INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans l'appareil objet de l'invention, l'extrémité de la structure accélératrice et la cible sont ainsi intimement combinées dans le blindage requis (hors champ utile).
De préférence, dans la présente invention, la fréquence des micro-ondes appartient à la bande X qui va d'environ 9 GHz à environ 12 GHz.
Selon un mode de réalisation préféré de l'appareil objet de l'invention, permettant de réduire davantage le poids et l'encombrement de cet appareil, l'axe de la structure accélératrice linéaire est perpendiculaire à l'axe de rotation du support tournant et rencontre cet axe de rotation.
On obtient ainsi un appareil dans lequel les pertes de rayons X sont réduites et qui est plus léger et moins encombrant que les appareils connus de radiothérapie qui utilisent des moyens de déflexion magnétique du faisceau d'électrons pour envoyer celui-ci depuis la structure accélératrice jusqu'à une cible produisant les rayons X.
Selon un mode de réalisation préféré de l'appareil objet de l'invention, pour que cet appareil soit encore plus léger et plus compact, la structure accélératrice linéaire comprend un ensemble de cavité résonnantes actives et de cavités résonnantes de couplage qui sont toutes coaxiales, l'axe commun à ces cavités formant l'axe de la structure accélératrice.
On notera la réduction résultante des dimensions transversales de la structure accélératrice par rapport au cas où les cavités de couplage ne sont pas situées sur l'axe des cavités actives.
Selon un premier mode de réalisation particulier de l'appareil objet de l'invention, ledit élément faisant partie des moyens de protection inclut la cible, est métallique et comprend, d'un côté, un premier trou dont l'axe coïncide avec l'axe de la structure accélératrice, l'extrémité de cette structure accélératrice étant logée dans ce premier trou et la cible étant formée par le fond de ce premier trou, et de l'autre côté, un deuxième trou dont l'axe coïncide avec celui du premier trou, qui va en s'élargissant vers l'extérieur de l'élément et dont le fond est au voisinage de celui du premier trou.
Selon un deuxième mode de réalisation particulier, ledit élément est métallique mais n'inclut pas la cible et comprend, d'un côté, un premier trou dont l'axe coïncide avec l'axe de la structure accélératrice, l'extrémité de cette structure accélératrice étant logée dans ce premier trou et la cible se trouvant dans cette extrémité, et de l'autre côté, un deuxième trou dont l'axe coïncide avec celui du premier trou, qui va en s'élargissant vers l'extérieur de l'élément et dont le fond communique avec celui du premier trou.
Dans ce cas, la structure accélératrice comprend de préférence au moins une canalisation qui est placée à proximité de la cible et destinée à la circulation d'un fluide de refroidissement de cette cible.
La cible peut être placée dans cette canalisation.
Dans le cas d'un faisceau d'électrons de forte puissance, il est préférable de placer la cible dans le vide, à l'extrémité de la structure accélératrice où arrive le faisceau d'électrons.
Notamment avec les deux modes de réalisation particuliers ci-dessus, on dispose d'un moyen d'atténuation des rayons X produits par la cible, à proximité immédiate de cette cible, d'où une réduction importante de poids et d'encombrement par rapport aux appareils connus dans lesquels ce moyen d'atténuation est relativement éloigné de la cible productrice des rayons X.
L'élément peut comprendre un premier blindage à base de tungstène, qui entoure le fond du premier trou.
L'élément peut comprendre en outre un deuxième blindage en plomb, qui entoure le premier blindage.
De préférence, les moyens de protection vis-à-vis des rayons X comprennent aussi des moyens d'atténuation des rayons X du faisceau de traitement (ou faisceau de thérapie), qui sont montés sur le support tournant, à l'opposé des moyens de collimation par rapport à l'axe de rotation de ce support tournant.
L'appareil objet de l'invention peut comprendre en outre, comme l'appareil décrit dans le document (1), des moyens d'examen, par tomographie, du patient destiné à recevoir le faisceau de rayons X, ces moyens d'examen étant montés sur le support tournant.
En outre, selon une variante particulièrement préférée de l'invention, les oligosaccharides sulfatés lèvent partiellement l'inhibition de la contraction des fibroblastes engendrée par la présence d'hydrocortisone, composé bien connu pour ralentir in vivo la cicatrisation des tissus. La levée d'inhibition est améliorée d'au moins 10 % après deux jours aux doses appropriées, de préférence au moins 20 %, par rapport au témoin traité à l'hydrocortisone.
Les oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention sont également remarquables en ce qu'ils activent la prolifération in vitro des kératinocytes.
L'invention concerne également des mélanges d'oligosaccharides de galactanes sulfatés contenant au moins 30 % en poids, de préférence au moins 50 % en poids, des oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention.
Avantageusement, ces mélanges contiennent 60 % en poids des oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention.
L'invention a également pour objet des oligosaccharides de galactanes sulfatés ou mélanges d'oligosaccharides de galactanes sulfatés tels qu'ils ont été décrits précédemment en tant que principe actif pour leur application comme régénérant dermique et épidermique et comme agent cicatrisant.
Ces oligosaccharides de galactanes sulfatés sont appliqués sous la forme d'une composition à usage topique externe contenant ledit principe actif et un support approprié.
L'invention concerne en particulier l'application pharmaceutique des oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention et plus particulièrement une composition pharmaceutique à usage topique externe, notamment pour régénérer le derme et l'épiderme, contenant un oligosaccharide de galactane sulfaté selon l'invention et un support inerte.
L'invention concerne également l'application cosmétique des oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention et plus particulièrement une composition cosmétique à usage topique externe, notamment pour régénérer le derme et l'épiderme contenant un oligosaccharide de galactane selon l'invention et un support inerte.
Les oligosaccharides de galactanes sulfatés seront dans les compositions pharmaceutiques ou cosmétiques en quantité suffisante de façon à ce que les compositions appliquées sur la peau procurent un effet positif sur le derme et l'épiderme, en ce qui concerne la cicatrisation, l'élasticité, et en général la régénération de la peau.
Ces compositions sont par exemple des solutions de type lotion, des émulsions de consistance liquide ou semi-liquide de type lait, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse ou inversement ou de suspension ou émulsion de consistance molle du type crème ou gel. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles.
Parmi les véhicules utilisés de façon usuelle dans les formulations pour la peau mentionnées ci-dessus, on peut citer les tensio-actifs. les colorants, les parfums, les agents conservateurs, les émulsionnants, les véhicules liquides tels que l'eau, des corps gras tels que les huiles naturcllcs ou synthétiques destinées à constituer la phase grasse des laits ou des crèmes, des résines du type carboxylvinylique ou anhydride maléique neutralisées par des formules tertiaires et notamment par des aminoalcools tels que l'acryéthanolamine.
L'invention concerne également l'utilisation des oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention ou un mélange d'oligosaccharides de galactanes à titre de principe actif pour la préparation de compositions destinées à favoriser la régénération du derme.
Cette utilisation concerne notamment la préparation de compositions destinées à accélérer le processus de cicatrisation.
Les utilisations des oligosaccharides de galactanes selon l'invention sont sous la forme de compositions notamment cosmétiques ou pharmaceutiques pour usage topique externe.
L'invention concerne enfin un additif pour culture cellulaire constitué d'oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention.
L'invention est maintenant illustrée par les exemples suivants donnés à titre indicatif, sans qu'ils limitent de quelque manière la portée de l'invention.
On distingue principalement les carraghénanes suivants 1/ Kappa carraghénane . formé par une succession de 1,3-BD galactopyranose 1,4 sulfate, conformation C1 "unité KgA" et de l,4-aD 3-6 anhydro galactopyranose, conformation 1C "unité Ka".
2/ Lambda carraghénane : Suite alternée de 1,3-BD galactopyranose 2 sulfate, conformation C1 "unité Lg2" et de 1,4 D galactopyranose 2-6 disulfate conformation C1 "unité Lg 2,6".
3/ Iota carraghénane : Succession de D galactopyranose 4 sulfate, conformation Cl "unité IgA" et de 1,4-αD 3-6 anhydrogalactopyranose 2 sulfate conformation 1C "unité Ia2".
Il existe également deux précurseurs biologiques des carraghénanes sus-mentionnés : 4/ Mu carraghénane : Succession de 1,3-ssD galactopyranose 4 sulfate, conformation C1 "unité MgA" et de 1,4 D galactopyranose 6 sulfate conformation C1 "unité Nlg6".
Sous l'action d'une enzyme dans l'algue ou bien en milieu alcalin Mg6 b Ka : le Mu carraghénane est le précurseur du Kappa carraghénane.
5/ Nu carraghénane : Succession de 1,3-BD galactopyranose 4 sulfate, conformation C1 "unité Ng4" et de 1,4- D galactopyranose 2-6 sulfate conformation C1 "unité Ng2,6" Sous l'action d'une enzyme présente dans l'algue ou bien en milieu alcalin: Ng2,6 Ia2: le Nu carraghénane est le précurseur du Iota carraghénane.
Les galactanes de type agar sont formés d'un groupe polymères dont le squelette de base est une chaîne 1,3-ssD galactopyranose et l,4a L 3-6 anhydrogalactose. Ces unités se répétant régulièrement et alternativement.
Les différences à l'intérieur de la famille des agars sont dues à la présence ou non de groupes sulfatés, méthylés ou carboxyéthylés. Ces structures h-brides sont en général présentes en pourcentage variables suivant les espèces d'algues, la saison de récolte. Les agars selon l'invention ont au moins (?,5 équivalent sulfate par mole de saccharide.
Dans le cas des carraghénanes de types Kappa, le tau de sulfatation est de 0,5 équivalent sulfate/mole de saccharide et dans le cas des carraghénanes Iota, le taux de sulfatation est de 1 équivalent sulfate/mole de saccharide.
Dans les cas des galactanes de type agar dont sont issus les oligosaccharides selon l'invention, le taux de sulfatation varie de 0,5 équivalent sulfate/mole de saccharide à 3 sulfate/mole.
Les terminaisons chimiques des oligosaccharides selon l'invention sont différentes selon le procédé qui a permis de les obtenir par hydrolyse des polysaccharides correspondants.
On sait en effet qu'il existe deux types principaux de procédé de dépolymérisation des polysaccharides conduisant aux oligosaccharides selon l'invention Bellion et al., ont décrit la dépolymérisation enzymatique des carraghénanes issues de Eucheuma spinosum et Eucheuma Cottonii à l'aide de iota-carraghénases et kappa-carraghénases issues de bactéries marines (Can.
J. Microbiol. 28(7), 874-80. Ces auteurs ont montré que l'hydrolyse enzymatique se passait au niveau de la liaison fr( F 4) et les oligomères ont donc la terminaison:
L'hydrolyse chimique a notamment été étudiée par Stortz et al., Carbohydr. Res., 166 (1987), 317-23, Stevenson et al., Carbohydr. Res. 210 (1991) 277-298 et USOV Hydrobiologia 260/261 (1993) 641-645. et il est probable que l'hydrolyse chimique agisse par la liaison 1 3.
Les études effectuées par la société déposante montrent que les oligosaccharides de galactanes sulfatés selon l'invention, qu'ils soient obtenus par dépolymérisation chimique ou enzymatique, présentent une activité remarquable, et en conséquence, l'invention n'est pas limitée à des oligosaccharides de galactanes sulfatés présentant une terminaison particulière.
Les terminaisons peuvent être des anhydrogalactose-2-sulfate, et plus précisément anhydrogalactitol-2-sulfate (hydrolyse chimique) ou des galactose-4 sulfate (hydrolyse enzymatique).
Exemple 1 - Prévaration des olinosaccharides 1. Production de carraghénase La bactérie marine ATCC 43554 a été cultivée en fermenteur de 15 litres dans le milieu salin ATCC n 1576 contenant 25 g/l de chlorure de sodium, 2,5 g/l de peptone de caséine et 2,5 g/l de iota-carraghénane. Le milieu a été inoculé avec 0,3 1 d'une culture effectuée en erlenmeer (proportion d'innoculum : 2 %). La turbidité du milieu augmente au cours de la fermentation de 0,0 à 0,4 (absorbance à 600 nm du milieu dilué au 1/10). La température est maintenue à 22;C, le pH reste compris entre 7,2 et 6,8 pendant la fermentation, qui dure 8 heures.
Après la fermentation, le milieu a été centrifugé (7500 t/min, 20 min), puis concentré par ultrafiltration (seuil de coupure : 10 000) et diafiltré à l'aide de tampon phosphate de sodium pH 8, 25 mbI contenant NaCl 0,1 SI. Le volume final de la préparation de carraghénase était de 1 litre.
Cette préparation contient 15 000 U de iota carraghénase et 300 mg de protéines (activité déterminée par dosage des sucres réducteurs à l'aide de ferricyanure et mesure d'absorbance à 267 nm).
2. Hydrolyse de iota-carraghénase La réaction d'hydrolyse de iota-carraghénase a été effectuée à pH 8, 40C dans le milieu suivant: volume 1,21 - Iota-carraghénase 10 g - Solution de carraghénase 0,6 1 - NaCl 0,1 NI - Tampon phosphate de sodium pH8 50 mol.
La réaction a été poursuivie pendant 100 heures. Le pouvoir réducteur (dosage DNS) varie de 0,1 à 0,4 g/l (équivalent glucose). Les polysaccharides ont alors été précipités à l'aide d'éthanol 66 % (v/v). Le précipité a été redissout dans l'eau et soumis à nouveau à l'hydrolyse (volume : 0,8 1) à l'aide de 0,3 1 de solution de carraghénase.
Ensuite, cette solution a également été traitée par précipitation à l'éthanol. Les surnageants de centrifugation ont alors été concentrés sous pression réduite, ce qui a permis d'obtenir les oligosaccharides en solution aqueuse (volume 200 ml).
3. Purification des oligocarraghénanes La solution a été diluée (1/2), puis acidifiée à pH 2,5 et mise au contact de charbon actif (2,5 g/l), puis filtrée sur papier et membrane de porosité 0,2 rm. Elle a été appliquée à une colonne de Sephadex G 10 (volume 1 1) par fractions de 100 ml. L'éluant est de l'acide chlorhydrique (pH 2,5).
L'élution dure 4 heures. Les oligosaccharides sont élués avant les sels.
Les fractions contenant les oligosaccharides ont été mélangées et le pH a été ajusté à 6 avec de la soude. La solution ainsi obtenue a été ultrafiltrée sur une membrane de seuil de coupure de 10 000, puis concentrée sous pression réduite, filtrée sur membrane de porosité 0,2 ,um et enfin lyophilisée.
4. Caractérisation de la préparation d'oliyocarrarhénanes Le lyophilisat obtenu a une masse de 6,1 g et se présente sous la forme d'une poudre beige. La poudre a été caractérisée par HPLC, par des dosages colorimétriques, et par des mesures physicochimiques, dont les résultats sont indiqués ci-dessous Teneur en eau 10% (Karl Fischer) e Propriétés d'une solution aqueuse pH (50 g/l) 5,7 conductivité (5 g/l) 2,3 mS/cm solubilité dans l'eau h 10 g/I (solution opalescente) Teneur en chlorures 3 % (dosage colorimétrique Sigma) Composition chimique: - Oligocarraghénanes totaux: 55 % dont: - oligocarraghénane tetrasaccharide 36 % - oligocarraghénane hexasaccharide 18% - oligocarraghénane octasaccharide 1 % - Chlorure de sodium: 35 % -Eau: 10% Analvse microbiologique termes totaux): s 200/g Exemole 2 : Activité biologique sur kératinocvte Cette étude a été effectuée avec des concentrations d'oligosaccharides obtenus selon l'exemple 1 de 10, 25 et 50 Fg/ml.
La profifération cellulaire est appréciée par le nombre de cellules vivantes présentes en fin d'essai, évalué par un test colorimétrique au MTT (test de viabilité cellulaire basé sur l'activité de la succinyldeshydrogénase mitrochondriale).
Protocole expérimental Des kératinocytes humains, issus de peau de prépuce de nouveau nés, sont cultivés dans du milieu de culture sans sérum (KGM + 0,4 % BPE, Clonetics) en atmosphère humide air - CO2 (95 % - 5 %) à 37OC dans des flacons de 75 cm2 (NUNC).
Avant d'atteindre la confluence, les cellules sont détachées de leur support par trypsinisation et mises en suspension dans du milieu KGM (Keratinocyte Growth Medium) supplémenté en BP (Bovine Pituitary Extract).
Après numération à la cellule de Nialassez, la suspension cellulaire est diluée de manière à ensemencer environ 10 000 cellules par puits dans chaque puits d'une microplaque (J-1).
24 heures après l'ensemencement, le milieu de culture est éliminé et remplacé soit par du milieu neuf (lot témoin) soit par du milieu contenant le produit à l'étude (lots traités). 4 concentrations ont été étudiées : 10, 25, 50 et 100 Fg/ml.
Parallèlement au traitement des microplaques, la révélation d'une plaque ensemencée avec la même suspension cellulaire à J-1 est effectuée à l'aide d'un test au MTT afin de déterminer la concentration cellulaire à JO (début des traitements), compte tenu de la relation linéaire qui existe entre la densité optique mesurée et le nombre de cellules ensemencées.
Le poids d'une molécule de saccharide est d'environ 250, poids qui peut varier selon le degré de sulfatation du polysaccharide. Ainsi, dans le cas de oligosaccharides de galactanes sulfatés présentant 2 à 20 unités saccharidiques, le poids moyen d'une unité saccharidique étant d'environ 250, la masse molaire est comprise entre environ 500 et 5000.
On a trouvé qu'il était très avantageux, en raison de leurs propriétés biologiques remarquables vis-a-vis de la peau, de mettre en oeuvre des oligosaccharides de galactanes sulfatés présentant 2 à 10 unités saccharidiques.
De préférence, encore, les oligosaccharides de galactanes sulfatés présentent un taux de sulfatation moyen d'au moins 0,7 sulfate par unité saccharidique lorsqu'ils sont sous forme de mélange.
On donne ci-après une liste d'oligosaccharides selon la présente invention qui présente un intérêt remarquable dans le cadre de l'application par voie topique externe: (Ig4 - Ia2)n n = 1 à 5, de préférence 2 2 (IgA - Ia2)2 (Ig - Ia2)3 (Kg4 - Ka2), n = 1 à 5, de préférence 2 2 (Kg4 - Ka2)2 (Kg4 - Ka2)3.
Selon un mode préféré de réalisation, les fragments de galactanes sulfatés selon l'invention proviennent de carraghénanes et de préférence encore de iota-carraghénane.
L'invention a encore pour objet selon une variante particulière prise ou non en combinaison avec une ou plusieurs des variantes mentionnées ci-dessus, des oligosaccharides de galactanes sulfatés tels qu'ils peuvent être obtenus par dépolymérisation chimique ou enzymatique de carraghénane ou d'agar, de préférence de carraghénane iota.
Comme cela a été mentionné ci-dessus, il existe deux procédés principaux pour hydrolyser les carraghénanes ou les agars, à savoir les procédés chimiques et les procédés enzymatiques.
De façon générale, le procédé enzymatique consiste à dépolyménser en présence d'une carraghénase ou d'une agarase appropriée comme décrit par exemple par Bellion et al. (1982). Dans le cas de la iotacarraghénase décrite par Bellion, l'enzyme ne supporte pas la lyophilisation ni la congélation (Greer et al., Can.J. blicrobiol. 30(12)1500-6(1984). On a par ailleurs déterminé sa masse molaire qui est de 57 000, son activité maximale est à pH 8 et à 40 C. Les produits majeurs de l'hydrolyse du iota-carraghénane sont constitués par les oligosaccharides de galactanes sulfatés présentant 4 à 6 unités saccharidiques. Ceci présente un avantage pour la dépolymérisation contrôlée de carraghénane dont un souci doit être d'éviter la formation d'oligosaccharides de très faible degré de polymérisation (1 à 2 unités saccharidiques).
On sait également purifier les kappa-carraghénases à partir d'un mélange de carraghénases extra-cellulaires produites par la bactérie Cytophaga species, Sarwar et al., Nlicrobiol. Immunol., 31(9), 869-77 (1987) et Potin et al., Eur. J. Biochem., 201(1), 241-7 (1991). L'enzyme étudiée dans ce dernier cas est une kappa-carraghénase produite par une bactérie proche du genre Cytophaga, mais non identifiée jusqu'à présent. Cette enzyme n'est pas thermostable (dénaturation à 40-C). Sa masse molaire est de 40 000. Elle produit du kappa-néocarratétraose sulfate et du kappa-néocarrahexaose sulfate contrairement à la kappa-carraghénase de Pseudomonas carrageenovora qui produit essentiellement du néocarrabiose sulfate.
Cette souche de Cytophaga a été isolée d'une algue en décomposition, sur un milieu solidifié avec du iota-carraghénane. Si la souche est cultivée en présence d'agar, une agarase est excrétée dans le milieu de fermentation.
La production d'oligosaccharides de carraghénane par voie enzymatique comprend de façon générale les étapes suivantes - Production de carraghénase par fermentation d'un microorganisme, - Dépolymérisation du carraghénane par la carraghénase, - Extraction et purification des oligosaccharides obtenus.
A titre d'exemple, les hydrolyses décrites par Potin et au.,(1991) ont été effectuées en présence de 0,2 U de carraghénase par mg de polysaccharide pendant 6 h. Dans ces conditions, il faut environ 200 000 U de carraghénase pour hydrolyser 1 kg de carraghénane.
L'extraction et la purification des oligosacchandes de galactanes sulfatés obtenus s'effectuent de manière connue par extraction hydroalcoolique ou par chromatographie.
Dans le cas des oligosaccharides de galactanes sulfatés obtenus à partir d'agars, on met en contact selon la procédure indiquée ci-dessus une agarase appropriée à dépolymériser le polysaccharide, comme ceci est décrit par Bhattacharjee et al. narine Algae in Pharmaceutical Sciences ed. by Hoppe, Levant, Tanaka, Walter de Gruyter - Berlin et New York p. 645-655 (1979).
Selon une autre variante de l'invention, les fragments de galactanes sulfatés sont tels qu'ils stimulent in vitro la contraction des dermes équivalents, provoquée par les fibroblastes, aux doses appropriées lorsqu'ils sont utilisés dans le test suivant Les fibroblastes répartis uniformément dans une matrice à trois dimensions de collagène contractent le réseau matriciel. Une réduction progressive du diamètre des dermes artificiels est observée. Le pouvoir contractile des fibroblastes est évalué par la mesure quotidienne de la surface occupée par les dermes à l'aide d'un analyseur d'image.
Selon l'invention, les oligosaccharides de galactanes sulfatés sont tels qu'ils provoquent une augmentation du pouvoir contractile des fibroblastes d'au moins 10 %, de préférence au moins 20 % pour une quantité appropriée, notamment de 100 crg/ml par rapport au témoin qui ne contient pas d'oligosaccharide.
Si un tel mode opératoire est employé, la durée de la réaction est réduite à moins d'une heure, voire quelques dizaines de minutes.
II est par ailleurs à noter que selon ce mode particulier l'agitation du mélange réactionnel peut devenir superflue.
Dans le cas où un catalyseur est utilisé, on effectue une étape de neutralisation dudit mélange, à l'issue de la réaction. Cette opération est effectuée au moyen d'un acide, de préférence minéral, comme l'acide chlorhydrique, I'acide sulfurique notamment.
En outre, il peut être approprié de filtrer le mélange réactionnel pour le débarrasser d'éventuels solides, comme par exemple de la mousse non dissoute, du bois, du tissu pouvant être apportés avec la mousse à l'origine, en fonction de rapplication antérieure de celleci.
Cette opération peut être réalisée en présence d'un solvant tel que les alcools par exemples. Tous les alcools peuvent convenir mais on utilise de préférence des alcools dont le point d'ébullition n'est pas trop élevé, de façon à ne pas compliquer rétape ultérieure d'élimination dudit solvant, par distillation, par exemple.
Ainsi, le méthanol, I'éthanol, Acétone conviennent particulièrement à la mise en oeuvre de filtration éventuelle du mélange réactionnel.
II est à noter que la filtration peut être effectuée préalablement à l'étape de neutralisation du mélange réactionnel.
La présente invention a de même pour objet une composition susceptible d'être obtenue par le procédé décrit ci-dessus. Par conséquent, tout ce qui a été dit précédemment à propos des différentes étapes de la réaction d'une mousse de polyuréthanne avec au moins un polyol reste valable et ne sera pas repris ici.