FR 2914779 A1 20081010 FR 0702559 A 20070406 Domaine de l'invention L'invention se rapporte à un procédé de spectrométrie de masse en tandem sans sélection de masse primaire. Etat de la technique Pour rappel la spectrométrie de masse (MS), de quel type qu'elle soit, comporte généralement les étapes consistant à identifier des molécules présentes dans un échantillon par une mesure de masse de ces molécules après avoir été ionisées, accélérées et introduites dans un spectromètre de masse. Le spectromètre de masse produit un spectre de masse des différentes molécules contenues dans l'échantillon analysé en fonction de la valeur du rapport masse sur charge (M/Q) (M étant la masse et Q la charge) des ions produits sous la forme de l'intensité du courant d'ions détectés par un détecteur d'ions en fonction de la variation d'une fonction F(M/Q) de la valeur du rapport masse sur charge des ions qui dépend du spectre de masse utilisé, qui est généralement de la forme : F(M/Q) = G x (M/Q), où G est une fonction qui dépend du type de spectromètre utilisé indépendante du 20 rapport masse sur charge des ions. Les principaux types de spectromètres de masse utilisés sont les spectromètres de masse à temps de vol, les spectromètres à secteurs magnétiques (B), les spectromètres de masse quadripolaires (Q), les trappes à ions (IT) 3D (géométrie 25 hyperbolique) ou 2D linéaire (géométrie cylindrique), et les spectromètre de masse à transformée de Fourier FTICR acronyme de Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance . Les modes de fonctionnement spécifiques de chaque type de spectromètre de masse précités, et leurs différentes variantes sont connus de l'homme du métier. 30 Dans le cas des spectromètres de masse à temps de vol on a : F(M/Q) = TOF2(M/Q) = GTOF x (M/Q), où TOF est le temps de vol des ions. Par exemple pour un temps de vol linéaire, on a : GTOF = (L2 /2 Vo), où L est la distance du temps de vol linéaire entre la pulsation du paquet d'ions et le 5 détecteur d'ions, et Vo est la tension d'accélération des ions. Dans le cas des spectromètres de masse à secteur magnétique on a : F(M/Q) = B2(M/Q) = GB x (M/Q), où B est le champ magnétique variable appliqué dans le secteur magnétique permettant de filtrer les ions en fonction de leur rapport masse charge vers un 10 détecter d'ions. Par exemple pour un secteur magnétique à simple focalisation on a : GB = (2 Vo/R2) (M/Q> où R est le rayon du secteur magnétique et Vo est la tension d'accélération des ions. Dans le cas des spectromètres de masse quadripolaire on a : 15 F(M/Q) = VQ(M/Q) = GQ x (M/Q), où VQ est la tension variable appliquée dans le quadripolaire pour filtrer les ions en fonction de leur rapport masse sur charge vers un détecteur d'ions. Dans le cas des spectromètres de masse du type trappe à ions on a : F(M/Q) = VIT(M/Q) = GIT x (M/Q), 20 où VIT est la tension variable appliquée dans la trappe à ions pour éjecter les ions en fonction de leur rapport masse sur charge vers un détecteur d'ions. Dans le cas des spectromètres de masse à transformée de Fourier FTICR acronyme de Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance on a : F(M/Q) = { I/0)FTICR (M/Q} = GFTICR x (M/Q), 25 où cOFTICR est la fréquence cyclotron correspondant à chaque valeur de rapport masse sur charge (M/Q) des ions dont la mesure et l'analyse par transformée de Fourier permet de produire le spectre de masse des ions. On distingue également la spectrométrie de masse en tandem (MS-MS), 30 utilisée généralement quand le spectre de masse primaire (MS) ne permet pas d'identifier les molécules étudiées. Elle comporte généralement les étapes consistant à produire à l'aide d'un premier spectromètre de masse un spectre de masse primaire (MS) des molécules ionisées présentes dans l'échantillon analysé, à mettre en oeuvre une étape de sélection d'une masse primaire, puis à fragmenter, ou dit autrement dissocier, avec un système de dissociation les ions primaires de ladite masse primaire sélectionnée, de sorte à produire un spectre de masse dit de dissociation des fragments chargés provenant de la dissociation de ces ions primaires à l'aide d'un deuxième spectromètre de masse. La sélection de masse primaire pour réaliser chaque spectre de masse de dissociation limite le débit d'acquisition du spectromètre de masse en tandem utilisé, 10 car chaque spectre de masse est produit successivement. Elle limite également la sensibilité du spectromètre de masse en tandem utilisé, définie comme la quantité d'échantillon consommée pour produire chaque spectre de masse de dissociation, car les autres ions primaires non sélectionnés fournies par la source d'ions, sont éliminés pour produire le spectre de dissociation des ions 15 primaires sélectionnés. La dissociation des ions primaires peut être réalisée à haute énergie cinétique (0.2-20 keV) ou à basse énergie cinétique (ù10 eV). Par exemple la dissociation peut être réalisée par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique avec par exemple des collisions multiples induites avec les molécules d'un 20 gaz dans un guide d'onde, ou par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à haute énergie cinétique avec une ou deux collisions induites avec les molécules d'un gaz dans une boite de collision. Dans le cas de la dissociation à basse énergie cinétique la mesure du rapport masse sur charge (m/q) des fragments chargés dissociés est obtenue généralement de 25 la même manière que celle des ions primaires parents sous la forme de l'intensité du courant d'ions détectés par un détecteur d'ions en fonction de la variation d'une fonction F(m/q) du rapport masse sur charge (m/q) qui dépend du spectre de masse utilisé qui est également de la forme : F(m/q) = G x (m/q), 30 où G est une fonction qui dépend du type de spectromètre utilisé indépendante du rapport masse sur charge des ions. La fonction F du spectromètre de masse utilisé ne dépend pas de l'énergie cinétique des ions primaires non dissociés et des fragments chargés, car soit les ions primaires non dissociés et les fragments chargés sont accélérés à la même énergie cinétique avant le spectromètre de masse, soit la fonction G du spectromètre de masse utilisé pour produire les spectres de dissociation ne dépend pas de l'énergie cinétique des ions. Dans le cas de la dissociation à haute énergie cinétique la fonction F'(m/q) du spectromètre de masse utilisée dépend de l'énergie cinétique des fragments chargés dissociés, car l'énergie cinétique des fragments chargés dissociés dépend de la masse des fragments. Pour le même spectromètre de masse utilisé, la fonction F(M/Q) pour la mesure du rapport masse sur charge des ions primaires non dissociés est donc différente de la fonction F'(m/q) pour la mesure du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés. La fonction F'(m/q) ne peut pas généralement se mettre sous la forme : F'(m /q) = G' x (m/q), où G' serait une fonction qui dépendrait du spectre de masse utilisé indépendante du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés. Dans le cas particulier de la spectrométrie de masse à temps de vol, en plus des spectromètres de masse à temps de vol en tandem décrits précédemment avec sélection de masse primaire, on connaît également des spectromètres de masse à temps de vol en tandem sans sélection de masse primaire. Ils permettent de produire plusieurs spectres de masse de dissociation simultanément. On connaît ainsi des procédés de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse primaire [1] [2] [3] [4] qui nécessitent malgré tout plusieurs acquisitions pour produire les différents spectres de dissociations, mais avec un nombre d'acquisitions successives inférieur par rapport aux appareils utilisant la sélection de masse primaire. On connaît en particulier trois procédés de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem permettant de produire plusieurs spectres de masse de dissociation sans sélection de masse primaire en une seule acquisition [5] [6] [7]. Le premier de ceux-ci est un procédé de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse primaire basé sur la transformation des temps de vol en positions mesurées [5]. Ce procédé limite la gamme de masse primaire accessible simultanément. Le second est un procédé de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse limité aux ions primaires mono chargés, basé sur l'identification individuelle de chaque paire de fragments dissociés en paire de fragments neutre et chargé [6], sans limite de la gamme de masse primaire accessible simultanément. Le troisième est un procédé de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse limité aux ions primaires multichargés, basé sur l'identification individuelle de paires de fragments dissociés en paire de fragments chargés [7], sans limite de la gamme de masse primaire accessible simultanément. Les procédés [1], [2], [3], [4], [5], et [6] ne sont compatibles qu'avec une dissociation des ions primaires à haute énergie cinétique. Seul le procédé [7] est compatible à la fois avec la dissociation des ions primaires à basse et à haute énergie cinétique. Mais le procédé [7] nécessite une détection individuelle des fragments chargés, et n'est donc pas compatible avec les spectromètres de masse à temps de vol en tandem produisant plusieurs ions par canal temporel à chaque pulsation du paquet d'ions, tel que par exemple les spectromètre de masse associant une trappe à ions pour produire chaque paquet d'ions et un spectromètre de masse à temps de vol (IT-TOF). La dissociation des ions primaires multichargés, peut être complexe et donner lieu à plusieurs canaux de dissociation possibles [8]. Les trois principaux canaux de dissociation sont [8], si l'on note M et Q respectivement la masse et la charge électrique de l'ion primaire parent et mi et qi 30 sont la masse et la charge de chaque fragment dissocié i (avec i = 1, 2 ou 3): (a) M(Q)--> mi(gi) + m2(g2), avec mi + m2 = M et qi + qz = Q, (b) M(Q)ù> mi(gi= Q+e) + m2(q2 = 0), avec mi + m2 = M, et e est l'unité de charge électrique, (c) M(Q)-* mi(qi) + m2(g2) + m3(g3), avec mi + m2 + m3= M et qi + q2 + q3 = Q. Ainsi, même pour les spectres de masse de dissociation réalisés avec sélection de masse primaire, la détermination du rapport masse sur charge des pics de masse de dissociation obtenus avec des ions primaires parents multichargés, et donc leur identification, est difficile à cause de ces différents canaux de dissociation possibles. Le seul procédé de spectrométrie de masse en tandem capable de sélectionner un seul canal de dissociation parmi l'ensemble des canaux de dissociation possibles des to ions primaires multichargés est le procédé [7] qui produit les spectres de dissociation uniquement pour les ions primaires se dissociant en paires de fragments chargés. On peut également produire des paires de fragments chargés avec des ions primaires mono chargés, en ionisant les fragments neutres provenant de la 15 dissociation des ions primaires mono chargés en paires de fragments neutres et chargés. Cette ionisation des fragments neutres dissociés peut être réalisée, par exemple, dans la source d'ions qui ionise et dissocie simultanément les ions, suivant la technique de la dissociation dans la source d'ions ISD acronyme de In Source 20 Decay . Les sources d'ions à impact électronique sont un exemple de ce type de sources d'ions mono chargés. Il n' existe pas actuellement de méthode de spectrométrie de masse en tandem universelle permettant de produire plusieurs spectres de dissociation simultanément 25 sans sélection de masse primaire pour des ions primaires multichargés et/ou mono chargés compatible avec toutes les techniques de spectrométrie de masse existantes. Résumé de l'invention lin but de l'invention est donc de pallier les inconvénients de l'état de la technique présenté notamment ci-dessus, dans le cas d'ions primaires multichargés et/ou mono chargés. En particulier, un but de l'invention est notamment de proposer un procédé de spectrométrie de masse sans sélection de masse primaire capable de produire simultanément en une seule acquisition l'ensemble de tous les spectres de dissociation de toutes les différentes masses primaires présentes dans un échantillon à analyser pour des ions primaires se dissociant uniquement en paires de fragments chargés. i0 A cet effet, on propose selon l'invention un procédé de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem comportant les étapes suivantes : - on fournit une source d'ions primaires à analyser, - on engendre un spectre de masse primaire des ions primaires sans dissociation, ce 15 spectre contenant des pics d'occurrences d'ions primaires, - à partir de ce spectre, on détermine pour chacun des pics de masse primaire qu'il contient la valeur de la fonction dépendant du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé, correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, et la charge électrique des ions primaires, 20 - à partir de ces données, on détermine des lois de corrélation sous la forme d'équations linéaires de chacun des pics de masse primaires, donnant toutes les paires possibles de valeurs de la fonction du rapport masse sur charge de fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé, correspondants à des maxima d'occurrences de paires possibles de pics de masse de dissociation produits par des 25 paires de fragments chargés de rapports masse sur charge susceptibles de provenir de la dissociation d'ions primaires identiques ayant le même rapport masse sur charge, - on dissocie des ions primaires sans sélection de masse primaire, à basse énergie cinétique, de sorte à obtenir pour chacun d'eux, une paire de fragments chargés, - on engendre un spectre de dissociation sans sélection de masse primaire contenant 30 les pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation correspondant à chaque pic de masse primaire, - à partir de ce spectre, on détermine pour chacun des pics de masse de dissociation qu'il contient chaque valeur de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, - on engendre à partir des valeurs mesurées de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de dissociation toutes les paires potentielles de ces valeurs, - on identifie, parmi lesdites paires potentielles, les paires réelles qui satisfont un critère de proximité par rapport aux lois de corrélation, et on identifie ainsi les paires de pics de masse de dissociation correspondant au même pic du spectre de masse primaire, - on produit chaque spectre de dissociation correspondant à chacun des pics de masse primaires, avec les paires de pics de masse de dissociation correspondant aux 15 paires réelles identifiés. Des aspects préférés mais non limitatifs de ce procédé sont les suivants : * les paires de fragments chargés dissociés, sont issues de la dissociation à basse énergie cinétique d'ions primaires multichargés, et sont également d'abord issues de 20 la dissociation à basse énergie cinétique d'ions primaires multichargés en paires de fragments neutre et chargé, puis de l'ionisation des fragments neutres. * les paires de fragments mono chargés dissociés sont d'abord issues de la dissociation à basse énergie cinétique d'ions primaires mono chargés en paires de 25 fragments neutre et mono chargé, puis de l'ionisation des fragments neutres. * l'étape d'identification des paires réelles comprend les sous-étapes suivantes : - on génère un spectre de masse bidimensionnel ayant deux premières dimensions représentant chacune les valeurs mesurées de la fonction du rapport 30 masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maximum d'occurrences de chacun des pics de dissociation, la position de chaque occurrence de détection dans le plan défini par les deux dimensions correspondant à une paire potentielle de ces valeurs, - on positionne dans ce même plan des droites caractéristiques déterminées par les équations linéaires de ces dites lois de corrélation, s - on positionne dans ce même plan les occurrences correspondant à chaque paire potentielle de valeurs, et - on identifie, parmi les paires potentielles de valeurs, celles ayant une position d'occurrence, dans ledit plan qui se trouve à une distance d'une des droites caractéristiques inférieure à un seuil donné, pour ainsi identifier les paires réelles de 10 valeurs correspondant à des paires réelles de pics de masse de dissociation produits par des paires de fragments chargés issues de la dissociation d'ions primaires identiques de même rapport masse sur charge. L'invention a également pour but de proposer un spectromètre de masse en 15 tandem comportant suivant le sens de déplacement général des ions: -une source d'ions (1), - des moyens de fourniture d'un spectre de masse primaire de ces ions primaires issus de ces molécules ionisées, de sorte à pouvoir identifier la valeur de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé 20 correspondant au maximum d'occurrences et la charge électrique primaire, correspondant à chaque pic de masse primaire de ces ions, - un dispositif de dissociation (2) des ions primaires de sorte à obtenir, pour chacun d'eux, une paire de fragments chargés, - un spectromètre de masse (3), produisant le spectre de masse primaire des ions 25 primaires, et le spectre de dissociation sans sélection de masse primaire des fragments chargés, - un détecteur d'ions (4), - des moyens d'identification, dans l'ensemble des pics de masse de dissociation, des paires de pics de masse de dissociation correspondant à des paires de fragments 30 chargés issue de la dissociation d'ion primaires parents de même rapport masse sur charge, ces moyens d'identification étant agencés pour que l'identification se base io sur les valeurs mesurées de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de masse de dissociation, et de lois prédéterminées, dites de corrélation, donnant les paires possibles de ces valeurs. L'invention a également pour but de proposer un spectromètre de masse en tandem comportant suivant le sens de déplacement général des ions: - une source d'ions (1), - des moyens de fourniture d'un spectre de masse primaire de ces ions primaires to issus de ces molécules ionisées, de sorte à pouvoir identifier la valeur de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences et la charge électrique primaire, correspondant à chaque pic de masse primaire de ces ions, - une trappe à ions (5) pour stocker les ions émis par la source d'ions (1) avant leur 15 injection dans le dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), -des moyens d'injecter dans le dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), uniquement les ions primaires provenant des pics de masse primaires des molécules à identifier, 20 - un dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), -un spectromètre de masse (3), produisant le spectre de masse primaire des ions primaires, et le spectre de dissociation sans sélection de masse primaire des fragments chargés, -un détecteur d'ions (4), 25 - des moyens d'identification, dans l'ensemble des pics de masse de dissociation, des paires de pics de masse de dissociation correspondant à des paires de fragments chargés issue de la dissociation d'ion primaires parents de même rapport masse sur charge, ces moyens d'identification étant agencés pour que l'identification se base sur les valeurs mesurées de la fonction du rapport masse sur charge des fragments 30 chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de masse de dissociation, et de lois prédéterminées, dites de corrélation, donnant les paires possibles de ces valeurs. Des aspects préférés, mais non limitatifs, de ces spectromètres de masse en 5 tandem, sont les suivants: - la source d'ions primaires (1) est une source d'ions multichargés et/ou mono chargés, - le dispositif de dissociation (2) des ions primaires en paires de fragments chargés est équipé d'un système ionisant les fragments neutres provenant de la dissociation à lo basse énergie cinétique des ions primaires. Des aspects préférés, mais non limitatifs, de ces spectromètres de masse en tandem, sont les suivants: - le dispositif de dissociation (2) produisant les paires de fragments chargés dissociés 15 est une trappe à ions, contenant du gaz dissociant à basse énergie cinétique les ions primaires par collisions multiples avec les molécules du gaz, - la trappe à ions (2) est équipée d'un système ionisant les fragments neutres provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires dans la trappe à ions (2), 20 - La trappe à ions formant le dispositif de dissociation (2), pour des ions primaires, ou des fragments chargés dissociés, de même rapport masse sur charge préalablement sélectionnés avec le mode sélection de masse de la trappe à ions, produit des paires de fragments chargés, en réalisant deux étapes successives de dissociations par collision avec les molécules du gaz et d'ionisations de fragments 25 neutres, sans sélection de masse primaires des fragments chargés dissociés produits à chacune des deux étapes. Des aspects préférés mais non limitatifs de ces spectromètres de masse en tandem, sont les suivants : - le dispositif de dissociation (2) des ions primaires en paires de fragments chargés à basse énergie cinétique est un guide d'onde multipolaire contenant du gaz dissociant les ions primaires par collisions multiples avec les molécules du gaz, - le guide d'onde multipolaire est équipé d'un système ionisant les fragments neutres 5 provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires dans le guide d'onde multipolaire (2). L'invention a également pour but de proposer un programme d'ordinateur apte à être mis en oeuvre dans un système de spectrométrie de masse à temps de vol to en tandem et comprenant un jeu d'instructions apte à effectuer les étapes suivantes : - on commande le système pour qu'il engendre à partir d'une source d'ions primaires à analyser, un spectre de masse primaire de ces ions primaires, sans dissociation, ce spectre contenant des pics d'occurrences d'ions primaires, - on effectue une acquisition des données de ce spectre, 15 - à partir desdites données, on détermine pour chacun des pics de masse primaire qu'il contient la valeur de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé, correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, et la charge électrique des ions primaires, - à partir de ces données de pics, on détermine des lois de corrélation donnant toutes 20 les paires possibles de valeurs de la fonction du rapport masse sur charge de fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant à des maxima d'occurrences de paires possibles de pics de masse de dissociation produits par des paires de fragments chargés provenant des différents ions primaires, - on commande le système pour qu'il engendre la dissociation des ions primaires à 25 basse énergie cinétique de sorte à obtenir pour chacun d'eux, une paire de fragment chargé, - on engendre, sans sélection de masse primaire, un spectre de dissociation de ces fragments chargés dissociés contenant les pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation correspondant à chaque pic de masse primaire, 30 - à partir de ce spectre, on détermine pour chacun des pics de masse de dissociation qu'il contient chaque valeur de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, - on engendre à partir des valeurs mesurées toutes les paires potentielles de ces valeurs, - on identifie, parmi lesdites paires potentielles, les paires réelles qui satisfont un critère de proximité par rapport aux lois de corrélation, et on identifie ainsi les paires de pics de masse de dissociation correspondant au même pic du spectre de masse primaire, - on produit chaque spectre de dissociation correspondant à chacun des pics de masse 10 primaires, avec les paires de pics de masse de dissociation correspondant aux paires réelles identifiés. Brève description des figures 15 D'autres aspects, buts et avantages de l'invention apparaîtront mieux à la lecture de la description suivante de l'invention, donnée à titre d'exemple non limitatif, et faite en référence aux dessins annexés sur lesquels : - la figure 1 est un organigramme d'un mode de réalisation préféré du procédé de 20 spectrométrie selon l'invention, - la figure 2 illustre des composants d'un système apte à mettre en oeuvre le procédé de spectrométrie de masse selon un exemple de l'invention, - la figure 3 illustre un spectre de masse primaire de molécules à identifier, comportant trois pics de masse primaires, 25 - la figure 4 illustre un spectre de masse de dissociation obtenu sans sélection de masse primaire, comportant les pics de masse des trois spectres de dissociation des trois pics de masse primaires de l'exemple de spectre de masse primaire de la figure 3, avec certaines des valeurs mesurées Finax(m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé, 30 correspondant au maximum d'occurrence de chaque pic de masse de dissociation, - la figure 5 illustre les trois spectres de dissociation des trois pics de masse primaires de la figure 3, obtenus avec le procédé selon l'invention, à partir du spectre de dissociation sans sélection de masse primaire de la figure 4, - la figure 6 illustre dans le plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/gs')} du spectre bidimensionnel, trois exemples de droites caractéristiques d'ions primaires multichargés se dissociant en paire de fragments chargés, correspondant aux lois de corrélation de trois pics de masse primaires, chaque pic de masse primaire correspondant à une charge primaire différente (Q' l = 2 e, Q'2 = 3 e et Q'3 = 4 e, où e est l'unité de chargé électrique), - la figure 7 illustre le plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} d'un spectre bidimensionnel comportant seulement trois droites caractéristiques correspondant trois pics de masse d'ions primaires doublement chargés de la figure 3, se dissociant sans sélection de masse primaire en paires de fragments chargés. Les positions dans le plan {Finax(mr/gr"),Fmax(ms/gs')} du spectre bidimensionnel de paires potentielles et réelles de valeurs de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de dissociation de la figure 4, sont également représentés sur la figure, - la figure 8 illustre un spectromètre de masse en tandem selon un mode de réalisation de l'invention, avec une trappe à ions positionnée entre la source d'ions et le dispositif de dissociation produisant les paires de fragments chargés. Description des modes de réalisation de l'invention On rappelle à titre préliminaire que l'on entend par ion multichargé un ion 25 ayant une charge électrique positive ou négative de valeur absolue supérieure ou égale à 2 e (où e est l'unité de charge électrique). Enréférence à la figure 1 en particulier, le procédé selon l'invention vise la dissociation des ions primaires multichargés en paires de fragments chargés, et la dissociation des ions primaires multichargés en paires de fragment neutre et chargé 30 avec ionisation des fragments neutres dissociés, en éliminant les autres canaux possibles de dissociation. En référence également à la figure 1, le procédé selon l'invention vise la dissociation des ions primaires mono chargés en paires de fragments mono chargés, le deuxième fragment mono chargé provenant de l'ionisation d'un fragment neutre provenant de la dissociation des ions primaires mono chargés en paires de fragments neutre et mono chargé, en éliminant le canal de dissociation en paires de fragments neutre et mono chargé sans ionisation du fragment neutre. Dans le présent mode de réalisation, on commence par fournir un spectre de 10 masse primaire d'ions primaires issus de molécules que l'on cherche à identifier sans dissociation. Ce spectre de masse primaire peut être obtenu par lecture dans une base de données, telle qu'une base de données tierce, dans laquelle il aura été précédemment sauvegardé. 15 Il peut également être obtenu par mise en oeuvre des étapes (a) et (b) illustrées sur la figure 1. A l'étape (a) de cette figure, on ionise les molécules à identifier dans une source d'ions, représentée sur la figure 2 par la référence (1), et on les accélère avec un champ électrique généralement constant. 20 Puis à l'étape (b), on injecte les ions primaires dans le spectromètre de masse utilisé (3), puis on mesure en fonction de la variation de la fonction F(M/Q) du spectromètre de masse utilisé (3), les occurrences (ou l'intensité du courant d'ions) des ions primaires détectés par le détecteur d'ions (4). La fonction F(M/Q) est de la forme : 25 F(M/Q) = G x (M/Q), où G est une fonction qui dépend du spectromètre de masse utilisé (3) indépendante du rapport masse sur charge des ions, et M/Q est le rapport masse sur charge des ions primaires. On produit ensuite le spectre de masse primaire (MS) sur la base de ces 30 mesures. Selon la présentation graphique habituelle en spectrométrie de masse, conventionnellement utilisée par l'homme du métier (mais non limitative), le spectre de masse primaire est généralement représenté avec deux axes perpendiculaires, avec en abscisse les valeurs mesurés de la fonction F(M/Q), et en ordonnée les occurrences (ou l'intensité du courant d'ions détectés) correspondantes. Ce spectre de masse primaire permet alors de déterminer, dans une étape (c), la valeur Finax(M/Q) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences et la charge électrique primaire Q des ions primaires, correspondant à chaque pic de masse primaire. L'homme du métier sait déterminer la charge Q pour des ions primaires multichargés correspondant à chaque pic de masse primaire avec les techniques d'identifications utilisées habituellement en spectrométrie de masse. De plus il saura déterminer les valeurs de chaque rapport masse sur charge primaire (M/Q) des ions primaires correspondant à chaque pic de masse primaire, en effectuant la calibration primaire préalable habituelle du spectromètre de masse utilisé, avec des molécules connues. La figure 3 montre un exemple de spectre de masse primaire contenant trois pics de masse primaire d'ions primaires, respectivement de rapport masse sur charge, (M1/Q1), (M2/Q2), et (M3/Q3), avec les valeurs Fmax(M/Q) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de chacun de ces pics de masse primaire. On détermine, dans une étape (d), à partir de ces données, des lois, dites de corrélation, de chacun des pics de masse primaires, donnant toutes les paires possibles {Finax(mk/gk'),Finax(ml/qh)} de valeurs de la fonction du rapport masse sur charge de fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé, correspondant à des maxima d'occurrences de paires possibles de pics de masse de dissociation produits par des paires possibles de fragments chargés dissociés de rapports masse sur charge {(mk/gk>),(ml/qr)}, susceptibles de provenir de la dissociation d'ions primaires identiques de même rapport masse sur charge (M/Q). La relations entre la masse primaire M et les paires de masses possibles des fragments chargés (mk,ml), est : M=mk+m~. Dans le cas des ions primaires multichargés se dissociant directement en paire de fragments chargés la relation entre la charge primaire Q et les paires de charges possibles des fragments chargés (qk',q>) est : Q = qk, + qr. Dans le cas des ions primaires multichargés se dissociant en paires de fragments neutre et chargé avec ionisation des fragments neutres on a : Q+e=qk,+qr• Dans le cas des ions primaires mono chargés se dissociant en paires de fragments neutre et mono chargé avec ionisation des fragments neutres on a : 15 Q=qk>=qr=e. Le nombre de lois de corrélation par pic de masse primaire est égal au nombre de possibilités de distribution de la charge électrique entre les paires de fragments chargés dissociés. Dans le cas des ions primaires mono chargés se dissociant en paires de 20 fragments neutre et mono chargé avec ionisation des fragments neutres, il n'existe qu'une seule possibilité de distribution de charge possible entre les paires de fragments chargés dissociés à savoir : qk, = e et qr = e, et donc une seule loi de corrélation correspondante donnant toutes les paires possibles de masse de fragments chargés (mk,m,). 25 Pour les ions multichargés se dissociant directement en paires de fragments chargés, avec Q = 2 e, il n'existe aussi qu'une seule possibilité de distribution de charges possible entre les paires de fragments chargés dissociés: qk, = e, qr = e, et donc également une seule loi de corrélation correspondante. Pour Q = 3 e, il existe deux possibilités de distribution de charges possibles 30 entre les paires de fragments chargés : (qk, = e,qr = 2 e), et (qk^ = 2 e,qr = e), et donc deux lois de corrélation correspondantes. Pour Q = 4 e, il existe trois possibilités de distribution de charges possibles entre les paires de fragments chargés (qk, = e,qj' = 3e), (qk'=3e, q1= e), et (qk' = 2e, q r = 2e), et donc trois lois de corrélation correspondantes. Et ainsi de suite. Dans le cas des ions primaires multichargés se dissociant en paires de fragments neutre et chargé avec ionisation des fragments neutres, pour Q = 2 e, il existe cieux possibilités de distribution de charges possibles entre les paires de fragments chargés : (qk' = e,qr = 2 e), et (qk' = 2 e,q1' = e), et donc deux lois de corrélation correspondantes. Pour Q = 3 e, il existe trois possibilités de distribution de charges possibles io entre les paires de fragments chargés (qk' = e,qi' = 3e), (qk'=3e, qi'= e), et (qk' = 2e, qi' = 2e), et donc trois lois de corrélation correspondantes. Et ainsi de suite. Avec la dissociation des ions primaires à basse énergie cinétique, la fonction F(m/q) du spectromètre de masse utilisé (3) est de la forme : F(m/q) = G x (m/q), 15 où G est une fonction qui dépend du spectromètre de masse utilisé indépendante du rapport masse sur charge des ions, et m/q est le rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés. Chacune des lois de corrélation correspondant à chaque paire de charges (gk',gr) de chacun des pics de masse primaire correspondant à des ions primaires de 20 même rapport masse sur charge (M/Q), se dissociant en paires fragments chargés peut alors toujours s'écrire sous la forme d'une équation linéaire: FinaX (mk/qk') = FinaX (M/gk') ù (qk'/qr) FinaX (mi/qr), avec : FinaX (M/qk') = (Q/qk') Finax(M/Q)• 25 Chaque lois de corrélation de chaque pic de masse primaire correspondant à chaque paire de charge des fragments dissociés (gk',gi'), peuvent donc être déterminées par le procédé selon l'invention simplement avec les valeurs de la charge primaire Q et de la fonction Finax(M/Q) correspondant au maximum d'occurrence dudit pic de masse primaire. 30 En effet, la détermination de la charge primaire Q de chaque pic de masse primaire dans l'étape précédente permet de déterminer chaque paire de charge possible (qi>,q;,) de chaque loi de corrélation de ce pic de masse primaire pour chaque canal de dissociation possible. La détermination du temps de vol du maximum d'occurrence Finax(M/Q) et de la charge primaire Q de chaque pic de masse primaire dans l'étape précédente, permet de déterminer également chaque valeur F(M/gk') de chaque loi de corrélation correspondant à ce pic de masse primaire par : F(M/gk ) = (Q/ qk') Fä,ax(M/Q• A l'étape (e), on dissocie (2) des ions primaires à basse énergie cinétique de 10 sorte à obtenir, pour chacun d'eux, une paire de fragments chargés. Puis dans l'étape (f), on injecte les fragments chargés dissociés dans le spectromètre de masse (3), puis on mesure en fonction de la variation de la fonction F(m/q) du spectromètre de masse utilisé (3) les occurrences (ou l'intensité du courant 15 d'ions), des fragments chargés dissociés détectés par le détecteur d'ions (4). La fonction F(m/q) est de la forme: F(m/q) = G x (m/q), où G est une fonction qui dépend du spectromètre de masse utilisé (3) indépendante du rapport masse sur charge des ions, et (m/q) est le rapport masse sur charge des 20 fragments chargés dissociés. On produit ensuite, sur la base de ces mesures, sans sélection de masse primaire, le spectre de masse de dissociation (MS-MS) contenant tous les pics de masse de dissociations de chacun des spectres de dissociation des ions primaires parents de chaque pic de masse primaire du spectre de masse primaire. 25 Les pics de masse de dissociation des différents spectres de dissociation correspondant aux différents pics de masse primaires sont donc mélangés dans le spectre de dissociation produit sans sélection de masse primaire. Selon la présentation graphique habituelle en spectrométrie de masse, conventionnellement utilisée par l'homme du métier (mais non limitative), le spectre 30 de masse de dissociation (MS-MS) obtenu est généralement représenté avec deux axes perpendiculaires, avec en abscisse les valeurs mesurés de la fonction F(m/q), et en ordonnée les occurrences correspondantes. La figure 4 montre à titre d'illustration et d'exemple non limitatif, un spectre de dissociation (MS-MS) contenant les pics de dissociation correspondant au canal de dissociation en paire de fragments chargés, des trois pics de masse primaires de l'exemple de figure 3. On comprend que dans la réalité, la dissociation des ions primaires produit des fragments chargés issus des autres canaux possibles de dissociation (par exemple dans le cas des ions primaires multichargés des fragments chargés provenant d'événements de dissociation en paires de fragments neutre et chargé sans ionisation des fragments neutres, ou en trois fragments ou davantage). Les sources d'ions multichargés produisent également généralement des ions primaires mono chargés qui peuvent se dissocier en paires de fragments neutres et mono chargés sans ionisation des fragments dissociés. Une partie des fragments neutres des événements de dissociation en paires de fragments neutre et mono chargé, dans le cas de sources d'ions mono chargés avec ionisation des fragments neutres, ne sera pas ionisée. Le spectre de dissociation obtenu sans sélection de masse primaire contiendra donc également, en plus des pics de masse de dissociation d'intérêt, des pics de masse de dissociation correspondant à ces autres canaux de dissociation possibles, ainsi que les pics de masse primaires des ions primaires multichargés et/ou mono chargés non dissociés. Ces autres pics de dissociation, qui sont éliminés par le procédé selon l'invention, et les pics de masse primaires, ne sont pas représentés sur la figure 4 pour simplifier la description. On peut voir dans cet exemple, que le spectre de dissociation comporte quatorze pics de masse de dissociation correspondant à sept paires de pics de dissociations, chaque paire de pic de dissociation étant produit par des paires de fragments chargés provenant de la dissociation d'ions primaires identiques ayant le même rapport masse sur charge.30 A l'étape (g) on détermine chaque valeur Finax(m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de chacun des pics de dissociation du spectre de dissociation obtenu sans sélection de masse primaire. On peut voir également, dans l'exemple de la figure 4, quatre des valeurs Fmax(m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences de quatre pics de dissociation parmi les quatorze différents pics de dissociation représentés. to A l'étape (h), on produit, à partir des valeurs mesurées de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de dissociation, toutes les paires potentielles {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} de ces valeurs. 15 Le nombre total de paires potentielles pour n valeurs mesurées est donc égal à n2. A l'étape (i), on identifie parmi l'ensemble des paires potentielles {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs^)}, les paires réelles {Finax(mt/gt),Finax(mä/qä)} correspondant 20 aux paires réelles de pics de dissociation produits par des paires de fragments chargés dissociés provenant de la dissociation d'ions primaires identiques de même rapport masse sur charge, pour chacun des pics de masse primaire, en comparant les paires potentielles {Finax(mr/qr'), Finax(ms/qs')}, aux paires possibles {Finax(mk/qk'), Finax(mi/gr)} déterminées par les lois de corrélation de chacun des pics de masse 25 primaire. Selon l'invention, cette étape d'identification consiste à sélectionner parmi les paires potentielles {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} celles qui satisfont un critère de proximité par rapport aux paires possibles {Finax(mk/qk>),Finax(ml/ql>)} fournies par lesdites lois de corrélation de chacun des pics de masse primaires. 30 Ce critère de proximité est de l'ordre de la précision de la mesure des valeurs Finax(M/Q) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maxima d'occurrences des différents pics de masse primaires et qui détermine la précision des lois de corrélations correspondantes, et de la précision des mesures des valeurs Finax(m%q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant au maxima d'occurrences des différents pics de masse dissociation et qui détermine la précision des paires potentielles et réelles. La précision des mesures des valeurs Fmax(M/Q) des mesures des valeurs Finax(m/q) dépend essentiellement de la résolution des pics de masse correspondant. io On produit finalement dans une étape (j) chaque spectre de masse de dissociation correspondant à chacun des pics de masse primaires avec les paires réelles identifiées {Finax(mt/gt),Finax(mu/qä)}, en positionnant les paires de pics de masse de dissociation correspondant dans chacun des spectres de dissociation de chaque pic de masse primaire. 15 Selon la présentation graphique habituelle en spectrométrie de masse conventionnellement utilisée par l'homme du métier (mais non limitative), chaque spectre de masse de dissociation est généralement représenté avec deux axes perpendiculaires, avec en abscisse les valeurs de la fonction F(m/q) mesurés, et en ordonnée les occurrences correspondantes. 20 La figure 5 illustre, à titre d'exemple non limitatif, les trois spectres de dissociation des trois pics de masse primaires de la figure 3, obtenus avec le procédé selon l'invention, à partir du spectre de dissociation sans sélection de masse primaire de la figure 4, après l'identification des différentes paires de pics de mase de dissociation avec le procédé selon l'invention. 25 Afin d'expliciter l'étape (i) mentionnée plus haut, on va maintenant décrire son mode de réalisation préféré en raisonnant sur une représentation graphique. L'homme du métier comprendra néanmoins, qu'il ne s'agit que d'un type de représentation parmi d'autres, destiné surtout à illustrer les principes de cette étape et 30 à comprendre la façon dont les traitements numériques selon l'invention s'effectuent. On réalise l'étape (i) du procédé selon l'invention avec les sous-étapes suivantes: On identifie tout d'abord parmi l'ensemble des paires potentielles {Finax(mr/gr'),F,,,ax(ms/gs')}, chaque paire réelle {Fmax(mt/gt),Finax(mu/qu)) en commençant par générer, selon une étape (i 1), un spectre bidimensionnel. Ce spectre possède, deux dimensions identiques représentant, chacune, les valeurs mesurées de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de masse de dissociation du spectre de dissociation obtenu sans sélection de lo masse primaire. Graphiquement, les deux dimensions correspondent à deux axes qui sont de préférence perpendiculaires l'un par rapport à l'autre. On associe à chaque paire potentielle {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} une position d'occurrence Prs correspondante dans le spectre bidimensionnel. 15 A chaque paire potentielle {Finax(mr/gr.),Finax(ms/qs')} correspond une paire potentielle symétrique {Finax(ms/gs'),Finax(mr/gr')} A ces deux paires potentielles symétriques correspondent donc une paire de positions d'occurrences différentes symétriques (Prs,Psr) dans le plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} du spectre bidimensionnel. 20 Si le nombre de paires potentielles est n2, on produit n2 positions d'occurrences Prs différentes correspondantes dans le plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} du spectre bidimensionnel. Dans le plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} du spectre bidimensionnel, chaque loi de corrélation est représentée par une droite caractéristique dont la position, selon 25 une étape (i2), dans le plan susmentionné est déterminée par l'équation linéaire: Finax (mk/qk') = Finax (M/gk') û (qk'/qr') Finax (mi/qi'), avec : Finax (M/qk') = (Q/qk') Finax(M/Q). On peut alors déterminer graphiquement dans le plan 30 {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} du spectre bidimensionnel chaque droite caractéristique avec les valeurs de chaque paire {Finax(M/gk'),Finax(M/gI')}. Chaque paire {Finax(M/gk'),Finax(M/gi')} sont les deux points sur chacun des deux axes du plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} du spectre bidimensionnel (Finax(M/gk') sur l'axe Frnax(mr/q,'), et Finax(M/gl') sur l'axe Finax(ms/qs,)), de la droite caractéristique d'équation : Finax (mk/qk') = Finax (M/qk') (qk'/gr) Finax (mi/qi'). On détermine donc simplement chaque droite caractéristique dans le plan {F,ax(mr/gr'),Finax(ms/gs')} du spectre bidimensionnel correspondant à chaque loi de corrélation en reliant les deux points Finax(M/gk'), et F,,,ax(M/gi') situés sur les deux axes du spectre bidimensionnel. On détermine les valeurs de chaque paire {Finax(M/gk'),Finax(M/gi')} de chaque droite caractéristique correspondant à chaque paire de charge (gk',gi') avec la valeur Fmax(MIQ) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences et de la charge primaire Q, du pic de masse primaire correspondant avec : Finax (M/qk') = (Q/gk') Finax(M/Q) et Finax (M/qi') = (Q/qi') Finax(M/Q). La figure 6 montre, à titre d'exemple non limitatif, les droites caractéristiques dans le plan {F,,,ax(mr/gr'),Finax(ms/gs')) du spectre bidimensionnel, déterminées par les lois de corrélation correspondant à trois pics de masse primaires d'ions primaires multichargés se dissociant directement en paires de fragments chargés, respectivement de charge primaires Q' l = 2 e, Q'2 = 3 e, et Q'3 = 4 e. L'équation de la droite caractéristique dans le plan {F,,,ax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} du spectre bidimensionnel de la figure 6 correspondant à la loi de corrélation du pic de masse primaire de charge électrique primaire Q' l = 2 e est : Finax (mk/e) =Finax (M' 1/e) ù Finax (mile). Les équations des deux droites caractéristiques dans le plan {F,,,ax(mr/gr-'),Finax(ms/qs')} du spectre bidimensionnel de la figure 6 correspondant aux deux lois de corrélation du pic de masse primaire de charge électrique primaire Q'2=3esont : F. (mk/e) = Fin. (M'2/e) ù 2 F,,,ax (mi/2e), et Fmax (mk/2e) = Fmax (M'2/2e) ù (1/2) Fmax (mi/e). Les équations des trois droites caractéristiques dans le plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs•)} du spectre bidimensionnel de la figure 6 correspondant aux trois lois de corrélation du pic de masse primaire de charge électrique primaire 5 Q'3=4esont : Finax (mk/e) = Fmax (M'3/e) ù 3 Fmax (mi/3e), Finax (mk/3e) = Fmax (M'3/3e) ù (1/3) Finax (mile), et Fmax (mk/2e) = Fmax (M'3/2e) ù Finax (mi/2e). 10 On identifie, dans une étape (i4), chaque paire réelle {Finax(mt/gt),Finax(mu/qä )} parmi les paires potentielles {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')}, en retenant celles dont la paire de positions d'occurrences (Ptu,Pä t) correspondante dans le spectre bidimensionnel, sont chacune à une distance d'une des droites caractéristiques déterminées, inférieure à un seuil donné. 15 La valeur de ce seuil de distance est de l'ordre de la précision des mesures des valeurs Finax(M/Q) qui déterminent la précision des lignes caractéristiques correspondantes, et de l'ordre de la précision des mesures des valeurs Fmax(m/q) qui déterminent la précision des positions d'occurrences potentielles et réelles dans le spectre bidimensionnel. 20 La figure 7 montre à titre d'exemple non limitatif, un plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} de spectre bidimensionnel où sont positionnées les trois droites caractéristiques correspondant aux lois de corrélation de trois pics de masse primaires d'ions primaires doublement chargés se dissociant directement en paires de fragments mono chargé respectivement de rapports masse sur charge (M1/Q1), 25 (M2/Q2), et (M3/Q3) (avec Q1 = Q2 = Q3 = 2 e), de l'exemple de spectre de masse primaire de la figure 3. On peut voir également, dans cet exemple non limitatif, et pour simplifier la description, que seulement quatre valeurs, {Fmax(m1/g1),Finax(m4/q4)} et 30 {Finax(milgl),Finax(m4/q4)}, correspondant à deux paires réelles de pics de dissociation parmi les quatorze de la figure 4, sont représentés. Ces quatre valeurs Finax(m/q) vont produire seize positions d'occurrences Prs différentes correspondant aux paires potentielles dans le plan {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs.)) du spectre bidimensionnel de la figure 7, qui sont représentés par des croix. Dans le cas où les quatorze valeurs Fmax(m/q) correspondant aux quatorze pics de dissociation de la figure 4 seraient représentés sur la figure 7, on déterminerait 196 positions d'occurrences potentielles. Les deux paires de positions d'occurrences réelles à identifier (P14,P41) et (P23,P32) sont représentés dans la figure 7 par des croix entourées d'un cercle. On constate que la paire de positions d'occurrences potentielles la plus proche de la droite caractéristique correspondant à des ions primaires de rapport masse sur charge (M1/Q1) est la paire (P14,P41). En effet, ces positions sont situées sur, ou au voisinage immédiat de cette droite caractéristique. La paire {Finax(mi/gi),Finax(m4/q4)} correspondant à la paire de positions (P14,P41) est donc identifiée comme étant celle d'une paire de pics de dissociation appartenant au spectre de dissociation du pic de masse primaire de rapport masse sur charge (M1/Q1) de l'exemple de la figure 3. Au contraire les autres paires de positions potentielles sont éloignées de cette droite caractéristique d'une distance supérieure au seuil choisi, de sorte que l'on considère qu'elles ne sont pas issues de paires de pics de dissociation appartenant au spectre de dissociation du pic de masse primaire de rapport masse charge (M1/Q1). On constate de même, que la paire de positions d'occurrences potentielles la plus proche de la droite caractéristique correspondant à des ions primaires de rapport masse sur charge (M2/Q2) est la paire de positions (P23,P32). La paire {Finax(m2/g2),Finax(m3/q 3)} correspondant à la paire de positions (P23,P32) est donc identifiée comme étant celle d'une paire de pics de dissociation appartenant au spectre de dissociation du pic de masse primaire de rapport masse sur charge (M2/Q2) de l'exemple de la figure 3. Les autres paires de positions potentielles sont trop éloignées des droites caractéristiques, par rapport au critère de seuil de distance choisi, de sorte que l'on considère qu'elles ne sont pas issues de la dissociation d'ions primaires de rapport masse charge (MI/QI), (M2/Q2), et (M3/Q3). Pour éviter d'alourdir inutilement la présente description, l'exemple précédent 5 illustré sur les figures 4 et 7, ne comporte que des pics de dissociations d'ions primaires parents se dissociant en paires de fragments chargés. En réalité, le spectre de dissociation obtenu sans sélection de masse primaire contiendra donc également des pics de masse correspondant à d'autres canaux de dissociation possibles des ions primaires multichargés et/ou mono chargés, ainsi que to les pics de masse primaires des ions primaires multichargés et/ou mono chargés non dissociés. Ces autres pics de dissociation vont produire d'autres paires potentielles supplémentaires. Ces paires potentielles sont pour la plupart éliminées par le critère d'identification des paires réelles. Mais certaines de ces paires potentielles peuvent 15 être acceptées par le critère d'identification, et produire de fausses paires réelles identifiées, qui vont produire de fausses paires de pics de dissociation dans les spectres de dissociation produits finalement par le procédé selon l'invention. L'homme du métier saura éliminer ces faux pics de masse de dissociation en comparant les valeurs correspondantes des masses des paires de fragments 20 correspondant à ces fausses paires de pics, aux masses des paires fragments des canaux de dissociation théorique possibles de la molécule parente. L'invention telle que décrite dans ce qui précède a été expliquée par une approche graphique mettant en jeu un espace bidimensionnel. 25 Toutefois, on comprend que sa mise en oeuvre concrète s'effectue typiquement par un calculateur numérique tel qu'un DSP (Digital Signal Processor) exécutant les programmes appropriés. En particulier, les lignes caractéristiques, vont être typiquement des données numériques (équations ou jeux de coordonnées) avec lesquelles les données 30 numériques produites par le spectromètres et fournies au calculateur vont être comparées. Plus concrètement, la présente invention peut être mise en œuvre sous forme d'un module logiciel venant s'ajouter à un équipement de spectrométrie de masse existant, et interfacé avec les autres logiciels de cet équipement de façon à assurer pour l'essentiel l'établissement des données de lignes caractéristiques et la collecte 5 des données mesurées pour les confronter à ces données de lignes caractéristiques. Dans tous les cas, l'homme du métier comprendra que la production du spectre de masse primaire et des spectres de dissociation issus d'ions primaires multichargés et/ou mono chargés se dissociant en paires de fragments chargés donne la possibilité 10 d'identifier les molécules étudiées. Il comprendra à cet égard que la production de spectres de dissociation ne contenant que des pics de masse correspondant seulement aux canaux de dissociation en paires de fragments chargés va faciliter leur identification. 15 La dissociation des ions primaires en paires de fragments chargésbasse énergie cinétique peut être réalise par la technique de la collision induite avec les molécules d'un gaz inerte CID/CAD (acronyme de "Collision Induced Dissociation/Collision Activated Dissociation"), par la technique de la collision avec une surface SID (acronyme de "Surface Induced Dissociation"), par la technique de 20 la capture d'électrons ECD (acronyme de "Electron Capture Dissociation"), par la technique d'ionisation par photons infrarouge IRMPD (acronyme de "Infra Red Multi Photon Dissociation"), par la technique de photons de haute énergie PD (acronyme de "Photo Dissociation"), par la technique de photons de haute énergie PD (acronyme de "Photo Dissociation"), par la technique de chauffage BIRD 25 (acronyme de "Black Body Infra Red Dissociation"), ou tout autre technique de fragmentation des ions primaires en paires de fragments chargés. Dans le cas de la dissociation des ions primaires multichargés par ECD (acronyme de "Electron Capture Dissociation"), la capture de l'électron induisant la fragmentation modifie la charge de l'ion primaire Q avant la dissociation. 30 Dans ce cas la relation entre la charge primaire Q et les paires de charges possibles des fragments chargés (gk',gr) est : Q-e=qk'+qr. L'invention a également pour but de proposer un spectromètre de masse de tandem, illustré à titre d'exemple non limitatif sur la figure 2, comportant suivant le sens de déplacement général des ions: - une source d'ions (1), - des moyens de fourniture d'un spectre de masse primaire de ces ions primaires issus de ces molécules ionisées, de sorte à pouvoir identifier la valeur de la fonction F,1ax(M/Q) du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences et la charge électrique primaire Q, correspondant à chaque pic de masse primaire de ces ions, - un dispositif de dissociation (2) des ions primaires de sorte à obtenir, pour chacun d'eux, une paire de fragments chargés, - un spectromètre de masse (3), produisant le spectre de masse primaire des ions primaires, et le spectre de dissociation sans sélection de masse primaire des fragments chargés dissociés, - un détecteur d'ions (4), - des moyens d'identification, dans l'ensemble des pics de masse de dissociation, des paires de pics de masse de dissociation correspondant à des paires de fragments chargés issue de la dissociation d'ion primaires parents de même rapport masse sur charge, ces moyens d'identification étant agencés pour que l'identification se base sur les valeurs F,,,ax(m/q) mesurées de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de masse de dissociation, et de lois prédéterminées, dites de corrélation, donnant les paires possibles de ces valeurs. La plupart des sources d'ions produisent, en plus des ions primaires d'intérêt des pics de masse primaire des molécules à identifier, un bruit de fond quasi continu d'ions entre les pics de masse primaires appelé bruit chimique. Ce bruit chimique également présent dans le spectre de dissociation produit sans sélection de masse primaire à l'étape (f) du procédé selon l'invention, peut masquer des petits pics de dissociation d'intérêts. Pour éliminer la quasi totalité de ce bruit chimique du spectre de dissociation produit sans sélection de masse primaire, on peut utiliser un dispositif pour sélectionner seulement tous les ions primaires des pics de masse primaires avant leur injection dans le dispositif (2) de dissociation en paires de fragments chargés. L"invention a donc également pour but de proposer un spectromètre de masse de tandem, illustrer à titre d'exemple non limitatif sur la figure 8, comportant suivant to le sens de déplacement général des ions: - une source d'ions (1), - des moyens de fourniture d'un spectre de masse primaire de ces ions primaires issus de ces molécules ionisées, de sorte à pouvoir identifier la valeur Finax(M/Q) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse 15 utilisé correspondant au maximum d'occurrences et la charge électrique primaire Q, correspondant à chaque pic de masse primaire de ces ions, - une trappe à ions (5) pour stocker les ions émis par la source d'ions (1) avant leur injection dans le dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), 20 -des moyens d'injecter dans le dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), uniquement les ions primaires provenant des pics de masse primaires des molécules à identifier, - un dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), -un spectromètre de masse (3), produisant le spectre de masse primaire des ions 25 primaires, et le spectre de dissociation sans sélection de masse primaire des fragments chargés dissociés, -un détecteur d'ions (4). - des moyens d'identification, dans l'ensemble des pics de masse de dissociation, des paires de pics de masse de dissociation correspondant à des paires de fragments 30 chargés issue de la dissociation d'ion primaires parents de même rapport masse sur charge, ces moyens d'identification étant agencés pour que l'identification se base 31 sur les valeurs mesurées Finax(m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de masse de dissociation, et de lois prédéterminées, dites de corrélation, donnant les paires possibles de ces valeurs. I)es aspects préférés mais non limitatifs des spectromètres de masse en tandem, représentés sur les figures 2 et 8, sont les suivants : - la source d'ions primaires (1) est une source d'ions multichargés et/ou mono chargés, - le dispositif de dissociation (2) des ions primaires en paires de fragments chargés est équipé d'un système ionisant les fragments neutres provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires. L'ionisation des fragments neutres provenant de la dissociation des ions primaires dans le dispositif de dissociation (2) permet d'appliquer le procédé selon l'invention non seulement aux ions primaires mono chargés se dissociant en paire de fragments neutre et mono chargé, mais également à d'autres canaux de dissociation d'ions primaires multichargés se dissociant en paires de fragments neutre et chargé. Dans les deux cas, chaque paire de fragments neutre et chargé devient une paire de fragments chargés après l'ionisation du fragment neutre dans le dispositif de dissociation (2). Les canaux de dissociation des ions primaires multichargés concernés, si l'on note M et Q respectivement la masse et la charge électrique de l'ion primaire parent et mi et qi la masse et la charge de chaque fragment dissocié i (avec i = 1, 2) avec mi + m2 = M, sont les suivants : M(Q)--> mi(g1= Q+e) + m2(q2 = 0) û* mi(g1= Q+e) + m2(q2 = e), et M(Q)û* mi(qi= Q) + m2(q2 = 0) û* mi(qi= Q) + m2(q2 = e). Dans le cas de la dissociation par la technique par capture d'électrons ECD acronyme de Electron Capture Dissociation , le système d' ionisation des fragments neutres dissociés dans le dispositif de dissociation (2) va permettre d'appliquer cette technique de dissociation aux ions primaires mono chargés, car la paire de fragments neutres qui est alors produit pourra être ionisée dans le dispositif de dissociation (2) par ce système. Des aspects préférés mais non limitatifs des spectromètres de masse en 5 tandem, représentés sur les figures 2 et 8, sont les suivants : - le dispositif de dissociation (2) produisant les paires de fragments chargés dissociés est une trappe à ions, contenant du gaz dissociant à basse énergie cinétique les ions primaires par collisions multiples avec les molécules du gaz, - la trappe à ions (2) est équipée d'un système ionisant les fragments neutres 10 provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires dans la trappe à ions (2). - La trappe à ions formant le dispositif de dissociation (2), pour des ions primaires, ou des fragments chargés dissociés, de même rapport masse sur charge préalablement sélectionnés avec le mode sélection de masse de la trappe à ions, 15 produit des paires de fragments chargés, en réalisant deux étapes successives de dissociations par collision avec les molécules du gaz et d'ionisations de fragments neutres, sans sélection de masse primaires des fragments chargés dissociés produits à chacune des deux étapes. 20 L'utilisation de la trappe à ions (5) pour éliminer, par sélection multiple des pics de masse primaires, le bruit chimique entre les pics de masse de masse primaires dans le spectre de dissociation produit sans sélection de masse primaire, permet également d'éliminer si nécessaire les ions primaires, et donc les pics de dissociation correspondants dans le spectre de dissociation produit par le procédé selon 25 l'invention, des pics de masse primaires des molécules identifiés par le spectre de masse primaire. Des aspects préférés mais non limitatifs des spectromètres de masse en tandem, représentés sur les figures 2 et 8, sont les suivants : 33 - le dispositif de dissociation (2) des ions primaires en paires de fragments chargés à basse énergie cinétique est un guide d'onde multipolaire contenant du gaz dissociant les ions primaires par collisions multiples avec les molécules du gaz, - le guide d'onde multipolaire est équipé d'un système ionisant les fragments neutres 5 provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires dans le guide d'onde multipolaire (2). Composants et fonctionnement de spectromètres selon l'invention 10 On va maintenant décrire plus en détail et à titre d'exemple seulement les composants et le fonctionnement d'un spectromètre de masse en tandem mettant en oeuvre le procédé de spectrométrie selon l'invention. La source d'ions (1) peut être continue ou pulsée. Elle peut être l'une des sources d'ions suivantes ou tout autre type de source d'ions multichargés et/ou mono 15 chargés: une source d'ions multichargés à électronébulisation ESI (acronyme de "Electro-Spray Ionisation"), une source d'ions à laser pulsée MALDI (acronyme de "Matrix Assisted Laser Desorption Ionisation"), une source d'ions à ionisation chimique à pression atmosphérique APCI (acronyme de "Atmospheric Pressure Chemical Ionisation"), une source d'ions à photo ionisation à pression atmosphérique 20 APPI (acronyme de " Atmospheric Pressure Photo Ionisation"), une source d'ions à désorption et ionisation par laser LDI (acronyme de " Laser Desorption Ionisation"), une source d'ions à plasma à couplage inductif ICP (acronyme de " Inductively Coupled Plasma"), une source d'ions à impact électronique EI (acronyme de "Electron Impact"), une source d'ions à ionisation chimique CI (acronyme de 25 "Chemical Ionisation"), une source d'ions à ionisation par champ FI (acronyme de "Field Ionisation"), une source d'ions par bombardement d'une cible avec un faisceau d'atomes neutres FAB (acronyme de " Fast Atom bombardment"), une source d'ions par bombardement d'une cible avec un faisceau d'ions LSIMS (acronyme de "Liquid Secondary Ion Mass spectrometry"), une source d'ions à 30 ionisation à pression atmosphérique API (acronyme de " Atmospheric Pressure Ionisation"), une source d'ions à désorption par champ FI (acronyme de "Field Desorption"), et une source d'ions à désorption et ionisation sur silicium DIOS (acronyme de "Desorption Ionisation On Silicium"). Le système de dissociation (2) peut être un guide d'onde multipolaire contenant du gaz permettant la dissociation par collisions induites CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") par chocs multiples à basse énergie cinétique avec un gaz, une trappe à ions permettant la dissociation par collisions induites CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") ou par capture d'électrons ECD (acronyme de "Electron Capture Dissociation"), un spectromètre de masse à transformée de Fourier permettant la dissociation par collisions induites CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") ou par capture d'électrons ECD (acronyme de "Electron Capture Dissociation"), ou encore tout dispositif de fragmentation des ions primaires permettant de produire des paires de fragments chargés. Le système de dissociation (2) peut être équipé d'un dispositif permettant d'ioniser les fragments neutres produits par la dissociation des ions primaires en paires de fragments neutres et chargés. Le dispositif permettant d'ioniser les fragments neutres produits par la dissociation des ions primaires en paires de fragments neutres et chargés dans le système de dissociation (2) peut être : un dispositif d'ionisation à impact électronique, une dispositif à photo ionisation par laser, ou tout autre type de dispositif d'ionisation permettant d'ioniser les fragments neutres dans le système de dissociation (2). La trappe à ions (5) utilisée pour injecter les ions primaires des pics de masse primaires vers le dispositif de dissociation (2), et éliminer les ions du bruit chimique émis par la source d'ions (1), peut être : une trappe à ions 3D à géométrie hyperbolique, une trappe à ions 2D linéaire à géométrie cylindrique, ou tout autre type de trappe à ions. Le spectromètre de masse (3) utilisé pour produire le spectre de masse primaire et le spectre de dissociation sans sélection de masse primaire peut être : un spectromètre de masse à temps de vol, un spectromètre de masse à secteur 35 magnétique, un spectromètre de masse quadripolaire, une trappe à ions, un spectromètre de masse à transformée de Fourier, ou tout autre type de spectromètre de masse. L'espace de temps de vol du spectromètre de masse à temps de vol (3) entre la pulsation du paquet d'ions et le détecteur d'ions (4), peut être linéaire, ou équipé d'un réflectron. Le réflectron utilisé peut être : à une étage, à deux étage, à champ courbé CFR (acronyme de "Curved Field Reflectron"), quadratique, ou tout autre type de réflectron. io Les ions produits par la source d'ions (1) peuvent être stockés pour produire la pulsation du paquet d'ions dans une trappe à ions, ou par tout autre système de stockage d'ions. La pulsation du paquet d'ions peut être située dans la source d'ions (1), entre la source d'ions (1) et le dispositif de dissociation (2), ou entre le dispositif de 15 dissociation (2) et le détecteur d'ions (4). La pulsation du paquet d'ions pour une source d'ions continue peut être réalisée : par balayage du faisceau d'ions continu à travers une fente, par un champ électrique variable appliqué entre deux plaques de déflexion, par la technique connue d'injection orthogonale en appliquant un champ électrique variable entre deux 20 électrodes dans la direction perpendiculaire au faisceau d'ions, ou par tout autre dispositif de pulsation d'un faisceau d'ions continue. La trappe à ions (3) peut être : une trappe à ions 3D à géométrie hyperbolique, une trappe à ions 2D linéaire à géométrie cylindrique, ou tout autre type de trappe à ions. 25 On va maintenant décrire quatre modes de réalisation, non limitatifs, de spectromètres de masse, basés sur l'utilisation des composants illustrés à la figure 2 et àla figure 8. 30 Premier mode de réalisation d'un spectromètre 36 Le premier mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem selon l'invention est illustré sur la figure 2. Il comporte successivement, suivant le sens de déplacement général des ions primaires, une source d'ions (1) multichargés à électronébulisation ESI (acronyme de "Electro-Spray Ionisation"), un dispositif de dissociation (2) constitué d'un guide d'onde multipolaire (q) contenant du gaz produisant, par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique la dissociation les ions primaires, un spectromètre de masse (3) quadripolaire (Q), et un détecteur d'ions (4). Ce mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem est connu de l'homme de métier qui utilise des spectromètres de masse en tandem avec sélection de masse du type triple quadripolaire Qi-q-Q2. Le premier mode de réalisation est identique à ces appareils avec l'élimination du premier quadripolaire Q1 qui est utilisé, par l'homme du métier, en mode MS-MS pour la sélection de masse primaire dans les quadripolaires triples existants. On produit d'abord le spectre de masse primaire avec le quadripolaire Q, sans dissociation dans le guide d'onde multipolaire q. Puis, on produit le spectre de masse de dissociation sans sélection de masse primaire également avec le quadripolaire Q, après la dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés dans le guide d'onde multipolaire par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique. On identifie les paires de pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation correspondant à chaque pic de masse primaire avec le procédé selon l'invention. On produit finalement chaque spectre de dissociation avec les paires de pics de masse de dissociation identifiées. Dans une variante du premier mode de réalisation qui vient d'être présenté, la source d'ions (1) peut être précédée d'un dispositif de séparation des molécules par chromatographie liquide LC acronyme de Liquid Chromatography . Deuxième mode de réalisation d'un spectromètre30 37 Le deuxième mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem selon l'invention est illustré sur la figure 2. Il comporte successivement, suivant le sens de déplacement général des ions primaires, une source d'ions (1) multichargés à électronébulisation ESI acronyme de Electro-Spray Ionisation , une trappe à ions linéaire 2D à géométrie cylindrique (2) (3), et un détecteur d'ions (4). Dans ce mode de réalisation la trappe à ions est utilisée à la fois comme dispositif de dissociation (2) et comme spectromètre de masse (3). Ce mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem est connu de l'homme du métier qui utilise des spectromètres de masse identiques pour produire des spectres de masse de dissociation avec sélection de masse primaire. On produit d'abord le spectre de masse primaire avec la trappe ions (2) (3) après le stockage des ions primaires émis par la source d'ions (1), sans dissociation. Puis, on produit avec la trappe à ions le spectre de masse de dissociation sans sélection de masse primaire, après la dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique avec les molécules d'un gaz neutre dans le volume de la trappe. On identifie ensuite les paires de pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation correspondant à chaque pic de masse primaire avec le procédé selon l'invention. On produit finalement chaque spectre de dissociation avec les paires de pics de masse de dissociation identifiés. Dans une variante du deuxième mode de réalisation qui vient d'être présenté, la source d'ions (1) peut être précédée d'un dispositif de séparation des molécules par 25 chromatographie liquide LC acronyme de Liquid Chromatography . Dans une autre variante du deuxième mode de réalisation qui vient d'être présenté, la trappe à ions 2D linéaire est remplacée par une trappe à ions 3D à géométrie hyperbolique. 30 38 Dans une autre variante du deuxième mode de réalisation qui vient d'être présenté, la trappe à ions (2) (3) est équipée d'un dispositif permettant d'ioniser les fragments neutres produits par la dissociation des ions dans la trappe. Ce dispositif peut être un système d'ionisation à impact électronique ou un système de photo ionisation par laser pulsé ou continu. Ce dispositif va permettre d'utiliser le procédé selon l'invention en mode MS'. Après avoir réalisé le spectre de dissociation (MS-MS = MS2) sans sélection de masse primaire avec la dissociation des ions primaires par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique, et l'ionisation des fragments neutres dissociés, on peut produire un deuxième spectre de dissociation (MS3) des fragments chargés dissociés. On commence par stocker les ions primaires émis par la source d'ions (1) dans la trappe à ions (2) (3), puis on sélectionne les ions primaires correspondant à un seul pic de masse primaire, en éliminant les autres ions primaires selon le mode connu de l'homme du métier de sélection de masse primaire de la trappe à ions (2) (3) utilisée. On dissocie dans une première étape les ions primaires sélectionnés par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique et on ionise les fragments neutres dissociés, puis on dissocie à nouveau dans une deuxième étape sans sélection de masse primaires les fragments chargés dissociés dans la première étape, par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique et on ionise les fragments neutres dissociés. On produit finalement le spectre de dissociation (MS3) des fragments chargés dissociés dans la deuxième étape sans sélection de masse primaire. Puis on identifie les paires de pics de masse de dissociation correspondant à chaque spectre de dissociation (MS3) de chaque pic de masse de dissociation du pic de masse primaire sélectionné. On produit finalement chaque spectre de masse de dissociation (MS3) avec les paires de pics de dissociation identifiés. On peut répéter les étapes précédentes pour produire les spectres de masse de dissociation (MS ) sans sélection de masse primaire de tout pic de masse de dissociation (MSn-2) sélectionné. 39 Dans une autre variante du deuxième mode de réalisation qui vient d'être présenté, illustrée par la figure 8, la trappe à ions (2) (3) est précédé d'une deuxième trappe à ions (5) pour injecter uniquement les ions primaires des pics de masse primaires dans la deuxième trappe à ions (2) (3), et éliminer le bruit de fond chimique de la source d'ions (1) du spectre de dissociation (MS-MS) produit sans sélection de masse primaire par la deuxième trappe à ions (2) (3). Troisième mode de réalisation d'un spectromètre Le troisième mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem selon l'invention est illustré sur la figure 2. Il comporte successivement, suivant le sens de déplacement général des ions primaires, une source d'ions (1) multichargés à électronébulisation ESI acronyme de Electro-Spray Ionisation , une trappe à ions linéaire 3D à géométrie hyperbolique (2), un spectromètre de masse à temps de vol avec réflectron (3), et un détecteur d'ions (4). Dans ce mode de réalisation la trappe à ions (2) est utilisée également pour pulser chaque paquet d'ions pour produire le temps de vol. Ce mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem est connu de l'homme du métier qui utilise des spectromètres de masse identiques pour produire des spectres de masse de dissociation avec sélection de masse primaire. On produit d'abord le spectre de masse primaire avec le spectromètre de masse à temps de vol après le stockage des ions primaires émis par la source d'ions (1), sans dissociation, et la pulsation du paquet d'ions vers l'espace de temps de vol. Puis, dans une deuxième acquisition, on dissocie sans sélection de masse primaire par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique avec les molécules d'un gaz neutre dans le volume de la trappe à ions (2), en paires de fragments chargés les ions primaires stockés dans la trappe. On produit ensuite le spectre de masse de dissociation à temps de vol sans sélection de masse primaire, en pulsant le paquet d'ions contenant les fragments chargés dissociés. On identifie ensuite les paires de pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation correspondant à chaque pic de masse primaire avec le procédé selon 40 l'invention. On produit finalement chaque spectre de dissociation avec les paires de pics de masse de dissociation identifiés. Dans une variante du troisième mode de réalisation qui vient d'être présenté, la 5 source d'ions (1) peut être précédée d'un dispositif de séparation des molécules par chromatographie liquide LC acronyme de Liquid Chromatography . Dans une autre variante du troisième mode de réalisation qui vient d'être présenté, la trappe à ions (2) est équipée d'un dispositif permettant d'ioniser les 10 fragments neutres produits par la dissociation des ions dans la trappe. Ce dispositif peut être un système d'ionisation à impact électronique ou un système de photo ionisation par laser pulsé ou continu. Ce dispositif va permettre d'utiliser le procédé selon l'invention en mode MS'. Après avoir réalisé le spectre de dissociation (MS-MS = MSZ) sans sélection de 15 masse primaire avec la dissociation des ions primaires par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique et l'ionisation des fragments neutres dissociés, on peut produire un deuxième spectre de dissociation (MS3) des fragments chargés dissociés. On commence par stocker les ions primaires émis par la source d'ions (1) dans la trappe à ions (2) (3), puis on sélectionne les ions 20 primaires correspondant à un seul pic de masse primaire, en éliminant les autres ions primaires selon le mode connu de l'homme du métier de sélection de masse primaire de la trappe à ions (2) (3) utilisée. On dissocie dans une première étape les ions primaires sélectionnés par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique et on ionise les fragments neutres dissociés, puis on dissocie 25 à nouveau dans une deuxième étape sans sélection de masse primaires les fragments chargés dissociés dans la première étape, par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique et on ionise les fragments neutres dissociés. On produit finalement le spectre de dissociation des fragments chargés dissociés à la deuxième étape sans sélection de masse primaire. Puis on identifie les paires de pics 30 de masse de dissociation correspondant à chaque spectre de dissociation (MS3) de chaque pic de masse de dissociation du pic de masse primaire sélectionné. On produit finalement chaque spectre de masse de dissociation (MS3) avec les paires de pics de dissociation identifiés. On peut répéter les étapes précédentes pour produire les spectres de masse de dissociation (MSn) sans sélection de masse primaire de tout pic de masse de 5 dissociation (MSi-2) sélectionné. Dans une autre variante du troisième mode de réalisation qui vient d'être présenté, illustrée par la figure 8, la trappe à ions (2) est précédé d'une deuxième trappe à ions (5) pour injecter uniquement les ions primaires des pics de masse to primaires dans la deuxième trappe à ions (2), et éliminer le bruit de fond chimique de la source d'ions (1) du spectre de dissociation produit sans sélection de masse primaire par la deuxième trappe à ions (2). Dans une autre variante du troisième mode de réalisation qui vient d'être 15 présenté, la source d'ions multichargés à électronébulisation est remplacée par une source d'ions mono chargée MALDI (acronyme de "Matrix Assisted Laser Desorption Ionisation"). Quatrième mode de réalisation d'un spectromètre 20 Le quatrième mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem selon l'invention est illustré sur la figure 2. Il comporte successivement, suivant le sens de déplacement général des ions primaires, une source d'ions (1) multichargés à électronébulisation ESI acronyme 25 de Electro-Spray Ionisation , un spectromètre de masse à transformée de Fourier FTICR (2) (3) acronyme de Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance , et un détecteur (4) mesurant la fréquence cyclotron des ions. Dans ce mode de réalisation lespectromètre de masse à transformée de Fourier est utilisé à la fois comme dispositif de dissociation (2) et comme spectromètre de masse (3). 42 Ce mode de réalisation de spectromètre de masse en tandem est connu de l'homme du métier qui utilise des spectromètres de masse identiques pour produire des spectres de masse de dissociation avec sélection de masse primaire. On produit d'abord le spectre de masse primaire avec le spectromètre de masse à transformée de Fourier après le stockage des ions primaires émis par la source d'ions (1), sans dissociation. Puis, dans une deuxième acquisition, on dissocie sans sélection de masse primaire par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique avec les molécules d'un gaz neutre dans le volume du spectromètre de masse à transformée de Fourier (2) (3), en paires de fragments to chargés les ions primaires stockés. On produit ensuite le spectre de masse de dissociation par transformée de Fourier sans sélection de masse primaire. On identifie ensuite les paires de pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation correspondant à chaque pic de masse primaire avec le procédé selon l'invention. On produit finalement chaque spectre de dissociation avec les paires de 15 pics de masse de dissociation identifiés. Dans une variante du quatrième mode de réalisation qui vient d'être présenté, la source d'ions (1) peut être précédée d'un dispositif de séparation des molécules par chromatographie liquide LC acronyme de Liquid Chromatography . 20 Dans une autre variante du quatrième mode de réalisation qui vient d'être présenté, le spectromètre de masse à transformée de Fourier (2) (3) est équipée d'un dispositif permettant d'ioniser les fragments neutres produits par la dissociation des ions dans la trappe. Ce dispositif peut être un système d'ionisation à impact 25 électronique ou un système de photo ionisation par laser pulsé ou continu. Ce dispositif va permettre d'utiliser le procédé selon l'invention en mode MS . Après avoir réalisé le spectre de dissociation (MS-MS = MS2) sans sélection de masse primaire avec la dissociation des ions primaires par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique et l'ionisation des 30 fragments neutres dissociés, on peut produire un deuxième spectre de dissociation (MS3) des fragments chargés dissociés. On commence par stocker les ions primaires émis par la source d'ions (1) dans spectromètre de masse à transformée de Fourier (2) (3), puis on sélectionne les ions primaires correspondant à un seul pic de masse primaire, en éliminant les autres ions primaires selon le mode connu de l'homme du métier de sélection de masse primaire du spectromètre de masse à transformée de Fourier (2) (3) utilisée. On dissocie dans une première étape les ions primaires sélectionnés par CID (acronyme de "Collision Induced Dissociation") à basse énergie cinétique et on ionise les fragments neutres dissociés, puis on dissocie à nouveau dans une deuxième étape sans sélection de masse primaires les fragments chargés dissociés dans la première étape, par CID (acronyme de "Collision Induced to Dissociation") à basse énergie cinétique et on ionise les fragments neutres dissociés. On produit finalement le spectre de dissociation des fragments chargés dissociés à deuxième étape sans sélection de masse primaire. Puis on identifie les paires de pics de masse de dissociation correspondant à chaque spectre de dissociation (MS3) de chaque pic de masse de dissociation du pic de masse primaire sélectionné. On 15 produit finalement chaque spectre de masse de dissociation (MS3) avec les paires de pics de dissociation identifiés. On peut répéter les étapes précédentes pour produire les spectres de masse de dissociation (MSn) sans sélection de masse primaire de tout pic de masse de dissociation (MSn-2) sélectionné. 20 Dans une autre variante du quatrième mode de réalisation qui vient d'être présenté, illustrée par la figure 8, le spectromètre de masse à transformée de Fourier (2) (3) est précédé d'une trappe à ions 2D linéaire (5) pour injecter uniquement les ions primaires des pics de masse primaires dans le spectromètre de masse à 25 transformée de Fourier (2)(3), et éliminer le bruit de fond chimique de la source d'ions (1) du spectre de dissociation produit sans sélection de masse primaire par le spectromètre de masse à transformée de Fourier (2) (3). Dans une autre variante du quatrième mode de réalisation qui vient d'être 30 présenté, la trappe à ions 2D linéaire (2) qui précède le spectromètre de masse à transformée de Fourier (3) est utilisé comme dispositif de dissociation (2) pour 44 produire les fragments chargés dissociés avant leur injection dans le spectromètre de masse à transformée de Fourier (3), qui n'est utilisé que comme spectromètre de masse (3). Dans une autre variante du quatrième mode de réalisation qui vient d'être présenté, la source d'ions multichargés à électronébulisation est remplacée par une source d'ions mono chargée MALDI (acronyme de "Matrix Assisted Laser Desorption Ionisation"). to Comme on l'aura compris, la présente invention n'est nullement limitée à la forme de réalisation décrite ci-dessus et représentée sur les dessins. En particulier, les variantes de chacun des modes de réalisation peuvent être utilisées une par une ou combinées entre elles. REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES [1] J.D. Pinston et al, Rev. Sci.Instrum., 57 (4), (1983), p.583. C. G. Enke et al, US Patent 4,472, 631 (1984). [2] S. Della-Negra and Y. Leybec, Anal. Chem., 57 (11), (1985), p. 2035. K.G. Standing et al, Anal. Instrumen., 16, (1987), p; 173. R.J. Conzemius US patent 4,894,536 (1990). [3] Alderdice et al, US patent 5,206,508 (1993). [4] R.H. Bateman, J. M. Brown, D. J. Kenny, US patent 2005/0098721 Al (2005). [5] C. G. Enke, patent PCT/US2004/008424. [6] D. Scigocki, brevet FR n 0602920 (2006) [7] D. Scigocki, brevet FR n 0605985(2006) [8] R. D. Smith et al, US patent 5,073,713 (1991). REVENDICATIONS 1. Procédé de spectrométrie de masse en tandem, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : (a) fournir une source d'ions primaires à analyser, (b) engendrer un spectre de masse primaire des ions primaires sans dissociation, ce spectre contenant des pics d'occurrences d'ions primaires ; (c) à partir de ce spectre, déterminer pour chacun des pics de masse primaire qu'il contient la valeur Finax(M/Q) de la fonction du rapport masse sur charge des io ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, et la charge électrique Q des ions primaires, (d) à partir de ces données, déterminer des lois de corrélation sous la forme d'équations linéaires de chacun des pics de masse primaires, donnant toutes les paires possibles {Finax(mk/gk'),Finax(mi/qr)} de valeurs de la fonction du rapport 15 masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant à des maxima d'occurrences de paires possibles de pics de masse de dissociation produits par des paires possibles de fragments chargés de rapports masse sur charge {(mk/gk•),(mi/qi^)} susceptibles de provenir de la dissociation d'ions primaires identiques ayant le même rapport masse sur charge (M/Q), 20 (e) dissocier des ions primaires sans sélection de masse primaire, à basse énergie cinétique, de sorte à obtenir pour chacun d'eux, une paire de fragments chargés, (f) engendrer un spectre de dissociation, sans sélection de masse primaire, contenant les pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation 25 correspondant à chaque pic de masse primaire, (g) à partir de ce spectre, déterminer pour chacun des pics de masse de dissociation qu'il contient chaque valeur Fiäax (m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, 30 (h) engendrer à partir des valeurs mesurées de la fonction F.. (m/q) du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse 47 utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de dissociation toutes les paires potentielles {Frrax(mr/gr'),Finax(ms/gs')} de ces valeurs, (i) identifier, parmi lesdites paires potentielles (Finax(mr/gr.),Finax(ms/qs')}, les paires réelles {Finax(mt/gt),Finax(mä/qu)) qui satisfont un critère de proximité par rapport aux lois de corrélation, et identifier ainsi les paires de pics de masse de dissociation correspondant au même pic du spectre de masse primaire, (j) produire chaque spectre de dissociation correspondant à chacun des pics de masse primaires, avec les paires de pics de masse de dissociation correspondant aux paires réelles identifiés {Finax(mt/gt),Finax(mä/qä)}. io 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les paires de fragments chargés dissociés, sont issues de la dissociation à basse énergie cinétique d'ions primaires multichargés, et sont également d'abord issues de la dissociation à basse énergie cinétique d'ions primaires multichargés en paires de fragments neutre et 15 chargé, puis de l'ionisation des fragments neutres. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les paires de fragments mono chargés dissociés sont d'abord issues de la dissociation à basse énergie cinétique d'ions primaires mono chargés en paires de fragments neutre et mono 20 chargé, puis de l'ionisation des fragments neutres. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que l'étape (i) d'identification des paires réelles comprend les sous-étapes suivantes : (il) générer un spectre de masse bidimensionnel ayant deux premières 25 dimensions représentant chacune les valeurs mesurées Finax(m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maximum d'occurrences de chacun des pics de dissociation, la position Prs de chaque occurrence de détection dans le plan défini par les deux dimensions correspondant à une paire potentielle {Finax(mr/gr'),Finax(ms/qs')} 30 de ces valeurs, 48 (i2) positionner dans ce même plan des droites caractéristiques déterminées par les équations linéaires de cesdites lois de corrélation, (i3) positionner dans ce même plan les occurrences Prs correspondant à chaque paire potentielle de valeurs, et (i4) identifier, parmi les paires potentielles de valeurs, celles ayant une position d'occurrence Prs, dans ledit plan qui se trouve à une distance d'une des droites caractéristiques inférieure à un seuil donné, pour ainsi identifier les paires réelles de valeurs correspondant à des paires réelles de pics de masse de dissociation produits par des paires de fragments chargés issues de la dissociation d'ions t o primaires identiques de même rapport masse sur charge. 5. Spectromètre de masse en tandem comportant suivant le sens de déplacement général des ions: - une source d'ions (1), 15 - des moyens de fourniture d'un spectre de masse primaire de ces ions primaires issus de ces molécules ionisées, de sorte à pouvoir identifier la valeur Fmax(MIQ) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences et la charge électrique primaire Q, correspondant à chaque pic de masse primaire de ces ions, 20 - un dispositif de dissociation (2) des ions primaires de sorte à obtenir, pour chacun d'eux, une paire de fragments chargés, - un spectromètre de masse (3), produisant le spectre de masse primaire des ions primaires, et le spectre de dissociation sans sélection de masse primaire des fragments chargés, 25 - un détecteur d'ions (4), - des moyens d'identification, dans l'ensemble des pics de masse de dissociation, des paires de pics de masse de dissociation correspondant à des paires de fragments chargés issue de la dissociation d'ion primaires parents de même rapport masse sur charge, ces moyens d'identification étant agencés pour que l'identification se base 30 sur les valeurs mesurées Finax(m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux 49 maxima d'occurrences des pics de masse de dissociation, et de lois prédéterminées, dites de corrélation, donnant les paires possibles de ces valeurs. 6. Spectromètre de masse en tandem comportant suivant le sens de déplacement général des ions: - une source d'ions (1), - des moyens de fourniture d'un spectre de masse primaire de ces ions primaires issus de ces molécules ionisées, de sorte à pouvoir identifier la valeur Finax(M Q) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences et la charge électrique primaire Q, correspondant à chaque pic de masse primaire de ces ions, - une trappe à ions (5) pour stocker les ions émis par la source d'ions (1) avant leur injection dans le dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), -des moyens d'injecter dans le dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), uniquement les ions primaires provenant des pics de masse primaires des molécules à identifier, - un dispositif de dissociation des ions primaires en paires de fragments chargés (2), -un spectromètre de masse (3), produisant le spectre de masse primaire des ions primaires, et le spectre de dissociation sans sélection de masse primaire des fragments chargés, - un détecteur d'ions (4). - des moyens d'identification, dans l'ensemble des pics de masse de dissociation, des paires de pics de masse de dissociation correspondant à des paires de fragments chargés issue de la dissociation d'ion primaires parents de même rapport masse sur charge, ces moyens d'identification étant agencés pour que l'identification se base sur les valeurs mesurées F,,,ax(m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant aux maxima d'occurrences des pics de masse de dissociation, et de lois prédéterminées, dites de corrélation, donnant les paires possibles de ces valeurs. 7. Spectromètre de masse en tandem, d'après les revendications 5 et 6, caractérisé en ce que : - la source d'ions primaires (1) est une source d'ions multichargés et/ou mono chargés, - le dispositif de dissociation (2) des ions primaires en paires de fragments chargés est équipé d'un système ionisant les fragments neutres provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires. 8. Spectromètre de masse en tandem, d'après les revendications 5 et 6, io caractérisé en ce que : - le dispositif de dissociation (2) produisant les paires de fragments chargés dissociés est une trappe à ions, contenant du gaz dissociant à basse énergie cinétique les ions primaires par collisions multiples avec les molécules du gaz, - la trappe à ions (2) est équipée d'un système ionisant les fragments neutres 15 provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires dans la trappe à ions (2). - La trappe à ions formant le dispositif de dissociation (2), pour des ions primaires, ou des fragments chargés dissociés, de même rapport masse sur charge préalablement sélectionnés avec le mode sélection de masse de la trappe à ions, 20 produit des paires de fragments chargés, en réalisant deux étapes successives de dissociations par collision avec les molécules du gaz et d'ionisations de fragments neutres, sans sélection de masse primaires des fragments chargés dissociés produits à chacune des deux étapes. 25 9. Spectromètre de masse en tandem, d'après les revendications 5 et 6, caractérisé en ce que : - le dispositif de dissociation (2) des ions primaires en paires de fragments chargés à basse énergie cinétique est un guide d'onde multipolaire contenant du gaz dissociant 30 les ions primaires par collisions multiples avec les molécules du gaz,- le guide d'onde multipolaire est équipé d'un système ionisant les fragments neutres provenant de la dissociation à basse énergie cinétique des ions primaires dans le guide d'onde multipolaire (2). 10. Programme d'ordinateur apte à être mis en oeuvre dans un système de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem et comprenant un jeu d'instructions apte à effectuer les étapes suivantes : (a) commander le système pour qu'il engendre à partir d'une source d'ions primaires à analyser, un spectre de masse primaire de ces ions primaires, sans dissociation, ce spectre contenant des pics d'occurrences d'ions primaires, (b) effectuer une acquisition des données de ce spectre, (c) à partir desdites données, déterminer pour chacun des pics de masse primaire qu'il contient la valeur FinaX(M/Q) de la fonction du rapport masse sur charge des ions primaires du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, et la charge électrique Q des ions primaires, (d) à partir de ces données de pics, déterminer des lois de corrélation donnant toutes les paires possibles de valeurs de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant à des maxima d'occurrences de paires possibles de pics de masse de dissociation produits par des paires de fragments chargés provenant des différents ions primaires, (e) commander le système pour qu'il engendre la dissociation des ions primaires de sorte à obtenir pour chacun d'eux, une paire de fragment chargé, (f) engendrer, sans sélection de masse primaire, un spectre de dissociation de ces fragments chargés dissociés contenant les pics de masse de dissociation de chacun des spectres de dissociation correspondant à chaque pic de masse primaire, (g) à partir de ce spectre, déterminer pour chacun des pics de masse de dissociation qu'il contient chaque valeur Finax (m/q) de la fonction du rapport masse sur charge des fragments chargés dissociés du spectromètre de masse utilisé correspondant au maximum d'occurrences de ce pic, (h) engendrer à partir des valeurs mesurées toutes les paires potentielles {Fm x(m,/gr'),Finax(ms/qs^)} de ces valeurs, 52 (i) identifier, parmi lesdites paires potentielles {Finax(mr/gr'),Finax(ms/gs')}, les paires réelles {Finax(mt/gt),Finax(mu/qu)} qui satisfont un critère de proximité par rapport aux lois de corrélation, et identifier ainsi les paires de pics de masse de dissociation correspondant au même pic du spectre de masse primaire, (j) produire chaque spectre de dissociation correspondant à chacun des pics de masse primaires, avec les paires de pics de masse de dissociation correspondant aux paires réelles identifiés {Finax(mt/gt),Finax(mu/qu)}•