FR 2697336 A1 19940429 FR 9212946 A 19921028 La présente invention a trait notamment, mais non exclusivement, au domaine de la chromatographie liquide à hautes performances, qui consiste à déterminer la composition d'un milieu liquide par le biais de son indice de réfraction. L'invention concerne un procédé de mesure de la différence entre les indices de réfraction de deux milieux chacun traversé par un faisceau lumineux. Plus précisément, l'invention a pour objet un réfractomètre différentiel à modulation de phase et à franges d'interférences glissantes. L'utilisation de la présente invention permet d'envisager des perfectionnements aux chromatographes en phase liquide à hautes performances, dits "HPLC" (High Performance Liquid Chromatography). A l'heure actuelle, la plupart des détecteurs utilisés dans ce domaine sont les photomètres et les réfractomètres, et, plus rarement, pour des applications très spécifiques, des détecteurs électrochimiques, conductimétriques ou autres. Les photomètres présentent les avantages d'une haute sensibilité et d'une grande stabilité. Ils sont utilisables dans tous les cas où les éluats à détecter absorbent la lumière dans la gamme des longueurs d'onde comprises entre 190 et 700 11 m environ. Mais ces photomètres présentent des inconvénients majeurs : ils ne sont pas universels et dans une même analyse, on peut rencontrer non seulement des éluats qui absorbent la lumière à des longueurs d'onde différentes ou qui même ne l'absorbent pratiquement pas, ce qui notamment en chromatographie préparative peut présenter l'inconvénient de laisser passer inaperçues des impuretés. Qui plus est, dans le cas de chromatographie préparative, le photomètre est rapidement saturé vers une densité optique de l'ordre de 2. En divisant par exemple par 10 la longueur du chemin optique dans la cuve, on diminue cet inconvénient, mais en perdant plus encore sur la sensibilité. Quant aux refractomètres, ils présentent l'avantage essentiel d'être pratiquement universels. La plupart des appareils actuellement commercialisés sont à déviation de faisceaux lumineux par double cuve prismatique à circulation. Dans ces détecteurs, une source lumineuse projette un faisceau sur un double photodétecteur après avoir traversé successivement un diaphragme, d'éventuelles lentilles de concentration, une lame de verre tournante à faces parallèles pour ajuster le zéro optique de l'appareil, c'est-à-dire pour équilibrer l'intensité lumineuse éclairant les deux photodétecteurs, une double cuve prismatique l'une pour le liquide de référence, l'autre pour la phase à analyser. Lorsque l'indice de réfraction de cette dernière varie, la section prismatique des deux cuves successives est telle que le faisceau dévie d'un photodétecteur vers l'autre, selon le signe de la différence des indices entre les deux cuves. Or, dans certains cas, notamment en chromatographie préparative, où l'on peut rencontrer des concentrations élevées dans l'une des deux cuves, ou si l'on crée un gradient d'élution, les variations d'indices peuvent être telles que le faisceau peut dévier jusqu'à saturation de l'instrument, c'est-à-dire que le faisceau dévié n'éclaire plus qu'une seule des deux cellules. Ainsi, le chromatogramme se trouve écrêté et plusieurs pics à base commune peuvent se trouver non distingués. Comme pour les photomètres, on peut réduire les inconvénients en diminuant les déviations, mais ceci au prix, encore ici, d'une perte sur la sensibilité. On évite alors la saturation mais on ne distingue plus les petits pics, c'est-à-dire les impuretés, quand on est en chromatographie préparative. Quels que soient les efforts déployés, on se heurte toujours aux problèmes que crée un gradient d'élution. On a également proposé un système réfractométrique à source monochromatique dont le faisceau est divisé pour traverser deux cuves en parallèle pour un liquide de référence et la phase à analyser, puis les deux faisceaux sont rassemblés pour éclairer un photodétecteur. Des interférences se produisent du fait de la variation du chemin optique, côté mesure en fonction de la variation de l'indice. On peut considérer que la sinusoïde suivie par l'intensité est linéaire au voisinage de la différence d'indice nulle ce qui donne une sensibilité acceptable mais ne résoud pas les problèmes de saturation et d'utilisation de gradient, et comme dans les cas précédents, la saturation peut être évitée au détriment de la sensibilité. Le brevet français FR2596526 illustre un exemple de détecteur réfractométrique dans lequel chacune des cuves (de référence et de mesure) participe de façon indépendante à un système d'interférométrie, les deux cuves étant alimentées en lumière par la même source. La détection photométrique est, selon cet art antérieur, réalisée par deux photodétecteurs indépendants qui recoivent donc chacun une intensité lumineuse qui est une fonction sinusoïdale de la différence des indices de réfraction entre la cuve de référence ou la cuve de mesure et l'air. Une calibration individuelle de chacun des photomètres est donc nécessaire. Ce système optique comporte notamment un élément piézoélectrique destiné à faire vibrer un miroir sur lequel se réfléchit une partie du faisceau lumineux issu de la source. Or, l'élément piézoélectrique peut créer une certaine dérive (liée à l'échauffement) de la mesure dans le temps. En outre, la mise en mouvement du miroir par la pièce piézo-électrique est nécessairement limitée en fréquence et/ou en amplitude, ce qui n'autorise pas une large plage de mesures ni une grande précision dans la mesure. La présente invention a pour but d'éviter notamment les inconvénients précités en proposant un système de conception simple qui, de plus, ne comporte qu'un seul photodétecteur. La présente invention permet notamment de rendre compatibles sensibilité et saturation, surtout pour la chromatographie préparative et permet en outre d'utiliser un gradient d'élution aussi bien en chromatographie analytique qu'en chromatographie préparative. Pour ce faire, conformément à l'invention, on fait appel à un réfractomètre différentiel interférentiel dont chacune des cuves (de référence et de mesure) participera indépendamment l'une de l'autre à un seul interferogramme alimenté en lumière par une même source (laser par exemple). En outre, le réfractomètre selon l'invention ne présente quasiment pas de dérive de la mesure, mais au contraire, une grande stabilité des interférences produites. Avantageusement, la précision de la mesure est améliorée puisqu'aucune limite mécanique n'est imposée, aucune pièce n'étant mise en mouvement. Enfin, la plage de mesure est très grande voire illimitée de part la nature et la combinaison même des éléments réaIisant l'invention. Pour ce faire, dans le réfractomètre différentiel interférentiel selon l'invention, chacune des cuves participe au même système interférométrique. La détection photométrique sera préférentiellement réalisée par un seul détecteur placé dans l'unique figure d'interférence produite par l'interféromètre. Le traitement optique de la branche de référence étant modulé à une fréquence de modulation FM, le photodétecteur associé reçoit ainsi une intensité lumineuse qui est une fonction sinusoïdale de fréquence 2xFM dont la phase est proportionnelle à sa position spatiale. L'intensité lumineuse dépend donc aussi de la différence des indices de réfraction entre les cuves de référence et de mesure. Plus précisément, dans un tel système, le photodétecteur restant fixe, il reçoit une intensité lumineuse de variation sinusoïdale en fonction du temps de fréquence égale à 2xFM et dont la variation de phase est fonction de la variation de la différence des indices entre cuve de référence et cuve de mesure. Ainsi, si l'on dispose d'une mesure de phase entre le signal issu du photo détecteur et une référence fixe, on peut mesurer la différence d'indice de réfraction entre les deux cuves, l'indice de réfraction pouvant varier progressivement même dans des proportions très grandes, par exemple en gradient La présente invention permet ainsi de répondre au problème de la dynamique de mesure et de la sensibilité maximum qui est recherchée notamment en chromatographie liquide à hautes performances. L'invention concerne un procédé de mesure de la différence entre des indices de réfraction de deux milieux, chacun traversé par un faisceau lumineux, lesdits faisceaux étant susceptibles de donner naissance à une figure d'interférence constitué de franges dont on mesure le déplacement. Selon l'invention, on utilise un unique moyen pour détecter le déplacement des franges de la figure d'interférence. Plus précisément, on réalise une modulation de phase sur l'un au moins desdits faisceaux et on contrôle ladite modulation de phase afin d'obtenir un glissement des franges de la figure d'interférence. Une cellule de Pockels peut être utilisée pour moduler la phase. L'invention a en outre pour objet un réfractomètre différentiel qui peut comprendre: - une source de lumière cohérente émettant un faisceau, - un diviseur optique destiné à diviser la polarisation dudit faisceau issu de ladite source, - un premier élément optique destiné à rendre parallèles les deux faisceaux cohérents issus du diviseur optique, - deux cuves, l'une contenant un liquide de référence, l'autre le liquide à mesurer, chacune traversée par l'un des deux faisceaux issus du premier système optique, - un ensemble optique convergent recevant chacun des deux faisceaux issus desdites cuves, et permettant de créer à son foyer une figure d'interférence, - un détecteur associé à ladite figure d'interférence. Selon l'invention, le réfractomètre comprend en outre - un premier milieu optique biréfringent placé sur le faisceau de la source et en amont du diviseur optique, et destiné à modifier l'une des composantes de la polarisation dudit faisceau, - un deuxième milieu optique biréfringent placé sur l'un des faisceaux issu du diviseur optique, - un système électronique destiné à moduler la phase de l'une des composantes de polarisation appliquée au premier milieu optique biréfringent, ledit système permettant en outre l'analyse de la phase instantanée relative entre le signal de modulation appliqué audit premier milieu biréfrigent et le signal mesuré aux bornes dudit photodétecteur ce qui permet de quantifier la différence relative des indices de réfraction de la cuve de référence et de la cuve de mesure, - un système informatique destiné à traiter les données issues du système électronique. Préférentiellement, le premier milieu biréfringent est une cellule de Pockels. De façon plus précise, le détecteur peut être constitué d'une fibre optique dont une extrêmité est placée au foyer de la lentille convergente, la surface d'extrêmité de la fibre qui reçoit l'intensité lumineuse étant perpendiculaire à l'axe optique du réfractomètre, l'autre extrêmité de la fibre optique étant reliée à un photodétecteur. D'autres détails, particularités et avantages de l'invention seront mieux compris à la lecture de la description qui va suivre, faite à titre illustratif et nullement limitatif, en référence aux dessins annexés sur lesquels - la figure 1 est un schéma montrant les composants essentiels de l'invention et leur agencement mutuel - la figure 2 est un schéma simplifié de la partie électronique de l'invention - la figure 3 représente un algorithme de traitement. Sur la figure 1 apparaissent de façon schématique l'ensemble des principaux constituants de l'invention : Une source 1 de lumière cohérente, monochromatique de préférence (de type LASER) émet un faisceau "F" polarisé, constitué de 2 composantes orthogonales. Selon l'invention, une cellule de Pockels 2 ou tout autre milieu optique biréfringent connu en soi, est placée sur le trajet du faisceau "F" en lui imposant un retard ou une avance de phase ce qui crée en sortie de cellule, un faisceau "F1" dont l'une des composantes de polarisation est modifiée. Par ailleurs, comme il sera expliqué plus loin, la cellule de Pockels 2 reçoit un signal de modulation R en provenance d'un système électronique. L'utilisation d'une cellule de Pockels dont la réponse électrique est strictement capacitive, vis-à-vis d'une cale piézoélectrique par exemple, assure une plus grande stabilité des interférences produites donc beaucoup moins de dérive durant la mesure. Le faisceau "F1" entre dans un diviseur optique 3, tel un prisme de Wollaston par exemple, destiné à le diviser en au moins deux faisceaux "F2" et "F3" qui sont envoyés dans un premier système optique 4. L'un des faisceaux est modulé en phase, l'autre non. Le premier élément optique 4 peut être par exemple un biprisme destiné à rendre parallèles, spatialement espacés, les deux faisceaux "F1" et "F2" qui, en sortie du diviseur 3 ne sont pas parallèles. De façon préférentielle, un deuxième milieu optique biréfringentS (ou lame-retard) est placé sur l'un des faisceaux "F2" ou "F3" afin de changer la polarisation du faisceau optique (F2 par exemple) sur lequel il est placé, de sorte que les faisceaux "F2" et "F3" puissent entrer dans le premier élément optique (biprisme) 4 avec une même polarisation. Ainsi, en sortie de biprisme 4, chacun des deux faisceaux parallèles I et II, spatialement espacés, traverse une cuve: l'une Cm contenant la composition à mesurer, l'autre cuve Cr contenant une composition de référence. Après avoir traversé chacun une cuve, les faisceaux I et II sont repris par une lentille convergente 6 destinée à ramener l'image des deux faisceaux en son foyer 7. C'est donc en cet endroit que seront créées les interférences ou la "figure" d'interférences. Un contraste optimal des franges formant la figure d'interférence peut être réalisé en faisant tourner autour de son axe X le faisceau issu de la source de lumière 1. Au foyer 7 est placé un détecteur d'interférences qui peut être constitué d'une fibre optique 8 (de rayon Rf) dont une extrémité est positionnée au foyer de la lentille convergente 6 de telle sorte que le rayon Rf reste inférieur ou égal à la distance séparant deux franges d'interférence de même nature. Autrement dit, le rayon Rf est du même ordre de grandeur que l'interfrange. La section droite de la fibre optique 8 est préférentiellement perpendiculaire à l'axe longitudinal X du réfractomètre. Cet axe est généralement confondu avec l'axe de la source lumineuse 1. L'autre extrémité de la fibre optique 8 peut être couplée à un photo détecteur linéaire 9, connu en soi, fonctionnant dans une plage d'intensité prédéterminée. Sans sortir du cadre de l'invention, une pastille percée placée dans la région 7 où convergent les faisceaux, peut directement être couplée mécaniquement au même photodétecteur. Comme il va être expliqué plus en détail ci-après, l'analyse de la phase instantanée relative entre le signal de modulation appliqué à la cellule de Pockels 2 et le signal mesuré aux bornes du photodétecteur 9 va permettre de quantifier la différence relative d'indice de réfraction entre la cuve de référence et la cuve de mesure. La figure 2 montre par un schéma simplifié le principe de la mesure de phase Un oscillateur à Quartz 1 1 fournit un signal H de fréquence égale à N fois Fm où N représente la résolution de la mesure de phase. Le signal H est divisé au moyen d'un diviseur 12 qui délivre donc un signal dit de référence R, de fréquence Fm. Ce signal est envoyé à la fois vers un compteur/décompteur 18 et vers la cellule de Pockels 2. Avant d'être appliqué à la cellule de Pockels 2, le signal R est de préférence intégré dans un intégrateur 13 puis amplifié dans un amplificateur 14. Par ailleurs, le signal S issu du photodétecteur 9 est de préférence amplifié dans un amplificateur 15, transformé en un signal carré de fréquence (2Fm) et comparé à un seuil dans un comparateur 16 ; puis le signal est divisé par 2 dans un diviseur 17 pour fournir finalement le signal carré I de mesure interférométrique. Le front montant du signal I déclenche le début du comptage dans le compteur/décompteur 18 qui fonctionne à la fréquence N x Fm, tandis que le front montant du signal R appliqué à ce compteur 18 déclenche l'arrêt du comptage. Le compteur est ensuite remis à zéro jusqu'à l'arrivée d'un nouveau front montant du signal I. Le compteur 18 (avant remise à zéro) contient donc (kfi) un nombre compris entre 0 et N qui représente la phase instantanée relative entre le signal de référence R et le signal de mesure I issu du photodétecteur 9. Ce nombre kfi peut avantageusement être transféré vers un système de traitement de données (tout microprocesseur FP connu en soi peut être utilisé) qui calcule la phase instantanée absolue qui, tous les 1/Fm. Un exemple d'algorithme de calcul est donné par la figure 3. La valeur calculée 4)i i = ki x 2x (en rd) ; ki étant une valeur fractionnaire issue de la concaténation de deux valeurs de registres du microprocesseur kfi et kei. La phase instantanée absolue Plusieurs sorties peuvent être prévues, telles que, par exemple, vers un micro-ordinateur via une liaison informatique connue en soi (type RS). Une sortie analogique peut aussi être prévue. En outre, selon l'invention, des mesures dans deux configurations de polarisation des faisceaux I et II traversant les cuves pourront être successivement faites. Ainsi selon une première mesure le deuxième élément optique biréfringent 5 est placé sur le faisceau "F2" tandis que selon une deuxième mesure, l'élément 5 est placé sur le faisceau "F3". Ainsi une détection du caractère chiral des molécules présentes dans la cuve de mesure pourra être faite. De façon préférentielle, l'invention est utilisée, comme indiqué en tête de la description, pour des mesures en chromatographie liquide à hautes performances, soit par exemple en adsorption ou en échange ionique. De façon particulièrement avantageuse, le réfractomètre selon l'invention peut aussi être utilisé en aval d'une colonne de chromatographie par perméation sur gel, vu sa grande dynamique de mesure. En outre, sans modification notable, le réfractomètre selon l'invention est adaptable à la mesure quantitative de l'indice de réfraction d'une solution en fonction de la concentration de soluté: mesure de calibration nécessaire à l'exploitation des résultats obtenus en diffusion statique de la lumière. Bien entendu, diverses autres utilisations et/ou modifications du réfractomètre décrit ci-dessus pourront être réalisées par l'Homme de Métier sans sortir du cadre de la présente invention. REVENDICATIONS 1. - Procédé de mesure, à partir d'une source 1 de lumière cohérente émettant un faisceau F, de la différence entre les indices de réfraction de deux milieux, (Cr, Cm) chacun traversé par un faisceau lumineux (I, II), lesdits faisceaux (I, II) étant susceptibles de donner naissance à une figure d'interférence (en 7) constituée de franges dont on mesure le déplacement, caractérisé en ce que l'on modifie l'une des composantes de polarisation du faisceau F puis la polarisation de l'un des faisceaux, en ce que l'on réalise une modulation de phase sur l'une au moins desdites composantes de polarisation du faisceau F et on contrôle ladite modulation de phase afin d'obtenir un glissement des franges de la figure d'interférence, ce qui permet de quantifier la différence relative des indices de réfraction des deux milieux (Cr, Cm) et en ce que lton utilise un unique moyen (9) pour détecter le déplacement des franges de la figure d'interférence. 2. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on utilise une cellule de Pockels pour moduler ladite phase. 3. - Réfractomètre différentiel utilisable notamment en chromatographie liquide à haute performances, comprenant - une source de lumière 1 cohérente émettant un faisceau F, - un diviseur optique 3 destiné à diviser la polarisation dudit faisceau F issu de ladite source, - un premier élément optique 4 destiné à rendre parallèles les deux faisceaux cohérents issus du diviseur optique 3, - deux cuves Cr, Cm, l'une Cr contenant un liquide de référence, l'autre Cm le liquide à mesurer, chacune traversée par l'un des deux faisceaux issus du premier système optique (4), - un ensemble optique convergent 6 recevant chacun des deux faisceaux I et II issus des dits cuves, et permettant de créer à son foyer 7 une figure d'interférences, et - un détecteur 9 associé à ladite figure d'interférences, caractérisé en ce qu'il comporte en outre un premier milieu optique biréfringent 2 placé sur le faisceau F de la source 1, en amont du diviseur optique 3 et destiné à modifier l'une des composantes de la polarisation dudit faisceau F, - un deuxième milieu optique biréfringent 5 placé sur l'un des faisceaux issu dudit diviseur optique 3, en amont de ladite figure d'interférence, - un système électronique (11 - 18) destiné à moduler la phase de l'une des composantes de polarisation appliquée au milieu optique biréfringent 2, ledit système électronique permettant en outre l'analyse de la phase instantanée relative entre le signal de modulation R appliqué audit milieu biréfringent 2 et le signal S mesuré aux bornes dudit photodétecteur 9, ce qui permet de quantifier la différence relative des indices de réfraction de la cuve de référence Cr et de la cuve de mesure Cm, et - un système informatique destiné à traiter les données, issues du système électronique. 4. - Réfractomètre selon la revendication 3, caractérisé en ce que ledit milieu biréfringent 2 est une cellule de Pockels. 5. - Réfractomètre selon l'une quelconque des revendications 3 ou 4, caractérisé en ce que ledit détecteur est notamment constitué d'une fibre optique 8 dont une extrêmité est placée au foyer 7 de ladite lentille convergente 6, la surface d'extêmité de la fibre 8 qui reçoit l'intensité lumineuse étant perpendiculaire à l'axe optique X du réfractomètre, l'autre extrêmité de la fibre optique étant reliée audit photodétecteur 9. 6. - Réfractomètre selon l'une quelconque des revendications 3 à 5, caractérisé en ce que ladite source de lumière 1 est monochromatique, de type LASER. 7. - Utilisation du réfractomètre selon l'une quelconque des revendications 3 à 6, en chromatographie liquide à hautes performances. 8. - Utilisation du réfractomètre selon l'une quelconque des revendications 3 à 7 en chromatographie par perméation sur gel. 9. -Utilisation du réfractomètre selon l'une des revendications 3 à 6 pour des mesures de variation de l'indice de réfraction d'une solution en fonction de la concentration en soluté, afin de calibrer un dispositif de diffusion statique de la lumière.