INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Des essais supplémentaires ont en outre montré que des souris prélablement infectées par LUT 12 étaient résistantes à une ré-infection par le type sauvage L028 de L. monocytogenes.
D'autre part, des essais ont été réalisés pour déterminer si des rates récoltées de souris infectées par LUT 12 contenaient des lymphocytes T aptes à conférer une protection à des receveurs syngéniques naïfs contre le type sauvage virulent de L. monocytogenes. La protection conférée a été déterminée par comptage des L.
monocytogenes vivantes, à la fois dans les foies et les rates des souris receveuses 48 heures après l'infection.
Lorsqu'elles étaient récoltées au jour 7 après l'infection par la souche mutante LUT 12, les rates contenaient des cellules aptes à protéger les receveurs d'un inoculum infectieux du type sauvage de L. monocytogenes.
Les cellules conférant une protection se sont révélées être des lymphocytes T appartenant à la sousclasse CD8.
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Nature 227, 680-685.
certaine distance.
La pression interne du fluide de coeur augmente à mesure que la température ambiante augmente Si le matériau du gainage résiste mal à la pression, on peut renforcer le gainage pour augmenter sa résistance à la pression, par exemple en le recouvrant d'une matière plastique ou de métal, en l'enroulant de ruban sur une certaine longueur ou en
tissant des fibres.
Dans la seconde forme de l'invention, le tuyau 10 formant guide d'onde optique est représenté sur la figure 4 comme comprenant un gainage 1 tubulaire creux, un coeur fluide 2 qui le remplit avec un indice de réfractibn plus élevé que celui du gainage, et des bouchons d'étanchéité 3 et 4 placés sur les ouvertures d'extrémités opposées du gainage 1 Le gainage'l est recouvert sur sa périphérie externe d'un
étui protecteur 7 en matériau formant barrière aux gaz.
Le matériau formant barrière aux gaz dont est fait l'étui protecteur 7 est de préférence un matériau qui présente de bonnes propriétés de barrière au gaz et qui ne nuit pas à la flexibilité du tuyau, comme par exemple des
matériaux plastiques, élastomères, minéraux ou métalliques.
Comme exemples, on peut citer les polymères comme le poly(al-
cool vinylique), les copolymères éthylène/alcool vinylique, le poly(chlorure de vinylidène), le poly(fluorure de vinyle), les polyesters, le polychlorotrifluoréthylène, les résines phénoliques, les polyamides, les résines époxydes, le polyacrylonitrile, le poly(chlorure de vinyle), la cellulose,
les résines acétals, les polycarbonates, les résines acryli-
ques, le polystyrène, les résines fluorées, le caoutchouc butyl, le caoutchouc butyl halogéné, le polyéthylène, le polypropylène, le polyuréthanne, le poly(acétate de vinyle), les copolymères éthylène/acétate de vinyle, le caoutchouc
hydrochloré, le caoutchouc naturel, le caoutchouc polyisoprè-
ne, le caoutchouc polybutadiène, les copolymères styrène/bu-
tadiène, le caoutchouc chloroprène, le caoutchouc acryle, 1 'EPDM, les copolymères acrylonitrile/butadiène et le caoutchouc fluoré, ainsi que les métaux comme l'acier inoxydable, l'aluminium, le cuivre, le fer, le zinc, l'étain, le laiton, le bronze, l'argent et l'or Ces matériaux peuvent être utilisés seuls ou comme matériaux composites avec
d'autres matériaux.
Les matériaux préférés sont le poly(chlorure de
Le latex, objet de la présente invention, peut bien entendu être déshydraté de manière à en obtenir un film qui constitue également un des objets de la présente invention.
Des particules sont plus particulièrement adaptées à la séparation de substances à haute valeur ajoutée. C'est ainsi que les cyclodextrines peuvent être fixées sur un latex magnétique de façon à faciliter la récupération d'une substance active comme par exemple des corps gras dans l'industrie alimentaire. L'utilisation de latex en outre magnétisable optimise cette séparation.
L'utilisation d'un latex filmogène est quant à elle plus appropriée pour une encapsulation de composés de type arôme, colorant, insecticide dont on veut par exemple prévenir la dégradation dans le cadre du pelliculage des semences, ou composés dont on souhaite empêcher la migration au sein de polymères, par exemples anti-UV ou anti-oxydants dans les plastiques. Les latex selon l'invention peuvent également être utilisés avec des colorants photochromes du type fluorochromes qui sont encapsulés dans les cyclodextrines adsorbées. De tels produits intéressent en particulier l'industrie électrooptique.
En conclusion, les latex selon la présente invention sont de manière générale tout particulièrement intéressants pour les domaines suivants - la catalyse : il est possible de préparer des dérivés de cyclodextrine possédant une activité catalytique. La cavité cyclodextrine permet la pénétration de la partie hydrophobe d'une molécule et la proximité du site catalytique fixé sur la paroi accèlère la réaction.
- les milieux de culture où par exemple le sérum ou l'albumine sérum est remplacé par des lipides inclus dans des cyclodextrines.
- les techniques séparatives : les latex selon l'invention sont alors utilisés comme phase stationnaire en chromatographie ou pour la séparation de substances actives et - l'agrochimie et la cosmétique pour la conception de formule retard.
D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture des exemples et figures fournis ci-après à titre non limitatif de la portée de l'invention.
La figure 1 représente l'isotherme d'adsorption à pH 9,7 d'un échantillon PVI -ss CD (masse moléculaire de départ 66.000) sur des particules de latex de polystyrène de diamètre 0,24 pm.
La figure 2 représente l'influence du pH sur la quantité maximale de PVI -ss CD (masse moléculaire 66.000).
Exemple 1 Fonctionnalisation de la ss - CD 20 g de (3-CD (1,76 10-2 mol) sont suspendus dans 20 ml d'une solution aqueuse de Zn (BF4)2 à 8 %. Le mélange est porté à 800C sous agitation vigoureuse. On ajoute alors goutte à goutte 1,76 10-1 mol.
d'épichlorhydrine en maintenant la température à 800C. L'addition dure environ 30 minutes. Le mélange est ensuite laissé à réagir pendant 1 h.
Le mélange réactionnel est précipité dans 500 ml d'acétone. Le précipité obtenu est repris dans l'eau et l'opération répétée deux fois.
Le produit séché sous vide à 700C, possède un nombre moyen d'unité glucose, n.s. de 0,56.
Isolement du dérivé monochloré La séparation du dérivé monochloré est effectuée sur une colonne HPLC préparative de phase inverse en Cg. L'élution est réalisée avec un mélange eau/méthanol 70/30. L'analyse élémentaire est conforme à la structure du produit (% Cl pour C45H74CL036 : 2,89 ; trouvé : 2,77).
Exemple 2 Greffage de la (3-CD fonctionnalisée Des rapports variables de PVI et de (3-CD monochlorée sont utilisés pour obtenir des polymères PVI-CD à taux variables en motifs cyclodextrine. Une solution à 5 % dans de l'eau distillée est portée à reflux, sous atmosphère d'azote, pendant 8 heures et sous agitation magnétique. La purification du polymère se fait par ultrafiltration sur membrane de cellulose régénérée ayant un seuil de coupure de 20.000.
Lorsque le filtrat ne contient plus que des traces de ss-CD (détection par décoloration d'une solution de phénolphtaléine), le rétentat est concentré et lyophilisé.
De plus, dans les deux cas, on extrait la racine, qui devient le bit démodulé et qui peut ensuite être effacé de la mémoire.
Le schéma de la figure 1 serait à adapter dans le cas d'une information non plus binaire, mais m-aire, car chaque élément numérique engendrerait à son tour m branches, ce qui augmenterait le nombre de chemins possibles.
Le procédé de démodulation peut être schématisé par la figure 2, dans laquelle on a supposé que les symboles reçus proviennent d'une démodulation les amenant en fréquence intermédiaire.
Les étapes successives sont alors les suivantes - introduction de l'information correspondant au bit à démoduler, qui vient d'être échantillonné, dans la suite CR,) des échantillons de signal reçu, - division de l'échantillon par les échantillons de signal reconstitué, dans les différentes hypothèses, pour obtenir les séquences CA,), - calcul des vraisemblances pour les différentes séquences AkY, - élimination des séquences les moins vraisemblables, pour réduire le volume de mémorisation nécessaire, - détermination du bit racine, c'est-à-dire du bit le plus ancien dans l'arborescence, par remontée de l'arborescence à partir de la vraisemblance maximale, pour retenir le bit à démoduler, - mémorisation du bit démodulé et effacement des informations correspondant à ce bit.
Dans le cas montré en figure 2, les échantillons R' reçus en fréquence intermédiaire sont soumis à un filtrage 10 adapté au symbole. Ce filtrage adapté, fonction de la nature du signal reçu, a une fonction de réjection et de récupération du signal sous forme complexe. Le signal obtenu est soumis à une rotation en 12 pour donner naissance à un signal en bande de base Rn . Ce signal est appliqué à des diviseurs 141 ,... 14l dont le nombre est égal à la largeur retenue dans l'arborescence. Chaque diviseur en bande de base reçoit également un signal représentant un même échantillon du signal, mais reconstitué à partir d'une hypothèse particulière Ck sur la séquence de bits émise. Avant application au diviseur respectif, chacun des échantillons H1 , H2 , ...., Hl est soumis à une remodulation et un filtrage adapté en bande de base en 161 , 162 ,..., 161 . Cette association de la modulation et du filtrage adapté est équivalente à un filtrage transverse non récursif, transformant la suite de bits reçus en un signal complexe en bande de base Sn pour le bit d'ordre n. La sortie de chaque diviseur fournit An/H dans une hypothèse déterminée sur H (formule 5).En d'autres termes, les sorties des diviseurs constituent des estimations de l'évanouissement An pour le bit d'ordre n dans les hypothèses H1 , H2 , ..., H1 , où Hi désigne le vecteur de bits supposés dans la séquence du signal reconstitué à partir de l'hypothèse Ci , avec iE(1,l) Les résultats fournis par les diviseurs 14 sont soumis en 18 à un calcul destiné à déterminer la valeur la plus vraisemblable du bit n-p (p étant la profondeur de l'arbre) en appliquant un critère de maximum de vraisemblance de l'affaiblissement. Pour cela on détermine la probabilité p(An) des séquences An correspondant chacune à une séquence Hi et on retient la séquence la plus vraisemblable, qui permet de déterminer le bit n-p.
L'arborescence est ensuite élaguée, par exemple par l'une des deux méthodes exposées plus haut.
L'organigramme de la figure 2 peut être réalisé à l'aide d'un démodulateur ayant la constitution de principe montrée en figure 3, où les composants destinés à remplir les diverses fonctions de la figure 2 sont désignés par les mêmes numéros de référence.
Le démodulateur de la figure 3 comprend un filtre transverse complexe d'entrée 10, en fréquence intermédiaire, fournissant deux composantes complexes au multiplieur 12 permettant de repasser en bande de base et qui reçoit la fréquence intermédiaire Fi . Le démodulateur comprend 1 filtres transverses complexes non récursifs de remodulation 161, ..., 16l qui reçoivent les échantillons du signal reconstitué dans les différentes hypothèses Cl,), .--, (Cl}. Ces filtres ont une constitution comparable à celle du filtre 10, mais fonctionnent en bande de base. Ils fournissent les deux composantes du signal complexe de sortie à des diviseurs complexes respectifs 141 , ..., 14l qui reçoivent également la sortie du multiplieur 12.Enfin les diviseurs attaquent un processeur de signal 18, pouvant être constitué par un circuit intégré d'application spécifique ou asic.
Le fonctionnement du dispositif de la figure 3 découle de la description qui précède. Si l'on suppose qu'il y a une racine unique et que l'affaiblissement a déjà été estimé, le processeur 18 a en mémoire le vecteur d 'évanouissement estimé sur une branche de l'arbre. I1 effectue alors la séquence de calcul suivante 1 / Calcul de la vraisemblance d'une branche de l'arborescence avec l'estimation de l'évanouissement et répétition du calcul 2L fois si L branches (chacune constituée de p bits, dont certains peuvent être communs entre différentes branches) sont conservées, dans le cas où chaque noeud d'embranchement pair a deux fils, ce qui se traduit par 2L noeuds.
Pour chaque noeud, le processeur 18 mémorise le bit hypothèse, l'évanouissement estimé et l'adresse du noeud pair dans l'arbre, afin de pouvoir remonter dans l'arborescence jusqu 1au bit à démoduler.
2 / Une fois les 2L vraisemblances des perturbations calculées, classement de ces vraisemblances par valeurs croissantes. La valeur minimale constitue un point de départ permettant la remontée dans l'arborescence vers le noeud constituant racine.
3 / Remontée dans l'arborescence, à partir du noeud de vraisemblance minimale, jusqu'à la racine commune.
40/ Elagage de tous les chemins partant de la racine ainsi déterminée et ayant comme seconde racine commune le noeud fils qui n'appartient pas au chemin dont la vraisemblance est minimale.
5 / Sélection de la racine actuelle comme bit démodulé et élimination de cette racine, le noeud fils de la racine dont la vraisemblance est maximale devenant la nouvelle racine de l'arbre.
6 / Eventuellement, s'il reste un nombre L+k de branches supérieur à L, élagage des k chemins dont la vraisemblance est minimale.
Le calcul est ensuite repris pour déterminer le bit suivant.
Par ailleurs, le revêtement selon l'invention présente une dureté comprise entre 30 et 500 daN/mm2, mesurée avec un microindenteur Shinatzu.
Enfin, la mesure du module d'Young du revêtement indique que celui-ci varie de 10 à 300 GPa.
La méthode de mesure du module utilisée est celle décrite dans la publication "Vickers Indentation Curves of Elastoplastic Materials" (Microidentation Techniques in Materials Science and Engineering. ASTM STP 889. P.J Blan and B.R Lawn Eds, American Society for Testing and Materials, 1986, pages 72 - 89).
Des exemples concrets mais non limitatifs de l'invention vont maintenant être présentés.
EXEMPLE 1 A/Préparation du polymère Dans un réacteur de trois litres double enveloppe muni d'une agitation mécanique, d'un tube d'entrée des gaz et d'un condenseur, on effectue une coammonolyse, en présence de 1,1 l d'éther isopropylique, d'un mélange de 53,6 g (0,36 mole) de (CH3)2 SiCl2 (motif D) et de 38,7 g (1,06 moles) de CH3SiCl3 (motif T). Le mélange T/D de 75/25 dans l'éther isopropylique est refroidi à 30C et est maintenu à cette température pendant l'introduction de NH3 gazeux. Le débit d'introduction de NH3 est maintenu à environ 6 ml/s de gaz et l'addition a lieu en 6 heures. Il se forme au cours de la réaction du chlorydrate d'ammonium qui est filtré en fin d'essai sur verre fritté (diamètre moyen des pores : 10 um). Le précipité est lavé plusieurs fois à l'aide de solvant sec. La solution récupérée est limpide. Les solvants sont évaporés sous vide (25 puis 2 mbars à 70 C).
Les coammonolysats ainsi obtenus sont dilués à 50 % en poids dans l'éther isopropylique puis traités avec de l'acide trifluorométhanesulfonique à 700C. Après polymérisation, les produits sont filtrés sur fritté nO 3 et concentrés à 1700C sous 2 mm de Hg pendant 30 mn.
B/Préparation de la barbotine Mélange A Dans une solution de 25 g de toluène on ajoute 50 g de poudre Si3N4 (LC 12 de Hermann C. Stark Berlin, soit HCST) et 1 g de tensio-actif (BEYCOSTAT C 213 CECA) et l'on mélange pendant 2 heures dans un agitateur rotatif à boulets Si3N4.
La fraction massique en poudre est de 48%.
Mélange B Dans une solution de 76 g de toluène, on mélange 152 g de polymère obtenu en A/.
La fraction massique en polymère est de 48 %.
Les deux mélanges sont réunis sous agitation puis filtrés sur tamis de 200 um.
Dans la barbotine, le rapport massique poudre/polymère est de 1/3.
C/Préparation du revêtement Le substrat à revêtir est plan et composé d'un acier inoxydable type 316 L (Norme française : Z2 CND 1713). Le substrat est préalablement traité au trichloroéthane puis séché sous un flux d'azote.
Le revêtement est déposé par centrifugation puis chauffé progressivement à 7000C par un épiradiateur en silice, sous balayage d'azote. La durée totale du traitement étant de 20 minutes.
D/Caractéristiques du revêtement Epaisseur : 10 pm- Homogène et sans fissures Dureté : 200 daN/mm2 Rugosité : 0,4 Um Adhérence : bonne EXEMPLE 2 A/On utilise le mème polymère que dans l'exemple 1.
B/La préparation de la barbotine est identique à celle décrite dans l'exemple 1 mais les proportions sont les suivantes Mélange A 25 g de poudre Si3N4 0,5 g de tensio-actif Beycostat 27 g de toluène soit une proportion massique en poudre de 48 %.
TABLEAU IV Milieux C. albicans C. tropicalis milieu 199 IP 0,002 0,02 milieu de Shadomy 0,21 0,83 milieu de Shadomy + extrait de levure 0,32 1,1 milieu de Shadomy + supplément G 0 0 plasma oxalaté 0 0 Les résultats du tableau IV montrent que le milieu 199 IP, le milieu de Shadomy contenant le supplément G et le plasma oxalaté ne conviennent pas pour la mise en oeuvre de l'invention. Le supplément G, qui con tient Fn, empêche l'adhérence des formes filamentaires sur le Fg des plaques de microtitration eu égard au mécanisme de compétition précité. De même, le milieu 199 IP fausse le résultat de la mesure d'affinité par ledit mécanisme de compétition. Le plasma oxalaté inhibe la filamentation des BL.
Le milieu de Shadomy normal (i.e. non-enrichi et non-complémenté) convient en tant que milieu de développement (i.e. milieu de multiplication-filamentation). En revanche, le milieu de Shadomy enrichi (extrait de levure à 1-4 g/l) utilisé en tant que milieu de développement est susceptible de fausser la réaction d'affinité, en ce sens que le Fg contenu dans l'extrait de levure, qui favorise la multiplication, peut se fixer sur les formes filamentaires lors de la filamentation , et les complexes formes filamentaires-Fg formés lors de ladite filamentation peuvent se fixer sur le Fg de la plaque de microtitration. Par suite, il est plutôt préférable d'utiliser le milieu de Shadomy enrichi lors de la multiplication puis le milieu de Shadomy normal lors de la filamentation.
EXEMPLE 5 On procède à la multiplication des BL de diverses souches de levures de référence (provenant de collections reconnues) et d'isolats (provenant de prélèvements cliniques), dans un milieu aqueux aérobie constitué du milieu de Shadomy enrichi (extrait de levure à 2 g/l) et complémenté en urée (2 g/l), saponine (0,2 g/l), héparine et ampicilline, pendant 18 h à 37"C et à pH 7,0-7,5 ; on procède ensuite à la filamentation des blastospores ainsi obtenues, dans un milieu aqueux aérobie constitué par le milieu de Shadomy normal, pendant 1-4 h à 370C et à pH 7,0-7,5, pour obtenir les formes GT (ou leurs analogues blastospores-sphérules), les souches soumises à la filamentation (ou pseudofilamentation) ayant une popula tion de 105 à 106 levures/ml.On introduit ensuite le milieu de filamentation ainsi obtenu qui contient des GT (ou leurs dits analogues) dans les cupules de plaques de microtitration revêtues de façon covalente de Fg, puis laisse incuber pendant 1-3 h à 37"C. On évalue ensuite l'affinité révélée par le substrat H-L-Leu-pNA par la variation de OD à 405 nm. Les résultats obtenus sont consignés dans les tableaux Va (souches de référence) et Vb (souches d'isolats) ci-après.
TABLEAU Va (Souches de référence) Nombre de souches Espèces testées affines Candida albicans 2 (a) 2 Candida albicans 2 (b) 0 Candida tropicalis 1 (a) 0 Candida tropicalis 2 (b) o Candida krusei 2 (a) 1 Candida krusei 1 (b) 0 Candida glabrata 1 (a) 1 Candida glabrata 1 (b) 0 Candida parapsilosis 2 (b) 0 Rhodotorula 2 (a) 1 Shodotorula 2 (b) 0 Trichosporum 1 (a) 1 Cryptococcus 1 (a) 1 Cryptococcus 1 (b) 0 Saccharomyces 2 (b) 0 Geotrichum 1 (a) 1 Aspergillus 1 (a) 1 Notes (a) : souche(s) réputée(s) pathogène(s) (b) : souche(s) réputée(s) non-pathogène(s) TABLEAU Vb (souches d'isolats) Nombre de souches Espèces testées affines Candida albicans 4 (c) 4 Candida albicans 7 (d) o Candida tropicalis 5 (c) 5 Candida tropicalis 4 (d) 0 Candida krusei 2 (c) 2 Candida krusei 8 (d) 0 Candida glabrata 2 (c) 2 Candida glabrata 13 (d) O Candida parapsilosis 1 (d) 0 Notes (c) : souche(s) reconnue(s) pathogène(s) (d) : souche(s) reconnue(s) non-pathogène(s) Les résultats des tableaux Va et surtout Vb mettent en évidence l'intérêt de l'invention pour distinguer les souches de levures qui sont pathogènes de celles qui ne le sont pas.Le tableau Va confirme par ailleurs que des souches de référence réputées pathogènes perdent leur pathogénicité par repiquages successsifs.
EXEMPLE 6 (comparatif) (a) Protocole On fait filamenter dans le milieu de Shadomy normal, pendant 4 h à 37"C et à pH 7,0-7,5, des souches de levures ayant une population supérieure ou égale à 105 levures/ml et provenant d'un prélèvement de sang (contenant de la fibrine), selon une technique d'hémoculture après dilution à lO-l du prélèvement sanguin dans un milieu de multiplication constitué par le milieu de Shadomy enrichi (extrait de levure à 2 g/l) et complémenté en urée (2 g/l).
On procède ensuite à la mise en évidence de l'éventuelle affinité en mettant en contact, pendant 1 h à 370 C, des prélèvements du milieu de filamentation résultant avec un réactif fixé par liaison covalente à des billes de latex, à savoir le réactif FDP-latex.
(b) Résultats Les résultats obtenus avec des souches de Candida qui sont consignés dans le tableau VI ci-après, mettent en évidence la nécessité de faire filamenter les levures en milieu plasmatique après avoir incorporé un agent anticoagulant. Dans cet exemple, la présence de Fn sous la forme d'un caillot qui stest formé fausse la mesure de l'affinité du réactif FDP-latex du fait du mécanisme de compétition entre Fn et FDP-latex.
TABLEAU VI Affinité de Candida à FDP-latex en présence d'un caillot de Fn Milieux Pousse Affinité (FDP-latex (4 h à 37;C) 1 h à 37"C) plasma citraté + CaCl2) caillot Fn (Candida fixés à Fn) sérum (absence de Candida) plasma citraté plasma hépariné sang hépariné + saponine (10 g/l) EXEMPLE 7 (comparatif) On a étudié l'influence de la dilution du système plasmatique sur l'évaluation de l'affinité de souches de Candida qui filamentent normalement (en donnant les GT, PMy et My).
Dans ce but, le prélèvement plasmatique (plasma sanguin ou sang total) a été additionné d'un moyen anticoagulant dans la minute qui suit la prise de sang, puis dilué ensuite au moyen du milieu de Shadomy enrichi (extrait de levure à 2 g/l) et complémenté en saponine (10 g/l), urée (2 g/l) et ampicilline.
La filamentation a été réalisée dans le milieu de Shadomy normal, pendant 4 h à 370C et à pH 7,0-7,5, à partir d'une population initiale de souches de levures de 105 à 106 levures/ml.
Pour apprécier l'affinité des formes filamentaires essentiellement constituées ici de GT, on a mis en contact des prélèvements du milieu de filamentation (tel qu'obtenu après culture pendant 4 h à 370C et à pH 7,07,5) avec le réactif FDP-latex de l'exemple 6 pendant 1 h à 370C et à pH 7,0-7,5.