INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
On obtient ainsi 2 g de produit attendu (cristaux) ANALYSES IR CHCl3 (cm-1) Absence d'OH -O 1722 Aromatique 1624-1606-1502 EXEMPLE 94 : 3,4-dihydroxy-5-(((5-(3-isoxazolyl)-2-thiényl) sulfonyl)oxy)-benzoate de méthyle On procède comme à l'exemple 2 à partir de 1,9 g de produit de l'exemple 93 dans 100 ml d'un mélange acide acétique 80/eau 20.
LIQUIDUS SOLIDUS COMPOSITION DENSITE Oc 47 47 Bi Pb Sn Cd In 9,41 52 47 Bi Pb Sn Cd In 9,51 58 58 Bi Pb Sn In 9,23 65 57 Bi Pb Sn Cd In 9,84 65 61 Bi Pb Sn Cd In 9,79 70 70 Bi Pb Sn Cd 9,57 79 79 Bi Sn In 8,83 138,5 138,5 Bi Sn 8,55
Domaine dc 1'inveuaon La présente invention concerne des séquences d'ADN, les molécules d'ADN recombinant et les procédés pour la production des ADNs recombinants et des protéines de capside du parvovirus du canard ou de polypeptides équivalents, les produits obtenus et les préparations les contenant, plus particulièrement pour des buts de diagnostic, de vaccination, d'immunothérapie ou de thérapie génique.
Amére-plan technolog c Le parvovirus du canard DPV est l'agent causal (Jestin, 1990, Fournier, 1991, Jestin et coll., 1991) d'une maladie apparue en France en 1988-1989 (Jestin, 1990, Drouin et coll., 1991), dénommée successivement "syndrome de malabsorption, mortalité, déplumement, reptation: SMMDR", puis "maladie de Derzsy", en raison d'une part des nombreuses analogies avec cette maladie décrite depuis 196s1965 chez l'oie (Derzsy, 1967) et depuis 1972 chez le canard (Gaudry et Tetkoff, 1973) et d'autre part de l'importance des communautés antigéniques entre le parvovirus de la maladie de Derzsy dénommé parvovirus de l'oie (GPV) et le parvovirus de canard.(Jestin, 1990, Jestin et coll., 1991), enfin désignée parvovirose du canard" pour insister sur les critères la différenciant de la maladie de Derzsy. En effet, l'évolution de ces deux maladies est liée à la fois à l'âge où les animaux la contractent et à leur immunité: les canetons de moins de 2 semaines sans immunité ou présentant une immunité médiocre sont pleinement sensibles et manifestent une forme aiguë conduisant à une mortalité élevée, alors que les animaux plus âgés présentent, selon les différentes combinaisons des 2 paramètres précités, tout un gradient de manifestations plus ou moins sévères alliant de la forme chronique caractérisée par de la prostration, un arret de croissanc;, des défauts d'emplumement, une mortalité plus ou moins faible, à l'absence de symptômes en passant par une seule perte de poids (Coudert et coll., 1972, Coudert et coll., 1973, Jestin, 1990, Jestin et coll., 1993).
Mais la parvovirose diffère de la maladie de Derzsy par le fait qu'elle ne touche pas l'oie (Fournier, 1991) et qu'elle induit des manifestations nerveuses d'une part (Plassiart, 1991), des formes aigus d'une sévérité accrue d'autre part (Jestin, 1990, Fournier, 1991, Jestin et coll.,1991). De plus le parvovirus du canard présente quelques différences antigéniques avec le GPV et son niveau de réplication en culture et dans les organes est beaucoup plus élevé (Fournier, 1991, Jestin et coll., 1991, Jestin et coll., 1995a).
Pour prévenir la parvovirose du canard, des moyens de prophylaxie médicale ont été mis en place sur le terrain. lls consistent à administrer par voie sous-cutanée au caneton d'1 jour un vaccin associant extemporanément une valence correspondant au virus atténué GPV et ur > e valence correspondant au virus inactivé DPV en adjuvant aqueux La rime intervention est réalisée entre 14 et 21 jours d'âge (préférentiellement à 14 jours) (Recommandations du fabricant). Par ailleurs, afin que le caneton bénéficie d'une immunité maternelle dans les premiers jours de sa vie, les reproducteurs reçoivent un rappel avant l'entrée en ponte consistant en l'administration par voie sous-cutanée d'un vaccin bivalent (associant les valences GPV et DPV) en adjuvant huileux (Fournier et Gaudry, 1992, Jestin et coll., 1992, Jestin et coll., 1993). Bien que ce protocole vise à procurer une immunité maternelle protégeant le caneton dans sa première semaine de vie et à l'immuniser activement en relais, la qualité de la protection apportée aux canetons de 2 à 3 semaines est incertaine (Jestin et coll., 1993). De plus l'immunité acquise peut ne pas se maintenir à un niveau suffisant pendant toute la période de réceptivité du caneton qui est d'environ 35 jours (Jestin et Coll., 1993). Ces failles peuvent expliquer les formes chroniques qui sont toujours observées sur le terrain dans un certain nombre de cas et qui sont responsables de pertes économiques (Balloy, 1995).
Il y a donc besoin d'améliorer la stratégie vaccinale. Le recours aux techniques de génie génétique peut apporter une solution à condition de disposer de données sur la structure moléculaire de ce virus. Une étude biochimique et génomique de ce virus réalisée récemment (Le Gall - Reculé et Jestin, 1994) apporte les éléments suivants.
Le virus DPV est classé dans les parvovirus autonomes ; il a une taille de 22-23 nm et une densité de 1.39 à 1.42 en CsCI. Les particules virales sont constituées de 3 protéines de capside de 91, 78 et 58 kDa en SDS-PAGE et d'un ADN sirnple brin de 5 300 bases présentant des extrémités palindromiques en forme d'épingles à cheveux La moitié des virions présentent un brin d'ADN de polarité positive, l'autre moitié un brin d'ADN de polarité négative. Une carte de restriction du génome a été aussi établie.
Alors que le génome de la plupart des parvovirus de mammifères a été séquencé, il n'existe aucune publication concernant la séquence nucléotidique du parvovirus du canard.
Cette absence de données bloquait toute mise au point de molécules d'ADN recombinantes comprenant des séquences codant pour des protéines immunogènes à intérêt diagnostique et vaccinal.
Résumé dc I'inveniion Sous un premier aspect, I'invention réside dans des molécules d'ADN recombinant comprenant les séquences d'ADN codant pour les protéines VP2 et VP3 du parvovirus du canard, ou de fragments ou des dérivés de ces séquences codant pour des polypeptides pouvant induire une réponse immunitaire.
Selon un deuxième aspect, l'invention concerne les molécules d'ADN recombinant nu ou constituant un vecteur d'expression ou un microorganisme ou une cellule ainsi transformés.
Sous d'autres aspects, la présente invention comprend les protéines de capside VP2 et VP3 préparées par génie génétique.
Les produits mentionnés et les préparations les contenant trouvent des applications comme vaccins, sérums et réactifs de diagnostic.
Descnption des figures d des tableaux Figure 1: Stratégie de clonage de fragments d'ADN bicaténaire du virus DPV dans le vecteur pBluescript (pBS SK). Le clone pDPV2 a été construit par ligation du fragment de 2950 bp généré par la digestion de l'ADN du DPV par BgE, dans le pBS SK digéré par BoenIll et EcoRV. Les abréviations utilisées pour désigner les sites de restriction sont : BH > BamHt ; B, Bgm; E, EiBoRV; H; HinalII; K, nmI.
Figure 2: Séquence nucléotidique de la partie d'intérêt du fragment cloné du génome du DPV.
Ces dispositifs sont onéreux et encombrants car ils utilisent pour chaque source lumineuse un dioptre et une lentille, par exemple lentille de Fresnel, et ils nécessitent un centrage de la source.
Un premier but de l'invention est de palier les mconsénlents précités en réalisant un dispositif plus simple, plus compact et moins onéreux.
Un autre but de l'invention est d'améllorer l'homogénéité de l'éclairement.
Ces buts sont atteints grâce à l'msention qui consiste en un ensemble lumineux, caracténsé en ce qu'il comporte en combinaison une matnce de n x m dioptres sphèresplan et un ensemble de sources lumineuses dingées vers les faces quasi-sphériques des dioptres.
Selon un autre mode de réalisation préférentiel la matnce de dioptres comporte quatre dioptres disposés en carré et en ce que la source lumineuse est une source ponctuelle positionnée sensiblement sur l'axe de symétrie du carré.
Selon un autre mode de réalisation préférentiel, la source lumineuse est une ligne de LED solidaires ou une source filiforme combinée à une matnce de 2n x 2 dioptres alignée dans le sens longitudinal avec la source lumineuse.
On comprendra mieux l'invention à l'aide de la descnption qui suit faite en oeférence aux figures annexées suivantes: - Figure 1: schéma de pnncipe de l'invention utilisant une matrice de quatre dioptres ditfractants, - Figure 2 : ligne de n sources lumineuses ponctuelles combinées à une matnce I I néai re de 2 n dioptres, - Figure 3 : montage électnque des sources lumineuses.
- Figure 4: autre mode de réalisation de l'invention utilisant une fibre optique en sortie directe, - Figure 5: autre mode de réalisation de l'invention utilisant une fibre optique et un système de renvoi à 90 , - Figure 6: autre mode de réalisation de l'invention utilisant un conducteur de lumière, - Figure 7: autre mode de réalisation de l'invention utilisant une source lumineuse filiforme, - Figure 8 : surface éclairante formée d'une matrice formée de m lignes de n dioptres.
Selon le principe de l'invention, une source lumineuse ponctuelle (1), dirigée et centrée sur une matrice (2) de quatre dioptres sphère-plan (3) génère un équivalent de quatre sources avec un angle d'éclairement doublé par rapport à l'angle d'éclairement de la source (1) (voir figure 1).
Cette source lumineuse est par exemple et non limitativement une LED.
La présente invention est utilisée pour créer des feux de signalisation, feux arrière, voire des témoins lumineux permettant dans ce cas particulier d'augmenter la surface d'un témoin à LED. L'utilisation actuelle d'un témoin à LED dans la signalisation est limitée dans son intégration par son manque de surface éclairante, ce système optique peut être intégré soit au support de lampe ou de LED, soit directement dans l'appareil comportant la LED, planche de bord, interrupteur lumineux, signalisation et toute autre instrumentation nécessitant une visualisation.
Dans l'application spécifique "feu de signalisation", le produit le plus difficile à réaliser étant le feu stop surélevé (HMSL), la présente invention est tout à fait indiquée: en fonction des différentes réglementations et de l'esthétique recherchée, la surface lumineuse pourra être générée par une ou plusieurs lignes de source lumineuse ponctuelle, ou filiforme et dirigée.
Selon un mode de réalisation préférentiel représenté en figure 2, on dispose une ligne de n LED, chacune centrée et dirigée sur une matrice de quatre dioptres (3) les dioptres plans formant deux lignes 2n dioptres. La ligne de LED est sensiblement dans le plan longitudinal médian de la matrice.
Sur cette ligne de LED, en face de chacune d'elles, une matnce (2) de quatre dioptres sphère-plan, va permettre d'obtenir une augmentation de l'angle d'éclairement afin de respecter la réglementation en vigueur, et d'avoir une très bonne homogénéité en terme de rendu lumineux, d'obtenir des mesures sans ambi8üïté en vue d'homologation et d'utilisation, d'augmenter la capacité de l'appareil qui peut aller jusqu'à une réduction par quatre du volume par rapport aux systèmes concurrents les plus compacts.
Bien entendu, pour le respect du cahier des charges, la durée de vie est un problème important. Le produit sera donc asservi en puissance lumineuse, grâce à une thermistance (4) pour éviter des dégradations lors des élévations momentanées de température et protégé par une diode (5) contre les courant et tension inverses (voir figure 3).
L'intérêt de l'invention est son ouverture à la quasi-totalité des sources lumineuses. Nous avons vu son intérêt sur la LED, mais le pflncipe est identique avec: - une extrémité de fibre optique en sortie de fibre directe (6) ou avec renvoi (7) à 90" (voir figures 4 et 5).
On chauffe au reflux pendant 9 heures.
La solution est versée dans 300 ml d'eau et les cristaux sont essorés et lavés avec 75 ml d'eau. Après chromatographie sur silice avec le mélange éluant chlorure de méthylène 98/méthanol 2, on purifie par recristallisation dans 30 ml d'acétate d'éthyle.
On obtient ainsi 0,43 g de produit attendu (cristaux blancs) F = 2200C.
ANALYSES IR NUJOL (cm-1) Absorptions OH/NH max 3575-3430 =0 1691 Aromatique + NH2 def 1660-1620-1592-1522 EXEMPLE 44 : N,N-diméthyl-2,2-diphényl-7-(((4-méthylphényl) sulfonyl)oxy)-1,3-benzodioxole-5-carboxamide On procède comme à l'exemple 34 en solubilisant pendant 10 minutes, à -300, de la diméthylamine dans 120 ml de chlorure de méthylène anhydre en ajoutant à OOC, 3,9 ml d'une solution de triméthylaluminium 2 M dans l'hexane et en laissant revenir à température ambiante en 45 minutes, 2 g du produit de l'exemple 23 en solution dans 50 ml de chlorure de méthylène.
On obtient ainsi 2,2 g de produit attendu (cristaux blancs) ANALYSES IR CHC13 cul 1 Absence de
=0 amide Aromatique 1632-1619 EXEMPLE 45 : 3,4-dihydroxy-N,N-diméthyl-5-(((4-méthyphényl) sulfonyl)oxy)-benzenecarboxamide On procède comme à l'exemple 2 à partir de 2,1 g du produit de l'exemple 44 dans 100 ml d'un mélange acide acétique 80/eau 20.
La solution est versée dans 150 ml d'eau, on extrait avec trois fois 100 ml d'éther isopropylique et la phase organique est évaporée à sec.
On recristallise dans 40 ml d'acétate d'éthyle et obtient 0,9 g de produit attendu (cristaux blancs) F = 1900C ANALYSES IR NUJOL (cm-1) Région OH/NH max 3420 + absorption générale =0 1580-1492 EXEMPLE 46 : 2,2-diphényl-N-méthyl-7-(((4-méthylphényl) sulfonyl)oxy)-1,3-benzodioxole-5-carboxamide On procède comme à l'exemple 34 en utilisant une solution de méthylamine dans 120 ml de chlorure de méthylène anhydre, obtenue par barbotage pendant 10 minutes à -300C, 3,9 ml d'une solution de triméthylaluminiumm en solution 2 X dans l'hexane et à partir de 2 g de produit de l'exemple 23 en solution dans 50 ml de chlorure de méthylène.
On obtient ainsi 0,8 g de produit attendu.
ANALYSES IR CHC13 (cal) =C-NH- - 3470 =0 1665 Aromatique amide II 1623-1601-1535-1492 EXEMPLE 47 : 3,4-dihydroxy-N-méthyl-5-(((4-méthylphényl) sulfonyl)oxy)-benzenecarboxamide On procède comme à l'exemple 2 à partir de 0,8 g du produit de l'exemple 46 dans 100 ml d'un mélange acide acétique 80/eau 20.
On chauffe au reflux pendant 24 heures.
La solution est versée dans 150 ml d'eau et les cristaux sont essorés, lavés avec 30 ml d'éther isopropylique puis purifiés par recristallisation dans 20 ml d'acétate d'éthyle.
On obtient 0,3 g de produit attendu (cristaux blancs) F = 2400C ANALYSES IR NUJOL (cm-1) Absorptions OH/NH Max - 3428 =0 1648 Aromatique + amide II 1616-1606-1558-1532-1492 EXEMPLE 48 : 1-(2,2-diphényl-7-(((4-méthylphényl) sulfonyl)oxy)-1,3-benzodioxol-5-yl)-ethanone STADE 1 : 2, 2-diphényl-7-benzyloxy-1, 3-benzodioxole-5- carboxylate de méthyle On introduit 8,1 g du produit obtenu au stade 1 de l'exemple 1 dans 160 ml de diméthylformamide anhydre, ajoute 6,2 g de carbonate de potassium, agite 5 minutes, ajoute 2,9 ml de bromure de benzoyle et agite 24 heures à température ambiante.
Le milieu réactionnel est versé dans 300 ml d'eau, la phase aqueuse neutralisée par une solution d'acide chlorhydrique 2N, puis extraite avec trois fois 100 ml d'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée avec 3 ml d'eau et séchée.
On obtient 10 g de produit attendu (cristaux blancs) ANALYSES IR CHC13 (cm - Absence de OH - CO2Me 1713 - Aromatique 1634-1605-1585-1507-1497 STADE 2 : [acide 2,2-diphényl-7-benzyloxy-1,3-benzodioxole-5- carboxylique On introduit 10 g du produit obtenu au stade 1 ci-dessus dans 150 ml de soude concentrée et on chauffe à 1000C pendant 2 heures.
Le plateau 100 présente des cases formant un parcours et ayant différentes significations : les cases 101 portent un symbole évocateur des sentiments et se rapportent à la vie affective; les cases 102 portent un symbole évocateur de la réussite sociale et se rapportent à la vie professionnelle; les cases 103 portent un symbole évocateur de l'argent et se rapportent à la vie matérielle; les cases 104 portent un chiffre dont la signification sera expliquée plus bas.
Les cases 105 sont vides mais reçoivent un sommet d'un triangle 106 nettement marqué, hors de l'alignement des cases, et portant en son centre une indication 107 de la règle du jeu.
En face de l'une des cases 104, se trouve une case 108 figurant une flêche pointée vers le centre du plateau 100.
Elle est suivie de neuf cases groupées en trois séries de cases 101, 102 et 103, puis d'une case 110 éminemment importante puisqu'il s'agit de la case finale du parcours, à laquelle on donne un lustre particulier en lui donnant la forme d'une étoile resplendissante, sur un fond bleu nuit 111 parsemé de chiffres 112 rappelant de loitaines étoiles scintillantes.
Ainsi, le parcours formé par les cases, comprend une partie fermée sur elle-même 115, en deux arcs de cercle sécants, et un segment rectiligne 116 s'étendant de la case 108 à la case finale 110.
De part et d'autre du segment 116, se trouvent deux cases, respectivement 120 marquée "CONSONNES" et 121 marquée "VOYELLES". La raison d'être de ces cases sera expliquée plus loin.
Sur les figures 2 à 4, on voit la structure d'une contremarque 200.
Chaque contremarque comprend d'une part un support 201 présentant un socle 202 et un fût central 203 et d'autre part un élément amovible 204 formé ici d'un disque à contour polygonal à neuf côtés repérés chacun par un chiffre de 1 à 9.
Le fût 203 est entaillé d'une fente longitudinale 205 dont la hauteur est légérement inférieure à la distance qui s'étend d'un sommet du disque 204 au côté opposé et dont la largeur est sensiblement égale à l'épaisseur du disque 204.
Ainsi, il est possible d'introduire le disque 204 dans la fente 205, comme l'indique la flêche F1 (figure 3) pour obtenir la contremarque 200 complète de la figure 4.
Le fût 203 est également entaillé d'une encoche supérieure en V 206, dans laquelle apparaît l'un des chiffres du disque 204, choisi selon des critères personnels axplicités plus loin. Sur la figure 4, le chiffre significatif est le chiffre 2.
Les contremarques 200 sont remises aux joueurs en vue de les déplacer sur les cases du plateau 100, comme cela est bien connu en soi, et les fûts 203 ainsi qu'éventuellement les disques 204 sont de différentes couleurs pour identifier la contremarque de chaque joueur.
Les cases 120 et 121 sont destinées à recevoir chacune une pile de fiches 300, l'une 301 ne comprend que des voyelles, l'autre 302 ne comprend que des consonnes.
Cela signifie qu'ici les fiches sont groupées en deux catégories : consonnes 301 et voyelles 302. Dans d'autres applications de l'invention, il peut s'agir de chiffres qui, eux aussi, permettent aux fiches correspondantes d'être groupées en deux catégories chiffres pairs et chiffres impairs.
Des fiches portant des symboles autres que des lettres ou des chiffres peuvent être rangées en une seule catégorie : couleurs, idéogrammes, alphabets étrangers, etc.
D'autres, au contraire, peuvent être rangées en un nombre de catégories supérieur à deux.
La LGC est une glycoprotéine de 379 acides aminés (AA) d'un poids moléculaire d'environ 50 kilodaltons (kDa) synthétisée sous forme d'un précurseur contenant un peptide signal à l'extrémité aminoterminale (NH2terminale) et sécrétée par les cellules médianes de la muqueuse fundique de l'estomac de chien (Carrière F. et al., 1991).
Cette enzyme appartient à une famille de lipases dites "préduodénales" dont certains membres ont déjà été purifiés et parfois même clonés (Docherty A.J.P. et al., 1985; Bodmer M.W. et al., 1987; Moreau H. et al., 1988; Brevets européens n" 0 191 061 et nO 0 261 016).
Pendant longtemps, on a tenu pour acquis que l'hydrolyse des lipides alimentaires s'effectuait au niveau de l'intestin grêle grâce à l'action d'enzymes produites par le pancréas (Bernard C., 1849).
Des observations laissaient cependant penser que l'hydrolyse des triglycérides pouvait avoir lieu dans l'estomac par le biais d'enzymes préduodénales (Volhard, F., 1901; Shonheyder, F., and Volquartz, K., 1945).
Ces enzymes, et en particulier la lipase gastrique de chien, ont des propriétés enzymatiques et physico-chimiques qui les différencient des lipases pancréatiques de mammifères. Ces différences entre lipases gastriques et pancréatiques concernent essentiellement les points suivants: poids moléculaire, composition en acides aminés, résistance à la pepsine, spécificité de substrat, pH optimum d'action, et stabilité en milieu acide.
De plus, in vitro, dans certaines conditions, on peut mettre en évidence une synergie d'action entre les lipases gastrique et pancréatique sur l'hydrolyse de triglycérides à chaînes longues (Gargouri, Y. et al., 1989).
On connaît plusieurs situations pathologiques (mucoviscidose, insuffisance pancréatique exocrine) où les patients sont totalement ou partiellement dépourvus de sécrétion pancréatique exocrine et donc des enzymes nécessaires à l'hydrolyse des aliments (amylases, lipases, protéases).
La non-absorption des graisses au niveau intestinal, et notamment des triglycérides à longues chaînes, se traduit par une augmentation très importante de la stéatorrhée chez ces patients et par un ralentissement très sensible de la prise de poids chez les jeunes malades. Pour corriger cela on administre à ces sujets des extraits pancréatiques de porc au moment des repas. L'efficacité thérapeutique de ces extraits pourrait être nettement améliorée par la co-prescription de LGC grâce à sa spécificité d'action sur les triglycérides à longues chaînes.
Dans l'article de Carrière et al. (1991) sont décrites la purification et la détermination de la séquence NH2-terminale de la LGC. Un procédé permettant d'extraire cette enzyme à partir d'estomacs de chien est également décrit dans cette publication. Ce procédé consiste essentiellement à faire subir à des estomacs de chiens une macération dans un milieu acide (pH 2,5) en présence de sels hydrosolubles favorisant le relargage de la lipase dans ledit milieu. Des étapes de filtrations sur tamis moléculaire et de chromatographies par échange d'ions, permettent de purifier la LGC à homogénéité. La LGC purifiée obtenue par ces procédés est une glycoprotéine ayant un poids moléculaire de 49 000 daltons, dont 6 000 correspondent à des sucres et 43 000 à la partie protéique.
Des raisons évidentes de difficultés d'approvisionnement en estomacs de chiens empêchent tout développement de ce procédé tant au niveau du laboratoire qu'au niveau industriel. D'où la nécessité de trouver un procédé qui permette de produire la LGC en grande quantité, en faisant abstraction de l'utilisation d'estomacs de chiens.
Les séquences nucléotidique et peptidique de la LGC ont été déterminées dans le but de produire industriellement la LGC par un procédé faisant appel au génie génétique. Ces travaux ont fait l'objet de la demande internationale n" WO 94/13816 déposée le 16 décembre 1993.
Le procédé de production de LGC recombinante décrit dans cette demande internationale revendique Escherichia coli (E. coli) en tant que cellule hôte transformée pouvant produire la LGC.
Certaines difficultés rencontrées lors de la production de LGC recombinante par E. coli, notamment la nécessité de cultiver des quantités importantes d'E. coli en fermenteur, avec des coûts élevés, a conduit les inventeurs à rechercher d'autres procédés de production de cette LGC.
Les cellules de mammifères sont, a priori, plus adaptées à l'expression de gènes de mammifères. Leur utilisation pose cependant des problèmes de maturation des protéines. L'équipement enzymatique qui réalise la maturation post-traductionnelle est différent d'un tissu, d'un organe ou d'une espèce à l'autre. Par exemple, il a été rapporté que la maturation post-traductionnelle d'une protéine plasmatique peut être différente lorsqu'elle est obtenue à partir du sang humain ou bien lorsqu'elle est produite par une cellule recombinante comme les cellules d'ovaires de hamster chinois ou dans le lait d'un animal transgénique. Par ailleurs, les faibles niveaux d'expression obtenus avec les cellules des mammifères impliquent des cultures in vitro en très grands volumes à des coûts élevés.La production de protéines recombinantes dans le lait des animaux transgéniques (souris, brebis et vaches) permet de diminuer les coûts de production et de surmonter les problèmes de niveau d'expression.
Cependant, il reste des problèmes d'éthique et de contaminations virales et subvirales (prions).