FR 2912312 A1 20080815 FR 0701052 A 20070212 1 L'utilisation de la vitamine C est classiquement préconisée et prescrite lors de stress (stress thermique, pathologique, vaccination, sevrage,...) chez les animaux d'élevage (J.F. Young et al, 2003, Vitamins in animal nutrition, 2002). La vitamine C ou acide ascorbique est instable et est rapidement dégradée par oxydation dans l'eau de boisson, ce qui nécessite parfois de répéter les apports deux fois par jour (E. Meucci et al, 1985, P.J. Jansson et al, 2004, J.C. Deutsch, 1998, Wayne State University, 1985, C.S. Johnston et al, 2002). De nombreuses références bibliographiques ont fait le lien entre les polyphénols du raisin (proanthocyanidines ou procyanidines) et leur protection de la vitamine C contre l'oxydation (Szent-Gyorgyi, 1936 ; Laparra, 1978 ; De Eds, 1949 ; Durmischidze, de 1955 à 1958 ; Masquelier, 1951). La présente invention concerne une méthode pour protéger la vitamine C ou acide 15 ascorbique de l'oxydation dans l'eau, caractérisée par un ajout de 0.3 à 5 % de polyphénols à la vitamine C ou acide ascorbique. Avantageusement, la présente invention permet de limiter la dégradation de la vitamine C ou acide ascorbique dans l'eau de boisson des animaux d'élevage par adjonction de 0.5 à 5 % d'extrait de raisin, soit entre 0.3 à 5 % de polyphénols totaux à la 20 quantité de vitamine C ou acide ascorbique. L'extrait de raisin utilisé est riche en polyphénols, ce qui lui confère une activité antioxydante largement décrite (K. Pelli, 2003). Il est obtenu par extraction et purification de raisin (baie entière de Vitis vinifera). Les procédés d'extraction mis en oeuvre ne font pas appel à des solvants organiques. Après extraction, le produit est atomisé. 25 Il comprend entre 70 et 95 % de polyphénols totaux et entre 30 et 90 % de proanthocyanidines, de la famille des flavonoïdes. Il contient par ailleurs entre 0.5 et 5 % d'anthocyanes et les cendres brutes représentent entre 5 et 7 %. L'humidité du produit est inférieure à 10 % et son pH est compris entre 3 et 5. Ce produit a une bonne solubilité dans l'eau car plus de 85 % se solubilise à une 30 concentration de 50 g/1. Une expérience menée par NOR-FEED a montré que la dégradation de la vitamine C est approximativement de 20 ppm par heure à une température de 20 C. 2 En combinant 500 ppm de vitamine C et 5 ppm d'extrait de raisin suivant les spécifications décrites précédemment, la dégradation de l'acide ascorbique en est fortement ralentie, car elle est uniquement de 1 l ppm par heure (Cf. Graphique 1). Ainsi, à partir des équations de droites, on en déduit que la demi-vie du témoin (500 ppm de vitamine C) est de 12.5 heures tandis que celle de 500 ppm de vitamine C combiné à l'extrait de raisin à 5 ppm est de 22.5 heures. Cette demi-vie se retrouve alors quasiment doublée grâce à cet ajout de 5 ppm d'extrait de raisin. Une deuxième expérience réalisée par NOR-FEED a montré que la vitesse d'oxydation de la vitamine C peut être réduite en incluant l'extrait de raisin. L'effet protecteur de 5 ppm d'extrait de raisin a été testé en comparaison à un témoin (500 ppm de vitamine C). Une tablette de 500 mg de vitamine C (acide ascorbique) a été écrasée puis dissoute dans 1 15 Litre d'eau. Après homogénéisation, un Becher de 250 mL a été rempli de cette solution. Parallèlement, une solution d'extrait de raisin diluée à 1 % a été préparée. 125 microlitres de la solution d'extrait de raisin à 1 % sont ajoutés dans le Becher contenant la vitamine C dissoute. Les mesures sont faites à l'aide d'un spectrophotomètre à 264 nm toutes les 15 à 30 20 minutes. Pour chaque mesure, des échantillons sont préparés par ajout de 100 microlitres de solution à tester à 2900 microlitres d'eau déminéralisée. L'expérience a été répétée trois fois (Cf. Graphiques 2, 3 et 4). Tableau 1 : Tableau récapitulatif des résultats obtenus sur les trois répétitions 1ère répétition 2ème répétition 3ème répétition Pente (taux d'oxydation) Y= -0.109 x Y= -0.0631 x Y= -0.091 x 500 ppm vitamine C Pente (taux d'oxydation) Y= -0.057 x Y= -0.015 x Y= -0.0632 x Vitamine C (500 ppm) + Extrait de raisin (5 ppm) Diminution du taux d'oxydation 48 % 76 % 31 % Diminution moyenne du taux 52 % d'oxydation Source : NOR-FEED On obtient une diminution moyenne de 52 % du taux d'oxydation de la vitamine C dans l'eau de boisson avec de l'extrait de raisin à 1 % en comparaison avec le témoin, ce 5 qui correspond à une diminution de la dégradation de la vitamine C de plus de 50 %. Conclusion : Ces expériences mettent en évidence le fait que 1 % d'un extrait de raisin spécifié permet 10 de diminuer la dégradation de la vitamine C, améliorant ainsi sa demi-vie de près de 50 % dans l'eau de boisson. 3 4 Références • BERKEM ù Oligomères ProCyanidoliques (OPC) ù Dossier technique ù Mai 1999 ROI 04/00 41. • J.C. Deutsch, 1998. Ascorbic acid oxidation by hydrogen peroxide, Anal. Biochem., 255(1):1-7. • P.J. Jansson, H.R. Jung, C. Lindqvist et T. Nordstrom, 2004. Oxidative decomposition of vitamin C in drinking water, Free. Radic. Res., 38(8):855-60. • C.S. Johnston et D.L. Bowling, 2002. Stability of ascorbic acid in commercially available orange juices, J Am Diet Assoc., 102(4):525-9. • J. Lappara, J. Michaud, M.F. Lesca, P. Blanquet et J. Masquelier, 1978. Etude pharmacocinétique des oligomères procyanidoliques totaux du raisin, Acta. Therapeutica, 4, 233-246. • J. Masquelier, 1951. Action comparée de divers facteurs vitaminiques P sur l'oxydation de l'acide ascorbique par les ions cuivriques, Bulletin de la Société de Chimie Biologique, 3-4, 304-305. • E. Meucci, G.E. Martorana, A. Ursitti, M.G. Pischiutta, G.A. Miggiano et A. Castelli, 1985. Ascorbic acid stability in aqueous solutions, Acta Vitaminol Enzymol., 7(3-4):147-53. • NOR FEED Danemark, communication personnelle. • NOR FEED Danemark, 2005. Nor-Grape 80 Powder - as a co-antioxidant to Vitamin C, product information Nor-Grape III, 1 page. • NOR FEED Danemark, 2005. Screening of antioxidant activity with a Vitamin-C based assay, 8 pages. • K. Pelli, M. Lyly, 2003. Les antioxydants dans l'alimentation, VTT Viotechnology, Finlande, 28 pages, dans le cadre du projet européen FLAIR FLOW EUROPE 4. • Vitamins in animal nutrition, 2002. ISBN 3-86037-167-3. • Wayne State University, 1985. Stability of ascorbic acid, STP PHARMA Science. • J.F. Young, J. Stagsted, S.K. Jensen, A.H. Karlsson et P. Henckel, 2003. Ascorbic acid, alpha-tocopherol, and oregano supplements reduce stress-induced deterioration of chicken meat quality, Poult Sci., 82(8):1343-51. Revendications 1. Méthode pour protéger la vitamine C ou acide ascorbique de l'oxydation dans l'eau caractérisée par un ajout de 0.3 à 5 % de polyphénols à la vitamine C ou acide ascorbique. 2. Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que la vitamine C ou acide ascorbique est utilisée dans de l'eau de boisson des animaux domestiques d'élevage. 3. Méthode selon la revendication 1, dans laquelle les polyphénols proviennent d'un extrait végétal antioxydant. 4. Méthode selon l'une des revendications 1 et 3, dans laquelle la protection de la vitamine C ou acide ascorbique se fait à l'aide de ce végétal antioxydant ajouté à hauteur de 0.5 à 5 % de la quantité de vitamine C. 5. Méthode selon la revendication 3, dans laquelle l'extrait végétal ajouté à hauteur de 0.5 à 5 % est issu de l'espèce Vitis Vinifera. 6. Méthode selon l'une des revendications de 1 à 5, dans laquelle l'extrait végétal de raisin est un extrait riche en polyphénols. 7. Méthode selon la revendication 6, dans laquelle l'extrait de raisin riche en polyphénols contient de 70 à 95 % de polyphénols totaux. 8. Méthode selon la revendication 7, dans laquelle les polyphénols totaux de l'extrait de raisin contiennent de 30 à 90 % de proanthocyanidines et entre 0.5 et 5 % d'anthocyanes.