INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le chemisage 105, par exemple en tôle inox, qui enveloppe l'ensemble disjoint des éléments alignés 102 et qui présente, de ce fait, la forme d'un parallèlépipède de section carrée, est muni, sur ses quatre faces, de lumières 107 situées en regard des lumières 106.
L'espace entre deux éléments 102 consécutifs est destiné à être empli de matériau granulé, réparti ainsi en lits filtrants 108. Ces lits 108 sont délim;eés par les faces 104a et 104b de deux éléments 102 consécueifs et par le chemisage 105 et sont de forme carrée come les éléments 102 eux-mSmes. L'unité de filtration 101 est disposée dans le caisson 100 ccexialement à ce dernier et l'en- semble est orienté de façon que l'une D des deux diagonales des cadres carrés 103 soit horizontale, c'est-à-dire que L'unité paral lèlépipédique carrée 101, vue selon l'axe XX', présente une arête supérieure et une arête ;nfSrieure.
Le chemisage 105 comporte, à sa partie supérieure qui correspond l'arête supérieure de l'unité 101, une fente d'alimentation 109 et est nuni d'une goulotte 110 de chargement du matériau granulé lequel arrive dans ladite goulotte par un puits d'alimentation 111. La goulotte 110 est divisée, par une paroi perforée 116 en tôle, sensiblement parallèle a la fente 109, en deux chambres, l'une supérieure 114, l'autre inférieure 115.
La chambre 114 dont l'une des extrémités est traversée par le puits d'alimentation 111 constitue une chambre de dépoussié- rage et est munie à cet effet, à son autre extrOmité, d'un raccord 112 prévu pour être relié å un dispositif aspirateur de poussières connu (non représenté).
La chambre 115 est une chambre de distribution qui commu- nique avec la fente 109 et qui est munie, lateralement et de part et d'autre de ladite fente, de rampes perforées 113a et 113b alimentées en air comprimé et prévues pour diriger des jets d'air comprimé en direction des parties inférieures 115a et 115b de la chambre 115 comme indiqué par les flèches F de la figure 2.La chambre 115 com- porte en outre, sous le puits 111, un réEartiteur 117 en forme de dièdre, disposé au-dessous de la paroi 116, parallèolement å la fente 109 et coiffant cette dernière. Le repartitolr 117 dirige le matériau granule ayant traverse la paroi 116 de part et d'autre de la fente 109 de façon qu'il soit reparti uniformement au-dessus des rampes perforees 113a et 113b et ne tombe pas directement dans ladite fente 109.
Le puits d'alimentation 111 reçoit le matériau granule délivré par des mayens d'injection SONS pression connus (non repre- sentes} par l'intermSdiaire d'un distributeur 120 OOmpDrtant un tube droit 121 de régulation pneumatique dont l'extrémité 121a est reliée aux moyens d'injection précités, d'un divergent 122 réduisant la vitesse du transport pneumatique et d'un tampon amortisseur 123, par exemple en caoutchouc disposé à l'extrémité dudit tube droit 121 et et dudit divergent 122/prévu pour éviter les effets de broyage des grains de matFriau a la suite de l'impact.
Le chemisage 105 comporte, à sa partie inférieure qui correspond à l'arête inférieure de l'unité 101, une fente de vidAnge 125 et est muni d'une goulotte de déchargement 126 qui com- munique directement avec ladite fente. La goulotte 126 est munie également d'un raccord de vidange obturable 127 prévu pour être relie à des moyens d'aspiration du matériau connus (non representes) et de deux tamis latéraux 128a, 128b places de part et d'autre de la fente 125 a proximité du raccord de vidange 127.Ces tamis permettent l'Evacuation des poussières comme il sera explique ci-apres.
Le caisson 100 est constitue de deux demi-viroles 100a et 100b qui ont une section en demi-cercle de rayon sensiblement égal ou légèrement supérieur à D/2 et sont soudées sur les goulottes 110 et 126. Les deux demi-viroles 100a et 100b sont fermées, a leurs deux extrEmites, par deux fonds bombEs 130 et 131 munis d'embouts à bri- des 130a et 131a prévus pour être raccordés au circuit (non repr6- sente) vEhdculant l'air a apurer. Deux opercules 132 et 133 soudEs entre les demi-viroles 100a, 10b et l'unité de filtration 101 permettent de diviser le volume interne du caisson en deux chambres ou collecteurs séparés, l'un d'admission 134 communiquant avec l'embout 130a qui reçoit l'air contaminé, l'autre d'évacuacuation 135 qui commu- nique avec l'embout 131a par lequel s'échappe l'air épuré. Les lumières 106 des éléments 102 successifs communiquent alternative- ment avec l'un et l'autre des oollecteurs 134 et 135 de sorte que l'air qui pénètre par l'embout 130a dans le collecteur 134 ne peut passer dans le collecteur 135 qu' avoir traversé les lits filtrants 108.Les flèches F de la figure 3 indiquent la trajectoire du flux d'air quand il entre contaminé par l'embout 130a et sort épuré par l'embout 131a. Un vibrateur 136 est monte sur le fond 130.
Le caisson 100 est monte sur un bâti 137 de maniere que son axe XX' soit incliné d'un angle de 15 environ par rapport à l'hDrizontåle. Une telle disposition permet de faciliter l'eccule- ment du matériau granule du puits d'alimentation 111 dans la goulotte de chargement 110 et ltévacuation dudit matériau en direction du rac- oord de vidange 127, c'est-d-dire hors de la goulotte de decharge- ment 126.
Lors du chargement, le matériau granule propre amené par le distributeur 120 au puits 111 pénètre danr la chambre 115. Dans cette dernière, après avoir été guidé par le répartiteur 117 en direction des rampes de soufflage 113a et 113b, il est brasse par l'air éjecte par ces rampes, chemine dans les parties latérales inférieures 115a et 115b de la chambre 11S, puis pénètre, par la fente 109, dans les intervalles entre les éléments 102 et constitue ainsi les lits filtrants 103. Lors de ce brassage, les poussières fines du matériau ayant pénétré dans la chambre 115 sont aspirées à travers la paroi perforée 116 et évacuées par le raccord 112.
Pour le dechargement, on relie le raccord de vidange 127 aux moyens d'aspiration, le matériau granulé contaminé des lits filtuants passe alors dans la goulotte de déchargement 126 en traversant la fente inférieure 125. Le vibrateur 136 est mis en service en fin de vidange pour faciliter l'evacuation du matériau. Les grains fins ou poussières du matériau qui auraient pu traversor les faces 104 a, 104b des éléments 102 et s'accumuler aux points bas 134a, 135a des collecteurs 134 et 135 sont également aspirés, ils traver- sent les tamis 128a, 128b et sont évacués par le raccord 127. I1 est à noter que les tamis 128a, 128b empêchent la remontée des grains normaux du matériau vers les collecteurs.
I1 apparaît clairement de ce qui précède que l'installation selon l'invention permet, en raison de la forme et de la disposition des éléments 102, non seulement de réduire l'encombrement du caisson et de diminuer les volumes morts comme indiqué plus haut mais égale ment de faciliter le chargement du fait de l'introduction du matériau dans l'unité de filtration par l'arête supérieure de cette derniere, de faciliter son déchargement du fait de ltévacuation dudit matériau par l'arête inférieure de l'unité de filtration et enfin d'assurer un dépoussiérage efficace lors du chargement évitant ainsi toute pollution de l'installation lors du chargement tout en assurant une bonne homDgénéite des lits filtrants et une évacuation des poussières résiduelles lors du déchargement.
Le brin le Dlus court (b2) du génome de la particule de Dane petit être "réparé" in vitro en pré- sence de nucléotides précljrseurs et d'une polymérase, Dar exemple selon la technique de T.A. LANDERS et coll., J.
VIROL, 23, 1977. p. 368 - 376. Les génomes ainsi séparés des virus de l'hépatite virale (ou tout ADN suscettible de coder les mêmes séquences d'acides aminés) seront,ci-après, désignés par 1' abréviation DNA HBV.
L'invention a donc pour but de fournir des procédés tels qi'ils ont été spécifiés-plus haut, qui soient applicables d'une facon générale à l'étude et à l'expression dans des cellules eucaryotes de tolet oii partie de Génomes entiers de virus, dont DNA HBV. Elle a étalement pour but la production de vecteurs.modifiés permettant la mise en oeuvre de ces procédés.
L'invention a enfin plus particulièrement pour but la production de préDarations contenant des antigènes présentant la même spécificité immunologique que l'HBsAg ou d'un antigène anslogue de haute pureté, comme il a été indiqué plus haut, à partir d'un système antre que le sérum humain , système qui est à la fois reproductible et stable (ou dont la stabilité d'un certain nombre de caractères déterminés peut faire l'objet d'une surveillance permanente).
Le procédé selon l'invention pour déterminer la possibilité éventuelle de transformation d'une culture de cellules déterminées par un ADN normalement circulaire ou un gènome ent.ier de microorganisme tel qu'un virus, comprend l'opération qui consiste à mettre cette culture de cellules en contact avec un vecteur, nlus particulièrement un plasmide contenant lui-meme une séquence d'insertion formée d'au moins deux de ces ADN orientés dans la même direction de transcription et dans laquelle la queue de l'un est reliée à la tête de l'autre (séquence dite "en tandem" lorsuq'elle ne comprend que deux de ces ADN).Dans ce qui suit il sera souvent, Dour la commodité du language, fait référence à la "séquence tandem", étant entendu que cette expression s'étendra aussi aux séquences comprenant de deux ADrl du genre en question,sauf lorsque spécifié autrement De préférence, l'on se place dans des conditions qui permettent en même temps in marquage des cellules transrormées, de facon à rendre leur détection aiséexpar exemple en mettant en oeuvre des cellules (ou mutants de ces cellules) rendues déficientes, à des fins de sélection, en un ozène marqueur sélectionnable normalement nécessaire à leur croissance (déficience naturelle ou induite) lorsau' elles sont placées dans certains milieux de culture déterminés, ces cellules étant néanmoins susceptibles de se développer à nouveau dans l'un au moins de ces mêmes milieux de culture, après introduction dans ces cellules d'un zène ou fragment d'ADN homologue, quoique d'origine étrangère (ADN de complémentation), susceptible de compenser ou "complémenter" ladite déficience, le procédé consistant alors; soit à tenter de réaliser ladite transformation avec le seul vecteur contenant la séquence d'ADN étudié, lorsqu'il contient également dans son propre ADN un tel "ADN de comDlémentation", soit, lorsque tel n'est pas le cas, à produire la co-transformation (ou transformation simultanée) d'au moins certaines des cellules d'une telle culture au sein d'in tel milieu, d'une part par ledit vecteur; d'autre part, par un vecteur, de préférence un plasmide, préalablement modifié par l'insertion dans son génome d'un tel ADN de complémentation.
Dans la mesure où un tel ADN est susceptible d'être exprimé dans la cellule de ladite culture, la séquence tandem (ou contenant plus de deux unités de l'ADN en auestion) doit normalement se comporter comme le ferait l'ADN circulaire corresDondant ainsi introduit dans la cellule, en l'absence de tout vecteur.
L'utilisation d'un tel vecteur. notamment plàsmi- de, en lieu et place de l'ADN circulaire lui-même est d'un très grand intérêt en ce que l'on peut disposer de quantités imDortantes d'un tel vecteur après amDlification par clonage d'une bactérie du vecteur préalablement construit in vitro Le procédé selon l'invention Dermet donc de tester la capacité d'un ADN circulaire ou dtexnrimer un génome entier de virus dans des cellules eucaryotes, même lorsaue la position du promoteur sous le contrôle duquel est placée la transcription, n'est pas connue.
Il va de soi que certaines parties de la séquence tandem d'insertion dans le plasmide vecteur peut comporter un certain nombre de délestions dans la mesure où la connaissance de la structure de l'ADN.étudié est suffisam- ment connue pour que l'cn sache de façon certaine que les parties délétées ne contenaient pas le promoteur ou l'ori- gine de transcription.
I1 peut par exemple en être ainsi de la partie terminale du second ADN de la séquence tandem et notamment de la partie en aval du gène S dans le sens de la transcription lorsque ladite séauence est formée à partir d'unités de DNA HBV.
Les vecteurs modifiés contenant de telles séquences tandem d'insertion, dont,le cas échéant,des parties essentielles sont délétéesF font eux-mêmes Dartie de l'invention.
Les vecteurs modifiés dans lesquels la séquence tandem est à base de DNA HBV peuvent être exprimés dans des cultures de cellules de souris.
Un mode de réalisation préféré du procédé selon l'invention dans lequel on met en oeuvre une culture de cellules eucaryotes, notamment des fibroblastes de souris, déficientes en un gène marqueur sélectionnable normalement nécessaire à leiir croissance (déficience naturelle ou induite) lorsqu'elles sont placées dans certains milieux de culture déterminés, ces cellules étant néanmoins susceptibles de se développer à nouveau dans l'lin au moins de ces mêmes milieux de culture. après introduction dans ces cellules d'un gène ou fragment d'ADN homologue, quoique d'origine étrangère (ADN de complémentation) susceptible de compenser ou "complémenter" ladite déficience, ce procédé comprenant l'étape consistant à produire la co-transformation (ou transformation simultanée) d'au moins certaines des cellules d'une telle culture au sein d'un tel milieu - d'une Dart, par un vecteur, de préférence un plasmide, préalablement modifié par l'insertion dans son génome d'un tel ADN de complémentation; - d'autre part, oar un vecteur. de préférence un plasmide, préalablement modifié par l'insertion dans le DNA d'un fragment d'ADN dérivé d'un DNA HBV ou d'unités répétitives d'ADN HBV reliées (par leurs têtes et queues respectives).
ledit fragment comprenant au moins une partie d'un tel DNA HBV, y inclus son site EcoRI unique et respectivement.
de part et d'autre de ce site EcoRI, d'une part un sousfragment contenant la séquence de.nucléotides du gène S qui est apte à coder le polyDeptide responsable des propriétés immunologiques de l'antigène UBs et, d'autre part, un sous-frgment suffisamment lone pour qu'il soit susceptible d'inclure le Dromoteur du gène S.
En d'autres termes ce second vecteur modifié comprend notamment, si l'on se réfère à la figure 1, d'une part le sous-fragment compris entre les positions numérotées de 73,6 à 100 (ou O), lorsaue ce sous-fragment comprend le gène S dans son entier et d'autre part. un sous-fragment compris entre la nosition 0 et une position correspondant à un nombre suffisemment éloigné de la position 0, dans le sens de la flèche fl Dour que le promoteur susdit soit suscentible d'y être incllls. La culture des cellules cotransformées dans le milieu susdit entraîne l'expression dudit fragment dérivé du DNA HBV et la Production de Doly- peptides présentant les propriétés immunologiques de l'HBsAg, dont au moins une partie peut en général être excrétée- dans le milieu de culture.
Il va de soi que la co-transformation susdite peut être remplacée par une transformation Dar le seul second vecteur ci-dessus mentionné s'il contient lui même également l'ADN de complémentation.
Le dispositif d'alimentation de clous est muni, a sa partie supérieure, d'un couvercle 27 qui pivote en 28 et qui peut se déplacer angulairement d'une position d'ouverture (Figures 1 et 3) jusqu'a une position qui correspond à la fermeture complète du dispositif 2, position à laquelle une fiche 29 d'introduction d'air située sur ce couvercle vient en face de ladite embouchure 22.
Une canalisation 30, qui part de l'échappement d'air du pistolet 1, est reliée a ladite fiche 29 de manière à imprimer, au clou qui arrive, une poussée en direction de la bouche du canon.
Selon une caractéristique de l'invention, le dispositif d'alimentation de clous 2 en vrac est incliné par rapport au canon 3, comme cela apparaît nettement sur les Figures 2 et 4, de manière que les clous, ou broquettes, puissent passer d'une position haute a une position basse, même lorsque l'on utilise le pistolet en maintenant son canon en position horizontale.
Cette inclinaison du dispositif d'alimentation est assurée par deux étriers 31 et 32 ayant chacun la forme d'un L comportant chacun une branche longue (31a, 32a) fixée latéralement au manche 5 et une branche plus courte (31b, 32b) fixée au-dessous du dispositif 2. Bien entendu, les angles que font entre eux les deux étriers 31 et 32 doivent être supplémentaires.
Le fonctionnement du dispositif d'alimentation de clous en vrac décrit ci-dessus est le suivant (on se reportera plus spécialement aux Figures 1 et 3) En agissant sur un bouton 33 situé sur le côté du manche 5, on introduit de l'air dans une canalisation 34 qui débouche dans le récipient 6, au-dessous de l'écran 8, ce qui provoque l'entrainenent de ce dernier. Comme on l'a signalé plus haut, le mouvement de cet écran permet d'entrainer le long de l'élément de guidage 9, par effet de force centrifuge, les clous 19 qui se disposent avec leur pointe tournée dans le sens opposé au couvercle du dispositif.
Un tel entrainement continu par effet de force centrifuge a pour conséquence que les clous, ou broquettes, sont poussés l'un contre l'autre et pénètrent dans la rainure de guidage 10 et dans la rainure 11 jusqu'à venir en regard du téton 24.
A ce stade, un premier coup a vide imprimé a la détente 34 du pistolet (Figure 2) provoque l'introduction d'air dans la chambre cylindrique 14, ce qui fait avancer la petite plaque 12 qui pousse le clou 19 dans l'embouchure 22. Au moment précis où le clou occupe une telle position, un jet d'air provenant de l'échappement du pistolet 1 pousse le clou dans la chambre du canon. Une nouvelle pression exercée sur la détente 34 du pistolet provoque, d'une part, la sortie du clou de l'intérieur de la chambre du canon et, d'autre part, l'introduction d'un nouveau clou dans cette chambre.
La présente invention concerne une scie circulaire.
Elle concerne plus particulièrement une scie circulaire destinée à etre utilisée à poste fixe dans les ateliers ou sur les chantiers, par exemple pour couper les bois de coffrage, bien que l'on puisse également envisager son application aux scies portatives.
De façon générale, les scies circulaires destinées à être utilisées à poste fixe comportent, outre une lame présentant la forme d'un disque dont la périphérie est munie de dents et qui est entraînée à rotation autour de son axe généralement par un moteur électrique, une table de coupe servant à l'appui et au guidage de la pièce à couper, et un capot de protection escamotable dont le rôle est de couvrir une zone de la scie formant saillie au-dessus de la table de coupe, c'est-à-dire la zone utile de la scie, tant que les dents de celle-ci ne sont pas en prise avec une pièce à couper ; ce capot est articulé sur la table et s'escamote au moment opportun, par l'action de la pièce elle-même, lorsque l'on approche du disque une pièce à couper.
Lorsque l'on désire couper plusieurs pieces au moyen d'une telle scie, on met le moteur en route et l'on présente successivement les différentes pièces devant la lame, entraînée en continu jusqu'à ce qu'on l'arrête volontairement à la fin de l'opération ; au passage de chaque pièce devant la lame, le cache se soulève pour retomber lorsque la pièce est passée.
De telles scies sont dangereuses dans la mesure où la lame tourne en continu, qu'une pièce à couper lui soit présentée ou non, et où le cache escamotable ne constitue qu'une faible protection n'interdisant pas la présentation accidentelle ou volontaire à la lame en rotation, c'est- -dire à la lame en état de couper, d'un objet autre que les pièces à scier ou de la main.
Rien n'interdit non plus d'escamoter volontairement le capot ou même de le démonter, cette opération ne présentant généralement aucune difficulte puisque sa fixation articulée à la table est généralement aisément accessible.
Ce manque de sécurité se retrouve également sur les scies portatives, dont on peut faire tourner la lame qu'une piece soit ou non présentée en vue de la coupe, et dont on peut escamoter à volonté ou même démonter sans difficulté le capot de protection de cette lame.
Le manque de sécurité offert par le capot de protection des scies circulaires, notamment à poste fixe, actuellement connut est également lié à la façon dont on règle la lame en fonction des besoins dans le cas de ces scies.
On sait en effet que, pour assurer un bon rendement d'une scie, il faut régler la position de la lame par rapport à la table de coupe de telle sorte que la lame forme au-dessus de cette table une saillie à peine supérieure à la hauteur de la pièce à couper, mesuree à partir de la table ; ainsi, un maximum de dents est en prise avec la pièce à couper à chaque instant du sciage.
L'invention fournit donc un produit susceptible d'une pureté inaccessible jusqu là ce-jour. Elle concerne plus particulièrement les préparations formées de façon quasi exclusive de particules d'antigènes HBsAg essentiellement sériques-. Elles sont totalement exemptes de particules de Dane décelables par les méthodes usuelles de dosage radioimmunologique. Elles sont au surplus totalement exemptes de protéines, notamment protéines sériques d'origine humaine. Elles sont exemptes d'ADN polymérase.Le cas échéant on peut, en ayant recours à des techniques antérieurement connues et pour des raisons de sécurité renforcées, exciser certaines parties extérieures au gène S du DNA HBV, de façon à n'utiliser pour la constitution des "sé- quences tandem susdites des génomes défectifs qui ne sont plus capables de coder des particules de Dane entières La capacité des vecteurs modifiés selon l'invention d'être exprimée dans des cellules eucaryotes semble témoigner du fait que la transcription du gène de l'HBsAg est sous le contrôle d'un promoteur viral contenu dans le fragment dérivé d'HBV DNA.Ces vecteurs ,tels que le plasmide pCP10 peuvent éventuellement être eux-mêmes utilisés à titre de vecteurs pour réaliser l'expression dans des cellules eucaryotes d'un ADN étranger préalablement inséré dans lesdits vecteurs. L'avantage des vecteurs modifiés selon invention vis-à-vis notamment de l'ADN dénommé "SV 40 DNA" (20,31),devrait alors résider dans le fait qu'ils n'induisent pas une lyse des cellules-hôtes. De plus le gène S peut être considéré comme disposant d'une séquence-signal sous le contrôle de laquelle la protéine hybride formée, résultant de l'expression dans les cellules hôtes de l'ADN étranger préalablement inséré dans le vecteur susdit, serait excrétée dans le milieu de culture.La récupération de cette protéine hybride s'en trouverait évidemment considérablement facilitée.
Bien que le procédé de l'invention ait été décrit dans ce quiprécède, principalement dans son application à DNA HBV, il peut s'étendre à tous autres ADN circulaires ou génomes entiers. En particulier il peut être appliqué à l'étude des ADN circulaires des virus des picornavirus, des virus de la polyomyélite, de la fièvre aphteuse et autres "petits virus".
Dans chaque cas il conviendra alors à des fins d'amplification de - cloner l1ADN à étudier dans une bactérie, notamment E.coli; i; - établir une carte de restriction de l'ADN en vue de choisir une enzyme de restriction (ou autre endonucléase) à la quelle ne correspond dans l'ADN circulaire qu'un seul site de restriction; - traiter in vitro cet ADN ainsi qu'un vecteur possédant le même site de restriction par cette enzyme de restriction, puis traiter les fragments par une ligase, en vue de réa liser une fusion génétique entre les fragments ;; - transformer une culture de bactéries avec les recombinants et sélectionner ( notamment au moyen d'une méthode d'hybri dation in situ avec une sonde marquée radioactivement préparée au préalable)parmi les colonies formées et recon nues comme hébergeant un recombinant du plasmide dans lequel est inséré au moins un ADN du virus étudié, celles qui paraissent en contenir au moins deux, dans une séquence tandem; - le cas échéant, vérifier par un nouveau traitement avec l'enzyme de restriction choisie, que lton retrouve bien parmi les fragments d'ADN amplifiées obtenus, des fragments présentant la même longueur que l'ADN étudié initial.
Toutes ces opérations peuvent être menées à bien en ayant recours à des techniques désormais classiques, telles qu'elles ont été illustrées ci-dessus dans les exemples relatifs au DNA HBV.