INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
outre, lorsque le volant est entraîné en rotation à gran-
de vitesse, les vibrations provoquées par la masse mise en mouvement alternatif engendrent des niveaux de bruits
élevés dans l'environnement de travail autour de la ma-
chine.
Jusqu'à présent, on a déj'à tenté de réduire les
vibrations provoquées par l'ensemble lame à mouvement al-
ternatif en compensant la masse mise en mouvement al-
ternatif en plaçant un contrepoids sur le volant en un
emplacement diamétralement opposé au point de liaison en-
tre la tringlerie de la lame et la poulie Bien que cet-
te mesure se soit révélée partiellement efficace pour
compenser la masse en mouvement alternatif, son efficaci-
té pour compenser totalement la charge mise en mouvement
alternatif est néanmoins limitée par les forces latéra-
A température ambiante, on introduit du CO2, ce qui provoque une exothermie. L'introduction est effectuée en trente minutes.
L'introduction du CO2 est alors arrêtée et on refroidit le mélange réactionnel à 15 C, température à laquelle on ajoute dans un premier temps la TDA1, puis du phosgène en 2 H 30. Le mélange réactionnel est très épais. On laisse ensuite remonter à 35C C et on agite 2 heures 30, puis éventuellement encore 1 heure à 55 C.
Après refroidissement, on ajoute 100 ml d'eau glacée. La phase organique lavée avec 3 x 100 ml d'eau, séchée sur 15 g de sulfate de sodium est évaporée à température ambiante. Le produit obtenu de couleur orangée est analysé par CPG.
Durée I I I Durée Durée Durée Quantité TDA1 ESSAI d'introduction à à phosgène (m1) RR % du phosgène 35 C 55 C (moles) Comparatif A 2 h 30 2 h 30 1 h 0, 102 0 31 Exemple 1 2 h 30 2 h 30 1h 0,078 3 58 Exemple 2 2 h 30 2 h 30 0 0,097 3 41 On entend par RR, le rendement sur le produit introduit, c'est-à-dire quantitéde produit obtenu (moles) --------------------------------- % quantité de tertiobutylate introduit (moles) Exemple 3 Influence de la température On opère comme dans l'exemple 1 en chargeant 0,075 mole de tertiobutylate de sodium 0,112 mole de phosgène 150 ml de toluène 3 ml de TDA 1 (0,0015 mole) La carbonatation est effectuée à 10 C, puis la température de réaction est amenée à 55" C et à cette température, on introduit le phosgène pendant 2 H 30 ; ensuite la réaction est poursuivie à cette température pendant 3 Heures.
On obtient un RR en dicarbonate de ditertiobutyle de 66 %.
Exemple 4 Utilisation du triphosgène On opère comme dans l'exemple 1 en chargeant 0,13 mole de tertiobutylate de sodium (TBuONa) 0,0167 mole de triphosgène (soit 0,0501 mole de phosgène) 75 ml de toluène 0,015 mole de TDA 1 La carbonatation est effectuée à 10 C et après introduction du triphosgène, la réaction est poursuivie à 20 C pendant 5 h 30.
On obtient un RR en BOC2O de 51 % (dans cet exemple le RR est calculé par rapport au trinhospène engagé exprimé en phosgène).
Exemple 5 Utilisation de diphosgène On opère comme dans l'exemple 1 en chargeant 0,13 mole de tertiobutylate de sodium (TBuONa) 0,025 mole de diphosgène (soit 0,0500 mole de phosgène) 75 ml de toluène 0,015 mole de TDA1 La carbonatation est poursuivie à 20 C pendant 5 h 30.
On obtient un RR en BOC20 de 50 % (dans cet exemple, le RR est calculé par rapport au diphosgène engagé exprimé en phosgène).
Exemple 6 Dans un réacteur de 250 ml, on charge 12,8 g de tBuONa (0,13 mole), et le toluène et 5 C, on fait barboter pendant 30 minutes du C02, de manière à former le pyrocarbonate de tertiobutyle après avoir stoppé l'introduction du CO2, on ajoute 5 9 de TDA1. 6,6 g de chlorure d'oxalyle (0,051 mole) sont coulées à 5"C en 15 minutes. On laisse remonter la température puis on laisse agiter pendant 4 h 30. Après traitement, on recueille 7,6 g d'une solution dans laquelle on dose, par CPG, 79 % de BOC2O, ce qui représente un rendement de 54 % par rapport au chlorure d'oxalyle engagé.
Exemple 7 Synthèse du BOC20 à partir de chlorure d'oxalyle en présence de dii sopropyl ethyl amine Dans un réacteur de 250 ml, on charge 75 ml de toluène, 12,8 g de t.BuONa (130 mM), 3 ml de diisopropyléthylamine. A cette suspension, on ajoute à température ambiante du C02, pendant environ 30 mn, jusqu'à ce que le débit de C02 à la sortie soit identique au débit de l'entrée.
Après refroidissement à 5"C, on additionne en 20 mn, 6,4g de chlorure d'oxalyle (42,8 mM) en solution dans 30 ml de toluène, puis on laisse revenir le mélange à température ambiante, où il est agité pendant 5h.
Après traitement, on recueille 5,05 g d'un liquide dans lequel on dose par RMN 30 % de BOC20, ce qui représente un rendement de 10 % par rapport au chlorure d'oxalyle engagé.
Exemple B Comparatif Phosgénation dans le toluène en présence de diaza-1,4 bicyclo (2,2,2) octane Dans un réacteur de 250 ml, on charge 7,5 g de tBuONa (75 mM), 1,7 g de diaza-1,4 bicyclo (2,2,2) octane (15 mM) et 75 ml de toluène. A cette suspension, on introduit à température ambiante du C02, pendant environ 30 mn, jusqu'à ce que le débit de C02 à la sortie soit identique au débit à l'entrée.
A température ambiante, on introduit pendant 2 h, 11,9 g de phosgène (120 mM), puis on purge à l'azote en chauffant le mélange réactionnel à 55" pendant 2 h.
Après refroidissement et traitement, on recueille 9,5 g d'un liquide blanc dans lequel on dose 4,6 % de BOC20, ce qui correspond à un rendement de 1% par rapport au t.butylate de sodium.
La présente invention propose un oscillateur piézoélectrique, à fréquence régulée dans une gamme de températures, comportant - un circuit oscillant comprenant un amplificateur dont la sortie est rebouclée sur l'entrée à travers un élément à capacité variable monté en série avec un cristal piézoélectrique, - un circuit de compensation de la fréquence en fonction de la température, connecté à l'une des bornes de l'élément à capacité variable, comprenant d'une part, un circuit principal fournissant en sortie une tension de compensation principale ayant une variation relative décroissante lorsque la température croît, et d'autre part un circuit complémentaire, l'oscillateur est caractérisé en ce que le circuit complémentaire est connecté entre la sortie du circuit principal et la borne de l'élément à capacité variable, le circuit complémentaire possédant un gain croissant dans une partie la plus élevée de la gamme de températures, de manière à ce que le gain du circuit de compensation soit sensiblement constant dans cette partie de la gamme de températures.
Selon une réalisation préférée, le circuit principal comporte un amplificateur opérationnel comprenant une résistance de contre-réaction et recevant sur son entrée non inverseuse la tension de compensation principale et sur son entrée inverseuse, une tension variable en fonction de la température.
La tension variable en fonction de la température est délivrée, de préférence, par un pont de résistances monté en diviseur, connecté à l'entrée inverseuse de l'amplificateur à travers un élément thermosensible.
Le circuit principal peut comporter deux éléments thermosensibles reliés par une de leurs extrémités à la sortie, leur autre extrémité étant respectivement reliée à deux ponts de résistances montés en diviseurs, un des ponts comprenant un troisième élément thermosensible.
Une résistance peut être connectée en parallèle aux extrémités de chacun des éléments thermosensibles.
De préférence, tous les ponts sont montés entre une même source et une même masse.
L'élément à capacité variable peut être une diode à capacité variable. Le circuit de compensation est alors connecté sur la cathode de la diode à capacité variable.
Selon une variante, le circuit de compensation peut être connecté à l'élément à capacité variable par l'intermédiaire d'un circuit de recalage en fréquence. Le circuit de recalage en fréquence peut comporter un amplificateur opérationnel ayant son entrée non inverseuse connectée au circuit de compensation et son entrée inverseuse reliée à un pont de résistances monté en diviseur et comprenant une résistance variable. L'amplificateur peut comporter une résistance de contre-réaction.
De préférence, une résistance est connectée entre la borne de l'élément à capacité variable et soit le circuit de compensation, soit le circuit de recalage.
D'autres caractéristiques de l'invention apparaîtront à la lecture de la description suivante, donnée à titre d'exemples non limitatifs, illustrée par les figures annexées qui représentent: - la figure 1 un schéma électrique d'un oscillateur à cristal compensé en température selon l'art connu - la figure 2 un schéma électrique d'un oscillateur à cristal compensé en température selon l'invention; - la figure 3 un graphique donnant la variation relative de la tension de compensation principale dVC/VC du circuit principal de l'oscillateur de la figure 2, en fonction de la température; - la figure 4 un graphique donnant le gain G1 du circuit de complémentaire de l'oscillateur de la figure 2, en fonction de la température;; - la figure 5 un graphique donnant le gain G2 du circuit de compensation de l'oscillateur de la figure 2, en fonction de la température; - la figure 6 un schéma d'une variante d'un oscillateur selon l'invention comportant un circuit de recalage en fréquence en fonction du temps; - la figure 7 un graphique donnant, avec des valeurs mesurées, la dérive thermique en fréquence dF/F d'un oscillateur selon l'art antérieur et d'un oscillateur selon l'invention.
La figure i représente un oscillateur à cristal à régulation de fréquence selon l'art connu. Cet oscillateur fonctionne sur une gamme de températures. L'oscillateur comporte d'une part un circuit oscillant et d'autre part un circuit de compensation. Le circuit oscillant comporte un amplificateur A dont la sortie S est rebouclée sur l'entrée par à travers une diode à capacité variable D montée en série avec un résonateur piézoélectrique P. La cathode de la diode à capacité variable D est reliée au résonateur piézoélectrique P tandis qu'un condensateur C est inséré entre son anode et la masse. La sortie S de l'amplificateur A est reliée à l'anode de la diode à capacité variable D. Le circuit de compensation est en deux parties : un circuit principal et un circuit complémentaire.
Ce circuit de compensation délivre à ses bornes 10,12 une tension de compensation variable avec la température. Cette tension de compensation est appliquée aux bornes de la diode à capacité variable D. La tension de compensation est destinée à compenser les variations de la fréquence délivrée par ltoscillateur en fonction de la température. Le potentiel présent sur la borne 10 est créé par le circuit principal, le potentiel présent sur la borne 12 est créé par le circuit complémentaire. Ces deux potentiels varient en fonction de la température.
La borne 10 est connectée à l'anode de la diode à capacité variable D, la borne 12 est connectée à la cathode de la diode à capacité variable D. Le circuit principal comporte une première thermistance thl et une deuxième thermistance th2 ayant une borne commune il. L'autre borne de la thermistance thl est reliée à un pont de résistances r7, r5 monté en diviseur à travers une résistance r6. La résistance r5 est reliée à la borne positive +V d'une source de tension, tandis que la résistance r7 est reliée à la borne négative de masse, de la source de tension.
L'autre borne de la thermistance th2 est reliée à travers une résistance r, à un pont diviseur ri2, rlO, th3 à deux branches. Une des branches du pont diviseur comporte une résistance r10 montée en série avec une thermistance th3.
L'autre branche comporte une résistance rl2. La thermistance th3 est reliée à la borne positive +V de la source de tension tandis que la résistance r12 est reliée à la masse.
Chacune des thermistances thi, th2, th3 comporte à ses extrémités, respectivement, une résistance r8,r9,rll en parallèle.
Avantageusement, la coiffe est réalisée en matériau textile imperméable ou imperméabilisé.
Avantageusement encore, le bas de la coiffe comporte une rigole formant gouttière pour la récupération de l'eau ruisselant le long des parois du sac et en vue du rejet de cette eau vers la partie arrière de la jupe.
Enfin, la jupe peut comporter un évidement correspondant à la face dorsale du sac.
Et selon une variante, ladite paroi auxiliaire conforme une poche amovible et rétractable comportant quatre pans verticaux, un fond et un couvercle rabattable, définissant un parallélépipède souple et déformable pour son passage à travers la fente lui permettant d'être rétracté à l'intérieur du sac ou déployé à l'extérieur pour constituer un volume de rangement additionnel.
Et de préférence, les dits pans de ladite poche comportent sur leur face extérieur, la poche étant en position déployée, des passants aptes à recevoir des sangles disposées en position d'attente sur la paroi extérieure voisine du sac, l'insertion des sangles dans les dits passants permettant une immobilisation de la poche déployée en position active contre la paroi extérieure du sac sans débattement.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront de la description qui suit et qui est donnée en rapport avec une forme de réalisation particulière présentée à titre d'exemple et en se référant aux dessins annexés.
La Figure 1 représente une vue en perspective d'un sac réalisé selon l'invention et comportant dans une pochette supérieure la coiffe de protection en position compactée.
La Figure 2 représente le sac de la Figure 1 dans laquelle la coiffe de protection imperméable a été mise en position active autour du sac.
La Figure 3 représente une vue en élévation latérale du sac de la Figure 1, la coiffe étant en position compactée et inactive.
La Figure 4 représente une vue en élévation latérale du sac de la Figure 2 dans laquelle la coiffe de l'invention est en position déployée.
La Figure 5 représente le sac en perspective après déploiement d'une poche effaçable, représentée en cours de déploiement dans la Figure 6 et en position rétractée et effacée selon la Figure 7.
Selon l'ensemble des Figures 1 à 6, on voit que l'on réalise un sac 1 de type classique comportant par conséquent un corps principal 2 , éventuellement des pochettes latérales 3a, 3b et un rabat supérieur 4 refermant le sac.
On comprend que le sac étant formé d'empiècements cousus entre-eux ne peut assurer complètement une protection étanche des produits, articles et objets, notamment les vêtements, contenus à l'intérieur du sac.
A cet effet, selon l'exemple qui est ici décrit, le rabat 4 comporte à sa partie supérieure une pochette intérieure 5 refermée par la fente 6 pourvue d'une fermeture à glissière 7 protégée par le repli 9.
L'ouverture de la fente 6 permet de libérer une coiffe 8 contenue dans l'espace intérieur du sac, notamment dans la pochette intérieure 5.
La coiffe 8 est réalisée sous forme d'un matériau extrêmement fin et léger, par conséquent peu encombrant elle peut être réalisée sous forme d'un film plastique en forme ou sous forme de textile enduit.
On peut citer notamment la méthyl-2-pentanone-4, l'heptanone-2, la cyclohexanone.
Selon un autre mode particulier, on utilise les esters d'acide hydroxycarboxyliques comme phase continue de l'émulsion.
Ainsi, le carbonate de propylène et le carbonate d'éthylène conviennent à la mise en oeuvre de l'invention.
Enfin, selon un dernier mode de réalisation de l'invention, on prépare l'émulsion en utilisant des nitriles.
On peut citer notamment l'acétonitrile, le n-butyronitrile, le lactonitrile.
En général, lors de la mise en émulsion de la solution aqueuse, le rapport en volume de la solution aqueuse sur le solvant organique varie entre 5 et 50%. De préférence, celui-ci est compris entre 10 et 30%.
Selon un mode préféré de réalisation du procédé, on met en émulsion la solution aqueuse des sels précités en présence d'un tensio-actif.
Le choix de celui-ci repose sur plusieurs critères relatifs à l'émulsion obtenue. Tout d'abord, celle-ci doit être stable au minimum pendant la durée d'introduction des réactifs qui est habituellement comprise entre quelques minutes et une heure.
Ensuite, les gouttelettes de l'émulsion doivent être submicroniques et préférentiellement monodisperses, de telles caractéristiques pouvant être observées au moyen d'un microscope ZEISS IM 35, équipé du contraste interférentiel de Nomarski et dont la limite de résolution est de 0,15uni.
Généralement, on utilise des tensio-actifs non ioniques mais les tensio-actifs anioniques, cationiques ou amphotères conviennent à la mise en oeuvre du procédé dans la mesure où ils satisfont aux conditions précitées.
De plus, ces tensio-actifs peuvent être utilisés seuls ou en mélange et être présents dans la phase organique ou dans les phases organiques et aqueuses.
Au titre de tensio-actifs anioniques, on utilise entre autres les alkylsulfates, les alkylsulfonates, les sulfosuccinates (AEROSOL OT Concernant les tensio-actifs cationiques, on peut préparer l'émulsion avec les acides alkylbenzène sulfoniques (SULFAMIN 1298 Comme tensio-actifs amphotères, on peut citer les sels d'alkyltriméthylammonium, d'alkylpyridinium, les dérivés d'imidazolinium, les alkylbétaines, les amidopropylbétaines.
Au titre de tensio-actifs non ioniques, on peut utiliser purs ou en mélange, les dérivés d'esters de sorbitan du type ARLACEL @ 581-582, ARLATONE T @ mais aussi du type SPAN les dérivés d'esters de sorbitan polyéthoxylés du type TWEEN les alkylphénols polyéthoxylés, les alcools gras polyéthoxylés, les triglycérides polyéthoxylés, les amines grasses polyéthoxylées, ces dérivés polyéthoxylés faisant partie du groupe des CEMULSOLS Selon une variante intéressante de la présente invention, on utilise une biogomme en combinaison avec le tensio actif.
Les biogommes sont des polysaccharides de poids moléculaire élevé, généralement supérieur à un million, obtenus par fermentation d'un hydrate de carbone sous l'action d'un microorganisme.
Comme biogommes pouvant être utilisées dans la préparation de l'émulsion, on peut citer celles obtenues par fermentation sous l'action de bactéries ou de champignons appartenant au genre Xanthomonas telles que Xanthomonas beqoniae, Xanthomonas campestris, Xanthomonas carotae, Xanthomonas hederae, Xanthomonas incanae, Xanthomonas malvacearum, Xanthomonas oaoavericola, Xanthomonas Phaseoli, Xanthomonas Disi, anthomonas vasculorum, Xanthomonas vesicatoria, Xanthomonas vitians, Xanthomonas Pelaraonii ; au genre Arthrobacter et plus particulièrement les espèces Arthrobacter stabilis, Arthrobacter viscosus ; au genre Erwinia ; au genre Azotobacter et plus particulièrement l'espèce Azotobacter indicus ; au genre Aarobacter et plus particulièrement les espèces Asrobacterium radiobacter, Agrobacterium rhizoqènes, Asrobacter tumefaciens ; au genre Alcalictènes et plus particulièrement l'espèce Alcalictènes faecalis ; au genre Rhizobium ; au genre Sclerotium et plus particulièrement les espèces Sclerotium rolfsii et Sclerotium ctlucanicum ; au genre Corticium ; au genre Sclerotinia ; au genre Stromatinia.
Comme biogomme pouvant être obtenue par fermentation par les microorganismes décrits ci-dessus, on utilise tout particulièrement la gomme obtenue par fermentation des bactéries du genre Xanthomonas et notamment la gomme xanthane.
La revelation du Ca++ peut eventuellement se faire à l'interieur même de la zone (C) si on y associe une sonde chromogène.Mais il est plus prudent d'installer cette sonde sur une membrane (D) de nylon blanc,sous la forme d'un spot de 3 à 6 mm de diamètre,incolore en l'absence de calcium. Cette membrane servira de toute façon de support et protection à la membrane contenant la zone (C),placée sous cette dernière.
L'empilement de membranes est thermosoudé entre deux plaques de PVC de 0.5 mm d'epaisseur dont la superieure,opaque,sera perforée pour y deposer la goutte de l'echantillon,tandis que l'inferieure sera transparente pour visualiser la coloration du spot (bleu par exemple) proportionnelle à la quantité de Ca++ libéré en (C),et donc proportionnelle au taux d'EGF de l'echantillon.
En cas de dosage semi-quantitatif,comme decrit plus haut,il conviendra d'ajouter (Figures 4.0 et 4.1) une membrane sous la membrane (A) dans le but de neutraliser une partie seulement de l'EGF de l'echantillon,cette partie correspondant au taux circulant normal chez tout individu.La partie excedentaire de l'EGF,si elle existe,sera revelée par la coloration d'un spot à la partie inferieure du dispositif.
Mais le dispositif peut très bien être une bandelette sur l'extrêmité de laquelle on depose une goutte d'echantillon qui va migrer horizontalement vers l'autre extrêmité avec toutes les etapes decrites ci dessus.
I1 peut se presenter aussi sous une forme completement liquide : un tube contenant une solution composée de - vesicules supportant le recepteur et enfermant les reactifs (liberant l'lP3 au contact de l'EGF) - les vesicules supportant la proteine canal liberant le Ca++ au contact de l'IP3 - un chromogène virant par exemple au bleu si le Ca++ a été libéré des vesicules ci dessus.
MODE OPERATOIRE A - PRODUCTION DU RECEPTEUR A1 - CLONAGE DE L'ONCOGENE HERS2/neu CODANT POUR LE RECEPTEUR Appartenant à la famille des oncogènes erbB-like,il code pour une proteine identique au recepteur de l'EGF avec les mêmes fonctions cellulaires.Son expression est modulée dans les premiers stades de cancer du sein.Les membranes purifiées de cellules tumorales contiennent 0.4 à 15 fmoles de recepteur par mg de proteine membranaire.Dans environ 25% des cas de cancer du sein (avec adenopathies),son expression est fortement amplifiée : les membranes des cellules tumorales contiennent alors 1000 fmoles de recepteur par mg de proteine.
L'oncogène HERS2/neu sera cloné dans un vecteur plasmidique (nous choisissons le Bluescript KS+ de Stratagène parce qu'il est universel,mais un autre vecteur contenant un site unique Sal I peut aussi être utilisé.) La technique de clonage s'inspire de celle decrite par Zabarovsky et Allikmets en 1986: a - Les bouts cohesifs de l'ADN de l'oncogène HERS2/neu constitués de quatre nucleotides simple brin,sont remplis partiellement avec les nucleotides dATP et dGTP (laissant seulement deux nucleotides en simple brin à chaque extremité) dilués dans un tampon de Kienow 10X: - Tris-HCl pH 7.5 0.5 M -MgC12 0.1M - Dithiothreitol 0.001 M (Ref Sigma D-9779) Methode de remplissage partiel des bouts cohesifs:Dans un microtube (Tube No 1) ajouter: - Oncogène HERS2/neu 1,ug - Tampon Kienow 10X 5 Ml - dATP 2mM pH 7 2,5, t - dGTP 2mM pH 7 2,5 mol - Completer H20 à 48, l - Fragment de Kienow à(6U/Ml) 2!" b - Le vecteur plasmidique Bluescript est linearisé par digestion totale avec Sal I (une endonuclease de restriction extraite de Streptomyces albus G et qui reconnait la sequence: TCGAC-3'. Ref Sigma R 0754):les bouts cohesifs de quatre nucleotides simple brin sont partiellement remplis avec les nucleotides dTTP et dCTP,laissant deux nucleotides en simple brin à chaque extremité.
Methode de remplissage des bouts cohesifs du vecteur: Dans un microtube (Tube No 2),ajouter: - ADN Bluescript-Sal I 1,ug - Tampon Klenow 10X 5 Ml - dCTP 2mM pH 7 2,5 l - dTTP 2mM pH 7 2,5!" - compl H20 à 48, l - Fragment de Klenow (6 UlMi) 2,u1 c - Incuber les deux tubes à 30 C penadnt 30 mn d - Extraction de l'ADN après precipitation au phenol/chloroforme et à l'ether e - Dissoudre le precipité dans du TE gris-HCl 10 mM pH 7,5,EDTA lmM) pour obtenir 1 Mg d'ADN/Ml.
A la suite de ces operations: L'ADN de l'oncogène sera appelé: Oncogène - dAMP - dGMP L'ADN du vecteur sear appelé : Bluescript - Sal I - dTMP - dCMP f - Ligature: * - Dans un microtube sur glace,ajouter: - Tampon ligase 10X Itcl (Tris-HCl pH 8 0.5 M - MgCl2 70 mM - Dithiothreitol 10 mM) - ATP 10 mM pH 7 1!" -H20 5!" - Oncogène-dAMP-dGMP (1, g/, l) 1 l - Bluescript-Sal I-dTMP-dCMP (1Mg/!") 1!" Melanger puis ajouter: - ADN ligase de T4 (10 U) 1 jul * - Incuber à 4 C toute la nuit.Cette solution va servir à transformer les cellules de E.Coli A2 - TRANSFORMATION DE E.COLI a - Solutions utilisées et preparées sterilement: * - Milieu LB: - Extrait de levure Bacto 5 g - Tryptone Bacto 10 g - NaCl 10 g - Eau distillée completer à 1 litre (pour obtenir un agar dur,il est preferable d'ajouter 1,5 g de Bacto-Agar/100 ml de milieu LB) - Autoclaver.