INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Pour doser un ligand (ex : un facteur de croissance ou l'insuline),il est necessaire d'inserer des recepteurs en etat de fonctionner,dans des membranes artificielles reproduisant le plus possible une membrane cellulaire.Il est aussi necessaire de les orienter convenablement : il faut que le site de liaison à l'agoniste soit extracellulaire et non caché en intramembranaire ou intracellulaire.Enfin il faut entourer le recepteur d'un environnement soigneusement dosé en phospholipides et proteines.(De nombreux auteurs ont prouvé qu'un recepteur membranaire ne fonctionne plus si son environnement artificiel ne correspond pas exactement à la composition proteolipidique de son environnement originel naturel).
Deux voies sont possibles pour obtenir des recepteurs fonctionnels: 1 - les extraire de membranes de certaines cellules où on les trouve en grande quantités,les purifier en respectant leurs caracteristiques (polymeres,conformation,etc) .J-L Popot (Methodologie des liposomes - Ed de l'insert - 1982) a purifié et reintegré avec succès le recepteur cholinergique de l'acetylcholine (extrait des electrocytes de Torpedo marmorata) dans des vesicules d'asolectine (un melange proteolipidique complexe mettant en evidence l'effet protecteur des lipides sur le recepteur).
Mais cette methode ne peut aboutir à une preparation à grande echelle du fait que le recepteur concerné ne se trouve pas sur toutes les cellules est apparu par ailleurs que de nombreuses considerations interferaient dans l'obtention de recepteurs fonctionnels : l'utilisation de tel ou tel detergent par exemple entraine des differences considerables dans le comportement du recepteur reconstitué.
2 - les produire par genie genetique en inserant le gène codant pour ces recepteurs,sur des vecteurs de clonage.De nombreuses chimères de recepteurs ont dejà été obtenues par cette methode,avec succès.C'est l'option la plus prometteuse et qui convient le mieux à la presente invention car elle respecte de nombreux caractères originels du recepteur.Cette voie va être decrite plus loin.
Kagawa et Racker (J.Biol.Chem.,1971) sont considérés comme les pionniers de la reconstitution de membranes biologiques.Leur technique consistait à solubiliser des proteines membranaires (par ex: des recepteurs) en presence de lipides dilués dans des detergents non agressifs pour les proteines puis à extraire le detergent par filtration sur gel ou par dialyse rapide.La solution est ensuite etalée sur une surface de verre plane et sechée sous vide.
Brunner et al. (Bioch.Biophys.Acta 1975) ont solubilisé des proteines membranaires dans des dispersions lecithiniques avec du cholate de sodium comme detergent doux,puis eliminé de dernier par filtration sur Sephadex G-50.Les membranes obtenues sont stables un mois à 4"C et contiennent moins d'une molecule de desoxycholate pour 1000 molecules de phospholipides.
Barenholz et al.(FEBS Lett.-1979) ainsi que Hamilton et al. (J.Lipid.Res.-1980) utilisent l'extrusion à haute pression (20.000 p.s.i. à 4"C) à travers la presse de French pour integrer de façon très homogène les proteines membranaires dans des dispersions de phosphatidylcholine d'oeuf.Cette methode presente de nombreux avantages : simple,reproductible,non destructive (aucune oxydation des lipides ni denaturation des proteines du fait du bref laps de temps du traitement physique).
Pick (Arch.Biochem.Biophys.- 1981) a reussi à obtenir des liposomes enfermant des proportions importantes d'ions et à integrer à la membrane une proteine de transport du glucose,fonctionnelle.Ce procédé convient à des melanges de phosphatidylcholines avec des phospholipides chargés negativement ou avec des lipides chargés positivement.
Hub et al. (FEBS Lett. - 1982) utilise les dipalmitoyl phosphatidylcholines additionnées de solution salinejyophilisées au bain-marie à 40"C pendant 4 heures.Le film lipidique se detache ainsi des parois du flacon et forme des vesicules lipidiques de diametre inferieur à 1,um.Ce qui est très interessant ici c'est que ces vesicules sont bilamellaires,ce qui permet de leur faire jouer,après integration de la proteine choisie (ex : un recepteur de l'EGF ou un canal calcique),le rôle de la bicouche membranaire cellulaire.
Les réactions de digestion sont effectuées dans 50 microlitres de tampon phosphate Na/Na2 25 mM, à pH 7,5, et contenant soit 2,5 mM de dithiothreitol (DTT) pour la clostripaïne ou 2,5 mM de DTT et 2 mM d'acide tétraacétique éthylènediamine dans le cas de la digestion par la pyroglutamate aminopeptidase. Les temps de réaction sont 180, 120 et 25 minutes pour la trypsine, la clostripaïne et la pyroglutamate aminopeptidase. Ces réactions sont stoppées par chauffage à 9O0C.
Les produits des digestions sont chromatographiés sur la colonne CLHP échangeuse d'ions décrite précédemment.
Pour les produits de digestion par la trypsine et la clostripaine, l'élution est effectuée durant 60 minutes avec un gradient allant du tampon de départ jusqu'à 20 % d'un tampon contenant 200 mM d'acétate d'ammonium, pH 4,10, et 30 % d'acétonitrile. Le produit de la digestion par la PGA est élué durant 30 minutes avec un gradient allant de 50 à 70 % en acétate d'ammonium à 200 mM, pH 4,10, contenant 30 % d'acétonitrile dans le tampon de départ.
Les fragments peptidiques isolés sont ensuite analysés sur une colonne Novapak (7,5 X 75 mm, Waters) avec un gradient durant 30 minutes allant de 15 à 20 ou 25 % en acétonitrile dans de l'eau contenant 0,1 % de TFA. Le débit est de 1 ml par minute et les fractions collectées sont de 0,5 ml.
Les résultats de ces digestions sont les suivants : la trypsine coupe la liaison peptidique au niveau du groupement carboxyle des résidus arginine et lysine, à l'exception des séquences Arg-pro (ou Hyp) et Lys-pro (ou Hyp), la première de ces séquences étant seulement sensible à la clostripaïne. Dans ces conditions expérimentales la trypsine et la clostripaine coupent la liaison peptidique de l'arginine dans différents peptides synthétiques de type mLHRH à l'exception de la Lys-8-LHRH et coupe aussi le peptide enogène élué dans le pic C (peptide du pic C) qui peut ou non générer le fragment commun (1-8)m LHRH. Les coupures sont indiquées sur la Figure 9.
La mLHRH synthétique, les (Hyp 9) LHRH et (Lys 8) LHRH ainsi que le peptide du pic C ne sont pas hydrolysés par la trypsine. Par contre, la (Leu 9) LHRH génère un fragment N-immunoréactif, qui a un comportement chromatographique identique à celui des fragments N-terminaux de la LHRH sur colonne échangeuse de cations comme montré sur la Figure 10.
Après digestion par la clostripaïne, une N immunoréactivité comparable est obtenue à partir des molécules synthétiques de LHRH et à partir du peptide du pic C avec une exception pour la (Lys 8) LHRH. L'analyse en chromatographie sur phase inverse qui suit montre que ces N-immunoréactivités résultant de l'hydrolyse correspondent à un peptide commun qui co-élue avec la (1-8) mLHRH synthétique, ce qui indique que les coupures dans les séquences ont lieu exclusivement après l'arginine.
La digestion par la pyroglutamate amminopeptidase de la mLHRH, de la (Hyp 9) LHRH, et de la (Leu 9) LHRH génère une immunoréactivité C qui a un comportement chromatographique identique à celui de la (2-10) mLHRH synthétique, qui est bien séparée des autres fragments LHRH Cterminaux sur colonne échangeuse de cations, comme montré sur la Figure 11. Une C immunoréactivité comparable est générée par le peptide du pic C.
Une analyse chromatographique sur phase inverse montre que l'immunoréactivité C générée à partir de la mLHRH co-élue avec la (2-10) mLHRH synthétique, ce qui indique que la coupure a lieu exclusivement au niveau de la liaison pyro Glul-His2 dans les conditions expérimentales précédemment décrites. Au contraire, les immunoréactivités C générées à partir de (Hyp 9) LHRH et de (Leu 9) LHRH correspondant aux fragments respectifs (2-10) éluent respectivement avant et après la (2-10) mLHRH synthétique. D'autre part, l'immunoréactivité C générée à partir du peptide du pic C co-élue avec le produit d'hydrolyse de (Hyp 9) LHRH.
6) Comportements chromatoqraphiques du peptide du pic C et de la (Hvp 9! LHRH Les comportements chromatographiques du peptide du pic C de rat et de la (Hyp 9) LHRH ont été trouvés strictement identiques à différentes étapes du procédé de purification. Dans tous les cas le peptide endogène de rat ainsi que le peptide synthétique éluent à la même position comme un pic simple quand ils sont chromatographiés séparément, comme on peut le voir sur les Figures 12. Les Figures 12A, 12B et 12C correspondent aux peptides résultant des étapes de purification 1, 2 et 3. Le même résultat est obtenu avec le pic humain C dans les conditions de l'étape 3 (Figure 12D). La co-élution est confirmée quand le pic C de rat et la (Hyp 9) LHRH sont chromatographiés ensemble (Figure 11E).
Dans ces deux exemples, la détermination de la concentration de protéines est effectuée selon Lowry et al.
[(1951) J. Biol. Chem. 193, 165-275].
Les résultats précédents montrent sans ambiguité la présence de deux molécules de type LHRH dans les extraits d'hypothalamus aussi bien murins que humains : la LHRH de mammifère, déjà connue, et la (hydroxyproline 9) LHRH qui n'avait pas été mise en évidence.
D'autre part, les contrôles effectués au cours de ces manipulations ont montré que la (hydroxyproline 9) LHRH n'était pas due à une transformation de la LHRH durant les manipulations, mais pré-existait dans les extraits. Ceci a été notamment mis en évidence lors de la chromatographie de LHRH pure et synthétique.
Les résultats obtenus en spectrométrie de masse, par mesure du poids moléculaire, et après coupure par la trypsine, la clostripaïne ou la pyroglutamate amminopeptidase ont confirmé que cette deuxième forme de molécule du type LHRH est bien une (hydroxyproline 9) LHRH.
EXEMPLE 3 : Activité biologique de la (Hvp 9) LHRH Dans des systèmes in vitro utilisant des cellules hypophysaires dispersées, la (Hyp 9) LHRH induit la libération de LH et de FSH en proportions comparables à celles de la LHRH elle-même. En concentration molaire, l'activité de la (Hyp 9) LHRH sur les sécrétions hypophysaires, de même que celle calculée sur le récepteur de la LHRH par mesure du déplacement de la LHRH radioactive par l'iode 125I liée à des préparations de membranes hypophysaires, est quinze fois plus faible que celle de la LHRH. Cette moindre activité apparente est cependant compensée par une biodisponibilité prolongée.
Les buses 31 assurent un décolmatage efficace des pores de la membrane 15.
L'appareil 2 selon l'invention a des peformances remarquables.
Dans le cas d'eau dite "sous-toile", ayant une concentration de 250 milligrammes par litre, en provenance d'une machine produisant un papier imprimé pour l'impression-écriture composé de 40 % de pâte de feuillus et 60 % de pâte de fibres longue de résineux raffinée à environ 50 degrés Schopper Riegler, l'appareil 2 assure, sous un débit de 110 mètres cubes à l'heure, une filtration telle que l'eau filtrée a une concentration en impuretés d'environ 20 milligrammes par litre. La concentration des particules éliminées par l'appareil 2 est d'environ 100 grammes par litre et ces particules peuvent être immédiatement réintroduites dans le circuit de fabrication de la machine.
PROCEDE DE FABRICATION D'UN MATERIAU ARTIFICIEL A PARTIR DE DECHETS, MATERIAU ARTIFICIEL OBTENU ET PARPAINGS CONFECTIONNES AVEC CE MATERIAU La présente invention concerne un procédé de fabrication d'un matériau artificiel en poudre à partir de déchets ménagers incinérés ou de cendres industrielles. Ce matériau peut être utilisé comme base dans la confection d'élements de construction moulées du type de plaques, de blocs, de parpaings ou de tuiles destinés au domaine du bâtiment.
Les techniques actuelles d'élimination des ordures ménagères sont très diverses ; à cet égard, les décharges contrôlées, les fosses de fermentation naturelle ou accélérée, les zones de compostage et les installations d'incinération offrent une panoplie de solutions d'usage plus ou moins facile et coûteux. Dans cette dernière catégorie, le recyclage des résidus ménagers en tant que combustible permet de récupérer une chaleur utile au chauffage urbain ou à la production d'électricité ; en outre, les cendres et les scories résultant de la combustion sont le plus souvent déferraillées et vendues aux entreprises de travaux publics pour servir, par exemple, de remblais ou de sous-couches de routes.Les mâchefers (résidus de combustion de la houille), qui représentent 30% du poids des résidus ménagers avant incinération, peuvent également rentrer dans la constitution de mortiers, de bétons ou de briques où leur porosité est appréciée. Sous cette forme, les cendres d'incinération, au sens le plus large, ne sont donc pas vraiment valorisées mais constituent un matériau très commun d'intérêt réduit. En outre, même lorsqu'elles sont utilisées comme élément rentrant dans la composition de parpaings, elles ne subissent généralement aucun traitement préalable normalisateur (calibrage et triage), ce qui serait nécessaire à la confection de parpaings aux propriétés mesurables et reproductibles.
La présente invention vise à remédier à ces inconvénients en proposant un procédé de fabrication d'un matériau artificiel en poudre à partir de déchets ménagers incinérés ou de cendres industrielles, caractérisé par la succession d'étapes suivantes - tamisage des cendres accompagné d'un broyage des charbons et des mâchefers, - dégraissage des cendres tamisées et/ou broyées, - mélange des cendres dégraissées avec un liant complexe contenant de l'argile, éventuellement un liant hydraulique, de l'amidon et une combinaison d'une résine d'accrochage et d'une résine synthétique avec durcisseur, ces composants entrant dans ledit mélange selon des proportions en poids respectivement égales à 89% + 2% pour les cendres dégraissées, 7% + 2% pour l'argile et éventuellement le liant hydraulique, 1% pour l'amidon, 1% pour la résine d'accrochage et 2% pour la résine synthétique avec durcisseur, - moulage du mélange obtenu sous forme de blocs, postérieurement séchés et durcis, - démoulage puis concassage des blocs secs jusqu'à obtention d'une poudre présentant une granulométrie prédéterminée.
Naturellement, il ne s'agit pas de confectionner des blocs directement utilisables comme matériaux de construction, ce qui serait peu réaliste compte tenu de la forte teneur en cendres de ces blocs qui sont, de ce fait, très friables ; par ailleurs, une plus forte proportion d'argile, qui agit comme un durcisseur naturel, ou encore d'un liant hydraulique dont on connaît les emplois multiples, présenterait l'avantage d'augmenter la résistance spécifique des blocs mais augmenterait sensiblement leur coût de fabrication sans garantir pour autant que le matériau de construction obtenu soit très durable.C'est pourquoi, la réduction en poudre des blocs secs présentent l'avantage de produire un matériau artificiel pouvant être directement utilisé en combinaison avec un liant hydraulique pour la confection de plaques ou de parpaings destinés au domaine du bâtiment, ce matériau artificiel étant disponible en sacs utilisables à la manière d'un ciment.
A cet égard, selon l'emploi qu'on désire faire du matériau artificiel conforme à l'invention, on mélange, à sec, un pourcentage en poids compris entre 50% et 70% de matériau artificiel en poudre, avec 5% d'un mélange d'une résine d'accrochage et d'une résine synthétique contenant un durcisseur époxydique, ainsi qu'un pourcentage complémentaire d'un liant hydraulique ou d'un mélange de liants hydrauliques, dont la nature dépend de l'application spécifique envisagée.Ce mélange est ensuite gâché à l'eau et préparé suivant les techniques habituelles de la maçonnerie il peut ainsi être moulé sous forme de plaques ou de parpaings, puis éventuellement chauffé à basse température (de l'ordre de 40"C) afin d'accélérer son séchage et la prise des liants hydrauliques sous les effets conjugués bien connus de l'hydratation et de la polymérisation des résines. Un séchage naturel d'une huitaine de jours sous hangar abrité est recommandé avant utilisation des plaques ou des parpaings, ce qui est courant dans le domaine du bâtiment lorsqu'on utilise des liants hydrauliques.
D'autres caractéristiques et avantages ressortiront mieux de la description qui va suivre d'une forme d'exécution donnée à titre d'exemple non limitatif du procédé de fabrication conforme à la présente invention.
Selon cette forme d'exécution préférée, les déchets ménagers traités selon l'invention proviennent d'une décharge et ont été préalablement triés afin d'en extraire les verres et les métaux. Sous cette forme brute, ces déchets sont brûlés dans un four à tirage classique, voir dans un four domestique, à une température avoisinant les 400"C. I1 est clair qu'on pourrait directement employer les cendres résultant de l'incinération contrôlée des déchets dans une installation élevant la température au-dessus de 1000"C et récupérant la chaleur de combustion pour un usage urbain ou pour la production d'électricité ; les cendres d'incinération à haute température présentent sensiblement la même nature que les cendres obtenues par brûlage à plus basse température, et en particulier, il est inutile de les dégraisser, les graisses ayant été éliminées à sec par élévation de température. A partir des cendres quelle que soit leur nature, on procède à un tamisage suffisamment fin pour que la surface des cendres susceptible d'être traitée soit relativement importante - il est, en effet, bien connu que plus la granulométrie d'un matériau pulvérulent est faible, plus la surface totale des poudres par rapport à leur volume est grande -. Les particules brûlées de trop fort calibre, telles les charbons ou les mâchefers, sont quant à elles broyées puis à nouveau tamisées jusqu'à obtention d'un mélange de cendres homogène présentant une granulométrie v réguliere.
Dans cet état, les cendres non dégraissées à sec sont très grasses et elles ne peuvent être liées de manière satisfaisante et durable avec un autre matériau que si elles sont dégraissées. Selon une forme d'exécution préférée de l'invention, le dégraissage des cendres consiste en un lavage à l'eau bouillante ou presque bouillante (à une température de l'ordre de 80"C), puis en un décantage, les graisses surnageant et étant éliminées par vidange, tandis que les cendres dégraissées forment une boue au fond d'un bac de décantation adapté à cet usage. Cette boue est alors séchée avant d'être mélangée au liant complexe dont la composition a déjà été donnée ; on notera que le séchage des boues peut être incomplet, et qu'il n'est pas nécessaire de disposer de cendres dégraissées sèches pour la bonne marche du procédé de fabrication selon l'invention. En effet, le mélange des boues de décantation et du liant complexe dans les proportions citées est moulé sous forme de blocs puis séché et durci, par exemple d'une manière accélérée dans un four élevant la température de l'ensemble aux environs de 1500C à 200"C pendant 2 heures ; on conçoit donc bien qu'il est inutile de déshydrater complètement les cendres dégraissées à l'eau chaude avant de les mélanger au liant complexe. Bien entendu, le pourcentage de cendres dégraissées rentrant dans la composition du matériau artificiel conforme à l'invention, qui est donné en poids, doit s'entendre pour des cendres dégraissées sèches ou pratiquement sèches ; dans cette variante de l'invention, la mesure du poids est en fait réalisée préalablement au dégraissage des cendres tamisées et/ou broyées, le poids des graisses étant négligeable.Avant leur séchage complet, les blocs de matériau artificiel sont démoulés, et après un durcissement suffisant, ils sont concassés et réduits en poudre dans un broyeur dont on peut régler la puissance ; on peut ainsi obtenir une poudre dont la granulométrie peut varier fortement depuis un grain proche de celui de la farine (très pulvérulente) jusqu'à un grain comparable au sable fin.
On expliquera maintenant plus en détail le rôle de chacun des constituants du liant complexe qui est mélangé aux cendres tamisées et dégraissées avant moulage et cuisson des blocs. Le liant complexe représente entre 9% et 13% du poids du matériau artificiel, le reste étant constitué par la cendre. On a mis en évidence qu'un tel pourcentage permettait de garantir l'obtention d'un matériau en poudre utilisable en complément direct d'un liant hydraulique, du type d'un plâtre ou d'un ciment, pour la confection de plaques, de hourdis ou de parpaings, mais il est clair qu'un autre pourcentage ne doit pas être exclu dans des applications différentes.Le rôle général du liant complexe est d'enrober les particules de cendres tamisées et dégraissées afin de constituer, après durcissement de ce liant, un agglomérat de poudres de cendres totalement ou partiellement enrobées, stables et imputrescibles. A cet effet, on utilise principalement dans ce liant complexe de l'argile jouant le rôle de durcisseur naturel suivant un pourcentage en poids du matériau artificiel égal à 7% + 2%, valeur choisie en fonction de la nature particulière et de la taille des cendres tamisées et dégraissées ; un plus fort pourcentage aurait tendance à fragiliser l'enrobage car l'argile est cassant une fois durcie, et inversement un plus faible pourcentage serait inutile car l'argile ne pourrait enrober convenablement toutes les cendres.Par ailleurs, le liant complexe comporte une plus faible part d'amidon, par exemple tiré directement d'épluchures de pommes de terre, son rôle étant d'accélérer la prise et de faciliter le démoulage des blocs. La résine d'accrochage incorporée au mélange est un agent promoteur d'adhésion des autres constituants, à savoir les cendres, l'argile et l'amidon ; son dosage est fonction de la proportion de ces autres constituants, un pourcentage plus faible n'étant pas efficace tandis qu'un pourcentage plus fort n'apporterait aucun bénéfice.Enfin, une résine synthétique avec durcisseur, normalement disponible dans le commerce, permet d'accélérer la prise, de durcir l'enrobage des cendres constitué par le mélange d'argile, d'amidon et de résine d'accrochage, donnant enfin une résistance élevée aux cendres sèches après traitement ; le pourcentage de cette résine synthétique est habituel et suffisant pour l'obtention des effets désirés qu'on vient de citer, cette résine étant employée dans le domaine du bâtiment pour favoriser la prise de certains bétons ; on peut à cet égard considérer que les cendres enrobées du matériau artificiel se comporte un peu comme du sable ou des granulats.
On notera que l'opération de broyage des blocs de matériau artificiel, secs et durcis, est tout à fait inattendu dans le domaine du bâtiment, dans la mesure où tous les procédés connus qui pourraient se rapprocher du procédé conforme à l'invention ne prennent en compte les cendres d'incinération des ordures ménagères que comme des granulats directement utilisables par incorporation à l'état brut dans des liants classiques.
Suivant l'invention, le broyage en poudre du matériau artificiel obtenu est ainsi particulièrement original et avantageux dans la confection de plaques ou de parpaings destinés au domaine du bâtiment. En effet, la granulométrie de cette poudre peut être très faible, ce qui favorise l'obtention de plaques très résistantes à la fissuration tout en éliminant les ponts thermiques ou acoustiques ; de cette manière, les matériaux de construction fabriqués à partir du matériau artificiel en poudre conforme à l'invention sont d'excellents isolants thermiques et phoniques. De même, la faible porosité et la faible rugosité de tels matériaux moulés en forme de plaques procurent des surfaces d'apprêt particulièrement adaptée au revêtement de plâtres, d'enduits, ou de revêtements décoratifs.
Par ailleurs, il est important de noter que le matériau artificiel en poudre ne craint pas le gel, ni l'humidité, et qu'il peut donc être stocké dans des sacs sous un abri aéré à la façon de certains enduits et ciments. En outre, ce matériau est ininflammable, ce qui est une condition impérative pour pouvoir être employée dans le domaine de la construction.
A titre d'exemples non limitatifs, il est proposé ciaprès deux compositions types élaborées à partir du matériau artificiel en poudre selon l'invention.