FR 2910326 A1 20080627 FR 0655871 A 20061222 UTILISATION COSMETIQUE D'UN EXTRAIT DE CHENOPODIUM PALLIDICAULE La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Chenopodium pallidicaule en tant que principe actif pour une application au traitement de la peau. L'invention se rapporte aussi à des extraits de Chenopodium pallidicaule ainsi qu'à toute composition cosmétique contenant un extrait de Chenopodium pallidicaule. Chenopodium pallidicaule, encore appelée canihua, est une plante appartenant à la famille des Chénopodiacées. Elle possède une structure anatomique particulière qui la protège du froid et de la sécheresse. Ses fleurs sont sans pétales et recouvertes par des feuilles, qui, à maturité, se colorent en jaune, rose, orange, rouge ou pourpre. Chenopodium pallidicaule, originaire des Andes du Pérou du Sud et de Bolivie, est traditionnellement utilisée dans l'alimentation humaine sous forme de farine appelée canihuaco. Elle est consommée légèrement grillée, chaude ou froide, dans les boissons ou en porridges. La farine de Chenopodium pallidicaule est également utilisée dans le domaine médical, pour neutraliser le mal des montagnes et combattre la dysenterie. L'utilisation de cette plante dans le domaine cosmétique n'a pas été envisagée. Or, de façon étonnante, Chenopodium pallidicaule présente des propriétés notables au niveau cutané. La peau est un organe complexe qui couvre la surface totale du corps et exerce de nombreuses fonctions vitales. Elle est organisée en trois couches principales l'épiderme, le derme et l'hypoderme. 2910326 2 La peau est constamment soumise à des agressions, tant externes qu'internes, qui peuvent menacer son équilibre et son aspect. C'est pourquoi on recherche des principes actifs capables de protéger la peau contre ces agressions susceptibles d'altérer son bon fonctionnement et son 5 aspect, et de lutter contre les manifestations qui en découlent. Pour répondre à cette problématique, la présente invention vise à utiliser au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule en tant que principe actif pour la préparation d'une composition destinée au traitement de la peau et/ou des phanères. 10 L'invention vise également des extraits de Chenopodium pallidicaule particuliers en tant que principes actifs pour la préparation de compositions destinées au traitement de la peau, ainsi que des compositions cosmétiques et/ou dermopharmaceutiques incluant au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule en tant que principe actif. 15 Les extraits de Chenopodium pallidicaule susceptibles d'être utilisés selon l'invention peuvent être obtenus par un procédé comprenant au moins un étape de solubilisation aqueuse ou hydroglycolique de Chenopodium pallidicaule. De manière préférentielle, les compositions selon l'invention peuvent contenir de 0,01 à 50 % d'un extrait de Chenopodium pallidicaule. 20 L'administration d'une composition contenant un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention est effectuée par voie topique. La composition peut se présenter sous toutes les formes permettant l'application par voie topique. L'utilisation d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention permet de protéger la peau et de lutter contre toutes manifestations perturbant son activité et son apparence. En particulier, l'utilisation d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon la présente invention permet, en agissant sur les différents acteurs impliqués dans le maintien de l'homéostasie de la couche cornée de la peau, notamment 2910326 3 - de restructurer la peau, -de l'hydrater, et/ou - de prévenir et/ou traiter le vieillissement cutané. L'utilisation d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon la présente invention 5 est également avantageuse pour d'autres applications cosmétiques par exemple : - la régénération du derme, - la dépigmentation et l'éclaircissement de la peau, et/ou - la lutte contre les radicaux libres. L'épiderme est la couche superficielle de la peau en contact avec l'extérieur. 10 Formé par plusieurs couches de cellules, il est constitué notamment de kératinocytes qui migrent vers la surface et se différencient pour se transformer progressivement en cornéocytes. La phase terminale de la différenciation conduit à la formation de lipides organisés en bicouche dans le stratum corneum. 15 Le stratum corneum, ainsi constitué de cornéocytes et de lipides épidermiques, joue un rôle capital au niveau de la fonction barrière et de l'hydratation de la peau. Il protège des agressions extérieures tant physiques que chimiques. De plus, il régule la perte insensible en eau de l'organisme. Lors d'agressions cutanées sévères chimiques ou physiques, au cours du 20 vieillissement ou encore lors d'affections dermatologiques, les systèmes de régulation de la différenciation kératinocytaire sont saturés ou perturbés. Le stratum corneum n'est plus correctement renouvelé et la peau devient sèche et rugueuse. L'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention est capable de pénétrer 25 jusqu'aux couches basales épidermiques, de relancer l'activité des cellules, dynamiser la différenciation kératinocytaire et assurer le renouvellement de la couche cornée. 2910326 4 L'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention est également capable de stimuler la synthèse d'entités constitutives du stratum corneum et ainsi d'améliorer et/ou de restaurer la fonction barrière du stratum corneum. Il agit en particulier : 5 - en stimulant la synthèse de protéines fortement impliquées dans la formation de la couche cornée, notamment l'involucrine et la calgranuline A, et en augmentant l'expression des ARNm codant pour les enzymes de synthèse des lipides épidermiques, notamment la Glucose Ceramide 10 Synthase, Serine Palmitoyl Transferase et glucocérébrosidase. L'utilisation de l'extrait selon l'invention permet donc de stimuler le renouvellement de la couche cornée, de renforcer les systèmes naturels restructurants de l'épiderme, de limiter les pertes hydriques et de régénérer la fonction barrière de la peau 15 L'utilisation de l'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention en tant que principe actif est donc particulièrement avantageuse pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à hydrater et à protéger et/ou à restructurer la couche cornée de la peau. L'utilisation de l'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention en tant que 20 principe actif est également intéressante pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à prévenir et/ou à traiter les signes du vieillissement cutané, en particulier destinée à prévenir et/ou lutter contre l'apparition des rides. En outre, l'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention est capable de 25 stimuler la prolifération des fibroblastes, cellules constitutives du derme. Ainsi, on peut avantageusement utiliser l'extrait de Chenopodium selon l'invention pour la préparation d'une composition cosmétique régénérante, favorisant le renouvellement cellulaire de la peau. 2910326 5 La peau est colorée par un pigment, les mélanines, synthétisées par des cellules spécialisées, les mélanocytes. La coloration de la peau varie en fonction du type et de la quantité de mélanines synthétisées. Plusieurs enzymes sont impliquées dans le processus de mélanogenèse, qui 5 transforment la tyrosine en pigments mélaniques. Parmi ces enzymes, la tyrosinase est une enzyme-clé qui catalyse l'hydroxylation de la tyrosine en dihydroxyphénylalanine (DOPA), ainsi que l'oxydation de cette DOPA en DOPAquinone. L'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention est capable d'inhiber 10 l'activité de la tyrosinase et donc d'atténuer les pigmentations cutanées disgracieuses. L'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention est donc également utile en tant que principe actif pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à la dépigmentation et à l'éclaircissement de la peau. 15 La peau est régulièrement exposée aux rayons UV (ultraviolets) qui provoquent des dommages importants. Les radiations UV induisent un certain nombre de réponses inflammatoires de la part des cellules qui génèrent des radicaux libres par l'intermédiaire de médiateurs pro inflammatoires. Les principales cibles cellulaires sont l'ADN, les protéines et les lipides membranaires. En particulier, 20 les lipides insaturés des membranes cellulaires, incluant les phospholipides, sont des cibles privilégiées de l'oxygène singulet ou des attaques des radicaux libres dans les cellules soumises à un stress oxydatif. L'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention est capable de lutter contre les radicaux libres induits par les radiations UV. 25 De fait, l'utilisation de l'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention en tant que principe actif est donc également avantageuse pour la préparation d'une composition cosmétique et/ou dermo-pharmaceutique destinée à protéger les cellules de la peau contre les effets néfastes des radicaux libres. 2910326 6 La présente invention est maintenant décrite en détail en s'appuyant sur des exemples non limitatifs de principes actifs et de compositions, ainsi que sur des résultats d'essais illustrant certaines actions d'un extrait de Chenopodium pallidicaule. 5 1. PROCEDE DE PREPARATION D'UN EXTRAIT DE CHENOPODIUM PALLIDICAULE SELON L'INVENTION L'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention peut être obtenu par la mise en oeuvre d'un procédé comprenant au moins les étapes suivantes 10 - solubilisation de Chenopodium pallidicaule en milieu aqueux ou hydroglycolique, - séparation des phases soluble et insoluble, et - purification de la fraction active contenue dans la fraction soluble. Selon un mode de réalisation préféré, le procédé comprend au moins les étapes 15 suivantes : - solubilisation de Chenopodium pallidicaule en milieux aqueux ou hydroglycolique, sous forme de poudre de plantes entières ou de poudre de graines, préférentiellement à raison de 10 à 200g/l à température supérieure à 30 C, 20 - hydrolyse(s) enzymatique(s) et/ou chimique(s), - séparation des phases soluble et insoluble, par filtration, décantation, et/ou centrifugation, et -purification de la fraction active contenue dans la fraction soluble, par filtration, ultrafiltration ou absorption. 25 L'étape d'hydrolyse(s) a pour objectif de favoriser la solubilisation de la plante. Dans le cas d'une hydrolyse enzymatique, la proportion en poids de la ou des enzyme(s) est comprise entre 0,01 et 20g/l. Cette étape d'hydrolyse(s) 2910326 7 enzymatique(s) peut être suivie par une étape de traitement thermique pour inhiber les activités enzymatiques résiduelles. Le procédé peut également comprendre une étape de déprotéinisation, préférentiellement par précipitation ou adsorption sélective, après l'étape de 5 séparation des phases soluble et insoluble. Après l'étape d'élimination des molécules non actives par filtration ou ultrafiltration ou absorption, une concentration de la fraction active peut être réalisée par filtration, ultrafiltration et/ou osmose inverse. Une étape de filtration stérilisante et/ou de lyophilisation et/ou d'atomisation peut aussi être 10 introduite. 2. EXEMPLES DE PREPARATION D'EXTRAITS DE CHENOPODIUM PALLIDICAULE SELON L'INVENTION 2.1 Procédé de préparation d'un extrait A 15 Le procédé de préparation de l'extrait A comprend les étapes suivantes : solubilisation de poudre de Chenopodium pallidicaule dans un milieu hydroglycolique pouvant contenir 0 à 50% de solvant de type butylène glycol, - séparation des phases soluble et insoluble, et 20 - filtration stérilisante. 2.2 Procédé de préparation d'un extrait B Le procédé de préparation de l'extrait B comprend les étapes suivantes : -solubilisation de poudre de Chenopodium pallidicaule dans un milieu aqueux, 25 hydrolyse(s) enzymatique(s) simultanée(s), - séparation des phases soluble et insoluble, - traitement thermique afin de neutraliser la ou les activité(s) enzymatique(s), et 2910326 8 - filtration stérilisante. 2.3 Procédé de préparation d'un extrait C Le procédé de préparation de l'extrait C comprend les étapes suivantes : - solubilisation de poudre de Chenopodium pallidicaule dans un milieu 5 hydroglycolique pouvant contenir 0 à 50% de solvant de type butylène glycol, - séparation des phases soluble et insoluble, - filtration et concentration de la fraction active, et - filtration stérilisante. 10 2.4 Procédé de préparation d'un extrait D Le procédé de préparation de l'extrait D comprend les étapes suivantes : -solubilisation de poudre de Chenopodium pallidicaule dans un milieu aqueux, - hydrolyse(s) enzymatique(s) successive(s), 15 - séparation des phases soluble et insoluble, - traitement thermique afin de neutraliser la ou les activité(s) enzymatique(s), - filtration et concentration de la fraction active, et - filtration stérilisante. 20 2.5 Procédé de préparation d'un extrait E Le procédé de préparation de l'extrait E comprend les étapes suivantes : - solubilisation de poudre de graines de Chenopodium pallidicaule dans un milieu hydroglycolique pouvant contenir 0 à 50% de solvant de type butylène glycol, 25 - séparation des phases soluble et insoluble, - filtration et concentration de la fraction active, - absorption des molécules colorées afin d'obtenir un produit de couleur claire, et 2910326 9 - filtration stérilisante. 2.6 Procédé de préparation d'un extrait F Le procédé de préparation de l'extrait F comprend les étapes suivantes - solubilisation de poudre de graines de Chenopodium pallidicaule dans 5 un milieu aqueux, - hydrolyse(s) enzymatique(s) successive(s) ou simultanée(s), - séparation des phases soluble et insoluble, - traitement thermique afin de neutraliser la ou les activité(s) enzymatique(s), 10 - filtration et concentration de la fraction active, - absorption des molécules colorées afin d'obtenir un produit de couleur claire, et - filtration stérilisante. 15 3. EXEMPLES DE COMPOSITIONS La présente invention couvre aussi les compositions, notamment cosmétiques, incluant un extrait de Chenopodium pallidicaule selon la présente invention dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. 20 Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme de crèmes, émulsions huile-dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples, solutions, suspensions ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. 25 Ces compositions contiennent entre 0,01 et 20% en poids de l'extrait de Chenopodium pallidicaule selon la présente invention. 2910326 10 Les exemples de compositions qui suivent sont obtenues par mélange des différents composants. Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. 3.1 Exemple de composition anti-rides 5 La formulation est la suivante : -Cetearyl alcool/Cetearyl glucoside : 2,0% - Arachidyl alcool/Behenyl Alcool/ Arachidyl glucoside : 3,0% - Isononyl isononanoate : 5,0% 10 -Polyacrylamide / C13-14 Isoparaff in / Laureth-7 : 0,3% - Conservateur: 0,7% - Extrait de Chenopodium pallidicaule : 4,0% - Eau 85% 15 3.2 Exemple de composition hydratante La formulation est la suivante : - Cetearyl octonoate : 5,0% - Isopropyl palmitate : 5,0% - Polyacrilamide/C13-C14 20 Isoparaff ine/laureth7 : 2,0% - Montanox 60 : 1,7% - Sorbitan sesquioleate : 1,3% - Conservateur: 0,7% - Extrait de Chenopodium pallidicaule : 4,0% 25 - Eau : 80,3% 3.3 Exemple de composition restructurante La formulation est la suivante : - Isohexadecane: 5,0% 2910326 11 - Arachidyl alcool/Behenyl Alcool/ Arachidyl glucoside : 3,0% - Butylène glycol : 3, 0% - Isopropyl palmitate : 2,0% 5 - Polyacrilamide/C-13-C14 paraffine/ laureth7 : 1,5% - Cetearyl alcool : 1,0% - PEG-100 stearate : 1,0% -Glyceryl stearate : 1,0% 10 - Conservateur : 0,7% -bimethicone/Cyclomethicone 0,5% - Extrait de Chenopodium pallidicaule : 4,0% - Eau : 77,3% 3.4 Exemple de composition dépigmentante 15 La formulation est la suivante : - Arachidyl alcool / Behenyl alcool / Arachidyl glucoside : 3,0% - Isononyl isononanoate : 2,0% - Cetearyl octanoate : 10,0% 20 - Polyacrylamide / C13-14 Isoparaff in / Laureth-7 : 2,0% - Conservateur : 0,5% - Extrait de Chenopodium pallidicaule : 4,0% -Eau : 78,5% 2910326 12 4. EVALUATION DE L'EFFET DE L'EXTRAIT DE CHENOPODIUM PALLIDICAULE SELON L'INVENTION 4.1 Effet protecteur de la couche cornée : étude sur la différenciation kératinocytaire 5 L'objectif de cette étude est de déterminer l'effet d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention sur la différenciation des kératinocytes humains. En particulier, l'étude consiste à évaluer l'effet d'un extrait de Chenopodium pallidicaule sur l'expression de l'involucrine et de la calgranuline A, protéines impliquées dans la différenciation kératinocytaire et la formation de la couche 10 cornée. a/Etude sur l'expression de l'involucrine L'involucrine est une protéine importante du stratum corneum car elle constitue le squelette protéique de la membrane plasmique des cornéocytes. L'étude est réalisée par la mesure de l'expression des ARNm (Acides 15 Ribonucléiques messagers) codant pour l'involucrine dans des cultures de kératinocytes humains. Le protocole opératoire consiste à incuber des kératinocytes humains en présence ou non d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention dosé à 0,5%. Après incubation on extrait les ARN totaux et on détermine le 20 pourcentage d'ARNm codant pour l'involucrine. Les résultats obtenus pour l'extrait de Chenopodium pallidicaule sont présentés en pourcentage par rapport au témoin sans extrait de Chenopodium pallidicaule, dans le tableau suivant : % d'ARNm involucrine / Témoin Témoin 100 2910326 13 Extrait de Chenopodium pallidicaule à 0,5% 182 On constate que dosé à 0,5%, l'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention permet d'augmenter l'expression des ARNm codant pour la synthèse de l'involucrine de 82% sur kératinocytes humains. 5 Un extrait de Chenopodium selon l'invention permet donc d'augmenter la synthèse de l'involucrine et ainsi de favoriser la différenciation épidermique conduisant à la formation du stratum corneum. b/Etude sur l'expression de la calgranuline A La calgranuline A est une protéine localisée au sein des membranes des 10 kératinocytes différenciés. Elle intervient dans la régulation de la différenciation kératinocytaire calcium-dépendante. L'étude est réalisée par la mesure de l'expression des ARNm codant pour la calgranuline A dans des cultures de kératinocytes humains. Le protocole opératoire consiste à incuber des kératinocytes humains en 15 présence ou non d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention dosé à 0,5%. Après incubation on extrait les ARN totaux et on détermine le pourcentage d'ARNm codant pour la calgranuline. Les résultats obtenus pour l'extrait de Chenopodium pallidicaule sont présentés en pourcentage par rapport au témoin sans extrait de Chenopodium pallidicaule, 20 dans le tableau suivant : % d'ARNm calgranuline / Témoin Témoin 100 Extrait de Chenopodium pallidicaule à 0,5% 150 On constate que dosé à 0,5%, l'extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention permet d'augmenter l'expression des ARNm codant pour la synthèse de l'involucrine de 50% sur kératinocytes humains. 2910326 14 Un extrait de Chenopodium selon l'invention permet donc d'augmenter la synthèse de la calgranuline A et ainsi de stimuler la différenciation kératinocytaire conduisant à la formation du stratum corneum. 4.2 Effet sur la fonction barrière de la couche cornée : étude sur 5 l'expression des enzymes de synthèse des lipides épidermiques Le stratum corneum est notamment constitué de lipides qui jouent un rôle essentiel dans la fonction barrière. Les lipides épidermiques sont de plusieurs types : les céramides, les cholestérols et les acides gras libres. Leur synthèse est régulée par différentes enzymes spécifiques à chaque classe de lipides : 10 - l'enzyme HMG-CoA reductase qui intervient dans la synthèse du cholestérol, - l'acétyl-CoA carboxylase et la fatty acid synthase, qui sont impliquées dans la synthèse des acides gras libres, - la serine palmitoyl transferase (STP) et la glucose ceramide synthase 15 (GCS), qui contribuent à la synthèse des céramides, et - la glucocérébrosidase (GC) qui contribue à la synthèse des sphingolipides. L'objectif de l'étude est de quantifier l'effet d'un extrait de Chenopodium pallidicaule, selon l'invention, sur le taux d'ARNm des enzymes GCS, STP et GC 20 dans des cultures de kératinocytes humains. Le protocole opératoire consiste à incuber des kératinocytes humains en présence ou non d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention dosé à 0,5%. Après incubation on extrait les ARN totaux et on détermine le pourcentage d'ARNm codant pour &SC, STP et GC. 25 Les résultats obtenus pour l'extrait de Chenopodium pallidicaule sont présentés en pourcentage par rapport au témoin sans extrait de Chenopodium pallidicaule, dans le tableau suivant : 2910326 15 % d'ARNm d'ARNm d'ARNm GCS/ STP/ GC/ Témoin Témoin Témoin Témoin 100 100 100 Extrait de Chenopodium pallidicaule 0,5% 150 160 151 On constate que sur kératinocytes humains, l'actif issu de Chenopodium pallidicaule dosé à 0,5% permet d'augmenter l'expression des ARNm codant pour la synthèse de la Glucose Ceramide synthase, des ARNm codant pour la synthèse 5 de la Serine Palmitoyl Transferase, et des ARNm codant pour la synthèse de la Glucocérébrosidase. L'utilisation d'un extrait issu de Chenopodium pallidicaule selon l'invention favorise donc la synthèse des lipides épidermiques constitutifs du stratum corneum. 10 4.3 Effet restructurant de la fonction barrière de la couche cornée : étude sur la Perte Insensible en Eau (PIE) La barrière cutanée joue un rôle régulateur dans l'équilibre en eau de la peau. Lorsque elle est lésée, des dérèglements dans la régulation des échanges en eau apparaissent : l'eau migre plus facilement vers le milieu extérieur et la Perte 15 Insensible en Eau (PIE) augmente. En revanche, si l'état de la barrière cutanée s'améliore, les valeurs de PIE diminuent. Cette étude a pour objectif de mesurer in vivo l'effet d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention formulé à 4% en émulsion contre placebo, sur la PIE de la peau. 20 Elle est réalisée sur 18 volontaires sains de sexe masculin d'âge moyen 31 ans. La mesure de la PIE est effectuée à l'aide d'un Tewamètre , appareil muni d'une sonde qui mesure le gradient de vapeur d'eau présent entre la surface cutanée et 2910326 16 l'air ambiant. Cette mesure permet d'apprécier les échanges d'eau entre la surface de la peau et le milieu environnant. Le protocole opératoire consiste à appliquer biquotidiennement sur la peau une émulsion contenant 4% de l'extrait de Chenopodium pallidicaule ou une émulsion 5 placebo, après lavage au Lauryl Sulfate de Sodium. L'application du Lauryl Sulfate de Sodium a pour but d'augmenter les pertes en eau de la peau, car sur un épiderme sain, les pertes en eau sont très faibles et ne permettent pas de mesurer et quantifier une diminution significative. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant Variation de la PIE/Placebo (%) Placebo 0 Extrait de Chenopodium pallidicaule 4% -8 10 On constate que l'extrait issu de Chenopodium pallidicaule dosé à 4% permet de diminuer la perte insensible en eau de la peau de 8% par rapport au placebo. L'utilisation d'un extrait issu de Chenopodium pallidicaule selon l'invention permet donc de restructurer la fonction barrière de la couche cornée. 15 4.4 Effet anti-âge : étude des propriétés anti-rides L'objectif de cette étude est quantifier in vivo l'efficacité anti-rides du principe actif selon l'invention formulé à 4% en émulsion contre placebo. L'étude est réalisée sur 18 volontaires sains de sexe féminin d'âge moyen de 51 ans. 20 L'efficacité anti-rides est mesurée à l'aide d'empreintes siliconées, réalisées au niveau des pattes d'oie des volontaires, analysées avec un prof ilomètre muni d'un analyseur d'images. L'analyse des empreintes permet d'obtenir trois paramètres : le nombre de rides, la surface totale ridée et la longueur totale des rides. Le protocole de l'étude est le suivant. 2910326 17 Entre J-15 et JO, les volontaires appliquent deux fois par jour une crème placebo. A JO, on détermine deux zones cutanées symétriques au niveau des pattes d'oie, une destinée à être traitée par le placebo, et l'autre par la formule contenant 5 l'extrait de Chenopodium pallidicaule, et on prend les empreintes sur ces deux zones. Entre JO et J27, une formule avec ou sans l'extrait de Chenopodium pallidicaule est appliquée deux fois par jour. A J28, les empreintes sont prises sur les deux zones étudiées. 10 Les résultats obtenus pour l'extrait de Chenopodium pallidicaule sont exprimés dans le tableau suivant, en pourcentage par rapport à ceux obtenus pour le placebo : Variation/Placebo (%) J28 Nombre de rides -6,2 Surface totale ridée -11,3 Longueur totale des rides -8,7 On constate que l'extrait de Chenopodium pallidicaule diminue à la fois le nombre 15 de rides, la surface totale ridée et la longueur totale des rides. Un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention peut donc être utilisé pour un effet anti-rides. 4.5 Effet régénérant : étude de la régénération des cellules du derme dans des conditions extrêmes 20 Des attaques accumulées et répétées de l'organisme par le soleil, la pollution, le stress, les chocs thermiques, la climatisation, etc., constituent des stress extrêmes pour la peau. Son activité cellulaire est alors ralentie : la 2910326 18 croissance et le métabolisme des cellules sont réduits, et la peau perd sa fonctionnalité première de protection. L'objectif de cette étude est de déterminer l'effet d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention sur la régénération de fibroblastes exposés à un 5 stress extrême, en particulier un stress solaire répété ou un choc thermique. a/Etude sur la régénération de fibroblastes exposés à un stress solaire répété L'étude est réalisée par mesure de la prolifération cellulaire à l'aide d'une coloration au M.T.T. (méthyl thiazolyl tetrazolium) de cultures de fibroblastes 10 humains incubés en présence ou non de l'extrait de Chenopodium pallidicaule dosé à 0,5%, 1% et 2% et soumis à des radiations UVA répétées ou non pour le témoin non irradié. Les résultats, présentés dans la tableau ci-dessous, sont exprimés en pourcentage de récupération cellulaire, calculé en fonction des mesures obtenues 15 sur fibroblastes irradiés traités avec l'extrait, sur fibroblastes irradiés non traités et sur fibroblastes non irradiés non traités Activité Activité Récupération prolifératrice prolifératrice / cellulaire Témoin non irradié Témoin non irradié 100 Témoin irradié UVA 62 -38% UVA + Extrait de Chenopodium 73 -27% +29% pallidicaule 0,5% UVA + Extrait de Chenopodium 77 -23% +39% pallidicaule 1% UVA + Extrait de Chenopodium 89 -11% +71% pallidicaule 2% On constate qu'après un stress UVA répété, la viabilité cellulaire est réduite de 38%. 20 Testé à 2%, un extrait de Chenopodium pallidicaule stimule la récupération cellulaire des fibroblastes stressés par des irradiations UVA répétées de 71%. 2910326 19 b/Etude sur la régénération de fibroblastes exposés à un choc thermique L'étude est réalisée par mesure de la prolifération cellulaire à l'aide d'une coloration au M.T.T. (méthyl thiazolyl tetrazolium) de cultures de fibroblastes humains incubés en présence de l'extrait de Chenopodium pallidicaule dosé à 5 0,5%, 1% et 2%, dans une étuve à 37 C pour le témoin ou une étuve à 20 C. Les résultats, présentés dans la tableau ci-dessous, sont exprimés en pourcentage de récupération cellulaire, calculé en fonction des mesures obtenues sur fibroblastes à 20 C traités avec l'extrait, sur fibroblastes à 20 C non traités et sur fibroblastes à 37 Cnon traités Activité Activité Récupération prolifératrice prolifératrice / cellulaire Témoin non irradié Témoin 37 C 100 / / Témoin 20 C 72 -28% / UVA + Extrait de Chenopodium 85 -15% +46% pallidicaule 0,5% UVA + Extrait de Chenopodium 89 -11% +61% pallidicaule 1% UVA + Extrait de Chenopodium 94 -6% +79% pallidicaule 2% 10 On constate qu'après un choc thermique froid, la viabilité cellulaire est réduite de 28%. Testé à 2%, un extrait de Chenopodium pallidicaule stimule la récupération cellulaire des fibroblastes stressés par le froid de 79%. 15 L'utilisation d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention permet donc de régénérer et revitaliser les cellules de la peau après un stress extrême. 4.6 Effet dépigmentant : étude de l'effet anti-tyrosinase et anti-mélanine Les mélanines, pigments responsables de la couleur de la peau et des 20 phanères, sont synthétisés au niveau des mélanosomes par une succession de réactions enzymatiques. La tyrosinase est une enzyme-clé impliquée dans ce 2910326 20 processus qui permet l'hydroxylation de la tyrosine en DOPA, puis l'oxydation de la DOPA en DOPAquinone. Une activité anti-tyrosinase entraîne une diminution de la synthèse des pigments mélaniques et permet de dépigmenter et d'éclaircir la peau. 5 L'objectif de cette étude est de mettre en évidence l'activité antityrosinase d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention. L'étude consiste à mesurer l'activité anti-tyrosinase et le taux de mélanine synthétisée sur des cultures de mélanocytes B16F1 en présence de l'extrait de Chenopodium pallidicaule. 10 Une activité anti-tyrosinase entraîne une diminution de la transformation de la tyrosine qui se visualise par une diminution de la coloration de la solution. Les résultats obtenus pour l'activité anti-tyrosinase sont exprimés en pourcentage d'activité par rapport à un témoin 15 Le taux de mélanine est quantifié par lecture spectrophotométrique à 490nm, à l'aide d'une gamme étalon de mélanine synthétique. Les résultats obtenus pour la synthèse de mélanine sont exprimés en pourcentage de diminution du taux de mélanine par rapport à un témoin : Taux de mélanine/témoin (%) Extrait de Chenopodium pallidicaule 1% 26% Extrait de Chenopodium pallidicaule 2% 53% Activité antityrosinase/témoin (%) Extrait de Chenopodium pallidicaule 1% 15% Extrait de Chenopodium pallidicaule 2% 23% 2910326 21 Ces différents résultats montrent que l'extrait de Chenopodium pallidicaule permet d'inhiber l'activité de la tyrosinase et de diminuer la teneur en mélanine des mélanocytes. L'utilisation d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention permet 5 donc d'atténuer les pigmentation cutanées disgracieuses. 4.7 Effet anti-radicalaire : méthode au DPPH L'objectif de l'étude est d'évaluer l'effet anti-radicalaire d'un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'invention en utilisant la méthode au DPPH (Di Phényl Picrylhydrazyl Hydrate). 10 Le DPPH est un radical libre absorbant dans le violet à 517nm. Un produit anti-radicalaire entraîne une diminution ou une disparition de la coloration violette. Les résultats obtenus pour l'extrait de Chenopodium pallidicaule, sont présentés dans le tableau qui suit en pourcentage d'activité anti-radicalaire : Activité anti radicalaire (%) Extrait de Chenopodium pallidicaule 1% 5% Extrait de Chenopodium pallidicaule 2% 16% Extrait de Chenopodium pallidicaule 10% 29% Extrait de Chenopodium pallidicaule 20% 58% Extrait de Chenopodium pallidicaule 50% 73% Ces résultats montrent que l'extrait de Chenopodium pallidicaule présente un effet anti-radicalaire. 15 REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule en tant que principe actif pour la préparation d'une composition destinée au traitement de la peau et/ou des phanères. 2. Utilisation d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule selon la revendication 1, caractérisée en ce que la composition est une composition cosmétique et/ou dermo-pharmaceutique destinée à améliorer l'état de la couche cornée de la peau. 3. Utilisation d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que la composition est une composition cosmétique dermo-pharmaceutique destinée à hydrater et/ou restructurer la couche cornée de la peau. 4. Utilisation d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que la composition est une composition cosmétique dermo-pharmaceutique destinée à prévenir et/ou traiter le vieillissement cutané. 5. Utilisation d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que la composition est une composition cosmétique dermo-pharmaceutique destinée à régénérer le derme. 6. Utilisation d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que la composition est une composition cosmétique dermo-pharmaceutique destinée à dépigmenter et/ou éclaircir la peau. 7. Utilisation d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que la composition est 2910326 23 une composition cosmétique dermopharmaceutique destinée à une activité antiradicalaire. 8. Extrait de Chenopodium pallidicaule adapté pour l'utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu'il est obtenu par un procédé 5 comprenant au moins une étape de solubilisation de Chenopodium pallidicaule dans un milieu aqueux ou hydroglycolique. 9. Extrait de Chenopodium pallidicaule selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il est obtenu par un procédé comprenant au moins les étapes suivantes 10 - solubilisation de Chenopodium pallidicaule en milieux aqueux ou hydroglycolique, - séparation des phases soluble et insoluble, et - purification de la fraction active contenue dans la fraction soluble. 10. Extrait de Chenopodium pallidicaule selon l'une des revendications 8 15 ou 9, caractérisé en ce qu'il est obtenu par un procédé comprenant notamment les étapes suivantes : - 20 - - - 11. hydroglycolique, sous forme de poudre de plantes entières ou de poudre de graines, hydrolyse(s) enzymatique(s) et/ou chimique(s), séparation des phases soluble et insoluble, par filtration, décantation et/ou centrifugation, et purification de la fraction active contenue dans la fraction soluble, par filtration, ultrafiltration ou absorption. Composition cosmétique adaptée pour l'utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce qu'elle contient comme principe actif entre 0,01 et 50% d'au moins un extrait de Chenopodium pallidicaule. solubilisation de Chenopodium pallidicaule en milieux aqueux ou 2910326 24 12. Composition cosmétique selon la revendication 11, caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme de crème, émulsion huile-dans-eau, émulsion eaudans-huile, émulsions multiples, solutions, suspensions ou poudres.