INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le plasmide pYG404 est décrit dans la demande de brevet EP 361 991. Ce plasmide comporte un fragment de restriction Hindîli codant pour le gène de la prépro-SAH précédé des 21 nucléotides naturellement présents immédiatement en amont de l'ATG initiateur de traduction du gène PGK de S. cerevisiae. La séquence nucléotidique de ce fragment de restriction est incluse dans celle de Ia Figure 2. Le site MstII localisé dans la séquence codante, à trois résidus du codon spécifiant la fin de traduction est particulièrement utile comme site de clonage d'un peptide biologiquement actif que l'on désire coupler en phase traductionnelle en C-terminal de la SAH.Dans un mode de réalisation particulier, il est utile d'utiliser des peptides dont la séquence est codée par un fragment de restriction MstII-HindIII du type: 5'-CCTTAGGCTTA [3xN]p TAAGCTT3', la séquence codant le peptide (p résidus) biologiquement actif est [3xN]p). La ligature de ce fragment avec le fragment de restriction HindIII MstII correspondant à la totalité du gène codant pour la SAH à l'exception des trois acides aminés les plus C-terminaux (résidus Leucine-Glycine Leucine) génère un fragment de restriction HindIII comportant un gène hybride codant pour une protéine chimère du type SAH-PEPTIDE (Figure 1, panneau A), immédiatement précédée de la région d'exportation "prépro" de la SAH. Dans un autre mode de réalisation, le peptide biologiquement actif peut être présents plus d'une fois dans la chimère.
EXEMPLE 2: COUPLAGE EN N-TERMINAL DE LA SAH.
Dans un mode réalisation particulier, les techniques combinées de mutagénèse dirigée et d'amplification PCR permettent de construire des gènes hybrides codant pour une protéine chimère résultant du couplage traductionnel entre un peptide signal (et par exemple la région prépro de la SAH), une séquence incluant le peptide biologiquement actif et la forme mature de la SAH ou un de ses variants moléculaires. Ces gènes hybrides sont préférentiellement bordés en 5' de l'ATG initiateur de traduction et en 3' du codon de fin de traduction par des sites de restriction HindIII et codent pour des protéines chimères du PEPTIDE SAH (Figure 1, panneau B). Dans un mode réalisation encore plus particulier, le peptide biologiquement actif peut être présents plus d'une fois dans la chimère.
EXEMPLE 3: COUPLAGE EN N- ET C-TERMINAL DE LA SAH.
Les techniques combinées de mutagénèse dirigée et d'amplification PCR décrites dans les exemples 1 et 2 permettent de construire des gènes hybrides codant pour une protéine chimère résultant du couplage traductionnel entre la forme mature de la SAH, ou un de ses variants moléculaires, et un peptide biologiquement actif couplé aux extrémités Net C-terminales de la SAH. Ces gènes hybrides sont préférentiellement bordés en 5' de l'ATG initiateur de traduction et en 3' du codon de fin de traduction par des sites de restriction Hindi et codent pour des protéines chimères du type PEPTIDE-SAH-PEPTIDE (Figure 1, panneau C), immédiatement précédée de la région d'exportation "prépro" de la SAH.
Dans un mode réalisation encore plus particulier, le peptide biologiquement actif peut être présents plus d'une fois dans la chimère.
EXEMPLE 4: PLASMIDES D'EXPRESSION.
Les protéines chimères des exemples précédents peuvent être exprimées dans les levures à partir de promoteurs fonctionnels, régulables ou constitutifs, tels que, par exemple, ceux présents dans les plasmides pYGIOS (promoteur LAC4 de Kluyveromyces lactis), pYG106 (promoteur PGK de Saccharomvces cerevisiae), pYG536 (promoteur PHOS de S. cerevisiae), ou des promoteur hybrides tels que ceux décrits dans la demande de brevet EP 361 991.Les plasmides pYGIOS et pYG106 sont ici particulièrement utiles car ils permettent l'expression des gènes codés par les fragments de restriction HindIII tel que décrits dans les exemples précédents et clonés dans le site HindIII et dans l'orientation productive (définie comme l'orientation qui place la région "prépro" de l'albumine de façon proximale par rapport au promoteur de transcription), à partir de promoteurs fonctionnels chez K. lactis régulables (pYG1OS) ou constitutifs (pYG106). Le plasmide pYG105 corresponds au plasmide pKan707 décrit dans la demande de brevet EP 361 991 dans lequel le site de restriction HindIII unique et localisé dans le gène de résistance à la généticine (G418) a été détruit par mutagénèse dirigée tout en conservant une protéine inchangée (oligodeoxynucleotide 5'-GAAATGCATAAGCTCTTGCCATT CTCACCG-3'). Le fragment SalI-SacI codant pour le gène URA3 du plasmide muté a été ensuite remplacé par un fragment de restriction SalI SacI comportant une cassette d'expression constituée du promoteur LAC4 de K. lactis (sous la forme d'un fragment SalI-HindIII) et du terminateur du gène PGK de S. cerevisiae (sous la forme d'un fragment Hindm-SacI).
Le plasmide pYGIOS est mitotiquement très stable chez les levures Kluyveromyces et une carte de restriction en est donnée à la Figure 3. Les plasmides pYGIOS et pYG106 ne diffèrent entre eux que par la nature du promoteur de transcription encodé par le fragment SalI-HindIII.
EXEMPLE 5: TRANSFORMATION DES LEVURES.
La gestion de l'interface alimentant 17 est assurée via la ligne 39 par le micro-contrôleur 22.
La commutateur 34 associé à la mémoire de connexion 35 assure, sous la commande du micro-contrôleur 22, un aiguillage exclusif de l'interface alimentant 17 vers le poste d'usager sélectionné (un parmi huit par exemple).
L'afficheur 37, constitué par exemple par un écran a cristaux liquides ou par des diodes électroluminescentes de couleurs, permet de visualiser l'état du sélecteur 1.
L'interface 44, par exemple de type RS 422, est une réalisation, adaptée à un support filaire, du modem multipoints 9 de la figure 2. Cette interface permet l'échange de données de type informatique (protocole) entre le sélecteur 1 (micro-contrôleur 22) et les dispositifs de paiement distants DPI...DP, de la figure 1 (la distance peut atteindre quelques kilomètres). En outre, l'interface 44 peut assurer la téléalimentation des dispositifs de paiement distants.
L'interface 44 peut être par exemple realisé à partir de circuits intégrés standards tels que des circuits MC 3486 et MC 3487.
La fonction SDD du bloc 8 de la figure 2 est réalisée par le déroulement d'un module logiciel stocké dans la PROM 32 et exécuté par le micro-contrôleur 22.
I1 associe et controle les données en provenance de l'un des dispositifs de paiement, chacun à son tour, et le décrochage du poste d'usager correspondant, en agissant sur le commutateur 34 et l'interface alimentant 17.
Lorsque les données reçues par le micro-contrôleur 22 sont cohérentes, c'est-à-dire quand il détecte un moyen de paiement valide dans le dispositif de paiement DP associé à l'un des postes d'usager P et quand il détecte simultanément l'état décroché du poste d'usager correspondant, le micro-controleur 22 provoque la prise de la ligne téléphonique LT par commande de l'interface de ligne bouclant 2. Le lien physique entre le poste d'usager et la ligne téléphonique LT est ainsi établi, autorisant l'usager à composer le numéro de l'abonné désiré.Une fois la communication établie et durant la conversation, le compteur de télétaxes transmet les signaux de taxe au micro-contrôleur 22 qui les achemine, via l'interface 44, au dispositif de paiement DP du poste d'usager P concerné, qui décrémente physiquement le crédit du moyen de paiement de l'usager (par exemple un compte d'unités de paiement contenu dans la mémoire d'une télécarte > .
Dans le mode de réalisation de la figure 3, la fonction comptage des télètaxes (bloc 6 de la figure 2) est réalisée par le processeur de signal 26 qui exécute un module logiciel stocké dans la mémoire fixe programmable 28. Ce module assure un filtrage numérique et une remise en forme des signaux de télétaxes provenant de la ligne LT. A cet effet, le circuit COFIDEC 18 effectue une transformation analogique/numérique des signaux. Ce circuit, qui est un circuit classique en télécommunication numérique, peut être par exemple constitué par un circuit intégré du type TMS 2913.
La fonction SDA (bloc 5 de la figure 2) peut être réalisée par le déroulement d'un module logiciel stocké dans la mémoire fixe programmable 32 et exécuté par le micro-contrôleur 22. Cette fonction est initialisée par la détection d'un appel entrant sur la ligne LT (détection d'un signal de sonnerie par le circuit 13 > .
En réponse à cet appel, le micro-contrôleur 22 commande la prise de la ligne LT par l'interface bouclant 2. Dans le cas d'un système téléphonique à numérotation fermée, le micro-contrôleur 22 demande au processeur de signal 26 de générer un message d'aide vocale, par l'exécution d'un module logiciel de synthése vocale contenu dans la mémoire fixe programmable 28 et réalisant la fonction du bloc 7 de la figure 2.Ce message d'aide vocale est envoyé par le circuit COFIDEC 18 à l'abonné appelant via l'interface bouclant 2. Le micro-contrôleur 22 positionne ensuite le processeur de signal 26 dans un mode de réception de numérotation SDA peut être réalisé de façon classique par le microcontrôleur 22 qui exécute un module logiciel stocké dans la mémoire fixe programmable 32.Le ou les numéros reçus par le processeur de signal 26 sont transmis au microcontrôleur 22 qui assure la mise en sonnerie du poste d'usager P appelé, en connectant le générateur de sonnerie 43 (70 V alternatif, 50Hz) audit poste d'usager via l'interface alimentant 17 et le commutateur 34.
L'établissement final de la communication entre l'abonné appelant et le poste d'usager appelé est réalisé dès la détection du décrochage du poste d'usager. Comme indiqué plus haut, cette détection est assurée de façon classique par l'interface alimentant 17.
Pendant toute la durée d'une communication téléphonique etablie à la suite d'un appel provenant de la ligne téléphonique LT, les dispositifs de paiement DP n'ont aucune action.
Les dispositifs de paiement DPi.l...DPn de la figure 1 peuvent être identiques et on ne décrira donc que l'un d'entre eux, désigné d'une manière générale par DP, en faisant référence a la figure 4. Dans la figure 4, la ligne 1 en provenance de l'interface 44 de la figure 3 aboutit d'une part a un circuit d'alimentation 45 apte à fournir la ou les tensions nécessaires au fonctionnement des circuits du dispositif de paiement DP a partir de la tension produite par le circuit de téléalimentation 25 de la figure 3 et délivrée à la ligne 1 par l'interface 44. La ligne l aboutit d'autre part à un microcontrôleur 46, via une interface 47 de type RS 422 comme l'interface 44 du sélecteur 1 de la figure 3.Dans le cas où le moyen de paiement utilisé avec le dispositif de paiement DP est une carte de crédit ou télécarte 48 du type de celles utilisées dans les cabines téléphoniques publiques, qui est munie d'une puce 49 dont la mémoire stocke un certain nombre d'unités de compte, représentant le crédit dont dispose l'usager, le dispositif de paiement DP comprend un lecteur de télécarte 51 qui assure le lien physique entre la télécarte 48 et le micro-contrôleur 46.Le lecteur de télécarte 51 peut par exemple comporter un connecteur de type C70210M0082054 de la Société SOCAPEX. Le microcontrôleur 46 peut être par exemple constitué par un circuit intégré du type EfC68HCll. Pendant une communication téléphonique initialisée par l'usager du poste P associé au dispositif de paiement DP, le microcontrôleur 46 reçoit les informations et les ordres provenant du sélecteur 1 via l'interface 47 et il exécute un module logiciel stocké dans sa mémoire fixe programmable interne (non mantréeA. Ce module logiciel assure de façon classique la gestion, le contrôle et l'écriture dans la télécarte 48 des informations de taxation reçues du sélecteur 1.Le micro-contrôleur 46 assure également l'affichage, sur l'écran d'un afficheur 52, par exemple du type à cristaux liquides, des aides au déroulement de l'opération et du suivi de l'opération (affichage du numéro de l'abonné appelé, durée de la communication téléphonique, nombre d'unités ou crédit encore disponible sur la télécarte, ...).
Le dispositif de paiement DP comporte en outre une alarme sonore 53, par exemple un vibreur acoustique, dont le fonctionnement est également géré de façon connue par le micro-contrôleur 46. Par exemple, celui-ci active l'alarme 53 lorsque l'usager oublie de retirer du lecteur 51 la télécarte 48 à la fin d'une communication téléphonique ou lorsque le crédit disponible sur la télécarte 48 est épuisé, afin d'avertir l'usager qu'il doit remplacer la télécarte dont le crédit est épuisé par une autre télécarte valide.
Le module logiciel gérant les fonctions décrites cidessus du dispositif de paiement est tout à fait classique et peut être identique à celui utilisé pour gérer les mêmes fonctions dans une cabine téléphonique publique. Le micro-contrôleur 46 du dispositif de paiement DP et le logiciel associé peuvent être en outre conçus pour commander l'affichage, sur l'écran de l'afficheur 52, d'un message indiquant l'état (libre ou occupé) de la ligne téléphonique LT quand le poste d'usager P associé au dispositif de paiement DP n'est pas en communication, afin d'avertir l'usager du poste s' il peut ou non effectuer un appel téléphonique.
L'utilisation de cette unité est fortement recommandée, mais l'utilisateur peut la traduire en valeur pondérale d'une SOD purifiée avec laquelle il aura préalablement construit une courbe d'étalonnage. Une telle estimation pondérale sera fortement affectée par le pourcentage d'enzyme inactive présent dans la préparation.
Les résultats peuvent aussi être exprimés par exemple en U/ml de sang total ou en U/mg de protéines érythrocytaires.
Remarques Le contrôle de la procédure de dosage peut être effectué en dosant l'activité SOD d'un lysat érythrocytaire préparé comme décrit précédemment et conservé à -700C sous forme d'aliquots pour servir de témoin. L'activité SOD de tels aliquots est stable au moins 6 mois à -700C.
Exemple 12 : Procédure de dosage utilisant le réactif BXT 01048 Identique à l'exemple 11, excepté que - Dans R1, le réactif BXT 01041 est remplacé par le réactif BXT 01048.
- L'évolution de l'absorbance est suivie à 505 nm.
La figure 2 annexée représente les variations de l'inverse de la différence (Vs-Vc), exprimé en min/variation de l'absorbance (min/Nabs.) en fonction de l'inverse de la concentration en activité SOD, exprimé en ml/U, dans cet exemple.
Unités d'activité SOD= 1/ {0,028 x [1/(VS-Vc)] - 0,077 } x D Exemple 13 : Procédure de dosage utilisant le réactif BXT 01049 Identique à l'exemple 11, excepté que - R1 est remplacé par R3 qui est défini de la façon suivante solution de BXT 01049 2.10-3M dans le mélange DMSO/H20 à 50/50 (v/v), contenant de l'acide borique 0,1M.
- L'évolution de l'absorbance est suivie à 522 nm pendant 1 min.
- La vitesse maximale d'autoxydation est obtenue en soustrayant la valeur d'absorbance relevée au bout de 20 s de celle relevée au bout de 50 s.
La figure 3 annexée représente les variations de l'inverse de la différence (Vs-Vc), exprimé en min/variation de l'absorbance (min/A abs.) en fonction de l'inverse de la concentration en activité SOD, exprimé en ml/U, dans cet exemple.
Unités d'activité SOD= 1/(0,023 x [l/(VS-VC)] - 0,063} x D.
Exemple 14 : Procédure de dosage utilisant le réactif BXT 01050 Identique à l'exemple 11, excepté que - R1 est remplacé par R4 qui est défini de la façon suivante solution de BXT 01050 2.10-3 M dans le mélange DMSO/H2O à 50/50 (v/v), contenant de l'acide borique 0,3M.
- L'évolution de l'absorbance est suivie à 525 nm pendant 1 min.
La figure 4 annexée représente les variations de l'inverse de la différence (Vs-Vc), exprimé en min/variation de l'absorbance (min/A abs.) en fonction de l'inverse de la concentration en activité SOD, exprimé en ml/U, dans cet exemple.
Un premier objet de l'invention est donc constitué par un procédé pour l'étude en laboratoire de la récupération assistée de pétrole à partir d' au moins un échantillon de roche de forme sensiblement cylindrique, ce procédé étant du type dans lequel on revêt par métallisation à chaud la surface externe de l'échantillon de roche à tester d'au moins une couche métallique apte à le rendre sensiblement imperméable aux fluides, on loge l'échantillon ainsi traité dans une enceinte d'essai, de façon telle que la surface externe de l'échantillon soit séparée des parois internes de l'enceinte par un espace annulaire, on injecte alors dans cet échantillon, à l'une de ses extrémités, une quantité déterminée de pétrole sous pression, on interrompt l'alimentation en pétrole de l'échantillon de roche, on injecte dans celui-ci, à l'une de ses extrémités, un gaz sous pression, et l'on récupère à l'autre extrémité de l'échantillon de roche le pétrole et le gaz provenant de l'échantillon, que l'on évacue à l'extérieur de l'enceinte d'essai, tout en maintenant dans l'espace annulaire séparant l'échantillon de roche de l'enceinte d'essai, pendant toute la durée de l'injection de pétrole et de l'injection d'air sous pression, une contrepression suffisante pour éviter l'éclatement de l'échantillon, ce procédé étant caractérisé en ce que le gaz sous pression injecté dans l'échantillon de roche est de l'air sous pression et en ce que l'échantillon revêtu d'au moins une couche métallique est gainé extérieurement d'un fourreau en un matériau thermorétractable imperméable aux fluides.
Dans la présente description et dans les revendications annexées, le terme "air" ne désigne pas seulement de l'air atmosphérique mais engloble également de l'air enrichi ou appauvri en oxygène.
L'échantillon pourra etre constitué par une unique carotte cylindrique prélevée dans un terrain. Le terme "échantillon de roche" doit cependant être entendu comme englobant aussi une pluralité de carottes de forme sensiblement cylindrique, disposées bout à bout et en contact mutuel par des faces planes, comme il est connu dans la technique.
L'injection de l'air comprimé dans la carotte s'effectuera à une pression élevée, représentation des pressions de gisement habituelles et elle pourra atteindre 450 x 105 Pascals (450 bars), voire davantage. Le débit de l'air comprimé sera généralement très faible, de l'ordre de 1 à 1 000 cm3/h à la pression régnant dans l'échantillon de roche et, de préférence, de I à 20 cm3/h.
La contrepression exercée dans l'espace annulaire séparant l'échantillon de roche de l'enceinte sera supérieure de quelques bars (105 Pascals) ou quelques dizaines de bars à la pression d'injection de l'air comprimé dans l'échantillon.
Dans les installations d'un type connu utilisées pour tester la récupération assistée de pétrole à partir d'un échantillon de roche, on exerce habituellement une pression statique à la périphérie de l'échantillon, à l'aide d'un liquide sous pression. Lorsque l'échantillon est disposé verticalement et que l'on opère à chaud, on constate toutefois qu'il existe un gradient de température entre les deux extrémités de l'échantillon, la température à l'extrémité la plus élevée de l'échantillon étant supérieure, par exemple, de 10 à 150C, à celle de 1' extrémité inférieure.
Un tel gradient de température n' est donc pas représentatif des conditions régnant dans un gisement et l'invention vise à remédier à cet inconvénient en proposant d'exercer une contrepression sur l'échantillon de roche en faisant circuler un liquide sous pression dans l'enceinte d'essai entre l'échantillon de roche et cette enceinte. I1 est ainsi possible de réduire à quelques degrés C la différence de température entre les deux extrémités de l'échantillon testé.
La surface extérieure de l'échantillon de roche sera revêtue d'au moins une couche métallique par projection à chaud sur l'échantillon ou sur une sous-couche solidaire de l'échantillon, comme décrit par exemple dans FR-A-2 606 037 précité.
Dans une demande de brevet déposée le meme jour que la présente demande, et intitulée "Procédé de consolidation et d'étanchéification d'un échantillon de roche", la Demanderesse décrit un procédé utilisable dans le cadre de la présente invention et selon lequel, d'une part, préalablement à la métallisation à chaud de cet échantillon, on rend uniforme la surface de celui-ci à l'aide d'un ciment, notamment d'un ciment céramique, destiné à obturer les cavités de cette surface, et, d'autre part, on utilise un fourreau en un matériau thermorétractable choisi dans le groupe comprenant les polyoléfines et les copolymères de fluorure de vinylidène et d'hexafluoropropylène, la face interne de ce fourreau étant de préférence collée contre l'échantillon de roche.
Le procédé conforme à l'invention pourra être mis en oeuvre à une température correspondant à celle régnant dans le gisement de pétrole d'où provient l'échantillon de roche à tester et pouvant atteindre 1300C. Dans ce but, des résistances chauffantes seront avantageusement enroulées autour de l'enceinte d'essai, à l'extérieur de celle-ci, et l'on mesurera la température régnant à chacune des extrémités de l'échantillon afin de réguler la température de chauffage. Le liquide sous pression circulant dans l'espace annulaire qui sépare l'échantillon de roche de l'enceinte d'essai réduira avantageusement le gradient de température d'une extrémité à l'autre de l'échantillon de roche.
L'invention a également pour objet un dispositif pour l'étude en laboratoire de la récupération assistée du pétrole contenu dans au moins un échantillon de roche sensiblement cylindrique, dont la surface externe a été rendue imperméable aux fluides, ce dispositif comprenant - une enceinte d'essai creuse - un moyen de chauffage de cette enceinte disposé à l'extrémité de celle-ci - des moyens pour maintenir l'échantillon de roche à l'intérieur de cette enceinte en une position espacée de la paroi interne de l'enceinte par un espace annulaire - un moyen d'injection de pétrole sous pression dans cet échantillon à une extrémité de celui-ci - un moyen d'injection d'air sous pression dans cet échantillon, de préférence à la même extrémité de celui-ci que celle de l'injection de pétrole sous pression - un moyen de récupération du pétrole et de l'air évacués de l'échantillon à l'extrémité de celui-ci opposée à l'extrémité de l'injection d'air - un moyen d'évacuation à l'extérieur de l'enceinte d'essai du pétrole et de l'air récupérés ce dispositif étant caractérisé en ce qu'il comprend - un moyen d'injection d'un liquide sous pression dans l'espace annulaire séparant l'échantillon de roche de l'enceinte d'essai - et un moyen d'évacuation de ce liquide en dehors de l'enceinte d'essai.
L'enceinte ou cellule d'essai pourra être constituée de façon simple par une structure tubulaire solidaire à ses deux extrémités d' un bâti support.
Le moyen de maintien en position de l'échantillon de roche pourra comprendre, à chaque extrémité de l'échantillon, un flasque coiffant l'extrémité correspondante de l'échantillon.
Un disque poreux sera avantageusement pincé entre chaque extrémité de l'échantillon de roche et le flasque associé, une face plane du disque étant appliquée contre l'extrémité correspondante de l'échantillon. En contact avec chacun des disques poreux pourra avantageusement être prévue une sonde de température, permettant de suivre l'évolution des températures à chaque extrémité de l'échantillon et de régler en conséquence le moyen de chauffage de l'enceinte d'essai et le débit du liquide assurant la contre pression latérale.
Le moyen d'injection du pétrole dans l'échantillon de roche comprendra alors un tube connecté à une source de pétrole sous pression et débouchant contre la face du disque poreux non appliquée contre l'échantillon de roche.
Le moyen d'injection d'air sous pression dans l'échantillon de roche pourra comprendre une canule connectée à une source d'air sous pression et débouchant à l'intérieur du disque poreux.
Les peptides, par exemple un mélange d'extraits de rate et de thymus, Thiolim et sérum albumine bovine non stabilisée.
Les protéines, par exemple l'hémocya nine qui est une protéine cuivrée extraite de l'escargot marin et l'apohemocyanine qui est une protéine analogue sans cuivre.
Les flavonoIdes, notamnent la catéchine, les proanthocyanidines, les flavanols, les flavones, les isoflavones, les flavanénols, les flavanones, les flavanes et les chalcones.
Les caroténordes, notamment le p -carotène et le rocou.