Le produit acide impur , à savoir l'acide 7p-(D-5'-ben- zamido-5 '-carboxypentanamido-3-méthyîthiométhylcéph-3-em-4-car boxylique, a été obtenu sous forme d'une mousse incolore (13,14 g) RF 0,09 et plusieurs taches rnineures (Système 1) l'acide (3-acé-toxyméthyl-7ss-(D-5'-benzamido-5'-carboxypentanamido)céph-3-em-4carboxylique possède un RF de 0,02), RF 0,87 (Système 2),#max (Nujol) 1755 (p-îactame), 1720 (cO2H), 1640, 1536 cm 1(CONH), -c (D20 avec NaHC03) 2,18, 2,44 (multiplet du proton-5; protons aromatiques), 4,44 (doublet du proton-1, -J 5 Hz; C-7 H), 4,93 (doublet de proton-l, J 5 Hz;C-6 H), 5,56 (multiplet du protons; 6,27, 6,68 hideux doublets du proton-l (branches d'un quart et) J 17 Hz; C-2 H2], 7,58 (multiplet du proton-2; CH2C0NH), 7,98 (singlet du proton-3; SCH3),#8,1 (multiplet du proton-4;CH2CH2CH2CONH), avec d'autres pics dus à l'acétate d'éthyle et à d'autres traces d'impuretés (b) Acide 7ss-amino-3-méthylthiométhylcéph-3-em-4-carboxylique De l'acide 7ss-(5'-benzamido-5'-carboxypentanamido)-3-mé thylthiométhylcéph-3-em-4-carboxylique (2,90 g, 5,72 mmoles) dans du chlorure de méthylène (210 ml) contenant de la pyridine (3,45 ml, 42,9 mmoles) a été traité par du chlorure de triméthyl si- lyle (5,34 ml, 45,3 mmoles) et la solution a été agitée à 30 C pendant 2 heures, puis refroidie jusou'à -120. La pyridine (6,69 ml, 90 mmoles), et ensuite du pentachlorure de phosphore (4,68 g, 22,6 mmoles) dans du chlorure de méthylène (44 ml) ont été ajoutés et le mélange a été agité pendant 40 minutes à -12 . Du me- thanol froid (90 ml) a été ajouté avec précaution, si bien que la température demeura inférieure à -10 C. On a agité la solution à -10 pendant 30 minutes, on l'a sortie du bain de refroidissement et on l'a agitée pendant 60 minutes, puis on l'a versée dans de l'acide formique aqueux à 50% (12 ml). On a ajusté le pH à 2,0 avec de la triéthylamine, et on a agité la solution pendant 45 minutes avant d'ajuster le pH à 3,5 avec de la triéthylamine.On a réfrigéré le mélange jusqu'au lendemain, on a séparé le précipité par filtration, on l'a lavé avec de l'eau, du méthanol et de l'éther, puis on l'a séché, de façon à obtenir de l'acide 70 amino-3-méthylthiométhylcéph-3-em-4-carboxylique sous forme d'une poudre incolore (0,50 g), P.F. 260-268 [α]D19 + 64,10 (c 1,00, 3%-NaHCO3), #max (tampon à pH 6) 267 nm ( 9.640) (c) Acide 7ss-(N-t-butoxycarbonyl-D-α-aminophénylacétamido)-3 méthylthiométhylcéph-3-em-4-carboxylique De la triéthylamine (4,04 g, 0,04 mole) a été ajoutée à une solution d'acide D-α;-t-butoxycarbonylaminophénylacétique (10,04 g, 0,04 mole) et de chloroformiate d'isobutyle (5,46 g, 0,04 mole) dans du tétrahydrofuranne (160 ml) à -10 . Ce mélange a été agité à -10 pendant 10 minutes, puis on l'a ajouté à une solution froide d'acide 7ss-amino-3-méthylthiométhylcéph-3-em-4- carboxylique (10,40 g, 0,04 mole) et de triéthylamine (6,06 g, 0,06 mole) dans du tétrahydrofuranne (80 ml) et de l'eau (80 ml) et le mélange a été agité pendant 3 heures à la température ambiante.On a évaporé le tétrahydrofuranne, on a dilué le résidu avec de l'eau (100 ml) et de l'acétate d'éthyle (100 ml) et on a ajusté le pH à 3,50 L'acide 7ss-amino-3-méthylthiométhylcéph-3- em-4-carboxylique (2,10 g) précipité a été séparé par filtration, le pH a été ajusté à 2,0 et la solution a été extraite par de l'acétate d'éthyle (3 x 250 ml).Ce extrait a été lavé'par de l'eau (2 x 250 ml) et de la saumure (250 ml), séché (sulfate de magnésium) et le solvant a été évapore, de façon à laisser subsister une mousse.jauneque l'on a agitée dans de l'éther isopropylique (20-ml) et du pétrole (P.F 40-60 ; 20 ml) pendant 2 heures, de façon à obtenir de l'acide 7ss-(N-t-butoxy-carbonyl-D-α- aminophénylacétamido)-3-méthylthiométhylcéph-3-em-4-carboxylique sous forme d'une poudre jaune pâle (3,84 g), RF 0,80 (Système I), TLC RF 0,51, #max (tampon à pH 6) 265 nm (# 7.800).