FR 2902656 A1 20071228 FR 0652627 A 20060623 UTILISATION COSMETIQUE D'UN EXTRAIT DE WITHANIA SOMNIFERA La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Withania somnifera en tant que principe actif pour une application cosmétique. L'invention se rapporte aussi à toute composition cosmétique contenant un extrait de Withania somnifera. L'invention couvre également un procédé d'obtention d'un extrait particulier de Withania somnifera et l'extrait obtenu. Withania somnifera, encore appelée Ashwagandha ou Ginseng indien , est une plante appartenant à la famille des Solanacées. Ses racines sont épaisses et charnues, ses feuilles sont simples, ovales, lisses et dépourvues de poils, et elle possède des fleurs à peine visibles, de couleur vert clair ou jaune pâle. Withania somnifera, originaire d'Inde, est utilisée depuis plus de 2000 ans dans la médecine traditionnelle ayurvédique en tant que tonique général et fortifiant. L'utilisation de cette plante dans le domaine cosmétique n'a pas été envisagée. Or, de façon étonnante, Withania somnifera présente des propriétés notables au niveau cutané. La peau est un organe complexe qui couvre la surface totale du corps et exerce de nombreuses fonctions vitales. Elle est organisée en trois couches principales l'épiderme, le derme et l'hypoderme. La peau est constamment soumise à des agressions, tant externes qu'internes, 20 qui peuvent menacer son équilibre et son aspect. C'est pourquoi on recherche des actifs capables de protéger la peau contre ces agressions susceptibles d'altérer son bon fonctionnement et son aspect, et de lutter contre les manifestations qui en découlent. Pour répondre à cette problématique, la présente invention vise à utiliser au 5 moins un extrait de Withania somnifera en tant qu'actif au sein d'une composition cosmétique destinée au traitement de la peau. L'extrait de Withania somnifera susceptible d'être utilisé selon l'invention peut être obtenu au moins par un procédé comprenant au moins une extraction enzymatique ou une décoction. 10 De manière préférentielle, les compositions selon l'invention peuvent contenir de 0,1 à 20 % d'un extrait de Withania somnifera. L'administration d'une composition contenant un extrait de Withania somnifera selon l'invention est de préférence effectuée par voie topique. La composition peut se présenter sous toutes les formes permettant l'application 15 par voie topique. L'utilisation d'un extrait issu de Withania somnifera selon l'invention permet de protéger la peau et/ou de lutter contre toutes manifestations perturbant son activité et/ou son apparence. En particulier, l'utilisation d'un extrait issu de Withania somnifera selon la 20 présente invention permet de régulariser les fonctionnalités naturelles cutanées notamment de contribuer à l'homéostasie dermique et de réparer et restructurer la fonction barrière. On peut noter ses capacités à, notamment - dynamiser le développement cellulaire, - maintenir et stimuler les systèmes naturels de défense de la peau, et 25 - maintenir et stimuler les systèmes naturels de protection de la peau. Il peut être utilisé pour de multiples applications cosmétiques par exemple pour augmenter le renouvellement cellulaire, prévenir et diminuer l'apparition des rides ou encore hydrater et protéger la couche cornée. Avantageusement, l'extrait de Withania somnifera est particulièrement efficace dans des conditions extrêmes d'agression de la peau. Les agressions de la peau (soleil, pollution, stress, chocs thermiques, climatisation...) accumulées et répétées entraînent progressivement une baisse de l'activité cellulaire. Les cellules perdent progressivement leur capacité à se diviser, le cycle cellulaire des cellules dermiques est ralenti et leur viabilité amoindrie. L'extrait de Withania somnifera selon l'invention est capable de stimuler et de restaurer la capacité des cellules de la peau à proliférer. Il revitalise les cellules 10 soumises à un stress et dynamise le développement cellulaire. Cette caractéristique permet notamment à l'extrait de Withania somnifera selon l'invention d'être utile en tant qu'actif pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à favoriser le renouvellement cellulaire de la peau. Par ailleurs, lorsque les cellules cutanées sont soumises à des conditions 15 stressantes, la protection naturelle des cellules cutanées disparaît et laisse la peau sans défense. Au niveau du derme, ce sont les fibroblastes qui sont responsables de la sauvegarde de l'intégrité et de la fonctionnalité du tissu. En particulier, ils assurent le renouvellement et le remodelage de la matrice extracellulaire en 20 régulant l'équilibre existant entre la synthèse des protéines matricielles et leur dégradation par les métalloprotéinases (MMP). L'activité des MMP est régulée par l'intermédiaire d'inhibiteurs spécifiques, les TIMP (Tissue Inhibitor of MetalloProteinases). Les TIMP constituent un des systèmes naturels de défense de la peau pour limiter et contrôler la dégradation 25 des fibres de collagène de la matrice. Dans une peau non stressée, un équilibre existe entre l'expression des MMP et des TIMP. Dans des conditions de stress, l'expression des MMP est fortement augmentée alors que celle des TIMP n'est que faiblement stimulée. L'induction insuffisante des TIMP pour neutraliser l'activité induite des MMP conduit à un déséquilibre responsable de la dégradation excessive des composants matriciels du derme. L'extrait de Withania somnifera selon l'invention est également capable de renforcer les systèmes naturels de défense cutanés. En particulier, il est capable de réguler la dégradation matricielle de la peau et de rétablir l'équilibre TIMP/MMP pour protéger le tissu dermique. En outre, on sait que le vieillissement cutané et l'apparition des rides peuvent être limités par régulation de la dégradation de la matrice extracellulaire. Ainsi, l'extrait de Withania somnifera peut donc être utile en tant qu'actif pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à prévenir et/ou à traiter les signes du vieillissement cutané, en particulier destinée à prévenir et/ou lutter contre l'apparition des rides. L'épiderme est la couche superficielle de la peau en contact avec l'extérieur. Sa couche supérieure, la couche cornée, assure la protection de l'organisme vis-à-vis de son environnement extérieur. La formation de la couche cornée résulte du processus de différenciation pendant lequel les kératinocytes exercent une activité dynamique : leur renouvellement est rapide et leur activité métabolique importante. La synthèse de nombreuses protéines impliquées dans les différentes étapes du processus de différenciation est assurée et permet la formation d'une barrière cutanée efficace et fonctionnelle. Dans des conditions de stress, les kératinocytes perdent leur vitalité et leur dynamisme : le renouvellement de l'épiderme ralentit, le métabolisme décline et la machinerie cellulaire s'épuise. Le taux de renouvellement des protéines diminue et induit un vieillissement précoce des constituants cellulaires. Les cellules ne peuvent plus générer une couche cornée cohésive et intègre. Le film hydrolipidique s'appauvrit et la barrière cutanée se fragilise. La peau ne peut plus assurer sa fonctionnalité première et essentielle de protection. Elle est sujette à la déshydratation et sa résistance aux agressions 5 extérieures est amoindrie. L'extrait de Withania somnifera selon l'invention est aussi capable de dynamiser l'activité métabolique des cellules de l'épiderme pour stimuler le processus de différenciation épidermique. Il renforce les systèmes de protection cutanés, en stimulant la formation d'une fonction barrière intègre et efficace. 10 L'utilisation de l'extrait de Withania somnifera selon l'invention en tant qu'actif est donc également avantageuse pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à protéger la couche cornée et à lutter contre une déshydratation de la peau. La présente invention est maintenant décrite en détail en s'appuyant sur un 15 exemple particulier non limitatif d'extrait et sur des exemples non limitatifs de compositions, ainsi que sur des résultats d'essais illustrant certaines actions d'un extrait de Withania somnifera. 1. EXEMPLE D'UN EXTRAIT DE WITHANIA SOMNIFERA 20 I.1/ Procédé de préparation de l'extrait Le procédé de préparation de l'extrait de Withania somnifera comprend les étapes suivantes : - solubilisation de poudre de racines de Withania somnifera dans l'eau avec au moins 100g/I, de préférence en milieu basique, 25 - une ou plusieurs hydrolyse(s) enzymatique(s) successive(s) ou simultanée(s), - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - traitement thermique pour inactiver les activités enzymatiques, - filtration pour concentrer la fraction active, et - filtration stérilisante. I.2/ Caractérisation de l'extrait I.2-1/ Matières sèches : On mesure le taux de matières sèches par passage à l'étuve à 105 C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant. Le taux de matières sèches est compris entre 30 et 300 g/I, plus particulièrement entre 48 et 65 g/I. I.2-2/ Mesure du pH : Le pH mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante conduit à des valeurs comprises entre 3 et 7, plus particulièrement entre 3 et 4. I.2-3/ Détermination de la teneur en sucres totaux On utilise la méthode de DUBOIS (DUBOIS M. & al [1956], Analytical chemistry, 28, n 3 p 350-356). En présence d'acide sulfurique concentré et de phénol, les sucres réducteurs donnent un composé jaune-orangé. A partir d'une gamme étalon, on peut déterminer le taux de sucres totaux d'un échantillon. Le taux de sucres totaux de l'extrait selon la présente invention est de 18 à 213 g/I, préférentiellement de 30 à 46 g/I. I.2-4/ Caractérisation des carbohydrates a. Dosage de sucres simples Le taux de sucres simples correspond à 100% de glucose. b. Degré de polymérisation Le tableau ci-dessous montre que la fraction glucidique de l'extrait selon la présente invention comprend du glucose essentiellement sous forme d'oligosaccharides possédant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 5. Degré de polymérisation Taux de (DP) carbohydrates Oligosaccharides DP 5 76,5% Oligosaccharides 5 200 6,6% I.2-5/ Identification de la fraction active Dans le but d'identifier la ou les fractions actives, on fractionne les sucres de l'extrait selon l'invention par chromatographie gel filtration. L'efficacité de la fraction obtenue est évaluée par l'activité prolifératrice de fibroblastes humains soumis à un stress UV répété. L'analyse des résultats montre que l'efficacité de l'extrait réside dans une fraction oligosaccharidique riche en glucosides. II. EXEMPLES DE COMPOSITIONS COSMETIQUES INCLUANT UN EXTRAIT DE WITHANIA SOMNIFERA SELON L'INVENTION : La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques et/ou dermopharmaceutiques incluant un extrait Withania somnifera dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme de crèmes, émulsions huile-dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples, solutions, suspensions ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. Ces compositions contiennent entre 0,01 et 20% en poids d'un extrait de Withania somnifera. Il convient alors d'analyser la stabilité des formes galéniques incluant un extrait de Withania somnifera selon l'invention, la stabilité étant caractérisée par une absence de précipitation de l'extrait, une absence de crémage et une absence de déphasage. On peut citer des formulations ayant montré une stabilité physique incluant 5% de l'extrait de Withania somnifera selon l'invention obtenu par la mise en oeuvre du procédé décrit en I.1 Gel limpide : - Carbopol : 0,5% avec Triéthanolamine : qsp pl-I=6,5 - Phénonip : 0,7% - Principe actif : 5,0% -Eau:93,8% Gel opaque : - Sépigel 305: 2,0% - Phénonip : 0,7% - Principe actif : 5,0% - Eau:92,3% Gel émulsionné : - Montanov 202 : 3,0% -Isopropyl palmitate : 12,0% - Phénonip : 0,7% - Viscolam AT 64 : 2,0% -Principe actif : 5,0% - Eau : 77,3% Emulsion non ionique : - Montanov 202 : 3,0% Simulsol 165: 2,0% - Isopropyl palmitate : 20,0% - Phénonip : 0,7% Principe actif : 5,0% - Eau : 69,3% Emulsion anionique : - Acide stéarique : 7,0% - Triethanolamine : 3,5% - Isopropyl palmitate : 20,0% -Phénonip : 0,7% - Principe actif : 5,0% - Eau:63,8% Emulsion cationique : Quaternium-82 : 5,0% - Alcool cétylique : 2,0% - Isopropyl palmitate : 15,0% - Alcool cétéarylique : 1% - PEG 100 stéarate : 1% - Phénonip : 0,7% - Principe actif : 5,0% - Eau:70,3% De plus, des tests ont montré la compatibilité de l'extrait avec les matières premières utilisées en cosmétique. 20 III. EVALUATION DE L'EFFET D'UN EXTRAIT DE WITHANIA SOMNIFERA Les différentes études ont été réalisées pour l'extrait de Withania somnifera selon l'invention obtenu par la mise en oeuvre du procédé décrit en I.1. III.1 Etude de l'effet sur la régénération cellulaire dans des conditions extrêmes 25 Cette étude a pour objectif de déterminer l'effet de l'extrait de Withania somnifera obtenu selon l'invention sur la régénération des cellules cutanées exposées à différents stress : froid, chaud, H202 ou UV. 10 15 L'étude est réalisée sur fibroblastes humains par mesure de la viabilité cellulaire à l'aide d'une coloration au M.T.T. (méthyle thiazolyl tetrazolium). a - Stress au froid Le protocole opératoire est le suivant. A JO, les fibroblastes sont ensemencés en plaques à une densité de 25000 cellules par puits dans un milieu de culture complet. A J1, le milieu de culture est éliminé et remplacé - par du milieu de culture pour deux séries témoin (témoin à 37 C, témoin à 20 C), - par du milieu de culture contenant l'extrait de Withania somnifera selon l'invention à 0, 5% et à 2% pour deux autres séries. Les cellules sont ensuite incubées dans une étuve : - à 37 C pour une série témoin, -à 20 C pour l'autre série témoin et les deux séries traitées avec l'extrait selon l'invention. A J4, les cellules sont récupérées et on étudie la croissance cellulaire par mesure de la coloration au M.T.T.. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant : Activité Activité Récupération prolifératrice (%) prolifératrice / cellulaire (%) Témoin 37 C (%) Témoin 37 C 100 Témoin 20 C 72 -28 Extrait de Withania 85 -15 +46 somnifera 0,5% Extrait de Withania 91 -9 +68 somnifera 2% 20 Ces résultats montrent que la viabilité cellulaire des fibroblastes est réduite de 28% après un stress au froid et que testé à 2%, l'extrait de Withania somnifera selon l'invention stimule la récupération de ces fibroblastes stressés par le froid de 68%. b -Stress au chaud Le protocole opératoire est le suivant. A JO, les fibroblastes sont ensemencés en plaques à une densité de 25000 cellules par puits dans un milieu de culture complet. A J1, le milieu de culture est éliminé et remplacé - par du milieu de culture pour deux séries témoin (témoin à 37 C, témoin à 41 C), - par du milieu de culture contenant l'extrait de Withania somnifera selon l'invention à 0,5% et à 2% pour deux autres 15 séries. Les cellules sont ensuite incubées dans une étuve : - à 37 C pour une série témoin, - à 41 C pour l'autre série témoin et les deux séries traitées. A J4, les cellules sont récupérées et on étudie la croissance 20 cellulaire par mesure de la coloration au M.T.T.. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant : Activité Activité Récupération prolifératrice (%) prolifératrice / cellulaire (%) Témoin 37 C (%) Témoin 37 C 100 Témoin 41 C 71 -29 Extrait de Withania 79 -21 +27 somnifera 0,5% Extrait de Withania 86 -14 +52 somnifera 2% Ces résultats montrent que la viabilité cellulaire des fibroblastes est réduite de 29% après un stress au chaud et que testé à 2%, l'extrait de Withania somnifera selon l'invention stimule la récupération de ces fibroblastes stressés par le chaud de 52%. c -Stress au H202 Le protocole opératoire est le suivant. A JO, les fibroblastes sont ensemencés en plaques à une densité de 70000 cellules par puits dans un milieu de culture complet. A J1, le milieu de culture est éliminé et remplacé - par du milieu de culture sans ou avec H202 à 30pM, - par du milieu de culture contenant l'extrait de Withania somnifera selon l'invention à 0,5% et à 2% avec H202 30PM. A J4, les cellules sont récupérées et on étudie la croissance cellulaire par mesure de la coloration au M.T.T.. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant : Activité Activité Récupération prolifératrice (%) prolifératrice / cellulaire (%) Témoin (%) Témoin 100 Témoin H202 (30pM) 61 -39 Extrait de Withania 83 -17 +56 somnifera 0,5% Extrait de Withania 104 0 +100 somnifera 2% Ces résultats montrent que la viabilité cellulaire des fibroblastes est réduite de 39% après un stress au chaud et que testé à 2%, l'extrait de Withania somnifera selon l'invention stimule la récupération 20 de ces fibroblastes stressés par H202 de 100%. d - Stress UV Le protocole opératoire est le suivant. A JO, les fibroblastes sont ensemencés en plaques à une densité de 25000 cellules par puits dans un milieu de culture complet. A J1, à 8heures, 12heures et 16 heures, les cellules sont traitées comme suit - le milieu de culture est éliminé, - les cellules sont irradiées aux UVA (4J/cm2), sauf une série de plaques qui constitue le témoin non irradié, - les cellules sont ensuite distribuées dans des puits avec un milieu de culture contenant l'extrait de Withania somnifera selon l'invention à 0,5% et à 2% pour deux séries, et - toutes les séries de plaques sont incubées à 37 C. A J2, les cellules subissent le même traitement qu'à J1. A J4, les cellules sont récupérées et on étudie la croissance cellulaire par mesure de la coloration au M.T.T.. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant : Activité Activité prolifératrice / Récupération prolifératrice (%) Témoin non irradié (%) cellulaire (%) Témoin non irradié 100 Témoin irradié UVA 62 -38 Extrait de Withania 71 -29 +24 somnifera 0,5% Extrait de Withania 77 -23 +39 somnifera 2% Ces résultats montrent que la viabilité cellulaire des fibroblastes est réduite de 38% après un stress UVA et que testé à 2%, l'extrait de Withania somnifera selon l'invention stimule la récupération de ces fibroblastes stressés par le chaud de 39%. L'extrait de Withania somnifera selon l'invention est donc capable de revitaliser les cellules stressées par le froid, le chaud, H202 ou les UVA et dynamise ainsi le développement cellulaire. III.2 Etude de l'effet sur la protection de la matrice dermique soumise à un stress solaire Le but de cette étude est de déterminer l'effet de l'extrait de Withania somnifera selon l'invention sur la dégradation de la matrice dermique par les MMP-1 après un stress solaire, les MMP-1 étant les métalloprotéinases matricielles responsables de la dégradation des fibres de collagène I et III. L'étude est réalisée sur fibroblastes humains soumis à une exposition aux UVA induisant une augmentation importante du taux de MMP au niveau de la matrice extracellulaire. A J1, les cellules sont ensemencées en plaques puis incubées à 37 C. A J4, les cellules sont cultivées pendant 48 heures en présence ou non de l'extrait selon l'invention à 0,5%, 1% ou 2%. Elles sont ensuite irradiées à l'aide d'une lampe UV avec des intensités UVA de 15J/cm2. Après irradiation, les cellules sont maintenues à l'étuve à 37 C pendant 48 heures. A J6, les surnageants cellulaires sont récupérés. Le dosage des MMP-1 est réalisé à l'aide d'un kit de dosage ELISA. Les résultats obtenus, exprimés en pourcentage de variation du taux de MMP-1 par rapport au témoin sont présentés dans le tableau qui suit : Taux de MMP-1 (ng/ml) Variation de MMP-1 (%) Témoin non irradié 7 Témoin irradié UVA 33 Extrait de Withania 28 -15 somnifera 0,5% Extrait de Withania 20 -40 somnifera 1% Extrait de Withania 12 -64 somnifera 2% Ces résultats confirment que le taux de MMP-1 augmente considérablement lorsque les cellules sont soumises à un stress solaire. On constate que l'extrait de Withania somnifera selon l'invention dosé à 2% inhibe de 64% l'expression des MMP-1 induite par un stress UVA. En outre, l'effet inhibiteur de l'extrait selon l'invention est dose-dépendant. III.3 Etude de l'effet sur la différenciation épidermique Cette étude a pour but d'évaluer l'effet de l'extrait selon l'invention sur sa capacité à dynamiser l'activité métabolique des cellules épidermiques, en étudiant l'expression de l'involucrine, protéine impliquée dans la différenciation des kératinocytes. L'étude est réalisée sur des kératinocytes humains normaux selon le protocole opératoire suivant. A JO, les cellules sont ensemencées puis incubées à 37 C. A J3, les cellules sont traitées avec l'extrait de Withania somnifera selon l'invention à 0,5% et 1%, puis sont de nouveaux incubées à 37 C. A J5, les cellules sont récupérées et on extrait les ARN totaux qui sont reverses-transcripts. Les ADN complémentaires obtenus sont ensuite analysés par PCR (Polymerase Chain Reaction) quantitative. Les résultats obtenus, exprimés en pourcentage d'ARNm d'involucrine par rapport au témoin de référence, sont présentés dans le tableau suivant Taux d'ARNm d'involucrine (%) Témoin 100 Extrait de Withania somnifera 0,5% 116 Extrait de Withania somnifera 1% 155 Ces résultats montrent que l'extrait de Withania somnifera selon l'invention augmente la synthèse des ARNm de l'involucrine. Dosé à 1% sur kératinocytes humains normaux, il augmente de 55% la synthèse de l'involucrine. III.4 Etude de l'effet sur le renouvellement cellulaire Cette étude a pour objectif de quantifier in vivo l'effet de l'extrait selon l'invention formulé à 4% contre placebo sur le renouvellement cellulaire après 14 jours d'applications biquotidiennes. L'étude est réalisée sur 21 volontaires sains de sexe féminin, âgés de 20 à 41 ans, après coloration de la peau à l'aide de dihydroxyacétone (DHA) et par mesure régulière de la couleur de la peau au chromamètre. La coloration de la peau au DHA est réalisée par application d'un patch contenant 4% de DHA pendant 24 heures. La mesure de la couleur obtenue est effectuée 48 heures après le retrait du patch afin de laisser la coloration se développer. Les mesures sont réalisées sur des zones symétriques au niveau du ventre. Les zones de mesures après application du patch DHA sont les suivantes - une zone non traitée, - une zone traitée biquotidiennement par une formule placebo, et - une zone traitée biquotidiennement par une formule contenant 4% de l'extrait de Withania somnifera selon l'invention. La couleur de la peau est mesurée à l'aide d'un chromamètre qui convertit les couleurs situées dans la plage de perception humaine en un code numérique composé de trois paramètres : L*, qui représente la clarté, a*, qui correspond à la gamme des verts aux rouges, et b*, qui correspond à la gamme des bleus aux jaunes. Pour cette étude, deux éléments sont évalués - le paramètre b*, caractéristique de la pigmentation jaune mélanique cutanée ; plus b* diminue, plus la peau s'éclaircit ; et - AE (Aa*+Ab*+AL*)1/'2, caractéristique de la variation de la couleur ; plus AE augmente, plus la peau s'éclaircit. L'éclaircissement de la peau, dans le cadre de cette étude, est significatif d'un renouvellement des cellules de la peau. Le protocole opératoire de l'étude est le suivant. A J-3, on détermine les trois zones cutanées au niveau du ventre de chaque volontaire et on y applique des patchs contenant 4% de bHA. A J-2, on retire les patchs. A JO, on mesure la couleur de la peau sur chaque zone. Entre JO et J14, on applique biquotidiennement sur une zone une formule placebo, et sur une autre zone une formule contenant l'extrait de Withania somnifera selon l'invention. La couleur de la peau au niveau des trois zones est mesurée tous les deux jours. Les résultats obtenus pour le paramètre b* sont présentés dans le tableau ci-dessous : J2-JO J4-JO J7JO J9-JO J11-JO J14-JO Zone non traitée 0,09 -0,50 -1,67 -1,77 -2,28 -2,96 Zone traitée placebo -0,51 -0,67 -1,32 -2,54 -2,94 -3,21 Zone traitée Withania -0,45 -1,01 -2,41 -3,15 -3,46 -4,21 somnifera On constate que l'application biquotidienne de Withania somnifera selon l'invention, comparé au placebo, permet de diminuer le paramètre b*, caractéristique de la pigmentation jaune mélanique cutanée. Il y a donc un éclaircissement de la peau correspondant à une accélération du renouvellement des cellules cutanées. Les résultats obtenus pour le paramètre AE sont récapitulés dans le 5 tableau suivant : J2-JO J4-JO J7-JO J9-JO J11-JO J14-JO Zone non traitée 2,11 2,03 3,47 3,70 4,73 5,04 Zone traitée placebo 2,33 2,62 3,06 4,35 5,05 5,35 Zone traitée Withania 1,85 2,59 4,04 4,82 5,53 6,04 somnifera On constate que l'application biquotidienne de Withania somnifera selon l'invention, comparé au placebo, permet d'augmenter le paramètre AE, caractéristique de la variation de la couleur de la peau. Il y a donc un 10 éclaircissement de la peau correspondant à une accélération du renouvellement des cellules cutanées. Cette étude montre donc que l'application de Withania somnifera selon l'invention formulé à 4% comparé au placebo accélère le renouvellement cellulaire. 15 III.5 Etude de l'effet sur la perte insensible en eau L'objectif est de quantifier in vivo l'effet de l'extrait selon l'invention formulé à 4% contre placebo sur la perte insensible en eau (PIE) de la peau après 14 jours d'applications biquotidiennes, afin d'évaluer l'effet barrière de la peau. 20 La barrière cutanée joue un rôle régulateur dans l'équilibre en eau de la peau. Si la peau est lésée, il apparaît des dérèglements dans la régulation des échanges en eau. L'eau migre alors plus facilement vers le milieu extérieur, ce qui augmente la PIE. Par contre, si l'état de la barrière cutanée s'améliore, les valeurs de PIE diminuent car la régulation des échanges en eau sera assurée de façon correcte. L'étude est réalisée sur 20 volontaires sains de sexe féminin, âgés de 24 à 40 ans présentant une peau normale au niveau des bras. La mesure de la PIE est effectuée avec un Tewamètre, appareil muni d'une sonde qui mesure le gradient de vapeur d'eau se mettant en place entre la surface cutanée et l'air ambiant. Cette mesure permet d'apprécier les échanges d'eau entre la surface cutanée et le milieu environnant, et par conséquent la qualité de la fonction barrière de la peau. A JO, on détermine sur chaque volontaire trois zones de mesure au niveau du haut des bras : - une zone non traitée, - une zone traitée avec une formule placebo, et - une zone traitée avec une formule contenant 4% de l'extrait de Withania somnifera selon l'invention. On effectue une première mesure au Tewamètre. Entre JO et J13, biquotidiennement on lave les zones étudiées avec un savon irritant SLS (Lauryl Sulfate de Sodium) et on applique le placebo et la formule contenant l'extrait de Withania somnifera. L'application de SLS permet d'augmenter les pertes en eau. A J14, une mesure au Tewamètre est réalisée sur chaque zone. Les résultats obtenus pour la PIE sont présentés ci-dessous : JO J14 Zone non traitée 11,1 17,1 Zone traitée placebo 11,0 16,6 Zone traitée Withania somnifera 10,8 14,7 Variation Withania somnifera / Placebo (%) -10,4 % On constateque dans les conditions de cette étude et en comparaison au placebo, l'extrait de Withania somnifera selon l'invention formulé à 4% entraîne une diminution de la PIE engendrée par des applications répétées de SLS. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins un extrait de Withania somnifera en tant qu'actif pour une application au traitement de la peau en vue de la protéger et/ou de lutter contre toutes manifestations perturbant son activité et son apparence. 2. Utilisation d'au moins un extrait de Withania somnifera selon la revendication 1, pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à régulariser les fonctionnalités naturelles cutanées. 3. Utilisation d'au moins un extrait de Withania somnifera selon la revendication 1 ou 2, pour la préparation d'une composition cosmétique capable de dynamiser le développement cellulaire. 4. Utilisation d'au moins un extrait de Withania somnifera selon l'une des revendications 1 à 3, pour la préparation d'une composition cosmétique capable de maintenir et stimuler les systèmes naturels de défense et de protection de la peau. 5. Utilisation d'au moins un extrait de Withania somnifera selon l'une des précédentes revendications, pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à maintenir l'homéostasie dermique et à réparer et restructurer la fonction barrière cutanée. 6. Utilisation d'au moins un extrait de Withania somnifera selon l'une des précédentes revendications, pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à hydrater et à protéger la couche cornée de la peau, à prévenir et lutter contre l'apparition des rides, ou à favoriser le renouvellement cellulaire de la peau. 7. Composition cosmétique adaptée pour l'utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle contient comme 25 actif entre 0,01 et 20% d'au moins un extrait de Withania somnifera. 8. Composition cosmétique et/ou dermopharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme de crème, émulsion huile-dans-eau, émulsion eau-dans-huile, émulsion multiple, solution, suspension ou poudre. 9. Procédé d'obtention d'un extrait de Withania somnifera adapté pour l'utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'il comprend la succession des étapes suivantes : - solubilisation de poudre de racines de Withania somnifera dans l'eau avec au moins 100g/I, de préférence en milieu basique, - une ou plusieurs hydrolyse(s) enzymatique(s) successive(s) ou simultanée(s), - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - traitement thermique pour inactiver les activités enzymatiques, - filtration pour concentrer la fraction active, et - filtration stérilisante. 10. Principe actif obtenu par la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 9, caractérisé par : - un taux de matières sèches compris entre 30 et 300 g/I, - un pH compris entre 3 et 7, - une teneur en sucres totaux comprise entre 18 et 213 g/I.