FR 2931675 A1 20091204 FR 0853537 A 20080529 1 COMPOSITION COSMÉTIQUE A BASE DE RIZ DE CAMARGUE, DE VINAIGRE DE RIZ, D'EXTRAIT DE REINE DES PRÉS ET D'HUILE ESSENTIELLE DE CITRON DESCRIPTION Domaine technique La présente invention se rapporte à une composition cosmétique et/ou dermatologique à base de riz rouge, avantageusement de riz rouge de Camargue, en particulier enrichi en zinc, en particulier en Zn PCA (� PCA � pour � acide L-pyrrolidone carboxylique �), et comprenant du vinaigre de riz, un extrait de reine des prés, une huile essentielle et de la poudre de riz rouge matifiante. La composition de la présente invention présente notamment les propriétés suivantes : elle inhibe l'activité de la 5-alpha réductase, enzyme impliquée dans la production exagérée de sébum, resserre les pores, inhibe la croissance de staphylococcus aureus, bactérie impliquée dans l'apparition des désordres cutanés des peaux grasses, et absorbe l'excès de sébum. Tout particulièrement, l'invention concerne une composition cosmétique ou dermatologique comprenant au moins un extrait de riz rouge, de préférence de Camargue, particulièrement enrichi en Zn PCA, du vinaigre de riz rouge, un extrait de reine des prés, une huile essentielle de citron, et une poudre de riz rouge matifiante. État de la technique Les conditions de la vie moderne font subir à l'organisme diverses agressions permanentes, globalement connues sous le nom de stress. Parce que la peau agit comme barrière (physique, thermique, immunologique, hydrique) entre le corps et les éléments extérieurs, elle se trouve alors directement exposée à ces diverses agressions extérieures (U.V., variation de température, pollution, fumée, métaux lourds). Il est bien établi aujourd'hui qu'un des stress les plus importants sur la peau résulte de l'action des radicaux libres qui, du fait de leur réactivité chimique, entraîne l'altération des différents composants cellulaires de la peau. Avec le temps, ces stress répétés provoquent une inflammation de la peau qui se traduit par des phénomènes de rougeurs sur les peaux à tendance sèche et des phénomènes d'hypersécrétion de sébum sur les peaux à tendance grasse. La peau est colonisée par de nombreux organismes, levures, 1 o champignons, bactéries, constituant la flore résidente cutanée. Les zones de la peau à forte teneur en sueur ou en sébum vont être le siège de la prolifération de ces micro-organismes. À la naissance, la peau du bébé qui est stérile se peuple d'une microflore cutanée, jusqu'à l'obtention d'un équilibre stable des différents micro-organismes. 15 L'homéostasie de cette flore assure un rôle de barrière en limitant l'invasion et la croissance des bactéries pathogènes à la surface de la peau. Cet équilibre de la surface de la peau est fragile et dépend de nombreux facteurs : l'âge, l'hygiène, la chaleur, la grossesse, un 20 changement de statut hormonal. Une sécrétion sébacée exagérée favorise la prolifération des bactéries à la surface cutanée. L'hyperséborrhée caractéristique de l'adolescence est souvent associée à des signes de rétention sébacée, comédons et mycrokystes 25 qui, souvent, sont le prélude à une poussée d'acné. Les imperfections liées à l'acné se présentent sous formes de lésions dues à l'accumulation du sébum dans le follicule qui conduisent à des comédons ouverts (points noirs) ou mycrokystes fermés (points blancs). 3o Ces désordres cutanés, même s'ils sont plus accentués de l'adolescence jusqu'à 25 ans, touchent toutes les tranches d'âge. Responsable de ces situations d'inconfort, le problème des peaux à tendance grasse ou acnéique constitue toujours une préoccupation majeure en cosmétique. Si différentes compositions ont été mises au point dans l'art antérieur, aucune n'apporte une réponse globale pour combattre l'ensemble des problèmes liés à l'hypersécrétion de sébum. Il existe donc un réel besoin d'une composition permettant d'apporter une réponse globale aux problèmes précités tout en respectant l'homéostasie de la flore de la peau. Description de l'invention La présente invention répond précisément à ce besoin en fournissant une composition cosmétique ou dermatologique caractérisée en ce qu'elle comprend : - un extrait de riz, - du vinaigre de riz, - une poudre de riz matifiante, - un extrait de reine des près, et - une huile essentielle. Selon l'invention, la composition peut comprendre toute teneur appropriée d'extrait de riz permettant d'obtenir une composition cosmétique ou dermatologique. De préférence, la composition de la présente invention comprend une teneur d'extrait de riz comprise entre 0,1% et 15% en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence entre 0,1% et 10%. Selon l'invention, l'extrait de riz est de préférence un extrait de riz rouge, de préférence encore, un extrait de riz rouge de Camargue. La culture du riz en Camargue est ancienne puisqu'elle remonte au XIVe siècle. Cette région offre un climat idéal : des températures régulières, un fort ensoleillement, un vent assez constant, le Mistral, qui 4 sèche les cultures et empêche l'apparition des maladies. La Camargue comprend plus de 180 exploitations de riz en activité produisant 90 000 tonnes de riz paddy. C'est une production dynamique et de qualité garantie par la mise en place de label et le développement de l'agriculture biologique. La riziculture représente un atout écologique majeur pour la préservation de l'écosystème camarguais. Sans l'apport d'eau douce du Rhône nécessaire à la culture du riz, la Camargue serait devenu un désert salé car l'eau de mer envahirait les nappes phréatiques. 1 o Le riz rouge de Camargue est un riz complet réputé pour ses qualités gustatives. Il est naturellement rouge grâce aux pigments naturels contenus dans son péricarpe. Ce riz est issu d'une mutation naturelle qui s'est produite sans l'intervention de l'homme. À la moisson, le riz récolté dans son état brut est appelé riz 15 paddy. Les grains de riz sont enveloppés dans une coque protectrice non comestible qui doit être retirée. Le riz est ensuite conservé dans des silos où il est nettoyé et séché. Décortiqué et trié, le riz paddy devient riz complet. C'est le riz riche en vitamines (A, B, D, E, F), minéraux et oligo-éléments (zinc, 20 magnésium, fer), acides aminés et fibres. Le riz rouge de Camargue est une variété de riz dont le son est naturellement coloré en rouge. Le riz blanc est débarrassé de sa balle, de ses couches de son et de son germe. Il est plus rapide à cuire que le riz complet mais il ne 25 contient pas autant de nutriments bénéfiques pour la santé. Pour élaborer la composition de la présente invention, on utilise un extrait de riz, par exemple un extrait sec. Il peut s'agir avantageusement d'un extrait de riz rouge, de préférence encore de riz rouge de Camargue. De préférence, l'extrait est obtenu à partit de riz issu d'une culture 3o biologique (c'est-à-dire notamment sans pesticide ni engrais chimique), de préférence. Cet extrait peut être obtenu par tout procédé connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'un procédé comprenant les étapes suivantes, illustré à titre d'exemple avec un riz rouge de Camargue : - broyade des grains de riz rouge de Camargue complets, par exemple au moyen d'un broyeur, par exemple à percussion, - macération dans de l'eau � Froide � (maximum 30°C, généralement de 4 à 30°C) pendant 8 à 24 heures, de préférence pendant 8 à 12 heures, pour limiter l'extraction de l'amidon, - filtration primaire de façon à éliminer les résidus de riz non solubilisés, - concentration par évaporation basse pression, de préférence environ 104 Pa (0,1 bar), par exemple de 0,5x104 à 1,5 x104 (0,05 à 1,5 bar) et basse température (de préférence moins de 80°C, par exemple entre 4 et 80 °C) - filtration secondaire et ajout du support hydrosoluble, - filtration stérilisante au moyen d'un tamis à 0,2 microns, ou pasteurisation - séchage par atomisation (à pression atmosphérique (par exemple 105 Pa environ) et environ 200°C, par exemple 180 à 220°C. 25 Ce procédé peut être suivi d'une étape de contrôles destinés à vérifier les paramètres de qualités physico-chimiques et microbiologiques. Les techniques de contrôle sont celles connues de l'homme du métier. Par exemple visuelles, tactiles, dosages, etc.... Le support hydrosoluble permet de limiter la reprise en 30 masse de la poudre naturellement hydroscopique. Il peut s'agir par exemple de la Maltodextrine Bio. 10 15 20 Un exemple d'extrait de riz utilisable dans la composition de la présente invention est l'extrait de riz rouge de Camargue commercialisé par la Société Greentech. Selon l'invention, la composition peut comprendre toute teneur appropriée de vinaigre de riz permettant d'obtenir une composition cosmétique ou dermatologique selon l'invention. Avantageusement, la composition comprend du vinaigre de riz rouge. De préférence, le vinaigre de riz est du vinaigre de riz rouge. Avantageusement, le vinaigre est obtenu à partir de riz rouge, de préférence de riz rouge de Camargue, de 1 o préférence issu de culture biologique. De préférence, la composition de la présente invention comprend une teneur en vinaigre de riz comprise entre 0,1% et 5% en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence entre 0,1 et 2,5%. Le vinaigre de riz peut être obtenu par tout procédé connu de 15 l'homme du métier. Il peut être obtenu par exemple par un procédé de fabrication, illustré avec du riz rouge, comprenant les étapes suivantes : - broyade des grains de riz rouge complets, par exemple au moyen d'un broyeur, par exemple à percussion, - macération dans de l'eau � Froide � (maximum 30°C, 20 généralement de 4 à 30°C) pendant 8 à 24 heures, de préférence pendant 8 à 12 heures, pour limiter l'extraction de l'amidon, - filtration Primaire (élimination des résidus de riz non solubilisés), 25 - ajout de bactéries permettant la formation de vinaigre (par exemple Aceobacter acetio, gluconobacter oxydans, Sacharromyces, etc.) sous forme de Mère, et, éventuellement, en fonction d'une analyse de l'extrait de riz, addition de glucose/éthanol ou équivalent, 30 - fermentation aérobie durant minimum 4 semaines (avec contrôles hebdomadaires des paramètres physicochimiques et correction si nécessaire), - dès que la fermentation est stable, extraction mécanique de la Mère puis filtration primaire, - ajout d'un conservateur, - pasteurisation et filtration stérilisante au moyen d'un tamis à 0,2 microns, - contrôles destinés à vérifier les paramètres qualités physico-chimiques et microbiologiques du vinaigre obtenu. Le vinaigre utilisable dans la présente invention comprend 1 o avantageusement un pourcentage d'acide acétique permettant une utilisation cosmétique ou dermatologique, généralement de 3 à 7% d'acide acétique. Un exemple de vinaigre utilisable dans la composition de la présente invention est le vinaigre de riz rouge de Camargue commercialisé 15 par la Société Greentech. Selon l'invention, la composition peut comprendre toute teneur appropriée de poudre de riz matifiante permettant d'obtenir une composition cosmétique ou dermatologique selon l'invention. Il peut s'agir avantageusement d'une poudre obtenue à partit de riz rouge, de 20 préférence de riz rouge de Camargue. De préférence, il s'agit de riz issu d'une culture biologique (c'est-à-dire notamment sans pesticide ni engrais chimique). De préférence, la composition de la présente invention comprend une teneur de poudre de riz matifiante comprise entre 0,01 % et 20% en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence 25 de 0,01% à 10%, de préférence de 0,01 à 5%. La poudre de riz matifiante peut être obtenue par tout procédé connu de l'homme du métier. Elle peut être obtenue par exemple par un procédé de fabrication, illustré ici à titre d'exemple avec du riz rouge de Camargue, comprenant les étapes suivantes : 30 - pré-broyage à 1 mm de balle de riz ou grains de riz rouge de Camargue, au moyen d'un broyeur, par exemple un broyeur à couteau, - micronisation dans un micronisateur à reflux, un ou plusieurs passages, de préférence deux passages : l'un Une poudre de riz matifiante de riz rouge de Camargue utilisable dans la composition de la présente invention est par exemple celle commercialisée par la société Greentech. Selon l'invention, la composition peut comprendre toute teneur appropriée d'extrait de reine des prés permettant d'obtenir une composition cosmétique ou dermatologique selon l'invention. De préférence, la composition de la présente invention comprend une teneur en extrait de reine des prés comprise entre 0,2% et 15% en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence entre 0,2% et 10%. La Reine des Prés ou fausse spirée, Filipendula ulmarea, famille des Rosacées, est une plante herbacée vivace au port dressé, feuillue, à rhizome rampant et mesurant de 50 cm à 1,5 m. La tige glabre et anguleuse porte de multiples fausses ombelles ramifiées, très odorantes, d'un blanc jaunâtre. Les feuilles sont imparipennées, vert sombre, glabres dessus, feutrées de blanc en dessous. La foliole terminale est palmée, divisée en 3 ou 5 parties. Les folioles latérales forment de 2 à 5 paires le long du pétiole. L'huile essentielle élaborée par la plante contient du salicylate de méthyle ainsi que de l'aldéhyde salicylique. C'est dans l'oxydation de l'aldéhyde salicylique qu'en 1838 le médecin et pharmacologue italien Rafaele Spiria a découvert l'acide salicylique. C'est à partir de cet acide salicylique que le chimiste strasbourgeois Charles Frédéric Gerhardt a découvert en 1853 l'acide acétyle salicylique, dérivé du précédent, qui est le plus répandu des médicaments puisque c'est l'aspirine. Le nom même de ce médicament évoque la reine des prés car il lui a emprunté son appellation scientifique en passant de spirée à aspirine. De préférence, dans la composition de la présente invention, l'extrait de reine des prés est un extrait hydroglycolique de reine des prés. L'extrait de reine des prés peut être par exemple un extrait 1 o hydroglycolique de reine des prés. Il peut s'agir par exemple de celui commercialisé par exemple par la société Silab. Selon l'invention, la composition peut comprendre toute teneur appropriée en huile essentielle permettant d'obtenir une composition cosmétique ou dermatologique selon l'invention. De préférence, la 15 composition de la présente invention comprend une teneur en huile essentielle de citron comprise entre 0,01% et 5% en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence entre 0,01% et 2,5%, de préférence de 0,01 à 2%, de préférence encore de 0,01 à 1,2%. Selon l'invention, avantageusement, l'huile essentielle peut être 20 choisie par exemple dans le groupe comprenant l'huile essentielle de bigaradier, l'huile essentielle de pamplemoussier, l'huile essentielle de cédratier, l'huile essentielle de kumquat, l'huile essentielle de citronnier ou un mélange de deux ou plusieurs de ces huiles essentielles. Selon l'invention, de préférence, l'huile essentielle est 25 une huile essentielle de citron. Le citronnier dont l'huile essentielle entre dans la présente composition est le Citrus Limon L. appartenant à la famille de Rutacées. La famille de Rutacées est connue comme étant celle des agrumes, c'est-à-dire des citronniers, orangers et espèces voisines 30 appartenant au genre Citrus. Forte de 1600 membres, la famille des Rutacées doit son nom à une herbe aromatique méditerranéenne qui a prêté son nom pour l'élaboration du terme Rutacées. Originaires des régions tropicales du Sud Est asiatique, les arbres du genre Citrus ont été cultivés pour leurs fruits par les civilisations les plus anciennes de Chine. Le genre Citrus est représenté par des arbustes généralement épineux dont certains atteignent la taille d'une dizaine de mètres. Les feuilles alternes et persistantes sont simples et se reconnaissent à leur aspect vernissé et à leur structure. Le limbe est articulé sur le pétiole pourvu d'ailes plus ou moins marquées. À l'aisselle 1 o des feuilles, le rameau chlorophyllien porte à côté du bourgeon axillaire, une épine légèrement déjetée. Les fleurs, symbole de pureté, dégagent un parfum suave ; elles sont de type 5, d'un blanc porcelainier, les étamines nombreuses, sont soudées en faisceaux. 15 L'ovaire comporte de 8 à 15 loges et il est surmonté d'un style court, épaissi au sommet. De préférence, selon l'invention, l'huile essentielle est une huile essentielle obtenue par expression à froid. De préférence, selon l'invention, l'huile essentielle est une huile essentielle de citron obtenue par 20 expression à froid. De préférence, cette huile essentielle est d'origine méditerranéenne. De préférence, elle est obtenue par expression à froid du péricarpe. La composition cosmétique de la présente invention peut également être appelée association. On entend par association, un 25 mélange qui comprend les éléments précités. La composition de la présente invention peut comprendre en outre un ou plusieurs agent(s) actif(s) généralement utilisé(s) en cosmétique ou dermatologie. Il peut s'agir par exemple d'un ou plusieurs agent(s) actif(s) choisi(s) dans le groupe comprenant les agents 30 affinants, restructurants, anti-inflammatoires, séborrégulateurs, hydratants, kératolytiques et antiseptiques de la peau. Ces agents actifs, s'ils sont 11 présents, peuvent représenter en tout de 0.1 % à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence de 0.1% à 25 % en poids de la composition, de préférence de 0,1 % à 20%. La composition selon l'invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques classiquement utilisées, et bien connues de l'homme de l'art, dans les domaines cosmétiques ou dermatologiques pour être appliquées sur la peau, comme par exemple, des émulsions Huile dans Eau (HIE) ou Eau dans Huile (E/H), des lotions, shampooings, sprays, gels moussants pour la douche, des laits, des masques, des 1 o crèmes, etc., sans aucune restriction galénique particulière autre que celles de la compatibilité avec les autres ingrédients de la formule. Ainsi la composition de l'invention peut aussi contenir tous les constituants classiquement utilisés dans ces présentations comme des agents conservateurs, des agents solubilisants, des agents gélifiants, des 15 additifs gras, du propylène glycol, du sorbitol, du glycérol, des bases de parfums, de l'eau en quantité suffisante pour 100 (qsp 100). La composition selon l'invention est tout particulièrement destinée aux soins de la peau du visage et du corps. À la suite d'importantes recherches, la Demanderesse a en effet 20 mis en évidence qu'une association composée : - d'un extrait de riz, notamment de riz rouge, notamment de Camargue, enrichi en Zn PCA, - de vinaigre de riz, notamment de riz rouge, en particulier de Camargue, 25 - d'une poudre absorbante de riz, notamment de riz rouge, notamment de Camargue, - d'un extrait de reine des prés, et - d'au moins une huile essentielle que développe, par un effet de synergie, notamment des 30 propriétés raffermissantes, assainissantes, matifiantes. Les recherches ont montré que la composition cosmétique ou 12 dermatologique de la présente invention présente notamment une action qui inhibe l'activité de la 5-alpha réductase, enzyme impliquée dans la production exagérée (hyperproduction) de sébum, resserre les pores, et inhibe la croissance de Staphylococcus aureus, bactérie impliquée dans l'apparition des désordres cutanés des peaux grasses, et absorbe l'excès de sébum. Ainsi, la présente invention se rapporte également à une méthode de soin cosmétique comprenant une étape d'application sur la peau d'une composition de la présente invention. Cette application peut se faire manuellement ou par tout autre moyen approprié, une ou plusieurs fois par jour. Ainsi également, la présente invention se rapporte également à l'utilisation d'une composition selon l'invention pour un traitement cosmétique destiné à inhiber l'activité de la 5-alpha réductase, resserrer les pores, inhiber la croissance de staphylococcus auréus et absorber l'excès de sébum. Cette utilisation permet un traitement cosmétique en profondeur. D'autres avantages pourront encore apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, illustrés par les figures annexées, donnés à titre illustratif. EXEMPLES Exemple 1 : Evaluation in vitro de l'effet de l'extrait sec de riz rouqe de Camarque enrichi de Zinc PCA MATERIELS ET METHODES 30 Principe L'activité de la 5 alpha-réductase est mesurée par dosage de la 5-alpha-dihydrotestostérone formée après métabolisation de la testostérone radiomarquée dans une culture de fibroblastes dermiques humains en monocouche. Les effets du produit à l'essai ont été comparés à ceux obtenus en présence du finastéride, inhibiteur de référence. Réactifs - Finastéride, principe actif des comprimés CHIBRO-PROSCAR : MERCK 10 SHARP & DOHME CHIBRET - (1,2,6,7-3H)-Testostérone : AMERSHAM, réf. TRK 921, activité spécifique 65 Ci/mmol - Testostérone non radiomarquée : SIGMA, réf. T500 - Tampon PBS (Phosphate Buffered Saline) GIBCO, référence 14190-014 15 - Autres réactifs: BIOPREDIC INTERNATIONAL, SIGMA, CARLO ERBA Préparation du système d'essai Culture de fibroblastes humains en monocouche Isolement des fibroblastes à partir d'un fragment de peau 20 humaine collecté après une opération de plastie abdominale (FIB101024, femme âgée de 27 ans) Emploi des cellules au quatrième passage Culture jusqu'à confluence des monocouches dans le milieu MCF à 37°C en atmosphère humide contenant 5% de CO2 25 Milieu MCF : MEM/M199 (3:1, v/v) additionné de pénicilline (50 UI/ml), de streptomycine (50 pg/ml) et de SVF (10 %, vlv) Milieu d'incubation (MIF) : milieu MCF additionné de testostérone tritiée (8x10-8 M) et de testostérone non radiomarquée (1,92x10-6 M) 30 Préparation du produit de référence et des produits à l'essai Finastéride : broyage d'un comprimé et extraction du principe actif par du DMSO Après centrifugation (élimination des excipients insolubles), obtention d'une solution à concentration théorique de 1 mg/ml en Finastéride Finastéride testé à 30 ng/ml après dilution en milieu MIF. - Produit à l'essai : Sel de zinc (Poids moléculaire = 161,75) - Préparation d'une solution-mère à 10-'M en milieu MCF puis dilutions en milieu MIF ; le sel de zinc est testé à 10-6M et 10-6M. - Produit à l'essai : Sel de zinc + extrait sec de riz rouge de Camargue lot n°ORS070604-ES Préparation d'une solution mère d'extrait sec de riz à 100 mq/ml en milieu 15 MCF À partir de la solution mère de sel de zinc et de la solution mère de poudre de riz, réalisation de solutions contenant : - sel de zinc (à 10-$M) + poudre de riz à 5 mg/ml - sel de zinc (à 10-6M) + poudre de riz à 2 ou 5 mg/ml. 20 Protocole d'incubation Système réactionnel : cultures de fibroblastes pré-incubées en présence des produits à l'essai ou du produit de référence pendant 2 heures avant l'ajout du substrat, la testostérone. Pour cette étape de pré- 25 incubation, les produits à l'essai et le produit de référence sont préparés dans le milieu MCF. Les cellules sont ensuite incubées en milieu MIF (concentration finale en testostérone : 10-6 M), en présence des produits à l'essai et du produit de référence. Temps d'incubation : 24 heures. 30 Température d'incubation : 37°C, en atmosphère humide contenant 5% de CO2 . Témoin sans produit : correspondant aux cellules incubées en absence de produit à l'essai ou de produit de référence Réplicates : 2 Échelle de temps : Temps H û 2 heures : pré-incubation des produits à l'essai et du produit de référence dans le milieu MCF Temps H : élimination des milieux MCF contenant les produits à l'essai ou le produit de référence Temps H : incubation des produits à l'essai et du produit de référence dans le milieu MIF Temps H + 24 heures : évaluation des effets Évaluation des effets Extraction des stéroïdes des surnageants de culture par du dichlorométhane Après évaporation du solvant, reprise des résidus secs par du méthanol et dépôt sur des plaques de chromatographie en couche mince (plaque de gel de silice, ALDRICH) Solvant de migration : mélange dichlorométhane /éther (7:3, v/v) Après autoradiographie (permet le repérage des différents métabolites), `grattage' des spots et comptage de la radioactivité en scintillation liquide (compteur Beta-Packard). Traitement des données Résultats exprimés en picomoles (pmole) de 5 alphadihydrotestostérone formées par puits et en pourcentage de variation par rapport au groupe témoin. Tests statistiques effectués sur les valeurs en pmole de 5 alpha-d ihydrotestostérone. Test non paramétrique de rang : comparaison du groupe � témoin � d'une part vs groupes � traités � d'autre part (Test de KRUSKAL-WALLIS). RESULTATS Effet du Finastéride sur l'activité de la 5ùalpha réductase de 5 fibroblastes dermiques humains en culture, après 24 heures d'incubation : Témoin Finastéride 30 ng/ml 5-alphaDHT 17,84 5,12 pmole/puits 17 56 3,80 14,52 6,16 Moyenne 16,64 5,03*** Écart-type 1,84 1,18 inhibition/T - 69,9 10 *** = moyenne significativement différente de celle du groupe Témoin (p 1 o But de l'étude Évaluer l'activité inhibitrice de 3 actifs en mélange, vis-à-vis de Staphylococcus auréus Principe 15 L'essai consiste à mettre en contact le mélange à étudier avec le microorganisme d'essai, dans un diluant approprié Des dénombrements de germes survivants sont effectués à différents temps et comparés à l'inoculum théorique. Un témoin (souche microbienne + diluant) est réalisé pour 20 évaluer le comportement de la souche dans les mêmes conditions. Protocole de l'essai Matériel et milieux Matériels 25 Flux laminaire ( classe 100 US ) Etuve bactériologique réglée à 32°C Bec Bunsen Système de filtration sous vide et entonnoirs stériles Filtres Millipore 0,45u, Ref. EZ Pak, lot F6BN40412 30 Boîtes de Pétri stériles, diamètre 90 mm Petit matériel stérile (flacons, pipettes, fioles, spatules...)5 19 Souche et milieux Souche utilisée : Staphylococcus auréus CIP 4.83 Bouillon TRYPCASE-SOJA, AES,Réf. : AEB 141502CE, lot 602001 B. Gélose TRYPCASE-SOJA, Bio Mérieux, Réf. : 41466, lot 810110601. Eau ppi, LAVOISIER, LOT15 708 Solution peptonée pH 7, Bio Mérieux, Réf 42609, lot 81889501 Préparation de l'inoculum Souche bactérienne : staphylococcus aureus CIP 4.83 1 o La souche est ensemencée dans 100 ml de bouillon Trypcase-Soja. Après 48 heures d'incubation à 33°C, on obtient une culture très dense, estimée à environ 109UFC/ml. Préparation des mélanges 15 Les mélanges sont préparés en Eau ppi Mélange 1 Mélange 2 Mélange 3 Mélange 4 Extrait de 1 % 0,50% 0,20% 2,50% reine des prés Vinaigre de 0,20% 0,20% 0,20% 0,20% riz Huile 0,02% 0,05% 0,03% 0,00% essentielle de citron Déroulement des essais 20 Essais Chacun des mélanges est introduit dans 4 tubes stériles, à raison de 9 ml, par tube : 1 ml de l'inoculum réglé à X107 UFC (0,5m1 de la suspension mère dans 100 ml de solution peptonée tamponnée ù UFC = unité formant colonie) est ajoutée à chaque tube. Tous les tubes sont agités 20 secondes au Vortex. Un dénombrement est réalisé immédiatement pour servir de t0. Tous les tubes sont incubés à 32°C. Les dénombrements sont effectués par filtration à t6heures, t10heures et t24heures Témoin négatif Un essai Témoin est réalisé en mélangeant 9ml d'eau ppi et 1 ml d'inoculum à X10' UFC. Résultats - Suspension bactérienne - Dénombrement de la suspension mère : 2,6x109 UFC/ml. - Quantité théorique de bactéries ensemencées (0,5m1/100ml) : 1,3x107 UFC/ml. Dénombrements des survivants des essais Dénombrements UFC x 104 Mélange 1 Mélange 2 Mélange 3 Mélange 4 Témoin t = 0 120 110 100 80 120 heure t=6 50 39 63 100 150 heures t = 10 47 16 52 72 160 heures t = 24 29 11 10 62 100 heures UFC = unité formant colonie Pourcentage d'inhibition Calculé par rapport à l'inoculum théorique : 1x106 UFC Mélange 1 Mélange 2 Mélange 3 Mélange 4 t=6 heures 62% 70% 52% 23% t=10 heures 64% 88% 60% 45% t=24 heures 78% 91% 92% 52% Les mélanges à l'essai inhibent la croissance de 1 o Staphylococcus aureus. Cet effet est dose et temps dépendant. Exemple 3 : Mesure de pouvoir absorbant de la poudre de riz rouqe de Camarque 15 Protocole Fabrication de sébum artificiel : 5% acide palmitique + 15% squalene + 6% cholestérol + 10/0 acide laurique + 3% acide stéarique + 3% acide myristique + 34% huile d'onagre + qsp Glycérol À partir d'un poids donné de poudre, de 4 g, ajout du sébum 20 artificiel (goutte à goutte) jusqu'à non absorption de la dernière goutte de sébum ajouté. 10 essais. Faire la mesure du poids de sébum en fonction de la quantité de poudre utilisée. Faire la moyenne des 10 mesures. 21 25 22 RESULTATS La poudre matifiante de riz rouge de Camargue est capable d'absorber jusqu'à 18 fois son poids en sébum. Exemple 4 : Evaluation clinique de la matité de la peau de la crème � velouté de riz ultra-matifiant � 1 o Cet exemple est réalisé à partir de la composition de l'exemple 7. Efficacité matifiante immédiate sur 8h tout au long de la journée. A T=O, T=30 minutes, T=4 heures, et T=8 heures, une évaluation clinique de la matité de la peau a été réalisée par le 15 dermatologue suivant une échelle en 10 points de 0 à 9. Plus l'état du paramètre est considéré comme bon, plus la note se rapproche de 9 et inversement. L'analyse statistique porte sur 26 volontaires. TO T3O TO/T30 T30 minutes minantes minutes Moy. \ Moy. Probabilité % %4a de % d'évolution sujets d'amélioration améliores chez les sujets arn.liorés 26 4,81 26 5,65 P=0,007 .+ 17,6 65,4 37,3 S(a} Légende : S = Significatif lorsque P Mesure des sécrétions sébacées au sébutape Efficacité sur le rééquilibre des sécrétions après 4 semaines du produit � Velouté de riz ultra-matifiant �. A T=0 et à T=4 semaines, la technicienne a effectué une 1 o mesure des sécrétions sébacées au sébutape sur le front pour évaluation visuelle. L'évaluation de l'importance des sécrétions sébacées a été réalisée à l'aide d'une échelle visuelle en 6 points de 0 à 5. Plus les sécrétions sébacées sont importantes, plus le score 15 (=Score du Sébutape) se rapproche de 5 et inversement. L'analyse statistique porte sur 26 volontaires. TO T4 TO!T4 T4 semaines semaines semaines Moy. N Moy. Probabilité % % de % d'évolution sujets d'amélioration améliores chez les sujets améliorés Score de 26 3,92 26 3,23 P=2,21 E _ -17,6 69,2 24,0 S :b atape 05 S(a) 20 RESULTATS L'analyse statistique des résultats met en évidence une diminution significative des sécrétions sébacées de 17,6 % après 4 semaines d'utilisation du Velouté de riz ultra-matifiant. 25 24 Exemple 5: Etude de la non comédogénicité et des qualités cosmétiques du Velouté de riz ultra-matifiant Un questionnaire a été soumis aux volontaires après 4 semaines d'application du produit d'investigation (T=4 semaines). L'analyse porte sur 26 volontaires. Les résultats sont présentés par pourcentage des modalités de réponses. Oui tout Oui Oui un peu Non pas fait D'accord D'accord D'accord d'accord Après 4 semaines d'utilisation La peau est hydratée 76,9 15,4 % (4) ` ,7 % (2) 0 % (0) (20) La peau est nette 73,1 23,1 % ({~) 3,8 % (1) 0 % (0) (19) La peau est assainie 69,2 °fa 2'3,1 % (6) 7;7 % (2) 0 % (0) (18) • Comment trouvez-vous le produit testé, le � Velouté de riz Matifiant � ? Très agréable = 69,2 % (18) Agréable = 26,9 % (7) Pas très agréable = 3,8 % (1) Désagréable = 0 % (0) • D'un point de vue cosmétique, considérez-vous le produit comme ? Très bon = 69,2 % (18) Assez bon = 26,9 % (7) Bon = 3,8 % (1) Pas très bon = 0 % (0) • Si vous avez déjà utilisé de façon habituelle ou si vous utilisez fréquemment ce type de produit, par comparaison à votre produit de 25 soin quotidien protecteur habituel, quel produit préférez-vous ? Votre produit habituel = 40 % Le produit étudié = 30 % (3) Pas de différence = 30 % (3) • Achèteriez-vous ce produit ? Oui = 88,5 % (23) Non = 11,5 % (3) • Quelle note globale donneriez-vous à ce produit ? (10 étant la meilleure note) très mauvais = 0 % (0) 6 moyen = 3,8 % (1) 15 mauvais = 0 % (0) 7 assez bien = 7,7 % (2) plutôt mauvais = 0 % (0) 8 bien = 0 % (0) médiocre = 0 % (0) 9 très bien = 26,9 (7) passable = 3,8 % (1) 10 excellent = 57,7 % (15) 20 Dans les conditions de cette étude, le produit d'investigation Velouté de riz ultra-matifiant : - Présente une bonne tolérance cutanée au niveau du visage et du cou chez des volontaires à la peau mixte ou grasse, 25 - Ne présente pas de potentiel comédogène, - Présente un effet matifiant longue durée de 8H - Diminue les sécrétions sébacées au cours des 4 semaines d'utilisation - Obtient une très bonne appréciation de son acceptabilité 30 cosmétique et de son efficacité subjective. 10 Exemple 6: Etude de la non comédogénicité et des qualités cosmétiques de l'Eau de riz purifiante Le produit d'investigation a été appliqué sur le visage et sur le cou, deux fois par jour, matin et soir pendant 4 semaines. L'étude a été menée sur 25 volontaires. Le tableau suivant regroupe les pourcentages de satisfaction et d'insatisfaction ainsi que le nombre de volontaires satisfaits et insatisfaits pour chaque item. Questions Satisfaction InsaList .ion Comparaison Nb % Nb P=1,94 E' S La peau est assainie 23 92,00 2 8,00 P=1,94 E °s S La peau est purifiée ?3 92,00 2 8,00 P-1,94 E-°5 S La peau est apaisée 23 92,00 2 8,00 P=1,94 E°5 S La peau est r~ratifie 23 92,00 2 8,00 P=1,94 E-°' S La production de sébum 23 92,00 2 8,00 P=1,94 E-" S Est rééquilibrée Le teint parait plus uniforme 23 92,00 2 8,00 Pù1,94 E-°5 S Légende : S : différence significative Aucun volontaire n'utilisait de tonique pour compléter le nettoyage du visage. 15 8 % des volontaires ont utilisé ou utilise ce type de produit de façon habituelle. 100 % des volontaires qui utilisent de façon habituelle un produit de même type ont préféré le produit d'investigation 92 % des volontaires achèteraient le produit d'investigation. 20 • À l'application du tonique : 10 Les volontaires ont très bien apprécié l'ensemble des items évalué à l'application (pourcentages de satisfaction compris entre 76 % et 100 %). Ils ont tous particulièrement apprécié : - La facilité d'application - L'effet fraîcheur immédiat procuré par le produit d'investigation. • Après 4 semaines d'utilisation : Les volontaires ont très bien apprécié l'ensemble des items évalué après 4 semaines d'utilisation (92 % de satisfaction pour tous les items). Conclusion Dans les conditions de cette étude, le produit d'investigation Eau de riz purifiante : - Présente une bonne tolérance cutanée au niveau du visage et du cou chez des volontaires à la peau mixte ou grasse, - Ne présente pas de potentiel comédogène, - Obtient une très bonne appréciation de son acceptabilité cosmétique et de son efficacité subjective. Exemple 7 : Exemple de crème soin visaqe réalisée à partir de la composition de la présente invention 25 • Stéarate de sucrose 0,5 à 6 0/0 • Distéarate de sucrose 0,5 à 6 0/0 • Triglycéride caprylique /caprique 3 à 15 0/0 • Triglycéride caprylique /caprique/succinique 3 à 15 0/0 30 • Extrait de riz 0,1 à 10 % 20 28 • ZincPCA 0,1 à5% • Vinaigre de riz 0,1 à 10 % • Poudre de riz matifiante 0,01 à 10 % • Extrait de Reine des Prés 0,2 à 10 0/0 • Huile essentielle Citron 0,01 à 2 0/0 • Acétate de tocophéryle 0,05 à 1 0/0 • Urée 0,5à2% • Glycérine 0,5 à 5 0/0 • Hyaluronate de Sodium 0,1 à 3 0/0 Gomme xanthane 0,1 à 0,5 0/0 • Parfum qs • Conservateurs qs • Eau qsp 100 0/0 Cette crème : - Présente une bonne tolérance cutanée au niveau du visage et du cou chez des volontaires à la peau mixte ou grasse, - Ne présente pas de potentiel comédogène, - Obtient une très bonne appréciation de son acceptabilité cosmétique et de son efficacité subjective.25 REVENDICATIONS1. Composition cosmétique ou dermatologique caractérisée en ce qu'elle comprend : - un extrait de riz, - du vinaigre de riz, - une poudre de riz matifiante, - un extrait de reine des près, et - une huile essentielle. 2. Composition selon la revendication 1, dans laquelle ladite huile essentielle est une huile essentielle de citron. 3. Composition selon la revendication 2, dans laquelle la 15 composition comprend une teneur en huile essentielle de citron comprise entre 0,01 % et 5% en poids par rapport au poids total de la composition. 4. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition comprend une teneur en extrait 20 de reine des prés comprise entre 0,2% et 15% en poids par rapport au poids total de la composition. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition comprend du vinaigre de riz 25 rouge. 6. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes dans laquelle la composition comprend une teneur en vinaigre de riz comprise entre 0,1% et 5% en poids par rapport au poids total de la 30 composition. 10 7. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes dans laquelle l'extrait de riz est un extrait de riz rouge de Camargue. 8. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes dans laquelle la composition comprend une teneur d'extrait de riz comprise entre 0,1% et 15% en poids par rapport au poids total de la composition. 9. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la poudre de riz matifiante est une poudre de riz rouge matifiante. 10. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes dans laquelle la composition comprend une teneur de poudre de riz matifiante comprise entre 0,01% et 20% en poids par rapport au poids total de la composition. 11. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition comprend en outre au moins un agent actif choisi dans le groupe comprenant les agents affinants, restructurants, anti-inflammatoires, hydratants, kératolytiques et antiseptiques de la peau. 12. Composition l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition comprend une teneur en ledit, au moins un, agent actif comprise entre 1 et 20% en poids par rapport au poids total de la composition. 13. Méthode de soin cosmétique comprenant une étape d'application sur la peau d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 12. 14. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 pour un traitement cosmétique destiné à inhiber l'activité de la 5-alpha réductase, enzyme impliquée dans la production exagérée de sébum, resserrer les pores, inhiber la croissance de staphylococcus auréus, bactérie impliquée dans l'apparition des désordres 1 o cutanés des peaux grasses et absorber l'excès de sébum.