vue d'une utilisation lors de la
fabrication sur mesure de vêtements.
Selon un aspect, la présente invention est constituée par un appareil permettant de découper segment par segment ou élément par élément des pièces à partir d'un matériau en feuille souple tel qu'un tissu. L'appareil inclut un moyen permettant de recevoir des données représentant des vêtements sur mesure et un moyen permettant de générer un marquage continu sur la base des données. Tel qu'utilisé ici, le terme "marquage continu" se rapporte à un marquage qui définit en continu des pièces constituant des vêtements ou des groupes de vêtements faits sur mesure lorsque des données définissant ces vêtements sont reçues. Le marquage arrange les pièces sur un élément ou plusieurs éléments du matériau en feuille et contrôle la taille de chaque élément de manière à réaliser une utilisation optimum de
1 5 I'étoffe.
L'appareil inclut en outre un chariot pour contrôler de manière précise le déplacement d'un outil de coupe conformément aux instructions de marquage au-dessus d'une surface de travail stationnaire sur laquelle la feuille de matériau souple est étalée. Le chariot inclut un moyen permettant de coupler de façon libérable le matériau en feuille au chariot de manière à ce qu'il se déplace avec ainsi que par rapport à la table pour délivrer des éléments successifs du matériau en feuille sur la surface de travail. Un moyen d'étiquetage est également prévu pour étiqueter chaque pièce
afin d'identifier le vêtement particulier auquel elle appartient.
Une source de vide en association avec un moyen qui communique avec la source de vide et avec la surface de travail est prévue
pour appliquer un vide au matériau en feuille étalé dessus.
Selon un second aspect, I'invention propose un procédé permettant de découper en éléments des pièces destinées à constituer des vêtements sur mesure. Le procédé inclut les étapes de réception de données représentant une pluralité de vêtements faits sur mesure; de génération d'un marquage continu à partir des données, le marquage produisant un jeu d'instructions définissant les contours des pièces, I'arrangement des pièces les unes par rapport aux autres pour une découpe à partir de segments successifs du matériau en feuille souple et la taille de chaque segment du matériau en feuille; de support du matériau en feuille dans une condition étalée sur une surface de travail; de commande de manière précise du déplacement d'un outil de coupe sur la surface de travail conformément aux instructions de marquage afin de couper les pièces à partir du matériau en feuille; et d'étiquetage de chaque pièce pour
identifier le vêtement adapté au client auquel elle appartient.
Les emplacements des CDR (régions déteminant la complémentarité) sont indiqués dans les caractéristiques des séquences SEQ ID NO : 1 et SEQ ID NO 3.
Exemple 2 : Construction de plasmides de transfert portant les séquences variables de D7C2 A) PLASMIDE DE TRANSFERT POUR LA CHAINE LEGERE LAMBDA 1) Obtention du lasmlde DBCX a- Plasmide pGmAcll6T Ce vecteur est dérivé du plasmide pGmAcll5T [ROYER et al., J. Virol., 66, 3230-3235, (1992)], luimême dérivé du plasmide pAcl [CHAABIHI et al., J. Virol., 67, 2664-2671 (1993)] contenant le fragment EcoRI-I du baculovirus de la polyédrose nucléaire d'Autographa californica (AcMNPV), et donc le gène polyédrine, et les séquences flanquant ledit gène.Pour obtenir pGmAc116T, le plasmide pGmAcll5T a été délété d'un fragment de 1900pb allant d'un site EcoRI situé en amont du gène polyédrine à un site XhoI situé 1900pb en aval de ce site EcoRI.
5 Rg du plasmide pGmAcll5T ont été digérés pendant 2 heures à 37 C par 15 unités d'enzyme XhoI (BOEHRINGER), dans un volume réactionnel de 50 1 et dans les conditions préconisées par le fournisseur. Après extraction au phénol/chloroforme, l'ADN plasmidique a été précipité à l'alcool. Cet ADN a été ensuite partiellement coupé par EcoRI (BOEHRINGER) dans un volume réactionnel de 50 Fl en présence de 0,5 unité d'enzyme. L'incubation a été faite à 37 C pendant 20 minutes.Après une nouvelle extraction au phénol/chloroforme, les extrémités générées par les coupures XhoI et EcoRI ont été rendues franches par l'enzyme de Klenow (BIOLABS) en présence des 4 dNTPs selon le protocole préconisé par le fournisseur. L'ADN plasmidique a enfin été précipité à l'alcool et incubé avec la ligase du phage T4 (BOEHRINGER) dans les conditions préconisées par le fournisseur.
b- Peptide signal La séquence codante choisie pour le peptide signal a été synthétisée chimiquement sous forme de deux oligonucléotides complémentaires ayant des extrémités permettant l'insertion du duplex dans un site BalII. Pour l'appariement, 15 'Lg de chacun des deux oligonucléotides sont incubés dans 50 Rl de tampon (Tris 1 mM pH 7,5, EulA 0,1 mM), pendant 5 minutes dans un bain marie à 70'C. Le bain est ensuite laissé refroidir jusqu'à température ambiante (22 à 25 C). Le produit d'appariement est utilisé directement dans les réactions de ligation avec le plasmide pGmAcll6T préalablement coupé par AglII.
Les conditions de ligation sont les suivantes lFg du plasmide pGmAcll6T coupé par AglII l'Lg de l'oligonucléotide bicaténaire portant la séquence codant pour le peptide signal ; 2 1 de tampon ligase 10X (BOEHRINGER) ; eau distillée q.s.p. 19 l ; 1 unité (îLLl) de ligase (BOEHRINGER). L'incubation est effectuée à 22 C pendant 2 heures ; le produit de ligation est utilisé pour transformer des bactéries E. coli compétentes.
c- Région constante Ck : La séquence codante de la région constante de la chaîne légère # humaine a été amplifiée par ACP en utilisant comme matrice de l'ADNc de lymphocytes B humains. Les lymphocytes humains (environ 5x108) ont été préparés à partir de 200 ml de sang en utilisant HISTOPAQUE# (SIGMA). L'ARN total a été extrait de ces lymphocytes en utilisant un kit PHARMACIA (RNk extraction kit). Le premier brin d'ADNc a été préparé à partir de l'ARN total à l'aide du kit "First-Strand cDNA synthesis kit de PHARMACIA.
L'amplification par ACP de la région Ck a été réalisée en présence de l'amorce OPP-HuCk3' complémentaire de l'extrémité 3' des régions C# et apportant le site de restriction BglII et de l'amorce OPP-HuCk5' complémentaire de l'extrémité 5' des régions C# et apportant le site de restriction XhoI.
Les séquences des deux amorces sont les suivantes *OPP-HuC#3': 5'-CCT GTC AGA TCT ATG AAC ATT CTG TAG GGG-3' (site BglII souligné) *OPP-HuC': 5'-CCG CCC TCC CTC GAG CTT CAA-3' (site XhoI souligné) Le produit de l'amplification a été digéré par BalII et XhoI avant d'être cloné dans les sites XhoI- BalII du plasmide pGmAc portant la séquence codant pour le peptide signal.
La composition du mélange de ligation est la suivante lRg du plasmide pGmAc coupé par XhoI et BalII ; 200 ng du fragment Ck amplifié et digéré par BalII et XhoI, 2F1 de tampon ligase 10X (BOEHRINGER), eau distillée q.s.p. 19R1, 1 unité (1R1) de ligase (BOEHRINGER).
L'incubation est effectuée à 22'C pendant 2 heures ; le produit de ligation est utilisé pour transformer des bactéries E. coli compétentes.
Le plasmide obtenu est dénommé pBC.
2) Clonaae de la région variable de la chaîne # de D7C2 Le clonage de la région variable de la chaine légère X de l'anticorps monoclonal humain IgM-D7C2 a été réalisé de la manière suivante La région variable # de l'anticorps monoclonal IgM-D7C2 a été amplifiée par ACP en utilisant - comme matrice, 1'ADN du plasmide PTZ-VLD7C2 décrit à l'exemple 1 ci-dessus, qui porte la région variable de la chaîne légère de l'anticorps monoclonal IgM-D7C2 - une amorce représentant une séquence consensus à l'extrémité 5' des gènes VL humains (OPP HuVX5'), et une autre amorce complémentaire de la région 5 de la séquence codant pour la région constante lambda (OPP-HuV#3'), et qui permet d'amplifier toute région variable de chaîne B).
Ces amorces apportent en outre respectivement les sites de restriction enzymatiques SacI et XhQI.
Les séquences nucléotidiques de ces amorces sont les suivantes * OPP-HuV#5': 5' -CA(GC)TCTGAGCTCAC(GT)CAG- 3' (site SacI souligné) L'utilisation de cette amorce provoque la modification de la séquence Gln-Ser-Val des trois premiers aminoacides de la charpente 1 de l'anticorps parental IgM-D7C2 en Asp-Ile-Glu dans l'anticorps recombinant.
* OPP-HuVX3': 5' -TTGAAG2Dgh9GGAGGGCGGGAA- 3' (site XhoI souligné) La composition du mélange d'amplification est la suivante 10 gl de tampon 10X de l'ADN polymérase ; 100 ng de plasmide PPTZ-VLD7C2 ; 4 Rl du mélange de déoxynucléotides (mélange contenant 5 mM dATP + 5 mM dCTP + 5 mM dGTP + 5 mM dTTP, BOEHRINGER) ; 2 mM MgSO4 ; 1000 pmoles de l'amorce OPP-HuVX5' et 200 pmoles de l'amorce OPP-HuVX3'; 1 l d'ADN polymérase thermostable, et eau distillée q.s.p. 100 Rl.
Dans un mode de réalisation et selon l'invention, la carte tableau est adaptée pour former un fond -notamment opaque- et la colonne et la ligne de sélection, ainsi que la grille de visualisation, sont transparentes.
Avantageusement, le rectangle de la carte grille délimité par la colonne et la ligne de sélection est transparent.
Avantageusement et selon l'invention, les deux cartes sont associées l'une à l'autre solidaires mais de façon à pouvoir être déplacées l'une par rapport à l'autre. Le dispositif selon l'invention est alors caractérisé en ce qu'il comporte des moyens d'assemblage relatif des deux cartes l'une à l'autre, comprenant des moyens de guidage en translation relative des carte selon les deux directions parallèles aux lignes et aux colonnes du tableau, ces moyens de guidage étant adaptés pour permettre le déplacement de la colonne et de la ligne de sélection en regard des différents caractères des ensembles de caractères.
Selon l'invention, les moyens d'assemblage relatif sont constitués d'un cadre d'assemblage délimitant une fenêtre ouverte centrale rectangulaire (ou d'une carte d'assemblage transparente rectangulaire), interposé entre la carte tableau et la carte grille, et comprenant deux replis rabattus vers la face inférieure de ce cadre d'assemblage ou de cette carte d'assemblage, le long de deux côtés opposés du cadre ou de la carte d'assemblage, pour le guidage dans la direction de ces côtés de la carte tableau ou de la carte grille dont les bords correspondants sont insérés dans ces replis, et deux replis rabattus vers sa face supérieure le long de deux autres côtés opposés, pour le guidage dans la direction de ces autres côtés de la carte grille ou de la carte tableau dont les bords correspondants sont insérés dans ces replis.
L'invention concerne aussi un dispositif caractérisé en ce qu'il comprend en combinaison tout ou partie des caractéristiques mentionnées ci-dessus ou ci-après.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaissent de la description suivante de ses modes de réalisation préférentiels représentés sur les figures dans lesquelles - les figures la et lb sont des vues en plan représentant respectivement la carte grille (personnalisée par un marquage négatif) et la carte tableau d'un dispositif selon un premier mode de réalisation de l'invention, - les figures 2a et 2b sont des vues en plan représentant respectivement la carte grille (non personnalisée) et la carte tableau d'un dispositif selon un deuxième mode de réalisation de l'invention, - la figure 3 est une vue en plan représentant le dispositif des figures la et lb personnalisé par un marquage négatif et en cours d'utilisation pour la visualisation d'un code confidentiel à quatre chiffres, - la figure 4 est une vue en plan représentant le dispositif des figures 2a et 2b personnalisé par un marquage positif et en cours d'utilisation pour la visualisation d'un code confidentiel à quatre chiffres, - la figure 5 représente une variante de réalisation d'un tableau de la carte tableau pour une grille de sélection à cinq lignes et huit colonnes, - la figure 6 représente une variante de réalisation d'un tableau de la carte tableau pour une grille de sélection à vingt lignes et deux colonnes, - la figure 7 est une vue schématique en perspective représentant un mode de réalisation d'un dispositif selon l'invention doté de moyens d'assemblage relatif des deux cartes l'une à l'autre.
Les figures la, lb, et 3 représentent en premier mode de réalisation d'un dispositif selon l'invention permettant le cryptage et la visualisation d'un code confidentiel à quatre chiffres tel qu'un code secret d'utilisation d'une carte de crédit.
Ce dispositif se compose d'au moins une carte grille 11 de sélection et de visualisation, formée d'un plaque rectangulaire en matière synthétique transparente rigide ou semi-rigide adaptée pour pouvoir être marquée par une encre de stylo ou de feutre ou par un crayon sur au moins l'une de ses faces, et d'une carte tableau 12 formée d'une plaque rectangulaire en matière synthétique rigide ou semi-rigide opaque.
La carte grille 11 et la carte tableau 12 ont toutes deux le même format correspondant au moins sensiblement à celui d'une carte de crédit, à savoir inférieur à 9 cm de hauteur et 6 cm de largeur -notamment de l'ordre de 8,5 cm de hauteur et 5,5 cm de largeur dans l'exemple représenté sur les figures à l'échelle 1-.
La carte grille 11 présente une grille de visualisation 13 comprenant 4 x 10, soit quarante, emplacements 4 initialement transparents disposés en dix lignes et quatre colonnes.
La grille de visualisation 13 a une hauteur de l'ordre du 3,5 cm pour une largeur de l'ordre de 1 cm, et présente des emplacements 14 ayant une hauteur de l'ordre de 3,5 mm et une largeur de l'ordre de 2,5 mm. elle est disposée au moins sensiblement dans l'angle inférieur droit de la carte grille 11.
La carte grille 11 présente une fenêtre rectangulaire transparente 15 disposée au moins sensiblement dans l'angle supérieur gauche de la carte grille 11. Cette fenêtre 15 est délimitée du côté droit par une colonne de sélection 16 transparente exempte de chiffres et représentée par un cadre dont la largeur correspond à celle des emplacements 14 de la grille de visualisation 13, et qui s'étend en hauteur vers le haut en prolongement de la colonne de gauche de la grille de visualisation 13. La fenêtre 15 est délimitée vers le bas par une ligne de sélection 17 transparente exempte de chiffres et représentée par un cadre dont la hauteur correspond à celle des emplacements 14 de la grille de visualisation 13, et qui s'étend horizontalement vers la gauche en prolongement de la ligne supérieure de la grille de visualisation 13.
La colonne de sélection 16 et la ligne de sélection 17 sont donc disposées à angle droit et se rejoignent à l'emplacement supérieur gauche de la grille de visualisation 13.
La grille de visualisation 13 est entièrement disposée dans le secteur angulaire inférieur droit s'étendant à l'opposé de l'angle formé entre la colonne 16 et de la ligne 17 de sélection. L'emplacement supérieur gauche de la grille de visualisation 13 peut coïncider avec le sommet de cet angle ou, en variante non représentée, est décalé vers la droite et/ou vers le bas.
Il est en tout cas toujours disposé dans le secteur angulaire inférieur droit à l'opposé de l'angle formé entre la colonne 16 et la ligne 17 de sélection. Autrement dit, la grille de visualisation 13 et son emplacement supérieur gauche sont disposés dans le secteur angulaire formé entre les prolongements (vers le bas et vers la droite) de la colonne 16 et de la ligne 17 de sélection au-delà de leur angle de jonction.
Les portions de la carte grille 11 en dehors de la fenêtre 15, de la colonne 16 et de la ligne 17 de sélection, et de la grille de visualisation 13 sont des préférence opaques pour faciliter la lecture et l'utilisation. Elles peuvent servir de zones de marquage laissées à la disposition de l'utilisateur, par exemple pour indiquer la nature du(des) code(s) crypté(s) par la carte grille 11.
* OPP-HuJH 5'- TGA GGA GAC GGT GAC CGT GGT ACC TTG GC- 3' (Le site KDnI est souligné).
Cette amorce est complémentaire de la séquence consensus à l'extrémité 3' des régions JH humaines et comprend un site KDnI La composition du mélange d'amplification est la suivante 10 1 de tampon 10X de 1'ADN polymérase, 100 ng de plasmide PTZ-VHD7C2, 4 Rl du mélange de déoxynucléotides (mélange contenant 5 mN dATP + 5 mM dCTP + 5 mM dGTP + 5 mM dTTP, BOEHRINGER), 75 pmoles de l'amorce OC1S-HuVH4 et 100 pmoles de l'amorce OPP-HuJH, 1R1 de DNA polymérase thermostable et eau distillée q.s.p. 100 Fl.
L'amplification a été effectuée en 30 cycles successifs d'incubation à 95 C pendant 30 secondes, 55 C pendant 30 secondes et 72 C pendant 30 secondes et a été suivie d'une incubation à 72 C pendant 10 minutes.
Après amplification de la région VHD7C2, une digestion Pst I-KDnI du fragment d'amplification obtenu (taille environ 360 pb) a été réalisée et le fragment obtenu a été inséré entre les sites PstI et KgnI du plasmide cassette chaîne lourde pBCtl pour donner le plasmide chargé pBylD7C2.
La composition du mélange de ligation est la suivante 2 pl de tampon 10X de la ligase (BOEHRINGER), 20 ng du fragment VlD7C2 traité par les enzymes PstI et KgnI, 500 ng du plasmide pBCAl coupé par PstI et KpnI, 1 l de ligase (BOEHRINGER) et eau distillée q.s.p. 20 Lil.
La ligation et la transformation des bactéries E. coli compétentes sont effectuées comme décrit cidessus.
Les étapes de construction du plasmide pBtlD7C2 sont représentées à la Figure 2.
La séquence de l'insert du plasmide pBylD7C2 qui code pour la chaine lourde gamma 1 d'un anticorps r IgG-D7C2, et pour le peptide signal, est représentée dans la liste de séquence en annexe sous le numéro SEQ ID NO:5 ; la séquence polypeptidique de la chaîne lourde gamma 1 codée par cet insert est représentée sous le numéro SEQ ID NO:6.
Exemple 3 : Construction d'un baculovirzs recoibinant produisant 1 'anticorps r-D7C2 a - Insertion de la chaîne légère Le plasmide chargé pBAD7C2 a été utilisé pour co-transfecter des cellules d'insecte avec de 1'ADN du baculovirus sauvage AcMNPV.
Les conditions de transfection sont les suivantes : 500 ng d'ADN viral et 4 Rg d'ADN plasmidique en présence de 40 F1 de DOTAP (BOEHRINGER) dans 3 ml de milieu de culture sans sérum de veau pour cellules d'insectes. La cotransfection a été réalisée sur 4 x 106 cellules d'insectes Sf9 (ATCC35CRL 1711). Après quatre heures de contact à 28 C, le mélange de cotransfection est remplacé par 4 ml de milieu de TGV5 (milieu complet pour cellules d'insectes avec 5% de sérum de veau). La culture est continuée pendant 6 jours à 28 C.
Le virus produisant la chaîne légère de l'anticorps r-IgG-D7C2 sous le contrôle du promoteur polyédrine a été sélectionné dans un premier temps sur son incapacité à produire des polyèdres, puis sur sa capacité à exprimer une chaîne légère d'environ 25 kDa détectable par Western blot à l'aide d'anticorps antichaîne x humaine du commerce (CALTAG, TEBU).
L'ADN du virus recombinant obtenu (appelé AcMNPV-kD7C2) a été préparé à partir des surnageants de cellules infectées.
b - Insertion de la chaîne lourde Le plasmide chargé pEtlD7C2 a été utilisé en cotransfection avec l'ADN du baculovirus modifié AcMNPV-A D7C2. La cotransfection a été réalisée avec 500 ng d'ADN viral et 5 'Lg d'ADN plasmidique, sur cellules Sf9. Les doubles recombinants ont été sélectionnés par la technique de la dilution limite, associée à la technique ELISA.
Après une semaine de culture, le surnageant de cotransfection est dilué (10-4 à 10-10) puis distribué en plaques de 96 puits sur des cellules Sf9 (100 F1 de surnageant/puits), après une heure de contact, 100 1 de milieu sont rajoutés dans chaque puits. La sécrétion d'immunoglobulines y1 est recherchée dans le surnageant de chaque puits par ELISA après une semaine de culture à 28'C.