FR 2857022 A1 20050107 FR 0308212 A 20030704 APPLICATIONS D'UNE NOUVELLE CLASSE D'ENZYMES : LES SULFIREDOXINES La présente invention est relative aux applications d'une nouvelle classe d'enzymes, les sulfirédoxines (Srx), qui catalyse la réduction des dérivés CysSO2H (cystéine-acide sulfinique) et notamment la réduction de la peroxyrédoxine (Prx) sous sa forme Cys-S02H en dérivé thiol. Dans les protéines, certains groupes thiols de cystéine (Cys-SH), ayant une activité rédox, peuvent être oxydés par du peroxyde d'hydrogène (H202) en acide sulfénique (Cys-SOH). Celui-ci étant instable, réagit soit avec n'importe quel groupe thiol proche pour former un pont disulfure (C-S-S-C), soit, en l'absence de groupe thiol proche accessible, le composé Cys-SOH peut être davantage oxydé en acide sulfinique (Cys-SO2H) stable ou acide cystéique (Cys-S03H). Les peroxyrédoxines (Prxs) sont des enzymes antioxydantes comportant de telles cystéines à activité redox. Par exemple, les 2-Cys Prxs sont des homodimères inversés avec 2 cystéines à activité rédox par sous-unité. Elles catalysent la réduction du peroxyde d'hydrogène. Le site catalytique de ces enzymes comprend deux cystéines à activité redox (cystéine N-terminale peroxydatique (Cysp) et cystéine C-terminale de résolution (CysR)). De manière plus précise le cycle catalytique de ces peroxyrédoxines comprend (Wood ZA et al., Science, 2003,300, 650-653 ; Wood et al., Trends in Biochemical Sciences, 2003, 28, 1, 32-40) : - l'oxydation de la Cysp-SH en Cysp-SOH (acide sulfénique) par H202; - la formation d'un pont disulfure entre la Cysp et la CysR de la deuxième sous-unité de Prx (Cysp-S-S-CysR) (processus lent) ; - la réduction de ce pont disulfure par des réducteurs cellulaires classiques tels que le glutathion ou la thiorédoxine (Trx), pour obtenir le produit de départ Cys-SH. Dans certains cas, les Prxs peuvent être inactivées, par superoxydation de la Cysp-SOH en acide sulfinique (Cysp-SOzH) ; cette réaction de superoxydation était considérée jusqu'à présent comme irréversible, (Wood ZA et al., Science, 2003,300, 650-653). Récemment (Woo HA et al., Science, 2003,300, 653- 656 ; Georgiou G. et al., Science, 2003,300, 592-594), la réversion de la Cys-acide sulfinique en composé Cys-SH a été montré in vivo dans le cas de la peroxyrédoxine à deux cystéines (2-Cys Prx) de mammifère, indiquant l'existence d'une réductase spécifique, qui n'a cependant pas été identifiée. Plus précisément, ces auteurs ont montré que, par marquage métabolique de cellules de mammifères avec du 35S, la forme sufinique de la peroxidine I, produite lors de l'exposition des cellules au H202, est rapidement réduite en forme thiol catalytiquement active. Ces auteurs pensent que la réduction de l'acide sulfinique observée lors de ces études nécessite l'intervention d'enzymes spécifiques, qui n'ont pas été identifiées. Etant donné que les Prxs de mammifères régulent la signalisation médiée par H202, leur inactivation réversible pourrait servir dans le processus de régulation. Les peroxyrédoxines (Chae et al., P. N.A.S., 1994,91, 7022-7026) sont des antioxydants ubiquitaires, qui contrôlent, dans de nombreuses espèces (microorganismes, plantes et organismes supérieurs y compris les mammifères), les taux de H202, qui régulent les cascades de signalisation conduisant à une prolifération cellulaire, une différentiation et une apoptose (Fujii J. et al., Redox Rep., 2002,7, 123- 130). Les Inventeurs ont maintenant identifié la famille d'enzymes qui réduisent les Prxs Cysp-SO2H. Il s'agit d'une protéine qui comprend au moins un site catalytique présentant le motif suivant : FXGCHR, avec X= G ou S et qui a un poids moléculaire d'environ 8 à 14 kDa. Cette enzyme est conservée chez les eucaryotes et est dénommée ciaprès sulfirédoxine (Srx). Chez la levure et en particulier chez Saccharomyces cerevisiae, cette enzyme est dénommée Srxl et a un poids moléculaire de 13 kDa. Des séquences polypeptidiques identiques à celles de la sulfirédoxine ainsi que les séquences nucléotidiques correspondantes figurent dans la base de données de séquences NCBI ou GenBank, sous les numéros d'accès suivants : S. cerevisiae : YKL086W, Homo sapiens: AAH47707, CAC28314, M. musculus : BAB24939, AAH11325, Arabidopsis thaliana : AAD21682, AA042977, Oryza sativa : BAA95812, Schizosaccharomyces pombe : SPBC106.02c, Thermosyne- chococcus. elongatus : BAC07716, Drosophila melanogaster : AAF48773, Nostoc sp. (PCC7120):NP~488186. En revanche, aucune fonction n'a été attribuée à ces séquences polypeptidiques, dans la base de données de séquences NCBI ou GenBank. Les Inventeurs ont maintenant trouvé un point commun entre ces différentes protéines : le site catalytique précité et une fonction : la catalyse de la réduction des Prxs Cysp-SO2H. La réaction catalysée par la sulfirédoxine (Srx) est résumée à la figure 1. La présente invention a en conséquence pour objet l'utilisation d'une protéine dénommée sulfirédoxine (Srx), qui comprend au moins un site catalytique présentant le motif suivant : FXGCHR, avec X= G ou S, pour catalyser la réduction des peroxyrédoxines (Prxs) sous leur forme super-oxydée Prx-Cysp-S02H (peroxyrédoxine cystéine acide sulfinique) en dérivé thiol (SH). La sulfirédoxine joue donc un rôle très important dans la fonction antioxydante des peroxyrédoxines et est impliquée dans la réparation ou le contrôle des protéines modifiées par la formation d'une cystéine-acide sulfinique. Selon un mode de réalisation avantageux de ladite utilisation, ladite sulfirédoxine est une sulfirédoxine de microorganisme, de plante ou d'organisme supérieur, qui comprend généralement entre 80 et 170 acides aminés et au ,moins le site catalytique présentant le motif suivant : FXGCHR, avec X= G ou S. Elles présentent entre elles les pourcentages d'identité et de similarité suivants : . levure/homme : 31 % d'identité et 67 % de similarité . levure/plantes : 23 % d'identité et 39 % de similarité . levure/souris : 31 % d'identité et 51 % de similarité . levure/champignons : 80 % d'identité et 90 % de similarité. Conformément à l'invention, l'identité d'une séquence par rapport à une séquence de référence (SEQ ID NO :1 correspondant à la séquence de la Srxl de S. cerevisiae) s'apprécie en fonction du pourcentage de résidus d'acides aminés qui sont identiques, lorsque les séquences correspondant à la région catalytique telle que définie ci-dessus sont alignées, de manière à obtenir le maximum de correspondance entre elles. Une protéine ayant une séquence en acides aminés ayant au moins X % d'identité avec la séquence de référence SEQ ID NO: 1 est définie, dans la présente invention comme une protéine qui peut inclure jusqu'à 100-X altérations pour 100 acides aminés de la séquence SEQ ID NO: 1. Au sens de la présente invention, le terme altération inclut les délétions, les substitutions ou les insertions consécutives ou dispersées d'acides aminés dans la séquence de référence. Cette définition s'applique, par analogie, aux molécules d'acide nucléique. La similarité d'une séquence par rapport à la séquence de référence SEQ ID NO: 1 s'apprécie en fonction du pourcentage de résidus d'acides aminés qui sont identiques ou qui différent par des substitutions conservatives, lorsque les séquences sont alignées de manière à obtenir le maximum de correspondance entre elles. Au sens de la présente invention, on entend par substitution conservative, la substitution d'un acide aminé par un autre qui présente des propriétés chimiques similaires (taille, charge ou polarité), qui généralement ne modifie pas les propriétés fonctionnelles de la protéine. Une protéine ayant une séquence en acides aminés ayant au moins X % de similarité avec la séquence SEQ ID NO: 1 est définie, dans la présente invention comme une protéine dont la séquence peut inclure jusqu'à 100-X altérations nonconservatives pour 100 acides aminés de la séquence de référence. Au sens de la présente invention, le terme altérations non-conservatives inclut les délétions, les substitutions non-conservatives ou les insertions consécutives ou dispersées d'acides aminés dans la séquence SEQ ID NO: 1. Ladite sulfirédoxine est notamment sélectionnée parmi les protéines dont les séquences correspondent respectivement aux séquences SEQ ID NO : 1 à 10, illustrées aux figures 2 et 3 ou représentées dans la liste de séquences : S. cerevisiae : SEQ ID NO :1 ; C. albicans : SEQ ID NO :2 ; S. pombe : SEQ ID NO :3 ; H. sapiens : SEQ ID NO :4 ; M. musculus : SEQ ID NO :5 ; D. melanogaster : SEQ ID NO :6 ; A. thaliana : SEQ ID NO : 7 ; T elongatus : SEQ ID NO : 8 ; Nostoc sp. : SEQ ID NO : 9 et Oryza sativa : SEQ ID NO :10. La présente invention a également pour objet un peptide, correspondant au site catalytique de la Srx, caractérisé en ce qu'il présente la séquence suivante : FXGCHR, avec X= G ou S. La présente invention a également pour objet des anticorps anti-Srx, caractérisés en ce qu'ils sont obtenus par immunisation convenable d'un animal avec une protéine Srx, telle que définie ci-dessus ou le peptide FXGCHR, avec X= G ou S. Lesdits anticorps sont soit des anticorps polyclonaux, soit des anticorps monoclonaux. La présente invention a également pour objet un médicament, caractérisé en ce qu'il comprend une quantité efficace d'une protéine telle que définie cidessus et éventuellement au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. La présente invention a aussi pour objet l'utilisation d'une protéine telle que définie ci-dessus pour la préparation d'un médicament antioxydant destiné à traiter les cancers et les troubles neurodégénératifs, dans lesquels l'on observe une défaillance du système antioxydant Prx/Srx. La présente invention a également pour objet un procédé de dépistage de maladies liées au cancer, au vieillissement et aux maladies neurodégénératives, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend, pour évaluer l'implication du système antioxydant Prx/Srx : (1) la mise en contact in vitro des cellules d'un échantillon biologique avec du peroxyde d'hydrogène (H202), (2) la détection de la Prx-Cysp-SOzH formée, entre 1 heure et 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1), et (3) l'établissement du rapport des quantités de Prx-Cysp-SO2H et de Prx-Cysp-SH, à partir de 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1). L'échantillon biologique est notamment constitué de cellules sanguines. Des rapports Prx-Cysp-SO2H/ Prx-Cysp-SH > 1 sont le signe d'une pathologie du système antioxydant Prx/Srx , liée à un dysfonctionnement de la Srx. Ainsi, un tel procédé permet d'évaluer si le système antioxydant Prx/Srx fonctionne normalement au non. La connaissance des mécanismes impliqués dans l'étiologie de la maladie permet de sélectionner le traitement le plus adapté à la situation, notamment dans les cas de systèmes antioxydants Prx/Srx défaillants. En variante, ledit procédé de dépistage comprend le génotypage de la sulfirédoxine, à partir de l'ARN total d'un échantillon biologique convenable, notamment des cellules sanguines. De manière plus précise, ledit procédé comprend : (1) l'extraction de l'ARN total, à partir d'un échantillon biologique convenable, (2) la préparation d'ADNc spécifique de la sulfirédoxine, par amplification de l'ARN à l'aide des deux amorces suivantes : GTCCCGCGGCGGCGGCGACG (SEQ ID NO Il) AGCAGGTGCCAAGGAGGCTG (SEQ ID NO :12) ; ces séquences étant situées respectivement en amont et en aval de l'ORF de la sulfirédoxine humaine (GenBank n AAH47707), (3) l'établissement de sa séquence nucléotidique et (4) la comparaison par rapport à une séquence d'ADN codant pour une protéine Srx, telle que définie ci-dessus, issue de la même espèce que celle de l'échantillon biologique à analyser. L'extraction de l'ARN, la préparation de l'ADNc et l'établissement de la séquence sont réalisées en utilisant les techniques classiques, selon les protocoles standards tels que ceux décrits dans Current Protocols in Molecular Biology (Frederick M. AUSUBEL, 2000, Wiley and son 1ne, Library Of COfz>t'es.s, USA). La présente invention a également pour objet l'utilisation de la séquence codant pour une protéine Srx, telle que définie ci-dessus ou d'un vecteur contenant ladite séquence codante, pour l'obtention de plantes dont les capacités de résistance au stress (sécheresse, froid, chaleur toxiques oxydants présents dans l'environnement) sont significativement augmentées. Les séquences codant pour la protéine Srx peuvent être aisément obtenues à partir des bases de données de séquences précitées. La présente invention a également pour objet des cellules hôtes, caractérisées en ce qu'elles sont transformées par un vecteur recombinant contenant une séquence codant pour une protéine Srx, telle que définie ci-dessus. Selon un mode de réalisation avantageux de ladite cellule hôte, elle est constituée par une souche de S. cerevisiae surexprimant le gène SRX1. Le vecteur est avantageusement un vecteur navette E. colilS. cerevisiae comprenant au niveau d'un site de clonage, la séquence codant pour la protéine Srx et le promoteur du gène Srx. Il s'agit notamment du plasmide pRS316 (n ATCC 77145). Le promoteur du gène Srx est 400 paires de bases en amont du site d'initiation de la traduction ; il est repérable sur le site http://www.yeastgenome.org/ (n d'accès YKL086W). Ces cellules hôtes transformées par un tel vecteur sont particulièrement intéressantes pour l'étude du système antioxydant Prx/Srx et le criblage in vitro de médicaments modulant l'activité du système antioxydant Prx/Srx. En conséquence, la présente invention a également pour objet un procédé de criblage de médicaments aptes à moduler l'activité du système antioxydant Prx/Srx, caractérisé en ce qu'il comprend : (1) la mise en contact de la substance à cribler avec des cellules hôtes selon l'invention, en présence de peroxyde d'hydrogène, (2) la détection de la Prx-Cysp-S02H formée, entre 1 heure et 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1), (3) l'établissement du rapport des quantités de Prx-Cysp-S02H et de Prx-Cysp-SH, à partir de 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1). La présente invention a également pour objet un procédé de criblage de médicaments utiles dans le traitement des cancers et des maladies neurodégénératives, liés à une défaillance du système antioxydant Prx/Srx, caractérisé en ce qu'il comprend : a) la mise en contact de la substance à tester avec un extrait de cellules hôtes modifiées telles que définies ci-dessus ou un échantillon biologique d'un animal transgénique non humain, notamment des souris, dans lequel le gène de la protéine Srx est invalidé, en présence de peroxyde d'hydrogène, b) la mesure par tout moyen approprié, de l'activité antioxydante du système Prx/Srx du mélange obtenu en a), et c) la sélection des substances capables de stimuler ou d'inhiber ladite activité. La mesure de ladite activité est notamment effectuée par la détection de la Prx-Cysp-S02H formée, entre 1 heure et 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (a) et l'établissement du rapport des quantités de Prx-Cysp-S02H et de Prx-Cysp-SH, à partir de 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (a). La présente invention a également pour objet un procédé de criblage de médicaments utiles dans le traitement des cancers et des maladies neurodégénératives, liés à une défaillance du système antioxydant Prx/Srx, caractérisé en ce qu'il comprend : (1) la mise en contact de la substance à cribler avec des mammifères transgéniques non-humains, notamment des souris, dans lesquels le gène de la protéine Srx est invalidé et (2) la mesure de la survie de l'animal. L'obtention de mammifères transgéniques non-humains est réalisée en utilisant des méthodes classiques et notamment selon les protocoles décrits dans Transgenic animais generation and use (C.M. Houdebine Ed., Harwood academic publishers, Amsterdam). La présente invention a également pour objet un procédé de réduction d'un produit comprenant au moins deux cystéines à activité redox, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend la mise en contact de ladite protéine avec une sulfirédoxine (Srx), qui comprend au moins un site catalytique présentant le motif suivant : FXGCHR, avec X= G ou S, en présence d'ATP et de magnésium. La réduction du produit comprenant au moins deux cystéines à activité redox implique son activation par phosphorylation suivie d'une réduction du soufre, ces deux activités étant catalysées par la sulfirédoxine. La présente invention a également pour objet un procédé de synthèse d'un produit comprenant des résidus Cys-SH à partir de produits comportant des résidus Cys-S02H, caractérisé en ce qu'il comprend une étape de réduction du produit comportant les résidus Cys-SO2H en produit comprenant des résidus Cys-SH, en présence d'une sulfirédoxine, d'ATP et de magnésium. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en #uvre du procédé objet de la présente invention ainsi qu'aux dessins annexés, dans lesquels : - la figure 1 illustre la réaction catalysée par Srx 1. - les figures 2 et 3 représentent la comparaison des séquences de Srx dans différentes espèces ; figure 2 : S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe, H. sapiens, M. musculus, D. melanogaster et A. thaliana ; les régions identiques sont encadrées ; le site catalytique se trouve autour de la cystéine conservée, indiquée par un astérisque ; figure 3 : S. cerevisiae, H. sapiens, M. musculus, D. melanogaster, A.thaliana, T. elongatus et Nostoc sp.. Les n d'accès GenBank sont indiqués sur cette figure. L'alignement des séquences a été réalisé à l'aide du logiciel CLUSTALW. Les acides aminés identiques dans environ 65 % des séquences sont encadrés. Le site actif Srxl comprenant une cystéine (flèche noire) et les autres cystéines (flèche blanche) sont indiqués. - la figure 4 illustre le recyclage de la forme cystéine-acide sulfinique de la Tsal, dépendant de la Srxl ; figures 4a et 4b : PAGE 2D des formes réduite (SH) et oxydée (S02H) de la Tsal marquée à la 35S-Met dans des cellules sauvages et des cellules dsrxl exposées au H202 (500 M) pendant la période indiquée ; les figures 4c et 4d correspondent à des Western blot de formes réduite (2xAMS) et oxydée (IxAMS) de Tsal à partir de cellules WT (c) ou de cellules #srx1 (d) traitées au H202 après alkylation in vitro avec de l'AMS. Après induction de l'expression de Srxl pendant 15 min avec de l'H202 (100 M), les cellules sont traitées avec de la cycloheximide (CHX) 5 min avant le traitement à 1' H202 (500 M). - la figure 5 illustre le rôle joué par la protéine Srxl dans la résistance des cellules au stress induit par du peroxyde d'hydrogène ; des tests de sensibilité sont réalisés en faisant croître une souche sauvage (WT) et une cellule invalidée (#srx1) ou une souche mutante srx1C84S dans des boîtes de Pétri contenant des concentrations croissantes (en mM) de peroxyde d'hydrogène (H202) (figure 5a et 5b) : figure 5a : résistance à H202 de la souche sauvage (WT), de la souche invalidée (#srx1) et de la souche mutante srx 1 C84Sfigure 5b : Western blot (incrustation) et QT-RT PCR de la protéine Srxl étiquetée à HA et de l'ARNm dans des cellules traitées au peroxyde d'hydrogène (400 M). - la figure 6 illustre le rôle joué par la protéine Srxl dans la résis- tance des cellules au stress induit par du t-butyl hydroperoxyde ; tests de sensibi- lité sont réalisés en faisant croître une souche sauvage (WT), une cellule invalidée (#srx1), une souche sauvage surexprimant Tsal ou Srxl, une cellule invalidée (#srx1) exprimant Tsal, une cellule invalidée (#tsa1) et une cellule invalidée (#tsa1) surexprimant Srxl dans des boîtes de Pétri contenant des concentrations croissantes de t-butyl hydroperoxyde (tBOOH) ; les concentrations sont exprimées en mM. - la figure 7 illustre l'interaction entre Tsal et Srxl de façon covalente (pont disulfure) et non-covalente ; Figure 7a : Western blot de la protéine Srx étiquetée HA (pistes 1,2 et 3) ou de la Srx 1 C84S étiquetée HA (piste 4) exprimées dans une souche sauvage (WT) (pistes 1,2, 4) ou dans des cellules dtsal (piste 3) traitées 15 min avec H202 (500 M) après une électrophorèse SDS-PAGE réalisée en conditions réductrices (R) (piste 2) ou non réductrices (NR) (pistes 1,3, 4) ; figure 7b : les protéines co-purifiées avec la Srxl étiquetée avec la 6His (pistes 2,4) ou la Srxl non étiquetée (pistes 1, 3) dans des conditions non-réductrices, sont séparées par SDS-PAGE dans des conditions non-réductrices (pistes 1, 2) ou réductrices (pistes 3, 4) et visualisées par coloration au bleu de Coomassie. Les bandes de protéines sont identifiées par spectrométrie de masses MALDI-TOF comme indiqué. - la figure 8 montre que la protéine Srxl et l'ATP sont nécessaires à la réduction de la Tsal oxydée in vitro par Srxl ; figures 8 a et b : en Western blot des formes réduite (SH) et super-oxydée (S02H) de la Myc-Tsal dans des lysats de cellules #tsa1 incubées 15 min à 30 C avec de la Srxl purifiée et de l'ATP, aux concentrations indiquées ; figure 8c : Analyse en Western blot des formes réduite (SH) et super-oxydée (S02H) de la 6His-Tsal incubée pendant 15 min à 30 C avec de la Srxl purifiée, de l'ATP (1 mM) et du Mg++ (1 mM), comme indiqué. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. Exemple 1 : Matériel et Méthodes. 1.1. Souches Les souches de S. cerevisiae utilisées sont la souche YPH98 (Sikorski R. et al., Genetics, 1989,122, 19-27) (MATa, ura3-52, lys2-801ambre, ade2- 101 ocre trp 1 -A leu2-41) et ses dérivés isogéniques. Les souches Asrxl, Atrrl et Atsal sont réalisées en remplaçant la région codante de SRX1 (sulfirédoxine) et de TRR1 (thiorédoxine réductase) par KANMX4 et le cadre ouvert de lecture TSA1 par TRP1 (tyrosinase-related protein 1). Les souches surexprimant Tsal et Srxl sont identiques aux précédentes, sauf qu'elles portent chacune une délétion du gène Tsal ou Srxl et portent le plasmide à copies multiples psRS426 (n ATCC 77107) ; Les cellules sont cultivées à 30 C dans un milieu YPD (extrait de levure à 1 %, bactopeptone à 2 % et glucose à 2 %) ou un milieu CASA (base azotée de levure à 0,67 %, casaminoacides à 0,1 %, glucose à 2 %), complémenté en adénine, tryptophane et uracile. 1. 2. Plasmides Les protéines de fusion suivantes : - Srxl-HA : protéine de fusion comprenant la fusion de deux épitopes HA en C-terminal de Srxl et - 6His-Srxl : protéine de fusion entre Srxlet à son extrémité Nterminale six étiquettes histidine, sont construites par PCR en deux étapes : les amorces nucléotidiques utilisées pour la PCR incorporent la séquence de l'un ou l'autre des épitopes HA (défini par l'anticorps commercial reconnaissant l'épitope HA 12CA5, Babco, MMS-101 R) et 6His (6 histidines) et amplifient la séquence codante complète de Srxl, flanquée par 400 et 200 paires de bases en amont et en aval de leur séquence et cloné au site EcoRI du plasmide pRS316 (n ATCC77145) ou du plasmide pRS426 (n ATCC 77107). Myc-Tsal, une protéine de fusion comprenant à l'extrémité Nterminale de Tsal, un épitope Myc (défini par l'anticorps anti-Myc, 9E10, Babco, MMS-150R) est construite et clonée de manière similaire au site EcoRI du plasmide pRS316. La mutagénèse dirigée pour la génération des mutants Cys>Ser est réalisée par un protocole standard d'amplification par PCR à l'aide d'oligonucléotides amorces comportant la séquence modifiée. 1. 3. Analyse des protéines * Pour l'analyse en PAGE 2D, les cultures cellulaires en début de phase exponentielle (D06oonm=0,3) sont marquées avec de la 35S-Met (100 Ci) 20 min à 30 C, suivie d'une chasse de la méthionine marquée par de la méthionine froide (1 mM final) et de la cystéine (0,1 mM final) et traitées avec de l'H2O2 (500 M). Les cellules sont soumises à une analyse PAGE 2D comme décrit dans Maillet et al. (J. Biol. Chem., 1996,271, 10263-10270). * Pour l'analvse de l'état redox in vivo de Srxl-HA, des lysats de cultures de cellules en début de phase exponentielle de culture (D06oonm=0,3) sont préparés par le protocole de lyse à l'acide trichloroacétique (Delaunay et al., EMBO J., 2000,19, 5157-5166). Les protéines précipitées sont solubilisées dans un tampon A [Tris-CI, pH 8 (100 mM), SDS (1 %), EDTA (1 mM)] contenant du N- éthylmaléimide (NEM) (50 mM). Les extraits sont séparés par SDS-PAGE à 17 % dans des conditions réductrices et non réductrices et la Srxl-HA est détectée par l'anticorps monoclonal 12CA5 précité. * Pour la dérivatisation de la cystéine de Myc-Tsal par AMS, les extraits cellulaires sont traités dans les mêmes conditions que celles du protocole de lyse TCA, sauf que les protéines précipitées sont d'abord solubilisées dans le tampon A contenant du DTT (50 mM) pendant 1 h à 37 C, précipitée par le TCA mises en suspension dans un tampon A contenant de l'AMS (15 mM) pendant 2 h à 37 C. Les extraits cellulaires sont séparés par SDS-PAGE à 20 % dans des conditions réductrices et Myc-Tsal est immunodétecté avec l'anticorps monoclonal anti-Myc 9E10, précité. * Pour la réduction in vitro, soit 3 l de lysat (2 mg/ml) de cellules Asrxl traitées à l'H202 comprenant de la Myc-Tsal oxydée, soit de la 6His-Tsal oxydée et purifiée (0,5 mg) sont ajoutés dans le tampon de réaction (RM) (80 l final) [Tris-CI pH 6,8 (50 mM), KCI (100 mM) ] contenant de la Srxl purifiée exprimée par un baculovirus, de l'ATP et du MgCl2 aux concentrations indiquées et incubés 15 min à 30 C. La 6His-Tsal est oxydée en cystéine-acide sulfinique par incubation dans le tampon RM contenant du DTT (10 mM) et de l'H202 (1 mM) pendant 30 min et diluée 16 fois de le milieu réactionnel. 1. 4. Purification des protéines recombinantes . La Srxl est exprimée dans des cellules d'insecte High Five en utilisant le système d'expression en baculovirus Bac-To-Bac# (Invitrogen) et purifiée successivement par chromatographe d'échanges d'ion, chromatographie d'affinité et HPLC (8ml-Porose 50HS, 8ml-Porose 50HE, 0,8ml-Porose 20HS) (Applied Biosystems). . La 6His-Tsal est exprimée dans des cellules E. coli BL21 à partir du plasmide pET28a-Tsal après induction à l'isopropyl-thio-p-D-galactopyranoside, conformément aux recommandations du fabricant (Stratagène). Les cellules sont mises en suspension dans un tampon de lyse [Tris-CI pH 6,8 (50 mM), KC1 (100 mM), DTT (2 mM), imidazole (20 mM) ], supplémenté en fluorure de phénylméthanesulfonyle (PMSF) (1 mM), lysées par des cycles congélation-décongélation et sonication. Les extraits sont centrifugés 30 min à 30. 000 g et le surnageant est passé dans une colonne d'agarose Ni-NTA (Qiagen). Après lavage de la colonne avec le tampon de lyse, la Tsal est éluée par du tampon de lyse supplémenté en imidazole (150 mM). La pureté et la concentration des protéines purifiées est déterminée par coloration au bleu de Coomassie après SDS-PAGE et test Bradford (Biorad). 1. 5. Purification des partenaires de réaction de la Srxl La 6His-Srxl et la Srxl sont exprimées à partir du plasmide pRS426 dans la souche #trr1, dépourvue du gène de la thiorédoxine réductase qui stabilise les ponts disulfures. Les cellules sont cultivées jusqu'au milieu de la phase exponentielle (D06oonm = 0,8) et traitées par H2O2 (5 mM) pendant 5 min, lavées deux fois dans de l'eau supplémentée en NEM (10 mM), congelées et lysées dans une presse Eaton dans un tampon C [Tris-CI pH 8 (100 mM), NaCI (50 mM) EDTA-sans inhibiteur de protéase (Roche-Boerhinger), PSMF (1 mM), imidazole (20 mM), NEM (10 mM)]. L'extrait cellulaire est centrifugé lh30 à 10. 000 g et le surnageant est passé dans une colonne Ni-NTA (Qiagen). Après lavage, de la colonne avec un tampon D [Tris-CI pH 8 (100 mM), NaCl (50 mM) ] + imidazole (20 mM), les protéines sont éluées avec le tampon D + imidazole (300 mM). 1. 6. Analyse de l'ARN L'ARN total est extrait comme décrit dans Lee et al. (J. Biol. Chem., 1999,274,4537-4544) et l'ADNc est synthétisé par transcription inverse avec des amorces aléatoires hexanucléotidiques, à partir d'1 g d'ARN total. Une PCR quantitative (Biorad iCycler) est réalisée en utilisant la méthode au Cybergreen fluorescent, avec les amorces spécifiques de SRX1 ou ACT1, trois fois séparément, conformément aux recommandations du fournisseur. Exemple 2 : Réversibilité de la sur-oxydation de la cystéine de la Tsal par l'activité catalytique de la Srxl. 2. 1 Matériel et méthodes L'une des 5 Prxs de S. cerevisiae, la Tsal, est une 2-Cys Prx et constitue l'antioxydant principal chez la levure avec une spécificité de substrat large envers à la fois H2O2 et les peroxydes organiques. L'oxydation de Tsal et la réversibilité de cette réaction en présence de Srx ont été analysées selon deux techniques : (A) séparation selon le point isoélectrique de la protéine en gel à deux dimensions (électrophorèse PAGE en 2D) ; les cellules de souche sauvage (WT) et la souche invalidée #srx1 sont initialement soumises à un marquage radioactif in vivo des protéines suivie d'une chasse de l'élément radioactif avant d'être traitées au H202, pendant des durées différentes (0,2, 30 et 90 minutes de traitement) ; tâche de gauche (figure 4a) représente la forme native de la protéine et la tâche de droite (figure 4a) la forme acide (acide sulfinique). (B) alkylation différentielle des thiols ; les cellules de souche sauvage (WT) et souche invalidée #srx1 portant une copie étiquetée de Tsal sont traitées à la cycloheximide (CHX) pour bloquer la synthèse protéique de novo en cours d'analyse, puis traitées à l'H202. Les protéines sont extraites, réduites au DTT puis les thiols sont alkylés par un composé de 500Da, l'acide 4-acétamido-4'maléimidylstilbène-2,2'-disulfonique (AMS) qui alkyle les cystéines au niveau des groupes SH libres mais pas sous forme de sulfinate, augmentant le poids moléculaire de la protéine de 0,5 kDa par cystéine alkylée (AMS) ; la différence de taille entre les protéines portant deux thiols alkylés (cystéines réduites ou pont disulfure, indiqué 2 AMS sur les figures 4c et 4d ou un thiol alkylé (acide sulfinique, indiqué 1 AMS sur les figures 4c et 4d) est observée après séparation selon leur taille sur un gel SDS-PAGE. La protéine est révélée par Western Blot ; 2. 2 Résultats Les résultats sont présentés aux figures 4a et 4b. Dans les extraits cellulaires non-traités, Tsal apparaît comme une tâche double : l'une intense correspondant à environ 85% de l'enzyme totale à une position de pI de 4,8 (+/- 0,05), ce qui correspond à une Tsal réduite (le pI théorique de la Tsa est 4,87) ; tâche plus fine se situant à une position de pI plus acide de 4,7 (+/- 0,05), ce qui correspond à la Tsal oxydée (la valeur théorique de la forme acide sulfinique de la cystéine de la Tsal est 4,75). Après deux minutes de traitement par H202 (500uM), la proportion de Tsal oxydée augmente au détriment de la Tsal réduite, et ce jusqu'à une proportion d'environ 90% des protéines totales. Après 30 minutes de traitement, le rapport Tsal réduit/oxydé revient à celui des cellules nontraitées. La réapparition de la tâche de Tsal réduite provient de la Tsal oxydée et non de Tsal synthétisée de novo, étant donné que le marquage de protéines est interrompu avant l'analyse. Des résultats identiques sont observés lorsque les cellules sont traitées avec du t-butyl hydroperoxyde (t-BOOH). Dans les extraits cellulaires non-traités par l'H202, la Tsal est en grande partie réduite et migre comme une bande double modifiée par l'AMS (Figures 4c et 4d) ; 15 minutes après traitement par H2O2, la Tsal migre comme des espèces singulières ou doubles modifiées par l'AMS, présentant un mélange de formes réduite et oxydée selon un rapport d'environ 1:3. Après une durée de 120 minutes de ce traitement, la Tsal est complètement revenue à son état initial, c'est à dire sous forme de doublet alkylé par l'AMS, mettant en évidence la réduction du sulfinate en CysSH. La réduction de la Tsal est différée comparativement à celle observée par 2DPAGE (Figure 4a), ce qui est probablement dû à l'inhibition de la synthèse de protéines. Ces deux expériences montrent que la forme sur-oxydée de Tsal (acide sulfinique) est réductible en thiol libre dans une souche sauvage et que la présence de Srx1 est indispensable à cette réduction. Exemple 3 : d'une protéine de 13 kDa chez S. cerevisiae liée à une Prx par pont disulfure (figure 7). 3. 1 Matériel et Méthodes (voir exemple 1) (A) Des cellules contenant une copie étiquetée (HA) de la protéine Srxl sont traitées par 500 M d'H202 pendant 15 minutes. Les protéines sont extraites selon une méthode permettant la conservation de l'état redox intracellulaire des thiols (voir exemple 1) puis séparées sur gel SDS-PAGE en conditions réductrices pour les cellules de la souche sauvage (WT) contenant une copie étiquetée (HA) de la protéine Srx (piste 1) et en conditions non-réductrices pour les cellules de souche sauvage (WT) (piste 2), la souche mutante #tsa1 portant une copie étiquetée du gène SRX1 (piste 3), et la souche dsrxl portant une copie étiquetée du gène SRX1 ayant subi une mutation C84S (piste 4) ; poids moléculaires de références (MW) sont exprimés en kDa. (B) la protéine Srxl est purifiée dans les conditions natives grâce à une étiquette 6His, à partir de cellules #ttr1 traitées pendant 5 minutes avec 5 mM de H202 ; les protéines purifiées sont ensuite séparées sur gel SDS-PAGE réducteur ou non-réducteur. L'identification des différentes protéines indiquées a été réalisée par spectrométrie de masse ; les protéines purifiée séparées dans des conditions nonréductrices et réductrices proviennent de la souche mutante #ttr1 contenant une copie du gène SRX1 (puits n 1et 3), et de la souche mutante #ttr1contenant une copie étiquetée (HA) du gène SRX1 (puits n 2 et 4), les poids moléculaires de références (MW) sont exprimés en kDa. 3. 2 Résultats La figure 7a met en évidence l'existence d'un pont disulfure intermoléculaire entre Tsal et Srxl, impliquant la cystéine conservée (Cys84) de Srxl (voir figures 2 et 3). Elle montre en outre que Srx1 peut se trouver sous deux formes : un monomère de 13 kDa et un multimère de 55 kDa lié par pont disulfure (Figure 7a, piste 2). La figure 7b illustre le fait que la copurification des Tsal, Tsa2 et Ahpl montre que Srxl interagit avec trois des cinq peroxyrédoxines existant chez la levure et que l'interaction avec Tsal peut être redox on non covalente. De manière plus précise, le matériau non-réduit purifié contient plusieurs bandes majeures de tailles de 80,55, 40, 35, 20 et 13 kDa (Figure 7b) qui se limitent à 2 bandes principales de 13et 20 kDa et une bande mineure de 18 kDa après réduction (dernier puits). La spectrométrie de masse de type MALDI-TOF appliqué sur le matériau réduit a permis d'identifier les protéines Srxl, Tsal et la protéine Ahpl qui est la seconde 2-Cys Prx majeure de levure, dans les bandes respectivement de 13,20 et 18 kDa. La Tsa2, qui est une troisième 2-Cys Prx, est aussi présente sous forme de traces dans la bande de 20 kDa. L'analyse par spectrométrie de masse de lysat non-réduit a permis d'identifier à la fois la protéine Tsal et la protéine Srxl dans la bande de 55 kDa, probablement sous forme d'hétérotrimères liés par pont disulfure contenant 2 molécules de Tsal. Cette analyse a permis également de détecter la présence de la protéine Tsal dans les bandes de 40,35 et 20 kDa, probablement sous forme de dimères et de monomères liés par pont disulfure. L'association des protéines Srxl et Tsal, qui sont liées par pont disulfure, est confirmée par immunodétection au cours de laquelle la bande de 55 kDa contenant la protéine Srxl n'est pas détectée dans les lysats traités par H2O2 provenant de la souche #tsa1 dépourvue du gène TSA1. Ces résultats montrent que la Srxl est fortement induite par H2O2 et s'associe avec la Tsal de façon non-covalente sous forme d'hétéromères liés par pont disulfure. La protéine Srxl s'associe aussi avec 2 autres Prx : Ahpl et Tsa2, mais son association est mineure dans les conditions testées. Exemple 4 : fonction Srxl est liée à l'activité peroxydase et à Tsal. 4. 1. Matériel et Méthodes 4. 1.1 Matériel La souche sauvage et les deux souches mutantes #tsa1 et #srx1 sont celles déjà décrites à l'Exemple 1. 4. 1.2 Méthodes Les tests de sensibilité des souches sauvage et mutantes au t-BOOH et au H2O2 sont effectués comme suit (voir également exemple 1) : - Test de sensibilité au tBOOH ou à l'H202 Des cellules sauvages ou invalidées pour le gène SRX1 sont déposées sur des boîtes de Pétri contenant des concentrations croissantes de peroxyde d'hydrogène (H202) ou de t-butyl hydroperoxyde (tBOOH). La croissance des cellules est observée après 48 heures d'incubation à 30 C. - Extraction des protéines tout en préservant leur état redox cellulaire (voir exemple 1). 4. 2. Résultats Les Figures 5a et 5b montrent que la souche invalidée pour le gène SRX1présente une hypersensibilité au peroxyde. La figure 6 montre également que la protéine Srxl est nécessaire à la résistance contre le stress au peroxyde. En particulier, cette figure 6 montre que la surexpression de TSA1 corrige totalement le défaut de résistance de la souche Asrxl montrant que cette sensibilité est due à un défaut d'activité peroxydase. La surexpression de SRX1 dans une levure Atsal n'a aucun effet, contrairement à la même surexpression dans une souche sauvage. Ceci montre que la présence de Tsalest indispensable à la fonction de Srxl. La fonction du gène SRX1 est liée au gène TSA1. La surexpression de TSA1 restaure le défaut de tolérance au H202 et au t-BOOH dans la souche Atsal, mais la surexpression du gène SRX1 ne provoque aucun effet de ce genre dans la souche Atsal, bien qu'elle augmente légèrement la tolérance de la souche sauvage au t-BOOH. Ces données indiquent que Srxl agit par l'intermédiaire de Tsal, alors que la surexpression de Tsalpeut compenser un défaut en protéine Srxl. La substitution en sérine de Cys84 (Srxl Cys84S) supprime complètement la fonction de la Srxl dans la tolérance au peroxyde d'hydrogène (Figure 5a) et la formation de pont disulfure Srxl-Tsal, indiquant que cette liaison est essentielle pour la fonction de Srxl et est due à la Cys84. Exemple 5 : L'ATP est nécessaire pour réduire la forme Cys-SCH de la Tsal. 5.1 Matériel et Méthodes Voir Exemple 1. 5. 2 Résultats Afin d'étudier plus en détails la réduction de la forme Cys-S02H de la Tsal par Srxl, la protéine Srxl recombinante exprimée par baculovirus a été produite. Elle montre que la Srx1 purifiée permet la réduction de la forme SO2H de la Tsal purifiée, et que cette réduction se produit seulement en présence d'ATP et de lysats provenant de cellules de type sauvage (Figure 8). Ces données montrent que Srxl catalyse la réduction de la forme sulfinate de la Tsal. En effet, la protéine Srxl permet la réduction de la forme Cys-SCH de la protéine Tsal présente dans les lysats des cellules ASrxl traitées à H202 selon une manière dose-dépendante, seulement lorsque l'ATP est ajouté (Figure 8a et b). Le GTP et l'AMP-PNP, qui est un homologue de l'ATP non-hydrolysable, n'a aucun effet sur la catalyse. L'ajout d'EDTA au lysat inhibe la réduction de la Tsal Srxldépendante et la réintroduction de Mg++ ou de Mn++ mais pas de Fe++, Ca++, Cu++, ou Zn++, restaure la réduction. Finalement, la Srxl purifiée réduit complètement la forme Tsal purifiée et oxydée in vitro en présence d'ATP, de Mg++ ou de Mn++ et de DTT (Figure 8c), démontrant que la Srxl elle-même catalyse la réduction de la forme CysS02 en la forme Cys-SH. Le couplage d'hydrolyse de l'ATP et le besoin spécifique en Mg ++ ou Mn++ suggèrent fortement que la phosphorylation du substrat est réalisée par la Srxl, comme étant une étape dans le processus réducteur de Cys-SO2H, bien qu'un intermédiaire n'ait pas encore été détecté, probablement à cause de la nature hautement instable de celui-ci. La liaison disulfure entre Srxl et Tsal suggère aussi qu'un mécanisme fonctionnant à base de groupe thiol existe comme étant une autre étape dans ce processus. L'activité des mutants Srxl a été testée par la substitution de chacune de ses 3 cystéines. La substitution de la Cys84 (SrxlCys84S), qui est conservée parmi les homologues de la Srxl chez d'autres eukaryotes supprime totalement la formation du pont disulfure entre Srxl et Tsal et la réduction de la forme Cys-S02H de la Tsal, alors que les autres mutants cystéine ne présentent aucun effet pour la SrxlCysl06S ou un effet mineur pour la SrxlCys48S. Ces données indiquent que la liaison Srxl-Tsal provient de Cys84 de la Srxl et qu'elle est essentielle pour la réduction de la Tsa Cys-S02H médiée par la Srxl. La substitution de la Cys84 en sérine supprime aussi le rôle de la Srxl in vivo dans la tolérance au peroxyde d'hydrogène, indiquant de plus que la réduction Srxl-dépendante de la Tsal Cys-S02H est importante pour que la peroxydase fonctionne. L'acide sulfinique des cystéines dans les protéines ne peut pas être réduit par des réducteurs mono- ou dithiol. Le mécanisme d'action suivant est proposé : La sulfirédoxine catalyse cette réduction selon un processus à multi- étapes en agissant à la fois comme une phosphotransférase spécifique et comme une thioltransférase (Figure 8). La réduction de l'acide sulfinique de la cystéine nécessite vraisemblablement son activation initiale, qui peut être réalisée par formation d'un ester sulfinique phosphorylé, comme le besoin en ATP et en Mg++ l'indique. Cette modification permet l'attaque du résidu sulfure par la cystéine au site activé de la Srxl, puis la formation temporaire d'un thiolsufinate intermoléculaire entre Srxl et Tsal. Le thiolsulfinate existe au cours du stress oxydatif et est accessible à la réduction thiol-dépendante. Ainsi, une fois formé, le thiolsulfinate entre Srxlet Tsal est converti en deux Cys-SH par des échanges thiol-rédox successifs impliquant initialement le clivage réducteur du pont thiolsulfinate en un sulfénate et en un pont disulfure grâce aux électrons fournis par le DTT in vitro et probablement par la thiorédoxine in vivo. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite ; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. REVENDICATIONS 1 ) Utilisation d'une protéine dénommée sulfirédoxine (Srx), qui comprend au moins un site catalytique présentant le motif suivant : FXGCHR, avec X= G ou S, pour catalyser la réduction des peroxyrédoxines (Prxs) sous leur forme super-oxydée Prx-Cysp-S02H (peroxyrédoxine cystéine acide sulfinique) en dérivé thiol (SH). 2 ) Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite sulfirédoxine est une sulfirédoxine de microorganisme, de plante ou d'organisme supérieur, qui comprend généralement entre 80 et 170 acides aminés et au moins le site catalytique présentant le motif suivant : FXGCHR, avec X= G ou S ainsi que les pourcentages d'identité et de similarité suivants : . levure/homme : 31% d'identité et 67 % de similarité . levure/plantes : 23 % d'identité et 39 % de similarité . levure/souris : 31 % d'identité et 51 % de similarité . levure/champignons : 80 % d'identité et 90 % de similarité. 3 ) Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que ladite sulfirédoxine est notamment sélectionnée parmi les protéines dont les séquences correspondent respectivement aux séquences SEQ ID NO : 1 à 10. 4 ) Peptide, correspondant au site catalytique de la Srxl, telle que définie aux revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'il présente la séquence suivante : FXGCHR, avec X= G ou S. 5 ) Médicament, caractérisé en ce qu'il comprend une quantité efficace d'une protéine telle que définie aux revendications 1 à 3 et éventuellement au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. 6 ) Utilisation d'une protéine telle que définie aux revendications 1 à 3, pour la préparation d'un médicament antioxydant destiné à traiter les cancers et les troubles neurodégénératifs dans lesquels l'on observe une défaillance du système antioxydant Prx/Srx. 7 ) Procédé de dépistage de maladies liées au cancer, au vieillissement et aux maladies neurodégénératives, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend, pour évaluer l'implication du système antioxydant Prx/Srx : (1) la mise en contact in vitro des cellules d'un échantillon biologique avec du peroxyde d'hydrogène (H202) (2) la détection de la Prx-Cysp-SO2H formée, entre 1 heure et 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1), et (3) l'établissement du rapport des quantités de Prx-Cysp-S02H et de Prx-Cysp-SH, à partir de 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1). 8 ) Procédé de dépistage de maladies liées au cancer, au vieillissement et aux maladies neurodégénératives, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend le génotypage de la sulfirédoxine, à partir de l'ARN total d'un échantillon biologique convenable, notamment des cellules sanguines, conformément aux étapes suivantes : (1) l'extraction de l'ARN total, à partir dudit échantillon biologique, (2) la préparation d'ADNc spécifique de la sulfirédoxine, par amplification de l'ARN à l'aide des deux amorces suivantes : GTCCCGCGGCGGCGGCGACG (SEQ ID NO Il) AGCAGGTGCCAAGGAGGCTG (SEQ ID NO :12) ; ces séquences étant situées respectivement en amont et en aval de l'ORF de la sulfirédoxine humaine (GenBank n AAH47707), (3) l'établissement de sa séquence nucléotidique et (4) la comparaison par rapport à une séquence d'ADN codant pour une protéine Srx, telle que définie ci-dessus, issue de la même espèce que celle de l'échantillon biologique à analyser. 9 ) Utilisation de la séquence codant pour une protéine Srx, telle que définie aux revendications 1 à 3, pour l'obtention de plantes dont les capacités de résistance au stress sont significativement augmentées. 10 ) Cellules hôtes, caractérisées en ce qu'elles sont transformées par un vecteur recombinant contenant une séquence codant pour une protéine Srx, telle que définie aux revendications 1 à 3. Il') Cellule hôte selon la revendication 10, caractérisée en ce qu'elle est constituée par une souche de S. cerevisiae modifiée par un vecteur surexprimant le gène SRX1. 12 ) Cellule hôte selon la revendication 10 ou la revendication 11, caractérisée en ce que ledit vecteur est avantageusement un vecteur navette E. colilS. cerevisiae comprenant au niveau d'un site de clonage EcoRI, la séquence codant pour la protéine Srx et le promoteur du gène Srx. 13 ) Procédé de criblage de médicaments aptes à moduler l'activité du système antioxydant Prx/Srx, caractérisé en ce qu'il comprend : (1) la mise en contact de la substance à cribler avec des cellules hôtes selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, en présence de peroxyde d'hydrogène (2) la détection de la Prx-Cysp-S02H formée, entre 1 heure et 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1), (3) l'établissement du rapport des quantités de Prx-Cysp-S02H et de Prx-Cysp-SH, à partir de 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (1). 14 ) Procédé de criblage de médicaments utiles dans le traitement des cancers et des maladies neurodégénératives, liés à une défaillance du système antioxydant Prx/Srx, caractérisé en ce qu'il comprend : a) la mise en contact de la substance à tester avec un extrait de cellules hôtes selon l'une quelconque des revendications 10 à 12 ou un échantillon biologique d'un animal transgénique non humain, notamment des souris, dans lequel le gène de la protéine Srx est invalidé, en présence de peroxyde d'hydrogène, b) la mesure par tout moyen approprié, de l'activité antioxydante du système Prx/Srx du mélange obtenu en a), et c) la sélection des substances capables de stimuler ou d'inhiber ladite activité. 15 ) Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que la mesure de ladite activité est notamment effectuée par la détection de la Prx-CyspS02H formée, entre 1 heure et 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (a) et l'établissement du rapport des quantités de Prx-Cysp-S02H et de Prx-Cysp-SH, à partir de 4 heures après ladite mise en contact selon l'étape (a). 16 ) Anticorps anti-Srx, caractérisés en ce qu'ils sont obtenus par immunisation convenable d'un animal avec une protéine Srx, telle que définie aux revendications 1 à 3 ou le peptide FXGCHR, avec X= G ou S selon la revendication 4. 17 ) Procédé de réduction d'un produit comprenant au moins deux cystéines à activité redox, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend la mise en contact de ladite protéine avec une sulfirédoxine (Srx), telle que définie aux revendications 1 à 3, qui comprend au moins un site catalytique présentant le motif suivant : FXGCHR, avec X= G ou S, en présence d'ATP et de magnésium. 18 ) Procédé de synthèse d'un produit comprenant des résidus CysSH à partir de produits comportant des résidus Cys-S02H, caractérisé en ce qu'il comprend une étape de réduction du produit comportant les résidus Cys-S02H en produit comprenant des résidus Cys-SH, en présence d'une sulfirédoxine telle que définie aux revendications 1 à 3, d'ATP et de magnésium.