FR 2893256 A1 20070518 FR 0511532 A 20051114 10 15 20 25 30 35 i Générateur d'impulsions électriques unipolaires Description Domaine technique de l'invention La présente invention concerne un dispositif permettant d'améliorer l'administration de substances dans des tissus in vivo et dans les cellules de ces tissus, en associant l'injection de principe actif à un processus physique. Le processus physique utilisé est l'administration de champs électriques ou de courants électriques. Ces champs et/ou ce courant ont pour effet de perméabiliser les cellules de façon transitoire et aussi d'améliorer la pénétration du principe actif dans le tissu. Etat de la technique antérieure. Contexte de l'invention L'électrotransfert ou l'électroperméabilisation consiste à injecter une molécule chimique ou un nucléotide dans un tissu, et à administrer simultanément ou après des impulsions de champs et de courant électrique, qui perméabilisent la paroi des cellules et par là même promeuvent l'entrée du nucléotide dans la cellule et, dans certains cas, jusqu'au noyau. Ceci résulte d'un effet d'électrophorèse ou d'iontophorèse sur le principe actif, par lequel les molécules du principe actif sont entraînées par convection électrique dans les tissus ou au sein même des cellules humaines, animales, végétales ou bactériennes. Dans la présente demande, nous appellerons "électrotransfert" ce procédé d'administration électriquement assistée, utilisant les champs électriques ou des courantes électriques pour améliorer l'administration d'un principe actif à des tissus biologiques, ainsi que son efficacité. Nous appellerons "champs" les champs électriques et électromagnétiques, ainsi que le courant électrique délivré entre deux électrodes soumises à des tensions différentes. La chimiothérapie antitumorale est un exemple dans lequel la pénétration de molécules chimiques à l'intérieur des cellules tumorales est nécessaire à une activité thérapeutique selon le procédé électrochimiothérapie . 2 L' électrotransfert d'ADN a pour effet de promouvoir la pénétration tissulaire et intracellulaire de ces ADN, ce qui rend possible leur expression sous forme d'ARN ou de protéine si ces ADN contiennent un gène précédé d'un promoteur et suivi d'une séquence de polyadénylation (ce que l'on appelle une cassette d'expression thérapeutique). Dans la présente demande, on entend par "principe actif' toute molécule ayant un effet bénéfique ou à des fins d'analyse comme l'imagerie, fonctionnelle, et en particulier, toutes macromolécules de type peptide ou acide nucléique. Parmi les acides nucléiques, les plasmides ou les brins d'ADN ou d'ARN linéaires produits par synthèse sont une forme préférée. L'invention concerne aussi tout acide nucléique, toute protéine, tout sucre ou toute autre molécule biologique modifiée génétiquement ou chimiquement, ou encore toute molécule entièrement synthétique, fabriquée selon les procédés de l'homme de l'art. L'électrotransfert peut être utilisé en particulier pour des ADN codant, des plasmides ou toute autre forme de matériel génétique (ADN, ARN ou autre) conduisant à l'expression du produit de ce gène, ce produit étant un ARN ou une protéine, notamment sur des tissus tel que muscles, tumeurs, peau, système nerveux ou foie. L'électrotransfert nécessite un dispositif composé au minimum d'un générateur d'impulsions 20 électriques et d'un dispositif d'électrodes. Le brevet US 5,273,525 décrit une seringue comportant deux aiguilles d'injection qui servent aussi d'électrodes. 25 Le brevet PCT WO FR98/01400 décrit l'amélioration du transfert d'acide nucléique dans le muscle apporté par l'utilisation de champs carrés unipolaires Le brevet FR98/01399 décrit l'amélioration du transfert d'acide nucléique dans les cellules d'organismes eucaryotes pluricellulaires Le brevet PCT FR 05-01611 décrit des dispositifs d'électrode et des méthodes permettant d'améliorer l'innocuité et baisser la toxicité de l'électrotransfert décrits dans cette demande Dans tout le présent document, nous entendons par impulsions carrées le sens communément 35 utilisé par l'homme de l'art, et comprend donc des impulsions pouvant aussi prendre une forme rectangulaire. 30 25 30 35 -3- Des générateurs d'impulsions carrées ont déjà été réalisés, mais n'offrent pas des impulsions parfaitement rectangulaires. Un exemple de méthode de réalisation de générateur consiste en l'utilisation d'un microcontrôleur générant des impulsions à haute fréquence, puis transférées à un transformateur qui amplifiera le signal à la tension requise, chaque paquet de micro impulsions correspondant à l'impulsion finale requise, l'ensemble étant transmis ensuite à un filtre. On obtient ainsi une impulsion carrée, mais dont la crête est en "dents de scie". Une autre méthode consiste à réaliser un cylindre, dont seulement une bande suivant l'axe du cylindre est conductrice électriquement, et reliée à un circuit générateur de courant continu à la tension requise. Ce cylindre étant en rotation à l'intérieur d'un deuxième cylindre creux suivant le même axe. Ce cylindre dispose d'une bande conductrice intérieure, reliée à une borne qui constitue l'une des bornes du générateur (l'autre borne est reliée à la terre). Les deux bandes métalliques sont en contact périodiquement du fait de la rotation, l'impulsion étant générée. La durée de l'impulsion, et la durée entre deux impulsions, dépend de la vitesse de rotation. L'inconvénient de ce générateur est notamment qu'il est mécanique, les systèmes numériques s'avérant plus précis. Description du problème La technologie de l'électrotransfert a d'abord été utilisée en Chimiothérapie, dans des conditions de voltage élevé (environ 2000 V pour des impulsions de l'ordre de quelques microsecondes). Elle peut être appliquée aussi à l'électrotransfert d'acide nucléique. II semble cependant que les conditions de champs bas (une tension inférieure à 500 V et de forme unipolaire) soient mieux tolérées. Il est d'autre part constaté que plus la forme des champs est parfaitement carrée, plus importante est la quantité d'acide nucléique ou de molécules chimiques transférées dans les cellules. Or, les technologies de générateurs existants n'offrent que des impulsions approximativement carrées, notamment une tension non constante lors de chaque impulsion (la tension allant en diminuant à la fin des impulsions). De plus, on constate que le passage de la tension nulle à la tension de l'impulsion et inversement n'est pas instantané, donnant un signal n'étant pas parfaitement rectangulaire. Il convient donc de proposer un dispositif d'électrotransfert le plus efficace possible. L'électrotransfert d'ADN peut provoquer des douleurs significatives, voir intolérables, et des contactions musculaires pouvant entraîner de grave séquelles parfois irréversibles. Or, la contraction musculaire peut avoir lieu même si le sujet est anesthésié. De plus, dans de nombreux cas, l'état de faiblesse ou l'âge du sujet rend l'anesthésie contre-indiquée. -4- Afin de pouvoir baisser les conditions de champs douloureuses, il convient de réaliser un acte le plus performant possible, afin de pouvoir donner des conditions de champs mieux tolérées sur le plan de l'innocuité, la perte d'efficacité conséquente étant compensée par les améliorations du dispositif de l'invention. II convient aussi d'apporter des méthodes et dispositifs d'électrotransfert mieux tolérés par le sujet. Il convient aussi d'apporter des mécanismes de plafonnement de l'intensité émise afin de parer aux situations de surcharge. Solution apportée au problème La présente invention propose un générateur d'impulsions électriques unipolaires performant. Associé à ce générateur, la présente invention propose des dispositifs d'électrodes invasives et non-invasives et des méthodes permettant d'améliorer l'efficacité et l'innocuité de l'électrotransfert et de diminuer sa toxicité et l'importance des contractions musculaires. La présente invention permet aussi d'injecter de manière optimum solution de principe actif dans tous les tissus. Par "délivrer" ou "délivrance" des champs, nous entendons par la présente demande la génération par le dispositif d'une différence de potentiel entre les électrodes, générant un courant 25 électrique et/ou des champs électriques entre les électrodes. Dans la présente demande, par "un jeu d'électrodes", on entend un ensemble d'au moins une électrode. LMmélioration de l'efficacité donne une marge permettant d'améliorer l'innocuité en diminuant les paramètres engendrant douleur et contraction musculaire. La présente invention est composée d'un dispositif pour améliorer la pénétration in vivo de molécules de principe actif dans les cellules des tissus d'un sujet humain ou animal, caractérisé 35 en ce qu'il comprend tous les composants suivants: - un générateur d'impulsions électriques unipolaires, appareil permettant de générer au moins une série d'impulsions électriques unipolaires carrées comprenant les composants suivants: o Un moyen permettant de renseigner la tension requise pour chaque série d'impulsions (130) 5 o Un moyen permettant de renseigner, pour chaque série d'impulsions, le nombre d'impulsions (133), la durée de chaque impulsion (132) et la durée entre chaque impulsion (131) o Un moyen (510) permettant, pour chaque série d'impulsions, de générer un signal à une faible et constante tension (611) en mode PWM (Pulses Width Modulation), et suivant la forme des impulsions requises (intervalle 131, durée 132, nombre 133), o Une source de tension continue (530) générant un courant (631) à une tension constante et supérieure à la plus haute tension requise pour les impulsions (130) o au moins un circuit générateur d'impulsions (1000) , utilisant: o ledit signal (611) et o la source de tension continue (530), pour générer à ses bornes de sortie (590) un courant (641) ayant les caractéristiques requises pour la série d'impulsions: • tension requise (130) et • forme des impulsions requises (intervalle 131, durée 132, nombre 133) 20 - au moins un dispositif d'électrodes relié électriquement à au moins un circuit générateur d'impulsions (1000) par ses bornes de sortie (590), chaque dispositif d'électrodes comprenant: o un premier ensemble d'électrodes comprenant au moins une électrode (10) reliée électriquement à une première borne (590b) du circuit o un deuxième ensemble d'électrodes comprenant au moins une électrode (11) reliée électriquement à une seconde borne (590a) du circuit - un moyen (8) d'injecter le principe actif dans les tissus. En complément de la caractéristique décrite ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le moyen (510) permettant de générer le signal requis à faible tension (611), comprend: o un moyen permettant de renseigner pour chaque série d'impulsions les caractéristiques des impulsions à générer (intervalle 131, durée 132, nombre 133) et o une source de signal informatique (510a) qui génère un signal électrique composé d'une série d'impulsions carrées (611): ^ à faible et constante tension et 25 30 35 -6 ^ aux caractéristiques citées: nombre d'impulsions (133), durée de chaque impulsion (132), durée entre chaque impulsion (131) En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être 5 caractérisé en ce que: - chaque circuit (1000) du générateur d'impulsions comprend : o un module de puissance (540) comprenant au moins un transistor (541) et o un circuit amplificateur d'impulsions (520 + 560): o comprenant un moyen permettant de renseigner la tension requise (130) 10 pour les impulsions o générant, à partir du signal de la série d'impulsions carrées (611), un signal (621) alimentant la base 543 de chaque transistor (541) du module de puissance (540) o le signal généré (621) ayant une tension U130a égale à la tension requise 15 citée (130) incrémentée de la différence de tension U130b entre la base 543 l'émetteur 544 de chaque transistor (541) du module de puissance (540); - la source de tension continue (530) est reliée au collecteur 542 de chaque transistor (541) du module de puissance (540) le module de puissance (540) délivre en conséquence, par son émetteur 544 aux bornes 20 de sortie (590) un courant : o dont la forme correspond à la série d'impulsions émises citée (611) et o dont la tension de chaque impulsion correspond à la tension cible requise (130) ; 25 En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que les impulsions émises aux bornes du générateur (590) sont caractérisées de la manière suivante: - la tension (130) entre les bornes de sortie (590) des impulsions émises est égale et constante et est inférieure à 500 V et 30 - la durée de l'intervalle entre les impulsions (131) émises est égale et comprise entre 1 et 150 ms et - la durée des impulsions (132) émises est égale et comprise entre 1 et 100 ms et - les champs générés entre chaque paire d'électrodes (100,101) sont compris entre 5 et 500 V/cm. et 35 -l'intensité (134) délivrée à chaque instant pendant la délivrance des champs est inférieure à ampères et - le nombre total d'impulsions (132) émises par série est inférieur à 25 - le nombre de séries émises simultanément est inférieur à 16 20 25 30 35 -7- - le nombre total de séries émises est inférieur à 32 En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que chaque circuit générateur d'impulsions (1000) dispose d'un module de contrôle d'intensité (550) qui permet en temps réel de plafonner à un certain seuil prédéfini (135) l'intensité de courant de chaque impulsion délivrée aux bornes de sortie (590) en induisant une résistance variable qui modifie en conséquence la tension délivrée aux bornes de sortie (590). En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le module de contrôle d'intensité (550): comprend: ^ une résistance de mesure (552) et ^ un transistor de contrôle (551) commandé par la différence de tension sur la résistance de mesure, le transistor étant relié: o à une extrémité de la résistance de mesure (552) par son émetteur (551c) et 15 o à la base (543) de chaque transistor de puissance (541) par son collecteur (551c) et o à l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) par sa base (551b) qui est aussi reliée à l'autre extrémité de la résistance de mesure (552); et permet de diminuer l'intensité de courant émis: • en générant un courant entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) dés que l'intensité de courant (134) dépasse très légèrement un certain seuil (135), la diminution de tension entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) ayant pour effet d'induire une résistance dans chaque transistor (541), et de diminuer ainsi la tension (130) entre les bornes de sortie (590) en ne générant plus de courant entre la base (543) et l'émetteur (544) une fois l'intensité de courant (134) descendue en dessous de du seuil d'intensité maximum (135). En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que chaque module de puissance (540) comprend au moins un transistor (541) de type IGBT En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que chaque circuit amplificateur de tension (520+560) comprend les composants suivants: 10 -8- - Un générateur de tension continue (560) générant une tension (661) à l'amplitude U130a vers la base (543) de chaque transistor (541) du module de puissance (540) - un circuit générateur du signal requis (520) permettant de découper la tension (661) selon le signal (611) émis par le générateur de signal (510), comprenant les composants suivants: o un optoisolateur (521) ayant fonction de commutateur et qui permet, en suivant les impulsions de la série d'impulsions carrées (611), de court-circuiter la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) et de rendre ainsi nul le courant émis (134) aux bornes de sortie de l'appareil (590) pendant la période entre deux impulsions (131) o un transistor (523), ayant aussi fonction de commutateur et qui permet, en suivant les impulsions de la série d'impulsions carrées (611) inversées obtenues au travers d'un optoisolateur (522), de relier la tension de la base (543) de chaque transistor de puissance (541) à la terre (526) o une résistance (524) comprise entre 20 KOHM et 560 KOHM se trouvant entre le générateur de tension (560) et le transistor commutateur (523) o une résistance 525 comprise entre10 KOHM et 470 KOHM se trouvant entre la base (543) de chaque transistor de puissance et le transistor commutateur (523) En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que chaque circuit de génération d'impulsions (1000) dispose d'un moyen de contrôle (570) permettant de collecter les informations sur les signaux et courants émis et les transmettre à un moyen informatique (510a) pouvant automatiquement, en cas d'anomalie ou de seuil d'intensité maximum atteint, réaliser l'une des actions suivantes: - Interrompre le courant avant son arrivée vers le module de puissance (540) à l'aide d'un circuit (538) - interrompre la génération des signaux (611) - signaler à l'opérateur les situations d'anomalie - prendre toute action logique préprogrammée En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le dispositif d'électrodes (23) est composé: - de deux électrodes invasives, chaque électrode étant reliée à une borne du générateur et - d'un moyen d'injecter le principe actif composé d'une aiguille d'injection se trouvant au centre des deux électrodes invasive, et à profondeur intermédiaire les électrodes et l'aiguille d'injection étant parallèles, assemblées et rendues solidaires à l'aide d'un support non-conducteur (41), et les électrodes étant de même profondeur 5 10 15 20 25 30 35 -9- En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le dispositif d'électrodes (23) comprend: - un premier ensemble d'électrodes composé d'une électrode invasive centrale (11), et faisant aussi office d'aiguille permettant d'injecter le principe actif et relié à une borne nulle (590a) de chaque circuit (1000) - un deuxième ensemble (10) composé d'électrodes invasives externes situées approximativement sur un cercle dont l'électrode centrale (11) se trouve au centre, les électrodes externes (10) étant équidistantes entre elle, chaque électrode externe (10) étant reliée à une autre borne (590b) d'un circuit (1000); les électrodes des deux ensembles étant parallèles, de même profondeur, assemblées et rendues solidaires à l'aide d'un support non-conducteur (41) En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le deuxième ensemble (10) d'électrodes est constitué de quatre électrodes invasives En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le deuxième ensemble (10) d'électrodes est constitué de trois électrodes invasives En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le deuxième ensemble (10) d'électrodes est constitué de deux électrodes invasives, les trois électrodes du dispositif étant alignées En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que les électrodes invasives de chaque dispositif d'électrodes (23) sont rendues solidaires à l'aide d'un support non-conducteur (41) et que chaque dispositif d'électrodes (23) comprend en outre un boîtier (6) disposant d'un habitacle permettant de loger les électrodes solidaires et le moyen d'injection du principe actif et le réservoir (1) contenant le principe actif, ce boîtier permettant une bonne prise en main des électrodes et assurant la liaison électrique entre chaque ensemble délectrodes et sa borne (590a ou 590b) En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que le dispositif de prise en mains: - dispose d'un moyen permettant d'enfoncer successivement les électrodes invasives (10,11) dans les tissus à des profondeurs intermédiaires prédéfinies, et - dispose d'un moyen permettant d'injecter le principe actif à chaque position d'arrêt. -10- En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que les électrodes invasives de chaque dispositif d'électrodes (23) sont recouvertes dans leur partie supérieure pénétrant dans les tissus d'un isolant électrique (15). En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être 5 caractérisé en ce que : Chaque circuit générateur d'impulsions (1000) est relié à 1 seule paire d'électrodes si la distance moyenne entre les électrodes d'une paire d'électrodes varie au delà d'un certain seuil, lors de la génération des impulsions, on fait varier automatiquement et en temps réel la résistivité d'une résistance variable (552) en série afin de maintenir l'intensité 10 du courant émis (134), ceci ayant pour effet de faire varier proportionnellement à la variation de distance entre les électrodes la tension de sortie (130) et donc de garder approximativement constante la valeur des champs V/cm des impulsions électriques entre les électrodes de la paire électrodes En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que qu'il ne dispose que d'un seul circuit générateur d'impulsions (1000), émettant simultanément une seule série d'impulsions vers deux bornes (590) reliées à un seul dispositif d'électrodes (23). En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le dispositif peut aussi être caractérisé en ce que les différents dispositifs d'électrodes reliés à leur circuit générateur d'impulsions (1000) respectif sont appliqués sensiblement à la même zone de tissus contenant le principe actif La présente demande propose aussi un procédé mis en oeuvre avec un dispositif comprenant tout ou partie des caractéristiques décrites ci-dessus; ce procédé permet d'améliorer la pénétration de molécules de principe actif in vivo dans les cellules des tissus d'un sujet humain ou animal, ce procédé comprenant les étapes suivantes: on met en contact avec les tissus à traiter au moins un groupe d'électrodes, chaque électrode du premier ensemble d'électrodes (10) étant reliée électriquement à une borne (590b) d'un générateur d'impulsion (21) et chaque électrode du deuxième ensemble d'électrodes (11) étant reliée électriquement à une autre borne (590a) d'un générateur d'impulsion (21) on injecte le principe actif (36) dans la zone de tissus à traiter on renseigne pour chaque série d'impulsions à délivrer les caractéristiques suivantes du signal électrique à générer: le nombre d'impulsions (133), la durée de chaque impulsion (132) et la durée entre chaque impulsion (131); 15 20 25 30 35 -Il- on renseigne pour chaque série d'impulsions à délivrer l'amplitude de la tension des signaux électriques à délivrer (130) puis on délivre des impulsions électriques unipolaires carrées, les impulsions électriques étant générées par le générateur (21) de la manière suivante pour chaque série d'impulsions: o On génère un signal (611) à une faible tension constante en mode PWM (Pulses Width Modulation), le signal correspondant à la forme des impulsions requises (intervalle 131, durée 132, nombre 133) o on utilise ce signal 611 pour découper le courant émis par une source de courant continu 530 afin de générer les impulsions requises à la bonne forme (intervalle 131, durée 132, nombre 133), le courant émis étant ramené à la tension requise 130; les impulsions obtenues génèrent alors le champ électrique (120) requis entre les électrodes de chaque paire d'électrodes, ceci permettant la pénétration dans les cellules des tissus du principe actif.. En complément de la caractéristique décrite ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce qu'on renseigne pour chaque série d'impulsions à délivrer l'amplitude de la tension des signaux électriques à délivrer (130), ainsi que le nombre 133, la durée132 et intervalle 131 des impulsions en fonction notamment de la distance entre les électrodes, de la nature des tissus et de la géométrie des électrodes, et aussi en prenant en compte la tolérance du sujet à l'électrotransfert, la tolérance de la région contenant les tissus soumis aux impulsions, ainsi que la toxicité potentielle de l'acte sur les tissus traités et les objectifs d'efficacité requis; En complément de la caractéristique décrite ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en 25 qu'on génère les impulsions (641) de la manière suivante: o Le signal (611) est généré à l'aide d'un procédé informatique o on amplifie ledit signal (611) afin d'obtenir un signal (621) à une tension U130a supérieure à la tension requise (130) et à la forme des impulsions requises (durée 131, intervalle 132, nombre 133) 30 o Un utilise un module de puissance (540) comprenant au moins un transistor (541) pour générer les impulsions requises de la manière suivante: ^ on alimente la base (543) de chaque transistor (541) du module de puissance (540) avec le signal amplifié (621) ; ^ on alimente le collecteur (542) de chaque transistor (541) composant un 35 module de puissance (540) avec un courant continu (530) le module de puissance (540) délivre alors à l'émetteur (544) de chaque transistor un courant dont la forme correspond à la forme des impulsions requises (130,131,132) et la tension de chaque impulsion requise (130) 10 15 20 - 12 - En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce qu'il qu'on génère des impulsions caractérisées de la manière suivante: - la tension (130) entre les bornes de sortie (590) des impulsions émises est égale et constante et est inférieure à 500 V et - la durée de l'intervalle entre les impulsions (131) émises est égale et comprise entre 1 et 150 ms et - la durée des impulsions (132) émises est égale et comprise entre 1 et 100 ms et - les champs générés entre chaque paire d'électrodes (100,101) sont compris entre 5 et 500 V/cm et -l'intensité de courant (134) délivrée à chaque instant pendant la délivrance des champs est inférieure à 5 ampères et - le nombre d'impulsions (132) émises par série est inférieur à 25 - le nombre de séries émises simultanément est inférieur à 16 - le nombre total de séries émises est inférieur à 32 En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce qu'on génère les impulsions avec un module de puissance (540) comprenant une pluralité de transistors à résistance quasiment nulle de mode IGBT (541), ces transistors étant mis en en parallèle Encomplément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce que les impulsions sont générées avec la méthode suivante: - On génère une tension continue (661) à l'amplitude U130a dont l'amplitude est égale à l'amplitude requise (130) plus l'amplitude U130b entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor (541) du module de puissance (540) , cette tension continue (661) étant reliée à la base (544) de chaque transistor du module de puissance (541) - on découpe la tension citée selon le signal (611) émis par le générateur de signal de la manière suivante: o pour interrompre le courant pendant la durée entre deux impulsions (131): - on génère un court-circuit entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) afin de rendre nulle la tension U130b et donc la tension de sortie aux bornes de l'appareil (590) et - simultanément, on relie à la terre la base (543) de chaque transistor de puissance (541), ceci permettant aussi de vider les tensions résiduelles; o inversement, pour laisser passer le courant pendant la durée de chaque impulsion (132): - on supprime le court- circuit entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541), rétablissant ainsi la différence de tension U13b et : - 13 - - on isole simultanément la base (543) de chaque transistor de puissance (541) de la terre En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce qu'on puisse demander au générateur d'interrompre automatiquement et immédiatement la génération des impulsions si l'intensité de courant émis (134) aux bornes (590) de ce circuit dépasse un certain seuil (135). En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce que la source de courant continu (530) provient d'une source d'alimentation en énergie alternative (500) du secteur, que l'on a transformée, puis redressée et enfin filtrée. En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce que, avant de délivrer les champs on réalise les étapes suivantes: - on enfonce successivement dans les tissus, à des profondeurs intermédiaires, un dispositif comprenant au moins deux électrodes invasives (10,11) reliées chacune à une borne d'un circuit générateur d'impulsions (1000), le dispositif contenant un moyen d'injection du principe actif et - on injecte dans les tissus le principe actif à des profondeurs successives à l'aide du dispositif, le principe actif étant injecté au centre du dispositif, - on enfonce à une profondeur finale prédéfinie toutes les électrodes invasives avant de déclencher la délivrance des champs. les électrodes invasives étant introduites à la même profondeur dans les tissus, selon le même axe 25 En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce qu'on isole électriquement la partie supérieure de toutes électrodes invasives afin d'éviter le passage de courant électrique parasite (52) dans le volume de tissus situé d'une part entre les électrodes et située d'autre part entre la surface de la peau (51) et la zone de tissus contenant le principe actif (36). 30 En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce qu'on plafonne à un seuil prédéfini (135) l'intensité de courant émis (134) par chaque impulsion, en diminuant proportionnellement et en temps réel la tension (130) des impulsions aux bornes (590) des électrodes concernées. En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce qu'on régule l'intensité de courant (134) en induisant en temps réel une résistance variable au niveau de chaque transistor (541) du module de puissance (540), cette 15 20 35 -14-résistance étant générée en provoquant une diminution de tension entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor du puissance (541) dès que l'intensité de courant (134) dépasse un seuil (136) très légèrement supérieur au seuil d'intensité de courant (135) programmée. En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce que la diminution de tension entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor (541) est provoquée à l'aide d'une résistance de mesure qui pilote un transistor (551) servant de commutateur à l'émission de courant entre la base et l'émetteur de chaque transistor de la manière suivante: o l'augmentation d'intensité 134 au-delà d'un certain seuil (135) entraîne l'ouverture du transistor (551) et donc le passage de courant entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor (541) o inversement, la baisse d'intensité 134 en dessous du seuil (135) entraîne l'ouverture du transistor (551) et donc stoppe le passage de courant entre la base (543) et 15 l'émetteur (544) de chaque transistor (541) En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce que: les différents ensembles d'électrodes (10,11) reliés à chaque circuit du générateur d'impulsion (1000) sont appliqués sensiblement à la même zone de tissus contenant le principe actif on programme le générateur (21) pour émettre alternativement des d'impulsions électriques à chaque groupe d'électrodes associé à un même circuit, afin d'améliorer l'innocuité des impulsions électriques en ayant une durée de l'intervalle entre deux impulsions sur un groupe d'électrode supérieure à la durée de l'intervalle entre deux impulsions sur l'ensemble de la zone recevant les électrodes En complément de certaines des caractéristiques décrites ci-dessus, le procédé peut aussi être caractérisé en ce que: chaque circuit du générateur d'impulsion (1000) est associé à une seule paire d'électrodes (10,11) on programme le générateur (21) pour émettre alternativement des d'impulsions électriques à chaque paire d'électrodes, afin de pouvoir limiter indépendamment l'intensité de courant de chaque impulsion sur chaque paire à un seuil prédéfini (135) si la distance entre le électrodes varie, ceci ayant pour effet de maintenir 20 25 30 35 -15-approximativement constant les champs V/cm délivrés entre les électrodes une fois le seuil d'intensité de courant prédéfini atteint. 10 Brève description des figures La figure 1 synthétise les principaux modules du générateur d'impulsions délivrant des impulsions unipolaires carrées à la tension requise 641. La figure 2.a décrit un exemple de série d'impulsions unipolaires. La figure 2.b décrit un exemple de série d'impulsions unipolaires dont l'intensité atteint le seuil limite 135, et contrôlé par le module de contrôle d'intensité 550. Les figures 3.a et 3.b schématisent le procédé d'électrotransfert, avec un dispositif à deux 25 électrodes 10,11, respectivement vue de profil et vue de dessus. La figure 3.c schématise le procédé d'électrotransfert, le principe actif se trouvant entre les électrodes 10,11 (vue de dessus). 30 La figure 4 illustre un exemple de dispositif avec une électrode 11 du premier ensemble positionné au centre du principe actif et de signe opposé aux deux autres électrodes 10 bordant le principe actif, selon une vue de profil La figure 5 illustre un exemple de dispositif avec une électrode 11 du premier ensemble 35 positionnée au centre du principe actif et de signe opposé aux huit autres électrodes 100 à 107 externes bordant le principe actif, selon une vue de dessus. 15 20 -16- Les figures 6.a à 6.c illustrent les champs délivrés pour un dispositif avec une électrode 11 placée entre deux (figure 6.a) ou quatre (figure 6.b) ou trois (figure 6.c) électrodes 100 à 103 de signe opposé et les électrodes externes se trouvant à équidistante l'une de l'autre (fig 6.b et 6.c). La figure 7, schématise un exemple de dispositif où les deux électrodes sont positionnées en bordure du principe actif, le moyen d'injection 8 se trouvant au centre du dispositif et étant moins profond que les deux électrodes 10,11 Les figures 8.a et 8.b illustrent respectivement un exemple de dispositif composé de 3 électrodes 11, 100, 101 et d'une (respectivement deux) aiguilles d'injection 8 positionnées au centre du 10 dispositif à des profondeurs intermédiaires. Les figures 9.a, 9.b et 9.c illustrent un exemple de dispositif intégrant une électrode-aiguille 11 d'injection au centre, le principe actif étant respectivement délivré une fois les électrodes 11, 100, 101 enfoncées dans les tissus (figure 9.a), ou délivrés à une profondeur intermédiaire (figure 15 9.b), puis les électrodes étant enfoncées jusqu'à la garde (figure 9.c). Les figures 10.1 et 10.2 illustrent un exemple de dispositif dont les 3 électrodes invasives (respectivement l'électrode centrale) sont isolées électriquement sur une partie à l'aide d'un film d'isolant 15. La figure 10.3 illustre un exemple de dispositif dont l'électrode externe 10 est non-invasive, électrode invasive 15 isolée électriquement sur une partie à l'aide d'un film plastique La figure 11 illustre un exemple de dispositif d'électrodes 11,100,101 solidaires prévu pour être 25 utilisé sans boîtier. Les figures 12.a à 12.c proposent un exemple de pièces composant un dispositif selon l'invention incluant un boîtier 6, un dispositif d'électrodes 23, et un système de butée 20 La figure 13 illustre un exemple de pièce d'injection 23 posée dans son habitacle du boîtier 6. La figure 14 illustre un exemple d'anneau de verrouillage 22 glissant le long du boîtier 6 fermé. La figure 15 illustre un exemple de dispositif verrouillé prêt à être appliqué sur le sujet. Les figures 16.a à 16.c illustrent des exemples d'électrode cathéter. 20 30 35 5 15 20 25 30 35 - 17 - La figure 17 illustre un exemple de dispositif composé d'une électrode non-invasive 18 et d'une électrode invasive 17, cette dernière traversant les tissus afin d'atteindre la zone de tissus, selon un axe approximativement parallèle au plan de l'électrode non-invasive posée sur les tissus. La figure 18 illustre un exemple de dispositif composé d'une électrode non-invasive 18 et d'une électrode invasive 17, cette dernière traversant les tissus afin d'atteindre la zone de tissus, selon un axe approximativement perpendiculaire au plan de l'électrode non-invasive posée sur les tissus. La figure 19 illustre un exemple de dispositif composé d'une électrode non-invasive 18 et d'une électrode invasive 17, cette dernière traversant l'électrode non-invasive par un orifice, et dont la position et l'angle de l'axe de l'aiguille est guidé par un dispositif de guide. Les figures 20.a et 20.b illustrent des exemples d'électrodes non-invasives 18 ayant respectivement une forme de disque percé d'un orifice en son centre et de fer à cheval La figure 20.c illustre un exemple d'électrode non-invasives 18 composé de plusieurs électrodes plates non solidaires Les figures 21.a et 21.b illustrent les lignes de champs se propageant sous la surface des tissus, entre des électrodes non-invasives 9 avec des électrodes en forme de fil ou de pointe, sur une surface respectivement plane et bombée La figure 21.c illustre un exemple de dispositif composé de deux électrodes filaires 44a,44b parallèles maintenues par une bande adhésive 92 La figure 22 illustre les champs délivrés 120 pour un dispositif composé de deux paires d'électrodes, les impulsions (ou les séries d'impulsion) étant alternativement délivrées à chaque paire La figure 23 décrit un exemple de générateur dans une forme préférée de l'invention délivrant des impulsions unipolaires carrées à la tension requise 641. La figure 24 décrit le mécanisme de génération des ondes de forme exactement carrée à la tension requise 641dans une forme préférée de l'invention ainsi que le circuit de plafonnement de l'intensité 550 La figure 25a illustre les connections générateur/électrodes pour un dispositif 3 électrodes alignées, et 3 bornes au générateur, chaque électrode étant connectée à sa propre borne. -18- La figure 25.b synthétise les principaux modules du générateur émettant deux séries d'impulsions 641 simultanées à l'aide de deux circuits 1000 vers un dispositif à 3 électrodes alignées, l'électrode centrale étant reliée à la terre, commune à chaque circuit. Présentation de l'invention La présente invention permet d'injecter une solution de principe actif dans tous les tissus, notamment dans le muscle, les tumeurs, les articulations, le derme et l'épiderme, et dans tous les organes, à l'exception du coeur, et notamment la vessie, l'estomac, les reins, les poumons, tous les organes de la tête, incluant en particulier le cerveau, les oreilles, l'oeil, la gorge, d'un animal ou humain vivant ou non et de délivrer les champs afin de perméabiliser les tissus et de favoriser le transfert du principe actif dans les cellules. Le dispositif de l'invention est composé d'un générateur d'impulsions électriques unipolaires carrées, et d'un dispositif d'électrodes reliées au générateur et pouvant comprendre un moyen d'introduire le principe actif dans les tissus. Le principe de l'invention est de générer un signal à une faible tension constante en mode PWM (Pulses Width Modulation) et à la forme des impulsions requises. Ce signal est alors utilisé pour découper une source de courant à la tension requise 130 25 Ce principe est illustré en figure 1 et 2.a et exemplifié comme suit. Une source de courant continu 530 à tension suffisamment élevée émet un courant continu 631 vers un module, appelé dans la présente "module de puissance", 540, comprenant un ou plusieurs transistors. Le courant est émis vers le collecteur de chaque transistor 541, disposés en parallèles. Parallèlement, un signal électrique à tension faible composé d'une série d'impulsions carrées 611 est généré en mode 30 PWM (Pulses Width Modulation). Il peut être généré par un moyen informatique 510. Par moyen informatique, nous incluons les processeurs, microprocesseurs, contrôleurs, microcontrôleurs, leur association, ainsi que toutes mémoires et composants électroniques associés. Nous incluons notamment les éventuels périphériques utiles ou nécessaires à leur fonctionnement. Les impulsions 611 peuvent aussi être générées par un circuit électronique, mais ce dispositif a de 35 nombreux désavantages par rapport à une solution informatique. Les impulsions sont transmises à un générateur de signal requis 520 qui, associé à un générateur de tension 560, porte les impulsions à une tension U130a supérieure à la tension finale requise 130, vers la base de chaque transistor 541 du module de puissance. En résultat, les impulsions souhaitées 641 sont 10 15 20 -19- générées par l'émetteur de chaque transistor 541 à la tension requise 130. La tension U130a est calculée en fonction des transistors utilisés, afin d'obtenir à leur émetteur la tension 130 requise. Un régulateur de courant 550 permet ensuite d'empêcher le courant de dépasser une certaine intensité prédéfinie 135. Les impulsions 641 sont ensuite transmises au dispositif d'électrodes 23 implantées dans les tissus où le principe actif a préalablement été injecté, permettant de délivrer les champs entre les électrodes. Le générateur a pour fonction principale d'émettre une série d'impulsions unipolaires carrées d'un nombre d'impulsions 133, d'une durée 132 de chaque impulsion et d'une durée 131 entre chaque impulsion prédéfinies. Dans une forme préférée de l'invention, la tension de chaque impulsion est identique. La tension peut être définie par un potentiomètre ou tout autre moyen connu de l'homme de l'art. Comme illustré en figure 1, le générateur comprend une source de tension continue 530 qui permet d'obtenir l'intensité de courant requise. Sa tension peut prendre toute valeur supérieure à la tension U130a maximum (fonction des impulsions maximum 130 à délivrer aux électrodes 23), par exemple prendre une valeur de 265 V pour obtenir des impulsions maximum U130a de 269 V permettant d'obtenir une tension maximum 130 de 250 V. Toutes techniques connues de l'homme de l'art de fabrication d'un courant continu peuvent être utilisées. 20 D'une façon plus détaillée, le générateur comprend une source de signal qui émet un signal électrique composé d'une série d'impulsions carrées 611 générée en mode PWM (Pulses Width Modulation) avec une faible tension constante. Ce signal électrique est composé d'un nombre d'impulsions 133 et d'une durée 132 de chaque impulsion et d'une durée 131 entre deux impulsions successives. Ses caractéristiques sont prédéfinies avant le déclenchement de la 25 génération des impulsions. Toutes techniques connues de l'homme de l'art de fabrication de ce signal peuvent être utilisées. Dans une forme préférée de l'invention, le signal peut être généré par un moyen informatique, et la tension délivrée est définie par les propriétés de ce moyen. Ainsi, d'après la technologie actuelle, la tension varie entre 2,7 et 5 V. Le choix d'un moyen générant un signal de 5 V (impulsions TTL) peut s'avérer plus opportun pour interfacer le moyen 30 informatique avec d'autres périphériques. Le signal 611 est amplifié à la tension U130a requise à l'aide d'un circuit amplificateur d'impulsions (520+560) comprenant les éléments suivants: - un circuit générateur de tension 560 générant une tension à l'amplitude (U130a) en fonction 35 de la tension 130 définie par l'opérateur, à l'aide, par exemple, d'un potentiomètre. - un circuit générateur de signal requis 520 chargé de découper la tension émise par le circuit 560 en impulsions, correspondant au train d'impulsions 611; 10 15 - 20 - Le signal obtenu, 621, est émis vers la base de chaque transistor 541 du module de puissance 540. Le module de puissance 540 comprenant au moins un transistor 541 est utilisé comme un commutateur commandé par le signal 621. II permet de découper le courant 631 (à la tension U130a), provenant de la source d'alimentation de courant continu 530, en impulsions requises (à la tension 130). On obtient ainsi la série d'impulsions finales souhaitées 641, à savoir avec la forme du signal amplifié 621, et à la tension requise (130) et à une intensité de courant portée par la source de courant continu 530. Dans une forme préférée de l'invention, les transistors 541 utilisés par le module de puissance 540 sont de type IGBT. Les principaux avantages du transistor IGBT par rapport à un transistor classique sont les suivants: -La base peut être commandée avec très peu de courant, et entraîne moins de perte de tension en sortie; celle-ci est donc plus précise - La base ouverte est parfaitement isolée - Le transistor est caractérisé par une résistance faible en conduction et peut donc supporter une forte intensité pendant une certaine durée sans fondre. Ces caractéristiques du transistor sont importantes car l'appareil doit générer des impulsions de basse fréquence, inférieur à 100 hertz avec une amplitude pouvant atteindre plusieurs centaines de volts et devant supporter une intensité de courant jusqu'à 5 A par impulsion. Dans une autre forme de l'invention, les transistors 541 utilisés par le module de puissance 540 sont de type MOFSET, mais ils sont moins appropriés. 25 II est très important de contrôler les phénomènes d'intensité trop élevée, voir de court-circuit durant la délivrance des impulsions. En effet, dans le cas d'utilisation d'électrodes invasives et proches, la contraction musculaire du sujet, provoquée par l'émission des premières impulsions, peut déformer les aiguilles et diminuer de façon significative leur distance. Cela peut ainsi 30 provoquer une intensité très importante pouvant être très douloureuse pour le sujet, voir toxique. La déformation des aiguilles peut aussi provoquer un court-circuit et détruire certains composants du générateur (transistors par exemple), le temps de réaction d'un fusible classique étant trop long. 35 La présente invention propose alors un moyen de contrôle 550 d'intensité de courant émise 134 permettant, en temps réel, de plafonner cette dernière à une valeur prédéfinie 135, comme illustré en figure 2.b. Ce moyen permet de diminuer la tension de sortie 130 proportionnellement à la diminution de la résistance des tissus, une fois le seuil 135 atteint. 10 15 20 5 15 20 25 30 35 -21- La présente invention propose aussi un moyen de contrôle du courant émis en transmettant en temps réel la valeur de l'intensité de courant émise à un moyen d'analyse comparative comprenant un circuit 572 permettant de comparer en temps réel les informations reçues avec certaines valeurs prédéfinies. En cas d'anomalie, par exemple intensité nulle ou supérieur à un certain seuil, ou si un transistor 541 est endommagé. Le moyen d'analyse transmet l'information au générateur de signal faible, par exemple le microcontrôleur, ou à tout autre moyen de contrôle informatique. Tout autre moyen de collecte d'informations d'anomalie peut être mis en oeuvre pour envoyer les informations au moyen de contrôle informatique. Pour la clarté du document, le moyen de génération de signal et tous les moyens informatiques du générateur seront rassemblés dans un seul composant, le microcontrôleur 510, correspondant à une forme préférée de l'invention, mais peuvent bien sûr être constitués de composants indépendants et interconnectés. Le microcontrôleur 510, qui peut avoir un temps de réaction court, par exemple de l'ordre du dixième de ms, prendra les décisions appropriées. II pourra notamment interrompre le passage de courant si programmé en ce sens. Pour ce faire, il pourra interrompre la génération du signal faible 611, et/ou ouvrir le relais 538 commandant le passage de la source de courant continu 530 vers le module de puissance 540 afin de couper la source de courant 530 (notamment si le transistor de puissance 541 fond et génère un court circuit entre émetteur et collecteur). Les impulsions requises sont transmises aux électrodes par fil électrique. Le générateur génère pour chaque paire d'électrodes une ou plusieurs séquences prédéfinies d'impulsions électriques selon les caractéristiques suivantes dans la pratique pour chaque séquence: - la tension 130 entre les bornes de sortie 590 des impulsions émises est égale et constante et est inférieure à 500 V et - la durée de l'intervalle entre les impulsions 131 émises est égale et comprise entre 1 et 150 ms et - la durée des impulsions 132 émises est égale et comprise entre 1 et 100 ms et - les champs générés entre chaque paire d'électrodes 100,101 sont compris entre 5 et 500 V/cm. et - l'intensité 134 délivrée à chaque instant pendant la délivrance des champs est inférieure à 5 ampères et - le nombre total d'impulsions 132 émises par série est inférieur à 25 - le nombre total séries émises est inférieur à 32 La durée entre deux séquences d'impulsion est inférieure à 600 sec, et le nombre de séquences est inférieur à 25. L'intensité délivrée sera inférieure à 5 Ampères. 10 15 20 25 30 35 - 22 - Le dispositif d'électrodes de l'invention est composé: - d'un premier ensemble d'électrodes 11 composé d'au moins une électrode, les électrodes étant reliées à une borne d'un générateur d'impulsions électriques 21 - d'un deuxième ensemble d'électrodes 10 composé d'au moins une électrode, les électrodes étant reliées à l'autre borne du générateur d'impulsions électriques 21, et donc d'une tension différente du premier ensemble d'électrodes. - d'un moyen d'injecter le principe actif 36 Les impulsions peuvent être émises à chaque paire simultanément ou successivement. Le moyen d'injecter le principe actif peut être composé d'une ou plusieurs aiguilles. Il peut aussi s'agir d'un moyen d'introduire le principe actif sous pression, à l'aide, par exemple, d'un pistolet à pression, par patch ou tout autre moyen de l'homme de l'art. Dans la présente demande, l'expression "électrode" désigne tout type d'électrode, notamment pleine ou creuse, invasive ou non-invasive. Le terme "électrode invasive" désigne une électrode conçue pour pénétrer à l'intérieur des tissus, notamment toute électrode prenant la forme d'une aiguille pleine ou creuse (notamment une aiguille d'injection médicale). Le terme "électrode non-invasive" désigne une électrode conçue pour rester à la surface des tissus. Chacun des deux ensembles d'électrodes 11, 10 est composé d'une ou plusieurs électrodes invasives et/ou d'une ou plusieurs électrodes non-invasives. Les électrodes invasives et non-invasives sont composées de matériaux métalliques de préférence inoxydables et de qualité médicale. La présente demande propose différents dispositifs et procédés d'électrodes qui, associés au dispositif et procédé du générateur 21 décrit, correspondent à une forme préférée de l'invention. Un exemple de dispositif à deux électrodes invasives 10, 11 est décrit en figure 3.a et 3.b. La figure 3.c représente les champs 120 traversant une zone de principe actif 36 se trouvant entre deux électrodes. Si les électrodes du deuxième ensemble sont non-invasives, alors le deuxième ensemble d'électrodes et positionné à la surface des tissus, sur le site d'injection du principe actif. Dans une forme préférée de l'invention, si le dispositif est constitué de plus d'une électrode invasive, alors les électrodes invasives ont toutes la même profondeur. 10 15 20 25 30 35 - 23 - Une forme préférée de l'invention propose un dispositif d'électrodes invasives où le premier ensemble d'électrodes 11 est introduit au sein du principe actif, de préférence en son centre, et est entouré par le deuxième ensemble d'électrodes 10, comme illustré en figure 4 avec un dispositif à deux électrodes externes vu de profil. La figure 5 illustre un dispositif à 8 électrodes externes vu de dessus. Dans la suite du descriptif, sauf indication contraire, les électrodes du premier ensemble d'électrodes 11 sont composés d'une seule électrode invasive, appelée électrode centrale. Le deuxième ensemble d'électrodes invasives sera nommé parfois: "électrodes externes". Afin d'améliorer l'efficacité du transfert de principe actif dans les cellules, les électrodes du deuxième ensemble 100 à 107 doivent être réparties régulièrement en formant un cercle dont l'électrode centrale 11 forme le centre. Les figures 6.a et 6.b illustrent la surface électrotransférée avec un dispositif où le deuxième ensemble d'électrodes est composé respectivement de deux électrodes (100, 101) et de quatre électrodes (100 à 103). La distance 30 entre les électrodes est divisée de moitié par rapport à un dispositif à deux électrodes (figure 7) et offre ainsi une configuration plus tolérable en diminuant la tension et la distance entre les électrodes pour obtenir un champ d'une même valeur. Note: dans le dispositif illustré en figure 7 le moyen d'injection 8 se trouve au centre du dispositif et est moins profond que les deux électrodes afin que le principe actif se trouve bien entre les deux électrodes. Afin de positionner précisément le premier ensemble d'électrodes au centre du principe actif, l'aiguille d'injection 8 du principe actif ainsi que les électrodes 11,100,101 peuvent être maintenues entre-elles à l'aide d'une ou plusieurs pièces de sertissage non-conductrices 41, quipermettent le maintien dans une géométrie définie. Ceci est exemplifié en figure 8.a. Afin que le principe actif soit bien situé entre les électrodes, de manière exemplifiée en figures 7, 8.a et figure 8.b sur un dispositif de trois électrodes invasives, la (ou les) aiguille (s) d'injection 8 doivent avoir une profondeur inférieure à celle des électrodes centrales et/ou des électrodes externes. L'électrode centrale peut faire aussi office d'aiguille d'injection (figure 9.a). Cependant, l'inconvénient de ce dispositif est qu'une partie du principe actif est diffusé en dessous l'électrode aiguille centrale, et n'est plus traversée par les champs (figure 9.a). Une méthode proposée par l'invention, exemplifiée figure 9.b et 9.c est d'injecter le principe actif 36 à une ou plusieurs profondeurs intermédiaires dans les tissus (50). Le dispositif d'électrodes 23 est enfoncé à chaque étape plus profondément dans les tissus, afin d'injecter le principe actif. A la dernière étape, les électrodes sont enfoncées jusqu'à la garde, sans délivrer de principe actif. 10 15 20 25 30 35 - 24 - Cependant, des champs 12 sont aussi diffusés dans des tissus n'hébergeant pas de principe actif. Or, cela entraîne une toxicité et une contraction ou douleur du sujet inutile et parasite. L'invention propose d'appliquer un isolant électrique 15 à la partie supérieure des aiguilles 100,101,11, comme exemplifié en figure 10.1 pour un dispositif à trois électrodes invasives, ce qui limite fortement la quantité de courant traversant les tissus. Le fait de n'isoler que les aiguilles rattachées à une seule borne du générateur ne diminuera qu'en partie les courants parasites 12 comme illustré en figure 10.2. Il peut aussi être intéressant d'isoler la partie supérieure de l'électrode invasive pour un dispositif comprenant une ou plusieurs électrodes non-invasives (exemplifié figure 10.3). Les aiguilles et les électrodes invasives ou non-invasives peuvent être rendues solidaires et serties par un support rigide ou légèrement flexible non-conducteur 41. Les composants invasifs seront alors parallèles. Un exemple est illustré en figure 11 pour un dispositif d'aiguilles invasives (100,101), les électrodes invasives traversant un bloc isolant électriquement 41, tout en étant directement relié au générateur 21 à l'aide de fil électrique 7. Dans l'optique de dispositif d'électrodes jetable et économique, le dispositif pourra en outre comprendre un boîtier 6 permettant de relier les électrodes au générateur. Ce boîtier permettra une prise en main du dispositif d'électrodes, qui sera alors aisément manipulable et assure l'isolation du manipulateur vis-à-vis des courants électriques. Le boîtier pourra intégrer, en outre, le moyen d'injection du principe actif et son réservoir 1. De plus, dans une forme préférée de l'invention, il pourra permettre d'enfoncer le dispositif d'électrodes à des profondeurs pré-définies, par exemple à l'aide de butées 22. Un exemple de dispositif d'électrodes jetables 23, de boîtier 6 avec son système de butée 20,22 et présenté en figures 12.a, 12.b et 12.c. La méthode d'assemblage de cet exemple de boîtier 6 et de la pièce d'électrodes 23 et de sa butée est présentée figures 13 à 15 et décrite plus loin dans la présente demande. Le système de butée peut aussi consister en un obstacle, à épaisseur prédéfinie, par exemple 5 mm, comprenant un manche et étant positionné entre les tissus et le dispositif d'électrodes afin de maintenir ce dernier à une distance prédéfinie des tissus lors de l'injection du principe actif. Il est retiré une fois le principe actif injecté, afin d'enfoncer le dispositif d'électrodes jusqu'à la garde. II peut avoir la forme d'un fer à cheval. Afin de faciliter l'acte d'Electrotransfert, le boîtier 6 peut contenir un dispositif qui, par pression du doigt, émet un signal (électrique, électromagnétique ou une onde) déclenchant la génération des impulsions. Les électrodes invasives peuvent être adaptées pour le traitement de zones fragiles afin de ne pas blesser la zone traitée avec l'aiguille lors de la contraction musculaire provoquée par la 10 15 20 25 30 35 - 25 -délivrance des champs. Une électrode "Cathéter", illustrée en figures 16.a et 16.b, est une électrode invasive, composée d'une aiguille invasive 71 recouverte d'un cathéter 70. Un cathéter est un tube composé de matériaux fins, flexibles et résistants à des forces de compression suivant son axe, par exemple du silicone. II est prévu pour être introduit dans les tissus à l'aide de l'aiguille 71 placée à l'intérieur du cathéter et pointu à son extrémité. La surface du cathéter est rendue conductrice électriquement, tout en lui conservant une certaine flexibilité, par exemple par un film ou un tressage métallique 72, sauf sur la partie supérieure 15 qui n'est pas conductrice. Une fois l'électrode cathéter dans les tissus, l'aiguille est reculée partiellement, voir entièrement retirée totalement du dispositif. Le cathéter 70, faisant office d'électrode, ne peut alors détériorer les tissus. Les électrodes cathéter peuvent aussi être constituées d'un cathéter isolant mais percé d'orifices (78), comme exemplifié figure 16.c, l'aiguille conductrice n'étant retirée que partiellement au moment de la délivrance des champs. Dans un mode préféré de l'invention, tout ou partie des électrodes du deuxième ensemble d'électrodes sont non-invasives, solidaire ou non du premier ensemble, et disposées à la surface des tissus recouvrant (ou proche de) la zone contenant le principe actif. La surface de chaque électrode non-invasive en contact avec les tissus au moment de la délivrance des champs peut avoir toute taille. Elle peut être très petite, comme une pointe légèrement aplatie à son extrémité. Elle peut être plus grande, permettant par exemple de recouvrir de manière significative la surface des tissus contenant le principe actif, ou de recouvrir une surface plus importante. Elle peut avoir toute forme: rectangle, triangle, demi-cercle, arc de cercle, disque, ovale... Chaque électrode peut disposer d'un manche, d'un orifice 43, exemplifié figure 20.a (cercle) et 20.b (fer à cheval), permettant aux électrodes invasives de la traverser. La figure 20.c illustre un exemple d'électrode non-invasives composé de plusieurs électrodes plates non solidaires. Les électrodes invasives peuvent aussi traverser les tissus 50 afin d'atteindre la zone contenant le principe actif comme illustré figure 17 et figure 18. Dans une forme préférée de l'invention, un guide 49 peut permettre de positionner de manière précise l'emplacement où l'électrode invasive doit pénétrer les tissus et/ou l'angle de pénétration de l'axe 69 de l'électrode invasive (exemplifié figure 19). Les deux ensembles d'électrodes peuvent aussi être constitués d'électrodes non-invasives, solidaires ou non. Les électrodes peuvent se faire face, ou être appliquées sur une même face des tissus 51. Les champs délivrés 120 se propageant alors entre les électrodes à travers d'une couche de tissus intermédiaires (peau, graisse...) et traversent les tissus contenant le principe actif comme exemplifié en exemple figure 21. a et 21.b. La figure 21.c montre un exemple d'électrodes non-invasives filaires. - 26 Une forme préférée du dispositif d'électrodes de l'invention comprend plusieurs groupes d'au moins deux électrodes invasives localisées dans la même zone, les impulsions étant alternativement délivrées par le générateur à chaque groupes. Un exemple est illustré par la figure 22 pour un dispositif à deux groupes 123,124 composés chacun d'une paire de deux électrodes. Emettre les impulsions alternativement à chaque groupe d'électrode comporte plusieurs avantages. Ainsi, cela permet d'augmenter la fréquence d'impulsions globale au niveau de toute la zone de tissus (effet d'amélioration pour l'innocuité), sans augmenter la fréquence au niveau de chaque paire (pouvant engendrer une baisse d'efficacité). De plus, si chaque groupe est composé de seulement deux électrodes, alors les champs de chaque impulsion émise à chaque paire d'électrodes distincte peuvent être maintenus si celles-ci se déforment, notamment du fait de la contraction musculaire. Ils peuvent être maintenus à un seuil maximum, et/ou minimum dans une certaine mesure. La résistance entre les électrodes est proportionnelle à la distance moyenne entre les électrodes; le champ (Volt/cm) moyen entre les électrodes est inversement proportionnel à la distance moyenne entre les électrodes. Selon le théorème U=RI, maintenir l'intensité de courant émise 134 alors que les électrodes se déplacent revient à maintenir approximativement les champs dans la limite des seuils d'intensité de courant définis. II s'agit cependant d'une approximation, car si les électrodes se déplacent, la nature (et donc la conductivité) des tissus traversés peut varier. De plus, le passage du courant peut légèrement modifier dans le temps les propriétés conductrice des tissus Cependant, si un groupe contient plus de deux électrodes reliées au même module de puissance 520 au travers du module de contrôle d'intensité 550, alors le maintient d'intensité sur une paire dont la distance entre les électrodes varie va entraîner une modification significative des champs sur les autres paires d'électrodes. Le module de contrôle d'intensité comprend une résistance en série qui varie alors de manière à maintenir automatiquement et en temps réel l'intensité en dessous du seuil maximum et/ou en dessus du seuil minimum. Ceci aura pour effet de faire varier proportionnellement la tension de sortie 130, une fois les seuils atteints, afin de maintenir approximativement constants les champs délivrés. Note: en cas de limitation à un seuil inférieur, la tension maximum ne pourra de préférence dépasser un certain seuil pour des raisons évidentes de tolérabilité. Ainsi, si ce seuil 15 20 25 30 35 5 10 20 25 30 35 -27- est atteint, la résistance ne devra plus varier afin de maintenir la tension constante. Une alternative est aussi de stopper les émissions d'impulsions en coupant la source de courrant continue 530 et de signaler cette situation. Dans une forme préférée de l'invention, le générateur permet de générer plusieurs séries d'impulsions successives (avec une durée entre deux séries prédéfinie) ou simultanées. Un premier ensemble d'électrode 11 peut être ramené à une seule électrode, appelée électrode centrale, reliée à une borne du générateur reliée à la terre, les autres électrodes et groupes d'électrodes 10 étant reliés à leur borne respective, chaque borne reliée à son module de puissance 520 afin d'émettre sa série d'impulsions. Ainsi, les dispositifs précédemment décrits, notamment figures 5 à 6.c, 8.a à 10.2, 24.a et 24.b peuvent délivrer des séries d'impulsions simultanées, l'électrode centrale 11 reliée à la borne commune 590a, les électrodes externes étant reliées individuellement ou par groupe à leur électrode de puissance respective 590b, 590c... Dans la pratique, le nombre de séries émises simultanément est inférieur à 16. La programmation des impulsions (tension130, nombre133, durée132 et intervalle 131) doit prendre en compte tout ou partie des éléments suivants: o la distance entre les électrodes, afin de définir la bonne valeur des champs (V/cm) o de la nature des tissus, ainsi les champs requis sont différents entre muscle et tumeur o la géométrie des électrodes (électrodes invasives, non invasives, forme et nombre des électrodes...) o la tolérance du sujet à l'électrotransfert. Ceci est particulièrement valable pour la race chevaline, les mouvements réflexes induits pouvant provoquer des séquelles si les champs délivrés sont trop importants o la tolérance de la région contenant les tissus soumis aux impulsions, dépendant notamment du degrés d'innervation des tissus o la toxicité potentielle de l'acte sur les tissus traités, l'intensité émise pouvant détruire de nombreuses cellule, notamment en les brûlant ou en les perforant o l'efficacité du procédé, à savoir en particulier la quantité de produit actif à faire pénétrer dans les tissus en fonction de la quantité injectée Description détaillée d'un mode de réalisation de l'invention 10 15 20 25 30 35 -28- Dans ce mode de réalisation, qui correspond à une forme préférée de l'invention, le générateur émet un nombre prédéfini d'impulsions de chaque série ayant les caractéristiques suivantes: la tension de chaque impulsion est identique la durée de chaque impulsion est identique l'intervalle entre chaque impulsion est identique Le générateur est composé de plusieurs modules fonctionnels. Il est exemplifié en figure 23 et 24. II comprend une source de signal 510 qui émet un signal électrique 611 généré en mode PWM (Pulses Width Modulation) composé d'une série d'impulsions carrées TTL d'une tension de 5 V. Le signal électrique est composé d'un nombre d'impulsions 133 et d'une durée 132 de chaque impulsion et d'une durée 131 entre chaque impulsion. Dans cette forme préférée de l'invention, le signal est généré par un microcontrôleur 510a comportant un processeur de technologie RISC à 8MHz par exemple. L'interface utilisateur comprend un clavier 511, permettant notamment de déterminer les trois premiers paramètres du signal (nombre d'impulsion 133, durée 132 et intervalle 131), et/ou des boutons, interrupteurs ou par tout autre moyen d'interface utilisateur, et peut restituer les informations à l'aide d'un ou plusieurs écrans 512, voyants lumineux 514 ou sonores 513. Les programmations de séquences d'impulsions peuvent être enregistrées dans une mémoire informatique (qui dans cette forme préférée est intégrée dans le microcontrôleur) afin d'être réutilisées ensuite. Le générateur peut émettre une sonnerie pendant l'émission des impulsions afin d'informer de manière auditive l'opérateur. La génération de signal électrique est déclenchée en appuyant sur un bouton 515 relié au microcontrôleur, ou par tout autre moyen (télécommande, ondes, ordinateur...). Le signal électrique émis par le microcontrôleur 510a est transféré en étant inversé au circuit générateur de signal requis 520 au travers d'un circuit de commande 518 comprenant deux Optoisolators 521 et 522. Ce circuit 520, à l'aide d'un circuit générateur de tension 560, amplifie le signal 611 à la tension U130a en tenant compte de cette inversion. La tension U130a est calculée en fonction de la différence de tension U130b entre base et émetteur de chaque transistor de puissance, de façon à obtenir la bonne tension requise 130 (selon la règle U130a = U130b + 130) à l'émetteur de chaque transistor. La tension finale requise 130 est précisée par l'opérateur, par exemple à l'aide d'un potentiomètre 561 manuel ou motorisé ou programmable. Dans notre exemple, l'opérateur sélectionne en réalité une tension U130b, un écran digital 563 10 15 20 25 30 35 - 29 - lui restituant la tension requise 130 (le circuit générateur de tension 560 générant en fait la tension U130a). Le circuit générateur de tension 560 comprend un stabilisateur de tension en série qui est composé d'une diode zener 564, d'un potentiomètre 561 et d'un transistor 562. Le signal obtenu 621 est transmis vers la base de chaque transistor 541 du module de puissance 540 et en commande l'ouverture et la fermeture du courant, d'une manière décrite plus loin dans le présent document. Le collecteur 542 de chaque transistor du module de puissance est alimenté par une tension électrique continue constante. Dans une forme préférée de l'invention, cette tension est générée à partir du secteur au travers d'une prise de courant 501. Le bloc d'alimentation 500 peut comprendre un fusible 503, par exemple de 6,3 A slow blow, et un interrupteur 502. La tension est tout d'abord transformée à 190V à partir d'un transformateur 533, puis redressée à 265 V (dans notre exemple de réalisation) à l'aide d'un redresseur 534, pour être enfin filtrée à l'aide d'au moins un condensateur 537. Dans cette forme préférée de l'invention, le module de puissance 540 comprend au moins deux transistors IGBT 541 en parallèle. En effet, deux transistors sont nécessaires au vu des paramètres élevés d'impulsion requis. Ils sont aussi utilisés comme un commutateur commandé par la source de signal amplifié 621 et permettant de laisser passer ou d'arrêter le courant continu 631, et donc de prendre la forme exacte du signal amplifié 621 requis. En sortie de chaque transistor, on obtient les impulsions souhaitées 641, à la tension 130 souhaitée, avec un ampérage dépendant de la résistance des tissus entre les électrodes reliées aux bornes de sortie 590. Afin d'éviter les risques de trop grande intensité de courant émise par les électrodes, un fusible 591, par exemple de 3,15 A, se trouve en sortie du module de puissance 540. Mais cette protection est insuffisante et inopérante pour de nombreuses situations du fait de sa lenteur. Aussi, le générateur dispose d'un module de contrôle d'intensité 550 en temps réel comprenant une résistance 552 de faible résistivité, par exemple de l'ordre de 20 Ohm et un transistor 551 (avec son collecteur 551a, sa base 551b et son émetteur 551c). Ce module permet de plafonner le courant à une valeur d'intensité prédéfinie. Il est nécessaire en cas de surcharge et tension trop élevée. Dans une autre configuration, ce module 550 pourrait, plutôt que de limiter l'intensité de courant émis, actionner un commutateur, sous forme de transistor par exemple, et à l'aide d'un relais dans une forme préférée de l'invention, couper le courant émis 641 avant son arrivée aux bornes 590 ou couper le courant 631 au niveau de la source de courant 530, avant sont arrivée au collecteur 542 de chaque transistor de puissance 541. 10 15 20 - 30 - La figure 24 décrit le principe de fonctionnement du module de contrôle d'intensité 550. II est basé sur le principe d'une résistance variable, dont la valeur est nulle tant que l'intensité n'atteint pas le seuil limite prédéfini. Une fois ce seuil atteint, alors la résistance variable augmente au fur et à mesure que l'intensité en provenance du module de puissance 540 tente de dépasser ce seuil, de manière à fixer l'intensité de courant à ce seuil. Cette résistance est en fait constituée par les transistors de puissance 541 eux-même. Ainsi, quand l'intensité de courant d'une impulsion 641 atteint un seuil prédéfini, considéré comme intensité maximum autorisée 135, puis le dépasse très légèrement (une différence de l'ordre de quelques millièmes d'ampère), cela se traduit par une faible augmentation de tension entre chaque extrémité de la résistance 552, donc une augmentation de la tension entre base 551b et émetteur 551c du transistor de contrôle d'intensité 551. Si cette augmentation de tension au niveau de la résistance 552 dépasse alors une certaine amplitude, de l'ordre de 0,5 V par exemple pour certains transistors dans notre exemple, cela a pour effet d'ouvrir le transistor de contrôle d'intensité 551, et donc de laisser passer une intensité entre son émetteur 551c et son collecteur 551a. En conséquence, la tension entre la base 543 et l'émetteur 544 de chaque transistor de puissance 541 diminue, ce qui correspond à une augmentation de la résistance du transistor 541 entre son collecteur 542 et son émetteur 544, et entraîne ainsi une baisse d'intensité de courant 134, et donc le résultat escompté. La résistivité de la résistance 552 est ainsi calculée de façon à ce que, au moment où l'intensité de courant 134 dépasse très légèrement le seuil 135, alors la différence de tension aux bornes de la résistance corresponde au seuil d'ouverture du transistor 551 de contrôle d'intensité (de l'ordre de 0,5 V dans notre exemple). 25 30 35 Inversement, au moment où la baisse d'intensité de courant 134 (et donc de tension à la résistance 552) obtenue sera suffisante, au seuil 135, le transistor de contrôle d'intensité 551 sera fermé, bloquant le courant entre son émetteur 551c et son collecteur 551a, annulant de fait la résistance des transistors de puissance 541. Le courant émis 134 pourra alors augmenter de nouveau de quelques millièmes d'ampères. C'est cette succession de micro-interruptions qui permet globalement de limiter l'intensité émise. Note: en réalité, la tension émise par l'émetteur de chaque transistor de puissance 541, et donc à l'origine la tension U130a, doit prendre en compte la légère perte de tension due à la résistance 552 pour obtenir une tension 130 aux bornes 590. -31- En complément, un moyen de mesure, utilisant une résistance 593 se trouvant juste avant les bornes de sortie du courant 590 fournit la valeur de l'intensité émise à un moyen de comparaison 570. Ce moyen permet de comparer en temps réel les informations reçues avec certaines valeurs prédéfinies, et transmet une information au microcontrôleur en cas d'anomalie constatée. Ainsi il transmet par exemple les événements suivants: Intensité nulle Intensité atteignant une valeur prédéfinie haute - Intensité atteignant une valeur prédéfinie basse Anomalie de fonctionnement d'un transistor de puissance 541 ou autre transistor ou composant Dans une forme préférée de l'invention, le message est transmis à l'aide de trois Optoisolators 516 au travers d'un module de commande 571, vers un circuit d'interface du 517 du microcontrôleur. Le microcontrôleur, qui peut avoir un temps de réaction de l'ordre du dixième de ms, prendra les décisions appropriées pour lesquelles il est programmé, par exemple: Intensité nulle: affiche un message d'avertissement - Intensité atteignant une valeur prédéfinie: interrompre la génération de signal faible 611, afin d'interrompre l'émission d'impulsions, ou continuer la série d'impulsions, selon le choix de l'opérateur Anomalie de fonctionnement du transistor de puissance 541: fermeture, au travers du circuit 519 du relais 538 pour couper la source de courant 530 notamment si le transistor 541 fond. Ces actions peuvent être accompagnées d'un message à l'écran, d'un signal lumineux et/ou sonore. La manière dont les transistors IGBT génèrent les impulsions est exemplifiée dans la figure 24. Cette méthode et ce dispositif permettent d'obtenir des impulsions parfaitement carrées. Le dispositif doit tout d'abord générer un courant continu à la tension requise. Pour ce faire: - Une source de tension continue 631 à 265 V est utilisée, permettant de supporter des intensités du courant jusqu'à 2,5 A et alimente le collecteur 542 de chaque transistor 541. - Cette tension est aussi utilisée par le circuit de génération de tension 560. Ce circuit comprend un régulateur de tension en série composé d'une diode zener 564, un potentiomètre 561 et un transistor 562, MOFSET de préférence. Ce circuit délivre à travers les résistances 524 et 525 une tension U13b (signal 661) entre 9 et 259 V définie par 10 15 20 25 30 35 5 15 20 25 30 35 - 32 - l'opérateur à l'aide du potentiomètre 561. Cette tension est alors reliée à la base 543 de chacun des transistors IGBT 541. Dans notre exemple de réalisation, la différence de tension entre l'émetteur 544 et la base 543 de chacun des transistors 541 est fixe d'environ 9 V, et dépend des caractéristiques du transistor de puissance 541. Nous avons ici un deuxième régulateur de tension en série, générant une tension 130 réalisé dans ce cas avec le transistor 541. Le dispositif doit aussi fonctionner comme un générateur d'impulsions, piloté par le signal faible 611 émis par le microcontrôleur 510a, afin de découper le courant émis en impulsions requises. Pour ce faire, le circuit générateur du signal requis 520 suivant a été réalisé. Le microcontrôleur génère une série d'impulsions 611 qui est transmise et inversée par les optoisolateurs 521 et 522. Quand le signal nul, une fois transmis et inversé, devient élevé: - l'optoisolateur 521 génère un court circuit entre la base 543 du transistor de puissance 541 et son émetteur 544, ce qui a aussi effet de fermer le transistor et de bloquer le courant. La tension de sortie 130 est donc presque nulle, car il reste une tension résiduelle. - Simultanément, l'autre optoisolateurs 522 ouvre un transistor 523, MOFSET de préférence ayant fonction de commutateur. Le transistor relie alors à la terre 526 la base 543 du transistor 541, ce qui ferme le transistor 541 et vide la tension résiduelle du transistor 541 entre deux interruptions. Ce mécanisme empêche aussi le risque de destruction de certains composants lors du court-circuit généré par le premier optoisolateur 521 (car le transistor commutateur 523 ainsi que les transistors de puissance 541 peuvent être endommagés à tension élevée). Inversement, quand le signal élevé, une fois transmis et inversé, devient presque nul: - le premier optoisolateur 522 ferme le transistor 523 et isole la base 543 de chaque transistor de puissance 541 de la terre 526 -le second optoisolateur 521 coupe le lien entre la base et l'émetteur du transistor de puissance 541, et la tension U130b est rétablie. A ce moment, la tension du signal 631 s'applique à la base du transistor de puissance 541, et donc l'impulsion est générée à la tension 130 requise. 10 15 20 25 30 35 - 33 - Lors de la durée 131 entre deux impulsions, le transistor commutateur 523 est relié à la terre 526, et des résistances doivent être implémentées, car on est en situation de court circuit pouvant endommager les transistors 541 et 523 et il faut absorber les charges. Ainsi il faut intégrer: - une résistance 524 entre le module de source de tension 560 et la terre 526, - une résistance 525 entre la base 542 du transistor de puissance 541 et la terre 526 La valeur de chacune des deux résistances est critique. Ainsi, elle ne doit pas être trop faible, car ne peut alors absorber le courant efficacement pendant les phases entre deux impulsions 131, ni trop forte, ce qui diminuerait l'efficacité de chaque transistor de puissance 541 pendant les phases 132 générant d'impulsion. Cette valeur dépend principalement des caractéristiques des transistors utilisés, et peut varier respectivement entre 20 KOHM et 560 KOHM pour la résistance 524 et 10 KOHM et 470 KOHM pour la résistance 525. Le microcontrôleur 510a et le module générateur de signal requis 520 sont alimentés par des redresseurs (813, 826) puis par des filtres (814,821,822,823). Le module générateur de tension requise 560 peut être alimenté à partir du circuit de génération de courant continu 530. Une diode 549 permet aussi de protéger les transistors 541 du module de puissance. Dans une forme préférée de l'invention, une sortie 592 permet de restituer, liée à des appareils de représentation et d'analyse tel que oscilloscope, ordinateur ou autre, un signal indiquant l'intensité et la tension générée aux bornes de sortie 590. Le générateur délivre une série d'impulsions qui seront transmises au sujet au travers d'électrodes. La demanderesse présente ici un exemple préféré de dispositif d'électrodes exemplifié dans son ensemble, par les figures 12.a, 12.b et 12.c. Il est composé d'un boîtier de maintient 6 et de d'un ensemble de trois électrodes invasives assemblées par un support exemplifié aussi figure 10.1. Le boîtier est composé de deux demi-cylindres 3, et l'ensemble est verrouillé à l'aide d'un anneau 22. La pièce d'injection 23 est constituée de trois électrodes alignées, parallèles et de même profondeur,l'électrode centrale 11 se trouvant à distance égale entre les deux électrodes externes 100,101 et permettant d'injecter le principe actif. Un orifice est prévu pour recevoir la seringue 1 qui contiendra le principe actif qui sera injecté par l'électrode Centrale 11. 10 15 20 25 30 35 - 34 - Les aiguilles sont assemblées à l'aide d'un ou deux disques de sertissage non-conducteur 41. Un film isolant électrique en matière synthétique 15 peut aussi être appliqué sur la partie supérieure des électrodes sous le disque de sertissage 41. Le boîtier 6 sert d'habitacle pour la pièce d'injection 23. II sert aussi de connexion électrique avec les bornes électriques de la pièce d'injection 23 et les fils électriques 7 reliés au générateur 21. Les deux électrodes 100,101 externes de la pièce d'injection sont reliées à la même borne du générateur 590b, l'électrode centrale 11 à l'autre borne 590a. Le boîtier 6 est composé de pièces qui, une fois assemblées, permettent d'obtenir une prise en main aisée du dispositif d'électrodes 23. Le contact est réalisé par des formes métalliques 38 pressées contre l'électrode par un ressort ou une pièce élastique, ou aussi bien par des lamelles métalliques flexibles. Le boîtier 6 sert aussi d'habitacle pour la seringue 1 contenant le principe actif 36 à injecter entre les deux électrodes externes de la pièce d'injection 23. Un système de butée 20 permet d'enfoncer les électrodes-aiguilles à une profondeur prédéfinie. La figure 13 montre une coupe du dispositif avec la pièce d'injection, composée de la seringue et de la pièce d'injection assemblée, positionnées dans son habitacle. On définit le programme décrivant la ou les séries d'impulsions, ou on sélectionne un programme pré-enregistré, qui définit notamment le nombre et la durée de chaque impulsion, l'intervalle entre les impulsions, la synchronisation des séquences et la tension à appliquer entre les électrodes. On assemble la seringue et son produit actif avec la pièce d'électrode 23, et on les pose dans l'habitacle correspondant du boîtier, puis on assemble les deux demi-cylindres, puis on verrouille le boîtier 6 en enfilant le cylindre de verrouillage 22, figure 14, puis on insère la butée 20 (figure 15). On branche les bornes électriques 7 au générateur d'impulsions électriques 21, on retire le capuchon protecteur des aiguilles 24. Le dispositif est prêt (figure 15), et on peut alors le planter dans les tissus du sujet, selon les pratiques et gestes médicaux habituellement en pratique pour planter une aiguille munie d'une seringue. Le dispositif de butée bloque le dispositif à une profondeur intermédiaire prédéfinie. On injecte le principe actif, on retire la butée, et on enfonce le boîtier jusqu'à la garde. On peut maintenant déclencher la ou les séries d'impulsions préprogrammées. Puis, on retire le dispositif du sujet, on déverrouille le boîtier et on jette les consommables: seringue 1, pièce d'injection 23. Les impulsions peuvent aussi être émises successivement à chaque paire. Plusieurs moyens sont proposés. 10 15 20 25 30 35 - 35 - Par exemple on peut utiliser un module alternateur évoluant en synchronisation avec le générateur, et mettant en contact alternativement chaque aiguille externe avec la borne 590b du générateur au moment de l'impulsion émise par le générateur. Dans une mode préféré de l'invention, illustré figures 25.a et 25.b, le générateur délivre chaque impulsion alternativement à chaque paire d'électrode: paires (101, 11) et (100,11); Chaque paire est reliée à ses propres bornes. Ainsi: l'électrode 100 est reliée à la borne 590b l'électrode 101 est reliée à la borne 590c - l'électrode 11 est reliée à la borne 590a La borne 590a, à la tension nulle, reliée à la terre, est commune aux paires d'électrodes. De plus, dans cet exemple, le dispositif d'électrode 23 est composé d'une électrode centrale 11 commune aux deux paires d'électrodes. Le générateur dispose de deux circuits de génération d'impulsions 1000, composé chacun des circuits ( 520, 540, 550, 560). Le circuit générateur de tension continue 530 peut être commun. Le moyen générateur d'impulsions faibles 510 peut aussi être commun, alternant les impulsions vers l'un ou l'autre circuit générateur 1000. Le circuit d'analyse 570 peut être commun et/ou faire partie de chaque circuit 1000. Si le dispositif comprend plus de deux électrodes externes, alors le nombre de circuit 1000 peut être multiplié. Quand une série d'impulsion à tension constante est émise entre deux électrodes invasives, et que celle-ci se déplacent, alors si l'intensité atteint le seuil maximum prédéfini (135), alors le module de contrôle d'intensité 550 entre en action, et diminue la tension 130 afin de maintenir l'intensité, ce qui a pour effet, la résistance entre les électrodes variant de manière proportionnelle, de maintenir les champs V/cm entre les deux électrodes. Application industrielle de l'invention Les applications industrielles de l'administration de nucléotides assistée par champs sont multiples. Le dispositif selon l'invention est particulièrement destiné à l'administration de médicaments, en particulier médicaments à base d'ADN, en médecine humaine et vétérinaire. Les applications thérapeutiques chez l'homme ou l'animal concernent, en particulier, mais de façon bien évidemment non exhaustive, le traitement des tumeurs et la production de protéines sanguines. 10 15 20 - 36 - La production de protéines dans le sang concerne le traitement de l'hémophilie, les troubles de la croissance, les myopathies, les maladies lysosomiales et métaboliques en général, l'insuffisance rénale chronique et la beta-thalassémie par la production endogène d'érythropoïétine. D'autres champs d'application concernent la néoangiogénèse, l'athérosclérose, en utilisant l'effet protecteur de cytokines telles que l'IL-10, la vaccination, l'utilisation d'oligonucléotides antisens, ou encore la prévention de la neuropathie périphérique induite par le cis-platine, par électrotransfert d'un plasmide codant pour une neurotrophine. Un accent particulier est mis actuellement sur l'utilisation dans la polyarthrite rhumatoïde articulaire ou dans des pathologies inflammatoires en général, en utilisant l'effet protecteur de l'IL-10, d'anti-TNF ou d'autres cytokines. L'utilisation de facteurs de croissance est aussi riche de potentiel dans des maladies neurodégénératives ou dégénératives de l'articulation (arthrose). En outre, sont aussi concernées toutes les pathologies pouvant bénéficier de l'expression locale d'une protéine sécrétée, comme par exemple une protéine anti-inflammatoire secrétée dans l'articulation pour le traitement de l'arthrite, ou une protéine anti-angiogénique pour le traitement du cancer. De même, la production dans une articulation dans facteur de croissance peut être envisagée pour le traitement de l'arthrose. L'utilisation de protéines angiogéniques sécrétées localement pour le traitement de l'artérite périphérique est aussi envisageable. Est aussi concerné la vaccination active et passive sur les êtres humains et les animaux, la fabrication de vaccins et la fabrication d'anti-corps, notamment dans le cadre des pathologies liées au bio-terrorisme. II faut aussi mentionner les applications thérapeutiques pour lesquelles l'expression intracellulaire d'une protéine est nécessaire, comme de nombreuses maladies neuromusculaires(myopathie), les tumeurs, etc.. 25 30 35 -37- Revendications 1) Dispositif pour améliorer la pénétration in vivo de molécules de principe actif dans les cellules des tissus d'un sujet humain ou animal, caractérisé en ce qu'il comprend tous les composants suivants: - un générateur d'impulsions électriques unipolaires, appareil permettant de générer au moins une série d'impulsions électriques unipolaires carrées comprenant les composants suivants: o Un moyen permettant de renseigner la tension requise pour chaque série d'impulsions (130) o Un moyen permettant de renseigner, pour chaque série d'impulsions, le nombre d'impulsions (133), la durée de chaque impulsion (132) et la durée entre chaque impulsion (131) o Un moyen (510) permettant, pour chaque série d'impulsions, de générer un signal à une faible et constante tension (611) en mode PWM (Pulses Width Modulation), et suivant la forme des impulsions requises (intervalle 131, durée 132, nombre 133), o Une source de tension continue (530) générant un courant (631) à une tension constante et supérieure à la plus haute tension requise pour les impulsions (130) o au moins un circuit générateur d'impulsions (1000) , utilisant: o ledit signal (611) et o la source de tension continue (530),- 38 - pour générer à ses bornes de sortie (590) un courant (641) ayant les caractéristiques requises pour la série d'impulsions: • tension requise (130) et • forme des impulsions requises (intervalle 131, durée 132, nombre 133) - au moins un dispositif d'électrodes relié électriquement à au moins un circuit générateur d'impulsions (1000) par ses bornes de sortie (590), chaque dispositif d'électrodes comprenant: o un premier ensemble d'électrodes comprenant au moins une électrode (10) reliée électriquement à une première borne (590b) du circuit o un deuxième ensemble d'électrodes comprenant au moins une électrode (11) reliée électriquement à une seconde borne (590a) du circuit - un moyen (8) d'injecter le principe actif dans les tissus. 2) Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que le moyen (510) permettant de générer le signal requis à faible tension (611), comprend: o un moyen permettant de renseigner pour chaque série d'impulsions les caractéristiques des impulsions à générer (intervalle 131, durée 132, nombre 133) et o une source de signal informatique (510a) qui génère un signal électrique composé d'une série d'impulsions carrées (611): ^ à faible et constante tension et ^ aux caractéristiques citées: nombre d'impulsions (133), durée de chaque impulsion (132), durée entre chaque impulsion (131) 3) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que : - chaque circuit (1000) du générateur d'impulsions comprend : o un module de puissance (540) comprenant au moins un transistor (541) et o un circuit amplificateur d'impulsions (520 + 560): o comprenant un moyen permettant de renseigner la tension requise (130) pour les impulsions o générant, à partir du signal de la série d'impulsions carrées (611), un signal (621) alimentant la base 543 de chaque transistor (541) du module de puissance (540) o le signal généré (621) ayant une tension U130a égale à la tension requise citée (130) incrémentée de la différence de tension U130b entre la base 543 l'émetteur 544 de chaque transistor (541) du module de puissance (540);-39- - la source de tension continue (530) est reliée au collecteur 542 de chaque transistor (541) du module de puissance (540) - le module de puissance (540) délivre en conséquence, par son émetteur 544 aux bornes de sortie (590) un courant : o dont la forme correspond à la série d'impulsions émises citée (611) et o dont la tension de chaque impulsion correspond à la tension cible requise (130) ; 4) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les impulsions émises aux bornes du générateur (590) sont caractérisées de la manière suivante: - la tension (130) entre les bornes de sortie (590) des impulsions émises est égale et constante et est inférieure à 500 V et - la durée de l'intervalle entre les impulsions (131) émises est égale et comprise entre 1 et 150 ms et - la durée des impulsions (132) émises est égale et comprise entre 1 et 100 ms et - les champs générés entre chaque paire d'électrodes (100,101) sont compris entre 5 et 500 Vlcm. et - l'intensité (134) délivrée à chaque instant pendant la délivrance des champs est inférieure à 5 ampères et - le nombre total d'impulsions (132) émises par série est inférieur à 25 - le nombre de séries émises simultanément est inférieur à 16 - le nombre total de séries émises est inférieur à 32 5) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que chaque circuit générateur d'impulsions (1000) dispose d'un module de contrôle d'intensité (550) qui permet en temps réel de plafonner à un certain seuil prédéfini (135) l'intensité de courant de chaque impulsion délivrée aux bornes de sortie (590) en induisant une résistance variable qui modifie en conséquence la tension délivrée aux bornes de sortie (590). 6) Dispositif selon la revendication 5, caractérisé en ce que le module de contrôle d'intensité (550): - comprend: ^ une résistance de mesure (552) et ^ un transistor de contrôle (551) commandé par la différence de tension sur la résistance de mesure, le transistor étant relié: o à une extrémité de la résistance de mesure (552) par son émetteur (551c) et o à la base (543) de chaque transistor de puissance (541) par son collecteur (551c) et-40- o à l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) par sa base (551b) qui est aussi reliée à l'autre extrémité de la résistance de mesure (552); et permet de diminuer l'intensité de courant émis: ^ en générant un courant entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) dés que l'intensité de courant (134) dépasse très légèrement un certain seuil (135), la diminution de tension entre la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) ayant pour effet d'induire une résistance dans chaque transistor (541), et de diminuer ainsi la tension (130) entre les bornes de sortie (590) ^ en ne générant plus de courant entre la base (543) et l'émetteur (544) une fois l'intensité de courant (134) descendue en dessous de du seuil d'intensité maximum (135). 7) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que chaque module de puissance (540) comprend au moins un transistor (541) de type IGBT 8) Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que chaque module de puissance (540) comprend au moins un transistor de type (541) MOFSET 9) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le chaque circuit amplificateur de tension (520+560) comprend les composants suivants: - Un générateur de tension continue (560) générant une tension (661) à l'amplitude U130a vers la base (543) de chaque transistor (541) du module de puissance (540) un circuit générateur du signal requis (520) permettant de découper la tension (661) selon le signal (611) émis par le générateur de signal (510), comprenant les composants suivants: o un optoisolateur (521) ayant fonction de commutateur et qui permet, en suivant les impulsions de la série d'impulsions carrées (611), de court-circuiter la base (543) et l'émetteur (544) de chaque transistor de puissance (541) et de rendre ainsi nul le courant émis (134) aux bornes de sortie de l'appareil (590) pendant la période entre deux impulsions (131) o un transistor (523), ayant aussi fonction de commutateur et qui permet, en suivant les impulsions de la série d'impulsions carrées (611) inversées obtenues au travers d'un optoisolateur (522), de relier la tension de la base (543) de chaque transistor de puissance (541) à la terre (526) o une résistance (524) comprise entre 20 KOHM et 560 KOHM se trouvant entre le générateur de tension (560) et le transistor commutateur (523)-41 - o une résistance 525 comprise entre10 KOHM et 470 KOHM se trouvant entre la base (543) de chaque transistor de puissance et le transistor commutateur (523) 10) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que chaque circuit de génération d'impulsions (1000) dispose d'un moyen de contrôle (570) permettant de collecter les informations sur les signaux et courants émis et les transmettre à un moyen informatique (510a) pouvant automatiquement, en cas d'anomalie ou de seuil d'intensité maximum atteint, réaliser l'une des actions suivantes: -Interrompre le courant avant son arrivée vers le module de puissance (540) à l'aide d'un circuit (538) - interrompre la génération des signaux (611) - signaler à l'opérateur les situations d'anomalie - prendre toute action logique préprogrammée 11) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le dispositif d'électrodes (23) est composé: - de deux électrodes invasives, chaque électrode étant reliée à une borne du générateur et - d'un moyen d'injecter le principe actif composé d'une aiguille d'injection se trouvant au centre des deux électrodes invasive, et à profondeur intermédiaire; les électrodes et l'aiguille d'injection étant parallèles, assemblées et rendues solidaires à l'aide d'un support non-conducteur (41), et les électrodes étant de même profondeur 12) Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que le dispositif d'électrodes (23) comprend: - un premier ensemble d'électrodes composé d'une électrode invasive centrale (11), et faisant aussi office d'aiguille permettant d'injecter le principe actif et relié à une borne nulle (590a) de chaque circuit (1000) - un deuxième ensemble (10) composé d'électrodes invasives externes situées approximativement sur un cercle dont l'électrode centrale (11) se trouve au centre, les électrodes externes (10) étant équidistantes entre elle, chaque électrode externe (10) étant reliée à une autre borne (590b) d'un circuit (1000); les électrodes des deux ensembles étant parallèles, de même profondeur, assemblées et rendues solidaires à l'aide d'un support non-conducteur (41) 13) Dispositif selon la revendication 12, caractérisé en ce que le deuxième ensemble (10) d'électrodes est constitué de quatre électrodes invasives-42- 14) Dispositif selon la revendication 12, caractérisé en ce que le deuxième ensemble (10) d'électrodes est constitué de trois électrodes invasives 15) Dispositif selon la revendication 12, caractérisé en ce que le deuxième ensemble (10) d'électrodes est constitué de deux électrodes invasives, les trois électrodes du dispositif étant alignées 16) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les électrodes invasives de chaque dispositif d'électrodes (23) sont rendues solidaires à l'aide d'un support non-conducteur (41) et que chaque dispositif d'électrodes (23) comprend en outre un boîtier (6) disposant d'un habitacle permettant de loger les électrodes solidaires et le moyen d'injection du principe actif et le réservoir (1) contenant le principe actif, ce boîtier permettant une bonne prise en main des électrodes et assurant la liaison électrique entre chaque ensemble d'électrodes et sa borne (590a ou 590b) 17) Dispositif selon la revendication 16, caractérisé en ce que le dispositif de prise en mains: - dispose d'un moyen permettant d'enfoncer successivement les électrodes invasives (10,11) dans les tissus à des profondeurs intermédiaires prédéfinies, et - dispose d'un moyen permettant d'injecter le principe actif à chaque position d'arrêt. 18) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les électrodes invasives de chaque dispositif d'électrodes (23) sont recouvertes dans leur partie supérieure pénétrant dans les tissus d'un isolant électrique (15). 19) Dispositif selon l'une quelconque des revendications 10 à 18, caractérisé en ce que: - Chaque circuit générateur d'impulsions (1000) est relié à 1 seule paire d'électrodes - si la distance moyenne entre les électrodes d'une paire d'électrodes varie au-delà d'un certain seuil, lors de la génération des impulsions, on fait varier automatiquement et en temps réel la résistivité d'une résistance variable en série afin de maintenir l'intensité du courant émis (134), ceci ayant pour effet de faire varier proportionnellement à la variation de distance entre les électrodes la tension de sortie (130) et donc de garder approximativement constante la valeur des champs V/cm des impulsions électriques entre les électrodes de la paire électrodes- 43 - 20) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que qu'il ne dispose que d'un seul circuit générateur d'impulsions (1000), émettant simultanément une seule série d'impulsions vers deux bornes (590) reliées à un seul dispositif d'électrodes (23).