INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les dérivés et analogues des alcools gras à longue chaîne de l'invention peuvent donc être utilisés dans le traitement de maladies neurodégénératives, comme la chorée de Huntington, la maladie d'Alzheimer ou de Parkinson. Ils permettent également d'améliorer le traitement de l'épilepsie et d'autres troubles du comportement liés au système limbique. De plus, elles sont capables d'induire une protection des neurones vis-à-vis des neurotoxines, de certains ions et de radicaux oxydants. Pour l'ensemble de ces applications, les doses thérapeutiques sont de l'ordre de 0,1 mg/kg/jour & 10 mg/kg/jour. L'administration est répétée, par voie parentérale ou orale.
EXEMPLE 2 : PROTECTION VIS-A-VIS DE LESIONS DUES AUX NEUROTOXIQUES On utilise les propriétés excitotoxiques d'un acide aminé, l'acide iboténique, pour étudier la survie des neurones cholinergiques du noyau basalis, selon une méthode précédemment décrite (WENK et al, Brain res., 293 : 184-186 (1984)). Après avoir anesthésié des rats mâles Long-Evans on les places dans un appareil stéréotaxique ; puis on injecte 25 nmole d'acide iboténique dans le noyau basalis du côté gauche.
Un groupe de rats est traité avec un dérivé d'alcool gras & longue chaîne, & raison d'une injection par jour (1 mg/kg) par voie intrapéritonéale à partir de deux jours avant l'injection d'acide iboténique.
On peut4464Hpartir de deux jours avant l'injection d'acide iboténique.
On peut utiliser plusieurs types de tests cognitifs et de comportement au cours de l'expérience, en particulier le labyrinthe radial à 8 branches, l'apprentissage du labyrinthe de Hebb-Williams, ou le test de la piscine (ALFORD et al, Exp. Brain Res., 69 (1988) 545-558)). Les animaux traités avec l'acide iboténique montrent un déficit des capacités d'apprentissage et de mémorisation. On observe également un déficit dans la localisation spatiale, similaire à celui observé dans la maladie d'Alzheimer.
Pour les animaux traités les déficits sont nettement moindres et les capacités d'apprentissage et de mémorisation sont maintenues.
A l'issue des tests comportementaux, on sacrifie les animaux afin de procéder à une analyse histologique de la zone du noyau basalis. On observe une perte de substance induite par l'acide iboténique qui est néttement plus restreinte pour les animaux traités. La lésion qui pour les témoins s'étend dans toutes les directions à partir du site d'injection vers le globus pallidus est moins étendue après traitement et correspond à une injection de neurotoxine moins importante. Des dosages biochimiques sont également effectués sur le néocortex et l'hippocampe. L'activité de la choline acétyl transférase est diminuée dans le cortex frontal, temporal et pariétal, ainsi que dans l'amygdale deux semaines après l'injection d'acide iboténique.Le traitement avec les dérivés de l'invention entraîne une réduction sensible de ce déficit dans ces régions et on observe une récupération progressive de l'activité choline acétyl transférase dans les semaines qui suivent l'injection.
Les dérivés de l'invention permettent de protéger certains neurones cérébraux contre des lésions induites par des acides aminés excitotoxiques et contre les conséquence fonctionnelles de ces lésions.
3) Réparation de lésions La régénérescence celulaire intervient également au cours de la réparation de lésions vasculaires ou cutanées. Ainsi l'endothélium vasculaire est composé d'une monocouche de cellules qui encadrent la face interne du sytème cardio-vasculaire. Cette monocouche représente une surface de plusieurs centaines de m2 et joue un rôle majeur dans l'intégrité vasculaire. Les cellules endothéliales produisent de nombreuses substances qui participent à la coagulation, à la fibrinolyse et aux phénomènes inflammatoires.
L'altération de ces fonctions peut conduire à une augmentation de la perméabilité vasculaire et à une accumulation de protéines et lipoprotéines dans le tissu-intersticiel, intersticiel, ou & l'adhésion de plaquettes au sous-endothélium accompagnée de sécrétion de "platelet derived growth factors" (PDGF), ou enfin à la migration et la prolifération de cellules musculaires lisses. Une altération de l'endothélium vasculaire est donc une étape initiale importante dans les phénomènes de thrombose et d'athérosclérose (Cazenave et al. Inter Angio 3:27-32 (1984)).A la suite d'une lésion de l'endothélium vasculaire, plusieurs phénomènes apparaissent dans le processus de réparation in vivo: tout d'abord la migration et la réplication de cellules endothéliales, l'adhésion plaquettaire sur le sousendothélium exposé et enfin la prolifération de cellules musculaires lisses qui conduit à la formation de plaques et à l'athérosclérose. Des dérivés permettant de protéger la paroi vasculaire ou d'inhiber l'adhésion plaquettaire peuvent donc empêcher la formation de plaques et l'athérosclérose.
Une des applications de l'invention consiste à utiliser les dérivés décrits ci-dessus pour favoriser la réparation de lésions cutanées ou vasculaires. Les lésions des cellules endothéliales entraînent la formation de dépôts de protéines ou lipoprotéines dans le tissu intersticiel, ainsi que la prolifération de cellules musculaires lisses. Ces phénomènes constituent l'étape initiale dans la formation de thrombose et de 1' athérosclérose (R.Ross. Atherosclerosis 1:293-311(1981)). Les dérivés de l'invention augmentent la différenciation des cellules du derme, de l'épiderme et des cellules endothéliales vasculaires. Comme nous le montrons dans l'Exemple 3, ces dérivés accelèrent la réparation d'nue lésion mécanique de cellules endothéliales vasculaires.Cette propriété est démontrée à l'aide d'un modèle in vitro de lésion mécanique de cellules endothéliales humaines en culture. Les cultures sont obtenues à partir de veines ombilicales humaines et sont maintenues dans un milieu RPNI plus HEPES plus 30% de sérum humain ; la lésion est réalisée 3 jours apres la confluence par l'application d'un disque de cellulose sur une couche confluente de cellules endothéliales (C.Klein-Soyer et al Thrombosis Haemostasis 56:232-235(1986)). La vitesse de régénération dépend de la taille de la lésion initiale et de la concentration en sérum. De plus l'addition au milieu de culture des dérivés de l'invention augmentent significativement la surface de la lésion initiale recouverte par l'endothélium qui régénère.Les doses utilisées sont de l'ordre de 0,01 à 100pu, plus particulièrement 0,1 à 10go. Les doses correspondantes pour l'utilisation in vivo sont de l'ordre de 0,olmg/kg à 100mg/kg, plus particulièrement 0,1 à 10mg/kg.
L'application des dérivés de la présente invention permet d'accélérer la réparation de lésions vasculaires ou cutanées et de retarder la dégénérescence des cellules de la peau, liée en particulier au vieillissement, à l'exposition aux rayons U.V et à des agressions chimiques. Cette propriété est démontrée in vitro à l'aide de cultures de kératinocytes. Les alcools gras à longue chaîne de l'invention augmentent la survie de ces cellules placées dans des conditions défavorables ou en présence de facteurs qui entraînent une dégénérescence de ces cellules. accél'èrent leur différenciation ainsi que la réparatietton de lésions tissulaires. Les doses utilisées sont similaires à celles décrites pour les lésions vasculaires.
EXEMPLE 3 : REPARATION DE LESIONS DE L'ENDOTHELIUM VASCULAIRE PAR DES ALCOOLS GRAS A LONGUE CHAîNE.
Des modèles de lésion mécanique d'une couche de cellules endothéliales in vitro permettent d'étudier les processus de réparation de ce type de lésions (C.Klein-Soyer et al sus-mentionné). Les cellules endothéliales sont isolées à partir de veines ombilicales humaines. On les incube avec de la collagénase 0,1% pendant 15 min à 37'C et on récupère l'effluent dans des tubes contenant du milieu de culture (RPMI, HEPES, glutamine et 5 à 30% de sérum humain). Après centrifugation on ensemence le culot dans des boites de Petri prétraitées avec de la fibronectine qui sert de support.
La lésion se fait sur des cultures confluentes par application d'un disque calibré de polyacetate de cellulose. Cette technique détache sélectivement les cellules endothéliales qui se trouvaient dans la zone d'application du disque. Puis on ajoute au milieu de culture les alcools gras à longue chaîne à des doses variant de 0,01 SM à 100 zM, et préférentiellement 0,1 à 10 SM.
- Changer le tampon d'hybridation et ajouter environ 4 x 106 c.p.m. de la sonde dénaturée (5 minutes à 100-C).
- Incuber de 16 à 24 heures à 42-"C.
- laver successivement avec 1 x 50 ml 5 x SSC, 50 % formamide 20 minutes à 42iC, 2 x 50 ml 2 x SSC, 0,1 % SDS 2 x 20 minutes à 42-C, 1 x 50 ml 0,2 x SSC, 0,1 % SDS 20 minutes à 42"C.
B) Conditions non stringentes - Hybrider le filtre avec 20 à 40 ml de tampon d'hybridation (5 x SSC, 1 x Denhardt , à,1 % SDS, 0,1 % SDS), pré-hybrider pendant 1 heure à 42 C.
- Changer le tampon d'hybridation et ajouter environ 4 X106 c.p.m. de la sonde dénaturée (5 minutes à 100-C).
- Incuber de 16 à 24 heures à 42"C.
- Laver successivement avec 1 x 50 ml 5 x SSC, 0,1 s SDS 20 minutes à 42je, 2 x 50 ml 2 x SSC, 0,1 % SDS 2 x 20 minutes à 42-C.
solution de Denhardt 1 1 % Ficoll, 1 polyvinylpyrrolidOne, 1 % BSA.
(WHAL et al, Proc. Natl. Acad. Sci., USA : 76, 3683-3687 (1979) ; MANIATIS et al, Molecular Cloning, Cold Spring Harbor Press, NEW YORK (1982).
Les légendes correspondant aux figures illustrant les expériences et observations qui précèdent sont les suivantes - Figure 1 Carte de restriction du plasmide pBU3. La partie supérieure de la figure représente le fragment BamHI de i'ADN de B. subtilis BD1238. Les localisations du gène lacZ du marqueur de résistance à l'érhythromycine (erm), et de Tn 917 sont respectivement représentées par une bande hachurée, une bande noire et une autre bande hachurée. Le fragment SalI-SPhI qui contient le locus sacU est indiqué par une, bande blanche. La partie inférieure de la figure représente le vecteur plasmidique avec son origine de réplication chez B.
figure 3 Représentation schématique du plasmide pHV1436 (8,7 kb), se répliquant à un faible nombre de copies, et du plasmide pHV1431 (10,8 kb) se répliquant à un nombre élevé de copies. Les origines de réplication fonctionnelle chez B. subtilis, sont indiquées par une bande pointillée (pHV1436) ou par une bande noire (pHV7431) ; le marqueur de résistance au chloramphenicol est représenté par une bande hachurée, et les séquences de pBR322 sont indiqués par une bande blanche.
- Figure 5 Séquence nucléotidique et carte de restriction détaillées du fragment d'ADN comprenant le locus sacU de B: subtilis.
Ar, R1, R2, Y, Ra, Rb, Rc ont la signification précitée et # re- présente un anion monovalent comme par exemple un anion halogé nure, tosylate ou méthylsulfate.
Selon 11 invention l'anode est en un métal choisi dans le groupe constitué par les métaux réducteurs et leurs alliages.
On entend par "leurs alliages" tout alliage contenant au moins un métal réducteur.
De façon préférée, l'anode est en un métal choisi dans le groupe constitué par le magnésium, l'aluminium, le zinc et leurs alliages.
Cette anode peut avoir une forme quelconque et notamment toutes les formes classiques d'électrodes métalliques : fil torsadé, barreau plat, barreau cylindrique, barreau de section carrée, plaque, lit renouvelable, toile, grille, ruban, billes, grenaille, poudre, etc.
De façon préférée, on utilise un barreau cylindrique -de diamètre adapté aux dimensions de la cellule.
Avant utilisation, il est préférable de nettoyer, chimiquement ou mécaniquement, la surface de l'anode.
La pureté du métal ou de l'alliage constituant l'anode n'est pas un paramètre important et les .qualités industrielles conviennent.
Au cours de l'électrosynthèse, l'anode est consommée par la réaction électrochimique dont elle est le siège. Un tel procédé est couramment appelé "à anode solubles ou "à anode consommable".
La cathode est du graphite ou un métal quelconque tel que l'acier inoxydable, le nickel, le platine, l'or, le cuivre.
Elle est constituée, de façon préférée, par une grille ou une plaque cylindrique disposée concentriquement autour de l'anode.
Les électrodes sont alimentées en courant continu par l'intermédiaire d'une alimentation stabilisée.
Les solvants organiques utilisés dans le cadre de la présente invention sont tous les solvants peu protiques usuellement utilisés en électrochimie organique. On peut citer par exemple l'hexa- méthylphosphorotriamide (HMPT), le tétrahydrofuranne (THF), la Nméthylpyrrolidone (NMP), la tétraméthylurée (TMU), le diméthylformamide (DMF), l'acétonitrile, ainsi que les mélanges de ces solvants, par exemple les mélanges THF-HMPT.
Les électrolytes supports utilisés pour rendre le milieu conducteur ou plus conducteur sont ceux habituellement utilisés en électrochimie organique. On peut citer par exemple les sels dont l'anion est un halogénure, un carboxylate, un alcoolate, un perchlorate, un hexafluorophosphate, un fluoroborate et le cation un ammonium quaternaire, un phosphonium quaternaire, le lithium, le sodium, le potassium, le magnésium, le zinc, l'aluminium.
Parmi ces sels, on peut notamment citer le tétrafluoroborate de tétraéthylammonium (BF4NBu4), le perchlorate de lithium (LiClo4), l'iodure de tétrabutylammonium (INBu4), le chlorure de tétraéthylammonium (ClNEt4), le perchlorate de tétrabutylammonium (Cl04NBu4), le bromure de tétrabutylammonium (BrNBu4).
L'ajout d'un électrolyte support n'est pas nécessaire lorsque le composé hétéroatomique benzylique est lui-mêne ionique, comme c'est le cas lorsque ce composé est un sel d'ammonium quaternaire benzylique, de sulfonium benzylique ou de phosphonium quaternaire benzylique.
Selon encore un autre aspect, la séquence de nucléotides de l'invention est capable de s'hybrider avec une sonde formée à partir de la séquence présentant l'enchaînement de nucléotides representé sur la figure 2 ou l'enchaînement des nucléotides complémentaires de cette séquence.
Les séquences de 11 invention sont des séquences d'ADN ou d'ARN.
Toute séquence de nucléotides hybridable avec celle de l'enchaînement de la figure 2, telle qu'obtenue par transcription enzymatique inverse de 1'ARN correspondant, ou encore par synthèse chimique, fait partie de l'invention.
Conformément à l'invention, le clonage de la séquence de nucléotides codant pour une protéine à activité NDP kinase comprend l'isolement des clones d'une banque d'expression construite dans un vecteur, du type de ceux exprimant une protéine interagissant spécifiquement avec un composé tel que [35S) GTPzS, donneur de triphosphate.
Pour l'expression de la protéine dans un hôte, on construit un vecteur en insérant un fragment nucléotidique renfermant la séquence codante.
Selon un mode de réalisation avantageux, on construit par exemple le plasmide pNDK pour exprimer la protéine à activité NDP kinase dans une bactérie telle que E.coli. A cet effet, on insère le fragment de restriction HaeIII - EcoRI du clone isolé, ce fragment ayant été avantageusement traité au préalable pour obtenir des extrémités franches. L'insertion est réalisée dans le site HincII du plasmide pTZ18R. Le plasmide recombinant résultant est introduit dans la bactérie aux fins d'expression, selon les techniques habituelles, de l'enzyme sous le contrôle du promoteur lac Z.
Un agent inducteur tel que 1'IPTG est avantageusement ajouté pour augmenter le taux d'expression. Plusieurs mg par litre de culture peuvent être ainsi obtenus.
L'enzyme récupérée est soumise à au moins une étape de purification sur une colonne de chromatographie.
Une préparation homogène d'enzyme est obtenue en mettant en contact un surnageant de centrifugation d'une suspension de bactéries préalablement cassées par sonication, obtenue à l'issue du procédé cidessus, avec un dérivé de dextrane tel que le DEAE Sephacele, puis en chromatographiant l'élut recueilli sur une colonne de résine telle que Af figel-Blue0.
A pH 8,5, la protéine à activité NDP kinase n'est pas retenue dans la résine et est éluée dans le volume mort.
Selon un autre aspect du procédé de synthèse de dérivés d'adénosine de l'invention, on fait réagir un dérivé d'ADP substitué, tel que défini ci-dessus, avec une protéine à activité NDP kinase capable de phosphoryler le dérivé d'ADP en conduisant à un dérivé d'ATP dans lequel le groupe phosphate apporté par la protéine à activité NDP kinase est éventuellement marqué.
Ainsi, la NDP kinase fixe de façon covalente le groupement phosphate marqué des Cr'32p7 triphosphonucléotides.
L'utilisation de l'enzyme fixée à un support, par exemple couplée à des billes d'agarose permet d'éliminer après la réaction de marquage, les nucléotides donneurs par rinçages successifs des billes. Le phosphate marqué fixé à la protéine est ensuite transféré aux nucléosides diphosphates accepteurs.
La mise en oeuvre des dispositions qui précèdent permet notamment d'effectuer une substitution sélective en une position donnée du dérivé recherché, par exemple en position 2' sans avoir à recourir à la séparation des isomeres en positions 2' et 3' qui sont obtenus habituellement en opérant par voie chimique.
I1 est également possible d'obtenir des dérivés substitués de façon sélective en 2' et en 3', alors que les procédés chimiques classiques conduisent à 6 isomères ce qui rend les opérations de séparation difficiles.
En outre, selon un aspect de grand intérêt, le coût de la synthèse est réduit de manière sensible par rapport aux procédés chimiques utilisés jusqu'à présent, étant donné que la séparation d'isomères n'est plus nécessaire, les réactions de substitution sont réalisées en une seule étape, si l'on excepte l'introduction d'un groupe en position 3', lorsqu'on souhaite une substitution à cette position, avec des rendements allant jusqu'à 100 t.
Quoiqu'il en soit ce brevet concerne le canalicule à l'intérieur de l'aiguille d'acupuncture,qui permet en plus de sa fonction thérapeutique séculaire d'être un vecteur de produits contenus dans le réservoir.
Cette lame-métal se termine d'un c8té par une pointe et de l'autre lle Entre plus ou moins profondément dans le réservoir.
Au niveau de la pénétration dela lame- métal dans la lame-manche, donc dans la zone A approximativement, s'enserre très fortement l'une des extrémités du fil sans spiralé, l'autre extrémité se terminant au niveau de la fin du support, donc en C lorsque cette aiguille est en place l'acupuncteur pourra par simple pression manuelle farte progresser et pénétrer le produit contenu dans le réservoir jusqu'au derme.
Les dessins annexés illustrent l'invention: -La figure 1) represente les 2 parties d'une aiguille d'acupuncture avec la lame rache d'une part et la lame-métal de l'autre.
--La figure 2) represente une aiguille avec une lame-métal precé d'une canal cule et une lame-manche composé d'un réservoir servant de support et spiralé d'un fil sans fin à partir de la zone A jusqu'a la zone C -La figure 3) reprisent une variante de l'invention avec un réservoir simple et non enserré d'un fil sans fin et de plus la lame-métal est percé d'un canali cule.
PERFECTIONNEMENTS APPORTES AUX SERRURES, NOTAMMENT POUR PORTIERES DE VEHICULES AUTOMOBILES.
L'invention est relative à des serrures du genre de celles qui comprennent un pene rotatif, destiné a coopérer avec une gache, et un cliquet propre à retenir le pene en position de fermeture, ainsi que des moyens de commande de l'ouverture de la serrure propres a agir sur le cliquet pour libérer le pêne, ces moyens de commande comprenant un levier articulé, entre ses deux extrémités, sur un axe porté par un bati, une extrémité du levier étant sollicitée par les moyens de commande de l'ouverture, tandis que l'autre extremite est propre à agir sur le cliquet.
L'invention concerne plus particulièrement, mais non exclusivement, de telles serrures pour portieres de véhicules automobiles.
L'invention a pour but, surtout, de rendre la fabrication de ces serrures plus simple et plus economique, et telle que le fonctionnement de la serrure soit doux et silencieux.
Selon l'invention, une serrure du genre défini précédemment est caractérisée par le fait que le levier est realisé en matière plastique et que l'axe d'articulation fait partie intégrante de ce levier, tandis qu'un alésage cylindrique est prévu dans une paroi du b ti pour recevoir ledit axe, un ressort de rappel étant monté autour de l'axe et ayant une extrémité ancrée dans la paroi du bati, et une autre extrémite liée au levier.
Avantageusement, le susdit axe du levier est prevu dans une zone en creux de ce levier, ledit axe faisant saillie par rapport au fond de la zone en creux et étant entouré par une jupe sensiblement cylindrique. De préférence, le ressort de rappel est un ressort de torsion dont les spires sont logees dans l'espace compris, radialement, entre l'axe et ladite jupe cylindrique.
La susdite jupe peut comporter une fente dans laquelle est engagée une extrémité du ressort recourbée radialement vers l'extérieur, pour assurer la liaison en rotation entre la susdite extremite et le levier. L'autre extrémité du ressort peut être repliée sensiblement parallèlement a l'axe d'enroulement des spires, cette extrémité recourbee étant propre à s'engager dans un trou prévu dans la paroi du bati pour assurer la liaison en rotation de ladite extremité et du bats.
L'alésage prevu dans la paroi du bâti pour recevoir l'axe du levier est avantageusement defini par une collerette, sol-idaire de la paroi, notamment obtenue par emboutissage, propre à s'engager dans la zone en creux du levier, les spires du ressort de rappel entourant exterieurement ladite collerette.
La paroi du bati peut comporter une lumière en arc de cercle situee radialement à l'extérieur par rapport a la susdite collerette, lumière dont l'étendue angulaire est supérieure au debattment maximum du levier, ce dernier comportant une patte propre à s'engager dans ladite lumiere.
La patte du levier peut être formée par un prolongement, parallèle à l'axe d'articulation, d'une zone de la jupe cylindrique du levier.
Cette patte peut comporter une partie recourbée vers l'extérieur, sensiblement à angle droit, tandis que la susdite lumiere comporte, à une extrémité, une échancrure pour permettre le passage de ladite partie recourbee de la patte, cette partie pouvant étre ainsi engagée de l'autre c8té de la paroi de manière à retenir le levier suivant une direction parallèle à l'axe d'articulation.
La figure 9 (sur laquelle l'abscisse représente la température du post-plasma en "C et l'ordonnée représente le % de gaz recueilli à la sortie) comporte les trois courbes suivantes - courbe E qui correspond à un résidu en C36; - courbe F qui correspond à un distillat lourd; et - courbe G qui correspond au Dobane en C16.
Cette figure montre que pour éviter la formation de gaz la puissance communiquée au résidu (charge contenant les hydrocarbures les plus lourds) ne doit pas dépasser une énergie thermique qui la laisse en fin de choc à 260"C, alors que la charge type C16 accepte une énergie qui la laisse à 400"C.
Cet exemple de référence montre - que l'énergie spécifique du choc est à ajuster en fonction de la structure de la charge; - que l'on peut pratiquement ne pas créer des hydrocarbures gazeux en convertissant des charges lourdes, alors que tous les procédés connus rejettent toujours du CH4 et des gaz légers en quantité très importante; - que l'on doit faire un bon compromis en pratique pour avoir de bons résultats de conversion selon la nature de la charge traitée et des objectifs visés.
En effet, l'exemple de référence 2 nous montre que l'on a intérêt à adopter un choc d'énergie aussi fort que possible se traduisant par une température de fin de mélange la plus élevée possible, mais les exemples de référence 1 et 3 nous enseignent que pour une structure de charge déterminée l'énergie ne doit pas dépasser une valeur maximum sous peine de produire des quantités insupportables de gaz et de solides.
Cette analyse fine des phénomènes élémentaires explique en particulier les résultats des essais de B.
SCHULTZE et E. HOFMAN, rapportés dans leur article intitulé "Hydropyrolyse des résidus du pétrole et d'huiles lourds" dans "Erdoel und Kohle, Erdgas, Petrochemie vereinigt mit Brennstoff-Chemie", 1983, 36, 457-461". En utilisant du H2 à trop fort débit et à température trop élevée, ils ont produit beaucoup de gaz et de coke.