INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Mono- Volume monomère MMA AIBN % mol Rdt/ Tg Ex. mère de toluène actif (mmol) % molaire monomère mono ('C) actif (cm3) (mmol) introduit mère 3 Comp 1 4 0.67 3,74 4,3 15 58 140 4 Comp 1 4 0,68 1.87 6.5 26,6 46 145 5 8,1 1,32 0.94 5.4 59 69 155 6 8 1.73 0 10.6 100 94 158 7 Comp 5 3 0,6 3,37 4.6 15 20 145 8 4 0.79 1.4 4,4 36 50 140 9 8 1.24 0.94 5.6 57 25 146 10 3 0,73 0,2 4,6 78 45 157 Exemple Il : Préparation de l'oxvde de (4-{4-[bis(2-hydroxy- nthvlaminolph8nvlazo)phénvldiphénvl phosphine. (Composé 10) Cette synthèse est réalisée selon le shéma réactionnel représenté sur la figure 3 1) Préparation de la 4-1(4-bromo)Dhénvlazo-N ,N-bis (2-hvdroxvéthvl)- phényl amine (M = 365). Composé 11 Dans un tricol de 500 Cm on introduit 10 g (58 mmol) de 4-bromoaniline, 4,2 g (60 mmol) de nitrite de sodium, 130 cm3 d'eau permutée.Dans la solution refroidie à 5 C est ajoutée goutte à goutte une dilution de 8 cm3 d'acide chlorhydrique concentré dans 10 cm3 d'eau permutée Ce mélange est maintenu entre 0 et 5"C et agité pendant 5 minutes.
10 g (55 mmol) de bis(2hydroxy éthyl) phénylamine sont ajoutés au milieu maintenu à 5"C, puis le mélange est agité pendant 24 heures à température ambiante.
2 g de soude sont dissous dans 100 cm3 d'eau permutée puis cette solution est versée sur le mélange réactionnel.
Après filtration, le produit rouge est lavé à l'eau permutée, puis au dichlorométhane et séché sous vide.
16 g de produit pur sont recueillis.
Rendement: 80 % 2) Préparation de la 4-1(4-bromo) Dhénvlazol -N. N- bis [2 (tétrahvdropvrannvl oxvéthvl)l Dhénviamine (M = 532). Comoosé 12 Dans un tricol de 500 cm3 sont introduits 12 g (33 mmol) du composé 11 précédemment obtenu, 14 cm3 (100 mmol) de dihydropyranne et 6 g (24 mmol) de paratoluènesulfonate de pyridinium dissous dans 50 cm3 de dichlorométhane. La dissolution de tous les réactifs n'est complète qu'après quelques heures. Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation pendant 48 heures.
Après neutralisation de l'acidité par ajout d'une préparation de 3 g de carbonate de sodium dans 10 cm3 d'eau, le dichlorométhane est évaporé.
Le produit est extrait à l'éther. La phase organique est lavée avec 2 fois 50 cm3 d'eau, puis séchée sur sulfate de magnésium. Après évaporation du solvant, le produit est purifié par chromatographie sur colonne de silice (éluant pentane: 90, acétone:10).
109 g de cristaux rouge orangé sont recueillis.
Rendement: 68 % RMN 1H dans CDCl3 composé 12
HA HB HC HD HE HF HG HH 8(ppm) 4.6 3.4 à 4,0 1,46 à 1,9 3.4 à 4,0 6,82 7,85 7,56 7,71 J (Hz) JHFHG=9 JHHHI=9 3) Préparation de l'oxyde de (4-{4-[bis (2-tétrahydropyrannyloxy éthyl)amino]phénylazo} phényl diphényl) phosphine (M =653).
(Composé 13) Svnthèse de la Phosphine En tricol de 250 cm3, équipé d'un réfrigérant, d'un septum, et sous courant d'argon, 5,32 g (10 mmol) de synthon bromé (composé 12) préalablement préparés sont dissous dans 40 cm3 de THF fraîchement distillé sur AlLiH4, puis le mélange est refroidi à - 60 C. La solution est rouge orangé.
6,25 cm3 (10 mmol) de butyllithium (1,6 mol.l-1 dans l'hexane) sont ajoutés à - 60 C goutte à goutte. Le mélange est alors réchauffé à 40 C, la solution prenant une teinte rouge sombre, puis à nouveau refroidi à 60 C.
A cette température, 1,85 cm3 de Ph2PCI, soit 10 mmol, sont ajoutés goutte à goutte. Le mélange est maintenu 15 minutes à -60 C, puis on laisse la température s'élever lentement jusqu'à 20 C.
On peut associer au microscope 28 un système de prise de vue comprenant, dans l'exemple représenté, une caméra 40 munie d'un écran de visualisation 42.
On utilise par exemple une caméra de type CCD.
A la place de la caméra associée à l'écran de visualisation on peut utiliser un appareil photographique permettant de prendre une photographie de ce qui est observé grâce au microscope 28.
Dans le cas où le coeur de la fibre optique est nettement supérieur à 10 un pour pouvoir être observé à l'oeil nu, le microscope 28 peut être supprimé.
On peut alors placer directement en regard du réticule 24 la caméra ou l'appareil photographique.
Dans le cas où la source 14 émet un rayonnement n'appartenant pas au domaine visible, par exemple un rayonnement infrarouge, on associe au microscope 28 un dispositif permettant la visualisation de ce rayonnement.
L'objectif 22, le réticule 24 (qui est placé dans le plan focal PF de l'objectif 22, la plaque de verre 34 étant perpendiculaire à l'axe Y) et l'objectif 38 du microscope 28 sont maintenus par des moyens non représentés.
On explique ci-après la manière d'utiliser le dispositif conforme à l'invention, qui est représenté sur la figure annexée, pour collimater le faisceau lumineux 4 issu de la fibre optique 10 grâce au miroir parabolique 6.
On commence par positionner l'extrémité 2 du coeur 8 de la fibre optique 10 à peu près au foyer F du miroir parabolique 6 car on sait approximativement où se trouve ce foyer F.
On éclaire le réticule 24 et l'on observe celui-ci grâce au microscope 28.
Le centre O du réticule 24 matérialise la position du foyer de l'objectif 22.
On active la source lumineuse 14 pour envoyer de la lumière dans la fibre optique 10, d'où la formation du faisceau lumineux 4.
On observe, grâce au microscope 28, la lumière ainsi émise par la fibre.
Cette lumière émise par la fibre est réfléchie par le miroir parabolique 6 puis atteint le microscope 28 après avoir traversé l'objectif 22 et la plaque de verre 34 portant le réticule 24.
On agit alors sur le moyen de positionnement 30 et sur le moyen de positionnement 32, par approximations successives, pour que l'image de l'extrémité 2 du coeur de la fibre optique se trouve dans le plan focal PF de l'objectif 22, au centre O du réticule 24, et que l'on obtienne ainsi un point lumineux de taille égale au diamètre de ce coeur (10 un dans l'exemple décrit) au centre O.
Lorsque l'image de l'extrémité 2 du coeur de la fibre optique se trouve dans le plan focal PF au point 0 (avec un grandissement égal à 1), on sait que cette extrémité 2 se trouve au foyer F du miroir parabolique 6.
Puis, ces fragments d'ADN ont été digérés doublement par HindIII et EcoRI et clonés aux sites HindIII et EcoRI du plasmide pNEB193 commercialisé par New England Biolabs. Le plasmide pNEB193 a été déphosphorylé comme décrit en II. a. La ligation et la transformation ont été réalisées comme décrites au chapitre I. b. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur 100 ssg/ml ampicilline, a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline (Stephen et al., 1990) et analysé par digestion enzymatique. Le clone resultant a été appelé pBIOC54.La séquence nucléotidique de ce gène chimérique résultant de la fusion traductionnelle entre la séquence codant pour le peptide transit et le cDNA codant pour la chaîne a globine mature a été vérifiée par séquençage comme décrit au chapitre I. b.
A partir du plasmide pBIOC54, le fragment HindIII-EagI, portant la séquence codant pour le peptide transit du précurseur de la petite sous-unité de la ribulose 1,5-biphosphate carboxylase et les 4 premiers codons de la chaîne a globine mature, a été isolé par double digestion, HindIII (digestion totale) et EagI (digestion partielle). Ce fragment HindIII- EagI, purifié par électrophorèse sur gel d'agarose 1,8% et par action du kit "Geneclean II" (BIO101), a été cloné aux sites HindIII et EagI du plasmide pBIOC44 déphosphorylé comme décrit au chapitre II. a.
La ligation et la transformation ont été réalisées comme décrites au chapitre I. b. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur 100 ssg/ml ampicilline, a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline (Stephen et al., 1990) et analysé par digestion enzymatique. Le clone résultant a été appelé pBIOC55. La séquence nucléotidique de ce gene chimérique résultant de la fusion traductionnelle entre la séquence codant pour le peptide transit et le cDNA codant pour la chaîne a globine mature a eté vérifiée par séquençage comme décrit au chapitre I. b.
b. CONSTRUCTION DU PLASMIDE pBIOC57 CONTENANT LE cDNA CODANT POUR LA P GLOBINE POUR UN ADRESSAGE CHLOROPLASTIQUE.
Pour obtenir un adressage chloroplastique de la chaîne ss de globine, la séquence codant pour le peptide transit du précurseur de la petite sous-unité de la ribulose 1,5-biphosphate carboxylase de Pisum sativum L. a été fusionnée au premier codon de la séquence codant pour la chaîne p globine mature en maintenant la phase ouverte de lecture. La séquence de clivage entre les séquences du peptide transit et de la chaîne p globine mature est Cys - Val.
La séquence codant pour le peptide transit du précurseur de la petite sous-unité de la ribulose 1,5-biphosphate carboxylase a été amplifiée par PCR sur le plasmide pJIT117 à l'aide des 2 oligodésoxynucléotides, WD23 (5' gtcattaattaaca ATG GCT TCT ATG ATA TCC TCT TCA GCT GTG 3') et WD24 (5' aatgagct C GGC cGA CTT CTC CTC AGG AGT CAG GTG CAC GCA CTT TAC TCT TCC ACC 3'). L'amorce WD23 apporte le site de restriction PacI, la séquence aaca favorisant l'initiation de la traduction (Joshi, 1987) et précédant les 10 premiers codons du peptide transit (dont 1'ATG initiateur).L'amorce WD24 apporte le site de restriction SacI, les 10 premiers codons de la séquence codant la chaîne ss globine mature (un site de restriction EagI est créé par mutation silencisuse dans le neuvième codon (TCT modifié en TCg)) et les 6 derniers codons de la séquence du peptide transit.
L'amplification PCR et le traitement des fragments d'ADN amplifiés ont été réalisés comme décrits dans la troisième étape du chapitre II. a. Puis, ces fragments d'ADN ont été digérés doublement par PacI et SacI, purifiés par électrophorèse sur gel d'agarose 1,8% et par action du kit "Geneclean II" (BIO101) et clonés aux sites PacI et SacI du plasmide pNEB193 commercialisé par New England Biolabs. Le plasmide pNEB193 a été déphosphorylé comme décrit en II. a. La ligation et la transformation ont été réalisées comme décrites au chapitre I. b. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur 100 g/ml ampicilline, a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline (Stephen et al., 1990) et analysé par digestion enzymatique. Le clone résultant a été appelé pBIOC56. La séquence nucléotidique de ce gène chimérique résultant de la fusion traductionnelle entre la séquence codant pour le peptide transit et le cDNA codant pour la chaîne p globine mature a été vérifiée par séquençage comme décrit au chapitre I. b.
A partir du plasmide pBIOC56, le fragment PacI EagI, portant la séquence du peptide transit du précurseur de la petite sous-unité de la ribulose 1,5-biphosphate carboxylase et les 9 premiers codons de la séquence codant la chaîne p globine mature, a été isolé par double digestion, PacI (digestion totale) et EagI (digestion partielle). Ce fragment PacI-EagI, purifié par électrophorèse sur gel d'agarose 1,8% et par action du kit "Geneclean II" (BIO101), a été cloné aux sites PacI et EagI du plasmide pBIOC45 déphosphorylé comme décrit au chapitre II. a. La ligation et la transformation ont été réalisées comme décrites au chapitre I. b.L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur 100 pg/ml ampicilline, a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline (Stephen et al., 1990) et analysé par digestion enzymatique. Le clone résultant a été appelé pBIOC57. La séquence nucléotidique de ce gène chimérique résultant de la fusion traductionnelle entre la séquence codant pour le peptide transit et le cDNA codant pour la chaîne p globine mature a été vérifiée par séquençage comme décrit au chapitre I. b.
c. CONSTRUCTION DU PLASMIDE BINAIRE DE CO-EXPRESSION pBIOC59 CONTENANT LES cDNA CODANT POUR LES GLOBINES, a ET ss, POUR UN ADRESSAGE CHLOROPLASTIQUE.
Le fragment HindIII-EcoRI portant le cDNA codant pour la chaîne a globine à adressage chloroplastique a été isolé à partir de pBIOC55 décrit au chapitre IV.
a., et ligué à l'ADN plasmidique de pBIOC43 doublement digéré par HindIII et EcoRI, et déphosphorylé comme decrit en II. a. La ligation et la transformation ont été réalisées comme décrite au chapitre I. b. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur 10 ;g/ml tétracycline, a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline (Stephen et al., 1990) et analysé par digestion enzymatique. Le clone résultant a été appelé pBIOC58.
Le fragment PacI-MluI portant le cDNA codant pour la chaîne p globine à adressage chloroplastique a été isolé à partir de pBIOC57 décrit au chapitre IV. b., et ligué à l'ADN plasmidique de pBIOC58 doublement digéré par PacI et MluI, et déphosphorylé comme décrit en II. a. La ligation et la transformation ont été réalisées comme décrites au chapitre II.c.3 en utilisant la souche E. coli Sure tet. L'ADN plasmidique des clones obtenus, sélectionnés sur 10 pg/ml tétracycline, a été extrait selon la méthode de la lyse alcaline (Stephen et al., 1990) et analysé par digestion enzymatique. Le clone résultant a été appelé pBIOC59.
La séquence nucléotidique des cDNA codant pour les chaînes a et p de globine recombinante permettant un adressage chloroplastique a été vérifiée par séquençage comme décrit au chapitre I. b. L'ADN plasmidique du vecteur binaire pBIOC59 a été introduit par transformation directe dans la souche LBA4404 d'Agrobacterium tumefaciens selon le procédé de Holsters et al. (1978). La validité du clone retenu a été vérifiée par digestion enzymatique de l'ADN plasmidique introduit.
V. CONSTRUCTION DES GENES CHIMERIQUES CODANT POUR LE8 CHAINES DE GLOBINE, a ET p, PERMETTANT UNE EXPRESSION DE l'HEMOGLOBINE HUMAINE RECOMBINANTE POUR LA SECRETION DANS LES FEUILLES DE TABAC.
Pour obtenir la sécrétion, la séquence codant pour le peptide signal (PS) de la sporamine A des racines tubérisées de la patate douce (Murakami et al., 1986 ; Matsuoka et Nakamura, 1991) (ATG AAA GCC TTC ACA CTC GCT CTC TTC TTA GCT CTT TCC CTC TAT CTC CTG CCC AAT CCA GCC CAT TCC), est fusionnée au premier codon de la séquence codant pour d'une part, la chaîne a globine mature (délétion de l'ATG initiateur) et d'autre part, la chaîne ss globine mature (délétion de l'ATG initiateur) en maintenant les phases ouvertes de lecture. Ce peptide signal de 23 acides aminés a été isolé à partir du plasmide pMAT103 (Matuoka et Nakamura, 1991) et utilisé lors de la réalisation des constructions.
a. CONSTRUCTION DU PLASMIDE pBIOC60 CONTENANT LE cDNA CODANT POUR L'a GLOBINE POUR LA SECRETION.
I1 sera possible de sérier les chronologies de codes d'impultions permettant de réafficher sur le monitor détachable (F) la partition musicale précédemment réalisée et d'y opérer des modifications.
D - L'AMPLIFICATEUR: Micro amplificateur d'une puissance maximale de 3 à 5 watts maximum;il n'y aura pas de haut parleur intégré au Les sorties son seront destinées à des hautparleurs amplifiés ;ces haut-parleurs seront en configuration excérieure. Les sorties son pourront être connectées à un amplificateur de pliais grande puissance E - LE TRANSMETTEUR DE DONNEES I1 aura en charge la transmission à l'écran des données venant vil pourra aussi transmetre des données venant d'un appareil multimédia ou dtun téléviseur.
Cette transmission pourra se faire par système sans fil Pour ce module , il sera prévu une place d'encastrage dans le clavier.
I1 pourra être lié au zeste par système sans fil.
Ce TRANSMETTEUR DE DONNEES,par sa puisance d'émission modulable,pourra, dans le cas de l'utilisation maximale de sa puissance permettre la connection d'un autre utilisateur situé à moins de 8 mètres de part et d'autre et au bout du faisceau de transmission ; le faisceau aurait une portée de 30 mètres ;cette distance est équivalente à la distance maximale de laquelle il sera possible de transmettre les données à l'écran.
I1 serait ainsi possible d'organiser grâce à ce dispositif et à l'entrée instrument(jack 3/4) ,d'en faire un outil de communication interne de modeste puissance.
La connection des autres utilisateurs ayant le même dipositifse fera par croisement de faisceaux(pour l'image) et par rayonnement (pour les signaux sonores venant de l'entrée (jack 3/4 cette entrée étant reliée aux sorties (line out) du micro ampiificateur(D) F- L'ECRAN DETACHABLE Cet écran sera détachable du module et pourra recevoir les données par système sans fil.
Cet écran pourrait être dans un matériau souple non cassable Tots les éléments le constituant,seraient extraplats et répartis dans un module transparent ou non; module dans lequel serait encastré l'écran qui pourrait avoir une taille de 15 à 20 cm Ce module pourrait avoir 35 cm de long,32 cm de large et 8,7 cm d'épaisseur; Tous les éléments chauffants seront entourés d'un matériau pouvant être de fines lamelles de liège superposées; alliant légèreté et jouant le rôle de tampon entre ces éléments chauffants et les parois internes du module.
DU FAIT DE LA TAILLE (pouvant encore être réduite) DE L'ECRAN ,LA SOUPLESSE DU MATERIAU ET SURTOUT LA DISPOSITION DE SES ELEMENTS PAR RANGEES DANS DES PLAQUES HORIZONTALES SEPAREES ENTRE ELLES PAR DES CANNELURES IL SERA POSSIBLE DE FAIRE UNE JONCTION ENTRE LA PARTIE HAUTE ET LA PAR TIE BASSE DE CE MODULE(où sera encastré l'écran) PERMETTANT D'OBTENIR UNE FIGURE CYLINDRIQUE; L'ON OBTIENDRAIT AINSI UN ECRAN ENROULABLE.
Cet écran sera fixé sur une structure automatisée(G) permettant la rotation ; cette rotation pourrait êtie de 45 à gauche ou à droite de l'axe; Cette structure permettra aussi un mouvement de 15 (de l'axe vers le bas);et 350 de l'axe vers le haut.
H- LES FILMS LOUPES: L'écran pourra être de petite taille et permettre la lecture à distance,grâce à son procedé d'agrandissement basé sur un principe de "FILMS-LOUPES" Ce procé4dd'agrandissement des données de cet écran détachable sera dans un matériau souple Les films loupes pourront avoir une épaisseur de 0,8mm à 2 mm et pourront offir un agrandissement de 2 à 8 X Ces films loupes pourront être fixés sur chassis automatisé Leur déroulement pourra aussi être manuel; I1 sera possible de séparer un film optique de son automatisme sars qu'il ne soit en contact avec l'utilisateur; Pour ce faire,le FILM LOUPE sera logé dans un tube de 35cm de long et 8,9cm de diamètre;il s'enroulera et se déroulera autour d'une tige fixée de par et d'autre à l'intérieur du tube dans le sens de la longueur; son déroulement manuel se fera par traction sur un appendice prévu à cet effet.
Grace à la possibilité de superposition des films loupes, il sera possible de visualiser les données de l'écran même s'il s'agit d'un écran miniaturisé dont les données étaient initialement illisible à l'eil nu.
Le déroulement et l'enroulement des FILMS LOUPES purra se faire par le biais d'une legère structure pouvant être automatisée cette structure pourra être fixée sur celle de l'écran,ou diiectement sur l'écran par système de ventouses dont certaines pourraient être fixées au bout de cordelettes.
Ce système de ventouses permettra d'adapter les films loupes à tout autre appareil vidéo.
J- LA TELECOMMANDE TRIPLE FACETTES: Clé du dispositif permettant d'activer ou de désactiver l'ensemble du système ainsi que l'écran et ses structures automatisées (G) et (I) Cette télécommande aura comme particularité 3 facettes entraînées par un rotor (motorisé ou non) tournant àl'intérieur d'un tube de 18cm de long; 6,5cm de diamètre, permattant la rotation sans frottement des facettes contre les parois internes.
L'une des facettes télécommandera le dispositif; les deux autres facettes commanderont d'une part la structure supportant l'écran;et d'autre part la structure de déroulement ,d'enroulement et de superposition des films-loupes.
La séquence MSRV-2B (SEQ ID NO 11) est suffisamment divergente des séquences rétrovirales déjà décrites dans les banques de données pour qu'on puisse avancer qu'il s'agit d'une région de séquence appartenant à un nouvel agent infectant, dénommé MSRV-2. Cet agent infectant s'apparenterait à priori, d'après l'analyse des premières séquences obtenues, à un rétrovirus, mais, étant donnée la technique utilisée pour obtenir cette séquence, il pourrait aussi s'agir d'un virus à ADN dont le génome code pour une enzyme qui possède accessoirement une activité transcriptase inverse comme c'est le cas, par exemple, pour le virus de l'hépatite B, HBV (12).De plus, le caractère aléatoire des amorces dégénérées utilisées pour cette technique d'amplification PCR peut très bien avoir permis, du fait d'homologies de séquences imprévues ou de sites conservés dans le gène d'une enzyme apparentée, l'amplification d'un acide nucléique provenant d'un agent pathogène et/ou co-infectant prokaryote ou eukaryote (protiste).
EXEMPLE 2 : OBTENTION DE CLONES DENOMMES MSRV-1B ET MSRV-2B, DEFINISSANT UNE FAMILLE MSRV-1 et MSRV2, PAR AMPLIFICATION PCR "NICHEE" DES REGIONS POL CONSERVEES DES RETROVIRUS, SUR DES PREPARATIONS DE LYMPHOCYTES B D'UN NOWEAU CAS DE SEP La même technique PCR modifiée d'après la technique de Shih (12) a été utilisée pour amplifier et séquencer le matériel nucléique ARN présent dans une fraction de virions purifiée au pic d'activité transcriptase inverse "de type LM7", sur gradient de saccharose selon la technique décrite par H.Perron (13) et selon les protocoles mentionnés dans l'exemple 1, à partir d'une lignée lymphoblastoïde spontanée, obtenue par auto-immortalisation en culture de lymphocytes B d'un patient SEP séropositif pour le virus d'Epstein-Barr (EBV), après mise en culture des cellules lymphoïdes sanguines dans un milieu de culture approprie contenant une concentration appropriée de cyclosporine A.
Une représentation de l'activité transcriptase inverse dans les fractions de saccharose prélevées sur un gradient de purification des virions produits par cette lignée est présentée dans la figure 4. De même, les surnageants de culture d'une lignée B obtenue dans les mêmes conditions à partir d'un témoin exempt de sclérose en plaques ont été traités dans les mêmes conditions, et le dosage de l'activité transcriptase inverse dans les fractions du gradient de saccharose s'est avéré négatif partout (bruit de fond) et est présenté dans la figure 5. La fraction 3 du gradient correspondant à la lignée B de SEP et la même fraction sans activité transcriptase inverse du gradient témoin non-SEP, ont été analysées par la même technique RT-PCR que précédemment, dérivée de Shih (12), suivie des mêmes étapes de clonage et de séquençage tels que décrites dans l'exemple 1.
Il est tout à fait notable que les séquences de type MSRV-1 et MSRV-2 soient retrouvées dans le seul matériel associé à un pic d'activité transcriptase inverse "de type LM7" provenant de la lignée lymphoblastoïde B de SEP. Ces séquences n'ont pas été retrouvées avec le matériel de la lignée lymphoblastoïde B témoin (non-SEP) dans 26 clones recombinants pris au hasard. Seules les séquences contaminantes de type Mo-MuLV provenant de la transcriptase inverse commerciale utilisée pour l'étape de synthèse de l'ADNc et des séquences sans analogie rétrovirale particulière ont été retrouvées chez ce témoin, du fait de l'amplification "consensus" des séquences de polymérases homologues que réalise cette technique PCR. De plus, l'absence de cible concentrée qui fait compétition pour la réaction d'amplification dans l'échantillon témoin permet l'amplification de contaminants dilués.La différence de résultats est à l'évidence hautement significative (chi-2, p < 0,001).
EXEMPLE 3 : OBTENTION D'UN CLONE PSJ17, DEFINISSANT UN RETROVIRUS MSRV-1, PAR REACTION DE TRANSCRIPTASE INVERSE ENDOGENE SUR UNE PREPARATION DE VIRION ISSUE DE LA LIGNEE PLI-2.