FR 2925683 A1 20090626 FR 0760113 A 20071220 PROCÉDÉ DE MESURE DE LA BIO ADHÉSIVITÉ D'UNE PRÉPARATION MUCO-ADHÉSIVE ET DISPOSITIF PERMETTANT DE LE METTRE EN OEUVRE. DOMAINE D'APPLICATION DE L'INVENTION La présente invention a trait au domaine pharmaceutique, cosmétique et nutraceutique et plus particulièrement à celui des dispositifs de détermination de la bio adhésivité des préparations pâteuses destinées à être appliquées sur les muqueuses ou la peau. DESCRIPTION DE L'ART ANTERIEUR Le domaine de la pharmacie, de la nutraceutique et de la cosmétique fait appel à un très grand nombre de formes médicamenteuses tels que : - des comprimés de toute nature enrobés, dragéifiés, effervescents, à libération prolongée, etc... - des gélules contenant des poudres, des microgranules, des masses cireuses, etc.... - des liquides tels que des sirops, des suspensions, 20 des laits, des collyres, etc - des produits semi pâteux : des suppositoires, des crèmes, des pommades, des gels, etc... - des dispositifs particuliers comme des patches, des implants, 25 - etc... Dans le domaine de la pharmacie, toutes ces formes médicamenteuses doivent répondre à un certain nombre de critères en fonction de leur qualification. C'est ainsi que pour des comprimés, enrobés ou non, dragéifiés ou à 30 libération prolongée, la cinétique de dissolution doit être déterminée. On entend par � cinétique de dissolution �, le temps que met le comprimé à libérer son principe actif dans le milieu de dissolution constitué par un liquide 35 représentant le suc gastrique ou le suc intestinal. Cette détermination se fait à l'aide de dispositifs - 2 décrits à la Pharmacopée Européenne. Le premier est un appareil de dissolution à palette tournante. Les palettes peuvent être substituées par des paniers dans le cas des gélules. Pour les systèmes transdermiques, une cellule est disposée au fond du réacteur contenant le milieu de dissolution. Sur cette dernière est fixé le patch, l'agitation du milieu étant maintenue par une palette. L'autre dispositif est une cellule à flux continu. Contrairement à l'appareil précédent, le milieu de dissolution circule à l'intérieur de la cellule et provoque un lessivage de la forme pharmaceutique. Cette cellule est utilisée aussi bien pour les comprimés que pour les suppositoires. D'autres tests sont réalisés sur les formes solides telles que la détermination du temps de désagrégation, la dureté des comprimés, etc.... En ce qui concerne les liquides, peu de tests sont mis en oeuvre, hormis la détermination de la viscosité ou de la densité lorsqu'il s'agit de préparations plus ou moins visqueuses telles que des suspensions. Des tests particuliers sont effectués pour certaines applications de liquides telle que l'obtention de mousse. Dans ce cas précis, un test d'expansion de la mousse formée est réalisé dans le but de déterminer sa capacité à tapisser rapidement une surface donnée. Pour des liquides conditionnés en spray, seul un test de la dose délivrée est requis mettant en jeu un appareil bien spécifique décrit à la Pharmacopée Européenne. Hormis la viscosité et la densité qui sont déterminées sur les formes pâteuses, aucun autre test n'est obligatoire en particulier en ce qui concerne les préparations dites muco-adhésives. La Pharmacopée Européenne décrit ces préparations comme étant � des préparations contenant une ou plusieurs substances actives destinées à être absorbées à travers la - 3 -muqueuse gingivo-jugale pendant une durée prolongée, en vue d'une action systémique. Elles peuvent se présenter sous la forme de comprimés gingivaux muco-adhésifs ou d'autres préparations solides ou semi-solides muco- adhésives. Le seul essai requis dans le cas de ces formes est un essai de dissolution prouvant que le produit libère progressivement l'actif dans le temps. Ce test met en oeuvre l'appareil de dissolution à palette tournante. A ce jour, ni la pharmacopée Européenne ni une autre documentation officielle internationale propose une mesure de la bio adhésivité des préparations, et entre autres lorsqu'il s'agit de préparations semi-solides. On entend par �préparations serai-solides�, toutes 15 préparations liquides présentant une certaine viscosité allant de 50 cPs à 100.000 cPs et plus. Cependant, on constate que de plus en plus de produits pharmaceutiques et voire cosmétiques sont qualifiés de bio-adhésifs. On trouve dans cette catégorie, 20 des produits destinés à la voie oculaire tels que des gels solubles qui ralentissent la libération du principe actif en raison de leur viscosité élevée. Cette viscosité prolonge le temps de contact du principe actif au niveau de la cornée et son temps de présence dans le cul de sac 25 conjonctival. Cette intensification de l'action est due au ralentissement du processus d'élimination au niveau du canal lacrymal de par la viscosité du produit. Dans certains cas, il aurait été mis en évidence une certaine bio- adhésion des matériaux utilisés au niveau de 30 la cornée. Ce serait le cas du Carbopol� (HO-WAH HUI et Coll. [1]). Mais le mécanisme de bio-adhésion ne serait pas parfaitement établi et aucune mesure de bio adhésion n'a été effectuée. Concernant la muqueuse nasale, le brevet Américain 35 US4226848 fait mention de l'utilisation de dérivés cellulosiques et de polymères acryliques pour une - 4 application nasale bio-adhésive. Là non plus, aucune mesure de bio adhésivité n'est réalisée. Ces mêmes dérivés cellulosiques sont utilisés comme excipients bio-adhésifs pour la voie orale, vaginale ou rectale telle que la carboxyméthylcellulose, sans pour autant que la bio adhésivité soit réellement démontrée. Le seul appareil de mesure utilisé à l'heure actuelle pour mettre en évidence le caractère uniquement adhésif des excipients est un appareil développé par BR Goodrich Instrument Services Division, qui n'est autre qu'un tensiomètre. Ainsi, après réalisation d'une solution à 1,2% de l'excipient testé, un échantillon du gel obtenu est placé sur un support en laiton, le tout fixé sur l'appareil de mesure qui détermine la force maximale d'adhésion. En aucun cas dans cette mesure, un élément biologique n'est mis en contact avec le produit à tester. De plus, il est nullement fait mention du caractère �bio� dans la fonction adhésive du produit, simplement de son caractère adhésif. Des variantes de cette méthode ont été utilisées par Robert, Buri et Peppas en utilisant le tensiomètre DuNouy modifié, en substituant l'anneau de mesure en platine iridium par un disque en nitrocellulose. Cet anneau est immergé dans la solution à analyser et le tensiomètre mesure la force nécessaire pour extraire l'anneau du milieu testé. La force ainsi obtenue permet de calculer la tension de surface du produit. Contrairement au laiton, la nitrocellulose présente un caractère �biologique� plus prononcé. Cependant le caractère bio adhésif en tant que tel n'est pas pour autant démontré. Seule la tension superficielle est calculée. Cette valeur cependant englobe aussi bien les forces créées par les liaisons entre le produit et la membrane, que des forces créées par le phénomène de capillarité entre le solvant et le support. Brannon-Peppas et Reilly ont étudié la bio adhésivité de certains matériaux en utilisant une membrane de - 5 nitrocellulose humidifiée sur un plan incliné, sur laquelle va s'écouler la composition bio adhésive. L'humidification de cette membrane est réalisée par de l'eau. Le temps que va mettre le produit à s'écouler sur une distance donnée est alors déterminée, mais comme précédemment, aucun élément biologique n'est additionné à la membrane pour mettre en évidence le vrai caractère �bio� adhésif de la préparation. Dans le cas présent, seule une comparaison de temps d'écoulement entre deux excipients permet de dire que l'un est plus adhérant que l'autre, toute proportion gardée si la viscosité du produit n'est pas prise en compte. De plus, Brannon-Peppas et Reilly comparent les temps d'écoulement des produits testés avec le temps d'écoulement du solvant sur le même support, le solvant étant dans le cas présent l'eau. Il apparaît clairement que, dans une telle étude où le solvant est l'eau ou un autre solvant tel que l'alcool, ou le propylèneglycol ou tout autre solvant pur, le temps d'écoulement de ces produits sera nettement plus rapide que la préparation contenant l'excipient qualifié de bio-adhésif étant donné que ces produits présentent une viscosité proche de 1. De ce fait, pour avoir des résultats comparables et tirer des conclusions, il est indispensable de travailler dans les mêmes conditions de viscosités. Après une étude approfondie des dispositifs de mesure de la bio-adhésivité, il n'existe à ce jour sur le marché aucun appareil permettant de mesurer la bio adhésivité en tant que telle. DESCRIPTION DE L'INVENTION Partant de cet état de fait, la demanderesse a imaginé un concept original pour mesurer réellement de la bio adhésivité applicable plus particulièrement aux formes semi-solides de préparations muco-adhésives. - 6 - Selon l'invention, ce procédé de mesure de la bio adhésivité d'une préparation muco-adhésive, consiste : - à disposer sur un même plan incliné, deux membranes biologiques, - à imprégner une des deux membranes biologiques, d'une solution de polymucosaccharide, - à injecter sur chacune des deux membranes biologiques, un échantillons d'une même préparation muco-10 adhésive, - à chronométrer les temps d'écoulement des deux échantillons de la même préparation muco-adhésive injectés sur l'une et l'autre des deux membranes biologiques, - et à mesurer la différence d'écoulement de manière 15 à fournir une information représentative du caractère bio adhésif de ladite préparation muco-adhésive. Le procédé de la présente invention a pour but de déterminer un facteur de bio adhésivité des préparations muco-adhésives de préférence sous forme semi-solide en 20 testant le temps d'écoulement d'une préparation mucoadhésive sur deux types de membranes : - l'une dite de référence c'est à dire dépourvue de matériaux biologiques au sens propre du terme, mais qui pourra être imprégnée d'eau déminéralisée ou d'une 25 solution tampon, - l'autre contenant un agent biologique tel que des polymucosaccharides avec une concentration en polymucosaccharides comprise entre 0,5ô et 10ô exprimée en poids par rapport au volume total de la solution. 30 Le composant biologique de la solution de polymucosaccharides pourra être de la mucine ou un dérivé de mucine. La différence de temps déterminée entre les deux mesures de temps d'écoulement représente le caractère bio 35 adhésif de la préparation au sens propre du terme. On entend par � matériaux biologiques �, tous les -7 constituants de l'être vivant appartenant au monde animal. On entend par �caractère bio adhésif� la capacité qu'ont certains composants à se fixer sur les matériaux biologiques tels que ceux constituant l'être vivant. Cette invention est applicable à tous types de préparations présentant un caractère newtonien. On entend par � caractère newtonien �, tous produits qui s'écoulent librement sans application d'une quelconque force telle qu'une agitation, pour le faire s'écouler. De même, cette détermination peut être faite sur des produits dits � thixotropes �. On entend par � thixotropes � toutes préparations qui, non soumises à agitation, ont tendance à se prendre en masse. Dès une simple agitation, la préparation redevient instantanément liquide. Ce procédé de l'invention est basé sur le fait que certaines substances à l'état solide ou à l'état liquide ont la propriété de se complexer avec certaines molécules des muqueuses ou des sécrétions desdites muqueuses. Ces dites substances se retrouvent donc figées à la surface des muqueuses. On entend par � complexer � la formation de liaisons chimiques telles que : - des liaisons hydrogènes, dans le cas des dérivés cellulosiques ou acryliques tels que les Carbopol� - ou liaisons de complexation dans le cas des carraghénanes formation de liaisons entre les groupements sulfates des carraghénanes et les protéines des muqueuses ou des sécrétions de ces dernières. Le procédé de mesure permettant de déterminer la bio-adhésivité faisant l'objet de la présente invention fait appel aux propriétés des excipients dits bio- adhésifs. Ces excipients sont des matières . 5 10 15 20 25 30 35 - 8 - - très avides d'eau tels que les celluloses. Elles forment des liaisons hydrogènes avec l'eau (H2O) présente sur les muqueuses ou certains composants biologiques présentant de nombreux groupement hydroxyles (OH), - ou très réactives sur le plan chimique grâce à la présence de groupements ionisés sur leur squelette tels que les groupements sulfates des carraghénanes. Dans ce cas les groupements anioniques vont réagir avec les charges positives des protéines présentes sur les muqueuses et dans les sécrétions de ces dernières. Dans les deux cas ces matières premières vont se retrouver plus ou moins fixées sur les muqueuses comme si elles étaient � collées � à cette dernière. Cette propriété a été mise à profit dans le dispositif objet de la présente invention en particulier dans le cas des formes semi-solides. En effet, considérant que ces substances ont tendance à se fixer sur des muqueuses biologiques, leur écoulement sur une membrane disposée sur un plan incliné et imprégnée d'une substance biologique, doit en être retardé comparativement à une membrane vierge de tout composant biologique tel que décrit précédemment, dite membrane de référence. Une telle détermination élimine le facteur viscosité. En effet plus une solution est visqueuse et plus elle aura tendance à s'écouler lentement. Une telle mesure d'écoulement ne présume en rien de l'adhésivité d'une substance. Inversement une préparation très liquide va s'écouler très vite sur un plan incliné. Seule une mesure comparative de temps d'écoulement de ces préparations sur une membrane de référence non imprégnée de substances biologiques permet réellement d'estimer un caractère bio- adhésif des préparations, abstraction faite de la viscosité. Appliquant cette hypothèse à une solution de carraghénane de concentration déterminée, il a été ainsi 10 15 20 25 30 35 - 9 - possible de mettre en évidence une nette différence d'écoulement sur une membrane imprégnée ou non d'une solution de polymucosaccharides comme montré sur le tableau de la figure la. Pour mettre en oeuvre ce procédé de mesure de la bio adhésivité d'une préparation muco-adhésive, l'invention propose également un dispositif constitué : - d'une plaque inclinée sur laquelle sont disposées deux membranes biologiques dont l'une est imprégnée d'une solution de polymucosaccharides, - d'un système d'injection d'échantillons d'une préparation muco-adhésive, - et d'un système de chronométrage permettant de mesurer les temps d'écoulement de deux échantillons de la même préparation muco-adhésive injectés sur l'une et l'autre des deux membranes biologiques, ledit système de chronométrage étant relié à une unité de traitement électronique apte à fournir en sortie un signal représentatif du caractère bio adhésif de la susdite préparation. La plaque qui peut être en acier inoxydable ou en matière plastique est suffisamment rigide pour éviter dans le temps toute courbure du plan d'écoulement. Sa longueur peut varier de 10 cms à 100 cms et plus, en fonction du nombre de mesures à réaliser en série. La hauteur de cette plaque est généralement fixée à 20 cms car le temps d'écoulement est déterminé sur une distance variant de 2,5 cms à 10 cms. Au-delà de 20 cms de hauteur, la membrane fixée sur ce plan incliné se dessécherait progressivement, faussant alors les mesures. Elle comportera des graduations par exemple de 2,5 cms en 2,5 cms avec la première zone en partant du haut réservée à la zone de dépôt des échantillons de préparation mucoadhésive. La deuxième graduation à 5 cms déterminera par exemple, le début de la zone de chronométrage de 10 15 20 25 30 35 - 10 - l'écoulement. De la deuxième graduation jusqu'à la dernière graduation, des graduations intermédiaires peuvent être ajoutées en fonction de la viscosité des solutions testées. La dernière graduation correspond à la fin de la zone de chronométrage. Cette plaque peut être déposée manuellement sur le support d'inclinaison, l'angle d'inclinaison de ce dernier étant parfaitement défini. Cet angle d'inclinaison peut varier de 10 à 85°. Même si la détermination de la différence du temps d'écoulement fait abstraction de la viscosité, il est cependant nécessaire d'en tenir compte dans l'inclinaison du plan incliné. En effet, plus la préparation sera visqueuse et plus elle aura tendance à s'écouler lentement sur un plan incliné de faible angle d'inclinaison et inversement pour des solutions très fluides (cf. tableau de la figure lb montrant les résultats obtenus avec une inclinaison de 45°) . Pour résoudre ce problème, l'inclinaison de la plaque peut se faire de façon semi-automatique par un système de leviers ou automatiquement par des engrenages pilotés électroniquement en programmant un angle d'inclinaison défini allant de 0° à 90°, le degré d'inclinaison pouvant varier de 2° en 2° ou de 5° en 5°. Afin d'éviter de donner de l'inertie à la masse d'échantillon de préparation déposée, l'inclinaison doit se faire le plus lentement possible. Ainsi, la vitesse d'inclinaison de la plaque doit être comprise entre 1 centième de seconde par degré d'inclinaison et 5 centièmes de seconde par degré d'inclinaison. Suivant l'utilisation du dispositif de mesure de bio adhésivité, soit en contrôle de routine soit pour des travaux de recherche, la détermination du temps d'écoulement peut se faire de différentes façons. - 11 - Dans le cadre d'un usage en contrôle de routine, la détermination peut être réalisée manuellement à l'aide d'un chronomètre ou en disposant des détecteurs à différents niveaux du plan incliné, détecteurs qui peuvent être des cellules photoélectriques ou des détecteurs par réflexion. Ces détecteurs sont placés de part et d'autre du plan incliné, à la hauteur de la deuxième graduation considérée comme le début du chronométrage, et de la sixième graduation considérée comme la fin du chronométrage, dans le cas des cellules photoélectriques. Pour les détecteurs à réflexion, ceux-ci sont placés à la surface du plan incliné à une distance plus ou moins variable en fonction de la sensibilité du détecteur utilisé. Cette distance est préférentiellement comprise entre 2 mm et 20 mm. Ces détecteurs peuvent être mobiles de manière à les disposer sur une graduation autre que la dernière, ceci en fonction de la viscosité du produit. Dans le cas d'une prise intermédiaire de mesure, il est possible de disposer différents détecteurs sur tout le trajet de l'écoulement. Ils sont reliés entre eux de telle manière qu'ils n'interrompent pas le chronométrage au cours de l'écoulement du produit, mais simplement à la dernière graduation. C'est ainsi qu'il est possible de monter en série quatre détecteurs au niveau de la deuxième graduation, chacun étant relié à un autre positionné sur chaque autre graduation. Au passage de chaque graduation, le produit interrompt le signal d'un des détecteurs sans interférer sur celui des autres. Dans ces conditions, des temps intermédiaires peuvent être déterminés voire enregistrés dans le but d'obtenir des profils d'écoulement de l'échantillon de préparation dans le temps. Le nombre de détecteurs positionné au niveau de la deuxième graduation peut être variable et dépend du nombre de graduations intermédiaires positionnées sur le trajet de l'échantillon de préparation. Ce nombre peut être compris 5 10 15 20 25 30 35 - 12 - entre 1 et 40. Dans le cas des cellules photoélectriques, leur déclenchement ne peut se faire que si la plaque inclinée présente des perforations pour laisser passer le rayon lumineux. Ces perforations se situent au niveau de la deuxième graduation et de la dernière ou peuvent être positionnées tout le long du trajet de l'écoulement. Plus que des perforations, une fente peut être réalisée tout le long de l'écoulement, les cellules étant toujours disposées à la hauteur des différentes graduations de la plaque. L'appréciation de la bio adhésivité d'un matériau se fait en calculant la différence entre l'écoulement du produit en présence de composants biologiques fixés sur la membrane cellulosique et celui obtenu sur la membrane cellulosique pure dite de référence. Ces deux mesures, en fonction de l'appareillage utilisé, peuvent se faire l'une après l'autre ou simultanément. Dans le cas d'une mesure simultanée, deux rampes de détecteurs sont montées sur le dispositif, déterminant dans chaque cas le temps d'écoulement dans les deux conditions de travail, avec ou sans solution de polymucosaccharides, la différence de temps se calculant manuellement. Cette différence peut être obtenue directement en positionnant des détecteurs sur les deux trajets mais reliés entre eux de telle façon que la lecture donne directement la différence de temps. Le montage le plus simple est le positionnement d'un détecteur en fin de trajet de la préparation testée sans polymucosaccharides (SP) imprégnées sur la membrane et un deuxième en fin de trajet de la préparation testée avec les polymucosaccharides (AP) imprégnées sur la membrane. Lorsque la préparation SP arrive en fin de trajet, le détecteur se déclenche entraînant le démarrage du chronomètre. Ce dernier s'arrête lorsque la préparation AP - 13 - passe au niveau du deuxième détecteur. L'enregistrement du temps total sur les deux membranes peut être effectué simultanément à l'enregistrement de la différence de temps. Ceci est obtenu en positionnant un détecteur au démarrage de l'écoulement sur chaque membrane déclenchant ainsi deux chronomètres indépendants de celui de la mesure différentielle. Leur arrêt est obtenu en positionnant un deuxième détecteur en fin d'écoulement. Ainsi, dans le cas de SP celui-ci arête le chronomètre de l'écoulement total et le deuxième agit comme précédemment en déclenchant le chronomètre de la mesure différentielle. Suivant la taille de la plaque inclinée, plusieurs expériences peuvent être réalisées simultanément. Par conséquent le nombre de perforations ou de fentes ainsi que celui des détecteurs pouvant être positionnés sur ce dernier, est variable et répond à un facteur 2. Les membranes utilisées pour la détermination de la bio adhésivité sont de nature cellulosique, la préférence allant aux membranes de cellulose pure ou à base d'esters de cellulose autre que la nitrocellulose. Ces membranes sont régénérées avant emploi soit dans l'eau déminéralisée soit dans une solution tamponnée aqueuse. 25 Par capillarité, ces membranes sont disposées sur la plaque inclinée, recouvrant les perforations destinées au passage du rayon lumineux des cellules photoélectriques. Elles sont maintenues en place par un simple retournement de l'excédent de membrane à chaque extrémité de la plaque 30 inclinée ou à l'aide de pinces recouvrant la largeur de la membrane ou encore à l'aide d'un système de pincement de la membrane incorporé à la plaque inclinée. Avant inclinaison de la plaque, un temps d'attente est nécessaire pour stabiliser le dépôt d'échantillons de 35 préparation. Suivant la viscosité de la préparation, le dépôt a tendance à plus ou moins s'étaler. Afin d'éviter 10 15 20 - 14 - que l'écoulement du dépôt ne soit influencer par les rebords de la membrane, effet de capillarité, suite à un étalement trop important, une largeur minimale de la membrane est requise, entre 20 mm et 60 mm. Après régénération de la membrane de référence, celle-ci est imprégnée soit par de l'eau déminéralisée ou par une solution tampon correspondant aux différentes valeurs de pH des sécrétions de l'organisme, telle que la salive, les larmes, le suc gastrique, le suc intestinal, les sécrétions vaginales et rectales. La quantité d'eau déminéralisée ou de solution tampon déposée à la surface de la membrane varie entre 0,5 ml et 3 ml. En ce qui concerne la solution de polymucosaccharides, celle-ci peut être constituée par de la mucine. En effet la mucine et ses dérivés sont les composants majeurs des muqueuses et des différentes sécrétions de l'organisme. En fonction de la préparation t testé, la concentration en polymucosaccharides dans le milieu aqueux ou tamponné peut varier de 0,5% à 10ô en masse par rapport au volume totale de la solution finale. Quel que soit le liquide d'imprégnation de la membrane, celui-ci est déposé à la surface de la membrane fixée sur la plaque maintenue à l'horizontale. Le dépôt est effectué à l'aide d'une pipette multi-canaux. Un étaleur classiquement utilisé en microbiologie permet de répartir de façon homogène le liquide à la surface de la membrane. Le dépôt de préparation muco-adhésive à tester peut être réalisé manuellement à l'aide d'une seringue. La hauteur du dépôt a été déterminée de telle sorte que le dépôt se stabilise rapidement avant inclinaison de la plaque. En effet, des études ont montré que la hauteur du dépôt influençait la vitesse d'écoulement de ce dernier. Ces variations sont liées à l'inertie d'une masse en mouvement. Cette inertie répond à l'équation suivante . - 15 - I = 1/2 MV2 Où . - I, représente l'inertie - M, la masse de produit en mouvement - V, la vitesse de déplacement de la masse en mouvement. Ainsi, plus le dépôt de la masse se fera à une hauteur élevée, plus l'inertie du produit sera importante (effet � boule de neige �), nécessitant un temps de stabilisation du dépôt plus long. Le tableau de la figure le montre les résultats obtenus à partir de plusieurs hauteurs de dépôt pour une solution à 3% en carraghénanes. Il en résulte que pour limiter le temps de stabilisation du produit déposé à 30 secondes, la hauteur du dépôt doit être comprise entre 2 mm et 15 mm. Afin d'éviter des fluctuations dans le temps d'écoulement dû à une variation de hauteur du dépôt, celui-ci peut être réalisé de façon automatique à l'aide d'un pousse seringue positionné à la verticale de la membrane, à une distance définie fixe, la plus faible possible. Dans le cas d'une mesure simultanée du temps d'écoulement sur les deux types de membranes imprégnées, le pousse seringue permet, de plus, le dépôt en parallèle du produit sur les deux membranes grâce à la présence de deux seringues actionnées au même moment. Suivant le nombre de mesures simultanées, le pousse seringue pourra être équipé d'autant de seringue répondant à un facteur 2. Un autre paramètre peut influencer la mesure du temps d'écoulement à savoir la température à laquelle est réalisée la détermination de la bio-adhésivité. En effet la majorité des préparations visqueuses sont sensibles à la température. Plus la température environnante est élevée, plus la viscosité des préparations diminue. Par conséquent le temps d'écoulement s'en trouvera altéré 5 10 15 20 25 30 35 - 16 - comme le montre le tableau de la figure ld montrant les résultats obtenus à partir de plusieurs températures de travail pour solution à 3% de carraghénanes). Afin d'annuler l'influence de ce facteur sur le temps d'écoulement des préparations bio-adhésives, le dispositif de mesure est placé dans une enceinte thermostatée dont la température de l'air est contrôlée. Cette dernière peut varier en fonction des préparations testées et des études effectuées de 15°C � 5°C à 50°C � 5°C. Que ce soit l'angle d'inclinaison de la plaque, le temps au bout duquel celle-ci doit être inclinée, la détermination des temps d'écoulement sur différentes distances, la dépose de la préparation à tester, et la température de travail, tous ces paramètres peuvent être programmés et pilotés par une unité de traitement électronique. Les exemples de dispositifs figurant ci-après sont des appareillages possibles selon la présente invention et ils ne les limitent en aucune façon. Ainsi, le dispositif de mesure le plus simple envisagé comprend : - un plaque de mesure indépendante de son support d'inclinaison. - un support d'inclinaison conduisant à un angle d'inclinaison de la plaque de 45°C, - un chronomètre se déclenchant manuellement au passage de la deuxième graduation et s'arrêtant manuellement au passage de la sixième graduation - une seringue d'injection de préparation indépendante du dispositif de mesure. Dans une forme plus évoluée du dispositif, l'appareillage peut comprendre : - une plaque de mesure placée à l'horizontale, - un système d'injection constitué d'un pousse seringue , solidaire de la plaque de mesure et disposé à la verticale de celle-ci à 1 cm - 17 - - un système d'inclinaison automatique de la plaque solidaire de cette dernière - un système automatique de chronométrage utilisant des cellules photoélectriques - un système de calcul des paramètres de bio- adhésivité temps d'écoulement, différence du temps d'écoulement, etc.... - et un système informatique de pilotage du dispositif. 15 20 25 30 35 REVENDICATIONS 1. Procédé de mesure de la bio adhésivité d'une préparation muco-adhésive, CARACTERISE EN CE QU'il consiste . - à disposer sur un même plan incliné, deux membranes biologiques, - à imprégner une des deux membranes biologiques, d'une solution de polymucosaccharides, - à injecter sur chacune des deux membranes 10 biologiques, un échantillon d'une même préparation mucoadhésive, - à chronométrer les temps d'écoulement des deux échantillons de la même préparation muco-adhésive injectés sur l'une et l'autre des deux membranes 15 biologiques, - et à mesurer la différence d'écoulement de manière à fournir une information représentative du caractère bio adhésif de ladite préparation muco-adhésive. 2. Procédé de mesure selon la revendication 1, 20 CARACTERISE EN CE QUE la membrane non imprégnée d'une solution de polymucosaccharides, est imprégnée d'eau déminéralisée ou d'une solution tampon 3. Procédé de mesure selon la revendication 1, CARACTERISE EN CE QUE la concentration en 25 polymucosaccharides de la solution est comprise entre 0,5ô et 10ô exprimée en poids par rapport au volume total de la solution. 4. Procédé de mesure selon la revendication 1, CARACTERISE EN CE QUE la susdite préparation muco-30 adhésive à mesurer est sous forme semi-solide. 5. Procédé de mesure selon la revendication 1, CARACTERISE EN CE QUE le composant biologique de la solution de polymucosaccharides est de la mucine ou un dérivé de mucine. 35 6. Dispositif permettant de mettre en oeuvre le procédé de mesure de la bio adhésivité d'une préparation- 19 - muco-adhésive selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, CARACTERISE PAR LE FAIT QU'il est constitué : - d'une plaque inclinée sur laquelle sont disposées au moins deux membranes biologiques dont l'une est imprégnée d'une solution de polymucosaccharides, - d'un système d'injection d'échantillons de préparation muco-adhésive sur les deux membranes, - et d'un système de chronométrage permettant de mesurer les temps d'écoulement de deux échantillons de la même préparation muco-adhésive injectés sur l'une et l'autre des deux membranes biologiques, ledit système de chronométrage étant relié à une unité de traitement électronique apte à fournir en sortie un signal représentatif du caractère bio adhésif de la susdite préparation. 7. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE la plaque inclinée présente des graduations tout le long du trajet d'écoulement. 8. Dispositif selon les revendications 6 et 7, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE la plaque inclinée présente des perforations au niveau des graduations tout le long du trajet d'écoulement. 9. Dispositif selon les revendications 6 et 7, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE la plaque présente une fente au niveau des graduations tout le long du trajet d'écoulement. 10. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE les membranes biologiques sont en cellulose ou dérivés de cellulose. 11. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE la largeur de la membrane est comprise entre 20 mm et 60 mm. 12. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE le système d'injection est constitué par 35 une seringue. 13. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE- 20 - PAR LE FAIT QUE le système d'injection est constitué par un pousse seringue avec au moins une seringue. 14. Dispositif selon les revendications 6 et 13, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE la seringue ou le pousse seringue est situé à une hauteur comprise entre 2 mm et 15 mm par rapport au plan horizontal de la plaque. 15. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE le système de chronométrage est constitués par des détecteurs constituées par des cellules photoélectriques et/ou des détecteurs à réflexion. 16. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE le système de chronométrage détermine un temps d'écoulement ou une différence de temps d'écoulement. 17. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE l'inclinaison de la plaque varie de 0° à 90°. 18. Dispositif selon la revendication 6, CARACTERISE PAR LE FAIT QUE la plaque inclinée, les deux membranes biologiques, le système d'injection et le système de chronométrage sont disposé dans une enceinte à température contrôlée. 30 35