FR 3097544 A1 20201225 FR 1906513 A 20190618 Description Titre de l'invention : Composition et méthode pour améliorer la croissance de plantes [0001] L'invention se rapporte à une composition contenant un extrait d'algues brunes et son utilisation en tant que biostimulant pour stimuler la croissance des plantes par stimulation de la croissance de certaines bactéries présentant un effet avantageux pour les plantes. [0002] 11 est actuellement nécessaire de développer des nouveaux produits afin (l'augmenter le rendement des cultures, tout en diminuant l'impact sur l'environnement. La nature de la faune et de la flore des sols agricoles s'avère importante pour ces questions, et notamment la présence dc certains micro-organismes permettant une meilleure fertilité des sols, ou réduisant la toxicité des métaux lourd tels que le nickel et le cobalt. Ces microorganismes peuvent être détruits par les produits phytosanitaires actuels (désherbants, fongicides ou herbicides). [0003] La bactérie Bucillus megaterium par exemple, permet une meilleure solubilité du phosphore, et la fixation dc l'azote dans les sols est facilitée par Rhizobium leguminosanun ou Azotobacter vinelatulii. Cependant, il existe différents types de sols qui ne sont pas constitués des mêmes populations microbiennes avec une diversité et une abondance pouvant grandement différer. [0004] Il est donc nécessaire d'identifier des produits d'origine naturelle qui puissent être adaptés à différents types de sols, c'est-à-dire notamment qui puissent agir sur différents types de micro-organismes. [0005] Selon une définition validée par la Commission Européenne, les biostimulants se dé- finissent comme des substance(s) et/ou micro-organisme(s) dont la fonction, lorsque appliqués aux plantes ou à la rhizosphère, est la stimulation des processus naturels qui favorisent/améliorent l'absorption ou l'utilisation des nutriments, la tolérance aux stress abiotiques, la qualité ou le rendement de la culture, indépendamment de la présence dc nutriments. [0006] Ainsi, l'action du biostimulant n'est pas uniquement liée à sa composition, mais également à l'effet qu'il aura sur la plante en tant que telle ou son environnement. [0007] Certains extraits d'algues, notamment à base d'algues brunes du genre Fucus sont disponibles à la vente en tant que biostimulants. Une majorité des formulations proviennent d'Ascophylhan nodosum, les techniques d'extraction étant variables. Les principes actifs présents dans les biostimulants à base d'algues sont généralement similaires mais leurs composition et fonctionnalité dépendent de la nature de la matière première, ainsi que de la méthode d'extraction. 2 [0008] L'invention se rapporte à un nouvel extrait d'algues brunes, qui présente des propriétés avantageuses pour la croissance de bactéries généralement présentes dans les sols. Ainsi, cet extrait d'algues peut être utilisé en tant que biostimulant, par application sur le milieu dc culture ou les sols, afin de permettre une meilleure croissance des plantes, grâce aux bactéries favorables stimulées par cet extrait. Il peut être intégré dans une composition biostimulante, avec des excipients ou d'autres principes actifs. On peut aussi utiliser l'extrait dans une composition dc biocontrôle, dans laquelle l'extrait est combiné avec des bactéries PGPR (acronyme de Plant Grokoh Promoting Rhizobacteria, rhizobactérics favorisant la croissance des plantes), afin de stimuler la croissance de ces bactéries. [0009] Cet extrait a été obtenu par extraction acide d'un broyat d'algues brunes, préféren- tiellement suivie d'une filtration de rétentat récupéré. [0010] Cet extrait contient des éléments permettant une stimulation dc la croissance de bactéries favorables à la croissance de la plante, en particulier Bacillus megaterium, Pseudomotzas fluorescens, Pseudomonas fillva et Arthrobacter agilis. Ces bactéries présentent un effet PGPR (Plant-Gan/oh Promoting Rhizobacteria), c'est-à-dire qu'il s'agit de bactéries colonisant les racines des plantes et favorisant leur croissance. [0011] L'invention se rapporte ainsi à un extrait d'algues brunes, caractérisé en ce qu'il comprend entre 15 et 25% de mannitol, entre 35 et 45% de laminarancs et entre 20 et 30% de fucoidanes. Les autres composés présents (généralement entre 10 et 15%) dans cet extrait sont des composés inorganiques variés. [0012] De préférence, les algues brunes utilisées sont des laminaires, c'est-à-dire des algues du genre Laminaria. On utilise en particulier des Laminaria hyperborea ou des Latninaria digitata. On peut toutefois utiliser d'autres types d'algues brunes, et en particulier Laminaria japonica, Sargassum sp., Ecklonia maxima, ,fitcus sp, Lessonia sp., et Macrocystis sp. [0013] Dans un autre mode de réalisation, les algues brunes sont du genre Fucus. Dans un autre mode de réalisation, les algues brunes sont du genre Ascophyllum. [0014] On peut aussi utiliser des mélanges de ces algues brunes. [0015] Dans un mode de réalisation préféré, l'extrait d'algues brunes comprend entre. 20 et 23% de mannitol, entre 39 et 42% de laminaranes et entre 20 et 25% de fucoidanes. Préférentiellement, il contient également entre 10 et 12% de composés inorganiques. [0016] Dans un mode de réalisation préféré, cet extrait se présente sous la forme d'un extrait liquide (préférentiellement sur base aqueuse) sans éléments en suspension, d'une solution aqueuse ou d'une forme de poudre soluble dans un milieu aqueux. Le milieu aqueux est préférentiellement de l'eau. [0017] Dans le mode de réalisation préféré, l'extrait d'algue brune est susceptible d'être obtenu par une méthode telle que décrite ci-après, qui fait également partie de 3 l' invention. [0018] On obtient en effet l'extrait d'algues brunes par une méthode d'extraction. Cette méthode comprend les étapes de a. Broyage d'un échantillon algues brunes, b. Suspension du broyat dans une solution acide pendant une durée supérieure à 2 heures c. Récupération de la fraction liquide, préférentiellement par centrifugation ou filtration. [0019] Ce procédé peut aussi comprendre également les étapes ultérieures de : d. Génération d'un précipité par ajout d'alcool dans la fraction liquide récupérée en c, c. Récupération du précipité f. Suspension du précipité dans une solution aqueuse séchage et/ou lyophilisation du précipité. [0020] Alternativement, ce procédé peut comprendre les étapes ultérieures de : d. Filtration de la fraction liquide récupérée en c, c. Récupération du rétentat après filtration f. Suspension du rétentat dans une solution aqueuse, séchage et/ou lyophilisation du rétentat. [0021] L'échantillon d'algues brunes peut être un échantillon d'algues fraîches, c'est-à-dire récoltées et qui n'ont pas été soumises à une étape de séchage. Si un tel échantillon doit être utilisé, il est préféré que les algues aient été récoltées au plus 24 hem-es avant utilisation. En effet, il existe un risque de dégradation des composés actifs dans un échantillon d'algues fraîches, non séchées, si cet échantillon est utilisé après plusieurs jours. Si l'extrait doit être préparé après récolte des algues, on préfère alors sécher celles-ci, afin de limiter l'altération de leurs actifs. Cette étape de séchage peut être effectuée par toute méthode connue dans l'art, en particulier à basse température juste après récolte ce qui permet de préserver au mieux la confmmation biochimique de composés actifs et ainsi leur fonctionnalité. On utilise donc préférentiellement des algues sèches. [0022] Le broyage de l'échantillon est effectué, par exemple en utilisant un broyeur/mi- croniseur classique afin d'obtenir des particules d'une taille de l'ordre du millimètre. [0023] Après broyage de l'échantillon d'algues, on suspend le broyat dans une solution acide. Cette solution acide présente de préférence un pH inférieur ou égal à 5, de préférence inférieur ou égal à 4, de préférence, inférieur ou égal à 3. On utilise de préférence un acide carboxylique faible, présentant en particulier de 4 à 8 atomes de carbones, et de une à trois fonctions acide. On préfère en particulier les acides présentant une chaîne carbonée principale de 4 à 6 atomes de carbones, et 2 ou 3 fonctions acide. On utilise en particulier l'acide citrique (C6H807, CAS 77-92-9 (anhydre) ou 5949-29-1 (monohydratc)), voire l'acide isocitrique (CAS 320-77-4). On peut toutefois aussi utiliser des acides forts dilués, en particulier l'acide sulfurique ou l'acide phosphorique. [0024] L'incubation du broyat d'échantillon d'algues brunes est effectuée pendant au moins deux heures, mais peut être prolongée. On préfère toutefois que cette incubation soit effectuée au maximum pendant 6 heures, de préférence environ 3 heures (soit entre 2h45 et 3h15 ou entre 2h50 et 3h10, ou entre 2h55 et 3h05). Dans un mode de réalisation particulier, cette incubation est réalisée à température ambiante. Dans un autre mode de réalisation, l'incubation est réalisée à une température comprise entre 55°C et 80°C, en particulier entre 65nC et 75°C. [0025] L'extrait liquide est alors récupéré après incubation. On peut éliminer la fraction solide par centrifugation (cc qui est la méthode préférée) ou par filtration avec un seuil de coupure à 200pm maximum. [0026] Dans un mode de réalisation préféré, on soumet l'extrait liquide acide récupéré à une étape complémentaire d'extraction d'actifs. Dans ce mode de réalisation, on induit une précipitation d'actif par addition d'une solution d'alcool dans l'extrait liquidc, et récupération du précipité. L'alcool est préférentiellement l'éthanol ou isopropanol. En particulier, l'étape de précipitation à l'alcool peut être effectuée avec un alcool à une température de l'ordre de -20°C à 0°C. L'alcool utilisé est généralement utilisé pur (alcool absolu). [0027] Le précipité obtenu peut alors être séché, lyophilisé, ou être remis en suspension dans une solution aqueuse. [0028] Alternativement, on peut effectuer une étape de filtration (en particulier d'ultrafiltration ou de filtration sur membrane) avec un seuil de coupure de 20kDa (seuls les éléments inférieurs à 20kDa passent par la membrane), éventuellement de 25kDa, voire de 30kDa. On récupère le rétentat (fraction qui n'est pas passée par les pores de la membrane), qui peut être séché, lyophilisé ou conservé en suspension dans une solution aqueuse. [0029] L'invention se rapporte ainsi à un extrait d'algue brune, susceptible d'être obtenu par un procédé tel que décrit plus haut. [0030] Les extraits d'algues brunes ainsi obtenus présentent une composition telle que définie ci-dessus. [0031] Ils peuvent être mélangés à tout excipient acceptable pour une utilisation dans le domaine agricole, c'est-à-dire compatible dans son application aux végétaux et acceptable par ces derniers. On peut ainsi citer un excipient choisi parmi les solvants, les tensio-actifs, les adhésifs, les agents émulsifiants, les stabilisants, les charges, notamment minérales, les diluants, les épaississants, les agents anti-lessivages. [0032] L'invention se rapporte ainsi à une formulation ou composition contenant l'extrait d'algues brunes décrit plus haut, et qui peut donc comprendre, en outre, des supports, des diluants et/ou des excipients appropriés, ainsi qu'à l'utilisation d'un tel extrait d'algues brunes pour la préparation d'une composition biostimulante ou fertilisante. Cette composition est biostimulante ou fertilisante, en ce qu'elle présente un tel effet de biostimulation ou de fertilisation des sols. En particulier, on pense que la fertilisation des sols est liée à la capacité de la formulation de stimuler la croissance de bactéries bénéfiques pour les plantes. [0033] À titre d'illustration, on peut citer, en tant que supports, diluants et/ou excipients des sels tels que le chlorure de potassium, le sulfate de potassium, le sorbatc de potassium, le citrate de potassium, le sulfate de sodium, le métabisulfite de sodium, le citrate de sodium, le carbonate de calcium, le benzoate de calcium, le phosphate de calcium. On peut aussi utiliser d'autres éléments tels que la maltodextrine, le gypse ou la bentonite, des alcools tels que l'éthanol, le butanol, l'alcool isopropyliquc, des acides tels que l'acide acétique, l'acide lactique. On peut aussi utiliser des combinaisons de ces éléments. [0034] Dans un mode de réalisation préféré, la formulation se présente sous forme liquide. [0035] Dans un autre mode de réalisation, la formulation se présente sous forme solide, notamment dans une pâte ou coque servant à enrober ou pelliculer des semences. Ainsi, l'extrait d'algues brunes peut être utilisé pour le traitement de semences. On formule un produit de traitement de semences en ajoutant l'extrait d'algues brunes à des formulants, adjuvants, agents pelliculants connus dans l'art. Ces composés n'ont pas d'effet biologique et sont utilisés notamment pour assurer une bonne tenue de la substance active sur la graine, ainsi qu'un bon recouvrement de la semence. Ainsi, on effectue le pelliculage en mélangeant l'extrait d'algues brunes avec un formulant et/ou un agent pelliculant. Puis on pulvérise le mélange sur les semences, pour application sur les graines, l'homogénéisation étant ensuite réalisée généralement dans des mélangeurs statiques. On utilise, en tant que formulant, des solvants organiques ou de l'eau, des dispersants, des émulgateurs, des tensioactifs ou des mouillants, des colorants... Les pelliculants sont utilisés pour appliquer un film microporeux à la surface de la semence. Ils permettent d'améliorer la couverture de la graine et l'homogénéité du recouvrement par la substance active. Ils peuvent également faciliter l'écoulement des semences dans le semoir. Les enrobants peuvent modifier la forme, la taille et/ou le poids de la semence, ce qui permet d'améliorer la précision du semis Un extrait d'algues brunes peut être intégré à cet enrobant. On peut effectuer un pelliculage monocouche ou répéter les étapes de pelliculage pour obtenir un pelliculage multicouche et augmenter ainsi la dose pour obtenir une dose optimale. Le pelliculage peut également contenir d'autres éléments comme des traitements phytosanitaires. [0036] L'invention se rapporte également à un procédé pour améliorer la croissance de 6 plantes comprenant. l'étape d'administration d'un extrait d'algues brunes tel que décrit plus haut ou d'une composition biostimulante contenant ledit extrait sur le milieu sur lequel les plantes sont. cultivées. [0037] Les volumes d'applications directement dans les sols sont dépendants de la concentration en composants actifs issus de l'extraction. Les taux de dilutions par volume d'eau seront cependant dans la gamme de 0,05% à 5% (0.5 g/L à 50 g/L d'extrait sec), plus particulièrement de 0,1 à 2% (1 g/L à 20 g/L d'extrait sec) pour assurer un effet sur la croissance bactérienne. [0038] On peut aussi appliquer l'extrait d'algues brunes ou la composition biostimulante par infiltration dans le sol, par pulvérisation sur les feuilles de la plante, par application sur une semence avant le semis ou sur les racines d'une plantule, notamment par pralinage, avant sa plantation. [0039] Une composition pour pralinage peut contenir l'extrait d'algues brunes, ainsi que tout autre composé connu dans l'art, tel qu'un polymère hydrophile non phytotoxique, notamment l'alcool polyvinylique, la polyvinylpyrrolidonc, le polyacrylamide, l'acétate de polyvinyle, le propionate de polyvinyle, l'hydroxypropylméthylcellulose, la méthylcellulose ou la carboxyméthylcellulose. On peut aussi utiliser des gommes dans des formulations pour pralinage, en particulier la gomme xanthanc ou la gomme arabique. L'amidon, en particulier les copolymères d'amidon avec des acrylamides, peut également être utilisé. [0040] L'invention se rapporte également à un procédé pour améliorer la croissance de bactéries, comprenant l'étape d'administration d'un extrait d'algues brunes tel que décrit ci-dessus dans le milieu de culture des bactéries. [0041] L'invention se rapporté également à un extrait d'algues brunes tel que décrit ci- dessus en tant que biostimulant, ou en tant qu'agent fertilisant il est rappelé qu'un agent fertilisant est une substance, utilisée en agriculture, en horticulture et sylviculture, permettant d'améliorer les sols, notamment leur structure, et fertiliser les plantes cultivées. Dans le cas présent, l'extrait n'apporte pas directement des éléments nutritifs nécessaires aux plantes, mais permet l'amélioration des sols du fait de l'augmentation de la croissance des bactéries favorables, et capables d'améliorer la croissance des plantes. [0042] L'invention se rapporte également à une composition biostimulante ou fertilisante comprenant un extrait d'algues brunes tel que décrit ci-dessus, ainsi qu'à l'utilisation d'un tel extrait d'algues brunes pour la préparation d'une composition biostimulante ou fertilisante. Brève description des dessins [0043] [fig.1] : Courbe de croissance d'une souche de Bacillus megaterium en présence de 7 l'extrait généré à différentes concentrations [0044] [fig.2] : Courbe de croissance d'une souche dc Pscudomonas fluorescence en présence de l'extrait généré à différentes concentrations [0045] [fig.3] : Courbe de croissance d'une souche dc Pscudomonas fulva en présence de l'extrait généré à différentes concentrations [0046] [fig.4] : Dénombrement de colonies bactériennes formées en milieu solide en présence de l'extrait généré à différentes concentrations. EXEMPLES Exemple 1. Obtention d'extrait d'algues [0047] Les extractions ont été réalisées à partir d'algues sèches de type laminaire (Laminaria ). [0048] Une solution de 4% d'acide citrique (120g) dans un volume de 31 d'eau préalablement chauffée à 70°C a été préparée puis 300g d'algues sèches broyées ont été incorporées à cette solution. Elle a été agitée et maintenu à 70°C avec une hélice pendant 3h, puis la solution a été centrifugée pour récupérer la fraction liquide (extrait brut). Le surnageant dc centrifugation a ensuite été concentré à un facteur de concentration volumique de 5 avant d'être précipité par deux volumes d'alcool absolu (éthanol) préalablement refroidi à -20°C. Après centrifugation, le précipité obtenu a été dissous dans une solution aqueuse (2 volumes d'eau pour 1 volume de précipité). [0049] Dans un second exemple, l'extrait brut a été traité par ultrafiltration à un seuil de coupure de 30 kDa sur une membrane en polyethersulfone. Le rétentat est collecté et constitue l'extrait utilisé dans l'application définie. Le perméat n'est pas conservé. Exemple 2. Analyse des extraits 100501 On a analysé les extraits redissous en eau. 100511 On a trouvé, pour un extrait, la composition suivante : 100521 Matière inorganique = 11.81% DW (matière sèche) 100531 Mannitol = 22.29% DW 100541 Fucoidanes = 25.61% DW 100551 Laminaranes = 41.86% DW 100561 Les pourcentages des différents composés étaient similaires pour d'autres extraits, obtenus à partir d'algues sèches ou fraîches quelle que soit la technique de purification utilisée (voir exemple 1). Exemple 3. Croissance en milieu liquide 100571 On a déterminé l'effet de l'ajout dans un milieu de culture solide, des extraits d'algues sur la cinétique de croissance de sept espèces bactériennes à effet PGPR ( Plant-Growth Promoting Rhizobacteria) reconnu : Bacillus megaterium, Bacillus subtilis, Rhizobium leguminosarum, Azotobacter vitzelattaii, Pseudomonas fluorescetts, 8 Pseuclomonas Jùlva, Arthrobacter agilis. [0058] Le milieu de culture nutrient hroth NB (Sigma-Aldrich) à 25g/L a été utilisé pour la multiplication des bactéries suivantes : Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Arthrobacter agilis, Pseuclomotzas fluorescens, Pseudotnonas fulva. Le milieu YMA (Sigma-Aldrich)) sans agar a été utilisé pour la bactérie Rhizobium legumituisarum. [0059] Des tests en rnicroplaques de 96 puits stériles à fonds ronds ont été effectués. Une ab- sorbance comprise entre 0,06 à 0,08 (600 nm) pour l'inoculation des bactéries dans la microplaque a été retenue dans le cadre de ces essais. [0060] L'ensemencement des tnicroplaques comprenait un blanc, un témoin positif, un témoin négatif et les échantillons. [0061] Témoin positif [0062] Le témoin positif était composé de bactéries et de milieu de culture optimum (nutrient hroth NB), afin de vérifier une bonne multiplication des bactéries se dans les microplaques. [0063] Témoin négatif [0064] Le témoin négatif était composé d'eau distillée stérilisée dépourvu d'éléments carbonés avec 200 de bactéries inoculées avec leur milieu de culture NB, afin de déterminer comment se comportait la croissance bactérienne dans un milieu appauvri en tout élément carboné. [0065] Blanc [0066] Le blanc était composé d'eau distillée dépourvu de bactéries afin de déterminer les éventuelles variations d'absorbance et les potentielles contaminations bactériennes. [0067] Echantillons [0068] Les différents tests d'extraits d'algues étaient composés d'eau distillée stérile avec les solutions testées aux différentes concentrations (66[11) auxquelles étaient ajoutés 20[11 de bactéries. [0069] Les différents extraits d'algues testés sont : mannitol commercial, laminaranes commercial, composition selon l'invention (laminaranes extrait). [0070] Les figures 1 à 3 montrent une croissance des souches bactériennes en milieu liquide en utilisant uniquement l'extrait généré comme source de carbone pour différentes bactéries. [0071] Les tests ont permis de montrer que les bactéries sont arrivées à se multiplier avec pour seule source de carbone les extraits d'algues créant une cinétique de croissance bactérienne. En effet, une concentration de l'extrait à 0.5% permet une croissance se rapprochant des conditions optimales de croissance (témoin positifs) et montre également une croissance significativement supérieure au témoin négatif (sans source de carbone). Exemple 4. Croissance en milieu solide 9 [0072] L'utilisation de vermiculite minérale naturelle exfoliée permet de simuler une croissance en milieu solide. [0073] Quatre extraits d'algues et quatre bactéries ont été utilisés. [0074] L'extrait a été testé à deux différentes concentrations, 5% et 10% Deux expériences complémentaires ont été réalisées en parallèle : le dénombrement des bactéries à des temps donnés et la quantification de la quantité de carbone utilisée par les bactéries pour se développer. [0075] Dans ces expérimentations, 4g de vermiculite stérile (tamisée à 2mm afin d'homogénéiser le volume et la texture) dans des pots de 40m1 avec ajout du milieu souhaité ont été testés. Les sept extraits d'algues testés séparément dans de l'eau, le témoin positif représenté par du milieu nutritif « nutricnt broth (NB) », le témoin négatif représenté par l'eau seule et le blanc représenté par l'eau sans bactérie. [0076] Témoin positif [0077] Le témoin positif était composé de bactéries et de milieu de culture optimum dilué au 1/5 (nutrient broth NB), afin de vérifier que les bactéries se multiplient en condition de sol solide vermiculite. [0078] Témoin négatif [0079] Le témoin négatif était composé d'eau distillée stérilisée dépourvu d'élément carboné avec 2m1 de bactéries inoculées avec leur milieu de culture NB dilué au 1/5, afin de déterminer comment se comporte la croissance bactérienne en milieu solide dans un milieu appauvri en tout élément carboné. [0080] Blanc [0081] Le blanc était composé d'eau distillée dépourvu de bactéries afin de déterminer les éventuelles variations d'absorbance et les potentielles contaminations bactériennes. [0082] Echantillons [0083] Les différents tests d'extraits d'algues étaient composés d'eau distillée stérile avec les solutions testées aux différentes concentrations avec un volume constant de 6.6m1 et 2m1 de bactéries. [0084] Les mesures ont été faites après quatre durées d'incubation, T0h, T24h, T48h et T? 2h. [0085] Les solutions d'extraits cf algues ont été diluées à 1% pour le mannitol standard (MS) et l'alginate commercial (AC) et à 2% pour les laminaranes standard (LS) et composition selon l'invention (laminaranes extrait (LE)). [0086] Le dénombrement bactérien a été effectué en utilisant 5g de chaque pot, ajouté dans un tube contenant 45m1 d'eau physiologique (9g NaC1 pour 11 d'eau). Des dilutions ont été réalisées à 10-2, 105, 10-4 (T0h) et 10-5, 1O6 et 10-' (autres durées) dans 900j4L d'eau physiologique avec une dilution en cascade en prélevant 100'11 de la solution précédente. On a étalé 1000 de chaque dilution sur milieu R2A et compté les colonies après incubation de 48h. [0087] La quantification de carbone a été effectuée avec un conductirnètre permettant la mesure d'une conductivité électrique et thermique. Le carbone organique se minéralise sous la forme de CO, piégé par l'hydroxyde de sodium. Le piégeage du carbone a été effectué avec de l'hydroxyde de sodium à 0,5N afin de piéger le carbone dégagé par les bactéries. La conductivité mesurée reflète la quantité de carbone piégé. [0088] La composition selon l'invention montre en fin d'expérimentation une croissance de la bactérie − megaterium supérieure à la croissance observée sans extrait (0) et avec un extrait standard (extrait LS). Exemple 5. Croissance in vivo [0089] On effectue des expériences in vivo sous serre. [0090] L'essai est conduit en serre sur plants de laitue. [0091] L'essai a été conduit avec des pots de 7,5 L. La fertilisation est fixée au préalable sans ajouts pendant l'essai. Des bactéries bénéfiques ont été apportées au sol par arrosage en début d'essai. [0092] Les bactéries sélectionnées sont Bucillus tnegaterium, Pseudontonas ftdva et Rhizobium leguminasorum. [0093] - Les extraits d'algues ont été apportés par arrosage avec une fréquence heb- domadaire. [0094] Des tests de détection et quantification ciblés (qPCR) pour ces bactéries bénéfiques ont été développés. [0095] En parallèle, un test de quantification moléculaire de la biomasse bactérienne totale présente dans un échantillon (marqueur 16S) a aussi été utilisé dans le cadre de cette étude. [0096] Les solutions d'extraits d'algues ont été diluées à 2% pour les lamimu-anes standard (LS) et l'extrait selon l'invention. [0097] Plantes [0098] Étape sur sol avec plants de laitue : [0099] L'essai a été organisé en 3 modalités avec 10 répétitions indépendantes d'une plante. [0100] Les deux extraits, appliqués avec 3 bactéries bénéfiques évalués au cours de l'essai ont été comparés à 1 modalité témoin : apport des bactéries seules. [0101] Les modalités sont les suivantes : [0102] 11 [Tableaux 1] Modalité Sol Nu/ Avec Plant Traitement % Bactéries Analyses Marqueurs Paramètre plants 1 Avec Plant Extrait 1 Mix 3 bactéries 4 points ci- nétiques (en cours et fin d'essais) : 165 et 3 marqueurs cibles Poids frais Matière séchcs 30% 2 Avec Plant Extrait 2 Mix 3 bactéries 4 points ci- nétiques (en cours et fin d'essais) : 165 et 3 marqueurs cibles Poids frais Matière séche 30% 3 Avec Plant Eau Mix 3 bactéries 4 points ci- nétiques (en cours et fin d'essais) : 16S et 3 marqueurs cibles Poids frais Matière séche [0103] Les premiers résultats montrent une amélioration de la croissance des plantes. 12 [Revendication 1] REVENDICATIONS[Revendication 2] [Revendication 3] Extrait d'algues brunes, caractérisé en ce qu'il comprend entre 15 et 25% de mannitol, entre 35 et 45% de laminarancs et entre 20 et 30% de fucoidanes. Extrait d'algues brunes, caractérisé en ce qu'il se présente sous la forme de solution aqueuse ou de poudre soluble dans un milieu aqueux. Méthode d'obtention d'un extrait d'algues brunes selon l'une des revendications 1 à 2, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes de a. Broyage d'un échantillon d'algues brunes, h. Suspension du broyat dans une solution acide pendant une durée supérieure à 2 heures c. Récupération de la fraction liquide. [Revendication 4] Méthode selon la revendication 3, caractérisée en ce qu'il comprend également les étapes ultérieures de : d. Génération d'un précipité par ajout d'alcool dans la fraction liquide récupérée en c. c. Récupération du précipité f. Suspension du précipité dans une solution aqueuse, séchage et/ou lyophilisation du précipité. [Revendication 5] Méthode selon la revendication 3, caractérisée en ce qu'il comprend également les étapes ultérieures de : d. Filtration de la fraction liquide récupérée en c. c. Récupération du retentit après filtration f. Suspension du retentit dans une solution aqueuse, séchage et/ou lyophilisation du retentit. [Revendication 6] Méthode selon l'une des revendications 3 à 5, caractérisée en ce que l'échantillon d'algues brunes de l'étape a) est un échantillon d'algues brunes sèches. [Revendication 7] Extrait d'algue brune, susceptible d'être obtenu par un procédé selon l'une des revendications 3 à 6. [Revendication 8] Procédé pour améliorer la croissance de plantes comprenant l'étape d'administration d'un extrait d'algues brunes selon l'une des revendications 1 à 2 ou 7 sur le milieu sur lequel les plantes sont cultivées. [Revendication 9] Procédé pour améliorer la croissance de bactéries, comprenant l'étape d'administration d'un extrait d'algues brunes selon l'une des reven- 13 [Revendication 10] [Revendication 11] dications 1 à 2 ou 7 dans le milieu de culture des bactéries. Composition biostimulante ou fertilisante comprenant un extrait d'algues brunes selon l'une des revendications 1 à 2 ou 7. Utilisation d'un extrait d'algues brunes selon l'une des revendications 1 à 2 ou 7 pour la préparation d'une composition biostimulante ou fertilisante.