INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le plasmide obtenu a été désigné par pAG4002. La carte de clivage par endonucléase de restriction du plasmide pAG4002 est montrée à la figure 11. Comme cela est apparent sur la figure 11, le plasmide pAG40û2 est un plasmide hybride comprenant le plasmide pAG50 et, inséré au site scindé par une enzyme de restriction BamHI, un fragment étranger de BamHI ayant une longueur moléculaire d'environ 3,2 kb qui correspond à un fragment partiel contenu dans un fragment d'ADN, dérivé d'une bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique , contenant un gène codant pour CS et ayant une longueur moléculaire d'environ 4,9 kb. Le transformant retenant le plasmide pAG4002 a été désigné par Corynebacterium melassecola 801 (pAG4002).
L'activité de CS de Corynebacterium melassecola 801 (pAG4OO2) a été déterminée sensiblement de la même manière qu'à l'étape 4 de l'Exemple 4. Le résultat est montré au Tableau 4 donné à l'étape 6 que l'on mentionnera ci-après.
Comme cela est apparent du Tableau 4, les cellules retenant le plasmide pAG4002 avaient une forte activité spécifique de CS.
sent pas les rayons lumineux émis par le filament de la
lampe associée dans une direction parallèle à l'axe de ré-
férence. Ainsi le réflecteur 14a comporte une zone qui présente en projection parallèlement à l'axe optique la forme d'une bande verticale longeant la ligne de transition entre les deux feux 10a et 10b et qui a la particulartié de dévier les rayons lumineux tels que R3 vers l'intérieur par rapport à la direction normale. De la sorte, tous les rayons émanant
du feu dans cette région ne participeront pas à la plage éclai-
rante.
De même, le feu 10b comporte une zone ré-
fléchissante modifiée 16b, essentiellement symétrique de la première, et tous les rayons R4 réfléchis par cette
zone ne participent pas non plus à la plage éclairante.
Ici encore, bien que les deux feux 10a et b soient accolés l'un à l'autre, ils sont conçus pour que leurs plages éclairantes 22a et 22b soient séparées
de la distance D requise, à savoir 100 mm pour le règle-
ment européen entre un feu stop et un feu anti-brouillard arrière, la zone morte correspondante étant illustrée par
des hachures sur la figure 5; ainsi que sur les autres figures.
Les zones respectives 15a, 15b des réflecteurs 14a et 14b pourront prendre toute forme appropriée donnant les résultats souhaités. Il pourra s'agir notamment
de portions de paraboloides dont les foyers seront déca-
lés par rapport aux filaments des lampes respectives 12a, 12b et/ou dont les axes seront décalés angulaireminent par
rapport aux axes de référence des réflecteurs.
Pour assurer le louvoiement de la porte, c' st-a- dire pour déplacer les deux panneaux de cette porte dans une direction transversale par rapport a l'ouverture de la porte en fin de course de fermeture et au début de la course d'ouverture des panneaux, chaque glissière ou rainure de section en U se termine par une partie coude orientée vers l'intérieur de l'ouverture de la porte.
Ces glissières ou rainures en creux présentent le grave inconvénient suivant Elles forment une rigole sur le bord inférieur de la porte. dans laquelle peuvent s'accumuler toute sorte de déchets solides, difficiles a enlever lors du nettoyage et qui, de plus, risquent d'endommager les galets solidaires des panneaux qui sont engagés dans ces glissières ou rainures, et même d'entraver un blocage du mécanisme de commande du déplacement de ces panneaux, susceptible de détériorer ce mécanisme.
Le but de la présente invention est de remédier aux inconvénients des réalisations connues précitées, en créant une porte coulissante et louvoyante comprenant un mécanisme de commande et de guidage des deux panneaux de la porte qui soit à la foisw efficace peu encombrant et dépourvu de toute glissière ou rainure au bord inférieur de l'ouverture de la porte.
La porte coulissante et louvoyante visée par l'invention comprend deux panneaux montés de façon mobile en translation parallèlement à l'ouverture de la porte, des moyens pour commander et guider cette translation et des moyens pour déplacer les deux panneaux dans une direction transversale par rapport à l'ouverture de la porte, en fin de course de fermeture et au début de la course d'ouverture des panneaux.
Suivant l'invention, cette porte est caractérisée en ce que les moyens pour guider la translation des panneaux comprennent deux rails de guidage, fixes respectivement à chacun des panneaux, et s'étendant l'un au-dessus de l'autre, près du bord supérieur des panneaux et dans deux plans parallèles à ce bord, l'une des extrémités de chaque rail étant fixée près d'un bord vertical d'un panneau et l'autre extrémité étant dirigée vers l'autre panneau et libre par rapport a celui-ci, en formant par rapport à ce panneau un certain angle ouvert vers cet autre panneau, en ce que dans chaque rail de guidage est engagé un galet fixez en ce que près de chaque bord vertical de l'ouverture de la porte s'étend une barre verticale montée en rotation suivant un axe vertical fixe, les extrémités opposées de cette barre comportant un levier perpendiculaire à cette barre et articulé à une embase fixée de fagon coulissante dans une glissière s'étendant parallèlement au bord supérieur et au bord inférieur de chaque panneau et en ce que l'extrémité du rail de guidage de chaque panneau opposée à celui-ci coopère avec des moyens qui permettent de commander la rotation de la barre verticale adjacente a l'autre panneau et le pivotement des leviers de cette barre articulée aux embases solidaires dudit panneau pour déplacer celui-ci dans une direction transversale par rapport à l'ouverture de la porte en fin de course de fermeture et au début de la course d'ouverture des panneaux.
Les rails de guidage fixés en haut de chaque panneau remplacent ainsi les glissières ou rainures de guidage ménagées sur le bord inférieur de l'ouverture de la porte. Ce bord inférieur de l'ouverture de la porte ne comporte ainsi aucun creux dans lequel peuvent s'accumuler des déchets difficiles à nettoyer et susceptibles de détériorer le mécanisme de commande et de guidage des panneaux de la porte.
Etant donné que ces rails de guidage sont fixés en haut de chaque panneau, ceux-ci n'encombrent pas d'une façon sensible, l'espace intérieur du véhicule équipé d'une porte conforme à l'invention.
Lors de la fermeture de la porte à la fin de la course de translation des panneaux de cette porte, l'extrémité du rail de guidage de chaque panneau commande la rotation de la barre verticale qui est située près de chaque bord vertical de l'ouverture de la porte. Lors de la rotation de ces barres, le levier fixe à chaque extrémité de ces barres pivote en tirant sur les embases coulissantes, reliées aux panneaux, de fanon à déplacer ceux-ci dans une direction transversale par rapport à leur direction de translation, ce qui a pour effet de plaquer les deux panneaux contre l'ouverture de la porte.
La position de ces deux barres verticales près des deux bords verticaux de l'ouverture de la porte ne constitue aucune géne pour les usagers franchissant l'ouverture de la porte conforme à l'invention.
D'autres particularités et avantages de l'invention apparaltront encore dans la description ciaprès.
Rux dessins annexés, donnés à titre d'exemples non limitatifs - la figure i est une vue schématique en perspective, montrant une première réalisation d'une porte coulissante et louvoyante conforme à 4,invention, les deux panneaux de cette porte étant fermés, - la figure 2 est une vue analogue a la figure 1, mais a échelle agrandie et avec arrachements, les deux panneaux étant en position d'ouverture partielle, - la figure 3 est une vue à échelle agrandie, en coupe transversale partielle d'un panneau, montrant le mécanisme de déplacement du panneau, transversalement à la direction de translation des panneaux et l'extrémité d'un rail de guidage en appui sur ce mécanisme, - la figure 4 est une vue analogue à la figure 3! le panneau n'étant pas en position de fermeture complète et le mécanisme n'étant pas sollicité par l'extrémité du rail de guidage, - la figure 5 montre en coupe transversale partielle, l'extrémité d'un panneau en position de fermeture et en appui par son galet sur une rampe ménagée sur le bord vertical de l'ouverture de la porte, - la figure 6 est une vue analogue à la figure 5, montrant le déplacement du galet du panneau sur la rampe, - la figure 7 est une vue en perspective partielle montrant une seconde réalisation d'une porte coulissante et louvoyante conforme à l'invention, - la figure 8 est une vue en coupe transversale schématique de la porte, les deux panneaux étant en position fermée, - la figure 9 est une vue analogue à la figure 8 les deux panneaux étant au début de leur course d'ouverture, - la figure 1 est une vue schématique en coupe transversale d'un bord latéral de l'ouverture de la porte et d'un panneau, en position d'ouverture, montrant le doigt en saillie coopérant avec la barre verticale rotative, - la figure 11 est une vue analogue a la figure 10, montrant la butée du panneau sollicitant le doigt, avant fermeture complète de la porte, - la figure 12 est une vue analogue à la figure 11, le panneau étant en position de fermeture complète et le doigt en position rétractée.
- - Dans Le5 -réal isati-ons de ltinvention.
représentées sur les figures 1 à 12, la porte coulissante et louvoyante comprend deux panneaux 1, 2 montés de fagon mobile en translation parallelement à l'ouverture 3 de la porte, des moyens pour commander et guider cette translation et des moyens pour déplacer les deux panneaux dans une direction transversale par rapport à l'ouverture 3 de la porte, en fin de course de fermeture et au début de la course d'ouverture des panneaux 1, 2 Les moyens pour guider la translation des panneaux 1, 2 comprennent deux rails 4, 5 de guidage, rectilignes, fixes respectivement à chacun des panneaux 1 2 et s'étendant l'un au-dessus de l'autre, près du bord supérieur la, na des panneaux 1, 2 et dans deux plans parallèles à ce bord.
L'une 4a, 5a des extrémités de chaque rail 4, 5 est fixée près d'un bord vertical lb, 2b d'un panneau et l'autre extrémité 4b, 5b est dirigée vers l'autre panneau et libre par rapport à celui-ci, en formant par rapport à ce panneau, un certain angle a (voir figure 8) ouvert vers lpautre panneau.
Dans chaque rail de guidage 4, 5 est engagé un galet 6, 7 < représenté en pointillés sur les figures 1, 2 et 7), ces galets 6, 7 étant de préférence conformes à la structure décrite dans le brevet français n 2 557 624 de la demanderesse.
Près de chaque bord vertical vas 3b de l'ouverture 3 de la porte, s'étend une barre verticale 8, 9, montée en rotation suivant un axe vertical fixe. Les extrémités opposées de chaque barre telle que 8 comprennent un levier 10, Il perpendiculaire à cette barre e et articulé a une embase 12, 13 montée coulissante dans une glissière telle que 14 s'étendant parallèlement au bord supérieur la, a et au bord inférieur de chaque panneau 1, 2.
Après chaque echange le solide est filtre et rincé. Le produitobtenu est référencé L 01 et contient alors 3 X en poids de potassium. Après séchage à l'étuve, le solide L 01 est calciné sous air sec (VVH = 3 l.h-1.g-1) à une température de 400 C pour obtenir la zéolithe notée L 02 (montée en température 2 C/mn, palier de 2 h à 400 C). Le te solide L 02 est échangé trois fois dans les conditions de l'échange cationique effectué précédemment pour obtenir le solide LO1. Le produit obtenu, référencé L 03, ne contient plus que 0,4 % en poids de potassium.
Les caractéristiques des solides LOO, LO1, L02, et L03 sont reportées dans le tableau 1.
Référence SiO2 % K # # % DX N2 C6H6 Al2O3 en pds (nm) (nm) (% poids) (% plids) I Imolesî I I I P/Ps = 0,19 P/Ps : 0,25 I ~~~~~ I ~~~ I ~~~ I ~~~ I ~~~ I ~~ I ~~~~~~ I ~~~~~~ I I I I I I I | I I L00 6 14,4 1,836 0,752 100 11,4 8,4 I I I I I I I I I I L01 6 1 3,0 11,84410,7541105 1 nd i 8,8 I I I I I I I I I L02 6 3,0 1,826 0,753 97 nd 8,8+ I I I I I I I I I I L03 | 6 1 0,4 1,835 0,752 102 1 nd 1 8,9+ | I I I I I I I I I I ~~~~~~ I ~~~~ I ~~~~ I ~~~~ I ~~~~ I ~~~ I ~~~~~~~~ I ~~~~~~~~ I Ainsi que l'attestent les mesures de diffraction des. rayons d'absorption de N2, de C6H6, nous avons obtenu avec le solide L03 une zéolithe L fortement décationisee dont la structure cristalline est restée intacte.
Le solide L03 est soumise deux traitements successifs ; un self-steaming ou une calcination sous vapeur d'eau puis une attaque acide. Les références des solides sont indiquees sur le schema suivant.
L04 v L05 self steaming L03 o attaque acide.
calcination sous vapeur d'eau L06 > L07 Les conditions opératoires des différents traitements sont detailles ci-apres : Self steaming Le solide L03 préalablement charge dans un reacteur en quartz est enfourné dans un four chauffé à 650 C. Le traitement est effectue sous atmosphère statique et sa durée est de 4 heures.
Calcination sous vapeur d'eau - vitesse de montee en température 10 C mn - débit d'air 3 1 h-1g-1, - injection d'eau à 400 C et débit 2,25 cm3 h 1g-1 ' d'eau liquide soit une teneur molaire en vapeur*.d'eau de 50 %, - température finale 650 C et palier de 4 heures à cette tempéra ture, - descente à l'ambiante sous air, débit 6 1 h-1g-1.
Attaque acide - HCl, 0,6N, - V/P = 10 cm3/g, - T = 80 C, - durée 4 heures sous agitation.
Le tableau 2 donne les caractéristiques physicochimiques des différents solides obtenus.
SiO2 % K # # % DX N2 C6H6 REFERENCE Al2O3 poids (nm) (nm) % pds (% pds) moles P/Ps=0,19 P/Ps= 0,25 I ~~~~~ I ~~~ I ~~~ I ~~~ I ~~~ I ~~~ I ~~~~~ I ~~~~~ I I I I I I I -I I I | L04 | 6 1 0,4 11,79510,7521 95 1 5,2 I I I I I I I I I I I L05 I 15 1 0,25 1,794 0,752 89 1 16,2 1 12,6 I I I I I I I I I L06 6 0,4 1,796 0,752 96 4,8 I I | | I I I I I L07 15 0,25 1,795 0,752 87 15,9 12,9 Les résultats de diffraction X montrent que les solides L04, L05, L06 et L07 sont bien cristallisés. Après la calcination en présence de vapeur d'eau, les solides L04 et L06 ont une faible capacité d'adsorption d'azote et de benzene en raison de la présence dans les pores des especes aluminiques extraites de la charpente sous l'effet de la vapeur d'eau à haute température.
L'élimination de tout ou partie de ces especes aluminiques extra réseau sous l'effet de l'attaque acide permet de restaurer les capacites d'adsorption des solides sans altérer la cristallinité me surée par diffraction X. Les solides L05 et L07 possèdent un réseau de pores secondaires crée au cours des traitements modificateurs.
Les rayons de ces pores secondaires sont centres aux alentours de 3 nm avec une distribution comprise dans la fourchette 1.5-20 nm.
Volume des pores secondaires par rapport au volume poreux total 29 %.
Les zéolithes décationisees et désaluminées L05 et L07 sont caractérisées par une stabilité thermique nettement améliorée par rapport au solide de depart. Apres une calcination effectuée sous un débit d'air sec de 10 1 h-1g-1 à 900 C pendant 4 heures les taux de cristallinité DX sont encore pour L05 et LQ7 respectivement egaux à 70 et 75 % alors que ce type de traitement conduit à la destruction quasi complète des solides non stabilisés (LOO, L01, L02, L03). Nous avons donc obtenu des solides tres fortement décationisés, possédant un rapport Si02/A1203 qui a plus que doublé par rapport à celui du solide initial et dont la stabilité thermique est considérablement améliorée.
ment, et des moyens destinés à commander l'opération de raccordement ou de séparation effectuée par les moyens de transfert pour que ces derniers exécutent de façon répétée cette opération plusieurs fois; et des moyens destinés à décharger l'encre
et/ou l'air introduit dudit orifice de décharge.
Un autre objet de l'invention est de proposer un appareil d'enregistrement à jet d'encre destiné à décharger de l'encre d'une tête d'enregistrement vers
un support d'enregistrement pour effectuer un enregis-
trement, l'appareil comprenant: une partie de raccordement pouvant être reliée à la tête d'enregistrement; des moyens de transfert destinés à effectuer le raccordement et la séparation de la partie de raccor- dement à et de la tête d'enregistrement; des moyens destinés à commander les moyens
de transfert pour effectuer le raccordement et la sépara-
tion de la partie de raccordement à et de la tête d'en-
registrement; les moyens de commande introduisant un gaz dudit orifice de décharge de la tête d'enregistrement vers l'intérieur de celle-ci par le raccordement de
ladite partie de raccordement à la tête d'enregistre-
ment; des moyens d'ouverture/fermeture destinés
à faire communiquer l'intérieur de la partie de raccor-
dement avec l'atmosphère avant le dégagement du raccor-
dement; et
des moyens destinés à décharger le gaz intro-
duit à l'intérieur de l'orifice de décharge avec l'encre
provenant de cet orifice.
Pour la transfection dans des cellules animales, 0,1 à 0,2 microgramme d'ADN plasmidique contenant l'ADN étranger entouré par des séquences clonées d'herpès virus appropriées (l'homovecteur) a été mélangé à 0,3 microgramme d'ADN intact. Les deux ADN ont été entreposés dans H20 ou 0,01 M de tris à pH 7,5, 1 mM d'EDTA, le volume final devant être inférieur à 0,25 ml. On a ajouté au mélange un volume égal de 2X de solution de sel tamponnée par de L'HEPES (10 g d'acide N-2-hydroxyéthylpipérazine-N' -2-éthanesulfonique (HEPES), 16 g de NaCl, 0,74 g de KCl, 0,25 g de Na2HPO4. 2H20, 2 g de dextrose par litre de H20 et tamponnée avec NaOH à pH 7,4).Le mélange a été ensuite dilué à 0,5 ml par addition du volume approprié de 1X solution de sel tamponnée par de l'HEPES (préparée par dilution de la solution ci-dessus dans le rapport 1:1 avec H20). Après mélange, 35 microlitres de Caca2 2,2 M ont été ajoutés au mélange d'ADN et le mélange a été effectué. Le mélange a été mis à incuber à température ambiante pendant 30 minutes. Le milieu a été séparé d'une monocouche confluente à 80 X de cellules d'épiderme de lapin, de cellules Vero ou de cellules de CEF croissant dans un flacon de 25 cm2, et le mélange d'ADN a été introduit dans le flacon et réparti sur les cellules.Après une incubation de 30 minutes à température ambiante, 5 ml de milieu EMD complet plus 10 X de sérum de bovin foetal ont eté ajoutés. Les cellules ont été mises à incuber pendant 5 heures à 37"C dans un incubateur humidifié contenant 5 % de C02 dans l'air. Le milieu a été changé au bout de 5 heures avec ou sans un choc au glycérol. Lorsqu'il a été utilisé, le choç au glycérol consistait à enlever le milieu et à ajouter de l'EMD contenant 20 % de glycérol pendant 3 minutes à température ambiante, puis à effectuer un lavage avec 10 % de glycérol dans le l'EMD, et un lavage dans 5 % de glycérol dans l'EDM, puis à ajouter du milieu d'EMD complet frais plus 10% de sérum de bovin foetal.Les cellules ont été mises à incuber à 37"C de la manière indiquée ci-dessus pendant 3 à 4 jours, jusqu'à production par le virus d'un effet cytopathogène de 50 à 100 %. Le virus a été recueilli de la manière décrite ci-dessus pour la préparation des réserves de virus. Cette réserve a été désignée sous le nom de réserve de transfection et elle a été ensuite soumise à un examen pour déterminer la présence de virus recombinants, avec ou sans un système de sélection destiné a enrichir des plaques en recombinants de la manière décrite ci-dessous.
PROCEDE DE LIGATION DIRECTE DESTINE A LA PRODUCTION D'HERPES VIRUS RECOMBINANTS.
Plutôt que d'utiliser des homovecteurs et de s'appuyer sur la recombinaison homologue pour produire un virus recombinant, la technique de ligation directe a été- mise au point pour insérer des gènes étrangers dans des herpès virus. Dans ce cas, le gène étranger cloné ne nécessite pas de séquences voisines d'ADN d'herpès virus mais necessite seulement la présence de sites de restriction disponibles pour éliminer par coupure le fragment de gènes étrangers du vecteur plasmidique. Un enzyme de restriction compatible a été utilisé pour couper l'ADN d'herpès virus. Un impératif de la technique était la nécessité que l'enzyme de restriction utilisé pour couper l1ADN d'herpès virus puisse effectuer une coupure à un nombre limité de sites, de préférence inférieur à 3 sites.Pour l'ADN de VPR, on a utilisé xbaI, qui coupe l'ADN de VPR à deux endroits, et l'utilisation de HindIII (2 coupures), EcoRV (2 ou 3 coupures) ou NdeI (3 à 5 coupures) est envisagée. L'ADN d'herpès virus a été mélangé à un excès molaire de 30 fois d'ADN plasmidique, et le mélange a été coupé avec l'enzyme de restriction approprié.
Le mélange d'ADN a été extrait par le phénol et précipité par l'éthanol pour éliminer les enzymes de restriction, et les ADN ont été fixés les uns aux autres par ligation suivant le procédé de ligation décrit en détail ci-dessus. Le mélange d'ADN soumis à une ligation a été ensuite extrait par le phénol, précipité par l1étha- nol et remis en suspension dans 298 microlitres de tris 0,01 M à pH 7,5, l'EDTA 1 mM. Quarante-deux microlitres de CaCl2 2M ont été ajoutés, suivis par un volume égal de 1X solution de sel tamponnée par de l'HEPES (voir ci-dessus), et l'échantillon a été utilisé pour transfecter des cellules animales de la manière décrite ci-dessus.
Le virus dans la souche de transfection a été ensuite soumis à un examen pour déterminer la présence d'éléments d'insertion d'ADN étranger de la manière décrite ci-dessous. L'avantage de la technique de ligation directe consistait en la nécessité d'une élaboration moindre de sous-clones à l'état de plasmides, et la présence du virus recombinant dans la souche de transfection à une fréquence bien supérieure à celle obtenue avec une recombinaison homologue.
SELECTIONPARHAT D'HERPES VIRUS RECOMBINANT EFFECTUANT L'EXPRESSION DE THYMIDINE-KINASE.
Des mutants par délétion d'herpès virus présentant des délétions dans le gène de la thymidinekinase (TK) ont été élaborés. Ces souches de VPR ont été appelées S-'PRV,002 et S-PR > -003 et ont été déposées dans l'ATCC respectivement sous les numéros de dépôt VR 2107 et VR 2108. Ces virus TK moins (TK-) ont été utilisés comme récepteurs pour l'insertion du gène TK étranger du virus de l'herpès simplex de type 1 (VHS-1). Un gène TK de VHS -1 qui a été utilisé contient le promoteur ICP4 de VHS-1 et provenait de B. Roizman (16). Il a été sous-cloné pour se placer entre deux régions voisines d'ADN de VPR, par exemple par insertion du gène TK dans le fragment BamHI N 5 de VPR entre les sites XbaI et HpaI. L'élément plasmidique construit a été ensuite transfecté avec l'ADN TK- de VPR, donnant un virus recombinant. La souche de transfection a été enrichie en virus contenant TK par le procédé de sélection par HAT décrit en (35). La souche de transfection a été utilisée pour infecter des monocouches de 143 cellules TK- dans des bortes- de culture de 60 mm qui ont été soumises à une incubation préalable dans du milieu HAT pendant 16 heures à 37 C (milieu HAT : milieu 199 contenant 2 mM de glutamine, 100 unités/ml de pénicilline, 100 unités/ml de streptomycine, 10 % de sérum de bovin foetal, 5 x 10 5 M d'hypoxanthine, 10 5 M de thymidine, 5 x 10 6 M d'aminoptérine).Des échantillons du virus de la souche de transfection ont été infectés dans les 143 cellules TK- en utilisant des dilutions de virus comprises entre 10 3 à 10 7 Au bout d'un ou deux jours à 37"C, les boîtes ensemencées avec la plus forte dilution de virus et présentant encore des plaques de virus ont été recueillies pour constituer des souches de virus, et la sélection a été répétée une seconde fois. La souche de virus recueillie par la seconde sélection par HAT a été utilisée dans un essai sur plaque et des plaques distinctes ont été prélevées et essayées en ce qui concerne la présence d'éléments d'insertion d'ADN étranger de la manière décrite cidessus.
SELECTION PAR LA BROMODESOXYURIDINE D'HERPES VIRUS RECOMBINANT.