FR 3092687 A1 20200814 FR 1901210 A 20190207 Description Titre de l'invention : Procédé assisté par ordinateur de déter- mination d'une architecture de circuit microfluidique reproduisant un circuit neuronal [000 La présente invention concerne le domaine des architectures de circuit micro- fluidique, et en particulier des architectures de circuit microfluidique reproduisant un circuit neuronal. [0002] Il est connu en neurosciences d'utiliser des circuits microfluidiques configurés en deux chambres séparées par des microcanaux. Cette compartimentalisation spatiale permet de séparer physiquement deux populations de neurones et de faire croître les neurites à l'intérieur des microcanaux pour assurer les connexions neuronales. [0003] La configuration microfluidique permet de cultiver des neurones différents et, par conséquent, dans des milieux différents, tout en assurant une connectivité fonctionnelle, i.e. une transmission de l'information entre les neurones. [0004] De nombreuses architectures de puces « neurofluidiques » ont pu faire l'objet de recherche, en se concentrant principalement sur la neurobiologie de quelques neurones et sur l'analyse de la transmission de signaux, entre au maximum deux ou trois populations, pour répondre à des problématiques de neurosciences fondamentales ou adresser des hypothèses biologiques pour des maladies neurodégénératives. [0005] Néanmoins ces puces se contentent de modéliser des petits circuits comprenant ty- piquement jusqu'à 3 populations de neurones, au maximum, et donc 3 compartiments pour les accueillir Il existe par ailleurs des dispositifs qui permettent de connecter des neurones à l'échelle individuelle, ou plusieurs dizaines de neurones entre eux pour reproduire un circuit basique, mais qui utilisent tous les mêmes types de neurones. [0006] Les inconvénients des dispositifs connus sont de ne pas permettre simultanément de : Cultiver plusieurs types de neurones dans le même dispositif, faute de l'existence de compartiments appropriés, Connecter plus de 3 populations de neurones, Contrôler la quantité de neurones dans chaque compartiment, ni le niveau de connectivité entre les compartiments lorsque ceux-ci existent, Créer des circuits neuronaux de complexité forte, et/ou physiologiquement significatif, pouvant réceptionner plusieurs millions de neurones connectés entre eux. [0007] L'invention a donc pour but de proposer une solution à tout ou partie de ces problèmes. [0008] A cet effet, la présente invention concerne un procédé assisté par ordinateur de déter- 2 mination d'un circuit microfluidique, le circuit microfluidique étant configure pour reproduire un circuit neuronal, et comprenant les étapes suivantes: - obtention d'une description du circuit neuronal, la description du circuit neuronal comprenant une pluralité de populations neuronales et au moins une connexion neuronale, chaque population neuronale comprenant au moins un neurone, chaque connexion neuronale de l'au moins une connexion neuronale reliant une population neuronale de la pluralité de populations neuronales à une autre population neuronale de la pluralité de populations neuronales par une liaison neuronale entre l'au moins un neurone de la population neuronale et au moins un autre neurone de l'autre population neuronale; - détermination d'au moins un premier paramètre pour chaque noeud d'une pluralité de noeuds du circuit microfluidique, chaque noeud de la pluralité de noeuds du circuit microfluidique étant associé à et configuré pour recevoir une population neuronale parmi la pluralité de populations neuronales du circuit neuronal; - détermination d'au moins un deuxième paramètre pour au moins une connexion du circuit microfluidique, chaque connexion de l'au moins une connexion reliant un noeud de la pluralité de noeuds à au moins un autre noeud de la pluralité de noeuds, chaque connexion de l'au moins une connexion du circuit microfluidique étant associée à et configure° pour recevoir une connexion neuronale de l'au moins une connexion neuronale du circuit neuronal; - détermination du positionnement de chaque noeud de la pluralité de noeuds et de chaque connexion de l'au moins une connexion. [0009] Selon un mode de mise en oeuvre, l'invention comprend une ou plusieurs des caracté- ristiques suivantes, seules ou en combinaison. [0010] Selon un mode de mise en oeuvre, l'au moins une connexion comprend une pluralité de connexions, i.e. cieux connexions ou plus. [0011] Selon un mode de mise en oeuvre, l'au moins un neurone comprend une pluralité de neurones, i.e. deux neurones ou plus. [0012] Selon un mode de mise en oeuvre, pour au moins un noeud de la pluralité de noeuds du circuit microfluidique, le noeud est en communication fluidique avec un puit d'entrée du noeud par un canal d'entrée du noeud et avec un puit de sortie du noeud par un canal de sortie du noeud, et le procédé comprend une étape de positionnement du puit d'entrée et du canal d'entrée du noeud, et de positionnement du puit de sortie et du canal de sortie du noeud. [0013] Selon un mode de mise en oeuvre, le procédé comprend une étape d'ajustement du positionnement de chaque noeud de la pluralité de noeuds et de chaque connexion de l'au moins une connexion après l'étape de positionnement du puit d'entrée et du canal d'entrée de chaque noeud, et de positionnement du puit de sortie et du canal de sortie 3 de chaque noeud. [0014] Selon un mode de mise en oeuvre, l'étape d'obtention de la description comprend : - la détermination d'un premier nombre de noeuds de la pluralité de noeuds ; - la détermination d'au moins une première caractéristique de chaque noeud de la pluralité de noeuds, l'au moins une première caractéristique comprenant au moins l'une parmi : un deuxième nombre de neurones de la population neuronale associée au noeud, et une hauteur, et une largeur, et une surface, et un volume, et une forme, - la détermination d'au moins une deuxième caractéristique de chaque connexion de l'au moins une connexion, l'au moins une deuxième caractéristique comprenant au moins l'une parmi : unidirectionnelle ou bidirectionnelle, et un poids fonctionnel, et un poids structurel, et une distance entre les noeuds, [0015] Selon un mode de mise en oeuvre, la description est une description graphique, ou une description matricielle. [0016] Selon un mode mise en oeuvre, la description graphique comprend une pluralité d'objets graphiques, chaque objet graphique correspondant à un noeud du circuit neuronal, et une pluralité de liaisons graphiques, chaque liaison graphique reliant un objet graphique à un autre objet graphique, et chaque liaison graphique correspondant à une connexion neuronale du circuit neuronal. [0017] Selon un mode de mise en oeuvre, la description matricielle comprend au moins une matrice, chaque matrice de l'au moins une matrice comprenant un nombre de lignes et un nombre de colonnes égaux au nombre de noeuds, chaque noeud étant associé à une ligne et à une colonne de la matrice, une valeur binaire ou un pourcentage au croisement entre une ligne et une colonne indiquant une présence ou une absence selon ladite valeur binaire, ou un poids relatif, ou une distance relative, selon ledit pourcentage, d'une connexion entre le noeud associé à la ligne et l'autre noeud associé à la colonne. [0018] Selon un mode de mise en oeuvre, l'étape de détermination d'au moins un premier paramètre pour chaque noeud de la pluralité de noeuds comprend la sélection d'une première méthode parmi : - une méthode par chambre de déposition, et - une méthode par confinement spatial millimétrique, et - une méthode par structure de support par colloïdes. [0019] la détermination de l'au moins un premier paramètre de chaque noeud de la pluralité de noeuds étant fonction de la méthode d'implémentation choisie. [0020] Selon un mode de mise en oeuvre, la méthode par chambre de déposition comprend la création d'une chambre de déposition pour chaque noeud de la pluralité de noeuds. [0021] Selon ces dispositions, il est possible de dimensionner les chambres en fonction du nombre de neurones de la population de neurones que le noeud doit recevoir. [0022] Selon un mode de mise en oeuvre, l'étape de détermination d'au moins un deuxième paramètre pour l'au moins une connexion comprend la sélection d'une deuxième méthode d'implémentation, la détermination de l'au moins un deuxième paramètre de l'au moins une connexion étant fonction de la deuxième méthode d'implémentation choisie. [0023] Selon un mode de mise en oeuvre, la deuxième méthode d'implémentation comprend une étape de réalisation de micro-canaux pour implémenter une connexion, une géométrie des micro-canaux étant déterminée en fonction des caractéristiques de la connexion. [0024] Selon un mode de mise en oeuvre, la deuxième méthode d'implémentation comprend une étape d'implémentation d'une connexion bidirectionnelle par des fibres de collagènes ou par un ensemble de micro-canaux parallèles et juxtaposés symétriquement de part et d'autre d'une direction commune, certains canaux étant orientés dans un sens et d'autre canaux étant orientés dans le sens opposé. [0025] Selon un mode de mise en oeuvre, l'étape de positionnement de chaque noeud de la pluralité de noeuds et l'au moins une connexion comprend les sous-étapes suivantes : - détermination d'au moins une dimension maximum du circuit microfluidique en fonction d'au moins une première contrainte associée à la première méthode de d'implémentation sélectionnée, et en fonction d'au moins une deuxième contrainte associée à la deuxième méthode d'implémentation sélectionnée ; - pour chaque noeud de la pluralité de noeud, détermination de la position du noeud en fonction de la dimension maximum du circuit, et de l'au moins une première caractéristique du noeud, et de l'au moins un premier paramètre du noeud et de l'au moins une première contrainte associée à la première méthode de création sélectionnée, et en fonction de l'au moins une deuxième contrainte associée à la deuxième méthode sélectionnée; - détermination de la position de l'au moins une connexion reliant un noeud à un autre noeud, en fonction de la position et de l'au moins une première caractéristique du noeud et en fonction de la position et de l'au moins une première caractéristique de l'autre noeud, et en fonction de l'au moins une deuxième caractéristique et de l'au moins un deuxième paramètre de la connexion et en fonction de l'au moins une première contrainte associée à la première méthode d'implémentation, et en fonction de l'au moins une deuxième contrainte associée à la deuxième méthode d'implémentation. [0026] Pour sa bonne compréhension, l'invention est décrite en référence aux dessins ci- annexés représentant, à titre d'exemple non limitatif, une forme de mise en oeuvre d'un procédé selon l'invention. Lcs mêmes références sur les dessins désignent des éléments similaires ou des éléments dont les fonctions sont similaires. [0027] [fig.1] est une description graphique d'un circuit neuronal [0028] [fig.2] est une illustration d'un circuit microfluidique créé à partir de la description graphique, sans les puits et canaux d'entrée et de sortie de chaque noeud du circuit microfluidique. [0029] [fig.3] est une illustration d'un circuit microfluidique créé à partir de la description graphique. [0030] [fig.4] est une représentation schématique des étapes d'un mode de mise en oeuvre du procédé selon l'invention [0031] La figure 1 est un exemple de description graphique 10 d'un circuit neuronal. La des- cription d'un mode de mise en oeuvre du procédé 100 est faite en référence aux figures 1, 2, 3 et en référence à la figure 4. Une première étape 101 de lecture de cette description graphique 10 indique que le circuit neuronal considéré comprend une pluralité de populations neuronales PNI, PN2, PN3, PN4, PN5 et au moins une connexion neuronale CNI, CN2, CN3, CN4, CN5. [0032] Chaque population neuronale PN1, PN2, PN3, PN4, PN5 comprend un ou plusieurs neurones. [0033] Chaque connexion neuronale CN1, CN2, CN3, CN4, CN5 de l'au moins une connexion neuronale CN1, CN2, CN3, CN4, CN5 relie une population neuronale de la pluralité de populations neuronales PNI, PN2, PN3, PN4, PN5 à une autre population neuronale de la pluralité de populations neuronales PN1, PN2, PN3, PN4, PN5 par une liaison neuronale entre l'au moins un neurone de la population neuronale et au moins un autre neurone de l'autre population neuronale. Ladite connexion neuronale est établie par une connexion synaptique entre les neurones, ou seulement via les prolongations des neurites, axones ou dendrites, associées aux neurones connectés. [0034] Le procédé 100 a pour objet la définition d'un circuit microfluidique 30, tel qu'il est illustré sur la figure 3, le circuit microfluidique 30 étant configuré pour reproduire le 6 fonctionnement du circuit neuronal lu sur la description 10 ; le circuit microfluidique 30 comprend une pluralité de noeuds N1, N2, N3, N4, N5 et au moins une connexion Cl, C2, C3, C4, chaque connexion Cl, C2, C3, C4, C5 reliant un noeud de la pluralité de noeuds N1, N2, N3, N4, N5 à au moins un autre noeud de la pluralité de noeuds N1, N2, N3, N4, Ni [0035] Afin que le circuit microfluidique 30 puisse reproduire le fonctionnement du circuit neuronal lu sur la description 10, chaque noeud de la pluralité de noeuds N1, N2, N3, N4, N5 du circuit microfluidique 30 est associé à et configure pour recevoir une population neuronale PN1, PN2, PN3, PN4, PN5 parmi la pluralité de populations neuronales PN1, PN2, PN3, PN4, PN5 du circuit neuronal, et chaque connexion Cl, C2, C3, C4, C5 du circuit microfluidique 30 est associée à et configurée pour recevoir une connexion neuronale CN1, CN2, CN3, CN4, CN5 de l'au moins une connexion neuronale CN1, CN2, CN3, CN4, CN5 du circuit neuronal. [0036] A cet effet, le procédé 100 comprend les étapes suivantes, mises en oeuvre après l'étape 101 de lecture de la description : [0037] - création 102 de chaque noeud N1,N2,N3,N4,N5 de la pluralité de noeuds N1,N2,N3,N4,N5 ; - création 103 de chaque connexion CN1 CN2, CN3, CN4, CN5 de l'au moins une connexion CN1, CN2, CN3, CN4, CN5; - positionnement 104 de chaque noeud N1,N2,N3,N4,N5 de la pluralité de noeuds et de chaque connexion CNI, CN2, CN3, CN4, CN5 de l'au moins une connexion. [0038] Selon un mode de mise en oeuvre, pour au moins un noeud Ni, N2, N3, N4, N5 de la pluralité de noeuds Ni, N2, N3, N4, N5 du circuit microfluidique 30, le noeud est en communication fluidique avec un puit d'entrée PEI, PE2 du noeud par un canal d'entrée CE2 du noeud et avec un puit de sortie PSI, PS2 du noeud par un canal de sortie CS2 du noeud, et le procédé comprend une étape de positionnement 105 du puit d'entrée PEI, PE2 et du canal d'entrée CE2 du noeud, et de positionnement du puit de sortie PSI, PS2 et du canal de sortie CS2 du noeud. [0039] Selon un mode de mise en oeuvre, le procédé comprend une étape 106 d'ajustement du positionnement de chaque noeud de la pluralité de noeuds et de chaque connexion de l'au moins une connexion après l'étape 105 de positionnement du puit d'entrée et du canal d'entrée de chaque noeud, et de positionnement du puit de sortie et du canal de sortie de chaque noeud. [0040] Selon un mode de mise en oeuvre le noeud peut être confondu avec le puit d'entrée et le puit de sortie. [0041] Selon un mode de mise en oeuvre, l'étape de lecture 101 de la description 10 comprend : - la détermination 1011 du nombre de noeuds de la pluralité de noeuds NI, N2, N3, 7 N4, N5; - la détermination 1012 des caractéristiques de chaque noeud de la pluralité de noeuds ; [0042] Les caractéristiques prises en compte pour un noeud comprennent notamment : -le nombre de neurones de la population neuronale associée au noeud, et/ou -une hauteur du noeud, et/ou -une largeur du noeud, et/ou -une surface du noeud, et/ou -un volume du noeud, et/ou -une forme du noeud, qui peut par exemple être une forme circulaire, carrée, arrondie ou en étoile. [0043] Les caractéristiques des noeuds correspondants au circuit neuronal de la description sont récapitulées, à titre d'exemple, dans le tableau 1 ci-dessous. [Tahleauxl] Volume (mm') Surface(m 2) Nombre de neurones PN3 470 8,84=104 5000000 PN2 48 9,021.04 510638 PN1 72 1,35*10-4 765957 PN4 4,27 8,02*104 45426 PN5 6 1,13*10-4 63830 [0044] L'étape de lecture 101 de la description 10 comprend également la détermination 1013 des caractéristiques de chaque connexion. [0045] Parmi les caractéristiques prises en compte pour chaque connexion, figurent notamment : le caractère unidirectionnelle ou bidirectionnelle de la connexion, et/ou un poids fonctionnel de la connexion, et/ou un poids structurel de la connexion, et/ou une distance entre les noeuds connectés par la connexion. [0046] La description 10 peut prendre la forme d'une description graphique 10, ou une des- cription matricielle. [0047] Selon un mode mise en oeuvre, la description graphique 10 comprend une pluralité d'objets graphiques, chaque objet graphique correspondant à un noeud du circuit neuronal, et une pluralité de liaisons graphiques, chaque liaison graphique reliant un objet graphique à un autre objet graphique, et chaque liaison graphique correspondant à une connexion neuronale du circuit neuronal. 8 [0048] Selon un mode de mise en oeuvre, la description matricielle comprend une matrice comprenant un nombre de lignes et un nombre de colonnes égaux au nombre de noeuds, chaque noeud étant associé à une ligne et une colonne de la matrice, une valeur binaire ou un pourcentage au croisement entre une ligne et une colonne indiquant une présence ou une absence selon ladite valeur binaire, ou un poids selon ledit pourcentage d'une connexion entre le noeud associé à la ligne et l'autre noeud associé à la colonne. [0049] Les connexions entre les noeuds correspondants au circuit neuronal de la description 10 sont représentées, à titre d'exemple, sous la forme d'une description matricielle dans le tableau 2 ci-dessous. Chaque cellule de la matrice située au croisement d'une ligne et d'une colonne porte les informations relatives à la connexion entre le noeud associé à cette ligne et le noeud associé à la colonne. Ainsi, la valeur 1 ou 0 indique respectivement l'existence ou l'absence d'une connexion entre ces noeuds. Les autres caractéristiques, propres à chaque connexion, peuvent ainsi se trouver dans la cellule correspondante d'une description matricielle du même type, associée à chaque caractéristique de connexion à prendre en compte. [0050] Ainsi à titre d'exemple, les tableaux 2, 3 et 4 ci-dessous décrivent sous forme ma- tricielle un réseau d'interconnexion entre les populations neuronales PNI, PN2, PN3, PN4 et PN5 des noeuds N1, N2, N3, N4 et N5, avec dans le tableau 2 la matrice contenant les informations relatives à l'existence d'une connexion entre deux noeuds, dans le tableau 3 la matrice contenant les informations sur le poids relatif de chaque connexion, et dans le tableau 4 la matrice contenant les informations relatives aux distances entre chaque noeuds. [Tableaux2] PN3 PN2 PN1 PN4 PN5 PN3 0 0 1 0 0 PN2 1 0 0 0 0 PNI 0 0 0 0 1 PN4 0 0 1 0 0 PN5 0 1 0 0 0 9 [Tablcaux3] PN3 PN2 PN1 PN4 PN5 PN3 0 0 0,42 0 0 PN2 0,53 0 0 0 0 PN1 0 0 0 0 1 PN4 0 0 0,8 0 0 PN5 0 0,2 0 0 0 ITableaux41 PN3 PN2 PN1 PN4 PN5 PN3 0 0 0,64 0 0 PN2 0,61 , 0 0 0 0 PN1 0 0 0 0 0,23 PN4 0 0 1 0 0 PN5 0 0,57 0 0 0 [0051] Après l'etape de lecture 101 de la description matricielle ou graphique du circuit neuronal, le procédé 100 comprend une étape de création 102 de chaque noeud. [0052] La création 102 des noeuds comprend la sélection 1021 d'une méthode d'implémentation de chaque noeud. [0053] Une méthode d'implémentation est par exemple une méthode par chambre de dé- position. Selon cette méthode, les noeuds sont implémentés avec : - un puit d'entrée adapté pour recevoir un liquide incluant un échantillon de la population neuronale associé au noeud, - une chambre de déposition, confondue avec le noeud, dans laquelle au moins une partie de l'échantillon est confinée, - un puit de sortie adapté pour évacuer le liquide ; - un canal d'entrée reliant le puit d'entrée et la chambre de déposition; - un canal de sortie reliant la chambre de déposition et le puit de sortie ; le canal d'entrée et le canal de sortie ayant des hauteurs aux hauteurs des puits d'entrée et de sortie, et étant disposés l'un par rapport à l'autre de telle sorte que le liquide reçu par le puit d'entrée s'écoule via le canal d'entrée, la chambre de déposition, i.c. le noeud, puis le canal de sortie vers le puit de sortie. Les dimensions respectives du canal d'entrée et du canal de sortie sont adaptées pour que lors de l'écoulement du liquide, au moins une partie de l'échantillon de la population neuronale considérée est confinée dans la chambre de déposition, i.e. dans le noeud, et 10 la distribution spatiale de l'échantillon dans la chambre de déposition est contrôlée. [0054] Selon ces dispositions, il est possible de dimensionner les chambres de déposition, donc les noeuds en fonction du nombre de neurones de la population de neurones que le noeud doit recevoir. [0055] Une autre méthode d'implémentation est par exemple la méthode connue de l'homme du métier sous le nom de méthode par confinement spatial millimétrique. [0056] Un autre méthode d'implémentation est par exemple la méthode connue de l'homme du métier sous le nom de méthode basée sur l'utilisation de structures de support à hase de colloïdes ; selon cette méthode d'implémentation, les noeuds sont formés par une agrégation de colloïdes et de neurones. [0057] Le procédé 100 comprend également une étape de création 103 de chaque connexion du circuit objet de la description matricielle ou graphique 10 lue à l'étape 101. [0058] La création d'une connexion comprend la sélection 1031 d'une méthode d'implémentation des connexions. [0059] Parmi les méthodes connues de l'homme du métier, pour implémenter une connexion, une connexion peut prendre la forme de micro-canaux, dont une géométrie est déterminée en fonction des caractéristiques de la connexion ; une connexion bidirectionnelle peut en outre être implémentée par des fibres de collagènes ou par des canaux juxtaposés symétriquement de part et d'autre d'une direction commune, certains canaux étant orientés dans un sens et d'autre canaux étant orientés dans le sens opposé. [0060] Le procédé comprend pour finir une étape de positionnement et de dimensionnement 104 de chaque noeud de la pluralité de noeuds et de chaque connexion de l'au moins une connexion. [0061] Le positionnement et le dimensionnement de chaque noeud et chaque connexion associée comprend les sous-étapes suivantes: - détermination 1041 d'au moins une dimension maximum du circuit microfluidique en fonction d'au moins une première contrainte associée à la première méthode de création sélectionnée, et en fonction d'au moins une deuxième contrainte associée à la deuxième méthode sélectionnée ; - pour chaque noeud de la pluralité de noeud, détermination 1042 de la position du noeud en fonction de la dimension maximum du circuit, et en fonction de l'au moins une première caractéristique du noeud, et en fonction de l'au moins une première contrainte associée à la première méthode de création sélectionnée, et en fonction de l'au moins une deuxième contrainte associée à la deuxième méthode sélectionnée; - pour chaque connexion reliant un noeud à un autre noeud, détermination 1043 de la position de la connexion, en fonction de la position et de l'au moins une première caractéristique du noeud et en fonction de la position et de l'au moins une première carac- 11 téristique de l'autre noeud, et en fonction de l'au moins une deuxième caractéristique de la connexion et en fonction de l'au moins une première contrainte associée à la première méthode de création sélectionnée, et en fonction de l'au moins une deuxième contrainte associée à la deuxième méthode sélectionnée ; [0062] Ainsi, à titre d'exemple : une dimension maximum du circuit microfluidique correspondant à la description matricielle ou graphique 10 peut être déterminée, les contraintes de fabrication à 20 mm x 30 mm ; de même, une dimension minimum pour les puits d'entrée peut être déterminée par la contrainte de pouvoir insérer une pipette, soit une dimension des puits d'entrée déterminée au minimum à 4 mm de diamètre ; les dimensions des micro-canaux peuvent également être déterminées, également du fait des contraintes de fabrication, à 3pm en hauteur et 5pm en largeur ; les distances entre les noeuds peuvent être déterminées par la description graphique 10 ou matricielle ; le dimensionnement des noeuds est déterminé selon la méthode des chambres de déposition. [0063] Sur la base des contraintes ci-dessus, et des caractéristiques des noeuds et connexions déduites de la lecture de la description graphique 10 ou matricielle, la figure 2 illustre un résultat de l'étape de détermination 1042 de la position de chaque noeud du circuit et la figure 3 illustre le résultat de l'étape de détermination 1043 des connexions, lorsque la méthode choisie pour l'implémentation des noeuds est la méthode par chambre de déposition, et la méthode choisie pour l'implémentation des connexions est basée sur l'utilisation de micro-canaux. [0064] Ainsi, pour chaque noeud, le processus de dimensionnement des chambres est le suivant : [0065] 1- une surface est calculée pour une chambre de déposition adaptée à recevoir le nombre de neurones de la population considérée, en tenant compte d'un diamètre déterminé en fonction du type de neurone considéré. Par exemple, pour des neurones d'hippocampe, le diamètre du neurone pris en compte pour le calcul de la surface de la chambre de déposition est de 15pm. Alternativement, selon une méthode dite volumétrique, il est possible de calculer un volume de la chambre de déposition au Heur de calculer une surface de déposition des neurones. Alternativement, il est possible de considérer des expiants entiers, la dimension de la chambre étant déterminée pour être adaptée à la taille de l'expiant visé. [0066] 2- une chambre rectangulaire est créée dont la surface est contrainte pour chaque noeud à celle calculée précédemment, le choix d'une longueur ou d'une largeur 12 constituant un degré de liberté. Alternativement, la chambre peut être de forme différente (circulaire, losange) à surface équivalente. Alternativement, selon la méthode volumétrique, la surface est déterminée en fonction d'une hauteur de la chambre créée et la forme de la surface peut être arbitrairement choisie. Alternativement pour un expiant, le volume est fixé par celui de l'expiant. [0067] 3- les chambres ainsi dimensionnées sont positionnées dans un plan, en respectant les contraintes de distances éventuellement fournies. La figure 2 illustre un résultat de cette étape de positionnement. [0068] Ensuite sont créés et positionnés des canaux d'entrée et de sortie, aussi appelés canaux de chargement ou déchargement, des chambres de déposition. Pour cela des canaux de chargement/déchargement sont construits en fonction de la méthode visée pour le chargement des cellules. Généralement, les canaux d'entrée/sortie sont connectés aux chambres de déposition et dimensionnés de façon à ce qu'un écoulement laminaire soit réalisable et permette la déposition des cellules dans les chambres avant sédimentation. [0069] Dans le cas de la méthode des chambres de déposition, ces canaux d'entrée/sortie sont dimensionnés d'une façon connue de l'homme du métier, de sorte que l'écoulement dans la chambre de déposition, d'un milieu fluide porteur, soit caractérisé par la relation suivante : [0070] [Math.1]