FR 2964980 A1 20120323 FR 1057620 A 20100922 1 DISPOSITIF DE DETECTION ET D'IMAGERIE D'ELEMENTS BIOCONTAMINANTS DESCRIPTION Domaine technique et art antérieur L'invention concerne un dispositif de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants. La maîtrise de la biocontamination est un enjeu de santé publique, aussi bien au niveau de la sécurité alimentaire qu'au niveau des établissements de santé ou de la pharmacopée. De même, dans l'habitat, en particulier dans l'habitat collectif (établissements scolaires, restauration, crèche, école, garderie, maison médicalisée), le respect des règles d'hygiène doit être garanti. Il est donc nécessaire de disposer de moyens de suivi de la qualité de l'air et de la propreté des environnements et surfaces. Dans le domaine des salles propres et biopropres, il existe des compteurs optiques pour le suivi particulaire (particule viable ou non) ainsi que des échantillonneurs actifs de suivi des biocontaminants (par impaction, filtration ou barbotage) ou passifs par sédimentation. L'air est généralement contaminé par une flore microbienne diversifiée qui est souvent résistante et variable dans le temps et l'espace. Pour mettre en place une chaîne globale de la maîtrise de la propreté et de l'hygiène, il faut se protéger contre les modes de transmission aérienne et surfacique. La première étape consiste à détecter et identifier les biocontaminants. La transmission aérienne des 2 biocontaminants d'origine humaine, par exemple, se fait par l'intermédiaire: - des droplets nuclei (particules de taille comprises entre 1 et 5 pm provenant de la dessiccation des gouttelettes microbiennes ou générés directement par la toux ou les éternuements); - des spores telles que Aspergillus (taille comprise entre 2 et 3pm), aérosolisées lors de la remise en suspension de la poussière consécutive, par exemple, à des travaux, des squames cutanées provenant du renouvellement incessant de notre épiderme (un renouvellement tous les 15 - 20 jours). Compte tenu de la multitude des sources de biocontamination et de leur mode de transfert, la maîtrise du risque de biocontamination résulte d'un contrôle permanent du niveau de biocontamination dans l'air et sur les surfaces des zones à protéger. De 20 plus, compte tenu de la cinétique de reproduction de ces organismes vivants (pour certaines bactéries, toutes les 20 à 40 minutes), il faut pouvoir disposer de moyens de contrôle in situ, fiables et rapides. Ci-dessous sont données un certain nombre 25 de définitions qui concernent le domaine de la biocontamination. - Contaminant Un contaminant est désigné comme suit dans la norme ISO 14644-1 : « Toute entité particulaire, 30 moléculaire, non particulaire ou biologique susceptible 10 15 3 de produire un effet indésirable sur le produit ou le procédé". - Biocontamination Contamination d'une matière, d'un appareil, d'un individu, d'une surface, d'un liquide, d'un gaz ou de l'air par des particules viables selon la norme ISO 14698-1. Dans le cadre de l'invention, on préférera considérer que la biocontamination est une contamination d'une matière, d'un appareil, d'un individu, d'une surface, d'un liquide, d'un gaz ou de l'air par des micro-organismes. Ces micro-organismes ne peuvent pas être assimilés à des particules. Ils sont en réalité de véritables amas moléculaires pouvant être le siège de réactions chimiques. En cela, les micro-organismes présentent aussi toutes les caractéristiques d'un contaminant chimique. Les micro- organismes présentent deux particularités supplémentaires par rapport à la contamination particulaire ou chimique : - leur capacité à se reproduire très rapidement, - leur capacité à muter, s'adapter aux conditions même les plus sévères. Les grandes familles de biocontaminants sont: - les bactéries, - les virus, - les levures et les champignons.30 - Bactéries Les bactéries sont des êtres vivants unicellulaires microscopiques, se reproduisant par scissiparité et dont le noyau n'est pas délimité par une membrane. Les bactéries, comme toutes les autres cellules, ont besoin d'énergie. L'ATP est la source d'énergie biochimique universelle. L'ATP est commune à toutes les formes de vie, mais les réactions d'oxydoréduction impliquées dans sa synthèse sont très variées selon les organismes et notamment chez les bactéries. Elles peuvent ainsi utiliser une très large variété de source de carbone et/ou d'énergie. Bien que leur nom dérive du grec baktêria, « bâton », les bactéries ont des formes variables : - sphérique (cocci, du grec k6kkos, grain ou microcoques), - en bâtonnet (bacilles pl. baccili, du Latin baculus, bâton), - ou spiralée (spirochètes). La taille des bactéries varie de 0,02 micromètre pour les nanobactéries à 0,75 millimètre pour Thiomargarita namibiensis, visible à l'oeil nu. La plupart mesure toutefois entre 0,5 et 100pm. Les bactéries se reproduisent de façon asexuée, par scissiparité (une simple division cellulaire). Le matériel génétique est tout d'abord dupliqué, puis la bactérie s'allonge, se contracte en son milieu et se divise, formant deux cellules filles identiques à la cellule mère. Ainsi, la descendance d'une cellule bactérienne est un clone de cellules génétiquement 4 identiques, appelé colonie. Certaines bactéries se divisent toutes les 20 à 40 min. Dans des conditions favorables, à raison d'une division toutes les 30 min, une seule cellule aura produit, en quinze heures 5 seulement, un milliard de cellules-filles, colonie visible à l'oeil nu. En revanche, dans de mauvaises conditions, certaines espèces produisent des spores, formes dormantes de la cellule, capables de supporter des conditions extrêmes de température ou de sécheresse. Le taux de mutations spontanées des bactéries est très élevé, surtout lorsqu'elles sont placées dans un environnement défavorable. - Biofilm Un biofilm est un ensemble constitué de bactéries adhésives incluses dans une matrice exopolymérique. - Levure Une levure est un champignon unicellulaire (certaines levures sont cependant capables d'arborer un aspect pseudo pluricellulaire par la formation, par ex., de pseudomycélium) apte à provoquer la fermentation des matières organiques animales ou végétales. Les levures sont employées pour la fabrication du vin, de la bière, des spiritueux, des alcools industriels, du pain et d'antibiotiques. Ces micro-organismes, de forme variable selon l'espèce (sphérique, ovoïde, en bouteille, triangulaire) mais généralement ovales, d'environ 6 à 10 microns et jusqu'à 50 micromètres, se multiplient 6 par bourgeonnement ou par scissiparité. Ils sont souvent capables d'accomplir une sporulation soit dans un but de dormance en milieu défavorable, soit dans un but de dispersion. - Micro-organismes Les micro-organismes sont des entités microbiologiques, cellulaires ou non, capables de se reproduire ou de transférer du matériel génétique. - Moisissures Les moisissures sont des organismes pluricellulaires. Ce sont des champignons microscopiques filamenteux du règne des mycètes. Il en existe des milliers de variétés différentes. Une espèce donnée de champignon microscopique peut générer plusieurs types de mycotoxines, et une même mycotoxine peut être produite par plusieurs espèces de moisissures. Ce sont des molécules de faible poids moléculaire ( Les virus sont le plus souvent de très petite taille comprise entre 10 et 300 nanomètres ; toutefois, le minivirus a une taille de 400 mm, ce qui le rend plus gros que les plus petites bactéries. - Dispositifs de prélèvement d'air La norme NF EN ISO 14698-1 décrit deux catégories de dispositifs de prélèvement d'air applicables aux environnements maîtrisés: - les échantillonneurs passifs plaques de sédimentation - les échantillonneurs actifs : par impaction, filtration et barbotage. Toutes ces techniques de prélèvement reposent sur les méthodes conventionnelles de culture (ou culturales) c'est à dire l'aptitude des micro-30 organismes, déposés sur un milieu de culture gélosé 7 25 8 approprié, à donner naissance à des colonies visibles à l'oeil nu, en fonction du milieu de culture utilisé et des conditions d'incubation (durée et température). La durée d'incubation est habituellement de 2 à 5 jours pour les bactéries et de 5 à 7 jours pour les levures et moisissures. En pratique, une première lecture est faite en laboratoire après 48h pour les bactéries et à 5 jours pour les levures et moisissures. La température d'incubation est habituellement de 30 à 35°C pour les bactéries et 20 à 25°C pour les levures et moisissures. A noter le développement de méthodes alternatives (plus rapides que les méthodes conventionnelles) présentant un niveau de réponse plus court et un niveau de qualité des résultats au moins équivalent à celui des méthodes conventionnelles. Parmi ces méthodes alternatives, retenons la cytométrie de flux, la fluorescence des particules, intrinsèque ou après marquage par un fluorochrome. Le marquage reposant sur une réaction enzymatique avec le réactif fluorochrome, seuls les micro-organismes viables sont rendus fluorescents. Cette technologie allie la filtration de l'échantillon, le marquage direct des micro-organismes viables et le dénombrement de cellules par cytométrie à balayage laser et visualisation à moyen d'un microscope à épifluoresence automatisé, en moins de 3 heures. - Echantillonneurs par sédimentation (ou boite de sédimentation) La sédimentation est une méthode simple 30 consistant à collecter les micro-organismes par gravité sur des boites de Pétri ouvertes contenant des milieux 9 de culture gélosés. Les résultats sont exprimés par unité de surface pendant un temps donné. Cette méthode est requise par les BPF de l'industrie pharmaceutique pour la fabrication des médicaments stériles. Cette méthode ne permet pas d'avoir un résultat quantitatif de l'aérobiocontamination mais sert plutôt à évaluer le risque de biocontamination d'une surface à partir d'un nombre de particules viables sédimentées sur la boite en fonction de la surface et du temps d'exposition. - Echantillonneurs actifs Les différentes méthodes de collecte des biocontaminants recueillis dans un certain volume aspiré d'air pendant un certain temps (ou biocollecteurs) sont : - La méthode par impaction sur milieu de culture qui est la plus répandue et qui impose une brève durée d'échantillonnage suivie d'une longue durée de mise en culture et d'analyse microbiologique ; - La méthode par filtration qui permet des prélèvements plus longs (optimaux sur 8h) et le recours à différentes méthodes d'analyse microbiologique après récupération de la membrane filtrante en milieu liquide et dilutions successives de l'échantillon (il convient toutefois de s'assurer que les conditions de filtration n'affectent pas la viabilité des micro-organismes recueillis) ; - La méthode par barbotage en milieu liquide qui a pour intérêt majeur d'éviter le risque de dessiccation de l'échantillon, les micro- 10 organismes étant transférés directement en milieu liquide. Cette méthode de collecte est jugée moins stressante pour les biocontaminants et serait donc à privilégier. - Classification des micro-organismes Dans les normes actuellement accessibles de la série 14644 et 14698, il n'existe pas de classification de la biocontamination ni en volume, ni en surface. Toutefois, la norme ISO 14698-1 préconise des mesures visant à dénombrer des unités viables par dm2 et par heure pour évaluer des cinétiques de contamination. - Système de classification microbiologique de l'air Pour les établissements de santé, les niveaux de propreté bactériologique sont définis dans la norme NF S 90 351. La norme NF S 90 351 recommande des performances techniques en fonction des zones à risques. Dans le domaine pharmaceutique, le guide des Bonnes Pratiques de Fabrication (BPF) propose quatre niveaux de propreté (cf. référence [1]). Les BPF françaises et européennes proposent aussi une surveillance et une classification microbiologique des zones de production en activité, dans le cas de la fabrication des médicaments stériles. Inconvénients de l'art antérieur A ce jour, le suivi des processus de biocontamination s'effectue en utilisant des échantillonneurs passifs ou actifs. 11 Les échantillonneurs passifs sont des plaques témoins que l'on expose dans les mêmes conditions que celles dans lesquelles est exposé l'individu ou l'objet dont on cherche à surveiller la biocontamination. Ces plaques témoin sont ensuite prélevées, conditionnées proprement et transportées, après une mise en culture et un dénombrement, dans un laboratoire d'analyses biologiques. C'est un processus long et fastidieux qui, de plus, ne garantit pas la qualité du résultat, dans la mesure où certains des micro-organismes présents sur les plaques peuvent mourir avant d'arriver au laboratoire d'analyses biologiques, ou encore se mettre en état dit « adverse », c'est-à-dire un état quasi léthargique, sans reproduction et donc non détectable. Les échantillonneurs actifs, ou biocollecteurs, présentent les mêmes inconvénients que les échantillonneurs passifs. Leur seul avantage par rapport aux échantillonneurs passifs est une mesure plus quantitative en concentration par litre d'air prélevé. Il existe en conséquence au moins deux sources d'erreur dans le dénombrement actuel des micro- organismes selon les techniques de l'art antérieur : - au niveau de la collecte des micro-organismes (une étude récente (cf. référence [2]) a montré une efficacité physique qui varie entre 1 et 100% suivant les modèles de biocollecteurs, 12 - au niveau de la culture elle-même (la même étude montre que l'efficacité biologique de culture à partir d'un échantillon de L.Pneumophila en milieu liquide peut varier de 1 à 5). L'invention ne présente pas ces inconvénients. Exposé de l'invention En effet, l'invention concerne un dispositif de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants, caractérisé en ce qu'il comprend : - une matrice de pixels détecteurs ayant une face active sur laquelle une lumière est incidente, - un support transparent à la lumière et qui recouvre la face active, support sur lequel les éléments biocontaminants sont susceptibles de se déposer, - des moyens d'éclairage qui produisent la lumière qui est incidente sur la face active, - des moyens de traitement aptes à transformer le signal délivré par la matrice de pixels détecteurs en signal numérique, et 25 - des moyens de visualisation aptes à visualiser sous forme d'images fixes ou d'images vidéo le signal numérique délivré par les moyens de traitement. Selon une caractéristique supplémentaire de 30 l'invention, le support transparent est un hublot qui protège la face active. 10 15 20 13 Selon une autre caractéristique supplémentaire de l'invention, le support transparent comprend un hublot qui protège la face active et une lame de verre amovible qui recouvre le hublot. Selon encore une autre caractéristique supplémentaire de l'invention, un système de chauffage contrôle la température du support transparent. Selon encore une autre caractéristique supplémentaire de l'invention, les moyens de traitement comprennent des moyens aptes à visualiser la morphologie des éléments biocontaminants. Selon encore une autre caractéristique supplémentaire de l'invention, les moyens de traitement comprennent des moyens aptes à dénombrer les éléments biocontaminants par unité de surface et/ou par unité de temps. Selon encore une autre caractéristique supplémentaire de l'invention, la matrice de pixels détecteurs est une matrice de capteurs CCD ou une matrice de capteurs CMOS. Les moyens d'éclairage peuvent être une source de lumière naturelle (par exemple la lumière solaire) ou une source de lumière artificielle monochromatique ou polychromatique, polarisée ou non. Dans un mode préféré de réalisation de l'invention, les moyens d'éclairage comprennent une diode électroluminescente. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux de l'invention, un milieu de culture apte à favoriser la croissance d'éléments 14 biocontaminants est déposé sur le support qui recouvre la matrice de pixels détecteurs. Le milieu de culture peut être un milieu apte à favoriser la croissance d'un grand nombre d'éléments biocontaminants différents ou un milieu de culture spécifique qui favorise un type de biocontaminant particulier. L'invention concerne également un système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants, caractérisé en ce qu'il comprend un ensemble de dispositifs de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants conformes à l'invention, les matrices de pixels détecteurs des dispositifs de détection et d'imagerie étant mises en réseau. L'invention concerne également un système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants, caractérisé en ce qu'il comprend au moins un dispositif de détection et d'imagerie selon l'invention, un support sur lequel est placée la matrice de pixels détecteurs du dispositif de détection et d'imagerie et des moyens aptes à déplacer le support de sorte que la matrice de pixels détecteurs passe d'une zone ouverte sur l'environnement, dans laquelle les éléments biocontaminants sont collectés, à une zone confinée, dans laquelle les éléments contaminants collectés sont mis en culture. Le dispositif de l'invention constitue un moyen simple et facilement transportable qui permet de suivre, in situ et en continu, voire en réseau, les biocontaminants sédimentés susceptibles de se développer en biofilm sur les surfaces. Brève description des figures 15 D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de modes de réalisation préférentiels faits en référence aux figures jointes, parmi lesquelles : la figure 1 représente un premier exemple de dispositif de détection et d'imagerie de biocontaminants selon l'invention ; la figure 2 représente un deuxième exemple de dispositif de détection et d'imagerie de biocontaminants selon l'invention ; la figure 3 représente un perfectionnement du dispositif de détection et d'imagerie de biocontaminants de l'invention ; la figure 4 représente un système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants selon l'invention qui comprend un ensemble de dispositifs de détection et d'imagerie dont les matrices de pixels détecteurs sont mises en réseau ; la figure 5 représente un système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants selon l'invention, apte à collecter des éléments biocontaminants puis à mettre en culture les éléments biocontaminants collectés. Sur toutes les figures, les mêmes références désignent les mêmes éléments.30 16 Description détaillée de modes de réalisation préférentiels de l'invention La figure 1 représente un premier exemple de dispositif de détection et d'imagerie de biocontaminants selon l'invention. Le dispositif comprend une matrice M de pixels d'imageur couverte d'un hublot protecteur H, des moyens d'éclairage ME, des moyens de traitement MT aptes à transformer les différences de tension prélevées au niveau des pixels d'imageur en signal numérique, des moyens de visualisation MV aptes à visualiser sous forme d'images fixes ou d'images vidéo le signal numérique délivré par les moyens de traitement MT. La matrice M est, par exemple, une matrice CCD (CCD pour « Charge Coupled Device ») ou une matrice CMOS que l'on trouve dans les systèmes imageurs de types webcam ou appareil photo numérique. Les éléments biocontaminants EC se déposent sur le hublot protecteur H. Les moyens d'éclairage ME délivrent une lumière L qui illumine les éléments biocontaminants EC. Les moyens d'éclairage ME sont constitués, par exemple, d'une diode électroluminescente, polarisée ou non, qui permet de voir l'opacification progressive de l'image enregistrée en temps réel pendant le dépôt des biocontaminants. Cette technique permet de détecter simplement les biocontaminants. Un choix judicieux d'une longueur d'onde d'éclairage dans l'Ultra-Violet permet de suivre les micro-organismes vivants individualisés après un marquage par des fluorochromes présents, par exemple, sur le milieu de culture. 17 Les moyens d'éclairage peuvent également être constitués d'une source lumineuse qui émet plusieurs longueurs d'ondes, par exemple une source de lumière blanche. Les moyens de traitement MT comprennent, de façon connue en soi, des amplificateurs, des convertisseurs analogiques/numériques et des filtres de couleurs. Un logiciel de pilotage contrôle les moyens de visualisation pour la prise de photographies et/ou le suivi vidéo de la contamination en temps réel. La figure 2 représente un deuxième exemple de dispositif de détection et d'imagerie de biocontaminants selon l'invention. En plus des éléments mentionnés en référence à la figure 1, le dispositif de détection et d'imagerie de l'invention représenté en figure 2 comprend un second hublot ou une lame de verre LV qui recouvre le hublot H. C'est alors sur la lame LV que se déposent les éléments biocontaminants EC. De façon avantageuse, la lame LV peut être amovible, ce qui permet d'effectuer plusieurs séries de mesures de biocontamination successives, chaque série de mesures étant effectuée avec la même lame nettoyée ou avec une lame différente (les lames gélosées contaminées sont alors remplacées par des lames gélosées stériles afin de poursuivre le suivi de la biocontamination sédimentée). Quand des lames différentes sont utilisées pour des séries de mesures successives, un autre avantage de l'invention est qu'il est possible de poursuivre des analyses micro-biologiques complémentaires sur une lame qui a fait l'objet d'une 18 série de mesures de biocontamination avec le dispositif de l'invention alors même qu'une nouvelle série de mesures est effectuée, avec une nouvelle lame, pour un nouvel échantillon. La figure 3 représente un perfectionnement du dispositif de détection et d'imagerie de biocontaminants de l'invention. En plus des éléments mentionnés en référence à la figure 1 ou 2, le dispositif de l'invention comprend un système de chauffage CH apte à contrôler la température de l'imageur et, en conséquence, la température du hublot sur lequel sont placés les bio-contaminants. Il est alors possible de chauffer les biocontaminants in situ à la température de culture (par exemple entre 20° et 35°C selon les organismes concernés). Il est également possible d'accélérer la croissance des biocontaminants (Unités Formant Colonies par opposition aux Unités Viables individualisées). Les images en temps réel des capteurs peuvent être analysées par traitement d'images pour à chaque instant visualiser la morphologie et dénombrer les biocontaminants par unité de surface et de temps. Avantageusement, le suivi vidéo permet de visualiser, en temps réel, le déplacement des bactéries viables dans le liquide par opposition aux bactéries mortes ou en état adverse. Le traitement informatique des images enregistrées permet de quantifier le nombre d'unités formant colonies voire d'unités viables déposées par 19 unité de surface et par unité de temps à tel ou tel site critique. Le système d'éclairage doit être positionné de manière adéquate par rapport à la matrice de pixels afin que cette dernière ne soit pas ombragée. Il peut être judicieux d'utiliser, par exemple, une ou plusieurs fibres optiques pour l'amenée de lumière. Une liste d'avantages de l'invention peut être établie comme suit : o Contrôler la biocontamination sédimentée des environnements à risques biologiques, o Permettre un suivi en continu et sur des longues périodes de la biocontamination des environnements, o Fournir en temps réel l'évolution de la biocontamination sur les surfaces d'une salle ou de plusieurs salles en même temps, o Fournir des preuves objectives de la présence de biocontaminants avec prise de photos et suivi vidéo de leur évolution (traçabilité assurée), o Donner des informations morphologiques des biocontaminants (coques, bacilles, etc.) permettant de donner des éléments d'identification des micro-organismes, o Donner une distribution surfacique des biocontaminants et, en particulier, des bactéries et des moisissures ou champignons (taille des biocontaminants compatibles des tailles de pixels), 20 o Suivre la cinétique de croissance des unités formant colonies à partir d'une unité viable, o déduire une cinétique de biocontamination en fonction des conditions d'exploitation des salles, du nombre d'opérateurs, de visiteurs, de la température, du débit de filtration, etc., o Permettre d'optimiser la fréquence de nettoyage des surfaces par un suivi en temps réel de la biocontamination des surfaces, o Permettre un gain réel de temps par rapport aux plaques témoins passives de l'art antérieur, o Améliorer la fiabilité des résultats en évitant tout transfert des plaques du point d'échantillonnage au point d'analyse, o Différencier les unités viables des unités mortes ou en état adverse par un suivi vidéo de leur mobilité, 20 o Différencier les unités viables des unités mortes ou en état adverse par un éclairage laser UV et un milieu de culture intégrant des fluorochromes, o Permettre le développement spécifique de tel 25 ou tel micro-organisme en utilisant des milieux de culture sélectifs, o Réaliser des procédés d'analyses de biocontaminants peu coûteux par rapport aux procédés d'analyse a posteriori en 30 laboratoire de l'art antérieur. 10 15 21 L'invention propose un nouveau concept de plaques de sédimentation et de croissance « actives » car elles permettent à elles seules un suivi en temps réel de la biocontamination des surfaces. Une originalité supplémentaire de l'invention est associée à la possibilité d'utiliser des lames amovibles jetables recouvertes d'un milieu de culture spécifique ou non, en lieu et place du hublot collecteur. Ces lames pourront être chauffées in situ pour permettre la visualisation de la croissance des UFC, voire des biofilms en temps réel. Une autre originalité consiste à pouvoir différencier les unités viables des unités mortes : - soit en assurant un suivi vidéo (la vitalité étant mesurée par la mobilité des micro- organismes), - soit en assurant un éclairage laser UV qui rend fluorescent les micro-organismes avec ou sans fluorochromes. L'invention trouve des applications dans toutes les industries (industrie pharmaceutique et agroalimentaire, mais aussi spatiale, micromécanique, optique, les nanotechnologies), et dans les établissements de santé. A ce jour, la maîtrise de la biocontamination passe par des prélèvements de courtes durées, via des échantillonneurs passifs ou actifs. Ensuite, ces prélèvements doivent suivre un long processus de culture à une température et pendant des 30 durées pouvant atteindre sept jours. 20 25 22 Le moyen de visualisation du dépôt de biocontaminants en temps réel proposé par l'invention est un substitut avantageux à ces échantillonneurs. Il permet de signaler instantanément que les niveaux d'alerte ou/et d'action sont atteints dans telle ou telle zone. C'est un atout essentiel pour une gestion intelligente et économique: - des environnements à risques biologiques, - du nettoyage des surfaces des salles que l'on régulera en fonction des résultats fournis en temps réel par les capteurs CCD ou CMOS, - du contrôle de la biocontamination au sens large. La figure 4 représente un système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants qui comprend un ensemble de dispositifs de détection et d'imagerie dont les matrices de pixels détecteurs sont mises en réseau. De façon préférentielle, les dispositifs de détection et d'imagerie partagent alors les mêmes moyens de visualisation. A titre d'exemple non limitatif, la figure 4 illustre le cas où cinq matrices de pixels détecteurs M1-M5 sont respectivement placées aux quatre coins et au centre d'une salle propre Sb. Un tel système de détection et d'imagerie permet avantageusement de suivre, en temps réel, l'évolution spatiale et temporelle d'une biocontamination éventuelle de la salle propre. Il est également possible d'équiper un ensemble de salles dont la propreté de l'environnement est à maîtriser avec un ensemble de matrices de pixels détecteurs. Les matrices de pixels détecteurs peuvent être avantageusement 23 disposées là où le risque de biocontamination est le plus élevé. Ici aussi, le système de détection et d'imagerie de l'invention permet un suivi d'évolution d'une éventuelle biocontamination. La figure 5 représente un exemple de système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants apte à collecter puis à mettre en culture des éléments biocontaminants collectés. Le système comprend au moins un dispositif de détection et d'imagerie conforme à l'invention (trois dans l'exemple de la figure 5), un support ST sur lequel est placée la matrice de pixels détecteurs du dispositif de détection et d'imagerie (matrices Ml-M3 dans l'exemple de la figure 5) et des moyens MC aptes à déplacer le support ST d'une zone Z1 ouverte sur l'environnement, dans laquelle les éléments biocontaminants sont collectés à la surface de la matrice, à une zone confinée Z2 dans laquelle les éléments biocontaminants collectés sont mis en culture. C'est alors préférentiellement dans la zone confinée que les moyens de chauffage sont activés afin de mettre en oeuvre une culture thermo-activée des éléments biocontaminants. 24 BIBLIOGRAPHIE [1] Bonnes Pratiques de Fabrication de l'industrie pharmaceutique, Ministère de l'emploi, de la cohésion sociale et du logement, Ministère de la santé et des solidarités et AFSSAPS, bulletin officiel n°2007-1 bis, fascicule spécial, JO du 28 décembre 2006 [2] T.L. Ha, L. Mathieu, E. Robine, Evaluation de biocollecteurs pour la détection de légionelles, Salles propres n°60, Pp 35-40, Mars 2009. REVENDICATIONS1. Dispositif de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants, caractérisé en ce qu'il comprend : - une matrice (M) de pixels détecteurs ayant une face active sur laquelle une lumière (L) est incidente, - un support (H, LV) transparent à la lumière et qui recouvre la face active, support sur lequel les éléments biocontaminants sont susceptibles de se déposer, - des moyens d'éclairage (ME) qui produisent la lumière qui est incidente sur la face active, - des moyens de traitement (T) aptes à transformer le signal délivré par la matrice (M) de pixels détecteurs en signal numérique, et - des moyens de visualisation (MV) aptes à visualiser sous forme d'images fixes ou d'images vidéo le signal numérique délivré par les moyens de traitement. 2. Dispositif selon la revendication 1, dans lequel le support transparent est un hublot (H) qui protège la face active. 3. Dispositif selon la revendication 1, dans lequel le support transparent comprend un hublot (H) qui protège la face active et une lame de verre (LV) amovible qui recouvre le hublot. 4. Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel un système de chauffage (CH) contrôle la température du support transparent. 5. Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel les moyens d'éclairage (ME) comprennent une diode électroluminescente. 6. Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel les moyens de traitement (T) comprennent des moyens aptes à visualiser la morphologie des éléments biocontaminants. 15 7. Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel les moyens de traitement (T) comprennent des moyens aptes à dénombrer les éléments biocontaminants par unité de surface et/ou 20 par unité de temps. 8. Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la matrice de photodétecteurs (M) est une matrice de capteurs CCD ou 25 une matrice de capteurs CMOS. 9. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans lequel un milieu de culture apte à la croissance des éléments biocontaminants est 30 placé sur le support. 10 27 10. Système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants, caractérisé en ce qu'il comprend un ensemble de dispositifs de détection et d'imagerie conformes à l'une quelconque des revendications 1 à 9, les matrices de pixels détecteurs des dispositifs de détection et d'imagerie étant mises en réseau. 11. Système de détection et d'imagerie d'éléments biocontaminants, caractérisé en ce qu'il comprend au moins un dispositif de détection et d'imagerie selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, un support (ST) sur lequel est placée la matrice de pixels détecteurs du dispositif de détection et d'imagerie et des moyens aptes à déplacer le support (ST) de sorte que la matrice de pixels détecteurs passe d'une zone (Z1) ouverte sur l'environnement, dans laquelle les éléments biocontaminants sont collectés, à une zone confinée (Z2), dans laquelle les éléments biocontaminants collectés sont mis en culture.