FR 2817868 A1 20020614 FR 0016027 A 20001208 NOUVELLE PROTEINE ISSUE DU GENE DE L'HORMONE DE MELANOCONCENTRATION"MELANIN-CONCENTRATING HORMONE" (MCH), ACIDES NUCLEIQUES CORRESPONDANTS ET LEUR APPLICATION A LA PREPARATION DE MEDICAMENTS L'invention concerne une nouvelle protéine issue du gène de l'hormone de mélanoconcentration"melanin-concentrating hormone" (MCH) et les acides nucléiques correspondants. L'invention concerne également leur application à la préparation de médicaments. La MCH (melanin-concentrating hormone), préalablement isolée à partir de glandes pituitaires de saumons (Kawauchi et al., 1983), a ensuite été identifiée chez le rat comme étant un neuropeptide cyclique de 19 acides aminés (Vaughan et al., 1989). Ce neuropeptide est issu de la maturation d'un précurseur polypeptidique de 165 acides aminés, la pro-MCH, dont le gène comprend 3 exons et 2 introns. Ce précurseur peut générer, en plus de la MCH, plusieurs peptides comme le NEI (neuropeptide-acide glutamique-isoleucine) et le NGE (neuropeptide-glycine-isoleucine amide) (Nahon et al., 1989 ; Parkes and Vale, 1992). Les cellules produisant la MCH sont principalement localisées dans le système nerveux central, et plus particulièrement dans l'hypothalamus latéral (LHA) et la zona incerta (ZI) (Bittencourt et al., 1992 ; Presse et al., 1992). Des neurones ont été mis en évidence dans des zones extra hypothalamiques comme les tubercules olfactifs et la formation réticulée pontique. Les neurones produisant le peptide MCH innervent la totalité du cerveau, à l'exception du cervelet et de l'éminence médiane externe (Bittencourt et al., 1992). Le système neuropeptidique à MCH apparaît impliqué dans la régulation de nombreux comportements physiologiques comme l'état de stress, la reproduction, l'apprentissage et le contrôle de la prise alimentaire (Nahon, 1994 ; Baker, 1994 ; Murray et al., 2000). De façon générale, l'expression des ARN messagers subit de nombreuses régulations post-transcriptionnelles. L'excision des séquences introniques fait partie de ces régulations. Ce mécanisme appelé épissage alternatif autorise une sélection alternative des jonctions d'épissage et permet de produire plusieurs transcrits à partir d'un seul et même gène. Ce type de maturation aboutit à la synthèse d'une plus grande diversité de protéines. Dans les systèmes neuroendocriniens, la production de différents peptides à partir d'un même gène peut s'effectuer par épissage alternatif. Un des premiers exemples connus concerne le système calcitonine/CGRP (Calcitonin gene-related peptide), la calcitonine étant exprimée dans les cellules de la thyroïde tandis que le CGRP est exprimé dans les cellules neuronales (Rosenfeld et al., 1983). Plus récemment, il a été révélé que le gène de la Melanin-Concentrating Hormone (MCH), dont il est question ci-dessus, était également capable de produire deux ARN messagers par un processus d'épissage alternatif : un messager MCH codant pour la proMCH et un transcrit codant pour une nouvelle protéine appelée MCH-Gene-Overprinted Polypeptide (MGOP) (Toumaniantz et al., 1996). Des études ont révélé la présence de neurones produisant du MGOP dans la ZI et le LHA (Toumaniantz et al., 1996). Dans ces zones, il existe une colocalisation entre le peptide MCH et la protéine MGOP. Des neurones exprimant la protéine MGOP ont également été mis en évidence dans le noyau périventriculaire (PeVN). D'autre part, des ARN messagers MGOP ont été mis en évidence par RT-PCR à la périphérie avec une expression majoritaire dans les organes de type lymphoïde, essentiellement dans la rate et le thymus. Ainsi, le transcrit MGOP issu de l'épissage alternatif du gène MCH a été mis en évidence chez le rat (Toumaniantz et al., 1996). L'excision de l'exon II du gène MCH crée un décalage du cadre de lecture dans l'exon III. Cette nouvelle phase de lecture code non pas pour un précurseur polypeptidique comme c'est le cas du messager MCH, \ mais apparemment pour une seule protéine, la protéine MGOP\ Cette protéine MGOP est constituée de 125 acides aminés. A ce jour, rien d'équivalent n'est connu pour l'homme et la souris. Le but de l'invention est de fournir une protéine unique en son genre, du fait de son originalité structurale, de sa localisation tissulaire et de son implication possible dans de nombreuses pathologies chez l'homme. L'invention a pour objet une nouvelle protéine, isolée chez la souris et chez l'homme, et les séquences d'ADN et d'ARN correspondantes. L'invention a également pour objet l'utilisation de cette protéine, notamment comme antiviral pour bloquer la réplication du VIHL ou VIH2. L'invention a également pour objet l'utilisation de cette protéine, notamment comme cible pour traiter l'obésité et les pathologies associées. L'invention concerne une protéine caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence SEQ ID NO : 2, - ou toute séquence dérivée de la séquence SEQ ID NO : 2, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 42, - toute séquence homologue de la séquence SEQ ID NO : 2, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 72% avec la séquence SEQ ID NO : 2 et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 42, - ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve qu'il présente un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 10 acides aminés contigus dans la séquence SEQ ID NO : 2, sous réserve qu'il soit différent du fragment ayant la séquence SEQ ID NO : 44. La séquence SEQ ID NO : 2 est une nouvelle protéine isolée chez l'homme, nommée MGOP-h. Cette nouvelle protéine humaine est obtenue par épissage alternatif du gène de la MCH, qui conduit à un ARN messager dans lequel les exons 1 et III sont directement liés et dans lequel l'exon II du gène MCH a disparu. Dans cette nouvelle protéine, l'exon 1 est délimité de l'acide aminé en position (1) à l'acide aminé en position (83) et l'exon III de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (127). La séquence SEQ ID NO : 42 est la protéine MGOP de rat, déjà connue. La séquence SEQ ID NO : 44 est nommée MGOP-P1, et est un fragment de la protéine de rat, délimité de l'acide'aminé en position (112) à l'acide aminé en position (125). Par définition, on rappelle que les chimiokines sont des molécules qui ont été initialement définies comme inducteurs de modifications d'orientation et de vitesse pour les leucocytes lors de processus inflammatoires et de défense immunitaire. Plus récemment, cette définition s'est élargie et les chimiokines ont été impliquées dans la régulation de la croissance cellulaire, l'angiogenèse, le développement cérébral au cours de l'embryogenèse (Ward et Westwick, 1998 ; Horuk, 1998). On rappelle que"l'effet neurotransmetteur/neuromodulateur"se réfère à toute substance libérée par un élément présynaptique après stimulation qui active des récepteurs postsynaptiques pour permettre de générer directement ou indirectement des potentiels d'action. On rappelle également que"l'effet endocrinien"se réfère à toute substance libérée dans le sang ou l'espace intercellulaire par tous types de cellules sécrétantes et agissant via des récepteurs comme un facteur endocrine, paracrine, juxtacrine ou autocrine (Bear et al., 1997 ; Bolander, Molecular Endocrinology, 1989). L'effet chimiokine peut être vérifié, selon les articles de Ward et Westwick (1998) et de Horuk (1998). Les effets neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocriniens peuvent être vérifiés selon les références suivantes : Bear et al., 1997 ; Bolander, Molecular Endocrinology, 1989. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, la protéine de l'invention, telle que définie ci-dessus, est caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par la séquence SEQ ID NO : 2. L'invention concerne une protéine telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence SEQ ID NO : 22, - ou toute séquence dérivée de la séquence SEQ ID NO : 22, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - toute séquence homologue de la séquence SEQ ID NO : 22, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec la séquence SEQ ID NO : 22 et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve qu'il présente un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 10 r-ifc amiUM frétions rtans artnnr La séquence SEQ ID NO : 22 est une nouvelle protéine, nommée MGOP-s, isolée chez la souris. Cette nouvelle protéine de souris est obtenue par épissage alternatif du gène de la MCH, qui conduit à un ARN messager dans lequel les exons I et III sont directement liés et dans lequel l'exon II du gène MCH a disparu. Dans cette nouvelle protéine, l'exon 1 est délimité de l'acide aminé en position (1) à l'acide aminé en position (83) et l'exon III de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (125). Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, la protéine de l'invention, telle que définie ci-dessus, est caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par la séquence SEQ ID NO : 22. L'invention concerne également un fragment de protéine, telle que définie cidessus, caractérisé en ce qu'il comprend ou est constitué par : - les séquences SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18 et SEQ ID NO : 20, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18 et SEQ ID NO : 20, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18 et SEQ ID NO : 20, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 72% avec lesdites séquences et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien. La séquence SEQ ID NO : 4 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (22) à l'acide aminé en position (127), et est nommé (MGOP-h 22-127). La séquence SEQ ID NO : 6 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (127), et est nommé (MGOP-h 84-127). La séquence SEQ ID NO : 8 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (1) à l'acide aminé en position (111), et est nommé (MGOP-h 1-111). La séquence SEQ ID NO : 10 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (22) à l'acide aminé en position (111), et est nommé (MGOP-h 22-111). La séquence SEQ ID NO : 12 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (1) à l'acide aminé en position (117), et est nommé (MGOP-h 1-117). La séquence SEQ ID NO : 14 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (22) à l'acide aminé en position (117), et est nommé (MGOP-h 22-117). La séquence SEQ ID NO : 16 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (111), et est nommé (MGOP-h 84-111). La séquence SEQ ID NO : 18 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (117), et est nommé (MGOP-h 84-117). La séquence SEQ ID NO : 20 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP humaine, délimité de l'acide aminé en position (112) à l'acide aminé en position (127), et est nommé (MGOP-h 112-127). L'invention concerne également un fragment de protéine, telle que définie cidessus, caractérisé en ce qu'il comprend ou est constitué par : - les séquences SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 et SEQ ID NO : 40, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 et SEQ ID NO : 40, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 et SEQ ID NO : 40, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec lesdites séquences et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien. La séquence SEQ ID NO : 24 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (22) à l'acide aminé en position (125), et est nommé (MGOP-s 22-125). La séquence SEQ ID NO : 26 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (125), et est nommé (MGOP-s 84-125). La séquence SEQ ID NO : 28 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (1) à l'acide aminé en position (111), et est nommé (MGOP-s 1-111). La séquence SEQ ID NO : 30 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (22) à l'acide aminé en position (111), et est nommé (MGOP-s 22-111). La séquence SEQ ID NO : 32 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (1) à l'acide aminé en position (115), et est nommé (MGOP-s 1-115). La séquence SEQ ID NO : 34 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (22) à l'acide aminé en position (115), et est nommé (MGOP-s 22-115). La séquence SEQ ID NO : 36 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (111), et est nommé (MGOP-s 84-111). La séquence SEQ ID NO : 38 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (84) à l'acide aminé en position (115), et est nommé (MGOP-s 84-115). La séquence SEQ ID NO : 40 est un fragment de la nouvelle protéine MGOP de souris, délimité de l'acide aminé en position (112) à l'acide aminé en position (125), et est nommé (MGOP-s 112-125). L'invention concerne également une protéine ou un fragment de protéine, tels que définis ci-dessus, se présentant sous la forme de multimères, notamment de dimères. L'invention concerne une séquence d'ARN messager codant pour une protéine telle que définie ci-dessus. L'invention concerne une séquence nucléotidique codant pour une protéine telle que définie ci-dessus. En particulier, l'invention concerne une séquence d'ADN qui comprend ou est constituée par : - soit la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 1, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, par dégénérescence du code génétique, de la séquence SEQ ID NO : 1 codant pour une protéine représentée par SEQ ID NO : 2, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 41, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, de la séquence SEQ ID NO : 1 codant pour une protéine dérivée de SEQ ID NO : 2, telle que définie dans la revendication 1, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 41, - ou toute séquence nucléotidique homologue de SEQ ID NO : 1, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 81%, avec la séquence SEQ ID NO : 1 codant pour une protéine homologue de SEQ ID NO : 2, telle que définie dans la revendication 1, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 41, - ou tout fragment de la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 1 ou des séquences nucléotidiques définies ci-dessus, ledit fragment étant de préférence constitué d'au moins environ 30 nucléotides contigus dans ladite séquence, sous réserve qu'il soit différent du fragment ayant la séquence SEQ ID NO : 43, - ou toute séquence nucléotidique complémentaire des séquences ou fragments susmentionnés, - ou toute séquence nucléotidique susceptible d'hybrider dans des conditions stringentes avec la séquence complémentaire d'une des séquences ou d'un des fragments susmentionnés. La séquence SEQ ID NO : 1 est une nouvelle séquence d'acide nucléique, identifiée chez l'homme, codant pour la protéine MGOP humaine représentée par la séquence SEQ ID NO : 2. La séquence SEQ ID NO : 41 est une séquence déjà connue d'acide nucléique de rat, codant pour la protéine MGOP de rat, représentée par la séquence SEQ ID NO : 42. La séquence SEQ ID NO : 43 est une séquence d'acide nucléique déjà connue, identifiée chez le rat, délimitée du nucléotide en position (363) au nucléotide en position (405), et codant pour le fragment MOP-PAL déjà connu de protéine de rat, représenté par la séquence SEQ ID NO : 44. L'expression"hybrider dans des conditions stringentes"correspond à un milieu d'hybridation contenant principalement 0,75 à 1 M de NaCl et à une température d'hybridation supérieure ou égale à 60oC, ainsi qu'à un milieu de lavage contenant 0,15 M de NaCl et à une température de lavage supérieure ou égale à 60oC. L'invention concerne une séquence d'ADN, telle que définie ci-dessus, qui comprend ou est constituée par : - soit la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 21, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, par dégénérescence du code génétique, de la séquence SEQ ID NO : 21 codant pour une protéine représentée par SEQ ID NO : 22, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, de la séquence SEQ ID NO : 21 codant pour une protéine dérivée de SEQ ID NO : 22, telle que définie dans la revendication 1, - ou toute séquence nucléotidique homologue de SEQ ID NO : 21, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec la séquence SEQ ID NO : 21 codant pour une protéine homologue de SEQ ID NO : 22, telle que définie dans la revendication 1, - ou tout fragment de la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 21 ou des séquences nucléotidiques définies ci-dessus, ledit fragment étant de préférence constitué d'au moins environ 30 nucléotides contigus dans ladite séquence, - ou toute séquence nucléotidique complémentaire des séquences ou fragments susmentionnés, - ou toute séquence nucléotidique susceptible d'hybrider dans des conditions stringentes avec la séquence complémentaire d'une des séquences ou d'un des fragments susmentionnés. La séquence SEQ ID NO : 21 est une nouvelle séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, codant pour la protéine MGOP de souris, représentée par la séquence SEQ ID NO : 22. Un fragment d'acide nucléique avantageux de l'invention est un fragment d'acide nucléique tel que défini ci-dessus, codant pour l'un des fragments de protéine ayant la séquence SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18, SEQ ID NO : 20, SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 ou SEQ ID NO : 40. Ces fragments de protéine ont été définis précédemment. Les fragments de protéine représentés par les séquences SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18 et SEQ ID NO : 20 sont des fragments de la nouvelle protéine humaine MGOP-h. Les fragments de protéine représentés par les séquences SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 et SEQ ID NO : 40 sont des fragments de la nouvelle protéine de souris MGOP-s. Ces fragments d'acide nucléique permettent de tenir compte de la dégénérescence du code génétique. L'invention concerne un fragment d'acide nucléique, tel que défini ci-dessus, qui comprend ou est constitué par : - les séquences SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 7, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : Il, SEQ ID N0 : 13, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 19, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 7, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 19, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 7, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 19, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 81% avec lesdites séquences. La séquence SEQ ID NO : 3 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (118) au nucléotide en position (435), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 4. La séquence SEQ ID NO : 5 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (304) au nucléotide en position (435), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 6. La séquence SEQ ID NO : 7 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (55) au nucléotide en position (387), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 8. La séquence SEQ ID NO : 9 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (118) au nucléotide en position (387), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 10. La séquence SEQ ID NO : 11 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (55) au nucléotide en position (405), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 12. La séquence SEQ ID NO : 13 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (118) au nucléotide en position (405), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 14. La séquence SEQ ID NO : 15 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (304) au nucléotide en position (387), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 16. La séquence SEQ ID NO : 17 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (304) au nucléotide en position (405), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 18. La séquence SEQ ID NO : 19 est une séquence nucléotidique, identifiée chez l'homme, délimitée du nucléotide en position (388) au nucléotide en position (435), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 20. L'invention concerne également un fragment d'acide nucléique, tel que défini cidessus, qui comprend ou est constitué par : - les séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 25, SEQ ID NO : 27, SEQ ID NO : 29, SEQ ID NO : 31, SEQ ID NO : 33, SEQ ID NO : 35, SEQ ID NO : 37 et SEQ ID NO : 39, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 25, SEQ ID NO : 27, SEQ ID NO : 29, SEQ ID NO : 31, SEQ ID NO : 33, SEQ ID NO : 35, SEQ ID NO : 37 et SEQ ID NO : 39, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 25, SEQ ID NO : 27, SEQ ID NO : 29, SEQ ID NO : 31, SEQ ID NO : 33, SEQ ID NO : 35, SEQ ID NO : 37 et SEQ ID NO : 39, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec lesdites séquences. La séquence SEQ ID NO : 23 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (94) au nucléotide en position (405), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 24. La séquence SEQ ID NO : 25 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (280) au nucléotide en position (405), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 26. La séquence SEQ ID NO : 27 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (55) au nucléotide en position (363), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 28. La séquence SEQ ID NO : 29 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (94) au nucléotide en position (363), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 30. La séquence SEQ ID NO : 31 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (55) au nucléotide en position (375), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 32. La séquence SEQ ID NO : 33 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (94) au nucléotide en position (375), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 34. La séquence SEQ ID NO : 35 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (280) au nucléotide en position (363), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 36. La séquence SEQ ID NO : 37 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (280) au nucléotide en position (375), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 38. La séquence SEQ ID NO : 39 est une séquence nucléotidique, identifiée chez la souris, délimitée du nucléotide en position (364) au nucléotide en position (405), et codant pour le fragment de protéine, représenté par la séquence SEQ ID NO : 40. L'invention concerne également un vecteur recombinant, notamment plasmide, cosmide, phage ou ADN de virus, contenant une séquence nucléotidique telle que définie ci-dessus. Un vecteur recombinant avantageux de l'invention est un vecteur recombinant tel que défini ci-dessus, contenant les éléments nécessaires à l'expression dans une cellule hôte des polypeptides codés par les acides nucléiques, tels que mentionnés ci-dessus, insérés dans ledit vecteur. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le vecteur recombinant défini ci-dessus contient notamment un promoteur reconnu par l'ARN polymérase de la cellule hôte, en particulier un promoteur inductible et éventuellement une séquence de transcription, de terminaison, et éventuellement une séquence signal et/ou d'ancrage. Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le vecteur recombinant, tel que défini ci-dessus, contient les éléments qui permettent l'expression d'une séquence nucléotidique, telle que définie ci-dessus, en tant que protéine mature ou protéine de fusion. L'invention concerne également une cellule hôte, choisie notamment parmi les bactéries, les virus, les levures, les champignons, les plantes ou les cellules de mammifères, ladite cellule hôte étant transformée, notamment à l'aide d'un vecteur recombinant tel que défini ci-dessus. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, la cellule hôte, telle que définie ci-dessus, contient les éléments de régulation permettant l'expression de la séquence nucléotidique telle que définie ci-dessus. L'invention concerne également le produit de l'expression d'un acide nucléique exprimé par une cellule hôte transformée telle que définie ci-dessus. L'invention concerne des ofigonucléotides antisens ou ARN messager antisens dérivés des séquences nucléotidiques telles que définies ci-dessus. L'invention concerne également une sonde nucléotidique capable d'hybrider avec l'une quelconque des séquences nucléiques de l'invention. L'invention concerne un anticorps caractérisé en ce qu'il est dirigé de manière spécifique contre une protéine telle que mentionnée ci-dessus. On ne se limite pas aux anticorps polyclonaux ; l'invention concerne également tout anticorps monoclonal produit par tout hybridome susceptible d'être formé selon les méthodes classiques à partir, d'une part, de cellules de rate d'animaux, en particulier de souris ou de rat, les cellules de l'animal étant immunisées contre la protéine de l'invention, et d'autre part de cellules d'une lignée cellulaire de myélome, ledit hybridome étant susceptible d'être choisi selon la capacité de la lignée cellulaire à produire des anticorps monoclonaux reconnaissant la protéine utilisée au préalable pour l'immunisation des animaux. L'invention concerne également une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend une protéine ou un fragment de protéine tels que définis ci-dessus, en association avec un vecteur pharmaceutique acceptable. L'invention concerne également l'utilisation de l'une des protéines telles que définies ci-dessus, pour la préparation de médicaments destinés au traitement de maladies notamment liées au comportement alimentaire, à l'homéostasie énergétique ou à l'altération de la croissance ou à la prise de drogues. Parmi les maladies du comportement alimentaire, on peut citer l'obésité, le diabète, les pathologies cardiovasculaires liées à l'obésité, l'anorexie mentale, la boulimie et les comportements alimentaires compulsifs. Par maladies d'altération de la croissance , on comprend les maladies d'altération de la croissance cellulaire ou de l'organisme. On peut citer tous les types de cancers (en particulier les lymphomes et les gliomes) et les anomalies dans la croissance des vaisseaux sanguins et du cerveau (avec des retards mentaux ou pas) et ce à tous les stades de développement (embryon, foetus, nouveau-né et adulte). Par prise de drogues licites ou illicites , on comprend la prise de drogues licites, telles que le tabac ou l'alcool, ainsi que la prise de drogues illicites. L'invention concerne également l'utilisation de l'une des protéines telles que définies ci-dessus, pour la préparation de médicaments destinés au traitement de pathologies comme les infections virales, en particulier causées par le VIH1 ou le VIH2, et de toutes pathologies faisant intervenir une réponse inflammatoire. Les médicaments peuvent se trouver notamment sous la forme de comprimés simples ou dragéifiés, de comprimés sublingaux, de gélules, d'ampoules buvables et injectables ou d'aérosols. Les doses de médicaments sont comprises entre 0, 1 à 500 mg par patient pour un traitement en une ou plusieurs prises par 24 heures selon la forme galénique utilisée. DESCRIPTION DES FIGURES Les Figures lA, lB et 1C concernent la production et la purification des protéines MGOP et MGOP-his à partir des cellules SF9 et S2. La Figure lA représente les immunoempreintes réalisées avec des anticorps antiMGOP ou anti-histidine sur des extraits protéiques (80 Ilg) de cellules SF9 (partie droite de la Figure lA) et S2 (partie gauche de la Figure lA). Dans la partie gauche de la Figure lA, la colonne NI concerne les cellules S2 transfectées non induites alors que la colonne 1 concerne les cellules S2 transfectées induites. La Figure 1B représente l'immunoempreinte réalisée avec l'anticorps anti-MGOP sur les fractions éluées de la résine de Nickel. La colonne W3 correspond au troisième lavage de la résine de nickel avec 2 ml de la solution contenant 20 mM d'imidazole, 150 mM de NaCl et 20 mM de TrisHCl pH 8,0. Les colonnes El, E2, E3 et E4 correspondent aux fractions d'élution 1, 2,3 et 4 avec la solution contenant 250 mM d'imidazole, 150 mM de NaCl et 20 mM de TrisHCI pH 8,0. La Figure 1C représente l'immunoempreinte réalisée avec l'anticorps anti-MGOP sur les fractions éluées sur la colonne d'immunoaffinité. La colonne W5 correspond au cinquième lavage de la colonne d'immunoaffinité avec 2 ml de PBS. Les colonnes El, E2, E3, E4, E5 et E6 correspondent aux fractions d'élution 1, 2, 3,4, 5 et 6 obtenues après l'addition d'un ml de la solution CAPS (acide [3- cyclohexylamino]-l-propanesulfonique, Sigma) 50 mM pH 11, 5. 1 Les Figures 2A et 2B représentent les résultats concernant le test de chimiotactisme sur les cellules MonoMac6 (MM6), c'est-à-dire la migration des cellules MM6 exprimée en cpm mises en présence de différentes protéines, dont la protéine MGOP. La Figure 2A représente les résultats concernant l'effet dose/réponse de la protéine MGOP et la Figure 2B représente les résultats des tests des contrôles négatifs. La colonne Cont correspond au contrôle, c'est-à-dire à la migration des cellules en l'absence de chimiokines. MCP-l (Monocyte chemoattractant protein) est une protéine chimioattractante pour les monocytes et est utilisée ici comme contrôle positif. La colonne PI 7 correspond à la protéine AROM PI 7 (Borsu et al., 2000) et la colonne SF9 NI correspond aux cellules SF9 non infectées. La Figure 3 représente les résultats concernant le test de chimiotactisme sur les cellules Jurkat, c'est-à-dire la migration des cellules Jurkat en cpm mises en présence de différents types cellulaires. La colonne Cont correspond au contrôle. SDF-1 (stromal cell-derived factor) (Vila-Coro et al., 1999) est utilisé ici comme contrôle positif. La colonne P17 correspond à la protéine AROM P17 (Borsu et al., 2000) et la colonne SF9 NI correspond aux cellules SF9 non infectées. MATERIELS ET METHODS PRODUCTION DE PROTEINES RECOMBINANTES Ce protocole concernant la production de protéines recombinantes a été mise en oeuvre à la fois pour la protéine humaine et la protéine de souris. 1) Lignées cellulaires eucaryotes et systèmes bactériens : Deux systèmes d'expression de cellules eucaryotes (lignées cellulaires établies d'insectes) ont été choisis afin de produire une protéine recombinante MGOP. Le premier système d'expression repose sur la transfection stable d'une lignée issue de drosophiles : la lignée S2, avec un plasmide recombinant (Schneider, 1972). La deuxième lignée cellulaire utilisée est la lignée SF9, issue de papillon. Il s'agit d'un système d'infection transitoire avec un baculovirus recombinant (Kidd and Emery, 1993). La lignée S2 est cultivée dans du milieu DES (Quiagen) et la lignée SF9 dans du milieu TC100 (Gibco BRL), complétés avec 10% de sérum de veau foetal et un cocktail d'antibiotiques. Les deux lignées sont cultivées à 27 C sans ajout de CO2. La protéine MGOP recombinante a également été produite dans la bactérie Escherichia Coli, en insérant les séquences codantes de MGOP dans des plasmides d'expression procaryote comportant des promoteurs de type T7 ou lac. 2) Constructions plasmidiques : Deux ADNc de MGOP ont été sous-clonés au niveau du site de polyclonage des plasmides pVL 1393 (Pharmingen) et des plasmides de type pMTV-5/histidine (Invitrogen), dont un appelé pS2 néo. Dans un premier temps, un ADNc codant pour une protéine MGOP dite "classique", sans addition de séquence"tag", est introduit aux sites Eco RJ/Bam HI du plasmide pVL 1393 (pVL-MGOP). Dans un deuxième temps, un ADNc codant pour une protéine munie d'un motif 6 histidines dans sa partie carboxy-terminale est introduit aux sites Eco Rl/Bam HI du plasmide pVL 1393 (pVL-MGOP-his) et au site Eco RI du plasmide pS2 néo (pS2MGOP-his). Dans un troisième temps, un ADNc codant pour la protéine MGOP est introduit aux sites NdeI/Xho du plasmide pET24a (Novagen) et aux sites BamHI/EcoRI du plasmide pGEX-3X (Amersham Pharmacia Biotech). Les constructions obtenues permettent de faire exprimer la protéine MGOP en fusion avec la protéine GST (glutathione S transférase) (plasmide pGEX-3X) ou avec un peptide composé de 6 histidines (plasmide pET24a). Les différents ADNc ont été obtenus par la technique de PCR avec des amorces (indiquées dans le tableau ci-dessous) contenant les sites de restriction enzymatiques. Séquences nucléotidiques de Séquences nucléotidiques Amorces d'amplification souris d'homme MGOP (3'BamHl) TTGGATCCATGGCAAAGAT TTGGATCCATGGCAAAA GACTCTC ATGAATCTC CCCGAATTCCTCGTTTGGCT CCCGAATTCCTCGTTTGA MGOP2 (3'EcoRl) TTATGCAAGCATCAAACTA CTGTATGCAAACATCAA AGG ACTAAGG GAATTCTTATTAGTGATGGT GAATTCTTATTAGTGATG MGOP3 (5'EcoRl) GATGGTGATGTAGCAACAT GTGATGGTGATGTAGTA CAAGGGCTTTTC GCAGTATGGGCTTCTC 3) Transfection de la lignée S2 : Les cellules S2 (4. 106 cellules) ont été transfectées avec 1 ug du plasmide pS2MGOP-his, par la technique au phosphate de calcium (kit Ca Maximaser Clontech). Le plasmide pS2 néo possède un gène de résistance à la généticine, permettant ainsi la sélection de cellules transfectées stables après addition de 1, 5 mg/ml de généticine dans le milieu de culture pendant 3 semaines. Le vecteur pS2 contient aussi un promoteur inductible, issu du gène de la métallothionéine. L'expression de la protéine est donc induite par 0,5 mM de sulfate de cuivre, pendant 3 jours. 4) Infection des cellules SF9 : Le système d'expression de la protéine recombinante par les cellules SF9 est basé sur l'infection de ces cellules par un baculovirus ayant subi une recombinaison homologue avec le plasmide d'intérêt (pVL 1393). Dans un premier temps, le plasmide pVL-MGOP ou pVL-MGOP-6his a été mis en présence du génome viral, autorisant une recombinaison homologue entre les deux séquences génomiques. Puis les cellules SF9 ont été infectées avec le virus recombinant pendant 48 heures. Les extraits cellulaires ont été testés par immunoempreinte. Le surnageant issu de cette première infection a été récupéré afin de procéder à d'autres infections. 5) Transformation des bactéries Escherichia Coli : Des bactéries E. Coli (souche BL21 ou BL21 DE3) transformées avec les plasmides pGEX-3X ou pET24a recombinants sont cultivées en milieu TB (terrifie broth). L'expression de MGOP est induite par ajout d'IPTG (isopropyl-thio-ss-D- galactoside). METHODES DE PURIFICATION Afin d'isoler la protéine recombinante MGOP humaine et de souris, deux méthodes de purification ont été utilisées, fondées sur l'affinité des motifs 6 histidine pour le nickel ou sur l'affinité de la protéine MGOP pour l'anticorps KM 125 (cet anticorps polyclonal est dirigé contre la partie carboxy-tenninale de la protéine MGOP (Néosystème)). A) Préparation des cellules eucaryotes : 1) Résine Ni-NTA : La purification sur résine Ni-NTA (Quiagen) a été faite dans les conditions décrites ci-dessous. Les cellules exprimant la protéine MGOP/his ont d'abord été traitées aux ultrasons dans un tampon contenant 20 mM d'imidazole, 150 mM de NaCl et un cocktail d'inhibiteurs de protéases. Après centrifugation à 14000 tpm pendant 5 minutes à 4 cl, les protéines du surnageant ont été incubées en présence de la résine pendant 3 heures, à 4 C (1 ml de résine pour 10 mg d'extrait protéique). Après 3 lavages de la résine avec le tampon de reprise (composition ci-dessus), les protéines retenues ont été éluées avec un tampon contenant 250 mM d'imidazole et 150 mM de NaCl. Une compétition s'est effectuée entre les groupements 6 histidine et l'imidazole. 2) Immunoaffinité : La chromatographie d'immunoaffinité repose sur la reconnaissance antigène/anticorps. L'anticorps KM 125 a été couplé une nuit à 4 C à de la sépharose activée au bromure de cyanogène (Sigma) ; 1,5 mg d'anticorps purifié a été couplé de façon covalente à 0,3 g de sépharose. Les cellules ont été traitées aux ultrasons pendant 20 secondes dans une solution de PBS/inhibiteurs de protéases, puis centrifugées 5 minutes à 14000 tpm, à 4 C, les protéines du surnageant ont ensuite été chargées sur la colonne par 3 fois (10 mg de protéines par ml de colonne). Après 5 lavages avec 2 ml de PBS, les protéines fixées sur la colonne ont été éluées par un changement de pH, avec 10 ml de tampon CAPS 50 mM pH 11, 5 (acide [3-cyclohexylamino]-l-propanesulfonique, Sigma). Les différentes fractions de 1 ml récupérées ont été immédiatement neutralisées avec 200 ici de tampon phosphate pH 6, 2. Les différentes fractions d'élution obtenues ont ensuite été analysées par immunoempreinte. B) Préparation de corps d'inclusion bactériens : Les culots bactériens ont été traités aux ultrasons pendant 2 minutes dans une solution de PBS contenant 5 mM d'EDTA, 1% de Triton X100 et 1% de sodium deoxycholate. Après centrifugation (à plus de 7000g pendant 10 minutes), le culot a été à son tour traité aux ultrasons dans la solution PBS/EDTA/Triton XlOO/Sodium deoxycholate. Après trois lavages successifs du culot, le matériel insoluble résiduel (composé à plus de 90% de protéine MGOP recombinante) est dissout dans une solution de chlorhydrate de guanidine (3 à 6 mole/1). La solution obtenue est ensuite dialysée contre du PBS afin d'éliminer le chlorhydrate de guanidine. Il est également possible de purifier les protéines MGOP recombinantes par chromatographie d'affinité sur une colonne de résine Ni-NTA (protéine de fusion MGOP-6xHis) ou sur une colonne de Glutathione sepharose (protéine de fusion GSTMGOP). EXPERIENCES DE CHIMIOTACTISME Ces expériences ont été menées sur des protéines MGOP humaines et sur des protéines MGOP de souris. 1) Lignées cellulaires : L'effet chimioattractant de la protéine MGOP a été testé par des expériences in vitro de chimiotactisme en utilisant deux lignées cellulaires : - une lignée monocytaire de type MonoMac6 (German Collection of Microorganism and Cell Cultures), et - une lignée lymphocytaire de type Jurkat (laboratoire du Professeur Auberger, INSERM, U 526 ; Référence Cellule Jurkat : Clone E6-1 (ATCC TIB 152)). Les deux lignées ont été cultivées dans le milieu RPMI 1640 (Gibco-BRL) en présence de 10% de sérum de veau foetal (SVF) (Gibco-BRL), 2mM de L-glutamin (Sigma), 100 unités/ml de pénicilline et 100 ug/ml de streptomycine (Gibco-BRL). Les cellules ont été maintenues en atmosphère humide à 37 C et sous 5% de CO2. 2) Migration cellulaire : Les expériences de migration cellulaire ont été effectuées dans le laboratoire du Dr. B. Rossi (INSERM, U 364). On a utilisé des chambres de Boyden, séparées par une membrane semi perméable ayant des pores de 8 um de diamètre et recouverte de fibronectine humaine (6, 5).. lg/ml). Les cellules ont été cultivées 12 heures en présence de thymidine tritiée (2 lCi/ml, ICN) dans le milieu de culture puis lavées 3 fois en milieu RPMI et resuspendues dans ce même milieu, à une concentration de 0,5. 10 cellules/ml. Ces cellules ont été disposées dans la chambre supérieure (volume de 100 ul) et la substance chimioattractante a été ajoutée dans la chambre inférieure afin de créer un gradient chimique (volume de 450 Ill). Les chambres ont alors été mises à incuber pendant 4 heures en atmosphère humide à 37 C et sous 5% de CO2. La réaction a été arrêtée lorsque l'on enlève la chambre supérieure. Les cellules ayant migré dans la chambre inférieure ont été récupérées et comptées dans un compteur à scintillation liquide (Packard). EFFETS DE L'ANTICORPS MGOP SUR LA SECRETION DE SOMATOSTATINE Les expériences suivantes concernent l'action de l'anti-MGOP (KM125) sur la sécrétion de la somatostatine (SRIF) dans des cultures hypothalamiques. 1) Cultures cellulaires : Des cultures cellulaires dissociées provenant des surfaces hypothalamiques arquées ou périventriculaires ont été initiées à partir de foetus de rat âgés de 17 jours (Loudes et al., 1997). On a prélevé un côté frontal du cerveau contenant l'hypothalamus qui ensuite a été disséqué en deux fragments : un fragment ventro-caudal, découpé transversalement au niveau de l'éminence médiane et contenant le noyau arqué et un mince segment dorsal, adjacent au troisième ventricule contenant la surface périventriculaire. Les fragments de tissu ont été dissociés de manière mécanique, mis en culture sur des plaques enduites de gélatine et de poly-L-lysine et cultivées dans un milieu défini tel que précédemment (Faivre-Bauman et al., 1984). On a ajouté de l'arabinoside de cytosine (1 u. M, Sigma, Saint-Quentin Fallavier, France) 4 divisions cellulaires (DIV) plus loin afin de bloquer la prolifération des cellules gliales. L'anticorps MGOP (1 : 250, sauf indication contraire) a été ajouté sur les plaques de culture au moment de la mise en culture et au jour 4 au moment du renouvellement du milieu. Pour tester l'effet de différentes doses d'anticorps, on a utilisé des concentrations en anticorps allant de 1 : 250 à 1 : 5000. 2) Contenu des cellules en somatostatine et milieux de culture : L'accumulation spontanée de somatostatine dans les milieux de culture a été quantifiée après un traitement par l'anticorps MGOP à 4 et 7 DIV. Les milieux de culture acidifiés lyophilisés et les extraits cellulaires ont été testés par radioimmunodosage en trois exemplaires comme décrit dans la référence Grouselle et al. (1998), en utilisant de l'antisérum NO L2044. RESULTATS PRODUCTION ET PURIFICATION DE LA PROTEINE MGOP 1) Systèmes d'expression : La protéine MGOP a été produite dans deux lignées cellulaires d'insectes, après transfection stable dans une lignée S2 issue de drosophile et après expression transitoire dans une lignée SF9 issue de papillon. Deux protéines recombinantes ont été fabriquées : une protéine MGOP munie d'un motif 6 histidines dans sa partie carboxyterminale (MGOP/6 his), exprimée dans les cellules S2 et SF9, et une protéine recombinante MGOP dite"classique", exprimée dans les cellules SF9. Les extraits cellulaires obtenus ont été analysés par immunoempreinte. Les résultats présentés dans la Figure lA montrent qu'une protéine de 15 kDa est majoritairement produite dans les cellules SF9 exprimant la protéine MGOP recombinante"classique". La différence de poids moléculaire entre la protéine exprimée dans l'hypothalamus (11 kDa) et la protéine produite dans les cellules SF9 (15 kDa) peut s'expliquer par des modifications post-traductionnelles. La protéine MGOP-his, exprimée dans les cellules S2 et SF9, apparaît à un poids moléculaire légèrement plus grand (20 kDa), le motif 6 histidines modifiant la migration de ces protéines (Figures lA et 1B). Une bande minoritaire correspondant à une protéine de 15 kDa est visible dans les conditions maximales d'expression (Figure lA). Les quantités de protéines MGOP obtenues étant supérieures dans le système d'expression SF9, on a procédé à la purification de la protéine recombinante à partir de ce système d'expression. 2) Techniques de purification : On a tout d'abord effectué mie purification de la protéine MGOP-6his sur résine de nickel (Ni-NTA, Quiagen), la Figure 1B montre le profil d'élution obtenu après purification. La protéine, retenue sur la résine Ni-NTA, est éluée dans les fractions El et E2. Afin d'obtenir une protéine MGOP sans motif 6 histidines, on a ensuite effectué une purification par immunoaffinité de la protéine classique. Le profil d'élution est représenté dans la Figure 1C, les protéines retenues sur la colonne sont principalement éluées dans les fractions E2, E3 et E4. Le séquençage partiel de la protéine MGOP"classique"produite dans les cellules SF9 a permis de confirmer le résultat obtenu en immunoempreinte. Le pourcentage de la protéine MGOP dans la fraction E2 étant supérieur à 70%, on a pu utiliser l'extrait purifié pour étudier la fonction de la protéine MGOP. TESTS FONCTIONNELS A) EFFET CHIMIOKINE Les analyses structurales ont révélé l'existence d'un motif CX3C dans la partie carboxy-terminale de la protéine MGOP. Ce motif présente des homologies de structure avec la fractalkine ou neurotactine qui appartient à une sous-classe de protéines de la famille des chimiokines (Bazan et al., 1997 ; Pan et al., 1997). Des études préliminaires sur l'effet chimioattractant de la protéine MGOP ont déjà été effectuées à partir d'extraits SF9 partiellement purifiés sur colonnes sep-pack Cl8 (Waters). Cette purification relative sur Sep Pak comprend au préalable une étape d'extraction en milieu acide. Cette étape consiste à traiter aux ultrasons les hypothalamus ou des cellules en culture dans une solution d'acide chlorhydrique 0,12 N, à incuber à 100OC pendant 10 minutes pour inactiver les protéases, à centrifuger à 14000 tpm pendant 10 minutes puis à récupérer le surnageant et à se placer à 0, 1% de TFA. Pour la séparation sur Sep Pak, on utilise une cartouche C18 Sep Pack (WATERS). Après avoir rincé la cartouche avec un mélange eau/TFA 0,1%, on passe l'extrait acide trois fois sur la colonne puis on rince de nouveau avec le mélange eau/TFA. On élue ensuite avec 10 ml d'une solution d'acétonitrile 60%/TFA 0, 1% puis les protéines sont lyophilisées, réhydratées et dosées. Les premiers résultats avaient montré un effet chimioattractant de ces extraits sur les polynucléaires neutrophiles (PNN) humains. Afin de compléter ces résultats et de valider l'effet chimioattractant de la protéine MGOP, les propriétés chimiotactiques de la protéine purifiée par chromatographie d'immunoaffinité ont été testées sur d'autres types cellulaires activés par la fractalkine. Une première série d'expériences de chimiotactisme (migration cellulaire) a été ainsi effectuée avec des lignées monocytaires et lymphocytaires. 1) Migration des cellules MonoMac6 : Dans un premier temps, on s'est intéressé à l'effet de la protéine MGOP sur les cellules d'une lignée monocytaire, les cellules MonoMac6. Les résultats présentés dans la figure 2A montrent que la protéine MGOP est capable d'induire la migration de ces cellules, de manière dose-dépendante, avec un EC 50 estimé à 7 nM. L'effet chimioattractant est comparable à l'effet constaté avec le MCP-l (Monocyte chemoattractant protein) pris comme contrôle positif (Gu et al., 1999). Ces résultats ont été reproduits dans trois séries d'expériences indépendantes. Ensuite, la spécificité de l'effet observé a été vérifiée en réalisant une série de contrôles. Dans un premier temps, on a testé un extrait cellulaire issu des cellules SF9 non infectées (SF9 NI), puis on a utilisé un extrait cellulaire de cellules infectées avec un baculovirus recombinant pour une autre protéine ne présentant aucune homologie de séquence avec la protéine MGOP : la protéine AROM P17 (P17). Les deux extraits ont été traités dans les mêmes conditions. Il apparaît clairement que les deux extraits (SF9 NI et PI 7) ne possèdent aucune propriété chimioattractive vis-à-vis des MonoMac6 (figure 2B), validant ainsi les résultats obtenus avec la protéine MGOP. 2) Migration des cellules Jurkat : Dans un deuxième temps, on s'est intéressé à l'effet de la protéine MGOP sur la migration des cellules Jurkat, pris comme modèle de lignée lymphocytaire. La figure 3 regroupe les résultats obtenus. La protéine MGOP ne stimule pas la migration des cellules Jurkat, alors que le SDF-1 (stromal cell-derived factor) induit une réponse comme attendue (Vila-Coro et al., 1999). Il semble donc exister une certaine sélectivité de l'effet de la protéine MGOP en fonction du type cellulaire étudié. B) EFFET DE L'ANTI-MGOP SUR LA SECRETION DE SRIF L'ensemble des résultats, à savoir quatre expériences indépendantes, démontre une forte augmentation de la sécrétion de SRIF dans les cultures neuronales du noyau périventriculaire (PeVN) ou du noyau arqué (ARC) incubées en présence de doses allant de 1/250 à 1/500 (PeVN) ou 1/250 à 1/2000 (ARC) d'anticorps MGOP. DISTRIBUTION DE MGOP MURIN DANS LE CERVEAU DE SOURIS La répartition et l'expression relative de l'ARN messager de la MCH et du MGOP dans le cerveau de souris a été étudié par transfert d'ARN, par amplification en chaîne par polymérase avec de la transcriptase reverse (RT-PCR) et par hybridation in situ. Les transcrits du gène MGOP ont été principalement détectés dans l'hypothalamus seulement par RT-PCR. De plus, différents antisérums ont été dirigés contre l'extrémité C-terminale du MGOP et utilisés pour identifier les produits de traduction. Dans le cerveau de souris, aucun peptide transformé de MGOP n'a pu être détecté par RPHPLC couplée à de l'analyse RIA spécifique. Dans l'hypothalamus de souris, une protéine spécifique de 12 kDa a été identifiée par transfert de protéine. Finalement, la distribution de l'immunoréactivité de MGOP (IR) a été étudiée dans le cerveau de souris. Des études de co-localisation ont démontré que 98% des corps neuronaux exprimant le MGOP synthétisait également la MCH. De plus, de nombreux neurones fortement colorés contenant du MGOP sont rencontrés dans le noyau périventriculaire hypothalamique (PeVN). Des corps neuronaux marqués avec de l'antisérum MGOP ont également été trouvés dans le cortex, le caudate putamen, les noyaux amigdaliens et le noyau central du septum. La MCH n'a pas été détectée dans ces neurones contenant du MGOP. De manière surprenante, une coloration dense des terminaux a été observée avec l'antisérum MGOP mais pas avec les anticorps MCH dans les noyaux suprachiasmatique (SCN), ventromedian (VMH) et arqué (ARC) et également dans l'éminence médiane externe. Ces résultats démontrent que les immunoréactivités MGOP et MCH se recouvrent dans la zone LHA/ZI mais se répartissent différemment dans d'autres régions. CONCLUSION Cette nouvelle chimiokine est produite dans les neurones du cerveau de souris. S'appuyant sur sa distribution cérébrale, MGOP peut agir comme une nouvelle protéine sécrétée pour réguler de nombreuses fonctions neuroendocriniennes telles que la reproduction, l'allaitement, l'alimentation et le contrôle de la croissance et dans les comportements associés. En ce qui concerne la protéine humaine MGOP, on a étudié sa colocalisation dans l'hypothalamus. Ces études ont démontré que la quasi-totalité des neurones à MCH dans l'hypothalamus latéral contenait aussi la protéine MGOP humaine. REFERENCES - Baker B. (1994) Melanin-concentrating HormoneUpdated. Trends Endocrinol Metab, 5, 120-126, - Bazan et al. (1997) A new class of membrane-bound chemokine with a CX3C motif, Nature, 385,640-644, - Bear et al. (1997) Neurosciences, Ed. Pradel, - Bittencourt et al. (1992) The melanin-concentrating hormone system of the rat brain : an immuno-and hybridization histochemical characterization, J. Comp. Neurol., 319,218-245, - Bolander F. F. (1989) Molecular Endocrinology, Academic Press Inc., - Borsu et al. (2000) J. Biol. Chem., 275, in press, - Faivre-Bauman et al. (1984) Differentiated mouse foetal hypothalami cells in serum-free medium ; in Barnes et al., Methods for Serum-free culture of Neuronal and Lymphoid cells. New York, A. Liss, pages 37-56 ; - Grouselle et al. (1998) Loss of somatostatin-like immunoreactivity in the frontal cortex of Alzheimer patients carrying the apolipoprotein epsilon 4 allele, Neurosci lett, 255,21-24, - Gu et al. (1999) Monocyte chemoattractant protein-1, Chem Immunol, 72,7- 29, - Horuk (1998) Nature, 393,524-525, - Kawauchi et al. (1983) Characterization of melanin-concentrating hormone in chum salmon pituitaries, Nature, 305,321-323, - Loudes et al. (1997) polysialylated neural cell adhesion is involved in targetinduced morphological differentiation of arcuate dopaminergic neurons, Eur JNeurosci, 9,2323-2333, - Murray et al. (2000) Melanin-concentrating hormone, melanocortin receptors and regulation ofluteinizing hormone release, JNeuroendocrinol, 12,217-223, - Nahon J. L. (1994) The melanin-concentrating hormone : from the peptide to the gene, Crit Rev Neurobiol, 8,221-262, - Nahon et al. (1989) The rat melanin-concentrating hormone messenger ribonucleic acid encodes multiple putative neuropeptides coexpressed in the dorsolateral hypothalamus, Endocrinology, 125,2056-2065, - Pan et al. (1997) Neurotactin, a membrane-anchored chemokine upregulated in brain inflammation, Nature, 387, 611-617, - Parkes et al. (1992) Secretion of melanin-concentrating hormone and neuropeptide-El from cultured rat hypothalami cells, Endocrinology, 131,1826-1831, - Presse et al. (1992) Rat melanin-concentrating hormone messenger ribonucleic acid expression : marked changes during development and after stress and glucocorticoid stimuli, Endocrinology, 131,1241-1250, - Rosenfëld et al. (1983) Production of a novel neuropeptide encoded by the calcitonin gene via tissue-specific RNA processing, Nature, 304,129-135, - Schneider I. (1972) Cell lines derived from late embryonic stages of Drosophila melanogaster, JEmbryol Exp Morpho/, 27,353-365, - Toumaniantz et al. (1996) The rat melanin-concentrating hormone gene encodes an additional putative protein in a different reading frame, Endocrinology, 137, 4518-4521, - Vaughan et al. (1989) Characterization of melanin-concentrating hormone from rat hypothalamus, Endocrinology, 125,1660-1665, - Vila-Coro et al. (1999) The chemokine SDF-1 alpha triggers CXCR4 receptor dimerization and activates the JAK/STAT pathway, Faseb J, 13, 1699-1710, - Ward et Westwick (1998) Biochem. J., 333,457-470, REVENDICATIONS 1. Protéine caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence SEQ ID NO : 2, - ou toute séquence dérivée de la séquence SEQ ID NO : 2, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 42, - toute séquence homologue de la séquence SEQ ID NO : 2, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 72% avec la séquence SEQ ID NO : 2 et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 42, - ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve qu'il présente un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 10 acides aminés contigus dans la séquence SEQ ID NO : 2, sous réserve qu'il soit différent du fragment ayant la séquence SEQ ID NO : 44. 2. Protéine selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend ou est constituée par : - la séquence SEQ ID NO : 22, - ou toute séquence dérivée de la séquence SEQ ID NO : 22, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - toute séquence homologue de la séquence SEQ ID NO : 22, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec la séquence SEQ ID NO : 22 et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - ou tout fragment d'une des séquences définies ci-dessus, sous réserve qu'il présente un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, notamment tout fragment étant constitué d'au moins environ 10 acides aminés contigus dans la séquence SEQ ID NO : 22. 3. Fragment de protéine selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend ou est constitué par : - les séquences SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18 et SEQ ID NO : 20, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18 et SEQ ID NO : 20, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18 et SEQ ID NO : 20, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 72% avec lesdites séquences et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien. 4. Fragment de protéine selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'il comprend ou est constitué par : - les séquences SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38etSEQIDNO : 40, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 et SEQ ID NO : 40, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 et SEQ ID NO : 40, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec lesdites séquences et présentant un effet chimiokine et/ou neurotransmetteur/neuromodulateur et/ou endocrinien. 5. Protéine ou fragment de protéine selon l'une des revendications 1 à 4 se présentant sous la forme de multimères, notamment de dimères. 6. Séquence d'ARN messager codant pour une protéine selon l'une des revendications 1 à 5. 7. Séquence nucléotidique codant pour une protéine telle que définie dans l'une des revendications 1 à 4. 8. Séquence d'ADN qui comprend ou est constituée par : - soit la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 1, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, par dégénérescence du code génétique, de la séquence SEQ ID N0 : 1 codant pour une protéine représentée par SEQ ID NO : 2, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 41, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, de la séquence SEQ ID NO : 1 codant pour une protéine dérivée de SEQ ID NO : 2, telle que définie dans la revendication 1, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 41, - ou toute séquence nucléotidique homologue de SEQ ID NO : 1, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 81%, avec la séquence SEQ ID NO : 1 codant pour une protéine homologue de SEQ ID NO : 2, telle que définie dans la revendication 1, sous réserve qu'elle soit différente de la séquence SEQ ID NO : 41, - ou tout fragment de la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 1 ou des séquences nucléotidiques définies ci-dessus, ledit fragment étant de préférence constitué d'au moins environ 30 nucléotides contigus dans ladite séquence, sous réserve qu'il soit différent du fragment ayant la séquence SEQ ID NO : 43, - ou toute séquence nucléotidique complémentaire des séquences ou fragments susmentionnés, - ou toute séquence nucléotidique susceptible d'hybrider dans des conditions stringentes avec la séquence complémentaire d'une des séquences ou d'un des fragments susmentionnés. 9. Séquence d'ADN, selon la revendication 8, qui comprend ou est constituée par : - soit la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 21, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, par dégénérescence du code génétique, de la séquence SEQ ID NO : 21 codant pour une protéine représentée par SEQ ID NO : 22, - ou toute séquence nucléotidique dérivée, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, de la séquence SEQ ID NO : 21 codant pour une protéine dérivée de SEQ ID NO : 22, telle que définie dans la revendication l, - ou toute séquence nucléotidique homologue de SEQ ID NO : 21, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec la séquence SEQ ID NO : 21 codant pour une protéine homologue de SEQ ID NO : 22, telle que définie dans la revendication 1, - ou tout fragment de la séquence nucléotidique SEQ ID NO : 21 ou des séquences nucléotidiques définies ci-dessus, ledit fragment étant de préférence constitué d'au moins environ 30 nucléotides contigus dans ladite séquence, - ou toute séquence nucléotidique complémentaire des séquences ou fragments susmentionnés, - ou toute séquence nucléotidique susceptible d'hybrider dans des conditions stringentes avec la séquence complémentaire d'une des séquences ou d'un des fragments susmentionnés. 10. Fragment d'acide nucléique, selon la revendication 8, codant pour un fragment de protéine ayant la séquence SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 18, SEQ ID NO : 20, SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 26, SEQ ID NO : 28, SEQ ID NO : 30, SEQ ID NO : 32, SEQ ID NO : 34, SEQ ID NO : 36, SEQ ID NO : 38 ou SEQIDNO : 40. 11. Fragment d'acide nucléique, selon la revendication 8, qui comprend ou est constituée par : - les séquences SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 7, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 19, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 7, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 19, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 7, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 19, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 81% avec lesdites séquences. 12. Fragment d'acide nucléique, selon la revendication 9, qui comprend ou est constituée par : - les séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 25, SEQ ID NO : 27, SEQ ID NO : 29, SEQ ID NO : 31, SEQ ID NO : 33, SEQ ID NO : 35, SEQ ID NO : 37 et SEQ ID NO : 39, - ou toute séquence dérivée des séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 25, SEQ ID NO : 27, SEQ ID NO : 29, SEQ ID NO : 31, SEQ ID NO : 33, SEQ ID NO : 35, SEQ ID NO : 37 et SEQ ID NO : 39, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs nucléotides, - toute séquence homologue des séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 25, SEQ ID NO : 27, SEQ ID NO : 29, SEQ ID NO : 31, SEQ ID NO : 33, SEQ ID NO : 35, SEQ ID NO : 37 et SEQ ID NO : 39, ayant de préférence une homologie d'au moins environ 89% avec lesdites séquences. 13. Vecteur recombinant, notamment plasmide, cosmide, phage ou ADN de virus, contenant une séquence nucléotidique selon l'une des revendications 7 à 12. 14. Vecteur recombinant selon la revendication 13, contenant les éléments nécessaires à l'expression dans une cellule hôte des polypeptides codés par les acides nucléiques selon l'une des revendications 7 à 12, insérés dans ledit vecteur. 15. Cellule hôte, choisie notamment parmi les bactéries, les virus, les levures, les champignons, les plantes ou les cellules de mammifères, ladite cellule hôte étant transformée, notamment à l'aide d'un vecteur recombinant selon l'une des revendications 13 ou 14. 16. Oligonucléotides antisens ou ARN messager antisens dérivés des séquences nucléotidiques selon l'une des revendications 7 à 12. 17. Anticorps caractérisé en ce qu'il est dirigé de manière spécifique contre une protéine selon l'une des revendications 1 à 5. 18. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend une protéine ou un fragment de protéine selon l'une des revendications 1 à 5, en association avec un vecteur pharmaceutique acceptable. 19. Utilisation de l'une des protéines selon l'une des revendications 1 à 5, pour la préparation de médicaments destinés au traitement de maladies notamment liées au comportement alimentaire ou à l'altération de la croissance ou à la prise de drogues. 20. Utilisation de l'un des protéines selon l'une des revendications 1 à 5, pour la préparation de médicaments destinés au traitement de pathologies comme les infections virales, en particulier causées par le VIH1 ou le VIH2, et de toutes pathologies faisant intervenir une réponse inflammatoire.