INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Les enzymes qui peuvent être utilisées pour réaliser le détachement de la "fraction biologiquement active atoxique" à partir de "l'extrait brut" sont celles qui permettent précisément l'obtention de fractions formées de constituants de poids moléculaire au plus égal à 10.000 et dans lesquelles les propriétés biologiques, plus particulièrement leur aptitude à induire une protection contre les infections bactériennes est -conser- vée, ce qui ne peut en fait être constaté, du moins dans le cas où le produit traité contient encore après incubation en présence de ces enzymes des constituants ayant un poids moléculaire plus élevé, que lorsque celles-ci ont été séparées et écartées.Un test qui peut être donc utilisé pour reconnaitre celles des nombreuses enzymes qui peuvent être utilisées repose donc sur un essai de séparation à partir de "l'extrait brut" traité en présence de l'enzyme, de fractions formées de constituants ayant un poids moléculaire inférieur à 10.000 et présentant les propriétés biologiques particulières qui ont été définies plus haut, à savoir la capacité de protection de la souris contre des bactéries infectant, notamment des Klebsiella et l'absence de choc endotoxinique et de létalité chez les souris préalablement sensibilisées par l'actinomycine D, et ce jusqu'à des doses de 10 microgrammes par animal. Parmi ces enzymes figurent celles qui sont capables d'effectuer la lyse soit de l'ADN, soit d'esters contenus dans les parties lipidiques de "l'extrait brut" traité.On peut ainsi avoir recours à des nucléases, notamment les désoxyribonucléases, à des lipases, par exemple la lipase, soit pancréatique, soit extraite de Rhizopus, ou de Candida albicans. Une lipase préférée est celle extraite de Rhizopus. On peut aussi avoir recours à d'autres groupes d'enzymes telles que les phosphatases, les phosphodiestérases et les protéases.
Bien entendu, on peut avoir recours à un traitement avec des enzymes distinctes associées ou encore réaliser des séquences d'incubation successives avec des enzymes distinctes.
Le traitement enzymatique s'effectue normalement en solution aqueuse, de préférence au pH optimal d'action de l'enzyme utilisée, notamment à un pH compris entre environ 7 et environ 8, par exemple au sein d'un tampon à pH 7,6.
La séparation des fractions biologiquement actives de bas poids moléculaire et des fractions toxiques de plus haut poids moléculaire (qui sont écartées) peut être réalisée de toute façon en soi connue. Avantageusement, on a recours à des filtrations sur des membranes ultrafiltrantes telles qu'elles ne laissent pas passer des molécules ayant un poids moléculaire plus élevé que la valeur maximum choisie, de l'ordre de 10.000.
On peut aussi utiliser des tamis moléculaires et ne retenir que les parties des éluats qui contiennent des constituants de poids moléculaire inférieur à 10.000.
Les constituants biologiquement actifs et atoxiques contenus dans les ultrafiltrats obtenus peuvent ensuite être obtenus de toute façon en soi connue à partir de ces ultrafiltrats, par exemple par lyophilisation.
Après traitement, l'enzyme peut être déactivée de toute façon en soi connue. Elle est d'ailleurs séparée en même temps que les constituants de poids moléculaire plus élevé qui restent dans le milieu après le traitement enzymatique, lorsque son eZvHLe do moléculaire est nettement supérieur à flC.O^O et lorsque cette séparation est effectuée par filtration sur membrane ultrafiltrante ou sur tamis moléculaire. C'est ainsi que la lipase de Rhizopus a un poids moléculaire de l'ordre de 25.000.
On constate souvent dans un tel cas que l'on peut encore détacher des proportions de fractions biologiquement actives atoxiques, qui peuvent être très supérieures aux quantités obtenues après la première filtration, en procédant à une redis solution dans une solution aqueuse, notamment dans le même tampon, des parties retenues sur le filtre (constituants de poids moléculaire supérieur à 10.000 et enzymes) auxquelles on se réfèrera dans ce qui suit sous l'expression "concentrat", et par réincubation du milieu ainsi obtenu ettoutraitement au phénol à froid et si besoin à chaud (60 - 70"C), avant de procéder à une nouvelle opération de séparation, notamment par filtration, dans les mêmes conditions que sus-indiqué, des fractions contenant une teneur supplémentaire en constituants de poids moléculaire inférieur à 10.000, le nouveau concentrat étant alors éliminé.
On notera que le traitement au phénol du premier concentrat a pour effet de dénaturer l'enzyme et de le rendre soluble dans la phase phénol, et contribue à l'obtention de quantités supplémentaires de fractions biologiquement actives et atoxiques.
Dans ce qui suit, on décrira les conditions préférées de mise en oeuvre du procédé selon l'invention, y compris l'obtention d'un "extrait brut" hydrosoluble, qui peut être appliqué à des bactéries gram négatif, notamment à des entérobacteriaceae, telles que les Salmonella enteritidis.
1) Délipidation des bactéries.
Partant de bactéries lavées, isolées d'une culture de bactéries réalisée de façon en soi connue, on procède à une délipidation des cellules bactériennes pour séparer et éliminer au moins partiellement les lipides externes faiblement liés, par traitement dans des solvants organiques polaires, notamment dans un mélange chloroforme/méthanol contenant au moins 10 vo lumes et de préférence 24 volumes de chloroforme pour 1 volume de méthanol, pendant une durée d'au moins 12 heures, de préférence de l'ordre de 24 heures, sous agitation. Les cellules sont ensuite séparées par centrifugation et les traces de solvant éliminées par plusieurs lavages, notamment 5 lavages, successifs, avec un tampon ayant un pH voisin de 8, de préférence un tampon Tris 10 2M, les cellules étant chaque fois récupérées par centrifugation.Toutes ces opérations sont réalisées à la température ambiante ou, de préférence, légèrement inférieure, par exemple de l'ordre de 15 C.
2) Traitement des bactéries délipidées Par un détergent.
Les bactéries délipidées ainsi obtenues sont alors soumises à l'action d'un détergent,avantageusement du SDS, au sein du même tampon. La concentration du milieu en SDS peut être comprise entre environ 0,4 et environ 5 %, avantageusement de l'ordre de 4 %, le contact étant maintenu pendant une durée d'environ 5 minutes à environ 1 heure, de préférence 1/2 heure, à une température supérieure à l'ambiante, notamment de 50 à 1000 C, de préférence à 1000 C.
Le mélange est ensuite refroidi rapidement, notamment dans de la glace, jusqu'à l'obtention d'une température de préférence inférieure à l'ambiante, par exemple de 'ordre de 60 C.
Par centrifugation, on élimine les parties non dissoutes et l'on recueille le surnageant, lequel est précipité par addition de 2,5 à 5 volumes, notamment 4 volumes d'alcool absolu refroidi à -200 C.
EXEMPLE 5 Dans un autoclave en acier inoxydable d'i; litre muni d'un agitateur à grande vitesse du type turbine, on charge Oxyde de mésityle prénylé à 89,5 % selon exemple 1a) .. 165 g Eau ; 100 g Hydroxyde de sodium * 1,7 g Acétone ........................................ 30 g On conduit la réaction comme à l'exemple 1b) pendant une heure à une température maximale de 2300C et à une pression maximale de 56 kg/cm2.
Après refroidissement on vide l'autoclave, le lave à l'acétone, sale la couche organique par 30 g de chlorure de sodium et sépare les deux couches. On extrait la couche aqueuse au benzène. On rassemble la couche organique et les extraits benzéniques puis les distille sous 28 mm de mercure après avoir chassé le benzène. L'analyse de toutes les fractions indique que l'on a obtenu un total de 72,2 g de méthylhepténone. Déduction faite de 0,078 mole d'oxyde de mésityle prélevée pour échantillonage, le rendement est de 72 % de la théorie.
EXEMPLE 6 a) PREPARATION DE L'OXYDE DE MESITYLE PRENYLE A PARTIR DE L'ACETONE A un mélange bien agité d'une mole (110 parties) de chloro-1 méthyl3 butène-2 à 95 % et de 5 moles (290 parties) d'acétone on ajoute 0,1 mole (8,6 parties) de piperidine et 1,5 moles (63 parties) de soude caustique à 96 X en paillettes. Après avoir maintenu la température à 30-350C pendant une heure un dosage indique que 67 X du chloro-1 méthyl-3 butène-2 ont réagi. Ce dosage est effectué en ajoutant à un échantillon du mélange réactionnel un excès d'une solution alcoolique à 50 X d'hydroxyde de potassium qui par chauffage hydrolyse le chlorure en carbinol avec dégagement d'acide chlorhydrique.Ce dernier est neutralisé par lthydroxyde de potassium et l'on dose l'excès d'hydroxyde de potassium en solution alcoolique.
Après 3 heures, quand le chloro-1 méthyl-3 butène-2 qui n'a pas réagi est tombé à 5 % de la quantité initiale, on refroidit le mélange réactionnel à 200C, on chasse l'excès de chlorure de sodium et l'excès de soude caustique par filtration et distille la phase liquide. On obtient ainsi 86 parties de méthylhepténone brute, point d'ébullition 55 à 850C sous 13 mm de mercure, et 42 parties de résidu à point d'ébullition plus élevé. La méthylhepténone brute contient 72 X de méthylhepténone selon la chromatographie en phase vapeur. Ceci correspond à un rendement de 49 % en méthylhepténone à partir de chloro-1 méthyl-3 butène-2.Par distillation fractionnée de la-méthylhepténone brute on obtient 46 parties de méthylhepténone pure (titrant 98 à 100 % selon chromatographie en phase vapeur) ayant un point d'ébullition de 1700C sous 760 mm de mercure et nD2O = 1,4410.
L'indice de réfraction de la méthyl-6 heptèn-5 one-2 est nD20 = 1,4410 à 1,4415 selon Bull. Soc. Chim. France [4] 39 1125 (1926).
Les 42 parts de la fraction de point d'ébullition plus élevé -contiennent 30,7 % d'oxyde de mésityle prénylé et 2,8 parts de méthylhepténone.
b) SCISSION HYDROLYTIQUE DE L'OXYDE DE hESITYLE PRENYLE OBTENU A L'ETAPE PRECEDENTE Dans un autoclave en acier inoxydable d'un litre muni d'un agitateur à grande vitesse du type turbine, on charge Oxyde de mésityle prénylé à 30,7 % et contenant 2,8 % de méthylhepténone ................................. 184 g Eau ............................................ 400 g Hydroxyde de sodium 1 1,8 g On conduit la réaction comme à l'exemple 1b) pendant 4,5 heures à une température maximale de 230 C et à une pression maximale de 36,4 kg/cm .
Après refroidissement on vide l'autoclave, le lave à l'acétone.
On sale la couche organique avec 30 g de chlorure de sodium et sépare les deuxcouches. On extrait alors la couche aqueuse au benzène On rassemble la couche organique et les extraits benzéniques et les distille sous 28 mm de mercure après avoir chassé le benzène. L'analyse de toutes les fractions indique que l'on a obtenu un total de 36 g de méthylhepténone. Déduction faite de 0,078 mole d'oxyde de mésityle prélevée pour échantillonnage, le rendement est 84,2 % de la théorie.
EXEMPLE 7 Dans un autoclave en acier inoxydable d'un litre muni d'un agitateur à grande vitesse du type turbine, on charge Oxyde de mésityle prénylé à 14,3 % et contenant 1,2 g de méthylhepténone préparé suivant une technique voisine de l'exemple 6a) ........ 165 g Eau ........................................... 350 g Hydroxyde de sodium ........................... 1,7 g Isopropanol ................................ 184 g On conduit la réaction comme à l'exemple lb) pendant 1,3 heures à 2 une température maximale de 230 C et à une pression maximale de 56 kg/cm2.
Après refroidissement on vide l'autoclave, la lave à l'acétone, sale la couche organique par 30 g de chlorure de sodium et sépare les deux couches. On extrait la couche aqueuse au benzène. On rassemble la couche aqueuse et les extraits benzéniques puis les distille sous un vide de 28 mm de mercure après avoir chassé le benzène. L'analyse de toutes les fractions indique que l'on a obtenu un total de 17,2 g de méthylhepténone. Déduction faite de 0,078 mole d'oxyde de mésityle prénylé prélevée pour échantillonnage, le rendement est 95,8 % de la théorie.
EXEMPLE 8 Dans un autoclave en acier inoxydable d'un litre muni d'un agitateur à grande vitesse du type turbine, on charge Oxyde de mésityle prénylé préparé selon exemple la) ...... 35 g Solution aqueuse de carbonate de sodium à 1 X ........ 43 g On échantillonne pendant la réaction et mesure par chromatographie en phase vapeur la teneur en oxyde de mésityle prénylé et en méthylhepténone.La réaction se déroule comme suit :
DUREE TEMP PRESSION ECHANTILLON PMO MH AVANCEMENT DE LA en mn C kg/cm REACTION EN % 0 30 0 1 94,6 0 0 30 237 4,2 60 275 30 90 275 35 2 87,5 7,2 7,6 120 275 37 On récupère un total de 29,4 g de constituants organiques. L'analyse indique la présence de 9,16 g de méthylhepténone (0,0726 mole).Compte tenu de 28,06 g (0,1688 mole)d'oxyde de mésityle récupéré le rendement direct est 28,59 % et le rendement réel 85,4 % EXEMPLE 9 Dans un autoclave en acier inoxydable d'un litre muni d'un agitateur à grande vitesse du type turbine, on charge : Oxyde de mésityle prényle préparé selon exemple 1a) ....... 40,3 g Solution aqueuse d'hydroxyde de potassium à 0,1 % ......... 51,4 g On prélève des échantillons au cours de la réaction et par chromatographie détermine les teneurs en oxyde de mésityle prénylé et en méthylhepténone.La réaction se déroule comme suit :
DUREE: TEMP: PRESSION: ECHANTILLON: PMO: MH: AVANCEMENT DE LA en mn: C : kg/cm : : : : REACTION EN % ) 0 35 0 1 94,6 0 0 30 230 5,6 60 : 275 : 33,2 ( 90 : 275 :, 38,2 2 : 60,3 : 28,2: 31,9 ( 120 : 275 : 43,3 : .
On récupère au total 34,8 g de fraction organique. L'analyse indique la présence de 15,1 g de méthylhepténone (0,119 mole). En tenant compte de 0,089 mole d'oxyde de mésityle prénylé récupéré, le rendement direct est 60,5 % et le rendement réel 90,2 %.
EXEMPLE 10 Dans un autoclave en acier inoxydable d'un litre muni d'un agitateur à grande vitesse du type turbine, on charge Oxyde de mésityle prénylé préparé suivant exemple 1a) ....... 40 g Solution aqueuse d'hydroxyde de tétraméthylammonium à 1 X .... 50 g On prélève des échantillons pendant la réaction et mesure par chromatographie en phase vapeur les teneurs en oxyde de mésityle prénylé et en méthylhepténone.Les résultats sont les suivants
Suivant une forme de réalisation avantageuse de l'in vention, on préfabrique des paquets techniques porteurs, comprenant des groupes d'installations d'alimentation et d'dvacuation.
La préfabrication peut porter sur des appuis dans lesquels sont intégrés à poste fixe des conduits et/ou des tuyaux d'alimentation et d'évacuation. Les enveloppes pare-feu qui sont exigées pour des appuis en acier, peuvent être également préfabriquées. Dans ce cas, les installations d'alimentation et d'évacuation sont disposées dans la ou les chambres délimitées par le profilé d'appui et l'enveloppe pare-feu. Dans ces chambres peuvent être placés des tubes servant à la pose de lignes électriques et de conduites d'eau ou de gaz, par exemple.Ces tubes peuvent être agencés aussi pour servir de conduits d'aération ou de tuyauteries d'alimentation ou d'évacuation, par exemple pour un chauffage à l'air. I1 est possible également d'utiliser les chambres directement, sans insertion de tubes supplémentaires, comme installation d'alimentation ou d'évacuation, notamment pour un chauffage à l'air.
Il n'est nullement nécessatre d'utiliser seulement des appuis en acier. On peut envisager d'autres systèmes de construction quelconques, tels que des ossatures en béton ou une construction par compartiments.
Des appuis comportant des profilés en acier et des enveloppes pare-feu sont cpnformés, de préférence, de façon que les extrémités des profilés d'appui soient en saillie. L'avantage ainsi obtenu réside en ce que les extrémités des profilés d'appui sont libres pour le montage. Ces extrémités n'ont pas besoin de recevoir une enveloppe pare-feu, car elles sont montées dans la zone du plafond à l'abri du feu. Le plafond terminant la pièce peut être monté sur la teAte de l'appui, de sorte que le montage de l'appui suivant peut être effectué à partir du plancher du plafond monté.
Les dimensions des profilés d'appui en acier sont déterminées systématiquement, compte tenu de la charge devant être supportée, de la surface d'influence par étage et du nombre der étages. L'enveloppe pare-feu peut être mise en forme industriellement par coffrage, ou comme profilé à coffrage perdu, ou encore au moyen de coffrages à recouvrement préfabriqués.
Selon un autre arrangement de l'invention, on peut préfabriquer également des éléments de mur, des éléments de plafond, des cassettes et/ou des éléments porteurs en cuvette, dans lesquels sont intégrés à demeure des conduits et/ou des tuyaux d'alimentation et d'évacuation. Les tuyaux utilisés peuvent se terminer par un manchon. Pour jonctionner les tuyaux éléments porteurs voisins ainsi agencés on nTa besoin que d'un tuyau in termédiaire dont une extrémité est embossée dans le manchon de l'un des tuyaux, tandis que son autre extrémité reçoit l'extrémité du tuyau se trouvant vis-à-vis, Les éléments porteurs en cuvette cités à titre d'exemple doivent être de construction autoportante.Ils peuvent eAtre en béton, en acier réfractaire ou en un autre matériau résistant au feu. Ils sont préfabriqués de préférence avec des découpes réglables pour les branchements des installations techniques d'alimentation et d'évacuation.
Suivant une autre caractéristique de l'invention, ces éléments porteurs en cuvette sont fixés à des supports dans la zone du plafond, avec leurs cotés ouverts horizontaux et dirigés vers le haut. La zone du plafond peut entre garnie entièrement, entre les appuis, d'éléments porteurs en cuvette ouverts vers le haut.
Il y a lieu de signaler que l'utilisation d'éléments porteurs en cuvette dans la zone du plafond de bâtiments est connue. Ces éléments porteurs, en général de section en U ou rectangulaire, sont toutefois utilisés toujours jusqu'à présent avec leur coté ouvert tourné vers le bas. Le garnissage du plafond au moyen d'éléments porteurs en cuvette posés avec leurs côtés ouverts orientés vers le haut, offre de très nombreux avantages. Si l'on utilise des cuvettes en béton, en acier ignifuge ou en un autre matériau réfractaire, les plaques de fond de ces éléments porteurs juxtaposés constituent des cloisons coupe-feu, de sorte qu'une couche pare-feu spéciale n'est plus nécessaire.Un autre avantage particulièrement important réside en ce que ces éléments porteurs en cuvette peuvent contenir toutes les installations d'alimentation et d'évacuation du logement situé au-dessus. Cet avantage est primordial, car le travail peut être exécuté toujours beaucoup plus facilement, mieux et à meilleur marché vers le bas à partir d'un logement, Cette disposition des éléments porteurs en cuvette a pour autre avantage de rendre possible le raccordement de tous objets aux installations d'alimentation et d'évacuation à travers le plancher dans l'espace utile. Même si tous les murs sont maintenus libres d'installations d'alimentation et d'évacuation, on 'a pour raccorder un objet n jamais besoin pour raccorder un obJet d'un tuyau ou d'un con- duit descendant du plafond.
Le garnissage du plafond au moyen d'éléments porteurs en cuvette montés avec leurs côtés ouverts tournés vers le haut procure un autre avantage notable, dû à ce que chaque logement forme une unité complètement fermée sur elle-même. I1 n'est plus nécessaire de faire passer de haut en bas à travers le plafond aucun conduit ou tuyau, de sorte qu'une telle unité de logement est totalement séparée acoustiquement des unités situées au-dessus et au-dessous. Cette séparation complète entre les unités de logement est également très avantageuse lorsque des travaux d'entre tien ou de réparations quelconques doivent être effectués sur les installations techniques d'une unité de logement, Ces travaux peuvent être exécutés toujours dans l'unité considérée, sans gêner en quoi que ce soit d'autres unités de logement.
Dans les bâtiments édifiés conformément à l'invention, il est possible aussi,pour la première fois, de modifier entièrement toute la technique d'alimentation d'une unité de logement ou d'une unité utilitaire du babtiment, par exemple pour transformer un chauffage central à l'eau chaude en un chauffage à l'air, sans aucune gêne apportée à l'unité de logement ou utilitaire située au-dessous. Pour effectuer cette transformation, il suffit de retirer le revêtement du plancher et de mettre en place dans les cuvettes des tuyauteries nouvelles ou différentes.
Dans les bStiments édifiés selon l'invention, il est également possible pour la première fois de changer l'ensemble de l'équipement technique sans modifier la construction. C'est ainsi, par exemple, qu'un atelier ou un bâtiment scolaire dans lequel n'étaient nécessaires et n'existaient qu'un très petit nombre de branchements d'eau chaude, peut être transrormé en logements.Pour cette transformation, il suffit de remplacer ou de compléter dans les supports en cuvette les paquets préfabriqués correspondants de tuyaux ou de conduits d'alimentation et d'évacuation et de raccorder les nouveaux tuyaux ou conduits aux tuyaux ou conduits appropriés dans les appuis, Suivant un autre mode de réalisation de l'invention, les cuvettes sont préfabriquées avec, sur leur face inférieure, des rainures agencées de manière à pouvoir recevoir des lignes électriques et servir de rails de guidage pour des cloisons de séparation, de rails supports, par exemple pour des placards suspendus ou des rideaux, et d'ouvertures d'aération ou de chauf- fage.Lors de la préfabrication, les rainures sont disposées avantageusement suivant des dessins rectangulaires ou carrés, de sorte qu'au garnissage de tout le plafond au moyen de tels supports il se forme des rainures continues, transversalement sur la face inférieure du plafond.
Cette forme de réalisation de l'invention contribue elle aussi à la fusion fonctionnelle et dans l'espace, tant des éléments porteurs que des installations techniques. Pour pouvoir exercer leur fonction portante, les rainures sont conformées de manière que leur diamètre horizontal soit plus grand dans leur partie supérieure que dans leur partie inférieure. Elles peuvent présenter une section en queue d'aronde ou en T. Sur leur face interne peuvent eAtre prévues en même temps des surfaces de glissement. Le diamètre vertical de ces rainures doit astre choisi de façon qu'en dehors des curseurs complémentaires de rails pour stores ou des organes de guidage pour des cloisons de séparation, on puisse monter dans les rainures des lignes électriques ou des barres adaptables.
Aux points d'intersection des rainures, les arêtes sont avantageusement arrondies, De ce fait, des cloisons de séparation dont les organes de guidage supérieurs coulissent dans les rainures, ou des rideaux, peuvent astre déplacés, non seulement le long d'une rainure continue, mais encore plus loin le long d'une autre rainure perpendiculairement à la première. Des rideaux ainsi guidés peuvent être décalés à des distances égales au réseau du plafond ou épouser des angles, ce qui n'était possible jusqu'à présent qu'avec des paravents.
Ces rainures servent également à subdiviser le gros module formé par les appuis disposés en réseau en un module de réseau plus petit. Elles peuvent servir aussi de contre-rainures pour le logement d'un élément de recouvrement, tel qu'un tube flexible, utilisé pour assurer l'étanchéité entre un mur extérieur ou intérieur et le plafond.