FR 2815538 A1 20020426 FR 0013563 A 20001023 PROCEDE D'EXTRACTION D'UN PRINCIPE ACTIF POUR LUTTER CONTRE L'INTOXICATION DE LA PEAU ET PRINCIPE ACTIF OBTENU La présente invention concerne un procédé d'extraction d'un principe actif pour lutter contre l'intoxication de la peau et le principe actif obtenu, ce principe actif étant extrait de Crataegus Oxyacantha ou Crataegus Monogyna et plus particulièrement de la partie florale. La peau est soumise à de nombreuses agressions de différentes origines, physiques ou chimiques, qui se propagent aux cellules. Les cellules sont normalement à même de pouvoir réagir par certains mécanismes de protection : Il existe des enzymes de réparation de l'ADN, des enzymes antioxydantes ou des protéines particulières de choc thermique. Mais ces systèmes peuvent être défaillants lorsque l'agression est trop forte, ou lorsque les systèmes de protection décroissent au fur et à mesure de l'avancée en âge. La cosmétique qui est le domaine de prédilection du déposant, vise à protéger et traiter la peau, première barrière aux agressions. Elle est directement exposée aux agents polluants, subissant ainsi les effets néfastes de la pollution. La peau peut ainsi s'intoxiquer et dans ce cas, elle développe de nombreuses réactions inflammatoires. On sait par ailleurs que les ions métalliques, du fer ou du plomb, participent à la conversion de certaines espèces réactives en radicaux hautement réactifs à l'encontre de cibles biologiques privilégiées comme les protéines, les lipides et les acides nucléiques. Il serait donc particulièrement satisfaisant de pouvoir limiter l'action de ces ions métalliques au niveau de la peau en stabilisant ces cations et en les neutralisant après les avoir piégés. Le but de la présente invention est de proposer un procédé d'extraction d'un principe actif présentant une forte affinité pour les cations métalliques permettant de chélater et d'inhiber l'action de ces cations. En ce qui concerne le fer, on connaît la réaction initiée par un réactif dit de Fenton, qui conduit à la formation des radicaux libres très actifs OH : Fe2+ + H202-OH + OH-+ Fe3+ Cette forme ferrique peut aussi être réduite par des agents réducteurs et à son tour générer des radicaux libres très réactifs. Ces radicaux libres sont un des facteurs des dommages inflammatoires car sous leur influence, les kératinocytes vont relâcher des cytokines proinflamatoires, notamment des interleukines-la. Le but de la présente invention est de proposer un principe actif issu de plantes qui permet de générer de telles réactions de chélation. Un autre but est de procurer en conséquence une action apaisante en inhibant certaines réactions inflammatoires. L'invention couvre le procédé d'extraction, le principe actif obtenu mais aussi des compositions utilisant ce principe actif et des utilisations de ces compositions. La présente invention est maintenant décrite en détail en regard des dessins annexés parmi lesquels les différentes figures représentent sous forme de tableaux les résultats obtenus concernant : - figure 1, la capacité de chélation du fer par le principe actif, - figure 2, l'activité anti-radicalaire du principe actif face aux agressions des ions métalliques du fer, - figure 3, l'activité inhibitrice du principe actif face à la libération d'interleukine-1 zip - figure 4, la capacité de chélation du plomb par le principe actif, et - figure 5, l'activité anti-radicalaire du principe actif face aux agressions des ions métalliques du plomb. La présente description nécessite un procédé d'extraction satisfaisant pour atteindre le principe actif selon la présente invention, principe permettant seul d'atteindre les objectifs fixés. 1/PROCEDE D'EXTRACTION Le procédé d'extraction selon la présente invention consiste en la succession des étapes suivantes : - solubilisation de la plante entière ou préférentiellement de la fleur de Crataegus Oxyacantha ou Crataegus Monogyna dans un mélange eau/alcool, préférentiellement du propylène glycol, porté à une température élevée, de préférence comprise entre 50 et 80 C. - agitation pendant une durée comprise entre 30 mn et 12 heures, - séparation des phases soluble et insoluble par tout moyen ou toute combinaison de moyens, par exemple : décantation, filtration ou centrifugation. - concentration de la fraction active, et - filtration stérilisante pour atteindre une flore mésophile totale inférieure 100 germes/g, et une absence de levures et de moisissures. 2/CARACTERISATION Matière sèche : Taux compris entre 10 et 100 g/ !, plus particulièrement entre 15 et 50 et spécifiquement entre 25 et 40 g/1 tel qu'obtenu par passage de l'extrait à l'étuve à 105 C jusqu'à obtention d'un poids constant. Mesure du pH Le pH est mesuré à température ambiante par la méthode potentiométrique, il est compris entre 3,0 et 8,0 plus particulièrement 4,0 et 6,0. Polyphénols totaux La détermination est réalisée par réaction des polyphénols en présence de ferricyanure de potassium et par une détection consécutive des complexes colorés à 715 nm. On compare ensuite par rapport à un étalon d'acide gallique allant de 40 à 120 mag/1 c'est-à-dire couvrant la plage concernée de mesures. On obtient les résultats suivants : taux de polyphénols totaux compris entre 2 et 50 g/l, plus particulièrement entre 2 et 20 g/l et spécifiquement une valeur comprise entre 3 et 10 g/l. De plus, le principe actif est stable dans des milieux ayant un pH compris entre 3 et 10 et stable en température jusqu'à 80 ob. 3/ACTIVITE CHELATRICE DU PRINCIPE ACTIF SELON LA PRESENTE INVENTION VIS A VIS DU FER Pour cette détermination, on évalue le pouvoir de combinaison du principe actif selon la présente invention avec les ions métalliques, en l'occurrence le fer. A cet effet, on mesure le taux de fer libre par un dosage spectrophotométrique. On met des concentrations différentes d'ions ferreux en présence du principe actif qui piège une partie de ces ions ferreux. Ensuite, en milieu acide, on piège les ions ferreux libres par la ferrozine, pour former un complexe magenta hydrosoluble dont l'absorbance maximale se situe à 560 nm. Par mesure différentielle avant et après mise en contact avec le principe actif selon l'invention, on évalue la quantité de fer libre restante. L'EDTA (éthylènediaminetétracétique acid) est un excellent chélatant connu et les résultats présentés dans le tableau de la figure 1 montre qu'à raison de 5% de principe actif, on obtient une capacité de chélation du fer supérieure à celle de l'EDTA. On constate que le principe actif selon la présente invention fixe et stabilise le fer de manière dose-dépendante, grâce à sa richesse en acides phénoliques. 4/ACTIVITE DETOXIFIANTE DU PRINCIPE ACTIF SELON LA PRESENTE INVENTION VIS A VIS DU FER Afin de tester les capacités détoxifiantes et dépolluantes du principe actif selon la présente invention vis à vis des ions métalliques, on soumet des cultures de kératinocytes au réactif de Fenton, composé d'un mélange 50/50 de fer/eau oxygénée. On mesure ensuite la viabilité cellulaire de ces kératinocytes par une mesure de densité optique suite à une coloration au M. T. T, ledit colorant n'étant susceptible d'être absorbé que par les cellules vivantes. Ainsi, on soumet des kératinocytes à une agression radicalaire par un mélange 50/50 de FeCt :,/H :, 0 ;, pendant deux heures à 37 C sous une atmosphère à 5% de CO2. L'agression radicalaire entraîne une diminution de 50% de la viabilité cellulaire. Le principe actif selon la présente invention est très efficace puisque dès 1 %, il permet de limiter les conséquences de cette agression et à 5%, cette agression est totalement inactivée. 5/ ACTIVITE APAISANTE DU PRINCIPE ACTIF SELON LA PRESENTE INVENTION Ce test a pour but d'évaluer les propriétés apaisantes du principe actif vis à vis des agressions inflammatoires métallo-induites. Dans des cultures de kératinocytes soumis à la même agression que pour le test précédent c'est-à-dire un mélange 50/50 de FeC'2/H202, on mesure le taux d'interleukines-1 a libérées qui font partie plus généralement des cytokines pro-inflammatoires. Les résultats obtenus sont lisibles sur la figure 3 et montrent que l'agression au réactif de Fenton provoque un très fort taux d'interleukines relarguées. En présence d'au moins 1 % de principe actif, on obtient un taux considéré comme nul. Ceci montre d'une part les qualités apaisantes du principe actif et d'autre part confirme l'action précédente sur les agressions métallo-induites qui étaient inhibées à 100% pour cette même concentration de principe actif. 6//ACTIVITE CHELATRICE DU PRINCIPE ACTIF SELON LA PRESENTE INVENTION VIS A VIS DU PLOMB Pour évaluer ce pouvoir chélateur du principe actif selon la présente invention vis à vis du plomb, on mesure le taux de plomb libre subsistant. On utilise du bromure de plomb que l'on place avec différentes concentrations de principe actif selon l'invention, on mesure la densité optique du complexe coloré obtenu après introduction de 4- (2-pyridylazo) resorcinol, ceci à 530 nm, zone d'absorbance maximale. On constate que le principe actif selon la présente invention, à 2 et 4% permet de limiter les actions des ions du plomb dans des ratios de 63 et 75%, voir la figure 4. 7/ACTIVITE DETOXIFIANTE DU PRINCIPE ACTIF SELON LA PRESENTE INVENTION VIS A VIS DU PLOMB Le test utilisé est identique à celui du point 4/mais dans ce cas, l'agression est réalisé avec du bromure de plomb. Les résultats regroupés dans le tableau de la figure 5 montrent que les agressions sont fortement inhibées en présence de 3% de principe actif selon la présente invention. XI y a donc une activité métallo-protectrice du principe actif selon la présente invention. Le principe actif peut être associé à toute forme galénique : crème, gel, onguent, lotion, lait ou émulsion ou solution et à des excipients adaptés et connus de l'homme de l'art pour en permettre un meilleur usage. Le principe actif extrait est présent à raison d'une quantité comprise entre 0,1 et 10%. On peut citer un exemple de crème détoxifiante mettant en oeuvre le principe actif selon la présente invention, sans que cet exemple soit limitatif : - Montanov 202 : 5% - Lanol 99 : 20% - Principe actif selon la présente invention : 3% - Sepigel 305 : 0,5% - Conservateur : 0,5% - Eau : Qsp 100% REVENDICATIONS 1. Procédé d'extraction d'un principe actif ayant une activité détoxifiante et apaisante en cosmétologie, caractérisé en ce que l'on réalise les étapes suivantes : - solubilisation de la plante entière de Crataegus Oxyacantha ou Crataegus Monogyna dans un mélange eau/alcool, préférentiellement du propylène glycol, porté à une température élevée, de préférence comprise entre 50 et 80 C. - agitation pendant une durée comprise entre 30 mn et 12 heures, - séparation des phase soluble et insoluble - concentration de la fraction active, et - filtration stérilisante pour atteindre un taux une flore mésophile totale inférieure à 100 germes/g et pour un produit avec une absence de levures et de moisissures. 2. Procédé d'extraction d'un principe actif ayant une activité détoxifiante et apaisante selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on utilise uniquement les parties florales de Crataegus Oxyacantha ou Crataegus Monogyna. 3. Procédé d'extraction d'un principe actif ayant une activité détoxifiante et apaisante selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que la séparation des phases soluble et insoluble est réalisée par décantation, filtration ou centrifugation. 4. Principe actif obtenu par le procédé selon la revendication 1,2 ou 3 caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de Crataegus Oxyacantha ou Crataegus Monogyna et en ce que - le taux de matière sèche est compris entre 10 et 1 00 g/I, - la quantité de polyphénols totaux est comprise entre 2 et 50 g/l - le pH est compris entre 3, 0 et 8, 0. 5. Principe actif obtenu par le procédé selon la revendication 1, 2 ou 3 caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de Crataegus Oxyacantha ou Crataegus Monogyna et en ce que : - le taux de matière sèche est compris entre 15 et 50 9/l, - la quantité de polyphénols totaux est comprise entre 2 et 20 g/l, - le pH est compris entre 4,0 et 6,0. 6. Principe actif obtenu par le procédé selon la revendication 1,2 ou 3 caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de Crataegus Oxyacantha ou Crataegus Monogyna et en ce que : - le taux de matière sèche est compris entre 25 et 40 g/l, - la quantité de polyphénols totaux est comprise entre 3 et 10 g/1, 7. Composition cosmétique mettant en oeuvre) le principe actif selon la revendication 4,5 ou 6 extrait selon le procédé de la revendication 1,2 ou 3, caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme de crème, gel, onguent, lotion, lait, émulsion ou solution. 8. Composition cosmétique selon la revendication 7, caractérisée en ce que le principe actif extrait est présent à raison d'une quantité comprise entre 0,1 et 10%. 9. Utilisation du principe actif selon la revendication 4,5 ou 6 extrait selon le procédé de la revendication 1,2 ou 3 et se présentant sous une composition cosmétique conforme aux revendications 7 et 8, caractérisé en ce qu'il permet de générer une activité chélatrice vis à vis des ions métalliques, notamment le fer et le plomb. 10. Utilisation du principe actif selon la revendication 4,5 ou 6 extrait selon le procédé de la revendication 1,2 ou 3 et se présentant sous une composition cosmétique conforme aux revendications 7 et 8, caractérisé en ce qu'il permet de générer un effet inhibiteur vis à vis de la libération des cytokines pro-inflammatoires, notamment des interteukines-ta.