FR 2679109 A1 19930122 FR 9109095 A 19910718 NOUVEAUX COMPLEMENTS NUTRITIONNELS OU DIETETIQUES ANTI-VIEILLISSEMENT A BASE D'ACIDE GRAS POLY-INTURE La présente invention se rapporte à un complément nutritionnel à base d'un acide gras poly insaturé et à son emploi pour corriger ou réparer les erreurs alimentaires. Elle a plus particulièrement pour objet des préparations à base d'un acide gras poly-insaturé pour compléter ou améliorer les besoins nutritionnels liés à l'âge. Elle a spécifiquement pour objet des préparations alimentaires ou diététiques destinées à compenser les effets du vieillissement, qui renferment en quantités déterminées, un acide gras poly-insaturé, l'acide stéaridonique ou acide octadécatétraénoique (C18:4 n-3) en association ou en mélange avec des diluants, des matériaux inertes comme des farines, des hydrates de carbone, des amidons ou des celluloses modifiées, notamment par voie chimique. L'acide stéaridonique est un acide gras poly-insaturé dont la présence dans les produits de la nature est rare et même fréquemment, non détectable. Les principales sources sont les graines de bourrache, d'onagre, les pépins de cassis, les pépins de framboise et les pépins de groseilles. Une autre source d'acide stéaridonique se trouve dans les huiles de poisson comme l'huile de thon, l'huile de sardine ou l'huile de flétan et d'autres poissons gras similaires. Il est possible d'utiliser l'huile telle quelle mais on préfère en général employer des concentrats obtenus par distillation sous vide ou par fractionnement de ces huiles. On peut aussi obtenir des concentrés renfermant principalement ou essentiellement de l'acide stéaridonique. Il est possible également de réaliser un fractionnement ou une concentration des lipides en acide stéaridonique par passage sur une résine argentique ou mercurielle ou sur une colonne de gel de silice chargée de nitrate d'argent et élution sélective. Toutefois, la source la plus abondante et la plus accessible est l'huile de pépins de cassis, l'huile de pépins de framboise, l'huile de pépins de groseilles ou l'huile de pépins de groseilles à maquereaux dont la teneur en acide stéaridonique varie de 2,5 à 5%. (cf. BREVET EUROPEEN 092085). Il est aussi possible, au départ d'huile de pépins de cassis d'effectuer un fractionnement par chromatographie liquide à haute performance pour obtenir une coupe dont la teneur en acide stéaridonique se trouve sensiblement relevée par rapport à ce qu'elle pouvait être dans l'huile d'origine. Le grand intérêt de l'acide stéaridonique pour l'alimentation, résulte de sa place dans la cascade de transformations, subies par les acides gras poly-insaturés vers les différents types de prostaglandines. Les prostaglandines de la série 1 (PG1) proviennent de l'acide dihomo r-linolénique, les prostaglandines de la série 2 (PG2) proviennent de l'acide arachidonique et les prostaglandines de la série 3 (PG3) proviennent de l'acide eicosapentaénoique. L'acide stéaridonique joue également un rôle important dans la constitution des membranes cellulaires conduisant à la formation de phospholipides riches en acides poly-insaturés. La formation des prostaglandines est un élément très important de la physiologie car ce sont des médiateurs essentiels pour la contraction musculaire, le fonctionnement cérébral et la vascularisation. Toutefois, cet ensemble biologique a tendance à s'altérer du fait du vieillissement car chez les personnes âgées, les activités enzymatiques dénommées activités désaturasiques vont en diminuant. Cette baisse des activités désaturasiques entraine à partir des acides linoléique (série n-6) et a-linolénique (série n-3) une diminution de la formation des acides gras poly-insaturés qui constituent les maillons indispensables de la nutrition, respectivement l'acide r-linolénique (C18:3 n-6) et l'acide stéaridonique (C18:4 n-3), qui donnent naissance, après désaturations et élongations successives, à la synthèse des acides gras poly-insaturés membranaires et des prostaglandines par cyclisation. La régulation de ce système biologique complexe s'effectue par l'intennédiaire d'une enzyme clef, la 86-désaturase. C'est l'enzyme limitante du système. C'est une enzyme très régulée notamment par l'insuline et par certaines protéines qui l'activent, l'adrénaline ou le glucagon qui l'inhibent. De même, certains acides gras comme l'acide a-linolénique l'inhibent. On a donc pu mettre en évidence l'existence d'un coefficient de transformation chez l'animal par des expériences in vivo. Chez l'homme, on constate avec l'âge, une baisse de l'activité de la A6-désaturase et la survenue, chez des sujets comatiques ou chez des insuffisants hépatiques graves, d'une voie métabolique anormale, la A5-désaturase. Il apparait de ce fait, deux voies de dérivation du métabolisme des acides gras poly-insaturés essentiels - une voie toxique (la ss-oxydation) - une voie d'utilisation énergétique qui constitue, en quelque sorte, un gaspillage. La conversion des acides gras essentiels en acides gras poly-insaturés sous l'influence de la A6-désaturase, constitue donc un goulot d'étranglement. Face à cette baisse d'activité désaturasique, essentielle pour la formation de médiateurs physiologiques, on pourrait concevoir l'apport d'acides gras peu insaturés pour réactiver l'activité désaturasique en augmentant artificiellement la concentration en substrat. Cette méthode s'est révélée peu efficace car de fortes concentrations en acides gras inhibent ou réduisent l'activité désaturasique par suite de la régulation. Au contraire, et c'est sur quoi repose l'invention, l'apport d'acides gras plus insaturés et en particulier celui d'acide stéaridonique permet de pallier la diminution de l'activité A6-désaturasique et ainsi, de poursuivre la biosynthèse des acides gras poly-insaturés à longue chaine et notamment la synthèse de l'acide eicosapentaénoique et finalement de l'acide docosahexaenoique ou acide cervonique. L'acide stéaridonique est le précurseur physiologique des prostaglandines PG3. On rétablit donc ainsi la biosynthèse de médiateurs indispensables. La baisse de l'activité désaturasique entraine une modification de la composition en acides gras des membranes et en particulier des membranes nerveuses. Les lipides cérébraux et en particulier les phospholipides cérébraux contiennent une teneur très élevée en acides gras poly-insaturés à longue chaine qui sont formés à partir des acides essentiels, l'acide linoléique et l'acide o-linolénique. Ils jouent donc un rôle important dans le maintien de l'activité nerveuse et pour la conservation de l'activité cérébrale normale. On a ainsi constaté chez le rat qu'un défaut d'acide a-linolénique dans l'alimentation, modifie d'une manière très importante la composition en acides gras dans différents organes et en particulier le cerveau. On constate, en effet, une modification de l'activité enzymatique de la membrane cérébrale, une réduction de l'amplitude des paramètres électrophysiologiques comme par exemple ltélectro-rétinogramme, une modification de la résistance aux substances toxiques du système nerveux central et surtout une réduction à l'aptitude à l'apprentissage. Compte-tenu de cette diminution considérable des fonctions nerveuses et cérébrales, il est apparu que l'introduction d'acide stéaridonique dans l'alimentation était de nature à compenser cette baisse de l'activité enzymatique et à restaurer la possibilité pour l'organisme d'effectuer la synthèse d'acides gras poly-insaturés comme l'acide docosahexaénoique ou acide cervonique (C22: n-3) et/ou de l'acide eicosapentaenoique (C20:5 n-3) tl a donc été écrit que la diminution de l'activité Q6-désaturasique était un facteur clef des phénomènes de vieillissement. L'addition d'acide stéaridonique dans des préparations alimentaires ou diététiques selon l'invention permet de diminuer ou de retarder l'influence de cette baisse d'activité enzymatique. Les préparations nutritionnelle ou diététiques selon l'invention, sont constituées par de l'acide stéaridonique, mélangé ou additionné de diluant ou d'un véhicule permettant l'utilisation par voie digestive. Pour cette utilisation, on aura recours à une formulation sous forme de capsules molles, de dragées ou de comprimés, de tablettes, de sachets de poudre aromatisée ou édulcorée, de biscuits, de galettes ou de confiseries en association éventuellement avec d'autres principes actifs (vitamines, citroflavonoides, capteurs de radicaux libres, oligo-éléments, dérivés flavonoiques). L'acide stéaridonique peut également être incorporé dans un véhicule fluide comme une gelée, un mucilage végétal ou une suspension ou bien sous forme de microgranules ou bien encore microencapsulé dans de la gélatine pour former une poudre. Pour l'utilisation chez le sujet âgé, la présentation sous forme de capsules molles ou sous forme de sachets de poudre est la plus commode. D'une manière générale, les préparations nutritionnelles ou diététiques selon l'invention renferment de 0,100 à 0,500 g d'acide stéaridonique pur ou sous forme d'un concentré titré en acide stéaridonique, et de préférence de 0,100 à 0,250 g. Ces préparations peuvent être administrées plusieurs fois par jour à la dose de O,lOO à 0,500 g par unité. L'administration administration j journalière sera fonction des autres apports lipidiques de l'alimentation et notamment de l'alimentation du sujet âgé. Si celle-ci est pauvre en source de lipides susceptibles de fournir des acides gras poly-insaturés comme par exemple l'huile d'arachide ou les graisses hydrogénées, il sera nécessaire de fournir des quantités plus importantes d'acide stéaridonique sous forme de supplément nutritionnel. Au contraire, si l'alimentation fournit déjà des matières grasses susceptibles de contenir de petites quantités d'acides gras poly-insdturés comme des huiles de poisson, le besoin alimentaire en acide stéaridonique sera plus réduit et les compositions selon l'invention constitueront donc un supplément diététique. Les exemples de réalisation de compositions nutritionnelles ou diététiques, illustrent l'invention sans toutefois la limiter. ETUDE PHARMACOLOGIQUE DE L'ACIDE STEARIDONIQUE SUR L'ACTIVITE DE LA DESATURASE CHEZ LE RAT ET LA SOURIS Dans la présente étude, l'activité 86-désaturasique a été mesurée chez la souris et trouvée linéaire jusqu'à 4 mg de protéine par ml de milieu d'incubation à tous les âges avec des homogénéisats de cerveau. Avec des homogénéisats de foie, l'activité était linéaire jusqu'à 2,5 mg de protéine/ml pendant les 5 premiers jours après la naissance. Ensuite, elle était linéaire jusqu'à 1,5 mgykl. La figure 1 montre que l'activité désaturasique du foie augmente approximativement de 7 fois du 18ème jour de la gestation au 11ème jour jusqu'au sevrage chez la souris et reste constante pendant 9 mois. D'une manière trèsintéressante, la t6-désaturase diminue de 4 fois au cours du vieillissement. En gros, ce schéma est similaire à celui trouvé pour la désaturation de l'acide linoléique, mais l'activité désaturasique est 2 fois plus grande avec l'acide &alpha;-linolénique qu'avec l'acide linoléique. La modification de l'activité désaturasique est plus marquée avec l'acide a-linolénique (4 fois) qu'avec l'acide linoléique. Dans les microsomes de foie de rat, l'activité désaturasique diminue jusqu'à 9 mois quoique l'animal se développe d'une manière continue pendant toute la durée de son existence. Dans le cerveau de souris, l'activité désaturasique diminue spectaculairement pendant le développement pré- ou post natal (4 fois) jusqu'au sevrage. L'activité la plus nette a été trouvée pendant la période périnatale. Le développement cérébral précoce nécessite des quantités importantes d'acides gras poly-insaturés pour la synthèse des membranes. L'activité désaturasique #6 chez le rat diminue de 2 fois entre le sevrage et l'âge de 9 mois pour présenter ensuite un niveau bas et stable. Ceci pose la question de savoir si ce faible niveau d'activité est suffisant pour fournir les acides gras poly-insaturés nécessaires pour le métabolisme physiologique de toutes les membranes cérébrales. Comme l'activité désaturasique baisse également au cours du vieillissement, dans le foie, si la concentration dans le cerveau est trop basse, le foie ne peut pas pallier cette déficience. C'est pourquoi, pendant la période de vieillissement, il parait particulièrement intéressant de fournir dans l'alimentation une quantité d'acide stéaridonique de façon à contourner la baisse d'activité désaturasique et de fournir à nouveau, un substrat pour l'élongation des chaines d'acides gras poly-insaturés. La figure I montre l'évolution de l'activité A6-désaturasique pendant le développement et au cours du vieillissement dans le cerveau de souris et dans les homogénéisats de foie. Les cercles i indiquent la synthèse complète d'acide gras poly-insaturés à partir d'acide o-linolénique (principalement l'acide stéaridonique (C18:4 n-3) avec de petites quantités d'acide eicosapentaénoique (C20:5 n-3) et d'acide docosahexaénoique (C22:6 n-3). représente l'acide stéaridonique synthétisé à partir d'acide &alpha;-linolénique. EXEMPLE I CAPSULES MOLLES A BASE D'ACIDE STEARIDONIQUE . Concentré à 10% d'acide stéaridonique .......... 500 g . Acétate d'&alpha;-tocophérol ......................... 0,3 g . Lecithine de soja .................................... 22 g . Cire d'abeille ....................................... 20 g pour 1000 capsules molles terminées au poids moyen de 800 mg EXEMPLE II PATE A BASE D'ACIDE STEARIDONIQUE Concentré d'acide stéaridonique ................ 10 g . Gomme arabique ................................. 5 g . Carboxyméthyl cellulose ........................ 6 g .Sorbitol ....................................... 27 g Agent d'aromatisation fraise ................... 2 g dissous dans 250 ml d'eau La suspension épaisse formée est concentrée jusqu'à formation d'une pâte que l'on découpe en losanges ou en carrés. EXEMPLE III EMULSION D'ACIDE STEARIDONIQUE . Concentré d'huile de poisson titrant 5 % d'acide stéaridonique ...................... 200 ml . Alginate de sodium ............................. 10 g . Hydroxypropyl methyl cellulose ................. 12 g . Stéarate de polyéthylène glycol j 2,5 g . Sorbitol ....................................... 25 g . Acétate d'&alpha;-tocophérol ................... 0,5 g . Arôme orange ................................... 1 g . Acide sorbique ................................. 1 g .Eau de boisson .......................... pour 1000 ml On réalise un mucilage en dissolvant l'hydroxypropyl méthyl cellulose et l'alginate de sodium dans 200 ml d'eau à SOC. On y ajoute le sorbitol et l'acide sorbique puis le stéarate d'éthylene glycol. On introduit le concentré d'acide stéaridonique par petites fractions sous forte agitation jusqu'à obtention d'un lait fortement visqueux. On dilue ensuite avec le volume restant d'eau puis on ajoute l'arôme orange. L'émulsion ainsi réalisée renferme 100 mg d'acide stéaridonique par cuillère à dessert. EXEMPLE IV POUDRE EN PAILLETTES EN SACHETS . Malt desséché ................................ 500 g . Concentré d'huile de pépin de groseilles à 10% d'acide stéaridonique .................. 200 g Le malt est séché par passage dans un four à 600 sous vide. Le malt reste 2 h sur les plateaux. La croûte recueillie est brisée puis chauffée au four à 400. On pulvérise sur les paillettes formées le concentré d'huile préalablement chauffé à 400. On sèche ensuite à l'étuve, on obtient ainsi des paillettes titrant 3 % en acide stéaridonique; -R E V E N D I C A T I O N S L'invention a pour objet De De nouvelles préparations nutritionnelles ou diététiques destinées à compléter ou améliorer les besoins nutritionnels notamment du sujet âgé qui renferment en quantités déterminées un acide gras poly-insaturé, c'est-à-dire l'acide stéaridonique, en association ou en mélange avec des diluants ou avec des matériaux alimentaires. 20- Une préparation selon la revendication 1 dans laquelle l'acide stéaridonique est utilisé sous forme d'huile de pépin de Ribes choisi dans le groupe constitué par le cassis, la framboise, la groseille, la groseille à maquereaux et/ou les hybrides de ceux-ci. 30- Une préparation selon la revendication 1 ou 20 dans laquelle l'acide stéaridonique est employé sous forme de concentré ou de produit d'extraction sélective. 40- Une préparation selon la revendication 1 à 30 dans laquelle l'acide stéaridonique est employé sous forme micro encapsulée avec de la gélatine. 5 - Une préparation selon l'une des revendications 1 à 30 dans laquelle le diluant est une farine, des hydrates de carbone, des amidons, des produits cellulosiques ou du malt. 60- Une préparation selon l'une des revendications 1 à 30 dans laquelle le diluant est un véhicule aqueux apte à former un gel ou une émulsion 70- Une préparation selon l'une des revendications 1 à 60 dans laquelle la teneur en acide stéaridonique varie par prise unitaire de 100 à 500 mg. 80- Une préparation selon l'une des revendications 1 à 70 dans laquelle la teneur en acide stéaridonique se situe de préférence entre 100 et 250 mg. 9 - Une préparation selon l'une des revendications 1 à 80 dans laquelle on ajoute un ou plusieurs autres principes actifs. 10 - Une préparation selon l'une des revendications 1 à 90 présentée sous la forme de capsules molles, de dragées, de tablettes, de biscuits ou de galettes et de sachets de poudre. 11 - Une préparation selon l'une des revendications 1 à 90 présentée sous forme d'émulsion, de lait ou de suspension gélifiée. 120-utilisation des préparations selon l'une des revendications 1 à 11 comme complément nutritionnel pour compenser les effets neurologiques dûs au vieillissement. 13 -Utilisation des préparations selon l'une des revendications 1 à 110 pour compenser les troubles neurologiques dûs au vieillissement.