FR 2775600 A1 19990910 FR 9802814 A 19980305 La présente invention concerne de nouvelles compositions à base d'un extrait de plante, leurs applications à titre de médicament et les compositions pharmaceutiques les renfermant. La migraine est une pathologie connue de longue date et représente un challenge des plus important pour la science moderne. La migraine touche de manière régulière 10 à 12% de la population mondiale. Les facteurs responsables de son apparition, de son évolution et de sa disparition restent méconnus. Selon les hypothèses actuelles, la migraine résulterait d'interactions complexes entre le système nerveux, vasculaire et le système sérotoninergique. On pense que lorsque la stimulation du système trigéminovasculaire par l'intermédiaire de stimuli chimiques (sérotonine, noradrénaline, prostaglandines, histamine) ou électriques franchit un certain seuil, le système trigéminovasculaire libère des tachykinines comme la substance P dans les vaisseaux sanguins des méninges et de la duremère afin de protéger l'encéphale. Ce processus provoque la dégradation des mastocytes, une vasodilatation, la libération de sérotonine par les plaquettes qui est suivie par une inflammation et le gonflement des vaisseaux sanguins. Cette inflammation neurogène entraîne une distension des artères crâniennes et des céphalées. I1 est maintenant établi que les récepteurs sérotoninergiques jouent un rôle majeur dans l'apparition et la progression des céphalées. Le profil de réceptologie de beaucoup de drogues utilisées dans le traitement aiguë de la migraine montrent qu'ils agissent comme agonistes des récepteurs 5-HT1-D ou comme antagonistes des récepteurs ss- adrénergiques ou des récepteurs sérotoninergiques 5-HT1-A, 5 HT1-B, 5-HT1-C (ergotamine), au niveau de centres nerveux qui sont impliqués dans la douleur migraineuse. Ainsi, toute substance capable d'agir comme agoniste des récepteurs 5-HT1-D et comme antagonistes des autres récepteurs à la sérotonine avec une certaine activité analgésique ou anti-inflammatoire constituerait un excellent agent pour la prévention et / ou le traitement des céphalées. Les traitements de la migraine sont essentiellement symptomatiques; aucun n'est réellement curatif. Les mécanismes à l'origine de la migraine ne sont pas connus et par conséquent, tous les traitements sont destinés à apporter une amélioration symptomatique mais n' ont pas d'effet préventif. Ainsi, la plupart des traitements actuellement disponibles ont pour objectif de réduire la douleur au cours de la crise mais n'ont aucun effet prophylactique visant à réduire la fréquence, l'intensité et la durée des crises. Les préparations à base d'acide acétyl-salicylique et d'acétaminophen inhibent la synthèse des prostaglandines et l'inflammation post-migraine ; les ergotamines agissent comme vasoconstricteurs par leur action sur certains récepteurs à la sérotonine et réduisent les céphalées mais ils possèdent de nombreux effets secondaires qui limitent leur utilisation. Ainsi, différents produits existants sur le marché combinent des propriétés analgésiques ou anti-inflammatoires avec une certaine activité vasoconstritrice ou limitent le vasospasme par une action sur certains récepteurs et apportent un soulagement symptomatique. Le Sumatriptan est un produit récent qui agit sur les récepteurs à la sérotonine 5-HTl-A et 5-HT1-D mais qui est actif seulement durant la crise de migraine. Ce produit ne peut être utilisé à long terme en raison de ses effets secondaires et est extrêment coûteux pour un traitement régulier. Certains antagonistes calciques, des inhibiteurs de canaux calciques, et des antidépresseurs, ont été testés et possèdent un certain effet préventif sur la fréquence des crises mais ils ne sont pas actifs dans de nombreux cas, possèdent des effets secondaires et leurs modes d'action ne sont pas connus. Par conséquent, il était crucial de rechercher une substance utilisée à titre prophylactique avec un minimum d'effets secondaires qui soit capable de stopper ou de réduire les céphalées, de diminuer leur fréquence d'apparition, leur intensité et leur durée. Notre recherche a été orientée vers les plantes médicinales, souvent très riches en principes actifs et disponibles en quantité, elles présentent des effets secondaires très limités par rapport aux molécules de synthèse. De plus, de nombreuses personnes préfèrent utiliser un médicament à base de plantes plutôt que des molécules synthétiques pour le traitement préventif des maladies. Nos efforts de recherche se sont concentrés sur un principe actif naturel ou une combinaison de plantes qui soit capable de moduler l'activité des récepteurs à la sérotonine, avec pour objectif de mettre au point une thérapeutique préventive de la migraine. Il est connu que certaines plantes des genres Filipendula (ulmaria), Salix (alba), Cinchonae (cortex), Ribes (nigrum) possèdent des propriétés analgésiques et anti-inflammatoires mais leur effet sur les récepteurs cérébraux à la sérotonine n'est pas connu. Les écorces de saule blanc (Salix alba) sont utilisées par voie orale, notamment en France, pour le traitement aiguë des fièvres légères et de grippes, pour le mal de tête, en cas de douleurs, et par voie orale et locale dans les manifestations articulaires, les tendinites et les foulures. Or la demanderesse a découvert avec étonnement, au cours d'expériences de criblage, que l'extrait d'écorce de Salix inhibe fortement les récepteurs à la sérotonine 5-HT1-A, 5-HT1- B et 5-HT1-C et agit remarquablement comme agoniste des récepteurs 5-HT1-D. Ce profil modulateur des récepteurs à la sérotonine (5 HT) des espèces du genre Salix n'est pas connu à ce jour. La combinaison des propriétés 5-HT1-D agoniste, 5-HT1-A antagoniste, 5-HT1-B antagoniste, 5-HT1-C antagoniste, de Salix avec une activité anti-inflammatoire faible à modérée font de cette plante une excellente drogue pour le traitement préventif de la migraine. Afin d'observer un effet thérapeutique avec ce mode d'action, il est nécessaire de suivre un traitement de longue durée (minimum 1 mois) . Ainsi, en l'absence de connaissances concernant les propriétés modulatrices des récepteurs sérotoninergiques de Salix, aucune étude n' a été réalisée jusqu'à ce jour pour rechercher les effets préventifs de l'écorce de Salix sur le mal de tête. C'est pourquoi la présente invention a pour objet l'utilisation préventive ou curative des compositions de Salix pour leur action sur les récepteurs à la sérotonine. Par extrait de plantes l'on entend tant des plantes que des parties de plantes, par exemple et de préférence de plante entière et de préférence séchées ou déshydratées, et broyées, ou encore des extraits de telles plantes ou parties de plantes obtenus à l'aide d'au moins un solvant aqueux et/ou organique et se présentant sous une forme classiquement employée en pharmacie ou diététique, liquide ou notamment solide. La plante du genre Salix, peut être par exemple Salix cinerea, et de préférence Salix alba. On utilise de préférence l'écorce de cette plante, séchée et broyée, par exemple sous forme d'extrait concentré à haute teneur en principes actifs. De tels extraits sont par exemple ceux commercialisés par la société QUIMDIS (France) ou par la société BIOSPHERE 99 (France) sous la référence BIO 3021. Ces extraits peuvent êtres utilisés pour le traitement de pathologies liées à un déséquilibre de l'activité des récepteurs à la sérotonine (5-HT), comme la migraine, la dépression, l'anxiété et les troubles de la mémoire, qui nécessitent la modulation des récepteurs sérotoninergiques. Les propriétés de Salix découvertes par le demandeur de la présente invention sont particulièrement intéressantes puisqu'elles permettent d'envisager la fabrication de compositions ayant des propriétés modulatrices des récepteurs sérotoninergiques, illustrées ci-après dans la partie expérimentale. Elles justifient leur utilisation comme méthode de traitement du corps humain ou animal, c'est à dire à titre de médicament. Les compositions selon la présente invention trouvent leur emploi, par exemple dans le traitement préventif de la dépression, de l'anxiété, des troubles de la mémoire, et tout particulièrement du mal de tête. La dose usuelle et la durée du traitement peuvent être variables selon le sujet traité et l'affection visée, par exemple de 50 à 1000 mg par jour par voie orale chez l'homme d'extrait d'écorce, séchée et broyée, de Salix pour le traitement préventif du mal de tête. A titre de médicaments, les extraits d'écorce ci-dessus peuvent êtres incorporées à des compositions pharmaceutiques destinées à la voie orale. Ces compositions pharmaceutiques se présentent sous une forme couramment utilisée en médecine humaine, solide ou liquide, par exemple des comprimés simples ou dragéifiés, des granulés, des pastilles ou des suppositoires et préparées selon les méthodes usuelles, et plus particulièrement sous forme de gélules. Ainsi, les extraits peuvent êtres incorporés à des excipients habituellement employés dans les compositions pharmaceutiques, tel que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, des véhicules aqueux ou non aqueux, des corps gras d'origine animale ou végétale, d'autres extraits de plantes comme stabilisateurs des principes actifs, des dérivés paraffiniques, des glycols, des conservateurs, des agents mouillants, des agents dispersants ou émulsionnants, notamment pharmaceutiquement acceptables. La présente invention a également pour objet des associations d'extraits de Salix mélangés par des méthodes connues en elles-mêmes avec un autre extrait de plante (par exemple Ulmaria), un oligo-élément (par exemple du zinc, du magnésium), une vitamine (par exemple de la riboflavine) ou un principe actif chimique tel qu'un analgésique (par exemple de l'aspirine). Une composition ci-dessus décrite peut également se présenter sous la forme d'un complément alimentaire ou d'un produit diététique ou phytothérapeutique. Elle peut se présenter sous les formes courantes des compositions pharmaceutiques, notamment celles destinées à un usage grand public . L'extrait ou l'écorce de Salix peuvent avantageusement êtres associés à un autre extrait de plante ou à un autre principe actif choisi parmi la famille des analgésiques, des anti-inflammatoires, des corticoides, des ergotamines, des antidépresseurs et la caféine. Les exemples qui suivent illustrent la présente invention. Exemple 1 On a préparé des gélules répondant à la formule a) Poudre lyophilisée d'extrait hydroalcoolique d'écorce de Salix alba 250 mg b) Excipient (Aerosil) 100 mg Exemple 2 On a préparé des gélules répondant à la formule a) Poudre lyophilisée d'extrait hydroalcoolique d'écorce de Salix alba 150 mg b) Poudre lyophilisée d'extrait hydroglycolique de parties aériennes de Tanacetum parthenium 150 mg Exemple 3 On a préparé des comprimés répondant à la formule a) Poudre lyophilisée d'extrait hydroalcoolique d'écorce de Salix alba 250 mg Exemple 4 On a préparé des ampoules buvables répondant à la formule a) Poudre lyophilisée d'extrait hydroalcoolique d'écorce de Salix alba 1% p/v b) Poudre lyophilisée d'extrait hydroalcoolique de parties aériennes de Tanacetum parthenium 1% p/v c) Excipient qsp 10 ml Exemple 5 On a préparé une crème répondant à la formule a) Poudre lyophilisée d'extrait hydroalcoolique d'écorce de Salix alba 1% p/v b) Poudre lyophilisée d'extrait hydroalcoolique de parties aériennes de Tanacetum parthenium 1% p/v c) Excipient qsp 10 ml ETUDE PHARMACOLOGIQUE 1. Effets analgésiques Les effets analgésiques de Salix alba ont été étudiés sur le modèle de crampe abdominale induite par phenylbenzoquinone chez la souris. A la dose de 150 mg/kg per os. Salix alba possède un léger effet analgésique (-13.22%) comparativement à une dose de 100 mg/kg per os d'aspirine (-33.30%). 2. Effets anti inflammatoires Les propriétés anti inflammatoires de l'extrait d'écorce de Salix alba (300 mg/kg) ont été étudiées sur le modèle d'oedème podal induit par carragénine chez le rat. L'indométhacine a été employée comme produit témoin (10 mg/kg). L'extrait de Salix alba n' a pas montré d'effets antiinflammatoires avec ce modèle. 3. Profil récepteur (n=minimum 2): Le profil récepteur de Salix alba a été obtenu à l'aide d'expériences de réceptologie par marquage radioactif (Technique dite du Binding ). Les tests ont été réalisés selon la méthode résumée ciaprès Récepteur Tissu Produit de référence 5-HT1B Cortex cérebral Sérotonine de rat 5-HT1D Noyau caudal Sérotonine bovin Les conditions expérimentales sont résumées ci-après Récepteur Ligand Concentration Ligand non Incubation spécifique [125I] CYP 0.1 nM Sérotonine 90 min / 5-HT1B (lOAM) 37"c [3H] 2.0 nM Sérotonine 30 min / 5-HT1D SEROTONINE (lOWM) 22"c Après incubation, les membranes ont rapidement été filtrées sous vide à l'aide de filtres en fibres de verre GF/B ou GF/C. Les filtres ont ensuite étés rincés plusieurs fois avec un tampon tenu dans la glace en utilisant un récupérateur de cellules Brandel ou Packard. L'activité liée a ensuite été mesurée à l'aide d'un compteur à scintillation liquide (LS 6000, Beckman) en utilisant un mélange de scintillation. Substance testée : solution hydroalcoolique d'extrait lyophilisé d'écorce de Salix alba a une concentration finale de 1%. Dans chaque essai, le composé de référence pour le récepteur étudié était testé de façon dupliquée et simultanée, selon huit concentrations, afin de permettre l'obtention d'une courbe de compétition. La liaison spécifique du radioligand au récepteur est définie comme étant la différence entre la liaison totale et la liaison non spécifique déterminée en présence d'un excès de ligand non marqué. Les résultats sont exprimés en pourcentage de la liaison spécifique du contrôle et en pourcentage de variation de la liaison spécifique obtenue en présence du produit testé. Les concentrations inhibitrices de 50% de l'activité et les coefficients de Hill (nH) ont étés déterminés pour les composés de référence par analyse des régressions non linéaires de leurs courbes de compétition. Résultats moyens Pourcentage moyen de variation de la liaison spécifique du radioligand obtenu avec la substance testée, pour les différents récepteurs étudiés et valeurs d'IC50 déterminées pour les composés de référence. IC50 nH Récepteur Salix alba Composé de référence Beta-1 - 48 atenolol 4,280 0.71 Beta-2 - 42 ICI 118551 4.2 0.76 5-HT1B - 42 Sérotonine 20.9 0.77 5-HT1D + 233 ! Sérotonine 2.7 0.87 5-HT2A - 96 | Kétansérine 1.6 1.03 5-HT2C - 104 4 Sérotonine 24.6 1.02 Les signes + et - indiquent une augmentation et une diminution respectivement Conclusion : Salix alba augmente de façon remarquable (+233%) la liaison du radioligand au récepteur 5-HT1-D. Par ailleurs, Salix alba inhibe fortement la liaison aux récepteurs 5-HT2-A et 5-HT2-C et inhibe modérément la liaison aux récepteurs 5-HTlB, B1 et B2. ETUDE CLINIQUE Une étude clinique pilote ouverte a été réalisée avec Salix alba comme modulateur des récepteurs à la sérotonine (5 HT) et Tanacetum parthenium comme agent anti-inflammatoire sans effets significatifs sur les récepteurs sérotoninergiques (code du produit : NIG-RL) . L'étude a été réalisée au département EEG de l'Hôtel Dieu, hôpital public de Clermont Ferrand, France. Les objectifs de cette étude étaient d'évaluer l'effet préventif de MIG-RL sur le nombre (fréquence), la durée et l'intensité des crises de patients souffrants de migraine commune, en accord avec les critères fixés par l' International Headache Society . Les patients ont été admis dans le protocole après vérification qu'ils remplissaient bien des critères d'inclusion préalablement fixés. Chaque patient recevait 4 gélules de MIG-RL par jour (voie orale) pendant une période de 84 jours. I1 était demandé à chaque patient de compléter un cahier d'observations entre les jours 0-42, et 43-84 au cours de l'essai clinique. Les caractéristiques de chaque crise de migraine ont été indiquées au cours de l'étude dans le cahier d'observation par les patients. Les données ont été analysées à l'aide d'un test de Student après les 84 jours de traitement et ont été comparés avec la période de 6 semaines précédant le début du traitement. Au cours de la période précédent le début du traitement, la fréquence moyenne des crises était de 7,3 en six semaines, avec une durée moyenne de 33.33 heures et une intensité moyenne de 8.5 sur une échelle allant de 0 à 10. Les résultats obtenus après l'utilisation sur une longue période de l'extrait de Salix alba (42 et 84 jours) ont dépassé toutes les attentes: - Le produit MIG-RL a diminué la fréquence des crises de 47,9% (NS=Non significatif) après 42 jours et de 65,8% (p - La durée minimum des crises a été diminuée de 52,6% (p durée maximum des crises a été diminuée de 61,0% (p respectivement. La durée moyenne des crises a été diminuée de 59,5% (p (p - L'intensité moyenne prise en compte lors des crises a été diminuée de 38,8% (p 48,2% (p - Les améliorations de tous ces paramètres ont été constatées chez tous les patients - Les patients ont également constaté que le produit MIG RL a également amélioré différents paramètres de qualité de vie. Ainsi la forme physique, 1' envie de réaliser des efforts physiques, la mémoire, la capacité de concentration, l'impression de liberté, la satisfaction dans les activités sociales et professionnelles, l'irritabilité et l'anxiété ont été nettement améliorés. Les performances intellectuelles, le dynamisme, les relations sociales, le moral et l'impression de tête lourde entre les crises se sont également trouvées améliorés. - La plupart des patients ont reconnu une amélioration perceptible de leur qualité de vie. L'index global de qualité de vie prenant en compte 18 paramètres a été augmenté de 12,5% pendant les six premières semaines de traitement (p douze semaines de traitement. - Le produit MIG-RL a été bien toléré chez tous les patients avec aucun effet secondaire constaté. - 6 patients sur 8 ont souhaité poursuivre le traitement à la fin de l'étude. Ces résultats montrent que le produit MIG-RL qui contient un extrait d'écorce de Salix alba constitue un traitement préventif efficace de la migraine. Bien que ces résultats ne permettent pas d'expliquer le mode d'action de MIG-RL avec une complète certitude, il est raisonnable de concevoir que l'extrait d'écorce de Salix alba agit sur les récepteurs de la sérotonine (5-HT) au niveau cérébral comme cela a été démontré à l'aide des expériences de pharmacologie( Binding ). De même, il est concevable que les autres composants du produit MIG-RL n'exercent pas d'activité modulatrice sur les récepteurs à la sérotonine (5-HT). Comme la sérotonine joue un rôle important dans l'initiation et la progression des crises de migraine et étant donné l'activité de l'extrait de Salix alba sur ces mêmes récepteurs, le produit MIG-RL doit modifier l'activité de la sérotonine et ainsi prévenir l'apparition des crises de migraine. Revendications 1. L'utilisation de Salix Alba ou de Salix Cinerea, dans la composition de médicaments ou de compléments nutritionnels destinés à limiter, traiter ou prévenir, chez l'Homme ou l'Animal, les maladies, syndromes ou symptômes liés à la dérégulation des récepteurs à la sérotonine (5-HT). 2. Utilisation d'une composition d'extraits solides de Salix Alba ou de Salix Cinerea selon la revendication 1 pour normaliser ou régulariser l'activité des neuro-récepteurs à la sérotonine (5-HT). 3. Utilisation d'une composition d'extraits liquides de Salix Alba ou de Salix Cinerea selon la revendication 1 pour normaliser ou régulariser l'activité des neuro-récepteurs à la sérotonine (5-HT). 4. Utilisation d'une composition d'extraits, liquides ou solides, de Salix Alba ou de Salix Cinerea selon la revendication 1, associée à d'autres extraits de plantes ayant une action modulatrice sur les neuro-récepteurs à la sérotonine (5-HT). 5. Utilisation d'une composition d'extraits, liquides ou solides, de Salix Alba ou de Salix Cinerea selon la revendication 1, associée à des éléments d'origine végétale, animale et/ou minérale ayant une action modulatrice sur les neuro-récepteurs à la sérotonine (5-HT). 6. Utilisation d'une composition d'extraits, liquides ou solides, de Salix Alba ou de Salix Cinerea selon la revendication 1, associée à des principes actifs chimiques ayant une action modulatrice sur les neuro-récepteurs à la sérotonine (5-HT). 7. Utilisation d'une composition selon les revendications 1, 2, 3, 4, 5, 6, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter ou prévenir les maux de tête, y compris les migraines, liés à la dérégulation des récepteurs à la sérotonine. 8. Utilisation d'une composition selon les revendications 1, 2, 3, 4, 5, 6, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter ou prévenir les syndromes dépressifs liés à la dérégulation des récepteurs à la sérotonine. 9. Utilisation d'une composition selon les revendications 1, 2, 3, 4, 5, 6, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter ou prévenir les troubles de la mémoire liés à la dérégulation des récepteurs à la sérotonine. 10. Utilisation d'une composition selon les revendications 1, 2, 3, 4, 5, 6, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter ou prévenir les troubles anxieux liés à la dérégulation des récepteurs à la sérotonine.