INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
3) Techniques d'hybridation sur filtre de nitrocellulose - purifier à partir du plasmide pBU16 le fragment SalI-SphI (2,55 kb), - marquer ce fragment radioactivement par translation de césure (nick-translation), - transférer l'ADN à tester sur un filtre de nitrocellulose, -déposer ce filtre sur du papier Whatman n" 3 (marque déposée) imbibé de NaOH 0.5 N, NaCl 0.9 M et laisser 20 minutes à température ambiante, - sécher brièvement sur papier, - répéter l'opération sur papier imbibé de M Tris-HCl, pH 7, 10 minutes, - sécher brièvement, - répéter l'opération sur papier imbibé de 2 x SSC (1 x SSC = 0.15 M NaCl, 0,015 M Na3citrate, pH 7), - sécher sur papier, puis à l'étuve à 80*C pendant 2 heures, Système homologue :: poursuivre selon A (conditions stringentes), Système hétérologue : poursuivre selon B (conditions non stringantes).
A) conditions strinaentes Hybrider le filtre avec 20 à 40 ml de tampon d'hybridation (50 % formamide, 5 x SSC, 1 x Denhardt ).
Préhybrider pendant 2 heure à 42 C.
- Changer le tampon d'hybridation et ajouter environ 4 x 106 c.p.m. de la sonde dénaturée (5 minutes à 100 C).
- Incuber de 16 à 24 heures à 42-C.
- laver successivement avec 1 x 50 ml 5 x SSC, 50 8 formamide 20 minutes à 42"C, 2 x 50 ml 2 x SSC, 0,1 % SDS 2 x 20 minutes à 42"C, I x 50 ml 0,2 x SSC, 0,1 a SDS 20 minutes à 42 C.
B) Conditions non strinqentes - Hybrider le filtre avec 20 à 40 ml de tampon d'hybridation (5 x SSC, 1 x Denhardt , Ori % SDS), préhybrider pendant 1 heure à 42"C.
- Changer le tampon d'hybridation et ajouter environ 4 x106 c.p.m. de la sonde dénaturée (5 minutes à 100-C) .
- Incuber de 16 à 24 heures à 42'C.
- Laver successivement avec 1 x 50 ml 5 x SSC, 0,1 "" SDS 20 minutes à 42 C, 2 x 50 ml 2 x SSC, 0,1 t SDS 2 x 20 minutes à 42"C.
* solution de Denhardt : 1 % Ficoll, 1 % polyvinylpyrrolidone, 1 t BSA.
(WHAL et al, Proc. Natl. Acad. Sci.r USA : 76, 3683-3687 (1979) ; MANIATIS et al, Molecular Cloningr Cold Spring Harbor Press, NEW YORK (1982).
L'osmolarité finale de ces milieux de 2,194 OSmoles (A) et 2,185 OSmoles (B). Les cryotubes sont conservés à -200C deux heures et stockés à -800C.
On récupère le nombre désiré de tubes après un stockage allant de 2 mois à 2 ans. Les cellules congelées sont décongelées rapidement à 370C et transférées dans des tubes stériles plastiques. Le DMSO est dilué lentement avec 9 ml de RPMI. Les cellules sont sédimentées (centrifugation à 400g pendant 5 min), remises en suspension dans 2 ml de milieu RPMI.
L'étude de la prolifération cellulaire est effectuée comme suit On distribue des quantités identiques de cellules dans des plaques renfermant 24 puits. Les cellules congelées dans le milieu A (4 réplicats) sont additionnées de 2 ml de milieu RP.N1I supplémenté à l'aide de 10% de SVF. Les cellules congelées dans le milieu B sont mises en suspension dans 2 ml de milieu supplémentés à l'aide de 10% de SVF ou avec 2 ml de milieus RPMI supplémentés avec 1% de SVF et 9% de fractions de lactosérum.Les cellules viables sont comptées et réalimentées avec le même milieu au 2e jour (2 ml de milieu), au 4e jour (2 ml de milieu), au 7e jour après tranfert dans un flacon de 25 cm2 (8 ml de milieu) et au île jour après transfert dans un flacon de 75 cm2 (30 ml de milieu).
On constate qu'après 2 ans de stockage à -80CC dans une fraction de lactosérum, environ 75% des hybridomes sont récupérés en ce qui concerne leur viabilité, alors que seulement environ 204 d'hybridomes conservés dans le SVF sont viables.
Les cellules prolifèrent rapidement lorsqu'elles sont remises en culture dans un milieu RPMI renfermant une fraction de lactosérum de l'invention à raison, par exemple, de 94 et du SVF, à raison de 1t, ce résultat étant avantageusement similaire à celui obtenu avec 10% de SVF.
On détermine selon la méthode Elisa le taux d'anticorps en utilisant des anticorps de chèvre antiIgG de souris et un deuxième anticorps conjugué à une peroxydase. On constate qu'après 2 ans de conservation dans les fractions de lactosérum de l'invention, les hybridomes F34 sécrétent une quantité d'anticorps aussi importante qu'après deux mois de conservation et que les cinétiques de sécrétion sont similaires.
Les résultats qui précèdent mettent en évidence des propriétés avantageuses des fractions de l'invention pour la conservation des cultures cellulaires à basse température. L'invention fournit ainsi des moyens pour conserver les cultures cellulaires avec un appareillage ne nécessitant que des températures de -80-C permettant d'éviter l'utilisation de dispositifs avec azote liquide.
1 DESCRIPTION 1- La présente invention coheerrle tn Dispositif pour ltouverture eS a fermeture, automatique, mécanique de barrières ou portails, actionnés par le poids d'un véhicule automobile.
L'ouverture ou fermeture de portails ou de barrières est tradition nellement effectuée manuelleme > lt, ce qui oblige le conducteur à descendre du véhicule, ouvrir la barrière, rementer dans la voiture au volant duquel il franchi l'obstacle, immobiliser la voiture, provocant ainsi un encombrement inutile de la rue et recommencer presque le même processus pour la fermeture.
Il y a d'autres procédés d'ouvrir et de fermer les barrières, dont le plus courant est peut-être l'ouverture électrique, mais qui n'est pas non plus sans inconvénients : pannes éventuelles de courant, provoques bien souvent par l'orage, moments où il est bien plus confortable de rester dans la voiture que d'aller sous la douce, il y a également le danger de l'électri- cité, qui malgré toutes les précautions prises, existent.
Le dispositif comprend d'un coté de la barrière un premier plot muni d'un prolongement par pidd à crémaillère, l'abaissement de ce plot ac tienne une roue dentée qui porte en son centre une tige dont la rotation en traine à son autre extrémité un autre pignon qui lui-même actionne l'ouver ture de la Darrière ou du portail à l'aide d'un pignon d'angle. Auprès de ce premier pleut est Placé un second plot qui est indépendant, et qui par abais sement entraine le mouvement de deux tiges dont a'action de l'une sur l'autre, libère ainsi la clanche de la barrière ou du portail par élévation d'une tige, qui lui est directement reliée.
De l'autre côté de la barrière ou du portail est placé en sur un un autre plot qui par enfoncement #### sous la pression du véhicule transmet par intermédiaire de tiges basculantes et d'un cable un mouvement de traction abaissant le premier plot. Le mouvement de ce dernier permet donc à nouveau l'ouverture désirée de la barrière ou du portail, vu qu'un autre plot permet par l'intermediaire de tiges de libérer la clanche de la barrière ou du portail.
Enfin deux autres plots permettent par enfoncement respectif de l'un ou de l'autre de libérer le crochet de fixation de la barrière ou du portail(23'########## dont les mouvements respectifs vers le haut et vers le bas , aboutissent à un mouvement Irers le haut de la tige (10) qui libère le clanche9 lorsque le véhicule à traversé le passage, la pression d'une roue sur le plot (20), abaisse le crochet (22), où la barrière s'est fixée. La barrière peut alors automatiquement se refermer grace à l'en trainement provoqué par le ressort fixé au plot (1) qui cré e un mouvement de retour automatique de la barrière en position fermée, ramenent les plots en position au-dessus du sol.Par conséquent, par le jeu des engrenages, une fermeture de la barrière.
Lorsque le véhicule arrive en face de la barrière, mais de l'autre côté, elle enfonce d'abord le plot (15) qui par l'intermédiaire des tiges (16), (17) et (10) libère la clanche (9), la barrière s'ouvre alors par enfoncement du plot (11) qui, relié au plot (1) par les tiges (12) et (13) et le cable (14) enfonce à nouveau le plot (1) provocant le mécanisme d'ouverture décrit ci-dessus. Lorsque le véhicule a tra versé le passage, il enfonce la ###### plot (21) qui est relié.au crochet (22) libérant la rlxallon, la Darrlere peut alors automatiquement se refermer grâce au ressort du plot (1) qui provoque le mouvement inverse des pignons, faisant remonter les plot (1) et 11) au-dessus J sol.
DESCRIPTION 2 Des ressorts de rappel permettent aux différents plots de re enir dans leur position initiale.
La figure (1) est une vue générale par en-dessus' du dispositif selon la présente invention.
De façon préférée, les mesures d'impédance électriques se font simultanément sur au moins deux fréquences différentes, ce qui permet des mesures plus précises et mieux adaptées aux variations conductrices sélectives du milieu tissulaire ou liquide étudié. Un dispositif de mesure des impédances par modulation de fréquence d'émission sur au moins une gamme de variation de fréquence, et éventuellement plusieurs gammes de fréquence, peut être effectué en utilisant les mêmes électrodes d'émission et de réception ou en utilisant, par exemple, plusieurs électrodes, notamment des électrodes placées sur deux axes géométriques définissant un plan géométrique, axes de préférence perpendiculaire, pour permettre la détection du vecteur d'impédance dans ce plan.De préférence, on effectue également et simultanément la mesure dans un axe situé hors de ce plan, de préférence perpendiculaire à ce plan, afin d'acquérir les vectogrammes tridimentionnels des impédances. Les courants de mesure peuvent être, par exemple, émis en impulsions de balayage de fréquences simultanées ou décalées d'un axe de mesure à l'autre.
Le décalage temporel de certaines parties du spectre d'impédance électrique peut également être utilisé.
Ces moyens peuvent comporter des électrodes disposées autour des voies vasculaires à protéger, par exemple une artère coronaire, ou dans la voie vasculaire même, notamment dans une oreillette ou artère, ces électrodes étant reliées à des moyens permettant d'y adresser des courants de mesure d'impédance électrique.
Des électrodes locales ou régionales pour la mesure de l'impédance peuvent également être insérées dans le tissu myocardique, notamment apical, septal ou pariétal, de façon à mesurer l'impédance locale dans une partie du myocarde surveillée par les électrodes. La distance entre les électrodes peut être, par exemple, de quelques millimètres.
On peut ainsi mesurer les valeurs de l'impédance ou, ce qui revient au même, de la conductance soit de façon intermittente, soit de façon continue.
On peut notamment mesurer l'écart maximal d'impédance électrique traduisant, par exemple, des variations du volume sanguin dans la voie considérée ou celles de la circulation capillaire et/ou de la contraction musculaire dans le myocarde par exemple, à chaque cycle cardiaque.
On peut également mesurer sur les décours de la courbe d'impédance acquise, les formes, pics et autres caractéristiques, y compris différentielles ou intégrales, à chaque cycle cardiaque.
Le courant utilisé pour la mesure des impédances peut Entre un courant continu en impulsions, par exemple dans le cas où l'on mesure l'impédance de zones très petites et assez homogènes, telles que par exemple une fine couche artificielle ou artificiellement provoquée de fibrine monomère ou polymère ou de précurseurs de la fibrine, fibrinogène, fibrinopeptides, en mélange ou isolés, ou de prothrombine mélangée à de la prothrombinase pour tester la tendance è la production de thrombine, facteur de la formation de fibrine tout en tenant compte, de préférence, de l'accumulation locale des ions calcium ou magnésium par rapport aux mêmes ions mesurés dans la circulation générale.
Ce courant peut également être, de préférence, variable et l'on peut, le cas échéant, utiliser un ou des courants de formes et de fréquences variables ou différentes en fonction du type de variation d'impédance à mesurer. Pour la mesure d'une impédance d'un volume sanguin, par exemple dans une artère coronaire ou dans une cavité cardiaque, on peut utiliser des fréquences relativement basses, par exemple de l'ordre de quelques kilohertz. On préférera utiliser les fréquences plus élevées pour la mesure d'impédances tissulaires, par exemple de l'ordre de 100 kHz à une centaine de megahertz.
On peut également enregistrer simultanément le long de deux axes, par exemple entre une électrode intraauriculaire et une électrode portée par le boîtier d'un stimulateur, d'une part, et une électrode intraventriculaire ou intramyocardique et la même électrode sur le bottier d'autre part. On obtient ainsi une courbe de type Lissajoux dans le plan formé par les deux axes et l'on peut reconstituer le vectogramme tridimensionnel des variations des impédances électriques du coeur si l'on ajoute une mesure selon au moins un axe supplémentaire extérieur au plan.On peut également utiliser des électrodes cutanées ou sous-cutanées dans ce but pour reconstituer l'image tridimentionnelle de la variation des impédances dans le coeur et éventuellement pour émettre des signaux correspondants hors du corps vers un récepteur de visualisation tridimensionnelle.
De façon préférée, on peut superposer à l'électrocardiogramme mono-, bi- ou, de préférence, tridimensionnel au vectogramme correspondant des variations des impédances électriques du coeur mono-, bi- ou, de préférence tri-dimensionnel. En cas de thrombose coronarienne qui provoque une modification nette de l'électrovectocardiogramme, le vectogramme des impédances électriques du coeur correspondant est nettement modifié et permet de valider, d'une part, la variation électrocardiographique et de préciser les répercussions sur les contractions du myocarde.
Comme autre paramètre biologique pour la protection des artères ou cavités du coeur, pris isolément ou combiné à la mesure de l'impédance, on peut utiliser des modifications de l'électrocardiogramme et notamment les modifications du vectocardiogramme détecté par des jeux d'électrodes disposées convenablement dans l'espace, soit épicardiques, soit simplement endocavitaires, soit en position monopolaire seule, soit avec ajout d'électrodes bipolaires, de préférence sur un cathéter endocavitaire d'un stimulateur cardiaque. On peut ainsi détecter des modifications significatives et sélectives de la propagation de l'électrogénèse cardiaque dans sa dépolarisation et sa repolarisation.
A la place ou en plus des mesures du ou des paramètres électriques précités, on peut également prévoir des moyens sensibles à des phénomènes liés à la teneur en oxygène et/ou en C02 et/ou CO et/ou pH et/ou rH (coefficient d'oxydo-réduction) et/ou aux ions sodium, chlore ou phosphore pour mesurer la pression osmotique et/ou à une ischémie du tissu irrigué par la branche artérielle à protéger, et notamment un capteur sensible à des variations ioniques telles que celles de l'ion potassium ou de l'ion H+ dans ledit territoire ou au voisinage de celui-ci et/ou un capteur sensible à la teneur en oxygène dans, ou près, de ce territoire, par exemple un capteur optique sensible à l'oxyhémoglobine à une longueur d'onde de 660 nm ou à la méthémoglobine. (Karl STANGL et al. A New Multisensor Pacing System ..., Pace, Vol.Il Juin 1988 :712-724).
Dans une autre forme de réalisation, on peut également, pour détecter une menace survenue d'une hémorragie interne, placer un détecteur optique, par exemple, un détecteur de lumière rouge ou autre sensible à longueur d'ondes absorbée par l'hémoglobine et/ou autres substances colorées, par exemple bilirubine, au niveau des lymphatiques drainant la lymphe du corps ou du cerveau dans le canal lymphatique. On peut également ajouter à ce dispositif de dosage sensible à de faibles quantités d'hémoglobines dans les vaisseaux lymphatiques, au moins un microcompteur optique de type connu permettant de compter les globules rouges ou plaquettes capables de quantifier un passage de sang dans la lymphe et, le cas échéant, de distinguer entre la provenance encéphalique ou non de ces éléments.Ainsi, une tendance hémorragique par hypocoagulabilité ou fragilité vasculaire, toxique ou infectieuse ou causée par une tension artérielle excessive, pourra être détectée et au besoin traitée automatiquement par la délivrance d'un médicament recoagulant tel que, par exemple, prothrombine en équilibre avec facteur Stuart et ions calcium ou hypotenseurs. Cette perfusion de recoagulation sera automatiquement stoppée dès que ledit détecteur de trace de sang dans la lymphe indique une disparition du saignement, ou bien dès qu'une mesure d'un facteur de la crase sanguine indique une tendance vers un début d1 hypercoagulabilité.
Il est également possible de détecter une hémorragie intra-myocardique ou intra-musculaire par l'utilisation d'un détecteur optique sélectif discriminant entre l'hémoglobine ou ses dérivés et la myoglobine, une telle cellule optique, du type fibres de silice endoscopique, permettant une analyse de l'image locale et l'observation d'une ischémie et le suivi de son évolution au repos et à 1' effort, et pouvant être placée dans une partie intra-myocardique d'une sonde reliée à un stimulateur cardiaque.
L'utilisation d'une cellule optique à fibres de quartz placée, par exemple, dans le cathéter, par exemple, dans les cavités du coeur droit permet également de mesurer la concentration sanguine en globules rouges, plaquettes et globules blancs et de mesurer l'hématocrite dont une baisse accompagne une hémorragie, ou mesurer une baisse isolée des globules rouges ou des thrombocytes en rapport ou non avec une hémorragie.
En outre, i'emballage étant réalisé à partir de deux éléments nécessite en usine deux passages sur machine ainsi que le jonctionnement de l'un des deux éléments qui est de type caisse américaine.
La présente invention vise à remédier à ces inconvénients en fournissant une caisse en carton ondulé possédant les mêmes caractéristiques de résistance que l'emballage précité, mais réalisée à partir d'un flan unique de carton.
A cet effet, la caisse qu'elle concerne est réalisée à partir d'un flan comprenant une partie centrale de forme rectangulaire correspondant au fond de la caisse prolongé le long de ses quatre bords par quatre panneaux dont il est séparé par des lignes de rainage, destinées à former respectivement les deux parois longitudinales et les deux parois transversales, ces quatre parois étant de même hauteur, I'une des deux parois longitudinales étant prolongée par un panneau qui, de surface égale à celle du fond, est destiné à former le couvercle, tandis que chaque paroi transversale est munie de deux prolongements latéraux, chacun de même hauteur que la paroi transversale considérée, et de longueur correspondant au plus à la moitié de la longueur de la caisse, des moyens étant prévus pour assurer la fixation de chacun des prolongements des parois transversales contre les parois longitudinales, après rabattement de ces prolongements.
En pratique, il est tout d'abord procédé à la mise en forme de la caisse par rabattement à 90" des parois longitudinales et transversales, puis au rabattement à 95 des prolongements des parois transversales qui viennent se fixer contre les parois longitudinales en doublant ces dernières. La caisse qui possède une bonne tenue mécanique peut alors être chargée, avant que soit réalisée sa fermeture par rabattement du couvercle.
Il est à noter que cette structure permet de doubler les parois longitudinales avec, compte tenu du mode de pliage, un croisement des cannelures des deux épaisseurs des parois longitudinales, ce qui favorise considérablement la résistance de la caisse ainsi obtenue.
Selon une forme préférée d'exécution de cette caisse, les moyens de fixation de chaque prolongement d'une paroi transversale contre une paroi longitudinale adjacente sont constitués en combinaison par une fente ménagée au niveau de la ligne de rainage entre le fond et la paroi longitudinale considérée, dans la partie centrale de cette ligne de rainage, et par une patte qui, faisant saillie d'un bord du prolongement d'une paroi transversale, est destinée à être engagée à l'intérieur de cette fente après rabattement du prolongement contre la paroi longitudinale considérée.
Avantageusement, chaque patte associée au prolongement d'une paroi transversale est équipée d'une languette qui, découpée dans ladite patte, est destinée, après engagement de la patte à l'intérieur de la caisse, à venir prendre appui contre la face intérieure de la paroi longitudinale correspondante de l'emballage.
Ceci permet d'éviter, après mise en forme de la caisse, que les prolongements des parois latérales se désolidarisent des parois longitudinales contre lesquelles elles ont été rabattues.
Conformément à une autre caractéristique de l'invention, la paroi longitudinale de la caisse, opposée à celle munie du couvercle, est prolongée au niveau de son bord opposé à celui adjacent au fond, par un panneau de même surface, dont le bord opposé au bord d'articulation sur la paroi longitudinale est équipé de deux languettes qui, disposées sensiblement à mi-longueur de ce bord, sont destinées à être engagées dans deux ouvertures ménagées dans les pattes de verrouillage associées au prolongement des parois transversales.
Il est ainsi obtenu, au niveau de cette paroi longitudinale, un triplement de l'épaisseur de matière, qui est associé à un doublage du verrouillage des prolongements des parois transversales rabattues contre ladite paroi longitudinale.
Selon une autre caractéristique de l'invention, le bord du couvercle, opposé au bord d'articulation sur l'une des parois longitudinales, est prolongé par une bande de matière. Cette bande de matière est destinée, lors de la fermeture de la caisse, à venir s'engager entre la paroi longitudinale opposée à la caisse et les deux prolongements plaqués contre cette paroi longitudinale.
Conformément à une autre particularité de cette caisse, les parois transversales et leurs prolongements respectifs sont prolongés au niveau de leurs bords opposés aux bords adjacents au fond par une bande de matière.
Cette bande de matière est, après fermeture du couvercle de la caisse, rabattue contre la face supérieure de ce couvercle en formant des rabats courts. Ces rabats assurent un renforcement mécanique de la caisse ainsi qu'une protection du couvercle qui permettent une fermeture de la caisse à l'aide de liens périphériques.
Afin de-favoriser le positionnement de tels liens et à éviter leur retrait par coulissement le long de la caisse, il est prévu, au niveau des lignes de rainage correspondant aux quatre angles de la caisse, autant de séries d'évidements que de séries de liens à mettre en place pour assurer le maintien en position fermée de la caisse.
De toute façon, l'invention sera bien comprise à l'aide de la description qui suit, en référence au dessin schématique annexé représentant, à titre d'exemple non limitatif, une forme d'exécution de cette caisse: Figure 1 est une vue à plat du flan à partir duquel est réalisée cette caisse Figures 2 à 4 sont trois vues en perspective de cette caisse au cours de trois phases du montage Figure 5 en est une vue partielle et à échelle agrandie en coupe suivant la ligne V-V de figure 2.
La caisse représentée au dessin est réalisée à partir d'un flan 2 en carton comprenant une parle centrale de forme rectangulaire constituant le fond 3.
Selon une variante, l'aile est constituée de 2 demi-ailes, qui ne sont pas dans un même plan mais dans 2 plans faisant entre eux un angle d'au moins 15 et généralement proche de 400. Ainsi, vues de l'avant, les 2 demi-ailes forment un angle alpha d'environ 140 comme montré à la figure 4.
Pour son utilisation, I'aile est mise dans une position proche de celle présentée à la figure 4 où la demi-aile supérieure est verticale, la demi-aile inférieure faisant alors un angle beta de 40 environ avec la verticale.
Ainsi, lorsque le vent supposé horizontal, souffle dans cette voile, la composante horizontale de la force donnée par l'aile supérieure est plus grande que la composante horizontale de la force donnée par l'aile inférieure. Le centre de poussée horizontale de la voile se trouve alors en un point (par exemple C) situé au-dessus du point de rotation (4) situé au sommet du mât.
On peut donc, si l'on fait tourner la voile autour de la tige (5) de commande, prise comme axe de rotation, déplacer le centre de poussée vers l'avant ou l'arrière du bateau.