FR 2905854 A1 20080321 FR 0608129 A 20060915 -1- La présente invention a pour objet l'utilisation de la xanthoxyline, et des extraits de plantes la contenant pour le traitement de la cellulite. La xanthoxyline définie comme le 4,6-dimethoxy-2-hydroxyacetophenone est également appelée la brevifoline. Cette molécule est d'origine naturelle. Elle est présente dans de nombreux végétaux regroupés principalement dans 2 familles botaniques, les Rutaceae où on la trouve présente dans les plantes suivantes = Mélicope borbonica, Phlebalium tuberculosum, Phlebalium filifolium, dans le genre Zanthoxylum avec Z. rhoifolium, Z.armatum, Z. bungeanum, Z. piperitum ; l'autre famille riche en xanthoxyline est celle des Euphorbiaceae avec Croton nepetaefolium, Hippomane mancinella, Sapium sebiferum, Sebastiana schottina, Euphorbia quinquecostata et Euphorbia fidjiana. Elle est également décrite dans une Inuleae = Blumea balsamifera et une Asteraceae = Artemisia brevifolia. La xanthoxyline a déjà fait l'objet de certains travaux de 20 valorisation. Ses propriétés antifongique et antimicrobienne ont été largement travaillées. L'activité antifongique est modérée en particulier sur Candida albicans et Penicillium expansum (Simonsen H. T., Phytotherapy Research, Jul 2004, vol 18, n 25 7, p 542-545) et sur les champignons pathogènes comme le Trichophyton (Pinheiro T.R. and coll. Arzneimittel -Forschung, Dec 1999, vol 49, n 12, p 1039-1043). L'activité antibactérienne est également moyenne sur les bactéries Gram positives et Gram négatives (Gonzaga - Wellington A. and 30 coll, Planta Medica, Apr 2003, vol 69, n 4, p 371-374). En thérapeutique, la xanthoxyline ainsi que certains dérivés furent travaillés essentiellement comme antispasmodique (Cechinel-Filho V. and coll, Journal of Pharmaceutical Sciences, Apr 1995, vol 84, n 4, p 473-475; Calixto J. B. 2905854 -2- and coll, Planta Medica, Feb 1990, vol 56, n 1, p 31-35 ; Hashimoto and coll, Planta Medica, 2001, vol 67 n 2, p 179-81). La xanthoxyline a également fait l'objet de protection dans 5 le domaine thérapeutique comme modulateur des activités cystéine protéase (WO 9930699). De façon surprenante et inattendue, la demanderesse a mis en évidence une activité originale de la xanthoxyline, et 10 d'extraits végétaux la contenant, sur l'inhibition de la différenciation des pré-adipocytes en adipocytes. Ce type d'activité est particulièrement intéressant dans l'application cosmétique amincissante, puisque lorsque les pré-adipocytes se différencient en adipocytes, cela se 15 traduit par une surcharge de graisse encore plus importante au niveau du tissu adipeux et en particulier cellulitique. La présente invention concerne donc l'utilisation de la xanthoxyline pour un traitement amincissant ; et pour la prévention ou le traitement des surcharges adipeuses et de la cellulite. Au sens de la présente invention, la xanthoxyline peut être obtenue par voie chimique ou à partir d'un extrait végétal. 25 La présente invention concerne de préférence l'utilisation d'extraits végétaux contenant de la xanthoxyline : avantageusement, l'extrait végétal est issu des plantes de la famille des Rutaceae : Mélicope borbonica, Phlebalium 30 tuberculosum, Phlebalium filifolium, dans le genre Zanthoxylum avec Z. rhoifolium, Z.armatum, Z. bungeanum, Z. piperitum ; des Euphorbiaceae : Croton nepetaefolium, Hippomane mancinella, Sapium sebiferum, Sebastiana schottina, Euphorbia quinquecostata, Euphorbia fidjiana mais aussi de 2905854 -3- Blumea balsamifera et Artemisia brevifolia et autres plantes la contenant. Préférentiellement, la xanthoxyline est issue d'un extrait de Zanthoxylum bungeanum. L'extrait végétal est préparé selon des étapes de préparation 5 classiques connues de l'homme du métier. La plante séchée préférentiellement est broyée puis extraite avec un solvant organique pouvant être un alcane (pentane, hexane, heptane, octane, cyclohexane), un éther oxyde (tetrahydrofurane, dioxane, diethyl éther), un ester (acétate 10 d'éthyle, acétate d'isopropyle), un alcool (méthanol, éthanol, propanol, isopropanol, butanol), une cétone (méthyl éthyl cétone, dimethylcetone, méthyl isobutyl cétone), un hydrocarbure halogéné (chloroforme, dichlorométhane), l'eau et un mélange toute proportion miscible de ces solvants. 15 L'extraction est réalisée dans un ratio plante/solvant compris entre environ 1/1 et environ 1/20 et peut être renouvelée 2 à 3 fois. La température du solvant d'extraction peut être égale à la température ambiante ou supérieure, pouvant atteindre la température d'ébullition du solvant 20 engagé. Le temps de contact de la plante avec le solvant est compris entre environ 30 min et environ 72 heures. On procède ensuite à une séparation solide/liquide, la plante étant séparée du solvant par filtration ou centrifugation. Le filtrat obtenu peut être soit : ^ mis à sec directement par évaporation totale du solvant d'extraction et constituer l'extrait final, ^ conservé liquide dans le solvant d'extraction s'il est compatible avec son utilisation. Dans ce cas il peut être plus ou moins concentré par une étape 30 d'évaporation, ^ purifié. Cette étape de purification peut être effectuée par des techniques connues de l'homme de l'art comme l'extraction liquide/liquide entre 2 solvants non miscibles, l'absorption sur un support comme de la 2905854 -4- silice, une résine échange d'ions, un support apolaire comme le polystyrène, la précipitation, la cristallisation, la sublimation. Après purification, l'extrait peut être séché par évaporation du solvant 5 puis séchage, il peut être également mis en solution dans un solvant compatible avec son utilisation. Un extrait obtenu par extraction, séparation solide/liquide puis séchage contient une fraction massique de xanthoxyline 10 comprise entre 0,1 et 30 g pour 100 g de matière sèche de l'extrait, et préférentiellement comprise entre 1 et 15 g pour 100 g de matière sèche de l'extrait . Si l'extrait est maintenu en solution, la teneur en matière sèche de l'extrait liquide est comprise entre 0,1 g et 80 g pour 100 ml 15 d'extrait liquide selon la concentration effectuée. La teneur en xanthoxyline peut s'exprimer selon la matière sèche contenue dans l'extrait liquide, elle sera alors comprise entre 0,1 et 30 g pour 100 g de cette matière sèche, et préférentiellement comprise entre 1 et 15 g pour 100 g de 20 matière sèche. Les techniques de purification permettent d'obtenir des extraits enrichis en xanthoxyline dont la fraction massique en xanthoxyline est supérieure à 30 g pour 100 g de matière sèche de l'extrait selon les techniques entreprises. 25 Avantageusement, ladite fraction massique en xanthoxyline est comprise entre 50 g et 100 g pour 100 g de matière sèche de l'extrait enrichi. La synthèse chimique de la xanthoxyline est connue de l'homme 30 du métier. Elle est notamment décrite dans Hunan Huagong : 1999 : vol 29(6), P 27-28, ISSN :1005-8435. La présente invention se rapporte également aux compositions cosmétiques comprenant de la xanthoxyline comme principe 2905854 -5- actif amincissant. Au sens de la présente invention, la xanthoxyline agit comme principe actif pour la prévention ou le traitement des surcharges adipeuses et de la cellulite. La xanthoxyline desdites compositions peut être obtenue par 5 voie chimique ou à partir d'un extrait végétal. De préférence, l'extrait est issu des plantes de la famille des Rutaceae : Mélicope borbonica, Phlebalium tuberculosum, Phlebalium filifolium, dans le genre Zanthoxylum avec Z. rhoifolium, Z.armatum, Z. bungeanum, Z. piperium , des 10 Euphorbiaceae : Croton nepetaefolium, Hippomane mancinella, Sapium sebiferum, Sebastiana schottina, Euphorbia quinquecostata, Euphorbia fidjiana mais aussi de Blumea balsamifera et Artemisia brevifolia et autres plantes la contenant. De façon préférée, la xanthoxyline est extraite de 15 Zanthoxylum bungeanum. La composition selon la présente invention peut contenir en outre d'autres actifs bien connus de l'homme du métier pour le traitement aminicissant: on citera de façon non 20 limitative : la caféine, la phloridzine, la forskoline, l'hespéridine méthyl chalcone, les extraits de Piloselle, de Ruscus, de Lierre, de branches de Pommier, de Coleus forskollii, 25 Ladite composition est de préférence sous forme topique ou orale. Avantageusement, la forme topique est un gel, un spray, une crème, un gel crème, une pommade, un lait ou une lotion. Cette composition peut aussi se présenter sous une forme orale, telle qu'un comprimé, gélule, poudre pour suspensions buvables. Enfin, la présente invention concerne également une méthode de traitement cosmétique de la peau pour prévenir ou réduire 2905854 -6- les surcharges adipeuses et la cellulite qui consiste en une administration par voie topique sur la zone de la peau nécessitant un tel traitement ou par voie orale d'une composition à base de xanthoxyline. Avantageusement, la forme 5 topique est choisie dans le groupe comprenant un gel, un spray, une crème, un gel crème, une pommade, un lait ou une lotion. Avantageusement, la forme orale est choisie dans le groupe comprenant des comprimés, des gélules et des poudres pour suspension buvable. 10 Les préparations et les compositions suivantes sont citées à titre d'exemples illustratifs et non limitatifs. EXEMPLES DE PREPARATION DE L'EXTRAIT VEGETAL EXEMPLE 1 : préparation d'un extrait de racines de Sebastiania schottiana. 5 kg de racines sèches broyées de Sebastiania schottiana sont 20 extraites à 2 reprises par 30 1 et 20 1 d'éthanol à 95 % à reflux. Après concentration des filtrats groupés à 30 1 environ on rajoute 10 1 d'alcool absolu, on glace à + 4 C une nuit et on filtre à froid rapidement sous pression pour éliminer les 25 éventuelles cires présentes. L'extrait fluide obtenu est dosé en hydroxy-methoxyacétophénone. Sa teneur en xanthoxyline se situe entre 0,1 et 5 % par rapport à la matière sèche. 30 EXEMPLE 2 : préparation d'un extrait de péricarpes de fruits de Zanthoxylum bungeanum 15 2905854 -7100 kg de péricarpes de fruits de Zanthoxylum bungeanum sont broyés et extraits à reflux 2 fois avec 500 1 d'heptane. Après concentration en extrait mou on ajoute 1000 1 d'alcool absolu. On concentre jusqu'à élimination totale de l'heptane 5 résiduel par azéotropie et on glace à + 4 pendant 1 nuit. Le floculat cireux est éliminé par filtration sous pression et l'extrait fluide est standardisé à 1 g/1 en xanthoxyline. EXEMPLE 3 : préparation de xanthoxyline sous forme 10 cristallisée à partir d'un extrait de péricarpes de fruits de Zanthoxylum bungeanum 100 kg de péricarpes de fruits de Zanthoxylum bungeanum broyés sont extraits à reflux par 500 1 d'éthanol 90 %. 15 Le filtrat est concentré sous vide à 100 1 environ et le principe actif enrichi par extraction liquide/liquide par 3 x 20 1 d'heptane. Les phases heptane groupées sont mises à sec. La xanthoxyline brute est redissoute dans 5 1 d'éthanol absolu chaud. Cette 20 solution refroidie est soumise à un glaçage 24 h à + 2 C et filtrée froide très rapidement. Par concentration à environ 11 et repos à température ambiante on obtient environ 1 kg de xanthoxyline cristallisée, séparée par filtration et lavage sur filtre par 200 ml d'éthanol absolu froid, puis séchage 25 sous vide à température ambiante. Sa pureté se situe entre 95 et 100 %. EXEMPLE 4 : préparation de xanthoxyline sous forme cristallisée à partir d'un extrait de péricarpes de fruits de 30 Zanthoxylum bungeanum Il est également possible d'obtenir le principe actif par sublimation directe à partir des péricarpes broyés chauffés au bain-marie bouillant et en opérant sous un vide de 15 mm 2905854 -8- Hg. La xanthoxyline est recueillie cristallisées sur le condenseur froid (10 C) , sa pureté se situe entre 95 et 100 %. 5 EXEMPLE DE COMPOSITION COSMETIQUE Gel crème amincissant . - Xanthoxyline 0,001 à 1% 10 -Hespéridine méthyl chalcone 0,3 à 1% - Caféine base 1 à 5% - Acide caféique carboxylique 2% - Extrait de branches de pommiers 0,1 à 5 % -Triglycérides caprique caprylique 20% 15 - Ethanol 95% 10% -Triéthanolamine 0,3% - Polymère carboxyvinylique 0,3% - Parfum q.s. -Conservateurs colorants 20 - Eau potable q.s.p. 100g Spray amincissant zones rebelles : - Extrait de Zanthoxylum bungeanum 1 à 5% - Acide caféique carboxylique 5% 25 - Extraits de branches de pommier 0,1 à 10% -Carbonate de guanidine 0,5% - Extrait fluide de Ruscus 1% - Alcool polyvinylique 0,2% - P.E.G. 400 1% 30 - Alcool à 95% 30% - Eau potable q.s.p. 100g 2905854 -9- Crème de massage amincissante décongestionnante : - Extrait de Zanthoxylum bungeanum 1 à 10% - Extraits de branches de pommiers 0,1 à 10% - Extrait de piloselle 1 à 5% 5 - Caféine carboxylate de 3 nicotinol 1 à 20% Acétate de vitamine E 0,5% Excipient de massage q.s.p. 100g EVALUATION PHARMACOLOGIQUE 10 ETUDE IN VITRO DE L'ACTION D'UN EXTRAIT SEC DE ZANTHOXYLUM BUNGEANUM ET DE XANTHOXYLINE SUR LA DIFFERENCIATION ADIPOCYTAIRE 15 La différenciation adipocytaire (différenciation des préadipocytes en adipocytes) est un phénomène biologique complexe régulé au niveau moléculaire par l'activation de gènes spécifiques conduisant à un phénotype adipocytaire particulier caractérisé par l'accumulation de gouttelettes 20 lipidiques. Les adipocytes sont capables d'hydrolyser les triglycérides et de libérer ainsi des acides gras et du glycérol, traceur de la lipolyse. La demanderesse a étudié d'une part l'effet d'un extrait sec 25 de Zanthoxylum bungeanum, et d'autre part l'effet de la xanthoxyline sur le processus de différenciation et prolifération adipocytaires. La référence utilisée pour cette étude est la cytokine TNFa (connue pour inhiber l'accumulation des triglycérides) dans le modèle de 30 différenciation des adipocytes durant une longue période de culture (Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism : PETRUSCHKE T., 1993, 76(3) :742-747). 2905854 - 10- Protocole expérimental : Les pré-adipocytes 3T3F442A sont capables de se différencier en adipocytes en présence d'insuline, de 3-isobutyl-lméthylxanthine et de dexaméthasone (the Journal of 5 Pharmacology and Experimental Therapeutics : RIVAL Y., 2004, 311(2) : 467-475). Cette différenciation s'accompagne d'une accumulation de gouttelettes intracellulaires de triglycérides mises en évidence par le réactif Adipored Assay Reagent (CAMBREX, PT-7009). 10 Les cellules 3T3F442A sont cultivées dans un milieu DMEM (GiscoBRL, ref 32430-027) contenant 10% de sérum de veau foetal à 37 C, 5% CO2 en atmosphère humide. Elles sont ensemencées à 5000 cellules par puits (plaque 96 puits). Deux 15 jours après l'obtention d'un tapis cellulaire confluent, les cellules sont mises en condition de différenciation dans du milieu contenant 1,7 pM d'insuline, 0,5M de 3-isobutyl-lméthylxanthine et 1 M de dexaméthasone, en présence ou pas des produits pendant 7 jours. Les produits testés sont d'une 20 part la forme sèche de l'extrait alcoolique de Zanthoxylum bungeanum titré à 1 g/1 de xanthoxyline préparé selon l'exemple 2 comparativement au TNFa humain (R&D, 210-TA) ; et d'autre part de la xanthoxyline obtenue selon l'exemple 3 comparativement au TNFa humain (R&D, 210-TA). 25 La visualisation et la quantification des vacuoles lipidiques intracellulaires au niveau des cellules différenciées sont analysées à l'aide du réactif Adipored, colorant fluorescent spécifique des triglycérides (lipides neutres et amphiphiles) 30 (Journal of Cell Biology : GREENSPAN P., 1985, 100 :965-973). Le milieu de culture est enlevé et les cellules sont rincées au tampon phosphate D-PBS (GIBCOBRL, ref 21300-058). Le réactif Adipored est alors ajouté. Après 10 minutes d'incubation à température ambiante, la fluorescence est 2905854 -11-mesurée (excitation 485 nm, émission 530 nm). Une analyse histologique au microscope confocal Laser (ZEISS LSM 410 Invert Laser scan Microscope) est également réalisée à 543 nm. 5 Résultats : Les figures 1 et 2 représentent l'accumulation des triglycérides dans les cellules différenciées (exprimées en unité arbitraire d'Adipored) lorsque la différenciation a été 10 induite respectivement par différentes concentrations en extrait de Zanthoxylum bungeanum et en xanthoxyline. Sept jours après le traitement par un mélange insuline, 3-isobutyl-l-methylxanthine, dexaméthasone, les pré-adipocytes 15 3T3F442A se différencient en adipocytes. Leur morphologie change, les cellules s'arrondissent et accumulent des triglycérides visualisés par le colorant Adipored au microscope confocal. La différenciation de la lignée cellulaire a été induite en 20 présence des différents produits à tester et a été estimée par quantification de l'accumulation des triglycérides. extrait de Zanthoxylum bungeanum : Les résultats sont présentés sur la figure 1 : la première 25 mesure correspond au témoin différencié en l'absence de produit à tester , puis les deux séries de mesure représentées correspondent respectivement au TNFa à 1 et 10 ng/ml et à l'extrait de Zanthoxylum bungeanum à 1, 3, 10 et 30 g/ml. 30 On observe que l'extrait de Zanthoxylum bungeanum inhibe l'accumulation de triglycérides de façon significative à 10 et 30 g/ml. 2905854 - 12 - xanthoxyline : Les résultats sont présentés sur la figure 2 : la première mesure correspond au témoin différencié en l'absence de produit à tester , la deuxième mesure correspond au TNFa à 5 5 ng/ml et enfin la série de mesures suivante correspond respectivement à des concentrations en xanthoxyline de 10, 3, 0,3 et 0,03 pg/ml. On observe que la xanthoxyline présente une activité optimale (12% d'inhibition) à la concentration de 0,3 g/ml. 10 REVENDICATIONS 1. Utilisation de la xanthoxyline pour un traitement amincissant. 2. Utilisation de la xanthoxyline pour la prévention ou le traitement des surcharges adipeuses et de la cellulite. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2 caractérisée en ce que la xanthoxyline est obtenue à partir d'un extrait végétal. 4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que l'extrait végétal est issu des plantes de la famille des Rutaceae : Mélicope borbonica, Phlebalium tuberculosum, Phlebalium filifolium, dans le genre Zanthoxylum avec Z. rhoifolium, Z.armatum, Z. bungeanum, Z. piperitum ; des Euphorbiaceae : Croton nepetaefolium, H:ippomane mancinella, Sapium sebiferum, Sebastiana schottina, Euphorbia quinquecostata, Euphorbia fidjiana et de Blumea balsamifera et Artemisia brevifolia. 5. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que l'extrait végétal est issu de Zanthoxylum bungeanum. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 3 à 5 caractérisée en ce que la fraction massique de xanthoxyline dans ledit extrait est comprise entre 0,1 et 30 g pour 100 g d'extrait sec. 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 3 à 6 caractérisée en ce que l'extrait végétal est enrichi en xanthoxyline, ledit extrait enrichi contenant une fraction massique de xanthoxyline supérieure à 30 g pour 100 g d'extrait sec. 8. Composition cosmétique comprenant au moins de la xanthoxyline comme principe actif amincissant. 9. Composition cosmétique comprenant au moins de la xanthoxyline comme principe actif dans la prévention ou 2905854 -14- le traitement des surcharges adipeuses et de la cellulite. 10. Composition cosmétique selon la revendication 8 ou 9 caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un ou 5 plusieurs actifs choisis dans le groupe formé par la caféine, la phloridzine, la forskoline, l'hespéridine méthyl chalcone, les extraits de Piloselle, de Ruscus, de Lierre, de branches de pommiers et de Coleus forskollii ainsi que leurs mélanges. 10 11. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 8 à 10 caractérisée en ce que la xanthoxyline est obtenue à partir d'un extrait végétal. 12. Composition cosmétique selon la revendication 11 caractérisée en ce que l'extrait végétal est issu des 15 plantes de la famille des Rutaceae : Mélicope borbonica, Phlebalium tuberculosum, Phlebalium filifolium, dans le genre Zanthoxylum avec Z. rhoifolium, Z.armatum, Z. bungeanum, Z. piperitum ; des Euphorbiaceae : Croton nepetaefolium, Hippomane mancinella, Sapium sebiferum, 20 Sebastiana schottina, Euphorbia quinquecostata, Euphorbia fidjiana et de Blumea balsamifera et Artemisia brevifolia. 13. Composition cosmétique selon la revendication 11 caractérisée en ce que l'extrait végétal est issu de 25 Zanthoxylum bungeanum. 14. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 8 à 13 caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme orale ou sous forme topique. 15. Composition cosmétique selon la revendication 14 30 caractérisée en ce que la forme topique est choisie parmi le groupe comprenant un gel, un spray, une crème, un gel crème, une pommade, un lait ou une lotion. 16. Composition cosmétique selon la revendication 14 caractérisée en ce que la forme orale est choisie parmi 2905854 -15- le groupe comprenant des comprimés, des gélules et des poudres pour suspensions buvables. 17. Méthode de traitement cosmétique de la peau pour prévenir ou réduire les surcharges adipeuses et la 5 cellulite caractérisée en ce qu'elle consiste en une administration par voie topique sur la zone de la peau nécessitant un tel traitement ou par voie orale de xanthoxyline. 18. Méthode selon la revendication 17 caractérisée en 10 ce que la forme topique est choisie parmi un gel, un spray, une crème, un gel crème, une pommade, un lait ou une lotion. 19. Méthode selon la revendication 17 caractérisée en ce que la forme orale est choisie parmi des comprimés, 15 des gélules et des poudres pour suspensions buvables.