INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Après la lésion on retire des boites toutes les 24h afin de mesurer la taille de la lésion. On utilise des grilles adhésives divisees en carrés de 0,5mm2 qu'on applique sur le fond de la boite, en coincidence avec la lésion. On mesure la surface de la lésion en comptant les carrez avec un microscope inversé. La vitesse de régénération est linéaire pendant 48h, puis se ralentit quand la lésion n'est plus que de 75 à 80% de la lésion initiale. La présence des dérivés de l'invention augmente la vitesse de régénêrescence aux temps précoces et même en absence de sérum humain dans le milieu de culture. De plus en l'absence de sérum on observe un début de dégénérescence des cellules endothéliales, ce qui n'est pas le cas en présence d'alcools gras à longue chaîne.
In vivo une lésion de l'endothélium vasculaire peut entraîner l'adhésion de plaquettes, la prolifération de cellules musculaires lisses et la formation de thrombose ou de plaques d'athérosclérose.
A l'aide du modèle de lésion mécanique, on observe que les alcools gras à longue chaîne de l'invention protègent la paroi vasculaire et améliorent les capacités de régénérescence de celle-ci. Les propriétés physico-chimiques de ces dérivés et leur bonne biodisponibilité en font des outils thérapeutiques particulièrement utiles dans le traitement et la prévention de la thrombose et de l'athérosclérose.
4) Cytoprotection Certaines lésions cellulaires sont liées à la présence de toxiques ou sont la conséquence d'une ischémie, comme dans le tissu nerveux. Ces phénomènes sont particulièrement importants dans le foie, le muscle cardiaque et le rein. Un certain nombre de molécules (xénobiotiques) peuvent altérer les fonctions des cellules hépatiques soit directement soit après conversion de ces molécules sous forme plus toxique. La le-sion cellulaire peut débuter soit par la formation d'un complexe stable avec une protéine ou un autre composé intra-cellulaire, soit par la formation d'une entité chimique très réactive ou en induisant des changements physico-chimiques dans la cellule ou dans son environnement (Bridges et al Ann N. Y.
Acad.Sci.407:42-63 (1983)). La lésion cellulaire peut être limitée ou empêchée par certains systèmes de défense, comme les enzymes du métabolisme des médicaments, des proteines de liaison ou des antioxydants. On peut utiliser des hépatocytes isolés comme modele expérimental pour étudier la toxicité de certaines molécules. On mesure la cytotoxicité par la libération d'enzymes cytosoliques, la sécrétion d'albumine, des changements morphologiques observés en microscopie optique et par la determination de la viabilité cellulaire. La lésion cellulaire est influencée par son environnement, en particulier la pression partielle d'oxygène ou la présence de calcium extra-cellulaire. La toxicité de certaines drogues est potentialisée par la déplétion en glutathion.
L'utilisation d'hépatocytes isolés maintenus en culture permet d'étudier la cytotoxicite hépatique et également de mettre en évidence des composés protecteurs vis-àvis des cytotoxiques. On peut étudier en particulier le maintien des cytochromes P450 et des enzymes du métabolisme des médicaments, comme la glucuronyltransferase et la sulfotransférase.
De même on peut étudier la cytotoxicité de certaines molécules sur les cellules du glomérule ou du tubule rénal à l'aide de cellules mésengiales, épithéliales - ou tubulaires isolées. On mesure la cytotoxicité par des changements morphologiques ou par l'expression de fonctions biochimiques propres à ces cellules (sécrétion d'un inhibiteur d'activateur du plasminogène, de PGE2, d'interleukine 1) (J. D. Sraer et Coll., FEBS Lett.104:420-424(1979)).
En particulier, les alcools gras à longue chaîne de l'invention, augmentent la synthèse et la secrétion des activateurs du Plasminogène de l'ordre de 70 a 100 % par rapport au contrôle, dans des cellules mésengiales et épithéliales de rein humain. L'effet maximum est obtenu à des doses allant de 105 à 107 N.
Ce résultat permet d'envisager une action pharmacologique dans les phénomènes de coagulation et dans la formation des iatrices extra-cellulaires. Les molécules de l'invention peuvent également empêcher la propagation de métastases provenant de tumeurs cancéreuses, et s'opposer en cela à l'action de certaines protéines.
En ce qui concerne le muscle cardiaque, les lésions cellulaires sont généralement la conséquence d'une ischémie. Des cellules musculaires cardiaques isolées permettent en particulier de suivre l'évolution de lésions sur le plan des modifications électrophysiologiques (P. Athias et al. In Vitro 22:44(1986)).
Les dérivés d'alcools gras à longue chaîne de l'invention jouent un rôle dans la protection contre des lésions chimiques ou liées à une ischémie qui s'exercent sur des cellules hépatiques, rénales ou musculaires cardiaques.
La présence de composés toxiques ou une ischémie provoque une dégénérescence cellulaire qui se manifeste par une diffusion d'enzymes cytosoliques (LDH), des changements morphologiques, une perte de la viabilité cellulaire. On peut utiliser des cellules en culture pour mettre en évidence cette toxicité et d'éventuels agents protecteurs. Comme nous le démontrons dans l'Exemple 4, les dérivés de l'invention augmentent la survie et maintiennent la différenciation d'hépatocytes maintenus en culture. Les cultures sont obtenues par fractionnement å partir de foie de rats adultes et sont maintenues dans un milieu Ham/F12 additionné d'albumine, insuline, hydrocortisone et 10% de sérum de veau foetal.La survie des hépatocytes in vitro est limitée, ils ont tendance à perdre certains caractères de différenciation et à dégénérer en présence de composés toxiques. C'est le cas en particulier pour la galactosamine, le paracétamol, le pentobarbital (Paine et Hockin. Toxicology 25:41(1982) ou le cyclophosphamide (ACOSTA et NITCHEL. Bioch. Pharm.
30:3225(1981).
L'addition d'alcools gras à longue chaîne dans le milieu de culture améliore la survie des hépatocytes in vitro, comme on peut le mesurer par des tests de viabilité, par le maintien du glutathion et de l'activité cytochrome P450, ainsi que la sécrétion d'albumine (Le Rumeur et al. Exp.Cell Res.147:247-254 (1983)). Ces dérivés de l'invention diminuent également la toxicité du pentobarbital ou du cyclophosphamide, comme on peut l'observer. par les changements morphologiques, la diffusion d'enzymes cytosoliques et l'activité d'enzymes de détoxification, comme les cytochromes P450, les monooxygénases et les enzymes de conjugaison. Les doses utilisées sont de l'ordre de 0,01 à 100pu, plus particulièrement 0,1 à lOWM. Les doses correspondantes pour l'utilisation in vivo sont de l'ordre de 0,olmg/kg à 100mg/kg, plus particulièrement 0,1 à 10mg/kg.
L'application des dérivés de la présente invention permet de protéger les cellules hépatiques, rénales ou musculaires cardiaques contre la dégénérescence due à des composés toxiques ou à une ischémie. L'effet protecteur pour des cellules du glomérule rénal est également démontré à l'aide de cellules mésengiales, épithéliales ou tubulaires in vitro. On peut mesurer l'effet sur la dégénérescence cellulaire par des changements morphologiques et par 1'expression de fonctions biochimiques spécifiques, comme la sécrétion d'inhibiteur d'activateur du plasminogène, de PGE2, d'interleukine 1 (J. D.Sraer et al. sus-mentionné). On peut mesurer l'effet sur la dégénérescence de cellules musculaires cardiaques, en particulier après une ischémie, par des changements morphologiques, ia diffusion d'enzymes cytosoliques(LDH) ou des modifications des propriétés excitatrices membranaires (P. Athias et al. sus-mentionné). Les doses utilisées sont similaires à celles décrites pour l'effet cytoprotecteur des hépatocytes.
Les dérives de la présente invention permettent de protéger. les cellules intestinales et gastriques vis-à-vis de composés toxiques, comme un excès -d'acidité gastrique -. Les molécules de invention rendent les cellules pariétales et épithéliales de l'estomac plus résistantes vis-à-vis d'un excès d'acidité gastrique ; elles diminuent la sécrétion des ions H+ et augmentent la secrétion de mucus. Cet effet permet de protéger cet organe contre les conséquences d'un stress, de régulariser la motricité intestinale dans une situation de stress et d'empêcher la formation d'un ulcère gastrique ou intestinal. Les dérivés de l'invention augmentent également la trophicité des villosités intestinales, des cellules épithéliales de l'estomac et des ilots de Langerhans du pancréas.Ils rendent la muqueuse intestinale plus résistante en situation de malnutrition et limitent les conséquences fonctionnelles liées à une pancréatite, en particulier sur la sécrétion d'insuline. Les dérivés de l'invention sont ajoutés avantageusement à des préparations destinées à l'alimentation parentérale ou à des substituts du lait maternel. Ils favorisent la différenciation et la maturation des tissus du tractus digestif au cours du développement ou à la suite d'un traumatisme chimique, mécanique ou chirurgical.
II ESSAIS BIOLOGIQUES IN VITRO et IN VIVO 1) Réqénérescence nerveuse Les dérivés et analogues des alcools gras à longue chaîne de l'invention jouent un rôle dans le contrôle de la plasticité du tissu nerveux au cours du développement et chez l'adulte. Ils augmentent la survie neuronale au cours de phases de développement qui voient la mise en place de nouvelles connections neuronales, également chez l'adulte au cours des processus d'apprentissage et de mémoire; Comme nous le décrivons dans l'Exemple 1 qui suit, les dérivés de l'invention favorisent la différenciation neuronale ainsi que la survie des neurones. Cette propriété leur donne la capacité d'augmenter la survie de neurones lésés à la suite d'une traumatisme. Les dérivés et analogues des alcools gras à longue chaîne de l'invention favorisent la survie et la régénérescence de cellules nerveuses à la suite d'un traumatisme du cerveau ou de la moelle épinière. Ces molécules sont capables de limiter l'extension des lésions, de réduire la dégénéréscence wallérienne et favorisent la régénérescence axonale. En particulier, les molécules décrites diminuent la nécrose post-ischémique, réduisent l'oedème autour de la lésion, augmentent la perfusion sanguine du tissu nerveux atteint et limitent la prolifération de fibroblastes ou d'astroblastes au niveau de la lésion.
Ces propriétés sont démontrées à l'aide de neurones maintenus en culture primaire dans différentes conditions, ou in vivo à l'aide de divers modèles de lésion expérimentale chez l'animal (GAGE et al, Brain Res., 268 : 27-37 (1983) t WILLIAX et al, Proc. Natl.
Sci. 83 : 9231-9235 (1986)). Les doses utilisées sont de l'ordre de 0,01 mg/kg, plus particulièrement 0,1 mg/kg à 5 mg/kg. En raison de la meilleure biodisponibilité des molécules que nous decrivons et de leur plus grande efficacité au niveau de la membrane cellulaire, nous améliorons avec des doses moindres les effets précédemment observés avec le n-hexacosanol (BORG et al, Neurosci. Lett, 213 : 406-410 (1987)).
Par ailleurs, les dérivés de l'invention favorisent également la régénerescence des nerfs périphériques; A la suite d'un traumatisme du nerf périphérique, il peut y avoir perte de la continuité nerveuse, suivie de la dégénéréscence wallérienne.
L' application des dérivés de la présente invention permet dans ce cas de réduire l'importance des lésions et de faciliter la restauration de la continuité nerveuse. Ce résultat est obtenu grâce aux propriétés neurotrophiques et régénérantes de ces dérivés.
EXEMPLE 1 : SURVIE ET REGENERESCENCE DE NEURONES CEREBRAUX EN PRESENCE DE DERIVES ET ANALOGUES DES ALCOOLS GRAS A LONGUE CRAINTE DE L'INVENTION.
L'utilisation de neurones cérébraux maintenus en culture primaire permet de mettre en évidence l'activité de facteurs neurotrophiques (G. BARBIN, I. SELAK, M. MANTHORPE et S. VARON ; Neuroscience, 12 (1984) 33-43). On prépare des cultures neuronales à partir du cerveau d t embryons de rat de 13 à 18 jours.
Les cellules sont ensemencées à faible densité (10 000 à 100 000 cellules par ml) ; elles poussent dans des boites de Pétri recouvertes d'un support de polylysine, en présence d'un milieu de culture qui est préparé à partir du milieu de Eagle-Dulbecco (R. DOBELCCO et G.
FREEMAN, Virology, 8, (1959) ; 396) auquel on ajoute des suppléments d'insuline, de transferrine, de progestérone, de sélénium et de putrescine (BORG et al, Develop Brain Res. 18 : 37-49 (1985)). Les dérivés testés sont ajoutés au début de la culture a des doses variant de 10-a à 105M.
On suit l'évolution de la culture à l'aide d'un microscope à contraste de phase. La coloration au bleu trypan permet de mesurer le nombre de neurones qui émettent des prolongements. On observe que dans les cultures contrôles le nombre de neurones vivants et de neurones avec prolongements diminue à partir d'une certaine durée de culture. Au contraire, dans les cultures traitées avec les dérivés de l'invention, le nombre de ces neurones reste constant avec le temps et la longueur des prolongements est beaucoup plus importante que dans les témoins. On note également un grand nombre de ramifications & partir de ces prolongements et la présence de nombreux contacts cellulaires. In vivo, ces observations correspondent à la mise en place de nouveaux circuits neuronaux et à la formation de jonctions intercellulaires ou synaptiques.
L'augmentation de la survie de neurones placés dans des conditions critiques et l'amélioration de leur maturation morphologique se traduit également par une maturation accrue sur le plan biochimique.
On peut mesurer la présence de certaines protéines spécifiques de ces neurones, comme les protéines des neurofilaments, l'énolase neurospécifique ou la glutaminase par des méthodes immunocytochimiques ou des méthodes enzymatiques. Après fixation on incube les cultures avec un anticorps spécifique contre un neurofilament ou contre l'énolase, à différents temps de culture. On révèle la présence de ces protéines par une méthode à la péroxidase ou avec des anticorps fluorescents. L'apparition de ces protéines est plus précoce et plus intense dans les cultures contenant les dérivés de l'invention.
On peut aussi mesurer l'activité enzymatique de l'énolase ou de la glutaminase qui sont de bons marqueurs de la maturation neuronale. (BORG et al, Neurosci. Lett., 213 :406-410 (1987)). L'activité enzymatique rapportée à la quantité de protéine permet de comparer l'effet neurotrophique des différents dérivés de l'invention. Cette mesure quantitative montre que l'effet s'observe de façon précoce et continue ; elle permet également de faire des corrélations entre la dose utilisée et l'effet observé.
Dans tous les cas, les neurones traités par les dérivés et analogues des alcools gras à longue chaîne de l'invention induisent une activité accrue des marqueurs de la maturation par rapport aux contrôles.
Les dérivés de l'invention ont un effet plus important que les autres facteurs neurotrophiques déjà connus, en raison de leur meilleure biodisponibilité et d'une meilleure efficacité au niveau cellulaire. Ces résultats montrent que les dérivés et analogues des alcools gras à longue chaîne favorisent la survie de neurones cérébraux et augmentent leur degré de maturation.
2) Neuroprotection Une autre application intéressante des dérivés de l'invention est liée à leur propriété de protéger les neurones de lésions dues à la présence de neurotoxiques, comme le glutamate, l'acide iboténique, 1'AF-64, la scopolamine ou le N-méthylD-aspartate. Le neurotransmetteur excitateur, le glutamate, et les excitotoxines en général, produisent des effets neurotoxiques en relation avec leur action dépolarisante au niveau de leurs récepteurs. Certains analogues du glutamate, comme l'acide iboténique ou le quisqualate ont des effets excitateurs plus puissants et produisent également des effets neurotoxiques. Les propriétés neuroprotectrices des dérivés et de l'invention sont démontrées à la suite d'une injection de neurotoxique, l'acide iboténique, dans le nucleus basalis chez le rat (Exemple 2).Normalement, cette injection entraîne une diminution de la production d'acétycholine et de l'activité de la choline acétyl transférase dans le néocrotex ipsilatéral, ainsi que des lésions morphologiques dans cette zone de cerveau.
Actuellernent, dans le HD-MAC. ces informations numériques de contrôle sont transmises peldant le retour trame de chaque trame vidéo. Les informations numériques de contrôle sont utilisées après transmission, dans un de codeur de réduction de bande passante tel que décrit dans les articles de IEE Conference Publication 293 en 1988. I)ans ce cas, les informations numériques de contrôle comportent principalement des signaux de synchronisation et des signaux d'assistance digitale.Le HD-MAC utilisant clos techniques de sous-échantillonnage sur quatre trames, certaines structures étant des structures quinconce-ligne ou quinconque-trame, les signaux de synchronisation sont constitues par le signal "RF" qui permet de différencier une trame parmi quatre et le signal "LT" permettant de repérer les lignes paires et impaires de la trame dans le cas de structure de sous-ecbantffionnage du type structure quinconque-trame. Les signaux (l'assistance digitale comportent plus particulièrement un signal indiquant le mode de transmission utilisé appelé "BD" et un vecteur-mouvement appelé "MV". Ces différents signaux seront décrits de manière plus détaillée ci-après.
En fait, la réalisation d'un de codeur selon l'art antérieur nécessite qu'auprès décodage des informations "BD" et "MV", l'on génère ces mêmes signaux retardés de multiples de 20 ms. De plus, ces signaux devront toujours être mis en phase avec le signal vidéo à chaque endroit Oi1 ils sont utilisés. Il en est de même des signaux de synchronisation "LT" et "RF".
Pour cette raison, toute modification du traitement de la vidéo entrainant un changement du retards nécessitera une reprogrammation du retard de tous les signaux de contrôle de la partie vidéo située en aval.
La présente invention a donc po'ï t but de remédier à ces inconvénients en proposant un nu veau procédé de transmission des informations numériques de contrôle associées à un signal vidéo numérique.
La présente invention a aussi pour but de proposer un dispositif de décodage des informations numériques de contrôle transmises selon le procédé ci-dessus qui est utilisé avec/ou qui est intégré sur le circuit du décodeur < le réduction de bande passante de manière à décoder les informations numériques de contrôle seulement aux endroits où elles doivent être utilisées.
En conséquence, la présente invention a pour objet un procédé de transmission d'informations numériques de contrôle associées à un signal vidéo numérique, caractérisé en ce que, pendant le retour ligne, on transmet les informations de contrôle associées au signal vidéo de la ligne suivante.
Selon un mode de réalisation préférentiel, la transmission est réalisée en multipléxan t temporellement la partie utile du signal vidéo et les informations numériques de contrôle associées.
Ainsi, le procédé de la présente invention permet de simplifier le traitement de l'assistance digitale en supprimant des fonctions retards spécifiques, car les informations sont en effet automatiquement retardées en même temps que le signal vidéo dans les fonctions retard de 20 ms. D'autre part, toute modification du retard est automatiquement répercutée sur les signaux de contrôle sans nécessiter de reprogrammation.
Selon un mode de réalisation de la présente invention, dans le cas d'un signal vidéo de type T1aute définition, les informations numériques de contrôle sont (onstituées par des informations de synchronisation et des informations sur le traitement à effectuer ou informations d'assistance digitale.
De préférence, les informations s synchronisation ne sont transmises qu'une fois par ligne.
En fait, selon un mode de realisation utilisé, les informations de synchronisation sont transmises dans un octet spécifique contenant des informations indiquant le début et la fin des effacements ligne et trame. De plais l'octet spécifique est précédé par un octet de valeur particulière. Ceci permet de séparer la vidéo utile des informations cI'assistance digitale sans l'aide de signaux externes ou base de temps.
La présente invention a aussi po'ir objet un dispositif de décodage des informations numériques tlo contrôle transmises selon le procédé décrit ci-dessus, caractérisé en ce qu'il comporte au moins une mémoire destinée à stocker, pour chaque bloc vidéo, l'information de décision de branche et l'information vecteur-mouvement corre sponda n tes, cette mémoire étant écrite pendant l'effacement ligne à la fréquence de transmission et lue pendant le retour ligne n la fréquence bloc.
D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture de In description faite ci-après d'un mode de réalisation préférentiel d'un décodeur de réduction de bande passante utilisé tl ans le cas de la transmission d'un signal vidéo en HD-MAC mettant en oeuvre la présente invention.Cette description est faite avec référence aux dessins ci-annexés dans lesquels - la figure I représente le protocole de codage des informations numériques de contrôle pendant le retour ligne du signal vidéo - la figure 2 est un schéma synoptique d'un circuit de décodage des informations numériques de contrôle selon un mode de réalisation de la présente invention - la figure 3 est un diagramme des temps expliquant le fonctionnement du décodeur de figure 2 - les figures 4 et 5 sont des schémas synoptiques représentant respectivement un dispositif de traitement des signaux d'assistance digitale et un décodeur de réduction de bande passante comportant des décodeurs d'informations numériques de contrôle conformément à la présente invention.
Dans les figures, les mêmes éléments portent les mêmes références. D'autre part, la présente description sera faite en se référant au décodage d'un signal vidéo haute définition de type HD-MAC. Toutefois, il est évident pour l'homme de l'art que l'invention peut s'appliquer à tout système utilisant un traitement adaptatif du signal vidéo.
Dans la présente invention on décrira plus particulièrement le traitement de signal de la voie luminance d'un signal vidéo HD-MAC. Dans ce cas, les informations numériques de contrôle associées au signal vidéo HD-MAC comportent des signaux de synchronisation et des signaux d'assistance digitale. Comme mentionné ci-dessus, les signaux de synchronisation comportent un premier signal de synchronisation noté "RF" qui permet de différencier une trame parmi quatre. Ce signal est donc constitué de deux bits. D'autre part, certaines structures de sous-échantillonnage sont des structures quinconce-ligne, ce qui signifie que la position horizontale des échantillons n'est pas la même sur les lignes paires et impaires de la trame. Le signal permettant de repérer ces lignes est noté "LT". Il est constitué d'un bit.D'autre part, le traitement HD-MAC utilise un principe de codage avec trois modes de transmission différents. Le mode de transmission utilisé est constant sur un bloc d'image, les blocs étant en général constitués par une matrice de 16 points par 1 G lignes. Le signal indiquant le mode de transmission utilisé est transmis parmi les données d'assistance digitale. Après décodage, il est appelé "BD". I1 comporte deux bits et est échantillonné à la fréquence bloc. Le mode "40 ms" ne transmet que les trames impaires de l'image haute définition d'origine ainsi qu'un ensemble de vecteurs de mouvement associés à la trame paire manquante. La trame paire manquante est donc interpolée en utilisant la position d'un point-image 20 ms plus tôt et 20 ms plus tard.Le procédé de calcul s'appelle : interpolation compensée en mouvement. I1 nécessite l'utilisation d'un vecteur de mouvement par bloc. Ces vecteurs de mouvement sont rodés sur 8 bits et notés "MV".
En conséquence, le protocole utilisé pour la transmission des informations numériques de contrôle doit pouvoir transmettre les informations ttBDn et ItMVtt correspondant à chaque bloc. Or, une ligne comporte 90 blocs. D'autre part, le protocole doit pouvoir transmettre les signaux "RF" et "lut" En fait, ces signaux peuvent n'être transmis qu'une fois par ligne.