FR 3074422 A1 20190607 FR 1761736 A 20171206 SOLUTION INJECTABLE A PH 7 COMPRENANT AU MOINS UNE INSULINE BASALE DONT LE PI EST COMPRIS ENTRE 5,8 ET 8,5 ET UN CO-POLYAMINOACIDE PORTEUR DE CHARGES CARBOXYLATES ET DE RADICAUX HYDROPHOBES [0001] L'invention concerne les therapies par injection d'insuline(s) pour traiter le diabete. [0002] L'invention conceme des compositions stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins une insuline basale dont le point isoelectrique (pI) est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes. [0003] L'insulinotherapie, ou therapie du diabete par injection d'insuline, a connu ces dernieres annees des progres remarquables grace notamment la mise au point de nouvelles insulines offrant une meilleure correction de la glycernie des patients en comparaison de l'insuline humaine et qui pernnettent de mieux simuler ractivite physiologique du pancreas. [0004] Lorsqu'un diabete de type II est diagnostique chez un patient, un traitement graduel est mis en place. Le patient prend en premier lieu des antidiabetiques oraux (OAD) comme la Metformine. Lorsque les OAD seuls ne suffisent plus a reguler le niveau de glucose dans le sang, un changement dans le traitement doit etre fait et, en fonction des specificites des patients, differentes associations de traitements peuvent etre mises en place. Le patient peut par exemple avoir un traitement a base d'une insuline basale de type insuline glargine ou insuline detemir en complement des OAD, puis ensuite en fonction de revolution de la pathologie un traitement a base d'insuline basale et d'insuline prandiale. [0005] Par ailleurs, aujourd'hui, pour assurer la transition des traitements par les OAD, lorsque ceux-ci ne sont plus en mesure de controler le niveau de glucose dans le sang, vers un traitement insuline basale/insuline prandiale, rinjection d'analogues de GLP-1 RA est preconisee. [0006] Les GLP-1 RA pour agonistes du recepteur Glucagon-Like Peptide-1, sont des peptides insulinotropiques ou incretines, et appartiennent a la famille des hormones gastro-intestinales (ou Gut Hormones) qui stimulent la secretion d'insuline lorsque la glycemie est trop elevee, par exemple apres un repas. [0007] Les hormones gastro-intestinales (Gut hormones) sont aussi appelees hormones de satiete. Elles comprennent notamment le GLP-1 RA (Glucagon like peptide-1 receptor agonist) et le GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), 2 l'oxyntonnoduline (un derive du proglucagon), le peptide YY, l'amyline, la cholecystokinine, le polypeptide pancreatique (PP), la ghreline et l'enterostatine qui ont des structures peptidiques ou proteiques. Elles stimulent egalement la secretion d'insuline, en reponse au glucose et aux acides gras et sont donc ce titre des candidats 5 potentiels pour le traitement du diabete. [0008] Parmi celles-ci, les GLP-1 RA sont celles qui ont apporte ce jour les meilleurs resultats dans le developpement de medicaments. Elles ont permis a des patients atteints de diabete de type II de perdre du poids tout en ayant un meilleur controle de leur glycemie. 10 [0009] Des analogues ou des derives de GLP-1 RA ont ainsi ete developpes notamment pour ameliorer leur stabilite. [00010] D'autre part, pour couvrir ses besoins journaliers en insuline, un patient diabetique dispose, actuellement, de fawn schematisee, de deux types d'insulines ayant 15 des actions complementaires : les insulines prandiales (ou insulines dites a action rapide) et les insulines basales (ou insulines dites a action lente). [00011] Les insulines prandiales permettent une prise en charge rapide (metabolisation et/ou stockage) du glucose apporte lors des repas at collations. Le patient doit s'injecter une insuline prandiale avant chaque prise alimentaire, soit environ 20 2 a 3 injections par ]our. Les insulines prandiales les plus utilisees sont : l'insuline humaine recombinante, NovoLog® (insuline aspart de NOVO NORDISK), Humalog® (insuline lispro de ELI LILLY) et Apidra® (insuline glulisine de SANOFI). [00012] Les insulines basales assurent le maintien de l'homeostasie glycemique du patient, en dehors des periodes de prise alimentaire. Elles agissent essentiellement pour 25 bloquer la production endogene de glucose (glucose hepatique). La dose journaliere d'insuline basale correspond generalement a 40-50 % des besoins totaux journaliers en insuline. Selon l'insuline basale utilisee, cette dose est dispensee en 1 ou 2 injections, regulierement reparties au cours de la journee. Les insulines basales les plus utilisees sont Levemir® (insuline detemir de NOVO NORDISK) et Lantus® (insuline glargine de 30 SANOFI). [0001]] On notera pour etre exhaustif que la NPH (insuline NPH pour Neutral PrOtamine Hagedorn ; Humuline NPH®, Insulatard®) est la plus ancienne insuline basale. Cette formulation est le resultat d'une precipitation de l'insuline humaine (anionique pH neutre) par une proteine cationique, la protamine. Les microcristaux ainsi forme's 35 sont disperses dans une suspension aqueuse et se dissolvent lentement apres injection sous-cutande. Cette dissolution lente assure une liberation prolong& de l'insuline. Cependant cette liberation n'assure pas une concentration constante d'insuline au cours du temps. Le profil de liberation est en forme de cloche et dure seulement entre 12 at 3 16 heures. Elle est donc inject& deux fois par jour. Cette insuline basale NPH est bien moms perfornnante que les insulines basales modernes, Levemir® et Lantus®. La NPH est une insuline basale a action internnediaire. [00014] Le principe de la NPH a dvolue avec l'apparition des insulines analogues 5 rapides pour donner des produits appelds « Premix » offrant a la fois une action rapide et une action intermediaire. NovoLog Mix® (NOVO NORDISK) et Humalog Mix® (ELI LILLY) sont des formulations comprenant une insuline analogue rapide, Novolog® at Humalog®, complex& partiellement par la protamine. Ces formulations contiennent ainsi des microcristaux d'insuline analogue dont l'action est dite internnediaire et une 10 partie d'insuline rest& soluble dont l'action est rapide. Ces formulations offrent bien l'avantage d'une insuline rapide mais elles ont aussi le defaut de la NPH, c.-à-d. une durde d'action limit& entre 12 et 16 heures et une insuline liberde en « cloche ». Cependant, ces produits permettent au patient de s'injecter en une seule fois une insuline basale a action intermediaire avec une insuline prandiale a action rapide. Or 15 nombreux sont les patients soucieux de reduire leur nombre d'injections. [00015] Les insulines basales actuellement comnnercialisees peuvent etre classees an fonction de la solution technique qui permet d'obtenir l'action prolong& et a ce jour deux approches sont utilisees. [00016] La premiere, celle de l'insuline detemir est la liaison a l'albunnine in vivo. Il 20 s'agit d'un analogue, soluble a pH 7, qui comprend une chaine laterale d'acide gras (tetradecanoyl) fix& a la position B29 qui, in vivo, permet cette insuline de s'associer l'albumine. Son action prolong& est principalement due a cette affinite pour l'albumine apres injection sous-cutanee. [00017] Cependant son profil pharmacocinetique ne permet pas de couvrir une 25 journde, ce qui fait qu'elle est le plus souvent utilisde en deux injections par jour. [00018] Une autre insuline soluble a pH 7, est l'insuline degludec commercialisee sous le nom de Tresibed. Elle comprend dgalement une chaine laterale d'acide gras fix& sur l'insuline (hexadecandioyl-y-L-Glu). [00019] La seconde, celle de l'insuline glargine, est la precipitation a pH 30 physiologique. L'insuline glargine est un analogue de l'insuline humaine obtenu par elongation de la partie C-terminale de la chaine B de l'insuline humaine par deux residus arginine, et par substitution du residu d'asparagine A21, par un residu de glycine (US 5,656,722). L'addition de deux residus d'arginine a etd pens& pour ajuster le pI (point isodlectrique) d'insuline glargine au pH physiologique, at ainsi rendre cet analogue de 35 l'insuline humaine insoluble en milieu physiologique. [00020] Aussi, la substitution de l'A21 a ete pensde afin de rendre l'insuline glargine stable a pH acide et pouvoir ainsi la formuler sous forme de solution injectable a pH acide. Lors de l'injection sous-cutanee, le passage de l'insuline glargine d'un pH acide 4 (pH 4-4,5) a un pH physiologique (pH neutre) provoque sa precipitation sous la peau. La redissolution lente des micro-particules d'insuline glargine assure une action lente et prolongee. [00021] L'effet hypoglycemiant de l'insuline glargine est quasi-constant sur une 5 duree de 24 heures ce qui permet a la plupart des patients de se limiter a une seule injection par jour. [00022] L'insuline glargine est consideree aujourd'hui comme l'insuline basale la plus utilisee. [00023] Cependant le pH necessairement acide des formulations d'insulines 10 basales, dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5, de type insuline glargine, peut etre un reel inconvenient, car ce pH acide de la formulation d'insuline glargine entraine parfois chez les patients des douleurs a !Injection et surtout empeche toute formulation avec d'autres proteines et en particulier avec les insulines prandiales car ces demieres ne sont pas stables a pH acide. L'impossibilite de formuler une insuline 15 prandiale, a pH acide, tient au fait qu'une insuline prandiale subit, dans ces conditions, une reaction secondaire de deamidation en position A21, ce qui ne permet pas de repondre aux exigences de stabilite applicables aux medicaments injectables. [00024] A ce jour, dans les demandes WO 2013/021143 Al, WO 2013/104861 Al, WO 2014/124994 Al et WO 2014/124993 Al il a ete demontre qu'il etait possible de 20 solubiliser ces insulines basales, de type insuline glargine dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5, a pH neutre, tout en maintenant une difference de solubilite entre le milieu in-vitro (le contenant) et le milieu in-vivo (sous la peau), independamment du pH. [00025] La demande WO 2013/104861 Al, en particulier, decrit des compositions 25 sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est connpris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moms (a) une insuline basale dont le point isoelectrique pI est compris entre 5,8 et 8,5 et (b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates substitue par des radicaux hydrophobes. [00026] Ces compositions de l'art anterieur ont l'inconvenient majeur de ne pas etre 30 suffisamment stables pour repondre aux cahiers des charges applicables aux formulations pharmaceutiques. [00027] Il existe donc un besoin de trouver une solution qui permet de solubiliser une insuline basale dont le point isoelectrique (pI) est compris entre 5,8 et 8,5 tout en conservant son profil basal apres injection mais qui permettent egalement de satisfaire 35 a des conditions de stabilite physique standard pour les produits pharmaceutiques a base d'insuline. [00028] De maniere surprenante, la demanderesse a trouve que les co- polyanninoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes selon 5 l'invention permettent d'obtenir des compositions sous forme de solutions qui non seulement repondent aux exigences decrites dans WO 2013/104861 Al mais qui de plus sont en mesure de conferer une stabilite physique a melioree auxdites compositions sans avoir augmenter la quantite d'excipients utilisee. 5 [00029] Ces performances a priori jamais atteintes sont de plus conservees lorsque l'insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est associee dans la composition avec une insuline prandiale et/ou une hormone gastro-intestinale. [00030] Ainsi, de facon surprenante, l'affinite des co-polyaminoacides selon l'invention pour l'insuline glargine a ete augmentee en ce qu'elle permet d'obtenir une 10 solubilisation et une stabilisation des solutions d'insuline glargine un ratio [Hy]/[insuline basale] inferieur celui de l'art anterieur ; ces resultats sont de plus obtenus sans alterer, voire en ameliorant, la propension de l'insuline glargine precipiter comme cela est demontre dans la partie experimentale. [00031] Cette amelioration de l'affinite permet en outre dans le cadre de 15 traitements chroniques de limiter le niveau d'exposition auxdits excipients. [00032] Les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy selon l'invention presentent une excellente resistance a l'hydrolyse. Ceci peut notamment etre verifie en conditions accelerees, par exemple par des tests d'hydrolyse a pH basique (pH 12). 20 En outre des tests d'oxydation forcee, par exemple du type oxydation de Fenton, montrent que les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy presentent une bonne resistance a l'oxydation. [00033] L'invention concerne ainsi des compositions stables physiquement sous 25 forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins : a) une insuline basale dont le point isoelectrique (pI) est compris entre 5,8 et 8,5 et b) un co-polyaminoacide de formule I 30 Q[Hy]i[PLG1k Formule I Dans laquelle : j 1 ; k 2 35 ledit co-polyaminoacide de formule I etant porteur de charges carboxylates et constitue d'au moms deux chaines d'unites glutamiques ou aspartiques PLG Dees entre elles par un radical ou spacer Q[-1, (i?3 avec i = j + k) lineaire ou ramifie au moms trivalent 6 constitud d'une chaine alkyle comprenant un ou plusieurs heteroatomes choisis dans le groupe constitue des atomes d'azote et d'oxygene et/ou portant un ou plusieurs heteroatomes constitue des atomes d'azote et d'oxygene et/ou des radicaux portant un ou plusieurs heteroatomes constitud des atonnes d'azote at d'oxygene et/ou des 5 fonctions carboxyles !edit radical Q[-*], portant au moms un radical hydrophobe monovalent -Hy; - ledit radical ou spacer Q[-*], etant lid aux au moms deux chaines d'unites glutamiques ou aspartiques PLG par une fonction amide et, - ledit radical ou spacer Q[-*], etant lie au au moms un radical hydrophobe -Hy 10 de formule X ci-apres definie par une fonction amide. - lesdites fonctions amides liant ledit radical ou spacer Q[-1, aux au moins deux chaines d'unites glutamiques ou aspartiques resultent de la reaction entre une fonction amine et une fonction acide respectivement portees soit par le precurseur Q' du radical ou spacer Q[-1, soit par une unite glutamique ou aspartique. 15 - la fonction amide liant !edit radical ou spacer Q[-*], au, au moms un radical hydrophobe -Hy de formule X resulte de la reaction entre une fonction amine et une fonction acide portees soft par le precurseur Q' du radical ou spacer Q[-*], soit par le precurseur Hy' du radical hydrophobe -Hy. 20 [00034] Le pH des compositions selon l'invention est compris entre 6,0 et 8,0, de preference compris entre 6,6 et 7,8 ou encore plus prefdrentiellement entre 6,8 et 7,6. [00035] Ledit co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moms un radical hydrophobe -Hy est soluble en solution aqueuse a pH compris entre 6 et 8, a une temperature de 25°C et a une concentration au moms dgale a 60 mg/ml. 25 [00036] On entend par « composition stable physiquement » des compositions qui satisfont aux criteres de l'inspection visuelle decrite dans la pharmacopee europeenne, americaine et intemationale, c'est-à-dire des compositions qui sont claires et qui ne contiennent pas de particules visibles, mais egalement incolores. [000]7] On entend par « solution aqueuse injectable » des solutions a base d'eau 30 qui repondent aux conditions des pharmacopees EP et US. [00038] On entend par « co-polyaminoacide etant constitue d'unites glutamiques ou aspartiques » des enchainements lindaires non cycliques d'unites acide glutamique ou acide aspartique Nees entre elles par des liaisons peptidiques, lesdits enchainements presentant une partie C-terminale, correspondant l'acide carboxylique d'une 35 extremite, et une partie N-terminale, correspondant l'amine de l'autre extremite de l'enchainement. 7 [00039] On entend per « soluble », susceptible de permettre de preparer une solution limpide et depourvue de particules une concentration inferieure a 60 mg/ml dans de l'eau distill& a 25°C. 5 [00040] Dans un mode de realisation, le radical ou spacer Q[-*], (i?.3) est represente par un radical de formule II : = ({Q1)[_*1 Formule II 10 Dans laquelle 15. q 55 Les radicaux Q' etant identiques ou differents et choisis dans le groupe constitue par les radicaux de formules III a VI suivantes, pour former Q[-*]. (13) 15 Fornnule III Dans laquelle 1 _5 t .:l. [00043] Dans un mode de realisation, si Fa et Fa' sont -CO- et -NH- , alors ta.l. [00044] Dans un mode de realisation, si Fb et Fb` sont -NH-, alors u et ui'?.2 et/ou 20 u2'?:2. [00045] Dans un mode de realisation, si Fc, Fc' et Fe" sont -NH- alors au moms deux de v, v' et v" sont differents de 0. [00046] Dans un mode de realisation, si Fc, Fc' et Fe" sont 2 -NH- et 1 -CO- alors 25 au moms un des indices des -(CH2)- portant un azote est different de 0. [00047] Dans un mode de realisation, si Fc, Fc' et Fc" sont 1 -NH- et 2 -CO- alors pas de conditions. [00048] Dans un mode de realisation, si Fc, Fc' et Fe" sont -CO- alors au moms un de v, v' et v" est different de 0. 30 [00049] Dans un mode de realisation, si Fd et Fd' sont -NH-, wl et w1' _2 et/ou w2 et w'2 2. [00050] Dans un mode de realisation, si Fd et Fd' sont -CO-, w1 et wl' ?1 et/ou w2 et w2' 1.. 35 [00051] Dans un mode de realisation, si Fd et Fd' sont -CO- et -NH-, w1 et w1' ..1 et/ou w2 et w2' .n. 9 [00052] Hy et PLG etant lies a Q[-*]; par une fonction Fx ou Fy par une liaison covalente pour former une liaison amide avec une fonction -NH- ou -CO- du PUG ou de Hy. 5 [00053] Dans un mode de realisation, 15_ q 4. [00054] Dans un mode de realisation, v + v' +v" 15. [00055] Dans un mode de realisation, au moins un des Q' est un radical de formule 10 III, [00056] dont le precurseur est une diamine. [00057] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule III est une diamine choisie dans le groupe constitue par l'ethylene diamine, la butylenediamine, 15 l'hexylenediamine, le 1,3-diaminopropane et le 1,5-diaminopentane, la propylene diamine, la pentylene diamine. [00058] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule III est un am inoacide. [00059] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule III est un 20 aminoacide choisi dans le groupe constitue par l'acide aminobutanoique, l'acide aminohexanoique et la beta-alanine. [00060] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule III est un diacide. [00061] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule III est un 25 diacide choisi dans le groupe constitue par l'acide succinique, l'acide glutarique et l'acide adipique. [00062] Dans un mode de realisation, au moins un des Q' est un radical de formule IV, 30 * Fb-[ CH2 h7 (CH2L1111. 1( CH2H- LI U112 Iv dont le precurseur est une diamine. [00063] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule IV est une diamine choisie dans le groupe constitue par le diethyleneglycoldiamine, le 35 triethyleneglycol diamine, le 1-amino-4,9-dioxa-12-dodecanamine et le 1-amino- 4,7,10-trioxa-13-tridecanamine. 10 [00064] Dans un mode de realisation, au moins un des Q' est un radical de formule V, -Fe--IC H2 IT 5 \ [CH2-- Fe..-* dont le precurseur est choisi dans le v" groupe constitue par les acides amines. [00065] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule V est un acide amine choisi dans le groupe constitue par la lysine, l'acide aspartique, l'acide glutamique, l'ornithine, l'acide 1,3-diaminopropionique. 10 [00066] Dans un mode de realisation, au moins un des Q' est un radical de formule *-Fe----ICH2 \ \ v" dont le precurseur est choisi dans le groupe constitue par les triacides. 15 [00067] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de fornnule V est un triacide choisi dans le groupe constitue par l'acide tricarballylique. [00068] Dans un mode de realisation, au moins un des Q' est un radical de formule V, * -Fe-CH2 17 CH \ IC H2-1- Fe..-* " 20 v dont le precurseur est choisi dans le groupe constitue par les triamines. [00069] Dans un mode de realisation, le precurseur du radical de formule V est une triamine choisie dans le groupe constitue par la tris-2(2-aminomethane)amine. /ICH2-17 Fe.- 25 11 [00070] Dans un mode de realisation, au moms un des Q' est un radical de formule VI, CH2 CH2 * I [rH L, I (CH23- Fdr--- W 1 2 ,,,,, W2 vv 2 * dont le precurseur est une triamine. 5 [00071] Dans un mode de realisation, w"2= 0 et le precurseur du radical de formule VI est une triamine choisie dans le groupe constitue par la spernnidine, la norspernnidine, et la diethylenetriamine et la bis(hexamethylene)triamine. [00072] Dans un mode de realisation, w"2=0 et le precurseur du radical de formule VI est la spernnidine. 10 [00073] Dans un mode de realisation, w"2=0 et le precurseur du radical de formule VI est la norspermidine. [00074] Dans un mode de realisation, w"2=1 et le precurseur du radical de formule VI est une tetramine. [00075] Dans un mode de realisation, w"2=1 et le precurseur du radical de formule 15 VI est une tetramine choisie dans le groupe constitue par la spermine et la triethylenetetramine. [00076] Dans un mode de realisation, les PLG sont lies a Fx avec Fx = -NH- ou a Fy 20 par au moms une fonction carbonyle du PLG. [00077] Dans un mode de realisation, les PLG sont lies a Fx avec Fx = -NH- ou a Fy par au moms une fonction carbonyle qui n'est pas en position C terminale du PLG. [00078] Dans un mode de realisation, les PLG sont lies a Fx avec Fx = -NH- ou a Fy par la fonction carbonyle en position C terminale du PLG. 25 [00079] Dans un mode de realisation, les PLG sont lies a Fx avec Fx = -NH- par la fonction carbonyle en position C terminale du PLG. [00080] Dans un mode de realisation, les PLG sont lies a Fx avec Fx = Fy par la fonction carbonyle en position C terminale du PLG. [00081] Dans un mode de realisation, les Hy sont lies a Fx avec Fx = -NH- ou a Fy 30 par une fonction carbonyle de Hy portee par GpR, GpA, GpG, GpH, GpL ou GpC. [00082] Dans un mode de realisation, les Hy sont lies a Fy par une fonction carbonyle de Hy portee par GpR, GpA, GpG, GpH, GpL ou GpC. [00083] Dans un mode de realisation, les Hy sont lies a Fx avec Fx = -NH- par une fonction carbonyle de Hy port& par GpR, GpA, GpG, GpH, GpL ou GpC. 12 [00084] Dans un mode de realisation, les PLG sont lies Fx, avec Fx = -CO- par l'atome d'azote en position N terminale du PLG. [00085] Dans un mode de realisation, les Hy sont lies Fx avec Fx = -CO- par un atome d'azote de Hy porte par GpA~ GpA, GpG, GpL ou GpH. [00086] Dans un mode de realisation les q Q' sont choisis dans le groupe comprenant les radicaux de formules VI, III et IV et Q comprend un radical de formule VI avec q 1 et Q[-*]i est un radical dans lequel i=3 et ledit co-polyaminoacide de formule I est un copolyaminoacide de formule generale Q[HyMPLG]k Avec j=1 et k=2 - Hy demi par la formule X est lie Q' via une liaison covalente a Fa, Fa', Fb, Fb', 15 Fd, Fd' ou Fy formant ainsi une liaison amide - les 2 chaines PLG etant lie'es Q' via une liaison covalente a Fa, Fa', Fb, Fb', Fd, Fd' ou Fy, fornnant ainsi une liaison amide. [00087] Dans un mode de realisation q = 1. 20 [00088] Dans un mode de realisation, Hy est lie Q' via une liaison covalente entre Fy et une fonction carbonyle de Hy port& par GpR, GpA, GpG, GpH ou GpL pour former une liaison amide. [00089] Dans un mode de realisation, les PLG sont lies Q' via une liaison covalente entre Fd, Fd' (Fd et Fd' = -NH-) at la fonction carbonyle an position C terminale de la 25 chaine PLG, formant ainsi une liaison amide. [00090] Dans un mode de realisation Q' est un radical de formule VI. [00091] Dans un mode de realisation Q' est un radical de formule VI dans laquelle : 30 w2=w"2=0 et 3 :54 et 3 Dans un mode de realisation, Q' est un radical de formule VI dans laquelle w2=w"2=0 et wi=3 et wi'=4. [00092] Dans un mode de realisation, Q' est un radical de formule VI dans laquelle w2=w"2=0 et wi=w1.'=3. 35 5 10 [0009]] Dans un mode de realisation Fd=Fd'=-NH- et sont Bees chacune independamment par une liaison covalente une fonction carbonyle terminale d'un PLG 13 formant une liaison amide et Fy est Hee par une liaison covalente une fonction carbonyle de l'hydrophobe Hy formant une liaison amide. [00094] Dans un mode de realisation les q Q' sont choisis dans le groupe 5 comprenant les radicaux de formules III, IV et V et Q comprend au moms un radical de formule V avec q 1 et Q[-*]i est un radical dans lequel i=3 et ledit co-polyaminoacide de formule I est un copolyaminoacide de formule generale Q[Hy]i[PLG1k 10 Avec j=1 et k=2 Hy etant Mini par la formule X, lie Q' via une liaison covalente Fc, Fc', Fc", Fb, Fb', Fa ou Fa' formant ainsi une liaison amide les 2 chaines PLG etant liees Q' via une liaison covalente avec Fc, Fc', Fc", Fb, 15 Fb', Fa ou Fa', formant ainsi une liaison amide. [00095] Dans un mode de realisation, Hy est lie Q' via une liaison covalente avec une fonction carbonyle de Hy portee par GpR, GpG, GpA, GpH, GpL ou GpC pour former une liaison amide. 20 [00096] Dans un mode de realisation, Hy est lie Q' via une liaison covalente avec une fonction amine de Hy portee par GpR, GpG, GpA, GpL ou GpH pour former une liaison amide. [00097] Dans un mode de realisation, les chaines PLG sont Dees Q' via une liaison 25 covalente entre Fc, Fc", Fb, Fb', Fa ou Fa' et la fonction carbonyle en position C terminale de la chaine PLG, formant ainsi une liaison amide. [00098] Dans un mode de realisation, les chaines PLG sont fides Q' via une liaison covalente entre Fc, Fc", Fb, Fb', Fa ou Fa' et la fonction amine en position N terminale de la chaine PLG, formant ainsi une liaison amide. 30 [00099] Dans un mode de realisation Q' est un radical de formule V et q =1. [000100] Dans un mode de realisation Q' est un radical de formule V lie a un ou deux radicaux de formule III et 2 3. [000101] Dans un mode de realisation Q' est un radical de fornnule V lie un ou deux radicaux de formule IV et 2 3. 35 [000102] Dans un mode de realisation Q' est un radical de formule V lie un ou deux radicaux de formule III et q = 2. 14 [000103] Dans un mode de realisation les q Q' sont choisis dans le groupe comprenant les radicaux de formules III, IV ou V et Q comprend au moins deux radicaux de formule V, avec 2 q 4 et Q[-*]i est un radical dans lequel i=4 et ledit co- 5 polyaminoacide de formule I est un copolyaminoacide de formule generale Q[HyMPLG]k Avec j=2 et k=2 10 les 2 Hy etant Minis par la formule X, lies Q' via une liaison covalente avec Fa, Fb ou Fc', formant une liaison amide, les 2 chaines PLG etant !ides Q' via une liaison covalente avec Fa, Fb ou Fc", formant ainsi une liaison amide. 15 [000104] Dans un mode de realisation, les 2 Hy etant Minis par la formule X, lies a Q' via une liaison covalente avec Fc', formant une liaison amide, et les 2 chaines PLG etant liees Q' via une liaison covalente avec Fc", formant ainsi une liaison amide. [000105] Dans un mode de realisation, q = 2. 20 [000106] Dans un mode de realisation, q = 3 [000107] Dans un mode de realisation, q = 4. [000108] Dans un mode de realisation, Fc est -CO- et Fa, Fa', Fb et Fb' sont -NH-. [000109] Dans un mode de realisation, Fc' est -NH- et Hy est lie Fc' par la fonction 25 carbonyle portee par GpR, GpG, GpA GpH ou GpL de Hy. [000110] Dans un mode de realisation, Fe" est -NH- et PLG est lie a Fe" par la fonction carbonyle en position C terminale du PLG. [000111] Dans un mode de realisation Q est un radical forme des radicaux choisis 30 dans les radicaux de formules IV ou V avec au moms deux radicaux de formule V, avec 2 5_q.5. 3 et Q[-]i est un radical dans lequel i=4. [000112] Dans un mode de realisation Q est un radical forme des radicaux choisis dans les radicaux de formules III ou V avec au moins deux radicaux de formule V, avec 2 5.q. 3 et Q[-]i est un radical dans lequel i=4. 35 [000113] Dans un mode de realisation Q est un radical forme des radicaux choisis dans les radicaux de formule V avec au moms deux radicaux de formule V, avec 2 3 et Q[-]i est un radical de formule dans lequel i=4. 15 [000114] Dans un mode de realisation les q Q' sont choisis dans le groupe comprenant les radicaux de formules VI et III et Q comprend au moms deux radicaux de formule VI, avec 2 5 q 5 3 et Q[-*]i est un radical dans lequel i=4 et ledit co- 5 polyaminoacide de formule I est un copolyaminoacide de formule generale Q[Hy]j[PLG1k Avec j=2 et k=2 10 les 2 Hy etant Minis par la formule X, lies Q' via une liaison covalente avec Fy, formant une liaison amide, les 2 chaines PLG etant Nees Q' via une liaison covalente avec Fd ou Fd', formant ainsi une liaison amide. 15 [000115] Dans un mode de realisation les q Q' sont choisis dans le groupe comprenant les radicaux de formules VI et III et Q comprend au moms deux radicaux de formule VI, avec q = 3 et Q[-*]i est un radical dans lequel i=4. [000116] Dans un mode de realisation les q Q' sont choisi dans le groupe des radicaux 20 de formules III, IV, V ou VI avec au moms deux radicaux choisis parmi les radicaux de formule V et les radicaux de formule VI, avec 2 5 q 5 5 et Q[-]i est un radical dans lequel 4 5 i 5 6 at ledit co-polyaminoacide de formule I est un copolyaminoacide de formule generale 25 Q[Hy]i[PLG]k Avec j = 1 et 3 5 k 5S Hy Mini par la formule X est lie Q' via une liaison covalente avec Fa, Fb, Fc ou Fy, formant une liaison amide, 30 les k chaines PLG etant Dees a Fa, Fa', Fb, Fb', Fc", Fd ou Fd' par une liaison covalente, formant ainsi une liaison amide. Dans un mode de realisation les q Q' sont choisis dans le groupe des radicaux de formules III, IV, V ou VI avec au moms deux radicaux choisis parmi les radicaux de 35 formule V et les radicaux de formule VI, avec 2 5 q 5 3 at Q[-*]i est un radical dans lequel i =4 et ledit co-polyaminoacide de formule I est un copolyaminoacide de formule generale I : 16 Q[HyMPLG]k Formule I Avec j=1 et k.1.3 5 Hy etant Mini par la formule X, lie Q' via une liaison covalente avec Fc, formant une liaison amide, les 3 chaines PLG etant !ides Fc", Fd, Fd' par une liaison covalente, formant ainsi une liaison amide. 10 [000117] Dans un mode de realisation, Q est un radical forme d'au moms un radical de formule VI et d'au moms un radical de formule V avec q 2 et Q[-liest un radical dans lequel i=4 [000118] Dans un mode de realisation, avec j = 1 at k=3 15 Fc' avec Fc' = -CO- est lie Fy par liaison covalente pour former une liaison amide Fe" est lie une chaine PLG par liaison covalente pour former une liaison amide. [000119] Dans un mode de realisation, Fe" est -NH- et est lie au PLG par le carbonyle en position C terminale pour former une liaison amide. 20 [000120] Dans un mode de realisation, Fc est -NH- at est lie au carbonyle de Hy porte par GpR, GpA, GpG, GpH, GpL ou GpC . [000121] Dans un mode de realisation ledit au moins un radical hydrophobe -Hy est choisi parmi les radicaux de formule X telle que definie ci-dessous : *(GpIR) (GPGHGpA r (GpL GpC 11 a' 25 Formule X dans laquelle - GpR est choisi parmi les radicaux de formules VII, VII' ou VII" : H H (II R N H *-N-R-N-^ Formule VII . ou * Formule VII' ou 0 0 30 *-1-1--Ral--* Formule VII"; GpG et GpH identiques ou differents sont choisis parmi les radicaux de formules XI ou XI': 17 0 °--NN--'G--NH--° Formule XI' H * 11 G N * Formule XI - GpA est choisi parmi les radicaux de formule VIII *-NH- [NHH,. Formule VIII 5 Dans laquelle A' est choisi parmi les radicaux de formule VIII',VIII" ou VIII"' A1 CO Af--Nil - A2 Ai- N - A2 - N- A3 I 1 * Formule VIII' Formule VIII" Formule VIII' 10 -GpL est choisi parmi les radicaux de formule XII 0 HN-* * II A/ 15 - les * indiquent les sites de rattachement des differents groupes lies par des fonctions amides ; - a est un entier egal a 0 ou a 1 et a' = 1 si a = 0 et a' = 1, 2 ou 3 si a = 1 ; - a' est un entier egal a 1, a 2 ou a 3 - b est un entier egal a 0 ou a 1 ; 20 - c est un entier egal a 0 ou a 1, et si c est egal a 0 alors d est egal a 1 ou a 2; d est un entier egal a 0, a 1 ou a 2 ; - e est un entier egal a 0 ou a 1 ; - g est un entier egal a 0, a 1, a 2, a 3 a 4 a 5 ou a 6; - h est un entier egal a 0, a 1, a 2, a 3 a 4 a 5 ou a 6; HN-* Formule XII, GpC est un radical de formule IX : 0 Formule IX; 18 I est un enter egal a 0 ou 1 et l' = 1 si I = 0 et l' = 2 si I = 1 ; r est un entier egal a 0 ou 1, et s' est un entier egal a 0 ou 1 ; A, Ai, A2 et A3 identiques ou differents sont des radicaux alkyles lineaires ou 5 ramifies comprenant de 1 a 6 atomes de carbone; B est un radical alkyle lineaire ou ramifie, eventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 a 9 atomes de carbone ; Cx est un radical alkyl monovalent lineaire ou ramifie, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et : 10 - Lorsque le radical hydrophobe -Hy porte 1 -GpC, alors 9 5 n5 25, Lorsque le radical hydrophobe -Hy porte 2 -GpC, alors 9 5 x 5 15, - Lorsque le radical hydrophobe -Hy porte 3 -GpC, alors 7 5 x 513, ^ Lorsque le radical hydrophobe -Hy porte 4 -GpC, alors 7 5 x 11, Lorsque le radical hydrophobe -Hy porte au moms 5 -GpC alors, 15 6 formant ainsi une fonction amide issue de la reaction d'une fonction amine port& par le precurseur de Q et une fonction acide port& par le precurseur du radical hydrophobe , et 15 o via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyle porte par Q, formant ainsi une fonction amide issue de la reaction d'une fonction amine du precurseur -Hy' du radical hydrophobe et une fonction acide port& par le precurseur du radical Q. le ratio M entre le nonnbre de radicaux hydrophobes at le nombre d'unites 20 glutamiques ou aspartiques etant compris entre 0 Figure 1 : A la figure 1, sont representees les courbes moyennes de glycemie en pourcents de deviation du niveau basal ± erreur standard de la moyenne apres les administrations 5 simultanees et se'parees de Humalog® (100 IU/mL, 0,17 lU/kg) et Lantus® (100 IU/mL, 0,50 U/kg) (cercles pleins) et de la composition CB]-10 (266 U/ml, 0,67 U/kg) (carres vides); les administrations ayant ete realisees sur le chien (n=10), par injection souscutanee. 10 Exemples L'invention est decrite plus en details au travers des exemples suivants de maniere non-!imitative. Partie A - Svnthese des radicaux hydrophobes lies au spacer [000517] Les radicaux hydrophobes lies au spacer sont re s dans 15 le Tableau 1. Molecule Structure hydrophobe Al H2N H2 2 HCI C HI23 H23 81 NH H2N . 2 HCI C13H27 C13H27 N H, 0 C13H27 NH 0 C13H27 A4 NH I. 2 Ha H27Cy3 A5 NH, A2 A3 82 83 All Al2 Tableau 1 : Liste des radicaux hydrophobes lies au spacer. Exemple Al - Molecule 1 : Produit obtenu par couplage entre l'acide laurique et la L-proline 5 [000518] A une solution d'acide laurique (31,63 g, 157,9 mmol) dans le THF (1 L) a temperature annbiante sont ajoutes successivement du N,Ndicyclohexylcarbodiimide (DCC) (33,24 g, 161,1 mmol) et du N-hydroxysuccinimide (NHS) (18,54 g, 161,1 mmol). Apres 18 h d'agitation a temperature ambiante, le milieu est refroidi 0 °C pendant 20 min et fare sur fritte. De la L-proline (20 g, 10 173,72 mmol), de la diisopropylethylamine (DIPEA) (137,5 mL) et de l'eau (120 mL) sont ajoutes au filtrat. Apres 24 h d'agitation a temperature ambiante, le solvant est evapore et le residu est dilue dans l'eau (500 mL). La phase aqueuse est lavee avec de l'acetate d'ethyle (2 x 500 mL), acidifiee jusqu'a pH -1 avec une solution aqueuse d'HCI 1 N puis extraite avec du dichloromethane (3 x 300 mL). Les phases organiques 15 combinees sont sechees sur Na2SO4, filtrees et concentrees sous vide. Rendement : 34,3 g (73 %) RMN (CDCI3, ppnn) : 0,87 (3H) ; 1,26 (16H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2,10 (3H) ; 2,35 (2H) ; 2,49 (1H) ; 3,48 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,60 (1H). LC/MS (ESI) : 298,2 ; (calcule ([M+Hr) : 298,2). 20 84 Molecule 2 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 1 et la L-lysine [000519] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule 1 appliqué A la molecule 1 (33,72 g, 113,36 mmol) et a la L-lysine (8,70 g, 59,51 mmol), un solide blanc de molecule 2 est obtenu. 5 Rendement : 26,2 g (66 %) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,26 (32H) ; 1,35-1,65 (8H) ; 1,85-2,35 (15H) ; 2,87 (1H) ; 3,40-3,75 (5H) ; 4,50-4,75 (3H) ; 7,87 (1H). LC/MS (ESI) : 705,6 ; (calcule ([M+Hr) : 705,6). 10 Molecule 3 : Produit obtenu per la reaction entre la spermidine et le 2-(tert- butoxycarbonyloxyimino)-2-phenylacetonitrile (Boc-ON) [000520] A une solution de spermidine (4,07 g, 28,00 mmol) dans le THF (70 mL) est ajoutee de la triethylamine (TEA, 8,50 g, 84,01 mmol) at le milieu reactionnel est refroidi 0 °C. Une solution de Boc-ON (13,66 g, 55,45 mmol) dans le THF (220 mL) 15 est ajoutee au goutte-A-goutte pendant 6 h 30 puis le milieu est agite pendant 18 h temperature ambiante. Le milieu reactionnel est concentre sous pression reduite, le residu est dilue avec du DCM (280 mL) et la phase organique est lay& successivennent par une solution aqueuse de soude 1 N (2 x 140 mL), de l'eau (140 mL), une solution aqueuse saturee en NaCI (140 mL), sechee sur MgSO4, filtree et 20 concentree sous pression reduite. Un solide blanc de molecule 3 est obtenu apres solubilisation du residu dans le chloroforme, concentration sous pression reduite et sechage sous vide. Rendement : 10,25 g (quantitatif) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 1,38-1,59 (23H) ; 1,61-1,70 (2H) ; 2,60 (2H) ; 2,66 (2H) ; 25 3,12 (2H) ; 3,20 (2H) ; 4,83 (1H) ; 5,17 (1H). LC/MS (ESI) : 346,3 ; (calcule ([M+H]+) : 346,3). Molecule 4 : Produit obtenu par couplage entre la molecule 2 et la molecule 3 [000521] A une solution de molecule 2 (5,56 g, 7,89 mmol) dans le chloroforme 30 (110 mL) sont ajoutes successivement de la triethylamine (1,04 g, 10,26 mmol), du 1-hydroxybenzotriazole (HOBt, 1,39 g, 10,26 mmol) at du N-(3- dimethylaminopropyI)-N'-ethylcarbodiimide (EDC, 1,97 g, 10,26 nnmol). Apres 15 min, la molecule 3 (3,00 g, 8,68 mmol) est ajoutee et le milieu reactionnel est agite pendant 18 h temperature ambiante. La phase organique est lavde successivement 35 avec une solution aqueuse saturee en NH4CI (110 mL), une solution aqueuse saturee an NaHCO3 (110 mL), une solution aqueuse saturee en NaCI (110 mL), sechee sur MgSO4, filtree et concentree sous pression recluite. Une huile jaunatre de molecule 4 est obtenue apres purification par chromatographie surged de silice (eluant : DCM, methanol). Rendement : 6,20 g (78 %) RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,22-2,46 (78H) ; 2,96-3,31 (6H) ; 3,31-3,76 5 (8H) ; 4,29-4,55 (2H) ; 4,65-4,85 (1H). Molecule Al [000522] A une solution de molecule 4 (6,20 g, 6,00 mmol) dans le DCM (75 mL) est ajoutee une solution de HCI 4 N dans le dioxane (15 mL) at le milieu reactionnel 10 est agite pendant 18 h temperature ambiante puis concentre sous pression reduite. Un solide blanc de molecule Al est obtenu apres solubilisation du residu dans le DCM et concentration sous pression reduite. Rendement : 5,25 g (96 %) RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,21-2,46 (60H) ; 2,81-3,34 (6H) ; 3,34-3,77 15 (8H) ; 4,30-4,80 (3H). LC/MS (ESI) : 417,0 ; (calcule ([M+2H]2+) : 416,9). Exemple A2 - Molecule A2 Molecule 5 : Produit obtenu par la reaction entre le chlorure de myristoyle et la L20 proline [000523] A une solution de L-proline (300,40 g, 2,61 mol) dans de la soude aqueuse 2 N (1,63 L) 0 °C est ajoute lentement sur 1 h du chlorure de myristoyle (322 g, 1,30 mol) en solution dans du DCM (1,63 L). A la fin de l'ajout, le milieu reactionnel est remonte a 20 °C en 2 h puis agite 2 h supplementaires. Le mélange 25 est refroidi 0 °C puis une solution de HCI a 37% (215 mL) est ajoutee en 15 min. Le milieu reactionnel est agite 10 min a 0 °C puis 1 h entre 0 °C et 20 °C. La phase organique est separee, lavee avec une solution de HCI 10% (3 x 430 mL), une solution aqueuse saturee en NaCI (430 mL), sechee sur Na2SO4, filtree sur coton puis concentree sous pression reduite. Le residu est solubilise dans de l'heptane (315 mL) 30 puis du pentane (1,6 L) est ajoute sous agitation mecanique. Un solide blanc est obtenu apres filtration sur fritte at sechage sous pression reduite. Rendement : 410,6 g (97 %) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,28 (20H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2,10 (3H) ; 2,36 (2H) ; 2,51 (1H) ; 3,47 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,61 (1H). 86 Molecule 6 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 5 et la L-Lysine [000524] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule 2 et appliqué h la molecule 5 (20,02 g, 61,5 nnmol) et h la L-lysine (4,72 g, 32,29 mmol), un solide blanc de molecule 6 est obtenu apres recristallisation dans l'acetate 5 d'ethyle. Rendement : 12,30 g {5396) RMN 1H (DMSO-ds, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,26 (40H) ; 1,35-1,50 (6H) ; 1,50-2,10 (10H) ; 2,10-2,25 (4H) ; 3,01 (2H) ; 3,31-3,55 (4H) ; 4,10-4,40 (3H) ; 7,68 (0,6H) ; 7,97 (1H) ; 8,27 (0,4H) ; 12,50 (1H). 10 LC/MS (ESI) : 761,8 ; (calcule ([M+H]+) : 761,6). Molecule 7 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 3 et la molecule 6 [000525] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule 4 et appliqué h la molecule 3 (3,00 g, 8,68 mmol) et h la molecule 6 (6,00 g, 7,89 15 mmol), une huile incolore de molecule 7 est obtenue. Rendement : 5,71 g (66 %) RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,23-2.48 (86H) ; 2,96-3,75 (14H) ; 4,30-4,56 (2H) ; 4,65-4,88 (1H). 20 Molecu::-.2 [000526] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule Al at appliqué a la molecule 7 (5,71 g, 5,24 mmol), une huile incolore de molecule A2 est obtenue. [000527] Rendement : 5,19 g (9S9/0) 25 RMN (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,21-2.46 (68H) ; 2,81-3,32 (6H) ; 3,32-3,78 (8H) ; 4,31-4,82 (3H). LC/MS (ESI) : 445,1 ; (calcule ([M+2H]2+) : 444,9). Exemple A3 - Molecule A3 30 Molecule 8: Produit obtenu par la reaction entre la norspermidine et le tert- butylphenylcarbonate [000528] A une solution de norspermidine (15 mL, 107,22 mmol) dans le DMF (70 mL) est ajoutee lentement une solution de tert-butylphenylcarbonate (49,6 mL, 268,06 mmol) dans le DMF (37 nnL) et le mélange est agite a temperature ambiante 35 pendant 16 h. Le milieu reactionnel est concentre sous pression reduite, le residu est repris dans l'eau (200 mL) puis acidifie jusqu'a pH 1,4 avec une solution aqueuse de HCI 10 %. La phase aqueuse est lavee au methyl tert-butyl-ether (MTBE, 2 x 500 mL), basifiee jusqu'a pH 12 avec une solution aqueuse de soude 10 0/0, at le produit 87 est extrait au DCM (4 x 250 mL). Les phases organiques combinees sont sechees our Na2SO4, filtrees et concentrees sous pression recluite. Un solide blanc de molecule 8 est obtenu apres cristallisation dans l'heptane. Rendement : 27,97 g (7996) 5 RMN 1H (CDCI3, ppm) : 1,44 (18H) ; 1,64 (4H) ; 2,64 (4H) ; 3,20 (4H) ; 5,16 (2H) LC/MS (ESI) : 332,3 ; (calcule ([M+H]+) : 332,3). Molecule 9 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 6 et la molecule 8 [000529] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule 10 4 et appliqué a la molecule 6 (18,00 g, 23,65 mmol) et a la molecule 8 (9,41 g, 28,38 maid), une huile incolore de molecule 9 est obtenue. Rendement : 22,83 g (90 %) RMN 1H (DMSO-ds, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,12-2,02 (80H) ; 2,02-2,30 (4H) ; 2,77-3,60 (14H) ; 4,16-4,41 (2H) ; 4,45-4,62 (1H) ; 6,59-6,94 (2H) ; 7,60-8,38 (21-I). 15 LC/MS (ESI) : 1075,3 ; (calcule ([M+H]+) : 1074,9). Molecule A3 [000530] Apres un procOde similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule Al et appliqué a la molecule 9 (22,80 g, 21,22 mmol), le residu obtenu est 20 solubilise dans le DCM, la phase organique est lavee par une solution aqueuse de soude 2 N, sechee sur Na2SO4, filtree et concentree sous vide. Un solide incolore de molecule A3 est obtenu apres solubilisation du residu dans de l'eau (1,5 L) at lyophilisation. Rendement: 17,76 g (96 0/0) 25 RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,13-2,28 (70H) ; 2,42-2,61 (4H) ; 2,83-3,61 (10H) ; 4,15-4,43 (2H) ; 4,52-4,73 (1H) ; 7,63-8,34 (2H). LC/MS (ESI) : 438,0, 874,9 ; (calcule ([M+2H]2+) : 437,9, UM+Hr) : 874,7). Example A4 : molecule A4 30 Molecule 10 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 6 et l'acide [2-(2- aminoethoxy)ethoxy]acetique [000531] A une solution de molecule 6 (8,08 g, 10,61 mmol) dans le DMF anhydre (65 nnL) sont ajoutes le NHS (1,23 g, 10,72 mmol) puis le DCC (2,21 g, 10,72 mmol) et le milieu est agite a temperature ambiante pendant 18 h. Le mélange est fare sur 35 fritte puis ajoute lentement sur une solution d'acide [2-(2- aminoethoxy)ethoxy]acetique (1,78 g, 10,91) en suspension dans le DMF (50 mL). Apres 24 h d'agitation a temperature annbiante, de l'acetate d'ethyle (220 mL) et une 88 solution aqueuse de HCI 0,1 N (100 mL) sont ajoutes. La phase organique est separee, lavee par une solution aqueuse saturee en NaCI, sechee sur Na2SO4, filtree et concentree sous vide. Une huile incolore de molecule 10 est obtenue apres purification par chromatographie flash (eluant : DCM, methanol). 5 Rendement : 4,90 g (51 %) RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,22-2,49 (62H) ; 3,09-3,29 (2H) ; 3,32-3,46 (2H) ; 3,46-3,61 (4H) ; 3,61-3,72 (6H) ; 4,13 (2H) ; 4,28-4,55 (3H) ; 7,83-8,26 (1H ). LC/MS (ESI) : 906,8 ; (calcule ([M+H]+) : 906,7). 10 Molecule 11 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 3 at la molecule 10 [000532] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule 4 appliqué a la molecule 3 (2,24 g, 6,49 mmol) et a la molecule 10 (4,90 g, 5,41 mnnol) en solution dans le DMF (15 mL), une huile incolore de molecule 11 est 15 obtenue apres purification par chromatographie flash (eluant : DCM, methanol). Rendement : 5,30 g (790/0) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,20-2,37 (86H) ; 2,99-3,52 (14H) ; 3,52-3,72 (8H) ; 4,14-4,26 (2H) ; 4,35-4,57 (3H) ; 4,78-5,75 (2H) ; 7,00-7,57 (3H). 20 Molecule A4 [000533] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule Al et appliqué a la molecule 11 (5,30 g, 4,29 mmol), une huile incolore de molecule A4 est obtenue. Rendement : 4,30 g (99 %) 25 RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,16-2,62 (68H) ; 2,95-3,93 (22H) ; 4,30-4,79 (5H) ; 7,52-8,67 (9H). LC/MS (ESI) : 517,8, 1033,8 ; (calcule ([M+2H]2+) : 517,4, ([M+H]+) : 1033,8). Example AS : molecule AS 30 Molecule 12 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 6 et rester methylique de la N-epsilon-tert-butyloxycarbonyl-L-Lysine (HLys(Boc)0Me) [000534] A une solution de molecule 6 (43,00 g, 56,49 mmol) dans le THF (375 mL) sont ajoutes a 0 °C de la DIPEA (8,76 g, 67,79 mmol), du HOBt (865 mg, 5,65 mmol) et de l'EDC (11,91 g, 62,14 mmol). Apres 15 min d'agitation la HLys(Boc)0Me 35 (20,12 g, 67,79 mmol) est ajoutee et le milieu reactionnel est agite pendant 24 h a 0 °C. Le residu est concentre sous pression reduite, repris dans l'acetate d'ethyle (300 mL) et la phase organique est lavee par une solution aqueuse saturee an NaHCO3 (150 mL), une solution aqueuse de HCI a 5 % (2 x 150 mL) puis une solution 89 aqueuse saturee an NaCI (2 x 150 mL). Apres sechage sur Na2SO4 et filtration, le milieu est concentre sous pression reduite. Un solide transparent de molecule 12 est obtenu. Rendement : 55,80 g (98q6) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,87 (6H) ; 1,18-1,74 (61H) ; 1,74-2,07 (8H) ; 2,07-2,38 (8H) ; 2,96-3,17 (3H) ; 3,30-3,50 (3H) ; 3,54-3,67 (2H) ; 3,71 (3H) ; 4,25-4,40 (1H) ; 4,44-4,63 (31-I) ; 4,74-4,98 (1H) ; 7,10 (1H) ; 7,48 (1H) ; 7,65 (1H). LC/MS (ESI) : 1003,8 (calcule ([M+H]+) : 1003,8). 10 Molecule 13 : Produit obtenu par saponification de rester methylique de la molecule 12 [000535] Une solution de molecule 12 (55,8 g, 55,61 mnnol) dans le THF/methanol 1:1 (370 mL) est refroidie A 0 °C, puis une solution de LiOH (2,0 g, 83,41 mmol) dans l'eau (185 mL) est ajoutee lentennent. Le milieu reactionnel est agite pendant 15 16 h 0 °C puis 30 min A temperature ambiante. Le residu est concentre sous pression reduite, repris dans du DCM (500 mL) et acidifie par une solution aqueuse de HCI 10 0/0 jusqu'a pH 1. Du DCM (500 mL) est ajoute, la phase organique est separee et la phase aqueuse est extraite au DCM (2 x 300 mL). Les phases organiques combinees sont lavees par une solution aqueuse saturee en NaCI (2 x 20 300 mL), sechees sur Na2SO4, filtrees at concentrees sous pression reduite. Un solide blanc de molecule 13 est obtenu apres cristallisation dans l'acetone. Rendement : 46,1 g (0496) RMN 1H (Pyridine-cis, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,14-2,08 (67H) ; 2,08-2,68 (10H) ; 3,14- 3,97 (8H) ; 4,55-5,22 (4H) ; 7,29-7,42 (1H) ; 8,28-8,59 (1H) ; 8,91-9,39 (2H). 25 LC/MS (ESI) : 989,8 (calcule ([M+H]+) : 989,8). Molecule 14 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 13 et la N-Boc ethylenediamine [000536] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule 30 10 appliqué A la molecule 13 (14,0 g, 14,15 mmol) en solution dans le DCM (94 mL) et la N-Boc ethylenediamine (2,72 g, 16,98 mmol), un solide blanc de molecule 14 est obtenu apres recristallisation dans l'acetonitrile. Rendement : 13,80 g {8696) RMN 1H (DMSO-ds, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,10-2,34 (86H) ; 2,77-3,18 (8H) ; 3,27-3,68 35 (4H) ; 4,00-4,46 (4H) ; 6,26-6,84 (2H) ; 7,45-8,30 (4H). LC/MS (ESI) : 1131,8 (calcule ([M+H]+) : 1131,9). 5 Molecule AS [000537] Apres un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule Al et appliqué a la molecule 14 (13,80 g, 12,19 mmol), le residu obtenu est solubilise dans le DCM, la phase organique est lavde par une solution aqueuse de 5 soude 2 N, sechee sur Na2SO4, filtree et concentree sous vide. Un solide incolore de molecule A5 est obtenu apres recristallisation dans l'acetonitrile. Rendement : 9,76 g (86 0/0) RMN 11-1(DMSO-ds, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,05-2,43 (7211) ; 2,43-2,60 (411) ; 2,89-3,14 (4H) ; 3,28-3,64 (4H) ; 4,00-4,46 (4H) ; 7,49-8,31 (4H). 10 LC/MS (ESI) : 466,4, 931,8 (calcule ([M+2H]2+) : 466,4, ([M+H]+) : 931,8). Example A6 : molecule A-- Molecule 15 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 5 et la N-epsilon-tertbutyloxycarbonyl-L-Lysine (HLys(Boc)0H) 15 [000538] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule 1 appliqué a la molecule 5 (37,00 g, 113,67 mmol) et a la (HLys(Boc)0H) (30,80 g, 125,04 nnmol), un solide blanc de molecule 15 est obtenu apres concentration du milieu reactionnel sous pression reduite, solubilisation du residu dans l'eau (500 mL), lavage de la phase aqueuse l'acetate d'ethyle (2 x 250 mL) puis acidification jusqu'a 20 pH 1 et filtration du precipite forme. Rendement : 61,83 g (98 0/0) RMN IH(DMSO-ds, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,13-2,05 (41H) ; 2,05-2,28 (2H) ; 2,81-2,95 (21-1) ; 3,23-3,55 (2H) ; 4,07-4,15 (0,5H) ; 4,15-4,23 (0,5H) ; 4,30-4,40 (1H) ; 6,30- 6,84 (1H) ; 7,99 (0,5H) ; 8,28 (0,5H) ; 12,51 (1H). 25 LC/MS (ESI) : 554,4 (calcule ([M+H]+) : 554,4). Molecule 16 : produit obtenu par la reaction entre la molecule 15 et la tri(ethyleneglycol)diamine [000539] A une solution de molecule 15 (45,00 g, 81,26 mmol) dans le DCM (540 30 mL) et a 0 °C sont ajoutes successivement du HOBt (1,24 g, 8,13 mmol), la tri(ethyleneglycol)diamine (6,02 g, 40,63 mmol) puis l'EDC (17,14 g, 89,38 mmol). Le mélange reactionnel est agite pendant 1 h 0 °C puis 15 h temperature ambiante. Le milieu est lave avec une solution aqueuse saturee en NaHCO3 (2 x 250 mL), une solution aqueuse de HCI 1 N (2 x 250 mL), une solution aqueuse saturee 35 en NaCI (250 mL), seche sur Na2SO4, fare, et concentre sous pression reduite. Un solide incolore de molecule 16 est obtenu. Rendement : 47,02 g (9S06) 91 RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,11-2,32 (86H) ; 2,80-2,92 (4H) ; 3,12-3,28 (4H) ; 3,28-3,59 (12H) ; 4,08-4,19 (1,3H) ; 4,19-4,34 (2H) ; 4,34-4,46 (0,7H) ; 6,32-6,81 (2H) ; 7,64-7,74 (1,3H) ; 7,74-7,83 (1,3H) ; 7,93-8,00 (0,7H) ; 8,11-8,18 (0,7H). 5 LC/MS (ESI) : 1220,0 (calcule ([M+H]+) : 1219,9). Molecule A6 [000540] Par un procede similaire A celui utilise pour la preparation de la molecule A5 at appliqué a la molecule 16 (23,00 g, 18,86 mmol), un solide blanc de molecule 10 A6 est obtenu. Rendement : 16,43 g (85 %) RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,11-2,05 (68H) ; 2,08-2,31 (4H) ; 2,44-2,54 (4H) ; 3,10-3,58 (16H) ; 4,08-4,18 (1,3H) ; 4,22-4,32 (2H) ; 4,37-4,46 (0,7H) ; 7,66-7,87 (2,6H) ; 7,96-8,06 (0,7H) ; 8,13-8,23 (0,7H). 15 LC/MS (ESI) : 510,5, 1020,0 (calcule ([M+2H]2+) : 510,4, ([M+H]+) : 1019,8). Example Al : molecule A7 Molecule 17 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 5 et l'acide N-beta(tert-butyloxycarbony1)-L-2,3-diaminopropionique (HDap(Boc)0H) 20 [000541] Par un procede similaire A celui utilise pour la preparation de la molecule 1 appliqué a la molecule 5 (100,00 g, 307,23 nnmol) et A la HDap(Boc)OH (65,88 g, 322,59 nnmol), un solide blanc de molecule 17 est obtenu apres concentration de la phase organique sous pression reduite. Celui-ci est directement utilise sans autre purification. 25 Rendement : 141,6 g (9O06) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,18-1,49 (29H) ; 1,54-1,68 (2H) ; 1,82-2,41 (6H) ; 3,37-3,78 (4H) ; 4,31-4,74 (2H) ; 5,61 (1H) ; 7,63 (1H) ; 9,59 (1H). LC/MS (ESI) : 512,2 (calcule ([M+H]+) : 512,4). 30 Molecule 18 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 17 et l'ethylenediamine [000542] Par un procede similaire A celui utilise pour la preparation de la molecule 16 et appliqué A la molecule 17 (41,00 g, 80,12 mmol) et a l'ethylenediamine (2,41 g, 40,06 mmol) en presence de DIPEA (20,71 g, 160,25 mmol), un solide blanc de molecule 18 est obtenu apres recristallisation dans l'acetonitrile. 35 Rendement : 40,80 g (97 %) RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,16-2,40 (74H) ; 2,97-3,63 (12H) ; 4,11- 4,25 (3H) ; 4,25-4,41 (1H) ; 6,54-6,79 (2H) ; 7,58-8,07 (4H). LC/MS (ESI) : 1047,8 (calcule ([M+H]+) : 1047,8). 92 Molecule A7 [000543] Par un procede similaire A celui utilise pour la preparation de la molecule A5 et appliqué A la molecule 18 (35,90 g, 34,27 mmol), un solide blanc de molecule 5 A7 est obtenu. Rendement : 16,43 g (85 0/0) RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,12-1,55 (48H) ; 1,67-2,31 (12H) ; 2,64- 2,82 (4H) ; 2,99-3,25 (4H) ; 3,25-3,61 (4H) ; 4,02-4,12 (1,4H) ; 4,12-4,22 (0,6H) ; 4,22-4,34 (1,4H) ; 4,38-4,45 (0,6H) ; 7,70-8,20 (4H). 10 LC/MS (ESI) : 424,4, 847,7 (calcule ([M+2H]2+) : 424,4, ([M+H]+) : 847,7). Exam' : molecule AS Molecule 19 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 15 et l'ethylenediamine [000544] Par un procede similaire A celui utilise pour la preparation de la molecule 15 18 appliqué A la molecule 15 (16,05 g, 29,0 mmol) et a l'ethylenediannine (0,96 g, 16,0 mmol), un solide blanc de molecule 19 est obtenu apres recristallisation dans l'acetonitrile. Rendement : 19,78 g (60 0/0) RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,09-2,38 (86H) ; 2,80-2,91 (4H) ; 3,00-3,60 20 (8H) ; 4,04-4,15 (1,3H) ; 4,15-4,23 (0,7H) ; 4,23-4,31 (1,3H) ; 4,36-4,45 (0,7H) ; 6,27-6,82 (2H) ; 7,60-8,21 (4H). LC/MS (ESI) : 1131,8, 1153,8 (calcule ([M+H]+) : 1131,9, ([M+Na]+) : 1153,9). 7o-icule AS 25 [000545] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation de la molecule Al et appliqué A la molecule 19 (19,78 g, 17,48 mmol), un solide blanc de molecule A8 est obtenu apres solubilisation du residu dans l'eau, ajout d'une solution aqueuse de soude 2 N jusqu'a formation d'un precipite, filtration et sechage sous pression red u ite. 30 Rendement : 9,93 g (61%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,16-2,25 (68H) ; 2,25-2,39 (4H) ; 2,65-2,83 (4H) ; 3,22-3,54 (6H) ; 3,54-3,74 (2H) ; 4,23-4,37 (2H) ; 4,43-4,58 (2H) ; 7,40 (2H) ; 7,63 (2H). LC/MS (ESI) : 466,7, 931,8 (calcule ([M+2H]2+) : 466,4, ([M+H]+) : 931,8). 35 93 Example A9 : molecule A9 Molecule 20 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 17 at la 4,7,10-trioxa1,13-tridecanediamine [000546] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule 5 18 appliqué a la molecule 17 (32,00 g, 62,54 mmol) et a la 4,7,10-trioxa-1,13- tridecanediamine (6,89 g, 31,27 mmol), un solide blanc de molecule 20 est obtenu. Rendement : 29,23 g (7796) RMN 1H (DMSO-ds, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,17-2,38 (78H) ; 3,01-3,15 (4H) ; 3,15-3,62 (20H) ; 4,09-4,24 (3H) ; 4,28-4,40 (1H) ; 6,58-6,87 (2H) ; 7,41-8,03 (4H). 10 LC/MS(ESI) : 1207,9 (calcule ([M+H]+) : 1207,9). Molecule A9 [000547] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule A5 et appliqué h la molecule 20 (28,30 g, 23,43 mmol), un solide blanc de molecule 15 A9 est obtenu. Rendement : 15,76 g (6J96) RMN 1H (DMSO-ds, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,10-2,33 (64H) ; 2,60-2,86 (4H) ; 3,01-3,19 (4H) ; 3,27-3,62 (16H) ; 4,01-4,13 (1,4H) ; 4,13-4,20 (0,6H) ; 4,20-4,30 (1,4H) ; 4,36-4,46 (0,6H) ; 7,57-7,70 (1,4H) ; 7,70-7,85 (1,4H) ; 7,91-8,03 (0,6H) ; 8,03- 20 8,19 (0,6H). LC/MS (ESI) : 504,4, 1007,9 (calcule ([M+2H]2+) : 504,4, ([M+H]+) : 1007,8). Example Al0 : molecule A10 Molecule 21 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 8 et la molecule 13 25 [000548] Par un procede sinnilaire a celui utilise pour la preparation de la molecule 4 appliqué h la molecule 8 (7,12 g, 21,47 mmol) et h la molecule 13 (17,70 g, 17,89 nnmol) en agitant entre 0 °C et temperature ambiante pendant 16 h, une mousse blanche de molecule A10 est obtenue apres lavage du milieu reactionnel dans le dichloromethane par une solution aqueuse saturee en NaHCO3 (2 x 100 mL), une 30 solution aqueuse de HCI a 10% (2 x 100 nnL), une solution aqueuse saturee en NaCI (50 nnL), sechage sur Na2SO4, filtration et concentration sous vide. Rendement : 20,10 g (0696} RMN 1H (DMSO-do, ppnn) : 0,85 (6H) ; 1,11-3,O4(95H) ; 2,04-2,32 (4H) ; 2,76-3,61 (16H) ; 4,09-4,62 (4H) ; 6,26-7,01 (3H) ; 7,57-8,43 (3H). 35 LC/MS(ESI) : 1303,1, 1325,1 (calcule ([M-i-H]+) : 1303,0, ([M+Na]+) : 1325,0). 94 Molecule A10 [000549] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule AS et appliqué A la molecule 21 (20,10 g, 15,43 mmol), un solide jaune pale de molecule A10 est obtenu. 5 Rendement : 10,70 g (69 %) RMN 1H (DMSO-ds, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,11-2,31 (78H) ; 2,41-2,70 (6H) ; 2,87-3,68 (10H) ; 4,06-4,50 (3H) ; 4,56-4,77 (1H) ; 7,59-8,35 (3H). LC/MS (ESI) : 501,9, 1002,7 (calcule ([M+2H]2+) : 501,9, ([M+H]+) : 1002,8). 10 Example All : molecule All Molecule 22 : Produit obtenu par la reaction de la molecule 6 et du a-tert-butyl-ybenzyl L-glutamate [000550] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule 12 appliqué A la molecule 6 (5,0 g, 6,57 mmol) en solution dans le chloroforme (34 15 mL) et A la a-tert-butyl-y-benzyl L-glutamate (2,167 g, 6,57 mmol), un solide blanc de molecule 22 est obtenu apths purification par chromatographie flash (eluant : DCM, Me0H). Rendement : 6,16 g (90 0/0) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,18-2,51 (75H) ; 2,89-3,68 (6H) ; 4,18-4,66 20 (4H) ; 5,11 (2H) ; 7,11 (1H) ; 7,28-7,41 (5H) ; 7,55 (1H) ; 7,70 (1H). LC/MS (ESI) : 1037,0 (calcule ([M+H]+) : 1036,8). Molecule 23 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 22 et du HCI [000551] A une solution de la molecule 22 (6,16 g, 5,94 mmol) dans du DCM (60 25 mL) est ajoutee une solution de HCI 4N dans le dioxane (15 mL). Apths 48 h A temperature ambiante, le milieu thactionnel est concentre sous pression thduite et le residu est purifie par chromatographie flash (eluant : DCM, MeOH). Rendement : 3,05 g (51 %) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,14-2,58 (66H) ; 2,98-3,69 (6H) ; 4,24-4,61 30 (4H) ; 5,10 (2H) ; 7,27-7,40 (5H) ; 6,75-7,60 (3H). LC/MS (ESI) : 980,8 (calcule ([1v1I-Hr) : 980,7). Molecule 24 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 23 et la moldcule 3 [000552] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule 35 4 appliqué a la molecule 23 (1,5 g, 1,53 mmol) at A la molecule 3 (0,582 g, 1,683 mmol) en solution dans le chloroforme (23 mL), une huile incolore de molecule 24 est obtenue apres purification par chromatographie flash (eluant : DCM, methanol). Rendement : 1,54 g {7796) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,18-2,53 (90H) ; 2,85-3,68 (14H) ; 4,24-4,63 (31-I) ; 4,80-4,98 (1H) ; 5,06-5,21 (2H) ; 7,28-7,39 (5H). Molecule All 5 [000553] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule Al et appliqué a la molecule 24 (1,54 g, 1,18 mnnol), un solide blanc du chlorhydrate de la molecule All est obtenu. Rendement : 1,32 g (95 oh) 10 15 Exemple Al2 : molecule Al2 Molecule 25 : Produit obtenu par la reaction entre le Fmoc-Lys(Fmoc)-OH et la resine 2-Cl-trityl chloride [000554] A une suspension de Fmoc-Lys(Fmoc)-OH (7,32 g, 12,40 mmol) dans du dichloromethane (60 nnL) a temperature ambiante est ajoutee de la DIPEA (4,32 20 mL, 24,80 mmol). Apres solubilisation complete (10 min), la solution obtenue est versee sur de la resine 2-CI-trityl chloride prealablement lavee au dichloromethane (100-200 mesh, 1 % DVB, 1,24 mmol/g) (4,00 g, 4,96 mmol), dans un reacteur adapte a la synthese peptidique sur support solide. Apres 2 h d'agitation a temperature ambiante, du methanol grade HPLC (0,8 mL/g resine, 3,2 mL) est ajoute 25 et le milieu est agite a temperature ambiante pendant 15 min. La resine est filtree, lavee successivement avec du dichloronnethane (3 x 60 mL), du DMF (2 x 60 mL), du dichloromethane (2 x 60 mL), de l'isopropanol (1 x 60 mL) et du dichloromethane (3 x 60 mL). 30 Molecule 26 : Produit obtenu par reaction entre la molecule 25 et un melange DMF/piperidine 80:20 [000555] La molecule 25, prealablement lay& au DMF, est trait& avec un mélange DMF/piperidine 80:20 (60 mL). Apres 30 min d'agitation a temperature ambiante, la resine est filtree, lavee successivement avec du DMF (3 x 60 mL), de 35 l'isopropanol (1 x 60 mL) et du dichloromethane (3 x 60 mL). RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,17-2,28 (66H) ; 2,34-3,60 (6H) ; 2,84-3,07 (4H) ; 3,07-3,29 (2H) ; 3,37-3,80 (8H) ; 4,16-4,46 (3H) ; 4,84-4,98 (1H) ; 5,14 (2H) ; 7,30-7,40 (5H). 96 Molecule 27 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 26 at le FmocGlu(OtBu)-OH [000556] A une suspension de Fmoc-Glu(OtBu)-OH (10,55 g, 24,80 mmol) et de 1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium 3-oxide 5 hexafluorophosphate (HATU, 9,43 g, 24,80 mmol) dans un mélange DMF/dichloromethane 1:1 (60 mL) est ajoutee de la DIPEA (8,64 nnL, 49,60 mmol). Apres solubilisation complete, la solution obtenue est versee our la molecule 26. Apres 2 h d'agitation a temperature ambiante, la resine est filtree, lavee successivement avec du DMF (3 x 60 mL), de l'isopropanol (1 x 60 nnL) at du 10 dichloromethane (3 x 60 mL). Molecule 28 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 27 et un mélange DMF/morpholine 50:50 [000557] La molecule 27, prealablement lavee au DMF, est trait& avec un 15 mélange DMF/nnorpholine 50:50 (60 mL). Apres 1 h 15 d'agitation a temperature ambiante, la resine est filtree, lavee successivement avec du DMF (3 x 60 mL), de l'isopropanol (1 x 60 mL) et du dichloromethane (3 x 60 mL). Molecule 29 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 28 et la molecule 5 20 [000558] Par un procede similaire a celui utilise pour la molecule 27 appliqué a la molecule 28 et a la molecule 5 (8,07 g, 24,80 mmol) dans du DMF (60 mL), la molecule 29 est obtenue. Molecule 30 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 29 et un mélange 25 dichloromethane/1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol (HFIP) 80:20 [000559] La molecule 29 est traitee avec un mélange dichloromethane/1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol (HFIP) 80:20 (60 nnL). Apres 20 min d'agitation a temperature ambiante, la resine est filtree et lavee avec du dichloromethane (2 x 60 mL). Les solvants sont evapores sous pression reduite. Deux 30 co-evaporations sont ensuite effectuees sur le residu avec du dichloromethane (60 mL) puis du diisopropylether (60 mL). Le produit est purifie par chromatographie sur gel de silice (dichloromethane, methanol). Un solide blanc de molecule 30 est obtenu. Rendement : 2,92 g (52 % sur 6 etapes) RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,22-2,47 (88H) ; 3,13-3,25 (2H) ; 3,45-3,76 35 (4H) ; 4,24-4,55 (5H). LC/MS (ESI+) : 1131,9 (calcule ([M+H]+) : 1131,8). 97 Molecule 31 : Produit obtenu par la reaction entre la molecule 30 et la molecule 3 [000560] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule 4 appliqué a la molecule 30 (3,12 g, 2,76 mnnol) et a la molecule 3 (1,048 g, 3,03 mmol) en solution dans le chloroforme (40 mL), une huile incolore de molecule 31 5 est obtenue apres purification par chromatographie flash (eluant : DCM, methanol). Rendement : 2,57 g (6496) RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,21-2,47 (112H) ; 2,82-3,74 (14H) ; 4,16-4,53 (4H) ; 4,53-4,78 (1H). 10 Molecule Al2 [000561] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation de la molecule Al et appliqué a la molecule 31 (2,56 g, 1,75 mmol), un solide blanc du chlorhydrate de la molecule Al2 est obtenu. Celui-ci est solubilise dans l'eau (40 mL) par ajout de solution de NaOH 1 N jusqu'a atteindre un pH 7 puis la solution est lyophilisee pour 15 donner un solide blanc de la molecule Al2. Rendement : 2,1 g (95 0/0) RMN 1H (CD30D, ppm) : 0,90 (6H) ; 1,19-2,32 (68H) ; 2,32-2,54 (8H) ; 2,82-3,15 (4H) ; 3,15-3,79 (10H) ; 4,23-4,76 (5H). LC/MS (ESI) : 1146,9 ; (calcule ([M+H]+) : 1146,8). 20 Partie B - Synthese des co-polvarninoacides hvdrophobes [000562] Les co-polyaminoacides hydrophobes sont represent& dans le Tableau 2. 25 Co Structure Polyaminoacide Na0 0 0 ONa B1 V= j0,022, DP (m+n) = 45 111= H ou pyroglutamate i'= 0,045, DP (m+n) = 22 B2 X= 98 X= C111.123 Cii Hz3 = H ou pyroglutamate 99 B3 H B4 NH H it Na0, NH -1= 0,05, DP (m+ri) = 20 O 11 C 1 3H27 X= = H ou pyroglutamate NaO ONa i'= 0,022, DP (m+n) = 46 C13H27 Ri= H ou pyroglutamste i'= 0,015, DP (m+ri) = 66 X= C13H27 Na0 , 0 ONa R1 0 B5 X= C13H27 Ri= H ou pyroglutamate 101 11= 0,056, DP (m+n) = 18 X= R1= H ou pyroglutamate C 3H27 ONa 11= 0,043, DP (m+n) = 23 CI3 = H ou pyroglutamate B8 NH 102 X= R1= H ou pyroglutamate B9 NaO R1 i'= 0,05 , DP (m+n) = 20 X= R1= H ou pyroglutamate 810 i'=0,05 , DP (m+n) = 20 O X= = H ou pyroglutamate B11 NaO 103 ONa 0 i'= 0,042 , DP (m+n) = 24 NI-I X= 27013 R1= H ou pyroglutarr Na0 NH 0 H27013 B12 NH ONa i'= 0,05 , DP (m+n) = 20 = H ou pyroglutamate 104 B13 B14 V= 0,037 , DP (m+n+p) = 27 x= 0 NH 0 H27013 NH NH NH R1= H ou pyroglutamate Ni 0, R1= H ou pyroglutamate i'= 0,026, DP (m+n) = 38 X= 0 0 R1= H ou pyroglutamate Tableau 2 : liste des co-polyaminoacides hydrophobises. Exemple 131: Co-polyaminoacide B1 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule 5 Al et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 6850 gimol [00056]] Dans un contenant adapte sont introduits successivement le sel de chlorhydrate de la molecule Al (3,70 g, 4,09 mmol), du chloroforme (40 mL), du tamis moleculaire 4 A (1,5 g), ainsi que de la resine echangeuse d'ion Amberlite IRN 150 (1,5 g). Apres 2 h 30 d'agitation sur rouleaux, le milieu est fare et la resine est 10 rincee avec du chloroforme. Le mélange est evapore puis co-evapore avec du toluene. Le residu est solubilise dans du DMF anhydre (5 nnL) pour etre utilise directement dans la reaction suivante. [000564] Dans un ballon prealablement seche a l'etuve, du y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (43,04 g, 163,50 mmol) est place sous vide pendant 2 h puis du 15 DMF anhydre (80 mL) est introduit. Le mélange est agite sous argon jusqu'a solubilisation complete, refroidi a 4 °C, puis la solution de molecule Al, preparee comme decrit precedemment, est introduite rapidement. Le mélange est agite entre 4 °C et temperature ambiante pendant 2 jours, puis chauffe a 65 °C pendant 2 h. Le mélange reactionnel est alors refroidi a temperature ambiante puis verse goutte a 20 goutte dans du diisopropylether (3,2 L) sous agitation. Le precipite blanc est recupere 0 - 0 C13H27 CO2N X= 106 par filtration, lave deux fois avec du diisopropylether (150 mL), puis seche sous vide a 30 °C pour obtenir un solide blanc. Le solide est dilue dans de l'acide trifluoroacetique (152 mL), et une solution de HBr a 33 Wo dans de l'acide acetique (106 mL) est alors ajoutee goutte a goutte et a 0 °C. La solution est agitee pendant 5 2 h a temperature annbiante puis coulee goutte a goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropylether/eau sous agitation (1,8 L). Apres 2 h d'agitation, le mélange heterogene est laisse au repos pendant une nuit. Le precipite blanc est recupere par filtration, lave successivement avec un mélange 1:1 (v/v) de diisopropylether/eau (150 mL), puis avec de l'eau (150 mL). Le solide obtenu est solubilise dans de l'eau 10 (750 mL), le pH est ajuste a 7,5 par ajout d'une solution aqueuse de soude 1 N, puis la concentration theorique an polymere est ajustee a 20 g/L par ajout d'eau. Le mélange est filtre sur filtre 0,45 pm, puis est purifie par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 9/0, puis de l'eau jusqu'a ce que la conductimetrie du permeat soit inferieure a 50 pS/cnn. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentree 15 a environ 30 g/L theorique at le pH est ajuste a 7,0. La solution aqueuse est filtree sur 0,2 pm et conservee a 4 °C. Extrait sec : 25,8 mg/g DP (estime par RMN 1-11) = 45 donc le ratio j/(m+n) = 0,022, ledit ratio j/(m+n) etant appele i'. 20 La masse molaire moyenne calculde du co-polyaminoacide B1 est de 7552 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 6850 g/mol. Exemple B2 : 25 Co-polyaminoacide B2 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule Al et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3330 g/mol [000565] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide 81 appliqué au sel de chlorhydrate de la molecule Al (4,76 g, 5,26 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (27,68 g, 105,1 mmol), un 30 poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule Al est obtenu. Extrait sec : 25,6 mg/g DP (estime par RMN 11-1) = 22 donc i' = 0,045 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B2 est de 4076 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3330 g/mol. 35 107 Exemple B3: Co-polyaminoacide B3 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3360 g/mol [000566] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- 5 polyaminoacide 81 appliqué au sel de chlorhydrate de la molecule A2 (4,90 g, 5,10 mnnol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (26,83 g, 101,9 mmol), un co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A2 est obtenu. Extrait sec : 29,7 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 20 donc = 0,05 10 La masse molaire moyenne calculee du co-polyanninoacide B3 est de 3830 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3360 g/mol. Exemp:z. 1;4: 15 Co-polyaminoacide B4 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 7050 g/mol [000567] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molecule A2 (5,90 g, 6,14 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (64,63 g, 245,50 mnnol), un 20 co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A2 est obtenu. Extrait sec : 24,1 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 46 donc = 0,022 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B4 est de 7759 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 7050 g/mol. 25 Exemple B5: Co-polyaminoacide 85 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 10440 g/mol 30 [000568] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molecule A2 (3,09 g, 3,21 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (52,09 g, 197.9 mmol), un co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A2 est obtenu. Extrait sec : 27,2 mg/g 35 DP (estime par RMN 1H) = 66 donc = 0,015 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B5 est de 10781 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10440 g/mol. 108 Exemple B6 : Co-polyaminoacide B6 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3020 g/mol [000569] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation du co- 5 polyaminoacide B1 appliqué a la molecule A3 sous forme d'amine libre (4,15 g, 4,75 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (25,0 g, 95,0 mmol), un copoly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A3 est obtenu. Extrait sec : 20,4 mg/g DP (estime par RMN Ifl) = 18 donc i' = 0,056 10 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B6 est de 3514 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3020 g/mol. Exemple B7 : Co-polyaminoacide B7 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule 15 A4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3360 g/mol [000570] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué a la molecule A4 sous forme d'amine libre (2,06 g, 1,99 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (10,5 g, 39,9 mmol), un copoly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A4 est obtenu. 20 Extrait sec : 17,6 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 23 donc i' = 0,043 La masse molaire nnoyenne calculee du co-polyaminoacide B7 est de 4429 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3360 g/nnol. 25 Exemple B8: Co-polyaminoacide B8 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule AS et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3360 g/mol [000571] Par un procede similaire a celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide 81 appliqué a la molecule AS sous forme d'amine libre (3,89 g, 4,18 30 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (22,00 g, 84,00 mmol), un co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A5 est obtenu. Extrait sec : 17,9 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 20 donc 1' = 0,050 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B8 est de 3873 g/mol. 35 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3360 g/mol. 109 Exemple B9 : Co-polyaminoacide B9 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3340 g/mol [000572] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- 5 polyaminoacide 81 appliqué a la molecule A6 sous forme d'amine libre (5,81 g, 5,70 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (30,00 g, 114 nnmol), un copoly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A6 est obtenu. Extrait sec : 16,4 nng/g DP (estime par RMN 1H) = 20 donc i = 0,05 10 La masse nnolaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B9 est de 3961 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3340 g/mol. Exemple : Co-polyaminoacide 810 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la 15 molecule A7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) ea 2920 g/mol [000573] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué a la molecule A7 sous forme d'amine libre (3,54 g, 4,18 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (22,00 g, 84,00 nnmol), un 20 co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A7 est obtenu. Extrait sec : 18,4 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 20 donc = 0,05 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B10 est de 3789 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2920 g/mol. 25 Exemple B11 : Co-polyaminoacide B11 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule AS et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Fin) 3750 g/mol 30 [000574] Par un procede similaire b celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué a la molecule A8 sous forme d'amine libre (2,51 g, 2,69 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (14,19 g, 53,90 mmol), un co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A8 est obtenu. Extrait sec : 20,9 mg/g 35 DP (estime par RMN 1H) = 24 donc = 0,042 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B11 est de 4478 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3750 g/mol. Exemple B12 : Co-polyaminoacide B12 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A9 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) 7. 660 g/mol 5 [000575] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- polyanninoacide B1 appliqué a la molecule A9 sous forme d'amine fibre (4,21 g, 4,18 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (22,00 g, 84,00 mmol), un co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A9 est obtenu. Extrait sec : 18,6 mg/g 10 DP (estime par RMN 1H) = 20 donc = 0,050 La masse molaire nnoyenne calculee du co-polyaminoacide B12 est de 3949 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3660 g/mol. Exemple B13: 15 Co-polyaminoacide _13 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A10 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4170 g/mol [000576] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué a la molecule Al0 sous forme d'amine libre (3,81 g, 3,80 20 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (30,00 g, 114,00 mmol), un co-poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule A10 est obtenu. Extrait sec : 22,3 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 27 donc ii= 0,037 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B13 est de 4962 g/mol. 25 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4170 g/mol. Exemple B14: Co-polyaminoacide B14 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule All et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 6500 30 g/mol [000577] Par un procede similaire b celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué au chlorhydrate de la molecule All (1,21 g, 1,09 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (10,8 g, 41,0 mmol), un co-poly-Lglutamate de sodium modifie par la molecule All est obtenu. 35 Extrait sec : 22,2 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 38 donc = 0,026 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B14 est de 6701 ginnol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 6500 g/mol. 111 Exemple B15: Co-polyaminoacic:2 715 - poly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule Al2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4300 5 g/mol [000578] Par un procede similaire celui utilise pour la preparation du co- polyaminoacide B1 appliqué a la molecule Al2 sous forme d'amine libre (2,00 g, 1,58 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (8,34 g, 31,7 mmol), un copoly-L-glutamate de sodium modifie par la molecule Al2 est obtenu. 10 Extrait sec : 15,1 mg/g DP (estime par RMN 1H) = 24 donc = 0,042 La masse molaire moyenne calculee du co-polyaminoacide B14 est de 4737 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4300 g/mol. 15 Partie C Co 'los tions cornmercia es Exennple Cl : Solution d'insuline analogue rapide (Humalogn a 100 U/mL [000579] Cette solution est une solution commerciale d'insuline lispro 20 commercialisee par la societe ELI LILLY sous le nom de Humalog®. Ce produit est une insuline analogue rapide. Les excipients dans Humalog® sont le meta-cresol (3,15 mg/mL), le glycerol (16 mg/mL), le phosphate de disodium (1,88 mg/mL), l'oxide de zinc (pour avoir 0,0197 mg d'ion zinc/mL), l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7-7,8) et de l'eau. 25 Exemple C2 : Solution d'insuline analogue rapide (NovoLogo) a 100 U/mL [000580] Cette solution est une solution commerciale d'insuline aspart commercialisee par la societe NOVO NORDISK sous le nom de NovoLog® aux EtatsUnis d'Amerique et Novorapid® en Europe. Ce produit est une insuline analogue 30 rapide. Les excipients de Novolog® sont la glycerine (16 mg/mL), le phenol (1,50 mg/mL), le meta-cresol (1,72 mg/mL, du zinc (19,6 pg/mL), le phosphate de disodium dihydrate (1,25 mg/mL), le chlorure de sodium (0,5 mg/nnL), l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7,2-7,6) et de l'eau. 35 Exemple C3 : Solution d'insuline analogue rapide (Apidrao) a 100 U/nnL [000581] Cette solution est une solution commerciale d'insuline glulisine commercialisee par la societe SANOFI sous le nom d'Apidra®. Ce produit est une insuline analogue rapide. Les excipients d'Apidra® sont le meta-cresol (3,15 mg/mL), 112 la tromethannine (6 mg/mL), le chlorure de sodium (5 mg/mL), le polysorbate 20 (0,01 mg/mL), l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7,3) et de l'eau. 5 Exennple C4 : Solution d'insuline analogue lente (Lantusn a 100 U/mL [000582] Cette solution est une solution commerciale d'insuline glargine commercialisee par la societe SANOFI sous le nom de Lantus®. Ce produit est une insuline analogue lente. Les excipients dans Lantus® sont le chlorure de zinc (30 pg/mL), le meta-cresol (2,7 mg/mL), le glycerol (85%) (20 mg/mL), l'hydroxyde de 10 sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 4) et de l'eau. Exemple C5 : Solution d'insuline humaine (ActRapid0) a 100 UI/mL [000583] Cette solution est une solution commerciale d'insuline humaine de NOVO NORDISK vendue sous le nom d'ActRapid®. Ce produit est une insuline humaine. Les 15 excipients d'ActRapid® sont le chlorure de zinc, le glycerol le meta-cresol, l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 6,9-7,8) et de l'eau. Exemple C6 : Solution d'insuline humaine [Umuline rapiden a 100 UI/mL [000584] Cette solution est une solution commerciale d'insuline humaine de ELI 20 LILLY vendue sous le nom d']muline rapide®. Ce produit est une insuline humaine. Les excipients d'Umuline Rapide® sont le glycerol, le meta-cresol, l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7,0-7,8) et de l'eau. 25 Partie CA 7 Compositions comprenant de I'msuline ofaroine [000585] Procede de preparation CA1 : Preparation d'une composition diluee co- polyaminoacide / insuline glargine 50 U/mL a pH 7,1, suivant un procede utilisant l'insuline glargine sous forme liquide (en solution) et un co-polyaminoacide sous forme liquide (en solution). 30 [000586] A une solution mere de co-polyaminoacide a pH 7,1 sont ajoutees des solutions concentrees de m-cresol et de glycerine de maniere obtenir une solution de co-polyaminoacide de concentration Cmere co-polyaminoacide/excipients (mg/mL). La quantite d'excipients ajoutee est ajustee de maniere obtenir une concentration de m-cresol de 35 mM et glycerine de 184 mM dans la composition co-polyaminoacide 35 / insuline glargine 50 U/mL a pH 7,1. [000587] Dans un pot sterile, un volume Vinsuline glargine d'une solution commerciale d'insuline glargine commercialisee sous le nom de Lantus® une concentration de 113 100 U/mL est ajoute un volume Vmere co-polyaminoacide /excipients d'une solution de co- polyaminoacide a la concentration Cmere co-polyaminoacide /excipients (mg/mL) de maniere a obtenir une composition diluee co-polyaminoacide Cco-polyaminoacide dilue (mg/mL)/insuline glargine 50 U/mL a pH 7,1. Un trouble apparalt. Le pH est ajuste 5 a pH 7,1 par ajout de NaOH concentree et la solution est placee en statique dans une etuve a 40 °C pendant 2 h jusqu'a solubilisation complete. Cette solution visuellement limpide est placee a +4°C. Procede de preparation CA2 : Preparation d'une composition co- 10 polyaminoacide/insuline glargine concentree a pH 7,1 a l'aide d'un copolyaminoacide, suivant un procede de concentration d'une composition diluee. [000588] Une composition co-polyaminoacide/insuline glargine 50 U/mL a pH 7,1 decrite dans l'exemple CA1 est concentree par ultrafiltration sur une membrane 3 kDa en cellulose regeneree (Amicon® Ultra-15 commercialisee par la societe 15 Millipore). A l'issue de cette ≊ d'ultrafiltration, le retentat est limpide et la concentration en insuline glargine dans la composition est determinee par chromatographie en phase inverse (RP-HPLC). La concentration en insuline glargine dans la composition est ensuite ajustee a la valeur souhaitee par dilution dans une solution d'excipients m-cresol/glycerine de maniere a obtenir une concentration finale 20 en m-cresol de 35 nnM et une osmolarite de 300 nnOsm/kg. Le pH est mesure et ajuste a pH 7,1 par ajout de NaOH et HCI concentre. Cette solution a pH 7,1, visuellement limpide, presente une concentration en insuline glargine Cinsuline glargine (U/mL) et une concentration en co-polyaminoacide Cco-polyaminoacide (mg/mL) = Ccopolyaminoacide dilue (mg/mL) X Cinsuline glargine (U/mL) / 50 (U/mL). 25 [000589] SeIon ce procede de preparation CA2, des compositions copolyanninoacide/insuline glargine ont ete preparees par exemple avec des concentrations en insuline glargine de 200 U/mL et 400 U/mL a pH 7,1. Exennple CA3 : Preparation de compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 30 U/mL a pH 7,1. [000590] Des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 U/mL sont preparees selon le procede decrit dans l'exemple CA2 de maniere obtenir une concentration en insuline glargine Cmsulme glargme = 200 U/mL et une concentration en co-polyaminoacide Cco-polyammoacide (mg/mL). 35 Ces compositions sont presentees dans le Tableau 3. 114 Compositio Co- Concentration en co- Insuline polyaminoacid polyaminoacide (en mg/ml) glargine (U/mL) CA3-1 B3 5 200 CA3-2 B4 7 200 CA3-4 B5 10 200 CA3-5 B6 5 200 CA3-6 B7 5 200 CA3-8 B11 6 200 CA3-9 B14 7 200 Tableau 3: Compositions d'insuline glargine (200 U/mL) an presence de copolyaminoacide. PUe C ciscffinm e 5 lisuro Procede de preparation CB1 : Preparation d'une composition diluee copolyaminoacide/insuline glargine 43 U/mL/insuline lispro 13,5 U/mL [000591] A un volume Vco-polyaminoacide / insuline glargine dilue de la 10 composition dilude co-polyaminoacide / insuline glargine 50 U/mL a pH 7,1 decrite dans l'exemple CA1 est ajoutee un volume Vinsuline lispro d'une solution commerciale d'insuline lispro Humalog® a 100 U/mL et de l'eau de rnaniereb obtenir une composition co-polyaminoacide/insuline glargine 43 (U/mL)/insuline lispro 13,5 (U/mL). 15 Procede de preparation CB2 : Preparation d'une composition co- po|yarninoacide/insuUneg|angine/insu|ina |ispnoconcantrem a pH 7,1 [000592] Unenomposition co-polyanninoacide/insuline glargine 43 (U/mL)/insuline lispro 13,5 (U/mL) dAchtedans |'exernp|eC81 est concentree par ultrafiltration sur 20 une membrane 3 kDa en cellulose regeneree (Amicon® Ultra-15 commercial's& par la societe MILLIPORE). A l'issue de cette etape d'ultraffitration, le retentat est limpide et la concentration an insuline glargine dans la composition est determinee par chromatographie en phase inverse (RP-HPLC). Les concentrations en insuline glargine et insuline lispro dans la composition sont ensuite ajustees a la valeur 25 souhaitee par dilution dans une solution d'excipients m-cresol/glycerine de maniere obtenir une concentration finale en m-cresol de 35 nnM et une osmolarite de 300 mOsnn/kg. Le pH est mesure et ajuste si necessaire a pH 7,1 par ajout de NaOH et HCI concentre. Cette solution a pH 7,1, visuellement limpide, presente une concentration en insuline glargine Cinsuline glargine (U/mL), une concentration en insuline lispro Cinsuline lispro = Cinsuline glargine x 0,33 et une concentration an co-polyaminoacide Cco-polyaminoacide (mg/mL) = Cco-polyaminoacide di/"e (mg/mL) Cinsuline glargine (U/mL) / 50 5 (U/mL). Exemple CB3 : Preparation de compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 U/nra/insuline lispro 66 U/mL a pH 7,1 [000593] Des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 U/nnL/insuline 10 lispro 66 U/mL sont preparees selon le procede decrit dans l'exemple CB2 de maniere obtenir une concentration en insuline glargine Cinsuline glargine = 200 U/mL, une concentration en insuline lispro Cmsuline lispro = 66 U/mL et une concentration en copolya minoacide Cco-polyaminoaade (mg/mL). Ces compositions sont presentees dans le Tableau 4. 15 Composition Co- Concentration en co- Insuline Insuline polyaminoacide polyaminoacide (en g la rg i ne Lispro mg/m1) U/m1 Wm! CB3-1 B1 17 200 66 CB3-2 B4 5 200 66 CB3-3 B3 7 200 66 CB3-4 8 200 66 CB3-6 B5 10 200 66 6 CB3-7 B6 5 200 CB3-8 B7 5 200 66 CB3-10 B11 6 200 66 CB3-11 B12 8 200 66 CB3-12 B14 7 200 66 Tableau 4: Compositions d'insuline glargine (200 U/mL) et d'insuline lispro (66 U/mL) en presence de co-polyaminoacide. 116 Partie Resultats Stabilite physique de compositions preparees ci-dessus 5 Exemple ol : Stabilite acceleree a 25 °C en dynamique. [000594] 3 vials de 3 mL remplis avec 1 mL de composition co-polyaminoacide/ insuline glargine ou co-polyaminoacide/insuline glargine/insuline prandiale sont places verticalement sur un agitateur orbital. L'agitateur est place dans une etuve 25°C et les vials sont soumis une agitation de 50 ou 250 rpm. Les vials sont 10 inspect& visuellennent de maniere quotidienne/hebdomadaire afin de detecter l'apparition de particules visibles ou d'une turbidite. Cette inspection est realisee selon les recommandations de la Pharnnacopee Europeenne (EP 2.9.20) : les vials sont soumis un eclairage d'au moms 2000 Lux et sont observes face a un fond blanc et un fond noir. Le nombre de jours de stabilite correspond a la duree partir 15 de laquelle au moins 2 vials presentent des particules visibles ou sont turbides. [000595] Les resultats de stabilite acceleree (obtenus avec differentes compositions) sont present& dans les Tableau 5, Tableau 6. Composition Co- concentration Stabilite en jours polyaminoacide (mg/mL) CA3 * CA3-1 B4 5 >24 CA3-2 B3 7 >24 CA3-5 B6 5 >24 CA3-6 B7 5 >24 CA3-8 B11 6 >24 20 Tableau 5 : resultats des stabilites des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL) a 25 °C en dynamique (sous agitation a 250 rpm). (*Apparition d'un precipite quand le pH de la solution d'insuline glargine est ajuste a pH 7). 117 Cornpositio Co- Concentration (mg/mL) Stabilite en polyaminoacide jours CB3 .11 CB3-1 B1 17 >10 CB3-2 B4 5 >20 CB3-3 B3 7 >20 CB3-4 8 >20 CB3-6 B5 10 >20 CB3-7 B6 5 >20 CB3-8 B7 5 >20 CB3--12 B9 6 >20 CB3-10 811 6 >20 CB3-11 B12 >20 Tableau G: resultats des stabilites des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL)/insuline lispro (66 U/mL) a 25 °C en dynamique (sous agitation a 250 rpm). (*Apparition d'un precipite quand le pH de la solution d'insuline glargine est ajuste 5 a pH 7). [000596] Les compositions selon 'Invention avec l'insuline glargine at avec l'insuline glargine et l'insuline lispro presentent une bonne stabilite dynamique 10 Exemple D2 : Stabilite acceleree a 30°C en statique [000597] 5 vials de 3 mL remplis avec 1 mL de composition sont places verticalement dans une etuve maintenue a 30 °C. Les vials sont inspect& visuellement de maniere quotidienne afin de detecter l'apparition de particules visibles ou d'une turbidite. Cette inspection est realisee selon les recommandations 15 de la Pharmacoppee Europeenne (EP 2.9.20) : les vials sont soumis un eclairage d'au moms 2000 Lux et sont observes face a un fond blanc et un fond noir. Le nonnbre de semaines de stabilite correspond a la duree partir de laquelle au moms la moitie des vials presentent des particules visibles ou sont turbides. [000598] Ces resultats sont en accord avec la pharmacopee US (USP ). 20 [000599] Les resultats de stabilite acceleree (obtenus avec differentes compositions sont present& dans les tableaux 8a et 8b ci-apres. 118 Compositions CA3 CA3-2 CA3-1 CA3-4 CA3-5 CA3-6 CA3-8 Co- polyaminoacide B4 B3 B14 B5 B6 B7 811 Stabilite a 30°C en statique (en semaine) * >16 >19 >19 >19 >19 >18 >19 [000600] Tableau 8a resultats des stabilites des compositions co- polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL) 30°C en statique. (*Apparition d'un precipite quand le pH de la solution est ajuste a pH 7). 5 Composition Co- Stabilite a 30°C en statique (en polyaminoacide semaine >16 >16 >16 >16 >16 >16 >16 >16 CB3 CB3-1 CB3-2 CB3-4 CB3-12 CB3-6 CB3-7 CB3-8 CB3-10 B1 B4 B3(0) B14 B5 B6 B7 B11 CB3-11 B12 >16 Tableau 8b : resultats des stabilites des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/nnL)/insuline lispro (66 UI/mL) a 30°C en statique. (*Apparition d'un precipite quand le pH de la solution est ajuste a pH 7). 10 [000601] Les compositions selon l'invention avec l'insuline glargine et avec l'insuline glargine et l'insuline lispro presentent une bonne stabilite statique 30°C. Exemple D3 : Stabilite acceleree a 40°C en statique [000602] La stabilite acceleree a 40 °C en statique des compositions a egalennent 15 ete analysee selon le meme protocole qu'a l'exemple D2. [000603] Ces resultats sont en accord avec la pharmacopee US (USP ). [000604] Les resultats de stabilite acceleree (obtenus avec differentes compositions sont present& dans le tableau 8c ci-apres. 119 Tableau 8c : resultats des stabilites des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL)/insuline lispro (66 UI/mL) a 40°C en statique. (*Apparition d'un precipite quand le pH de la solution est ajuste a pH 7). 5 [000605] Les compositions selon l'invention avec avec l'insuline glargine et l'insuline lispro presentent une bonne stabilite statique a 40°C. Exemrie : Precipite tion de l'insuline glargine dans des compositions co- 10 polyaminoacide/insuline glargine a 200 U/mL [000606] 1 mL de solution de co-polyarninoacide/insuline glargine preparee l'exemple CA3 est ajoute dans 2 mL d'une solution de PBS (Phosphate Buffer Saline, tampon phosphate salin) contenant 20 mg/nriL de BSA ((Bovine serum Albumine, serum albumine bovine)). Le mélange PBS/BSA simule la composition du milieu sous- 15 cutane. Un precipite apparalt. [000607] Une centrifugation a 4000 tr/min est effectude pour separer le precipite du surnageant. Ensuite l'insuline glargine est dosee dans le surnageant par RP-HPLC. Il en resulte que l'insuline glargine se retrouve majoritairement sous une forme precipitere. 20 Les resultats sont presentes dans le Tableau 7. Compositi Co- Insuli Concentratio Solubilisati Precipitati on polyaminoac ne n en co- on de on de ide glargi polyaminoac l'insuline l'insuline ne ide (en glargine glargine mg/ml) 200 NON NA CA3-1 B4 200 OUI OUI CA3-2 B3 200 7 OUI OUI CA3-4 B5 200 10 OUI OUT CA3-5 B6 200 5 OUT QUI CA3-9 B14 200 7 OUI OUI Tableau 7: Compositions co-polyaminoacide /insuline glargine (200 U/mL); solubilisation/precipitation de l'insuline glargine. B3 CB3-2 CB3-4 B4 (8) Composition CB3 Co- polyaminoacide >3 >3 Stabilite a 40°C en statique (en semaine) [000608] Les co-polyaminoacides permettent preparer une solution d'insuline glargine a pH neutre et permettent une precipitation de celle-ci quand ladite solution est ajoutee dans un milieu simulant le milieu sous-cutane. 5 Exernokl D4 : Precipitation de l'insuline glargine dans les compositions copolyaminoacide/insuline glargine 200 U/mL/insuline lispro 66 U/mL a pH 7,1 [000609] 1 mL de solution de co-polyaminoacide /insuline glargine/insuline lispro preparee l'exemple CB3 est ajoute dans 2 mL d'une solution de PBS contenant 20 10 mg/mL de BSA (bovine serum albumin). Le mélange PBS/BSA simule la composition du milieu sous-cutane. Un precipite apparait. [000610] Une centrifugation a 4000 tr/min est effectuee pour separer le precipite du surnageant. Ensuite l'insuline glargine est dosee dans le surnageant par RP-HPLC. Il en resulte que l'insuline glargine se retrouve majoritairement sous une forme 15 precipitee. Les resultats sont presentes dans le Tableau 8. Composit Co- Insuli Lisp Concentrat Solubilisa Precipita ions polyamino ne ro ion en co- tion de tion de acide glargi polyamino l'insuline l'insuline ne acide (en glargine glargine mg/ml) CB3-1 B1 200 66 17 OUI OUI CB3-2 B4 200 66 5 OUI OUI CB3-3 B3 200 66 7 OUI OUI CB3-6 B5 200 66 10 OUI 66 CB3-7 B6 8C422 200 5 OUI OUI CB3-12 BB14 200 66 7 OUI OUI 66 CB3-8 B7 200 5 OUI OUI CB3-10 B11 200 66 6 OUI OUI CB3-11 B12 200 66 8 OUI OUT CB3-9 B13 200 66 5 OUI OUI Tableau 8 : Compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL)/insuline lispro (66 U/mL) ; solubilisation et precipitation d'insuline glargine. 20 [000611] Les co-polyaminoacides permettent preparer une solution d'insuline glargine en presence d'insuline lispro a pH neutre et permettent une precipitation de 121 l'insuline glargine quand ladite solution est ajoutee dans un milieu simulant le milieu sous-cutanee. Exemple D5 : Pharmacodvnamie chez le chien 5 [000612] Des etudes chez le chien ont ete conduites dans l'objectif d'evaluer la pharmacodynamie de l'insuline apres administration de la composition de copolyaminoacide B11 et d'insulines (composition CB3-10). [000613] Les effets hypoglycerniants de cette composition ont ete compares a ceux d'injections simultanees, mais separdes, de Lantus® (pH 4) et d'Humalog® dans 10 les proportions 75% de Lantus0/25% d'Humalog® (dose/dose). [000614] Dix animaux, qui ont ete mis a jeun depuis 18 h environ, ont ete inject& au niveau du cou, au-dessus de la region interscapulaire, a la dose de 0,67 U/kg. Dans l'heure precedant !Injection ] prelevennents sont realises afin de determiner le niveau basal de glucose. La glycennie est ensuite determinee pendant 24 h au moyen 15 d'un glucometre. [000615] Les courbes de pharmacodynamie moyenne du glucose exprimee en pourcents de deviation du niveau basal sont representees dans la Figure 1. [000616] Les resultats de pharmacodynamie obtenus avec les administrations 20 simultanees et separees de Humalog® (exemple C1) et Lantus® (exemple C4) en connparaison avec la composition CB3-10 sont presentes sur la figure 1. L'activite hypoglycerniante de la composition CB3-10 est biphasique. La premiere phase rapide est definie par une decroissance marquee de la glycemie durant environ 60 minutes caracteristique de l'effet rapide de l'insuline lispro. Cette premiere phase est 25 egalement visible sur la double injection Lantus® / Humalog®, indiquant que !Invention ne modifie pas le caractere rapide d'Humalog®. Apres environ 60 minutes, la glycernie rennonte jusqu'a 3 h avant une seconde phase plus lente, caracterisee par une activite hypoglycemiante moms marquee et prolong& jusqu'a 18-20 h post-injection. Cette seconde phase basale est caracteristique de l'effet basal de l'insuline 30 glargine, egalement visible sur la double injection, REVENDICATIONS1. Composition stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est connpris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moms : a) une insuline basale dont le point isoelectrique (pI) est compris entre 5,8 et 8,5 et b) un co-polyaminoacide de formule I Q[Hy]i[PLG]k Formule I Dans laquelle : j 1 ; k 2 !edit co-polyaminoacide de fornnule I etant porteur de charges carboxylates et constitue d'au moins deux chaines d'unites glutamiques ou aspartiques PLG Dees entre elles par un radical ou spacer Q[-*], (i.3 avec i =j + k) lineaire ou ramifie au moms trivalent constitue d'une chaine alkyle comprenant un ou plusieurs heteroatomes choisis dans le groupe constitue des atomes d'azote et d'oxygene et/ou portant un ou plusieurs heteroatomes constitue des atomes d'azote et d'oxygene et/ou des radicaux portant un ou plusieurs heteroatomes constitue des atomes d'azote et d'oxygene et/ou des fonctions carboxyles !edit radical Q[-*], portant au moms un radical hydrophobe monovalent -Hy; - ledit radical ou spacer Q[-1, etant lie aux au moms deux chaines d'unites glutamiques ou aspartiques PLG par une fonction amide et, - ledit radical ou spacer Q[-*], etant lie au au moms un radical hydrophobe -Hy de formule X ci-apres definie par une fonction amide. 2. Composition selon la revendication 1, caracterisee en ce que le radical ou spacer Q[-*], 3) est represente par un radical de formule II : = ([Q1){_*li Formule II Dans laquelle q 5 Les radicaux Q' etant identiques ou differents et choisis dans le groupe constitue par les radicaux de formules III a VI suivantes, pour former Q[-*], (i?3) 123 ,I- Fa [CH21-Fa.-* Formule III 5 Dans laquelle 1 5 t 8 -Fb--{CH2}6-- O 1 CHI a (CH2) d Fbr-* Ui tiPii U u"2 Dans laquelle Au moins un des Lit" ou u2" est different de 0. Si ui" * 0 alors * 0 et si u2" * 0 alorsuf * 0, 10 ue et U2' sont identiques ou differents et, 2 4 -GpC, alors 7 5 x 5 11, * Lorsque le radical hydrophobe -Hy porte au moms 5 -GpC alors, 6 5 x 5 11, 126 G est un radical alkyle ramifie de 1 a 8 atomes de carbone ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonction(s) acide carboxylique libre. H est un radical alkyle ramifie de 1 a 8 atomes de carbone ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonction(s) acide carboxylique libre., 5 R est un radical choisi dans le groupe constitue par un radical alkyle divalent, lineaire ou ramifie connprenant de 1 a 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, lindaire ou ramifie comprenant de 1 a 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions -CONH2 ou un radical ether ou polyether non substitue comprenant de 4 a 14 atomes de carbone et de 1 a 5 atomes 10 d'oxygene : Le ou les radicaux hydrophobes -Hy de fornnule X etant lies a Q : o via une liaison covalente entre un carbonyle du radical hydrophobe -Hy et un atome d'azote porte par Q formant ainsi une fonction amide issue de la reaction d'une fonction amine port& par le precurseur de Q et 15 une fonction acide port& par le precurseur -Hy' du radical hydrophobe -Hy, et o via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe -Hy et un carbonyle porte par Q, formant ainsi une fonction amide issue de la reaction d'une fonction amine du precurseur -Hy' du radical 20 hydrophobe -Hy et une fonction amide port& par le precurseur du radical Q, le ratio M entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unites glutamiques ou aspartiques etant connpris entre 0 6. Composition selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterisee en ce qu'elle comprend entre 40 et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5. 7. Composition selon rune quelconque des revendications precedentes, 15 caracterisee en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 60 mg/mL. 8. Composition selon rune quelconque des revendications precedentes, caracterisee en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges 20 carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 40 mg/mL. 9. Composition selon l'une quelconque des revendications precedentes caracterisee en ce que la concentration an co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 20 mg/mL. 25 10. Composition selon l'une quelconque des revendications precedentes , caracterisee en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 10 mg/mL. 30 11. Composition selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterisee en ce qu'elle comprend en outre une insuline prandiale. 12. Composition selon la revendication precedente, caracterisee en ce que l'insuline prandiale est de l'insuline humaine. 35 13. Composition selon l'une quelconque des revendications 19 et 20, caracterisee en ce que au total elle comprend entre 40 et 500 U/mL d'insuline avec 133 une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5. 14. Composition selon l'une quelconque des revendications 19 a 21, caracterisee 5 en ce que les proportions entre l'insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et l'insuline prandiale sont en pourcentage de 25/75, 30/70, 40/60, 50/50, 60/40, 70/30, 80/20 ou 90/10. 15. Composition selon l'une quelconque des revendications precedentes, 10 caracterisee en ce qu'elle comprend en outre une hormone gastrointestinale. 16. Composition selon la revendication precedente, caracterisee en ce que l'hormone gastrointestinale est choisie dans le groupe constitue par l'exenatide, le liraglutide, le lixisenatide, l'albiglutide et le dulaglutide, leurs analogues ou derives 15 et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 17. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 a 24, caracterisee en ce que l'hormone gastrointestinale est le dulaglutide ses analogues ou derives et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 20 18. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 a 24, caracterisee en ce que l'hormone gastrointestinale est l'exenatide ses analogues ou derives et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 25 19. Composition selon rune quelconque des revendications 23 a 24, caracterisee en ce que l'hormone gastrointestinale est le liraglutide ses analogues ou derives et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 20. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 a 24, caracterisee 30 en ce que l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide ses analogues ou derives et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 21. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 a 28, caracterisee en ce que la concentration en hormone gastrointestinale est comprise dans un 35 intervalle de 0,01 a 10 mg/mL. 134 22. Composition selon l'une quelconque des revendications 24 ou 26, caracterisee on ce qu'elle comprend entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et de 0,05 a 0,5 nrig/mL d'exenatide. 5 23. Composition selon rune quelconque des revendications 24 ou 27 caracterisee en ce qu'elle comprend entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et de 1 a 10 mg/mL de liraglutide. 10 24. Composition selon l'une quelconque des revendications 24 ou 28, caracterisee en ce qu'elle comprend entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 at de 0,01 a 1 mg/mL de lixisenatide. 15 25. Formulation unidose a pH compris entre 7 et 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et une insuline prandiale. 26. Formulation unidose a pH compris entre 7 et 7,8 comprenant une insuline 20 basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et une hormone gastrointestinale. 27. Formulation unidose a pH compris entre 7 et 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 at 8,5, une insuline prandiale 25 et une hormone gastrointestinale.