INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les cellules péritonéales sont mises en suspension à la concentration de 106 cellules par ml dans une solution de Hanks sans rouge de phénol. La chimioluminescence est mesurée par un photomultiplicateur LKB 1250 connecté à un pico-ampèremètre. Pour ce faire, un ml de suspension péri tonéale est mis dans-une cuvette maintenue à 370C dans une enceinte à l'abri de la lumière avec 20 iii de luminol (5 amino-2,3 dihydro 1-4 phthalazinedione, PM 177,2, Sigma) d'une solution-mère à 5 x 10-6M dans du liquide Hanks sans rouge de phénol. Quand l'émission lumineuse est stabilisée, on ajoute soit 100 l de Zymosan (Sigma), soit 10 ng d'acé tate de phorbol myristate.Le Zymosan avait été opsonisé de la façon suivante : 60 mg sont dispersés dans 15 mi de milieu de Hanks sans rouge de phénol additionné de 10 % de sérum de souris. On incube 60 min à 370C, puis on lave trois fois à 400 x g pendant 5 min, et on remet en suspen sion dans 4 ml de solution de Hanks sans sérum. La solu tion est stockée à -2O0C.
* Relation dose-réponse La figure 1 montre les résultats d'une expé rience dans laquelle trois doses de PhA2 ont été injectées par par voie i.p. 30 min avant le prélèvement des cellules par lavage péritonéal : 0,35 U, 0,7 U et 1,4 U par souris. La dose optimum due0,7 U a été utilisée dans les expériences ultérieures.
* Répétition des doses La figure 2 montre les résultats d'uhe expé rience dans laquelle la PhA2 a été injectée au jour O à un certain nombre de souris. L'activité péritonéale est mesurée. Quant elle est revenue à la normale, on a ré injecté la PhA2 et observé une nouvelle augmentation de la réponse.
* Association avec d'autres immunomodulateurs Cinq immunomodulateurs ont été étudiés. Dans les conditions expérimentales, la réponse de trois d'entre eux, le dimycolate de tréhalose (TDM), la bestatine et l'aclacinomycine, a été augmentée par l'injection de PhA2.
Au contraire, la PhA2 n'a pas d'effet sur les cellules péritonéales de souris ayant reçu de faibles doses de LPS.
Les déssins annexés illustrent l'innovation s La figure 1 représente, en vue générale, le dispositif selon l'inventation.
La figure 2 représente, es vue générale avec le couvercle étan- che retiré, le dispositif selon l'invention.
La figure 3 représente, en coupe, le dispositif selon l'invention.
La figure 4 représente l'électrode qui permet au dispositif de détecter des variations de conductibilité électrique La figure 5 représente le cable qui permet au dispositif de stimuler chacune des aiguilles implantées.
La figure 6 représente le module interchangeable du dispositif.
La figure 7 représente une variante du dispositif.
La figure 8 représente le support électro-mécanique couplé au diepo dtii.
La figure 9 représente la boite à compartiments qui renferes les aiguilles utilisées spécifiquement par le dispositif.
La figure 10 représente l'aiguille spécifique au dispositif.
EXPOSE DETAILLE D'UN MODE DE REALISATION : DISPOSITIF ELECTRONIQU COMMANDE PAR MICROPROCESSEUR ET PORTATIF, POUR ADMINISTRER ET PRELEVER DES PRODUITS AINSI QUE DES MICRO-COURANTS, DESTINE AU MILIEU MEDICAL.
Le dispositif électronique portatif pour administrer et prélever des micro-courants représenté sur la figure 1 à l'échelle réclle comporte un carter étanche (1) dont la partie supèrieure (2) pourvue d'un fenè- tre transparente(3) pour voir la progréssion du produit àl'intèrieur de la seringue (4) est amovible pour fixer une seringue Jetable eu rilisable (4)représentée sur la figure se Cette seringue (4) peut porter t - une seule aiguille (5), représentes sur la figura 2, dont la par tie intermédiaire , bonne conductrice de courant élestrique, présente des facettes (6), et dont la partie postèrieure cylindrique (7), égale ment bonne conductrice de courant, est destinée à se fixer, comme le mon tre la figure 3, sur l'extrémité (8) de la seringue (4) au niveau d'un support (9) également boa conducteur électrique, et qui peut renfermer une résistance - ou un bobinage - électrique (1O)o ou un support linéaire - qui peut être également rectangulaire ou circulaire - à cinq aiguilles ou plus (11) représenté sur la figure 1, lorsqu'une mire démontable (12) représentée à la figure 2, est retirée.
ainsi que le représente la figure 3 : Un microprocesser (13), commande, lorsque l'utilisateur appuie sur un déclencheur souple et étanche (14), le fonctionnement : . D'un moteur électrique (15) qui, par l'intermèdiaire de pignons démultiplicateurs (16), anime d'un mouvement alternatif une crémaillè- re coulissante (17).
Dans le premier temps du mouvement alternatif, le noteur (15) fait reculer et pénetrer la crémaillère (17) dans le carter (1) jusqu'à ce que l'aiguille (5) pénètre dans la peau à une profondeur programmée de demi-millimètre en demi-millimètre par une butée mobile (18) réglé par le curseur (15) ( ainsi que le représente la figure 2) ou par une butée fixe contre laquelle vient buter l'extrémité de la tige filetée (20) qui avance ou reculé à l'intèrieur de la crémaillère (17), en fonction du réglage d'une molette (21) située à l'extrémité antèrieure de cette crémaillère (17) ( comme le représente la figure 3 ).
Dans le second temps du mouvement alternatif, le microprocesseur (13) inverse la polarité ou courant administré au moteur (15) qui, en fonctionnant en sens inverse, fait avancer la crémaillèr (117), dont l' etxrémité antèrieure vient repousser la surface cutanée, et retire de ce fait l'aiguille (5).
.D'un second moteur électrique (22) qui actionne par l'inter médiaire de pignons démultiplicateurs (23) une crémaillère (24) qui pousse le piston (25) à l'intèrieur du corps de la seringue (4) lorsqu un sélecteur à deux position " Injection-Prélèvement " (26) est mis sur la position " Injection ", ou attire le piston (25) à l'intèrieur du corps de la seringue (4) lorsque le sélecteur (26), étant mis sur la position " Prélèvement ", inverse la polarité du courant administré au moteur (22) lui, par conséquent, fonctionne en sens inverse.
Un boîtier (2?), dont la parfaite étanchéité est assurée - comme celle du carter ( 1) - par le même système qui usure étanchéité des appareils photographiques le plongée sous marine -, conteau dans la poignée ( 2a) ( qui est représentée sur la figure i ) , renferme s - Le microprocesseur (13) ainsi que le circuit d'une horlage électronique à quarts (29), un circuit électronique sensible à des varia- tions de conductibilité électrique de quelques micro-ampères (30), et un circuit électronique générateur de micro-courants pulsés (31). Lc ensemble étant représenté sur la figure 3.
L'exposé donné ci-dessus décrit des lames de
couteaux selon l'invention. Toutefois, de nombreuses mo-
difications et substitutions peuvent leur être apportées sans sortir du cadre de l'invention. Par exemple, si on le désire, la largeur de la partie raidisseuse 26 ou 126 des lames de couteaux 10 et 110 respectivement peut être
diminuée ou ces parties peuvent être biseautées pour ai-
der les lames à couper la matière en feuille. En outre, si on le désire, l'une ou l'autre des faces de la partie tranchante 24 ou 124 peut être formée parallèlement au
plan de coupe 37 ou 147 respectivement, tandis que l'au-
tre face peut être biseautée pour être sécante à la pre-
mière face de la partie tranchante.
R E V E N D IC AT IONS
1 - Lame de couteau destinée à couper une ma-
chante qui comprend une âme et un revêtement qui recou-
vre une partie de cette âme, ladite âme possédant une première face et une deuxième face qui convergent l'une vers l'autre pour former une arête avant, caractérisée en ce que la première face (36, 142, 236) est exposée au contact de la matière en feuille pendant la coupe et en ce que la deuxième face (25, 140, 225) est revêtue dudit
revêtement (32, 132, 232), de telle manière que le revê-
tement adjacent au bord avant de l'âme définisse au moins partiellement une arête tranchante (40, 146, 240)
de la lame (10, 110, 210) et de manière que le revête-
Sur l'ase de la parabole au foyer, le point F décrit un axe circulaire de centre 0 (12)engendre une couronne tubulaire à section variable dépendante du'tracégéométrique, et de la parabole choisie normale, semi-cubique ou cubique, laauelle matériallsée, détermine l'élément de base de cette invention " LE CAPTEUR CONCENTRATEUR SOLAIRE ".
Cette couronne est bombardée dés le lever du jour par les rayons solaires directs du soleil, ceux réfléchis et concentrés par la surface parabolique circulaire concave du toit, secteur d'environ 240 (voir plan journée solaire).
De par leur essence propre; des rayons restent ravonnants 4 l'axe circulaire au foyer de la couronne et perpendiculaires durant la course diurne du soleil de l'EST à l'OUEST.
Considérant. que la terre est fixe, convention admise tar les spécialistes (pour faciliter les calculs) Vue le soleil se déplace naturellement et immuablement durant le jour, quelle sue soit la saison, été ou hiver, grand soleil, brouillard ou nuages Que ce toit parabolioue -fait partie intégrante de l'invention qu'il capte, réfléchit et concentre les rayons au foyer circulaire du concentrateur. Il permet d'obtenir un résultat punctuel c'est-à dire obtenir des températures élevées du fait même de la mécaniaue céleste simple et gratuite.
Le comportement du soleil durant sa course diurne sur ce toit la variation de la courbe des AZIMUTS et la concentration se font naturellement et en souplesse. Ce phénomène naturel découlant de la mécanique céleste, le soleil se déplacant sur l'élipse de l'axe du monde (23,27 ) ne nécessite pas de mécanisation complexe pour la poursuite, et la focalisation au concentrateur (chaudière) système humain tres onéreux.
L'apprévoisementent et la domestication de ce phénomène céleste grace à ce parabolotde concave, simplifie la caotation et permet d'obtenir des tempe ratures élevées, et benéficier @ prix ransonnables, des bienfaits de l'énergie solaire anti-poluante.
A partir du centre de stockage, tous les problèmes et solutions peuvent être envisagés en couplant les transformations diverses , passées, présentes et d'avenir.; eau chaude, vapeur, froid, traitement des eaux, électricité sous toutes ses applications,séchage industriel etc.
Son entretien, sa maintenance sont simplifiés et ne nécessi tent pas un haut niveau technique tour son contrôle.
DEVELOPPEMENT DE L'INVENTION, CONSTRUCTION. - Création d'une unité CELLULE AUTONOME pouvant être utilisée et adaptée pour pavillon ou maison individuelle.
- Pour un ensemble industriel ou centrale solaire.
Cette unité comprend : Un toit parabolique concaves circulaire (2400) avec tracé géométrique de la - parabole normale (3) - # semi-cubiaue (5) - " cubique (4) et aussi, être de révolution à la tangente sur parabole afin de bénéficier de l'éclairement nocturne, lumière de la lune (piles photovoltaiques).
Ce toit est limité par 2 secteurs 1er secteur : Actif orienté NORD-SUD mesure 2400 environ , durée jour solaire, Solsiste 21 juin.
20 secteur : de 1200 environ, orientation NORD permet une toiture traditionnelle ou contemporaine.
Cotte invention Dar sa forme, la conception et la-fonction orécise et déterminante de ce toit parabolique concave Son étude technique trés poussée a été conçue pour permettre la création et la mise au point d'un concentrateur solaire nouveau et trés différent des capteurs plans.
- Ce toit est constitue par une structure simple réalisé avec des fermettes bois ou métalliques, ou coques en B.A, 3 part-cs (q)(10)(11) modules pour industrialisations pour faciliter ke nontage sur chantier.
- Un chéneau (4) central circulaire encaissé, canalisera et évacuera les eaux pluviales de la toiture.
vrés manuellement par l'opérateur lorsque le processus
de remise en état est exécuté.
Lorsque la pompe 6 fonctionne pour aspirer de l'encre à partir de l'orifice 2 de décharge alors que le tube 17 d'alimentation est ouvert à l'atmosphère,
l'effet de cette forme de réalisation est amélioré.
De plus, cette forme de réalisation peut également être
appliquée efficacement à un appareil dans lequel l'ali-
mentation en encre n'utilise pas une pression négative.
L'introduction d'air peut être effectuée par des moyens de pression données à l'aide d'une valve à trois voies
La figure 26 montre un autre exemple d'un corps principal d'une autre forme de réalisation de
l'appareil selon l'invention. Dans cette forme de réali-
sation, la décharge de l'encre est exécutée par dériva-
tion d'un orifice de décharge présentant une grande résistance à l'écoulement, sans introduction d'air à l'intérieur de l'orifice de décharge, pour exécuter
ainsi un processus de remise en état.
En téférence à la figure 26, un tube 82 de branchement part d'un tube 17 d'alimentation. Une partie raccordée 86, qui peut être raccordée à l'aide d'une coiffe 3A, est formée sur l'extrémité distale du tube 82 de branchement. Une valve 80 à trois voies est placée sur la partie de branchement afin d'aiguiller
l'écoulement de l'encre, à partir du réservoir secon-
Les resultats obtenus sont Les suivants : - D = 14,2, Ni - D = 0,5, Co - X de nickel extrait = 93,4X, - X de cobalt extrait = 33 X, - Facteur de décontamination (D /D ) Ni Co = 28,4 %.
On réextrait ensuite le nickel et le cobalt en mettant en contact un volume de la phase organique avec un volume d'une solution aqueuse d'acide sulfurique 2N dans les mêmes conditions que celles de l'exemple 2.
Les résultats obtenus sont les suivants - D = 0,523, Ni - D = 0,077, Co - X de nickel réextrait = 65,62, - X de cobalt réextrait = 92,8X.
EXEMPLE 9 : Separation nickel-cob~lt On répète le mode opératoire de l'exemple 8 en utilisant la même solution aqueuse de de part et la même phase organique pour extraire le nickel et le cobalt.
On réalise ensuite la réextraction du nickel et du cobalt en utilisant une solution aqueuse d'acide nitrique 2N au lieu de la solution aqueuse d'acide sulfurique 2N. Les résultats obtenus sont Les suivants - D = 14,8, Ni - D = 0,25, Co - X de nickel réextrait = 6Z, - X de cobalt réextrait = 80X.
EXEMPLE~lo : Separation nickel-cobalt On répète le mode opératoire de l'exemple 5 mais en utilisant pour la réextraction une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2N au lieu de la solution d'acide sulfurique.
Les résultats obtenus sont Les suivants : - D = 3,4, Ni - D = 0,26, Co - X de nickel réextrait = 22X, - X de cobalt réextrait = 79X.
Si l'on compare les résultats des exemples 8, 9 et 10, on constate que lorsqu'on utilise comme ligand le TPTZ, il est préférable de réaliser la réextraction au moyen d'une solution d'acide sulfurique.
Dans les exemples 1 à 10, on a effectué des dosages du ligand (Bipy ou TPTZ) en solution aqueuse lors du stade d'extraction et éventuellement lors du stade de réextraction. On a ainsi constaté qu'il n'existe pas de ligand libre en quantité décelable dans la phase aqueuse.
EXEMPLE Il : Extraction du rhodium Dans cet exemple, on extrait le rhodium à partir d'une solution aqueuse nitrique 0,1N en utilisant le second mode de mise en oeuvre du procédé, c'est-å-dire la formation préalable du complexe en phase aqueuse.
Dans ce but, on ajoute à la solution aqueuse nitrique -I 0,1N qui contient 0,0005 mol.l de rhodium sous forme de nitrate, une quantité de bipyridine telle que l'on obtient un concentration en bipyridine de la phase aqueuse de 0,0015 mol.l et on laisse réagir pendant 24 heures à 600C. Après cette opération, on met en contact un volume de la phase aqueuse ainsi obtenue avec un volume d'une phase organique contenant 0,3 -1 mol.l d'acide dinonylsulfonaphtaléne. Après 2 minutes de mise en contact sous agitation forte à la température ambiante, on laisse décanter les deux phases et on détermine leurs concentrations respectives en rhodium.On obtient ainsi le cofficient de distribution du rhodium, c'est-à-dire le rapport de sa concentration en phase organique sur sa concentration en phase aqueuse.
On répète ces opérations en utilisant comme solution aqueuse de départ des solutions nitriques dont les concentrations -1 en acide nitrique varient de 0,1 à 2 mol.l Les resultats obtenus avec ces différentes solutions sont donnés sur la figure 5 (courbe 11) qui représente les variations du coefficient de distribution D du rhodium en Rh -1 fonction de la concentratioon en acide nitrique (en mol.l ) de la phase aqueuse.
EXEMPLE 12 : Extraction du rh odium On répète le mode opératoire de l'exemple 11 mais en utilisant de l'orthophénanthroline (Ophe) au lieu de la bipyridine.
Les résultats obtenus sont donnés sur la figure 5 (courbe 12) qui représente les variations du coefficient de distribution D du rhodium en fonction de la concentration en Rh acide nitrique de la solution aqueuse de départ.
EXEMPLE 13 : Extraction du rhodium On répète le mode opératoire de l'exemple 11 mais en utilisant le TPTZ au lieu de la bipyridine.
Les résultats obtenus sont donnés sur la courbe 13 de la figure 5 qui illustre les variations de D en fonction de Rh l'acidité nitrique de la solution aqueuse de départ.
Comme enzymes de restriction, on a utilisé EcoRi, BamHI, HindIII, SalI, XhoI et XbaI (chacune fabriquée et vendue par Nippon Gene Co., Ltd, Japon) et PstI (fabriquée et vendue par Bethesda Research Laboratories, EUA). Chacune des enzymes de restriction a été utilisée en une quantité de 10 unités. Les digestions ont été entreprises en utilisant les enzymes de restriction seules et en combinaison . Les produits de digestion ainsi obtenus ont été soumis à une électrophorèse sur gel agarose à 1% (poids/ volume) et une électrophorèse sur gel de polyacrylamide à 4% (poids/volume) selon la méthode de Maniatis et autres tT. Maniatis, E.F. Fritsch, J. Sambrook; Molecular (:loning A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor laboratory, Cold Spring Harbor New York pages 150-185, 1982i .Après accomplissement de l'électrophorèse, le gel a été immergé dans une solution de bromure d'éthidium contenant -1 ug/mt de bromure d'éthidium pendant 30 minutes pour teinter le gel. Alors, le gel a été irradié d'une lumière ultraviolette pour déterminer le nombre de bandes correspondant au nombre de fragments d'ADN obtenus. Les longueurs moléculaires respectives des fragments d'ADN ont été déterminées par la comparaison des distances respectives de migration des fragments dans une électrophorèse à celles de fragments d'ADN ayant respectivement des longueurs moléculaires connues. La longueur moléculaire du plasmide pAG401 a été calculée en ajoutant les longueurs moléculaires des fragments respectifs d'ADN.
Par ailleurs, en se basant sur les résultats obtenus dans l'analyse ci-dessus, on a déterminé les sites de clivage par endonucléase de restriction du plasmide pAG401.
Les longueurs moléculaires respectives des fragments d'ADN ont été déterminées par la comparaison des distances respectives de migration des fragments dans une électrophorèse à celles des fragments d'ADN ayant respectivement des longueurs moléculaires connues. Dans ladétermination des longueurs moléculaires de 1,0 kb ou plus, on a employé une électrophorèse sur gel agarose à 1% (poids/volume) et dans la détermination de celles d'environ 0,1 kb à moins de 1,0 kb, on a employé une électrophorèse sur gel de polyacrylamide à 4% (poids/volume).Comme fragment d'ADN ayant une longueur moléculaire connue, on a utilisé des fragments d'ADN obtenus par digestion par HindIII d'un ADN X phagique (fabriqué et vendu par Nippon Gene Co., Ltd., Japon) dans le cas de l'électrophorèse sur gel agarose et des fragments d'ADN obtenus par digestion par HaeIII de l'ADN X174 phagique (fabriqué et vendu par Bethesda Research Laboratories, EUA) dans le cas de l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide.
Par suite, on a trouvé que le plasmide pAG401 avait une structure illustrée par la carte de scission par endonucléase de restriction montrée à la figure 1. Le plasmide pAG401 se composait d'un ADN de vecteur obtenu par insertion d'un linker XbaI au plasmide pBR325 à son site EcoRI et, inséré à son site XbaI,d'un fragment XbaI étranger contenant un gène produisant CS ayant une longueur moléculaire d'environ 4,9 kb. Le fragment XbaI est un fragment d'ADN contenant un gène codant pour CS dérivé de Corynebacterium melassecola 801 (déposé au FRI sous le numéro d'accession FERM BP-558).
Les cellules de la souche W620 de E. coli K12 ont été transformées par 1'ADN du plasmide pAG401 ci-dessus obtenu sensiblement de la même manière qu'à l'étape 2 de l'Exemple 1 à l'exception que l'on a utilisé 1'ADN du plasmide pAG401 au lieu de pBR325 pour obtenir des transformants. Les transformants résultants ont été examinés en ce qui concerne la résistance aux médicaments et l'auxotrophie. Tous les transformants examinés se sont révélés être résistants à la tétracycline et à l'ampicilline, ne nécessitant pas d'acide glutamique Par ailleurs, la carte de clivage par l'endonucléase de restriction du plasmide retenu dans le transformant s'est révélée être la même que celle du plasmide employé dans la transformation ci-dessus.
Etape 7 (Isolement d'un fragment d'ADN contenant un gène codant pour CS et ayant une longueur moléculaire d'environ 4,9 kb) A 20 jig de 1'ADN du plasmide pAG401 obtenu à l'étape 6 de l'Exemple 1, on a ajouté 60 unités de l'enzyme de restriction XbaI. On a laissé le mélange résultant réagir dans 100 pt d'un tampon contenant Tris-HCl 50 mM (pH 7,4), MgSO4 10 mM et NaCl 100 mM à 37 C pendant 2 heures. Le plasmide digéré a été soumis à une électrophorèse en utilisant un gel agarose à 1% sensiblement de la même manière qu'à l'étape 6 de l'Exemple 1, à l'exception que l'on a utilisé un gel agarose à 1% préparé à partir d'agarose LMP (dénomination commerciale d'un produit fabriqué et vendu par Bethesda Research Laboratories, EUA), et que l'électrophorèse a été effectuée à 4 C. Le gel agarose a été teinté de bromure d'éthidium et exposé à un rayonnement UV de manière à observer visuellement un fragment d'ADN contenant un gène codant pour CS et ayant une longueur moléculaire d'environ 4,9 kb. Une portion du gel où l'on a trouvé un tel fragment d'ADN a été découpée.Au gel découpé, on a ajouté un tampon TE en une quantité égale à trois fois le poids du gel, et on a chauffé à 65 C pendant 10 minutes pour dissoudre complètement le gel agarose dans le tampon. A la solution résultante, on a ajouté un volume égal de phénol et on a soumis à agitation, avec ensuite récupération d'une phase aqueuse. A la phase aqueuse on a ajouté un volume égal d'un mélange à 1:1 (volume/volume) de phénol et de chloroforme et on a soumis à agitation, avec ensuite récupération d'une phase aqueuse. A la phase aqueuse,on a ajouté un volume égal de chloroforme et on a soumis à agitation, avec ensuite récupération d'une phase aqueuse. A la phase aqueuse,on a ajouté de l'acétate de sodium jusqu'à une concentration finale de 300 mM puis un volume double d'éthanol, et on a soumis à agitation.Alors, le mélange a été maintenu au repos à -30 C pendant 3 heures et soumis à centrifugation à 10.000 t/mn (9.000 g) à température ambiante pendant 10 minutes pour obtenir une boulette d'ADN. La boulette ainsi obtenue d'ADN a été séchée sous vide puis dissoute dans 20 ,ut d'un tampon TE.
On a ainsi obtenu une solution contenant environ 3 d'un fragment d'ADN contenant un gène codant pour CS et ayant une longueur moléculaire d'environ 4,9 kb.
EXEMPLE 2 Dans cet exemple, on a utilisé Corynebacterium melassecola 801 (FERM BP-558) comme donneur d'ADN pour effectuer le clonage d'un gène codant pour AH (aconitate hydratase). Le gène codant pour AH a été cloné en utilisant le système hôte-vecteur où l'on a utilisé Bacillus subtilis comme hôte et le plasmide pUB110 comme vecteur.
Bacillus subtilis 168 NO 60871 a été obtenu du Docteur E. Freese du National Institute of Health, EUA. Bacillus subtilis 168 Milî3 a eté obtenu du Professeur Shuichi Aiba, Faculty of Engineering, Osaka University ìmanaka et autres, J. Bacteriol., 146, 1091-1097, (1981)3 Etape 1 (Mise en culture d'un hôte déficient en AH et capacité de restriction) (1) Préparation d'un ADN chromosomique à partir d'une souche déficiente en AH.
Bacillus subtilis 168 NO 60871 a été inoculé dans 100 m t d'un bouillon L (contenant 10 g/Q de polypeptone, 5 9/2 d'extrait de levure et 10 9/t de NaC1, et ajusté à pH 7,2) et mis en culture à 37 C pendant une nuit tout en secouant pour ainsi obtenir une culture du microorganisme.