INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les souches bactériennes utilisées pour les transformations ont été les souches E. coli 1106 (80rkmk) et 1107 (803rkmk) (MURRAY, N.E., BRAMMAR, W.J.
and MURRAY, K. (1976), "Molec. Gen. Genet.", 150, 5361). Les souches eucaryotes utilisées ont été des clones 1D de souris L TK-, des cellules de chimpanzés Vero, des cellules OMK et des cellules humaines HeLa. Les cultures de ces cellules ont été réalisées dans un milieu de EAGLE modifié par DULBECCO, complété avec du sérum de veau à 5 ou 10 %. Les techniques de transformation des cellules par les ADN de plasmide ont été réalisées comme décrit par COLBERE-GARAPIN et al (COLBERE-GARAPIN, F., CHOUSTERMAN, S., HORODNICEANU, F., KOURILSKY, P. et GARAPIN, A.C. (1979), "Proc. Natl. Acad.Sci., U.S.A.", 76, 3755-3759), en mettant en oeuvre la technique de préci pitation.par le calcium de GRAHAM et VAN DER EB (GRAHAM, F.L. et VAN DER EB (1973), "Virolofgy", 52, 456-467). Les cellules transformées exprimant l'enzyme APH(3')-II ont été sélectionnées dans un milieu contenant de 10 à 400 microgrammes par millilitre de l'antibiotique G418. Les cellules TK+ ont été sélectionnées dans le milieu de HAT, également dans les conditions décrites par COLBERE GARAPIN et Coll. Pour le clonage des cellules, les colonies individuelles ont été isolées au hasard et cultivées jusqu'à produire des cultures confluentes.
Construction des plasmides recombinants Le promoteur utilisé provient de la"région du promoteur eucaryote: provenant du gène HSV1 TK EPR(ciaprès dénommé EPR) et qui dans le plasmide pAGO se trouve située entre le site PvuII et HincII au début du gène TK (figure 1). Cet EPR comprend à l'extrémité 5' du gène deux régions TATA (TATA boxes), l'une d'entre elles étant maintenant connue comme jouant un rôle important pour la transcription du gène TK (MC KNIGHT, S.L. (1980) Nucl.Acids Res., 8, 5949-5964).On produit un recombinant par ligation d'une part d'un fragment d'ADN HincII-HincII de 2480 paires de bases auquel est incorporé le gène de résistance à la kanamycine (schématiquement représenté par la flèche "kanar") que contient normalement le transposon Tn5, lequel a été représenté de façon schématique à la figure 2 > 2, et, d'autre part,du plasmide pAGO ouvert au niveau du site HincII par digestion partielle en présence de cette enzyme de restriction. Le recombinant obtenu a servi à la transfection d'une souche d' Escherichia coli 1106 (803 ru mu ) On sélectionne les colonies résistantes aux trois antibiotiques que sont la kanamycine, la té.tracycline et l'ampicilline.Deux plasmides recombinants,pAG40 et pAG45 ont ainsi été obtenus. L'analyse par restriction montre que le fragment de 2480 paires de bases issues de Tn5 a été incorporé dans le site HincII situé dans la séquence TK à la position 2301 de pAGO (Fig.1). L'orientation de ce fragment a été déterminée par analyse de ces plasmides au moyen de restrictions par XhoI et EcoRI. Le site XhoI de Tn5 est situé à proximité de l'extrémité 5' du gène APH(3')-II. On constate (Fig. 3) que le site XhoI est très proche dans pAG40 du site HincII, lui-meme contigu à la région TK EPR. Au contraire le fragment est dans la direction opposée dans le plasmide pA045.Le plasmide pAG40 a donc été reconnu comme approprié pour expression dans des cellules eucaryotes. Ce plasmide qui s averse egalement contenir le promoteur bactérien de APH(3')-II a été capable de résister jusqu'à 60 pg/ml de kanamycine.
La distance dans pAG40 entre l'EPR et le premier tripletAUG du gène codant pour APH(3')-II est d'environ 1500 paires de bases. Afin d'obtenir une expression améliorée ultérieure, un nouveau recombinant a été formé entre,d'une part ,un fragment .BglII situé dans pAG40 entre les coordonnées 3670 et 4795 de sa carte de restriction, et d'autre part pAGO, lequel avait été ouvert au niveau du site BglII du fragment TK DNA. Les plasmides obtenus, pAG50 (Fig. 4) et pAG55, lesquels se distinguent de pAGO par la présenced'un insertdell25 paires de bases délimité par des extrémités BglII, la plus proche de ces dernières se trouvant à une distance d'environ 130 paires de bases de la région EPR.Par restriction au moyen de l'enzyme SmaI et par analyse sur gels il a été déterminé que l'extrémité 5' du gène APH(3')-II était connectéeà l'EPR de TK, alors que l'insert était intégré dans la direction opposée dans le plasmide pAG55. C'est donc le plasmide pAG50 qui a été choisi pour l'obtention de l'expression de l'enzyme sous le contrôle de la région régulatrice de TK.
Le poids moléculaire de pAG50 (comme celui de pAG55) est de7490 + 50 paires de bases.
Le site de polyadénylation TK (PAS dans les dessins) est situé dans pAG50 immédiatement en aval du site SmaI dans la direction de transcription du gène TK (dans la région de coordonnées 4608 dans la figure 4. Par excision d'un fragment d'ADN de 1,2 k/base entre les deux sites SmaI (de coordonnés 3243 et 4608 dans la carte) de pAG5O, la distance séparant l'extrémité 3' du gène APH(3')-II et le site de polyadénylation TK (McKNIGHT) a été réduite de 1 365 paires de bases. Le codon stop TGA de TK est situé à une distance correspondant à 21 paires de bases en aval du site SmaI. La position du codon stop de APH(3')-II n'est pas exactement connue. Elle en est néanmoins très proche.Le nouveau plasmide obtenu a été désigné sous lSexpression pAG60 (Fig.5). Il a une longueur correspondant à environ 6 150 paires de bases.
Dans le but d'améliorer encore davantage l'effi- cacité de transformation de pAG60, on a tenté de lui incorporer une origine de réplication eucaryote. A cette fin on a eu recours au génome défectifs mentionné plus haut de 1'ADN du virus de l'Herpès Saimiri, ce génome d'effectifs comprenant une forme multimère d'une sousunité de 1,4kllobases dont on pense qu'elle contient une origine de réplication. Ce gène d'effectifs (provenant de la souche 11 du virus de l'Herpès Saimiri, décrit par Fleckenstein et coll.(1979) Biochim. Biophys. Acta 560 301 - 342) a été clivé par l'enzyme TaqI puis ligaturé au vecteur pAG0 lui-meme préalablement clivé par l'en- zyme ClaI. Les plasmides recombinants obtenus contenaient soit une (pFG22) soit deux unités répétitives en tandem (pFG 24).Les séquences répétitives isolées de pFG 24 par excision au moyen de l'enzyme TaqI, ont été liées par ligation à pAG60 préalablement linéarité par ClaI, pour former le plasmide recombinant pAG70 (Fig. 6).
Les effets de G-418 sur des cellules eucaryotes Comme l'ont déjà indiqué JIMENEZ et DAVIES, l'antibiotique G-418 a une activité de synthèse d'une grande variété de protéines inhibitrices.La toxicité de cet antibiotique a par conséquent été testée vis-à-vis des cellules de souris L TK-, , clone ID, de cellules de chimpanzés (non clonées ou cloneVCI0) et de cellules OMK ainsi qu'à l'égard de cellules humaines HeLa. Le nombre des cellules a doublé dans les cultures dans les premières 48 heures qui ont suivi l'addition deG-418.
Sous une concentration de 25 ptg/ml d'antibiotique les cellules ID ne se détachèrent pas avant un mois. Mais à la concentration usuelle d'antibiotique (150 ,ug/ml) les cellules ID moururent et se détachèrent des plaques dans les 10 jours. Contrairement aux cellul.es ID, les cellules Vero non clonées ne moururent qu'un mois plus tard à la merle concentration de G-418. Des colonies présentant des résistances spontanées n'ont jamais été obtenues à des doses de 50 à 400 g/ml (fréquence de colonies à résistance spontanée < 4.10 8, dans le cas de cellules ID).
Transformation des cellules de souris avec les plasmides recombinants Le clone ID des cellules de souris L TK est fortement sensible à la transfection, comme l'ont montré WIGLER et coll. (1978) Cell, 14, 725-731). Ces cellules ont donc été choisies pour étudier la capacité de transfert et d'expressíon du marqueur sélectif de l'invention.
Les transfections ont été réalisées comme indiqué plus haut dans des flacons contenant chacun environ 3.106 cellules. L'agent sélectif C-418 a été ajouté 48 heures après la transfection, à une concentration de 15O,ug/ml.
Les colonies ont été comptées trois semaines après la transfection. Les résultats sont présentés dans le tableau I ci-après.
Plasmide ADN de plasmide ADN support colonies par flacon Colonies/ g de par flacon ( g) par flacon ( g) plasmides 0 10 0 - 0 - 0 - 0 0 pAG40 10 0 27 - 58 - 49 - 14 3.7 2 8 15 - 3 - 5 - 4 3.3 pAG55 10 0 7 - 22 - 7 - 11 1.2 2 8 1 - 1 - 5 - 0 0.8 pAG50 10 0 149 - 182 - 210 - 160 17.5 2 8 66 - 56 - 43 - 49 27 pAG60 10 0 Confluence 2 8 107 - 157 - 162 - 163 74 Le tableau fait apparaître que l'on a obtenu des colonies transformées résistant à l'antibiotique G-1118 après transfection avec les plasmides recombinants contenant le gène APH(3')-II. Des rendements de transformation relativement faibles, de l'ordre de 1 à 3 colonies par fig d'ADN, ont été obtenues avec le transposon bactérien Tn5 et les plasmides pAG45, pAG40 et pAG55.On constate cependant que lton a obtenu une efficacité de transformation beaucoup plus importante avec pAG50 dans lequel la région promoteur de TK a été rapprochée de beaucoup de l'extrémité 5' du gène APH(3')-II (20 à 30 colonies par ,ug) . On a obtenu une efficacité de transformation encore davantage accrue, avec le plasmide pAG60, dans lequel le site de polyadénylation TK a été rapproché de l'extrémité 3' du gène APH(3')-II (70-80 colonies/,ug) On a obtenu un rendement de 50 % encore plus élevé avec le plasmide pAG70 contenant les sous-unités répétitives du virus Herpès Saimiri.Il a été constaté que le rendement de transformation n'était pas dépendant dans une grande mesure des concentrations en G-418 à des doses comprises entre 150 et 300 ZgXml ni de l'intervalle de temps séparant la transfection et l'addition du G-418.
Par exemple, dans le groupe 1C1 - 1C4, la barre 1 de la rangée 1 de la couche moyenne Il est connectée à la barre 1 de la rangée 11' se trouvant dans la couche extérieure 10 de l'envoi lement, laquelle est connectée à la barre 1 de la rangée 2' de lt couche moyenne 11 qui est ensuite connectée à la barre 1 de la rangée 12' se trouvant dans la couche intérieure 12 de l'enroulement, et ainsi de suite.
Les autres groupes de bobines 2o1 - 204 ; 102 - 1C5, etc.. sont formés de manière analogue.
Les parties d'extrémité 2 des barres 1 des rangées impaires 1', 3', 5' etc (Fig. 4) de l'enroulement sont disposées dans la couche extérieure 10 (Fig. 5) de l'enroulement par rapport à l'axe du stator, les parties d'extrémité 2 des barres 1 des rangées paires 2', 4', 6' etc.. sont disposées dans la couche intérieure 12 (Fig. 3) de l'enroulement par rapport à l'axe longitudinal du stator, tandis que les barres 1 de la couche moyenne 11 de l'enroulement sont disposées tant dans les rangées paires que dans les rangées impaires.
L'invention permet d'assurer une diminution de la longueur de la portée des parties d'extrémité de l'enroulement de 20 à 30 % par comparaison avec un enroulement à barres en deux couches.
La présente invention se rapporte à une moissonneuse de fourrage comportant deux rouleaux d'écrasement placés entre le dispositif de hachage et le ventilateur en vue de l'ensilage de céréales.
Le procédé, utilisé en agriculture pour la préparation de l'ensilage, consiste à hacher les récoltes, vertes ou à maturité, en fines particules et à les stocker dans un silo, où elles subissent une fermentation pour empêcher leur altération. Par ce procédé, la récolte est transformée en un aliment très efficace pour le bétail. Une moissonneuse de fourrage, qui coupe les récoltes en petites particules lorsqu'elles ont été moissonnées par une machine mobile sur le terrain, est un élément dséquipement essentiel pour la préparation de l'en- silage. On connait déjà des moissonneuses de fourrage, par exemple du type décrit dans le brevet américain no 3 916 605 de Richards et autres.Cette machine utilise un dispositif de hachage rotatif comportant des lames hélicotdales, qui coopèrent avec une barre de coupe fixe, pour hacher le produit à récolter lorsqu'il est introduit dans le dispositif rotatif.
Un tamis perforé suppldmentaire, pour une deuxième coupe, peut être utilisé afin de diminuer davantage la dimension des morceaux hachés, Le produit qui traverse le tamis est ensuite transporté par une vis à un ventilateur qui élève la récolte hachée vers un silo de stockage.
Une difficulté, rencontrée lors de la consommation d'ensilage préparé de cette façon, réside en ce que la plupart des grains de céréales restent entiers. Le système digestif des animaux ne peut pas totalement digérer les éléments nutritifs qui existent à l'intériour du grain entier, La présente invention évite cet inconvdnient et a pour objet un perfectionnement des moissonneuses de fourrage suivant l'art antérieur.
L'addition de rouleaux d'écrasement placés entre le dispositif de hachage et le ventilateur permet d'obtenir un type d'ensilage de plus grande valeur nutritive. Le fait que la valeur nutritive peut titre améliorée par Itecrasemant des grains est ddjà utilise dans le broyeur de cdrdales décrit dans le brevet américain nO 3 349 823 de Stott, et autres.
La moissonneuse de fourrage suivant l'invention convient pour le traitement de céréales en épis. Dans le cas d' une machine capable de se rendre sur le terrain, une tdte de fauche usuelle est montée à l'avant de la moissonneuse de fourrage, Les épis de céréales sont nettement sépares de la tige par cette tête de fauche et envoyés dans une tête de ha charge. Après avoir été tranché en petits morceaux par les lames de la tête rotative, le produit haché est ensuite obligé de traverser un tamis perforé de deuxième coupe placé à la base du cylindre. Lorsque le produit quitte le cylindre, il est déplacé vers le haut par un groupe de vis élévatrices disposes en parallèle. Les épis hachés, à la sortie des vis, tom- bent entre des rouleaux d'écrasement.Un Un intervalle prédéter- miné entre les rouleaux permet de traiter les grains et l'enveloppe pour les amener au degré désiré de consistance. Les rouleaux tournent à des vitesses légèrement différentes, pour effectuer à la fois une avance et un écrasement du produit r6- collé. A sa sortie des rouleaux dtdcrasement, le produit traité est dirigé vers un ventilateur qui le transfère dans un wagon ou un camion.
Les vis élévatrices peuvent être disposées de façon à être facilement démontables, de sorte que la moissonneuse peut être transformée en une configuration, dans laquelle la sortie du dispositif rotatif de hachage est envoyée directement au ventilateur, sans passer à travers les rouleaux d'écrasement.
Fig. 1 est une vue en élévation, avec coupe partielle, d'une moissonneuse de fourrage comportant un groupe moteur d'autopropulsion avec lequel elle peut être utilisée.
Fig. 2 est une vue de côté, plus détaillée et à plus grande échelle, du mécanisme de traitement du produit récolté comprenant des rouleaux d'écrasement.
Fi. 2A est une vue latérale partielle de la moissonneuse, lorsque le dispositif de vis élévatrice est enlevé.
Fig. 3 est une vue de dessus montrant la position relative des rouleaux d'écrasement, de la vis d'alimentation et du ventilateur.
Domaine technique.
La présente invention concerne des perfectionnements aux passerelles de service pour coffrage vertical reposant sur la partie supérieure des fermes ou poutres verticales de maintien dudit coffrage, lesdites passerelles faisant la meme longueur que ledit coffrage et étant dé servi es par une échelle et comportant un garde-corps avec lisses s'encastrant verticalement dans des douilles solidaires du plancher de la passerelle qui est composée d'un caillebotis maintenu par un cadre de profilés ayant au moins une aile verticale.
Problème pose.
Les coffrages verticaux, faisant généralement la hauteur dsun mur et qui ont fait l'obJet de nombreux brevets de la part de la demanderesse en particulier, les brevets fran quais nO 1.277.437 du 13 octobre 1960 "NOWEAU COFFRAGE VERTICAL", nO 1.369.46 POUR CONSTRUCTIONS EN MATERIAU COULE", n02.256.671 du 28 décembre 1973 "PERFECTIONNEMENTS AUX COFFRAGES TUNNELS" nécessitent l'intervention de main d'oeuvre à leur partie supérieure, notamment pour la pose des armatures de béton armé et la coulée du béton. La main d'oeuvre doit donc avoir un accès commode et sur à la partie supérieure du coffrage. Cela nécessite une passerelle de service.
Etat de la technique antérieure et inconvénients.
La plupart des coffrages verticaux fabriqués par la demanderesse depuis de nombreuses années possèdent une passerelle qui repose à la partie supérieure des fermes ou poutres verticales et à laquelle on accède par une échelle. Cette passerelle comporte un garde-corps sur le coté opposé au coffrage et il comporte des lisses. Pour accéder à la passerelle à partir du haut de l'échelle, il faut passer entre les lisses.Le plancher de la passerelle est généralement constitué par un cadre de cornières dont une des ailes est dirige vers le haut pour constituer une feuillure au fond de laquelle on pose un calllSo- tis, généralement du métal déployé. L'aile supérieure des cor nières constitue une petite plinthe qui évite la chute d'objets qui pourraient être posés sur le plancher de la passerelle.
Gette passerelle donne satisfaction techniquement mais on cherche toujours à l'améliorer dans le but d'éviter des accidents toujours possibles. C'est le but de la présente invention.
En particulier, l'accès de la passerelle actuel, à partir du haut de l'échelle, est délicat pour la double raison qu'il faut se contorsionner entre les lisses et qu'il faut franchir le seuil-ou plinthe constitué par l'aile verticale du profilé du cadre du plancher de la passerelle. Aux extrd- mités, il n'existe pas de porte et l'usager inattentif risque de faire une chute. La plinthe constituée par le rebord du cadre est parfois considérée comme insuffisamment haute. Enfin les deux passerelles de deux coffrages adjacents risquent de ne pas se trouver exactement au même niveau et cette solution de continuité risque de provoquer des inconvénients pour les utili- sateurs.
Ce sont ces divers inconvénient s que se propose d'éliminer la présente invention.
Bref exposé de l'invention.
La passerelle de l'invention est caractérisée prin cipalement par la combinaison a) d'un plancher de passerelle dont le cté qui longe le cof 2 rage au plus près a un profilé avec une aile verticale située au-dessus du niveau du caillebotis, tandis que les trois autres côtés comportent des profilés dont les éléments verticaux sont situés sous le niveau du caillebotis, les deux côtés de la passerelle perpendiculaires au coffrage présentant des moyens d'emboîtement et de mise i niveau avec le plancher de la passerelle du coffrage adjacent ; b) de garde-corps en plusieurs parties, de longueurs modulaires, s'adaptant aux différentes longueurs de coffrage et réservant des portes s'ouvrant vers 1'lntdrleur uniquement, grâce à des butées, et se refermant automatiquement grâce à un moyen élas- tique et/ou à pesanteur, le garde-corps et les portes présentant tous une plinthe, les portes se fixant à raison d'une - a' chaque extrémité de la passerelle, perpendiculairement au plan du coffrage en position fermée, - le long du garde-corps, parallèlement au plan du coffrage, en position fermée, entre deux fermes ou poutres verticales ;; c) d'une échelle dont la partie supérieure est articulée au plancher de la passerelle au niveau de cette dernière porte et dont la partie inférieure est soutenue par un bras oscillant s'articulant au eoffrage et s'emboîtant, de façon amovible, sur l'échelle de façon à pouvoir, - soit maintenir l'échelle en position de service normal, inclinée, - soit la rabattre sous la passerelle, entre les deux fermes ou poutres verticales.
Suivant une forme préférée de réalisation, le cadre du plancher est constituée - sur son grand côté, le plus proche du coffrage, par une cor- nière avec une aile tournée vers le haut, - sur un grand cote extérieur, par une cornière avec une aile tournée vers le bas, - sur ses deux petits cotés, par un fer U avec ses deux ailes horizontales tournées vers l'extérieur, des taquets de posi tionnement étant soudés entre les ailes et au fond de l'âme pour fairesaillie et venir éventuellement s'encastrer entre les ailes d'un fer U correspondant de la passerelle adjacente.
Une des nouveautés de la passerelle de la présente invention est de prévoir des portes qui ont des gonds à portées obliques par rapport à ltaxe de pivotement de la porte, la ligne de plus grande pente du plan oblique de la portée passant par l'axe étant parallèle du plan de la porte fermée. Les portes peuvent présenter, en variante ou en plus, un ressort de rappel de fermeture qui, de façon commode sera constitué par un ressort hélicoïdal passé autour de l'axe d'oscillation de ladite porte.
I1 ne faut cependant pas que les portes en bout de passerelle soient une gêne pour la desserte de deux coffrages adjacents et, dans ce but, elles peuvent etre maintenues ouvertes par un crochet, taquet ou similaire fixé au garde-corps.
En ce qui concerne l'échelle, le bras oscillant qui la supporte est généralement constitué par une fourche dont les deux dents ont leurs extrémités recourbées vers le bas pour s'engager dans des oeillets correspondants de l'échelle, plusieurs oeillets étant prévus pour les différentes inclinaisons et positions de l'échelle.
Pour le cas ou plusieurs niveaux de passerelles doivent être prévus, le bas de l'échelle est repliable autour d'axes horizontaux en tronçons de hauteurs correspondants aux différences de niveaux où peuvent s'adapter la passerelle contre le coffrage. La plupart du temps, la passerelle peut s'adapter à deux niveaux et l'échelle est alors en deux tronçons articulés autour d'un axe horizontal.
permettant de dégager le ruban découpé dans les coupe-
bordures.
Il est un autre objet de l'invention de fournir un
dispositif et un procédé nouveauxet perfectionnéspermet-
tant le dégagement à faible vitesse du ruban découpé, consistant à dégager le ruban du coupe-bordure à la même vitesse de déplacement que la vitesse de parcours de la bande de laquelle le ruban a étét découpé et à déplacer de manière continue le ruban découpé à travers une trappe d'accueil à une vitesse relativement faible, de manière efficace et essentiellement sans engendrer de bruit ou à engendrer un niveau de bruit suffisamment bas pour
qu'il puisse être toléré.
L'invention fournit, en combinaison avec un coupe-
bordure destiné à découper un ruban sur les bords d'une
bande en déplacement et avec une trappe d'accueil définis-
sant un passage de dégagement du coupe-bordure et orientée en accusant un angle par rapport à celui-ci et permettant d'accueillir le ruban découpé, un dispositif de rotation disposé en position de coopération avec le coupe-bordure et permettant d'accueillir le ruban découpé entre deux
éléments rotatifs et permettant de recourber et de déflé-
chir le ruban découpé en le dégageant du coupe-bordure vers la trappe d'accueil à une vitesse essentiellement égale à la vitesse de déplacement de la bande, et un dispositif situé dans la trappe d'accueil permettant d'avancer le ruban découpé dans celle-ci à une vitesse relative -3- plus faible que la vitesse de la bande. On fournit
également un procédé permettant d'utiliser cet appareil.
L'invention fournit également, dans un poste à trappe d'accueil pour les rubans découpés destiné à accueillir et à dégager. les rubans découpés des bandes en déplacement, des moyens permettant de diriger le ruban découpé vers la trappe d'accueil, et des organes opposés situés à l'intérieur de la-trappe d'accueil et entrainés dans un mouvement rotatif opératoire, le ruban découpé étant pris en sandwich entre les organes opposés, ce dans le but d'avancer la bande découpéedans la trappe d'accueil. On fournit également un procédé permettant,
d'utiliser l'appareil décrit ci-avant.
La présente invention fournit également une trappe d'accueil permettant le dégagement des rubans de rognage
La présente invention à pour objet un dispositif ne présentant pas les inconvénients de la technique antérieure du tripode rappelé ci-dessus, mais permet de maintenir en équilibre constant, mbme à l'arrêt du véhicule à deux roues du type moto, système offrant un facteur sportif et attrayant à ce dispositif de conception simple et d'un coût de fabrication minime.