FR 2911251 A1 20080718 FR 0752660 A 20070112 34FDEP.doc 2911251 La présente invention concerne la traçabilité des aliments pour animaux, et en particulier les procédés et produits permettant d'assurer cette traçabilité. Dans l'utilisation des aliments pour animaux, il se produit parfois des incidents ou des accidents, tels que des maladies des animaux, que l'on pourrait imputer à la qualité des aliments administrés aux animaux. Dans la recherche des causes et des responsabilités de ces incidents ou accidents, on a besoin de connaître la composition de l'aliment, et sa provenance, c'est-à-dire l'identité du ou des fabricants de l'aliment. II y a donc un besoin de tracer les aliments, pour prouver que tel aliment éventuellement responsable d'un incident ou d'un accident a été produit par tel ou tel fabricant. On a déjà imaginé d'incorporer à l'aliment des éléments de traçage, en faible quantité, dont on peut retrouver la présence dans l'aliment fini distribué aux 15 animaux. Par exemple, le document US 3,807,981 propose d'incorporer à l'aliment un élément de traçage à base de phosphate métallique. Le document GB 1 418 332 propose d'utiliser un matériau de traçage ferromagnétique finement divisé que l'on peut ensuite séparer par des moyens magnétiques. Le document 20 US 4,029,820 enseigne d'utiliser un matériau de traçage sous forme de fer réduit finement divisé et ayant absorbé du sélénite de sodium ou du sélénate de sodium. Le document US 6,200,610 propose d'incorporer à l'aliment pour animal des particules codées ayant approximativement la même taille que les particules de l'aliment, les particules codées pouvant comporter des symboles tels que des 25 lettres ou des nombres. Ces produits de traçage connus ne donnent pas satisfaction dans une utilisation courante des aliments pour animaux, soit parce qu'ils mettent en oeuvre des molécules additionnelles, neutres ou nuisibles, dont l'usage alimentaire est interdit par les normes actuelles, soit parce que leur fabrication est trop onéreuse. 30 Le problème proposé par la présente invention est de concevoir des moyens de traçage d'aliments pour animaux qui ne mettent en oeuvre aucune molécule interdite par les règlements en vigueur, et qui permettent le traçage de l'aliment sur une durée suffisante après sa fabrication. L'invention vise aussi à prévoir des moyens de traçage qui participent 35 aux propriétés naturelles de l'aliment, notamment son odeur, son goût, sa texture. 34PDI l'.doc 2 L'invention vise en outre à prévoir de tels moyens de traçage dont la mise en oeuvre soit économique et simple, et donne des résultats fiables pour le traçage des aliments pour animaux. L'idée qui est à la base de l'invention est d'utiliser, comme moyen de traçage d'un aliment, des arômes identifiables sur une durée suffisante pour être détectés pendant toute la durée d'utilisation des aliments et pour être distingués de façon univoque vis-à-vis des arômes éventuellement présents dans les autres aliments. Pour atteindre ces objets, ainsi que d'autres, l'invention propose, selon un premier aspect, un additif de traçage pour incorporation dans un aliment pour animal, contenant au moins trois molécules aromatiques de reconnaissance, de type "note de fond" et chimiquement stables dans l'aliment. On entend par "note de fond" une capacité de la molécule aromatique à persister dans le produit pendant une durée suffisante sans s'évaporer totalement dans l'atmosphère ambiante. Une telle molécule, si elle est chimiquement stable dans l'aliment, peut alors être reconnue à l'issue de la durée suffisante. On la désigne, dans la présente description et dans les revendications, par l'expression "molécule aromatique de reconnaissance". Un tel additif est identifiable après une durée suffisante, de plus de trois mois, même lorsqu'il est présent en faible proportion dans l'aliment. En effet, les molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond" ne disparaissent pas, ni par évaporation, ni par réaction chimique avec l'aliment. La présence d'au moins trois molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond" constitue un moyen de reconnaissance, une combinaison pouvant être distinguée de manière univoque vis-à-vis d'autres combinaisons possibles de molécules aromatiques dans les arômes des aliments. Selon un mode de réalisation avantageux, les molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond" ont, à la température ambiante, une tension de vapeur inférieure à 100 pm de mercure, de préférence comprise entre 0,1 et 100 pm de mercure. On facilite ainsi leur persistance dans l'aliment pendant une longue durée. De préférence, les molécules aromatiques de reconnaissance sont choisies parmi les molécules aisément détectables en faible proportion dans l'aliment. Selon un autre aspect, l'invention propose un aliment pour animaux contenant un additif de traçage tel que défini ci-dessus. 4 )34T i)EI'. doc En pratique, l'additif de traçage peut avantageusement être en quantité de 100 à 1 000 milligrammes par kilogramme d'aliment (100 à 1 000 mg/kg), pour une concentration de chaque molécule allant de 1 à 100 milligrammes par kilogramme d'aliment (1 à 100 mg/kg). Dans un aliment sous forme de granulés, l'additif de traçage peut par exemple être présent dans et/ou sur des granules d'aliment. Selon un autre aspect, l'invention propose un procédé de traçage d'aliments pour animaux, comprenant les étapes : - incorporer dans l'aliment un additif de traçage tel que défini ci-dessus, - après une durée limitée de stockage de l'aliment, extraire de l'aliment les molécules aromatiques de l'additif de traçage, - détecter et quantifier chaque molécule aromatique de reconnaissance par chromatographie, en recherchant les pics caractéristiques des molécules. L'incorporation de l'additif dans l'aliment peut par exemple être effectuée par atomisation de l'additif en solution liquide sur l'aliment granulé. Selon un autre aspect, l'invention propose d'utiliser un arôme comme produit de traçage dans un aliment pour animal. L'arôme comprend de préférence au moins trois molécules aromatiques de reconnaissance, de type "note de fond", chimiquement stables dans l'aliment. D'autres objets, caractéristiques et avantages de la présente invention ressortiront de la description suivante d'exemples avantageux de moyens de traçage pour aliments destinés aux animaux, faite en relation avec les figures jointes, parmi lesquelles : - la figure 1 illustre le chromatogramme d'un aliment neutre ; - la figure 2 illustre le chromatogramme d'un produit de traçage selon un mode de réalisation de l'invention, peu après sa production ; et - la figure 3 illustre le chromatogramme du produit de traçage de la figure 2 après incorporation dans l'aliment, après trois mois de stockage de l'aliment, et après extraction hors de l'aliment. Les arômes sont couramment utilisés en parfumerie ou dans l'industrie alimentaire, pour donner à une substance des propriétés olfactives et/ou gustatives appropriées. Les arômes se répartissent généralement en trois catégories essentielles que l'on appelle "note de tête", "note de coeur" et "note de fond". Cette répartition est basée sur un critère unique, à savoir la tension de vapeur. Ainsi, les molécules aromatiques de type "note de tête" présentent une tension de vapeur supérieure à 800 pm de mercure à la température ambiante. 341 DEP.doe 4 Les molécules aromatiques de type "note de coeur" présentent une tension de vapeur comprise entre 100 pm de mercure et 800 pm de mercure à température ambiante. Les molécules aromatiques de type "note de fond" présentent une 5 tension de vapeur inférieure ou égale à 100 pm de mercure à température ambiante. Selon l'invention, on définit un additif de traçage en préparant un arôme, ou mélange de molécules aromatiques, qui présente des propriétés aromatiques satisfaisantes, par exemple un goût de vanille, ou un goût de fruits, ou un goût 10 d'herbe, et qui simultanément contient au moins trois molécules aromatiques de reconnaissance, de type "note de fond" et chimiquement stables dans les aliments dans lesquels doit être incorporé l'additif de traçage. Les molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond" pourront être choisies par exemple parmi les molécules du tableau 1 ci-dessous 15 PRODUIT N FEMA pm Hg LAEVO-CARVONE 2249 95.0 TERPINYL ACETATE 3047 64.0 ANETHOLE 2096 60.0 GERANYL ACETATE 2509 58.0 trans-ANETHOLE 2086 58.0 ALCOOL PHENYLETHYLIQUE 2858 54.0 DL-MENTHOL 2665 54.0 ETHYL SALICYLATE 2458 54.0 CITRAL 2303 50.0 alpha-TERPINEOL 3045 48. 0 PARA-CYMENE 2356 47.0 THYMOL 3066 35.0 ALDEHYDE ANISIQUE 2670 32.0 CINNAMALDEHYDE 2286 30.0 ETHYL PHENYL ACETATE 2452 29.0 ALDEHYDE M.N.A 2749 28.0 GERANIOL 2507 21.0 beta- IONONE 2595 16.0 alpha-IONONE 2594 16. 0 ISOAMYL PHENYL ACETATE 2081 16.0 METHYL CINNAMATE 2698 15.0 34FDEP.doc EUGENOL 2467 14.0 METHYL ANTHRANILATE 2682 12.0 ETHYL ANTHRANILATE 2421 12.0 BENZYLIDENE ACETONE 2881 10.5 CETONE FRAMBOISE 2588 10.0 ETHYL LAURATE 2441 7.0 ISOAMYL SALICYLATE 2084 5.0 ETHYL CINNAMATE 2430 5.0 ALCOOL CINNAMIQUE 2294 4.0 HELIOTROPINE (PIPERONAL) 2911 4.0 gamma NONALACTONE 2781 4.0 MELILOTINE 2381 4.0 gamma DECALACTONE 2360 2.0 ALDEHYDE PECHE (C-14) 3091 1.0 ALDEHYDE FRAISE (C-16) 2444 1.0 ETHYL VANILLINE 2464 0.2 VANILLINE 3107 0.2 Tableau 1 Ce tableau contient, en première colonne, la désignation commune de la molécule, en seconde colonne son numéro de reconnaissance dans le répertoire 5 FEMA, et en troisième colonne sa tension de vapeur exprimée en micromètres de mercure à la température ambiante. On choisira, dans les molécules de ce tableau ou dans d'autres molécules de type "note de fond", celles qui sont stables dans les aliments où l'on veut incorporer l'additif de traçage. La stabilité pourra être vérifiée par des essais préalables, en incorporant la molécule dans l'aliment, puis en recherchant sa présence dans le temps. En cas de disparition de la molécule à l'issue d'une durée déterminée, on en déduira que la molécule n'est pas stable dans l'aliment et que son utilisation comme molécule aromatique de reconnaissance de l'additif de traçage n'est pas appropriée dans cet aliment. Exemple 1 On a préparé un additif de traçage à arôme vanille, contenant les molécules de "note de fond" et proportions suivantes : - alpha-ionone (1% environ) - beta-ionone 1% environ) 34FDEP.doc 6 -gamma-décalactone - Vanilline - Maltol - Aldéhyde pêche -gamma-nonalactone - Butyrate de benzyle (1.5% environ) (8.5% environ) (1% environ) (1.5% environ) (5% environ) (1% environ) Exemple 2 On a préparé un additif de traçage de type arôme fruits, contenant les 10 molécules de type "note de fond" et proportions suivantes : 15 - alpha-ionone -gamma-décalactone - Vanilline - Maltol - Cinnamaldéhyde - Cétone framboise - Butyrate de benzyle (1.5% environ) (2% environ) (8.5% environ) (1% environ) (2% environ) (1.5% environ) (1.5% environ) 20 Exemple 3 On a préparé un additif de traçage ayant un arôme herbe, contenant les molécules de type "note de fond" et proportions suivantes : - alpha-ionone (1% environ) 25 - gamma-décalactone (1% environ) -Vanilline (2% environ) - Eugénol (3% environ) - alpha-terpinéol (1 % environ) 30 On a vérifié la possibilité d'utiliser ces additifs comme éléments de traçage, en incorporant ces additifs dans un aliment granulé pour porcelets ne contenant pas d'arôme. Chaque composition aromatique de type vanille, fruits ou herbe a été pulvérisée sur l'aliment prégranulé selon une concentration de 200 milligrammes de composition aromatique par kilogramme d'aliment. 35 On a en parallèle déterminé des méthodes d'analyse permettant de vérifier la présence et la concentration en arôme dans l'aliment, et on a recherché 341,DEP.doc 7 la présence et la concentration des arômes dans l'aliment aussitôt après la production, puis trois mois après la production. Pour analyser la concentration en arôme dans l'aliment, il faut d'abord extraire les molécules aromatiques. Ceci peut se faire par de nombreuses méthodes, telles que l'entraînement à la vapeur, les techniques headspace (dont la SPME (micro-extraction en phase solide)), le soxhlet, l'extraction au solvant assisté par micro-ondes. Dans les exemples, on a utilisé l'extraction par solvant accéléré (ASE û appareil Dionex ASE 200) avec de l'acétone en utilisant une pression de 100 bars 10 et une température de 100 C, et en effectuant 3 cycles d'extraction avec un remplissage de la cellule à 35%. Pour chaque produit, une méthode d'analyse spécifique par GC/MS en mode SIM (pour selected ion monitoring û recherche spécifique d'ion) est mise au point afin de pouvoir séparer et quantifier chaque composant. 15 Néanmoins les conditions chromatographiques peuvent rester les mêmes pour tous les produits. On peut par exemple choisir les paramètres suivants : Colonne HP5, 30m x 250pm x 0.25pm. 20 Injecteur : Splitless, température 250 C. Détecteur MS mode SIM, température 300 C. Volume d'injection : 1 pl. Flux : hélium, 1 ml/min. Programme de température : 25 Température initiale : 80 C, 3 minutes. lère rampe : 5 C/min jusqu'à 140 C, 2 minutes à 140 C. 2ème rampe : 10 C/min jusqu'à 200 C, 2 minutes à 200 C. 3ème rampe : 50 C/min jusqu'à 300 C, 0 minute à 300 C. Temps total : 27 minutes. 30 A titre d'exemple, la figure 1 illustre le chromatogramme de l'aliment neutre dans lequel aucun arôme n'a été incorporé. La figure 2 illustre le chromatogramme de l'arôme vanille détecté dans l'aliment peu après sa production et son incorporation dans l'aliment. 35 La figure 3 illustre le chromatogramme de l'arôme vanille retrouvé dans l'aliment après trois mois de stockage de l'aliment. 34FDEP.doc 8 Le tableau 2 ci-après reproduit les résultats quantitatifs des analyses effectuées, exprimés en pourcentage de la quantité initiale de chaque molécule aromatique de l'arôme vanille incorporée dans l'aliment. beta - Benzyl but. gamma- Vanilline gamma- alpha- MOYENNE ionone nonalactone décalactone ionone Vanille û 0 mois 91 71 74.5 130 93 74.5 89 Vanille û 3 mois 70.5 0 74.5 93 85.5 55 63 Tableau 2 L'analyse quantitative montre que sur les 100% (200 mg/kg) d'arôme vanille on parvient à en retrouver 89% (180 mg/kg environ) juste après la production. La perte est probablement due à une petite évaporation lors de la pulvérisation. Après 3 mois, toutes les molécules sont retrouvées à l'exception du butyrate de benzyle qui a totalement disparu, probablement à cause de sa réactivité avec l'aliment. La perte en arôme est relativement limitée (à peine 15% si on exclut le butyrate de benzyle), ce qui permet de tracer aisément l'arôme dans l'aliment même 3 mois après la production. Toutes les molécules aromatiques de ce mélange, à l'exception du butyrate de benzyle, peuvent donc constituer des molécules aromatiques de reconnaissance, dont la détection et le dosage permettent de détecter de manière univoque l'arôme, et donc de tracer un aliment. Le pourcentage de 130% de vanilline à 0 mois, supérieur à 100%, résulte de la présence de cette molécule dans l'aliment lui-même. Les quantités restantes à 3 mois, nettement supérieures à la quantité normalement présente dans l'aliment, permettent encore d'utiliser la vanilline comme molécule de reconnaissance. Ces essais montrent que la combinaison de plusieurs molécules aromatiques de type "note de fond" dans un arôme a permis de tracer l'aliment, même plusieurs mois après la production de cet aliment. Il est indispensable, pour pouvoir identifier l'arôme, de disposer d'un arôme contenant au moins trois molécules de reconnaissance de type "note de 30 fond", chimiquement stables dans l'aliment. Dans les exemples ci-dessus, la composition aromatique a été incorporée par pulvérisation sur l'aliment précédemment mis en forme de granules. 5 34FDHP.doc 9 L'additif de traçage est alors présent sur les granules d'aliment, ou absorbé en tout ou partie dans les granules. En alternative, la composition aromatique peut être incorporée sur un support particulaire, qui lui-même est ensuite mélangé à l'aliment avant granulation. L'additif de traçage est alors présent dans les granules d'aliment. La présente invention n'est pas limitée aux modes de réalisation qui ont été explicitement décrits, mais elle en inclut les diverses variantes et généralisations contenues dans le domaine des revendications ci-après. REVENDICATIONS 1. ù Additif de traçage pour incorporation dans un aliment pour animal, caractérisé en ce qu'il contient au moins trois molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond" et chimiquement stables dans l'aliment. 2 ù Additif selon la revendication 1, caractérisé en ce que les molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond" ont, à la température ambiante, une tension de vapeur inférieure à 100 pm de mercure, de préférence comprise entre 0,1 et 100 pm de mercure. 3 ù Additif selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que 10 les molécules aromatiques de reconnaissance sont choisies parmi les molécules aisément détectables en faible proportion dans l'aliment. 4 ù Additif selon la revendication 3, caractérisé en ce que les molécules aromatiques de reconnaissance sont choisies parmi le groupe de molécules comprenant : VANILLINE, ETHYL VANILLINE, ALDEHYDE FRAISE (C-16), 15 ALDEHYDE PECHE (C-14), gamma DECALACTONE, MELILOTINE, gamma NONALACTONE, HELIOTROPINE (PIPERONAL), ALCOOL CINNAMIQUE, ETHYL CINNAMATE, ISOAMYL SALICYLATE, ETHYL LAURATE, CETONE FRAMBOISE, BENZYLIDENE ACETONE, ETHYL ANTHRANILATE, METHYL ANTHRANILATE, EUGENOL, METHYL CINNAMATE, ISOAMYL PHENYL ACETATE, alpha-IONONE, 20 beta-IONONE, GERANIOL, ALDEHYDE M.N.A, ETHYL PHENYL ACETATE, CINNAMALDEHYDE, ALDEHYDE ANISIQUE, THYMOL, PARA-CYMENE, alpha- TERPINEOL, CITRAL, ETHYL SALICYLATE, DL-MENTHOL, ALCOOL PHENYLETHYLIQUE, trans-ANETHOLE, GERANYL ACETATE, ANETHOLE, TERPINYL ACETATE, LAEVO-CARVONE. 5 ù Additif selon l'une des revendications 3 ou 4, caractérisé en ce qu'il forme un arôme vanille contenant les molécules de type "note de fond" et proportions suivantes : 25 30 - alpha-ionone - beta-ionone - gamma-décalactone - Vanilline Maltol - Aldéhyde pêche 35 - gamma-nonalactone - Butyrate de benzyle (1% environ) 1% environ) (1.5% environ) (8.5% environ) (1 % environ) (1.5% environ) (5% environ) (1 % environ)34FDIP.doc 11 6 ù Additif selon l'une des revendications 3 ou 4, caractérisé en ce qu'il forme un arôme fruits contenant les molécules de type "note de fond" et proportions suivantes : - alpha-ionone - gamma-décalactone - Vanilline - Maltol - Cinnamaldéhyde 10 - Cétone framboise - Butyrate de benzyle(1.5% environ) (2% environ) (8.5% environ) (1% environ) (2% environ) (1.5% environ) (1.5% environ) 7 ù Additif selon l'une des revendications 3 ou 4, caractérisé en ce qu'il forme un arôme herbe contenant les molécules de type "note de fond" et 15 proportions suivantes : alpha-ionone (1% environ) - gamma-décalactone (1% environ) - Vanilline (2% environ) 20 - Eugénol (3% environ) -alpha-terpinéol (1% environ) 8 ù Aliment pour animaux, contenant un additif de traçage selon l'une quelconque des revendications 1 à 7. 25 9 ù Aliment pour animaux selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'additif de traçage est en quantité de 100 à 1 000 mg/kg d'aliment. ù Aliment pour animaux selon l'une des revendications 8 ou 9, caractérisé en ce qu'il est sous forme de granulés, et en ce que l'additif de traçage est présent dans et/ou sur des granules d'aliment. 30 11 ù Procédé de traçage d'aliments pour animaux, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes : -incorporer dans l'aliment un additif de traçage selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, - après une durée limitée de stockage de l'aliment, extraire de l'aliment les 35 molécules aromatiques de l'additif de traçage, - détecter et quantifier chaque molécule aromatique de reconnaissance par chromatographie, en recherchant les pics caractéristiques des molécules.34FDFP.doc 12 12 ù Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'on incorpore l'additif dans l'aliment par atomisation de l'additif en solution liquide sur l'aliment granulé. 13 ù Utilisation d'un arôme comme produit de traçage dans un aliment 5 pour animal. 14 ù Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que l'arôme comprend au moins trois molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond", chimiquement stables dans l'aliment. 15 ù Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que les 10 molécules aromatiques de reconnaissance de type "note de fond" ont, à la température ambiante, une tension de vapeur inférieure ou égale à 100 pm de mercure.