FR 2685331 A1 19930625 FR 9115422 A 19911212 La présente invention a pour objet des phosphotriesters de la ddU, leur préparation et leur application en thérapeutique. La ddU est la 2',3'-didésoxy-uridine dont la formule est donnée en annexe 1. Les composés de l'invention répondent à la formule (I) donnée en annexe 1 dans laquelle R'1 est la 5'-ddU, la 3'-dT ou la 5'-dT, R'2 est un cation, le radical méthyle, le radical -CH2O-CO- C(CH3)3, -CH2CH20CH3, -CH2CH2CN, -CH2CH2S-CO-C(CH3)3, -CH2CH2S - S CH2CH2OH, La 2'-désoxythymidine (dT) se lie par la liaison 3'ou 5' les formules sont données en annexe 1. La préparation des composés est indiquée ci-après et dans 1 ' annexe 2. Les chromatographies sur couche mince ont été réalisées sur plaques de silice Merck 60F 254 (art.5554). Les chromatographies sur colonne de gel de silice ont été effectuées avec de la silice Merck 60 H (art. 7736) ou avec de la silice silanisée RP2 Merck (art. 7719). Les analyses CLPH ont été effectuées sur colonne Waters Radial-Pak (diam.: 8 mm, l : 100 mm) C18 de granulométrie sphérique de 10 pm. Cette colonne est protégée par une préco- lonne Guard-Pak. Le système CLHP est composé d'un injecteur U6K, de deux pompes M-6000 A, d'un programmateur M-720 (Waters), d'un détecteur UV multicanal Pye Unicam PU 4021 et d'un centre de contrôle vidéo PU 4850 (Philipps). L'élution a été réalisée avec une solution d'acétonitrile dans un tampon d'acétate d'ammonium 0,1 M (pH 5,9) à un débit de 2 ml par minute (TR : temps de rétention). Les purifications CLHP ont été effectuées sur colonne SFCC Nucléosil (diam.: 19 mm, 1 : 150 mm) de granulométrie sphérique de 10 pm. Le système CLHP est composé d'un injecteur UsK, de deux pompes M-510 EF, d'un programmateur M-720, d'un détecteur UV M-481 et d'un enregistreur Data Module 746 (Waters). L'élution est réalisée avec une solution d'acétonitrile dans lveau à un débit de 6,25 ml par minute. Avant analyse, purification CLHP ou lyophilisation, les solutions ont été filtrées sur filtre Millex HV-4 (Millipore). Les spectres UV ont été enregistrés sur un spectrophotomètre UVIKON 810. Les spectres de masse ont été pris sur un appareil JEOL JMS DX 300 par la méthode d'ionisation FAB dans une matrice de glycérol (G), glycérol/thioglycérol (GT) ou d'alcool 3-nitrobenzylique (NBA). Les spectres RMN du proton ont été enregistrés sur un appareil Varian EM 360 ou sur appareil Brüker AC 250. Les déplacements chimiques sont exprimés en ppm par rapport au signal du tétraméthylsilane (TMS). La multiplicité et l'allure des signaux observés par RMN sont indiquées par une (ou plusieurs) lettre(s) : s (singulet), d (doublet), t (triplet), m (multiplet), 1 (large). Les spectres RMN du phosphore ont été enregistrés sur un appareil Brüker WP 200 SY avec découplage du proton. Les déplacements chimiques sont exprimés en ppm par rapport au signal de H3PO4 pris comme référence externe. 5'-O-Diméthylthexylsilyl 2' -didesoxythymidine 2. La 2'-desoxythymidine 1 (1,09 g, 4,50 mmol.) en solution dans 32 ml de pyridine est mise en réaction avec 1,10 ml (5,50 mmol.) de chlorure de diméthylthexylsilyle durant 48 h. L'acide libéré est neutralisé par addition d'une solution de bicarbonate de triéthylammonium et le produit est extrait avec du dichlorométhane. La phase organique est concentrée sous pression réduite et chromatographiée sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-4%) dans CH2Cl2) pour donner 1,39 g (80%) de 2. 2 UV (EtOH) : X max 266 nm (E 10600) x min 233 nm (E 1700) SM (FAB positif, GT) : 385 (2M+H)+, 127 (TH2)+, RMN H (DMSO-d6) : 6 = 0,11 (s, 6H, (CH3)2Si) ; 0,82-0,87 (m, 12H, H(CH3)2C(CH3)2Si) ; 1,59 (quintuplet, 1H, H(CH3)2)C(CH3)2Si, J = 6,8 Hz) ; 1,78 (s, 3H, CH3) ; 2,06 (m, 2H, H-2', 2'') ; 3,73 (m, 2H, H-5',5'') ; 3,79 (m, 1H, H-4') ; 4,18 (m, 1H, H3') ; 5,28 (d, 1H, OH, J = 3,3 Hz) ; 6,15 (t, 1H, H-i', J = 6,9 Hz) ; 7,43 (s, 1H, H-6) ; 7,73 (sl, 1H, NHCO) ppm. 3'-O-(4-Méthoxytrityl) 5'-O-diméthylthexysilyl 2'-desoxy- thymidine 3. A une solution de 1,33 g (3,45 mmol.) de 2 dans 11 ml de pyridine sont ajoutés 2,14 g (6,93 mmol.) de chlorure de 4-méthoxytrityle. Après 40 heures, le mélange réactionnel est dilué avec du CH2Cl2 et lavé avec une solution aqueuse de NaHCO3 puis avec de l'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4, concentrée et purifiée par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-5%) dans CH2Cl2) pour conduire à 2,19 g (96%) de 3 suffisamment pur pour la suite de la synthèse. 3 UV (EtOH) : À max 266 nm (E 13700) À min 249 nm (E 10400) À max 231 nm (E 19300) À min 227 nm (E 19000) SM(FAB positif, NBA) : 657 (M+H) , 273 (MTr) RMN H (DMSO-d6) : 6 = -0,07 et -0,04 (s et s) ; 3H et 3H, 2CH3Si) ; 0,65-0,73 (m, 12H, H(CH3)2C(CH3)2CSi) ; 1,35-1,60 (m, 3H, H-2',2'' H(CH3)2C(CH3)2Si) ; 1,70 (s, 3H, CH3) 3,40 (H-5' partiellement masqué par l'eau) ; 3,55 (d, 1H, H-5'', J = 13,5 Hz) ; 3,73 (s, 3H, CH3OTr) ; 3,97 (s, 1H, H-4') ; 4,17 (d, 1H, H-3', J = 4 Hz) ; 6,14 (dd, 1H, H-l', J = 6,1 et 8,4 Hz) ; 6,89-7,45 (m, 15H, Tr, H-6), 11,3 (sl, NHCO) ppm. 3'-0-( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidine 4 La désilylation de 2,06 g (3,14 mmol.) de 3 est réalisée à l'aide de 5,70 ml d'une solution 1,1 M de fluorure de tétrabutylammonium dans le THF en 6 h. Le solvant est évaporé et le brut obtenu purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-8%) dans CH2Cl2) pour conduire à 1,47 g (91%) de 4. 4 UV (EtOH) : À max 265 nm (E 12100) À min 250 nm (E 10500) À inflex 228 nm (E 18500) SM (FAB positif, NBA) : 515 (M+H)+, 273 (MTr) RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,50 (dd, 1H, H-2', J = 5,5 et 13,4 Hz) ; 1,62-1,79 (m, 1H, H-2") ; 1,70 (s, 3H, CH3) ; 3,15 (m, 1H, H5t) ; 3,36 (m, 1H, H-5") ; 3,74 (s, 3H, CH3OTr) ; 3,76 (m, 1H, H-4') ; 4,25 (d, 1H, H-3', J = 5,3 Hz) ; 4,95 (t, 1H, OH, J = 5,0 Hz) ; 6,18 (dd, 1H, H-l', J = 5,4 et 9,3 Hz) ; 6,90-7,44 (m, 14H, Tr) ; 7,60 (s, 1H, H-6) ; 11,3 (sl, 1H, NHCO) ppm. 0-(2',3' -didésoxyuridin-Ei '-yl) -hydrogénophosphonate 5. Une solution 2 M d'acide phosphoreux (70,5 ml, 141 mmol.) dans la pyridine anhydre est ajoutée à 3,00 g de 2',3'-didé- soxyuridine 6 (14,1 mmol.) et est traité avec 9,6 ml de chlorure de pivaloyle (77,9 mmol.). Après 3 heures de réaction, une solution aqueuse 1 M de bicarbonate de triéthylammonium est ajoutée jusqu'à neutralisation et le solvant est évaporé sous pression réduite. L'huile obtenue est chromatographiée sur colonne de gel de silice (éluent MeOH (0-35%) dans CH2Cl2) pour conduire à 5. Le produit est repris dans du méthanol et est filtré sur filtre Millipore. L'évaporation du solvant donne 4,17 g (78%) de 5 (forme triéthylammonium) suffisamment pur pour la suite de la synthèse. Un échantillon de plus grande pureté est obtenu après une purification supplémentaire par chromatographie sur couche mince de gel de silice utilisant un mélange d'isopropanol, ammoniaque, eau (8:1:1:) comme éluant. Le produit sous forme ammonium est extrait de la silice avec du méthanol, le solvant est chassé par évaporation et le résidu est repris à l'eau, filtré sur filtre Millipore et lyophilisé. 5 CLHP: TR = 172s (99,9%) (3% CH3CN/AcONH4 0,1 M). UV (H2O) : X max 262 nm (E 9940) À min 230 nm (E 2080) SM (FAB négatif, GT) : 275 (M) RMN H (DMSO-d6) :6 = 1,78-2,05 (m, 3H, H-2',3',3'') ; 2,18-2,45 (m, 1H, H-2") ; 3,65-3,95 (m, 2H, H-5',S'') ; 4,11 (m, 1H, H-4') ; 5,55 (d, 1H, H-5, J = 8,1 Hz) ; 5,95 (dd, 1H, H-1', J = 6,8 et 3,8 Hz), 6,63 (d, 1H, HP, J = 592 Hz) ; 7,87 (d, 1H, H-6, J = 8,1 Hz) ppm RMN P (DMSO-d6) : 6 = 1,596 ppm. O-(5'-0-(4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3'yl) hydrogénophosphonate 7. Une solution de 5,65 g (83,0 mmol.) d'imidazole dans 70 ml d'acétonitrile est traitée à 0 C par 2,22 ml (25,4 mmol.) de trichlorure de phosphore et 13,0 ml (92,2 mmol.) de triéthylamine durant 30'. Ce mélange est additionné à 4,36 g (8,47 mmol.) de 5'-0-(4-méthoxytrityl) 2'-désoxythymidine 8 dans 70 ml d'acétonitrile. La phosphorylation est laissée 3 h et 2 ml d'eau sont ajoutés. La solution est concentrée sous pression réduite, reprise avec une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium et extraite avec du CH2Cl2. La phase organique est séchee sur Na2SO4 et évaporée. L'huile obtenue est purifiée sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-20%) dans CH2Cl2) pour donner 4,2 g (86%) du nucléotide 7 sous forme acide. 7 UV (EtOH 95) :R max 265 nm (E 12000) À min 249 nm ( 9200) À inflex 229 nm (E 19300) SM (FAB négatif, GT) : 576 (M) RMNH (DMSO-d6) : # = 1,38 (s, 3H, CH3), 2,33 (m, 1H, H-2') ; 2,72 (m, 1H, H-2'') ; 3,16 (dd, 1H, H-5', J = 2,5 et 10,3 Hz) ; 3,27 (dd, 1H, H-5'', J = 3,8 et 10,2 Hz) 3,73 (s, 3H, CH3OTr) ; 4,07 (m, 1H, H-4') ; 4,76 (m, 1H, H-3') ; 6,19 (t, 1H, H-1', J = 6,9 Hz) ; 6,60 (d, 1H, HP, J = 590 Hz) ; 6,85-7,47 (m, 14H, Tr) ; 11,4 (sl, 1H, NHCO) ppm RMN37P (DMSO-d6) : 6 = -0,315 ppm. o-(3'-o-(4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-5'-yl) hydrogénophosphonate 9. Ce composé a été préparé selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 7. Ainsi, 1,40 g (2,72 mmol.) de 3'-O-(4-méthoxytrity1) 2-désoxythymidine 4 conduit à 1,28 g (69%) du nucléotide 9 sous forme de triéthylammonium apres évaporation en présence de triéthylamine. 9 UV (EtOH) : À max 264 nm (E 11700) À min 250 nm (E 10700) À inflex 228 nm (E 18300) SM (FAB négatif, GT) : 576 (M)-, 125 (T) RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,12 (t, 9H, (CH3CH2)3N, J = 7,3 Hz) ; 1,55 (dd, 1H, H-2', J = 5,2 et 13,1 Hz) ; 1,73 (s et m, 4H, CH3 et H-2'') ; 2,92 (q, 6H, (CH3CH2)3N, J = 7,2 Hz) ; 3,36 (m, 1H, H-5') ; 3,59 (m, 1H, H-5'') ; 3,73 (s, 3H, CH30) ; 3,81 (m, 1H, H-4') ; 4,20 (d, 1H, H-3', J = 4,7 Hz) ; 6,23 (dd, 1H, H-l', J = 5,4 et 8,7 Hz) ; 6,55 (d, 1H, HP, J = 643 Hz) ; 6,90-7,60 (m, 14H, Tr) ; 8,22 (s, 1H, H-6) ; 11,2 (sl, 1H, NHCO) ppm RMN37P (DMSO-d6) :6 = -0,812 ppm. O,O-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) phosphate 10.(Composé I) Une solution de 2,98 g d'hydrogénophosphonate 5 (7,90 mmol., forme triéthylammonium) et de 1,51 g (7,12 mmol.) 2',3'-didé- soxyuridine 6 dans 55 ml de pyridine est traitée par 2,4 ml (19,5 mmol.) de chlorure de pivaloyle pendant 2 h. Le dinucléoside hydrogénophosphonate intermédiaire est alors oxydé à l'aide de 45 ml d'une solution d'iode 2 M dans le mélange pyridine, eau, tétrahydrofuranne (8:40:2). Le solvant est partiellement évaporé avant que le milieu réactionnel ne soit dilué avec du dichlorométhane et extrait avec une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium. La phase aqueuse est évaporée et le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant, MeOH (0-40%) dans CH2Cl2). Les fractions appropriées sont évaporées, reprises avec du méthanol et filtrées sur filtre Millipore. Une dernière évaporation du solvant en présence de triethylamine donne 3,2 g (77%) du dinucléoside 10. Un échantillon analytique est obtenu après purification par CLHP semi-préparative (colonne nucléosil C181 éluant 2% CH3CN dans H20), filtration sur filtre Millipore et lyophilisation dans l'eau. 10 CLHP : TR 776 s (99,5%) (3% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : À max 262 nm (E 17900) À min 231 nm (E 1630) SM (FAB négatif, GT) : 485 M, 373 (MH-B) RMN H (DMSO-d6) :6 = 1,80-2,05 (m, 6H, H-2',3',3'') ; 2,17-2,32 (m, 2H, H-2'') ; 3,77 et 3,83 (m et m, 2H et 2H, H-5',5'') ; 4,11 (m, 2H, H-4') ; 5,53 (d, 2H, H-5, J = 8,0 Hz) ; 5,95 (dd, 2H, H-1', J = 6,6 et 3,6 Hz) ; 7,95 (d, 2H, H-6, J = 8,0 Hz) ppm RMN P (DMSO-d6, D2O) :6 = -0,732 ppm. 0-(5'-0-( Q-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3 '-yl) (2,3' -didésoxyuridin-5 '-yl) phosphate 11. Une solution d'hydrogénophosphonate (2,06 g, 3,57 mmol.) 7 et de 2',3'-didésoxyuridine 6 (630 mg, 2,97 mmol.) dans 60 ml de pyridine anhydre est traitée avec 915 ul (7,43 mmol.) de chlorure de pivaloyle durant 3 h. Le milieu réactionnel est alors dilué avec du CH2Cl2, lavé avec une solution aqueuse de NaHCO3 puis avec de l'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4 et concentrée. Le résidu est repris avec 76 ml d'une solution d'iode à 2% dans le mélange pyridine, eau (98:2). Après 30', une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium est ajoutée et l'iode en excès est réduite par addition de thiosulfate de sodium. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le brut chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-30%) dans CCl2). Les fractions appropriées sont rassemblées, évaporées, et le produit obtenu est dissous dans du MeOH pour être passé sur filtre Millipore. Le filtrat est évaporé pour conduire à 1,69 g (72%) de 11 suffisamment pur pour la suite de la synthèse. 11 RMNH (DMSO-d6) : # = 1,34 (s, 3H, CH3 dT) ; 1,67-1,98 (m, 3H, H-2',3',3'' ddU) ; 2,11-2,55 (m, 3H, H-2'' ddU, H-2',2'' dT) ; 3,12 (dl, 1H, H-5' dT, J = 8 Hz) ; 3,26 (dd, 1H, H-5" dT, J = 4 et 10 Hz) ; 3,60-3,90 (m, 2H, H-5'5'' ddU) ; 3,73 (s, 3H, CH3OTr) ; 4,04 (m, 1H, H-4' ddU) ; 4,11 (m, 1H, H-4' dT) ; 4,71 (m, 1H, H-3' dT) 5,48 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,89 (dd, 1H, H-l' ddU, J = 3,8 et 6,6 Hz) ; 6,22 (dd, 1H, H-i' dT, J = 6,0 et 8,2 Hz) ; 6,83-7,45 (m, 14H, MTr), 7,49 (s, 1H, H-6 dT) ; 7,88 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 11,1 (sl, 2NHCO) ppm RMN37P (DMSO-d6) : 6 = 1,836 ppm. 0-(3'-0-( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-5'-yl) O-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) phosphate 12. Ce composé a été obtenu selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 11. Ainsi, 1,18 g (1,74 mmol.) d'hydrogénophosphonate 9 et 307 mg (1,45 mmol.) de 2',3'-didésoxyuridine 6 conduisent à 941 mg (73%) de diester 12 sous forme de triéthylammonium après évaporation en présence de triéthylamine. 12 UV (EtOH) : À max 264 nm (E 18700) À min 245 nm (E 13500) À inflex 230 nm (E 17500) SM (FAB négatif, GT) : 787 (M) , 111(U) RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,08 (t, 9H, (CH3CH2)3N, J = 7,3 Hz) ; 1,39-1,54 (m, 1H, H-2' dT) ; 1,62-2,00 (m, 4H, H-2'' dT, H-2',3',3'' ddU) ; 1,75 (s, 3H, CH3 dT) 2,11-2,30 (m, 1H, H-2' ddU) ; 2,82 (q, 6H, (CH3CH2)3N, J = 7,3 Hz) ; 3,40 (m, 1H, H-5'' dT), 3,45-3,82 (m, 3H, H-5'' dT, H-5',5'' ddU) ; 3,73 (s, 3H, CH3O) ; 3,84 (m, 1H, H-4' dT) ; 3,97 (m, 1H, H-4' ddU) ; 4,22 (d, 1H, H-3' dT, J = 5,1 Hz) ; 5,50 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,90 (dd, 1H, H-l' ddU, H = 4,1 et 6,6 Hz) ; 6,24 (dd, 1H, H-1' dT, J = 5,4 et 9,4 Hz) ; 6,85-7,47 (m, 14H, Tr) ; 7,75 (s, 1H, H-6 dT) ; 7,84 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,0 Hz), 11,2 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMNP (DMSO-d6) : ô = 0,810 ppm. O,O'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-méthyl phosphate 13. (Composé 2) Le diester 10 (245 mg, 0,417 mmol.) en solution dans 12,5 ml de pyridine est traité avec 85 ul (2,09 mmol.) de MeOH et avec 309 mg (1,04 mmol.) de 1-(2-mésitylènesulfonyl) 3-nitro 1,2,4 triazole. Après 2 h de réaction, une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium est ajoutée et le solvant est évaporé sous pression réduite. La purification est réalisée par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-7%) dans CH2Cl2) puis par CLHP semi-préparative (colonne nucléosil Cul8, éluant : CH3CN (18%) dans l'eau) pour conduire à 28 mg (13%) de triester 13 après filtration sur filtre Millipore et lyophilisation dans l'eau. 13 CLHP : TR = 308s (98,4%) (15% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : À max 261 nm (E 18300) À min 231 nm (E 4600) SM (FAB positif, GT) : 501 (M+H)+, 389 (M-B)+, 113 (BH2)+ ; (FAB négatif, GT), 499 (M-H) RMN H (DMSO-d6) : ô = 1,65-2,12 (m, 6H, 2H-2',3',3'') ; 2,22-2,39 (m, 2H, 2H-2') ; 3,678 et 3,684 (d et d, 3H, CH30P, J = 11,2 et 11,2 Hz) ; 3,95-4,25 (m, 6H, 2H-4',5',S'') ; 5,59 (d, 2H, 2H-5, J = 8,1 Hz) ; 6,00 (m, 2H, 2H-1') ; 7,648 et 7,655 (d et d, 1H et 1H, 2H-6, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN37P : 6 = 0,571 ppm. O,O'-bis (2', 3 ' -didéseoxyuridin-5'-yl) O-(2-méthoxyéthyl) phosphate 14 (Composé 4) Un mode opératoire identique à celui décrit pour la synthèse de 13 à été employé pour obtenir 14. La réaction de 10 (300 mg, 0,511 mmol.) avec 200 u1 (2,6 mmol.) de méthoxyéthanol donne 171 mg (62%) de 14 après lyophilisation dans l'eau. La purification a été réalisée par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : EtOH (0-10%) dans CH2Cl2) puis sur colonne de silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-25%) dans l'eau. 14 CLHP : TR = 600 s (100%) (15% CH3CN/AcONH4 0,1M) UV (H2O) : X max 261 (E 18600) À min 230 (E 4400) SM (FAB negatif, GT) : 543 (M-H) , 485 (M-CH3OCH2CH2) RMNH (DMSO-d6) : # = 1,71-1,87 (m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,09 (m, 4H, 2H-2',3''); 1,99 (m, 2H, 2H-2''); 3,25 (s, 3H, CH30); 3,50 (m, 2H, CH3OCH2); 4,02-4,25 (m, 8H, CH2CH2OP, 2H-4',5',5''); 5,58 (d, 2H, H-5, J = 8,1 Hz); 5,99 (dd, 2H, 2H-1', J = 4,1 et 7,0 Hz); 7,65 (d, 2H, 2H-6, J = 8,2 Hz); 11,26 (sl, 2H, 2NHCO) RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,346 ppm. O,O'-Bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) 0-(2-cyanoéthyl) phosphate 15 (Composé 5) Ce composé a été prépare selon le même mode opératoire que celui utilise lors de la synthèse de 13 La réaction de 234 mg (0,481 mmol.) de 10 avec 165 ul de 3-hydroxypropionitrile conduit à 140 mg (54%) de 15 après deux purifications sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-10%) dans CH2Cl2) et lyophilisation dans l'eau. 15 CLHP : TR = 464 s (100%) (15 CH3CN/AcONH4 0.1M) UV (H2O) : X max 261 nm (E 19300) À min 230 nm (E 4400) SM (FAB positif, GT) : 540 (M+H) +; (FAB négatif, GT) 538 (M-H) , 485 (M-CH2CH2CN) RMN1H (DMSO-d6) : ô = 1,71-i,87(m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,10 (m, 4H, 2H-2',3"); 2,28 (m, 2H, 2H-2"); 2,92 (t, 2H, CH2CN, J = 5,9 Hz); 4,10-4,30 (m, 8H, CH2CH2CN, H-4',5',5"); 5,60 (d, 2H, H-5, J = 8,1 Hz). 6,00 (m, 2H, 2H-1'); 7,63 (d, 2H, 2H-6, J = 8,0Hz); 11,30 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,875 ppm. O,O'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-pivaloyl-2-thio éthanol) phosphate 16 (Composé 6) La réaction de 311 mg (0,529 mmol.) de 10 avec 430 mg (2,65 mmol.) de S-pivaloyl 2-thioéthanol en présence de 391 mg (1,32 mmol.) 1 -(2-mesitylènesulfonyl) 3-nitro 1,2,4-triazole dans la pyridine (10,6 ml) a été réalisée en 5h. Le mélange réactionnel a été dilué avec une solution aqueuse 1M de bicarbonate de triéthylammonium avant d'être extrait avec du CH2Cl2. La phase organique a été lavée avec de l'eau, séchée sur sulfate de sodium, concentrée sous pression réduite puis purifiée sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-4%) dans le CH2Cl2) pour conduire à 254 mg (76%) de 16 après lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne. 16 CLHP : TR = 532 s (98,8%) (30% CH3CN/AcNH4 0,1M) UV (H2O) : X max 261 nm (E 17500) À min 230 nm (E 8000) SM (FAB positif, GT, NBA) : 631 (M+H)+ RMNH (DMSO-d6) : # = 1,16 (s, 9H, (CH3)3C); 1,71-1,89 (m, 2H, 2H-3'); 1,89-2,09 (m, 4H, 2H-2',3"); 2,29 (m, 2H, 2H-2"); 3,10 (t, 2H, SCH2, J = 6,5 Hz); 4,03 (m, 2H, CH2CH2OP); 4,06-4,27 (m, 6H, 2H-4',5',5"); 5,586 (d, 1H, 1H-5, J = 8,1 Hz); 5,741 (d, 1H, 1H-5, J = 8,0 Hz); 6,00 (m, 2H, 2H-1'); 7,638 ( d, 1H, 1H-6, J = 7,8 Hz); 7,641 (d, 1H, 1H-6, J = 8,0 Hz); 11,31 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN P (DMSO-d6) : ô = -0,866 ppm. 0,0'-bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) o- (2- (4-nitrobenzamido) éthyl) phosphate 17 (Composé 8) Ce composé a été obtenu en suivant un mode opératoire analogue à celui décrit pour la synthèse de 13. La réaction de 300 mg (0,511 mmol.) de 10 avec 537 mg (2,56 mmol.) de N-(2-hydroxyéthyl) 4-nitrobenzamide conduit à 205 mg (59%) du composé 17 après deux purifications sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-6%) dans CH2Cl2 et lyophilisation dans un mélange eau Idioxanne. 17 CLHP : TR = 324 s (98,3%) (25% CH3CN/AcNH4 0,1M) UV (H2O) : A max 261 nm (E 25200) À min 230 nm (E 7500) SM (FAB positif, NBA) : 679 (M+H) RMN H (DMSO-d6) : # = 1,68-1,87 (m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,05 (m, 4H, 2H-2',3"); 2,25 (m, 2H, 2H-2"); 3,55 (m, 2H, NHCH2); 4,05-4,24(m, 8H, 2H-4',5',5",CH2CH2OP); 5,57 (d, 2H, 2H-5, J = 8,0 Hz); 5,96 (m, 2H, 2H-1'); 7,60 (d, 1H, 1H-6, J = 8,5 Hz); 7,62 (d, 1H, 1H-6, J = 8,3 Hz); 8,06 (d, 2H, 2H arom., J = 8,9 Hz); 8,31 (d, 2H, 2H arom., J = 8,7 Hz); 8,99 (t, 1H, -CH2, J = 5,5 Hz); 11,30 (sl, 2H, NHCO) ppm RMN31P (DMSO-d6) : # = -0,398 ppm. O,O'-bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O- (benzyloxycarbonyl L-sérinyl éthylester) phosphate 18 (Composé 9) La méthode de synthèse de ce composé est identique à celle décrite pour le triester 13 Ainsi, 300 mg (0,511 mmol.) du diester 10 et 824 mg (3,08 mmol.) d'éthylester de la N-benzyloxycarbonyl L-sérine conduisent à 130 mg (35%) de 18 après plusieurs purifications sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-8%) dans CH2Cl2) ainsi que sur silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-40%) dans l'eau) et lyophilisation dans un mélange eau/dioxanne. 18 CLHP : TR = 564 s (100%) (30% CH3CN/AcNH4 0,1M) UV (H2O) : X max 261 nm (E 19700) À min 230 nm (E 5800) SM (FAB positif, GT) : 736 (M+H) RMN H (DMSO-d6) : # = 1,16 (t, 3H, CH3CH2, J = 7,1 Hz); 1,70-1,87 (m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,09 (m, 4H, 2H-2',3"); 2,27 (m, 2H, 2H-2"); 4,03-4;30 (m, 10H, 2H-4',5',5", CH,-20, CHCH2OP); 4,43 (m, 1H, NHCHCH2); 5,06(s, 2H, CH2Ph); 5,58 (d, 2H, 2H-5, J = 8,1 Hz); 5,99 (m, 2H, 2H-1'); 7,26-7,42 (m, 5H, Ph); 7,620 (d,1H, 1H-6, J = 8,0 Hz); 7,624 (d, 1H, 1H-6, J = 8,2); 7,93 (d, 1H, NHCHCH2, J = 8,2 Hz); 11,30 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN31P (DMSO-d6) : ô = -0,855 ppm. O,O'-bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(O-(4-méthoxytrityl) 2-oxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 19. Le diester 10 (175 mg, 0,298 mmol.) et 636 mg (1,49 mmol.) de mono-O-(4-méthoxytrityl) dithiodiéthanol dans 10 ml de pyridine sont traités avec 221 mg (0,746 mmol.) de i-(2-mésitylè- nesulfonyl) 3-nitro 1,2,4 triazole. Après 2 h, le milieu réactionnel est dilué avec du CH2Cl2 et lavé avec une solution aqueuse de NaHCO3 puis avec de l'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4 et concentrée sous pression réduite. Le brut obtenu est chromatographié sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-4%) dans CH2Cl2) pour conduire à 168 mg (63%) de triester protégé 19. 19 UV (EtOH) : À max 261 nm (E 20600), 232 nm (E 19700) À min 244 nm (E 16200), 227 nm SM (FAB, positif, GT) : 895 (M+H)+, 273 (MTr) + RMN1H (DMSO-d6) : ô = 1,75-1,88 (m, 2H, 2H-3'), 1,91-2,08 (m, 4H, 2H-2',3'') ; 2,23-2,48 (m, 2H, 2H-2'') ; 2,88 (t, 2H, CH2CH20P, J = 6,3 Hz) ; 2,92 (t, 2H, CH2CH2OMTr, J = 6,4 Hz) ; 3,24 (t, 2H, CH2CH2OMTr, J = 6,0 Hz) ; 3,74 (s, 3H, CH30) ; 4,07-4,18 (m, 8H, 2H-4',5',5'', CH2CH2OP) 5,569 et 5,572 (d et d, 2H, 2H-5, J = 8,1 et 8,1 Hz) 5,99 (m, 2H, 2H-1') ; 6,88-7,45 (m, 14H, Tr) ; 7,62 (d, 2H, 2H-6, J = 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN P (DMSO-d6) : ô = -0,601 ppm. 0-(5 '-0-( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3'-yl) 0-(2'.3' -didésoxyuridin-5 '-yl) O-(S-(O-(4-méthoxytrityl) 2-oxyéthylsulfidyl) 2-(thioéthyl) phosphate 20. Ce composé a été obtenu selon le même mode opératoire utilisé lors de la synthèse de 19. Ainsi 355 mg (0,450 mmol.) du diester 17 conduisent à 310 mg (58%) de triester 20. 20 SM (FAB positif, NBA) : 1197 (M+H)+, 273 (MTr) RMN1H (DMSO-d6) : ô = 1,44 et 1,46 (s et s, 3H, CH3 dT) 1,65-1,74 (m, 1H, H-3' ddU) ; 1,75-2,05 (m, 2H, H-2',3" ddU) ; 2,17-2,34 (m, 1H, H-2' ddU) ; 2,40-2,57 (m, H-2',2" dT) ; 2,81 (m, 2H, SCH2CH2OP) ; 2,89 (m, 2H, SCH2CH2OMTr) ; 3,15-3,42 (m, 4H, H-5',5'' dT, SCH2CH2OMTr) ; 4,02-4,22 (m, 6H, H-4',5',5'' ddU, H-4' dT, SCH2CH2OP) ; 5,03 (m, 1H, H-3' dT), 5,53 et 5,54 (d et d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 5,93 (m, 1H, H-1' ddU) ; 6,21 (t, 1H, H-1' dT, J = 7,0 Hz) ; 6,82-7,43 (m, 14H, Tr) ; 7,47 (s, 1H, H-6 dT) ; 7,58 et 7,59 (d et d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO dT ddU) ppm RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,689 et -1,748 ppm. O- (5 '-O- ( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3'-yl) O-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) (H(S-pivaloyl 2-thioéthyl) phosphate 21. La réaction de 266 mg (0,377 mmol.) du diester 17 avec 274 mg (1,69 mmol.) de S-pivaloyl 2-thioéthanol selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 19 conduit à 124 mg (55%) du triester 21. 21 RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,13 et 1,14 (s et s, 9H, (CH3)3C) 1,46 et 1,44 (s et s, 3H, CH3 dT) ; 1,65-1,85 (m, 1H, H-3' ddU) ; 1,85-2,08 (m, 2H, H-2',3'' ddU) ; 2,18-2,40 (m, 1H, H-2'' ddU) ; 2,42-2,60 (m, H-2',2'' dT) ; 3,05 (m, 2H, SCH2CH2) ; 3,17-3,45 (m, 2H, H-5',5'' dT), 3,73 (s, 3H, CH30 Tr) ; 3,92-4,25 (m, 6H, H-4' dT, H-4',5',5'' ddU, SCH2CH2OP) ; 5,04 (m, 1H, H-3' dT) ; 5,54 et 5,55 (d et d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz et 8,1 Hz) ; 5,94 (m, 1H, H-1' ddU) ; 6,21 (t, 1H, H-1' dT, J = 7,0 Hz) ; 6,85-7,45 (m, 14H, Tr) ; 7,49 (s, 1H, H-6 dT) ; 7,598 et 7,602 (d et d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 11,4 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,749 et -1,854 ppm. O-(3'-O-(4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-5'-yl) 0-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(O-(4 méthoxytrityl) 2-oxyéthylsulfidyl) 2-(thioéthyl) phosphate 22 Le même mode opératoire que celui décrit lors de la synthèse de 19 a été employé. Ainsi, 400 mg (0,449 mmol.) de diester 12 conduisent à 348 mg (65%) du triester 22. 22 UV (EtOH) : A max 263 nm (E 22000) À min 250 nm (E 19700) À max 232 nm (E 34400) À min 227 nm (E 33500) + SM (FAB positif, NBA) : 1197 (M+H)+, 273 (MTr) RMNH (DMSO-d6) : 6=1,55-2,07 (m, 5H, H-2',2" dT, H-2',3',3" ddU) ; 1,69 (s, 3H, CH3 dT) ; 2,78 (t, 2H, MTrOCH2CH2, J = 6,3 Hz) ; 2,88 (t, 2H, POCH2CH2, J = 5,8 Hz) ; 3,21 (t, 2H, MTrOCH2CH2, J = 5,7 Hz) ; 3,67-4,17 (m, 8H, H-4',5',5" dT, H-4',5',5'' ddU, POCH2CH2) ; 3,72 (s, 6H, 2CH30 Tr) ; 4,20 (m, 1H, H-3' dT) ; 5,53 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,95 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 3,8 et 6,7 Hz) ; 6,19 (dd, 1H, H-1' dT, J = 6,4 et 8,7 Hz) ; 6,85-6,43 (m, 28H, 2Tr) ; 6,44 (s, 1H, H-6 dT) ; 5,57 et 5,59 (d et d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN P (DMSO-d6) : ô = -0,662 et - 0,722 ppm. O-(2'-désoxythymidin-3'-yl) 0-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) phosphate 23 (Composé 10) Le composé protégé 11 (200 mg ; 0,254 mmol.) est traité par 30 ml/mmol. d'un mélange acide acétique, eau (8:2) pendant 3 h. Le solvant est évaporé. Après coévaporation avec de l'eau, le brut obtenu est dissous dans l'eau, lavé avec du CH2Cl2 et concentré sous pression réduite. La purification est réalisée par chromatographie semi-préparative sur couche mince de silice (éluant isopropanol, ammoniac, eau (8:1:1). Le produit est extrait de la silice avec du MeOH et la solution filtrée sur filtre Millipore. Une lyophilisation dans l'eau donne 47 mg (35%) de 23. 23 CLHP : TR 412s (98,1%) (8% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : A max 263 nm (E 18700) À min 232 nm (E 4200) SM (FAB négatif GT) : 515 M RMNiH (DMSO-d6) : 6 = 1,72-2,04 (m, 3H, H-2',3',3'' ddU) ; 1,76 (s, 3H, CH3 dT) ; 2,04-2,18 (m, 1H, H-2', dT) 2,18-2,33 (m, 2H, H-2ll ddU, H-2ll dT) ; 3,56 (m, 2H, H-5',5'' dT) ; 3,78 (m, 2H, H-5',5'' ddU) ; 3,92 (dl, 1H, H-4' dT, J = 2,8 Hz) ; 4,11 (m, 1H, H-4' ddU) ; 4,58 (m, 1H, H-3' dT) ; 5,48 (sl, 1H, OH, dT) ; 5,55 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,94 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 7,0 et 3,8 Hz) ; 6,12 (dd, 1H, H-11 dT, J = 6,1 et 7,7 Hz) ; 7,66 (s, 1H, H-6 dT) ; 7,95 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 9,4 (sl, 2NHCO, NH) ppm RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,346 ppm. O,O'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(2-hydroxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 24 (Composé 7) La déprotection de 150 mg (0,168 mmol.) de 19 par l'acide acétique a été réalisée de manière analogue à celle décrite lors de la synthèse de 23. Une chromatographie sur colonne de silice (éluant : MeOH (0-10%) dans CH2Cl2) suivie d'une purification par CLHP semi-préparative (colonne Nucléosil C78 éluant : 20% CH3CN/H2O) conduit à 45 mg (43%) de 24 après lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne. 24 CLHP : TR = 372s (99,1%) (20% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : X max 262 nm (E 18500) À min 231 nm (E 4400) SM (FAB positif, GT ou NBA) : 623 (M+H) + RMNH (DMSO-d6) : # = 1,70-2,12 (m, 6H, 2H-2';7,3',3'') 2,18-2,40 (m, 2H, 2H-2ll) ; 2,79 (t, 2H, CHzCH2OH, J = 6,3 Hz), ; 2,98 (t, 2H, CH2CH20P, J = 6,3 Hz) ; 3,60 (m, 2H, CH2CH2OH) ; 4,05-4,20 (m, 8H, 2H-4l,5',5'', CH2CH2OP) ; 4,91 (t, 1H, OH, J = 5,4 Hz) ; 5,59 (d, 2H, 2H-5, J = 8,0 Hz) ; 6,01 (m, 2H, H-1') ; 7,65 (d, 2H, 2H-6, J = 8,1 Hz), 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm. RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,582 ppm O-(2'-désoxythymidin-3'-yl) O-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) o-(s-(2-hydroxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 25 (Composé 73) Le traitement de 290 mg (0,240 mmol.) de 20 par l'acide acétique selon le mode opératoire décrit précédemment lors de la synthèse de 23 conduit, après purification par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-10%) dans CH2Cl2) et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne, à 80 mg (51%) de 25. 25 CtHP : TR = 584s (52,4%) et 640s (46,1%) (18% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : À max 263 nm (E 18300) À min 232 nm (E 4300) SM : (FAB positif, GT) : 653 (M+H)+, 577 (M-SCH2CH2O + (FAB positif NBA) 653 (M+H) + RMN H (DMSO-d6) : ô = 1,73-1,91 (m, 1H, H-3' ddU) ; 1,77 (s, 3H, CH3 dT) ; 1,91-2,12 (m, 2H, H-2',3'' ddU) 2,22-2,47 (m, 3H, H-2' ddU, H-2',2" dT) ; 2,801 et 2,807 (t et t, 2H, SCH2CH2OH, J = 6,38 et 6,37 Hz) ; 3,00 (t, 2H, SCH2CH2OP, J = 6,2 Hz) ; 3,55-3,70 (m, 4H, H-5',5" dT, OCH2CH2OH) ; 4,07 (m, 1H, H-4' dT) ; 4,11-4,34 (m, 5H, H-4';5';5'' ddU, SCH2COP) ; 4,88 (sl, 1H, OH) ; 4,96 (tl, 1H, H-3' dT, J = 5,8 Hz) ; 5,61 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 6,01 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 6,8 et 4,2 Hz) 6,19 (dd, 1H, H-1 dT, J = 6,3 et 8,0 Hz) ; 7,65 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 7,68 (s, 1H, H-6 dT) ; 11,3 (sl, 2H, 2HNCO) ppm RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,658 et -1,687 ppm. O- (2 '-désoxythymidin-3 '-yl) O-(2',3'-didesoxyuridin-5'-yl) O-(S-pivaloyl 2-thioéthyl) phosphate 26 (Composé 12) La déprotection de 21 (164 mg ; 0,176 mmol.) selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 23 conduit à 50 mg (43%) de 26 après chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-6%) dans CH2Cl2) et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne. 26 CtHP : TR = 520s (59,9%) et 612s (40,1%) (30% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : A max 262 nm (E 18300) À min 233 nm (E 7200) SM (FAB positif, GT) : 661 (M+H) , 577 (M-(CH3)3CCO+H) 127 (TH2)+, 113 (UH2)+ RMN1H (DMSO-d6) : 1,18 (s, 9H, (CH3)3C) ; 1,72-1,93 (m, 1H, H-3' ddU) ; 1,79 (s, 3H, CH3 dT) ; 1,93-2,15 (m, 2H, H-2',3'' ddU) ; 2,22-2,48 (m, 3H, H-2'' ddU, H-2',2'' dT) ; 3,14 (t, 2H, CH2S, J = 6,3 Hz) ; 3,62 (m, 2H, H-5',5'' dT) ; 4,03-4,18 (m, 3H, H-4' dT, SCH2CH2) ; 4,18-4,32 (m, 3H, H-4',5',5'' ddU) ; 4,97 (m, 1H, H-3' dT) ; 5,26 (sl, 1H, OH dT) ; 5,62 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 6,02 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 6,8 et 6,1 Hz) 6,20 (dd, 1H, H-1' dT, H = 6,3 et 8,0 Hz) ; 7,67 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 7,70 (s, 1H, H-6 dT) ; 11,4 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN37P (DMSO-d6) : 6 = -1,817 et -1,764 ppm. 0-(2' -Désoxythymidin-Ei '-yl) 0-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(2-hydroxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 27 (Composé 14) La déprotection a été réalisée de façon analogue à celle utilisée lors de la synthèse de 23. Ainsi, 298 mg (0,249 mmol.) de 22 conduisent à 85 mg (53%) de 27 après purification par chromatographie sur colonne de silice (éluant : MeOH (0-10%) dans CH2Cl2). 27 CLHP : TR = 560s (99,7%) (18% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : X max 262 nm (E 18300) À min 232 nm (E 3700) SM (FAB positif, GT) : 653 ((M+H)+, 577 (M-OCH2CH2S+H) RMN H (DMSO-d6) : # = 1,70-2,22 (m, 5H, H-2',3',3" ddU, H-2',2'' dT) ; 1,78 (s, 3H, CH3 dT) ; 2,22-2,43 (m, 1H, H-2'' ddU) ; 2,79 (t, 2H, HOCH2CH,, J = 6,3 Hz) ; 2,98 (t, 2H, POCH2CH2, J = 6,2 Hz) ; 3,63 (m, 2H, HOCH2CH2) ; 3,92 (m, 1H, H-4' dT) ; 4,08-4,33 (m, 8H, H-3',5',5'' dT, H-4',5',5'' ddU, POCH2CH2) ; 4,90 (t, 1H, HOCH2CH2, J = 5,4 Hz) ; 5,46 (d, 1H, OH dT, J = 4,1 Hz) ; 5,59 (d, 1H, H-5 ddU, J = 7,9 Hz) ; 5,99 (m, 1H, H-1' ddU) ; 6,21 (t, 1H, H-1' dT, J = 6,9 Hz) ; 7,48 (s, 1H, H-6, dT) ; 7,64 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO, ddU dT) ppm RMN37P (DMSO-d6) : 6 = -0,543. RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,543. 0,0'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-pivaloyloxyméthyl phosphate 28 (Composé 3) Le dimère phosphodiester 10 est mis sous forme de sodium par échange sur une colonne DOWEX W50 Na et est ensuite lyophilisé. Une suspension de 200 mg (394 mol.) du produit pulvérulent obtenu dans 10 ml d'acétonitrile est mise en réaction avec 940 mg (3,88 mmol.) d'iodure de pivaloyloxyméthyle à reflux. Après 15', le reflux est arrêté et le milieu réactionnel est dilué avec une solution de bicarbonate de triéthylammonium.Le solvant est évaporé et le brut purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-5%) dans CH2Cl2) puis sur colonne de silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-30%) dans l'eau) pour conduire 45 mg (19 ) du composé 28 après filtration sur filtre Millipore et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne. 28 CLHP : TR = 600s (98,5%) (25% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : X max 261 nm (E 17900) À min 231 nm (E 3800) SM (FAB positif, GT) 601 (M+H)+, 113 (BH2)+ RMNH (DMSO-d6) : ô = 1,00 (s, 9H, (CH3)3C) ; 1,62-1,82 (m, 2H, 2H-3') ; 1,82-2,02 (m, 4H, 2H-2',-3'') ; 2,11-2,30 (m, 2H, 2H-2'') ; 4,01-4,20 (m,-6H, 2H-4',5',5'') ; 5,44 (d, 2H, 2H-5, J = 7,8 Hz), 5,45 (d, 2H, OCH2OP, J = 13,7 Hz) ; 5,85 (dd, 2H, 2H-1', J = 4,2 et 6,8 Hz) ; 7,49 (d, 2H, 2H-6, J = 8,1 Hz) ; 10,5 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN P (DMSO-d6) 6 = -1,822 ppm. 0-(2' -désoxythymidin-3 '-yl) 0-(2',3' idésoyuridin- '-yl) O-pivaloyloxyméthyl phosphate 29 (Composé il) Le diester 11 est mis sous forme sodium par passage sur une colonne DOWEX W50 Na et est lyophilisé dans l'eau. Le produit pulvérulent obtenu (308 mg, 0,380 mmol.) est mis en suspension dans 10 ml d'acétonitrile et est traité avec 946 mg (0,888 mmol.) d'iodure de pivaloyloxyméthyle. Après 2 h, la réaction est achevée (détritylation partielle du produit d'arrivé). Du MeOH (1 ml) est ajouté et après 15' (détritylation totale) le solvant est évaporé. Le brut est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-12%) dans CH2Cl2 puis sur colonne de silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-40%) dans l'eau).Le composé 29 (87 mg, 36%) est isolé après filtration sur filtre Millipore et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne. 29 CLHP : TR = 428s (46,3%) et 484s (51,8%) (25% CH3CN/AcONH4 0,1 M) UV (H2O) : X max 262 nm (E 18900) À min 232 nm (E 5700) SM (FAB positif, GT) : 631 (M+H)+, 127 (TH2)+, 113 (UH2) + RMN H (DMSO-d6) : 6=1,67(s, 9H, (CH3)3C), 1,74-1,90 (m, 1H, H-3' ddU) ; 1,77 (s, 3H, CH3 dT) ; 1,90-2,12 (m, 2H, H-2',3' ddU) ; 2,23-2,45 (m, 3H, H-2' ddU, H-2',2'' dT) 3,60 (t, 2H, H-5',5'' dT, J = 4,3 Hz) ; 4,07 (m, 1H, H-4' dT) ; 4,12-4,30 (m, 3H, H-4',5',S'' ddU) ; 4,97 (m, 1H, H-3' dT) ; 5,25 (m, 1H, OH dT) ; 5,60 (d, 1H, H-5 ddU, J = 7,9 Hz) ; 5,627 et 6,631 (d et d, 2H, OCH2OP, J = 12,7 et 12,2 Hz) ; 6,00 (m, 1H, H-1' ddU) ; 6,19 (m, 1H, H-1' dT) ; 7,63 et 7,65 (d et d, 1H, H-6 ddU, J = 8,2 et 8,2 Hz) ; 7,68 (s, 1H, H-6 dT) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm RMN37P (DMSO-d6) : ô = -2,894 et -2,938. Tableau Composé R'1 R'2 1 ddU cation 2 ddU -CH3 3 ddU -CH2O-CO-C(CH3)3 4 ddu -CH2CH2OCH3 5 ddU -CH2CH2CN 6 ddU -CH2CH2S-CO-C(CH3)3 7 ddU -CH2CH2S-SCH2CH2OH 8 ddU -cH2cH2-NH-c No2 sCOOEt 9 ddU NH-COOCH2 O 10 3'-dT cation 11 3'-dT -cH2o-co-c(CH3)3 12 3'-dT -CH2CH2S-CO-C(CH3)3 13 3'-dT -CH2CH2S-SCH2CH2OH 14 5'-dT -CH2CH2S-SCH2CH2OH Les composés de l'invention ont été soumis à des essais pharmacologiques montrant leur intérêt dans le traitement de maladies virales. - Evaluation de l'activité anti-VIH 1 sur les cellules CEM VIH = virus de l'immunodéficience humaine CEM = celiule lymphoblastoïde T humaine. La réplication du VIH-1 (isolat LAI) dans les cellules CEM est mesurée par un dosage de la réverse transcriptase (RTase) dans le surnageant de culture après 5 jours d'infection. Cette activité traduit la présence de virus libéré par les cellules. Après l'adsorption du virus, les composés testés sont ajoutés à différentes concentrations dans le milieu de culture. L'activité antivirale est exprimée par la concentration la plus faible de composé qui diminue la production de RTase d'au moins 50 % (ED50). L'effet toxique sur les CEM non infectées est apprécié par une réaction colorimétrique basée sur la capacité des cellules vivantes à réduire le bromure de 3-(4,5 diméthylthiazol-2-yl)-2,5 diphényltetrazolium en formazan après 5 jours d'incubation en présence de différentes concentrations des composés. Les résultats sont exprimés par la concentration la plus faible de composé qui provoque une inhibition d'au moins 50 % de la formation de formazan (CD50). Les composés de l'invention ont une ED50 allant de 10 M à 10 M pour une CD50 de 10 M à 10 M. Annexe 1 Annexe 2 6 R : 5'-ddU 5 R : 5'-ddU 10 R1 : 5'-ddU 8 3'-dTMTr 7 3'dTMRTr 11 3'-dTMTr 4 5'-dTMTr 9 5'-dTMTr 12 5'-dTMTr 13 R : 5'-ddU R : CH3 14 5'-ddU CH2CH2OCH3 15 5'-ddU CH2CH2CN 16 5'-ddU CH2CH2SCOC(CH3)3 17 5'-ddU CH2CH2NHCOPhNO2 18 5'-ddU CH2CH(COOEt)NHCOOCH2Ph 19 5'ddU CH2CH2SSCH2Ch2OMTr 20 3'-dTMTr CH2CH2SSCH2CH2OMTr 21 3'-dTMTr CH2CH2SCOC(CH3)3 22 5'-dTMTr CH2CH2SSCH2CH2OMTr Annexe 2 (suite) 19 20 21 22 24 R3 : 5'-ddU R2 : CH2CH2SSCH2CH2OH 25 3'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH 26 3'-dT CH2CH2SCOC(CH2)3 27 5'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH Revendications 1. Dérivés de la ddU répondant à la formule dans laquelle R'1 est la 5'-ddU, la 3'-dT ou la 5'-dT, R'2 est un cation, le radical méthyle, le radical -CH2O-CO C (CH3)3, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2CN, -CH2CH2S-CO-C C(CH3)3 - CH2CH2S - S CH2CH2OH, tes formules des motifs -O-ddU -0-3'-dT et -0-5'-dT étant les suivantes respectivement 2. Médicament caractérisé en ce qu'il contient un composé selon la revendication 1. 3. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient un composé selon la revendication 1 en association avec tout excipient approprié.