FR 2929943 A1 20091016 FR 0802072 A 20080415 L'invention a pour objet de nouveaux sels de quinoléines 2-substitués, leur procédé de fabrication et leur utilisation pour la production de médicaments. Ces sels ont l'avantage de pouvoir être obtenus sous forme de cristaux, ce qui facilite leur mise en oeuvre pour la fabrication de compositions pharmaceutiques. Des quinoléines substituées de structures variées ont été décrites pour leur action sur le traitement des infections dues à des protozoaires, telles que les leishmanioses, les trypanosomiases, les toxoplasmoses, et/ou les infections dues à des rétrovirus comme par exemple le VIH ou le HTLV. Toutefois, si certaines molécules parmi les quinoléines ont montré un potentiel intéressant pour le traitement de ces pathologies, aucune n'a permis à ce jour d'aboutir à la formulation d'un médicament susceptible d'être produit à l'échelle industrielle. En effet, pour permettre un tel développement, une molécule doit à la fois présenter une activité pharmacologique in vivo satisfaisante, une toxicité réduite, mais aussi des qualités physiques et physico-chimiques permettant sa formulation dans des conditions satisfaisantes : facilité de manipulation, stabilité dans le temps, compatibilité avec les excipients, résistance aux conditions de stockage. Dans le cas de principes actifs devant être mis en oeuvre dans des médicaments se présentant sous des formes galéniques orales solides, certaines propriétés physiques sont requises. Notamment dans le cas des médicaments destinés au traitement de maladies tropicales telles que les leishmanies et les trypanosomiases, de tels médicaments doivent pouvoir être conservés dans des conditions de température et d'hygrométrie très contraignantes, sans perdre leur efficacité ni se dégrader. En outre pour des raisons d'économie, on souhaite pouvoir produire dans les pays utilisateurs les molécules destinées à ces traitements. Il faut donc que, soumises à des conditions climatiques difficiles, ces molécules présentent et conservent toutes les qualités requises pour la formulation d'un médicament, pour sa fabrication sur des outils industriels, pour son stockage et sa distribution dans les pays visés. Or les inventeurs ont constaté que certaines quinoléines, dont l'activité biologique pour le traitement des maladies précitées était particulièrement remarquable, présentaient l'inconvénient d'être peu manipulables pour la formulation de médicaments en particulier des médicaments pour voie orale sous des formes galéniques solides. Ces quinoléines sont notamment celles répondant à la formule générale35 [ 2 R (A) dans laquelle R représente un groupement alkyle ou alcényle en C2-05, éventuellement porteur d'une ou plusieurs fonctions -OH. En effet ces molécules se présentent sous la forme d'une huile, et sont donc difficiles, voire impossibles, à formuler sous forme de comprimés ou de gélules simples contenant des mélanges de poudres. D'une façon générale et dans les pays tropicaux en particulier, la formulation sous forme solide dans des comprimés ou des gélules confère aux principes actifs et aux médicaments qui les contiennent une meilleure stabilité, de meilleures conditions de conservation et une facilité d'utilisation plus grande qu'une formulation sous forme liquide. Ces formes galéniques sont en outre plus simples à produire sur les outils de fabrication plus généralement disponibles localement. En outre l'administration de gélules ou de comprimés permet d'éviter les sous dosages ou surdosages plus facilement que des formes liquides. L'éventuel recours à des mélanges de poudres disponibles sous forme de sachets ou de bouteilles pour reconstitution extemporanée de suspensions ou solutions buvalbles permet lorsque nécessaire et pour de fortes doses unitaires par prise de limiter les risques de dégradation chimique qui pourraient avoir lieu dans des formes liquides prêtes à l'emploi. Aussi, l'un des objectifs de l'invention a été de pouvoir obtenir ces composés sous une forme solide, de préférence cristalline.. afin de permettre leur formulation dans des conditions satisfaisantes. En outre, ces composés devraient conserver leur activité biologique et leur faible toxicité. Ces objectifs ont pu être atteints grâce à la découverte de certains sels des molécules de formule (A). L'invention a pour objet les sels des molécules (A), qui sont des molécules répondant à la formule (I) ci-dessous : +., 3 dans laquelle : X représente l'anion camphosulfonate ou anion de l'acide 7,7-diméthyl-2-oxobicyclo [2.2.1 ]heptane- l -méthane sulfonique, R représente un groupement alkyle ou alcényle linéaire, ramifié ou cyclique en C2-05, éventuellement porteur d'une ou plusieurs fonctions -OH. Parmi les molécules répondant à la formule (I) ci-dessus, on peut citer notamment les sels de l'acide camphosulfonique de - la 2-n-pentyl quinoléine, - la 2-n-propyl quinoléine, - la 2-propényl quinoléine, - la 2-(2-hydroxypropényl) quinoléine. L'invention se caractérise encore par le fait que ces molécules peuvent être cristallisées ou recristallisées et donc obtenues sous forme de cristaux, qui sont plus stables, plus faciles à manipuler, plus faciles à formuler sous forme de comprimés ou de gélules ou de poudres (conditionnés sous forme de sachets ou bouteilles) destinées notamment à la préparation extemporanée de suspensions ou de solutions buvables. Dans le cas de la 2-n-propyl quinoléine, la forme cristalline est caractérisée par la présence des pics suivants dans le spectre de diffraction aux rayons X mesuré sur un diffractomètre en configuration thêta-thêta, équipé d'une anti-cathode de cuivre et exprimé en termes de distances inter-réticulaires d, d'angle de Bragg 2 thêta et d'intensité relative : Angle 2-thêta (°)* Distance inter-réticulaire d (Angstrbm)** Intensité relative (%)*** 30 4,463 19,78297 79,1 12,975 6,81756 89,3 14,223 6,22226 49,6 14,407 6,14309 100 17,02 5,20542 56,7 22,586 3,93359 71,4 * valeurs +0,2° ** valeurs +0,2À *** valeurs +0,5% L'invention a encore pour objet un procédé de fabrication, d'obtention, d'isolement, et/ou de purification d'un sel de formule (I) d'une molécule de formule (A), et notamment sous forme cristalline ou par le biais d'une cristallisation, ce procédé comprenant les étapes suivantes : On utilise le composé de formule (A) obtenu par n'importe quel procédé de l'art antérieur. On additionne alors à ce composé (A) de l'acide camphosulfonique en 4 quantité équimolaire, de façon à former le sel (I). On peut par exemple utiliser le composé quinoléine-2-substitué précurseur (A) préparé par le procédé décrit dans WO 93/07125 et former le sel correspondant (I) par addition d'acide camphosulfonique en quantité équimolaire. Le composé de formule (I) est alors dissout dans un solvant choisi parmi : l'acétone, la méthyl-ethyl-cétone, la diéthylcétone, le méthanol, l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, l'éther éthylique, le diisopropyl éther, à une concentration allant de 0,05 à 60 g/1. Le solvant est avantageusement porté au reflux puis la solution est 10 refroidie jusqu'à une température comprise entre -30°C et 30°C , notamment entre 0 et la température ambiante, par exemple 20 à 25°C. La solution peut avantageusement être ensemencée pendant l'étape de refroidissement, avantageusement lorsqu'elle est à une température comprise entre 0 et 4°C. 15 Les cristaux obtenus sont avantageusement filtrés, et éventuellement lavés.avec du diisopropyl éther. Le choix du solvant ou du mélange de solvants de cristallisation et de la vitesse de refroidissement peut conduire à des formes cristallines différentes pour une même molécule. 20 Dans le cas de la 2-n-propyl quinoléine, on prévoit avantageusement de la dissoudre dans un mélange de méthanol et d'éther éthylique. C-n additionne ensuite une quantité équimolaire d'acide camphosulfonique et on chauffe au reflux du solvant. Ensuite, on laisse refroidir et on ajoute quelques gouttes de diisopropyl éther Le sel d'acide camphosulfonique de quinoléine-2-substituée ainsi obtenu 25 l'est sous forme de cristaux homogènes de couleur blanche à légèrement beige. Si on le souhaite, le produit de formule (I) une fois cristallisé peut être broyé et/ou tamisé et/ou granulé en association avec des excipients, par exemple par voie sèche par une étape de compaction, afin de se présenter sous forme d'une poudre parfaitement homogène en vue de sa formulation. 30 Les propriétés physiques du sel de formule (I) permettent sa formulation pharmaceutique sous une forme galénique solide de type gélule ou comprimé ou encore de poudres, notamment pour reconstitution extemporanée d'une solution ou d'une suspension d'une composition constante et reproductible. La forme cristalline du sel de formule (I) ainsi obtenue est stable au stockage, même dans des conditions de température et 35 d'hygrométrie élevées comme celles des climats tropicaux. L'invention a encore pour objet toute composition pharmaceutique comprenant ce sel de formule (I), en particulier sous sa forme cristalline ou sous une de ses formes cristallines, et un support pharmaceutique, notamment avec un ou plusieurs excipients inertes non toxiques et adaptés à la pathologie, à la population à traiter et aux conditions climatiques. Parmi les compositions pharmaceutiques pouvant être réalisées à partir des sels de formule (E) objets de l'invention, on peut mentionner celles qui permettent une administration orale, parentérale, nasale, les comprimés (simples ou dragéifiés), les comprimés sublinguaux, les gélules, les tablettes, les suppositoires, les crèmes, les pommades, les préparations injectables, les suspensions buvables etc. La posologie est adaptée en fonction : de la pathologie à traiter, de la sévérité de l'affection, de l'âge et du poids du patient, de la voie d'administration. Elle peut varier de 0,01 à 50 mg par jour en une ou plusieurs prises. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'un sel de formule (I) pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie sélectionnée parmi les infections dues à des protozoaires, telles que les leishmanioses, les trypanosomiases, les toxoplasmoses, et/ou les infections dues à des rétrovirus comme par exemple le VIH ou le HTLV. PARTIE EXPERIMENTALE 1- Préparation du sel camphosulfonique de la 2-n-propyl quinoléine La 2-n-propyl quinoléine a été préparée conformément au mode 20 opératoire enseigné par WO 93/07125. La 2-n-propyl quinoléine ainsi obtenue (6,5152 g) est sous forme d'une huile. Elle est dissoute dans 20 mL de méthanol et 60 mL d'éther, à 20°C. On ajoute alors à la solution sous agitation 8,8 g d'acide camphosulfonique et on chauffe légèrement sous agitation. On laisse refroidir et on ajoute quelques gouttes de diisopropyl éther et on observe la précipitation de cristaux qui sont filtrés et lavés avec du diisopropyléther. 2- Caractérisation Les cristaux ainsi obtenus (12,7439 g) sont caractérisés par microscopie optique et par diffraction aux rayons X. A- Microsco ie optique Sur la figure 1 on observe des cristaux de camsylate de 2-n-propyl quinoléine. Il s'agit de clichés de microscopie optique de cristaux de sel de camsylate en lumière réfléchie, grandissement x 40. Sur la figure 2 on observe des cristaux de camsylate de 2-n-propyl 35 quinoléine. Il s'agit de clichés de microscopie optique de cristaux de sel de camsylate en lumière polarisée, grandissement x 81. B- Diffraction aux rayons X 25 30 6 - Matériel et méthode L'analyse est réalisée sur un diffractomètre Bruker AXS, modèle D8 Advance, en configuration thêta-thêta, équipé d'une anti-cathode de cuivre, d'un porte-échantillon en silicium monocristallin et d'un détecteur linéaire à localisation spatiale. En première intention, les échantillons sont déposés sur le portoir en silicium sans trituration ni traitement préalable, et les diffractogrammes sont enregistrés selon les conditions présentées dans le tableau 1. Température Ambiante _ Ambiante Atmosphère Générateur de rayons X _ 40 - tension (kV) _ _ - intensité (mA) 40 Source de rayons X _ __ - cible Cu - raie d'émission : K7,1 (nm) 0,15406 Ka,2 (nm) 0,15444 Ratio KX2/KX1 0,5 - filtre raie K(3 Ni Fente (mm) _ __ - anti-divergence 0,6 Goniomètre _ 4-70 - secteur angulaire balayé (° en 20) _ 0,069 - pas de déplacement (° en 20) _ 30 Vitesse de rotation du porte-échantillon (tpm) Détection - ouverture angulaire (°) __ _ 8 - temps d'exposition par pas de 6 goniomètre (s) Tableau 1 : Conditions opératoires instrumentales pour l'acquisition des profils de 10 diffraction de rayons X. - Résultats L'expérience est faite sur quatre lots distincts de produit numérotés 1 à 4. La figure 3 représente la superposition des profils de diffraction aux rayons X des quatre lots. Des raies de diffraction sont présentes dans chacun des diffractogrammes des lots 15 analysés indiquant la présence de matière cristallisée, et aucune phase amorphe n'est détectée. On constate la présence d'une même phase cristalline au sein des quatre lots. La figure 5 illustre de façon plus détaillée le profil de diffraction de rayons X sur poudre du sel de camsylate de l'un des lots. Il correspond au tableau 2 ci-dessous qui récapitule la liste des pics de diffraction de rayons X sur poudre du sel de 20 camsylate. Angle 2-thêta Distance inter-réticulaire d Intensité Intensité relative (°) (Angstrôm) (Cps) (%) 4,463 19,78297 2063 79,1 7,513 11,75803 196 7,5 8,64 10,22599 151 5,8 10,352 8,53876 241 9,3 11,808 7,48837 326 12,5 12,164 7,27052 917 35,1 12,975 6,81756 2329 89,3 14,223 6,22226 1295 49,6 14,407 6,14309 2609 100 15,548 5,69468 445 17 15,899 5,5697 276 10,6 17,02 5,20542 1479 56,7 17,452 5,07755 769 29,5 18,151 4,88352 489 18,8 19,247 4,60779 812 31,1 20,354 4,35972 242 9,3 20,697 4,28815 842 32,3 21,604 4,11004 234 9 22,586 3,93359 1864 71,4 22,885 3,88283 886 34 23,168 3,83615 262 10,1 23,66 3,75743 1152 44,2 24,592 3,6171 591 22,7 24,707 3,6005 641 24,6 25,298 3,5177 353 13,5 26,218 3,39633 170 6,5 26,631 3,34457 467 17,9 26,978 3,30231 982 37,6 27,217 3,27392 796 30,5 27,697 3,21819 478 18,3 28,55 3,12402 743 28,5 28,994 3,07712 268 10,3 30,352 2,94248 168 6,4 31,079 2,87526 226 8,7 31,894 2,80364 416 15,9 32,397 2,76125 155 6 33,07 2,7066 389 14,9 34,3 2,61232 184 7,1 34,607 2,58981 181 7 35,041 2,55872 198 7,6 35,809 2,5056 161 6,2 37,751 2,38103 239 9,2 38,388 2,34298 225 8,6 39,063 2,30406 144 5,5 39,54 2,27734 145 5,5 40,521 2,22446 110 4,2 41,294 2,18455 489 18,7 42,282 2,13578 121 4,6 42,604 2,1204 119 4,6 43,112 2,09658 106 4,1 44,276 2,04412 135 5,2 44,945 2,01525 136 5,2 46,119 1,96664 130 5 46,789 1,94 120 4,6 48,358 1,88066 87 3,3 48,893 1,86132 105 4 51,81 1,76319 93,7 3,6 56,362 1,6311 81,4 3,1 58,642 1,573 80,7 3,1 Tableau 2 : Liste des pics de diffraction de rayons X sur poudre du sel de camsylate de 2-n-propyl quinoléine C -- Hygroscopie - Matériel et méthode L'évaluation de l'hygroscopie des cristaux de camsylate de 2-n-propyl quinoléine est réalisée en conduisant l'étude de l'isotherme de sorption / désorption d'eau en phase vapeur sur un appareil de type DVS-1000 commercialisé par la société SMS. L'échantillon, analysé dans une nacelle de quartz avec une prise d'essai de l'ordre de 10mg, est soumis à deux cycles de variation en humidité relative (HR) enchaînés sans discontinuité. Chaque cycle comprend deux étapes, adsorption puis désorption d'eau, aux cours desquelles l'humidité relative dans la chambre de mesure est augmentée puis diminuée graduellement selon les conditions décrites dans le tableau 2. L'échantillon est d'abord séché sous flux d'air sec filtré jusqu'à stabilisation de sa masse. Puis les étapes d'adsorption et de désorption sont enchaînées. Le gaz vecteur utilisé pour maintenir l'humidité relative à un pourcentage fixé est de l'air séché en amont de l'appareil et délivré à un débit de 100mL/min. Pendant le déroulement du programme, la température dans la chambre de mesure est maintenue à 25°C. - Résultats : La figure 4 représente les isothermes d'adsorption et de désorption d'eau à 25°C. Celte isotherme de sorption / désorption, conduite à 25°C, montre une prise en masse inférieure à 2% à 25°C/60% d'humidité relative, comparativement à la masse du produit équilibré à 0% d'humidité relative à 25°C. 3- Formulation On prépare une gélule à l'aide des ingrédients suivants : sel camphosulfonique de la 2-n-propyl quinoléine, lactose, hydroxypropyl-méthylcellulose, silice, stéarate de magnésium. REVENDICATIONS1. Molécule répondant à la formule (I) : X- (I) dans laquelle : X représente l'anion camphosulfonate, R représente un groupement alkyle ou alcényle linéaire, ramifié ou cyclique en C2-05, éventuellement porteur d'une ou plusieurs fonctions -OH. 2. Molécule selon la revendication 1, choisie parmi les sels de l'acide camphosulfonique de : - la 2-n-pentyl quinoléine, - la 2-n-propyl quinoléine, - la 2-propényl quinoléine, - la 2-(2-hydroxypropényl) quinoléine. 3. Molécule selon l'une quelconque des revendications let 2, sous forme cristalline. 4. Molécule selon la revendication 3, sel de l'acide camphosulfonique de la 2-n-propyl quinoléine, sous forme cristalline, caractérisée par la présence des pics 20 suivants dans le spectre de diffraction aux rayons X mesuré sur un diffractomètre en configuration thêta-thêta, équipé d'une anti-cathode de cuivre et exprime en termes de distances inter-réticulaires d, d'angle de Bragg 2 thêta et d'intensité relative : 10 15 Angle 2-thêta (0)* Distance inter-réticulaire d (Angstrdm)** Intensité relative (%)*** 25 4,463 19,78297 79,1 12,975 6,81756 89,3 14,223 6,22226 49,6 14,407 6,14309 100 17,02 5,20542 56,7 22,586 3,93359 71,4 * valeurs �0,2° ** valeurs �0,2À ***valeurs +0,5% 10 5. Procédé de fabrication de la forme cristalline d'une molécule de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 4, ce procédé comprenant une étape d'addition au composé (A) de l'acide camphosulfonique en quantité équimolaire. R (A) 6. Procédé selon la revendication 5, comportant au moins les étapes suivantes : - le composé de formule (I) est dissout dans un solvant choisi parmi : acétone, méthyl-éthyl-cétone, diéthylcétone, méthanol, éthanol, propanol, isopropanol, éther éthylique, diisopropyl éther, à une concentration allant de 0,05 à 60 g/1, - le solvant est porté au reflux puis la solution est refroidie jusqu'à une température comprise entre -30°C et 30°C - les cristaux obtenus sont filtrés, et éventuellement lavés. 7. Procédé selon la revendication 6, de production du sel camphosulfonique de la 2-n-propyl quinoléine, comportant au moins les étapes suivantes : - la 2-n-propyl quinoléine est dissoute dans un mélange de méthanol et d'éther éthylique, - addition d'une quantité équimolaire d'acide camphosulfonique - chauffage au reflux du solvant, - laisser refroidir - addition de quelques gouttes de disisopropyl éther. 8. Médicament qui comporte un composé de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 4 et un support pharmaceutique. 9. Médicament selon la revendication 8, qui est sous forme de comprimé de gélule ou de poudre. 10. Utilisation d'une molécule de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 4 pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie sélectionnée parmi les infections dues à des protozoaires et les infections dues à des rétrovirus. 11. Utilisation selon la revendications 10 pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie sélectionnée parmi : le VIH, le HTLV, les leishmanioses, les trypanosomiases, les toxoplasmoses.