INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Analyse en minicellules des protéines codées Par les Plasmides: On utilise la souche E.coli P678-54 pour produire des minicellules (8). Le processus de trans forî < ation du plasmide pUC8 et de ses dérivés en réalisé selon le manuel de Cold Spring Harbor (9). La purification des minicellules, le marquage des protéines codées par le plasmide et l'autoradiographie sont effectues comme décrit par Stoker et al. (10).
Sous-clo@sge de M13 et séquencage du nucléotide Le déterminant de résistance bifonctionnelle à la gentamicine et à la kanamycine est obtenu tout d'abord par clonage d'un fragment de 2,4 kb HpaII- Hindi à partir du plasmide de streptocoque pGB3013.
Etant donné que ce fragment ne contient pas la séquence génomique entière du déterminant, le segment voisin Hindi est également cloné aux fins de séquençage. On procède ensuite au sous-clonage du fragment de 1,5 kb AluI dans le site SmaI de pUC8 pour former le plasmide pUC815A.
Ce plasmide est utilisé comme source de quantItés importantes du fragment de 1,5 kb qui est dégradé de manière unidirectionnelle par BAL31 selon une modification du procédé décrit par Gilmore et al.
On procède comme suit : 5 mg de pUC815 sont digérés par EcoRI et PstI, sites polylinkers adjacents au fragment cloné de 1,5 kb, et ce fragment est isolé par centrifugation avec un gradient de 10 à +0S de sucrose (12). Le fragment de 1,5 kb a été auto ligué en présence de la T4ADN ligase pour produire de longs polymères. Ces polymères sont ensuite digérés par PstI pour produire des dimères du fragment 1,5 kb liés au site EcoRI. Les dimères sont digérés avec BAL31 et à 5 mn d'intervalle on prélève des aliquotes et l'ADN digéré par BAL31 est précipité à l'aide d'éthanol. Cet ADN est ensuite digéré par EcoRI pour produire des fragments contenant des extrémités EcoRI et BAL31.
Cet ADN est ensuite ligué dans mp18 digéré par SmaI EcoRI et transfecté dans E.coli JM109. On prépare l'ADN c brin des phages recombinants pour le séquençage comme décrit dans (13).
Les bennes de ce type sont consituées par une trémie de section rectangulaire se raccordant à un cône d'évacuation généralement décentré par rapport å l'axe vertical de la trémie, le cône se terminant par une ouverture frontale munie d'un volet.
A l'origine, ces bennes ont été conçues pour être manutentionnées à l'aide de grues, et comportent à cet effet une anse, articulée sur les parois latérales de la trémie, sur laquelle vient s'adapter le crochet de la grue.
Avec le développement des chariots de manutention à mât élévateur ou à bras télescopique, on a adapté sur le châssis de ces bennes connues des moyens pour l'attelage soit sur les mats des chariots a fourches, soit sur les tabliers d'accrochage d'accessoires des chariots à bras télescopique.
L'inconvénient des bennes à béton connues est leur hauteur qui les rend inaptes à être chargées directement à partir d'une bétonnière. I1 faut alors soit un dispositif de reprise en sortie de bétonnière soit installer la bétonnière sur un socle surélevé.
En outre, en raison de leurs dimensions importantes, les bennes connues peuvent difficilement être utilisées sur un chantier clôs, puisque si on les manutentionne avec une grue, on doit l'amener par le haut a son point de déversement, et si on les manutentionne avec un chariot élévateur leur encombrement vertical excède la taille des ouvertures disponibles.
La présente invention a pour objet de remédier à ces inconvénients et de procurer une benne qui tout en conservant la capacité et les performances au déversement des bennes à goulotte classiques, puisse être chargée directement sous une bétonnière sans dispositifs spéciaux ou sans reprise, et qui puisse passer dans les ouvertures d'un bâtiment de sorte qu'elle puisse être utilisée à tous les stades d'évolution d'un chantier.
A cet effet, la benne selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle est constituée par un parallélépipède ouvert sur le dessus, de hauteur inférieure à -sa longueur muni sur un côté de moyens d'accrochage soit au mât d'un chariot élévateur, soit au tablier porte-outil d'un bras télescopique et sur le côté d'une ouverture d'évacuation sensiblement verticale munie d'un volet, le fond dudit parallélépipède étant légèrement incline vers le bas en direction de l'ouverture d'évacuation.
La valeur de cette pente n'est pas à elle seule suffisante pour assurer un déversement correct, du contenu de la benne. Mais ce résultat est atteint en combinant cette pente avec les possibilités d'inclinaison vers l'avant des mâts des chariots élévateurs ou des tabliers porte-outils des chariots à bras télescopiques.
L'encombrement vertical de la benne selon l'invention n'excédera pas 75 mm, ce qui lui permet à la fois d'etre chargée directement sous une bétonnière et de passer par la majorité les ouvertures d'un bâtiment existant.
Ainsi, on élimine les opérations de reprise du béton tant au chargement qu'au déchargement.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront de la description qui va suivre d'un exemple de realisation non limitatif en référence aux dessins annexés sur lesquels La figure l est une vue schématique de profil d'une benne à béton conforme à l'invention La figure 2 est une vue de dessus de la benne de la figure i La figure 3 est une vue schématique montrant la benne des figures 1 et 2 montée sur le mât d'un chariot élévateur à fourches par l'intermédiiare d'un dispositif basculeur La figure 4 illustre le montage de la benne des figures 1 et 2 sur un chariot élévateur à bras mobile ou télescopique La figure 5 illustre le montage de la benne des figures 1 et 2 directement sur le mât d'un chariot élévateur à fourches.
Comme on le voit sur les figures 1 et 2, la benne selon l'invention se présente comme un parallélépipède dont la longueur est supérieure à la hauteur et dont le côté supérieur est ouvert.
Ce parallélépipède comporte une face arrière 1, deux faces latérales 2, 3 disposées à angle droit par rapport à la face arrière 1, et se raccordant à deux faces latérales 4, 5 convergeantes en direction d'une face frontale 6 munie en partie basse d'une ouverture d'évacuation 7.
Sur les faces convergentes 4, 5 sont articulés deux bras 8, 9 portant un volet 1 venant masquer l'ouverture 7.
Le volet 1 est muni d'une poignée de manutention 11 et d'une chaîne 12 coopérant avec un doigt 13 fixé en partie haute de la face frontale, pour le réglage et le maintien de la position ouverte dudit volet.
Le fond 14 de la benne s'étend obliquement vers le haut 'depuis le bas de l'ouverture 7 jusqu'a la face arrière 1.
Si l'on dispose une source de tension (6) dont on fait varier la tension V2 lue sur le voltmètre (7), on observe sur l'ampèremètre (8) le passage d'un courant 12 important et variable selon la tension et la polarité.
La figure 2 représente un dispositif qu' on a utilisé pour déterminer les caractéristiques du post-plasma obtenu en utilisant comme charge gazeuse Ar + H2, d'une part, et Ar + H2 + CH4, d'autre part.
Ce dispositif comporte une cathode (1) en tungstène d'un diamètre de 6 mm, une anode (2) avec une buse d'un diamètre de 4 mm, la distance de la cathode à l'anode étant de 35 mm. Une sonde en tungstène (9) d'un diamètre de 4 mm est placée à 25 mm de l'extrémité de l'anode. Le tungstène a été choisi pour ses propriétés thermiques réfractaires.
La tension (VKA) et l'intensité (IKA) entre la cathode (1) et l'anode (2) ont été respectivement de 95 volts et de 150 ampères.
En disposant entre l'anode (2) et la sonde (9) une source de tension (6) et en faisant varier la tension V indiquée par le voltmètre (7) on fait varier l'intensité I du courant lue sur l'ampère- mètre (8). On détermine ainsi l'intensité de saturation (IS). On appelle intensité de saturation l'intensité qui n'augmente plus lorsqu'on augmente la tension.
Sur la figure 3, les courbes 2a et 2b représentent les intensités du courant, (exprimées en mA pour la courbe 2a et en luA pour la courbe 2b) obtenues en fonction de la tension en volt entre la cathode et l'anode. La courbe 2a correspond a un post-plasma riche en hydrogène (gaz plasmagène : Ar + H2), tandis que la courbe 2b correspond à un post-plasma également riche en CH4 (gaz plasmagène : Ar + H2 + CH4).
La courbe 2a correspond à un très fort courant électronique de saturation et il faut des tensions de plus de 60 volts pour extraire totalement les électrons. En présence de CH4, la courbe 2b correspond à un courant très faible ne dépassant pas 15 microampères.
La figure 4 représente le courant obtenu en inversant la polarité de la tension, en collectant probablement des ions, mais le courant se sature avec des tensions de l'ordre de 30 volts et n'est que 1/2000-me du courant précédent.
La courbe 2a' correspond à un gaz riche en H2 et l'intensité de saturation est de l'ordre de 40 à 45 microampères.
La courbe 2b' correspond à une atmosphère contenant H2 et CH4 et l'intensité de saturation ne dépasse pas 3 microampères.
Ces mesures et relevés ont été faits en atmosphère confinée, ctest- -dire en l'absence totale d'oxygène qui aurait créé des réactions d'oxydation.
Ces mesures indiquent qu'on doit appliquer à la torche à plasma de préférence une tension positive par rapport à l'anode et que l'on pourra considérer le courant comme d'origine électronique, les électrons ayant une très forte mobilité par rapport aux ions.
Ces courbes montrent également qu'un post-plasma provenant de gaz fortement chargés initialement en CH4 semble très fortement dé ionisé ou que la mobilité des charges est très faible. Ceci peut s'expliquer par la très forte réactivité des produits et radicaux issus de CH4, qui tendent dans un premier temps à repasser à l'état neutre ou moléculaire stable, ou encore à absorber les électrons libres à forte mobilité.
Par ailleurs, on note que l'intensité de saturation (Is) par tension positive avec un gaz riche en H2 est de 90 mA, soit 90.000 /uA, tandis que l'intensité de saturation pour un mélange de H2 + CH4 est d'environ 15 pA et on a le rapport I+s(H2)/I+s(H2+CH4) = 6300+ Is (H2) et Is (H2 + CH4) désignant les intensités de saturation pour une charge gazeuse essentiellement chargée en hydrogène, respectivement pour une charge gazeuse fortement chargée en CH4.
En tension négative, ce rapport est de 45 =15 D'autres expériences ont été réalisées avec le dispositif représenté par la figure 5.
Sur cette figure, une cathode-(l) de 6 mm de diamètre est placée près d'une anode (2) comportant une buse de 4 mm de diamètre. Une anode tangentielle (9) de 16 mm de diamètre est placée à une distance de 43 mm de l'anode (2), séparée de 2 à 3 mm de l'arc primaire (10) qui se forme lorsqu'on établit une différence de potentiel de 240 volts entre l'anode tangentielle (9) et la cathode (1). L'intensité du courant entre l'anode (9) et la cathode (1) est de 130 ampères. En faisant passer des débits d'environ 90 Nl/minute à travers la buse de l'anode (2), l'arc primaire comporte une puissance d'environ 30 kW et un arc de retour (1OR) est accroché à l'anode tangentielle (9).On constate à l'aide d'un voltmètre (11) que le post-arc est encore à une différence de potentiel de 24 volts par rapport a l'anode (9), à 200 mm de celle-ci.
Comme décrit précédemment, la lame de scie ou bande BS est supportée par les galets 107 et 108 et les blocs 104 sur les deux faces plates et par le bloc
à la face arrière.
Un vérin pivotant P-CYL est raccordé au corps
pivotant PB afin que la lame BS puisse être mise en direction verticale et en direction horizontale. La partie de base de ce vérin est raccordée au boîtier 101 de guidage et sa tige de piston est raccordée au 25 corps pivotant PB.
Un axe 110 de butée est fixé à la partie supérieure du corps pivotant PB afin qu'il vienne au contact de boulons 111 de butée (un seul étant représenté) fixés à des supports eux-mêmes fixés au boîtier 101 et permet30 tant un réglage de la position de pivotement, de manière
que le pivotement du corps PB soit limité.
Un vérin L-CYL de blocage (figure 5(B)) est monté sur l'organe de guidage 102 afin qu'il bloque le corps pivotant PB. Un piston 112 de ce vérin est relié à un organe 113 de pincement à l'aide d'un boulon. Un ressort 114 est placé entre le piston 112 et l'organe 113 de pincement afin que le corps pivotant PB puisse
être débloqué.
En conséquence, lorsque le vérin pivotant P-CYL est commandé, le corps pivotant PB pivote d'un angle droit et dirige la partie dentée de la lame de scie vers la direction verticale ou horizontale. Ensuite, lorsque 5 le vérin de blocage L-CYL est manoeuvré, le corps pivotant PB est fixé entre l'organe 113 de pincement et l'organe
102 de guidage.
Il est possible d'utiliser un mécanisme à moteur
et pignon ou tout autre mécanisme à la place du vérin 10 pivotant P-CYL.
La construction du dispositif droit de guidage
de la bande BSG(R) est presque la même que celle du dispositif gauche précité BSG(L), mis à part le corps pivotant, si bien qu'on ne la décrit pas.
La figure 6 représente un circuit hydraulique de commande du vérin de soulèvement L-CYL, du vérin d'équilibrage B-CYL, et de deux vérins de déplacement en
translation avant-arrière BF-CYL(R) et BF-CYL(L).
pectivement dans les joues supérieure et inférieure du feu, ici constituées de prolongements horizontaux du ré- flecteur 20. Mais comme on le verra plus loin, d'autres
modes de fixation sont possibles dans l'esprit de l'inven-
On a représenté sur la figure 2 un feu de signa-
lisation conforme à une seconde forme de réalisation de l'invention. Sur cette figure et sur les suivantes,des éléments ou parties identiques ou similaires à ceux de la
figure 1 sont désignés par les mêmes numéros de référence.
La figure 2 représente un feu de coin, tel qu'un feu clignotant arrière, susceptible d'émettre un faisceau lumineux non seulement vers l'arrière (rayons R1 et R2) mais également vers le côté (rayon R3), le réflecteur 20
comportant deux parties 20a, 20b conformées à cet effet.
Dans cette forme de réalisation, la feuille souple sérigraphiée 50 est fixée dans le feu en étant accolée à la surface externe du ballon 40. Ce dernier
est donc conçu pour que sa surface externe soit dévelop-
pable, par exemple cylindrique à base circulaire ou non-
circulaire. Comme le montre la figure 3, les motifs des zones opaques 52 du masque 50 sont adaptés aux éléments
optiques réfringents formés sur la surface du globe 30.
Plus précisément le globe 30 est constitué par une partie arrière généralement droite 30a, une partie latérale 30b
également droite, et une partie de coin 30c, coudée à en-
viron 90 , réunissant les parties 30a et 30b. La partie
L'invention s'applique notamment aux articles de mercerie tels que les boutons.
L'état de la technique des moules permettant l'injection dans des bosselages est le suivant 10) injection dans des moules trois plaques avec plaque dévétisseuse.
20) injection en sous-marin , par exemple injection en courge.
Le premier inconvénient réside dans le prix du moule, qui, de par sa conception, n'est amortissable que pour de très grandes séries.
Deuxièmement, la mise en oeuvre de ces moules est très lourde du fait du nombre de pièces (soit au montage dudit moule, soit au changement d'empreinte dans les moules).
Troisième inconvénient : il est nécessaire d'avoir des éjecteurs qui laissent une trace sur l'article moulé.
En ce qui concerne ces moules actuels permettant d'injecter dans des bosselages, ceux-ci sont chers. Le fait de préparer dans le moule une courge d'injection pour chaque objet, par usinage, coûte très cher.
Une fois le moule réalisé, il est très difficile et très coûteux de changer la face, le dos ou le diamètre de l'objet à injecter, donc t:ute modification du moule d'injection est très coûteuse, il est donc nécessaire de réaliser de très grandes quantités d'objets moulés pour amortir le coût de fabrication du moule d'injection (par exemple il faut réaliser environ CINQ MILLIONS de boutons pour amortir un moule actuel).
Enfin, tous ces canaux d'injection usinés dans un moule complexe, fabriqués en plusieurs parties, font perdre beaucoup de matière à injecter (par exemple environ 150 kgs de matière pour environ 28 kgs de boutons).
L'invention tend à résoudre tous ces inconvénients.
Elle permet d'utiliser un moule beaucoup plus simple, plus facile à modifier. On perd moins de matière. La trace du point d'injection est masquée, mais située, par exemple, en dessous du plan de la face appelée "dos". Cette configuration du point d'injection permet à l'objet moulé de ne pas présenter de protubérances gênantes pour l'esthétique et le toucher de l'objet moulé. Les demi-bosselages, du fait de leur mobilité, sont aisément interchangeables.
Le procédé selon l'invention consiste à prévoir que la carotte d'injection aboutisse dans l'empreinte au niveau d'un bosselage formé à partir d'au moins deux demi-bosselages ménagés dans les parties mobiles d'un moule, prévu à cet effet, par exemple, soit sur le côté appelé "Dos", soit sur le côté appelé "Face" de la pièce à injecter.
Selon un mode de réalisation préféré, les parties mobiles du moule sont des mâchoires.
Dans le cas d'un moule classique avec des mâchoires et une semelle, les canaux débouchent dans les demi-empreintes par l'intermédiaire des demi-bosselages.
Les dessins ci-joints sont donnés à titre d'exemple indicatif et non limitatif. Ils représentent un mode de réalisation préféré selon l'invention. Ils permettront de comprendre aisément l'invention.
Les figures 4 et 5 mettent en évidence un bouton moulé par injection selon la méthode actuelle.
D'autres herpès virus considérés comme convenant pour ces modes opératoires sont l'herpès virus félin (HVF), l'herpès virus équin (HVE), et l'herpès virus canin (HVC). Ces agents pathogènes provoquent une maladie chez chacun de leurs hôtes- respectifs.
L'herpès virus félin provoque une rhinotrachéite féline, une infection aiguë du tractus respiratoire supérieur caractérisée par une fièvre, des éternuements prononcés, des sécrétions nasales et lacrymales et une dépression.
Le virus peut provoquer une ulcération de la cornée et un avortement. Les voies et les cornets du nez présentent des foyers de nécrose, et les amygdales sont hypertrophiées et hémorragiques. L'herpès virus équin provoque une rhinopneumonie, un avortement, un exanthème des organes génitaux et, occasionnellement, des troubles neurologiques. La maladie aiguë est caractérisée par une fièvre, une anorexie et un écoulement nasal séreux abondant. Les symptômes neurologiques, lorsqu'ils sont présents, consistent en une ataxie, une faiblesse et une paralysie. L'herpès virus canin provoque une maladie grave chez les chiots, chez lesquels la mortalité peut atteindre 80 %. La maladie est caractérisée par une virémie, une anorexie, des troubles respiratoires, des douleurs abdominales, des vomissements et des cris incessants.En général, il n'y a pas de fievre. Les lésions principales sont une nécrose disséminée et des hémorragies dans les reins, le foie et les poumons.
La biologie moléculaire concernant les herpès virus félin, équin et canin est dans sa phase initiale. Des cartes de restriction partielles sont disponibles pour l'herpès virus équin, et des progrès sont eff-ectués dans au moins un laboratoire pour l'herpès virus félin. Au-delà de ce type d'analyse de génome, aucune preuve de la délétion ou de l'insertion de gènes étrangers dans ces virus n'est disponible.
La présente invention comprend l'utilisation d'herpès virus soumis à des manipulations génétiques afin de protéger des animaux contre une maladie.
La nature des délétions dans les herpès virus servant à atténuer le virus au degré convenable n'est pas évidente. Même l'essai de canditats-vaccins chez des modèles animaux, par exemple la souris, ne constitue pas une prédiction convenable de l'inocuité et de l'efficacite du vaccin chez l'espèce animale servant de cible, par exemple le porc Un autre objectif de la présente invention est un vaccin contre la maladie à virus pseudorabique du porc (herpes virus suis, herpes virus 1 suid ou virus de la maladie de Aujesky). Le porc est l'hotte naturel du virus pseudorabique, l'infection étant fréquemment inapparente chez les animaux âgés mais pouvant être caractérisée par une fièvre, des convulsions et la mort, en particulier chez les animaux plus jeunes.
Le virus pseudorabique infecte également les bovins, les moutons, les chiens, les chats, les furets, les renards et les rats (37), chez lesquels l'infection provoque habituellement la mort. La mort est habituellement précédée par un prurit intense, une folie, une encéphalite, une paralysie et un coma. Des vaccins vivants traditionnels sont disponibles pour l'utilisation chez le porc, mais ils sont létaux pour les autres animaux. Un vaccin amélioré pour la pseudorage induirait une réponse immunitaire plus fiable chez le porc, serait atténué de manière précise afin d.'être incapable d'une réversion de virulence, et ne provoquerait pas de maladie chez d'autres hôtes.
Le virus pseudorabique, un herpès virus alpha du porc, possède un gène de classe D (23) ; c'est å-dire qu'il contient deux copies d'une seule région de répétition. une située entre la région d'ADN longue unique et la région d'ADN courte unique et une au niveau de l'extrémité de la région courte unique (voir figure 1). Le virus de l'herpès simplex est un herpès virus alpha ayant un génome de classe E (23) ; c'est-à-dire qu'il contient deux copies de chacun des éléments de répétition. L'herpès saimiri est un herpès virus gamma ayant un génome de classe B ; c'est-à-dire qu'il contient de nombreuses répétitions de la même séquence aux deux extrémités (23).Ces différentes classes d'herpès virus présentant des différences importantes dans la structure du génome, et les différents virus attaquant différentes cellules dans leurs hôtes et provoquant des pathologies différentes, il est nécessaire dans chaque cas d'établir quelles régions particulières peuvent être éliminées afin d'obtenir une atténuation et quelles régions peuvent être modifiées pour obtenir l'expression de gènes étrangers.
Le virus pseudorabique a été étudié en utilisant les outils de la-biologie moléculaire, comprenant l'utilisation des techniques d'ADN recombinant.
Des cartes de restriction BamHI, KpnI et BgIII du génome viral ont été publiées (24, 27). Des procédés de transfection d'ADN ont été utilisés pour préserver des mutants du virus par délétion et sensibles à la température par le procédé de recombinaison homologue (24). Il existe deux exemples de délétions qui ont été produites dans le génome du virus pseudorabique - l'une est une délétion du gène thymidine-kinase (25), décrite également dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N" 4 514 497 intitulé "Modified Live Pseudorabies Viruses". Ce brevet apporte des enseignements seulement sur des délétions concernant la thymidine-kinase et ne suggère pas d'autres délétions d'atténuation, pas plus qu'il ne suggère l'insertion de séquences d'ADN étranger.L'autre référence concerne la délétion d'une petite séquence d'ADN aux environs d'un site de restriction HindîlI dans la région de répétition (26), sur laquelle est basé le brevet européen publié sous le N" 0141458, correspondant â la demande de brevet européen N" 84 201475.8, déposée le 12 Octobre 1984. Cette demande de brevet ne fait connaftre ni ne suggère des délétions d'atténuation, pas plus qu'il ne fait connaf- tre ou nesuggère l'insertion de séquences d'ADN dans le virus pseudorabique.
La présente invention concerne des délétions qui ont été introduites dans le génome du virus pseudorabique à des sites précédemment non décrits. Des séquences d'ADN étranger ont été également introduites dans le génome du virus pseudorabique atténué et exprimées sous forme de protéines. Une forme de réalisation de la présente invention concerne un vaccin utile pour la prévention de la pseudorage et d'autres maladies porcines avec un seul inoculum.