FR 2916447 A1 20081128 FR 0703709 A 20070525 Procédé de production et utilisation de familles d'oligomères d'acide galacturonique La présente invention se rapporte à un procédé de production d'une 5 famille d'oligomères d'acide galacturonique et à une utilisation d'une telle famille d'oligomères. Les oligosaccharides constituent une large famille de composés parmi laquelle de nombreuses molécules présentent des activités biologiques susceptibles d'être utilisées dans diverses applications. ~o Certains dérivés de ces oligosaccharides peuvent être élaborés dans le but d'inhiber le développement des processus infectieux, par exemple chez les végétaux. Les végétaux sont précisément une importante source d'oligosaccharides biologiquement actifs et la plupart d'entre eux sont 15 obtenus en fragmentant des pectines, des pectines issues du lin par exemple ou de tout autre végétal. Les pectines correspondent à un constituant majeur de la paroi des cellules végétales. Les pectines se composent essentiellement d'homogalacturonanes et de rhamnogalacturonanes de type RG I et de 20 type RG Il. Les homogalacturonanes sont constitués de 100% d'acide galacturonique partiellement méthylé en C6 et actétylé en C2 et/ou C3. Les rhamnogalacturonanes de type RG I sont constitués majoritairement de rhamnose, d'acide galacturonique et de galactose, d'arabinose et parfois de xylose. Quant aux rhamnogalacturonanes de type RG II, 25 présents en moins grande proportion dans les pectines, ils sont constitués d'acide galacturonique, d'acide glucuronique, de rhamnose, de galactose, d'arabinose, de fucose, d'apiose, de KDO, d'un dérivé de l'acide heptulosurique et de xylose. Des méthodes ont été mises en oeuvre'pour dégrader ces pectines 30 dans le but d'obtenir des oligomères d'acide galacturonique. Ces méthodes procèdent de la dégradation enzymatique de pectines puis de la purification des oligomères d'acide galacturonique. On citera notamment l'article de L. Bédouet et al. ( Methods for obtaining neutral and acid oligosaccharides from flax pectines , Biotechnology Letters (2005) 27 : 40), dans lequel il est décrit une méthode enzymatique pour obtenir des oligosaccharides neutres et acides à partir de pectines de lin partiellement substitués par des groupements methyl en C6 et/ou acétyl en C2/C3. La purification des familles d'oligosaccharides 100% neutres (oligogalactanes, oligoarabinogalactanes) ou 100% acides (oligogalacturonanes), ou partiellement anioniques, nécessitant une purification par chromatographie échangeuse d'anions. Io On pourra se référer également au document japonais JP 10 226 701 dans lequel il est décrit également une méthode de décomposition des pectines brutes pour obtenir des oligomères d'acide galacturonique. La méthode consistant à faire une extraction à chaud (60 à 100 C) de ladite pectine puis de soumettre l'extrait à une dégradation 15 enzymatique à l'aide de pectinase. Les enzymes utilisées permettent de couper les chaînes polymériques en oligomères. Ces chaînes polymériques présentent naturellement des substituants acétylés, la préparation en oligogalacturonane décrite dans le procédé est naturellement contaminée par des oligomères non 100% anioniques 20 puisque l'extraction à chaud entraîne obligatoirement des fractions d'oses neutres de masse moléculaire faible, on citera l'article de L. Bedouet (Changes in esterified pectins development in the flax stems and leaves Carbohydrate Polymers 65, (2006) 165-173) ; les oligomères qui résultent de cette dégradation enzymatique présentent une activité antibactérienne 25 Bien qu'intéressantes, les méthodes décrites dans ces documents sont relativement complexes à mettre en oeuvre, et par conséquent coûteuses. Par ailleurs, la structure des oligomères obtenus dépend fortement de l'origine des pectines, notamment la substitution notamment par les acétates qui varie d'une plante à une autre, mais aussi en fonction 30 du stade de croissance de la plante (L. Bedouet et al, 2006, Carbohydrate Polymers 65, 165-173). Aussi, un problème qui se pose et que vise à résoudre la présente invention est de fournir un procédé moins coûteux de production d'oligomères, constitués uniquement d'acide galacturonique, non substitués ou acétylés. Un autre problème, que résout l'invention, est de fournir un procédé, qui permette d'obtenir des oligomères ayant la même structure (non contaminés par des oligomères contenant des oses neutres), quelle que soit l'origine des pectines utilisées, ces oligomères pouvant être non substitués ou acétylés selon un pourcentage déterminé. Dans ce but, la présente invention propose un procédé rapide et peu onéreux de production d'oligomères d'acide galacturonique acétylés ou non, ledit procédé étant du type selon lequel on fournit un mélange de polymères d'acide galacturonique; et selon l'invention ce procédé comprend en outre les étapes suivantes : a) on porte ledit mélange à une température et à une pression déterminées pour dégrader lesdits polymères d'acide galacturonique de façon à obtenir un mélange d'oligomères comprenant des oligomères d'acide galacturonique dont le degré de polymérisation dp est compris essentiellement entre 2 et 40 ; et, b) on récupère lesdits oligomères d'acide galacturonique de dp essentiellement compris entre 2 et 40 ; de cette façon on obtient des oligomères qui seront acétylés selon un pourcentage déterminé et présentant un degré de polymérisation dp essentiellement compris entre 2 et 40. Ainsi, une caractéristique de l'invention réside dans la mise en oeuvre d'un mélange de polymères d'acide galacturonique que l'on dégrade thermiquement de manière contrôlée pour obtenir des oligomères d'un degré de polymérisation limité compris entre 2 et 40, par exemple entre 5 et 25. Avantageusement, et selon une étape c), après l'étape b), on fait réagir un composé acétique sur lesdits oligomères d'acide galacturonique récupérés de façon contrôlée pour greffer des groupements acétates selon un pourcentage déterminé sur lesdits oligomères d'acide galacturonique récupérés ; de cette façon on obtient des oligomères d'acide galacturonique acétylés sans modification du degré de polymérisation. De la sorte, les polymères d'acide galacturonique qui sont naturellement partiellement acétylés, mais selon un taux variable qui dépend de leur origine, sont d'abord entièrement débarrassés de leurs substituants pour ensuite être acétylés de manière totalement contrôlée. De cette façon on peut s'affranchir de l'origine des polymères. Par ailleurs, et selon encore un autre mode de mise en oeuvre, lesdits oligomères sont avantageusement substitués avec des groupements choisis parmi l'ensemble des, Alkyl, Aryle, Acyl, Phosphate, Sulfate, selon un pourcentage déterminé de manière à leur conférer des to propriétés particulières. Ces oligomères seront alors traités par un réactif d'acétylation, on choisira de préférence un réactif facile à éliminer au terme de la réaction, comme par exemple l'anhydride acétique. Dans le cas des oligomères d'acide galacturonique sulfatés, ils seront obtenus de préférence à l'aide d'un complexe S03-DMF. 15 Selon un mode de mise en oeuvre de l'invention particulièrement avantageux, lesdits polymères d'acide galacturonique sont obtenus en hydrolysant des pectines issues de végétaux, de quelle que nature que ce soit. Une telle source d'approvisionnement est quasiment infinie, et par conséquent d'un coût très avantageux. Aussi, non seulement la matière 20 première est d'un faible coût, mais au surplus le procédé de mise en oeuvre, est relativement simple et ne fait pas appel à des méthodes coûteuses de dégradation enzymatique. Par ailleurs les procédés de préparation des oligogalacturonanes par voie enzymatique nécessitent l'élimination de la protéine afin que la fraction oligogalacturonane soit 25 pure. Le procédé objet de la présente invention s'affranchi de cette étape de déprotéinisation. Avantageusement, à l'étape a), on porte ledit mélange de polymères d'acide galacturonique à une température supérieure à 110 C, de manière à dégrader les polymères d'acide galacturonique. De préférence, on 30 applique une température inférieure à 130 C, par exemple 121 C et ce durant un laps de temps compris entre 30 et 60 minutes. Par exemple, le mélange est placé en autoclave durant 40 minutes. Dans ces conditions de température et de pression, on obtient essentiellement des oligomères d'acide galacturonique non substitués. De manière préférentielle, on abaisse le pH du mélange d'oligomères après l'étape a), pour provoquer la précipitation des oligomères d'acide galacturonique dont le degré de polymérisation dp est supérieure à 40 ou de préférence supérieur à 25, de façon à récupérer à l'étape b) un surnageant contenant lesdits oligomères d'acide galacturonique de degré de polymérisation dp, compris entre 2 et 40 ou bien de préférence compris entre 2 et 25 et essentiellement compris entre to 5 et 25. Ensuite, ledit surnageant est traité de manière à récupérer des oligomères de dp essentiellement compris entre 5 et 25, soit par précipitation, soit par ultrafiltration; il pourra avantageusement être mélangé à un alcool pour faire précipiter lesdits oligomères d'acide galacturonique dont le degré de polymérisation dp est essentiellement ts compris entre 5 et 25. Dans le cas de la filtration on pourra avantageusement utiliser une membrane de seuil de coupure de 1 kDa, les oligomères de dp essentiellement compris entre 5 et 25 sont récupérés dans le rétentat, ce procédé de filtration permet en outre de concentrer la solution d'oligomères qui peut être lyophilisée. Et à l'étape 20 c), on fait réagir avantageusement de l'anhydride acétique sur les oligomères d'acide galacturonique récupérés pour greffer des groupements acétates. De la sorte, le procédé d'acétylation est relativement doux et il ne provoque ainsi pas de modification du degré de polymérisation. Il n'y a pas de dégradation supplémentaire des 25 oligomères. Selon un mode de réalisation particulier, à l'étape c), le composé acétique et lesdits oligomères d'acide galacturonique forment un mélange réactionnel, et on interrompt la réaction d'acétylation en ajoutant une quantité d'eau donnée audit mélange réactionnel. Ensuite, ledit mélange 30 réactionnel additionné de ladite quantité d'eau donnée est dialysé après réaction pour récupérer lesdits oligomères acétylés en solution dans l'eau. Avantageusement, lesdits oligomères acétylés en solution dans l'eau sont lyophilisés pour être isolés. De préférence, ils sont congelés avant lyophilisation. Selon un autre aspect, la présente invention propose l'utilisation d'oligomères acétylés selon le procédé décrit ci-dessus, pour une 5 utilisation comme agent antimicrobien. D'autres particularités et avantages de l'invention ressortiront à la lecture de la description faite ci-après de modes de réalisation particuliers de l'invention, donnés à titre indicatif mais non limitatif, en référence aux dessins annexés sur lesquels : Io - la Figure 1 est un spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (1H RMN) d'un composé obtenu selon le procédé conforme à l'invention et présentant un premier degré de substitution ; et, - la Figure 2 est un spectre de ce même composé présentant un second degré de substitution. 15 Les séquences d'oses neutres sont sensibles aux acides contrairement aux séquences d'acide uroniques. En milieu acide, les oses neutres et les oligomères d'oses neutres sont solubles alors que les oligomères d'oses acides forment un précipité. Les séquences d'oses neutres seront donc éliminées par hydrolyse acide contrôlée, tandis que 20 les séquences d'oses acides resteront intactes ; on obtiendra alors des polymères d'acide galacturonique (PGA). La méthode utilisée pour dégrader les polymères d'acide galacturonique (PGA) en oligomères d'acide galacturonique (OGA) correspond à une auto-hydrolyse, en condition acide à un pH compris 25 entre 4 et 5 et de manière préférentielle à un pH de 4,4, de ces polymères d'acide galacturonique (PGA) provoquée par chauffage en autoclave à 121 C (1 atm) pendant 40 minutes. Méthode : Les oligomères de pectine sont obtenus par dégradation des 30 pectines brutes, lesquelles contiennent des oses acides (acide galacturonique) et des oses neutres. Le rapport oses acides/oses neutres varie selon l'origine des pectines. Il est respectivement de 75/25 pour le lin, de 80/20 pour la pomme, ou encore de 82/18 pour le citron. La méthode appliquée pour dégrader les pectines selon laquelle elles sont soumises à un traitement acide puis sont portées à au moins 120 C, permet d'éliminer tous les substituants présents sur le polymère et en particulier les groupements acétyl. Après purification, les oligomères d'acide galacturonique (OGA) ainsi obtenus, dont le degré de polymérisation DP est essentiellement compris entre 5 et 25 unités sont donc non acétylés. En revanche, d'autres méthodes que la dégradation thermique, ~o notamment la dégradation enzymatique par des pectinases commerciales peut conduire à l'obtention d'oligomères d'acide galacturonique (OGA) acétylés, puisque les polymères d'acide galacturonique sont naturellement acétylés et que la dégradation enzymatique consiste simplement au découpage du polymère en oligomères. Cependant l'exploitation d'un tel is procédé peut conduire à une hétérogénéité des échantillons puisque le taux de substitution des pectines varie en fonction du végétal, mais aussi en fonction de son stade de développement. Et surtout, ces méthodes sont plus coûteuses. De même, le rapport oses acides/oses neutres varie en fonction 20 des plantes et de leur stade de croissance et l'exploitation de pectines brutes entraînerait une variabilité de composition qui pourrait être préjudiciable à la reproductibilité des propriétés dans le cas de l'application de ces molécules. Pour s'assurer de la parfaite reproductibilité des lots on s'intéresse 25 plus particulièrement à la fraction ne contenant que les oses acides. On pourra extraire les polymères d'acide galacturonique (PGA) à partir de pectines isolées de plantes de quelle que nature que ce soit. On pourra aussi utiliser des polymères d'acide galacturonique vendus tels quels dans le commerce. Dans les deux cas, on vise à obtenir des oligomères d'acide 30 galacturonique (OGA). Exemple 1 Un procédé de préparation de polymères d'acide galacturonique à partir d'une quantité déterminée de pectine est décrit ci-après. On fournit tout d'abord 10 g de pectine que l'on met en solution dans de l'eau, et de manière avantageuse dans de l'eau ultra pure. Une telle qualité d'eau est susceptible d'être obtenue au moyen d'un dispositif du commerce, par exemple le système PURELAB UHQ. Ensuite, on ajoute à la solution de l'acide chlorhydrique quatre fois molaire, puis on porte le mélange à 50 C et on le met sous agitation pendant une durée de 2 à 4 to heures avantageusement on traitera la préparation trois heures à 50 C. De la sorte, les séquences d'oses neutres sont hydrolysées tandis que les liaisons entre les acides uroniques ne sont pas dégradées. Après cette phase d'agitation, le mélange est neutralisé par de la soude 12 fois molaire. Puis on additionne au mélange 2 volumes 15 d'isopropanol. Ainsi, seules les molécules de masse moyenne élevée précipitent avec l'isopropanol, tandis que les molécules de masse faible (mono et oligosaccharides) restent en solution. On introduit ensuite le mélange dans des tubes d'une centrifugeuse. On récupère alors le précipité dans le culot desdits tubes, après centrifugation du mélange 20 porté à 4 C et à 15.000 g pendant 30 minutes, tandis que le surnageant est éliminé. On obtient par là même, des polymères d'acide galacturonique. Exemple 2 Le précipité obtenu selon l'exemple 1 est ensuite remis en solution 25 dans de l'eau ultra pure UHQ. Le pH de la solution est alors ajusté à 4,4 avec de l'acide chlorhydrique 0,1 fois molaire. De la sorte, les fonctions carboxyliques du polymère d'acide galacturonique (PGA), sont majoritairement sous la forme ionisée COO" H+. Cela améliore l'auto-dégradation lorsque le mélange est porté à 121 C en autoclave pendant 30 40 minutes. Une diminution de la durée du traitement réduit la dégradation du polymère, alors qu'à l'inverse une augmentation de la durée du traitement à 121 C augmente la dégradation du polymère et conduit à des oligomères d'acide galacturonique dont les dp sont en moyenne, selon les cas majoritairement plus élevés ou plus petits que ceux obtenus par traitement pendant 40 minutes. Grâce à ce traitement thermique et aux conditions d'application, d'une part tous les substituants du polymère sont éliminés, notamment les substituants acétyl, et d'autre part, on obtient notamment des oligomères d'acide galacturonique dont le degré de polymérisation dp est majoritairement compris entre 2 et 25 unités ose. D'ailleurs, lorsque l'on compare les profils d'élution en chromatographie échangeuse d'ions (DEAE-Sepharose), des polymères ~o d'acide galacturonique obtenus selon l'exemple 1 précité et des oligomères d'acide galacturonique obtenus grâce au traitement thermique décrit ci-dessus, on observe pour les seconds, une élution qui non seulement démarre plus tôt, mais aussi qui est plus étalée que celle des premiers. Cela est révélateur de la dégradation des polymères, puisque 15 l'élution des petites molécules est plus rapide et que l'élution des plus grosses molécules. Le mélange d'oligomères d'acide galacturonique précité, est ensuite refroidi rapidement. Puis, on ajuste le pH de ce mélange refroidi à 2,0 avec de l'acide acétique. Cet ajustement provoque alors la précipitation 20 des molécules de masse moyenne qui peuvent résulter d'une dégradation incomplète. Ainsi, après centrifugation du mélange à 15 000 g pendant 30 minutes et ce à une température de 4 C, on récupère le surnageant que l'on neutralise par de l'ammoniaque et qui est constitué de petites 25 molécules, tandis que le culot des tubes de centrifugation contenant les molécules de masse moyenne précitée est éliminé. Là encore, l'élution en chromatographie échange d'ions du surnageant en comparaison des deux autres profils d'élution décrit ci-dessus, montre un profil qui démarre encore un peu plus tôt et surtout qui 30 s'atténue bien plutôt que le profil des oligomères d'acide galacturonique après traitement thermique. Cela témoigne de l'élimination des composés de haut poids moléculaire et ce, grâce à la précipitation a pH 2 en présence d'acide acétique. Les petites molécules constituées d'oligosaccharides sont ensuite récupérées, soit par précipitation en présence d'un alcool, soit par ultrafiltration sur membrane de lkDa de seuil de coupure ; dans les 2 cas, les oligomères peuvent être séchés par lyophilisation. Dans le cas de la précipitation alcoolique on choisira préférentiellement un traitement par 7 volumes d'isopropariol. Le mélange est à nouveau centrifugé dans les mêmes conditions et l'on récupère alors dans le culot des tubes, les Io fractions d'oligomères d'acide galacturonique. Pour ce faire, le précipité récupéré dans le culot est séché par exemple par évaporation. Ensuite, le précipité sec peut avantageusement être solubilisé dans de l'eau UHQ (10g d'oligomères d'acide galacturonique par litre) puis lyophilisé. La lyophilisation améliore le conditionnement des oligomères d'acide 15 galacturonique (OGA). On se référera au tableau I reporté ci-dessous, dans lequel apparaît alors, le pourcentage des fractions d'oligomères d'acide galacturonique obtenu par précipitation dans l'isopropanol, en fonction du degré de polymérisation. 20 Tableau I Degré de Rendement Degré de Rendement polymérisation polymérisation 2 0,3 % 0,01 14 0,9 % 0,05 3 3,5 % 0,2 15 0,6 % 0,03 4 10% 0,5 16 0,7% 0,03 5 13,5 % 0,6 17 0,15 % 0,03 6 14,5% 0,7 18 0,2% 0,03 7 14% 0,7 19 0,15% 0,03 8 14,5% 0,7 20 0,15% 0,03 9 11,5% 0,6 21 0,15% 0,03 9,75 % 0,6 22 0,1 % 0,03 Degré de olvmérisation Rendement Degré de polymérisation Rendement 11 6,5% 0,3 23 0,1 % 0,03 12 2'4% 0'1 24 0,1 % 0,03 13 1,3 % 0,06 25 0,1 % 0,03 Ainsi qu'on peut le constater, les oligomères d'acide galacturonique dont le degré de polymérisation est compris entre 4 et 11 représentent près de 95 % de tous les composés obtenus selon ce procédé. Par ailleurs, près de 78 % des composés ont un degré de polymérisation compris entre 5 et 10. Par conséquent, le procédé ici mis en oeuvre est extrêmement sélectif. Dans le cas de la récupération des oligomères d'acide galacturonique par ultrafiltration sur membrane de 1 kDa de seuil de to coupure, on récupérera le rétentat contenant les oligomères de dp majoritairement compris entre 5 et 25 ; ces oligomères concentrés dans le rétentat sont lyophilisés. Par ailleurs, ces oligomères sont non substitués, en raison de l'élimination des acétates et des méthyles durant le procédé de préparation décrit ci-dessus. En outre, les fractions sont exemptes 15 d'oses neutres. Bien évidemment, des oligomères d'acide galacturonique sont susceptibles d'être obtenus selon le mode de préparation proposé dans l'exemple 2 ci-dessus à partir de polymères d'acide galacturonique disponibles dans le commerce. Le procédé selon l'invention, vise à obtenir des oligomères d'acide 20 galacturonique partiellement acétylés tout comme le sont les polymères d'acide galacturonique présents dans la plante, mais avec un taux d'acétylation déterminé. Pour ce faire, il a été mis au point un procédé d'acétylation ménagé. Ainsi, selon cette technique, en partant d'oligomères non substitués, l'acétylation des fractions d'oligomères 25 d'acide galacturonique peut être contrôlée. Les oligomères d'acide galacturonique sont additionnés d'anhydride acétique et l'acétylation est très douce et non dénaturante, c'est-à-dire qu'elle ne dégrade pas les oligomères. Exemple 3 : un cycle de traitement A 1 g d'oligomères d'acide galacturonique on ajoute 10 ml d'anhydride acétique 0,1 fois molaire et ce en quatre fois. Le mélange est alors mis sous agitation douce pendant 24 heures et à température ambiante. Puis, le processus d'acétylation est stoppé par l'ajout de 50 ml d'eau ultra pure UHQ. Ensuite le mélange est dialysé afin d'éliminer les ~o réactifs puis lyophilisé. Avant lyophilisation, le mélange est avantageusement congelé. De la sorte, on obtient un produit final contenant des oligomères d'acide galacturonique acétylés avec un rendement de 100 % par rapport aux oligomères de départ, c'est-à-dire que tous les oligomères présentent des substituant acétylés. 15 En revanche, on obtient en moyenne pour un premier cycle de traitement, 10 % d'acétylation, par rapport à toutes les substitutions possibles, sans diminution du degré de polymérisation dp. On pourra se référer au spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (1H RMN) illustré sur la Figure 1, lequel illustre le mode de calcul du taux 20 d'acétylation. En effet, le rapport de l'intégration des signaux 10 correspondants aux protons des acétates de la région allant de 2,5 à 3 ppm, à l'intégration des signaux 12 correspondants aux protons des résidus d'acide galacturonique de la région allant de 3,8 à 6 ppm permet de déterminer le taux d'acétylation. 25 Un deuxième cycle conduit à des oligomères d'acide galacturonique (OGA) acétylés à environ 30%. Le spectre de résonance magnétique nucléaire du proton illustré sur la Figure 2, montre la progression des signaux 10 correspondants aux protons des acétates de la région, 2,5 à 3 ppm par rapport à ceux 12 de la région correspondant 30 aux résidus d'acide galacturonique, 3,8 à 6 ppm. Aussi, un troisième cycle conforme au premier cycle de traitement précité, conduit à des OGA acétylés à environ 40% sans modification du degré de polymérisation dp. Le spectre des molécules ainsi produites n'est en revanche pas représenté. Le taux d'acétylation des oligomères d'acide galacturonique auxquels ont fait subir le traitement du type précité est reproductible. Exemple 4 Les oligomères d'acide galacturonique (OGA) ainsi obtenus, ont été appliqués à des micro-organismes pour en démontrer leurs activités. Ainsi, les OGA ont été introduits dans des milieux de culture inoculés par des bactéries à Gram positif (Staphylococcus aureus, Listeria innocuita) et to à Gram négatif (Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa) à raison de 10' unités formant colonies (UFC) par millilitre pour E. coli, L. innoccua, S. aureus et S. typhimurium, et 5 x 10' UFC par millilitre pour P. aeruginosa. Le développement de ces micro-organismes en présence des OGA a été mis en oeuvre dans un mélange liquide 15 pendant 6 heures à 37 C sous agitation. La mesure de l'activité des oligomères d'acide galacturonique est faite par mesure de la densité optique du mélange à 600 nm. Les résultats présentés dans le tableau I ci-dessous correspondent à la moyenne de 4 essais distincts. La croissance des micro-organismes en présence des OGA est comparée à 20 un témoin sans OGA. Le pourcentage d'inhibition de croissance est déterminé par le rapport de la densité optique standard du témoin sans OGA à 600 nm moins la densité optique de l'essai, le tout divisé par la densité optique standard et multiplié par 100: DO600 Standard û DO600 essais / D0600 Standard x 100. 25 Tableau Il E. coli Pseudomonas Salmonella Staphylococcus Listeria OGADP 10.1 2 13.1 3 7.8 3 32.6 7 17.2 3 5-25 OGA DP 11.4 3 17.2 1 37.1 8 53.9 4 16.4 5 5-25 10%Ac OGA DP _ 25.0 6 25.5 6 27.5 4 8.4 5 5-25 13.6 5 40 % Ac Ainsi, il est montré que pour les micro-organismes Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa et Staphylococcus aureus, les oligomères d'acide galacturonique acétylés à un taux de 10 %, et présentant un degré de polymérisation compris entre 5 et 25, freinent le développement de ces micro-organismes avec une efficacité supérieure aux oligomères d'acide galacturonique non acétylés du même degré de polymérisation. Les fractions d'oligomères d'acide galacturonique (OGA) qui to réduisent de manière conséquente la croissance de bactéries pathogènes tel Staphylocoque et Pseudomonas, ainsi que Salmonella et qui présentent une faible activité vis-à-vis de Escherichia col/ présentent un grand intérêt pour l'alimentation humaine. En effet, si elles étaient incorporées à l'alimentation sous forme de compléments alimentaires par 15 exemple, elles pourraient réduire la croissance des pathogènes en ayant une très faible activité sur les saprophytes et Escherichia colt en particulier. À terme, il pourrait y avoir alors extinction de la flore pathogène. Par ailleurs, les OGA pourraient être exploités dans le domaine 20 des cosmétiques pour des applications cutanées. Dans ce cas, il y aurait comme dans le cas précédent diminution de la flore pathogène notamment des Staphylocoques et des Pseudomonas. REVENDICATIONS 1. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique, ledit procédé étant du type selon lequel on fournit un mélange de polymères d'acide galacturonique ; caractérisé en ce qu'il comprend en outre les étapes suivantes : a. on porte ledit mélange à une température et à une pression déterminées pour dégrader lesdits polymères d'acide galacturonique de façon à obtenir un mélange d'oligomères io comprenant des oligomères d'acide galacturonique dont le degré de polymérisation dp est essentiellement compris entre 2 et 40 ; et, b. on récupère lesdits oligomères d'acide galacturonique de dp essentiellement compris entre 2 et 40 ; 15 par quoi on obtient des oligomères selon un pourcentage déterminé et présentant un degré de polymérisation dp essentiellement compris entre 2 et 40. 2. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon la revendication 1, caractérisé en ce que le degré de polymérisation 20 dp est essentiellement compris entre 5 et 25. 3. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que selon une étape c, après l'étape b, on fait réagir un composé acétique sur lesdits oligomères d'acide galacturonique récupérés de façon contrôlée pour greffer des 25 groupements acétates selon un pourcentage déterminé sur lesdits oligomères d'acide galacturonique récupérés de manière à obtenir des oligomères acétylés. 4. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que 30 lesdits oligomères sont substitués avec des groupements choisis parmi l'ensemble des, Alkyl, Aryle, Acyl, Phosphate et Sulfate. 5. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que lesdits polymères d'acide galacturonique sont obtenus en hydrolysant des pectines issues de végétaux. 6. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'à l'étape a, on porte ledit mélange à une température supérieure à 110 C. 7. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'on lo abaisse le pH du mélange d'oligomères après l'étape a, pour provoquer la précipitation des oligomères d'acide galacturonique de façon à récupérer à l'étape b un surnageant contenant lesdits oligomères d'acide galacturonique. 8. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique 15 selon la revendication 7, caractérisé en ce que ledit surnageant est mélangé à un alcool pour faire précipiter lesdits oligomères d'acide galacturonique. 9. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'à 20 l'étape c, on fait réagir de l'anhydride acétique sur lesdits oligomères d'acide galacturonique récupérés. 10. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'à l'étape c, le composé acétique et lesdits oligomères d'acide 25 galacturonique forment un mélange réactionnel, et en ce qu'on interrompt la réaction d'acétylation en ajoutant une quantité d'eau donnée audit mélange réactionnel. 11. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon la revendication 10, caractérisé en ce que ledit mélange réactionnel 30 additionné de ladite quantité d'eau donnée est dialysé après réaction pour récupérer lesdits oligomères acétylés en solution dans l'eau. 12. Procédé de production d'oligomères d'acide galacturonique selon la revendication 10 ou 11, caractérisé en ce que lesdits oligomères acétylés en solution dans l'eau sont lyophilisés pour être isolés. 13. Utilisation d'oligomères selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, pour utilisation comme agent antimicrobien.