FR 3160893 A1 20251010 FR 2403599 A 20240408 UTILISATION EN COSMÉTIQUE D’UN EXTRAIT ISSU D’UNE ALGUE DU GENRE CYSTOSEIRA POUR RÉDUIRE L'APPARENCE DES CERNES VASCULAIRES ET DES POCHES SOUS LES YEUX, AMÉLIORER LA FERMETÉ ET L’HYDRATATION CUTANÉES DU CONTOUR DE L’ŒIL La présente invention concerne un ingrédient actif cosmétique issu d’une algue du genre Cystoseira destiné à améliorer la qualité de la peau dans la région du contour de l’œil, ou région périorbitaire, en atténuant les signes de vieillissement et fatigue tels que les cernes d’origine vasculaire et les poches sous les yeux et en améliorant la fermeté et l’hydratation cutanée. UTILISATION EN COSMÉTIQUE D’UN EXTRAIT ISSU D’UNE ALGUE DU GENRE CYSTOSEIRA POUR RÉDUIRE L'APPARENCE DES CERNES VASCULAIRES ET DES POCHES SOUS LES YEUX, AMÉLIORER LA FERMETÉ ET L’HYDRATATION CUTANÉES DU CONTOUR DE L’OEIL CONTEXTE DE L'INVENTION La présente invention concerne un ingrédient actif cosmétique destiné à améliorer la qualité de la peau dans la région du contour de l’œil, ou région périorbitaire, en atténuant les signes de vieillissement et fatigue tels que les cernes d’origine vasculaire et les poches sous les yeux et en améliorant la fermeté et l’hydratation cutanée. DESCRIPTION DE L’ART ANTÉRIEUR Rappels sur la peau et ses différentes structures La peau, cet organe complexe et dynamique, se compose de trois couches principales : l’hypoderme, le derme et l’épiderme. Chacune de ces couches abrite une diversité de types cellulaires qui sont en interaction constante, jouant des rôles cruciaux dans la santé et la fonctionnalité cutanées. Au sein de l’hypoderme, on trouve principalement des adipocytes, qui stockent les lipides et jouent un rôle important dans l'isolation thermique et la protection mécanique du corps. Les fibroblastes, situés dans le derme, sont essentiels à la synthèse des composants de la matrice extracellulaire, tels que le collagène, l’élastine, l’acide hyaluronique, contribuant ainsi à la fermeté et à l'élasticité de la peau. Les cellules endothéliales, localisées dans les vaisseaux sanguins du derme, assurent la nutrition et l’oxygénation des tissus cutanés, en plus de participer à la régulation de la réponse inflammatoire et à la cicatrisation. L’épiderme, la couche la plus externe de la peau, est principalement constitué de kératinocytes, qui forment la barrière protectrice contre les agressions environnementales et préviennent la perte d’hydratation. Dénué de vascularisation, il s’approvisionne en nutriments et en oxygène grâce à la diffusion à partir des capillaires sanguins situés dans le derme sous-jacent. Enfin, différents types de cellules immunitaires dispersées à travers ces couches jouent un rôle vital dans la défense contre les pathogènes et la régulation des réponses inflammatoires. Le contour de l’œil, une zone très sensible aux signes du vieillissement et de fatigue La zone périorbitaire, ou contour des yeux, se distingue comme étant l’une des régions les plus fines et fragiles du visage, possédant des attributs qui la singularisent des autres parties anatomiques. Sa peau, notablement plus délicate, est de 3 à 5 fois moins épaisse comparativement au reste du visage, ce qui la rend particulièrement délicate et sensible aux dommages et aux signes de vieillissement. Sa grande vascularisation, couplée à une faible épaisseur et une certaine transparence, permet aux capillaires sanguins d'être visiblement perceptibles. De surcroît, cette zone du visage est caractérisée par un derme et un hypoderme très fins, avec une présence minime de glandes sébacées et sudoripares, ce qui la prédispose à une sécheresse accrue en raison de l'absence presque totale de film hydrolipidique protecteur. La sollicitation mécanique constante due aux clignements et aux expressions faciales accentue encore sa sensibilité. Ces particularités la rendent excessivement vulnérable face aux influences d’origine endogène (génétique, âge, fatigue, stress, manque de sommeil, habitudes de vie inadaptées) responsables du vieillissement intrinsèque ou chronologique. De plus, les facteurs de l’exposome exogène cutané d’origine environnementale (UV, polluants…) accentuent les effets du vieillissement intrinsèque, menant à une amplification des marques de l'âge dans la région du contour de l’œil. Ces processus de vieillissements intrinsèque et extrinsèque sont généralement accompagnés d'un état inflammatoire de bas grade qui favorise l'émergence de problèmes tels que cernes, poches, sécheresse, perte de fermeté, ainsi que rides et ridules. Ces préoccupations cosmétiques fréquentes sont exacerbées par les divers facteurs de l'exposome. Les cernes, particulièrement complexes en raison de leur nature multifactorielle, peuvent être d’origines pigmentaires, structurelles ou vasculaires. Les cernes se caractérisent par leur couleur bleu violacé et sont associées à une altération de la microcirculation cutanée qui fait référence au réseau de petits vaisseaux sanguins qui irriguent la peau. Une mauvaise circulation sanguine et une accumulation de liquides dans la région périorbitaire peuvent également conduire à la formation de poches. Cette condition est principalement due à l'accumulation de liquides ou à un mauvais drainage lymphatique, résultant en un gonflement visible sous les yeux. L'utilisation d’une algue du genre Cystoseira s'appuie sur ses propriétés biologiques uniques, offrant une approche innovante dans le domaine cosmétique pour répondre aux préoccupations esthétiques observées dans la région du contour de l’œil. Cette algue a été choisie pour sa composition riche en composés bioactifs, offrant des bénéfices ciblés pour améliorer l'hydratation, la fermeté de la peau et réduire les cernes vasculaires sous les yeux, répondant ainsi de manière efficace aux signes de vieillissement et de fatigue cutanés observés dans la région périorbitaire. Même si les mécanismes sous-jacents à ces problématiques ne sont pas complètement élucidés, l’état inflammatoire de bas grade et le stress oxydatif provoqués et/ou accentués par certains facteurs de l’exposome, pourraient favoriser localement la perméabilité accrue des vaisseaux sanguins dans la zone périorbitaire. Fragilisés, les vaisseaux sanguins, tapissés intérieurement par une couche de cellules endothéliales, perdent leur fonctionnement optimal, caractérisé par une augmentation de la perméabilité vasculaire, la fuite de fluides, une inflammation exacerbée qui peut stimuler la production de nouveaux vaisseaux, processus connu sous le terme d’angiogenèse. Sous les yeux, ces phénomènes entraînent une stagnation du flux sanguin ou stase et une extravasation d'hémoglobine. Cette fuite d'hémoglobine, ainsi que la libération de ses produits de dégradation, tels que l'hémosidérine et la biliverdine, sont à l'origine de modifications de couleur au sein des couches de la peau, se manifestant par une teinte bleuâtre ou violacée sous les yeux. L’accumulation des fluides dans le tissu cutané périorbitaire conduit à la formation de poches sous les yeux. De plus, les molécules relarguées par les vaisseaux perméables sont potentiellement pro-oxydantes et entretiennent l’état inflammatoire avec la libération chronique de marqueurs pro-inflammatoires (cytokines, chimiokines…) contribuant de manière significative au vieillissement prématuré de la peau du contour de l’œil, incluant le photovieillissement dû aux radiations solaires. Parmi ces facteurs pro-inflammatoires, des enzymes telles que les métalloprotéases matricielles (MMPs), ou des facteurs de croissance, tels que le VEGF, provoquent respectivement la dégradation des composants de la matrice extracellulaire (collagène, élastine, acide hyaluronique…) mais aussi la formation de nouveaux vaisseaux, rendant les cernes davantage visibles et accentuant la réactivité de cette zone. L’interaction des différents types cellulaires cutanés L'interaction synergique entre les différents types cellulaires cutanés joue un rôle crucial dans le maintien de la santé et de la vitalité de la peau. Ces cellules, par leur communication et coopération, orchestrent une série de processus biologiques essentiels à l'homéostasie cutanée. Les adipocytes, au-delà de leur rôle de stockage des lipides, sécrètent des facteurs qui régulent l'inflammation et la réparation des tissus, influençant ainsi directement le comportement des kératinocytes dans l’épiderme et les cellules endothéliales des vaisseaux sanguins. Avec l'avancée en âge, le tissu adipeux, déjà naturellement restreint dans la zone périorbitaire, subit une réduction supplémentaire de volume. Ce phénomène contribue à un affaissement de la peau, favorisant l'émergence de rides et de sillons marqués. En parallèle, une diminution du volume sous les yeux entraîne un creusement visible, accentuant une apparence plus fatiguée et vieillie du regard. Cette transformation du contour de l’œil souligne les signes de l'âge, modifiant de manière significative l'expression faciale et l'esthétique générale du visage. De plus, avec le vieillissement, le tissu adipeux sous-cutané devient source d'inflammation. Cette inflammation chronique, ou " inflamm’aging " se traduit par la sécrétion de composés, dont des cytokines (IL-6), et la diminution de sécrétion d’adipokines aux propriétés anti-inflammatoires (adiponectine) qui peuvent impacter le fonctionnement des autres cellules cutanées. Parmi celles-ci, les cellules endothéliales, responsables de la formation des vaisseaux sanguins, assurent un apport en nutriments et en oxygène essentiels à la survie et à la fonction des cellules cutanées, y compris des kératinocytes situés dans l’épiderme dépourvu de vascularisation et qui sont indispensables à la mise en place et au maintien de la barrière de la peau. La réaction inflammatoire au niveau du tissu adipeux, via le relargage de composés pro-inflammatoires, contribue à la dégradation de la matrice extracellulaire, à une inflammation accrue des vaisseaux sanguins et à une perte d'hydratation cutanée, aggravant ainsi les signes visibles du vieillissement et de la fatigue, incluant l’apparence des cernes et des poches dans la région du contour de l’œil. Ces interactions complexes entre les différents types cellulaires présents dans la peau soulignent l'importance d'une approche globale pour comprendre et traiter les signes de fatigue et du vieillissement cutané. En ciblant ces interactions et leurs déséquilibres liés à l'âge, il est possible de concevoir des soins cosmétiques plus efficaces pour préserver la jeunesse et la santé de la peau dans la région de l’œil, en atténuant notamment la perte de fermeté, la sécheresse cutanée et l’apparence des cernes vasculaires, en contrant les effets néfastes d'un microenvironnement pro-inflammatoire. Altération de l’horloge biologique et fatigue cutanée Les perturbations de notre horloge biologique naturelle, résultant du rythme de vie moderne, notamment l'exposition excessive aux écrans, le manque de sommeil, la sédentarité, la perte de rythme des repas, influencent la qualité de la peau et particulièrement celle de la zone périorbitaire. Cliniquement, cela peut se traduire par l'accentuation des signes de fatigues, dont les cernes et les poches, de façon plus générale, par un vieillissement cutané prématuré du contour de l’œil. Le déséquilibre des rythmes circadiens, qui se réfèrent à nos cycles biologiques qui durent environ 24 heures, affecte de nombreux processus physiologiques et interfère avec le fonctionnement et l'homéostasie des cellules cutanées, conduisant aux signes cliniques mentionnés précédemment. En effet, au niveau cellulaire de nombreux gènes et fonctions biologiques sont régulés de manière cyclique, impliqués dans la régénération et la réparation tissulaires, la barrière cutanée, la production de sébum, la protection contre les irradiations UV, la réparation de l’ADN, la circulation sanguine ou encore dans les réponses immunitaires. Les dysfonctionnements du rythme circadien peuvent conduire à la perte de l’homéostasie cutanée via la dérégulation de tous ces processus et la mise en place d’un état inflammatoire chronique à l’origine du vieillissement prématuré particulièrement observé dans la région du contour de l’œil. Les cernes et les poches sous les yeux étant les signes les plus visibles et marquants de fatigue cutanée, s'avèrent être un reflet direct du déséquilibre du rythme circadien, causé par les perturbations de notre horloge biologique naturelle dues au rythme de vie moderne. Les cernes vasculaires et les poches Plus ou moins marqués, les cernes et les poches contribuent à la perception de l’âge, de l’état de fatigue et sont associées à un état de tristesse, cela quelle que soit la culture. Ces manifestations impactent profondément le regard, le bien-être, l'estime de soi, et la confiance en soi, représentant ainsi un défi cosmétique de taille. Leur présence ne se contente pas de révéler un état de fatigue, mais elle modifie également la perception que l'on a de la vitalité et de la santé d'un individu, soulignant l'importance cruciale de maintenir une synchronisation harmonieuse de nos cycles biologiques pour préserver non seulement l'esthétique de la peau mais aussi le bien-être psychologique. OBJETS DE L’INVENTION Considérées comme particulièrement inesthétiques, la recherche de solutions pour estomper les signes de fatigue (cernes, poches) et de vieillissement cutané (perte de fermeté, sécheresse cutanée...) dans la région du contour de l’œil est permanente. A l’heure actuelle, les solutions en médecines esthétiques sont généralement invasives allant de l’injection de comblement, comme avec l’acide hyaluronique, aux remplissages graisseux ( lipofilling ) en passant par les peelings chimiques ou le microneedling . Par conséquent, il est devenu primordial de développer des stratégies absolument non invasives et sans aucune chirurgie ou effets secondaires. La présente invention a pour objet de répondre à ces besoins en proposant un nouvel actif permettant d’estomper les cernes vasculaires, améliorer la fermeté et l’hydratation cutanées de la région périorbitaire, en agissant directement sur les mécanismes biologiques sous-jacents : Réduire l’état inflammatoire du microenvironnement cutané en agissant sur le tissu adipeux afin de prévenir l’ inflamm’aging et ses conséquences sur les autres composants cutanés, incluant le maintien de la matrice extracellulaire ; Augmenter le stockage des lipides dans les adipocytes pour un effet de comblement et raffermissant naturel ; Limiter la production et la perméabilité excessives des vaisseaux sanguins pour réduire l’apparence des cernes vasculaires et des poches ; Stimuler la production de l’acide hyaluronique, pour une peau hydratée et plus ferme ; Réinitialiser le rythme circadien, pour le maintien de l’homéostasie cutanée et des différentes fonctions de régénérations et protection cutanées. C’est dans cette optique que la société demanderesse a mené des recherches et a mis en évidence qu’un extrait obtenu à partir d’une algue du genre Cystoseira, en particulier Cystoseira tamariscifolia , permettait de répondre aux objectifs de l’invention. DESCRIPTION DETAILLÉE DE L’INVENTION La présente invention est basée sur la découverte inattendue qu’un extrait aqueux de phéophycées du genre Cystoseira présente des effets notables au niveau cutané avec des propriétés cosmétiques très intéressantes pour diminuer les signes de fatigue et vieillissement cutanés incluant l’apparence des cernes d’origine vasculaire et des poches, la perte de fermeté et la sécheresse dans la région périorbitaire, en régulant certains mécanismes biologiques sous-jacents à ces problématiques. Ainsi, l’invention concerne l’utilisation cosmétique d’un extrait aqueux issu d’une algue du genre Cystos pour la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, incluant la réduction ou la prévention de l’apparition de cernes vasculaires et de poches sous les yeux, l’amélioration de la fermeté et de l’hydratation cutanée. Ainsi, selon l’invention, l’extrait de Cystoseira est destiné à l’entretien ou le traitement des peaux fatiguées ou présentant des signes de vieillissement prématuré, mais saines, au niveau du contour des yeux. Par « peaux fatiguées » au sens de l’invention, on entend une peau présentant des cernes d’origine vasculaire et/ou des poches, des signes de vieillissement prématuré tels qu’une perte de fermeté, un manque d’hydratation et une sécheresse à l’origine de la formation des rides et ridules et de l’affaissement cutané dans la région du contour de l’œil. Par « peaux saines » au sens de l’invention, on entend une peau dite « non pathologique » par un dermatologue, c’est à dire ne présentant pas d’infection, de cicatrice, de maladie ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite, ou de plaies ou de blessures et/ou autres dermatoses. Par « extrait aqueux » selon l’invention, on comprend que les composés polaires (hydrophiles) se sont solubilisés et/ou ont été extraits dans un solvant polaire. Ainsi, selon l’invention, l’extrait est issu d’une algue du genre Cystoseira de la classe des phéophycées. Les phéophycées, ou Phaeophyceae, sont des algues de l’embranchement des Ochrophyta. On les désigne également sous la dénomination « d’algues brunes ». Les inventeurs de la présente invention ont ainsi démontré à l’aide de tests in vitro , qu’un extrait aqueux d’une algue du genre Cystoseira est capable de réduire l’inflammation du tissu adipeux par l’inhibition de l’interleukine-6 (IL-6), d’augmenter l’adiponectine, d’augmenter l’accumulation de lipides par les adipocytes, de limiter la formation de pseudo-tubes à partir de cellules endothéliales, composantes clés des vaisseaux sanguins, de diminuer la perméabilité vasculaire en réduisant la porosité, de booster la synthèse d’acide hyaluronique par les kératinocytes, de réinitialiser l’expression des gènes clés régulateurs du rythme circadien au niveau cellulaire. En particulier, selon l’invention, la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut la réduction de la formation de vaisseaux sanguins et de leur perméabilité. L’application de l’extrait selon l’invention permet en effet de prévenir la fuite d’hémoglobine dans la région périorbitaire et l’apparence bleu violacé des cernes vasculaires et des poches. En particulier encore selon l’invention, la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut la réduction des rides ou des ridules. L’application de l’extrait selon l’invention permet en effet l’activation de la production d’acide hyaluronique par les kératinocytes et permet ainsi de lutter contre la sécheresse cutanée responsable de l’apparition de rides et ridules. En particulier encore selon l’invention, la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut la régénération de l’épiderme. L’activation de la production d’acide hyaluronique par les kératinocytes permet également de régénérer l’épiderme. En particulier encore selon l’invention, la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut le rétablissement de l’expression des gènes horloges. L’application de l’extrait selon l’invention permet en effet de restaurer l’expression des gènes horloges généralement altérée par la lumière bleue et permet ainsi le maintien de l'homéostasie de la peau. Avantageusement, l’extrait est issu de Cystoseira tamariscifolia, de Cystoseira Barbata, de Cystoseira Amantacea stricta, de Cystoseira Nodicaulis, de Cystoseira Usneoides, préférentiellement de Cystoseira tamariscifolia. Avantageusement encore, l’extrait de Cystoseira se caractérise par : - Un taux de matière sèche supérieur à 5 g/L d’extrait liquide, préférentiellement compris entre 5 et 100 g/L d’extrait liquide, plus préférentiellement compris entre 10 et 50 g/L d’extrait liquide ; - Entre 0,15 et 0,5 mg de phlorotannins totaux par gramme d’extrait liquide, préférentiellement entre 0,25 et 0,35 ; - Entre 0,5 et 5 mg de mannitol par gramme d’extrait liquide, préférentiellement entre 1 et 4. Selon un mode de réalisation de l’invention, l’extrait est formulé dans une composition, préférentiellement topique, dans laquelle la quantité d'extrait est supérieure ou égale à 0,01 % et inférieure ou égale à 5 % en poids, de préférence comprise entre 0,1 à 3 %, par rapport au poids total de la composition. Avantageusement, la composition cosmétique se présente sous la forme d’une crème, d’une émulsion huile dans eau, d’une émulsion eau dans huile, d’une émulsion multiple, d’une solution, d’un gel, d’une suspension, d’un spray ou d’une poudre. Une telle composition pourra bien entendu comprendre un ou plusieurs autres composés tels que des colorants, des agents filmogènes, des tensio-actifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des filtres UV, des vitamines, ou tout autre composé adapté à l’application cosmétique de la composition. L’invention concerne encore un procédé de traitement cosmétique, caractérisé en ce qu’il consiste à appliquer un extrait aqueux issu d’une algue du genre Cystoseira tel que défini précédemment, ou une composition en comprenant, sur la peau au niveau du contour des yeux. La préparation de l’extrait utilisé dans le cadre de l’invention peut être effectuée comme indiqué dans ce qui suit. Les algues peuvent être récoltées à un stade précoce tout comme à un stade mature. Celles-ci peuvent être soumises à une étape de séchage partiel, voire total. Préférentiellement, l’algue est récoltée fraîche puis partiellement séchée pour assurer une meilleure reproductibilité de la composition de l’extrait. Toute méthode d'extraction connue de l'homme du métier et permettant d'extraire les phlorotannins conjointement au mannitol peut être utilisée pour préparer l'extrait contenu dans la composition selon l'invention. On pense notamment à la macération, la digestion, la décoction, l’infusion, mais aussi l’utilisation de techniques telles que l’extraction par ultrasons, par micro-ondes ou encore l’utilisation de fluides subcritiques ou supercritiques. Parmi les solvants adaptés, on peut citer ainsi l'eau elle-même, les solvants hydroalcooliques en toute proportion ou encore les solvants constitués d'eau et d'un composé comme le propylène glycol, le butylène glycol, le propanediol, le glycérol en toute proportion. Parmi les solvants alcooliques on peut citer notamment l'éthanol. La préparation des extraits convenant à l'invention se déroule selon des techniques conventionnelles et mettent généralement en œuvre une étape de broyage suivie d'une étape d'extraction. Les modalités d'extraction relèvent clairement des compétences de l'homme de l'art. D'une manière générale, elles mettent en œuvre un solvant d'extraction qui est bien entendu choisi pour son aptitude à extraire les phlorotannins et le mannitol contenus dans les végétaux considérés. Ce solvant d'extraction peut être un solvant polaire, en particulier un solvant aqueux tel que de l'eau, ou hydroglycolique, c'est-à-dire un mélange d'eau et de propylène glycol, de butylène glycol ou de propanediol, ou un solvant hydroglycérique, c'est à dire un mélange eau/glycérol ou un solvant hydroalcoolique formé par mélange d'eau avec au moins un solvant tel que l’éthanol. Préférentiellement, l'extrait est un extrait aqueux, alcoolique, hydroglycolique, glycolique, hydroalcoolique ou hydroglycérique. Par exemple, l’extrait selon l’invention peut être obtenu par immersion de la matière première végétale dans un solvant chaud avec un rapport massique matière première/solvant comprise entre 1/10 et 1/100, pendant une durée de quelques heures, par exemple cinq heures. Le pH peut être ajusté avant ou après extraction dans le mélange aqueux. La température du solvant mis en œuvre peut être notamment comprise entre 20 et 80°C environ. De manière préférentielle et avantageuse, l’extrait peut être obtenu par extraction de la matière première grâce à un véhicule d’extraction contenant de l’eau et de la glycérine, la glycérine étant potentiellement présente dans le solvant final dans une quantité en poids supérieure à celle de l’eau. La température de ce solvant peut notamment être comprise entre 20 et 80°C environ, préférentiellement entre 30 et 70°C, plus préférentiellement entre 40 et 60°C. La durée d’extraction peut être de plusieurs heures, par exemple entre 2 et 24 heures, préférentiellement entre 2 et 8 heures, plus préférentiellement entre 4 et 6 heures. Le mélange peut être agité mécaniquement in situ à une vitesse comprise entre 10 et 1000 rpm. Une fois extrait, le résidu solide de l’algue est séparé de la solution extractive par décantation ou centrifugation. L’extrait est ensuite filtré sur une ou plusieurs membranes de seuils différents. Les teneurs en phlorotannins totaux des extraits selon l’invention sont évaluées par HPLC/UV (chromatographie liquide à haute performance avec détection par ultraviolet) et exprimé en équivalent en phloroglucinol. La teneur en mannitol des extraits selon l’invention peut être évaluée par électrophorèse ou par HPLC. Les caractéristiques de l'invention mentionnées ci-dessus, ainsi que d'autres, apparaîtront plus clairement à la lecture de la description suivante d’exemples de réalisation. EXEMPLES Exemple 1 : exemple de méthodes d’extraction de l’extrait aqueux selon l’invention Exemple d’extraction A : Extraction hydroglycérique à chaud (eau/glycérine) - Incorporation de 80 kg de Cystoseira Tamariscifolia dans 1000 kg d’un mélange hydroglycérique. - Chauffage entre 30 et 70°C. - Durée de chauffage et de la solubilisation comprise entre 2 h et 24 h. - Séparation des phases solubles et insolubles par décantation et/ou centrifugation et/ou filtration. - L’extrait est ensuite filtré sur poches puis filtré sur membranes jusqu’à 2µm. Exemple d’extraction B : Extraction hydroglycolique et immobilisation sur support solide (eau/glycérine) - Incorporation de 80 kg de Cystoseira Tamariscifolia dans 1000 kg d’un mélange hydroglycolique. - Chauffage entre 30 et 70°C. - Durée de chauffage et de la solubilisation comprise entre 2 h et 24 h. - Séparation des phases solubles et insolubles par décantation et/ou centrifugation et/ou filtration. - Sélection sur support solide. - L’extrait est ensuite filtré sur poches puis filtré sur membranes jusqu’à 2 μm. Exemple d’extraction C : Extraction aqueuse - Incorporation de 80 kg de Cystoseira Tamariscifolia dans 1000 kg d’eau. - Chauffage entre 30 et 70°C. - Durée de chauffage et de la solubilisation comprise entre 2 h et 24 h. - Séparation des phases solubles et insolubles par décantation et/ou centrifugation et/ou filtration. - Sélection sur support solide. - L’extrait est ensuite filtré sur poches puis filtré sur membranes jusqu’à 2 μm. Exemple d’extraction D : Extraction hydroalcoolique (eau/éthanol) - Incorporation de 80 kg de Cystoseira Tamariscifolia dans 1000 kg d’un mélange eau/éthanol. - Extraction à une température de 30 à 70°C entre 2 h et 24 h. - L’extrait est ensuite filtré sur poches puis filtré sur membranes jusqu’à 2 μm. Les solvants sont évaporés sous vide. Exemple 2 : dosage des teneurs en phlorotannins et en mannitol d’un extrait selon l’invention Des extraits d’algues appartenant au genre Cystoseira ont été obtenus par la méthode d’extraction A présentée dans l’exemple 1. Les teneurs en phlorotannins totaux des extraits obtenus sont déterminées par HPLC/UV et exprimé en équivalent en phloroglucinol. Les résultats obtenus sont présentés dans la Table 1 ci-dessous : Espèce, tissu Solvant extraction Teneur en phlorotannins totaux Eq. Phloroglucinol Cystoseira Tamariscifolia Eau/glycérine 0,25 mg/g extrait liquide Cystoseira Barbata Eau/glycérine 0,24 mg/g extrait liquide Cystoseira Amantacea stricta Eau/glycérine 0,23mg/g extrait liquide Cystoseira Nodicaulis Eau/glycérine 0,20 mg/g extrait liquide Cystoseira Usneoides Eau/glycérine 0,19 mg/g extrait liquide Les teneurs phlorotannins totaux par gramme d’extrait liquide, se situent entre 0,15 et 0,5 mg de préférentiellement entre 0,25 et 0,35. Les teneurs en mannitol des extraits obtenus sont déterminées par électrophorèse capillaire. Les résultats obtenus sont présentés dans la Table 2 ci-dessous : Espèce, tissu Solvant extraction Teneur en mannitol Cystoseira Tamariscifolia Eau/glycérine 1,5 mg/g extrait liquide Cystoseira Barbata Eau/glycérine 1,2 mg/g extrait liquide Cystoseira Amantacea stricta Eau/glycérine 1,4 mg/g extrait liquide Cystoseira Nodicaulis Eau/glycérine 0,9 mg/g extrait liquide Cystoseira Usneoides Eau/glycérine 1,2 mg/g extrait liquide Les teneurs en mannitol par gramme d’extrait liquide se situent entre 0,5 et 5 mg de, préférentiellement entre 1 et 4. Il a été observé que les extraits provenant de différentes espèces d'algues du genre Cystoseira affichent des teneurs en phlorotannins et en mannitol remarquablement homogènes. Cette homogénéité démontre une constance qualitative et quantitative des composés phlorotanniques et du mannitol à travers le genre Cystoseira, ce qui est indépendant de l'espèce concernée. Exemples 3 à 5 : Amélioration de l’accumulation de lipides dans les préadipocytes sous-cutanés et inhibition de l’inflammation du tissu adipeux L’objectif de l’étude est d’évaluer la capacité de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à inhiber l’état inflammatoire du tissu adipeux et activer la différenciation et l’accumulation des lipides dans les préadipocytes pour un effet raffermissant du visage et de comblement dans la zone périorbitaire. Mode opératoire : L’extrait utilisé est un extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) obtenu selon le procédé d’extraction présenté dans l’exemple 1 (méthode A). Les effets anti-inflammatoires de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) ont été recherchés, évaluant le relargage de la cytokine pro-inflammatoire IL-6 et de l’adiponectine, aux propriétés anti-inflammatoires et l’accumulation de lipides par des cultures de préadipocytes soumis à un stress ou non pro-inflammatoire. Des préadipocytes humains isolés de l’hypoderme d’une femme (indice de masse corporelle = 30 kg/m² et âgée de 33 ans) sont cultivés pendant 24 heures dans du milieu DMEM en plaques 96 puits. Pour l’étude de l’adipogenèse, c’est-à-dire la différenciation des préadipocytes en adipocytes blancs, les préadipocytes sont incubés dans un cocktail pro-adipogénique incluant de l’insuline, un glucocorticoïde, du 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) et de la thiazolidinedione. Les préadipocytes traités avec le milieu basal DMEM/F12 (non différenciés) ou traités avec un antagoniste du PPARγ (GW9662, 1 µM, M6191, Sigma) sont utilisés comme témoins négatifs de la différenciation adipocytaire. Les milieux de culture, incluant ou pas l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 0,025 %, 0,05 % et 0,1 % ont été changés tous les 2-3 jours pendant la période de culture (12 jours). Pour induire la différenciation des préadipocytes dans un environnement pro-inflammatoire, les cellules ont été traitées avec un cocktail proadipogénique (incluant de l'insuline, un glucocorticoïde, du 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) et de la thiazolidinedione) et un milieu conditionné par des macrophages humains activés (AcMc) pendant 15 jours. La dexaméthasone à 100 nM a été utilisée comme contrôle de réponse anti-inflammatoire. Durant les dernières 24 heures de culture, les cellules sont replacées dans un milieu de culture sans actif pour collecter les sécrétions cellulaires. Toutes les conditions ont été réalisées en trois réplicats expérimentaux (n=3). Les milieux, incluant ou pas l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 0,025 %, 0,05 % et 0,1 % ont été changés tous les 2/3 jours pendant 15 jours. Après la période de culture, les milieux de culture (sécrétion sur 24 heures) ont été collectés et les cellules ont été fixés avec du paraformaldéhyde à 4 % avant les expériences de coloration fluorescente ou autres dosages à partir des surnageants de culture. Analyse de l’accumulation / dosage des lipides Après la culture (12 jours pour l'environnement proadipogénique classique et 15 jours pour l'environnement proadipogénique pro-inflammatoire), les cellules ont été fixés avec du paraformaldéhyde à 4 % puis colorées par AdipoRed et DAPI (4',6-Diamidino-2-Phénylindole, Dihydrochloride) à température ambiante pour révéler respectivement les gouttelettes lipidiques intracellulaires et les noyaux. La quantification de l'accumulation lipidique et des noyaux a été réalisée par des mesures de signal de fluorescence en utilisant le spectrophotomètre Spark M10 (TECAN). Analyses biochimiques des relargages de l’IL-6 et de l’adiponectine Des analyses biochimiques de l'adiponectine (Biotechne, DY1065) ont été réalisées dans les milieux de culture des préadipocytes cultivés dans des environnements proadipogéniques classiques et pro-inflammatoires après respectivement 12 et 15 jours de culture. Les analyses biochimiques de l'IL-6 (Biotechne, DY206) ont été réalisées uniquement sur les préadipocytes cultivés dans un environnement proadipogénique pro-inflammatoire après 15 jours de culture. L'évaluation a été réalisée par des tests ELISA en utilisant des kits spécifiques et conformément aux recommandations des fournisseurs. Résultats : Exemples 3 : Amélioration de l’accumulation de lipides dans les préadipocytes sous-cutanés Le tableau 3 ci-dessous résume les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur l’accumulation des lipides dans les préadipocytes en cours de différenciation. Pour les statistiques, les valeurs de p Dosage de l'accumulation des lipides (% du control différencié) en conditions basales Différenciation classique Différenciation classique + Antagoniste du PPARγ GW9662 Différenciation classique + EACT 0,025% Différenciation classique + EACT 0,05% Différenciation classique + EACT 0,1% Moyenne 100 58 112 113 158* Ecart-type 38 9 50 49 38 L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué sur les préadipocytes à 0,1 %, a significativement augmenté l’accumulation de lipides de (+58 %) par rapport à la différenciation classique seule, démontrant son effet prodifférenciant de ce type cellulaire et suggèrante ses capacités de comblement cutané dû à la réduction du tissu adipeux sous-cutané au niveau du visage. Exemples 4 : Amélioration de la différenciation des préadipocytes sous-cutanés par la stimulation du relargage de l’adiponectine Le tableau 4 ci-dessous résume les effets significatifs de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur le relargage de l’adiponectine, par les préadipocytes en cours de différenciation. Pour les statistiques, les valeurs de p Dosage du relargage de l'adiponectine (% du control différencié) en conditions basales Différenciation classique Différenciation classique + Antagoniste du PPARγ GW9662 Différenciation classique + EACT 0,025% Différenciation classique + EACT 0,05% Différenciation classique + EACT 0,1% Moyenne 100 26 53 63 180* Ecart-type 48 24 41 20 69 L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué sur les préadipocytes à 0,1 %, a significativement augmenté le relargage d’adiponectine de (+80 %) par rapport à la différenciation classique seule, démontrant son effet prodifférenciant de ce type cellulaire et ses propriétés anti-inflammatoires. Exemples 5 : Amélioration de l’état inflammatoire du tissu adipeux Le tableau 5 ci-dessous résume les effets significatifs de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur le relargage de l’adiponectine et de l’IL-6, par les préadipocytes en cours de différenciation et en conditions pro-inflammatoires. Dosage du relargage de l'adiponectine et de l'IL6 (% du control différencié) en conditions pro-inflammatoires) Différenciation classique + Stimulation pro-inflammatoires (AcMc) Différenciation classique + Stimulation pro-inflammatoires (AcMc) + Antagoniste du PPARγ GW9662 1 µM Différenciation classique + Stimulation pro-inflammatoires (AcMc) + EACT 0,025% Différenciation classique + Stimulation pro-inflammatoires (AcMc) + EACT 0,05% Différenciation classique + Stimulation pro-inflammatoires (AcMc) + EACT 0,1% Moyenne Adiponectine 100 410 481* 267* 370** Ecart-Type Adiponectine 32 170 232 143 63 Moyenne IL-6 100 57 121 75 87 Ecart-Type IL6 13 12 60 24 24 L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué sur les préadipocytes à 0,025 % ; 0,05% et 0,1 %, a significativement augmenté le relargage d’adiponectine de respectivement +381 %, 167 % et 270%, par rapport à la différenciation classique seule et en situation pro-inflammatoire, démontrant ses propriétés anti-inflammatoires. L’extrait à 0,05 % tend également à inhiber le relargage de la cytokine pro-inflammatoire IL-6, confirmant ses propriétés anti-inflammatoires sur le préadipocytes stressés par un milieu pro-inflammatoire conditionné issu de macrophages humains activés (AcMc). De plus, l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué sur les préadipocytes à 0,025 %, 0,05% et 0,1 %, a augmenté l’accumulation des lipides dans les préadipocytes en cours de différenciation, de respectivement 85 %, 18 % et 75 %** (**p Exemple 6 : Réduction de la formation de pseudo-tubes à partir de co-cuture de cellules endothéliales et de fibroblastes dermiques L’objectif de l’étude est d’évaluer la capacité de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à inhiber la formation de nouveaux vaisseaux sanguins (test de pseudo-tubes) à partir de co-cultures de cellules endothéliales et fibroblastes dermiques et de limiter leur porosité afin de réduire l’apparence des vaisseaux ainsi que la fuite et l’accumulation de dépôts d’hémoglobine dans la zone périorbitaire, à l’origine de la couleur bleu violacé des cernes d’origine vasculaire, de poches et de l’état inflammatoire local. Mode opératoire : Test des pseudo-tubes Le test des « pseudo-tubes » désigne une méthode d'expérimentation en laboratoire utilisée pour étudier la formation de nouveaux vaisseaux sanguins à partir de vaisseaux préexistants. Pour cela, des cellules endothéliales microvasculaires dermiques humaines (HMVEC-d) et les fibroblastes dermiques humains normaux (NHDF) ont été ensemencés en co-culture en plaque 96 puits et incubés pendant 24 heures. Le milieu a été ensuite remplacé par du milieu de co-culture contenant ou non (témoin) l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 0,1%, ou la référence (suramine à 100 µM). Les cellules ont ensuite été stimulées par le VEGF (100 ng/ml) afin de stimuler la formation des pseudo-tubes. Les cellules ont alors été incubées pendant 7 jours avec un renouvellement des traitements et stimulation après 72 heures d’incubation. Une condition témoin non stimulée a été réalisé en parallèle. Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en trois réplicats expérimentaux (n=3). Résultats : Le tableau 6 ci-dessous résume les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur la formation des pseudo-tubes. Quantification de la formation de pseudotubes (% du control stimulé au VEGF) Control non stimulé Témoin stimulé VEGF 100 (ng/ml) Control Suramine, inhibiteur de pseudo-tubes VEGF + EACT 0,1% Moyenne 7 100 42 81 Ecart-type 0 4 7 5 Le VEGF, testé à 100 ng/ml, a fortement augmenté la formation des pseudo-tubes (+1240%). L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué à 0,1 %, sur les co-cultures de HMVEC-d et de NHDF, a inhibé la formation de pseudo-tubes de -19 % par rapport à la condition stimulée seulement au VEGF. Ces résultats démontrent que l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) est capable de limiter la formation de nouveaux vaisseaux et potentiellement de réduire leur apparence au niveau périorbitaire. Exemple 7 : Amélioration de la perméabilité et de la fonction vasculaire L’objectif de l’étude est d’évaluer la capacité de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT à renforcer la barrière et l’intégrité vasculaires. Le test de perméabilité vasculaire est couramment utilisé pour évaluer la fonction de la barrière endothéliale. La barrière endothéliale, composée de cellules endothéliales qui tapissent les vaisseaux sanguins, joue un rôle crucial dans le contrôle du passage des substances entre le sang et les tissus environnants. Ce test permet de mesurer la capacité des molécules à traverser cette barrière et donc d'évaluer l’intégrité et la fonctionnalité vasculaire. Mode opératoire : Analyse de la perméabilité vasculaire Pour le test, des cellules HMVEC-d sont ensemencées dans les inserts préalablement coatés avec une solution de fibronectine et incubées pendant 7 jours, avec un remplacement du milieu à 24 et 72 heures après l'ensemencement. Après cette période, le milieu est remplacé par un milieu d'essai contenant l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 0,5% ou un témoin (dexaméthasone à 1 µM), suivi d'une pré-incubation de 24 heures. L'inducteur TNF-α à 1 ng/ml est ensuite ajouté, et les cellules sont incubées pendant 24 heures supplémentaires. Des témoins non-stimulés sont également inclus. A la fin de l’incubation, le traceur fluorescent FITC-dextran a été ajouté dans le compartiment du haut de l’insert et les cellules ont été incubées pendant 20 minutes. Pour la mesure de fluorescence, un échantillon de 50 µl provenant du compartiment bas de chaque insert a été prélevé et ces échantillons ont été dilués avec une solution de PBS avant d’être transférés en plaques 96 puits blanches à fond plat. La mesure de fluorescence a été réalisée à λex 490 nm et λem 530 nm à l’aide d’un spectrophotomètre (Synergy H1, BioTeck). Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en trois réplicats expérimentaux (n=3). Résultats : Le tableau 7 ci-dessous résume les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur la perméabilité vasculaire. Quantification de la perméabilité vasculaire (% du control stimulé au TNF-α, 1 ng/ml) Control non stimulé Témoin stimulé VEGF 100 ng/ml) Control Dexaméthasone TNF-α + EACT 0,5% Moyenne 57 100 69 80 Ecart-type 4 8 2 2 Le TNF-α, testé à 1 ng/ml, a augmenté la perméabilité des cellules endothéliales de +75%, démontré par une diffusion plus importante du signal fluorescent à travers l’insert. L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué à 0,5 % sur les HMVEC-d a inhibé de -20,5 % la perméabilité vasculaire en présence de TNF-α par rapport à la condition stimulée seulement au TNF-α. Ces résultats démontrent que l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) est capable de préserver la barrière et l’intégrité endothéliale et de prévenir la fuite des vaisseaux. Exemple 8 : Activation de la synthèse d’acide hyaluronique L'acide hyaluronique joue un rôle essentiel dans l'hydratation et la régénération de l'épiderme, contribuant à maintenir la peau hydratée, ferme, élastique, et à favoriser sa réparation. L’objectif de l’étude est d’évaluer la capacité de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à réguler la synthèse d’acide hyaluronique. Mode opératoire : Analyse de la production d’acide hyaluronique par des kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) Les kératinocytes sont ensemencés en plaques 96 puits et cultivés pendant 24 h avant d’être traités pendant 72h en présence de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué à 1 % ou avec l’acide rétinoïque utilisé comme contrôle. Après 72h de traitement, les surnageants sont prélevés et l’acide hyaluronique est dosé par ELISA (R&D system). Résultats : Le tableau 8 ci-dessous résume les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur la production d’acide hyaluronique par des NHEK. Quantification de la libération d’acide hyaluronique par les NHEK (% du control) Control Traité Acide rétinoïque (10 -7 M) EACT 1% Moyenne 100 255 121* Ecart-type 2 8 2 Comme attendu, l’acide rétinoïque testé à 10 -7 M, a significativement activé la production et/ou le relargage de l’acide hyaluronique par les NHEK (+155%). L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) appliqué à 1 %, sur les NHEK a significativement stimulé de 21 % la production et/ou le relargage de l’acide hyaluronique par les NHEK. Ces résultats suggèrent que l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) est capable de renforcer l’hydratation et la fermeté cutanées. Exemple 9 : Régulation de l’expression de gènes « horloge » altérée par la lumière bleue L’objectif de l’étude est d’évaluer la capacité de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à rétablir l’expression de gènes « horloge » altérée par la lumière bleue. Au niveau cellulaire, les gènes « horloge » ou « clock » genes , sont essentiels à la mise en place et à la régulation des rythmes circadiens. Ce rythme naturel régule les cycles biologiques sur une période d'environ 24 heures. Il joue un rôle crucial dans la régulation de plusieurs fonctions cutanées, telles que la barrière cutanée, l'hydratation, la température de la peau, la réponse immunitaire, processus essentiels au maintien de l'homéostasie de la peau. Afin d’évaluer la capacité de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à rétablir l’expression de gènes « horloge », nous avons mis en place un modèle de culture de kératinocytes humains normaux, irradiés à la lumière bleue. L'exposition excessive à la lumière bleue est en effet reconnue comme étant impliquée dans l’altération de l'expression de ces gènes et du rythme circadien. Mode opératoire : Analyse de l’expression des gènes codant pour BMAL1, PER1, CRY2 par RT-PCR L’étude a été menée sur des kératinocytes humains normaux (NHEK) ensemencés en plaques de 24 puits. Après 24h, les cellules ont été incubées avec l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à une concentration de 0,3 % pendant 24 heures, puis soumises à une irradiation à la lumière bleue via une lampe LED Medelisol (Deleo SAS, dose d'irradiation de 50 J/cm²). Suite à l'irradiation, les cellules ont été incubées de nouveau pendant 18 heures en présence de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 0,3 % avant l'extraction des ARN à l'aide du réactif TriPure® suivant scrupuleusement les instructions du fournisseur. La qualité et la quantité des ARN extraits ont été évaluées respectivement par électrophorèse capillaire (Bioanalyzer 2100, Agilent Technologies) et spectrophotométrie (Synergy H1, BioTek Instruments). Les ADN complémentaires (cDNA) ont été synthétisés à partir de ces ARN totaux en présence d'oligo(dT) et de la Transcriptor Reverse Transcriptase (Roche). Les quantités de cDNA ajustées ont ensuite été soumises à la réaction en chaîne par polymérase (PCR) en utilisant le système LightCycler® (Roche Molecular System Inc.), conformément aux instructions du fournisseur. Pour l'analyse de l'expression différentielle des gènes horloges BMAL1, PER1 et CRY2, une RT-PCR quantitative a été réalisée. Les valeurs de seuil de cycle (Ct) obtenues ont été normalisées en fonction du Ct d'un gène de référence, la protéine ribosomale S28. L'application de la méthode ΔΔCt a permis la quantification relative de l'expression génique et la détermination du fold change (FC). Les résultats obtenus pour les cellules traitées avec l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) et exposées à la lumière bleue ont été comparés, d'une part, à ceux des cellules non traitées et non exposées (contrôle) et, d'autre part, aux cellules exposées uniquement à la lumière bleue sans traitement par l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT). Résultats Le tableau 9 ci-dessous résume les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur l’expression des gènes « horloge » par des NHEK irradiés à la lumière bleue. Symbol du gène Nom du gène FC (Fold change) Lumière bleue versus contrôle non irradié FC (Fold change) Lumière bleue + EACT 0,3% versus contrôle non irradié FC (Fold change) Lumière bleue + EACT 0,3% versus Lumière bleue BMAL1 Basic helix-loop-helix ARNT like 1 2,21 ± 0,04* 1,97 ± 0,04* 0,89 ± 0,02* PER1 Period circadian clock 1 3,55 ± 0,07** 1,75 ± 0,03* 0,49 ± 0,02* CRY2 Cryptochrome circadian clock 2 2,32 ± 0,05* 1,11 ± 0,1* 0,48 ± 0,02* La lumière bleue a significativement stimulé l’expression des gènes BMAL1, PER1 et CRY2 (*p Cystoseira tamariscifolia (EACT) a significativement inhibé la suractivation de l’expression des gènes BMAL1, PER1 et CRY2 induite par la lumière bleue, respectivement de -11%, -51% et -52% (*p Cystoseira tamariscifolia (EACT) rétablit l’expression des gènes « horloge » altérée par la lumière bleue et par conséquent maintient leur synchronisation essentielle à l’établissement du rythme circadien et de l’homéostasie cutanés. Exemple 10 à 13 : Tests cliniques démontrant l’efficacité de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur les cernes d’origine vasculaire, la fermeté et l’hydratation cutanées. Afin d’évaluer les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) sur les signes de fatigue dont les cernes vasculaires et le vieillissement (perte de fermeté, sécheresse cutanée), un essai clinique a été réalisé avec des volontaires présentant des cernes visibles d’origine vasculaire. Des analyses biométrologiques de la peau ont permis d’évaluer la microcirculation et la colorimétrie dans la région sous l’œil, la fermeté et l’hydratation cutanées. Exemple 10 : Effets sur la microcirculation, réduction de la stase veineuse dans la zone sous l’œil L'essai clinique s'est déroulé avec 23 participantes en bonne santé, toutes de sexe féminin, avec un âge moyen de 60±2 ans. Chaque volontaire a utilisé une crème sur une moitié de son visage qui contenait 3 % de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT), tandis que sur l'autre moitié du visage, elle a appliqué un placebo ne contenant pas d'EACT. Les applications ont été effectuées deux fois par jour pendant une durée de 28 jours. Le TiVi700® ou Tissues Viability Imaging (Wheels Bridge) est un système d'imagerie par spectroscopie de polarisation qui évalue la microcirculation cutanée. Il a été utilisé afin d'analyser le flux sanguin dans les très petits vaisseaux sanguins situés juste sous la peau dans la zone périoculaire et associés à la formation et l’apparence des cernes vasculaires. Les mesures effectuées avec le TiVi700® ont été réalisées au premier jour de l'étude (J0), avant toute application, et de nouveau après 28 jours (J28) d'utilisation biquotidienne du produit contenant l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% ou de la crème placebo. Le pourcentage de variation de la microcirculation à J28 par rapport à J0 est calculé selon la formule suivante : ((Valeur TiVi700® à J28 - Valeur TiVi700® à J0) / Valeur TiVi700® à J0)*100. Le tableau 10 ci-dessous résume les effets de la formulation contenant 3% d’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) et de la formule placebo sur l’évolution de la microcirculation cutanée. Pour les statistiques, les valeurs de p Placebo J28 EACT 3% J28 Evolution de la microcirculation cutanée dans la région sous l’œil (% de J0) -2,6 -3,6 Ecart-type -3,1 -2,6 p value versus J0 p = 0,0813 p = 0,0005 Après 28 jours d’application, l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% a significativement diminué de 3,6% la microcirculation dans la région sous l’œil comparé à J0 démontrant une amélioration du flux sanguin et de l’apparition de cernes. Le placebo n’a pas démontré d’effet significatif. Afin de vérifier la diminution de l’apparence des cernes vasculaires, la mesure du paramètre colorimétrique b* dans le système CIE Lab a été utilisée. Il s’agit d’un indicateur essentiel pour évaluer l'apparence des cernes sous les yeux d'origine vasculaire. Exemple 11 : Effets anticernes vasculaires Le paramètre b* dans le système CIE Lab est essentiel pour analyser la couleur des cernes sous les yeux, indiquant une teinte bleuâtre pour les cernes d'origine vasculaire. Une augmentation de la valeur b* signifie une réduction de cette coloration bleu-violacé, suggérant l'efficacité d'un traitement contre les cernes. La spectrocolorimétrie CIE Lab, méthode non invasive, a été utilisée pour mesurer objectivement ces changements de couleur, permettant d'évaluer de manière fiable l'impact de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% sur les cernes vasculaires. Les mesures effectuées au Spectrocolorimètre® ont été réalisées au premier jour de l'étude (J0), avant toute application, et de nouveau après 28 jours (J28) d'utilisation biquotidienne du produit contenant l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% ou de la crème placebo. Le pourcentage de variation du paramètre b*à J28 par rapport à J0 est calculé selon la formule suivante : ((Valeur b* à J28 - Valeur b* à J0) / Valeur b* à J0)*100. Le tableau 11 ci-dessous résume les effets de la formulation contenant 3% d’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) et de la formule placebo sur le paramètre b*. Pour les statistiques, les valeurs de p Placebo J28 EACT 3% J28 Evolution du paramètre b* dans la région sous l’œil (% de J0) 0,6 5,7 Ecart-type 1,7 1,9 p value versus J0 p = 0,8911 p = 0,0067 Après 28 jours d’application, l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% a significativement augmenté de 5,7% le paramètre b* dans la région sous l’œil comparé à J0 démontrant une réduction de la couleur bleu violacé des cernes. Le placebo n’a pas démontré d’effet. Exemple 12 : Effets raffermissants La mesure du paramètre R0 (Uf) a été réalisée à l’aide du Cutomètre® pour évaluer les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% sur la fermeté cutanée après 28 jours d’application. Une baisse de la valeur R0 (Uf) témoigne d’une augmentation de la fermeté cutanée. Les mesures effectuées au Cutomètre® ont été réalisées au premier jour de l'étude (J0) avant toute application, et de nouveau après 28 jours (J28) d'utilisation biquotidienne du produit contenant l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% ou de la crème placebo. Le pourcentage de variation du paramètre R0 (Uf) à J28 par rapport à J0 est calculé selon la formule suivante : ((Valeur R0 (Uf) à J28 - Valeur R0 (Uf) à J0) / Valeur R0 (Uf) à J0)*100. Le tableau 12 ci-dessous résume les effets de la formulation contenant 3% d’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) et de la formule placebo sur le paramètre b*. Pour les statistiques, les valeurs de p Placebo J28 EACT 3% J28 Evolution du paramètre R0 (Uf) au niveau de la tempe (% de J0) -10,028 -16,493 Ecart-type 1,519 1,619 p value versus J0 p p Après 28 jours d’application, la formulation contenant l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% a significativement diminué de -16,5 % le paramètre R0 (Uf) dans la région de la tempe comparé à J0 démontrant une nette amélioration de la fermeté cutanée. La crème placebo a également amélioré la fermeté cutanée, avec une diminution de seulement -10 % du paramètre R0 (Uf) par rapport à J0. L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% a significativement diminué le paramètre R0 (Uf) par rapport au placebo de -64,5 % à J28 (p Exemple 13 : Effets hydratants La mesure de la capacitance électrique a été réalisée à l’aide du Cornéomètre® pour évaluer les effets de l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% sur les niveaux d’hydratation de la surface de peau, soit au niveau de la couche cornée, après 28 jours d’application. Les mesures obtenues avec le Cornéomètre® sont exprimées en Unités Arbitraires (UA) ou en Unités de Cornéométrie. L’augmentation de ces unités indique une amélioration du niveau relatif d'hydratation de la couche cornée. Les mesures effectuées au Cornéomètre® ont été réalisées au premier jour de l'étude (J0), avant toute application, et de nouveau après 28 jours (J28) d'utilisation biquotidienne du produit contenant l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% ou de la crème placebo. Le pourcentage de variation des valeurs obtenues au Cornéomètre® à J28 par rapport à J0 est calculé selon la formule suivante : ((Valeur Cornéomètre® à J28 - Valeur Cornéomètre® à J0) / Valeur Cornéomètre® à J0)*100. Le tableau 13 ci-dessous résume les effets de la formulation contenant 3% d’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) et de la formule placebo sur l’hydratation de la couche cornée. Pour les statistiques, les valeurs de p Placebo J28 EACT 3% J28 Evolution des valeurs données par le Cornéomètre® au niveau de la joue (% de J0) 19,012 29,003 Ecart-type 2,819 2,312 p value versus J0 p p Après 28 jours d’application, la formule contenant l’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% a significativement augmenté de 29 % le taux d’hydratation de la couche cornée comparé à J0 démontrant un effet hydratant. La crème placebo a également amélioré l’hydratation de la couche cornée, avec une augmentation de seulement 19 % du taux d’hydratation de la couche cornée par rapport à J0. L’extrait aqueux de Cystoseira tamariscifolia (EACT) à 3% a significativement augmenté le taux d’hydratation par rapport au placebo de +53 % à J28 (p Les résultats des tests cliniques spécifiques à l'extrait de Cystoseira tamariscifolia montrent une amélioration notable de l'état de la peau, confirmant son potentiel comme ingrédient clé dans les formulations cosmétiques destinées à améliorer les signes de fatigue et de vieillissement prématuré cutané dans la région du contour de l’œil. CONCLUSION L’invention démontre que l'extrait de Cystoseira tamariscifolia offre une solution remarquable et innovante aux défis posés par le vieillissement cutané de la zone périorbitaire, notamment en réduisant l'apparence des cernes vasculaires, en améliorant la fermeté et l'hydratation de la peau. Les résultats obtenus à travers des études approfondies, tant in vitro qu' in vivo , confirment l'efficacité exceptionnelle de cet extrait dans le traitement des signes de l'âge et de fatigue au niveau du contour des yeux, offrant ainsi une alternative prometteuse aux solutions invasives actuellement disponibles sur le marché. Par ailleurs, cette invention s'inscrit parfaitement dans une démarche de développement durable, valorisant les ressources naturelles et la biodiversité marine. En exploitant l'extrait de Cystoseira tamariscifolia , elle contribue à l'émergence de produits cosmétiques respectueux de l'environnement, tout en offrant des bénéfices esthétiques avérés. Utilisation cosmétique d’un extrait aqueux issu d’une algue du genre Cystoseira pour la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, incluant la réduction ou la prévention de l’apparition de cernes vasculaires et de poches sous les yeux, l’amélioration de la fermeté et de l’hydratation cutanée. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut la réduction de la formation de vaisseaux sanguins et de leur perméabilité. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut la réduction des rides ou des ridules. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut la régénération de l’épiderme. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la prévention ou le traitement des signes de fatigue et de vieillissement cutané dans la région du contour de l’œil, inclut le rétablissement de l’expression des gènes horloges. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait est issu de Cystoseira tamariscifolia, de Cystoseira Barbata, de Cystoseira Amantacea stricta, de Cystoseira Nodicaulis, de Cystoseira Usneoides, préférentiellement de Cystoseira tamariscifolia. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait présente : un taux de matière sèche supérieur à 5 g/L d’extrait liquide, préférentiellement compris entre 5 et 100 g/L d’extrait liquide, plus préférentiellement compris entre 10 et 50 g/L d’extrait liquide ; entre 0,15 et 0,5 mg de phlorotannins totaux par gramme d’extrait liquide, préférentiellement entre 0,25 et 0,35; entre 0,5 et 5 mg de mannitol par gramme d’extrait liquide, préférentiellement entre 1 et 4. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait est en solution dans un solvant polaire, en particulier un glycol, tel que le glycérol, le propanediol, le butanediol ou le propylène glycol, ou un mélange de glycol et d’eau. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait est formulé dans une composition, préférentiellement topique, dans laquelle la quantité d'extrait est supérieure ou égale à 0,01 % et inférieure ou égale à 5 % en poids, de préférence comprise entre 0,1 à 3 %, par rapport au poids total de la composition. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que la composition cosmétique se présente sous la forme de crème, d’une émulsion huile dans eau, d’une émulsion eau dans huile, d’une émulsion multiple, d’une solution, d’un gel, d’une suspension, d’un spray ou d’une poudre. Utilisation selon l’une des revendications 8 à 9, caractérisée en ce que la composition comprend un ou plusieurs autres composés tels que des colorants, des agents filmogènes, des tensio-actifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des filtres UV, des vitamines, ou tout autre composé adapté à l’application cosmétique de la composition. Procédé de traitement cosmétique, caractérisé en ce qu’il consiste à appliquer un extrait aqueux issu d’une algue du genre Cystoseira, ou une composition en comprenant, sur la peau au niveau du contour des yeux.