INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les circuits de synchronisation pipeline-pipeline 224A et 224b reçoivent un signal d'entrée de sélection de mode que l'on peut utiliser pour forcer à zéro les valeurs présentes sur les sorties des circuits de synchronisation pipeline-pipeline, dans le but de permettre aux oscillateurs de période A et B de fonctionner à la manière de deux oscillateurs indépendants. Lorsqu'il fonctionne en oscillateur indépendant, chacun des oscillateurs de période A et B fonctionne à une fréquence maximale qui est égale à la moitié de la fréquence maximale de fonctionnement du circuit oscillateur complet, lorsqu'il fonctionne à la manière d'un seul oscillateur. Le signal d'entrée de sélection de mode est utilisé conjointement au signal d'entrée SEL MODE 1 qui est appliqué au circuit diviseur 32 (figure 1), pour permettre l'utilisation du circuit générateur de configurations 12 (figure 1) conjointement à des cartes de canaux ne comportant que des circuits générateurs locaux à un seul chemin connectés à la sortie A du circuit diviseur 32 et aux sorties DDC A et RESIDU A du circuit oscillateur 34.
D'autre part, le signal d'entrée de sélection de mode peut être utilisé en association avec le signal d'entrée SEL MODE 2 qui est appliqué au circuit diviseur 32, pour permettre à l'ensemble du système générateur de base de temps rapide de fonctionner avec deux générateurs de configurations, et de fournir, à chaque entrée de noeud du dispositif sous test, une forme d'onde qui résulte soit des signaux qui sont appliqués sur le chemin A, soit des signaux qui sont appliqués sur le chemin B, conformément à des signaux d'entrée de sélection de générateur de configura tions qui sont appliqués à chaque générateur local.
Le registre 232A est incorporé entre les additionneurs 222A et 204A, et le registre 232B est incorporé entre les additionneurs 222B et 204B. Ces registres permettent l'utilisation d'additionneurs qui fonctionnent à la moitié de la vitesse qui serait nécessaire en l'absence des registres.
Les multiplexeurs 234A et 234B reçoivent des valeurs de période qui sont fournies par les mémoires vives 202A et 202B, et ils reçoivent des valeurs de période de zéro et des valeurs de période prises par défaut de 16,384 nanosecondes (un cycle d'horloge). Les multiplexeurs 234A et 234B sont adressés par des signaux de validation de rang RE A et RE B provenant du générateur de configurations, et par des signaux FORCAGE ZERO A et FORCAGE ZERO B provenant du circuit de période prise par défaut 236. Les sorties des multiplexeurs 234A et 234B sont connectées aux registres respectifs 226A et 226B, et aux circuits de synchronisation pipeline-pipeline respectifs 224B et 224A. Le circuit de période prise par défaut 236 applique également aux additionneurs 204A et 204B un signal d'entree qui force à zéro les signaux de sortie des additionneurs, et il applique aux détecteurs de confidence 212A et 212B un signal d'entrée qui force au niveau haut les signaux de sortie des detecteurs de coîncidence. Avant chaque salve de valeurs de période, pendant le fonctionnement du système de test automatique, le circuit de période prise par défaut 236 restaure et synchronise les oscillateurs A et B par l'intermé- diaire des multiplexeurs 234A et 234B, d'une manière décrite ci-dessous.
Les composants restants des oscillateurs A et B sont analogues aux composants qui sont représentés dans le circuit de la figure 5.
La transformation des levures appartenant au genre Kluvveromlvces, et en particulier les souches MW98-8C et CBS 293.91 de K.
lactis s'effectue par exemple par la technique de traitement des cellules entières par de l'acétate de lithium [Ito H. et al., J. Bacteriol. 153 (1983) 163168], adaptée comme suit. La croissance des cellules se fait à 280C dans 50 ml de milieu YPD, avec agitation et jusqu'à une densité optique à 600 nm (DO600) comprise -entre 0,6 et 0,8; les cellules sont récoltées par centrifugation à faible vitesse, lavées dans une solution stérile de TE (10 mM Tris HCl pH 7,4; 1 mM EDTA), resuspendues dans 3-4 ml d'acétate lithium (0,1 M dans du TE) pour obtenir une densité cellulaire d'environ 2 x 108 cellules/ml, puis incubées à 30"C pendant 1 heure sous agitation modérée.Des aliquotes de 0,1 ml de la suspension résultante de cellules compétentes sont incubés à 30"C pendant 1 heure en présence d'ADN et à une concentration finale de 35% de polyéthylène glycol (PEG4000, Sigma).
Après un choc thermique de 5 minutes à 42"C, les cellules sont lavées 2 fois, resuspendues dans 0,2 mi d'eau stérile et incubées 16 heures à 28"C dans 2 ml de milieu YPD pour permettre l'expression phénotypique du géne de résistance au G418 exprimé sous contrôle du promoteur Pkl (cf. EP 361 991); 200 Cll de la suspension cellulaire sont ensuite étalés sur boites YPD sélectives (G418, 200 Lg/ml). Les boites sont mises à incuber à 28"C et les transformants apparaissent après 2 à 3 jours de croissance cellulaire.
EXEMPLE 6: SECRETION DES CHIMERES.
Après sélection sur milieu riche supplémenté en G418 les clones recombinants sont testés pour leur capacité à sécréter la forme mature des protéines chimères. Quelques clones correspondant à la souche CBS 293.91 ou MW98-8C transformée par les plasmides d'expression des chimères entre la SAH et la partie biologiquement active sont mis à incuber en milieu YPD ou YPL à 280C.Les surnageants cellulaires sont récupérés par centrifugation quand les cellules atteignent la phase stationnaire de croissance, éventuellement concentrés 10 fois par précipitation pendant 30 minutes à -20 C dans une concentration finale de 60% d'éthanol, puis testés après électrophorèse en gel SDS-PAGE à 8.5%, soit directement par coloration du gel par du bleu de coomassie, soit après immunoblot en utilisant des anticorps primaires dirigés contre la partie biologiquement active ou un sérum polyclonal de lapin dirigé contre la SAH. Lors des expériences de détection immunologique, le filtre de nitrocellulose est d'abord incubé en présence des anticorps primaires spécifiques, lavé plusieurs fois, incubé en présence d'anticorps de chèvre dirigés contre les anticorps primaires, puis incubé en présence d'un complexe avidine-péroxydase en utilisant le "kit ABC" distribué par Vectastain (Biosys S.A., Compiègne, France). La réaction immunologique est ensuite révélée par addition de diamino-3,3' benzidine tetrachlorydrate (Prolabo) en présence d'eau oxygénée, selon les recommandations du fabricant.
EXEMPLE 7: CHIMERES DERIVEES DU FACTEUR DE VON WILLEBRAND.
E.7.1. Fragments antagonistes de la fixation du vWF aux plaquettes.
E.7.1.1. Résidus Thr470-Val7î3 du vWF.
Le plasmide pET-8c52K comporte un fragment du cDNA du vWF codant pour les résidus 445 à 733 du vWF humain et inclus donc plusieurs déterminants cruciaux de l'interaction entre le vWF et les plaquettes d'une part, et certains éléments de la membrane basale et du tissu sous-endothelial d'autre part, et notamment les peptides G10 et D5 antagonistes de l'interaction entre vWF et GPlb [Mori H. et al., J. Biol.
Chem. 263 (1988) 17901-17904]. Cette séquence peptidique est identique à la séquence correspondante décrite par Titani et al. [Biochemistry 25 (1986) 3171-3184] à l'exception du résidu 618 (thréonine à la place de l'alanine).
L'amplification de ces déterminants génétiques peut être réalisée à partir du plasmide pET-8c52K, par exemple par la technique d'amplification PCR, en utilisant comme amorce des oligodéoxynucléotides codant pour des résidus contigus localisés de part et d'autres de la séquence à amplifier.
Les fragments amplifiés sont ensuite clonés dans des vecteurs du type M13 en vue de leur vérification par séquençage en utilisant soit les amorces universelles situées de part et d'autre du multisite de clonage, soit des oligodéoxynucléotides spécifiques de la région amplifiée du gène du vWF dont la séquence de plusieurs isomorphes est connue [Sadler J.E.
et al., Proc. Natal. Acad. Sci. 82 (1985) 6394-6398; Verweij C.L. et al., EMBO J.
5 (1986) 1839-1847; Shelton-Inloes B.B. et al., Biochemistry 25 (1986) 31643171; Bonthron D. et al., Nucleic Acids Res. 17 (1986) 7125-7127]. Ainsi, l'amplification PCR du plasmide pET-8c52K avec les oligodéoxynucléotides 5'-CCCGGGATCCCTTAGGCTTAACCTGTGAAGCCT- GC-3' (Sq1969, le site MstII est souligné) et 5'-CCCGGGATCCAAGCTTAG ACTTGTGCCATGTCG-3' (Sq2029, le site HindIII est souligné) génère un fragment de restriction MstII-HindIII incluant les résidus Thr470 à Val713 du vWF (Figure 4, panneau A). La ligature de ce fragment avec le fragment de restriction HindIII-MstII correspondant à la totalité du gène codant pour la SAH à l'exception des trois acides aminés les plus Cterminaux (cf.Figure 2) génère un fragment de restriction Hindîli comportant un gène hybride codant pour une protéine chimère du type SAH-PEPTIDE (Figure 1, panneau A), immédiatement précédée de la région d'exportation "prépro" de la SAH. Ce fragment de restriction est cloné dans l'orientation productive dans le site Hindîli du plasmide pYG105, ce qui génère le plasmide d'expression pYG1248.
E.7.1.2. Variants moléculaires.
Dans un autre mode de réalisation, le site de liaison du vWF est un peptide incluant les résidus Thr470 à Asp498 du vWF mature. Cette séquence inclus le peptide GlO (Cys474-Pro488) décrit par Mori et al. [J.
La synthèse des 4'-thio-oligonbonucléotides utilise la méthode de synthèse sur support solide en stratégie méthoxyphosphoroamidite bien connue en série oxygénée.
Cependant, les oligomères modifiés obtenus sont tout à fait nouveaux à ce jour.
III. PARTIE EXPERIMENTALE.
Exemple I: Synthèse de l'homododecamère BrSU12.
1-1 Synthèse du support solide: Le support solide P-1 (2,415 g) est mis en suspension avec une solution (50 ml) d'acide trichloroacétique à 3 % dans CH2C12 anhydre. Après 4 h 15 d'agitation, 50 ml d'une solution de triethylamine et de diisopropylamine (9:1) est ajoutée et après 5 mn d'agitation la solution est filtrée. Le support solide P-2 ainsi obtenu est lavé par du dichlorométhane (2 x 50 ml) puis par de l'éther (50 ml) et mis à sécher.
Condensation du support solide P-3 avec le 1-[3'-O-tert-butyldiméthylsilyl-2'- hydroxy-4' thio-5 ' -O-dimethoxytrityle-B-D-ribofurannosyU Uracile 25 b Un mélange de P-3 (2,415 g) de 1-[3'-O-tert-butyldiméthylsilyl-2'-hydroxy-4'thio-5'-O- diméthoxytrityle-ss-D-ribofurannosyl]Uracile 25 b (333 mg, 1 éq.) de la DMAP (29,5 mmg, 0,5 éq.) de la triethylamine (0,146 mg, 202 l, 0,003 éq.) et du DEC (920 mg, 10 éq.) dans 29 ml de pyridine anhydre est agité 3 jours à température ambiante.
On ajoute ensuite du pentachlorophénol (321 mg, 2,5 éq.) et on laisse sous agitation 24 heures supplémentaires. Le support solide est alors filtré, rincé avec de la pyridine anhydre (2 x 50 ml) puis avec du dichlorométhane (2 x 50 ml) et de l'éther (2 x 50 ml).
Immédiatement après, on traite le support solide P-5 par 25 ml de pipéridine. Après agitation à température ambiante pendant 24 heures, le support solide est filtré, lavé par du dvichlorométhane (2 x 50 ml) puis de l'éther (2 x50 ml) et mis à sécher sous vide.
Le support solide sec (2,415 g) est mis en prèsence d'une solution d'anhydride acétique (0,5 M) dans le THE (15 ml) et d'une solution de collidine (0,5 M) dans le THF (15 ml).
Après 4 heures de réaction, le support solide est lavé avec de la pyridine anhydre (2 x 50 mi), du dichlorométhane (2 x 50 ml), du TNF (2 x 50 ml) et de l'éther (2 x 50 ml).
On ajuste alors le volume à 10 ml avec la solution 0,1 M d'acide para-toluène sulfonique dans l'acétonitrile. On prélève 0,3 ml de cette solution à laquelle on ajoute 5 ml de la solution 0,1 M d'acide para-toluène sulfonique. La lecture de la DO (0,317 unité de DO) à 500 nm nous permet de calculer le degré de fonctionnalisation du support P-6 qui est dans ce cas de 21 ,umole/gramme de support solide.
DESCRIPIION DU MODE DBECUTION PREFERE Nous référant à la numérotation référencée dans les figures, l'articulation perfectionnée pour membres de poupées est fondée sur la base du rattachement des membres opposés au moyen d'éléments élastiques, cette liaison étant assurée par des pièces tronconiques, tel qu'on peut le constater dans la figure 1.
Ainsi donc, nous aurons les extrémités supérieures 1-1' reliées à travers la poitrine de la poupée au moyen de l'élément élastique 3. Cet élément élastique 3 coulisse à ses deux bouts dans des pièces tronconiques 4, et reste assuré à l'aide d'une bride ou collier de serrage 5 qui vient s'encastrer dans un évidement cylindrique 6 prévu à cet effet.
Cette pièce tronconique 4 vient s'introduire dans le membre 1-1' à travers un orifice 7 pratiqué dans l'extrémité de celui-ci, où elle demeure logée dans un renfoncement 8 prévu pour la recevoir. Elle demeure fixée par la butée constituée par la collerette 9 de la pièce tronconique venant se loger à l'intérieur de la configuration annulaire du membre.
Une fois insérées les pièces tronconiques 4 dans les extrémités 1-1', ces dernières resteront plaquées contre le corps 2 de la poupée sous l'effet de l'élément élastique 3; toutes sortes de mouvements étant dès lors rendus possibles grâce à la configuration sphérique que présentent les bouts de ces extrémités venant se loger dans les alvéoles 10 du corps 2.
Par ailleurs, les extrémités inférieures 11-11' seront articulées de la même manière décrite ci-dessus, avec la particularité que l'élément élastique 12 qui les relie est enserré par une bride 13, constituant ainsi un lien 14 qui monte à l'intérieur du corps de la poupée pour articuler la tête 15 à travers le col, au moyen du même système précédemment décrit. Le corps de la poupée peut même être constitué par une partie pectorale 2 et une partie inférieure 16 qui sont rattachées et assurées par le lien 14 en matière élastique, avec possibilité d'articulation grâce à la forme générale sphérique 17 des deux parties.
AGENT DE BROYAGE ET/OU DE DISPERSION A BASE DE POLYMERES ET/OU COPOLYMERES NEUTRALISES EN PARTIE PAR DU MAGNESIUM POUR SUSPENSIONS AQUEUSES DE MATERIAUX MINERAUX EN VUE D'APPLICATIONS PIGMENTAIRES.
La présente invention concerne un agent amélioré de broyage et/ou de dispersion en suspension aqueuse de matériaux minéraux grossiers permettant d'obtenir une suspension aqueuse de particules minérales affinées, destinée à des applications pigmentaires telle qu'une suspension aqueuse de carbonate de calcium dont la teneur en matière sèche est d'au moins 70% en poids, dont au moins 90% des particules constitutives après broyage ont une dimension inférieure à deux microns, tandis qu'au moins 60% d'entre elles ont une dimension inférieure à un micron.
Depuis longtemps déjà, il est connu d'utiliser des substances minérales telles que les carbonates de calcium ainsi que le dioxyde de titane pour la préparation de produits industriels destinés aux domaines des peintures, de l'enduction du papier, des charges pour caoutchoucs et résines synthétiques, ou autres.
Mais, comme ces substances minérales ne possèdent pas une structure naturelle lamellaire ou feuilletée facilitant leur délitage, comme c'est le cas de certaines substances telles que les silicates d'aluminium habituellement connus sous le nom de kaolin, l'homme de l'art, pour pouvoir les utiliser dans le domaine pigmentaire, doit les transformer par broyage en une suspension aqueuse de grande finesse dont les grains constitutifs ont une dimension la plus faible possible, c'est-à-dire inférieure à quelques microns.
Ainsi, jusqu'à présent, l'homme de l'art connait l'utilisation d'agents de broyage et/ou de dispersion aqueuse de particules minérales constitués par des polymères et/ou copolymères acryliques totalement ou partiellement neutralisés par divers agents de neutralisation (brevets FR2539137, FR2531444, Fur2603042) L'homme de l'art connait aussi l'utilisation d'un agent de broyage et/ou de dispersion constitué par la fraction des polymères et/ou copolymères acryliques alcalins totalement neutralisés par un seul cation, et dont la viscosité spécifique est comprise entre 0,3 et 0,8 (brevet FR2488814), ou partiellement neutralisés par un seul cation tel que le sodium, le potassium, le lithium ou l'ammonium (EP0127388; EP0185458).
Ces divers types d'agents de broyage et/ou de dispersion de l'art antérieur permettent d'obtenir des suspensions aqueuses de particules minérales affinées, considérées jusqu'à maintenant comme stables dans le temps mais pour lesquelles l'utilisateur éprouve certaines difficultés de manipulation car il est amené à stocker ces suspensions plusieurs jours ou semaines sans agitation et se retrouve ainsi confronté à l'augmentation de la viscosité de la suspension non agitée.
En effet, dans l'art antérieur, la mesure de la viscosité de la suspension aqueuse de particules minérales était habituellement effectuée à l'aide d'un viscosimètre Brookfield type RVT à une température de 200C et une vitesse de rotation du mobile n03 de 100 tours par minute (a) à la sortie du broyeur, (b) après huit jours de repos dans le flacon et après une agitation préalable de la suspension laissée au repos.
Ces deux paramètres de mesure n'ont pas permis de mettre en évidence "l'augmentation de la viscosité" de la suspension aqueuse minérale néfaste pour l'utilisateur ayant à manipuler des suspensions concentrées stockées depuis plusieurs jours sans agitation, et caractérisée par une viscosité Brookfield avant agitation supérieure à 2000 mPa.s pour une mesure effectuée à 10 tours par minute.
Forte de cette constatation, la Demanderesse a alors mis au point un agent de broyage et/ou de dispersion qui, de manière surprenante, permet de réaliser des suspens ions minérales aqueuses répondant aux critères de qualité précités.
De manière surprenante, le but de l'invention est obtenu lorsque le pourcentage de neutralisation des sites actifs acides du polymère par un agent de neutralisation contenant l'ion magnésium est compris entre 40 et 60%, bornes incluses, tandis que le pourcentage de neutralisation des sites acides actifs du polymère par un agent de neutralisation contenant l'ion sodium est inférieur ou égal à 60%.
RMN 31p (CD3CN): S 151,30 et 150,05 Spectrométrie de masse FAB > O PEG m/z 941 [M+H]+, 637 [M+H-DmTrH] 303 [D,Tr]+.
1-[2'-O-tert-butyldiméthylsilyl-3'-N,N-diisopropylméthoxyphosphoramidite4'thio-5'-O-diméthoxytrityle-ss-D-ribofurannosyl] N6benzoyl Adénine 26 d.
RMN 31p (CDCl3): s 151,26 et 150,01 Spectrométrie de masse FAB > O PEG m/z 964 [M+H]+, 600 [M+H-DmTrH]' 303 [DmTrJ+.
Il. 3 Fonctionalisation du support solide (Schéma 10).
Le support solide ou LCA-CPG (Long Chain Aikylamine Controlled Pore Glass) P-1 a tout d'abord été activé par une solution d'acide trichloroacétique à 3 % dans le dichlorométhane à température ambiante pendant 2 à 3 heures afin de libérer le plus grand nombre de groupements amino, ce qui conduit au maximum de sites réactifs sur la surface des billes de verre. Le support ainsi activé P-2 est alors fonctionnalisé par couplage avec de l'anhydride succinique dans la pyridine en présence de 4-DMAP ce qui conduit à P-3. Dans l'étape suivante, le nucléoside 3'-silylé 25 est utilisé puisqu' il a été obtenu pendant la réaction de silylation des thioribonucléosides et n'est pas nécessaire pour la synthèse d'oligothionucléotides contenant la liaison phosphodiester 3'-5'.Ainsi, P-3 activé par le 1 (3-diméthylaminopropyl) 3-éthylcarbodiimide (DEC) en présence de 4-DMAP est mis en réaction dans la pyridine anhydre avec le 5'-O-DmTr-3'-OTBDMS ss-D-thioribonucléoside 25. Les sites non utilisés du support sont masqués à l'aide de pipéridine. Une dernière étape de masquage à l'anhydride acétique en présence de collidine dans le THF conduit à P-6. La quantité de nucléoside fixée sur le support est déterminée par spectrophotométrie U. V. en mesurant la quantité de cation diméthoxytrityle libéré après un traitement par une solution à 10 % d'acide trichloroacétique dans le dichlorométhane. Le degré de fonctionnalisation varie de 21 à 38 pmole par gramme de support suivant la nature de la base nucléosidique.
(i = TCA3%, CH2C12; ii = anhydride succinique, DMAP, Pyr.; iii = 51o-DrnTr4'-thio-3'o-TBDMS-I3- D-ribonucléoside, DMAP, NEt3, DEC Pyr.; iv = pentachlorophénol; v = pipéridine; vi = Ac1O 0.5M dans THF) SCHEMA 10 II. 4. Synthèse automatisée des thiooligonucléotides (Schéma 11).
Les thiooligonucléotides ont été synthétisés sur un synthétiseur à ADN (Applied Biosystems modèle 381 A). Le cycle d'élongation comporte quatre étapes importantes: Détritylation du nucléoside ou de l'oligonucléotide fixé sur le support solide.
Condensation du phosphoramidite activé par le tétrazole sur l'hydroxyle 5' libre du nucléoside ou de l'oligonuciéotide.
SCHEMA 11 Chaque synthèse a été effectuée sur une colonne contenant 40 mg de support solide. Le rendement de chaque incorporation est de 98 % évalué en mesurant la concentration des cations diméthoxytrityles récupérés après chaque couplage par traitement du support à l'acide trichloroacétique.
Numéro Etape Temps (sec.) Solvant et Réactifs 1 Séchage et 24 MeCN-Argon Lavage 2 Détritylation 80 TCA à 3% dans CH2Cl2 3 Séchage et 74 MeCN-Argon Lavage 4 Couplage 915 amidite 0.1M(24eq.)+MeCN +tétrazole 0.5M(10eq.)+MeCN 5 Séchage 45 argon 6 Masquage 23 Méthyimidazole-THF Ac2O/lutidine/THF::1/1/8 7 Séchage 11 argon 8 Oxydation 43 12 0.1M dans THF/Pyr./H2O 40/10/1 9 Lavage 53 MeCN TABLEAU 1: Cycle d'élongation utilisé pour la synthèse du BrSU12.
II. 5. Décrochage, Déprotection et Purification du thiooligomère.
l'ADN hétérologue consiste de préférence en un gène hétérologue codant pour un antigène protecteur cible de lymphocytes T de la sous-classe CD8.
Cet antigène peut être d'origine bactérienne (par exemple de mycobactéries), parasitaire, (par exemple de Leishmania, Trypanosoma ou Toxoplasma) ou viral (virus de la grippe, virus de la chorioméningite lymphocytaire (LCMV) ou virus du Sida (VIH)).
Un mutant recombinant de Listeria monocytoge nes particulièrement intéressant comporte les gènes codant pour l'antigène gag et/ou l'antigène nef du VIH ou tout ou partie de l'enveloppe gp 120 du VIH 1 ou gp 140 du VIH 2 ou par un peptide tel que défini dans US-4 943 628.
La construction du mutant recombinant peut être réalisée par transformation d'un mutant atténué tel que défini ci-dessus, notamment du mutant LUT 12 à l'aide d'un plasmide appropriélet par exemple électroporation.
Avantageusement, le clonage de l'ADN hétérologue sera réalisé chez E. Coli et on utilisera un plasmide navette E. Coli - Listeria monocytogenes pour réaliser la transformation.
Comme plasmides, on peut citer pMKA (Sullivan et al., (14)) ou PHT 320 (Leredus et al., (15)).
Pour permettre l'expression du gène d'intérêt (gène hétérologue), il est avantageux d'insérer en amont du gène d'intérêt un promoteur fort de Listeria, tel que le promoteur hly.
Pour que le produit de traduction du gène d'intérêt puisse être secrété, il est préférable de fusionner le gène d'intérêt au début de hly afin d'utiliser "la séquence signal" de la listériolysine 0 pour libérer la protéine d'intérêt codée par le gène hétérologue dans le cytoplasme d'une cellule d'hôte.
Les souches recombinantes de Listeria monocytogenes tels que définies ci-dessus conviennent de manière avantageuse pour la préparation d'un vaccin recombinant humain ou vétérinaire, contre une infection provoquée par un microorganisme produisant un antigène correspondant à la protéine codée par l'ADN hétérologue inséré dans le génome de Listeria monocytogenes recombinant.
Les vaccins selon l'invention peuvent être administrés par voie intra-veineuse, sous-cutannée, intra-musculaire ou orale.
Une dose appropriée se situe entre 5.104 et 109 cellules/kg de poids.
Cette dose varie en fonction de la voie d'administration ainsi que de la sensibilité de l'hôte.
L'administration est de préférence répétée afin de conférer une protection efficace à l'hôte.
Les mutants recombinants de Listeria monocytogenes définis ci-dessus sont également appropriés à la préparation d'une composition de diagnostic destinée au contrôle de l'état de protection d'un hôte humain ou animal contre une infection provoquée par un microorganisme produisant un antigène correspondant à la protéine codée par l'ADN hétérologue inséré dans le génome de Listeria monocytogenes recombinant ou exprimé dans cette souche lorsque porté par un plasmide.