INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La fonction de corrélation est calculée dans une fenêtre étroite dont la position et la largeur sont déterminées à partir des mesures précédentes ou par un algorithme de prédiction.
Cet algorithme de prédiction est par exemple réalisé par un filtre de Kalman.
Ce filtre est également utilisé pour corriger les erreurs i
Initialement, on choisit, dans le réseau 16a, deux photodétecteurs adjacents, dont l'espacement est égal au pas des photodétecteurs.
Un cycle est représenté schématiquement sur la figure 5.
Ce cycle commence à un instant TO et s'achève à un instant T3.
Deux instants intermédiaires T1 et T2 du cycle apparaissent également sur la figure 5 (TO < T1 < T2 < T3).
Pendant ce cycle, la mesure de vitesse et de distance parcourue, comprend une période d'acquisition des N échantillons, qui va de TO à T1, et une période de calcul de corrélation, qui va de T1 à T2.
Le résultat obtenu à la fin de cette période de calcul correspond à une valeur moyenne de vitesse et à une valeur moyenne de distance pour l'intervalle de temps T1-TO.
Le dispositif présente donc un retard qui est égal au temps de calcul T2-T1.
Ce retard est compensé pendant la période du cycle allant de T2 à T3.
Cette compensation (correction de la vitesse moyenne et de la distance parcourue précédemment obtenues) utilise une prédiction, par exemple par un filtrage de Kalman, qui est capable de donner une estimation de la vitesse et de la distance parcourue à la fin du cycle de calcul, c'est-à-dire au temps T3.
La technique de filtrage de Kalman est de préférence utilisée dans la présente invention plutôt que d'autres techniques de filtrage estimatif ou prédictif, en raison de ses très bonnes propriétés d'estimation et de prédiction pour des signaux aléatoires non-stationnaires.
Par "sonde", on entend aussi bien désigner un polynucléotide comportant au moins 20 nucléotides correspondant à une sonde unique qu'un "contig", c'est-à-dire un ensemble de sondes qui sont contiguës ou chevauchantes et recouvre la zone en cause, ou plusieurs sondes séparées.
La longueur des sondes utilisées est comprise, par exemple, entre 5 kb et 4050 kb.
Enfin, de façon générale, dans ce qui va suivre on parlera de "génome", il faut bien entendre qu'il s'agit d'une simplification, toute séquence d'ADN ou d'acides nucléiques susceptible d'être fixée sur une surface de peignage est englobée dans cette terminologie.
En outre, le terme de gène" sera parfois utilisé indifféremment pour désigner une partie de gène" d'origine génomique ou bien une "séquence polynucléotidique" synthétique spécifique.
Dans un premier mode de mise en oeuvre, le procédé selon l'invention est utilisé pour permettre le diagnostic de cassures dans un génome, de même que pour le clonage positionnel de telles cassures. Il convient de remarquer que le terme cassure" recouvre un grand nombre de modifications locales du génome dont la liste sera explicitée plus tard.
Le procédé selon la présente invention consiste à déterminer la position des éventuels points de cassure impliqués dans une pathologie d'origine génétique par hybridation sur ADN génomique peigné de patients atteints de la dite pathologie, d'une sonde génomique de taille connue (clonée ou autre) située dans la région du gène recherché. Ces points de cassure consistent en points dans la séquence génétique dont l'environnement change sur plusieurs kilobases (kb) entre individu sain et individu malade.
Plus particulièrement, la présente invention concerne un procédé de mise en évidence d'une anomalie génétique de cassure dans un génome, caractérisé en ce que (a) on fixe et on peigne une certaine quantité dudit génome sur une surface de peignage, (b) on hybride le produit de peignage avec une ou plusieurs sondes spécifiques marquées correspondant à la séquence génomique dont on cherche l'anomalie, (c) on mesure la taille des fragments correspondant aux signaux d'hybridations et éventuellement leur répétition, et (d) on en déduit la présence d'une cassure, soit par mesure directe soit par comparaison avec un étalon.
A titre d'illustration, la mesure de la taille des fragments conduit à un histogramme, c'est-à-dire une représentation graphique des longueurs des fragments observés.
Afin de réaliser un histogramme de la sonde, on évalue le nombre de clones présentant une longueur de sonde déterminée. En principe l'histogramme ne comporte qu'un ou deux pics suivant le type de cassure analysée, deux pics lorsque la sonde s'hybride en deux fragments séparés et un seul pic lorsqu'elle s'hybride un un seul fragment.
Ce procédé peut être également utilisé pour effectuer du clonage positionnel, c'est-à-dire pour déterminer la position d'un ou plusieurs gènes inconnus impliqués dans une pathologie. Le principe consiste, comme précédemment, à hybrider des clones d'ADN humain, ou animal ou végétal, servant alors de sonde sur l'ADN génomique peigné d'un ou de plusieurs patients atteints de la pathologie étudiée. La révélation de ces hybridations permet de mesurer la taille des fragments hybridés et de construire un histogramme des différentes tailles observées. Si le clone utilisé comme sonde recouvre un point de cassure du gène, la signature de ce phénomène sera lisible sur la longueur (plus petite) du fragment hybridé.
L'utilisation d'un nombre limité de clones spécifiques de la région incriminée qui pourra avoir été déduite par analyse de liaison génétique ( linkage analysis"), permettra ainsi une détermination rapide et précise de la position d'un point de cassure, d'une délétion ou de tout autre remaniement génétique.
Dans ce cas évidemment, on recherche la cassure afin de la cartographier, dans le diagnostic la cassure est connue, c'est sa présence ou son absence qui est recherchée.
Deux cas de figure peuvent se présenter (dans l'hypothèse où il existe un point de cassure dans la région du génome impliquée dans le pathologie): (i) la sonde ne chevauche pas le point de cassure, (ii) la sonde chevauche le point de cassure.
Dans le cas (i), la mesure des longueurs des sondes fluorescentes est comparable à celle qui serait obtenue avec la même sonde hybridée sur un ADN génomique non pathologique de même nature (c'est-àdire essentiellement, de même taille et préparé dans les mêmes conditions).
Dans le cas (ii), au contraire, la sonde étant systématiquement hybridée sur deux morceaux (ou davantage) séparés dans l'ADN génomique peigné (par définition de l'existence d'un point de cassure), la mesure des longueurs des sondes fluorescentes hybridées se distingue du résultat obtenu par hybridation sur un ADN génomique non pathologique. De surcroît, la taille des fragments hybridés sur l'ADN pathologique permet d'estimer la position du point de cassure au sein du clone avec une précision de quelques kb.
De ce fait, il ne reste alors plus qu'à rechercher le gène dans ce clone. Pratiquement, il s'agira de répéter ces mesures pour l'ensemble des clones susceptibles de recouvrir partiellement la zone correspondant au gène. Le nombre de lames d'hybridations pourra être réduit en hybridant simultanément plusieurs sondes marquées différemment, ou en utilisant une méthode de codage par combinaison de couleurs, comme cela sera décrit ci-après.
Après réalisation du lot de médicament, le récipient 10 est transporté par la tête de manipulation 4 au poste 14 d'impression et d'apposition d'étiquette 15. Ce poste est disposé à proximité de l'unité de stockage des récipients 10 et de l'extrémité amont du moyen d'évacuation 16. Ce poste est pourvu d'un bras télescopique 58 rétracté ou déployé par un organe moteur piloté par l'unité de contrôle et de commande 1, ce bras portant en extrémité libre une tête d'apposition 59 des étiquettes 15 sur les récipients 10 et plus précisément sur les flancs de ces derniers. Pour éviter la déformation du récipient lors de l'apposition de l'étiquette, la tête de manipulation 4 est dotée d'une plaque de pression engagée dans le récipient pour venir en regard du flanc destiné à recevoir l'étiquette d'identification.
Après apposition de l'étiquette 15, le récipient est transporté vers le moyen d'évacuation 16. Ce moyen d'évacuation est constitué par un transporteur formé par deux bandes sans fin, écartées l'une de l'autre et disposées en tension entre un même rouleau mené et un même rouleau menant accouplé à un organe moteur piloté par l'unité de commande et de contrôle. L'extrémité amont du transporteur à bande est située de manière attenante à l'unité de stockage des récipients.
La zone de délivrance 17 est préférentiellement constituée par la section terminale du moyen d'évacuation 16 et s'étend sur une distance de quelques dizaines de centimètres.
De préférence, est prévu un moyen de transfert 60, piloté par l'unité de commande et de contrôle 1, ledit moyen de transfert étant destiné à saisir le récipient 10 porté par le support 33 et à le déposer sur l'extrémité amont du moyen d'évacuation 16.
Le moyen de transfert 60 est disposé entre les bandes du moyen d'évacuation 16 et comprend un organe de préhension 61 activé et désactivé par l'unité de contrôle et de commande 1, déplaçable verticalement par un organe moteur 62 commandé par l'unité de contrôle et de commande 1, entre une position d'effacement selon laquelle il est disposé selon un niveau de hauteur inférieur à celui de la face supérieure du brin supérieur de chaque bande sans fin, et une position de préhension selon laquelle il est disposé selon un niveau de hauteur supérieur à celui de la face supérieure des bandes sans fin et identique à celui de la paroi de fond 103 du récipient 10 porté par le support 33 de récipient. Ce support 33, pour délivrer au moyen de transfert 60 le récipient qu'il porte est disposé selon sa position de débordement et au dessus du moyen de transfert. Pour transférer le récipient de cette position vers une position de pose sur le moyen d'évacuation, l'organe moteur 62 du moyen de transfert 60 est d'abord activé par l'unité de contrôle et de commande en sorte d'amener l'organe 61 en position de préhension du récipient et ledit organe dès qu'il atteint cette position est activé par l'unité de commande pour saisir le récipient par sa paroi de fond 103.
Ensuite, le support 33, par activation de son organe moteur 51 est ramené en position d'effacement dans la tête de manipulation 4, l'organe de préhension 61 demeurant en prise avec la paroi de fond 103 du récipient. Par activation de l'organe moteur 62 du moyen de transfert, dans le sens du haut vers le bas, le récipient est déposé sur les bandes sans fin du moyen de transport, après quoi l'organe de préhension est désactivé de façon que le récipient soit libéré et entraîné par le transporteur à bande 16 vers la zone de délivrance 17.
L'organe de préhension 61 du moyen de transfert est constitué par une ventouse destinée à coopérer en préhension avec la paroi de fond 103 du récipient. Le conduit interne de la ventouse est connecté par l'intermédiaire d'une électrovanne pilotée par l'unité de commande et de contrôle, soit à une source à dépression pour la préhension du récipient soit à l'atmosphère pour libérer le récipient. L'organe moteur 62 est constitué quant à lui par un vérin pneumatique double effet connecté à une électrovanne raccordée à une source d'air comprimé et pilotée par l'unité de contrôle et de commande 1. La ventouse 61 est montée en extrémité de la tige du vérin 62. Ce vérin est fixé par son corps au châssis du moyen d'évacuation 16.
Avant pose du récipient sur le moyen d'évacuation, l'étiquette que comporte un des flancs du récipient, est lue par le moyen de lecture 18 lequel est connecté électriquement à l'unité de contrôle et de commande et comporte sur un support approprié un lecteur de code à barres. Par lecture de cette étiquette il devient possible de reconnaître les récipients dont le lot doit être complété manuellement et doivent, dans ce but, être retirés du moyen d'évacuation 16 ou de la zone de délivrance 17, par le moyen d'extraction 19 afin d'être évacués vers une zone de traitement manuel.
Le moyen d'extraction 19, piloté par l'unité de contrôle et de commande 1, comprend d'une part, à distance de la zone de délivrance 17, une butée 63 actionnée par un organe moteur 64 piloté par l'unité de contrôle et de commande, entre une position de retrait par rapport à la trajectoire du récipient sur le moyen d'évacuation et une position d'arrêt du récipient, et d'autre part, en amont de la butée 63, un dispositif poussoir 65, déplaçable perpendiculairement à la trajectoire du récipient vers la zone 17, actionné par un organe moteur 66 piloté par l'unité de contrôle et de commande 1. Le dispositif poussoir 65, lorsque son organe moteur 66 est activé par l'unité de contrôle et de commande, vient pousser latéralement le récipient 10, l'extraire du moyen d'évacuation 16 et le disposer sur l'extrémité amont d'un transporteur à bande sans fin 67 qui évacue le récipient vers une zone de traitement manuel.
Chaque organe moteur 64, 66 est constitué par un vérin pneumatique simple ou double effet associé à une électrovanne connectée à une source d'air comprimé et pilotée par l'unité de contrôle et de commande 1. La butée 63 est fixée en extrémité de la tige du vérin 64, et le corps du vérin est fixé au bâti du moyen d'évacuation 16. La butée 63 est mobile verticalement entre les deux bandes sans fin du moyen d'évacuation. Le dispositif poussoir 65 est fixé en extrémité de la tige du vérin 66. Par son corps ce vérin est fixé à une structure support.
Immédiatement en amont de la zone de délivrance 17 et en aval de la butée 63, est disposée une seconde butée mobile 68, actionnée par un organe moteur 69 piloté par l'unité de contrôle et de commande, entre une position de retrait par rapport à la trajectoire du récipient 10 sur le moyen d'évacuation 16 et une position d'arrêt du récipient 10, ladite butée 68 étant maintenue selon la position d'arrêt tant qu'un récipient est présent sur la zone de délivrance 17 et tant que ce récipient n'a pas été évacué de cette zone par le dispositif manipulateur pour être introduit dans l'un des casiers du chariot de transport.
L'organe moteur 69 est constitué par un vérin pneumatique simple ou double effet associé à une électrovanne connectée à une source d'air comprimé et pilotée par l'unité de contrôle et de commande 1. La butée 68 est montée en fixation sur la tige du vérin 69. Ce vérin, par son corps, est fixé au châssis du moyen d'évacuation. La butée 68 est mobile verticalement entre les deux bandes sans fin du moyen d'évacuation.
Comme dit précédemment, si l'étiquette 15 est absente ou illisible ou si les données inscrites sur l'étiquette sont relatives àun autre lot que celui qui vient d'être formé, le récipient correspondant est retiré soit du moyen d'évacuation 16, soit de la zone de délivrance 17 par le moyen d'extraction 19A. Préférentiellement, le moyen d'évacuation 19A est associé à la zone de délivrance 17.
Le moyen d'extraction 19A à écartement de l'extrémité aval du moyen d'évacuation 16, est doté d'une butée mobile 63A actionnée par un organe moteur 64A piloté par l'unité de contrôle et de commande, entre une position de retrait par rapport à la trajectoire du récipient 10 sur la zone de délivrance 17 et une position d'arret du récipient 10 sur cette zone. En amont de la butée 63A, le moyen d'évacuation est pourvu d'un dispositif poussoir 65A déplaçable perpendiculairement à la trajectoire du récipient sur la zone 17, actionné par un organe moteur 66A piloté par l'unité de contrôle et de commande 1. Le dispositif poussoir 65A, lorsque son organe moteur 66A est activé par l'unité de contrôle et de commande 1, vient pousser latéralement le récipient 10,1'extraire de la zone de délivrance 17 et le disposer sur l'extrémité amont d'un transporteur à bande sans fin 67A qui évacue le récipient vers une zone de rebut ou de traitement manuel.
La butée 63A est mobile verticalement entre les deux bandes sans fin du moyen d'évacuation.
L'organe moteur 64A est constitué par un vérin pneumatique simple ou double effet associé à une électrovanne connectée à une source d'air comprimé et pilotée par l'unité de contrôle et de commande 1. La butée 63A est fixée en extrémité de la tige du vérin 64A, et le corps de ce vérin est fixé au bâti du moyen d'évacuation.
Ces extraits sont de bons anti-inflammatoires pluripotents.
Exemple 3 : Exemples de formulations illustrant l'invention et particulièrement les compositions selon l'invention associant au moins un extrait de Rosmarinus officinalis et un produit à effet irritant. Ces compositions ont été obtenues par simple mélange des différents composants.
Composition 1: Lotion démaquillante pour le visage Extrait de l'exemple 1 (forme aqueuse) 10,00 % Antioxydant 0,05 % Isopropanol 40,00 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 2 : Shampooing Extrait de l'exemple I (forme aqueuse) 5,00 % Hydroxypropylcellulose (Klucel H vendu par la société Hercules) 1,00 % Parfum 0,50 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 3 : Crème de soin du visage (émulsion huile dans eau) Extrait de l'exemple 1 (forme lyophilisée) 0,20 % Stéarate de glycérol 2,00 % Polysorbate 60 (Tween 60 vendu par la société ICI) 1,00 % Acide stéarique 1,40 % Triéthanolamine 0,70 % Carbomer 0,40 % Fraction liquide du beurre de karité 12,00 % Perhydrosqualène 12,00 % Antioxydant 0,05 % Parfum 0,50 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 4: Gel pour le traitement de l'acné Extrait de l'exemple 1 (forme lyophilisée) 0,50 % Acide tout trans rétinoïque '0,05 % Hydroxypropylcellulose (Klucel H vendu par la société Hercules) 1,00 % Antioxydant 0,05 % Isopropanol 40,00 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 5 : Gel pour le soin du visage Extrait de l'exemple 1 (forme aqueuse) 5,00 % Hydroxypropylcellulose (Klucel H vendu par la société Hercules) 1,00 % Antioxydant 0,05 % Isopropanol 40,00 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 6 : Gel anti-douleur Extrait de l'exemple 1 (forme aqueuse) 10,00 % Hydroxypropylcellulose (Klucel H vendu par la société Hercules) 1,00 % Antioxydant 0,05 % Chlorhydrate de lidocaine 2,00 % Isopropanol 40,00 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 7: Crème de soin de l'érythème solaire (émulsion huile-dans-eau) Extrait de l'exemple I (forme lyophilisée) 0,50 % Stéarate de glycérol 2,00 % Polysorbate 60 (Tween 60 vendu par la société ICI) 1,00 % Acide stéarique 1,40 % Acide glycyrrhétinique 2,00 % Triéthanolamine 0,70 % Carbomer 0,40 % Fraction liquide du beurre de karité 12,00 % Huile de tournesol 10,00 % Antioxydant 0,05 % Parfum '0,50 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 8: Crème de soin antirides pour le visage (émulsion huile/eau) Extrait de l'exemple 1 (forme aqueuse) 5,00 % Stéarate de glycérol 2,00 % Polysorbate 60 (Tween 60 vendu par la société ICI) 1,00 % Acide stéarique 1,40 % Acide n-octanoyl-5-salicylique 0,50 % Triéthanolamine 0,70 % Carbomer 0,40 % Fraction liquide du beurre de karité 12,00 % Perhydrosqualène 12,00 % Antioxydant 0,05 % Parfum 0,50 % Conservateur 0,30 % Eau qsp 100,00 % Composition 9: Lotion pour éliminer les cicatrices dues à l'acné Extrait de l'exemple 1 (forme aqueuse) 5,00 % Acide glycolique 50,00 % Hydroxypropylcellulose (Klucel H vendu par la société Hercules) 0,05 % Conservateur 0,30 % NaOH qsp pH = 2,8 Ethanol qsp 100,00 %
Composition pharmaceutique contre les tumeurs et infections à papillomavirus La présente invention a pour objet une composition pharmaceutique destinée au traitement ou la prévention des lésions associées aux papillomavirus et plus particulièrement aux papillomavirus humains (HPV) de type 16, 18, 31, 33 et 45.
Les papillomavirus sont des virus à ADN possédant un génome circulaire d'environ 7900 paires de bases entouré par une capside protéique. Un certain nombre de types de papillomavirus bovins (BPV), humains (HPV) ont été identifiés et leur génome séquencé (Pfister, 1987, in The papovalZiridae: The Papilloniaî4iiises (edition Salzman et Howley) Plenum Press, New York, p 1-38). Il comprend une région précoce et une région tardive. La région tardive contient deux cadres de lecture L1 et L2 qui codent pour les composants majeurs de la capside. La région précoce contient au moins les cadres de lecture El, E2, E4, E5, E6 et E7. Les produits d'expression El et E2 régulent la replication virale et l'expression des gènes viraux alors que ceux des régions E5, E6 et E7 sont impliqués dans les processus de transformation oncogénique des cellules infectées. En effet, il a été montré expérimentalement que la protéine E5 de BPV-1 peut il? vizro transformer des cellules (Schlegel et al., 1986, Science 233, 464-467). Les protéines E6 de BPV-I et E7 de HPV-16 sont impliquées dans l'induction et le maintien de la transformation oncogène. Le pouvoir transformant de E7 a été démontré pour HPV-16 et HPV-18 (Kanda et al., 1988, J. Virol. 62, 610-613 ; Vousden et al., 1988, Oncogene Res. 3, 1-9 ; Bedell et al., 1987, J. Virol. 61, 3635-3640). Il n'a pas été mis en évidence de fonction à E4.
Chez l'homme, les HPV sont associés à des pathologies allant de l'infection bénigne de la peau aux verrues et aux tumeurs malignes. Ces virus sont hautement spécifiques des épithélium de l'épiderme des voies génitales, orales et respiratoires.
Les données épidémiologiques suggèrent fortement le role de certaines souches dans le cancer du col de l'utérus et des voies basses, en particulier les HPV-16 et 18 et à un moindre degré les HPV-31, 33 et 45. Le cancer du col utérin est la deuxième cause de cancer féminin dans le monde. Selon l'OMS, 460000 nouveaux cas sont répertoriés chaque année dont 200000 cas au moins sont clairement associés aux HPV. Toute une série d'études démontre le rôle transformant de ces virus, leur intégration spécifique dans le génome des cellules néoplasiques, leur activité génique dans les cellules cancéreuses et l'importance de l'expression des gènes précoces E6 et E7 dans le maintien du phénotype malin des cellules néoplasiques HPV positives (Monsenego, J. Impact Medecin, 11 mars 1994).
Les pathologies associées aux virus HPV posent un problème thérapeutique du fait de leur nature persistante et récurrente. De nombreuses approches ont déjà été utilisées dans le traitement de ces maladies comme la chirurgie, la chimiothérapie, les agents antiviraux et l'immunothérapie.
A cet égard, le brevet européen EP 0 462 187 décrit une approche de vaccination utilisant les gènes précoces des papillomavirus pour établir une immunité à l'égard des tumeurs résultant de l'intégration du génome HPV dans l'ADN cellulaire et dans lesquelles les protéines de la capside ne sont plus exprimées. La demande WO 93/02184 enseigne une approche thérapeutique basée sur l'utilisation des antigènes de capside à titre d'agents immunogénes. Ces documents ne suggèrent pas la possibilité d'associer l'effet préventif procuré par les polypeptides précoces et l'effet curatif conféré par les polypeptides tardifs des papillomavirus pour générer des compositions adaptées à l'ensemble des pathologies graves dues aux HPV. Par ailleurs, au cours des dernières années, il a été proposé d'utiliser des polypeptides ayant une activité immunostimulatrice dans le but d'activer les cellules T avec un résultat plus ou moins bénéfique selon les pathologies ciblées (voir par exemple Wu96/ 11279).
La présente invention concerne plus précisément une préparation basée sur un mélange d'antigènes originaires des régions précoces et tardives d'un papillomavirus ou un vecteur les exprimant simultanément, dans le but d'établir une immunité durable à l'encontre des cellules infectées. Les candidats vaccins proposés dans le cadre de la présente invention peuvent être utilisés à titre préventif (immunoprophylaxie) pour limiter le développement ou la propagation de l'infection virale aux tissus voisins ou à titre curatif (immunothérapie) pour empecher ou réduire une évolution tumorale chez les patientes infectées.
L'utilisation des antigènes de capside va induire la production d'anticorps contre les épitopes antigèniques localisés à la surface des particules virales empêchant l'infection de s'établir durablement. L'usage des protéines précoces va permettre d'induire une immunité à l'encontre des cellules infectées après intégration de l'ADN viral.