FR 3099883 A1 20210219 FR 1909203 A 20190814 Description Titre de l'invention : Nanoparticules pour le traitement du cancer par rayonnement de radiofréquence Domaine technique [0001] La présente divulgation concerne une méthode pour traiter les tumeurs. En par- ticulier, l'invention concerne une nouvelle utilisation thérapeutique des nanoparticules en tant qu'agent sensibilisant au rayonnement de radiofréquence. L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation des nanoparticules en combinaison avec des rayonnements de radiofréquence pour le traitement de tumeurs, les radiofréquences induisant une hyperthermie de ladite tumeur comprenant les nanoparticules chez le patient. Technique antérieure [0002] En dépit de grandes avancées dans le traitement des cancers, les traitements utilisés en particulier dans les tumeurs solides présentent de nombreux effets secondaires considérables voire délétères. [0003] L'utilisation de la radiofréquence est de plus en plus proposée comme traitement al- ternatif. [0004] Les ondes radio pénètrent facilement les différents tissus et des zones profondes peuvent être atteintes. Les ondes induisent localement une agitation ionique qui déclenche des mouvements de friction moléculaire responsables d'une élévation thermique qui est transmise dans les tissus adjacents conduisant à une augmentation de la température interne des tissus entrainant l'endommagement voire la mort des cellules. La radiofréquence peut donc être utilisée soit pour induire une hyperthermie localisée dans la tumeur via une sonde spécifique conduisant à l'ablation des cellules tumorales, soit pour permettre de rendre la tumeur plus sensible à certains traitements. [0005] Bien que les cellules tumorales soient plus sensibles aux changements de température que les cellules saines, le traitement par rayonnement de radiofréquence ne permet pas de cibler une zone très spécifique. [0006] Pour remédier à cet inconvénient, des agents permettant d'absorber l'énergie des ondes et augmenter l'hyperthermie locale peuvent être utilisés. Ces agents, appelés agents sensibilisants sont par exemple les nanoparticules de silicium ou d'or ou des nanotubes de carbones (Tamarov K. P. et al. 2014, Scientific Reports, 4 :7034 ; Rejinov N. J. et al. 2015, Journal of Controlled Release, 204 :84-97). Les agents sont insérés dans les cellules tumorales et permettent ainsi suite au traitement par rayonnement de radiofréquence, une augmentation locale de la température spécifiquement dans les cellules tumorales. 2 100071 Cependant, ces agents présentent de nombreux inconvénients. Ils sont de taille élevée et ne ciblent pas spécifiquement les cellules tumorales. Ces agents doivent donc être injectés dans la tumeur. Par ailleurs, ces agents sont peu biocompatibles et difficiles à éliminer. De plus, ces agents ne sont pas adaptés pour une administration intraveineuse. [0008] Il reste donc un besoin de développer des agents sensibilisants ne présentant pas tous ces inconvénients. Résumé de l'invention [0009] De façon surprenante, les inventeurs ont montré que des nanoparticules comprenant une matrice non-conductrice et non-magnétique fonctionnalisée en surface par des cations métalliques tels que le gadolinium peuvent interagir de façon favorable avec des radiofréquences et provoquer une augmentation locale de la température, en particulier des cellules cancéreuses comprenant ces nanoparticules et bloquer ainsi la croissance tumorale. [0010] Ainsi, il est proposé unc nanoparticule pour une utilisation dans le traitement d'une tumeur par un rayonnement de radiofréquence chez un patient induisant une hyperthermie de ladite tumeur, caractérisée en cc que la dite nanoparticule comprend une matrice non-conductrice et non-magnétique et des cations métalliques ayant un numéro atomique Z supérieur à 40, ladite nanoparticule étant administrée avant le dit traitement par un rayonnement de radiofréquence. De préférence, la dite matrice est une matrice en polysiloxanc. Dc manière avantageuse, ladite nanoparticule pour l'utilisation telle que décrite précédemment comprend au moins un agent chélatant, de préférence le DOTA, DTPA, DOTAGA ou un de ses dérivés destiné à complexer les cations métalliques. Dans un mode particulier, les cations métalliques de la dite nanoparticule représentent plus de 10% de la masse de la dite nanoparticule, de préférence moins de 50 % de la masse de la dite nanoparticule, de manière encore plus préférée, les cations métalliques sont disposés à la surface de ladite matrice. Lesdits cations métalliques sont de préférence le gadolinium ou le bismuth. De manière avantageuse, la nanoparticule pour l'utilisation telle que décrite précédemment a unc taille inférieure à 10 nm, de préférence inférieure à 5nm. [0011] En particulier, la nanoparticule est utilisée pour le traitement d'une tumeur sé- lectionnée parmi le groupe consistant en une tumeur rénale, une tumeur des poumons, une tumeur hépatique, une tumeur du sein, une tumeur des os, la dite nanoparticule étant de préférence sous une forme adaptée pour une administration par voie intraveineuse, intratumonde ou par inhalation. [0012] L'invention concerne également un agent sensibilisant hypertherinique par radio- fréquence comprenant ladite nanoparticule telle que décrite précédemment. 3 Brève description des dessins [0013] D'autres caractéristiques, détails et avantages apparaîtront à la lecture de la des- cription détaillée ci-après, et à l'analyse des figures annexées, sur lesquelles : Fig. 1 [0014] [fig.1] représente la température (le transition de l'eau déionisée (can-é noir), (l'un milieu salin (triangle), d'un milieu salin en présence d'albumine (triangle renversé) et de la solution d'AGuIX (losange) sous un traitement par un rayonnement de radiofréquence à 27MHz. Fig. 2 [0015] [fig.2] représente la température de transition de l'eau déionisée, d'un milieu comprenant de l'yttrium, du gadolinium, du bismuth, du terbium, de l'AGuIX sous un traitement par un rayonnement de radiofréquence à 27 MHz. Fig. 3 [0016] [fig.3] représente des images en IRM de souris avant et après une injection intra- tumorale d'une solution saline d'AGuIX. Fig. 4 [0017] [fig.4] représente des images thermiques d'une souris pendant le traitement par un rayonnement en radiofréquence pendant 1, 5 et 10 min. Fig. 5 [0018] [fig.5] est un graphique (A) représentant la taille de la tumeur à différents temps après le traitement par un rayonnement de radiofréquence des différents groupes de souris contrôles (rond noir), injectées par voie intra-tumorale avec une solution comprenant des AGuIX (rond), injectées par voie nitra-tumorale avec une solution comprenant des AGuIX suivi d'un traitement radiofréquence (carré), (B) représentant la taille de la tumeur après le traitement par radiofréquence de souris injectées par voie intratumorale avec une solution saline suivi d'un traitement radiofréquence (carré), et de souris injectées par voie intra-tumorale avec une solution comprenant des AGuIX suivi d'un traitement par un rayonnement de radiofréquence (rond). Fig. 6 [0019] [fig.6] est un graphique représentant la survie à différents temps après la greffe du carcinome pulmonaire de Lewis des différents groupes de souris injectées par voie intra-tumorale avec une solution saline (carré noir), injectées par voie intratumorale avec une solution saline suivi d'un traitement radiofréquence (triangle renversé), injectées par voie intratumorale avec une solution comprenant des AGuIX (rond), injectées par voie intratumorale avec une solution comprenant des AGuIX suivi d'un traitement radiofréquence (triangle). Description des modes de réalisation 100201 Les inventeurs ont montré que l'administration de nanoparticules comprenant une matrice de polymère non-magnétique et non conductrice et des cations métalliques ayant un numéro atomique supérieur à 40 conduit à une diminution de la croissance tumorale in vivo chez les souris. [0021] Les nanoparticules selon l'invention sont déposées dans la tumeur et vont agir comme agent sensibilisant au traitement par radiofréquence. En effet, suite au traitement par radiofréquence les nanoparticules présentes dans la tumeur vont absorber une grande quantité d'énergie et entrainer une dissipation plus importante d'énergie conduisant à une hyperthermie locale dans la tumeur et à l'élimination des cellules tumorales. [0022] Par hyperthermie, on entend des températures supérieures à la température du corps, en particulier supérieures à 37°C chez l'homme. [0023] Dans un mode particulier, par hyperthermie, on entend une température corporelle locale comprise entre 37.5°C et 45°C, de préférence 39 et 45°C L'hyperthermie va permettre d'éliminer ou endommager les cellules cibles ou les sensibiliser pour un autre traitement, en particulier radiothérapie ou chimiothérapie. Nanoparticules [0024] La présente invention concerne ainsi les nanoparticules comprenant une matrice non- magnétique et non-conductrice et des cations métalliques ayant un numéro atomique Z supérieur à 40 pour une utilisation dans le traitement d'une tumeur par un rayonnement en radiofréquence chez un patient, la dite nanoparticule étant administrée avant ledit traitement par un rayonnement en radiofréquence. [0025] Les nanoparticules sont des particules de taille de l'ordre du nanomètre. [0026] Dans un mode particulier, les nanoparticules sont administrées chez le sujet par voie intraveineuse. Dans cc cas-là, les nanoparticules doivent être suffisamment petites pour pouvoir cibler les cellules tumorales via le système vasculaire et être éliminées rapidement par les reins. Ainsi, dans un mode particulier de l'invention, les nanoparticules ont un diamètre inférieur à 20 nm, de préférence inférieur à 10 nm. [0027] Plus particulièrement, les nanoparticules sont des particules dont le diamètre moyen est compris entre 1 et 20 nm, de préférence entre 1 et 10 nm et encore plus préféré entre 2 et 5 nm, ou encore entre 1 et 6 nm. [0028] Selon l'invention, on utilisera avantageusement des nanoparticules de très faible diamètre par exemple compris entre 1 et 10 nm, de préférence entre 2 et 5 nm. [0029] La distribution de taille des nanoparticules est par exemple mesurée à l'aide d'un gra- nulomètre commercial, tel qu'un granulomètre Malvern Zêtasizer Nano-S basé sur la PCS (Photon Correlation spectroscopy). Cette distribution est caractérisée par un diamètre hydrodynamique moyen. [0030] Au sens de l'invention, par « diamètre moyen » on entend la moyenne harmonique des diamètres des particules. Une méthode de mesure de ce paramètre est également décrite dans la norme ISO 13321:1996. [0031] Les nanoparticules selon l'invention sont des nanoparticules comprenant une matrice organique ou hybride (organique-inorganique) non-magnétique et non-conductrice. [0032] Par matrice non-conductrice, on entend une matrice isolante c'est-à-dire une matrice qui ne conduit pas l'électricité. De préférence, la matrice ne contient pas de matériaux conducteurs tels que les métaux sous leur forme métallique (au degré d'oxydation zéro). [0033] Par matrice non-magnétique, on entend une matrice qui n'est pas attirée vers le champ magnétique. Avantageusement, la nanoparticule selon l'invention comprend une matrice non-ferromagnétique et/ou non super-paramagnétique, et de préférence ne comprend pas ou moins de 5 % de Fer, de Cobalt ou de Nickel de la masse de la matrice. [0034] De préférence, la nanoparticule comprend une matrice non-magnétique et non- conductrice qui est un polymère hiocompatihle tels que le polyéthylène glycol, le polyéthylèneoxide, polyacrylamidc, hiopolymères, polysaccharides ou polysloxane, de préférence le polysiloxane. [0035] Les nanoparticules telles que décrites précédemment comprennent en outre des cations métalliques ayant un numéro atomique supérieur à 40 permettant d'agir comme agents sensibilisants aux radiofréquences. Plus particulièrement, les cations métalliques sont choisis parmi les métaux lourds, de préférence parmi le groupe constitué de : Pt, Pd, Sn, Ta, Zr, Tb, Tm, Ce, Dy, Er, Eu, La, Nd, Pr, Lu, Yb, Bi, Hf, Ho, Sm, In et Gd, ou un mélange de ces derniers. De préférence, les cations métalliques sont du Bi et/ou Gd. [0036] De préférence, la nanoparticule pour l'utilisation selon l'invention a un rapport massique en cation métallique, en particulier de Bi et/ou Gd de plus de 10%, de préférence compris entre 10 et 50%. [0037] Les cations métalliques peuvent être couplés à la matrice par des couplages covalents ou piégés par liaison non-covalente, par exemple par encapsulation ou interaction hydrophile/hydrophobe ou à l'aide d'un agent chélatant. [0038] Dans un mode préféré, les cations métalliques sont situés à la surface de la matrice de la nanoparticule. [0039] De manière préférée, les nanoparticules qui peuvent être utilisées selon l'invention comprennent des agents chélatants qui sont liés de façon covalente à la matrice et permettent de complexer les cations métalliques. De préférence les chélatants sont greffés en surface de la matrice de la nanoparticule de façon à complexer les cations métalliques à la surface de la matrice. [0040] De préférence, la nanoparticule pour l'utilisation selon l'invention comprend une 6 matrice de polysiloxane, un agent chélatant lié de manière covalente à ladite matrice et un cation métallique complexé par l'agent chélatant. [0041] Avantageusement, l'agent chélatant est choisi parmi les produits suivants : - les produits du groupe des acides polycarboxyliques polyamines et leurs dérivés et plus préférentiellement dans le sous-groupe comprenant : DOTA, DTPA, EDTA, EGTA, BAPTA, NOTA, DOTAGA, DTPABA et leurs mélanges, - les produits du groupe comprenant la porphyrine, la chlorinc, 1,10-phénanthroline, bipyridinc, terpyridine, cyclam, triazacyclononane, et leurs dérivés et leurs mélanges, - et leurs mélanges. [0042] Dans un mode préféré, lorsque la nanoparticulc comprend un cation métallique Gd ou Bi, l'agent chélatant est le DOTA, DTPA, DOTAGA ou un de ses dérivés, de préférence le DTPA, DOTAGA ou un de ses dérivés. [0043] Dans un mode particulier et préféré, le ratio des cations métalliques par nano- particule, par exemple le ratio des éléments de terre rare, par exemple le gadolinium (optionnellement chélate avec le DOTAGA) par nanoparticulc est entre 3 et 100, de préférence entre 5 à 20, typiquement environ 10. [0044] Si le cation métallique est un lanthanide, par exemple le gadolinium, l'agent chélatant est avantageusement sélectionné parmi ceux dont la constante de cornplexation log(KC1) est supérieure à 15, de préférence 20. Comme exemple préférés de chélatants, complexant des lanthanides, on peut citer ceux comprenant un motif d'acide diéthylène triamine penta acétique (DTPA), d'acide 1,4,7,10-tetraazacyclododécane-1,4,7,10-tetra acétique (DOTA) ou d'acide 1,4,7,10-tetraazacyclododecance-1,glutarique anhydre-4,7,10-triacetique (DOTAGA). Nanoparticules ultratines fonctionnalisées « sans coeur » [0045] Dans un mode de réalisation plus particulièrement préféré, en raison notamment de leur très faible dimension, les nanoparticules utilisables selon l'invention sont obtenues par la méthode suivante : - obtenir un coeur comprenant un oxyde métallique, M étant un élément métallique, - ajouter au moins une couche d'enrobage (coquille) comprenant des polysiloxanes par exemple par une méthode sol gel; - greffer un agent chélatant à la couche de polysiloxanes, l'agent chélatant étant lié à ladite couche de polysiloxane par une liaison covalente -Si-C-, pour obtenir une nanoparticule précurseur noyau-coquille - purifier et transférer la nanoparticule précurseur noyau-coquille dans une solution aqueuse dans laquelle l'agent de greffage est en quantité suffisante pour dissoudre le coeur d'oxyde métallique et pour complexer le cation métallique de sorte que le diamètre moyen de la nanoparticule ainsi obtenue est réduit à une valeur de moins de 10 nm, de préférence de moins de 5 nm, par exemple entre 1 et 5 nm. 7 [0046] Ces nanoparticulcs obtenues selon le mode décrit ci-dessus ne comprennent pas de coeur encapsulé par au moins un enrobage. De plus amples détails sur la synthèse de ces nanoparticulcs sont donnés dans la section suivante. [0047] Il en résulte des nanoparticulcs de tailles observées comprises entre 1 et 5 nm. On parle alors de nanoparticulcs ultrafines. [0048] Alternativement, une autre méthode de synthèse « one-pot » permettant de préparer des nanoparticulcs sans coeur avec un diamètre moyen de moins de 10 nm, typiquement entre 1 et 5 nm est décrite dans la section suivante. [0049] Les chélatants peuvent être greffés en surface des particules de polysiloxane ou di- rectement insérés au sein de la matrice POS. Une partie ou la totalité de ces chélatants sont destinés à complexer des cations métalliques (c.g. du gadolinium, du bismuth). [0050] Outre la fonctionnalisation chélatants, ces nanoparticules peuvent être modifiées (fonctionnalisation) en surface par des composés hydrophiles (PEG) et/ou chargées différemment pour adapter leur bio-distribution au sein de l'organisme et/ou permettre un bon marquage cellulaire, en particulier pour le suivi des thérapies cellulaires. [0051] Elles peuvent être par exemple fonctionnalisées en surface par greffage de molécules ciblant les tissus pulmonaires, ou, du fait de leur passage dans le sang, par greffage de molécules ciblant certaines zones d'intérêt de l'organisme, en particulier de zones tumorales. [0052] La fonctionnalisation peut se faire également par des composés comportant un autre principe actif et/ou des composés luminescents (fluorescéine). Il en résulte des possibilités d'utilisations thérapeutiques comme agent radiosensibilisant, des neutron-thérapies, comme agent radioactif pour des traitements de curiethérapie, comme agent pour la PDT (photodynamic therapy) ou comme agent de vectorisation de molécules à effet thérapeutique. [0053] Une autre caractéristique de ces nanoparticules ultrafines est le maintien du caractère rigide des objets et de la géométrie globale des particules après injection. Cette forte rigidité tridimensionnelle peut être assurée par une matrice en polysiloxane, où la majorité de silicium sont liés à 3 ou 4 autres atomes de silicium via un pont oxygène. La combinaison de cette rigidité avec leur petite taille permet d'augmenter la relaxivité de ces nanoparticules pour les fréquences intermédiaires (20 à 60 MHz) par rapport aux composés commerciaux (complexes à base de Gd-DOTA par exemple), mais aussi pour des fréquences supérieures à 100 MHz présentes dans les IRM haut champ de nouvelle génération. [0054] Cette rigidité, non présente dans les polymères, est aussi un atout pour la vecto- risation et l'accessibilité des molécules ciblantes. [0055] De préférence, les nanoparticules selon l'invention, et en particulier selon le présent mode de réalisation, ont une relaxivité r1 par cation métallique Mn+ qui est supérieure à 8 5 mM-'(d'ion Mn'-).s-1 préférentiellement 10 mM-'(d'ion Mn'-).s-i pour une fréquence de 20 MHz. Par exemple, elles ont une relaxivité r, par nanoparticule compris entre 50 et 5000 mM4.0. Mieux encore, ces nanoparticules ont une relaxivité r, par ion Mn- à 60 MHz qui est supérieure ou égale à la relaxivité r, par ion Mn- à 20 MHz. La relaxivité r , considérée ici est une relaxivité par ion Mn (par exemple gadolinium). r, est extrait de la formule suivante : 11T, = 11/Tileau + [0056] Plus de détails concernant ces nanoparticules ultrafincs, leurs procédés de synthèse et leurs applications sont décrits dans la demande de brevet W02011/135101, W02018/224684 ou W02019/008040. Méthode de préparation nanoparticules [0057] D'une façon générale, l'homme du métier pourra aisément fabriquer des nano- particules utilisées selon l'invention. [0058] Pour la matrice POS, plusieurs techniques peuvent être employées, dérivées de celles initiées par Stoeher (Stoeher, W J. Colloid Interf Sci 1968, 26, 62). On peut également utiliser le procédé employé pour l'enrobage comme décrit dans Louis et al (Louis et al.,2005, Chemistry of Materials, 17, 1673-1682) ou la demande internationale WO 2005/088314. [0059] En pratique, la synthèse de nanoparticules ultrafincs est par exemple décrite dans Mignot et al. Chem. Eur. J. 2013, 19 :6122-6136. Typiquement, on forme une nanoparticule de type coeur/coquille avec un coeur d'oxyde de lanthanide (par voie polyol modifiée) et une coquille de polysiloxane (par sol/gel), cet objet a par exemple une taille aux alentours de 10 nm (préférentiellement 5 nanomètres). Un coeur d'oxyde de lanthanide de taille très petite (adaptable inférieure à 10 nm) peut ainsi être élaboré dans un alcool par un des procédés décrits dans les publications suivantes : P. Perriat et al., J. Coll. Int. S ci, 2004, 273, 191 0. Tillcment et al., J. Am. Chem. Soc, 2007, 129, 5076 et P. Perriat et al., J. Phys. Chem. C. 2009, 113, 4038. Ces coeurs peuvent être enrobés par une couche de polysiloxane en suivant par exemple un protocole décrit dans les publications suivantes : C. Louis et al., Chem. Mat., 2005, 17, 1673 et O. Tillement et al., J. Am. Chem. Soc, 2007, 129, 5076. [0060] On greffe à la surface du polysiloxane des chélatants spécifiques des cations mé- talliques visés (par exemple DOTAGA pour Gd''); on peut également en insérer une partie à l'intérieur de la couche mais le contrôle de la formation du polysiloxane est complexe et le simple greffage extérieur donne, à ces très faibles tailles, une proportion de greffage suffisante. [0061] On sépare les nanoparticules des résidus de synthèse par une méthode de dialyse ou de filtration tangentielle, sur une membrane comportant des pores de taille adaptée. [0062] Le coeur est détruit par dissolution (par exemple en modifiant le pH ou en apportant des molécules complexantes dans la solution). Cette destruction du coeur permet alors 9 un éparpillement de la couche de polysiloxanc (selon un mécanisme d'effondrement ou de corrosion lente), ce qui permet d'obtenir en final un objet en polysiloxane de morphologie complexe dont les dimensions caractéristiques sont de l'ordre de grandeur de l'épaisseur de la couche de polysiloxane, c'est-à-dire beaucoup plus petit que les objets jusqu'à présent élaborés. Le fait de retirer le coeur permet ainsi de passer d'une taille de particules d'environ 5 nanomètres de diamètre à une taille d'environ 3 nanomètres. De plus, cette opération permet d'augmenter le nombre de cations métalliques (e.g. gadolinium) par nm en comparaison d'une nanoparticulc de polysiloxane théorique de même taille mais comprenant du métal (e.g. gadolinium) uniquement en surface. Le nombre de cations métalliques pour une taille de nanoparticule est évaluable grâce au rapport atomique M/Si mesuré par EDX. [0063] Sur ces nanoparticules, on peut greffer des molécules ciblantes, par exemple à l'aide de couplage par liaison peptidique sur un constituant organique de la nanoparticule, comme décrit dans Montalbetti, C.A.G.N, F algue B. Tetrahedron 2005, 61, 10827-10852. On pourra également utiliser une méthode de couplage utilisant la « click chemistry » Jewett, J.C.; Bertozzi, C.R. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 1272-1279, et faisant intervenir des groupements du type : -N3, -CN, -CECH, ou l'un des groupements suivants : X ". CH, GO [0064] Dans un mode de réalisation spécifique, la nanoparticule selon l'invention comprend un chélatant présentant une fonction acide, par exemple le DOTA. On procède à l'activation de la fonction acide de la nanoparticule, par un exemple à l'aide d'EDC/NHS (1-éthy1-3-(3-diméthylaminopropyl)carbodiimide/N-hydrosuccinimide) en présence d'une quantité appropriée de molécules ciblantes. Les nanoparticules ainsi greffées sont ensuite purifiées, par exemple par filtration tangentielle. 100651 Dans un mode particulier, les nanoparticules selon la présente invention sont obtenues par une méthode de synthèse (« one-pot synthesis method ») comprenant le mélange d'au moins un hydroxysilane ou d'alcoxysilane qui est chargé négativement à un pH physiologique et au moins un agent chélatant choisi parmi les acides polyaminopolycarboxyliques avec: - au moins un hydroxysilane ou alcoxysilane qui est neutre à un pH physiologique, et/ ou - au moins un hydroxysilane ou alcoxysilane qui est chargé positivement à un pH physiologique et comprend une fonction amine, dans lequel: - le ratio molaire A de silanes neutres sur les silanes chargés négativement est défini comme suit: O Exemples 1. Echantillons [0105] Les nanoparticules AGuIX (50 µM par bouteille) sont obtenues par le Dr. O. Tillement via Dr. V. Lysenko. [0106] Les nanoparticules sont dissoutes dans une solution physiologique à une concentration de 20mM (par Gd). 2.Traitement par un rayonnement de radiofréquence [0107] Les radiations électromagnétiques de radiofréquence sont générées par un appareil médical UVCH-60 (MedTeeko Ltd., Russie) opérant à 27MHz avec une puissance allant jusqu'à 60 W. [0108] Différentes cuvettes contenant de l'eau, une solution saline, une solution saline avec de l'albumine 50g/L et une solution saline avec de l'albumine 50g/L et 7.5 mM de nanoparticule d'AGuIX (Gd) sont traitées par un rayonnement de radiofréquence pendant une durée de 20 à 30 min Les températures des solutions sont. mesurées sans contact à l'aide d'un thermomètre. 101091 Ensuite différentes cuvettes contenant de l'eau, du Yttrium (Y) (10,3 mM), Ga- dolinium (Gd) (10,2 mM), Bismuth (Bi) (9,9 mM), Terbium (Tb) (10,5 mM), de l'AGul X sont traitées par un rayonnement de radiofréquence comme décrit précédem ment. 101 101 Les expériences réalisées avec des cuvettes de 10 mL remplies de nanoparticules AGuIX et des liquides de référence montrent que le traitement par un rayonnement de radiofréquence permet une élévation plus importante de la température dans les solutions d'AGuIX que dans les solutions de référence. Les nanoparticules d'AGuIX agissent comme un agent sensibilisant important au traitement par un rayonnement de radiofréquence (Figures 1 et 2). 3. Etudes in vivo 101 1 11 Des souris C57B1/6, BDFI présentant un carcinome pulmonaire de Lewis sont utilisées. La greffe du carcinome pulmonaire de Lewis est réalisée en homogénéisant le tissu de la tumeur du carcinome pulmonaire de Lewis dans une solution stérile de milieu 199 (Merck). 101 121 Les animaux donneurs sont sacrifiés, et des morceaux de tumeurs sont excisés sans site nécrotique et ensuite homogénéisés dans du milieu 199. La masse tumorale est diluée dans le milieu 199 et administrée intramusculairement dans la hanche droite de souris C57B1/6 à un volume de 0.3 mL. 101131 Les souris sont divisées en quatre groupes, un groupe de souris contrôle injectées avec une solution saline (A), un groupe de souris injectées avec une solution saline et traitées par un rayonnement de radiofréquence pendant 10 min (B), un groupe de souris 16 injectées avec AGuIX et non traitées par un rayonnement de radiofréquence (C), et un groupe de souris injectées avec AGuIX et traitées par un rayonnement de radiofréquence (D) (Tableau 1). [0114] Les solutions salines et AGuIX (0.2 mL) sont injectées intramusculairement six jours après l'inoculation de la tumeur, quand la tumeur atteint une taille de 70 ± 15 mmi. [0115] Toutes les expériences sur les animaux sont réalisées en accord avec les principes de travail avec les animaux de laboratoire (Règles NIH PNIc 85-23, révisée en 1985) et la convention Européenne de la protection des animaux utilisés à des fins expérimentales ou à d'autres fins scientifiques (Strasbourg, 18.111.1986, protocole ETS 170). [0116] [Tableaux 1] Gr*, 3LÛatEiF1)OÎ1 tE;_ 0:2 Fi C3t sn nê füllowe( ) 0.2 ai of 20 mNI AenIX inteitumendly lui, of 20 st,...M AgisiX followcd with RE for min. Tableau 1 : description des différents groupes des souris 4. Monitorage par IRM [0117] Lc monitorage par 1RM de la biodistribution des AGuIX est réalisé en utilisant un scanner IRM 7 T Brukcr BioSpec (Brikcr BioSpin GmbH, Allemagne) avec un système de gradient de 105 mT/m utilisant le logiciel ParaVision 5.0. [0118] La Figure 3 montre les images en 1RM d'une souris avant et après l'injection intra- tumorale de la solution d'AGulX. Les nanoparticules d'AGuIX sont observées dans la région tumorale au moins une heure après l'injection. [0119] Les souris du groupe B et D sont traitées par un rayonnement de radiofréquence avec une puissance d'environ 10 W pendant 10 min. Le monitorage thermique des souris durant le traitement par un rayonnement de radiofréquence est réalisé avec une caméra thermique Seek Thermal. Une température maximale d'environ 43-45°C dans la tumeur est mesurée 5 à 10 minutes après le début du traitement par radiofréquence (Figure 4). La survie des souris injectées est ensuite suivie 65 jours après la greffe du carcinome pulmonaire de Lewis. La survie des souris est améliorée chez les souris injectées avec de l'AGuIX et traitées par un rayonnement de radiofréquence (Figure 6). Conclusions 101201 Les nanoparticules AGuIX agissent comme des agents sensibilisants à l'hyperthermie suite au traitement par un rayonnement de radiofréquence. Comme le montre les données en IRM, les nanoparticules AGuIX injectées par voie intra-tumorale sont situées dans la région de la tumeur pendant au moins lh après l'injection. 101211 L'injection de nanoparticules AGuIX suivi du traitement par radiofréquence permet de supprimer la croissance du carcinome pulmonaire de Lewis par hyperthermie 17 (Figure 5) et d'améliorer la survie des souris (Figure 6). La croissance du carcinome pulmonaire de Lewis est surveillée à l'aide de caméra thermique. [0122] Pour améliorer l'effet des agents sensibilisants à l'hyperthermie par un rayonnement de radiofréquence, différentes voies d'optimisation peuvent être proposées : (i) prolonger le temps de traitement par radiofréquence (plus d'une heure) après une seule injection, (ii) des traitements répétés (injection d'AGuIX suivi du traitement par radiofréquence, (iii) administration des nanoparticules AGuIX par voie intraveineuse en surveillant l'accumulation maximale dans les tumeurs suivi du traitement par un rayonnement de radiofréquence. 18 REVENDICATIONS[Revendication 1] Nanoparticule pour une utilisation dans le traitement d'une tumcur chez un patient par un rayonnement de radiofréquence induisant une hyperthermie de ladite tumcur, caractérisée en cc que ladite nanoparticule comprend une matrice non-conductrice et non-magnétique et des cations métalliques ayant un numéro atomique Z supérieur à 40. [Revendication 2] Nanoparticule pour une utilisation selon la revendication 1 caractérisée en cc que la nanoparticule comprend une matrice en polysiloxane. [Revendication 3] Nanoparticule pour une utilisation selon la revendication 1 ou 2 ca- ractérisée en ce que la dite nanoparticule comprend au moins un agent chélatant, de préférence le DOTA, DTPA, DOTAGA ou ses dérivés, destiné à complexer les cations métalliques. [Revendication 4] Nanoparticule pour une utilisation selon les revendications 1 à 3 ca- ractérisée en ce que les cations métalliques représentent plus de 10 % de la masse de la dite nanoparticule et de préférence moins de 50 % de la masse de la dite nanoparticule. [Revendication 5] Nanoparticule pour une utilisation selon les revendications 1 à 4 ca- ractérisée en ce que les cations métalliques sont disposés à la surface de ladite matrice. [Revendication 6] Nanoparticule pour une utilisation selon les revendications 1 à 5 ca- ractérisée en ce que les cations métalliques sont le gadolinium ou le bismuth. [Revendication 7] Nanoparticule pour une utilisation selon les revendications 1 à 6 ca- ractérisée en ce que ladite nanoparticule a une taille inférieure à 10 nm, de préférence inférieure à 5 nm. [Revendication 8] Nanoparticule pour une utilisation selon les revendications 1 à 7 ca- ractérisée en ce que la tumeur est sélectionnée parmi le groupe consistant en une tumeur rénale, une tumeur des poumons, une tumeur hépatique, une tumeur du sein, tumeur des os. [Revendication 9] Nanoparticule pour une utilisation selon les revendications 1 à 8 ca- ractérisée en ce que ladite nanoparticule est sous une forme adaptée pour une administration par voie intraveineuse, Mtra-tumorale ou par inhalation. [Revendication 10] Agent sensibilisant hyperthermique par radiofréquence comprenant une nanoparticule comprenant une matrice non-conductrice et non magnétique et des cations métalliques avec un numéro atomique Z supérieur à 40.