FR 2711991 A1 19950512 FR 9313310 A 19931103 Composés dérivés de la 8-hydroxy-quinoléine, agents chélateurs, complexes du fer et utilisations La présente invention concerne des agents complexants synthétiques du fer, dérivés de la 8-hydroxyquinoléine. Selon la présente invention, on utilisera indifféremment les termes agent complexant du fer ou agent chélateur du fer pour désigner un ligand possédant un ou des sites de complexation du fer susceptibles de former avec ce dernier une ou des liaisons de coordination. Par sidérophore selon l'invention, on entend tout ligand dont la molécule possède à elle seule un nombre de sites de complexation au moins égal au nombre de coordination du fer. Plus particulièrement, l'invention concerne des agents complexants multidentés, chacun étant susceptible de saturer la totalité des sites de coordinence de l'ion ferrique ou de l'ion ferreux, pour conduire à un "effet chélate" se traduisant par une forte stabilité du complexe formé. Pour cela, lesdits agents répondent à une structure multipodale résultant du couplage entre au moins deux molécules d'un ligand bidenté chélateur du fer et d'un composé dit espaceur, conférant à ladite structure une flexibilité suffisante pour permettre la formation des liaisons entre le fer et les sites de complexation du ligand, sans déformation excessive de la géométrie octaédrique du complexe. Selon le document EP-A-0 308 757, il est proposé un agent chélateur du fer obtenu par couplage entre au moins deux molécules d'un dérivé de la 8-hydroxyquinoléine, cette dernière étant substituée en position 2 par un groupement carboxylique, et un espaceur polyaminé, ledit agent répondant à la formule suivante: dans laquelle B est l'espaceur et A représente CH2 ou C o Selon ce document, ces agents chélateurs trouvent des applications dans des techniques de diagnostic et de thérapeutique, in vivo, notamment grâce à l'imagerie médicale. C'est en s'intéressant au problème de la nutrition en fer des plantes, que les inventeurs ont mis au point les agents chélateurs, objets de la présente invention, qui se révèlent très performants en particulier dans ce domaine d'application. La nutrition en fer des plantes est dépendante de la solubilité des sels ferreux et ferriques dans leur milieu de croissance. Cette solubilité aux pH physiologiques est très faible, très souvent limitante pour les plantes qui présentent alors un syndrôme de carence en fer, la chlorose, qui compromet leur développement, en empêchant l'appareil photosynthétique de se différencier. Dans la nature, selon que la plante est du type "non adaptatif" ou "adaptatif", l'apport en fer n'est pas effectué par le même mécanisme. Les plantes dites "non adaptatives" utilisent diverses molécules présentes dans le sol, comme des acides aminés, des acides organiques, des polyphénols issus de la dégradation des lignines, pour assurer le transfert du fer jusqu'aux racines ; mais ces molécules ne sont spécifiques ni du fer, ni de la plante et sont donc peu efficaces. Les plantes dites "adaptatives" sont capables de mobiliser le fer par l'intermédiaire de molécules qu'elles produisent, telles que l'acide caféïque, ou bien en utilisant à leur profit des sidérophores bactériens ou fongiques produits par les microorganismes qui colonisent leurs racines. Ces molécules ou ces sidérophores biologiques respectivement produits ou utilisés par les plantes adaptatives comportent le plus souvent, des groupements catécholate ou hydroxamate constituant des sites de liaison du fer. Parmi les plantes adaptatives, certaines graminacées, les Poacées essentiellement, sont capables de fabriquer ellesmêmes leurs sidérophores appelés phytosidérophores, tels que l'acide muginéique, l'acide avénique. L'agriculteur tente de corriger la chlorose gracie à des chélateurs du fer de synthèse parmi lesquels les plus largement utilisés sont l'EDTA (Ethylène Diamine Tetraacetic Acid) et ses dérivés. Comme mis en évidence plus loin dans la description, les performances de l'EDTA ou dérivés ne sont pas satisfaisantes, essentiellement en raison de leur photosensibilité. De ce fait, leur emploi est fortement limité: - d'une part, en pulvérisation foliaire, à cause de l'intervention du mécanisme de photolyse du ligand qui provoque la libération de Fe (II) et qui fait, par là, encourir à la plante des dangers de graves dégâts oxydatifs comme précisés ci-après, et - d'autre part, en apport par le sol, car leur caractère photosensible rend nécessaire leur enfouissement, ce qui entraîne des pertes par dilution et lessivage. Dans la composition des milieux de culture in vitro, le biologiste se heurte à une double nécessité fournir le fer ferrique sous une forme assimilable, et éviter la toxicité précitée du fer ferreux en présence d'oxygène, le fer (II) catalysant l'apparition de radicaux libres, responsables de graves dégradations biochimiques ("effet Fenton"). Un sidérophore de synthèse destiné aux végétaux doit présenter de fortes affinités spécifiques du fer, ferreux et ferrique, et un potentiel redox compatible avec les réducteurs biochimiques naturels, notamment les réductases racinaires ou cellulaires, résister à la photolyse, et il doit, avant tout, être parfaitement soluble au pH physiologique végétal. Selon la présente invention, on a découvert un composé dérivé de la 8-hydroxy-quinoléine, qui possède toutes les propriétés recherchées précitées. Le composé de l'invention répond à la formule I suivante: dans laquelle - A1, A2,..., Ar sont indépendamment choisis parmi B représente un groupement hydrocarboné saturé ou insaturé, cyclique ou aliphatique, linéaire ou ramifié, éventuellement polyfonctionnalisé par des fonctions choisies parmi les fonctions amine secondaire, amine tertiaire, imine, oxy, la liaison entre Al, A2,..., Ar et B étant comprise dans une fonction amine secondaire, amine tertiaire, imine ou amide, - n est un entier compris entre 2 et 4, - R2, R3, R4, R5 et R6 sont indépendamment choisis parmi l'atome d'hydrogène, les halogènes, les alkyles, les phénols, les éthers, les substituants aminés, nitrés, nitrosés, les acides carboxyliques et dérivés notamment halogénures, esters et amides, les sulfonamides, les acides sulfoniques et sulfonates, les acides phosphoriques et leurs sels, - et R est un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur. Les indices affectés aux substituants R du noyau quinoléique correspondent à leur position respective sur le noyau, ce qui explique l'absence d'un substituant R1 Curieusement, le composé de l'invention s'est avéré posséder une solubilité beaucoup plus élevée à pH physiologique, que les dérivés de la 8-hydroxy-quinoléine substitués en position 2 du document EP-A-0 308 757. Au surplus, des préparations de complexes du fer à partir respectivement de composés de l'invention et de composés selon EP-A-0 308 757, ont montré que les composés de l'invention permettaient d'obtenir plus facilement les complexes, traduisant ainsi une meilleure adaptabilité conformationnelle dudit composé pour former l'octaèdre de coordination autour du métal. En effet, par simple mélange de solutions méthanoliques du fer, sous forme de sel perchlorate par exemple et d'un composé de l'invention répondant à la formule I, dans laquelle - n est égal à 3 - A1, A2 et A3 représentent chacun -C ii O - B représente - R2, R3, R4, R5 et R6 sont chacun un hydrogène, on observe rapidement une couleur verte du mélange, caractéristique du complexe du fer. Par contre, dans les mêmes conditions expérimentales, le composé selon EP-0 308 757 correspondant n'a pas complexé le fer et a même eu tendance à précipiter. L'addition d'une base s'est révélée nécessaire pour que le complexe se forme. Un composé préférentiel de l'invention est un composé de formule (I) dans laquelle B, l'espaceur, comporte trois fonctions amine secondaire ou imine et est choisi parmi les groupements polyazotés suivants avec m étant égal à 2 ou 3 et D représentant N ou CH -HN-(CH2)m-D-(CH2)p-NH- , =N-(CH2)m-D-(CH2)p-N= avec m et p étant indépendamment égaux à 2, 3 ou 4 et D représentant N ou CH Préférentiellement, l'espaceur est la spermidine et le groupement B est alors choisi parmi: -HN-(CH2)-NH-(CH2)p-NH- ou N- (CH2) rnNH (CH2) p-N= formule pour laquelle m est égal à 3 et p est égal à 4. Les substituants R21 R3, R4, R5 et R6 sont choisis de manière à ne pas rendre le composé de l'invention trop hydrophobe, car dans l'utilisation du composé obtenu pour la nutrition des plantes en fer, l'assimilation du fer au niveau des racines serait insuffisante. Préférentiellement, R2, R3, R4 et R6 représentent chacun un atome d'hydrogène et R5 représente S03Na. L'invention concerne aussi l'agent chélateur du fer, sidérophore, qui consiste en un composé de l'invention tel que décrit précédemment, et le complexe de coordination du fer constitué par au moins un agent chélateur de l'invention et du fer, associés par des liaisons de coordination. Dans une application particulière l'agent chélateur et le complexe de fer de l'invention sont utilisés pour traiter les plantes. A cet effet, l'invention concerne un agent de traitement pour les plantes contenant à titre de principe actif au moins ledit agent chélateur et/ou au moins ledit complexe du fer. Plus spécifiquement, l'agent chélateur et le complexe de fer de l'invention sont utilisés pour prévenir et/ou traiter la chlorose des plantes. Et à ce titre, ils sont incorporés seul ou en mélange, à titre de principe actif, dans des agents de prévention et/ou de traitement de la chlorose. Au cours d'expériences résumées dans les exemples illustrant l'invention, on s'est aperçu que de façon surprenante, l'agent chélateur de l'invention se comportait comme un excellent complexant du fer, mais qu'en même temps, ce dernier était facilement mobilisé par la plante, traduisant donc une libération aisée du fer par le ligand. En effet, l'affinité de l'agent chélateur de l'invention à l'égard du Fe (III) est très supérieure à celle des agents complexants utilisés naturellement par la plante (citrate ...). Par analogie avec les mécanismes intervenant chez certains micro-organismes, on pourrait expliquer ce comportement inattendu, par la participation de réductases qui transformeraient le fer complexé sous forme ferrique, en fer ferreux dont la constante de complexation est plus faible. La présente invention a également pour objet l'utilisation pour traiter les plantes, et en particulier, prévenir et/ou traiter leur chlorose, de composés répondant généralement à la formule II suivante dans laquelle - Q représente une 8-hydroxy-quinoléine substituée choisie parmi la flèche indiquant la position du substituant A1, A2,..., Arn avec R2, R3, R4, R5, R6 et R7 étant indépendamment choisis parmi l'atome d'hydrogène, les halogènes, les alkyles, les phénols, les éthers, les substituants aminés, nitrés, nitrosés, les acides carboxyliques et dérivés notamment halogénures, esters et amides, les sulfonamides, les acides sulfoniques et sulfonates, les acides phosphoriques et leurs sels, et R étant un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur. - A1, A2,..., Arn sont indépendamment choisis parmi -CH=, -CH2-, -C-, -N= ou -NH o - B représente un groupement hydrocarboné saturé ou insaturé, cyclique ou aliphatique, linéaire ou ramifié, éventuellement polyfonctionnalisé par des fonctions choisies parmi les fonctions amine secondaire, amine tertiaire, imine, oxy, la liaison entre A1, A2,..., Arn et B étant comprise dans une fonction amine secondaire, amine tertiaire, imine ou amide, - n est un entier compris entre 2 et 4. Grâce à leurs propriétés de forte complexation du fer, les composés de l'invention répondant à la formule I limitent la disponibilité de fer ferreux et son engagement dans les réactions de Fenton. Ils peuvent être utilisés dans une application à la détoxification et/ou l'apport de fer à un milieu nutritif. Dans une application particulière, ils sont utilisés pour détoxifier des milieux surchargés en fer. La présente invention est à présent illustrée par les Exemples 1 à 12 ci-après et le dessin annexé comprenant les figures. L'exemple 1 décrit une synthèse d'un dérivé de la 8-hydroxy-quinoléine substitué en position 7, la 7carboxy-8-hydroxyquinoléine. L'exemple 2 décrit la synthèse d'un composé de l'invention, le tris-N-(2-aminoéthyl-[8-hydroxyquinoléine7-carboxamido])amine, répondant à la formule I dans laquelle R2, R3, R4, R5 et R6 représentent chacun un H, obtenu à partir du produit de l'exemple 1 et de la tris(2aminoéthyl)amine (TREN). L'exemple 3 décrit la synthèse à partir du composé obtenu dans l'exemple 2, d'un composé de l'invention, le tris-N- (2-aminoéthyl-[8-hydroxyquinoléine-5-sulfonato-7- carboxamido])amine répondant à la formule I dans laquelle R21 R31 R41 R5 et R6 représentent chacun un H et R5 représente S03Na, et dénommé par la suite CC1. L'exemple 4 décrit la préparation d'un complexe de Fe (III) à partir du composé obtenu à l'exemple 3. L'exemple 5 décrit la préparation des graines d'Arabidopsis thaliana axéniques, sur lesquelles les expériences de nutrition en fer seront menées. L'exemple 6 décrit la préparation de milieux de culture d'Arabidopsis thaliana, sans fer. L'exemple 7 décrit la préparation de cultures stériles comprenant l'étape d'introduction du fer à l'état complexé. L'exemple 8 décrit la préparation de milieux de culture de cellules d'érable. L'exemple 9 décrit la préparation et l'entretien des cultures de cellules de cambium d'érable. L'exemple 10 décrit la nutrition de cellules d'érable en fer radioactif complexé par l'EDTA et le composé de l'invention obtenu à l'exemple 3. L'exemple 11 décrit le dosage de la radioactivité présente dans la ferritine des cellules d'érable, après nutrition selon l'exemple 1, la ferritine correspondant à la forme de réserve du fer dans les cellules. L'exemple 12 décrit des tests de photosensibilité comparatifs de complexes ferriques du citrate, de 1'EDTA Na2 et du composé obtenu à l'exemple 3. Le dessin en annexe comprend les figures selon lesquelles Figure 1 est un diagramme représentant la consommation ferrique de cellules d'érables après nutrition en fer radioactif conformément à l'exemple 10. Figure 2 est un diagramme représentant la quantité de 59Fe assimilé et stocké dans la ferritine, dans des cellules d'érable illustrant le dosage effectué à l'exemple 11. Figure 3 représente la variation d'absorbance à 562 nm observée pour les complexes testés à l'exemple 12, à différents pH, en fonction du temps, avec la légende des courbes suivantes citrate pH=8 # c(trate pH=4,8 EDTA pH-6 - EDTA pH=4.8 -. ccl pH- ccl pH=4.8 Exemple 1 7-Carboxy-8-hydroxvauinoléine La 8-hydroxyquinoléine commerciale (5 g, 34,00 mmol) est additionnée à une solution de méthanolate de sodium préparée au préalable (sodium lg, 43,00 mmol, méthanol 50 ml). La solution est agitée un quart d'heure a température ambiante puis le méthanol est évaporé et le solide jaune obtenu est séché pendant plusieurs heures sous pression réduite. Le sel de sodium de la 8hydroxyquinoléine est ensuite introduit rapidement dans un autoclave sec, ce dernier est purgé trois fois avec du dioxyde de carbone et chargé à une pression de 40 bars. L'autoclave est chauffé à 1700C pendant trois jours. Aprés refroidissement, l'appareillage est remis à la pression ambiante et le produit dissous dans de l'eau distillée ; la solution est ensuite filtrée et la 2-carboxy-8hydroxyquinoléine est isolée par précipitation à pH acide. Le produit est filtré, lavé à l'eau puis séché sous vide. Le solide est recristallisé dans l'eau pour donner un solide de couleur jaune vif (4.1 g; 21.7 mmol, rendement 64%). Température de fusion Tf = 2720C 1H RMN (CDC13, d6-DMSO), d 7.20 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.53 (dd, J1 = 8.3 Hz, J2 = 4.3 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.19 (dd, J1 = 8.0 Hz, J2 = 1.0 Hz, 1H), 6.83 (dd, J1 = 4.1 Hz, J2 = 1.1 Hz, 1H) 13C RMN (CDC13 , d6-DMSO), d 111.73, 114.17, 123.75, 127.68, 132.16, 136.61, 139.70, 146.40, 160.83, 170.92. Exemple 2 Tris-N- A une suspens ion de 7-carboxy-8-hydroxyquinoléine (0.50 g, 2.64 mmol) dans 50 ml de tétrahydrofurane (THF) sec, on ajoute le l,1'-carbonyldiimidazole (0.47 g, 2.91 mmol). Le mélange réactionnel est agité à reflux pendant une heure puis la tris(2-aminoéthyl)amine (TREN) (0.13 g, 0.88 mmol) diluée dans 10 ml de THF sec est ajoutée goutte à goutte. La solution hétérogène est agitée à reflux pendant la nuit. Aprés évaporation du THF sous pression réduite, le résidu est repris dans 100ml de chloroforme. Cette phase organique est lavée avec 100ml d'une solution saturée de chlorure d'ammonium, puis avec une solution saturée de chlorure de sodium, et est mise à sécher sur sulfate de magnésium. Aprés évaporation du CHCl3, le produit est obtenu pur sous forme d'un solide rose orangé, (0.42 g, 0.64 mmol, rendement 72%). Tf = 1010C 1H RMN (d6-Acétone), d 2.90 (t, J = 5.6 Hz, 6H), 3.67 (dd, J1 = 10.9 Hz, J2 = 5.3 Hz, 6H), 7.00 (d, J = 8.8 Hz, 3H), 7.44 (dd, J1 = 8.3 Hz, J2 = 4.2 Hz, 3H), 7.91 (d, J = 8.8Hz, 3H), 8.02 (dd, J1 = 8.2 Hz, J2 = 1.5 Hz, 3H), 8.40 (t large, 3H), 8.60 (dd, J1 = 8.4 Hz, J2 = 1.5 Hz, 3H). 13C RMN (d6-Acétone+d6- DMSO), d 38.71, 54.32, 114.11, 117.62, 123.87, 126.74, 131.01, 136.55, 139.70, 149.22, 155.50, 167.88. Spectre de Masse (SM) pour C36H33N706 = 659.249, mode "Fast Atom Bombardment" (FAB), FAB (+): (M+H)+ pic parent 660, 458, 215, 172; FAB (-): (M-H)- pic parent 658. Exemple 3 Tris-N- (2-aminoethvl-F8-hvdroxvauinoléine-5- sulfonato-7-carboxamidol 0 amine (CC1) La tris-N-(2-aminoethyl-[8-hydroxyquinoléine-7- carboxamido])amine (1.5g, 2.27mmol) est mise en suspension, à 0 C, dans environ 20 ml d'oléum (H2S04 contenant 30 à 40t de S03) . On laisse revenir le mélange réactionnel à température ambiante sous agitation pendant une nuit. La solution est alors versée lentement sur de la glace. Le produit précipite sous forme d'un solide blanc qui est filtré et rincé à l'eau, puis solubilisé par addition de base (solution aqueuse de carbonate de sodium ou d'hydroxyde de sodium) jusqu'à pH=8. L'eau est évaporée sous pression réduite et le résidu repris dans le méthanol. Les sels minéraux sont filtrés, le filtrat évaporé ; cette opération est effectuée plusieurs fois. Le produit est ainsi obtenu sous forme du sel de sodium (1.7g, 1.65 mmol, rendement 73%) soluble dans l'eau à pH neutre. 1H RMN (D20), d 3.07 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 3.74 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 7.62 (dd, J1 = 8.6Hz, J2 = 4.3 Hz, 3H), 8.56 (s, 3H), 8.73 (dd, J1 = 4.3 Hz, J2 = 1.5 Hz, 3H), 8.82 (dd, J1 = 8.6 Hz, J2 = 1.5 Hz, 3H). 13C RMN (D20), d 36.63, 52.87, 110.89, 119.12, 123.45, 127.35, 128.72, 134.20, 144.73, 146.99, 170.26, 170.94. Exemple 4 Complexe de fer de la tris-N-(2-aminoethvl-r8- hvdroxvauinoléine-5-sulfonato-7-carboxamidol amine La tris-N-(2-aminoethyl-[8-hydroxyquinoléine-5- sulfonato-7-carboxamido])amine (10 mg, 10-2 mmol) est dissoute dans 1 ml de méthanol, à cette solution on ajoute du perchlorate de fer (3.7 mg, 10-2 mmol) dissous dans 1 ml de méthanol. Le mélange prend instantanément une couleur verte. Le produit est précipité par addition d'éther éthylique puis filtré et rincé à l'éther. Aprés séchage sous vide, on obtient un solide vert foncé (5.6 mg, 5.5 10-3 mmol, rendement 57%). SM pour C36H27FeN7Na3015S3 = 1017.977, mode FAB FAB (+): 1042, 1020, 997; FAB: (-) 1019, 996, 974, 916. Exemple 5 Préparation des graines d'Arabidopsis thaliana axéniques La solution stérilisante est préparée au préalable. L'hypochlorite de calcium (5 g) est mis en solution dans 100 ml d'eau distillée avec 0.1 ml de triton X100. Aprés une heure d'agitation, la solution est centrifugée et le surnageant récupéré. Des graines d'Arabidopsis thaliana (WT Columbia) (20 à 30 mg) sont mise en suspension dans 1 ml de la solution stérilisante. Aprés agitation (10 min), et centrifugation (1 min, 1000 tours), le surnageant est prélevé dans des conditions stériles et les graines sont rincées trois fois avec 1 ml d'eau distillée stérile (autoclavée 15 min à 1200C), puis laissées sécher sous la hotte à flux laminaire. Exemple 6 Préparation des milieux de culture d'Arabidopsis thaliana Le milieu de germination utilisé est dérivé de celui de Murashige et Skoog. I1 est préparé avec de l'eau distillée ainsi que des sels minéraux utiles à la croissance, du saccharose comme source de carbone, un tampon pour fixer son pH et de l'agarose pour le solidifier. La composition exacte du milieu est indiquée ci-après. Un milieu de culture stérile sans fer est préparé de manière à exclure un rôle de la rhizosphère dans l'assimilation du fer et son agent chélateur sont introduits lors de la préparation de chaque pot de culture. Macroéléments (mg/l) KH2 P03 1700 NH4NO3 1650 KNO3 1900 MgSO4.7H20 370 CaCl2.2H20 440 Microéléments (mg/l) MnSO4.H20 22.3 ZnSO4.7H20 8.6 H3BO3 6.2 KI 0.83 Na2MoO4.2H2O 0.25 CuSO4.5H2O 0.025 CoCl2.6H2O 0.025 Fer-ligand (mg/l) FeSO4 . 7H20 27.8 EDTANa2 37.3 ou FeSO4.7H2O 27.8 CC1 200 Tampon (g/l) MES 0.5 Saccharose (g/l) 10 Agar (g/l) 8 Exemple 7 Préparation de cultures et nutrition en fer Arabidopsis thaliana Le milieu de culture sans fer préparé selon le mode opératoire décrit dans l'exemple 6 est distribué dans des pots en verre fermés (pots "Veck", volume 500 ml) à raison de 45 ml par pot. On fixe ensuite les conditions de nutrition en fer pour chaque pot de culture - un tiers est laissé sans fer - un tiers contient EDTANa2-Fe - un tiers contient CC1-Fe. Dans les deux derniers cas, la concentration en fer est de 0.1 mmol/l. Les pots contenant les milieux de culture sont alors autoclavés à 1200C pendant 15 min. Après refroidissement et solidification des milieux, les graines d'Arabidopsis thaliana axéniques sont semées dans des conditions stériles. Les cultures sont ensuite tranférées dans une enceinte thermostatée à 230C, avec un éclairage permanent. Ainsi, moins d'une semaine aprés l'ensemencement, les plantules d'Arabidopsis thaliana cultivées sur milieu sans fer présentent le symptôme de chlorose: feuilles de couleur verte très pâle. Les plantes cultivées sur des milieux contenant du fer sont par contre d'un vert soutenu. De plus, les plantes du milieu contenant le complexe CC1-Fe présentent, les premières semaines, un développement plus avancé que celles du milieu contenant 1' EDTANa2-Fe. Une action curative de CC1-Fe sur la chlorose a été démontrée sur des plantules d'Arabidopsis thaliana fortement atteintes par la chlorose (deux semaines de culture sur milieu dépourvu en fer). En effet, deux jours après introduction d'une solution de CC1-Fe stérile dans le milieu de culture, les plantules d'Arabidopsis thaliana chlorosées commencent à reverdir, le phénomène concernant d'abord les tissus jeunes. Depuis 1844, on connait des formules d'apport de fer par voie foliaire susceptibles de résorber la chlorose. Leur emploi est aujourd'hui très limité à cause des dangers de brûlure provoqués par la photo lyse des ligands du fer, la toxicité due la concentration excessive après dessèchement de l'aérosol. Des formules (CC1 + agents mouillants + ligand du Fe(II)), sont susceptibles d'élargir ce procédé curatif, qui est en principe beaucoup plus économique que la nutrition par le sol, parce que ciblé aux organes aériens chlorotiques. Exemple 8 Préparation des milieux de culture des cellules d'érable La composition du milieu de culture est indiquée ci-après. Le pH du milieu est ajusté à 5.5 avec une solution HC1 0.1 N, puis les solutions nutritives sont stérilisées par autoclavage pendant 15 min à 1200C. I1 est à noter que le facteur de croissance est ajouté au milieu stérilement aprés autoclavage. D'autre part, les milieux de culture sont préparés sans fer ni chélateur, ceux-ci sont additionnés stérilement au début de chaque expérience. Macroéléments (mg/l) KNO3 1960 MgSO4.7H20 360 KH2PO4 500 Ca(NO3)2.4H20 290 KCl 65 Na2HP04 48 Microéléments (mg/l) MnSO4.H20 22.3 ZnSO4.7H20 8.6 H3BO3 6.2 KI 0.83 Na2MoO4.2H2O 0.25 CuSO4.5H2O 0.025 CoCl2.6H2O 0.025 Fer-ligand (mg/l) FeSO4 . 7H2O 2.78 EDTANa2 7.46 ou FeS04.7H2O 2.78 CC1 20.0 Vitamine (mg/l) thiamine 1 Facteur de croissance (mol/l) acide 2,4-dichloro phénoxyacétique 5 Saccharose (g/l) 20 Exemple 9 Préparation et entretien des cultures de cellules de cambium d'érable L'EDTANa2-Fe est très généralement utilisé pour la nutrition en fer de cultures axéniques d'organes excisés, de cals, de suspensions cellulaires et autres explants cultivés in vitro en vue de multiplication végétative, de sélections sanitaires ou de transformations génétiques pratiquées en biotechnologie. Les cellules sont cultivées dans des flacons erlenmeyer de 300 ml contenant 100 ml de milieu nutritif. Elles sont maintenues en suspension à l'aide d'un agitateur rotatif. La température de la pièce de culture climatisée est de 250C. Le repiquage des cellules est effectué de façon routinière tous les 7 jours sous une hotte à flux laminaire, de façon à maintenir les cellules en phase de croissance exponentielle. Ainsi, une fraction aliquote de la culture de 7 jours est prélevée et introduite dans 100 ml de milieu nutritif neuf contenant du fer et de l'EDTANa2 (concentration en Fer = concentration en EDTA =10 ssmol/l) Exemple 10 Nutrition de cellules d'érable en fer radioactif par l'EDTA et le CC1 Des cellules d'érable en croissance exponentielle (repiquées depuis 7 jours) sont filtrées et lavées avec du milieu de culture sans fer puis remises en culture dans un milieu nutritif dépourvu de fer. Des fractions aliquotes (3 ml) de cette suspension sont disposées dans des puits d'une plaque à 12 avéoles. On ajoute alors le 59Fe (1.7 ssCi par alvéole) et l'EDTANa2 ou le CC1, la concentration en fer étant de 10 pM et celle du chélateur 20 ssM. Les cellules sont maintenues en suspension par agitation de la plaque pendant 17 heures. Les échantillons sont alors filtrés, les cellules sont lavées et drainées 4 fois avec 300 ssl d'une solution de EDTANa2-Fe afin d'éliminer le fer radioactif présent à l'extérieur de la cellule, dans l'apoplasme. Les cellules sont pesées (environ 200 mg par alvéole) puis broyées avec 700 pl d'un milieu d'extraction de protéines natives. La solution obtenue est centrifugée. On prélève 100 Al de surnageant que l'on dilue dans 1 ml de scintillant. La radioactivité de la solution est alors dosée à l'aide d'un compteur à scintillation. Conformément à la Figure 1, les essais de nutrition en fer (radioactif) de cellules de cambium d'érable montrent que CC1 assure une nutrition intracellulaire environ 4 fois plus active que 1'EDTA, pour une croissance comparable. Le milieu de culture utilisé ici est l'équivalent du fluide intercellulaire interne de la plante, qui est normalement mis à l'abri des agents toxiques externes par la barrière sélective des racines et de l'épiderme. Le composé CC1 ne déclenche aucun signe de léthalité. Cela laisse espérer que CC1 puisse remplacer avantageusement 1'EDTA dans ses fonctions nutritionnelles des milieux de synthèse utilisés en biotechnologie. Exemple 11 Dosage de la radioactivité dans la ferritine des cellules d'érable On effectue une électrophorèse des protéines de cellules d'érable préparées selon l'exemple 10. Pour cela, on dispose sur un gel d'acrylamide, Exemple 12 Tests de photosensibilité à 366 nm des complexes ferriques du citrate. de l'EDTA Na2et de CC1. On prépare des solutions de complexe ferrique de citrate, d'EDTANa2 et de CC1 à des concentrations en fer de 0.1 mmol/l et des rapports ligand / Fer = 2, le pH étant fixé à 4.8 ou 6.0 par des tampons acétate. On y ajoute un fort ligand du Fer (II) en excés : la ferrozine (concentration = 9 mmol/l)- le complexe ferrozine-Fer (II) absorbe à la longueur d'onde de 562 nm avec un coefficient d'extinction molaire (e562) de 28000 L. mol-1.cm-l. Les solutions sont irradiées à une longueur d'onde de 366 nm et la densité optique à 562 nm est mesurée aprés chaque irradiation. Conformément à la Fig. 3, les résultats de l'expérience de photosensibilité menée parallèlement sur les complexes ferriques du citrate, de l'EDTA et de CC1, montrent que ce dernier composé n'est pas sensible au rayonnement lumineux utilisé, alors que les complexes ferriques de citrate et de l'EDTA sont rapidement photoréduits et libèrent du fer ferreux; celui-ci s'engage dans les réctions de Fenton responsables des dégats physiologiques. REVENDICATIONS 1/ Composé dérivé de la 8-hydroxy-quinoléine, caractérisé en ce qu'il répond à la formule I suivante: dans laquelle - A1, A2,..., Ar sont indépendamment choisis parmi - B représente un groupement hydrocarboné saturé ou insaturé, cyclique ou aliphatique, linéaire ou ramifié, éventuellement polyfonctionnalisé par des fonctions choisies parmi les fonctions amine secondaire, amine tertiaire, imine, oxy, la liaison entre A1, A2,..., Ar et B étant comprise dans une fonction amine secondaire, amine tertiaire, imine ou amide, - n est un entier compris entre 2 et 4, - R2, R3, R4, R5 et R6 sont indépendamment choisis parmi l'atome d'hydrogène, les halogènes, les alkyles, les phénols, les éthers, les substituants aminés, nitrés, nitrosés, les acides carboxyliques et dérivés notamment halogénures, esters et amides, les sulfonamides, les acides sulfoniques et sulfonates, les acides phosphoriques et leurs sels, - et R est un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur. 2/ Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que B est choisi parmi avec m étant égal à 2 ou 3 et D représentant N ou CH -HN-(CH2)m-D-(CH2)p-NH- t =N-(CH2)m-D-(CH2)p-N= avec m et p étant indépendamment égaux à 2, 3 ou 4 et D représente N ou CH 3/ Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que B est choisi parmi -HN-(CH2)m-NH-(CH2)p-NH- ou =N-(CH2),-NH-(CH2)p N= et m est égal à 3 et p est égal à 4. 4/ Composé selon la revendication 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que R21 R3, R4 et R6 représentent chacun un atome d'hydrogène et R5 représente SO3Na. 5/ Agent chélateur du fer caractérisé en ce qu'il consiste en un composé répondant à la formule I, selon l'une quelconque des revendications 1 à 4. 6/ Complexe de coordination du fer caractérisé en ce qu'il est constitué par au moins un agent chélateur selon la revendication 5 et du fer, associés par des liaisons de coordination. 7/ Agent de traitement des plantes, caractérisé en ce qu'il contient à titre de principe actif au moins un agent chélateur du fer selon la revendication 5 et/ou au moins un complexe du fer selon la revendication 6. 8/ Utilisation du composé répondant à la formule II, pour traiter les plantes dans laquelle - Q représente une 8-hydroxy-quinoléine substituée choisie parmi - R2, R3, R4, R5, R6 et R7 étant indépendamment choisis parmi l'atome d'hydrogène, les halogènes, les alkyles, les phénols, les éthers, les substituants aminés, nitrés, nitrosés, les acides carboxyliques et dérivés notamment halogénures, esters et amides, les sulfonamides, les acides sulfoniques et sulfonates, les acides phosphoriques et leurs sels, - et R étant un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur. - A1, A2,..., Ar sont indépendamment choisis parmi - B représente un groupement hydrocarboné saturé ou insaturé, cyclique ou aliphatique, linéaire ou ramifié, éventuellement polyfonctionnalisé par des fonctions choisies parmi les fonctions amine secondaire, amine tertiaire, imine, oxy, la liaison entre A1, A2,..., Ar et B étant comprise dans une fonction amine secondaire, amine tertiaire, imine ou amide, - n est un entier compris entre 2 et 4. 9/ Utilisation d'un composé selon la revendication 8, caractérisée en ce que ledit composé répond à la formule I selon l'une quelconque des revendications 1 à 4. 10/ Agent selon la revendication 7, pour prévenir et/ou traiter la chlorose des plantes. 11/ Utilisation selon la revendication 8 ou 9, pour prévenir et/ou traiter la chlorose des plantes. 12/ Utilisation d'un composé répondant à la formule I selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, pour détoxifier un milieu surchargé en fer.