INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
A des rats Lewis on injecte l'adjuvant par voie souscutanée dans la face plantaire de la patte arrière droite, le greffage, on mesure le diamètre de la tumeur. On effectue un essai identique sur un lot de souris témoin auxquelles on n'a pas administré de glucanne hydrolysé, et on calcule le taux de suppression de la tumeur (%) d'après la formule suivante: do -d x x 100 d o dans laquelle d représente le diamètre moyen de la tumeur -o (en mm) du lot témoin et d représente le diamètre moyen de la tumeur du lot traité. Les résultats obtenus sont rapportés au tableau 1, qui montre l'effet, sur le taux de suppression de la tumeur, des variations des quantités de glucanne hydrolysé administrées par jour.
45 jours après le greffage t on examine soigneusement toutes les souris, afin de déterminer le nombre de souris présentant une régression complète-de la tumeur. Les résultats de cet examen sont également rapportés au tableau i, dans lequel le nombre de souris présentant une régression complète est rapporté en proportion du nombre total de souris testées dans Ele groupe concerné.
Tableau 1 afin de provoquer la maladie. Puis on injecte une solution du glucnne hydrolysé suivant l'invention, chaque jour, dans l'abdomen, pendant 15 jours après l'inoculation de l'adjuvant. On effectue des essais identiques sur un lot témoin d'animaux auxquels on n'administre pas le glucanne hydrolysé. 18, 20, 24, 28 et 32 jours après l'inoculation de l'adjuvant, on compare le gonflement des -pattes des rats traités avec celui des pattes des rats non traités et, en utilisant une formule similaire à celle utilisée pour calculer le taux de suppression de la tumeur, on calcule le taux de suppression pour chaque dose du glucanne hydrolysé. Les résultats (moyennes) sont rapportés au tableau 2 suivant.
Quantité administrée Nombre Taux de (mg/kg de poids cor- d'ani- suppression dol50 porelZjour) maux 0,1 5 36,8 + 3,6 0,33 1,0 10 59,0 + 3,9 (3) Toxicité aigue On effectue un test de toxicité aigue (une semaine d'observation) en injectant des échantillons du glucame hydrolysé dans l'abdomen de souris mâles ddy. Après administration du produit a des doses de 100 et 300 mg/kg, on n'observe pas de mortalité et le poids augmente de façon normale.
Il découle des résultats ci-dessus que le glucanne hydrolysé suivant la présente invention est très précieux comme agent immunomodulateur . I1 est préférable d'administrer l'agent par voie parentérale (par exemple par injection sous-cutanee, intraveineuse ou intramusculaire). La posologie journalière varie suivant la maladie à traiter, la voie d'administration et la fréquence d'administration mais, d'une façon générale, la posologie journalière chez l'adulte est de préférence de 0,5 à 50 mg, par exemple de 5 mg environ. On peut l'administrer en une seule dose ou en doses fragwntees.
Le glucanne hydrolysé suivant l'invention peut être présenté sous une forme convenant à la voie d'administration choisie, en utilisant tout type de composition couramment utilisé pour d'autres agents immunosuppresseurs.
Par exemple, on peut présenter une composition dans une ampoule, sous forme de dose unitaire, ou la présenter dans un récipient pour plusieurs doses, de préférence en association avec une substance antiseptique. La composition peut être sous la forme d'une suspension, d'une solution ou d'une émulsion dans un véhicule huileux ou aqueux, et peut comprendre des adjuvants classiques, par exemple des agents de mise en suspension et/ou stabilisants et/ou dispersants. L'ingrédient actif peut également être présenté sous la forme d'une poudre à dissoudre avant l'administration dans un véhicule approprié, par exemple de l'eau stérile apyrogène.
Lorsque la composition suivant l'invention est présentée sous la forme de doses unitaires, elle contient de préférence de 0#5 à 10 mg d'ingrédient actif par dose unitaire.
Les exemples non limitatifs suivants sont donnés à titre d'illustration de la présente invention. L'exemple 1 illustre la préparation du glucanne hydrolysé suivant l'invention et l'exemple 2 illustre la préparation d'une composition pharmaceutique le contenant.
EXEMPLE 1 A 3g- de Corticane (polysaccharide produit par un fongus de la famille des Corticiacées comme décrit dans la préparation du Corticane donnée ciaprès) on ajoute 240 ml d'une'solution aqueuse d'acide formique à 90%/pds.
On-porte le mélange à 950C pendant 20 minutes, en agitant.
Après avoir évaporé l'acide formique sous pression réduite, on ajoute 600 ml d'eau au résidu et on chauffe le mélange aqueux résultant au reflux. Puis on centrifuge le mélange réactionnel pendant 15 minutes à 10.000 tours/min.
Au liquide surnageant ainsi séparé on ajoute 2,4 litres d'éthanol, et on recueille le précipité résultant par centrifugation. On ajoute 500 ml d'eau au précipité, puis on lyophilise le mélange aqueux, obtenant ainsi 2,0 g du glucanne hydrolysé cherché, sous la forme d'un produit solide amorphe blanc. Le produit présente les caractéris- tiques suivantes: Analyse élémentaire, pour (C6H10O5)n nH2O C H Eau Calculé %: 40,00 6,71 10,00 Trouvé %e 40,22 6,52 9,63 Pouvoir rotatoire /cL/D = 150 (c = 0,1, diméthyl sulfoxyde).
Spectre d'absorption IR (KBr) # cm-1 : 3400, 1640, 1080, 1040.
déterminée chaque fois la position angulaire désirée. Le calcula-
teur 51 détermine la longueur de coupe L du matériau M en cours de sciage à partir de la position angulaire réelle 9 de la lame 15, fournie par l'enregistreur 49, et de données concernant la forme et les dimensions de la section (plan de coupe) du matériau M. A cet effet, la forme de section, ronde ou carrée par exemple, et les dimensions, telles que la largeur et la hauteur ou le diamètre dans le plan de coupe, du matériau M à scier sont mises en mémoire dans le calculateur 51 avant les opérations de sciage, la longueur de coupe L à un moment donné au cours du sciage pouvant naturellement
être déterminée mathématiquement à partir de la forme et des dimen-
sions du matériau et de la position angulaire de la lame 15
puisqu'elle peut être considérée comme une fonction L(e) de la posi-
tion angulaire 9 réelle de la lame.
Les dimensions du matériau M à scier peuvent être mesurées automatiquement avant chaque opération de sciage par un mesureur de largeur 59 et un mesureur de hauteur 61, qui peuvent être formés tous deux par un dispositif à graduation inductosyne linéaire, comme représenté figure 3, ou par un autre dispositif. Le mesureur de largeur 59 mesure la largeur du matériau M à scier par la mesure de la distance entre les faces intérieures du mors fixe 29f et du mors mobile 29m de l'étau 29. Le mesureur de hauteur 61 possède un bras de mesure 63 et est agencé pour mesurer la hauteur du matériau M à scier par la mesure de la distance entre le côté inférieur du bras
de mesure 63 appliqué contre le matériau et le dessus de la table 27.
Cependant, il est bien entendu possible aussi d'introduire les dimen-
sions du matériau M à scier manuellement dans la mémoire du calcula-
teur de longueur de coupe 51 avant les opérations de sciage.
Le calculateur 51 détermine la position angulaire e désirée de la lame 15 à un moment t sur la base de l'équation (2) (t= L(y)-dy/dt), la longueur de coupe étant exprimée par la fonction L(@) de la position angulaire e réelle. A supposer que la lame 15
soit avancée dans le matériau M d'une quantité dé dans un petit inter-
valle de temps dt, entre le moment t et le moment (t + dt), et que la longueur de coupe L(e) ne change pas pendant cet intervalle dt, on peut remplacer l'équation (2) (t= L(y)-dy/dt) par IL= L(e)-de/dt dt =. L(9)-de o d -est considéré comme la quantité d'avance de la lame 15 dans le
petit intervalle dt.
Selon l'invention, la position angulaire 9 réelle de la lame 15 dans l'équation ci-dessus (dt = l/L.L(9)-de) est détectée par le capteur d'angle 43 et est transmise au calculateur 51 par l'enregistreur de position angulaire réelle 49, comme décrit dans ce qui précède. De plus, le calculateur 51 détermine la longueur de coupe L(e) du matériau M en cours de sciage à partir de la position angulaire G de la lame 15 et de la forme et des dimensions du matériau M, ayant été mémorisées préalablement dans le calculateur 51
Un dispositif qui convient particulièrement bien à cette mesure est l'appareil connu sous le nom de 'Ithermo- mètre à rayonnement gamma" ou "y-thermomètre". Ces disposée tifs sont décrits en particulier dans les demandes de brevet français 77 08657 du 23 mars 1977 et 79 05739 du 6 mars 1979 déposées au nom du demandeur pour "Dispositif de mesure de la puissance locale dans un assemblage combustible de réacteur nucléaire I1 est cependant important de noter que ces y-thermomètres sont décrits pour une utilisation bien particulière qui est de mesurer localement la quantité de chaleur produite au sein du combustible dans un assemblage du coeur du réacteur.On voit donc que même si l'on met en oeuvre dans ce mode de réalisation les mêmes appareils, l'utilisation de ces appareils est totalement différente puisqu'il s'agit de mesurer le coefficient d'échange thermique. Néanmoins, on pourra avantageusement se reporter à ces textes pour certains détails de structure.
Cependant, les éléments de mesure peuvent ne pas être au sens propre des y-thermomètres. L'élément de mesure peut consister simplement en un barreau cylindrique en maté- riau conducteur dans lequel on a placé deux capteurs de température situés dans un même plan de section du barreau, l'un des capteurs étant disposé selon l'axe du barreau et l'autre à proximité de sa périphérie. La valeur de la diffe- rence des températures mesurées est en valeur relative représentative du coefficient d'échange de chaleur avec le milieu fluide et donc representatif de l'état du milieu fluide.
De toute façon l'invention sera mieux comprise a la lecture de la description qui suit de plusieurs modes de réalisation des éléments de mesure, ces exemples illustrant en même temps la mise en oeuvre du procédé objet de l'invention. La description se réfère aux figures annexées sur lesquelles on a représenté - sur la figure 1, une vue simplifiez an coupe verticale d'une cuve de réacteur PWR montrait des inplanta- tions possibles des éléments de mesure - sur la figure 2, une vue simplifiée d'un assemblage combustible de PWR montrant l'introduction de dispositifs de mesure sous la forme d'une canne comportant plusieurs éléments de mesure à l'intérieur des tubes-guides de l'asseimblage combustible - sur la figure 3, une vue partielle en coupe verticale d'un premier mode de réalisation de l'élément de mesure qui correspond à un y-thermomètre dit "humide" - sur la figure 4, une vue partielle en coupe verticale d'un deuxième mode de réalisation de l'élément de mesure qui correspond à un y-thermomètre dit "sec" - sur la figure 5, une vue en coupe verticale d'un élément de mesure correspondant à un y-thermomètre individuel du type "humide', cet lt'ment étant r.lobile ; - sur la figure 6, une vue en coupe verticale d'un élément de mesure correspondant à un y-thermomètre individuel du type "sec", cet elément étant mobile ;; - sur les figures 7 et 8, des vuesen coupe verticale des éléments de mesure selon des modes de réalisation dans lesquels l'élément a la forme d'un barreau sans chambre ; et - sur la figure 9, une vue en coupe verticale de la partie inférieure d'un élément de mesure comportant à la fois des y-thermomètres du type !'sec" et du type "humide".
Dans la description qui suit, on envisage le cas ou l'enceinte est un réacteur du type PWR qui contient normalement de l'eau sous pression. I1 s'agit donc de détecter une éventuelle apparition de vapeur d'eau ou d'un autre gaz.
De même, dans ce cas, on dispose d'une source de chaleur qui est soit la puissance dégage par le coeur, soit la puissance résiduelle du réacteur. Cependant, comme on l'a déjà indiqué, l'invention pourrait s'appliquer à d'autres enceintes contenant un autre liquide. I1 faut simolement observer que dans certains cas, on peut être amené à utiliser une source de chaleur externe pour chauffer les éléments de mesure.
Sur la figure 1, on a représenté la cuve 2 d'un réacteur nucléaire fermée par son fond 4 et son couvercle 6.
On a également représenté le coeur 8 avec ses assemblages combustibles 10, le coeur 8 étant supporté par le panier de coeur 12. Au-dessus du coeur 8, on a symbolisé les structures internes supérieures 13 servant en -articufier au guidage des barres de conmande.
Sur cette figure, on a représenté différentes implantations possibles pour les dispositifs de mesure selon l'invention. La référence D1 représente un dispositif de mesure en forme de canne comportant plusieurs éléments successifs de mesure. Cette canne D1 ou tige pénètre par le couvercle 6 et est introduite dans le coeur. La référence D2 illustre un dispositif de mesure plus court qui traverse le couvercle et qui sert seulement à effectuer une détection au sommet de la cuve. La référence D3 illustre un dispositif de mesure en forme de canne qui traverse le fond 4 de la cuve de-rEsistance à la pression et pénètre dans les assemblages combustibles.
Sur la vue en perspective de la figure 2, la référence 10 désigne de façon schématique une structure d'assemblage combustible comportant de façon connue une série d'aiguilles ou crayons combustibles gainés 14 régulièrement répartis, la géométrie du réseau selon lequel sont disposés ces crayons étant maintenue par des grilles alvéolaires 16 montées dans l'assemblage à intervalles réguliers.
Le faisceau des crayons 14 comporte, en un endroit convenablement déterminé du réseau, un tube de protection 18, permettant l'introduction à l'intérieur de celui-ci du dispositif de mesure D, celui-ci étant mis en place dans ce tube 18 par sa partie inférieure ou sa partie supérieure et permettant d'effectuer une mesure locale de l'état du milieu fluide à différents niveaux dans l'assemblage, ces niveaux étant repérés sur le dessin par une série de flèches 20.
On va maintenant d- trire plusieurs modes de réalise tion des dispositifs de mesure selon l'invention. Cepc..dant, ces dispositifs faisant largement appel à la structure des y-thermomètres qui est bien connue, en particulier à la lumière des deux demandes de brevets déjà citées, on ne décrira pas en détail ces dispositifs mais on s'attachera surtout à en expliquer le fonctionnement particulier dans le cadre de l'invention.
Sur la figure 3, on a représenté un dispositif de mesure analogue à un y-tnermometre du type humide. Le dispositif consiste en une tige cylindrique 30 de faible diamètre et de grande longueur en un matériau bon conducteur de la chaleur et de l'électricité, de préférence réalisé en un métal par exemple en acier inoxydable, ou en un alliage ou une céramique conductricé approprié, et un tube 32 en doigt de gant de protection de la tige 30 enfilée dans ce tube.
Cette tige allongée 30 susceptible ainsi de s'etendre sur toute la hauteur du tube de protection extérieur 18 dans l'assemblage combustible 8, présente une fois mise en place dans ce tube 32 et au droit des zones où doivent être effectuées les mesures, des parties de section réduites 34 entourées par des chambres annulaires étanches 36 délimitées entre ces parties 34, la paroi interne du tube 32 et les parties 38 de diamètre plus important.
Selon l'invention également, la tige cylindrique 30 comporte un canal axial longitudinal 40' s'étendant sur toute la hauteur de cette tige et dans lequel est disposé un ensemble de thermocouples différentiels tels que 42, chacun de ces thermocouples étant associé à une des zones de mesure repérées par les flèches 20 (Fig. 2) selon la longueur du tube 18, de telle sorte qu'une jonction chaude 44 de thermocoup le soit sensiblement disposée au milieu de la hauteur de chaque partie 34 de section réduite et une jonction froide 46 au-del de l'extrémité de la chambre 36 correspondante, dans la partie 38 de la tige 30 de section plus importante.
Lors du fonctionnement normal du réacteur, c'està-dire lorsqu'vil contient seulement de l'eau sous fore liquide, le thermocouple différentiel donne une indication représentative de la puissance locale. I1 fonctionne en y-thermomètre classique. S'il apparaît dans l'espace entre le tube de guidage 18 et le tube externe 32 du dispositif de mesure de la vapeur ou un gaz,il y a modification de l'échange thermique, en particulier au niveau de la partie de diamètre plus important 38 . La différence de température mesurée par le thermocouple 42 (soudures 44 et 46) est alors modifiée. I1 y a donc modification du signal électrique délivré par le thermocouple qui indique ainsi qu'il y a eu modification de l'état du milieu fluide au niveau de l'élé- ment de mesure considéré.Bien entendu, cette mesure aurait pu aussi être comparée à la mesure faite par un élément de mesure qui reste entouré par de l'eau.
Sur la figure 4, on a représenté un autre mode de réalisation du dispositif correspondant à un y-ternomètre du type sec. Ce dispositif est identique à celui de la figure 3, mais il ne comporte pas le tube 32. En conséquence, il demeure les portions de diamètre réduit 34 mais il n'existe plus à proprement parler de chambre 36 puisque ces chambres sont remplies par le liquide caloporteur.
Ce mode de fabrication étant très rapide et très bon marché, peut être utilisé pour la confection d'articles chaussants vendus dans le commerce, la confection de chaussants asseptiques utilisés dans les. hôpitaux et les cliniques, la confection d'objets promotionnels servant par exemple de supports publicitaires que ce soit pour les hôtels ou toute autre entreprise.
L'invention est relative à un acide nucléique comprenant une séquence nucléotidique capable de coder une séquence peptidique immunogène correspondant à l'anty;ène de surface du virus de l'hépatite virale B, et aux polypeptides et peptides obtenus .
Elle Elle concerne également un procédé permettant d'ob- tenir un tel acide nucléique.
L'hépatite B est une maladie virale fréquente tout particulièrement en Afrique Tropicale, en Asie du Sud-Est et en Extrême-Orient.
L'agent étiologique est un virus (HBV) ou particule de Dane, comprenant une enveloppe antigène Australia ou antigène HBs), une capside (antigène HBc), une polymérase endogène et une molécule d'ADN circulaire partiellement simple brin; le brin le plus long de cette molécule d'ADN comporte près de 3.200 nucléotides (SUMMERS J., O'CONNELL, A et MILLMAN I. (1975) Proc. Nat.Acad.Sci.U.S.A. 72, 45974601).
L'ADN polymérase endogène peut etre utilisée pour réparer in vitro le brin le plus court (T.A.LANDERS, H.B.
GREENBERG et J.S.ROBINSON, J.VIROL., 23, 1977, p.368-376).
L'analyse électrophorétique des protéines de l'en- veloppe a montré la présence de 2 à 7 polypeptides dont les principaux sont appelés : polypeptide I et polypeptide II.
(PETERSON,D.L., ROBERTS,I.M. et VYAS,G.N. (1977) Proc.Nat.
Acad.Sci., USA, 74, 1530-1534, et PETERSON, D.L., CHIEN, D.Y., VYAS, G.N., NITECKI, D. et BOND, H. (1978) In Viral Hepatitis, ed.G.VYAS, S.COHEN et R.SCHMID, The Franklin Institute Press, Philadelphie, 569-573).
Le polypeptide I a un poids moléculaire de-22.000 à 26.000 daltons. Le polypeptide II est glycosilé et a un poids molécillaire de 28.000 à 30.000 daltons. La composi tion en acides aminés de ces deux polypeptides est très sem blable, de sorte que l'hypothèse a été formulée que le poy- peptide II pourrait ne différer du polypeptide I que par une glycosilation.
Les séquences que forment, respectivement, leurs 15 premiers amino-acides (à partir de l'extrémité N-terminale) et leurs 3 derniers amino-acides sont identiques.
L'étude de ces polypeptides est extremement difficile dans la mesure où l'on ne dispose d'aucun système de culture cellulaire permettant la propagation du virus. Cette difficulté a déjà en partie été contournée,plus particulièrement en ce qui concerne le sérotype avw de 1'ADN entier (génome) du virus, qui a été identifié et cloné, notamment dans E.Coli, après son insertion préalable dans le site uni que Eco RI d'un vecteur Agt.WES. X B, selon la technique dé- crite par FRITSCH, A., POURCEL, C., CHARNAY, P. et TIOLLAIS, (P (1978) C.R. Acad.de Paris, 287, 1453-1456).
A ce jour, l'identification des polypeptides I et II eux-memes, la localisation dans l'ADN viral de la séquence codant ces peptides n'ont pas été réalisées.
L'invention a pour but l'obtention d'une séquence d'ADN beaucoup plus petite que l'ADN viral lui-meme, contenant la séquence apte à coder la séquence peptidique douée de propriétés immunogènes permettant, lorsqu'elle est introduite dans l'organisme d'un hôte vivant, d'induire la fabrication par ce dernier d'anticorps susceptibles de protéger ultérieurement ce meme hôte à l'égard du virus de l'hépatite virale B, notamment lorsque celui-ci se trouve à l'état viruilent L'invention découle non seulement de l'analyse nucléotidique complète du génome de la particule de Dane à laquelle ont procédé les inventeurs, mais à l'idée qu'ils ont eue pour identifier le gène codant (ci-après dénommé "gène S") des susdits polypeptides, de rechercher dans la structure nucléotidique complète ainsi préétablie du génome de la particule de Dane, celles des séquences de nucléotides susceptibles de coder les séquences peptidiques proximales et terminales connues de ces polypeptides.
On rappellera que PETERSON et collaborateurs ont rapporté, notamment dans les articles dont les références ont été rappelées plus haut, que la séquence proximale (premier amino-acide N-terminal) des 15 premiers amino-acides s'analysait en principe comme suit met glu asn ile thr ser gly phe leu gly pro leu leu val ser et que la séquence terminale de ces mêmes polypeptides (der- nier amino-acide C terminal) était la suivante val tyr ile La figure 1 est une carte schématique du génome de la particule de Dane. Celui-ci comporte deux brins b1 et b2; le plus court d'entre eux (b2) étant normalement dépourvu de la partie représentée par une ligne en trait interrompu dans le dessin.
Dans le support 15 est monté coulissant un anneau 22 dont la section interne correspond à la section de la barre 7 et dont deux côtés opposés présentent des rainures 23 coulissant sur les ailes 16 et 17 du support 15. Le côté supérieur 24 de l'anneau 22 est percé d'un conduit dans lequel est engagée une vis 25 qui traverse des trous allongés 27 des ailes 15 et 16 et qui reçoit un écrou 26 avec interposition d'une rondelle 28. Grâce à cette disposition, on peut faire coulisser l'anneau 22 le long de son support et le bloquer à toute hauteur désirée- sur celui-ci.
L'organe de guidage et de support 9 (voir fig. 2) comprend une platine 30 en forme de ttU" et présentant une âme 31 et deux ailes 32 et 33. Chaque aile 32 et 33 est prolongée longitudinalement et latéralement par une patte 34 percée de deux trous 35 pour la fixation de la platine sur le cadre 1.
L'âme 31 de la platine 30 est pourvue d'une entaille 37 dans laquelle vient se loger la gorge 49 d'une vis 38 de commande du coulissement d'une pièce en "U' 40. La pièce en "U" 40 est constituée de deux parties 41 et 42 symétriques par rapport à un plan passant par un filetage 50 situé en un point intermédiaire médian de l'âme de la pièce 40 La partie 41 à une extrémité est pourvue de rebords 52 et 43 qui constituent une surface de glissement pour la barre', le rebord 52 formant un épaulement contre lequel peut venir buter l'ergot 13 pour li miter le coulissement de ladite barre.Sur la surface interne de l'aile de la partie 41, il est prévu une butée 44 surélevée par rapport à l'âme afin de former un couloir 45 dans lequel peut coulisser l'ergot 13 de la barre 7 et décalé par rapport au rebord 43 pour permettre le passage, dans un espace libre 46, dudit ergot 13, celui-ci devant être supporté par la partie supérieure 47 de la butée 44 lorsque l'allonge est en position d'utilisation. La partie 42 comporte exactement les mêmes éléments que la partie 41 et ceux-ci sont indiqués par les mêmes références affectées de la lettre a.
L'aile de la partie lut1, sur sa surface externe) est pourvue d'une saillie longitudinale 53 dans laquelle sont pratiquées deux rainures 54 qui sont destinées à coulisser dans une fente 36 de l'aile 33.