INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Une protéine dite stable selon l'invention présente au moins une des propriétés suivantes - l'activité enzymatique de la ss-lactamase, les cas échéant modifiée en intensité, - la capacité à être reconnue par un anticorps notamment un anticorps anti-p-lactamase, ou un anticorps dirigé contre un épitope hétérologue qu'elle contient, lorsqu'il s'agit de la protéine recombinante ou, - une insensibilite à la dégradation par les protéases cellulaires, - la possibilité d'être purifiée.
Differents enchaînements nucléotidiques hétérologues peuvent être choisis pour réaliser les séquences nucléotidiques recombinantes de l'invention.
Un premier groupe d'enchaînements hétérologues est caractérisé en ce qu'il comprend des séquences codant pour un peptide ou un polypeptide, impliqué dans la virulence d'un agent pathogène ou de façon générale pour un antigène à potentiel protecteur contre un facteur produit à la suite d'une infection. A cet égard une séquence caracteristique d'un organisme pathogène est par exemple une séquence de virus, de parasite, de bactérie ou de champignon (par exemple du genre Aspergillus). En particulier on citera dans le cadre de la presente invention les séquences de bactéries telles que M. leprae, M. tuberculosis, M.
intracellulare, M. africanum, M. avium, les bacilles responsables de la diphtérie, du tétanos, Salmonella, certains treponèmes, la toxine de pertussis, des sequences d'autres microorganismes tels que les sporozoites et les mérozoïtes de plasmodium, les séquences de Leishmania ou Schistosoma, de Shigella, de Neisseria, de Borrelia, des séquences de virus notamment le virus des oreillons, de la rubéole, de la rougeole, de l'herpes, d'influenza, le virus de la rage, de la polio, de l'hépatite, du SIDA HIV, HTLV-I, HTLV-II et SIV ainsi que des virus oncogènes.
La séquence d'acide nucléique à exprimer peut aussi coder pour une séquence immunogène telle que celle de venin de serpent ou d'insecte.
A titre d'exemple un enchaînement nucléotidique hétérologue interessant est par exemple un enchaînement codant pour une séquence peptidique d'un antigène de rétrovirus humain de type HIV, notamment un antigène d'enveloppe, de qaq, nef ou pol d'un rétrovirus HIV-1 ou HIV-2.
D'autres séquences intéressantes sont les séquences immunogènes de mycobactéries, en particulier les protéines ou les fragments des protéines correspondant à des gènes impliqués dans la virulence et des antigènes à potentiel protecteur. Un antigène est dit à "potentiel protecteur" lorsqu'il est susceptible de déclencher ou de favoriser une réponse immunitaire protectrice, en particulier par production d'anticorps ou par induction d'une réponse immunitaire à médiation cellulaire, en particulier de type CTL. Un tel antigène à potentiel protecteur peut être constitué par un épitope voire un haptène insuffisant en soi pour déclencher la réponse immunitaire.
L'invention permet ainsi la préparation de protéines recombinantes intéressantes notamment pour la constitution de compositions immunogènes, dans lesquelles l'épitope exposé à la surface de la protéine recombinante est caractéristique par exemple d'une hormone, ou de toute substance dont on cherche à atténuer, voire neutraliser les effets biologiques.
Avantageusement une séquence nucléotidique recombinante peut être constitué par une séquence nucléotidique codant pour la ss-lactamase ou une p- lactamase tronquée, telle que décrite précédemment dans laquelle serait insere un enchaînement hétérologue codant pour la séquence peptidique V3 de l'antigène d'enveloppe des différentes variants HIV-1 ou une séquence de plus grande taille de l'enveloppe d'un virus HIV. Cette séquence a été décrite dans la publication de K. Javaherian et al. (Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 86:6768-6772, 1989).
L'invention vise egalement un vecteur recombinant de clonage et/ou d'expression, réplicatif ou intégratif caractérisé en ce qu'il est modifié, en l'un de ses sites non essentiels pour sa réplication ou son intégration, par une sequence nucléotidique recombinante ci-dessus decrite.
Lorsque ce vecteur est modifié par la seule séquence codante ou par une séquence codante partielle de la 8-lactamase, il peut comprendre également des signaux d'expression, de traduction et voire de sécrétion, d'origine differente de celle de la p- lactamase, choisis en fonction de l'hôte dans lequel on cherche à cloner ou à exprimer ce vecteur recombinant.
En effet, lorsqu'un tel feu de signalisation est soumis à un éclairement depuis l'extérieur, notamment par la lumière solaire, les rayons admis à pénétrer à l'intérieur du feu sont réfléchis par le réflecteur métallisé avant et/ou après avoir traversé le globe de coloration, si bien que le feu de signalisation peut paraître allumé, ou tout au moins l'effet esthétique recherché par le voyant fumé est détruit.
La présente invention a pour objet de pallier cet inconvénient.
Un feu de signalisation d'aspect fumé, selon l'invention, qui comprend un boîtier fermé par un fond et, à l'opposé du fond, un voyant translucide d'aspect fumé, à l'intérieur duquel est insérée une lampe, est caractérisé en ce qu'il est exempt de toute surface métallisée et en ce qu'il comporte un dispositif optique récupérateur de lumière transparent, placé entre ladite lampe et ledit voyant d'aspect fumé.
Avantageusement, et selon un point particulier de l'invention, ledit dispositif récupérateur de lumière transparent est teinté de manière à assurer la coloration du faisceau lumineux émis par la lampe dans la teinte de la fonction désirée.
D'autres caractéristiques et avantages de l'inventon apparaîtront à la lecture de la description qui suit, en regard du dessin annexé sur lequel - la figure 1 représente une vue en perspective d'éléments d'un feu de signalisation, suivant l'invention ; - la figure 2 représente une vue en coupe d'un tel feu de signalisation.
On a représenté, à la figure 1, un feu de signalisation 1, à deux fonctions, qui comprend un boîtier 2 en forme globale de parallélipipède, séparé sensiblement dans sa partie médiane par une cloison 5, formant ainsi deux compartiments respectivement 3 et 4.
Un voyant de fermeture 6 transparent, en étant de teinte fumée, est destiné à venir obturer par l'avant les deux compartiments 3 et 4 dudit feu de signalisation 1.
Par le fond 7 du boîtier 2, est insérée, dans chacun des compartiments 3 et 4, une lampe 8,9.
Conformément à l'invention, les parois intérieures du boîtier 2 ainsi que la cloison de séparation 5 sont d'aspect sombre et mat.
Selon l'invention, le feu de signalisation, en pratique et comme représenté, chaque compartiment du feu est exempt de toute métallisation.
Selon l'invention également, un dispositif récupérateur de lumière qui se présente globalement sous la forme d'une coupelle transparente, est placé de manière à, sensiblement, entourer la lampe 8,9 en étant placé entre cette dernière et le voyant de fermeture 6.
Comme représenté, le récupérateur de lumière 10,11 consiste en un dispositif, en forme de calotte, constitué d'éléments déviateurs plus particulièrement d'échelons de Fresnel, situés à la fois à l'intérieur et à l'extérieur du récupérateur, pour permettre à un maximum de rayons lumineux émis par la lampe d'être récupérés.
Les rayons lumineux émis par la lampe peuvent ainsi être dirigés dans des directions privilégiées, ce qui permet de répondre aux conditions exigées par la sécurité et la réglementation.
Selon la fonction de signalisation concernée, ledit récupérateur de lumière 10,11 est teintée à la coloration de ladite fonction de signalisation.
En variante non représentée, le fond du boîtier comporte, ou est formé d', un élément en forme de paraboloïde ou similaire dont le foyer correspond sensiblement avec l'emplacement du filament d'une lampe telle que 8 et/ou 9.
Conformément à l'invention, cet élément en forme de paraboloïde ou similaire, ne comporte aucune métallisation en surface. I1 est avantageusement réalisé en matière plastique, comme c'est le cas pour le reste du boîtier.
fig. 15= container rectangulaire avec portes vitres.
fig. 16= container rectangulaire avec rideau coulissant
BLOC LIMITEUR A TROIS BATTANTS DESCRIPTION : 1) DOMAINE TECHNIQUE DE L'INVENTION : - SECTEUR DE LA GRANDE DIXTRIBUTION (EX. HYPERMARCHES) ET DU DOMAINE PUBLIS (EX. S N C F) QUI SCNT EQUIPES POUR LEUR CLIEN TELE DE CHARIOTS A CONSIGNEZ 2) ETAT DE LA TECHNIQUE ANTERIEURE FAISANT RESSORTIR LE PROBLE- ME TECHNIQUE POSE - L'ETAT DES TECHNIQUES ESSAYEES ANTERIEUREMENT, DEMONTRE DES DEFICTENCES AU NIVEAU DE LA FIABILITE, DE LA FACILITE D'UTILI SATION, DE LA FRAGILITE DU SYSTEME OU D'UN COUT DE L'INVESTIS SEMENT TROP ELEVE.
3) CE SYSTEME AUTONOME ET INDEPENDANT PERMET D'IMPOSER UN ORDRE ET UN NOMBRE DESTINE DE STOCKAGE DE CHARIOTS AVEC OU SANS CONSI GNEURt LORS DU PASSAGE D'UN CHARIOT DE DIMENSION DEFINIE DANS UN COULOIR ADAPTE, L'OBTURATEUR DU LIMITEUR DE FILE REDUIT LA DIMENSION DE CE PASSAGE ET VERROUILLE CE COULOIR LA CREATION D'UN COULOIR IMPLIQU L'UTILISATION D'UN GUIDE OU ELEMENT CALIBRANT LE PASSAGE FACE AU LIMITEUR DE FILE CET ELEMENT PEUT ETRE UN TUBE OU LA FACE ARRIERE DES LIMITEURS DE FILES SI CEUX-CI SONT INSTALLES POUR CREER PLUSIEURS COULOIRS DE STOCKAGE (VOIR FIGURE 1).
LORSQU'UN CHARIOT EST AMEME DANS LE COULOIR DE DIMENSION PREVUE A CET EFFET, IL ENTRAINE LE BRAS REP.2 QUI ENROULE UNE CHAINE REP.17 AUTOUR DE SON CYLINDRE CET ENROULEMENT A POUR EFFET DE FAIRE PIVOTER UN LOQUET REP.5 AUTOUR DE L'AXE REPERE 14.
CE LOQUET OBSTRUE LE PASSAGE DE L'AXE REP.4 A DE L'OBTURATEUR REP.4 L'OBTURATEUR NE PEUT DONC PLUS PIVOTER QUE DANS LA DIRECTION DU BRAS EN POSITION DF REPOS (BRAS REP.3 FIG.3) LA PROGRESSION DU CHARIOT DANS LE COULOIR, AMENE LE PIVOTEMENT DU BRAS REP.3 QUI ENTRAINE L'ENROULEMENT D'liNE CHAINE REP.17.
CET ENROULEMENT A POUR EFFET DE VOULOIR FAIRE PIVOTER LE LOQUET REP^6e LA ZONE DE DEBATTEMENT DU LOQUET ETANT DEJA OCCUPER PAR L'OBTU RATEUR REP.4.
L'ENSEMBLE RESSORT-PRECONTRAINT REP.9, PERMET AU BRAS REP.3 D'EF FECTUER SA COURSE EN RQTATIONe LA FORME EN DEVELOPPANTE DE CERCLE DU REP.4 PERMETTRA SON RETOUR MALGRE L'APPUI DU LOQUET REP.6 SUR CETTE FACES LA FORME DE L'OBTURATEUR A POUR EFFET DE REDUIRE LE JEU ENTRE LE CARTER ET SA FACE; CETTE FORME A POUR AVANTAGE, DANS SON MOUVEMENT, DE NE JAMAIS AVOIR UN EFFET DE CISEAUX SON PIVOTEMENT AUTOUR D'UN DE SES AXES A POUR AVANTAGE DE L'ECLIPSER TOTALEMENT LORS DE L'INTRODUCTION D' UNE QUANTITE X DE CHARIOTS DANS UN COULOIR DE STOCKAGE DE LONGUEUR DEFINIE, LE DERNIER CHARIOT MAINTIENT LE BRAS REP.3 EN POSITION PIVOTEE;CE QUI MAINTIENT LE LOQUET REP.6 EN PO SITION DE VERROUILLAGE, SI UNE NOUVELLE INTRODUCTION DE CHARIOT VOULAIT ETRE TENTEE, LE.
PROCESSUS DE FONTIONNEMENT S'ACCOMPLIRAIT COMME SUIT - PIVOTEMENT DU BRAS REP.2 - VERROUILLAGE DU LOQUET REP.5 - IMMOBILISATION TOTALE DE L'OBTURATEUR DONC IMPOSSIBILITE D'INTRODUIRE UN NOUVEAU CHARIOT, POUR L'EVACUATION DES CHARIOTS STOCKES - SI LE STOCKAGE DETERMINE EST INCOMPLET - PIVOTEMENT DU BRAS REP.3 - VERROUILLAGE DU LOQUET REP.6 - PAR LE RECUL DU CHARIOT, L'OBTURATEUR S'ECLIPSE.
- SI LE STOCKAGE EST COMPLET - LE BRAS REP.3 QUI EST DEJA EN POSITION PIVOTEE, GLISSE SUR LE CHARIOT ET LE PROCESSUS PRECEDEMMENT DECRTT S'ACCOMPLIT.
4) PRESENTATION DES DIFFERENTES FIGURES - FIG.1 : SCHEMA D'UTILISATION ET DEFINITION DE PRINCIPE - FIG2 ET 3: PRINCIPE DE FONCTIONNEMENT - FIG.4 : DESCRIPTION DE LA FONCTION "ANTI-RECUL"DU BRAS REP.3 5) EXPOsE DETAILLE, REFERENCE PAR RAPPORT AUX DESSINS, PRECISANT LA STRUCTURE, LES DIFFERENTES PARTIES ET L'ASSEMBLAGE DE L'EN- SEMBLE, AINSI QUE LE FONCTIONNEMENT: -SYSTEME MECANIQUE CONSTITUE D'UN CARTER EN DEUX ELEMENTS REN FERMANT UN MECANISME CONSTITUE D'ELEMENTS APPARENTS ET D'ELEMENTS INTERNES AU CARTER.
- LES ELEMENTS APPARENTS SONT - UN BRAS PIVOTANT REP.2 CONSTITUE D'UN CYLINDRE SUPPORTANT UN BRAS EN FORME DE CE SOUDE AU CYLINDREZ - UN OBTURATEUR REP.4 CONSTITUE DE DEUX JOUES PARALLELES SUR LE PLAN HORIZONTAL, DONT LES CONTOURS APPARENTS SONT EN DEVELOPPANTE DE CERCLE PAR RAPPORT AUX AXES OPPOSES.
L'OBTURATEUR EST EGALEMENT CONSTITUE DE DEUX AXES REP.4 A ET 4 B (VOIR FIG.2) ET POSSEDE DEUX AXES D'ARTICULATION.
- UN BRAS PIVOTANT REP.3 CONSTITUE D'lJN CYLINDRE SUPPORTANT UN BRAS DE FORME EN CE VRILLE SUR SA PARTIE HAUTE, LUI PERMETTANT DE S'INTRODUIRE DANS L'ESPACE RENDU LIBRE PAR LA FORME CONIQUE DES CHARIOTS A STOCKER (VOIR FIG.4), RENDANT AINSI IMPOSSIBLE LES RECUL DE LA FILE DE CHARIOTS - LES ELEMENTS INTERNES SONT: - 2 LOQUETS REP.5 ET 6 - 2 RESSORTS DE RAPPEL DE LOQUET REP.7 - 2 POULIES DE RENVOI REP.8 - 2 ENSEMLES RESSORT-PRECONTRAINT REP.9 - 2 GALETS MONTES SUR CHAPE REP.10 - 2 PLATINES GUIDE-CHAINE REP.11 - 1 CHAINE DE TRACTION POUR RETOUR D'OBTURATEUR REP.12 - 2 PLATINES DE GUIDAGE OBTURATEUR REP.13 FIXEES SUR REP.1 - 2 AXES PIVOTANTS POUR LOQUET REP14 - 2 RESSORTS DE RAPPEL POUR OBTURATEUR REP 15 - 2 AXES POUR BRAS PIVOTANTS REP.16.
6) APPLICATION INDUSTRIELLE PRINCIPE ADAPTABLE A UN BESOIN D'ORDRE DE RANGEMENT LIMITE ET SPECIFIQUE.
DESCRIPTIF INTERCEPTEUR, FIXE SUR L'EMBOUT DU FLEXIOLE D'ASPIRATION, AVANT L'ENTREE DES POUSSIERES DANS LE RESEAU DES SYSTEMES D'ASPIRATION CENTRALISEE.
Le greffage ionique ne doit pas être préjudiciable à la stabilité ni à la taille de la matrice polysaccharidique. Ces ligands seront donc choisis de préférence parmi des molécules biologiques naturellement présentes dans l'organisme, et couplés à la matrice par des liaisons hydrolysables enzymatiquement.
Selon un des aspects de l'invention, les ligands greffés sur la matrice sont des composés acides. Ces ligands acides peuvent notamment être choisis parmi l'acide succinique, l'acide phosphorique, l'acide citrique, la glycine, l'alanine, l'acide glutamique, l'acide aspartique.
L'acide succinique est un constituant naturel de l'organisme et intervient dans le cycle de Krebs. C'est un diacide carboxylique qui peut former avec les hydroxyles de la matrice polysaccharidique une liaison ester facilement biodégradable grâce à la présence ubiquitaire dans l'organisme de succinylestérase. La fonction acide qui n'est pas engagée dans la fontion ester avec la matrice polysaccharidique reste donc disponible pour assurer les propriétés d'échange d'ions.
Les phosphates sont également des fonctions extrêmement fréquentes dans l'organisme. On les retrouve principalement associés à des lipides, des sucres et à des nucléotides.
On peut également greffer sur la matrice des mono hydroxy ou des monoaminoacides, par exemple l'acide citrique, les acides aminés à chaîne courte et les acides aminés acides.
I1 est intéressant de disposer de noyaux ayant un taux de greffage de ligands suffisant pour permettre un niveau d'encapsulation ultérieur satisfaisant. Ce taux doit se rapprocher d'une charge par sucre élémentaire.
On obtient par exemple des vecteurs particulaires dans lesquels l'acide succinique est greffé à un taux correspondant environ à une charge pour 1,5 résidus de glucose ; ou bien l'acide phosphorique est greffé à un taux correspondant environ à une charge pour 1,5 résidus de glucose.
Selon un autre aspect de l'invention, les vecteurs particulaires sont caractérisés en ce que les ligands greffés sur la matrice sont des composés basiques, fixés à la matrice par l'intermédiaire d'un composé acide.
Afin d'obtenir le greffage biodégradable de ligands basiques, la Demanderesse a trouvé qu'il était possible d'utiliser notamment l'acide succinique entre la matrice polysaccharidique et un composé basique. L'une des fonctions acides de l'acide succinique est utilisée pour réaliser une fonction ester biodégradable avec la matrice polysaccharidique et l'autre fonction acide est utilisée pour réaliser une fonction ester ou amide avec le composé basique.
De préférence, les ligands basiques greffés sur la matrice sont des composés bifonctionnels comportant une fonction acylable formant une liaison amide ou ester avec un composé acide fixé sur la matrice.
La fonction acylable est par exemple une fonction hydroxyle, amine primaire ou secondaire.
L'autre fonction, basique, non acylable, est par exemple une fonction amine tertiaire ou quaternaire.
Le ligand basique peut notamment être choisi parmi, le 2-(diméthylamino) éthanol et la 2-(diméthylamino)éthylamine.
Des taux de greffage ionique correspondant à une charge pour trois résidus glucose peuvent être observés.
La matrice polysacchar idique, elle-même biodégradable, peut être constituée d'un polysaccharide réticulé chimiquement choisi parmi le dextrane, l'amidon, la cellulose, les oligosaccharides et leurs dérivés.
Elle peut être notamment réalisée en réticulant un polysac cl aride biodégradable comme l'amidon avec un agent bifonctionnel, comme l'épichlorhydrine. Dans le cas où le rapport épichlorhydrine/glucose est maintenu en dessous de 1/10, le gel obtenu conserve la propriété d'être hydrolysé par les amylases. La cinétique d'hydrolyse est toutefois ralentie lorsque ce rapport augmente et se rapproche de 1/10. L'analyse des produits d'hydrolyse enzymatique des matrices d'amidon réticulé ne permet pas de mettre en évidence des oligomères de glucose non hydrolysable de taille supérieure à 10. L'administration de telles matrices d'amidon réticulé à l'intérieur de l'organisme ne doit donc pas conduire à la formation de polymères de glucose non éliminables par l'organisme.
L'utilisation de ces réactifs est donc particulièrement intéressante dans toute situation où un ou des mercaptan(s) interfère(nt) dans un dosage, comme c'est le cas par exemple du glutathion réduit pour un dosage de l'activité superoxyde dismutase d'un échantillon biologique, ou encore pour le dosage plasmatique de disulfures.
En effet, l'introduction, dans la solution à doser, d'au moins l'un des réactifs selon l'invention permet de s'affranchir de toute phase de préparation de cet échantillon (extraction, précipitation, chromatographie, dialyse), sans par ailleurs perturber la mesure, et permet en particulier d'effectuer une mesure spectrophotométrique dans le domaine visible du spectre d'absorption.
Ces nouveaux réactifs chimiques piégeurs de mercaptans présentent donc l'intérêt de pouvoir considérablement simplifier la mise en oeuvre de dosages effectués en milieu aqueux pour lesquels il est nécessaire de s'affranchir de la réactivité des mercaptans interférentiels. De plus, du fait de leur grande réactivité et de l'absence d'absorption par les adduits formés dans une gamme étendue de longueurs d'ondes analytiquement exploitables, ces réactifs sont tout à fait adaptés pour compléter le (ou les) réactif(s) nécessaire(s) à la mesure d'un paramètre donné par spectrophotométrie d'absorption, et en particulier pour l'élaboration de nécessaires ou kits de dosage utilisables pour les recherches biologiques en général, ainsi qu'en Chimie Clinique.
Certains des composés répondant à la formule générale I ci-dessus, bien que n'ayant encore jamais été proposés en tant que réactifs piégeurs de mercaptans, sont des composés chimiques connus (cas où Z1 = alkyle et soit Z1 = vinyle, Z3 = Z4 = Z5 = hydrogène, soit Z3 = vinyle, z2 = Z4 = Z5 = hydrogène). Toutefois, la plupart d'entre eux sont nouveaux.
Selon un autre de ses aspects, l'invention a également pour objet les composés répondant à la formule I dans laquelle z1 à Z5 et X sont définis comme précédemment, étant entendu que Z1 est différent d'alkyle - soit lorsque z2 = vinyle, et Z3, Z4 et Z5 représentent simultanément 1 'hydrogène; - soit lorsque Z3 = vinyle, et 22, z4 et Z5 représentent simultanément 1 'hydrogène.
Ces composés sont nouveaux.
Les composés de formule générale I, et en particulier les composés nouveaux définis ci-dessus, peuvent être préparés selon les procédures générales décrites cidessous, par vinylation de l'hétérocycle et alkylation de l'azote des composés hétérocycliques correspondants, ncn vinyliques et non substitués sur l'azote, et par ailleurs substitués de façon appropriée, connus ou préparés par analogie à des procédés connus d'obtention de tels composés.
Ainsi, les composés de type 2-vinylique (z2 = vinyle et Z3 = hydrogène ou alkyle) peuvent être préparés comme suit.
Le composé de départ (pyridine ou quinoléine substitués) est soumis à la méthode de Comins (références 11 et 12) à l'aide de bromure de vinylmagnésium. Le produit ainsi obtenu est oxydé avec, par exemple, de la tétrachloro1,4-benzoquinone (parachloranil) ou du soufre Sg, pour conduire au produit aromatique correspondant. L'alkylation de l'azote hétérocyclique de ce produit est réalisée à l'aide d'un agent alkylant approprié tel que par exemple le tétrafluoroborate de triméthyloxonium, le sulfate de méthyle, le bromure de benzyle, le fluorodinitrobenzène, l'iodoacétate de sodium ou le 3-bromopyruvate de sodium.
Remarque : Dans le cas de la préparation de composés de type pyridinium, le produit A obtenu selon la méthode de Comins est le produit de rétro Diels-Alder du produit d'addition du groupement vinyle sur le pyridinium correspondant. Il se recyclise à haute température, lors de l'oxydation pour donner un produit B.
Le schéma réactionnel qui suit est destiné à illustrer le procédé décrit ci-dessus dans le cas de la préparation du tétrafluoroborate de 1,4,6-triméthyl-2- vinylpyridinium (composé de l'exemple 3 de la partie expérimentale qui suit).
A 1/PhOCOC1 / sg' parachloranil 2/vinylMgBr C02Ph PhCH3,reflux A X Me30+, BF4- Ns B |
Par ailleurs, les composés de type 4-vinylique (z2 = hydrogène ou alkyle et Z3 = vinyle) peuvent être préparés comme suit.
L'aldéhyde hétérocyclique correspondant (fonction aldéhyde en position 4 du cycle pyridine) est soumis à la réaction de Wittig, avec, par exemple, le bromure de triphénylméthylphosphonium, ou à la réaction de Peterson, avec, par exemple, le chlorométhyltriméthylsilane pour conduire à un produit intermédiaire C. L'alkylation de l'azote hétérocyclique du produit C est réalisée à l'aide d'un agent alkylant approprié tel que par exemple le tétrafluoroborate de triméthyloxonium, le sulfate de méthyle, le bromure de benzyle, le fluorodinitrobenzène, l'iodoacétate de sodium ou le 3-bromopyruvate de sodium.
Le schéma réactionnel qui suit est destiné à illustrer le procédé décrit ci-dessus dans le cas de la préparation du tétrafluoroborate de 1,2-diméthyl-4vinylquinoléinium (composé de l'exemple 5 de la partie expérimentale qui suit).
cF.a f M M (Ph)3P+CH3 M M Base Base C M Me30+,BF4- M M >
Le traitement de cet oligomère est identique à celui défini dans l'Exemple I.
L'analyse et la purification CLHP, réalisée sur une colonne SFCC Nucleosyl C18 N125 2P789 dans un gradient de 10% à 20 % d'acétonitrile dans une solution aqueuse d'acétate de triéthylammonium 0,05 M pendant 20 minutes (débit 1 ml / min, temps d'analyse: 30 min) montre une pureté spectrophotomètrique à 260 nm de 85 %.
La purification par CLPH semi-préparative sur une colonne Nucleosyl semi-préparative avec un débit de 2 ml / min dans des conditions isocratiques à 19 % d'acétonitrile dans une solution aqueuse d'acétate de triéthylammonium 0,05 M augmente la pureté de l'oligomère à 99,1 %.
Exemple IV: Synthèse du dodécamère anti "tat": 4'-Sr-(A-C-A-C-C-C-A-A-U-U-C-U), l.
I Synthèse du support solide Le support solide utilisé pour cette synthèse automatisée est identique à celui décrit dans l'exemple L IV-2) Synthèse automatisée du dodécamère anti"tat": 4'-Sr-(A-C-A-C-C-C-A-A-U-U-C-U), 1 La synthèse de cet hétérododécamère, complémentaire du site accepteur d'épissage du gène tat du Vin est effectuée sur une colonne contenant 38,5 mg de support solide fonctionnalisé, soit sur 0,808 mole de 4'-thiouridine (1 éq.).Chaque cycle d'élongation utilise un excés de 25,24 éq (20,4 mole) en synthon 4'-thioadénosine phosphoroamidite, 13,5 éq. (10,97 llmole) en synthon 4'-thiocytidine et 30 éq. (24,25 mole) en synthon 4'-thiouridine.
La durée d'un cycle d'incorporation est de 20,71 minutes et le dosage des cations diméthoxytrityles indique un rendement moyen d'incorporation des synthons phosphoramidites de 93,6 %.