INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
A la combinaison 1 sont associés des gants 6 et des bottes 7 dont les extrémités ouvertes 8, 9 sont tubulaires.
Comme montré à la figure 2, un élément rigide tubulaire 10 est fixé à l'extrémité tubulaire 4 d'une manche 2 et un élément rigide tubulaire 11 est fixé à l'extrémité tubulaire 8 d'un gant 6.
L'agencement général d'un tel dispositif ressort de l'examen de la fig 1 du dessin annexé aux présentes Le tablier souple 1, dont les bords coopèrent avec des guides verticaux 2 fixés de part et d'autre de l'ouverture à protéger, est rendu solidaire par son bord supérieur de deux tambours 3 montés fous sur une poutrelle horizontale 4 supportée par deux platines latérales 5 A l'intérieur de chaque tambour 3 est prévu un ressort spiral dont une extrémité est fixée à la poutrelle 4, tandis que l'extrémité opposée est amarrée à la paroi interne du tambour correspondant On comprend que chaque ressort est enroulé lors de la descente du tablier 1 et qu'il tend ainsi à entraîner en sens inverse
son tambour 3 lorsqu'il s'agit de remonter ledit tablier.
Bien qu'un tel système permette une manoeuvre du tablier à la main, on a proposé de le motoriser en fixant sur la poutrelle 4, entre les deux tambours 3, un moto-réducteur 6 Celui-ci comprend un mécanisme de fins de course 6 a destiné à la commande d'un moteur électrique associé à un frein automatique et à un réducteur de vitesse, le plus souvent du type épicycloldal L'arbre de sortie de ce moto-réducteur porte un pignon qui coopère avec une denture ménagée à l'intérieur d'un tambour 6 b, de sorte qu'il suffit de fixer le bord supérieur du tablier 1 audit tambour pour en assurer la manoeuvre électrique à l'aide d'un
commutateur-inverseur du type de celui indiqué en 7.
Il y a bien entendu lieu de prévoir une commande de secours propre à permettre de pallier à une avarie du moteur d'entraînement ou à une panne de courant, en permettant la manoeuvre manuelle du tablier en dépit de la présence du frein automatique Cette commande de secours est ordinairement opérée à l'aide d'une poignée 8 reliée par un câble 9 à une fourchette agencée pour agir sur la partie mobile du frein et l'éloigner de la partie fixe à l'encontre des moyens élastiques qui
tendent à maintenir lesdites parties appliquées l'une contre l'autre.
L'effort à exercer sur la commande 8 est important et par ailleurs la manoeuvre manuelle du tablier 1 est rendue pénible du fait que la
couronne 6 b reste liée à l'ensemble du mécanisme épicycloidal de réduc-
tion qui doit donc être entraîné en rotation pour le déplacement du tablier. C'est à cet inconvénient qu'entend remédier la présente invention, laquelle consiste essentiellement à faire agir la commande de secours, non plus sur le frein automatique, mais sur la couronne dentée du réduc- teur épicycloidal pour la libérer et faire ainsi cesser momentanément la transmission du mouvement au frein automatique lié au moteur électrique d'entraînement. Le dessin annexé, donné à titre d'exemple, permettra de mieux comprendre l'invention, les caractéristiques qu'elle présente et les avantages qu'elle est susceptible de procurer:
Fig 1 est une vue en perspective indiquant de manière sché-
matique l'implantation d'un moto-réducteur électrique du type visé par
Fig 2 est une coupe axiale partielle montrant à plus grande
échelle l'agencement du moto-réducteur suivant l'invention.
Fig 3 représente, à plus grande échelle encore, la commande
de secours du moto-réducteur suivant fig 2.
L'iconographie ou l'imagerie (médicale) obtenue est analysée sous stéréo microscopique en lumière polarisée.
Ici, dans le procédé la lecture informatisée par reconnaissance de forme est utilisée.
L'analyse comprend un descriptif des structures géométriques champ par champ et par couche de cristaux. En microscopie électronique il a été noté 3 couches de cristaux, chacune comprenant des structure géométriques distinctes ou superposées et associées à des éléments marqueurs de pathologaies. On peut les différencier sous stéréo microscopique en faisant varier la réfringence.
La morphocristallisation du sang d'un animal permet notamment de mettre en évidence par le biais de la chélation du cuivre, certains facteurs ayant une spécificité tissulaire par exemple pour les organes glandulaires... D'autres marqueurs Peuvent être mis en évidence, qui sont les témoins de facteurs génétiques innés.
Cette morphocristallisation permet de localiser les structures et les éléments marqueurs qui identifient l'origine génétique altérée ou non par des facteurs pathologiques.
La cristallisation du sang d'un animal sain montre des striations régulières harmonieuses rayonnantes à partir d'un centre de cristallisation. L'organisation de l'image de cristallisation découle de son centre excentré par rapport au centre de la plaque d'essai. Elle caractérise d'un animal à un autre une aptitude plus ou moins grande à l'effort.
L'agencement des cristaux (striations) est analysé sous l'angle de la largeur des stries, leur longueur, leur épaisseur. Les stries vont donner naissance en se modifiant et en s'écartant à des structures spécifiques. Les défauts ponctuels sont des défauts de dislocation du système cristallin rhomboédrique dont toutes les faces des rhomboédres demeurent visibles quelque soit le substrat. Le concept a une valeur de niveau d'énergie décrivant l'ensemble des striations (puissantes, moirées, faibles intensités) On situe des structures à rayons courts moyens et longs ou champ supérieur, médian et inférieur hormonal ou tel ou tel organe.
Toutes les structures lacunes, striures ont été attribuées à des organes précis parce qu'elles ont été co-reliées expérimentalement aux désordres de ces organes et les informations par les test médicaux ont été réunies dans un catalogue Ce catalogue représente différentes images de cristallisation du sang que l'on peut obtenir en fonction de l'organe concerné. Les images obtenues sont alors balayées par un faisceau laser classique et mémorisées sur la disquette. Ce dernier permet de restituer l'image de la cristallisation du sang pour un animal considéré.
La présente invention dénommée : "Procédé de lecture de la morphocristallisation du sang afin de déterminer le quotient sportif génétique" caractérisée par la préparation du spectre de cristallisation du sang mélangé à une solution diluée et tamponnée de chlorure de cuivre, la cristallisation est obtenue par évaporation lente et laminaire, l'image cristallisée est analysée selon son champ supérieur, médian et inférieur, caractéristiques des organe de l'animal, l'analysas est faite par une lecture optique laser, enregistrée sur une disquette à mémoire permettant d'établir un quotient génétique inné puis, afin d'obtenir un quotient sportif génétique.
L'invention sera mieux comprise gracie aux dessins annexés qui ne sont présentés qu'å titre d'exemple non limitatif de la détermination et du suivi du quotient.
Les figures 1, 2 , 3 et 4 représentent une cristallisation rayonnante du sang, du sérum, d'hématies et de leucocytes d'un animal.
La figure y représente le schéma synoptique du dispositif de comparaison, de mémorisation et de lecture de l'imagerie des spectres de cristallisation du sang et le suivi de l'évolution du quotient.
En se reportant aux figures 1, 2, 3 et 4 on découvre l'image de la cristallisation d'une solution de sang (Fig. 1) du sérum (Fig. 2) un mélange hématies (Fig. 3) et de leucocytes (Fig. 4).
Ces différentes imageries sont obtenues au moyen d'une goutte de sang (Fig. 1) de sérum (Fig . 2) d'hématies (Fig.
3) de leucocytes (Fig. 4) recueillies sur un support inerte -de type papier filtre sans-cendre.
Le substrat est ensuite dilué avec un volume minimal de sérum physiologique et soumis a une mesure de densité optique. Cette densité optique permet de choisir la concentration de la solution aqueuse de chlorure de cuivre à utiliser.
- L'acétone est évaporée. On récupère 2,12 g de produit brut. Ce brut est dissous à chaud dans de l'acétone (120 ml).
Des impuretés noires insolubles sont filtrées à chaud. Après évaporation de l'acétone, on recueille des cristaux blancs de masse : 1,84 g. Le rendement est de 95,8%.
TABLEAU EX;1 RMN(500 MHZ)
H1 H2 H3 H4 H5 H6H6, CH2 (Bn) H aromatique NH2 d dd ddd dd m d #(ppm) 7,24 4,02 3,72 3,64 4,06 3,64 4,4 7,2 8,4 J(Hz) J1,2=5,21 J2,3=8,68 J5,4=9,9 J2,1=5,2 J5,6=4,77 J5,6'=1,77 EXEMPLE 2 PREPARATION DU DI (2,3,4,6 TETRA-O BENZYL-1 ALPHA D-GLUCO PYRANOSYL) DISELENIDE
1,49 g (2,19 mmole) mth = 1,32 g - 1,49 g (2,19 mmole) de sel de sélénouronium, 3,7 ml d'une solution de KOH 0,71 md.l 1 (2,63 mmole et 5 ml d'acétone sont mélangés dans un ballon de 50 ml.
- La réaction est suivie en CCM avec 2 éluants Elll et Acétone/ACOEt/ ACOH = 5/5/1.
- Le produit précipite au cours de la réaction.
Après 6 heures d'agitation, la CCM montre qu'il n'y a plus de produit de départ.
- L'acétone est évaporée. Le mélange est repris à l'éther (40 ml) et lavés à l'eau jusqu'à pH neutre. La phase aqueuse est réextraite 2 fois avec 10 ml d'éther.
On récupère 1,23 g de produit brut.
- Une purification par chromatographie sur colonne de silice est faite éluant E215.
On recueille 894 mg de cristaux blancs. Le rendement est de 68%. TABLEAU EXEMPLE 2
H2 ; H3 ; H4 - CH2 H1 HAromatique H5 ; H6 ; H6 Benzyl m m d m 3,6 4,0 4,3 4,9 5,9 6,9 EXEMPLE 3 PREPARATION DU DI(2, 3, 4, 6 TETRA-O-ACETYL 1 BETA D GLUCO PYRANOSYL) DISELENIDE 534,2 820,5 106,84 mg (0,2 mmole) mth = 82,05 mg - Dans un ballon de 25 ml sont dissous, à l'aide de 2 ml d'acétone et 1 ml d'éthanol absolu, 106,84 mg (0,2 mmole) de sel, 45,6 mg (à,24 mmole) de Na2S205 ainsi que 29,5 mmole (0,24 mmole) de K2CO3.
- La réaction est suivie avec 2 systèmes d'éluant acétone ACOEt /ACOH'= 5/5/1 et ACOEt/P = 1/1.
- Après trois heures d'agitation, il n'y a plus de produit de départ à la vue des plaques de CCM.
Le dispositif de détection et de localisation comprend une enceinte 15 hermétiquement close. La paroi de l'enceinte en regard de la source 12 est formée par un convertisseur plan 16.
Dans le cas d'utilisation de photons X ou gamma, ce convertisseur peut-être constitué d'une plaque de métal lourd tels du plomb, du tantale, du tungstène ou autre, d'une épaisseur de 5 microns à 1 cm.
Dans le cas d'utilisation de neutrons, ce convertisseur peut-être constitué d'une couche de gadolinium de quelques microns d'épaisseur déposée sur un substrat en aluminium.
Le convertisseur 16 peut présenter une surface carrée, ou rectangulaire.
Du côté opposé au convertisseur 16, ltenceinte 15 est fermée par une fenêtre de sortie 26 qui peut être par exemple une plaque de silice transparente aux U.V.
Le dispositif comprend des moyens d'amplification de particules chargées permettant de déclencher des phénomènes d'avalanche de Townsend, ces moyens sont du type d'un compteur proportionnel à plaques parallèles (PPAC ou Parallel Plate Avalanche Chamber en terminologie anglosaxonne).
Ces moyens d'amplification comprennent un mélange gazeux 17 contenu dans lrenceinte 15 et autorisant l'apparition d'une amplification de charges par ionisation stimulée. A cette fin, ce gaz peut contenir un mélange d'argon et d'hydrocarbure par exemple de l'éthane ou du méthane, ce dernier constituant la substance d'extinction (quencher). La pression du mélange gazeux 17 dans l'enceinte est d'environ 1 bar.
Le gaz circule à l'intérieur de l'enceinte 15 dans laquelle il pénètre par une entrée e et dont il ressort par une sortie s.
Dans le cas où les particules incidentes sont des protons, l'usage d'un convertisseur est inutile. Les protons particules ionisantes interagissent directement avec le gaz pour produire des électrons et des ions.
Les moyens d'amplification comprennent encore un ensemble permettant de soumettre le gaz à une différence de potentiel.
Cet ensemble est décrit de manière plus précise en référence à la figure 2.
Il est composé de plaques parallèles 19, 23, en fait, deux électrodes qui sont des plans de fils très serrés 18, 22, tendus sur des cadres 20, 24 par exemple en circuit imprimé. Le réseau de fils 18 est porté à la masse et le réseau de fils 22 est relié à une source HT de potentiel positif, ce dernier étant par exemple de ltordre de 4000 V.
A titre d'exemple, les réseaux de fils 18 et 22 sont réalisés en acier inoxydable ou en tungstène doré; les fils ont un diamètre de 100 ,um et sont disposés au moins à peu près parallèlement les uns aux autres à environ 1 mm les uns des autres.
L'électrode 18 est fixée à l'intérieur de l'enceinte 15 à une distance d'environ 1 mm du convertisseur 16. L'électrode 22 est fixée à l'intérieur de l'enceinte 15 à une distance d'environ 4 mm de l'électrode 18.
La fonction du convertisseur est de produire une particule ionisante à l'intérieur de l'enceinte sous l'impact d'une particule incidente PN venant frapper sa surface d'incidence (face d'entrée de l'enceinte 15). Le trajet d'une particule ionisante a été représenté de façon symbolique sur la figure 2 par un trait mixte PC1.
Les particules ionisantes telles que celle qui se propage suivant PC1 provoquent la création, à partir des molécules du gaz 17 contenu dans l'enceinte 15 des charges électriques et plus précisément des électrons et des ions.
KLEINHOFS, A., WARNER R. L., HAMAT, H.B., JURIDEK, M., HUANG, C., AND SCHNORR, K. (1988) Molecular genetics of barley and rice nitrate reductases. Curr. Topics Plant Biochem. Physiol. 7 : 35-42.
McCABE D.E., SWAIN W., MARTINELLI B., CHRISTOU P. (1988) Stable transformation of soybean (Glycine max) by prticle acceleration. Bio/technology 6 : 923-927.
NEUHAUS G., SPANGENBERG G., MITTELSTEN SCHIED O., SCHWEIGER H.G. (1987) Transgenic rapeseed plants obtained by the microinjection of NDNA into microspore-derived embrloids. Theor. Appl. Genet. 75 : 30-36.
OSTREM J.A. AND COLLINS G.B. (1983) Genetic variation for nitrate concentration in Nicotiana tabacum L.J. Heredity 74 : 431-434.
ROCHA-SOSA M., SONNEWALD U., FROMMER W. STRATMAN M., SCHELL J., WILLMITYZER L. (1989) Both develomental and metabolic signals activate the promoter of a class I patatin gene. EMBO J. S : 23-29.
SAUX C., LEMOINE Y., MARION-POLL A., VALADIER M.H., DENG M., MOROT-GAUDRY J.F. (1987) Consequences of absence of nitrate reductase activity on photosynthesis in Nicotiana plumbaginifolia plants. Plant.
Physiol. 84 : 67-72.
STOCHER R.J., SCHILLITO R., SAUL M., PASKOWSKI J., POTRYKUS I.
(1986) Co-transformation of unlinked foreign genes into plants by direct gene transfer. Bio/technology 4 : 1093-1096.
THOMAS S.P. (1980) Hybridization of denatured RNA and small DNA fragments transferred to nitrocellulose. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 67 442-447.
THOMSON W.F. AND WHITE M.J. (1991) Physiological and molecular studies of light-regulated nuclear genes in higher plants. Ann. Rev. Plant Physiol.
Plant Mol. Biol. 42 : 423-466.
VAUCHERET, H., VINCENTZ, M., KRONENBERGER, J., CABOCHE, M., AND ROUZE, P. (1989) Molecular cloning and characterization of the two homeologous genes coding for nitrate reductase in tobacco. Mol. Gen.
Genet. 216 : 10-15.
VINCENTZ M. et CABOCHE M. - 1991 - Constitutive expression of nitrate reductase allows normal growth and development of Nicotiana plumbagini folia plants. EMBO J., 10, 1027-1035.
WARNER R.L. AND HUFFAKER R.C. (1989) Nitrate transport is independent of NADH and NADPH nitrate reductases in barley seedlings. Plant Physiol. 91 : 947-953.
Loqiciel de gestion des postes de contrôle (L70) A la suite d'une reconnaissance d'une demande de consultation (L71) par le "logiciel d'acquisition des commandes clients", celui ci lui fourni les données suivantes: - "identité du client" demandeur, - la commande passée (déroulement arrière ou avant, simple affichage) - adresse du poste en consultation.
Le logiciel de gestion des postes de contrôles assure alors: - la récupération du fichier d'achat du client concerné (L42), - il désigne, par commande vidéo inverse, une ligne qui peut être modifiée par le clavier de la console.
- il désigne l'adresse de la console du poste en consultation, - il formate les données du fichier dans le format compatible avec le protocole de communication de la console (standard), - envoie les données via le port RS232 du PC (74).
- récupère le message (L74) en provenance de la console spécifiant les modifications faites par le client et gère momentanément le fichier client (L73) jusqu'à la modification finale (la clé du client est retirée implique: plus d' identification disponible), - renvoie les nouvelles données du fichier client vers le logiciel de gestion des fichiers clients (L41) qui gère à nouveau le fichier (L42).
Logiciel de gestion des postes de prise en charge (L90) A la suite d'une reconnaissance d'une demande de déstockage par le "logiciel d'acquisition des commandes clients" (L91), celui ci lui fourni les données suivantes: - "identité du client" demandeur, - la commande passée (déstockage) - l'adresse du poste de destockage Le logiciel de gestion des postes de déstockage assure alors: - la récupération (L92) du fichier d'achats client (L42), - l'émulation (L93) du "module coupleur pour cartes à mémoire" implanté sur le poste de prise en charge désigné qui assure conjointement avec le logiciel: . le dialogue client/système pour lui demander son code (optionnel) de sécurité, la lecture du code sécurité système et client inscrits dans la clé.
Après contrôle de concordance (L94) respectif des deux types de codes, l'un lu dans la clé 2, comparé avec l'autre entré par le client d'une part, et d'autre parut, contrôle des codes lus dans le fichier client comparé avec celui lu dans la clé, le logiciel envoie des ordres de déstockage vers le module logiciel ( L25 et L55) des automates des systèmes 5,6 de stockage/déstockage permanent et provisoire et au dispositif 12 de tapis roulants et aiguilleurs.
En fin du déstockage, le logiciel précité (L94) envoie un message vers le logiciel de gestion des fichiers clients (L41), pour lui permettre d'effacer le fichier.
Loqiciel de gestion des achats à distance Ce logiciel gère: - les liaisons "modem" avec la base de données Minitel contenant: . la liste des magasins accessibles par ce mode de sélection à distance, . les fichiers 14 des prix des produits respectifs de chaque magasins régulièrement mis à jour.
A noter que les téléchargements de fichiers dans l'interface d'achat sont réalisés par le système Minitel.
- les dialogues entre client, système central 11 du magasin, banques, de manière à effectuer les paiements et valider ces paiements.
Les routines logicielles décrites ci-dessus sont résumées dans le tableau ci-dessous:
II I . L10 Logiciel d'installation
Lll fichier de définition des standards I L12 logiciel de menu d'installation I L13 fichier descriptif de la configuration du site I L14 fichier de définition des commandes I L15 Accès logiciel d'installation, entrées des données opérateur produits/module d'acquisition des comman des li16 génération de la séquence d'horloge pour les modu les d'acquisition des commandes I L17 fichier des prix des produits en multiples exem plaire s L18 test de fonctionnement de la configuration du site L logiciel d'approvisionnement des produits dans le système de stockage permanent I L21 bibliothèque des produits L22 génération des dialogues d'entrée/sortie produits par un opérateur du magasin L23 données de stockage L24 fichier d'occupation du système de stockage perma nent L24 fichier d'occupation du système de stockage perma nent I L25 création d'un fichier d'exécution des transferts sur postes de stockage/destockage permanent l I L30 logiciel d'acquisition des commandes pour modules d'acquisition des commandes I L31 génération de la séquence d'horloge L32 (déjà définit ?) mot d'identification client sur le bus I L33 formatage des identifications clients I li34 définition des messages d'ordres clients L35 messages d'ordres clients L40 Logiciel de gestion des fichiers clients L41 création/actualisation/effacement des fichiers clients (fichier du jour et fichier type)
r li42 ensemble des fichiers clients L43 message de transaction du fichier client L50 logiciel de rangement des produits dans le système de stockage provisoire I L51 ordre client de dépôt ou de destockage vers le stockage provisoire L52 entretient du fichier d'occupation du site de stockage provisoire L53 fichier d'occupation du site de stockage provisoire I L54 donnée de positionnement en provenance des capteurs du système de stockage provisoire L55 génération des commandes à destination des automates, tapis, aiguilleurs du système de stockage provisoire L56 commandes de mouvement destinés aux automatismes de stockage provisoire L60 logiciel d'approvisionnement des produits unitaires dans les stands d'exposition sélection I L61 gestion des emplacements de présentation des produits unitaires L62 saisie des caractéristiques et prix des produits uni taires i L63 donnée sur un produit, saisie par un opérateur du maga sin I li64 fichier produits unitaires L65 commande à destination du stockage provisoire, à la suite d'une réservation de produit unitaire L70 logiciel de gestion des postes de contrôle li i L71 message de demande de consultation d'un fichier client II I L72 récupération d'un fichier client, gestion momentanée du fichier II I L73 fichier client en modification II I L74 données échangées (RS232) entre poste contrôle et sys tème central II I' L80 logiciel de gestion des paiements L81 ordre de paiement d'un client
L82 émulation des périphériques modules pour carte à me moire et imprimante, génération des dialogues périphé riques L83 code de sécurité (optionnel) du client L84 fichier de comptabilité X L90 logiciel de gestion des postes de prise en charge L91 ordre de destockage d'un client L92 récupération du fichier client L93 émulation des modules pour carte à mémoire des postes de prise en charge, génération des dialogues L94 test de concordance des code sécurité, émission des messages de destockage, effacement du fichier client 11. Les Catalogues 14 de produits Ces catalogues identifient et décrivent tous les produits accessibles par le mode de sélection d'achat à distance.
*Chaque article a une identification par CODE ARTICLE et par code barre.
EXEMPLE 4 : INFLUENCE DU pH SUR L'EFFICACITE DE LA REACTION D'ALCOOLYSE : Des milieux réactionnels ont été préparés comme détaillé dans 1 'Exemple 3 avec seulement l'méthanol et le n-propanol comme alcools utilisés et les pH des milieux réactionnels ajustés à 5,0 ou à 7,0 avec HC1.
Les produits de la réaction après 6 heures d'incubation ont été obtenus comme indiqué dans l'Exemple 3 et caractérisés (Tableau 2).
L'hydrolyse de protéines par la Subtilisine est efficace à pH basique, 7 à 10. Néanmoins, il a été observé que l'efficacité de la réaction d'alcoolyse est significativement augmentée lorsque le pH du milieu réactionnel est acide, le pH étant ajusté à 5,0 notamment.
Tableau 2 : Influence du pH sur l'efficacité de la réaction d'alcoolyse des gliadines par la subtilisine
pH Milieu Taux Alcool de synthèse Mw d'estéri fication Ethanol 7,0 6 700 14 Ethanol 5,0 9 400 49 N-propanol 7,0 8 300 39 N-propanol 5,0 8 400 50 EXEMPLE 5 : ALCOOLYSE DES PROTEINES DU GLUTEN DE BLE PAR LA PAPAINE 250 g de gluten de blé vital sont dispersés dans 1,0 1 de n-propanol à 70 t v/v. Le pH de la suspension est ajusté à 6,0 à l'aide de HC1. 100 g de papaïne (6500 NF Gist Brocades, Seclin, France ), et de la cystéine (concentration finale : 10 mM) sont ajoutés à la suspension.Le mélange est incubé 24 heures sous agitation douce à 25"C. Le produit de la réaction est récupéré comme indiqué dans l'Exemple 1. La masse molaire moyenne des peptides solubles à pH 6,0 est 5 700 et le taux d'estérification est égal à 9 %.
EXEMPLE 6 : ALCOOLYSE DE LA GELATINE PAR LA SUBTILISINE 25 g de gélatine alimentaire (140-160 bloom) sont dispersés dans 250 ml de n-propanoî à 70 % v/v. Le pH est ajusté à 5,0 avec HCl (0,3 mmole). La subtilisine (2,5 ml d'Alcalase 2,4L) est ajoutée et le mélange est incubé pendant 22 heures sous agitation douce à 25"C.
12,5 ml de préparation de Subtilisine sont alors ajoutés et le mélange incubé pendant 4 heures. La Subtilisine est enfin dénaturée par ajout de 11 mmoles de HCl (pH = 3,5) et le mélange chauffé à 50"C pendant 30 minutes. L'alcool est évaporé et le produit dilué dans l'eau est lyophilisé. La masse molaire moyenne des produits solubles dans l'eau à pH = 7 est 12 000 et le taux d'estérification est égal à 29 %.