FR 2915899 A1 20081114 FR 0754905 A 20070507 NOUVELLES UTILISATIONS DE L'HIBISCUS, NOTAMMENT PHARMACEUTIQUES La présente invention a pour objet de nouvelles utilisations de l'hibiscus, notamment dans le domaine pharmaceutique. L'hibiscus (Hibiscus sabdariffa) est une plante largement cultivée en Afrique de l'Ouest où elle est consommée sous forme de boisson chaude ou rafraîchissante : le karkadé. Les pétales de l'hibiscus renferment des polyphénols de types flavonols et flavonols sous forme simple ou polymérisée. Parmi ces polyphénols, on retrouve des dérivés catéchiques sous forme monomère ou dimère (Procyanidine A ou B) et des flavonoïdes. L'hibiscus présente notamment un flavonoïde particulier, le gossypetin (3,5,7,8,3',4'-hexahydroxy flavone) et sa forme glycosylée, le gossypin. Ce flavonoïde a montré des propriétés antibactériennes in vitro sur certains microorganismes (Mounnissamy VM; Kavimani S; Gunasegaran R. Antibacterial activity of gossypetin isolated from hibiscus sabdariffa. The Antiseptic. 2002 Mar; 99(3): 81-2), à savoir Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Bacillus pumpilus et Pseudomonas aeruginosa. Les études épidémiologiques montrent que plus d'une femme sur deux sera confrontée à des infections urinaires au cours de sa vie. Le germe à l'origine de cette infection est presque toujours un colibacille, qui colonise naturellement à des milliards d'exemplaires le gros intestin tout proche. La femme est bien plus fréquemment touchée que l'homme par cette infection en raison des différences anatomiques de l'appareil urinaire : l'urètre de la femme, plus court, facilite la contamination de la vessie par les bactéries. Les jeunes hommes sont peu touchés par cette affection. Cependant, les hommes d'âge mûr qui sont atteints de troubles de la prostate en sont plus à risque. La cystite, ou infection urinaire basse, est une inflammation de l'appareil urinaire due à une prolifération de germes de type Escherichia coli, Proteus, Staphylococcus saprophyticus... Le traitement pour cette pathologie est le plus souvent de type antibiotique. Il arrive que l'infection soit de faible intensité, elle disparaît alors rapidement avec une bonne hygiène ; dans le cas contraire, un traitement antibiotique est nécessaire. Mais il faut à tout prix éviter les récidives trop fréquentes, en raison de l'apparition de résistances à ces médicaments, et surtout en raison de complications rénale possibles. La présente invention a pour but de fournir un produit permettant de retrouver un confort urinaire. La présente invention a également pour but de fournir un nouveau médicament destiné au traitement des troubles urinaires. La présente invention concerne l'utilisation de l'hibiscus ou d'un extrait brut ou purifié d'hibiscus, pour maintenir les urines à un pH inférieur à 7, de préférence inférieur ou égal à 6, et notamment à un pH compris d'environ 5 à environ 6, et encore de préférence d'environ 5,5 à environ 6. Ainsi, l'hibiscus ou un extrait brut ou purifié d'hibiscus peut être utilisé afin de retrouver un confort urinaire. En effet, le maintien du pH des urines à une valeur inférieure à 7 permet de créer un milieu défavorable au développement des bactéries. De façon avantageuse, l'hibiscus ou l'extrait brut ou purifié d'hibiscus permet d'enrichir les urines en polyphénols spécifiques de l'hibiscus, ces polyphénols présentant une activité antimicrobienne et étant notamment des anthocyanes ou des proanthocyanidines. La présente invention concerne également l'utilisation telle que définie ci-dessus 15 dans laquelle l'hibiscus ou l'extrait brut ou purifié d'hibiscus est sous la forme d'un complément alimentaire. Un tel complément alimentaire peut être notamment sous la forme de gélules, de comprimés, de capsules, de poudres solubles (sachets ou sticks) ou de boissons (sous forme de concentré ou prête à boire). 20 Ce complément alimentaire peut donc être utilisé par exemple par des femmes désirant retrouver un confort urinaire. Il peut également être utilisé pour prévenir les gênes urinaires et leurs récidives. La présente invention concerne également l'utilisation de l'hibiscus ou d'un extrait 25 brut ou purifié d'hibiscus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention des troubles urinaires. L'hibiscus, en particulier les pétales, renferme de nombreux acides organiques notamment de type AHA (alpha-hydroxyacide). Or, ces acides permettent de maintenir acide le pH des urines donc de lutter contre la prolifération des bactéries dans le tractus 30 urinaire. La composition chimique de l'hibiscus est riche en acides organiques, en anthocyanes, en polyphénols de type proanthocyanidines et flavonoïdes antibactériens. Parmi les anthocyanes présents chez l'hibiscus, on peut citer les suivants : delphinidine-3-O-sambubioside, delphinidine-3-O-glucoside, cyanidine-3-O- sambubioside et cyanidine-3-O-glucoside. Parmi les flavonoïdes, on peut citer le gossypetin et sa forme glycosylée, le gossypin cités plus haut. Par prévention et traitement des troubles urinaires, on entend limiter la fréquence d'apparition des troubles urinaires ainsi que favoriser la disparition de la pathologie. Les troubles urinaires évoqués ici sont avant tout de nature infectieuse, liés à une prolifération d'une certaine flore pathogène, entraînant une inflammation locale du tractus urinaire. Selon un mode de réalisation avantageux de la présente invention, l'hibiscus est utilisé pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention de la cystite. Une utilisation avantageuse selon la présente invention est caractérisée en ce que l'hibiscus provient de la plante entière, sous forme fraîche ou sèche, ou provient des fleurs. L'hibiscus peut donc être utilisé dans le cadre de la présente invention sous forme fraîche ou sèche, quelle que soit sa granulométrie. Ainsi, l'hibiscus peut être par exemple (cryo)broyé ou micronisé. Une autre utilisation avantageuse selon la présente invention est caractérisée en ce que l'extrait brut ou purifié d'hibiscus est un extrait sous forme liquide, quel que soit le solvant (par exemple un alcool, de l'eau ou un mélange hydroalcoolique) ou sèche, quel que soit le moyen de séchage (notamment par élimination de l'eau dans un flux d'air chaud, par nébulisation, par évaporation, par sublimation, par déshydratation, par adsorption sur support). Les extraits d'hibiscus peuvent être bruts ou purifiés, obtenus par les moyens habituels de l'homme du métier. L'extrait brut est obtenu en mettant en présence la plante (hibiscus) avec un solvant, tel que de l'eau, pour une étape d'extraction, en séparant la plante et le solvant afin d'obtenir un extrait brut sous forme liquide. Afin d'obtenir un extrait brut sous forme sèche, l'extrait brut sous forme liquide est séché par exemple par élimination de l'eau dans un flux d'air chaud, par nébulisation, par évaporation, par sublimation, par déshydratation, par adsorption sur support. L'extrait purifié est obtenu à partir de l'extrait brut obtenu à l'étape précédente afin d'augmenter le titre en principe actif. Pour ce faire, on soumet ledit extrait brut à une étape de purification soit par chromatographie soit par extraction liquide/liquide avec un solvant organique non miscible à l'eau. Ainsi, à partir d'un extrait brut sous forme liquide en phase aqueuse, obtenu soit par extrait brut de la plante à l'eau, soit par extrait brut à l'alcool et désolvantisé, soit par remise en solution de l'extrait brut en poudre dans de l'eau, on peut appliquer une méthode de purification par technique de chromatographie. Cet extrait brut est déposé sur des résines de chromatographie. Les principes actifs recherchés (polyphénols) restent fixés sur la résine, qui est ensuite lavée à l'eau ou à l'aide d'un mélange eau-solvant organique qui ne resolubilise pas les principes actifs recherchés. Enfin, on récupère les principes actifs de la colonne par élution avec un solvant organique par exemple de type alcool (méthanol ou éthanol par exemple) ou ~o cétone. Ce procédé permet de récupérer plus de 90% des principes actifs présents dans la phase aqueuse de départ. Les extraits purifiés peuvent de façon identique être manipulés sous forme liquide en phase alcoolique, ou sous forme liquide en phase aqueuse après désolvantisation, ou sous forme liquide en phase aqueuse concentrée, ou en forme séchée (forme 15 pulvérulente). Les résines de chromatographie utilisées peuvent être par exemple de type échange d'ions (anions ou cations), ou de type adsorption/désorption, par exemple de type copolymère divinylbenzène/styrène, polystyrénique ou polyméthacrylique, commercialisé notamment par les marques Rohm & Haas ou Mitsubishi Chemical. 20 La présente invention concerne également un médicament contenant de l'hibiscus ou un extrait brut ou purifié d'hibiscus pour le traitement ou la prévention des troubles urinaires. La présente invention concerne également un extrait concentré d'hibiscus, sous forme liquide ou sèche, avec un titre en polyphénols supérieur ou égal à 20%, de 25 préférence compris d'environ 20% à environ 100%, et encore de préférence d'environ 50% à environ 100%. Les polyphénols sont dosés par HPLC en utilisant comme éluant un gradient des solvants A : eau/acide acétique (99/1), B : eau/acide acétique (9416) et C : 30 eau/acétonitrilelacide acétique (65/30/5). Le gradient appliqué est le suivant : Temps % A % B % C (min) 0 100 0 0 15 0 100 0 30 0 100 0 50 0 90 10 60 0 80 20 80 0 70 30 120 0 0 100 122 100 0 0 140 100 0 0 Le débit appliqué est de 0,5 ml/min (détecteur UV : 280 nm ; colonne : phase greffée C18). La teneur en polyphénols est exprimée en équivalent catéchine. Selon un mode de réalisation avantageux, l'extrait concentré d'hibiscus de l'invention est caractérisé en ce qu'il présente un titre en anthocyanes supérieur ou égal à 10%, de préférence compris d'environ 10% à environ 20%, et encore de préférence d'environ 15% à environ 20%. Les anthocyanes sont dosés par HPLC en utilisant comme éluant un gradient des solvants B : acide phosphorique 3 % (vlv) dans de l'eau Ultra-pure (Millipore) et C : ~o méthanol. Le gradient appliqué est le suivant : Temps B (%) C (%) (min) 0 77 23 35 74 26 70 60 40 Le débit appliqué est de 1,0 ml/min (détection : 525 nm ; colonne : phase greffée C18). La teneur en polyphénols est exprimée en équivalent cyanidine 3-0-glucoside. 15 La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant à titre de substance active un extrait concentré d'hibiscus tel que défini ci-dessus, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. La présente invention concerne également un complément alimentaire comprenant un extrait concentré d'hibiscus tel que défini ci-dessus, en association avec 20 un véhicule acceptable. EXEMPLES 1) Préparation d'extraits d'hibiscus : a) Préparation d'un extrait brut d'hibiscus : 1 kg de fleurs d'hibiscus séchées est extrait par macération dans de l'eau à 50 C pendant 2 heures. Le solvant chargé est séparé de la matière solide en suspension, filtré, puis 10 concentré. Le concentré constitue un extrait brut liquide, qui peut être transformé en extrait brut en poudre par élimination du solvant, par séchage sous vide par exemple. Le rendement massique est de l'ordre de 30 à 40% p/p. L'analyse de ce produit montre la présence des acides organiques, des 15 polyphénols de type proanthocyanidols, des flavonoïdes et des anthocyanes. Les analyses montrent que cet extrait est titré à plus de 20% de proanthocyanidines. b) Préparation d'un autre extrait brut d'hibiscus : 20 1 kg de fleurs d'hibiscus fraîches est extrait par macération dans de l'éthanol 90% pendant 2 heures. Le solvant chargé est séparé de la matière solide en suspension, puis filtré. Ce produit constitue un extrait brut liquide, dans lequel on retrouve également tous les composés recherchés, mais avec une autre répartition. 25 Ce produit liquide peut être distillé, puis concentré, et éventuellement séché par les moyens habituels, par exemple sous vide avec une action thermique. c) Préparation d'un extrait purifié d'hibiscus : 1 kg de fleurs d'hibiscus séchées est extrait par macération dans de l'éthanol 90% 30 pendant 2 heures. Le solvant chargé est séparé de la matière solide en suspension, filtré, puis distillé et concentré. Ce concentré est soumis à une étape de purification par chromatographie sur résine d'adsorption / désorption adaptée aux polyphénols. 6 L'éluat constitue alors l'extrait purifié, qui peut également être conservé sous forme liquide ou séché. On obtient un extrait purifié d'hibiscus contenant jusqu'à 9% d'anthocyanes et jusqu'à 50% de polyphénols, mesurés par HPLC. d) Préparation d'un autre extrait purifié d'hibiscus : A partir d'un extrait brut obtenu par exemple comme ci-dessus (paragraphe a)), notamment sous forme concentrée, on peut appliquer une étape de purification par extraction liquide/liquide à l'aide d'un solvant non miscible à l'eau, du type par exemple n-butanol ou acétate d'éthyle. La fraction purifiée est désolvantisée et contient jusqu'à 65% de polyphénols. Les analyses montrent que cet extrait est titré à plus de 50% de proanthocyanidines. Dans tous les cas d'extraits d'hibiscus sous forme liquide, on peut stabiliser les extraits par des additifs du type glycérol ou glycol, du type conservateur, ou tout autre ingrédient de formulation. 2) Exemples de formulations galéniques : a) Préparation d'une boisson prête à boire : Eau Extraits d'hibiscus Extraits de queues de cerise Extraits de Reine des prés Extraits de Thé vert Correcteur d'acidité (acide citrique) Arôme naturel citron vert L'hibiscus permet de lutter contre dans le tractus urinaire, les autres % qsp 1 1 1 1 2 0,2 l'apparition d'une flore bactérienne pathogène extraits favorisent l'élimination de l'eau en augmentant la diurèse, ce qui contribue à l'effet positif général de la boisson contre les pathologie infectieuse du tractus urinaire.35 b) Préparation d'une gélule : Extrait d'hibiscus brut 210 mg Cellulose Microcristalline 25 mg Stéarate de magnésium 20 mg Dioxyde de silicone 10 mq Total 265 mg Ce type de galénique permet sans problème d'apporter les 36 mg de 1a proanthocyanidines par jour proposés par I'AFSSA. 8 15 REVENDICATIONS 1. Utilisation de l'hibiscus ou d'un extrait brut ou purifié d'hibiscus, pour maintenir les urines à un pH inférieur à 7, de préférence inférieur ou égal à 6, et notamment à un pH compris d'environ 5 à environ 6, et encore de préférence d'environ 5,5 à environ 6. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'hibiscus ou ~o l'extrait brut ou purifié d'hibiscus est sous la forme d'un complément alimentaire. 3. Utilisation de l'hibiscus ou d'un extrait brut ou purifié d'hibiscus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention des troubles urinaires. 4. Utilisation selon la revendication 3, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention de la cystite. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, 20 caractérisée en ce que l'hibiscus provient de la plante entière, sous forme fraîche ou sèche, ou provient des fleurs. 6. Utilisation selon la revendication 1 à 5, caractérisée en ce que l'extrait brut ou purifié d'hibiscus est un extrait sous forme liquide ou sèche. 7. Extrait concentré d'hibiscus, sous forme liquide ou sèche, avec un titre en polyphénols supérieur ou égal à 20%, de préférence compris d'environ 20% à environ 100%, et encore de préférence d'environ 50% à environ 100%. 30 6. Extrait concentré d'hibiscus selon la revendication 7, avec un titre en anthocyanes supérieur ou égal à 10%, de préférence compris d'environ 10% à environ 20%, et encore de préférence d'environ 15% à environ 20%. 15 25 9. Composition pharmaceutique comprenant à titre de substance active un extrait concentré d'hibiscus selon la revendication 7 ou 8, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. 10. Complément alimentaire comprenant un extrait concentré d'hibiscus selon la revendication 7 ou 8, en association avec un véhicule acceptable.