INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
1.6.4 CPU de ARM7 CPU RISC de ARM7 est le processeur maître de MSP. I1 contient des trajets de données à 32 bits et se conforme à l'architecture de l'ensemble d'instructions de ARM7 standard. ARM7 comporte également des instructions spéciales de coprocesseur pour une mise en interface avec le Processeur Vectoriel.
1.6.5 Processeur Vectoriel Le Processeur Vectoriel est le moteur de DSP de MSP.
I1 contient des trajets de données de 288 bits et fonctionne en tant que coprocesseur pour ARM7. Sa fonctionnalité est telle que décrite dans le document d'Architecture du Processeur Vectoriel.
Le Processeur Vectoriel fonctionne à 80 MHz et contient 6 étages de pipeline : recherche, décodage, émetteur, accès registre, exécution et écriture. I1 est optimisé pour un traitement en rapport avec DSP.
1.6.6 Gestion Mémoire Virtuelle MSP-lEX NE supporte PAS la gestion de la mémoire virtuelle.
1.6.7 Traitement d'Interruptions et d'Exceptions Le traitement d'interruptions et d'exceptions dans MSP est pour la plus grande part effectué par ARM7.
Toutes les interruptions des dispositifs internes d'entrée/sortie passent par le Contrôleur d'Interruptions interne 8254 qui les met en priorité et envoie l'interruption de la plus grande priorité à ARM7 pour un plus ample traitement.
1.6.8 Topographie d'Adresses de Mémoire Physique Les programmes de ARM7 et du Processeur Vectoriel voient également tous les dispositifs d'entrée/sortie de MSP en tant que topographies en mémoire selon la mémoire physique telle qu'illustrée à la figure 8 ci-dessous.
Veuillez noter que la topographie d'adresses de MSP telle que vue par ARM7 (ou le Processeur Vectoriel) part de zéro et s'étend jusqu'à 4 GB.
Dans la région de 2 GB à 4 GB, les adresses sont topographiées aux adresses de PCI de l'hâte (Pentium) de 0 à 2 GB selon la relation suivante Adresse PCI hôte = adresse ARM7 - 8000 0000 (en hexa -décimal) Cette topographie permet à ARM7 (ou au Processeur Vectoriel) d'utiliser les adresses comprises entre 2 GB et 4 GB pour accéder à l'adresse de la mémoire hôte de PCI allant de 0 à 2 GB. Toutes les adresses de mémoire hôte de PCI au-delà de 2 GB ne sont pas accessibles par ARM7.
Les programmes hôtes (Pentium) voient également tous les dispositifs d'entrée/sortie de MSP topographiés en mémoire mais selon une carte d'adresses physiques plus limitée comme cela est illustré à la figure 9.
Veuillez noter que dans les programmes vues de l'hôte (Pentium) MSP~BASE est le début de la carte d'adresses de MSP.
MSP~BASE + 7DFFFFF est la fin de la carte adresse de MSP.
la carte d'adresses de MSP est simplement définie dans cette gamme de 128 MB.
Les tampons éventuellement mis en oeuvre sont, par exemple, les suivants : phosphate, phtalate, borate, etc.
Le fait que la phase aqueuse soit préférentiellement formée par une solution saline, n'est pas exclusive de la variante dans laquelle on a affaire à de l'eau, avantageusement désionisée.
Les microparticules lipidiques préférées conformément à l'invention sont celles caractérisées par la composition suivante (I) triglycéride(s) d'acide d'ester gras à chaînes moyennes, I'huile de coco étant particulièrement préférée, (II) eau déionisée ou solution saline tamponnée, le pH de cette phase aqueuse étant compris entre 6 et 8, (ici) copolyaminoacide de type Leu/Glu, de préférence 50/50.
Au-delà des caractéristiques structurelles et fonctionnelles des PV, telles qu'elles ont été énoncées ci-dessus, la présente invention a également pour objet un procédé de préparation de microparticules, notamment du type de celles définies supra, caractérisé en ce qu'il comprend, essentiellement, les étapes suivantes, successives ou non - a - préparation d'un gel à partir de la phase aqueuse (II) et d'au moins un copolyaminoacide (m), (II) et (m) étant tels que définis dans la description, - b - mise en présence du gel issu de l'étape - a - avec de l'huile (I), telle que définie dans la description, - c - agitation du mélange gel + (I) conduisant à une dispersion de microparticules dans une phase continue huileuse ou aqueuse (I), - d - éventuelle séparation des microparticules et de la phase continue huileuse ou aqueuse, de préférence par centrifugation, - e - éventuelle redispersion des microparticules recueillies à l'issue de l'étape - e - dans un liquide de stockage, - f - éventuel traitement de lyophilisation des microparticules de l'étape - d -, redispersées ou non.
L'un des fondements de ce procédé et des microparticules qui en découlent tient à l'étape - a - de préparation d'un gel issu de l'association du copolyaminoacide (ici) et de la phase aqueuse (II). Il s'agit, plus précisément, de mélanger (11) à (ici) dans des proportions telles que (ici) représente de 2 à 50 %, de préférence de 5 à 30 % en poids du gel (ici)+ (II). Ce mélange s'effectue sous agitation grâce à tout moyen d'agitation connu en lui-même et approprié. Il peut s'agir, par exemple, d'un dispositif du type Vortex ou bien encore du type rotor-stator, barreau magnétique, ultrasons, homogénéiseur haute pression.
Avantageusement, cette étape - a - est assortie d'un traitement d'élimination de la mousse formée lors de l'agitation. Une telle élimination peut être, par exemple, réalisée par centrifugation.
Le gel obtenu à l'étape - a - est ensuite mis en présence de tout ou partie de l'huile (I) (étape - b -), le mélange ainsi formé étant ensuite soumis à une agitation (étape - c -) avec des moyens d'agitation du même type que ceux évoqués pour l'étape - a -. Cette étape - c - correspond à l'étape de formation des microparticules lipidiques.
L'introduction de l'huile (I) dans le mélange de l'étape - b - peut être effectuée en une ou plusieurs fois au cours de l'étape - c -.
Il est clair que les conditions d'agitation sont déterminantes pour la formation des PV lors de l'étape - c -, en particulier eu égard à la nature de la phase homogène contenant les PV : eau ou huile.
Aussi, selon un mode préféré de mise en oeuvre de l'invention, conduisant à des PV gel-composite en suspension dans une phase aqueuse, cette agitation - c est réalisée à l'aide d'un dispositif rotor/stator et en mettant en oeuvre une vitesse d'agitation comprise entre 1 000 et 40 000, de préférence 5 000 et 25 000 tr/min.
Selon une variante de ce mode préféré, dans laquelle on vise l'obtention de PV en suspension dans une phase huileuse, on enrichit la suspension en huile.
Au terme de l'étape - c -, il est possible d'obtenir un produit intermédiaire intéressant, formé par une dispersion concentrée de PV dans l'eau ou une suspension de PV dans l'huile. Dans ce dernier cas, on peut éliminer l'huile excédentaire et on obtient alors un sédimentat concentré en PV.
La présente invention a donc également pour objet cette dispersion et ce sédimentat concentrés de PV dans l'eau, qui peuvent être considérés comme des produits intermédiaires.
Ces produits intermédiaires sont caractérisés par * une concentration moyenne en copolyaminoacides (m) variant de 1 % à 50 % en poids, de préférence de 2 % à 40 % en poids, cette concentration s'établissant, plus préférentiellement encore, de 3 % à 30 % en poids, * une concentration en huile (I) représentant de 9 à 90 % en poids, de préférence de 20 à 80 % en poids et, plus préférentiellement encore, de 40 à 60 % en poids; * une concentration en phase aqueuse de 5 à 90 %, de préférence de 10 à 70 %, plus préférentiellement encore de 30 à 50 % en poids, les concentrations ci-dessus étant exprimées par rapport à la masse totale de la dispersion ou du sédimentat concentrés en PV.
Les quantités relatives d'huile (I) et de phase aqueuse (II) prévaudront l'une sur l'autre, selon la nature hydrophile ou hydrophobe visée pour les PV. Dans l'application biovecteur, cette nature sera fonction du principe actif à vectoriser.
Pour récapituler, on peut donc indiquer que les microparticules selon l'invention peuvent être définies par les caractéristiques quantitatives suivantes, selon lesquelles leurs constituants (I), (n), (m) sont présents dans les proportions ci-après, exprimées en % en poids par rapport à (I) + (II)+ (ici) (I) 9 à 90, de préférence 20 à 80 et, plus préférentiellement encore, 40 à 60, (II) 5 à 90, de préférence 10 à 70 et, plus préférentiellement encore, 30 à 50, (ici) 1 à 50, de préférence 2 à 20 et, plus préférentiellement encore, 3 à 10.
Parmi les promoteurs envisageables dans le cadre de l'invention, on peut citer les promoteurs SV40 (Virus Simian 40), HMG (Hydroxy-Methyl-Glutaryl-coenzyme A), TK (Thymidine Kinase), CMV (cytomégalovirus), RSV (Rous Sarcoma Virus), le MLP (Major Late Promoter) de l'adénovirus adaptés au vecteur adénoviraux et le LTR du Mo-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus) plus spécifiques aux vecteurs rétroviraux. Lorsque le vecteur dérive d'un poxvirus, de préférence le promoteur sera le promoteur d'un gène du poxvirus utilisé, par exemple le promoteur du gène codant pour la protéine 7,5K, H5R, TK ou KIL du virus de la vaccine. Ces derniers sont décrits dans la littérature et peuvent être clonés à partir du génome viral par les techniques classiques.
Par ailleurs, les éléments nécessaires à l'expression peuvent également comporter des séquences améliorant l'expression ou le maintien dans la cellule hôte (intron, séquence signal, séquence terminatrice de la transcription, site d'initiation de la traduction, séquences modifiant la présentation du polypeptide aux cellules du système immunitaires de l'hôte....). Cependant, s'agissant d'un vecteur dérivé d'un poxvirus, on évitera l'emploi d'introns.
Une composition selon l'invention peut être obtenue soit avec plusieurs vecteurs recombinants exprimant chacun un polypeptide donné soit avec un seul vecteur exprimant les fragments d'ADN correspondant aux polypeptides choisis placés sous le contrôle d'éléments indépendants ou communs. Selon cette dernière option, on peut avoir recours à des séquences permettant d'initier la traduction de manière interne (IRES) ou à des fusions en phase des différents gènes.
Les conditions générales d'obtention d'un vecteur recombinant en usage dans la présente invention sont largement décrits dans l'état de la technique. S'agissant d'un vecteur poxviral, on peut se référer au brevet européen EP 83 286 dont le contenu est ici incorporé par référence. Ces conditions sont applicables aux autres virus acceptables comme vecteur qui possèdent une région génomique non essentielle dans laquelle les blocs d'expression peuvent être incorporés. Bien entendu, ils peuvent être insérés dans le même locus ou un locus différent. Par exemple, lorsque l'on utilise un virus de la vaccine de la souche Copenhague, le site d'insertion préféré est le locus TK et/ou le locus K1L. L'insertion au niveau du gène viral TK a pour effet d'inactiver celui-ci et ainsi faciliter la sélection des recombinants. Dans le cadre d'un virus de la vaccine de la souche MVA, l'insertion des gènes de papillomavirus et immunostimulateurs peut être réalisée au sein d'une des excisions I à VI et, de préférence, la zone d'excision II ou III (Meyer et al., 1991, J. Gen.
Virol. 72, 1031-1038 ; Sutter et al., 1994, Vaccine 12, 1032-1040).
Conformément aux buts poursuivis par la présente invention, un vecteur recombinant peut en outre comprendre un bloc d'expression d'un gène marqueur de sélection afin de faciliter les étapes d'isolement et de purification du virus recombinant. On peut citer notamment le gène Neo conférant la résistance à l'antibiotique G418, le gènepac de résistance à la puromycine, le gène TK du virus de l'herpès simplex de type 1 (HSV-1) qui confère la sensibilité à certains analogues de nucléosides tels que le ganciclovir ou l'acyclovir, les gènes bactériens LacZ codant pour la p-galactosidase et giisA codant pour la P-glucuronidase. Ces deux derniers marqueurs enzymatiques permettent de repérer les virus recombinants par coloration en présence des substrats X-Gal (5-bromo-4-chloro-3indolyl-ss-D-galactopyranoside) et XglcA (5-bromo-6-chloro-3-indolyl-,-D- glucoronide) respectivement.
Une composition pharmaceutique selon l'invention en vue du traitement ou la prévention d'une infection ou tumeur à papillomavirus, comprend un ou plusieurs vecteur(s) recombinant(s) dérivé(s) d'un virus de la vaccine de la souche Copenhague ou MVA dans le(s)quel(s) sont insérés (1) un fragment d'ADN codant pour la protéine E6 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine E7 d'un papillomavirus et un fragment d'ADN codant pour la molécule B7. 1, (2) un fragment d'ADN codant pour la protéine E6 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine E7 d'un papillomavirus et un fragment d'ADN codant pour l'interleukine-2, (3) un fragment d'ADN codant pour la protéine E6 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine E7 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la molécule B7. 1 et un fragment d'ADN codant pour l'interleukine-2, (4) un fragment d'ADN codant pour la protéine E6 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine E7 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L1 d'un papillomavirus et un fragment d'ADN codant pour la protéine L2 d'un papillomavirus, (5) un fragment d'ADN codant pour la protéine E6 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine E7 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L 1 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L2 d'un papillomavirus et un fragment d'ADN codant pour la molécule B7. 1, (6) un fragment d'ADN codant pour la protéine E6 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine E7 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L1 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L2 d'un papillomavirus et un fragment d'ADN codant pour I'interleukine-2, ou (7) un fragment d'ADN codant pour la protéine E6 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine E7 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L1 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L2 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la molécule B7. 1 et un fragment d'ADN codant pour l'interleukine-2.
En revanche, une composition pharmaceutique selon l'invention plus particulièrement destinée à des fins d'immunoprophylaxie, comprend un ou plusieurs vecteur(s) recombinant(s) dérivé(s) d'un virus de la vaccine de la souche Copenhague ou MVA dans le(s)quel(s) sont insérés: (1) un fragment d'ADN codant pour la protéine L1 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L2 d'un papillomavirus et un fragment d'ADN codant pour la molécule B7. 1, (2) un fragment d'ADN codant pour la protéine L1 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L2 d'un papillomavirus et un fragment d'ADN codant pour l'interleukine-2, ou (3) un fragment d'ADN codant pour la protéine L1 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour la protéine L2 d'un papillomavirus, un fragment d'ADN codant pour l'interleukine-2 et un fragment d'ADN codant pour la molécule B7. 1.
Une composition selon l'invention peut etre préparée selon les procédés connus dans le domaine des vaccins et les doses applicables peuvent varier dans une large gamme. Elles sont fonctions notamment des polypeptides et du virus employés, de la pathologie à traiter, de l'état du patient et d'autres paramètres qui peuvent être évalués par le clinicien. Cependant, en général, la dose de virus par kilo sera de 104 à 1011, avantageusement de 106 à 1010 et, de préférence de 107à 109 UnitéS formant des plages (ufp) lorsque l'agent thérapeutique est un vecteur viral et de 0,05 à 500 mg, avantageusement de 0,5 à 200 mg et, de préférence de 1 à 100 mg lorsque l'agent thérapeutique est d'origine polypeptidique.
Une composition selon l'invention peut être administrée selon n'importe quelle voie conventionnelle d'administration, en particulier par voie intramusculaire, souscutanée ou sous-épithéliale ou bien par scarification. Dans le cas d'une tumeur accessible, il est également possible de recourir à une injection directe dans le site ou à proximité de la tumeur ou à une application topicale. A titre de vaccin, une composition selon l'invention peut être administrée selon les pratiques courantes dans le domaine, par exemple en dose unique ou répétée une ou plusieurs fois après un certain délai d'intervalle. Par contre dans le cadre d'un traitement curatif, elle peut être administrée fréquemment pendant une période suffisante pour que le traitement soit efficace. Lorsque l'agent thérapeutique est un vecteur viral, ce virus est de préférence sous forme vivante. S'agissant d'un vecteur poxviral, on préférera employer une souche atténuée comme la souche MVA ou la souche Copenhague thymidine kinase négative. Enfin un vecteur viral recombinant peut être atténué par un traitement chimique approprié connu de l'homme du métier. Toutefois, on peut aussi envisager d'injecter un vecteur recombinant tué.
Selon un mode de mise en oeuvre préféré, une composition pharmaceutique selon l'invention comprend une quantité théra recombinant en association avec un support acceptable d'un point de vue pharmaceutique. Le support est choisi de manière à permettre son administration par injection à l'homme ou à l'animal. Elle peut également comprendre un véhicule, un diluant et/ou un adjuvant et se présenter sous forme liquide ou lyophilisée.
La présente invention concerne également une composition pharmaceutique selon l'invention, à titre de médicament pour le traitement ou la prévention du cancer du col de l'utérus, d'une dysplasie du col de bas grade et d'une infection à papillomavirus.
Enfin, la présente invention a également trait à une méthode de traitement ou de prévention des pathologies citées ci-dessus, selon laquelle on administre à un individu ayant besoin d'un tel traitement une quantité efficace d'un point de vue pharmaceutique d'un mélange de polypeptide ou d'un vecteur recombinant en usage dans la présente invention.
La présente invention est illustrée par référence aux Figures suivantes.
La Figure 1 est une représentation schématique du vecteur pTG5021 permettant le transfert au locus TK de la vaccine Copenhague des gènes tardifs L1 et L2 de HPV-16 placés sous le contrôle du promoteur p7,5K, les deux cassettes étant en orientation opposée l'une par rapport à l'autre.
La Figure 2 est une représentation schématique du vecteur pTG5065 permettant le transfert au locus K1L de la vaccine Copenhague des gènes précoces E6 et E7 de HPV-16 placés sous le contrôle du promoteur pHSR (les deux cassettes étant en orientation opposée l'une par rapport à l'autre), du gène IL-2 humain (IL2h) placé sous le contrôle du promoteur p7,5K et du gène marqueur LacZ (btaGAL) placé sous le contrôle du promoteur pKlL.
Dans une deuxième étape 2 la composition de vernis ou de peinture chargée électriquement est atomisée. Ce sont les bols tournant électrostatiques qui permettent de réaliser cette atomisation. Un bol présente en effet l'avantage d'atomiser le produit en fines particules de taille homogène. Il permet également, en particulier avec l'assistance d'un flux d'air comprimé, de diffuser les fines particules résultantes dans une large zone de manière à former un brouillard ; c'est l'étape 3. Ce flux d'air qui peut ne pas être indispensable permet de déterminer par sa force la dimension du champ de diffusion, appelé aussi "impact" et de contribuer avec la vitesse de défilement des articles à obtenir la bonne densité de particules dans le brouillard.
Enfin, la dernière étape 4 consiste à placer les articles en verre dans la zone de diffusion des particules. Le phénomène de conductibilité de surface du verre permet de répartir les particules de façon homogène à la surface des articles.
On notera que les étapes 1 et 2 et 3 sont présentées ici successivement. Elles peuvent cependant être simultanées, ou même se produire en ordre inversé.
Le procédé selon l'invention est applicable sur tous les types de verre et sur des articles présentant toutes sortes de formes plus ou moins complexes. Ces articles sont par exemple des bouteilles, carafes, flacons, pots, vases etc.
La figure 2, représente un schéma en perspective d'un dispositif de mise en oeuvre du procédé selon l'invention, sur lequel les dimensions n'ont pas ete respectées afin de permettre une meilleure compréhension.
Ce dispositif est isolé, en particulier des poussières, dans une cabine 800 de peinture. Dans un exemple préféré la cabine de peinture est à filtres sec. Deux de ces filtres sec sont représentés sur la figure 2 et désignés par les références 700, 710. Le filtre 710 est destiné à filtrer l'air introduit dans la cabine selon les flèches A sur la figure 2. Cet air est constamment renouvelé à l'intérieur de la cabine, par l'intermédiaire d'une centrale, dite "MAKE UP" en littérature anglo-saxonne, aspirant l'air extérieur et le filtrant, et un système d'aspiration 900 permet le rejeter vers l'extérieur. Le filtre 700 est destiné à récupérer sous l'effet de cet air les particules de vernis et/ou de peinture, non déposées sur les articles. Le filtre 700 est destiné à être retraité par incinération. L'intérêt d'utiliser des filtres secs au lieu de filtres humides est lié ici au faible taux des rejets. Ce qui fait que malgré son coût d'exploitation, en théorie plus important que celui concernant l'utilisation d'un filtre humide, le filtre sec est ici d'autant plus intéressant que sa saturation intervient tardivement du fait des très bons rendements de dépôts cités précédemment. De plus l'utilisation d'un tel filtre ne nécessite aucun entretien.
La référence 210 désigne un convoyeur métallique, ici aérien, relié à la masse M. D'autres types de convoyeurs peuvent être utilisés, comme par exemple un convoyeur inversé. Le convoyeur 210 comporte plusieurs pièces métalliques 220 formées chacune d'une tige conductrice et d'un embout. Chaque embout est enfoncé dans l'orifice d'un article en verre creux, tel qu'une bouteille 200 par exemple, de manière à le soutenir et à le relier à la masse M par l'intermédiaire de la tige et du convoyeur 210 métalliques. L'embout peut être un écouvillon métallique, par exemple engagé dans chaque article pour assurer son maintien. Pour éviter que l'intérieur de l'article soit pollué par le produit à l'eau, on fixe aux tiges des caches qui masquent l'orifice des articles par lequel l'embout est passé.
Dans cette description, seuls les articles en verre creux sont cités. Cependant, il est tout à fait possible d'envisager la réalisation du procédé selon l'invention sur des articles en verre plein, par exemple des bouchons en verre. Dans ce cas, les embouts, aptes à soutenir les articles, se présentent sous la forme de pinces par exemple.
Le convoyeur 210 permet de faire défiler les bouteilles 200 à une vitesse constante, de l'ordre de 4 à 8 mètres/minute par exemple. Ce défilement est schématisé par les flèches D sur la figure 2. Le convoyeur 210 permet en outre de faire tourner les tiges selon les flèches R, et par conséquent les bouteilles 200, sur elles-même. La vitesse de rotation est de préférence inférieure ou égale à 60 tours/minute pour les articles qui ne sont pas de révolution par rapport à l'axe de rotation. Le critère de réglage de la vitesse consiste à essayer de faire en sorte que l'article fasse un tour sur lui même pendant la durée de son passage dans le champ de diffusion des particules de produit à l'eau. Une vitesse supérieure à 60 tours/minute risque de provoquer un effet de "ventilation" sur des objets non de révolution entraînant l'apparition de perturbations lors de l'application de la peinture et l'obtention d'un revêtement de qualité inférieure. On observe cependant que la répartition des lignes de champs électrostatiques n'est pas altérée par une telle rotation qui est bien trop lente à l'échelle de la propagation de la lumière.
Il est ainsi possible d'appliquer toutes sortes de compositions de produits à l'eau : hydroémuîsionnés, hydrosolubles ou hydrodispersés voire un mélange comportant une proportion déterminée de produits appartenant à ces trois familles. Les peintures et vernis à l'eau peuvent aussi être soit bi-composant, soit mono-composant. Dans le premier cas, le durcissement du film appliqué est provoqué par la réaction chimique de deux résines (une base et un durcisseur) émulsionnées, dispersées ou solubilisées.