FR 2928518 A1 20090918 FR 0851637 A 20080313 NOUVELLE COMPOSITION POUR LA CONSERVATION DES TISSUS La présente invention a pour objet une nouvelle composition destinée à 5 la conservation des tissus, notamment pour la conservation des pièces anatomiques ou pour la réalisation de soins de thanatopraxie. La conservation d'échantillons biologiques et l'embaumement des corps humains ou animaux ont été historiquement effectués en utilisant des fluides contenant des quantités significatives de formaldéhyde. io Cependant, le formaldéhyde présente un grand nombre d'inconvénients en tant que conservateur. Par exemple, il existe de nombreux risques sanitaires et environnementaux associés à son utilisation notamment en raison de sa toxicité élevée. Parmi les dangers d'une exposition à court terme au formaldéhyde, on peut citer des irritations du nez et de la gorge, 15 des maux de tête et des nausées. Une exposition de longue durée peut provoquer une altération chronique des fonctions pulmonaires, une inflammation de la peau et un cancer. Le formaldéhyde déshydrate également les tissus biologiques et présente une odeur nuisante. Un inconvénient de l'utilisation du 20 formaldéhyde dans les fluides pour l'embaumement est lié au fait que le formaldéhyde coagule et réticule de nombreux liquides du corps, ce qui engendre un raidissement des tissus corporels. Par conséquent, il peut être difficile et long de s'assurer d'une répartition régulière du fluide d'embaumement dans tout le corps. Le dessèchement de la peau par le 25 formaldéhyde peut également conduire à des écorchures du corps et à des brûlures localisées. En raison de son caractère volatile, le formaldéhyde présente une faible efficacité résiduelle, ce qui conduit à une décomposition rapide des surfaces de la peau Ainsi, le formaldéhyde présente différents problèmes sanitaires, 30 d'hygiène et de sécurité. A ce jour, il n'existe pas de produit de substitution satisfaisant. La présente invention a donc pour but de fournir un produit destiné à la conservation des tissus, et notamment à la réalisation de soins de 15 20 25 30 thanatopraxie, permettant de s'affranchir des inconvénients mentionnés ci- dessus liés à l'utilisation du formaldéhyde. Plus particulièrement, ce produit doit permettre d'assurer, d'une part, une bonne présentation du défunt de façon à faciliter le transfert du deuil des familles, et d'autre part, la conservation du corps durant une durée suffisante permettant de réaliser les opérations définies par les autorités publiques et nécessitant l'utilisation de soins de conservation. Un autre but de la présente invention consiste à fournir une nouvelle composition destinée à la conservation des tissus, permettant de disposer, lo pour le personnel réalisant les soins et plus généralement pour toute personne fréquentant les lieux où les soins ont été réalisés ou simplement étant proche du corps du défunt, de conditions sanitaires, d'hygiène et de sécurité satisfaisantes n'engageant aucun élément de dangerosité particulière. La présente invention concerne l'utilisation d'une composition comprenant du 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol pour la conservation des tissus. Le bronopol ou 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol (C3H6BrNO4) est une poudre cristalline dont la couleur varie de blanc à jaune pâle. Ce produit est stable et est utilisé comme bactéricide. Le bronopol est un biocide qui ne présente pas ou peu de risques pour la santé humaine. Son utilisation permet d'éviter l'inhalation de vapeurs lors de la réalisation des soins par le praticien. Par ailleurs, le bronopol ne présente aucune volatilité à température ambiante. Selon un mode de réalisation particulier, la composition susmentionnée est utilisée pour la conservation des pièces anatomiques humaines, notamment pour la conservation des corps destinés à être disséqués. Selon un autre mode de réalisation particulier, la composition susmentionnée est utilisée pour la réalisation de soins de thanatopraxie. Le terme "thanatopraxie" désigne les soins visant à la conservation du corps d'un défunt, à savoir les techniques d'embaument ou qui s'apparentent à l'embaumement des cadavres. La composition susmentionnée peut donc être utilisée pour les soins de thanatopraxie, pour la conservation des corps dans l'optique de leur dissection et pour la conservation des pièces anatomiques humaines et animales. La présente invention concerne l'utilisation telle que définie ci-dessus d'une composition comprenant au moins environ 1% en poids de 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol. De préférence, dans le cadre de l'utilisation telle que définie ci-dessus, la composition susmentionnée comprend d'environ 0,5% à environ 2,5%, et io de préférence d'environ 0, 8% à environ 2,5%, en poids de 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol. Ces valeurs de concentrations sont liées à la variabilité de réaction du bronopol en fonction de l'état spécifique des corps traités. Selon un autre mode de réalisation, dans le cadre de l'utilisation telle 15 que définie ci-dessus, la composition susmentionnée comprend en outre un anticoagulant, de préférence le citrate de sodium. Un anticoagulant est une molécule destinée à empêcher ou à retarder la coagulation du sang. Dans le cadre de la composition de l'invention, l'anticoagulant permet de dissoudre les caillots sanguins et de favoriser le 20 passage de ladite composition en intra-artériel et le drainage des artères. Parmi les anticoagulants, on peut citer : le citrate de sodium, l'héparine, l'oxalate de sodium, l'EDTA, les borates tels que le borate de sodium, le tétraborate de sodium ou le pyroborate de sodium, le sulfate de magnésium, le chlorure de sodium, le sulfate de sodium et le phosphate de sodium. 25 On peut noter que certains de ces produits sont utilisés en médecine pour la décoagulation de fluide sanguin. Par exemple, l'héparine et le citrate de sodium peuvent être utilisés pour fluidifier le sang et éviter la formation de caillots sanguins chez les malades, et le sulfate de magnésium peut être utilisé dans les fluides d'embaumement pour favoriser l'évacuation de l'eau 30 contenue dans les oedèmes. Plus particulièrement, dans le cadre de la présente invention, la composition susmentionnée comprend d'environ 0,1% à environ 2%, de préférence d'environ 0,15% à environ 1,5%, en poids d'anticoagulant, et notamment d'environ 0,15% à environ 1,5% en poids de citrate de sodium. Pour des soins effectués sur des corps destinés à la dissection ne pouvant être ponctionnés ou drainés, on utilise une concentration peu élevée en substance anticoagulante. C'est également le cas pour des défunts dont la confession religieuse prohibe toute ponction. Par ailleurs, et dans certaines conditions, cette même concentration sera augmentée de façon à améliorer la ponction cardiaque. La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie io ci-dessus, caractérisée en ce que la composition susmentionnée comprend en outre un agent pénétrant, notamment la glycérine. Dans le cadre de la composition de la présente invention, l'agent pénétrant permet de transporter les liquides par drainage et capillarité et est également associé à un effet déshydratant. 15 Parmi les agents pénétrants, on peut citer : le sorbitol, l'éthylène glycol et le propylène glycol. Plus particulièrement, dans le cadre de la présente invention, la composition susmentionnée comprend d'environ 3% à environ 40% en poids d'agent pénétrant, notamment d'environ 3% à environ 40% en poids de 20 glycérine. La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que la composition susmentionnée comprend en outre un antiseptique, notamment choisi parmi le méthanol et l'éthanol. Un antiseptique est une substance qui désinfecte et tue les germes 25 microbiens. Dans le cadre de la composition de la présente invention, on utilise de préférence de l'éthanol ou du méthanol. Ces produits présentent des propriétés d'antiseptique, de conservateur et de déshydratant ; ils agissent comme solvants des produits en présence dans la composition de l'invention. 30 De préférence, l'antiseptique utilisé est un monoalcool primaire à faible masse molaire permettant une bonne diffusion dans les tissus. Plus particulièrement, dans le cadre de la présente invention, la composition susmentionnée comprend d'environ 2% à environ 45%, de préférence d'environ 2% à environ 40%, et préférentiellement d'environ 2% à environ 35% en poids d'antiseptique, et notamment d'environ 2% à environ 35% en poids de méthanol ou d'éthanol. La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que la composition susmentionnée comprend en outre un colorant, notamment choisi parmi l'amarante et l'éosine. Ainsi, la composition utilisée dans le cadre de la présente invention contient également un colorant des tissus. Parmi les colorants utilisés, on peut citer, outre l'amarante (qui donne une coloration rouge rosé) et l'éosine io (qui donne une coloration rose), le ponceau (qui donne une coloration rouge cerise), l'érythrosine (qui donne une coloration rouge cerise) et l'acide carminique (qui donne une coloration rouge carmin). Ces colorants sont inertes, c'est-à-dire qu'ils ne servent qu'à pigmenter la composition de l'invention et ces produits sont classés par gamme de 15 couleur en fonction des sujets rencontrés. Plus particulièrement, dans le cadre de la présente invention, la composition susmentionnée comprend moins d'environ 0,2% en poids de colorant, notamment de 0 à 0,2% en poids d'amarante ou d'éosine. D'autres produits peuvent être introduits en quantité variable dans ladite 20 composition, de façon à obtenir, en fonction des différents cas d'application, les résultats escomptés (cas des ictères par exemple). Ainsi, en cas d'excès de bilirubine non conjuguée dans les tissus, il est possible d'ajouter à la composition de l'acide glucoronique et une enzyme spécifique, la transférase diphosphate uridyle, ceci permettant la disparition 25 de la bilirubine et donc de la coloration jaune ou verdâtre. Il est également possible d'ajouter des réducteurs de tension de surface (aide à la pénétration dans les tissus), tels que les éthers de polyéthylène glycol et de chlorure d'alkydiéthyl benzylamonnium. Il est enfin possible d'ajouter le polyacrylate de sodium qui permet de 30 capter l'eau contenue dans les tissus (notamment en cas d'oedème). La présente invention concerne également une composition comprenant du 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol, un anticoagulant, un agent pénétrant, un antiseptique, et le cas échéant, un colorant. 5 io De préférence, la composition susmentionnée est constituée de 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol, d'un anticoagulant tel que le citrate de sodium, d'un agent pénétrant tel que la glycérine, d'un antiseptique tel que le méthanol ou l'éthanol, et d'un colorant tel que l'éosine ou l'amarante. Selon un mode de réalisation avantageux, cette composition comprend : ù d'environ 0,5% à environ 2,5% en poids de 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol; ù d'environ 0,1% à environ 2% en poids d'anticoagulant ; ù d'environ 3% à environ 40% en poids d'agent pénétrant ; ù d'environ 2% à environ 45% en poids d'antiseptique ; et ù moins d'environ 0,2% en poids de colorant. La présente invention concerne également une méthode d'embaumement, qui comprend l'injection, dans le corps qui doit être 15 embaumé, d'une composition telle que définie ci-dessus comprenant du 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol. L'injection peut être effectuée dans les cavités (notamment thoraciques ou abdominales) ou dans les artères (notamment fémorales, carotides ou axillaires). 10 15 20 25 PARTIE EXPÉRIMENTALE I - Injection artérielle : Pour préparer la composition de l'invention, on prépare 1 litre de solution, qui est ensuite à diluer avec 2 à 8 litres complémentaires d'eau. La composition en masse est la suivante : ^ citrate de sodium : de 2 à 15 g ; ^ glycérine : de 30 à 400 g ; ^ éthanol ou méthanol : de 20 à 350 g ; ^ amarante ou éosine : de 0 à 2,0 g ; ^ bronopol : supérieur à 10 grammes ; • eau 1) Préparation de la solution artérielle avant injection : On peut envisager deux procédés, à savoir : ù soit la solution concentrée est prête à l'utilisation et il convient alors simplement de rajouter le volume d'eau complémentaire souhaité (de 2 à 8 litres d'eau complémentaires) ; ù soit la solution concentrée est préparée sans y avoir introduit le bronopol ; ainsi, après introduction du bronopol dans la solution concentrée, il convient de rajouter le volume d'eau complémentaire souhaité. Il est important de mentionner que la quantité d'eau à rajouter, généralement de l'ordre de 5 litres pour 1 litre de solution de base, peut être modifiée en fonction des conditions observées au moment de l'injection. L'état du défunt et les causes du décès peuvent en effet conduire à des concentrations différentes. 7 30 10 15 20 Dans le cadre de l'injection artérielle, les compositions suivantes ont été préparées et testées (ces compositions sont préparées pour 1 litre de solution concentrée auquel on ajoute 5 litres d'eau) : (1) composition contenant 0,8% en poids de bronopol, qui comprend : • 49,8 g de bronopol ; • 9 g de citrate ; • 301,37 g de glycérine ; • 254,40 g (à 95%) d'alcool ; et • 4 gouttes d'éosine. (2) composition contenant 1,7% en poids de bronopol, qui comprend : • 100 g de bronopol ; • 5,5 g de citrate ; • 305 g de glycérine ; • 242 g (à 95%) d'alcool ; et • 4 gouttes d'éosine. (3) composition contenant 1,2% en poids de bronopol, qui comprend : • 72 g de bronopol ; • 9 g de citrate ; • 305 g de glycérine ; • 242 g (à 95%) d'alcool ; et • 4 gouttes d'éosine. Il est à noter que pour des personnes à forte corpulence, il sera nécessaire d'injecter plus de solution afin d'obtenir des volumes d'injection 25 plus importants. Cette préparation est adaptable en fonction de la morphologie du cas traité. Dans le cas où la personne a séjourné dans un endroit réfrigéré ou en fonction du délai d'injection après décès, il faudra moduler les concentrations afin d'obtenir des résultats de qualité optimale. 30 2) Procédé d'injection : Cette opération met en oeuvre le procédé généralement utilisé en matière de soins de thanatopraxie, à savoir une injection et un drainage, ce dernier étant généralement effectué au niveau du coeur droit. L'injection est réalisée au travers des artères fémorale ou carotide ou encore axillaire. La quantité de fluide injecté est de l'ordre de 6 litres, cette quantité pouvant varier en fonction de l'état du défunt et du diagnostic réalisé par le thanatopracteur (besoin par exemple d'un drainage plus important). i0 II - Injection dans les cavités : Dans le cas d'une injection en cavité (zone n'affectant pas la présentation physique du corps), l'objectif recherché est de stopper la prolifération bactérienne. Il convient alors de n'utiliser que les produits ayant 15 une action antibactérienne, à savoir le bronopol et le méthanol ou l'éthanol. Ainsi, dans ce mode de réalisation, la glycérine et le citrate ne sont pas obligatoirement utilisés. On peut cependant par exemple prévoir l'utilisation éventuelle de citrate. En ce qui concerne les concentrations et afin de renforcer l'effet 20 antibactérien, la concentration en bronopol et en éthanol est renforcée (voir ci-après) pour atteindre 5% pour le bronopol et 40% pour l'alcool éthylique. Pour préparer la composition de l'invention, on prépare 0,5 litre de solution dont la composition en masse est la suivante : 25 o bronopol : supérieur à 10 g ; o éthanol ou méthanol : supérieur à 100 g ; o eau 1) Préparation de la solution : 30 On peut envisager trois procédés, à savoir : ù soit la solution est prête à l'emploi ; ù soit la solution est une solution concentrée à laquelle il convient de faire l'appoint d'eau ; ù soit le bronopol est ajouté avant la réalisation du soin et l'appoint d'eau est effectué. Dans le cadre de l'injection dans les cavités, les compositions suivantes ont été préparées et testées (ces compositions sont préparées pour 500 mL et sont utilisées en l'état) : (4) composition comprenant : • 104,75 g de bronopol (20%) ; et • 257,31 g (à 95%) d'alcool. lo (5) composition comprenant : • 25 g de bronopol (5%) ; et • 202 g (à 95%) d'alcool. 2) Procédé d'injection : 15 Cette opération utilise le procédé généralement pratiqué en matière de soins de thanatopraxie, à savoir : ponction des gaz et liquides au niveau des cavités thoraciques et abdominales, et injection de la composition selon l'invention, dans chacune des cavités du produit, de façon à ce que ladite composition diffuse au mieux dans l'ensemble des cavités concernées. 20 III - Durée du soin : Le procédé opératoire de réalisation du soin est identique à celui utilisé dans le cas de l'utilisation d'un produit à base de formaldéhyde. La durée du soin dans son intégralité est donc identique, à savoir de 1h15 à 1 h30 25 (maquillage compris). IV - Résultats : En utilisant toujours une base identique en glycérine, éthanol ou méthanol, des essais ont été effectués en utilisant les compositions 30 exemplifiées ci-dessus (compositions (1), (2) et (3) pour l'injection artérielle et compositions (4) et (5) pour l'injection dans les cavités). 25 30 Le bronopol étant un des éléments actifs essentiels dans la conservation des tissus, sa variation a une forte influence sur cette conservation. Plus la concentration est élevée, plus les effets de conservation sont importants, engendrant cependant des facteurs potentiellement perturbateurs au niveau de la présentation du corps des défunts. Le choix de cette concentration résulte donc du bon compromis à faire entre les 2 objectifs recherchés (conservation et présentation), l'optimum commun (pour des corps ne présentant pas de spécificité particulière) ayant io été déterminé à 1,2%. Pour les essais qui ont été effectués, les corps ont fait l'objet d'une observation pendant une durée maximale de 15 jours. L'objectif poursuivi dans la variation de concentration en bronopol est d'établir la concentration optimale permettant une bonne conservation du 15 corps ainsi qu'une bonne présentation sans que l'on assiste à une déshydratation trop importante. Les essais réalisés, pour des corps ne présentant pas d'anomalie particulière, ont permis de mettre en évidence que la concentration de 1,2% en bronopol conduisait à des résultats satisfaisants. 20 1) Conservation du corps : Dans le cadre de l'injection dans les cavités ou l'injection artérielle, on assiste à une diminution importante de la décomposition du corps mise en évidence par : - la faible modification de l'apparence du défunt tout au long de la période observée ; - l'absence d'apparition de gaz au niveau des cavités ; et - l'absence d'odeur particulière pendant la durée d'observation. 2) Aspect du défunt : Après avoir effectué le soin, on observe une réhydratation des tissus, accompagnée d'une bonne diffusion (fluidité) du produit de l'invention dans le corps. Ceci se caractérise par un toucher de la peau plus souple et à un visuel plus "doux". Le défunt conserve un aspect naturel et ne comporte pas l'aspect cireux souvent observé lors d'une injection de produits formolés. Les effets du bronopol sont donc satisfaisants, tant à l'égard de la conservation, qu'à celui de la qualité de présentation des défunts. L'absence de décomposition résultant probablement de la faible évolution bactérienne permet de conclure au bon comportement hygiénique des corps traités. V - Comparaison du produit avec le formol : io La pratique opératoire du soin est identique à celle effectuée avec les produits formolés. Sur le plan de la conservation des corps en tant que telle (durant la période d'observation soit de l'ordre de 15 jours), on peut conclure à une efficacité identique des solutions à base de bronopol et à base de 15 formaldéhyde. La différence essentielle résulte de l'apparence du corps qui, comme nous l'avons précisé précédemment, est plus souple, avec des couleurs moins dégradées et donc une apparence générale plus "sereine" et détendue que dans le cas d'utilisation de solution où le formaldéhyde est utilisé. 20 Comme pour les solutions comportant du formol, le produit peut être modulable dans sa concentration en bronopol en fonction de la nature des corps à traiter. On choisira ainsi : ù des concentrations plus importantes pour des corps dont la 25 dégradation biologique est plus avancée (soit de l'ordre de 1,7% en poids de bronopol) ; ù des concentrations de 1 à 1,2% pour des corps "normaux" de manière à ne pas provoquer de dessèchement trop rapide des tissus ; ù en cas d'ictère (jaunisse), on peut encore réduire la concentration en 30 bronopol à 0,8%, ce qui permettra d'éviter le verdissement du corps et permettra une meilleure diffusion des produits dans les tissus. 20 25 30 VI ù Conservation des pièces anatomiques : Des essais on également été effectués au sein de la faculté de médecine dans le cadre de la conservation des corps destinés à être disséqués. Les résultats observés sont très intéressants, sachant que ces essais ont été réalisés uniquement en injection sans procéder à aucune ponction. Pour obtenir une conservation optimale du corps, on a utilisé une concentration en bronopol de 1,9% en poids pour une quantité injectée de 4 litres au total. io La dilution de la solution de base étant effectuée dans ce cas précis avec 3 litres et non 5 litres d'eau, les concentrations en alcool, en glycérine, en citrate et en éosine se trouvent également majorées par un facteur de 1,5 environ. Les résultats obtenus lors des dissections intervenues 14 et 16 jours 15 après le décès sont très intéressants. De plus, de très bons résultats sont obtenus en ce qui concerne l'état de conservation du corps et la souplesse des tissus, le sang étant gélifié, ce qui permet ainsi une observation et une dissection dans de meilleures conditions. Par exemple, la composition (2) susmentionnée a été utilisée sur un sujet (homme décédé depuis 8 jours) de corpulence moyenne. Il a été constaté avant la pratique du test que les lividités étaient très marquées et la présence de taches vertes abdominales importantes et des globes oculaires affaissés (corps congelé). Le produit a ensuite été injecté par l'artère carotide en une passe (une fois 3 litres d'eau et 1 000 mL de composition (2) susmentionnée), pour une meilleure dilution du produit (total de l'injection = 4 litres). Le sujet a été porté en alternance entre la chambre froide (7°C) et la table d'autopsie (25°C). Résultat après injection : Bon passage du fluide, mise en chambre froide. Résultat 1er jour : Le corps a été sorti pour permettre des travaux pratiques le lendemain. Aucun gonflement n'a été constaté, seuls les bras 14 laissaient apparaître des traces veineuses importantes, pas de tache verte abdominale. Résultat 2ème jour : Réalisation de travaux pratiques : dissection du cou par les médecins, les muscles étaient bien colorés, aucune odeur. Le médecin n'a pas constaté de différence avec un corps juste décédé, n'ayant pas reçu d'injection au formol. Résultat 6ème jour : Prélèvement par les médecins du bloc coeur-poumon, qui ont été trouvés comme étant de bonne qualité. Les viscères étaient bien conservées, ce qui a facilité le prélèvement et donné l'apparence io intérieure d'un corps non � embaumé � et récent. Le sang était gélatineux. 20 25 REVENDICATIONS 1. Utilisation d'une composition comprenant du 2-bromo-2- nitropropane-1,3-diol pour la conservation des tissus. 2. Utilisation selon la revendication 1, pour la conservation des corps et des pièces anatomiques. io 3. Utilisation selon la revendication 1, pour la réalisation de soins de thanatopraxie. 4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que la composition comprend au moins environ 1% en 15 poids de 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que la composition comprend d'environ 0,5% à environ 2,5% en poids de 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que la composition comprend en outre un anticoagulant, notamment le citrate de sodium. 7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que la composition comprend d'environ 0,1% à environ 2%, de préférence d'environ 0,15% à environ 1,5%, en poids d'anticoagulant. 8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, 30 caractérisée en ce que la composition comprend en outre un agent pénétrant, notamment la glycérine. 15 9. Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que la composition comprend d'environ 3% à environ 40% en poids d'agent pénétrant. 10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que la composition comprend en outre un antiseptique, notamment choisi parmi le méthanol et l'éthanol. 11. Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que la lo composition comprend d'environ 2% à environ 45% en poids d'antiseptique. 12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisée en ce que la composition comprend en outre un colorant, notamment choisi parmi l'amarante et l'éosine. 13. Utilisation selon la revendication 12, caractérisée en ce que la composition comprend moins d'environ 0,2% en poids de colorant. 14. Composition comprenant du 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol, un 20 anticoagulant, un agent pénétrant, un antiseptique, et le cas échéant, un colorant.