FR 2941376 A1 20100730 FR 0950508 A 20090128 UTILISATION COSMETIQUE ANTI-STRESS ET/OU ANTI-AGE D'UN PRINCIPE ACTIF ISSU DE PANICUM MILIACEUM, PRINCIPE ACTIF, PROCEDE D'OBTENTION ET COMPOSITIONS La présente invention concerne l'utilisation cosmétique d'un principe actif issu de Panicum miliaceum pour un effet cosmétique anti-stress et/ou anti-âge. L'invention se rapporte également à un principe actif issu de Panicum miliaceum, à un procédé d'obtention ainsi qu'à des compositions anti-stress et/ou anti-âge comprenant un principe actif issu de Panicum miliaceum et à un procédé cosmétique. Le stress est omniprésent dans nos sociétés actuelles. Il se manifeste chez un individu par un ensemble de réactions physiologiques et psychologiques de l'organisme, lorsque celui-ci est soumis à un changement ou à une contrainte. Bien qu'ayant souvent une connotation négative, le stress est en fait une réponse de l'organisme pour maintenir l'équilibre biologique dans un état fonctionnel. C'est un mécanisme qui permet aux individus de s'adapter à toutes modifications physiques, sociales et/ou psychiques de leur environnement. Comme le reste de l'organisme, l'enveloppe corporelle possède également un système d'adaptation au stress pour faire face aux diverses agressions extrinsèques ou intrinsèques qui l'affectent et maintenir ses fonctions biologiques face à son environnement. Tout se passe comme si la peau avait un capital stress, qui lorsqu'il est épuisé conduit à la modification de ses paramètres et à son vieillissement. La sénescence des cellules cutanées à l'origine du vieillissement de la peau peut en effet être déclenchée prématurément par divers agents stressants environnementaux, biologiques ou mécaniques. On parle d'état de � sénescence prématurée induite par un stress � ou SIPS. En outre, un stress psychologique peut également avoir un retentissement cutané. On sait que la peau, le système nerveux et le système immunitaire sont associés à la fois physiologiquement et anatomiquement dans le cadre d'un système dit � neuro-immuno-cutané �. Intimement liés par un ensemble de sécrétions biochimiques, le cerveau et la peau sont en dialogue permanent. Lorsque le cerveau ressent un stress psychologique, la peau répond par un manque d'éclat et une grise mine. Depuis plusieurs années, l'industrie de la cosmétique et de la beauté s'est particulièrement attachée au phénomène du stress en proposant des produits aux objectifs variés, visant l'aspect du bien être. Toutefois ces produits existants ne sont pas vraiment satisfaisants, car ils traitent uniquement les causes d'un stress en fonction de son origine, comme la protection de la peau contre les agressions environnementales ou la stimulation du bien-être via les molécules de plaisir. Or, le stress, quel qu'il soit, est l'un des responsables majeurs de l'atteinte des paramètres cutanés accélérant inévitablement le vieillissement de la peau. C'est pourquoi l'objectif de la présente invention est de proposer une solution cosmétique permettant de lutter contre les effets du stress, quelle qu'en soit son origine et combattre le vieillissement induit. Pour y répondre, la présente invention vise à utiliser au moins un principe actif riche en oligopeptides issu de Panicum miliaceum, en tant que principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge. En effet, de façon surprenante, les principes actifs issus de Panicum miliaceum riches en oligopeptides, présentent des propriétés remarquables qui permettent de combattre le vieillissement prématurément induit par le stress et de corriger l'impact du stress émotionnel sur la qualité de la peau. Avantageusement, l'utilisation d'un principe actif issu de Panicum miliaceum dans une composition cosmétique permet d'aider la peau surmenée et fatiguée à récupérer du stress quotidien, à se ressourcer et à retrouver son éclat. L'invention vise également un principe actif cosmétique anti-stress, obtenu à partir d'au moins un extrait issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides, un procédé d'obtention de ce principe actif, des compositions cosmétiques incluant au moins un tel principe actif et l'utilisation de ces compositions cosmétiques. Par principe actif � anti-stress � on entend un principe actif capable d'agir sur au moins un paramètre cutané modifié par un stress. Par oligopeptide on entend un peptide comportant moins de 30 acides aminés. Par � paramètres cutanés � on entend l'ensemble des données permettant d'évaluer l'état général de la peau. Elles peuvent être obtenues par analyse sensorielle, par évaluation clinique d'un expert, par mesures au moyen d'appareils et de sondes ou par photographies. Les principes actifs issus de Panicum miliaceum selon l'invention peuvent être obtenus par un procédé comprenant au moins une étape d'hydrolyse enzymatique. De manière préférentielle, les compositions cosmétiques selon l'invention contiennent 0,01 à 20% d'un extrait riche en oligopeptides issus de Panicum miliaceum. L'administration d'une composition contenant un principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention est effectuée par voie topique. Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toutes formes permettant l'application par voie topique. La présente invention est maintenant décrite en détail. UTILISATION Selon un premier aspect l'invention vise donc l'utilisation cosmétique d'au moins un principe actif issu de Panicum miliaceum, présentant une teneur en oligopeptides d'au moins 25% du poids total de l'extrait sec, préférentiellement d'au moins 40%, en tant que principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge dans une composition cosmétique. En particulier l'invention a pour objet l'utilisation d'au moins un principe actif issu de Panicum miliaceum dans une composition cosmétique pour corriger les modifications de l'expression des marqueurs biologiques et des paramètres cutanés induits par un stress environnemental ou émotionnel. Selon l'invention un actif issu de Panicum miliaceum peut donc être utilisé pour lutter contre le vieillissement prématuré cutané induit par un stress. Tout stress implique un spectre de réponse cellulaire. La réponse au stress des cellules est variable. Les cellules sont affectées graduellement en fonction de la nature du stress et de leurs caractéristiques intrinsèques. D'une période d'adaptation transitoire, permettant à la cellule de moduler son expression génique pour faire face à son environnement, la cellule peut également, en état de stress, entrer dans un état de sénescence prématurée. L'état de sénescence prématurée induite par le stress se caractérise par un arrêt de la croissance cellulaire associé à des modifications morphologiques, une activité p-galactosidase, une régulation du cycle cellulaire et des modifications de l'expression génique : certains gènes sont sous-régulés tandis que d'autres sont sur-exprimés. L'étude de l'expression génique d'une population de jeunes fibroblastes ayant subi d'une part un stress oxydatif, et d'autre part, un vieillissement par réplications successives, montre que certains gènes sont sous-régulés tant sur les cellules stressées que sur les cellules vieillies. Parmi les gènes présentant le même comportement chez des fibroblastes stressés et des fibroblastes vieillis, on peut citer notamment les gènes codant pour des protéines de la matrice extracellulaire, comme le collagène V, le perlécan ou le Hyaluronane synthase-2 (HAS-2), et pour des protéines de défense cellulaire comme la Protectine ou l'HIF-1a (l'hpypoxia Inductible Factor-1a). Le collagène V est un collagène fibrillaire associé au collagène I et III qui régule le diamètre des fibres de collagène et la fibrillogenèse, processus majeur déterminant les caractéristiques fonctionnelles du tissu. Le perlécan ou Heparan sulfate proteoglycan 2 est un composant des protéoglycannes simples intervenant dans l'organisation fonctionnelle de la membrane basale en interagissant avec le collagène IV, les laminines et le nidogène. Le HAS-2 est une enzyme de synthèse de l'acide hyaluronique qui est le constituant le plus important des glycosaminoglycanes de la matrice extracellulaire. Ce dernier assure l'hydratation et l'assemblage des différents éléments du tissu par formation de complexes supramoléculaires. La Protectine (CD 59 ou Homologous Restriction Factor 20) est une glycoprotéine membranaire de 18 à 20 kb possédant un résidu carbohydrate lié au phosphatidylinositol. La Protectine régule négativement l'activation du complément et maintient ainsi l'intégrité de la peau pendant les réponses inflammatoires. L'HIF-1a est un facteur transcriptionnel hétérodimère régulateur clé de la réponse cellulaire à l'hypoxie. Le stress hypoxique est géré par la stabilisation et l'activation de la sous-unité HIF-1a du facteur transcriptionnel central HIF-1. Le profil d'expression des gènes codant pour ces protéines, sur des fibroblastes est présenté ci-dessous : Gènes Fibroblastes Fibroblastes Fibroblastes jeunes vieillis stressés Matrice Collagène V a1 100 54 41 extracellulaire Perlecan 100 76 69 FIAS-2 100 43 37 Défense Protectine 100 13 59 cellulaire HIF-1a 100 55 72 Selon l'invention, un actif issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides peut être utilisé pour stimuler l'expression des protéines sous-exprimées dans les cellules de la peau en cas de stress et de vieillissement cutanée, et ainsi de lutter contre le vieillissement cutané prématuré induit par un stress. En particulier, un principe actif issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides peut être utilisé pour stimuler l'expression des ARNm (acides ribonucléiques messagers) codant pour le collagène V, le perlecan, l'HAS-2, la Protectine et/ou l'HIF-la. Avantageusement, l'utilisation cosmétique d'un actif issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides tend à restaurer les expressions des différents marqueurs de vieillissement prématuré induit par un stress à un taux similaire à celui des fibroblastes jeunes et prévient ainsi le vieillissement cellulaire accéléré induit par le stress. Par ailleurs, on sait que les paramètres cutanés peuvent être altérés sous l'influence d'un stress émotionnel. L'éclat du teint, reflet de l'état général de santé, est dépendant notamment de l'état émotionnel et hormonal, de l'état de fatigue et d'anxiété. La fonction barrière de la peau et sa réparation sont également altérés par le stress psychologique. Or, selon l'invention, un principe actif issu de Panicum miliaceum peut également être utilisé pour corriger l'impact du stress émotionnel sur la qualité de la peau. En particulier, il peut être utilisé pour améliorer les différents paramètres liés à l'éclat de la peau et illuminer le teint. L'utilisation selon l'invention sur une peau stressée permet notamment d'augmenter le rayonnement de la peau, altérée pour les personnes stressées, et de diminuer le microrelief de la glabelle résultat des crispations dues au stress, plus marqué pour les personnes stressées. L'invention permet également de rendre les traits du visage plus détendus, la peau plus relaxée, vitalisée et plus lumineuse, et d'atténuer les signes de fatigue. Ainsi, un extrait issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides peut être utilisé pour un effet cosmétique anti-stress et anti-âge, en particulier : - pour agir sur l'expression des marqueurs biologiques du vieillissement cutané, notamment pour rajeunir une peau stressée et diminuer les signes visibles du vieillissement comme les rides, et/ou - pour corriger l'impact du stress émotionnel sur les paramètres cutanés, notamment pour améliorer l'éclat de la peau et illuminer le teint. Avantageusement, un actif issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides permet de ressourcer les peaux surmenées et fatiguées, de réveiller leur éclat pour un aspect plus jeune. PRINCIPE ACTIF Selon un deuxième aspect, l'invention concerne un principe actif cosmétique antistress et/ou anti-âge, obtenu à partir de Panicum miliaceum, présentant une teneur en oligopeptides supérieure ou égale à 25% du poids total de l'extrait sec. Préférentiellement le principe actif comprend au moins 40% en poids de oligopeptides par rapport au poids total de l'extrait sec. De façon préférée le principe actif est obtenu à partir de graines germées de Panicum miliaceum. Le principe actif selon l'invention est soluble en milieu aqueux. Il est également soluble en milieu hydroalcoolique jusqu'à un taux 50/50 éthanol/eau. Il peut supporter des températures allant jusqu'à 80°C pendant au moins 2 heures. Préférentiellement, le principe actif selon l'invention est sous forme liquide. Il peut être défini par les caractéristiques exposées ci-après. Matières sèches : On mesure le taux de matières sèches par passage à l'étuve à 105°C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant. Le taux de matières sèches d'un principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention est compris entre 10 et 130 g/I, plus particulièrement entre 25 et 39 g/I. Mesure du pH : Le pH mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante conduit à des valeurs comprises entre 3,0 et 6,0, plus particulièrement entre 3,5 et 4,5. Détermination de la teneur en protéines Le taux de protéines est obtenu par la méthode de LOWRY. Les résultats donnent une teneur en protéines comprise entre 4 et 60g/l, plus particulièrement entre 10 et 18g/l. Le principe actif contient moins de 25% de protéines par rapport aux matières sèches totales, préférentiellement moins de 40%. Caractérisation des protéines La fraction protéique d'un principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention est composée d'une fraction protéique majoritairement inférieure à 6500 Da sous forme d'oligopeptides. Fraction active La fraction active du principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention est une fraction oligopeptidique dont le poids moléculaire est compris entre 243 et 2000 Da. PROCEDE D'OBTENTION Selon un autre aspect, la présente invention vise un procédé d'obtention d'un principe actif issu de Panicum miliaceum. Il s'agit d'un procédé qui permet de concentrer l'actif en terme d'oligopeptides. 10 Le procédé comprend au moins une étape d'hydrolyse enzymatique de graines de Panicum miliaceum permettant d'obtenir des oligopeptides. Préférentiellement il s'agit d'un procédé comprenant les étapes suivantes - solubilisation de poudre de graines germées de Panicum miliaceum dans une solution aqueuse, 15 - hydrolyse enzymatique afin d'obtenir des oligopeptides, - séparation des phases soluble et insoluble, - inactivation des enzymes utilisées pour l'hydrolyse par traitement thermique, et - filtration(s) et concentration. 20 Des étapes supplémentaires peuvent être ajoutées comme une étape de désodorisation ou de décoloration afin de garantir l'obtention d'un produit liquide de couleur claire et d'odeur faible. L'hydrolysat obtenu se présente sous la forme d'une solution aqueuse liquide limpide de couleur jaune clair. 25 COMPOSITIONS COSMETIQUES La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant au moins un principe actif issu de Panicum miliaceum, préférentiellement de graines germées de Panicum miliaceum, dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d'émulsions huiledans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersion, gel aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. Ces compositions contiennent entre 0,01 et 20% en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de Panicum miliaceum selon la présente invention, préférentiellement entre 0,5% et 3%. Préférentiellement, elles présentent un pH compris entre 2 et 10. Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur tels que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Ce milieu contient généralement de l'eau. Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un 20 composé choisi parmi - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ; - les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba ; 25 - les élastomères de silicone, - les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationaiques ou amphotères ; - les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires ; - les épaississants et/ou gélifiants, - les humectants, tels que les polyols comme la glycérine ; - les filtres organiques, - les filtres inorganiques, - les colorants, les conservateurs, les charges, - les tenseurs, - les séquestrants, - les parfums, - et leurs mélanges, sans que cette liste ne soit limitative. Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingrédient Dictionary and Handbook publié par le Personal Gare Product Council). Ces compositions sont notamment destinées au soin, au traitement, à la protection et/ou à l'hydratation de la peau humaine, en particulier pour un effet anti-stress et/ou anti-âge : pour rajeunir la peau stressée, diminuer les rides, améliorer l'éclat de la peau et illuminer le teint. On peut citer des formulations ayant montré une stabilité physique incluant 5% d'un principe actif selon l'invention. La stabilité est caractérisée par une absence de précipitation de l'extrait, une absence de crémage et une absence de déphasage. Gel limpide : - Carbopol : 0,5% avec Triéthanolamine : qsp pl-1=6,5 - Glycérol : 10,0% - Propylène glycol : 10,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention: 5,0% - Eau : 73,5% 5 10 15 20 25 Gel opaque : - Sépigel 305: 3,0% - Lanol 99 : 12,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention: 5,0% - Eau : 79,0% Gel émulsionné : - Montanov 202 : 3,0% - Isopropyl palmitate : 10,0% - Sepigel 305 : 2,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention: 5,0% - Eau : 79,0% Emulsion non ionique : - Montane 60 : 2,0% - Montanox 60 : 4,0% - Isopropyl myristate : 8,0% - Paraff in wax 130/135 : 3,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention: 5,0% - Eau : 77,0% Emulsion anionique : - Acide stéarique : 7,0% Triethanolamine qsp pH=8 - Ritaphyl ICS : 20,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention: 5,0% - Eau : 67,0% Emulsion cationique : - Quaternium-82 : 5,0% - Alcool cétylique : 1,0% - Gemseal 60 : 8,0% - Alcool cétéarylique : 1,0% - PEG 100 stéarate : 1,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention: 5,0% - Eau : 78,0% Des tests ont montré la compatibilité du principe actif avec les matières premières utilisées en cosmétique : épaississants, émulsionnants, solvants. On peut également citer des exemples de compositions cosmétiques anti-stress et/ou anti-âge, incluant le principe actif selon l'invention. Les exemples de compositions qui suivent sont obtenus par mélange des différents composants. Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée. Exemple de crème détente hydratante La formulation est la suivante : A. Eau QSP 100% B. Emulgade 1000 MI (Henkel) 4% Montanov 14 (Seppic) 2,3% Pelemol 89 (Cornelius) 2,7% Gemseal 60 (Total) 4% DC 200 (Dow Corning) 3,3% C. Conservateur 1% Principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention 3% D. Aristoflex 0,5% pH 6,5 (Henkel) 3,3% Cette crème a un pH de 4,3. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique, - émulsionner B dans A sous agitation, - ajouter C dans l'ordre à 40°C, et homogénéiser, - additionner D, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que la crème soit uniforme, et - laisser sous agitation jusqu'à refroidissement à 30°C. Exemple de gel ressourçant anti-stress La formulation est la suivante : A. Eau QSP 100% Glycérol 1% B. Lanette N (Cognis) 2% DUB STG AE 30 (Stéarinerie Dubois) 1,2% Lanette 37 T (Seppic) 2,3% DUB Synersol (Stéarinerie Dubois) 107. DC 345 (Dow Corning) 3% C. Conservateur 1% Principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention 3% D. Viscolam SMC20 (Rita) 3% Ce gel a un pH de 4,8. Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A et B à 80°C, - émulsionner B dans A sous agitation, - ajouter C dans l'ordre à 40°C, et homogénéiser, - additionner D, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que le gel émulsionné soit uniforme, et - laisser sous agitation jusqu'à refroidissement à 30°C. Exemple de crème adoucissante relaxante La formulation est la suivante : A. Eau QSP 100% B. Volpo G26LW (Croda) 3% DUB MCT 45 (Stéarinerie Dubois) 5% Finester EH 25 (Cornelius) 8% DC 345 (Dow Corning) 3% DUB microlub 50 (Stéarinerie Dubois) 2% STG AE 30 (Stéarinerie Dubois) 2% Montanov 82 (Seppic) 1% C. DC 7-3100 (Dow Corning) 10% D. Conservateur 1% Principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention 3% Cette crème a un pH de 5,6. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A et B à 80°C, - émulsionner B dans A sous agitation, - ajouter C à 50°C, et homogénéiser sous émulseur rotor/stator, - additionner D dans l'ordre à 40°C, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que la crème soit uniforme, et - laisser sous agitation jusqu'à refroidissement à 30°C. Exemple de lait fondant délassant La formulation est la suivante : A. Eau QSP 100% Glycérol 1,3% Statiaxane CX 930 (Degussa) B. DC 345 (Dow Corning) 2,1% Eumulgine B1 (Sidobre) 5,7% Montanov 68 (Seppic) Monomuls 900 18 (Henkel) 5% C. Conservateur 1% Principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention 3% Ce lait gel a un pH de 5. Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A et B à 80°C, - émulsionner B dans A sous agitation, - ajouter C dans l'ordre à 50°C, et homogénéiser, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que le lait soit uniforme, et 10 - laisser sous agitation jusqu'à refroidissement à 30°C. EVALUATION DE L'EFFET D'UN PRINCIPE ACTIF ISSU DE PANICUM MILIACEUM SELON L'INVENTION L'extrait utilisé pour les études qui suivent est un actif issu de Panicum 15 miliaceum présentant les caractéristiques suivantes : - solution aqueuse - aspect : liquide limpide - couleur : jaune clair - matières sèches : 34 g/I 20 - protéines totales : 13 g/I - pourcentage d'oligopeptides par rapport à la matière sèche : 38% - pH : 4,0 - sucres totaux : 16 g/I - cendres : 4 g/I 25 Cet exemple d'extrait n'est bien entendu pas limitatif. La formulation testée dans les études sur volontaires est : Lanol 99 (Seppic) 5,0% Principe actif issu de Panicum miliaceum 3,0% Montanov 202 (Seppic) 3,0% Montanov 68 (Seppic) 2,0% Conservateur 1,0% Sepigel 305 (Seppic) 0,3% Eau QSP 100% 1/ Evaluation de l'effet anti-stress/anti-âge d'un actif issu de Panicum miliaceum sur cellules cutanées stressées et vieillies Cette évaluation consiste à réaliser dans un premier temps une modélisation de l'induction de stress et de vieillissement cellulaire prématuré sur des cultures de cellules cutanées, puis à évaluer l'effet du principe actif issu de Panicum miliaceum sur les cellules stressées et vieillies. 1.1/ Modélisation d'un stress inducteur de vieillissement cellulaire prématuré Le but de cette étude est d'étudier l'expression différentielle de gènes de jeunes fibroblastes humains normaux ayant subi d'une part un stress oxydatif (H202) et d'autre part un vieillissement par passages successifs. L'étude est réalisée à l'aide de puces à ADN (� Microarrays �), en comparant le profil de ces populations dites fibroblastes normaux, fibroblastes stressés et fibroblastes vieillis. Les résultats sont présentés dans le tableau ci-dessous Gènes Abréviatio Fibroblastes Fibroblastes Fibroblastes n normaux vieillis stressés Enzyme de Steroid 5-alpha SRDA1 100 50 61 régulation reductase 1 Signalisation 14-3-3-protein epsilon YWHAE 100 40 59 cellulaire Biglycan BGN 100 18 14 Collagène V a1 COL5A1 100 54 41 Fibrilline 1 FBN1 100 62 65 Matrice Fibronectine FN1 100 31 48 extracellulaire Perlecan HSPG2 100 76 69 HAS-2 HAS-2 100 43 37 Lamin gamma 1 subunit LAMC1 100 13 11 Epidermal growth EGFR 100 50 51 factor receptor Facteurs de Fibroblast growth FGF7 100 21 68 croissance factor 7 Vascular endothelial VEGFB 100 16 62 growth factor B Protectine CD59 100 13 59 27-KD heat shock HSP27 100 58 69 Défense protéine cellulaire Hypoxia inductible HIF-1a 100 55 72 factor 1 alpha On constate que des fibroblastes stressés par le stress oxydatif présentent des modifications de l'expression de certains de leur gènes similaires à celles obtenues pour les fibroblastes vieillis. Ces résultats permettent donc de modéliser le stress oxydatif cellulaire comme un inducteur de vieillissement prématuré. 1.2/ Evaluation de l'effet sur les marqueurs du vieillissement prématuré L'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet d'un principe actif issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides sur sa capacité à augmenter l'expression d'ARNm codant pour différents marqueurs du vieillissement cutané prématuré : - marqueurs de la matrice extracellulaire : HAS-2, collagène V et Perlécan, et - marqueurs de défense cellulaire : protectine et HIF-1a. L'étude est réalisée par PCR quantitative sur de jeunes fibroblastes humains normaux ou stressés par H2O2. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant en pourcentage d'ARNm exprimé, par rapport aux fibroblastes humains normaux non traités. Taux d'ARNm (%) HAS-2 Collagène V Perlécan HIF- la Protectine Fibroblastes normaux non traités 100 100 100 100 100 Fibroblastes normaux + principe 92 100 89 96 93 actif 0, 5% Fibroblastes stressés non traités 55 37 33 62 74 Fibroblastes stressés + principe 82 56 55 71 83 actif 0, 5% 0 +49 +51 +67 +15 +12 /o Avec _ (Fibroblastes stressés traités - f ibroblastes stressés non traités) / (f ibroblastes stressés non traités) On constate que l'expression des ARNm des différents marqueurs du vieillissement prématuré des fibroblastes stressés est réduite par rapport aux fibroblastes normaux.15 Ces résultats montrent que testé à 0,5% sur fibroblastes stressés, l'utilisation d'un principe actif issu de Panicum miliaceum selon l'invention permet de restaurer les expressions des ARNm de différents marqueurs de vieillissement prématuré à un taux similaire à celui des fibroblastes normaux. 2/ Evaluation de l'effet anti-stress d'un principe actif issu de Panicum miliaceum sur la peau 2.1/ Etude comparative de l'éclat du teint sur peaux stressées et non stressées Cette évaluation consiste à réaliser dans un premier temps une étude comparative de l'éclat du teint entre un groupe stressé et un groupe non stressé, puis à évaluer l'effet sur l'éclat du teint de ces groupes du principe actif issu de Panicum miliaceum. L'étude est réalisée sur 46 volontaires de sexe féminin. Les groupes stressé / non stressé sont réalisés par discrimination sur la base d'un questionnaire comprenant des questions relatives à la vie professionnelle, à la vie quotidienne et à l'environnement. Les aspects étudiés sont analysés séparément puis comptabilisés globalement afin d'établir un niveau de stress global. Ce degré de stress est classé en 5 niveaux différents : - niveau 0 traduisant l'absence de stress, - niveau 1 traduisant un faible niveau de stress, - niveau 2 traduisant un niveau de stress moyen, - niveau 3 traduisant un niveau de stress élevé, et - niveau 4 traduisant un niveau de stress très élevé. Les personnes qui, à l'issu du questionnaire, obtiennent une note correspondant au niveau 0 ou 1 sont regroupées dans le groupe de personnes non stressées (groupe A) et celles qui obtiennent une note correspondante aux niveaux de stress 2, 3 ou 4 sont regroupées dans le groupe de personnes stressées (groupe B). L'évaluation de l'éclat du teint est réalisée en aveugle par un expert entraîné sur le paramètre rayonnement de la peau. L'évaluation est réalisée sur une échelle de score allant de 1 à 10. Le rayonnement de la peau est caractéristique d'un teint éclatant. Plus l'intensité des accroches de lumière sur les zones saillantes du visage est importante, plus la peau est lumineuse. L'évaluation du rayonnement se fait sur les zones suivantes : pommettes, front, menton et yeux. a/ Modélisation : Etude comparative de l'éclat du teint entre un groupe stressé et un groupe non stressé L'objectif de cette étude est d'évaluer l'impact du stress sur les paramètres d'éclat du tient. En effet, l'éclat du teint est fortement influencé par différents évènements liés à l'activité professionnelle, à la vie quotidienne ou encore à l'environnement. Les résultats obtenus sur le paramètre rayonnement de la peau pour les deux groupes sont présentés dans le tableau suivant : Rayonnement de la peau Groupe A (non stressé) 6,1 Groupe B (stressé) 5,5 On constate qu'il existe une différence significative du paramètre relatif à l'éclat du tient entre un groupe de personnes stressées et un 20 groupe de personnes non stressées. b/Evaluation de l'effet du principe actif issu de Panicum miliaceum sur le groupe stressé L'évaluation de l'éclat du teint a également été réalisée avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion ou du placebo, sur le paramètre rayonnement de la peau. Les résultats obtenus pour le groupe B stressé sont présentés dans le tableau suivant : Groupe B stressé JO J28 Zone placebo 6,1 6,1 Zone traitée 5,5 5,9 On constate que dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes, un principe actif issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides formulé à 3% en émulsion, améliore significativement le rayonnement de la peau (+ 6,3%). L'utilisation du principe actif selon l'invention permet au groupe stressé de retrouver un éclat du teint comparable à celui du groupe non stressé, la différence entre les deux groupes n'étant plus significative à J28. En améliorant le paramètre rayonnement de la peau caractéristique de l'éclat du teint, un principe actif issu de Panicum miliaceum riche en oligopeptides illumine le visage de peaux perturbées par le stress psychologique. 2-2/Etude comparative du microrelief de la glabelle sur peaux stressées et non stressées Cette évaluation consiste à réaliser dans un premier temps une étude comparative du microrelief cutané de la glabelle sur deux groupes d'âge identique et de niveau de stress différent, afin d'évaluer si le stress émotionnel peut participer aux modifications de l'aspect du microrelief. Dans un second temps, cette étude permet d'évaluer l'effet anti-stress d'un principe actif issu de Panicum miliaceum sur le groupe stressé. Cette étude a été réalisée sur 30 volontaires de sexe féminin réparties en 2 groupes d'âge similaire de niveau de stress différent. Les volontaires ont été réparties en 2 groupes constitués de la manière suivante : - groupe 1 : 13 volontaires d'âge moyen 62 ans présentant une peau mature et majoritairement stressées ; - groupe 2 : 17 volontaires d'âge moyen 62 ans présentant une peau mature et majoritairement non stressées. Des empreintes en polymère siliconé sont réalisées au niveau de la glabelle. Ces empreintes sont observées et analysées à l'aide d'un prof ilomètre muni d'un système d'analyse d'image et d'un logiciel adapté S.I.A. (software Image Analysis). Le paramètre surface totale ridée (mm 2) est retenu pour caractériser le microrelief de la glabelle. a. Modélisation : comparaison du microrelief cutané de deux groupes de peaux matures et de niveau de stress différent L'objectif de cette étude est d'évaluer l'impact du stress sur le microrelief de la glabelle. Le tableau suivant présente les résultats correspondant au paramètre de surface totale ridée (mm 2) de chacun des deux groupes. Surface totale ridée (mm 2 ) Groupe 1 : peaux matures stressées 7,68 Groupe 2 : peaux matures non stressées 5,45 Ces résultats montrent qu'il existe une différence significative sur le paramètre surface totale ridée caractéristique du microrelief de la glabelle entre deux groupes du même âge mais de niveau de stress différent. b/Evaluation de l'effet du principe actif issu de Panicum miliaceum sur le groupe stressé L'évaluation du microrelief cutané a également été réalisée avant et après 42 jours d'applications biquotidiennes d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion ou du placebo. Les résultats sont présentés dans le tableau suivant Surface totale ridée (mm 2 ) JO J42 Groupe 1 : peaux matures stressées 7,68 5,79 Traité par le principe actif 3% Groupe 2 : peaux matures non stressées 5,45 5,72 Traité par le placebo Dans les conditions de cette étude, après 42 jours d'applications biquotidiennes sur le groupe stressé, le principe actif issu de Panicum miliaceum diminue significativement la surface totale ridée de 25%. 10 Cette diminution permet de revenir à un aspect du microrelief proche de celui du groupe non stressé. 3/ Evaluation de l'effet anti-stress/anti-âge d'un principe actif issu de Panicum miliaceum sur le microrelief de la peau L'objectif de cette étude est dans un premier temps de comparer le paramètre 15 cutané du microrelief de la glabelle de trois groupes d'âge et de niveau de stress différents, afin d'étudier si l'altération de ce microrelief avec l'âge pouvait être accentuée par l'impact du stress émotionnel. Les trois groupes sont les suivants : - groupe 1 : 13 volontaires d'âge moyen 62 ans présentant une peau mature et 20 majoritairement stressées ; - groupe 2 : 17 volontaires d'âge moyen 62 ans présentant une peau mature et majoritairement non stressées.5 groupe 3 : 16 volontaires d'âge moyen 46 ans présentant une peau jeune et majoritairement non stressées Dans un second, cette étude permet d'évaluer l'effet anti-stress/anti-âge d'un principe actif issu de Panicum miliaceum sur le groupe 1. Des empreintes en polymère siliconé sont réalisées au niveau de la glabelle. Ces empreintes sont observées et analysées à l'aide d'un prof ilomètre muni d'un système d'analyse d'image et d'un logiciel adapté S.I.A. (Software Image Analysis). Le paramètre surface totale ridée (mm 2) est retenu pour caractériser le microrelief de la glabelle. a/ Modélisation : comparaison du microrelief cutané de deux groupes non stressées mais d'âge différent L'objectif de cette étude est d'évaluer l'impact de l'âge sur le microrelief de la glabelle. Le tableau suivant présente les résultats correspondant au paramètre de surface totale ridée (mm 2) de deux groupes peaux non stressées. Surface totale ridée (mm 2 ) Groupe 2 : peaux matures non stressées 5,45 Groupe 3 : peaux jeunes non stressées 3,72 Ces résultats montrent qu'il existe une différence significative sur le paramètre surface totale ridée caractéristique du microrelief de la glabelle entre deux groupes non stressés mais ayant en moyenne 15 ans d'écart d'âge. b/ Modélisation : comparaison du microrelief cutané de deux groupes de niveau de stress et d'âge différents L'objectif de cette étude est d'évaluer l'impact de l'âge et du stress sur le microrelief de la glabelle. Le tableau suivant présente les résultats correspondants au paramètre 25 de surface totale ridée (mm 2) de chacun des deux groupes. Surface totale ridée (mm 2 ) Groupe 1 : peaux matures stressées 7,68 Groupe 3 : peaux jeunes non stressées 3,72 Ces résultats montrent qu'il existe une différence significative sur le paramètre surface totale ridée caractéristique du microrelief de la glabelle entre le groupe peaux matures stressées et le groupe peaux jeunes non stressées. Ces deux modélisations permettent de confirmer que le stress émotionnel accentue l'impact du vieillissement sur le microrelief de la glabelle. c/Evaluation de l'effet du principe actif issu de Panicum miliaceum sur le groupe mature et stressé L'évaluation de microrelief cutané a également été réalisée avant et après 42 jours d'applications biquotidiennes d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion ou du placebo. Les résultats sont présentés dans le tableau suivant : Surface totale ridée (mm 2 ) JO J42 Groupe 1 : peaux matures stressées 7,68 5,79 Traité par le principe actif 3% Groupe 3 : peaux jeunes non stressées 3,72 4,32 Traité par le placebo bans les conditions de cette étude, après 42 jours d'applications biquotidiennes sur le groupe peaux matures et stressées, le principe actif issu de Panicum miliaceum diminue significativement la surface totale ridée de 25%. Cette diminution permet de revenir à un aspect du microrelief proche de celui du groupe non stressé. REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique d'un principe actif issu de Panicum miliaceum, présentant une teneur en oligopeptides d'au moins 25% du poids total de l'extrait sec, en tant que principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge dans une composition cosmétique. 2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, pour corriger les modifications de l'expression des marqueurs biologiques et des paramètres cutanés induits par un stress environnemental ou émotionnel. 3. Utilisation cosmétique la revendication 1 ou 2, pour lutter contre le vieillissement prématuré cutané induit par un stress. 4. Utilisation cosmétique selon l'une des précédentes revendications, pour améliorer l'éclat de la peau, illuminer le teint et/ou diminuer les rides. 5. Utilisation cosmétique selon l'une des précédentes revendications, pour stimuler l'expression du collagène V, du perlecan, de l'HAS-2, de la Protectine et/ou de l'HIF-1a. 6. Principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge, obtenu à partir de Panicum miliaceum, présentant une teneur en oligopeptides d'au moins 25% du poids total de l'extrait sec. 7. Principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'il présente une teneur en oligopeptides d'au moins 40% du poids total de l'extrait sec. 8. Principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-stress, selon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de graines germées de Panicum miliaceum. 9. Principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge, selon l'une des revendications 6 à 8, caractérisé en ce qu'il présente un taux de matières sèches compris entre 10 et 130 g/I. 10. Principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge selon l'une des revendications 6 à 9, caractérisé en ce qu'il présente un pH compris entre 3 et 6. 11. Principe actif cosmétique anti-stress et/ou anti-âge selon l'une des revendications 6 à 10, caractérisé en ce qu'il présente une teneur en protéines totales comprise entre 4 et 60 g/I. 12. Procédé d'obtention d'un principe actif cosmétique anti-stress et/ou 10 anti-âge selon l'une des revendications 6 à 11, comprenant au moins une étape d'hydrolyse enzymatique de graines de Panicum miliaceum. 13. Procédé d'obtention selon la revendication 12, comprenant les étapes suivantes : - solubilisation de poudre de graines germées de Panicum miliaceum 15 dans une solution aqueuse, - hydrolyse enzymatique afin d'obtenir des oligopeptides, - séparation des phases soluble et insoluble, - inactivation des enzymes utilisées pour l'hydrolyse par traitement thermique, et 20 - filtration(s) et concentration. 18. Composition cosmétique anti-stress et/ou anti-age, contenant entre 0,01% et 20% en poids d'au moins un principe actif obtenu à partir de Panicum miliaceum selon l'une des revendications 6 à 11. 19. Procédé cosmétique pour lutter contre les effets du stress sur la 25 peau, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition selon la revendication14.