INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Ici, et comme cela a déjà été signalé, il n'est pas nécessaire d'échantillonner effectivement le signal s(t) pour chacune de ces n suites d'échantillons. En effet, du fait que le théorème de Shannon est respecté pour l'échantillonnage pour la suite d'instants t1, t2 ... ... et tn (26) toute l'information du signal s(t) se retrouve dans la suite (23) des échantillons correspondants, et les n suites (251), (252) ... et (25n) correspondant aux n signaux échantillonnés sont ici calculées par interpolation à partir du signal mesuré échantillonné représenté par la suite (23).
La projection mathématique de chacun des n signaux échantillonnés (251), (252)... et (25n) est faite en utilisant, par exemple, la formule (22).
L'énergie projetée de chacun des n signaux (251), (252)...
Le rotor 4 peut coulisser longitudinalement le long de l'axe de l'arbre primaire 1, qui comporte des cannelures 62, ce qui a pour effet de le rendre solidaire en rotation de l'arbre primaire 1.
Lorsqu'on éloigne ou que l'on rapproche le rotor 4 de l'arbre secondaire 2, les galets 46 et 47 sont guidés soit par les chemins de roulement 51a et 52a, soit par les chemins de roulement 51b et 52b qui ont une forme différente.
La forme des chemins de roulement conditionnant les paramètres de fonctionnement de l'accouplement, il est possible de modifier ces paramètres simplement en modifiant la position de la fourchette de commande 61, ce qui peut être fait même lorsque l'arbre moteur 1 est en rotation. L'homme de l'art peut calculer la forme de différents chemins de roulement pour que l'accouplement s'embraye différemment selon la vitesse et le couple des arbres primaires et secondaires, et que la loi de fonctionnement de l'accouplement corresponde par exemple soit à un fonctionnement du moteur à la puissance maximale, soit à son fonctionnement dans les conditions les plus économes en énergie, soit encore par exemple à son fonctionnement à un régime auquel le couple est maximal. Dans l'application à l'automobile, cela peut correspondre par exemple à la circulation par temps sec ou de pluie ou de verglas.
Dans une disposition préférée, les chemins de roulement Sla et 51b, de même que les chemins de roulement 52a et 52b sont reliés par des surfaces de liaison progressives, de qui facilite le passage du galet d'un chemin de roulement à l'autre (non représenté). Il est également préférable que la surface de roulement des galets ait une section courbe, afin de faciliter ce passage.
Au lieu de prévoir plusieurs chemins de roulement différents, l'on peut aussi dessiner l'ensemble comme une infinité de chemins de roulement différents, la trajectoire des galets 46 et 47 variant en continu en fonction de la position linéaire du rotor 4 sur l'arbre primaire.
Le dessin d'un couple quelconque de chemins de roulement intérieur et extérieur peut comporter deux cycles par tour, comme cela est représenté, ou un seul ou encore un nombre plus important de cycles par tour, l'homme de l'art choisissant ce nombre de cycles en fonction de la place dont il dispose pour installer le dispositif, de la puissance du moteur, et de la résistance des matériaux qu'il peut utiliser.
Dans une version plus évoluée du dispositif, illustré par les figures 16, 17 et 18 qui sont des schémas de fonctionnement, le dispositif comporte trois groupes de chemins de roulement - un élément 50 dit élément de marche avant comportant un ou plusieurs couples de chemins de roulement, relié directement à l'arbre secondaire, permettant l'entraînement de l'arbre secondaire dans le même sens de rotation que l'arbre primaire (comme décrit précédemment), - un élément 56 dit élément de point mort comportant un chemin de roulement en forme de cylindre dont l'axe est confondu avec celui du système, correspondant au point mort (comme décrit précédemment), - un élément 53 dit élément de marche arrière comportant un ou plusieurs couples chemins de roulement, relié à l'arbre secondaire par l'intermédiaire d'un jeu d'engrenages de type connu (non représenté), permettant l'entraînement de l'arbre secondaire dans le sens de rotation opposé à celui de l'arbre primaire.
Dans une variante, non représentée, les cannelures de l'arbre primaire et du rotor 4 associé audit arbre primaire 1, permettant à l'arbre primaire d'entraîner ladite partie coulissante en rotation, sont hélicoïdales. Lorsque le couple auquel est soumis l'accouplement tend à faire accélérer l'arbre secondaire, le support des galets se déplace longitudinalement vers l'arbre secondaire.
Cependant, cette mesure de l'absorption vers 215 nm présente l'inconvénient d'être peu sensible, et de ne pas être spécifique, car des solvants ainsi que des ions organiques ou inorganiques sont également détectés.
Il existe des méthodes permettant de détecter spécifiquement les peptides, par une réaction chimique (dérivatisation en ligne ) à la sortie de la colonne de chromatographie. Cette méthode présente l'avantage d'augmenter la sensibilité de la détection, mais en alourdit la mise en oeuvre, et en outre modifie irréversiblement le peptide ; cette modification peut en particu lier avoir des conséquences importantes sur ces propriétés fonctionnelles (par exemple son antigénicité).
Les problèmes exposés ci-dessus dans le cas des peptides se posent également pour la détection d'autres molécules d'intérêt etc... En effet, de nombreuses substances, telles que les sucres, les polyosides, les stéroïdes, ou bien ne présentent pas d'absorption spécifique à une longueur d'onde déterminée en W, ou bien ne présentent qu'une absorption faible, ce qui nuit à la sensibilité de la détection.
On est alors amené à détecter, par un moyen physique ou chimique approprié, la présence de la molécule recherchée dans chaque fraction issue de la chromatographie, ce qui bien évidemment prend beaucoup de temps bien en outre, cette analyse est souvent destructive de l'analyte concerné.
La présente Invention a pour but l'obtention de conjugués, faciles à synthétiser et à purifier, de molécules d'intérêt avec un monomère de PCE. Dans ce but, les Inventeurs ont préparé des conjugués possédant des propriétés que ni la molécule d'intérêt, ni le monomère de PCE ne possèdent naturellement.
Dans ces conjugués, la molécule d'intérêt et le monomère de PCE sont reliés par l'intermédiaire d'une chaîne oligonucléotidique, faisant office de bras espaceur entre le monomère de PCE groupe et la molécule d'intérêt considérée.
La présente invention a pour objet une macromolécule de formule (I) suivante P-O-M (I) dans laquelle M représente une molécule d'intérêt O représente une chaîne oligonucléotidique P représente un monomère d'un polymère conducteur électronique.
Au sens de la présente invention on entend par molécule d'intérêt , toute molécule présentant une fonctionnalité utile dans des réactions sur support solide, par exemple des réactions de synthèse, ou de détection directe ou indirecte. Cette molécule d'intérêt peut être, par exemple, sans que cette liste soit limitative, une biomolécule, telle qu'une protéine (en particulier une enzyme) un acide aminé, un peptide, un glycopeptide, un lipide, un astéroïde, un glycolipide, un sucre, un polysaccharide, une molécule capable de générer, directement ou indirectement, un signal, ou bien une molécule complexe, multifonctionnelle ; etc.
Avantageusement, cette molécule d'intérêt constitue l'un des membres d'un couple d'affinité, il peut s'agir par exemple de la biotine, ou d'un peptide potentiellement antigénique, etc.
Ppeut par exemple être un monomère de polyacétylène, de polyazine, de poly(p-phénylène), de poly(pphénylène vinylène), de polypyrène, de polypyrrole, de polythiophène, de polyfuranne, de polysélénophène, de polypyridazine, de polycarbazole, de polyaniline, etc.
Avantageusement, P est un groupe pyrrole.
La chaîne oligonucléotidique Opeut être constituée d'un oligonucléotide simple-brin, ou d'un oligonucléotide double-brin sur au moins une partie de sa longueur. Dans le deuxième cas, l'un des brins est fixé de manière covalente au monomère P, et l'autre brin est fixé de manière covalente à la molécule d'intérêt M.
De façon théorique il n'y a pas de limitation dans la nature ou la longueur de l'oligonucléotide avantageusement, la chaîne oligonucléotidique aura une longueur comprise entre 6 et 60, préférentiellement entre 10 et 30 nucléotides. Avantageusement le pourcentage en (G+C) de l'oligonucléotide O est inférieur ou égal à 70t, et de préférence inférieur ou égal à 50W.
La fixation de l'oligonucléotide O sur le monomère de PCE peut être effectuée comme décrit dans la demande PCT WO 94/22889. La fixation de la molécule d'intérêt M sur ltoligonucléotide O peut être effectuée par différents procédés, connus en eux-même, permettant de lier un oligonucléotide à une autre molécule. Le choix du procédé le plus approprié dépend essentiellement de la nature de la molécule d'intérêt M.
Par exemple, l'oligonucléotide O peut être activé par fixation d'un ester de N-hydroxy-succinimide d'acide aminé, d'un groupe SH [ARAR et al., Bioconjugate Chem. 6, p. 573-577, (1995)], ou d'un groupe maléimide.
La présente invention a également pour objet un procédé de préparation d'une macromolécule P-O-M telle que définie ci-dessus, à partir d'un mélange comprenant ladite macromolécule ainsi que les réactifs P-O et M à partir desquels elle a été formée, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend au moins une étape au cours de laquelle on procède au fractionnement dudit mélange, par tous moyens permettant de séparer les fractions comprenant respectivement M et P-O-M, de la fraction comprenant P-O, et une étape au cours de laquelle l'on procède à la détection de la fraction comprenant P-O-M, et/ou à la détermination de la quantité de P-O-M par détection et/ou mesure d'un paramètre associé à l'oligonucléotide O et non-associé à la molécule d'intérêt M.
L'ensemencement a lieu par un repiquage de la microplaque (B) vers la microplaque (A), il se réalise ainsi une dilution au 1/100 de l'inoculum la microplaque A contenant alors 106 germes par ml, peut être mise à l'étuve 24 h à 32"C.
La lecture de la plus grande dilution donnant lieu à une clarté identique au témoin stérilité du milieu, constitue la concentration minimale inhibitrice ou CMI.
Etude de l'association - n-octanoyl-glycine - Zn SO 4 Des solutions-mères à 2 fois la C > ll sont réalisées (comme précédemment décrit).
La méthode de l'échiquier réalisée sur microplaque est utilisée pour croiser les séries de dilutions au demi de chaque actif.
Après ensemencement et incubation à 32"C, la lecture des CMI est réalisée.
Un repérage des CMI donnant lieu à une synergie, et une additivité peut alors se faire.
Nous obtenons après calcul des FiC Index le tableau suivant
CMI Produits Seuls Associés FiC FiC Index Zn SO 4 0,15 0,03 0,20 0,70 n octanoyl glycine 0,25 0,125 0,5 Le calcul des FiC Index des produits est la somme FiC des rapports (FiC A + FiC B).
Le FiC d'un produit A est défini comme suit: CMI du produit A en association FiC A = CMI du produit A seul L'association de deux produits A et B est synergique si le FiC Index est inférieur ou égal à 0,75. Plus la valeur FiC est faible, plus la synergie est importante.
On considère qu'il y a simple additivité pour des valeurs de FiC comprises entre 0,75 et 1,1 et indifférence dans l'intervalle compris entre 1,1 et 2. Audelà, l'association est antagoniste.
Les efficacités bactéricides de formules avec et sans actif ont été déterminées sur St.aureus ATCC 9144 pour un temps de contact de 2 et 5 minutes (selon le protocole décrit à la Pharmacopée Française).
Les produits ont été testés purs (à 90%) eà 50% et à 23%.
Les résultats exprimés en chute logarithmique du nombre de germes montrent que le produit pur dès cinq minutes de contact, a une activité antiseptique (réduction logarithmique supérieure à 5).
D'une manière générale, le produit met 1'24 pour réduire la population microbienne de 1 Log 10 (= D Value = 1'24).
Le tableau suivant nous permet de résumer les cinétiques d'efficacité d'une formulation à base de n-octanoylglycine et de sulfate de zinc.
D. Value sur Staureus 6538 P
(COC1)2 T. Fujisawa et al., Chem. Lett.,1982, 1891.
POC13 H. Bredereck, K. Bredereck, Chem.
Ber., 94, 1961, 2278.
Généralement, on part de quantités stoechiométriques d'urées tétrasubstituées et de composés chlorés électrophiles et on opère en présence d'un solvant tel que le tétrachlorure de carbone dans le cas du chlorure d'oxalyle, soit sans solvant avec le phosgène ou le chlorure de thionyle, à une température généralement de OOC à 400C, et en atmosphère anhydre pour éviter toute hydrolyse.
Avantageusement, on choisit les urées tétrasubstituées parmi la tétraméthylurée, la tétraéthylurée, la tétra n-propylurée et la tétra nbutylurée.
Les chlorures de chloroformamidinium (H) sont mis généralement dans un solvant tel que le toluène ou l'acétonitrile. Leurs réactions avec les résines à fonction amine primaire (A) sont effectuées en présence d'une base, de préférence en présence d'un excès de base.
Si la base est la triéthylamine (TEA), on opère généralement avec un excès molaire de TEA de 10 à 50% par rapport aux chlorures de chloroformamidinium (H). Ces derniers sont généralement en excès molaire de 10 à 100% par rapport au nombre de moles de fonction amine primaire, pour transformer la totalité de ces dernières en fonction guanidine.
20 Dans la formule générale (I) le groupe B est un radical de formule (D) (a) On commence par préparer une résine de formule générale (J) comme au point 10 a) ci-dessus, L représentant un radical -(CH2)n-, n entier valant 1, 3 à 9 et X étant un chlore ou un brome.
(b) La résine halogénée ci-dessus est mise en réaction avec du 1,5,7-triaza-bicyclo [4.4.0] déc-5-ène (TBD), d'une manière analogue au procédé de M. Tomoi et al, J.M.S.
Pure Appl. Chem. A29(3), 1992, 249-261, en particulier page 251 (" Preparation of Polystyrene-Supported TBD).
On obtient ainsi une résine PS-DVB fonctionnalisée par un groupe guanidine bicyclique de formule générale (I.D.)
L représentant un radical -(CH2)n- avec n entier valant 1, 3 à 9.
Le procédé de Tomoi et al, J. Macromol. Sci. Pure Appl. Chem. A29(3) 1992, 249-261, consiste à faire réagir le sel de lithium du TBD sur une résine chlorométhylée.
Un mode opératoire simplifié a été étudié dans le cadre de la présente invention pour préparer des quantités plus importante de résines à fonction -TBD en faisant réagir directement le 1,5,7-triaza-bicyclo [4.4.0] déc-5-ène en excès sur de la résine PS-DVB chlorométhylée dans du THF anhydre comme solvant.
L'efficacité catalytique des résines utilisées dans la présente invention se trouve améliorée lorsqu'on les utilise sèches.
La présente invention sera mieux comprise grâce à la partie expérimentale ci-après, qui comprend notamment une description de l'appareillage utilisé, ce dernier étant schématiquement représenté sur la figure unique annexée.
En effet, le liquide, entre le moment où il est mis en place dans le réservoir du dispositif, et le moment où il est distribué, c'est-à-dire pendant la période de stockage, a tendance à s'évaporer, ou peut être contaminé par des agents extérieurs tels que des bactéries, ou être oxydé par de l'oxygène. Dans le cas de certains médicaments, ceci peut entraîner une perte totale de son efficacité.
Pour résoudre ce problème, deux types de systèmes ont principalement été utilisés: Un premier type de dispositif comprend un réservoir dont l'ouverture est obturée par une membrane, ladite membrane étant percée ou déchirée par un dispositif approprié au moment de l'actionnement du dispositif. De tels systèmes sont notamment décrits dans les documents EP-O 407 276 et US-4 017 007. L'inconvénient de ces dispositifs à membrane réside dans le fait que la membrane doit être appliquée sur l'ouverture du récipient avec soin, ce qui nécessite une étape de montage relativement complexe après que le réservoir ait été rempli. Ainsi, le produit liquide contenu dans le réservoir est exposé à une contamination possible pendant le temps requis pour appliquer ladite membrane.
Dans un second type de système, un élément en caoutchouc, utilisé en tant que piston de pompe est percé au moment de l'actionnement du distributeur par une aiguille qui est reliée à la sortie de pulvérisation du distributeur. Un tel système est décrit dans le document FR-2 684 304. Dans ce type de système, qui résout le problème de la membrane, la dimension du piston doit être telle qu'il puisse coulisser relativement facilement dans le réservoir. En d'autre termes, l'interférence entre le piston et le réservoir, c'est-à-dire la pression exercée par le piston contre les parois du réservoir, et par conséquent la surface de contact entre ces deux éléments, doivent être aussi faibles que possible afin d'éviter des problèmes de frottement lors de l'actionnement du distributeur, ainsi que pour minimiser la force nécessaire à l'actionnement du distributeur.
Cette caractéristique de faible interférence entraîne une protection limitée contre l'évaporation dans certaines conditions, telles que par exemple avec des températures de stockage élevées, et peut également autoriser une contamination du produit, par exemple par pénétration d'oxygène.
La présente invention a pour but de fournir un dispositif de distribution d'un produit fluide qui ne reproduit pas les inconvénients précités.
Ainsi, la présente invention a pour but de fournir un dispositif de distribution de produit fluide qui assure simultanément une fermeture efficace et hermétique du réservoir de produit et qui comporte un piston qui peut facilement coulisser dans ledit réservoir pour assurer un actionnement sûr, fiable et aisé du distributeur.
La présente invention a donc pour objet un dispositif de distribution d'un produit fluide contenu dans un réservoir pourvu d'une ouverture, ledit dispositif comportant un élément mobile entre une position de repos, où il obture l'ouverture dudit réservoir, et une position d'actionnement, des moyens pour relier l'intérieur du réservoir à un canal d'expulsion du produit, et un organe d'actionnement pour déplacer ledit élément vers sa position d'actionnement, ledit élément coulissant de manière étanche dans ledit réservoir de sorte que le produit est expulsé à travers ledit canal d'expulsion, caractérisé en ce que ledit élément comporte des moyens d'étanchéité qui, dans la position de repos du élément, coopèrent avec celui-ci pour augmenter l'interférence entre l'élément et le réservoir garantissant ainsi une fermeture totalement hermétique du réservoir, ledit organe d'actionnement comportant des moyens pour déplacer lesdits moyens d'étanchéité et ainsi diminuer l'interférence entre l'élément et le réservoir, de sorte que l'élément se déplace dans le réservoir vers sa position d'actionnement avec un faible frottement.
Ainsi, l'élément agit, dans sa position de repos, en tant que bouchon qui obture hermétiquement le réservoir, et, lorsqu'il se déplace vers sa position d'actionnement, agit en tant que piston pour expulser le produit contenu dans le réservoir.
Avantageusement, L'organe d'actionnement comporte des moyens pour solidariser l'élément et l'organe d'actionnement après déplacement des moyens d'étanchéité par lesdits moyens pour déplacer.
De préférence, ledit élément est sensiblement cylindrique et comporte un passage sensiblement cylindrique reliant l'intérieur du réservoir, sensiblement cylindrique, audit canal d'expulsion, lesdits moyens d'étanchéité comportant un organe d'obturation qui obture ledit passage de manière étanche dans la position de repos de l'élément, lesdits moyens pour déplacer ledit organe d'obturation étant adaptés à ouvrir ledit passage.
De préférence, ledit organe d'obturation a un diamètre supérieur à celui du passage de sorte que, dans la position de repos du bouchon, il comprime la surface latérale extérieure de l'élément contre les parois intérieures du réservoir, augmentant ainsi l'interférence entre l'élément et le réservoir dans ladite position de repos.
Avantageusement, ledit organe d'obturation est une bille qui est emmanchée à force dans le passage de l'élément après le remplissage du réservoir.
Avantageusement, ledit organe d'actionnement comporte une tige traversée par le canal d'expulsion, ladite tige pouvant coulisser de manière étanche dans le passage pour déplacer ledit organe d'obturation.
Avantageusement, I'extrémité de ladite tige déplace ledit organe d'obturation hors du passage dans le réservoir, qui comporte un évidement pour recevoir ledit organe d'obturation.
De préférence, ledit élément comporte en outre des moyens de blocage qui empêchent le déplacement de l'élément lorsqu'il est dans sa position de repos, ledit organe d'actionnement comportant en outre des moyens pour déplacer lesdits moyens de blocage.
Avantageusement, lesdits moyens de blocage comportent une bride annulaire qui, dans le position de repos de l'élément, coopère avec l'ouverture du réservoir pour empêcher le déplacement de l'élément dans le réservoir.
En particulier, les conditions de mise en oeuvre de ce procédé peuvent être les suivantes: 1) incubation du produit dans un mélange de méthanol/chloroforme (v/v) sous agitation pendant 24 h à 4"C + 2"C, 2) incubation du produit obtenu à l'issue de l'étape 1, dans une solution d'acide chlorhydrique (HCI) à 0,5 M, sous agitation pendant 48 h à 4 C + 2 C, 3) neutralisation du produit déminéralisé dans trois bains successifs de 2 heures dans une solution de bicarbonate de sodium (NaHCO3) 0,7Mou0,7Mà40C+20C, 4) dessiccation du produit obtenu jusqu'à obtention d'un taux résiduel d'eau libre inférieur ou égal à 9%, 5) stérilisation du produit obtenu à l'issue de l'étape 4) par chauffage en présence d'oxyde d'éthylène à une température comprise entre 50 et 52"C et de préférence d'environ 50"C pendant 48 h, 6) désorption de l'oxyde d'éthylène par chauffage à une température comprise entre 35 et 37"C, de préférence à une température d'environ 35"C pendant une durée suffisante pour obtenir un taux résiduel d'oxyde d'éthylène inférieur à 0,1 PPM.
La dessiccation dont question précédemment peut être réalisée par lyophilisation, en utilisant de l'alcool éthylique 90" (PC R), de la carboglace (CARBOXIQUE) et au moyen d'un microsublimateur (à titre d'exemple MSP 32-4).
L'étape de dégraissage est normalement précédée d'une étape de nettoyage du produit utilisé, en particulier lorsqu'il s'agit de tissu, par exemple d'un tissu conjonctif tel que le cartilage. En outre, on pourra le cas échéant effectuer un façonnage du matériel en pièces de dimensions déterminées, avant d'effectuer le traitement de décontamination.
Le cas échéant, et dans la mesure où l'effet virucide peut effectivement être ainsi obtenu, les solutions d'incubation du produit permettant le dégraissage puis la déminéralisation peuvent être modifiées par rapport aux exemples de solutions décrits ci-dessus.
A titre d'exemple, un alcool acyclique différent du méthanol peut être utilisé.
Le procédé de traitement de l'invention est particulièrement adapté pour traiter des produits d'origine humaine tels que des tissus, notamment des tissus conjonctifs comme le cartilage, des tissus fibreux, de la matière osseuse, des artères, des tendons, des enveloppes.
L'invention a également pour objet les produits à usage thérapeutique, d'origine humaine ou animale, obtenus après traitement selon le procédé décrit ci-dessus.
Avantageusement, l'invention concerne du cartilage traité selon le procédé ci-dessus décrit.
Des produits selon l'invention sont ainsi caractérisés en ce qu'ils sont dépourvus de particules virales infectieuses ou de virus de type VIH et/ou HTLV et/ou des virus de l'hépatite et/ou des herpesvirus.
La validation du procédé de l'invention destinée à démontrer son efficacité en tant que méthode d'inactivation et/ou d'élimination de virus ou de particules virales infectieuses a été réalisée sur différentes souches virales, et en particulier sur le virus VIH-I, le virus de la pseudorage porcine (PSR) et le virus simien SV40.
Les résultats rapportés ci-après démontrent que le procédé selon l'invention inactive et/ou élimine efficacement les virus en question dans du matériel d'origine humaine, et par exemple dans du cartilage.