INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Seules les pousses vertes sont repiquées dans un système de culture SORBAROD. Le système de culture SORBAROD consiste en une mini-serre fermée et stérile contenant des cylindres de cellulose humidifiés avec du milieu M3 (macro-éléments, micro-éléments, Fe-EDTA et vitamines du milieu MS) additionné de 10 g/l de saccharose. La mini-serre est perforée de 3 orifices recouverts d'une membrane assurant les échanges gazeux et équilibrant l'humidité relative intérieure avec l'humidité relative extérieure.
Les pousses vertes issues de la troisième culture sont plantées dans des cylindres de cellulose et installées dans les mini-serres SORBAROD (Figure 4).
Les mini-serres sont placées dans une chambre de culture (16 h lumière 23"C, 15 p Einstein / m2, et 8 h d'obscurité, 21"C). Après 30 jours d'incubation, les plantes transformées s'enracinent et se développent.
Le milieu M3 est ensuite éliminé par pipettage et les cylindres sont rincés 3 fois à l'eau distillée stérile puis les cylindres sont humectés avec du milieu M4 (macro-éléments, micro-éléments, Fe-EDTA et vitamines du milieu MS) dépourvu de saccharose. Après 10 jours de culture en chambre de culture, les plantes développent de larges feuilles et atteignent une taille de 2 à 3 cm. Les mini-serres SORBAROD sont transférées en serre (température 26"C - photopériode 16 h / 8 h) pendant 10 jours. Pendant cette période, les plantes enracinées se développent et s'acclimatent au conditions de serre. Ensuite, les cylindres portant les plantes de tournesol ayant développé des racines et des feuilles sont placées dans des pots contenant de la tourbe arrosée avec une solution de type COIC et LESAINT (1971 - Hortic. Fr., 8 : 11).
Les plantes non enracinées sont greffées sur des tiges de porte-greffes (tournesol non transformé stade 4 à 6 feuilles après la levée). La base de la tige de la plante transformée est coupée en biseaux et placée dans une fente réalisée sur la tige du porte-greffe.
Le greffon est fixé au porte-greffe par un lien de raffia et entouré d'un sac plastique. Après la prise du greffon, les feuilles et la tige se développent et le sac plastique est enlevé. Les porte-greffes et les greffons sont ensuite conduits en serre avec un arrosage avec la solution nutritive de type COIC et LESAINT (1971 - Hortic. Fr., 8 : 11).
Les plantes de tournesol croissent, fleurissent et sont autofécondées. Les graines de chaque plante transformée sont récoltées pour analyse de la ségrégation du gène de résistance à la kanamycine et du gène GUS (voir, exemple 8).
Exemple 4 : Influence de la souche bactérienne et du plasmide binaire sur l'efficacité de transformation génétique des feuilles issues de demi-méristèmes.
Les feuilles issues de demi-méristèmes sont bombardées et cocultivées avec différentes souches - LBA 4404 contenant le plasmide binaire PGA 492-GI (décrit dans l'exemple 1, partie 1.3) - GV 2260 contenant le plasmide binaire p35S GUS intron (VANCANNEYT et al, 1990 - Mol. Gen. Genet, 220 : 245-250) - C58'3 (MULLINEAU et al, 1989 - Plant Sci, 63 237-245) contenant le plasmide pGA 492-GI (Cf exemple 1, partie 1.3).
Après 6 semaines de culture des feuilles (selon le protocole décrit dans l'exemple 3) sur milieu sélectif contenant 100 mg/l ou 200 mg/l de kanamycine, les pousses vertes résistantes à la kanamycine sont soumises à un test d'expression de l'activité glucuronidase. Lorsque les cellules expriment l'activité glucuronidase, cette activité est notée activité GUS +. Le protocole pour tester l'activité glucuronidase est décrit dans l'exemple 1, partie 1.5.
Les résultats sont présentés dans le tableau 3.
Enfin, le circuit 6 de combinaison de signaux est remplacé par le circuit de soustraction 83.
On voit donc que le conformateur numérique de bruit 80 de la figure 5 est un équivalent fonctionnel du convertisseur sigma-delta 1 de la figure 1. A cet égard, le conformateur numérique de bruit 80 interpole et suréchantillonne le signal Xin à n bits de manière à produire un signal de sortie Yout qui fournit un estimation à m bits du signal d'entrée Xin. L'erreur de quantification résultant du processus d'échantillonnage est rejetée vers les fréquences plus élevées par l'intégrateur qui est utilisé pour réaliser la conversion sigma-delta.
Sur la figure 5, les m bits Ymsb les plus significatifs du signal Xint sont soustraits du signal d'entrée Xin à n bits par le bloc de soustraction 83, à la suite de quoi l'intégrateur 81 additionne Xint au signal résultant. Ceci constitue un équivalent de l'addition directe de (n-m) bits Ylsb les moins significatifs du signal Xint au signal Xin. La figure 6 montre un conformateur numérique de bruit 90 dans lequel cette simplification a été mise en oeuvre. Le conformateur numérique de bruit 90 comprend le registre numérique 84, le troncateur 82 et le circuit d'addition 85 de la figure 5 cependant que dans ce mode de réalisation de l'invention1 les bits Ylsb les plus significatifs sont accumulés jusqu'à ce qu'ils produisent un dépassement du signal Ymsb et soient ainsi transférés vers la sortie de l'écrêteur Yout.
Comme le convertisseur sigma-delta 20 de la figure 3, le convertisseur 90 mémorise ainsi l'erreur de conversion entre son signal d'entrée et son signal de sortie. Dans une application qui nécessite plusieurs plages de signaux d'entrée, une variation du gain du signal d'entrée altère la relation entre la fonction de l'intégrateur et la valeur numérique stockée dans l'accumulateur1 ce qui peut être évité en multipliant l'erreur de conversion par le rapport du gain nouveau au gain ancien.
La figure 7 montre un mode de réalisation du convertisseur sigma-delta 71 à plages multiples de la figure 4. Ce dernier comprend le convertisseur 90 de la figure 6 et deux circuits de multiplication 91 et 92. Le circuit de multiplication 91 multiplie le signal d'entrée Xin par le signal de gain G(k) choisi provenant du bus 75.
La valeur du gain G(k) peut être changée en fonction du choix de la plage du signal d'entrée du convertisseur 71.
Comme l'erreur entre le signal d'entrée Xin et le signal de sortie Yout est accumulée dans l'accumulateur numérique 84 avec un gain qui dépend de la plage choisie, le changement de la plage du signal d'entrée introduit du bruit de commutation dans l'erreur de conversion mémorisée. Pour éviter ce bruit de commutation, le circuit de multiplication 92 est connecté dans le circuit de contre-réaction entre le troncateur 82 et le circuit d'addition 85, afin de multiplier le signal Ylsb par le rapport du nouveau gain G(k) à l'ancien gain G(k-1).
Bien que ceci ne soit pas essentiel pour l'invention, l'accomplissement de cette multiplication est simplifié si les valeurs du gain sont limitées à des puissances de 2.
Dans ce cas, la position des bits dans chacun des mots numériques Xin et Ylsb peut être décalée d'un nombre approprié d'emplacements. Ceci peut être réalisé, de préférence, en utilisant des registres à décalage, les signaux de gain G(k) et G(k)/G(k-1) déterminant le nombre de positions dont les bits doivent être décalés.
Un autre mode de réalisation de la présente invention sera maintenant décrit en faisant référence à la figure 8 qui montre d'une façon générale, un convertisseur sigmadelta A/D 100 comprenant l'intégrateur 22, le comparateur 23 et un amplificateur 27 du signal de sortie du convertisseur sigma-delta 20. Le fonctionnement de ces composants a déjà été décrit à propos de la figure 3. En outre, le convertisseur sigma-delta 100 comprend un circuit 101 de combinaison de signaux, un amplificateur 102 du signal de réaction, un circuit de réglage de plages 103 et un circuit de contre-réaction 104.
L'amplificateur de contre-réaction 102 comprend quatre condensateurs 105, 106, 107 et 108. Les armatures de ces condensateurs sont respectivement reliées aux bornes d'interrupteurs 109, 110, 111 et 112. Les autres bornes de ces interrupteurs sont reliées ensemble à l'entrée non-inverseuse d'un amplificateur opérationnel 37 par l'intermédiaire de l'interrupteur 56. La tension Vref présente aux bornes 52 et 53 est appliquée sur un ou plusieurs des condensateurs 105, 106, 107 et 108. De préférence, ces condensateurs ont la même valeur Cref Le circuit de réglage de plages 103 comprend un circuit de commande d'interrupteurs 113 ainsi que des interrupteurs 109, 110, 111 et 112. Le circuit 113 présente quatre sorties 113a, 113b, 113c et 113d pour commander le fonctionnement respectivement des interrupteurs 109, 110, 111 et 112. Le fonctionnement des interrupteurs est commandé sélectivement en fonction du signal de gain provenant du bus 45 de sorte que toute combinaison des condensateurs 105, 106, 107 et 108 peut être connectée de manière à recevoir la tension Vref. La charge emmagasinée entre les armatures des condensateurs connectés en parallèle peut ainsi être égale à Cref*Vref, 2Cref*Vref, 3Cref*Vref ou 4Cref*Vrefî en fonction du gain qui est présent sur le bus 45.
Le signal d'entrée Vin présent entre les bornes 40 et 41 est appliqué aux bornes d'un condensateur 114 dont la valeur est Cin, au moyen des interrupteurs 42 et 43. Une charge Qin égale à Vin*Cin est ainsi produite entre les armatures du condensateur Cin. Cette charge est appliquée à l'entrée inverseuse de l'amplificateur opérationnel 37 par l'intermédiaire de l'interrupteur 39.
Le circuit de contre-réaction 104 comprend un circuit de commande 115, des bornes 52 et 53, les contacteurs 39, 54, 55 et 56 et la source de tension Vref. Le circuit de commande 115 détecte le mot numérique à la sortie de l'amplificateur 27 du signal de sortie, ce mot résultant de la multiplication de l'information numérique dans le train de bits provenant du comparateur 23 par l'inverse du gain sur le bus 45. Le circuit de commande 115 présente des sorties 115a et 115b pour permettre la commande du fonctionnement des interrupteurs 54 et 55, respectivement.
La charge G*Qref est intégrée soit positivement soit négativement en fonction de la valeur +1 ou -1 du bit produit à la sortie du comparateur 23, grâce à la commande du fonctionnement des interrupteurs 54 et 55. La différence entre les charges Qin + G*Qref est emmagasinée entre les armatures du condensateur 38 et elle est ainsi intégrée par l'amplificateur opérationnel 37.
Comme décrit précédemment à propos de la figure 3, le convertisseur sigma-delta 100 est stable tant que la charge Qin est inférieure à la valeur absolue de la charge de réaction Qref. La tension maximale admissible du signal d'entrée Vin, en tant que valeur absolue, est donnée par Vinmax = Vref*(N Cref/cin) où N est le nombre de condensateurs aux bornes desquels est appliquée la tension de contre-réaction Vref. La plage du signal d'entrée pour le signal d'entrée Vin peut ainsi être choisie selon le nombre N de condensateurs 105, 106, 107 et 108 connectés en parallèle.
Comme décrit précédemment, le condensateur 38 de l'intégrateur 22 accumule la différence entre le signal d'entrée analogique et le signal de sortie numérique reconverti sous forme analogique. Dans le convertisseur sigma-delta 20 représenté à la figure 3, le bruit de commutation est introduit au moment où la plage du signal d'entrée est modifiée en raison de l'altération de la relation entre le gain du signal d'entrée Vin et l'erreur de quantification emmagasinée par le condensateur 38. Ce bruit est évité par la multiplication de l'erreur de quantification par le rapport du nouveau gain à l'ancien gain.
- Groseilles Ribes species - Framboises Rubus idaeus L.
- Mûres Rubus species et Morus species - Myrtilles ou airelles Vaccinium species - Fraises Fragaria species - Arbouse Arbutus unedo L.
- Baies de sureau Sambucus species DES FRUITS DE ROSACÉES Par exemple, églantiers, sorbiers, pommiers, pruniers, cerisiers ...
DES FRUITS DE RUTACÉES Par exemple, orangers, mandariniers, citronniers ...
DES FRUITS EXOTIQUES - Papaye Carica papaya L.
- Kaki Diospyros kaki L.f.
- Feijoa Feijoa sellowiana Berg.
- Fruit de la passion Passiflora edulcis Sims - Goyaves Psidium species - Jujube Zizyphus jujuba Mill.
- Mangue Mangifera indica L.
- Tamarin Tamarindus indica L.
- Kiwis Actinidia chinensis Planchon - Litchis Nephelium litchi G. Don.
DES FRUITS OLÉAGINEUX - Olive Olea europea L.
- Avocats Persea americana Miller - Noix Juglans species - Noix de pécan Carya illisensis (Wangenh-) K. KOCH - Noisettes Corylus avellana L.
- Amandes Prunus amygdalus Batsch - Noyaux de rosacées Prunus species - Fruits de crucifères Brassica species - Arachide Arachis hypogaea L.
- Maïs Zea mays L.
- Ricin Ricinus communis L.
De même, I'insert de l'élément distal a une forme quatriangulaire.
L'ensemble est réalisé de préférence en titane, à l'exception de l'insert réalisé en polyéthylène.
La présente invention a également pour objet un matériel ancillaire simple permettant la mise en place de cette prothèse.
Outre des mèches pour l'alésage des diaphyses et les fraises sphériques pour le creusement de l'épiphyse proximale, il comprend deux pièces présentant à leurs extrémités les caractéristiques inverses (mâle et femelle) des prothèses.
D'autres caractéristiques de la prothèse vont maintenant être décrites, mais sans caractère limitatif, en référence aux dessins annexés sur lesquels - La figure 1 représente une vue de dessus de la prothèse articulaire de l'invention.
- La figure 2 représente une vue latérale de cette même prothèse articulaire.
- La figure 3 représente une vue de dessous de l'élément proximal.
- La figure 4 représente une vue latérale de cet élément proximal.
- La figure 5 représente une vue de dessus/dessous de l'élément distal - La figure 6 représente une vue latérale de cet élément distal.
- La figure 7 représente une vue latérale de la prothèse articulaire de l'invention en position fléchie.
- La figure 8 représente une vue de dessus de la prothèse articulaire de l'invention avec débattement latéral.
- La figure 9 représente une vue de l'ancillaire.
La cage (1) de l'élément proximal (Fig. 3) présente une forme en quart de sphère et comporte dans sa partie interne un axe transversal (2) dans lequel s'encastre I'insert (3) de l'élément distal (Fig. 5). L'insert (3) de forme quatriangulaire présente une gorge (4) dans laquelle s'encastre l'axe transversal (2).
La stabilité latérale de la prothèse est assurée par l'encastrement des deux pièces prothétiques avec un degré de liberté en valgus et en varus de 5 à 10 (Fig. 8).
La stabilité transversale, toujours assurée par l'encastrement de ces deux pièces présente un degré de liberté en flexion extension de O à 1100 (Fig. 7).
Par ailleurs, l'embase (5) de l'élément proximal présente deux ailes latérales (6) permettant la fixation de I'insert (3) en polyéthylène.
02 INITIATION I TERMINAISON PROPAGATION TH LH : > - r Loo z > LOOH LOOL LOOH LH
Dans les milieux biologiques, les AGPI les plus importants sont ceux qui sont dérivés de l'acide linoléique et de l'acide a-linolénique, ctest-à-dire ceux qui appartiennent aux familles dites en "n-6T' et en "n-3", respectivement.
Toute mesure dtindice(s) de peroxydation lipidique doit donc être aussi spécifique que possible des produits ou sous-produits de peroxydation des AGPI précités.
Un grand nombre de méthodes de mesure de la peroxydation lipidique ont été décrites dans le passé. On peut les diviser en cinq grandes familles I. Méthodes spectrophotométriques directes ou indirectes.
2. Méthodes spectrofluorimétriques.
3. Méthodes électrochimiques.
4. Méthodes chimiluminescentes.
5. Méthodes chromatographiques.
Les méthodes appartenant aux familles 2. à 5. ont été décrites récemment (références 1 et 2). Elles posent des problèmes de spécificité ou de complexité instrumentale qui excluent leur utilisation en routine par des laboratoires non spécialisés.
Les méthodes spectrophotométriques directes connues de la famille 1. dans laquelle s'inscrit la présente invention, sont résumées ci-après.
La méthode classique des "diènes conjugués" est basée sur une mesure d'absorbance à 233 nm qui permet de quantifier les structures bis-allyliques (trans-diéniques) des hydroperoxydes et alcools d'AGPI, avec une sensibilité élevée.
Dans la plupart des échantillons biologiques, la présence d'autres structures diéniques ainsi que l'absorption très intense des groupements carbonyle et des mono-alcènes produisent malheureusement des interférences majeures qui ne peuvent être éliminées que par des procédures de spectroscopie différentielle, généralement incompatibles avec un dosage sur échantillon biologique de composition inconnue.
Le dosage colorimétrique du dialdéhyde malonique (1,3-propanedial ou MDA) fournit l'indice de peroxydation lipidique le plus utilisé (référence 2).
Le MDA est à la fois un métabolite enzymatique de l'acide arachidonique et un produit secondaire de la peroxydation des AGPI (référence 3).
La principale voie de production enzymatique du MDA est celle de la thromboxane synthétase (référence 4) qui convertit la prostaglandine PGH2 (endoperoxyde) en thromboxane A2, 12 (L) -hydroxy-5,8, ll-heptatriènoate et MDA (dans les proportions respectives 1/3, 1/3, 1/3).
Le MDA d'origine non-enzymatique se forme par décomposition radicalaire d'endoperoxydes mono- ou bi cycliques dérivés d'un radical peroxyle bis-allylique.
Les résultats expérimentaux de ces différentes approches pharmacologiques ne sont donc pas suffisants pour envisager leur usage dans les élevages et, en conséquence, les procédés physiques demeurent le seul type de traitement dont l'éleveur puisse disposer.
La compréhension des mécanismes hormonaux associés à l'expression du comportement de couvaison se sont accompagnés d'études fondamentales visant à caractériser ces molécules, notamment la prolactine (32, 33), et à identifier les gènes correpondants chez différentes expèces d'oiseaux. Ainsi, les gènes de la prolactine de poule (34, 35) et de dinde (36, 37) ont été identifiés, séquencés et clonés.
I1 a notamment été proposé d'utiliser le vecteur d'expression pGEX-2T (38) pour produire la prolactine de dinde recombinante (39).
Les Inventeurs ont mis à profit l'ensemble des connaissances académiques précédentes pour rechercher de nouveaux moyens permettant la conception et la fabrication de compositions pharmaceutiques aptent à prévenir et/ou traiter efficacement l'expression du comportement de couvai son chez les oiseaux et plus particulièrement chez la dinde, sans induire d'effet négatif sur la reproduction et le maintien ou la reprise de la ponte.
Ce but est atteint grâce à des compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles comportent à titre d'agent actif, soit une molécule hybride constituée d'un groupe porteur et d'une protéine comprenant au moins un déterminant antigénique de la prolactine, soit un micro-organisme exprimant à sa surface ou excrétant ladite molécule hybride, soit des anticorps dressés contre au moins un site antigénique de la prolactine.
I1 a été mis en évidence par les Inventeurs que les anticorps dirigés contre la prolactine ou contre une forme modifiée ou une partie de celle-ci, sont capables de neutraliser la prolactine circulante et de réprimer l'expression du comportement de couvaison chez la dinde. En conséquence, la présente invention propose d'utiliser à titre d'agents actifs dans des compositions pharmaceutiques, soit les anticorps dirigés contre au moins un site antigénique de la prolactine, soit des molécules antigéniques reproduisant au moins un caractère immunogène de la prolactine et donc capables d'induire in vivo la production d'anticorps dirigés contre ladite prolactine.
Les déterminants et sites antigéniques envisagés selon l'invention sont ceux portés par la séquence en acides aminés de la prolactine représentée dans la SEQ ID NO:1 de la liste de séquence en annexe.
Dans les compositions pharmaceutique de l'invention, l'agent actif peut être avantageusement associé à un véhicule pharmaceutiquement acceptable connu de l'homme du métier.
Un premier mode de réalisation d'une composition pharmaceutique selon l'invention, destinée à prévenir et/ou traiter l'expression du comportement de couvaison chez les oiseaux, consiste à utiliser à titre d'agent actif, une molécule hybride constituée d'une protéine comprenant au moins un déterminant antigénique de la prolactine et un groupe porteur.
La prolactine existant à l'état endogéne chez les oiseaux, il n'était pas possible d'induire chez ces espèces une réponse immunitaire en administrant à ces animaux la prolactine native ou une partie de celleci. Les Inventeurs ont donc conçu une molécule hybride constituée - d'une protéine comprenant au moins un déterminant antigénique de la prolactine, et - d'un groupe porteur existant ou non à l'état endogène chez l'oiseau auquel sera administrée la composition pharmaceutique de l'invention.
L'association de ce groupe porteur et de ladite protéine conduit à une molécule hybride qui n'existe pas dans l'organisme de l'oiseau, et en conséquence permet d'induire une réponse immunitaire dirigée notamment contre le ou les déterminants antigéniques de la prolactine portées par la protéine associée au groupe porteur.
La présente invention a plus particulièrement pour support les techniques récentes de biologie moléculaire mises en oeuvre pour produire de la prolactine recombinante. Ces techniques reposent sur la construction d'acides nucléiques recombinants comprenant au moins la séquence d'ADN codant pour la prolactine, associée avec un promoteur et/ou un terminateur de transcription reconnu par les enzymes de la cellule hôte dans laquelle ledit acide nucléique recombinant est introduit.
Cet acide nucléique recombinant est introduit dans une cellule hôte au moyen de vecteurs; le vecteur ainsi que les signaux de contrôle de l'expression de l'acide nucléique recombinant sont choisis en fonction de la cellule hôte, eucaryote ou procaryote, dans lequel il est placé. Le vecteur peut être un plasmide mais aussi un vecteur viral capable d'infecter la cellule hôte. Les techniques permettant le clonage et l'expression d'un acide nucléique recombinant dans différentes cellules hôtes sont connues de l'homme du métier; elles seront illustrées dans la description des exemples qui suit, étant entendu que d'autres vecteurs et cellules hôtes peuvent être utilisés.
Ces techniques permettent de préparer une protéine identique à la séquence de la prolactine, mais aussi des dérivés ou des séquence incomplètes de celleci mais comprenant un ou plusieurs déterminants important de la prolactine pour l'induction d'une réponse immunitaire.
La présente invention se propose d'utiliser ces techniques pour préparer une protéine comprenant au moins un déterminant antigénique de la prolactine fusionnée à un groupe porteur suite à une manipulation génétique de 1'ADN recombinant correspondant.
On connait dans l'art antérieur de tels manipulations visant à associer à la protéine recherchée un groupe porteur, la plupart du temps une autre protéine, de façon à favoriser une meilleur expression de la protéine dans la cellule hôte ou à provoquer son excrétion hors de la cellule ou encore de permettre la séparation et la purification de la protéine désirée. La molécule hybride ne constitue donc qu'un intermédiaire qui est ensuite clivée pour obtenir la protéine recherchée.
Avantageusement, la machine comporte deux bras disposés de part et d'autre du plan médian de la machine, lesdits bras étant couplés par un ressort.
L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui suit, faisant référence aux dessins annexés où: - la figure 1 représente une vue en coupe transversale d'une machine selon l'invention ; - la figure 2 représente une vue schématique selon un plan de coupe AF ; - la figure 3 représente une vue d'une variante d'ensemble de secouage - la figure 4 représente une vue en détail d'une autre variante de la liaison entre les tiges de secouage et les moyeux ; La machine à vendanger représentée en figure 1 selon un plan de coupe transversal comporte, de façon connue, un châssis enjambeur tracté ou automoteur.
Cette machine à récolter est ouverte à l'avant et à l'arrière pour laisser le passage de la végétation (1). La machine présente à la partie inférieure une ouverture médiane (2) pour le passage des pieds de végétation et des piquets, cette ouverture étant surmontée par un système détancheification, par exemple un système d'écailles mobiles (4, 5) de type connu dans l'art antérieur.