INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Une autre fonction du ressort d'extraction 45 est l'extraction du tiroir 1 de son support 11 de manière à ce que la personne chargée d'extraire le tiroir 1 de son support 11 n'ait pas à fournir une force d'extraction importante.
Pour ce faire, en dévissant les écrous 43 des tiges filetées 42 jusqu'à ce que les ressorts de rappel 46 sortent les tiges filetées des fentes 47 des moyens de centrage et de fixation 44, les ressorts d'extraction 45 repoussent le tiroir 1 ce qui a également pour effet de déconnecter automatiquement les connecteurs mâles/femelles 5A-5C des connecteurs femelles/mâles 4A-4C.
La figure 5 est une vue de dessus du dispositif de protection des connecteurs du tiroir selon le mode de réalisation préféré.
On retrouve dans cette figure 5 l'élément de centrage 41 muni de son ressort d'extraction 45, la tige filetée 42 munie de son écrou 43 et associée au ressort de rappel 46 et le moyen de centrage et de fixation 44 et sa fente 47.
L'amplification consiste en une étape de RT-PCR selon le protocole décrit dans l'Exemple 2, suivie d'une PCR "nichée" selon le protocole PCR décrit dans la demande de brevet EP-A-0569272. Dans le premier cycle RT-PCR, les amorces M001 et P004 ou P005 sont utilisées. Dans le deuxième cycle PCR, les amorces M002-A ou M003-BCD, et l'amorce POO4 sont utilisés.Les amorces sont positionnées comme suit: M002-A M003-BCD M001 ~~~ P004 P005 ARN POL-2
pol MSRV-1 PSJ17 Leur composition est: amorce M001: GGTCITICCICAIGG (SEQ ID N020) amorce M002-A: TTAGGGATAGCCCTCATCTCT (SEQ ID N021) amorce M003-BCD: TCAGGGATAGCCCCCATCTAT(SEQ ID N022) amorce P004: AACCCTTTGCCACTACATCAATTT (SEQ ID N023) amorce P005: GCGTAAGGACTCCTAGAGCTATT (SEQ ID N024) Le produit d'amplification "nichée" obtenu et dénommé M003-P004 est présenté dans la figure 9, et correspond à la séquence SEQ ID N08.
EXEMPLE 6: AMPLIFICATION ET CLONAGE D'UNE PORTION DU GENOME RETROVIRAL MSRV-1 A L'AIDE D'UNE SEQUENCE DEJA IDENTIFIEE, DANS UN ECHANTILLON DE VIRUS PURIFIE AU PIC D'ACTIVITE TRANSCRIPTASE INVERSE Une technique PCR dérivée de la technique publiée par Frohman et coll. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1988, 85, 8998-9002) a été utilisée. La technique dérivée permet, à l'aide d'une amorce spécifique en 3' du génome à amplifier, d'élonguer la séquence vers la région 5' du génome à analyser. Cette variante technique est décrite dans la documentation de la firme "Clontech Laboratories Inc., (Palo-Alto California, USA) fournie avec son produit "5'-AmpliFINDERTM RACE Kit", qui a été utilisé sur une fraction de virion purifié comme décrit précédemment.
Les amorces 3' spécifiques utilisées dans le protocole du kit pour la synthèse du cDNA et l'amplification PCR sont respectivement complémentaires aux séquences MSRV-1 suivantes: cDNA: TCATCCATGTACCGAAGG (SEQ ID N025) amplification: ATGGGGlTCCCAAGlTCCCT (SEQ ID N026) Les produits issus de la PCR ont été purifiés après purification sur gel d'agarose selon les méthodes conventionnelles (Sambrook J., Fritsch E.F., et Maniatis T., Molecular cîoning, a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989), puis resuspendus dans lOml d'eau distillée.Une des propriétés de la polymérase Taq consistant à ajouter une adénine à 1'extrémité 3' de chacun des deux brins d'ADN, 1'ADN obtenu a été directement inséré dans un plamide à l'aide du kit TA CloningTM (British Biotechnology). Les 2 1 de solution d'ADN ont été mélangés avec 5ss1 d'eau distillée stérile, 1 1 d'un tampon de ligation 10 fois concentré "10X LIGATION BUFFER", 2 1 de "pCRTM VECTOR" (25 ng/ml) et 1Z1 de TA DNA LIGASE". Ce mélange a été incubé une nuit à 120C. Les étapes suivantes ont été réalisées conformément au instructions du kit TA Cloninge (British Biotechnology).A la fin de la procédure, les colonies blanches de bactéries recombinantes (white) ont été repiquées pour être cultivées et permettre l'extraction des plasmides incorporés selon la procédure dite de "miniprep" (Sambrook J., Fritsch E.F., et Maniatis T., Molecular cloning, a îaboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989). La préparation de plasmide de chaque colonie recombinante a été coupée par une enzyme de restriction appropriée et analysée sur gel d'agarose. Les plasmides possédant un insert détecté sous lumière UV après marquage du gel au bromure d'éthidium, ont été sélectionnés pour le séquençage de l'insert, après hybridation avec une amorce complémentaire du promoteur Sp6 présent sur le plasmide de clonage du TA Cloning Kits.La réaction préalable au séquençage a ensuite été effectuée selon la méthode préconisée pour l'utilisation du kit de séquençage "Prism ready reaction kit dye deoxyterminator cycle sequencing kit" (Applied Biosystems, ref. 401384) et le séquençage automatique a été réalisé avec l'appareil "automatic sequencer, modèle 373 A Applied Biosystems selon les instructions du fabricant.
Cette technique a d'abord été appliquée à deux fractions de virion purifié comme décrit ci-après, sur saccharose à partir de l'isolat "POL-2" produit par la lignée PLI-2 d'une part, et à partir de l'isolat MS7PG produit par la lignée LM7PC d'autre part: les surnageants de cultures sont collectés deux fois par semaine, précentrifugés à 10 000 trs/min pendant 30 minutes pour éliminer les débris cellulaires, et ensuite, congelés à -800C ou utilisés tels quels pour les étapes suivantes.
Les surnageants frais ou décongelés sont centrifugés sur un coussin de PBS-glycérol 30% à 100 000g (ou 30 000 trs/min dans un rotor LKB-HITACHI de type 45 T) pendant 2h à 40C. Après élimination du surnageant, le culot sédimenté est repris dans un petit volume de PBS et constitue la fraction de virions concentrés, mais non purifiés. Le virus concentré est ensuite déposé sur un gradient de sucrose dans un tampon PBS stérile (15 à 50% poids/poids) et ultracentrifugé à 35 000 trs/min (100 000g) pendant 12 h à +4 OC dans un rotor à godets. 10 fractions sont recueillies et 20ss1 sont prélevés dans chaque fraction après homogénéisation pour y doser l'activité transcriptase inverse selon la technique décrite par H.
Perron et coll. (Res. Virol., 1989, 140, 551-561). Les fractions contenant le pic d'activité RT "de type LM7" sont ensuite diluées dans du tampon PBS stérile et ultracentrifugées une heure à 35 000 trs/min (100 000 g) pour sédimenter les particules virales. Le culot de virion purifié ainsi obtenu est alors repris dans un petit volume d'un tampon adéquat pour l'extraction d'ARN. La réaction de synthèse de cDNA mentionnée plus haut est réalisée sur cet ARN extrait de virion extracellulaire purifié.
L'amplification PCR selon la technique citée plus-haut a permis d'obtenir le clone F1-ll dont la séquence identifiée par SEQ ID N02, est présentée dans la figure 10.
Ce clone permet de définir, avec les différents clones préalablement séquencés, une région représentative du gène "pol" du rétrovirus MSRV-1, telle que présentée dans la figure 11. Cette séquence dénommée SEQ ID N01 est reconstituée à partir de différents clones se recouvrant à leurs extrémités, en corrigeant les artéfacts liés aux amorces et aux techniques d'amplification ou de clonage, qui interromperaient artificiellement la trame de lecture de l'ensemble.
Dans la figure 11, la trame de lecture potentielle avec sa traduction en acides aminés est présentée en dessous de la séquence en acides nucléiques.
EXEMPLE 7: CAPTURE, AMPLIFICATION ET CLONAGE D'UNE PORTION DU GENOME MSRV-2 A L'AIDE D'UNE SEQUENCE DEJA IDENTIFIEE, DANS UNE CULTURE INFECTEE PAR MSRV-2 Les surnageants d'une culture cellulaire exprimant une activité transcriptase inverse "de type LM7" similaire à celle décrite par H. Perron et coll. (Res.
Virol., 1989, 140, 551-561) ont été collectés régulièrement pendant plusieurs semaines et conservés congelés à -800C après addition de 10% de glycérol.
L'ensemble des surnageants a ensuite été décongelé afin de concentrer les particules infectantes par ultracentrifugation et de les purifier par centrifugation à l'équilibre sur gradient de saccharose; l'activité transcriptase inverse a ensuite été mesurée dans les différentes fractions collectées sur le gradient selon la méthodologie décrite par H. Perron et coll., (Research in Virology, 1992, 143, 337-350).
Les différentes fractions représentant le pic d'activité transcriptase inverse ont été regroupées afin d'en extraire les acides nucléiques selon un protocole destiné à la purification d'ARN décrit par P.Chomzynski et N. Sacchi (Analytical Biochemistry, 1987, 162, 156-159), mais les acides nucléiques extraits n'ont pas été traités par l'ADNase. Une amplification PCR dérivée de la technique décrite par Shih et coll. (J.Virol., 1989, 63, 64-75) a été effectuée directement sur cet échantillon d'acides nucléiques non traité par 1'ADNase, selon un procédé d'amplification d'ARN tel que décrit dans la demande de brevet EP-A-0 569 272, dans un volume total de 100 1, contenant 200ng d'ARN, 1 p1 d'ARN Guard, 33 immoles de chaque mélange d'amorces (MOP) décrits par Shih et code., et identiques à ceux utilisés pour la PCR (ADN) directe ; 0,25mM de chaque dNTP, 10Z1 de tampon 10X, 2,5 u d'enzyme Taq et 0,4 Ccl d d'enzyme RT (RT-AMV; 10u) sont aussi ajoutés aux échantillons. Les cycles d'amplification sont réalisés comme suit: dénaturation de 1'ARN 650 C/10 minutes, synthèse de l'ADNc 500C/8 minutes puis les cycles sont identiques à ceux de la PCR décrite par Shih et collaborateurs. Des réactions de contrôle ont été effectuées de manière à controler l'absence de contaminants (réaction sur de l'eau). Les produits ont été analysés sur gel d'acrylamide 10%.
Les échantillons amplifiés par RT-PCR ont ensuite été clonés et séquencés selon les techniques décrites dans l'exemple 1.
La majorité des clones séquencés à partir du produit de RT-PCR correspond à la séquence MSRV-2A et à son équivalente MSRV-2B précédemment décrites dans les exemples 1 à 3.
Des cellules transparentes comportant deux plaques en regard pourvues d'électrodes et d'un cadre d'assemblage délimitant un espace rempli d'une composition cristal liquide sont bien connues de l'art antérieur et plusieurs documents concernent leur fabrication selon des modes particuliers, comme indiqué ci-après Le brevet GB 2 039 679 divulgue un procédé de fabrication permettant de remplir en une seule opération un lot de cellules disposées sur un même support entouré d'un joint périphérique d'étanchéité, chaque cellule étant ensuite détachée du support et individuellement scellée.
Dans le brevet EP 0 113 838, la cellule comporte plusieurs compartiments communiquant entre eux, et pouvant être remplis d'une composition de cristaux liquides au moyen d'un orifice unique dont le scellement permet de fermer la cellule dans son ensemble, sans pour autant isoler les compartiments les uns des autres.
Dans le brevet GB 2 049 214, le procédé décrit permet le remplissage simultané d'un empilement de cellules à cristaux liquides destiné à améliorer la résolution de l'affichage. A cet effet, des trous sont pratiqués dans les plaques, puis alignés de façon à permettre en une seule opération leur remplissage et le scellement d'au moins un orifice extérieur, ce qui ne permet toutefois pas d'isoler les uns des autres les milieux actifs de chaque cellule.
Le brevet GB 2 064 843 divulgue un procédé permettant d'obtenir un dispositif d'affichage de grande surface, en remplissant des cellules deux par deux, à travers une fente pratiquée dans l'un des substrats, ladite fente étant ensuite scellée par un cordon ou un ruban adhésif pour constituer un enchaînement de cellules isolées et situées dans un même plan. Comme on le comprend chaque opération de remplissage et de scellement ne peut concerner que deux cellules en même temps.
De ce qui précède, il ressort que les procédés de l'art antérieur concernent essentiellement des cellules à cristaux liquides, soit pour une fabrication par lot, soit pour un remplissage simultané de plusieurs compartiments d'une même cellule ou d'un assemblage de cellules, dont au plus deux peuvent être séparées par l'opération de scellement, tout en restant sur le même support.
L'invention a donc pour but principal de remédier aux inconvénients susmentionnés de l'art antérieur en fournissant un procédé dans lequel une cellule compartimentée en plusieurs cellules élémentaires est pourvue d'un orifice unique, le cadre d'assemblage et les ouvertures de chaque cellule élémentaire étant conformés de telle sorte qu'il soit possible de remplir en une seule fois toutes les cellules élémentaires d'une même substance liquide active et d'isoler les milieux liquides de chaque cellule élémentaire par une seule opération de scellement.
L'invention concerne plus particulièrement un tel procédé pour le remplissage d'une cellule compartimentée constituée par au moins deux cellules élémentaires.
L'invention concerne également une cellule obtenue par ledit procédé, et plus particulièrement une cellule dans laquelle les cellules élémentaires sont des cellules photoélectrochimiques pouvant être mises en série. La cellule ainsi obtenue ne comporte aucune limitation quant à sa surface, mais l'invention concerne encore plus particulièrement une telle cellule compartimentée destinée à former la glace ou le cadran d'une pièce d'horlogerie, et à fournir au mouvement la tension utile à son fonctionnement.
A cet effet, l'invention a pour objet un procédé de remplissage avec un matériau liquide actif d'une cellule compartimentée en plusieurs cellules élémentaires et le scellement de ladite cellule au moyen d'un matériau d'obturation, dans lequel chaque cellule élémentaire pourvue d'une ouverture est délimitée, d'une part par un premier substrat plan et par un deuxième substrat parallèle au premier, l'un au moins des deux substrats étant transparent, d'autre part par un cadre d'assemblage formé de plusieurs portions reliées entre elles, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes consistant à - déposer sur un même premier substrat un moyen d'assemblage pour conformer le cadre d'assemblage de chaque cellule élémentaire en orientant leurs ouvertures respectives vers une chambre de distribution communiquant avec le milieu extérieur au moyen d'un unique orifice de remplissage; - fixer un deuxième substrat sur les faces supérieures des cadres de toutes les cellules élémentaires selon un procédé adapté au moyen d'assemblage utilisé; - remplir toutes les cellules élémentaires avec le matériau liquide actif par l'orifice de remplissage; - introduire dans la chambre de distribution le matériau d'obturation permettant de sceller en une seule fois toutes les ouvertures des cellules élémentaires.
L'invention concerne également une cellule compartimentée en plusieurs cellules élémentaires, contenant un matériau liquide actif scellé par un matériau d'obturation, dans laquelle chaque cellule élémentaire pourvue d'une ouverture est délimitée d'une part par un premier substrat plan et par un deuxième substrat parallèle au premier, l'un au moins des deux substrats étant transparent, d'autre part par un cadre d'assemblage formé de plusieurs portions reliées entre elles, le cadre d'assemblage de chaque cellule élémentaire étant situé sur un même premier substrat, les ouvertures respectives de chaque cellule élémentaire débouchant dans une chambre de distribution en communication avec le milieu extérieur par un orifice, ladite chambre contenant le matériau d'obturation permettant d'isoler les cellules élémentaires les unes des autres et du milieu extérieur.
A titre de matériau d'obturation on peut choisir parmi les matériaux polymérisables, thermofusibles et thermodurcissables bien connus de l'homme du métier dans les techniques de fabrication des cellules d'affichage.
Quand au moyen d'assemblage il peut être choisi parmi une colle, un verre frittable et un matériau polymérisable, thermofusible ou thermodurcissable, ledit moyen d'assemblage pouvant incorporer des espaceurs (billes ou bâtonnets) dans sa composition, comme on pourrait de façon équivalente les incorporer dans le matériau liquide actif.
Le dépôt du moyen d'assemblage sur le premier substrat est effectué selon deys procédés connus de l'homme du métier, par exemple par sérigraphie, tampographie ou par application au moyen d'un distributeur-doseur motorisé. La fixation du deuxième substrat sur le cadre d'assemblage est bien entendu fonction du moyen d'assemblage utilisé, et consistera, par exemple, dans le cas d'un matériau polymérisable à provoquer la polymérisation par irradiation, ou élévation de température.
Le procédé selon l'invention permet ainsi de réduire le nombre d'opérations, et en conséquence les coûts de production lorsqu'on cherche à obtenir une cellule compartimentée lamellaire dans laquelle toutes les cellules élémentaires doivent coopérer en vue d'une même fonction dans un produit donné. Il en est par exemple ainsi pour une cellule photoélectrochimique, dans laquelle les cellules élémentaires sont destinées à être mises en série pour obtenir une tension suffisante pour l'alimentation du mouvement d'une pièce d'horlogerie.Dans ce cas, chaque cellule élémentaire aura, par exemple, la configuration décrite dans le document US 5 441 827, dans laquelle deux substrats transparents comportent une électrode transparente, le deuxième substrat étant alors revêtu d'une couche nanostructurée d'un oxyde semiconducteur photoélectrochimiquement actif, le matériau liquide actif remplissant la cellule étant un électrolyte.
Lorsque la cellule compartimentée est destinée à un affichage, chaque cellule élémentaire est formée de façon connue par deux substrats pourvus d'électrodes structurées, le matériau liquide actif étant alors une composition de cristaux liquides.
De façon avantageuse, les cadres d'assemblage des cellules élémentaires ont des portions communes de façon à conférer à la cellule compartimentée un contour géométrique défini, tel qu'un cercle, une ellipse, un carré ou un rectangle. Selon la forme de ce contour géométrique et le procédé de fabrication unitaire ou par lot, il pourra être utile, pour parfaire ce contour, d'effectuer une opération supplémentaire d'usinage le long dudit contour extérieur du cadre d'assemblage, et en particulier au niveau de l'orifice de remplissage.
Le siliconate et/ou ses dérivés sont introduits dans le cogranulé par mise en contact d'une solution aqueuse de siliconate (ou de ses dérivés) avec les autres composants solides et liquides, à savoir carbonate et silicate.
De préférence, la solution de siliconate est ajoutée par tout moyen connu en soi à un cogranulé silicate-carbonate décrit précédemment.
Un exemple de procédé général de préparation de cogranulé contenant un siliconate est le suivant, qui consiste à (1) mettre en oeuvre un procédé de préparation des agents sous forme de cogranulés décrit dans EP-A-0488 868, (2) à mettre en contact une solution aqueuse de siliconate ou de ses dérivés sur les cogranulés ainsi obtenus et (3) éventuellement à sécher.
Cet ajout de siliconate (et son éventuel séchage) est réalisé de façon contrôlée de manière à respecter un rapport ponderal (eau associée au silicate)/(silicate exprimé en sec) de l'ordre de 33/100 à 120/100 comme indiqué ci-dessus.
La quantité maximale de siliconate ou de ses dérivés présente dans ce produit correspond à la limite du pouvoir adsorbant et/ou absorbant de l'agent, tel que décrit précédemment. Cependant, pour fixer les idées, la limite maximale d'adsorption et/ou d'absorption d'un agent à base de silicate de métal alcalin supporté sur du carbonate de métal alcalin et d'eau associée au silicate, le rapport (eau associée au silicate)/(silicate exprimé en sec) étant supérieur ou égal à 33/100, est généralement située aux environs de 13 *, de préférence de 10 %, de son poids total.
La quantité minimale de siliconate ou de ses dérivés présente dans ce produit correspond préférentiellement à 2 % du poids total du produit, et de manière plus avantageuse à 3 %.
Dans une composition de lavage en poudre conforme à l'invention, le système de blanchiment comprend un percarbonate classique et lesdits cogranulés.
Le percarbonate ne subit aucun traitement particulier.
Les cogranulés, contenant ou non des siliconates, stabilisent le percarbonate sans qu'il y ait besoin d'un contact intime entre les deux produits. De façon inattendue, l'amélioration est obtenue par suite d'un simple mélange à sec des produits pulvérulents ou granulaires.
Le cogranulé est introduit de manière avantageuse à raison de 8 à 22 % en poids de la composition et de préférence de 12 à 18 %.
Le percarbonate de sodium ou de potassium est introduit de manière avantageuse à raison de 6 à 20 % en poids de la composition et de préférence de 7 à 13 %.
Pour obtenir un effet de blanchiment à basse température, on peut utiliser un système de blanchiment activé qui comporte, en plus du percarbonate, un activateur de blanchiment, notamment la tétraacétyléthylènedia- mine (TAED), le pentaacétylglucose (PAG), le tétraacétylglycoluryl (TAGU) ou l'isonanoyloxybenzènesulfonate (ISONOBS).
L'activateur est de préférence présent à raison de 0,5 à 6 % en poids de la composition, et plus préférentiellement de 1 à 5 % en poids.
Le taux d'ajout de l'activateur peut être à deux niveaux, ce qui correspond à des formulations dites "standard" pour le bas niveau et à des formulations dites "compactes" pour le haut niveau.
Une composition de lavage en poudre conforme à l'invention peut être préparée à partir des constituants mentionnés ci-dessus par simple mélange à sec de l'agent de blanchiment, et éventuellement de l'activateur de blanchiment, avec l'agent stabilisateur, en les proportions indiquées précédemment, et ajout d'autres composants classiques des compositions détergentes pour le lavage du linge, indiqués ci-après.
A côté du système de blanchiment stabilisé faisant l'objet de l'invention est présent dans la composition détergente au moins un agent tensio-actif avantageusement en quantité pouvant aller de 8 à 20 %, de préférence de l'ordre de 10 à 15 % du poids de ladite composition.
s) Les produits décrits ci-dessus peuvent, si désiré, faire l'objet de réactions de salification par exemple par un acide minéral ou organique ou par une base minérale ou organique selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier.
t) Les éventuelles formes optiquement actives des produits décrits ci-dessus peuvent être préparées par dédoublement des racémiques selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier.
Les composés de formule (I) tels que définis ci-dessus ainsi que leurs sels d'addition avec les acides présentent d' intéressantes propriétés pharmacologiques.
Les produits de formule (I) sont également capables de s'opposer aux effets stimulants de l'endothéline au niveau de tous les types cellulaires, notamment les cellules muscu laires lisses, les cellules neuronales et les cellules osseuses.
Ces propriétés justifient leur application en thérapeutique et l'invention a également pour objet à titre de médicaments, les produits tels que définis par la formule (I) cidessus, les dits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques ou optiquement actives, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques pharmaceutiquement acceptables desdits produits de formule (I).