INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans une partie du Mode d'Initialisation, l'opérateur a la possibilité d'introduire indirectement la vitesse de l'onde acoustique de cisaillement (front d'onde transversale ) pour l'anneau de retenue 22 à contrôler. Cela est réalisé en utilisant un instrument disponible dans le commerce et opérant par échos d'impulsions ultrasoniques, et également en utilisant un transducteur ultrasonique 91 qui produit un front d'onde de cisaillement de zéro degré normal à la surface d'inspection. La section de filtrage d'écho de l'instrument 13 est réglée en adaptation à la fréquence de résonance du transducteur ultrasonique, qui est la même que la fréquence nominale de résonance du ou des transducteurs ultrasoniques utilisés pour l'inspection de l'anneau de retenue. L'opérateur place le transducteur ultrasonique en contact avec une partie de l'anneau à contrôler, qui est parallèle à l'axe du rotor de générateur 28, et dans une position axiale correspondant à une épaisseur radiale connue de l'anneau de retenue. L'opérateur enregistre ensuite le temps mis par l'onde acoustique ultrasonique pour traverser l'épaisseur radiale de l'anneau de retenue, pour être réfléchie par la surface périphérique intérieure de l'anneau de retenue et pour revenir à l'instrument ultrasonique 13. Cette valeur, t, est introduite dans le modèle d'entrée de données du Mode d'Initialisation.
L'ordinateur 19 calcule la vitesse d'onde de cisaillement mesurée en utilisant la relation suivante Vs = 2X/t x 106 où Vs = vitesse de l'onde acoustique de cisaillement dans 11 anneau de retenue (centimètres/seconde) X = épaisseur d'anneau prise sur le dessin ( en pouces t = temps en microsecondes pour le déplacement de l'onde acoustique de cisaillement jusqu'à la périphérie intérieure de l'anneau de retenue et pour son retour à l'instrument ultrasonique 13.
L'ordinateur 19 affiche la vitesse d'onde acoustique calculée sur le visualiseur 223 et mémorise cette valeur dans la mémoire RAM en vue d'une utilisation ultérieure. Si l'opérateur sort du Mode d'Initialisation, l'ordinateur 19 mémorise l'information contenue dans le modèle d'entrée de données dans la mémoire RAM et sur un support d'enregistrement magnétique 229.
Lors d'une entrée dans le Mode "Home" (Définition position de zéro ), l'ordinateur 19 affiche un modèle d'interface d'opérateur sur le visualiseur 223.
Le Mode "Home" sert à définir la position de zéro à la fois pour l'axe circonférentiel et pour l'axe axial de l'appareil de sondage 22 d'anneau de retenue.
L'opérateur peut ramener à zéro l'axe axial en déplaçant le chariot linéaire 34 jusque dans la position de zéro à ltextrémité-nez de l'anneau de retenue 25. Ce mouvement est réalisé en utilisant la télécommande manuelle 181 et le mouvement se poursuit jusqu'à ce que le contacteur-limiteur avant 160 soit atteint et que le mouvement soit arrêté. Sous l'effet d'erreurs de position lors d'une détermination exacte de la position d'arrêt du chariot linéaire quand le contacteur-limiteur avant 160 est atteint, un transducteur de déplacement 220 détecte de façon plus précise lorsque le chariot linéaire 34 est situé dans la position correcte par rapport à l'avant de l'appareil de sondage 22 d'anneau de retenue. L'opérateur signale à l'ordinateur 19 par l'intermédiaire du clavier à touches 226 que le chariot linéaire a atteint la position de zéro.
Pour ramener à zéro l'axe circonférentiel, l'opérateur déplace l'appareil de sondage 22 d'anneau de retenue jusque dans la position "douze heures".
Le signal de sortie du clinomètre analogique 217 est échantillonné par le module analogique-numérique 205 et il est transmis à l'ordinateur 19 pour un affichage sur le visualiseur 223 afin d'indiquer la position "douze heures" pour l'opérateur. A ce moment l'opérateur signale à l'ordinateur 19 par l'intermédiaire du clavier à touches 226 que l'appareil de sondage 22 de l'anneau de retenue a atteint la position circonférentielle de zéro.
L'étape suivante consiste à produire un facteur d'étalonnage pour le transducteur correctif de position circonférentielle 55. Cela doit être effectué pour chaque anneau de retenue 25 principalement à cause de variations concernant les diamètres d'anneaux et les longueurs de chaînes. A partir de la position de zéro, l'opérateur déplace l'appareil de sondage 22 de l'anneau de retenue de trois cent soixante degrés (360 ) autour de l'anneau de retenue jusqu'à ce qu'il atteigne le même point de départ. A ce moment, l'opérateur signale à l'ordinateur 19, par l'intermédiaire du clavier à touches 226, que l'appareil de sondage 22 d'anneau de retenue a parcouru 360 . L'ordinateur 19 calcule le facteur d'étalonnage correct pour le transducteur correctif de position circonférentielle 55, sur la base de la différence entre la valeur de position de zéro et la valeur de position 360".
Le Mode "Time-of-Flight Table" (Tabulation de paramètre de contrôle) est utilisé pour créer une table de paramètres de contrôle d'anneau de retenue à partir des dimensions sur plans de l'anneau de retenue et des mesures de vitesse acoustique qui ont été enregistrées dans le Mode "Initialization". L'ordinateur 19 détermine les paramètres de contrôle qui sont optimaux pour l'anneau à contrôler. Les paramètres de contrôle comprennent des positions de transducteurs, des angles de coins à transducteurs et des temps précis de propagation d'ondes ultrasoniques nécessaires pour un examen d'un emplacement approprié sur les surfaces intérieures de l'anneau de retenue. La table de paramètres de contrôle est mémorisée par l'ordinateur 19 dans une mémoire à accès sélectif en vue d'une utilisation éventuelle dans le Mode "Scan" (Sondage). L'opérateur a la possibilité facultative de produire une impression de la table dans une imprimante 232 de sortie de copie.
(Infection and Immunity : 1985, 47 : 191-200) . Les anticorps primaires ont été dilués au 1/8, le sérum de chèvre anti IgG de lapin marqué à l'or colloïdal (Jansen Pharmaceutical, Piscatoway, N.J.) et le sérum de chèvre anti IgG lapin marqué à la ferritine (Miles-Yeda, L td.
Rehovot, Israël) ont été utilisés au 1/50.
B) ETUDE MORPHOLOGIOUE DE L'ANTIGENE CS31A EN MICROSCOPIE ELECTRONIOUE I - Observations après coloration négative (acide phosphotunastique) 1) Sur cellules entières La Figure 1 est une photographie représentant une coloration négative x110000 de la souche sauvage de référence E.coli 31A. Cette bactérie exprime à sa surface des flagelles (fl), des fimbriae rigides dénommés 20K (fim) et l'antigène CS31A (clp).
Les fimbriae 20K ont une structure filamenteuse rigide de 5 nm de diamètre et peuvent atteindre une longueur de 1 Fm. L'antigène CS31A ne présente pas cet aspect filamenteux, mais forme une structure capsulaire granuleuse qui enveloppe entièrement la surface de la cellule bactérienne.
2) Sur des extraits totaux Les structures péricellulaires ont été séparées des cellules bactériennes par Vortex.
Après coloration négative (x110 000), on observe clairement sur la photographie de la figure 2 les flagelles (fl) et fimbriae 20K (fim) . L'antigène CS31A (clp) a l'aspect d'une masse granuleuse qui adhère aux autres structures. Chaque granule a une dimension estimée de 50 x 100 . Ces grains pourraient représenter la sous-unité constitutive de l'antigène CS31A.
3) Sur des extraits purifiés La photographie de la figure 3 montre l'antigène CS31A purifié de haut poids moléculaire, après coloration négative.
La fraction purifiée a un aspect granuleux déjà observé sur les autres préparations. On ne distingue aucune structure fibrillaire, les "grains" semblent désordonnés. Par comparaison, l'extrait purifié d'antigène K88 montre clairement un aspect fibrillaire (photographie de la Figure 4).
Il - Observation après marquage par des anticorps spécifiques 1) Révélation à l'or colloïdal (10 nm) sur cellules entières Après dépôt sur les grilles, l'antigène CS31A a été marqué par un anticorps spécifique (lapin), puis revélé par un anti-lapin conjugué à l'or colloïdal.
Sur la photographie de la figure 5, on observe que les grains d'or sont répartis uniformément autour de la cellule bactérienne, qu'il n'y a pas de marquage de fibres comme on l'observe généralement avec des fimbriae. L'antigène CS31A semble se détacher facilement de la cellule.
2) Révélation à la ferritine sur coupe de 50 nm d'épaisseur Les bactéries sont marquées par des anticorps spécifiques anti CS31A obtenus en immunisant des lapins et par des anti-IgG de lapin obtenues sur chèvre conjugués à la ferritine. Les cellules sont ensuite enrobées dans une résine synthétique puis coupées.
La photographie de la figure 6 montre que les grains de ferritine sont disposés tout autour d'une structure de type capsulaire qui enveloppe entièrement la cellule bactérienne. Aucune structure fibrillaire n'est marquée par la ferritine.
III - Conclusions de l'étude structurale de CS31A Dans un fimbria, les sous-unités (piline) polymérisées, adoptent une structure hélicoïdale plus ou moins WTtendueWr. Dans les fimbriae dits "rigides" (diamètre de 5-7 nm) les sous-unités sont enroulées le long d'un squelette hélicoïdal, les sous-unités d'une spire formant des interactions avec les sous-unités des autres spires. Dans les "fimbrillae" ou fimbriae flexibles (diamètre de 2 nm) les sous-unités sont également enroulées sur un squelette hélicoïdal, mais les sous-unités d'une spire n'ont plus d'interactions directes avec les sous-unités des autres spires. Par contre, les hélices "détendues" peuvent former des fuseaux en associant des centaines de fibres individuelles. Les antigènes K88 et F41 adoptent ce type de structure comme le montre la photographie de la figure 4.
Dans le cas de CS31A, les sous-unités protéiques sont polymérisées, mais ne semblent pas enroulées sur un squelette hélicoïdal et ne forment pas de fimbrillae. Les sous-unités s'associent en masse granuleuse pouvant ressembler à une capsule. Ce type d'organisation de type "capsule like antigen" a été décrit en 1985 par Orskov et al. (An adhesive capsule of Escherichia coli. Infect. Immun. 1985, 47 : 191-200).
Les résultats déjà publiés (Infect. Immun.
56 : 2180-2188) montrent ce type de structure capsulaire. Cependant la terminologie de "capsule like" n'ayant pas été adoptée, le terme de fimbriae qui paraissait convenir a été retenu, mais les travaux menés ultérieurement à partir d'extaits purifiés, confirment pourtant l'aspect non fibrillaire de l'antigène CS31A, comme le montre la photographie de la figure 3.
Les opérations de 1'ALU 17 avec l'unité de décalage 16 permettent d'extraire en deux instructions (et 2 cycles CPU) la mantisse et l'exposant d'un nombre.
Une opération de multiplication est exécutée en instructions multiples à un cycle (MPY/MPY1).
Les instructions de multiplication utilisent l'algorithme de Booth avec un procédé de décalage et d'addition.
L'unité centrale de traitement CPU du BBSP contient huit registres internes à 16 bits qui peuvent être utilisés comme registres universels ou comme registres spécialisés avec une fonction dédiée.
Les registres X et B peuvent être utilisés pour un adressage indirect avec une possibilité de post incrémentation.
Le registre 6 est utilisé comme compteur de programme.
Le registre M est utilisé pour la multiplication avec un décalage de 2 bits à droite.
Le registre A2 est le registre de destination pour la normalisation d'instructions.
SW est le registre de status.
L'organisation de la CPU et de la mémoire du BBSP va maintenant être décrite.
Le diagramme fonctionnel de la Fig.1 montre les principaux blocs et trajets de données dans le BBSP.
La CPU du BBSP contient huit registres internes qui sont les suivants.
Le registre X est un registre à 16 bits ou registre indirect.
Le registre B est un registre à 16 bits ou registre indirect.
Le registre Ao est un registre à 16 bits.
Le registre AI est un registre à 16 bits.
Ainsi que cela est visible dans les figures, l'élément de fixation avant 3 est assemblé au ski par l'intermédiaire d'une embase 25, qui s'étend approximativement sous la plaque de base 6 de l'élément de fixation. En particulier, 'embase 25 présente une partie arrière 26 qui est surélevée par rapport à la surface supérieure du ski, et à laquelle l'organe de liaison 21 est connecté, par exemple par le moyen d'un axe d'articulation transversal 27. Dans les figures, la partie arrière 26 de l'embase 25 se trouve en arrière de la plaque d'appui 7 de l'élément de fixation avant 3.
Ainsi, L'organe de transmission 21 transmet la force P à l'embase 25, dans une zone qui est surélevée par rapport à la surface supérieure du ski. L'embase génère alors sur le ski un moment de flexion qui tend à faire plonger l'extrémité avant du ski en direction de la surface de glisse, ce qui tend à améliorer la conduite du ski sur la neige.
En se référant plus particulièrement aux figures 2 à 4, L'embase 25 comprend un élément fixe 30, qui s'étend au moins en partie sous la plaque de base 6 de l'élément de fixation avant 3, qui est assemblé au ski par tout moyen approprié, et par exemple par des vis. La plaque de base 6 de I'élément de fixation est assemblée à l'élément fixe 30 par tout moyen approprié, par exemple par des vis. ces vis peuvent traverser totalement l'élément fixe 30 pour réaliser son assemblage au ski, ou alors, la plaque de base et l'élément fixe peuvent être assemblés par des vis distinctes.
Dans le mode de réalisation illustré, l'élément fixe 30 présente, vu de dessus, une forme de U ouvert vers l'arrière, qui définit, dans sa partie centrale, un évidement 32.
L'embase 25 comprend par ailleurs un élément de transmission mobile 31, qui peut se déplacer librement selon une direction longitudinale. Dans l'exemple illustré, l'élément de transmission mobile 31 est emboîté sur l'élément fixe 30, et il se guide sur l'extérieur de cet élément pour n'avoir qu'un seul mouvement possible selon une direction longitudinale. L'organe de transmission 21 est relié à l'élément de transmission mobile 31 de l'embase 25 par l'axe d'articulation 27 précédemment décrit, qui est situé dans la partie arrière 26 de l'embase 25, c'est-à-dire de l'élément mobile 31.
L'embase 25 présente également un moyen de rappel élastique 33 qui s'oppose au mouvement de translation de l'élément de transmission 31 vers l'avant du ski. Dans l'exemple illustré, le moyen de rappel élastique 33 est constitué par une batterie de trois ressorts 35, 36 et 37, qui sont montés parallèlement à l'axe longitudinal défini par le ski. Les ressorts sont logés dans l'évidement 32 que présente l'élément fixe 30. lis prennent appui par l'une de leurs extrémités contre l'élément fixe 30, et leur autre extrémité est sollicitée par les mouvements de l'élément de transmission 31 auquel les ressorts s'opposent en développant une force de rappel élastique.De préférence, les ressorts sont tarés, c'est-à-dire qu'ils sont précontraints et que leur longueur reste constante tant que la force appliquée par l'élément de transmission 31 ne dépasse pas une valeur prédéterminée de tarage. Tant que cette force est inférieure à la force prédéterminée, elle est transmise intégralement à l'embase 25 et elle génère, au niveau de l'embase, un moment de flexion sur l'extrémité avant du ski.
Si la force appliquée par l'élément de transmission 31 excède la force prédéterminée de tarage, une partie de cette force appliquée est absorbée par les ressorts de tarage. Ceci se produit lors de sollicitations élevées de la chaussure en direction du ski ou du ski en direction de la chaussure. De telles sollicitations provoquent une rotation du basculeur 16 et une translation de l'organe de transmission 21 sur une amplitude relativement importante. La compression des ressorts 35 à 37 permet d'absorber une partie de l'énergie engendrée par un tel déplacement, et évite que l'organe de transmission 21 soumette l'embase 25 à des contraintes très élevées et le ski à des moments de flexion excessifs. Elle évite aussi que le dispositif interface réagisse de façon excessive lorsque le ski est soumis de la part du terrain à des déformations brutales, des chocs notamment.
En d'autres termes, l'énergie qui naît avec les mouvements du palpeur sous l'action des sollicitations entre le ski et la chaussure est transmise à l'embase 25 par l'organe de transmission 21.
Jusqu'à une valeur prédéterminée correspondant à la précontrainte des ressorts, cette énergie est transmise à l'embase 25 qui se comporte comme un élément monobloc, et elle est transformée en une sollicitation à la flexion de l'extrémité avant du ski.
Au-delà de la valeur prédéterminée correspondant à la précontrainte des ressorts 35 à 37, cette énergie est en partie transformée en moment de flexion qui s'exerce sur la partie avant du ski, et en partie absorbée par les ressorts.
Egalement, si l'extrémité avant du ski est soumise à une sollicitation de flexion qui modifie la cambrure du ski, cette sollicitation ramenée à la chaussure par le dispositif interface par l'intermédiaire des ressorts qui réalisent une sorte de filetage. Une telle sollicitation de flexion ne remonte donc pas directement et entièrement vers la chaussure.
En se référant aux figures 2 à 4, les ressorts 35 à 37 sont montés dans une cartouche 38, qui est située dans le logement 32 que présente l'élément fixe 30. De préférence, la cartouche est interchangeable, de façon à pouvoir utiliser des ressorts présentant une précontrainte et une raideur différente.
De préférence, la cartouche 38 présente au repos une longueur prédéterminée. En se référant à la figure 3, la cartouche comprend une butée transversale 39, qui est en appui au fond du logement 32 contre l'élément fixe 30. La cartouche comprend également, du côté de l'élément mobile 31, un piston 40. Les ressorts sont situés entre la butée 39 et le piston 40, et de préférence ils sont guidés par des tiges longitudinales 44, 45 et 46. Dans l'exemple illustré, la tige centrale 46 est en fait un goujon, qui est vissé dans la butée transversale 39, et dont la tête retient le piston 40 et l'empêche de s'éloigner au-delà d'une distance prédéterminée par rapport à la butée transversale 39.
La cartouche 38 est simplement emboîtée entre l'élément fixe 30 et l'élément de transmission 31. Il est donc possible de démonter ces éléments pour extraire la cartouche et la remplacer par une autre, ou alors pour replacer la même cartouche, après avoir par exemple modifié ses caractéristiques. En effet, il est possible de modifier les caractéristiques de la cartouche en échangeant la butée transversale 39 par une autre butée d'épaisseur plus importante ou d'épaisseur moins importante. La précontrainte des ressorts est déterminée en effet par les paramètres propres aux différents ressorts utilisés, mais aussi par la distance qui sépare les deux faces en regard de la butée transversale 39 et du piston 40.
Dans l'ensemble illustré, il est aussi possible de régler la précontrainte de tarage des ressorts 35 à 37 en vissant le goujon 46. Ceci provoque un déplacement de la butée transversale 39 dans le sens d'une compression des ressorts 35 à 37. C'est alors l'extrémité du goujon 46 qui fait appui contre l'élément fixe 30. La longueur de la cartouche reste donc constante. L'orifice 47 de l'élément mobile 31 permet d'accéder à la tête du goujon 46.
L'invention concerne le dosage des mercaptans et du glutathion réduit, notamment dans les milieux biologiques.
Elle a plus particulièrement pour objet un procédé spectrophotométrique de dosage des mercaptans totaux, du glutathion réduit (en abrégé GSH) et, par différence, des mercaptans autres que le GSH, dans un milieu aqueux, notamment biologique, des réactifs et des nécessaires ou kits pour la mise en oeuvre de ce procédé.
Le glutathion, composé ubiquitaire, est une molécule-clef sur le plan physiologique en raison de ses nombreuses fonctions biochimiques (référence 1) , En conséquence, les variations de sa concentration, en particulier une diminution de son taux intracellulaire normal (1-10 mM), peuvent entraîner des désordres importants. Il est donc nécessaire de pouvoir disposer d'une méthode de dosage du GSH qui soit fiable, simple, sensible et spécifique de ce paramètre biochimique.
L'existence de nombreuses méthodes de dosage du GSH suggère que ces dernières ne sont pas satisfaisantes (référence 2).
Les techniques de mesure connues des mercaptans, en général, et du GSH en particulier, exploitent l'une ou l'autre des deux principales propriétés chimiques des mercaptans : pouvoir réducteur et pouvoir nucléophile, d'où leur classification en - Méthodes utilisant le pouvoir réducteur des mercaptans Ces méthodes ne sont pas spécifiques du GSH, elles nécessitent donc une étape de purification chromatographique pour doser le GSH et, dans certains cas, la présence d'une enzyme de couplage comme par exemple la glutathion-réductase (référence 3) ; et - Méthodes utilisant le pouvoir nucléophile des mercaptans Ces méthodes reposent sur la substitution de dérivés halogénés (de type dinitrohalogénobenzène ou monohalogénobimane, par exemple) avec ou sans glutathiontransférase.Ces méthodes également, ne sont pas spécifiques du GSH en absence d'enzyme et nécessitent une étape de séparation chromatographique pour doser le GSH.
Selon les cas, la détection peut être de type spectrophotométrique, spectrofluorimêtrique (référence 4), ou électrochimique (référence 5).
Dans l'exposé qui suit, on se limitera aux méthodes utilisant la spectrophotométrie d'absorption UV/visible ou la spectrofluorimétrie comme technique de détection.
Les méthodes utilisant le pouvoir réducteur des mercaptans sont basées sur un échange thiol-disulfure, selon le mécanisme réactionnel suivant (dans le cas du glutathion) 2 GS- + RSSR
GSSG + 2 RS- La plus connue utilise le réactif d'ELLMAN (références 6 et 7). Cette méthode basée sur la formation d'un chromophore à 412 nm est peu complexe, mais l'instabilité du réactif d'ELLMAN vis-à-vis de la lumière et du pH (hydrolyse) et l'autoxydation du chromophore libéré nécessitent la réalisation d'une mesure de référence qui alourdit le test. Tout ceci en fait un réactif non utilisable en Biologie Clinique sur de grandes séries d'échantillons.
L'analogue sélénié du réactif d'ELLMAN a été synthétisé et utilisé pour le dosage de mercaptans (référence 8). Il est plus résistant que le réactif d'ELLMAN vis-à-vis de l'hydrolyse alcaline mais présente, par ailleurs, les mêmes inconvénients que ce dernier.
Enfin, il convient de mentionner l'utilisation de disulfures pyridiniques (référence 9).
D'une façon générale, les réactifs d'échange thiol-disulfure ne peuvent pas être utilisés pour un dosage spécifique du GSH.
Les méthodes basées sur le pouvoir nucléophile des mercaptans exploitent leur capacité d d'addition sur des réactifs électrophiles, à savoir 10 Les réactifs halogénoaromatiques activés Ces réactifs du type l-chloro-2,4-dinitrobenzène (CDNB) ou 2,4-dinitro-1-fluoro-benzène (DNFB) ne sont pas spécifiques des groupements thiols à pH alcalin. Ils nécessitent la présence d'une enzyme telle que la GSHtransférase, dont ils servent par ailleurs à mesurer l'activité. La faible sensibilité de ces réactifs est l'un des inconvénients majeurs de ces méthodes. De plus, leur réactivité non enzymatique ntest pas nulle, ce qui exclut un dosage totalement spécifique du GSH.Pour pallier cet inconvénient, de nombreuses méthodes sont basées sur la séparation chromatographique des produits réactionnels comme, par exemple, la méthode de chromatographie liquide haute performance (HPLC) de REED (références 10 et 11) qui couple une formation de dérivés, ou dérivatisation, des amines (à l'aide du DNFB : réactif de Sanger) à une Scarboxyméthylation, mais qui est longue et lourde à mettre en oeuvre.
20 Les monohalogénobimanes (référence 12) Ces composés peuvent réagir avec des groupements nucléophiles autres que les groupements thiols, tels que par exemple les amines. Ils ne sont pas, non plus, spécifiques du GSH en présence d'autres mercaptans : il est donc, ici encore, nécessaire d'intégrer dans le protocole une étape de séparation chromatographique. Ce procédé permet néanmoins d'obtenir un profil exhaustif des mercaptans présents.
Toutefois, la photosensibilité des réactifs et des produits de réaction implique des précautions d'emploi qui alourdissent la méthode de dosage.