FR 2926993 A1 20090807 FR 0800618 A 20080206 ASSOCIATION ENTRE UN SEL DE BIS-THIAZOLIUM OU L'UN DE SES PRECURSEURS ET L'ARTÉMISININE OU L'UN DE SES DERIVES POUR LE TRAITEMENT DU PALUDISME La présente invention se rapporte à une nouvelle association de principes actifs antipaludiques, à savoir un sel de bis-thiazolium ou l'un de ses précurseurs et l'artémisinine ou ses dérivés, ainsi qu'à une composition pharmaceutique comprenant une telle association, utile pour le traitement et/ou la prévention du paludisme. Le paludisme est l'une des premières causes infectieuses de mortalité au monde et touche annuellement plus de 500 millions de personnes, parmi lesquelles 1,5 à 3 millions décèdent chaque année. Ce fléau touche principalement l'Afrique subsaharienne, l'Asie du Sud-Est et l'Amérique Latine. Quatre types de parasites du genre Plasmodium (P. falciparum, P. malariae, P. vivax et P. ovale), véhiculés par les moustiques Anophèles, propagent le paludisme. Plasmodium falciparum, largement répandu en Afrique, est le parasite le plus virulent et est responsable de la plupart des formes mortelles de la maladie. La forte recrudescence de la maladie observée depuis quelques années est due à plusieurs facteurs, parmi lesquels la résistance de nombreuses souches de Plasmodium falciparum aux médicaments actuellement utilisés, tels que la chloroquine, la méfloquine, l'amodiaquine ou encore les antifoliques et antifoliniques tel que la pyriméthamine et la sulfadoxine. Beaucoup d'individus atteints de paludisme présentent une infection aiguë, avec peu de signes physiques révélateurs à part une anémie légère et une augmentation de volume de la rate (splénomégalie). Les symptômes dépendent de la variété de paludisme. Néanmoins, les caractères cliniques généraux sont : malaise, hyperthermie (fièvre), céphalées, troubles digestifs tels que nausées, vomissements et/ou douleurs abdominales, diarrhée, asthénie, douleurs des muscles, arthralgies (douleurs des articulations) et ictère, notamment. Le traitement s'effectue en général par l'administration de chloroquine (ou de chlorhydrate basique de quinine en cas de résistance à la chloroquine) jusqu'à obtention d'une amélioration et disparition des parasites dans le sang (entre 3 et 5 jours habituellement). Le patient prend généralement ensuite un médicament unique constitué de 1,5 grammes de sulfadoxine et de 75 mg de pyrirnéthamine. D'autres traitements à base d'anti-foliques et d'anti-foliniques, ou encore à base de malarone, sont également utilisés. Le paludisme sévère à Plasmodium falciparum est un paludisme cérébral associant une élévation importante de la température (40°C) et un coma de mauvais pronostic malgré le traitement et pour lequel la mortalité s'élève parfois à 20 % chez les adultes et 15 % chez les enfants. L'apparition d'un paludisme sévère est soit progressive soit brutale. Il débute après des convulsions instantanées et passagères d'un ou plusieurs muscles, suivies de décontractions. Elles sont localisées ou généralisées à l'ensemble du corps. Cette variété de paludisme s'accompagne d'un nystagmus (tressautement des yeux dans le plan horizontal de façon incessante), quelquefois d'une raideur du cou et d'une perturbation des réflexes. Le paludisme sévère peut s'accompagner également d'hémorragies de la rétine, d'hypoglycémie, d'oedèmes pulmonaires, d'atteinte des reins, d'anémie, et/ou d'hématémèse (rejet de sang provenant des organes lésés et qui est dégluti, puis réapparaît sous forme d'une hémorragie accompagnant le vomissement). Dans le cas de Plasmodium falciparum causant un paludisme compliqué ou paludisme cérébral ainsi que les autres manifestations sévères, il s'agit d'urgence médicale quand 1 % des hématies (globules rouges) ou plus sont parasités chez un sujet qui n'est pas encore immunisé contre cette maladie. Le traitement dans le cas du paludisme sévère a pour priorité de faire baisser de manière massive et rapide (dans les 24 à 48 heures suivant la prise en charge) la parasitémie pour écarter le pronostic létal. Une fois la parasitémie maitrisée et le pronostic vital confirmé, un traitement anti-paludique plus classique, tel que chloroquine ou chlorhydrate basique de quinine par exemple, peut être administré. Le traitement du paludisme sévère est difficilement administrable par voie orale ou rectale, les patients étant souvent atteints de vomissements accompagnés de 25 diarrhées importantes. Isolée en 1972 de la plante Artemisia annua (qinghaosu), utilisée depuis des siècles en Chine, l'artémisinine présente une puissante activité antipaludique. Des dérivés aux propriétés pharmacologiques améliorées, tels que l'artéméther, l'artééther et 30 l'artésunate sont aussi commercialisés. L'artémisinine et ses dérivés, en particulier l'artésunate, font aujourd'hui partie des principes actifs les plus efficaces contre Plasmodium falciparum. Cependant, ces composés conduisent difficilement à des guérisons complètes et on note de nombreuses recrudescences. L'utilisation d'artésimine ou de ses dérivés en monothérapie pourrait 35 donc être un facteur causal de sélection de souches parasitaires résistantes. La communauté scientifique préconise maintenant l'utilisation d'associations de principes actifs, et en particulier d'associations de l'artémisine ou de ses dérivés avec 3 d'autres principes actifs antipaludiques. Ces polythérapies, nommées ACT (Artemisininbased Combination Therapies), sont recommandées depuis 2002 par l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS). Elles offrent de multiples avantages : amélioration de l'efficacité thérapeutique sur les souches résistantes, protection mutuelle des deux principes actifs contre l'apparition de résistance, réduction de la transmission de la maladie et de la propagation des résistances. Plusieurs associations de ce type sont connues. L'association entre l'artéméther et la luméfantrine, commercialisée sous la dénomination Coartem°, a par exemple été proposée, ainsi que l'association entre 10 l'artésunate et l'amodiaquine (Arsucam°). L'association de la ferroquine avec un dérivé d'artémisinine est décrite dans le document WO 2006/111647. Cependant, l'effet bénéfique des polythérapies ACT n'est ni évident ni prévisible. Par exemple, il est exposé dans la publication de C. Snyder et al., Experimental 15 Parasitology 115 (2007), 296-300, que l'association de la pipéraquine avec le composé OZ277 semble plus prometteuse que l'association de la pipéraquine avec un dérivé d'artémisinine tel que l'arthéméther. De même, l'association entre la chloroquine et l'artésunate n'atteint pas des niveaux d'efficacité satisfaisants (Am. J. Trop. Med. Hyg., 2003, 69(1), 19-25 et 20 Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene, 2003, 97, 429-433) et peut conduire à la sélection de souches résistantes, notamment à la chloroquine. Ainsi, même si la stratégie ACT est recommandée par l'OMS, la recherche de nouvelles associations de principes actifs antipaludiques n'en est pas pour autant évidente et doit être poursuivie. 25 La présente invention concerne une association entre un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs tels que définis ci-dessous, et l'artémisine ou l'un de ses dérivés. Parmi les dérivés de l'artémisinine utiles dans la présente invention on peut par exemple citer l'artésunate, l'artéméther, l'artééther, 30 l'hydroartémisinine ou la dihydroartémisinine. Une telle association montre une synergie intéressante et non prévisible et, par conséquent, est utile pour la prévention et/ou le traitement du paludisme, en particulier du paludisme sévère. 35 Les composés de formule (VI), ainsi que ses précurseurs au sens de la présente invention, sont décrits dans le brevet publié sous le numéro EP 1 196 371. Les précurseurs des sels de bis-thiazolium de formule (VI) au sens de la présente invention répondent aux formules (I), (Il), (III), (IV) et (V) de EP 1 196 371. Ce brevet décrit en effet des précurseurs de drogues à effet anti-paludique, caractérisés en ce qu'il s'agit de produits capables de générer des sels de bis-ammonium quaternaire et qu'ils répondent à la formule générale (I) : A ,A jNù(a) Z ù(a)ùV (I) B B' dans laquelle - A et A' sont identiques ou différents l'un de l'autre et représentent : . soit, respectivement, un groupe A, et A', de formule : ù(CH2)n--CÎ ùR'1 W 10 où n est un entier de 2 à 4 ; R', représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en Cl à C5, éventuellement substitué par un radical aryle (notamment un radical phényle), un hydroxy, un alkoxy, dans lequel le radical alkyle comprend de 1 à 5 atomes de carbone, ou aryloxy (notamment phénoxy) ; 15 et W représente un atome d'halogène choisi parmi le chlore, le brome ou l'iode, ou un groupe nucléofuge, comme le radical tosyle CH3-C6H4-SO3, mésityle CH3-SO3, CF3-SO3, NO2-C6H4-SO3, . soit un groupe A2 qui représente un radical formyle -CHO, ou acétyle -CO-CH3, 20 - B et B' sont identiques ou différents l'un de l'autre et représentent : . soit respectivement les groupes B, et B',, si A et A' représentent respectivement A, et A',, B, et B', représentant un groupe R, qui présente la même définition que R', ci-dessus, mais ne peut pas être un atome d'hydrogène, . soit respectivement les groupes B2 et B'2, si A et A' représentent A2, B2 ou B'2 étant le groupe R, tel que défini ci-dessus, ou un groupement de formule : dans lequel -Ra représente un groupe RS- ou RCO-, où R est un radical alkyle en Cl à C6, notamment de Cl à C5, linéaire, ramifié, ou cyclique, le cas échéant substitué par un ou plusieurs groupes hydroxy, alcoxy ou aryloxy, ou un groupe amino et/ou un groupe - COOH ou COOM, où M est un alkyle en Cl à C3 ; un radical phényle ou benzyle, dans 25 30 lequel le radical phényle est le cas échéant substitué par au moins un radical alkyle ou alcoxy en Cl à C5, ceux-ci étant éventuellement substitués par un groupe amino, ou par un hétérocycle azoté ou oxygéné, un groupe -COOH ou ûCOOM ; ou un groupe -CH2-hétérocycle, à 5 ou 6 éléments, azoté et/ou oxygéné ; R2 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en Cl à C5, ou un groupe -CH2-COO-alkyl(C1 à C5); et R3 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alkényle en Cl à C5, le cas 10 échéant substitué par -OH, un groupement phosphate, un radical alkoxy, dans lequel le radical alkyle est en Cl à C3, ou aryloxy; ou un groupe alkyl (ou aryl)carbonyloxy ; ou encore R2 et R3 forment ensemble un cycle à 5 ou 6 atomes de carbone ; R et R3 peuvent être reliés pour former un cycle à 5 à 7 atome:; (carbone, oxygène, soufre) - a représente : . soit une simple liaison, lorsque A et A' représentent Al et A'l : ou lorsque A et A' représentent A2, c'est-à-dire un groupe -CHO ou -COCH3, et B2 et B'2 représentent : . soit, lorsque A et A' représentent A2 et B2 et B'2 représentent R,, un groupement de formule : (b) (SùRa (a) ou un groupement de formule : (b) SùRa >-C (a) R3 dans lesquels (a) représente une liaison vers Z et (b) une liaison vers l'atome d'azote, - Z représente un radical alkyle en C6 à C21, notamment de C12 ou C13 à C21, le cas 35 échéant avec insertion d'une ou de plusieurs liaisons multiples, et/ou d'un ou plusieurs 5 15 20 25 30 hétéroatomes O et/ou S, et/ou d'un ou de plusieurs cycles aromatiques, et les sels pharmaceutiquement acceptables de ces composés, sous réserve que R', ne représente pas H ou un radical alkyle en Cl ou C2, lorsque n = 3 ou 4, R, représente un radical alkyle en Cl à C4 et Z représente un radical alkyle en C6 à C10. EP 1 196 371 décrit également un sous groupe de composés précurseurs tels que précédemment décrits, répondant à la formule générale (Il) : H H R'-Cù(CH2)nùNùzùNù(CH-)nùCùR'i W RI RI W dans laquelle R,, R'1, W, n et Z sont tels que définis précédemment. EP 1 196 371 décrit aussi un autre sous groupe de composés précurseurs, constitué par les précurseurs tels que précédemment décrits, pour lesquels Z représente un radical alkyle de C13 à C21. 15 EP 1 196 371 décrit également un sous groupe de composés précurseurs, constitué par les précurseurs tels que décrits dans le sous-groupe précédent, pour lesquels Z représente un groupe -(CH2)16 -. EP 1 196 371 décrit en particulier les précurseurs choisis parmi le dichlorhydrate du N, 20 N'-diméthyl-N,N'-(5-chloropentyl)-1,16-hexadécanediarine, ou le dichlorhydrate du N, N'-diméthyl-N,N'-(4-chloropentyl)-1,16-hexadécanediamine. EP 1 196 371 décrit en outre un groupe de précurseurs, répondant à la formule générale (III) : 25 1-1 Oj-1 O RaùS NùzùN SùRa R2 R2) R3 ou à la formule générale (IV) :10 R2 O ou à la formule générale (V) : 5 (V) dans laquelle Ra, R,, R2, R3 et Z sont tels que définis p écédemment. EP 1 196 371 décrit en particulier des composés précurseurs de formule (III), (IV) et (V) tels que décrit précédemment choisis parmi : -N,N'-diformyl-N,N'-di[I-méthyl-2-S-thiobenzoyl-4-méthoxybut-1-ényl]-1, 12-diaminododécane (TE4c), - N,N'-diformyl-N,N'-di [1-méthyl-2-S-(p-diéthylaminométhylphényl-carboxy) thio-4-méthoxybut-1-ényl]-1, 12-diaminododécane (TE4f), -N,N'-diformyl-N,N'-di[1-méthyl-2-S-(p-morpholino-méthylphényl carboxy)-thio-4-méthoxybut-1-ényl]-1,12-diaminododécane (TE4g), -N,N'-diformyl-N,N'-di [1-méthyl-2-S-thiobenzoyl-4-méthoxybut-1-ényl]-1, 16- diamino hexadécane (TE8), - N, N'-diformyl-N, N'-di[l(2-oxo-4,5-dihydro-1,3-oxathian-4-ylidène) éthyl]1,12-diaminododécane (TE3) ; ou encore parmi : -N,N'-diformyl-N,N'-di[l-méthyl-2-tétrahydrofurfuryl-méthyldi thio-4-hydroxybut-1-ényl]-1,12-diaminododécane (TS3a), -N,N'-diformyl-N,N'-di[1-méthyl-2-propyl-dithio-4- hydroxybut-1-ényl]-1, 12-diaminododécane (TS3b), - N,N'-diformyl-N,N' -di[1-méthyl-2-benzyl-dithio- 4-hydroxybut-1- ényl]-1, 12 diaminododécane (TS3c), - N,N'-diformyl-N,N' -di[1-méthyl-2-(2-hydroxyéthyl)dithio-4-hydroxybut-1- ényl]-1, 12-diaminododécane (TS3d), - N, N'-diformyl-N, N'-di[l -méthyl-2-propyldithio-4-méthoxybut-1-ényl]-1, 12-diaminododécane (TS3d), et - N,N'-diformyl-N,N'-di[l-méthyl-2-propyldithio-éthényl] -1,12-diaminododécane (TS6b), ou bien : - 2,17-(N,N'-diformyl- N, N'-diméthyl)diamino-3,16-S-thio-p-méthoxybenzoyl-6,13-dioxaoctadéca-2, 16-diène (TE9), - 2,17-(N,N'-diformyl-N,N'-dibenzyl)diamino-3,16-S-thio-p-méthoxybenzoyl- 6,13-dioxaoctadéca-2,16- diène (TE10), - 3,18 (N,N'- diformyl-N,N'-diméthyldiamino-4,17-S-thiobenzoyl-eicosa-3,17-diènedioate d'éthyle (TE12), -3,18-(N,N'-diformyl-N,N'-dibenzyl)diamino-4,17-S-thiobenzoyl-eicosa-3, 17-diènedioate d'éthyle (TE13), ou enfin : - le 2,15-(N,N'-diformyl-N,N'-diméthyl)diamino-1,16-S-thiobenzoyl-hexadéca-1, 15-diène (TE15), - le 2,15-(N,N'-diformyl-N,N'-dibenzyl)diamino-1,16-S-thio-benzoyl-hexadéca-1, 15-diène (TE16). EP 1 196 371 décrit de plus des dérivés cyclisés générés à partir des précurseurs de sels de thiazolium, présentant une bonne activité anti-paludique et répondant à la 25 formule générale (VI) : SN� Rb )ù( Rc Rd (VI) dans laquelle . Rb représente R, ou T, T représentant le groupe de formule : ù zùN+.S )ùK 30 R2 R3 sous réserve que Z ne représente pas un radical alkyle en C6 à C8, lorsque Rc, Rd, R2 et R3 représentent un radical méthyle, ou lorsque Rc et Rd d'une part, et R2 et R3 d'autre part, forment ensemble des cycles aromatiques à 6 atomes de carbone, . Rd représente R2 ou P, P représentant le groupe de formule : S' N+ ùR1 )ùK R3 z . Rc représente R3 ou U, U représentant le groupe de formule SN� R1 )ù( z R2 R,, R2, R3 et Z étant tels que définis plus haut, étant entendu que Rb = T, si Rc = R3 et Rd = R2 ; Rd = P, si Rc = R3 et Rb = R, ; et Rc = U, si Rb = R,, et Rd = R2. Selon la présente invention, les composés de formule (VI) peuvent être sous forme de base libre, de sel, d'hydrate ou de solvat. En particulier, EP 1 196 371 cite parmi les dérivés cyclisés décrits ci-dessus, les dérivés 15 choisis parmi : - dibromure de 1,12-dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium] (T3) ; -diiodure de 1,12-dodécaméthylène bis[4-méthyl-5-(2-rnéthoxyéthyl)thiazolium] (T4) ; - diiodure de 1,12-dodécaméthylènebis(4-méthylthiazolium) (T6) ; - diiodure de 1,16-hexadécaméthylènebis[4-méthyl-5-(2-méthoxyéthyl)thiazolium] (T8) ; 20 - diiodure de 3,10-dioxadodécaméthylènebis[5-(1,4-diméthyl)thiazolium] (T9) ; - dibromure de 3,10-dioxadodécaméthylènebis[5-(1-benzyl,4-méthyl)-thiazolium] (T10) ; -Diiodure de dodécaméthylènebis[5-(1-méthyl-4-éthoxycarbonyléthyl)-thiazolium] (T12) ; - Dibromure de dodécaméthylènebis[5-(1-méthyl-4-éthoxycarbonyléthyl)-thiazolium] (T13) 25 - diiodure de dodécaméthylènebis[4-(1-méthyl)-thiazolium] (T15) ; -dibromure de dodécaméthylènebis[4-(1-benzyl)-thiazolium] (T16). EP 1 196 371 décrit enfin le procédé d'obtention des sels de bis-thiazolium et de ses précurseurs cités précédemment, notamment la synthèse des composés de formule (VI) 30 tel que T3, T4, T6, T8, T9, T10, T12, T13, T15 et T16. En particulier, la synthèse de T3 est décrite en page 18 de EP 1 196 371. De même, l'activité antipaludique du composé T3 est décrite dans le tableau 13, page 28 de ce même document. Ainsi, l'invention concerne une association comprenant, en tant que principes 35 actifs, un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs, tels 10 10 que décrit précédemment, et l'artémisinine ou l'un de ses dérivés. Selon un second objet, l'invention concerne une association entre un sel de bisthiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs tel que décrit 5 précédemment et l'artésunate. Selon un troisième objet, l'invention concerne une association entre un sel bisthiazolium, composé de formule (VI), choisi parmi : - dibromure de 1,12- dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium] (T3) ; 10 - diiodure de 1,12-dodécaméthylène bis[4-méthyl-5-(2-rnéthoxyéthyl)thiazolium] (T4) ; - diiodure de 1,12-dodécaméthylènebis(4-méthylthiazolium) (T6) ; - diiodure de 1,16-hexadécaméthylènebis[4-méthyl-5-(2-méthoxyéthyl)thiazolium] (T8) ; -diiodure de 3,10-dioxadodécaméthylènebis[5-(1,4-diméthyl)thiazolium] (T9) ; - dibromure de 3,10-dioxadodécaméthylènebis[5-(1-berzyl,4-méthyl)-thiazolium] (T10) ; 15 - Diiodure de dodécaméthylènebis[5-(1-méthyl-4-éthoxycarbonyléthyl)-thiazolium] (T12) ; - Dibromure de dodécaméthylènebis[5-(1-méthyl-4-éthoxycarbonyléthyl)-thiazolium] (T13) -diiodure de dodécaméthylènebis[4-(1-méthyl)-thiazolium] (T15) ; -dibromure de dodécaméthylènebis[4-(1-benzyl)-thiazolium] (T16) ; 20 et l'artésunate. Selon un quatrième objet, l'invention concerne une association entre un sel de bisthiazolium de formule (VI), le dibromure de 1,12-dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium] (T3) et l'artésunate. Dans ces objets, chacun des principes actifs est utilisé à une concentration reflétant leur puissance respective à guérir l'infection. Dans chacune des associations, les quantités respectives des composés sont fonction de ces doses actives. 30 Le dibromure de 1,12- dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium] (T3) présent dans les associations selon l'invention a la structure qui suit : 255 L'artésunate présent dans les associations selon l'invention a pour formule : HO Br Br C24H42N2o2S2•2Br O O ONa O L'invention a encore pour objet une composition pharmaceutique comprenant en tant que principe actif une association entre un sel bis-thiazolium de formule (VI) ou l'un 10 de ses précurseurs, en particulier T3, et l'artémisinine ou l'un de ses dérivés, en particulier l'artésunate, telle que définie précédemment. Une telle composition pharmaceutique contient des doses thérapeutiquement efficaces d'un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs, et d'artémisinine ou de ses dérivés, ainsi qu'au moins un excipient pharmaceutiquement 15 acceptable. Lesdits excipients sont choisis selon la forme pharmaceutique et le mode d'administration souhaité, parmi les excipients habituels qui sont connus de l'Homme du métier. Les fourchettes de proportions de chacun des composés sont définies en fonctions de leur doses exerçant une activité antimalarique en monothérapie et reflètent leur puissance respective à guérir l'infection. 20 Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes par voie orale telles que les comprimés, les gélules molles ou dures, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale, buccale, intratrachéale, intraoculaire, intranasale, par inhalation, les formes 25 d'administration topique, transdermique, sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse (bolus ou perfusion), les formes d'administration rectale et les implants. Pour l'application topique, on peut utiliser les composés selon l'invention dans des crèmes, gels, pommades ou lotions. Des voies d'administration envisagées sont les voies orale, rectale et parentérale, 5 en particulier la voie musculaire, intra rectale et intraveineuse, et notamment la perfusion. Pour une administration parentérale, on utilise des suspensions aqueuses, des solutions salines isotoniques ou des solutions stériles et injectables qui contiennent des agents de dispersion et/ou des mouillants pharmacologiquement compatibles, par 10 exemple le propylèneglycol ou le butylèneglycol. Les suspensions peuvent également contenir, au besoin, des adjuvants anti-oxydants, ou les principes actifs selon l'invention peuvent être dilués dans des solutions appropriées telles que du glucose ou du NaCl pour être ultérieurement perfusés. 15 Par voie parentérale, et en particulier en perfusion, les doses journalières préférées en chacun des deux principes actifs de l'association selon l'invention sont comme indiquées plus haut : sel de bis-thiazolium de formule (VI), en particulier T3 : entre 0,01 et 3 mg/kg; - artémisinine ou l'un de ses dérivés, en particulier artésunate : entre 1 et 5 20 mg/kg Il peut y avoir des cas particuliers où des dosages plus élevés ou plus faibles sont appropriés ; de tels dosages ne sortent pas du cadre de l'invention. Selon la pratique habituelle, le dosage approprié à chaque patient est déterminé par le médecin selon le 25 mode d'administration, le poids et la réponse dudit patient. L'association selon l'invention est destinée à être administrée pendant 1 à 4 jours consécutifs, en une ou plusieurs prises quotidiennes de chacun des deux principes actifs, de préférence 1 à 3 prises (orales ou rectales) ou bolus par jour. Ce temps de 30 traitement limité de préférence à 4 jours ou moins est particulièrement avantageux pour faire diminuer de manière massive et rapide la parasitémie et permettre au patient ayant éloigné son pronostique létal d'être ensuite traité contre le paludisme proprement dit. Ce traitement subséquent peut être effectué par une monothérapie par des dérivés d'artémisinine, par tout autre traitement connu du paludisme, mais également par une 35 administration de l'association selon l'invention. Un exemple de dosage et de mode d'administration peut être de 2,4 mg/kg/jr d'artésunate et 1 mg/kg/jr de T3 durant les premières 24 heures de prise en charge du patient (J1) présentant un paludisme sévère, puis de 1,2 mg/kg/jr d'artésunate et 0,8 mg/kg/jr de T3 durant les 48 heures suivantes (J2 et J3), l'artésunate et le T3 étant administrés par perfusion, dans une poche de perfusion unique à JI et dans des poches de perfusion séparées à J2 et J3. L'administration de chacun des deux principes actifs peut être effectuée de façon simultanée, ou bien séparée ou étalée dans le temps (administration séquentielle). Lorsque l'administration est effectuée de façon simultanée, les deux principes actifs peuvent être réunis au sein d'une forme pharmaceutique unique (combinaison fixe), tel que dans un comprimé ou une gélule adaptés à l'administration orale, ou dans une même poche de perfusion, ou une formulation adaptée à la voie intrarectale. Les deux principes actifs de l'association selon l'invention peuvent également, que leur administration soit simultanée ou non, être présents dans des formes pharmaceutiques distinctes. A cet effet, les associations selon l'invention peuvent se présenter sous forme de kit comprenant, d'une part, le composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs, en particulier T3 ou un sel, hydrate ou solvant, et, d'autre part, l'artémisinine ou l'un de ses dérivés, en particulier l'artésunate, ledit composé de formule (VI) tel que T3 et l'artésunate, étant dans des compartiments distincts et étant destinés à être administrés de façon simultanée, séparée ou étalée dans le temps (administration séquentielle) . A titre d'exemple, une forme unitaire d'adm nistration de T3 sous forme de comprimé peut comprendre les composants suivants : T3 6 mg Mannitol 224 mg Croscaramellose sodique 6 mg Amidon de maïs 15 mg Hydroxypropyl-méthylcellulose 2 mg Stéarate de magnésium 3 mg Egalement, à titre d'exemple, une forme unitaire d'administration d'artésunate sous forme de comprimé peut comprendre 50 ou 100 mg d'artésunate et des excipients usuels, par exemple du lactose, du croscarmellose, de la silice colloïdale anhydre, de la cellulose microcristalline et du stéarate de magnesium. Egalement, à titre d'exemple, une forme unitaire d'administration comprenant une combinaison d'artésunate et de T3 peut comprendre 1,5 mg de T3 et 50 mg d'artésunate, ainsi que des excipients usuels tels que ceux cités ci-dessus, la dose quotidienne pour un adulte étant atteinte en 4 prises d'un comprimé ou en une prise de 4 comprimés. 14 Les mêmes dosages de T3, d'artésunate, ou de combinaison T3 et artésunate sont utilisés pour les formes unitaires d'administration par voie rectale, avec les excipients connus de l'homme du métier. Pour un mode d'administration par injection parentérale, une forme unitaire d'administration de T3 peut comprendre 1 mg de T3 dans une ampoule, par exemple, ainsi que des excipients usuels bien connus de l'homme du métier tels que le glycérol et un tampon phosphate, l'ampoule étant prévue pour 10 kg de poids corporel. Egalement, à titre d'exemple, une forme unitaire d'administration d'artésunate et de T3 dans une ampoule peut comprendre 24 mg d'artésunate et 1 mg de T3, ainsi que des excipients usuels tels que ceux cités ci-dessus, l'ampoule étant administrée à raison d'une ampoule par 10 kg de poids corporel La présente invention a également pour objet une méthode de traitement et/ou de prévention du paludisme qui comprend l'administration, à un patient, d'une dose thérapeutique efficace d'au moins un sel de thiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs, en particulier T3, et d'une dose thérapeutique efficace d'artémisinine ou de l'un de ses dérivés, en particulier l'artésunate, lesdites doses étant administrées de façon simultanée ou bien séquentielle audit patient, comme cela est décrit précédemment. La présente invention concerne également une méthode telle que définie précédemment, de traitement et/ou de prévention du paludisme, en particulier du 25 paludisme sévère. L'invention a encore pour objet une utilisation d'une association comprenant en tant que principes actifs, un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs, tels que décrit précédemment, et l'artémisinine ou l'un de ses dérivés, en 30 particulier l'artésunate, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention du paludisme, en particulier du paludisme sévère. L'invention a enfin pour objet û un kit pour le traitement ou la prévention du paludisme comprenant, d'une 35 part, au moins un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs, et, d'autre part, au moins l'artémisinine ou l'un de ses dérivés, en particulier l'artésunate, ledit composé de formule (VI) / précurseur et l'artémisinine / dérivé étant dans des compartiments ou poches de perfusion distincts et étant destinés à être administrés de façon simultanée ou séquentielle, et 15 - un kit tel que défini précédemment, caractérisé en ce qu'il comprend, d'une part, au moins le dibromure de 1,12- dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium], et, d'autre part, au moins l'artésunate. L'association selon l'invention a fait l'objet de tests pharmacologiques et biochimiques in vivo chez la souris infectée par un plasmodium de type Plasmodium falciparum (souche Plasmodium vinckei petten), permettant de mettre en évidence son efficacité et l'effet synergique qu'elle procure, pour le traitement du paludisme. Mesure in vivo de l'activité anti-paludisme chez la souris infectée par Plasmodium vinckei petteri, de l'association du dibromure de 1,12-dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium] (T3) avec l'art:ésunate Définitions des termes utilisés dans ce test : - ED50 = Dose en mg/kg/jour qui entraîne une diminution de 50% de la parasitémie, observée chez les souris infectées, - ED90 = Dose en mg/kg/jour qui entraîne une diminution de 90% de la parasitémie, observée chez les souris infectées, - ip = administration intra-péritonéale, - iv = administration intra-veineuse, - ir = administration intra-rectale. 1. Description du test in vivo utilisé -Infection des souris Au jour 0 (JO), on inocule à des souris femelles de type � Swiss � (OF1, 22-26g), (Charles River Laboratories France, 59 rue de la Paix, 76410 Saint-Aubin-les-Elbeuf), par voie iv dans la veine caudale, 108 érythrocytes parasités suspendus dans 200 pl de NaCl (0,9%). Les parasites utilisés sont de type Plasmodium vinckei petteri (souche 279 BY, fournie par le Dr. l Landau, Paris, France). Les souris sont au préalable, acclimatées pendant deux semaines. Elles sont nourries et boivent ad libitum. L'injection de 108 érythrocytes parasités conduit, au jour 1 (J1) à un taux de parasitémie compris entre 5% et 10% (7,2% � 0,2%). La souche Plasmodium vinckei petteri est maintenue par infection hebdomadaire chez la souris par 107 à 108 érythrocytes parasités suspendus dans un tampon phosphate salin (0,9%)(infection par voie intra-péritonéale). 16 - Préparation des solutions de T3 et d'artésunate Les produits sont dissous dans un tampon phosphate 0,3M (pH = 8,1) La concentration finale de la solution de T3 est comprise entre 40 et 200 mg/I selon la dose, La concentration finale de la solution d'artésunate est comprise entre 100 et 500 mg/l selon la dose Les produis sont administrés par voie ip. Le volume d'administration est de l'ordre de 100pl, mais dépend du poids de la souris. -Traitements Les souris sont traitées une fois par jour pendant 4 jours aux jours J I, J2, J3 et J4 (Peters, W., J. H. Portus, and B. L. Robinson. 1975. The chemotherapy of rodent malaria. XXII. The value of drug-resistant strains of °. berghei in screening for blood schizonticidal activity. Ann. Trop. Med. Parasitol. 69:155û171 ; and: Ancelin ML, Calas M., Bonhoure A., Herbute S. and Vial H., ln vivo antimalarial activity of mono and bis quaternary ammonium salts interfering with Plasmodium phospholipid metabolism. Antimicrob. Agents Chemother., 2003, 47, 2598-2605). Quatre souris sont utilisées par dose. On administre à l'animal, par voie ip, selon le cas, du T3, de I'artésunate ou du mélange des deux principes actifs solubilisés. Mesure de la parasitémie Au 5ème jour, quelques gouttes de sang sont prélevées à la queue de la souris afin de déterminer la parasitémie par FACS (Fluorescence-activated cell sorter) et de réaliser un frottis sanguin. La parasitémie est d'abord déterminée par FACS sur 20000 cellules. Les globules rouges prélevés pour le FACS sont fixés au glutaraldéhyde puis marqués avec un fluorochrome (YOYO1�) qui marque l'ADN et donc uniquement les cellules parasitées (Barkan, D., Ginsburg, H., and Golenser, J. 2000. Optimisation of flow cytometric measurement of parasitemia in plasmodium-infected mice. Int. J. Parasitol. 30 : 649-653). Les parasitémies inférieures à 15% sont ensuite recomptée sur frottis. Les frottis sont fixés au méthanol puis colorés au Giemsa. On compte au microscope le nombre de cellules sanguines parasitées. La parasitémie est exprimée en pourcentage d'érythrocytes infectés présents dans le prélèvement sur un échantillon de 2000 cellules. Les ED50 et ED90 sont déterminées à J5. La parasitémie est déterminée du 1er au 10ième jour de traitement, puis aux 15ième 22ième et 47ième jours. Les souris pour lesquelles le frottis à J5 ne révèle aucune trace de parasites seront contrôlées à nouveau pendant au moins 1 mois après la fin du traitement, afin de détecter une possible recrudescence des parasites. La dose curative est la dose en produit qui assure la survie de l'ensemble du lot d'animaux traité après un mois 17 Détermination des ED50 Le 0% d'inhibition correspond à la moyenne des parasitémies observées chez les souris infectées non traitées. Le 100% d'inhibition correspond à une parasitémie très faible ou nulle, inférieure à 0,01%. Les ED50 sont déterminés par interpolation linéaire de la courbe dose réponse représentée en logarithme des concentrations. 2. Mesure de l'activité anti-paludique du T3 et de l'artésunate sur une 10 souche de parasite Plasmodium vinckei petteri in vivo Afin de mettre en évidence un effet synergique entre les deux composés il est important de connaitre leur activité lorsqu'ils sont administrés seuls, afin de les associer à des doses proches de leur ED50. Le cas de leur administration par voie parentérale 15 correspond à la situation clinique du paludisme sévère. Dans ce cas il est important de faire chuter rapidement la parasitémie au cours des premiers jours de traitement. Aux doses testées l'artésunate administré seul ne fait pas chuter la parasitémie le premier jour ainsi que les jour suivants (figure 1). T3 fait chuter efficacement la parasitémie après 4 jours de traitement a la dose de 1 mg/kg/j mais n'empêche pas une montée de la 20 parasitémie après le premier jour de traitement (figure2). Les ED50 obtenues sont présentées dans le tableau I qJi suit : Tableau I ED50 (mg/kg/jour) T3 0, 55 artésunate > 2,5 25 Plus l'ED50 est faible, meilleure est l'activité. Ainsi, T3 seul montre une meilleure activité sur la parasitémie (0,55 mg/kg/jour) que l'artésunate seul (>2,5 mg/kg/jour). De plus T3 seul, à une dose de 0,5 mg/kg/jour, permet une guérison totale après un mois (résultats non montrés) alors que l'artésunate seul, à une dose de 2,5 mg/kg/jour, ne le permet 30 pas. 3. Mesure de l'activité anti-paludisme de l'association T3/artésunate sur une souche de parasite Plasmodium vinckei petteri in vivo Pour cette étude en association, on a choisi la dose de 2,5 mg/kg/j d'artésunate 35 (légèrement inférieure mais proche de L'ED 50), la dose de 0,5 mg/kg/j étant totalement inactive sur la parasitémie à 4 jours. T3 a été évalué en association à une dose inferieure, proche et supérieure à l'ED50, soit 0,2, 0,5 et 1 mg/kg/j De façon surprenante, comme indiqué dans les figures 3, 4 et 5 l'association comprenant T3 (à toutes les doses précitées) avec de l'artésunate présent à une dose de 2,5 mg/kg/jour, permet de diminuer significativement le taux de parasitémie, par comparaison avec l'administration séparée de T3 seul ou d'artésunate seul. Notamment, il est important de constater que 24 h après la première administration (jour 2) et quelque soit la dose de T3 administrée on observe une diminution de la parasitémie des souris alors qu'à ce temps les produits administrés individuellement sont inactifs. Le tableau II (et figures 3,4,5) fournit la moyenne des parasitémies relevées à ce jour 2 (4 animaux par dose). Il est à noter qu'il existe un effet statistiquement synergique 24 heures après la première administration (jour 2) pour le T3 à des doses de 0,2, 0,5 et 1 mg/kg en association avec de l'artésunate à une dose de 2,5 mg/kg. Cet effet synergique très significatif après le premier jour de traitement est particulièrement important dans le cas du traitement du paludisme sévère, où le clinicien recherche justement une réduction massive et rapide de la parasitémie du patient afin d'éloigner le pronostique mortel. Tableau Il Artesunate T3 parasitemie J1 parasitemie J2 parasitemie J5 (mg/kg/j) (mg/kg/j) 0 0 7,20% 26,90% death 2,5 0 7,00% 32,90% 58,20% 2,5 0,2 8,10% 5,70% 54,90% 2,5 0,5 8,30% 3,40% 15,10% 2,5 1 6,10% 5,10% 10,70% 0 0,2 6,60% 35,00% 55,20% 0 0,5 7,80% 34,00% 56,80% 0 1 7,20% 27,90% 19,40% A partir de la dose en T3 de 0,5 mg/kg/jr associée à l'artésunate 2.5mg/kg/j la parasitémie est maintenue à sa valeur initiale avant traitement pendant toute la durée du traitement alors que les administrations individuelles en produits ne le permettent pas (tableau II, figures 3,4,5). Le composé T3 est responsable de l'effet majoritaire sur la cure totale des souris après un mois. La co-administration de l'artésunate à 2.5 mg/kg/jr n'améliore pas la dose curative obtenue avec T3 seul. Le tableau III résume les résultats discutés ci-dessus. 5 Tableau III T3 (mg/kg/j) 0 0,2 0,5 1 Ainsi, lorsque les 2 principes actifs sont administrés en combinaison, la 10 parasitémie diminue de façon significative pendant les 4 premiers jours de traitement. L'effet est très nettement supérieur à des doses comparables, voire plus faibles que celles déterminées pour l'administration de chacun des deux principes actifs pris individuellement. 15 Notamment lorsque T3 est administré en association avec l'artésunate, l'artésunate étant présent à une dose d'au moins 2,5 mg/kg/jour, un effet bénéfique est observé sur la diminution de la parasitémie. On comprend donc que l'association des deux principes actifs est particulièrement efficace dans une fenêtre définie par la dose minimale de l'un des composés et le ratio de l'un des composés par rapport à l'autre, à 20 l'intérieur de cette fenêtre. Les résultats obtenus in vivo chez la souris infectée par P. vinckei petteri prouvent que l'association selon l'invention, de l'artémisinine ou l'un de ses dérivés (en particulier l'artésunate) et d'un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI), en particulier T3 est 25 avantageuse pour le traitement du paludisme et notamment du paludisme sévère. réduction de la croissance parasitaire dose dépendante de J3 à J5 réduction de la croissance parasitaire dose dépendante de J3 à J5, dose curatie réduction de la croissance parasitaire dose dépendante de J3 à J5 réduction de la parasitemie par rapport à JO, à J1 réduction de la parasitemie par rapport a JO pendant toute la duree du traitement Artesunate (mg/kg/j) 0 2,5 REVENDICATIONS , 1. Association, comprenant en tant que principes actifs un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) : S"N� Rb )ù( Rc Rd (VI) dans laquelle . Rb représente : - un groupe R, représentant lui-même un atome d'hydrogène, un radical alkyle en Cl à C5, éventuellement substitué par un radical aryle (notamment un radical phényle), un hydroxy, un alkoxy, dans lequel le radical alkyle comprend de 1 à 5 atomes de carbone, ou aryloxy (notamment phénoxy), - ou bien un groupe T, T représentant le groupe de formule : ù zùN+'S K R3 dans lequel : - R2 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en Cl à C5, ou un groupe -CH2-COO-alkyl(C1 à C5) ; 20 - R3 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alkényle en Cl à C5, le cas échéant substitué par -OH, un groupement phosphate, un radical alkoxy, dans lequel le radical alkyle est en Cl à C3, ou aryloxy; ou un groupe alkyl (ou aryl)carbonyloxy ; 25 ou encore R2 et R3 forment ensemble un cycle à 5 ou 6 atomes de carbone ; R2 et R3 peuvent être reliés pour former un cycle ou un hétérocycle de 5 à 7 chaînons comprenant éventuellement un ou plusieurs hétéroatomes O et/ou S, - Z représente un radical alkyle en C6 à C21, notamment de C12 ou C13 à C21 le cas 30 échéant avec insertion d'une ou de plusieurs liaisons multiples, et/ou d'un ou plusieurs hétéroatomes O et/ou S, et/ou d'un ou de plusieurs cycles aromatiques, et les sels pharmaceutiquement acceptables de ces composés, 15 21 sous réserve que Z ne représente pas un radical alkyle en C6 à C8, lorsque Rc, Rd, R2 et R3 représentent un radical méthyle, ou lorsque Rc e.: Rd d'une part, et R2 et R3 d'autre part, forment ensemble des cycles aromatiques à 6 atomes de carbone, . Rd représente R2 tel que précédemment défini ou P, P représentant le groupe de formule : S^N� R1 . Rc représente R3 tel que précédemment défini ou U, U représentant le groupe 10 de formule : S"N�R )-C ùz R2 étant entendu que Rb = T, si Rc = R3 et Rd = R2 ; Rd = P, si Rc = R3 et Rb = R, ; et Rc = 15 U, si Rb = R,, et Rd = R2, sous forme de base libre, de sel, d'hydrate ou de solvat, ou l'un de ses précurseurs, et l'artémisinine ou l'un de ses dérivés. 20 2. Association selon la revendication 1, caractérisée en ce que le dérivé d'artémisinine est choisi parmi l'artésunate, l'artéméther, l'artééther, l'hydroartémisinine ou la dihydroartémisinine. 3. Association selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que le sel bis-25 thiazolium, composé de formule (VI) est choisi parmi : -dibromure de 1,12- dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium] ; - diiodure de 1,12-dodécaméthylène bis[4-méthyl-5-(2-méthoxyéthyl)thiazolium] ; - diiodure de 1,12-dodécaméthylènebis(4-méthylthiazolium) ; - diiodure de 1,16-hexadécaméthylènebis[4-méthyl-5-(2-méthoxyéthyl)thiazolium]; 30 -diiodure de 3,10-dioxadodécaméthylènebis[5-(1,4-diméthyl)thiazolium] ; -dibromure de 3,10-dioxadodécaméthylènebis[5-(1-benzyl,4-méthyl)-thiazolium] ; - Diiodure de dodécaméthylènebis[5-(1-méthyl-4-éthoxycarbonyléthyl)-thiazolium] ; -Dibromure de dodécaméthylènebis[5-(1-méthyl-4-éthoxycarbonyléthyl)-thiazolium] ; -diiodure de dodécaméthylènebis[4-(1-méthyl)-thiazolium] ; 35 - dibromure de dodécaméthylènebis[4-(1-benzyl)-thiazolium]. 22 4. Association selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que chacun des principes actifs est destiné à être administré de façon simultanée ou séquentielle. 5. Composition pharmaceutique comprenant des doses thérapeutiquement efficaces d'artémisinine ou de l'un de ses dérivés, et d'au moins un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI), ou l'un de ses précurseurs ainsi qu'au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. 6. Composition pharmaceutique selon la revendication 5, caractérisée en ce que le sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) est le dibromure de 1,12-dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium]. 15 7. Composition pharmaceutique selon la revendication 5 ou la revendication 6 caractérisée en ce que le dérivé d'artémisinine est l'artésunate. 8. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 5 à 8, caractérisée en ce qu'elle est adaptée à l'administration orale, rectale ou injectable, et de 20 préférence adaptée à l'injection intraveineuse, particulièrement sous forme de perfusion. 9. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 5 à 8, caractérisée en ce qu'elle est utile pour le traitement et/ou la prévention du paludisme, en particulier du paludisme sévère. 25 10. Utilisation d'une association selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention du paludisme, en particulier du paludisme sévère. 30 11. Kit pour le traitement ou la prévention du paludisme comprenant, d'une part, au moins un sel de bis-thiazolium, composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs, et, d'autre part, au moins l'artémisinine ou l'un de ses dérivés, ledit composé de formule (VI) ou l'un de ses précurseurs et l'artémisinine ou l'un de ses dérivés étant dans des compartiments distincts et étant destinés à être administrés de façon simultanée ou 35 séquentielle. 12. Kit selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'il comprend, d'une part, au moins le dibromure de 1,12- dodécaméthylène bis [4-méthyl-5-(2-hydroxyéthyl) thiazolium], et d'autre part, au moins l'artésunate. 10