FR 2644461 A1 19900921 FR 8903303 A 19890314 La présente invention concerne un procédé de stabilisation de l'hybridation d'une première séquence polynucléotidique d'ADN ou ARN, c'est-à-dire polyribonucléotidique ou polydésoxyribonucléotidique, avec une seconde séquence polynucléotidique cible complémentaire de la première. La présente invention concerne également de nouveaux conjugués utiles pour la mise en oeuvre du procédé selon l'invention consistant dans le couplage d'une séquence polynucléotidique d 'ADN ou ARN avec une séquence peptidique Enfin, l'invention concerne l'application de ce procédé et de ces nouveaux conjugués dans le domaine du diagnostic à titre de sonde d'acidesnucléiqueset dans le domaine thérapeutique à titre d'agent de blocage ou d'inhibition de l'expression de gènes. L'emploi de séquences polynucléotidiques d'ADN ou ARN faisant intervenir leur capacité d ' appariement avec des séquences polynucléotidiques complémentaires à des fins de diagnostic, c'est-à-dire comme sonde lorsque ces séquences sont marquées ou à des fins thérapeutiques comme agent de blocage sélectif de l'expression d'un gène qutil soit exogène (ADN ou ARN de virus, de parasites ou de bactéries) ou endogène (inhibition de la traduction de 1'ARN messager), est maintenant bien connu. Une difficulté réside toutefois dans la nécessaire stabilisation de l'appariement, c'est- > -dire de l'hybridation entre les deux séquences complémentaires, sans compter les principales difficultés rencontrées lors de l'utilisation de ces molécules qui sont dues princi palement à cinq causes 1) une très faible efficacité de pénétration 2) une faible durée de vie des molécules non protégées 3) une instabilité des dérivés protégés 4) une perte de spécificité au profit de l'affinité de certains dérivés (w anomères) 5) une inhibition de l'expression d'un ARNm, due le plus souvent à une digestion RNasique (lorsque cela est possible) plutôt qu'au blocage du site d'attachement du ribosome. Pour surmonter ces difficultés r on est contraint d'utiliser des séquences suffisamment longues pour obtenir une bonne spécificité, mais pas trop longues pour éviter l'apparition de structure secondaire due à un repliement interne de la molécule. On a propose d'adjoindre au polynucléotide des agents intercalants, tels que l'acridine. Enfin, plus récemment, il a également été proposé d'utiliser des séquences polynucléotidiques dont les nucléotides présentent une configuration anomérique non naturelle cr. Ces séquences à anomérie a s'apparient de faon parallèle et plus stable avec des séquences complémentaires à anomérie 8 naturelle. En effet, les séquences polynucléoti- diques d'anoméries ss complémentaires s'apparient de façon anti-parallèle. Toutefois, il se produit des erreurs d'appariement avec la séquence cible faisant perdre à la molécule sa spécificité. Le but de la présente invention est donc de stabiliser l'hybridation de séquences complémentaires d'ADN ou ARN tout en palliant aux inconvénients précités de l'état de la technique. La présente invention a en effet pour objet un procédé de stabilisation de l'hybridation d'une première séquence polynucléotidique d'ADN ou d'ARN modifiés ou non, à configuration anomérique a ou S, avec une seconde séquence cible complémentaire de la première d'ADN ou d'ARN, caractérisé en ce qu 'un peptide forme un complexe avec la double hélice d'hybridation que forment lesdites première et seconde séquences nucléotidiques. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le peptide est fixé sur ladite première séquence. Il convient de noter que Lemaitre et al. (PNAS) 1987, 84, 648-652 ont couplé un peptide de polylysine à un oligonucléotide, afin d'en augmenter la pénétration, le peptide n'ayant aucun rle dans la stabilisation de l'hybride. En outre, la polylysine est très toxique pour la cellule. Dans une première variante de réalisation de l'invention, 1'enchaL:ement d'aminoacides du peptide comporte . une première succession d'aminoacides qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite première séquence nucléotidique , le cas échéant, à partir du site de fixation du peptide sur celle-ci, . une seconde succession d'un même nombre d'aminoacides que la première succession d'aminoacides, qui présentent une interaction un -à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite seconde séquence, . lesdites première et seconde successions d'aminoacides étant reliées entre elles par une séquence dite "charnière" constituée notamment par un ou plusieurs acides aminés n'interagissant pas avec les bases desdites première et seconde séquences, de telle sorte que . les acides aminés de ladite première succession interagissent de manière coopérative avec les acides aminés de ladite seconde succession d'acides aminés, . l'interaction coopérative résultante entre le -peptide et l'hélice double brin formée par le complexe d'hybri dation desdites première et seconde séquences étant telle que le peptide se glisse dans le grand sillon de la double hélice et prenne une structure en épingle d cheveux entre ladite première et ladite seconde sé quences nucléotidiques par l'intermédiaire de la sé quence dite "charnière". La présente invention dé des résultats d'un travail effectué par le ceessdeur sur l'origine du code génétique. Selon l'invention, le peptide prend une structure en épingle à cheveux et se glisse dans le grand sillon de l'hélice nucléotidique double brin en prenant la configuration telle que représentée sur les figures 1 à 3 dans lesquelles chaque azote d'une liaison peptidique est à l'origine de deux liaisons hydrogène (excepté la Proline); une comme accepteur d'hydrogène appelée E (Electrcnj et une autre comme donneur a 'hydrogène appelée H. L'azote peptidique a une structure tétraédrique dans ce modèle. il est convenu que E (Electron) interagit avec le NH2 en C4 de la cytosine ou le NH2 en C6 de l'adénine entre autres bases, et que H interagit avec 1'04 de la thymine ou de l'uracyle ou de 1'06 de la guanine entre autres bases. Le site E ou H resté libre interagit avec celui de la partie peptidique antiparallèle resté également libre. Le radical R de l'acide aminé de série L de formule NH-HCR-CO interagit avec le reste de la surface exposée au grand sillon de la base B2, du côté amide de l'acide aminé. Dans ce type d'interaction coopérative, un mauvais appariement des nucléotides, par exemple G-T, C-A, G-A ou T-C, empêche une stabilisation globale du complexe. L'interaction coopérative acides aminésacides aminés entre les deux branches de l'épingle à cheveux peptidique est à l'origine selon la présente invention du processus de stabilisation de l'hybridation entre lesdites première et seconde séquences. On notera que la forte interaction entre le peptide et la double hélice peut faire apparaitre, dans certaines conditions de pH, de force ionique et en présence de certains sels, une double activité de nature protéasique et nucléasique. En effet, si la cible est un RNk, il est possible aue l'OH en position 2' du ribose attaque le carbone 6+ du carbonyl peptidique. De cette attaque résulte alors un clivaoe du RNA cible et du peptide. Ce -ype c'action est particulièrement intéressant dans le adre d'une application comme agents thérapeutiques du conjugué peptide-polynucléotides. Dans la première variante de réalisation évoouée précédemment, le peptide peut être relié par une seule liaison covalente avec ladite première séquence, le conjugué peptide-polynucléotides de la première séquence peut alors répondre à la formule suivante AA1 ------- AAm-N1 ------ Nn (I) dans laquelle n est compris entre 200 et 1 ,-rnais le plus souvent entre 5 et 50 m = 2n+p et p est un entre entier supérieur ou égal à 1 et dans laquelle AAireprésente les acides aminés et N les nucléotides. Lors de l'hybridation avec une séquence complémentaire N1 "' Np+n le complexe dthybridation se présente selon la configuration suivante Les lignes pointillées "...." schématisent l'interaction entre acides aminés et bases et l'interaction entre les deux channes peptidiques. (AAi)p représente la séquence "charmière", par exemple p acides aminés identiques ou différents. La configuration (1) schématisée ci-dessus peut également se produire sans que le peptide soit lié à la séquence oligonucléotidique. Dans la présente demande, . la séquence N1-N2 ---- Nn correspond à la convention de sens 5' # 3', et N1-N2-----Nn au sens 3' # 5'. . les enchaînements d'acides aminés AA1-AA2 ---- AAm (1#m) correspondent à l'extrémité NH2 libre pour AA1 et COOH libre pour AAm, c'est-à-dire qu'un acide aminé AAx corres pond à (NH2-)AAx(-COOH), De préférence, le cas échéant, la liaison entre le peptide et l'oligonucléctide se fait au départ entre un nucléotide portant une thymine uracile triazolée de l'oligonucléotide que l'on aura ajouté si nécessaire à l'extrémité 5' de l'oligonucléotida et une lysine du peptide que l'on aura ajoutée si nécessaire à l'extrémité C terminale du peptide, selon le procédé suivant 1) le groupe oxo de la thymine ou de l'uracile est substitué sur son carbone en position 4 par un groupe triazole, 2) le groupe triazole est substitué par ladite lysine et partant par le peptide, par l'intermédiaire du groupe NE2 à l'extrémité de la chaîne de ladite lysine. Finallement, après fixation, la thymine ou l'uracile triazolées deviennent une méthyl-cytosine ou une cytosine fonctionnalisée respectivement et l'oligonucléotide est lié au peptide par une méthyl-cytosine ou une cytosine respectivement. On peut schématiser l'épingue à cheveux (C) entre ladite première séquence ou séquence sonde (A) et ladite seconde séquence ou séquence cible (B) de la manière suivante Lesdites première et seconde sequences peuvent constituer une partie seulement des séquences sonde et cible respectivement, c'est-d-dire que le complexe d'hybridation peut se schématiser ainsi Dans ce dernier cas de figure, un conjugué peptide-polynucléotide de la première séquence peut être représenté formule dans laquelle p est compris entre 100 et 1 , le plus souxm.t entre 5 et 25 n est compris entre 100 et 0, le plus souvent entre 0 et 20 m est compris entre 400 et 3, le plus souvent entre 10 et 110 (lorsque p = 1, on retrouve la formule (I)). Selon une autre variante de réalisation, le peptide comporte : - une première succession d'acides aminés qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite première séquence, - une seconde succession d'acides aminés qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succession de bases de nucléotides de ladite seconde séquence, - une troisième succession d'acides aminés qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite première sé quence nucléotidique, - lesdites première et seconde successions d'acides aminés d'une part, et lesdites seconde et troisième successions d'acides aminés d'autre part, étant reliées à chaque fois par une séquence dite charnière constituée notam ent par un ou plusieurs acides aminés n1 interagissant Was avec les bases desdites première et seconde séquences nucléotidiques, - les séquences de nucléotides dont les bases interagissent avec ladite seconde succession d'acides aminés consti tuant la séquence complémentaire totale ou partielle de celles dont les bases interagissent avec lesdites prière et troi sièmes successions d' acides amines, de telle sorte que, - les acides aminés desdites première et troisième succes sions d'aminoacides interagissent de manière coopérative avec les acides aminés de ladite seconde succession, - l'interaction coopérative résultante entre le peptide et l'hélice double brin formée par le complexe d'hybri dation desdites première et seconde séquences nucléo tidiques dtant telle que le peptide se glisse dans le grand sillon de la double hélice et prenne une structure en double épingle à cheveux entre ladite première et ladite seconde séquences nucléotidiques par l'intermé- diaire des deux séquences "charniéres". cette variante de réalisation de l'invention, on peut schématiser le complexe d'hybridation de la manière suivante - représente la première succession d'aminoacides 3 représente la seconde succession d'aminoacides 2 représente la première série d'acides aminés "charnière" entre 1 et 3 5 représente la troisième succession d'aminoacides dans ce mode de réalisation de l'invention, et représente les acides aminés "charnière" entre 3 et 5 Aset(B) représentent respectivement lesdites première et seconde séquences. La configuration (4) peut encore se produire sans oue nécessairement le peptide soit lié à ladite première séquence. On peut, selon un autre aspect de l'invention, fixer le peptide sur ladite première séquence par l'intermédiaire de deux liaisons, c'est-à-dire par chacune des extrémités du polypeptide sur le polynucléotide de ladite première séquence, comme décrit précédemment. Le complexe pourra alors être schématisé comme suit dans laquelle z = x + y (AAi)x représente une séquence dite "charnière", par exemple x acides aminés "charnières" (AAj)y représente une séquence dite "charnière" par exemple y acides aminés "charnières" D'une manière générale, les nucléctides de ladite première séquence peuvent comporter des bases choisies permi l'adénine, la guanine la thymine, la cytosine, l'uracyle, et toutes autres bases puriques telles que l'inosine, la 2-6 diaminopurine ou la 6 amino 8-bromopurine, ou pyrimidiques,telle que le 5-bromo uracyle ou le 5-iodo uracyle. Avantageusement donc la séquence oligomucléctidique sonde com portera une cytosine terminale. Par ailleurs, du fait de la ressemblance entre les motifs exprimés par l'uracyle et la cytosine il est préférable d'éviter les interactions entre un acide aminé et l'un, on choisira donc des séquences cibles de préférence avec le moins possible d'uccvle et par conséquent, une séquence soude avec le moins possible d'adénine. Les peptides se complexent sur des hélices nucléo tidiques de préférence de forme A, mais des interactions avec des hélices B peuvent aussi être envisagées. Les différents acides aminés constituant le peptide sont choisis en fonction de la nature des bases qui se succèdent sur les nucléotides de séquences d'acides nucléiques concernés comme mentionné ci-dessus. Lorsque la base est une thymine, l'acide aminé doit être très hydrophobe, de préférence. L'acide aminé peut donc être choisi parmi entre autres la L-phénylalanine, la L-leucine, la L-isoleucine, la L-valine, la L-alanine, la L-méthionine. De préférence encore, on la choisira parmi la L-leucine, la L-isoleucine et la Lvaline. On évitera les acides aminés hydrophiles, tels que la L-sérine, la L-thréonine, la L-histidine, la Lasparagine, la L-glutamine, la L-lysine ou la L-arginine. Lorsque la base est un uracyle, l'acide aminé doit être un acide aminé dit "ambigu" ou "mphiphile", c'est-à-dire ne présentant pas d'effets solvants, soit ni trop hydrophobes ni trop hydrophiles, excepté des acides aminés acides. On peut citer, lorsque la base est un uracyle, les acides aminés suivants : L-alanine, l'acide L-aspartique, l'acide L-glutamique, L-sérine, L-cystéine, Lthréonine, mais de préférence on citera la L-alanine, la L-sérine et la L-thréonine. On évitera la L-isoleucine, la L-leucine, la L-asparagine, la L-glutamine, la L-lysine et la L-arginine. Lorsque la base est une cytosine, on choisira des acides aminés "ambigus" OU n amphiphiles", c'est-àdire ne présentant pas d'effet solvant soit ni trop hydrophobes; ni trop hydrophiles. On peut citer notamment la L-alanine, la L-sérine, la L-cystéine, la L-thréonine, la L-tyrosine, la L-histidine, mais de préférence on utilisera la Lalanine, la L-sérine, la L-thréonine. Lorsque la base est une adénine ou une guanine, on utilisera des acides aminés hydrophiles. On peut citer notamment la L-tyrosine, la L-histidine, la Lasparagine, la L-glutamine, la L-lysine, la L-arginine, la L-acide aspartique, la L-acide glutamique, la L-sérine, la L-cystéine, la glycine, la L-thréonine. Plus précisément, lorsque la base est une adénine, on choisira de préférence des acides aminés très chargés et très hydrophiles, notamment la Lasparagine, la L-glutamine ou la L-lysine. Lorsque la base est une guanine, on choisira des acides aminés petits et hydrophiles, de préférence la L-sérine et la L-cystéine, ainsi que la L-a.rginine et la L-lysine. Lorsque la base est une adénine1 on évitera donc les acides aminés hydrophobes, tels que la L-leucine, la L-isoleucine, la L-valine, la L-phénylalanine et la L-alaline. Lorsque la base est une guanine, on évitera les acides aminés hydrophobes, tels que la L-phénylalanine, la L-leucine, la L-isoleucine, la L-valine, la L-alanine. Si la base est une autre pyrimidine, l'acide aminé doit être choisi entre autres et de préférence parmi les acides aminés conseillés pour la thymine, l'uracyle ou la cytosine. Si la base est une autre purine, l'acide aminé doit être choisi entre autres et de préférence parmi les acides aminés conseillés pour l'adénine ou la guanine. D'autres acides aminés non naturels peuvent être utilisés soit pour augmenter l'affinité du peptide pour l'hélice, soit pour apporter des propriétés nouvelles au peptide. Certains enchaînements d'acides aminés ne permettent pas une intèraction stable avec une séquence précise d'ADN ou ARN double brin, notamment on évitera les enchaînements suivants dans la mesure du possible AAX-Cys-Asp-AAz AAX-Cys-Asp-AAz AAX-Cys-Glu-AAz AAX-Cys-Gln-AAz AAX-Asp-Cys-AAz AAX-Asn-Cys-AAz AAX-Glu-Cys-AAz AAX-Gln-Cys-AAz AAX-Asp-Trp-AAz AAX-Glu-Trp-AAz AAX-Trp-Asp-AAz AAX-Trp-Glu-AAz AAX-Asp-Gly-AAz AAX-Asn-Gly-AAz AAX-Cys-Asp-AAz AAX-Cly-Asn-AAz AAX-Glu-Gly-AAz AAX-Gln-Gly-AAz AAX-Gly-Glu-AAz AAX-Gly-Gln-AAz AAX-Ser-Asp-AAz AAX-Ser-Glu-AAz AAX-Thr-Asp-AAz AAX-Thr-Glu-AAz AAX-Glu-Thr-AAz AAX-Asp-Ser-AAz AAX-Glu-Ser-AAz AAX-Asp-Thr-AAz AAx et AAz représentent des acides aminés en amont et en aval, respectant la convention (NH2)-AAx ----- AAz(-COOH). La charnière de l'épingle à cheveux est constituée de préférence de 2, 3 ou 4 acides aminés. Ils seront de préférence choisis parmi la glycine, la Lasparagine et la L-glutamine. La présente invention a également pour objet des conjugués peptide-polynucléotide utiles dans le procédé selon l'invention, conjugués de formule générale (I) : formule dans laquelle ën général 100 > p L 1, le plus souvent 25 > p .5 100 > n h Q , le plus souvent 25 > n b O 400 > m 2 3 , le plus souvent 100 > m w 10 - AA w AA représente un peptide, - N1 ---- Np+n représente un polynucléotide les acides aminés AA étant choisis en fonction de la nature des nucléotides N constituant le polynucléotide compte tenu des principes de correspondance énumérés précédemment, de manière à ce que le peptide adopte une structure en épingle à cheveux entre ladite première s- quence et ladite seconde séquence dans le grand sillon de la double hélice polynucléotidique par l'intermédiaire d'une séquence dite charnière constituée notamment par un ou plusieurs acides aminés n'interagissant pas avec les bases des nucléotides. Comme il ressort de la formule I ci-dessus, le peptide est fixé sur le polynucléotide non nécessairement à une des extrémités de celui-ci. Toutefois, de préférence, cette fixation aura lieu à une des extrémités du polynucléotide, an aura alors p = 1 dans la formule I ci-dessus. Les acides aminés doivent avantageusement respecter les règles de principe de concordances énumérées précéaemment vis-à-vis des nucléotides desdites première et seconde séquences d'une part, et vis-à-vis des acides aminés voisins dans la chaîne peptidique d'autre part. Toutefois, il n'est pas obligatoire que tous les acides aminés respectent ces règles de principe dans la mesure où une proportion suffisante pour assurer la stabilité de l'hybridation y répond. On peut notamment citer une proportion de 30 %. On notera en outre que le peptide n'est pas nécessairement fixé au polynucléotide par l'intermédiaire d'un acide aminé terminal, contrairement à la réalisation préférentielle qui est représentée sur la formule I. De même, la ou les charnière(s) n'est pas ou ne sont pas nécessairement constituée(s) d'une chaîne d'acides aminés, mais peuvent être des groupements chimiques non peptidiques. La présente invention a également pour objet un conjugué peptide-polynucléotide utile dans un procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'il répond à la formule générale II dans laquelle - AAi AAm représente m acides aminés du peptide - n1 ---------N p+n représente ladite première séquence de p+n nucléotide - 100 > p 2 1 , le plus souvent 25 > p p # 5 - 100 > n ; 1, , le plus souvent 25 > n > 0 - 400 > m : 3, le plus souvent 110 > > m m # 10 les acides aminés de AAî AAm étant choisis conformément aux règles de correspondance mentionnées précédemment, de manière à ce que le peptide adopte une structure en double épingle à cheveux grâce à deux séquences "charnières" en son sein Dans ce conjugué AAm paut être lié à Np+1 par un lien amide entre le COOH de AAm et un NH2 de la base. En outre, AA1 peut être lié à Np par un lien amide entre un COOH de AA1 et un NH2 de la base si AA1 représente un acide glutamique ou un acide aspartique.On peut sinon relier un NH2 de AA1 et celui de la base par unnlinker" chimique consistant par exemple en un groupement chimique présentant deux fonctions COOH, telles qu'un groupement hémisuccinyl, chacune des fonctions COOH du "linker" formant un lien amide avec les fonctions NH2 de l'acide aminé et de la base respectivement. Toutefois, de préférence, les liens entre le peptide et le polynucléotide se feront comme aécrit précédemment entre une lysine at the thymine ou uracile triazolée. Dans ce cas, AAm et AA1 représentent donc des lysines et Np+1 et Np représentent des méthyl-cytosine, ou cytosine respectivement. Dans un mode de réalisation approprié des conjugues selon l'invention, ceux-ci peuvent être représentés par une formule générale III dans laquelle m est un nombre entier compris entre 3 et 400. R est choisi parmi les chaînes d'acides aminés naturels éventuellement modifiés et les chaînes d'acides aminés non naturels éventuellement modifiés. Z est choisi parmi le radical OH, un polynucléotide, une molécule de protection et une molécule de mar quage telle que notamment le dinitrophénol, la biotine, la fluorescéine entre autres .... X est choisi parmi le radical H, un polynucléotide, une molécule de protection et une molécule de marquage telle notamment le dinitrophénol, la biotine, la fluorescéine, entre autres. Y est présent lorsque R est la chatne de la lysine, de l'acide aspartique ou glutamique auquel cas Y peut représenter un polynucléotide, une molécule de protection, ou une molécule de marquage, notamment le dinitrophénol, la biotine, la fluorescéine, ces éléments étant fixés sur la fonction RH2 ou COOH de R. L'un seulement de X, Y et Z est un polynucléo tide correspondant à ladite première séquence. Cette alternative entre X, Y et Z pour repré senter le polynucléotide témoigne de la triple possibi lité de fixer celui-ci sur le peptide,soit par l'inter médiaire d'une fonction COOR du peptide sur le NH2 d'une base, soit d'une fonction Nil du peptide sur une base de 2 l'oligonucléotide, en particulier d'une fonction NH2 située en bout de chaine d'une lysine du peptide sur une thymine ou uracile triazolée de l'oligonucléotide tel que mentionné précédemment. Le peptide peut encore être iié à un oligo nucléotide par l'un des sites réactifs dudit oligonucléo tide ou l'un de ses sites modifiés, selon l'une des autres méthodes suivantes La synthèse des complexes peptide-oligonucléotide est connue dans l'art antérieur, on pourra faire appel aux techniques décrites d'une part par Barbara Chu (Nucleic Acid Research, 1983, 11, 6513-6529), d'autre part par Dannagupta et al. (EP 154 884) reprises par Lemaitre et coll. (FR 2 582 653). On pourra notamment effectuer des liaisons sur les sites réactifs, tels que , le radical 2'OH d'un ribose s'il s'agit d'un ARN , le radical 3'OH d'un ribose s'il s'agit d'un ARN ou d'un ADN , le radical 5'OH d'un ribose , le radical OH du phosphate en 3' , le radical OH du phosphate en 5' , le radical H2 en C6 de l'adénine le radical NH2 en C2 de la guanine le radical NH2 en C4 de la cytosine. ces radicaux NH2 seront fixés par exemple sur la fonction carboxyle du peptide par l'intermédiaire d'un lien amide. La méthode selon Barbara Chu consiste à conjuguer une fonction NH2 d'un acide aminé terminal du peptide avec le radical OH du phosphate en 5'. La méthode de Lemaitre et coll. consiste à modifier le cycle ribose d'ARN pour introduire deux fonctions aldéhydes sur les carbones en 2' et 3', l'alcoylation réductive du composé obtenu par un polypeptide sur sa fonction NH2 permettant le couplage par l'intermédiaire d'une cyclisation sous forme d'un hétérocycle avec un hétéroatome d'azote. La synthèse des peptides est connue et fait appel aux techniques classiques utilisant soit les voies du génie génétique, soit les voies du génie chimique sur support solide selon Merrifield ou en phase liquide. La synthèse des oligonucléotides esc acalement connue et fait appel aux techniques classiques utilisant soit les voies du génie chimique, soit celles du génie génétique. La présente invention a donc également pour objet des conjugués caractérisés en ce que la liaison entre le peptide et le polynucléotide se fait entre une lysine du peptide et une méthyl-cytosine ou cytosine du polynucléotide, le NH2 situé à l'extrémité de la chaîne de la lysine étant fixé sur le carbone en position 4 de la méthyl-cytosine ou cytosine respectiverent. De même, la présente invention a pour objet un procédé de préparation des conjugués selon l'invention, caractérisé en ce que le peptide est lié au polynucléotide en substituant le groupe triazole d'une thymine ou uracile triazolée en position 4 du polynucléotide de départ, par le peptide via son groupe NH2 situé à l'extrémité de la channe d'une lysine. Enfin, la présente invention a pour objet l'application du procédé et des conjugués selon l'invention. Il peut s'agir d'une application thérapeutique ou biotechnologique dans le cas d'une utilisation du procédé ou des conjugués au blocage ou au déblocage d'un gènade structure ou de régulation situé sur l'ADN d'un organisme quelconque. I1 peut également s'agir d'une application thérapeutique ou biotechnologique dans le cas d'une utilisation du procédé ou de ces conjugués à l'irnnnitlQi de la traduction d'un ARN messager ou non ainsi qu'à l'inhibition des processus d'épissage des ARN messagers. Les applicat2rs du procédé ou de ces conjugués peuvent également être des applications comme sondes diagnostiques, dans ce cas, l'un de X ou Z doit représenter une molécule de marquage. Une application biotechnologique peut également consister en l'utilisation du procédé ou de ces conjugués, comme outil de purification de matériel nucléique. On peut compléter le matériel génétique d'une cellule sous quelle que forme que ce soit de telle façon que cette cellule produise par exemple une molécule antisens et le peptide qui la stabilise sur sa cible, sans pour autant qu'une liaison covalente existe entre le peptide et 1'oligonucléotide, notamment pour une application dans le domaine des plantes transformées. En revanche, pour une application en thérapeutique humaine il sera nécessaire que le peptide soit lié à l'oligonucléotide. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lumière des exemples qui vont suivre qui font référence à des figures. Sur la figure 1~sont représentés deux groupes :NH de deux acides aminés qui coopèrent entre eux et interagissent dans le grand sillon avec une paire de bases - A hybridée Sur la figure 2, sont représentés deux groupes :NH de deux acides aminés qui coopèrent entre eux zt interagissent dans le grand sillon avec une paire ae bases C - G hybridée. Sur la figure 3, est représentée l'interaction du complexe d'hybridation incorporant le peptide selon l'invention. EXEMPLE 1 : INTERACTION ET COOPERATION Sur les figures 1 et 2, (1) représente le site de fixation des bases aux cycles riboses. Sur les figures 1 et 2, on voit que chaque azote d'une liaison peptidique (2a et 2b) de chacun des deux acides aminés et à l'origine de deux liaisons hydrogènes, une comme accepteur d'hydrogène, appelé "E" par le biais de l'électron, et une comme donneur d'hydrogène, appelé "". L'azote d'un groupe NH d'un acide aminé interagit avec l'hydrogène d'un groupe NH de l'autre acide aminé. De même, l'électron de l'azote de cette autre acide am interagit avec le NH2 en C6 de l'adénine (figure 1) ou le NH2 en C4 de la cytosine (figure 2). L'hydrogène de l'azote du premier acide aminé interagit avec l'04 de la thymine (figure 1) ou l'06 de la guanine (figure 2). Le radical R de l'acide aminé de série L représenté figure 3 interagit avec le reste de la surface exposée au grand sillon de la base du côté amine de l'acide aminé. Les flèches symbolisent cette interaction. Sur la figure 3, B1 et B2 représentent deux bases de nucléotides de ladite première séquence et B1 et B; représentent les deux bases complémentaires de B1 et B2, bases de nucléotides de ladite seconde séquence. B1 peut représenter par exemple une thymine, B; représentant alors l'adénine. Ces deux bases interagissent notamment par l'intermédiaire de 1'04 de la thymine et du NH2 en C6 de l'adénine comme représenté figure 1. B2 peut représenter par exemple une guanine, B2 représentant alors la cytosine ; ces deux bases interagissant notamment par l'intermédiaire de 1'06 de la guanine et du NH2 en C4 de la cytosine comme représenté figure 2. EXEMPLE 2 : COrIJUGUE PEPTIDE-OLIGONUCLEOTIDE On donne ci-après un exemple de réalisation de l'invention pour un agent antiparasitaire, notamment contre la trypanosomiase, la molécule étant dirigée contre une partie d'une séquence consensus de 35 nucléotides ajoutée à l'extrémité 5' de tous les ARNm de ce parasite 5' AAC GCT ATT ATT AGA ACA GTT TCT GTA CTA TAT TG 3'. La séquence mentionnée ci-dessus correspond à la séquence au niveau de l'ADN. Un exemple de conjugué peptide-oligonucléotide et de complexe d'hybridation est donné ci-dessous la séquence cible correspondant à la traduction ARN de la séquence donnée précédemment Outre l'application antiparasitaire pour la trypanosomiase mentionnée ci-dessus, on peut également utiliser des conjugués selon l'invention dans une action antiparasitaire contre la leishmaniose ou une action antivirale dans le cas de HiVt, HiV2' d'Herpès, etc., ou encore antibactérienne pour la lèpre, la tuberculose, etc. Une application à l'inhibition de la traduction des ARNm peut être envisagée dans le cas - du récepteur H1 (ulcère) - de la rénine (hypertension artérielle) - de l'angioteusine (hypertension artérielle). Ce type d'application où la séquence cible est de l'ARN est particulièrement intéressant car la double hélice d'hybridation ADN-ARN adopte une forme A sur laquelle les peptides se complexent plus facilement compte tenu du grand sillon de ces hélices A. EXEMPLE 3 : SYNTHESE D'UN OLIGONUCLEOTIDE COUPLE A UN PEPTIDE Préparation des solvants La pyridine est portée 2 heures au reflux sur hydrure de calcium, distillée, portée au reflux avec le chlorure de l'acide paratolulène sulfonique puis redistillée. I ) Préparation de thymine triazolée pour la synthèse manuelle (phosphotriester) (selon la méthode décrite par W.L. Sung : Nucleic Acid Research (1981), vol 9, p 6139 et J. Org. Chem. (1982), vol 47, p 3623) On prend 4 gr d'O-di-méthoxytrityl-5'0-[(2-chlorophényl)( cyanoéthyl) phosphate]-3' désoxy-2' thymidine (=DMTr Tpce) (PM = 787,5 ; S,07 mmoles) préparé selon la méthode décrite par M.I Gait ("Oligonucleotide synthesis : a practical approach", 1985, IRL Press) et 2,5 g o-chlorophényl dichlorophosphate (PM = 245,33 ; 10,1 mmoles) et 1,4 g 1, 2, 4 triazole (PM = 69,07 ; 20,3 mmoles). On agite la solution dans 9 ml de pyridine déshydratée à 100C pendant 5 minutes puis à la température de la pièce pendant un week-end. On dilue le mélange avec 45 ml d'H2O et extrait deux fois dans 79 ml CH2Cl2 désacidifié. On lave des phases organiques combinées dans 2 % NaHCO3 aqueux, puis séchage avec Na2SO4, filtrage et évaporation sous vide. On resuspend le précipité dans un ballon avec 2 ml de CH2Cl2, puis on verse rapidement 100 ml d'éther de pétrole, on laisse reposer, on enlève l'éther usagé et on remet 100 ml d'éther propre afin d'enlever toute trace de pyridine qui aurait l'inconvénient d'empêcher la séparation des produits. Le produit est chromatographié sur une colonne de silice Merck 9385 ou 7734 tassée dans le CH2Cl2. On élue d'abord avec le CH2C12 100% puis avec CH2C12 + 1 % méthanol, puis CH2C12 t 2 % méthanol, puis CH2Cl2 + 3 % méthanol puis CH2C12 + 4 % méthanol et enfin avec CH2Cl2 + 5 % méthanol. Les contrôles de sortie de colonnes se font par chromatographie sur couches minces (CCM) effectuées sur des plaques de silice Merck 60F254 (0,2 mm). L'avantage du triazole est qu'il fluoresce à 366 nm ce qui permet de le suivre très facilement. Les sorties de colonne, fluorescentes à 366 nm, sont repassés afin d'obtenir un produit parfaitement pur. A la fin de la quatirème colonne, lorsque l'on arrive au 5 % méthanol, on obtient une seule tache. 2) Couplage en synthèse manuelle du nucléoside modifié à un oligonucléotide Couplage d'un oligo (n-l) à la machine Applied Biosystems dans un premier temps. On sort la cartouche de la machine et la décortiquer. Mettre les billes sur un petit fritté. Décyanoéthyler le DMTr Tpce avec un mélange de Triéthylamine, Pyridine et Eau (TPE 1/3/1) pendant 20 minutes. On couple ensuite la thymine triazolée 3'OH, comme un nucléotide normal à l'oligo 5'OH avec 500 moles de (triisopropyl-2, 4, 6 benzène sulfonyl)-l nitro-3 triazole-l, 2, 4 (TPNST) dans la pyridine anhydre pendant 2 heures. Les fonctions 5' restées libres sont bloquées avec une solution d'anhydride acétique dans la pyridine (10 % v/v) pendant 30 minutes à température ambiante. On rinçe plusieurs fois à la pyridine puis au CH2C12-CH3OH (90:10 v/v). Détrityler l'extrémité 5' avec de l'acide benzène sulfonique à 2 % dans un mélange CH2Cl2. On répéte l'opération jusqu'à complète détritylation. On lave l'oligonudéotide plusieurs fois avec de la pyridine. 3) Préparation de thymine triazolée pour la synthése automatique (phosphoramidite) (selon la méthode décrite par T.R. Webb et M.D. Matteucci, Nucleic Acids Res., 1986, vol 14, p 7661) Mettre 1,4 g de 1, 2, 4-triazole (PM = 69,07 ; 20,3 mmoles) dans 30 ml d'acétonitrile. On refroidit le mélange dans un bain de glace. On ajoute très lentement et sous bonne agitation 500 l de chlorure de phosphoryle distillé (POCL3) (5,4 mmoles) qui font apparaître un précipité blanc. On ajoute ensuite, goutte à goutte, 3 ml de triéthylamine (21,7 mmoles). On agite le mélange réactionnel dans un bain de glace pendant 30 minutes. On ajoute I g d'O-di-méthoxytrityl-5' O4(2hlorophényl) (p-cyanoéthyl) N, N'-(diisopropyl) phosphoramidite]-3' désoxy-2' thymidine (PM = 793,65 ; 1,26 mmoles) fourni par la Société Applied Biotsytems, dissoute dans S ml d'acétonitrile. On agite 30 minutes à température ambiante. On laisse incuber pendant 48 heures. La réaction est arrêtée avec une solution à 5 % de bicarbonate de sodium. La phase aqueuse est extraite plusieurs fois avec du dichlorométhane, séché sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. La (1, 2, 4-triazol-l-yl)-4 O-diméthoxytrityl-5' O cyanoéthyl) N, N'4liisopropyl) phosphoramidite]-3' désoxy-2' thymidine est dissoute dans une très petite quantité de dichlorométhane puis reprécipitée dans l'éther de pétrole à 700C. 4) Couplage en synthèse automatique du nucléoside modifié à ltoligonucléotide Le DMTr Tpce est couplé à l'extrémité 5' de l'oligonucléotide fixe sur la résine comme un nucléoside normal. 5) Préparation du peptide Les différents peptides sont synthétisés avec un synthétiseur Applied Biosystems en phase solide selon les méthodes classiques. Ceux-ci sont purifiés sur HPLC avec un gradient de tampon A et de tampon B (tampon A: acétate d'ammonium 100 pM, tampon B : 20 % acétate d'ammonium 100 uM et 80 % acétonitrile). Les-colonnes utilisées pour analyser les produits contiennent un support de phase inverse de type HS3 C18 ou Nucléosil uCl8. Les peptides destinés à être liés à un oligonucléotide sont fournis sans protecteur et ont leurs extrémités N-terminale acétylée et C-terminale amidée. 6) Préparation du conjugué oligonucléotide-peptide Le peptide est accroché par le NH2 situé à l'extrémité de la chaine de la lysine C-terminale au nucléotide par une réaction de substitution du triazole. On met dans 500 Ctl de pyridine l'oligonucléotide fixé sur les billes et le peptide dans les proportions 1:3 à 1:10, à température ambiante pendant 48 à 72 Heures. On lave les billes 4 à 5 fois avec de la pyridine puis on les séche. On détache le conjugué oligonucléotide-peptide des billes ainsi que les éléments protecteurs des nucléotides avec une solution d'ammoniaque à 25 % pendant 5 heures à 560C. On prélève le surnageant après centrifugation puis on le sèche. Le produit resuspendu dans de l'eau est purifié sur HPLC par un gradient de tampon A et tampon B. Le pic majoritaire (sorti à' 13 % pour le peptide ne 1) est caractérisé par l'hydrolyse acide d'un petit aliquot. L'analyse d'acides aminés permet de s'assurer que le peptide est bien fixé à l'oligonucléotide. Un spectre UV permet de visualiser la présence de l'oligonucléotide à 250 nm. Le rendement de couplage se situe entre 80 et 85 %. Le rendement de purification est seulement de 20 %. N.B.: après fixation du peptide la thymine triazolée devient une méthylcytosine fonctionnalisée. EXEMPLE 4 : Mesure de l'effet stabilisateur de différentes séquences peptidiques sur différentes séquences oligonucléotidiques L'effet de stabilisation d'un peptide sur une hélice oligonucléotidique A est mis en évidence par l'élévation de la température de demi-transition des complexes. La mesure se fait dans une solution à 66 % éthanol et 6,5 mmol de phosphate de sodium à pH 7,4. Les séquences suivantes ont été étudiées I ) OliRonucléotide-peptide I Acétyl-NH-Asn-Thréo-Arg-Ser-Arg-Ala-Ala-Ala-Arg-Ala-Ser-Ser-Gly Gly-Ala-Ala-Arg-Ala-Ser-Gly- Oligonucléotide complémentaire : 5'GGCGCCCGAACAG 3' Oligonucléotide témoin I bis : 3'CCGCGGGCTTGTC 5' Oligonucléotide complémentaire 1: 5'GGCGCCCGAACAG 3' 2) Acétyl-NH-Asn-Ala-Ala-Ala-Ala-Ser-Lys-Gln-Thréo-Arg-Ser-Ser- Gly-Cly-Ser-Phe-Val-Ser-Phe-Leu-Ala-Ser-Ser-Ser-Ser-s-CONH2 3'CCTTGTTCGGGGT Cme 5' Oligonucléotide complémentaire 2 : 5'GGAACAAGCCCCAG 3' Oligonucléotide témoin 2 bis : 3'CCTTGTTCGGGGTC 5' Oligonucléotide complémentaire 2 : 5'GGAACAAGCCCCAG 3' 3) Peptide autocomplémentaire 3 non fixé sur l'oligonucléotide 3 H-Arg-Gln-Ala-Ser-Leu-Ala-Arg-Gln-Ala-Ser-Leu-Ala-OH OH-Ala-Leu-Ser-Ala.Gln-Arg-Ala-Leu-Ser-Ala-Gln-Arg-H Oligonucléotide complémentaire 3 3'GACGTCGACGTC 5' 5'CTGCAGCTGCAG 3' 4) Peptide autocomplémentaire 4 non fixé surl'oligonucléotide 4 H-Ala-Leu-Ala-Ser-Lys-Ser-Ala-Leu-Ala-Ser-Lys-Ser-OH OH-Ser-Lys-Ser-Ala-Leu-Ala-Ser-Lys-Ser-Ala-Leu-Ala-H Oligonucléotide autocomplémentaire : 3'CTCGAGCTCGAG 5' 5'GAGCTCGAGCTC 3' Ainsi, pour cette dernière expérience sans peptide la température de demi-transition n'est que de 32"C alors qutavec peptide la température de demi-transition s'élève à 48"C témoignant d'une plus forte hybridation. REVENDICATIONS 1. Procédé de stabilisation de l'hybridation d'une première séquence polynucléotidique d'ADN ou d'ARN modifiés ou non, à configuration anomérique a ou ss avec une seconde séquence cible complémentaire de la première séquence d'ADN ou d'ARN, caractérisé en ce qu'un peptide forme un complexe avec la double hélice d'hybridation que forment lesdites première et seconde séquences nucléotidiques. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le peptide est fixé de manière covalente sur ladite première séquence. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'enchaînement d'aminoacides du peptide comporte - une première succession d'aminoacides qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite première sé quencet le cas échéant, à partir du site de fixation du peptide sur celle-ci, - une seconde succession d'un même nombre d'aminoacides que la première succession d'aminoacides, qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite seconde séquence, - lesdites première et seconde successions d'aminoacides étant reliées entre elles par une séquence dite "charnière" constituée notamment par un ou plusieurs acides aminés n'interagissant pas avec les bases des dites première et seconde séquences, de telle sorte que - les acides aminés de ladite première succession =-.ter- agissent de manière coopérative avec les acides aminés de ladite seconde succession, - l'interaction coopérative résultante entre le peptide et l'hélice double brin formée par le complexe d'hybri dation desdites première et seconde séquences étant telle que le peptide se glisse dans le grand sillon de la double hélice et prenne une structure en épingle à cheveux entre ladite première et ladite seconde sé quences nucléotidiques par l'intermédiaire de la séquence dite "charnière, 4. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que le peptide comporte - une première succession d'acides aminés qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite première séquence, - une seconde succession d'acides aminés qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite seconde séquence, - une troisième succession d'acides aminés qui présentent une interaction un à un respectivement avec une succes sion de bases de nucléotides de ladite première séquence, lesdites première et seconde successions d'acides aminés d'une part, et lesdites seconde et troisième successions d'acides -aminés d'autre part, étant reliées à chaque fois par une séquence dite "charnière" constituée notamment nar un ou plusieurs acides aminés n interagissant cas avec les bases desdites première et seconde séquences, - les séquences de nucléotides dont les bases interagissent avec ladite seconde succession d'aminoacides constituant la séquence complémentaire de celles dont les bases interagissent avec lesdites première et troisième succes sions d'acides aminés, de telle sorte que':: - les acides aminés desdites première et troisième succes sions d' aminoacides interagissent de manière coopérative avec les acides aminés de ladite sonde succession, - l'interaction coopérative résultante entre le peptide et l'hélice double brin formée par le complexe d'hybri dation desdites première et seconde séquences, étant telle que le peptide se glisse dans le grand sillon de la double hélice et prenne une structure en double épingle à cheveux entre ladite première séquence et ladite seconde séquence nucléotidiques par l'inter médiaire des deux séquences "cflarnie'res". 5. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que les nucléotides de ladite première séquence comportent des bases choisies parmi l'adénine, la guanine, la thymine, la cytosine, l'uracyle, l'inosine, la 2-6 diaminopurine, le 6 amino 8-bromopurine, le 5 bromouracyle, le 5-iodouracyle. 6. Procédé selon l'une des revendications 3 à 5, caractérisé en ce que lorsque la base d'une desdites première ou seconde séquences est une thymine, l'acide aminé correspondant est un acide aminé hydrophobe. 7. Procédé selon la revendication , caractérisé en ce que l'acide aminé est choisi parmi la L-phénylalanine, la L-leucine, la L-isoleucine, la L-valine, la L-alanine, la L-méthionine. De préférence, l'acide aminé étant choisi parmi la L-leucine, la L-isoleucine et la L-valine. 8. Procédé selon l'une des revendications 3 à 7, caractérisé en ce que lorsque la base est un uracyle, l'acide aminé est un acide aminé amphiphile ou acide. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'acide aminé est choisi par la L-alanine, l'acide L-aspartique, l'acide L-glutamique, la L-sérine, la la L-cystéine, la L-thréonine. De préférence, l'acide aminé est choisi parmi la Alanine, la L-sérine, la Lthréonine. 10. Procédé selon l'une des revendications 3 à 9, caractérisé en ce que la base est une cytosine, l'acide aminé étant choisi parmi des acides aminés amphiphiles. 17, Procédé selon la revendication1Q, caractérisé en ce que l'acide aminé est choisi parmi la Lalanine, la L-sérine, la L-cystéine, la L-thréonine, la L-tyrosine, la L-histidine. De préférence, l'acide aminé étant choisi parmi la L-alanine, la L-sérine, la Lthréonine. 12. Procédé selon l'une des revendications à d 11, caractérisé en ce que la base est une adénine ou une guanine, l'acide aminé correspondant étant-choisi parmi les acides aminés hydrophiles. 13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'acide aminé est choisi parmi la L-tyrosine, la L-histidine, la L-asparagine, la L-glutamine, la L-lysine, la L-arginine, l'acide L-aspartique, l'acide L-glutamique, la L-sérine, la glycine, la L-thréonine. 14. Procédé selon l'une des revendications 3 à 13, . caractérisé en ce que lorsque la base est une adénine, l'acide aminé correspondant est choisi parmi les acides aminés très chargés et très hydrophiles, notamment la L-asparagine, la L-glutamine ou la L-lysine et la L-arginine, et lorsque la base est une guanine, l'acide aminé correspondant est choisi parmi les acides aminés petits et hydrophiles, de préférence la L-sérine, la L-cystéine, la L-arginine et la L-lysine. 15. Procédé selon l'une des revendications 3 à 13, caractérisé en ce que le peptide est constitué d'un enchaînement d'acides aminés qui ne présentent pas les enchaînements suivants : AAx-Cys-Asp-AAz AAx-Cys-Asp-AAz AAx-Cys-Gln-AAz AAx-Cys-Gln-AAz AAx-Asp-Cys-AAz AAx-Asn-Cys-AAz AAx-Gln-Cys-AAz AAx-Gln-Cys-AAz AAx-Trp-Asp-AAz AAx-Trp-Gln-AAz AAx-Asp-Trp-AAz AAx-Glu-Trp-AAz AAx-Asp-Gly-AAz AAx-Asn-Gly-AAz AAx-Gly-Asp-AAz AAx-Gly-Asn-AAz AAx-Gln-Gly-AAz AAx-Cln-Gly-AAz AAx-Gly-Glu-AAz AAx-Gly-Glu-AAz AAx-Ser-Asp-AAz AAx-Ser-Glu-AAz AAx-Thr-Asp-AAz AAx-Thr-Glu-AAz AAx-Glu-Asp-AAz AAx-Asp-Ser-AAz AAx-Glu-Ser-AAz AAx-Asp-Thr-AAz AAx et AAz représentent des acides aminés en amont et en aval, respectant la convention (NH2)-AAx ----- AAz(-COOH). 16 . Procédé selon l'une des revendications 3 à 15, caractérisé en ce que les acides aminés "charnières" sont choisis parmi la glycine, la L-asparagine at la L-glutamine. 17 . Conjugués peptide-polynucléotlde utiles dans le procédé selon l'une des revendications 2, 3 et 5 à 15, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale I : formule dans laquelle en général 100 > p # 1 100 > n 2 400 > m # 3 AA1 ---- AAm représente m acides aminés du peptide, et1 p+n représente n+p nucléotides du polynucléo tide, les acides aminés de AA1 ---- AAm étant choisis conformément aux revendications 2 et 4 à 15. 18 . Conjugués peptide-polynucléotide utiles dans le procédé selon l'une des revendications 3 et4 à 16, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale (II) dans laquelle - AA1----- AAm représente m acides aminés du peptide - N1 ---------- Np+n représente ladite première séquence de p+n nucléctide - 100 > p 2 - 100 > n # 1 - 400 > m 2 3 les acides aminés de AAr ----- AAm étant choisis conformément aux revendications 2 et 3 à 9. 19. Conjugués selon la revendication 17, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale III dans laquelle m est un nombre entier compris entre 3 et 100. R est choisi parmi les chaînes d'acides aminés naturels éventuellement modifiés et les chaînes d'acides aminés non naturels éventuellement modifiés. Z est choisi parmi le radical OH, un polynucléotide, une molécule de protection et une molécule de mar quage telle que notamment le dinitrophénol, la biotine, la fluorescéine entre autres. X est choisi parmi le radical H, un polynucléotide, une molécule de protection et une molécule de marquage telle que notamment le dinitrophénol, la biotine, la fluorescéine entre autres. Y n'est présent que lorsque R est la chaque de la lysine, de l'acide aspartique ou de l'acide glutamique, auquel cas Y peut représenter un polynucléotide, une molécule de protec tion ou une molécule de marquage, notamment le di nitrophénol, la biotine, la fluorescéine, ces éléments étant fixés sur la fonction NE2 ou COOH de R. L'un seulement de X, Y et Z est un polynucléo tide correspondant à ladite première séquence. 20. Conjugué selon l'une des revendications 17 à 19, caractérisé en ce que la liaison entre le peptide et le polynucléotide se fait entre une lysine du peptide et une méthyl-cytosine ou cytosine du polynucléotide, le NH2 situé à l'extrémité de la chaîne de la lysine étant fixé sur le carbone en position 4 de la méthyl-cytosine, ou cytosine respectiverent. 21. Procédé de préparation de conjugués selon la revendication 20, caractérisé en ce que le peptide est lié au polynucléotide en substituant le groupe triazole d'une thymine ou uracile triazolée en position 4 du polynucléotide dé départ, par le peptide via son groupé NH2 situé à ltextré- mité de la chaîne d'une lysine 22. Composé utile au blocage ou au déblocage d'un gène de structure ou de régulation situé sur 1'ADN d'un organisme quelconque, caractérisé en ce qu'il consiste en un conjugué selon l'une des revendications 17 à 20. 23. Composé utile à l'inhibition de la traduction ou de l'épissage d'un ARN messager ou non, caractérisé en ce qu'il consiste en un conjugué selon l'une des revendications 17 à 20. 24. A titre de médicament, les conjugués selon l'une des revendications 17 à 20. 25. Sonde de diagnostic caractérisée en ce qu'elle est constituée par un conjugué selon l'une des revendications 17 à 20 lié à une molécule de marquage.