INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Ensuite, on place un papier filtre dans la boite et on introduit le nombre spécifié de graines de la plate à essayer. Après la période de croissance indiquée, on mesure la longueur des tiges et des feuilles. Le taux de croissance est exprimé sous forme d'une valeur relative en considérant que la croissance de la plante témoin est égale à 100. Les résultats des essais sont donnés ci-après.
- voir tableau page 30 - Essai n 10 - Essai de croissance de l'avoine Dans une boîte da Pétri do 4 cm de diamètre, dans laquelle on a placé un papier filtra, on introduit une so- lotion acétonique du composé d'essai et on l'y laisse pendant la nuit, ce qui fait évaporer l'acétone. On ajoute ensuite 2,5 ml d'une solution à 2 % de saccharose contenant 1 mg/l d'acide indole-acétique. Dans la solution ainsi préparée, on introduit 7 fragments d'Avena coleoptile de 5 mi de longueur, dont on a éliminé les germes, et on maintient la tout dans l'obscurité pendant 20 heures, à 270C. Ensuite, on mesure la longueur de croissance des fragments d'Avena coléoptile. Les résultats d'essais qui indiquent l'action du composé d'essai en coopération avec l'acide indole-acétique sur la croissance des fragments d'Avena coleoptile sont donnés ci-dessous.
Concentration (mg/l) 50 10 2 0,4 o Composé n 4 5,67 5,98 6,33 7,80 8,94 n 3 5,56 6,04 6,33 7,00 8,94 Essai n 11 - Inhibition de la croissance de l'axa hypocotylé du concombre Dans un bchar do 7 cm de diamètre, dans lequel on a placé un papier filtre, on verse 2 ml d'une solution acétonique du composé d'essai. On laisse ensuite reposer cette
Conditions de croissance Concentration (ppm) Longueur Plante Nombre Lieu Data mesurée 3 10 30 100 300 de d'obser- à graines vation l'endroit de la tige Phascolus pièce 7ème 6 chaude jour 64,1 56,3 47,6 - hirpus (28 C) Blé 10 13ème sur la lon- 97,0 80,0 43,0 - jour gueur entière Millet 10 pièce 9ème (mésocotylédon 113,5 117,5 115,9 - chaude jour ( feuilles 83,2 71,1 47,6 - (28 ) ( Panic 10* pièce 4ème (mésocotylédon - 122 121 100 100 pied de chaude jour ( # feuilles - 72 47 1 0 coq (28 C) ( 10* Pièce 4ème (mésocotylédon - 116 114 118 noire jour ( feuilles - 100 74 46 (28 C) ( * les graines utilisées ont des racines d'environ 0,5 - 1 cm de longueur et des germes d'environ 0,5 cm de longueur. solution pour permettre à l'acétone de s'évaporer complètement0 On introduit 8 semences de concombre et on les recouvre de 25 g de sable fin séché à l'air. On verse ensuite 15 ml au total d'eau pure et on ajoute de l'eau pure tous les jours pour compenser la quantité d'eau perdue par évaporation0 Pendant l'essai, on irradie continuellement les semences avec une lampe de 300 lux , à 24 C. On mesure la longueur de l'axe hypocotylé au moment où le cotylédon du concombre est complètement développés Les résultats des essais sont donnés dans le tableau suivant dans lequel les chiffres indiquent le taux de croissance, sous forme d'une valeur relative exprimée par rapport à la longueur de l'axe hypocotylé témoin considérée comme égale à lOOo Concentration (mg/ bécher) 50 20 10 5 1 0,5 0,1 Composé n 3 - - 0 O 49 85 91 n n 7 - - 73 74 89 - " B-995* 44 61 74 85 - - B - 995 : acide N-(diméthylamino)-succinamique.
Essai n 12 Inhibition de la formation de bour geons auxiliaires sur les plants de tabac On pince des plantules de tabac comportant 21 feuilles au total, de manière à ne laisser que 13 feuilles. On mélange 30 g du composé n 3 avec 55 g de xylène, 10 g de "Sorpol 800A" et 5 g de "Sorpol 800B", puis on chauffe le mélange sur un bain marie à 50 C, ce qui donne une émulsion qu'on dilue avec de l'eau jusqu'd la concentration indiquée avant de la pulvériser sur les feuilles de t Essai n0 13 - Disparition de la chlorophylle du cotylédon des radis Après développement complet du cotylédon du radie,on applique au pinceau une solution aqueuse du composé n 3 pris à des concentrations diverses, sur un cotylédon prélevé dans la partie inférieure de l'axe hypocotylé. On recouvre l'extrémité coupée d'un papier filtre humide. On place le cotylédon dans un bêcher et on observe périodiquement le degré de disparition de la chlorophylle.
Conc. 1er jour 2ème jour 3ème jour 4ème jour 5ème jour (ppm) 1000 - + ++ +++ +++ 300 - + ++ +++ +++ 100 + ++ ++ ~+++ +++ +++ 30 - + ++ +++ +++ 10 - + ++ +++ +++ 0 - - + # + ++ "-" signifie couleur verte ; "+"' signifie vert pâle "++" signifie jaune et "+++" signifie jaune avec flétrissement Essai a 14 - Accélération de la défoliation (1) Dans un pot, on cultive 4 plantules de haricots rouges. On applique au pinceau sur la surface de la feuille principale et du pétiole de ces plantules, une solution aqueuse du composé d'essai pris à des concentrations diverses, à trois reprises, tous les deux jours. Une semaine après le traitement, en observe l'état des feuilles. Les résultats des essais sont donnés ci-dessous.
Conc. 1000 300 100 0 ppm) a b c a b c a b c a b c Composé n 3 5 1 2 3 2 3 2 1 5 - - n0 4 6 0 2 2 15 1 1 6 - - " n 7 413 206 107 - - - " n @ 9 3 1 4 10 7 0 0 6 - - - Témoin 008 "a" Nombre de feuilles défoliées "b" Nombre de feuilles étiolées "c" Nombre de feuilles en bonne santé (2) On laisse pousser parfaitement des plantules de haricots rouges dans une solution nutritive. On sectionne les feuilles principales de part et d'autre des nervures médianes et on applique au pinceau sur les parties restantes, nc solution aqueuse du composé à'essai. On laisse les plantules reposer dans la solution nutritive. On observe ensuite l'état des feuilles et les résultats obtenus sont donnés dans le tableau suivant0 Conc.
1000 300 100 0 (ppm) abc abc abc a b c Composé n 3 2 0 0 2 0 0 2 0 0 - - n 4 2 0 0 2 0 0 2 0 0 - - n0 7 0 1 1 0 1 1 0 0 2 - - n0 9 2 0 0 2 0 0 0 0 2 - - Témoin - - - - - - --- 0 0 2 "a", "b" et "c" ont la même signitication que dans (1).
(3) On découpe les feuilles primaires de plantules de haricots rouges à la base de leurs pétioles et on les plonge dans une solution aqueuse du composé d'essai0 Apres séchage à l'air, on étale ces teuilles dans une boite de Pétri pour observer le cnangement de couleur. Les résultats sont donnés ci-dessous.
Concentration (ppm) 1000 300 100 30 0 Composé n 3 +++ ++ ++ + n0 4 +++ +++ ++ ++ " n 7 + + n0 9 + g - Témoin "-" signifie couleur verte ; "+" couleur vert pâle "++" couleur jaune et "+++" couleur jaune avec flétrissement Essai 15 On pulvérise uniformément, à deux ou trois reprises, et à des intervalles de 5 jours, une solution isopropanolique aqueuse du compos n 3 pris dans la concentration spéciiiée, sur les feuilles de plants ce tomates qui ont atteint une hauteur moyenne de 55 - 65 cm et sont en fleurs.
Quarante jours après la première pulvérisation, on observe le degré de coloration des fruits0 Les résultats sont donnés ci dessous.
Nombre de Concentration (ppm) pulvérisations 10 30 100 300 0 Deux - - +++ +++ Trois ++ ++ +++ +++ - "-" signifie couleur verte ; "+" couleur vert päle pale "++" couleur rouge/ et "+++" couleur rouge.
Essai n 16 3 (1) On pulvérise séparément 5 cm3 d'une solu tion isopropanolique aqueuse du composé n 3 pris dans la con centratIon spécifiée et ensuite une solution identique d'acide giuberellique en une concentratjon de 50 ppm sur des feuilles de potm@m qu'on a laissé pousser pendant 27 jours après l'esemen- cernent. Sent jours après la pulvérisation, on pulvérise de nou veau la même solution du composé n 3, de la même manière que ci-dessus. On mesure périodiquement la longueur totale moyenne de la plante à partir du moment de la première pulvérisation.
Les résultats sont donnés dans les tableaux suivants.
Clavulinopsis pulchra (Peck) Corner
Stereum hirsutum (Fr.) S.F. Gray
Echinodontium tsugicola (P.Henn. et Shirai) Im.
38,63
Hirschioporus abietinus (Fr.) Donk
Les dents de coupe de chacun des dits groupes 4 5 et 6 s'étendent dans une direction telle que les éléments de moule let 2 puissent venir s'emboîter et soient séparables. Les dents de coupe de l'un des éléments de moule séparables sont constituées de manière à s'adapter aux dents de coupe correspondantes de l'autre élément de moule. Les dents de coupe de l'élément de moule ouvrant 1 constituent une série d'arêtes 8 dont la surface inclinée 8a est dirigée vers l'intérieur de la partie de cavité 3 et les dents de coupe de l'élément de moule ouvrant 2 ont la même forme en arête 9 mais avec les surfaces inclinées 9a dirigées vers 11 extérieur de la dite partie de-cavité.
Les dites séries d'arêtes 8 et 9 sont adaptées l'une par rapport à l'autre de manière que les surfaces inclinées 8a et 9a soient légèrement en contact les unes avec les autres lorsque la cavité du moule est fermée de sorte que les surfaces arrière 9b des arêtes 9 constituent une partie de la surface interne de la cavité.
Les dites arêtes 9 comportent une surface supérieure 9a inclinée par rapport à la longueur de celle-ci et faisant face à la partie interne de la dite cavité. De plus, si nécessaire, la surface supérieure 9c et la surface inférieure 9b des arêtes 9 sont enduites avec, par exemple, du tétrafluoréthylène.
Pendant le fonctionnement, une ébauche comportant deux ou plus de deux couches réalisées en résines synthétiques de différentes espèces, par exemple une couche externe de polyéthylène et une couche interne de polycarbonate, est mise sous la forme d'un cylindre creux par l'intermédiaire d'une filière et descendue entre les parties de moule ouvrant séparées jusqu'à l'intervalle où celles-ci viennent en contact l'une avec l'autre selon la ligne de séparation de manière à fermer les parties de cavité 3.
A ce stade les dents de coupe mordent dans les parties formant les côtés du goulot et la parties inférieure de la dite ébauche de manière à former des languettes (A) sur les parties sectionnées de la dite ébauche. Les dites languettes A sont gui~ dées par les surfaces latérales supérieures et arrière 9 et 9b des dents arrière 9 de manière à être rabattues et noyées dans la couche externe du corps de l'ébauche positionné dans une partie de la cavité.
Il en résulte que les couches externes indépendantes des languettes sont solidarisées l'une avec l'autre par l'intermédiaire de la couche externe du corps de l'ébauche lorsque le soufflage est démarré.
La présente invention, à la réalisation de laquelle ont participé M. CLEMENCE François et Mlle LE MARTRES Odile, a pour objet de nouveaux dérivés du tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole ainsi qu'un procédé de préparation de ces composés et leur application comme médicaments.
L'invention a plus particulièrement pour objet les nouveaux dérivés du carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole, de formule générale, I dans laquelle X représente un groupement hydroxyle, un radical alcoyloxyle inférieur, un groupement amino ou un groupement OZ dans lequel Z est un métal alcalin et Y représente un radical aryle subs titué ou non substitué, un radical cycloalcoyle ou un radical hétéro- cyclique substitué ou non substitué.
Les substitnants X et Y des composés I ont, de préférence, les valeurs suivantes : X représente un radical alcoyloxyle inférieur comportant de 1 à 6 atomes de carbone et notamment un radical néthozyle, éthoxyle, propoxyle, isopropoxyle, butoxylet aecbutoxyOs tert.butoxyle ;; Y représente soit un radical phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, un ou plusieurs radicaux alcoyles inférieurs tels que méthyle, éthyle, propyle, un ou plusieurs radicaux alcoyloxyles inférieurs tels que méthoxyle, éthoxyle, propoxyle, un ou plusieurs groupements nitre, un ou plusieurs groupements trihalogénométhyles, soit un radical cycloalcoyle tel que cyclohexyle ou cyclopentyle, soit un radical hétérocyclique tel que thiényle, pyridyle, furyle, pyrannyle, pyrrolyle, pyrazinyle, pyridazinyle, pyrimidinyle, thiazolylet isothiazolyle, isoxazolyle, pyrrolidinyle, imidazolidinyle, pyrazolidinyle, etc..., ces radicaur pouvant éventuellement entre substitués.
L'invention s'étend à l'application, comme médicaments, des composés thérapeutiquement actifs englobés dans la formule générale I et notamment des composés suivants - le phényl-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le phényl-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le sel de sodium du phényl-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzo thiazole - lto-tolyl-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - l'a-tolyl-2-oarboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - lto-tolyl-2 carbométhoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le p-chlorophényl-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le p-chlorophényl-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le ss-pyridyl-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le ss-pyridyl-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le p-tolyl-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le p-tolyl-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le (m-trifluorométhyl-phényl)-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le (m-trifluorométhyl-phényl) -2 carboxyle4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le (p-méthoxy-phényl)-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzo thiazole - le (p-méthoxy-phényl)-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - l'(o-chlorophényl)-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazcle - lt(o-chlorophényl)-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - l'α;-thiényl-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le (dichloro-2',4' phényl) 2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le (dichloro-2' ,41 phényl)-2 carboxy-4 4 tétrahydro-4,5h6,7 benzo- thiazole - le (p-nitrophényl)~2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole -le (dichloro-3',4' phényl)-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzo thiazole - le (dichloro-2',6' phényl)-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzo thiazole - le (p-fluorophényl)-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - 1' (o-méthoxy-phényl)-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - l'(o-thiazolyl)-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le cyclohexyl-2 carbéthoxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole - le cyclohexyl-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole.
Ces composés sont dotés de propriétés pharmacclogiques int4- ressantes. Ils possèdent notamment des propriétés antiinflammatoires et/ou analgésiques qui les rendent aptes à être utilisés pour le traitement des algies musculaires, articulaires ou nerveuses, affections rhumatismales, douleurs dentaires, zona, migraines et comme traitement complémentaire des états fébriles ou infectieux.
Ils sont utilisés soit par voiesbucoale, transoutanée, rectale, soit par voie locale en application topique sur la peau et les muqueuses.
Ces produits peuvent se présenter sous forme de solutions ou de suspensions injectables, conditionnées en ampoules, en flacons à prises multiples, de comprimés, de comprimés enrobés, de capsules, de sirops, de suppositoires et de pommades.
La posologie utile de ces composés s'échelonne entre 25 mg et 150 mg par jour, chez l'adulte, en fonction de la voie d'adminis- tration. Leurs formes d'utilisation pharmaceutiques telles que solutions ou suspensions injectables, comprimés, comprimés enrobés, capsules, sirops, suppositoires et pommades, sont préparées selon les procédés usuels.
L'invention comprend également un procédé de préparation des composés I, illustré par le schéma annexé et essentiellement caractérisé en ce que l'on fait réagir un ester d'alcoyle inférieur de la carboxy-2 halogéno-6 cyclohexanone, II, avec un thiamide substitué saponifie ltY-2 alcoyloxy inférieur carbonyl-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole résultant, I avec X = alcoyloxy inférieurepour obtenir un Y-2 carboxy-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole, I avec X = OH, qui peut entre estérifié à-nouveau par les méthodes classiques ou qui peut être salifié par un hydroxyde alcalin pour fournir un sel alcalin d'un Y-2 carboxy-4 tétrahydro4,5,6,7 benzothiazole, I avec X = OZ, Z étant un métal alcalin, ou bien transforme, éventuellement, par action de 1tammoniac, 1'Y-2 alcoyloxy inférieur carbonyl-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole, I avec I = alcoyloxy inférieur en Y-2 carbamoyl-4 tétrahydro-4,5,6,7 benzothiazole, I avec X = NH2.
Dans ses modes d'exécution actuellement préférés, le procédé de l'invention peut titre caractérisé par les points énoncés ci-apres.
On obtient de bons résultats en égalisant les impédances caractéristiques des trois tronçons. Il faut et il suffit pour cela que l'on ait la relation avec n = Ci ( & constante diélectrique) la figure 4 représente,schématiquement et en coupe,un mode de réalisation de l!inverX 6- trouve le cylindre 1, l'axe 2, le piston 32 et la tirette 31, le conducteur 41, le diélectrique 50.Toutefois, la diode G est insérée dans le conducteur 21 au voisinage du fond 11 à une distance égale environ au quart de la longueur du conducteur 21 sans que cette valeur soit particulièrement critique. On a ajouté des organes destinés à faciliter l'iso- lement et la solidité de l'ensemble. Ainsi, entre le fondtl et le conducteur 1, on trouve une rondelle isolante6,par exemple en mica de quelques centièmes de mm d'épaisseur. La sonde 5 porte un manchon isolant 51 entouré d'un manchon métallique 52 qui coulisse dans l'ajutage 3 monté sur le cylindre 1. Le bottier 62 de la diode 6 comporte une tête filetée 61 vissée dans le conducteur 21 et une face plane 63 soudée au conducteur 21 (dans sa deuxième partie). A l'autre extrémité du conducteur 21, entre celui-ci et le fond 411 est placée une rondelle 7 de diélectrique par exemple en polytétrafluoréthylène.
Il y a lieu de remarquer qu'une épaisseur de l'ordre du milLi- mètre suffit à assurer l'espace libre, au point de vue électroma gnétique entre le conducteur 21 et le cylindre rempli de diélectrique 50.
A titre dlordre de grandeur, on peut citer une réalisation destinée à fonctionner sur la fréquence 2,5 GHz + 0,1 GEz avec un diélectrique en verre ( & 6,3). L'impédance caractéristique des tronçons de cable coaxial est de l'ordre de 40 à 50 ohms et la longueur totale du dispositif est de 3 à 4 cm dans le cas d'un tronçon comportant du verre de tordre de la demi-longueur d'onde dans le verre soit 1,21 cm à a fréquence médiane de 2,5 GHz.
Un autre avantage de l'invention est tiré de la simplicité de la réalisation. En effet, gråce au fait qu'un même conducteur central sert de support aux deux tronçons de coaxiaux, on parvient facilement à construire un ensemble de très grande précision, ce qui est particulièrement important en hyperfréquence.
L'invention est applicable aux circuits résonnants utilisés comme récepteur d'ondes.
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La présente invention se rapporte à une installation destinée à couper des matériaux continus, par exemple pour la fabrication de fibres discontinues à partir de fibres synthétiques, installation équipée d'un organe monté à rotation et transportant la 5 matière à couper vers l'endroit de sectionnement, organe auquel est associé un dispositif de sectionnement également monté à rotation.
Les dispositifs de coupe connus, notamment pour des câbles ou faisceaux de fibres synthétiques doivent être partagés en 10 deux groupes. Dans les installations d'un groupe, le faisceau est brisé par des tranchants rapprochés à grande vitesse du faisceau, et dans les installations de l'autre groupe, le faisceau est sectionné par application sous pression contre le tranchant. Les deux systèmes présentent des inconvénients.
15 Dans les installations du premier groupe, soit il est prévu un tranchant projeté transversalement au travers le faisceau maintenu entre les cylindres dentés, et assurant la rupture de ce faisceau, soit le faisceau avance le long de la périphérie d'un cylindre en caoutchouc qui est soumis à l'action d'un cylindre 20 équipé de lames, cylindre dont les lames issues radialement agissent sur le faisceau et le sectionnement sous l'action de la pression. Dans ce système, les durées de vie des lames sont très courtes, et par ailleurs la longueur des fibres discontinues produites n'est pas uniforme.
25 II est préférable de procédér au broyage des fibres, par fait que le faisceau est enroulé en spirale sur un panier à lames, tandis qu'en même temps un cylindre presseur disposé à distance constante de l'axe du panier à lames agit à partir de l'extérieur sur le faisceau. Lorsque l'épaisseur du faisceau de 30 fibres synthétiques enroulé en spirale sur le panier à lames a atteint une valeur déterminée, la pression entre le cylindre et les tranchants des lames orientées radialement atteindra une intensité qui produit le sectionnement des couches de fibres directement voisines des tranchants. Dans ce cas, la durée de vie 35 des lames ou des tranchants est sensiblement plus grande, parce que les fibres ne viennent pas en contact avec le contre-cylindre. Néanmoins, le principe de cette méthode de sectionnement n'est pas idéal, parce que des pression très élevées, influençant négativement les tranchants, sont nécessaires pour obtenir un
sectionnement des fibres.
0,84 11
0,99 "
Inonotus sciurinus Imazeki
0,63 "
Préparation de cellulose de bagasse pour essais sur plaques.
La bagasse a d'abord été délignifiée par traitement au chiorite. De la bagasse broyée (100 g) a été dispersée das de l'eau (3 1) à 700C et de l'acide acétique glacial (12 ml). Ensuite du chlorite de sodium à 325o (100 ml) a été ajouté. Après 30 minutes à 700C, de nouvelles quantités d'acide (12 ml) et de chlorite de sodium à 32% (loeml) ont été ajoutées. Cette addition a j'té encore répétée après 30 minutes. Après la troisième addition (30 minutes) le produit a été lavé à fond avec de l'eau et traité à la soude caustique à 4%. Le rendenlent a été de 50ss Fermentation : La bagasse traitée à l'alcali (750 g poids à sec) a-été agitée avec de l'eau (40 1) durant 12 h et ensuite ajoutée à une quantité supplémentaire d'eau (40 1) dans un récipient (189 litres) de fermentation. La suspension a été stérilisée à SOC durant 30 minutes,à 900 durant 30 minutes et ensuite à 1200 durant 120 minutes.Après refroidissement elle a été agitée pendant 18 h à 20-25 (la quantité de bagasse utilisée a donné moins que la concentration optimale trouvée au cours des essais à petite échelle, mais a été choisie à cause des difficultés rencontrées dans la stérilisation des suspensions de bagasse à cette échelles De la liqueur te macération de mais L2,5 kg; 2,5% N (poids/volume)J a été mélangée à de l'eau (10 1) et ajoutée à le bagasse. Le pH était dans le domaine 4,3 - 4,5 à cette phase. Le mélange a été stérilisé par chauffage à 500C durant 30 min., à 900C durant 30 brin. et ensuite à 1200C durant 90 min.De la craie (Sturcal F; 500 g) en suspension dans de l'eau distillée (3,5 1) 9 été stérilisée à 1200C durant 6 h, puis ajoutée à la bagasse/liqueur de macération de mais refroidie et mélangée par agitation à raison de 350 tours/min. durant 1 h. La vitesse d'agitation a été réduite à 250 tours/min. et le milieu 9 été inoculé avec 5 x 109 spores de la souche 2GI 134.756 de P.funiculosum. Le milieu de fermentation a été incubé à 270, agité à 250 tours/min. et aéré à raison de 0,028 à 0,056 m3 par minute. Lj croissance a débuté après 2 jours.
Elle était bien établie après 3 jours; l'activité de la cellulase dans le liquide surnageant était maximale après 5 jours environ sous ces conditions de croissance. et s'est produite au moment où le pH, étant tombé, a recommencé ê s'élever.
Isolement : La liqueur de fermentation a été récoltée et clarifiée par un seul passage à travers une centrifugeuse à écoulement continu pour donner approximativement 2,3 kg de substance solide.
Le pH de la liqueur clarifiée a été ajusté à 4,0 par addition d'acide chlorhydrique tout en agitant rapidement et la température a été ramenée à 50C. La liqueur froide a été re-clarifiée par un passage supplémentaire à travers la centrifugeuse à écoulement continu et 3 volumes d'acétone à -200C ont été ajoutés. La solution a été maintenue une nuit entre 2 et 50C, le liquidesurna- geant a été décanté et le précipité solide récupéré par centrifugation. Une poudre friable a été obtenue en broyant le solide sous dicétone à -200C.
Le produit final a été obtenu par filtration sur verre fritté ou sur papier-filtre. Le rendementétait d'environ 280 g (0,3%) de préparation brute d'enzyme sèche.
La préparation brute a été alors purifiée et séparée pour donner le composant C1 purifié par les procédés décrits plus haut.
Synergie entre le composant C1 et d'autres composants du nouveau système de cellulase et d'autres svstèmes de cellulase.