FR 2688221 A1 19930910 FR 9202773 A 19920309 Estratriènol-B-D-thioxylosides, leur procédé de préparation et leur utilisation en thérapeutique. La présente invention concerne les composés estratriènol-ss-D-thioxylosides de formule I ci-dessous. Elle concerne également leur procédé de préparation et leur utilisation en thérapeutique en tant qu'agents antithrombotiques veineux. On a déjà proposé dans EP-A-0 290 321 des dérivés de benzoyl-phényl-thioxylose, a-hydroxybenzyl-phénylthioxylose et benzyl-phényl-thioxylose en tant qu'agents antithrombotiques. On connaît également de EP-A-0 365 397 des phényl-ss-D- thioxylosides, de SP-A-0 421 829 des benzopyranones-ss- D-thioxylosides, de EP-A-0 451 007 des sulfonyl-phényl ss-D-thioxylosides, ces composés étant utiles en tant qu'agents antithrombotiques. On connaît enfin de la communication de Fulgentîus N. Lugemwa et al. dans The Journal of Biological Chemistry vol. 266 (11) pp. 6674-6677, 1991 l'estradiol-B-D-xyloside présenté comme stimulant de la biosynthèse d'héparane sulfate. On vient à présent de trouver que les composés estratriènol-ss-D-thioxylosides selon l'invention, structurellement différents des produits connus de l'art antérieur, sont utiles dans le traitement et la prévention des maladies liées aux troubles circulatoires, notamment en tant qu'agents antithrombotiques veineux. Les produits selon l'invention sont caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi l'ensemble constitué par les estratriènol-ss-D-thioxylosides de formule dans laquelle X représente un atome de soufre ou un atome d'oxygène. Dans cette formule le groupe hydroxy en position 17 du reste estratriènol a la configuration ss. Les composés de formule I selon l'invention peuvent être préparés selon une réaction de glycosylation caractérisée en ce que (a) on fait réagir un composé de formule dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur, notamment le groupe tertiobutyldîméthysilyle et X est défini comme ci-dessus, avec un dérivé du thioxylose choisi parmi l'ensemble comprenant (i) les halogénures d'acylthioxylosyles de formule:: (ii) les thioxyloses peracylés de formule et, (iii) les trichloracétimidates d'acylthioxylosyle de formule dans lesquelles Hal représente un atome d'halogène tel que C1 ou Br (l'atome de brome étant ici l'atome d'halogène préféré) et Y représente un groupe acyle, notamment un groupe acyle aliphatique comprenant un nombre total d'atomes de carbone de 2 à s et de préférence le groupe acétyle, dans un solvant inerte, à raison de 1 mole de II pour environ 0,6 à 1,5 moles de composé III, IV ou V, notamment en présence d'un accepteur d'acide et/ou d'un acide de Lewis, pour obtenir un composé de formule dans laquelle X, Y et R ont les significations indiquées ci-dessus, (b) si nécessaire on déprotège le composé de formule I' dans laquelle R représente un groupe protecteur, notamment par désilylation en milieu acide en presence d un fluorure, notamment KF, (c) on soumet le composé de formule I' dans laquelle R représente l'atome d'hydrogène à une réaction de désacylation à une température comprise entre 0;;C et la température de reflux du milieu réactionnel, dans un alcool inférieur en C-1 -C4 (de préférence le méthanol), en présence d'un alcoolate métallique (de préférence le méthylate de magnésium ou le méthylate de sodium), pour obtenir un composé de formule I. Les composés de formules III, IV et V peuvent être de configuration Q ou ss ou sous forme d:un mélange anomérique des deux configurations. Les réactions de glycosylation des composés de formule Il ont été conduites, soit au départ du composé III en présence d'un catalyseur comme par exemple l'oxyde de zinc, soit au départ du du composé V cl présence d un acide de Lewis, notamment l'éthérate de trifluorure de bore ou le chlorure de zinc, soit encore au départ du composé IV en présence d'un acide de Lewis. Selon un mode préféré de mise en oeuvre de-l'invention, on préconise de condenser 1 mole du composé de formule II, dans laquelle R représente l'atome d'hydrogène et X représente l'atome de soufre, avec environ 0,6 à 1,5 mole d'halogénure d'acylthioxylosyle III dans un solvant inerte (comme par exemple le toluène et/ou l'acétonitrile) en présence d'oxyde de zinc. On utilisera avantageusement le bromure de 2,3,4-tri-Oacétyl-5-thio-D-xylopyranosyle dans un mélange toluène/acétonitrile, en présence de 1 à 2 moles d'oxyde de zinc, à une température comprise entre la température ambiante et la température de reflux du milieu réactionnel, de préférence à environ 40-6Q'C, pendant 2 à 48 heures. Selon un autre mode préféré de mise en oeuvre de l'invention, on préconise de condenser 1 mole du composé de formule II, dans laquelle R représente un groupe protecteur et X représente l'atome d'oxygène, avec environ 1,1 à 1,3 moles de trichloracétimidate d'acylthioxylosyle dans un solvant inerte (comme par exemple le dichlorométhane, le dichloroéthane ou l'acétonitrilel en présence d'éthérate de trifluorure de bore ou de chlorure de zinc. On utilisera avantageusement le trichloracétimidate de 2, 3, 4-tri-O-acétyl-5-thio-a-D-xylopyranosyle dans du dichlorométhane ou du dichloroéthane, en présence de 0,05 à 0,5 mole d'éthérate de trifluorure de bore en solution dans du dichlorométhane, du dichloroéthane ou de l'acétonitrile, ou en présence de chlorure de zinc, à une température comprise entre -40 C et la température ambiante (1s-2 G1, de préférence à environ - 30 C à à 0 C, pendant 0,5 à 5 heures. La réaction de glycosylation conduit dans tous les cas à un mélange des isomères de configuration a et ss en proportions variables. L'isomère de configuration B est isolé selon les méthodes connues de l'homme de l'art, comme par exemple ia cristallisation fractionnée ou la chromatographie, notamment la "flash chromatography" [i.e. chromatographie sur colonne de silice et sous pression selon la technique décrite par W.C. STILL et al. dans J. Org. Chem. 1978), 2 (; 14) 2923]. Les intermédiaires de formule I' dans laquelle R représente un groupe protecteur sont soumis à une déprotection, notamment une désilylation en milieu acide en présence d'un fluorure, notamment KF. Les intermédiaires de formule I', dans laquelle R représente l'atome d'hydrogène, sont soumis à une désacylation, plus particulièrement à une désacétylation, qui est réalisée à une température comprise entre 0C et la température de reflux du milieu réactionnel dans un alcool inférieur en C1-C4, en présence de l'alcoolate métallique correspondant. De préférence, on choisira le méthanol comme alcool inférieur et le méthanolate de sodium ou de magnésium comme alcoolate métallique. La réaction de désacylation peut éventuellement etre conduite après glgcosylation sans isoler le composé acylé intermédiaire formé. On peut également réaliser la réaction dedésacylation par voie enzymatique, par exemple par action de l'estérase de foie de porc. Pour accéder aux composés intermédiaires de formule Il où X = S et R représente l'atome d'hydrogène on préconise (i) de condenser, en milieu basique fort, le chlorure de diméthyl-amino-thiocarbamoyle, de formule sur un composé de formule pour obtenir le composé de formule (ii) de soumettre le composé de formule VII ainsi obtenu à une acylation, notamment une acétylation par l'anhydride acétique en présence de pyridine, pour obtenir un composé de formule dans laquelle Y représente un groupe acyle en C2-C5 , notamment un groupe acétyle, (iii) soumettre le composé de formule VIII ainsi obtenu à un réarrangement de Newmann (J. Org.Chem. (1966) 31, p 3980), par chauffage, pour obtenir un composé de formule (iv) traiter le composé de formule IN ainsi obtenu par un alcoolate métallique, de préférence le méthanolate de sodium ou de magnésium, dans un alcool inférieur en Ct-C4,ade préférence le méthanol, le diméthylformamide ou le dioxanne pour obtenir un composé de formule II où X = S et Y représente l'atome d'hydrogène. Les composés intermédiaires de formule I' sont des composés nouveaus et constituent un des objets de l'invention. Selon l'invention, on propose une composition thérapeutique caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement acceptable, au moins un composé choisi parmi l'ensemble constitué par les produits de formule I. Bien entendu, dans une telle composition l'ingrédient actif intervient en quantité thérapeutiquement efficace. Les composés de formule I sont utiles en thérapeutique en tant qu'agents antithrombotiques. Ils sont notamment utiles dans ia prévention et le traitement des troubles de la circulation veineuse. Selon l'invention, on preconise l'utilisation d'une substance appartenant à l'ensemble des composés de formule r pour l'obtention d'un médicament antithrombotique destiné à une utilisation thérapeutique vis-vis des troubles de la circulation veineuse. D'autres caractéristiques et avantages de 1 l'invention seront mieus compris à la lecture qui va suivre, d'exemples de préparation, nullement limitatifs, donnés à titre d'illustration, et de résultats d'essais mafi20ioo iqlles . PREPARATION I (17 B)-17-hsdroxsestra-l,3,5(10)-trièn-3-sl 2,3g4-tri- O-acétyl-1,5-dithio-ss-D-xylopyranoside Une suspension de 1 g (3,4.10-3 mole) de 3-mercapto estra-1,3,6tl0)-trièn-1-sss-ol, de 1,5 g (4,2.10-3 mole) de bromure de 2,3,4-tri-O-acétyl-5-thio-xylopyranosyle, de 565 mg (6,9.10-3 mole) d'oxyde de zinc, de tamis moléculaire 13X dans 20 ml de toluène et 20 ml d'acétonitrile est maintenue sous agitation, sous atmosphère inerte, à 50 C pendant 6 heures. Le mélange réactionnel est alors filtré sur CéliteR dans l'acétate d'éthyle, lavé à l'acide chlorhydrique 1N puis à l'eau et enfin par une solution saturée de chlorure de sodium.La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium puis concentrée à sec. Après chromatographie sur gel de silice (dichlorométhane/acétone ; 16/1 v/v) et cristallisation dans l'éther, on obtient 900 mg du composé attendu (rendement : 47 %). F = 191 C L(1JD20 = + 46 (C = 0,30 ; CHCl3) PREPARATION II Benzoate de (17ss)-17-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthyl silslloxsl-estra-1.3.5(10)-trièn-3-ol Une solution de 4,8 g (12,7.10-3 mole) de benzoate de (17ss)-17-hydrosyestra-1,3,5(10)-trièn-3-ol, de 2,7 g (39,6.10-3 mole) d'imidazole et de 2,5 g (16,6.10-3 mole) de chlorure de tertiobutyldiméthylsilyle dans 80 ml de N,N-diméthylformamide est maintenue sous agitation, sous atmosphère inerte, pendant 7,5 heures. Le mélange réactionnel est alors dilué avec de l'acétate d'éthyle, lavé avec de l'eau, puis avec une solution saturée de chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium puis filtrée. Après évaporation des solvants, on obtient 5,2 g du produit attendu (rendement : 83 %). F = 132C [&alpha;]D22,5 = + 43,3' (C = 0,48 ; CHCla) PREPARATION III (17ss)-17- r r (1.1-diméthyléthyl)diméthylsilylloxYl-estra- 1.3,5(10)-trièn-3-ol Une solution de 7,5 g (15,3.10-3 mole) de benzoate de (17ss)-17-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]oxy]-estra- 1,3,5(10)-trièn-3-ol et 14,6 ml t97,6.10-3 mole) de 1,8-diazabicyclo [5.4.0] undec-7-ène dans 100 ml de méthanol est maintenue sous agitation et sous atmosphère inerte pendant 20 heures. Le mélange réactionnel est alors hydrolysé dans de l'eau glacée puis extrait avec du dichlorométhane. Après séchage de la phase organique sur sulfate de magnésium et concentration à sec, on obtient 4,9 g (rendement : 83 %) du dérivé attendu. F = 190 C L PREPARATION IV (17ss)-17-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]oxy]-estra- 1,3,5(10)-trièn-3-yl 2,3,4-tri-0-acétsl-5-thio-ss-D- xylopyranoside A une suspension de 2,3 g (5,9.10-3 mole) de (17ss)-17[[(1,1-diméthyléthylXdiméthylsilylloxy]-estra- 1,3,5(10)-trièn-3-ol, de 3,1 g (7,1.10-3 mole) de trichloroacétimidate de 2,3,4-tri-O-acétyl-5-thio-&alpha;;-D- xylopyranosyle, de tamis moléculaire 13 X dans 70 ml de dichloroéthane, sous atmosphère inerte, on ajoute 5 ml d'une solution 0,1 M d'étherate de trifluorure de bore dans le dichloroéthane à -30"C. Après une heures cette température, on additionne 780 mg de bromure de xylosyle. Après une heure supplémentaire, le mélange réactionnel est filtré, lavé avec une solution saturée de bicarbonate de sodium puis à l'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium et concentrée à sec. Une chromatographie sur gel de silice (méthylcyclohexane/acétate d'éthyle ; 7/1 ; v/v) donne le composé attendu (1,65 g après cristallisation dans l'éthanol) (rendement : 42 %). F = 184 C LJDZO = + 2,8 (C = 0,535 ; CHCl3) PREPARATION V (17B)-17-hsdroxsestra-1,3.5(10)-trièn-3- 2,3.4-tri-O- acétyl-5-thio-ss-D-xylopyranoside Une solution de 1,5 g (2,2.10-3 mole) de (17ss)-17-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]oxy]-estra- 1,3,5(10)-trièn-3-yl 2,3,4-tri-O-acétyl-5-thio-ss-D- xylopyranoside, de 266 mg (4,6.10-3 mole) de fluorure de potassium, de 1,6 ml d'acide bromhydrique à 48 % dans 30 ml de N,N-diméthylformamide est maintenue 5 heures sous agitation et sous atmosphère inerte puis le mélange réactionnel est hydrolysé. Le composé attendu précipite et est filtré puis séché. On obtient 1,2 g du produit attendu (rendement : 95 %). F = 224 C (éther) [(LJD22 = + 2,05 (C = 0,39 ; CHCl3) PREPARATION VI (17ss)-17-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]oxy]-estra- 1,3,5(10)-trièn-3-yl 2,3 ,4-tri-O-acétyl--D- xylopyranoside Une suspension de 4,8 g (12,4.10-3 mole) de (17ss)-17-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]oxy]-estra- 1,3,5(10)-trièn-3-ol, de 6,-3 g (14,9.10-3 mole) de trichloroacétimidate de 2,3,4-tri-O-acétyl-&alpha;-D- xylopyranosyle dans 160 ml de dichloroéthane est maintenue sous atmosphère inerte, en présence de tamis moléculaire 13X, à -30C. On ajoute alors 10 ml d'une solution 0,1 M d'étherate de trifluorure de bore dans le dichloroéthane et 20 ml de dichloroéthane.Après 2,5 heures à cette température, le mélange réactionnel est neutralisé par addition de carbonate de potassium, filtré, dilué avec du dichlorométhane et lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium et concentrée à sec. Après chromatographie sur gel de silice (hexane/acétate d'éthyle ; 6/1 ; v/v), on obtient 5,44 g (rendement : 68 %) de produit attendu qui précipite dans l'éther. F = 204 C LaiD22 = + 11,7" (C = 0,47 ; CHC13) PREPARATION VII (17ss)-17-hydroxyestra-1,3,5(10)-trièn-3-yl 2,3.4-tri-O- acétyl--D-xylopyranos ide Une suspension de 5,3 g (8,2.10-3 mole) de (17ss)-17-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl]oxy]-estra- 1,3,5(10)-trièn-3-yl 2,3,4-tri-O-acétyl-B-D-xylopyra- noside dans 400 ml de N,N-diméthylformamide est maintenue sous agitation et sous atmosphère inerte.On ajoute alors 480 mg (16,4.10-3 mole) de fluorure de potassium et 1,66 ml d'acide bromhydrique à 48 % (9,6.10-3 mole). Après 16 heures à 30"C, on ajoute 1,66 ml d'acide bromhydrique à 48 % puis 0,8 ml après 18 heures. Après 22 heures, le mélange réactionnel est hydrolysé par de l'eau glacée. On obtient 2,87 g (rendement : 66 %) du produit attendu par précipitationpuis chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle/hexane ; 1/2 ; v/v). F = 250.C [&alpha;]D22 = + 19,5 (C = 0,46 ; CHCl3) Exemple 1 : (17ss)-17-hydroxyestra-1,3,5(10)-trièn-3-yl 1,5-dithio ss-D-xylopyranoside A une suspension de 520 mg (0,9.10-3 mole) de (17ss)-17- hydroxyestra-1,3,5(10)-trièn-3-yl 2,3 ,4-tri-O-acétyl- 1,5-dithio-ss-D-xylopyranoside dans 25 ml de méthanol, on ajoute sous atmosphère inerte, 50 ul de méthanolate de sodium (8% ; p/v). Apres 2 heures, le milieu est neutralisé par addition de résine AmberliteR IR 120 H+, filtré puis concentré à sec.Par chromatographie sur gel de silice (dichlorométhane/méthanol ; 15/1 ; v/v ) et cristallisation dans le méthanol, on obtient 350 mg du composé attendu (rendement : 87 %). F = 187'C [a]D20 = 51,6- (C = 0,37 ; méthanol) Exemple 2 (17ss)-17-hydroxyestra-1,3,5(10)-trièn-3-yl 5-thio-ss-D- xyloyranoside A une suspension de 1,2 g (2,1.10-3 mole) de (17B)-17- hydroxyestra-1,3s5(10)-trièn-3-yl 2,3,4-tri-O-acétyl-5 thio-ss-D-xylopyranoside dans 50 ml de méthanol, on ajoute 0,1 ml de méthanolate de sodium (8 % ; p/v) sous atmosphère inerte. Après 30 minutes, le milieu réactionnel est solubilisé par addition de tétrahydrofuranne puis neutralisé par de la résine AmberliteR IR 120 H+.Une filtration et une évaporation à sec donnent le produit attendu qui cristallise dans l'éthanol (830 mg ; rendement : 90 %) F = 240 C Lai 20 = + 1,1. (c = 0,47 ; diméthylsulfoxyde) Exemple comparatif (17ss)-17-hydroxyestra-1,3,5(10)-trièn-3-yl ss-D- xylonyranoside A une suspension de 2,48 g (4,67.10-3 mole) de (17B)- 17-hydroxyestra-1,3,5(10)-trièn-3-yl 2,3,4-tri-O- acétyl-B-D-xylopyranoside dans 75 ml de méthanol, on ajoute 134 pl d'une solution de méthanolate de sodium (8% ; p/v), sous atmosphère inerte. Après 4,5 heures sous agitation, le mélange réactionnel est homogénéisé par ajout de tétrahydrofuranne et de méthanol.On neutralise alors le milieu par ajout de résine AmberliteR IR 120 H+, on filtre puis on concentre à sec. Après chromatographie sur gel de silice (chloroforme/méthanol ; 7/1 ; v/v) et précipitation dans le méthanol, on obtient 1,35 g (rendement : 71 %) du composé attendu. F = 213 C [&alpha;]D22 = + 43,4 (C = 0,40 ; diméthylsulfoxyde) L'activité anti-thrombotique des produits selon l'invention a été mise en évidence selon le protocole opératoire de thrombose veineuse suivant On réalise une stase veineuse sous hypercoagulation selon la technique décrite par WESSLER et al. (J. Applied Physiol. 1959, p. 943-946). L'agent hypercoagulant utilisé est, comme dans la technique décrite par J. HAUPMAN et al. (Thrombosis and Haemostasis 43 (2l 1980, p.118), une solution de facteur X activé (Xa) fourni par la soxiété dite Flow Laboratoires (1 Knat pour 12,5 ml de sérum physiologique). L'étude est réalisée sur des rats mâles Wistar, non à jeûn, de 250 à 280 g répartis en lots de 10 animaux chacun. Les produits à tester sont administrés per os, en suspension dans le PEG 400. Une thrombose est induite 4 heures après ce traitement et le thrombus formé est prélevé et pesé. A la dose de 25 mg/kg le composé de l'exemple 1 induit une inhibition de 36 % de la formation du thrombus et le composé de l'exemple 2 induit une inhibition de 73 % à la dose de 12,5 mg/kg. A titre de comparaison, le produit connu de l'art antérieur décrit par Fulgentius N. Lugemwa et al. dans The Journal of Biological Chemistry, vol.266(11) pp.6674-6677, 1991 n'induit une inhibition de 36 % qu'à la dose de 100 mg/kg. Les produits selon l'invention présentent donc une activité antithrombotique 4 à 8 fois supérieure à l'activité du produit connu de l'art antérieur. Revendications 1. Composé oside caractérisé en ce qu'il il est choisi parmi l'ensemble comprenant les estratriènol-ss-D- thioxylosîdes de formule dans laquelle X représente un atome de soufre ou un atome d'oxygène. 2. Composé selon la revendication I caractérisé en ce que X représente un atome de soufre. 3. Composé selon la revendication I caractérisé en ce que X représente un atome d'oxygène. 4. Composition thérapeutique caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement acceptable, au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3. 5. Utilisation d'une substance selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, pour l'obtention d'un médicament antithrombotique destiné à une utilisation thérapeutique vis-vis des troubles de la circulation veineuse. 6. Procédé de préparation d'un estratriènol-ss-D- thioxyloside de formule I selon la revendication 1 caractérisé en ce que: (a? on fait réagir un composé de formule dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur, notamment le groupe tertiobutyldiméthysilyle et X est défini comme ci-dessus, avec un dérivé du thioxylose choisi parmi l'ensemble comprenant (i? les halogénures d'acylthioxylosyle de formule:: (ii) les thioxyloses peracylés de formule et, (iii) les trichloracétimidates d'acylthioxylosyle de formule dans lesquelles Hal représente un atome d'halogène tel que Cl ou Br (l'atome de brome étant ici l'atome d'halogène préféré) et Y représente un groupe acyle, notamment un groupe acyle aliphatique comprenant un nombre total d'atomes de carbone de 2 à 5 et étant de préférence le groupe acétyle, dans un solvant inerte, à raison de I mole de II pour environ 0,6 à 1,5 moles de composé III, IV ou XFX en présence d'un accepteur d'acide et/ou d'un acide de Lewis, pour obtenir un composé de formule dans laquelle X, Y et R ont les significations indiquées ci-dessus, et, (b) si nécessaire on déprotège le composé de formule I' dans laquelle R représente un groupe protecteur, notamment par désilylation en milieu acide en présence d'un ftuorure, notamment KF, (c) on soumet le composé de formule I' dans laquelle R représente l'atome d'hydrogène à une réaction de désacylation à une température comprise entre Oi et la température de reflux du milieu réactionnel, dans un alcool inférieur en Ci-C4 (de préférence le méthanol) en présence d'un alcoolate métallique (de préférence le méthylate de magnésium ou le méthylate de sodium), pour obtenir un composé de formule I. 7. Produit intermédiaire intervenant dans la synthèse des estratriènol-ss-D-thioxylosides de formule I caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par les composés de formule dans laquelle - X représente un atome de soufre ou un atome a'oxygène, - Y représente un groupe acyle en C2-C5, et - R représente l'atome d'hydrogène ou un groupe protecteur, notamment le groupe tertiobutyldiméthyisilyle.