FR 2773802 A1 19990723 FR 9800656 A 19980122 Polypeptide de fusion comprenant une acétylcholinesterase monomérique liee a un récepteur protéique et polynucléotide codant pour un tel polypeptide. Application à la détection de molécules ligand. La présente invention concerne un polypeptide de fusion comprenant un premier polypeptide constitué d'une acétylcholinestérase monomérique, lié de façon covalente à un second polypeptide constitué d'un récepteur protéique. L'invention a aussi pour objet un polynucléotide codant pour un tel polypeptide de fusion, un vecteur de clonage et/ou d'expression contenant un tel polynucléotide ainsi qu'un hôte cellulaire recombinant contenant un tel vecteur. L'invention vise également un procédé de détection d'une molécule ligand dans un échantillon à l'aide a'un polypeptide de fusion selon l'invention ainsi qu'une trousse de diagnostic pour la mise en oeuvre du procédé de détection selon l'invention. Dans la présente description, les termes acét.ylcholinestérase et AChE seront Indifferemment employés pour désigner cette enzyme. Depuis leur apparition il y a 20 ans, les techniques immunoen.zyrnatiques occupent une place prépondérante dans le domaine du dosage in vitro de nombreuses substances biologiques. L'utilisation d'un support solide favcrisant l'immobilisation de l'un des mmunoréactifs a révolutionné la reconnaissance fine d'un élément parfois peu représenté dans un échantillon biologique (Engvall et al., 1971 VanWeeman et al., 1971 ; Avraméas et al., 1971). Ces techniques sont aujourd'hui très largement mises en oeuvre dans de nombreux secteurs industri.el.s tels que notamment l'analyse des effluents industriels ou domestiques, l'analyse de la qualité de l'eau potable, de la qualité des produits agro-alimentaires et également en biologie clinique humaine ou vétérinaire dans des domaines aussi divers que l'hormonologie, les maladies auto-immunes, les marqueurs tumoraux ou les maladies infectieuses. Le dosage d'analytes dans un échantillon à tester se fait principalement au moyen de traceurs enzymatiques constitués d'un antigène, un haptène ou tout ou partie d'un anticorps lié, de façon covalente, à une enzyme dont l'activité catalytique est détectable. Afin de permettre un développement de tests fiables et reproductibles, une enzyme appropriée doit satisfaire les critères suivants - son activité spécifique doit être élevée pour des faibles concentrations de substrat et sa constante catalytique doit être également élevée - les produits résultant de l'activité catalytique de l'enzyme doivent pouvoir être détectés par spectro photométrie - cette enzyme doit avoir une bonne stabilité, quelle que soit la nature du milieu constituant l'échantillon à tester et doit ainsi rester biologiquement active dans une large gamme de conditions de pH, de force ionique et/ou de température - l'enzyme doit pouvoir être obtenue facilement, en grande quantité et à un coût réduit - le cas échéant, l'enzyme doit contenir des groupes réactifs libres par lesquels elle pourra être liée de manière covalente à d'autres protéines (haptènes, protéines) - elle doit être stable durant une conservation de longue durée - l'enzyme ne doit pas interagir de façon non spécifique avec une phase solide ou avec d'autres protéines - les substrats utilisés pour la détection colorimétrique doivent être stables, peu coûteux et les produits de réaction doivent pouvoir être détectés dans une large gamme de concentration. Aujourd'hui, quatre enzymes sont couramment utilisées comme constituants de traceurs enzymatiques 1) La peroxydase de raifort est l'enzyme la plus utilisée, du fait de ses caractéristiques avantageuses de cinétique enzymatique rapide et de ses limites de détection comprises entre 10-14 et 10-17 M. Cependant, cette enzyme est peu stable et son activité enzymatique est rapidement inhibée par les produits de réaction, ce qui limite le temps d'incubation de l'enzyme avec son substrat. Elle est aussi très sensible aux métaux et est facilement inactivée par certains milieux comme l'urine. Enfin, il peut y avoir une interférence avec des peroxydases présentes dans l'échantillon à doser. 2) La phosphatase alcaline possède une activité spécifique élevée et le substrat colorimétrique le plus souvent utilisé (le p-nitrophenylphosphate) est stable et la réaction colorée se développe lentement. Cependant, la phosphatase alcaline est une enzyme coûteuse. Par ailleurs, l'existence de phosphatases endogènes dans l'échantillon peut donner lieu à des réactions faussement positives. 3) La beta-galactosidase est une enzyme tétramérique stable mais de poids moléculaire élevé (465 kDa) et peu utilisée dans des tests immunoenzymatiques. 4) L'acétylcholinestérase (AChE) de gymnote (Electrophorus electricus) est une enzyme tétramérique soluble de haut poids moléculaire (240 kDa) possédant une constante catalytique plus élevée que les trois enzymes précédemment décrites et ayant un seuil de détection très faible de l'ordre de 10-18 M. Parmi les substrats utilisés, contenant des groupes SH libres, on préfère généralement l'acétylthiocholine en présence d'acide 5,5'-dithio-bis(2-nitrobenzoique) . Ce substrat permet le développement d'une réaction colorée dont le signal augmente de façon linéaire pendant plusieurs heures, sans nécessiter un arrêt de la réaction. L'acétylcholinestérase de gymnote a été utilisée dans le développement de tests de type ELISA pour la détection et la quantification de substances variées en phase homogène ou hétérogène (Grassi et al., 1989 ; Pradelles et al., 1989 ; Creminon et al. 1993 ; Volland et al., 1994 ; Grassi et al., 1996, Brevet européen nO 0 139 552 au nom du Commissariat à l'Energie Atomique, France). Des tests mettant en oeuvre l'AChE peuvent ainsi être adaptés à la concentration de la substance à rechercher dans un échantillon, sans nécessiter la répétition du test, simplement en déterminant les temps de réaction pour lesquels une lecture colorimétrique sera effectuée. De fortes concentrations de la substance recherchée seront détectées rapidement après quelques minutes de réaction enzymatique, alors que de faibles concentrations de cette substance pourront être détectées pour des temps d'incubation plus longs pouvant aller jusqu'à 24 h ou 48 h. Bien que représentant une enzyme réunissant de nombreuses caractéristiques de l'enzyme idéale décrite ciavant, l'AChE de gymnote présente des inconvénients qui n'ont jamais été surmontés jusqu'à présent. Tout d'abord, l'AChE de gymnote est obtenue par purification protéique à partir de l'organisme naturel, ce qui représente une méthode longue et coûteuse et qui, de surcroît, ne peut garantir la production d'une protéine oui serait purifiée à homogénéité et qui serait, en outre, dépourvue de produits contaminants non apparentés susceptibles de, gêner l'activité enzymatique ou d'interférer avec le test de détection dans lequel elle est mise en oeuvre. En particulier, les techniques de purification de l'AChE nécessitent l'utilisation de détergents, tels que le Triton X-100 ou le Brj-.96, ou encore de protéases, ce qui conduit à des préparations contenant une partie de la protéine solubilisée ayant une conformation aitérée ou étant partiellement protéolysée. En second lieu, il est difficile d'obtenir une enzyme monomérique et enzymatiquement active à partir de l'AChE de gymnote, qui est naturellement tétramérique. De plus, la structure de l'AChE de gymnote, ainsi que la plupart des autres AChE multimériques décrites jusqu'à présent, contient un segment T du côté C-terminal. La structure du peptide T est bien conservée parmi les AChE, sa longueur est de 40 acides aminés, avec une succession d'acides aminés aromatiques. La nature de la séquence peptidique T , l'espacement des acides aminés aromatiques ainsi que le fait que les acides aminés aromatiques se superposent sur un côté de l'hélice, indiquent une organisation structurale sous forme d'une hélice alpha amphiphile, pouvant être associée avec des protéines structurales dépourvues d'activité enzymatique, ce qui rend ces protéines, peu ou pas du tout solubles en solution. De plus, l-'AChE de gymnote, ainsi que la plupart des autres formes moléculaires de l'AChE, exceptée l'AChE de venin de serpent, est associée aux membranes biologiques et à d'autres structures cellulaires ou peri-cellulaires (par exemple, membranes basales) de sorte qu'un traitement à haute force ionique ou en présence de détergent est nécessaire pour solubiliser cette enzyme. En outre, la présentation de l'AChE de gymnote sous forme tétramérique, et en conséquence le haut poids moléculaire de cette protéine (240 kDa) , conduit à l'obtention de conjugués utilisables en diagnostic d'un poids moléculaire d'au moins 300 kDa, possédant un faible coefficient de diffusion dans l'échantillon à tester et donc une cinétique de réaction assez lente. Afin de remédier aux inconvénients des enzymes constitutives des traceurs enzymatiques de l'art antérieur, les inventeurs ont cherché à réaliser des traceurs enzymatiques incorporant une forme d'acétylcholinestérase, catalytiquement active, dont l'activité catalytique est du même ordre de grandeur que celle de l'acétylcholinestérase de gymnote. précédemment décrite, qui est présentée sous une forme de monomère soluble en solution, de manière à favoriser l'obtention d'une cinétique de réaction élevée. Plus particulièrement, les inventeurs se sont attachés à mettre au point un traceur enzymatique réunissant à la fois des caractéristiques d'activité spécifique et de constante catalytique élevées, qui soit stable longtemps, qui puisse être obtenu facilement, en grande quantité et à un coût réduit, qui soit capable de modifier des substrats stables, peu coûteux et dont les produits de la réaction enzymatique sont détectés dans une large gamme de concentration. Pour atteindre ce but, les inventeurs ont construit un polypeptide de fusion entre une acétylcholinestérase monomérique, dépourvue de peptide T , et un récepteur protéique ayant une affinité pour une molécule ligand à rechercher dans un échantillon, de faible poids moléculaire ayant une constante et une cinétique catalytique élevées, et qui peut être purifié en une seule étape sur une colonne de chromatographie d'affinité. Par acétylcholinestérase monomérique aux fins de la présente invention, on entend un polypeptide purifié présentant l'activité catalytique d'hydrolyse de l'acétylcholine caractéristique de ces enzymes regroupées, selon la nomenclature internationale, dans le groupe EC 3.1.1.7, dont l'activité catalytique est observée lorsque l'enzyme libre est sous la forme d'un monomère. Répond notamment à la définition ci-dessus un polypeptide purifié, soluble en solution saline, représentant l'une des sous-unités catalytiques d'une acétylcholinestérase multimérique dépourvue du peptide T . De préférence, une acétylcholinestérase répondant aux buts de la présente invention est une acétylcholinestérase qui, lorsqu'elle est produite naturellement, se présente sous une forme monomérique et soluble. Entre dans cette catégorie, les acétylcholinestérases retrouvées dans les venins de serpent. Avantageusement, une acétylcholinesérase constitutive d'un polypeptide de fusion selon l'invention est codée par un polynucléotide hybridant, dans des conditions d'hybridation stringentes, avec le polynucléotide de séquence SEQ ID N03 selon l'invention. De manière tout à fait préférée, une telle acétylcholinestérase monomérique est définie de telle sorte que le polynucléotide codant celle-ci hybride, dans des conditions. d'hybridation fortement stringentes, avec au moins l'un quelconque des oligonucléotides suivants a) un oligonucléotide codant pour l'un des peptides suivants - SEQ ID N08 : SEDCLY - SEQ ID N09 : SEDCLYLN - SEQ ID N010 : FGESAG les peptides de séquences SEQ ID N08, SEQ ID N09 et SEQ ID N010 étant compris dans le polypeptide de séquence SEQ ID N01 constitutif d'un polypeptide de fusion selon l'invention b) un oligonucléotide comprenant l'une des séquences nucléotidiques suivantes - SEQ ID Noll : DSHGARGAYTGYYTNTAY, dans laquelle D représente A, T ou G, S représente G ou C H représente C, A ou T R représente G ou A Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C - SEQ ID N012 : DSHGARGAYTGYYTNTAYHTNAAY, dans laquelle D représente A, T ou G S représente G ou C H représente C, A ou T R représente G ou A Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C c) un oligonucléotide comprenant la séquence SEQ ID N013 suivante TTYGGDGARWSDGCNGG, dans laquelle D représente A, T ou G S représente G ou C R représente G ou A W représente A ou T Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C d) un oligonucléotide particulier, répondant à la définition selon a), b) ou c) ci-dessus, comprenant l'une des séquences suivantes SEQ ID N05 : AGC GAG GAC TGC CTC TAC SEQ ID-N06 : AGC GAG GAC TGC CTC TAC CTC AAC ; et SEQ ID N07 : TTT GGG GAG AGT GCC GGG les oligonucléotides de séquences SEQ ID N05, SEQ ID N06 et SEQ ID N07 étant compris dans le polynucléotide de séquence SEQ ID N03 codant pour l'acétylcholinestérase monomérique retrouvée dans le venin du serpent Bungarus fasciatus. Les conditions d'hybridation de forte stringence au sens de la présente invention sont définies à partir du calcul de la température Tm (ou température de fusion), qui représente la température. à laquelle les deux brins d'un homoduplex -ADN/ADN ou un hétéroduplex ADN/ARN se trouve à 50 W sous forme dissociée ou dénaturée. Avantageusement, les polynucléotides codant pour une acétylcholinestérase monomérique constitutive d'un polypeptide de fusion selon l'invention hybrident avec l'une quelconque des séquences. SEQ ID N03, SEQ ID N05, SEQ ID N06, SEQ ID N07, SEQ ID Roll, SEQ ID N012 et SEQ ID N013 dans un intervalle de température allant de (Tm - 150C) à (Tm - 200C) A titre illustratif, les conditions de stringence de l'étape d'hybridation aux fins de définir les fragments polynucléotidiques décrits ci-dessus. sont avantageusement les suivantes l'hybridation est réalisée à une température préférentielle de 650C, en présence de tampon 6 x SSC, 5 x de solution de Denhardt, 0,5 k SDS et 100 yg/ml d'ADN de sperme de saumon. 1 x SSC correspond à 0,15 M NaCl et 0,05 M citrate de Na et une solution de 1 x Denhardt correspond à 0,02 W Ficoll, 0,02 W de polyvinylpyrrolidone et 0,02 k de sérum albumine bovine. Les étapes de lavage peuvent, par exemple, être les suivantes - deux lavages de 5 min, préférentiellement à 650C, dans un tampon 2 x SSC et 0,1 W SDS - un lavage de 30 min, préférentiellement à 65"C, dans un tampon 2 x SSC et 0,1 W SDS - un lavage de 10 min, préférentiellement à 650C, dans un tampon de 1 x SSC et 0,7 k SDS. L'AChE monomérique sélectionnée par les inventeurs en tant que mode de réalisation particulier du polypeptide de fusion selon l'invention est originaire du venin du serpent Bungarus fasciatus et a récemment été caractérisée (Cousin et al., 1996a ; Frobert et al., 1997). I1 s'agit d'une protéine soluble monomère, à la différence des AChE précédemment décrites qui sont des homodimères liés aux membranes via des glycolipides, ou encore des structures oligomériques reliées par des ponts disulfures, et comprenant des homo-oligomères (dimères et tétramères) et des hétéro-oligomères liés au collagène ou à des sousunités hydrophobes (Massoulié et al., 1993). La constante catalytique de l'AChE de B. fasciatus est de 7000/s (7000 molécules de substrat hydrolysées par une molécule d'enzyme en une seconde) . Cette constante catalytique est deux fois plus faible que celle de l'AChE tétramérique du gymnote, mais supérieure à celle de la péroxydase de raifort (1000/s) ou encore celle de la phosphatase alcaline (2000/s) et de la beta-galactosidase (250-500/s) (Vigny et al., 1978 ; Grassi et al.., 1987). L'une des difficultés attendues de mise en oeuvre d'une AChE monomérique pour la réalisation d'un traceur enzymatique est inhérente au fait qu'il s'agit d'une protéine de -petite taille, d'un poids moléculaire de 72 kDa. Le couplage d'une AChE monomérique de ce type avec un récepteur protéique spécifique de la molécule ligand à rechercher dans un échantillon est fortement susceptible d'affecter la conformation dans l'espace de l'enzyme et ainsi de réduire significativement, voire abolir son activité catalytique. De manière surprenante, les inventeurs ont découvert qu'un polypeptide de fusion entre une AChE monomérique et un récepteur protéique conserve l'activité catalytique de l'AChE à un niveau comparable à celui de l'enzyme libre. Cette découverte a permis aux inventeurs de réaliser un traceur enzymatique comprenant un premier polypeptide constitué d!une acétylcholinestérase monomérique, ou d'un variant biologiquement actif de cette dernière, et un second polypeptide constitué d'un récepteur protéique reconnaissant spécifiquement une molécule ligand à rechercher dans un échantillon. Par variant biologiquement actif d'une acétylcholinestérase monomérique selon la présente invention, on entend un polypeptide présentant, par rapport au polypeptide initial, une o plusieurs additions, substitutions et/ou délétions d'acides aminés, étant entendu que le variant biologiquement actif doit, d'une part, conserver qualitativement l'activité catalytique caractérisant les acétylcholinestérases et, d'autre part, posséder un niveau d'activité catalytique au moins du même ordre que l'enzyme libre native, c'est-à-dire d'au moins la moitié du niveau d'activité catalytique de l'enzyme native. L'activité catalytique d'un variant biologiquement actif d'une acétylcholinestérase, tel que defini ci-dessus, peut être aisément quantifiée, par exemple en mettant en oeuvre la technique décrite à l'Exemple 3 de la présente description. Une délétion de 15 acides aminés du côté C-terminal de la séquence peptidique de l'acétylcholinestérase du venin de Bungarus fasciatus peut par exemple être pratiquée sans affecter aucunement l'activité catalytique du polypeptide résultant. Un tel peptide tronqué est, par exemple, représenté par le polypeptide de séquence SEQ ID N01, constitutif d'un polypeptide de fusion selon l'invention. Ainsi, une délétion sera préférentiellement pratiquée du côté C-terminal de la région du polypeptide de fusion correspondant à l'acétylcholinestérase, la taille de cette délétion étant avantageusement de 1 à 20 acides aminés. Cela n'exclut pas qu'une délétion puisse également être localisée dans un ou plusieurs autres segments de cette région du polypeptide de fusion. Danse cas d'une substitution, un ou plusieurs acides aminés -consécutifs ou non consécutifs- sont remplacés par des acides aminés équivalents . L'expression acide aminé équivalent vise ici à désigner tout acide aminé susceptible d'être substitué à l'un des acides aminés de la structure de base sans cependant modifier essentiellement les propriétés catalytiques des peptides correspondants. Ces aminoacides équivalents peuvent être déterminés soit en s'appuyant sur leur homologie de structure avec les aminoacides auxquels ils se substituent, soit sur les résultats des essais d'activité acétylcholinestérase. A titre d'exemple, on mentionnera les possibilités de substitutions susceptibles d'être effectuéns sans qu'il en résulte une modification approfondie de l'activité acétylcholinestérase des peptides modifiés correspondants, les remplacements, par exemple, de la leucine par la valine ou l'isoleucine,' de l'acide aspartique par l'acide glutamique, de la glutamine par l'asparagine, de l'arginine par la lysine etc., les substitutions inverses étant naturellement envisageables dans les mêmes conditions. Ainsi, un acide aminé appartenant à une classe particulière d'acides aminés pourra être remplacé par un acide aminé différent appartenant à la même classe, comme illustré dans le Tableau 1 ci-après. Tableau 1 : Les différentes classes d'acides aminés Classe d'acide aminé Exemples d'acides aminés Non polaire A, V, L, I, P, G, F, W Polaire non chargé M, S, T, C, Y, N, Q Acide D, E Basique K, R, H Par récepteur protéique au sens de la présente invention, on entend un polypeptide d'origine naturelle, obtenu par synthèse chimique ou par recombinaison génétique et ayant une affinité pour un ligand, de telle manière que ce polypeptide se lie spécifiquement, au moins par des liaisons dites faibles (liaisons électrostatiques, liaisons hydrogènes, forces de Van der Waals, forces électrostatiques ou encore liaisons hydrophobes), à la molécule dite molécule ligand du récepteur considéré. Par affinité, on entend la valeur de la constante d'association intrinsèque, K, dont la formule de calcul est la suivante [Récepteur-Ligand] K = , [Récepteur] x [Ligand] dans laquelle [Récepteur-Ligand] représente la concentration du complexe polypeptide de fusion avec sa molécule ligand, [Récepteur] représente la concentration du polypeptide de fusion selon l'invention sous forme libre et [Ligand] représente la concentration de la molécule Ligand selon l'invention sous forme libre. La valeur de l'affinité du récepteur protéique pour son ligand n'est pas une caractéristique technique déterminante des polypeptides de fusion selon l'invention. Une forte affinité du récepteur protéique pour son ligand ne sera pas requise lorsque l'échantillon à tester n'est pas un milieu complexe au sein duquel peuvent se former des complexes non spécifiques de molécules contenues dans l'échantillon avec le traceur enzymatique constitué par le polypeptide de fusion. La définition ci-dessus d!un récepteur protéique selon l'invention inclut des molécules protéiques qui sont considérées généralement par l'homme du métier comme des ligands d'un récepteur. Entrent dans cette catégorie les hormones, qui sont reconnues par leur(s) récepteur(s) respectif(s), comme par exemple la LHRH ou encore l'hormone de croissance. Une molécule ligand selon l'invention est définie de telle sorte qu'elle possède une affinité pour le récepteur protéique précédemment décrit. Une telle molécule ligand peut représenter un analyte de nature quelconque, protéique (par exemple un récepteur de médiateur endogène ou encore une enzyme biologiquement active ou inactivée), ou non protéique, dont on recherche la présence dans un échantillon. La molécule ligand peut être elle-même une molécule de marquage, par exemple un anticorps couplé à la biotine ou à l'avidine. Par polypeptide de fusion au sens de la présente invention, on entend une molécule protéique comprenant un premier polypeptide ayant une activité d'acétylcholinestérase monomérique et comprenant en outre au moins un second polypeptide représentant un récepteur protéique, le premier et le second polypeptide étant liés entre eux, directement ou indirectemént, de manière covalente, soit que le polypeptide de fusion résulte d'un couplage chimique entre les deux polypeptides de départ, soit du fait que le polypeptide de fusion représente le produit d'expression dlun acide nucléique codant, dans une phase de lecture ouverte unique, les deux polypeptides de départ, étant entendu, en outre, que le premier et le second polypeptide peuvent être indifféremment orientés l'un par rapport à l'autre au sein du polypeptide dé fusion. Par échantillon au sens de l'invention, on entend un milieu liquide ou un matériau solide susceptible de contenir une molécule ligand telle que définie ci-dessus. Un tel échantillon peut être d'origine biologique tel que notamment du sérum, du plasma, une coupe de tissu biologique (par exemple une biopsie) ou encore l'urine. L'échantillon de l'invention peut être aussi le résultat d'un prélèvement sur des produits agro-alimentaires ou sur des effluents domestiques ou industriels ainsi que sur de l'eau à analyser. L'échantillon peut également être représenté par le contenu d'une plaque de microtitration dans lequel on recherche la présence d'un complexe récepteur-ligand, par exemple un complexe antigèneanticorps, l'une des molécules parmi le récepteur ou le ligand étant marquée par une molécule non directement détectable ou visualisable, telle que la biotine ou l'avidine. Comme exemple illustratif des polypeptides de fusion selon la présente invention, les inventeurs ont utilisé, en tant qu'acétylcholinestérase monomérique, 1 'actétyl- cholinestérase retrouvée dans le venin du serpent Bungarus fasciatus. Les inventeurs ont ainsi pu mettre au point la réalisation d'un polypeptide de fusion entre l'AChE de Bungarus fasciatus et un récepteur protéique, en l'occurrence un fragment peptidique constitué d'une chaîne unique contenant la partie variable Fv d'un anticorps monoclonal, le polypeptide de fusion pouvant être utilisé pour détecter spécifiquement, et avec une grande sensibilité, l'antigène correspondant. Ainsi, l'invention a pour objet un polypeptide de fusion caractérisé en ce qu'il comprend a) un premier polypeptide constitué d'une acetyl cholinestérase monomérique ou un variant biologiquement actif de ladite acétylcholinesterase monomérique b) un second polypeptide constitué d'un récepteur protéique spécifique d'une molécule ligand recherchée dans un échantillon. Plus particulièrement, l'invention vise un polypeptide de fusion tel que défini ci-dessus, dans lequel l'acétylcholinestérase monomérique comprend la séquence en acides aminés SEQ ID N01 suivante Met Pro Ser Cys Gln Pro Gly Lys Met Pro Ala Pro Trp Pro Trp Trp 1 5 10 15 Leu Leu Cys lie Pro Ser Cys Val Ala Val Leu Gln Leu Leu Pro Gly 20 25 30 Arg Ala Gly Glu Leu Lys Val Ser Thr Gln Thr Gly Ser Val Arg Gly 35 40 45 Leu Ser Leu Pro Val Leu Asp Gly His Val Ser Ala Phe Leu Gly lie 50 55 60 Pro Phe Ala Glu Pro Pro Leu Gly Arg Met Arg Phe Leu Arg Pro Glu 65 70 75 80 Pro Val Lys Pro Trp Gln His Val Leu Asp Ala Thr Se Tyr Lys Pro 85 90 95 Ala Cys Tyr Gln Met Val Asp Thr Ser Tyr Pro Gly Phe Gln Gly Thr 100 105 110 Glu Met Trp Asn Pro Asn Arg Gly Met Ser Glu Asp Cys Leu Tyr Leu 115 120 125 Asn lie Trp Val Pro Ser Pro Arg Pro Lys Asp Ala Pro Val Leu Val 130 135 140 Trp lie Tyr Gly Gly Gly Phe Tyr Ser Gly Ala Ala Ser Leu Asp Val 145 150 155 160 Tyr Asp Gly Arg Phe Leu Thr Tyr Thr Gln Asn Val lie Leu Val Ser 165 170 175 Leu Ser Tyr Arg Val Gly Ala Phe Gly Phe Leu Gly Leu Pro Gly Ser 180 185 190 Pro Glu Ala Pro Gly Asn Met Glu Leu Leu Asp Gln Arg Leu Ala Leu 195 200 205 Gln Trp lie Gln Asn Asn lie His Pro Phe Gly Gly Asn Pro Arg Ala 210 215 220 Val Thr Val Phe Gly Glu Ser Ala Gly Ala Ala Ser Val Gly Met His 225 230 235 240 Leu Leu Ser Thr Gln Ser Arg Thr Leu Phe Gln Arg Ala lie Leu Gln 245 250 255 Ser Gly Gly Pro Asn Ala Pro Trp Ala Thr Val Thr Pro Ala Glu Ser 260 265 270 Arg Gly Arg Ala Ala Leu Leu Gly Lys Gln Leu Gly Cys His Phe Asn 275 280 285 Asn Asp Ser Glu Leu Val Ser Cys Leu Arg Ser Lys Asn Pro Gln Glu 290 295 300 Leu Ile Asp Glu Glu Trp Ser Val Leu Pro Tyr Lys Ser lie Phe Arg 305 310 315 320 Phe Pro Phe Val Pro Val lie Asp Gly Asp Phe Phe Pro Asp Thr Pro 325 330 335 Glu Ala Met Leu Ser Ser Gly Asn Phe Lys Glu Thr Gln Val Leu Leu 340 345 350 Gly Val Val Lys Asp Glu Gly Ser Tyr Phe Leu lie Tyr Gly Leu Pro 355 360 365 Gly Phe Ser Lys Asp Asn Glu Ser Leu lie Ser Arg Ala Asp Phe Leu 370 375 380 Glu Gly Val Arg Met Ser Val Pro His Ala Asn Asp lie Ala Thr Asp 385 390 395 400 Ala Val Val Leu Gln Tyr Thr Asp Trp Gln Asp Gln Asp Asn Arg Glu 405 410 415 Lys Asn Arg Glu Ala Leu Asp Asp Ile Val Gly Asp His Asn Val Ile 420 425 430 Cys Pro Val Val Gln Phe Ala Asn Asp Tyr Ala Lys Arg Asn Ser Lys 435 440 445 Val Tyr Ala Tyr Leu Phe Asp His Arg Ala Ser Asn Leu Leu Trp Pro 450 455 460 Pro Trp Met Gly Val Pro His Gly Tyr Glu Ile Glu Phe Val Phe Gly 465 470 475 480 Leu Pro Leu Asn Asp Ser Leu Asn Tyr Thr Pro Gln Glu Lys Glu Leu 485 490 495 Ser Arg Arg Met Met Arg Tyr Trp Ala Asn Phe Ala Arg Thr Gly Asn 500 505 510 Pro Thr Asp Pro Ala Asp Lys Ser Gy Ala Trp Pro Thr Tyr Thr Ala 515 520 525 Ser Gln Pro Gln Tyr Val Gln Leu Asn Thr Gln Pro Leu Ala Thr Gln 530 535 540 Pro Ser Leu Arg Al.a Gln lie Cys Ala Phe Trp Asn His Phe Leu Pro 545 550 555 560 Lys Leu Leu Asn Ala Thr 565 Dans un mode particulier de réalisation du polypeptide de fusion selon l'invention, la partie polypeptidique constituée du récepteur protéique est dérivée d'un anticorps, ou d'une partie d'un anticorps, par exemple un anticorps monoclonal. Par partie d'un anticorps selon l'invention, on entend notamment un fragment Fab, un fragment (Fab) '2 ou encore un ou plusieurs fragments scFv. Dans un mode de réalisation tout à fait préféré, le récepteur protéique consiste en un fragment scFv unique, ie polypeptide de fusion résultant étant alors monovalent, ce qui lui confère un poids moléculaire minimal et ainsi une excellente constante de diffusion lui permettant de lier la molécule ligand beaucoup plus rapidement qu'un immunoconjugué divalent. D'autre part, la présence d'un site unique de fixation de l'antigène abolit la formation de réseaux de complexes antigène-anticorps observés lorsque plusieurs sites antigéniques sont présents dans une même structure, et réduit en outre la présence d'interactions non spécifiques. Plus généralement, une partie d'anticorps monoclonal aux fins de la présente invention sera représentée par un polypeptide portant les régions variables responsables de la reconnaissance spécifique de l'antigène contre lequel celui-ci est dirigé et plus précisément au moins l'une des régions choisies parmi VL et VH et en particulier au moins l'une des régions hypervariables CDR1 et/ou CDR2 et/ou CDR3 (CDR signifiant complementary determining region ) se liant à l'antigène. A titre illustratif, un polypeptide de fusion selon l'invention a été réalisé en fusionnant l'acétylcholinestérase de Bungarus fasciatus avec le fragment scFv d'un anticorps monoclonal dirigé contre la sous-unité non catalytique CA de la crotoxine, ledit polypeptide de fusion possédant la séquence en acides aminés SEQ ID N02 suivante Met Pro Ser Cys Gln Pro Gly Lys Met Pro Ala Pro Trp Pro Trp Trp 1 5 10 15 Leu Leu cys lie Pro Ser Cys Val Ala Val Leu Gin Leu Leu Pro Gly 20 25 30 Arg Ala Gly Glu Leu Lys Val Ser Thr Gln Thr Gly Ser Val Arg Gly 35 40 45 Leu Ser Leu Pro Val Leu Asp Gly His Val Ser Ala Phe Leu Gly lie 50 55 60 Pro Phe Ala Glu Pro Pro Leu Gly Arg Met Arg Phe Leu Arg Pro Glu 65 70 75 80. Pro Val Lys Pro Trp Gln His Val Leu Asp Ala Thr Ser Tyr Lys Pro 85 90 95 Ala Cys Tyr Gln Met Val Asp Thr Ser Tyr Pro Gly Phe Gln Gly Thr 100 105 110 Glu Met Trp Asn Pro Asn Arg Gly Met Ser Glu Asp Cys Leu Tyr Leu 115 120 125 Asn lie Trp Val Pro Ser Pro Arg Pro Lys Asp Ala Pro Val Leu Val 130. 135 140 Trp lie Tyr Gly Gly Gly Phe Tyr Ser Gly Ala Ala Ser Leu Asp Val 145 150 155 160 Tyr Asp Gly Arg Phe Leu Thr Tyr Thr Gln Asn Val lie Leu Val Ser 165 170 175 Leu Ser Tyr Arg Val Gly Ala Phe Gly Phe Leu Gly Leu Pro Gly Ser 180 185 190 Pro Glu Ala Pro Gly Asn Met Gly Leu Leu Asp Gln Arg Leu Ala Leu 195 200 205 Gln Trp lie Gln Asn Asn lie His Pro Phe Gly Gly Asn Pro Arg Ala 210 215 220 Val Thr Val Phe Gly Glu Ser Ala Gly Ala Ala Ser Val Gly Met His 225 230 235 24 Leu Leu Ser Thr Gln Ser Arg Thr Leu Phe Gln Arg Ala lie Leu Gln 245 250 255 Ser Gly Gly Pro Asn Ala Pro Trp Ala Thr Val Thr Pro Ala Glu Ser 260 265 270 Arg Gly Arg Ala Ala Leu Leu Gly Lys Gln Leu Gly Cys His Phe Asn 275 280 285 Asn Asp Ser Glu Leu Val Ser Cys Leu Arg Ser Lys Asn Pro Gln Glu 290 295 300 Leu lie Asp Glu Glu Trp Ser Val Leu Pro Tyr Lys Ser lie Phe Arg 305 310 315 320 Phe Pro Phe Val Pro Val lie Asp Gly Asp Phe Phe Pro Asp Thr Pro 325 330 335 Glu Ala Met Leu Ser Ser Gly Asn Phe Lys Glu Thr Gln Val Leu Leu 340 345 350 Gly Val Val Lys Asp Glu Gly Ser Tyr Phe Leu lie Tyr Gly Leu Pro 355 360 365 Gly Phe Ser Lys Asp Asn Glu Ser Leu lie Ser Arg Ala Asp Phe Leu 370 375 380 Glu Gly Val Arg Met Ser Val Pro His Ala Asn Asp Ile Ala Thr Asp 385 390 395 400 Ala Val Val Leu Gln Tyr Thr Asp Trp Gln Asp Gln Asp Asn Arg Glu 405 410 415 Lys Asn Arg Glu Ala Leu Asp Asp lie Val Gly Asp His Asn Val Ile 420 425 430 Cys Pro Val Val Gln Phe Ala Asn Asp Tyr Ala Lys Arg Asn Ser Lys 435 440 445 Val Tyr Ala Tyr Leu Phe Asp His Arg Ala Ser Asn Leu Leu Trp Pro 450 455 460 Pro Trp Met Gly Val Pro His Gly Tyr Glu Ile Glu Phe Val Phe Gly 455 470 475 480 Leu Pro Leu Asn Asp Ser Leu Asn Tyr Thr Pro Gln Glu Lys Glu Leu 485 490 495 Ser Arg Arg Met Met Arg Tyr Trp Ala Asn Phe Ala Arg Thr Gly Asn 500 505 510 Pro Thr Asp Pro Ala Asp Lys Ser Gly Ala Trp Pro Thr Tyr Thr Ala 515 520 525 Ser Gln Pro Gln Tyr Val Gln Leu Asn Thr Gln Pro Leu Ala Thr Gln 530 535 540 Pro Ser Leu Arg Ala Gln Ile Cys Ala Phe Trp Asn His Phe Leu Pro 545 550 555 560 Lys Leu Leu Asn Ala Thr Glu Gln Lys. Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu 565 570 575 Asn Ala Ala Gln Pro Ala Met Ala Gln Val Lys Leu Gln Gin Ser Gly 580 585 590 Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys île Ser Cys Lys Ala 595 600 605 Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg 610 615 620 Pro Gly Tyr Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly 625 630 635 640 Ser Thr Ile Tyr Ser Thr Lys Phe Lys Gly Lys Val Thr Phe Thr Ala 645 650 655 Glu Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser 660 665 670 Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr'Cys Ala Arg Arg Trp Leu Tyr Phe Ser 675 680 685 Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 690 695 700 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu 705 710 715 720 Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ile Met Ala Ala Ser Leu Gly Gln Lys Val 725 730 735 Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His 740 745 750 Trp Phe Gln Gln Lys Ser Gly Ala Ser Pro Lys Pro Leu Ile His Arg 755 760 765 Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly 770 775 780 Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala Glu Asp 785 790 795 800 Asp Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Phe Thr Phe 805 810 815 Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 820 825 Des anticorps, ou les polynucléotides codant pour ces derniers, utilisés comme matériel de départ pour la construction, par voie chimique ou par recombinaison génétique, d'un polypeptide de fusion selon l'invention sont préférentiellement des anticorps monoclonaux dirigés contre certains médiateurs endogènes comme les cytokines, et parmi celles-ci les cytokines intervenant dans la régulation de la réponse immunitaire ainsi que certains facteurs de croissance, tels que l'EGF ou le NGF. Parmi les cytokines d'intérêt reconnues par le récepteur protéique d'un polypeptide de fusion selon l'invention, on peut citer l'interféron alpha, l'interféron beta, l'interféron gamma, les interleukines (IL-1 à IL-16), le facteur stimulant les colonies de monocytes/macrophages (CSF-1 ou MCSF), le facteur stimulant la formation de colonies de granulocytes (G-CSF!, le facteur stimulant la formation de colonies mixtes granulocytes/macrophages (GM CSF), le facteur inhibiteur de leucémie (LIF), le facteur de nécrose tumorale (TNF alpha), la lymphotoxine (LT ou TNF beta), le facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGF), les facteurs de croissance des fibroblastes (FGFs), le facteur de croissance des cellules endothéliales vasculaires (VEC-GF), l'érythropoïétine, le TGF beta (pour Transforming growth factor beta ), le TGF alpha, le facteur de croisance des cellules B (BCGF), le facteur inhibiteur dé la migration des macrophages (MIF) ou encore la protéine-l chémoattractive pour les monocytes ( Monocyte Chemoattractant Protein-l ou MCP-1). A titre illustratif des hybridomes utilisés comme matériel de départ pour la réalisation d'un polypeptide de fusion selon l'invention, on peut citer notamment les hybridomes produisant les anticorps suivants aj Ac. anti-IL-l beta : ATCC NO HB10219 ; NO 10220 NO 10221 ; NO 10222 b) Ac. anti-IL-2 (rat) : ATCC NO HB8091 ; NO HB8092 NO HB8093 c) Ac. anti-interféron alpha (humain) : ATCC NO HB8619 d) Ac. anti-interféron gamma (humain) : ATCC NO HB8700 No HB8291 ; NO HB8699 e) Ac. anti-CSF-l (humain) : ATCC NO HB8207 ; NO HB8208. Parmi les interleukines, on recherchera tout particulièrement l'interieukine 4 (IL-4), l'interleukine 6 (IL-6) et l'interleukine 8 (IL-8) : a) L'IL-4 est une interleukine.définie principalement comme étant un facteur de prolifération de lymphocytes B. Elle induit une activité de prolifération des cellules pro-B chez la souris, augmente le volume des cellules B au repos, induit ou modifie de façon importante la différenciation des lymphocytes B et affecte la nature des isotypes sécrétés. L'IL-4 intervient dans des circonstances pathologiques et peut en conséquence avoir une application notamment dans le traitement de maladies inflammatoires acompagnant un choc endotoxinique ou dans le traitement d'affections allergiques. La mise au point d'un test d'immunodétection de l'IL-4 dans un échantillon biologique revêt donc une importance diagnostique et médicale. A titre illustratif, un polypeptide de fusion entre l'AChE et le fragment scFv de les anticorps monoclonaux décrits par Cavaillon et al. (1996) et par Marty et al. (1994), l'anticorps monoclonal produit par l'hybridome 126-68 ou encore par l'hybridome llBll. (ATCC N HD188) font également partie de l'invention. b) L'IL-6 est un médiateur du système immunitaire qui possède un large spectre d'activités biologiques, et de nombreux types cellulaires sont capables de synthétiser cette cytokine, tels que les monocytes/macrophages, les fibroblastes, les cellules endothéliales, les kératinocytes, les mastocytes, les cellules T et de nombreuses cellules tumorales. Des taux élevés sériques ou plasmatiques peuvent intervenir dans différentes maladies telles que le choc septique, les maladies auto-immunes, après un rejet de greffe, les lymphomes, le SIDA ou encore les patients présentant différentes pathologies inflammatoires. Un autre objet de l'invention consiste en un polypeptide de fusion selon l'invention dans lequel le récepteur protéique est constitué du fragmment scFv de l'anticorps monoclonal produit par l'hybridome H12.3 ou encore des anticorps monoclonaux décrits par Cavaillon et al. (1996) ou par Marty et al. (1994). c) L'IL-8 est une cytokine inflammatoire qui est présente chez des patients présentant différentes pathologies inflammatoires. Un autre polypeptide de fusion selon l'invention comprendra un récepteur protéique constitué du fragment scFv de l'anticorps monoclonal produit par l'hybridome -clone 4 - ou encore des anticorps monoclonaux décrits par Cavaillon et al. (1996) ou par Marty et al. (194). Dans un autre mode de réalisation du polypeptide de fusion selon l'invention, le récepteur protéique est un antigène, par exemple un antigène bactérien, viral ou fongique, si le ligand que l'on cherche à détecter est un anticorps, par exemple un anticorps généralement retrouvé chez des patients affectés d'une pathologie telle qu'une infection bactérienne ou virale ou encore un désordre immunitaire tel qu'une maladie auto-immune. Plus particulièrement un antigène constitutif du récepteur protéique contenu dans un polypeptide de fusion selon l'invention peut être choisi parmi les antigènes suivants a) tout ou partie de l'une des glycoprotéines codées par le génome d'un virus de type HIV, notamment HIV-1 (brevets GP 8324800, EP 84401834, ou EP 85905513j ou du virus HIV-2 (EP 87400151), et en particulier tout ou partie d'une protéine sélectionnée parmi gag, pol, nef ou env., préférentiellement de la glycoprotéine d'enveloppe d'un virus de type HIV, et de manière tout à fait préférée de tout ou partie de la boucle V3 de la glycoprotéine d'enveloppe b) un antigène de surface de l'hépatite B (brevet FR 79 21811), sous l'une de ses formes S, S-préSl, S-préS2 ou S-préS2-préSl ; ou encore une protéine d'un virus de l'hépatite A, ou d'une hépatite non-A, non-B, telle que dérivée d'un virus de l'hépatite C, E ou delta. c) un antigène mycobactérien, en particulier originaire de M. tuberculosis, comprenant tout ou partie d'une protéine choisie parmi les protéines suivantes : la protéine 45/47kD (PCT/FR 92/00508 ; PCT/FR 96/00166), la protéine LIP-DTH (PCT/FR 93/00268), la protéine P27 (FR 97 00100 du 08/0S11997), la protéine ESAT-6 (Harhoe et al., 1996 ; Sorensen et al., 1995) ou encore le polypeptide LHP codé par un polynucléotide situé, sur le génome de M. tuberculosis, en aval des signaux de régulation de ESAT-6 et en amont de la séquence codant ESAT-6. Sont également considérés comme des récepteurs protéiques au sens de la présente invention des protéines inhibitrices d'enzymes, telles qe les inhibiteurs d'enzymes impliquées dans la coagulation sanguine (par exemple inhibiteur de l'activateur tissulaire du plasminogène ou tPA). Entrent également dans la définition ci-dessus des enzymes inactivées, de préférence des enzymes inactivées conservant une affinité pour leur substrat, telles que les enzymes ayant pour substrat l'enképhaline. Constituent également des récepteurs protéiques selon l'invention, des lectines ou parties de lectines, par exemple les lectines de type C animales telles que la Mannose-Binding-Protein (MBP) ou encore des molécules d'adhésion cellulaire, des récepteurs d'endocytose et des protéines de la matrice extracellulaire comme les sélectines (p. ex. selectine E), les récepteurs des asialoglycoprotéines, ou des récepteurs macrophagiques (Spiess, 1990). Parmi les lectines d'intérêt figurent aussi la IX/X-binding protein qui se lie aux facteurs IX(a) et X(a) (Atoda 1989, 1991, 1994) , la botrocétine (Fujimura 1991 ; Usami 1993) et la bitiscetine (Hamako 1996) qui induisent la liaison du facteur von Willebrand aux plaquettes, la GPIb-binding protein (Fujimura 1995, Kawasaki 1996), l'agkicétine (Chen 1995), l'alboaggrégine B (Yoshida 1993, Usami, 1996), la tokaracétine (Kawasaki 1995), la flavocétine A et B (Taniuchi 1995) et i'échicétine (Peng 1993., 1994, 1995) qui se lient à la glycoprotéine Ib, la convulxine qui active les plaquettes (Polgar 1997) et la bothrojaracine qui inhibe la thrombine (Zingali 1993). Dans encore un autre mode de réalisation du polypeptide de fusion selon l'invention, le récepteur protéique est du type avidine ou streptavidine, par exemple dans le cas où le polypeptide de fusion est utilisé pour un marquage indirect d'une substance utilisée comme premier révélateur de la présence d'une molécule recherchée dans un échantillon, ce premier révélateur étant conjugué à une molécule de type biotine. La propriété de la biotine à lier simultanément. plusieurs molécules d'avidine permet une amplification du signal visualisable et constitue ainsi un mode de réalisation avantageux d'un polypeptide de fusion selon l'invention. Dans le cas où le premier révélateur est conjugué à une molécule de avidine ou streptavidine, c'est le polypeptide de fusion selon l'invention qui contiendra une région peptidique correspondant à une molécule de type biotine. Dans un autre mode de réalisation du polypeptide de fusion selon l'invention, le récepteur protéique est représenté par un analogue non métabolisé d'un substrat enzymatique, si l'on recherche par exemple la présence d'une enzyme particulière dans un échantillon. Le procédé selon l'invention permet, en outre, la construction de banques de ScFv en fusion avec l'AChE, en utilisant notamment les sites de clonage SfiI et NotI qui sont les sites les plus utilisés pour la construction de banques de cDNA. Ceci permet un criblage rapide des anticorps clonés. Le récepteur protéique du polypeptide de fusion selon l'invention peut aussi être constitué par un peptide dérivé d'une banque de peptides aléatoires, utiles notamment dans la recherche d'épitopes. Des techniques de réalisation de banques de peptides aléatoires utilisables dans le cadre de la présente invention sont par exemple la technique utilisant des phages recombinants décrite par Parmley et Smith en 1988. De préférence, le polypeptide de fusion selon l'invention comprend l'acétylchoiinestérase monomérique, ou le variant biologiquement actif de celle-ci, placé du côté N-terminal afin d'éviter tout encombrement stérique de nature à réduire l'accessibilité du site catalytique de l'enzyme pour son substrat et ainsi affecter la cinétique enzymatique. Le polypeptide de fusion selon l'invention peut en outre contenir d'autres fragments polypeptidiques placés indifféremment à l'extrémité N-terminale, à l'extrémité Cterminale ou encore entre le premier polypeptide AChE et le polypeptide récepteur protéique tel que défini ci-dessus. De tels fragments polypeptidiques peuvent revêtir des natures fonctionnelles diverses. I1 peut s'agir, par exemple, d'un fragment peptidique reconnu par un anticorps déterminé, ce fragment peptidique étant alors utile pour détecter et/ou s'assurer de la bonne structure du polypeptide de fusion lors de sa préparation. I1 peut s'agir également d'un ou de plusieurs fragrnents peptidiques utilisés comme peptides de liaison entre les différents domaines fonctionnels du polypeptide de fusion selon l'invention et qui peuvent s'avérer nécessaires pour maintenir l'intégrité conformationelle, et en conséquence l'intégrité fonctionnelle, de l'AChE monomérique et du récepteur protéique constitutifs dudit polypeptide de fusion. I1 peut aussi s'agir d'un fragment peptidique portant un ou plusieurs sites de reconnaissance par des enzymes protéolytiques, telles que la trypsine, la chymotrypsine etc. Dans ce cas, le site de reconnaissance pour l'enzyme protéolytique sera choisi préférentiellement de telle manière que ce site soit unique dans le polypeptide de fusion, de telle sorte que l'action de l'enzyme protéolytique résulte dans tous- les cas en l'obtention de deux fragments polypeptidiques de longueur et de structure définies. Dans ce mode de réalisation particulier du polypeptide de fusion selon l'invention, l'action de l'enzyme protyéolytique conduit notamment à l'obtention de la partie peptidique contenant le récepteur protéique sous une forme libre et purifiable par les différentes techniques de purification de protéines bien connues de l'homme du métier. Le polypeptide de fusion selon l'invention peut être le résultat d'un couplage chimique entre l'AChE monomérique et le récepteur protéique. De manière générale, pour lier par une liaison de covalence les différents polypeptides constitutifs du polypeptide de fusion selon l'invention, on fait réagir l'un des groupements réactifs libres de l'AChE monomérique, tel que l'un des groupements lysyle, tyrosyle, histydyle, tryptophanyle ou glutamyle avec un groupement réactif porté par le récepteur protéique, par exemple avec une fonction acide, une fonction amine, une fonction phénol, une fonction hydroxyle ou une fonction cétone. Ceci peut être effectué en particulier par des réactions de couplage couramment utilisées, au moyen de réactifs tels que les carbodiimides, le glutaraldéhyde, la benzidine, les anhydrides mixtes ou encore l'acide para-aminophénylacétique. On aura notamment recours à des techniques classiques de couplage entre deux protéines bien connues de l'homme du métier, telles que le couplage avec le réactif hétérobifonctionnel N-succinimidyl-4-(N-maleimido-methyl) cyclohexane-l-carboxylate (McLaughlin et ai., 1987 Caruelle et al., 1988 ; Grassi et al., 1989). Toutefois, l'obtention d'un polypeptide de fusion par couplage chimique présente de nombreux inconvénients, tant du point de vue du coût, de la durée, de la reproductibilité du procédé employé que de la pureté du produit de couplage résultant. Dans la majorité des cas, un protocole spécifique de couplage doit être préalablement mis au point pour la réalisation de chaque conjugué. De plus, pour un conjugué donné, les opérations de couplage doivent être répétées lors de la préparation de chaque lot de réactif, ce qui introduit une hétérogénéité qualitative et/ou quantitative dans la composition de chacun des lots du conjugué considéré. Par ailleurs, la nécessité d'utiliser des réactifs chimiques susceptibles de porter des éléments réactionnels spécifiques aux deux polypeptides de départ, pour la plupart des cas l'antigène ou l'anticorps, d'une part, l'enzyme d'autre part, impose l'utilisation de réactifs de base parfaitement purs afin d'éviter des réactions de couplages indésirables susceptibles de fausser la réaction. C'est pourquoi, dans un mode de réalisation tout à fait préféré de la présente invention, le polypeptide de fusion est obtenu directement comme produit d'expressIon recombinant d'un polynucléotide comprenant, dans une phase de lecture unique, une séquence codant pour le polypeptide de fusion en tant que tel. Un tel mode de réalisation du polypeptide de fusion selon l'invention par fusion de gènes permet la production d'un polypeptide recombinant, ce qui évite ainsi les difficultés évoquées plus haut, liées à la préparation purement chimique des traceurs enzymatiques et, parmi celles-ci, la détérioration des activités des capacités imunologiques ou enzymatiques pouvant survenir au cours du couplage chimique. Certains traceurs immunoenzymatiques ont déjà été préparés selon une telle technique, comme par exemple la réalisation d'un polypeptide de fusion entre un fragment Fab d'anticorps monoclonal et une phosphatase alcaline sous forme dimérique. A titre illustratif, Ducancel et al., en 1993, ont obtenu une protéine de fusion contenant deux fragments scFv, dérivés d'un anticorps monoclonal dirigé contre la toxine-alpha du venin de Naja ni gri colis, liés de manière covalente à la phosphatase alcaline de E. coli. La protéine de fusion recombinante résultante a une affinité pour l'antigène significativement réduite par rapport à l'anticorps monoclonal natif. En outre, l'immunoconjugué recombinant de Ducancel et al., contrairement au polypeptide de fusion selon l'invention qui est monovalent, possède une structure bi-fonctionnelle contenant à la fois deux sous-unités de la phosphatase alcaline et deux fragments scFv. De plus, les protéines de fusion enzyme-fragment d'anticorps de l'art antérieur sont toutes des molécules de haut poids moléculaire, ce qui leur confère un coefficient de diffusion très faible et une cinétique enzymatique résultante peu compatible avec la sensibilité de détection recherchée pour la réalisation de réactifs d'Immuno- détection commercialisables. A titre d'exemple illustratif, la protéine de fusion recombinante décrite par Ducancel et al. a un poids moléculaire supérieur à 250 kDa. Au contraire des protéines de fusion recombinantes décrites dans l'état de la technique, le faible poids moléculaire de l'AChE monomérique qui lui est constitutive (72 kDa pour l'AChE de B. fasciatus), permet de réaliser de manière reproductible un polypeptide de fusion recombinant monovalent d'un poids moléculaire d'environ 100 à 150 kDa et possédant une capacité de détection très élevée. En conséquence, l'invention a également pour objet un polypeptide de fusion recombinant ayant la structure précédemment décrite des polypeptides de fusion selon l'invention. De préférence, la séquence codant l'acétyl- cholinestérase, ou un variant biologiquement actif de celle-ci, est placée du côté 5' du polynucléotide codant le polypeptide de fusion. Plus particulièrement, l'invention vise un polypeptide de fusion recombinant caractérisé en ce que la partie polypeptidique constituée par l'acétylcholinestérase est codée par le polynucléotide de séquence SEQ ID N"3 suivante ATGCCCTCCT GCCAGCCTGG CAAGATGCCT GCGCCGTGGC CTTGGTGGCT CCAGCTCCTC 60 CTTTGCATCC CGTCCTGTGT AGCGGTTTTG CCCGGCCGGG CAGGCGAGCT GAAAGTGTCC 120 ACCCAGACTG GCTCGGTGCG TGGCCTGAGC CTGCCGGTTC TCGACGGCCA CGTCTCGGCC 180 TTCCTAGGCA TCCCCTTTGC GGAGCCTCCC CTGGGCAGGA TGCGCTTCCT GCGCCCTGAG 240 CCCGTCAAGC CCTGGCAGCA CGTCCTGGAC GCCACTTCCT ACAAGCCCGC CTGCTACCAG 300 ATGGTGGACA CCAGCTACCC AGGCTTCCAG GGCACGGAGA TGTGGAACCC CAACCGGGGC 360 ATGAGCGAGG ACTGCCTCTA CCTCAACATC TGGGTGCCCT CCCCGCGCCC CAAGGATGCC 420 CCCGTCCTGG TCTGGATCTA CGGAGGGGGC TTCTACAGCG GCGCTGCCTC CCTGGACGTC 480 TATGACGGCC GCTTCCTGAC CTACACGCAG AACGTCATCC TGGTCTCCCT CAGCTACCGT 540 GTGGGGGCCT TCGGCTTTTT GGGCCTCCCG GGAAGTCCAG AGGCCCCGGG AAACATGGG AACCCCCAGG AGTTGATTGA CGAGGAGTGG TCCGTCCTGC CCTACAAGAG CATTTTCCGC 960 TTCCCCTTCG TCCCGGTCAT TGACGGGGAC TTCTTTCCAG ATACCCCCGA GGCCATGCTG 1020 AGCTCGGGCA ACTTCAAGGA GACCCAGGTG TTGCTGGGCG TGGTGAAGGA CGAGGGCTCC 1080 TACTTCCTGA TCTACGGGCT GCCTGGCTTC AGCAAGGACA ACGAGAGCCT CATCAGCCGG 1140 GCCGACTTCC TGGAAGGGGT GCGGATGAGC GTGCCCCACG CCAACGACAT CGCCACTGAT 1200 GCCGTGGTGC TGCAATACAC TGACTGGCAG GACCAGGACA ACAGGGAGAA GAACCGGGAG. 1260 GCCCTGGACG ACATCGTGGG AGACCACAAC GTCATCTGCC CGGTCGTGCA GTTCGCCAAC 1320 GACTACGCCA AGCGCAACAG CAAGGTGTAC GCCTACCTGT TTGACCACCG GGCCTCCAAC 1380 CTCCTCTGGC CCCCCTGGAT GGGGGTCCCC CATGGCTACG AGATCGAGTT TGTCTTTGGA 1440 TTGCCGCTCA ACGACAGCCT GAACTACACG CCCCAAGAGA AGGAGCTGAG CCGCAGAATG 1500 ATGCGCTACT GGGCCAACTT CGCCCGGACA GGGAACCCCA CCGACCCTGC CGATAAGAGC 1560 GGGGCCTGGC CCACCTACAC CGCCTCCCAG CCGCAGTATG TCCAGCTCAA CACCCAGCCG 1620 CTGGCCACCC AACCCAGCCT GCGGGCCCAG ATCTGCGCCT TCTGGAACCA CTTCCTCCCC 1680 AAACTGCTGA ACGCCACA 1698 A titre illustratif d'un mode particulier de réalisation du polypeptide de fusion selon l'invention, les inventeurs ont réalisé une construction génétique comprenant successivement, de l'extrémité 5' vers l'extrémité 3', une séquence codant pour l'AChE de Bungarus fasciatus, une séquence codant pour le peptide cMyc (polypeptide oncogène d'origine humaine) et une séquence codant pour la partie variable simple chaîne (scFv) d'un anticorps monoclonal dirigé contre la sous-unité non catalytique (CA) de la crotoxine, principale toxine retrouvée dans le venin du crotale originaire d'Amérique du Sud. La région d'acide nucléique codant pour la partie variable de la chaîne lourde (VH) du fragment scFv et la région d'acide nucléique codant pour la partie variable de la chaîne légère (VL) du fragment scFv sont reliées entre elles par un fragment polynucléotidique codant pour un peptide de liaison, ledit peptide de liaison étant souligné en trait pointillé sur la Figure 1B. Ce peptide de liaison est destiné à assurer un positionnement adéquat de la chaîne lourde par rapport à la chaîne légère dans le polypeptide de fusion final, afin que ce dernier ait une affinité pour la sous-unité CA de la crotoxine comparable à celle observée pour l'anticorps monoclonal natif. L'invention a donc également pour objet un polynucléotide caractérisé en ce qu'il code pour un polypeptide de fusion selon l'invention. En particulier, un polynucléotide tel que défini cidessus comprendra une séquence codant pour une acétylcholinestérase monomérique ou pour un variant biologiquement actif d'une acétylcholinestérase. Plus particulièrement, un tel polynucléotide comprendra la séquence SEQ ID N03 décrite ci-dessus codant pour l'acétylcholinestérase retrouvée dans le venin du serpent Bungarus fasciatus. Selon un aspect particulier du polynucléotide codant pour un polypeptide de fusion selon l'invention, ce polynucléotide comprend notamment, de l'extrémité 5' vers l'extrémité 3', une séquence codant pour l'acétyl- cholinestérase monomérique du venin du serpent Bunyarus fasciatus, le peptide cMyc, et le fragment scFv d'un anticorps monoclonal dirigé contre la sous-unité CA non catalytique du venin de crotale. Une telle séquence est, par exemple, la séquence SEQ ID N04 suivante ATGCCCTCCT GCCAGCCTGG CAAGATGCCT GCGCCGTGGC CTTGGTGGCT CCAGCTCCTC 60 CTTTGCATCC CGTCCTGTGT AGCGGTTTTG CCCGGCCGGG CAGGCGAGCT GAAAGTGTCC 120 ACCCAGACTG GCTCGGTGCG TGGCCTGAGC CTGCCGGTTC TCGACGGCCA CGTCTCGGCC 180 TTCCTAGGCA TCCCCTTTGC GGAGCCTCCC CTGGGCAGGA TGCGCTTCCT GCGCCCTGAG 240 CCCGTCAAGC CCTGGCAGCA CGTCCTGGAC GCCACTTCCT ACAAGCCCGC CTGCTACCAG 300 ATGGTGGACA CCAGCTACCC AGGCTTCCAG GGCACGGAGA TGTGGAACCC CAACCGGGGC 360 ATGAGCGAGG ACTGCCTCTA CCTCAACATC TGGGTGCCCT CCCCGCGCCC CAAGGATGCC 420 CCCGTCCTGG TCTGGATCTA CGGAGGGGGC TTCTACAGCG GCGCTGCCTC CCTGGACGTC 480 TATGACGGCC GCTTCCTGAC CTACACGCAG AACGTCATCC TGGTCTCCCT CAGCTACCGT 540 GTGGGGGCCT TCGGCTTTTT GGGCCTCCCG GGAAGTCCAG AGGCCCCGGG AAACATGGGG 600 CTGCTGGACC AGCGCTTGGC CCTGCAGTGG ATCCAGAACA ACATCCATCC TTTTGGGGGC 660 AATCCGAGGG CGGTCACCGT CTTTGGGGAG AGTGCCGGGG CCGCTTCGGT GGGCATGCAC 720 CTGCTTTCCA CCCAGFGCCG CACCCTCTTC CAGCGGGCCA TTCTGCAGAG CGGCGGCCCC 780 AACGCACCGT GGGCCACCGT CACGCCTGCC GAAAGCCGGG GCCGGGCGGC CCTTCTGGGA 840 AAGCAGCTGG GCTGCCACTT CAACAACGAC TCCGAGCTGG TCAGTTGCTT GCGCTCGAAA 900 AACCCCCAGG AGTTGATTGA CGAGGAGTGG TCCGTCCTGC CCTACAAGAG CATTTTCCGC 960 TTCCCCTTCG TCCCGGTCAT TGACGGGGAC TTCTTTCCAG ATACCCCCGA GGCCATGCTG 1020 AGCTCGGGCA ACTTCAAGGA GACCCAGGTG TTGCTGGGCG TGGTGAAGGA CGAGGGCTCC 1080 TACI'TCCTGA TCTACGGGCT GCCTGGCTTC AGCAAGGACA ACGAGAGCCT CATCAGCCGG 1140 GCCGACTTCC TGGAAGGGGT GCGGATGAGC GTGCCCCACG CCAACGACAT CGCCACTGAT 1200 GCCGTGGTGC TGCAATACAC TGACTGGCAG GACCAGGACA ACAGGGAGAA GAACCGGGAG 1260 GCCCTGGACG ACATCGTGGG AGACCACAAC GTCATCTGCC CGGTCGTGCA GTTCGCCAAC 1320 GACTACGCCA AGCGCAACAG CAAGGTGTAC GCCTACCTGT TTGACCACCG GGCCTCCAAC 1380 CTCCTCTGGC CCCCCTGGAT GGGGGTCCCC CATGGCTACG AGATCGAGTT TGTCTTTGGA 1440 TTGCCGCTCA ACGACAGCCT GAACTACACG CCCCAAGAGA AGGAGCTGAG CCGCAGAATG 1500 ATGCGCTACT GGGCCAACTT CGCCCGGACA GGGAACCCCA CCGACCCTGC CGATAAGAGC 1560 GGGGCCTGGC CCACCTACAC CGCCTCCCAG CCGCAGTATG TCCAGCTCAA CACCCAGCCG 1620 CTGGCCACCC AACCCAGCCT GCGGGCCCAG ATCTGCGCCT TCTGGAACCA CTTCCTCCCC 1680 AAACTGCTGA ACGCCACAGA ACAAAAACTC ATCTCAGAAG AGGATcrGAA TGCGGCCCAG 1740 CCGGCCATGG CCCAGGTCAA GCTGCAGCAG TCTGGAGCTG AGTTGATGAA GCCTGGGCC 1800 TCAGTGAAGA TATCCTGCAA GGCGACTGGC TACACATTCA GTAGCTACTG GATAGAGTGG 1860 GTAAAGCAGA GGCCTGGATA TGGCCTTGAG TGGATTGGAG AGATTTTACC TGGAAGTGGT 1920 AGTACTATCT ACAGTACTAA GTTCAAGGGC AAGGTCACAT TCACTGCAGA AACATCCTCC 1980 AACACAGCCT ACATGCAACT CAGCAGACTG ACATCTGAGG ACTCTGCCGT CTATTACTGT 2040 GCAAGACGAT GGTTATACTT CTCCTTTGAC TACTGGGGCC AAGGGACCAC GGTCACCGTC 2100 TCCTCAGGTG GAGGCGGTTC AGGCGGAGGT GGCTCTGGCG GTGGCGGATC GGACATCGAG 2160 CTCACTCAGT CTCCATCAAT AATGGCTGCC TCTCTGGGGC AGAAGGTCAC CATGACCTGC 2220 AGTGCCAGCT CAAGTGTAAG TTCCAGTTAC TTGCACTGGT TCCAGCAGAA GTCAGGCGCT 2280 TCCCCCAAAC CCTTGATTCA TAGGACATCC AACCTGGCTT CTGGAGTCCC AGCTCGCTTC 2340 AGTGGCAGTG GGTCTGGGAC CTCTTACTCT CTCACAATCA GCAGCGTGGA GGCTGAAGAT 2400 GATGCAACTT ATTACTGCCA GCAGTGGAGT GGTTACCCAT TCACGTTCGG TGCTGGCACC 2460 AAGCTGGAAA TCAAACGG 2478 La construction génétique décrite ci-dessus a été insérée dans un vecteur permettant l'expression du polypeptide dans des cellules hôtes et ledit vecteur a été introduit par transfection dans des cellules eucaryotes. La séquence caractérisant les polynucléotides selon l'invention peut être optimisée, selon le type d'organisme hôte dans lequel l'expression du polypeptide de fusion est désirée et donc l'usage des codons spécifique à l'organisme considéré (cellules de mammifère ou d'insecte, cellules de plante, bactérie, notamment) . Pour les bactéries et les plantes, respectivement, l'usage générai des codons peut être retrouvé dans la demande de brevet européen NO EP0 359 472 (Mycogen). En conséquence, constitue aussi un objet de l'invention un vecteur de clonage et/ou d'expression contenant un polynucléotide codant pour un polypeptide de fusion tel que défini ci-dessus. Avantageusement, un tel vecteur comprendra, en outre, les signaux d'expression et/ou de régulation de la transcription et de la traduction nécessaires à une expression optimale du polypeptide de fusion dans l'hôte cellulaire choisi, ces signaux d'expression et/ou de régulation devant être, au sein du vecteur recombinant, liés de manière fonctionnelle au polynucléotide codant pour le polypeptide de fusion selon l'invention. Par signaux d'expression et/ou de régulation liés de manière fonctionnelle à un polynucléotide codant pour un polypeptide de fusion selon l'invention, on entend des séquences de régulation permettant l'expression du polynucléotide codant dans l'hôte cellulaire recombinant choisi. La nature précise des régions de régulation nécessaires à l'expression du gène varie d'un hôte cellulaire à l'autre. Celles-ci comprennent en général une région promotrice laquelle, contient chez les procaryotes à la fois le promoteur (qui dirige l'initiation de la transcription) ainsi qu'une ou plusieurs régions, lesquelles, une fois l'ADN transcrit en ARN, contiennent un signal de début de traduction et un site de liaison aux ribosomes (séquence Shine-Dalgarno).. En outre, un site de terminaison de la transcription fonctionnel chez l'hôte cellulaire recombinant choisi peut être, si nécessaire, inséré en aval du codon d'arrêt de la traduction de la séquence codante, afin d'obtenir des transcrits de la taille la plus réduite possible et ainsi favoriser l'expression du polynucléotide codant pour le polypeptide de fusion selon l'invention. Les régions promotrices placées à proximité de la séquence à exprimer sont choisies de telle manière qu'elles soient fonctionnelles dans l'hôte cellulaire désiré. Parmi les promoteurs bactériens, on pourra motamment utiliser les promoteurs LacI, LacZ, les promoteurs de l'ARN polymérase du bactériophage T3 ou T7, le promoteur de la polyhédrine ou le promoteur de la protéine pi0 du baculovirus (kit Novagen ; Smith et al., 1983 ; O'Reilly et al., 1992) ou encore le promoteur lambda PR ou le promoteur trc. De préférence, la région promotrice sera placée à proximité du site d'initiation de la traduction de la séquence codant le polypeptide de fusion, par exemple à une distance comprise entre 10 et 400 paires de base en amont du codon ATG. Pour une expression dans des cellules eucaryotes, on pourra avantageusement utiliser le promoteur précoce du CMV, le promoteur de la thymidine kinase du virus de l'Herpès simplex, le promoteur précoce ou le promoteur tardif de SV40, les régions LTR ( Long Terminal Repeat ) de certains retrovirus ou encore le promoteur de la métallothionéine I de souris. Plus généralement, le choix d'un promoteur adéquat par l'homme du métier pourra aussi être guidé par l'ouvrage de Sambrook de 1989 ou encore l'ouvrage de Fuller de 1996. En particulier, si l'hôte cellulaire choisi est une bactérie, le vecteur de clonage et/ou d'expression selon l'invention comporte soit une origine de réplication fonctionnelle dans une bactérie, soit des séquences lui permettant de s'intégrer dans le génome d'une bactérie. il peut s'agir plus particulièrement d'un plasmide, d'un phage, etc. En outre certains vecteurs peuvent comporter avantageusement plusieurs origines de réplication, notamment deux origines de réplication, l'une fonctionnelle dans des bactéries du genre E. coli, utile pour une duplication aisée du vecteur, l'autre fonctionnelle dans la bactérie choisie pour l'expression du polypeptide de fusion selon l'invention. De tels vecteurs sont notamment décrits dans l'ouvrage de Sambrook et al. publié en 1989. On peut également utiliser un vecteur d'expression du type baculovirus contenant au moins un site de clonage multiple dans lequel sont insérés les éléments spécifiques de l'expression du gène pol dans un squelette de plasmide de type pUC8. De tels plasmides peuvent être classés en deux sous-groupes, respectivement, d'une part, les vecteurs pVLMelMyc- qui permettent la fusion du polynucléotide à exprimer avec la séquence signal du gène de la mellitine (Chai et al., 1993 ; Vlasak et al., 1983) et, d'autre part, les vecteurs pVLPolMyc- permettant la fusion du polynucléotide à exprimer avec la séquence codant pour les 12 premiers acides aminés de la protéine Pol et de la protéine cMyc. Le polynucléotide codant pour le polypeptide de fusion selon l'invention est inséré au niveau du site de clonage multiple, résultant en une fusion du peptide Mel Myc ou Pol-Myc avec l'extrémité N-terminale du polypeptide de fusion selon l'invention. La mise en oeuvre de tels vecteurs est notamment décrite par Lenhard et al. en1996. Parmi les vecteurs utilisables dans un système d'expression baculovirus, on peut encore citer les vecteurs de la famille BacTen, commercialisés par la société Quantum-Bioprobe. il s'agit d'un système d'expression basé sur un promoteur fort et unique, le promoteur plO. Dans ces vecteurs particuliers, la totalité du locus polyhédrine ainsi que la séquence codant le polypeptide plO sont délétés, ce qui réduit le bruit de fond dû aux protéines natives. Par ailleurs, l'absence de séquence codant le polypeptide plO contribue à retarder la lyse des cellules infectées, ce qui prolonge la période de production des protéines recombinantes d'intérêt. il s'agit en particulier des vecteurs QBI-pTenl2, QBI-pTen21, QBI-pTenTwin et QBI- pTenACE. Le plasmide QBI-pTenTwin permet l'expression simultanée de deux transgènes ; le plasmide QBI-pTenACE contient la séquence codant le peptide signal de l'acétylcholinestérase de drosophile, ce qui permet la sécrétion dans le milieu de culture de la protéine recombinante d'intérêt. Les vecteurs d'expression suivants peuvent également être utilisés a) vecteurs bactériens : pBs, phagescript, PsiXl74, pBluescript SK, pNH8a, pNH16a, pNH18a, pNH64a (commercialisés par Stratagene) ; pTrc99A, pKK223-3, pDR540, pRITS (commercialisés par Pharmacia) ; pQE-30 (commercialisé par QIAexpress) b) système baculovirus : pVL1392/1393 (commercialisé par Pharmingen) c) vecteurs pour cellules eucaryotes : pWLneo, pSV2cat, pOG44, pXT1, pSG (commercialisés par Stratagene) pSVK3, pBPV, pMSG, pSVL (commercialisés par Pharmacia), pCDNA3 (commercialisé par Invitrogen). De manière particulièrement préférée, le vecteur de l'invention est un vecteur réplicable dans E. coli et fonctionnel dans les cellules de mammifères, en particulier les cellules COS. il s'agit du vecteur pCDNA3. A ce titre, fait également partie de l'invention le plasmide pC-AChEscFv contenu dans la souche de E. coli I12-AChE B.f.l déposée à la CNCM'le 30 octobre 1997 sous le numéro d'accès I-1938. L'invention concerne en outre tout hôte cellulaire recombinant, procaryote ou eucaryote, comprenant un polynucléotide codant pour un polypeptide de fusion selon l'invention ou un vecteur de clonage et/ou d'expression tel que défini précédemment. Les cellules recombinantes de l'invention peuvent être préparées en utilisant toutes les techniques connues de l'homme du métier permettant l'introduction d'un acide nucléique dans une cellule. il peut s'agir par exemple de techniques physiques (électroporation, biolistique, etc.), de techniques chimiques (précipitation au phosphate de calcium, utilisation d'agents de transfert chimiques lipides cationiques, polymères, etc.) ou d'autres méthodes telles que la fusion de cellules, la conjugaison, etc. Des hôtes cellulaires recombinants préférés selon l'invention sont notamment a) E. coli : Kï2 (ATCC NO 23820), DH5-alpha b) cellules eucaryotes : cellules HeLa (ATCC N CCL2 NO Cul2.1 ; N CCL2.2), cellules Cvl (ATCC NO CCL70), cellules COS (ATCC N CRL1650 ; N CRL 1651) , cellules CHO (ATCC N CRL9096, N CRL96l8), cellules Sf-9 (ATCC N CRL1711) ; S. cerevisiae (ATCC N 2364 ; N 2365 N 2366). De manière tout à fait préférée, un hôte cellulaire recombinant utile pour l'expression du polypeptide de fusion recombinant selon l'invention est une lignée de cellules COS. Selon un autre aspect, un hôte cellulaire recombinant préféré pour le maintien et l'amplification d'un vecteur recombinant selon l'invention est la souche de E. coli I12-AChE B.f.l recombinante déposée le 30 octobre 1997 sous le numéro d'accès N I-1938. Dans le cas où le récepteur protéique possède un ou plusieurs sites de glycosylation et où ce(ces) sites(s) de glycosylation est (sont) important (s) du point de vue de la capacité dudit récepteur protéique à se lier à la molécule ligand qui est recherchée, on préférera une expression du polypeptide. de fusion recombinant dans une cellule possédant un système enzymatique apte à réaliser convenablement l'étape de maturation protéique par glycosylation, c'est-à-dire une cellule eucaryote, par exemple une cellule de levure (comme Saccharomyces cerevisiae) et de manière particulièrement avantageuse dans une cellule de mammifère '(cellules COS, cellules CHO, cellules HeLa). L'invention concerne également un procédé de production d'un polypeptide de fusion tel que défini dans l'invention. Un procédé particulier de production d'un polypeptide de fusion selon l'invention comprend la culture d'un hôte cellulaire recombinant tel que précédemment décrit, la récupération, et, le cas échéant, la purification dudit polypeptide de fusion à partir du surnageant de culture ou du lysat cellulaire de l'hâte recombinant. Lorsque l'hôte recombinant est une cellule COS transfectée par le piasmide pC-AChE-scFv selon l'invention, le polypeptide de fusion sera de préférence purifié à partir du surnageant de culture où la plus grande partie du polypeptide de fusion est retrouvée, comme l'indiquent les résultats d'activité acétylcholinestérase présentés sur le Tableau 2. il a été observé que la protéine de fusion AChE-scFv est produite en grande quantité dans les cellules COS, sa concentration dans le milieu de culture des cellules COS transfectées étant supérieures à 1 yg/ml. La protéine AChEscFv a été produite et sécrétée par les cellules COS recombinantes sous une forme active, tant du point ae vue de l'activité catalytique de l'AChE que du point de vue de l'affinité du scFv pour la sous-unité CA de la crotoxine. Les polypeptides de fusion recombinants selon l'invention peuvent être purifiés par chromatographie d'affinité selon diverses modalités. Par exemple, lesdits polypeptides sont purifiés par passage sur un support de chromatographie sur lequel a été préalablement immobilisée une molécule choisie parmi un substrat ou un pseudosubstrat de l'acétylcholinestérase ou encore un anticorps polyclonal ou monoclonal dirigé contre tout ou partie du polypeptide de fusion à purifier, notamment contre l'acétylcholinestérase, contre le récepteur protéique ou encore contre un peptide interne de liaison ou servant de site de reconnaissance pour la purification, tel que le peptide cMyc. Les polypeptides de fusion recombinants selon l'invention, dans le mode de réalisation particulier dans lequel ils portent à l'une de leurs extrémités un segment de polyhistidine, par exemple une queue de six résidus histidine, peuvent en outre être purifiés sur une colonne de chromatographie contenant une résine à base de nickel, comme par exemple la résine NiNTA (Porath et al., 1975 demande internationale N" PCT/FR 96/01801, publiée sous le NO WO 97/18311 [Deubel et al. Le polypeptide de fusion AChE-scFv a été purifié en une seule étape sur une colonne de chromatographie d'affinité de faible coût et réutilisable. il s'agit d'un procédé beaucoup plus satisfaisant que les procédés de purification d'immunoconjugués recombinants de l'art antérieur. En particulier, l'immunoconjugué recombinant décrit par Ducancel et ai. précipite au niveau du cytoplasme bactérien et doit, après extraction à partir des sphéroplastes, être renaturé et purifié selon des méthodes conventionnelles beaucoup moins performantes, à savoir des traitements répétés de congélation-décongélation en présence de Dnase I, ultracentrifugation des lysats ainsi obtenus, filtration puis enfin passage sur une colonne de chromatographie d'affinité. Le procédé de purification de l'état de la technique décrit ci-dessus est donc long, coûteux du fait de l'infrastructure nécessaire à sa réalisation, à rendement faible du fait du nombre d'étapes important, et peu efficace du fait de la perte d'activité enzymatique due aux environnements de milieu défavorables utilisés. Les polypeptides de fusion selon l'invention permettent la réalisation de tests de détection de grande sensibilité et spécifiques de la molécule ligand recherchée. Notamment, le récepteur protéique constitutif du polypeptide de fusion conserve une affinité pour son ligand du même ordre de grandeur que lorsque ce récepteur protéique est sous une forme libre, non-fusionnée. Ainsi, le polypeptide de fusion AChE-scFv constitutif du traceur enzymatique décrit ici par les inventeurs a permis de réaliser un test immunoenzymatique de grande spécificité pour la sous-unité CA de la crotoxine. Ainsi, pour une dilution au 1/2000 du peptide de fusion, ce qui correspond approximativement à une concentration du peptide de fusion en solution de 0,7 ng/ml (Figure 2 B et Tableau 2), le ligand, en l'occurrence la sous-unité CA de la crotoxine, a été détecté. Dans un test de type ELISA par compétition, la fixation du polypeptide de fusion à la sous-unité CA de la crotoxine immobilisée sur la surface d'une plaque de microtitration est inhibée à 50 W par une concentration de sous-unité CA libre de 5 x 10-9 M (Indice iC50) . La valeur de l'indice IC50 de la sous-unité CA avec le polypeptide de fusion AChE-scFv est identique à l'affinité de l'anticorps natif A-56.36 (Choumet et al. 1992). Ce dernier résultat démontre que le repliement protéique de la partie variable simple chaîne (scFv) produite par recombinaison génétique n'a pas été modifié au sein du polypeptide de fusion AChE-scFv. Les polypeptides de fusion selon l'invention seront donc avantageusement mis en oeuvre en tant que réactifs pour la détection de ligands possédant une affinité pour le récepteur protéique inclus dans ces polypeptides, tel que par exemple le récepteur protéique constitué du fragment scFv de l'anticorps monoclonal A-56.36 dirigé contre la sous-unité CA de la crotoxine. En conséquence un autre objet de l'invention consiste en un réactif de diagnostic caractérisé en ce qu'il comprend un polypeptide de fusion selon l'invention, le cas échéant en association avec un ou plusieurs excipients biocompatibles. L'invention vise aussi un procédé de détection d'une molécule ligand dans un échantillon, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes a) mise en contact d'un polypeptide de fusion ou d'un réactif de diagnostic selon l'invention avec un échantillon susceptible de contenir la molécule ligand recherchée b) mise en évidence du complexe formé entre, d'une part, le polypeptide ou le réactif de diagnostic et, d'autre part, la molécule ligand éventuellement présente dans l'échantillon à analyser. Dans le mode particulier de réalisation d'un polypeptide de fusion dans lequel le récepteur protéique possède une structure dérivée d'un anticorps, en particulier d'un anticorps monoclonal, et donc dans le cas où le procédé de détection précédemment décrit revêt toutes les caractéristiques d'un test de détection immunoenzymatique, l'homme du métier pourra avantageusement se référer, pour sa mise en oeuvre, à l'ouvrage de D. Wild (1994), à l'ouvrage de S.S. Desphande (1996) ou encore à l'ouvrage de M. Terpstra (1992), l'enseignement contenu dans ces ouvrages, en tant qu'il se rapporte à des techniques immunoenzymatiques, étant ici incorporé par référence. Fait aussi partie de l'invention un procédé de détection immunoenzymatique (ELISA) d'une molécule ligand susceptible d'être p.résente au sein d'un échantillon à tester. Un tel procédé comprendra, par exemple, les étapes suivantes a) dépôt.d'une fraction aliquote d'un échantillon à tester, ou d'une dilution d'un échantillon à tester, dans les puits d'une plaque de microtitration b) lavage des puits de la microplaque afin d'éliminer la partie de l'échantillon non adsorbée sur les puits d) incubation des puits de la. microplaque avec un polypeptide de fusion selon l'invention, dirigé contre l'antigène recherché e) détection, le cas échéant en comparaison avec un témoin de contrôle positif et/ou un témoin de contrôle négatif, de la quantité de substrat hydolysé par l'acétyl- cholinestérase du polypeptide de fusion complexé à l'antigène recherché. Fait également partie de l'invention un procédé de détection de type sandwich , dans lequel un anticorps de spécificité donnée -dit molécule de capture- est préalablement immobilisé sur un support avant incubation avec ltéchantillon à analyser, la détection des complexes récepteur protéique-molécule ligand étant alors réalisée par une seconde incubation avec un polypeptide de fusion selon l'invention. Dans ce mode de réalisation particulier de l'invention, l'anticorps immobilisé et la partie récepteur protéique constitutif du polypeptide de fusion doivent reconnaître des épitopes différents de la molécule analyte dont la présence est recherchée dans l'échantillon. Une telle technique de type sandwich , appliquée à un test immunologique, a été notamment décrite par Addison en 1970, le contenu de cet article étant ici incorporé par référence. Dans un autre mode de réalisation du procédé de détection selon i'invention, la molécule ligand à rechercher est un traceur primaire , comme par exemple un conjugué de type biotine ou encore de type avidine ou streptavidine, le polypeptide de fusion selon l'invention étant alors employé comme traceur secondaire permettant de visualiser la formation d'un complexe avec le conjugué traceur primaire dans un échantillon. Un ensemble de deux molécules traceur primaire et traceur secondaire tels que définis ci-dessus fait également partie de l'invention et peut avantageusement être inclus dans une trousse de détection telle que décrite ultérieurement dans la description. L'invention concerne donc également un ensemble de réactifs de diagnostic, caractérisé en ce qu'il comprend a) un réactif comprenant une molécule reconnaissant spécifiquement un analyte à rechercher dans un échantillon, ladite molécule étant couplée à une molécule de type biotine b) un polypeptide de fusion selon l'invention, dans lequel le récepteur protéique est une molécule de type avidine ou streptavidine. Dans encore un autre mode de réalisation avantageux du procédé de détection selon l'invention, au moins deux polypeptides de fusion sont mis en oeuvre a) un premier polypeptide de fusion comprenant un récepteur protéique ayant une affinité pour l'analyste d'intérêt recherché dans l'échantillon et représentant la molécule ligand dudit récepteur protéique b) au moins un second polypeptide de fusion comprenant un récepteur protéique ayant une affinité pour une région du premier polypeptide de fusion différente de l'acétyl cholinestérase, la fixation du second polypeptide de fusion n'affectant pas significativement l'activité catalytique de la partie acétylcholinestérase du premier polypeptide de fusion. La mise en oeuvre, comme décrit ci-dessus, d'au moins deux polypeptides de fusion catalytiquement actifs pour reconnaître un même analyte constitue un moyen avantageux d'amplifier le signal de détection et, en conséquence, d'améliorer encore la sensibilité du test de détection selon l'invention. La présente invention concerne donc également, de manière générale, l'application dans le domaine de la détection d'analytes dans un échantillon, d'une acétylcholinestérase monomérique, en particulier lorsque l'acétylcholinestérase est présentée comme élément constitutif d'un polypeptide de fusion selon l'invention. Les trousses de détection actuellement commercialisées, par exemple les trousses de type ELISA pour différentes cytokines sont onéreuses et la valeur de la limite inférieure de détection est parfois trop élevée pour permettre une évaluation rigoureuse de faibles concentrations de cytokines, notamment telles que l'IL-4, l'IL-6 ou l'IL-8, ce seuil de détection étant en général de 5 à 10 pg/ml. Les inventeurs se proposent en conséquence de remédier aux inconvénients des trousses de détection de 1'art antérieur grâce aux polypeptides de fusion selon l'invention. L'invention a également pour objet une trousse ou kit de détection d'une molécule ligand dans un échantillon, caractérisée en ce qu'elle comprend a) un polypeptide de fusion ou un r La séquence nucléotidique du gène synthétique est représentée avec l'indication de la position des sites de restriction BamH1, BglII et SfiI. La séquence codant pour l'AChE tronquée s'étend du nucléotide en position 1 au nucléotide en position 1698 de la Figure. La séquence codant pour le peptide cMyc s'étend du nucléotide en position 1699 au nucléotide en position 1731 de la Figure. La séquence codant pour le fragment scFv s'étend du nucléotide en position 1732 au nucléotide en position 2478 de la Figure. Les séquences codant pour les régions hypervariables de la chaîne lourde (VH1, VH2, VH3) et de la chaîne légère (VL1, VL2, VL3) du fragment scFv sont soulignées en gras. La séquence codant pour le peptide de laison entre la chaîne lourde et la chaîne légère du fragment scFv s'étend du nucléotide en position 2107 au nucléotide en position 2151 de la Figure. B) Séquence en acides aminés du polypeptide de fusion AChEscFv. La séquence peptidique représentant l'AChE tronquée s'étend de l'acide aminé en position 1 à l'acide aminé en position 566 de la Figure. La séquence peptidique du peptide cMyc s'étende de l'acide aminé en position 567 à l'acide aminé en position 577 de la Figure. La séquence peptidique du fragment scFv s'étend de l'acide aminé en position 578 à l'acide aminé en position 826 de la Figure. La séquence peptidique du peptide de liaison entre la chaîne lourde et la chaîne lègère du fragment scFv s'étend de l'acide aminé en position 703 à l'acide aminé en position 717 de la Figure ; cette séquence est soulignée en pointillés. Les régions correspondant aux régions hypervariables de la chaîne lourde (VH1, VH2, VH3) et de la chaîne légère (VLl, VL2, VL3) du domaine peptidique scFv sont soulignées en gras. Figure 2 : Fonction du traceur immunoenzymatique AChE-scFv. (A) Le milieu de culture des cellules COS transfectées a été incubé pendant 1 heure à 37 C dans une plaque de microtitration sur laquelle a été préalablement immobilisée la sous-unité CA de la crotoxine. La plaque a ensuite été lavée puis incubée pendant 1 heure à 37 C avec l'anticorps monoclonal 9E10, spécifique du peptide cMyc. Le test ELISA a été réalisé comme décrit dans la section Matériel et Méthodes. (Q > pcBi ; (C) pC-AChE-scFv. (B) L'extrait cellulaire des cellules COS transfectées a été incubé pendant 1 heure à 37 C dans une plaque de microtitration sur laquelle a été préalablement immobilisée la sous-unité CA de la crotoxine. La plaque a ensuite été lavée, le milieu de test AChE a été ajouté et la réaction a été poursuivie pendant 4 heures à 37 C. (O) pcBi; (z) pC AChE-scFv. Figure 3 : Affinité de la protéine de fusion AChE-scFv pour la sous-unité CA de la crotoxine. Le milieu de culture des cellules COS transfectées avec le gène chimère a été préparé à la dilution 15800 et incubé pendant une nuit à 4 C avec différentes concentrations de la sous-unité CA. Des fractions aliquotes de 100 pl ont ensuite été transférées dans les puits d'une plaque de microtitration sur laquelle a été préalablement immobilisée la sous-unité CA de la crotoxine. La plaque est ensuite incubée pendant 30 minutes à la température du laboratoire, lavée, puis l'activité AChE est mesurée par la méthode d'Ellman. Figure 4 : Electrophorèse de la protéine de fusion purifiée par chromatographie d'affinité. Des protéines, dénaturées en présence de SDS à 1 , de mercaptoéthanol à 0,1 M, ont été déposées sur un gel de polyacrylamide à 12 k et soumises à une électrophorèse. Après migration, le gel d'électrophorèse a été coloré au bleu de Coomassie. Les protéines marqueurs de poids moléculaire suivants sont symbolisés sur le côté droit de la photographie du gel phosphorylase B, 94 kDa ; sérumalbumine bovine, 67 kDa ovalbumine, 43 kDa ; anhydrase carbonique, 30 kDa. Piste de gauche : protéine de fusion AChE-scFv purifiée par chromatographie d'affinité. Piste de droite : AChE du venin de Bungarus fasciatus, purifiée par chromatographie d'affinité. Figure 5 : Carte du plasmide pCDNA3 contenant l'insert de séquence SEQ ID N04 et déposé à la CNCM le 30 octobre 1997 sous le numéro I-1938. P CMV : promoteur du cytomegalvirus P T7 : promoteur du bactériophage T7 P SP6 : promoteur pSP6 ColE1 : origine de réplication fonctionnelle dans Escherichia coli provenant du plasmide pUCi9 SV40 polyA : site de polyadénylation ; Amp R : gène de la beta lactamase conférant un phénotype de résistance à l'ampiciiine P SV40 ori : origine de réplication de SV40 pour une expression épisomale transitoire dans des cellules exprimant l'antigène T de SV40. Les promoteurs P T7 et P SP6 sont localisés de part et d'autre du site de clonage multiple détaillé sur la figure et orientés en sens opposés. Le polynucléotide de séquence SEQ ID N04, sous une forme double brin est inséré, dans le sens 5' vers 3', entre le site EcoRI et le site NotI du site de clonage multiple représenté sur cette Figure. En conséquence, les sites EcoRV et BstXI situés entre les sites EcoRI et NotI sont supprimés au moment de l'introduction de l'insert de séquence SEQ ID N 4. Matériel et Méthodes I. Matériel L'acétylthiocholine et l'acide 5-5'-dithio-bis(2nitrobenzoïque) sont commercialisés par Sigma (St Louis, Missouri, USA). Les enzymes utilisées pour la construction des plasmides sont commercialisées par Boehringer-Mannheim (Allemagne) et par Promega Biotech (Madison, USA). L'anticorps monoclonal 9E10 anti-cmyc est commercialisé par Pharmingen (San Diego, USA). La crotoxine ainsi que la sous-unité CA de la crotoxine ont été purifiés à partir du venin de Crotalus durissus terri fi cus comme décrit précédemment (Hendon et al., 1971 ; Faure et al., 1991). Les autres réactifs et les solvants de haute pureté sont respectivement commercialisés par Merck (Darmstadt, Allemagne), Sigma (St Louis, Missouri, USA) et par Prolabo (Paris, France). Les plaques de microtitration ont été obtenues auprès de Nunc (Roskilde, Danemark). Il. Méthodes A) Production du gene chimérique codant l'AChE et le scFv. Un ADNc codant l'AChE du venin de B. fasciatus a été isolé à partir d'une banque d'ADNc clonée dans le plasmide pT3T7 (Pharmacia), cette banque d'ADNc ayant été construite après digestion par les enzymes EcoRI et NotI (Cousin et ai., 1996a) . Un fragment codant le domaine catalytique (allant du nucléotide en position 204 au nucléotide en position 1946 de la séquence décrite par Cousin et al., 1996a) a été introduit entre les sites EcoRI et NotI du plasmide pcDNA3 (Invitrogen) résultant en le plasmide pCB1, plasmide qui a été utilisé comme témoin négatif (Cousin et al., 1996a). Le gène chimère a été obtenu par réaction PCR, en utilisant une amorce aller de séquence identique à la séquence allant du nucléotide en position nit1641 au nucléotide nt1664 inclus de la séquence décrite par Cousin et ai. (1996a) (5'-GGATTGCCGCTCAACGACAGCCTG-3') et une amorce retour hybridant avec la séquence complémentaire de la séquence allant du nucléotide en position nt 1946 au nucléotide en position nt 1884 de la séquence décrite par Cousin et al. (1996a) (3' TTTGACGACTTGCGGTGTCTTGTTTTTGAGTAGAGTCTTCTCCTAGACTTACGCCGGGT CGGCCGGTAC-5') du gène de l'AChE de B. fasciatus. Cette dernière amorce comprend, du côté 5', et dans le sens 3' vers 5', une séquence complémentaire de la séquence codant pour le peptide cMyc ainsi qu'une séquence complémentaire de la séquence reconnue par l'enzyme de restriction SfiI sur le brin codant. La région codant pour le peptide cMyc ainsi que le site de restriction SfiI sont ainsi ajoutés à cette étape. L'amplicon résultant contient donc la séquence codante du polypeptide cMyc et le site de restriction SfiI. Le fragment amplifié est cloné dans pGEM-T. Ce fragment contient l'extrémité 3' de l'AChE fusionné avec la séquence codante de cmyc et le site sfiI. Ce plasmide est digéré par BGlII et NotI (le site NotI est dans le vecteur pGEM-T) et le fraqment est transféré dans pT3T7 à la place du fragment Bgl.II-notI d'AChE. On obtient alors le vecteur pT3T7-AChE-cmyc. * Le plasmide résultant est ensuite digéré par BamHI et NotI, et le fragment obtenu est introduit dans le vecteur pCB1 (à la place du fragment AChE correspondant). Le gène codant scFv I12, le fragment de l'anticorps spécifique de la sous-unité CA de la crotoxine, est ensuite introduit entre les sites SfiI et NotI du fragment pC-AChEcMyc afin d'obtenir la construction pC-AChE-scFv, un plasmide qui contient le gène chimère (Fig. l). B) Transfection dans les cellules COS. Les cellules COS ont été transfectées avec 5 yg du vecteur pCDNA3 contenant le gène chimère AChE-scFv, en utilisant la méthode au DEAE-dextran, comme décrit par Bon et Massoulié (1997). Les cellules sont ensuite mises en culture pendant 5 jours à 370C puis récupérées par centrifugation (4000 t/min pendant 10 min) . Le surnageant de culture est séparé et conservé. Les cellules sont remises en suspension dans 500 yl de tampon phosphate (PBS) contenant des inhibiteurs de protéases, puis soumis à une sonication pendant 90 sec. Les cellules intactes ont été récupérées par centrifugation et le surnageant de centrifugation (contenant l'extrait cellulaire soniqué) est séparé et conservé à 40C. C) Purification de la protéine de fusion. La protéine de fusion AChE-scFv a été purifiée par chromatographie d'affinité, comme décrit par Cousin et al. (1996b) ou Frobert et al. (1997). Un gel de chromatographie d'affinité pour l'AChE a été préparé en couplant le ligand m-carboxyphényldiméthyléthyle au support de chromatographie EAH Sepharose 4B (Massoulié et al., 1976). Le surnageant de culture des cellules COS (3 ml) a été dialysé contre une solution de phosphate de potassium à 0,1 M à pH 7,4, puis chargé sur une colonne contenant 1 ml de gel d'affinité et équilibré avec un tampon identique au tampon de dialyse. La colonne est lavée avec 2 ml du tampon d'équilibrage, puis avec 2 ml de solution de NaCl à 0,25 M dans le tampon d'équilibrage. L'échantillon est élué avec 2 ml de solution NaCl à 0,25 M, décaméthonium à 20 mM, phosphate de potassium à 0,1 M à pH 7,4. Les fractions d'élution contenant une activité AChE ont été réunies puis dialysées contre une solution tampon de phosphate de potassium à 0,05 M à pH 7,4 pendant 72 heures à une température de 40C. D) Mesure de l'activité AChE. L'activité acétylcholinestérase a été déterminée par colorimétrie, selon la technique décrite par Ellman et al. en 1961. E) Détection de la protéine de fusion par ELISA. Les puits de plaques de microtitration ont été incubés avec la sous-unité CA de la crotoxine (100 yl par puits dans une solution de PBS contenant une concentration de l Hg/ml de CA) pendant 2 heures à 370C. Les sites libres de la surface des puits de microplaques sont ensuite saturés en incubant chacun d'entre eux avec 100 Ul d'une solution de PBS (tampon PBS-Tween-SAB) contenant 3 W de sérum albumine bovine (SAB) et 0,1 k de Tween-20. Les surnageants de cultures des cellules COS et les extraits cellulaires ont fait l'objet de dilutions en série dans du tampon PBS-Tween-SAB. Une fraction aliquote de 100 pl de chaque dilution est ajoutée dans chacun des puits et les plaques de microtitration ont été incubées pendant 1 heure à 370C. Deux méthodes de détection ont été utilisées - l'activité acétylcholinestérase (AChE) a été mesurée en ajoutant 100 ssl de réactif d'Ellman par puits de microplaque et en déterminant la densité optique à 415 nm après des temps d'incubation variables - la protéine de fusion a été détectée en ajoutant, dans chacun des puits, 100 Hl d'une solution au 1/500 ème de l'anticorps monoclonal 9E10, spécifique du polypeptide cmyc, dans du tampon PBS-Tween-SAB et en incubant durant 1 heure à 370C. Les puits de microplaques sont ensuite lavés avec une solution de PBS contenant 20 k de Tween-20 (tampon PBS-Tween), puis incubés avec un anticorps anti igG de souris conjugué à la péroxydase. La microplaque est ensuite à nouveau lavée, incubée avec le substrat ophénylènediamine (OPD) et l'activité enzymatique est calculée à partir des mesures de densité optique à 490 nm. F) Affinité de la protéine de fusion. La protéine de fusion AChE-scFv a été incubée pendant une nuit à 40C, à la dilution appropriée (comme déterminée par les expériences d'ELISA direct) avec plusieurs concentrations de sous-unité CA de la crotoxine. Des fractions aliquotes de 100 Ul ont été transférées dans les puits d'une plaque de microtitration préalablement incubée avec la sous-unité CA, et la plaque a été soumise à une incubation de 30 min à 370C. La plaque a ensuite été lavée avec du tampon PBS-Tween et l'activité AChE résiduelle a été déterminée comme décrit précédemment, après incubation de la plaque pendant 4 heures à 370C. G) Analyse de la protéine de fusion par électrophorèse. La solution contenant la protéine purifiée par chromatographie d'affinité a été concentrée par centrifugation sur une membrane Centricon (Amicon, Grasse, France) puis soumise à une électrophorèse sur un gel de polyacrylamide-SDS à 12,5 W à l'aide d'un appareil Phastsystem (Pharmacia, Uppsala, Suède). Le gel a été coloré à l'aide du kit colloidal Coomassie (Novex, San Diego, CA, USA). Exemples Exemple 1 : Séquence du gène codant pour la protéine de fusion. La séquence du gène de fusion synthétique AChE-scFv, codant le domaine cmyc de l'AChE et le fragment scFvI12, est représentée sur la Figure 1. On s'attend à ce que seul le domaine catalytique soit présent dans le produit d'expression de l'AChE mature, du fait que l'enzyme subit une mâturation postraductionnelle aboutissant à la sécrétion dans le venin d'une enzyme dont une partie de l'extrémité C-terminale a été clivée. Des études sur l'expression de ce gène ont montré que ce clivage a lieu dans les cellules COS (Cousin et al., 1996a). Le domaine cmyc est reconnu par l'anticorps 9E10, facilitant ainsi la détection de la protéine de fusion. Le domaine scFvI12 code un anticorps reconnaissant la sous-unité CA de la crotoxine (Choumet et al., 1997). Exemple 2 : Expression de la protéine de fusion AChE-scFv dans les cellules COS. La production de la protéine de fusion AChE-scFv par les cellules COS transfectées avec le vecteur pC-AChE-scFv a été testée en mesurant l'activité AChE dans le milieu de culture et dans les extraits cellulaires obtenus par sonication des cellules (Tableau 2). Le vecteur pCBl a été utilisé comme témoin positif et le vecteur pCDNA3 dépourvu d'insert a été utilisé comme témoin négatif pour la transfection des cellules COS. Tableau 2 : Mesure de l'activité AChE dans les extraits cellulaires Vecteur Activité Concentration enzymatique (U/ml) déduite(*) (yg/ml) Extraits cellulaires Pcdna3 8,5 + 1,14 0,112 + 0,15 Pcbl 30,3 + 4,36 0,401 + 0,057 pC-AChE-scFv 74,56 + 7,14 0,985 + 0,09 Surnageants de culture Pcdna3 34,82 0,461 pcB1 52,2 0,691 pC-AChE-scFv 102,7 1,36 (*) La concentration a été calculée en postulant que la constante catalytique de la protéine de fusion est identique à celle de l'AChE du venin de Bungarus fasciatus. L'activité AChE a été détectée dans les surnageants de cellules transfectées avec le vecteur dépourvu d'insert, vraisemblablement du fait de la sécrétion de AChE native dans les cellules COS. Des niveaux d'activité beaucoup plus grands ont été détectés dans les cellules transfectées avec les vecteurs AChE-scFv ou pCB1. Exemple 3 : Propriétés fonctionnelles de la protéine de fusion AChE-scFv. La protéine de fusion AChE-scFv a été détectée dans des extraits cellulaires par ELISA. La plaque de microtitration a été incubée avec la sous-unité CA de la crotoxine et l'anticorps 9E10, spécifique du polypeptide cMyc, a été utilisé lors de l'étape de détection (Figure 2A). Le témoin négatif est constitué du surnageant de lysat des cellules transfectées avec le vecteur pCB1 puis détruites par sonication. Une protéine contenant à la fois le fragment scFv et le polypeptide cMyc est présent dans le milieu de culture des cellules COS transfectées avec le vecteur pC-AChE-scFv. Une telle protéine n'a pas été détectée dans le surnageant des cellules COS transfectées avec le vecteur pCB1. Des résultats similaires ont été obtenus en utilisant les surnageants de culture des cellules COS transfectées (résultats non représentés). La protéine de fusion a été également détectée en utilisant un test ELISA dans lequel les puits d'une plaque de microtitration sont incubés avec la sous-unité CA de la crotoxine et la protéine est détectée par mesure directe de l'activité AChE. La protéine de fusion a été détectée spécifiquement dans les cellules COS transfectées avec le vecteur pC-AChE-scFv. Cette méthode de détection est extrêmement sensible, du fait qu'un niveau d'activité significativement positif par rapport à un témoin négatif a été obtenu pour des dilutions du conjugué aussi importantes que 1/2000 (Figure 2B). L'anticorps 9E10 anti-cmyc n'est capable de détecter le conjugué qu'au plus à la dilution 1/180 (Figure 2A). Comme déterminé par les tests ELISA, la liaison de la construction AChE-scFv avec la sous-unité CA de la crotoxine immobilisée est déplacée de manière dosedépendante par la sous-unité CA de la crotoxine libre, à des concentrations entre 4 x 10-6 et 6 x 10-10 M. On observe 50 d'inhibition pour une concentration de la sous-unité de CA de 5 x 10 9 M (Figure 3). Ainsi, l'activité AChE mesurée est associée au fragment scFv, qui reconnaît la sous-unité CA de la crotoxine fixée sur la plaque de microtitration. La CI50 de la sous-unité CA sur le complexe AChE-scFv est identique à l'affinité de l'anticorps A-56.36 initial pour la sous-unité CA et est identique à l'affinité du fragment scFv libre (Travaux non publiés de Choumet et al.) Exemple 4 : Purification de la protéine de fusion AChE-scFv et analyse en électrophorèse, La protéine de fusion AChE-scFv a été purifiée en une seule étape à partir des surnageants de culture des cellules COS transfectées par le vecteur pCDNA3 contenant le gène chimère AChE-scFvI12, par chromatographie d'affinité retenant l'AChE. Le rendement de purification est de 40 W. La fraction protéique purifiée migre en une seule bande protéique dans un gel de type SDS-PAGE, montrant clairement que la protéine de fusion peut être purifiée simplement et efficacement à partir du milieu de culture cellulaire (Figure 4). Le poids moléculaire observé de la protéine de fusion est légèrement supérieur à 94 kDa, ce qui est en accord avec le poids moléculaire de la protéine de fusion (97 kDa), calculé à partir des poids moléculaires de ses composants, scFvIl2 (25 kDa) et AChE (72 kDa). Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux des modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite ; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée de la présente invention. Références Addison G.M. et ai., 1970, The radioimmunometric assay, In:i Radioimmunoassay Methods, K.E. Kirkham and W.M. Hunter Eds., Churchill-Livingstone, Edinburgh, UK : 447-461. Atoda H. et al., 1989, A novel blood coagulation factor IX/factorX-binding protein with anticoagulant activity from the venom of Trimeresurus flavoridis (habu snake) isolation and characterization, J. Biochem., 106 : 808-813. Atoda H. et al., 1991, The primary structure of coagulation factor IX/factorX-bining protein isolated from the venom of trimeresus flavoridis. J. Biochem, 266 : 14903-14911. Atoda H. et ai., 1994, Binding properties of the coagulation factorIX/factorX-binding protein isolated from the venom of trimeresus flavoridis. Eur. J. Biochem., 224 703-708. Avrameas, S. and Guilbert, B. (1971) Dosages enzymoimmunologiques de protéines à l'aide d'immunoadsorbants et d'antigènes marqués aux enzymes (1971) CR Acad. Sci. Paris Série D 273, 2705-2707. Bon S. et Masoulié J., 1997, Quaternary associations of acetylcholinesterase, J. Biol. Chem., 272 : 3007-3015. Caruelle D., Grassi J., Courty J., Groux-Muscatelli B., Pradelles P., Barritault D., Caruelle J.P., 1988, Development and testing of radio and enzyme immunoassays for acidic fibroblast growth factor (aFGF), Anal. Biochem., 173(2) : 328-339. Cavaillon J-M. et al., 1996, J. Endoth. Res., 3 : 471-480. Chai H., Vasudevan S.G., Porter A.G., Chua K.L., Oh S., Yap M., 1993, Glycosylation and high-level secretion of human tumour necrosis factor-beta in recombinant baculovirusinfected insect cells, Biotechnol. Appl. Biochem., 18(Pt 3) : 259-273. Chen Y.L. et al., 1995, Functional and sequence characterization of agkicetin, a new glycoprotein Ib antagonist isolated from Agkistrodon acutus venom. Biochem. Biophys. Res. Comm., 210 : 472-477 Choumet, V., Faure, G., Robbe-Vincent, A., Saliou, B., Mazié, J.C. & Bon, C., 1992, Immunochemicai analysis of a snake venom phosphôlipase A2 neurotoxin, crotoxin, with monoclonal antibodies. Mol. Immunol., 29, 871-882. Choumet, V., Lafaye, P., Mazié, J.-C. and Bon, C., 1997, A monoclonal antibody directed against the non-toxic subunit of crotoxin neutralizes its toxicity. Mechanism of action and analysis of the zone of Interaction between crotoxin's subunits. manuscript in preparation. Cousin X., Bon S., Duval N., Massoulié J. and Bon C., 1996a, Cloning and expression of acetylcholinesterase from Bungarus fasciatus venom. A new type of COOH-terminal domain ; Involvement of a positively charged residue in the peripheral site. J. Biol Chem. 271 : 15099-15108. Cousin X., Créminon C., Grassi J., Méflah K., Cornu G., Saliou B., Bon S., Massoulié J. and Bon C., 1996b, Acetylcholinesterase from Bungarus venom : a monomeric species. FEBS Lett. 387 : 196-200. Créminon, C., Frobert, Y., Habib, A., Maclouf, J., Patrono, C., Pradelles, P. and Grassi, J., 1993, Enzyme immunometric assay for endothelin using tandem monoclonal antibodies. J. Immunol. Methods 162 : 179-192. Desphande S.S., 1996, In : Enzyme Immunoassays from concept to product development, Chapman and Hall Eds., New York. Ducancel F., Gillet D., Carrier A., Lajeunesse E., Ménez A. and Boulain J.-C., 1993, Recombinant colorimetric antibodies : construction and characterization of a bifunctional F(ab)2/alkaline phosphatase conjugate produced in Escherichia coli Bio/Technology 11 : 601-605. Ellman G.L. et al., 1961, A new rapis colorimetric determination of acetyîchoîinesterase activity. Biochem. Pharmacol., 7 : 88-95. Engvall, E. and Perlmann,. P., 1971, Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) : quantitative assay of immunoglobulin G. Immunochemistry 8 : 871-874. Faure, G., Guillaume, J. L., Camoin, L., Saliou, B. and Bon, C., 1991, The multiplicity of acidic subunit isoforms of crotoxin, the phospholipase A2 neurotoxin from Crotalus durissus terrificus venom, results from post-translational modifications. Biochemistry 30, 8074-8083. Frobert Y., Créminon C., Cousin X., Rémy M.-H., Chatel J. M., Bon S., Bon C. and Grassi J., 1997, Acetylcholinesterases from Elapidae snake venoms biochemical, immunological and enzymatic characterization. Biochim. Biophys. Acta, 1339 : 253-267. Fujimura Y. et al., 1991, Isolation and chemical characterization of two structurally and functionally distinct forms of botrocetin, the platelet coagglutinin isolated from the venom of Bothrops jaracaca. 30 : 19571964. Fujimura y. et al., 1995, Isolation and characterization of jararaca GPIb-BP, a snake venom antagonist specific to platelet glycoprtein Ib. Thromb. Haemost., 74 : 743-750. Fuller S.A. et al., 1996, Immunology in Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel et al. Eds, John Wiley & Sons, Zinc., USA. Grassi, J., Créminon, C., Frobert, Y., Etienne, E., Ezan, E., Volland, H. and Pradelles, P., 1996, Two différent approaches for developing immunometric assays of haptens. Clin. Chem. 42 : 1532-1536. Grassi, J., Frobert, Y., Pradelles, P., Chercuitte, F., Gruaz, F., Dayer, J.-M. and Poubelle, P. E., 1989, Production of monoclonal antibodies against interleukins la and lés : development of two enzyme immunometric assays (EIA) using acetylcholinesterase and application to biological media. J. Immunol. Methods 123(2), 193-210. Grassi, J., Maclouf, J. and Pradelles, P., 1987 Radioiodination and other- labelling techniques. In: Handbook of Experimental Pharmacology ; Patrono, C. Peskar, B. A., Eds.; Springer-Verlag Bers in ; Berlin-Heidelberg, vol 82, pp91-141. Hamako J., 1993, Purification and characterization of Bitiscetin, a novel von Willebrand factor modulator protein from Lenhard T., Maul -G., Haase W. Reilander., 1996, A new set of versatile vectors for the heterologous expression of foreign gens using the baculovirus system, Gene, 169(2) 187-190. Marty,.M., Misset, B., Tamion, F.., Fitting, C., Carlet, J. and Cavaillon, J.-M., 1994, Circulating interleukin-8 concentrations in patients with multiple organ failure of septic and non-septic origin. Cri t. Care Medicine 22, 673679. Massoulié J., Pezzementi L., Bon S., Krejci E., Valette F.M., 1993, Molecular and cellular biology of cholinesterases, Prog. Neurobioi., 41 : 31-91. Mc Laughlin L.L. et al., 1987, Biochem. Biophys. Res. Commun., 144 : 469. O'Reilly et al., 1992, Baculovirus expression vectors : a Laboratory Manual. W.H. Freeman and Co., ew York. Oellerich, M., 1984, Enzyme-immunoassay a Review. J. Clin. Chem. Clin Biochem. 2 : 895-904. Parmley et al., 1988, Gene, 73 : 305-318. Peng M. et al., 1993. Echicetin : a snake venom protein that inhibits 'binding of von Wiilebrand factor and alboaggregins to platelet glycoprotein lb. Blood, 81 2321-2328. Peng M. et al., 1994. Isolation, characterization, and aminoacid sequence of echicetin beta-subunit, a specific inhibitor of von Willebrand factor and thrombin interaction with glycoprotein Ib. Biochem. Biophys. Res. Comm., 205 68-72. Peng M. et al., 1995. Interaction of echicetin with a high affinité thrombin binding site on platelet glycoprotein Ib. Thromb. Haemost., 74 : 954-957. Polgar J. et al., 1997, Platelet activation and signal transduction by convulxin, a C-type lectin from Cro tai us durissus terrificus (Tropical rattlesnake) venom via the p62/GPVI collagen receptor. J. Biol. Chem., 272 : 1357613583. PORATH et al., 1975, Nature, Vol. 258, NO 5536, pp 598-599. Pradelles, P. and Grassi, J., 1989, Enzyme immunoassays of adenosine cyclic 3',5'-monophosphate and guanosine cyclic 3',5'-monophosphate using acetylcholinesterase. Anal. Chem. 61 : 447-453. Sambrook, J. et al., 1989, In Molecular cloning : A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press. Smith et al., 1983, Mol. Cell. Biol., 3 : 2156-2165. Srensen, A. L., Nagai, S., Houen, G., Andersen, P. and . B. Andersen, 1995, Purification and characterization of a low-molecular-mass T-cell antigen secreted by Mycobacterium tuberculosis. Infect. Immun. 63 : 1710-1717. Spiess, M., 1990,The asialoglycoprotein receptor : a model for endocytic transport receptors. Biochemistry, 29 10009-10018. Taniuchi Y. et al., 1995, Flavocetin-A and -B, two high molecular mass glycoprotein Ib binding proteins with high affinity purified from trimeresurus flavoridis venom, inhibite platelet aggregation at high shear stress. Biochem. Biophys. Acta, 1244 : 331-338. Terpstra M., 1992, In : immunoassay, J. Sigmond, B. Salomons and M. Terpstra eds., Elsevier Science Publishers Ltd., London and New York. Usami Y. et al., 1993, Primary strucutre of two chains botrocetin, a van Willebrand factor modulator purified from the venom of Pothrops jaracaca. Proc. natl. Acad. sci., 90 : 928-932. Usami Y. et al., 1996, Primary structure of alboaggregin-B purified from the venom of Trimeresurus aibolabris. Biochem. Biophys. Res. Comm., 219 : 727-733. VanWeeman, B. K. and Schuurs, A. H. W. M., 1971, Immunoassays using antigen-enzyme conjugates. FEBS Lett 15, 232-236. Vigny, M., Bon, S., Massoulié, J. and Leterrier, F., 1978, Active-site catalytic efficiency of acetylcholinesterase molecular forms in electrophorus, torpedo, rat and chicken. Eur. J. Biochem. 85 : 317-323. Vlasak R., Unger-Ullmann C., Kreil G., Frischauf A.M., 1983, Nucleotide sequence of clones cDNA coding for honeybee prepromelittin, Eur. J. Biochem., 135(1) : 123126. Voilant, H., Vulliez Le Normand, B., Mamas, S., Grassi, J., Créminon, C., Ezan, E. and Pradelles, P., 1994, Enzyme immunometric assay for leukotriene C4. J. Immunol. Methods 175 : 97-105. Wild D., 1994, In : The Immunoassay Handbook, D. Wild ed., Stockton Press, New York USA. Yoshida E. et al., 1993. Alboaggregin-B and botrocetin, two snake venom proteins with highly homologous amino acid sequences but totally distinct functions on von Willebrand factor binding to platelets. Biochem. Biophys. res. Comm., 191 : 1386-1392. Zingali R. et al., 1993, Bothrojaracin, a bew thrombin Inhibitor isolated from Pothrops jararaca venom characterization and mechanism of thrombin inhibition. Biochemistry, 32 : 10794-10802. LISTE DE SEQUENCES (1) INFORMATIONS GENERALES: (i) DEPOSANT: (A) NOM: INSTITUT PASTEUR (B) RUE: 28 RUE DU DOCTEUR ROUX (C) VILLE: PARIS CEDEX 15 (E) PAYS: FRANCE (F) CODE POSTAL: 75724 (A) NOM: INSTITUT NATIONAL DE LA RECHERCHE AGRONOMIQUE (B) RUE: 147 RUE DE L'UNIVERSITE (C) VILLE: PARIS CEDEX 07 (E) PAYS: FRANCE (F) CODE POSTAL: 75338 (ii) TITRE DE L' INVENTION: POLYPEPTIDE DE FUSION COMPRENANT UNE ACETYLCHOLINESTERASE LIEE A UN RECEPTEUR PROTEIQUE ET POLYNUCLEOTIDE CODANT POUR UN TEL POLYPEPTIDE. APPLICATION A LA DETECTION DE MOLECULES LIGAND. (iii) NOMBRE DE SEQUENCES: 13 (iv) FORME DECHIFFRABLE PAR ORDINATEUR: (A) TYPE DE SUPPORT: Floppy disk (B) ORDINATEUR: IBM PC compatible (C) SYSTEME D' EXPLOITATION: PC-DOS/MS-DOS (D) LOGICIEL: PatentIn Release &num;1.0, Version #1.30 (OEB) (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 1: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 566 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 1: Met Pro Ser Cys Gln Pro Gly Lys Met Pro Ala Pro Trp Pro Trp Trp 1 5 10 15 Leu Leu Cys Ile Pro Ser Cys Val Ala Val Leu Gln Leu Leu Pro Gly 20 25 30 Arg Ala Gly Glu Leu Lys Val Ser Thr Gln Thr Gly Ser Val Arg Gly 35 40 45 Leu Ser Leu Pro Val Leu Asp Gly His Val Ser Ala Phe Leu Gly Ile 50 55 60 Pro Phe Ala Glu Pro Pro Leu Gly Arg Met Arg Phe Leu Arg Pro Glu 65 70 75 80 Pro Val Lys Pro Trp Gln His Val Leu Asp Ala Thr Ser Tyr Lys Pro 85 90 95 Ala Cys Tyr Gln Met Val Asp Thr Ser Tyr Pro Gly Phe Gln Gly Thr 100 105 110 Glu Met Trp Asn Pro Asn Arg Gly Met Ser Glu Asp Cys Leu Tyr Leu 115 120 125 Asn Ile Trp Val Pro Ser Pro Arg Pro Lys Asp Ala Pro Val Leu Val 130 135 140 Trp Ile Tyr Gly Gly Gly Phe Tyr Ser Gly Ala Ala Ser Leu Asp Val 145 150 155 160 Tyr Asp Gly Arg Phe Leu Thr Tyr Thr Gln Asn Val Ile Leu Val Ser 165 170 175 Leu Ser Tyr Arg Val Gly Ala Phe Gly Phe Leu Gly Leu Pro Gly Ser 180 185 190 Pro Glu Ala Pro Gly Asn Met Gly Leu Leu Asp Gln Arg Leu Ala Leu 195 200 205 Gln Trp Ile Gln Asn Asn Ile His Pro Phe Gly Gly Asn Pro Arg Ala 210 215 220 Val Thr Val Phe Gly Glu Ser Ala Gly Ala Ala Ser Val Gly Met His 225 230 235 240 Leu Leu Ser Thr Gln Ser Arg Thr Leu Phe Gln Arg Ala île Leu Gln 245 250 255 Ser Gly Gly Pro Asn Ala Pro Trp Ala Thr Val Thr Pro Ala Glu Ser 260 265 270 Arg Gly Arg Ala Ala Leu Leu Gly Lys Gln Leu Gly Cys His Phe Asn 275 280 285 Asn Asp Ser Glu Leu Val Ser Cys Leu Arg Ser Lys Asn Pro Gln Glu 290 295 300 Leu Ile Asp Glu Glu Trp Ser Val Leu Pro Tyr Lys Ser Ile Phe Arg 305 310 315 320 Phe Pro Phe Val Pro Val Ile Asp Gly Asp Phe Phe Pro Asp Thr Pro 325 330 335 Glu Ala Met Leu Ser Ser Gly Asn Phe Lys Glu Thr Gln Val Leu Leu 340 345 350 Gly Val Val Lys Asp Glu Gly Ser Tyr Phe Leu Ile Tyr Gly Leu Pro 355 360 365 Gly Phe Ser Lys Asp Asn Glu Ser Leu Ile Ser Arg Ala Asp Phe Leu 370 375 380 Glu Gly Val Arg Met Ser Val Pro His Ala Asn Asp Ile Ala Thr Asp 385 390 395 400 Ala Val Val Leu Gln Tyr Thr Asp Trp Gln Asp Gln Asp Asn Arg Glu 405 410 415 Lys Asn Arg Glu Ala Leu Asp Asp Ile Val Gly Asp His Asn Val Ile 420 425 430 Cys Pro Val Val Gln Phe Ala Asn Asp Tyr Ala Lys Arg Asn Ser Lys 435 440 445 Val Tyr Ala Tyr Leu Phe Asp His Arg Ala Ser Asn Leu Leu Trp Pro 450 455 460 Pro Trp Met Gly Val Pro His Gly Tyr Glu Ile Glu Phe Val Phe Gly 465 470 475 480 Leu Pro Leu Asn Asp Ser Leu Asn Tyr Thr Pro Gln Glu Lys Glu Leu 485 490 495 Ser Arg Arg Met Met Arg Tyr Trp Ala Asn Phe Ala Arg Thr Gly Asn 500 505 510 Pro Thr Asp Pro Ala Asp Lys Ser Gly Ala Trp Pro Thr Tyr Thr Ala 515 520 525 Ser Gln Pro Gln Tyr Val Gln Leu Asn Thr Gln Pro Leu Ala Thr Gln 530 535 540 Pro Ser Leu Arg Ala Gln Ile Cys Ala Phe Trp Asn His Phe Leu Pro 545 550 555 560 Lys Leu Leu Asn Ala Thr 565 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 2: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 826 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 2: Met Pro Ser Cys Gln Pro Gly Lys Met Pro Ala Pro Trp Pro Trp Trp 1 5 10 15 Leu Leu Cys Ile Pro Ser Cys Val Ala Val Leu Gln Leu Leu Pro Gly 20 25 30 Arg Ala Gly Glu Leu Lys Val Ser Thr Gln Thr Gly Ser Val Arg Gly 35 40 45 Leu Ser Leu Pro Val Leu Asp Gly His Val Ser Ala Phe Leu Gly Ile 50 55 60 Pro Phe Ala Glu Pro Pro Leu Gly Arg Met Arg Phe Leu Arg Pro Glu 65 70 75 80 Pro Val Lys Pro Trp Gln His Val Leu Asp Ala Thr Ser Tyr Lys Pro 85 90 95 Ala Cys Tyr Gln Met Val Asp Thr Ser Tyr Pro Gly Phe Gln Gly Thr 100 105 110 Glu Met Trp Asn Pro Asn Arg Gly Met Ser Glu Asp Cys Leu Tyr Leu 115 120 125 Asn Ile Trp Val Pro Ser Pro Arg Pro Lys Asp Ala Pro Val Leu Val 130 135 140 Trp Ile Tyr Gly Gly Gly Phe Tyr Ser Gly Ala Ala Ser Leu Asp Val 145 150 155 160 Tyr Asp Gly Arg Phe Leu Thr Tyr Thr Gln Asn Val Ile Leu Val Ser 165 170 175 Leu Ser Tyr Arg Val Gly Ala Phe Gly Phe Leu Gly Leu Pro Gly Ser 180 185 190 Pro Glu Ala Pro Gly Asn Met Gly Leu Leu Asp Gln Arg Leu Ala Leu 195 200 205 Gln Trp Ile Gln Asn Asn Ile His Pro Phe Gly Gly Asn Pro Arg Ala 210 215 220 Val Thr Val Phe Gly Glu Ser Ala Gly Ala Ala Ser Val Gly Met His 225 230 235 240 Leu Leu Ser Thr Gîn Ser Arg Thr Leu Phe Gln Arg Ala Ile Leu Gln 245 250 255 Ser Gly Gly Pro Asn Ala Pro Trp Ala Thr Val Thr Pro Ala Glu Ser 260 265 270 Arg Gly Arg Ala Ala Leu Leu Gly Lys Gln Leu Gly Cys His Phe Asn 275 280 285 Asn Asp Ser Glu Leu Val Ser Cys Leu Arg Ser Lys Asn Pro Gln Glu 290 295 300 Leu Ile Asp Glu Glu Trp Ser Val Leu Pro Tyr Lys Ser Ile Phe Arg 305 310 315 320 Phe Pro Phe Val Pro Val Ile Asp Gly Asp Phe Phe Pro Asp Thr Pro 325 330 335 Glu Ala Met Leu Ser Ser Gly Asn Phe Lys Glu Thr Gln Val Leu Leu 340 345 350 Gly Val Val Lys Asp Glu Gly Ser Tyr Phe Leu Ile Tyr Gly Leu Pro 355 360 365 Gly Phe Ser Lys Asp Asn Glu Ser Leu Ile Ser Arg Ala Asp Phe Leu 370 375 380 Glu Gly Val Arg Met Ser Val Pro His Ala Asn Asp Ile Ala Thr Asp 385 390 395 400 Ala Val Val Leu Gln Tyr Thr Asp Trp Gln Asp Gln Asp Asn Arg Glu 405 410 415 Lys Asn Arg Glu Ala Leu Asp Asp Ile Val Gly Asp His Asn Val Ile 420 425 430 Cys Pro Val Val Gln Phe Ala Asn Asp Tyr Ala Lys Arg Asn Ser Lys 435 440 445 Val Tyr Ala Tyr Leu Phe Asp His Arg Ala Ser Asn Leu Leu Trp Pro 450 455 460 Pro Trp Met Gly Val Pro His Gly Tyr Glu Ile Glu Phe Val Phe Gly 465 470 475 480 Leu Pro Leu Asn Asp Ser Leu Asn Tyr Thr Pro Gln Glu Lys Glu Leu 485 490 495 Ser Arg Arg Met Met Arg Tyr Trp Ala Asn Phe Ala Arg Thr Gly Asn 500 505 510 Pro Thr Asp Pro Ala Asp Lys Ser Gly Ala Trp Pro Thr Tyr Thr Ala 515 520 525 Ser Gln Pro Gln Tyr Val Gln Leu Asn Thr Gln Pro Leu Ala Thr Gln 530 535 540 Pro Ser Leu Arg Ala Gln Ile Cys Ala Phe Trp Asn His Phe Leu Pro 545 550 555 560 Lys Leu Leu Asn Ala Thr Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu 565 570 575 Asn Ala Ala Gln Pro Ala Met Ala Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly 580 585 590 Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala 595 600 605 Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg 610 615 620 Pro Gly Tyr Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly 625 630 635 640 Ser Thr Ile Tyr Ser Thr Lys Phe Lys Gly Lys Val Thr Phe Thr Ala 645 650 655 Glu Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser 660 665 670 Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Trp Leu Tyr Phe Ser 675 680 685 Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 690 695 700 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu 705 710 715 720 Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ile Met Ala Ala Ser Leu Gly Gln Lys Val 725 730 735 Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His 740 745 750 Trp Phe Gln Gln Lys Ser Gly Ala Ser Pro Lys Pro Leu Ile His Arg 755 760 765 Thr Ser.Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly 770 775 780 Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala Glu Asp 785 790 795 800 Asp Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Phe Thr Phe 805 810 815 Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 820 825 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 3: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 1698 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 3: ATGCCCTCCT GCCAGCCTGG CAAGATGCCT GCGCCGTGGC CTTGGTGGCT CCAGCTCCTC 60 CTTTGCATCC CGTCCTGTGT AGCGGTTTTG CCCGGCCGGG CAGGCGAGCT GAAAGTGTCC 120 ACCCAGACTG GCTCGGTGCG TGGCCTGAGC CTGCCGGTTC TCGACGGCCA CGTCTCGGCC 180 TTCCTAGGCA TCCCCTTTGC GGAGCCTCCC CTGGGCAGGA TGCGCTTCCT GCGCCCTGAG 240 CCCGTCAAGC CCTGGCAGCA CGTCCTGGAC GCCACTTCCT ACAAGCCCGC CTGCTACCAG 300 ATGGTGGACA CCAGCTACCC AGGCTTCCAG GGCACGGAGA TGTGGAACCC CAACCGGGGC 360 ATGAGCGAGG ACTGCCTCTA CCTCAACATC TGGGTGCCCT CCCCGCGCCC CAAGGATGCC 420 CCCGTCCTGG TCTGGATCTA CGGAGGGGGC TTCTACAGCG GCGCTGCCTC CCTGGACGTC 480 TATGACGGCC GCTTCCTGAC CTACACGCAG AACGTCATCC TGGTCTCCCT CAGCTACCGT 540 GTGGGGGCCT TCGGCTTTTT GGGCCTCCCG GGAAGTCCAG AGGCCCCGGG AAACATGGGG 600 CTGCTGGACC AGCGCTTGGC CCTGCAGTGG ATCCAGAACA ACATCCATCC TTTTGGGGGC 660 AATCCGAGGG CGGTCACCGT CTTTGGGGAG AGTGCCGGGG CCGCTTCGGT GGGCATGCAC 720 CTGCTTTCCA CCCAGAGCCG CACCCTCTTC CAGCGGGCCA TTCTGCAGAG CGGCGGCCCC 780 AACGCACCGT GGGCCACCGT CACGCCTGCC GAAAGCCGGG GCCGGGCGGC CCTTCTGGGA 840 AAGCAGCTGG GCTGCCACTT CAACAACGAC TCCGAGCTGG TCAGTTGCTT GCGCTCGAAA 900 AACCCCCAGG AGTTGATTGA CGAGGAGTGG TCCGTCCTGC CCTACAAGAG CATTTTCCGC 960 TTCCCCTTCG TCCCGGTCAT TGACGGGGAC TTCTTTCCAG ATACCCCCGA GGCCATGCTG 1020 AGCTCGGGCA ACTTCAAGGA GACCCAGGTG TTGCTGGGCG TGGTGAAGGA CGAGGGCTCC 1080 TACTTCCTGA TCTACGGGCT GCCTGGCTTC AGCAAGGACA ACGAGAGCCT CATCAGCCGG 1140 GCCGACTTCC TGGAAGGGGT GCGGATGAGC GTGCCCCACG CCAACGACAT CGCCACTGAT 1200 GCCGTGGTGC TGCAATACAC TGACTGGCAG GACCAGGACA ACAGGGAGAA GAACCG ,GAG 1260 GCCCTGGACG ACATCGTGGG AGACCACAAC GTCATCTGCC CGGTCGTGCA GTTCGCCAAC 1320 GACTACGCCA AGCGCAACAG CAAGGTGTAC GCCTACCTGT TTGACCACCG GGCCTCCAAC 1380 CTCCTCTGGC CCCCCTGGAT GGGGGTCCCC CATGGCTACG AGATCGAGTT TGTCTTTGGA 1440 TTGCCGCTCA ACGACAGCCT GAACTACACG CCCCAAGAGA AGGAGCTGAG CCGCAGAATG 1500 ATGCGCTACT GGGCCAACTT CGCCCGGACA GGGAACCCCA CCGACCCTGC CGATAAGAGC 1560 GGGGCCTGGC CCACCTACAC CGCCTCCCAG CCGCAGTATG TCCAGCTCAA CACCCAGCCG 1620 CTGGCCACCC AACCCAGCCT GCGGGCCCAG ATCTGCGCCT TCTGGAACCA CTTCCTCCCC 1680 AAACTGCTGA ACGCCACA 1698 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 4: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 2478 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 4: ATGCCCTCCT GCCAGCCTGG CAAGATGCCT GCGCCGTGGC CTTGGTGGCT CCAGCTCCTC 60 CTTTGCATCC CGTCCTGTGT AGCGGTTTTG CCCGGCCGGG CAGGCGAGCT GAAAGTGTCC 120 ACCCAGACTG GCTCGGTGCG TGGCCTGAGC CTGCCGGTTC TCGACGGCCA CGTCTCGGCC 180 TTCCTAGGCA TCCCCTTTGC GGAGCCTCCC CTGGGCAGGA TGCGCTTCCT GCGCCCTGAG 240 CCCGTCAAGC CCTGGCAGCA CGTCCTGGAC GCCACTTCCT ACAAGCCCGC CTGCTACCAG 300 ATGGTGGACA CCAGCTACCC AGGCTTCCAG GGCACGGAGA TGTGGR4CCC CAACCGGGGC 360 ATGAGCGAGG ACTGCCTCTA CCTCAACATC TGGGTGCCCT CCCCGCGCCC CAAGGATGCC 420 CCCGTCCTGG TCTGGATCTA CGGAGGGGGC TTCTACAGCG GCGCTGCCTC CCTGGACGTC 480 TATGACGGCC GCTTCCTGAC CTACACGCAG AACGTCATCC TGGTCTCCCT CAGCTACCGT 540 GTGGGGGCCT TCGGCTTTTT GGGCCTCCCG GGAAGTCCAG AGGCCCCGGG AAACATGGGG 600 CTGCTGGACC AGCGCTTGGC CCTGCAGTGG ATCCAGAACA ACATCCATCC TTTTGGGGGC 660 AATCCGAGGG CGGTCACCGT CTTTGGGGAG AGTGCCGGGG CCGCTTCGGT GGGCATGCAC 720 CTGCTTTCCA CCCAGAGCCG CACCCTCTTC CAGCGGGCCA TTCTGCAGAG CGGCGGCCCC 780 AACGCACCGT GGGCCACCGT CACGCCTGCC GAAAGCCGGG GCCGGGCGGC CCTTCTGGGA 840 AAGCAGCTGG GCTGCCACTT CAACAACGAC TCCGAGCTGG TCAGTTGCTT GCGCTCGAAA 900 AACCCCCAGG AGTTGATTGA CGAGGAGTGG TCCGTCCTGC CCTACAAGAG CATTTTCCGC 960 TTCCCCTTCG TCCCGGTCAT TGACGGGGAC TTCTTTCCAG ATACCCCCGA GGCCATGCTG 1020 AGCTCGGGCA ACTTCAAGGA GACCCAGGTG TTGCTGGGCG TGGTGAAGGA CGAGGGCTCC 1080 TACTTCCTGA TCTACGGGCT GCCTGGCTTC AGCAAGGACA ACGAGAGCCT CATCAGCCGG 1140 GCCGACTTCC TGGAAGGGGT GCGGATGAGC GTGCCCCACG CCAACGACAT CGCCACTGAT 1200 GCCGTGGTGC TGCAATACAC TGACTGGCAG GACCAGGACA ACAGGGAGAA GAACCGGGAG 1260 GCCCTGGACG ACATCGTGGG AGACCACAAC GTCATCTGCC CGGTCGTGCA GTTCGCCAAC 1320 GACTACGCCA AGCGCAACAG CAAGGTGTAC GCCTACCTGT TTGACCACCG GGCCTCCAAC 1380 CTCCTCTGGC CCCCCTGGAT GGGGGTCCCC CATGGCTACG AGATCGAGTT TGTCTTTGGA 1440 TTGCCGCTCA ACGACAGCCT GAACTACACG CCCCAAGAGA AGGAGCTGAG CCGCAGAATG 1500 ATGCGCTACT GGGCCAACTT CGCCCGGACA GGGAACCCCA CCGACCCTGC CGATAAGAGC 1560 GGGGCCTGGC CCACCTACAC CGCCTCCCAG CCGCAGTATG TCCAGCTCAA CACCCAGCCG 1620 CTGGCCACCC AACCCAGCCT GCGGGCCCAG ATCTGCGCCT TCTGGAACCA CTTCCTCCCC 1680 AAACTGCTGA ACGCCACAGA ACAAAAACTC ATCTCAGAAG AGGATCTGAA TGCGGCCCAG 1740 CCGGCCATGG CCCAGGTCAA GCTGCAGCAG TCTGGAGCTG AGTTGATGAA GCCTGGGGCC 1800 TCAGTGAAGA TATCCTGCAA GGCGACTGGC TACACATTCA GTAGCTACTG GATAGAGTGG 1860 GTAAAGCAGA GGCCTGGATA TGGCCTTGAG TGGATTGGAG AGATTTTACC TGGAAGTGGT 1920 AGTACTATCT ACAGTACTAA GTTCAAGGGC AAGGTCACAT TCACTGCAGA AACATCCTCC 1980 AACACAGCCT ACATGCAACT CAGCAGACTG ACATCTGAGG ACTCTGCCGT CTATTACTGT 2040 GCAAGACGAT GGTTATACTT CTCCTTTGAC TACTGGGGCC AAGGGACCAC GGTCACCGTC 2100 TCCTCAGGTG GAGGCGGTTC AGGCGGAGGT GGCTCTGGCG GTGGCGGATC GGACATCGAG 2160 CTCACTCAGT CTCCATCAAT AATGGCTGCC TCTCTGGGGC AGAAGGTCAC CATGACCTGC 2220 AGTGCCAGCT CAAGTGTAAG TTCCAGTTAC TTGCACTGGT TCCAGCAGAA GTCAGGCGCT 2280 TCCCCCAAAC CCTTGATTCA TAGGACATCC AACCTGGCTT CTGGAGTCCC AGCTCGCTTC 2340 AGTGGCAGTG GGTCTGGGAC CTCTTACTCT CTCACAATCA GCAGCGTGGA GGCTGAAGAT 2400 GATGCAACTT ATTACTGCCA GCAGTGGAGT GGTTACCCAT TCACGTTCGG TGCTGGCACC 2460 AAGCTGGAAA TCAAACGG 2478 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 5: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 18 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 5: AGCGAGGACT GCCTCTAC 18 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 6: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 24 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 6: AGCGAGGACT GCCTCTACCT CAAC 24 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 7: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 18 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 7: TTTGGGGAGA GTGCCGGG 18 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 8: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 6 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 8: Ser Glu Asp Cys Leu Tyr 1 5 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 9: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 8 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (iii TYPE DE MOLECULE: peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 9: Ser Glu Asp Cys Leu Tyr Leu Asn 1 5 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 10: (i) CARACTERISTIQUES DE LA.SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 6 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 10: Phe Gly Glu Ser Ala Gly 1 5 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 11: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 18 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 11: DSHGARGAYT GYYTNTAY 18 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 12: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 24 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 12: DSHGARGAYT GYYTNTAYHT NAAY 24 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 13: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 17 paires de bases (B) TYPE: nucléotide (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 13: TTYGGDGARW SDGCNGG 17 REVENDICATIONS 1. Polypeptide de fusion caractérisé en ce qu'il comprend a) un premier polypeptide constitué d'une acétyl cholinestérase monomérique ou un variant biologiquement actif de ladite acétylcholinestérase monomérique b) un second polypeptide constitué d'un récepteur protéique spécifique d'une molécule ligand. 2. Polypeptide selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un polypeptide recombinant. 3. Polypeptide selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que le polynucléotide codant pour celui-ci hybride, dans des conditions d'hybridation fortement stringentes, avec au moins l'un des oligonucléotides suivants : a) un oligonucléotide codant pour l'un des peptides suivants : - SEQ ID N08 : SEDCLY - SEQ ID N09 : SEDCLYLN - SEQ ID N010 : FGESAG b) un oligonucléotide comprenant l'une des séquences nucléotidiques suivantes - SEQ ID N 11 : DSHGARGAYTGYYTNTAY, dans laquelle D représente A, T ou G S représente G ou C H représente C, A ou T R représente G ou A Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C - SEQ ID N012 : DSHGARGAYTGYYTNTAYHTNAAY, dans laquelle D représente A, T ou G S représente G ou C H représente C, A ou T R représente G ou A Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C c) un oligonucléotide comprenant la séquence SEQ ID N013 suivante TTYGGDGARWSDGCNGG, dans laquelle D représente A, T ou G S représente G ou C R représente G ou A W représente A ou T Y représente C ou T ; et N représente A, T, G ou C d) un oligonucléotide comprenant l'une des séquences suivantes SEQ ID N05 : AGC GAG GAC TGC CTC TAC SEQ ID N06 : AGC GAG GAC TGC CTC TAC CTC AAC; et SEQ ID N07 : TTT GGG GAG AGT GCC GGG. 4. Polypeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que 1'acétylcholinestérase monomérique ou un variant biologiquement actif de l'acétylchoîinestérase monomérique provient de Bungarus fasciatus. 5. Polypeptide selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'acétylcholinestérase monomérique comprend la séquence d'acides aminés SEQ ID N0l suivante Met Pro Ser Cys Gln Pro Gly Lys Met Pro Ala Pro Trp Pro Trp Trp 15 10 15 Leu Leu Cys Ile Pro Ser Cys Val Ala Val Leu Gln Leu Leu Pro Gly 20 25 30 Arg Ala Gly Glu Leu Lys Val Ser Thr Gln Thr Gly Ser Val Arg Gly 35 40 45 Leu Ser Leu Pro Val Leu Asp Gly His Val Ser Ala Phe Leu Gly Ile 50 55 60 Pro Phe Ala Glu Pro Pro Leu Gly Arg Met Arg Phe Leu Arg Pro Glu 65 70 75 80 Pro Val Lys Pro Trp Gln His Val Leu Asp Ala Thr Ser Tyr Lys Pro 85 90 95 Ala Cys Tyr Gln Met Val Asp Thr Ser Tyr Pro Gly Phe Gln Gly Thr 100 105 110 Glu Met Trp Asn Pro Asn Arg Gly Met Ser Glu Asp Cys Leu Tyr Leu 115 120 125 Asn Ile Trp Val Pro Ser Pro Arg Pro Lys Asp Ala Pro Val Leu Val 130 135 140 Trp Ile Tyr Gly Gly Gly Phe Tyr Ser Gly Ala Ala Ser Leu Asp Val 145 150 155 160 Tyr Asp Gly Arg Phe Leu Thr Tyr Thr Gln Asn Val Ile Leu Val Ser 165 170 175 Leu Ser Tyr Arg Val Gly Ala Phe Gly Phe Leu Gly Leu Pro Gly Ser 180 185 190 Pro Glu Ala Pro Gly Asn Met Gly Leu Leu Asp Gln Arg lieu Ala Leu 195 200 205 Gln Trp Ile Gln Asn Asn Ile His Pro Phe Gly Gly Asn Pro Arg Ala 210 215 220 Val Thr Val Phe Gly Glu Ser Ala Gly Ala Ala Ser Val Gly Met His 225 230 235 240 Leu Leu Ser Thr Gln Ser Arg Thr Leu Phe Gln Arg Ala Ile Leu Gln 245 250 255 Ser Gly Gly Pro Asn Ala Pro Trp Ala Thr Val Thr Pro Ala Glu Ser 260 265 270 Arg Gly Arg Ala Ala Leu Leu Gly Lys Gln Leu Gly Cys His Phe Asn 275 280 285 Asn Asp Ser Glu Leu Val Ser Cys Leu Arg Ser Lys Asn Pro Gln Glu 290 295 300 Leu Ile Asp Glu Glu Trp Ser Val Leu Pro Tyr Lys Ser Ile Phe Arg 305 310 315 320 Phe Pro Phe Val Pro Val Ile Asp Gly Asp Phe Phe Pro Asp Thr Pro 325 330 335 Glu Ala Met Leu Ser Ser Gly Asn Phe Lys Glu Thr Gln Val Leu Leu 340 345 350 Gly Val Val Lys Asp Glu Gly Ser Tyr Phe Leu Ile Tyr Gly Leu Pro 355 360 365 Gly Phe Ser Lys Asp Asn Glu Ser Leu Ile Ser Arg Ala Asp Phe Leu 370 375 380 Glu Gly Val Arg Met Ser Val Pro His Ala Asn Asp Ile Ala Thr Asp 385 390 395 400 Ala Val Val Leu Gln Tyr Thr Asp Trp Gln Asp Gln Asp Asn Arg Glu 405 410 415 Lys Asn Arg Glu Ala Leu Asp Asp Ile Val Gly Asp His Asn Val Ile 420 425 430 Cys Pro Val Val Gln Phe Ala Asn Asp Tyr Ala Lys Arg Asn Ser Lys 435 440 445 Val Tyr Ala Tyr Leu Phe Asp His Arg Ala Ser Asn Leu Leu Trp Pro 450 455 460 Pro Trp Met Gly Val Pro His Gly Tyr Glu Ile Glu Phe Val Phe Gly 465 470 475 480 Leu Pro Leu Asn Asp Ser Leu Asn Tyr Thr Pro Gln Glu Lys Glu Leu 485 490 495 Ser Arg Arg Met Met Arg Tyr Trp Ala Asn Phe Ala Arg Thr Gly Asn 500 505 510 Pro Thr Asp Pro Ala Asp Lys Ser Gly Ala Trp Pro Thr Tyr Thr Ala 515 520 525 Ser Gln Pro Gln Tyr Val Gln Leu Asn Thr Gln Pro Leu Ala Thr Gln 530 535 540 Pro Ser Leu Arg Ala Gln Ile cys Ala Phe Trp Asn His Phe Leu Pro 545 550 555 560 Lys Leu Leu Asn Ala Thr 565 6. Polypeptide selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le récepteur protéique est un anticorps ou une partie d'anticorps. 7. Polypeptide selon la revendication 6, caractérisé en ce que le récepteur protéique est le fragment Fab ou le fragment (Fab' > 2 d'un anticorps. 8. Polypeptide selon la revendication 6, caractérisé en ce que le récepteur protéique est un fragment scFv. 9. Polypeptide selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il comprend la séquence en acides aminés SEQ ID N02 suivante Met Pro Ser Cys Gln Pro Gly Lys Met Pro Ala Pro Trp Pro Trp Trp 1 5 10 15 Leu Leu Cys Ile Pro Ser Cys Val Ala Val Leu Gln Leu Leu Pro Gly 20 25 30 Arg Ala Gly Glu Leu Lys Val Ser Thr Gin Thr Gly Ser Val Arg Gly 35 40 45 Leu Ser Leu Pro Val Leu Asp Gly His Val Ser Ala Phe Leu Gly Ile 50 55 60 Pro Phe Ala Glu Pro Pro Leu Gly Arg Met Arg Phe Leu Arg Pro Glu 65 70 75 80 Pro Val Lys Pro Trp Gln His Val Leu Asp Ala Thr Ser Tyr Lys Pro 85 90 95 Ala Cys Tyr Gln Met Val Asp Thr Ser Tyr Pro Gly Phe Gln Gly Thr 100 105 110 Glu Met Trp Asn Pro Asn Arg Gly Met Ser Glu Asp Cys Leu Tyr Leu 115 120 125 Asn Ile Trp Val Pro Ser Pro Arg Pro Lys Asp Ala Pro Val Leu Val 130 135 140 Trp Ile Tyr Gly Gly Gly Phe Tyr Ser Gly Ala Ala Ser Leu Asp Val 145 150 155 160 Tyr Asp Gly Arg Phe Leu Thr Tyr Thr Gln Asn Val Ile Leu Val Ser 165 170 175 Leu Ser Tyr Arg Val Gly Ala Phe Gly Phe Leu Gly Leu Pro Gly Ser 180 185 190 Pro Glu Ala Pro Gly Asn Met Gly Leu Leu Asp Gln Arg Leu Ala Leu 195 200 205 Gln Trp Ile Gln Asn Asn Ile His Pro Phe Gly Gly Asn Pro Arg Ala 210 215 220 Val Thr Val Phe Gly Glu Ser Ala Gly Ala Ala Ser Val Gly Met His 225 230 235 240 Leu Leu Ser Thr Gln Ser Arg Thr Leu Phe Gln Arg Ala Ile Leu Gln 245 250 255 Ser Gly Gly Pro Asn Ala Pro Trp Ala Thr Val Thr Pro Ala Glu Ser 260 265 270 Arg Gly Arg Ala Ala Leu Leu Gly Lys Gln Leu Gly Cys His Phe Asn 275 280 285 Asn Asp Ser Glu Leu Val Ser Cys Leu Arg Ser Lys Asn Pro Gln Glu 290 295 300 Leu Ile Asp Glu Glu Trp Ser Val Leu Pro Tyr Lys Ser Ile Phe Arg 305 310 315 320 Phe Pro Phe Val Pro Val Ile Asp Gly Asp Phe Phe Pro Asp Thr Pro 325 330 335 Glu Ala Met Leu Ser Ser Gly Asn Phe Lys Glu Thr Gln Val Leu Leu 340 345 350 Gly Val Val Lys Asp Glu Gly Ser Tyr Phe Leu île Tyr Gly Leu Pro 355 360 365 Gly Phe Ser Lys Asp Asn Glu Ser Leu Ile Ser Arg Ala Asp Phe Leu 370 375 380 Glu Gly Val Arg Met Ser Val Pro His Ala Asn Asp Ile Ala Thr Asp 385 390 395 400 Ala Val Val Leu Gln Tyr Thr Asp Trp Gln Asp Gln Asp Asn Arg Glu 405 410 415 Lys Asn Arg Glu Ala Leu Asp Asp Ile Val Gly Asp His Asn Val Ile 420 425 430 Cys Pro Val Val Gln Phe Ala Asn Asp Tyr Ala Lys Arg Asn Ser Lys 435 440 445 Val Tyr Ala Tyr Leu Phe Asp His Arg Ala Ser Asn Leu Leu Trp Pro 450 455 460 Pro Trp Met Gly Val Pro His Gly Tyr Glu Ile Glu Phe Val Phe Gly 465 470 475 480 Leu Pro Leu Asn Asp Ser Leu Asn Tyr Thr Pro Gln Glu Lys Glu Leu 485 490 495 Ser Arg Arg Met Met Arg Tyr Trp Ala Asn Phe Ala Arg Thr Gly Asn 500 505 510 Pro Thr Asp Pro Ala Asp Lys Ser Gly Ala Trp Pro Thr Tyr Thr Ala 515 520 525 Ser Gln Pro Gln Tyr Val Gln Leu Asn Thr Gln Pro Leu Ala Thr Gln 530 535 540 Pro Ser Leu Arg Ala Gln Ile Cys Ala Phe Trp Asn His Phe Leu Pro 545 550 555 560 Lys Leu Leu Asn Ala Thr Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu 565 570 575 Asn Ala Ala Gln Pro Ala Met Ala Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly 580 585 590 Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala 595 600 605 Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr Trp île Glu Trp Val Lys Gln Arg 610 615 620 Pro Gly Tyr Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly 625 630 635 640 Ser Thr Ile Tyr Ser Thr Lys Phe Lys Gly Lys Val Thr Phe Thr Ala 645 650 655 Glu Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser 660 665 670 Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Trp Leu Tyr Phe Ser 675 680 685 Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 690 695 700 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu 705 710 715 720 Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ile Met Ala Ala Ser Leu Gly Gln Lys Val 725 730 735 Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His 740 745 750 Trp Phe Gln Gln Lys Ser Gly Ala Ser Pro Lys Pro Leu Ile His Arg 755 760 765 Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly 770 775 780 Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala Glu Asp 785 790 795 800 Asp Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Phe Thr Phe 805 810 815 Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 820 825 10. Polypeptide selon l'une quelconque des revendications 6 à 8, caractérisé en ce que l'anticorps ou la partie d'anticorps est dirigé contre une cytokine ou une partie biologiquement active d'une cytokine. 11. Polypeptide selon l'une quelconque des revendications 6 à 8, caractérisé en ce que l'anticorps ou la partie d'anticorps est dirigé contre tout ou partie d'un antigène, en particulier un antigène bactérien, viral ou fongique. 12. Polypeptide selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le récepteur protéique est une lectine. 13. Polypeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le récepteur protéique est une protéine de type avidine ou streptavidine, ou de type biotine. 14. Réactif de diagnostic, caractérisé en ce qu'il comprend un polypeptide de fusion selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, le cas échéant en association avec un ou plusieurs excipients biocompatibles. 15. Ensemble de réactifs de diagnostic, caractérisé en ce qu'il comprend a) un réactif comprenant une molécule reconnaissant spécifiquement un analyte à rechercher dans un échantillon, ladite molécule étant couplée à une molécule de type biotine b) un polypeptide de fusion selon la revendication 13, dans lequel le récepteur protéique est une molécule de type avidine ou streptavidine. 16. Trousse de détection d'une molécule ligand dans un échantillon, caractérisée en ce qu'elle comprend a) un polypeptide selon l'une des revendications 1 à 13 ou un réactif de diagnostic selon la revendication 14 ou encore un ensemble de réactifs selon la revendication 15 b) le cas échéant, un substrat de l'acétyl cholinestérase c) le cas échéant, un témoin de contrôle positif comprenant une quantité ou une concentration déterminée de la molécule ligand recherchée. 17. Procédé de détection d'une molécule ligand dans un échantillon, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes a) mise en contact d'un polypeptide selon l'une des revendications 1 à 13 ou d'un réactif de diagnostic selon la revendication 14 avec un échantillon susceptible de contenir la molécule ligand recherchée b) mise en évidence du complexe formé entre, d'une part, le polypeptide ou le réactif de diagnostic et, d'autre part, la molécule ligand éventuellement présente dans l'échantillon à analyser. 18. Polynucléotide caractérisé en ce qu'il code pour un polypeptide de fusion selon l'une quelconque des revendications 1 à 13. 19. Polynucléotide selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'il comprend la séquence nucléotidique SEQ ID N03 suivante ATGCCCTCCT GCCAGCCTGG CAAGATGCCT GCGCCGTGGC CTTGGTGGCT CCAGCTCCTC 60 CTTTGCATCC CGTCCTGTGT AGCGGTTTTG CCCGGCCGGG CAGGCGAGCT GAAAGTGTCC 120 ACCCAGACTG GCTCGGTGCG TGGCCTGAGC CTGCCGGTTC TCGACGGCCA CGTCTCGGCC 180 TTCCTAGGCA TCCCCTTTGC GGAGCCTCCC CTGGGCAGGA TGCGCTTCCT GCGCCCTGAG 240 CCCGTCAAGC CCTGGCAGCA CGTCCTGGAC GCCACTTCCT ACAAGCCCGC CTGCTACCAG 300 ATGGTGGACA CCAGCTACCC AGGCTTCCAG GGCACGGAGA TGTGGAACCC CAACCGGGGC 360 ATGAGCGAGG ACTGCCTCTA CCTCAACATC TGGGTGCCCT CCCCGCGCCC CAAGGATGCC 420 CCCGTCCTGG TCTGGATCTA CGGAGGGGGC TTCTACAGCG GCGCTGCCTC CCTGGACGTC 480 TATGACGGCC GCTTCCTGAC CTACACGCAG AACGTCATCC TGGTCTCCCT CAGCTACCGT 540 GTGGGGGCCT TCGGCTTTTT GGGCCTCCCG GGAAGTCCAG AGGCCCCGGG AAACATGGGG 600 CTGCTGGACC AGCGCTTGGC CCTGCAGTGG ATCCAGAACA ACATCCATCC TTTTGGGGGC 660 AATCCGAGGG CGGTCACCGT CTTTGGGGAG AGTGCCGGGG CCGCTTCGGT GGGCATGCAC 720 CTGCTTTCCA CCCAGAGCCG CACCCTCTTC CAGCGGGCCA TTCTGCAGAG CGGCGGCCCC 780 AACGCACCGT GGGCCACCGT CACGCCTGCC GAAAGCCGGG GCCGGGCGGC CCTTCTGGGA 840 AAGCAGCTGG GCTGCCACTT CAACAACGAC TCCGAGCTGG TCAGTTGCTT GCGCTCGAAA 900 AACCCCCAGG AGTTGATTGA CGAGGAGTGG TCCGTCCTGC CCTACAAGAG CATTTTCCGC 960 TTCCCCTTCG TCCCGGTCAT TGACGGGGAC TTCTTTCCAG ATACCCCCGA GGCCATGCTG 1020 AGCTCGGGCA ACTTCAAGGA GACCCAGGTG TTGCTGGGCG TGGTGAAGGA CGAGGGCTCC 1080 TACTTCCTGA TCTACGGGCT GCCTGGCTTC AGCAAGGACA ACGAGAGCCT CATCAGCCGG 1140 GCCGACTTCC TGGAAGGGGT GCGGATGAGC GTGCCCCACG CCAACGACAT CGCCACTGAT 1200 GCCGTGGTGC TGCAATACAC TGACTGGCAG GACCAGGACA ACAGGGAGAA GAACCGGGAG 1260 GCCCTGGACG ACATCGTGGG AGACCACAAC GTCATCTGCC CGGTCGTGCA GTTCGCCAAC 1320 GACTACGCCA AGCGCAACAG CAAGGTGTAC GCCTACCTGT TTGACCACCG GGCCTCCAAC 1380 CTCCTCTGGC CCCCCTGGAT GGGGGTCCCC CATGGCTACG AGATCGAGTT TGTCTTTGGA 1440 TTGCCGCTCA ACGACAGCCT GAACTACACG CCCCAAGAGA AGGAGCTGAG CCGCAGAATG 1500 ATGCGCTACT GGGCCAACTT CGCCCGGACA GGGAACCCCA CCGACCCTGC CGATAAGAGC 1560 GGGGCCTGGC CCACCTACAC CGCCTCCCAG CCGCAGTATG TCCAGCTCAA CACCCAGCCG 1620 CTGGCCACCC AACCCAGCCT GCGGGCCCAG ATCTGCGCCT TCTGGAACCA CTTCCTCCCC 1680 AAACTGCTGA ACGCCACA 1698 20. Polynucléotide selon l'une des revendications 18 ou 19, caractérisé en ce qu'il comprend la séquence nucléotidique SEQ ID N04 suivante ATGCCCTCCT GCCAGCCTGG CAAGATGCCT GCGCCGTGGC CTTGGTGGCT CCAGCTCCTC 60 CTTTGCATCC CGTCCTGTGT AGCGGTTTTG CCCGGCCGGG CAGGCGAGCT GAAAGTGTCC 120 ACCCAGACTG GCTCGGTGCG TGGCCTGAGC CTGCCGGTTC TCGACGGCCA CGTCTCGGCC 180 TTCCTAGGCA TCCCCTTTGC GGAGCCTCCC CTGGGCAGGA TGCGCTTCCT GCGCCCTGAG 240 CCCGTCAAGC CCTGGCAGCA CGTCCTGGAC GCCACTTCCT ACAAGCCCGC CTGCTACCAG 300 ATGGTGGACA CCAGCTACCC AGGCTTCCAG GGCACGGAGA TGTGGAACCC CAACCGGGGC 360 ATGAGCGAGG ACTGCCTCTA CCTCAACATC TGGGTGCCCT CCCCGCGCCC CAAGGATGCC 420 CCCGTCCTGG TCTGGATCTA CGGAGGGGGC TTCTACAGCG GCGCTGCCTC CCTGGACGTC 480 TATGACGGCC GCTTCCTGAC CTACACGCAG AACGTCATCC TGGTCTCCCT CAGCTACCGT 540 GTGGGGGCCT TCGGCTTTTT GGGCCTCCCG GGAAGTCCAG AGGCCCCGGG AAACATGGGG 600 CTGCTGGACC AGCGCTTGGC CCTGCAGTGG ATCCAGAACA ACATCCATCC TTTTGGGGGC 660 AATCCGAGGG CGGTCACCGT CTTTGGGGAG AGTGCCGGGG CCGCTTCGGT GGGCATGCAC 720 CTGCTTTCCA CCCAGAGCCG CACCCTCTTC CAGCGGGCCA TTCTGCAGAG CGGCGGCCCC 780 AACGCACCGT GGGCCACCGT CACGCCTGCC GAAAGCCGGG GCCGGGCGGC CCTTCTGGGA 840 AAGCAGCTGG GCTGCCACTT CAACAACGAC TCCGAGCTGG TCAGTTGCTT GCGCTCGAAA 900 AACCCCCAGG AGTTGATTGA CGAGGAGTGG TCCGTCCTGC CCTACAAGAG CATTTTCCGC 960 TTCCCCTTCG TCCCGGTCAT TGACGGGGAC TTCTTTCCAG ATACCCCCGA GGCCATGCTG 1020 AGCTCGGGCA ACTTCAAGGA GACCCAGGTG TTGCTGGGCG TGGTGAAGGA CGAGGGCTCC 1080 TACTTCCTGA TCTACGGGCT GCCTGGCTTC AGCAAGGACA ACGAGAGCCT CATCAGCCGG 1140 GCCGACTTCC TGGAAGGGGT GCGGATGAGC GTGCCCCACG CCAACGACAT CGCCACTGAT 1200 GCCGTGGTGC TGCAATACAC TGACTGGCAG GACCAGGACA ACAGGGAGAA GAACCGGGAG 1260 GCCCTGGACG ACATCGTGGG AGACCACAAC GTCATCTGCC CGGTCGTGCA GTTCGCCAAC 1320 GACTACGCCA AGCGCAACAG CAAGGTGTAC GCCTACCTGT TTGACCACCG GGCCTCCAAC 1380 CTCCTCTGGC CCCCCTGGAT GGGGGTCCCC CATGGCTACG AGATCGAGTT TGTCTTTGGA 1440 TTGCCGCTCA ACGACAGCCT GAACTACACG CCCCAAGAGA AGGAGCTGAG CCGCAGAATG 1500 ATGCGCTACT GGGCCAACTT CGCCCGGACA GGGAACCCCA CCGACCCTGC CGATAAGAGC 1560 GGGGCCTGGC CCACCTACAC CGCCTCCCAG CCGCAGTATG TCCAGCTCAA CACCCAGCCG 1620 CTGGCCACCC AACCCAGCCT GCGGGCCCAG ATCTGCGCCT TCTGGAACCA CTTCCTCCCC 1680 AAACTGCTGA ACGCCACAGA ACAAAAACTC ATCTCAGAAG AGGATCTGAA TGCGGCCCAG 1740 CCGGCCATGG CCCAGGTCAA GCTGCAGCAG TCTGGAGCTG AGTTGATGAA GCCTGGGGCC 1800 TCAGTGAAGA TATCCTGCAA GGCGACTGGC TACACATTCA GTAGCTACTG GATAGAGTGG 1860 GTAAAGCAGA GGCCTGGATA TGGCCTTGAG TGGATTGGAG AGATTTTACC TGGAAGTGGT 1920 AGTACTATCT ACAGTACTAA GTTCAAGGGC AAGGTCACAT TCACTGCAGA AACATCCTCC 1980 AACACAGCCT ACATGCAACT CAGCAGACTG ACATCTGAGG ACTCTGCCGT CTATTACTGT 2040 GCAAGACGAT GGTTATACTT CTCCTTTGAC TACTGGGGCC AAGGGACCAC GGTCACCGTC 2100 TCCTCAGGTG GAGGCGGTTC AGGCGGAGGT GGCTCTGGCG GTGGCGGATC GGACATCGAG 2160 CTCACTCAGT CTCCATCAAT AATGGCTGCC TCTCTGGGGC AGAAGGTCAC CATGACCTGC 2220 AGTGCCAGCT CAAGTGTAAG TTCCAGTTAC TTGCACTGGT TCCAGCAGAA GTCAGGCGCT 2280 TCCCCCAAAC CCTTGATTCA TAGGACATCC AACCTGGCTT CTGGAGTCCC AGCTCGCTTC 2340 AGTGGCAGTG GGTCTGGGAC CTCTTACTCT CTCACAATCA GCAGCGTGGA GGCTGAAGAT 2400 GATGCAACTT ATTACTGCCA GCAGTGGAGT GGTTACCCAT TCACGTTCGG TGCTGGCACC 246G AAGCTGGAAA TCAAACGG 2478 21. Vecteur recombinant de clonage et/ou d'expression caractérisé en ce qu'il comprend un polynucléotide selon l'une des revendications 18 à 20. 22. Vecteur recombinant selon la revendication 21, caractérisé en ce qu'il s'agit du plasmide pC-AChE scFv hébergé par la souche de E. coli déposée à la CNCM le 30 octobre 1997 sous le numéro In1938. 22. Hôte cellulaire recombinant caractérisé en ce qu'il contient un vecteur selon l'une quelconque des revendications 21 et 22. 24. Hôte cellulaire recombinant selon la revendication 23, caractérisé en ce qu'il s'agit de cellules COS. 25. Hôte cellulaire recombinant selon la revendication 23, caractérisé en ce qu'il s'agit de la souche d'E. coli déposée à la CNCM le 30 octobre 1997 sous le numéro I- 1938. 26. Procédé de préparation d'un polypeptide de fusion selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes a > culture d'un hôte cellulaire recombinant selon l'une des revendications 23 à 25 b > récupération du polypeptide de fusion produit par l'hôte cellulaire recombinant c > le cas échéant, purification dudit polypeptide de fusion à partir du surnageant de culture ou du lysat cellulaire de l'hôte recombinant. 27. Application d'une acétylcholinestérase monomérique constitutive d'un polypeptide de fusion selon l'une des revendications 1 à 13 à la détection d'un analyte dans un échantillon.