FR 3090384 A1 20200626 FR 1873827 A 20181221 Description Titre de l'invention : Effet pro-vitaminique d'un extrait d'un microorganisme probiotique Domaine technique [0001] La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait d'un microorganisme pro- biotique dans une composition pour application topique, comme agent à effet provitaminique. Technique antérieure [0002] Il est notoire que la qualité de la nutrition se reflète sur la santé de la peau et que certains désordres cutanés sont associés à des déficiences, en particulier en certains micronutriments (Park K. Role of micronutrients in skin health and function. Biomol.Ther. 2015 ; 23 ; 207-217). [0003] L'équilibre micro-nutritionnel de la peau peut en effet être affecté par des facteurs externes et/ou internes, tels que par exemple la fatigue, le stress, les effets oxydants, les expositions aux UV, et/ou la sénescence des cellules. [0004] Les micronutriments sont essentiels au développement et à la formation de la peau (organe en constante évolution), au renouvellement physiologique de l'épiderme et à l'adaptation de la peau à son environnement (rôle d'enveloppe de protection). Les vitamines en particulier participent notamment : à la protection anti-oxydante (vitamines A, E, C) aux métabolismes des lipides, glucides ou protéines (vitamines B3, B5, C pour la synthèse de collagène), à la production d'énergie (vitamine B2), à la coagulation normale du sang (vitamine K) et à l'absorption du calcium pour une bonne santé des os (vitamine K). [0005] L'utilisation de vitamines (A, E, C) est connue dans la formulation de compositions cosmétiques destinées à la peau, notamment pour leur effet protecteur et/ou nutritionnel, mais il subsiste le besoin de nouveaux composés permettant de maintenir et/ ou favoriser l'équilibre nutritionnel de la peau. [0006] De manière inattendue, la Demanderesse a mis en évidence sur des cellules de peau in vitro qu'un extrait. d'un microorganisme probiotique, en particulier de l'espèce Lactobacillus rhamnosus (CNCM I- 5313), avait une action sur le transport vitaminique et les récepteurs vitaminiques (activation de 12 gènes) des vitamines du groupe B, de la vitamine A (rétinol), des vitamines K et des vitamines Cet E. Cet extrait d'un microorganisme probiotique a également un effet stimulant sur le transport de sucres énergétiques (GLUT-1 = SLC2A1, GLUT-3 = SLC2A3). [0007] L'utilisation d'un tel extrait dans une composition pour application topique sur les 2 matières kératiniques permet donc de conférer un effet nutritionnel et pro-vitaminique aux matières kératiniques, en particulier la peau, résultant de la stimulation de plusieurs transporteurs et récepteurs vitaminiques au niveau des cellules de la peau et qui sont directement impliqués dans les effets bénéfiques de ces vitamines pour la peau, et un effet antifatigue et tonifiant (production d'énergie, transport de sucres énergétiques et action pro-vitaminique). [0008] Il peut également être avantageux d'associer l'extrait d'un microorganisme selon l'invention à d'autres vitamines ou extraits en contenant, administrées en complément par voie topique ou par voie orale (complément alimentaire). Exposé de l'invention [0009] Un premier objet de l'invention est donc l'utilisation d'au moins un extrait d'un mi- croorganisme probiotique, de l'une de ses fractions et/ou de l'un de ses métabolites, dans une composition pour application topique sur les matières kératiniques, comme agent provitaminiquc, capable notamment de favoriser et/ou améliorer la nutrition des matières kératiniques et/ou l'efficacité vitaminique. [0010] Selon un mode préféré, l'extrait de microorganisme probiotique mis en oeuvre dans l'invention est un lysat de Lactobacillus rhamnosus, en particulier un lysat de Lamahacillus rhamnosus (CNCM 1-5313). [0011] La présente invention porte encore sur un procédé cosmétique non thérapeutique destiné à favoriser et/ou améliorer la nutrition des matières kératiniques, comprenant l'application sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou ses phanères et/ ou les lèvres, d'au moins un extrait d'un microorganisme probiotique selon l'invention, de préférence un lysat de Lactobacillus rhamnosus (CNCM 1-5313), ou d'une composition cosmétique pour application topique en contenant. [0012] En particulier, le procédé est destiné notamment aux peaux fatiguées, âgées, atones, impactées par un contexte nutritionnel défavorable ou déséquilibré, de stress émotionnel ou de manque de sommeil. [0013] Un autre objet de l'invention est une composition pour application topique sur les matières kératiniques comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention, de préférence un lysat de Lactobacillus rhamnosus (CNCM 1-5313), et au moins une vitamine ou un extrait en contenant, en particulier une vitamine A, C, E et leurs mélanges. [0014] Un autre objet de l'invention est un ensemble cosmétique comprenant au moins une première composition pour application topique comprenant un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention, de préférence un lysat de Lactobacillus rhamnosus (CNCM 1-5313), et au moins une seconde composition pour 3 application topique ou administration orale, de préférence un complément alimentaire, comprenant une vitamine ou un extrait végétal en contenant, en particulier une vitamine A, C, E et leurs mélanges. Description des modes de réalisation [0015] L'invention porte donc notamment sur l'utilisation d'au moins un extrait d'un mi- croorganisme probiotique, l'une de ses fractions et/ou un de ses métabolites, dans une composition pour application topique sur les matières kératiniques, comme agent pro-vitaminique, capable notamment (le favoriser et/ou améliorer la nutrition des matières kératiniques et/ou l'efficacité vitaminique. [0016] Par 'matières kératiniques', on entend selon l'invention la peau, les muqueuses (en particulier les lèvres), et les phanères. Selon un mode particulier, la composition est destinée à une application topique sur la peau, les lèvres ou les phanères, de préférence la peau. [0017] Par 'milieu physiologiquement acceptable', on entend un milieu compatible avec les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres. [0018] Par 'agent provitaminique' ou 'effet provitaminiquc' selon l'invention, on entend que l'extrait d'un microorganisme probiotique selon l'invention a un effet sur (i) l'activation des transporteurs vitaminiques (ex : ABCA1, SLC19A3, SLC2A3 et SLC52A1) et/ou sur (ii) l'activation des récepteurs vitaminiques. [0019] L'activation des transporteurs vitaminiques permet une meilleure biodisponibilité au niveau de la peau des vitamines concernées et leur utilisation par les cellules cutanées et l'activation des récepteurs vitaminiques facilite l'action biologique de ces vitamines sur les cellules de la peau. [0020] Parmi les vitamines concernées par l'action stimulante (au niveau des gènes) de l'extrait d'un microorganisme de L rhatnnosus selon l'invention, sur leurs transporteurs et récepteurs, la Demanderesse a identifié : [0021] - la vitamine BI (SLC19A3) [0022] - la vitamine B2 (SLC52A 1), [0023] - la vitamine B 12 (CUBN, TCN1 et 2) [0024] - la vitamine B9 (FOLR3), [0025] - la vitamine B3 (HCAR2 et 3), [0026] - la vitamine A / rétinol (RBP1, STRA6), [0027] - les vitamines E et K (SCARB1), [0028] - les vitamines K (ABCA1), [0029] - la vitamine C (SLC2A3) [0030] Ainsi, l'extrait d'un microorganisme probiotique selon l'invention, de préférence le lysat de Lactobacillus rhamnosus (CNCM 1-5313) est capable notamment de favoriser et/ou améliorer la nutrition des matières kératiniques et l'efficacité vitaminique. Extrait de microorganisme probiotique 100311 Selon les définitions utilisées par les associations scientifiques internationales pour les probiotiques et les prébiotiques, on entend par 'probiotiques', des microorganismes vivants qui, lorsqu'ils sont administrés en quantité adéquate, ont des effets bénéfiques sur la santé de l'hôte. On entend par `prébiotiques', des ingrédients alimentaires résistants à la digestion qui induisent des changements spécifiques dans la composition et/ou l'activité du microbiote intestinal produisant ainsi un effet bénéfique sur la santé de l'hôte. On entend par 'symbiotiques', des produits qui contiennent à la fois des pro-biotiques et des prébiotiques. [0032] Lc ou les microorganisme(s) peu(ven)t être inclus dans une composition selon l'invention sous une forme vivante, semi-active ou inactivée, morte. Ils peuvent être inclus sous forme de fractions de composants cellulaires ou sous la forme dc métabolites. Le ou le(s) microorganisme(s), métabolite(s) ou fraction(s) peu(ven)t également être introduit(s) sous la forme d'une poudre lyophilisée, d'un surnageant de culture et/ou le cas échéant sous une forme concentrée. [0033] Selon un mode dc réalisation particulier, ces microorganismes sont mis en oeuvre sous une forme inactivée voire morte, et plus particulièrement sous forme d'un lysat. [0034] Ainsi, selon un mode particulier et préféré, l'extrait d'un microorganisme probiotique selon l'invention est un lysat de microorganisme prohiotique (non vivant), l'une dc ses fractions et/ou un de ses métabolites. [0035] On parlera indifféremment dans la description 'd'extrait probiotique' ou 'd'extrait de micro-organisme probiotique' ou 'd'extrait de souche bactérienne prohiotique' ou de lysat probiotique' ou de `lysat de micro-organisme probiotique' ou de lysat de souche bactérienne probiotique'. [0036] Par 'lysat', on entend notamment un matériau obtenu par lyse cellulaire des cellules du microorganisme considéré provoquant ainsi la libération des constituants biologiques intracellulaires naturellement contenus dans lesdites cellules. Le lysat mis en oeuvre est formé en tout ou partie des constituants biologiques intracellulaires et des constituants des parois et membranes cellulaires. La présente invention concerne donc la mise en oeuvre d'un lysat probiotique et/ou une de ses fractions. [0037] Au sens de l'invention, le terme 'fraction' désigne plus particulièrement un fragment dudit microorganisme doté d'une efficacité provitaminique par analogie audit microorganisme entier. [0038] En particulier, le lysat selon l'invention contient la fraction cytoplasmique cellulaire renfermant les enzymes (ex : déhydrogénases, phosphatases...) et/ou les constituants des parois cellulaires (ex : peptidoglycanes...) et/ou les constituants des membranes cellulaires (ex : glycérophospholipides...). [0039] La lyse cellulaire peut être réalisée par différentes technologies bien connues dc l'homme du métier, telles que par exemple choc osmotique, choc thermique, par ultrasons, ou encore sous contrainte mécanique (ex : centrifugation). [0040] Selon un mode de réalisation préféré, le lysat est obtenu par centrifugation et choc osmotique (ex : ajout de soude). [0041] Selon un mode particulier, le microorganisme est cultivé anaérobiquement dans un milieu de culture adéquat. Lorsque la phase stationnaire du développement est atteinte, le milieu de culture peut être inactivé par pasteurisation, par exemple à une température dc 60 à 65 °C pendant 30 mn. Les microorganismes sont alors recueillis par une technique de séparation conventionnelle par exemple filtration membranaire, centrifugation et remis en suspension dans une solution NaCI physiologique stérile. Le lysat peut être obtenu par désintégration aux ultrasons d'un tel milieu afin d'en libérer les fractions cytoplasmiques, les fragments de paroi cellulaire et les produits issus du métabolisme. Puis tous les composants dans leur distribution naturelle sont ensuite stabilisés dans une solution aqueuse faiblement acide. [0042] Le lysat ainsi obtenu possède généralement une concentration de l'ordre de 0,1 à 10 %, en particulier de 0,5 à 5 % et notamment de 1 à 2% en poids en matière(s) sèche(s) (active(s)) par rapport à son poids total. [0043] Le lysat peut être mis en oeuvre sous différentes formes, sous la forme d'une solution ou sous la forme d'une poudre. [0044] Plus particulièrement, le microorganisme probiotique est issu du groupe des bactéries lactiques, comme notamment les Lactobacillus et/ou les Bifidobacterium. A titre illustratif de ces bactéries lactiques, on peut plus particulièrement citer les Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus casei ouBifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, et leurs mélanges. [0045] Selon un mode particulier, le microorganisme probiotique appartient au genre Lacto- bacillus, au genre Bifidobacterium, ou leur mélange, de préférence au genre Lactobacillus choisi dans le groupe constitué par : Lactobacillus acidophiles, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus thermophylus, et Lactobacillus johnsonii. [0046] Les espèces convenant tout particulièrement sont les Lactobacinus johnsonii, Lacto- bacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus casei, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium longum et respectivement déposées suivant le traité de Budapest avec l'Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) les 30/06/92, 12/01/99, 15/04/99 et le 15/04/99 sous les désignations suivantes CNCM I- 6 1225 (Lactobacillus johnsonii), CNCM 1-2116 (Lactobacillus paracasei), CNCM 12168 (Bificlobacterium) et CNCM 1-2170 (Bifidobacteriurn longum) et le genre Bifidobacterium lactis (Bh 12) (ATCC27536) ou Bifielobacterium longum (BB536), selon les informations décrites dans la demande FR2938429. [0047] Selon un mode particulier, le lysat de Bifidobacterium longum peut-être celui en- registré sous le nom INCI : Bifidat ferment Lysate, sous le nom EINECS:Bifidohacterium longum, sous le N° EINECS: N° 306-168-4 et sous le N° CAS : 96507-89-0. [0048] Selon un autre mode de réalisation particulier et préféré, on utilise un mi- croorganisme du genre Lactohacillus sp., en particulier choisi parmi les espèces Lactobacillus johnsonii, Lactohacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei, Lactohacillus casei, et leurs mélanges. [0049] Selon un mode de réalisation particulier, on peut utiliser un Lactohacillus paracasei, tel la souche Lactohacillus paracasei ST I I déposée suivant le traité de Budapest auprès de l'Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) le 12/01/99 sous la désignation CNCM 1-2116. [0050] Selon un autre mode de réalisation particulier et préféré, le microorganisme pro- biotique selon l'invention appartient à l'espèce Lactobacillus rhamnosus (ATCC 7469, CCM 1825, NCDO 243, NCIB 6375 ou encore WDCM 00101 suivant les collections dans lesquelles elle a été déposée), de préférence la souche Lactohacillus rhamnosus CNCM I-5313, déposée suivant le traité de Budapest auprès de l'Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) le 8 Mars 2018 sous la désignation CNCM I-5313, et/ou une de ses fractions et/ou un de ses métabolites. [0051] Un lysat de cette souche L. rhamnosus est obtenu selon le protocole suivant du fournisseur Greentech : 1. Culture de la souche L. rhamnosus dans un milieu de culture adéquat ; 2. Récupération de la biomasse par centrifugation ; 3. Lyse cellulaire (ajout de soude) ; 4. Ajustement du pH (ajout d'acide citrique) et de la matière sèche (ajout d'eau stérile) pour obtenir une teneur en matière active allant de 0,1% à 10% en poids de matière sèche (matière active) par rapport au poids total dudit lysat ; 5. Ajout de conservateur (phénoxyéthanol). [0052] Un tel lysat de L. rhamnosus est dénommé Probiophyte LB par le fournisseur Greentech, et définie en nom INCI sous la dénomination WATER and LACTOBACILLUS FERMENT LYSATE and PHENOXYETHANOL and SODIUM HYDROXIDE and CITRIC ACID, le phénoxyéthanol pouvant être remplacé par un autre conservateur. [0053] Ce lysat comprend une teneur en Lactobacillus rhamnosus allant de 0,1% à 10%, en 7 particulier de 0,5 à 5% en poids et notamment de 1 à 2% en poids de matière sèche (matière active) par rapport au poids total dudit lysat. [0054] Le lysat de microorganisme de l'invention peut être formulé dans une composition à raison d'au moins 0,0001 % (exprimé en poids sec ou poids de matière active), en particulier à raison de 0,0001 à 10 % et plus particulièrement à raison de 0,0001 à 5 % en poids en particulier de 0,0001 à 2 % en poids, et notamment de 0,0001 % à 1 %, voire de 0,0001 à 0,05% en poids de matière active (matière sèche) par rapport au poids total de la composition. [0055] Le lysat de microorganisme probiotique selon l'invention pourra être utilisé seul ou associé à d'autres microorganismes probiotiques, des ingrédients prébiotiques, des ingrédients symbiotiques ou leur mélange. [0056] Selon un autre mode particulier, le lysat de microorganisme probiotique selon l'invention pourra être utilisé associé à des vitamines ou des extraits en contenant, lesdites vitamines pouvant être présentes dans la composition de l'invention ou une composition distincte, pour une application topique ou orale (complément alimentaire), administrée de façon simultanée, séquentielle ou différée dans le temps, comme décrit ci-après. [0057] A cet apport vitaminique, on pourra également associer d'autres actifs cosmétiques choisis parmi des huiles riches en acides gras essentiels ou non, des extraits distincts de l'extrait probiotique selon l'invention et capables de stimuler des récepteurs et transporteurs vitaminiques, des extraits prébiotiques (qui facilitent la croissance de certaines espèces bactériennes bénéfiques de la microflore cutanée au détriment d'espèces indésirables), d'autres extraits d'autres souches de microorganismes probiotiques ou encore des ingrédients symbiotiques (extrait de probiotiques + extraits prébiotiques), des séborégulateurs (pour favoriser la biodiversité de la flore) et des agents raffermissants (pour limiter l'élargissement des pores), des agents apaisants, des actifs protecteurs en particulier des stimulateurs de défenses antioxydantes et détoxifiantes de la peau, des agents dépigmentants, des agents desquamants, des actifs antiâge, des ingrédients hydratants, des actifs irnmunomodulateurs, et leurs mélanges. Procédé cosmétique [0058] L'invention porte également sur un procédé cosmétique non thérapeutique destiné à favoriser et/ou améliorer la nutrition des matières kératiniques, comprenant l'application sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou ses phanères et/ ou les lèvres, d'au moins un extrait d'un microorganisme probiotique selon l'invention ou d'une composition cosmétique pour application topique en contenant. [0059] Selon un mode préféré, l'extrait d'un microorganisme probiotique selon l'invention est un lysat de Lactobacillus rhainnosus, en particulier un lysat de Lactobacillus rhamnosus (CNCM I-5313). 8 [0060] Selon un mode particulier de l'invention, on pourra associer à l'extrait de mi- croorganisme probiotique selon l'invention, dans une même composition ou dans deux compositions distinctes destinées à être utilisées de façon simultanée, séquentielle ou différée dans le temps, par voie topique ou voie orale (ex : complément alimentaire), au moins une vitamine ou un extrait (ex : extrait végétal) en contenant. [0061] Ainsi, selon un mode particulier de l'invention, le procédé cosmétique de l'invention comprend en outre l'administration simultanée, séquentielle ou différée dans le temps, par voie topique ou orale, d'au moins une vitamine ou un extrait en contenant. [0062] Il peut comprendre alternativement : i. l'application d'une composition pour application topique sur les matières kératiniques comprenant un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention de préférence un lysat de Lactobacillus rhatnnosus (CNCM 1-5313), et au moins une vitamine ou un extrait en contenant ; ou ii. l'application d'une première composition pour application topique sur les matières kératiniqucs comprenant un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention de préférence un lysat de Lactobacillus rhatnnosus (CNCM 1-5313), et l'administration par voie orale d'une seconde composition, de préférence sous la forme d'un complément alimentaire, comprenant au moins une vitamine ou un extrait en contenant ; ou iii. l'application d'une première composition pour application topique sur les matières kératiniques comprenant un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention de préférence un lysat de Lactobacillus rhattmosus (CNCM I-5313), et d'une seconde composition topique comprenant au moins une vitamine ou un extrait en contenant ; ou iv. l'application d'une première composition pour application topique sur les matières kératiniques comprenant un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention de préférence un lysat de Lactobacillus rhattmosus (CNCM I-5313), et au moins une vitamine ou un extrait en contenant, et l'administration d'une seconde composition orale, de préférence sous la forme d'un complément alimentaire, comprenant au moins une vitamine ou un extrait en contenant. [0063] Par 'administration simultanée', on entend que l'extrait de microorganisme pro- biotique selon l'invention et la ou les vitamines sont administrés au sujet d'intérêt, en même temps (même moment). [0064] Par 'administration séquentielle', on entend que l'extrait de microorganisme pro- biotique selon l'invention et la ou les vitamines sont administrés au sujet d'intérêt selon un ordre défini, la ou les vitamines pouvant être administrées avant ou après ledit extrait de microorganisme probiotique selon l'invention. 9 100651 Par 'administration différée dans le temps', on entend que l'extrait de mi- croorganisme probiotique selon l'invention et la ou les vitamines sont administrés au sujet d'intérêt selon un ordre défini et à des temps différents, plus ou moins éloignés l'un de l'autre en fonction de l'effet recherché. [0066] La ou les vitamines peuvent être des vitamines hydrosolubles ou liposolubles selon la phase dans laquelle elles sont incorporées. [0067] Parmi les vitamines hydrosolubles, on peut citer notamment : [0068] - les vitamines du groupe B : B1 (Thiamine), B2 (Riboflavine), B3 ou vitamine PP (Niacinc), B5 (Acide Pantothénique), B6 (Pyridoxine), B8 ou vitamine H (Biotine), B9 (Acide Folique) et B12 (Cyanocobalaminc), [0069] - la vitamine C (Acide Ascorbique) et ses dérivés comme l'ascorhyl glucoside, l'acide éthyle ascorbique, le magnésium ascorbyl phosphate. [0070] Parmi les vitamines liposolubles, on peut citer notamment : [0071] - la vitamine A (Rétinol) et ses dérivés comme le palmitate et le propionatc de vitamine A [0072] - la vitamine E (alpha, beta, gamma, delta-tocophcrol) et ses dérivés acétate et phosphate ainsi que le tocotriénol (alpha, beta, gamma, delta-tocotrienol) et ses dérivés. [0073] On peut également utiliser tout extrait connu, en particulier extrait végétal, pour sa richesse en ces vitamines. [0074] L'extrait d'un microorganisme probiotique est présent généralement en une teneur allant de 0,0001 à 10% en poids de matière sèche, en particulier de 0,0001 à 5%, de préférence de 0,0001 à 2%, et notamment de 0,0001 % à 1 %, voire de 0,0001 à 0,05% en poids de matière sèche pou- rapport au poids total de la composition. [0075] Le procédé cosmétique de l'invention est notamment destiné aux peaux fatiguées, âgées, atones, impactées par un contexte nutritionnel défavorable ou déséquilibré, de stress émotionnel ou de manque de sommeil. [0076] La composition mise en oeuvre dans le procédé cosmétique peut être une composition de soin et/ou de maquillage, en particulier une composition de soin de la peau du visage et/ou du corps. Composition et ensemble cosmétique [0077] Un autre objet de l'invention est une composition pour application topique sur les matières kératiniques comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention, et au moins une vitamine ou un extrait végétal en contenant, en particulier une vitamine A, C. E et leurs mélanges. [0078] Selon un mode préféré, l'extrait d'un microorganisme probiolique selon l'invention est un lysat de Lactobacillus rhainnosus, de préférence un lysat de Lactobacillus rhatnnosus (CNCM 1-5313). [0079] Par 'composition' selon l'invention, on entend une composition cosmétique ou der- matologique. [0080] Selon un mode particulier, il s'agira d'une composition cosmétique. [0081] Selon un autre mode particulier, il s'agira d'une composition dermatologique. [0082] La composition selon l'invention peut, par exemple, être utilisée comme produit de soin et/ou de maquillage pour le visage et/ou le corps. [0083] Lcs compositions selon l'invention sont destinées plus particulièrement à une ap- plication topique sur les matières kératiniqucs, en particulier sur la peau. [0084] Lcs compositions de l'invention comprennent un milieu physiologiquement ac- ceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau et les phanères. Les compositions peuvent avoir toutes les formes cosmétiques, et notamment être sous la forme d'une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou émulsion multiple, d'une micro-émulsion, d'une solution, d'une suspension, d'une lotion, d'un gel, d'une crème, d'un lait, d'un sérum, d'une brume (solution fluide pulvérisée), d'un stick ou encore d'une poudre et adaptées à une application sur la peau, les lèvres et/ou les phanères. [0085] Selon un mode particulier, la composition de l'invention est destinée à une ap- plication topique sur la peau et/ou les lèvres et se présente sous la forme d'une composition cosmétique de soin et/ou de maquillage de la peau et/ou des lèvres. [0086] La composition cosmétique de l'invention est avantageusement sous la forme d'une émulsion, d'un serum, ou d'une brume. [0087] La composition comprend généralement au moins une phase aqueuse et au moins une phase huileuse. [0088] La phase aqueuse représente généralement de 1 à 99% en poids, par rapport au poids total de ladite composition. [0089] Une phase huileuse selon l'invention peut comprendre des huiles hydrocarbonées, si- liconées, fluorées ou non, et leurs mélanges. Ces huiles peuvent être volatiles ou non volatiles, végétale, minérale ou synthétique. [0090] Avantageusement, on utilisera des huiles hydrocarbonées, notamment d'origine végétale. [0091] Comme huiles volatiles hydrocarbonées, on peut citer notamment les alcanes ramifiés en C8-C16, les esters ramifiés en C8-C16 et leurs mélanges. [0092] Comme huiles non volatiles hydrocarbonées, on peut citer notamment les huiles hy- drocarbonées, les huiles hydrocarbonées d'origine végétale, les éthers de synthèse en C10-C40, les esters de synthèse en C10-C40, les alcools gras en C12-C26, les acides gras supérieurs en C12-C22, et leurs mélanges. [0093] Les huiles pourront être présentes dans la composition de l'invention en une teneur allant de 1 à 95 % en poids par rapport au poids total de la composition. 11 100941 La composition de l'invention peut également comprendre tout additif usuellement utilisé en cosmétique tels que des filtres UV, des antioxydants, des tensio-actifs, des gélifiants, des charges, matières colorantes (ex : pigments), des conservateurs, des polymères filmogènes, des parfums, des agents actifs cosmétiques, comme par exemple des émollients, des hydratants, des vitamines, des agents anti-âge, des agents éclaircissants, et leurs mélanges. [0095] L'invention porte encore sur un ensemble cosmétique comprenant au moins une première composition pour application topique comprenant un extrait d'un microorganisme probiotique tel que défini dans l'invention, de préférence un lysat de Lactobacillus rhamnosus (CNCM 1-5313), et au moins une seconde composition pour application topique ou administration orale, de préférence un complément alimentaire, comprenant une vitamine ou un extrait végétal en contenant, en particulier une vitamine A, B, C, K, E et leurs mélanges. [0096] L'invention va désormais être illustrée dans les exemples non limitatifs suivants. [0097] Sauf indication contraire, les pourcentages sont des pourcentages pondéraux exprimés en poids par rapport au poids total de la composition. Exemples [0098[ La Demanderesse a évalué l'effet d'un lysat de souche bactérienne probiotique de L. rhamnosus: ATCC 7469, CCM 1825, NCDO 243, NCIB 6375 ou encore WDCM 00101 suivant les collections dans lesquelles elle a été déposée. [0099] En particulier, la souche bactérienne probiotique utilisée a été déposée suivant le traité de Budapest auprès de l'Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) le 8 Mars 2018 sous la désignation CNCM 1-5313. [0100[ Un lysat de cette souche L. rhamnosus est obtenu selon le protocole suivant du fournisseur Greentech : 1. Culture de la souche L rhamnosus dans un milieu de culture adéquat ; 2. Récupération de la biomasse par centrifugation ; 3. Lyse cellulaire (ajout de soude) ; 4. Ajustement du pH (ajout d'acide citrique) et de la matière sèche (ajout d'eau stérile) pour obtenir une teneur en matière active allant de 0,01 à 10% en poids de matière sèche (matière active) par rapport au poids total dudit lysat ; 5. Ajout éventuel de conservateur (ex : phénoxyéthanol). [0101] Un tel lysat de L. rhamnosus est dénommé Probiophyte LB par le fournisseur Greentech, et définie en nom INCI sous la dénomination WATER and LACTOBACILLUS FERMENT LYSATE and PHENOXYETHANOL and SODIUM HYDROXIDE and CITRIC ACID, le phénoxyéthanol pouvant être remplacé par un autre conservateur. 12 101021 Ce lysat comprend une teneur en Lactobacillus rhamnosus allant de 0 ,1 à 10%, en particulier de 0,5 à 5% en poids et notamment de 1 à 2%, voire de 1,75% en poids de matière sèche (matière active) par rapport au poids total dudit lysat. [0103] Un tel lysat (mais sans conservateur phénoxyéthanol) est testé à une teneur de 0,1 et 0,2% dans les tests sur des cultures cellulaires de cellules de peau et utilisé dans les compositions cosmétiques pour application topique illustrées ci-après à dcs teneurs allant de 1 à 2% en poids de matière première. [0104] Il est nommé indifféremment Probiophyte LB ou lysat de Lactobacillus rhamnosus dans les exemples suivants. [0105] Exemple 1 : Effet pro-vitaminique de l'extrait prohiotique de L. rhamnosus sur des cultures de kératinocytes, de mélanocytes et de fibroblastes [0106] Le test mis en oeuvre utilise une méthodologie TLDA (Taqman Low Density Array) qui permet d'observer la stimulation ou l'inhibition ou encore l'absence de stimulation d'un nombre étendu de gènes impliqués dans des processus cutanés du soin des matières kératiniques, en particulier sur des kératinocytcs, fibroblastes et mélanocytes. [0107] Il s'agit ici d'évaluer l'effet de l'extrait prohiotique selon l'invention sur un ré- pertoire ciblé de gènes correspondant aux transporteurs et récepteurs vitaminiques. [0108] Des kératinocytcs humains normaux (KHN), fibroblastes humains normaux (FHN) et mélanocytes humains normaux (MHN) sont mis en culture puis traités avec l'extrait prohiotique de L. rhatnnosus décrit ci-dessus. [0109] Après traitement des KHN, une étude par Taqman Low Density Array (TLDA) sur les gènes étudiés est effectuée à partir des ADNc obtenus après transcription inverse des ARN totaux extraits. Cellules utilisées : [0110] Cellules : kératinocytcs épidermiques humains normaux au 5'me passage (KHN 12889), fibroblastes humains normaux de derme au 6Cme passage (FHN) et mélanocytes humains normaux au True passage (MHN 161) Composés testés : [0111] Prohiophytc LB sans conservateur: extrait de Lactobacillus rhamnosus CNCM I- 5313 [0112] Doses testées : 0,1 et 0,2 % [0113] Temps de traitement : 24h [0114] N=3 cultures par conditions expérimentales Analyses effectuées : 101151 Mesure de l'expression génique par RT-qPCR à partir les ARN messagers extraits des tapis cellulaires non traités (témoins) et traités avec les différentes concentrations de Probiophytc LB. 13 [0116] Technologie TLDA (Tac-A/fan Low Density Array) - Obtention des ARN totaux [0117] Le milieu de culture des cellules est éliminé, et 250 pl. de tampon de lyse RLT (fourni dans le kit Nucicospin RNA trace, Macherey-Nagel) sont ajoutés. Les cellules sont raclées à l'aide d'un Cell Scraper puis, le lysat cellulaire est récupéré dans une deepwell 1,2 mL (fournie dans le kit Nucicospin RNA). Les ARN totaux sont extraits selon les protocoles définis. [0118] Les solutions d'ARN totaux obtenues sont dosées, et leur qualité vérifiée, à l'aide d'un lecteur de microplaqucs, le spectrostarNANO (BMG Lahtech) couplé au MicrolabSTAR. Cet appareil est relié à l'ordinateur pilotant la plateforme Robotique et possède le logiciel spécifique d'analyse des résultats (logiciel MARS). La technique nécessite une micro-plaque de 384 puits (LoBase), un contrôle positif (RNA 250, AM7155, Thermofisher) permettant de valider les pipetagcs réalisés par le robot ainsi que les valeurs générées par le lecteur spectrostarNANO. - Synthèse des ADN complémentaires [0119] Le kit de reverse transcription (RT) utilisé est le High Capacity Reverse Trans- cription Kit (Thermo Fisher). Il a été utilisé selon le protocole fourni. 500 ng d'ARN totaux sont dilués dans de l'eau pour un volume final de 25 pl.. Ils sont ensuite incubés pendant 10 minutes à 25°C puis 2 heures à 37°C en présence de 25 pL de mélange réactionnel de High Capacity Reverse Transcription Kit 2X préalablement préparé comme indiqué ci-dessous. Les différentes incubations sont faites au sein du TRobot (Biométra). [Tableauxl] Réactifs RT tampon dNTP Primer RNase OUT RT H2O Volume 5 pL 2 pL 5 pl. 0,5 pL 2,5 pL 10 pL 101201 Mélange réactionnel High Capacity Reverse Transcription Kit 2X pour 1 réaction - PCR-TaqMan Low Density Array 101211 15 pL de chaque RT sont mélangés à 60 pl d'eau puis 75 pl- de TaqMan Gene Ex- pression master mix (ThermoFisher), contenant l'ADN polymerase, sont ajoutés. Après homogénéisation, 100 pL sont déposés sur les cartes microlluidiques contenant les sondes correspondant aux gènes testés, ces dernières sont centrifugées puis scellées. Le CD Rom correspondant au profil des gènes déposés sur les plaques est chargé dans le logiciel SDS 2.3, précisant l'emplacement de chaque gène sur la carte. Le gène contrôle (ou « endogeneous gene ») à utiliser pour la normalisation des résultats est à indiquer avant le lancement de la PCR. Cette dernière est réalisée selon le protocole fourni par Applied Biosystems dans l'appareil ABI Prism 7900HT Sequence detection 14 system. Les étapes de la qPCR sont 2 min à 50°C, 10 min à 94,5°C puis 30s à 97°C et 1 min à 59,7°C pour 40 cycles. [0122] Analyses su-distiques [0123] La PCR quantitative en temps réel peut être exploitée si son efficacité est comprise entre 90% et 110%. Pour chaque échantillon, le nombre de cycles auquel apparaît le signal est déterminé par le logiciel SDS 2.3. Pour un même essai, les niveaux d'expression des transcrits d'intérêt obtenus sont normalisés par rapport à la valeur obtenue pour le gène de ménage Beta-2-microglobuline. Cc gène dont l'expression est constitutive et invariante permet de s'affranchir toutes variations induites au cours de l'expérience (dosage des ARNs totaux, pipetages, étape de reverse transcription, PCR dans l'appareillage). [0124] Dans la méthode de RT-PCR TLDA, la quantification est effectuée en utilisant la méthode comparative de AACt Les valeurs de quantification relative (RQ) obtenues correspondent au niveau d'amplitude (x fois plus ou moins que le contrôle) de l'expression par rapport à notre contrôle ici le non irradié. Le RQ est obtenu par le calcul suivant où le contrôle est égal à 1 : [0125] [Math .1] RO = 2-AACt = 2-(1Ct traité - ACt non traité) [0126] ACt traité = Ct gène cible traité - Ct gène de ménage traité [0127] ACt non traité Ct gène cible non traité - Ct gène de ménage non traité [0128] Afin d'évaluer des variations d'activité transcriptionnelle statistiquement signi- ficative, nous utiliserons le test t de Student. Chaque condition est réalisée en triplicate (3 non traités et 3 traités dans les mêmes conditions). Le test-F de Fischer est tout d'abord appliqué en comparant les deux matrices de données. Lorsque la valeur est supérieur à a = 0,05 alors la variance pour le test t de Student est de 2, lorsque le test-F de Fischer est inférieur à a = 0,05 alors la variance sera égale à 3. Les variations transcriptionnelles retenues seront celles qui ont un test t de Student inférieur à a = 0,05. [0129] Les résultats sont présentés en moyenne sur n=3. Le test t de Student a été utilisé pour comparer l'effet entre les cellules traitées et non traitées. [0130] Les résultats sont considérés comme significatifs pour p