FR 2892820 A1 20070504 FR 0511207 A 20051103 La présente invention concerne un procédé magnétique d'immunodiagnostic pour la mise en évidence de complexe anticorps/antigène. Un tel procédé a pour application la recherche et/ou l'identification d'anticorps ou d'antigène, de préférence d'anticorps anti-antigène ou d'antigène de groupe sanguin, ce procédé mettant en oeuvre une suspension de particules magnétiques revêtues d'antigène pouvant être porté par des cellules telles que des érythrocytes. L'invention comprend également un dispositif et un kit permettant de réaliser un tel procédé. La transfusion sanguine consiste de nos jours à administrer par voie intraveineuse des préparations de concentré de globules rouges (concentrés globulaires) 10 obtenues à partir de sang de donneurs. Lors d'une transfusion sanguine, le risque premier est lié à la possibilité de réunir dans l'organisme du receveur (la personne transfusée) un anticorps et son antigène érythrocytaire. On trouve en effet à la surface des érythrocytes, appelés encore globules rouges ou hématies, des antigènes membranaires érythrocytaires, notamment 15 des antigènes de groupe (ou système) sanguin, capables d'être reconnus par le système immunitaire et de déclencher une réponse immune. Les globules rouges du donneur sont dits compatibles avec le sang du receveur si le receveur ne présente pas d'anticorps circulants dirigés contre un antigène érythrocytaire du donneur. 20 Parmi l'ensemble des variants antigéniques d'un antigène membranaire érythrocytaire constituant les groupes sanguins, plus de vingt systèmes antigéniques érythrocytaires chez l'Homme ont été à ce jour identifiés : système ABO avec les antigènes A ou B, système Rhésus avec l'antigène D, E ou e et C ou c, système Kell avec l'antigène K ou k, Duffy (Fya, Fyb), Kidd (Jka, Jkb) ou encore d'autres systèmes 25 moins fréquemment recherchés en pratique existant aussi tels que MNS, Lewis, etc.. Les individus présentant une même association d'antigènes érythrocytaires appartiennent à un même groupe sanguin érythrocytaire. Les groupes sanguins sont d'autant plus complexes et nombreux que l'on utilise plusieurs systèmes antigéniques. En dehors de situation pathologique, dans le cas par exemple de maladie auto- 30 immune, le sérum d'un individu peut contenir deux types d'anticorps dirigés contre des antigènes érythrocytaires : - (i) les anticorps dits réguliers et dirigés contre les antigènes du système ABO (par exemple anticorps anti-A chez l'individu de groupe B). Il s'agit d'immunoglobulines de type IgM qui sont capables d'agglutiner les globules rouges in vitro. Ce phénomène est mis à profit pour déterminer le groupe ABO d'un individu par les épreuves de Beth-Vincent et Simonin, l'épreuve de Beth-Vincent permettant de déterminer les antigènes portés par les globules rouges de l'individu (phénotype antigénique) et l'épreuve de Simonin permettant de réaliser l'étude complémentaire, c'est-à-dire de déterminer les anticorps anti-A et/ou anti-B circulants présents dans le sérum de l'individu. Dans l'épreuve de Beth-Vincent, les globules rouges de l'individu sont mis en présence de sérums tests, ou anticorps tests, possédant chacun un type d'anticorps précis, dirigé contre un antigène du système ABO. Il s'agit donc d'un test d'agglutination des globules rouges avec des sérums tests. Dans l'épreuve de Simonin, appelée encore contre-épreuve, le sérum de l'individu, contenant ses anticorps circulants, est mis en présence de globules rouges tests, ou érythrocytes tests, appartenant chacun à un groupe antigénique précis du système ABO. Il s'agit donc d'un test d'agglutination du sérum avec des globules rouges tests : - (ii) les anticorps dits irréguliers (ou immuns) dont la présence dans le sérum ou plasma est facultative et qui sont dirigés contre des antigènes des systèmes non ABO. Il s'agit le plus souvent d'IgG, apparaissant à l'occasion d'une stimulation antigénique par des globules rouges étrangers, par exemple suite à une immunisation contre un ou plusieurs antigènes lors d'une transfusion sanguine ou encore lors d'une grossesse par réaction immunitaire maternelle dirigée contre les antigènes érythrocytaires foetaux n'appartenant pas au groupe sanguin maternel, notamment lors de l'accouchement. La recherche de ces anticorps dits irréguliers est appelée Recherche d'Agglutinine Irrégulière (RAI). Ce test est utilisé pour détecter la présence ou non dans le sang d'un individu d'IgG dirigées contre divers antigènes érythrocytaires. Pour cela, on cherche à mettre en évidence la fixation de ces IgG sur des globules rouges tests dont les antigènes sont connus. On procède en parallèle sur de nombreux types de globules rouges, la comparaison des résultats permettant d'identifier l'IgG ou les IgG présentes. Le risque est plus important pour les antigènes les plus immunogènes comme le rhésus D mais aussi les autres rhésus (E>c>e>C), le Kell (K), le Duffy (Fy a, Fy b), le Kidd (Jka, Jk b), etc.. En pratique, on ne peut tenir compte de tous ces antigènes pour réaliser une transfusion faute de quoi on ne disposerait jamais du bon groupe sanguin au bon moment, d'autant moins que certaines associations antigéniques sont très rares. La transfusion standard ne tient compte que du groupe dans le système ABO plus le Rhésus D (Rh+ ou Rh-). Dans les situations à risque d'apparition d'une agglutinine irrégulière, on tient compte d'un certain nombre d'autres systèmes, notamment les Rhésus C et E et le Kell, voire encore d'autres systèmes. Il s'agira alors pour ces situations à risques de respecter la compatibilité du groupe sanguin du donneur avec celui du sang du receveur en tenant compte de la présence ou du risque d'apparition de ces agglutinines irrégulières. Ainsi, chez un patient receveur porteur d'anticorps irréguliers anti- érythrocytaires ou dans une situation à risque comme notamment chez les patients polytransfusés ne possédant pas d'anticorps irréguliers anti-érythrocytaires et chez la femme enceinte, il est indispensable de sélectionner les unités de concentrés érythrocytaires qui vont lui être transfusées de telle sorte que les globules rouges du donneur devront être dépourvus des antigènes contre lesquels les anticorps du receveur sont dirigés ou susceptibles d'apparaître. Cette épreuve de compatibilité est obligatoire chez ces patients et de manière préventive chez tous les receveurs avant l'administration des concentrés érythrocytaires en effectuant une épreuve de compatibilité directe avec les hématies du donneur en présence du sérum ou plasma du receveur. Aucune réaction d'agglutination et/ou de lyse dans les techniques utilisées pour la RAI ne doit être observée. En pratique clinique transfusionnelle, le phénotypage érythrocytaire, qui correspond à la recherche et à l'identification des antigènes de groupe sanguin à la surface des hématies (à l'exception du système particulier ABO où l'on recherche en outre la présence des anticorps réguliers correspondants), concerne aussi bien le receveur que le donneur. A l'échelon du receveur et du donneur, trois niveaux de phénotype érythrocytaire existent afin de mettre à disposition du receveur des concentrés érythrocytaires compatibles en fonction des situations à risque : - la détermination du phénotype groupage ABO (ou groupage ABO) et Rhésus standard (présence ou absence de l'antigène D) ; - la détermination du phénotype Rhésus Kell (présence ou absence des antigènes C, E, e, e et K) ; et - la détermination du phénotype étendu (ou élargi) (présence ou absence des antigènes du système Duffy, Fy a et Fy b, du Système Kidd, Jk a et Jk b, et du système MNSs (antigènes S et s), d'autres antigènes pouvant être en outre recherchés selon la nature du risque et/ou de l'anticorps irrégulier mis en évidence dans le sérum du receveur. Les techniques habituellement utilisées, mises en oeuvre pour rechercher et identifier la présence ou l'absence d'antigène de groupe sanguin à la surface d'érythrocyte de donneur et/ou de receveur, ou visant à rechercher et identifier la présence ou l'absence d'anticorps anti-antigène de groupe sanguin, régulier (pour le groupage ABO) ou irrégulier dans le cadre de la RAI dans le sérum ou plasma de donneur et/ou de receveur, sont bien connues de l'homme de l'art et ne seront ici pas décrites. Pour le phénotypage, elles consistent en général à rechercher à l'aide de sérums-tests contenant les anticorps appropriés la présence ou l'absence de l'antigène recherché. De préférence, ces anticorps contenus dans ces sérums tests sont de nature agglutinante (IgM ou IgA), ce qui permet d'obtenir une agglutination totale ou partielle des érythrocytes à phénotyper lorsque ces derniers portent l'antigène correspondant à l'anticorps présent dans le sérum test. Néanmoins, il est possible d'utiliser des anticorps tests non agglutinants (de type IgG), l'agglutination étant provoquée au moyen d'une anti-immunoglobuline et visible notamment après une étape de centrifugation et remise en suspension du culot obtenu (technique dite de Coombs indirect). Il est également possible d'utiliser des anticorps tests non agglutinants où la présence de ces anticorps tests fixés sur le globule rouge est visualisée au moyen d'une anti-immunoglobuline fixée sur une phase solide (technique dite d'immuno-adhérence). La lecture du résultat pourra être réalisée à l'oeil ou au moyen de lecteur approprié. Pour la recherche et l'identification dans l'échantillon de sérum ou plasma du patient à tester d'anticorps anti-antigènes de groupe sanguin, réguliers pour le groupage ABO ou irréguliers dans le cadre de la RAI, on met en général en présence du sérum ou du plasma du patient avec des érythrocytes-tests (appelés encore hématies-, ou globules rouges-tests, d'antigénicité connue dans un certain nombre de systèmes de groupes sanguins (ABO, Rhésus, Kell, Duffy, Kidd, MNSs, ...). Pour la RAI, pour laquelle les anticorps susceptibles d'être présents sont plutôt de type non agglutinant, les techniques utilisées sont de type Coombs indirect par agglutination au moyen d'une antiimmunoglobuline ou par immunoadhérence sur une phase solide revêtue d'une anti- immunoglobuline. Pour la RAI, on utilise dans une première étape un panel de globules rouges dit de dépistage (deux ou trois globules rouges de groupe différent choisis de façon à comporter le maximum d'antigènes) permettant de détecter (mais pas d'identifier) la présence ou l'absence d'anticorps irréguliers. Lorsque le dépistage est positif, on réalise alors l'identification de la spécificité du ou des anticorps irréguliers présents au moyen d'au moins un panel de globules rouges dit d'identification comportant en général 10 globules rouges différents phénotypés dans la grande majorité des systèmes de groupes sanguins connus. Il existe un grande nombre de variantes des techniques utilisées pour le phénotypage ou la RAI dans le domaine de la transfusion sanguine, ces techniques pouvant être manuelles, sur plaque d'opaline, en tube ou en cupule de microplaque, ou complètement automatisées à l'aide de robot distributeur d'échantillon et de réactif, agitateur, incubateur et lecteur automatique dont les programmes sont adaptés aux techniques mises en oeuvre. Parmi les techniques utilisées, on peut citer les techniques pour lesquelles la présence d'anticorps anti-antigène de groupe sanguin ou d'antigène de groupe sanguin est basée sur la mise en évidence d'une agglutination de globules rouges après centrifugation mettant en oeuvre une mini colonne de filtration transparente (gel type sephadex ou microbilles) dont l'évasement à l'extrémité supérieure sert de chambre d'incubation et dont le seuil de coupure choisi pour la colonne empêche les hématies agglutinées après centrifugation de traverser la colonne (voir notamment le document brevet EP 0 194 212 ou brevet EP 0 755 719). On peut également citer les techniques pour lesquelles le phénotypage ou la RAI est basée sur la mise en évidence de globules rouges sensibilisés avec un anticorps après centrifugation puis immunoadhérence mettant en oeuvre une barrière de séparation constituée d'un gel ou d'un liquide dont la densité est choisie de telle manière que seuls les globules rouges peuvent traverser cette barrière lors d'une centrifugation, le container à réaction étant revêtu dans sa partie inférieure d'une anti-immunoglobuline afin de piéger les globules rouges sensibilisés et donner une image caractéristique. Parmi ces techniques, on peut citer le document brevet EP 0 058 780 qui décrit un procédé de phénotypage sanguin dans lequel le mélange réactionnel est centrifugé au travers d'un coussin de densité supérieure (de type solution d'albumine bovine ou de polyvinyl pyrrolidone), ce qui présente l'avantage de supprimer l'étape de lavage des hématies sensibilisées. On peut également citer le document brevet WO 98/02752 qui décrit un procédé général pour déterminer la présence d'un antigène sanguin présent sur des érythrocytes ou d'un anticorps fixant un tel antigène. Dans ce procédé, les érythrocytes sensibilisés ou non, sont séparés des anticorps non fixés par centrifugation grâce à un milieu de séparation dont la densité est supérieure à celle du liquide contenant les anticorps, mais inférieure à celle des érythrocytes, les érythrocytes sensibilisés étant séparés des érythrocytes non sensibilisés sur la paroi inférieure du container à réaction sur lequel est immobilisée une antiimmunoglobuline, les érythrocytes non sensibilisés étant rassemblés dans le fond du container, l'analyse de l'image finale obtenue étant spécifique de la présence ou non de l'analyte recherché. Parmi les variantes des techniques utilisées pour le phénotypage ou la RAI, on peut également citer celles qui ont été développées de manière générale pour la recherche dans un échantillon d'un analyte capable de se fixer sur une cellule en utilisant des particules magnétiques, ceci notamment afin de supprimer la centrifugation, opération nécessaire notamment dans les techniques basées sur l'agglutination comme la technique à l'antiglobuline (Coombs indirect par agglutination ou par immunoadhérence sur phase solide) pour la RAI ou encore pour le phénotypage, ou encore, comme pour la RAI, lorsqu'il est nécessaire de laver les globules rouges sensibilisés afin d'éliminer les anticorps non spécifiques capables de reconnaître l'anti-immunoglobuline utilisée à l'étape suivante. En effet, l'étape de centrifugation est toujours difficile à mettre en oeuvre dans les procédés que l'on souhaite entièrement automatiser, notamment due au coût et à l'encombrement des centrifugeuses, leur manipulation, etc.. Les particules magnétiques sont depuis longtemps utilisées pour la détection de 5 complexes de type ligand-récepteur ou anticorps-antigène, on peut citer par exemple les procédés tels que ceux décrits dans les documents brevets suivants : - le document WO 92/17781 qui décrit une méthode de détermination de la présence d'un ligand dans un échantillon dans laquelle on incube des particules de latex magnétiques, pouvant être de couleurs différentes, revêtues d'une substance, telle un anticorps, capable de 10 se fixer avec ce ligand, puis on applique un champ magnétique au milieu d'incubation et enfin on observe la présence ou l'absence d'agglutination ; ou encore - le document EP 0 426 170 qui décrit une méthode de détermination de la présence d'un ligand dans un échantillon, méthode dans laquelle on incube des particules de gélatine magnétiques sensibilisées avec des antigènes ou des anticorps capables de se fixer avec ce 15 ligand, puis on applique un champ magnétique au milieu d'incubation et enfin on observe la présence ou l'absence d'agglutination, ladite méthode étant caractérisée en ce qu'on observe l'état de glissement de ces particules après inclinaison du container, notamment une cupule de microplaque à fond en V. De telles particules magnétiques ont déjà été utilisées en immunohématologie pour 20 le phénotypage et/ou la RAI. Parmi les documents décrivant de telles applications, on peut citer notamment : - le document EP 0 351 857 qui décrit un procédé de dosage immunologique utilisant des marqueurs magnétisés tels que des anticorps ou des antigènes fixés sur des billes de latex magnétiques. Ces marqueurs sont capables de se lier à une substance que l'on 25 souhaite déterminer dans une étape d'immunoréaction, et l'on rassemble ensuite les particules magnétiques à marqueur sur une région prédétel,ninée de la surface d'une paroi dans un récipient de mesure à l'aide d'un aimant positionné sous cette cupule et sous l'action d'un champ magnétique, ce procédé pouvant comprendre une substance qui peut se lier spécifiquement à la substance à déterminer immobilisée sur une région prédéterminée 30 de la surface de la paroi du récipient de mesure. Il est décrit notamment une technique RAI par immunoadhérence dans laquelle des érythrocytes préalablement fixés au fond d'une cupule de microplaque sont ensuite sensibilisés avec le sérum du receveur, puis lavés (par aspiration et injection du liquide de lavage), puis dans laquelle cupule on ajoute les billes de latex magnétiques revêtues d'une anti-immunoglobuline avant d'appliquer un champ magnétique ; - le document EP 0 528 708 qui décrit un procédé de détection par immunoadhérence d'une substance biologique susceptible d'être présente dans un échantillon. Dans ce procédé, les érythrocytes à phénotyper ou servant de panel de dépistage et/ou d'identification sont fixés préalablement sur le fond d'une microplaque. Après sensibilisation des érythrocytes ainsi fixés avec le sérum test (pour le phénotypage) ou le sérum du receveur à tester (pour la RAI), les cupules sont lavées et on ajoute ensuite lo des billes de latex magnétiques revêtues d'anti-immunoglobuline. Dans ce procédé, on applique notamment deux types de champ magnétique successifs (de type vertical et circulaire) afin de déplacer les particules magnétiques non liées spécifiquement avec la substance à rechercher ; et - le document brevet EP 0 230 768 qui décrit un procédé de co-agrégation de 15 particules magnétiques capable de se lier à une substance contenue dans un échantillon au moyen de composés polycationiques ou polyanioniques en présence d'un champ magnétique. Ce document décrit en particulier la séparation du plasma d'un échantillon de sang total contenant des globules rouges dans lequel procédé, on ajoute séquentiellement dans un container placé sur un aimant l'échantillon de sang total et un ferrofluide 20 (FeC12/FeC13) revêtu d'albumine bovine sérique succinylée, les agrégats de particules d'érythrocytes ainsi obtenus étant entraînés vers l'aimant permettant ainsi de récupérer le plasma clarifié par décantation. Dans ce document, il est également décrit un procédé permettant de quantifier la présence d'un anticorps anti-RH (anti-D) dans un échantillon de plasma préparé selon le procédé précédent lequel est incubé en présence d'une suspension 25 de globules rouges RH+ fluorescents et auquel mélange on ajoute ensuite et séquentiellement le ferrofluide succinylé et du polybrène, les globules rouges étant lavés plusieurs fois par application d'un champ magnétique et décantation avant l'ajout d'une anti-immunoglobuline. La quantification de l'anticorps anti-RH dans l'échantillon de plasma est évaluée par comparaison à des témoins en analysant les fluctuations de quantité 30 de fluorescence observée dans un volume donné. Ainsi, il reste de pouvoir disposer d'un procédé rapide et simple de mise en évidence de la présence d'un anticorps dirigé spécifiquement contre un antigène donné dans un mélange réactionnel complexe contenant notamment des anticorps dirigés contre d'autres antigènes, dans lequel procédé, il n'y ait ni étape de lavage et ni étape de centrifugation. Un tel procédé sans étape de centrifugation et sans étape de lavage, notamment pour la RAI, aurait comme avantage de pouvoir être mis en oeuvre sur un support pratique et disponible tel qu'une microplaque, et être entièrement automatisé. Ceci est justement l'objet de la présente invention. Dans un réacteur de type cupule de microplaque à fond rond présentant une paroi inclinée revêtue d'une anti-immunoglobuline capable de se lier spécifiquement à un anticorps, les inventeurs ont mis au point un procédé simple et efficace de mise en évidence de complexe spécifique formé entre un anticorps et un antigène dans un mélange réactionnel complexe pouvant contenir des anticorps libres, notamment dirigés contre d'autres antigènes, ceci sans étape de lavage et sans étape de centrifugation. Ce procédé met en oeuvre une suspension de particules magnétiques revêtues d'antigène pouvant être porté par une cellule, ce procédé pouvant être largement automatisé et appliqué en particulier à la RAI, et, le cas échéant, au phénotypage de globules rouges. Dans ce procédé la présence du complexe anticorps/antigène est déterminé en fin de réaction par visualisation de la présence du complexe formé sur la paroi inclinée du réacteur par immunoadhérence. Les inventeurs ont mis en évidence de manière surprenante qu'il était possible après incubation d'un mélange réactionnel entre une solution d'anticorps et une suspension de particules magnétiques revêtues d'antigènes, notamment d'érythocytes, ledit mélange réactionnel étant formé dans une cupule au-dessus d'une solution visqueuse ou d'un gel de densité supérieure à la solution d'anticorps, de faire migrer ladite suspension de particules magnétiques au travers de cette solution visqueuse ou de ce gel séparateur vers la paroi inclinée revêtue d'anti-immunoglobuline et/ou le fond de la cupule en utilisant l'action d'un champ magnétique obtenu au moyen d'un aimant situé sous la cupule et de pouvoir visualiser la présence de complexe spécifique formé par immunoadhérence, ceci sans faire migrer les anticorps libres susceptibles de saturer l' anti-immunoglobuline. Les inventeurs ont mis en évidence de manière encore plus surprenante qu'il était possible d'améliorer très avantageusement ce procédé par une action combinée et simultanée du champ magnétique et d'une agitation rotative de la cupule qui non seulement permet de faciliter grandement la migration des particules, notamment revêtues d'érythrocytes, au travers de la solution visqueuse ou de gel, mais également de favoriser la probabilité de rencontre entre les antigènes portés par les particules magnétiques et l'anti-immunoglobuline fixée sur la paroi inclinée et le fond de la cupule. Si il a été montré qu'il était possible d'utiliser des solutions visqueuses, ou des gels, de densité supérieure à celle du liquide contenant les anticorps, mais inférieure à celle des érythrocytes, pour séparer par centrifugation des érythrocytes (sensibilisés ou non) des anticorps libres non fixés à ces érythrocytes, ceci pour éviter l'étape de lavage dans les techniques d'immunoadhérence (voir les documents brevets EP 0 058 780 et WO 98/02752 cités précédemment), les inventeurs ont mis en évidence qu'il était également possible d'éliminer également cette étape de centrifugation en utilisant ces substances visqueuses ou gels avec des particules magnétiques porteuses d'antigène, notamment des érythrocytes, au moyen d'un champ magnétique provoqué par un aimant permanent situé à l'extérieur et sous la cupule, en particulier en combinant ce champ magnétique avec une étape d'agitation rotative du réacteur. Ainsi, sous un premier aspect, la présente invention a pour objet un procédé de mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène lié à une particule magnétique, la réaction s'effectuant dans un réacteur ouvert vers le haut et à fond fermé et dont la section diminue au moins dans la zone voisine du fond pour former une paroi inclinée s'étendant jusque dans le fond, ladite paroi inclinée étant au moins en partie revêtue d'une anti-immunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps dudit complexe formé, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) préalablement à la réaction : - le remplissage préalable du réacteur avec une substance visqueuse ou un gel 30 homogène de manière à recouvrir au moins en partie la paroi inclinée du réacteur, b) la mise en contact au-dessus de la solution visqueuse contenue dans le réacteur de la solution contenant ou susceptible de contenir ledit anticorps avec la suspension de particules magnétiques portant ou susceptible de porter ledit antigène ; c) l'incubation du réacteur, de préférence pendant un temps et une température appropriés à la formation du complexe, de préférence pendant au moins 5 mn ; d) l'application d'un champ magnétique audit réacteur et l'agitation du réacteur, de telle manière que les particules magnétiques soient entraînées vers le fond et/ou la paroi inclinée du réacteur revêtue d'une anti-immunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps, en particulier de telle manière que la plus grande partie Io des particules magnétiques se retrouvent localisées au fond du réacteur et/ou fixées spécifiquement à la paroi inclinée par ladite anti-immunoglobuline ou ledit autre composé capable de se lier à l'anticorps ; et e) la lecture à l'oeil et/ou par tout autre système de lecture approprié, de l'image obtenue au fond du réacteur et/ou sur la paroi inclinée du réacteur revêtue de ladite anti15 immunoglobuline, cette image obtenue permettant de mettre en évidence la présence ou non de la formation d'un complexe spécifique anticorps/anti-antigène. Par complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène lié à une particule magnétique, on entend désigner dans la présente description le complexe formé entre un anticorps capable de reconnaître 20 spécifiquement un antigène et cet antigène, ce complexe étant formé ici sur la particule magnétique sur laquelle est fixé l'antigène. Par complexe spécifique, il est également inclus ici le complexe formé entre un anticorps capable de reconnaître spécifiquement un antigène porté par une cellule, notamment un érythrocyte et cet antigène, ce complexe étant formé également ici sur la 25 particule magnétique sur laquelle est fixée la cellule porteuse de l'antigène. De manière générale, l'anticorps di complexe spécifique anticorps/antigène peut être de nature IgG, IgM, IgA ou IgE ou de tout autre classe d'anticorps. Par anti-immunoglobuline capable de se lier à l'anticorps dudit complexe formé, on entend désigner ici par anti-immunoglobuline, les anti-immunoglobulines, 30 polyclonales ou monoclonales, capables de reconnaître et de fixer tout anticorps, notamment humain, qu'il soit de type IgG, IgM, IgA ou IgE (anti-immunoglobuline totale), ou certaines classes particulières d'anticorps, notamment anti-IgG spécifique. De telles anti-immunoglobulines, notamment humaines, sont bien connues de l'homme de l'art et disponibles chez de nombreux fournisseurs, et ne seront pas développées ici, notamment leurs procédés de production. Par tout autre composé capable de se lier à l'anticorps dudit complexe formé, on entend particulièrement les composés de type protéine A ou protéine G bien connue de l'homme de l'art pour reconnaître et fixer spécifiquement les anticorps. Par la plus grande partie des particules magnétiques, on entend désigner ici au moins 60 % de la quantité de particules magnétiques présentes dans le mélange réactionnel, de préférence au moins 70 %, 80 %, 85 %, 90 % et 95 %. De préférence encore au moins 98 %. De manière particulière lorsqueles antigènes sont portés par des cellules, notamment des érythrocytes, par la plus grande partie des particules magnétiques, on entendra désigner la plus grande partie des particules magnétiques ou la plus grande partie des cellules, la plus grande partie des cellules signifiant au moins 60 % de la quantité de cellules magnétisées présentes dans le mélange réactionnel, de préférence au moins 70 %, 80 %, 85 %, 90 % et 95 %. De préférence encore au moins 98 %. Dans ce cas particulier où les antigènes sont portés par des cellules, notamment des érythrocytes, l'étape d) d'application d'un champ magnétique audit réacteur et d'agitation du réacteur devra être comprise comme de telle manière que lesparticules magnétiques ou les cellules magnétisées soient entraînées vers le fond et/ou la paroi inclinée du réacteur revêtue d'une anti-immunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps, en particulier de telle manière que la plus grande partie des particules magnétiques ou des cellules magnétisées se retrouvent localisées au fond du réacteur et/ou fixées spécifiquement à la paroi inclinée par ladite antiimmunoglobuline ou ledit autre composé capable de se lier à l'anticorps. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce que le mélange réactionnel obtenu après incubation du mélange entre la solution contenant ou susceptible de contenir ledit anticorps et la suspension de particules magnétiques portant ou susceptible de porter ledit antigène, contient des anticorps libres, en particulier non dirigés contre les antigènes portés par les particules magnétiques, ces anticorps libres étant capables de se fixer à l'antiimmunoglobuline ou au composé utilisé capable de se lier à l'anticorps. Par anticorps libres, on entend désigner ici les anticorps non complexés à un antigène porté par les particules magnétiques. Dans un mode de réalisation également préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce que ledit anticorps contenu ou susceptible d'être contenu dans la solution et dont on cherche à mettre en évidence la formation d'un complexe spécifique avec un antigène porté par les particules magnétiques, est un anticorps de type IgG, ou, si cet anticorps est un anticorps anti- antigène de groupe sanguin, est un anticorps non agglutinant les érythrocytes portant l'antigène correspondant. De préférence encore, lorsque cet anticorps est de type IgG, on préférera comme anti-immunoglobuline, une anti-IgG, notamment humaine (dirigée contre des anticorps d'origine humaine). Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'agitation du réacteur est effectuée en présence du champ magnétique. A l'étape d), l'étape d'application du champ magnétique et l'étape d'agitation du réacteur peuvent être réalisées en commençant par l'une ou par l'autre, mais de telle sorte qu'au moins pendant un temps donné, l'application du champ magnétique et l'agitation soient simultanées. Bien entendu, sont également compris dans le procédé selon l'invention, le cas où une application du champ magnétique est effectuée avant l'agitation du réacteur à l'étape d) du procédé, cette application du champ magnétique seule (sans agitation) ne devant pas excéder une durée d'au plus 2 mn, de préférence d'au plus 1 mn 30 s, 1 mn ou 30 s. Il en est de même si l'agitation était effectuée avant l'application du champ magnétique, cette période d'agitation seule ne devant pas excéder une durée d'au plus 2 mn, de préférence d'au plus 1 mn 30 s, 1 mn ou 30 s. Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la présente invention 30 comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application du champ magnétique est effectuée simultanément avec l'agitation du réacteur. Par simultanément, on entend désigner un laps de temps ne devant pas excéder plus de 20 s où seule une agitation ou une application du champ magnétique est réalisée. Sous cet aspect, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application du champ magnétique et l'agitation sont réalisées simultanément pendant une durée comprise entre 2,5 mn et 10 mn. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application du champ magnétique et l'agitation sont réalisées simultanément pendant une durée comprise entre 4 mn et 7 mn, de manière encore plus préférée entre 5 mn et 6 mn. La présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application du champ magnétique est réalisée au moyen d'un aimant situé à l'extérieur sous le réacteur de telle manière que les particules magnétiques soient entraînées vers le fond du réacteur, de préférence selon l'axe longitudinal du réacteur. Dans un mode de réalisation préféré du procédé de l'invention, à l'étape d), ledit aimant est un aimant permanent de magnitude comprise entre 8 000 et 16 000 gauss, de préférence entre 10 000 et 14 000 gauss, de manière plus préférée entre 11 500 et 12 500 gauss, une magnitude de 12 000 gauss étant encore plus préférée. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'agitation est réalisée au moyen 20 d'un agitateur rotatif. Par agitateur rotatif, on entend citer ici particulièrement une plateforme rotative dont le réacteur, ou l'ensemble des réacteurs lorsqu'il s'agit notamment d'une microplaque de 96 cupules, est solidaire (voir figures lA et 1B). Dans un mode particulier d'agitation, la présente invention comprend un procédé 25 selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'agitation est une agitation rotative ayant une orbitale comprise en proportion entre 1,0 mm et 2,5 mm de diamètre, de préférence entre 1,25 mm et 2,25 mm, entre 1,5 mm et 2 mm de diamètre, 2 mm étant le diamètre de l'orbitale préférée, lorsque le réacteur à comme diamètre 7 mm pour sa plus grande section. 30 Par proportion, on comprendra ici que par exemple lorsque le diamètre de la plus grande section du réacteur est le double ou la moitié de 7 mm, le diamètre correspondant de l'orbitale de rotation mentionné sera respectivement doublé ou divisé par 2. Par orbitale pour une agitation de type rotative, on entend désigner le diamètre du cercle décrit par le point le plus bas du réacteur lors de l'agitation (point le plus bas 5 de l'axe centrale longitudinal du réacteur). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'agitation est effectuée à une vitesse comprise entre 250 et 750 trs/mn, de préférence entre 400 et 600 trs/mn. Dans un mode de réalisation particulier, l'aimant situé sous chacun des réacteurs 10 est solidaire de la plateforme d'agitation (voir également figures lA et 1B) . Dans ce dernier cas, l'axe central longitudinal de l'aimant situé sous le réacteur suit l'orbitale suivi par l'axe central longitudinal du réacteur pendant l'agitation. Dans un mode de réalisation particulier, l'aimant situé sous chacun des réacteurs est désolidarisé de la plateforme d'agitation. Dans ce dernier cas, l'axe central 15 longitudinal de l'aimant situé sous le réacteur ne bouge pas et ne suit pas l'orbitale suivi par l'axe central longitudinal du réacteur pendant l'agitation. La présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape c), la durée d'incubation est comprise entre 10 mn et 30 mn, de préférence entre 15 mn et 25 mn. 20 Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape c), l'incubation est réalisée à une température comprise entre 10 C et 40 C, de préférence entre 25 C et 40 C, entre 30 C et 40 C, de préférence à environ 37 C (37 C 1 C). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé 25 selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape b), l'incubation est réalisée à une température comprise entre 30 C et 40 C, de préférence à 37 C. Les techniques immunodiagnostiques, de capture ou de tri cellulaire mettant en oeuvre des particules magnétiques ont fait l'objet de nombreuses publications et sont bien connues de l'homme de l'art. 30 Parmi ces techniques, on peut citer celles faisant appel à une fontionnalisation de la particule magnétique permettant d'obtenir une fonction réactive en surface capable de réagir dans des conditions et avec des réactifs appropriés avec l'antigène que l'on souhaite greffer de manière covalente sur la particule, notamment une fonction acide, amine, époxy ou aldhéhyde pour ne citer que les plus courants. On peut également citer celles faisant appel à une adsorption passive de l'antigène que l'on souhaite fixer sur la particule, notamment par un traitement adéquate permettant d'obtenir des billes chargées positivement ou négativement en fonction des antigènes et des conditions dans lesquelles on souhaite réaliser cette absorption passive. Parmi les fournisseurs, dont les microbilles (ou particules) magnétiques peuvent être utilisées dans le cadre de la présente invention, on peut citer en particulier la société Ademtech (33600 Pessac, France) qui propose des particules magnétiques d'environ 100 à 500 nm de diamètre pouvant être fonctionnalisées par une acide ou une amine ainsi que les protocoles et réactifs permettant d'effectuer le greffage souhaité avec ces fonctions. Cette société fournie également ces mêmes particules non fonctionnalisées, de type hydrophobe de diamètre d'environ 300 nm 30 nm, particules utilisées notamment dans les exemples ci-après. Ces particules magnétiques sont constituées à plus de 50 % d'un noyau de composé ferromagnétique (type oxyde de fer), ce noyau étant enrobé de polystyrène. On peut également citer la société Bioclone Inc. (San Diego, CA, U.S.A) qui propose tout un catalogue de billes magnétiques fonctionnalisées pouvant être utilisées. On peut citer encore la société Dynal Biotech GmbH (Hamburg, Germany) avec sa gamme très variée de DynabeadsTM proposant notamment des microbilles magnétiques activées à la streptavidine, au tosyl ou activées par une fonction acide carboxylique. On peut également citer la société Merck Chimie SAS (94126 Fontenay-sous-Bois, France) qui avec sa gamme de microbilles magnétiques EstaporTM propose différentes tailles de particules (de 300 nm à 2 m) à base de polystyrène ou de divinylbenzène pouvant comprendre jusqu'à plus de 50 % de ferrite et pouvant être fonctionnalisées ou non, par exemple avec une fonction acide ou amine. Ces particules sont préparées par un procédé mettant en oeuvre une polymérisation du styrène en présence du composé ferromagnétique. On peut enfin citer les particules magnétiques décrites dans le document brevet européen EP 0 038 730 de Rhône Poulenc qui décrit des latex de polymères magnétiques, dans le document brevet européen EP 0 125 995, dans les demandes de brevets européens EP 0 105 714, EP 0 190 006, EP 0 238 353 et EP 0 249 357 de Serono Diagnostics, ou encore dans les documents brevets français FR 2 262 805 et FR 2 454 098 de Corning Glass Works. Par particules magnétiques au sens de la présente invention, on entend également ici les solutions aqueuses de ferrofluide obtenues à partir d'un mélange polyoxoanions de Fe(III) et d'au moins un métal M(II) de degré II d'oxydation, tel que Fe(II)), ferrofluide tel qu'obtenu notamment par les procédés décrits aux exemples 1 à 8 de la demande de brevet français publiée sous le No. FR 2 461 521. De préférence la solution de ferrofluide qui pourra être utilisée dans les procédés de l'invention résultera d'une dilution de la solution de ferrofluide, obtenu par les procédés de préparation de ferrofluide décrits aux exemples 1 à 8 de la demande de brevet français publiée sous le No. 2 461 521, en milieu aqueux et de préférence en absence de tensio-actif (ou détergent) pour éviter notamment la lyse des érythrocytes lorsque ces derniers seront mis en contact avec cette solution de ferrofluide pour être magnétisés, ceci dans le procédé particulièrement préféré de l'invention mettant en oeuvre des antigènes portés par des érythrocytes. Dans un mode de réalisation préféré, ladite solution de ferrofluide sera caractérisée en ce qu'elle est préparée à partir d'un mélange polyoxoanions de Fe(III) et d'au moins un métal M(II) de degré II d'oxydation de préférence choisi parmi les métaux de la première série des métaux de transition tels que Fe(II), Co(II), Mn(II), Cu(II) ou Ni(II). La solution de ferrofluide pourra notamment être préparée à partir d'un mélange 20 de polyoxoanions de Fe(III) et d'au moins un métal M(II) associé à un cation tel que H+, CH3+, N(CH3)4+, N(C2H5)4+ ou tout autre cation capable de conférer au polyoxoanion une plus grande solubilité dans l'eau que les cations Na, K+ et NH4, ces cations pourront être notamment apportés par les acides appropriés, tels que HCI, CH3COOH, ou encore par l'hydroxyde de tétraméthyl- ou tétraéthyl-ammonium. 25 De préférence, les sources de métaux de départ choisis pour Fe(III) et M(II) pour préparer le ferrofluide seront des sels choisis parmi : - pour Fe(III), ceux listés dans de la demande de brevet français publiée sous le No. 2 461 521, page 4, lignes 1 et 2, notamment le chlorure ferrique, et - pour M(II), ceux listés dans de la demande de brevet français publiée sous le 30 No. 2 461 521, page 4, lignes 3 à 6, notamment le chlorure ferreux. De préférence, lasolution de ferrofluide est préparée à partir d'un mélange entre Fe(III) et le métal M(II) caractérisé en ce que le rapport molaire initial de degré II est de 2 1 ; de manière plus préférée de 2 0, 5 ; 2 0,25 ou encore 2 0,1, un rapport molaire initial de 2 entre Fe(III) et le métal M(II) de degré II étant le plus préféré. De préférence encore, au mélange initial de sel de Fe(III) et du métal M(II) de degré II sera ajoutée une base forte appropriée telle que l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de tétraméthyl- ou tétraéthyl-ammonium. De préférence encore, la solution aqueuse de ferrofluide est préalablement diluée dans un tampon ou une solution physiologique. Dans certaines applications, notamment lorsqu'il s'agira d'améliorer la sensibilité ou la vitesse de réaction (sans toutefois augmenter la non spécificité du test), on pourra utiliser un tampon dit de basse force ionique (BFI), appelée encore tampon LISS ( LISS pour Low Ionie Strength Solution ). Dans un mode de réalisation préféré, ladite solution de ferrofluide est diluée de 0,25 à 10 % (v/v) dans ledit tampon ou ladite solution physiologique, de préférence entre 0,25 et 5 %, entre 0, 25 et 2,5 %, entre 0,25 et 1 %, entre 0,25 et 0,75 %. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce que les particules magnétiques ont un diamètre compris entre 100 nm et 1,5 m, de préférence entre 150 nm et 1,2 m, un diamètre compris entre 200 nm et 1 m ou entre 200 nm et 800 nm étant le plus préféré. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce que les particules magnétiques contiennent au moins 35 %, de préférence au moins 50 % en poids de composés ferromagnétiques (ferrite ou oxyde de fer par exemple), de préférence au moins 70 %, de préférence lesdits composés ferromagnétiques sont des oxydes de fer. De préférence encore, lorsque l'antigène du complexe spécifique est porté par une cellule, notamment un érythrocyte, les particules magnétiques sont de type hydrophobe et lavées préalablement en présence de surfactant, de préférence d'un détergent de type non-ionique. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape a), le remplissage préalable du réacteur avec une substance visqueuse ou un gel homogène est réalisé avec une substance visqueuse ou un gel dont la densité est telle qu'elle empêche la migration des anticorps n'ayant pas formé de complexe avec les antigènes liés aux particules magnétiques vers la paroi inclinée et le fond du réacteur revêtue d'anti-immunoglobuline ou du composé capable de reconnaître l'anticorps lors de l'étape d). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape a), la solution visqueuse ou le gel est de densité supérieure à 1. De préférence, la solution visqueuse est une solution à base de sérum albumine, en particulier bovine, à base de polyvinyl pyrrolidone (PVP-40 ou PVP-60) ou encore de gélatine. De préférence ces solutions . L'homme de l'art saura adapter le protocole exemplifié ci-après dans les exemples pour une solution homogène de gel SephadexTM G-100 superfine aux autres types de gel ou de solution visqueuse, ceci suivant la nature des antigènes (portés ou non par des cellules), la taille et la composition des particules magnétiques en ferrite, ceci pour obtenir la migration complète des particules au travers de ces solutions visqueuses ou gels, notamment en faisant varier la densité finale de la solution visqueuse ou de gel, le temps de migration (agitation), la vitesse d'agitation et le cas échéant l'orbitale de rotation de l'agitation rotative. Par exemple, en ce qui concerne les solutions visqueuses à base d'albumine ou de PVP, des concentrations d'environ 30 % 10 % pourront être utilisées. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape a), le gel est un gel de dextran ou d'agarose (Type SepharoseTM (Pharmacia, Suède), notamment le SepharoseTM 4B ou 6B. Dans un mode de réalisation également préféré, lorsque ladite solution est de type gel, ce gel est préparé en présence de sérum albumine bovine afin d'augmenter la densité de la solution de gel, de préférence à des concentrations finales dans la solution de gel comprises entre 5 % et 15 % en p/v, de préférence à 10 % 2,5 %. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape a), la solution visqueuse est du SephadexTM, (Société Pharmacia, Suède, ou Sigma-Aldrich), de préférence du G-10TM, du G-25TM du G-50TM du G-75TM du G-100TM du G-150TM ou du G-200TM dont le diamètre des billes de dextran peut varier entre 20 nm et 300 nm. De manière plus préférée le SephadexTM est le G-100TM superfine. De préférence encore, la concentration en gel, notamment en SephadexTM ou SepharoseTM est comprise entre 1,5 % et 6 %, de préférence entre 2 % et 5 %, entre 2,5 % et 4 %. La concentration de 3 % 0,5 % en p/v étant la plus préférée, notamment pour le SephadexTM, en particulier pour le G-100TM superfine. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape b), la solution contenant ou susceptible de contenir ledit anticorps est déposée sur la solution visqueuse avant le dépôt de la suspension de particules magnétiques portant ou susceptible de porter ledit antigène. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'avant l'étape b), la solution visqueuse est recouverte d'une solution aqueuse destinée à diluer le mélange réactionnel déposé à l'étape b), de préférence lorsque la solution d'anticorps est du serum ou plasma humain non dilué. De préférence, ladite solution aqueuse destinée à diluer la solution ou l'échantillon d'anticorps représente un volume de 1 à 10 fois le volume de la solution d'anticorps, de préférence encore de 2 à 7 fois, de 3 à 6 fois ou de 4 à 5, 5 fois. De 4 à 5 fois étant la gamme la plus préférée, notamment dans un réacteur de type cupule de microplaque 96 puits. La solution de dilution peut être ainsi une solution physiologique, pouvant également contenir de la BSA (voir ci-après pour les concentrations de BSA préférées). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'avant l'étape b), la solution visqueuse est recouverte d'une solution aqueuse destinée à diluer et à favoriser la formation du complexe anticorps/antigène à l'étape b) (voir figures 2A et 2B). Dans ce cas, lorsqu'il s'agit de mettre en évidence un complexe spécifique formé par un anticorps/antigène de groupe sanguin, notamment dans le cadre d'une RAI ou d'un phénotypage de globule rouge, cette solution de dilution favorisant la réaction est réalisée à base d'un tampon basse force ionique (BFI), ce tampon étant bien connu de l'homme de l'art en immunohématologie, ce tampon BFI pouvant être le cas échéant réalisé en présence d'une concentration finale en sérum albumine bovine (BSA) comprise entre 1, 5 % et 6 % (p/v), de préférence entre 2 % et 5 %, la valeur 3 % 1 % étant préférée. Dans certaines applications, notamment lorsqu'il s'agira d'améliorer la sensibilité ou la vitesse de réaction (sans toutefois augmenter la non spécificité du test), on pourra utiliser un tampon dit de basse force ionique (BFI), appelé encore tampon LISS ( LISS pour Low Ionic Strength Solution ). Par tampon ou solution physiologique, l'homme de l'art comprendra qu'il s'agit ci-avant de tampon habituellement utilisé dans le domaine de la biologie cellulaire, notamment en immunohématologie afin d'éviter la lyse des globules rouges, notamment pour l'application RAI ou phénotypage. De tels tampons ou solutions seront par exemple des tampons à pH physiologique, compris entre 6,8 et 7,5, avec une molarité des constituants du tampon ajustée de telle sorte que la solution finale obtenue s'apparente pour la pression osmotique à la molarité d'une solution de type NaCl à 9 pour mille (proche de 0,15 M de NaCl). On peut notamment citer mais sans s'y limiter le tampon phosphate type PBS à pH 7,0 û 7,4 bien connu de l'homme de l'art. La composition des tampons BFI ou LISS ne sera pas ici développée, ces tampons étant bien connus en immunohématologie pour favoriser les réactions d'agglutination. Ces tampons sont notamment disponibles auprès des fournisseurs de réactifs pour l'immunohématologie (on pourra citer pour exemple, mais sans s'y limiter le tampon LISS de composition suivante : 16 g/1 de glycine, 0,03 M de NaCl et 0,015 M phosphate à pH 6,7). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce que le réacteur est une cupule de microplaque à fond rond (ou encore appelé à fond en U ou hémisphérique), ou encore ou à fond V. Les réacteurs de type cupule de microplaque présensibilisés (revêtues) sur le fond et sur en partie la paroi inclinée de la cupule avec l'anti-immunoglobuline humaine ou tout autre composé capable de reconnaître un anticorps peuvent être réalisées aisément selon les techniques bien connues de l'homme de l'art (voir notamment les exemples ci-après). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce que la solution d'anticorps est un échantillon de plasma ou de sérum humain dans lequel on cherche à mettre en évidence la présence d'un anticorps dirigé spécifiquement contre un antigène lié à la particule magnétique, de préférence un anticorps n'agglutinant les particules magnétiques, en particulier de type IgG, et en ce que l'anti-immunoglobuline est une anti-immunoglobuline humaine, notamment une anti-IgG humaine. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'à l'étape e), la collecte au point le plus bas du réacteur de l'ensemble des particules magnétiques est significative de l'absence de formation de complexe spécifique anticorps/antigène ou en ce que la présence d'au moins une fraction visible de particules magnétiques sur la paroi inclinée du réacteur revêtue d'anti-immunoglobuline est significative de la formation dudit complexe. De préférence, les particules magnétiques peuvent être colorées pour une meilleur visualisation de ces particules. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène porté par une cellule ou par un virus, elle- ou lui-même lié à une ou plusieurs particules magnétiques (incluant ici les solutions de type ferrofluide comme ci-avant mentionnées) suivant la taille de la cellule ou du virus et celle de la particule. De préférence, la cellule est choisie parmi les cellules eucaryotes, mammifère ou levure, ou de bactérie. De préférence encore, la cellule est une cellule de mammifère, notamment 20 humaine, de préférence un globule blanc, de type lymphocyte ou macrophage, ou encore une plaquette ou encore un érythrocyte (ou globule rouge). Sous un aspect particulier l'antigène porté par la cellule n'est pas un antigène naturellement présent à la surface externe de la cellule, cet antigène ayant dans ce cas était préalablement fixé par liaison covalente, ionique ou adsorbé à la surface de la 25 cellule. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps anti-antigène de groupe sanguin présent dans une solution et un antigène de groupe sanguin, caractérisé en ce que la cellule est un érythrocyte, et de 30 préférence en ce que ledit antigène est un antigène naturel porté par l'érythrocyte. Dans la présente description les termes érythrocyte, globule rouge et hématie seront employés indifféremment pour désigner la même cellule sanguine. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, pour la recherche et d'agglutinines irrégulières (RAI) ou la recherche d'anticorps érythrocytaires dans un échantillon de sérum ou plasma, de préférence d'anticorps non agglutinants, ou encore pour le phénotypage de globule rouge, caractérisé en ce qu'il comprend une étape dans laquelle les érythrocytes portant les antigènes sont préalablement liés par liaisons ioniques ou par adsorption à des particules magnétiques ou en suspension dans une solution de ferrofluide, de préférence les particules magnétiques sont non fonctionnalisées et lavées en présence de surfactant, notamment non ioniques, ces particules magnétiques pouvant être après ce lavage en détergent mises en contact avec une solution d'albumine (comprise entre 0,05 % et 5 %, de préférence entre 0, 1 % et 1 %) pour faciliter l'adsorption des érythrocytes. Dans ce cas, l'albumine est elle-même liée par liaison ionique ou adsorbée à la surface de la particule magnétique si le traitement de cette particule ou sa fonctionnalisation, notamment sa charge surfacique résultante, autorise cette liaison ionique ou cette adsorption ; ou encore par couplage covalent de l'albumine sur des fonctions de la particule magnétique, notamment carboxyliques ou aldéhydiques greffées à la surface de ces particules autorisant notamment la possibilité de formation de liaison covalente avec les fonctionsamines, notamment avec des résidus lysines de l'albumine (BSA). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, pour le phénotypage de globules rouges, caractérisé en ce que la solution d'anticorps à l'étape b) est une solution de sérum test contenant un anticorps anti-antigène de groupe sanguin connu, de préférence de nature IgG, le réacteur étant alors revêtu d'une anti-immunoglobuline dirigée contre l'espèce dont est issu l'anticorps anti-antigène de groupe sanguin utilisé (animale ou humaine) ou de tout autre composé capable de reconnaître l'anticorps spécifique contenu dans ce sérun test (notamment une protéine A ou G). Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'avant ou après leur fixation sur des particules magnétiques ou leur mise en suspension dans la solution de ferrofluide, de préférence avant, les érythrocytes peuvent être soumis à l'action d'une protéase, de préférence la broméline ou la papaïne, ceci afin de favoriser la formation du complexe spécifique, ces techniques étant bien connues de l'homme de l'art pour le phénotypage de groupe sanguin. Dans un mode de réalisation préféré, la présente invention comprend un procédé selon l'invention, caractérisé en ce que la concentration d'érythrocytes dans la suspension finale d'érythrocytes liés aux particules magnétiques ou dans la solution de ferrofluide, avant d'être ajoutée à la solution d'anticorps dans le réacteur, est comprise entre 0,1 % à et 5 % en volume, de préférence entre 0,5 % et 2,5 % et entre 0,75 % et 2 %, la valeur 1 % 0, 25 % étant la plus préférée. Dans un procédé de l'invention particulièrement préféré pour la RAI et ou le phénotypage réalisé dans une cupule de microplaque, ce procédé comprend les étapes suivantes : a) préalablement à la réaction : - le remplissage préalable d'une cupule fond rond avec 50 l 10 gl d'une solution homogène d'un gel de SephadexTM G-100 superfine à environ 3 % 0,5 % dans un tampon de type LISS en présence de BSA à 10 % 2,5 % de manière à recouvrir au moins en partie la paroi inclinée du réacteur ; et, le cas échéant, - l'ajout de 60 gl 15 gl d'un tampon LISS à 3 % 1 % de BSA, de préférence à pH compris entre 6,5- et 7,5 ; - de disposer d'érythrocytes magnétisés à l'aide d'une solution de ferrofluide ou particules magnétiques, de préférence quand il s'agit de particules magnétiques de taille comprise entre 200 nm et 1000 nm ou entre 200 nm et 800 nm, de préférence ces particules sont non fonctionnalisées, de préférence contiennent au moins 40 % de ferrite (d'oxyde de fer), de préférence encore étant recouvertes de BSA et/ou ayant été préalablement traitées afin que ces particules puissent se fixer par liaison ionique ou par adsorption sur les érythrocytes portant l'antigène pouvant former le complexe spécifique avec ledit anticorps, notamment par lavage en présence de détergent non ionique ; b) la mise en contact au-dessus de la solution de gel homogène, ou, le cas échéant, au-30 dessus du tampon LISS à 3 % 1 % de BSA, contenue dans la cupule : - de la solution contenant ou susceptible de contenir ledit anticorps avec 25 pl 7,5 l de la suspension d'érythrocytes revêtus de particules magnétiques portant ou susceptibles de porter ledit antigène, les érythrocytes étant à une concentration dans la suspension comprise entre 0,75 % et 1, 25 % en v/v, avec - 12 gl 8 gl d'échantillon contenant les anticorps (sérum ou plasma dans le cas de la RAI, ou sérum test dans le cas d'un phénotypage) ; c) l'incubation du réacteur pendant 20 mn 5 mn à 37 C 1 C ; d) simultanément, l'application d'un champ magnétique audit réacteur et l'agitation du réacteur, pendant une durée de 5 mn 30 s 1 mn ; et e) la lecture à l'oeil et/ou par tout autre système de lecture approprié, de l'image obtenue au fond du réacteur et/ou sur la paroi inclinée du réacteur revêtue de ladite antiimmunoglobuline, cette image obtenue permettant de mettre en évidence la présence ou non de la formation d'un complexe spécifique anticorps/anti-antigène, l'interprétation pouvant être réalisée à l'aide de la figure 3 et de la figure 4 caractéristique respectivement d'une image négative (pas de formation de complexe spécifique et d'une image positive (présence de complexe). 15 Sous un autre aspect, la présente invention a pour objet un dispositif pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène lié à une particule magnétique, de préférence pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps anti- 20 antigène de groupe sanguin présent dans une solution et un antigène de groupe sanguin porté par un érythrocyte lié lui-même à une ou plusieurs particules magnétiques, notamment pour la RAI, la recherche d'anticorps érythrocytaire, ou encore pour le phénotypage de groupe sanguin, caractérisé en ce qu'il comprend : a) - un réacteur ou un ensemble de réacteurs ouvert vers le haut et à fond fermé et dont 25 la section diminue au moins dans la zone voisine du fond pour former une paroi inclinée s'étendant jusque dans le fond, ladite paroi inclinée étant au moins en partie revêtue d'une anti-immunoglobuline ou d'un composé capable de se lier à l'anticorps dudit complexe formé, - chacun des réacteurs pouvant être rempli en partie d'une substance visqueuse ou 30 d'un gel ; b) au moins un aimant ou un ensemble d'aimants pouvant être disposé à l'extérieur sous le ou les réacteurs et un système d'agitation rotatif dudit ou desdits réacteurs, ce système d'agitation étant de préférence solidarisé avec l'aimant ou la plate-forme supportant les aimants afin de déplacer les aimants de la même manière que lesdits réacteurs pendant la phase d'agitation ; c) le cas échéant, un incubateur capable de réguler la température d'incubation des réacteurs ; et d) le cas échéant, un lecteur capable d'évaluer la présence et la localisation des érythrocytes magnétisés à la fin de la réaction sur chacun des réacteurs, notamment sur la paroi inclinée et le fond du réacteur revêtu de l'anti-immunoglobuline ou du composé capable de se lier à l'anticorps du complexe spécifique éventuellement formé. De préférence, le dispositif selon l'invention est caractérisé en ce que la substance visqueuse ou le gel a les caractéristiques telles que définies dans le procédé selon l'invention ci-avant avec les mêmes préférences. Il en est de même pour les particules magnétiques ou la suspension de cellules magnétisées, les caractéristiques de l'aimant et de l'agitateur rotatif.. De préférence encore, le dispositif selon l'invention est caractérisé en ce que ledit réacteur est une cupule de microplaque, de préférence à fond rond (hémisphérique) ou à fond en V, une microplaque comprenant 96 cupules étant encore plus préférée. De préférence, l'aimant est sous la forme d'une pile, comme montré au schéma des figures 1A et 1B, de préférence une plate-forme comprenant 96 aimants en forme de pile, disposés chacun sous une cupule. Sous encore un autre aspect, l'invention concerne un kit pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène lié à une particule magnétique, caractérisé en ce qu'il comprend : a) un réactif comprenant une suspension de particules magnétiques revêtues au moins d'un antigène ; et b) - un réacteur ou un ensemble de réacteurs ouvert vers le haut et à fond fermé et dont la section diminue au moins dans la zone voisine du fond pour former une paroi inclinée s'étendant jusque dans le fond, ladite paroi inclinée étant au moins en partie revêtue d'une anti- immunoglobuline capable de se lier à l'anticorps dudit complexe formé, - un container contenant une solution visqueuse ou un gel, ou le cas échéant, chacun des réacteurs étant rempli en partie de ladite substance visqueuse ou dudit gel ; et, c) le cas échéant, au moins un aimant ou un ensemble d'aimants pouvant être disposé à l'extérieur sous le ou les réacteurs, ledit aimant étant de préférence solidaire d'un agitateur rotatif, de préférence l'orbitale de l'agitateur étant de 2 mm 1 mm pour un diamètre de réacteur dans sa plus grande section de 7 mm (ou en proportion équivalente). De préférence, l'invention concerne un kit selon l'invention, pour la RAI, caractérisé en ce que ledit réactif contient une suspension d'érythrocytes tests de phénotype comm magnétisés à l'aide de particules magnétiques ou d'une solution de ferrofluide. De préférence, l'invention concerne un kit selon l'invention, pour le phénotypage de groupe sanguin caractérisé en ce que ledit réactif contient un sérum test contenant un anticorps anti-antigène de groupe sanguin, de préférence de type IgG, et, en outre un réactif contenant une suspension de particules magnétiques ou solution de ferrofluide pouvant se lier à une suspension d'érythrocytes que l'on cherche à phénotyper. De préférence également, l'invention concerne un kit selon l'invention, caractérisé en ce que la substance visqueuse ou le gel, et le cas échéant les particules magnétiques ou la suspension de cellules magnétisées, le cas échéant les caractéristiques de l'aimant et de l'agitateur rotatif, a ou ont les caractéristiques telles que définies pour le procédé selon l'invention avec également les préférences définies pour ces solutions visqueuses ou de gel ou autres composés et éléments. De préférence encore, l'invention concerne un kit selon l'invention, caractérisé en ce que ledit réacteur est une cupule de microplaque, de préférence à fond rond (hémisphérique) ou à fond en V, une microplaque comprenant 96 cupules étant encore plus préférée. Les figures dont les légendes sont ci-après, ainsi que les exemples qui suivent sont destinés à illustrer l'invention sans aucunement en limiter la portée.30 Légendes des figures Figures lA et 1B : Schéma vue de dessus (figure 1A) et vue de côté (figure 1B) de la plate-forme d'agitation ( teleshakeTM ) comprenant une plaque de fer doux sous la microplaque sur laquelle plaque de fer doux est fixé magnétiquement chacun des aimants en forme de pile sous chaque cupule de la microplaque. (1) Gabarit en plastique permettant d'obtenir le bon espacement des aimants ; (2) Eléments permettant de caler la plaque d'aimants sur le teleshake ; (3) Taquet du Teleshake permettant de caler les microplaques ; (4) Aimant piles ; (5) Microplaque ; (6) Gabarit plastique ; (7) Plaque de fer doux sur laquelle les aimants sont fixés magnétiquement ; (8) Plaque de carton isolant le teleshake du champ magnétique des aimants piles ; (9) Plateau rotatif du teleshake. Figures 2A et 2B : Schémas d'une cupule réacteur à fond rond (ou en U) après revêtement avec de l'anti-immunoglobuline sur sa paroi inclinée (en partie) et au fond de la cupule avant l'ajout de la solution de gel (tampon 1) et des différents solutions et réactifs. Figure 3 : Photographie montrant une image d'une réaction négative d'immunoadhérence avec des antigènes portés par des érythrocytes (pas de formation de complexe 20 spécifique). Figure 4 : Photographie montrant une image d'une réaction positive d'immunoadhérence avec des antigènes portés par des érythrocytes (formation de complexe spécifique adhérent à la paroi inclinée revêtue d'anti-immunoglobuline). Figure 5 : Titrage de l'anti-D du CNRGS, dilution en polycontrol : douteux à 1 croix sur l'hématie homozygote à 2,5 ng/ml. Figure 6 : Titrage de l'anti-D du CNRGS, dilution en plasma AB : 1 croix sur l'hématie 30 homozygote à 2,5 ng/ml. Figure 7 : Titrage de l'anti- D et de l'anti- Fya du Contrôle Qualité en sérum AB. * Figure 8 : Répétabilité et Reproductibilité 35 8 échantillons négatifs et 4 échantillons positifs (anti-D) ont été passés 3 fois sur une même plaque. Figure 9 : Répétabilité et Reproductibilité 8 échantillons négatifs et 4 échantillons positifs (anti-D) ont été passés sur une autre 40 plaque. EXEMPLE 1 : Revêtement de la paroi inclinée et du fond de la cupule avec une anti- immunoglobuline La nature chimique et physico-chimique du plastique de la cupule utilisée 45 permet de recouvrir celui-ci d'une couche d'anti- immunoglobuline humaine (de type AHG monoclonale ou polyclonale) capable de se lier spécifiquement avec lesanticorps 25 des complexes spécifiques éventuellement formés, lorsque l'anticorps dudit complexe est d'origine humaine. On peut noter en outre que cette composition d'AGH peut comprendre des anticorps dirigés contre des déterminants de protéines sériques de type complément. Les surfaces de la paroi interne du récipient qui ne sont pas revêtues d'AGH, peuvent être saturées à l'aide des agents saturants classiquement utilisés dans des techniques de type phase solide ou ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Par exemple, la solution d'AGH à une concentration comprise entre 1 et 10 g/ml, peut être préparée en tampon carbonate 0,2 M pH 9,6. Cette solution est répartie sous un volume de 75 l dans chaque cupule d'une micro-plaque à fond rond de type Maxisorp U8 NUNC, puis les plaques sont incubées une nuit à 4 C. Les cupules sont ensuite lavées à l'aide d'une solution tampon phosphate (PBS 2,5 mM pH 7,4) afin d'éliminer toutes les protéines non adsorbées directement au plastique. Les cupules 1 sont ensuite traitées à l'aide d'une solution d'albumine à 30 g/1 en tampon PBS à raison de 100 pl par cupule. Après une incubation de 2 heures à température ambiante, les cupules sont à nouveau lavées en tampon phosphate. EXEMPLE 2 : Préparation d'une suspension d'érythrocytes magnétisés à l'aide de particules magnétiques ou d'une solution de ferrofluide A) A l'aide de particules magnétiques On a utilisé dans cet exemple des particules paramagnétiques qui présentent une très grande homogénéité de taille (environ 300 nm de diamètre), une forte charge en matériau ferromagnétique (supérieure à 50 % en masse, environ 75 % en masse) et un état de surface plutôt hydrophobe (non fonctionnalisé). Ces particules peuvent être utilisées directement pour la magnétisation desérythrocytes, ou de préférence après un lavage préalable en détergent non ionique. Ces particules peuvent être également utilisées après une étape de traitement avec le sérum albumine bovine (BSA) pour fixer l'érythrocyte de sorte à créer de multiples liaisons de faibles intensités entre la surface de l'érythrocyte et les particules. A cet effet, la fixation se déroule en deux étapes, la première consiste en l'activation des particules à l'aide de la BSA et la deuxième est la mise en présence de ces particules magnétiques recouvertes de BSA avec une suspension d'érythrocytes traités ou non par des enzymes protéolytiques. Les érythrocytes ainsi obtenues sont attirées par un champ magnétique et peuvent ainsi être utilisées dans le procédé de l'invention. a) Première étape : activation des particules ferromagnétiques à la BSA Des particules de type Ademtech hydrophobe non fonctionnalisées de taille d'environ 300 nm, sont préalablement lavées et stockées en détergent non ionique. Le cas échéant, ces particules sont mises en présence d'une solution d'albumine bovine à 0,1 % (poids/volume) en tampon PBS pH 7,2. Après une incubation de trente minutes à température ambiante et sous agitation non magnétique, les particules en suspension sont attirées par un aimant et le surnageant dépourvu de particules est éliminé. Le culot de particules ainsi recouvert de BSA peut être utilisé directement au cours de la phase de magnétisation des érythrocytes. b) Deuxième étape :Magnétisation des érythrocytes Est ajoutée, au culot de particules ferromagnétiques obtenu à l'étape précédente, la suspension globulaire mise en tampon LISS à la concentration adéquate (possibilité d'effectuer la magnétisation des érythrocytes avec des suspensions cellulaires comprises entre 0,6 à 10 % en v/v et, le cas échéant, préalablement lavées trois fois avec de l'eau physiologique par exemple). Après avoir parfaitement homogénéisé, la suspension est incubée trente minutes à température ambiante sous agitation douce et homogène. Les érythrocytes sont ensuite lavés avec un tampon PBS pH 7,4 (deux lavages par centrifugation, trois minutes à 500 g). Le culot d'érythrocytes magnétisés peut être ensuite repris à la concentration de mise en oeuvre de l'analyse à l'aide d'un tampon type LISS (ou BFI). Dans un exemple particulier, le rapport entre la quantité de particules mises en oeuvre et la quantité d'érythrocytes est compris entre 10 et 30 de sorte à obtenir une magnétisation efficace sans risquer de dégrader les antigènes de groupe sanguin présents à la surface de l'érythrocyte. Les érythrocytes ainsi obtenus peuvent soit être utilisés directement en tant que réactif (pour la RAI par exemple) ou en tant qu'analyte (pour le phénotypage). A ce stade, ils peuvent également subir un traitement par des enzymes protéolytiques telles que la broméline ou la papaïne si nécessaire pour effectuer l'analyse demandée. B) A l'aide d'une solution de ferrofluide 1) Fabrication du ferrofluide prépurifié Matériel et méthode Matériel particulier et produits - 1 filtre Stericup GS 200 ml 0,22 m (Réf.: 107943) - 1 aimant solution de NH4OH à 28-30 % (ACROS, Réf.: 205840025 lot n A 017559001) - solution de HNO3 à 60 % (NORMAPUR, Réf. : UN 2031 lot n N182) FeC12, 4H2O (SIGMA, Réf. : 22,029-9 lot n S18641-463) - FeCl3, 6H2O (SIGMA, Réf. : F-2877, lot n 033K0108) 15 Fabrication du Ferrofuide : Préparation : 1/ Peser 13,51 g de FeC13 et dissoudre dans 20 ml d'eau déminéralisée et filtrée par agitation magnétique. Transférer la solution dans une éprouvette de 50 ml, rincer et compléter à 50 ml avec de l'eau déminéralisée filtrée (solution à 1 M). 20 2/ Peser 19,88 g de FeC12 et dissoudre dans 20 ml d'eau déminéralisée et filtrée par agitation magnétique. Transférer la solution dans une éprouvette de 50 ml, rincer et compléter à 50 ml avec de l'eau déminéralisée filtrée (solution à 2 M). 3/ Filtrer chaque solution sur filtre seringue 0,22 m. 4/ Mettre 30 ml d'une solution d'ammoniac (NH4OH) à 28 % dans une éprouvette 25 de 250 ml et ajouter qsp 120 ml d'eau déminéralisée et filtrée (solution à 2 M). 5/ Peser le ballon en verre de 1 1 du Rotavapor à vide. Incubation : 6/ Mettre 10 ml de la solution de FeC12 (2 M) et 40 ml de la solution de FeCl3 (1 M) dans le ballon 1 L pour Rotavapor, homogénéiser la solution en agitant le ballon à 30 la main. 7/ Ajouter 200 ml d'eau déminéralisée filtrée, homogénéiser la solution en agitant le ballon à la main. 8/ Placer le ballon de façon inclinée sur un appareil de type Rotavapor. 9/ Faire tourner le ballon à vitesse maximum pour bien homogénéiser la solution. 10/ Ajouter 120 ml de la solution d'ammoniac 2 M. 11/ Laisser tourner le ballon pendant 15 minutes. 12/ Mettre 105 ml d'acide nitrique (HNO3) à 60 % dans une fiole de 1 1 et ajouter qsp 1 1 d'eau déminéralisée filtrée (solution à 1 M). 13/ Après les 15 minutes de rotation, placer le ballon sur l'aimant pendant 4 minutes. 14/ Aspirer la totalité du surnageant. 15/ Resuspendre le culot. 1 er lavage : 16/ Placer le ballon sur le Rotavapor et le faire tourner à vitesse maximum. 17/ Ajouter 200 ml de la solution d'HNO3 à 1 M. 18/ Laisser tourner le ballon pendant 10 minutes. 19/ Resuspendre le culot. 20/ Répéter l'opération jusqu'à dissolution complète du culot. 21/ Placer le ballon sur pour faire décanter la suspension de fer. 22/ Aspirer le surnageant. 23/ Resuspendre le culot. Les étapes 16 à 23 peuvent être répétées si nécessaire. Dilution finale : 26/ Peser le ballon. 27/ En déduire la masse du culot obtenu et calculer le rendement de la réaction : (Masse culot obtenu / Masse de fer initiale) x 100 Masse de fer initiale = 14,77 g 55 % Préparation de la solution mère de ferrofluide : Diluer le ferrofluide ainsi obtenu dans un tampon LISS ou une solution physiologique à la concentration voulue dans un flacon. Conservation du ferrofluide et/ou de la solution diluée à 4 C. 2) Magnétisation des Erythrocytes a) possibilité 1 : - mise en contact des érythrocytes avec la solution de ferrofluide diluée entre 0,3 et 0,5 % (v/v) dans du LISS ou dans un tampon physiologique afin d'obtenir la concentration désirée en érythrocytes de la suspension finale, de préférence entre 0, 5 % et 3 % en érythrocyte. b) possibilité 2 : - amener la solution de ferrofluide à une DO à 450 nm équivalente à 0,9 dans du LISS, - ajouter 10 l de culot globulaire à 80 % d'hématocrite pour 240 pl solution de ferrofluide. EXEMPLE 3 : Exemple de protocole et matériels et méthodes pour la RAI A) Protocole 1. Prendre une microplaque 96 puits revêtue avec AGH. 2. Déposer 50 pl de Tampon 1 (solution de gel) dans autant de cupules que nécessitera le test RAI. 3. Déposer 60 l de solution LISS à 3 % en BSA chaque cupule utilisée. 4. Déposer 12 l d'échantillon (sérum ou plasma) à analyser. 5. Déposer 25 pl d'hématies magnétisées de panel RAI (hématie 1 dans le puits 1, hématie 2 dans le puits 2 et hématie 3 dans le puits 3). 6. Incuber la microplaque 20 min à 37 C. 7. Sortir la microplaque de l'incubateur. 8. Mettre la plaque sur le teleshakeTM (agitateur de microplaque commercialisé par H+P LAB., Allemagne) adapté pour ce protocole (voir figures lA et 1B). 9. Agiter 5 min 30 sec. à 500 tours/min10. Interpréter Plaque coatée (revêtue d'AGH) avant et après dépôt (voir figures 2A et 2B). B) Interprétation (vue de dessus) (voir figures 3 et 4) 1. Un culot central, régulier et lisse sera interprété comme négatif (voir figure 3). 2. Toute ouverture du culot central sera considérée comme positif. 3. Un tapis de cellule sur l'ensemble de la surface du puits sera un positif fort (voir figure 4). C) Composition des éléments nécessaires à la réaction 1. Tampon 1 1.1. Ramener la BSA 30 % à une concentration de 10 % dans du tampon LISS. 1.2. Peser le SephadexTM G-100 superfine (600 mg pour 20 ml de tampon 1) (Réf. 10 17.0061.01 - Amersham Bioscience). 1.3. Dissoudre le SephadexTM dans la BSA ramenée précédemment à 10 % dans le LISS. 1.4. Laisser le tampon 1 une nuit à 4 C avant utilisation. 2. Solution LISS à 3 % en BSA (voir composition d'une solution type LISS dans 15 la description) ou utiliser une solution LISS du commerce. 3. Tampon LISS (voir composition dans la description). 4. Hématies magnétisées de panel RAI (voir Exemple 2). 5. Microplaque révêtue d'anti immunoglobuline. Microplaque NUNC maxisorp de 96 puits coatée avec une antiglobuline 20 Humaine monoclonale anti-IgG entre 1 et 5 g /ml (voir exemple précédent pour les conditions de coating). EXEMPLE 4 : Résultats A) Etude de receveurs 25 Le protocole a été testé sur 308 échantillons de receveurs. Panel d'hématies magnétisées 15 jours avant le début des analyses Tableau 2 : Comparaison avec une technique standard Diamed par gel centrifugation RAI PROCEDE DE L'INVENTION TOTAL Positifs Douteux Négatifs DIAMED Positifs 4 0 0 4 Négatifs 3 2 299 304 TOTAL 7 2 299 308 Seuls 5 échantillons sont discordants sur 308, soit un taux de concordance avec 10 Diamed de 98,4 %. Tous les échantillons positifs sont vus par le procédé de l'invention. Sensibilité 100 % (n=4) Parmi les 304 négatifs, on peut noter 5 discordants soit 98,3 % de corrélation 15 Taux de faux positifs réels : 1 % Taux de douteux : 0,6 % Spécificité (n = 304) : 98,3 % B) Etude de panels de positifs 20 1) Premier panel testé : 22 sérums positifs : - 7 sérums avec leurs dilutions : deux échantillons de sérum présentant un anticorps anti-D, deux échantillons avec un anticorps anti-Fya, un avec un anticorps anti-Kell, un avec un anti-E et un avec un anti-S. Résultats : aucun échantillon raté. 25 2) Deuxième panel (Life Therapeutics) - 32 sérums Nbre d'échant Anticorps 1 CDE Nbre d'échant.Anticorps Nbre d'échant Anticorps 2 Jkb 3 Lub C 3 Fyb 2 E 3 30 D slide 5 Jka 1 Jsa 1 e 2 Kpb 2 Lua 1 Fya 4 S 2 Panel testé avec le protocole de l'invention (décrit dans les exemples) Résultats : aucun sérum positif raté. Seulement 2 échantillons n'ont pas montré une concordance parfaite sur les 3 hématies testées en screening : 2 hématies faussement positives. 3) Test de receveurs du Centre Hospitalier Régional & Universitaire de Lille (CHR&U de Lille, France) 4 échantillons receveurs du CHR&U de Lille ont été détectés positifs par notre méthode et confirmés en méthode de référence DIAMED. 4) Limite de détection Protocole de l'invention Afin de tester la limite de détection de la méthode décrite nous avons utilisé l'anti-D à 20 ng/ml du CNRGS (centre National de Référence des Groupes Sanguins) ainsi qu'un anticorps anti-Fya du contrôle Qualité, tous deux dilués dans du polycontrol. -Anti-D CNRGS Dilution en polycontrol : douteux à 1 croix sur l'hématie homozygote à 2,5 ng/ml. Voir Figure 5 Dilution en plasma AB : 1 croix sur l'hématie homozygote à 2,5 ng/ml. Voir Figure 6 - Titrage de l'anti- D et de l'anti- Fya du contrôle qualité en sérum AB Voir Figure 7 5) Répétabilité et Reproductibilité Protocole de l'invention Afin de tester le protocole 8 échantillons négatifs et 4 échantillons positifs (anti-D) ont été passés sur 2 plaques différentes et 3 fois sur une même plaque. - 3 fois sur la même plaque (test intra-plaque) (voir figure 8) - sur une autres plaque (test inter-plaque à comparer avec la figure 8) (voir figure 9). Les résultats observés montrent une excellente reproductibilité et répétabilité du procédé de l'invention. REVENDICATIONS 1. Procédé de mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène lié à une particule magnétique, la réaction s'effectuant dans un réacteur ouvert vers le haut et à fond fermé et dont la section diminue au moins dans la zone voisine du fond pour former une paroi inclinée s'étendant jusque dans le fond, ladite paroi inclinée étant au moins en partie revêtu d'une anti-immunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps dudit complexe formé, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: a) préalablement à la réaction : - le remplissage préalable du réacteur avec une substance visqueuse ou un gel homogène de manière à recouvrir au moins en partie la paroi inclinée du réacteur, b) la mise en contact au-dessus de la solution visqueuse contenue dans le réacteur de la solution contenant ou susceptible de contenir ledit anticorps avec la suspension de particules magnétiques portant ou susceptible de porter ledit antigène ; c) l'incubation du réacteur pendant un temps donné nécessaire à la formation du complexe ; d) l'application d'un champ magnétique audit réacteur et l'agitation du réacteur, de telle 20 manière que les particules magnétiques soient entraînées vers le fond et/ou la paroi inclinée du réacteur; et e) la lecture à l'oeil et/ou par tout autre système de lecture appropriée, de l'image obtenue au fond du réacteur et/ou sur la paroi inclinée du réacteur revêtue de ladite antiimmunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps, cette image 25 obtenue permettant de mettre en évidence la présence ou non de la formation d'un complexe spécifique anticorps/anti-antigène. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le mélange réactionnel obtenu par mélange entre la solution contenant ou susceptible de contenir ledit anticorps et la suspension de particules magnétiques portant ou susceptible de 30 porter ledit antigène, contient un ou plusieurs anticorps non dirigés contre les antigènes portés par les particules magnétiques et capables de se fixer à l'anti-immunoglobuline ou à tout autre composé capable de se lier à l'anticorps. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application d'un champ magnétique audit réacteur et l'agitation du réacteur sont réalisées simultanément. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application du champ magnétique et l'agitation sont réalisées simultanément pendant une durée comprise entre 2,5 mn et 10 mn. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application du champ magnétique et l'agitation sont réalisées simultanément pendant une durée comprise entre 5 mn et 6 mn. 6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'application du champ magnétique est réalisée au moyen d'un aimant situé à l'extérieur sous le réacteur de telle manière que les particules magnétiques soient entraînées au fond du réacteur. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'à l'étape d) ledit aimant est un aimant permanent de magnitude comprise entre 10 000 et 14 000 gauss. 8. Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'agitation est réalisée au moyen d'un agitateur rotatif. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'agitation est effectuée à une vitesse comprise entre 250 et 750 trs/mn. 10. Procédé selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'à l'étape c), la durée d'incubation est comprise entre 10 mn et 30 mn. 11. Procédé selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisé en ce qu'à l'étape c), l'incubation est réalisée à une température comprise entre 20 C et 40 C. 12. Procédé selon l'une des revendications 1 à 11, caractérisé en ce qu'à l'étape b), l'incubation est réalisée à une température de 37 C 1 C. 13. Procédé selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisé en ce que les particules magnétiques ont un diamètre compris entre 100 nm et 1,5 m. 14. Procédé selon l'une des revendications 1 à 13, caractérisé en ce que les particules magnétiques contiennent au moins 40 % en poids au moins de composés ferromagnétiques. 15. Procédé selon l'une des revendications 1 à 14, caractérisé en ce qu'à l'étape a), le remplissage préalable du réacteur avec une substance visqueuse ou un gel homogène est réalisé avec une substance visqueuse ou un gel dont la densité est telle qu'elle empêche la migration des anticorps n'ayant pas formé de complexe avec les antigènes liés aux particules magnétiques vers la paroi revêtue d'anti-immunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps lors de l'étape d). 16. Procédé selon l'une des revendications 1 à 15, caractérisé en ce qu'à l'étape a), la solution visqueuse ou le gel est de densité supérieure à 1. 17. Procédé selon l'une des revendications 1 à 16, caractérisé en ce qu'à l'étape a), le gel est un gel de dextran ou d'agarose. 18. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce qu'à l'étape a), la solution visqueuse est du SephadexTM, de préférence du G-10OTM superfine. 19. Procédé selon l'une des revendications 1 à 18, caractérisé en ce qu'à l'étape b), la solution contenant ou susceptible de contenir ledit anticorps est déposée sur la solution visqueuse avant le dépôt de la suspension de particules magnétiques portant ou susceptible de porter ledit antigène. 20. Procédé selon l'une des revendications 1 à 19, caractérisé en ce qu'avant l'étape b), la solution visqueuse est recouverte d'une solution aqueuse destinée à diluer le mélange réactionnel déposé à l'étape b). 21. Procédé selon l'une des revendications 1 à 20, caractérisé en ce qu'avant l'étape b), la solution visqueuse est recouverte d'une solution aqueuse destinée à diluer et à favoriser la formation du complexe anticorps/antigène à l'étape b). 22. Procédé selon l'une des revendications 1 à 21, caractérisé en ce que le réacteur est une cupule de microplaque à fond rond ou à fond V. 23. Procédé selon la revendication 22, caractérisé en ce qu'à l'étape d), l'agitation est une agitation rotative ayant une orbitale comprise entre 1,0 mm et 2,5 mm de diamètre. 24. Procédé selon la revendication 23, caractérisé en ce que la solution d'anticorps est un échantillon de plasma ou de sérum humain dans lequel on cherche à mettre en évidence la présence d'un anticorps dirigé spécifiquement contre un antigène lié à la particule magnétique et en ce que l'anti-immunoglobuline est une anti- immunoglobuline humaine. 25. Procédé selon l'une des revendications 1 à 24, caractérisé en ce qu'à l'étape e), la collecte au point le plus bas du réacteur de l'ensemble des particules magnétiques est significative de l'absence de formation de complexe spécifique anticorps/antigène ou en ce que la présence d'au moins une fraction visible de particules magnétiques sur la paroi inclinée du réacteur revêtue d'anti-immunoglobuline est significative de la formation dudit complexe. 26. Procédé selon l'une des revendications 1 à 25, pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène porté par une cellule elle-même liée à une ou plusieurs particules magnétiques. 27. Procédé selon la revendication 26, pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps anti-antigène de groupe sanguin présent dans une solution et un antigène de groupe sanguin, caractérisé en ce que la cellule est un érythrocyte. 28 Procédé selon la revendication 27, pour la recherche et d'agglutinines irrégulières (RAI) dans un échantillon de sérum ou plasma, caractérisé en ce qu'il comprend une étape dans laquelle la suspension d'érythrocytes portant les antigènes sont liés par adsorption à des particules magnétiques préalablement mises en contact avec une solution d'albumine. 29. Procédé selon la revendication 27, pour le phénotypage de globules rouges, caractérisé en ce que la solution d'anticorps à l'étape b) est une solution de sérum test contenant un anticorps anti-antigène de groupe sanguin connu. 30. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce qu'avant la fixation des particules magnétiques, les érythrocytes sont préalablement soumis à l'action d'une protéase. 31. Procédé selon l'une des revendications 27 à 30, caractérisé en ce que la concentration d'érythrocytes dans la suspension d'érythrocytes liés aux particules magnétiques est comprise entre 0,1 % à et 5 %. 32. Dispositif pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène lié à une particule magnétique, ou pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps anti-antigène de groupe sanguin présent dans une solution et un antigène de groupe sanguin porté par un érythrocyte lié à une ou plusieurs particules magnétiques, ou pour la RAI ou pour le phénotypage de groupe sanguin, caractérisé en ce qu'il comprend : a) - un réacteur ou un ensemble de réacteurs ouvert vers le haut et à fond fermé et dont la section diminue au moins dans la zone voisine du fond pour former une paroi inclinée s'étendant jusque dans le fond, ladite paroi inclinée étant au moins en partie revêtue d'une anti-immunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps dudit complexe formé, - chacun des réacteurs pouvant être rempli en partie d'une substance visqueuse ou d'un gel ; b) au moins un aimant ou un ensemble d'aimants pouvant être disposé à l'extérieur sous le ou les réacteurs couplé(s) à un système d'agitation rotatif dudit ou desdits réacteurs ; c) le cas échéant, un incubateur capable de réguler la température d'incubation des réacteurs ; et d) le cas échéant, un lecteur capable d'évaluer la présence et la localisation des 15 érythrocytes magnétiques à la fin de la réaction de chacun des réacteurs. 33. Kit pour la mise en évidence d'un complexe spécifique formé par réaction entre un anticorps présent dans une solution et un antigène lié à une particule magnétique, caractérisé en ce qu'il comprend : a) un réactif comprenant une suspension de particules magnétiques revêtues au moins 20 d'un antigène ; et b) - un réacteur ou un ensemble de réacteurs ouvert vers le haut et à fond fermé et dont la section diminue au moins dans la zone voisine du fond pour former une paroi inclinée s'étendant jusque dans le fond, ladite paroi inclinée étant au moins en partie revêtue d'une anti-immunoglobuline ou de tout autre composé capable de se lier à l'anticorps 25 dudit complexe formé, - un container contenant une solution visqueuse ou un gel, ou le cas échéant, chacun des réacteurs étant rempli en partie de ladite substance visqueuse ou dudit gel ; et, c) le cas échéant, au moins un aimant ou un ensemble d'aimants pouvant être disposé à l'extérieur sous le ou les réacteurs couplé(s) à un agitateur rotatif 30 34. Kit selon la revendication 33, pour la RAI, caractérisé en ce que ledit réactif contient une suspension d'érythrocytes tests de phénotype connu. 35. Kit selon la revendication 33, pour le phénotypage de groupe sanguin caractérisé en ce que ledit réactif contient un sérum test contenant un anticorps antiantigène de groupe sanguin, de préférence de type IgG, et, en outre, un réactif contenant une suspension de particules magnétiques pouvant se lier à une suspension d'érythrocytes que l'on cherche à phénotyper.