FR 2747045 A1 19971010 FR 9604310 A 19960405 NOUVEAU MEDICAMENT OPTIMISANT LA VISCOSITE DES MUCUS ET AMEUORANT LE FONCTIONNEMENT DE L'INTESTIN L'invention se rapporte au domaine de la biologie et plus particulièrement à celui de la chimie thérapeutique. L'invention a pour objet des compositions pharmaceutiques ou diététiques à base d'un complexe enzymatique pouvant contribuer à la prévention ou au traitement des différentes maladies. Elle a plus particulièrement pour objet des compositions pharmaceutiques à base d'un complexe enzymatique pouvant contribuer à la prévention ou au traitement des maladies dégénératives liées au vieillissement Elle a spécifiquement pour objet des compositions pharmaceutiques renfermant à titre de principe actif une ou plusieurs enzymes edraites ou contenues dans le complexe enzymatique obtenu par mise en culture de Streptomyces fradiae dans les conditions définies dans le brevet français 2.600.340 au nom du Demandeur. Dans le brevet précité, on a décrit la production et l'utilisation en zootechnie d'un nouveau complexe protéolytique, obtenu à partir d'une bactérie filamenteuse, Streptomyces fradiae ; ce complexe sera désigné ci-après par sa marque commerciale actuelle : PANSTIMASE. Cette bactérie filamenteuse peut produire simultanément au moins 5 protéinases (I,, lb, Il. 111, N) et 2 peptidases ; ces 7 enzymes ont été décrites par KMORIHARA et al.(Biochim.BiophysActa, 1967, 139, 382). Lorsqu'elles sont ajoutées conjointement dans les aliments consommés par les animaux, ces 7 enzymes provoquent une réduction excessive de la viscosité du mucus intestinal. et peuvent ensuite provoquer une ulcération de la paroi intestinale. Ces 7 enzymes ont donc des effets négatifs en zootechnie lorsqu'elles sont utilisées conjointement. Dans les conditions indiquées dans le brevet précité, on a obtenu la PANSTIMASE, qui est constituée seulement par 3 protéinases exocellulaires (Il, III, IV), avec prépondérance de la protéinase Il, et à l'exclusion des protéinases et peptidases endocellulaires. Ajoutée dans les aliments consommés par les animaux la PANSTlMASE provoque seulement une réduction modérée de la viscosité du mucus intestinal, et n'est pas susceptible d'attaquer la paroi intestinale. En méme temps que son action relativement modérée sur les protéines du mucus intestinal, la PANSTIMASE exerce une action plus forte sur les protéines de matières premières entrant dans la composition des aliments, ce qui améliore leur digestibilité. Outre ces actions directes dans l'intestin, la PANSTIMASE exerce des actions indirectes sur les différents organes, notamment sur le pancréas ; comme déjà indiqué dans le brevet précité, on a constaté qu'elle provoque une augmentation de 50 à 80 % de la concentration en enzymes ou en proenzymes, dosée dans cet organe. En raison de ces actions favorables, directes ou indirectes, la PANSTIMASE est maintenant utilisée comme complément nutritionnel s'ajoutant dans les aliments destinés aux animaux, pour améliorer leur croissance ou leur productivité. C'est ainsi qu'on a pu constater qu'elle améliore aussi la résistance des animaux vis-à-vis des maladies infectieuses, bactériennes ou virales. Ces constatabons ont suggéré des applications possibles en thérapeutique, pour l'animal comme pour l'homme, de la PANSTIMASE, ou des principes actifs dont elle est constituée. La présente demande de brevet a donc pour objet des compositions diététiques ou pharmaceutiques renfermant à titre de principe actif au moins une des proteinases exocellulaires obtenue à partir de Streptomyces fradiae, en mélange ou en association avec un excipient ou un véhicule inerte, non toxique, physiologiquement acceptable. Les compositions pharmaceutiques requièrent une purification supplémentaire du produit initialement utilisé pour l'animal. Dans les conditions indiquées par le brevet précité, on obtient une PANSTIMASE dont le titre est au moins égal à 2.000 U.A./mg. Divers ajustements de ces conditions permettent d'obtenir une PANSTIMASE semi-purifiée dont le titre est au moins égal à 4.000 U.A./mg Les techniques de précipitations fractionnées, ou de passages sur colonne, (K.MORIHARA, et al. Biochim. Biophys. Acta, 1967. 139. 382), qui sont devenues maintenant applicables à l'échelle industrielle, permettent d'obtenir séparément les protéinases 11, III ou IV qui ont chacune un titre au moins égal à 10.000 U.A/mg. L'Unité ANSON (en abréviation U.A) est ici définie comme étant la quantité d'enzyme qui, incubée pendant 10 min à 25"C et à pH 7.5 en présence d'hémoglobine dénaturée, libère de ce substrat l'équivalent de 1 mcg de tyrosine, déterminée par absorption spectrophotométrique à 280 nm sur le filtrat non précipitable par l'acide trichloracétique. Lorsqu'on fait agir , à égalité de concentration en U.A (par exemple 250 UA pour 1 g de mucus) soit la PANSTIMASE semi-purifiée, soit la protéinase Il séparée, on obtient en un temps donné la même réduction de la viscosité du mucus (intestinal ou bronchique) ; L'action de la protéinase III est voisine, et celle de la protéinase IV est un peu plus faible. II existe une correspondance partielle entre l'action La protéinase 11, qui est prépondérante dans la PANSTIMASE, exerce une action spéciale sur le collagène, qui est la protéine la plus abondante dans le règne animal : chez les mammifères, les différents types de collagène représentent environ un tiers des protéines totales. On sait que la solubilité du collagène dans l'eau chaude est forte si le collagène provient d'animaux jeunes, et faible s'il provient d'animaux âgés. Lorsqu'on traite par la PANSTIMASE du collagène d'animaux âgés, on augmente sa solubilité à chaud, qui devient comparable à celle du collagène d'animaux jeunes. On peut donc dire que la PANSTIMASE provoque un certain rajeunissement > du collagène des animaux âgés (les collagénases typiques sectionnent les 3 chaînes peptidiques qui s'enroulent pour former la triple hélice du collagène ; la PANSTIMASE n'agirait pas sur ces 3 chaines. mais couperait les ponts qui s'établissent progressivement entre elles lorsque les animaux vieillissent). La plupart des résultats sur animaux jusqu'ici obtenus correspondent à des essais effectués avec de la PANSTIMASE semi-purifiée. Cependant, pour l'homme, il convient d'utiliser soit les protéinases Il, III ou IV séparées, soit des protéinases dont les séquences en acides aminés ont au moins 60 % d'homologie avec celles des protéinases 11, III ou IV, soit une ast une association entre ces différentes protéinases. Malgré leur diversité, ces résultats obtenus sur animaux ont tous une même origine L'action fondamentale de la PANSTIMASE sur l'intestin ; cette action présente différents aspects qui seront décrits successivement ETC DE PHARMACOLOGIQUE DES COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES SELON L'INVENTION ACTION DE LA PANSTIMASE SUR L'INTESTIN 1. - villosités Sur des rats relativement jeunes (environ 2 mois), des examens en microscopie photonique montrent que les villosités ont un développement normal, pour les rats témoins comme pour les rats traités. Sur des rats relativement âgés (environ 7 mois), ces examens montrent que les villosités des rats témoins sont atrophiées, tandis que celles des rats traités depuis leur sevrage à 4 semaines sont aussi bien développées que celles des rats âgés de 2 mois. On constate donc que la PANSTIMASE provoque un certain L'intestin n'est pas seulement un filtre, physiologiquement inactif; bien au contraire, c'est la plus grande des glandes endocrines (B.LEBLANC et al.Rec. Med. Vet. 1981, 157 629; K.UVNAS-MOBERG, pour la SCIENCE, Septembre 1989, 24 > . Constitué de petites cellules en renouvellement rapide durant toute la vie, I'intestin est l'organe la plus riche en Acides Nucléiques : ADN+ARN (G.DURAND et al. Ann. Biol. Anim. Broch. Biophys. 1.966. 6. 389); il a donc la plus forte capacité latente de synthèse protéique. L'examen de coupes histologiques de l'intestin indique que la PANSTIMASE permet une meilleure expression de cette capacité latente, et par suite une meilleure production équilibrée de nombreux composés physiologiquement actifs enzymes digestives, hormones (agissant sur le pancréas, le foie, le cerveau), immunoglobines, cytokines, neurotransmetteurs (par exemple le VIP = Vasoactive Intestinal Peptide) ; facteurs de croissance (ou de survie) cellulaire... Ainsi s'expliquerait que la PANSTIMASE, qui agit directement dans l'intestin, puisse agir indirectement sur les organes et les systèmes physiologiques influencés par les composés précédents ; ainsi s'expliquerait notamment son action remarquable sur le pancréas (A ESTIVAL et al. Communication aux Joumées Métabolisme de Nancy 25-26 Janvier 1979 - Université de Nancy I). L'intestin est également l'organe le plus riche en cellules immunitaires, qui circulent dans ses vaisseaux sanguins et lymphatiques, ou qui se rassemblent et se multiplient dans ses plaques de PEYER (N.CERF-BENSUSSAN et al. Gut 1985 26 81). Ces cellules immunitaires sont une composante du MALT (Mucosae Associated Lymphoid Tissue) qui se subdivise en GALT situé dans l'intestin (Gut), et en BALT situé dans les bronches (Bronchies), et qui présente des analogies avec le SALT situé dans la peau (Skin). Le GALT et le BALT sont interdépendants et agissent en synergie pour assurer la défense immunitaire des muqueuses, et pour contribuer à la défense de l'organisme dans son ensemble. L'examen de coupes histologiques de l'intestin montre que la PANSTIMASE, stimule directement le GALT ; elle peut donc stimuler indirectement la défense immunitaire générale. Ainsi s'expliquerait en partie le fait que la PANSTIMASE augmente la résistance des animaux vis-à-vis des maladies infectieuses. 2- Microvillosités Sur des rats, jeunes ou âgés. des examens en microscopie électronique montrent que les microvillosités des rats témoins sont enrobées par du mucus hypervisqueux et par des traces de résidus alimentaires ; au contraire, celles des rats traités par la PANSTIMASE apparaissent plus nettes, plus hautes, plus nombreuses. La PANSTIMASE peut donc augmenter la surface développée totale des microvillosités, c'est-àdire leur capacité d'absorption. zip In vitro , en traitant par la PANSTIMASE des fragments d'intestin prélevés sur des rats témoins, on a constaté qu'on pouvait, sans endommager les microvillosités, éliminer le mucus hypervisqueux qui les enrobe ; cette action détergente modérée peut s'effectuer en quelques minutes. zip In vivo , ce nettoyage de la muqueuse intestinale permet l'établissement d'un contact plus étroit entre les germes infectieux et cette muqueuse, ce qui peut induire la multiplication dans l'intestin des cellules immunitaires aptes à lutter contre ces germes. 3 - Cellules sécrétrices et micrmiandes exocrines Diverses cellules sécrétrices (productrices de mucus, de lysozyme...) et de nombreuses microglandes exocrines sont réparties tout au long de l'intestin dans lequel elles déversent d'importantes quantités de sécrétions (environ 2 000 ml par jour chez l'homme). L'écoulement de ces sécrétions peut être freiné, ou même bloqué, par la présence de microbouchons muqueux L'examen de coupes histologiques de l'intestin montre que la PANSTIMASE désagrège ces microbouchons, rétablit l'écoulement normal de ces sécrétions, et provoque une augmentation réactionnelle de leur production. On sait que la sécrétion buccale de salive contient un facteur de croissance cellulaire I'E.G.F. (Epithélial Growth Factor) ; de même. les sécrétions intestinales peuvent contenir des facteurs de croissance susceptibles d'agir sur les entérocytes, les lymphocytes. L'augmentation de la production de tels facteurs, sous l'action de la PANSTIMASE, pourrait expliquer le meilleur développement des villosités et du GALT. constaté sur les coupes histologiques de l'intestin des rats traités. 4 - Plaques de PEYER Les plaques de PEYER, qui sont des agrégats de cellules immunitaires répartis tout au long de l'intestin, sont plus nombreuses chez les rats traités : elles apparaissent dès le duodénum chez ces rats, mais seulement à partir du jéjunum chez les rats témoins ; elles sont aussi plus denses: leurs lymphocytes sont plus petits, plus serrés, et semblent plus actifs (ils sont plus intensément colorés par les réactifs utilisés en histologie). 5 - Non adhérence prolongée des germes infectieux La PANSTIMASE peut s'opposer à l'adhérence prolongée des germes infectieux sur la muqueuse intestinale. Ceffe adhérence prolongée résulte de la formation de liaisons chimiques entre des adhésines fixées sur ces germes et leurs récepteurs fixés sur cette muqueuse : adhésines et récepteurs sont des (glyco-lipo) protéines complexes. Des essais cor in vitrez ont montré que la PANSTIMASE, qui a une certaine affinité pour les protéines complexes, peut couper des adhésines, ou détacher des récepteurs de la muqueuse où ils sont forcés ; il en résulte souvent une rupture de l'adhérence qui peut s'effectuer en quelques dizaines de minutes. D'ailleurs, comme indiqué cidevant, la PANSTIMASE peut stimuler le renouvellement des villosités de l'intestin, c'est-à-dire l'élimination des anciennes cellules anormales ou affectées par l'adhérence des germes infectieux ; cette éiimination est facilitée par l'intensification du flux des sécrétions intestinales, dont la production est augmentée sous l'action de la PANSTIMASE. On voit donc que, si la PANSTIMASE peut d'abord permettre un contact plus étroit entre les germes infectieux et la muqueuse intestinale (et induire la multiplication dans l'intestin de cellules immunitaires aptes à lutter contre ces germes). elle peut aussi s'opposer ensuite à l'adhérence prolongée de ces germes sur cette muqueuse et à leur pénétration dans le tissu sousjacent. 6-Conclusion La PANSTIMASE exerce, tout au long de l'intestin, une action fondamentale qui améliore le fonctionnement global de cet organe clé, et par suite de tout l'organisme ; d'où la grande diversité des exemples d'applications thérapeutiques. APPUCATIONS THERAPEUTIQUES DES COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES SELON L'INVENTION L'action fondamentale de la PANSTIMASE sur l'intestin, permet d'envisager son utilisation ou celle des protéinases 11, III ou IV (séparées ou associées) pour contribuer à la prévention ou au traitement de diverses maladies. 1 - hÈacoOiscidose et maladies respiratoires La mucoviscidose est caractérisée par la sécrétion excessive d'un mucus trop visqueux, au niveau intestinal comme au niveau bronchique. Tous les mucus ont le même type de structure biochimique; c'est pourquoi la PANSTIMASE, qui peut optimiser la viscosité du mucus intestinal lorsqu'elle est administrée par voie orale, peut également optimiser celle du mucus bronchique lorsqu'elle est administrée en aérosol. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent donc contribuer au traitement de la mucoviscidose et de certaines maladies respiratoires. par exemple la bronchite chronique. 2 - Amélioration de la résorption et de la circulation sanguine Par son action détergente modérée, la PANSTIMASE provoque un décolmatage de la paroi intestinale qui contribue à l'amélioration de la résorption. Cette amélioration de la résorption peut se constater en dosant dans le sang des animaux des médicaments administrés par voie orale. Par exemple, on a administré à des poulets, par sonde gastrique, 50 mg de tétracycline sans PANSTIMASE (lot témoin) ou en association avec 3 mg de PANSTIMASE titrant 400 U.A/mg (lot traité) ; on a prélevé 2.5 ml de sang 2 heures après cette administration, et on a constaté que la concentration moyenne de la tétracycline dans le sérum était de 1.35 mcg/ml pour le lot témoin et de 1.90 mcglml pour le lot traité. Cette amélioration de la résorption peut s'analyser plus précisément en étudiant la vocation des médicaments dans différents organes. Par exemple, on a donné à des truites, pendant 2 jours, un aliment médicamenteux contenant 4g/kg d'Oxytétracycline non supplémenté en PANSTIMASE (lot témoin), ou supplémenté par 300 mgtkg de PANSTIMASE titrant 400 UA!mg (lot traité). On a ensuite sacrifié ces poissons et on a dosé cet antibiotique dans leur foie, leurs muscles, leurs reins. On a constaté que la PANSTIMASE provoque une importante augmentation de la concentration tissulaire en antibiotique, qui varie beaucoup suivant l'organe considéré: + 100 % dans le foie soit 5,75 mcg/g pour le lot traité vs 2,5 mcg/g pour le lot témoin + 400 % dans les muscles soit 1,75 mcg/g pour le lot traité vs 0,3 mcg/g pour le lot témoin + 1.000 % dans les reins soit 5,75 mcg/g pour le lot traité vs 0,5 mcg/g pour le lot témoin II apparaît que la PANSTIMASE provoque une meilleure résorption de l'Oxytétracycline, et une meilleure distribution de cet antibiotique dans tout l'organisme, depuis son entrée par le foie jusqu'à son excrétion par les reins. Cette meilleure distribution pourrait s'expliquer par une amélioration de la circulation sanguine, en rapport avec une production plus importante dans l'intestin de composés vasoactifs, tels que le VIP Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent donc contribuer au traitement des malabsorptions de médicaments ou de nutriments, ainsi qu'au traitement de certains troubles de la circulation , elles peuvent contribuer au traitement de la dénutrition constatée chez certaines personnes âgées ou chez certains malades ayant reçu des médicaments dont les effets secondaires affectent le bon fonctionnement de l'intestin. 3 - Ulcères digestifs et entérotoxémies Les ulcères digestifs ont pour origine l'adhérence sur la paroi stomacale d'une bactérie (Helicobacter pylori), et certaines entérotoxémies ont pour origine l'adhérence sur la paroi intestinale de divers gennes infectieux. La PANSTIMASE qui s'oppose à l'adhérence prolongée de gennes infectieux sur les muqueuses, et stimule le renouvellement de l'intestin, à un effet positif sur la prévention ou le traitement des ulcères digestifs et desdites entérotoxémies. De fait, en élevage industriel, on a constaté que la PANSTIMASE est capable de réduire le nombre de porcs souffrant d'ulcères digestifs, ainsi que la mortalité par entérotoxémies. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent donc contribuer à la prévention ou au traitement des ulcères digestifs et de certaines entérotoxémies. 4 - Diabète. insuffisances hépatiques et troubles du transit intestinal Le brevet français n" 2.600.340 mentionne que la PANSTIMASE stimule la fonction excrine du pancréas ; on a en effet constaté une importante augmentation de la concentration dans le pancréas de toutes les enzymes ou proenzymes dosées: + 50 % pour l'amylase, + 70 % pour le trypsinogène et le chymotrypsinogène, + 80 % pour la lipase (FESTIVAL et al. Communication aux Journées Métabolisme de Nancy 25-26 Janvier 1979 - Université de Nancy I). L'examen de coupes histologiques de pancréas a ensuite montré que les îlots de LANGERHANS, produisant une hormone essentielle : l'insuline, sont plus nombreux et ont un aspect meilleur chez les rats traités. Ces examens suggèrent que la PANSTIMASE stimule d'abord la fonction endocrine du pancréas, avec pour conséquence une amélioration générale de l'anabolisme protéique, y compris dans le pancréas lui-même, d'où la stimulation consécutive de sa fonction exocrine. Cette stimulation du pancréas peut s'expliquer par une meilleure production dans l'intestin d'une hormone : la PZ (Pancréozymine). II a été démontré que cette hormone est la même que celle qui agit sur le foie ; la CCK (Cholécystokinine). La PANSTIMASE peut donc agir favorablement aussi bien sur le foie que sur le pancréas ; comme elle améliore également l'écoulement continu de toutes les sécrétions intestinales, elle provoque nécessairement une réduction des troubles du transit intestinal, tels que la diarrhée ou la constipation. En élevage intensif, on observe souvent des constipations chez les truies gestantes attachées; on a constaté que la supplémentation de leur alimentation en PANSTIMASE permet d'éviter ces perturbations nuisibles du transit intestinal. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent donc contribuer à la prévention ou au traitement du diabète, des insuffisances hépatiques et des troubles du transit intestinal. 5 - Maladies infectieuses. dvsfonctionnements immunitaires. et vaccination On a déjà indiqué que la PANSTliMASE agit favorablement sur le GALT, et par suite sur l'ensemble du système immunitaire. II en résulte des améliorations dans les 3 domaines suivants. A - Maladies infectieuses Certaines observations en élevage intensif ont montré que la PANSTIMASE améliorait souvent l'état sanitaire des animaux, ce qu'on a d'abord attribué au fait qu'elle facilite la résorption des antibiotiques qui sont ajoutés dans la plupart des aliments industriels. Mais on a constaté ensuite que cette amélioration était particulièrement nette en cas d'infections par différents virus, alors que ceuxci sont en général insensibles à l'action des antibiotiques. Ces constatations concement la grippe et la maladie d'AUJESKY chez les porcins, la maladie de GUMBORO chez les poulets, I'ecthyma chez les chevreau. Dans ce demier cas, I'infection virale s'est développée fortuitement au cours d'un essai en station expérimentale, ce qui a permis d'effectuer des observations précises, portant au total sur 120 chevreaux; le pourcentage d'animaux non atteints a été de 34 % pour le lot témoin, et de 70 % pour le lot traité; le pourcentage d'animaux très atteints a été de 28 % pour le lot témoin, alors qu'aucun animal n'a été très atteint dans le lot traité. Cette action antivirale peut s'expliquer en partie par le fait que la PANSTIMASE augmente le nombre et la densité de plaques de PEYER qui sont des agrégats de cellules immunitaires répartis tout au long de l'intestin. La disparition de ces plaques a d'ailleurs été signalée chez les sujets infectés par le virus du SIDA Puisque la PANSTIMASE agit favorablement sur le développement de ces plaques, on peut se demander si elle ne permettrait pas d'éviter leur disparition chez les sujets séropositifs, et d'augmenter le pourcentage de ces sujets non atteints par la maladie ; en outre, du fait qu'elle améliore la résorption des nutriments, elle devrait contribuer à la reprise de poids chez les sujets amaigris. B - Dysfonctionnements immunitaires ; par exemple réactions inflammatoires. D'autres observations en mélange intensif ont montré que la PANSTIMASE réduisait la durée des arthrites qui sont des réactions inflammatoires consécutives à des blessures aux articulations affectant certains porcs élevés sur caillebotis métalliques. Après cicatrisation des blessures. ces réactions inflammatoires peuvent s'estomper progressivement sous l'action de cellules immunitaires dites suppressives, qui sont nombreuses dans l'intestin, et qui peuvent migrer vers les zones d'inflammation. II est possible que la PANSTIMASE stimule la multiplication de ces cellules dans l'intestin, et qu'elle facilite leur migration, ce qui expliquerait le fait qu'elle réduit la durée des arthrites, d'environ 50 % : 34 vs 8-10 jours. C - Vaccinations Les améliorations de l'état sanitaire constatées en élevage intensif peuvent s'espliquer en partie par une meilleure réponse aux vaccinations des animaux recevant un aliment supplémenté en PANSTIMASE. Des essais préliminaires en laboratoire, sur des souris, ont effectivement confirmé que la PANSTIMASE peut augmenter l'efficacité des vaccinations, notamment lorsqu'elles sont effectuées par voie orale. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent donc contribuer à la prévention ou au traitement des maladies infectieuses et des dysfonctionnements immunitaires ; elles peuvent également être utilisées pour augmenter l'efficacité des vaccinations. 6 - Insuffisances hormonales et maladies dégénératives liées au vieillissement On a constaté que, sur les porcins reproducteurs âgés, la PANSTIMASE provoque une réduction de l'intervalle sevrage-saillie fécondante (qui tend à augmenter chez les truies), et une stimulation de l'ardeur sexuelle, (qui tend à décliner chez les verrats). II apparaît donc que la PANSTIMASE permet de remédier aux insuffisances hormonales, et probablement à d'autres effets négatifs du vieillissement On a déjà indiqué que la PANSTIMASE provoque un certain du collagéne et de l'intestin ; le rajeunissement > du collagène de type IV, principal constituant de la lame basale sous-jacente aux antérocytes, pourrait expliquer en partie celui de l'intestin. Ce a rajeunissement de l'intestin est susceptible de s'étendre à tout l'organisme . il se traduit en effet par une amélioration de la résorption des nutriments et de la production locale de nombreux composés physiologiquement actifs L'un de ces composés. la CCK (cholécystokimine) est une hormone agissant sur le cerveau (K.UVNAS-MOBERG, pour la SCIENCE. Septembre 1989, 24) qui peut ainsi améliorer lui-même sa propre production d'hormones, dont l'hormone de croissance et la mélatonine ; de tels composés. produits industriellement, sont actuellement étudiés en vue de leur utilisation possible pour réduire les effets négatifs du vieillissement. Puisque la PANST1MASE améliore la production endogène d'un ensemble équilibré de tels composés, elle devrait provoquer un certain (1 rajeunissement. de l'organisme, plus naturel et plus global que celui qui serait obtenu par l'administration d'un seul de ces composés, produit industriellement. On a effectivement constaté que la PANSTIMASE provoque un certain rajeunissement , chez les rates reproductrices âgées, et une réduction de certains effets négatifs du vieillissement chez les truies et les poules reproductrices âgées. A La première saillie des rates est normalement affectée vers l'âge de 70 jours lorsqu'elle est effectuée vers 140 jours, les performances de reproduction sont mauvaises, pour le lot témoin, mais sont meilleures pour le lot traité (recevant le même aliment supplémenté par 300 mglkg de PANSTIMASE titrant 400 UA/mg). Lot témoin Lot témoin Lot traité saillie à B Les truies reproductrices sont réformées dès qu'elles apparaissent en mauvais étant,. par exemple lorsque l'éleveur estime qu'elles ne peuvent plus se tenir bien d'aplomb, ni se coucher en souplesse (au lieu de se laisser tomber lourdement en risquant d'écraser leurs porcelets nouveau-nés). Dans un élevage de 80 truies, avant l'utilisation de la PANSTIMASE, l'éleveur réformait ses truies après 4,4 cycles de reproduction en moyenne; six mois après cette utilisation, il est apparu que l'on pouvait réformer les truies après 5,8 cycles de reproduction en moyenne. On peut donc considérer que la PANSTIMASE a permis de prolonger, d'environ 30%, la vie productive des truies, sans dégradation inacceptable de leur cor bon état, et de leurs performances. C. En vieillissant, les poules pondeuses ont tendance à produire des oeufs ayant une coquille plus fragile, de sorte que le pourcentage d'oeufs fêlés peut devenir supérieur à 10 % en fin de ponte. La PANSTIMASE a permis de réduire de moitié ce pourcentage, ce qui implique une stimulation du métabolisme phosphocalcique. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent donc contribuer à la prévention ou au traitement des insuffisances hormonales et de certaines maladies dégénératives liées au vieillissement, par exemple l'arthrite, l'arthrose, I'ostéoporose. EVALUATION PREUMINAIRE DE LA TOLERANCE DES COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES SELON L'INVENTION Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être administrées par voie orale, pulmonaire, ou génitale. Elles seront à ces fins mises sous une des formes pharmaceutiques convenant à ces types d'administration, en mélange ou en association avec des excipients classiques. Dans le cas d'une administration par voie orale, les comprimés ou les gélules contiendront une quantité de principe actif qui varie en général de 5.000 à 100.000 U.A, et la prise quotidienne pourra varier de 1 et 5 comprimés ou gélules. La forme aérosol convient pour l'administration par voie pulmonaire, et la forme ovule pour l'administration par voie génitale Des essais toxicologiques ont montré que la PANSTIMASE n'avait aucune toxicité lorsqu'elle était administrée pendant 1 mois aux porcelets à une dose 20 fois supérieure à la dose d'emploi actuellement recommandée qui est de 40.000 U.A. par Kg d'aliment, ou lorsqu'elle est administrée pendant 3 mois aux rats à une dose 200 fois supérieure à cette dose d'emploi. En conséquence, on a pu engager un essai préliminaire de tolérance chez l'homme, sous une dose d'emploi relativement élevée par rapport à la dose actuellement prévue ; on a en effet utilisé des gélules contenant 750.000 U.A de PANSTIMASE purifiée (soit 50 mg d'un lot tirant 15.000 U.Atmg) qu'on a administrés à raison de 2 à 3 gélules par jour pendant 2 ou 3 semaines, à des malades suivis par un médecin gastroentérologue. On a sélectionné 24 patients (12 hommes - 12 femmes), ayant 44 ans d'âge moyen avec des extrêmes allant de 25 à 70 ans; 17 de ces patients souffraient de dyspepsie au sens le plus large du terme sans qu'aucune lésion organique n'ait pu être mise en évidence par les investigations paracliniques (examens de laboratoire, radiologies, dans certains cas endoscopie ; 7 de ces patients étaient porteurs de lésions organiques: 3 pancréatiques, 2 gastrectomie (I'une pour ulcère, I'autre pour néoplasme), 2 colectomie (I'une pour rectocolite ulcérohémorrhagique, I'autre pour néoplasme). Sur l'ensemble de ces 24 patients, on a étudié l'évolution de la symptomatologie et du poids, lorsqu'une insuffisance pondérale, avec ou sans dénutrition, existait au début du traitement Plusieurs sujets ont signalé une amélioration portant sur la régularisation du transit intestinal en cas de constipation ou au contraire de diarrhée, ainsi qu'une reprise de poids en cas de dénutrition. On a pu également engager un essai préliminaire concernant la mucoviscidose chez un malade âgé de 18 ans qui a reçu chaque jour, pendant 3 semaines, 2 gélules contenant chacune 10.000 U.A de PANSTIMASE; on a constaté une amélioration des symptômes, au niveau intestinal (fèces moins abondantes et moins collantes) et au niveau bronchique (expectorations plus faciles et moins fréquentes). En conclusion, on peut dire que la PANSTIMASE a été bien tolérée, et qu'elle semble particulièrement efficace en cas de dénutrition. REVENDICATIONS 1. Compositions pharmaceutiques eVou diététiques contenant comme principe actif un mélange des protéinases 11, III ou IV produites par Streptomyces fradiae, ou des protéinases dont les séquences en acides aminés ont au moins 60 % d'homologie avec celie de ces protéinases Il, III ou IV ou des associations d'au moins 2 de ces différentes protéinases en mélange ou en association avec un excipient ou un véhicule inerte non toxique physiologiquement acceptable. 2. Compositions selon la revendication 1 renfermant à titre de principe actif, I'un seulement des principes actifs du groupe défini par la revendication 1. 3. Compositions diététiques selon la revendication 1 renfermant à titre de principe actif au moins une des proteinases exocellulaires obtenues à partir de Streptomyces fradiae, en mélange ou en association avec un excipient ou un véhicule inerte non toxique physiologiquement acceptable. 4. Compositions selon la revendication 1 ou la revendication 2 destinées à l'usage thérapeutique dans lesquelles le principe actif est présenté sous forme de gélule, aérosol ou ovule à des doses comprises entre 5.000 et 100.000 U.A. par jour et par malade, en vue d'optimiser la viscosité des mucus intestinal ou bronchique. 5. Utilisation des compositions pharmaceutiques selon les revendications 1 ou 2 pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement des maladies en rapport avec une sécrétion excessive d'un mucus visqueux intestinal ou bronchique. 6. Utilisation des compositions pharmaceutiques selon les revendications 1 ou 2 pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement des malabsorptions de médicaments ou de nutriments, ainsi qu'au traitement des troubles de la circulation sanguine. 7. Utilisation des compositions pharmaceutiques selon les revendications 1 ou 2 pour la fabrication d'un médicament destiné à prévenir etlou traiter l'adhérence prolongée des germes infectieux sur les muqueuses et faciliter la régénération des villosités atrophiées ou détruites de la muqueuse intestinale, ainsi qu'à prévenir et/ou traiter des ulcères digestifs et des entérotoxémies. 8. Utilisation des compositions pharmaceutiques selon les revendications 1 ou 2 pour la fabrication d'un médicament destiné à prévenir etlou traiter le diabète, les insuffisances hépatiques et les troubles du transit intestinal. 9. Utilisation des compositions pharmaceutiques selon les revendications 1 ou 2 pour la fabrication d'un médicament destiné à prévenir etlou traiter les maladies infectieuses, les dysfonctionnements immunitaires, ainsi qu'à augmenter l'efficacité des vaccinations. 10. Utilisation des compositions pharmaceutiques selon les revendications 1 ou 2 pour la fabrication d'un médicament destiné à prévenir et"ou à traiter les insuffisances hormonales et les maladies liées au vieillissement. Il Utilisation des compositions selon la revendication 3 en vue de la réalisation d'une composition diététique pour l'alimentation des sujets fragiles ou dénutris.