FR 2950889 A1 20110408 FR 0956962 A 20091006 La présente demande de brevet concerne un nouveau procédé de synthèse de l'ergothonéine et de dérivés apparentés. L'Ergothionéine, découverte en 1909 par Tanret dans l'ergot de seigle, est un acide aminé d'origine naturelle, aux propriétés antioxydantes, répondant à la formule suivante : S Sa présence a été démontrée non seulement dans un grand nombre de champignons et de mycobactéries, mais aussi chez les végétaux, les animaux et l'Homme. C'est au niveau de leurs racines que les végétaux absorbent l'ergothionéine biosynthétisée par les champignons qui y sont fixés. Ce n'est qu'au travers de leur alimentation que les organismes supérieurs, et l'Homme en particulier, ingèrent ce composé. Plusieurs synthèses de cette molécule ont ainsi été proposées dans la littérature, deux d' entre elles seulement permettant d'aboutir à la L-ergothionéine (énantiomère naturel). La demande internationale WO 95/00 494 propose une synthèse en 5 étapes de la L-ergothionéine par réaction de l'ester méthylique de la Na,Na-diméthylhistidine (elle-même obtenue à partir de L-histidine en 2 étapes) avec du chlorothioformiate de phényle, puis réaction avec du chloroformiate d'éthyle, formation de l'ammonium quaternaire et enfin déprotection du soufre et de l'ester méthylique. Ainsi, une telle stratégie de synthèse nécessite la protection du soufre, qui ne peut être présent sous forme libre, afin de permettre la méthylation du groupement diméthylamine pour conduire à la fonction bétaïne. De plus, le chlorothioformiate de phényle doit être préparé à partir du thiophosgène (CSC12), réactif toxique et difficilement disponible en grande quantité pour une utilisation à l'échelle industrielle. La demande de brevet US 2009/093 642 décrit également une synthèse en 9 étapes de la L-ergothionéine à partir de l'histidine par ouverture du cycle imidazole et réaction avec un thiocyanate tel que le thiocyanate de potassium, pour donner la 2-thiohistidine (selon la méthode décrite par Heath, H. et al., 1951, J.Chem.Soc., 2215), puis protection du soufre par un groupement tertiobutyle, formation de l'ammonium quaternaire et déprotection du soufre. Outre l'utilisation de grands volumes d'acide chlorhydrique, le KSCN, utilisé en milieu acide, est un réactif hautement toxique. Ces deux procédés présentent plusieurs points communs. Outre leur nombre d'étapes élevé, ils cumulent les inconvénients d'utiliser non seulement des réactifs très toxiques mais aussi des quantités importantes de solvants organiques et d'acide chlorhydrique concentré, d'où des risques sur le plan environnemental. Sur le plan de la stratégie de synthèse, ces deux procédés ont en commun d'introduire le soufre, à partir de l'histidine ou de l'un de ses dérivés N-diméthylés, avant de générer le groupement bétaïne, ce qui présente l'inconvénient d'alourdir la synthèse par des étapes supplémentaires de protection et de déprotection. Ainsi, il existe un réel besoin de développer un nouveau procédé de synthèse de l'ergothionéine et de ses dérivés qui soit applicable au niveau industriel, c'est-à-dire qui ne présente pas de difficultés de purification, qui n'utilise pas de produits ou de solvants dangereux et toxiques pour l'Homme et l'environnement, et qui permet d'accéder, à l'échelle industrielle, au produit avec un bon rendement et un faible coût. Dans le souci de développer un procédé respectueux de l'environnement, en utilisant à la fois des réactifs peu toxiques, en minimisant le nombre d'étapes ainsi qu'en réalisant des réactions en milieu aqueux, la Demanderesse a décidé d'opter pour une stratégie de synthèse « inversée » qui consiste à introduire le soufre sur un intermédiaire possédant déjà le groupement bétaïne. Cette approche, totalement originale, peut être qualifiée de bio-mimétique dans la mesure où la biosynthèse par voie enzymatique de la L-ergothionéine dans les champignons procède de la même façon (Askari, A. et Melville, D.B., 1962, J. Biol. Chem., 237, 1615-1618). La présente demande de brevet a ainsi pour objet un procédé de synthèse d'un dérivé de formule (I) suivante : O S (I), ou d'un sel physiologiquement acceptable de celui-ci, d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle : RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle tel que méthyle, au moins un des groupements RI et R2 représentant un atome d'hydrogène, et avantageusement représentant chacun un atome d'hydrogène, et R3, R4 et R5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupe (C1-C4)alkyle tel que méthyle, comprenant les étapes successives suivantes : (i) réaction d'un composé de formule (II) suivante : O O (II), ou d'un sel physiologiquement acceptable de celui-ci, d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle : X''- -X R N i N N NR ~ 2 représente ou 2, RI, R2, R3, R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, R6 représente un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle ou -CO-((C1- C4)alkyle), et en particulier un atome d'hydrogène ou un groupe -COCH3, et plus particulièrement un atome d'hydrogène, et R7 représente un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle, et en particulier un atome d'hydrogène, avec un agent réducteur organique ou minéral, de préférence soluble dans le solvant de réaction qui pourra être notamment de l'eau, pour donner un composé de formule (I), et (ii) séparation du composé de formule (I) obtenu à l'étape (i) précédente du milieu réactionnel. Par « tautomère », on entend, au sens de la présente invention, un isomère de constitution du composé obtenu par prototropie, c'est-à-dire par migration d'un atome d'hydrogène et changement de localisation d'une double liaison. Les différents tautomères d'un composé sont généralement interconvertibles et présents en équilibre, en solution, dans des proportions qui peuvent varier selon le solvant utilisé, la température ou encore le pH. Dans le cadre des composés de l'invention, le cycle 2-thioimidazole peut être présent sous les différentes formes tautomères suivantes : HN kù NH NH S HS Dans la présente invention, on entend désigner par «physiologiquement acceptable » ce qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation pharmaceutique, cosmétique ou alimentaire (humaine ou animale), en particulier alimentaire. On entend désigner par « sels physiologiquement acceptables » d'un composé, des sels qui sont physiologiquement acceptables, comme défini ci-dessus, et qui possèdent l'activité (pharmacologique, cosmétique ou alimentaire) souhaitée du composé parent. De tels sels comprennent : (1) les hydrates et les solvates, (2) les sels d'addition d'acide formés avec des acides inorganiques tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique et similaires ; ou formés avec des acides organiques tels que l'acide acétique, l'acide benzènesulfonique, l'acide benzoïque, l'acide camphresulfonique, l'acide citrique, l'acide éthanesulfonique, l'acide fumarique, l'acide glucoheptonique, l'acide gluconique, l'acide glutamique, l'acide glycolique, l'acide hydroxynaphtoïque, l'acide 2-hydroxyéthanesulfonique, l'acide lactique, l'acide maléique, l'acide malique, l'acide mandélique, l'acide méthanesulfonique, l'acide muconique, l'acide 2-naphtalènesulfonique, l'acide propionique, l'acide salicylique, l'acide succinique, l'acide dibenzoyl-L-tartrique, l'acide tartrique, l'acide p-toluènesulfonique, l'acide triméthylacétique, l'acide trifluoroacétique et similaires, ou (3) les sels formés lorsqu'un proton acide présent dans le composé parent est soit remplacé par un ion métallique, par exemple un ion de métal alcalin, un ion de métal alcalino-terreux ou un ion d'aluminium ; soit coordonné avec une base organique ou inorganique. Les bases organiques acceptables comprennent la diéthanolamine, l'éthanolamine, N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la trométhamine et similaires. Les bases inorganiques acceptables comprennent l'hydroxyde d'aluminium, l'hydroxyde de calcium, l'hydroxyde de potassium, le carbonate de sodium et l'hydroxyde de sodium. Par « stéréoisomères », on entend, au sens de la présente invention, des diastéréoisomères et des énantiomères. Il s'agit donc d'isomères optiques. Les stéréoisomères qui ne sont pas des images dans un miroir l'un de l'autre sont désignés par « diastéréoisomères », et les stéréoisomères qui sont des images dans un miroir l'un de l'autre, mais non superposables, sont désignés par « énantiomères ». Un mélange contenant des quantités égales de deux formes énantiomères individuelles de chiralité opposée est désigné par « mélange racémique ». Par groupement « (C1-C4)alkyle », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant 1 à 4 atomes de carbone. Il pourra s'agir des groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-butyle, ou tert-butyle. En particulier il s'agira du groupe méthyle. Le composé de formule (I) pourra être en particulier un composé de formule (Ia) suivante : 0 S (Ia), ou un sel physiologiquement acceptable, un tautomère, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle RI, R2, R3, R4 et R5 sont tels que définis précédent. Le composé de formule (I) représentera notamment l'ergothionéine, et en particulier la L-ergothionéine. Etape (i) : Cette étape est une réaction de clivage, réalisée en présence d'un agent réducteur, organique ou minéral, qui permet d'obtenir le composé de formule (I) ainsi que de l'acide pyruvique (CH3C(0)-CO2H) ou un de ses dérivés, notamment un ester (CH3C(0)-0O2R7) ou un dérivé obtenu par réaction avec l'agent réducteur, tel qu'un dérivé cétalique lorsque l'agent réducteur est un thiol (deux molécules de thiol pouvant réagir avec la fonction cétone de l'acide pyruvique). Pour cela, l'agent réducteur sera de préférence un agent réducteur non générateur d'hydrogène (H2), c'est-à-dire un agent réducteur qui ne génère pas d'hydrogène dans les conditions de la réaction. Par ailleurs, l'agent réducteur devra être de préférence soluble dans le solvant de réaction qui pourra être notamment de l'eau, ce qui présente l'avantage supplémentaire d'être plus écologique. L'agent réducteur organique utilisé dans cette étape (i) pourra être plus particulièrement : un thiol répondant avantageusement à la formule Ao-SH, avec Ao représentant une chaîne alkyle, linéaire ou ramifiée, et de préférence linéaire, comportant de 2 à 6, avantageusement 2 à 4, atomes de carbone, substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi OH, SH, NH2 et COOH, ou une phosphine répondant avantageusement à la formule PAIA2A3 avec A1, A2 et A3 représentant, indépendamment les uns des autres, une chaîne alkyle, linéaire ou ramifiée, et de préférence linéaire, comportant de 2 à 6, avantageusement 2 à 4, atomes de carbone, substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi OH, SH, NH2 et COOH. La présence de groupements hydrophiles (OH, SH, NH2 et COOH) pourra permettre notamment de rendre l'agent réducteur plus soluble dans l'eau, lorsque l'eau est utilisée comme solvant. Le thiol pourra plus particulièrement être choisi parmi la cystéine, le dithiothréitol, le 2-mercaptoéthanol, l'acide 2-mercaptopropionique, l'acide 3-20 mercaptopropionique et l'acide thioglycolique, et de préférence sera l'acide 3- mercaptopropionique. La phosphine pourra être la tris(2-carboxyéthyl)phosphine (P(CH2CH2CO2H)3). L'agent réducteur minéral pourra être l'acide phosphonique (H3PO2), le 25 bisulfite de sodium (HOS(0)O- Na+) ou le dithionite de sodium (S2O42 2Na+). Avantageusement, on utilisera au moins 2 équivalents molaires d'agent réducteur par rapport au composé (III), c'est-à-dire qu'au moins 2 moles d'agent réducteur sont utilisées pour une mole de composé (III) utilisée. On pourra en particulier utiliser au moins 5 équivalents molaires d'agent réducteur, et notamment 30 5 à 10 équivalents molaires, par rapport au composé (III). Le mélange réactionnel pourra être chauffé à une température supérieure à 60°C car en-dessous de cette température, la cinétique de la réaction serait trop lente. Ainsi, la réaction pourra être réalisée à une température comprise entre 60 et 120°C, avantageusement entre 80 et 100°C, plus particulièrement après addition de l'agent réducteur. La réaction pourra être réalisée notamment en milieu acide. Etape (ii) : Le produit final obtenu (composé de formule (I)) pourra être séparé du milieu réactionnel par des techniques bien connues de l'homme du métier et applicables à l'échelle industrielle, en particulier par évaporation, éventuellement partielle, des solvants, suivie de préférence d'une recristallisation pour purifier le produit. Les composés de formule (I) étant solubles dans l'eau, une ou plusieurs extractions préalables avec un solvant organique, tel que par exemple l'acétate d'éthyle ou l'éther tert-butyl-méthylique, pourront permettre d'éliminer les sous-produits organiques formés au cours de la réaction, tels que l'acide pyruvique ou ses dérivés, ainsi que l'agent réducteur. Le produit obtenu pourra être purifié si nécessaire par des techniques bien connues de l'homme du métier, par exemple par recristallisation, éventuellement après désalinisation de la phase aqueuse le contenant, par des techniques bien connues de l'homme du métier (par exemple par électrodialyse, par ajout d'une résine adéquate, par osmose inverse, etc.). Avant ou après cette étape (ii), un sel du composé formé pourra être préparé, si cela est souhaité, notamment par addition d'un acide ou d'une base 25 physiologiquement acceptable tels que définis précédemment. Le composé de formule (II) pourra être préparé à partir d'un sel d'addition d'acide, à l'exclusion du sel de l'acide iodhydrique (HI), d'un composé de type bétaïne de formule (III) suivante : O NRRR+ 3 4 5 (III), ou d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle X1 /X2 , R3, R4 et R5 sont tels que définis précédemment, 5 par réaction successivement avec du dibrome, puis avec un dérivé de cystéine de formule (IV) suivante : N H R6 HS~/~,OR7 O (IV), ou un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de 10 celui-ci, dans laquelle R6 et R7 sont tels que définis précédemment. Par « sel d'addition d'acide du composé de type bétaïne de formule (III) », on entend, au sens de la présente invention, un sel du composé de type bétaïne de formule (III) obtenu par addition d'un acide, à l'exclusion de l'acide iodhydrique HI. 15 L'acide pourra être en particulier de l'acide chlorhydrique ou de l'acide sulfurique. L'acide iodhydrique ne sera pas utilisé pour former un sel d'addition d'acide du composé de type bétaïne de formule (III) car alors la réaction de formation du composé de formule (II) ne marche pas, certainement du fait de l'oxydation de l'iodure en iode. 20 Dans cette réaction, le dibrome pourra être utilisé à raison de 1 à 1,5 équivalent molaire par rapport au composé de type bétaïne de formule (III). De préférence, le dibrome est ajouté à froid (addition très rapide de préférence), à une température inférieure à 10°C, de préférence inférieure à 5°C. L'addition du dibrome pourra donc être réalisée à une température comprise entre 25 -10°C et 10°C, avantageusement comprise entre -5°C et 5°C. Le dérivé de cystéine pourra être en particulier la N-acétylcystéine ou la cystéine (notamment sous forme D, L ou racémique), et en particulier de la cystéine et notamment de la L-cystéine. Le dérivé de cystéine sera avantageusement utilisé en excès, en particulier à raison de 2 à 10, avantageusement 3 à 7 équivalents molaires de dérivé de cystéine par rapport au composé de type bétaïne de formule (III), c'est-à-dire que 2 à 10, avantageusement 3 à 7 moles de dérivé de cystéine sont utilisées pour une mole de composé (III) utilisée. Cette réaction pourra être réalisée dans un solvant tel que l'eau. Le rendement de cette étape pourra être supérieur ou égal à 45%, voire supérieur ou égal à 60%. De préférence, le composé de formule (II) ne sera pas isolé du milieu réactionnel mais au contraire sera engagé directement dans l'étape (i) suivante. Ainsi, la préparation du composé (I) à partir du composé (III) peut être réalisée dans un seul réacteur, sans isolement du composé (II) intermédiaire (réaction « one-pot »). Le procédé de préparation d'un composé de formule (I) selon l'invention pourra donc comprendre les étapes successives suivantes : (al) réaction d'un sel d'addition d'acide, à l'exclusion du sel de l'acide iodhydrique, d'un composé de type bétaïne de formule (III) tel que défini ci-dessus, ou d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, avec du dibrome, puis avec un dérivé de cystéine de formule (IV) tel que défini ci-dessus ou un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, et en particulier avec de la cystéine et notamment de la L-cystéine, pour donner une composé de formule (II) tel que défini ci-dessus, (hl) réaction du composé de formule (II) obtenu à l'étape (al) précédente avec un agent réducteur organique ou minéral tel que défini précédemment, de préférence soluble dans le solvant de réaction qui pourra être notamment de l'eau, pour donner un composé de formule (I), et (cl) séparation du composé de formule (I) obtenu à l'étape (b1) précédente du milieu réactionnel. Les étapes (bl) et (cl) correspondent respectivement aux étapes (i) et (ii) précédentes. L'étape (al), quant à elle, correspond à l'étape de préparation du composé de type bétaïne de formule (II) décrite précédemment. Avantageusement, les étapes (al) et (b1) seront réalisées dans un même solvant, tel que l'eau, de préférence, dans un même réacteur, c'est-à-dire sans isolement des produits intermédiaires (composé de formule (II) en particulier). Dans ces conditions, le milieu réactionnel pourra contenir un dérivé de cystéine utilisé de préférence en excès à l'étape (al). Avant de séparer le composé de formule (I) du milieu réactionnel (étape (cl)), il pourra donc être nécessaire d'éliminer l'excès de dérivé de cystéine afin de faciliter l'isolement et la purification du composé de formule (I). Notamment, dans le cas d'un dérivé de cystéine pour lequel R7 = H ou (C1-C4)alkyle et en particulier dans le cas de la cystéine, il peut être ajouté par exemple du benzaldéhyde qui formera alors avec le dérivé de cystéine en excès un dérivé de l'acide 2-phénylthiazolidine-4-carboxylique, composé qui précipite dans un solvant tel que l'eau. Par ce moyen, le dérivé de cystéine en excès pourrait être recyclée. Le rendement global de préparation du composé de formule (I) à partir du composé de type bétaïne de formule (III) pourra être supérieur ou égal à 40%. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, le composé de formule (I) est un composé de formule (Ia) et son procédé de préparation comprend les étapes successives suivantes : (a2) réaction d'un sel d'addition d'acide, à l'exclusion du sel de l'acide iodhydrique, d'un composé de type bétaïne de formule (IIIa) suivante : O ou d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle X1 2 , R3, R4 et R5 sont tels que définis précédemment, successivement avec du dibrome, puis avec un dérivé de cystéine de formule (IV) tel que défini ci-dessus ou un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, et en particulier avec de la cystéine et notamment de la L-cystéine, pour donner un composé de type bétaïne de formule (IIa) suivante : O O (IIa), ou un sel physiologiquement acceptable, un tautomère, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange 10 d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle 1 - 2 , R3, R4, R5, R6 et R7 sont tels que définis précédemment, (b2) réaction du composé de type bétaïne de formule (IIa) obtenu à l'étape (a2) précédente avec un agent réducteur organique ou minéral tel que défini précédemment, de préférence soluble dans le solvant de réaction qui pourra être 15 notamment de l'eau, et en particulier avec la cystéine, le dithiothréitol, le 2-mercaptoéthanol, l'acide 2-mercaptopropionique, l'acide 3-mercaptopropionique ou l'acide thioglycolique, et de préférence avec l'acide 3-mercaptopropionique, pour donner un composé de formule (Ia), et (c2) séparation du composé de formule (Ia) obtenu à l'étape (b2) précédente du 20 milieu réactionnel. Les étapes (a2), (b2) et (c2) correspondent respectivement aux étapes (al), (bl) et (cl) précédentes. Les composés de formule (IIa) représentent des formes particulières du composé de formule (II). De même, les composés de type bétaïne de formule (IIIa) 25 représentent des formes particulières du composé de type bétaïne de formule (III). La présente invention a également pour objet un composé de formule (II) suivante : O (II), ou un sel physiologiquement acceptable, un tautomère, un stéréoisomère ou un 5 mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle : X''- R N i N N NR ~ 2 représente ou 2, et RI, R2, R3, R4, R5, R6 et R7 sont tels que définis précédemment, 10 à l'exclusion du composé pour lequel X1 2 représente H N N ou NNH , et R3, R4 et R5 représentent chacun un groupe méthyle. Le composé exclu est décrit dans : Ishikawa et al. J. Biol. Chem. 1974, 249(14), 4420. Il pourra s'agir notamment d'un composé de formule (IIa) telle que défini précédemment. En particulier, ce composé pourra être le dichlorhydrate du 2-{2-[(2-ammonio-2-carboxyéthyl)thio]-1H-imidazol-4-yl} -1-carboxy-N,N,N- triméthyléthanaminium (Herc-Cys, 2HC1) O 15 20 La présente invention a également pour objet un procédé de préparation d'un composé de formule(II) suivante : O (II), ou un sel physiologiquement acceptable, un tautomère, un stéréoisomère ou un 5 mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle : X''- --X R N i N N NR 2 représente ou 2, et RI, R2, R3, R4, R5, R6 et R7 sont tels que définis précédemment, 10 par réaction d'un sel d'addition d'acide, à l'exclusion du sel de l'acide iodhydrique, d'un composé de type bétaïne deformule (III) tel que défini précédemment ou d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange 15 racémique de celui-ci, pour laquelle 1 - 2 , R3, R4 et R5 sont tels que définis précédemment, successivement avec du dibrome, puis avec un dérivé de cystéine de formule (IV) tel que défini précédemment. Dans cette réaction, le dibrome pourra être utilisé à raison de 1 à 1,5 20 équivalents molaires par rapport au composé de type bétaïne de formule (III). De préférence, le dibrome est ajouté à froid (addition très rapide de préférence), à une température inférieure à 10°C, de préférence inférieure à 5°C. L'addition du dibrome pourra donc être réalisée à une température comprise entre -10°C et 10°C, avantageusement comprise entre -5°C et 5°C. O Le dérivé de cystéine pourra être en particulier la N-acétylcystéine ou la cystéine (notamment sous forme D, L ou racémique), et en particulier de la cystéine et notamment de la L-cystéine. Le dérivé de cystéine sera avantageusement utilisé en excès, en particulier à raison de 2 à 10, avantageusement 3 à 7 équivalents molaires de dérivé de cystéine par rapport au composé de type bétaïne de formule (III), c'est-à-dire que 2 à 10, avantageusement 3 à 7 moles de dérivé de cystéine sont utilisées pour une mole de composé (III) utilisée. Cette réaction pourra être réalisée dans un solvant tel que l'eau. La présente invention sera mieux comprise à la lumière des exemples qui suivent, qui sont fournis simplement à titre d'illustration et ne sauraient en aucune façon limiter la portée de l'invention. EXEMPLES Toutes les réactions sont réalisées à l'air libre sauf indication contraire. 1- Préparation des composés de formule (II) selon l'invention Exemple 1: Préparation du dichlorhydrate du 2-{2-[(2-ammonio-2-carboxyéthyl)thio]-1H-imidazol-4-yl}-1-carboxy-N,N, N-triméthyléthanaminium (Herc-Cys, 2HC1) O O 986 mg (5 mmoles) d'Hercynine (V. N. Reinhold et al., J. Med. Chem. 11, 258 (1968)) sont dissous dans 10 mL d'eau. On ajoute 417 µL (5 mmoles) d'acide chlorhydrique concentré, puis on refroidit la solution à 0°C. Sous très forte agitation, 308 µL (959 mg, 6 mmoles, 1,2 équiv.) de dibrome sont ajoutés goutte à goutte (temps d'addition lmin2O). Le mélange réactionnel se colore en jaune, et un solide rougeâtre se forme. Cinq minutes après la fin de l'addition du dibrome, 1,87 g (15 mmoles, 3 équiv.) de L-Cystéine sont ajoutés. Immédiatement, le mélange se décolore, et le précipité rougeâtre se dissout en quelques minutes. Après agitation à 0°C pendant 1h, le mélange est filtré, et le précipité lavé avec 2x0,5 mL d'eau. Le filtrat est déposé sur une colonne remplie avec 75g de DOWEX® 50WX2-400, conditionnée auparavant avec de l'acide chlorhydrique HC1 1N. Après élution avec 400 mL d'acide chlorhydrique HC1 1N, puis 500 mL d'acide chlorhydrique HC1 2N, les fractions contenant le produit désiré sont réunies. Après évaporation et 2 coévaporations avec 2x20 mL de toluène, on obtient après séchage 894 mg (46%) du produit désiré sous forme de cristaux jaunes. (Ce produit a été synthétisé avec un faible rendement à partir de l'Ergothionéine et de la Chloroalanine, mais sous forme acide aminé libre, par Ishikawa et al., J. Biol. Chem. 249 (14), 4420 (1974).) 'H-RMN (D20/DC1, 400 MHz) : S (ppm) = 3,14 (s, 9H) ; 3,37 (m, 2H) ; 3,56 (m, 2H) ; 4,20 (m, 1H) ; 4,28 (m, 1H) ; 7,31 (s, 1H). 20 UPLC-MS (ES+) : 317,4 (MH+) Exemple 2: Préparation du dichlorhydrate du 2-{2-[(2-ammonio-2-carboxyethyl)thio]-1H-imidazol-4-yl}-1-carboxy-N,N, N-trimethylethanaminium dichloride (Herc-Cys, 2HC1) ù variation de la quantité de L-Cystéine O 25 On procède comme décrit dans l'Exemple 1, sauf que l'on ajoute 3,12g (25 mmoles, 5 équiv.) de L-Cystéine. Sept minutes après la fin de l'addition de dibrome. Après traitement et purification sur colonne de DOWEX®, on obtient après séchage 1,13 g (58%) du produit désiré sous forme de cristaux jaunes. L'analyse 'H-RMN (D20/DC1) est identique à celle décrite dans l'Exemple 1. 2- Préparation des composés de formule (I) selon l'invention à partir des intermédiaires de formule (II) Exemple 3 : Préparation de la L-Er2othionéine par clivage de Herc-Cys, 2HC1 O S 1,67g (4,4 mmoles) de Herc-Cys, 2HC1 sont solubilisés dans 16,7 mL d'eau, et on ajoute 1,895 mL (2,29g, 21,39 mmoles, 5 équiv.) d'acide 3-mercaptopropionique. Le mélange limpide, légèrement jaune, est chauffé sous agitation pendant 24h à 85°C. Ensuite on ajoute de nouveau 1,895 mL (2,29g, 21,39 mmoles, 5 équiv.) d'acide 3-mercaptopropionique, et on poursuit le chauffage pendant 48h. Le mélange réactionnel est refroidit à 0°C, et un précipité blanc se forme. Après filtration et rinçage du précipité avec 2x2 mL d'eau froide, on lave le filtrat avec 5x20 mL de dichlorométhane et 5x20 mL d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est évaporée sous vide, et le résidu dissout dans 33 mL d'eau. Par addition d'une solution d'ammoniaque à 20%, le pH de la solution est ajusté à 6. Après lyophilisation, la poudre obtenue est solubilisée à chaud dans un mélange éthanol/eau (7/1). Après addition de charbon activé (100 mg) et filtration à chaud sur Clarcel, la solution obtenue est gardée à froid pendant 14h. Après filtration et séchage on obtient 676 mg (69%) de L-Ergothionéine sous forme de poudre blanche. Les données analytiques obtenues sont identiques à celles obtenues dans la littérature (J. Xu, J. C. Yadan, J. Org. Chem. 60, 6296 û 6301 (1995)). 0- HN_ NH NMe3+ 'H-RMN (D2O, 400 MHz) : 6 (ppm) = 3,20 (m, 2H) ; 3,29 (s, 9H) ; 3,90 (dd, J = 11 Hz, J = 5 Hz, 1H) ; 6,81 (s, 1H). UPLC-MS (ES+): 230,6 (MH+) 3- Préparation des composés de formule (I) selon l'invention sans isolement des intermédiaires de formule (II) Exemple 4 : Préparation de la L-Ergothionéine à partir de l'Hercynine (« one-pot ») ù purification après désalinisation de la phase aqueuse avec une résine 10 a) Formation de l'adduit Herc-Cys (composé de formule (II)) 19,72 g (0,1 mole) d'Hercynine (V. N. Reinhold et al., J. Med. Chem. 11, 258 (1968)) sont dissous dans 200 mL d'eau. On ajoute 8,35 mL (0,1 mole) d'acide chlorhydrique concentré, puis on refroidit la solution à 2°C. Sous très forte agitation, 6,68 mL (20,77 g, 130 mmoles, 1,3 équiv.) de dibrome sont ajoutés goutte à goutte 15 sans dépasser 3°C (temps d'addition l0min). Le mélange réactionnel se colore en jaune, et un solide rougeâtre se forme. Sept minutes après la fin de l'addition du dibrome, 62,4 g (0,5 moles, 5 équiv.) de L-Cystéine sont ajoutés, et la température interne monte à 3°C. Immédiatement, le mélange se décolore, et le précipité rougeâtre se dissout en quelques minutes. 20 Après agitation à 0°C pendant 1h, une analyse d'un échantillon par 'H-RMN (D2O) montre que l'adduit Herc-Cys est formé avec un rendement réactionnel de 55%. Le bain de glace est enlevé, et on laisse agiter le mélange réactionnel pendant une heure. La température interne monte à 10°C. Le produit obtenu n'est pas isolé du milieu réactionnel et est utilisé directement dans l'étape suivante. 25 b) Formation de la L-Ergothionéine On ajoute ensuite 87,7 mL (106 g, 10 équiv.) d'acide 3-mercaptopropionique au mélange, et l'on chauffe sous forte agitation à 80°C pour 22h. Une analyse d'un échantillon par 'H-RMN (D2O) montre que l'adduit Herc-Cys est complètement clivé en Ergothionéine. 30 c) Isolement de la L-Ergothionéine Après refroidissement à température ambiante, le mélange d'une couleur orange-marron est extrait avec 4x400 mL d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est retenue, et le pH est ajusté à 4,5 û 5 avec une solution d'ammoniaque aqueuse à 20% (environ 21 mL). Afin de piéger l'excès de la L-cystéine présente dans le milieu, on ajoute 50,8 mL (53,0 g, 5 équiv.) de benzaldéhyde (selon M. P. Schubert, J. Biol. Chem. 114, 341-350 (1936) ou M. Seki et al. , J. Org. Chem. 67 (16), 5532 (2002)). Le mélange est agité à température ambiante pendant 15h, et l'acide 2- phénylthiazolidine-4-carboxylique précipite sous forme d'un solide jaune claire. Après filtration du solide et rinçage avec 4x50 mL d'eau, le filtrat est extrait avec 2x200 mL d'acétate d'éthyle. d Purification a.rès désalinisation de la phase aqueuse avec une résine Pour faciliter la cristallisation du produit final, la phase aqueuse retenue est désalinisée. Pour cela, elle est traitée par exemple avec de la résine Amberlite IRA 410 sous forme hydrogénocarbonate (selon K. A. Piez et al., J. Biol. Chem. 194, 669-672 (1952)). On ajoute 120 g de la résine au mélange réactionnel et on agite pendant 2h à température ambiante. Un fort dégagement gazeux est observé, ainsi qu'une décoloration progressive du milieu. Par ailleurs, le pH du mélange réactionnel descend vers pH = 8. Après 2h de temps de contact, on filtre la résine. Après rinçage avec 5x20 mL d'eau, l'opération est répétée encore 2 fois. Le filtrat est ensuite évaporé à sec, et le solide obtenu est recristallisé avec de l'éthanol aqueux. On obtient 8,21g (34,9%) de L-Ergothionéine sous forme d'une 25 poudre blanche. 'H-RMN (D2O, 400 MHz) : S (ppm) = 3,20 (m, 2H) ; 3,29 (s, 9H) ; 3,90 (dd, J = 11 Hz, J = 5 Hz, 1H) ; 6,81 (s, 1H). UPLC-MS (ES+): 230,6 (MH+) 30 [a]D _ +124,6° (c=l, H2O) Exemple 5 : Préparation de L-Ergothionéine à partir de l'Hercynine (« one-pot ») û purification après désalinisation de la phase aqueuse par électrodialyse a) Formation de l'adduit Herc-Cys (composé de formule (II)) 98,6 g (0,5 mole) d'Hercynine sont dissous dans 1,5 L d'eau. La solution est transférée dans un réacteur en verre double enveloppe avec agitation mécanique. On ajoute 41,75 mL (0,5 mole) d'acide chlorhydrique concentré, puis on refroidit la solution à 0°C. Sous très forte agitation, 34 mL (106 g, 0,66 mole, 1,3 équiv.) de dibrome sont ajoutés goutte à goutte sans dépasser 2°C (temps d'addition 6,5min). Le mélange réactionnel se colore en jaune, et des flocons rougeâtres se forment. Sept minutes après la fin de l'addition du dibrome, 432 g (3,5 moles, 7 équiv.) de LCystéine sont ajoutés, et la température interne monte à 4°C. Immédiatement, le mélange se décolore, et le précipité rougeâtre se dissout en quelques minutes. On obtient une suspension blanchâtre. Après agitation à 0°C pendant 1h, une analyse d'un échantillon par 'H-RMN (D2O) montre que l'adduit Herc-Cys est formé avec un rendement réactionnel de 56%. Le système de refroidissement est arrêté, et on laisse agiter le mélange réactionnel pendant une heure. La température interne monte à 10°C. b) Formation de la L-Ergothionéine On ajoute ensuite 441 mL (533 g, 5 moles, 10 équiv.) d'acide 3-mercaptopropionique au mélange, et l'on chauffe sous forte agitation à 80°C pour 24h. Une analyse d'un échantillon par 'H-RMN (D2O) montre que l'adduit Herc-Cys est complètement clivé en Ergothionéine. c) Isolement de la L-Ergothionéine Après refroidissement à température ambiante, le mélange d'une couleur orange-marron est extrait avec 4 x 2 L d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est retenue, et le pH est ajusté à 4,5 û 5 avec une solution d'ammoniaque aqueuse à 20% (environ 110 mL). Afin de piéger l'excès de la cystéine présente dans le milieu, on ajoute 359 mL (375 g, 3,5 moles, 7 équiv.) de benzaldéhyde (selon M. P. Schubert, J. Biol. Chem. 114, 341-350 (1936) ou M Seki et al. , J. Org. Chem. 67 (16), 5532 (2002)). Le mélange est agité à température ambiante pendant 15h, et la 2-phénylthiazolidine-4-carboxylique acide précipite sous forme d'un solide jaune clair. Après filtration du solide et rinçage avec 4x500 mL d'eau, le filtrat est extrait avec 4 x 1,5 L d'acétate d'éthyle. d Purification a . rés désalinisation de la s hase a s ueuse s ar électrodial se Pour faciliter la cristallisation du produit final, la phase aqueuse retenue est désalinisée. Pour cela, elle est par exemple désalinisée par électrodialyse (Bench Scale Electrodialysis Pump System BED 1-3 de PCCe11(Allemagne), cellule ED200-020, 20 paires de membranes (cation échange PC-SK, anion-échange PC-SA), 10V). La solution désalinisée est ensuite évaporée à sec, et le solide obtenu est recristallisé avec de l'éthanol aqueux. On obtient 47,68 g (41%) de L-Ergothionéine sous forme d'une poudre blanche. 'H-RMN (D2O, 400 MHz) : S (ppm) = 3,20 (m, 2H) ; 3,29 (s, 9H) ; 3,90 (dd, J = 11 Hz, J = 5 Hz, 1H) ; 6,81 (s, 1H). UPLC-MS (ES+): 230,6 (MH+) [a]D = +125,2° (c=l, H2O) REVENDICATIONS1. Procédé de synthèse d'un dérivé de formule (I) suivante : O S (I), ou d'un sel physiologiquement acceptable de celui-ci, d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle : RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle tel que méthyle, au moins un des groupements RI et R2 représentant un atome d'hydrogène, et avantageusement représentent chacun un atome d'hydrogène, et R3, R4 et R5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupe (C1-15 C4)alkyle tel que méthyle, comprenant les étapes successives suivantes : (i) réaction d'un composé de type bétaïne de formule (II) suivante : O O (II), 20 ou d'un sel physiologiquement acceptable, d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, 23 pour laquelle : X--- -X R N i N N NR 1 ~ 2 représente ou 2, R1, R2, R3, R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, R6 représente un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle ou ùCO-((C1- C4)alkyle), et en particulier un atome d'hydrogène ou un groupe -COCH3, et plus particulièrement un atome d'hydrogène, et R7 représente un atome d'hydrogène ou un groupe (C1-C4)alkyle, et en particulier un atome d'hydrogène, avec un agent réducteur organique ou minéral, de préférence soluble dans le solvant de réaction qui pourra être de l'eau, pour donner un composé de formule (I), et (ii) séparation du composé de formule (I) obtenu à l'étape (i) précédente du milieu réactionnel. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'agent réducteur organique est : un thiol répondant avantageusement à la formule Ao-SH, avec Ao représentant une chaîne alkyle, linéaire ou ramifiée, et de préférence linéaire, comportant de 2 à 6, avantageusement 2 à 4, atomes de carbone, substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi OH, SH, NH2 et COOH, ou une phosphine répondant avantageusement à la formule PAIA2A3 avec A1, A2 et A3 représentant, indépendamment les uns des autres, une chaîne alkyle, linéaire ou ramifiée, et de préférence linéaire, comportant de 2 à 6, avantageusement 2 à 4, atomes de carbone, substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi OH, SH, NH2 et COOH. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que le thiol est choisi parmi la cystéine, le dithiothréitol, le 2-mercaptoéthanol, l'acide 2-mercaptopropionique, l'acide 3-mercaptopropionique et l'acide thioglycolique, et de préférence est l'acide 3-mercaptopropionique.30 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'agent réducteur minéral est l'acide phosphonique, le bisulfite de sodium ou le dithionite de sodium. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce 5 que le composé de formule (I) répond à la formule (Ia) suivante : O S (Ia), ou à un sel physiologiquement acceptable de celui-ci, à un tautomère, à un stéréoisomère ou à un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier à un mélange d'énantiomères, et notamment à un mélange racémique de 10 celui-ci, pour laquelle RI, R2, R3, R4 et R5 sont tels que définis à la revendication 1 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le composé de formule (I) représente l'ergothionéine, et notamment la L-15 ergothionéine. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le composé de type bétaïne de formule (II) est préparé à partir d'un sel d'addition d'acide, à l'exclusion du sel de l'acide iodhydrique, d'un composé de type bétaïne de 20 formule (III) suivante : O NR3R4R5 (III), ou d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, 25 pour laquelle X1 ~- 2 , R3, R4 et R5 sont tels que définis à la revendication 1,par réaction successivement avec du dibrome, puis avec un dérivé de cystéine de formule (IV) suivante : N H R6 HS~/~,OR7 O (IV), ou un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en 5 particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, dans laquelle R6 et R7 sont tels que définis à la revendication 1. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que le composé de formule 10 (I) répond à la formule (Ia) telle que définie à la revendication 5 et que le procédé comprend les étapes successives suivantes : (a2) réaction d'un sel d'addition d'acide, à l'exclusion du sel de l'acide iodhydrique, d'un composé de type bétaïne de formule (IIIa) suivante : O O + NRRR 3 4 5 (IIIa), 15 ou d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier d'un mélange d'énantiomères, et notamment d'un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle X1 - 2 , R3, R4 et R5 sont tels que définis à la revendication 1, successivement avec du dibrome, 20 puis avec un dérivé de cystéine de formule (IV) tel que défini à la revendication 7 ou un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, et en particulier avec de la cystéine et notamment de la L-cystéine pour donner un composé de type bétaïne de formule (IIa) suivante :O O (IIa), ou un sel physiologiquement acceptable, un tautomère, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle X1 - 2 , R3, R4, R5, R6 et R7 sont tels que définis à la revendication 1, (b2) réaction du composé de type bétaïne de formule (IIa) obtenu à l'étape (a2) précédente avec un agent réducteur organique ou minéral, et en particulier avec la cystéine, le dithiothréitol, le 2-mercaptoéthanol, l'acide 2-mercaptopropionique, l'acide 3-mercaptopropionique ou l'acide thioglycolique, et de préférence avec l'acide 3-mercaptopropionique, pour donner un composé de formule (Ia), et (c2) séparation du composé de formule (Ia) obtenu à l'étape (b2) précédente du milieu réactionnel. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 et 8, caractérisé en ce que le dérivé de cystéine est utilisé en excès, à raison de 2 à 10, avantageusement 3 à 7 équivalents molaires de dérivé de cystéine par rapport au composé de type bétaïne de formule (III). 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9, caractérisé en ce que le dibrome est utilisé à raison de 1 à 1,5 équivalents molaires par rapport au composé de type bétaïne de formule (III). 2620 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 10, caractérisé en ce que la préparation du composé (I) à partir du composé (III) est réalisé dans un seul réacteur, sans isolation du composé (II) intermédiaire. 12. Composé de type bétaïne de formule (II) suivante : O (II), ou un sel physiologiquement acceptable, un tautomère, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle : X''- R N N N NR ~ 2 représente ou 2, et RI, R2, R3, R4, R5, R6 et R7 sont tels que définis à la revendication 1, à l'exclusion du composé pour lequel X~ 2 représente H N N ou NNH et R3, R4 et R5 représentent chacun un groupe méthyle. 13. Procédé de préparation d'un composé de type bétaïne de formule (II) suivante : O Oou un sel physiologiquement acceptable, un tautomère, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, en particulier un mélange d'énantiomères, et notamment un mélange racémique de celui-ci, pour laquelle : X'-- 2 représente R 1 N N ou N N R 2 , et RI, R2, R3, R4, R5, R6 et R7 sont tels que définis à la revendication 1, par réaction d'un sel d'addition d'acide, à l'exclusion du sel de l'acide iodhydrique, d'un composé de type bétaïne de formule (III) tel que défini à la revendication 7, avec du dibrome, puis avec un dérivé de cystéine de formule (IV) tel que défini à la revendication 7, et en particulier avec de la cystéine et notamment de la de L-cystéine. 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que le dibrome est utilisé à raison de 1 à 1,5 équivalents molaires par rapport au composé de type bétaïne de formule (III). 15. Procédé selon l'une quelconque des revendications 13 et 14, caractérisé en ce que le dérivé de cystéine est utilisé en excès, à raison de 2 à 10, avantageusement 3 à 7 équivalents molaires de dérivé de cystéine par rapport au composé de type bétaïne de formule (III).