FR 2924943 A1 20090619 FR 0759936 A 20071218 La présente invention se rapporte à une composition pharmaceutique, notamment dermatologique, à base d'un composé de la famille des dérivés de la vitamine D, et plus particulièrement le calcitriol, sous forme de nanocapsules dispersées dans une phase hydrophile. Elle porte également sur son procédé de préparation et sur son utilisation dans la préparation d'un médicament destiné au traitement des affections dermatologiques, en particulier du psoriasis. Les dérivés de la vitamine D, notamment le calcitriol, sont utilisés pour réguler le taux de calcium dans l'organisme. L'utilisation du calcitriol dans le traitement des maladies dermatologiques a notamment été décrite dans le brevet US 4,610,978 pour le traitement du psoriasis. A la lecture de l'art antérieur, les traitements existants contiennent souvent un fort pourcentage de vaseline pour favoriser l'occlusivité et la pénétration de l'actif mais présentent donc l'inconvénient d'être très gras et collants, ne favorisant pas ainsi le confort et la facilité d'application. Les autres types de compositions couramment fort pourcentage de glycol propénétrant afin de favoriser la pénétration de l'actif mais sont collants et peuvent provoquer des problèmes d'intolérance (� The critical role of the vehicle to therapeutic efficacy and patient compliance" Piacquadio & ail, Journal of American Academy of dermatology) rencontrées dans l'art antérieur contiennent un, August 1998). Le problème que se propose de résoudre ici la présente invention, est donc de concevoir une 25 composition stable physiquement et chimiquement, contenant du calcitriol pour le traitement du psoriasis, la composition selon l'invention permettant : - de protéger l'actif vis-à- vis de toute dégradation au contact de l'eau grâce à une enveloppe polymérique ; - de vectoriser l'actif ; 30 - et d'améliorer sa pénétration cutanée grâce à la petite taille des particules. Une telle composition apporterait en outre plus de confort au patient et garantirait une meilleure observance du traitement. Cependant, les dérivés de vitamine D, et notamment le calcitrol, sont instables dans les milieux aqueux, et sensibles aux pH acides. L'objectif de la présente invention est donc de réaliser une composition aqueuse qui atteint les 5 objectifs précités. A cette fin, il semble intéressant de travailler sur la structure de l'interface entre le milieu de solubilisation du calcitriol et la phase aqueuse. La présente invention a donc pour objet une composition, notamment pharmaceutique, comprenant au moins un dérivé de la vitamine D, de préférence le calcitriol, ladite composition 10 comprenant des nanocapsules dispersées dans une phase hydrophile continue, lesdites nanocapsules comprenant une enveloppe polymérique continue insoluble dans l'eau, une phase interne huileuse dans laquelle le dérivé de vitamine D est solubilisé et de préférence un enrobage lamellaire externe. 15 Comme le montrent les exemples, l'encapsulation du dérivé de vitamine D, notamment le calcitriol, permet de stabiliser l'actif en solution aqueuse à 4°C et à température ambiante. Ce type d'encapsulation permet donc de formuler un dérivé de vitamine D, et notamment le calcitriol, dans des formulations hydrophiles. Par ailleurs, les nanocapsules selon l'invention ont une structure qui imite celle du ciment 20 intercellulaire du stratum corneum. Par ce biomimétisme, notamment apporté par la nature de l'enrobage lamellaire externe, les nanocapsules présentent une bonne compatibilité avec la peau. La composition selon l'invention comprend de entre 0,00001 et 0,1% d'au moins un dérivé de la 25 vitamine D en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence de 0.0001 à 0.05%. De manière préférentielle, la composition selon l'invention contient de 0.0001% à 0.05% de calcitriol, de préférence de 0.003% à 0.015%. Par nanocapsule, on entend un système ayant une structure de type � noyau-enveloppe �, 30 c'est-à-dire une structure constituée d'une phase interne huileuse (ou � coeur lipidique �) liquide à température ambiante contenant le dérivé de vitamine D sous forme solubilisée, ladite phase interne huileuse étant encapsulée dans une enveloppe protectrice continue insoluble dans le milieu.5 De telles nanocapsules sont capables de traverser les couches supérieures de l'épiderme vivant pour y libérer le dérivé de vitamine D. Par température ambiante, on entend une température comprise entre 15 et 25°C. Par dérivés de vitamine D, on entend les composés choisis parmi le calcitriol, le calcipotriol et le {4-[6-Ethyl-4'-(1-ethyl-1-hydroxy-propyl) -2'-propyl-biphenyl-3-yloxymethyl]-2-hydroxymethylphenyl}-méthanol. De préférence, on utilisera le calcitriol. 10 Selon la présente invention, la composition comprend des nanocapsules et non des nanosphères. En effet, les nanosphères sont constituées d'une matrice polymère dans laquelle le principe actif est absorbé et/ou adsorbé et/ou mélangé, donc la totalité de la masse est solide. Lorsque les nanosphères contiennent un principe actif pharmaceutiquement acceptable, celui-ci est finement dispersé dans la matrice solide. 15 Les nanocapsules selon la présente invention ont une taille moyenne comprise entre 130nm et 600nm, de préférence comprise entre 150nm et 300nm, de préférence aux alentours de 250nm. Les nanocapsules sont présentes dans la composition selon l'invention en quantité comprise entre 0.1 et 50% en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence entre 0.5 20 et 25%. Les nanocapsules sont chacune constituées d'une phase interne huileuse (coeur lipidique) liquide à température ambiante, encapsulée dans une enveloppe protectrice, ladite enveloppe étant enrobée d'une phase lamellaire externe. 25 L'enveloppe protectrice est de nature polymérique ; le polymère peut être biodégradable ou non. Les nanocapsules en polymères biodégradables pénètrent dans la peau et se dégradent dans l'épiderme sous l'action des enzymes qui y sont présentes. En revanche, les nanocapsules en polymères non biodégradables ne sont pas dégradées par les enzymes de la peau, ne 30 pénètrent que dans les couches superficielles du stratum corneum et sont éliminées naturellement lors du renouvellement de la peau. 1) Comme polymères biodégradables, on peut utiliser tout polymère susceptible d'être dégradé par les enzymes de la peau, et notamment ceux cités dans le document EP-A-447318. On peut citer en particulier comme polymères biodégradables les poly-L- et DL-lactides et les polycaprolactones, les polyglycolides et leurs copolymères, ainsi que les polymères issus de la polymérisation d'alkyl cyanoacrylate (la chaîne alkyle ayant de 2 à 6 atomes de carbone). 2) Selon une variante de l'invention, le polymère biodégradable constituant l'enveloppe des nanocapsules peut être un polyester du type poly(alkylène adipate), c'est-à-dire soit un homopolymère d'acide adipique et d'un alcane-diol, soit un copolymère de type poly(ester éther), linéaire ou ramifié, obtenu à partir d'acide adipique et d'un ou de plusieurs alcane-diols et/ou éthers-diols et/ou triols. Les alcane-diols utilisés pour la préparation desdits poly(alkylène adipate) sont des alcane-diols en C2.6 à chaîne linéaire ou ramifiée choisis parmi l'éthylèneglycol, le propylèneglycol, le 1,3-propanediol, le 1,4-butanediol, le 1,5-pentanediol, le 1,6-hexanediol et le néopentylglycol. Les éther-diols sont des di-, tri- ou tétra-(alkylène en C2-4 )-glycols tels que le diéthylèneglycol, le triéthylèneglycol, le tétraéthylèneglycol, le dipropylèneglycol, le tripropylèneglycol, le tétrapropylèneglycol ou le dibutylèneglycol, le tributylèneglycol ou le tétrabutylèneglycol. Les triols utilisés sont généralement choisis parmi le glycérol, le triméthyloléthane et le triméthylolpropane. La fraction des motifs de ramification dérivés des triols ci-dessus n'excède généralement pas 5 0/0 en moles par rapport à l'ensemble des motifs dérivés de diols et de triols. Selon un mode de réalisation préféré de la présente invention, l'enveloppe des nanocapsules est formée par un poly(éthylène adipate) ou un poly(butylène adipate). Les poly(alkylène adipate) utilisés dans la présente invention ont une masse molaire moyenne en poids (mesurée par chromatographie de perméation de gel) qui est de préférence comprise entre 2000 et 50 000, plus préférentiellement entre 5 000 et 15 000. Toute une gamme de produits de différentes compositions chimiques et de différentes masses molaires est commercialisée sous la dénomination FOMREZ � par la société WITCO. La société SCIENTIFIC POLYMER PRODUCTS commercialise sous la dénomination POLY(ETHYLENE)ADIPATE � un poly(éthylène adipate) d'une masse molaire moyenne en poids (déterminée par CPG) d'environ 10 000. 3) Les polymères non-biodégradables utilisables selon l'invention peuvent être choisis parmi tous les polymères qui ne sont pas dégradés par les enzymes de la peau, et notamment les copolymères d'acide méthacrylique et d'ester méthylique d'acide méthacrylique, l'acéto-phtalate 5 de polyvinyle, l'acéto-phtalate de cellulose, les copolymères de polyvinylpyrrolidone-acétate de vinyle réticulé, les polyéthylènesvinylacétates, les polyacrylonitriles, les polyacrylamides, les polyéthylèneglycols, les polyamides, les polyéthylènes, les polypropylènes et les organopolysiloxanes, sans que cette liste soit limitative. De préférence, comme polymères biodégradables, on utilisera les polycaprolactones, telles que celles vendues par les Laboratoires Solvay sous le nom de � CAPA 6506 �. Parmi les polymères non biodégradables, on utilisera de préférence les copolymères d'acide 10 méthacrylique et d'ester méthylique d'acide méthacrylique. De préférence, on utilisera le mélange 30/70 d'acide méthacrylique/méthyle méthacrylate vendu sous le nom de � Eudragit S100 � par Degussa-Rohm Pharma. Le dérivé de vitamine D, notamment le calcitriol, se trouve ainsi solubilisé dans le coeur des 15 nanocapsules (phase interne huileuse), ledit coeur étant liquide à température ambiante. La composition de la phase interne huileuse est donc essentielle pour la stabilité du principe actif. Par ailleurs, la phase interne huileuse doit bien entendu être compatible avec l'actif à solubiliser. 20 Cette phase interne huileuse comprend au moins un solvant huileux, choisi parmi les esters de tocophérols, et les triglycérides et huiles en contenant. Parmi les triglycérides et huiles en contenant, on préfère les triglycérides d'acide octanoïque ou encore les huiles de tournesol, de maïs, de soja, de courge, de pépins de raisin, de sésame, de noisette, d'abricot, de macadamia, d'arara, de ricin, d'avocat, les triglycérides des acides 25 caprylique/caprique comme ceux vendus par la société Stearineries Dubois ou ceux vendus sous les dénominations Miglyol 810, 812 et 818 par la société Dynamit Nobel, l'huile de jojoba, et l'huile de beurre de karité. De préférence, le solvant huileux est choisi parmi l'acétate de vitamine E et les triglycérides des acides caprylique/caprique, comme le Mygliol 812N. 30 En sus de ce(s) solvant(s) huileux, la phase interne peut également comprendre un ou plusieurs corps gras liquides ou semi-liquides à température ambiante non solubilisants de l'actif, tels que: - des 2-alkyl alcanols, comme : le butyloctanol, l'hexyldécanol, l'octyldécanol, l'alcool isostéarylique, l'octyldodécanol, le décyltétradécanol, le undécylpentadécanol, le dodécylhexadécanol, le tétradécyloctadécanol, l'hexyldécyloctadécanol, le tétradécyleicosanol, le cétylarachidol et le mélange d'alcools iso-cétylique, iso-stéarylique et iso-arachidylique. Tous ces composés sont disponibles dans le commerce, auprès de CONDEA VISTA sous la dénomination commerciale Isofol�, de EXXON CHEMICAL sous la dénomination Exxal� ou de JARCHEM sous la dénomination Jarcol�. On peut également utiliser le composé disponible auprès de HENKEL sous la dénomination commerciale EUTANOL G. Comme esters desdits alcools, on peut citer : I'octanoate d'octyldodécyle ; le caprylate d'hexyldécyle ; le laurate d'hexyldécyle ; le palmitate d'hexyldécyle ; le stéarate d'hexyldécyle ; et I'octyldodécyle meadowfoamate, qui est un ester d'octyldodécanol et d'acides gras dérivés d'huile de germe de Limnanthes Alba ; - des esters d'acides gras ou d'alcools gras, tels que le palmitate d'isopropyle, le néopentanoate d'isostéaryle et le palmitate d'octyle ; -des esters d'acide aminé N-acylé et d'alcool gras, tels que le N-lauroyl sarcosinate d'isopropyle ;et - des éthers liquides d'alcool gras et de polypropylèneglycol, tel que l'éther stéarylique de polypropylène glycol renfermant 15 motifs propylène glycol. Le(s) solvant huileux est(sont) présent(s) en quantité comprise entre 90 et 99.99% en poids par rapport au poids total de la phase interne ; et en quantité comprise entre 1 et 10% en poids par 20 rapport au poids total de la composition, de préférence entre 2 et 8%. Dans un mode préféré selon l'invention, les nanocapsules sont constituées d'une phase interne huileuse (coeur lipidique) liquide à température ambiante, cette phase étant encapsulée dans une enveloppe protectrice, ladite enveloppe étant enrobée d'une phase lamellaire externe. 25 Par phase lamellaire externe, on entend une structure organisée en un ou plusieurs feuillet(s) lipidique(s) constitué(s) chacun d'une bicouche de molécules amphiphiles semblable à celle des membranes biologiques. Ces molécules sont appelées agents d'enrobage. Cet enrobage, outre sa fonction d'ajustement de la taille des nanocapsules, améliore l'étanchéité des nanocapsules vis-à-vis d'une fuite du principe actif vers d'autres phases lipidiques de la composition. 30 Les agents d'enrobage sont des agents tensioactifs à caractère hydrophobe solubles dans la phase organique utilisée dans le présent procédé et qui sont capables, en présence d'eau, de former les doubles couches lipidiques décrites ci-dessus. Dans le procédé d'encapsulation de principes actifs utilisé par la demanderesse, cet agent d'enrobage est dissous dans la phase organique (acétonique/alcoolique) contenant le polymère et la phase lipidique. On peut citer à titre d'exemple de tels agents d'enrobage les phospholipides tels que la lécithine selon la demande EP-A-447 318, certains polycondensats d'oxyde d'éthylène et d'oxyde de propylène comme les produits vendus sous la dénomination PLURONIC(Registered trademark) par la société BASF tels que PLURONIC L121 ou sous la dénomination SYNPERONIC(Registered trademark) par la société ICI, ou certains agents tensioactifs siliconés, tels que ceux décrits dans les documents US-A-5 364 633 et US-A-5 411 744 et utilisés dans la demande de brevet FR-A-2 742 677, par exemple ceux vendus par la société DOW CORNING sous les dénominations DC 5329, DC 7439-146, DC 2-5695 et Q4-3667. La phase hydrophile continue comprend de l'eau. Cette eau peut être de l'eau déminéralisée, une eau florale telle que l'eau de bleuet, ou une eau thermale ou minérale naturelle, par exemple choisie parmi l'eau de Vittel, les eaux du bassin de Vichy, l'eau d'Uriage, l'eau de la Roche Posay, l'eau de la Bourboule, l'eau d'Enghien-les-Bains, l'eau de Saint Gervais-les-Bains, l'eau de Néris-les-Bains, l'eau d'Allevard-les-Bains, l'eau de Digne, l'eau de Maizières, l'eau de Neyrac-les-Bains, l'eau de Lons-le-Saunier, les Eaux Bonnes, l'eau de Rochefort, l'eau de Saint Christau, l'eau des Fumades et l'eau de Tercis-les-bains, l'eau d'Avène ou l'eau d'Aix les Bains. L'eau peut être présente à une teneur comprise entre 70 et 90 % en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence comprise entre 80 et 90 % en poids. La phase hydrophile peut également comprendre un tensioactif hydrosoluble, ou bien d'autres composés hydrophiles tels que des agents conservateurs ou des humectants. Par tensioactif hydrosoluble, on entend un tensioactif soluble à au moins 1% dans l'eau, la solution obtenue devant être parfaitement limpide. Comme tensioactif hydrosoluble, on peut citer les poloxamers, tels que le Synperonic PE/F68 ou le poloxamer 188. Parmi les agents conservateurs utilisables, on peut citer notamment les parabens ou le phénoxyéthanol. Parmi les humectants utilisables, on peut citer notamment la glycérine. La phase hydrophile peut également comprendre un agent gélifiant. Cet agent gélifiant est de préférence un dérivé cellulosique choisi parmi les gélifiants cellulosiques semi-synthétiques, tels que la méthylcellulose, l'éthylcellulose, l'hydroxypropylméthylcellulose, l'hydroxyéthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, et l'hydroxypropylcellulose, pris seuls ou en mélange. On utilise de préférence l'hydroxypropylméthylcellulose ou l'hydroxyéthylcellulose. Ces composés sont notamment commercialisés par la société Dow Chemical sous le nom de 20 Methocel� (par exemple : Methocel� E4M) ou par la société Hercules sous le nom de Natrosol� (par exemple : Natrosol� 250 HHX). L'agent gélifiant peut également être choisi parmi les gommes naturelles comme la gomme de tragacanthe, la gomme de guar, la gomme d'acacia, la gomme arabique, l'amidon et ses dérivés, les copolymères d'acide polyacrylique et de methylmethacrylate, les carboxyvinyl polymères, les polyvinyl pyrrolidones et leurs dérivés, les polyvinyl alcools, l'alginate de sodium, la pectine, la dextrine, le chitosan, pris seuls ou en mélange. L'agent gélifiant est utilisé notamment à une concentration comprise entre 0.1 et 10% en poids, de préférence entre 0.1 et 2% en poids. La composition pharmaceutique utilisable selon l'invention est destinée au traitement de la peau et peut être administrée par voie topique, parentérale ou orale. De préférence, la composition est administrée par voie topique. Par voie orale, la composition pharmaceutique peut se présenter sous forme liquide, ou pâteuse, et plus particulièrement sous formes de gélules, de dragées, ou de sirops. Par voie parentérale, la composition peut se présenter sous forme de suspensions pour perfusion ou pour injection. Par voie topique, la composition peut se présenter sous forme liquide, ou pâteuse, et plus particulièrement sous forme de crèmes, de laits, de pommades, de tampons imbibés, de syndets, de lingettes, de gels, de sprays, de mousses, de lotions, de sticks, de shampoings, ou de bases lavantes. 25 La composition comprenant les nanocapsules comprend ainsi de préférence dans l'eau, en poids par rapport au poids total de la composition : a) 0.1 à 5% de polymère biodégradable ou non biodégradable ; b) 1 à 20% de solvant huileux à température ambiante, de préférence de l'acétate de 30 vitamine E ou des triglycérides des acides caprylique/caprique ; c) entre 0,00001 et 0,1% d'au moins un dérivé de la vitamine D, et de préférence de préférence de 0.0001 à 0.05%.de calcitriol ; d) 0 à 2% de gélifiant, de préférence un dérivé cellulosique. Dans un mode préféré, la composition selon l'invention comprend également un agent d'enrobage, tels les phospholipides précédemment décrits. La composition pharmaceutique selon l'invention pourra en outre contenir des additifs inertes ou des combinaisons de ces additifs, tels que - des agents conservateurs; - des agents propénétrants ; - des agents stabilisants ; - des agents régulateurs d'humidité ; - des agents régulateurs de pH ; - des agents modificateurs de pression osmotique ; -des filtres UV-A et UV-B ; - et des antioxydants. Parmi les propénétrants utilisables selon l'invention, on peut notamment citer le propylène glycol, la N-méthyl-2-pyrrolidone, ou encore le diméthylsulfoxyde. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir le ou les éventuels composés à ajouter à ces compositions de telle manière que les propriétés avantageuses attachées intrinsèquement à la 20 présente invention ne soient pas ou substantiellement pas altérées par l'addition envisagée. Ces additifs peuvent être présents dans la composition de 0.001 à 20% en poids par rapport au poids total de la composition. 25 L'invention a également pour objet un procédé de préparation des nanocapsules comprenant au moins un dérivé de la vitamine D, de préférence le calcitriol, et de compositions les comprenant. Ce procédé fait appel à la précipitation des polymères préformés. Le procédé mis en oeuvre dans la présente invention comprend ainsi les étapes suivantes : 30 (i) Préparation d'une phase organique par mélange d'au moins un dérivé de vitamine D, du polymère biodégradable ou non biodégradable, du solvant huileux, d'un agent d'enrobage et d'un solvant organique. (ii) Préparation d'une phase hydrophile par mélange de l'eau avec un tensioactif hydrosoluble. (iii) Mélange des phases (i) et (ii), afin d'obtenir la composition telle définie plus haut comprenant des nanocapsules dispersées dans une phase hydrophile continue. Le solvant organique utilisé à l'étape (i) doit être miscible avec l'eau, et le polymère doit y être soluble. De préférence, le solvant organique est l'acétone, les alcools inférieurs, par exemple l'éthanol ou l'isopropanol, ou encore le méthylal et l'acetate d'ethyle, ou des mélanges de ces solvants. L'agent d'enrobage doit former spontanément une phase lamellaire par contact avec l'eau. De préférence, le rapport solvant : eau est compris entre 0.05 et 0.5. Les nanocapsules se forment ainsi par le mécanisme suivant : 1) une solution saturée de solvant, notamment l'acétone, se forme à l'interface des phases organique (i) et hydrophile (ii) ; 2) le solvant diffuse dans l'eau ; 3) des gouttelettes de solvant huileux se forment ; 4) le polymère précipite sur les gouttelettes de solvant huileux. L'invention a également pour objet l'utilisation des nanocapsules selon l'invention, et des compositions les comprenant, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter les affections dermatologiques humaines. L'invention a également pour objet les nanocapsules selon l'invention telles que définies plus 25 haut pour leur utilisation dans le traitement des affections dermatologiques humaines. L'utilisation des nanocapsules, et compositions les comprenant, selon l'invention est plus particulièrement destinée au traitement du psoriasis. 30 II va être maintenant donné, à titre d'illustration et sans aucun caractère limitatif, diverses formulations de compositions comprenant le calcitriol. Exemple 1 : Etude de préformulation du calcitriol Des études préliminaires de préformulation ont été conduites pour orienter le choix du coeur lipidique (phase interne huileuse) d'une part et le choix de la phase solvante (solvant organique) d'autre part. a) Etude de la solubilité et la stabilité du calcitriol dans les solvants huileux : 1) Calcitriol dans le Mygliol Calcitriol 800ppm dans Miglyol 812 4°C TA +40°C Temps de Nb Teneur Rec. Teneur Rec. Teneur Rec. stabilité jours (pg/g) %/t=0 (pg/g) %/t=0 (pg/g) %/t=0 t = 0 0 1011.5 100% 1011.5 100% 1011.5 100% t+2 semaines 14 1020.2 100.9% 1029.6 101.8% 1028.7 101.7% t+4 semaines 28 1009.4 99.8% 1013.6 100.2% 1013.1 100.2% 2) Calcitriol dans l'acétate de Tocophérol Calcitriol 800ppm dansAcetate de tocophérol 4°C TA +40°C Temps de Nb Teneur Rec. Teneur Rec. Teneur Rec. stabilité jours (pg/g) %/t=0 (pg/g) %/t=0 (pg/g) %/t=0 t = 0 0 805.1 100% 805.1 100% 805.1 100% t+2 semaines 14 856.6 106.4% 826.9 102.7% 840.0 104.3% t+4 semaines 28 792.5 98.4% 817.0 101.5% 834.6 103.7% Ces études préliminaires ont pour but de trouver l'huile qui sera la meilleure candidate pour solubiliser le Calcitriol et dans laquelle il est stable. Résultats: Le Calcitriol est stable 1 mois à 800ppm aux trois températures dans le Miglyol et l'acétate de tocophérol. A l'issue de cette étude, le Miglyol et l'Acétate de tocophérol ont été choisis pour la réalisation 20 du coeur huileux des nanocapsules. b) Etude la solubilité du calcitriol dans des mélanqes eau/acétone afin de définir le meilleur rapport phase solvante / phase dispersante : 1520 Le but étant de trouver le meilleur ratio de mélange eau/solvant organique dans lequel le Calcitriol n'est pas soluble de manière à ce qu'il ne s'échappe pas de son coeur huileux et ne rentre pas en contact avec l'eau, dans laquelle il est instable lors du procédé de fabrication. Le solvant retenu est l'acétone ; il permet de solubiliser le polymère lors du procédé de fabrication. Calcitriol 800ppm dansmélange eau/acétone (v/v) Mél 1 Mél 2 Mél 3 Teneur Rec. Teneur Rec. Teneur Rec. (pg/g) %/t=0 %/t=0 (pg/g) %/t=0 (pg/g) 7.3 0.8% 64.2 7.2% 493.3 55.2% Résultats: La solubilité du calcitriol est inversement proportionnelle à la teneur en eau du mélange binaire. Sélection des paramètres : - Phase huileuse : Miglyol ; - Ratio phase aqueuse / phase organique 4:1. Exemple 2 : Exemples de Formulations Description des constituants de la formulation : A base de poly-E-caprolactone : Ingrédients Dénomination chimique Fonction Eau purifiée Eau purifiée Véhicule Synperonic PE/F68 Poloxamer 188 Tensio-actif Nipagin M Méthyl Parahydroxybenzoate Conservateur antibactérien Epikuron 145V Lécithine agent d'enrobage CAPA 6506 Poly-e-caprolactone Polymère synthétique biodégradable Calcitriol 0.3% Miglyol Triglycéride caprylique/Caprique Solution mère d'actif solution Phenoxetol Phénoxyéthanol Conservateur antibactérien 25 10 Formules 0 à 3 : N° de FORMULE 0 1 2 3 Phase Ingrédients 1 Eau Purifiée 92.50 91.50 90. 80 89.30 1 Nipagin M - - 0.20 0.20 1 Synperonic PE/F68 0.50 0.50 1.00 1.50 2 Epikuron 145V 1.00 1.00 1.00 1.00 2 CAPA 6506 - 1.00 2.00 3.00 2 Calcitriol 0.3% Miglyol 5.00 5.00 5.00 5.00 Solution 3 Phénoxyéthanol 1. 00 1.00 - - La formule 0 correspond à la formulation 1 sans enveloppe polymère, soit une nanoémulsion 5 sans paroi polymèrique. A base d'Eudragit S100 : Ingrédients Dénomination chimique Fonction Eau purifiée Eau purifiée Véhicule Span 60 Sorbitan Stéarate Tensio-actif Nipagin M Méthyl Parahydroxybenzoate Conservateur antibactérien Tween 80 Polysorbate 80 Agent d'enrobage Eudragit S100 Copolymère d'acide Polymère synthétique méthacrylique/méthyle méthacrylate Calcitriol 0.3% Miglyol Triglycéride Solution mère d'actif solution caprylique/Caprique Phenoxetol Phénoxyéthanol Conservateur antibactérien Formule 4 à 6 : N° de FORMULE 4 5 6 Phase Ingrédients 1 Eau Purifiée 91.50 91.3 89. 3 1 Nipagin M - 0.2 0.2 1 Synperonic PE/F68 0.50 - - 1 Span 60 0.5 1 2 Tween 80 1 1.5 2 Epikuron 145V 1.00 - - 2 Eudragit S100 1.00 1 3 2 Calcitriol 0.3% Miglyol Solution 5.00 5 5 3 Phénoxyéthanol 1.00 1 - 135 Formule 7 à 8 : Nanocapsules polymériques qélifiées N° de FORMULE 7 8 Concept Triple Eudra Triple Capa Ingrédients Eau Purifiée 97.57 97.57 Nipagin M 0.23 0.23 Synperonic PE/F68 - 0.20 Span 60 0.13 - Natrosol HHX 0.80 0.80 Tween 80 0.20 - Epikuron 145V - 0.13 Eudragit S100 0.40 - Calcitriol 0.3% Miglyol 0.67 0.67 Solution CAPA 6506 - 0.40 Exemple 3 : Mode Opératoire des formulations 1ère étape : Préparation de la Phase aqueuse : 10 1/ Tarer 1 bécher formulaire de 1000ml 2/ Peser successivement : l'eau (400m1), le tensioactif (Synperonic PE/F68 ou Span 60) et le conservateur antimicrobien (Nipagin M). 3/ Une fois la phase aqueuse pesée, la placer sous agitation Rayneri lente, puis chauffer à 85°C 15 pour assurer la solubilisation du Nipagin M. 4/ Enfin laisser la température redescendre à 45°C. 2ème étape : Préparation de la Phase organique : 20 1/Tarer 1 bécher de 250 ml 2/Peser successivement : - La solution mère huileuse de calcitriol - La CAPA 6506/ l'Eudragit S100 - L'Epikuron 145V / ou Tween 80 25 - L' Acétone (100m1 équivalent à 79g pour être au ratio eau/ acétone équivalent à 4/1) 30 3/ Une fois la phase organique pesée, la placer sous agitation magnétique, puis chauffer à 50°C. 3eme étape : Emulsification Verser la phase organique dans la phase aqueuse, sous agitation Rayneri sous cisaillement fort pendant environ 10 minutes. 4eme étape : Evaporation : 10 1/ Tarer un ballon rodé de 1000ml, 2/ Transférer l'émulsion obtenue dans le ballon rodé de 1000ml. 3/ Placer le ballon sur l'évaporateur rotatif et allumer le bain Marie à 40°C 4/ Procéder à l'évaporation du solvant sous vide avec une vitesse de rotation de 10 rpm. 15 Cette étape doit permettre d'évaporer la totalité de l'acétone ainsi que les 3/4 de la quantité d'eau afin d'obtenir 50g de produit au final, soit une teneur de 5% en phase huileuse. 5/ Introduire le Phénoxyéthanol à la fin de la fabrication et homogénéiser sous agitation magnétique. 20 Pour les exemples 7 et 8, les formes gélifiées des nanocapsules polymériques, un base gélifiée est mise en oeuvre avec un dérivé cellulosique, base dans laquelle on incorpore la solution concentrée de Nanocapsules polymériques. 25 Exemple 4 : ETUDES DE STABILITE PHYSIQUE des formulations de l'exemple 2 La stabilité physique des compositions est mesuré par granulométrie. La granulométrie mesure le diamètre moyen des particules dans la composition, mesure réalisée au moyen d'un granulomètre laser de type Zetasizer de marque Malvern. La formule � simple enveloppe � correspond à 1% de poly-e-caprolactone ou d'Eudragit S100. (Formules 1, 4 et 5) La formule � double enveloppe � correspond à 2% de poly-e-caprolactone. (Formule 2) 15 La formule � triple enveloppe � correspond à 3% de poly-E-caprolactone ou d'Eudragit S100. (Formules 3) Les formulations ont été suivies sur 3 à 6 mois à 4°C, température ambiante et 40°C. 1 2 3 5 Concept poly-E- poly-E- poly-E- Eudragit caprolactone caprolactone caprolactone Type d'enveloppe simple double triple simple Taille (nm) TO 196 222 212 198 pH TO ND 5.32 4.72 4.61 T1 TA 196 211 211 215 Mois +4°C 199 220 ND 203 +40°C 149 216 215 284 T2 TA 192 213 209 241 Mois +4°C 196 218 ND 208 +40°C 196 225 218 333 T3 TA 197 217 213 Mois +4°C 192 212 210 +40°C 202 230 227 T6 TA 195 216 213 Mois +4°C 195 220 210 +40°C 209 231 227 ND : Non déterminé La granulométrie est stable au cours du temps, 3 à 6 mois selon les formules, et quelles que 10 soient les conditions de température. Nous avons donc réussi à obtenir un système physiquement stable. Exemple 5 : Stabilité chimique des formules Formule 3 5 TO 151 pg/g 140pg/g 4°C 4°C TA T1 mois(% p/r TO) 95% 99% 91 % T2mois (% p/r TO) 95% 103% 96% T3mois (% p/r TO) 91 % 82% - Les nanocapsules à base de poly-E-caprolactone augmentent la stabilité du Calcitriol dans l'eau à 4°C et cette stabilité est d'autant meilleure que la quantité de polymère est plus importante : 1 20 à 3%. 10 Le Calcitriol en solution aqueuse se dégrade d'autant plus rapidement que la température augmente. Les nanocapsules à base d'Eudragit S100 permettent de stabiliser le Calcitriol en phase aqueuse à 4°C et à température ambiante. Résultats de la stabilité chimique du calcitriol dans les formulations gélifiées des nanocapsules polymériques : Formule 7 8 Concept Triple CAPA Triple EUDRAGIT TO 18.5 pg/g 18.0 pg/g 4°C Tamb 4°C Tamb Tl mois 106% 102% 110% 98% T3mois 107% 95% 107% 87% T5 mois 107,4 107 T7.5 mois 104 103 T8 mois 112 101 T 9 mois 113 102 Pour la formule 8, formule pour laquelle la poly-e-caprolactone est mis en oeuvre pour former les nanocapsules, la gélification de la phase hydrophile permet d'améliorer la stabilité chimique du calcitriol en comparaison aux résultats chimiques obtenus avec la formule 3 15 Exemple 6 : Test in-vivo de libération des formulations de nanocapsules ciélifiées Une évaluation de la libération du calcitriol à partir des nanocapsules a été réalisée grâce à des tests in-vivo. Les deux polymères ont été testés dans les formes gélifiées (exemple 7 et 8) avec différents 20 dosage en calcitriol compris 5, 10 et 20 ppm. La libération du calcitriol dans les nanocapsules a été comparée à celle d'une solution ethanolique de calcitriol à 10 ppm. Application des différentes formulations à évaluer pendant 6 jours consécutifs et prélèvement 25 sanguin après 48h sans application. Le dosage du calcium dans le plasma ainsi que la perte de poids permet d'évaluer la libération ainsi que la toxicité de nos différentes formulations. REVENDICATIONS 1. Composition comprenant au moins un dérivé de la vitamine D choisi parmi le calcitriol, le calcipotriol et le {4-[6-Ethyl-4'-(1-ethyl-1-hydroxy-propyl) -2'-propyl-biphenyl-3-yloxymethyl]-2-hydroxymethyl-phenyl}-méthanol, caractérisée en ce qu'elle comprend des nanocapsules dispersées dans une phase hydrophile continue, lesdites nanocapsules comprenant une enveloppe polymérique continue insoluble dans l'eau et une phase interne huileuse dans laquelle le dérivé de vitamine D est solubilisé. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le dérivé de vitamine D est le calcitriol. 3. Composition selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que la phase interne huileuse des nanocapsules comprend au moins un solvant huileux choisi parmi 15 les esters de tocophérols et les triglycérides des acides caprylique/caprique. 4. Composition selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l'enveloppe polymérique comprend au moins un polymère choisi parmi les polycaprolactones et les copolymères d'acide méthacrylique et d'ester méthylique d'acide méthacrylique. 5. Composition selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que les nanocapsules sont présentes en quantité comprise entre 0.1 et 50% en poids par rapport au poids total de la composition. 25 6. Composition selon l'une des revendications 3 à 5, caractérisée en ce que le solvant huileux est présent en quantité comprise entre 90 et 99.99% en poids par rapport au poids total des nanocapsules. 7. Composition selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que la phase 30 hydrophile continue comprend un tensioactif hydrosoluble. 8. Composition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que la phase hydrophile continue comprend un agent gélifiant. 5 9. Composition selon la revendication 8, caractérisée en ce que l'agent gélifiant est un dérivé cellulosique choisi parmi la méthylcellulose, l'éthylcellulose, l'hydroxypropylméthylcellulose, l'hydroxyéthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, et l'hydroxypropylcellulose, pris seuls ou en mélange. 10. Composition selon l'une des revendications 1 à 9, caractérise en ce que les nanocapsules sont entourées par un agent d'enrobage lamellaire. 11. Composition selon l'une des revendications 3 à 10, caractérise en ce qu'elle comprend 10 dans l'eau, en poids par rapport au poids total de la composition : a) 0.1 à 5% de polymère choisi parmi les polycaprolactones et les copolymères d'acide méthacrylique et d'ester méthylique d'acide méthacrylique ; b) 1 à 20% de solvant huileux ; c) 0.0001 % à 0.05% d'au moins un dérivé de vitamine D ; 15 d) 0 à 2% de gélifiant. 12. Composition selon l'une des revendications 1 à 11, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme adaptée pour une administration topique. 20 13. Composition selon l'une des revendications 1 à 12, à titre de médicament. 14. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications 1 à 12, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement d'affections dermatologiques. 25 15. Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que l'affection dermatologique est le psoriasis. 16. Procédé de préparation d'une composition selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : 30 (i) Préparation d'une phase organique par mélange d'au moins un dérivé de vitamine D avec un polymère biodégradable ou non biodégradable, un solvant huileux, un agent d'enrobage et un solvant organique ; (ii) Préparation d'une phase hydrophile par mélange d'eau avec un tensioactif hydrosoluble ; (iii) Mélange des phases organique et hydrophile.