FR 2696740 A1 19940415 FR 9212232 A 19921013 DERIVES DE LA DIMETHYL BIGUANIDE ET APPLICATIONS THERAPEUTIQUES L'invention a pour objet des dérivés cyclisés de N diméthyl biguanide ( imidodicarbonimidiodiamine) et les applications de ces substances comme médicaments. La molécule de diméthyl biguanide ainsi que les procédés d'obtention de cette molécule sont déjà décrits dans la littérature.On trouve notamment la référence de ce produit dans l'index Merk 11 eme édition. On sait déjà que cette molécule peut être utilisée,outre ses applications thérapeutiques antidiabètiques, dans le traitement des maladies vasculaires.Cependant l'utilisation de cette substance présente des inconvénients liés à une mauvaise tolérance gastro-intestinale et une demi-vie relativement courte. L'objet de la présente invention est de fournir des dérivés de la diméthyl biguanide libérant in vivo cette molécule ,il s'agit par conséquent de prodrogues,ayant d'une part une plus faible toxicité gastro-intestinale et d'autre part une action prolongée en raison de la libération progressive du principe actif,avec par conséquent une durée d'action pharmacologique et thérapeutique allongée. A ce titre l'invention a pour objet des composés chimiques dérivés de la diméthyl biguanide répondant à la formule générale (I) suivante: dans laquelle le groupe -CO-R-CO- est issu d'un anhydride d'acide dicarboxylique (ou diacide) et plus particulièrement dans laquelle R représente: - une chaine hydrocarbonée de 4 à 6 atomes de carbones saturée ou non,le cas échéant substituée et notamment par des groupes méthyles, propyles ,allyles - un cycle aromatique notamment benzénique,naphtalénique le cas échéant substitué par des atomes d'halogènes,des hydroxyles ou des chaines alliphatiques. - un cycle non aromatique de 5 à 6 atomes de carbones notamment un groupe cyclohexane ou cyclopentane le cas échéant substitué par des groupes hydroxyles ou des chaines alliphatique. - un cycle aromatique ou non de 5 à 6 atomes comprenant un hétéroatome comme l'azote ou l'oxygène. Ces composés peuvent se présenter sous forme de mélanges racémiques ou sous forme de stéréoisomères. Les composés peuvent également se présenter sous forme de base ou sous forme de sels pharmaceutiquement acceptables,en particulier sous forme de chlorhydrates. Des composés particulièrement préférés dans le cadre de la présente invention sont ceux pour lesquels le groupe -CO-R-COsitué sur un atome d'azote dans la formule indiquée ci-dessus correspond à l'un des groupements succinoyl,maloyl,isatoyl, glutaroyltdodécénylsuccinoyl,phtaloyl,di-o-acétyltartroyl et cis cyclohexane dicarboxoyl. A ce titre l'invention, a plus particulièrement pour objet les composés correspondant à l'un des composés suivants: - N-di-oxobutyl Nt -diméthyl biguanide, - N-phtaloyl N' -diméthyl biguanide, - N-diméthyl N'-cyclohexane dicarboxo biquanide, - N-diméthyl N' -diacétyltartroyl biguanide, - N-diméthyl N' -glutaroyl biguanide, - N-diméthyl N' -isatoyl biguanide, - N-diméthyl N' -maléyl biguanide, - N-diméthyl N' -dodécénylsuccinoyl biguanide, L'invention vise également toute composition pharmaceutique comprenant au moins un composé tel que décrit ci-dessus selon l'invention,en association avec un ou plusieurs véhicules diluants,excipients ou adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables De préférence,les compositions pharmaceutiques selon l'invention se présentent sous une forme appropriée pour l'administration par voie orale, parentérale ou intraveineuse. Avantageusement, les compositions pharmaceutiques selon l'invention contiennent une quantité de composés tels que décrits ci-dessus,permettant d'adapter une posologie quotidienne chez l'Homme comprise entre environ 0,2 g et environ 1 g en une ou plusieurs prises. L'invention a plus particulièrement pour abjet,l'utilisation d'au moins un composé tel que décrit ci-dessus,pour l'obtention de médicaments destinés au traitement du diabète sous toutes ses formes et au traitement des maladies vasculaires de la macro et de la microcirculation,que ces maladies soient liées ou non au diabète. Les composés de la présente invention sont avantageusement obtenus par le procédé comprenant les étapes suivantes: -couplage de la cyanoguanidine avec l'anhydride de diacide en milieu anhydre polaire ou non polaire,selon le schéma suivant: - couplage du dérivé de formule (II) obtenu à l'étape précédente avec la diméthylamine en milieu hexanol,selon le schéma suivant: - le cas échéant,transformation du dérivé de formule (I) obtenu à l'étape précédente en un sel,par mise en présence, sous ébullition à reflux,de ce dérivé avec un acide en milieu méthanolique anhydre,notamment avec de l'acide chlorhydrique dans le cas de la formation d'un chlorhydrate. Les composés de l'invention peuvent également être obtenus selon le procédé suivant: -obtention du chlorhydrate de diméthyl biguanide de formule (III) par réaction de la cyanoguanidine avec le chlorhydrate de diméthylamine en milieu alcool hexylique selon le schéma suivant: - traitement du dérivé de formule (III) obtenu à l'étape précédente par le méthylate de sodium,suivi de la condensation de la diméthyl biguanide base ainsi obtenue avec l'anhydride de diacide en milieu DMSO,DMF,ou xylène selon le schéma suivant: - le cas échéant,transformation du dérivé de formule (I) obtenu à l'étape précédente en un sel,par mise en présence, 50US ébullition à reflux ,de ce dérivé avec un acide en milieu méthanolique anhydre,notamment avec l'acide chlorhydrique dans le cas de la formation d'un chlorhydrate. L'invention concerne également les dérivés de formule (11) et (III) décrits ci-dessus,dans lesquels R a la signification susmentionnée,ainsi que les sels de ces dérivés,notamment leur chlorhydrate. L'invention sera davantage illustrée à l'aide de la description détaillée qui suit, d'exemples de préparation de composés de l'invention,ainsi que de la mise en évidence de leurs propriétés pharmacologiques et thérapeutiques. Exemple 1 : Préparation du N-di-oxobutyl N-diméthyl biguanide Méthode 1 : La préparation de ce composé sous forme de chlorhydrate s'effectue en trois étapes. 1/bloqueur la fonction aminée de la cyanoguanidine ( ou Dicyan-diamide) par le groupement di-oxo aryl ou alcoyl en condensant la cyanoguanidine avec l'anhydride succinique en milieu anhydre polaire ou non polaire (DMSO,DMF,Toluène, Xylène). 2/ Traiter ce nouveau dérivé par la diméthylamine (sous forme de Chlorhydrate) en milieu hexanol ( alcool n hexylique) t 2 - /WII\ t NH + CH O VH 3/ Préparation du chlorhydrate C8,H13,N5,02,HCL PM=247,5 Mode opératoire Première étape :Dans un appareil à distiller dissoudre dans du DMF 0,1 mole de cyanoguanidine et 0,1 mole d'anhydride succinique. Chauffer au doux reflux sous agitation pendant 120 minutes.Après quelques minutes de chauffage la masse réactionnelle devient limpide et homogène.Un précipité de fins cristaux incolores apparait dès la dixième minutes et est total après 100 minutes. on isole ce précipité par essorage La vérification du spectre RMN ,de l'analyse centésimale et de la pureté du produit par chromatographie sur couche mince est réalisée.Le rendement est quantitatif. Deuxième étape.Le N-dioxo butyl guanidine obtenu est condensé avec le chlorhydrate de diméthylamine en milieu alcool n-hexylique Dans un ballon à distiller on introduit 0,1 mole du précédent dérivé, 0,11 mole de chlorhydrate de diméthylamine et 60 ml d'hexanol.Chauffer lentement sous agitation;après 20 à 30 mn la masse réactionnelle devient homogène limpide et incolore;continuer de chauffer 2h à 150 degrés avec élimination de l'azéotrope H20 hexanol.Un précipité gris clair apparait.L'hexanol est chassé sous vide. Le précipité est recristallisé dans l'éthanol.On obtient de fines aiguilles blanches brillantes. Le spectre EMM,l'analyse centésimale et la présence d'une seule tache après chromatographie sur couche mince confirme la structure et le pureté du produit.Le point de fusion est de 240-245 degrés C.Le rendement est de 80 Ces fines aiguilles sont insolubles dans l'eau mais solubles dans les acides faibles par suite de formation de sels (Chlorhydrate...).Le produit est également insoluble dans les solvants benzéniques. Troisième étape.La base obtenue est transformée en chlorhydrate.Dans un réacteur ,la base est mise en suspension dans du méthanol anhydre et de l'acide chlorhydrique est ajouté en proportion équimolEculaire.Après ébullition à reflux pendant deux heures,le méthanol est évaporez à sec sous vide.Le précipité est le chlorhydrate soluble dans l'eau et les solvants polaires. L'analyse centésimale, les différents spectres ainsi que le point de fusion 237 degrés C confirment l'originalité du sel obtenu.Par cette méthode il n'y a pas formation de triazine correspondant à la cyclisation de la molécule de biguanide. Méthode 2:La préparation s'effectue en quatre étapes. 1/Premièrement préparation de la Diméthyl biguanide HCl par réaction de la cyanoguanidine avec le chlorhydrate de diméthylamine en milieu alcool hexylique. 2/ Liberatjn de la base :diméthyl biguanide par le mGthylate de sod CRs 30 alun NH ,r3ct\3 rY L, G)rS Hrh' rtf NW Nfl 15r 3/Condensation de la diméthyl biguanide base avec l'anhydride succinique en milieu DMSO,DMF ou Xylène par une méthode évitant la formation de triazine. 4/ Préparation du chlorhydrate Mode opératoire. Premiere étape.Dans un appareil à distiller mélanger 0,1 mole de cyanoguanidine et 0,11 mole de chlorhydrate de diméthylamine dans 60 ml d'alcool hexylique et un millilitre d'eau distiîlée.Chauffer sous agitation pendant 30 minutes à 80 degrés C,le mélange devient homogène et limpide.Chauffer alors progressivement jusqu'à 150 degrés C.avec dans un premier temps une distillation du mélange azéotrope ( H20alcool hexylique).Puis l'alcool hexylique distille (récupération presque totale).Terminer l'élimination de l'alcool hexylique sous vide.Le chlorhydrate de diméthyl biguanide qui a précipité correspond aux normes du produits du commerce.Le rendement est de 958. Deuxième étape. Mettre en suspension 0,1 mole du produit précédent dans 100 ml de méthanol et ajouter en plusieurs fois du méthylate de sodium ( 0,3 mole dissous dans 20 ml de méthanol ).La réaction est exothermique avec élévation du pH jusqu'à 12.Le précipité de chlorure de sodium est essoré et lavé avec de l'alcool méthylique bouillant. On réunit tout l'alcool méthylique que l'on distille.on chasse le résidu d'alcool sous vide et on pratique une distillation azéotropique avec du benzène pour chasser les dernières traces de méthanol.Le résidu solide jaune orangé est constitué de diméthyl biguanide base.Le rendement est quantitatif. Troisième étape:Dans un ballon avec réfrigérant ascendant mélanger dans 100 ml de DMF (également possible avec DMSO et - xylène) 0,1 mole de diméthyl biguanide base, précédemment obtenu, avec 0,1 mole d'anhydride succinique Une exothermie et un changement de coloration sont observés. On chauffe au B.M.bouillant sous agitation pendant six heures.Un précipité I blanc légèrement grisâtre se forme.On laisse refroidir et on essore.Le précipité est lavé par du DMF. Une fois séché,le produit se présente sous une forme microcristalline insoluble dans l'eau et les solvants benzèniques mais soluble dans les alcools et les acides dilués par suite de formation de sels ( chlorhydrate. ... )Le rendement est quantitatif.Le point de fusion est de 237 degrés C.Le spectre RMM,l'analyse centésimale et la présence d'une seule tache par chromatographie sur couche mince confirment la structure et la pureté du N'-di-oxo-butyl N diméthyl biguanide obtenue Quatrième étape.Préparation du chlorhydrate selon la méthode décrite précédemment.Le point de fusion du chlorhydrate est de 233 degrés C. Les spectres RMN,IR et de masse confirme la structure du composé obtenu qui est soluble dans l'eau et les alcools. Exemple 2 :Préparation du N Phtaloyl N' diméthyl biguanide Les méthodes précédentes de synthèse sont utilisées pour tous les produits de cette demande d'invention.Comme cela est déjà décrit, deux méthodes d'obtention du N Phtaloyl N' diméthyl biguanide sont proposées. Méthode 1: 3 étapes 1/ Condensation de la cyanoguanidiné avec l'anhydride phtalique en milieu DMF (oMSO et Xylène également possible) 3 heures à 145 degrés C. 2/Réaction entre le N Phtaloyl cyanoguanidine et le chlorhydrate de diméthylamine en milieu hexanol à 150 degrés 3/Préparation du chlorhydrate en milieu méthanolique C12,H13,N5,O2 HC1 PM= 295,5 Méthode 2 : 4 étapes Les deux premières consistent à synthétiser du chlorhydrate de diméthyl biguanide et à- libérer la base comme cela est décrit dans l'exemple l.La troisième étape consiste à traiter la diméthyl biguanide base par l'anhydride phtalique à 145 degrés c. pendant deux heures dans du DMF comme solvant (également possible dans le xylène et le DMSO ).Enfin le chlorhydrate est obtenu en faisant réagir mole à mole la base obtenue avec de l'acide chlorhydrique en milieu méthanolique. Le rendement est de 80%. Le point de fusion est de 241 degrés C. Le produit obtenu est une poudre blanche microcristalline soluble dans l'eau et les solvants polaires.Les spectres RMN,IR,W et de masse confirment la structure proposée. Exemple 3 . Préparation du chlorhydrate de N-diméthyl N' cyclohexane dicarboxobiguanide.Les méthodes de synthèses sont toujours identiques à celles décrites précédemment et le produit est obtenu avec l'anhydride cis-cyclohexane dicarboxylique et la diméthyl biguanide base. Rendement 80%.Point de fusion 260 degrés C. C12,H19,N5,02,HCL Pu=301,5 Exemple 4 : Préparation du chlorhydrateN diméthyl N'Diacétyltartroyl biguanide obtenu avec l'anhydride Di acétyl tartrique. Rendement 80, Point de fusion 245 degrés C. Exemple 5 : Préparation du chlorhydrate de N diméthyl N'glutaroyl biguanide obtenu avec 1(anhydride glutarique. Rendement quantitatif.Point de fusion: 235 degrés C. Exemple 6 : Préparation du chlorhydrate de N diméthyl N' isatoyl biguanide obtenu avec l'anhydride isatoïque Rendement 85. P.F. 255 degrés c. C12,H14,N6,02 HC1 PM=310,5 Exemple 7 : Préparation du chlorhydrate de N diméthyl N'maléyl biguanide obtenu avec l'anhydride maléique.Rendement 100%;P.F. 235 degrés C. C8,Hll,N5,02 HCl PM=245,5 L'invention a d'autre part pour objet des médicaments contenant au moins un des composés décrits ci dessus sous forme de base ou de sels,en particulier des médicaments pour le traitement du diabète sous toutes ses formes, pour le traitement des maladies vasculaires liées au diabète (rétinite,neuropathies, néphropathies) ou non (artérite,maladie de Raynaud...) et des maladies vasculaires secondaires à la formation de néovaisseaux. La présente invention a encore pour objet une composition pharmaceutique contenant une quantité efficace d'au moins un des composés précédemment décrits en association avec un ou plusieurs diluants,excipients ou adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables. De telles compositions sont particulièrement destinées au traitement du diabète sous toutes ses formes et au traitement des maladies vasculaires de la macro et de la microcirculation. L'intérêt pharmacologique ,cinétique et clinique des composés selon la présente invention est décrit ci-après,en prenant comme exemple illustratif,le N-di-oxo-butyl N diméthyl biguanide. Pour montrer l'intérêt de ce produit,différentes études ont été ménées chez l'animal et chez l'Homme. Du point de vue toxicité aiguë,la DL 50 par voie orale chez la souris est trouvée égale à 1,55 g/kg avec un intervalle de 1,21 à 1,72. Cette DL 50 est inférieure à celle observée avec la diméthyl biguanide 1,77 g/kg avec un intervalle de 1,53 à 2,12 g/kg.De plus la mortalité qui apparait rapidement avec la diméthyl biguanide ( dans les deux heures ) est retarde avec le composé substitué cyclique.Ce résultats correspond à une diminution de la toxicité aiguë et à un produit à action prolongée.Un résultat identique est obtenu chez le Rat ou la DL 50 est trouvée égale à 1,4 g/kg avec la dimdthyl biguanide substituée contre 1,8 g/kg avec la diméthyl biguanide. Du point de vue pharmacologique,l'activité antidiabètîque a été étudiée sur deux modèles de rats rendus diabètiques. Le premier modèle consiste a traiter les rats par de la streptozotocine ,molécule qui induit un accroissement de la glycémie qui passe de 5,5 mM/l à 9 mM/l en cinq jours. L'administration de diméthyl biguanide substituée,par voie orale,entraine une diminution significative de la glycémie et il existe une relation entre la dose et 1'effet.Dès 20 mg/kg l'effet est observé avec un maximun à 50 mg/kg.La dose efficace 50 est de 35 mg/kg.Dans les mêmes conditions,la dose de 20 mg/kg de diméthyl biguanide est inactive et la D.E.50 est de 45 mg/kg.Ces résultats montrent que la diméthyl biguanide substituée est plus active que le dérivé non substitué. Sur un second modèle de rats génétiquement diabétiques,une étude de la cinétique d'action a été effectuée en administrant 50 mg/kg de diméthyl biguanide substituée.La glycémie de ces rats diabétiques étaient de 11 mM/1 et le traitement a diminué la valeur de la glycémie à 7 mM/l.Cet effet se prolonge pendant 24 heures.Dans les mêmes conditions la diméthyl biguanide diminue la glycémie de 11 mM/l à 8 mM/l et l'action disparait dès la septième heure qui suit l'administration de la substance.Ces résultats démontrent que l'effet antidiabètique de la diméthyl biguanide substituée est supérieur et surtout beaucoup plus long que celui de la diméthyl biguanide. Sur un modèle de vasomotricité microvasculaire,la diméthyl biguanide substituée s'est révélée deux fois plus active et d'une durée d'action cinq fois plus longue que la diméthyl biguanide non substituée. Une étude pharmacocinétique menée chez 10 rats recevant par voie orale 20 mg/kg soit de diméthyl biguanide soit du dérivé substitué a permis de calculer les différents paramètres cinétiques des deux produits.Le dosage plasmatique de la diméthyl biguanide,produit actif circulant dans le sang,a été effectué par chromatographie liquide haute performance. Après administration de diméthyl biguanide le pic de concentration est observé au temps une heure et il est égal à 2,8 ug/ml. La demi-vie est dans ce cas égale à 2,3 heures. Après administration du dérivé substitué,il y a suppression du pic initial de concentration;un plateau de concentration est observé à partir de 1,5 heures et ce plateau se prolonge sur 24 heures. Avec ce type de molécule prodrogue,il est difficile de calculer une demi-vie mais la durée de présence de la substance dans le plasma est 4 à 5 fois plus longue que celle trouvée avec la diméthyl biguanide. Une étude clinique réalisée,selon un protocole de cross over avec une période de 15 jours séparant les deux phases,chez 6 diabètiques non insulino-dXpendants traités pendant 15 jours soit par la diméthyl biguanide substituée soit par la diméthyl biguanide avec des gelules gastro-resistantes dosées dans les 15 cas à 500 mg de principe actif montrent: - que la diminution de la glycémie est comparable avec un effet légèrement plus important dans le cas de la diméthyl biguanide substituée non significatif en raison du faible effectif de patients rentrant dans l'essai. - que les patients n'ont pas eu d'effets secondaires gastrointestinaux (nausées,diarrhées.v) lorsqu'ils étaient sous diméthyl biguanide substituée,alors que 2 patients sur 6 traités par la diméthyl biguanide non substituée,ont présenté des diarrhées lors des premiers jours de traitement. Ce résultat clinique montre que la substitution de la diméthyl biguanide diminue les effets secondaires. En conclusion des essais pharmacologiques et cliniques,la substitution de la diméthyl biguanide augmente l'action, prolonge de façon très importante la durée des effets principaux et diminue les effets secondaires. De manière préférentielle les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont présentées en vue de l'administration orale,parentérale ou intraveineuse. La posologie proposée doit être active et par conséquent comprise entre 0,2 et 1 g par jour. REVENDICATIONS 1. Composes chimiques dérivés de la diméthyl biguanide répondant à la formule générale (I) suivante: dans laquelle le groupe -CO-R-CO- est issu d'un anhydride d'acide dicarboxylique (ou diacide) et plus particulièrement dans laquelle R représente: - une chai ne hydrocarbonée de 4 à 6 atomes de carbones saturée ou non,le cas échéant substituée et notamment par des groupes méthyles, propyles ,allyles ... - un cycle aromatique notamment benzénique,naphtalénique le cas échéant substitué par des atomes d'halogènes,des hydroxyles ou des chaines alliphatiques. - un cycle non aromatique de 5 à 6 atomes de carbones notamment un groupe cyclohexane ou cyclopentane le cas échéant substitué par des groupes hydroxyles ou des chaines alliphatique. - un cycle aromatique ou non de 5 à 6 atomes comprenant un hétéroatome comme l'azote ou l'oxygène. 2. Composes selon la revendication 1, caractérises en ce quels correspondent à l'un des composés suivants: - N-di-oxobutyl N'-diméthyl biguanide, - N-phtaloyl N'-diméthyl biguanide, - N-dîinéthyl N t -cyclohexane dicasboxobiguanide, - N-diméthyl N'-diacétyltartroyl biguanide, - N-diméthyl '-glataroyl biguanide, - Ndiéthyl N1-isatoyl biguanide, - N-diméthyl '-malOyl biguanide, - N-dimétyl N' -dodécénylsuccinoyl biguanide 3 Composés selon la revendication I ou la revendication 2, caractérises en ce qu'ils se présentent sous forme de me langes racémiques ou sous forme de stéréolsonieres. 4. Composés selon Itune des revendications 1 a 3, caractérisés en ce qu'ils se présentent sous forme de sels pharmaceutiquement acceptables, notamment sous forme de chlorhydrates. 5. Composition pharmaoeutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé selon l'une de revendications I d 4, en association avec un ou plusieurs véhicules diluants, excipients ou adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables. 6. Composition pharmaceutique selon la revendication 5, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme appropriée pour l'administration par voie orale, parentérale ou intraveineuse. 7. Composition pharmaceutique selon la revendication 5 ou la revendication 6, caractérisée en ce qu'elle contient une quantité de composés selon l'une de revendications 1 à 4, permettant d'adapter une posologie quotidienne chez 1' Lipome comprise entre environ 0,2 g et environ 1 g, en une ou plusieurs prises. 8. Utilisation dtau moins un composé selon lune des revendications 1 b 4, pour l'obtention de médicaments destinés au traitement du diabete sous toutes ses formes, et au traitement des maladies vasculaires de la macro et de la microcirculatloa, que ces maladies soient liees ou non au diabete. 9. Procédé l'obtention des composés selon l'une de revendications I à 4, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: - couplage de la cyanoguanidine avec l'anhydride de diacide en milieu anhydre polaire ou non polaire , selon le schéma suivant: - couplage du dérivé de formule (II) obtenu à r étape précédente avec la dnnéthylamine en milieu hexanol, selon le schéma suivant:: - le cas échéant, transformation du dérivé de formule (I) obtenu a l'étape précédente en un sel, par mise en présence, sous ebullition a reflux, de ce dérivé avec un acide en milieu méthanolique anhydre, notamment avec de I 1acide chlorhydrique dans le cas de la formation d t un chlorhydrate. 10. Procédé d'obtention des composes selon l'une de revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: - obtention du chlorhydrate de diméthyl biguanide de formule (III) par réaction de la cyanoguanidine avec le chlorhydrate de diméthylamine en milieu alcool hoxylique, selon le schéma suivant: - traitement du dérivé de formule (III) obtenu a l'étape précédente par le méthylate de sodium, suivi de la condensation de la diméthyl biguanide base ainsi obtenue avec l'aaliydride de diacide en milieu DMSO, DMF ou xylène selon le schéma suivant: Ca AZS V3 + R xc/ X (I If Q; 60 (I) - le cas échéant, transformation du dérivé de formule (I) obtenu à l'étape précédente en un sel, par mise en présence, sous ébullition à reflux, de ce dérivé avec un acide en milieu méthanolique anhydre, notamment avec de l'acide chlorhydrique dans le cas de la formation d'un chlorhydrate.