INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans la demande de brevet WO93/24510 est décrite une approche très générale permettant de délivrer intracellulairement des mononucléotides via l'utilisation de phosphotriesters nucléosidiques neutres substitués par deux groupements bioréversibles.
Cette approche peut étire appliquée à tout type d'analogues nucléosidiques qui se doivent, pour exercer leurs activités biologiques, d'entre métabolisés en leurs dérives triphosphates. Ce tic métabolisation intracellulaire s'effectue généralement via l'action successive de trois kiioases, la première étant hautement sélective et fortement régulée. II s'ensuit que si un analogue nucléosidique n'est pas monophosphorylé au préalable par une première kinase, son activité inhibitrice ne peut s exprimer.
Certains virus, comme ceux de l'herpès simplex, encodent une kinase virale susceptible d'activer certains analogues nucléosidiques alors que les kinases cellulaires ne le peuvent pas. En particulier, certains acyclonucléosides qui ne sont pas substrats de la première kinase cellulaire ne présentent aucune activité contre des virus n'apportant pas leur propre kinase. C'est le cas de l'acyclovir (ACV) dont l'activité anti- herpétique est bien établie suite à sa monophosphorylation sélective par la thymidine kinase des virus herpes simplex (llsV). Par contre, ce mème acyclovir n'est pas actif contre d'autres virus, tels le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) ou encore celui de l'hépatite B (HBV) qui n'apportent pas de kinases spécifiques. Par ailleurs, I'ACV n'est que peu actif contre des virus herpétiques dont l'activité thymidine kinase est réduite ou manquante, par exemple le virus d'Epstein-Barr ou le cytomégalovirus. Enfin, il est bien établi que des virus herpes simplex résistant a l'acyclovir pcuvcnt apparaitre tant in vitro qu'in vivo, en particulier, chez des patients fortement immunodéprimés. Ces résistances ont généralement pour origine une altération de la thymidine kinase virale, d'où une réduction ou une disparition de la phosphorylation de l'ACV (A.J. Wagstaff, D. Faulds and K.L Goa, "Acyclovir.A Reappraisal of its Antiviral Activity, Pharmacokinetic Properties and Therapeutic Efficacy", Drugs, 47, 153 (1994)).
Un dérivé préféré de l'époprosténol pour les besoins de l'invention est constitué par le composé connu sous la désignation "Iloprost" (qui sera aussi utilisée dans la suite de l'exposé pour le désigner) de formule FORMULE Il lloprost Son poids moléculaire est de 360,48.
Il va de soi que les concentrations relatives indiquées ci-dessous en citrate et en dérivé d'époprosténol, notamment en iloprost, se sont avérées fournir des résultats particulièrement efficaces dans le système expérimental utilisé. Sans qu'il y ait lieu de considérer les proportions relatives qui suivent comme ayant un caractère limitatif, il peut être indiqué que ces concentrations pourront en général être contenues dans des intervalles - de l'ordre de 0,350 à de l'ordre de 1,1 M pour le citrate trisodique - de l'ordre de 35 x 10-6 à de l'ordre de 35 x 10-9 M pour le dérivé d'époprosténol, notamment en iloprost, les concentrations étant exprimées par rapport au volume de liquide de prélèvement.
L'invention concerne aussi les compositions solides contenant les proportions pondérales appropriées des constituants de base des solutions sus-indiquées permettant de réaliser des solutions ayant les concentrations respectives sus-indiquées, par exemple en citrate trisodique et en Iloprost.
Elle concerne naturellement les solutions ellesmêmes, souvent préparées à l'avance en tube initialement fermé, aux fins de recevoir les échantillons de plasma ou de sang à conserver, par exemple dans un rapport de 9 volumes de sang ou plasma pour 1 volume de liquide de prélèvement.
Enfin, le procédé selon l'invention concerne le procédé de conservation lui-même d'un échantillon de sang ou de plasma, procédé qui consiste à mettre et à maintenir en contact cet échantillon avec le liquide de prélèvement, notamment dans les condition susindiquées, de préférence à la température ordinaire.
L'efficacité d'une solution conforme à l'invention ci-après, désignée par l'abréviation "C + IW est illustrée par le Tableau I suivant, dans lequel sont rapportés des résultats d'essais comparatifs effectués sur du sang prélevé, à plusieurs mois d'intervalle, et cela chaque fois à raison de 1 volume de liquide de prélèvement pour 9 volumes de sang. Les essais ont été réalises avec un liquide de prélèvement constitué d'une solution aqueuse, contenant les constituants désignés ci-après, aux concentrations molaires respectives également indiquées ci-apres Citrate trisodique 2,5 H20 : 0,109 M/1 "Iloprost" (Laboratoire Schering) 5 x 10-7 M/1.
Compte plaquettaire x 10 /mm en fonction de la durée de conservation du sang du patient Prélèvement du sang Expérience 1 Expérience 2 Expérience 3 sur: 1/4 114 h. I h. 1/4 I h. 3h30 1/4 h . I h Citrate 0.01 I M 219 162 278 65 106 270 153 CTAD 300 178 273 233 232 non testé Liquide de préleve- 337 347 271 271 236 286 267 ment proposé CIL La concentration de l'Iloprost choisie est celle pour laquelle est obtenue une inhibition presque complète de l'activation et de l'agrégation plaquettaire.
Les résultats ont été exprimés par les numérations de plaquettes après les intervalles de temps indiqués dans le Tableau I. On constate la stabilité dans le temps nettement plus grande des nombres de plaquettes dans le sang prélevé sur les liquides de prélèvement C + I, que dans les échantillons de comparaison. Les nombres de plaquettes mesurées tiennent compte des dilutions du sang par le solution stabilisante.
I1 est remarquable que la composition selon l'invention soit apte à surmonter la plus grande résistance à l'héparine qui est observée chez certains malades, comme cela avait aussi été remarqué pour le même malade. Afin de le montrer plus précisemment, du sang de ce même malade a été prélevé sur des solutions de CTAD, de citrate de sodium et, enfin de citrate de sodium et d'Iloprost, et ce aux fins d'obtenir, notamment pour les deux derniers liquides de prélèvement, des concentrations finales dans le plasma, respectivement - de citrate de sodium 0,109 M/1 et - de citrate 0,109 M/1 additionné d'Iloprost, 5 x 10-7 M/1. Les mélanges ont été conservés à la température du laboratoire, parallèlement à un sang normal servant de témoin et subissant les mêmes manipulations.La concentration finale de l'Iloprost dans le plasma citraté était voisine de 10-7 M/1.
On a ajouté des concentrations croissantes d'héparine de 0,1 à 0,5 unité internationale (concentration finale) et mesuré l'allongement du temps de céphaline plus activateur.
L'héparine utilisée était 1'héparine produite par la Société Léo 5000 U/ml diluée dans du sérum physiologique. Le plasma du patient a été obtenu par centrifugation (20 min à 2000 g) pour réaliser les concentrations d'héparine souhaitées. Un sang normal témoin a été utilisé comme témoin. Des numérations plaquettaires ont été pratiquées immédiatement avant la centrifugation, aussi bien sur l'échantillon de sang à l'étude que sur le témoin. Les résultats sont rassemblés dans le Tableau II et la figure 1.
Témoin ----------- Patient L. Jacques------- Citrate Citrate 0.10') M 0.109 M CIAD Solution C.ll % dc plaquettes agrégées 5% 35 8 10 46 0% Concentration héparine néccs- sairc pour 0,20 > 0,50 0,35 0,20 doubler le TCA Les résultats sont exprimés vis à vis des concentrations d'héparine capable de doubler le temps de céphaline avec activateur (TCA) du patient, par rapport aux valeurs mesurées, sans addition d'héparine, et les pourcentages calculés des plaquettes agrégées pour ces mêmes concentrations d'héparine.
La numération des plaquettes a été faite à l'appareil Coulter S+.
Le TCA a été réalisé avec le réactif APTT (Laboratoire Organon) sur un automate de coagulation appelé KC 10.
La Figure 3 montre un dispositif d'administration par électrotransport représentatif qui peut être utilisé dans le contexte du présent procédé. Le dispositif 10 comprend un boîtier supérieur 16, un montage sur carte à circuit imprimé 18, un boîtier inférieur 20, une anode 22, une cathode 24, un réservoir anodique 26, un réservoir cathodique 28 et un adhésif 30 compatible avec la peau. Le boîtier supérieur 16 comporte des ailettes latérales 15 qui aident à maintenir le dispositif 10 sur la peau du patient.
Le boîtier supérieur 16 est de préférence constitué d'un élastomère moulable par injection (par exemple un copolymère éthylène-acétate de vinyle) . Le montage sur carte à circuit imprimé 18 comprend un circuit intégré 19 connecté à des composants discrets 40 et une pile 32. Le montage sur carte à circuit imprimé 18 est attaché au boîtier 16 par des colonnettes (non représentées sur la Figure 3) s'insérant dans des ouvertures 13a et 13b, les extrémités des colonnettes étant chauffées/fondues afin de fixer à chaud la carte à circuit imprimé 18 au boîtier 16.
Le boîtier inférieur 20 est fixé au boîtier supérieur 16 au moyen de l'adhésif 30, la surface supérieure 34 de l'adhésif 30 adhérant à la fois au boîtier inférieur 20 et au boîtier supérieur 16, y compris aux surfaces inférieures des ailettes 15.
Une pile bouton 32 est représentée (partiellement) sur la face inférieure du montage sur carte à circuit imprimé 18. D'autres types de piles ou accumulateurs peuvent également être utilisés pour alimenter le dispositif 10.
Le dispositif 10 se compose généralement de la pile 32, du circuit électronique 19,40, des électrodes 22,24 et des réservoirs de médicament/produit chimique 26,28, qui sont tous intégrés dans une unité indépendante. Les sorties (non représentées sur la Figure 3) du montage sur carte à circuit imprimé 18 sont électriquement connectées aux électrodes 24 et 22 par des ouvertures 23,23' ménagées dans des concavités 25,25' formées dans le boîtier inférieur 20, au moyen de bandes d'adhésif électriquement conducteur 42,42'. Les électrodes 22 et 24 sont elles-mêmes en contact électrique et mécanique direct avec les faces supérieures 44',44 des réservoirs de médicament 26 et 28. Les faces inférieures 46',46 des réservoirs de médicament 26,28 entrent en contact avec la peau du patient à travers des ouvertures 29',29 ménagées dans l'adhésif 30.
Le dispositif 10 comporte facultativement un moyen qui permet au patient de s'auto-administrer une dose de médicament par électrotransport. Lorsque le patient appuie sur un commutateur à bouton-poussoir 12, le montage électronique sur carte à circuit imprimé 18 délivre un courant continu prédéterminé aux électrodes/réservoirs 22,26 et 24,28 pendant une période d'administration de durée prédéterminée. Le commutateur à bouton-poussoir 12 est commodément disposé sur la face supérieure du dispositif 10 et il est facilement actionné à travers un vêtement. Pour activer le dispositif afin de délivrer le médicament, il est préférable d'employer une double pression sur le commutateur à bouton-poussoir 12, avec un court délai de temporisation, par exemple de trois secondes, pour minimiser ainsi le risque d'actionnement accidentel du dispositif 10.De préférence, le dispositif envoie à l'utilisateur une confirmation visuelle et/ou sonore du début de la période d'administration de médicament au moyen d'une diode électroluminescente 14 qui s'allume et/ou d'un générateur de bips, par exemple, qui émet un signal sonore audible. Le médicament est délivré par électrotransport à travers la peau du patient, par exemple sur le bras, durant la période d'administration prédéterminée.
L'anode 22 comprend de préférence de l'argent et la cathode 24 comprend de préférence du chlorure d'argent. Les deux réservoirs 26 et 28 comprennent de préférence des matières à base d'hydrogel de polymère. Les électrodes 22,24 et les réservoirs 26,28 sont retenus dans les concavités 25',25 formées dans le boîtier inférieur 20.
Le commutateur à bouton-poussoir 12, le montage électronique sur carte à circuit imprimé 18 et la pile 32 sont "scellés" au moyen d'adhésif entre le boîtier supérieur 16 et le boîtier inférieur 20. Le boîtier supérieur 16 est de préférence constitué de caoutchouc ou d'une autre matière élastomère. Le boîtier inférieur 20 est de préférence constitué d'une matière plastique ou élastomère en feuille (par exemple du polyéthylène) qui peut être facilement moulée pour former les concavités 25,25' et découpée pour former les ouvertures 23,23'. Le dispositif 10 assemblé est de préférence résistant à l'eau (c'est-à-dire à l'épreuve des éclaboussures) et il est très préférablement étanche à l'eau. Le système a un profil bas qui s'adapte facilement au corps, pour laisser ainsi la liberté de mouvement sur le site et au voisinage du site où il est porté.Les réservoirs 26 et 28 sont disposés sur la face du dispositif 10 qui entre en contact avec la peau et ils sont suffisamment séparés pour éviter une mise en court-circuit électrique accidentelle pendant la manipulation et l'utilisation normales.
Le dispositif 10 adhère à une surface corporelle du patient (par exemple la peau) au moyen de l'adhésif périphérique 30 qui présente une face supérieure 34 et une face 36 entrant en contact avec la peau. La face 36 de l'adhésif possède des propriétés adhésives qui assurent que le dispositif 10 reste en place sur le corps pendant l'activité normale de l'utilisateur, tout en permettant son enlèvement après une période d'utilisation prédéterminée (par exemple 24 heures). La face supérieure 34 de l'adhésif adhère au boîtier inférieur 20 et maintient ce dernier fixé au boîtier supérieur 16.
Les réservoirs 26 et 28 comprennent généralement une matrice de gel, la solution de médicament étant uniformément dispersée dans l'un au moins des réservoirs 26 et 28. On peut employer des concentrations de médicament comprises dans l'intervalle d'environ 1 x 10 N à 1,0 M ou plus, les concentrations de médicament situées dans la partie inférieure de l'intervalle étant préférées. Des polymères appropriés pour la matrice de gel peuvent comprendre essentiellement n'importe quelles matières polymères synthétiques et/ou naturelles de caractère non ionique. Une nature polaire est préférée lorsque l'agent actif est polaire et/ou capable d'ionisation polaire, afin d'augmenter la solubilité de l'agent.La matrice de gel est facultativement gonflable par l'eau. Des exemples de polymères synthétiques appropriés comprennent, sans y être limités, le poly(acrylamide), le poly(acrylate de 2hydroxyéthyle), le poly(acrylate de 2-hydroxypropyle), la poly(N-vinylpyrrolidone), le poly(N-méthylolacrylamide), le poly < diacétone-acrylamide), le poly < méthacrylate de 2hydroxyéthyle), le poly(alcool vinylique) et le poly(alcool allylique) . D'autres exemples de polymères synthétiques polaires appropriés sont des polymères de condensation à fonctionnalité hydroxyle (c'est-à-dire des polyesters, polycarbonates, polyuréthannes).Des exemples de polymères naturels polaires (ou dérivés de ceux-ci) utilisables pour la matrice de gel sont, par exemple, des éthers de cellulose, des éthers de méthylcellulose, la cellulose et la cellulose hydroxylée, la méthylcellulose et la méthylcellulose hydroxylée, des gommes telles que le guar, la gomme de caroube, le karaya, la gomme de xanthane, la gélatine et leurs dérivés. Il est possible également d'utiliser des polymères ioniques pour la matrice, à condition que les contre-ions disponibles soient des ions de médicament ou soient d'autres ions de charge opposée à celle de l'agent actif.
Ainsi, les analogues de polypeptides de la présente invention sont incorporés dans le réservoir de médicament, par exemple une matrice de gel tel que décrite ci-dessus, et administrés à un patient en utilisant un système d'administration de médicament par électrotransport, éventuellement tel que décrit en exemple ci-dessus.
L'incorporation de la solution de médicament peut être effectuée d'un certain nombre de manières, par exemple en imbibant la matrice du réservoir avec la solution, en mélangent la solution de médicament avec la matière de matrice avant la formation d'hydrogel, etc.
Bien que l'invention ait été décrite en considérant ses formes de réalisation particulières préférées, on doit comprendre que la description précédente, ainsi que les exemples qui suivent, sont destinés à illustrer et non à limiter l'invention. D'autres aspects, avantages et modifications entrant dans le cadre de l'invention apparaîtront aux spécialistes du domaine auquel l'invention s'applique.
III. PARTIE EXPÉRIMENTALE En général, les techniques usuelles de la technologie de l'ADN recombinant sont décrites dans diverses publications, par exemple : Molecular Cloning: A Laboratory Manual de Sambrook et coll. (Cold Spring Harbor Laboratory, 1989) ; Current Protocols in Molecular Biology de Ausubel et coll., volumes 1 et 2 et suppléments (1987) ; et Methods in Enzymology, dirigé par Wy et Grossman, volume 53 (ADN Recombinant, Partie D, 1987). Les enzymes de restriction, les milieux de culture pour cellules de mammifères et la lignée cellulaire E. coli DH1OB F80dlacZDM15 DlacX74 deoR recAl araD139 D(ara,leu)7697 galU galK I rpsL endAl nupG) ont été achetés chez Gibco/BRL (Gaithersburg, MD).La polymérase Taq provenait de chez Perkin Elmer Cetus (Norwalk, CT). La résine liant His a été achetée chez Novagen (Madison, WI) et utilisée selon les instructions du fabricant. La désoxyribonucléase (DNase) et la lysozyme ont été achetées chez Boehringer Mannheim (Indianapolis, IN). Le bromure de cyanogène a été acheté chez Aldrich (Milwaukee, WI) . Les oligonucléotides ont été synthétisés sur un synthétiseur d'ADN, modèle 394, de Applied Biosystems Inc. (Foster City, CA) en utilisant les produits chimiques de cette même firme. La parathormone humaine synthétique et la parathormone bovine synthétique ont été achetées chez Bachem (Torrance, CA).
EXEMPLE 1 Construction de vecteurs d'expression pour les polypeptides PTH Les vecteurs d'expression de PTH sont construits en plusieurs étapes en utilisant le plasmide pBAD18 (Guzman et coll., 1995) comme plasmide de départ. Le plasmide pBAD18 contient le promoteur araB suivi par un lieur multisite et un terminateur sous la commande du régulateur positif/négatif ara C, également spécifié par le plasmide. Le plasmide pBAD18 contient également une origine modifiée de plasmide pBR322 et le gène bla pour permettre la réplication et la sélection dans E. coli, ainsi que la région intragénique du phage M13 pour permettre le dégagement d'ADN monocaténaire. Cependant, le vecteur de clonage effectivement utilisé pour construire les vecteurs d'expression de l'invention n'est pas déterminant aux fins de la présente invention.
Par exemple, le plasmide pMC3 pourrait servir de vecteur de clonage à la place du plasmide pBAD18 dans les protocoles exposés ci-dessous. Le plasmide pMC3 est décrit dans le brevet des E.U.A. NO 5 270 170. Le plasmide pMC3 diffère du plasmide pBAD18 en ce que le plasmide pMC3 code pour un répresseur de lac à queue de dynorphine B dans la région correspondant à la région NheI-XbaI du site de clonage multiple de pBAD18 et code une séquence d'opérateur lac dans la région correspondant au fragment NdeI-ClaI du plasmide pBAD18. Étant donné que ce dernier fragment n'est pas essentiel aux fins de la présente invention, on peut facilement construire des vecteurs convenant aux fins de l'invention à partir du plasmide pMC3.Le plasmide pMC3 est disponible dans la souche ARIî6l fournie par l'American Type Culture Collection sous le numéro de dépôt ATCC 68818.
L'étalonnage croisé de type IV est intéressant dans le même cas que l'étalonnage croisé de type II mais avec moins de paramètres à estimer.
On peut également montrer que, dans le cas de l'étalonnage croisé de type III, il existe une solution linéaire pour trouver les valeurs des paramètres géométriques minimisant l'erreur de reprojection.
En ce qui concerne le fantôme rigide, on précise qu'il existe des méthodes linéaires conduisant à des matrices 3x4 (" matrices de projection conique ") que l'on décompose ensuite pour trouver les paramètres intrinsèques et extrinsèques.
On peut aussi trouver directement les paramètres intrinsèques et extrinsèques grâce à des méthodes non linéaires itératives.
On notera que les marqueurs peuvent être placés à des positions arbitraires et que le procédé objet de l'invention est donc plus souple que les procédés d'étalonnage connus car il permet l'utilisation, pour examiner la tête d'un patient, d'une sorte de bonnet de bain ou de bandeau dont on couvre la tête du patient et qui porte les marqueurs, au lieu d'utiliser un cadre rigide pour la tête dans le cas des procédés connus.
Le procédé s'applique également à d'autres parties du corps par exemple le thorax ou l'abdomen pour lesquelles il n'existe pas de cadre rigide.
De plus, il n'est pas nécessaire de voir toutes les billes dans toutes les projections pour mettre en oeuvre l'invention.
Il suffit que chaque marqueur soit vu dans au moins deux images successives.
En outre, il n'est pas nécessaire d'avoir un nombre minimum de marqueurs simultanément présents dans toutes les images.
L'invention n'est pas limitée à l'imagerie par rayons X.
Elle s'applique également à l'imagerie visible et à l'imagerie infrarouge ainsi qu'à l'imagerie y.
DETECTEUR DE PARTICULES SENSIBLE A LA POSITION DESCRIPTION Domaine technique La présente invention concerne un détecteur de particules sensible à la position.
Par "particules", on entend notamment les particules chargées telles que les ions et les électrons, ainsi que les photons.
L'invention s'applique notamment aux sondes atomiques et, plus généralement, à tout domaine où l'on recherche une corrélation entre l'espace et le temps.
L'invention s'applique ainsi par exemple en Physique des particules, à la microscopie d'ions secondaires à temps de vol ("Time Of Flight Secondary Ion Microscopy"), à la spectrométrie de masse et à la fabrication de dispositifs à couplage de charge à temps de vol ("Time Of Flight Charge Coupled Devices").
L'invention permet de repérer précisément, dans le temps et dans l'espace, les impacts de particules sur un détecteur muni de moyens de multiplication d'électrons (généralement des galettes de microcanaux).
Le déssin 1-2 représente une vue d'ensemble concernant la modul -ation en amortissement avec l'adaptation dans la partie hachur -ée.
Le déssin 1-3 représente la cinématique du pilier-pivot à rotul -es modulaire fig 1 et 2 ainsi que la cinématique de la modulat -ion en amortissement fig 3.
Le déssin 1-4 fig 1 2 et 3 représente la DISPOSITION DE PRINCIPE des éléments.
Le déssin 1-5 représente un vue d'ensemble éclatée à l'échelle 2/3.
En rapport aux déscriptions des déssins 0.1.1-2 et 1-5, la base est constituée de deux éléments symétriques 2 et 2A, formés d'une demi-sphère convexe chacun et travèrsés par deux perforations.leur conception permet de les réunir afin d'adapter en centrage la rot -ule 6. les éléments 2 et 2A maintiennent ainsi la rotule 6 tout en lui permettant un degré de mobilité sur lui-même. La fixation est éfféctuée par un système traditionnel vis-boulons introduits et traversant les perforations 4 et 4A afin de réunir les éléments 2 et 2A comme sur le déssin O " vue d'ensemble ,' constituant une base homogène.
Les éléments 5A.53.5C et 5D sont des mécanismes-ressorts. Ils sont prévus pour récupérer l'énèrgie des vibrations de base et de la structure superposée pour la réstituer progréssivement entre eux et stabiliser l'ensemble. Les éléments 5A.5B.5C et 5D sont solidai -res. Pendant que certains d'entre-eux subissent une compréssion, les autres par compensation marginale subissent une décompréssion et même un étirement. La cinématique du déssin 1-3 fig 1 et 2 réalise la démonstration du phénomène.
Dans l'ordre d'assemblage, les dispositifs 5A.53.5C et 5D se positionnent sur les éléments 2 et 2A comme sur le déssin O TUE D'ENSEMBLE ".
Le dispositif 7 est l'élément intèrmdiaire entre la base const -ituée avec 2.2A.5A.5B.5C.5D et 6 et les éléments de support et de compréssion 1 et 1A. Il est formé d'une demi-sphère convexe sur la partie supérieure ainsi que d'une gorge circulaire 8 et 8A dans la partie inférieure lui perméttant de s'emboiter sur 6. L'ensemble 6 et 7 représente le pilier-pivot à rotules. On remarque que les mécanismes-ressorts 5A.5B.5C et 5D s'emboitent dans l'ordre d'ass -emblage avec le dispositif 7 simultanément. L'ensemble 5A.5B.5C.