INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Comme cela est apparent sur la figure 3, le plasmide pAG103 comprend le plasmide pBR325 et, inséré à son site de EcoRI, un fragment d'ADN contenant un gène codant pour la glutamate déshydrogénase (que l'on appelera souvent ci-après "GDH") et ayant une longueur moléculaire d'environ 5,4 kb, lequel fragment d'ADN est dérivé de Corynebacterium melassecola 801 (FERM BP-558). Le fragment d'ADN contenant un gène codant pour GDH contenait un site XbaI. Le plasmide pAG103 a été préparé comme suit.
Etape 1. (Préparation du plasmide pAG103) (1) Extraction de 1'ADN de Corynebacterium melassecola 801 (FERM BP-558) et sa scission3 On a répété sensiblement les mimes processus qu'à l'étape 1 de exemple 1 pour obtenir une solution d'ADN contenant 1'ADN de Corynebacterium melassecola 801.
L'ADN dans la solution d'ADN a été scindé comme suit. On a aJouté 160 unités de l'enzyme de restriction EcoRI (fabriquée et vendue par Nippon Gene Co., Ltd., Japon) à 34 g de l'ADN, et l'on a mélangé le mélange résultant avec 67 l d'un tampon contenant Tris-HCl 50 mM (pH7,4), MgS04 10 mM et NaCl 100 mM et l'on a laissé reposer à 370C pendant 30 minutes de façon que la réaction se passe. Alors, le mélange réactionnel a été chauffé à 700C pendant 10 minutes pour arreter la réaction.
(2) (Préparation du plasmide pBR325 et sa scission).
La souche PA340 de Escherichia coli K12 qui est une souche déficiente en GDH et glutamate synthase et nécessite de l'acide glutamique pour sa croissance a été inoculée dans 50 ml d'un bouillon L (contenant 10 g/l de polypetone, 5 g/l d'extrait de levure, 5 g/l de NaCl et ayant un pH de 7,2) et mise en culture à 370C jusqu'à ce que la concentration en cellules atteigne 5 x 108 cellules/ml. Les cellules ont été recueillies de la culture par centrifugation à 20C. Les cellules ont été mises en suspension dans 50 ml de MgCl2 100 mM tout en refroidissant avec de la glace. De la suspension, les cellules ont été recueillies et mises en suspension dans 25 ml de CaCl2 100 mM tout en refroidissant avec de la glace. On a laissé la suspension ainsi obtenue reposer dans la glace pendant 30 minutes.De la suspension, les cellules ont été recueillies et mises en suspension dans 5 ml de CaCl2 100 mM tout en refroidissant avec de la glace. On a laissé la suspension ainsi obtenue reposer dans la glace pendant 1 heure. A 200 pl de la suspension, on a ajouté O,lzg d'ADN de pBR325 (fabriqué et vendu par Bethesda Research Laboratories, E.U.A.) et on a laissé le mélange résultant reposer dans la glace pendant 1 heure.
Subséquemment, on a laissé le mélange reposer à 420C pendant 2 minutes puis on y a ajouté 5 ml d'un bouillon L. Le mélange résultant a été incubé stationnairement à 370C pendant 90 minutes. Alors, le mélange a été dilué avec de l'eau stérile et étendu sur un milieu d'agar L (milieu obtenu en ajoutant 15 g d'agar à un bouillon L de façon que le volume total soit de 1 litre) contenant 10 ug/ml de tétracycline, avec ensuite incubation pendant une nuit à 370C pour obtenir Escherichia coli transformé par le plasmide pBR325.
Escherichia coli K12 PA340 transformé par le plasmide pBR325 a été inoculé dans 100 ml d'un bouillon L contenant 10 wug/ml de tétracycline et on a mis en culture pendant une nuit à 37 C.
Du mélange, des cellules ont été recueillies par centrifugation et lavées avec un tampon TE. Les cellules ont été mises en suspension dans 2 ml d'une solution aqueuse consistant en 15% (poids/volume) de saccharose, Tris-HCl 50 mM (pH8,5) EDTA 50 mM et 2 mg/ml de lysozyme (fabriqué et vendu par Sigma Chemical Company, E.U.A.) et on laissé reposer à température ambiante pendant 30 minutes. A la suspension résultante, on a ajouté 2 ml d'une solution de Triton t0,1% (poids/volume) de Triton X-100 fabriqué par Rohm & Haas Co., E.U.A. et vendu par Wako Pure Chemical Industries Ltd., Japon), Tris-HCl 50 mM (pH 8,5) et EDTA 50 mMet on a laissé reposer à 370C pendant 30 minutes. La solution ainsi obtenue a été soumise à centrifugation à 30000 t/mn (64000 g) à 50C pendant 1 heure pour obtenir un produit surnageant.Au produit surnageant on a ajouté un tampon TE en une quantité telle que le mélange résultant ait un volume de 18 ml. On a doucement dissous 1,2 ml d'une solution aqueuse à 10 mg/ml de bromure d'éthidium et 18,64 g de chlorure de césium, dans le mélange obtenu ci-dessus, avec ensuite centrifugation à 40000 t/mn (100000 g) à 150C pendant 48 heures. Après accomplissement de la centrifugation, deux bandes ont été visualisées sous lumière ultraviolette. La bande inférieure a été prélevée du tube de centrifugeuse à travers le côté du tube en utilisant une seringue pour obtenir une fraction du plasmide pBR325. La fraction ainsi obtenue a été soumise quatre fois à une extraction avec un volume égal d'alcool isopropylique pour obtenir un extrait.De l'extrait, le bromure d'éthidium a été retiré et la solution résultante a été dialysée avec le tampon TE pour obtenir 1 ml d'un dialysat contenant le plasmide pBR325 qui avait une concentration en ADN de 130 pg/ml.
A une aliquote de dialysat contenant 17 pg de l'ADN du plasmide pBR325 obtenu, on a ajouté 40 unités de l'enzyme de restriction EcoRI. Le résultat a été ajouté à 150 p1 d'une solution tampon contenant Tris-HCl 50 mM (pH7,4), MgS04 10 mM et NaCl 100 mM, avec ensuite incubation à 370C pendant 2 heures pour avancer une réaction.
Ensuite, le mélange a été chauffé à 700C pendant 10 minutes pour arreter la réaction. Au mélange réactionnel, on a ajouté de l'acétate de sodium en une quantité telle que le mélange résultant contienne de l'acétate de sodium à une concentration de 300 millimoles. Au mélange on a ajouté un volume double d'éthanol et on a laissé le mélange obtenu reposer à -300C pendant 3 heures. Alors, le mélange a eté soumis à centrifugation à 12000 t/mn (8900 g) à température ambiante pendant 10 minutes-pour obtenir un produit surnageant et des précipités. Les précipités ont été recueillis et séchés sous pression réduite. Les précipités ainsi obtenus ont été dissous dans 200 pl drun tampon BAPT (Tris-HCl 50 mM, pH8,4).A la solution ainsi obtenue on a ajouté une unité de phosphatase alcaline bactérienne (fabriquée et vendue par Takara Shuzo Co., Ltd., Japon) avec ensuite incubation à 650C pendant 30 minutes. Alors, on a ajouté une unité de phosphatase alcaline bactérienne à la solution, avec ensuite incubation à 650C pendant 30 minutes. Ensuite, on a ajouté à la solution un volume égal de phénol saturé de tampon TNE, avec ensuite mélange. Le mélange résultant a été soumis à une centrifugation à 12000 t/mn (8900 g) à température ambiante pendant 10 minutes et on a récupéré une phase aqueuse. A la phase aqueuse ainsi obtenue, on a ajouté un volume égal de phénol saturé de tampon TNE, avec ensuite mélange.Le mélange résultant a été soumis à une centrifugation à 12000 t/mn (8900 g) à la température ambiante pendant 10 minutes et l'on a récupéré une phase aqueuse. Alors, on a ajouté un volume égal d'un mélange de phénol-chloroforme (1:1, volume/volume) à la phase aqueuse, avec ensuite mélange. Le mélange résultant a été soumis à centrifugation à 12000 t/mn (8900 g) à température ambiante pendant 10 minutes et l'on a récupéré une phase aqueuse. Alors, un volume égal de chloroforme a été ajouté à la phase aqueuse tout en agitant, et on a soumis à centrifugation à 12000 t/mn (8900 g) à température ambiante pendant 10 minutes pour récupérer une phase aqueuse.A la phase aqueuse ainsi obtenue, on a ajouté de l'acétate de sodium en une quantité telle que le mélange résultant contienne de l'acétate de sodium une concentration de 300 millimoles et deux fois le volume d'éthanol tout en agitant. On a laissé le mélange résultant reposer à -300C pendant 3 heures. Subsequemment, le mélange a été soumis à centrifugation à 12000 t/mn (8900 g) à température ambiante pendant 10 minutes pour obtenir des précipités d'ADN. Les précipités d'ADN ont été séchés sous pression réduite et dissous dans 23 pl d'une solution de tampon TE.
(3) (Recombinaison de l'ADN) 2,4 pg de l'ADN obtenu à l'étape 1-(1) de l'exemple 2 et 1,4 > ig de l'ADN obtenu à l'étape 1-(2) de l'exemple 2 et 3 unités d'ADN ligase T4 phage (fabriquée et vendu par Nippon Gene Co., Ltd., Japon) ont été ajoutés à 100 jil dtun tampon contenant 50 mx de Tris-HCl (pH7,4), 10 mx de MgC12, 10 mM de dithiothréitol, 1 mM de spermidine, 1 mM de ATP et 0,1 mg/ml de BSA (albumine de sérum bovin) (fabriquée et vendue par Bethesda Research Laboratories, E.U.A.). On a laissé le mélange résultant reposer pour avancer une réaction à 150C pendant une nuit. Le mélange réactionnel ainsi obtenu a été chauffé à 700C pendant 10 minutes pour arrêter la réaction.
si elles sont simplement touchées du bout des doigts.
Le capuchon mobile vers le haut et vers le bas 34 est construit comme le montrent les figures et 6. Le capuchon 34 est assemblé à un châssis solide 43 en tant que support et il est prévu pour exécuter un mouvement vers le haut et vers le bas au moyen d'un dispositif de commande non illustré et il peut se déplacer vers une position dans laquelle il recouvre le BJA 33 et une position dans laquelle il est séparé complètement -vers le bas du BJA 33 comme
le montre la figure 3.
Des éléments d'absorption d'encre 44-47 couvrant les éléments de tête respectifs 1 des BJU
-38 sont contenus dans le capuchon 34.
Les éléments d'absorption d'encre 44-47 sont contenus dans des châssis de support 50 fixés à des bras 49 supportés de manière pivotante sur le
châssis 43 au moyen d'un arbre 48 et une plaque d'étran-
glement 51 est disposée en dessous de chaque élément d'absorption d'encre 44-47 et il est supporté de manière pivotante sur l'extrémité d'un autre bras 52 au moyen
d'une broche 52a.
Les bras 49 et 52 sont supportés de manière pivotante sur l'extrémité d'un bras 53 s'étendant vers
le bas depuis l'arbre 48 au moyen d'un arbre 54.
Les bras 49 et 52 sont prévus de manière à pouvoir pivoter dans le sens longitudinal du châssis
de support 50.
Une butée 55 est prévue sur le côté de châssis 43 dans une position opposée à la partie courbée
du bras 52 supportant la plaque d'étranglement 51.
Par ailleurs, comme le montrent les dessins,
dites surfaces étant au contraire réalisées en une seule opération lors de la fabrication du support de roues En outre les caractéristiques de vibration du support de roues doivent être améliorées en ce qui concerne la rigidité statique et dynamique de manière à augmenter ainsi la capacité de production des scies à rubans ainsi que la durée de
service des rubans de scie utilisés.
Ce problème est résolu, à partir d'une scie à ruban du type défini cidessus, conformément à l'invention en ce que le support de roues est agencé essentiellement sous forme d'une pièce moulée en béton-polymère et en ce que les parties servant à former les paliers des roues, à la fixation des guides du ruban de scie, au montage de l'entraînement de ruban et du dispositif de tension de ruban et à l'articulation des moyens d'entraînement du support de roues et par conséquent du ruban de scie par rapport à une pièce sont constituées par des pièces métalliques ou des
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pièces en matière plastique incorporées au moulage dans
le support de roues.
Grâce à l'agencement du support de roues conforme à l'invention, celui-ci peut être fabriqué en une seule opération suivant laquelle le bétonpolymère-est
coulé dans un moule correspondant dans lequel ont été dispo-
sées au préalable les surfaces fonctionnelles ou les parties fonctionnnelles Le béton-polymère établit avec ces parties
fonctionnelles une liaison extrêmement intime qui est large-
ment suffisante pour absorber les forces exercées A cet
égard, il est d'une importance particulière que le béton-
polymère ait un degré de retrait particulièrement faible de façon-à pouvoir obtenir une tenue des cotes dans une plage de 0,1 mm, qui est suffisante dans le cas considéré pour rendre superflu un usinage ultérieur jusqu'aux cotes nécessaires. En outre, comme cela a été démontré, un support de roues en béton-polymère possède un effet d'amortissement bien supérieur à celui de structures en fonte grise ou soudée, de sorte qu'on obtient une amélioration importante des propriétés de vibration et de bruit de la scie à ruban
équipée d'un support de roues conforme à l'invention.
En outre, on peut se passer complètement d'un laquage de la structure inoxydable et résistant à un haut degré à des agents de refroidissement et de lubrification, auquel cas on peut tenir compte de souhaits de coloration de la structure, d'une manière simple, par addition de pigments. En ce qui concerne les parties fonctionnelles
indiquées ci-dessus, on fait rentrer dans celles-ci évidem-
Plus précisément un tronçon 121S de petit diamètre est formé à l'extrémité de l'arbre i21 et, en outre, un tron-
son plat 121f et une gorge circonférentielle 121g sont formés
On se réfère maintenant aux figures 1, 7 et 8 qui indiquent que le dispositif 49 de protection de la lame, qui recouvre la p&rtie exposée de la lame 25 entre le tronçon 13 de boîtier qui loge la roue menée 23 et le bras mobile 33 de guidage, est disposé de manière qu'il puisse se déplacer télescopiquement, en fonction du déplacement du bras mobile
Le bras principal 1 est manoeuvré dans sa rotation autour de son extrémité inférieure par le verin hydraulique 6 qui prend appui sur l'équerre 7 solidaire du chassis 3.
La benne amovible 8, qui présente la forme classique parallélépipédigue munie du haillon arrière basculant 9, est donc suspendue au fléau 5 au moyen des chaines et élingues 10 accrochées de façon amovible à ses quatre angles.
Le dispositif étant ainsi constitué, on comprend, selon les figures I et 2, que la simple manoeuvre des verins latéraux 6 qui agissent sur les bras 1 provoque la rotation des parallélogrammes déformables constitués par les bras I et 2 et les fleaux 5, ce qui provoquera le deplacement toujours obligatoirement horizontal de la benne 8 qui s'élèvera au-dessus du plateau du véhicule 4 et sera ainsi transportée hors de ce dernier jusqu'à être posée sur le sol (fig. 2). Et, après que les élingues 10 auront été détachées, elle sera abandonnée en vue de son chargement en vrac, liberant ainsi le véhicule 4 qui pourra ainsi effectuer une même opération avec une autre benne sur un autre chantier.
Le chargement sur le vehicule 4 de la benne remplie s'effectuera avec la même facilité de la manière inverse.
Les élingues 10 ayant eté replacées sur la benne 8 qui est sur le sol, la manoeuvre inverse des verins latéraux 6 suffira en effet pour élever la benne et la replacer sur le plateau du véhicule dans un mouvement toujours horizontal si même le chargement qu'elle contient présente des défauts même notables d'équilibre des charges.
Au cours de la manoeuvre de la benne 8 le chassis 3 est stabilise au moyen des pieds de biche articulés 11 manoeuvres par les vérins 12.
Si le maintien horizontal de la benne au cours de ses manoeuvres permet de pallier les mauvaises répartitions des charges par rapport au plan médian transversal de ladite benne, il ne permet pas de pallier les mauvaises répartitions des charges par rapport au plan longitudinal qui peuvent provoquer le gauchissement de l'ensemble du systeme.
C'est pour cela que, selon l'invention, les deux axes de rotation, haut et bas, du bras principal 1 sont reliés ensemble de part et d'autre du véhicule par une entretoise tubulaire qui, tranvaillant à la torsion, s'oppose au gauchissement du cadre rigide ainsi formé par lesdites entretoises et les bras 1 situés de part et d'autre du véhicule.
De même, les articulations supérieures des bras 2 situés aussi de part et d'autre du véhicule sont aussi reliées entre elles par un entretoise de manière à les solidariser.
En outre, selon la figure 3, on constate qu'un tel dispositif n'empêche pas le déchargement de la benne selon la méthode connue de son basculement qui provoque l'ouverture automatique de son haillon arrière basculant 9 sous la poussée du matériau contenu dans la benne.
En effet, il suffit de detacher seulement les elingues 10 arrières pour que la benne 8, qui n'est plus sollicitee par le fléau 5 qu'au niveau de ses elingues 10 avant soit entraidée à basculer autour de son point d'articulation arrière 15 lors de la manoeuvre des bras 1, ce qui conserve à ce dispositif l'avantage des bennes connues non amovibles, avantage que n'ont pas les bennes amovibles trapézoidales jusqu'à présent utilises.
Afin de faciliter les différentes manoeuvres de la benne et en particulier sa mise en place sur le plateau du véhicule aussi bien que son basculement arrière, et afin de rendre ces opérations quasiment automatiques en supprimant toute intervention humaine, le plateau du véhicule est équipé (selon les figures 3 et 4) de la butée avant 14 contre laquelle vient se situer la benne 8 lorsqu'elle est posee sur le plateau, le tourillon 15 dont est munie la base de chacun de ses montants arrière 16 venant alors se loger spontané- ment dans chacun des berceaux 17 en forme de V qui assure la retenue de la benne en position et joue le rôle de palier lors de son basculement arrière, qui s'opère donc autour desdits tourillons 15.Chacun des berceaux 17 situés de part et d'autre du chassis 3 est prolongé à l'arrière par la glissière incline 18 qui assure le guidage du tourrillon 15 vers le berceau 17 dans le cas où, par suite de la position inclinée du véhicule, donc de son chassis, par rapport a l'horizontale, ce tourillon 15 ne se présenterait pas à l'aplomb exact du V dudit berceau.
Cette double possibilité de pouvoir manoeuvrer la benne selon une position horizontale, constante, quelle que soit la répartition de la charge, et, en même temps, de la vider de son contenu par son simple basculement autour de son arête inférieure arrière permet d'envisager l'utilisation d'un tel dispositif pour des travaux qui ne pourraient pas être accomplis avec des bennes amovibles du type trapézoïdal connu.
C'est ainsi que dans les entreprises de maçonnerie elles-même, alors que les bennes amovibles trapézoïdales ne peuvent être utilises que pour le transport hors des chantiers des décombres de demolition, un véhicule equipe du dispositif objet de l'invention peut être utilisé pour l'approvisionnement de plusieurs chantiers en toutes sortes de materiaux. S'il s'agit en effet de sable ou de gravier, le chargement sera deversé sur le sol par simple basculement de la benne sans qu'elle quitte le véhicule porteur.S'il s'agit de tout autre matériau, c'est la benne elle-même qui peut être posée sur le sol, le véhicule etant alors utilisé pour prendre une benne vide sur ce chantier ou sur un autre précédemment approvisionné de la même manière en vue d'effectuer un autre transport au profit d'un troisième chantier pendant le déchargement du second.
Le dispositif objet de l'invention peut aussi être avantageusement utilisé pour le transport des ordures municipales, la benne pouvant, dans ce cas, comporter un couvercle et son déchargement pouvant ainsi s' adapter aux conditions de reception du centre de traitement des déchets de voierie.
Il peut aussi être utilisé pour le transport des déchets d'abattoir, la benne étant posee au sol pour recevoir les dechets au fur et à mesure de leur extraction, sans que le vehicule porteur soit immobilise pour autant.
Lorsque la scie 24 à ruban sans fin est commandée de la manière décrite ci-dessus, la partie du brin tranchant de cette scie 24 comprise entre le point de tangence CP' auquel elle touche la courbe imaginaire CS', et un point P auquel ledit brin tranchant de la scie 24 est tangentiel à la courbe imaginaire précédente CS' (surface tronçonnée de la matière W) à l'une des extrémités opposées de la course du mouvement dudit point de tangence CP', est utilisée dans la pratique en tant que zone de coupe 24a. Cette zone de
coupe 24a de la scie 24 à ruban sans fin sectionne en cour-
be la matière W dans chaque région curviligne délimitée par les courbes imaginaires avoisinantes CS', jusqu'à ce qu'elle passe par le point B de ladite matière W opposé au point A, ce qui achève le sectionnement complet de ladite matière W. La longueur de la zone de coupe 24a de la scie sans fin 24 (c'est-à-dire une longueur de coupe La) présente une valeur fixe étant donné que le brin tranchant de la scie 24 se meut tangentiellement par rapport à la courbe imaginaire CS'. De surcroît,
étant donné que le point de tangence CP' se meut alterna-
tivement à vitesse égale en suivant la courbe imaginaire CS', la vitesse à laquelle la zone de coupe 24a de la scie sans fin 24 sectionne en courbe la matière W (cette vitesse étant qualifiée ci-après de "vitesse de coupe curviligne") accuse
une valeur fixe. La longueur de coupe La peut être sélec-
tionnée à n'importe quelle valeur souhaitée en faisant varier la profondeur s de la coupe progressant verticalement,
si le rayon de courbure de l'une quelconque des courbes ima-
ginaires avoisinantes CS' est fixe, ce qui est obtenu à l'une quelconque des extrémités el et e2 de la course du basculement du support 9 de la scie, de manière à faire
varier l'intervalle séparant les courbes imaginaires avoisi-
nantes CS'. De plus, la vitesse de coupe curviligne peut,elle aussi,être choisie à n'importe quelle valeur souhaitée en commandant le débit des fluides hydrauliques devant être délivrés respectivement aux vérins 46a et 46b, de façon à
faire varier la vitesse d'inclinaison du mouvement de bascule-
ment à décalage tangentiel effectué par le support 9 de la scie à ruban. En conséquence, il est avantageux de choisir individuellement ou conjointement la longueur de coupe La et
la vitesse de coupe curviligne à une valeur maximale admis-
sible, en fonction de la matière W devant être sectionnée et/ou de la résistance mécanique de la scie 24 à ruban
sans fin utilisée dans la machine.
1,8 pg de l'échantillon III d'ADN obtenu à l'étape 1 de l'exemple 2 et 1,5 pg de 1'ADN obtenu à l'étape 2 de l'exemple 2 et 3 unités d'ADN ligase T4 phage (fabriqué et vendu par Nippon Gene Co., Ltd., Japon) ont été ajoutés à 100 P1 d'un tampon contenant 50 mM de Tris-HCl (pH7,4), 10 mM de MgCl2, 10 mM de dithiothréitol, 1 mM de spermidine, 1 mM de ATP et 0,1 mg/ml de BSA (albumine de sérum de bovin) (fabriqué et vendu par Bethesda Research Laboratories, E.U.A.). On a laissé le mélange résultant reposer pour avancer une réaction à 150C pendant une nuit. Le mélange réactionnel ainsi obtenu a été chauffé à 70DC pendant 10minutes pour arrenter la réaction.
Etape 4. (Transfert du plasmide recombinant dans Escherichia coli).
Une suspension de cellules compétentes de la souche 342-167 de Escherichia coli K12 a été préparée sensiblement de la même manière qu'à l'étape 2 de l'exemple 1. On a répété sensiblement les mêmes processus qu'à l'étape 4 de l'exemple 1 à l'exception que l'on a utilisé, comme milieu de culture, un milieu d'agar de synthèse contenant 10 pg/ml de tétracycline.
Etape 5. Sélection et isolement de E. coli ayant un gène codant pour PEPC dérivé d'un micro-organisme Corynebacterium melassecola 801 (FERM BP-558,1 Les cellules obtenues à l'étape 4 de l'exemple 2 ont été mises en culture séparément sur le milieu d'agar de synthèse ci-dessus mentionné contenant de l'ampicilline (30 pg/ml) et de la tétracycline (10 pg/ml) et sur le milieu d'agar de synthèse ci-dessus mentionné contenant de la tétracycline (10 pg/ml) seule. Les cellules qui ne croissaient pas sur le milieu d'agar de synthèse contenant l'ampicilline et la tétracycline mais croissaient sur le milieu d'agar de synthèse contenant la tétracycline ont été choisies et isolées.Les cellules ainsi isolées étaient sensibles à l'ampicilline mais résistantes à la tétracycline, ne nécessitant pas d'acide glutamique dans le milieu. Les cellules ainsi isolées ont été désignées par la souche 342-167 de Escherichia coli K12 (pAG204) qui avait le gène souhaité codant pour PEPC.
E. coli isolé a été mis en culture pour cloner le gène codant pour PEPC.
L'activité de PEPC de E. coli isolé a été déterminée de la même manière qu'à l'étape 5 de l'exemple 1 pour confirmer que le gène cloné était un gène codant pour PEPC.
Les résultats sont montrés au tableau 3 donné ci-dessous.
Comme cela est apparent par les résultats montrés au tableau 3, la souche 342-167 de Escherichia coli K12 (pAG204) avait une activité spécifique de PEPC extrêmement élevée.