INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
PREPARATION, RESTRICTION ET MODIFICATION DE L'ADN Sauf spécification contraire, toutes les méthodes utilisées pour les modes opératoires suivants sont telles que décrites dans les pages indiquées de Maniatis et col., 1982, "Molecular Cloning", Cold Spring Harbor Laboratory: préparation d'ADN de plasmide (pages 86-96), digestion de restriction de 1'ADN (pages 98-106) et purification de fragments de restriction à partir de gels de gélose à faible température de fusion (pages 157-161 et page 170), conditions de réaction pour 1 enzyme ADN polymérase de E. coli du fragment de Klenow (pages 107-114), réactioP de phosphatase alcaline de l'intestin de veau (pages 133-134) et réaction des ligases (page 146), préparation de sondes bien translatées (pages 109-112) et modes opératoires pour l'hybridation ADN-ADN (pages 324-325).
CONSTRUCTION DE VECTEURS DE PLASMIDES CONTENANT LE VIRUS DE VACCINE, PROMOTEUR, LIE PAR LIGATION AUX SEQUENCES DE CODAGE DU GENE DE L'ENVELOPPE DE LAV On décrit ci-après la construction de divers vecteurs de plasmides contenant des séquences de codage du gene de l'enveloppe de LAV (adénopathie) précédées par des séquences de commande de transcription du virus de la vaccine; ces fréquences chimériques sont entourées par de 1'ADN TK.
Ces vecteurs de plasmides recombinants ont servi par la suite à insérer, par recombinaisonwin vivo", les séquences de codage d'enveloppe de LAV dans le génome du virus de la vaccine.
On a purifié la séquence de codage de l'enveloppe de LAV à partir de pRS-3, qui est un sous-clone de lambda J19 (S. Wain-Hobson et col., 1985, Cell 40:9) et on l'a insérée dans le plasmide pGS20 (M. Mackett, G.L. Smith et B. Moss, 1984, J. Virol. 49, 857-864) en aval par rapport au promoteur 7,5 K de vaccine contenu dans pGS20, afin de construire pv-envî, pv-env2 et pv-env5. Dans chacune de ces constructions, le gène chimérique (c'est-à-dire le promoteur de vaccine 7,5 K relié par ligation à la séquence des nucléotides spécifiques de LAV) est entouré par les séquences de gène TK de la vaccine.
Comme précédemment expliqué, PRS-3 consiste en un fragment de 3840 paires de bases, de EcoRI à SstI, de la séquence d'ADN de LAV contenue par insertion dans lambda J19 cloné dans le site EcoRI et SstI de pUCi8. Cela a été obtenu par clonage du fragment de restriction SstI de J19 introduit dans le site SstI de pUC18 pour créer pBT-1 > qui a été ensuite soumis à digestion avec EcoRI et soumis à nouvelle ligation. On a utilisé cet ADN pour transformer E.coli et l'on a isolé le plasmide pRS-3. L'ADN spécifique de LAV, contenu dans pRS-3, va du site EcoRI, logé au nucléotide 5289, au site SstI situé au nucléotide 9129 sur le génome de LAV (S. Wain-Hobson et col., 1985, Cell 40:9) ; voir figure 2).
CONSTRUCTION DE VECTEURS DE PLASMIDES CONTENANT DU VIRUS DE VACCINE PROMOTEUR RELIE PAR LIGATION A LA SEQUENCE CODANT EN 3' DU GENE DE L'ENVELOPPE DE LAV On a soumis cinq microgrammes d'ADN de plasmide de pRS-3 à digestion,jusqu'à achèvement, avec l'enzyme de restriction KpnI, et l'on a résolu les fragments résultants sur un gel de gélose à 1 % à faible température de fusion.
On a isolé et purifié un fragment de 2,68 pKb ( kilopaires de bases). Ce fragment a contenu de 1'ADN spécifique de LAV allant du nucléotide numéro 5889 au numéro 8572 et comprenant des séquences (5889-8349) qui codent la portion carbonée terminale de la protéine d'enveloppe de LAV.
On a mélangé 1 pg de ce fragment avec 0,5 ug d'ADN de pGS 20 qui a été au préalable linéarisé à l'aide de l'enzyme de restriction BamHI. On a laissé une ligation de ces deux fragments se poursuivre durant 24 heures à 4"C en présence d'agents de liaison de type oligodésoxynucléotide consistant en 0,6 )ug de 5'-GATCCACCATGGTAC-3'-OH et 0,3 pg de 5'-CATGGTG-3'-OH.Ces agents de liaison ont servi (a) à transformer les extrémités cohésives de KpnI du fragment à 2,68 pKb provenant de 1'ADN de plasmide de pRS-3 en des extrémités cohésives de BamHI qui sont complémentaires des extrémités cohésives de BamHI de 1'ADN de pGS 20 clivé et (b) à fournir une séquence d'initiation de translation (ATG) dans le cadre correct de lecture de la séquence de gène d'enveloppe de LAV ainsi que des séquences de nucléotides nécessaires pour une translation efficace de l'ARNm transcrit.On a utilisé le mélange de ligation pour transformer la souche de E. coli MC1000. On a soumis de 1'ADN de plasmide provenant de transformants résistant à l'ampicilline à des essais de détermination de l'orientation de la séquence insérée et de régénération des sites BamHI, NcOI et KpnI aux jonctions de ligation. La structure confirmée du plasmide voulu, pv-env2, est montrée sur la figure 3 dans laquelle la partie carboxylique de codage du gène d'enveloppe de LAV, correspondant aux numéros de nucléotides 58898672 (comme représenté sur la figure 2) est située en aval par rapport au promoteur de vaccine à 7,5 K. La séquence d'enveloppe de LAV est placée dans le cadre correct de lecture par rapport à 1'ATG d'initiation fourni par 1'ADN de liaison.
CONSTRUCTION DES VECTEURS DE PLASMIDES CONTENANT DU PROMOTEUR DE VIRUS DE VACCINE RELIE PAR LIGATION A LA SEQUENCE CODANT EN 5' DU GENE D'ENVELOPPE DE LAV On a soumis 5 microgrammes d'ADN de plasmide de pRS-3 à digesti.on,jusqutå achèvement, avec l'enzyme de restriction Avaîl et l'on a résolu les fragments résultants sur un gel de gelose à 1 % a faible température de fusion.
On a isolé et purifié un fragment de 0,82 pKb. Ce fragment a contenu des séquences spécifiques de LAV entre les numéros de nucléotides 5671 et 6490 (comme représenté sur la figure 2). Cela comprend des séquences (numéros de nucléotide 57666490) codant la partie terminale azotée de la protéine d'enveloppe et 95 paires de bases de séquences non translatées de LAV voisines de 5'. On a traité ce fragment avec 1'ADN polymérase de fragment de Klenow de E. coli en présence d'un excès de triphosphate de désoxyribonucléotide. Le fragment résultant à extrémité émoussée a été soumis à fixa tion par ligation sur 0,5 pg d'ADN de pGS 20 qui a été au préalable linéarisé avec SmaI et traité par de la phosphatase alcaline d'intestins de veau ( calf-intestine alcaline phosphatase ; CIAP).On a laissé la ligation se poursuivre durant 16 heures à 12"C. On a utilisé le mélange de ligation pour transformer la souche MClGOO de E.coli. On a soumis de 1'ADN de plasmide provenant de transformants résistants à l'ampicilline à des essais de détermination de l'orientation des séquences correspondant à LAV insérées, par rapport aux séquences de commande de transcription du virus de la vaccine. La structure confirmée pour le plasmide voulu, pv-envî, est présentée sur la figure 4, dans laquelle la partie amino de codage du gène de l'enveloppe de LAV,conte- nant sa propre séquence d'initiation ATG, correspondant aux nucléotides numéros 6671 à 6490 (comme représenté sur la figure 2),est située en aval par rapport au promoteur de vaccine 7,5 K.
CONSTRUCTION DES VECTEURS DE PLASMIDES CONTENANT DU VIRUS DE VACCINE PROMOTEUR RELIE PAR LIGATION A LA TOTALITE DES SEQUENCES DE CODAGE DU GENE D'ENVELOPPE DE LAV On a soumis 2 microgrammes d'ADN de plasmide pv-envl à digestion,jusqu'à achèvement, par l'enzyme de restriction StuI, PvuI et XhoI. On a résolu les fragments résultants sur un gel de gélose à 1 x à faible température de fusion.
On a isolé et purifié le fragment à 4 pKb, contenant l'élé- ment de commande de transcription du virus de la vaccine et la partie 5' des séquences de codage d'enveloppe LAV.
On a relié par ligation ce fragment à un fragment de 6,5 pKb engendré par des digestions de pv-env2 à l'aide des enzymes de restriction StuI et PvuI. On a utilisé le mélange de ligation pour transformer la souche Mi 1000 de E. coli.
On a choisi des transformants pouvant résister 9 l'ampicilline. On a soumis de 1'ADN de plasmide provenant de transformants individuels à des essais de détermination de la régénération des sites de restriction StuI et PvuI et de la présence des fragments apparentés à 4 paires de kilobases (4 pKb) et 6,5 pKb. Le plasmide voulu, pv-env5, décrit sur la figure 4, contient la totalité du gène d'enveloppe de LAV correspondant aux nucléotides n" 5766 à 8349 (comme représenté sur la figure 2), relié par ligation en aval des éléments de commande de transcription du virus de la vaccine.
Une validation annule la précédente. Lorsque la prise en compte des points de contrôle est impossible, le système d'observation de la machine sous-test étant insuffisant, un message d'erreur est affiché.
Exemple SET~CHECKPOINT (CHECK1, CHECK2) ICI.2 VALIDATION D'UNE OU PLUSIEURS SIMULATIONS Syntaxe Validation de simulation ::= SET SIMULATION identificateur , identificateur i Sémantique Cette validation permet de mettre en service des simulations préalablement déclarées.
Les identificateurs doivent être des identificateurs de simulation.
La recherche dans le programme sous test des instructions à simuler et la modification du code sous test sont effectuées lors de la validation de la simulation.
Lorsque cette recherche est infructueuse, une erreur est signalée.
ICI.3 INVALIDATION D'UNE OU PLUSIEURS SIMULATIONS Syntaxe Invalidation de simulation ::= RESET~SIMULATION C identificateur (, identifi cateur i ] Sémantique Cette invalidation permet de mettre hors service des simulations préalablement validées.
Si aucun identificateur n'est présent, toutes les simulations préalablement validées sont invalidées.
III.4. CHARGEMENT D'UN PROGRAMME SOUS-TEST Syntaxe chargementd~ 'un~programme sous~test ::= LOAD Nom~de~fichier Sémantique Cette instruction effectue, dans la mémoire de la machine sous-test, le chargement d'un fichier caractérisé par son nom et de format auto-chargeable.
Exemple LOAD - PROGTEST; Chargement du programme contenu dans le fichier PROGTEST.
ICI.5 LANCEMENT D'EXECUTION Deux instructions permettent le lancement d'un programme sous-test; l'une adaptée au test en temps réel : START qui est à utiliser avec l'instruction SET CHECKPOINT, l'autre d'utilisation plus simple pour le test statique EXEC.
III.5.1. L'ntruction EXEC Syntaxe Lancement~d~'unprogramme sous test~par~EXEC ::= EXERCE point~de~lancement ] (TO liste~de~point~d'~arrêt ] point de lancement : : = point de contrôle déclaré liste~des~paramètres~actuels liste~depointsd'~arrêt ::= pointbe contrôlebéclaré Sémantique Cette instruction effectue l'exécution d'un programme sous-test à partir d'un point de lancement jusqu'à un point de contrôle s'il en existe un défini, sinon jusqu là une sortie normale de la procédure sous-test. Lorsque l'exécution s'arrête sur un point de contrôle, celui-ci sera considéré à 1'EXEC suivant comme point de lancement Si ce dernier n'est pas indiqué.
Lors d'un EXEC, il y a invalidation des points de contrôle précédemment posés.
Un point de lancement est un point de contrôle particulier.
Il est possible d'utiliser des variables de test ou des variables sous-test comme paramètres réels à une pièce sous-test quel que soit le mode de passage de ces paramètres (par adresse ou par valeur).
Exemple EXEC PROGTEST (ESSAI) TO PCl Exécution de la procédure PROGTEST dont ESSAI est le paramètre jusqu'au point d'arrêt PC1.
Outre le principe actif, ces compositions contiennent, en général, un véhicule et/ou un agent tensio-actif, non ionique, assurant, en outre, une dispersion uniforme des substances constitutives du mélange.
Le vehicule utilisé peut être un liquide, tel que l'eau, l'alcool, les hydrocarbures ou autres solvants organiques, une huile minérale, animale ou végétale, une poudre tel que le talc, les argiles, les silicates, le kieselguhr ou un solide combustible.
Les compositions -insecti ci des selon l'invention contiennent de préférence de 0,005 X à 10 % en poids de matiere active.
Selon un mode opératoire avantageux, pour un usage domestique, les compositions selon l'invention sont utilisées sous forme de compositions fumigantes.
Les compositions selon l'invention peuvent alors être avantageusement constituées, pour la partie non active, d'un serpentin insecticide (ou coil) combustible, ou encore d'un substrat fibreux incombustible. Dans ce dernier cas, le fumigant obtenu après incorporation de la matière active est placé sur un appareil chauffant tel qu'un électromosquito destroyer.
Dans le cas où l'on utilise un serpentin insecticide, le support inerte peut être, par exemple, composé de marc de pyrèthre, poudre de Tabu (ou poudre de feuilles Machilus Thumbergii), poudre de tige de pyrèthre, poudre de feuille de cèdre, poudre de bois (telle que de la sciure de pin) amidon et poudre de coque de noix coco.
La dose de matière active peut alors être, par exemple1 de 0,03 à 1 % en poids.
Dans le cas où l'on utilise un support fibreux incombustible, la dose de matière active peut alors être, par exemple, de 0,03 à 95 % en poids.
Les compositions selon l'invention pour un usage domestique peuvent aussi être obtenues en préparant une huile pulvérisable à base de principe actif, cette huile imbibant la mèche d'une lampe et étant alors soumise à la combustion.
La concentration du principe actif incorporé à l'huile est, de préférence, de 0,03 à 95 % en poids.
Les compositions insecticides selon l'invention, comme les compositions acaricides et nématicides, peuvent être additionnées éventuellement d'un ou plusieurs autres agents pesticides. Les compositions acaricides et nématicides peuvent se presenter notamment sous forme de poudre, granules, suspensions, mulsions, solutions.
Pour l'usage acaricide, on utilise de préférence des poudres mouillables, pour pulvérisation foliaire contenant de 1 à 80 1 ou des liquides pour pulverisation foliaire contenant de 1 à 500 g/l de principe actif. On peut également employer des poudres pour poudrage foliaire contenant de 0,05 à 3 % de matière active.
L'invention a donc pour objet les compositions acaricides, destinées à la lutte contre les acariens parasites des végétaux, caractérisées en ce qu'elles renferment au moins l'un des composés de formule générale I, définis précédemment.
Pour l'usage nématicide, on utilise de préférence des liquides pour traitement des sols contenant de 300 à 500 g/l de principe actif.
Les composés acaricides et nématicides selon l'invention sont utilises, de préférence, a des doses comprises entre 1 et 100 g de matière active à l'hectare.
Pour exalter l'activité biologique des produits de l'invention, on peut les additionner a des synergistes classiques utilises en pareil cas tel que le 1-(2,5,8-trioxadodecyl) 2-propyl 4,5-methylenedioxy benzene (ou butoxyde de piperonyle) ou la N-(2-ethyl heptyl) bicyclo/2,2-1/-5-heptene-2,3-di carboximide, ou le pi peronyl -bi s-2-( 2' - n-butoxy éthoxy) éthylacétal (ou tropital).
Lorsque le boitier se déplace pour pousser la pièce, d'aord le doigt entre en contact avec la pièce provoquant l'action de la came sur le commutateur, qui envoie un signal dont le rôle est défini ci-dessous Ensuite, le boitier déplace la pièce jusqu'à la position d'usinage puis revient à sa position initiale.
Sous l'action d'un moyen de rappel, le doigt revient à sa position dite "position initiale".
Le signal émis par le comutateur commande les unités d'usinage de la pièce amenée.
Selon une variante, le doigt réalise à la fois la fonction d'amenage et de palpage.
En effet, le doigt est limité dans sa course par une butée qui s'appuie sur le boitier lors du cycle de fonctionnement le boitier s'approche de la pièce, le doigt entre en contact avec la pièce, se déplace d'une longueur permettant le déclenchement du commutateur par la came, il est arrêté dans sa course par la butée définie en position de poussage et donc pousse la pièce à amener.
Lorsque cette pièce est en position d'usinage le boitier revient à sa position initiale.
Selon une première conception, le doigt de palpage revient à sa position initiale sous l'action d'un moyen de rappel.
Selon une seconde conception, le doigt reste enfoncé dans le boitier dans la position de "poussage". Le doigt retourne à sa position initiale lorsqu'il est actionné par un moyen de couplage défini ci-après De forme préférentielle, le boitier comporte deux doigts qui réalisent chacun à leur tour les deux fonctions de palpage et de poussage décrites ci-dessous.
La pièce à pousser comporte des bossages disposés alternés qui se trouvent soit en face du premier doigt, soit en face du second doigt.
Chaque doigt comporte en plus sur sa partie postérieure des moyens de couplage avec la partie correspondante de l'autre doigt.
Ces moyens de couplage permettent lorsque un doigt s'enfonce jusqu'à sa position de "poussage", de repousser le second doigt dans sa position init a le.
Le moyen de couplage est constitué par une rondelle de diamètre supérieur à l'entrée axe des palpeurs et comportant deux trous situés au niveau de deux détons eux-mêmes fixés dans chaque doigt.
Le système peut être inversé, les trous dans les doigts et les tétons sur la rondelle.
La rondelle peut être elle-même fixée en son centre au boitier par un axe perpendiculaire à son. plan ou bien reposer par sa partie périphérique contre le boitier.
Lors de la rotation de la rondelle, les tétons se déplacent latéralement (ou les trous) pour compenser ce déplacement il existe un jeu latéral entre les trous et les tétons, ou bien un certain espace de débattement entre les deux parties les plus rapprochées des doigts.
Les cames ou poussoirs sont fixées de préférence sur la face postérieure des doigts face en regard avec le fond du boitier. Elles peuvent être également situées sur la partie latérale des doigts. Les commutateurs sont fixés selon la position des cames sur le fond ou les parties latérales du boitier.
ou tulipe d'amarrage 29 à l'extrémité libre de la colonnette 30.
La tulipe 29 sert à guider un appui de réaction correspondant d'une monture 17b antagoniste, comme expliqué par la suite. Chaque tulipe 29 a la forme d'un guide tronconique attaché par sa petite base à la colonnette 30. A l'extrémité extérieure de chaque colonnette 30 (o commence le guide 29) se trouve une plaque terminale (non représentée) de plus grand diamètre que la
colonnette 30.
La monture d'amarrage 17b, mentionnée plus haut, comporte une plaque triangulaire 22. Cette plaque d'une première monture 17b est fixée (par boulonnage par exemple) à une extrémité du module à charge utile 15. La plaque 22 d'une deuxième monture 17b est fixée à une extrémité du module de propulsion 13. Des appuis de réaction 26a, 27a et 28a aux angles de la plaque 22 s'accouplent aux appuis de réaction 26, 27 et 28 sur la plaque 20 du module d'amarrage 17a du bus, lors de l'assemblage du module de bus 11 avec le module 13 respectivement le module 15. Chacun des appuis de réaction 26a, 27a et 28a comporte une colonnette 30a portant à son extrémité extérieure une plaque de réaction 24a. La plaque terminale ou plaque de réaction précitée sur chaque colonnette 30 de la monture 17a est semblable aux plaques de
réaction 24a sur les colonnettes 30a.
Au centre de la plaque triangulaire 22 est situé un tourillon 21a destiné à coopérer avec le verrou d'amarrage NASA à
moteur 21. Le tourillon est formé essentiellement par un axe cylin-
drique 21b maintenu à distance de la plaque 22 par deux pieds 21c.
Deux raccords à fentes 23a et 25a sont fixés sur la plaque 22 de part et d'autre du tourillon. Les axes longitudinaux des raccords 23a et 25a correspondent aux dimensions longitudinales des raccords à lames 23 et 25. Les axes longitudinaux des raccords à fentes 23a et 25a sont perpendiculaires à l'orientation de l'axe
cylindrique de verrouillage 21b du tourillon 21a.
Pendant l'assemblage du module 11 avec le module 13 ou
avec le module 15, les montures d'amarrage 17a et 17b sont mutuel-
lement alignées au moyen des guides d'amarrage 29, de manière que les appuis 26, 27 et 28 de la monture 17a s'alignent avec les appuis 26a, 27a et 28a de la monture 17b et de manière que les plaques de réaction (non représentées) des appuis 26 à 28 s'appliquent contre les plaques de réaction correspondantes 24a des appuis 26a à 28a. Les trois tulipes de guidage 29 servent à aligner le tourillon 21a avec le verrou 21 et à faire pénétrer les lames 23 et 25 dans les fentes 23a et 25a. Lorsque l'alignement a ainsi été obtenu, un signal électrique actionne le verrou à moteur 21, ce qui a pour effet que ce verrou saisit et tire vers lui le tourillon 21a. De ce fait, les plaques 20 et 22 sont tirées l'une vers l'autre. Les plaques de réaction sur les colonnettes 30, comme les plaques de réaction 24a sur les colonnettes 30a, s'étendent au-delà des colonnettes respectives. Des réglages effectués préalablement sur les plaques de réaction assurent qu'elles présentent une pré-tension (charge élastique) désirée, prédéterminée, lorsque le tirage du tourillon dans le verrou est terminé. A ce moment, les plaques des appuis 26 à 28 et des appuis 26a à 28a sont légèrement repoussées les unes par les autres, ce
qui crée une charge élastique.
La figure 3 indique schématiquement les directions des charges exercées à l'interface des plaques des montures. Ainsi que le montre cette figure, le verrou à tourillon résiste au mouvement dans le sens vertical, comme indiqué par les flèches 30, entre les montures 17a et 17b. Les raccords à lames 23, 25 résistent au mouvement dans le sens horizontal, comme indiqué par les flèches 31, entre les montures 17a et 17b. Les gros points à
la périphérie indiquent la précontrainte entre les appuis.
CONDITIONNEMENT A DEUX COMPARTIMENTS SEPARES PAR UN OPERCULE DECHIRABLE La présente invention est relative à un conditionnement comprenant deux compartiments séparés l'un de l'autre par un opercule déchirable. Un tel conditionnement permet de conserver, indépendamment l'un de l'autre, au moins deux produits et d'effectuer ultérieurement leur mélange : par exemple, au moment de l'utilisation.
De tels conditionnements sont utilisés dans de nombreux domaines, en particulier dans celui des colorants, notamment pour la teinture des cheveux.
Le document EP-A-99.754 décrit, par exemple, un flaçon à deux compartiments disposés l'un au-dessus de l'autre, muni chacun d'un opercule déchirable à leurs extrémités se faisant face, et comprenant un élément intermédiaire cylindrique solidaire du compartiment supérieur et se vissant sur le compartiment inférieur. Le compartiment supérieur comporte des lames coupantes solidaires de sa paroi supérieure ; le compartiment inférieur peut également comporter une couronne coupante située sur le bord supérieur de sa paroi latérale. En vissant cet élément intermédiaire sur le compartiment inférieur, les lames coupantes, ainsi que la couronne coupante éventuelle, déchirent les opercules, mettant ainsi en contact les produits contenus dans chacun des compartiments.
La réalisation d'un tel flacon est reativ.ement complexe notamment du fait de la structure du compartiment supérieur. Les opercules sont découpés circulairement à leur périphérie les disques ainsi obtenus tombent dans le mélange de produits et, par suite, peuvent nuire au-bon mélange de ces produits ainsi qu'â un bon fonctionnement du flacon.
Un autre type de flacon à deux compartiments est décrit dans le document EP-A-101.594. Ce flacon comprend un réservoir inférieur contenant les composants principaux, et un réservoir supérieur renfermant les additifs : Le réservoir inférieur est élastiquement déformable. Ce ------------------------ flacon comprend, en outre, un couteau pour découper l'opercule obstruant la partie inférieure du réservoir supérieur : ce couteau circulaire est monté à l'extrémité d'une sorte de trépied qui repose sur la paroi inférieure du réservoir inférieur et dont le diamètre est sensiblement égal à celui de l'oper- cule. En appuyant sur le fond du réservoir inférieur, on fait monter le couteau circulaire en direction de l'opercule jusqu'à déchirer celui-ci sensiblement selon un disque.
Un tel flacon bien que d'un maniement facile, présente les mêmes inconvénients que celui décrit précédemment.