INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
L'invention a également pour objet un procédé de production d'un polypeptide déterminé par un micro-organisme approprié qui comprend la transformation des cellules dudit micro-organisme au moyen d'un vecteur contenant . à la fois, en l'un de ses sites non essentiels pour sa réplication, un fragment d'ADN selon l'invention, codant pour un activateur du phénotype Sedh, et une séquence d'ADN codant pour le polypeptide déterminé, cette dernière séquence d'ADN étant précédée par une séquence signal, qui est elle-même précédée par une séquence cible et par une séquence nucléotidique comprenant les éléments nécessaires pour permettre l'expression de la séquence signal et de la séquence codant pour le polypeptide déterminé, la mise en culture des dites cellules transformées dans un milieu approprié, et la récupération dudit polypeptide à partir du milieu de culture.
La séquence d'ADN codant pour le polypeptide déterminé peut également être insérée.en aval d'une séquence signal endogène dans le chromosome de la cellule hôte utilisée à l'aide notamment d'un vecteur contenant une séquence d'ADN codant pour ledit polypeptide déterminé.
Avantageusement les cellules hôtes utilisées pour la mise en oeuvre de l'ensemble des procédés de production de protéines sus-mentionnés, sont également transformées à l'aide d'un vecteur, notamment plasmide, contenant, en l'un de ses sites non essentiels pour sa réplication, une ou plusieurs séquences d'ADN codant pour un autre activateur conduisant au phénotype Sedh que celui codé par un fragment d'ADN selon l'invention, et les éléments nécessaires pour permettre l'expression de ladite séquence d'ADN.
Parmi les activateurs du phénotype Sedh indiqués indiqués ci-dessus, on citera notamment les polypeptides Sac,, SacQ5, SacQA, codés respectivement par les gènes sacs de B. licheniformis, B subtilis et B. amvloliauefaciens, et le polypeptide é 60 acides aminés codé par le géne DrtR de B. natto.
Avantageusement, le vecteur sus-mentionné comprend une séquence d'ADN codant pour le polypeptide Sac, .
Les tranformations de la cellule hôte de manière à ce que son génome, ou son chromosome, contienne une, ou plusieurs, séquence(s) d'ADN codant pour un activateur autre que celui codé par un fragment d'ADN selon l'invention, peut également être réalisée par l'intermédiaire de tout vecteur utilisé pour la mise en oeuvre de l'ensemble des procédés de l'insertion décrits ci-dessus, ledit vecteur contenant un autre fragment d'ADN codant pour un, ou plusieurs, des activateurs sus-mentionnés.
A ce titre, l'invention concerne plus particulièrement un vecteur, notamment plasmide, contenant, en l'un de ses sites non essentiels pour sa réplication, un fragment d'ADN selon l'invention, ainsi qu'un fragment d'ADN pour un, ou plusieurs, activateur(s) conduisant au phénotype Sedh autre(s) que celui codé pour le fragment d'ADN selon l'invention, et contenant les éléments nécesaires pour permettre l'expression de ce dernier fragment d'ADN.
L'invention concerne aussi le vecteur sus-mentionné contenant également un fragment d'ADN contenant une séquence d'ADN codant pour un polypeptide déterminé précédée par une séquence d'ADN contenant une séquence cible et les éléments nécessaires pour permettre l'ex- pression de la séquence codant pour ledit polypeptide.
L'invention concerne plus particulièrement le vecteur tel que décrit ci-dessus et comprenant également en amont de la séquence codant pour le polypeptide déterminé, une séquence signal ainsi que les éléments nécessaires pour permettre l'expression de la séquence signal et de celle codant pour ledit polypeptide.
Avantageusement, le vecteur sus-mentionné comprend une séquence d'ADN codant pour le polypeptide activateur Sac,.
Parmi les séquences signal utilisées, pour la construction des vecteurs de l'invention, on citera notamment celle permettant la secrétion de la protéase alcaline, de la lévane-saccharase, de la cellulase et de l'-amylase.
D'une' manière générale, toute séquence pouvant jouer le rôle de séquence signal précédant la séquence d'ADN codant pour une enzyme par un micro-organisme approprié peut être utilisée.
L'invention concerne également les cellules de B.subtilis, ou de tout autre micro-organisme approprié, transformées par les plasmides sus-mentionnés comprenant un fragment d'ADN selon l'invention conduisant au phénotype Sedh notamment un fragment d'ADN codant pour le polypeptide SacU5, ceux-ci étant capables de se répliquer dans ces cellules.
L'invention concerne plus particulièrement les cellules bactériennes sus-mentionnées qui sont transformées par un plasmide contenant un fragment d'ADN selon l'invention et une, ou plusieurs, séquence(s) codant pour un autre activateur conduisant au phénotype Sedh que celui codé par le fragment d'ADN de l'invention.
A ce stade, la buse 20 est mise en communication avec le
canal défini par les rainures 21 pour alimenter en air com-
primé l'intérieur de la partie 22 du tube 19, afin de faire
adhérer ladite partie 22 à la surface des deux empreintes 17.
Quand le moulage est terminé, le moule 13 est ouvert et il est extrait de celui-ci un produit semi-ouvré (Fig.2)
constitué par une enceinte fermée 23 cui présente une forme iden-
tique à celle de l'enveloppe 3 et qui ne diffère de cette
dernière que par la présence d'une paroi plane 24 de ferme-
ture de l'extrémité arrière de l'embout 7 et d'une bride axiale intermédiaire 25 qui sont enlevées toutes deux lors
d'une opération de coupe afin d'obtenir l'enveloppe 3 réa-
lisée en matière thermoplastique soufflée d'une seule pièce.
Dans le cas du feu 2, la matière thermoplastique qui constitue le tube 22 présente la coloration que l'on veut donner audit feu 2 et la lampe 9 est montée directement au
travers de l'embout 7.
La variante représentée sur la Fig.4 concerne un feu 26 obtenu selon le procédé de soufflage décrit plus haut, a partir d'un tube 19 de matière thermoplastique transparente, incolore. Dans ce cas, entre la lampe 9 et et la coupelle 12 il est interposé un filtre 27 coloré, en forme de cuvette et monté au travers de l'ouverture 8 de l'embout 7. En variante, ledit tube 19 est constitueed'une matière thermoplastique pré- sentant une couleur quelconque, tandis que le filtre 27 est
réalisé à partir d'un matériau coloré, de manière à communi-
quer, de façon connue, par synthèse complémentaire, la colo-
Dans ce second mode de mise en oeuvre du procédé de L'invention, l'utilisation d'un gel hydrophobe rigide comme milieu de polymérisation permet d'inclure le polymère conducteur électronique dans l'épaisseur du film d'ionomère, ce qui était impossible avec les procédés antérieurs où le milieu de polymérisation était - constitué par une solution aqueuse. Dans ce cas, on obtient en fin d'opération un élément composite comprenant d'une part, Le film d'ionomère dans lequel est inséré Le polymère conducteur électronique et, d'autre part, Le gel hydrophobe rigide en excès.
On peut éliminer le gel en excès par dissolution dans un solvant organique et récupérer ainsi un film composite possédant une tenue mécanique correspondant à celle du film d'origine et une bonne conductivite électrique.
Dans les deux modes de mise en oeuvre du procédé de L'invention, on peut ajouter au gel hydrophobe rigide de la poudre de polymère conducteur électronique, ce qui permet de faire croître le polymère conducteur éLectronique dans la totaLité du gel rigide au cours de l'electropolymerisation et d'adapter ainsi les propriétés électriques de L'élément obtenu.
Dans ces deux modes de mise en oeuvre du procédé de L'invention, on peut encore ajouter au gel rigide d'autres additifs en vue de conférer certai nes propriétés à L'élément en polymère conducteur mixte obtenu. Ces additifs peuvent être en particulier des catalyseurs, des groupes actifs par exemple des espèces ioniques oxydoréductrices telles que Co2+, Ru042- etc., des groupes electroactifs tels que les -groupes viologène, ferrocène et nitroxyde.
En effet, en ajoutant ces additifs au gel hydrophobe rigide lors de sa preparati-on, il est possible- d'insérer ces additifs dans- le polymère conducteur mixte obtenu avec une répartition homogène de ces additifs.
Dans le procédé de L'invention, les polymères conducteurs é-Lectroniques à former peuvent être en particulier des polyfluorènes, des polyanilines, des polythiophenes, des polypyrroles,-ou Leurs dérives.
Dans ce cas, Les monomères de base présents dans Le gel hydrophobe rigide peuvent être Le fluorocène, l'aniline, le thiophène, le pyrrole ou leurs dérivés ou d'autres composés aromatiques ou héréroaromatiques.
A titre d'exemples, Les dérivés d'aniline susceptibles d'être utilisés répondent à La formule dans laquelle n est un nombre égal à O ou à 1 et RO, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 qui peuvent être identiques ou différents, représentent (a) un atome d'hydrogène, (b) un atome d'halogène, (c) un groupement choisi parmi OH, NO21 NH2, CF3, S02, CN, SCN, OCN, SR, OR, C-OH, C-Cl, C-H, C-OR, S-R, S-OR, P- (OR)2, C-R, I J Il Il Il Il II il O O O O O O O O avec R étant un radical alkyle Linéaire ou ramifié ou un radical aryle, ou (d) un radical choisi parmi les radicaux alkyle Linéaires ou ramifiés et aryle, comportant éventuellement un ou plusieurs substituants choisis dans le groupe comprenant OH, NO2, NH2, CF3, SO2, CN, Cl, F, SCN, OCN, SR, OR, C-OH, C-CL, C-H, C-R, C-OR, S-R, S-OR, P-(OR)2 # # # # # où R est un radical alkyle, Linéaire ou ramifié ou un radical aryle.
Les dérivés de pyrrole susceptibles d'être utilisés peuvent répondre à La formule dans Laquelle R9, R10, et R11 qui peuvent être identi ques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupement choisi parmi NO2, S02, CN, OCH3, Cl, F, C=OH'=, C=OR'=O, SCN, OCN, C=R'=O SO2R, S=RO, P=(OR)2,=O SR (avec R = radical alkyl, aryle), ou un radical choisi parmi les radicaux alkyles et aryles comportant éventuellement un ou plusieurs substituants choisis dans le groupe comprenant NO2, SO2, CN, OCH3, Cl, F, SCN, OCN, #, SO2R, #, #, #, #, SR (avec R=radical alkyle ou aryle).
On peut aussi utiliser comme dérivés d'anili-- ne la toluidine, les aminophénols et les carboxyanili- nes. Les dérivés de thiophènes susceptibles d'être utilisés sont par exemple le bithiophène, Le méthyl- 3-thiophène et Les phénothiophènes.
Les ionomères susceptibles d'être utilisés dans Le procédé de L'invention sont des polymères conducteurs ioniques capables d'être transformés en gels rigides par dissolution dans un solvant organique polaire. Ces polymères comportent généralement des groupements échangeurs de cations répondant par exemple aux formules -S03M ou -COOM avec M représentant un proton, un cati on métaLLique ou une entité cationique beaucoup plus complexe On utilise en particulier des polymères perfluorés. Ces ionomères sont définis par Leur poids équivalent qui est la masse moléculaire de polymère à laquelle correspond une charge unitaire échangeable, ou par Leur capacité d'échange cationique exprimée en meq./g.
A titre d'exempLe, L'ionomère utilisé dans L'invention peut être un polymère -perfluoré sulfonique répondant à la formule : dans laquelle M représente un proton, un cation métallique ou un cation complexe, m est un nombre entier allant de O à 3 et n un nombre entier allant de O à 16. Cet ionomère est commercialisé sous la marque Nafion.
On peut bien entendu utiliser dans le procédé de L'invention d'autres ionomères du moment qu'ils peuvent être mis sous la forme de gels hydrophobes suffisamment rigides. En particulier, on peut choisir des gels d'ionomères perfluorés carboxyliques.
A titre d'exemple d'autres ionomères, on peut citer les copolymères de styrène et d'acide acrylique ou méthacrylique comportant des groupements COOM.
Lorsque L'ionomère utilisé a une faible densité de charge, on peut ajouter au gel hydrophobe un sel qui permet d'accroître artificiellement cette densité de charge de manière à permettre un meilleur ancrage du polymère électronique dans l'ionomère.
L'excès de sel est éliminé en fin d'opération par lavage.
2/ BENZYLAMIINATION 24,8 g de CMD" sont dissous dans 163 ml d'eau distillée, puis le pH est porté à 3,5 par ajout d'acide chlorhydrique 1M : solution 1.
27,7 g d'EEDQ sont ensuite dissous dans 225 ml d'éthanol : solution 2. La solution 2 est ajoutée lentement à la solution 1 tout en maintenant le pH à 3,5.
On maintient le mélange réactionnel à température ambiante pendant 1/2 heure, puis on ajoute 12,2 ml de benzylamine. Le pH est porté à 9,2 à l'aide d'une solution aqueuse de NaOH 6M.
On laisse réagir une nuit à température ambiante.
Le mélange réactionnel est ensuite neutralisé et concentré avant de précipiter le produit dans le méthanol.
Après ultrafiltration et lyophilisation, le produit est analysé (dosage acido-basique, analyse élémentaire).
Composition du CMD" B A = 7% ; B = 82% ; C = 11%.
EXEMPLES 2 - 6 : PREPARATION DE DERIVES DE DEXTRANE COMPORTANT LES MOTIFS A,B, C DECRITS PLUS HAUT DANS DES PROPORTIONS VARIEES En faisant varier le nombre de fois où l'on répéte les différentes étapes de carboxyméthylation et de benzylamination décrites dans l'exemple 1 et les durées de réaction, on obtient une gamme de dérivés possédant des proportions variées de motifs A, B et C.
Les composés suivants ont ainsi été préparés
Exemple : nombre de : nombre de : A % : B % : C % N carboxymé- benzylami thylations nations 2 2 4 6 59 35 3 : 3 : 5 : 19 : 29 : 51 4 : 4 : 3 : 19 : 64 : 34 5 : 4 : 3 : 0 : 68 : 32 6 : 4 : 1 .12 :102 : 10
DlSPOSmF DE TRANSMISSION POUR VEHICULE DE LUTTE CONTRE L'INCENDIE.
La présente invention est relative à un système de transmission pour véhicule de lutte contre l' incendie et plus particulièrement à un véhicule devant à la fois se déplacer et propulser les agents extincteurs tel que par exemple les véhicules de lutte contre les feux d' avion.
On connaît des véhicules dotés de deux moteurs à combustion interne, un pour le déplacement du véhicule et un pour l' entraînement de la pompe centrifuge de propulsion des agents extincteurs.
Ces systèmes présentent les inconvénients de colt, poids, maintenance et fiabilité liés à la présence des deux moteurs à combustion interne.
On connaît également des véhicules tels que ceux décrits dans le brevet français 79 03735 ; dans ce cas, la pompe centrifuge est entraînée par le moteur de traction du véhicule à l' aide d' une transmission mécanique, l' avancement du véhicule étant assuré, pendant le fonctionnement de la pompe centrifuge, par une transmission hydrostatique.
Ce système présente l' inconvénient d' une possibilité réduite de réglage de la puissance de traction et de la vitesse d' avancement, et de la nécessité d' arrêter le véhicule pour mettre en fonction le dispositif de transmission de la pompe centrifuge.
brées de fils électriques, de rallonges et de prises multiples. Un tel montage électrique est préjudiciable à la sécurité plus particulièrement quand on tient compte du fait que les matériaux travaillés sont inflammables et qu'il y a une présence de sciure de bois quasi inévitable à
chacun des postes.
Une telle installation outre son aspect inesthéti-
que présente de nombreux inconvénients. Un premier inconvénient est celui de nécessiter une grande surface au sol ce qui est incompatible avec la recherche d'une diversification à moindres frais par certains prestataires et incompatible également
avec les coûts des surfaces commerciales.
De plus, le prestataire doit effectuer un grand nombre de déplacements pour la réalisation d'un cadre. Ces déplacements conduisent à des coûts de prestation élevés, à une baisse de rendement et à une mauvaise qualité de réalisation. Le niveau de qualité inférieur est aussi dû au fait que les manipulations à chacun des postes sont perturbées par la présence des machines des autres postes de travail, au mauvais éclairage des postes ou tout au moins à des variations de la qualité d'éclairage
d'un poste à l'autre.
Le conseil gui peut être donné au client est égale-
ment perturbé lors du choix, car le prestataire de l'installation est obligé de s'interrompre dans son travail pour aider ce client dans le choix de son
échantillon par exemple.
Le but de la présente invention est de pallier ces inconvénients en proposant une unité d'encadrement qui soit ergonomique, compacte, qui permette un travail en toute sécurité, tout en favorisant l'échange client utilisateur, et d'un prix de
revient et d'un coût de fonctionnement peu élevées.
A cet effet, l'unité compacte et ergonomique d'en-
cadrement d'images & partir de baguettes moulurées selon l'invention comprend un comptoir avec un plateau dans lequel sont intégrés des moyens de découpe des baguettes, des moyens d'agrafage des portions de baguettes découpées, des moyens de découpe du verre, du carton et des passe-partout, des moyens de présentation des échantillons de baguettes et des moyens d'essais de coordination image - passe-partout - baguette, ainsi qu'un
raccordement électrique extérieur unique.
Selon une autre caractéristique, l'unité d'encadre-
De cette façon, un signal différentiel clair entre mâle et femelle est obtenu avec la méthode "Drop Stain".
Cette technique de détection avec le bromure d'ethidium appelée par les inventeurs "Drop stain", évite donc de devoir faire appel aux méthodes coûteuses et peu commodes de séparation par électrophorèse sur gel, et permet de déterminer très rapidement le sexe d'un boviné d partir d'une quantité d'ADN extrêmement faible.
De plus, puisque les séquences amplifiées sont constituées de régions Pu-Py alternantes, qui adoptent dans des conditions salines appropriées une conformation dite en Z-DNA, une autre façon de détecter rapidement 1'ADN cible serait constituée par un test du type ELISA faisant appel à des anticorps anti-Z-DNA. Cette procédure réduirait de manière importante le temps requis pour un diagnostic de sexe par rapport au temps requis par une procédure d'hybridation d'une sonde.
Disposer d'une séquence Y spécifique pourrait aussi faciliter la recherche de méthodes de séparation des spermatozoïdes portant le chromosome Y des spermatozoïdes portant le chromosome X, séparation qui reste un but important de l'élevage. La sonde de l'invention peut être utilisée dans de rrdct ns séparées pour vérifier la fiabilité de ces méthodes de séparation.
La figure 1 montre des empreintes de transfert selon la méthode de Southern, appelée "Southern Blot" obtenues avec de 1'ADN génomique bovin digéré par HaeIII et la sonde pSP64.2.5EI apparentée a "Per".
La figure 2 montre les "Dot Blots" de quantités variées d'ADN bovin mâle et femelle avec la sonde btDYZ-1 (a), et avec de 1'ADN bovin génomique {b). Un signal positif est obtenu même avec 100 pg d'ADN male, tandis que les échantillons d'ADN femelle étaient toujours négatifs. L'empreinte obtenu avec de 1'ADN génomique total comme sonde montre que des quantités comparables avaient été utilisées pour chaque sexe.
La figure 3 montre la séquence Y1.2 de manière à faire ressortir son organisation en motifs répétés en tandem. Chaque motif répété se compose de deux parties distinctes : une unité longue de 40 paires de bases dont la séquence consensus est illustrée, ainsi que les déviations de cette séquence consensus pour chaque unité; et une séquence riche en TG de longueur très variable de motif en motif. Il est à noter que la séquence consensus de 40 bases est CNNTTNTCAGCCCTGTGCCCTGGNRAYTGTGGNAANNNGTT dans laquelle seuls les nucléotides qui sont conservés en raison de 280% ont été retenus. Les nucléotides qui sont conservés à < 80% ont été remplacés par "N", sauf dans le cas des positions 25 et 27, qui ont été remplaces par R (= purine) et Y (= pyrimidine) respectivement.
La figure 4 montre l'estimation du nombre de.
copies du motif répété par génome mâle. Des quantités définies d'ADN mâle et de Y1.2 ont été hybridées å la sonde Y1.2, permettant l'estimation du nombre de copies à environ 105. Des quantités équimolaires de vecteur (ds M13mpl8) servaient comme contrôle de contamination éventuelle de la sonde avec de l'ADW de M13.
La figure 5 est un histogramme qui montre la répartition des grains d'argent apurés hybridation in situ de btDYZ-l sur des chromosomes métaphasiques de taureau. L'histogramme a été fait selon la méthode de Fries et al.
La figure 6 montre un étalement de plaque métaphasique bovin avant et après hybridation avec la sonde btDYZ-l. La plaque était colorée avec la moutarde de quinacrine (å gauche) et avec Giemsa (d droite) après hybridation. La flèche indique des grains spécifiques au chromosome Y. Les triangles indiquent des accumulations de grains dans des noyaux interphasiques et représentent sans doute des signaux provenant de séquences Y.
La figure 7 montre le polymorphisme du satellite btDYZ-1 dans la race bovine Bleu Blanc Belge. L'image obtenu montre clairement que le taureau nO 5 possède une variante de btDYZ-1 différente aux 4 autres. Les ADN étaient digérés par HaeIII et la sonde utilisée était btDYZ-l. Les marqueurs de taille sont en Kb.
La figure 8 montre la conservation de la séquence btDYZ-1 dans la famille Bovinae. Un signal différentiel clair est obtenu entre mâles et femelles avec la sonde btDYZ-1 sur des taches de 100ng d'ADN génomique chez toutes les espèces testées de la sousfamille Bovinae. Aucun signal différentiel n'était observé chez d'autres mammifères, par exemple d'autres Bovidae comme les moutons.
La figure 9 montre la séquence Y1.2, les parties soulignées étant les séquences utilisées comme amorce dans la P.C.R.
La figure 10 (a) et (b) montrent des images Polaroïd des "Drop Stains" obtenus après la réaction P.C.R. Un dixième du volume réactionnel total de la PCR était mesuré.
La figure 11 montre les fragments obtenus par la digestion avec EcoRI de btDYZ-1, et le fait que la séquence Y1.2 constitue le fragment EcoRI de 1.2kb produit de cette digestion.
Le premier but de l'invention est de proposer un distributeur de papier en rouleau de constitution simple et économique permettant un changement par la partie supérieure et éliminant les problèmes de rupture du ruban de papier dûs à la friction du rouleau contre les parois du boîtier du distributeur.
Ce premier but est atteint par le fait que le distributeur de papier en rouleau comprend un boîtier destiné à supporter un rouleau et comportant un dispositif de recharge dans sa partie supérieure constitué d'un axe porte mandrin monté en porte-à-faux, solidaire d'une plaque latérale, elle-meme solidaire perpendiculairement d'une partie perpendiculaire du bottier formant couvercle, ladite plaque latérale étant susceptible de se déplacer dans un plan parallèle à la cloison de fixation du distributeur, selon un mouvement longitudinal ou de rotation vers la partie supérieure du distributeur.
Selon une autre disposition de l'invention, ce distributeur comporte une poignée de déplacement et une serrure de verrouillage de la partie de boîtier formant couvercle.
Un autre but de l'invention est de proposer un distributeur de papier en rouleau à chargement par la partie supérieure à rouleau de réserve, ce distributeur permettant une mise en place facile du rouleau de réserve après usage du premier rouleau.
Ce but est atteint par le fait que le distributeur a chargement par la partie supérieure comprend un boitier destiné à supporter deux rouleaux à mandrins sciés dont le premier se trouve dans une position de distribution en face d'une ouverture de distribution du boitier et la deuxième dans une position de réserve, le bolier comportant une manette traversant la coque du boîtier et sollicitée par un ressort de rappel vers la position sur l'axe la plus -éloignée de l'ouverture de distribution.
Un autre but de l'invention est de proposer une première variante permettant l'utilisation de rouleaux sciés transversalement à l'axe de symétrie du rouleau.
Ce but est atteint par le fait que le mandrin de chaque rouleau est scié transversalement à l'axe de smétrie du rouleau à une longueur déterminée (D) et en ce que l'axe porte mandrin se déplaçant dans un mouvement de pivotement a une longueur correspondant à la largeur de deux rouleaux diminuée de la valeur correspondant à la longueur déterminée (D).
Dans une variante avantageuse, la longueur déterminée (D) correspond à une demi-largeur du rouleau.