INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La figure 4 représente le schéma électrique d'une troisième variante de ce dispositif. En référence à cette figure 4, le dispositif comprend deux groupes de diodes électroluminescentes (12).. L'énergie lumineuse fournie par cette ensemble de diodes (12) est transmise à la cellule photovoltalque (11).- Le reste du montage est identique aux autres.
- la figure 12 représente le plasmide pDEV41155.
Le plasmide pSTD41150 contenant seulement 2 sites EcoRV a été restreint par EcoRV et le fragment EcoRV/EcoRV de 225 pb a été délété. Le premier site EcoRV est situé à 40 pb en amont du codon initiateur ATG du gène clpG et le second dans le polylinker du vecteur Bluescript SK(+) . Le plasmide résultant de cette construction, pDEV41155 porte le fragment EcoRV/HpaI de 0.92 kb du gène clpG. Ce fragment exprime la sous-unité ClpG lorsque pDEV41155 est complémenté par le plasmide pDSPH 524. pDEV41155 est un plasmide à grand nombre de copies ayant l'origine de réplication Col EI et codant pour la résistance à l'ampicilline (Apr).
2) Dans le plasmide vecteur pSELECT-1 Le fragment PstI/HpaI du gène clpG contenant le promoteur, la région codante et la région terminatrice du gène clpG a été cloné dans le vecteur bluescript SK+ restreint par SmaI er PstI. Puis le fragment PstI/XbaI de ce recombinant (contenant le fragment PstI/HpaI précité) a été cloné dans le vecteur p-SELECT-1 restreint par PstI et XbaI, conduisant à l'obtention du plasmide pPSX83.
Le plasmide pSELECT-1 (Promega) est un vecteur à grand nombre de copies. Il porte le gène de résistance à la tétracycline et a une origine de réplication (col El) différente de celle de pDSPH524.
La complémentation de CS31A est schématisée sur la figure 13, dans laquelle E représente EcoRV, P représente PstI et Xb représente XbaI. Elle fait intervenir le plasmide pDSPH524 et le plasmide pPSX83 qui contient le seul gène de la sous-unité majeure de CS31A sous le contrôle de son propre promoteur dans p SELECT-1. Les bactéries hébergeant à la fois les plasmides pPSX83 et pDSPH524 sont CS31A positives.
F) IDENTIFICATION PRESOMPTIVE DES REGIONS DE LA SOUS-UNITE ClpG POUVANT ACCEPTER DES ADDITIONS D'ACIDES AMINES OU DES SUBSTITUTIONS HETEROLOGUES Pour obtenir cette information trois stratégies ont été mises en oeuvre - Définition des régions variables susceptibles d'accepter des modifications à partir de la comparaison des séquences primaires de la protéine CS31A avec celles des protéines K88 et F41.
- Recherche des épitopes continus dans la protéine CS31A. Les épitopes continus correspondent souvent à des régions variables de la protéine. L'étude de leur accessibilité aux anticorps fournit aussi une information sur leur localisation dans la protéine native.
- La mutagénèse insertionnelle au hasard consiste à insérer de façon aléatoire un court oligonucléotide de synthèse possédant le site de reconnaissance d'une endonucléase de restriction ("linker") dans le gène clpG. L'introduction de ce nouveau site de restriction permet d'insérer ultèrieurement une séquence hétérologue. L'analyse de l'expression des protéines modifiées par complémentation intergénique in vivo et par immunoblotting utilisant des anticorps spécifiques dirigés contre la protéine ClpG, constitue la base de l'évaluation du degré de permissivité de cette protéine. Les régions permissives sont ensuite localisées et identifiées après analyse de restriction et séquençage nucléotidique.
I - Comparaison de séquences La figure 14 représente l'alignement des séquences primaires déduites des antigènes CS3lA, K88 et F41. La comparaison de ces séquences indique que CS31A présente une identité de 44% avec la sous-unité de l'antigène K88 et 24% avec la sous-unité de l'antigène F41. Malgré les importantes divergences observées dans les séquences primaires de CS31A et K88, la conservation de plusieurs régions hydrophobes systématiquement associées à la présence d'un résidu proline suggère que les deux sous-unités adoptent une conformation similaire. Les régions variables susceptibles d'être permissives sont délimitées par les acides aminés situés dans la figure 9 aux positions 10 et 58 pour la région B, 123 et 164 pour la région C et 183 et 257 pour la région D.
II - Recherche des épitopes continus dans la protéine CS31A Les réponses immunitaires étant différentes contre une protéine présentée sous forme native ou dénaturée, les épitopes continus ont été définis soit avec des anticorps dirigés contre la sous-unité dénaturée, soit avec des anticorps dirigés contre la protéine native de haut poids moléculaire.
1) Définition des épitopes continus des sous-unités dénaturées La présence d'épitopes continus est recherchée en mesurant la réactivité des antisérums polyclonaux préparés chez 4 lapins (L1, L2, L3, L4) contre la protéine dénaturée vis à vis des 257 nonapeptides chevauchants qui recouvrent la séquence CS31A.
La figure 15 représente en A le profil de réactivité des nonapeptides vis à vis de l'antisérum L2 dirigé contre la protéine CS31A dénaturée; la figure 15 représente en B le profil de réactivité des nonapeptides vis à vis d'un antisérum aspécifique témoin. Cet antisérum témoin est celui d'un lapin immunisé selon le même protocole mais contre une autre protéine, la protéine OmpA.
La figure 16 représente les régions immunoréactives reconnues par les antisérums anti-CS31A dénaturé produits chez les quatre lapins.
Les figures 15 et 16 montrent que les 4 antisérums reconnaissent essentiellement 6 régions contenant les épitopes continus de la molécule dénaturée.
Les peptides suivants ont été retenus : 1019; 37-58; 88-106; 144-172; 184-219 ainsi que la région C-terminale (232-257). Individuellement les sérums reconnaissent des séquences plus courtes (5 à 7 résidus).
A ces régions immunodominantes reconnues par tous les animaux, s' ajoutent des régions reconnues seulement par certains antisérums. C'est le cas des peptides 37-44 et 200-207 pour le lapin L1 et 84-93 chez les lapins L3 et L4.
Annexe 2 6 R : 5'-ddU 5 R : 5'-ddU 10 R1 : 5'-ddU 8 3'-dTMTr 7 3'dTMRTr 11 3'-dTMTr 4 5'-dTMTr 9 5'-dTMTr 12 5'-dTMTr 13 R : 5'-ddU R : CH3 14 5'-ddU CH2CH2OCH3 15 5'-ddU CH2CH2CN 16 5'-ddU CH2CH2SCOC(CH3)3 17 5'-ddU CH2CH2NHCOPhNO2 18 5'-ddU CH2CH(COOEt)NHCOOCH2Ph 19 5'ddU CH2CH2SSCH2Ch2OMTr 20 3'-dTMTr CH2CH2SSCH2CH2OMTr 21 3'-dTMTr CH2CH2SCOC(CH3)3 22 5'-dTMTr CH2CH2SSCH2CH2OMTr
Annexe 2 (suite) 19 20 21 22 24 R3 : 5'-ddU R2 : CH2CH2SSCH2CH2OH 25 3'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH 26 3'-dT CH2CH2SCOC(CH2)3 27 5'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH
signalisation, notamment pour véhicules automobile, dont une glace (ou globe ou encore voyant) est équipé d'éléments pseudo-catadioptriques et le cas échéant d'éléments catadioptriques.
Dans toute la description qui suit, on entend par
"pseudo-catadioptre" ou "élément pseudo-catadioptrique" un élément optique qui présente un aspect voisin de celui d'un véritable catadioptre, sans en posséder la fonction
de rétro-réflexion.
En référence tout d'abord à la figure 1, un élément ou "aiguille" catadioptrique classique 10 formé par exemple dans une glace de feu de signalisation se compose d'une face essentiellement plane d'entrée et de 1.5 sortie de lumière, située du côté extérieur de la glace, et de trois surfaces planes 14 a-14 c disposées selon un trièdre tri-rectangle, situées du côté intérieur de la glace et destinées à rétro-réfléchir, par réflexion totale sur chacune des faces, la lumière incidente orientée selon une direction proche de l'axe longitudinal
de l'élément.
Pour que cette rétro-réflexion soit convenablement réalisée, l'angle a défini par les faces du trièdre deux à deux est égal à 90 , et ces faces tangentent un cône
dont le demi-angle au sommet e est égal à 35-15 '.
Un élément pseudo-catadioprique bien connu 20 est représenté sur la figure 2 Les faces 24 a-24 c du trièdre font entre elles un angle a' différent de 90 , et par exemple de l'ordre de 92 , et le demi-angle au sommet À' vaut par exemple 36 '25 ', si bien que la fonction de rétro-réflexion n'est plus assurée, tandis que l'élément conserve, lorsque le feu est éteint, un aspect tout à fait semblable à celui d'un élément catadioptrique
véritable.
2 - Une autre solution connue pour réaliser un pseudo-catadioptre consiste à conserver la géométrie de
l'élément catadioptrique de la figure 1, en effectuant un dépolissage des faces 14 a-14 c pour supprimer la réflexion5 totale sur celles-ci.
Ces deux solutions connues présentent un premier inconvénient, selon lequel les éléments pseudo-
d) Enfin, suivant une autre variante de ce procédé, pour faciliter l'amarrage du câble, le matriçage du manchon se fera en une seule fois, et, muni de deux plats sur une partie de sa longueur, permettra ainsi le filetage sur sa partie cylindrique restante.
Les dispositifs précités rendent donc possible, sans nuire à la sécurité, l'utilisation de manchon en acier. L'invention sera bien comprise à l'aide de la description qui suit, en référence aux dessins schématiques annexés, représentant, à titre d'exemple non limitatifs, quelques formes de mise en oeuvre de ce procédé.
La Figure 1 montre, en perspective, un câble équipé d'un manchon par mise en oeuvre du procédé selon l'invention.
Figure 2 à 5 illustrent ce procédé dans son mode d'exécution le plus simple, Figure 6 à 10 illustrent des variantes de mise en oeuvre de ce procédé.
La figure I montre un câble 2, équipé d'un manchon 3, par mise en oeuvre du procédé selon l'invention. D'après sa mise en oeuvre la plus simple, illustrée par les Figures 2 et 3, ce procédé consiste à utiliser un manchon de section cylindrique, dont l'alesage est supérieur au diamètre du câble de quelques dixièmes, sur lequel ce manchon doit être serti. Après mise en place du manchon sur le câble, à l'endroit où il doit être serti, dans l'empreinte 4a de section semi-cylindrique de la matrice 4 mobile d'une presse hydraulique, dont la matrice supérieure fixe 5, est munie d'une empreinte 5a, de profil également semi-cylindrique, symétrique par rapport à l'empreinte 4a de la matrice inférieure mobile 4.Le profil des empreintes 4a et 5a, permet donc d'appliquer au manchon 3, du début à la fin du matriçage, deux forces radiales F, étant uniformément réparties à la périphérie du manchon 3 de section cylindrique. Ce dernier ne subit aucune déformation importante dans une zone particulière. Sa section circulaire restant telle qu'elle.
Les figures 4 et 5 illustrent une variante de mise en oeuvre de ce procédé; variante selon laquelle le manchon 3 est de forme oblongue, permettant ainsi le matriçage de deux câbles 2 de diamètre et de section identiques.
Cette variante est utilisée pour la fabrication d'élingues-assurant ainsi une plus grande sécurité d'utilisation. La mise en oeuvre de ce procédé est identique au procédé illustré dans les Figures 2 et 3.
La figure 6 montre le manchon 3 utilisé pour illustrer le procédé, dans son mode d'exécution le plus simple.
Comme on peut le constater, l'alesage de celui-ci, n'est m murii de stries ou de toutes autres formes de rainures, qui pour des raisons de sécurité évidentes, entraineraient une détérioration du manchon.
La figure 7 montre, un manchon acier utilisé, pour illustrer la variante du procédé cité plus haut (Figures 4 et 5).
Les figures 8 et 9 montrent le manchon 3 est muni de deux plats 6 sur une partie de sa longueur. La partie cylindrique restante, étant apte à être filetée, le matriçage du manchon se faisant en une seule fois : les matrices utilisées sont de fabrication spéciale et munies de deux plats à une de leurs extrémités. Cette technique est particulièrement intéressante pour l'amarrage du câble, pour la manutention de certaines machines et dans le bâtiment ou les travaux publics : blocs de béton, dalles, préfabriqués, ...
Enfin la Figure 10 montre une élingue comportant une boucle munie d'un manchon acier serti I de section cylindrique et d'un manchon acier serti 3 fileté sur une partie de sa longueur et muni au moins de deux plats 4 à son autre extrémité.
Comme on le conçoit aisément, les dispositions précédemment décrites, tendant à assurer la protection du câble 2 malgré les pressions élevées du matriçage du manchon 3, permettent d'utiliser ce procédé de sertissage acier, sans risque de détériorer le câble 2 et sans risque de nuire à la sécurité.
il va de soit que l'invention ne se limite pas aux seules formes d'exécution de ce procédé, qui ont été décrites ci-dessus à titre d'exemples non limitatifs. Elle embrasse, au contraire, toutes les variantes de réalisation.
DISPOSITIF DE PONTAGE D'UN CONVERTISSEUR DE COUPLE HYDRODYNAMIOUE La présente invention est relative à un convertisseur de couple hydrodynamique, trouvant notamment son utilisation dans une transmission automatique de véhicule automobile. Ce convertisseur constitue alors un embrayage hydraulique assurant une liaison souple, entre le moteur et le mécanisme de la transmission automatique.
Le fonctionnement d'un convertisseur de couple hydrodynamique de bolte de vitesses automatique peut être décomposé en deux phases au démarrage, le convertisseur multiplie le couple du moteur, exerçant ainsi sa fonction de convertisseur, tandis qu'à haute vitesse, il transmet le couple sans le multiplier. A haute vitesse, le convertisseur fonctionne donc comme un simple coupleur hydraulique entre le moteur et le mécanisme de la transmission.
Un exemple d'un tel flux lumineux est représenté à la figure 3 dans laquelle l'axe des ordonnées représente la quantité de lumière reçue sur la surface 4, tandis que l'axe des abscisses représente sur un diamètre quelconque de ladite face réceptrice de lumière 4, la distance r au centre 7 de cette surface.
Une telle répartition du flux lumineux peut être obtenue grâce à un concentrateur de lumière tel que celui représenté à la figure 4.
Le concentrateur de lumière 8 représenté sur cette figure comporte une calotte ellipsoidale 9 découpée dans un ellipsoïde 10 à deux foyers 11 et 12.
La calotte 9 s'étend depuis l'extrémité de l'ellipsoïde 10 située à gauche sur la figure 4 jusqu'au plan médian 13 dudit ellipsoïde.
Une source lumineuse 14 se trouve au foyer Il situé à 11 intérieur de la calotte 9, tandis qu'un distributeur optique 1 selon 1 invention est placé au voisinage de l'autre foyer 12, dans l'axe focal de l'ellipsoïde 10, avec sa face réceptrice de lumière 4 orientée du côté de la source lumineuse 14.
La face intérieure réfléchissante de la calotte 9 a subi un traitement multicouche grâce auquel elle ne réfléchit principalement que les rayons lumineux appartenant au spectre visible.
Ainsi, 90Z des rayonnements infrarouges issus de la source lumineuse 14 sont éliminés lors de la réflexion sur la calotte 9, ce qui permet de ne transmettre majoritairement au distributeur optique 1 que de la lumière froide.
La calotte ellipsoidale 9 réfléchit les rayons lumineux 16 issus de la partie arrière de la source lumineuse 14, ctest-à-dire ceux situés à gauche du plan focal 15 par rapport à la figure 4, ainsi que les rayons lumineux 17 issus de la partie avant de la source lumineuse 14, c'est-à-dire ceux qui se réfléchissent sur la partie de la calotte ellipsoidale 9 située à droite du plan focal 15 par rapport à la figure 4.
Les rayons 16 issus de la partie arrière de la source lumineuse 14 arrivent sur la face réceptrice de lumière 4 du distributeur optique 1 en faisant par rapport à l'axe focal de l'ellipsoïde 10 un angle au maximum égal à 30 , ce qui est admissible pour un bon fonctionnement du distributeur optique 1.
En revanche, les rayons lumineux 17 issus de la partie avant de la source lumineuse 14 arrivent au foyer 12 en faisant par rapport à l'axe focal de l'ellipsoïde 10 un angle compris entre 30 et 55 .
Pour réduire cet angle à des valeurs inférieures à 30 , ce qui est nécessaire pour un bon fonctionnement du distributeur optique 1, on place une lentille divergente 18 sur la trajectoire des rayons lumineux issus de la partie avant de la source lumineuse 14.
De cette manière on récupère d1 l'ordre de 20 à 25% de rayonnement lumineux supplémentaire issu de la source 14.
Au sommet de la calotte 9, une ouverture 19 ménage un passage pour un support de la source lumineuse 14, ainsi que pour des fils d'alimentation électrique.
Bien que la surface intérieure de la calotte 9 reçoive un traitement multicouche limitant les réflexions dans le domaine infrarouge, on peut également placer une vitre réfléchissante 20 devant le foyer 12 pour éliminer quasi totalement tout rayonnement infrarouge pénétrant dans le distributeur 1.
Dans le mode de réalisation représenté, la vitre réfléchissante 20 est orientée avec un angle de 45" par rapport à l'axe focal de l'ellipsoïde 10.
La figure 5 représente une variante d'une face réceptrice de lumière 4 d'un distributeur optique selon l'invention.
tème 10 de la figure 1 en ce sens qu'il est démuni des élé- ments réfléchissants permettant à la lumière 181 18 N sortant des fibres optiques 141 14 N et 28 î 28 N d'être dirigées, respectivement, directement vers les éléments de lentille 201 20 N* En outre, la lumière appliquée aux fibres optiques 141 14 Nt et concernant l'éclairage en code est produite par une première source 42 de lumière de
tion, à un foyer d'un réflecteur elliptique 44 d'une manière qui sera décrite en liaison avec la figure 7 La lumière appliquée à la fibre optique 281 28 N' concernant l'éclairage en feux de route est produite par une seconde source de lumière de haute intensité (non représentée> d'une façon semblable à celle du réflecteur elliptique 44 La manière avec laquelle la lumière émise par les fibres optiques 141 14 N et 28 k 28 N est combinée et collimatée par des éléments de lentilles 20 20 N sera décrite en
fibres optiques 14, et 28, placées côte à côte et à une dis-
tance égale à la distance focale f 12 de la lentille 201 La figure 6 représente également la partie centrale de la fibre optique 281 (B), relative à l'éclairage en feux de route, et disposée sur l'axe de l'élément de lentille 201, alors que la partie centrale de la fibre optique 14, (A) fait un angle
avec l'élément de lentille 20 ayant une valeur typique com-
prise entre environ 3 e et environ 5 En outre, les rayons lumineux représentés en figure 6 qui sont transmis par la fibre optique 14, et collimatés par la lentille 20 sont indiqués par A et sont parallèles D'une façon similaire, les rayons lumineux transmis par la fibre optique 28, et
^ 15 -
collimatés par la lentille 201 sont indiqués par B et sont parallèles Le fonctionnement de l'agencement de la figure 6
ceaux lumineux qui sont séparés par un angle limité approxi- mativement à une valeur d'environ 3,40 de manière à fournir l'éclairage en
feux de code et en feux de route du véhicule en suivant une façon similaire à celle décrite en liaison
Un but de l'invention est de proposer une telle méthode.
Un autre but de l'invention est de proposer une méthode d'isolement qui puisse faire l'objet d'une automatisation.
Un autre but de l'invention est de proposer une méthode d'isolement ayant un bon rendement, c'est-à-dire permettant d'obtenir un grand nombre de cellules non endommagées par le procédé d'isolement.
Pour atteindre ces différents buts, la présente invention a pour objet une méthode d'isolement de cellules ou groupes de cellules à partir d'un organe ou d'une fraction d'organe, du type consistant - à disposer l'organe ou la fraction d'organe à digérer à l'intérieur d'une chambre de digestion munie d'au moins une entrée et une sortie sur laquelle est adaptée un filtre apte à laisser passer les cellules ou groupes de cellules à isoler, - à faire circuler au travers de la chambre une solution apte à permettre la digestion de l'organe ou de la fraction d'organe en cellules ou groupes de cellules à isoler, - à recueillir en continu dans au moins un récipient la solution provenant de la chambre de digestion et comportant les cellules ou groupes de cellules digérés ayant traversé le filtre, caractérisée en ce qu'elle consiste - à effectuer une digestion totale de l'organe ou de la fraction d'organe, - et à effectuer régulièrement la séparation entre les cellules ou groupes de cellules et la solution ayant permis la digestion.
Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux de l'invention, la présente méthode est caractérisée en ce que l'étape de séparation entre les cellules ou groupes de cellules recueillis et la solution provenant de la chambre consiste notamment à centrifuger la solution recueillie en provenance de la chambre de digestion, et à remettre en suspension le culot de centrifugation contenant les cellules ou groupes de cellules digérés.
Ainsi, la solution enzymatique ayant digéré l'organe ou la fraction d'organe peut être rapidement éliminée ou récupérée pour une phase de digestion ultérieure, et il est en outre facile de déterminer le point de digestion totale qui se traduit par une absence de culot de centrifugation.
Selon une autre caractéristique avantageuse de l'invention, le culot de centrifugation est remis en suspension dans une solution dépourvue d'enzyme digestive.
Grâce à cela, les cellules ou groupes de cellules isolés sont rapidement mis en contact avec un milieu qui leur est favorable et peuvent ainsi conserver le maximum de leur fonctionnalité.
La présente invention a également pour objet un dispositif pour la mise en oeuvre de la méthode proposée, comprenant - au moins une chambre de digestion munie d'une entrée et d'une sortie sur laquelle est adapté un filtre apte à laisser passer les éléments dont la taille est celle des cellules ou groupes de cellules à isoler, - une source de solution, - au moins une canalisation reliant l'entrée de la chambre de digestion à la source de solution, - des moyens de chauffage de la solution, - un premier moyen de recueil de la solution provenant de la chambre de digestion.
Ce dispositif est caractérisé en ce qu'il comprend en outre - au moins un second moyen de recueil de la solution, - des moyens pour diriger la solution provenant de la chambre de digestion vers le premier moyen de recueil puis vers au moins le second moyen de recueil.
De nombreux avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture de la description qui va suivre, en référence à la figure unique qui illustre de façon schématique et sans échelle déterminée, un mode de réalisation de l'invention.
Le dispositif représenté sur la figure comporte une chambre de digestion 1 munie d'une entrée 2 et d'une sortie 3. La sortie 3 est équipée d'un filtre 4 dont la maille est de 1 mm2. L'entrée 2 de la chambre est reliée à une canalisation d'alimentation 5 pourvue d'une pompe 6. Cette canalisation 5 est munie d'un circuit de dérivation 7 à l'intérieur duquel le liquide est réchauffé avant son entrée dans la chambre 1 ; cette dérivation 7 est reliée à la canalisation 5 par deux vannes 3-voies 8 et 9. La canalisation 5 est pourvue, en amont de la pompe 6, d'une vanne 12 permettant de la mettre en communication sélectivement avec une éprouvette 11 ou une éprouvette 10. Ces deux éprouvettes 10 et 11 sont maintenues dans de la glace pilée pour que leur contenu soit à une température sensiblement égale à 4"C.
La sortie 3 de la chambre de digestion est reliée à une canalisation de collecte 14 dont une portion est plongée dans de la glace pilée. Cette canalisation 14 est reliée aux éprouvettes 11 ou 10 par l'intermédiaire d'une vanne 3-voies 13.
Un tel dispositif peut être utilisé pour l'isolement d'îlots de Langerhans à partir d'un pancréas, ainsi que cela est décrit ci-après.
La position des vannes 12 et 13 est commandée pour mettre les canalisations 5 et 14 en communication avec l'éprouvette 11 contenant une solution telle que la solution UW. La canalisation 5 est tout d'abord reliée directement à la canalisation 14 ; les vannes 8 et 9 sont orientées pour permettre la circulation de la solution UW dans la dérivation 7. Grâce à la mise en oeuvre de la pompe 6, I'ensemble du circuit est peu à peu rempli de solution UW dont la température est portée à 30 C ; on alimente l'éprouvette il en solution UW jusqu'à ce que le circuit soit totalement rempli.
Après avoir injecté dans le pancréas à digérer, 100 ml de solution UW contenant de la collagénase, on le place dans la chambre 1 dont l'entrée 2 est alors reliée à la canalisation 5 et la sortie 3 à la canalisation 14.
La présente invention concerne un feu de signalisation, notamment pour