FR 2943534 A1 20101001 FR 0951981 A 20090330 UTILISATION COSMETIQUE ANTI-RADICALAIRE D'UN PRINCIPE ACTIF ISSU DE MYRTUS COMMUNIS, NOTAMMENT DE TANINS HYDROLYSABLES D'UN PRINCIPE ACTIF ISSU DE MYRTUS COMMUNIS La présente invention se rapporte à l'utilisation d'un principe actif issu de Myrtus communis pour un effet cosmétique anti-radicalaire, notamment de tanins hydrolysables d'un principe actif issu de Myrtus communis, ainsi qu'à un procédé cosmétique de soin destiné à protéger la peau humaine des effets des radicaux libres et à prévenir le vieillissement induit. L'invention se rapporte également à un principe actif anti-radicalaire particulier issu de Myrtus communis, à un procédé d'obtention ainsi qu'à des compositions cosmétiques refermant cet actif. La peau est en relation constante avec le milieu extérieur et subit plus que les autres tissus les agressions de son environnement. Ces agressions permanentes conduisent au vieillissement cutané accéléré via la production d'espèces radicalaires présentant des effets délétères. Les radicaux libres, représentés principalement par l'ion superoxyde, le radical hydroxyl, le singulet d'oxygène et le peroxyde d'hydrogène, possèdent un électron libre. La présence de cet électron célibataire confère à ces molécules une grande instabilité qui les rendent très réactives et susceptibles d'agir et d'altérer différents composants cellulaires. Les cellules cutanées possèdent un ensemble de systèmes naturels de défense, systèmes anti-oxydants enzymatiques et chimiques, qui permettent aux cellules de maintenir l'équilibre primordial entre les espèces pro- et anti-oxydantes. Toutefois, en cas de surexposition de la peau à des agents stressants extrinsèques (exposition prolongée au soleil, traitements chimiques répétés, etc.), des quantités excessives de radicaux libres sont générés et submergent les systèmes naturels de défense cutanés qui ne peuvent plus canaliser ce flux radicalaire important. Les radicaux libres provoquent alors des dégâts cellulaires non négligeables comme l'oxydation des protéines conduisant à la perte de leur fonctionnalité, l'altération des acides nucléiques par formation de dimères de pyridine ou de cassures, ou encore la peroxydation des lipides conduisant à l'augmentation de la perméabilité membranaire. Les conséquences majeures de ce stress oxydatif non maîtrisé et le cumul des dégâts cellulaires occasionnés, conduisent à l'altération de la structure cutanée associée à son vieillissement accéléré. C'est pourquoi l'objectif de la présente invention est de fournir une solution cosmétique permettant de limiter ces phénomènes cutanés induits par le stress 15 oxydatif et de détoxifier la peau agressée. Pour y répondre, l'invention propose d'utiliser au moins un principe actif issu de Myrtus communis, en tant qu'agent cosmétique anti-radicalaire dans une composition cosmétique, en particulier un principe actif issu de Myrtus communis comprenant des polyphénols, notamment des tanins hydrolysables. 20 En effet, de façon surprenante, les principes actifs issus de Myrtus communis comprenant notamment des tanins hydrolysables, présentent des propriétés remarquables qui permettent de prévenir et/ou de lutter contre les altérations cutanées induites par le stress oxydatif. Un tel actif se comporte comme un chélateur de métaux et présente une activité antiradicalaire. Avantageusement, 25 son utilisation permet de renforcer la protection de la peau en stimulant les défenses naturelles anti-oxydantes et en neutralisant les radicaux libres chimioinduits. La présente invention a ainsi pour objet l'utilisation cosmétique d'un principe actif issu de Myrtus communis pour protéger la peau humaine des effets des radicaux libres, notamment pour prévenir le vieillissement de la peau provoqué par les radicaux libres chimio-induits. L'invention a également pour objet un procédé cosmétique de soin de la peau, destiné à la protéger des effets des radicaux libres, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un principe actif issu de Myrtus communis. L'invention vise également un principe actif cosmétique anti-radicalaire, obtenu à partir de Myrtus communis, comprenant des composés phénoliques, notamment des tanins hydrolysables, ainsi qu'un procédé d'obtention de ce principe actif et des compositions cosmétiques incluant au moins un tel principe actif. Les principes actifs issus de Myrtus communis selon l'invention peuvent être obtenus par un procédé comprenant une étape de solubilisation suivie d'étapes de traitements mécaniques de façon à obtenir un actif comprenant des composés phénoliques. De manière préférentielle, les compositions cosmétiques selon l'invention contiennent 0,01 à 20% d'un actif issu de Myrtus communis comprenant des polyphénols, notamment des tanins hydrolysables. L'administration d'une composition contenant un principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention est effectuée par voie topique. Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toutes formes permettant l'application par voie topique. La présente invention est maintenant décrite en détail. UTILISATION L'invention vise donc l'utilisation cosmétique d'un principe actif issu de Myrtus communis pour protéger la peau humaine des effets des radicaux libres, en particulier pour prévenir le vieillissement de la peau provoqué par les radicaux libres. Selon un mode de réalisation, l'invention vise l'utilisation d'au moins un principe actif issu de Myrtus communis présentant une teneur d'au moins 7% en polyphénols, préférentiellement un principe actif issu de Myrtus communis présentant une teneur en composés phénoliques comprise entre 7% et 25%. Encore plus préférentiellement, l'invention vise l'utilisation en tant qu'agent cosmétique anti-radicalaire, d'au moins un principe actif issu de Myrtus communis comprenant des composés phénoliques représentés par 65% de tanins hydrolysables. Les tanins sont des substances polyphénoliques, substances d'origine organique que l'on trouve pratiquement dans tous les végétaux, et dans toutes leurs parties (écorces, racines, feuilles, etc.). Les tanins peuvent être divisés en deux grandes familles : les tanins hydrolysables ou gallotanins et les tanins condensés ou tanins catéchiques. Les tanins hydrolysables sont des esters de sucre ou d'un polyol apparenté, et d'un nombre variable de molécules d'acide phénolique. Le sucre est très généralement le glucose, et l'acide phénolique est soit l'acide gallique, soit l'acide hexahydroxydiphénique (HHbP) et ses dérivés d'oxydation (déhydrohexahydroxydiphénique ou bHHbP) dans le cas des tanins classiquement dénommés ellagiques. Un actif issu de Myrtus communis peut être utilisé, comme agent cosmétique anti-radicalaire, pour protéger les cellules de la peau des effets des radicaux libres. La présence en quantité suffisante de composés phénoliques, notamment sous forme de tanins hydrolysables, dans l'actif de Myrtus communis, permet en particulier de conférer l'activité anti-radicalaire. Selon un premier aspect de l'invention, un actif de Myrtus communis est capable de protéger les cellules cutanées contre les radicaux libres en piégeant leur électron célibataire, neutralisant ainsi leur action néfaste. Son utilisation permet en particulier de protéger les kératinocytes et les fibroblastes humains vis-à-vis de radicaux libres induits par une agression chimique. Selon un autre aspect spécifique de l'invention, un actif de Myrtus communis est 5 capable d'agir au niveau des cellules de la peau en se comportant comme un chélateur de métaux, notamment un chélateur du fer. Les ions fer sont des polluants environnementaux qui peuvent être dangereux pour l'intégrité des cellules car ils sont impliqués dans la formation de radicaux libres qui conduisent à des dommages au niveau de la double hélice d'ADN ou 10 encore qui engendrent des réactions de peroxydation lipidique. Des expositions au soleil augmentent le niveau de fer libre au niveau de la peau, promouvant ainsi la formation de radicaux hydroxyles. Avantageusement un actif issu de Myrtus communis selon l'invention, en présentant une activité chélatrice vis-à-vis des métaux, en particulier vis-à-vis 15 du fer, permet ainsi de limiter la formation de radicaux libres dans les cellules de la peau et de prévenir les dommages cellulaires qui en découlent. Selon un troisième aspect, un actif de Myrtus communis peut être utilisé pour stimuler les systèmes de défense naturels anti-oxydants. Les cellules de la peau sont dotées de systèmes naturels de défense permettant 20 de préserver l'équilibre entre la synthèse de molécules anti-oxydantes et la production de radicaux libres induite par des processus physiologiques ou lors de l'exposition exagérée de l'organisme à des agents exogènes stressants, comme les radiations UV, l'exposition à des produits chimiques, les stress thermiques, la pollution, etc. Les systèmes de défense anti-oxydants sont classés en trois 25 catégories : le piégeage d'ions métalliques, le système de protection enzymatique, assuré par plusieurs enzymes dont la superoxyde dismutase, la glutathion peroxydase et la catalase, et le système de défense non enzymatique, qui fait intervenir des molécules telles que la vitamine E, la vitamine C, les caroténoïdes ou encore le glutathion. Le glutathion est un tri-peptide capable de réagir avec différents radicaux comme le radical hydroxyle ou l'oxygène singulet. Il est également impliqué dans l'élimination du peroxyde d'hydrogène en tant que cofacteur de l'enzyme glutathion-peroxydase. L'essentiel de son activité provient du fait qu'il est un excellent réducteur donneur d'oxygène. Avantageusement un actif issu de Myrtus communis selon l'invention est capable de stimuler les systèmes de défense naturelle anti-oxydante. En particulier il est capable de stimuler les systèmes de défense non enzymatique et permet de récupérer le taux de glutathion cellulaire. Selon l'invention, un actif de Myrtus communis peut donc être utilisé pour protéger les cellules cutanées des effets néfastes du stress oxydatif, en particulier prévenir le vieillissement induit par les radicaux libres, notamment - en piégeant leur électron célibataire, neutralisant ainsi leur action néfaste pour la peau, - en limitant la formation des lipoperoxydes cutanés, - en agissant comme un chélateur des métaux, en particulier du fer, et/ou - en stimulant les systèmes de défense naturels anti-oxydants de la peau. PRINCIPE ACTIF L'invention concerne également un principe actif cosmétique anti-radicalaire, obtenu à partir de Myrtus communis, présentant une teneur en polyphénols d'au moins 7% du poids total de la matière sèche, majoritairement sous forme de tanins hydrolysables. Préférentiellement le principe actif comprend une teneur en polyphénols 25 comprise entre 7% et 25% du poids total de la matière sèche. Encore plus préférentiellement, au moins 65% des polyphénols présents dans le principe actif sont sous forme de tanins hydrolysables. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le principe actif est obtenu à partir de feuilles de Myrtus communis. Le principe actif selon l'invention est soluble en milieu aqueux. Il est également soluble en milieu hydroalcoolique jusqu'à un taux 50/50 éthanol/eau. Il peut supporter des températures allant jusqu'à 80°C pendant au moins 2 heures. Le principe actif selon l'invention se présente préférentiellement sous forme liquide. Il peut être défini par les caractéristiques exposées ci-après. Matières sèches : Le taux de matières sèches d'un principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention, mesuré par passage à l'étuve à 105°C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant, est compris entre 10 et 100 g/I, préférentiellement entre 20 et 35 g/I. Mesure du pH : Le pH mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante 15 conduit à des valeurs comprises entre 3,0 et 6,0, préférentiellement entre 3,0 et 4,0. Dosage des composés phénoliques Les composés phénoliques forment en présence de ferricyanure de potassium des composés colorés, détectables à 715nm. L'intensité de 20 coloration est proportionnelle à la quantité de composés phénoliques. Les lectures sont réalisées à partir d'une gamme étalon d'acide gallique allant de 40 à 120mg/I. La teneur en composés phénoliques est comprise entre 1,25 g/I et 14,3 g/I, préférentiellement entre 2,5 et 5,0 g/I. 25 La teneur en composés phénoliques peut aussi être exprimée en pourcentage par rapport aux matières sèches. L'actif cosmétique selon l'invention issu de Myrtus communis contient au moins 7% de composés phénoliques par rapport aux matières sèches totales, préférentiellement entre 7% et 25%. Caractérisation des composés phénoliques La caractérisation et la quantification des composés phénoliques du principe actif selon l'invention peuvent être réalisées par HPLC (High Performance Liquid Chromatography). Le chromatogramme du principe actif selon l'invention montre la présence de composés hydroxybenzoïques, de flavonols et de tanins hydrolysables, les proportions étant sensiblement de l'ordre des valeurs données dans le tableau suivant : Famille de polyphénols Concentration identifiée Tanins hydrolysables 65 n 77% Flavonols 10 n 15% Composés 13 n 20% Hydroxybenzoïques Fraction active Afin de déterminer la fraction active, on élimine les polyphénols de l'actif issu de Myrtus communis selon l'invention par absorption sur de la polyvinylpolypyrolidone (PVPP). On compare l'activité anti-radicalaire de cette fraction sans polyphénol, à l'activité anti-radicalaire d'un actif issu de Myrtus communis non traité au PVPP, selon la méthode au bPPH (diphenylpicrylhydrazyl hydrate). Le bPPH est un radical libre, absorbant dans le violet à 517nm. Un produit anti-radicalaire entraîne une disparition de la coloration violette. La solution DPPH utilisée pour l'étude est une solution préparée à partir de 4,8mg de DPPH dissous dans du méthanol. On utilise en outre un témoin contrôle, connu pour son activité antiradicalaire : l'épigallocatéchine gallate (EGCG) à 0,12% dans de l'eau distillée. Le protocole expérimental consiste à ajouter dans des tubes à hémolyse la solution DPPH et la solution diluée du produit à tester (principe actif de Myrtus communis à 1%, avec ou sans PVPP, ou bien EGCG) ou de l'eau distillée (pour le blanc). On agite ensuite la solution et on attend 20 minutes pour lire les densités optiques (DO) à 517 nm contre l'air. Les résultats sont présentés dans le tableau suivant : Activité anti-radicalaire (%) Témoin positif (épigallocatéchine galiote 0,12%) 82 Actif issu de Myrtus communis 1% 87 Actif issu de Myrtus communis 1% + PVPP 0,7 La fraction active du principe actif issu de Myrtus communis selon 15 l'invention est une fraction polyphénolique, composée majoritairement de tanins hydrolysables. PROCEDE D'OBTENTION La présente invention vise aussi un procédé d'obtention d'un principe actif issu de Myrtus communis présentant une teneur en polyphénols d'au moins 7%. 20 Il s'agit d'un procédé qui permet de concentrer l'actif en terme de polyphénols. Il comprend au moins les étapes suivantes : - solubilisation aqueuse de poudre de feuilles de Myrtus communis, - séparation des phases soluble et insoluble, - traitement thermique, - filtration(s) pour récupérer une fraction active comprenant des polyphénols dont majoritairement des tanins hydrolysables, - désodorisation de la fraction active par absorption sur adjuvant - filtration et filtration stérilisante. Ces étapes sont usuelles dans le domaine des extractions d'actifs à partir de plantes, et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales. L'actif obtenu se présente sous la forme d'une solution aqueuse liquide limpide de couleur ambré. COMPOSITIONS COSMETIQUES La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant au moins un principe actif issu de Myrtus communis présentant une teneur en polyphénol d'au moins 7%, dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d'émulsions huiledans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersion, gel aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. Ces compositions contiennent entre 0,01 et 20% en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de Myrtus communis selon la présente invention, 25 préférentiellement entre 1% et 3%. Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur tels que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Ce milieu contient généralement de l'eau. Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ; - les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba ; - les élastomères de silicone, - les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères ; - les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires ; - les épaississants et/ou gélifiants, - les humectants, tels que les polyols comme la glycérine ; - les filtres organiques, - les filtres inorganiques, - les colorants, les conservateurs, les charges, - les tenseurs, - les séquestrants, - les parfums, - et leurs mélanges, sans que cette liste ne soit limitative. Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingrédient Dictionary and Handbook publié par le Personal Gare Product Council). Ces compositions sont notamment destinées au soin, au traitement, à la protection de la peau humaine contre les effets des radicaux libres, en particulier pour prévenir le vieillissement cutané prématuré induit par un stress oxydatif. 10 15 20 25 L'invention vise à cet effet un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à protéger la peau des effets des radicaux libres, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un principe actif issu de Myrtus communis, en particulier une composition renfermant entre 0,01 et 20% en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de Myrtus communis selon la présente invention. On peut citer des formulations ayant montré une stabilité physique incluant 5% d'un principe actif selon l'invention. La stabilité est caractérisée par une absence absence de crémage et une absence de - Glycérol : 10,0% - Propylène glycol : 10,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Myrtus communis selon l'invention: 5,0% - Eau : 73,5% Gel opaque : - Sépigel 305: 3,0% - Lanol 99 : 12,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Myrtus communis selon l'invention: 5,0% - Eau : 79,0% Gel émulsionné : - Montanov 202 : 3,0% - Isopropyl palmitate : 10,0% - Sepigel 305 : 2,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Myrtus communis selon l'invention: 5,0% - Eau : 79,0% Emulsion non ionique : - Montane 60 : 2,0% de précipitation de l'extrait, une déphasage. Gel limpide : - Carbopol : 0,5% avec Triéthanolamine : qsp pl-I=6,5 - Montanox 60 : 4,0% - Isopropyl myristate : 8,0% - Paraffin wax 130/135 : 3,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Myrtus communis selon l'invention: 5,0% - Eau : 77,0% Emulsion anionique : - Acide stéarique : 7,0% Triethanolamine qsp pH=8 - Ritaphyl ICS : 20,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Myrtus communis selon l'invention: 5,0% - Eau : 67,0% Emulsion cationique : - Quaternium-82 : 5,0% - Alcool cétylique : 1,0% - Gemseal 60 : 8,0% - Alcool cétéarylique : 1,0% - PEG 100 stéarate : 1,0% - Conservateur : 1,0% - Actif issu de Myrtus communis selon l'invention: 5,0% - Eau : 78,0% Des tests ont montré la compatibilité du principe actif avec les matières premières utilisées en cosmétique : épaississants, émulsionnants, solvants. On peut également citer des exemples de compositions cosmétiques antiradicalaires, incluant le principe actif selon l'invention. Les exemples de compositions qui suivent sont obtenus par mélange des différents composants. Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée. Exemple de crème de jour anti-âge La formulation est la suivante A. Eau QSP 100% Glycérol 3% B. Cire de Lanol CTO (Seppic) 3% Montanov 68 (Seppic) 4% IPM (Rita) 6% DUB pulpie (Stéarinerie Dubois) 2% Arlamol (Noveon) 1% C. Conservateur 1% Principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention 3% Cette crème a un pH de 5. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique, - émulsionner B dans A sous émulseur, - ajouter C dans l'ordre à 40°C, et homogénéiser, - additionner D, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que la crème soit uniforme, et - laisser sous agitation jusqu'à refroidissement à 30°C. Exemple de crème hydratante anti-rides La formulation est la suivante : A. Eau QSP 100% Glycérol 10% B. Sensanov WR (Seppic) 3% AAB2 (Aiglon) 5% Sophim MC30 (Sophim) 5% Phoenate GC7 (Phoenix chemical) 5% DUB BA (Stéarinerie Dubois) 9% DUB PTCC (Stéarinerie Dubois) 3% Phytowax Olive 14L48 (Sophim) 4% C. Conservateur 1% Principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention 3% D. Talc Superior DOC (Luzenac) 2% Cette crème a un pH de 4,5. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A et B à 80°C, - émulsionner B dans A sous agitation, - ajouter C dans l'ordre à 40°C, et homogénéiser, - additionner D, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que l'émulsion soit uniforme, et 15 - laisser refroidir jusqu'à 30°C. Exemple de sérum BIO La formulation est la suivante : A. Eau QSP 100% Glycérine Bio (IES LABO) 2% 20 Blanose 7M31CF (Degussa) 3% B. Tocophérol Natural (A&E Connock) 1% Conservateur 1% Principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention 3% Ce sérum a un pH de 6,3. 25 Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - mélanger A sous agitation mécanique à 40°C, - ajouter B dans l'ordre, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que le gel soit uniforme. Exemple de gel émulsionné BIO La formulation est la suivante : A. Eau QSP 100% Glycérine Bio (IES LABO) 3% Satialgine U5551 1% B. DUB MCT5545 (Stéarinerie Dubois) 4% DUB Zeonate (Stéarinerie Dubois) 2,5% DUB pulpie (Stéarinerie Dubois) 1% Phytosqualane (Sophim) 2% Stérol CC/595 1% C. Conservateur 1% Principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention 3% Ce gel a un pH de 4,5. Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A et B à 80°C, - émulsionner B dans A sous agitation, - ajouter C dans l'ordre à 40°C, et homogénéiser, - continuer l'homogénéisation jusqu'à ce que le gel émulsionné soit uniforme, et - laisser sous agitation jusqu'à refroidissement à 30°C. EVALUATION DE L'EFFET D'UN PRINCIPE ACTIF ISSU DE MYRTUS COMMUNIS SELON L'INVENTION Le principe actif utilisé pour les études qui suivent est issu de Myrtus communis 25 et présente les caractéristiques suivantes : - solution aqueuse - aspect : liquide limpide - couleur : ambré - matières sèches : 29,1 g/I - polyphénols : 4,9 g/I soit 16,8% en poids de matière sèche dont 71,5% de tanins hydrolysables - pH:3,2 Cet exemple n'est bien entendu pas limitatif. La formulation testée dans les études sur volontaires est : Cetearyl ethylhaxanoate (Lanol 1688, Seppic) 10% Arachidyl alcool / Behenyl Alcool / arachidyl glucoside (Montanov 202, Seppic) 3% Principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention 3% Isononyl isononanoate (Lanol 99, Seppic) 2% Glycol palmitate (Lanol P, Seppic) 2% Polyacrylamide / C 13-14 isoparaff in / laureth-7 (Seppigel 305, Seppic) 2% Conservateur 1% Eau Qsp 100% 1/ Evaluation de l'effet anti-radicalaire in tubo Cette première étude a pour objectif d'évaluer l'activité anti-radicalaire d'un 10 actif issu de Myrtus communis, selon la méthode au DPPH. Cette méthode est décrite dans la partie relative à la fraction active. Le protocole expérimental de d'étude est décrit en suivant. On ajoute dans des tubes à hémolyse de la solution DPPH et on ajoute la solution diluée du produit à testé (principe actif de Myrtus communis selon l'invention 15 à 0,25%, 0,5% ou 1%, ou EGCG) ou de l'eau distillée (pour le blanc). On agite et on attend 20 minutes avant de lire les densités optiques (DO) à 517nm contre l'air. Les résultats obtenus sont présentés en pourcentage d'activité anti-radicalaire, dans le tableau ci-dessous : Activité anti-radicalaire (%) Témoin EGCG 0,12% 82 Actif issu de Myrtus communis 0,25% 35 Actif issu de Myrtus communis 0,5% 64 Actif issu de Myrtus communis 1% 87 Ces résultats montrent bien que l'actif de Myrtus communis selon l'invention présente une activité anti-radicalaire. Cet effet est dose dépendant. Utilisé à 1%, il présente une activité anti-radicalaire de 87%. 2/ Evaluation de l'activité chélatrice Le but de cette étude est d'évaluer le pouvoir chélateur d'un actif issu de Myrtus communis selon l'invention, vis-à-vis des ions métalliques comme le fer qui est, par l'intermédiaire des ions Fe2+, à l'origine de la formation de radicaux libres et participe à la peroxydation des lipides. Le principe de l'étude repose sur la quantification du taux de fer libre par dosage spectrophotométrique. La ferrozine, dérivé sulfoné de la diphényltriazine, forme un complexe magenta hydrosoluble avec le fer dont l'absorbance maximale se situe à 560nm. Une quantité d'ions ferreux est ajoutée à différentes concentrations de principe actif issu de Myrtus communis. Les ions ferreux non chélatés sont dosés à l'aide de la réaction à la ferrozine. La différence entre la quantité de fer non fixé et la quantité totale ajoutée correspond à la quantité de fer chélatée. Les solutions utilisées pour cette étude sont les suivantes - tampon : TRIZMA 0,5 mol/I - étalon de fer : chlorure ferreux dans une solution d'hydroxylamine - réaction de coloration du fer (ferrozine 0,85% (p/v) dans une solution d'hydroxylamine), - principe actif : actif de Myrtus communis à 0,25%, 0,5% et 1%, et - témoin contrôle : EbTA à lg/l dans l'eau distillée. Le protocole consiste à réaliser dans des cuves les mélanges présentés dans le tableau suivant : Blanc Etalon Témoin Principe actif Tampon X X X X Eau distillée X X - / Principe actif ou - - X X Témoin Etalon Fer - X X X La lecture des mélanges est réalisée contre le blanc. On additionne ensuite le réactif de coloration à chaque mélange. Après 10 minutes d'attente les mélanges sont lus à nouveau contre le blanc. Les résultats sont calculés en pourcentages d'activité chélatrice en appliquant la 10 formule suivante et sont présentés ci-dessous : = 100 ù ((~DOprincipe actif / /.bOétalon) X 100) AbOprincipe actif = Al principe actif - A2 principe actif AbOétalon= Al étalon - A2 étalon Activité chélatrice fer (%) Solution EbTA 2% 28 Actif issu de Myrtus communis 0,25% 37 Actif issu de Myrtus communis 0,5% 66 Actif issu de Myrtus communis 1% 93 15 On constate que l'actif de Myrtus communis selon l'invention présente une activité chélatrice vis-à-vis du fer. Utilisé à 1%, il permet de chélater 93% du fer présent initialement dans une solution. 3/ Evaluation de l'effet protecteur après agression radicalaire chimio-induite L'objectif de cette étude est d'évaluer in vitro l'effet protecteur des cellules de la peau d'un actif issu de Myrtus communis, vis-à-vis d'une agression radicalaire chimio-induite. Afin de déterminer cette activité protectrice, l'étude consiste à effectuer des tests de viabilité cellulaire après avoir soumis artificiellement des cultures cellulaires de kératinocytes ou de fibroblastes humains à un stress provoqué par un agent chimique hypoxanthine-xanthine oxydase (HX-XO). Les radicaux libres formés lors de ce stress sont responsables de l'augmentation de la mort cellulaire. L'activité anti-oxydante du produit est déterminée par mesure de la viabilité cellulaire. Le protocole opératoire de l'étude est le suivant. A JO, des kératinocytes ou des fibroblastes humains sont ensemencés. A J2 les cultures cellulaires sont traitées en présence ou non de l'actif issu de Myrtus communis à 0,25%, 0,5% et 1% et sont agressées chimiquement par une solution hypoxanthine - xanthine oxydase. Après 2 heures, l'effet de l'actif vis-à-vis des radicaux libres chimio-induits est évalué par mesure spectrophotométrique de la viabilité cellulaire réalisée par la méthode au M.T.T. (3-(4,5-diméthyl thiazol-2-yl)-2,5diphényl tetrazolium bromide) à 540 nm. Les résultats sont exprimés en pourcentage de protection, calculé par application de la formule suivante _ ((toxicité témoin - toxicité actif)/toxicité témoin) x 100 avec toxicité témoin = (DOtémoin non agressé - DOtémoin agressé )/ DOtémoin non agressé toxicité actif = (DOactif non agressé ù D0actif agressé )/ D0actif non agressé Les résultats obtenus sont présentés ci-dessous : Protection cellulaire Protection cellulaire (%) sur kératinocytes (%) sur fibroblastes humains humains Témoin non agressé 100 100 Témoin agressé HX-XO 0 0 Actif issu de Myrtus communis 0,25% 31 26 + HX-XO Actif issu de Myrtus communis 0,5% 54 34 + HX-XO Actif issu de Myrtus communis 1% 70 60 + HX-XO On constate que l'actif de Myrtus communis selon l'invention protège les kératinocytes humains et les fibroblastes humains vis-à-vis des radicaux libres induits par un stress chimio-induit. Utilisé à 1%, il permet de protéger les kératinocytes humains de 70% et les fibroblastes humains de 60%. 4/ Evaluation de l'effet sur les défenses naturelles anti-oxydantes Cette étude a pour but d'évaluer l'effet d'un principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention sur les défenses naturelles anti-oxydantes de la peau, en évaluant sa capacité à préserver le taux de glutathion lorsque les cellules sont soumises à un agent chimique hypoxanthine-xanthine oxydase. Le glutathion est une molécule essentielle intervenant dans le système de protection des cellules. Il participe, en tant que co-facteur de la glutathionperoxydase, à la transformation du peroxyde d'hydrogène en eau et en oxygène. Le protocole opératoire de l'étude est le suivant. A JO, des fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J2 les cultures cellulaires sont traitées en présence ou non de l'actif selon l'invention à 0,25%, 0,5% et 1%, puis sont agressées chimiquement par une solution hypoxanthine - xanthine oxydase. Après 2 heures, le dosage du taux de glutathion est réalisé à l'aide du kit 5 glutathione assay kit II (354103 Calbiochem), et le dosage des protéines totales est réalisé à l'aide du kit BCA (BCA1 -SIGMA). Les résultats obtenus sont présentés ci-dessous Taux de glutathion (pmol/pg de protéines) Fibroblastes Fibroblastes normaux agressés Témoin 17 3 Actif issu de Myrtus communis 0,25% 18 6 Actif issu de Myrtus communis 0,5% 19 12 Actif issu de Myrtus communis 1% 25 18 Ces résultats montrent que l'actif de Myrtus communis selon l'invention permet de stimuler les défenses naturelles anti-oxydantes cutanée, en particulier une 10 récupération du taux de glutathion cellulaire de cellules soumises à une agression chimique. Cet effet est dose dépendant. Utilisé à 1%, il permet une récupération de 66% de taux de glutathion cellulaire. 5/ Effet anti-lipoperoxydant 15 Cette étude a pour objectif d'évaluer in vivo l'efficacité anti-lipoperoxydante après un prétraitement biquotidien de 14 jours du principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion contre placebo au niveau des avant-bras. En effet, les lipoperoxydes trouvent leur origine dans le stress oxydatif qui engendre un déséquilibre entre pro-oxydants et anti-oxydants au niveau 20 cellulaire. Ce déséquilibre peut alors conduire à des altérations moléculaires telles que la peroxydation lipidique responsable en partie du vieillissement prématuré des cellules cutanées. L'étude est réalisée sur 19 volontaires de sexe féminin. L'effet antilipoperoxydant de l'actif de Myrtus communis selon l'invention est évalué par dosage des lipoperoxydes formés après induction d'une micro-inflammation engendrée par une application locale de nicotinate de méthyle à l'origine de la formation de lipoperoxydes. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau ci-dessous Taux de lipoperoxydes Variation / TO(%) Variation/Placebo(% ) Zone placebo +22,3% Zone Actif issu de Myrtus communis +2,6% -16,2% 3% On constate que dans les conditions de cette étude, après un prétraitement biquotidien de 14 jours, en comparaison à un placebo, le principe actif issu de Myrtus communis selon l'invention formulé à 3% en émulsion, limite la formation de lipoperoxydes induits par l'application d'un patch de nicotinate de méthyle de 16,2%. Ces résultats montrent bien que l'utilisation d'un actif selon l'invention permet de limiter l'impact d'un stress oxydatif, tel que celui induit par l'application de nicotinate de méthyle. REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique d'un principe actif issu de Myrtus communis pour protéger la peau humaine des effets des radicaux libres. 2. Utilisation cosmétique d'un principe actif issu de Myrtus communis selon la revendication 1, pour prévenir le vieillissement de la peau provoqué par les radicaux libres. 3. Utilisation cosmétique selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que le principe actif limite la formation des lipoperoxydes cutanés. 4. Utilisation cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que le principe actif stimule les défenses naturelles antioxydantes des cellules cutanées. 5. Utilisation cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que le principe actif se comporte comme un chélateur de métaux. 6. Utilisation cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que le principe actif est un principe actif issu de Myrtus communis présentant une teneur en polyphénols d'au moins 7% du poids total de la matière sèche. 7. Utilisation cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce que le principe actif est un principe actif issu de Myrtus communis comprenant des polyphénols dont au moins 65% sont présents sous forme de tanins hydrolysables. 8. Principe actif cosmétique anti-radicalaire, obtenu à partir de Myrtus communis, caractérisé en ce qu'il présente une teneur en polyphénols d'aumoins 7% du poids total de la matière sèche, majoritairement sous forme de tanins hydrolysables. 9. Principe actif cosmétique anti-radicalaire selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il présente une teneur en polyphénols comprise entre 7% 5 et 25% du poids total de la matière sèche. 10. Principe actif cosmétique anti-radicalaire selon la revendication 8 ou 9, caractérisé en ce qu'au moins 65% des polyphénols sont sous forme de tanins hydrolysables. 11. Principe actif cosmétique anti-radicalaire selon l'une des 10 revendications 8 à 10, caractérisé en en ce qu'il se présente sous forme liquide avec les caractéristiques suivantes - un taux de matières sèches compris entre 20 et 35 g/I, - une teneur en polyphénols totaux compris entre 2,5 et 5,0 g/I, et - un pH compris entre 3,0 et 4,0. 15 12. Principe actif cosmétique anti-radicalaire selon l'une des revendications 8 à 11, caractérisé en en ce qu'il est issu de feuilles de Myrtus communis. 13. Procédé d'obtention d'un principe actif cosmétique anti-radicalaire selon l'une des revendications 8 à 12, comprenant les étapes suivantes : 20 - solubilisation aqueuse de poudre de feuilles de Myrtus communis, - séparation des phases soluble et insoluble, - traitement thermique, - fitration(s) pour récupérer une fraction active comprenant des polyphénols dont majoritairement des tanins hydrolysables, 25 - désodorisation de la fraction active par absorption sur adjuvant, - filtration et filtration stérilisante. 14. Composition cosmétique contenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, entre 0,01% et 20% en poids d'au moins un principe actif selon l'une des revendications 8 à 12. 15. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à protéger la peau des effets des radicaux libres, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un principe actif issu de Myrtus communis. 16. Procédé cosmétique selon la revendication 15, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition selon la revendication 14.