INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Selon un autre mode de réalisation de l'invention, l'activité du système Protéine C etlou Protéine S est déterminée selon les méthodes dites photométriques. Par détermination photométrique selon l'invention, il faut comprendre la mesure d'une quantité de lumière émise ou absorbée par le substrat. Ce peut être par exemple, la détermination d'une activité colorimétrique, fluorescente ou luminescente. Au mélange de la présente invention, est donc ajouté un substrat de synthèse de la thrombine et l'activité du système Protéine C - Protéine S est déduite de la mesure de l'activité amidolytique de la thrombine sur le substrat de synthèse.Comme substrat de synthèse dans le procédé selon l'invention, on peut utiliser un substrat chromogène choisi par exemple parmi les substrats suivants: Tos-Gly-Pro-Arg-pNA.AcOH ( Chromozym TH, Marque déposée, PENTAPHARM ), H-D-Phe-Pip-Arg-pNA.2HCl ( S-2238, Marque déposée, RABBI), H-D-Phe-Pro-Arg-ANBA-isopropylamide ( BCP 100, Marque déposée, BEHRINGWERKE ), H-D-CHG-Abu-Arg-pNA. 2AcOH ( CBS 34-47, Marque déposée, PENTAPHARM ), H-D-HHT-Ala-Arg-pNA. 2AcOH ( Spectrozyme TH, Marque déposée, PENTAPIIARM ), H-D-CHG-Ala-Arg-pNA. 2AcOH ( Th-l, Marque déposée, PENTAPHARM), D-CIIA-Abu-Arg-pNA. 2AcOH ( Berichrom, Marque déposée, PENTAPIIARM ), H-D-HHT-Abut-Arg-pNA. 2AcOH, H-D-CIIA-NVal-Arg-pNA. 2AcOH, dans lesquels Tos représente un groupement protecteur paratoluènesulfonyle, pNA signifie un groupement chromogène para-nitroaniline, D désigne un isomère optique dextogyre, ANBA correspond à l'acide 5-amino-2-nitro benzoïque, CIIG représente un groupement cyclohexylglycyle, IIIIT signifie un groupement hexahydrotyrosile, CHA correspond à un groupement cylohexylalanile, Abu et Abut signifient un motif dérivé d'acide oe-aminobutyrique, Pip représente un groupement piperazinyle, AcOH signifie l'acide acétique; ou un substrat fluorogène tel que: Cbz-Gly-Pro-Arg-ssNA, H-D-Phe-Pro-Arg-AIA, Boc-Val-Pro-Arg-MCA, dans lesquels Cbz représente un groupement protecteur carbobenzyloxy, Boc représente un groupement protecteur butyloxycarbonyle, NA signifie g-naphtylamine, AlA représente 1acide 5 amino isophtalique, MCA représente la 7-amino-4-méthylcoumarine et D a la même signification que précédemment; ou un substrat luminescent tel que: Cbz-Phe-Pro-Arg-IL, Ala-Phe-Pro-Arg-IL, dans lesquels Cbz a la même signification que précédemment, IL est un groupement isoluminolamide Selon un mode de réalisation préférentiel de l'invention, pour préparer le mélange de l'étape a), on ajoute de façon séquentielle i) l'échantillon plasmatique ii) la quantité prédéterminée de thrombomoduline iii) les facteurs activés de la coagulation etlou les activateurs des facteurs de la coagulation, pour la formation de thrombine endogène.
Le procédé peut être exécuté à pH neutre ou légèrement alcalin. De préférence la valeur du pH est comprise entre 7 et 8. Comme tampon pour ajuster le pH, on peut utiliser tout tampon physiologiquement compatible qui soit efficace dans cette gamme de pH, tel par exemple un tampon TrislHCI.
Elle concerne également un procédé de préparation du dodécapeptide monomère dans lequel on limite substantiellement la formation du peptide dimère de formule II.
ARRIERE PLAN DE L 'INVENTION On sait que la mégacaryocytopoièse concerne l'engagement des cellules-souches hématopoïétiques vers la lignée mégacaryocytaire, la prolifération des progéniteurs mégacaryocytaires et la maturation des mégacaryocytes pour donner naissance aux plaquettes ; voir à cet effet les articles de E.M. NAZUR, Exp.Hematol., (1987), 15, 340-350, de R. HOFFMAN, Blood, (1989) 74, 1106-1212, et de Z.C. HAN et al., Int. J. Hematol., (1991), 54, 314.
On sait par ailleurs que les plaquettes sanguines jouent un rôle très important dans certains processus physiologiques, notamment dans les mécanismes de l'hémos- tase ; voir à cet effet l'ouvrage de J.P. CAEN et al., intitulé "Platelet Physiology and Pathology", Stratton International, New York, 1977.
La moëlle hématoporétique est un système complexe formé de cellules de nature et de fonction différentes.
Son organisation peut se concevoir en cinq compartiments cellulaires : les cellules-souches de toute la lignée hématopoïétique, les cellules progénitrices hématopoiétiques, les cellules hématopoïétiques matures, le microenvironnement et les cellules accessoires. Les cellulessouches par une série de différenciations et de maturations donnent naissance aux cellules progénitrices dont font partie les progéniteurs mégacaryocytaires, et ces derniers donnent naissance à leur tour aux plaquettes comme indiqué ci-dessus.
La thrombocytémie est un état pathologique dont la multiplication excessive atteint la lignée mégacaryocyto-plaquettaire. Elle est présente dans plusieurs maladies, à savoir en particulier la thrombocytémie essentielle, la polyglobulie, la leucémie myeloide, la splénomégalie myéloide et la leucémie mégacaryocytaire. La persistance de la thrombocytémie pose des problèmes de thromboses et d'hémorragies.
ART ANTéRIEUR L'art antérieur le plus proche est constitué par l'article de A.M. GEWIRTZ et al., intitulé : "Inhibition of Human Megakaryocytopoiesis in Vitro by Platelet Factor 4 (pF4) and a Synthetic COOH-terminal pF4 Peptide" et publié dans Clin. J. Invest., (1989), 83, 1477-1486.Cet article fait état d'essais in vitro avec un pF4 hautement purifié et deux peptides synthétiques (désignés ici par commodité "C-13 et "C-24") correspondant à des fragments du pF4, à savoir - le peptide court C-13 constitué par les 13 der niers aminoacides (i.e. 58-70) de l'extrémité C terminale du pF4, et - le peptide long C-24 constitué par les 24 der niers aminoacides (i.e. 47-70) de l'extrémité C terminale du pF4, en vue d'apprécier leur éventuel effet sur la mégacaryo cytopoïèse.
Cet article enseigne que (i) le peptide C-13 n'a aucun effet sur la mégacaryocytopoïèse, (ii) le pF4 hautement purifié et le peptide C-24 inhibent in vitro la mégacaryocytopoièse humaine quand ils interviennent à une dose relativement élevée (environ 25 lug/ml), et (iii) les résultats des essais réalisés in vitro ne sont pas automatiquement applicables aux mécanismes d'action in vivo.
Il se trouve que le dodécapeptide de formule I selon l'invention et son dimère de formule II se différencient de l'enseignement dudit article de A.M. GEWIRTZ et al., par le fait que les composés selon l'invention, utilisés in vitro, inhibent la mégacaryocytopoièse à des doses beaucoup plus faibles (notamment à 5 pg/ml voire à 0,1 lug/ml), l'inhibition de la mégacaryocytopoièse se manifestant par un effet anti-prolifération des cellules HEL sans action sur la maturation desdites cellules HEL, alors que le peptide C-24 et le pF4 hautement purifié limitent la maturation desdites cellules HEL mais n'agissent pas sur leur prolifération.
De plus, les composés selon l'invention exercent des propriétés anti-mégacaryocytopoïèse in vivo, en ce sens qu'ils régulent négativement la mégacaryocytopoi'èse in vivo.
On sait par ailleurs que le pF4, ses analogues, ses mutants et leurs fragments, notamment le peptide court C-13 précité, peuvent présenter des propriétés anti-angiogénèse. Voir à cet effet l'article de M.B. ZUCKER et al., intitulé "Immunoregulatory activity of peptides related to platelet factor 4" et publié dans Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (1989), 86, 7571-7574 ; l'article de T.E. MAIONE et al., intitulé : "Inhibition of Angiogenesis by Recombinant Human Platelet Factor-4 and Related Peptides" et publié dans Science, (1990), 247, 77-79 ; et les publications EP-A-0 378 364 et EP-A-O 407 122 de la société REPLIGEN CORPORATION.Or, il se trouve que les propriétés anti-mégacaryocytopoi'èse, qu'exercent le composé dodécapeptide et son dimère selon l'invention, sont différentes des propriétés anti-angiogénèse préci tées.
Enfin, il convient de remarquer que la structure 1-12 des aminoacides du composé dodécapeptide de formule I selon l'invention est nouvelle quoique voisine de la séquence 47-58 des aminoacides du pF4. L'aminoacide en position 10 (i.e. Glu) dudit dodécapeptide est différent de l'aminoacide en position 56 (i.e. Gln) du pF4.
BUT DE L'INVENTION Il existe du point de vue technique un double besoin, à savoir, d'une part, un moyen inhibiteur de la mégacaryocytopoïèse pour le traitement des thrombocytémies, et d'autre part, un outil biologique pour tester et mesurer la mégacaryocytopoièse.
On se propose de satisfaire ce double besoin en faisant appel à une nouvelle solution technique mettant en oeuvre un moyen anti-mégacaryocytaire qui soit efficace et non-cytotoxique in vivo.
OBJET DE L'INVENTION La nouvelle solution technique que l'on préconise selon l'invention, fait appel à un composé peptidique à chaine linéaire constitué par 12 aminoacides d'une part, et à son dimère, d'autre part.
Suivant un premier aspect de l'invention, l'on préconise, en tant que produit industriel nouveau, un matériau peptidique caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par (a) le dodécapeptide de formule Asn-Gly-Arg-Lys-Ile-Cys-Leu-Asp-Leu-Glu-Ala-Pro (I) (b) son dimère de formule Asn-Gly-Arg-Lys-Ile-Cys-Leu-Asp-Leu-Glu-Ala-Pro (II) Asn-Gly-Arg-Lys-Ile-$ys-Leu-Asp-Leu-Glu-Ala-Pro et (c) leurs mélanges.
Une cinquième séquence de nucléotides pour l'identification par hybridation d'une région hypervariable détectée par le procédé selon l'invention mis en oeuvre avec le polynucléotide de formule (GTAGAGGTTCTGGACT) nt n étant supérieur à 20, est constitué du motif unitaire suivant 5' GAGGAGAGGGTGGCGGT 3' répété en tandem environ 400 fois.
La séquence de nucléotides ci-dessus, sera désignée dans la description expérimentale qui suivra par "CEB2"; elle correspond au fragment de restriction HinfI d'environ 6 kb du cosmide contenant la portion d'ADN génomique humain située en position 20q13.1 et présentant 57 % d'hétérozygocie, lequel cosmide est cloné dans le vecteur pWE15 introduit dans Echerichia.
Une sixième séquence de nucléotides pour l'identification par hybridation d'une région hypervariable détectée par le procédé selon l'invention mis en oeuvre avec le polynucléotide de formule (GTAGAGGTTCTGGACT)n, n étant supérieur à 20, correspond au fragment de restriction d'environ 2,5 kb obtenu après hydrolyse par HaeIII et HinfI du cosmide contenant la portion d'ADN génomique humain située en position 6q27 et présentant 95 % d'hétérozygocie, lequel cosmide cloné dans le vecteur pWEî5 introduit dans Echerichia. Coli a été déposé à la CNCM, le 14 août 1991 sous le NO I-1133.
Cette sixième séquence sera désignée dans la description expérimentale qui suivra par "CEB3".
Une septième séquence de nucléotide pour l'identification par hybridation d'une région hypervariable détectée par le procédé selon l'invention, mis en oeuvre avec le polynucléotide de formule (GTAGAGGTTCTGGACT) n, n étant supérieur à 20, est constitué du motif unitaire suivant 5' CTGTGCACCACCCAGGTCGAATCTCGGCTCACTGCGACCTC TGCCTCCGCGTAG 3' répété en tandem environ 50 fois.
La séquence de nucléotides ci-dessus, sera désignée dans la description expérimentale qui suivra par "CEB5"; elle correspond au fragment de restriction HaeIII d'environ 3 kb, du cosmide contenant la portion d'ADN génomique humain située en position 13q34.1 et présentant 80 % d'hétérozygocie, lequel cosmide est cloné dans le vecteur pWE15 introduit dans Echerichia.
Les séquences de nucléotides peuvent être marquées par tout marqueur classiquement utilisé tel qu'énoncé précédemment pour les polynucléotides.
invention concerne naturellement aussi les polynucléotides et séquences de nucléotides complémentaires des précédentes et donc capables de s'apparier avec la même portion d'ADN en raison de sa nature bicaténaire.
Font aussi partie de l'invention les polynucléotides et séquences de nucléotides dans la séquence desquelles les thymines sont remplacées par des uraciles ou dans lesquelles une des quatre bases est remplacée par une inosine.
L'invention concerne également tout polynucléotide et séquences de nucléotides ne se distinguant des précédentes au niveau de leur séquence que par additions et/ou suppressions et/ou substitutions d'un ou plusieurs nucléotides, dès lors que celles-ci n'entraînent pas de modification des propriétés d'hybridation desdits polynucléotides ou séquences nucléotidiques.
L'invention concerne aussi un procédé d'amplification génétique d'une région hypervariable détectée par le procédé de l'invention, lequel procédé d'amplification consiste à fixer par hybridation aux extrémités de ladite région hypervariable, une séquence amorce de 17 à 30 bases judicieusement choisie parmi tout ou partie des séquences flanquantes des régions hypervariables, telle qu'elle peut être obtenue à partie des cosmides, puis à mettre en oeuvre un processus d'extension enzymatique à l'aide d'ADN-polymérase, suivi d'un processus de dénaturation, et à répéter le cycle hybridation-extension-dénaturation, connu sous le nom de PCR et décrit par la Société CETUS, un nombre de fois suffisant pour augmenter la quantité de la séquence constituant la région hypervariable de départ dans une proportion exponentielle par rapport au nombre de cycles mis en oeuvre.
L'invention concerne également un procédé pour l'identification d'une région hypervariable détectée par le procédé conforme à l'invention, consistant à mettre en contact une séquence d'ADN dénaturée et fixée sur un support , avec une séquence de nucléotides selon 1 r invention marquée et constituant une sonde, dans un milieu et des conditions permettant une hybridation, puis par la détection des hybrides produits, à mesurer les quantités et les localisations de la sonde marquée sur la séquence d'ADN étudiée.
L'invention concerne enfin l'utilisation des séquences de nucléotides selon l'invention, éventuellement marquées, dans des procédés pour le diagnostic de maladies héréditaires ou tumorales.
Parmi celles-ci on peut citer la recherche de pertes d'allèles ou de régions chromosomiques dans des tumeurs, ou l'identification de régions tumorales grâce aux sondes hypervariables à taux de mutation important.
L'échantillon est préparé à une concentration de 5 g/l dans le tampon d'élution et centrifugé si nécessaire.
Détermination de la quantité d'alcool liée au produit par hydrolyse basique du groupe ester L'alcool total contenu dans l'échantillon correspond à l'alcool lié au produit et éventuellement à l'alcool libre résiduel, non éliminé par évaporation et lyophilisation.
L'alcool lié au produit correspond donc à l'alcool total par gramme de produit moins l'alcool libre par gramme de produit.
Alcool total 67 mg de produit sont introduits dans un tube Eppendorf. 0,3 ml d'eau, puis 0,3 ml de NaOH 2N sont ajoutés et le tube est bouché. Le mélange est agité et incubé à température ambiante pendant 2 heures. Le mélange est ensuite acidifié à l'aide de 0,3 ml de H2SO4 2,1N. Le mélange est centrifugé et la quantité d'alcool total par gramme de produit est déterminée par analyse HPLC du surnageant de centrifugation.
Alcool libre 67 mg de produit sont introduits dans un tube Eppendorf. 0,3 ml d'eau, puis 0,6 ml de H2S04 l0mN sont ajoutés et le tube est bouché. Le mélange est agité, incubé à température ambiante pendant 2 heures, centrifugé et la quantité d'alcool libre par gramme de produit est déterminée comme précédemment.
L'alcool est analysé par HPLC à l'aide d'une colonne Polypore H (Brownlee Labs, 250 x 7,0 mm, 10 microns). L'éluant est une solution aqueuse de H2SO4, l0mN à un débit compris entre 0,35 et 0,70 ml/min. Le volume injecté est de 20 1. Le detecteur est un réfractomètre.
Taux d'estérification : Le taux d'estérification correspond au nombre de micromoles d'alcool lié par gramme de produit divisé par le nombre de micromoles de peptides et d'esters de peptides par gramme de produit.
Caractérisation du produit obtenu par alcoolyse du gluten par la subtilisine en présence de n-propanoî 70 % v/v - teneur en peptides : 71 % (méthode de Kjeldahl) - masse molaire moyenne : 6200 - n-propanoî lié : 2,7 mg/g peptides - taux d'estérification : 28 t EXEMPLE 2 : ALCOOLYSE DE PEPTIDES DE GLUTEN DE BLE Les peptides de gluten de blé ont été préparés par hydrolyse du gluten par la subtilisine (Alcalase) à pH = 8 : la masse molaire moyenne des peptides solubles dans l'eau déterminée selon les conditions décrites dans l'Exemple 1 est de 4 200.
75 g d'hydrolysat de gluten sont dispersés dans 0,75 1 de n-propanol à 70 % v/v. Le pH du milieu réactionnel est ajusté à 5,1 à l'aide de 120 mmoles de HC1. 15 ml de subtilisine (Alcase R 2,4L) sont ajoutés à la suspension. Le mélange est incubé 20 heures sous agitation douce à 25"C.
La subtilisine est ensuite dénaturée par ajustement du pH du mélange à 3,5 avec 80 mmoles de HC1 et chauffage à 50"C pendant 40 minutes. Le npropanol est éliminé par évaporation à 55"C et le produit mis en suspension dans de l'eau (volume de la suspension aqueuse : 0,75 1, pH = 2,9).
Le pH de la suspension aqueuse est ajusté à 6,0 à l'aide de 85 mmoles de NaOH. Les produits solubles sont collectés par centrifugation, microfiltrés sur filtre 0,2 micron et lyophilisés. Les insolubles sont éliminés . Après lyophilisation, la quantité collectée de produit soluble est de 61 g.
Caractérisation du produit obtenu par alcoolyse de peptides de gluten par la subtilisine en présence de n-propanol 70 % v/v - teneur en peptides : 62 % (méthode de Kjeldahl) - masse molaire moyenne : 3900 - n-propanol lié : 8,2 mg/g - taux d'estérification : 53 % EXEMPLE 3 : ALCOOLYSE DES GLIADINES EN PRESENCE D'ALCOOLS MISCIBLES ET NON MISCIBLES A L'EAU Des milieux réactionnels contenant - gliadines (Sigma G-3375) : 30 g/l - subtilisine (Alcalase 2,4L) : 2 % v/v - alcool : 70 % ont été préparés à pH = 5 (ajusté avec HC1) et incubés à 25"C sous agitation douce. Après incubation, la subtilisine est dénaturée par ajustement du pH à 2 avec HC1, l'alcool évaporé, le produit mis en suspension dans l'eau. Les mélanges sont ensuite lyophilisés et les produits de réaction caractérisés.
Tableau 1 : Alcoolyse des gliadines en présence d'alcools miscibles et non miscibles à l'eau
Alcool, Durée Masse mol. Taux 70 % v/v d'incuba- (produits d'estéri tion h solubles fication à pH = 7,0 % (a), Ethanol 2 9 900 79 n-propanol 6 8 400 50 n-butanol 15 8 100 15 n-butanol:45% 15 8 200 32 2-propanol::25 n-pentanol 15 4 800 4 n-pentanol 15 8 300 9 2 -propanol (a) Le taux d'estérification est donné pour l'alcool primaire.
L'efficacité de la réaction d'alcoolyse diminue lorsque la longueur de la chaîne aliphatique augmente (éthanol, propanol).
Lorsque l'alcool est partiellement miscible (nbutanol) ou immiscible à l'eau (n-pentanol), l'efficacité de la réaction d'alcoolyse est augmentée par la présence d'un tiers composé à la fois miscible à l'eau et miscible à l'alcool (par exemple, le 2- propanol).
La coupe A-A du creux 6 et de son fond ou plage amincie 4 est montrée (fig. 4) au stade de l'allongement maximal commandé par l'outil d'allongement 9, c'est-à-dire juste apres rupture localisée de la plage 4 donnant la fente 14 qui est ouverte dans cette position, et après retour élastique, c'est-à-dire dans l'état d'utilisation en l'absence de pression (fig. 3), la lèvre 16 constituant le bord rompu de la plage amincie 4, ce bord étant allongé et davantage aminci pres de son extrémité par le travail de rupture.
2)Deuxième exemple La figure 5 presente partiellement un voile elastique 2 en PE formant un dôme arrondi 17 d'épaisseur 1,2 mm, ayant deux plages amincies 4 chevauchant son sommet 5 et s'y croisant (fig. 6). Ces plages 4 sont les fonds de deux creux 6 de l'envers 12 du voile 2 ou dôme 17, se croisant de même. L'épaisseur de la demi-plage amincie 40 coupée axialement et à gauche dans la figure 5 a une epaisseur variant de 0,25 à l'avant à 0,4 mm à l'arrière. Les trois autres demi-plages amincies 40 surplombant les portions des creux 6 extérieures à leur croisement sont de même en biseau transversal, leurs côtés d'épaisseur 0,25 mm se rejoignant en formant deux angles 18 opposes.
La figure 5 montre aussi l'extrémité agissante 8 de l'outil 9 d'allongement du dôme 17. Une fois l'allongement effectué, des fentes traversantes 14 étant obtenues, et apres rétraction du dôme 17, on observe la disposition de la figure 6 : deux fentes 14 en angle le long des angles 18 d'épaisseur 0,25 mm, bordées chacune d'une lèvre 16 en L de largeur 0,3 à 0,4 mm recouvrant le bord de la portion de creux 6 correspondante. Les épaisseurs plus faibles permettent ainsi de maitriser sans difficulté l'emplacement des fissures traversantes 14 munies chacune d'une levre 16 formant un clapet à retour élastique.
3)Troisième -exemple La figure 7 représente la portion conique 2 d'un voile selon l'invention, portant trois creux 6 sur sa face envers, de longueur 5 mm selon des génératrices rectilignes du cône 2 et de largeur 1 mm avec des bords abrupts. Ces creux 6 délimitent des fonds 4 formant des plages amincies 4 de 0,3 mm, d'extrémité haute située à 8 mm du sommet intérieur du cône formant un angle de 90". L'outil 9 en acier poli a une extrémité conique 8 d'angle 110 avec au sommet un rayon de 0,8 mm.Le travail d'allongement effectué en déplaçant cet outil 9 selon l'axe 11 a pour effet de bloquer la portion du cône 2 surmontant les creux 6, et d'allonger préférentiellement une partie du voile 2 comprenant les plages amincies 4, obtenant plus vite et de façon mieux contrôlée une fente traversante dans chacune de ces plages 4.
4)Quatrième exemple L'element de sortie 3 (fig. 8) est un voile 2 à fixer mécaniquement dans un récipient. La portion conique 2 porte à un même niveau trois plages amincies ovales 4 décalées de 1200. Comme pour la figure 7, l'outil d'allongement 9 a un cône d'extrémité 8 d'angle plus grand que celui du cône intérieur de la portion conique 2, de façon à bloquer la portion du cône 2 surmontant les plages amincies 4 et à mieux allonger ces plages 4. On obtient une fente traversante 14 correspondant au bord supérieur du creux envers 6 definissant chaque plage amincie 4 et une levre amincie 16 recouvrant l'autre bord de la fente 14 vue ici à travers l'arrière du cône 2.
APPLICATION INDUSTRIELLE Distribution sans rappel d'air de tout produit liquide, crémeux ou pâteux, avec une conservation et une étanchéité améliores en cours d'utilisation d'un tube ou distributeur de ce produit.
RECIPIENT PRESSURISE, EN PARTICULIER BOITER AéROSOL, POUR LA DISTRIBUTION SOUS PRESSION D'UN COMPOSANT LIQUIDE OU PATEUX.
L'invention est relative à un récipient pressurisé pour la distribution sous pression d'un composant liquide ou pâteux, contenu dans ce récipient et mis sous pression d'un gaz propulseur, ledit récipient comportant, à l'intérieur, une capsule de réalimentation qui comprend une chambre destinée à recevoir un gaz sous pression relativement élevée, une valve prévue dans une paroi de ladite chambre, et des moyens pour commander la valve en fonction de la valeur de la pression environnante relativement à une pression de référence.
Les capsules de réalimentation en gaz propulseur sont connues d'après EP-A-O 349 053 et EP-A-O 446973.
A titre indicatif, la pression du gaz propulseur à l'intérieur du récipient pressurisé, en particulier du boîtier aérosol, est de l'ordre de quelques bars, par exemple 4 bars (4.105 Pa) alors que la pression de gaz à l'intérieur de la chambre de ladite capsule de réalimentation peut être de l'ordre de 60 bars (60.105 Pa).
Les récipients pressurisés, pour la distribution d'un composant liquide ou pâteux contenu dans ce récipient doivent satisfaire à plusieurs exigences contradictoires.
Une première exigence consiste en le maintien d'une pression suffisante et aussi constante que possible à l'intérieur de ce récipient au fur et à mesure de la distribution du composant liquide ou pâteux.
La solution proposée par EP-A-O 349 053 ou EP-A-O 446 973 apporte une amélioration, de ce point de vue, puisque la pression initiale du gaz propulseur dans le récipient peut être optimale, sans être trop forte pour la résistance mécanique du réservoir, alors que la pression dans la chambre de la capsule est beaucoup plus élevée. Cette pression initiale optimale est maintenue grâce à la réalimentation assurée par la capsule.