INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
La séquence correspondante de 479 acide aminés est la suivante Met Asn Ile Val Glu Asn Glu Ile Cys Ile Arg Thr Leu Ile Asp Asp Asp Phe Pro Leu Met Leu Lys Trp Leu 30 40 50 Thr Asp Glu Arg Val Leu Glu Phe Tyr Gly Gly Arg Asp Lys Lys Tyr Thr Leu Glu Ser Leu Lys Lys His Tyr Thr 60 70 Glu Pro Trp Glu Asp Glu Val Phe Arg Val Ile Ile Glu Thr Asn Asn Val Pro Ile Gly Tyr Gly Gln Ile Tyr Lys 80 90 100 Met Tyr Asp Glu Leu Tyr The Asp Tyr His Tyr Pro Lys Thr Asp Glu Ile Val Tyr Gly Met Asp Gln Phe Ile Gly 110 120 Glu Pro Asn Tyr Trp Ser Lys Gly Ile Gly Thr Arg Tyr Ile Lys Leu Ile Phe Glu Phe Leu Lys Lys Glu Arg Asn 130 140 150 Ala Asn Ala Val Ile Leu Asp Pro His Lys Asn Asn Pro Arg Ala Ile Arg Ala Tyr Gln Lys Ser Gly Phe Arg Ile 160 170 180 Ile Glu Asp Leu Pro Glu His Glu Leu His Glu Gly Lys Lys Glu Asp Cys Tyr Leu Met Glu Tyr Arg Tyr Asp Asp 190 200 @@@ @@@ Asn Val Lys Ala Met Lys Tyr Leu Ile Glu His Tyr Phe Asp Asn Phe Lys Val Asp Ser Ile Glu Ile 210 220 230 Ile Gly Ser Gly Tyr Asp Ser Val Ala Tyr Leu Val Asn Asn Glu Tyr Ile Phe Lys Thr Lys Phe Ser Thr Asn Lys 240 250 Lys Lys Gly Try Ala Lys Glu Lys Ala Ile Tyr Asn Phe Leu Asn Thr Asn Leu Glu The Asn Val Lys Ile Pro Asn 260 270 280 Ile Glu Tyr Ser Tyr Ile Ser Asp Glu Leu Ser Ile Leu Gly Tyr Lys Glu Ile Lys Gly Thr Phe Leu Thr Pro Glu 290 300 310 Ile Try Ser Thr Met Ser Glu Glu Glu Gln Asn Leu Leu Lys Arg Asp Ile Ala Ser Phe Leu Arg Gln Met His Gly 320 330 Leu Asp Try Thr Asp Ile Ser Glu Cys Thr Ile Asp Asn Lys Gln Asn Val Leu Glu Glu Tyr Ile Leu Leu Arg Glu 340 350 360 @@@ Ile Tyr Asn Asp Leu Thr Asp Ile Glu Lys Asp Tyr Ile Glu Ser Phe Met Glu Arg Leu Asn Ala Thr Thr Val 370 380 Phe Glu Glu Lys Lys Cys Leu Cys His Asn Asp Phe Ser Cys Asn His Leu Leu Leu Asp Gly Asn Asn Arg Leu Thr 380 400 410 Gly Ile Ile Asp Phe Gly Asp Ser Gly Ile Ile Asp Glu Tyr Cys Asp Phe Ile Tyr Leu Leu Glu Asp Ser Glu Glu 420 430 440 Glu Ile Gly Thr Asn Phe Gly Glu Asp Ile Leu Arg Met Tyr Gly Asn Ile Asp Ile Glu Lys Ala Lys Glu Tyr Gln 450 460 Asp Ile Val Glu Glu Tyr Tyr Pro Ile Glu Thr Ile Val Tyr Gly Ile Lys Asn Ile Lys Gln Glu Phe Ile Glu Asn 470 Gly Arg Lys Glu Ile Tyr Lys Arg Thr Tyr Lys Asp *----------- Cette séquence d'acides aminés possède deux régions homologues de celles de protéines de résistance déjà séquencées.Il s'agit de la région N-terminale qui contient une séquence homologue (identique ou fonctionnellement apparentée) à la chloramphénicol acétyltransférase codée par le gène cat86 de Bacillus Pumilus qui présente une activité AAC(6') et de la région C terminale qui contient une séquence homologue de l'amino glycoside phosphotransférase codée par Streptomyces fradiae, qui présente une activité APH(2").
L'invention vise également les ADN recombinants contenant les fragments d'ADN ci-dessus recombinés avec des fragments hétérologues, ainsi que les vecteurs recombinants, notamment les plasmides hybrides comportant au moins une partie du gène AAC(6') APH(2").
De tels plasmides comprennent le plasmide pUC815A tel qu'obtenu par sous-clonage dans le site SmaI de pUC8 d'un fragment AluI de 1,5 kb environ.
L'invention vise en outre, en tant qu'intermédiaire, les souches bactériennes modifiées, ou transformants, caractérisées par l'insertion dans leur génome d'au moins une partie d'un fragment d'ADN tel que défini ci-dessus.
Conformément à l'invention, la séquence codante du gène AAC(6')-APH(2") est obtenue par - clonage d'un fragment de restriction HDaII - HincII de 2,4 kb environ du plasmide de streptocoque pGB3012 et d'un segment adjacent HincII, - sous-clonage d'un fragment AluI de 1,5 kb environ, sous-cloné dans le site SmaI de pUC8 pour former le plasmide pUC815A, - dégradation unidirectionnelle par BAL31 en soumettant pUC815A à une digestion par EcoRI et PstI, isolément du fragment de 1,5 kb par centrifugation sur gradient de sucrose, - autoligation du fragment de 1,5 kb environ, en présence de T4 ADN ligase ce qui conduit à des polymères de fragments de 1,5 kb environ, qui sont ensuite digérés avec Pstl pour produire des dimères de fragments de 1,5kb, liés au site EcoRI, digestion des dimères avec BAL3î, suivie d'une précipitation de l'ADN digéré par BAL31 telle qu'obtenue à l'aide de l'étha- nol, digestion par EcoRI pour produire des fragments contenant des extrémités EcoRI et BAL3î, ligation dans mp18 digéré par SmaI et EcoRI, et transformation dans E.coli JM109.
Les vaccins à base de sous-unités possèdent également des limitations. Ils contiennent un nombre limité d'antigènes viraux, comparativement à ceux produits par des virus vivants. Ce manque d'antigènes produit une réponse immunitaire faible de courte durée chez l'animal vacciné, à un cott considérablement supérieur à celui d'une vaccination par virus vivant. Cependant, le spectre antigénique limité dans le. vaccin à base de sous-unités permet de distinguer les porcs vaccinés des porcs qui ont été infectés par le virus de type sauvage. L'aptitude à distinguer les porcs vaccinés des porcs infectés est une propriété cruciale d'un vaccin pseudorabique car aucun des vaccins nouveaux ne permet d'éviter une surinfection des animaux vaccinés par le virus de type sauvage.Bien que les animaux vaccinés ne deviennent pas malades par surinfection, il existe de fortes présomptions qu'ils puissent devenir des porteurs du virus de type sauvage et transmettent- le virus de type sauvage à d'autres porcs.
Dans n'importe quel programme d'éradication ayant pour but l'élimination du virus pseudorabique, un vaccin muni des caractéristiques qui permettraient de distinguer les animaux vaccinés des animaux infectés par le virus de type sauvage serait avantageux. Les vaccins à base de sous-unités sont d'un coût élevé et possèdent une efficacité faible, mais un animal vacciné avec ce type de vaccin produit seulement des anticorps contre le spectre limite d'antigènes présents dans le vaccin. Par prélèvement d'un échantillon du sérum des porcs, il est possible de montrer que l'animal vacciné possède seulement des anticorps contre les antigènes présents dans le vaccin, tandis qu'un animal infecté par le virus de type sauvage posséderait des anticorps contre une gamme plus large d'antigènes.
Un vaccin à base de sous-unités utilisé de cette manière pour différencier les animaux vaccinés des animaux infectés par le virus pseudorabique a été décrit dans la demande de brevet européen N" 85 40074.4, déposée le 4 Septembre 1985, publiée le 27 Novembre 1985 sous le numéro de publication européenne N" 0162738 et intitulée "Production of Pseudorabies Virus Subunit Vaccines".
Cette demande de brevet publiée n'apporte pas d'enseignements ni ne suggère l'élaboration ou l'utilisation d'un test de diagnostic similaire, conjointement avec un vaccin à virus vivant. La vaccination d'un animal avec un virus vivant qui aurait pour résultat une réponse immunitaire pouvant être distinguée d'une infection à virus de type sauvage, aurait également les avantages supplémentaires de faible coût et de forte efficacité associés aux vaccins à virus vivants.
Des délétions dans les gènes codant pour des antigènes viraux ont été décrites précédemment.
Une délétion spontanée dans le gène glycoproteine C du virus de l'herpès simplex (52), une délétion spontanée dans le gène glycoprotéine A du virus de la maladie de Marek (53), une délétion spontanée dans le gène glycoprotéine A (appelée également glycoprotéine gI) du VPR (27,55) et l'absence ou la présence d'une quantité fortement réduite de glycoprotéine gIII dans certains mutants de VPR (54) sont connues. Cependant, toutes ces délétions sont survenues spontanément dans un procédé non contrôlé. En conséquence, il n'a pas été possible d'orienter des délétions vers l'ADN codant pour des antigènes particuliers afin d'ajuster le procédé de délétion et de diriger les délétions vers des antigènes convenant particulièrement comme marqueurs de diagnostic.
La présence ou l'absence d'antigènes particuliers dans une maladie infectieuse quelconque peut être exploitée comme test de diagnostic de l'agent responsable de la maladie infectieuse. Cette présence ou cette absence constitue la base de tous les tests de diagnostics immunologiques, qui diffèrent seulement par les détails de leur investigation immunologique particulière. Les publications concernant la présente invention comprennent Wathan et Wathan (54) qui ont indiqué que le gène gI ou le gène gIII pourrait être éliminé du VPR par délétion- et ont suggéré que le virus résultant pourrait être utilisé pour distinguer les porcs vaccinés des porcs infectés.Cependant, ils n'ont pas décrits la méthodologie nécessaire pour produire le vaccin, ils n'ont pas démontré l'utilité d'un tel vaccin dans des tests sérologiques et ils n'ont en aucune manière trouvé la possibilité de produire un tel vaccin.
Van Oirschot et collaborateurs (56) ont utilisé un système de détection immunologique particulier à base d'anticorps monoclonaux pour l'antigène gI du VPR et ont montré que des porcs auxquels ont été inoculées des souches vaccinales naturelles auxquelles manque au moins une portion du gène gI peuvent être différenciés des porcs infectés par le VPR de type sauvage. Cependant, ce test de diagnostic peut être utilisé pour n'importe lequel de plusieurs vaccins contre le VPR qui existent déjà en Europe et aux Etats Unis, sans différencier le vaccin qui a été utilisé.
Cela limite l'utilité de ce diagnostic, puisque les vaccins qui peuvent être détectés possèdent des propriétés biologiques et de virulence différentes.
La voie d'investigation concernant la délétion d'un gène afin d'atténuer un virus associé à un diagnostic pour ce gène permet d'obtenir un vaccin qui peut être différencié de n'importe lequel des vaccins couramment utilisés contre le VPR et du VPR de type sauvage. Il est important de pouvoir différencier un vaccin nouveau,, plus sûr, de ceux couramment utilisés car les porcs auxquels sont administrés les vaccins classiques sont tous soumis à la même réglementation au cours des programmes d'éradication que ceux infectés par le VPR de type sauvage.
Les antigènes de choix en vue d'un marqueur de diagnostic auraient les caractéristiques suivantes: 1) les antigènes et leurs gènes ne seraient pas essentiels pour la production de virus infectieux dans une culture de tissu ; et 2) l'antigène produirait une réponse sérologique importante chez l'animal, mais ne serait de préférence pas un agent neutralisant important.
En conséquence, la présente invention comprend l'aptitude à atténuer le virus pseudorabique du porc pour produire un vaccin à virus vivant et l'apti- tude à distinguer si un animal a été soumis à la vaccination ou si l'animal a été infecté par le virus pseudorabique de type sauvage.
La présente invention propose un herpes virus hybride, d'animal n'appartenant pas aux primates, comprenant de l'ADN qui contient une séquence essentielle pour la réplication virale de l'herpès virus hybride, d'animal n'appartenant pas aux primates, dont au moins une partie est présente dans une séquence essentielle pour la réplication d'un herpès virus naturel, d'animal n'appartenant pas aux primates, et au moins une séquence d'ADN étranger.
Il est également proposé un herpès virus atténué, d'animal n'appartenant pas aux primates, comprenant de l'ADN qui contient une séquence essentielle pour la réplication virale de l'herpès virus atténué, d'animal n'appartenant pas aux primates, dont au moins une portion est présente dans une séquence essentielle pour la réplication d'un herpès virus naturel, d'animal n'appartenant pas aux primates, de laquelle au moins une portion d'une séquence de répétition a été éliminée par délétion.
La présente invention propose en outre un herpès virus hybride atténué, d'animal n'appartenant pas aux primates. Ce virus comprend de l'ADN qui contient une séquence essentielle pour la réplication virale de l'herpès virus hybride atténué, d'animal n'appartenant pas aux primates, dont au moins une partie est présente dans une séquence essentielle pour la réplication d'un herpès virus naturel, d'animal n'appartenant pas aux primates, et au moins une séquence d'ADN étranger.
Il est également poroposé des virus pseudorabiques atténués qui sont formés d'ADN comprenant une séquence essentielle pour la réplication du virus atténué, dont au moins une partie est présente dans une séquence essentielle pour la réplication d'un virus pseudorabique naturel, et au moins une séquence d'ADN étranger apte à l'expression dans un hôte et codant pour une séquence d'amino-acides qui est antigénique chez l'hôte Les vaccins comprenant une quantité immunisante efficace d'un virus de la présente invention et un support convenable sont utiles pour l'immunisation d'animaux contre la maladie à virus pseudorabique.
Au début de cette phase,un compteur de répétition RPT, ayant pour fonction de compter le nombre de phases de contrôle, pendant la phase de mise en oeuvre, est mis à zéro.
De 103 à 109 une sous routine déterminant le commencement des phases de contrôle est effectuée.
Cette sous routine consiste - en 103 à initialiser un compteur CNT de cycle de boucles.
L'initialisation se fait par une remise à zéro de ce compteur, - en 104 à mettre à 1 un drapeau de contrôle du gain AMP, ce drapeau étant utilisé dans la routine 200 de surveillance de l'amorçage et de contrôle du gain qui sera décrit plus loin.
- en 105 à effectuer une boucle (105 - 108) de temporisation entre deux phases de contrôle.
Cette dernière boucle comporte tout d'abord, en 105, un test visant à savoir si une tonalité est présente ou non sur la ligne. En effet il se peut que l'un des correspondants ait raccroché prématurément. Dans ce cas, la logique du déviateur, non décrite ici, commande l'interruption de la communication et le programme de commande de mise en service de l'amplification se repositionne en 101 dans l'attente d'une nouvelle activation.
En 106 un test du compteur CNT visant à savoir si le contenu de ce compteur est égal à 2000 est effectué. Dans la négative on vérifie, par des moyens appropriés, qu'il ne s'est pas écoulé une milliseconde depuis la précédente incrémentation du compteur CNT. Tant que ce temps n'est pas écoulé un test effectué en 107 est négatif et le programme est repositionné en 105. Le test 107 vérifie, en fait si, une interruption du programme principal 100 a eu ou non lieu. De telles interruptions sont commandées de façon classique par l'horloge associée au microprocesseur. Cette horloge est pilotée par un quartz et est adaptée à délivrer un signal d'interruption toutes les millisecondes.
Lorsque le temps d'une milliseconde est écoulé, le test 107 est positif et le compteur CNT est incrémenté de 1 et le programme se repositionne en 105.
On comprend que la boucle 105-108 est effectuée ainsi chaque milliseconde et que le contenu du compteur CNT est représentatif du temps écoulé depuis sa précédente incrémentation. Ainsi le test effectué en 106 permet de savoir si un temps de 2000 ms (2 secondes) s'est écoulé depuis le point 103.
Dans l'affirmative le programme est positionné en 109. En 109 le compteur de répétition RPT est incrémenté d'une unité.
En résumé, lors de la sous routine 103, 110 - le drapeau AMP est mis à 1 ce qui commande, comme on le verra à l'occasion de la description de l'organigramme 200, l'exécution d'une phase de contrôle avec remontée du gain G, telle que schématisée en t0t1, t2t3 etc.. (figure 2).
- les étapes 105, 108 permettent de décompter le temps de deux secondes entre deux phases de contrôle dans la phase de mise en oeuvre.
- le compteur RPT est incrémenté d'une unité à chaque phase de contrôle.
- dès que six phases de contrôle espacées de deux secondes ont été effectuées (test 110 positif), le programme sort de la sous routine 103 - 110.
Une routine 111 - 116 de commande de la phase de transmission est alors effectuée. Cette routine est semblable à la routine 103, 108.
En 111 le compteur CNT est remis à zéro.
rayons R3d devront également présenter une forte inclinai-
son en arrivant sur cette zone 203, et il n'est donc pas approprié que la zone 303 du miroir réfléchisse les rayons directement vers la région correspondante de la zone 203, c'est-à-dire essentiellement dans la direction de la pro-
fondeur du feu.
Par conséquent, les anneaux réfléchissants 33 de la zone 303 présentent une inclinaison relativement forte par rapport au plan général du miroir, de manière
à réfléchir les rayons émis par le filament vers la ré-
gion diamétralement opposée de la zone 203 du globe, comme représenté en R3r. Ici encore, la position du filament 12, l'inclinaison des prismes à réflexion totale 23 et l'inclinaison des anneaux réfléchissants 33 seront déterminées les unes en fonction des autres de manière à assurer à la sortie de la zone 203 du globe une certaine complémentarité entre le flux légèrement convergent de rayons directs R3d et le flux légèrement divergent de rayons R3r réfléchis par la zone 303 du mirOir7 ces deux flux étant intimement fondus en sortie du globe à
l'aide des billes 25.
On peut indiquer par ailleurs qu'il n'existe pas sur le miroir 30 d'homologue de la zone 201 du globe,
cet espace étant réservé par exemple au culot (non repré-
senté) de la lampe 10. La géométrie des prismes de cette zone sera donc conçue uniquement en fonction des rayons directs.
On va indiquer ci-dessous les valeurs géométri-
que des divers prismes et anneaux réfléchissants de la
forme de réalisation de la figure 1.
Globe largeur du sillon angle de prisme zone 201 1 mm 10 zone 202 1 mm 25 zocne 203 0,5 mm 55 Miroir largeur anneau + dépouille angle de réflexion zone 301 2 mm 13 zone 302 2 mm 30 zone 303 2 mm 63
Bien entendu, toute autre configuration géomé-
trique pourra être envisagée sans sortir du cadre de l'in-
22. R. Desrosiers et collaborateurs, Ninth Annual Herpesvirus Meeting, Seattle, Abrégé No 280 (1984).
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Partie -6- , bride permettant la fixation de la pièce sur la pièce suivante et la rigidification de l'ensemble ainsi constitué.
Partie -7- , replat facultatif permettant la fixation ultérieure d'une couverture Partie -8- Percements effectués en usine ou sur site permettant l'assemblage par boulonnage des éléments entre eux.
Les parties -2- et -3- permettent par fixation d'une lame deversante d'obtenir une rigole d'évacuation de la liqueur décantée.
La figure Il montre un décanteur constitué par l'assemblage de 6 éléments identiques, objets de la présente invention.
MACHINE A LAVER COMPORTANT UN COUVERCLE DE CARROSSERIE ARTICULE PAR CHARNIERE SUR UNE ARETE SUPERIEURE DE LA CARROSSERIE La présente invention concerne une machine à laver comportant un couvercle de carrosserie articulé par charnière sur une arête supérieure de la carrosserie pour fermer une ouverture de chargement et au moins un compartiment à produit détergent ouvert à sa partie supérieure placé au-dessous du couvercle à proximité de la charnière de ce dernier pour distribuer des poudres ou liquides détergents dosés à la main.
De telles machines à laver sont usuelles et connues sous la désignation abrégée de "machines se chargeant par le haut". L'importante offre de liquides détergents présente sur le marché renforce le désir de pouvoir approvisionner de tels liquides détergents dans une machine à laver. On connaît déjà de nombreuses propositions du niveau de la technique pour un tel approvisionnement de liquides détergents dans une machine à laver, mais elles nécessitent toutes sans exception des dispositifs compliqués pour pouvoir amener au processus de lavage des doses individuelles des divers produits approvisionnés. Il faut d'autre part maintenir la possibilité de distribuer avec dosage manuel des poudres détergentes.L'invention a en conséquence pour objet un dispositif par lequel on puisse, d'une part, mettre à la disposition du processus de lavage par des moyens très simples des liquides détergents approvisionnés et, d'autre part, continuer à doser manuellement, comme d'usage jusqu'à présent, des poudres ou des liquides détergents.
Ce dispositif est caractérisé par le fait qu'au couvercle de la carrosserie est fixé au moins un réservoir pour détergents liquides comportant, positionné au-dessus d'au moins un compartiment à détergent lorsque le couvercle est relevé, un orifice d'écoulement qui est muni d'un organe manuel d'ouverture et de fermeture. On peut, de la sorte, transférer de façon très simple une dose déterminable par le servant d'un détergent liquide approvisionné dans le réservoir de ce dernier au compartiment à détergent se trouvant sous l'orifice d'écoulement lorsque le couvercle est enlevé. Les avantages de l'invention résident avant tout dans une construction et un service simples.
Etant donné que, pour la manipulation des liquides détergents, le couvercle de la carrosserie est de toute façon relevé, il est avantageux que le réservoir soit remplissable par une ouverture de complément de plein disposée dans la zone du réservoir qui est la plus élevée lorsque ledit couvercle est relevé.
Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le réservoir est fixé de façon amovible au couvercle de la carrosserie. On peut se réserver ainsi la possibilité d'insérer dans un dispositif de logement prévu à cet effet dans le couvercle de la carrosserie des récipients de transport de liquides détergents déjà formés en tant que réservoirs, ou de les échanger contre de tels réservoirs vidés.
L'invention sera mieux comprise à l'aide de la description détaillée d'un mode de réalisation pris comme exemple non limitatif et illustré schématiquement par le dessin annexé.