FR 3100332 A1 20210305 FR 1909601 A 20190830 Description Titre de l'invention : Méthodeet dispositifdecaractérisation optique de particules Domaine technique [0001] La présente description concerne une méthode et un dispositif de caractérisation optique de particules et concerne en particulier la détermination de la polarisabilité optique dipolaire complexe de particules de tailles nanométriques et micrométriques et des sections efficaces d'absorption, d'extinction ou de diffusion. Etat de la technique [0002] Certaines particules, telles que par exemple les nanoparticules (NPs) métalliques, présentent des effets de résonances plasmoniques localisées autour de la gamme visible /infrarouge et ont été largement étudiées pour des applications en nanophotonique comme par exemple le confinement de la lumière ou la génération de chaleur à l'échelle nanométrique pour des applications en catalyse, biomédecine ou biodétection. Récemment, des matériaux alternatifs pour les particules ont été proposés, que ce soit en plasmonique ou pour l'étude des résonances de Mie. Ces matériaux comprennent par exemple des alliages, des matériaux semi-conducteurs, des oxydes, des nitrures et des diélectriques. [0003] Un défi majeur consiste à quantifier les propriétés optiques de l'ensemble de ces particules, telles que leur polarisabilité et sections efficaces de diffusion, d'absorption et d'extinction, qui sont reliées à la façon dont les électrons oscillent dans les particules en présence de lumière, et à comparer ces réponses optiques entre elles. Ce problème reste entier aujourd'hui que ce soit en plasmonique, en nanophotonique et pour la recherche et la caractérisation actives de nouveaux matériaux. [0004] Pour estimer quantitativement les propriétés optiques d'un matériau, ou d'une particule, e.g., sa capacité à exalter le champ proche optique, ou à générer de la chaleur, reliées respectivement à la section efficace de diffusion et à la section efficace d'absorption, des modèles analytiques peuvent être utilisés dans le cas de géométries simples, ou des simulations numériques dans le cas de géométries ou d'environnements complexes. Cependant, une particule constituée d'un certain matériau sera modélisée au moyen de sa permittivité optique macroscopique, généralement mesurée sur couches minces dudit matériau constituant la particule. Cette approche s'est révélée efficace pour la caractérisation de NPs en or, mais peut ne pas convenir si les particules sont constituées d'autres matériaux, qui présentent des effets de surface dominants ou des oxydations de surface. [0005] Expérimentalement, la caractérisation optique de NPs consiste généralement à 2 mesurer une section efficace d'extinction, comme décrit par exemple dans l'article [A. Arbouct et al., Direct Measurcment of the Single-Metal-Cluster Optical Absorption, Phys. Rev. Leu. (2004), 93, p. 127401]. [0006] Cependant, pour une caractérisation complète des propriétés optiques de particules, on cherche également à déterminer les sections efficaces de diffusion et d'absorption. Ces deux dernières grandeurs physiques sont plus difficiles d'accès et les méthodes proposées pour la mesure de chacune de ces grandeurs physiques requièrent en général des systèmes différents, parfois complexes et souvent basés sur des approximations (particules petites devant la longueur d'onde par exemple). [0007] De façon intéressante, la polarisabilité optique dipolaire complexe n est définie par la relation : [0008] [Math.1] p = £ 017 E0 [0009] où P est le moment dipolaire électrique, E 0 est la permittivité du vide, et E0 l'amplitude complexe du champ électrique de la lumière incidente, et est un paramètre plus fondamental de caractérisation d'une particule dipolaire, à partir duquel l'ensemble des sections efficaces peuvent être déterminées selon les équations : [0010] [Math.2] aexr = n-hu ( a ) [0011] [Math.3] k4 s c 6 Tir [0012] [Malh.4] aahs = Cf PX t aSea [0013] où " est l'indice optique de l'environnement de la particule, et k est le vecteur d'onde et s'exprime selon l'équation : [0014] [Math.5] k = 2 n I À 0 [0015] où X0 est la longueur d'onde de la lumière dans le vide. [0016] Ainsi, la mesure de la polarisabilité complexe peut fournir toutes les informations relatives aux propriétés optiques d'une particule. En outre, elle ne quantifie pas seulement l'amplitude de l'oscillation des électrons dans la particule, mais aussi leur phase, une quantité physique importante en plasmonique. [0017] Des travaux antérieurs visant à déterminer la polarisabilité dipolaire de NPs ont été rapportés. [0018] Davis et al. [B.J. Davis et al., "Robust determination of the anisotropie pohuizability of nanoparticles using coherent confocal microscopy", Journal of the Optical Society 3 of America A (2008), 25, pps. 2102-21131, par exemple, ont montré une méthode de détermination de la polarisabilité anisotrope par microscopie confocale cohérente. Cette méthode permet d'estimer à la fois la polarisabilité complexe et la position d'une NP. Cependant, la méthode décrite est complexe tant du point de vue de la configuration expérimentale utilisée que du fait de la procédure d'extraction de la polarisabilité. Plus précisément, la méthode expérimentale est basée sur l'utilisation d'un microscope confocal et la méthode d'extraction de la polarisabilité utilise un algorithme d'inversion pour optimiser l'estimation de la polarisabilité à partir des données mesurées. [0019] La présente description propose une méthode de caractérisation optique complète de particules, permettant notamment une mesure quantitative de la polarisahilité dipolaire complexe et des sections efficaces d'absorption de diffusion et d'extinction, sans aucune connaissance préalable sur leur composition et leur géométrie et avec un montage expérimental plus simple que ceux proposés dans l'état de l'art. Résumé de l'invention [0020] Selon un premier aspect, la présente description concerne une méthode dc caracté- risation optique de particules. [0021] La méthode selon l'invention permet par exemple la détermination quantitative de la polarisahilité optique complexe dipolaire d'au moins une particule présente dans un échantillon. [0022] Selon un premier aspect dc la présente description, la méthode comprend : [0023] le positionnement de l'échantillon dans l'espace objet d'un système optique ; l'éclairage dudit échantillon au moyen d'un faisceau lumineux ; l'acquisition d'au moins une image en phase et d'au moins une image en intensité de ladite au moins une particule éclairée par le faisceau lumineux, l'acquisition étant faite dans un plan d'analyse agencé dans l'espace image du système optique ; la détermination d'au moins une propriété optique de ladite au moins une particule à partir desdites acquisitions desdites au moins une image en phase et en intensité. [0024] Par « particule », on comprend dans la présente description et dans les revendications un objet confiné dans les trois dimensions de l'espace et contenu dans le champ de vue du système optique. Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la particule est une nanoparticule (NP) ou une microparticule. Par exemple, toutes les dimensions de la particule peuvent être comprises entre 10 nm et 500 nm. Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la particule est de nature biologique (végétale, animale, procaryote, eukaryote, unicellulaire, multicellulaire) ou inerte (métallique, diélectrique, minérale, semiconductrice). Par exemple, la particule peut être un organisme vivant, tel qu'une bactérie, ou un objet inerte, tel qu'une particule métallique comme par exemple une nanoparticulc d'or. [0025] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la méthode selon l'invention peut s'appliquer à des particules isolées et/ou regroupées pour former, par exemple, un agglomérat ou un réseau régulier ou non de particules. [0026] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, l'au moins une particule est présente dans l'échantillon sous la forme d'une suspension ou déposée sur un substrat, tel qu'une lamelle de verre. Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, l'échantillon comprend une pluralité de particules, dont certaines sont présentes sous la forme d'une suspension et d'autres sont déposées sur un substrat. [0027] Par images en phase et en intensité, on comprend une répartition spatiale bidimen- sionnelle respectivement de la phase et de l'intensité du champ électromagnétique dans ledit plan d'analyse. [0028] La phase du champ électromagnétique en un point du plan d'analyse est comprise au sens large dans la présente description et comprend généralement toute quantité reliée à la dite phase, comme toute quantité proportionnelle à la différence de marche (ou « ddm », ou OPD, selon l'appellation anglo-saxonne, pour Optical Path Difference) subie par un rayon transmis ou réfléchi par l'échantillon et incident au dit point en présence de la particule caractérisée, en comparaison du cas où la particule est absente, ou toute quantité proportionnelle au gradient local du front d'onde optique. [0029] Les déposants ont montré qu'il était possible d'obtenir par une méthode expé- rimentale simple, une caractérisation quantitative et complète de particules comprenant notamment la détermination d'une propriété optique dont l'une au moins parmi la polarisabilité complexe et les trois sections efficaces. [0030] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, ladite propriété optique comprend au moins l'une de la polarisabilité dipolaire complexe, la section efficace d'absorption, la section efficace de diffusion, la section efficace d'extinction. [0031] Par « polarisabilité », dans les revendications et la description, on entend la polari- sabilité optique complexe dipolaire. De façon générale, la polarisabilité est un scalaire défini par l'équation (1). La mesure d'un seul scalaire pour la polarisabilité peut convenir par exemple aux particules isotropes. Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la particule considérée n'est pas isotrope et la méthode de l'invention vise à déterminer un tenseur de polarisabilité optique dipolaire. La méthode peut alors comprendre la détermination d'autant de mesures scalaires qu'il y a de composantes dans le tenseur. De telles composantes du tenseur de polarisabilité sont associées à des dimensions de l'espace dans lequel la polarisabilité de la particule est considérée. Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, lorsque l'on considère, par exemple, le cas d'une particule possédant une polarisabilité pouvant s'exprimer comme un tenseur comportant 4 composantes dans un repère orthogonal (x, y), les composantes du tenseur peuvent être mesurées par la méthode, en variant l'orientation de la polarisation linéaire du faisceau lumineux éclairant l'échantillon via un polariseur (polariseur en illumination), et en variant l'orientation d'un polariseur linéaire placé entre l'échantillon et l'espace image du système optique (polariseur en détection), par exemple juste en amont de l'espace image du système optique. Par exemple, pour obtenir le terme scalaire a a x (resp. ayy . la méthode comprend l'orientation des deux polariseurs (en illumination et détection) suivant la même direction x (resp. Y), et la détermination de la polarisabilité dans cette condition. Pour obtenir le terme diagonal a y (resp. a x), l'échantillon est illuminé avec une lumière polarisée suivant x(resp. Y), le polariseur en détection est orienté suivant l'autre direction Y (resp. x), et la polarisabilité est déterminée dans cette condition. [0032] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la méthode comprend l'acquisition d'une image en phase et d'une image en intensité de façon simultanée. Une telle simultanéité peut par exemple permettre d'accélérer le temps de mesure de la méthode de l'invention, et peut s'avérer pratique dans le cas de particules dont les propriétés optiques évoluent dans le temps. Alternativement, mais de façon toutefois combinable, l'acquisition d'au moins une image en phase et d'au moins une image en intensité peut ne pas être simultanée. Par exemple, dans le cas où la propriété optique de la particule varie peu ou pas du tout au cours du temps, une telle simultanéité n'est pas requise. [0033] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, le plan d'analyse est conjugué op- tiquement avec le plan de l'échantillon. Une défocalisation, c'est à dire une mesure dans un plan qui s'écarte du plan d'analyse, n'affecte cependant pas la justesse de la mesure, car la valeur mesurée des propriétés optiques telles que la polarisabilité a et les sections efficaces est indépendante de la mise au point.. [0034] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, le système optique comprend un système optique en transmission. Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, le système optique comprend un système optique en réflexion. [0035] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, l'éclairage de l'échantillon est au moins partiellement spatialement cohérent et obtenu à partir d'une source lumineuse non cohérente, par exemple une LED, une lampe à filament, une lampe à plasma entretenu par laser (LDLS). Un dispositif permettant l'ajustement de l'ouverture numérique de l'éclairage peut par exemple contribuer à faire varier le degré de cohérence spatial de l'éclairage. Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, l'éclairage comprend une illumination de Kôhler. [0036] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la détermination de la propriété 6 optique comprend un traitement effectué à partir des acquisitions desdites au moins une image en phase et en intensité. Un tel traitement peut par exemple comprendre le traitement mathématique d'une image en phase et d'une image en intensité, pour aboutir à la production d'une image de combinaison, i.c., une image combinant des informations reliées à la phase et à l'intensité. [0037] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la détermination de l'au moins une propriété optique comprend une sommation de pixels d'une telle image de combinaison, dans un champ donné de ladite image de combinaison. L'image de combinaison peut comprendre des tâches d'Airy, correspondant à la détection d'autant de particules présentes dans l'échantillon. [0038] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la sommation de pixels s'effectue sur une zone restreinte de l'image de combinaison, comprenant une tâche d'Airy, par exemple la zone minimale permettant de recouvrir l'ensemble des anneaux de diffraction de la tâche d'Airy. [0039] Dans la mesure où tous les anneaux de diffraction de la tâche d'Airy sont contenus dans la zone de l'image de combinaison sur laquelle se fait la sommation de pixels, la méthode pourra offrir une détermination précise de l'au moins une propriété optique. Lorsque la sommation se fait sur une zone contenant plusieurs tâches d'Airy correspondant à autant de particules, alors l'ensemble desdites particules pourra être considéré en tant que système multiple. La méthode permet de déterminer la polarisabilité et les sections efficaces d'un tel système multiple, car la polarisabilité et les sections efficaces sont additives. [0040] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, l'acquisition d'au moins une image en phase et d'au moins une image en intensité est réalisée par interférométrie à décalage quadrilatéral. L'interférométrie à décalage quadrilatéral permet, en une seule mesure, une détermination quantitative de la phase et de l'intensité avec une haute résolution et une sensibilité élevée. [0041] D'autres méthodes sont envisageables pour la formation des images en phase et en intensité : les plus communes concernent la famille des microscopies holographiques avec des géométries "hors axe" (DHM pour Digital Holographic Microscopy, Hilbert Phase Microscopy, ) ou "cornillon path" (Fourier Phase Microscopy, Diffraction Phase Microscopy) ; on peut aussi utiliser des méthodes de type "phase-shirting interferometry" ; enfin, il existe aussi une technique non interférométrique basée sur l'équation du transport d'intensité (TIE microscopy). [0042] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la méthode comprend en outre la variation de l'ouverture numérique dudit système optique et l'acquisition d'une pluralité d'images en intensité et/ou d'images en phase aux différentes ouvertures numériques. Par exemple, le système optique peut comprendre un iris, dont la rotation 7 permet de faire varier l'ouverture numérique du système optique. Acquérir des images en intensité et en phase à différentes ouvertures numériques et les moyenner permet de réduire l'extension spatiale des anneaux de diffraction d'une tâche d'Airy, et donc d'intégrer une zone de l'image (e.g., en effectuant une sommation de pixels de l'image) comprenant la tâche d'Airy moins étalée, et de gagner ainsi en rapport signal sur bruit. Cela peut par exemple permettre d'étudier des particules très proches les unes des autres et comportant des anneaux d'Airy qui se chevaucheraient sans un tel moyennage. De plus, lorsqu'une image de combinaison est produite à partir d'une acquisition d'une image en phase et d'une acquisition d'une image en intensité, un gain de IN peut être obtenu dans le rapport signal sur bruit, où N est le nombre d'images de combinaison produites aux différentes ouvertures numériques. [0043] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, la méthode comprend en outre l'acquisition d'une pluralité d'images en intensité et/ou d'images en phase pour une pluralité de mises au point du système optique. Par exemple, lorsque le système optique comprend un objectif de microscope, la mise au point peut être modifiée en changeant la distance entre l'échantillon et l'objectif du microscope vers des distances hors-focus. Acquérir des images en intensité et en phase pour différentes mises au points et les moyenner permet de réduire l'extension spatiale des anneaux de diffraction d'une tâche et donc d'intégrer une zone de l'image (e.g., en effectuant une sommation de pixels de l'image) comprenant la tâche d'Airy moins étalée, et de gagner ainsi en rapport signal sur bruit. Cela peut par exemple permettre d'étudier des particules très proches les unes des autres et comportant des anneaux d'Airy qui se chevaucheraient sans un tel moyennage. Par exemple, lorsqu'une image de combinaison est produite à partir d'une acquisition d'une image en phase et d'une acquisition d'une image en intensité, un gain de IN peut être obtenu dans le rapport signal sur bruit, où N est le nombre d'images de combinaison produites aux différentes mises au point. [0044] Selon un deuxième aspect, la présente description concerne un dispositif de caracté- risation optique d'au moins une particule présente dans un échantillon comprenant : [0045] - une source lumineuse pour la formation d'un faisceau d'éclairage dudit échantillon ; - un système optique, l'échantillon étant, en opération, positionné dans un espace objet dudit système optique ; [0046] - des moyens d'acquisition d'au moins une image en phase et d'au moins une image en intensité de ladite au moins une particule éclairée par le faisceau lumineux, l'acquisition étant faite dans un plan d'analyse situé dans l'espace image du système optique. [0047] - une unité de calcul configurée pour la détermination d'au moins une propriété optique de ladite au moins une particule à partir desdites acquisitions desdites au moins 8 une image en phase et en intensité. [0048] Par exemple, la source lumineuse peut être un dispositif de Kiihler. Une illumination de Kiihler comportant une LED ou une lampe à filament est utilisée pour illuminer un échantillon avec un faisceau lumineux contrôlé en taille et en ouverture numérique. Différentes couleurs de LEDs sont utilisées pour sélectionner la plage de longueur d'onde d'illumination. Une telle longueur d'onde peut être alternativement variée en utilisant une source de lumière blanche et un monochromateur. [0049] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, les moyens d'acquisition comprennent un interféromètre à décalage quadrilatéral. [0050] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, le plan d'analyse est conjugué op- tiquement avec le plan de l'échantillon ou faiblement défocalisé. [0051] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, le système optique comprend un objectif de microscope. [0052] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, le système optique comprend des moyens permettant de varier l'ouverture numérique de l'illumination et ladite unité de calcul est configurée pour la détermination de ladite au moins une propriété optique à partir d'une pluralité d'images en phase et en intensité acquises pour une pluralité d'ouvertures numériques. Par exemple, le système optique peut comprendre un iris, dont la rotation permet de faire varier l'ouverture numérique du système optique. [0053] Selon un ou plusieurs exemples de réalisation, le système optique comprend des moyens permettant de varier la mise au point et ladite unité de calcul est configurée pour la détermination dudit au moins une propriété optique à partir d'une pluralité d'images en phase et en intensité acquises pour une pluralité de mises au point. [0054] Les formes de réalisation décrites ci-dessus ne sont pas exhaustives. Notamment, il est entendu que des formes de réalisation supplémentaires peuvent être envisagées sur la base de différentes combinaisons des formes de réalisation explicitement décrites. Sauf spécification contraire dans la présente description, il sera apparent pour l'homme du métier que toutes les formes de réalisation décrites ci-dessus peuvent être combinées entre elles. Par exemple, sauf spécification contraire, toutes les caractéristiques des formes de réalisation décrites ci-dessus, quelles que soient les formes de réalisation de la méthode ou du dispositif auxquelles elles se réfèrent, peuvent être combinées avec ou remplacées par d'autres caractéristiques d'autres formes de réalisation. [0055] Des formes de réalisation selon les aspects référencés ci-dessus ainsi que des avantages supplémentaires apparaîtront à la lecture de la description détaillée suivante et des revendications annexées. Brève description des figures 9 100561 Ifie.11 représente : Schéma d'un système d'imagerie par QLSI. Une illumination de Kiihler comportant une LED est utilisée pour illuminer un échantillon avec un faisceau lumineux contrôlé en taille et en ouverture numérique. Différentes couleurs de LEDs sont utilisées pour sélectionner la plage de longueur d'onde d'illumination. L'échantillon peut. être composé d'objets de taille micro et/ou manométrique. [0057] [fig.2] rcprésentc : (a) Images d'intensité et d'OPD d'une NP d'or de 100 nm de diamètre (Echelle : 1 pm) ; (h) Profils d'intensité correspondants. [0058] [fig.3] rcprésentc : Polarisahilités de nanoparticulcs d'or de 100 nm mesurées expéri- mentalement dans le domaine visible. (a) Partie réelle, (b) Partie imaginaire, et (c) argument de la polarisabilité. Les mesures ont été réalisées en milieu homogène avec un indice de réfraction de 1,5. Les résultats expérimentaux sont comparés à la théorie de Mie. [0059] [fig.4] rcprésentc : Polarisahilités mesurées de NPs d'or et de polystyrène dispersées sur le même substrat en verre, représentées dans le plan complexe. Le gradient grisé code le diamètre des nanosphères d'or. (h) Mesures (points) et calculs (lignes pleines, par DDA (Discrete Dipole Approximation)) de la partie imaginaire de la polarisabilité de nanosphères d'or et de polystyrène en fonction de leur diamètre. Images (c) SEM, (d) OPD (phase), (e) intensité des NPs d'or et de polystyrène. Les particules d'or sont indiquées avec un ergot et celles en polystyrène avec une flèche. Echelle : 2 pm. [0060] [fig.5] rcprésentc : (a) Images d'intensité et d'OPD de NPs d'or de 100 nm à dif- férentes position Z de l'échantillon, avec leurs profils. (b) Partie réelles et imaginaires de la polarisabilité pour différentes positions montrant l'absence d'effet du défocus du microscope sur l'estimation de a . Echelle : 1 pm. [0061] [fig.6] représente : (a) Images d'intensité et d'OPD de nanoparticules d'or mesurées avec différentes ouvertures numériques de l'objectif. (b) Parties réelles et imaginaire de la polarisabilité mesurées à partir de ces images, montrant l'absence d'effet de l'ouverture numérique sur la détermination de la valeur de polarisabilité. [0062] [fig.7] représente : (a) Image SEM de nanobâtonnets d'or, (b) Partie réelle, (c) Partie imaginaire, et (d) argument de la polarisabilité selon les axes court et long des bâtonnets. La polarisabilité mesurée est comparée à celle calculée par DDA. [0063] [fig.8] représente : (a) Image SEM de nanobâtonnets d'or, (b) Partie réelle, (c) Partie imaginaire, et (d) argument de la polarisabilité selon les axes court et long des bâtonnets. La polarisabilité mesurée est comparée à celle calculée par DDA. Description détaillée [0064] Dans la description détaillée suivante des formes de réalisation de la présente invention, de nombreux détails spécifiques sont exposés afin de fournir une compréhension plus approfondie de la présente description. Cependant, il apparaîtra à l'homme du métier que la présente description peut être mise en oeuvre sans ces détails spécifiques. Dans d'autres cas, des caractéristiques bien connues n'ont pas été décrites en détail pour éviter de compliquer inutilement la description. [0065] Par ailleurs, le terme « comprendre » signifie la même chose que « inclure », « contenir », et est inclusif ou ouvert et n'exclut pas d'autres éléments non décrits ou représentés. En outre, dans la présente description, le terme « environ » est synonyme de (signifie la même chose que) une marge inférieure et/ou supérieure de 10%, par exemple 5%, de la valeur respective. [0066] La présente description décrit des exemples de traitement d'images d'intensité et de front d'onde (ou PIWI, pour « Processing of Tntensity and Wavefront Images ») de particules sous éclairage. [0067] Dans les exemples décrits ci-dessous, une technique d'imagerie de phase quantitative appelée interférométrie à décalage quadrilatéral (ou QLST, pour « Quadriwave Lateral Shcaring Interferometry) est utilisée, car elle permet à la fois une imagerie à haute résolution, une sensibilité élevée et une mesure de phase quantitative. Toutefois, d'autres techniques d'imagerie peuvent être utilisées dans des exemples de méthodes selon l' invention. [0068] Dans une première partie, le principe de hase de QLST est introduit. Dans une deuxième partie, il est expliqué comment utiliser PIWI pour récupérer la polarisabilité complexe de NPs simples. En particulier, il est montré que les mesures sont indépendantes de la mise au point, de l'ouverture numérique, et ne sont pas affectées par la limite de diffraction, ce qui rend les mesures particulièrement robustes et précises. Dans une troisième partie, les résultats sur les NPs en or (sphères et bâtonnets) et diélectriques sont présentés et discutés. Les mesures sont appuyées par des calculs théoriques et des simulations numériques. Une quatrième partie est consacrée à la caractérisation de couches denses de NPs, pour lesquelles un traitement d'images PIWI est également capable de récupérer une polarisabilité complexe effective. [0069] Première partie : L'interférométrie à décalage quadrilatéral LSI) - Principe de base de la QLSI [0070] L'interférométrie à décalage quadrilatéral (QLSI) est une technique optique capable de cartographier en une seule acquisition interférométrique non seulement l'intensité mais également le gradient de phase d'un faisceau lumineux donné en deux dimensions. Cartographier la phase d'un faisceau lumineux revient à cartographier le profil du fi-ont d'onde du faisceau lumineux ou, de manière équivalente, la différence de chemin optique (OPD) créée par un objet à l'étude. Une caméra de détection de front d'onde QLSI consiste en un réseau de diffraction bidimensionnel (2D) (généralement appelé masque de Hartmann modifié, MHM) situé à une distance millimétrique d'une caméra classique (cf. [J. Primot et al., "Extended Hartmann Test Based 11 on the Pscudoguiding Property of a Hartmann Mask Completed hy a Phase Chesshoard", Applied °pars (2000), 39, p. 5715]). Grâce au réseau, le front d'onde est reproduit en quatre copies identiques niais légèrement décalées, interférant les unes avec les autres, entraînant la formation d'un interférogramtne sur le capteur de la caméra. L'interférogramme est traité numériquement en temps réel (environ 1 image par seconde) pour récupérer les profils d'intensité et de front d'onde de la lumière incidente. La nature interférométrique des mesures rend cette technique extrêmement sensible. La caméra QLSI utilisée dans les exemples expérimentaux présentés ci-après comprend un réimageur Sid4 Flet-rient de Phasics© associée à un capteur Zyla© 5.5 sCMOS et présente une sensibilité de 0,1 nm Hz - ln. Il est important de noter que l'interférométrie QLSI bénéficie des avantages d'une mesure interférométrique sans souffrir de ses inconvénients : aucun faisceau de référence n'est requis comme pour d'autres techniques interférométriques, ni aucun alignement complexe sensible aux perturbations externes. Le positionnement relatif du MHM par rapport à la caméra est effectué une fois pour toutes et n'est pas sensible aux perturbations externes telles que la variation de température, la dérive mécanique ou le flux d'air. [0071] Plusieurs applications basées sur l'utilisation de QLSI, telles que l'imagerie cellulaire, l'imagerie thermique, et l'imagerie de matériaux 2D [S. Khadir et al. , "Optical Imaging and Charactcrization of Graphene and Other 2D Materials Using Quantitative Phase Microscopy", ACS Pholonics (2017), 4, p. 3130] sont déjà décrites. La métrologie sur NP apparaît comme une nouvelle application du QLSI et plus généralement de l'imagerie de phase quantitative. [0072] La configuration expérimentale combinant une caméra QLSI et un microscope optique est illustrée à la Figure 1. Une illumination de Kiihler a été utilisée pour éclairer l'échantillon avec une onde optique contrôlée (zone éclairée et ouverture numérique contrôlées). 17 LEDs de couleurs différentes ont été utilisées pour faire varier la longueur d'onde de l'éclairage et effectuer les mesures spectrales (405, 420, 430, 455, 470, 505, 530, 565, 590, 617, 625, 665, 680, 700, 730, 780, 850 nm). Dans chaque mesure, une image de référence a tout d'abord été prise sur une zone dégagée (sans aucun objet), avant d'acquérir une image avec l'objet d'intérêt dans le champ de vision, ce qui con-esponcl à l'approche conventionnelle en QLSI, destinée à éliminer toute imperfection du faisceau lumineux entrant. Le coefficient complexe de transmission normalisé t / t0 s'exprime selon l'équation 6 suivante, en fonction du coefficient complexe de transmission de l'échantillon sans particule I- o(x , y) et du coefficient complexe de transmission de l'échantillon en présence de la particule d'intérêt, i.e., t (X y) [0073] 12 [Math.6] t0 = -ireXp(i 2)176 i) [0074] 6 1(x, y) est la distorsion du front d'onde, ou de manière équivalente, la différence de chemin optique causée par la présence de la particule. est la transmittance de l'échantillon. À 0 est la longueur d'onde de la lumière dans le vide. 1. et S I sont les deux quantités cartographiées simultanément par QLSI à partir d'une seule mesure. QLSI permet ainsi de remonter à la transmission complexe t(x , y) d'un échantillon. [0075] Dans la section suivante, il est expliqué comment un traitement d'une image de t (x , y), c'est-à-dire un traitement des images d'intensité et de front d'onde (un traitement PIWI), peut être exécuté pour déterminer la polarisabilité complexe de particules de toute nature. [0076] Deuxième partie - traitement PIWI pour déterminer la polarisabilité d'une particule - [0077] Description (lu modèle théorique [0078] La polarisabilité dipolaire complexe a d'une NP est définie par l'équation 7 : [0079] [Math.71 1-1 = E ocr -Lex [0080] où kt est l'amplitude complexe du moment dipolaire électrique de la NP et -Fe); est l'amplitude complexe du champ électrique local. La NP est placée près d'une interface entre deux milieux semi-infinis, le milieu de la nanoparticule et le milieu du substrat, caractérisés respectivement par leurs indices de réfraction " et 11 s. Pour interpréter les images d'OPD et d'intensité et en extraire la polarisabilité complexe (en utilisant l'équation 6), il faut (l'abord modéliser quantitativement les images de la NP, en intensité et en phase, au microscope optique. À cette fin, un modèle quantitatif a récemment été publié, permettant de calculer le champ électrique complexe d'un dipôle oscillant au niveau du plan image d'un microscope [Khadir et al., " Quantitative model of the image of a radiating dipole through a microscope", Journal of the Optical Society of America A 36, 478-484 (2019)]. En utilisant ce modèle, une relation simple entre la polarisabilité complexe a d'une particule et la fonction t tx y' peut être déduite : [0081] [Math.8] a - (nk ils) cf (1 _ ,1± (x' y)) dxdy (c) 100821 où t / tu est le coefficient complexe de transmission normalisé et ' et Us sont les indices de réfractions respectivement de l'environnement de la particule et du substrat. 100831 Ainsi, on peut récupérer les parties réelle et imaginaire de la polarisabilité de toute particule unique en tant que fonctions de T(x, y) et ô Rx , y) en utilisant les 13 relations suivantes : [0084] [Math.9] ( k n + ns) - = (x, y ) sin ( k 061(x, y) )dxdy [0085] [Math.10] (n n b if [1 - (x, y )cos (koô 1(x, y ))dxdy [0086] Les deux mesures de T(x, y) et de 6 1(x, y) sont donc suffisantes pour dé- terminer la polarisabilité complexe. En pratique, il s'agit d'une somme de pixels sur la zone contenant l'image de la particule. Aucune hypothèse n'est nécessaire concernant la nature (diélectrique ou métallique) ou la forme de la particule. Seule est requise la connaissance préalable des indices de réfraction du milieu, " et n s, ainsi que de la longueur d'onde d'éclairement À o. [0087] Troisième partie - Résultats expérimentaux -Nanosphères d'or [0088] Afin d'illustrer l'applicabilité du formalisme et de la méthode décrits précédemment, cette section présente des mesures sur des NPs (nanosphères d'or) métalliques et isotropes dans un milieu homogène. Cc cas simple permet de comparer facilement les mesures avec des calculs théoriques utilisant la théorie de Mie. [0089] Des nanosphères d'or de 100 nm de diamètre ont été dispersées sur un substrat de verre puis recouvertes de glycérol (il = 1, 5, proche de l'indice du substrat de verre) afin d'obtenir un milieu homogène. Les mesures ont été effectuées avec une longueur d'onde incidente de À 0 = 530 nm. Comme la NP est isotrope, la polarisabilité ne dépend pas de l'état de polarisation de la lumière incidente et constitue une quantité physique scalaire. [0090] La Figure 2A montre les images d'OPD et d'intensité mesurées et la Figure 2B leurs profils respectifs. La taille de la particule étant inférieure à la limite de diffraction, son image s'apparente à une tâche d'Airy. La détermination des parties réelle et imaginaire de la polarisabilité selon les équations 9 et 10, comprend la sommation numérique des pixels d'une combinaison d'images OPD et d'intensité. Bien que, théoriquement, cette somme de pixels doive être effectuée sur une zone infiniment grande, il suffit expérimentalement de faire la somme, par exemple, sur un disque de rayon R choisi de manière à contenir tous les anneaux de diffraction. Dans le cas présent, la polarisabilité mesurée est u = (-2,03 ± 0,26)-106+ i (3,25± 0,26>106 nm3. La valeur calculée en utilisant la théorie de Mie, i.e., selon l'équation : [0091] [Math.11] - r6 7T 1 2 a t h - pi n. 7,3 a 1 o 14 [0092] où al est le coefficient de Mie dipolaire, est ad, = -1,59-106+ i 3,55.106 nm3, en accord avec les mesures. La légère différence entre les valeurs expérimentales et théoriques peut être expliquée par la dispersion en taille des NP colloïdales utilisées. [0093] Dans ce qui suit, des mesures spectrales de la polarisabilité complexe de la même NP d'or à 100 nm sur toute la plage visible sont présentées. Des images d'intensité et d'OPD de la NP ont été enregistrées par QLSI pour un ensemble de longueurs d'onde d'illumination différentes. Pour chaque longueur d'onde, la polarisabilité complexe a été extraite. Les mesures ont été effectuées dans un milieu homogène (NP recouvert de glycérol sur un substrat de verre) et les résultats comparés à la polarisabilité calculée en utilisant la théorie de Mie. Les parties réelles, imaginaires et l'argument de la polarisabilité sont illustrés aux Figures. 3a à 3c, respectivement. Les spectres de polarisabilité mesurés reproduisent bien ceux calculés. La partie imaginaire (section proportionnelle à l'extinction) présente un pic autour À rcs = 610 nm, ce qui correspond à la longueur d'onde de la résonance localisée du plasmon de surface (LSPR). Cette résonance est associée à une transition abrupte des valeurs de Re (a) et Arg (a). [0094] Particules métalliques versus particules diélectriques [0095] Dans cette section, la capacité du traitement PIWI à discriminer des NP de com- position différente est démontrée, ainsi que l'effet de la dispersion de taille de NP sur les polarisabilités mesurées. Des expériences ont été menées sur des nanoparticulcs d'or et de polystyrène dispersés de manière aléatoire sur le même substrat de verre. Les NPs proviennent de solutions colloïdales commerciales supposées être de forme et de taille monodisperses (nanosphères de 100 nm de diamètre pour l'or et de 200 nm pour le polystyrène). L'échantillon a été analysé par traitement PIWI pour déterminer la polarisabilité d'un ensemble de NPs sélectionnées de manière aléatoire. Les mesures ont ensuite été corrélées avec des images au microscope électronique à balayage (SEM), ce qui a permis de confirmer la nature des NPs ainsi que leurs tailles et morphologies réelles. Les résultats sont présentés dans la Figure 4. Les polarisabilités mesurées sont présentées sur le plan complexe (partie imaginaire par rapport à la partie réelle de la polarisabilité) dans la Figure 4a. Chaque point correspond à une NP. Les carrés noirs correspondent au polystyrène et les cercles grisés correspondent à l'or, comme déterminé par SEM. Des exemples d'images SEM en corrélation avec des images d'OPD et d'intensité sont présentés sur les Figures 4c, 4d et 4e, respectivement. Le contraste des NPs en polystyrène (indiqué par des flèches sur les images MEB) est inférieur à celui de l'or (indiqué par un ergot). On peut observer que les NPs en or et en polystyrène occupent deux domaines distincts du plan complexe (Figure 4a), associés à différentes dispersions des valeurs de polaiisabilité. Dans le cas de l'or, la dispersion ne provient pas d'erreurs de mesure. Elle provient principalement de la dispersion dans les diamètres de NP, qui varient de 110 nm à 140 nm selon les mesures au Microscope Electronique à Balayage (MEB). Cette conclusion est confirmée par le graphe de la Figure. 4h de l'évolution de la partie imaginaire de la polarisahilité en fonction du diamètre des nanosphères d'or, qui traduit une bonne corrélation. Ces mesures sont étayées par des simulations DDA (Discretc Dipole Approximation, ligne continue sur la Figure. 5b), technique numérique appropriée pour prendre en compte l'effet d'un substrat. Pour les NPs en polystyrène, la dispersion des mesures rapportée dans la Figure Sa est beaucoup plus large, ce qui s'explique par une dispersion importante en taille mais également en forme des particules, comme le révèlent les mesures au MEB. Ces résultats illustrent l'utilité du traitement PTWI et du travail dans le plan complexe de la polarisahilité a pour distinguer différents types de nanoparticules et quantifier leur dispersion morphologique. [0096] Indépendance de la mise au point (focus) [0097] Dans cette section est démontré, contre-intuitivement, que le changement de mise au point du microscope n'affecte pas l'estimation de la polarisahilité complexe. En d'autres ternies, les intégrations ou sommations de pixels des images d'une NP suivant les équations 9 et 10 sont indépendantes de la mise au point. Ceci peut être montré de manière théorique et les mesures confirment cette prédiction. L'effet du dcfocus sur la détermination de la polarisahilité d'une NP d'or à 100 nm a été déterminé en acquérant des images d'OPD et d'intensité à différentes positions 2, comme illustré à la Figure 5a. Comme prévu par la théorie, les images OPD et d'intensité dépendent fortement de la mise au point. Néanmoins, les parties réelles et imaginaires extraites de la polarisabilité pour chaque position de illustrées par la Figure 5b, ne montrent aucune dépendance vis-à-vis du defocus zplus grande que les barres d'erreur. [0098] Cette observation offre un moyen d'améliorer la précision des mesures de polari- sabilité en faisant la moyenne d'une série d'images d'intensité et d'OPD prises à différentes positions z(comme la moyenne de la série d'images présentée dans la Figure. 5a). Puisque toutes ces images donnent la même estimation a., leur moyenne donne toujours la même estimation, mais avec au moins deux avantages. Tout d'abord, un gain de IN est obtenu dans le rapport signal sur bruit, où N est le nombre d'images. Le second avantage est que la moyenne des images réduit l'extension spatiale des anneaux de diffraction de la tâche d'Airy, permettant ainsi la somme des pixels sur une zone réduite. Cela permet par exemple d'étudier des nanoparticules plus proches les unes des autres et comportant des anneaux d'Airy qui se chevaucheraient sans un tel moyennage. Dans le cas de la Figure 5, en utilisant cette méthode, la barre d'erreur de Re (a) a diminué de 4-10-3à 1,7.10-3 (en unité de ).3) lorsque la moyenne des polarisabilités est effectuée à différentes positions z. [0099] Indépendance de l'ouverture numérique [0100] Dans cette section, il est expérimentalement démontré que modifier l'ouverture 16 numérique (ON) de l'objectif du microscope n'affecte pas l'estimation de la polarisahilité complexe. Cet effet est également prédit par la théorie. Pour étudier expérimentalement l'effet de l'ON, des images d'OPD et d'intensité de NP d'or à 100 nm ont été enregistrées pour différentes valeurs d'ON à l'aide d'un objectif de microscope avec une variation d'ON de 0,6 à 1,3 (voir FIG. 6A). De toute évidence, le schéma de diffraction dépend fortement de l'ON utilisée. Néanmoins, l'ON n'affecte pas la polarisahilité complexe déterminée à partir des images, comme indiqué sur la Figure 6h. [0101] Le cas des nanoparticules anisotropes [0102] Cette section est consacrée à la mesure de la polarisahilité complexe de NPs ayant des formes anisotropes. Dans ce cas, les propriétés optiques de la NP dépendent de la polarisation de la lumière incidente. Ainsi, la polarisahilité de la NP n'est plus scalaire, niais correspond à un tenseur 2x2. [0103] Des nanobâtonnets d'or fabriqués sur un substrat de verre, comme indiqué sur la Figure 7a ont été étudiés. Les positions des nanobâtonnets sont aléatoires mais elles ont la même orientation. La densité de nanobâtonnets est relativement faible afin d'obtenir une séparation importante et de permettre la caractérisation de nanobâtonnets isolés. L'illumination étant à incidence normale, la méthode de mesure est concentrée dans ce cas à la mesure de la polarisahilité dans le plan. Pour la forme considérée, deux polarisations sont privilégiées : une le long du grand axe et une autre le long du petit axe du nanobâtonnet. Ainsi, les valeurs propres de la polarisahilité dans le plan peuvent être extraites, selon l'expression suivante : [0104] [Math.12] 0 xx 0 a a yy [0105] Pour ce faire, la lumière d'éclairage a été polarisée le long du grand axe (respectivement, de l'axe court) et les images d'OPD et d'intensité ont été enregistrées et traitées pour extraire a xx (respectivement a yy). Les Figures 7b à 7d montrent les spectres de parties réelles, imaginaires, et arguments de la polarisabilité le long des axes long et court des nanobâtonnets. À des fins de comparaison, les pohuisabilités calculées à l'aide de la méthode DDA ont été tracées sur les mêmes graphiques, ce qui montre également un bon accord avec les expériences. [0106] Ces résultats montrent qu'un traitement PIWI est également apte à caractériser des structures plus complexes que des sphères. [0107] Traitement PIWI pour déterminer la polarisabilité d'une distribution dense de nano- particules [0108] Dans la section précédente, des NPs clairsemées, séparées par des distances beaucoup plus grandes que la limite de diffraction optique, ont été considérées, ce qui a 17 permis d'étudier des NP uniques. En pratique, les applications n'impliquent pas toujours des NP isolées niais des distributions parfois denses et uniformes, réalisées par exemple par lithographie par faisceau d'électrons, par lithographie micellaire à copolymère bloc, par lithographie par nanosphères, etc. Dans cc cas, la couche de NPs peut être vue comme un support 2D efficace caractérisé par une polarisabilité 2D effective a 21) qui a la dimension d'une longueur (et non d'un volume). La caractérisation des systèmes 2D est plus facile et plus courante dans la littérature que l'étude d'une seule NP. En particulier, des mesures basées sur la transmission et la réflexion combinées à des équations de Fresnel modifiées ont déjà été rapportées dans la littérature pour caractériser les propriétés optiques des couches. [C.E. Holloway et al., "A discussion on the interprétation and characterization of metafilms/metasurfaces: The two-dimensional equivalent of metamaterials", Metatnaterials (2009) 3, p. 100], [A. Mendoza-Galvàn el al., "Optical response of supported gold nanodisks", Optics Express (2011), 19, p. 12093], [R. Ogier et al., "Ncar-Complete Photo Spin Selectivity in a Metasurface of Anisotropie Plasmonic Antennas", Physical Review X 5 (2015), 5, p. 041019], [G. Lavigne et al., "Susceptihility Dcrivation and Experimental Demonstration of Rcfracting Metasurfaces Without Spurious Diffraction", IEEE Transactions on A tztennas and Propagation (2018), 66, p. 1321]. Dans la prochaine section, il est démontré que l'interférométrie QLSI est également capable de caractériser une polarisabilité a 2D. [0109] Description du modèle théorique [0110] Les bases théoriques du traitement PIWI permettent de remonter à la polarisabilité linéaire effective d'une distribution dense de NPs. [0111] Ici, la distribution de NPs est considérée comme une couche uniforme et infiniment mince placée à l'interface entre deux milieux caractérisés par leurs indices de réfraction et 1't s. La couche 2D de NPs est décrite via sa polarisabilité complexe surfacique a 7D définie par l'équation : [0112] [Math.13] 132r) = E o a 2DE0 [0113] où P23 est l'amplitude complexe du vecteur de polarisation surfacique induite par la distribution 2D des NPs et E0 est l'amplitude du champ électrique incident. La dimension de :F2D est une longueur [m] et est liée à la polarisabilité effective d'une seule NP a en par a = p a eff, où P est la densité surfacique de NPs. Dans ce cas, a en n'est pas nécessairement la polarisabilité de la NP isolée, notamment si les NPs sont très proches les unes des autres et présentent un couplage optique en champ proche. La quantité mesurée dans ce cas est plutôt une polarisabilité effective de NP dans la couche. [0114] Ce système peut être modélisé à l'aide d'équations de Fresnel modifiées. Un tel 18 modèle a précédemment été utilisé pour déterminer la conductivité optique complexe 2D (ci 2D) de matériaux 2D (graphène et MoS2 (cf. [S. Khadir et al., "Optical -Imaging and Characterization of Graphene and Other 2D Materials Using Quantitative Phase Microscopy", ACS Phownics (2017), 4, p. 3130]). Une conductivité 2D est une autre quantité physique pouvant être utilisée pour caractériser un matériau 2D. Elle est définie comme suit J2r) = a 2DE, où J70 est le courant électronique 2D densité, et E est le champ électrique total à l'interface. Ces formalismes considèrent une illumination incidente normale et E est contenu dans la couche 2D. La conductivité optique complexe et la polarisahilité sont équivalentes, car elles sont liées par -1 + ( ken 2D)-11-1. En cas normale, 'dence normale le ni- a 2D = E DCRil + n s ) efficient de transmission t(x , y) d'un tel système est lié à la polarisabilité complexe a 913 comme décrit dans l'article 1S. Khadir et al., "Optical imaging and Characterization of Graphene and Other 2D Materials Usine Quantitative Phase Microscopy", ACS Photonics (2017), 4, p. 3130], par l'équation : 101151 1Math.141 2n t - ns+ n -ikoa 2D [0116] En normalisant cette quantité par la transmission en l'absence de la couche, à savoir : [0117] [Math.15] 2n to- ns+ n [0118] on obtient l'équation 16 suivante : [0119] [Math.16] t 1 t 0 - ik oa 2D 1 - n s n [0120] Ainsi, la polarisabilité complexe a 2H peut être exprimée en fonction du coefficient de transmission normalisé mesuré t / te par QLSI, selon l'équation [0121] [Math.17] a 2L) - i À 0(n ,s + n) t0 [0122] où [0123] [Math.18] 2rr t t i 2rr 5 t 0 1e À 0 101241 et où T et £5 I sont les images de transmission et OPD mesurées. 101251 Comme a 21) = P a eff, la polarisahilité effective d'une seule NP (qui prend en compte le couplage entre les NP dans la couche) peut être exprimée selon : 101261 19 [0127] [Math.19] eff IÀ 0(ns + n) 1-0 [0128] En utilisant peuvent être [Math.20] 2 p t l'équation 19, les parties réelles ar,eff et imaginaires a tett de a eff exprimées en fonction des quantités mesurées par QLSI, T et SI : r,eff À 0(n s + n) (7-r 1) 2Tr p Jr À sin si [0129] [Math.21] o(ns + n) Ce telt - 2n p 61)1 v1/2- cas (ro [0130] Résultats expérimentaux [0131] Les mesures ont été effectuées sur une distribution dense de nanobâtonnets d'or déposés sur un substrat de verre, comme indiqué sur l'image SEM de la figure 9. La densité surfacique des NPs est t = 1.9-10 s nm 2. Les mesures ont été effectuées pour les deux états de polarisation : le long des axes long et court du nanobâtonnet. Les parties réelles et imaginaires effectives estimées et l'argument de la polarisabilité utilisant le formalisme décrit ci-dessus sont illustrés aux Fig. 9 b, c et d respectivement. La Figure 9c montre que la partie imaginaire (proportionnelle à la section efficace d'extinction) reproduit bien les pics de résonance du plasmon le long des axes court et long du nanobâtonnet. Ces résonances sont représentées par une transition abrupte pour la partie réelle et l'argument de la polarisabilité. Ici aussi, les résultats expérimentaux sont comparés à la polarisabilité calculée pour un seul nanobâtonnet obtenue par DDA (les mêmes courbes de simulation que celle de la section précédente). L'accord est assez bon, montrant que la polarisabilité effective déterminée ici est équivalente à celle mesurée sur une NP isolé dans la section précédente. Toutefois, les valeurs de polarisabilité dans le cas d'une distribution dense de NPs sont légèrement supérieures à celles de NPs isolées, ce qui peut être attribué à la contribution du couplage optique en champ proche entre les NP. 20 REVENDICATIONS[Revendication I] Méthode de caractérisation optique d'au moins une particule présente dans un échantillon comprenant : - l'éclairage dudit échantillon au moyen d'un faisceau lumineux, l'échantillon étant positionné dans l'espace objet d'un système optique ; - l'acquisition d'au moins une image en phase et d'au moins une image en intensité de ladite au moins une particule éclairée par le faisceau lumineux, l'acquisition étant faite dans un plan d'analyse agencé dans l'espace image du système optique ; et - la détermination d'au moins une propriété optique de ladite au moins une particule à partir desdites acquisitions desdites au moins une image en phase et en intensité. [Revendication 2] Méthode selon la revendication 1, dans laquelle ladite propriété optique comprend au moins l'une de la polarisabilité dipolaire complexe, la section efficace d'absorption, la section efficace de diffusion, la section efficace d'extinction. [Revendication 3] Méthode selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans laquelle l'au moins une particule est une mmoparticule ou une microparticule. [Revendication 4] Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'au moins une image d'intensité et/ou l'au moins une image de phase sont produites au moyen d'un interféromètre à décalage quadrilatéral. [Revendication 5] Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant en outre l'acquisition d'une pluralité d'images en intensité et en phase à différentes ouvertures numériques. [Revendication 6] Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant l'acquisition d'une pluralité d'images en intensité et en phase pour une pluralité de mises au point du système optique. [Revendication 7] Dispositif de caractérisation optique d'au moins une particule présente dans un échantillon comprenant : - une source lumineuse pour la formation d'un faisceau d'éclairage dudit échantillon ; - un système optique, l'échantillon étant positionné, en opération, dans l'espace objet dudit système optique ; - des moyens d'acquisition d'au moins une image en phase et d'au moins une image en intensité de ladite au moins une particule éclairée par le faisceau lumineux, l'acquisition étant faite dans un plan d'analyse 21 [Revendication 8] agencé dans l'espace image dudit système optique ; et [Revendication 9] - une unité de calcul configurée pour la détermination d'au moins une propriété optique de ladite au moins une particule à partir desdites acquisitions desdites au moins une image en phase et en intensité. Dispositif selon la revendication 7, dans lequel les moyens d'acquisition comprennent un interféromètre à décalage quadrilatéral. [Revendication 10] Dispositif selon l'une quelconque des revendications 7 ou 8, dans lequel le système optique comprend un objectif de microscope. [Revendication 11] Dispositif selon l'une quelconque des revendications 7 à 9, dans lequel le système optique comprend une ouverture numérique variable et ladite unité de calcul est configurée pour la détermination de ladite au moins une propriété optique à partir d'une pluralité d'images en phase et en intensité acquises pour une pluralité d'ouvertures numériques. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 7 à 10, dans lequel ladite unité de calcul est contigu& pour la détermination de ladite au moins unc propriété optique à partir d'une pluralité d'images en phase et en intensité acquises pour une pluralité de mises au point.