FR 3089754 A1 20200619 FR 1873117 A 20181217 Description Titre de l'invention : COMPOSITION ANTIFONGIQUE DE BIOCONTRÔLE POUR PELLICULAGE DE SEMENCES [0001] L'invention se rapporte au domaine du biocontrôle pour la protection des semences contre les maladies fongiques et au traitement de celles-ci par des composés d'origine naturelle. [0002] La fusariose du blé (ou gale du blé) est une maladie affectant le blé, l'orge, l'avoine, le seigle, le triticale et les graminées. Elle est due à diverses espèces de champignons du genre Fusarium (F. granzinearunz, F. culmorum, F. tricinctuin, F. poile, F. avetzaceutn, F. langsethiae ou F. sporotrichioides) mais aussi du genre Microdochiunz (M. nzajus ou M. nivale (autrefois appelé Fusariutn nivale)). [0003] M. nivale provoque une fonte des semis, qui entraîne la mort des pousses et un éclaircissage. Pour les autres espèces, un symptôme fréquent est la coloration brun foncé des noeuds inférieurs, et l'on peut aussi observer le blanchiment de tout ou partie de l'épi. Le principal problème est la production potentielle de mycotoxincs dans les grains (en particulier par F. gratninearutn), substances toxiques dont la concentration dans les grains, la farine et les produits à base de farine destinés à l'alimentation humaine et animale doit être inférieure aux valeurs fixées par la réglementation. La fusariosc est également une maladie problématique chez le maïs. [0004] La carie commune du blé est une maladie provoquée essentiellement en France par le champignon Tilletia caries, mais aussi éventuellement par Tilletict foetida. Les grains malades prennent une couleur foncée, deviennent gonflés, car constitués essentiellement de spores. À la récolte au moment du battage, les grains s'écrasent facilement, libérant une odeur désagréable. Les spores contenus dans les grains cariés se dispersent et contaminent les grains sains et le sol. Bien que l'on puisse prévenir ou traiter cette maladie par les traitements de semences fongicides efficaces, elle reste néanmoins présente. De fait, la lutte contre cette maladie, préventive ou curative, ne passe que par le traitement de semences, car il n'est pas possible de traiter les plantes une fois que la maladie est apparue en végétation. [0005] La plupart des spécialités chimiques efficaces vis-à-vis des fusarioses sont également homologuées et efficaces vis-à-vis de semences contaminées par des spores de carie. On peut citer Vibrance® Gold (difénoconazole, fludioxonil et sedaxane, Syngenta), Redigo0 (prothioconazole, Bayer Agri), Rancona® 15 ME (ipconazole, Aysta LifeSciences) ou CelestO Power (fludioxonil et sedaxane, Syngenta). [0006] En agriculture biologique, face à la contamination des semences, deux spécialités sont autorisées : Copseed (sulfate de cuivre nibasique, Nufarm) et le vinaigre. 2 [0007] Dans une logique de développement de produits d'origine naturelle, en particulier pour l'agriculture biologique, niais aussi en anticipation de la disparition de certaines solutions chimiques du marché, il apparaît important de développer de nouvelles compositions de biocontrôle capables de protéger les semences contre les maladies fongiques, et notamment les fusarioses et la carie. [0008] L'invention se rapporte ainsi à une nouvelle composition, dite de biocontrôle, pour pelliculage des semences afin de les protéger contre les maladies fongiques, comprenant un broyat de pommes de terre, et en particulier un simple broyat de germes de pommes de terre. [0009] Ainsi, dans un premier aspect, l'invention se rapporte à une méthode de biocontrôle pour protéger des graines de plantes d'attaques par un pathogène fongique, comprenant l'étape de pelliculage des graines dans un broyat de germes de pommes de terre avant semis. Le biocontrôle correspond aux méthodes de protection des cultures basées sur le recours à des organismes vivants ou des substances naturelles. [0010] Le pelliculage de graines est une technique connue dans l'art et rappelée plus bas. [0011] Dans le mode de réalisation préféré, le broyat de germes de pommes de terre est un broyat complet de germes de pommes de terre, c'est-à-dire que le broyat ne subit aucune transformation ou extraction après broyage. Dans un mode de réalisation alternatif, le broyat de germes de pommes de terre est obtenu après une étape de filtration suivant le broyage de germes de pommes de terre. [0012] Ainsi que vu plus haut, on effectue un broyage de germes de pommes de terre. [0013] En particulier, on préfère lorsque le germe présente une longueur comprise entre 10 et 25 cm. [0014] Par ailleurs, on préfère lors que les pommes de terre ne soient pas exposées à la lumière pendant la germination et le développement des germes pour éviter toute lignification. [0015] La méthode selon l'invention est particulièrement adaptée pour protéger les semences d'un pathogène fongique est choisi dans le groupe constitué de Fusarium graminearum, Fusarium culmorum, Fusarium tricinctum, Fusarium poae, Fusarium avenaceum, Fusarium langsethiae, Fusarium sporotrichioides, Microdochitnn ma jus et Microclochium nivale dans le groupe des Tilletia, par exemple Tilletia caries ou le groupe de pathogènes du genre Pythium. [0016] En particulier, elle s'avère particulièrement adaptée contre Fusarium graminearum, Fusarium cultnortim, Microdochium nivale et TIlletia caries. [0017] Le fait que le broyat de germes de pommes de terre soit utilisable directement dans une composition enrobant des semences est particulièrement inattendu, dans la mesure où la quantité estimée de principe actif présente sur la semence après pelliculage est potentiellement relativement faible. Cependant des travaux complémentaires 3 pourraient permettre de caractériser notamment la fraction du germe de pomme de terre contenant le plus de principe actif de façon à réduire la quantité de matière à appliquer sur chaque graines par traitement de semence. [0018] Dans un mode de réalisation préféré, on utilise entre 0,5 et 3 kg, de préférence entre 1 et 2,5 kg, de façon plus préférée entre 1,5 et 2 kg, de façon encore plus préférée, entre 1,6 et 1,9 kg, de façon plus préférée environ 1,77 kg de broyat de germes de pommes de terre pour un quintal (1q) de semences de blé. En particulier on pourra utiliser 1,77 kg de broyat de germes de pomme de terre pour un quintal de semences de blé de PMG (poids de mille grains) 43.3g. [0019] Dans un mode de réalisation préféré, on utilise entre 0,3 et 2 kg, de préférence entre 0,4 et 1,5 kg, de façon plus préférée entre 0,5 et 1,2 kg, de façon encore plus préférée, entre 0,6 et 1 kg, de façon plus préférée environ 0,7 à 1 kg de broyat de germes de pommes de terre pour lq de semences de maïs. On peut utiliser en particulier 0,8 kg de broyat de germes de pomme de terre pour lq de semences de maïs pour un PMG (poids de mille grains) du maïs de 294g et 0,94 pour 1 quintal de semences de maïs ayant un PMG de 371g. [0020] TI est connu que la composition chimique des germes de pomme de terre est variable. Ainsi, les doses ci-dessus pourront varier en fonction de la variété de pomme de terre utilisée. [0021] Le pelliculage des semences sert à une protection efficace des semences. Ainsi qu'indiqué par le Unis Pédagogie, afin d'obtenir le niveau de protection nécessaire, il convient d'appliquer de façon homogène sur toute la surface des semences les matières actives adaptées aux pathogènes que l'on souhaite combattre. De fait, si la surface du grain n'est pas entièrement couverte par les produits, y compris dans le sillon, la protection risque d'être inefficace. [0022] On formule un produit de traitement de semences en ajoutant la matière active à des formulants, adjuvants, agents pelliculants connus dans l'art. Ces composés n'ont pas d'effet biologique et sont utilisés notamment pour assurer une bonne tenue de la substance active sur la graine, ainsi qu'un bon recouvrement de la semence. [0023] Ainsi, on effectue le pelliculage en mélangeant le broyat de germes de pommes de terre avec un formulant et/ou un agent pelliculant. Puis on pulvérise le mélange sur les semences, pour application sur les graines, l'homogénéisation étant ensuite réalisée généralement dans des mélangeurs statiques. [0024] On utilise, en tant que formulant, des solvants organiques ou de l'eau, des dis- persants, des émulgateurs, des tensioactifs ou des mouillants, des colorants... [0025] Les pelliculants sont utilisés pour appliquer un film rnicroporeux à la surface de la semence. Ils permettent d'améliorer la couverture de la graine et l'homogénéité du recouvrement par la substance active. Ils peuvent également faciliter l'écoulement des semences dans le semoir. [0026] Les enrobants peuvent modifier la forme, la taille et/ou le poids de la semence, ce qui permet d'améliorer la précision du semis. Un broyat de germe de pomme de terre peut être intégré à cet enrobant. [0027] On peut effectuer un pelliculage monocouche ou répéter les étapes de pelliculage pour obtenir un pelliculage multicouche et augmenter ainsi la dose pour obtenir une dose optimale. Le pelliculage contient couramment d'autres éléments comme des traitements phytosanitaires ou des produits de biocontrôle. [0028] Dans un mode de réalisation préféré, la plante est une graminée. [0029] En particulier, la méthode est particulièrement adaptée pour des semences de blé. [0030] On peut aussi appliquer la méthode sur des semences d'orge [0031] On peut aussi appliquer la méthode sur des semences de seigle. [0032] On peut aussi appliquer la méthode sur des semences de maïs. [0033] On peut aussi appliquer la méthode sur des semences de colza ou tournesol mais cette méthode s'applique également sur des espèces potagères cucurbitacéc, solanacéc, brassicacée ou astéracées. [0034] L'invention se rapporte également à une composition pour pelliculage de graines, ca- ractérisée en ce qu'elle comprend un broyat de germes de pommes de terre et au moins un agent pclliculant ou un formulant. Cette composition a des propriétés antifongiques et est destinée notamment à pelliculcr des semences, ainsi que décrit plus haut, afin de protéger les semences contre les fusarioses, et/ou les septorioses et les caries. [0035] L'utilisation d'une telle composition pour pelliculer des semences est aussi un objet de l'invention. En effet le broyat objet de l'invention peut être utilisé en pulvérisation directe sur des plantes en culture ou en traitement de semence. [0036] Enfin, l'invention se rapporte à un broyat de germes de pommes de terre en tant que produit phytosanitaire. Ce produit phytosanitaire présente une activité antifongique. L'invention se rapporte également à un broyat de germes de pommes de terre en tant que composé antifongique. L'invention se rapporte également à un broyat de germes de pommes de terre en tant que produit de biocontrôle antifongique. Ce broyat peut être utilisé en pelliculage ou en application par pulvérisation directe. Brève description des dessins [0037] [fig.]] : Nombre de plantes levées par pathothest blé / Fusarium graminearum ; Series 1 et Series 2 correspondent aux 2 séries de tests. T : plantes témoin non contaminées ; T + Fg : plantes témoins, contaminées par Fusarium graminearum ; T + Fg + P : plantes témoin, contaminées par Fusarium graminearum pelliculées ; T + Fg + P + Redigo® : plantes témoin, contaminées par Fusaiium graminearum pelliculées avec du Redigo® ; Fg + P + GPdeT ; plantes, contaminées par Fusarium gramincarum pelliculées avec du broyat de germes de pomme de terre. [0038] [fig.2] : photos des pathotcst blé! Fusarium gramincarum, 35 jours après semis. T : plantes témoin non contaminées ; T + Fg : plantes témoins, contaminées par Fusarium gramincarum ; T + Fg + P : plantes témoin, contaminées par Fusarium gra- mincarum pelliculées ; T + Fg + P + Redigo® : plantes témoin, contaminées par Fusarium grarnincarum pelliculées avec du Redigo® ; Fg + P + GPdeT ; plantes, contaminées par Fusarium gramincarum pelliculées avec du broyat de germes de pomme de terre. [0039] [fig.3] : test techno semences pathotcst blé/ Fusarium culmorum ; pourcentage de plantes malades ; Scries 1 et Scries 2 correspondent aux 2 séries de tests. T : plantes témoin non contaminées ; T + Fc : plantes témoins, contaminées par Fusarium culmorum ; T + Fc + P : plantes témoin, contaminées par Fusarium culmorum pelliculées ; T + Fc + P + Redigo® : plantes témoin, contaminées par Fusarium culmorum pelliculées avec du Redigo® ; Fc + P + GPdeT ; plantes, contaminées par Fusarium culmorum pelliculées avec du broyat de germes de pomme de terre. [0040] [fig.4] : test Tcchno semence Microdochium nivale! blé. L'évaluation est faite 5 à 6 semaines après semis. La partie sombre de l'histogramme (partie inférieure) correspond à la proportion de plantes saines, la partie claire à celui des plantes malades. T : plantes témoin non contaminées ; T + Mn : plantes témoins, contaminées par Microdochium nivale ; T + Mn + P : plantes témoin, contaminées par Microdochium nivale pelliculées ; T + Mn + P + Redigo® : plantes témoin, contaminées par Microdochium nivale pelliculées avec du Redigo® ; Mn + P + GPdeT ; plantes, contaminées par Microdochium nivale pelliculées avec du broyat de germes de pomme de terre. [0041] EXEMPLES [0042] Exem le 1. Production du bro at de ermes de iomme de terre a lication en traitement de semence [0043] Le broyat a été obtenu à partir de pommes de terre de la variété Charlotte issues de la culture biologique, et dépourvues de traitement anti germinatif. Les pommes de terre ont été entreposées dans une endiverie, conservées à l'obscurité, température de 20°C, humidité 40%. Après 3 mois de culture, les germes ont été prélevés, broyés, et le jus ainsi obtenu filtré (filtre GP Millipore Express® PLUS Membrane de 0.22pm) pour limiter la présence de granules d'amidon. [0044] Pour obtenir une semence traitée, on élabore une « bouillie de traitement » composée I I 6 du broyat décrit ci-dessus, d'un « poli iculant » et d'eau. Ce « pclliculant » est composé d'un adhésif de 20 à 50%, d'éléments colorants de 10 à 40% et de 10 à 40% de charges. La semence est traitée en multicouche, application de plusieurs couches successives avec un temps de séchage intermédiaire (2h). Cette application se fait dans un bol de type SATEC : la bouille incluant le broyat de germes de pomme de terre est pulvérisé sur les semences tenues en rotation dans un bol pendant quelques secondes. [0045] Exemple 2. Activité du broyat de germe de pomme de terre en traitement de semence blé / Pathotest Fusarium graminearum [0046] Le pathotcst à l'encontre du fusariurn a été conduit à partir de lots de semences de blé (poids de mille grains, PMG 40g) naturellement contaminées par Fusarium graminearum et de lots de semences témoin saines (T). [0047] Les semences du lot contaminé ont été soit non traitées (T + Fg) soit pelliculées avec du Redigo0 aux doses homologuées (T + Fg + P + Redigo®), soit pelliculées avec du poil iculant seul (T + Fg + P), soit du poil iculant et un broyat de germe de pomme de terre (Fg + P + GP&T), appliqué en six couches, à la dose de 1.77 Kg par quintal. [0048] 50 graines par conditions ont été semées (5 graines/pot), conservées 5 jours en chambre froide à 10°C et ensuite en module climatique avec une phase jour de 16h (300nm) à 21°C et une phase nuit de 8h à 19°C, à 80% d'hygrométrie. Deux répétitions ont été faites (scries 1 et scries 2). La notation est faite autour de 35 jours après semis, elle portera sur le nombre de graines levées (figure 1) ; la figure 2 montre des photos des plantules 35 jours après semis. [0049] La présence de pathogènes fongiques sur les graines affecte la levée des plantes, la présence de l'agent REDIGOC) sur ces plantes permet aux graines de lever malgré la présence de pathogènes fongiques. Un très bon résultat est également obtenu avec utilisation en pelliculage de broyat de gennes de pomme de ten-e. [0050] Exemple 3. Activité du broyat de germe de pomme de terre en traitement de semence blé / Pathotest Flearill111 culmorum [0051] L'expérimentation a été réalisée sur des semences de genotype ALIXAN. Ces semences ont été pelliculées selon le protocole décrit à l'exemple 1. Les graines ont été semées selon la répartition suivante (5 graines/pot -20 pots/condition, 2 barquettes (10 pots/barquette) ; [0052] L'infection a été réalisée par un dépôt d'inoculum (400 ml d'une suspension de spores à 106 spores/ml/grain), directement sur le substrat, au-dessus du grain semé. La souche de Fusarium culmorum utilisée est R96-4 ; [0053] Après semis les barquettes ont été placées 5 jours à 10°C pour homogénéiser la levée, puis passage à 19°C la nuit et 20°C le jour pour 16 heures de lumière (300 nm) et 80% d'hygrométrie, avec arrosage manuel. [0054] L'analyse des symptômes a été réalisée 5 à 6 semaines post-inoculation : taux de 7 levée et dénombrement des plantes avec symptômes au niveau du collet (% de plantes malades, figure 3) ; [0055] Le traitement des semences par le broyat de germe de pomme de terre, protège ces semences de l'infection par Fusarium Cul/nom/il. [0056] Exemule 4. Activité du broyat de germe de pomme de terre en traitement de semence blé IMicrodochium nivale. [0057] Le pathotcst à l'encontre de Microdochium nivale a été conduit à partir de lots de graines naturellement contaminées et de lots de graines témoin saines (T). [0058] Les graines du lot contaminé (Mn) ont été soit non traitées (T + Mn), soit pelliculées avec du Redigo® (T + Mn + P + Redigo®), soit pelliculées avec du pelliculant seul (T + Mn + P), soit pelliculées avec du pclliculant et un broyat de germes de pommes de terre (Mn + P + GPdeT). [0059] Les semis ont été faits en terrines 25 graines par terrines et 4 terrines par modalité sur un substrat étuvé humide. Les terrines (15 x 20 x 4,5 cm) ont été placées à 5°C à l'obscurité pendant 7 jours puis à 15°C, 10h Jour, avec 80% d'humidité relative pendant 3 semaines. [0060] Les résultats sont présentés à la figure 4. Le taux de levée pour le témoin est de 85% et l'ensemble des plantes sont saines. Pour les lots contaminés, on observe, parmi les plantes levées, une proportion de plantes saines et une proportion de plantes malades (sont considérés comme malades l'ensemble des plantes présentant un symptôme, allant (les plantes ayant une simple nécrose jusqu'aux plantules mortes). L'application du broyat de germe de pommes de terre sur les grailles permet de préserver ces grailles de l'infection par Microdochium nivale. [0061] Exemple 5. Activité du broyat de germes de pomme de terre en traitement de semence blé, pathotest Tilletia caries [0062] Une Contamination artificielle sèche d'un lot de semence saine a été effectuée. Des graines de la variété RENAN indemne de carie ont été utilisées. La contamination avec la souche de Tilletia caries (issues de graines cariés) est faite avec à hauteur d'I g de spore / kg de semences, avec application d'un tampon fixateur (méthode CEB n°42 p6). [0063] Les premiers tests ont été réalisés à partir de 30 graines ; la détection de la conta- mination a été effectuée au stade 3 feuilles, par le protocole présenté par Orgeur et al., 31st ISTA Congress June 2016 : Transmission from seed to plant and from soil to plant of Tilletia caries (early detection by PCR and damage threshold). 8 [Tableaux 1] Nombre de plantules contaminées / nombre de plantules semées -> % de contamination Essai I Essai 2 Témoin sain 0 / 10 (0%) 0 / 10 (0%) Témoin contaminé 12/30(40%) 15 / 30(50%) Témoin contaminé, pelliculé 12 / 30(40%) 10 / 30(33,3%) Témoin contaminé, pelliculé, REDIGO 0 / 30 (0%) 3 / 30 (10 %) Contaminé, pelliculé, broyai de germes de pomme de terre 3 / 30(10%) 1 / 30 (0.33%) [0064] Le broyat de germes de pomme de terre a un impact sur la transmission de la carie de la semence à la plantule, son efficacité est comparable à REDIGOO. 9 [Revendication 1] [Revendication 2] [Revendication 3] [Revendication 4] [Revendication 5] [Revendication 6] [Revendication 7] [Revendication 8] [Revendication 9] [Revendication 10] [Revendication 11]