FR 2899900 A1 20071019 FR 0603406 A 20060418 DÉRIVÉS DE CALIXARÈNES COMME AGENT ANTICANCEREUX La présente invention se rapporte au domaine de la thérapie anticancéreuse. Elle concerne tout particulièrement des dérivés de calixarènes spécifiques présentant une activité anticancéreuse. Les cancers sont une des principales causes de mortalité, ils sont en effet responsables d'environ 30% des décès en France. Aujourd'hui, un tiers des nouveaux cas de cancers présentent une résistance à de multiples drogues (encore appelée Multiple Drug Resistant ou MDR) ou chimiorésistant. Cette résistance est un problème dramatique d'un point de vue thérapeutique mais également d'un point de vue psychologique pour les patients. D'autre part, certains composés utilisés pour traiter les cancers, par exemple la vinblastine, peuvent induire un développement des cellules tumorales chimiorésistantes et/ou provoquer des effets secondaires, comme une certaine toxicité. Enfin, les traitements du cancer représentent un problème économique, en effet le coût de ces traitements peut être estimé à 15 milliards d'euros en 2002. I:1 subsiste donc un besoin pour des composés présentant 25 des propriétés améliorées pour traiter les cancers. De manière surprenante, les inventeurs ont découvert que des dérivés de calixarènes spécifiques présentent une activité anticancéreuse et permettent de résoudre en tout ou partie les problèmes évoqués ci-dessus. 30 Selon un premier aspect, l'invention a pour objet un composé répondant à la formule (I) suivante X2 X3 X' X4 Formule (I) dans laquelle : - X1, X2, X3 et X4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupe alkyle ou acyle, notamment comprenant de 1 à 7L0 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique ou aromatique; - R1 et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, -(R)XY où R représente un groupement alkyle comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, alcène ou alcyne comprenant de 2 à 10 atomes de carbones, linéaire, ramifié ou cyclique, éventuellement substitué par un ou plusieurs hétéroatome, notamment O, S, N ou P, ou encore R représente un radical aromatique, notamment comprenant de 6 à 20 atomes de carbone, x représente 0 ou 1, et Y est un groupement choisi dans le groupe comprenant les groupements phosphate, sulfate et carboxylate, ou l'un de ses sels. Ires composés répondant à la formule (:[) peuvent être obtenu selon des techniques bien connues de l'Homme du Métier. On peut par exemple citer la synthèse de para- tertButyl calix[4]arène, la déterbutylation et la fonctionnalisation des couronnes supérieures et inférieures décrite dans la littérature par Gutsche, Shinkai et Kalchenko. On entend par groupement carboxylate au sens de la présente invention, l'enchaînement -COOM, dans lequel M peut représenter un atome d'hydrogène ou un cation, notamment un métal alcalin ou alcalino-terreux ou un cation organique, tel que l'ammonium, l'alkylammonium, le phosphonium, le guanidinium et le pyridinium. On entend par groupement phosphate , l'enchaînement - PO(OM)2, dans lequel M peut être tel que défini ci-dessus. On entend par groupement sulfate au sens de la présente invention, l'enchaînement -SO3M, dans lequel M peut être tel que défini ci-dessus. Les sels du composé répondant à la formule (I) peuvent être obtenu par des techniques bien connues de l'Homme du Métier. En particulier le composé selon l'invention répond à la formule (I) dans laquelle X1, X2, X3 et X4 représentent le 20 même atome ou le même groupe. Le composé selon l'invention peut répondre à la formule (I) dans laquelle R1 et R2 représentent le même groupement. Tout particulièrement, le composé selon l'invention peut répondre à la formule (I) dans laquelle R1 et R2 25 représentent le même groupement, et X1, X2, X3 et X4 représentent le même atome ou le même groupe. Selon un mode de réalisation particulier le composé répond à la formule (I) dans laquelle X1, X2, X3 et x4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome 30 d'halogène choisi dans le groupe comprenant l'atome d'iode, de brome, de chlore et de fluor. Selon un mode de réalisation particulier le composé répond à la formule (I) dans laquelle X1, X2, X3 et X4 représentent un atome d'hydrogène. Selon un mode de réalisation particulier le composé répond à la formule (I) dans laquelle X1, X2, X3 et X4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un groupe alkyle choisi dans le groupe comprenant le groupe méthyl, iso-propyl et tert-Butyl. Selon un mode de réalisation particulier le composé répond à la formule (I) dans laquelle X1, X2, X3 et X4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un groupe acyle choisi dans le groupe comprenant le groupe méthyl, iso-propyl et tert-Butyl. En particulier, le composé selon l'invention répond à 15 la formule (I-a) suivante : Formule (I-a) En particulier, le composé selon l'invention répond à 20 la formule (I-b) suivante : 0 OH HOùp O HOOH O 0=PùOH OH / 0= \ OH HO OH 0 OH OH 0 HOùp/ =O \ Formule (I-b) En particulier, le composé selon l'invention répond à 5 la formule (I-c) suivante : HO OH Formule (I-c) 10 En particulier, le composé selon l'invention répond à la formule (I-d) suivante : 0 OH OH O HOùp= O \ / 0= \ OH Formule (I-d) Selon un autre aspect, l'invention a également pour objet un composé complexe comprenant l'association de plusieurs, en particulier 2, composés identiques ou différents tels que définis précédemment. En particulier, les composés associés pour former le composé complexe sont liés par des liaisons covalentes 10 et/ou non covalentes. Les liaisons non covalentes peuvent être des liaisons hydrogènes, des liaisons ioniques, des interactions hydrophobes, des associations de Van der Waals, des interactions aromatiques-aromatiques et d'autres 15 interactions électrostatiques. Lorsque les composés associés pour former le composé complexe sont liés par des liaisons covalentes, ces composés peuvent être liés directement ou via un espaceur. En particulier, l'espaceur est un radical au moins 20 divalent comprenant de 1 à 20 atomes de carbone : diamides, diesters, pontage ethylene glycole. 0 OH OH O HOùP=O 0=p\ùOH HO OH Selon un autre aspect, l'invention a également pour objet un composé selon l'invention ou l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, en tant que composition pharmaceutique. On entend par sels pharmaceutiquement acceptables au sens de la présente invention, des sels appropriés à une utilisation pharmaceutique. À titre d'exemples de sels pharmaceutiquement acceptables, on peut citer le benzène sulfonate, le bromhydrate, le chlorhydrate, le citrate, l'éthanesulfonate, le fumarate, le gluconate, l'iodate, l'iséthionate, le maléate, le méthanesulfonate, le méthylène-bis-b-oxynaphtoate, le nitrate, le nitrite, l'oxalate, le pamoate, le phosphate, le salicylate, le succinate, le sulfate, le tartrate, le théophyllinacétate et le p-toluènesulfate, en particulier le nitrate, le nitrite, le phosphate et tout particulièrement :L'ammonium. Les sels pharmaceutiquement acceptables du composé selon l'invention peuvent être obtenus par des techniques bien connues de l'Homme du Métier. Selon un autre de ses aspects, l'invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant au moins un composé ou au moins un de ses sels pharmaceutiquement acceptables tels que définis précédemment. La composition pharmaceutique selon l'invention peut comprendre en outre au moins un agent anti-tumoral choisi dans le groupe comprenant : - des inhibiteurs de l'angiogenèse tels que l'angiostatine, l'endostatine, la genistéine, la 30 staurosporine et le thalidomide; - des agents antiproliferatifs tels que la N-acétyl-D-sphingosine, l'aloé-émodine, l'apigenine, le chlorure de berberine, l'émodine, l'hydroxycholesterol et la rapamycine ; - des agents inhibiteurs de la synthèse de l'ADN tels que l'amethopterine, la cytosine 0.-D-arabinofuranoside, la 5-fluoro-5-déoxyuridine, le ganciclovir, l'hydroxyurée, la 5 mercaptopurine et la thioguanine ; - des inhibiteurs d'enzymes tels que la DL-aminoglutethimide, l'apicidine, le 2',4',3,4-tetrahydroxychalcone, le camptothecine, le degueline, le depudecine, la doxycycline, l'etoposide, le formestane, la 10 fostriecine, l'hispidine, l'indomethacine, la mevinoline, l'oxamflatine, la roscovitine, la trichostatine et la tyrphostine AG. On entend par agent anti-tumoral au sens de la présente invention, un composé permettant de lutter et/ou 15 de prévenir un cancer. La composition pharmaceutique peut comprendre le composé selon l'invention et l'agent anti-tumoral dans un rapport molaire allant de 10/1 à 1/10. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention 20 peuvent être administrées par différentes voies. À titre d'exemples de voies d'administration, on peut citer la voie orale, rectale, cutanée, pulmonaire, nasale, sublinguale, la voie parentérale notamment intradermique, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, intraartérielle, intra-rachidienne, intra-articulaire, intrapleurale, intra-péritonéale, oculaire, inhalations, transdermique, épidurale, intra bronchiale, intra bursale, intracamérale, intracardiaque, intracérébrale, intracaverneuse, intracérébroventriculaire, 30 intracisternale, intra gastrique, intralésionale, intra lymphatique, intraosseuse, intra spinale, intrathécale, intratrachéale, intraduodenale, intra tympanique, intrarethale, intra-utérine, intra vaginale, intravésicale, 8 intravitréale, sublabiale, rectale, subconjonctivale, rétrobulbaire, intra tumoral en particulier subconjonctivale, rétrobulbaire, intra tumoral et tout particulièrement intra tumoral. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être administrées en une ou plusieurs fois ou en libération continue. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent se présenter sous différentes formes,, notamment sous une forme choisie dans le groupe comprenant les comprimés, les gélules, les dragées, les sirops, les suspensions, les solutions, les poudres, les granulés, les émulsions, les microsphères et les solutions injectable et les nanoparticules lipidiques solides en particulier les nanoparticules lipidiques solides. Ces différentes formes peuvent être obtenues par des techniques bien connues de l'Homme du Métier. Tout particulièrement les formulations appropriées à une administration par voie parentérale, les véhicules pharmaceutiquement acceptables appropriés à cette voie d'administration et les techniques de formulation et d'administration correspondantes peuvent être réalisées selon des méthodes bien connues de l'Homme du Métier, en particulier celles décrites dans le manuel Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co., Easton, Pa., 20ème édition, 2000). Selon un mode de réalisation particulier, le composé selon l'invention ou au moins un de ses sels pharmaceutiquement acceptables est présent dans la composition pharmaceutique en une quantité allant de 1 à 400 mg par unité de prise, et en particulier de 10 à 40 mg. La composition pharmaceutique selon l'invention peut être administrée en une ou plusieurs prises par jour, en particulier en 1 à 3 prises par jour. Avantageusement, le composé peut être administré en une 5 quantité allant de 0,1 à 6 mg par jour et par kg. Avantageusement, la composition pharmaceutique comprend une quantité d'au moins un composé ou d'au moins un de ses sels pharmaceutiquement acceptable allant de 1 à 100 mg, en particulier de 10 à 40 mg. 10 La composition pharmaceutique peut comprendre en outre un support pharmaceutiquement acceptable. On entend par support pharmaceutiquement acceptable au sens de la présente invention, une matière qui est appropriée à une utilisation dans un produit 15 pharmaceutique. À titre d'exemples de support pharmaceutiquement acceptable, on peut citer le lactose, l'amidon, éventuellement modifié, la cellulose, l'hydroxypropyl cellulose, l'hydroxypropylméthyl cellulose, le mannitol, le 20 sorbitol, le xylitol, le dextrose, le sulfate de calcium, le phosphate de calcium, le lactate de calcium, les dextrates, l'inositol, le carbonate de calcium, la glycine, la bentonite, la polyvinylpyrriolidone, et leurs mélanges. La composition pharmaceutique peut comprendre une 25 teneur en support pharmaceutiquement acceptable allant de 5 à 99 % en poids, notamment de 10 à 90 % en poids, et en particulier de 20 à 75 % en poids par rapport au poids total de la composition. Selon un autre aspect, l'invention a également pour 30 objet l'utilisation d'un composé ou de l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables tels que défini ci-dessus pour la fabrication d'une composition pharmaceutique destinée au traitement de cancers, quels que soient leur nature et leur degré d'anaplasie, en particulier les mélanomes, les carcinomes, les sarcomes, les fibrosarcomes, les leucémies, les lymphomes, les neuroblastomes, les médulloblastomes, les glioblastomes, les astrocytomes, les angioblastomes, les méningiomes, rétinoblastomes, les prolactinomes, les macrobulimia, les leiomyosarcomes, les mesothéliomes, les choriocarcinomes, les phéochromocytomes, les myelomes, les polycythémie, les angiosarcomes, les chondrosarcomes extra-squelettiques, les hémangiosarcomes, les ostéosarcomes, les chondrosarcomes, et tout particulièrement les mélanomes, les carcinomes, les sarcomes, les fibrosarcomes et les leucémies. À titre d'exemples de tels cancers, on peut citer le cancer du pancréas, les cancers de l'oro-pharynx, le cancer de l'estomac, le cancer de l'oesophage, le cancer du colon et rectal, le cancer du cerveau, notamment les gliomes, le cancer des ovaires, le cancer du foie, le cancer du rein, le cancer du larynx, le cancer de la thyroïde, le cancer du poumon, le cancer des os, les myélomes multiples, les mésothéliomes et les mélanomes, le cancer de la peau, le cancer du sein, le cancer de la prostate, le cancer de la vessie, le cancer de l'utérus, le cancer des testicules, les lymphomes non-Hodgkinien, la leucémie, la maladie de Hodgkin, le cancer de la langue, le cancer du duodénum, le cancer des bronches, le cancer du pancréas et des cancers des tissus mous, ainsi que des localisations secondaires métastatiques des cancers cités précédemment tels que dans le poumon, le foie ou le sein. Selon un autre mode de réalisation particulier de l'invention, le composé est associé à au moins un agent anti-tumoral choisi dans le groupe comprenant : - des inhibiteurs de l'angiogenèse tels que l'angiostatine, l'endostatine, la génistéine, la staurosporin et le thalidomide; - des agents antiproliferatifs tels que la N-acetyl-D-sphingosine, l'aloé-émodine, l'apigenine, le chlorure de berberine, l'émodine, l'hydroxycholesterol et la rapamycine ; - des agents inhibiteurs de la synthèse de l'ADN tels que l'amethopterine, la cytosine (3-D-arabinofuranoside, la 5-fluoro-5-déoxyuridine, le ganciclovir, 1'hydroxyurée, la mercaptopurine et la thioguanine ; - des inhibiteurs d'enzymes tels que la DL- aminoglutethimide, l'apicidine, le 2',4',3,4-tetrahydroxychalcone, le camptothecine, le degueline, le depudecine, la doxycycline, l'etoposide, le formestane, la fostriecine, l'hispidine, l'indomethacine, la mevinoline, l'oxamflatine, la roscovitine, la trichostatine et la tyrphostine AG. On entend par associé , le fait que le composé et l'agent anti-tumoral peuvent être administrés simultanément, séparément ou de manière étalée dans le temps. La présente invention a également pour objet un procédé in vitro d'induction de l'apoptose des cellules cancéreuses, comprenant la mise en présence desdites cellules avec au moins un composé selon l'invention. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront au regard des figures et des exemples qui suivent. Les figures et les exemples qui suivent sont donnés à 30 titre illustratif et non limitatif.25 13 - La Figure 1 (A et B) illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules leucémiques lymphoblastiques aigüe humaines chimiosensibles (CEM/s) par mesure de la viabilité cellulaire. Dans la Figure 1B, la racine de l'équation de régression est : a+b•xl'S+c•x '5 dans laquelle X à Y=5.000000000000E+01 et X=6.874748783580E+00. La Figure 2 (A et B) illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules leucémiques lymphoblastiques aigüe humaines chimiorésistantes (CEM/VLB5) par mesure de la viabilité cellulaire. Dans la Figure 2B, la racine de l'équation de régression est : a+b•x+c•x '5 dans laquelle X à Y=5.000000000000E+01 et X=1.701434371714E+01. - La Figure 3 (A et B) illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules de mélanome choroïdien humain (MU2), par mesure de la viabilité cellulaire. Dans la Figure 3B, la racine de l'équation de régression est : a•exp((b-(x-b)2)/(2•c2)) dans :Laquelle X à Y=5.000000000000E+01 et X=2.189932229650E+01. - La Figure 4 (A et B) illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules de mélanome choroïdien humain (MU2F), par mesure de la viabilité cellulaire. Dans la Figure 4B, la racine de l'équation de régression est : ax2+b•x+c dans laquelle X à Y= 5.000000000000E+01 et X=5.209011013695E+01. - La Figure 5 (A et B) illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules de fibrosarcome humain (HT1080), par mesure de la viabilité cellulaire. - La Figure 6 (A et B) illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules de mélanome choroïdien humain (SP6.5), par mesure de la viabilité cellulaire. La Figure 7 illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules de mélanome irien humain (IPC227), par mesure de la viabilité cellulaire. - La Figure 8 illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules de mélanome cutané humain (MEWO), par mesure de la viabilité cellulaire. -La Figure 9 illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène sur une culture de cellules de mélanome uvéal humain (DLM.1), par mesure de la viabilité cellulaire. - La Figure 10 (A et B) illustre, sous la forme de courbes, l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène et celui de la vinblastine (VLB) sur une culture primaire de PBMC humain (cellules mononuclées du sang périphérique) par mesure de la viabilité cellulaire. La Figure 11 illustre sous la forme d'un histogramme, l'effet anticancéreux et lymphoprotecteur de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène (C4Dip), par représentation de l'IC50 moyen pour différentes cultures cellulaires. EXEMPLES 1. Exemple 1 : Étude de l'effet anticancéreux de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène (C4Dip) sur des cultures cellulaires. Cet exemple illustre l'effet anticancéreux de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène (C4Dip) sur différentes cellules tumorales en culture, notamment des cellules leucémiques, de mélanomes et de fibrosarcomes. I.1 Protocole expérimental Les cellules (0,2 106/ml) ont été incubées stérilement dans 100 p1 de milieu de culture (RPMI-1640 supplémenté de 10% de sérum de veau foetal, de pénicilline, streptomycine et amphotéricine B) au jour JO avec des quantités variables (de 0 à 100 mM) de C4DiP à 37 C et 5% CO2 en atmosphère saturée d'eau. Au 4ème jour, 20 pl de MTS (test de prolifération cellulaire non-radioactif (Promega Cat. #: G 3580) sont ajoutés aux 100 pl précédents puis une lecture spectrophotométrique est réalisée à 490 nm après 2 heures d'incubation contre des blancs-réactifs. Les lignées cellulaires utilisées sont les suivantes : 20 -CEM : Leucemie lymphoblastique aigüe humaine - CEM/s : CEM chimiosensible - CEM/VLB5 : CEM Chimioresistante. La chimiorésistance a initialement été induite par la présence de vinblastine dans le milieu de culture 25 cellulaire à des concentrations croissantes. Dans le cas des CEM/VLB5, la chimiorésistance est entretenue en culture en présence de vinblastine à une concentration de 5 pg/mL. - MU2 : Mélanome choroïdien humain crée à l'Institut de Biologie et Chimie des Protéines (IBCP, Lyon, 30 France). - MU2F : Mélanome choroïdien humain qui implanté chez la souris induit une métastase hépatique. - HT1080 : Fibrosarcome humain. -SP6.5 : Mélanome choroïdien humain. -IPC227 : Mélanome irien humain. - MEWO : Mélanome cutané humain. - DLM.1 : Mélanome uvéal humain. L'effet anticancéreux du C4diP est évalué par mesure de 10 la viabilité cellulaire en fonction de quantités variables de C4diP. Afin de déterminer l'effet anticancéreux du C4diP sur une culture de cellules tumorales particulière, l'IC50 a été calculé. L'IC50 correspond à la concentration moyenne 15 de C4diP à laquelle les cellules présentent une mortalité de 50%. I.2 Résultats 1.2. 1 Effet anti-cancéreux du C4diP sur une culture de 20 cellules tumorales chimiosensibles : CEM/s L'effet du C4diP sur une culture de cellules leucémiques lymphoblastiques aiguë humaines chimiosensibles est présenté sur la figure 1 (A et B). La mesure d' IC50 du C4diP montre une mortalité de 50 % 25 pour une concentration moyennée de 7,33 pM de C4DiP avec un écart-type de 3,06. Cette expérience montre bien que le C4diP permet de lutter contre les cellules cancéreuses chimiosensibles. Le C4diP est donc un composé efficace pour traiter les cancers. I.2.2 Effet anti-cancéreux du C4diP sur une culture de cellules tumorales chimiorésistantes : CEM/VLBS L'effet du C4diP sur une culture de cellules leucémiques lymphoblastiques aiguë humaines 10 chimiorésistante est présenté sur la figure 2 (A et B). La mesure d' IC50 du C4diP montre une mortalité de 50 % pour une concentration moyennée de 13,55 pM de C4DiP avec un écart-type de 4,88. Cette expérience montre bien que le C4diP permet de 15 lutter contre les cellules cancéreuses chimiorésistantes. Le C4diP est donc un composé efficace pour traiter les cancers de type Multiple Drug Resistant (MDR), pour lesquels les composés habituellement utilisés ne sont pas efficaces, comme la vinblastine. 20 I.2.3 Effet anti-cancéreux du C4diP sur différentes cultures de cellules tumorales: MU2, MU2F, HT1080, SP6.5, IPC227, MEWO, DLM.1 L'effet du C4diP sur différentes cultures de cellules 25 tumorales de mélanome et de fibrosarcome est présenté sur les figures 3 à 9. La mesure d'IC50 du C4diP relative à ces différentes lignées cellulaires est présentée dans le tableau ci-dessous :5 Lignée cellulaire IC50 en M Écart-type MU2 12,06 5,96 MU2F 32,10 17,27 HT1080 14,36 Non déterminable SP6.5 9,4 Non déterminable IPC227 20,2 Non déterminable MEWO 10,2 Non déterminable DLM.1 30,83 Non déterminable Cette expérience montre bien que le C4di]? permet de lutter contre différents types de cellules cancéreuses. Le C4diP est donc un composé efficace pour traiter différents types de cancers. II. Exemple 2 : Comparaison de l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène (C4Dip) et de la vinblastine sur une culture cellulaire de PBMC. Cet exemple illustre l'effet de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène (C4Dip) sur une culture primaire de PBMC humain. Cet effet est comparé à celui de la vinblastine. II.1 Protocole expérimental Le protocole utilisé est celui décrit précédemment dans l'exemple 1. Lorsque de la vinblastine est utilisée dans le milieu de culture, elle remplace le C4diP. 11.2 Effet lympho-protecteur du C4diP L'effet du C4diP et de la vinblastine sur une culture primaire de PBMC (cellules mononuclées du sang périphérique) humain est présenté sur la figure 10 (A et B). La mesure d' IC50 du C4diP montre une mortalité de 50 % pour une concentration moyennée de 39,1 pM de C4DiP. Une comparaison entre l'IC50 du C4DiP et de la vinblastine sur des cultures primaires de PBMC (WBC=White Blood Cell) montre un bon effet lympho-protecteur du C4DiP (IC50 = 39 pM) par rapport à la vinblastine (IC50 = 0,005 PM). III. Exemple 3 : Effet anticancéreux et lympho-protecteur 15 de l'acide dihydrophosphonique du calix(4)arène (C4Dip) Une représentation graphique de l'IC50 moyen du C4DiP est présentée sur la figure 11. La zone d'activité de C4DiP se situe entre 7 et 15 pM, sans discrimination entre cellules chimiorésistantes MDR et chimiosensibles à 20 l'exception de la métastase MU2F qui semble plus résistante à C4DiP que les autres lignées cellulaires testées. Toutefois, il est intéressant de noter que l'IC50 du C4DiP est de 39 pM pour les lymphocytes sains, ce qui montre un bon effet lympho-protecteur du C4Di.P vis-à-vis 25 des autres lignées plus sensibles testées. Ces résultats montrent bien que certains dérivés de calixarènes comme le C4DiP présentent une activité anti- tumorale sur des lignées cellulaires tumorales maintenues 30 en culture, en particulier dans le cas de la lignée de leucémie lymphoblastique aiguë humaine CEM et de sa dérivée chimiorésistante CEM/VLB5, ainsi que sur la lignée de mélanome uvéal humain MU2. REVENDICATIONS 1. Composé répondant à la formule (I) suivante X2 X3 Xl X4 R' Formule (I) dans laquelle : - X1, X2, X3 et X4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupe alkyle ou acyle, notamment comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique ; - R' et Rz représentent, indépendamment l'un de l'autre, -(R)XY où R représente un groupement alkyle comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, alcène ou alcyne comprenant de 2 à 10 atomes de carbones, linéaire, ramifié ou cyclique, éventuellement substitué par un ou plusieurs hétéroatome, notamment 0, S, N ou P, ou encore R représente un radical aromatique, notamment comprenant de 6 à 20 atomes de carbone, x représente 0 ou 1, et - Y est un groupement choisi dans le groupe comprenant les groupements phosphate, sulfate et carboxylate, ou l'un de ses sels. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que X1, X2, X3 et X4 représentent le même atome ou le même groupe, notamment un atome d'hydrogène. 3. Composé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que R1 et R2 représentent le même groupement . 10 4. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que X1, X2, X3 et X4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'halogène choisi dans le groupe comprenant l'atome d'iode, de brome, de chlore et de fluor. 15 5. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce X1, X2, X3 et X4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un groupe alkyle choisi dans le groupe comprenant le groupe méthyl, iso-propyl et 20 tert-Butyl. 6. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (I-a) suivante : O HOùp/ ùo HOOH OH O 0=pùOH OH 510Formule (I-a) 7. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (I-b) suivante : Formule (I-b) 8. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (I-c) suivante : CH3 cH3 CH3 O O HOùp/ =O I HO Formule (I-c) 9. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule particulière (I-d) suivante : O OH OH O 0=PùOH OH HOùp= O I HO 0 OH OH O 0=PùOH OHO OH OH O HOùp=0 \ / 0= \ OH HO OH Formule (I-d) 10. Composé complexe comprenant l'association de plusieurs, en particulier 2, composés identiques ou différents tels que définis selon l'une quelconque des revendications 1 à 9. 11. Composé selon l'une quelconque des revendications 10 1 à 10 ou l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, en tant que composition pharmaceutique. 12. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé selon l'une quelconque 15 des revendications 1 à 10 ou au moins un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 13. Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins un 20 agent anti-tumoral choisi dans le groupe comprenant : - des inhibiteurs de l'angiogenèse tels que l'angiostatine, l'endostatine, la génistéine, la staurosporine et le thalidomide; - des agents antiproliferatifs tels que la N-acétyl-D- sphingosine, l'aloé-émodine, l'apigenine, le chlorure de berberine, l'émodine, l'hydroxycholesterol et la rapamycine ; - des agents inhibiteurs de la synthèse de l'ADN tels que l'amethopterine, la cytosine (3-D-arabinofuranoside, la 5-fluoro-5-déoxyuridine, le ganciclovir, l'hydroxyurée, la mercaptopurine et la thioguanine ; - des inhibiteurs d'enzymes tels que la DL-aminoglutethimide, l'apicidine, le 2',41,3,4-tetrahydroxychalcone, le camptothecine, le degueline, le depudecine, la doxycycline, l'etoposide, le formestane, la fostriecine, l'hispidine, l'indomethacine, la mevinoline, l'oxamflatine, la roscovitine, la trichostatine et la tyrphostine AG. 14. Composition selon la revendication 12 ou 13, caractérisée en ce qu'elle est administrée par au moins une voie choisie dans le groupe comprenant la voie orale, rectale, cutanée, pulmonaire, nasale, sublinguale, la voie parentérale notamment intradermique, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, intra-artérielle, intrarachidienne, intra-articulaire, intra-pleurale, intrapéritonéale oculaire, inhalations, transdermique, épidurale, intra bronchiale, intra bursale, intracamérale, intracardiaque, intracérébrale, intracaverneuse, intracérébroventriculaire, intracisternale,, intra gastrique, intralésionale, intra lymphatique, intraosseuse, intra spinale, intrathécale, intratrachéale, intraduodenale, intra tympanique, intrarethale, intra- utérine, intra vaginale, intravésicale, intravitréale, sublabiale, rectale, subconjonctivale, rétrobulbaire, intra tumoral en particulier subconjonctivale, rétrobulbaire, intra tumoral et tout particulièrement intra tumoral. 15. Composition selon l'une quelconque des revendications 12 à 14, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme choisie dans le groupe comprenant les comprimés, les gélules, les dragées, les sirops, les suspensions, les solutions, les poudres, les granulés, les émulsions, les microsphères et les solutions injectables et les nanoparticules lipidiques solides en particulier les nanoparticules lipidiques solides. 16. Utilisation d'un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 10 ou l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables pour la fabrication d'une composition pharmaceutique destinée au traitement de cancers. 17. Utilisation selon la revendication 16, caractérisée en ce que le cancer est choisi dans le groupe constitué par les mélanomes, les carcinomes, les sarcomes, les fibrosarcomes, les leucémies, les lymphomes, les neuroblastomes, les médulloblastomes, les glioblastomes, les astrocytomes, les angioblastomes, les méningiomes, rétinoblastomes, les prolactinomes, les leiomyosarcomes, les mesothéliomes, les choriocarcinomes, les macrobulimia, les phéochromocytomes, les myelomes, les polycythémie, les angiosarcomes, les chondrosarcomes extra-squelettiques, les hémangiosarcomes, les ostéosarcomes, les chondrosarcomes, et tout particulièrement les mélanomes, les carcinomes, les sarcomes, les fibrosarcomes et les leucémies 18. Utilisation selon la revendication 16 ou 17, caractérisée en ce que le composé est associé à au moins un agent anti-tumoral choisi dans le groupe comprenant : - des inhibiteurs de l'angiogenèse tels que l'angiostatine, l'endostatine, la génistéine, la staurosporin et le thalidomide; - des agents antiproliferatifs tels que la N-acetyl-D-sphingosine, l'aloé-émodine, l'apigenine, le chlorure de berberine, l'émodine, l'hydroxycholesterol et la rapamycine ; - des agents inhibiteurs de la synthèse de l'ADN tels que i'amethopterine, la cytosine (3-D-arabinofuranoside, la 5-fluoro-5-déoxyuridine, le ganciclovir, l'hydroxyurée, la mercaptopurine et la thioguanine ; - des inhibiteurs d'enzymes tels que la DL-aminoglutethimide, l'apicidine, le 2',4',3,4-tetrahydroxychalcone, le camptothecine, le degueline, le depudecine, la doxycycline, l'etoposide, le formestane, la fostriecine, l'hispidine, l'indomethacine, la mevinoline, l'oxamflatine, la roscovitine, la trichostatine et la tyrphostine AG. 19. Procédé in vitro d'induction de l'apoptose des cellules cancéreuses, comprenant la mise en présence desdites cellules avec au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 10.