INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Pour obtenir une bactérie corynéforme sous une telle forme capable de donner les produits souhaités de manière efficace à un haut rendement, on effectue usuellement une reproduction ou un élevage de la bactérie. En particulier, ces dernières années, on a tenté de reproduire une bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique par technique d'ADN recombinant.Jusqu'à maintenant, dans la mise en pratique de la reproduction d'une bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique par le moyen d'une technique d'ADN recombinant, les gènes suivants ont été clones (1) un gène codant pour l'homosérine déshydrogénase dérivé de Brevibacterium lactofermentum [Ishida et autres, résumés des conférences données aux rencontres de la Society of Fermentation Technology, Japon, page 284 (1983)3, (2) un gène codant pour la phosphoénolpyruvate carboxylase dérivé de Brevibacterium lactofermentum EItoh et autres, résumés des conférences données aux rencontres annuelles de la Agricultural Chemical Society au Japon, page 431 (1984)] (3) un gène codant pour la résistance à la S-(2-aminoéthyl)-cystéine dérivé de Corynebacterium glutamicum (ATCC 21543) et un gène codant pour l'anthranilate synthétase dérivé de Brevibacterium flavum (ATCC 14067) SKatsumata et autres, divulgation de la demande de brevet au Japon NO 58-126789/19831 -(4) un gène codant pour l'ATP-phosphoribosyltransférase dérivé de Corynebacterium glutamicum tMizugami et autres, résumés des conférences données aux rencontres annuelles de la Agricultural Chemical Society au Japon, page 249 (1984)2 ;; (5) un gène codant pour l'anthranilate phosphoribosyltransférase dérivé de Brevibacterium lactofermentum (ATCC 13869) ÈMiwa et autres, publication de la demande de brevet au Japon NO 59-196098 (1984) (6) un gène codant pour la méso-2,6-diaminopimélate carboxylase dérivé de Brevibacterium lactofermentum (ATCC 13869) LSano et autres, divulgation de la demande de brevet au Japon NO 59-210887 (1984) 3; (7) un gène codant pour l'histidinol phosphatase dérivé de Brevibacterium lactofermentum LNakamori et autres, divulgation de la demande de brevet au Japon NO 60-62983 (1985) ;; (8) un gène codant pour l'homosérine kinase dérivé de Brevibacterium lactofermentum rNakamori et autres, divulgation de la demande de brevet au Japon NO 60-62982 (1985) (9) un gène codant pour la sous-unité P de la chorismate mutase dérivé de Brevibacterium lactofermentum pNakamori et autres, divulgations de demandes de brevets au Japon NOs 60-66984 (1985) et 60-70093 (1985)1 ; et autres.
La plupart des acides aminés, des acides nucléiques et autres, sont directement ou indirectement produits à partir d'intermédiaires formés dans le cycle TCA. Le cycle TCA est une séquence de réactions enzymatiques se produisant dans les cellules. Dans le cycle TCA, 1' A-cétoglutarate, l'un des intermédiaires du cycle TCA, est synthétisé de l'oxaloacétate et de l'acétyl CoA par les réactions enzymatiques. Les enzymes qui catalysent les réactions enzymatiques sont la citrate synthase (souvent appelée ci-après "CS"), l'aconitate hydratase (souvent appelée ci-après "AH") et l'isocitrate déshydrogénase (souvent appelée ci-après "ICDH").CS, AH et ICDH catalysent la première étape, la seconde étape et la troisième étape des réactions enzymatiques pour la synthèse de 1' l'.i-cétoglutarate à partir de l'oxaloacétate et de l'acétyl CoA dans le cycle TCA, respectivement.
Si les activités des enzymes ci-dessus mentionnées peuvent être accrues dans les cellules de la bactérie produisant l'acide glutamique ci-dessus mentionnée, les réactions enzymatiques du cycle TCA dans les cellules de la bactérie sont favorisées, permettant la production d'acides aminés,d'acides nucléiques et autres, à un haut rendement par fermentation en utilisant la bactérie.
Cependant, jusqu maintenant, aucun moyen efficace n'a été proposé pour augmenter les activités des enzymes dans les cellules d'une bactérie. Par conséquent, le rendement des acides aminés et des acides nucléiques, et autres, obtenus par mise en culture d'une bactérie,n'est pas encore satisfaisant.
Les présents inventeurs ont fait des études intensives pour surmonter les problèmes ci-dessus mentionnés. Par suite, ils ont réussi à isoler un fragment d'ADN, dérivé d'une bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique, contenant un gène codant pour une enzyme qui catalyse une réaction pour la synthèse de l'O(-céto- glutarate à partir de l'oxaloacétate et de l'acétyl CoA et ont réussi à cloner le fragment d'ADN. De même, on a trouvé que lorsqu'un tel fragment d'ADN est inséré à un vecteur pour obtenir un ADN recombinant et qu'une cellule d'un micro-organisme est alors transformée par le recombinant obtenu, l'activité de l'enzyme dans la cellule du micro-organisme transformé peut être accrue. Ainsi, la présente invention a été accomplie.
Par conséquent, la présente invention a pour objet un fragment d'ADN contenant un gène codant pour l'enzyme ci-dessus mentionnée, qui est utile pour la production d'acides aminés, d'acides nucléiques, et autres, à un haut rendement.
La présente invention a pour autre objet un microorganisme contenant l'ADN recombinant ci-dessus mentionné.
L'invention sera mieux comprise, et d'autres buts, caractéristiques, détails et avantages de celle-ci apparaîtront plus clairement au cours de la description explicative qui va suivre faite en référence aux dessins schématiques annexés donnés uniquement à titre d'exemple illustrant plusieurs modes de réalisation de l'invention et dans lesquels - la figure 1 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG401 de la présente invention; - la figure 2 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAGSO1 de la présente invention; - la figure 3 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG302 de la présente invention;; - la figure 4 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG303 de la présente invention; - la figure 5 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG311 de la présente invention; - la figure 6 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG1 utilisé dans la présente invention; - la figure 7 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG3 utilisé dans la présente invention; - la figure 8 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG14 utilisé dans la présente invention; - la figure 9 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAGSO utilisé dans la présente invention;; - la figure 10 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG40ûl de la présente invention; - la figure 11 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG4002 de la présente invention; - la figure 12 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG4003 de la présente invention; - la figure 13 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG5QO1 de la présente invention; et - la figure 14 illustre la carte de scission par endonucléase de restriction d'un plasmide pAG3001 de la présente invention.
Sur les figures 1 à 14, les positions sur la carte des divers sites de restriction sont données en coordonnées de kilobases (ci-après, kilobase sera appelée"kb") relativement au site de restriction de XbaI à 0,0/10,9 kb sur la figure 1, au site de restriction de XbaI à 0,0/8,8 kb sur la figure 2, au site de restriction de EcoRI à 0,0/11,1 kb sur la figure 3, au site de restriction de EcoRI à 0,0/7,5 kb sur la figure 4, au site de restriction de SalI à 0,0/9,4 kb sur la figure 5, au site de restriction de XbaI à 0,0/20,4 kb sur la figure 6, au site de restriction de HindIII à 0,0/4,5 kb sur la figure 7, au site de restriction de XbaI à 0,0/10,6 kb sur la figure 8, au site de restriction de BamHI à 0,0/7,6 kb sur la figure 9, au site de restriction de XbaI à 0,0/12,5 kb sur la figure 10, au site de restriction de BamHI à 0,0/10,8 kb sur la figure 11, au site de restriction de BamHI à 0,0/10,4 kb sur la figure 12, au site de restriction de XbaI à 0,0/12,3 kb sur la figure 13 et au site de restriction de SalI à 0,0/11,0 kb sur la figure 14. Sur la figure 9, ADN-(a) est un fragment d'ADN dérivé du plasmide pAG1, dont la longueur moléculaire est d'environ 3,1 kb et qui contient un gène pour la résistance à la tétracycline.
Essentiellement, selon la présente invention, on prévoit un fragment d'ADN, dérivé d'une bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique, contenant un gène codant pour une enzyme qui catalyse une réaction pour la synthèse de l' -cétoglutarate à partir de l'oxaloacétate et de l'acétyl CoA dans le cycle TCA.
Par ailleurs, selon la présente invention, on prévoit un-ADN recombinant comprenant un premier fragment d'ADN, dérivé d'une bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique, contenant un gène codant pour une enzyme qui catalyse une réaction pour la synthèse de 1' Of-cétoglutarate à partir de l'oxaloacétate e-t de l'acétyl CoA dans le cycle TCA et un second fragment d'ADN contenant un gène pour la- réplication dans une cellule d'une bactérie, ledit premier fragment d'ADN étant directement ou indirectement lié audit second fragment d'ADN.
La bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique est une bactérie non mobile et aérobie, à Gram-positif , qui ne forme pas de spore et nécessite de la biotine pour sa croissance, et qui produit l'acide L-glutamique à un haut rendement dans un milieu contenant de la biotine en une quantité limitée ou dans un milieu additionné d'un surfactant contenant de la biotine en une forte quantité. Pour cette bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique, on peut mentionner les bactéries appartenant au genre Corynebacterium, Brevibacterium ou Microbacterium. Le fragment d'ADN de la présente invention est dérivé de la bactérie corynéforme produisant l'acide glutamique ci-dessus.
De plus, des produits comme les raffles de mals, les écorces, les sciures, les différentes pulpes et tiges de produits agricoles ou mêmes certaines plantes aquatiques posent des problèmes évidents de volume de stockage.
La présente invention propose donc un procedé et un dispositif continus permettant la mise en oeuvre des trois phénomènes explicités ci-dessus sans adjonction d'eau et permettant la valorisation de produits à faible valeur énergétique en association avec les coupes lourdes difficilement utilisables des produits pétroliers.
La presente invention a ainsi pour objet un procédé pour la fabrication d'un produit combustible mixte à base de matières organiques et de matières hydrocarbonées dans une machine modulaire comportant au moins une vis entrainée en rotation à l'intérieur d'un fourreau et munie de filets hélicolaux à pas variable et d'organes périphériques de traitement, caractérisé en ce que le traitement des matières organiques et hy drocarbonées est réalisé dans la machine modulaire en plusieurs étapes se succédant en continu et comprenant - au moins une étape de dilacération de la matière organique sous l'action combinée de forces de compression et de cisaillement, - au moins une étape d'hyperpressage mécanique pour améliorer les qualités de combustion du produit com bustible en diminuant sa teneur en eau, - au moins une etape de traitement thermochimique, - et une etape de formage dudit produit combustible.
Ce procedé est en outre caractérise en ce que les matiéres hydrocarbonées sont constituees par des hydrocarbures liquides pouvant être emulsionnes avec de l'eau ou des hydrocarbures solides tels que des asphaltes, ou encore des produits intermédiaires tels que des huiles lourdes.
L'invention propose également un dispositif pour la mise en oeuvre du procédé caractérisé en ce qu'il est constitué d'un extrudeur a vis comportant au moins deux vis corotatives et copenétrantes entrainées en rotation a l'intérieur d'un fourreau muni de moyens d'introduction des matiéres organiques et hydrocarbonées, lesdites vis étant constituées chacune de sections accolées munies d'organes de transport et de traitement specifique et déterminant des zones successives correspondant aux étapes de la preparation du produit combustible et comprenant - une zone d'alimentation et de compression, - une zone de cisaillement et de contrepression associée avec des moyens d'évacuation de l'eau, - éventuellement. une zone de detente associée avec des moyens d'évacuation de la vapeur, - au moins une nouvelle zone de compression, de cisaillement et de contrepression, éventuellement asso ciee avec des moyens d'évacuation de l'eau, - une zone de transfert, - et enfin une zone de mise en forme du produit combustible placée a l'extrémité aval du transporteur a vis.
D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaitront au cours de la description qui va suivre, faite en référence aux dessins annexés sur lesquels - la Figure 1 est une vue en coupe par un plan vertical passant parl'axe d'une vis d'un dispositif pour la mise en oeuvre du procedé selon l inven- tion. cette figure étant d'ordre général, - la Figure 2 est une vue en coupe selon la ligne 2-2 de la figure 1.
~ la Figure 3 représente un dispositif d'accouplement et des moyens de mise en température du dispositif selon l'invention, - la Figure 4 est une variante du dispositif représenté à la Figure 3, - la Figure 5 est une vue en coupe du dispositif pour l'application de produits hydrocarbonés sous forme d'émulsion, - la Figure 5a représente un diagramme montrant les pressions et températures du produit dans le cas de la Figure 5, - la Figure 6 est une représentation du dispositif pour l'application utilisant de l'huile surchauffée, - la Figure 6a représente un diagramme montrant les pressions et températures du produit dans le dispositif de la Figure 6, - la Figure 7 est une vue en coupe du dispositif utilisant comme produit hydrocarbone des asphaltes.
- la Figure 7a represente un diagramme montant les pression et températures du produit dans le dispositif de la Figure 7.
Le dispositif pour la mise en oeuvre du procédé, représenté d'une maniére genérale sur les figures 1 et 2, est constitué par un extrudeur a vis 1 comprenant au moins deux vis la et lb entrainees en rotation autour de leurs axes a l'intérieur d'une en ceinte allongée formant un fourreau 2 qui les enveloppe.
Comme on le voit sur la Figure 2, les vis la et lb sont munies de filets ou autres organes periphériques qui engrènent les uns dans les autres et la paroi interne du fourreau 2 forme deux lobes cylindriques sécants, de diamètre intérieur légèrement supérieur au diamètre extérieur des filets ou des organes périphériques. Ces filets sont imbriqués les uns dans les autres et, dans l'exemple représenté, les deux vis la et lb sont entrainées en rotation dans le méme sens de telle sorte que les filets soient identiques et simplement décalés l'un par rapport a l'autre.
Les vis la et lb sont constituées avantageusement d'arbres cannelés sur lesquels sont empilés des tronçons de vis constitués de manchons dont la partie intérieure est munie de cannelures correspondant à celles de l'arbre et dont la partie extérieure est munie de filets a pas différents ou autres organes péri phériques de traitement et de transport. On peut disposer d un assez grand nombre de tronçons permettant de faire varier le pas, la profondeur et le nombre des filets ainsi que la longueur de chaque zone.
L'extrudeur a vis 1 est constitué de plusieurs zones successives correspondant chacune a une fonction particulière.
D'une maniére générale, l'extrudeur a vis 1 comporte une première zone A munie d'une première section Al d'alimentation et de compression suivie d'une seconde section A2 de cisaillement et de contrepression.
Dans la première section Al, les vis la et lb sont munies de filets 3 à pas direct, ces derniers se resserrant vers l'aval pour créer une compression.
Dans la seconde section A2, les vis la et lb sont munies de filets 4 à pas inversé dans lesquels sont menagées des ouvertures 5 qui s'étendent radialement depuis l'arbre de chaque vis la et lb jusqu'à la péri phérie du filet et sont en outre réparties régulière- ment autour de l'axe. Les vis la et lb sont calées de façon que deux ouvertures 5 viennent en coincidence périodiquement dans la zone centrale d'entrainement.
On contrôle de la sorte le passage a débit contrôlé de matière vers l'aval, ce qui détermine un freinage dans la section A2 et de ce fait une compression en amont.
vail (instant E) à l'étape S15, le processus d'aspiration est déclenché et l'électrovalve 8 est ouverte à la fin
d'une période prédéterminée (instant F) à l'étape S17.
Puis l'opérateur déplace le levier 9 vers la position-
hors travail à l'étape S19, et l'électrovalve 8 est
fermée à l'étape S21.
tive est effectuée dans cet état par la pompe 6, de l'air est déchargé d'un seul coup de l'orifice 2 et la résistance à l'écoulement opposée par le trajet est sensiblement réduite, ce qui produit une grande force d'aspiration. Par conséquent, les causes d'une mauvaise décharge, présentes dans le trajet d'alimentation en encre allant du réservoir secondaire 12 jusqu'à l'orifice
de décharge 2, à savoir la présence de matières étran-
gères telles que des bulles dans le filtre 30 ou dans un coude ou un angle du trajet d'alimentation, peuvent
être supprimées de façon sûre.
Il convient de noter que l'aspiration de l'encre est effectuée et que la coiffe 3A et le tube 4 d'aspiration sont remplis d'encre aux étapes S3 à S7 de manière qu'une élévation de la pression, résultant du raccordement de la coiffe 3A, agisse de façon fiable sur l'orifice 2 de décharge pendant l'introduction d'air dans la partie arrière de l'orifice de décharge 2. De plus, l'instant d'ouverture de l'électrovalve 8 à l'étape S17 est retardé par rapport à l'instant o le levier 9 est déplacé vers la position en travail pour les raisons suivantes. On suppose que, alors que l'orifice 2 de décharge est complètement fermé par la coiffe 3A et que le clapet d'évent 5A et l'électrovalve 8 sont fermés, la pompe 6 est mise en marche (état en travail) à l'instant E des figures 7, 8 et 9. L'aspiration est alors appliquée par le tube 4 d'aspiration, une pression négative (pression négative d'aspiration de l'encre) est établie dans la coiffe 3A et dans le tube 5 ouvert à l'atmosphère, et le processus d'aspiration à partir
de l'orifice 2 de décharge est exécuté.
Dans ce cas, l'encre aspirée de l'orifice 2 de décharge avec l'air remplit la coiffe 3A et fuit de l'absorbeur d'encre 3B. L'encre peut également remplir le tube 5 ouvert à l'atmosphère. Cependant, cet état
L'invention vise un dispositif de fixation du type précité permettant à la fois un placage du panneau contre la structure porteuse et un réglage en hauteur du panneau.
L'invention atteint son but grâce à un dispositif dans lequel le panneau comporte au moins deux vis réglables à composante verticale et de sens inverse, coopérant respectivement avec 1 'une d'au moins deux surfaces de support inclinées et inversées, le panneau et la structure comportant l'un et l'autre au moins une zone de réaction destinée à équilibrer les composantes horizontales des forces développées par la coopération des vis et des surfaces de support.
Les vis réglables sont généralement verticales ou proches de la verticale. L'inclinaison des surfaces de support est une inclinaison par rotation autour d'un axe horizontal, de manière à pouvoir coopérer avec les vis pour le réglage en hauteur.
La nature des zones de réaction dépend du choix de la coopération entre les vis et les surfaces de support : si l'engagement de la vis contre la surface tend à repousser le panneau par rapport à la structure, les zones de réaction comportent des moyens de résistance à l'arrachement (crochets, etc.). I1 est toutefois plus simple de choisir la solution contraire selon laquelle les vis coopèrent avec une surface de manière à rapprocher le panneau de la structure: les zones de réaction n'ont qu'à être de simples zones d'appui (de butée).
I1 est avantageux que les vis et les surfaces de support soient dissimulées dans un évidement de la face interne du panneau et que les vis soient accessibles de l'extérieur grâce à un trou traversant une paroi de l'évidement.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaitront à la lecture de la description suivante d'un mode de réalisation préféré. I1 sera fait référence à la figure annexée unique qui représente en coupe le dispositif de l'invention.
On y voit la structure porteuse 1, ici une paroi murale, équipée d'un panneau 2. Les supports 3, 4 sont formés d'une embase 5 et 6 vissée sur la paroi 1 et d'une surface d'appui 7 et 8 inclinée par rapport à la paroi (surface contenue dans un plan passant par une droite horizontale) et tournée vers la paroi. Les surfaces 7 et 8 sont inversées l'une par rapport à l'autre (elles sont symétriques quand elles sont à la verticale l'une de l'autre, ce qui n'est pas obligatoire).
Le panneau 2 comporte au voisinage de ses bords supérieur 9 et inférieur 10 des logements 11 et 12 à l'intérieur desquels sont logées les vis verticales inversées 13 et 14 qui tournent dans des pièces 15 et 16, par exemple en équerre, formant écrou, vissées au panneau. Les logements ll et 12 dissimulent également les supports 3 et 4.
Des trous 17 et 18 sont prévus dans les bords 9 et 10, en alignement avec les vis 13 et 14 pour atteindre et manoeuvrer lesdites vis depuis l'extérieur du panneau 2.
L'écartement en hauteur des supports 3, 4 et des vis 13, 14 est défini en vue de leur coopération. Le panneau 2 peut prendre appui sur la paroi 1 grâce aux zones de réaction 19, 20, 21.
Pour faciliter le montage et économiser la matière, il est prévu que les surfaces inclinées 7 et 8 ont une largeur qui n'est qu'une faible fraction du panneau. On peut toutefois concevoir que les surfaces inclinées 7 et 8 font partie de glissières horizontales. Deux jeux de supports 3, 4 distants horizontalement peuvent être nécessaires pour assurer le maintien de panneaux larges et/ou non soutenus par des panneaux voisins. L'effet de pincement contre les surfaces de crochetage inclinées réalise en même temps la suspension à hauteur voulue par l'intermédiaire de la vis 13 et l'application du panneau 2 en serrage contre la paroi ou structure porteuse par l'effet de appel opéré par la vis 14.
La manipulation en sens inverse des deux vis 13 et 14 en même temps qu'on maintient l'effet de pincement, permet le réglage en hauteur de 1' élément suspendu, tandis que cette manoeuvre répétée sur chacun des deux jeux permet le réglage horizontal de l'élément suspendu.
Un procédé de mise en oeuvre du système prévoit que le panneau suspendu 2 est en premier lieu réglé à hauteur et de niveau tout en étant maintenu appuyé contre la paroi 1, puis étayé provisoirement ou définitivement en hauteur dans cette position par un procédé quelconque employant vérins, cales, etc., les vis 13 et 14 suant au départ écartées au maximum ; puis le pincement est opéré en tournant ces vis juqu'à venir au contact des surfaces inclinées 7 et 8, et en commençant de préférence par la vis du bas 14. La vis 14 étant venue en appui contre la surface inclinée 8 de la pièce 4, on termine par la manoeuvre de la vis du haut 13, jusqu'à obtenir le contre-serrage équivalent vers le haut, ce qui contre-bloque en même temps le panneau 2 contre la paroi. Après cela les moyens d'étaiement peuvent être dégagés, si désiré.Dans une forme de réalisation avantageuse, les moyens d'étaiement sont des vérins à vis, sommaires, placés en permanence à la base du panneau et pouvant être masqués par une plinthe en fin de pose.
Les vérins réalisent la mise à hauteur et l'horizontalité de chaque panneau avant leur blocage en position par les vis.