INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La présente invention a également pour objet tout procédé d'obtention de LGC recombinante sous forme d'enzyme active, et/ou d'un (ou plusieurs) polypeptide(s) dérivé(s) de cette dernière, notamment par addition et/ou suppression et/ou substitution d'un ou plusieurs acide(s) aminé(s), ce (ou ces) polypeptide(s) dérivé(s) présentant une activité lipasique, caractérisé en ce qu'il comprend:: - la transformation de cellules végétales, de manière à intégrer, dans le génome de ces cellules, une (ou plusieurs) séquence(s) nucléotidique(s) recombinante(s) selon l'invention, - le cas échéant, l'obtention de plantes transformées à partir des cellules transformées susmentionnées, - la récupération de la LGC recombinante et/ou du (ou des) polypeptide(s) dérivé(s) susmentionné(s) produit(s) dans lesdites cellules ou plantes transformées susmentionnées, notamment par extraction, suivie, le cas échéant, par une purification.
Selon un mode de réalisation du procédé susmentionné de l'invention, la transformation de cellules végétales peut être réalisée par transfert de la séquence nucléotidique recombinante de l'invention dans les protoplastes, notamment après incubation de ces derniers dans une solution de polyéthylène glycol (PEG) en présence de cations divalents (Ca2 +) selon la méthode décrite dans l'article de Krens et al., 1982.
La transformation des cellules végétales peut également être réalisée par électroporation notamment selon la méthode décrite dans l'article de Fromm et al., 1986.
La transformation des cellules végétales peut également être réalisée par utilisation d'un canon à gène permettant la projection, à très grande vitesse, de particules métalliques recouvertes de séquences nucléotidiques recombinantes selon l'invention, délivrant ainsi des gènes à l'intérieur du noyau cellulaire, notamment selon la technique décrite dans l'article de Sanford, 1988.
Une autre méthode de transformation des cellules végétales, est celle de la micro-injection cytoplasmique ou nucléaire telle que décrite dans l'article de De La Penna et al., 1987.
Selon un mode de réalisation particulièrement préféré du procédé susmentionné de l'invention, les cellules végétales sont transformées par mise en présence de ces dernières avec un hôte cellulaire transformé par un vecteur selon l'invention, tel que décrit ci-dessus, ledit hôte cellulaire étant susceptible d'infecter lesdites cellules végétales en permettant l'intégration dans le génome de ces dernières, des séquences nucléotidiques recombinantes de l'invention initialement contenues dans le génome du vecteur susmentionné.
Avantageusement, l'hôte cellulaire susmentionné utilisé est Agrobacterium tumefaciens, notamment selon les méthodes décrites dans les articles de Bevan, 1984 et d'An et al., 1986, ou encore Agrobacterium rhizogenes, notamment selon la méthode décrite dans l'article de Jouanin et al., 1987.
Parmi les cellules végétales susceptibles d'être transformées dans le cadre de la présente invention, on peut citer celles du colza, tabac, maïs, pois, tomate, carotte, blé, orge, pomme de terre, soja, tournesol, laitue, riz et luzerne.
Selon un mode de réalisation du procédé susmentionné de l'invention, les cellules végétales transformées selon l'invention, sont cultivées in vitro, notamment en bioréacteurs selon la méthode décrite dans l'article de Brodelius, 1988, en milieu liquide, ou selon la méthode décrite dans l'article de Brodelius et al., 1979, sous forme immobilisées, ou encore selon la méthode décrite dans l'article de Deno et al., 1987, procédant par culture de racines transformées in vitro.
Les milieux des cultures in vitro susmentionnés sont ensuite récupérés pour en extraire, et le cas échéant purifier, notamment par chromatographie, la LGC recombinante et/ou les polypeptide(s) dérivé(s) définis ci-dessus, produits par lesdites cellules transformées cultivées in vitro.
Selon un mode de réalisation préféré du procédé susmentionné d' obtention de LGC recombinante et/ou de polypeptide(s) dérivé(s) selon l'invention, la transformation de cellules végétales est suivie par une étape d'obtention de plantes transformées par mise en culture desdites cellules transformées dans un milieu approprié. La LGC recombinante et/ou le (ou les) polypeptide(s) dérivé(s), produit(s) dans les cellules des plantes entières ainsi obtenues, sont récupérés par extraction réalisée à partir des plantes entières, ou de fragments de ces plantes (notamment à partir des feuilles ou des tiges), ou encore à partir de semences issues de ces plantes, cette extraction étant le cas échéant suivie par une étape de purification de la LGC recombinante et/ou du (ou des) polypeptide(s) dérivé(s).
Les plantes transformées utilisées pour la récupération de la LGC recombinante et/ou du (ou des) polypeptide(s) dérivé(s) dans le cadre du procédé susmentionné, sont celles de la génération TO, à savoir celles obtenues à partir de culture de cellules transformées de l'invention sur un milieu approprié, ou avantageusement celles des générations suivantes (T1, T2 etc.) obtenues par autofécondation des plantes de la génération précédente et dans lesquelles les séquences nucléotidiques recombinantes de l'invention se reproduisent selon les lois de Mendel.
Parmi les polypeptides dérivés de la LGC recombinante susceptibles d'être obtenus dans le cadre de la mise en oeuvre d'un procédé selon l'invention, on peut citer - le polypeptide délimité par les acides aminés situés aux positions 55 et 379 de la figure 2, encore désigné polypeptide (A54), - le polypeptide délimité par les acides aminés situés aux positions 5 et 379 de la figure 2, encore désigné polypeptide (A4).
L'invention a plus particulièrement pour objet tout procédé tel que décrit ci-dessus, d'obtention de la LGC recombinante représentée sur la figure 2, et le cas échéant, d'obtention d'un (ou de plusieurs) polypeptide(s) dérivé(s), notamment du polypeptide (554) et/ou du polypeptide (A4) susmentionnés, ledit procédé étant caractérisé en ce que l'étape de transformation des cellules végétales est réalisée par intégration dans le génome de ces dernières, d'une séquence recombinante telle que décrite ci-dessus, contenant d'une part l'ADNc représenté sur la figure 1, et, d'autre part, la séquence codant pour le peptide signal de 22 acides aminés de la LGL, avantageusement celle codant pour les 19 premiers acides aminés du peptide signal de la LGL.
L'invention vise plus particulièrement un procédé d'obtention tel que décrit ci-dessus de la LGC recombinante représentée sur la figure 2, le cas échéant en association avec le polypeptide (A54) et/ou le polypeptide (A4), caractérisé en ce qu'il comprend: - la transformation de cellules d'explants de feuilles d'une plante, par mise en présence de ces dernières avec une souche d'Agrobacterium tumefaciens transformée par un plasmide tel que décrit cidessus contenant la séquence nucléotidique recombinante pd3 5S-RS-LGC susmentionnée, sur un milieu de culture approprié, - sélection des explants transformés sur un milieu contenant de la kanamycine, - obtention de plantes transformées à partir des explants transformés susmentionnés par culture de ces derniers sur des milieux appropriés, - extraction de la LGC recombinante, et le cas échéant du polypeptide (A54) et/ou du polypeptide (A4), notamment par broyage des feuilles et/ou des graines des plantes transformées susmentionnées dans un tampon approprié, centrifugation et récupération du surnageant constituant l'extrait végétal à activité enzymatique, - le cas échéant purification de la LGC recombinante à partir de l'extrait obtenu lors de l'étape précédente, notamment par chromatographie réalisée à partir du surnageant, ce qui conduit à l'obtention de LGC recombinante sous forme essentiellement pure.
n permet selon l'inventeur de faire échec aux tentatives de vol de ces derniers.
A ce jour, quelques rares types de véhicules récents possèdent des dossiers basculants équipés d'un dispositif de blocage interne du mécanisme d'arrimage en position fonctionnelle par blocage du déverrouillage à commande par boutons poussoirs.
Ces dispositifs sont placés à demeure dans le dossier.
fis ne peuvent pas être ajoutés ultérieurement à la fabrication du dossier et ne sont utilisables éventuellement par les constructeurs sur les dossiers des futures automobiles que lorsque la commande de déverrouillage s'effectue par boutons poussoirs.
L'invention porte sur un dispositif agissant en dehors du mécanisme et pouvant être amovible.
En conséquence, il pourra être utilisé pour la plupart des dossiers des voitures construites, que la commande de déverrouillage soit à boutons poussoirs ou à manettes, ainsi que pour les futures automobiles conçues ou non, qui ne possèderaient pas le dispositif existant cité ci-dessus.
Les propriétaires d'automobile soucieux de protéger leurs biens transportés, auront ainsi la possibilité d'assurer leur protection à peu de frais.
MODES PARTICULIERS D'EXECUTION Suivant le système maintenant le dossier en position fonctionnelle, deux conceptions sont proposées: Première conception Elle s'applique aux dossiers basculants dont les deux pênes assurant leur arrimage en position fonctionnelle sont accessibles de l'intérieur de l'emplacement à bagages, lorsque le hayon est ouvert. Le blocage des pênes en prise sur les gâches est obtenu par le positionnement au-dessus de ceux-ci de butées de forme et de dimensions choisies en fonction de la configuration des éléments fixes situés à leur proximité dans l'emplacement à bagages.
Si ces éléments sont inexistants ou inadaptés, des pièces de maintien des butées en position de blocage des pênes seront prévues, éventuellement autocollantes.
L'antivol pourra être amovible. Dans ce cas, une entretoise sera placée entre les butées et les maintiendra en appui contre les parois latérales de l'emplacement à bagages à chacune des extrémités du dossier. Ceci grâce à un dispositif extensible.
La fonction d'extensibilité sera obtenue grâce à un système télescopique, à vis ou à levier.
Un dispositif retractable à ressort pourra également être appliqué.
L'antivol amovible est utilisable sur les voitures existantes et pourra l'être sur les futures.
Pour les voitures à concevoir, d'autres systèmes de maintien en place des butées pourront être prévus et l'antivol pourra éventuellement être placé à demeure dans l'emplacement à bagages lors de la fabrication de l'automobile.
Dans ce cas, des dispositions particulières pourront être prévues, dès l'origine près des points d'arrimage du dossier (forme, protubérances, axes, trous lisses ou filetés).
Les systèmes pourront être coulissants ou basculants par exemple, et l'actionnement du déverrouillage sera à faire à partir de l'intérieur de l'emplacement à bagages.
Ces poles sont indépendants, c'est-à-dire que: - chacun peut être situé sur une machine informatique différente, ou bien on peut en regrouper plusieurs sur une même machine; - chaque pôle est sollicité sans en informer les autres. Les fonctions de chacun d'entre eux sont exécutées, sauvegardées, rechargées et être transmises aux autres pôles ultérieurement; - chaque pôle peut faire l'objet d'un choix de programmation différent (par exemple: pôle 1 en Fortran, pôle 2 en langage C, pôle 3 sous Orade).
Compléments sur le générateur d'études Le système de l'invention est caractérisé avantageusement entre autres par la présence d'un générateur d'études (niveau 4), qui est une couche du système chargée d'analyser la nature des données d'entrée et de séquence les calculs nécessaires afin de foumir en sortie les résultats sous une forme définie par l'utilisateur.
Ce générateur d'études possède une structure originale en V, dont les éléments sont sur la figure 3: - un interpréteur d'instructions 10; - un constructeur d'études Il; - un séquenceur de simulations 12; - un analyseur de résultats 13; - un conditionneur de résultats 14.
Description de l'architecture en étoile de l'interface homme-machine L'organigramme fonctionnel de l'interface homme-machine pour la gestion de déchets est représenté sur la figure 4.
II s'agit de la disposition de fonctionnement de cette interface, dans le cadre des outils d'aide à la gestion des déchets.
Contrairement aux interfaces dassiques d'acquisition de données et de traitement des résultats, cette interface n'est pas d'une utilisation séquentielle. II s'agit plutôt d'une architecture en étoile avec priorités.
On a ainsi la feuille principale (action générale) 20 qui est reliée à chacun des modules périphériques: - choix des modules physiques 21; - assemblage des modules et des scénarios 22; - mise au point des données sur les modules 23; - définition et exploitation des résultats 24; - exécution des calculs 25; - mise au point des caractéristiques des calculs 26; - mise au point des données sur les particules 27; - choix des particules à faire migrer 28.
L'utilisateur se trouve par défaut au centre de cette étoile, c'est à-dire dans la situation où l'interface attend une sollicitation de l'opérateur.
Quand on est au centre, il est possible d'effectuer toutes les opérations à caractère général: sauvegarde ou chargement de toute une étude, exécution d'un calcul ou fin de travail par exemple.
L'opérateur peut donc se rendre dans l'une quelconque des branches du système pour mettre au point (exemples non exhaustifs): - la famille de radionudéides à étudier; - la configuration spatiale et temporelle du scénario; - les paramètres de chaque module physique; - les résultats à retenir.
Bien que l'on puisse se rendre dans chaque branche sans contrainte particulière, il y a un certain ordre initial naturel à respecter: les paramètres d'un module ne peuvent en effet être examinés qu'après avoir sélectionné ce même module. Cette règle de priorité évidente mise à part (et liée à la dépendance entre éléments), il est possible de solliciter chaque branche dans le désordre.
Description du langage entre interface et code de calcul Pour que les niveaux 1 à 4 puissent être exécutés indépendamment du niveau 5 (par exemple, exécution à partir d'un terminal non graphique, multifenêtrage indisponible, etc.), et que la communication entre ces deux parties soit la plus simple possible, on emploie un langage très simple (quelques mots dés, une syntaxe de base, claire et non cryptée) qui permet de décrire à la fois l'assemblage des modules, le scénario et les types d'études ainsi que les grandeurs à extraire. Ce langage symbolique adopte la philosophie d'un Langage Orienté Objet, dans une optique simplifiée et que l'on nommera LSE (langage symbolique pour les études).
L'utilisateur peut de cette façon concevoir, à l'aide d'un éditeur rudimentaire, un jeu de données représentant toute son étude, puis le foumir comme fichier d'entrée.
Le niveau 4 est alors équipé d'un interpréteur simple qui permet de convertir les instructions du jeu de données en pointeurs et séquences d'activation internes: l'interprétation ne se fait donc qu'une seule fois dans toute l'étude, au début et non à chaque itération de calcul, comme le proposent malheureusement ia plupart des langages interprétés.
II en découle que l'interface homme-machine est conçue simplement comme un outil qui traduit les directives de l'utilisateur à l'écran en un jeu de données du type précédent. Le niveau 5 dispose bien entendu de l'inventaire complet des modèles et fonctions supportés par les niveaux inférieurs.
Le coeur du système (niveaux 1 à 4) fournit en retour, des informations variées: - pendant l'interprétation et avant toute exécution, le coeur renvoie des messages faisant état d'éventuelles incohérences des jeux de données. Cette information, qui peut etre mise sous forme de fichier, est directement consultable en console et doit être supportée par l'interface hommemachine; - après ou pendant l'exécution, toute anomalie de calcul (dépassement mémoire, erreurs de calcul, etc.) est identifiée et remonte jusqu'à l'utilisateur, par le biais de canaux du type précédent (fichiers); - naturellement, après une exécution fructueuse, les résultats que l'utilisateur a spécifié de sortir sont accessibles directement ou par le biais de l'interface homme-machine.
Chaque organe de blocage comporte deux faces latérales opposées 51, 52 qui forment entre elles un angle aigu, de sorte que 1 'organe de blocage a une forme de coin dont l'extrémité la plus mince ou extrémité avant 50a est la plus proche de la deuxième extrémité 33b de la fente de guidage correspondante, l'extrémité la plus épaisse ou arrière 50b étant la plus proche de la première extrémité 33a de la fente.
La face latérale 51 de l'organe de blocage 50 est en contact avec une paroi latérale 33c de la fente 33 qui fait face à la surface cylindrique 24 du flasque mobile.
Ainsi, chaque organe de blocage 50 en forme de coin coulisse longitudinalement dans un espace également en forme de coin formé entre, d'une part, la paroi 33c et, d'autre part, la surface cylindrique 24, l'extrémité avant 50a de l'organe de blocage 50 étant dirigée dans un sens où l'espace en forme de coin, délimité par la paroi 33c et la surface 24, va en diminuant.
Lorsque les organes de blocage sont déplacés vers la deuxième extrémité 33b de leur fente de guidage respective, c'est-à-dire, vers le bas dans la position représentée sur les dessins, la surface latérale 51 de chaque organe de blocage, qui est dirigée en biais par rapport à la paroi 33c vient se coincer contre la surface cylindrique 24. Chaque organe de blocage 50 est alors serré radialement entre d'une part la paroi 33c de sa fente de guidage, et d'autre part la surface cylindrique 24, dans une position dite de blocage.
Ainsi, le jeu radial ménagé entre la paroi cylindrique intérieure 32 de la came et le logement cylindrique 23 du flasque mobile est supprimé dans deux directions différentes, les points de contact entre les deux organes de blocage 50 et la paroi cylindrique 24 n'étant de préférence pas diamétralement opposés.
De plus, les organes de blocage 50 assurent alors aussi un freinage entre les flasques 10 et 20.
corme il va être décrit ci-après, les organes de blocage 50 sont maintenus dans leur position de blocage, sauf lorsque le mécanisme d'articulation est actionné volontairement, auquel cas lesdits organes de blocage 50 sont déplacés simultanément vers les premières extrémités 33a des fentes de guidage, c'est-à-dire vers une position effacée où ils ne sont plus coincés contre la surface cylindrique 24 du flasque mobile 20.
La commande du déplacement des organes de blocage 50 est obtenue au moyen d'une coulisse 40 rigide et généralement métallique, qui présente la forme générale d'une plaque parallèle à la came 30 et montée coulissante selon l'axe 30c, entre la deuxième face 30b de la came et un couvercle 61 solidaire du flasque fixe 10.
Comme on peut le voir en particulier sur les figures 3, 6 et 7, dans l'exemple particulier considéré ici, la coulisse 40 est reçue dans un logement 35 qui est formé sur la face 30b de la came et qui guide la coulisse dans son mouvement.
En outre, toujours dans l'exemple particulier considéré ici, la face 30b de la came comporte deux ergots 36 qui s'étendent vers la coulisse 40 et qui sont reçus respectivement dans deux fentes 43 qui guident également la coulisse dans son mouvement.
La coulisse 40 présente un orifice central 41 qui, dans l'exemple représenté, a une section carrée identique à la section de l'orifice 34 de la came, l'orifice 41 étant également traversé par l'arbre de commande 60. L'orifice central 41 pourrait également avoir une section rectangulaire ou autre.
Par ailleurs, la coulisse 40 comporte quatre fentes de commande 42 qui reçoivent chacune un ergot 53 s'étendant parallèlement aux axes 1 et 2 depuis une extrémité longitudinale d'une partie du guidage 54, d'un des organes de blocage 50, ladite partie de guidage 54 coulissant dans une des fentes 33 et présentant une largeur voisine de celle de la fente 33. Les fentes de commande 42 sont disposées non parallèlement aux fentes de guidage 33, et de préférence perpendiculairement à celles-ci.
Deux ressorts de compression 62 sont montés entre la came 30 et la coulisse 40 Comme on peut le voir en particulier sur les figures 3 et 4, les ressorts 62 sont logés essentiellement dans des évidements allongés 44 qui sont ménagés dans la face de la coulisse 40 dirigée vers la came 30 et qui s'étendent longitudinalement parallèlement à l'axe 30c. La face 30b de la came présente également deux rainures 62a de faible profondeur en regard des ressorts 62.
Une des extrémité de chaque ressort 62, c'est-à-dire une extrémité inférieure de ces ressorts dans la position représentée sur les dessins, s'appuie sur un épaulement 45 formé à une extrémité de chaque évidement 44, tandis que l'autre extrémité de chacun des ressorts 62 s'appuie sur une butée 37 appartenant à la came 30.
Aux deux extrémités des ressorts 62, la coulisse 40 est percée par des orifices 46 qui servent au passage d'outils pour maintenir comprimés les ressorts 62 lors du montage de la coulisse 40 sur la came 30.
En outre, les deux orifices 46 disposés en face des butées 37 reçoivent ces butées et présentent une épaisseur plus grande que les deux autres orifices 46 parallèlement à l'axe 30c, de façon que les butées 37 n'interfèrent pas avec le mouvement de la coulisse 40.
Des systèmes plus recents prévoient la possibilité de replier le stand en entier, du moins des modules complets de celui-ci.
A titre d'exemples non exhaussifs, de tels systèmes sont décrits dans le brevet americain US-A-4 888 895 ou la demande de brevet européen EP-A-0 271 088 Ils permettent certes beaucou? nlus de souplesse de configuration, mais ils presentent cependant une structure souvent complexe, notamment en ce qui concerne les articulations. ou sont prévus pour des applications qui ne couvrent pas les applications préférentielles visées par la présente invention marchés ou autres manifestations similaires.
En effet. le matériel utiiise dans les applications préférentielles de l'invention doit présenter outre les qualites précedemment énumérées (modularité, simplicité, etc.), une résistance mécanique elevée. Il doit être possible, à titre d'exemple, de réaliser des cloisons pouvant supporter des charges non négligeables.
Les dispositifs décrits dans les documents précités sont surtout destinés à la présentation de documents ou cartes lors de conférences, c'est-à-dire d'articles relativement légers.
En variante de ces systèmes, il existe un type de stand que l'on pourrait qualifier de "stand parapluie", car il est repliable dans un espace très réduit. Un exemple d'un tel système peut être trouvé dans le brevet américain US-A-4 479 340.
Ce système présente les mêmes avantages et inconvénients que les systèmes précédemment rappeles. En outre. il ne peut remplir qu'une gamme de fonctions simplifiées, voir restrictives - Hauteur du stand limitée: - Structure posée au sol en autostabilité; - Fonctions limitées à l'affichaae ou à la présentation.
L'invention, tout en conservant les avantages des systèmes de l'art connu, vise donc a remplir les besoins qui se font sentir, notamment dans le domaine de la construction de stands de marchés ou de manifestations similaires, que ces stands soient temporaires ou de longue durée itinérants ou sédentaires.
Pour ce faire, le systeme selon l'invention est réalisé à partir d'une structure porteuse extensible permettant de créer des trames variables. Chaque trame se déplie a cause de un jeu de croisillons monoaxiaux en forme de "X", le deploiement. pour des dimensions donnees desdits jeux de croisillons, pouvant être repliable Le su stems dans un rnde de realisation préféré, comprend de panneaux de remplissage et divers accessoires de présentation.