FR 2905271 A1 20080307 FR 0607680 A 20060901 L'invention a pour objet un procédé de synthèse d'une surface à activité biocide ainsi que les surfaces obtenues par ledit procédé et leurs utilisations dans des domaines aussi variés que les domaines médical, cosmétique, alimentaire, de l'hygiène ou des fluides industriels, entre autres. Par "activité biocide" on entend selon la présente demande - la protection de solutions ou compositions pouvant être en contact avec la surface à activité biocide, contre les contaminations microbiennes (bactérie, virus ou champignons), voire éventuellement si nécessaire contre les contaminations cellulaires pour éliminer toute cellule vivante non désirée. De telles solutions ou compositions peuvent être par exemple des solutions à usage cosmétique, paramédical ou médical (par exemple collyres, solutions de transfusion (sang, sérum, etc.)), sirop, etc., des compositions ou solutions alimentaires, les eaux de piscines ; - la décontamination de solutions comme par exemple des effluents contaminés (eaux usées) ; - la protection d'objet contre les contaminations (formation de biofilm) comme par exemple des instruments chirurgicaux, des prothèses, mais aussi des coques de bateaux ou des objets devant subir une immersion prolongée (bouée, corps-morts , etc...). L'invention se place donc dans le domaine de la prévention de la contamination aussi bien que dans celui de la décontamination de toute matière destinée à entrer en contact avec la surface à activité biocide avec la garantie que l'agent biocide greffé sur la surface ne se retrouvera pas à l'état libre dans ladite matière. Ladite matière peut être solide, liquide ou gazeuse. Un grand nombre de solutions aqueuses ou non aqueuses, utilisables par l'Homme ou chez l'animal dans divers domaines, dont en particulier les domaines cosmétique ou pharmaceutique, et par différentes voies (à titre d'exemples non exhaustifs : voie orale, voie intraveineuse, voie intramusculaire, voie péritonéale, voie ophtalmique, voie dermique, ....) nécessitent une protection et une propreté microbiologiques de très haut niveau. A cet égard des normes très strictes ont été édictées par les autorités sanitaires. Une des méthodes actuelles pour atteindre cet objectif consiste à dissoudre un ou plusieurs conservateurs, qui sont la plupart du temps des antibactériens 2905271 2 et/ou des antifongiques, dans lesdites solutions. Dès lors ces conservateurs sont donc également consommés par l'utilisateur de la solution protégée ce qui peut conduire à des effets potentiellement indésirables, voire nocifs, pour le consommateur lors d'administrations répétées. 5 D'autre part cette procédure conduit à ne pas utiliser certains conservateurs qui pourraient s'avérer extrêmement efficaces mais qui pourraient avoir, si libres dans la solution un effet négatif sur la personne ou l'animal utilisant la solution. Afin de palier ces inconvénients majeurs, une solution est de supprimer les agents biocides dissous dans les solutions ingérées et/ou injectées et de les 10 remplacer par des agents biocides fixés de manière irréversible sur une surface solide ou semi-solide qui serait alors mise en contact avec la solution ou la composition à traiter. A ce jour, il est connu dans l'art antérieur le greffage d'agents biocides sur des surfaces par liaison chimique covalente et non pas par simple adhésion 15 ("coating") ; mais les méthodologies employées ne permettent en aucun cas d'atteindre des densités de greffage suffisantes d'agents biocides pour respecter les normes d'éradication imposées par la pharmacopée des différents pays. L'activité agent biocide nécessite un contact entre l'agent biocide et l'agent pathogène à éliminer. 20 Lorsqu'un agent biocide est en solution comme dans les systèmes classiques, le mouvement brownien des molécules et des germes éventuels est suffisant pour permettre le contact et ainsi atteindre une activité biocide minimale afin d'empêcher le développement des germes. Il n'en est pas de même lorsque l'agent biocide est greffé directement par 25 liaison covalente sur un support solide. En effet, la probabilité de collision entre les germes éventuels et les molécules d'agent biocide greffées sur un support, donc immobiles, sera moindre par rapport à une concentration identique d'agent biocide en solution. Pour augmenter cette probabilité, il faut augmenter le nombre de molécules 30 d'agent biocide greffées par rapport au nombre de molécules identiques que l'on devrait mettre en solution pour atteindre une activité équivalente. Donc quel que soit le support solide à greffer, il faut multiplier le nombre de sites en surface susceptibles de lier un agent biocide. 2905271 3 Le document WO 98/04296 décrit des substrats auxquels sont greffées des antibiotiques par l'intermédiaire d'une monocouche d'un espaceur. Le document EP 0596615 décrit des surfaces destinée à entrer en contact avec du sang ou des dérivés de sang, recouvertes d'un agent bioactif greffé par 5 l'intermédiaire d'une monocouche de polymère. Malheureusement la concentration en agents biocides fixés s'avère insuffisante pour satisfaire les pharmacopées les plus exigeantes. L'invention vise à résoudre les problèmes soulevés dans l'art antérieur en proposant une multiplication de la densité d'agents biocides greffés à un support, 10 ce qui permet de satisfaire les normes des pharmacopées les plus exigeantes, tout en garantissant qu'aucun mélange de l'agent biocide avec la matière à conserver ne se produise. Pour se faire l'invention propose de constituer à la surface d'un support une succession de couches de polymères fixées l'une à l'autre par l'intermédiaire d'un 15 amorceur de polymérisation et portant des fonctions capables de fixer un agent biocide. Les polymères servent de support aux molécules d'agent biocide. On obtient ainsi un support dont au moins une surface présente une activité biocide. Le support devient biocide en greffant les agents biocides par liaisons covalentes, indirectement par l'intermédiaire de connecteurs organiques. 20 Le support peut être la surface interne d'un contenant destiné à être mis en contact, de manière statique ou dynamique, avec la solution ou la composition à traiter. II peut être aussi une ou plusieurs, voire la totalité des surfaces externe(s) d'un objet non soluble destiné à être mis en contact, de manière statique ou 25 dynamique, avec une solution ou une composition à traiter, de manière libre ou non à l'intérieur d'un contenant tel que ceux décrits précédemment. Il peut encore être une ou plusieurs, voire la totalité des surfaces externe(s) d'un objet non soluble, destiné à être mis en contact avec une solution potentiellement contaminante, que l'on veut préserver d'une contamination voire 30 d'une colonisation par des organismes comme des algues, des champignons, des bactéries ou encore des coquillages. On pense en particulier aux coques de bateaux ou aux parois de piscines. Le support peut prendre toutes les formes désirées, qui sont en fait liées à 2905271 4 l'usage pour lequel ledit support est destiné. A cet égard on peut citer à titre d'exemple une surface plane ou pseudo-plane comme une lamelle ou une feuille, des paillettes, des billes de toute taille, des boules, une bouteille, une poche, une ampoule, une dosette, un flacon, un tube tel par exemple un cathéter, une 5 seringue, une aiguille, des gants, des tissus, des implants médicaux, des prothèses, des lentilles de contact, des instruments, par exemple chirurgicaux, des microfibres pleines ou creuses comme celles constituant par exemple un filtre, ou encore des cartouches de filtration (de dialyse par exemple), un système de transfert quand cela est nécessaire, ou enfin une combinaison de 10 ces différentes possibilités. Il peut également constituer tout ou partie d'une coque de bateaux ou tout ou partie d'un réservoir ou d'une piscine. L'invention a donc pour objet un procédé de préparation d'un support à surface à activité biocide dans lequel dans une étape A on active la surface d'un support ; 15 dans une étape B on constitue une première couche de polymère (premier polymère) à partir d'au moins un site actif du support obtenu à l'étape A ; dans une étape C on fixe au moins une molécule d'un amorceur de polymérisation sur au moins un site actif fonctionnel d'au moins un des 20 monomères du premier polymère fixés à l'étape B ; - dans une étape D on constitue une seconde couche de polymère (second polymère) à partir d'au moins un site actif généré à l'étape précédente ; éventuellement, dans une étape E on fixe au moins une molécule 25 d'agent biocide sur au moins un site actif d'au moins un des polymères fixés aux étapes B et D, ou dans une étape E' on convertit le second polymère en molécule d'agent biocide. Selon l'invention, aux étapes B et D, à partir des sites actifs de la surface du support obtenu à l'étape A, on constitue la couche de polymère soit en greffant à 30 chacune des étapes directement un polymère d'oléfine fonctionnalisée préalablement préparé à partir d'une molécule d'oléfine fonctionnalisée polymérisable (monomère d'oléfine fonctionnalisée polymérisable), soit on réalise à chacune des étapes un cycle de polymérisation d'un monomère d'oléfine 2905271 5 polymérisable. Il est aussi possible de greffer un polymère préalablement préparé soit à l'étape B soit à l'étape D et de réaliser une polymérisation d'un monomère d'oléfine fonctionnalisée polymérisable à l'autre étape (B ou D). Bien entendu, le polymère greffé ou constitué aux étapes B et/ou D peut 5 être identique ou différent. Ainsi aux étapes B et/ou D le polymère préalablement préparé et greffé peut être identique ou différent ou lorsque l'on réalise un cycle de polymérisation d'une oléfine fonctionnalisée celle-ci peut être identique ou différente. L'étape E est facultative dans la mesure ou il est possible que le (ou les) 10 polymère(s) greffé(s), ou que I' (les) oléfine(s) utilisée(s) aux étapes B et D soient initialement porteurs d'une molécule d'agent biocide. Dans ce cas l'étape E devient obsolète puisqu'il n'est plus nécessaire de fixer l'agent biocide. Cette étape E devient nécessaire lorsque les monomères constituant le (ou les) polymère(s) ne porte(nt) pas de molécules d'agent biocide. Dans ce cas lesdits 15 monomères sont porteurs de sites capables de fixer un agent biocide. Selon encore une autre variante du procédé de l'invention, une étape E peut être intercalée juste après l'étape B. Cette étape facultative supplémentaire permet de fixer des molécules d'agents biocides sur le premier polymère fixé à l'étape B, ce polymère étant porteur de fonctions capables de conduire à la 20 fixation d'un agent biocide. Par "activation de la surface d'un support" on entend toute manipulation du support permettant de générer des fonctions chimiques à la surface dudit support, lesdites fonctions chimiques étant capables de créer une liaison covalente entre la surface du support et une première molécule de monomère 25 dont la polymérisation constituera un polymère. Par "site actif' on entend toute fonction chimique, naturelle ou obtenue après activation, capable de créer des liaisons covalentes soit entre la surface du support et une première molécule du premier polymère, soit entre le premier polymère et une première molécule du second monomère dont la polymérisation 30 constituera le second polymère, soit entre le support et un amorceur de polymérisation, soit entre le premier polymère et un amorceur de polymérisation, soit entre un amorceur de polymérisation et une première molécule d'un second monomère dont la polymérisation constituera le second polymère soit encore 2905271 6 entre le premier polymère et/ou le second polymère et les molécules d'agent biocide. Quelque soit la variante envisagée, il est possible de répéter autant de fois que désirées, en boucle, les étapes B à D. 5 Selon l'invention, on entend par oléfine fonctionnalisée polymérisable, un composé hydrocarboné courant qui comporte par définition une double liaison entre deux atomes de carbone et une fonction chimique réactive portée par au moins un de ces carbones oléfiniques. Une polyoléfine fonctionnalisée est donc un polymère issu de la polymérisation d'une oléfine fonctionnalisée ou de la 10 copolymérisation d'un mélange d'oléfines fonctionnalisées. Le terme de polyoléfine fonctionnalisée couvre entre autres les familles de polymères suivantes : acides polyacryliques, acides polyméthacryliques, polyacrylamides, polyacrylonitriles, polyacrylates, polyméthacrylates, polystyrènes, ou encore chlorure de polyvinyle (PVC). 15 Selon l'invention, le premier et/ou le second monomère d'oléfine fonctionnalisée, identiques ou différents, peut (peuvent) être choisi(s) parmi les acides acryliques, les acides méthacryliques, les acrylamides, les acrylates, les méthacrylates, les acrylonitriles, les halogénures d'acide acrylique et méthacrylique, le styrène et ses dérivés substitués, le chlorure de vinyle, la 4- 20 vinyl pyridine et ses dérivés substitués, et leurs dérivés. On peut citer à cet égard l'acide acrylique, l'acide méthacrylique, l'acrylate de N,N-diméthylaminoéthyle, l'acrylate de N,N-diméthylaminoéthyle, ou n'importe quel acrylate de N,N-dialkylaminoalkyle ou n'importe quel acrylate N,N-dialkylaminoaryle. 25 Avantageusement selon l'invention on utilise à l'étape B du procédé, l'acide acrylique ou l'acide méthacrylique et à l'étape D l'acrylate de N, N-diméthylaminoéthyle, ou n'importe quel acrylate de N,N-dialkylaminoalkyle ou n'importe quel acrylate N,N-dialkylaminoaryle. Par "amorceur de polymérisation" on entend selon l'invention une molécule 30 choisie parmi la famille des peroxydes tels que le peroxyde de benzoyle, le peroxyde de dicumyle, le peroxyde de di-t-butyle, l'hydroperoxyde, l'hydroperoxyde de t-butyle, le peroxydes d'acétyle, le peroxyde de lauryle, les peroxodicarbonates, les peresters ou les peroxalates ; ou parmi la famille des 2905271 7 composés azoïques tels que l'azobisisobutyronitrile, l'azobis (cyclohexanecarbonitrile), le 2,2'-azobis (2,4-dimethylpentanenitrile), le 2,2'-azobisvaleronitrile, le 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine) dihydrochlorure, ou encore le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique). 5 L'étape A du procédé selon l'invention permet de générer des sites actifs à la surface d'un matériau a priori inerte, sites actifs qui permettront la fixation de molécules de polymère ou la polymérisation d'un premier monomère d'oléfine fonctionnalisée. L'étape B du procédé selon l'invention, permet de fixer (ou de générer la 10 polymérisation d') au moins un premier polymère à (ou à partir d') au moins un site actif généré sur le support à l'étape A du procédé selon l'invention ; L'étape C du procédé selon l'invention permet d'ajouter une entretoise (l'amorceur de polymérisation) entre les couches successives de polymères ; L'étape D du procédé selon l'invention, permet de fixer (ou de générer la 15 polymérisation d') au moins un second polymère à (ou à partir d') au moins un site actif généré à l'étape précédente, c'est-à-dire, soit à au moins un site actif du premier polymère obtenu à l'étape B, soit à au moins un site actif de l'amorceur de polymérisation (qui constitue une entretoise) fixé à l'étape C du procédé selon l'invention et de générer ainsi un polymère du second monomère fixé audit site 20 actif ou à l'entretoise. Ces étapes permettent de multiplier le nombre de sites actifs portés par les polymères et porteurs ou aptes à recevoir à terme des molécules d'agent biocide. L'étape E du procédé selon l'invention, permet de fixer un grand nombre de molécule d'agent biocide alors liées de manière covalente au support activé dans 25 la première étape. Selon l'invention, le premier et le second monomère d'oléfine fonctionnalisée, permettant d'obtenir la première et la seconde couche de polymère, peuvent être identiques ou différents. Il est aussi possible qu'aux étapes B et D, indépendamment ou simultanément, on utilise un mélange de 30 monomères. Lorsque l'on utilise aux étapes B et D simultanément deux mélanges de monomères, lesdits mélanges peuvent être identiques ou différents. Selon encore une autre variante des procédés selon l'invention, il est possible que le premier et/ou le second monomère des polymères des étapes B 2905271 8 et D puisse(nt) constituer tout ou partie de la molécule d'agent biocide finale. Dans ce cas, lorsque le premier et/ou le second polymère constitue une partie de la molécule d'agent biocide finale, le procédé selon l'invention ou sa variante comporte alors une étape E' qui n'est plus la fixation d'une molécule d'agent 5 biocide mais est une étape de conversion du second polymère en molécule d'agent biocide finale. Selon l'invention, le support peut être en tout matériau compatible d'une part avec l'usage envisagé d'autre part avec une réaction d'activation. Le support peut donc être un support solide métallique, minéral ou organique. A titre 10 d'exemple de matériau on peut citer les polyacrylates, les polyméthacrylates, les polycarbonates, les polyacrylamides, les polyacrylonitriles, les polysiloxanes, les polysaccharides telle la cellulose, les polyéthers, les polyesters saturés ou insaturés tels le téréphtalate de polyéthylène (PET), les polyuréthanes, les polyamides, les polyéthylènes (basse ou haute densité) (PE), les polystyrènes, 15 les polypropylènes (PP), les polyisoprènes, les chlorure de polyvinyle (PVC) ; les polyméthylméthacrylates (PMMA, Plexiglass), les polytétrafluoroéthylènes (PTFE, Teflon ), les copolymères tels que l'acrylonitrile-butadiène-styréne (ABS), ou encore les verres, les silicones et les métaux tels l'aluminium, l'étain, le cuivre, le nickel, le zinc, l'argent, le titane, l'indium, l'or ou le fer, ou leurs alliages. 20 Selon l'invention, à l'étape A, l'activation peut être réalisée par tout moyen capable de générer sur la surface du matériau des sites actifs, préférentiellement un maximum d'espèces réactives par unité de surface, par exemple des radicaux alkyles, des fonctions hydroperoxydes ou carbonyles. A cet égard on peut citer - l'activation chimique en utilisant des réactifs tels qu'une solution d'acide 25 chromique (H2SO4/H2O/CrO3) (S. R. Holmes-Farley, G. M. Whitesides, Langmuir 2 (1986) 266), pour aboutir à la formation de fonctions acides et cétones à la surface du PE. Une autre méthode d'oxydation consiste à utiliser le couple KMnO4/H2SO4. Cette voie d'activation crée à la surface du PE des groupements alcools, peracides, cétones, acides (S. Holmes-Farley, G. Whitesides, Langmuir 30 3 - (1987) 62) et esters. Diverses autres méthodes telles que celles utilisant l'acide nitrique fumant (D. S. Bag, S. N. Ghosh, Eur. Polym. J. 34 (1998) 855), l'acide sulfurique fumant (D. E. Bergbreiter, K. Kabza, Ind. Eng. Chem. Res. 34 (1995) 2733), l'acide chlorosulfonique ou encore des mélanges oxydants tels que 2905271 9 KCIO3/H2SO4, K2Cr2O7/H2SO4 permettent de créer à la surface du matériau une large gamme de fonctions afin d'élargir les possibilités de greffage. - l'activation couronne ou corona telle que décrite dans la littérature (H. Iwata, A. Kishida, J. Polym. Sci. A-Polym. Chem. 26 (1988) 3309, ou A. R. 5 Blythe, D. Briggs, Polymer 19 (1978) 1273), qui consiste à appliquer un champ électrique de haut voltage au travers d'un espace d'air, à pression atmosphérique, entre deux électrodes distantes de quelques millimètres, afin de créer les sites actifs, amorceurs potentiels de polymérisation, tels que des radicaux alkyles, des fonctions hydroperoxydes ou carbonyles sur la surface du 10 matériau ; l'activation plasma telle que décrite dans la littérature (J. ûS. Kong, D. û J. Lee, J. Appl. Polym. Sci., 82 (2001) 1677, ou C. M. Chan, T. M. Ko, Sun`. Sci. Rep., 24 (1996) 1-54, ou J. Meichsner, M. Zeuner, Surf. Coat. Tech., 98 (1998) 1565, ou T. Aumann, D. Theirich, Surf. Coat. Tech., 142 (2001) 169, ou D. 15 Lohmann, P. Chabrecek, brevet US 6169127 (2001), ou M. Pascu, C. Vasile, Mat. Chem. Phy.,. 80 (2003) 548, ou N. Médard, J. C. Soutif, Langmuir, 18 (2002) 2246, ou N. Médard, J. C. Soutif, Surf. Coat. Tech., 160 (2002) 197), présentant des effets équivalents à l'activation corona, mais réalisée en présence d'un gaz ou d'un mélange de gaz, tel que l'argon, l'oxygène, l'azote ou encore le 20 fluor et à basse pression ; l'activation au rayonnement ultra-violet telle que décrite dans la littérature. De nombreuses publications décrivent la modification de la surface d'un polymère à l'aide d'une activation UV. Par exemple, l'utilisation du persulfate de potassium sous l'effet d'une lampe UV permet de créer des fonctions alcools 25 à la surface du PE (H. Kubota, Y. Hariya, Polym. Degrad. Stabil. 72 (2001) 223). Il est bien connu que les persulfates d'ammonium (D. Bandopadhay, A. B. Panda, J. Appl. Polym. Sci. 82 (2001) 406) et de potassium (T. Amornsakchai, N. Liewcharoen, J. Matter. Sci. Lett., 21 (2002) 1035, ou G. J. Price, A. A. Clifton, Polymer 37 (1996) 5825) sont utilisés comme initiateurs lors de polymérisation 30 radicalaire. II est également possible d'accélérer la réaction en utilisant un photoamorceur (T. H. Kim, H. K. Kim, J. Appl. Polym. Sci. 77 (2000) 2968) tel que la benzophénone. Préférentiellement selon l'invention on réalise à l'étape A du procédé selon 2905271 10 l'invention une activation corona (couronne) ou plasma. Selon l'invention, le premier cycle de polymérisation de l'étape B peut être réalisé en mettant en présence le support activé obtenu à l'étape A et le premier monomère d'oléfine fonctionnalisée choisi, à une température comprise entre 5 50 C et 150 C, préférentiellement entre 60 C et 120 C, très préférentiellement à 80 C, pendant un temps compris entre 60 et 180 minutes, préférentiellement entre 90 et 150 minutes, très préférentiellement pendant 120 minutes. Selon l'invention, l'étape C peut être réalisée en mettant en présence le support porteur du premier polymère obtenu à l'étape B et un amorceur de 10 polymérisation tel que ceux de - la famille des peroxydes : peroxyde de benzoyle, peroxyde de dicumyle, peroxyde de di-t-butyle, hydroperoxyde, hydroperoxyde de t-butyle, peroxydes d'acétyle, peroxyde de lauryle, les peroxodicarbonates, les peresters ou les peroxalates, ou autres ; 15 - la famille des composés azoïques : azobisisobutyronitrile, azobis (cyclohexanecarbonitrile), 2,2'-azobis (2,4-dimethylpentanenitrile), 2,2'-azobisvaleronitrile, 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine) dihydrochlorure, 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) ou autre ; Préférentiellement on utilise selon l'invention soit du 2,2'-azobis (2- 20 méthylpropionamidine) dihydrochlorure, soit du 4,4'-azobis (acide 4-cyanovalérique) modifié, après avoir activé les fonctions de la première couche de polymère créée dans l'étape B afin d'accueillir ces amorceurs. Préférentiellement, ces fonctions sont des fonctions acides carboxyliques issues de la polymérisation de l'acide acrylique ou méthacrylique qui seront activées par 25 des agents de couplage comme par exemple l'éthylchloroformiate, la N-méthylmorpholine, en présence de diméthylformamide (DMF) comme solvant, ou tout autre agent de couplage en présence de tout autre solvant convenable, à température ambiante (environ 25 C) et sous atmosphère inerte (par exemple sous azote), pendant un temps compris entre 5 et 25 minutes, préférentiellement 30 entre 10 et 20 minutes, avantageusement pendant 15 minutes. La modification du 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) peut être réalisée en mettant en présence cet amorceur et du chlorure de thionyle à une température comprise entre 100 C et 140 C, préférentiellement entre 110 C et 2905271 11 130 C, avantageusement à une température de 120 C, pendant un temps compris entre 10 et 30 minutes, préférentiellement entre 15 et 25 minutes, avantageusement 20 minutes afin d'obtenir le dérivé dichloré du 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique). Le dérivé dichloré obtenu peut alors être mis à réagir 5 avec un a,co-aminoalcool de longueur de chaîne variable dont la fonction amine aura préalablement été protégée par un groupe protecteur tel le dicarbonate de tertiobutyle. Le couplage du dérivé dichloré avec l'aminoalcool protégé se fait préférentiellement dans du dichlorométhane entre 0 et 25 C pendant 12heures. La déprotection des fonctions alcools du 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) 10 ainsi modifié se fait en présence d'un mélange acide trifluoroacétique/Dichlorométhane (1/1) à température ambiante pendant un temps compris entre 30 et 90 minutes, préférentiellement entre 45 et 75 minutes, avantageusement pendant 60 minutes pour obtenir le sel de bis ammonium correspondant de l'acide trifluoroacétique. 15 Bien que le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) ait besoin d'une modification chimique avant d'être greffé afin de présenter des extrémités azotées au lieu d'extrémités carboxyliques, son utilisation apparaît plus appropriée que celle de la 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine) non modifié puisqu'il permet un meilleur rendement de greffage. En effet, la 2,2'-Azobis (2méthylpropionamidine) est seulement soluble dans les solvants polaires comme l'eau ou le méthanol ; or les fonctions anhydrides précédemment créées lors de l'activation des fonctions acides carboxyliques de la première couche de polymère par des agents de couplage tels que le chloroformiate d'éthyle peuvent réagir avec les solvants hydroxylés tels que l'eau ou le méthanol et donner lieu à 25 une compétition entre ces réactions secondaires de dégradation et l'étape de greffage de l'amorceur. L'utilisation du 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) modifié, soluble dans une gamme plus étendue des solvants, permet d'éviter ces réactions secondaires et un plus grand rendement de greffage est atteint. Selon l'invention, le second cycle de polymérisation de l'étape D peut être 30 réalisé en mettant en présence le support porteur du premier polymère obtenu à l'étape B sur lequel on a fixé l'amorceur de polymérisation, préférentiellement le 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine), ou le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) modifié, et le second monomère d'oléfine fonctionnalisée choisi, à une 2905271 12 température comprise entre 50 C et 150 C, préférentiellement entre 60 C et 120 C, très préférentiellement à 80 C, pendant un temps compris entre 60 et 180 minutes, préférentiellement entre 90 et 150 minutes, très préférentiellement pendant 120 minutes. 5 Selon l'invention, les molécules d'agent biocide fixées à l'étape E du procédé selon l'invention, peuvent appartenir aux différentes classes de molécules possédant un squelette organique au sens chimique du terme. A cet égard on peut citer les agents biocides du type antibactériens, antifongiques, antiviraux, algicides, ou encore antiparasitaires. 10 Parmi les antibactériens on peut citer : - les conservateurs comme ceux de type ammoniums quaternaires tels que le chlorure de benzalkonium, le benzododécinium, le cetrimide, de type mercuriel (thimerosal, sels de phenylmercure), de type parabènes (parahydroxybenzoates de méthyle, butyle, propyle), de type alcool (alcool benzylique, chlorobutanol), ou 15 encore les sels de chlorhexidine ou la picloxydine ; - les antibiotiques, préférentiellement ceux agissant au niveau de la paroi cellulaire, comme par exemple ceux comportant un noyau R-lactame comme les pénicillines, les céphalosporines, les monolactames, les thiénamycines, les inhibiteurs de R-lactamases, les inhibiteurs de la synthèse des peptidoglycanes, 20 des polypeptides basiques comme les bacitracines ou la novocine, les sels d'ammonium quaternaire tels que ceux de la famille des imidazoles comme la nystatine, l'amphotéricine B, des composés aliphatiques comme l'undécylénate de zinc de calcium ou desodium, ceux de la famille des carbamates, des dithiocarbamates et des iodocarbamates comme le 3-iodo-2-butylcarbamates, 25 des dérivés organomercuriels comme le silicate de méthoxyéthylmercure, des composés hétérocycliques comme les triazines ou la 1,3,5, hexahydriotriazine, des dérivés de l'isothizoline, du pyridine éthione, les alcools aminés ; - les antiseptiques tels que les biguanides (par exemple la chlorhexidine), les alcools, les tensioactifs de type ammonium quaternaire, les diamidines (par 30 exemple l'hexamidine) ou encore les carbanilides. Parmi les antifongiques on peut citer par exemple ceux de la famille des polyènes (amphotérine B déoxycholate et formes lipidiques), des analogues nucléosidiques (par exemple 5-fluoro-cytosine,...), des azolés (Ketoconazole, 2905271 13 fluconazole, itraconazole, voriconazole,...), des echinocandines (caspofonfine,....). Parmi les algicides on peut citer la DL-méthionine ou ses analogues hydroxyles. 5 Bien entendu selon l'invention il est possible d'utiliser un mélange de deux ou plus d'agents biocides. L'utilisation d'un mélange d'agents biocides permet d'éradiquer soit différents agents pathogènes simultanément, soit d'éviter des phénomènes de résistance à un agent biocide particulier. La réaction de fixation de la molécule d'agent biocide peut être réalisée 10 selon les réactions chimiques standard liées à la nature chimique de l'agent biocide à fixer. Lorsqu'à l'étape D, le second monomère constitue une partie de la molécule d'agent biocide finale, ledit monomère peut être choisi parmi les amines tertiaires comme par exemple la N,N-diméthylaminoéthyle ou encore n'importe quel N,N- 15 dialkylaminoalcane ou N,N-dialkylaminoarène. Dans ce cas, le procédé selon l'invention comporte une étape E' qui est une étape de conversion du second polymère en molécule d'agent biocide finale. Cette étape peut être une étape de quaternisation qui peut être réalisée au reflux d'acétone, en atmosphère d'azote, pendant un temps compris entre 48 et 144 20 heures, préférentiellement entre 72 et 120 heures, avantageusement pendant 96 heures, en présence d'un composé organique halogéné, par exemple un halogénure d'alkyle ou d'aryle comme par exemple le bromure ou le chlorure de benzyle ou encore un bromo ou chloro alcane linéaire ou ramifié de longueur de chaîne variable de 2 à 20 atomes de carbone ou plus. Selon l'invention on utilise 25 préférentiellement du bromure de benzyle. L'agent biocide obtenu est alors un sel d'ammonium quaternaire. L'invention a également pour objet un support à surface à activité biocide susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention. L'invention a également pour objet l'utilisation du procédé selon l'invention 30 dans la préparation d'un support à surface à activité biocide. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'un support à surface à activité biocide susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention pour conserver une matière, liquide, semi-liquide, semisolide ou solide. Ladite matière peut être 2905271 14 entre autre un produit cosmétique, un produit pharmaceutique (médicament), un produit parapharmaceutique ou un aliment. A titre de médicament on citera particulièrement les médicaments liquides comme un sirop, un collyre, ou encore un sérum, une solution de dialyse péritonéale ou du plasma sanguin. A titre de 5 cosmétique on citera particulièrement une lotion, un gel une émulsion une crème ou encore un lait. A titre d'aliment on citera sans limitation, une boisson pour l'homme ou l'animal. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'un support à surface à activité biocide susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention pour 10 décontaminer un effluent liquide ou gazeux. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'un support à surface à activité biocide susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention pour prévenir la formation d'un biofilm lors de l'immersion du support dans un milieu potentiellement contaminant. 15 Des caractéristiques et avantages de l'invention ressortent des exemples qui suivent, donnés à titre illustratif, non limitatif, en regard des figures annexées dans lesquelles : - la figure 1 illustre l'étape B du procédé selon l'invention, en décrivant la polymérisation de l'acide acrylique à la surface du polyéthylène 20 (Exemple 1.3) ; - la figure 2 illustre une étape E du procédé selon l'invention, réalisée après l'étape B, en décrivant la fixation de molécules d'agents biocides sur le premier polymère acrylique fixé à l'exemple 1.3 (Exemple 1.4) ; - la figure 3 illustre l'étape C du procédé selon l'invention, en décrivant le 25 couplage d'une entretoise avec la première couche de polymère (Exemple 1.5) ; - les figures 4 à 8 illustrent l'étape C du procédé selon l'invention, en décrivant le couplage d'un amorceur modifié, le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) modifié (Exemple 1.5.2 ) selon 30 o les figures 4, 5, 6 et 7 illustrent la modification du 4,4'-azobis (acide 4-cyanovalérique) (Exemple 1.5.2.1) en décrivant : ^ la protection de fonctions amines de différents a,waminoalcools aliphatiques de longueur variable [Exemple 2905271 15 1.5.2.1 a ), Figure 4] ; ^ la chloration des fonctions acides carboxyliques du 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) [Exemple 1.5.2.1 b ), Figure 5] ; ^ le couplage entre le dichiorure d'acide et l'a,w-aminoalcool 5 protégé [Exemple 1.5.2.1 c ), Figure 6] ; ^ la déprotection des fonctions terminales du 4,4'-Azobis (acide 4- cyanovalérique) modifié [Exemple 1.5.2.1 d ), Figure 7] ; ^ la figure 8 illustre le couplage entre le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) modifié et la première couche de polymère 10 (Exemple 1.5.2.2) ; la figure 9 illustre l'étape D du procédé selon l'invention en décrivant le greffage d'une seconde couche de polymère acrylique à partir de la première couche activée par un amorceur non modifié (Exemple 1.6) ; la figure 10 illustre l'étape D du procédé selon l'invention en décrivant 15 le greffage d'une seconde couche de polymère acrylique à partir de la première couche activée par un amorceur modifié (exemple 1.7) ; - les figures 11 et 12 illustrent l'étape E' du procédé selon l'invention (Exemple 1.8) en décrivant o la réaction de quaternisation des polyamines obtenues dans 20 l'exemple 1.6 [Exemple 1.8.1, Figure 11] ; o la réaction de quaternisation des polyamines obtenues dans l'exemple 1.7 [Exemple 1.8.2, Figure 12]. Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toutefois la limiter aucunement. Les exemples qui suivent ont été réalisés sur des plaques de 25 polyéthylène (PE) basse densité de format 2cm x 1 cm et d'épaisseur 1 mm, obtenues chez Goodfellow. Exemple 1 : Préparation d'une surface à activité biocide Exemple 1.1 : Nettoyage des plaques Le nettoyage des plaques commerciales de polyéthylène permet d'éliminer 30 les antioxydants et autres additifs adsorbés à la surface du PE, ceux-ci étant ajoutés lors de la manufacture du polymère. Ces impuretés peuvent à la fois défavoriser les réactions d'activation de la surface mais aussi gêner la lecture des spectres infrarouges obtenus par la méthode de réflexion totale atténuée 2905271 16 (ATR). Les plaques de polyéthylènes sont placées dans un soxhlet muni d'un réfrigérant et d'un ballon contenant du dichlorométhane ; un reflux de ce solvant est ensuite maintenu pendant 15 h. Le plastique est ensuite récupéré, puis mis à sécher sous vide (10"1 Torr) pendant 2 heures. Les plaques sont ainsi 5 conservées sous atmosphère inerte jusqu'à utilisation. Exemple 1.2 : activations de la surface (étape A) Plusieurs stratégies sont envisageables afin d'activer la surface du plastique obtenu à l'exemple 1.1 afin de greffer les couches successives de polymères. 10 Exemple 1.2. 1 : activation chimique par oxydation sulfochromique Le mélange oxydant est une solution aqueuse constituée d'oxyde de chrome et d'acide sulfurique (H2O/CrO3/H2SO4) dans des proportions bien établies (42 :29 :29 w/w/w). Les plaques de polyéthylènes préalablement nettoyées sont plongées dans 10 ml d'une solution sulfochromique à 75 C et 15 ceci pendant 75 secondes. Les plaques sont alors retirées et nettoyées d'abord dans de l'acétone durant 10 minutes pour être placées ensuite dans un soxhlet au reflux du dichlorométhane pendant 15h. Après séchage sous vide les plaques sont conservées sous atmosphère inerte jusqu'à utilisation pour les étapes 20 ultérieures. Exemple 1.2.2 : activation par création de fonctions hydroperoxydes sur le PE par la technologie Corona. La méthodologie d'obtention des fonctions hydroperoxydes à la surface du polyéthylène consiste à placer dans un premier temps une plaque de polymère 25 entre les deux électrodes d'un appareil à Corona. La plaque de polyéthylène est placée sur l'électrode faisant masse, face à activer orientée vers l'autre électrode. Les deux électrodes sont espacées de 2,54 cm. Un champ électrique d'environ 50000 volts est alors créé entre les deux électrodes afin d'ioniser l'air compris entre les deux électrodes. Des espèces réactives sont alors créées et 30 viennent interagir avec la surface du polyéthylène pour créer des radicaux. Ces derniers se recombinent au contact de l'air en fonction hydroperoxydes. Exemple 1.3 : Polymérisation de l'acide acrylique à la surface du polyéthylène (Figure 1) 2905271 17 12 ml d'une solution aqueuse d'acide acrylique à 25% est traversée pendant 30 minutes par un courant d'azote. Une plaque préparée suivant l'exemple 1.2.2 est alors introduite dans le milieu réactionnel. L'agitation est maintenue pendant 2 heures à 80 C. 5 La plaque est alors lavée pendant 20 heures dans une eau à 80 C afin d'éliminer toutes traces d'homopolymère éventuellement adsorbées à la surface du polyéthylène. Exemple 1.4 : fixation de molécules d'agents biocides sur le premier polymère acrylique fixé à l'exemple 1.3 (Figure 2) 10 10 ml de diméthylformamide anhydre (DMF), 6x10-3 mol de diisopropyléthylamine (DIEA), 3x10-3 mol de bromotris(pyrrolydino) phosphonium hexafluorophosphate (PyBroP ) sont successivement introduits dans un tube rodé de 15 ml, ainsi qu'une plaque de polyéthylène greffée selon le protocole décrit à l'exemple 1.3. 15 Au bout de 15 min., on ajoute au milieu réactionnel 4,5x10-3 mol d'un ammonium quaternaire possédant une fonction alcool terminale (par exemple le bromure de (11-hydroxyundécényl) benzyldiméthylammonium). Le milieu réactionnel est maintenu sous agitation et sous azote durant 45 min. afin d'aboutir, après nettoyage à l'acétone, à l'estérification des fonctions 20 acides avec le composé hydroxylé porteur de l'ammonium quaternaire. Exemple 1.5 : Couplage d'une entretoise avec la première couche de polymère (étape C) (Figure 3) Exemple 1.5.1 : Couplage d'un amorceur non modifié, le 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine) dihydrochlorure 25 La première étape de ce couplage consiste à activer les fonctions acides carboxyliques de la première couche de polymère. Pour cela dans un tube rodé de 15 ml, on ajoute à la plaque obtenue à l'exemple 1.4, sous atmosphère inerte successivement 10m1 de diméthylformamide (DMF) utilisé comme solvant, 0,2m1 de chloroformiate d'éthyle et 0,2ml de N-méthylmorpholine. On maintient 30 l'agitation du milieu durant 25 min. avant de retirer la plaque et de la nettoyer à l'acétate d'éthyle. La plaque est séchée sous flux d'azote et mise à réagir immédiatement avec le 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine) dihydrochlorure. Dans un tube rodé sous azote, on introduit 12 ml d'une solution 2905271 18 méthanolique à 10"3 mol de 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine) dihydrochlorure et la plaque dont les fonctions acides de la première couche de polymère ont été activées précédemment. On poursuit l'agitation durant 2 heures à 75 C avant de retirer la plaque du milieu. Le nettoyage s'effectue à l'acétone et 5 le séchage sous flux d'azote. Exemple 1.5.2 : Couplage d'un amorceur modifié, le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) modifié Exemple 1.5.2.1: modification du 4,4'-azobis (acide 4-cyanovalérique). a ) Protection de fonctions amines de différents a,w-aminoalcools 10 aliphatiques de longueur variable (Figure 4) On solubilise 1x10"3 mol de l'a,waminoalcool choisi (n = de 0 à 20) dans du dichlorométhane fraîchement distillé. A 0 C, on ajoute goutte à goutte 1,05x10-3 mol de Boc2O (dicarbonate de di-tertiobutyle), sous agitation. A la fin de l'addition, le mélange est maintenu à une température de 0 C pendant 2 heures, 15 sous agitation. On laisse revenir le mélange à température ambiante, sous agitation, jusqu'a disparition totale de l'a,w-aminoalcool de départ (contrôle par chromatographie en phase vapeur). Au bout d'environ 12 heures, le solvant est distillé sous pression réduite afin d'obtenir une huile visqueuse de couleur blanche. On obtient le produit recherché avec un rendement d'environ 95%. 20 b ) Chloration des fonctions acides carboxyliques du 4,4'-Azobis (acide 4- cyanovalérique) (Figure 5) Dans un ballon de 50 ml, on introduit 1x10-2 mol de 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) préalablement lyophilisé. On ajoute alors, sous flux d'azote, 15 ml de chlorure de thionyle. On monte la température du ballon à 120 C et cela 25 pendant une durée de 20min. Après refroidissement, on élimine le chlorure de thionyle en excès ainsi que les résidus de la réaction sous pression réduite (pompe à palette). La poudre légèrement jaunâtre du dichlorure de diacide est obtenue avec un rendement d'environ 95%. c ) Couplage entre le dichlorure d'acide et l'a,w-aminoalcool protégé 30 (Figure 6) On solubilise sous flux d'azote 1x10-2 mol de dichlorure d'acide précédemment préparé dans 30 ml de dichlorométhane anhydre. On ajoute alors 2,2x10"2 mol de triéthylamine. La température de la réaction est descendue au 2905271 19 voisinage de 0 C à l'aide d'un bain de glace. Puis on ajoute goutte à goutte 2,2x10-2 mol de l'aminoalcool protégé préalablement préparé, solubilisés dans 30 ml de dichlorométhane anhydre. A la fin de l'addition le milieu est ramené à température ambiante et maintenu sous agitation durant 12 heures. 5 On filtre le chlorure de triéthyl ammonium afin d'obtenir, après évaporation du solvant sous pression réduite un gel de couleur foncé. Le composé recherché est obtenu sous la forme d'une huile transparente, après séparation à l'aide d'une colonne de silice utilisant comme éluant un mélange acétate d'éthyle/chloroforme (1/1) avec un rendement d'environ 75%. 10 d ) Déprotection des fonctions terminales du 4,4'-Azobis (acide 4- cyanovalérique) modifié (Figure 7) La méthodologie consiste à solubiliser 1 x10"2 mol de l'amorceur modifié dans 30 ml d'un mélange 1:1 dichlorométhane/acide trifluoroacétique (TFA). L'agitation du milieu s'effectue à température ambiante (T.A.) pendant une heure. 15 On évapore les solvants sous pression réduite afin d'obtenir le sel double d'acide trifluoroacétique sous la forme d'un gel visqueux. Exemple 1.5.2.2: Couplage entre le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique) modifié et la première couche de polymère (Figure 8) On active dans un premier temps les fonctions acides carboxyliques à l'aide 20 d'un mélange chloroformiate d'éthyle/N-méthylmorpholine dans 30m1 de diméthylformamide (DMF) afin d'obtenir des fonctions anhydrides plus réactives que les fonctions acides carboxyliques. En parallèle, on prépare une solution de 1x10-2 mol de sel double de l'acide trifluoroacétique précédemment préparé correspondant à l'amorceur modifié et 2,2x10"2 mol d'une base telle la 25 triéthylamine (N(Et)3) ou encore de la diisopropyléthylamine (DIEA) dans 30 ml de DMF. On plonge la plaque dans le milieu précédent à 0 C. Au bout de deux heures d'agitation, on retire la plaque et on la lave à l'acétone. On obtient ainsi une plaque portant la première couche de polymère acrylique dont au moins une des fonctions pendantes porte un amorceur modifié greffé. 30 Exemple 1.6 : Exemple d'étape D. Greffage d'une seconde couche de polymère acrylique à partir de la première couche activée par un amorceur non modifié (exemple 1.5.1) (Figure 9) Dans un tube rodé de 15 ml, on introduit 12 ml d'un mélange (75/25) 2905271 20 dioxanne/acrylate de N,N-diméthylaminoéthyle (le monomère est préalablement distillé). On fait buller de l'azote au sein du milieu durant 20 min. Au bout de ce laps de temps, on introduit dans le milieu, la plaque de polyéthylène greffée avec l'initiateur radicalaire (obtenue à l'étape C). On chauffe à une température de 5 70 C et on laisse évoluer la réaction durant 12 heures avant de retirer la plaque du milieu. Le substrat est nettoyé dans l'acétate d'éthyle, l'acétone et au dichlorométhane (à l'aide d'un soxhlet) afin d'éliminer toute trace d'homopolymère absorbé à la surface du substrat. Exemple 1.7 : Exemple d'étape D. Greffage d'une seconde couche de 10 polymère acrylique à partir de la première couche activée par un amorceur modifié (exemple 1.5.2) (Figure 10) Dans un tube rodé de 15 ml, on introduit 12 ml d'un mélange (75/25) dioxanne/acrylate de N,N-diméthylaminoéthyle (le monomère est préalablement distillé). On fait buller de l'azote au sein du milieu durant 20 mn. Au bout de ce 15 laps de temps on introduit dans le milieu la plaque de polyéthylène greffée avec l'initiateur radicalaire modifié (obtenue à l'étape C). On chauffe à une température de 70 C et on laisse évoluer la réaction durant 12 heures avant de retirer la plaque du milieu. Le substrat est nettoyé dans l'acétate d'éthyle, l'acétone et au dichlorométhane (à l'aide d'un soxhlet) afin d'éliminer toute trace 20 d'homopolymère absorbé à la surface du substrat. Exemple 1.8 : Exemple d'étape E' Exemple 1.8.1 : réaction de quaternisation des polyamines obtenues dans l'exemple 1.6 (Figure 11) On solubilise 10"3 mol d'un composé organique bromé (on peut utiliser par 25 exemple le N-benzylbromoacetamide) dans 30 ml d'acétone. Après complète solubilisation, on plonge la plaque de PE et on laisse agiter durant 96 heures au reflux de l'acétone et cela sous azote. Au terme de la réaction, on retire la plaque du milieu et on la lave abondamment à l'acétone ainsi qu'au dichlorométhane. Exemple 1.8.2: réaction de quaternisation des polyamines obtenues dans 30 l'exemple 1.7 (Figure 12) On solubilise 10-3 mol d'un composé organique bromé (on peut utiliser par exemple le bromure de benzyle) dans 30 ml d'acétone. Après complète solubilisation, on plonge la plaque de PE et on laisse agiter durant 96 heures au 2905271 21 reflux de l'acétone et cela sous azote. Au terme de la réaction, on retire la plaque du milieu et on la lave abondamment à l'acétone ainsi qu'au dichlorométhane. Exemple 2 : Exemples d'efficacité antimicrobienne des surfaces biocides préparées 5 L'efficacité antimicrobienne des surfaces biocides préparées a été testée après 24 heures de contact selon la méthodologie décrite à la pharmacopée européenne et adaptée à des échantillons solides (plaque de 2 cm x 1 cm traitée sur une seule face). La plaque (surface à activité biocide) est directement immergée dans une 10 solution saline contaminée (105 à 106 microorganismes par millilitre de solution). Après 24 heures, un échantillon de la solution est prélevé pour détermination du nombre de microorganismes. Les résultats exprimés en réduction logarithmique sont présentés dans le tableau suivant. Ils ont été obtenus sur Staphy/ococcus aureus après 24 heures de contact. 15 Surface à activité biocide Référence de la Réduction logarithmique après 24 structure heures T24h Structure 2 de l'exemple 1.8.1 2,7 R = -CH2-CO-NH-C6H13 2,6 Structure 4 de l'exemple 1.8.1 R = -CH2-CH2-C6H5 2,2 Structure 9 de l'exemple 1.8.2 R = -CH2-CO-NH-CH2-C6H5 Les surfaces biocides démontrent une efficacité antimicrobienne de 2 à 3 réductions logarithmiques correspondant à une réduction des germes comprise entre 90% et 99% de la contamination initiale. Ces résultats ont été obtenus sur 20 une plaque seulement représentant une surface traitée biocide de 2 cm2. REVENDICATIONS 1- Procédé de préparation d'un support à surface à activité biocide dans lequel - dans une étape A on active la surface d'un support ; - dans une étape B on constitue une première couche de polymère (premier polymère) à partir d'au moins un site actif du support obtenu à l'étape A ; - dans une étape C on fixe au moins une molécule d'un amorceur de polymérisation sur au moins un site actif d'au moins un des monomères du premier polymère fixés à l'étape B ; - dans une étape D on constitue une seconde couche de polymère (second polymère) à partir d'au moins un site actif généré à l'étape précédente ; - éventuellement, dans une étape E on fixe au moins une molécule d'agent biocide sur au moins un site actif d'au moins un des polymères fixés aux étapes B et D, ou dans une étape E' on convertit le second polymère en molécule d'agent biocide. 2- Procédé de préparation selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape A d'activation est une activation chimique ou une activation couronne ou corona ou une activation plasma ou une activation au rayonnement ultra-violet, préférentiellement une activation couronne ou plasma. 3- Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce qu'aux étapes B et D, à partir des sites actifs de la surface du support obtenu à l'étape A, on constitue la couche de polymère soit en greffant à chacune des étapes directement un polymère d'oléfine fonctionnalisée préalablement préparé à partir d'une molécule d'oléfine fonctionnalisée polymérisable (premier (étape B) et/ou second monomère (étape D) d'oléfine fonctionnalisée polymérisable) soit on réalise à chacune des étapes un cycle de polymérisation d'un monomère d'oléfine polymérisable. 4- Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le premier et/ou le second monomère d'oléfine fonctionnalisée polymérisable, identiques ou différents, est (sont) choisi(s) parmi les acides acryliques, les acides méthacryliques, les acrylamides, les acrylates, les méthacrylates, les acrylonitriles, les halogénures d'acide 2905271 23 acrylique et méthacrylique, le styrène et ses dérivés substitués, le chlorure de vinyle, la 4-vinyl pyridine et ses dérivés substitués, et leurs dérivés. 5- Procédé de préparation selon la revendication 4, caractérisé en ce que le premier monomère utilisé à l'étape B du procédé est de l'acide acrylique ou 5 de l'acide méthacrylique et/ou le second monomère utilisé à l'étape D du procédé est de l'acrylate de N, N-diméthylaminoéthyle ou de N,N-diméthylaminoalkyle. 6- Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le monomère utilisé aux étapes B et D constitue tout 10 ou partie de la molécule d'agent biocide finale. 7- Procédé de préparation selon la revendication 6, caractérisé en ce que lorsque le monomère utilisé aux étapes B et/ou D constitue une partie de la molécule d'agent biocide finale, le procédé selon l'invention ou sa variante comportant alors une étape E' de conversion du second polymère en 15 molécule d'agent biocide finale. 8- Procédé de préparation selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'étape E' de conversion du polymère en molécule d'agent biocide finale est une étape de quaternisation. 9- Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, 20 caractérisé en ce que l'amorceur de polymérisation est une molécule choisie parmi la famille des peroxydes telle que le peroxyde de benzoyle, le peroxyde de dicumyle, le peroxyde de di-t-butyle, l'hydroperoxyde, l'hydroperoxyde de t-butyle, le peroxydes d'acétyle, le peroxyde de lauryle, les peroxodicarbonates, les peresters ou les peroxalates ; ou parmi la 25 famille des composés azoïques tels que l'azobisisobutyronitrile, l'azobis (cyclohexanecarbonitrile), le 2,2'-azobis (2,4-dimethylpentanenitrile), le 2,2'-azobisvaleronitrile, le 2,2'-Azobis (2-méthylpropionamidine) dihydrochlorure, ou encore le 4,4'-Azobis (acide 4-cyanovalérique). 10- Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, 30 caractérisé en ce que le support est un support solide métallique, minéral ou organique. 11- Procédé de préparation selon la revendication 10, caractérisé en ce que le support est en un matériau choisi parmi les polyacrylates, les 2905271 24 polyméthacrylates, les polycarbonates, les polyacrylamides, les polyacrylonitriles, les polysiloxanes, les polysaccharides telle la cellulose, les polyéthers, les polyesters saturés ou insaturés tels le téréphtalate de polyéthylène (PET), les polyuréthanes, les polyamides, les polyéthylènes 5 (basse ou haute densité) (PE), les polystyrènes, les polypropylènes (PP), les polyisoprènes, les chlorure de polyvinyle (PVC) ; les polyméthylméthacrylates (PMMA, Plexiglass), les polytétrafluoroéthylènes (PTFE, Teflon ), les copolymères tels que l'acrylonitrile-butadiène-styréne (ABS), ou encore les verres, les silicones et les métaux tels l'aluminium, 10 l'étain, le cuivre, le nickel, le zinc, l'argent, le titane, l'indium, l'or ou le fer, ou leurs alliages. 12- Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que l'agent biocide est choisi parmi les antibactériens, antifongiques, antiviraux, algicides, ou encore antiparasitaires. 15 13- Procédé de préparation selon la revendication 12, caractérisé en ce que les antibactériens sont choisis parmi les conservateurs, les antibiotiques, ou les antiseptiques. 14- Procédé de préparation selon la revendication 13, caractérisé en ce que les conservateurs sont choisis parmi des conservateurs de type ammoniums 20 quaternaires tels que le chlorure de benzalkonium, le benzododécinium, le cetrimide ; de type mercuriel tels que le thimerosal ou les sels de phenulmercure ; de type parabènes comme le parahydroxybenzoates de méthyle, de butyle, ou de propyle ; de type alcool comme l'alcool benzylique ou le chlorobutanol ; ou les sels de chlorhexidine ou la picloxydine. 25 15- Procédé de préparation selon la revendication 13, caractérisé en ce que les antibiotiques sont choisis parmi ceux agissant au niveau de la paroi cellulaire, comme par exemple ceux comportant un noyau 3-lactame comme les pénicillines, les céphalosporines, les monolactames, les thiénamycines, les inhibiteurs de p-lactamases, les inhibiteurs de la 30 synthèse des peptidoglycanes, des polypeptides basiques comme les bacitracines ou la novocine, les sels d'ammonium quaternaire tels que ceux de la famille des imidazoles comme la nystatine, l'amphotéricine B, des composés aliphatiques comme l'undécylénate de zinc de calcium ou de 2905271 25 sodium, ceux de la famille des carbamates, des dithiocarbamates et des iodocarbamates comme le 3-iodo 2 butylcarbamates, des dérivés organomercuriels comme le silicate de méthoxyéthylmercure , des composés hétérocycliques comme les triazines ou la 1,3,5, 5 hexahydriotriazine, des dérivés de l'isothizoline, du pyridine éthione, les alcools aminés. 16- Procédé de préparation selon la revendication 13, caractérisé en ce que les antiseptiques sont choisis parmi les biguanides (par exemple la chlorhexidine), les alcools, les tensioactifs de type ammonium quaternaire, 10 les diamidines (par exemple l'hexamidine) ou encore les carbanilides. 17- Procédé de préparation selon la revendication 12, caractérisé en ce que les antifongiques sont choisis parmi ceux de la famille des polyènes (amphotérine B déoxycholate et formes lipidiques), des analogues nucléosidiques (par exemple 5-fluoro-cytosine), des azolés (Ketoconazole, 15 fluconazole, itraconazole, voriconazole), ou encore des echinocandines (caspofonfine). 18- Procédé de préparation selon la revendication 12, caractérisé en ce que les algicides sont choisis parmi la DL-méthionine ou ses analogues hydroxyles. 19- Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, 20 caractérisé en ce que l'on répète autant de fois que désirées, en boucle, les étapes B à D. 20- Support à surface à activité biocide susceptible d'être obtenu par le procédé décrit dans l'une quelconque des revendications 1 à 19. 21- Support selon la revendication 20, caractérisée en ce que le support est une 25 surface plane ou pseudo-plane comme une lamelle, des billes de toute taille, des boules, une bouteille, une poche, une ampoule, une dosette, un flacon, un tube tel par exemple un cathéter, une seringue, une aiguille, des gants, des tissus, des implants médicaux, des prothèses, des lentilles de contact, des instruments, par exemple chirurgicaux, tout ou partie d'une 30 coque de bateaux, des microfibres pleines ou creuses comme celles constituant par exemple un filtre éventuellement placé à la sortie d'un récipient ou encore des cartouches de filtration (dialyse par exemple), un 2905271 26 système de transfert quand cela est nécessaire, ou enfin une combinaison de ces différentes possibilités. 22- Utilisation d'un support à surface à activité biocide selon l'une quelconque des revendications 20 ou 21 pour conserver une matière, liquide, semi- 5 liquide, semi-solide ou solide, à usage cosmétique, pharmaceutique, parapharmaceutique ou alimentaire. 23- Utilisation selon la revendication 22, caractérisée en ce que le médicament est un médicament liquide comme un sirop, un collyre, ou encore un sérum, une solution de dialyse péritonéale ou du plasma sanguin. 10 24- Utilisation selon la revendication 22, caractérisée en ce que le produit cosmétique est une lotion, un gel une émulsion une crème ou encore un lait. 25- Utilisation selon la revendication 22, caractérisée en ce que l'aliment est une boisson pour l'homme ou l'animal. 15 26- Utilisation selon la revendication 22, pour décontaminer un effluent liquide ou gazeux. 27- Utilisation d'un support à surface à activité biocide selon l'une quelconque des revendications 20 ou 21 pour prévenir la formation d'un biofilm lors de l'immersion du support dans un milieu potentiellement contaminant. 20 28- Utilisation du procédé décrit dans l'une quelconque des revendications 1 à 19, dans la préparation d'un support à surface à activité biocide.