INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La proportion de captation de la radioactivité par les divers organes a été évaluée par deux méthodes : d'une part par dissection, pesage des organes et comptage de la radioactivité, et d'autre part par scintigraphie dans les zones d'intêrêt (cas du Tc 99m).
Les résultats obtenus avec les différents types de microcapsules étudiés sont comparables et sont résumés dans le Tableau suivant Temps après Z de captation de la radioactivité par injection (minutes) poumon foie rate rein sang 10 7 60 2 2 29 30 6 67 4 1 22 40 5 69 4 1 21 Préparation de l'acide diéthylènetriamine tétracétique On dissout 0,8g d'acide iminodiacétique dans 60ml d'éthanol contenant 36ml de soude 0,5N. On ajoute ensuite 0,54g de chlorhydrate de bis(chloro-2 éthyl) amine. On porte et maintient au reflux Fendant 6 heures.
- 12- mutateur de position ouverte de la même demande de brevet de Berner et coll., qui procure une indication lorsqque la fenêtre est dans une position ouverte souhaitée. Comme cela est bien connu, lorsque chacun de ces commutateurs 112 et 114 est actionné, son contact se déplace en position fermée.
Aussi couplé en parallèle avec chacune des résis-
tances R10 et RII, se trouve un circuit de triac couplé optiquement
116 ou 118 respectivement, qui fait partie du circuit de synchroni-
sation de la figure 6 expliquée ci-dessous.
Dans des conditions normales, sans différence de
tension entre les bornes 104 et 106, le moteur 28 est désexcité.
En supposant que les commutateurs de fin de course 112 et 114 sont dans leur position normalement ouverte et que les triacs 116
et 118 sont non conducteurs, si un potentiel de tension suffisam-
ment élevé est présent entre les bornes 104 et 106, le moteur 28 est alors excité. Par exemple, si la fenêtre est commandée pour s'ouvrir comme expliqué ci-dessus, la ligne de commande 32-2 qui est couplée à la seconde borne 106 est au potentiel de masse et la ligne de commande 32-1 qui est couplée à la première borne 104 est à un potentiel de 24 volts. En conséquence, le premier FET Q5 conduit au travers de sa diode incorporée afin de provoquer par cela la conduction pour le moteur 28. Simultanément, par la tension de 24 volts appliquée via la diode du premier FET Q5 aux résistances
R12 et R 1, la tension de la porte du second FET Q6 monte suffisam-
ment haut que pour enclencher le second FET Q6. Le second FET Q6 étant enclenché, il met en contact le côté opposé du moteur
28 et la masse. Ceci produit 24 volts au travers du moteur 28, provo-
quant son excitation et le déplacement de la fenêtre comme décrit dans la demande de brevet Berner et coil. Si la fenêtre atteint sa position complètement ouverte, le contact du commutateur de fin de course 114 se ferme, mettant hors circuit la résistance RII, et connectant donc la porte du second FET Q6 à la masse de sorte que le second FET Q6 est non conducteur. En conséquence le moteur
28 est désexcité et un déplacement ultérieur dans le sens de l'ouver-
ture est empêché. De même si le second circuit de triac 118 est -13-
Un autre objet de l'invention est un procédé de détection de la présence d'ADN spécifique au chromosome Y des différentes especes de la sousfamille des bovinés dans un échantillon d'ADN de boviné, caractérisé par les étapes successives suivantes - l'amplification spécifique d'au moins une partie de 1'ADN spécifique au chromosome Y de boviné par la réaction de polymerisation en chaîne (P.C.R.), cette amplification s'effectuant par l'intermediaire d'au moins une amorce nucléotidique, la ou lesdites amorce(s) nucléotidique(s) étant choisie(s) afin d'être soit identique(s), soit complementaire(s) à un segment de la séquence [(X)p-(Z)n-(W > qii définie cidessus, ce- segment contenant au moins 12 nucléotides consécutifs de la séquence X, soit capable d'hybrider avec ce segment, - la détection de la présence d'ADN spécifiquement ainplifié La séquence W peut être n'importe quelle séquence nucléotidique qui n'est pas X ou Z, par exemple, des linkers, des adapteurs, etc, et ne nuit pas à la spécificité de la sonde, à condition que la séquence X représente au moins 1%, et de préférence au moins 30S de la longueur totale de la partie t a-(W)qiu.
Les séquences A et B peuvent être n'importé quelles séquences nucléotidiques, respectivement identiques où différentes,- qui sont essentiellement exemptes de séquences présentes dans le chromosome Y de boviné, par exemple des séquences plasmidiques. La spécificité élevée de la séquence X pour le chromosome Y de bovin permet d'obtenir un signal différentiel entre de 1'AD mâle et femelle, même quand la séquence X ne représente qu'une proportion très faible de la séquence entière. La nature hautement répétitive de la séquence permet l'utilisation de toute une gamme de séquences définie dans la formule générale ci-dessus, la séquence la plus petite qui peut être utilisée étant une séquence de 12 nucléotides consécutifs de la séquence X.
Par "capable d'hybrider", il faut comprendre des séquences présentant au'moins 708 d'homologie et qui s'hybrident dans des conditions non-stringentes.
La caractérisation de Y1.2 et, par conséquence de btDYZ-l, a révélé que son organisation presente un motif répétées en tandem reminiscent des séquences des familles de satellites, caractérisé neanmoins par une divergence inter-motif peu habituelles. Cette divergence touche les deux parties du motif de répétition : une unité longue de 40 paires de bases appelée par convenance "X" et présentant une divergence moyenne entre unités de 27%, et une partie riche en TG, appelée par convenance "Z", de longueur très variable, qui pourrait résulter de dérapage lors de la réplication. Ces expériences de caractérisation ont été effectuées sur la séquence Y1.2. La nature hautement répétitive et le nombre très élevé de copies du motif répété par chromosome Y ont été interpétés comme signifiant que la séquence totale byDYZ-1 a la même structure que Y1.2. Une étude plus étendue de la séquence totale de btDYZ-l pourrait mettre en évidence un degré d'organisation supérieur présentant une conservation plus importante entre les répétitions, comparable à celle observée dans les satellites alpha humains (Willard et Waye, 1987). Si non, la divergence inter-répétitions pourrait alors refléter une mauvaise homogénéisation des répétitions en tandem résultant éventuellement de l'hémizygocité du chromosome Y.
Le nombre de copies du motif répété a été estimé à 1 x 105 copies par chromosome Y. Si on présume que la longueur moyenne du motif répété est de 60 paires de bases, le satellite bt-DYZ-1 s'étend sur environ 6Mb, ou un dixième du chromosome Y bovin.
Aucune ressemblance n'était trouvee entre btDYZ-l et les 6 séquences satellites bovines suivantes 1706, 1709, 1711a, 1711b, 1715 et 1720b. Pourtant, on aurait pu s'attendre à une homologie avec l'une ve ces séquences satellites bovines par analogie avec le satellite Y spécifique humain DYZ-3 évidemment apparenté à la famille satellite alpha humain.
Le polymorphisme génétique mis en évidence par btDYZ-l dans la sous-famille des Bovins, et dont on suppose qu'il résulte d'un réarrangement des sites de restrictions interne par des "crossing-over" inégaux entre chromatides soeurs ou tout autre mécanisme apparenté, constitue en fait un outil précieux dans l'étude de la généalogie mâle.
La possibilité de sexer des embryons des différentes espèces de la sous-famille des bovinés avant implantation est d'un intérêt évident. Le nombre éleVé de copies du motif répété ainsi que la localisation centromérique fait de btDYZ-1 une sonde particulièrement appropriée à cette fin. En effet, on pourrait s'attendre à trouver d'autres séquences hautement répétées provenant de la région hétérochromatique du bras long du chromosome Y de boviné par analogie avec d'autres espèces. Néanmoins, des pertes importantes d'hétérochromatine du bras long ont ét rapportées chez des hommes phénotypiquement normaux, ce qui rend le sexage par ces sondes risqué (Gtodfellow et al., 1985).
Les inventeurs ont montré qu'avec la sonde de l'invention, un signal différentiel entre mâles et femelles peut être obtenu avec S 100 pg d'ADN, ce qui correspond à + 15 cellules. En déposant sur une surface plus petite, cette limite peut être réduite d'avantage, par exemple, si on dépose quelques cellules embryonnaires sur des membranes de nitrocellulose ou de nylon, une technique qui a été appelée "embryo blot", et en procédant comme pour les hybridations de colonies. (Voir exemples; hybridations "Dot Blot"). De cette manière un signal différentiel peut être obtenu avec au moins 50 pg d'ADN. La sonde de l'invention peut être utilisée pour effectuer des hybridations in situ. Cette technique d'hybridation in situ permet non seulement de déterminer le vexe d'un membre de la sous-famille des bovinés, mais peut aussi être utilisée dans le cadre de l'invention pour des études de karyotype et de localisation chromosomique.
Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, la réaction de polymérisation en chaine (PCR) est utilisée, pour amplifier lADN male présent dans un échantillon, tout en profitant de l'amplification naturelle de la séquence cible. De cette manière, un signal différentiel peut être obtenu a partir d'une seule cellule qui pourrait être isolée par aspiration, après avoir percé la zona pellucida.
La technique de base de la P.C.R. est bien décrite dans la littérature [par exemple, R.K. Saiki et al. 1988].
Pour la P.C.R., il est préférable d'utiliser deux amorces. Au moins, une des amorces doit correspondre à la séquence de 40 bases, X, ou à un fragment comportant au moins 12 bases consécutives de la séquence X. Par "correspondre", il faut entendre dans ce contexte "être identique" ou "être complémentaire" ou "être capable d'hybrider avec".
Il peut aussi être envisagé d'utiliser une amorce qui corresponde à la région de jonction entre les deux séquences X et Z, à condition qu'au moins 12 nucléotides consécutifs de la séquence X soient présents. L'utilisation d'une amorce qui contient uniquement des nucléotides de la séquence Z est à éviter en raison du fait que des séquences riches en TG sont également présentes dans le génome de boviné femelle. Une telle amorce pourrait donc conduire à l'amplification d'ADN femelle, et l'obtention d'un signal différentiel entre mâle et femelle serait part conséquence compromise.
De préférence, deux amorces sont utilisées pour la PCR qui correspondent chacune à au mqins 12 nucléotides consécutifs de la séquence X, et plus préférablement, à au moins les 12 nucléotides qui forment les extrémités 5' et 3' respectivement de la séquence X. De cette façon, aucun ADN femelle n'est amplifié.
La ou les sonde(s) peut (vent) être synthétisée(s) chimiquement à partir de la séquence connue.
Dans un mode de réalisation particulièrement préféré de l'invention, l'ADN amplifié par la PCR est visualisé par fluorescence après addition de bromure d'ethidium (EtBr). Cette technique, mise au joint par les inventeurs et appelée "Drop Stain" (coloration de goutte), s'est révélée particulièrement bien adaptée a l'amplification de la séquence de l'invention. Cette méthode implique l'addition de EtBr directement au mélange réactionnel de la PCR, sans avoir à séparer les fragments de taille différente sur un gel d'agarose. Cependant, dans certaines conditions, l'utilisation d'un tel gel, facilite l'interprétation des résultats obtenus.
Dans cet arbre, une face est décrite par un contour interne et éventuellement par l'ensemble de ses contours externes fils. Une# composante connexe est décrite par un contour externe et .éventuellement par l'ensembLe de ses contours internes fils connexes.
Ainsi, Les feuilles de l'arbre des contours sont soit des contours internes ne contenant aucune composante connexe, soit des contours externes sans aucun contour interne fils.
L'arbre d'inclusion fournit une bonne représentation de la partition du plan et est donc utilisé pour : obtenir Les contours frontière d'une face, obtenir Les composantes connexes, localiser un point, etc.
Ainsi, dans Le procédé conforme à L'invention, La carte planaire qui est décrite dans une structure de données n'est pas Limitée à des segments de droite. Ladite structure est divisée, selon le procédé conforme à L'invention, en deux parties distinctes : une structure de données géométriques et une structure de données topologiques.
Conformément à L'invention également, dans La structure de données géométriques : - une courbe est décrite par un polygone de contrôLe et une série ordonnée d'arcs.
- L'orientation d'une courbe est donnée par L'ordre de ses points de contrôle.
- un arc est une portion de courbe délimitée par deux points, L'orientation d'un arc est donnée par L'ordre des paramètres de ses points extrémités.
- Les arcs se projettent sur les arêtes.
- un point est repéré par un paramètre curviligne sur une courbe.
Un point peut être un point extrémité d'une courbe, un point dtauto-intersection d'une courbe, ou un point dtintersection entre deux courbes. Les points se projettent sur Les sommets Il est rappelé que La structure de données topologique comprend des données représentant des brins, des sommets, des arêtes, des contours.
Conformément à l'invention, -dans ta structure de données topologiques - un brin b est décrit par le brin & b), le brin t (b), Le sommet autour duquel est incident Le brin b, L'arête à laquelle est associe Le brin b et Le contour auquel appartient Le brin b.
- un sommet s est décrit par des coordonnées cartésiennes dans un espace que L'on s'est borné au départ et que Lton nomme grille, et par un brin b incident autour de ce sommet s.
Ce brin permet d'obtenir la Liste des brins incidents à s.
- une arête e est décrite par la liste des arcs confondus portés par cette arête e et par un brin b de e. L'autre brin de e est obtenu par La relation - un contour c est décrit par un brin b appartenant à ce contour c et des Liens vers les contours peres, fils et frères de c utilisés pour le parcours de L'arbre d'inclusion des contours.
On a donc représenté sur La figure la un exempLe de dessin sur lequel a été repéré chaque élément de sa topologie, ainsi que sur La figure lb l'arbre d'inclusion des contours de La carte associée à de dessin, sous la forme d'une structure arborescente.
En cherchant à procéder à des insertions et/ou à des gommages de courbes et/ou d'éléments de courbes pendant La réalisation d'un dessin par ordinateur, la demanderesse s'est heurtée au problème de la réalisation d'un outil interactif, c'est-à-dire d'un outil qui permette à L'utilisateur d'insérer La courbe qu'il désire dans Le dessin de façon quasi instantanée, L'utilisateur n'ayant pas à attendre.
Les composés dimériques de l'invention sont obtenus soit à partir de composés traités de manière identique à celle décrite ci-dessus pour les monomères de l'invention (par exemple des caroténoides naturels de sources diverses, ou synthétiques, contenant 40 à 60 atomes de carbone, et qui sont linéaires, ou possèdent un cycle dans leur structure), soit par couplage de deux unités monomères, notamment par hydrogénation sur Pd/C dans l'éthanol.
Les dérivés d'alcools gras de l'invention précédemment décrits étant peu solubles en milieu aqueux, leur emploi pour des études biologiques ou pour des applications thérapeutiques peuvent présenter des difficultés méthodologiques. Pour remédier à ces inconvénients, des prodrogues hydrosolubles représentées par les esters de l'acide monophosphorique ont été synthétisés. Ces composés sont hydrolysés dans l'organisme pour donner les produits de départ à savoir les dérivés de l'invention pour lesquels R = H.
Ces composés sont particulièrement hydrosolubles (plus de 10 % dans l'eau selon les cas), donc les solutions obtenues sont compatibles avec des injections intraveineuses. Ils améliorent la biodisponibilité des dérivés de l'invention, ce qui permet de potentialiser les effets biologiques observés. Ainsi la présence du groupe phosphate a permis dladministrer une solution aqueuse de corticostêroides sans perte de l'activité biologique (R.J. W. CREMLYN et I. Khattak, Chemistry of steroid phosphates. Phosphorus 27 (1976) 237-246).
Le radical représenté par R3 permet un meilleur ciblage du dérivé de l'invention. I1 peut favoriser la pénétration du dérivé à travers des membranes (membrane bactérienne) ou la diffusion a partir des capillaires du tractus digestif, de la membrane méningée ou d'autres tissus (F. IGLESIAS-GUERRA, J.M. NEUMANN et T.
HUYNH-DINH, Synthetic 6-glutamatecosyl phospholipid as a drug transport system/Tetrahedron Lett. 28 (1987) 3581-3584). Ce radical permet également au dérivé de se fixer sur un récepteur spécifique ; le dérivé agira donc spécifiquement sur les cellules qui présentent un tel récepteur. Un raisonnement similaire a conduit à la synthèse de dérivés phosphatés de certaines hormones stéroides (L. LEBEAU, C. MIOSKOWSKI et P. OUDET, Synthesis of phospholipids linked to steroid hormone derivatives. Chemistry and Physics of Lipids, 46 (1988) 57-62).
Les dérivés hydrosolubles de l'invention pour lesquels R représente le groupe dans lequel R3 et y+ sont tels que définis ci-dessus, sont obtenus par phosphorylation d'un dérivé monomère ou dimère de l'invention, pour lequel R = H, avec l'ophenylènephosphochloridate, ou avec le bisphosphochloridate suivie d'une hydrolyse oxydative, notamment par le tétracétate de plomb.
Les conditions opératoires de 1' ensemble des réactions décrites. ci-dessus seront plus particulièrement développées dans la description détaillée qui suit Les dérivés de l'invention favorisent la régénérescence nerveuse et ont un effet neuroprotecteur; ils présentent notamment les propriétés suivantes.
Ils augmentent l'extension de neurites in vitro et in vivo, et facilitent la réparation à la suite de lésions traumatiques du SNC et du SNP (système nerveux périphérique), en favorisant l'extension de neurites et la formation de nouveaux contacts cellulaires et donc la récupération fonctionnelle. Ils atténuent l'effet de l'ischémie, favorisent la survie neuronale et réduisent ladégênérescence wallérienne après une lesion.
Ils protègent les neurones de la mort cellulaire consécutive à la présence de composés neurotoxiques, comme des métaux lourds ou des composés neuroexcitateurs, comme le glutamate et ses analogues.
Les dérivés de l'invention sont des facteurs cytotrophiques, notamment, pour les cellules de la peau et les cellules endothéliales. Ils favorisent la réparation des lésions de certaines couches cellulaires comme les cellules de la peau ou les cellules de l'endothélium vasculaire. Ces dérivés augmentent la différenciation des cellules du derme, de l'épiderme ou les cellules endothéliales ; ils augmentent la formation de prolongements et le comblement de la lésion par les cellules qui la bordent.
Les dérivés de l'invention ont un effet cytoprotecteur qui siexerce, notamment, sur les cellules hépatiques, les cellules musculaires striées cardiaques et les cellules glomérulaires rénales. Ils protègent ces cellules contre des lésions chimiques ou liées à une ischémie. Ces dérivés permettent également de protéger le tissu cardiaque contre les conséquences d'une interruption du flux sanguin, en particulier dans les arteres coronaires. Les dérivés de l'invention permettent donc de protéger les cellules hépatiques, rénales et musculaires cardiaques contre leur dégénérescence d'origine chimique ou ischémique.
Les dérivés de l'invention présentent également en effet trophique sur les cellules du glomérule rénal.
Ils permettent une meilleure synthèse et la sécrétion de facteurs fibrinolytiques, comme les activeurs du plasminogène. Ils favorisent donc la fibrinolyse et empêchent la formation de thrombi, en particulier à la suite de néphropathies aigres ou chroniques, de glomérulonéphrites ou de coagulation intra-vasculaire.
Les dérivés de l'invention ont un effet cytotrophique sur les cellules qui participent aux défenses immunitaires de l'organisme, en particulier les macrophages, les monocytes et les lymphocytes. Ces dérivés favorisent la différenciation des lymphocytes, macrophages et monocytes ; ils augmentent la production des facteurs de l'immunité, favorisent l'acquisition de caractères différenciés et permettent de renforcer les défenses naturelles ou induites de l'immunité.
Les dérivés de l'invention ont un effet cytotrophique sur les mastocytes et les leucocytes basophiles qui jouent un rôle primordial dans les phénomènes inflammatoires. Ces dérivés favorisent l'acquisition de caractères différenciés de ces cellules, modifient leur réponse à la stimulation par un antigène et par les IgE et diminuent la production consécutive d'histamine. Ils modifient également la réponse des cellules musculaires lisses aux médiateurs de l'inflammation, comme l'histamine, les leucotriènes et les prostaglandines.
Les dérivés de l'invention ont un effet cytotrophique et différenciateur sur des cellules qui participent à la défense de l'organisme contre la néoplasie. Ils augmentent l'activité phagocytaire des macrophages, des lymphocytes et des monocytes et augmentent la sécrétion de facteurs tumoricides, comme le TNF (tumor necrosis factor). Ils ont aussi un effet différenciateur sur des cellules cancéreuses ou précancéreuses, comme les promyélocytes.
Si après réflexion il souhaite ne pas acheter un article qu'il a précédemment comptabilisé, il le retire du chariot et efface son montant par une nouvelle séquence d'opérations 28, dont le détail est donné en figure 4. Lorsque les achats sont terminés, c'est-à-dire lorsqu'il n'y a plus d'autre article à prendre en compte, il se présente à une caisse rapide (opération 30) pour régler ses achats, sauf si, par suite d'une violation de la procédure prescrite, inadvertante ou délibérée, il a provoqué une alarme, matérialisée par un si- gnal tel que l'extinction d'une lampe verte 32 et l'allumage d'une lampe rouge 34 ; dans ce cas il est orienté vers une caisse normale où le contenu du chariot est inventorié.
Les opérations successives lors de la prise en compte d'un article peuvent autre celles schématisées sur la figure 3.
Le chaland qui prélève un article 20 (opération 32) doit lire le code à barres porté par l'article ou par le linéaire où il l'a pris. La lecture fait apparaitre, sur l'afficheur 16, la mention du prix de l'article et du total déjà comptabilisé et éventuellement la nature de l'article (opération 34).
La séquence illustrée comporte une temporisation, d'une dizaine de secondes par exemple, dont le déroulement peut être porté à la connaissance de l'utilisateur par le fonctionnement d'un ronfleur, au cours duquel l'article choisi doit être déposé dans le chariot.
Si l'article n'est pas déposé dans ce délai, il y a déclenchement de l'alarme. L'existence de ce délai permet de réduire le risque de fraude par substitution d'article.
Le dépôt de l'article 20 dans le chariot est détecté par passage successif de l'article à travers les deux rideaux dans un sens déterminé. Simultanément, le code multi-fréquences porté par l'étiquette de l'article est lu et une comparaison est effectuée (opération 38) entre le code å barres mémorisé et le code multi-frequences : si ces deux codes sont compatibles, il y a prise en compte définitive de l'article. La prise en compte peut être indiquée au client par l'émission d'un top sonore. Dans le cas contraire une alarme est déclenchée. La possibilité de fraude par introduction simultanée et délibérée de deux articles à la fois est réduite du fait qu'il existe une probabilité réduite que les étiquettes de deux articles introduits simultanément passent en même temps à travers les rideaux. Elle est encore réduite si chaque code barres est associé, de façon aléatoire suivant les articles, à plusieurs combinaisons de fréquence ou si des moyens de discrimination en fonction de l'amplitude du signal sont prévus.
En cas de dépôt d'un article dans le chariot sans lecture préalable du code barres, aucune comparaison n'est possible et une alarme est déclenchée.
La séquence de restitution peut être celle schématisée en figure 4 : le chaland extrait l'article à restituer (opération 40). Les moyens de détection placés à l'entrée du chariot indiquent que l'article est sorti et en même temps mémorisent son code multi-fréquences.