INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'ensemble de la partie électronique et de son câblage pourra être réalisé en procédé CMS, afin d'obtenir une miniaturisation maximale et en obtenant de ce fait une diminution du coût de fabrication, une meilleure performance mécanique ainsi qu'une résistance plus importante aux vibrations.
Il s'agit d'un dispositif ultra-simple, remplissant pleinement la fonction de calculateur directionnel adapté pour une brosse à dents. Le synoptique est clair et concis pour qu'un homme de métier en comprenne le fonctionnement et sa fabrication.
De même, ce nouveau concept de brosse à dents peut être étendu à plusieurs équipements électroniques comme: - une horloge, - un indicateur de température de l'eau, - un indicateur de pH, - une lampe pour les zones d'ombres dans la bouche.
La tension de la pile d'alimentation choisie pour cette présente invention n'excède pas 6 volts en courant continu. Elle peut être réduite selon l'équipement électronique. Le principe électronique de base permet l'obtention d'une bonne autonomie appréciable par l'utilisateur. Le logement de la pile est réduit au maximum et pourra l'être encore plus en utilisant par exemple le principe connu sur l'énergie solaire ou tout simplement en y incorporant une ou plusieurs piles plates utilisées pour les montres. Dans ce cas, et sans que cela remette en cause la présente invention, l'ensemble des dispositifs mécaniques et électroniques sera adapté à toutes modifications et améliorations.
SIEGE AVEC UN DISPOSITIF INTEGRE DE VERTICALISATION La présente invention a pour objet un siège avec un dispositif intégré de verticalisation, notamment avec un réglage de l'incidence du dossier en fonction de la morphologie de l'utilisateur.
On connaît le problème des personnes souffrant d'un handicap, pour qui le passage de la position assise à la position debout est impossible sans assistance.
De ce fait il est recherché des moyens d'assistance qui assurent cette verticalisation.
On connaît des dispositifs qui permettent le passage de la position couchée à la position assise et de la position assise à la position debout mais de tels dispositifs restent complexes dans leurs agencements pour atteindre ces résultats multiples et complexes.
C'est le cas du fauteuil décrit dans la demande de brevet WO-A-79 00647.
l'aile 74 de l'enveloppe.
Par suite du mouvement de traction, la tête de manoeuvre 81 vient en butée
contre l'enveloppe et déplace celle-ci sur la courbe b.
Nous allons décrire ci-après les étapes d'un procédé de fabrication
Dans une première étape de ce procédé, on commence par mettre en place l'une sur l'autre les deux parties de moule 5 et 6 de telle manière que leurs plans de joint
soient en contact.
Dans une seconde étape, l'insert est déplacé dans le sens de la flèche k de telle sorte que l'enveloppe extérieure 7 définisse par ses zones 740 et 750 respectivement,
une partie complémentaire de la face interne de la glace et une partie de base en contre-
dépouille adjacente à cette face interne, de la patte 3.
Au cours de ce déplacement, l'enveloppe 7 coulisse à l'intérieur du logement 50 mais son déplacement est limité par sa partie d'aile 73 qui vient en butée
contre la face 54 du logement. L'enveloppe occupe alors la position illustrée à la figure 5.
Au cours du déplacement de l'insert, la tête de manoeuvre 81 coulisse à l'intérieur de l'enveloppe 7 et actionne le sabot mobile 9 dans le sens de la flèche n de sorte que son appendice 93 occupe une position qu'il l'amène à définir une partie intermédiaire en contre-dépouille de la patte située entre la partie de base et la dent
saillante dont il a été question plus haut.
On est alors dans la situation de la figure 5, situation dans laquelle il est
alors possible de procéder au moulage de manière conventionnelle.
La région E2 est impliquée dans la régulation de l'ADN viral. Cette région E2 est constituée de deux sous unités de transcription E2A et E2B.
La région E4 est impliquée dans la régulation de l'expression des gènes tardifs, dans la stabilité des ARN nucléaires tardifs, dans l'extinction de l'expression des protéines de la cellule hôte et dans l'efficacité de la réplication de l'ADN viral. Des mutants dépourvus de E4 sont incapables de se propager. E4 constitue ainsi une région essentielle à la propagation virale. Cette région E4 est constituée de 7 phases ouvertes de lecture, désignées ORF1, ORF2, ORF3, ORF4, ORF3/4, ORF6 et ORF6/7 ( figure 2). Parmi celles-ci, ORF3 et ORF6 sont les deux gènes essentiels à la propagation virale. Chacun de ces gènes est capable d'induire la propagation virale, ORF6 y jouant toutefois un rôle plus important que ORF3 (Huang et Hearing (1988), J. Virol. 63, 2605) .
Dans un mode particulier, dans les vecteurs de l'invention, la totalité de la région considérée est placée sous contrôle d'un promoteur inductible à la tétracycline.
Dans le cas particulier de la région E2, il peut s'agir d'un fragment correspondant à l'ADNc de la 72K, à l'ADNc de la polymérase de 140K ou à l'ADNc de la protéine pré-terminale de 87K. En ce qui concerne la région E4, il peut s'agir en particulier du fragment Taql-Bgl2 correspondant aux nucléotides 35576 -32490.
Dans un autre mode particulier, seule l'expression d'une partie fonctionnelle de ces régions c'est-à-dire suffisante pour permettre la propagation virale, est contrôlée. Dans le cas particulier de E4, cette partie comprend au moins un gène ORF3 ou ORF6 fonctionnel. Préférentiellement, la partie fonctionnelle de E4 est constituée essentiellement de ORF6. A titre d'exemple, le fragment Bgl2, compris entre les positions 34115 à 32490 et contenant les séquences des ORF6 et ORF7 de l'Ad5 peut être positionné en aval d'un promoteur inductible tel que défini selon l'invention.
Dans un autre mode particulier de la présente invention, la région essentielle est constituée de la région codant pour la protéine IVa2 et par exemple son ADNc.
Dans un autre mode de réalisation, la région codant pour la protéine IVa2 est comprise dans un fragment BglII-NruI correspondant aux nucléotides 3328 à 6316 sur la séquence de l'adénovirus Ad5 sauvage, un fragment DraI-NlaIII correspondant aux nucléotides 4029 à 5719 ou un fragment draI à XhoI correspondant aux nucléotides 4029 à 5788.
Selon un mode préféré de l'invention, les promoteurs des régions essentielles à la propagation virale sont remplacés au sein du génome viral par un promoteur inductible et plus préférentiellement par un promoteur inductible à la tétracycline.
Dans un premier mode particulier de réalisation, les adénovirus recombinants de l'invention portent une délétion de tout ou partie du gène El et possèdent la région E4, en tout ou partie, sous contrôle d'un promoteur inductible à la tétracycline, de préférence de type Op2/Tk.
Dans un autre mode particulier de réalisation, les adénovirus recombinants de l'invention portent une délétion de tout ou partie du gène El et possèdent la région E2 en tout ou partie sous contrôle d'un promoteur inductible à la tétracycline, de préférence de type Op2/Tk.
Toujours selon un mode préféré de réalisation, les adénovirus recombinants de l'invention portent une délétion de tout ou partie des gènes El et E2 et possèdent la région E4 en tout ou partie sous contrôle d'un promoteur inductible à la tétracycline, de préférence de type Op2/Tk.
Dans une variante particulièrement avantageuse, les adénovirus recombinants de l'invention portent une délétion de tout ou partie des gènes El et E4 et possèdent la région E2 en tout ou partie sous contrôle d'un promoteur inductible à la tétracycline, de préférence de type Op2/Tk.
Avantageusement, les adénovirus recombinants de l'invention comportent en outre une séquence d'acides nucléiques hétérologue comportant un ou plusieurs gènes thérapeutiques dont le transfert et/ou l'expression dans une cellule, un organe ou un organisme est recherché.
Les gènes thérapeutiques qui peuvent ainsi être transférés sont tout gène dont la transcription et éventuellement la traduction dans la cellule cible génèrent des produits ayant un effet thérapeutique.
Il peut s'agir en particulier de gènes codant pour des produits protéiques ayant un effet thérapeutique. Le produit protéique ainsi codé peut être une protéine, un peptide, etc. Ce produit protéique peut être homologue vis-à-vis de la cellule cible (c'est-à-dire un produit qui est normalement exprimé dans la cellule cible lorsque celleci ne présente aucune pathologie). Dans ce cas, I'expression d'une protéine permet par exemple de pallier une expression insuffisante dans la cellule ou l'expression d'une protéine inactive ou faiblement active en raison d'une modification, ou encore de surexprimer ladite protéine. Le gène thérapeutique peut aussi coder pour un mutant d'une protéine cellulaire, ayant une stabilité accrue, une activité modifiée, etc. Le produit protéique peut également être hétérologue vis-à-vis de la cellule cible.Dans ce cas, une protéine exprimée peut par exemple compléter ou apporter une activité déficiente dans la cellule lui permettant de lutter contre une pathologie.
Parmi les produits thérapeutiques au sens de la présente invention, on peut citer plus particulièrement les enzymes, les dérivés sanguins, les hormones, les lymphokines interleukines, interférons, TNF, etc (FR 9203120), les facteurs de croissance, les neurotransmetteurs ou leurs précurseurs ou enzymes de synthèse, les facteurs trophiques : BDNF, CNTF, NGF, IGF, GMF, aFGF, bFGF, NT3, NT5, etc; les apolipoprotéines : ApoAI, ApoAIV, ApoE, etc (FR 93 05125), la dystrophine ou une minidystrophine (FR 9111947), les gènes suppresseurs de tumeurs : p53, Rb, RaplA, DCC, k-rev, etc (FR 93 04745), les gènes codant pour des facteurs impliqués dans la coagulation : Facteurs VII, VIII, IX, etc, les gènes suicides : Thymidine kinase, cytosine désaminase, etc; ou encore tout ou partie d'une immunoglobuline naturelle ou artificielle (Fab, ScFv, etc), etc.
Les vecteurs de PTH sont ensuite construits comme suit. Les deux oligonucléotides partiellement chevauchants suivants sont assemblés par annelage et la synthèse du second brin est effectuée avec la polymérase Taq 5'-GCT CGG GCT AGC TAA CTA ATG GAG GAT ACA TAA ATG AkA GCT ATC TTC Nhe I S & séquence de tête TrpLe GTT CTG AAA GGT TCC CTG GAC CGT GAC CCG GAG3' 3'-AC CTG GCA CTG GGC CTT AAG CAG CTG TAC TAG Sal I Bcl I TTG GTC TAG AGG GTG GTG GTG GTA GTG GTA ATT ATT TTC GAA GGC AGG-5' Bgl II His6 Hind III Le produit est digéré par NheI et HindIII et inséré aux sites correspondants de pBAD18. Le duplex contient le site d'attachement du ribosome de Shine-Dalgarno (S & ) et le peptide de tête TrpLe.Il a été antérieurement montré que cette séquence de tête de 17 acides aminés accroît l'expression des petites protéines et peut favoriser la séquestration de produits fusionnés dans des corps d'inclusion (Derynck et coll., Cell (1984), 38, 287-297 ; Miozzari et Yanofsky, J. Bacteriol. (1978), 133, 14571466). Le peptide de tête TrpLe est séparé de la séquence His6 par un site de clonage multiple. Le site de polyhistidine permet une purification rapide de la molécule de parathormone recombinante (PTHR) et des analogues de PTHR par chromatographie de chélation au nickel (voir le brevet des E.U.A. NO 4 551 271). La polyhistidine est suivie par deux codons d'arrêt (TAATAA).
Un gène de PTHR (1-34) ayant la séquence suivante est conçu et synthétisé en utilisant des codons très utilisés dans E. coli 1 2 3 4 5 6 7 8 Val-Asp-Met-Ile-Asn-Met-Ser-Val-Ser-Glu-Ile-Gln-Leu-Leu 5'-GGC TGG GTC GAC ATG ATC AAC ATG TCC GTT TCC GAA ATC CAG CTG CTG 3'-CCG ACC CAG CTG TAC TAG TTG TAC AGG OAA AGG CTT TAG GTC GAC GAC Sal I 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 His-Asn-Leu-Gly Lys-His-Leu-Asn-Ser-Leu-Glu-Arg-Val-Glu-Trp-Leu CAC AAC CTG GGT AAA CAC CTG AAC TCC CTC GAG CGT GTT GAA TGG CTG GTG TTG GAC CCA TTT GTG GAC TTG AGG GAG CTC GCA CAA CTT ACC GAC 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 Arg-Lys-Lys-Leu-Gln-Asp-Val-His-Asn-Tyr-Met-Gln-Ile-Ser CGT AAA AAA CTG CAG GAC GTC CAC AAC TAC ATG CAG ATC TCC CTC-3' GCA TTT TTT GAC GTC CTG CAG GTG TTG ATG TAC GTC TAG AGG GAG-5' BgI II Ce gène de PTHR est digéré par SalI et BglII et inséré dans le vecteur pBAD modifié.
EXEMPLE 2 Expression et purification de polypeptides PTH La souche E. coli DH1OB contenant le plasmide décrit ci-dessus est cultivée en croissance pendant une nuit dans du milieu LB contenant de l'ampicilline (50 à 100 Ag/ml).
On utilise 10 ml de cette culture pour ensemencer une culture de 500 ml de Superbroth (35 g/l de tryptone Bacto, 20 g/l d'extrait de levure, 5 g/l de NaCl et NaOH jusqu'à pH 7,5) contenant de l'ampicilline. Les cellules sont cultivées en croissance jusqu'à une D.O.600 d'environ 0,5 à 1,0 et l'on ajoute du L-(+)-arabinose à une concentration finale de 0,2 %. Les cellules sont cultivées en croissance pendant 3 heures de plus. Au bout de ce temps, la D.O.600 se situe entre 1,5 et 3. Les cellules sont récoltées par centrifugation et lavées successivement avec 250 ml de tampon WTEK (Tris 50mM, pH 7,5, EDTA lOmM, KCl 100mM), 250 ml de solution saline de tampon phosphate (STP) et 250 ml de Tris lOmM, pH 7,5.Les cellules sont ensuite remises en suspension dans 100 ml d'une solution constituée de Tris 10mM, pH 7,5, 0,1 mg/ml de N-tosyl-L-phénylalaninechlorométhylcétone (TPCK) comme inhibiteur de protéase, 0,1 mg/ml de N-tosyl-L-lysine-chlorométhylcétone (TLCK) comme inhibiteur de protéase, 0,1 mg/ml de fluorure de phénylméthylsulfonyle (FPMS) comme inhibiteur de protéase et 0,05 mg/ml de lysozyme. La solution résultante est mise à incuber sur glace pendant 1 heure. Les cellules sont ensuite congelées-décongelées, on ajoute 1 mg de DNase aux cellules congelées-décongelées, et le mélange résultant est mis à incuber sur glace pendant 1 heure de plus.
Les corps d'inclusion provenant des cellules sont purifiés par centrifugation à 10 000 g pendant 15 minutes.
Les corps d'inclusion sont solubilisés dans du dodécylsulfate de sodium (DSS) à 10 %, mais, dans certains cas, un traitement aux ultrasons de l'échantillon est également nécessaire pour solubiliser toute la protéine. Un tampon de liaison (imidazole 5mM, NaCl 500mM et Tris 20mM, pH 7,9) est ajouté pour diluer le DSS jusqu'à une concentration de 1 %, et l'échantillon est appliqué sur une colonne contenant une résine liant His (Novagen). La colonne est ensuite lavée avec 15 volumes de colonne de tampon de liaison, et la protéine liée est ensuite éluée avec 1 volume de colonne de tampon d'élution < NaCl 500mM, EDTA 100mM et Tris 50mM, pH 7,9). On ajoute ensuite 2 volumes d'éthanol absolu pour précipiter la protéine.
Le polymère de PTH précipité est ensuite dissous dans l'acide formique à 70 % et l'on ajoute du CNBr en un excès molaire de 500 fois (un excès de 100 à 1000 fois peut être utilisé) . Une mesure de temps de clivage (conduite à différentes concentrations de CNBr pour déterminer le temps optimal), tel que contrôlé par analyse d'acides aminés, indique que le clivage complet est réalisé en 2 heures à la température ambiante. Après clivage au CNBr, les peptides sont lyophilisés et remis en suspension dans de l'eau distillée. Le peptide est remis en suspension dans du Tampon A [0,1 % d'acide trifluoracétique (TFA)] et encore purifié par CLHP en utilisant une colonne semi-préparative Vydac C18. Une quantité d'environ 30 mg de peptide est injectée sur la colonne. Le peptide est ensuite élué avec un gradient de 20 à 40 % d'acétonitrile/TFA à 0,1 % en 40 minutes. La fraction du pic principal, s'éluant à environ 15 minutes, est recueillie et lyophilisée jusqu'à siccité.
Après isolement des corps d'inclusion et purification comme décrit ci-dessus, le peptide a une pureté supérieure à 95 %, comme déterminé par électrophorèse sur gel de polyacrylamide au dodécylsulfate de sodium (EGPA-DSS). Le peptide est ensuite dessalé et purifié partiellement sur une colonne Sep-Pak. Les pics individuels sont isolés et analysés par spectrométrie de masse à électropulvérisation pour déterminer la composition. Il y a deux pics secondaires qui sont la conséquence d'un clivage incomplet par le bromure de cyanogène et qui représentent le peptide PTH-His6 et le peptide I-N-M-PTH. Le pic principal représente plus de 80 % de la protéine totale. Une comparaison de l'échantillon purifié par Sep-Pak "brut" avec une PTHR purifiée par CLHP ne révèle aucune différence importante quant au pouvoir stimulateur d'adénylatecyclase.
EXEMPLE 3 Production d'analogues de la PTH Afin de produire les analogues de la PTH de la présente invention, le peptide PTH est substitué par les acides aminés indiqués sur les Figures 1B, 1C et 1D. Les analogues de la PTH sont produits par des techniques de recombinaison, en construisant d'une manière similaire à celle décrite ci-dessus pour le gène recombinant de PTHR-A, en opérant les remplacements des bases appropriées.
Les analogues de la PTH sont exprimés et purifiés comme décrit ci-dessus.
EXEMPLE 4 Évaluation de 1'active des analogues de la PTH La PTH synthétique ayant la séquence du type sauvage et les analogues de la PTH recombinante (PTHR) sont examinés quant à leur aptitude à stimuler l'adénylatecyclase. Les concentrations de PTH sont déterminées par la D.O.280 en utilisant un coefficient d'extinction de 6600 pour le peptide recombinant et de 5500 pour le peptide synthétique. La lignée cellulaire d'ostéosarcome de rat UMR106 (ATCC CRL 1661) est utilisée pour évaluer in vitro l'aptitude du peptide à activer le récepteur de la PTH.
L'activation du récepteur de la PTH entraîne une élévation intracellulaire de la concentration d'AMPc.
Les cellules UMR106 sont inoculées à raison d'environ 2,5 x 105 par puits dans une plaque à 48 puits et cultivées en croissance jusqu'à confluence. Les évaluations sont effectuées sur les cellules 3 à 5 jours après confluence.
On enlève le milieu (milieu de Eagle modifié par Dulbecco, DMEM, avec sérum foetal de veau) et l'on applique 1 ml de milieu frais. La PTH (recombinante ou synthétique) à diverses concentrations et de la 3-isobutyl-lméthylxanthine (IBMX) à une concentration finale lmM sont ensuite ajoutées à chaque puits de la plaque, qui est ensuite mise en incubation pendant 5 minutes à la température ambiante. Le milieu est ensuite enlevé et les cellules sont lavées rapidement avec du STP glacé. Les cellules sont ensuite extraites deux fois avec 1 ml d'éthanol absolu. Les deux produits d'extraction sont rassemblés et l'éthanol est éliminé par évaporation.
L'extrait est ensuite redissous dans 1 ml de tampon pour dosage de proximité par scintillation (tampon SPA) (Amersham, Arlington Heights, IL). La concentration d'AMPc est déterminée par dosage en utilisant un nécessaire de dosage de proximité par scintillation (SPA) disponible chez Amersham. L'analogue 1 a une Kd (constante de dissociation) de 1,5nM et une CE50 (concentration efficace) de 0,9nM.
La PTH de type sauvage a une Kd de 8,5nM et une CE50 de 4,4nM. Les analogues 2 et 3 n'ont pas d'activité mesurable.
juxtaposés et qui sont parallèles à l'axe OZ.
Ainsi que représenté sur la figure 4a qui représente la facette F3 en coupe, ces deux segments plans F31 et F32 présentent des orientations de sens opposés par
rapport à l'axe OY (axe vertical).
L'angle a32 entre le segment F32 (qui correspond au segment supérieur de la facette F3) et l'axe OY est
inférieur à 5 .
La facette F4 illustre une configuration concave à n segments référencés de F41 à F4n. Ces n segments F41 à F4n sont juxtaposés les uns aux autres dans la hauteur de la facette F4 (c'est-à-dire selon la direction de l'axe OY). Ainsi que représenté sur la figure 4b, l'angle entre les segments F41 à F4n et l'axe OY est croissant dans la hauteur de la facette F4 à partir du segment inférieur F41. L'angle a41 entre l'axe OY et le segment F41 est positif; l'angle a4n entre l'axe OY et le segment F4n est
inférieur à 10 .
Avec une telle configuration, la lumière réfléchie par la facette F4 est concentrée vers le bord inférieur de
la face de sortie du barreau optique 3.
On notera que, dans les différents exemples qui viennent d'être décrits, les dimensions des segments sont
choisies en fonction du type d'éclairage à réaliser.
D'autres configurations sont possibles pour les facettes F. Notamment, il est bien entendu possible de combiner des configurations permettant de réaliser une concentration horizontale et des configurations permettant
de réaliser une concentration verticale.
Egalement, les facettes peuvent présenter des surfaces de réflexion présentant une courbure continue (ce qui correspond au cas d'un nombre infini de segments plans). L'invention est avantageusement mise en oeuvre pour réaliser un éclairage à coupure, et par exemple un éclairage de croisement à coupure en V. On pourra par exemple utiliser un barreau 103 du type de celui représenté sur la figure 5a. Ce barreau 103 présente cinq facettes échelonnées référencées de F101 à
F105 qui sont du type des facettes précédemment décrites.
On a représenté sur la figure 5b les lignes isolux de l'éclairage E100 que réalise un projecteur équipé d'un
Comme décrit ci-dessus, même si plusieurs demandes de verrouillage, identifiées par "Aa(i)" et "Bc(vi)" par exemple, sont fournies, un blocage est évité de manière fiable en fournissant les numéros d'ordre de ces demandes de verrouillage aux dispositifs de traitement de télégrammes 1 0a et 10b et en triant les numéros d'ordre de manière à les foumir dans l'ordre normal. En outre, le processus de verrouillage est réalisé par l'enregistrement de données plutôt que par unité de table, I'exécution en parallèle d'un procédé (programme d'application) étant rendue possible en donnant accès à des enregistrements de données autres que les enregistrements de données identifiés par "Aa(i)" et "Bc(vi)".Dans ce qui précède, le numéro d'ordre n'a pas nécessairement la forme d'une donnée numérique, mais peut avoir une forme de caractère alphabétique.
En référence à la figure 7, la section autonome de contrôle de télégrammes 133 comporte une section 233 de détection de portion anormale pour détecter une portion anormale en enregistrant un nom de dispositif anormal, un numéro d'enregistrement anormal ou similaire, une section 333 de récupération de portion anormale pour exécuter un traitement d'autorécupération de la portion anormale, une section 433 de traitement de remise à jour pour exécuter un traitement de remise à jour après la récupération de la portion anormale, et une section 533 de détermination de la remise à jour pour déterminer si le traitement de remise à jour a réussi ou non.
L'autorécupération dans la section 333 de récupération de la portion anormale est réalisée par exemple de la manière suivante: En cas d'apparition d'une faute dans la section 14 de stockage de ressources, les données stockées sont remplacées par un journal de la section 17 d'acquisition du journal de manière à être restaurées dans l'état normal. Par contre, en cas d'erreur de programme, I'élimination de fautes ou similaire est exécutée pour la récupération. Ce traitement d'autorécupération et le traitement de remise à jour qui suit sont répétés jusqu'à ce que le traitement de mise à jour (mise à jour réelle) dans la section 13 de traitement de télégrammes se finisse normalement.
Un mode de fonctionnement sera maintenant décrit en référence à l'organigramme de la figure 8, dans lequel le dispositif de traitement de télégrammes 1 0a doit mettre à jour les ressources partagées.
A l'étape S200, on détermine si un télégramme, qui nécessite une mise à jour du fichier dans la section de stockage de ressources du propre dispositif de traitement ou d'un autre dispositif de traitement, est reçu ou non.