INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
P 3803); la phase aqueuse est collectée et un volume d'eau distillée stérile est ajouté à la phase organique pour réextraire le matériel nucléique résiduel. Les phases aqueuses collectées sont regroupées et les acides nucléiques contenus sont précipités par addition d'acétate de sodium 3M, pH 5,2 au 1/10 de volume + 2 volumes d'éthanol + 1b1 de glycogène (Boehringer-Mannheim ref. 901 393) et mise à -200C de l'échantillon pendant 4h ou la nuit à +4"C. Le précipité obtenu après centrifugation est ensuite lavé avec de l'éthanol à 70% et resuspendu dans 60 ml d'eau distillée. Les produits de cette réaction ont ensuite été purifiés, clonés et séquencés selon les protocole décrit ci-après: des ADN bouts francs avec des adénines non-appariées aux extrémitées ont été générés: une réaction de "remplissage" a d'abord été effectuée: 25 1 de la solution d'ADN précédemment purifiée ont été mélangés avec 2 1 d'une solution 2.5 mM contenant, en quantité equimolaire, dATP + dGTP + dTTP + dCTP / 1 l d'ADN polymérase T4 (Boehringer-Mannheim ref. 1004 786) / 5 l de 10X "incubation buffer for restriction enzyme" (Boehringer-Mannheim ref. 1417 975) / 1 p1 d'une solution à 1% de sérum-albumine bovine / 16 1 d'eau distillée stérile.Ce mélange a été incubé 20 minutes à lloC. 50 1 de tampon TE et 1p1 de glycogène (Boehringer-Mannheim ref.
901 393) y ont été ajoutés avant extraction des acides nucléiques avec du phénol/chloroforme/alcool isoamylique (Sigma ref. P 3803), et précipitation à l'acétate de sodium comme décrit précédemment. L'ADN précipité après centrifugation est resuspendu dans 10 p1 de tampon 10 mM Tris pH 7.5. Puis, 5ss1 de cette suspension ont été mélangés avec 20p1 de tampon Taq 5X, 20 1 de 5mM dATP, 1M1 (5U) de Taq ADN polymérase (AmplitaqTM) et 54 1 d'eau distillée stérile. Ce mélange est incubé 2 h à 750C avec un film d'huile à la surface de la solution.L'ADN en suspension dans la solution aqueuse prélevée en dessous du film d'huile après incubation est précipité comme décrit précédemment et resuspendu dans 2 1 d'eau distillée stérile. L'ADN obtenu a été inséré dans un plamide à l'aide du kit TA CloningTM Les 2p1 de solution d'ADN ont été mélangés avec 5ss1 d'eau distillée stérile, 1 1 d'un tampon de ligation 10 fois concentré "10X LIGATION BUFFER", 2p1 de "pCRTM VECTOR" (25 ng/ml) et 1 1 de "TA DNA LIGASE". Ce mélange a été incubé une nuit à 120C. Les étapes suivantes ont été réalisées conformément au instructions du kit TA Clonings (British Biotechnology).A la fin de la procédure, les colonies blanches de bactéries recombinantes (white) ont été repiquées pour être cultivées et permettre l'extraction des plasmides incorporés selon la procédure dite de "miniprep" (Sambrook J., Fritsch E.F., et Maniatis T., Molecular cloning, a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989). La préparation de plasmide de chaque colonie recombinante a été coupée par une enzyme de restriction appropriée et analysée sur gel d'agarose.Les plasmides possédant un insert détecté sous lumière UV après marquage du gel au bromure d'éthidium, ont été sélectionnés pour le séquençage de l'insert, après hybridation avec une amorce complémentaire du promoteur Sp6 présent sur le plasmide de clonage du TA cloning kit. La réaction préalable au séquençage a ensuite été effectuée selon la méthode préconisée pour l'utilisation du kit de séquençage "Prism ready reaction kit dye deoxyterminator cycle sequencing kit" (Applied Biosystems, ref. 401384) et le séquençage automatique a été réalisé avec l'appareil "Automatic Sequencer, modèle 373 A Applied Biosystems, selon les instructions du fabricant.
L'analyse discriminante sur les banques de données informatiques des séquences clonées à partir des fragments d'ADN présents dans le mélange réactionnel a permis de mettre en évidence une séquence de type rétroviral. Le clone correspondant PSJ17 a été entièrement séquencé et la séquence obtenue, présentée dans la figure 8 et identifiée apr SEQ ID No9, a été analysée à l'aide du logiciel "Geneworkse" sur les banques de données actualisées Genebank. L'analyse des banques de données n'a pas permis de trouver de séquence identique déjà décrite. Seule une homologie partielle a pu être retrouvée avec certains éléments rétroviraux connus.L'homologie relative la plus intéressante concerne un rétrovirus endogène dénommé ERV-9, ou HSERV-9, selon les références (La Mantia et code., Nucleic Acids Research, 1991, 19, 1513-1520).
EXEMPLE 5: Amplification PCR de la séquence nucléique contenue entre la région 5' définie par le clone "pol MSRV-1B" et la région 3' définie par le clone PSJ17.
Dès lors, cette composition présente de multiples désavantages, en particulier au niveau de sa mise en oeuvre industrielle, car elle nécessite pour l'utilisateur, de se procurer les divers composés, d'en préparer très exactement les doses (par rapport à la composition décrite, mais également par rapport au poids des articles textiles à traiter) et de les introduire séparément dans le milieu aqueux de traitement, au risque de commettre une erreur dans les dosages ou un oubli dans leur introduction.
Ainsi, il serait intéressant pour l'utilisateur, de disposer d'un produit unique homogène qui pourrait être introduit dans le milieu de traitement selon une quantité seulement fonction du poids de textile à traiter, sans qu'il ait à effectuer lui-même le dosage des composés de la composition de traitement.
Expos sommaire de l'invention Au contraire des moyens mis en oeuvre dans l'état de la technique pour le traitement, en milieu aqueux, de modification de l'état de surface et/ou de la teinte d'articles textiles, formés au moins en partie de matériaux cellulosiques, une solution a été trouvée aux multiples problèmes précités par la création d'un produit d'aspect homogène se présentant sous la forme de particules et du procédé pour l'obtenir.
Selon l'invention, ce produit comprend au moins une enzyme cellulolytique et de la perlite expansée et présente la spécificité d'être formé de particules composées chacune à la fois de l'enzyme et de la perlite expansée.
Selon l'invention, le procédé de préparation du produit particulaire consiste à faire adsorber une composition aqueuse de l'enzyme par la perlite expansée.
Exoosé détaille de l'invention Selon l'invention, le produit particulaire est formé à la fois d'un support qui est de la perlite et de l'enzyme cellulolytique adsorbée par le support, sous la forme d'une composition aqueuse contenant ladite enzyme, un agent tampon réglant le pH du milieu, éventuellement un agent dispersant, un agent de rétention des colorants et/ou pigments.
Ainsi, le produit particulaire selon l'invention offre, par opposition à l'état de la technique, au moins deux fonctions simultanément, la fonction de l'hydrolyse de la cellulose attachée à l'enzyme et la fonction d'abrasion attachée à la perlite : le produit est directement mis en oeuvre par son introduction dans le milieu de traitement selon une quantité facilement déterminée qui est fonction de la quantité d'articles textiles à traiter.
La perlite entrant dans la composition du produit particulaire selon l'invention, qui est d'origine volcanique, est préférentiellement expansée thermiquement.
Elle se présente sous la forme de particules ayant une dimension généralement comprise entre 0,05 mm et 20 mm et préférentiellement entre 0,10 et 10 mm. La perlite a une densité après expansion comprise entre 0,03 à 0,15 et préférentiellement de 0,05 à 0,09.
L'enzyme cellulolytique entrant dans la composition du produit particulaire selon l'invention est choisie dans le groupe constitué par les cellulases d'origine fongique ou bactérienne, mises en oeuvre sous des formes acide, neutre ou alcaline, c'est-à-dire dans les zones de pH leur donnant le maximum d'efficacité.
A titre d'exemple, une cellulase acide est mise en oeuvre dans une zone de pH généralement inférieure à 6, mais préférentiellement entre 4 et 6 ; une cellulase neutre dans une zone de pH située entre 6 et 8 (bornes incluses), mais préférentiellement pour certaines d'entre elles entre 6,5 et 7 et pour les autres 7 et 7,5 et une cellulase alcaline, dans une zone de pH supérieure à 8 mais préférentiellement proche de 9.
En raison de la grande diversité des cellulases d'origine fongique ou d'origine bactérienne, les cellulases mises en oeuvre dans l'invention peuvent etre notamment choisies, par exemple pour celles intervenant en milieu acide, parmi celles provenant ou dérivant de souches comme TRICHODERMA REESEI, PENICILLIUM FUNICOLOSUM, IRPEX, CLOSTRIDIUM ou THERNOCELLUN, et pour celles intervenant en milieu neutre ou alcalin, parmi celles provenant ou dérivant de souches comme : HUMICOLA INSOLENS, FUSARIUM, BACILLUS, CELLULOMONAS, PSEUDOMONAS, MYCELIOPHTHORA ou PHANEROCHAETE.
L'enzyme cellulolytique intervenant dans le produit selon l'invention y est présente selon une quantité nécessaire pour modifier l'état de surface et/ou la teinte de l'article textile concerné, en particulier en agissant sur la qualité du toucher textile et, dans le cas des articles colorés, sur l'affaiblissement plus ou moins régulier et prononcé de la couleur, cette quantité étant étroitement liée à l'activité de l'enzyme.
L'activité de l'enzyme cellulolytique qui s'exprime en unité d'enzyme cellulolytique (ECU) peut être déterminée par les méthodes d'analyse décrites dans la demande de brevet internationale publiée sous le numéro W095/09225.
Ainsi, le produit selon l'invention contient une quantité d'enzyme cellulolytique correspondant généralement au plus à 200 ECU et préférentiellement comprise entre 20 et 100 ECU par gramme dudit produit particulaire selon l'invention.
Selon l'enzyme cellulolytique mise en oeuvre dans le cadre de l'invention, le pH du milieu aqueux de traitement peut être favorablement maintenu dans l'intervalle souhaité grâce à la présence d'un agent tampon dudit pH. Cet agent tampon peut être choisi parmi ceux bien connus, tels qu'un phosphate, borate, citrate, acétate, adipate, triéthanolamine, monoéthanolamine, diéthanolamine, carbonate, en particulier le carbonate de sodium, de potassium ou d'une diamine et les sels de l'acide chlorhydrique, la diaminoéthane, l'imidazole ou une amine acide. Très préférentiellement, l'agent tampon est choisi dans le groupe des phosphates.
Les procédés d'extraction décrits ci-dessus s'appliquent en particulier à l'espèce Bertholletia excelsia.
Selon un second aspect, la présente invention conceme aussi une composition cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, une quantité cosmétiquement efficace d'un extrait de Bertholletia, en particulier de Bertholletia excelsa, de préférence dispersé dans un excipient cosmétiquement acceptable.
Selon une variante de réalisation particulière, cette composition cosmétique stimulant la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène I, est destinée notamment à lutter contre les effets du vieillissement cutané, ou à obtenir un raffermissement cutané. Une telle composition, par exemple, peut avantageusement être utilisée comme composition pour prévenir l'apparition des rides ou en atténuer la profondeur.
Selon un troisième aspect, l'invention concerne encore une composition pharmaceutique, notamment dermatologique, stimulant la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène I, caractérisée cn ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, une quantité pharmaccutiquement efficace d'un extrait de Bertholletia, en particulier de Bcrtholletia excelsa, dispersé dans un excipient pharmaceutiquement acceptable.
Selon un mode de réalisation particulier, ladite composition est destinée à améliorer la cicatrisation cutanée ou à traiter les diverses pathologies accompagnées d'une déficience en collagène.
Selon un quatrième aspect, l'invention couvre encore un procédé de traitement cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, caractérisé en ce qu'il comprend l'application d'une quantité cosmétiquement ou pharmaceutiquement efficace pour un traitement cosmétique ou pharmaceutique d'un extrait de Bertholletia, en particulier Bertholletia excelsa, en particulier dispersé dans un excipient cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable. Les applications cosmétiques ou pharmaceutiques particulièrement avantageuses actuellement résultent de la description précédente ainsi que de la description suivante en relation avec les exemplcs, et des revendications. Il en est de même en ce qui concerne la concentration cn extrait.
Dans l'un ou l'autre des aspects précédents, on utilisera de préférence l'extrait de Bertholletia, en particulier Bertholletia excelsa, à une concentration comprise entre 0,0001% et 1% en poids par rapport au poids total de la composition finale. De préférence, cette concentration est comprise entre 0,01 % et 0,25 % en poids par rapport au poids total de la composition finale.
Egalement dans l'un quelconque des aspects précédents, la composition selon l'invention contient de préférence en outre une substance active choisie parmi le groupe constitué par l'acide ascorbique, l'acide madécassique, l'acide asiatique, le madécassoside, l'asiaticoside, l'alpha-1 -protéinase inhibiteur, les inhibiteurs de collagénase, tels que l'acide rétinoique, les inhibiteurs d'élastase, la lysine, la proline, le 2-oxoglutarate, et le ginsénoside Rg.
D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à la lecture de la description cxplicative qui va suivre, faite en référence à plusieurs exemples donnés uniqucment à titre d'illustration et qui ne sauraient par conséquent en aucune façon limiter la portée de l'invention.
Dans les excmples, les pourcentages sont exprimés en poids, sauf indication contraire. Dans le cas des extraits, les quantités de ceux-ci sont exprimées en poids sec.
Exemple 1 Préparation d'un extrait méthanolique d'écorce du tronc de Bertholletia excelsa.
enrichi en saponines On prépare dc la poudre d'écorche dc tronc de Bertholletia excelsa par broyage. On fait ensuite macérer 49 g de cette poudrc pendant 2 h dans 500 ml de méthanol. On porte le tout à rcflux pendant 3 h, puis on laisse refroidir et on filtre sur verre fritté. Ce filtrat obtenu constituc un premier extrait selon l'invention, dit extrait I1. Ce premier extrait est évaporé à sec. Le résidu, pesant 14,7 g, est repris par 100 ml de méthanol. On effectue une précipitation en versant cette solution dans 500 ml d'acétone, puis on filtre.Le précipité est ensuite séché sur un agent déshydratant solide tel que de la potasse, on obtient ainsi 1,33 g de produit sec.
Une quantité de 830 mg de ce produit est ensuite dialysée pendant 4 jours contre 9 ml d'eau déminéralisée, puis on lyophilise. On obtient ainsi 182 mg d'extrait enrichi en saponines selon l'invention, dit extrait lo.
Exemple2 Mise en évidence de l'activité d'un extrait méthanolique d'écorce de Bertholletia excelsa préparé selon l'exemple 1. extrait h. sur la synthèse de collagène par des fibroblastes humains en culture Culture de fibroblastes Des cultures de fibroblastes de derme adulte sain sont réalisées en utilisant la méthode par explants à l'aide d'un prélèvement de peau faciale obtenu sur une femme âgée de 60 ans au cours d'un lifting.
Les fibroblastes sont cultivés jusqu'à confluence dans un milieu E 199 (Gibco) supplémenté avec 2 mM de L-glutamine (Gibco) et 10 % en v/v de sérum de veau foetal (Gibco) à 37'C dans une atmosphère à 5 % de CO2 humidifiée. Pour évaluer la teneur en collagène, les cultures primaires en confluence sont récoltées avec une solution à 0,1 % de trypsine et 0,02 % d'EDTA dans une solution saline tamponnée de phosphate (PBS) à pH 7,2 ct les cellules sont alors ensemencées à la densité de 104 fibroblastes par puits, dans des plaques de microculture (Falcon) à 96 puits, en présence du même milieu dc culture que cclui décrit ci-dessus.
24 h après l'ensemencement, le milieu est enlevé et remplacé par un milieu de même composition que le milieu décrit précédemment, si ce n'est qu'il ne contient pas de sérum et que l'on a ajouté 25 MM d'acide L-ascorbique sous forme de sel de sodium. En outre, ce nouveau milieu contient ou non le produit à tester (extrait I2) selon qu'il s'agit d'une culture traitée ou d'une culture témoin. On laisse ensuite incuber pendant une période supplémentaire de 48 h à 37-C. Le produit à tester (extrait I2) a été dissous dans le DMSO avant l'incorporation dans le milieu de culture (la concentration finale en DMSO dans le milieu est de 0,1 % en v/v).
La touche 6 selon l'invention représentée sur la figure 8 comporte un axe 6a central de basculement qui divise ladite touche 6 en une première partie 6b, qui lorsqu'elle est enfoncée provoque la descente de la vitre et une seconde partie 6c, qui lorsqu'elle est enfoncée provoque la montée de la vitre. La limite entre les deux parties 6b,6c est située à la verticale de l'axe 6a. La touche 6 est montée dans une platine P localement plane avec son axe 6a de basculement situé dans un plan parallèle au plan de ladite platine P. De manière à s'assurer qu'un appui involontaire sur la touche 6 ne puisse par provoquer une remontée dangereuse de la vitre, la surface de ladite touche 6 est telle qu'il existe un point B de la surface de la première partie 6b et un rayon R de référence tels que tous les points de la surface de la seconde partie 6c soient situés à l'extérieur d'un cylindre Cy de rayon égal audit rayon R et d'axe parallèle à l'axe 6a de la touche 6, en appui à la fois sur ledit point B de la surface de la première partie 6b et sur la platine P. Le rayon R de référence est choisi égal à celui du genou d'un enfant. Des relevées anatomiques ont donné une valeur approximative de 35 millimètres pour un tel rayon R de référence. Cette forme de la touche 6 fait qu'une sphère, matérialisant le genou d'un enfant et donc de rayon supérieur ou égal au rayon R de référence qui roulerait sur la platine P en direction de la seconde partie 6c de la touche 6 entrerait en contact avec ladite touche 6 par un point de sa première partie 6b avant de quitter son point de contact A avec la platine P. Le point de contact situé sur la première partie 6b sera situé au-delà ou au pire au niveau du point B. La surface de la touche 6 peut être telle que ladite sphère entre en contact simultanément avec un point C de la seconde partie 6c. Dans tous les cas, la touche 6 ne pourra pas s'enfoncer par sa seconde partie 6c et provoquer la descente de la vitre car la sphère sera en contact à la fois avec la première partie 6b et avec la platine P au point A. Si la sphère poursuit son mouvement en direction de la première partie 6b, la touche 6 s'enfoncera par ladite première partie 6b et provoquera la descente de la vitre. En aucun cas, le genou de l'enfant ne peut provoquer l'enfoncement de la seconde partie 6c de la touche et donc la remontée dangereuse de la vitre. Selon une variante particulière de l'invention, la seconde partie 6c de la touche 6 présente une surface concave cylindrique d'axe parallèle à
l'axe 6a de la touche 6 et de rayon inférieur au rayon R de référence.
Lors de l'actionnement volontaire de la touche, la remontée de la vitre pourra être provoquée en appuyant sur la seconde partie 6c de la touche avec le doigt. De manière à faciliter cet actionnement de la remontée, la touche 6 présente, selon une variante, une première partie 6b de forme propice à l'accrochage avec le doigt permettant de tirer ladite touche 6 par sa première partie 6b afin de provoquer l'enfoncement de la seconde partie 6c et donc la remontée de la vitre. Contrairement aux touches 3 et 4 de l'art antérieur, il est possible d'actionner la remontée de la vitre en tirant sur la première partie 6b tout en poussant simultanément sur la seconde partie 6c, ce qui permet de se contenter d'un première partie 6b présentant un ergot très peu prononcé et évite ainsi les risques d'accrochage mentionnés pour les touches 3 et 4. A cet effet, la flanc sensiblement vertical rejoignant le sommet de la première partie 6b de la
touche 6 à la platine P pourra présenter un profil légèrement concave.
Dans ce cas, et de manière à s'assurer que la sphère ne puisse pas provoquer la remontée de la vitre en venant rouler contre cette surface concave, le sommet de la première partie 6b de la touche 6 devra être situé à une hauteur, par rapport à la platine P. inférieure au rayon R de référence. La platine P peut donc rester de forme simple et la profondeur d'implantation P6 est comparable à la profondeur P1 de la touche plate
classique et par conséquent extrêmement faible.
Bien entendu, la forme de la touche selon l'invention n'est nullement limitée au mode de réalisation décrit et illustré qui n'a été donné qu'à titre
d'exemple.
EOUIPEMENT POUR LA PREPARATION DE PORTIONS DE PATE A PAIN La présente invention concerne un équipement pour la préparation de portions de pâte à pain, qui comprend une chambre de préfermentation ou repos et une façonneuse de baguettes de pâte à pain.
Dans les équipements traditionnels de panification, la façonneuse de baguettes est située dans le prolongement de la chambre de préfermentation, toutes deux situées sur le sol, ce qui suppose un certain problème au moment du montage dans l'enceinte ou dans des locaux de petite surface.
Cet inconvénient peut être résolu par une conception adéquate de la chambre de préfermentation, de façon à pouvoir situer la façonneuse sur celle-ci.
Cependant, le problème fondamental des équipements décrits, quelle que soit la position relative occupée par la chambre de préfermentation et la façonneuse de baguettes, réside dans le transport des portions de pâte à pain depuis ladite chambre de préfermentation jusqu'à la façonneuse, opération qui s'effectue manuellement et nécessite au moins un ouvrier, avec l'augmentation du coût de procédé consécutif et le risque de contamination de la pâte lorsque les mains touchent les portions de pâte à pain.
La présente invention a pour objet un équipement à l'aide duquel on élimine les problèmes signalés.
D'une part, sur l'équipement de l'invention, la façonneuse de baguettes est située au-dessus de la chambre de préfermentation, ce qui réduit la surface occupée par ces éléments.
D'autre part, sur l'équipement de l'invention, le transport des portions de pâte à pain depuis la chambre de préfermentation jusqu'à la façonneuse s'effectue automatiquement, sans intervention de main-d'oeuvre, réduisant ainsi les coûts de main-d'oeuvre et les risques de contamination de la pâte.
Selon la présente invention, la chambre de fermentation et la façonneuse sont reliées à l'aide d'un mécanisme de transport chargé d'amener les portions de pâte à pain depuis la bouche de sortie de la chambre de préfermentation jusqu'à la bouche d'entrée de la façonneuse. Ce mécanisme est composé d'un élévateur de portions de pâte à pain, d'un convoyeur inférieur qui déplace les portions de pâte à pain depuis la bouche de sortie de la chambre jusqu'au départ de l'élévateur, et d'un convoyeur supérieur qui démarre à l'arrivée de l'élévateur et arrive jusqu'à la bouche de charge de la façonneuse. L'élévateur de portions de pâte à pain démarre à un point situé à une hauteur proche de la bouche de sortie de la chambre, de préférence légèrement au-dessous de ladite bouche, et arrive approximativement jusqu'à hauteur de la bouche de charge de la façonneuse.
Cette interface homme-machine est conçue comme une "surcouche" du niveau 4, c'est-à-dire qu'elle se présente comme un habillage informatique performant. L'interface homme-machine permet de mettre au point les systèmes physiques et les moyens de les étudier, d'appréhender les résultats souvent volumineux, de communiquer avec une base de données ainsi qu'avec d'autres logiciels et de faire interagir l'ensemble de ces données.
Domaines techniques de chaque niveau Chaque niveau englobe un domaine technique particulier: SYSTEME DOMAINE Niveau 5 Niveau 4 Niveau 3 Niveau 2 Niveau 1
Informatique pure Probabilités, calculs, méthodes statistiques Algorithmique des événements Physique des systèmes Physique locale De cette manière, le système de l'invention apparaît découpé en thèmes indépendants, possédant chacun une problématique propre. Un progrès effectué à un niveau ne contraint pas à remodeler les autres, si ce n'est pour les informer de l'existence de cette nouveauté.