INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les composants A et B sont alors injectés sous une pression de 100 bars dans un moule en acier de dimensions 12 x 22 x 0,3 cm préchauffe a 100 C. La pièce moulée est alors retirée du moule au bout de 5 minutes puis soumise à une étape de post-réticulation au four pendant 1 heure à 140 C. Après refroidissement jusqu'à la température ambiante, les proprietés suivantes sont mesurees sur la piéce moulée: module en flexion: 960 MPa contrainte à la rupture en flexion: 18 MPa température de distorsion à la chaleur : 48 C resistance au choc Charpy non entaille: non mesurable (échantillon trop souple) EXEMPLE2 On charge dans un réacteur 225 parties en poids d'anhydride maliques 145 parties en poids de neopentylglycol, 105 parties en poids de propylene glycol, 195 parties en poids de diéthylène glycol, 3,3 parties en poids de morpholine et 0,2 partie en poids d'hydroquinone. Le réacteur maintenu sous léger courant d'azote, est chauffé à 75 C pour obtenir la fusion de tous les composants solides. On met ensuite l'agitateur en action, puis le réacteur est chauffé jusqu'a 220 C et maintenu a cette température pendant 7 heures. La fin de la reaction est accélérée par la mise en action dune pompe a vide. puis la réaction est arrêtée lorque le nombre d'acide de la resme descend en dessous de 5.L'analyse du produit final montre que 97 % des fonctions maléate ont été isomérisés en fonctions fumarate.
EXEMPLES 3 à 15 La resine de polyester insaturée preparee conformément à l'exemple 2 est refroidie depuis sa temperature de préparation (220 C) jusqu'a la temperature T1 indiquée dans le tableau I ci-après, puis au réacteur on ajoute X1 parties en poids de polyoxyalkylène polyamine pour 100 parties de resine polyester et on laisse la réaction de Michael se poursuivre pendant la duree t exprimée en minutes) indiquee dans le tableau I ci apures. A l'issue de la réaction de Michael, l'analyse de la résine polyester insaturée aminée montre une isomêrisation en résidus fumarates au moins egale à 99 %.Les polyoxyalkylène polyamines utilisées sont commercialisees par la société TEXACO sous la marque JEFFAMINE et portent les références suivantes: - D-400 pour les exemples 3 à 5, - T-403 pour l'exemple 6, - D-230 pour l'emple 7, - BD-600 pour l'exemple 8, - BD-605 pour l'exemple 9, - D-2000 pour l'exemple 10, - T-3000 pour les exemples 11 a 13, - D-4000 pour l'exemple 14 et - T-5000 pour l'exemple 15, Tableau I
Exemple z 3 4 5 6 7 8 9 5,3 8,5 11,1 6,0 4,4 11,1 11,1 T1 120 120 180 120 120 120 120 t | 30 30 20 30 30 30 30 Tableau I (suite)
Une approche un peu différente est celle des brevets FR-A-2 604 526 et FR A-2 651 326 qui consiste non pas à suivre l'apparition du signal optique propre aux agrégats, mais à mesurer la diminution d'absorbance du milieu réactionnel à la longueur d'onde correspondant au maximum d'absorption vraie du traceur libre [FR A-2 651 326, p. 2, lignes 1-5]. Dans cette technique, il est très surprenant de constater que des marqueurs particulaires constitués de polymères aromatiques (polystyrène, polyvinyltoluène, styrène/butadiène) ou éthyléniques (polyvinylbutadiène), présentent un maximum d'absorption vraie entre 320 et 800 nm [FR-A-2 604 526, p. 19, lignes 20-32; Figure 2], alors qu'il est parfaitement reconnu que de tels systèmes conjugués ont une absorption vraie comprise entre 200 et 300 nm.C'est d'ailleurs le fait que ces marqueurs macromoléculaires n'ont aucune absorption vraie dans le spectre visible qui justifie leur large emploi dans de nombreuses techniques de calibration optique. Il est encore plus surprenant de constater qu'à matière constituante égale, par exemple du polystyrène, c'est uniquement l'enveloppe caractéristique (dimensions et formes) du traceur [FR-A-2 651 326, p. 8, lignes 1-6; p. 9, lignes 10-12] qui conditionne la longueur d'onde de maximum d'absorbance vraie [FR-A-2 651 326, revendication 8] alors que par définition l'allure d'un spectre d'absorption vraie est indépendante de la concentration et de l'organisation macromoléculaire du chromophore.En fait les observations décrites dans ces deux brevets sont plus à rapprocher des principes diffusiométriques que de tout autre phénomène, et expliquent en particulier les limites de sensibilité (10 ng.ml-1) et les problèmes rencontrés, analogues à ceux de la diffusiométrie.
D'une manière générale les techniques diffusiométriques à traceur particulaire, turbidimétrie et néphélémétrie en particulier, sont limitées par plusieurs facteurs: 1. obligation de choisir des marqueurs d'un diamètre inférieur à 0,2 ym pour des techniques en lumière visible et 0,8,um en infrarouge. Ceci pour éviter que, à la longueur d'onde de mesure, le bruit de fond optique dû au traceur libre ne soit trop important, diminuant d'autant la dynamique du signal mesuré; 2. obligation de travailler généralement avec des dilutions importantes de traceur pour éviter les interférences de signaux optiques entre centres diffusants adjacents; 3. manque de sensibilité (10-100 ng.ml-1), lié à l'emploi de marqueurs de petit diamètre et de faibles concentrations de traceur.Il faut alors des échantillons suffisamment concentrés en analyte pour développer des agrégats optiquement actifs à la longueur d'onde de mesure; agrégats dont la croissance est de toute façon limitée par la dilution initiale du traceur libre; 4. manque de reproductibilité, lié à l'instabilité des marqueurs en suspens ion trop diluée (facteur d'agglutination aspécifique du traceur) et au difficile contrôle de l'agglutination même dans des conditions excessivement standardisées; 5. traitement éventuel des réactifs avant dosage; et 6. mise en oeuvre nécessitant parfois des appareils spécifiques et coûteux.
Par conséquent, I'objet essentiel de la présente invention est d'exploiter des principes optiques nouveaux qui suppriment les inconvénients inhérents aux lois de la diffusion simple (lois de MIE) mises en jeu dans les méthodes d'immunodosage turbidimétriques, néphélémétriques et dérivés, en proposant une solution technique basée sur des traceurs particulaires réunissant une substance immuno-réactive et un marqueur à l'état particulaire, utilisables dans le domaine des immunodosages photométriques, tels que:: 1. ladite substance immuno-réactive est choisie parmi des anticorps ou des antigènes, incluant les haptènes; 2. ledit marqueur est une particule dont la plus grande dimension est d'au moins 0,2 Fm, cependant que des dimensions comprises entre 0,5 et 4,0 m sont préférables; 3. ledit marqueur est constitué d'un matériau ne présentant pas d'absorption vraie dans le domaine des longueurs d'onde visibles/proches infrarouges; 4. ledit marqueur est constitué d'un matériau lyophobe ou amphilyophile et présente en surface, de manière constitutive ou induite, un certain caractère hydrophile nécessaire à la stabilité du traceur en phase liquide aqueuse; et 5. les tracés des courbes spectrales en lumière visible/proche infrarouge desdits traceurs particulaires et de leurs agrégats en phase liquide aqueuse sont sensiblement identiques quelles que soient les dimensions développées par réaction d'agglutination anticorps/antigène.
Selon un autre aspect de Itinvention, on réalise un procédé d'immunodosage en phase homogène, simple, peu onéreux et nouveau, n utilisant que le minimum de réactif nécessaire à l'agglutination anticorps/antigène et qui met en oeuvre les propriétés optiques originales des traceurs particulaires susmentionnés pour la recherche quantitative d'anticorps et d'antigènes, incluant les haptènes, dans divers liquides d'épreuve.
Le troisième objet de la présente invention est de proposer un procédé de microdosage suffisamment simple de mise en oeuvre pour pouvoir être adapté facilement sur la plupart des instruments permettant une mesure photométrique, utilisables dans le domaine de l'analyse biologique et médicale, et plus particulièrement ceux permettant le dosage et l'analyse partiellement ou totalement automatisée d'une multiplicité d'échantillons, de manière à minimiser les temps de manipulation et de lecture de la mesure.
Un autre but de la présente invention est de proposer une micro-méthode de dosage immunologique suffisamment sensible, de l'ordre du nanogramme par millilitre, pour détecter des quantités extrêmement faibles d'anticorps et d'antigènes, dans tous les cas où la grande sensibilité des techniques radioimmunologiques (RIA) et enzymo-immunologiques (ELISA) n'est pas requise; ceci avec un gain de temps énorme par rapport au RIA et l'ELISA (pas de lavage, pas de phase d'extraction des complexes anticorps/antigène, temps d'incubation réduits) et sans les risques biologiques liés à la manipulation de radiosources (RIA).
Enfin le dernier but de cette invention est de proposer, suivant le type de molécule à rechercher, un procédé polyvalent permettant des dosages quantitatifs ou semi-quantitatifs d'anticorps et d'antigènes, incluant les haptènes, aussi bien sous forme de tests directs de détection (réaction d'agglutination) que de tests indirects de détection (réaction d'inhibition d'agglutination). Par extension, ce procédé peut aussi être utilisé pour des mesures qualitatives par simple comparaison de la valeur dosée à une valeur témoin, significative de la présence de l'anticorps et/ou de l'antigène à rechercher (en dépistage par exemple).
La manière dont la solution technique et le procédé suivant l'invention peuvent être réalisés et les autres buts et avantages qui en découlent, ressortiront mieux de la discussion et des exemples détaillés qui suivent, à l'appui des figures annexées dans lesquelles: La Figure 1 est un diagramme illustrant les lois de MIE à travers la comparaison des courbes spectrophotométriques apparentes obtenues pour des suspens ions aqueuses de traceurs particulaires (à marqueur latex) dont les plus grandes dimensions sont respectivement de 0,1 Fm (Courbe 1A), 0,3 llm (Courbe 1B), 0,8 Zm (Courbe 1C) et 2,0 Fm (Courbe 1D).
La Figure 2 est un diagramme illustrant les courbes spectrophotométriques apparentes de différents niveaux d'agglutination, par réaction anticorps/antigène, d'un traceur latex toxoplasme ayant un diamètre moyen de 0,88 m au cours d'un titrage type d'un sérum Toxoplasme gondi positif: Blanc tampon (Courbe 2A), Sérum dilué au 1/16 (Courbe 2B), au 1/8 (Courbe 2D), au 1/4 (Courbe 2F), au 1/2 (Courbe 2E) et Sérum pur (Courbe 2C).
La Figure 3 est un diagramme illustrant les courbes spectrophotométriques apparentes de différents niveaux d'agglutination, par réaction anticorps/antigène, d'un traceur latex myoglobine ayant un diamètre moyen de 0,52 Fm au cours d'un dosage type de solutions étalons de myoglobine humaine titrées à 25 ng.ml-1 (Courbe 3A), 50 ng.ml-1 (Courbe 3B), 125 ng.ml-1 (Courbe 3C), 250 ng.ml-1 (Courbe 3D) et 550 ng.ml-1 (Courbe 3E).
La Figure 4 montre des courbes étalons de densité optique mesurées à des longueurs d'onde de 405 nm (Courbe 4A) et 540 nm (Courbe 4B) en utilisant d'une part un traceur latex myoglobine ayant un diamètre moyen de 0,52 ,um, et d'autre part différentes solutions étalons de myoglobine humaine.
La Figure 5 montre des courbes étalons de densité optique mesurées à des longueurs d'onde de 405 nm (Courbe SA) et 540 nm (Courbe 5B) en utilisant d'une part un traceur kaolin gentamicine ayant un diamètre variant entre 1,0 et 4,0 sum, et d'autre part différentes solutions étalons de sulfate de gentamicine.
Selon les recherches qui ont abouti à la mise au point de la présente invention, on a découvert que les propriétés optiques de traceurs particulaires réunissant une substance immuno-réactive et un marqueur à l'état particulaire, caractérisés en ce que: 1. ladite substance immuno-réactive est choisie parmi des anticorps ou des antigènes, incluant les haptènes; 2. ledit marqueur est une particule dont la plus grande dimension est d'au moins 0,2 Clam ; 3. ledit marqueur est constitué d'un matériau ne présentant pas d'absorption vraie dans le domaine des longueurs d'onde visibles/proches infrarouges ; et 4. ledit marqueur est constitué d'un matériau lyophobe ou amphilyophile et présente en surface, de manière constitutive ou induite, un certain caractère hydrophile; ne suivaient plus les lois de Mie ; les traceurs précités présentant alors avantageusement en lumière visible/proche infrarouge des courbes spectrales de tracé sensiblement identique, quel que soit leur degré d'agglutination par réaction anticorps/antigène.
Jusqu'à présent, les traceurs particulaires utilisés en immunoanalyse avaient un comportement optique décrit par les lois de la diffusion classique, comme illustré Figure 1; à savoir que I'intensité diffusée aux grandes longueurs d'onde (radiations rouges) augmente avec la taille des traceurs tandis qu'elle diminue aux petites (radiations bleues). C'est ce phénomène qui a été maladroitement interprété comme une absorption vraie dans les brevets FR-A-2 604 526 [Figure 3, planche 2/4] et FR-A-2 651 326.C'est aussi ce phénomène qui se cache derrière les termes visible et invisible utilisés dans les brevets FR-A-2 645 967 et FR-A-2 642 174, et plus généralement derrière toutes les techniques photométriques à traceur particulaire: dans la pratique, on se place à une longueur d'onde de mesure (X) telle que les traceurs libres ne sont pas photométriquement visibles alors que leurs agrégats le sont.Pour éviter un chevauchement trop important des spectres de diffusion des traceurs libres d'une part et de leurs agrégats d'autre part - facteur de perte de dynamique du signal optique et par conséquent de sensibilité - il faut soit se cantonner à n'utiliser que des marqueurs dont la plus grande dimension (d) est inférieure à 0,2 CLm si l'on travaille en lumière visible, soit recourir à des instruments optiques de mesure infrarouge pour pouvoir employer des marqueurs de plus grande taille (de toute façon inférieure à 0,8 ÇIm) ; ceci afin de maintenir un rapport X/d au moins supérieur à 2, garantissant que, à la longueur d'onde de mesure, le bruit de fond optique dû aux traceurs libres est minimum.Or si les traceurs sont de trop petite dimension, il faut alors des échantillons suffisamment concentrés en analyte pour développer des agrégats optiquement actifs à la longueur d'onde de mesure. Par ailleurs, la spécificité du signal engendré est médiocre compte tenu de l'hétérogénéité des agrégats développés par la réaction anticorps/antigène ; et ceci d'autant plus que le traceur est de petite taille. Il en résulte que les techniques turbidimétriques en lumière visible sont bien moins sensibles (100 ng.ml-1) que leurs équivalents en infrarouge (10-20 ng.ml-1).
L'autre alternative étant non pas de suivre l'apparition du signal optique dû aux agrégats comme en turbidimétrie classique et en néphélémétrie, mais d'observer l'extinction du signal engendré par les traceurs libres au cours de l'agglutination anticorps/antigène; ce que préconise par exemple les brevets FR-A-2 604 526 et FR-A-2 651 326. C'est une approche a priori intéressante puisqu'elle lie le signal optique mesuré au seul paramètre qui n'évolue pas lors de l'agglutination: la dimension du traceur libre. Du fait de cette meilleure spécificité du signal, cette technique en lumière visible permet de gagner en sensibilité par rapport à la turbidimétrie classique, mais reste limitée par le fait qu'il faut quand même des échantillons assez concentrés en analyte pour déplacer suffisamment le signal optique dû aux agrégats et éviter toute interférence avec celui du traceur libre.
Conformément aux investigations menées dans le domaine des interactions matière/lumière, on a découvert que les traceurs particulaires suivant l'invention et leurs agrégats présentaient avantageusement des propriétés spectrales analogues sur tout le spectre visible/proche infrarouge. Par exemple, les spectres de transmission déterminés entre 200 à 670 nm de longueur d'onde, pour différents niveaux d'agglutination anticorps/antigène de suspensions liquides aqueuses de traceurs latex toxoplasme (0,88 Fm de diamètre) et latex myoglobine (0,52 Fm de diamètre) sont représentés respectivement Figures 2 & 3.De l'examen des Figures 2 & 3, il ressort clairement que, pour un traceur donné, les courbes spectrales (Courbes 2A, 2B, 2C, 2D, 2E, 2F ; Courbes 3A, 3B, 3C, 3D, 3E) dans l'intervalle de longueurs d'onde comprises entre 320 et 670 nm ont sensiblement le même tracé quel que soit le niveau d'agglutination du traceur par réaction anticorps/antigène. CeIa représente un fait nouveau nullement décrit dans l'art antérieur.
De telles fractions que l'on peut qualifier d'"actives" peuvent être obtenues par clivage avec des enzymes ou par traitement avec un détergent conduisant à la dissociation des sous-unités, par exemple avec du SDS.
Les moyens décrits précédemment, pour la détection in vitro d'IgE anti-thaumétopoéine, peuvent être mis en oeuvre dans le cadre d'un protocole de diagnostic d'une allergie à des insectes urticants, par exemple des lépidoptères, en particulier à des chenilles ou papillons urticants, par exemple la chenille processionnaire du pin ou la chenille processionnaire du chêne.
D'autres tests tels que les tests cutanés habituellement effectués pour détecter les allergies, peuvent être réalisés pour compléter le diagnostic.
Des tests cutanés ont par exemple été décrits par les Laboratoires des Stallergènes (7 Allée des Platanes, 94264 Fresnes) sous la référence "Stallerpointe".
En outre, la caractérisation de la capacité de la thaumétopoéine à se comporter comme un allergène permet de définir des moyens en vue de la prévention d'allergies due à la thaumétopoéine, et d'envisager des opérations de désensibilisation, voire de traitement.
Pour ce faire, on aura recours à l'administration de thaumétopoéine voire d'extraits de poils urticants, selon des concentrations déterminées, en un temps déterminé, selon les techniques habituelles pratiquées par exemple lors de désensibilisation aux venins d'hymenoptères.
L'invention concerne à cet égard des extraits de thaumétopoéine sous forme lyophilisée. De préférence, dans le cadre d'une utilisation en vue d'une désensibilisation voire d'un traitement contre la thaumétopoéine.
Ainsi l'invention a pour objet une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif, un extrait de thaumétopoéine, de préférence lyophilisée.
Une telle composition peut être mise en oeuvre pour réaliser une désensibilisation ou un traitement visant à atténuer voire neutraliser, au moins pendant une durée limitée, les effets de l'allergène ; dans ce cas, des doses croissantes de l'extrait d'allergène sont administrées, au cours d'une période déterminée.
S'agissant de la mise en oeuvre de la désensibilisation, on pourra avoir recours au protocole "rush" de désensibilisation (désensibilisation accélérée). A cet égard, on se reportera à la technique décrite par exemple par Freeman J. (Lancet, i, 1930, 744-747) ou Bousquet J. et al (J. Allergy Clin.
Immunol. 1983, 69, 133).
Dans le cadre d'un traitement homéopathique de l'allergie, l'extrait de thaumétopoéine est utilisé à de hautes dilutions dites homéopathiques. Une solution à haute dilution est obtenue à partir de thaumétopoéine purifiée (substance active), diluée à plusieurs reprises dans une solution de dilution, pour que la substance active soit inférieure à environ 10-10 moles/l.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront dans les exemples et les figures qui suivent.
Figure 1. Pipette de prélèvement des poils urticants.
Figure 2. Courbe de dilution entre l'extrait total de poils urticants et le sérum de lapin.
Figure 3. Courbe de dilution entre la protéine urticante et le sérum de lapin.
A la figure 3 on a représenté une vue plus détaillée des plateformes de travail avec leur fixation au chariot coulissant.
Sur la figure 3, la plate-forme 14 est représentée en position inclinée vers le haut, tandis que la plate-forme 16 est horizontale.
Le chariot 12 comporte une partie s'étendant au dessous du plancher des plateformes. Le vérin 28 qui soutient la plate-forme 14 et lui permet de s'incliner plus ou moins vers le haut ou vers le bas est fixé à une structure métallique 40 qui est solidaire du chariot 12 sous le plancher des plateformes et qui est très près du mât.
Le vérin 28 comporte une tige télescopique de longueur variable dont une extrémité est accrochée sous la plate-forme 14 à une distance suffisante du mât pour que le vérin ait une action efficace de maintien et d'orientation.
La figure 4 représente une réalisation de plate-forme autoélévatrice dont la particularité est que la plate-forme de travail peut tourner autour d'un axe vertical.
Pour cela, le mât de hissage 10 est constitué de deux parties superposées qui peuvent tourner l'une par rapport à l'autre. Les plateformes de travail sont réalisées comme précédemment. En particulier elles peuvent être inclinables par rapport à l'horizontale comme cela a été expliqué ci-dessus.
Le bas du mât est de préférence fixe par rapport au socle de support (référence 18 aux figures 1 et 2). Et le haut du mât peut tourner. Sur la figure 4, le bas du mât est désigné par la référence 102 et le haut par la référence 104.
Le haut du mât repose de préférence sur un plateau 106 monté à roulement sans frottement (roulement à billes ou aiguilles) dans une couronne dentée 108 fixée au bas du mât. Un pignon denté 110 vient s'engrener avec les dents de la couronne. Ce pignon est actionné par un moteur 112 fixé à la partie supérieure 104 du mât (et donc fixe par rapport au plateau 106).
Sur la figure 4, on remarquera qu'on voit la crémaillère 114 du mât de hissage, qui permet de monter le chariot coulissant 12 (figures précédentes) auquel sont accrochées les plateformes de travail 14 et 16.
L'intérêt de cette structure tournante de mât est de pouvoir placer la structure de plate-forme sur le sol dans un endroit où il y a de la place entre des zones encombrées, puis de faire monter la ou les plateformes de travail, et ensuite de les faire tourner au dessus de ces zones encombrées. Un autre intérêt est de pouvoir travailler à l'intérieur de silos de cheminées sur toute la surface du cylindre intérieur.
Un autre intérêt est aussi de pouvoir travailler sous une toiture en provoquant la rotation de la plate-forme sur 180 . Dans ces dernières utilisations, représentées schématiquement sur la figure 5 par des flèches 120 ou des pointes de flèches 121, la rotation du mât 10 est assurée par un ancrage supérieur 122. Cet ancrage supérieur 122 comporte de préférence un élément de mât 123 (figure 1) solidaire par un croisillon 124 et 125 du sommet du silo (ou des murs de ce silo).
L'élément de mât 123 est lié au mât 10 par un mécanisme identique à celui de la figure 4. On peut se passer cependant pour ce dernier mécanisme du moteur 112 et de la couronne dentée 108. La plate-forme ainsi décrite est de type autohissable. Les opérateurs munissent le plateau de la plate-forme d'éléments de mât et, au fur et à mesure de l'élévation, ajoutent manuellement les éléments de mât les uns au-dessus des autres en tête du mât.
Dans un perfectionnement le mécanisme 28 d'inclinaison des plates-formes est couplé par des pantographes à des éléments de plancher de ces plates-formes. Ceci est représenté sur la figure 1 où des marches d'escalier 125 sont ainsi réalisées. La longueur de chaque marche est égale à la longueur d'un élément de plancher. Les marches sont articulées par des axes 126 horizontaux et perpendiculaires à la longueur de la plate-forme. Ceci permet de grandes inclinaisons sans risque de glissade.
Dans un autre perfectionnement, les autres extrémités des plates-formes comportent des éléments de plancher télescopiques pour augmenter ou réduire la longueur totale de la plate-forme au fur et à mesure de son ascension, en fonction des besoins, pour approcher des murs d'un réfrigérant circulaires mais non verticaux par exemple.
DISPOSITIF D'ALIMENTATION-DISTRIBUTION DE PORTIONS DE PATE A PAIN.
La présente invention se rapporte à un dispositif d'alimentation-distribution de portions de pâte à pain, en particulier mis au point pour déposer des boules ou portions de pâte à pain dans les godets des chambres de fermentation statiques, ce dispositif étant aussi utilisable dans le déchargement de la chambre de fermentation, pour alimenter des machines de formation de baguettes de pain, etc.