FR 2974013 A1 20121019 FR 1153205 A 20110412 UTILISATION DE CALIXARENES ASSOCIES AVEC UN ANTIBIOTIQUE DANS LE TRAITEMENT DES INFECTIONS BACTERIENNES La présente invention concerne l'utilisation de calixarènes avec un antibiotique dans le traitement des infections bactériennes. Dans le domaine de la santé publique, la lutte contre les infections bactériennes communautaires ou nosocomiales, est toujours un sujet d'actualité et d'inquiétudes. En effet, les bactéries sont les microorganismes le plus souvent responsables d'infections nosocomiales (IN), avec, par ordre de fréquence : Escherichia coli (24,7%), Staphylococcus aureus (18,9%), Pseudomonas aeruginosa (10%) et Enterococcus spp. (6%) (Enquête RAISIN 2006). Des bactéries fréquemment impliquées en clinique présentent fréquemment une résistance voire, une multi-résistance aux antibiotiques et/ou antiseptiques utilisés en routine. On parle de BMR pour Bactéries Multi-Résistantes et de BTR pour Bactéries Totalement Résistantes. On peut citer par exemple les SARM (Staphylococcus aureus Résistants à la Méticilline, avec une résistance à l'ensemble des 13-Lactamines), Entérobactéries porteuses de BLSE (13-Lactamase à Spectre Etendu) ou encore les ERG (Enterococcus spp. Résistants aux Glycopeptides). A l'heure actuelle, 64% des Staphylococcus aureus isolés au cours d'IN sont résistants à la méticilline (Enquête RAISIN 2006). Le problème est que les bactéries sont souvent porteuses de plusieurs mécanismes de résistance, induisant une résistance à de nombreuses familles d'antibiotiques : 13-lactamines, aminosides, fluoroquinolones ou macrolides... Par ailleurs, cette résistance aux antibiotiques, est souvent associée à une résistance aux antiseptiques, utilisés en quantité importante, en milieu hospitalier, pour lutter contre la dissémination des infections nosocomiales. La résistance d'une souche bactérienne vis-à-vis d'un antibiotique peut être une résistance naturelle (caractéristique de l'ensemble des souches d'une même espèce). Elle peut être aussi acquise (caractéristique de certaines souches au sein d'une espèce); elle résulte alors d'une modification du capital génétique de ces bactéries. Ce genre de modification génétique peut conférer à une souche bactérienne concernée un mécanisme de résistance à un antibiotique, à une famille d'antibiotiques ou à plusieurs familles d'antibiotiques. La recherche fondamentale sur les mécanismes mis en jeu par les bactéries et les informations épidémiologiques suscitent actuellement des doutes sur la possibilité d'éradiquer les bactéries pathogènes dans l'avenir. Dès lors, il n'est plus certain que les antibiotiques disponibles actuellement permettent de contrôler durablement le problème. Si la mise à disposition de nouveaux antibiotiques a permis jusqu'à aujourd'hui de répondre à chaque forme de résistance bactérienne, cette démarche fait maintenant face à de nombreuses limites, puisque aucune nouvelle classe d'antibiotiques n'a été développée depuis vingt-cinq ans (Boucher et al. CID, 2009). Peu de nouveaux antibiotiques ont été commercialisés depuis le début des années 90. Parmi ces nouveaux antibiotiques, seuls le linézolide et la daptomycine, ont un mécanisme d'action innovant, mais sont réservés à des applications bien particulières et actifs uniquement sur les bactéries à Gram positif. En outre, ils présentent une toxicité importante (toxicité hématologique et médullaire pour le linézolide, pneumopathies à éosinophiles pour la daptomycine), ce qui a restreint leur usage. De plus, l'utilisation excessive et le mésusage de la plupart des antibiotiques ont eu pour conséquence, l'apparition et la dissémination de bactéries présentant un ou plusieurs mécanismes de résistance aux antibiotiques, et ce très peu de temps après le début de leur commercialisation. Ainsi, à titre d'exemple, on peut citer les cas du linézolide, de la daptomycine, de la quinupristine-dalfopristine, ou de la tigécycline, y compris chez des bactéries initialement BMR. En mettant en jeu un concept innovant liant chimie supramoléculaire avec ciblage et désorganisation de l'enveloppe bactérienne, une nouvelle famille de composés antibactériens, en particulier le para-guanidinoéthylcalix[4]arène, désigné ci-après le Cxl, a été développée récemment. Cette famille de composés présente des propriétés antibactériennes vis-à-vis de différentes bactéries impliquées dans les infections nosocomiales et/ou communautaires. La publication de Grare et al. (J. Antimicrob. Chemother. 60 (2007), 575-581) décrit que le Cxl possède une activité antibactérienne sur les bactéries résistantes ou non aux antibiotiques. Dans la publication de Grare et al. (Clin. Microbiol. Infect. 16 (2010), 432-438), l'activité antibactérienne du Cxl est comparée à celle de l'hexamidine et de la chlorhexidine, deux antiseptiques, d'utilisation très courante en thérapeutique humaine, sur toute une série d'isolats cliniques : MDR (« multidrug resistant »), XDR (« extended drug resistant »), voire PDR (« pan-drug resistant »). L'article de Grare et al. (Pathologie Biologie 58 (2010), 46-51) décrit que le Cxl, en tant qu'antibactérien cationique, interagit avec la paroi bactérienne, entraînant au final une perte d'intégrité membranaire. Néanmoins, face à la menace d'apparition de bactéries, PDR, l'urgence absolue reste de pouvoir disposer, de nouveaux composés antibactériens possédant des mécanismes d'action innovants pour traiter les patients infectés par ce type de bactéries ; et/ou de moyens nouveaux permettant de rendre le traitement par des antibiotiques utilisés normalement en thérapeutique anti-infectieuse, à nouveau accessibles à ces patients. Un aspect de la présente invention est de fournir de nouveaux produits antibactériens. Un autre aspect de l'invention est de fournir de nouvelles compositions d'antibactériens associant des calixarènes et des antibiotiques. La présente invention repose sur un fait inattendu constaté par les Inventeurs, lors de l'évaluation de l'activité antibactérienne du para-guanidinoéthylcalix[4]arène, désigné ci- après Cxl. Cette molécule permet de diminuer la CMI (Concentration Minimale Inhibitrice) d'un antibiotique vis-à-vis duquel une souche bactérienne présente une résistance. En d'autre terme, d'un côté, le Cxl permet de conférer de novo un certain niveau de sensibilité vis-à-vis d'(un) antibiotique(s) chez une souche bactérienne présentant une résistance acquise audit(s) antibiotique(s), et d'un autre côté, le Cxl est aussi capable de conférer une sensibilité vis-à-vis d'(un) antibiotique(s) chez une souche bactérienne présentant une résistance naturelle audit(s) antibiotique(s). Concrètement, dans le cadre clinique, le traitement du Cxl en association avec le traitement d'au moins un antibiotique permet de diminuer la dose de ce dernier dans le cadre du traitement d'une infection par une bactérie résistante audit antibiotique, et/ou de rendre le traitement par ledit antibiotique efficace aux patients présentant une infection à au moins une souche bactérienne résistante audit antibiotique. La présente invention propose un produit comprend au moins un antibiotique donné, et un calixarène représenté par la formule I suivante : Formule I n ox dans laquelle : (i) n = un entier de 4 à 16, (ii) m= un entier de 1 à 10, (iii) X est choisi parmi : - un hydrogène, - un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, 5 - un halogène choisi parmi Cl, Br, I, ou - un groupement amphiphile choisi parmi un groupe anionique, tels que les carboxylates -RCO2 , les sulfates -RSO4-, les sulfonates -RS03-, un groupe cationique, tel que RNH3+, dans lesquels R est un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, 10 pour son utilisation comme médicament. Dans un mode de réalisation particulier, le produit selon l'invention comprend un antibiotique donné et un calixarène représenté par la formule I, dans laquelle n=4, ledit calixarène représenté par la formule I(1) suivante : NH2 HNNH OXFormule I(1) 4 15 m et X ayant les significations indiquées ci-dessus. Dans un autre mode de réalisation particulier, le produit selon l'invention comprend un antibiotique donné et un calixarène représenté par la formule I, dans laquelle m=l, ledit calixarène représenté par la formule I(2) suivante : NH2 HNNH OXFormule I(2) 20 n n et X ayant les significations indiquées ci-dessus. Selon un autre mode de réalisation particulier, le produit selon l'invention comprend un antibiotique donné et un calixarène représenté par la formule I, dans laquelle X est un 5 hydrogène, ledit calixarène représenté par la formule I(3) suivante : Formule I(3) OH n m et n ayant les significations indiquées ci-dessus. 10 Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne un produit comprenant un antibiotique donné et un calixarène représenté par la formule I, dans laquelle n=4, m=1 et X est un hydrogène, ledit calixarène représenté par la formule II suivante : NH2 HNNH OH Formule II 4 15 La molécule représentée par la formule II est le para-guanidinoéthylcalix[4]arène, désigné par Cxl dans la présente invention. Le Cxl peut être synthétisé selon le procédé décrit dans Mourer et al. (Bioorganic & Medicinal Chemistry Letter 16 (2006) 2960-2963). Le calixarène selon l'invention peut être tel que décrit ci-dessus, ou un sel d'acide physiologiquement acceptable dérivé d'un composé de formule (I) tel qu'un chlorhydrate, un formiate, un trifluoroacétate ou un oxalate (HOOCCOOH). L'expression « sel d'acide physiologiquement acceptable» signifie un dérivé d'un 5 composé de formule I, obtenu par réaction d'un acide inorganique ou d'un acide organique, sur un composé de formule I. Des exemples d'acides inorganiques permettant l'obtention de sels physiologiquement acceptables incluent sans être limités à ceux-ci, l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide nitrique, l'acide carbonique, l'acide formique, l'acide monohydrogénocarbonique, 10 l'acide phosphorique, l'acide monohydrogénophosphorique, l'acide dihydrogénophosphorique, l'acide perchlorique, l'acide sulfurique, l'acide monohydrogénosulfurique, l'acide iodhydrique. Des exemples d'acides organiques permettant l'obtention de sels physiologiquement acceptables incluent sans être limités à ceux-ci, l'acide acétique, l'acide lactique, l'acide 15 propionique, l'acide butyrique, l'acide isobutyrique, l'acide palmique, l'acide maléique, l'acide glutamique, l'acide hydroxymaléique, l'acide malonique, l'acide benzoïque, l'acide succinique, l'acide glycolique, l'acide subérique, l'acide fumarique, l'acide mandélique, l'acide phthalique, l'acide salicylique, l'acide benzènesulfonique, l'acide p-toluènesulfonique, l'acide citrique, l'acide tartrique, l'acide méthanesulfonique, l'acide hydroxynaphthoïque. 20 Les sels d'acides aminés, tels que les arginates et leurs équivalents sont également inclus ainsi que les sels d'acides organiques tels que l'acide glucuronique ou l'acide galacturonique et leurs équivalents (voir, par exemple, Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). 25 L'antibiotique donné mis en oeuvre dans le susdit produit selon l'invention peut être choisi parmi les 13- lactamines, les aminosides, les fluoroquinolones, la fosfomycine, la colimycine, la rifampicine, la tigécycline, ou l'acide fusidique, et plus particulièrement dans le groupe comprenant l'imipénème, la pipéracilline-tazobactam, la pénicilline G, le céfotaxime, la ceftazidime, la tobramycine, la gentamicine, la ciprofloxacine, la rifampicine, 30 la fosfomycine, la colimycine, la streptomycine, la ticarcilline-acide clavulanique, la tigécycline ou l'acide fusidique. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la tigécycline. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et l'acide fusidique. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la fosfomycine. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la pénicilline. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et l'imipénème. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la gentamicine. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et le céfotaxime. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la rifampicine. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la pipéracillinetazobactam. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la ciprofloxacine. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la ceftazidime. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la colimycine. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la ticarcilline-acide clavulanique. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le produit selon l'invention comprend un calixarène représenté par la formule II (Cxl) et la tobramycine. Dans une telle composition selon l'invention, le calixarène représenté par la formule II (Cxl) et un antibiotique donné peuvent être physiquement mélangés ensemble dans un produit unitaire final. Le calixarène représenté par la formule II (Cxl) et un tel antibiotique donné peuvent être aussi présents sous forme d'un même produit unitaire final, mais physiquement séparés. Par exemple, le Cxl et l'antibiotique donné peuvent être présents respectivement dans deux compartiments séparés d'une gélule. Un autre aspect de l'invention concerne un produit tel que décrit ci-dessus pour son 5 utilisation comme médicament dans le traitement de pathologies impliquant une souche bactérienne présentant une résistance à au moins un antibiotique déterminé. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne un produit tel que décrit ci-dessus pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant une souche 10 bactérienne résistante parmi Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, et Staphylococcus aureus, plus particulièrement une souche bactérienne résistante choisie parmi : - une souche de Staphylococcus aureus de phénotype sauvage - une souche de Staphylococcus aureus Résistant à la Méthicilline (SARM) sans résistance associée, 15 - une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides et aux fluoroquinolones, une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides, aux fluoroquinolones et aux macrolides - lincosamides - synergystines, - une souche d'Escherichia coli de phénotype sauvage 20 - une souche d'Escherichia coli porteuse d'une pénicillinase, - une souche d'Escherichia coli porteuse de BLSE (13-Lactamase à Spectre Etendu), présentant une résistance associée aux aminosides, - une souche d'Escherichia coli hyperproductrice de céphalosporinase, présentant une résistance associée aux aminosides et aux fluoroquinolones, 25 - une souche de Pseudomonas aeruginosa de phénotype sauvage - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et à la fosfomycine, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine, à la fosfomycine et aux aminosides, 30 - une souche muqueuse de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance 13-lactamines, à la rifampicine et aux fluoroquinolones. Le produit selon l'invention est notamment utilisé dans le traitement des pathologies impliquant une souche de bactéries présentant une résistance, notamment les infections nosocomiales et/ou communautaires, telles que les infections abdominales, les infections digestives, les infections urinaires, les infections respiratoires, les infections neuro-méningées, les infections de la sphère oro-pharyngée, les infections génitales, les endocardites, les infections de la peau et des tissus mous, les infections ostéoarticulaires, les infections oculaires, les septicémies ou bactériémies, plus particulièrement dans le traitement des pathologies citées ci-dessous dans le tableau 1. infections abdominales péritonite, appendicite... infections digestives diarrhées toxi-infection alimentaire collectives, diarrhées post-antibiothérapie... infections urinaires cystites, pyélonéphrites, prostatites... infections respiratoires bronchites, pneumonies, pneumopathies, abcès... infections neuro-méningées méningites bactériennes, abcès cérébraux... infections de la sphère oro- sinusites, otites, angines, phlegmons, épiglottites... pharyngée infections génitales vulvite, vaginite/vaginose, cervicite, salpingite... infections de la peau et des furonculose, abcès, escarre, pied diabétique ... tissus mous infections oculaires conjonctivites, kératites, endophtalmies... autres infections septicémies ou bactériémies... Tableau 1 Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la tigécycline, l'acide fusidique ou la fosfomycine 15 pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant la souche de SARM sans résistance associée. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : 20 - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la pénicilline G, la tigécycline, l'acide fusidique ou la fosfomycine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant la souche de SARM présentant une résistance aux aminosides et aux fluoroquinolones. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la pénicilline G, l'imipénème, la gentamicine, la tigécycline, l'acide fusidique ou la fosfomycine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant la souche de SARM présentant une résistance aux macrolides, aux fluoroquinolones et aux macrolides-lincosamides-synergistines. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la tigécycline, l'acide fusidique ou la fosfomycine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant la souche Staphylococcus aureus de phénotype sauvage. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi le céfotaxime, la gentamicine ou la rifampicine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant la souche d'Escherichia coli porteuse de BLSE. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la gentamicine ou la rifampicine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant la souche d'Escherichia coli porteuse d'une pénicillinase, ou la souche d'Escherichia coli hyperproductrice de céphalosporinase. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la gentamicine, la tobramycine, ou la rifampicine son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant une souche d'Escherichia coli de phénotype sauvage. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la pipéracilline-tazobactam, la rifampicine, la tobramycine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et à la fosfomycine. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la ceftazidime, la rifampicine, la colimycine, la fosfomycine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine, à la fosfomycine et aux aminosides. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne 25 un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la pipéracilline-tazobactam, l'imipénème, la rifampicine, la colimycine, la fosfomycine, la tobramycine et la ciprofloxacine pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant une souche de 30 Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et aux fluoroquinolones. Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, l'invention concerne un produit comprenant : - un calixarène représenté par la formule II, et - un antibiotique donné choisi parmi la pipéracilline-tazobactam, la ceftazidime, la tobramycine, la ciprofloxacine, la rifampicine, la fosfomycine ou la ticarcilline-acide clavulanique pour son utilisation dans le traitement de pathologies impliquant une souche de Pseudomonas aeruginosa de phénotype sauvage. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique 10 comprenant au moins un produit tel que décrit ci-dessus comme substance active en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Diverses formulations sont possibles pour les dites compositions pharmaceutiques : sous forme de gélule, comprimé, poudre, crème, lotion, solution aqueuse ou hydroalcoolique, collutoire, collyre, lait, mousse, gel, spray ou poudre par exemple. 15 Ladite composition pharmaceutique peut être administrée par voie orale, parentérale, ou topique. Dans une telle composition pharmaceutique selon l'invention, l'homme du métier sait que la dose d'administration unitaire du Cxl dépend de la nature des bactéries à traiter, mais également de la dose unitaire d'un antibiotique donné. 20 La dose d'administration unitaire d'un antibiotique donné classique est connue de l'homme du métier. Un autre aspect de la présente invention a pour objet de fournir un produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de 25 pathologies impliquant au moins une souche bactérienne présentant une résistance. Ledit produit de combinaison contient : - un antibiotique donné choisi parmi : les 13-lactamines, les aminosides, les fluoroquinolones, la fosfomycine, la colimycine, la rifampicine, la tigécycline, ou l'acide fusidique, et 30 - un calixarène représenté par la formule I suivante : NH2 HN NH OX nFormule I dans laquelle : (i) n = un entier de 4 à 16, (ii) m= un entier de 1 à 10, (iii) X est choisi parmi : - un hydrogène, - un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, - un halogène choisi parmi Cl, Br, I, ou - un groupement amphiphile choisi parmi un groupe anionique, tels que les carboxylates -RCO2-, les sulfates -RSO4-, les sulfonates -RS03-, un groupe cationique, tel que RNH3+, dans lesquels R est un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, comme produit de combinaison, pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant au moins une souche bactérienne présentant une résistance acquise à au moins un antibiotique déterminé, telles que les infections abdominales, les infections digestives, les infections urinaires, les infections respiratoires, les infections neuro-méningées, les infections de la sphère oro-pharyngée, les infections génitales, les endocardites, les infections de la peau et des tissus mous, les infections ostéoarticulaires, les infections oculaires, les septicémies ou bactériémies, plus particulièrement les pathologies citées ci-dessus dans le tableau 1. Dans un tel produit de combinaison selon l'invention, le calixarène représenté par la formule I et l'antibiotique donné sont présents physiquement séparés dans un produit final. Le calixarène et l'antibiotique donné peuvent être administrés aux patients simultanément, séparément ou selon un ordre étalé dans le temps, selon la prescription.25 Dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit de combinaison dans lequel le calixarène correspond au calixarène représenté par la formule II suivante : 4 HNNH OHFormule II La molécule représentée par la formule II est le para-guanidinoéthylcalix[4]rène, désigné par Cxl dans la présente demande. Dans un autre mode de réalisation avantageux du produit de combinaison de l'invention, l'antibiotique donné est choisi parmi l'imipénème, la pipéracilline-tazobactam, la pénicilline G, le céfotaxime, la ceftazidime, la tobramycine, la gentamicine, la ciprofloxacine, la rifampicine, la fosfomycine, la colimycine, la streptomycine, la ticarcilline-acide clavulanique, la tigécycline ou l'acide fusidique. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit de combinaison dans lequel ladite souche bactérienne résistante appartenant à une espèce choisie parmi Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, et Staphylococcus aureus. Dans un autre mode de réalisation particulier, le produit de combinaison selon l'invention est destiné pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en 20 thérapie de pathologies impliquant au moins une souche bactérienne résistante choisie parmi : - une souche de Staphylococcus aureus de phénotype sauvage - une souche de Staphylococcus aureus Résistant à la Méthicilline (SARM) sans résistance associée, - une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides et aux 25 fluoroquinolones, une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides, aux fluoroquinolones et aux macrolides - lincosamides - synergystines, - une souche d'Escherichia coli de phénotype sauvage - une souche d'Escherichia coli porteuse d'une pénicillinase, - une souche d'Escherichia coli porteuse de BLSE (13-Lactamase à Spectre Etendu), présentant une résistance associée aux aminosides, - une souche d'Escherichia coli hyperproductrice de céphalosporinase, présentant une résistance associée aux aminosides et aux fluoroquinolones, - une souche de Pseudomonas aeruginosa de phénotype sauvage - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et à la fosfomycine, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine, à la fosfomycine et aux aminosides, - une souche muqueuse de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance 13-lactamines, à la rifampicine et aux fluoroquinolones. Dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la tigécycline, l'acide fusidique ou la fosfomycine, comme produit de combinaison, pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant la souche de SARM sans résistance associée. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la pénicilline G, la tigéncyline, l'acide fusidique ou la fosfomycine, comme produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant la souche de SARM présentant une résistance aux aminosides et aux fluoroquinolones. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la pénicilline G, l'imipénème, la gentamicine, la tigécycline, l'acide fusidique ou la fosfomycine, comme produit de combinaison pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant la souche de SARM présentant une résistance aux macrolides, aux fluoroquinolones et aux macrolides-lincosamidessynergistines. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la tigécycline, l'acide fusidique ou la fosfomycine, comme produit de combinaison pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant la souche Staphylococcus aureus de phénotype sauvage. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi le céfotaxime, la gentamicine ou la rifampicine, comme produit de combinaison pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant la souche d'Escherichia coli porteuse de BLSE. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la gentamicine ou la rifampicine, comme produit de combinaison pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant la souche d'Escherichia coli porteuse d'une pénicillinase, ou la souche d'Escherichia coli hyperproductrice de céphalosporinase. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la gentamicine, la tobramycine, ou la rifampicine, comme produit de combinaison, pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant la souche d'Escherichia coli de phénotype sauvage. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la pipéracilline-tazobactam, la rifampicine, la tobramycine, comme produit de combinaison, pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et à la fosfomycine. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la ceftazidime, la rifampicine, la colimycine, la fosfomycine pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant une souche Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine, à la fosfomycine et aux aminosides. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la pipéracilline-tazobactam, l'imipénème, la rifampicine, la colimycine, la fosfomycine, la tobramycine et la ciprofloxacine, comme produit de combinaison, pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et aux fluoroquinolones. Dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne un produit contenant le calixarène de formule II (Cxl) et un antibiotique donné choisi parmi la pipéracilline-tazobactam, la ceftazidime, la tobramycine, la ciprofloxacine, la rifampicine, la fosfomycine ou la ticarcilline-acide clavulanique, comme produit de combinaison, pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant une souche de Pseudomonas aeruginosa de phénotype sauvage. Les figures et les exemples ci-dessous permettant d'illustrer à titre d'exemple la présente invention, ne peuvent être interprétés en aucun cas la limitation de la portée de l'invention. Figures Figure 1 : la figure 1 représente une microplaque préparée pour mesurer la sensibilité d'une souche bactérienne vis-à-vis d'une solution contenant un antibiotique et le Cxl respectivement dans une proportion des concentrations déterminées. Les colonnes 1 et 12 ne contiennent que du milieu témoin. Les colonnes 2 et 11 contiennent du milieu témoin et des bactéries, mais sans antibiotique ni le Cxl. Les colonnes 3 à 10 contiennent les bactéries, le Cxl en concentration décroissante et un antibiotique en concentration croissante. Figure 2A : la figure 2A illustre une additivité entre le Cxl et un autre antibiotique. Figure 2B : la figure 2B illustre une indifférence entre le Cxl et un autre antibiotique. Figure 2C : la figure 2C illustre une synergie entre le Cxl et un autre antibiotique. Figure 2D : la figure 2D illustre un antagonisme entre le Cxl et un autre antibiotique. . Matériel et Méthode 1.1 Matériel et réactif - Seringue de 10, 20 ou 50 mL - Filtre 0,22 µm (filtres Millex®GP, 0,22 µm, Millipore, France) - Tubes Falcon 15 et 50 mL - Plaques de 96 puits (Greiner, 650161) - Géloses Mueller Hinton (MHA) (Difco, 225250) - Bouillons Mueller Hinton (MHB) (Difco, 275730) - Eau distillée stérile Solution de la drogue à tester : Cxl (M = 1221,11 g/mol) fournie par le Pr. Regnouf de Vains sous forme de poudre blanche, reprise en eau distillée stérile et filtrée sur 0,22 µm pour obtenir une solution stérile à 10-2 mol/L. Nous nous sommes procuré les antibiotiques commerciaux par les fabricants, sous forme de poudre stérile, prête à l'emploi. 1.2 Souches bactériennes Trois souches de référence ont été utilisées, correspondant à celles étudiées pour les CMI et les CMB (Concentration Minimale Bactéricide) : Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Pour chacune de ces souches ont été choisis 3 isolats cliniques correspondant, présentant divers profils de résistance aux antibiotiques classiquement utilisés en routine : - EcRl, EcR2, EcR3; - SaRl, SaR3, SaR4; - PaR2, PaR3, PaR5. Les profils de sensibilité aux antibiotiques de ces isolats cliniques sont figurés Annexe 1. 1.3. Mode opératoire : Technique de l'échiquier J-1 : Mise en culture des bactéries sur gélose MHA (Mueller Hinton Agar) Incuber 24 h à 35°C. JO : Ensemencement d'un bouillon MHB (Mueller Hinton Broth) Prélever une colonie « moyenne » sur la gélose J-1 et ensemencer 5 mL de bouillon MHB. Incuber 24 h à 35°C. 1830 J1 : Préparation des plaques de 96 puits Préparation de l'inoculum bactérien : La pureté des souches est vérifiée par l'absence de contaminants sur la gélose MHA ensemencée parallèlement au bouillon, et par réalisation d'une coloration de Gram. La suspension bactérienne est transférée dans un tube Falcon de 15 mL, centrifugée 10 min à 4500g puis le culot est remis en suspension dans 1 mL d'eau distillée stérile. Les dilutions adéquates sont ensuite réalisées afin d'obtenir un inoculum bactérien entre 5.105 et 5.106 UFC/mL. Préparer les solutions : 1) Antibiotique (ATB) à tester, 2) Cxl Les CMI des antibiotiques ont été déterminées préalablement pour chaque souche, par méthode de microdilution en milieu liquide (CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute), 2003]. Les dilutions adéquates sont réalisées afin d'obtenir une solution de concentration équivalente à 32 fois la CMI de l'ATB à tester, en milieu MH (Mueller-Hinton). Puis nous avons procédé à une série de dilutions d'ordre 2 en milieu MH afin d'obtenir les concentrations suivantes : 16, 8, 4, 2, 1, 0,5 et 0,25 fois la CMI (tubes Falcon de 15 mL). Le même mode opératoire est suivi pour le Cxl. Cela permet d'obtenir une gamme de concentration de 8 à 0,06 fois la CMI dans la microplaque pour les deux molécules (dilution au demi avec addition de la 2ème molécule, puis nouvelle dilution au 1/2 après ajout de la suspension bactérienne). On obtient ainsi 64 combinaisons ATB/Cxl. Pour chaque plaque, 1 mL de solution de chaque dilution est nécessaire. Préparation des microplaques Le volume final contenu dans chacun des puits doit être de 100 µL. Deux témoins doivent être présents sur chaque plaque : - colonne 1 et 12 : témoin milieu - colonne 2 et 11 : témoin milieu + bactéries Distribution du milieu MH 100 µL dans chacun des puits des colonnes 1 et 12. 50 µL dans chacun des puits des colonnes 2 et 11. Distribution de la gamme de dilution de l'antibiotique à tester et de la molécule d'intérêt Cxl : 25 µL dans les puits des colonnes 11 à 3, en commençant par la plus faible concentration. ATB : 25 µL dans les puits des lignes H à A (colonnes 3 à 11), en commençant par la plus faible concentration. Distribution de la suspension bactérienne 50 µL dans chacun des puits des colonnes 2 à 11. J2 : Lecture de la turbidité à 540 nm. Les différents types d'interactions observés par la technique de l'échiquier sont présentés dans les figures 2A, 2B, 2C et 2D : 15 La valeur FIC (Fractional Inhibitory Concentration Index) est déterminée par la formule suivante : Ft = F1C'~ + F C = C M4 en assoc t CMIF: en assise CM A seul GNlia seul 20 Lorsque FIC 4, il y a un effet antagoniste entre l'antibiotique A et l'antibiotique B. 25 Pour chaque souche et chaque combinaison antibiotique/Cxl, les expériences ont été répétées au minimum 3 fois. 2. Résultats & Discussion Les résultats obtenus sont présentés sous forme de tableaux (Tableaux I à XII), 30 présentant de façon plus détaillée, par couple ATB/Cxl : - les FIC index obtenus lors des différentes expériences ; - les concentrations optimales pour la synergie ;10 - les CMI des composés utilisés seuls ; - les gammes évaluées et nature de l'interaction observée. Les résultats ci-après montrent qu'aucun antagonisme entre le Cxl et un antibiotique testé n'a été observé, quelque soit la souche et les associations testées. Pseudomonas aeruginosa est la souche, parmi toutes les souches analysées, sur laquelle le plus grand nombre d'associations synergiques, avec des antibiotiques très variés ((3-lactamines, aminosides, fluoroquinolones...), a été observé. Une restauration de l'activité de certains antibiotiques est observée pour tous les isolats cliniques testés. Par ailleurs, les antibiotiques pour lesquels une synergie entre lesquels et le Cxl a été observée agissent au niveau : - de la paroi : fosfomycine (sachant que le mécanisme d'action spécifique de la fosfomycine se traduit par une synergie d'action quasi-constante avec les autres antibiotiques actifs sur la paroi bactérienne) mais aussi avec les associations pipéracilline-tazobactam & ticarcilline-acide clavulanique, et la ceftazidime ; - de la synthèse des protéines : tigécycline, gentamicine, tobramycine, streptomycine, acide fusidique ; - de la synthèse des acides nucléiques : rifampicine, ciprofloxacine. 2. Synergie de l'association du Cxl avec des antibiotiques vis-à-vis de souches d'Escherichia coli résistantes ou non aux antibiotiques. 2.1. Synergie vis-à-vis de la souche d'Escherichia coli ATCC 25922 (phénotype sauvage) Tableau I : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour Escherichia coli ATCC 25922 (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Amoxicilline 1-4 nd 4/4 32/32 Indifférence Cxl /Amoxicilline- 0,53-1 0,125/2 4/4 16/256 Additivité Acide clavulanique Cxl/Pipéracilline 1-4 nd 4/2 16/256 Indifférence Cxl/Céfotaxime 0,53-1 0,125/0,03 4/0,06 16/1 Additivité Cxl/Ceftazidime 0,62-0,98 2/0,015 4/0,125 16/1 Additivité Cxl/Imipénème 1-4 nd 4/0,125 16/1 Indifférence Cxl/Ertapénème 0,625-1 1/0,07 4/0,015 16/1 Additivité Cxl/Gentamicine 0,27-0,98 0,125/0,03 4/0,125 16/4 .................... ..................... Synergie Cxl/Amikacine 1-4 nd 4/0,25 16/4 Indifférence Cxl/Tobramycine 0,365-1 0,5/0,06 4/0,25 16/4 ..................... .................... Synergie Cxl/Ciprofloxacine 1-4 nd 2/0,015 16/1 Indifférence Cxl/Rifampicine 0,16-1 0,5/0,125 4/4 16/16 .................... ..................... 2.2. Synergie vis-à-vis d'une souche d'Escherichia coli porteuse d'une pénicillinase (ou EcR1) Tableau II : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour EcRl (pénicillinase acquise) (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Amoxicilline 1-4 nd 2/>256 32/256 Indifférence Cxl/Amoxicilline- 1-4 nd 2/16 16/256 Indifférence Acide clavulanique Cxl/Pipéracilline 1-4 nd 2/256 16/256 Indifférence Cxl/Céfotaxime 0,75-1 1/0,015 2/0,06 16/1 Additivité Cxl/Ceftazidime 0,56-1 0,125/0,125 2/0,25 16/1 Additivité Cxl/Imipénème 1-4 nd 2/0,125 16/1 Indifférence Cxl/Ertapénème 0,75-1 0,5/0,07 2/0,015 16/1 Additivité Cxl/Gentamicine 0,3-1 0,125/0,03 2/0,125 16/4 .................... ..................... Cxl/Amikacine 1-4 nd 2/0,25 16/4 Indifférence Cxl/Tobramycine 1-4 nd 2/0,25 16/4 Indifférence Cxl/Ciprofloxacine 1-4 nd 2/0,015 16/1 Indifférence Cxl/Rifampicine 0,28-1 0,5/0,125 2/4 16/16 ..................... .................... r5 2.3. Synergie vis-à-vis d'une souche d'Escherichia coli porteuse de BLSE, présentant une résistance associée aux aminosides (ou EcR3) Tableau III : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour EcR3 (BLSE) (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Amoxicilline 1-4 nd 2/>256 16/256 Indifférence Cx l /Amoxicilline- 0,56-1 0,125/16 2/32 16/256 Additivité Acide clavulanique Cxl/Pipéracilline 1-4 nd 2/128 16/256 Indifférence Cxl/Céfotaxime 0,375-1 0,25/32 2/128 16/256 ..................... .................... Synergie Cxl/Ceftazidime 0,56-1 0,125/0,5 2/1 16/16 Additivité Cxl/Imipénème 1-4 nd 2/0,125 16/1 Indifférence Cxl/Ertapénème 1-4 nd 2/0,0015 16/1 Indifférence Cxl/Gentamicine 0,31-1 0,125/0,5 2/2 16/4 ?1c Cxl/Amikacine 1-4 nd 2/1 16/4 Indifférence Cxl/Tobramycine 1-4 nd 2/4 16/4 Indifférence Cxl/Ciprofloxacine 0,56-1 0,125/0,03 2/0,06 16/1 Additivité Cxl/Rifampicine 0,25-1 0,25/0,5 2/4 16/16 .................... ..................... E r 5 2.4. Synergie vis-à-vis d'une souche d'Escherichia coli hyperproductrice de céphalosporinase, présentant une résistance associée aux aminosides et aux fluoroquinolones (ou EcR2) Tableau IV : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour EcR2 (céphalosporinase hyperproduite) (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Amoxicilline 1-4 nd 2/256 16/256 Indifférence Cxl/Amoxicilline- 0,56-1 0,125/128 2/256 32/256 Additivité Acide clavulanique Cxl/Pipéracilline 0,56-1 0,125/16 2/32 16/256 Additivité Cxl/Céfotaxime 1-4 nd 2/4 16/32 Indifférence Cxl/Ceftazidime 1-4 nd 2/8 16/32 Indifférence Cxl/Imipénème 1-4 nd 2/0,125 16/1 Indifférence Cxl/Ertapénème 1-4 nd 2/0,03 16/1 Indifférence Cxl/Gentamicine 0,31-1 0,125/0,5 2/2 16/4 .................... ..................... E r Cxl/Amikacine 1-4 nd 2/0,5 16/4 Indifférence Cxl/Tobramycine 1-4 nd 2/4 16/4 Indifférence Cxl/Ciprofloxacine 1-4 nd 2/0,015 16/1 Indifférence Cxl/Rifampicine 0,31-1 0,25/0,5 2/2 16/16 3. Synergie de l'association du Cxl avec des antibiotiques vis-à-vis de souches de Staphylococcus aureus résistantes ou non aux antibiotiques 3.1. Synergie vis-à-vis de la souche Staphylococcus aureus ATCC 29213 (phénotype sauvage) Tableau V : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour Staphylococcus aureus ATCC 29213 (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Pénicilline G 0,5-1 2/0,25 8/1 64/4 Additivité Cxl/Imipénème 1-4 nd 8/0,015 64/1 Indifférence Cxl/Erythromycine 1-4 nd 8/0,5 64/4 Indifférence Cxl/Vancomycine 0,75-1 4/0,125 8/0,5 64/4 Additivité Cxl/Lévofloxacine 1-4 nd 8/0,125 64/4 Indifférence Cxl/Amikacine 0,53-1 4/0,03 8/1 64/4 Additivité Cxl/Gentamicine 0,49-1 2/0,06 8/0,25 64/2 Additivité Cxl/Streptomycine 0,375-1 1/1 8/4 64/32 Cxl/Linézolide 1-4 nd 8/2 64/8 Indifférence Cxl/Tigécycline 0,18-1 0,5/0,03 8/0,25 64/2 .................... ..................... Synergie Cxl/Acide fusidique 0,125-1 0,5/0,125 8/2 64/8 r Cxl/Fosfomycine 0,18-1 0,5/1 8/8 64/32 ..................... .................... Synergie 3.2. Synergie vis-à-vis d'une souche de SARM sans résistance associée (ou SaRl) Tableau VI : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour SaRl (SARM, sans résistance associée) (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Pénicilline G 0,5-1 2/0,125 8/0,5 64/4 Additivité Cxl/Imipénème 0,625-1 0,5/0,06 8/0,25 64/4 Additivité Cxl/Erythromycine 1-4 nd 8/0,5 64/4 Indifférence Cxl/Vancomycine 1-4 nd 8/0,25 64/4 Indifférence Cxl/Lévofloxacine 1-4 nd 8/0,25 64/4 Indifférence Cxl/Gentamicine 0,49-1 2/0,06 8/0,25 64/2 Additivité Cxl/Streptomycine 0,75-1 4/1 8/4 64/32 Additivité Cxl/Linézolide 1-4 nd 8/2 64/8 Indifférence Cxl/Tigécycline 0,18-1 0,5/0,03 8/0,25 64/2 ..................... .................... r Cxl/Acide fusidique 0,245-1 1/0,06 8/0,5 64/8 .................... ..................... Cxl/Fosfomycine 0,31-1 0,5/0,5 8/2 64/32 .................... ..................... E r5 3.3. Synergie vis-à-vis d'une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides et aux fluoroquinolones (SaR3) Tableau VII : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour SaR3 (SARM, KT R, Ofloxacine R) (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Pénicilline G 0,375-1 2/0,06 8/0,5 64/4 .................... ..................... E r Cxl/Imipénème 0,56-1 2/0,06 8/0,25 64/4 Additivité Cxl/Erythromycine 1-4 nd 8/0,5 64/4 Indifférence Cxl/Vancomycine 1-4 nd 8/0,25 64/4 Indifférence Cxl/Lévofloxacine 1-4 nd 8/8 64/32 Indifférence Cxl/Gentamicine 0,74-1 4/0,03 8/0,125 64/2 Additivité Cxl/Streptomycine 0,625-1 1/2 8/4 64/32 Additivité Cxl/Linézolide 1-4 nd 8/2 64/8 Indifférence Cxl/Tigécycline 0,245-1 1/0,03 8/0,25 64/2 ..................... .................... er Cxl/Acide fusidique 0,365-1 1/0,06 8/0,25 64/8 ..................... .................... r Cxl/Fosfomycine 0,18-1 0,5/2 8/16 64/32 5 3.4. Synergie vis-à-vis d'une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides, aux fluoroquinolones et aux macrolides-lincosamides-synergistines (SaR4) Tableau VIII : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour SaR4 (SARM, KT R, MLSB constitutif, Ofloxacine R) (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cxl/Pénicilline G 0,375-1 2/0,5 8/4 64/32 .................... ..................... Cxl/Imipénème 0,375-1 1/0,5 8/2 64/32 Synergie 2/0,25 Cxl/Erythromycine 1-4 nd 8/>32 64/32 Indifférence Cxl/Vancomycine 1-4 nd 8/0,25 64/4 Indifférence Cxl/Lévofloxacine 1-4 nd 8/>32 64/32 Indifférence Cxl/Gentamicine 0,30-1 0,5/0,06 8/0,25 64/2 .................... ..................... Cxl/Streptomycine 0,625-1 4/0,4 8/4 64/32 Additivité Cxl/Linézolide 0,56-1 0,5/1 8/2 64/8 Additivité Cxl/Tigécycline 0,18-1 0,5/0,03 8/0,25 64/2 ..................... .................... er Cxl/Acide fusidique 0,08-1 0,5/0,06 8/4 64/8 ..................... .................... r Cxl/Fosfomycine 1-4 nd 8/128 64/32 Indifférence5 4. Synergie de l'association du Cxl avec des antibiotiques vis-à-vis de souches de Pseudomonas aeruginosa résistantes ou non aux antibiotiques 4.1. Synergie vis-à-vis de la souche Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (phénotype sauvage) Tableau IX : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cx 1 /Ticarcilline- 0,375-1 4/1 32/8 256/32 .................... Acide clavulanique ..................... Cxl/Pipéracilline 0,31-1 2/4 32/16 256/128 r e Tazobactam Cxl/Ceftazidime 0,375-1 4/1 32/4 256/64 Synergie Cxl/Imipénème 0,5-4 8/0,5 32/2 256/16 Additivité Cxl/Rifampicine 0,12-1 2/4 32/64 256/256 ..................... .................... rr Cxl/Colimycine 0,5-1 nd 32/4 256/64 Additivité Cxl/Fosfomycine 0,375-1 4/4 ou 2/8 32/16 256/256 .................... ..................... E r Cxl/Tobramycine 0,18-1 2/0,06 32/0,5 256/4 .................... ..................... Synergie Cxl/Amikacine 1-4 nd 32/0,5 256/4 Indifférence Cxl/Ciprofloxacine 0,185-1 4/0,125 32/0,5 256/4 ..................... .................... Synergie10 4.2. Synergie vis-à-vis d'une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux (3-lactamines, à la rifampicine et à la fosfomycine (ou PaR2) Tableau X : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour PaR2 (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cx 1 /Ticarcilline- 1-4 nd 32/512 256/512 Indifférence Acide clavulanique Cxl/Pipéracilline 0,25-1 4/64 32/512 256/512 Tazobactam Cxl/Ceftazidime 1-4 nd 32/8 256/64 Indifférence Cxl/Imipénème 0,5-4 8/1 32/2 256/16 Additivité Cxl/Rifampicine 0,185-1 4/4 ou 8/2 32/64 256/256 ..................... ..................... Synergie Cxl/Colimycine 1-4 nd 32/8 256/64 Indifférence Cxl/Fosfomycine 0,5-4 16/32 32/64 256/256 Additivité Cxl/Tobramycine 0,31-1 2/0,25 32/1 256/4 ..................... ..................... ................... .. e Cxl/Amikacine 1-4 nd 32/1 256/4 Indifférence Cxl/Ciprofloxacine 0,5-4 nd 32/1 256/4 Additivité 5 4.3. Synergie vis-à-vis d'une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux (3-lactamines, à la rifampicine, à la fosfomycine et aux aminosides (ou PaR3) Tableau XI : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour PaR3 (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cx 1 /Ticarcilline- 1-4 nd 32/512 256/512 Indifférence Acide clavulanique Cxl/Pipéracilline- 1-4 nd 32/512 256/512 Indifférence Tazobactam Cxl/Ceftazidime 0,31-1 2/4 32/16 256/64 .................... ..................... Synergie Cxl/Imipénème 0,5-1 8/8 32/32 256/256 Additivité Cxl/Rifampicine 0,09-1 2/2 32/32 256/256 ..................... .................... Synergie Cxl/Colimycine 0,155-1 4/0,5 32/8 256/64 ..................... .................... r Cxl/Fosfomycine 0,31-1 2/64 32/> 64 256/256 .................... ..................... Cxl/Tobramycine 0,185-1 2/8 32/64 256/256 .................... ..................... E r Cxl/Amikacine 1-4 nd 32/1 256/4 Indifférence Cxl/Ciprofloxacine 0,5/4 8/0,125 32/0,5 256/4 Additivité5 4.4. Synergie vis-à-vis d'une souche muqueuse de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux (3-lactamines, à la rifampicine et aux fluoroquilones (ou PaRS) Tableau XII : FIC index et concentrations optimales Cxl/ATB, valeurs obtenues pour PaR5 (n=4). Associations FIC index Concentrations CMI Gammes Conclusion optimales (mg/L) (mg/L) testées (mg/L) Cx 1 /Ticarcilline- 1-4 nd 32/32 256/512 Indifférence Acide clavulanique Cxl/Pipéracilline 0,31-1 2/8 32/32 256/512 r Tazobactam Cxl/Ceftazidime 1-4 nd 32/8 256/64 Indifférence Cxl/Imipénème 0,25-1 4/0,25 32/2 256/16 .................... ..................... E r Cxl/Rifampicine 0,185-1 2/2 32/16 256/256 ?rc Cxl/Colimycine 0,187-1 2/2 32/16 256/64 ..................... .................... Cxl/Fosfomycine 0,375-1 8/2 ou 4/4 32/16 256/256 ..................... .................... Synergie Cxl/Tobramycine 0,25-1 4/0,125 32/1 256/4 Cxl/Amikacine 1-4 nd 32/0,5 256/4 Indifférence Cxl/Ciprofloxacine 0,31-1 2/0,25 32/1 256/4 .................... ..................... er i5 EcR1 : Escherichia coli pénicillinase Identification et antibiogramme L'identification bactérienne et d'antibiogramme est effectuée par le système VITEK2 (bioMérieux) et par la technique de diffusion sur disques. Antibiotiques Diamètre Dmin Résultats CMI mg/L Résultats Dmax Amoxicilline 6 14-21 Résistant > 32 Résistant Amox + ac.clavulanique 20 14-21 Intermédiaire 4 Sensible Ticarcilline 6 18-22 Résistant > 128 Résistant Pipéracilline 17 12-20 Intermédiaire 32 Amox + ac.clavulanique Résistant > 32 Ticarcilline Intermédiaire 32 C1G Résistant > 64 Céfoxitine 11 15-22 Résistant Céfotaxime 24 15-21 Intermédiaire Ceftazidime 20 15-21 Intermédiaire Imipénème Sensible 32 Péfloxacine Résistant >8 Nitrofurantoïne Sensible 0,5 Résistant Oxacilline > 8 Résistant Kanamycine 20 15-17 Sensible 8 Kanamycine 21 20-20 Résistant Tobramycine Résistant Gentamicine Sensible Chloramphénicol Sensible 8 Tétracycline Sensible 8 Lincomycine Résistant > 16 Pristinamycine Sensible 8 Nitrofurantoïne Sensible 64 39 PaR2 : Pseudomonas aeruginosa groupe 03 Identification et antibiogramme par diffusion disques Antibiotiques Diamètre Dmin-Dmax Résultats Ticar + ac. clavulanique 10 18-22 Résistants Ticarcilline 10 18-22 Résistant Pipéracilline 22 12-18 Sensible Piper + tazobactam 22 14-19 Sensible Ceftazidime 23 15-21 Sensible Aztréonam 16 17-23 Résistant Imipénème 27 17-22 Sensible Tobramycine 24 14-16 Sensible Gentamicine 21 14-16 Sensible Amikacine 22 15-17 Sensible Nétilmicine 19 17-19 Sensible Minocycline 6 17-19 Résistant Colistine 20 15-15 Sensible Trimétoprime - Sulfamét. 6 10-16 Résistant Péfloxacine 8 16-22 Résistant Rifampicine 25 19-22 Sensible Fosfomycine 13 14-19 Résistant Ciprofloxacine 18 14-14 Sensible Céfépime 19 15-21 Intermédiaire 41 PaR3 : Pseudomonas aeruginosa groupe 03 Identification et antibiogramme L'identification bactérienne et d'antibiogramme est effectuée par le système VITEK2 (bioMérieux). Antibiotiques CMI Résultats Ticar + ac. clavulanique 128 Résistant Ticarcilline 128 Résistant Pipéracilline 128 Résistant Piper + tazobactam 128 Résistant Ceftazidime 4 Sensible Aztréonam 16 Sensible Imipénème 16 Résistant Méropénème 16 Résistant Tobramycine 16 Résistant Gentamicine 16 Résistant Amikacine 4 Sensible Minocycline 4 Résistant Colistine 0,5 Sensible Trimétoprime - Sulfamét. 320 Résistant Péfloxacine 4 Intermédiaire Ciprofloxacine 1 Sensible Céfépime 16 Intermédiaire PaR5 : Pseudomonas aeruginosa muqueux Identification et antibiogramme par diffusion disques Antibiotiques Diamètre Dmin-Dmax Résultats Ticar + ac. clavulanique 40 18-22 Sensible Ticarcilline 32 18-22 Sensible Pipéracilline 33 12-18 Sensible Piper + tazobactam 40 14-19 Sensible Ceftazidime 32 15-21 Sensible Aztréonam 33 17-23 Sensible Imipénème 25 17-22 Sensible Méropénème 34 15-20 Sensible Tobramycine 28 14-16 Sensible Gentamicine 25 14-16 Sensible Amikacine 27 15-17 Sensible Nétilmicine 28 17-19 Sensible Minocycline 11 17-19 Résistant Colistine 23 15 Sensible Trimétoprime - Sulfamét. 6 10-16 Résistant Norofloxacine 17 22-25 Résistant Ofloxacine 11 22-25 Résistant Ciprofloxacine 30 19-22 Sensible Rifampicine 13 14-19 Résistant Fosfomycine 30 14 Sensible Céfépime 32 15-21 Sensible REVENDICATIONS1. Produit comprenant au moins un antibiotique donné et un calixarène représenté par la formule I suivante : NH2 HNNH OxFormule I n dans laquelle : (i) n = un entier de 4 à 16, (ii) m= un entier de 1 à 10, (iii) X est choisi parmi : - un hydrogène, - un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, - un halogène choisi parmi Cl, Br, I, ou - un groupement amphiphile choisi parmi un groupe anionique, tels que les carboxylates -RCO2-, les sulfates -RSO4-, les sulfonates -RSO3-, un groupe cationique, tel que RNH3+, dans lesquels R est un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, pour son utilisation comme médicament. 2. Produit selon la revendication 1, dans lequel le calixarène correspond au calixarène représenté par la formule II suivante : 44NH2 HNNH OHFormule II 3. Produit selon la revendication 1 ou 2, dans lequel ledit antibiotique donné est choisi dans le groupe constitué des 13- lactamines, des aminosides, des fluoroquinolones, de la fosfomycine, de la colimycine, de la rifampicine, de la tigécycline, ou de l'acide fusidique. 4. Produit selon la revendication 3, dans lequel ledit antibiotique donné est choisi parmi l'imipénème, la pipéracilline-tazobactam, la pénicilline G, le céfotaxime, la ceftazidime, la tobramycine, la gentamicine, la ciprofloxacine, la rifampicine, la fosfomycine, la colimycine, la streptomycine, la ticarcilline-acide clavulanique, la tigécycline ou l'acide fusidique. 5. Produit selon l'une des revendications 1 à 4, pour son utilisation comme médicament dans le traitement des pathologies impliquant une souche bactérienne présentant une résistance à au moins un antibiotique déterminé. 6. Produit selon la revendication 5, pour son utilisation dans le traitement des pathologies impliquant une souche bactérienne résistante appartenant à une espèce choisie parmi Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, et Staphylococcus aureus. 20 7. Produit selon la revendication 6, pour son utilisation dans le traitement des pathologies impliquant une souche bactérienne résistante choisie parmi : - une souche de Staphylococcus aureus de phénotype sauvage, - une souche de Staphylococcus aureus Résistant à la Méthicilline (SARM) sans résistance associée, 25 - une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides et aux fluoroquinolones,15- une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides, aux fluoroquinolones et aux macrolides-lincosamides-synergistines, - une souche d'Escherichia coli de phénotype sauvage, - une souche d'Escherichia coli porteuse d'une BLSE (13-Lactamase à Spectre Etendu), - une souche d'Escherichia coli porteuse d'une pénicillinase, - une souche d'Escherichia coli hyperproductrice de céphalosporinase, - une souche de Pseudomonas aeruginosa de phénotype sauvage, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et à la fosfomycine, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine, à la fosfomycine et aux aminosides, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et aux fluoroquinolones. 8. Produit selon l'une des revendications 5 à 7, pour son utilisation dans le traitement des pathologies appartenant au groupe constitué des infections nosocomiales et/ou communautaires, telles que les infections abdominales, les infections digestives, les infections urinaires, les infections respiratoires, les infections neuro-méningées, les infections de la sphère oro-pharyngée, les infections génitales, les endocardites, les infections de la peau et des tissus mous, les infections ostéoarticulaires, les infections oculaires, les septicémies ou bactériémies. 9. Composition pharmaceutique comprenant comme substance active au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 en association avec un véhicule 25 pharmaceutiquement acceptable. 10. Produit contenant : - un antibiotique donné choisi dans le groupe constitué des 13- lactamines, des aminosides, des fluoroquinolones, de la fosfomycine, de la colimycine, de la rifampicine,de la tigécycline, ou 30 de l'acide fusidique, et - un calixarène représenté par la formule I suivante :NH2 HN NH OX n 46 Formule I dans laquelle : (i) n = un entier de 4 à 16, (ii) m= un entier de 1 à 10, (iii) X est choisi parmi : - un hydrogène, - un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, - un halogène choisi parmi Cl, Br, I, ou - un groupement amphiphile choisi parmi un groupe anionique, tels que les carboxylates -RCO2-, les sulfates -RSO4-, les sulfonates -RS03-, un groupe cationique, tel que RNH3+, dans lesquels R est un groupement alkyl, le nombre de carbones étant de 1 à 20, notamment de 1 à 10, comme produit de combinaison, pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant au moins une souche bactérienne présentant une résistance à au moins un antibiotique déterminé, telles que les infections abdominales, les infections digestives, les infections urinaires, les infections respiratoires, les infections neuroméningées, les infections de la sphère oro-pharyngée, les infections génitales, les endocardites, les infections de la peau et des tissus mous, les infections ostéoarticulaires, les infections aoculaires, les septicémies ou bactériémies. 11. Produit de combinaison selon la revendication 10, dans lequel le calixarène correspond au calixarène représenté par la formule II suivante : 47NH2 HNNH OHFormule II 12. Produit de combinaison selon la revendication 10 ou 11, dans lequel ledit antibiotique donné est choisi parmi l'imipénème, la pipéracilline-tazobactam, la pénicilline G, le céfotaxime, la ceftazidime, la tobramycine, la gentamicine, la ciprofloxacine, la rifampicine, la fosfomycine, la colimycine, la streptomycine, la ticarcilline-acide clavulanique, la tigécycline ou l'acide fusidique. 13. Produit de combinaison selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant au moins une souche bactérienne résistante appartenant à une espèce choisie parmi Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, et Staphylococcus aureus. 14. Produit de combinaison selon la revendication 13, pour une utilisation simultanée, 15 séparée ou étalée dans le temps en thérapie de pathologies impliquant au moins une souche bactérienne résistante choisie parmi : - une souche de Staphylococcus aureus de phénotype sauvage, - une souche de Staphylococcus aureus Résistant à la Méthicilline (SARM) sans résistance associée, 20 - une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides et aux fluoroquinolones, - une souche de SARM présentant une résistance aux aminosides, aux fluoroquinolones et aux macrolides-lincosamides-synergistines, - une souche d'Escherichia coli de phénotype sauvage, - une souche d'Escherichia coli porteuse d'une BLSE (13-Lactamase à Spectre Etendu), 25 - une souche d'Escherichia coli porteuse d'une pénicillinase,- une souche d'Escherichia coli hyperproductrice de céphalosporinase, - une souche de Pseudomonas aeruginosa de phénotype sauvage, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et à la fosfomycine, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine, à la fosfomycine et aux aminosides, - une souche de Pseudomonas aeruginosa présentant une résistance aux 13-lactamines, à la rifampicine et aux fluoroquinolones.