INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'invention concerne donc un détecteur spatial bidimensionnel à haute résolution spatiale et à haute résolution temporelle.
Etat de la technique antérieure On connaît déjà de nombreux détecteurs spatiaux de particules qui utilisent des galettes de microcanaux ("Microchannel Plates").
Au cours des vingt dernières années, le développement de tels détecteurs s'est en effet avéré nécessaire dans des domaines aussi variés que l'imagerie spatiale ou la physique des particules élémentaires.
Toutefois, très peu de détecteurs offrent la possibilité d'une localisation, à la fois spatiale et temporelle, d'impacts multiples.
Les domaines d'application pour lesquels ces détecteurs ont été développés expliquent en grande partie les limitations des détecteurs spatiaux usuels.
Ainsi, les détecteurs développés pour l'imagerie conduisent à une très bonne résolution spatiale mais ne permettent pas la mesure des instants d'impact de façon précise.
Dans le domaine des particules élémentaires, on a développé de nombreux systèmes capables de mesurer précisément l'instant et la position d'impact de particules.
Ces systèmes, qui ont été développés pour la détection d'événements rares, sont bien souvent incapables de résoudre des événements simultanés ou très rapprochés dans le temps.
On distingue ainsi deux grandes familles de détecteurs spatiaux.
La première famille comprend des détecteurs sensibles aux événements simultanés mais possédant une résolution temporelle médio~cre.
C'est par exemple le cas des détecteurs à caméra CCD.
Ces détecteurs ont une bonne résolution spatiale et sont sensibles aux événements multiples.
Cependant, le temps de "lecture" des informations d'une caméra CCD est long -il vaut plusieurs millisecondes- et détermine ainsi le "temps mort" de la chaîne de mesure des temps de vol qui est associée à la caméra.
Lorsque les événements sont séparés d'un temps inférieur à ce temps mort (ce qui est toujours le cas dans une sonde atomique), il est impossible d'assigner de manière univoque un temps de vol à un impact visualisé.
A ce sujet, on consultera le document (1) qui, comme les autres documents cités par la suite, est mentionné à la fin de la présente description.
Suivant une caractéristique constructive, chaque élément modulaire est formé d'un corps parallélépipédique dont une face latérale comporte une queue d'aronde et la face opposée une rainure ayant une section correspondante.
Afin de faciliter la pose des fibres optiques dans les conduits des éléments modulaires, chaque conduit présente une extrémité évasée par laquelle est introduite une extrémité correspondante de la fibre optique, tandis que l'autre extrémité présente une section légèrement inférieure à celle de la fibre optique.
De préférence, les fibres optiques sont fixées par de la colle coulée dans l'extrémité évasée des conduits.
Suivant une variante de réalisation, les fibres optiques sont fixées dans les conduits par un soudage aux ultrasons.
Suivant une autre forme de réalisation des éléments modulaires, chaque élément modulaire comprend, d'une part, une âme formée par une plaque dont deux faces opposées présentent des striures, chaque face comportant des tétons et, d'autre part, deux plaquettes complémentaires percées de trous pour le passage des tétons, chaque plaquette complémentaire présentant des striures complémentaires de celles de l'âme, les extrémités des fibres optiques étant logées dans les striures et l'ensemble étant soudé aux ultrasons.
Suivant une caractéristique constructive se rapportant à la variante de réalisation des éléments modulaires, l'une des extrémités de l'âme comporte une queue d'aronde, tandis que les extrémités de plaquettes complémentaires, tournées du côté opposé à la queue d'aronde, présentent, chacune, un talon, ces derniers formant entre eux une rainure à section en queue d'aronde correspondante.
Suivant une forme d'exécution particulière, le boîtier est réalisé en une seule pièce de matière plastique moulée pour présenter une coquille le long d'un bord de laquelle s' le long d'une bande souple, un couvercle, le bord libre de ces deux éléments comportant une rainure dans laquelle est insérée une plaquette de protection translucide, les extrémités des éléments modulaires, opposées à celles à travers lesquelles saillent les fibres optiques, étant appliquées contre la face interne de la plaquette de protection translucide, la coquille comportant une série de picots constituant des butées pour les éléments modulaires et dont les extrémités libres sont fixées au couvercle.
Ainsi, on réalise un feu de signalisation très simple et très facile à monter.
De préférence, le couvercle comporte des trous, les extrémités libres des picots traversant les trous et étant soudées audit couvercle.
Afin de faciliter le montage, le couvercle et la coquille comportent des organes conjugués de verrouillage entre eux.
L'invention va maintenant être décrite avec plus de détails en se référant à des modes de réalisation particuliers donnés à titre d'exemple seulement et représentés aux dessins annexés, dans lesquels Figure 1 est une vue en élévation de face d'un feu, selon l'invention.
Figure 4 est une vue en élévation en bout du feu de la figure 1.
Figure 5 est une vue en coupe suivant la ligne 5-5 de la figure 1.
Figure 6 est une vue en coupe suivant la ligne 6-6 de la figure 2.
De ce fait, chaque image radiologique obtenue ne montre pas tous les marqueurs et il y a en fait peu de marqueurs par image.
En outre, il est difficile de repérer les marqueurs sur les images, c' est-à-dire d'établir une correspondance entre les marqueurs du fantôme et les projections de ceux-ci que l'on voit sur les images.
On connaît également un troisième procédé permettant la détermination des paramètres géométriques cherchés.
Ce troisième procédé connu utilise un autoétalonnage au moyen d'un fantôme flexible.
I1 s'agit d'un support flexible et transparent aux rayons X, comme par exemple une bande adhésive, auquel sont fixés les marqueurs.
La bande adhésive portant les marqueurs est alors fixée sur la tête du patient (ou sur toute autre partie du corps de celui-ci lorsqu'on souhaite examiner cette partie).
I1 est à noter que, dans ces conditions, on ne connaît pas les positions respectives des marqueurs.
Néanmoins, on est capable de repérer les marqueurs sur les images successives.
Toutefois, on est incapable d'établir une correspondance entre ceux-ci et les marqueurs réels.
I1 serait possible d'utiliser ce troisième procédé connu si les paramètres intrinsèques ne variaient pas au cours de la rotation de la source et du détecteur autour du patient.
Mais on sait que ce n'est pas le cas.
EXPOSÉ DE L'INVENTION La présente invention concerne un procédé d'étalonnage beaucoup plus précis que les procédés connus, mentionnés plus haut, pour déterminer très précisément les neuf paramètres géométriques définis ci-dessus.
Pour ce faire, la présente invention utilise ce que l'on peut appeler un étalonnage croisé (" cross-calibration " en anglais).
I1 s'agit d'améliorer les valeurs des paramètres que l'on obtient au moyen d'un étalonnage préalable, par exemple réalisé au moyen d'un fantôme rigide, en utilisant, pour cette amélioration, des mesures effectuées avec un fantôme flexible.
On combine donc, en quelque sorte, un étalonnage préalable et un auto-étalonnage, d'où l'expression " étalonnage croisé On réalise l'étalonnage préalable à des intervalles de temps déterminés, par exemple chaque matin, chaque semaine ou chaque mois, suivant des critères tels que la rigidité de l'arceau.
La fréquence de l'étalonnage préalable est d'autant plus grande que cette rigidité de l'arceau est faible.
photométrique particulier.
Àcet effet, le feu de signalisation multifonctions selon l'invention, qui est du type comportant un socle définissant un ensemble de compartiments de signalisation abritant des sources lumineuses et fermé par une glace, la glace comportant au moins une premiere zone destinée à remplir une fonction de rétroréflexion catadioptrique et au moins une deuxieme zone comportant une pluralité d'éléments pseudo-catadioptriques aptes à assurer, par un aspect général en lumière ambiante similaire à celui de la première zone, une continuité d'aspect avec cette dernière mais sans en remplir la fonction, est caractérisé en ce qu'au moins certains des éléments pseudo- catadioptriques de la deuxième zone sont des éléments présentant chacun du côté intérieur de la glace une forme prismatique et remplissant une fonction déviatrice en direction verticale et/ou horizontale des rayons lumineux issus d'une source lumineuse du feu et traversant la glace à l'endroit de cet élément
pseudo-catadioptrique.
De préférence, les dimensions des éléments pseudo-catadioptriques de la deu:xième zone sont, en projection sur le plan tangent à la glace, sensiblement les mêmes que celles des éléments catadioptriques
voisins, de la première zone.
Pour optimiser le rôle optique de la glace, la direction de la normale à la face d'incidence du prisme peut varier d'un élément pseudocatadioptrique à un autre. Dans une forme de réalisation préférentielle, au moins un groupe d'éléments pseudo-catadioptriques est disposé en une bande allongée comportant au moins une rangée de ces éléments. Lorsqu'il est prévu une pluralité de ces bandes allongées d'éléments pseudo-catadioptriques, celles-ci sont de préférence disposées sensiblement en alignement avec une pluralité de bandes allongées homologues d'éléments catadioptriques de la premiere zone. De préférence également, les bandes allongées d'éléments pseudo-catadioptriques de la deuxième zone et les bandes allongées homologues d'éléments catadioptriques de la première zone avec lesquelles elles sont alignées ont
alors sensiblement les mêmes largeurs respectives.
De préférence encore, ces bandes allongées d'éléments pseudocatadioptriques sont disposées en alternance avec une pluralité de bandes allongées d'éléments remplissant une fonction de dispersion des rayons lumineux traversant la glace à l'endroit de cet élément, tels que des éléments à surface torique ou sphérique. Enfin il est avantageux que la glace de fermeture soit constituée de deux éléments superposes, l'élément intérieur portant sur sa face intérieure les divers éléments optiques, et l'élément extérieur étant lisse
D'autres buts, caractéristiques et avantages de
l'invention apparaîtront à la lecture de la description
détaillée ci-dessous d'un exemple de réalisation, faite
en référence aux dessins annexes.
La figure 1 est une vue de face d'un bloc de feux de signalisation, montrant les diverses zones de
fonctions différentes.
La figure 2 est une coupe schématique, selon 2-2 de la figure 1, du bloc de feux de signalisation de la
Des moyens non représentés sur la figure 1 permettent de mettre l'arceau 2 en mouvement par rapport à un support 8, par exemple en rotation autour d'un axe X par rapport à ce support.
Lorsque l'arceau est animé d'un mouvement de rotation, la source S et le détecteur D tournent autour de la table 4 et donc autour du patient 6.
Lors de l'examen, ce patient 6 est traversé par un faisceau 10 de rayons X issu du -foyer F de la source S.
Après avoir traversé le patient, ce faisceau atteint le détecteur D.
Dans l'exemple représenté sur la figure 1, le détecteur D fournit une image de la zone du patient que l'on veut examiner, sous forme de signaux électriques.
L'appareil comprend aussi des moyens 12 de traitement et de visualisation destinés à traiter ces signaux électriques et à afficher les images souhaitées.
L'appareil de la figure 1 est capable de fournir des images de la zone examinée du patient.
Ces images correspondent respectivement à des positions successivement occupées par la source S et donc par le détecteur D lorsque ceux-ci tournent autour du patient 6.
On voit également sur la figure 1 le centre image P qui est la projection orthogonale du foyer F de la source S sur le plan du détecteur D.
La distance entre le foyer F et ce point P est la distance focale de la source.
On explique ci-après un procédé conforme à l'invention que l'on met en oeuvre avec l'appareil de la figure 1.
Comme on l'a vu plus haut, un tel procédé est un procédé d'étalonnage géométrique de l'appareil.
Ce procédé est destiné à déterminer précisément neuf paramètres géométriques relatifs à cet appareil, à savoir - trois paramètres intrinsèques qui sont les deux coordonnées du point P par rapport à un repère lié au détecteur ainsi que la distance focale, et - six paramètres extrinsèques, à savoir les trois coordonnées de la source S par rapport à un repère fixe R et les trois angles d'Euler définissant l'orientation du plan du détecteur D par rapport à ce repère R.
Bien entendu, à chaque position de la source S correspond un ensemble de ces neuf paramètres.
Pour déterminer les neuf paramètres relatifs à l'appareil de la figure 1 conformément à la présente invention, on suppose que ces neuf paramètres ne varient pas tous avec la même amplitude.
On suppose que les paramètres extrinsèques varient très peu d'une acquisition en déplacement à l'autre et que les paramètres intrinsèques varient de façon significative d'une acquisition en déplacement à l'autre, ou bien on fait l'hypothèse inverse.
L'invention concerne également un hôte cellulaire ayant intégré dans son génome une structure provirale comprenant une seule région LTR d'un rétrovirus. Cette séquence LTR comporte une copie unique d'une séquence de nucléotides d'intérêt. Plus particulièrement, l'hôte cellulaire de l'invention est une cellule eucaryote et la structure provirale est caractérisée en ce qu'elle est essentiellement libre de séquence PBS, de signal d'encapsidation et de dimérisation eVou de PPT.
L'invention conceme aussi les hôtes cellulaires recombinants contenant la séquence unique LTR ou une partie de celleci et la séquence d'intérêt.
L'invention conceme également l'utilisation de la séquence de rétroéléments ou du vecteur rétroviral de l'invention dans la production dans des cellules hôtes de protéines codées par une séquence de nucléotides d'intérêt comprise dans cet ADN rétroviral ou dans le traitement médical d'un patient visant à intégrer une séquence de nucléotides d'intérêt dans le génome de cellules visées.
Plus particulièrement, la séquence de l'invention permet également le transfert de séquences de nucléotides codant pour des anticorps dans des cellules hôtes. On parle alors d'immunisation extracellulaire puisque les anticorps générés à partir de ces séquences produisent leur effet à l'intérieur des cellules les ayant intégrées. Parmi les séquences de nucléotides codant pour des anticorps pouvant être intégrées dans des cellules hôtes en utilisant la séquence rétrovirale et le vecteur rétroviral de l'invention, on peut mentionner, à titre d'exemple non limitatif, les anticorps reconnaissant des protéines d'enveloppe de virus HIV, particulièrement les protéines gp.120 du virus HIV-1 et du virus HIV-2 ainsi que des anticorps permettant de bloquer la transcriptase inverse.De tels anticorps sont décrits entre autres dans la publication de Maciejewski et al (Nature Medicine, Volume No 7, juillet 1995). Le vecteur rétroviral de l'invention permettant une intégration plus efficace de ces séquences de nucléotides d'intérêt, I'efficacité thérapeutique de cette approche en est d'autant améliorée.
L'invention conceme donc l'utilisation de vecteurs rétroviraux comprenant une séquence de nucléotides d'intérêt codant pour un anticorps reconnaissant une protéine ou un fragment d'une protéine de virus HIV, ainsi qu'une séquence de nucléotides de reconnaissance, ces deux séquences de nucléotides étant situées dans une région pouvant être transférée dans des lymphocytes humains à la suite d'une infection. De façon préférée, ces deux séquences sont situées dans la région LTR3' du vecteur rétroviral.
L'invention concerne également une méthode ou procédé d'expression d'une molécule codée par une séquence de nucléotides d'intérêt dans une cellule hôte. La méthode comprend: - I'infection de la cellule hôte par un vecteur rétroviral de l'invention comprenant la séquence de nucléotides d'intérêt; - la croissance de la cellule hôte dans des conditions permettant l'expression de la séquence de nucléotides d'intérêt; et - I'obtention de la molécule désirée.
La séquence de nucléotides rétrovirale ainsi que les vecteurs rétroviraux de l'invention peuvent être utilisés de plusieurs façons pour permettre l'intégration de la séquence de nucléotides d'intérêt désirée. En fait, les inventeurs ont démontré qu'il n'était pas nécessaire d'associer l'expression de la recombinase directement au vecteur rétroviral, bien que les rendements d'intégration soient supérieurs lorsqu'une séquence nucléotidique codant pour la recombinase est partie intégrante du vecteur.
Dans une première réalisation de l'invention, un vecteur rétroviral comprenant dans la région LTR3' ou LTR5' du vecteur rétroviral une première séquence de nucléotides comprenant une séquence de nucléotides d'intérêt ainsi qu'une séquence de reconnaissance située en aval ou en amont de la séquence d'intérêt, ainsi qu'une deuxième séquence de nucléotides identique à la première séquence de nucléotides insérée dans la région LTR5' du vecteur, est introduit dans le génome d'une cellule hôte par infection. Un plasmide comprenant une séquence de nucléotides codant pour une recombinase susceptible de reconnaitre la séquence de reconnaissance est également introduite dans la cellule par transfection. L'expression de la recombinase par transfection transforme la structure d'un provirus à deux LTR à un provirus à une seule LTR.Dans ce type de réaction, environ 50% des transformants stables contiennent le provirus modifié. Ce résultat partiel peut s'expliquer par l'expression éphémère du plasmide comprenant la séquence de nucléotides codant pour la recombinase après la transfection, aboutissant à une recombinaison sans intégration.
Dans une seconde réalisation de l'invention, on utilise une séquence rétrovirale comprenant une séquence nucléotidique comprenant une séquence d'intérêt ainsi qu'une séquence de reconnaissance située en aval ou en amont de cette séquence d'intérêt. La séquence complète est insérée dans la région LTR3' d'un rétrovirus. Le vecteur rétroviral ainsi obtenu est ensuite utilisé pour infecter une lignée cellulaire qui exprime constitutivement ou par induction une recombinase susceptible de reconnaître la séquence de reconnaissance. L'efficacité d'un tel système est élevée surtout lorsque le gène codant pour la recombinase est exprimé dès le début de l'infection rétrovirale.
Dans un troisième mode de réalisation de l'invention, un vecteur rétroviral comprend une séquence de nucléotides insérée dans sa région LTR3'. Cette séquence de nucléotides comprend une séquence d'intérêt ainsi qu'une séquence de reconnaissance pouvant être reconnue par une recombinase. La séquence de reconnaissance est située en aval ou en amont de la séquence d'intérêt. De plus, un gène codant pour une recombinase ainsi qu'un promoteur sont intégrés dans le vecteur rétroviral entre les deux LTR de ce vecteur. Une lignée cellulaire est ensuite infectée par ce rétrovirus. Un tel vecteur rétroviral ne génère que des provirus à une seule LTR. L'efficacité de ce système est élevée puisque tous les événements intégrés et analysés ont cette structure.Le principal avantage d'un tel vecteur rétroviral est qu'il associe des événements de recombinaison réussis entre les deux LTR avec la délétion du gène codant pour la recombinase. Par conséquent, les cellules infectées n'expriment la recombinase qu'éphémèrement.
Dans une des réalisations préférentielles de l'invention, les inventeurs ont utilisé le système de recombinase Crelox spécifique du site du bactériophage PI. Le site de reconnaissance LoxP a été inséré dans la LTR3' en amont de la séquence de nucléotides d'intérêt dans un vecteur de type Enh, et le gène codant pour la recombinase cre entre les deux LTR. Dans la lignée cellulaire productrice, la protéine Cre est exprimée à partir de la construction plasmidique provirale. Toutefois, puisque le plasmide ne contient qu'une seule cible loxP, il n'est pas recombiné par la protéine Cre. Après l'infection, le site loxP est dupliqué de la LTR3' dans la LTR5'.Ainsi, Cre recombine les deux sites loxP répétés directs, ce qui se traduit par la délétion de toutes les séquences comprises entre les deux loxP, y compris le PBS, le signal d'encapsidation et de dimérisation et la PPT. Ne reste alors intégré dans le génome cellulaire qu'une seule LTR contenant le gène rapporteur. Le gène cre est également perdu lors de la recombinaison.
Dans tous les modes de réalisation préférentiels décrits ci-dessus, la séquence de nucléotides d'intérêt, qui est généralement une séquence étrangère au rétrovirus, est introduite de façon avantageuse dans la région U3 de LTR3' de la séquence rétrovirale. En effet, la possibilité d'introduire des séquences, voire des unités transcriptionnelles complètes, dans la région U3 de LTR3' est très bien documentée. On peut cependant envisager l'introduction de séquences d'intérêt ailleurs que dans la région U3 de LTR3' du vecteur rétroviral. Des exemples incluent la région U5 du LTR5'.De plus, bien qu'il soit préférable que le site de reconnaissance soit situé immédiatement en aval ou en amont de la séquence de nucléotides d'intérêt, on peut également positionner cette séquence à une distance appréciable qui peut varier entre 32nt et 4.5 Kb sans affecter l'intégration finale de la séquence d'intérêt à la cellule visée.
La quantité de produits génétiques étrangers introduite dans la région U3 de l'ADN viral peut être élevée et dans certains cas supérieure à 4 kpb. Ces séquences peuvent même correspondre à une unité transcriptionnelle complète avec un promoteur indépendant, ce qui démontre la polyvalence de ces vecteurs.
La possibilité d'introduire des quantités considérables de produits génétiques étrangers dans la 3' LTR du vecteur rétroviral de l'invention fait de ce vecteur rétroviral un système de choix pour l'insertion de séquences de gènes dans des cellules, plus particulièrement dans des cellules eucaryotes. Plusieurs types de cellules eucaryotes peuvent ainsi être transformées. Parmi les cellules eucaryotes pouvant être utilisées dans le contexte de la présente invention, notons particulièrement les types de cellules suivants: NIH 3T3, BRL, HM1, D3, PLL4, LT.
Dans une des réalisations particulières de la présente invention, I'insertion d'une séquence de nucléotides codant pour un marqueur est prévue dans la région LTR3' du vecteur rétroviral. La présence de ce marqueur permet de prouver l'insertion du produit nouveau.
A titre d'exemples non limitatifs, les marqueurs suivants peuvent être utilisés : LacZ, GFP (green fluorescent protein), CD9, PAL (alkaline phosphatase) et HRP (Horse Radish Peroxydase).
Ainsi, il est possible d'utiliser tout latex issu de la polymérisation en émulsion de momères en présence d'un initiateur de polymérisation choisi parmi les initiateurs azo, peroxydes, persulfates et peresters, et pouvant être hydrosolubles ou solubles dans le monomère utilisé. II peut s'agir plus précisément:: d'un initiateur de type azo (azobisnitrile) (hydro ou oléosoluble) tel que le 2,2- azobisisobutyronitrile, le 2,2'-azobis-(2-méthylpropanenitrile), le 2,21-azobis-(2,4 diméthylpentanenitrile), le 2,2'-azobis-(2-méthylbutane nitrile), le 1,1'-azobis- (cyclohexanoearbonitrile), le 2,2'-azobis-(2,4-diméthyl-4-méthoxyvaléronitrile), le 2,2- azobis-2,4-diméthylvaléronitrile) et le chlorhydrate de 2,Z-azobis-(2-amidinopropane), d'un initiateur de type peroxyde tel que le peroxyde de benzoyle, I'hydroperoxyde de cumène, le peroxyde d'hydrogène, le peroxyde d'acétyle, le peroxyde de lauroyle, . du persulfate d'ammonium, de sodium ou de potassium, . des peresters tels que le peroxypivalate de t-butyle, le peroxypivalate de acumyle et le peroctoate de t-butyle.
Le pH de la phase aqueuse des latex utilisés dans le procédé selon l'invention est en général d'au moins 2, voire d'au moins 3.
Le polymère des particules de latex peut être filmogène ou non à température ambiante. Sa température de transition vitreuse Tg peut être compris entre - 50 C et 150 C, de préférence entre 0 et 1 200C.