INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
DISPOSITIF ET PROCEDE DE DOSAGE RAPIDE D'UN RECEPTEUR MEMBRANAIRE OU DE SON LIGAND DANS UN FLUIDE BIOLOGIQUE La presente invention est relative à un dispositif et un procédé pour la determination qualitative et quantitative d'une substance reactive presente dans un fluide.L'invention s'applique plus particulièrement,mais non limitativement,à la detection de la presence de recepteurs membranaires cellulaires fixes (à la surface externe ou dans la bicouche lipidique ou à la face interne de la dite membrane) ou libres (cellulaires extra ou intra-cytoplasmiques ;;circulant dans le sang,serum,plasma,et tous les fluides biologiques),ou à la detection des ligands (comme les facteurs de croissance,les cytokines,les neuromediateurs,etc..) specifiques de ces recepteurs dans un fluide quelconque,grace à l'activation et l'amplification de phenomènes chimiques (ex: flux de Ca++ ) ou de complexes enzymatiques (ex: phospholipase C ou la Phosphorylase a ou encore la Phospholipase A2) par le simple contact du ligand avec son recepteur.Ce sont ces reactions d'activation et d'amplification aboutissant à un produit final activé tout à fait different du ligand ou du recepteur recherché, qui vont permettre de detecter la presence de la molecule recherchée alors que dans les methodes de dosages classiques,la molecule recherchée (marquée ou non) est directement impliquée ou liée au signal.De plus,alors que dans les autres methodes,il existe une continuité dans le dosage,ici,le processus est discontinu.Exemple : un anticorps marqué radioactivement revèle la presence et le taux d'un antigène sur une plaque Elisa;si après un rinçage intempestif,une partie du complexe Anticorps-antigène se detache de la plaque,le taux de radioactivité va diminuer,entrainant une fausse evaluation du dosage.Dans le procédé present,le contact ligand-recepteur declenche extrêmement vite un signal proportionnel au taux de la substance recherchée,qui à son tour declenche une cascade de reactions,qui vont se poursuivre même si entre temps le ligand s'est separé de son recepteur.Le signal n'est donc pas proportionnel à la durée ni à la permanence du contact ligand-recepteur.Ceci explique la rapidité des resultats mais aussi que les etapes de lavage, d'incubation,de rinçage,ne sont plus necessaires. Les methodes deja existantes de determination de la presence ou de la concentration de ligands ou de leurs recepteurs dans des fluides biologiques utilisent le plus souvent les diverses techniques lentes et complexes d'electrophorèse ou la voie immunologique et elles sont bien connues;cette dernière est basée sur la formation d'un complexe entre l'antigène recherché (ici le ligand ou son recepteur) et un ou des anticorps specifiques au dit antigène, marqués le plus souvent par un element radioactif tel que l'iode 125,pour permettre sa detection et/ou son analyse quantitative après separation de l'anticorps marqué complexé à son antigène,de l'anticorps marqué non complexé.
Pour le dosage des recepteurs membranaires par voie immunologique,l'on peut citer Judith L.Luborsky and Harold R.Behrman: Antiserum against rat luteinizing hormone (LH) receptors,insuline receptors and acethylcholine receptors dans Biochemical and biophysical research communications,pages 1407-1413,vol 90,No 4,1979.
Pour le dosage des ligands,Astrid Zimmermann,Anne Sutter et Eric M.Shooter (Proc.Nat.Acad.Sci.USA - vol 78,No 7,pp 4611 - 4615,July 81) ont pu produire des anticorps monoclonaux contre le Beta-Nerve Growth Factor (Beta-NGF),ligand specifique des recepteurs des neurones sympathiques.
Alain Schreiber,Irit Lax,Yossef Yarden,Zelig Eshhar et Joseph Schlesinger (Institut Weizmann - Rehovot - Israel) ont publié leurs travaux dans Proc.Nat.Acad.Sci.USA-vol 78,No12,pp 75357539,December 1981 : ils ont pu produire à la fois des anticorps contre un ligand : le Epidermal Growth Factor (EGF) et des anticorps contre son recepteur dans les glandes salivaires sousmaxillaires de souris,connues pour leur action trophique et cicatrisante.
Depuis ces premiers travaux,la liste des anticorps reconnaissant des ligands ou leurs recepteurs s'est enormément allongée et de nombreux kits commerciaux proposent le dosage immunologique de ces substances.Les publications à ce sujet sont innombrables mais elles ont toutes un point commun: le dosage utilise exculsivement la voie immunologique decrite plus haut.
Ces dosages, qui representent certes un progrès considerable dans la connaissance de la biologie cellulaire et des echanges membranaires,ont malheureusement les defauts et les limites de tout dosage immunologique: alors que par exemple la detection immunologique de l'hormone hCG de grossesse circulant à raison de plusieurs microgrammes par litre,ne presente aucune difficulté,la detection de picogrammes de ligands comme par exemple l'interferon,l'EGF,le TNF (Tumor Necrosis Factor) ou le NGF (Nerve Growth factor),les cytokines,etc est très difficile: si une molecule de ces ligands se lie à une molecule d'anticorps marqué,le signal delivré par ce dernier,sera imperceptible.Le même problème se pose pour le dosage de recepteurs.De plus,les bruits de fond dans les techniques immunologiques,interdisent tous dosages en dessous d'une certaine limite.Des ameliorations techniques,certes,ont permis par exemple en Immunohistologie de mettre en evidence des recepteurs membranaires grace à des anticorps marqués radioactivement ou par fluoresceine ou encore grâce au complexe Peroxydase Anti Peroxydase.
Mais les dosages de ligand ou de recepteur circulants restent difficiles.
L'objet de l'invention est donc de mettre en evidence la presence de ligand ou de recepteur dans un echantillon, sans que le signal transmis à l'operateur ne provienne d'un quelconque marquage du ligand ou de son recepteur.
Même si la solution test est en très petite quantité et que le support qui la contient soit en verre ou en matière plastique, le résultat observé quant à la résistance ou au tonus du bras tendu est exactement le même que celui obtenu dans la phase 2 du test cité plus haut. Il est donc possible, par une technique simple, de vérifier le caractère perturbateur ou non pour le reste de l'organisme du rayonnement vibratoire émis par un tissu ou organe humain vivant.
Mais il est également possible de corriger la nature perturbatrice de l'émission vibratoire d'un organe ou d'un tissu vivant dysfonctionnel en délivrant à cet organe ou à ce tissu l'information vibratoire adéquate qui rendra le rayonnement de organe ou du tissu harmonieux par rapport au reste de l'organisme.
Cette information vibratoire correctrice pourra, en application d'une découverte personnelle, être apportée: - soit par une dilution infinitésimale de l'organe ou du tissu animal homologue de l'organe ou du tissu humain testé; - soit par une dilution infinitésimale ou un mélange de dilutions infinitésimales d'extraits moléculaires constitués de métaux, acides aminés, vitamines, acides nucléiques ou coenzyme A; - soit par le mélange d'une ou de plusieurs dilutions infinitésimales tissulaires avec une ou plusieurs dilutions infinitésimales d'extraits moléculaires.
Cette dilution infinitésimale correctrice, contenue dans un support en verre ou en plastique, sera placée dans la paume de la main qui tient déjà la solution test au 1/20e et à côté de celle-ci. Le rayonnement vibratoire émis par cette dilution infinitésimale sera correcteur s'il neutralise instantanément le rayonnement perturbateur émis par la solution au 1/20e de l'organe ou du tissu animal ou par l'organe ou le tissu humain homologue lui-même.
Il est également un fait constant vérifiable et reproductible que la dilution infinitésimale, tissulaire ou moléculaire, qui permettra de corriger l'émission vibratoire perturbatrice d'un tissu ou organe humain dysfonctionnel se situe dans l'immense majorité des cas parmi les cinq dilutions suivantes: 10-8; 10-14; t0-18; 1030; 10-60 Chacune de ces cinq dilutions pourra aussi être exprimée en Centésimale Hanhemanienne ou CH, selon la dénomination homéopathique. On obtient alors les équivalents respectifs suivants: 4 CH ; 7 CH; 9 CH ;15 CH ; 30 CH Ces dilutions peuvent se présenter indifféremment sous forme de solutions, granules, globules, tablettes ou toute autre forme que l'on voudra bien leur donner. C'est la composition et non la forme qui importe.
Il faut donc pour chacun des tissus ou organes dysfonctionnels à tester essayer successivement l'une des cinq dilutions citées ci-dessus de tissu animal homologue ou d'extrait moléculaire pour déterminer celle qui corrigera le désordre vibratoire mis en évidence. La prise d'une dose par semaine de la dilution infinitésimale tissulaire ou d'extrait moléculaire ainsi déterminée et ce pendant trois semaines permettra la disparition du désordre vibratoire comme l'attestera à l'issue de cette période un nouveau test de contrôle soit directement par l'index posé sur la zone tégumentaire de projection vibratoire de l'organe anciennement dysfonctionnel, soit par l'utilisation d'une solution au 1/20e (un vingtième) de l'organe animal homologue. L'effet de cette correction persiste souvent bien au-delà d'une période de trois mois.
Le regroupement au sein d'une même mallette, dans un ordre déterminé, de différentes dilutions au 1/20e, en 10-8, en 10-14, en 10-18, en 10-30 et en 10-60, correspondant aux principaux tissus humains homologues et aux principales structures moléculaires jouant un rôle dans l'organisme, permettra la détection et la correction simple, individuelle, précise et sélective des perturbations vibratoires affectant les divers tissus vivants de l'organisme.
La simplicité de manipulation du contenu de la mallette vibratoire informative ainsi que le caractère individuel précis et sélectif des renseignements fournis par lui expliquent l'originalité et la supériorité de ce dispositif par rapport aux moyens techniques jusqu'ici employés.
Enfin, il faut préciser deux points fondamentaux résultant d'observations person nelles: - le premier est l'intérêt particulier des dilutions infinitésimales de tissus animaux homologues par rapport à celles constituées d'extraits moléculaires, qui est de permettre de situer le niveau ou si l'on préfère l'origine de la perturbation vibratoire affectant le tissu humain homologue. Ainsi: la dilution tissulaire en 10-8 corrigera une perturbation vibratoire provenant des ingesta, c'est-à-dire en rapport avec des aliments, des boissons ou des produits inhalés incompatibles vibratoire ment avec tout ou partie de l'organisme.
la dilution tissulaire en 10-14 corrigera une perturbation vibratoire d'origine métabolique, c'est-à-dire résultant d'une transformation inadéquate des aliments ou boissons dans l'organisme.
* la dilution tissulaire en 10-18 corrigera une perturbation vibratoire d'origine psychosomatique, c'est-à-dire résultant de la transmission des perturbations vibratoires du niveau psychique à un niveau plus organique. Comme s'il se produisait un début "d'incorporation" de ces vibrations d'origine psychique dans la matière organique.
* la dilution tissulaire en 10-30 corrigera une perturbation vibratoire d'origine purement psychique, c'est-à-dire simplement réfléchie par un système organique qui ne l'incorpore pas, qui ne se laisse pas pénétrer, tel un miroir.
la dilution tissulaire en 10-60 corrigera également une perturbation vibratoire d'origine purement psychique.
On peut dire que la différence essentielle entre ces deux dernières dilutions est que la dilution en 10-30 correspond plutôt au plan de 1'INTELLIGENCE MEDIATE, c'est-à-dire au plan intellectuel du raisonnement ou encore au plan émotif simple, alors que la dilution en 10-60 correspond plutôt au plan de l'INTELLIGENCE IMMEDIATE, c'est-àdire au plan conceptuel, affectif ou spirituel.
Le deuxième point fondamental correspond à une série de constatations personnelles qui sont les suivantes: * la perturbation vibratoire d'un tissu humain vivant est toujours corrigée par un mélange, à parts égales, des cinq dilutions fondamentales en 10-8 10-14,10-18, 10-30,10-60 du tissu animal homologue.
* un mélange, à parts égales, des cinq dilutions, en 10-8, lo-l4, 1t18 10-30, 10-60 de l'un quelconque des extraits moléculaires dont la liste figure ci-après (p.24.) permet de rendre le système vibratoire associé à cette molécule, au sein de l'organisme humain, harmonieux par rapport à l'ensemble de cet organisme et par-là même de corriger le désordre vibratoire mis en évidence au niveau tissulaire lorsque celui-ci est en fait d'origine moléculaire.
Un orifice de sortie 18 est ménagé dans la paroi inférieure 4 de l'enceinte, et peut être raccordé à une canalisation d'évacuation d'eau usée.
La paroi inférieure 4 de enceinte comporte une nervure diamétrale 19, à section arrondie, disposée selon un axe sensiblement parallèle aux deux premières parois latérales 5 et 6 d'enceinte. La nervure 19 est bordée de deux parties en creux 20 et 21 conduisant l'eau usée vers l'orifice d'évacuation 18. De préférence, la paroi inférieure 4 est légèrement en pente pour descendre en direction de l'orifice 18.
Des diffuseurs de jets d'eau sont répartis sur les deux premières parois 5 et 6 de l'enceinte, dans chaque compartiment 1 et 2.
Ainsi, dans le compartiment 1, les diffuseurs comprennent une première série de diffuseurs de jets d'eau 22, disposés en partie inférieure des premières parois latérales 5 et 6 du compartiment, et une seconde série de diffuseurs de jets d'eau 23 disposés en partie supérieure des premières parois latérales 5 et 6 du compartiment. La première série de diffuseurs de jets d'eau 22 produit des jets atteignant la coquille d'un portionneur lorsqu'il est placé dans le dispositif. ta seconde série de diffuseurs de jets d'eau 23 produit des jets atteignant le manche de portionneur et atteignant tangentiellement les secondes parois latérales 7 et 8 du compartiment.
Dans le mode de réalisation représenté sur les figures, la paroi intermédiaire 8 ou cloison amovible se divise vers le bas en deux parois inclinées formant les parties inclinées de paroi latérale 8 pour les compartiments 1 et 2. En outre, la paroi intermédiaire 8 comprend une nervure arrondie verticale disposée sensiblement en zone médiane de la paroi, sur chacune des faces de la paroi. Ainsi, le compartiment 1 dispose de la première nervure verticale 24, et le second compartiment 2 dispose de la seconde nervure verticale 25.
Comme on le voit en coupe sur la figure 3, chaque diffuseur de jets d'eau tel que le diffuseur 22 est formé d'un bottier muni d'orifices de pulvérisation 26 orientés vers l'intérieur du compartiment correspondant, et comportant un orifice d'entrée 27 raccordé à une canalisation d'amenée d'eau 28. Ledit bottier est rapporté dans une lumière correspondante 29 ménagée dans la première paroi correspondante 5 du compartiment. Avantageusement, les bottiers diffuseurs de jets et les parois tels que le diffuseur 22 et la paroi 5 de l'enceinte sont réalisés en matière plastique. La fixation du bottier dans la lumière 29 peut alors être réalisée par soudure à ultrasons. Le bottier comporte un rebord venant se plaquer sur la face interne de paroi 5 selon le pourtour de la lumière 29, ledit rebord étant soudé à la paroi. Le bottier présente une forme peu dépassante qui vient sensiblement en affleurement de la face interne de la paroi correspondante 5 dans l'enceinte, évitant de former des aspérités trop importantes susceptibles de retenir les particules de matières détachées du portionneur.
La canalisation d'amenée d'eau 28, elle-même disposée à l'extérieur de l'enceinte 3, relie l'ensemble des diffuseurs de jets d'eau, et est raccordée à une installation de distribution d'eau.
Le dispositif comprend en outre une paroi externe 30, entourant la paroi inférieure 4 et les parois latérales 5, 6 et 7 de l'enceinte.
Un orifice inférieur 31 est prévu pour l'évacuation des eaux de condensation se formant éventuellement sur la face extérieure des parois 5, 6 et 7 latérales d'enceinte et de la paroi inférieure 4 d'enceinte.
On peut ainsi laver les portionneurs avec de l'eau froide, sans subir des écoulements désagréables d'eau de condensation.
Le fonctionnement du dispositif est illustré sur les figures 4 et 5. Le dispositif de l'invention est destiné à recevoir un portionneur à glace 32, comportant un manche 33 et une coquille 34. ta coquille 34, de forme hémisphérique, comprend un arceau de décollement 35 articulé selon un premier axe 36 situé au voisinage du point de raccordement du manche 33 avec la coquille 34, et selon un second axe 37 formant un ergot dépassant diamétralement opposé.
Lorsque le portionneur 32 est introduit dans un compartiment, coquille 34 en bas et manche 33 en haut, la partie utile de portionneur, comprenant la coquille 34 et la partie adjacente 38 de manche, est située à l'intérieur du compartiment. Grâce à la forme particulière du fond 4 muni de la nervure 19 et des parois latérales 5, 6, 7 et 8 du compartiment, la coquille 34 s'oriente de manière que l'ergot 37 soit situé dans l'un des creux 20 ou 21 disposés de part et d'autre de la nervure diamétrale 19. Dans cette position, la coquille 34 s'oriente automatiquement pour présenter son ouverture 39 face à l'un des diffuseurs de la première série de diffuseurs de jets d'eau 22 en partie inférieure du compartiment.
Dans le mode de réalisation qui a été précédemment décrit, l'enceinte comporte deux compartiments 1 et 2.
En alternative, on peut concevoir une enceinte comportant un compartiment unique, sans cloison intermédiaire 8.
Egalement, on peut concevoir une enceinte comportant plus de deux compartiments, disposés alors pour former une rangée de compartiments orientée selon une ligne sensiblement parallèle aux premières parois latérales 5 et 6 munies de diffuseurs, et donc sensiblement parallèle à la nervure inférieure 19.
risqueront pas de s'échauffer et de se déformer.
De retour à la figure 3, on observe également que le trajet des rayons réfléchis est tel qu'il permet l'incorporation d'un cache de lumière directe connu en soi, désigné par la référence Il et représenté schématiquement en tiretés, sans qu'aucun des rayons
réfléchis ne soit intercepté par ce cache.
Enfin on notera que l'on a défini des jeux de paramètres différents (avec indices respectivement "G" et "D" pour les parties gauche et droite du réflecteur; ceci permet de concevoir un réflecteur asymétrique si nécessaire; mais dans une forme de réalisation particulière, les paramètres à gauche et à droite peuvent
être identiques.
Pour illustrer les avantages de la présente invention en matière de largeur et d'homogénéité de faisceau, on a représenté sur les dessins, par des courbes isolux, divers types de faisceaux tels qu'ils se présentent en l'absence de la glace de fermeture: 19 - la figure 5 b illustre un faisceau de croisement obtenu avec un réflecteur selon l'invention et le filament de croisement occulté d'une lampe normalisée H 4, tandis qu'à titre de comparaison, la figure 5 a illustre le faisceau obtenu avec le même filament et un réflecteur parabolique de l'art antérieur; la figure 6 b montre un faisceau de route obtenu avec le même réflecteur que pour la figure Lb et le filament de route de la lampe H 4, tandis que la figure 6 a montre le faisceau de route obtenu avec le réflecteur parabolique conventionnel;
la figure 7 b représente un faisceau anti-
brouillard obtenu avec un filament axial et le réflecteur de l'invention, la figure 7 a montrant quant à elle le faisceau obtenu avec le même filament et le réflecteur conventionnel décrit dans FR-A-2 536 503 de la Demanderesse; la figure 8 b représente le faisceau obtenu avec ln filament transversal et un réflecteur selon l'invention, tandis que la figure 8 a représente le faisceau correspondant, convenant pour un projecteur antibrouillard ou un projecteur de croisement aux normes américaines, avec un ensemble réflecteur/lampe décrit
dans FR-A-2 602 305 ou FR-A-2 602 306.
Les tracés des diverses courbes isolux sont à
considérer comme incluses dans la présente description.
On observe pour chacun des faisceaux obtenus avec des réflecteurs de l'invention une bonne homogénéité et une largeur très importante Comme déjà expliqué plus haut, le travail à effectuer par la glace en largeur est donc réduit, voire inexistant, si bien que l'emploi d'une glace même fortement inclinée ( 450 ou davantage) n'induit
aucun rabattement indésirable du faisceau vers ses bords.
Maintenant en référence aux figures 9 et 10, on va décrire des feux de signalisation pouvant utiliser les
principes de la présente invention.
- Un feu de signalisation comprend classiquement une lampe incorporant un filament 10, un réflecteur 20 et un globe de fermeture 30 Dans ce genre de feu connu, le réflecteur est du genre parabolique, et des billes essentiellement sphériques sont prévues sur la surface du globe pour assurer une dispersion convenable du faisceau formé afin de satisfaire à des exigences photométriques d'ordre réglementaire Plus précisément, les billes assurent une dispersion vers le haut et vers le bas ainsi que latéralement vers la gauche et vers la droite, pour que le feu apparaisse avec une intensité lumineuse satisfaisante lorsqu'il est observé en biais par rapport
Selon un autre mode de réalisation de l'invention, le procédé comprend les étapes suivantes: - on introduit la substance témoin dans la solution initiale contenant la substance active avant la première dilution de ladite solution initiale, - on effectue les dilutions successives de la solution initiale contenant la substance active et la substance témoin, la première dilution de la solution initiale étant obtenue par prélèvement d'une fraction ou de la totalité de la solution initiale, et le mélange de cette fraction ou de la totalité de la solution initiale dans une solution de dilution, ce qui donne la solution de première dilution, la deuxième dilution de la solution initiale étant obtenue par prélèvement d'une fraction ou de la totalité de la solution de première dilution, et le mélange de cette fraction ou de la totalité de la solution de première dilution dans une solution de dilution, pour donner la solution de deuxième dilution et ainsi de suite, jusqu'à la solution de la dernière dilution, la substance active disparaît entre la dilution p et la dilution p + 1 et la substance témoin disparaît entre la dilution p + x et la dilution p + x + 1, p étant compris de 3 à 6, x étant compris de 2 à 4, la solution présentant encore une activité pour au moins une dilution supérieure ou égale à la dilution p + 1, - après la première dilution, on prélève pour au moins une dilution déterminée, à partir de la solution obtenue à l'issue de ladite dilution une quantité suffisante de solution pour doser la substance témoin, et de préférence on dose la substance témoin à chaque dilution de la dilution 1 à la dilution p + x et de préférence au moins une fois de la dilution p + x + 1 à la dilution 1 + p + x + y, y étant avantageusement compris de 2 à 10, avantageusement de 3 à 5, et avantageusement encore à chaque dilution de la dilution p + x + 1 à la dilution 1 + p + x + y, - et de la dilution 1 à la dilution p + x, on compare la valeur de la concentration de la substance témoin obtenue et la valeur de la concentration de la substance témoin calculée d'après la dilution, ce qui permet de contrôler quantitativement les dilutions et de la dilution p + x + 1 à la dilution 1 + p + x + y, on vérifie qu'il n'y a plus de substance témoin, ce qui permet de contrôler d'une part qu'il n'y a pas eu contamination et d'autre part la qualité des dilutions, et on procède à une étape d'agitation de la solution de dilution déterminée au minimum après toutes les dix dilutions, de préférence après toutes les trois dilutions, avantageusement après chaque dilution, l'agitation étant constituée par une étape de bullage de la solution de dilution déterminée à l'aide d'insufflation de gaz à un taux d'agitation suffisant pour créer la formation d'un vortex dans la solution de dilution déterminée à agiter.