INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
b) La variante de ce procédé, qui prévoit la mise en place entre les torons du câble (2) de plaquettes en acier (8), provoque la détérioration de l'âme centrale de celui-ci ainsi que les inconvénients enumérés en a).
c) Une autre variante de mise en oeuvre de ce procédé, dans laquelle, entre le manchon extérieur (3) et le câble (2), est disposé un manchon intermédiaire (7) qui provoque un glissement du manchon extérieur dû à une mauvaise adhérence de celui-ci, sur le manchon intermédiaire.
d) Le passage du matriçage hexagonal au matriçage cylindrique du manchon, pour que celui-ci retrouve une section cylindrique sur une partie de sa longueur, provoque un déplacement de matière qui engendre une détérioration des torons du câble, ainsi qu'une détérioration du manchon.
La présente invention vise à remédier aux inconvénients cités et permet d'obtenir les résultats suivants: O Une meilleure répartition des pressions sur le manchon 3 ainsi que sur les torons du câble 2.
@ Une déformation du manchon réduite au maximum uniformément répartie à la périphérie de celui-ci.
e La possibilité de sertir suivant une variante de ce procédé, un ou deux câbles de diamètre et de composition identiques.
o Enfin, il en résulte un coefficient de sécurité plus élevé.
Les moyens mis en oeuvre pour réaliser ces résultats sont: a) Suivant une première forme de mise en oeuvre de l'invention, le métal constituant le manchon est un acier recuit, d'une dureté légèrement inférieure à l'acier constituant les torons du câble, permettant donc une meilleure pénétration du ou des câbles dans le manchon.
b) Suivant une variante de ce procédé, les stries faites à l'intérieur du manchon, seront supprimées, évitant ainsi toutes fissures et amorces de rupture pouvant se former à l'intérieur du manchon.
c) Dans une autre variante de ce procédé, les plaqueftes en acier, placées entre les torons du câble sont, elles aussi, supprimées pour éviter les inconvénients énumérés en b).
Le transistor 26 est bloqué lorsque la tension de charge VL aux bornes du phare de route 18 est inférieure à une première valeur de référence VR1, par exemple 12,5 V, qui est déterminee par la tension de Zener de la diode Zener 28. Dans cet etat, le courant de gâchette est fourni à la gâchette du thyristor 21 via la diode 22, la résistance 23 et la diode 24, ce qui rend le thyristor conducteur. Ainsi, la diode 13 est court-circuitee, ce qui permet au courant d'entre dirige dans l'un ou l'autre sens.
D'autre part, lorsque la tension de charge VL est supérieure à la première valeur de référence, le transistor 26 est rendu conducteur, et le courant de gâchette est bloqué en etant détourné par la diode 22, la résistance 23, le transistor 26 et la diode 34, ce qui bloque le thyristor 21. Cet etat bloqué du thyristor 21 met fin au contournement de la diode 13 et seule l'alternance négative de la sortie de la bobine 10 est fournie au phare de route 18.
Dans le circuit décrit ci-dessus, le redresseur à une alternance 12 ne fournit que l'alternance positive 19 de la sortie à courant alternatif de la bobine du générateur 10 aux accessoires à courant continu, et la diode 13 fournit l'alternance négative 20 de la sortie à courant alternatif aux accessoires à courant alternatif. La tension de Zener de la diode Zener 28 est définie comme etant la première tension de référence, et un circuit de détection de la tension du phare 25 est formé par la partie du circuit complet qui rend conducteur le transistor 26 lorsque la tension de charge VL dépasse ce premier niveau de référence. Ce circuit de détection de la tension du phare 25 peut être considéré comme un premier moyen de détection de la tension fournie aux accessoires à courant alternatif dépassant la première tension de référence.Le thyristor 21 qui devient conducteur lorsque le transistor 26 est bloqué peut être considéré comme un moyen de fournir l'alternance positive 19 aux accessoires à courant alternatif. En outre, le régulateur de la tension du phare 17 sert de deuxième moyens de détection de la tension fournie aux accessoires à courant alternatif dépassant une deuxième valeur de référence VR2, et des moyens pour transmettre l'alternance négative de la sortie à courant alternatif de la bobine du générateur aux accessoires à courant alternatif pour un angle de phase donne qui dépend de la sortie des deuxièmes moyens de détection.
Le fonctionnement du dispositif selon l'invention pour la regulation de la tension de sortie d'un alternateur va être décrit ci-apres.
Lorsque le rotor de l'alternateur est entraîne par un moteur à combustion interne, le courant alternatif est produit par la bobine du générateur 10 comme indiqué par la Figure 2. La tension de charge VL appliquée au phare de route 18 varie avec la vitesse de rotation de l'alternateur comme indiqué par la Figure 3.
Lorsque la tension de charge VL est inferieure à la premiere valeur de référence VR1, comme le thyristor 21 est à l'étant conducteur, les alternances positive et négative 19 et 20 de la sortie à courant alternatif de la bobine 10 sont fournies au phare de route 18. Lorsque la tension de charge VL appliquée au phare de route 18 dépasse la première valeur de référence, le thyristor 21 est bloqué pour un angle de phase donné en fonction de la différence entre la tension de charge VL et la première valeur de tension de référence, et la partie de l'alternance positive 19 de la sortie à courant alternatif qui est ainsi détournée du phare de route 18 est fournie au feu de stop 15 et à la batterie 16 via un redresseur à simple alternance 12.
En d'autres termes, lorsque la vitesse de rotation du moteur est basse et que la tension de sortie de la bobine 10 est faible, la totalité de la sortie de la bobine 10 est fournie au phare de route 18 pour assurer que l'intensité lumineuse du phare de route 18 est dans une plage acceptable. D'autre part, lorsque la tension de sortie de la bobine 10 augmente avec la vitesse de rotation du moteur, et que la tension de charge VL dépasse la première valeur de référence, le thyristor 21 est bloqué pour un angle de phase donné, et la sortie à courant alternatif de la bobine 10 est fournie au phare de route 18 et une partie de l'alternance positive 19 est coupée.Ainsi, le courant de charge Ib destiné à la batterie 16 augmente progressivement avec la tension de sortie de la bobine 10, et la batterie 16 est chargée de maniere efficace, sans pour autant que soit reduite l'intensité lumineuse du phare de route 18.
Lorsque la vitesse de rotation du moteur augmente encore, l'alternance positive 19 de la bobine de l'alternateur 10 est entièrement coupée, et seule l'alternance négative 20 est fournie au phare de route 18 de sorte que la batterie 16 puisse être chargée le plus possible. Lorsque la tension de charge VL depasse la deuxième valeur de référence VR2, une partie de l'alternance négative 20 est court-circuitée par un angle de phase donné qui dépend de la différence entre la tension de charge VL et le deuxième niveau de tension de référence VR2 par un circuit non illustré sur le dessin, empêchant que soit fournie une éventuelle tension excessive au phare de route 18.Lorsque la tension de charge de la batterie dépasse une certaine limite supérieure acceptable, le redresseur à simple alternance 12 est bloqué par un circuit non représenté, et la surcharge de la batterie 16 peut ainsi être évitée.
Comme on peut facilement le comprendre par l'expose cidessus, la première valeur de tension de reference VR1 associee au transistor 26 est inférieure à la deuxième valeur de tension de référence VR2 associée au régulateur de la tension du phare 17.
La Figure 4 est un schema qui montre une deuxième realisation de la présente invention. Les composants identiques sont identifiés par le même numéro de repère tout au long de l'exposé des différentes réalisations.
Sur la Figure 4, le circuit comprend une diode 41 qui redresse l'alternance négative 20 de la tension fournie au régulateur de la tension du phare 17. Plus précisément, l'anode de la diode 13 est connectée à la cathode de la diode 41 dont l'anode est mise à la masse via les resistances 42 et 43. Le noeud entre les deux resistances 42 et 43 est mis à la masse via un condensateur électrolytique 44 et est connecté à la base d'un transistor PNP 46 via une diode Zener 45 montée à l'envers. La cathode de la diode Zener 45 est mise à la masse via la résistance 47. Le collecteur du transistor 46 est connecté à la diode 13 via une résistance 48 et un condensateur électrolytique 49, et l'émetteur de ce transistor 46 est mis à la masse.Le noeud entre la resistance 48 et le condensateur électrolytique 49 est connecté à la gâchette du thyristor 50 via une diode. La cathode du thyristor 50 est connectée à la borne de sortie à courant alternatif 11 et son anode est à la masse.
La borne de sortie à courant alternatif 11 est connectee à la borne de la batterie 52 via un thyristor 51 monte normalement et servant de redresseur à une alternance, et l'anode du thyristor 51 est mise à la masse via une résistance 53, une diode 54 montee normalement, et une paire de diodes Zener 55 et 56 montées à l'envers et en série. Une résistance 57 est connectee entre la cathode et la gâchette du thyristor 51 et le noeud entre la resistance 53 et la diode 54. La borne de la batterie 52 est en outre connectée à un accessoires à courant continu 59 comme par exemple un circuit de commande d'un dispositif d'allumage par décharge de condensateurs (CDI).
Le fonctionnement de la deuxième réalisation de la présente invention va être décrit ci-après en relation avec les diagrammes de forme d'onde de la Figure 5.
Dans cette réalisation, la première tension de référence VR1 fournie par la diode Zener 28 et la deuxieme tension de référence VR2 fournie par la diode Zener 45 sont déterminées de sorte que VR1 < VR2.
Pour commencer, "a" de la Figure 5 représente la forme d'onde de la tension de charge VL qui apparat au point V de la Figure 4 lorsque la vitesse de rotation du moteur est basse. Comme la tension de sortie de la bobine du générateur 10 est faible, la tension de charge VL qui apparaît sous la forme d'une tension continue aux bornes du condensateur électrolytique 29 est inférieure à la tension de Zener de la diode Zener 28, et aucun courant ne passe dans la base du transistor 26. En conséquence, le circuit de détection de la tension du phare 25 détecte une tension de charge VL qui est inférieure à la premiere tension de référence VR1.Ainsi, le transistor 26 est à l'état bloque, et le thyristor 21 est conducteur du fait que la tension de sortie à courant alternatif de la bobine de l'alternateur est fournie à la gâchette du thyristor 21 sous la forme d'un signal de gâchette via la diode 22, la résistance 23 et les diodes 24. Il en résulte que l'alternance positive 19 de la sortie de la bobine de l'alternateur 10 et l'alternance négative 20 de la sortie sont toutes les deux fournies au phare de route 18 via le thyristor 21 et la diode 13.
Lorsque la vitesse de rotation du moteur est à un niveau intermédiaire, la tension aux bornes du condensateur électrolytique 29 ou la tension de charge redressée sur deux alternances VL devient supérieure à la tension de Zener de la diode Zener 28, et le transistor 26 est rendu conducteur, son courant de base entant fourni à l'envers à travers la diode Zener 28. En d'autres termes, la tension de charge VL devient supérieure à la première tension de référence VRî donnée par la tension inverse de la diode Zener 28. En conséquence, la tension du collecteur du transistor 26 chute, et aucun signal de gâchette n'est fourni au thyristor 21. Il en résulte que dès qu'une tension inverse est fournie au thyristor 21, celui-ci est bloqué.Une partie de l'alternance positive 19 de la sortie de la bobine de l'alternateur 10 n'est donc plus fournie au phare de route 18 et la forme d'onde donnée à la Figure 5b est produite au point V.
En thérapeutique humaine et vétérinaire (c'est-àdire chez l'homme et les animaux à sang chaud, notamment les animaux mammifères), le matériau peptidique intervient in vivo en tant que régulateur négatif (i.e. inhibiteur) de la mégacaryocytopoièse, et s'est révélé particulièrement efficace vis-à-vis du traitement des thrombocytémies.
Les thrombocytémies comprennent en particulier - la thrombocytémie dite essentielle, - la thrombocytémie d'autres types de syndromes myéloprolifératifs (notamment la polyglobulie, la leucémie myéloïde chronique et la splénomégalie myéloide), - la leucémie mégacaryocytaire, et - les thrombocytoses observées dans un certain nombre de cancers et d'autres états pathologiques.
Le matériau peptidique convient notamment par voie injectable (en particulier par voie intraveineuse, intramusculaire ou sous-cutanée) suivant une posologie quotidienne de 40 pg/kg à 1 mg/kg, et par voie orale suivant une posologie. quotidienne de 40 pg/kg à 10 mg/kg (sous forme de comprimés, gélules, manoparticules, le cas échéant en association avec des liposomes), dans le traitement desdites thrombocytémies.
De façon pratique, on utilisera par voie injectable une dose unitaire quotidienne de 40 pg/kg à 1 mg/kg, et par voie orale sous une forme gastrorésistante une dose unitaire quotidienne de 40 jug/kg à 10 mg/kg.
Comme indiqué ci-dessus, ledit matériau peptidique est également utile, en tant qu'inhibiteur spécifique de la mégacaryocytopoïèse, dans des tests biologiques et diagnostiques concernant la mégacaryocytopoièse.
ZEIlLvK MODE Le meilleur mode de mise en oeuvre de l'invention consiste à faire appel à un matériau peptidique qui essentiellement pur est constitué par le composé dodécapeptide de formule I, c'est-à-dire à un matériau qui contient au moins 95 % en poids de monomère, et mieux au moins 99 % en poids de monomère.
On préfère plutôt le monomère de formule I essentiellement pur pour la standardisation de la posologie anti-thrombocytémie, d'une part, et la mise en oeuvre des tests biologiques concernant la mégacaryocytopoïèse, d'autre part.
En effet, si du point de vue de la structure, une molécule du composé dimère de formule II est équivalente à deux molécules du compose monomère de formule I, les résultats des essais in vivo en pathologie dont on dispose ne permettent pas d'affirmer que le dimère est strictement équivalent à deux monomères sur le plan de 1' activité anti-mégacaryocytaire.
D'autres avantages et caractéristiques de l'invention seront mieux compris à la lecture qui va suivre d'exemples de préparation, d'une part, et d'essais pharmacologiques et biologiques, d'autre part. Bien entendu, l'ensemble de ces éléments n'est nullement limitatif mais est fourni à titre d'illustration.
EXEMPLE 1 Préparation d'un dodécapeptide de formule I où les aminoacides en position 1 et 3-12 sont de configuration L.
Ce produit est préparé selon la méthode classique de synthèse peptidique en phase hétérogène avec fixation sur un support solide. Au moment où l'aminoacide Cys va intervenir dans la synthèse, on introduit dans le milieu réactionnel une substance réductrice, dans le cas d'espèce, le dithiothréitol. Cette substance réductrice est présente dans le milieu réactionnel jusqu'à ce que le dernier aminoacide ait été fixé sur la chaîne peptidique.
On ajoute alors un antioxydant, le tampon acide ascorbique/ascorbate de potassium. On procède à la séparation du peptide formé de son support en présence dudit tampon. Le peptide ainsi séparé de son support est purifié par HPLC ou SDS-PAGE en présence dudit tampon acide ascorbique/ascorbate de potassium ; il est ensuite obtenu à l'état sec par lyophilisation.
Le matériau peptidique ainsi obtenu renferme plus de 99 % en poids du peptide monomère désiré.
EXEMPLE 2 Préparation d'un dodécapeptide de formule I où l'aminoacide en position 1 est de configuration D et les aminoacides en positions 3-12 sont de configuration L.
On procède comme indiqué à l'exemple 1 en rempla çant L-Asn par D-Asn et en incorporant dans le produit purifié de l'acide iodoacétique avant lyophilisation.
La présente invention procède de la découverte surprenante qu'il est possible d'activer le système protéine C etlou protéine S sans avoir recours à un activateur exogène qui, comme décrit précédemment, présente de nombreux inconvénients. De plus, le procédé de la présente invention présente les avantages d'être simple, facilement automatisable et sensible, même à des concentrations relativement faibles en protéine C etlou S.
Aussi, le procédé de la présente invention pour la détermination d'une activité anticoagulante protéine C etlou S dans un échantillon plasmatique comprend les étapes consistant à a - préparer un mélange comprenant i) l'échantillon plasmatique ii) une quantité prédéterminée de thrombomoduline pour permettre l'activation de la protéine C iii) au moins un facteur activé de la coagulation et/ou au moins un activateur de facteurs de la coagulation pour permettre la formation de thrombine endogène; b - incuber le mélange ainsi obtenu dans des conditions permettant l'activation de la Protéine C et l'expression de la protéine C activée; c - ajouter au mélange un substrat de la thrombine ; et d - quantifier l'activité protéine C etlou protéine S dans l'échantillon par détermination d'une activité enzymatique de la thrombine sur ledit substrat.
Bien entendu, il est connu de l'homme du métier que le mélange doit contenir une concentration prédéterminée en ions Ca++ pour activer la formation de thrombine endogène et l'expression de la protéine C activée.
Ces ions Ca++ peuvent être apportés au mélange par exemple par l'addition de thrombomoduline en solution dans un tampon calcique etXou par les facteurs et activateurs des facteurs de coagulation etlou par addition séparée. Dans le procédé selon l'invention, les ions Ca++ peuvent être apportés au mélange par les activateurs des facteurs de la coagulation.
Par ailleurs, les conditions d'incubation du mélange doivent être déterminées pour permettre l'activation de la protéine C par le complexe thrombomoduline exogène-thrombine endogène et l'expression de l'activité anticoagulante de la protéine C activée conduisant à l'inhibition de la formation de thrombine endogène. Ces conditions (temps, température) peuvent être déterminées dans chaque cas par des expériences de routine.
Aussi, selon un mode de réalisation particulier de l'invention, l'incubation du mélange est effectuée pendant 3 à 6 minutes, avantageusement 5 minutes, à 370C.
La thrombomoduline peut être d'origine humaine etlou animale, native etlou recombinante, modifiée et/ou non modifiée.
La thrombomoduline native humaine ou animale, par exemple de lapin, est extraite des cellules, par exemple les cellules endothéliales de poumon, de placenta, d'aorte, de pancréas, de foie, de rein, de peau, de coeur ou analogues. L'extraction peut être effectuée par un traitement des cellules endothéliales, par exemple par traitement thermique ou traitement chimique par un tensioactif ou un mélange de tensioactifs, selon les techniques conventionnelles, de façon à obtenir de la thrombomoduline soluble en présence de son environnement phospholipidique qui favorise sa solubilisation dans le mélange de l'invention.L'extraction peut également être effectuée après une étape préalable de traitement des tissus, tel qu'un traitement chimique, pour enlever l'environnement phospholipidique et la thrombomoduline insoluble ainsi obtenue est ensuite resolubilisée par addition subséquente d'agents chimiques de solubilisation, tel qu'un tensioactif ou un mélange de tensioactifs, par exemple un tensio-actif anionique tel que du désoxycholate de sodium ou un tensio-actif non ionique tel que du Triton X100 (nom commercial) ou par addition de phospholipides en milieu aqueux, tels que des phospholipides humains, animaux, végétaux ou de synthèse, ou encore par traitement enzymatique avec une élastase. Un traitement enzymatique par l'élastase permet à la fois de solubiliser la thrombomoduline et de supprimer son activité stimulant l'AT III.Il a en effet été montré que le domaine de la thrombomoduline adjacent à la partie transmembranaire, qui lui confère son insolubilité, est riche en chaînes polysaccharidiques susceptibles de multiplier par 4 ou 5 l'inhibition de la thrombine par I'AT III présente dans le plasma. Ces chaînes polysaccharidiques peuvent ainsi modifier la quantité de thrombine formée et fausser les tests.Pour les éliminer il est possible soit de cliver la partie C terminale de la thrombomoduline par l'élastase qui sépare le domaine porteur des sites de glycosylation et en même temps rend la molécule soluble, sans altérer ses sites de fixation pour la thrombine, soit de cliver les chaînes polysaccharidiques par un traitement enzymatique approprié, par exemple par la chondroïtinase, trypsine ou analogues, qui ne modifie pas la fixation de la thrombine, donc l'activation de la protéine C, tout en éliminant l'effet sur la neutralisation par I'AT III. Les chaînes polysaccharidiques peuvent aussi être neutralisées par addition de polycations, tels que bromure d'hexadiméthrine (Polybrène, marque déposée, ABBOTT LABORATORIES), sulfate de protamine, poly L-lysine ou analogues.
La thrombomoduline peut également être obtenue par recombinaison génétique. Un gène d'origine humaine ou animale codant pour la thrombomoduline, peut ainsi être cloné dans un vecteur d'expression et introduit dans une cellule procaryote ou eucaryote. La thrombomoduline peut être exprimée sous forme insoluble si l'ADNc code pour la synthèse complète de la protéine et solubilisée comme décrit précédemment, ou directement sous forme soluble si la transfection ne concerne que la partie de l'ADNc codant pour la partie soluble de la protéine.La thrombomoduline ainsi obtenue peut de plus être modifiée par un traitement enzymatique ou chimique approprié comme décrit précédemment.
La formation de thrombine selon le procédé de l'invention est déclenchée par l'addition au mélange de facteurs de coagulation activés, tels que les facteurs XII etlou X activés, etlou d'activateurs des facteurs de la coagulation.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, la formation de thrombine est déclenchée par addition au mélange d'un activateur du facteur XII en présence d'un mélange de phospholipides, ledit activateur étant choisi parmi l'acide ellagique, le kaolin, la silice ou la silice diatomée telle que la Célite ( nom commercial ). Selon un autre mode de réalisation,la formation de thrombine est déclenchée par addition au mélange d'un activateur du facteur VII, par exemple de la thromboplastine humaine ou animale, native ou recombinante, ou leurs mélanges. Selon un troisième mode de réalisation, un activateur du facteur X, par exemple du venin de serpent, tel que du venin de Vipera Russellii en présence de phospholipides, est ajouté au mélange de l'invention.
Le mélange de phospholipides est soit d'origine animale, soit d'origine végétale, soit de synthèse.
La concentration des facteurs de coagulation et/ou des activateurs des facteurs de la coagulation influence le temps de formation de la thrombine endogène. Aussi, les concentrations sont déterminées de façon à favoriser l'activation de la protéine C par la thrombine, et l'expression anticoagulante de la protéine C activée.
La quantification de l'activité du système Protéine C etlou Protéine S est effectuée selon des méthodes conventionnelles. Selon un mode de réalisation de l'invention, la formation endogène de thrombine est déterminée par addition au mélange préalablement formé du substrat naturel de la thrombine, c'est-à-dire le fibrinogène, et détermination de l'activité coagulante de la thrombine par une méthode chronométrique.