FR 2772235 A1 19990618 FR 9715760 A 19971212 La présente invention concerne une composition polyphénolique susceptible de trouver son application comme complément alimentaire, comme nutraceutique, ou encore comme composition cosmétique administrable par voie orale ou topique. II apparaît clairement aujourd'hui qu'une alimentation saine est source de santé. Les médias se font régulièrement l'écho des découvertes dans le domaine de la nutraceutique, aliment favorisant un bon état de santé, confortés par différentes enquêtes épidémiologiques sur les régimes crétois, méditerranéens et du sud de l'Europe. On observe fréquemment que les populations qui consomment tel ou tel produit particulier sont moins affectées par les maladies cardio-vasculaires, première cause de mortalité au sein des pays industrialisés. En 1978, les résultats d'une étude de l'Organisation Mondiale de la Santé (O.M.S.) sur les causes de mortalité dans 23 pays européens ont été analysés par un auteur (Genevois), qui a montré que l'infarctus du myocarde est une des plus fréquentes maladies frappant les hommes entre 55 et 64 ans. II apparaît cependant que les taux de mortalité varient beaucoup selon les pays. Genevois divise les pays en trois groupes: 1) les pays viticoles, 2) les pays d'Europe Centrale, 3) les pays de l'Europe du Nord. Le premier étant celui des pays les moins touchés, et le troisième celui des pays à taux très élevé d'infarctus. En 1979, Saint-Léger, Cochrane et Moore publient leurs résultats d'une enquête réalisée dans 18 pays développés sur les facteurs associés à la mortalité cardiaque. (The Lancet - 12 mai 1979, pages 1010 à 1020). Les taux de mortalité y sont confrontés à diverses variables telles que la densité de population, la densité médicale, le revenu brut individuel, le tabagisme, le comportement alimentaire, etc. La seule corrélation indiscutable qui se dégage de cette enquête conceme, de façon négative le taux de mortalité par infarctus du myocarde et la consommation habituelle de micronutriments, entre les flavonoïdes amenés par les légumes, les céréales, mais aussi les huiles non raffinées. Ainsi, la France et l'Italie, en tête des consommateurs de vin, riche en flavonoïdes, enregistrent des mortalités trois à cinq fois plus basses que celles de l'Ecosse et de lilrlande. Saint-Léger, Cochrane et Moore en déduisent que le pouvoir protecteur du vin provient de constituants autres que l'alcool. En 1982, preuves scientifiques à l'appui, Masquelier développe une théorie nouvelle selon laquelle les procyanidines exercent leurs effets à deux niveaux, à savoir dans ie sang circulant et dans la paroi artérielle. dans le sang, le vin accélère l'épuration du cholestérol. C'est le pouvoir hypocholestérolémiant, décrit dès 1961. Les polyphénols du vin agissent également comme cofacteurs et facteur d'épargne de la vitamine C. dans la paroi artérielle, ces mêmes procyanidines exercent une double action tissulaire. D'une part, elles stabilisent les fibres de collagène qui servent de soutien aux diverses tuniques du vaisseau, ce renforcement du collagène s' explique par l'établissement de pontages entre les chaines de polypeptides. D'autre part, une inhibition de l'enzyme HD leur permet d'éviter une production exagérée d'histamine qui aurait pour conséquence d'accroître la perméabilité de la paroi artérielle. Puis les résultats intermédiaires de l'étude Monica confirment totalement la faible prévalence du risque cardio-vasculaire dans les populations à régime méditerranéen. Au bilan, il ressort de ces études, que plusieurs nutriments ont un rôle dans le retard d'émergence de pathologie dans le sud de l'Europe: - les légumes et les fruits par les fibres et les flavonoïdes, les lipides insaturés de certaines huiles, notamment d'olive, - le vin. La consommation d'aliments apportant ces nutriments est en forte régression ce qui justifie une supplémentation. La présente invention a pour objet une composition polyphénolique, caractérisée en ce qu'elle contient simultanément au moins deux des constituants suivants: i) concentré de jus de raisin titré de 1 à 20 % en poids de polyphénols; ii) extrait de vin titré de 1 à 20 % en poids de polyphénols; iii) extrait hydrosoluble d'olive titré de 0,1 à 40 % en polyphénols. Selon une autre caractéristique de l'invention, la composition est caractérisée en ce que le concentré de jus de raisin est riche en flavonoïdes et en anthocyanes, et de préférence, contient de 1 à 20 % en poids de flavonoïdes. Selon une autre caractéristique, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que l'extrait de vin est riche en flavonoïdes, en anthocyanes et en procyanidinols, et de préférence, contient de 1 à 20 % en poids de flavonoïdes. Selon une autre caractéristique de l'invention, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que l'extrait hydrosoluble d'olive est riche en oleuropéine, tyrosol et acide caféique, et de préférence, contient de 0,1 à 40 % en poids de tyrosol, d'oleuropéïne et d'acide caféique. Selon une variante avantageuse de la présente invention, la composition contient simultanément les trois constituants i), ii) et iii) et, en particulier, répond à la composition suivante: i) 3 à 20 % en poids de concentré de jus de raisin, ii) 0,5 à 40 % en poids d'extrait de vin, iii) 0,01 à 5 % en poids d'extrait hydrosoluble d'olive. En variante, la composition selon l'invention peut également contenir au moins un constituant additionnel choisi parmi les vitamines, en particulier, la vitamine E naturelle, les oligo-éléments, les hydrolysats d'huile de soja, de toumesol et d'olive, lycopènes, minéraux aromatisants, colorants, antioxydants et additifs alimentaires. Les compositions selon l'invention peuvent être utilisées de façon générale comme complément alimentaire, ils peuvent notamment entrer dans la composition de préparation culinaire en jouant le rôle d'agents aromatisants, colorants, antioxydants, ou toute autre fonction d'additifs alimentaires. On rappellera, ci-après, le mode de fabrication de l'huile d'olive vierge traditionnelle. Après lavage, les fruits mûrs sont soumis à une pression modérée à température inférieure à 80"C. L'émulsion est recueillie, puis le mélange est séparé par centrifugation en deux phases, aqueuse et lipidique où persistent des phénomènes d'émulsion. Les microcomposants de l'olive se répartissant entre ces deux phases selon leur solubilité (coefficient de partage). L'huile vierge non raffinée est, en particulier, relativement riche en micronutriments tels que les phytostérols, les vitamines liposolubles (E, etc), les polyphénols (acide caféique, tyrosol, syringique, etc) et leur précurseur, à savoir l'oleuropéine. Ces composés existent également dans des ratios voisins dans la phase aqueuse qui pourra donc être utilisée pour la préparation des composés selon l'invention à titre d'extraits actifs. L'étude analytique des composés phénoliques met en évidence: - La similitude de ces composés polyphénoliques et iridoïdes tant dans la phase aqueuse que dans la phase lipidique. - I'identité des composés présents dans la phase aqueuse et dans la phase lipidique, par exemple acide caféique, tyrosol, oleuropéine, - que ces composés participent pour tout ou partie à l'effet constaté au niveau cardiovasculaire chez les populations consommatrices d'huile d'olive non raffinée, - I'utilisation d'un actif issu de la phase aqueuse dans des préparations de type nutraceutique destinées à supplémenter en oligo-nutriments essentiels de la diète méditerranéenne, chez l'individu sain, ne recevant qu'une nourriture standardisée industrielle. On rappellera, ci-après, rapidement comment peuvent être obtenus le concentré de jus de raisin et l'extrait de vin. Ces extraits sont généralement obtenus par évaporation sous pression réduite, sous atmosphère inerte des jus et liquides correspondants. A titre d'exemple, les procédés de "flash détente" peuvent être utilisés, mais d'autres méthodes sont également applicables. La déshydratation de ces jus et liquides peut être totale (extrait sec contenant moins de 8,1 % d'eau incorporant un agent tel que la maltodextrine, I'amidon, la silice) ou partielle (extrait fluidecontenant moins de 0,5 % p/p d'éthanol). Le concentré de jus de raisin ainsi obtenu est riche en flavonoîdes et en anthocyanes : 1 à 20 % exprimé en flavonoïdes. L'extrait de vin ainsi obtenu est riche en fiavonoïdes, anthocyanes, procyanidinols 1 à 20 % exprimé en flavonoïdes. Evaluation de l'activité des composants et de l'association La plaque athéromateuse se forme par dépôt de substances lipidiques sur l'endothélium vasculaire, puis par oxydation de ces substances par des cellules de la lignée blanche (Polynucléaires neutrophiles) ; L'activité prophylactique et curative d'une substance ou d'une association de substances peut être évaluée in vitro par des tests simples mimant le phénomène pathologique : la diminution de l'adhérence des cellules de lignée blanche aux cellules endothéliales correspondant à une réponse favorable. En particulier, o Diminution de l'adhérence des PMN à la surface de cellules endothéliales en culture, Inhibition de l'expression de gène de facteurs d'adhésion (VCAM, ICAM) par les cellules endothéliales. Partie expérimentale : Des cellules endothéliales humaines issues de cordons ombilicaux sont mises en culture sur les plaques à puits dans des conditions appropriées. La culture est menée jusqu'à confluence. Les composés à étudier ou leur association sont introduites dans la culture 30 à 60 min avant le déclenchement d'une réaction pharmacologique entraînant l'adhérence lymphocytes (interleukin 1 iLi ; xanthine -xanthine oxydase : XXO). Résultats: Absence d'activité cytotoxique : Aucun des composants évalués ou leur association (50/50 p/p) n'a d'activité cytotoxique à 100 pg/ml Concentré de jus de raisin 023323n Extrait de vin 023324r Extrait hydrosoluble d'olive 023328Cl Inhibition de l'adhésion des lymphocytes aux cellules endothéliales déclenchées par iL1 : L'adhésion mesurée par cytométrie du flux est diminuée de la façon suivante par les associations : Teneur Composants en 1 2 3 4 5 6 pglml Concentré de jus de raisin 50 + - - + + + Extrait de vin 7 + Extrait hydrosoluble d'olive 13 - - + - + + %d'inhibition 20 25 35 60 80 100 La forte potentialisation trouvée, à ces concentrations, par l'association concentrée de jus de raisin/extrait hydrosoluble d'olive, est manifeste à des concentrations d'extraits hydrosolubles d'olive beaucoup plus faible. Par exemple: Composants Teneur Teneur Teneur Teneur Teneur en en g/ml en g/ml en g/ml en g/ml pglml Concentré de jus de raisin 50 50 50 50 50 Extrait de vin 7 7 7 7 7 Extrait hydrosoluble d'olive 0,13 1,3 3,3 8,6 13 % d'inhibition 65 65 75 100 i00 Une inhibition supérieure, pour les associations "raisins-olive" est mise en évidence lorsque la réaction d'adhésion est déclenchée par une stimulation de type radicalaire telle xanthine-xanthine-oxydase. Expression des molécules d'adhésions : I'expression des molécules d'adhésion est déclenchée par contact des cellules avec iL1 en 4 heures. Le concentré de jus de raisin et l'extrait de vin seul a une activité modérée. L'association des trois constituants dans des rapports allant de 1.1.1. à 10. 1 1/10 (jus de raisin, vin, olives) ont tous des activités supérieures à une simple addition d'effet. En conclusion, on observe que: P Le concentré de jus de raisin, l'extrait de vin et les extraits hydrosolubles d'olive sont non cytotoxiques, P Ils ont une activité modérée sur l'adhésion des lymphocytes à l'endothélium, P L'activité potentialisatrice de l'association ternaire est supérieure à celles des composés pris individuellement lorsque la réaction d'adhésion est déclenchée par IL1 et surtout par les réactions radicalaires xanthine-xanthine-oxydase. L'activité de l'association ternaire est manifeste sur l'expression des molécules d'adhésion, alors que chacun des composants est peu actif. Principe actif n" i: Extrait hydrosoluble d'olive Titré en polyphénols : 0,5 à 40 % Ce produit est riche en polyphénols, oleuropéine, tyrosol et acide caféique Principe actif n" 2 : Concentré de jus de raisin Titré de 1 à 20 % de polyphénols exprimé en flavonoïdes Ce produit est riche en flavonoïdes et anthocyanes Principe actif n" 3 : Concentré de vin Titré de 1 a 20 % de polyphénols exprimés en flavonoïdes Ce produit est riche en flavonoldes, anthocyanes et oligo-procyanidinols. Formulations : Différentes formes galéniques ont été développées, solides et liquides telles que des poudres, gélules, comprimés, sirops, solutions pour incorporation soit à la fabrication, soit a la consommation des préparations alimentaires. Les formulations, ci-après, illustrent l'invention sans en limiter la portée: Exemple 1: En poids Concentré de jus de raisin 5 à 95 % Concentré de vin 5 à 25 % Exemple 2 : Extrait hydrosoluble d'olive : 0,01 à 25 % Concentré de jus de raisin 5 à 95 % Concentré de vin 5 à 25 % Exemple 3: Concentré de jus de raisin 5 à 95 % Concentré de vin 5 à 25 % Stabilisé par les vitamines E, C et du licopène Exemple 4 : Extrait hydrosoluble d'olive 0,01 à 25 % Concentré de jus de raisin 5 à 95 % Concentré de vin 5 à 25 % Stabilisé par les vitamines E et C et du licopène Exemple 5: Les formules suivantes sous forme de solution à boire pure ou diluée ont été jugées particulièrement intéressantes : Composants % Plus Précisément A B Concentré de jus de raisin 3 à 20 7 10 Extrait de vin (30 à 50 fois) 0,5 à 40 1 2 Olive extrait hydrosol 0,001 à 5 0,01 0,05 Vitamine E naturelle (&alpha; tocophérol) 0,010 à 0,5 0,01 0,03 Autres oligo-éléments lycopènes et minéraux apportés par : QS QS QS - extrait de tomate, - miel - composition aromatiqu - eau purifiée Posologie jour 0,5 à 50 g 15 g 15 g Exemple 6 : Hydrolysat d'huile de soja associé à l'exemple 5. Exemple 7 : Hydrolysat d'huile de toumesol associé à l'exemple 5. Exemple 8: Hydrolysat d'huile d'olive associé à l'exemple 5. Exemple 9: Hydrolysat d'huile de soja, de toumesol associé à l'exemple 5. Exemple 10 : Hydrolysat d'huile de soja, d'olive associé à l'exemple 5. Exemple 11 Hydrolysat d'huile d'olive et de toumesol associé à l'exemple 5. Exemple 12 : Hydrolysat d'huile de soja, d'olive et de toumesol associé à l'exemple 5. Présentations : Les compositions selon l'invention peuvent être formulées en vue des présentations suivantes Ingrédients alimentaires destinés à être utilisés pour la fabrication ou l'aromatisation de plats : poudres, solutions lipidiques à base de paraffine, + Actifs présents sous forme assimilable : boisson, gélules, barres, en vue d'un effet nutraceutique bénéfique. Actifs cosmétologiques pour des présentations destinées à être ingérées ou appliquée sur la peau, en vue d'un effet bénéfique cutané. REVENDICATIONS 1. Composition polyphénolique, caractérisée en ce qu'elle contient simultanément au moins deux des constituants suivants: i) concentré de jus de raisin titré de 1 à 20 % en poids de polyphénols; ii) extrait de vin titré de 1 à 20 % en poids de polyphénols; iii) extrait hydrosoluble d'olive titré de 0,5 à 40 % en polyphénols. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le concentré de jus de raisin est riche en flavonoïdes et en anthocyanes. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que le concentré de jus de raisin présente une teneur de 1 à 20 % en poids de flavonoïdes. 4. Composition selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l'extrait de vin est riche en flavonoîdes, en anthocyanes et en procyanidinols. 5. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que l'extrait de vin présente une teneur de 1 à 20 % en poids de flavonoïdes. 6. Composition selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l'extrait hydrosoluble d'olive est riche en oleuropéine, tyrosol et acide caféique. 7. Composition selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l'extrait hydrosolubles d'olive présente une teneur de 0,1 à 40 % en poids de tyrosol, d'oleuropeïne et d'acide caféique.. 8. Composition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que les trois constituants i), ii) et iii) sont présents simultanément. 9. Composition selon la revendication 8, caractérisée en ce qu'elle contient: i) 3 à 20 % en poids de concentré de jus de raisin, ii) 0,5 à 40 % en poids d'extrait de vin, iii) 0,01 à 5 % en poids d'extrait hydrosoluble d'olive. 10. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un constituant additionnel choisi parmi les vitamines, en particulier la vitamine E naturelle, des oligo-éléments, des hydrolysats d'huile de soja, de toumesol et d'olive, lycopènes, minéraux aromatisants, colorants, antioxydants, et additifs alimentaires. 11. Composition selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle est utile comme complément alimentaire. 12. Composition selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle est utile comme nutraceutique. 13. Composition selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle est utile comme agent cosmétique administrable par voie orale ou topique.