FR 2968557 A1 20120615 FR 1060293 A 20101209 COMBINAISON ANTITUMORALE COMPRENANT UN DERIVE DE LA FAMILLE DES COMBRETASTATINES ET LE CETUXIMAB La présente invention concerne une combinaison antitumorale comprenant un dérivé de la famille des combrétastatines tel que l'AVE8062 (l'ombrabuline), pouvant être sous forme de base ou sous forme d'un sel d'un acide pharmaceutiquement acceptable, et le cetuximab, cette combinaison étant efficace dans le traitement des cancers et plus particulièrement des tumeurs solides. Les dérivés de la famille des combrétastatines comme l'AVE8062, sont des inhibiteurs de la polymérisation des microtubules des cellules. Ces composés sont des agents détruisant les vaisseaux tumoraux (VDA pour « Vascular Disrupting Agent ») et le cetuximab est un anticorps monoclonal dirigé contre le récepteur du facteur de croissance épidermique humaine (EGFR pour « Epidermal Growth Factor Receptor »). [Art antérieur] Des combinaisons incluant l'AVE8062 sont décrites dans les documents de brevet ci- dessous : - WO 2007/077309 décrit la combinaison entre l'AVE8062 et le VEGF Trap (ou aflibercept), un agent empêchant l'angiogenèse tumorale. - WO 99/51246 décrit la combinaison de l'AVE8062 et de sels de platine. - WO 2004/037258 décrit la combinaison entre l'AVE8062 et divers agents antitumoraux 2 0 choisis parmi les taxanes dont le taxol et le taxotere, les agents alkylants tels que le cyclophosphamide, ou l'isosfamide, les antimétabolites comme le 5-FU ou la cytarabine, l'épidophyllotoxine, les antibiotiques dont la doxorubicine ainsi que les vinca alcaloïdes. - EP 1407784 décrit la combinaison de l'AVE8062 avec la dexamethasone. 25 Sur le site de l'EMEA, le Résumé des Caractéristiques du Produit cetuximab, commercialisé sous la marque Erbitux®, (http://www.ema.europa. eu/docs/en_GB/document_library/EPAR_-_ProductInformation/human/000558/WC50 0029119.pdf) indique que le cetuximab peut être associé à d'autres traitements anticancéreux comme la radiothérapie et la chimiothérapie à base de sels de platine. [Brève description de l'invention] L'invention est relative à une combinaison pharmaceutique antitumorale comprenan : un dérivé de la famille des combrétastatines, tel que l'AVE8062 de formule OMe MeO OMe , et - le cetuximab (Erbitux®), un anticorps monoclonal chimérique IgG1 dirigé contre le récepteur du facteur de croissance épidermique humaine (EGFR). Le dérivé de la famille des combrétastatines, tel que l'AVE8062, peut être sous forme de base ou sous forme d'un sel d'un acide pharmaceutiquement acceptable. La combinaison comprend une quantité efficace d'un dérivé de la famille des combrétastatines, tel que l'AVE8062, et une quantité efficace de cetuximab. La combinaison peut-être destinée à être administrée à un patient au cours d'un cycle 15 pouvant aller de 1 à 4 semaines, plus particulièrement 3 semaines, comprenant une administration d'un dérivé de la famille des combrétastatines tel que l'AVE8062 et trois administrations de cetuximab. La combinaison peut être décalée dans le temps ou concomitante. 2 0 Selon l'une des réalisations préférées de l'invention, l'AVE8062 est administré à un patient selon un schéma intermittent avec un intervalle entre deux administrations (durée d'un cycle) pouvant aller de 1 à 4 semaines, par exemple de 3 semaines. Le cetuximab peut être quant à lui administré à un patient selon un schéma intermittent avec un intervalle d'une semaine entre deux administrations. 25 L'invention est aussi relative à l'utilisation d'un dérivé de la famille des combrétastatines tel que l'AVE8062 et de cetuximab pour la préparation de la combinaison antitumorale ci-dessus décrite. 30 [Description de l'invention] définitions - acide pharmaceutiquement acceptable : acide organique ou inorganique présentant une faible toxicité (voir « Pharmaceutical salts » J.Pharm.Sci. 1977, 66, 1-19) ;10 - quantité efficace : quantité d'un composé pharmaceutique produisant un effet sur la tumeur traitée. On entend par dérivés de la famille des combrétastatines, ou encore dérivés du stilbène, les dérivés de formule générale suivante : (I) dans laquelle A représente un groupe hydroxyle ou un groupe amino ainsi que ses sels pharmaceutiquement acceptables. Parmi les sels on peut citer le chlorhydrate, l'acétate, le phosphate, le méthanesulfonate. Quand le composé ou A est un groupe amino il peut aussi être couplé à des acides aminés pour conduire à des amides ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables. La synthèse des combrétastatines, qui peuvent être sous forme de base ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, ainsi que les compositions pharmaceutiques qui les contiennent sont décrites dans les brevets US 4,996,237 ; US 5,525,632 ; US 5,731,353 et US 5,674,906. Ces brevets décrivent les combrétastatines ainsi que leurs métabolites et décrivent leur activité anticancéreuse in vitro et in vivo. Les dérivés de la famille des combrétastatines sont des inhibiteurs de la polymérisation des microtubules des cellules. L'un de ces dérivés, l'AVE8062 a pour formule : OMe MeO OMe OH NH2 (Isomère Z) C'est un agent détruisant les vaisseaux tumoraux (ou VDA pour « Vascular Disrupting Agent »). II a pour nom chimique : (Z)-N-[2-methoxy-5-[2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)vinyl]phenyl]-L-sérinamide. Ce composé, qui est décrit dans EP 731085 B1, peut être préparé selon le procédé décrit dans WO 03/084919. L'AVE8062 peut être administré sous forme de base (cf. formule ci-dessus) ou sous forme d'un sel d'un acide pharmaceutiquement acceptable, par exemple sous forme du chlorhydrate, représenté ci-dessous : OMe MeO OMe Une fois administré, l'AVE8062 libère in vivo le métabolite actif (Z)-1-(3-amino-4-méthoxyphényl)-2-(3,4,5-triméthoxyphényl)éthène qui a pour formule : OMe On peut donc aussi substituer à l'AVE8062 une autre combrétastatine de formule OMe MeO OMe OMe N H-Y sous forme de base ou sous forme d'un sel d'un acide pharmaceutiquement acceptable, dans laquelle Y représente un acide aminé, qui libère in vivo ce métabolite. Le cetuximab est commercialisé sous la marque Erbitux®. C'est un anticorps monoclonal chimérique qui se lie spécifiquement au domaine extra-cellulaire du récepteur du facteur de croissance épidermique humaine (EGFR). Il est composé de la région Fv d'un anticorps murin anti-EGFR et des régions constantes IgG1 humaines (chaines lourdes et kappa). Il est produit par culture cellulaire d'un myélome murin. Les voies de signalisation de I'EGFR sont impliquées dans le contrôle de la survie cellulaire, de la progression du cycle cellulaire, de I'angiogenèse, de la migration, de l'invasion cellulaire 2 0 et du potentiel métastatique des cellules. Le cetuximab bloque la liaison des ligands endogènes de I'EGFR aboutissant à une inhibition de la fonction du récepteur. S'agissant de la combinaison, celle-ci consiste à associer sous forme de deux préparations pharmaceutiques distinctes un dérivé de la famille des combrétastatines, tel que l'AVE8062, 2 5 et le cetuximab. OMe NH2 La combinaison est administrée de façon répétée au cours de plusieurs cycles selon un protocole qui dépend de la nature et du stade du cancer à traiter ainsi que du patient à soigner (âge, poids, précédent(s) traitement(s),...). Le protocole peut être déterminé par tout praticien spécialisé en oncologie. Ainsi, la combinaison peut-être destinée à être administrée à un patient au cours d'un cycle pouvant aller de 1 à 4 semaines, plus particulièrement 3 semaines, comprenant une administration d'un dérivé de la famille des combrétastatines, tel que l'AVE8062, et trois administrations de cetuximab. La combinaison peut être décalée dans le temps ou concomitante. Selon l'une des réalisations préférées de l'invention, l'AVE8062 est administré à un patient selon un schéma intermittent avec un intervalle entre deux administrations (durée d'un cycle) pouvant aller de 1 à 4 semaines, par exemple de 3 semaines. Le cetuximab peut être quant à lui administré à un patient selon un schéma intermittent avec un intervalle d'une semaine entre deux administrations. La combinaison est donc destinée à être administrée à un patient au cours d'un cycle pouvant aller de 1 à 4 semaines, plus particulièrement 3 semaines, comprenant une administration d'AVE8062 et trois administrations de cetuximab. La combinaison peut être décalée dans le temps ou concomitante. Le mode d'administration peut être la voie parentérale et/ou la voie orale et dépend de la forme galénique utilisée pour l'agent antitumoral. Par voie parentérale, l'agent antitumoral peut être administré par voie intraveineuse en bolus ou préparé dans une poche de perfusion intraveineuse, avec des vecteurs pharmaceutiquement acceptables par différents procédés connus de l'homme du métier. Selon un mode particulier, le dérivé de la famille des combretastatines, tel que l'AVE8062, est administré par voie parentérale, telle que par administration intraveineuse, en bolus ou par perfusion, et le cetuximab est administré par voie parentérale telle que la voie intraveineuse. Une forme galénique de l'AVE8062 adaptée à la voie parentérale est celle où l'AVE8062 est en solution dans l'eau. Une forme galénique du cetuximab adaptée à la voie intraveineuse est par exemple celle commercialisée sous la marque Erbitux® sous forme de solution pour perfusion. Les doses d'AVE8062 et de cetuximab administrées à chaque fois à un patient dépendent de différents paramètres telles que la nature et le stade du cancer à traiter ainsi que du patient à soigner (âge, poids, précédent(s) traitement(s),...). L'AVE8062 peut être administré une fois toutes les 3 semaines à une dose tolérée comprise entre 5 et 60 mg/m2 (dose définie pour chaque administration). Le cetuximab peut être administré quant à lui à une dose tolérée comprise entre 250 et 400 mg/m2 (dose définie pour chaque administration). La combinaison peut être efficace dans le traitement des cancers, plus particulièrement des tumeurs solides en général, préférentiellement dans le traitement de cancers colorectaux, de la tête et du cou, de sarcomes, de cancers du poumon ou de l'ovaire. L'efficacité d'une combinaison peut être démontrée dans des modèles animaux pré-cliniques par la détermination de sa synergie thérapeutique. Une combinaison manifeste une synergie thérapeutique si elle est thérapeutiquement supérieure au meilleur agent utilisé seul à sa dose optimale (T.H. Corbett et al., Cancer Treatment Reports 1982, 66, 1187). L'efficacité d'une combinaison peut être également démontrée par comparaison de la dose maximale tolérée de la combinaison avec la dose maximale tolérée de chacun des constituants séparés dans l'étude en question. Enfin, la synergie en combinaison peut être mise en évidence par comparaison statistique des volumes tumoraux dans les différents groupes. On compare la somme des effets des produits seuls à l'effet de la combinaison des produits aux mêmes doses en utilisant des estimations obtenues à partir d'une analyse de la variance à deux facteurs (procédure MIXED du logiciel SAS). C'est ce dernier mode d'évaluation qui a été utilisé dans des essais expérimentaux décrits ci-après, réalisés chez des souris avec la combinaison selon l'invention. Dans ces essais sur les souris, l'activité antitumorale peut-être déterminée conformément à différents paramètres tels que la dose (en mg/kg) le mode d'administration, le temps d'administration, la toxicité, la variation de poids tumoral dans le groupe traité par rapport au groupe contrôle à un jour donné (%ATIAC), le pourcentage médian de régression tumorale à un jour donné, le délai d'atteinte médian (T-C) d'un poids tumoral cible dans le groupe traité (T) par rapport au groupe contrôle (C), et le nombre de régressions tumorales partielles (PR = régression de 50% de la taille tumorale initiale) et complètes (CR = régression au dessous du seuil de palpation). Dans les essais expérimentaux décrits ci-après, une activité antitumorale est déclarée pour AT/AC L'activité antitumorale sur des tumeurs solides est déterminée expérimentalement de la manière suivante : les animaux soumis à l'expérience sont des souris femelles SCID qui sont greffées bilatéralement par voie sous-cutanée avec 30 à 60 mg d'un fragment de tumeur primaire humaine de colon, IMM-COLOI, au jour O. Cette tumeur primaire surexprimant EGFR présente un génotype de type K-ras sauvage la prédisposant à répondre au cetuximab. Les animaux, porteurs de tumeurs ayant atteint une taille tumorale préalablement définie et supérieure à 120 mg, sont distribués dans les différents groupes, de traitements et contrôles, de manière à ce que la gamme de taille tumorale soit comparable d'un groupe à l'autre.. Généralement, la chimiothérapie commence de 3 à 22 jours après la greffe, selon le type de tumeur et la taille tumorale désirée. Les animaux sont observés et pesés tous les jours. Une dose induisant une perte de poids de 20% ou plus au jour où la perte de poids est maximale (nadir - moyenne du groupe) ou une mortalité de 10% ou plus est considérée comme toxique. L'évaluation de l'activité antitumorale est réalisée à la plus forte dose non toxique (HNTD pour « Highest Non Toxic Dose »), ou à la plus forte dose testée (HDT pour « Highest Tested Dose »), dans le cadre d'un agent non cytotoxique. Les tumeurs sont mesurées 2 ou 3 fois par semaine jusqu'à ce qu'elles atteignent approximativement 2 g ou jusqu'à ce que l'animal meure si cela survient avant que la tumeur n'atteigne 2 g. Les animaux sont autopsiés lorsqu'ils sont sacrifiés. Dans le cadre des études qui suivent, l'AVE8062 sous forme de chlorhydrate est formulé dans l'eau avec 0,9% de NaCl. Le cetuximab est formulé dans un tampon phosphate dépourvu de calcium et de magnesium à un pH de 7.4. Dans cette étude, où les tumeurs sont traitées à un stade avancé, l'AVE8062 a été administré par voie intraveineuse aux jours 21, 25 et 29 suivant l'implantation de la tumeur. Le cetuximab a été administré par voie intrapéritonéale aux jours 21, 25 et 29. Quand les deux agents ont été administrés en combinaison, les mêmes schémas que ceux utilisés pour les agents seuls ont été repris, la combinaison des deux agents ayant été réalisée à 4 heures d'intervalle (AVE8062 administré en premier) aux jours 21, 25 et 29. La perte de poids corporel est rapportée au premier jour suivant la fin du traitement (J30). La variation de poids tumoral dans le groupe traité par rapport au groupe contrôle ainsi que le pourcentage de régression médian sont rapportés 3 jours après le dernier traitement (J32) et le délai d'atteinte est calculé pour un poids tumoral cible de 500 mg. Les études statistiques comparent les temps pour atteindre 500mg dans les groupes traités par rapport au groupe contrôle ou par rapport au meilleur agent seul. La synergie est évaluée en comparant les volumes tumoraux sur une période de 13 jours après la fin du traitement. Le tableau I présente les résultats expérimentaux de l'étude. Le temps de doublement de la tumeur a été de 4,9 jours. Le poids tumoral médian au début des traitements a été de 182 à 195 mg, le contrôle ayant atteint un poids tumoral de 500 mg, 29 jours après la greffe tumorale. La plus haute dose testée (HDT) de l'AVE8062 est 58 mg/kg par injection, soit une dose totale de 174 mg/kg. A cette dose, l'AVE8062 est actif avec 6/6 régressions partielles (PR) et aucune régression complète (CR). L'AVE8062 conserve son activité aux deux paliers de dose inférieurs. Le délai de croissance par rapport au groupe contrôle s'échelonne entre 7 et 11 jours. Le cetuximab à sa plus haute dose testée (HDT) de 12,5 mg/kg par administration, soit une dose totale de 37,5 mg/kg, est actif avec 1/6 PR et un délai de croissance de 13 jours. Le palier de dose inférieur ne permet pas de conserver l'activité antitumorale. La plus haute dose non toxique (HNTD) de la combinaison a été déterminée à la dose de 58 mg/kg par administration d'AVE8062 combinée avec celle de 3,1 mg/kg par administration de cetuximab, les doses supérieures de la combinaison ayant été trouvées toxiques. A cette HNTD, la combinaison est très active avec 100% de régressions partielles (6/6 PR) et 33% de régressions complètes (2/6 CR) de la tumeur. Les doses inférieures de la combinaison sont également actives, induisant des CR à 2 paliers de doses et des PR à tous les paliers de doses testés. Le délai de croissance par rapport au groupe contrôle s'échelonne entre 14 jours à la plus faible dose et 32 jours à la HNTD. 2 0 Le tableau II présente l'analyse statistique des résultats de l'étude. Une synergie est observée au jour 36 pour tous les groupes de combinaison et se prolonge jusqu'au jour 42 pour les 3 paliers de dose les plus élevés. En conclusion, la combinaison de l'AVE8062 avec le cetuximab, induit des régressions 2 5 tumorales complètes, non observées pour les agents seuls. Ces régressions complètes en combinaison sont observées à plusieurs niveaux de doses. Le délai de croissance en combinaison est systématiquement supérieur à celui observé en monothérapie et une synergie est observée à différents paliers de dose. La combinaison de l'AVE8062 avec le cetuximab confère donc un avantage thérapeutique statistiquement significatif dans un 30 modèle expérimental de tumeur humaine primaire du colon. 1 I. Evaluation de l'AVE8062 en combinaison avec le cetuximab sur des souris femelles SCID porteuses de arcinome du colon humain IMM-COLOI : résultats expérimentaux figent, Voie Schéma Mortalité %bwc %AT/OC %regression Jour median T-C en régressions commentaires ig/kg/adm (en mg/kg) (jour du moyen au median au median au pour atteindre en jours décès) jour 30a jour 32 jour 32 500 mg jours partielle complète V Cétuximab IP 21,25,29 0/6 -5.4 REVENDICATIONS1. Combinaison pharmaceutique antitumorale comprenant un dérivé de la famille des combrétastatines, pouvant être sous forme de base ou sous forme d'un sel 5 pharmaceutiquement acceptable, et le cetuximab. 2. Combinaison selon la revendication 1 dans laquelle le dérivé de la famille des combrétastatines est ! AVE8062 de formule OMe MeO OMe OMe O~ OH N H2 10 , pouvant être sous forme de base ou sous forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable. 3. Combinaison selon la revendication 1 ou 2 comprenant une quantité efficace d'un dérivé de la famille des combrétastatines et une quantité efficace de 15 cetuximab. 4. Combinaison selon l'une des revendications 1 à 3 dans laquelle le dérivé des combrétastatines est sous forme de chlorhydrate. 2 0 5. Combinaison selon l'une des revendications 1 à 4 pour son application comme médicament dans le traitement d'une tumeur solide. 6. Combinaison selon l'une des revendications 1 à 5 pour son application comme médicament dans le traitement de sarcomes, de cancers du poumon, de la tête 25 et du cou, de l'ovaire ou de cancers colorectaux. 7. Utilisation d'un dérivé de la famille des combrétastatines et de cetuximab pour la préparation d'une combinaison antitumorale telle que décrite à l'une des revendications 1 à 6. 30