INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'onde hybride inférieure se propage, dans les machines de fusion thermonucléaire, avec une vitesse de phase inférieure à la vitesse de la lumière et donc ne peut être excitée par des ondes rayonnées librement. En revanche, ces rayonnements libres peuvent se propagent autour du plasma dans l'espace libre entre le plasma et les parois conductrices de l'enceinte de la machine, car leurs longueurs tonde (comprises entre 30 et 3 cm) sont généralement plus petites que les dimensions de cet espace libre. Mais la propagation de rayonnement libre autour du plasma ne sert pas à chauffer le plasma, et représente une perte de rendement en ce qui concerne le chauffage.
La solution connue de 11 art antérieur consiste à faire l'application de l'énergie hyperfréquence à l'aide d'un organe appelé un "grill" qui est capable d'exciter des ondes lentes dans le plasma. Le grill comporte de nombreuses ouvertures de guides d'ondes adjacents qui répartissent l'énergie sur un espace étendu à l'intérieur de la machine avec des phases convenables.
Un exemple d'un tel grill connu de l'art antérieur est montré sur la figure la. L'énergie hyperfréquence provenant des sources (non montrées) à très haute puissance est injectée via les brides 1 et traverse des fenêtres hyperfréquence 2 pour rentrer dans le grill. Le grill est évacué avant et pendant I'utilisation par le raccordement 3 prévu à cet effet. L'énergie provenant de chaque source est ensuite divisée dans les diviseurs de puissance 4 et véhiculée vers la machine (un Tokamak, non montré). Les coupleurs 5 permettent de prélever une petite partie de la puissance véhiculée pour effectuer des mesures dans chaque guide après division. Les phases sont ajustées dans la région 6 pour compenser les différences de longueurs des chemins parcourus par les différentes ondes.
Ensuite l'énergie propage vers les guides d'ondes 8 à travers des "tapers" ou adaptateurs de section 7. Les guides provenant d'un seul diviseur sont sensiblement parallèles et adjacents les uns aux autres dans un plan ; dans l'exemple de la figure la il y en a six pour chaque diviseur. Par une sinuosité entre les tapers 7 et la bride de raccordement 9, les guides provenant de diviseurs différents sont emmenés ensemble pour se trouver tous parallèles et adjacents les uns aux autres dans une disposition suivant un rectangle : dans un sens (y), autant de guides que de divisions dans chaque diviseur (six dans l'exemple de la figure la) et dans l'autre sens (z), autant de guides que de diviseurs (quatre dans l'exemple de la figure la).
Dans le cas plus général discuté ci-dessous, on peut considérer un rectangle de m x N guides, avec m guides provenant de chaque diviseur, disposés selon y, et N guides disposés selon z (qui proviennent de N = 4 diviseurs dans l'exemple de la figure 1). Dans la discussion qui suit, on fait abstraction des sources et des diviseurs, car l'invention de situe en aval de ces composants. On considérera donc la répartition du couplage d'énergie hyperfréquence véhiculée dans un réseau de m x N guides disposés dans un rectangle à leur embouchure aval.
Revenant à la figure 1, et partant de la bride 9, les guides restent parallèles et adjacents dans la région droite 12 jusqu a la fenêtre hyperfréquence 13 épaisse. Cette partie droite 12 pénètre vers l'enceinte du Tokamak par un hublot il (montré en écorché sur la figure la), et sera soutenue mécaniquement par un soufflet métallique 10.
L'enceinte d'un Tokamak a la forme d'une toroide > et l'extrémité du grill comporte une courbure pour épouser la courbure de la paroi du Tokamak. Sur les figures la et lb, on a porté des références à des axes cartésiens .y. z qui seront utiles pour une description mathématique qui suivra, des interactions entre le plasma et les ondes propageant dans les guides du grill selon la direction x (perpendiculaire aux axes y, z, non montrée). La figure lb montre dans un détail de la figure la, des ouvertures 14 des guides d'onde du grill vu de l'intérieur du Tokamak. La disposition du grill des figures la, lb par rapport à la chambre toroidale d'un tokamak est montrée sur les figures 2a, 2b.
La figure 2a montre la toroide en coupe sur l'axe principal (trait pointillé), dans le plan x, y. La partie hachurée représente le plasma 16 à l'intérieur de la machine, confiné par des forces magnétostatiques provenant des aimants supraconducteur (non montrés) autour de la toroide, en dehors de sa paroi 15. Les ouvertures 14 du grill arrivent sur le côte de la paroi 15 pour injecter la puissance hyperfréquence véhiculée par le grill vers le plasma 16 selon l'axe x. L'axe , porté ici pour mémoire, a la même orientation que dans les figures la, lb.
La figure 2b montre la toroide en coupe perpendiculaire à la coupe de la figure 2a, dans le plan x, z. Comme dans la figure 2a, on voit que le plasma 16 est confiné à l'intérieur de la paroi 15, laissant un espace essentiellement vide autour du plasma entre le plasma 16 et la paroi interne 15 de la toroide.
Comme dans la figure précédente, les ouvertures 14 du grille arrivent sur le côté de la paroi 15. L'énergie hyperfréquence doit donc traverser cet espace, selon l'axe x pour exciter le plasma. L'axe z porté ici pour mémoire, à la même orientation que dans les figures la, lb.
Procédé de dosage de l'activité SOD utilisant la braziline ou ltun de ses dérivés, nécessaires pour sa mise en oeuvre, composés dérivés de la braziline et leur préparation.
La présente invention concerne le dosage de l'activité superoxyde dismutase (SOD).
Elle a plus particulièrement pour objet un nouveau procédé de dosage de l'activité SOD, notamment dans des échantillons biologiques, à l'aide de la braziline ou de l'un de ses dérivés définis plus loin, des nécessaires ou kits pour la mise en oeuvre de ce procédé et des nouveaux dérivés de la braziline utilisables dans ce procédé ainsi que leur préparation.
Les tissus des organismes aérobies et ceux de l'organisme humain en particulier, sont le siège d'une production continue d ion superoxyde 2--, qui résulte du processus de respiration cellulaire, ainsi que de nombreuses voies métaboliques essentielles.
Cette production de superoxyde augmente fortement lorsque ces organismes sont soumis à un "stress oxydant" d'origine toxicologique (hyperoxie, irradiation, intoxication par des xénobiotiques générateurs de radicaux libres, notamment) ou physiopathologique (inflammation, ischémie, reperfusion post-ischémique, notamment).
I1 est admis par ltensemble de la communauté scientifique que 1 ion superoxyde est très toxique, bien que les mécanismes sous-jacents à cette toxicité restent sujets à controverse (référence 1).
Pour se protéger contre les effets délétères de l'ion superoxyde, les organismes aérobies possèdent des systèmes enzymatiques, les superoxyde dismutases (SOD), qui catalysent la dégradation de l'ion superoxyde selon la réaction de dismutation suivante
Compte tenu du rôle protecteur majeur de cette réaction de dismutation vis-à-vis de la toxicité de l'ion superoxyde, l'activité catalytique des SOD intra- et extracellulaires conditionne la survie des tissus d'un organisme aérobie (références 2 à 5).
Une méthode de dosage de l'activité SOD serait un outil analytique d'intérêt majeur pour les chercheurs biologistes comme pour les laboratoires de Chimie Clinique, à condition d'être sensible, spécifique, rapide et peu complexe.
De nombreuses méthodes de dosage de l'activité SOD ont été publiées et critiquées (références 6 à 10), mais il est généralement admis qu'il n'existe toujours pas de compromis satisfaisant entre fiabilité et complexité des méthodes existantes car la mesure d'une activité SOD pose deux problèmes majeurs qu'aucune des méthodes publiées à ce jour n'a permis de résoudre de façon simple.
Le premier problème est celui de la décomposition spontanée de l'unique substrat, l'ion superoxyde, qui est très rapide à pH voisin de 7, et qui bien que fortement ralentie, reste significative à pH 9, pH au-delà duquel certains types de SOD naturelles sont rapidement inactivées.
L'obtention d'une concentration stationnaire suffisamment stable requiert donc la présence d'une source dynamique de superoxyde dans la solution de dosage.
Les sources électrolytiques requièrent un équipement complexe et une préextraction du catalyseur SOD, ce qui est prohibitif en Chimie Clinique.
Les sources photochimiques telles que la riboflavine conduisent à des méthodes non standardisables et de mise en oeuvre complexe.
Les sources enzymatiques telles que la xanthine oxydase requièrent des solutions à préparer extemporanément.
Elles sont chères, source d'artéfacts et difficilement automatisables.
Dans le cas d'un contrôle du débit de fuite sous forte pression sans blocage du déplacement du piston, des efforts importants sont susceptibles d'être transmis aux éléments extérieurs à l'amortisseur. Pour déterminer le débit de fuite sous charge maximale, on applique une charge intermédiaire correspondant à environ 20 % de la charge maximale et on effectue une extrapolation.
Dans un premier temps, on règle le clapet de purge à la pression de sécurité et on assure la connexion entre les tuyauteries de raccordement et les chambres de l'amortisseur.
On met en fonctionnement le banc d'essai hydraulique, puis on augmente progressivement le débit de fluide hydraulique pour fermer les clapets d'obturation du diaphragme ; on continue à augmenter le débit, jusqu'à ce que la pression interne de l'amortisseur atteigne le point de réglage du clapet de purge.
Lorsque le débit de fluide hydraulique à la pression maximale est stabilisé, on enregistre en temps réel le déplacement du piston 5, en utilisant le capteur de déplacement 24.
On mesure le débit de la pompe du banc d'essai et on soustrait de ce débit, le débit de fluide hydraulique correspondant au déplacement du piston 5, pour obtenir le débit de fuite circulant au travers du diaphragme 16.
On enregistre le débit de fuite et la pression d'alimentation de l'amortisseur.
On obtient le débit de fuite sous charge maximale, en extrapolant les résultats se traduisant par une courbe débit de fuite en fonction de la pression.
Après arrêt du banc d'essai, on remet le circuit à la pression atmosphérique et on effectue la déconnexion des tuyauteries souples.
Dans le cas du contrôle du débit de fuite sous faible pression, les faibles pressions utilisées sont déterminées au préalable, pour s'assurer que les effets résultants ne sont pas susceptibles d'entraîner un déplacement des éléments extérieurs à l'amortisseur.
Le contrôle est effectué suivant une procédure identique au contrôle effectué sous forte pression.
Cependant, on n'a pas à effectuer de correction du débit de fuite, en fonction du déplacement du piston.
La mesure précise de la pression et du débit de fuite permet de déterminer la valeur du coefficient K apparaissant dans la loi de variation du débit en fonction de la pression.
On en déduit par extrapolation le débit maximal à la pression maximale d'utilisation.
Pour effectuer le contrôle du débit de fuite sous forte pression avec blocage du déplacement du piston de l'amortisseur, on utilise un dispositif de blocage tel que représenté sur la figure 4 ou sur la figure 6.
Le dispositif de blocage représenté sur la figure 4 et désigné de manière générale par le repère 35 comporte trois parties 36, 37 et 38 en forme de fourches susceptibles de se déplacer l'une par rapport à l'autre de manière à réaliser un réglage de l'écartement des pièces extrêmes 36 et 38.
Les pièces 36 et 38 sont montées mobiles l'une par rapport à 1 ' autre dans la direction de 1 ' axe 40, par l'intermédiaire de moyens d'assemblage constituant une glissière 41.
que d'appui 17 et qu'un volant à main 18 puisse être vissé
sur le f iletage terminal Le tenon de guidage 14 est dimen-
sionné de façon à s'engager dans l'ouverture longitudinale du guidechaîne, permettant ainsi un guidage longitudinal
exact du guide-chaîne 12 ainsi que la résorption de couples.
A côté de l'ouverture longitudinale 15 du guide-
chaîne 12 se trouvent deux ouvertures 19 sous forme de peti-
tes forures dans lesquelles s'engagent de manière ajustée des saillies 21 disposées latéralement aux extrémités des branches 20 d'un coulisseau 8 en U Le coulisseau 8 en U présente sur son arc 22 un tenon 9 qui fait saillie sur le coulisseau du côté éloigné du guide-chaîne 12 Ce tenon 9 s'engage dans une rainure de guidage curviligne 5 ménagée dans le disque rotatif 16 La rainure de guidage 5 s'étend sur un angle de rotation d'environ 3900 En l'occurrence, une extrémité 6 de la rainure de guidage 5 se trouve à une distance minimale et l'autre extrémité 7 à une distance maximale du centre de rotation D Lorsqu'on fait tourner le disque 16 le mouvement de rotation est transformé, du fait du tenon 9 s'engageant dans la rainure de guidage 5, en un coulissement longitudinal du coulisseau 8, ce qui détermine
à son tour un coulissement de même importance du guide-
chaîne 12 Le trajet de coulissement total possible est dé-
terminé par la différence entre la distance minimale et la
distance maximale par rapport au centre de rotation.
Le disque rotatif 16 présente sur son bord des
creux régulièrement répartis 23 qui assurent une bonne mani-
abilité lors du réglage de la tension de la chaîne Pour pouvoir être monté sur le boulon 13 le disque 16 présente un trou central 24 La plaque d'appui 17 et le volant à main 18 sont prévus pour permettre à la tension réglée de la chaîne d'être rendue fixe La plaque d'appui 17 présente un trou , à travers lequel passe le boulon 13, et une saillie 26 orientée en direction de l'enveloppe 10 et qui s'engage dans une ouverture correspondante 27 de l'enveloppe, empêchant ainsi la plaque d'appui, à savoir le couvercle 17 de la roue
à chaîne, de tourner La plaque d'appui 17 est appuyée con-
tre le disque 16, au moyen du volant à main 18 susceptible
Le support solide défini dans l'exemple II a été utilisé.
II-4.2) Synthèse autcmatisée de tdT5 (SrT) dT6 Les mêmes conditions de synthèse mises au point pour la synthèse de B ( SrT)1 dT11 ont été utilisées.
Le dosage des cations diméthoxytrityles libérés à chaque étape de détritylation a permis d'évaluer le rendement moyen d'incorporation de l'unité 2'-désoxythymidine à 99,3 % et à 96,1 % pour le synthon 4'-thiothymidine II-4.3) Décrochage et purification du pdT5 (SrT) dT6 Le traitement de cet oligomèrea été effectué selon le protocole mis au point dans l'exemple II. L'analyse et la purification CLHP, réalisée dans les mêmes conditions de gradient révèle un temps de rétention de 13,18 minutes et une pureté spectrophotométrique à 260nm de 100 %.
III. SYNTHESE AUTOMATISEE DE 4'-THIOOLIGORIBONUCLEOTIDES ET OLIGOMERES MIXTES On dércrit la synthèse d'un 4'-thio-ribo-oligomère homogène 1 dirigé sur la séquence acceptrioe d'épissage du gène tat du VIR. On-montre qu'il est ensuite possible d'obtenir des oligomères mixtes comprenant une séquence limitée d'ADN présentant des liaisons phosphodiesters ( séquence 4 ) ou phosphorothioates ( séquence 5 ).
De telles séquences mixtes 5'-(4'-S-ARN / ADN / 4'-S-ARN)-3' 4 et 5 peuvent être utilisées dans une approche antisens et sont susceptibles d'être hautement sélectives dans la mesure où la "fenêtre" de structure ADN sera seule substrat de la RNAse H après appariement de l'antisens avec une cible complémentaire. Il est à noter que la "fenêtre" ADN (phosphodiester ou phosphorothioate) peut être de longueur variable - dans les séquences 4 et 5 il y a six désoxynucléotides - et que cette "fenêtre" peut être incluse à n'importe quelle position de l'oligomère, même aux extrémités 5' et / ou 3'.
Complémentairement, cette possibilité ouvre la voie à la conception de ribozymes artificiels (homogènes ou non) comportant des séquences d'oligo-ribonucléotides 4'-ARN.
On a synthétisé un certain nombre de 4'-thio-oligoribonucléotides homogènes (4'-S ARN) sur un synthétiseur à ADN (Applied Biosystems modèle 381A) en utilisant le procédé général décrit pre'ced'ereet.
C'est le cas notamment: du 4'-Sr-(A-C-A-C-C-C-A-A-U-U-C-U), 1 du 4'-Sr-(U-U-U-U-U-U), (4'-SrU6), 2 et du 4'-Sr-(U-U-U-U-U-U-3'-P-CH2-CH2-CH2-OH). (4'-SrU6-3'n-prOH), 3.
L'expression 4'-Sr veut dire : oligoribonucléotide de configuration ss où l'oxygène du cycle furannose des sucres est remplacé par un atome de soufre.
3'n-prOH signifie qu'une fonction n-propanol est fixée sur le groupement phosphate introduit à l'extrémité 3' de l'oligoribonucléotide.
De plus; des oligomères mixtes comprenant des séquences d'oligodésoxynucléotides phosphodiester ou phosphorothioate ont été obtenus et les modifications apportées au cycle d'élongation sont décrites en prenant comme exemple les séquences suivantes: 4'-Sr-(U-U-U)-d(T-T-T-T-T-T)-4'-Sr-(U-U-U)/P11, [4'-SrU3-dT6-4'-SrU3/P11], 4.
et 4'-Sr-(U-U-U)-d(T-T-T-T-T-T)-4'-Sr-(U-U-U)/F3PS5P3, [4'-SrU3-dT6-r'-SrU3/P3PS5P3], 5.
où 4'-Sr a déja été défini comme précedemment, Px correspond au nombre de liaisons phosphodiesters entre les unités nucléotidiques et PSy au nombre de liaisons phosphorothioates entre les unités nucléotidiques.
Les thiooligoribonucléotides ont été synthétisés sur un synthétiseur à ADN (Applied Biosystems modèle 381 A).
111-1) Synthèse des 4r-fhiooligoribonucléotides : 4'-Sr(A-C-A-C-C-C-A-A-U-U-C-U), 1, 4-SrU6, 2 et 4'-SrU6-3'n-prOH, 3.
Le cycle d' élongation comporte quatre étapes importantes: a) Détritylation du nucléoside ou de l'oligonucléotide fixé sur le support solide dans le cas de 4'-SrU6 et de 4'-Sr-(A-C-A-C-C-C-A-A-U-U-C-U), ou bien détritylation du bras n-propanol fixé sur le support solide ou de l'oligonucléotide fixé sur le lien n propanol dans le cas de 4'-SrU6-3'n-prOE.
Par suite, la présence de Fg ou de l'un de ses dérivés, soit au cours de l'étape (1 ) dans le milieu de multiplication des BL, qui est constitué de l'échantillon de levures à tester, d'une part, et du milieu nutritif de multiplication, d'autre part, soit au cours de l'étape (2 ) dans le milieu de filamentation qui est constitué au départ des BL qui ont déjà été multipliées et qui proviennent de l'échantillon de levures à tester, d'une part, et du milieu nutritif favorisant la filamentation, d'autre part, va fausser la mesure de l'adhérence (i.e.
l'affinité) ou de la non-adhérence (i.e. l'absence d'affinité) de l'étape (4"), dès lors que à l'étape (3 ) il y aura compétition entre (a) ladite substance (F) (i.e. le Fg ou l'un de ses dérivés, de préférence fixé sur un support inerte) que l'on ajoute à l'étape (3 ), et (b) le Fg ou l'un au moins de ses dérivés déjà présent(s) à l'étape (1 ) ou à l'étape (2").
En conséquence, il convient selon l'invention que le milieu de multiplication des BL et le milieu de filamentation desdites BL soient dépourvus ou essentiellement appauvris en substance(s) pouvant interférer avec ladite substance (F) au cours de la réalisation de l'étape (3 ).
Parmi les produits ou substances pouvant interférer avec ladite substance (F), on peut notamment citer le fibrinogène et ses dérivés, à savoir - la fibrine, - les FDP particuliers que sont les fragments D, E, X et Y, - les FDP globaux que sont les produits de dégradation FgDP et FnDP, d'une part, et, le cas échéant, - les protéines de l'inflammation, - les composés antifongiques, et - les anticorps anti(levure), d'autre part.
Les substances interférentes énumérées ci-dessus ou certaines d'entre elles peuvent être présentes dans le sang total ou le plasma sanguin, d'une part, ainsi que dans les échantillons de levures qui ont été prélevés, d'autre part. Ainsi, le sang et le plasma contiennent en général du fibrinogène et le cas échéant un ou plusieurs de ses dérivés, et notamment dans les cas pathologiques des protéines de l'inflammation et/ou des anticorps anti(levure) [notamment des anticorps anti(Candida) dans les cas de candidoses] ; et les prélèvements de souches de levures de la famille des Candida peuvent contenir un composé antifongique tel que le cycloheximide qui inhibe la plupart des levures et en particulier les Candida à 1 'exception des souches de Candida albicans et de quelques souches de Candida zeylanoides (voir à cet effet la demande de brevet français No 90 03 726 du 23 mars 1990 de la demanderesse).
Dans la pratique de l'invention, on évite la présence de substance(s) interférente(s) dans le milieu nutritif de multiplication des BL et dans le milieu nutritif de filamentation des BL déjà multipliées grâce au choix approprié desdits milieux nutritifs. Par ailleurs, en fonction de l'origine de l'échantillon de levures à tester, il peut être impératif de diluer ledit échantillon pour l'appauvrir en substance(s) interférente(s).
Les milieux nutritifs de multiplication et de filamentation peuvent être liquides (i.e. milieux aqueux dits homogènes ou monophasiques) ou hétérogènes (i.e.
milieux aqueux contenant une ou plusieurs matières solides et dits diphasiques). La multiplication et la filamentation peuvent être réalisées de façon aérobie ou anaérobie. On préfère selon l'invention les milieux aqueux monophasiques aérobies.
Par ailleurs, s'il est possible dans certains cas de procéder simultanément à la multiplication et à la filamentation, il est plus sûr et plus efficace de procéder à la multiplication (quand elle est nécessaire) puis à la filamentation. On recommande donc, notamment pour les hémocultures, de séparer les deux étapes : d'abord la multiplication puis la filamentation.
Une hémoculture consiste à prélever du sang (sang total ou plasma) et à faire pousser les microorganismes qu'il contient, à savoir les bactéries (hémoculture bactérienne) ou les levures (hémoculture fongique), la pousse des levures étant effectuée en présence d'un moyen antibactérien pour inhiber le développement des bactéries ou détruire lesdites bactéries dès lors qu'elles croissent généralement avant ou plus rapidement que les levures. Si nécessaire, les souches de levures qui ont poussé au cours de l'hémoculture fongique sont ensuite, soit isolées pour identification, soit identifiées sans isolation (quand il s'agit de Candida) selon l'enseignement de la demande française No 90 03 726 précitée.
On sait que l'hémoculture fongique (désignée ciaprès "hémoculture" par commodité) est réalisée de façon standardisée sur un prélèvement de sang (sang total ou plasma) préalablement dilué à 10-1 dans un milieu nutritif de multiplication et/ou filamentation. Généralement un tel milieu est le milieu de Sabouraud ou le milieu trypticase-soja, additionné de SPS, de EDTA ou de citrate de sodium. Cependant, un tel milieu qui permet la croissance des champignons ne conduit pas toujours à l'obtention des formes filamentaires, notamment dans le cas de certaines souches de Candida par exemple.
Or, il se trouve que la dilution de 10-1 comporte une teneur en substance(s) interférente(s) trop importante. Selon l'invention, pour disposer dans le cadre d'une hémoculture d'un échantillon essentiellement appauvri en substance(s) interférente(s), il est critique d'utiliser à l'étape (1 ) ou à l'étape (2 ) un échantillon de sang préalablement dilué au moyen d'un milieu nutritif aqueux de multiplication ou de filamentation jusqu'à une dilution de x-l, où x est un nombre supérieur ou égal à 50, c'est-à-dire par exemple une dilution allant de 50-1 à notamment 150-1 ou 200-1.
L'étape (1 ) a pour objet la multiplication des BL jusqu'à ce que l'on obtienne une population supérieure ou égale à 10Q levures/ml (i.e. 104 blastospores/ml) et de préférence une population supérieure ou égale à 105 levures/ml (i.e. 105 blastospores/ml). La durée de l'étape (1 ) est en général inférieure ou égale à 48 h à une température comprise entre 25 et 400 C, de préférence à 37 C, lorsque ladite étape (1") est mise en oeuvre.
Le milieu de multiplication des BL, qui est préféré selon l'invention, surtout pour les hémocultures, est constitué par un milieu aqueux, à savoir le milieu de Shadomy (qui renferme YNB, glucose et asparagine) enrichi en extrait de levure (1 à 4 g/l) et, si nécessaire, complémenté en saponine, urée et/ou antibactérien.
L'étape (1 ) peut être supprimée quand on dispose déjà d'un échantillon de souches de levures ayant la population requise précitée et qui est dépourvu ou essentiellement appauvri en substance(s) interférente (s).