FR 2687574 A1 19930827 FR 9202156 A 19920225 NOUVELLE APPLICATION THERAPEUTIQUE DE DERIVES DU PYRIDYLPYRROLOTRIAZOLE CARBOXAMIDE La présente invention concerne une nouvelle application thérapeutique de dérivés du (pyridyl-3)-3 1H,3H-pyrrolo[1,2-c] thiazole carboxamide-7 de formule générale dans laquelle R représente un radical de formule générale pour lequel X est un atome d'oxygène, un radical carbonyle, hydroxyméthylène, carboxamido, méthylènecarbonyle, carbonylvinylène ou vinylènecarbonyle, et Y est un radical carbocyclique ou hétérocyclique aromatique, sous leurs formes stéréoisomères ou leurs mélanges ainsi que leurs sels Des produits de formule générale (I) ou leurs analogues ainsi que leur préparation, ont été précédemment décrits dans les brevets européens EP 115 979, EP 388 309 et américains US 4 906 757 et US 4 783 472 pour leur utilité dans le traitement des allergies, de l'inflammation et de l'inhibition de l'agrégation des plaquettes sanguines, ainsi que dans le traitement des affections dans lesquelles est impliqué le rôle physiologique du PAF-acéter. Les dérivés de pyrrolo[1,2-cthiazole carboxamide de formule générale (I) sous leurs formes stéréoisomères ou leurs mélanges, ainsi que leurs sels, sont utiles pour l'obtention d'un médicament destiné à la prophylaxie et/ou au traitement thérapeutique des infections à rétrovirus, et plus particulièrement du SIDA (syndrome d'immuno-déficience acquise) et de syndromes associés [ARC (AIDS relate & complex)] Par prophylaxie nous sous entendons le traitement des sujets qui ont été exposés aux virus HIVs (human immunodeficiency virus), en particulier les séropositifs asymptomatiques, qui présentent le risque de développer la maladie dans les mois et les années à venir après la primo-infection. Dans la formule générale (I) le symbole Y représente un radical aromatique qui peut être avantageusement choisi parmi les radicaux phényle, thiényle ou pyridyle. Les produits de formule générale (I) pour lesquels X est un radical carboxamido ou hydroxyméthylène sont des produits nouveaux. Ces dérivés du pyrrolo[1,2-c]thiazole carboxamide peuvent être préparés par analogie avec les méthodes décrites dans les références citées ci-dessus. L'activité des produits de formule générale (I) a été mise en évidence de la manière suivante Le Tumour Necrosis Factor (TNF) est responsable'de l'activation du virus HIV notamment dans les cellules chroniquement infectées. Les effets des dérivés du pyrrolo[1,2-c]thiazole carboxamide sur l'induction du virus HIV-1 ont été étudiés sur des lignées cellulaires chroniquement infectées. On utilise des lignées cellulaires U1 obtenues après infection de la lignée promonocytaire, U937, par le virus HIV-1 et sélectionnée selon la capacité à augmenter la production virale en réponse au Phorbol Myristate Acétate (PMA), au TNF et à d'autres médiateurs [Folks et al., Science, 238, 800 (1987)]. L'activité de la reverse transcriptase est utilisée comme un indicateur de la production virale. On analyse ainsi l'effet de concentrations croissantes du produit à étudier sur des lignées cellulaires stimulées. Etude expérimentale Le produit à étudier est mis en solution dans le diméthylformamide (DMF). Les solutions mères sont préparées le jour de l'essai et conservées à une température de 40C. Les dilutions sont réalisées de telle manière que la concentration en DMF soit constante (0,1%). Les cultures cellulaires sont prélevées en phase de croissance exponantielle et remises en culture à raison d'une concentration finale de 2x105 cellules/ml, en présence de différentes concentrations du produit à étudier. 30 minutes après, l'ensemble des cultures est additionné de TNFa ou de PMA. Chaque essai est fait en triple, excepté les contrôles qui sont faits en quadruple. Trois jours après, une fraction de surnageant des cultures est prélevée, et congelée en vue de la mesure de la reverse transcriptase. La mesure de l'activité de la reverse transcriptase est faite par les techniques connues, en double exemplaire [Strebel et al., Nature, 328, 728 (1987)]. Les dérivés du pyrrolo[1,2-c]thiazole carboxamide sont étudiés aux concentrations de 1, 10 et 30 pM. Le TNFa est additionné à raison de 100, 10 ou i Unités/ml. Certains contrôles ne recoivent pas l'activateur. D'autres contrôles ne reçoivent pas le produit à étudier. D'autres ne reçoivent ni le produit ni l'activateur. Résultats : La diminution de la production virale par les dérivés du pyr rolo[1,2-c]thiazole carboxamide-7 est significative et dose-dépendante dans le cas de cellules U1 traitées par le TNFa ou par le PMA. Le jour 3, on observe une diminution d'au moins 50% de l'acti vité de la reverse transcriptase pour les cellules U1 traitées par 10 Unités/ml de TNFa et additionnées d'une concentration de 10uM des produits. Par ailleurs les dérivés de pyrrolo[1,2-c]thiazole carboxamide de formule générale (I) sont sans effet sur la viabilité des cellules quelque soit la concentration utilisée. Les résultats figurent dans le tableau I ci-après. Tableau I Exemple % d'inhibition x Y n0 1 10 1 -CO- M 23 72 2 -CO-CH=CH- M 6 75 3 -0- M 33 71 4 -CO- W 14 68 5 -CH2-Co- M 14 69 6 -CH=CH-CO- M 32 85 7 -CHOH- M 10 50 Exemple Y % d'inhibition x Y n0 1 I 10 8 -CONH- M 14 56 D 9 -O- N 30 47 La présente invention concerne l'obtention dune composition pharmaceutique contenant un dérivé de pyrrolothiazole carboxamide de formule générale (I) sous ses formes stéréoisomères ou leur mélanges, éventuellement sous forme de sel, à l'état pur ou sous forme d'association avec un ou plusieurs diluants ou adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont capables d'inhiber la réplication des rétrovirus et donc de réduire la progression vers la maladie ou de diminuer sa gravité chez les sujets infectés. Notamment dans le cas des infections par le HIV, en inhibant la réplication de ce virus, elles sont capables de réduire la progression vers le SIDA ou de diminuer sa gravité chez les sujets infectés. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont susceptibles d'empécher ou de ralentir l'évolution des sujets infectés par rétrovirus vers un stade aggravé de la maladie. Elles peuvent être utilisées à titre préventif ou curatif. Par "préventif" on entend le fait de prévenir l'évolution chez des sujets présentant une immunodéficience et/ou infectés par rétrovirus. Bien entendu, la constitution de ces compositions sera adaptée au cas particulier du tractus digestif des immunodéprimés. Les compositions peuvent être utilisées par voie orale, paren térale ou rectale. Les compositions stériles pour administration parentérale peuvent être de préférence des solutions aqueuses ou non aqueuses, des suspensions ou des émulsions. Comme solvant ou véhicule, on peut employer l'eau, le propylèneglycol, un polyéthylèneglycol, des huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, des esters organiques injectables, par exemple l'oléate d'éthyle ou d'autres solvants organiques convenables. Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, dispersants et stabilisants. La stérilisation peut se faire de plusieurs façons, par exemple par filtration aseptisante, en incorporant à la composition des agents stérilisants, par irradiation ou par chauffage.Elles peuvent également être préparées sous forme de compositions solides stériles qui peuvent être dissoutes au moment de l'emploi dans un milieu stérile injectable. Comme compositions solides pour l'administration orale peuvent être utilisés des comprimés, des pilules, des poudres ou des granulés. Dans ces compositions, le produit actif selon l'invention (éventuellement associé à un autre produit pharmaceutiquement compatible) est mélangé à un ou plusieurs diluants ou adjuvants inertes, tels que saccharose, lactose ou amidon. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que des diluants, par exemple un lubrifiant tel que le stéarate de magnésium. Comme compositions liquides pour l'administration orale, on peut utiliser des émulsions pharmaceutiquement acceptables, des solutions, des suspensions, des sirops, des élixirs contenant des diluants inertes tels que l'eau ou l'huile de paraffine. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que les diluants, par exemple des produits mouillants, édulcorants ou aromatisants. Les compositions pour administration rectale sont les suppositoires ou les capsules rectales, qui contiennent outre le principe actif, des excipients tels que le beurre de cacao, des glycérides semi-synthétiques ou des polyéthylèneglycols. D'une manière générale, le médecin déterminera la posologie qu'il estime la plus appropriée en fonction de l'âge, du poids et des facteurs propres au produit et au sujet à traiter. Généralement chez l'adulte les doses sont comprises entre 25 et 500 mg par jour. L'exemple suivant donné à titre non limitatif illustre une composition selon l'invention. Exemple - N-(phénoxy-3 phényl) (pyridyl-3)-3 1H,3H-pyrrolo [1 ,2-c]thiazolecarboxamide-7 5 mg - Stéarate de magnésium : 1%..................... 1% 2 mg - ACDISOL : 1%................................ 1% 2 mg - Silice colloïdale : 0,58................ 0,5% 1 mg - Lactose ....................................... 190 mg Les dérivés de pyrrolo[1,2-c]thiazole carboxamide peuvent être préparés comme décrit dans les références citées précédemment. A titre d'exemple les produits des exemples 5 à 8 peuvent être préparés comme décrit ci après Exemple 5 On ajoute, vers 600C, en 10 minutes environ, 2 g de 7-chloroformyl-3-(3-pyridyl) 1H,3H-pyrrolo [1,2-c]thiazole-(RS) à une solution 3 de 1,4 g de 3-benzoylméthylaniline et de 1,9 cm de triéthylamine 3 dans 50 cm de dioxane.Le mélange réactionnel est chauffé 5 heures à 1000C, refroidi vers 250C et le solvant est éliminé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 600C. Le 3 3 résidu est repris par 200 cm de dichlorométhane et 80 cm d'eau distillée. La phase organique est décantée, lavée par 180 cm au 3 total de soude 1N puis 300 cm d'eau distillée. Les extraits orga- niques sont additionnés de 0,5 g de noir décolorant, séchés sur sulfate de magnésium anhydre, filtrés et le solvant est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 450C. 3 Les 2,9 g de résine obtenus sont dissous dans 300 cm d'acétate d'éthyle, filtrés sur une colonne de 3 cm de diamètre contenant 25 3 g de silice (0,02-0,045 mm). La colonne est lavée par 75 cm au total d'acétate d'éthyle. Les filtrats sont rassemblés et concentrés à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 500C. Les 2,5 g de solide crème obtenus sont dissous une 3 première fois dans 25 cm d'acétonitrile bouillant. La solution obtenue est filtrée à chaud. Le filtrat est refroidi à une température voisine de 100C pendant 48 heures. Les cristaux obte 3 nus sont séparés par filtration, lavés par 10 cm au total d'acétonitrile glacé et séchés sous pression réduite (13,5 Pa) à une température voisine de 500C.On obtient ainsi 1,4 g d'un so 3 lide beige qui est redissous à chaud dans 200 cm d'acétate d'éthyle, et traité en présence de 0,5 g de noir décolorant, filtré à chaud. Après évaporation du solvant sous pression réduite (2,7 kPa), à une température voisine de 500C, les 1,2 g obtenus 3 sont dissous une dernière fois dans 25 cm d'acétonitrile bouil- lant. La solution est filtrée à chaud. Le filtrat est refroidi vers 200C pendant 48 heures. Les cristaux obtenus sont séparés par 3 filtration, rincés par 10 cm au total d'acétonitrile et séchés sous pression réduite (13,5 Pa) à une température voisine de 800C. On obtient ainsi 0,75 g de N-(3-phénacylphényl)-3-(3-pyridyl) 1H, 3H-pyrrolo [1 ,2-c] thiazole-7-carboxamide- (RS), sous la forme d'un solide crème fondant vers 1650C. La 3-benzoylméthylaniline est préparée d'après G.G.I. MOORE, J.K. HARRINGTON, J. Med. Chem., 18, 386 (1975). Exemple6 On ajoute, vers 600C environ, en 10 minutes environ, 8,8 g de 7-chloroformyl-3- (3-pyridyl) 1H, 3H-pyrrolo [1 ,2-c] thiazole- (RS) à 3 une solution de 6,6 g de 3-aminochalcone et de 8,3 cm de 3 triéthylamine dans 165 cm de dioxane. Le mélange réactionnel est chauffé 6 heures 30 minutes à 1000C, refroidi vers 250C et le solvant est éliminé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température 3 voisine de 500C. Le résidu est repris par 500 cm de dichloromé 3 thane et 200 cm d'eau distillée. La phase organique est décantée, 3 lavée par 450 cm au total d'eau distillée, séchée sur sulfate de magnésium anhydre et le solvant est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C.Les 13,9 g de me 3 ringue obtenus sont dissous dans 300 cm d'acétonitrile bouillant. La solution obtenue est filtrée à chaud. Le filtrat est refroidi à une température voisine de 100C pendant 3 heures environ Les 3 cristaux obtenus sont séparés par filtration, lavés par 20 cm au total d'acétonitrile glacé et séchés sous pression réduite (13,5 Pa) à une température voisine de 500C. On obtient ainsi 6,6 g de N-[3-(3-phényl-3-oxo-propényl)phényl]-3-(3-pyridyl) IH,3H-pyrrolo [1,2-c]thiazole-7-carboxamide-(RS), sous la forme d'un solide crème fondant vers 1800C. La 3-aminochalcone peut être préparée de la manière suivante: Une solution de 42,5 g de chlorure stanneux dans un mélange de 40 3 3 cm d'éthanol absolu et 16 cm d'acide chlorhydrique 12N est ajou- tée goutte à goutte, en 50 minutes environ, à une suspension de 15 3 g de 3-nitrochalcone dans 50 cm d'éthanol absolu, en maintenant la température vers 450C. Le mélange réactionnel est alors chauffé 2 heures 30 au reflux, puis refroidi vers 200C. Le précipité est 3 séparé par filtration, lavé par 100 cm environ d'éthanol et mis en solution dans 25 cm d'ammoniaque 10N. On ajoute 200 cm d'eau 3 distillée et 200 cm d'acétate d'éthyle. La phase organique est 3 décantée et la phase aqueuse est extraite par 800 cm au total d'acétate d'éthyle. Les extraits organiques sont rassemblés, lavés 3 par 300 cm au total d'eau distillée, séchés sur du sulfate de magnésium anhydre et concentrés à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 9,5 g de 3-aminochalcone, sous la forme d'un solide jaune, fondant vers 1560C. La 3-nitrochalcone est préparée d'après Le Fevre et Pearson, J. Chem Soc., 2807 (1932). Exemple 7 On ajoute goutte à goutte, à une température voisine de 250C, une solution de 0,31 g de borohydrure de sodium dans un mélange com 3 3 posé de 0,42 cm de soude 2N et 4 cm d'eau distillée, à une solu- tion de 8,8 g de N-(3-benzoylphényl)-3-(3-pyridyl) 1H,3H-pyrrolo 3 [1,2-c]thiazole-7-carboxamide-(RS) dans 25 cm de méthanol. Après 3 48 heures sous agitation, on ajoute 3 cm d'acide acétique 4N, 250 3 3 cm d'eau distillée et 250 cm d'acétate d'éthyle. La phase orga 3 nique est décantée, la phase aqueuse est extraite par 250 cm d'acétate d'éthyle. Les extraits organiques sont réunis, lavés par 3 3 200 cm au total d'eau distillée, puis par 100 cm d'une solution 3 saturée de bicarbonate de sodium et par 100 cm d'eau distillée. On ajoute 0,5 g de noir décolorant, sèche sur du sulfate de magnésium anhydre, et évapore le solvant sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Les 8,2 g de meringue orange obtenus sont chromatographiés sur une colonne de 8,5 cm de diamètre contenant 800 g de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle 20-80 (en volumes) en 3 recueillant des fractions de 80 cm . Les 45 premières fractions sont éliminées, les 32 suivantes sont rassemblées et le solvant est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Les 5,6 g de meringue orange obtenus sont dissous 3 dans 90 cm d'acétonitrile bouillant. La solution est filtrée à chaud. Le filtrat est refroidi 12 heures à 100C.Les cristaux sont 3 séparés par filtration, lavés par 10 cm au total d'acétonitrile et séchés sous pression réduite (12,5 Pa) à une température voi sine de 600C. On obtient ainsi 1,4 g de N-[3-(a-hydroxybenzyl)phényl]-3-(3-pyridyl) 1H, 3H-pyrrolo [1 ,2-c] thiazole-7-carboxa- mide-(RS), sous la forme d'un solide blanc, fondant vers 1820C. Exemple8 On ajoute, vers 600C, en 15 minutes environ, 6 g de 7-chloroformyl-3- (3-pyridyl) 1H, 3H-pyrrolo [1 ,2-c] thiazole- (RS) à 3 une solution de 4,2 g de 3-aminobenzanilide, 5,6 cm de triéthyla 3 mine dans 100 cm de dioxane. Le mélange réactionnel est chauffé 6 heures au reflux, refroidi vers 250C et le solvant est éliminé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 600C. 3 Le résidu est repris par 500 cm de dichlorométhane, l'insoluble 3 est séparé par filtration, lavé par 60 cm au total de dichloromé 3 thane et 200 cm d'eau distillée. La phase organique est décantée, 3 3 lavée par 100 cm de soude 7N et 500 cm au total dTeau distillée. On ajoute le solide obtenu précédemment à la phase chlorométhylènique et ajoute 100 cm d'un mélange chlorure de méthylène/méthanol 90-10 (en volumes) pour avoir une solution limpide. La solution est séchée sur sulfate de magnésium anhydre et filtrée sur 50 g de silice (0,063-0,200 mm). Le solvant est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 500C. Les 3 8,5 g de solide obtenus sont dissous dans 150 cm de butanol bouillant. La solution obtenue est filtrée à chaud. Le filtrat est refroidi à une température voisine de 100C pendant 24 heures. Les 3 cristaux obtenus sont séparés par filtration, lavés par 30 cm au 3 total de butanol et 40 cm d'éther éthylique et séchés sous pression réduite (13,5 Pa) à une température voisine de 1000C. On obtient ainsi 5,3 g de N-(3-phénylcarbamoylphényl)-3-(3-pyridyl) 1H, 3H-pyrrolo [1 ,2-c] thiazole-7-carboxamide- (RS), sous la forme d'un solide crème fondant vers 2060C. Revendications 1 - Application de dérivés du (pyridyl-3)-3 1H,3H-pyrrolo[1,2-c] thiazole carboxamide-7 de formule générale dans laquelle R représente un radical de formule générale pour lequel X est un atome d'oxygène, un radical carbonyle, hydroxyméthylène, carboxamido, méthylènecarbonyle, carbonylvinylène ou vinylènecarbonyle, et Y est un radical carbocyclique ou hétérocyclique aromatique, sous leurs formes stéréoisomères ou leurs mélanges, ainsi que leurs sels, pour l'obtention d'un médicament destiné à la prophylaxie et/ou au traitement thérapeutique des infections à rétrovirus. 2 - Application selon la revendication 1, caractérisée en ce que le médicament est destiné à la prophylaxie et/ou au traitement du SIDA. 3 - Application selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que le symbole Y du dérivé du (pyridyl-3)-3 1H,3Hpyrrolo[1,2-c]thiazole carboxamide-7 représente un radical phényle, thiényle ou pyridyle. 4 - Procédé de préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement préventif et/ou curatif des infections à rétrovirus caractérisé en ce que l'on mélange un produit selon la revendication 1 ou 3 avec un ou plusieurs diluants ou adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables. 5 - Un nouveau dérivé du (pyridyl-3)-3 1H,3H-pyrrolo[1,2-c]thiazole carboxamide-7 selon la revendication 1, pour lequel X est un radical carboxamido ou hydroxyméthylène et Y est défini comme dans la revendication 1.