FR 3018189 A1 20150911 FR 1451787 A 20140305 COMPOSITION COSMETIQUE / DERMATOLOGIQUE COMPRENANT AU MOINS UNE HUILE ESSENTIELLE DE CISTE ET SON UTILISATION Domaine technique La présente invention se rapporte à une composition cosmétique et/ou dermatologie comprenant une huile essentielle de Cistus ladaniferus. Elle se rapporte également à l'utilisation cosmétique d'une huile essentielle de Cistus ladaniferus en tant que principe actif cosmétique, notamment pour ses effets protecteur, réparateur, stimulant et remodelant. Elle se rapporte également à une huile essentielle de Cistus ladaniferus pour utilisation comme agent dermatologie, notamment comme agent cicatrisant. La présente invention trouve une application notamment dans les domaines de la cosmétique ou de la dermatologie. Etat de la technique La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et structures. L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques. En position intermédiaire, le derme est aussi un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d'autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques et les annexes épidermiques (poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares) qui prennent naissance dans le derme profond. La matrice dermique et les cellules qui la synthétisent (les fibroblastes) sont particulièrement fragiles aux agressions de type Ultra-Violet (UV), par exemple les UVA, très énergétiques et pouvant pénétrer à 80% jusque dans le derme. Les dégâts occasionnés peuvent être irréversibles : dégradation et rupture des fibres protéiques (collagène, élastine...), altérations cellulaires, perte de leur capacité de réparation et de renouvellement jusqu'à la mort cellulaire. Ces dommages importants peuvent endommager tout le tissu dermique, provoquant des pertes des qualités biomécaniques (rides, relâchement, ptose...). Le derme est, par ailleurs, le siège du remodelage (structuration de la matrice) et de la cicatrisation, laquelle comporte aussi une phase de remodelage nécessaire et très importante pour la reconstruction du tissu cutané. Pour toutes ces raisons, stimuler les capacités prolifératives des fibroblastes, leurs capacités de défense, de résistance et de réparation, ainsi que leurs propensions à synthétiser du collagène est un besoin absolu pour assurer un bon état esthétique et fonctionnel du derme et de la peau en général. Le tissu le plus en surface et donc le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisant, dont la partie la plus externe est la couche cornée, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière de protection. Les cellules majoritaires sont les kératinocytes qui, par leurs processus de prolifération/différenciation, aboutissent à la formation de la couche cornée connue pour son aspect et ses propriétés hydrophobes, compactes et étanches. Le rôle majeur de l'épiderme est donc d'apporter à la peau, via la différenciation et le stratum corneum, une première ligne de protection contre les agressions physiques chimiques, thermiques, hydriques, bactériologiques. La différenciation kératinocytaire est une maturation orientée des 3 0 kératinocytes épidermiques en cornéocytes (kératinocytes de la couche cornée) durant laquelle les cellules changent de taille, de morphologie, de composition biochimique, de nature membranaire, d'activité biologique. Les cornéocytes sont des kératinocytes morts, anucléés qui s'empilent à la surface de la peau, avant de desquamer. Ils forment ainsi une couche compacte et très hydrophobe au travers de laquelle la pénétration d'agents exogènes ou les déperditions hydriques ne sont normalement pas possibles. Ce processus de différenciation s'accompagne aussi de modifications des composantes et de structures cellulaires comme les jonctions interkératinocytaires qui sont de plus en plus représentées en fonction de la différenciation. Les jonctions intercellulaires sont des zones caractéristiques des membranes des cellules épithéliales qui permettent une adhérence forte des cellules entre elles. Elles représentent des zones d'interaction de la membrane plasmique avec le cytosquelette et de fait, des zones de communication intercellulaire. On peut les subdiviser en trois catégories : jonctions d'ancrage (jonctions mécaniques), jonctions communicantes et jonctions imperméables (jonctions étanches). Aussi appelées jonctions serrées (zonula occludens), les jonctions imperméables (de l'anglais "tight junctions") assurent une cohésion par fusion des feuillets externes des membranes de deux cellules adjacentes. Les protéines transmembranaires occludine et claudine relient les micro-filaments d'actine par l'intermédiaire des protéines ZO1 à ZO3 au niveau de ces jonctions. Elles sont localisées sur toutes les cellules polarisées des épithéliums unistratifiés et pluristratifiés et ont un lien direct avec la différenciation, avec un gradient d'expression en fonction de la différenciation. Elles sont présentes en majorité dans le stratum granulosum. Elles assurent, en plus de la différenciation en elle-même, un rôle de protection et d'étanchéité du tissu épidermique. Elles contribuent à la fonction barrière de l'épiderme, protégeant tout notre corps de l'extérieur et réciproquement des déperditions hydriques. Les jonctions serrées sont donc impliquées dans la régulation de l'hydratation de la peau, dans la protection de celle-ci et dans les procédés de cicatrisation. Les kératinocytes sont donc les cellules de défense de première ligne contre les agressions extérieurs (agressions microbiologiques, physiques (UV), thermiques, pollution ...). Les consolider, renforcer leur résistance et les conditionner pour une meilleure réactivité est une voie importante à considérer pour une action cosmétique ou dermatologique. Cependant peu de compositions de l'art antérieur, voire aucune, permettent d'agir à la fois au niveau des mécanismes cellulaires d'hydratation, de protection, de réparation, de remodelage et de cicatrisation dans le but de conditionner la peau pour un meilleur fonctionnement, par exemple d'améliorer la résistance et/ou la régénération de la peau, que ce soit avant et/ou après un endommagement de quelque nature que ce soit. En outre, peu de compositions ou crèmes de l'art permettent de modifier la réactivité cellulaire pour une action préventive et/ou curative, notamment pour atténuer les effets du vieillissement, notamment ceux causés par des rayonnements UV ou la pollution. Il existe donc de réels besoins de trouver de nouvelles compositions cosmétiques ou dermatologiques, et/ou des composés, permettant d'agir à la fois au niveau des mécanismes cellulaires d'hydratation, de protection, de réparation, de remodelage et de cicatrisation. En outre, il existe un réel besoin de trouver des composés permettant de modifier la réactivité cellulaire pour une action préventive et/ou curative. Exposé de l'invention La présente invention a précisément pour but de répondre à ces besoins de l'art antérieur en fournissant des compositions cosmétiques ou dermatologiques comprenant une huile essentielle de Ciste. Les inventeurs sont en effet les tous premiers à avoir découvert, notamment, que l'huile essentielle de Ciste permet d'agir à la fois au niveau des mécanismes cellulaires de l'hydratation, de protection, de réparation, de stimulation, du remodelage et/ou de la cicatrisation. Egalement, les inventeurs sont les premiers à avoir découvert, de manière surprenante, que les huiles essentielles stimulent, notamment, la synthèse de collagène et l'expression de la claudine-1. Les travaux des inventeurs ont ainsi permis de mettre au point des compositions à usages cosmétiques ou dermatologiques, notamment pour les applications précitées. Ainsi la présente invention a notamment pour objet l'utilisation d'une huile essentielle de Ciste en tant qu'actif cosmétique. Selon l'invention, l'huile essentielle de Ciste est l'huile essentielle de Cistus ladaniferus L. également appelée « Cistus ladaniferus » ou « Ciste ladanifère ». Le Ciste est une plante issue de la famille des Cistacées. Le Ciste ladanifère est un arbuste sauvage méditerranéen que l'on trouve sur des étendues de plusieurs milliers d'hectares en Andalousie où il colonise les terres en friche. En avril, cet arbuste se couvre de belles fleurs éphémères de couleur blanche avec des taches rouges à la base des pétales. Les pétales présentent un aspect de soie froissée ce qui lui a donné le nom de « rose des rochers ». Les feuilles sont vert-gris et luisantes sur la face supérieure, et sont ternes et collantes sur la face intérieure. L'arbuste produit une gomme visqueuse et odorante, appelée labdanum, qui l'aide à se protéger de la chaleur et de l'évaporation. Selon l'invention, on entend par « huile essentielle de Cistus ladaniferus » par exemple un extrait concentré de composés volatils de Cistus ladaniferus. Selon l'invention, l'huile essentielle de Cistus ladaniferus peut comprendre au moins 100, de préférence au moins 200, de préférence au moins 300 composés, dont 40 d'entre eux représentent 80% de la composition chimique globale en monoterpènes, monoterpénols, sesquiterpènes, sesquiterpénols, cétones, esters terpéniques, oxydes, aldéhydes, acides et eugénol de ladite huile essentielle. Avantageusement, selon l'invention, l'huile essentielle de Cistus ladaniferus peut comprendre au moins un des composés choisis parmi l'alpha-pinène, le viridiflorol (ou ledol ou globulol), le viridoflorène (ou ledene), l'acétate de bornyle, le paracymène et le trans-pinocarvéol ou le mélange de ceux-ci. Selon l'invention, l'huile essentielle de Cistus ladaniferus peut être une huile essentielle disponible dans le commerce. Il peut s'agir par exemple d'une huile essentielle de Cistus ladaniferus biologique commercialisée par la société Biolandes (Le Sen - Les Landes - France). Selon l'invention, l'huile essentielle de Cistus ladaniferus peut être obtenue par tout procédé d'extraction d'huiles essentielles connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'un procédé par d'hydrodistillation, par exemple d'hydrodistillation d'une plante et/ou partie d'une plante dans un alambic où les constituants volatils sont entraînés par de la vapeur d'eau puis condensés et récupérés dans le vase de décantation (l'essencier). L'huile essentielle peut être obtenue dans le vase de décantation sous la forme d'une phase organique, et surnageant une phase aqueuse dans laquelle peut être solubilisée une partie des composés organiques entraînés par la distillation Selon l'invention, quel que soit le procédé d'obtention de l'huile 2 0 essentielle, elle peut être obtenue, par exemple, à partir de plantes entières et/ou d'une ou plusieurs parties de la plante. De manière avantageuse, l'huile essentielle de Cistus ladaniferus est obtenue à partir des feuilles de la plante avec ou sans les brindilles. Selon l'invention, l'huile essentielle de Cistus ladaniferus en tant 25 qu'actif cosmétique, ou une composition cosmétique en comprenant, en particulier une composition cosmétique selon l'invention, peut être utilisée pour protéger et/ou réparer la peau ou les muqueuses, et/ou pour hydrater la peau ou les muqueuses, et/ou pour prévenir et/ou atténuer les effets du vieillissement de la peau ou des muqueuses, et/ou pour remodeler le 30 derme. Dans la présente, on entend par « atténuer les effets du vieillissement », une action de protection et/ou de régénération de la peau et des muqueuses. Notamment, cette action peut permettre d'améliorer la fermeté ou de réduire la perte de fermeté de la peau ou des muqueuses. Elle peut en outre permettre la prévention et/ou le retard et/ou la limitation du relâchement de la peau ou des muqueuses. Elle peut en outre permettre de lutter contre le vieillissement de la peau ou des muqueuses. L'atténuation des effets du vieillissement selon l'invention peut être en outre une action de prévention et/ou de retard et/ou de limitation du vieillissement accéléré, dit vieillissement exogène, provoqué par les stress environnementaux, par exemple les ultraviolets ou la pollution, on parle alors de vieillissement photo-induit, ou du vieillissement chronologique, dit vieillissement endogène. L'atténuation des effets du vieillissement selon l'invention peut être en outre une action de raffermissement et/ou une amélioration des qualités bio-mécaniques de la peau ou des muqueuses. L'atténuation des effets du vieillissement selon l'invention peut être en outre une limitation de la ptose cutanée. L'atténuation des effets du vieillissement selon l'invention peut être 2 0 en outre une action de restauration, de maintien ou de renforcement de la synthèse de collagène. Dans la présente, on entend par « protéger et/ou réparer », une action de prévention et/ou de réparation par rapport aux dommages subis par la peau, éventuellement causés par les stress environnementaux 25 auxquels la peau peut être soumise. Il peut s'agir, par exemple des rayonnements Ultra-Violet (UV), de stress thermiques, hydriques et/ou de la pollution. En effet, les rayonnements Ultra-Violet (UV), stress thermiques, hydriques et/ou de la pollution sont susceptibles d'altérer la peau et/ou les cellules qui la composent. Ils peuvent, par exemple, 30 provoquer une altération de leur fonctionnement, de leur métabolisme, de leurs systèmes de défense, pouvant aller jusqu'à la mort cellulaire. Dans la présente par « protéger », on entend, par exemple une limitation des dommages cutanés induits, par exemple par les des rayonnements Ultra-Violet (UV), stress thermiques, hydriques et/ou de la pollution. Dans la présente par « réparer », on entend, par exemple une meilleure réactivité, un retour à une situation cutanée normale, par exemple le retour à une peau/surface cutanée saine et/ou normale et/ou initiale après que ladite peau/surface cutanée ait subit, par exemple des dommages cutanés induits, par exemple par les des rayonnements Ultra- Violet (UV), stress thermiques, hydriques et/ou de la pollution. Dans la présente, on entend par « remodeler », une action de réparation non seulement cellulaire, mais aussi tissulaire, qui permet de réorganiser la peau pour revenir à une situation initiale. Il peut s'agir par exemple d'une action de remaniement matriciel profonde et/ou une cicatrisation. Avantageusement, la présente invention permet la stimulation des protéines des jonctions serrées, en particulier la claudine-1. La stimulation des jonctions serrées selon la présente invention permet avantageusement d'améliorer la protection, la restauration et la régénération de la fonction barrière épidermique et le maintien de l'hydratation épidermique. En particulier, la stimulation de la claudine-1 permet avantageusement de consolider et fonctionnaliser les jonctions serrées au niveau des kératinocytes. Ainsi l'utilisation cosmétique selon la présente invention peut également être une consolidation des jonctions serrées, notamment par la stimulation de la claudine 1. La présente invention se rapporte également à une composition cosmétique et/ou dermatologique comprenant au moins une huile essentielle de Cistus ladaniferus et au moins un véhicule cosmétiquement 3 0 et/ou dermatologiquement acceptable. Dans la présente par « composition cosmétique » on entend toute composition à visée cosmétique c'est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les organes externes, les dents et les muqueuses. Dans la présente par « composition dermatologique » on entend toute composition à visée dermatologique c'est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les organes externes, les dents et les muqueuses. On entend par « muqueuses », au sens de la présente invention, notamment les lèvres supérieure et inférieure de la bouche. Dans la présente, on entend part « véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable », tout véhicule adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales, en particulier les cellules de l'épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable. La composition cosmétique et/ou dermatologique acceptable selon l'invention peut comprendre un ou plusieurs adjuvants connus de l'homme du métier. Il peut s'agir, par exemple, d'un ou plusieurs adjuvant(s) choi(s) parmi les agents de type esters, des agents hydratants, des agents émollients, des agents épaississants minéraux, des agents épaississants organiques, associatifs ou non, des filtres solaires organiques hydrosolubles et liposolubles, des filtres solaires minéraux, des composés siliconés, des parfums, des conservateurs, des vitamines, des protéines, des agents séquestrants, des agents alcanisants, des agents acidifiants, des agents réducteurs, des agents oxydants, des charges minérales, des colorants ou tout autre adjuvant susceptible d'être mentionné dans le dictionnaire INCI (International Nomenclature Cosmetic Ingredients) publié par le CTFA (Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association). Selon l'invention, la composition peut comprendre en outre au moins une, au moins deux, au moins trois huiles essentielles d'une autre plante que Cistus ladaniferus. Ces huiles essentielles peuvent être obtenues par exemple selon les procédés d'obtention d'huile essentielle décrits dans la présente. Par exemple, la composition selon l'invention peut comprendre en outre au moins une huile essentielle choisie parmi les huiles essentielles de Cinnamosma, Citron, Géranium, Néroli, Sauge, Orange, Rose, Cèdre, Lavande, Myrrhe ou tout autre huile essentielle mentionnée dans le dictionnaire INCI (International Nomenclature Cosmetic Ingredients) publié par le CTFA (Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association). Des compositions particulièrement avantageuses selon l'invention, peuvent être par exemple des compositions comprenant, en plus de l'huile de Cistus ladaniferus, au moins deux autres huiles essentielles, notamment parmi celles précitées. Selon l'invention, l'huile essentielle ou un mélange d'huiles essentielles peut, par exemple, être présent dans une composition à une teneur comprise de 0,0001% à 10% en poids par rapport au poids total de la composition, par exemple de 0,0001% à 5% en poids, de préférence de 0,001 à 2% en poids, de manière encore plus préférée de 0,05 à 2 % en poids. Il n'est généralement pas requis des teneurs en huile essentielle de Cistus ladaniferus supérieures à 5%, voire 10%, en poids dans une composition cosmétique selon l'invention. Néanmoins, des teneurs en huile essentielle de Cistus ladaniferus supérieures à 5%, voire 10%, en poids ne sont pas exclues du domaine de la présente invention. Selon l'invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut, par exemple, se présenter sous toute forme connue de l'homme du métier. Il peut s'agir, par exemple d'une forme choisie parmi un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, une solution, un gel, par exemple un gel aqueux ou hydroalcoolique, une lotion, par exemple une lotion aqueuse ou hydroalcoolique, une suspension et une émulsion. Lorsque la composition selon l'invention est une émulsion, elle peut être, par exemple, une émulsion huile-dans-l'eau, eau-dans-l'huile ou eau dans silicone. En outre, l'émulsion peut être une émulsion multiple, une miniémulsion, une microémulsion, une nanoémulsion, une émulsion solide La composition de l'invention peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l'homme du métier pour la fabrication d'une composition cosmétique ou dermatologique. Il peut s'agir, par exemple d'un simple mélange. Il peut s'agir également, par exemple, d'un procédé comprenant une étape d'incorporation d'une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-stator. Il peut s'agir également par exemple d'un procédé utilisant la Température d'Inversion de Phase (TIP), procédé classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 pm. La présente invention a également pour objet l'utilisation d'au moins une huile essentielle selon l'invention pour la fabrication d'une composition cosmétique ou dermatologique telle que décrite précédemment. La composition selon l'invention peut être conditionnée, c'est-à-dire contenue, par exemple dans un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un stick, un tampon imbibé, un dispositif transdermique, un patch, un spray, une capsule ou une gélule. Ainsi la présente invention a également pour objet un dispositif se présentant sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un stick, un tampon imbibé, un dispositif transdermique, un patch, un spray, une capsule ou une gélule, ledit dispositif comprenant une composition cosmétique ou dermatologique selon la présente invention. La présente invention a également pour objet un procédé de traitement cosmétique comprenant l'application sur la peau ou les muqueuses d'une composition cosmétique selon l'invention. Pour cette application, on peut, par exemple, utiliser les formes galéniques décrites ci-dessus. L'application sur la peau peut donc être réalisée en fonction de la forme galénique utilisée. Cette application peut avantageusement être accompagnée d'un massage. L'application peut être, par exemple une application journalière quotidienne, hebdomadaire. Il peut s'agir par exemple d'une application une fois par jour, deux fois par jour ou plusieurs fois par jour. Le procédé de traitement cosmétique selon l'invention peut notamment permettre la prévention ou le traitement d'agressions telles que le rayonnement Ultra-Violet (UV) et/ou la pollution. En outre, le procédé de traitement cosmétique selon l'invention permet avantageusement d'hydrater la peau et/ou lutter contre les signes du vieillissement cutané, par exemple les signes du vieillissement cutané induits par un rayonnement UV et/ou par la pollution. De préférence, toute utilisation cosmétique et/ou tout procédé cosmétique selon l'invention sont respectivement des utilisations 20 cosmétiques non-thérapeutiques et/ou procédés cosmétiques non-thérapeutiques. En particulier, toute utilisation cosmétique et/ou tout procédé cosmétique selon l'invention peuvent notamment être destinés à des peaux ou les muqueuses ne présentant pas un état pathologique. Un autre objet de l'invention est une composition dermatologique 25 selon l'invention ou une huile essentielle de Cistus ladaniferus pour utilisation comme agent dermatologique. Lorsque la composition dermatologique selon l'invention ou de l'huile essentielle Cistus ladaniferus est utilisée comme agent dermatologique selon l'invention, il s'agit par exemple d'une utilisation sur une peau et/ou 30 une muqueuse présentant ou susceptible de présenter un état dégradé et/ou pathologique. Il peut s'agir par exemple d'un état dégradé et/ou pathologique transitoire ou acquis. Il peut s'agir par exemple d'une peau enflammée et/ou irritées et/ou atopiques et/ou xérotiques. L'homme du métier, de part ses connaissances générales via notamment l'observation d'une peau et/ou une muqueuse, sait identifier une peau et/ou muqueuse présentant un état dégradée et/ou pathologique. La composition dermatologique ou l'huile essentielle de Cistus ladaniferus pour utilisation comme agent dermatologique selon l'invention, peut notamment être utilisé comme agent cicatrisant. Avantageusement, la présente invention fournit notamment des moyens d'action au niveau des mécanismes cellulaires d'hydratation, de protection, de réparation, de stimulation et de remodelage dans le but de conditionner la peau et/ou les muqueuses permettant avantageusement un meilleur fonctionnement, par exemple de résistance et/ou de régénération de la peau et/ou des muqueuses avant et/ou après un endommagement de nature esthétique. La présente invention fournit également des moyens permettant de traiter la peau ou les muqueuses par exemple lorsqu'elles présentent un état pathologique tel d'une plaie. La présente invention peut être utilisée, par exemple, pour prévenir et/ou traiter un tissu épidermique et/ou dermique d'agressions extérieures, par exemple d'agressions physiques, chimiques, thermiques, hydriques, solaires et/ou des effets de ces agressions et d'en améliorer les conséquences. D'autres avantages pourront encore apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, donnés à titre illustratif et non limitatif. Brève description des figures - La figure 1 est un schéma représentant la structure protéique d'une jonction serrée. 3 0 - La figure 2 représente des photographies, figures 2 A à D d'explants de peaux après immunomarquages de la claudine 1 en fonction de la présence dans le milieu d'Hibiscrub® (marque déposée) (Figure 2 B), d'Hibiscrub et de à 0,005% en poids d"huile essentielle de Cistus ladaniferus (Figure 2 C), d'Hibiscrub (marque déposée) et de 0,05% en poids d"huile essentielle de Cistus ladaniferus (Figure 2 D). EXEMPLES Exemple 1 : Préparation de l'extrait de Cistus ladaniferus L'huile essentielle de Ciste est une huile essentielle extraite à partir des rameaux feuillus frais, recouverts de gomme résineuse et collante. Il s'agit d'hydrodistillation de rameaux frais cueillis moins de 12 heures avant l'hydrodistillation. Le procédé d'hydrodistillation dure environ vingt-quatre heures à pression atmosphérique afin de préserver toute la richesse olfactive de l'huile essentielle. L'Huile essentielle de Ciste se présente sous la forme d'une phase organique de couleur jaune orangée aux notes ambrées, résineuses, épicées et cuirées. Exemple 2 : Effet de l'huile essentielle de Cistus ladaniferus sur la protection cellulaire et la réparation cellulaire A partir des cellules fibroblastiques dermiques humaines normales (FDHN) obtenus par méthode enzymatique de plasties abdominales, un stress physique (UV) a été induit par une dose énergétique d'irradiation de 25 760W/m2 délivrée pendant 17 minutes par un irradiateur solaire (SUNTEST CPS+), afin de provoquer environ 50% de mortalité cellulaire. Suite à ce stress, un dosage fluorimétrique au CellTiter-Blue a été réalisé afin de quantifier l'activité métabolique mitochondriale correspondant à la viabilité cellulaire résiduelle avec ou sans irradiation. 30 Les fibroblastes ont été ensemencés à J1 dans des plaques 96 puits à raison de 22 000 cellules/puits/100 pl de milieu nutritif DMEM High Glucose sans rouge de phénol, contenant 10% de sérum de veau nouveau-né (SVNN) (Invitrogen, réf. 16010, lot 5396405D), 1% d'une solution d'acides aminés non essentiels (Invitrogen, réf. 11140), 1% Pénicilline Streptomycine, 1% de L-Glutamine et 1% d'une solution de pyruvate de sodium. Deux plaques par actif ont été ensemencées: l'une est la plaque essai stressée et l'autre, la plaque témoin non-stressée. Les plaques ont été traitées de façon préventives (traitement avant le stress) et/ou curatives (traitement après le stress). Les cellules ont été placées dans un incubateur à 37°C, 5% de CO2 et 95% d'humidité pendant 24 heures. Après 24 heures de culture (J1), une huile essentielle de Cistus ladaniferus de l'exemple 1 (HE Ciste) a été testée pendant 24 heures soit en conditions préventives (J2), soit en conditions curatives (J3), soit avec les deux conditions réunies (J2 et J3). L'huile essentielle de Cistus ladaniferus utilisée était un extrait liquide qui a été dilué à 1% dans du DMSO. La concentration testée était 8.10-5%. Deux témoins ont été utilisés : - Témoin stressé non traité (interne à la plaque stressée). Il est composé par le milieu à 10% de SVNN constitué de DMEM High Glucose sans rouge de phénol, 10% de SVNN, 1% d'une solution d'acides aminés non essentiels, 1% Pénicilline Streptomycine, 1% de L-Glutamine et 1% d'une solution de pyruvate de sodium. - Témoin non stressé non traité : il s'agit de la plaque témoin réalisée de la même façon que la plaque stressée, mais qui ne subit pas de stress physique. Elle est également mise en contact avec le milieu d'ensemencement à 10% de SVNN. La viabilité cellulaire a été estimée par un dosage fluorimétrique au Cell-Titer Blue (Promega, réf. G8080), qui permet de mesurer l'activité protéique mitochondriale et ainsi de déterminer la viabilité cellulaire suite à l'exposition aux irradiations. Les données du tableau I ci-dessous présentent le pourcentage de viabilité cellulaire résiduelle des fibroblastes selon le traitement subi. Tableau I : Ces résultats démontrent clairement que la viabilité cellulaire résiduelle après traitement avec l'huile essentielle de Cistus ladaniferus est toujours majorée par rapport au témoin. Le traitement à l'huile essentielle de Cistus ladaniferus permet donc avantageusement de conditionner les cellules dermiques pour une meilleure résistance face aux stress UV, leur permettant une meilleure réparation en traitement curatif. D'un point de vue plus général, l'huile essentielle de Cistus 15 ladaniferus pouvant permet ainsi une réparation, cicatrisation et une meilleure prévention générale des structures cellulaires du derme. Exemple 3 : Effet de l'huile essentielle de Ciste sur la synthèse de collagène 20 Différentes études ont été réalisées sur des fibroblastes dermiques humains normaux obtenus par méthode enzymatique de plasties abdominales ou mammaires ensemencés en monocouche dans les Témoin 100 36 100 % de viabilité cellulaire résiduelle (CTB) plaque irradiée à 760W/m2 -17min par rapport à la plaque non irradiée plaque irradiée à 760W/m2 -17min par rapport au témoin rapporté à 100% plaque non irradiée HE Ciste 8.10-5% préventif curatif 104 45 123 104 51 139 conditions de culture adéquates avec du milieu DMEM (milieu de Dulbecco - Invitrogen). L'étude de la synthèse de collagène a été réalisée sur des cultures monocouches de fibroblastes cultivées dans un milieu de prolifération puis traitées par l'huile essentielle de Cistus ladaniferus de l'exemple 1 (HE Ciste) (2.10-3 % en volume/volume de milieu) durant 48h, en plaques 6 puits et en milieu de base. Le dosage a été effectué sur les surnageants de culture par méthode colorimétrique (SIRCOL Soluble Collagen Assay, réf. 054S1000). Selon cette méthode, le réactif de coloration (Sirius red) réagit spécifiquement avec les unités hélicoïdales de type [Gly-X-Y]n du collagène de type I à XIV. Le complexe coloré est condensé après centrifugation, puis ressolubilisé par une solution alcaline pour le dosage. La référence interne positive est la vitamine C (20µg/ml). Les calculs présentés dans le tableau II ci-dessous ont été réalisés à partir du milieu seul (de dilution) rapport à une base 100. Tableau II : L'adjonction d'extrait de l'huile essentielle de Cistus ladaniferus permet de stimuler la synthèse de collagène jusqu'à 413%, et donc potentiellement d'améliorer les qualités biomécaniques du derme, d'améliorer le remodelage matriciel et de favoriser certains processus de la cicatrisation. Vitamine C +330% 20µg/ml +413% 2.10-3% HE Ciste Synthèse de collagène (48h) Eléments testés Concentrations Exemple 4 : Effet de l'huile essentielle de Cistus ladaniferus sur la synthèse des éléments de jonctions kératinocytaires Des explants de peau humaine normale provenant de la société BIOPREDIC (Rennes - France) ont été mis en culture dans différentes conditions pour y provoquer un état inflammatoire (stress SDS ou acide caprique) et/ou pour y provoquer la désorganisation de la fonction barrière, en présence ou en absence de l'huile essentielle de Cistus ladaniferus. Le milieu a été complété avec Hibiscrub® (Marque déposée) à une concentration de 4% afin de provoquer un état inflammatoire. Les explants de peau ont été cultivés pendant 24 heures à une température de 37°C dans une atmosphère humide contenant 5% de CO2. La protéine claudine-1 (protéine membranaire des jonctions serrées) a ensuite été visualisée par immunomarquages à l'aide d'un anticorps (obtenu commercialement chez Zymed Laboratories (Marque déposée) France) et d'une révélation du secondaire à la peroxydase. Le marquage a été visualisé avec un microscope optique, et quantifiés grâce à un logiciel d'analyse d'images histolab (marque déposée). Les résultats se présentent sous forme d'images et de pourcentages. Le pourcentage correspond au rapport de marquage par rapport au témoin non traité. Le marquage obtenu après le traitement avec l'huile essentielle de Cistus ladaniferus à une concentration de 0,005% et 0,05% en poids, montre une augmentation significative d'intensité au niveau cytoplasmique et au niveau membranaire. La figure 2 A à D sont des photographies représentant des explants de peaux après immunomarquages de la claudine 1 en fonction de la présence ou non (figure 2 A) dans le milieu d'Hibiscrub® (marque déposée) (antiseptique local associé à un agent moussant, dont la substance active est une solution de Chlorhexidine gluconate) (figure 2 B), d'Hibiscrub® et de 0,005% en poids d'huile essentielle de Cistus ladaniferus (figure 2 C), d'Hibiscrub® et de 0,05% en poids d'huile essentielle de Cistus ladaniferus (figure 2 D). Tel que démontré sur les figures 2 C et 2D, la présence dans le milieu d'huile essentielle de Cistus ladaniferus permet d'inhiber l'effet du stress lié, notamment à la présence de Sodium Dodécyl Sulfate ou acide caprique, et à l'état inflammatoire induit par l'Hibiscrub®. Cet exemple démontre que l'application d'huile essentielle de Cistus ladaniferus permet d'inhiber l'effet du stress et donc de restaurer la fonction barrière en stimulant l'expression des protéines signant les structures jonctionnelles de l'épiderme. Les effets de protection de la barrière épidermique (via la différenciation) seront donc renforcés par le traitement. Exemple 5 : Exemples de compositions cosmétiques Dans cet exemple, l'huile essentielle de Cistus ladaniferus (HE Ciste) est une huile essentielle de Cistus ladaniferus obtenu suivant l'exemple 1. La teneur de chaque composant, exprimé selon leur nomenclature INCI, est exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition. « Q.S.P. 100 % » signifie « quantité suffisante pour atteindre 100%. 5.1 Composition cosmétique pour le soin du corps comprenant une huile essentielle (HE) de Ciste La composition cosmétique ci-dessous correspond à un exemple de composition topique pour le soin du corps. La présente composition a été élaborée de manière à disposer de la viscosité d'un lait épais, pouvant permettre son application sur une surface corporelle importante. Composants Teneur Q.S.P. 100% Aqua Glycerin 6% Xanthan gum 0,15°/0 Carbomer 0,2°/0 Allantoin 0,10/0 5.2 Composition cosmétique protectrice pour le soin du visage comprenant une huile essentielle (HE) de Ciste La composition cosmétique ci-dessous correspond à un exemple de composition topique pour le soin du visage. La présente composition a été élaborée afin d'être appliquée, soit en soin du visage de manière classique, soit en couche épaisse de type masque. Composants Teneur Aqua Q.S.P. 100% Biosaccharide-gum-4 0,01°/0 Glyceryl stearate 2,75% PEG-100 stearate 0,2°/0 Ceteareth-20 0,45% Urea 2,5°/0 Niacinamide 2°/0 Fragrance 0,2°/0 HE de Ciste 0,05% HE de Citron CJ,2°/0 HE de Cinnamosma 0,10/0 Agent(s) de conservation 0,01 à 2% 2°/0 Cetearyl alcohol 80/0 Paraffinum liquidum 2°/0 Butyrospermum parkii butter 2°/0 Octyldodecanol 6°/0 Isopropyl palmitate 30/0 Methylpropanediol 2°/0 Pentylene glycol 2°/0 Tocopheryl acetate Autre(s) Huile(s) essentielle(s) 0,001 à 2% Agent(s) régulateur(s) de pH 0,001 à 1% Agent(s) régulateur(s) de viscosité 0,01 à 1% 5.3 Composition cosmétique pour le soin des lèvres comprenant une huile essentielle (HE) de Ciste La composition cosmétique ci-dessous correspond à un exemple de composition topique pour le soin des lèvres. La présente composition a été élaborée afin d'être appliquée en stick ou en bâton. Glycerin 40/0 Xanthan gum 0, -I 5°/0 Cellulose gum 0, -I 5°/0 Carbomer 0,2°/0 Glycol(s) 5°/0 Allantoin 0,10/0 PEG-40 stearate 3,2°/0 Stearic acid 1,5% Dimethicone 10/0 Hydrolysed soy protein 0,05% Urea 2°/0 Fragrance 0,2°/0 HE de Ciste 0,15% HE de Géranium 0,2°/0 HE de Néroli 0,05% Agent(s) de conservation 0,01 à 2% 80/0 Coco caprylate/caprate 2°/0 Cetyl alcohol 5°/0 Glyceryl stearate 10/0 Cera microcristallina 2°/0 Butyrospermum parkii butter 10/0 Tocopherol(s) Autre(s) Huile(s) essentielle(s) 0,001 à 2% Agent(s) régulateur(s) de viscosité 0,01 à 1% Agent(s) régulateur(s) de pH 0,001 à 1% 5.4 Composition cosmétique pour le soin du visage comprenant une huile essentielle (HE) de Ciste La composition cosmétique ci-dessous correspond à un autre exemple de composition topique pour le soin du visage et/ou du corps ayant une galénique adaptée pouvant être appliquée par le biais d'un applicateur type « roll-on ». Composants Teneur Q.S.P. 100% Vegetable oil Ozokerite 9°/0 Cera alba 10% Fragrance 0,4°/0 HE de Ciste 0,1 % HE de Sauge 0.05% HE d'Orange 0,2°/0 5°/0 Butyrospermum parkii butter 25% Hydrogenated vegetable oil 15% Polybutene 30/0 Cera microcristallina 30/0 Polyethylene 15% Caprylyl/capric triglyceride 2°/0 Stearyl alcohol 10/0 Tocopherol(s) Autre(s) Huile(s) essentielle(s) 0,001 à 2% Composants Teneur Q.S.P. 100% Aqua Glycerin 5°/0 5°/0 Glycol(s) Ammonium acryloyldimethyltaurate/VP copolymer 1,9% Methylpropanediol 30/0 5.5 BAUME CORPS : Composition cosmétique pour le soin du corps comprenant une huile essentielle (HE) de Ciste La composition cosmétique ci-dessous correspond à un autre exemple de composition topique pour le soin du corps. La présente composition a été élaborée selon une galénique de type baume pouvant être appliquée sur des zones du corps, comme les mains, nécessitant un soin intense. Methylsilanol mannuronate 0.02% Hydrolysed soy flour 0.05% Escin 0,30/0 Fragrance 0,2°/0 HE de Ciste 0,05% HE de Rose 0,01°/0 HE de Cèdre 0,10/0 Agent(s) de conservation 0,01 à 2% Glyceryl acrylate/acrylic acid copolymer 0,01°/0 Autre(s) Huile(s) essentielle(s) 0,001 à 2% Agent(s) régulateur(s) de viscosité 0,01 à 1% Agent(s) régulateur(s) de pH 0,001 à 1% Composants Teneur Q.S.P. 100% Aqua Xanthan gum C),2°/0 Glycerin 10% Allantoin 0,2°/0 Sorbitan stearate 2,5°/0 PEG-100 stearate 0,25% Glyceryl behenate 3,5°/0 Stearyl alcohol 2,5°/0 Palmitic acid 4,5°/0 Acrylates/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer 0,25% Theobroma cacao seed butter 3,5°/0 Copernicia cerifera cera 2,5°/0 Dimethicone 2°/0 Fragrance Cl,30/0 HE de Ciste 0,05% HE de Lavande 0,2°/0 HE de Myrrhe 0,10/0 Agent(s) de conservation 0,01 à 2% 6% Ethyl hexyl cocoate 5°/0 Cocos nucifera oil 10/0 Tocopherol(s) Autre(s) Huile(s) essentielle(s) 0,001 à 2% Agent(s) régulateur(s) de viscosité 0,01 à 1% Agent(s) régulateur(s) de pH 0,001 à 1% REVENDICATIONS1. Utilisation d'une huile essentielle de Cistus ladaniferus en tant qu'actif cosmétique. 2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, pour protéger la peau ou les muqueuses, et/ou pour hydrater la peau ou les muqueuses, et/ou pour prévenir et/ou atténuer les effets du vieillissement de la peau ou des muqueuses, et/ou pour remodeler le derme. 3. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle l'huile essentielle de Cistus ladaniferus comprend au moins un des composés choisi parmi l'alpha-pinène, le viridiflorol, le viridoflorène, l'acétate de bornyle, le para-cymène et le trans-pinocarvéol ou le mélange de ceux-ci. 4. Composition cosmétique ou dermatologique comprenant au moins une huile essentielle de Cistus ladaniferus et un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant de 0,0001 à 5 % en poids de ladite huile essentielle de Cistus ladaniferus par rapport au poids total de la composition. 5. Composition cosmétique ou dermatologique selon la revendication 4, dans laquelle l'huile essentielle de Cistus ladaniferus comprend au moins un des composés choisis parmi l'alpha-pinène, le viridiflorol, le viridoflorène, l'acétate de bornyle, le para-cymène et le transpinocarvéol ou le mélange de ceux-ci. 6. Composition cosmétique ou dermatologique selon la revendication 4 ou 5, ladite composition étant sous une forme choisieparmi un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, une solution, un gel, une lotion, une suspension et une émulsion. 7. Dispositif se présentant sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un stick, un tampon imbibé, un dispositif transdermique, un patch, un spray, une capsule ou une gélule, ledit dispositif comprenant une composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 6. 8. Huile essentielle de Cistus ladaniferus, pour utilisation comme agent dermatologique. 9. Huile essentielle de Cistus ladaniferus pour utilisation selon la revendication 8, pour utilisation comme agent cicatrisant. 10. Procédé cosmétique non-thérapeutique comprenant l'application sur la peau ou les muqueuses d'une composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 6. j'