FR 2654430 A1 19910517 FR 8914978 A 19891115 La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés de peptides, utilisables comme inhibiteurs des collagénases bactériennes qui appartiennent à la classe des métalloprotéases à zinc. De façon plus précise, elle concerne des dérivés de polypeptides possédant un groupement chélatant phosphonamide susceptible d'interagir fortement avec l'atome de zinc du site actif de ces collagénases. Le collagène est un composant majoritaire de la matrice extracellulaire des organismes eucaryo- tes pluricellulaires Ainsi, il est le constituant principal de la peau, des tendons, des os, des cartilages et des tissus, et représente environ % de toutes les protéines du corps humain. Bien que la molécule de collagène soit très résistante à l'action de la plupart des protéa- ses, elle peut être néanmoins dégradée par des protéases qui lui sont spécifiques, les collagénases. Deux classes distinctes de collagénases ont été identifiées à ce jour et sont caractérisées par la spécificité des coupures qu'elles opèrent dans la molécule de collagène La première classe de collagénases est constituée par les collagénases d'organismes supérieurs qui hydrolysent les liaisons peptidiques contenant le doublé Gly-Ile ou Gly-Leu alors que la deuxième classe est constituée par les collagénases bactériennes qui hydrolysent systématiquement toutes les liaisons peptidiques comportant la séquence X-Gly et dégradent en général toute la molécule de collagène. Les collagénases bactériennes appartiennent à la classe des métalloprotéases à zinc et l'existen- ce d'un atome de zinc dans leur site catalytique qui est impliqué directement dans la réaction d'hydrolyse de la liaison peptidique des substrats, rend possible le développement d'inhibiteurs compétitifs de ces enzymes Ces inhibiteurs qui peuvent être des dérivés de peptides, comportent une partie peptidique dont la fonction est d'engager des interactions spécifiques avec les sous-sites de liaison de l'enzyme, et un groupement chélatant susceptible d'interagir fortement avec l'atome de zinc du site actif. Ce modèle d'interaction enzyme-substrat, propre à la famille des protéases à zinc, a permis récemment la mise au point de puissants inhibiteurs présentant des propriétés pharmacologi- ques intéressantes Parmi ceux-ci, on peut citer les inhibiteurs de l'enzyme de conversion et les inhibiteurs des enképhalinases Toutefois, ces composés sont incapables d'inhiber les collagénases bactériennes Ceci s'explique par le fait que chacune de ces trois protéases à zinc (enképhalinase, enzyme de conversion, collagénase bactérienne) possède une spécificité différente. Dans le cas des collagénases bactériennes, des travaux récents ont montré qu'il était possible, d'après les hypothèses développées ci-dessus, de produire aussi pour cette classe de protéases des inhibiteurs pseudo-peptidiques comportant un groupe- ment chélatant thiol, cétone ou phosphoramide. Ainsi, Yotakis et ai dans Eur J Biochem, vol 160, p 413-418 ( 1986) et dans Eur J Biochem, vol 172, p 761-766, ( 1988), ont montré que les composés HS-CH 2-CH 2-CO-Pro -Arg et HS-CH 2-CH 2-CO- Pro-Har inhibaient les collagénases produites par Achromobacter iophagus et par Clostridium histolyti- cum, les constantes d'inhibition Ki obtenues étant de 400 10-9 M et de 210 10-9 M. Galardy et a L dans Biochemistry, vol. 22, n 19, p 4556-4561, ( 1983) et dans US-A- 4 558 034 ont montré que des di et tripeptides comportant un groupement phosphorye inhibaient la collagénase de clostridium histolyticum Dans ce cas, pour le meilleur composé isoamyl-PO 2 G Ly-Pro- Ala,la constante d'inhibition Ki est de 20 10-6 M. Mookhtiar et a L dans Biochemistry, vol. 27, p 4299-4304 ( 1988) ont montré que des dérivés de peptides comportant une fonction cétone pouvaient inhiber les collagénases de Clostridium histolyticum. Dans ce cas, la constante d'inhibition Ki est de 1 10-6 M pour le meilleur composé (cinnamoyl Leuk- Gly-Pro-Arg). Ainsi, aucun des inhibiteurs connus ne conduit à des constantes d'inhibition de l'ordre de la nanomole. Aussi, des recherches ont été poursuivies pour trouver d'autres inhibiteurs plus actifs, notamment dans Le groupe des inhibiteurs comportant un groupe phosphoryle L'intérêt de tels composés réside dans le fait qu'ils représentent des analogues parfaits de l'état de transition des substrats de la collagénase et sont donc en conséquence suscep- tibles d'interagir très fortement avec l'enzyme. D'autre part, à l'inverse des composés qui possèdent un groupement thiol, ces composés i permettent des modifications de part et d'autre du groupe phosphoryle, autorisant ainsi une meilleure investigation des facteurs qui gouvernent à la fois l'activité et la sélectivité des composés. La présente invention a précisément pour objet de nouveaux dérivés de peptides qui sont des inhibiteurs des collagénases bactériennes plus puissants que les inhibiteurs connus actuellement. Selon l'invention, ces dérivés de peptides répondent à la formule: O R 4 il 1 R 1-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 (I) OR'5 OR R 3 dans laquelle R 1 représente un groupe choisi parmi les groupes aryle et aralkyle non substitués ou substitués sur leur partie aryle par au moins un substituant choisi parmi les groupes halo, trifluoro- méthyl, alcoxy en C 1 à C 4, alkyle en C 1 à C 4, alcanoyloxy en C 1 à C 4, carbonyloxyalkyle en C 2 à C 5, nitro, carboxy ou cyano, et le groupe de formule: -CH-NH-R 7-R 8 R 6 dans laquelle R 6 est la chaîne latérale d'un a-aminoacide, R 7 est une simple liaison ou un radical dérivé d'un a-aminoacide ou d'un peptide de formule (CO-CH-NH)n 1 I R 9 dans laquelle R 9 est la chaîne latérale d'un o-amino- acide, N est un nombre entier de 1 à 2 et les R 9 peuvent être différents lorsque n> 1, relié à NH par CO; et R 8 est un groupe bloquant la termi- naison N d'un -aminoacide ou un groupe aralkyle non substitué ou substitué par au moins un substi- tuant choisi parmi les groupes halo, trifluorométhy- le, alcoxy en C 1 à C 4, alkyle en C 1 à C 4, alcanoyloxy en C 1 à C 4, carbonyl oxyalkyle en C 2 à C 5, nitro, carboxy ou cyano; R 2 est un radical bivalent dérivé d'un -aminoacide choisi parmi la proline, l'hydroxyproli- ne, la thiazolidine et la déshydroproline, de formules: CH 2 CH S CH 2 CH 2 CH J I I I N -CH CO N -CH CO - OH CH 2 / H 2 C CH 2 H 2 C CH 2 I I I l NCH -N CH CON CH CO - relié par sa partie NH à CO; R 3 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C 1 à C 4, R 4 est un groupe alkyle en C 1 à C 5 ou la chaîne latérale d'un a-aminoacide; et R 5 et R'5 qui peuvent être identiques ou différents, sont un atome d'hydrogène, un métal, un groupe alkyle en C 1 à C 5 ou un groupe benzyle; à condition que R 1 représente un atome d'hydrogène et R 4 représente le groupe n-butyle lorsque R 1 est un groupe aryle ou aralkyle non substitué. Dans ces dérivés de peptides, le choix e de R 1 permet d'obtenir des inhibiteurs plus puissants que ceux réalisés par Galardy dans lesquels les groupes utilisés correspondant à R 1 sont des groupes alkyle, par exemple éthyle ou isoamyle. En effet, en utilisant selon l'invention un groupement aryle ou aralkyle, de préférence un groupe aralkyle substitué sur sa partie aryle, on améliore l'interaction entre R 1 et le sous-site Pl de la collagénase, ce qui permet d'obtenir des inhibiteurs plus puissants dont l'activité peut être en particulier réglée en choisissant de façon appropriée le groupe alkyle et le type de substituant introduit sur la partie aryle. On améliore également le pouvoir inhibiteur des dérivés de peptides en disposant après le groupe phosphoryle, un groupe de type: -CH-NH-R 7-R 8 R 6 comportant un ou deux analogues d'acides aminés. En effet, dans ce cas, les groupements substituants l'atome de phosphore sont des acides aminés et sont par conséquent très proches de la structure d'un substrat type de collagénase à l'état de transi- tion. Le terme "aryle" utilisé ici comprend les systèmes à noyau aromatique carbocyclique et hétérocyclique contenant par exemple un ou plusieurs hétéroatomes tels que O, S et N Ces groupes aryle ont généralement de 3 à 10 atomes de carbone. A titre d'exemples de groupes aryle, on peut citer les groupes phényle, naphtyle, furyle, thiényle, pyrolyle, imidazolyle, pyridyle, pyrimidi- nyle, indolyle, quinolyle, oxazolyle et isooxazolyle. Le terme "aralkyle" désigne ici des groupe- ments formés par l'association d'un groupe aryle à et d'un groupe alkyle Les groupes aryle peuvent être du type de ceux décrits ci-dessus Les groupes a Lky Le peuvent être linéaires ou ramifiés et ont de préférence de 1 à 4 atomes de carbone. Selon l'invention, le groupe aralkyle peut être substitué sur sa partie aryle par au moins un substituant choisi parmi les groupes halo, par exemple le fluor, le chlore, le brome ou l'iode, trifluorométhyle, alcoxy en C 1 à C 4, alkyle en C 1 à C 4, alkanoyloxy en C 1 en C 4, carbonyloxyalkyle avec un groupe alkyle en C 1 à C 4, nitro, carboxy, et cyano. Selon l'invention, lorsque R 1 représente un groupe aryle, il peut être également substitué par les groupements décrits ci-dessus. Le terme "alpha-aminoacide" utilisé ici se rapporte aux vingt aminoacides communément trouvés dans les protéines qui sont également connus sous le nom d'aminoacides standard et à leurs analogues Les chaînes latérales de ces aminoacides comprennent des groupes alkyle linéaires et ramifiés, hydroxyalkyle, carboxyalkyle, aralkyle, aminoalkyle, carboxamide alkyle, mercapto alkyle, phénylalkyle, hydroxyphénylalkyle, guanidinoalkyle, imidazoylalkyle, indolylalkyle, et pyrrolidinyle. A titre d'exemple d'acides aminés utilisa- bles, on peut citer l'alanine, l'arginine, l'asparagine, l'acide aspartique, la cystéine, la glutamine, l'acide glutamique, la glycine, l'histidine, l'isoleucine, la leucine, la norleucine, la lysine, la méthionine, la phénylalanine, la proline, l'hydroxyproline, la sérine, la thréonine, le tryptophane, la tyrosine, la valine, la nitrophényl alanine, l'homo arginine, la thiazolidine et la déshydroproline. Les termes "groupe bloquant la terminaison N d'un e-aminoacide" incluent tous les groupes bloquants utilisables pour bloquer les fonctions amines d'aminoacides et de peptides, par exemple les groupes t-butoxycarbonyle, *benzyloxycarbonyle, cinnamoyle, pivaloyle et N-( 9-fluoré nyl-méthoxycarbo- nyle). Les métaux utilisables pour R 5 et R'5 sont en particulier des métaux pharmaceutiquement acceptables, par exemple des métaux alcalins tels que le sodium et le lithium. Selon un premier mode de réalisation de l'invention, R 1 est un groupe choisi parmi les groupes aryle et aralkyle non substitués ou substi- tués sur leur partie aryle par au moins un subsituant choisi parmi les groupes halo, trifluorométhyle, alcoxy en C 1 à C 4, alkyle en C 1 à C 4, alcanoyloxy en C 1 à C 4, carbonyloxyalkyle en C 2 à C 5, nitro, carboxy ou cyano. Selon une première variante de ce mode de réalisation, R 1 est un groupe aryle ou aralkyle non substitué et dans ce cas, R 3 est un atome d'hydrogène et R 4 est le groupe n-butyle. A titre d'exemples de tels dérivés, ont peut citer ceux répondant à la formule (I) dans laquelle R 1 est le groupe phényléthyle ou phénylméthyle. Selon une seconde variante préférée de ce premier mode de réalisation de l'invention, R 1 est un groupe aryle ou aralkyle substitué sur sa partie aryle par au moins l'un des substituants décrits ci-dessus. A titre d'exemple de tels groupes, on peut citer les groupes nitrophényléthyle et trifluorométhylphényléthyle. Dans cette variante préférée, R 3 et R 4 peuvent être de différents types. Ainsi l'extrémité R 4 -N-CH-COOR 5 R 3 du dérivé de peptide peut correspondre à différents acides aminés - A titre d'exemple, il peut s'agir de la norleucine et dans ce cas R 3 est un atome d'hydro- gène et R 4 est le n-butyle. Dans les deux variantes de ce premier mode de réalisation de l'invention, R 2 est dérivé d'un acide aminé choisi parmi la proline, l'hydroxy- proline, la thiazolidine et la déshydroproline. Ainsi R 2 peut répondre aux formules suivan- tes OH CH CH /CH H 2 C S H 2 H 2 C CH 2 ( CH 2 H 2 C CH I I i 1 i l J N CH-CO, N CH-CO N CH-CO N CH-CO- De préférence R 2 est le dérivé de la proline et répond à la formule: -N CH-CO- Dans les deux variantes de ce premier mode de réalisation de l'invention, R 5 et R'5 peuvent être un atome d'hydrogène ou de métal, ou encore un groupe alkyle ou benzyle. Le métal peut être par exemple le lithium ou le sodium. Les groupes alkyle utilisés qui peuvent être linéaires ou ramifiés ont de préférence de 1 à 4 atomes de carbone. Selon un second mode de réalisation de l'in- vention R 1 est le groune de formule: -CH-NH-R 7-R 8- I R 6 Dans ce cas, R 6 est la chaîne latérale d'un acide aminé, par exemple un groupe méthyle, ou benzyle ou isobutyle. R 7 peut être une simple liaison ou un radical dérivé d'un acide aminé ou d'un peptide. De nombreux acides aminés peuvent être utilisés pour adapter la structure du dérivé à l'enzyme à inhiber A titre d'exemple R 7 peut être le radical dérivé de la proline de formule: t -CO-CH-N- Dans ce second mode de réalisation de l'invention, R 8 est un groupe bloquant la terminaison N d'un -aminoacide, par exemple le groupe benzyloxy- carbonyle R 8 peut aussi être un groupe aryle ou aralkyle éventuellement substitué tel que ceux décrits précédemment pour le premier mode de réalisa- tion de l'invention. Dans ce second mode de réalisation de l'invention, R 2, R 3, R 4, R 5 et R'5 peuvent être constitués par les différents groupes ou atomes décrits précédemment pour le premier mode de réalisation de l'invention. Ainsi, R 2 peut être dérivé de la proline, R 3 et R 4 peuvent correspondre à la norleucine, R 5peut être H, Li, Na ou le groupe benzyle et R'5 peut être H, Li ou Na. Dans ce second mode de réalisation de l'invention, on peut ainsi choisir R 6 et R 7 de façon à disposer de l'autre côté du groupe phosphory- le d'autres acides aminés et à améliorer la sélectivité du dérivé de peptide vis-à-vis d'autres métalloprotéases à zinc. Ces dérivés de peptide ont vis-à-vis des collagénases bactériennes un comportement cinéti- que différent de celui des dérivés correspondant au premier mode de réalisation de l'invention. En effet, ils se fixent au site actif de l'enzyme très lentement, mais à l'inverse ils possèdent des temps de résidence sur le site actif extrêmement longs, la demi-vie du complexe pouvant être par exemple de 12 à 25 heures Ceci est intéres- sant pour des applications pharmaceutiques car le complexe formé avec L'enzyme cible ne peut être déstabilisé par un excès du substrat de l'enzyme. Les dérivés de peptide de l'invention peuvent être préparés par des procédés classiques tels que celui décrit par Thorsett et ai dans Proc. Natl Acad Sci USA, vol 79, p 2176-2180 ( 1982). Ainsi, les dérivés correspondant au premier mode de réalisation de l'invention peuvent être préparés par un procédé comprenant les étapes succes- sives suivantes: a) Synthèse d'un dibenzyl phosphonate de formule: R 1-P-(OCH 2-C 6 H 5)2 (II) II 0 o selon le schéma réactionnel suivant O i (C 6 H 5-CH 2-O-)2 P-H + Na+H-_ I (C 6 H 5-CH 20)2 P-Na+ + H 2 o i (C 6 H 5 CH 20-)2 P-Na + R 1 Br o I (C 6 H 5-CH 20-)2 P-R 1 + Na Br b) Synthèse du chlorure de benzyl phospho- nate de formule: o Il C 6 H 5-CH 20-P-CL (III) R 1 selon la réaction suivante: 0 O (C 6 H 5-CH 20)2-P-R 1 + P C 15 +C 6 Hs-CH 20-P-R 1 + C 6 H 5-CH 2 Cl + POCI 3 l Cl c) Couplage du chlorure de formule (III) avec un peptide pour former le dérivé protégé de formule: 4 o R 1-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 (IV) I I 3 OCH 2 C 6 H 5 R dans laquelle R 5 est un groupe protecteur tel que le groupe benzyle. Ceci correspond au schéma suivant: O R 4 Il I C 6 H 5-CH 20-P-Cl + H 2 N-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 Ri R 3 Dérivé (IV) + H Cl. A la fin de cette étape, on peut réaliser une déprotection du dérivé de formule (IV), par exemple par hydrogénation catalytique, éventuellement en présence d'hydroxyde de lithium ou de bicarbonate de sodium, pour obtenir le dérivé de formule (V). R 1-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-Coo R 5 (V) b R 5 13 dans laquelle R 5 et R'5 sont H, Li ou Na. Le phosphite de dibenzyle utilisé comme produit de départ dans ce procédé peut être préparé à partir d'alcool benzylique, de P C 13 et de phényl diméthylamine par la réaction suivante: 3 C 6 H 5-CH 20 H + P C 13 + 2 C 6 H 5-N-(CH 3)2 -> 0 CH 3 IQ l (C 6 H 5-CH 20)2-P-H + C 6 H 5-CH 2 Cl + 2 C 6 H 5-NOHC CH 3 Les composés R 1 Br et R 4 H 2 N-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 R 3 utilisés respectivement dans les étapes a) et c) peuvent également être préparés par des procédés classiques. Les dérivés de peptide correspondant au second mode de réalisation de l'invention dans lesquels R 7 est une simple liaison et R 8 est un groupe bloquant, peuvent être préparés par un procédé comprenant les étapes successives suivantes: a) Synthèse du composé de formule: I R 8-NH-CH-P ( O C 6 H 5)2 (VI) R 6 par la réaction suivante: R 6-CH=O + R 8-NH 2 +(C 6 H 50)3 P o Il R 8-NH-CH-P-(OC 6 H 5)2 + C 6 H 5 OH R 6 b) Conversion du composé de formu Le (VI) en composé de formule: o II R 8-NH-CH-P-(OCH 3)2 (VII) R 6 par réaction avec CH 30 Na selon Le schéma suivant: 0 O Il il -R 8-NH-CH-P-(OC 6 H 5)2 + 2 CH 30-Na+ R 8-NH-CH-P-(OCH 3)2 R 6 R 6 + 2 C 6 H 5 O Na c) Synthèse du composé de formule: R 8-NH-CH-P-OH (VIII) 16 I IR OCH 3 selon le schéma suivant 0 O Il II R-HC OH)+Na H R 8-NH-CH-P-(OCH 3)2 + Na OH> R 8-NH-CH OH + CH 30 Na I I R 8-N-6 (OH) +R 6 OCH 3 d) Synthèse du composé de formule: o I R 8-NH-CH-P-CL (IX) R 6 OCH 3 par réaction du produit de formule (VIII) avec SO C 12 selon le schéma réactionnel suivant: o Il R 8-NH-CH-P-OH + SOCL 2 > R 6 OCH 3 Il R 8-NH-CH-P-CL + SO 2 + HCL R 6 OCH 3 puis couplage du composé (IX) avec un peptide de formule: R 3 NH 2-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 R 3 dans laquelle R 5 est un groupe alkyle ou aryle, pour former le composé de formule: R 8-NH-CH-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 (X) R 6 OCH 3 R 3 On peut réaliser ensuite une déprotection du dérivé de formule (X), par exemple par hydrogéna- tion catalytique comme précédemment, pour obtenir le dérivé de formule: R 8-NH-CH-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 R 6 OR'5 R 3 *dans laquelle R'5 est H, Na ou Li. Les dérivés de peptide correspondant au second mode de réalisation de l'invention dans lesquels R 7 est une simple liaison et R 8 est un groupe aralkyle éventuellement substitué, ou dans lesquels R 7 est dérivé d'un aaminoacide ou d'un peptide et R 8 est un groupe aralkyle éventuellement substitué, peuvent être préparés par un procédé analogue comportant une étape supplémentaire pour introduire R 7-R 8 ou R 8. Dans ce cas, on suit le même mode opératoi- re pour préparer un dérivé de peptide de formule: 0 R 4 # l R-NH-CH-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 (XII) 16 I ROCH 3 R 3 dans laquelle R est un groupe protecteur tel que le groupe benzyloxycarbonyle, puis on soumet le dérivé de formule (XII) à une hydrogénation catalyti- que pour former le dérivé de formule: 0 R 4 NH 2-CH-_-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 (XIII) R 6 OCH 3 R et on faitréagir le dérivé de formule (XIII) avec R 8 R 7 OH pour former le dérivé de formule: O R 4 Ii I R 8-R 7-NH-CH-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-Coo R 5 (XIV) O 6 b CH 3 R On peut enfin réaliser une déprotection du dérivé de formule (XIV) pour obtenir le dérivé O R 4 I I R 8-R 7-NH-CH-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 R O R 3 R o R 5 R avec R'5 représentant H, Na ou Li. Les dérivés de peptides de l'invention peuvent trouver de nombreuses applications en raison de leur pouvoir inhibiteur vis-à-vis des collagénases bactériennes. Ils peuvent être utilisés en particulier dans des compositions pharmaceutiques destinées au traitement de certaines infections dues à la présence de bactéries capables d'excréter de la collagénase. En effet, la présence de ces bactéries peut entraîner une destruction importante du co(lagè- ne et porter donc atteinte à l'intégrité du tissu conjonctif de l'organisme infecté C'est le cas en particulier des affections par Clostridium histolyticum ou par Pseudomonas aeruginosa On peut les utiliser en particulier pour le traitement des maladies parodontales associées aux microorganismes col lagénolytiques qui sont responsables de la destruction du col Lagène, entrant par exemple dans la composition de la gencive. En effet, bien que les dérivés de peptides de l'invention n'aient pas d'action directe sur les microorganismes collagénolitiques, ils constituent un moyen thérapeutique intéressant dans certaines pathologies (par exemple gangrène, infections dentaires) car ils sont des inhibiteurs puissants et spécifiques des collagénases bactériennes Dans ces applications pharmaceutiques, on peut aussi utiliser les dérivés de peptides de l'invention pour inhiber d'autres métalloprotéases présentant des spécificités proches de celles des collagénases bactériennes, impliquées dans le métabolisme du collagène. Aussi, l'invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant une quanti- té pharmaceutiquement efficace d'un dérivé de peptide de l'invention répondant à la formule (I) donnée ci-dessus dans laquelle R'5 est l'hydrogène ou un métal. Cette composition peut être sous la forme d'un sel physiologiquement acceptable du dérivé de peptide, dans un véhicule ou un support physiologiquement acceptable appropriée Elle peut par exemple être administrée sous la forme de solutions ou de suspensions par injection. Les doses préférées à administrer se situent dans la gamme allant de lmg/kg/jour à environ Smg/kg/jour. Les compositions peuvent être aussi sous la forme de compositions destinées à l'administration orale, telles que des comprimés ou des capsules, obtenus par exemple en combinant les dérivés de peptides de l'invention avec des supports, des excipients et des additifs classiques tels que le carbonate de magnésium, le stéarate de magnésium, le talc, le sucre, le lactose, la pectine, la dextri- ne, l'amidon, la gélatine, le tragacanthe, la méthyl- cellulose, la carboxyméthylcellulose de sodium, le beurre de cacao, etc Des diluants, des agents de saveur, des solubilisants, des lubrifiants, des agents de mise en suspension, des liants, des agents de désintégration etc peuvent être ajoutés aux compositions Les ingrédients actifs peuvent être aussi encapsulés avec d'autres supports etc. Les dérivés de peptides de l'invention peuvent également trouver des applications dans d'autres domaines, par exemple pour la protection des peaux dans le domaine de la fabrication du cuir et pour la protection de la gélatine dans différentes activités utilisant la gélatine. En effet, si le substrat naturel des collagénases bactériennes apparait être prioritaire- ment le collagène natif, on sait que cette protéase peut utiliser comme substrat du collagène sous sa forme dénaturée, c'est-à-dire la gélatine La gélatine est utilisée actuellement dans divers contexes et il est intéressant de maintenir l'intégrité parfaite de la gélatine pour ces applications Ceci peut donc être obtenu en utilisant les dérivés de peptides de l'invention comme inhibiteurs compétitifs des collagénases bactériennes susceptibles de détruire la gélatine. On peut encore utiliser les dérivés de peptides de l'invention pour isoler de nouvelles protéases à zinc présentant une spécificité proche de celle que possedent les collagénases bactériennes, notamment au sein des organismes supérieurs Dans ce cas, on peut utiliser les dérivés de peptides de l'invention comme ligand pour la réalisation de colonnes d'affinité en vue de séparer d'autres protéases à zinc. On peut aussi utiliser les dérivés de peptides de l'invention comme moyen pour contrôler l'activité de la collagénase bactérienne, par exemple dans des procédés biotechnologiques basés sur l'utilisation de bactéries collagénolytiques, par exemple pour l'attendrissement de la viande et la digestion de sédiments dans les bassins de sédimentation. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront mieux à la lectue des exemples suivants donnés bien entendu à titre illus- tratif et non limitatif. Parmi ces exemples, les exemples 1 à illustrent la préparation de dérivés de peptides conformes au premier mode de réalisation de l'inven- tion et les exemples 6 à 8 illustrent des dérivés de peptides conformes au second mode de réalisation de l'invention. Exemple I: Préparation du dérivé de peptide de formule: CH 3 O (CH 2 > 3 C 6 H 5-CH 2-CH 2-P-NH-CH 2-CO-N-CH-CO-NH-CH-COOH OH (composé n 1) Ce dérivé est un dérivé répondant à la formule (I) dans laquelle R 1 est le groupe phényl- éthyle, R 2 est dérivé de la proline, R 3 est un atome d'hydrogène, R 4 est le groupe n-butyle et R 5 est un atome d'hydrogène. a) Préparation du phosphonate du dibenzy L- phényléthyle: il C 6 H 5-CH 2-CH 2-P-(OCH 2 C 6 H 5)2 On mélange délicatement dans du diméthyl- formamide lmmol d'hydrure de sodium, sous atmosphère d'azote à -15 C, et on y ajoute peu à peu lmmol de phosphite de dibenzyle dissoute dans du diméthyl- formamide On laisse la réaction se poursuivre jusqu'à l'arrêt complet du dégagement d'hydrogène. On ajoute alors sous agitation lmmol de bromure de phényléthyle dans du diméthylformamide, toujours sous atmosphère d'azote, et on réalise cette addition suffisamment lentement pour que la température varie de -10 C à O C Quand toute la solution de bromure de phényléthyle est ajoutée, on laisse le mélange réactionnel revenir à 25 C. On enlève l'azote et on maintient sous agitation pendant 3 h. On évapore alors de ce mélange le diméthyl- formamide (DMF) sous vide poussé, à une température de 35 à 40 C, puis on reprend dans de l'éther, on lave ensuite deux fois à l'eau la phase organique, puis on la sèche sur sulfate de sodium Après évaporation du solvant, on obtient le dibenzylphényléthyl phosphonate voulu avec un rendement de 80 %. On purifie ensuite ce produit par chromato- graphie flash sur silice en utilisant comme éLuant un mélange d'éther et d'acétate d'éthyle dans un rapport 2/3 en volume On obtient ainsi le phosphona- te purifié avec un rendement de 40 %. b) Préparation du chlorure de monobenzyl- phényléthyl phosphonate. On ajoute lmmol de pentachlorure de phos- du benzène à une soution dans du benzène phor dans du benzène à une solution dans du benzène de lmmol du dibenzylphényléthyl phosphonate obtenu précédemment On chauffe le mélange à 70 C sous reflux et sous atmosphère anhydre, pendant 3 à 4 h, jusqu'à l'obtention complète du chlorure On évapore ensuite le benzène de ce mélange et on le reprend dans du dichlorométhane sec On utilise immédiatement cette solution pour réaliser le couplage avec le peptide. c) Couplage avec le peptide. A la solution de lmmol de chlorure de monobenzylphényléthyl phosphonate dans du dichloromé- thane obtenue précédemment, on ajoute à O C, 0,9 mmol du peptide HCL, Gly-Pro-Nle-OCH 2-C 6 H 5 dans du dichloro- méthane et deux équivalents de triéthylamine On laisse réagir sous agitation pendant une demi-heure toujours à O C, puis pendant une demiheure supplémentaire à 25 C On évapore alors le dichlorométhane et on reprend l'huile dans de l'acétate d'éthyle, puis on lave à l'eau avec de l'acide chlorhydrique 0,1 N, du Na HCO 3 à 5 %, puis avec de l'eau jusqu'à neutralité On sèche la phase organique puis on l'évapore On obtient ainsi le dérivé de peptide protégé avec un rendement de % On purifie ce dérivé par chromatographie flash en utilisant comme solvant d'élution Le mélange dichlorométhane-méthanol ( 9/1 en volume). d) Déprotection. On réalise la déprotection du dérivé par hydrogénation catalytique en utilisant le palla- dium comme catalyseur On obtient ainsi le composé n 1. On caractérise ce composé par résonance magnétique nucléaire du phosphore et du proton. En particulier, l'irradiation sélective du phosphore permet d'identifier dans le spectre protonique du produit, les protons du résidu glycine et du groupement R 1 substituant le phosphore Ces protons sont en effet couplés scalairement au phosphore. La présence de tels couplages scalaires démontre de façon univoque l'existence de la liaison phosphonamide entre le résidu glycine et le groupement R 1 substituant le phosphore Les spectres ont été enregistrés à 500 M Hz Les déplacements chimiques pour le proton sont exprimés en ppm, en prenant comme référence le tétraméthyl silane (TMS). Les données sont présentées de la façon suivante: déplacement chimique, (multiplicité, constante de couplage en Hz). Les déplacements chimiques carbone 13 et phosphore sont référencés respectivement par rapport au dioxanne et H 3 P 04 à 85 % L'interprétation des spectres proton carbone 13 a été réalisée par des méthodes de corrélation proton-proton, proton-carbone 13 à deux dimensions. Les caractéristiques de RMN sont les suivantes: 1 H RMN (D 20): CHE N Le 0,88 (t,3, 7 Hz); CH&,Y Nle 1,27-1,32 (m,4); CHAN Le 1,65 (m,1); CH/Nle 1, 76 (m,1); 9-CH 2-CH 2 1,88 (m,2,2 J HP 16 Hz); CHY Pro 2 (m,2); CHP Pro 2, 05 (m,1); CHJ Pro 2,25 (m,1); 9-CH 2-CH 22,82 (m,2); CH&Pro 3,55 (m,2); CHX Gly 3,25 3,62 (ABX, 2, 3 JHP 9 Hz, 2 JAB 16 Hz); C Hx Nle- 4,13 (q,1)C Ha Pro 4,40 (q,1); Ar 7,25-7,40 (m,5). 13 C RMN (D 20): C Nle 14; CA Nle 22,5; CF Pro ,1; CV Nle 28,1; C P Pro 30,1; f-CH 2-CH 230,4; 9-CH 2-CH 2 31,5 ( 1 JCP 121 Hz); Cp Nle 32,2; CGly 44,2; C&Pro 47,6; Ca Nle 56,1; CPro 61,5; CO Gly 172, CO Pro 174,3; CO Nle 144; Ar 129,5, 129, 126,9, 180. 31 p RMN(D 20): 28,3. Exemp Le 2: Préparation du dérivé de peptide de formule: CH 3 0 C Il C 6 H 5-CHZ-P-NH-CH 2-CO-N-CH CO-NH-CH-COOH l OH (composé n 2) OH Ce composé n 2 correspond au dérivé de peptide de formule (I) dans laquelle R 1 est le groupe phénylméthyle, R 2 est dérivé de la proline, R 3 est un atome d'hydrogène, R 4 est le groupe n-buty- le et R 5 est un atome d'hydrogène. On suit le même mode opératoire que dans l'exemple 1 pour préparer ce composé, sauf que dans la première étape, on utilise lmmol de bromure de phénylméthyle au lieu d'lmmol de bromure de phényléthyle. Les caractéristiques du produit obtenu sont les suivantes: 1 H RMN (D 20): CHE Nle 0,88 (t, 3, 7 Hz); CHà,y Nle 1,32 (m, 4); CHJ Nle 1,65 (m, 1); CH/P Nle 1,76 (m,1); CHY Pro 1,95 (m, 2); C Hp Pro 2,12 (m,1); CHA Pro 2, 25 (m,1); P-CH 23 (m,2); CH&Pro 3,4 (m,2); C Ha Gly 3,5-3,53 (ABX,2, 3 JHP 7,2-8,05 Hz, 2 JAB 16 Hz); C Ha Nle 4,13 (q,1)C Ha Pro 4,40 (q,1); Ar 7,25-7,40 (m,5)- 13 C RMN (D 20): CE Nle 14; C 8 Nle 22,5; Cy Pro 25,1; CY Nle 28,1; C/p Pro 30,1; CP Nle 32,2; P-CH 2 37,9- ( 1 JCP 121 Hz); C&Gly 44,2; Có Pro 47,6; Ca Nle 56,1; Ca Pro 61,5; CO Gly 172, CO Pro 174,3; CO Nle 144; Ar 126,8, 129, 126,9, 180. 31 p RMN(D 20): 23,98. Exempte 3: Préparation du composé n 3 de formule: CH 3 5 %-Ln( H 2)3 p NO 2-C 6 H 5-P-NH-CH 2-CO-N -CH-CO-NH-CH-COO Li I O Li (composé n 3) Ce composé répond à la formule (I) dans laquelle R 1 est le groupe pnitrophényléthyle, R 2 est dérivé de la proline, R 3 est un atome d'hydrogène, R 4 est le groupe n-butyle et R 5 est un atome de lithium. On suit le même mode opératoire que dans l'exemple I pour préparer ce composé, sauf que dans la première étape, on utilise lmmol de bromure de p-nitrophényléthyle au lieu de lmmol de bromure de phényléthyle. On réalise en plus dans la dernière étape la déprotection du dérivé en présence d'hydroxyde de lithium, ce qui conduit au sel de lithium. Les caractéristiques du produit obtenu sont les suivantes: 1 H RMN (D 20) : CHE Nle 0,88 (t,3,7 Hz); CHS,Y Nle 1,27-1,32 (m,4); C Hi Nle 1,71 (m,1); C Hp Nle 1,80 (m,1); NO 2-q-CH 2-CH 2 1,92 (m,2,2 J HP 16 Hz); CHY Pro 2, 08 (m,2); CHP Pro 2,18 (m, 1); CHA Pro 2,35 (m,1); N 02-P-CH 2-CH 2 2,95 (m,2); CH&Pro 3,6 (m,2); C Ha Gly 3,70-3,75 (ABX,2, 3 JHP 8 Hz, 2 JAB 16 Hz); C Ha Nle 4,13 (q,1)C Ha Pro 4,40 (q,1); Ar 7,25 (d,2); 8,2 (d,2). 31 p RMN (D 20): 27,4. Exempte 4: Préparation du dérivé de peptide de formule: CH 3 O Il (c H 2) 3 p CF 3-C 6 Hs-CH 2-CH 2-P-NH-CH 2-CO-N -CH-CO-NH-CH-COOH H (composé n 4) Ce composé est un dérivé de peptide de formule (I) dans Laquelle R 1 est Le groupe p-trif Luo- rophény Léthyle, R 2 est dérivé de La proline, R 3 est un atome d'hydrogène, R 4 est Le groupe n-butyle et R 5 est un atome d'hydrogène. On suit le même mode opératoire que dans L'exemp Le 1, sauf que L'on utilise dans La première étape lmmot de bromure de p-triftuorophény Léthyle au Lieu dlmmol de bromure de phény Léthy Le. Les caractéristiques du produit obtenu sont Les suivantes: 1 H RMN(D 20): CHEN Le 0,88 (t,3); CH&,y N Le 1,27-1,32- (m,4); CHBN Le 1,65 (m,1); CH 3 N Le 1,73 (m, 1); CF 3-q-CH 2-CH 2-1,88 (m,2,2 J HP 16 Hz); C Hy Pro 2 (m,2); CHP Pro 2,05 (m,1); CH/Pro 2,25 (m,1); CF 3- P-CH 2-CH 2 2,90 (m,2); CHS Pro 3,55 (m,2); C Ha Gly 3,25-3,62 (ABX, 2, 3 JHP 9 Hz, 2 JAB 16 Hz); C Ha Nle 4,13 (q,1)C Ha Pro 4,40 (q,1); Ar 7,33; 7,52; 7,63 (m, 4). 31 p RMN (D 20): 29 28. Exemple comparatif 1: Préparation d'un dérivé de peptide répondant à la formule: CH 3 O O (CH 2)3 il I CH 3-P-NH-CH 2-CO-N-CH-CO-NH-CH-COOH 1 H i,-. Ce composé est un dérivé de peptide de formu Le (I) dans Laquelle R 1 est le groupe méthyle, R 2 est dérivé de la proline, R 3 est un atome d'hydro- gène, R 4 est le groupe n-butyle et R 5 est un atome d'hydrogène. On suit le même mode opératoire que dans l'exemple I pour préparer ce composé, sauf que l'on utilise dans l'étape a) lmmol de bromure de méthyle au lieu d'lmmol de bromure de phény 16thyle. Les caractéristiques du produit obtenu sont les suivantes: 1 H RMN (D 20) : CHEN Le 0,88 (t,3,); CH 3-P 1,25 (d, 3, 2 JHP 15 Hz); CHS,y Nle 1,27-1, 32 (m,4); CH"Nle 1,65 (m,1); CH 3 Nle 1,76 (m, 1); CHY Pro 2 (m,2); CHA Pro 2,05 (m,1); C He Pro 2,25 (m,1); CHS Pro 3,55 (m,2); C Ha Gly 3,7-3, 73 (ABX,2, 3 JHP 8 Hz, 2 JAB 16 Hz); C Ha N Le4,13 (q,1) C Ha Pro 4,40 (q,1); Ar 7,25-7,40 (m,5). 31 p RMN(D 20): 27,8. Exempte 5: Préparation du composé n 5 de formule: C 6 H 5 CH C 2 H O A (CH 2)3 CH 6 H 5 CH 20 CONH-CH-P-NH-CH 2-CO-N-CH-CO-NH-CH-COO Li I O Li Ce composé est un dérivé de peptide de formule (I)dans laquelle R 1 est Le groupe de formu- le: C 6 H 5-CH 2-OCO-NH-CH H 2 C 6 H 5 R 2 est dérivé de la proline, R 3 est H, R 4 est le groupe n-butyle et R 5 représentant Li. a) Préparation de benzyloxycarbonylphényla- lanyldibenzyl phosphonate. Dans 15 ml d'acide acétique glacial, on ajoute 26 ml ( 0,1 lmol) de phosphite de triphényle, ,1 g ( 0,1 mol) de carbamate de benzyle et 0,15 mol d'aldéhyde benzylique On soumet alors la solution à une agitation à 25 C pendant une heure, puis on la chauffe pendant une autre heure à 80 C On évapore sous vide poussé à 100 C, puis on reprend dans 150 ml de méthanol et on laisse à -4 C Après quelques heures, on obtient un précipité du phospho- nate voulu avec un rendement de 40 à 70 X. b) Préparation du benzyloxycarbonylphényla- lanyldiméthyl phosphonate. On dilue très délicatement 0,2 mol de sodium solide dans 150 ml de méthanol, puis on ajoute 1 Ommol du benzyloxycarbonylphénylalanyldibenzyl phosphonate obtenu précédemment, dissous dans 50 m L de méthanol On laisse sous agitation à 25 C pendant 2 h, puis on évapore On reprend dans de l'éther, on lave à l'eau, on sèche la phase organique, puis on évapore En laissant à 4 C cette huile, on obtient un produit qui cristallise On purifie ce produit par chromatographie flash sur silice en utilisant comme éluant un mélange éther-hexane. c) Préparation de benzyloxycarbonylphényla- lanylmonométhyl phosphonate. On dissout 10 mmol du benzyloxycarbonylphé- nylalanyldiméthyl phosphonate obtenu précédemment dans 55 ml de méthanol, puis on ajoute 20 mmol de Na OH On chauffe la solution jusqu'à l'ébullition pendant 8 h sous reflux On laisse ensuite cette solution revenir à 25 C, sous agitation, pendant 8 à 12 h On acidifie la solution avec H Cl 2 N jusqu'à l'obtention d'un p H de 2, puis on évapore le méthanol sous vide On reprend le produit dans de l'acétate d'éthyle, on sèche la phase organique, puis on évapore On cristallise le produit dans de L'éther de pétrole. d) Couplage au peptide et déprotection. On dilue dans du dichlorométhane lmmol du benzyloxycarbonylphénylalanylmonométhyl phosphona- te obtenu précédemment, puis on ajoute 2 mmol de chlorure de thionyle On laisse cette solution sous agitation pendant 4 h à 25 C On évapore à sec sous vide poussé, on rajoute du dichlorométhane et on réévapore On reprend dans du dichlorométhane, on refroidit à O C, puis on ajoute lmmol de chlorhy- drate de Gly-Pro-Nle-OCH 2 C 6 H 5, et 2 mmol de triéthyl- amine On laisse sous agitation pendant une demi-heu- re à O C, puis pendant une autre demi-heure à 25 C. On évapore le dichlorométhane, puis on reprend l'huile dans de l'acétate d'éthyle et on lave à l'eau, avec HCI 0,1 N, Na HCO 3 à 5 % puis avec de l'eau jusqu'à neutralité On sèche la phase organique, puis on évapore On obtient ainsi le dérivé protégé que l'on purifie par chromatographie flash en utilisant comme solvant d'élution un méLange dichlorométhane- méthanol ( 9/1 en volume) Le dérivé correspond au mélange de 4 diastéréoisomères que l'on peut séparer en 4 fractions en utilisant une colonne de silice greffée avec un groupement chiral en utilisant comme solvant d'élution un mélange hexane-chloroforme-n-propanol. On réalise ensuite la déprotection comme dans l'exemple 1, mais en opérant en présence d'hydroxyde de lithium Après déprotection, il ne reste plus qu'un seul centre asymétrique au niveau du groupe phénylalanyle et par conséquent les 4 fractions peuvent être réparties en deux lots A et B. L'analyse par résonance magnétique nucléai- re de la fraction A a donné Les résultats suivants: 1 H RMN (D 20): CHE Nle 0,88 (t,3,); CH&,Y Nle 1,32 (m,4); C Hi Nle 1,65 (m,1); CH P Nle 1,76 (m,1); CHY Pro 2 (m,2); C Hi Pro 2,05 (m, 1); CHJ 3 Pro 2,25 (m,1); CH/3 Phe 2,65 (m,1, 2 J t 514 Hz, 3 J p 12,6 Hz, 3 JHP 6,3 Hz); CH/3 Phe 3,19 (m, 1, 2 J "/3/314 Hz, 3 J ap 3 Hz, 3 JHP 3 Hz; CHS Pro 3,55 (m,2); C Ha Gly 3,767-3,76 (ABX, 2, 3 JHP 8 Hz 2 JAB 16 Hz); C Ho Phe 3,91; C Ha Nle 4,13 (q,1) C He Pro 4,40 (q,1); 9 - CH 2-O 4,98-4,85 (dd,2) Ar 7,25-7,40 (m,5). 31 p RMN (D 20): 22,4. Exemp Le 6: Préparation du dérivé de peptide de formule: CH 3 O I l l O (CH 2)3 C 6 H 5-CH 2 OCONH-CH-P-NH-CH 2-CO-N -CH-CO-NH-CH-COO Li I \ CH 2 O Li I CH (composé n 6) CH 3 CH 3 Ce dérivé de peptide répond à la formule (I) dans laquelle R 1 représente le groupe de formu- le: C 6 H 5 CH 20 CONH-CH- I îH 2 CH R 2 est dérivé de la proline, R 3 est un atome d'hydro- gène, R 4 est le groupe n-butyle de la leucine et R 5 est un atome d'hydrogène. On suit le même mode opératoire que dans l'exemple 5 pour préparer ce dérivé de peptide, sauf que dans l'étape a), on utilise 0,15 mol d'aldé- hyde isobutylique au lieu de 0,15 mol d'aldéhyde benzylique. Les caractéristiques de la fraction A du produit obtenu sont les suivantes: 1 H RMN (D 20): CHE Nle 0,88 (t, 3,); CH&,Y Nle 1,32 (m,4); CH 3 Nle 1,65 (m,1); CH/i Nle 1,76 (m, 1); CH& Leu 1,2 (m, 1), CH 3 Leu 0,88-0,91 (d, 3) CHY Pro 2 (m, 2); CH/A Pro 2,05 (m, 1); CH/3 Pro 2,25 (m, 1); CH/3 Leu 1, 54 (m, 1); CH 3 Leu 1,67 (m, 1); CHS Pro 3,55 (m, 2); C Ha Gly 3,767-3,76 (ABX, 2, 3 JHP 8 Hz, 2 JAB 16 Hz); C Ha Leu 3,85; CH 0 4,98-4,85 (dd, 2) Ar 7,25-7,40 (m, 5). Exemp Le 7: Préparation du dérivé de peptide de formule: CH 3 O( (CH 2)3 il I) I C 6 H 5-OCONH-CH-P-NH-CH 2-CO-N-CH-CO-NH-CH-COO Li H 3 O Li (composé n 7) Ce composé est un dérivé de peptide de formule (I) dans laquelle R 1 est le groupe de formu- le: R 8-R 7-NH-CH- R 6 avec R 6 représentant le groupe méthyle, R 7 étant une simple liaison et R 8 étant le groupe benzyloxycarbonyle, R 2 est dérivé de la proline, R 3 est un atome d'hydrogène, R 4 est le groupe n-butyle et R 5 est un atome d'hydrogène. On suit le même mode opératoire que dans l'exemple 5, sauf que l'on utilise lmmol d'aldéhyde acétique au lieu de lmmol d'aldéhyde benzylique. Les caractéristiques de la fraction A du produit obtenu sont les suivantes: 1 H RMN (D 20): C He N Le 0,88 (t, 3,); CH&,y Nle 1,32 (m,4); C Hp Nle 1,65 (m,1); CHA Nle 1,76 (m, 1); CH 3 Ala 1,25 (d, 3); CHY Pro 2 (m, 2); CHJ Pro 2,05 (m, 1); CHP Pro 2,25 (m, 1); CH&Pro 3,55 (m,2); C Ha Gly 3,767-3,76 (ABX, 2, 3 JHP 8 Hz, 2 JAB 16 Hz); CH Ala 3,80; C Ha N Le 4,13 (q, 1) C Ha Pro 4,40 (q, 1); 9-CH 2 O 4,98-4,85 (dd, 2) Ar 7,25- 7,40 (m, 5). Exempte 8. Dans cet exemple, on mesure les activités des composés des exemples 1 à 7 et de l'exemple comparatif 1 en déterminant les constantes d'inhibi- tion de ces composés par la méthode de Henderson dans le cas des composés 1 à 4 et du composé de l'exemple comparatif 1. Pour les composés n 5 à 7, on détermine la constante d'inhibition à partir des valeurs expérimentales des constantes de vitesses Kon et Koff L'activité de la collagénase est suivie par spectroscopie UV, en utilisant comme substrat chromo- génique le Fa-Leu-Gly-Pro-Ala dans un tampon Tricine p H 6,8, 10 m M de Ca CL 2 à 25 C en suivant le protocole décrit par Yotakis et al dans Eur J Biochem, 160, p 413-418 ( 1986) et la collagénase de Clostri- dium Histolyticum (EC 3 4 24 3) Les résultats obtenus avec ces différents composés sont donnés dans le tableau qui suit. Au vu de ces résultats, on constate que les constantes d'inhibition sont beaucoup plus basses que dans Le cas des composés de l'art anté- rieur. En effet, le meilleur composé synthétisé par Galardy a une constante Ki de 10-6 M alors que le meilleur composé de l'invention a une constante Kide 0,5 10-9 M, soit un gain d'activité d'un facteur 1000. TABLEAU Constantes d'inhibition de la col Laqénase de C Lostridium histo Lyticum par les composés o R 1-P-G Ly-Pro-N Le-R 5 o I Composé Ki de R 1 R 5 = R'5 ( 10-9 M) L'ex. i compara- tif 1 C 6 H 5 C 2 H 4 - *C 6 H 5-CH 2- p N 02-C 6 HS-C 2 H 4- p CF 3-C 6 H 5-C 2 H 4- CH 3 C 6 H 5-CH 2-O-C-NH-CH Il I O CH 2 C 6 H 5 C 6 H 5-CH 20 C-NH-CH- Il I 0 CH 2 CH CH 3 CH 3 C 6 H 5-CH 20 C-NH-CH- Il I 0 CH 3 H H Li H H Li Li Li 0,5 REVENDICATIONS 1 Dérivé de peptide répondant à la formu- Le: O R 4 Il I R 1-P-NH-CH 2-CO-R 2-N-CH-COOR 5 (I) I I OR'5 R 3 dans Laquel Le R 1 représente un groupe choisi parmi les groupes aryle et ara Lkyle non substitués ou substitués sur leur partie aryle par au moins un substituant choisi parmi Les groupes halo, trifluoro- méthy L, alcoxy en C 1 à C 4, a Lkyle en C 1 à C 4, alca- noy Loxy en C 1 à C 4, carbonyloxyalkyle en C 2 à C 5, nitro, carboxy ou cyano, et Le groupe de formule: -CH-NH-R 7-R 8 R 6 dans Laque L Le R 6 est la chaîne latérale d'un a-aminoacide, R 7 est une simple liaison ou un radical dérivé d'un o-aminoacide ou d'un peptide de formule (CO-CH-NH)n R 9 dans laquelle R 9 est la chaîne latérale d'un -amino- acide, N est un nombre entier de I à 2 et Les R 9 peuvent être différents Lorsque n> 1, relié à NH par CO; et R 8 est un groupe bloquant la termi- naison N d'un a-aminoacide ou un groupe aralkyle non substitué ou substitué par au moins un substi- tuant choisi parmi les groupes ha Lo, trifluorométhy- Le, alcoxy en C 1 à C 4, a Lkyle en C 1 à C 4, alcanoy Loxy en C 1 à C 4, carbony L oxyalkyle en C 2 à C 5, nitro, carboxy ou cyano; R 2 est un radical bivalent dérivé d'un -aminoacide choisi parmi La proline, l'hydroxyproli- ne, La thiazo Lidine et la déshydroproline, de formule: CH 2 CH S CH 2 CH 2 CH i I I I -N -CH CO N -CH CO- OH CH 2 êH H 2 C CH 2 H 2 C CH 2 I t I I N CH -N CHN H CO- relié par sa partie NH à CO; R 3 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C 1 à C 4, R 4 est un groupe alkyle en C 1 à C 5 ou la chaîne latérale d'un a-aminoacide; et R 5 et R'5 qui peuvent être identiques ou différents sont un atome d'hydrogène, un métal, un groupe alkyle en C 1 à C 5 ou un groupe benzyle; à condition que R 3 représente un atome d'hydrogène et R 4 représente le groupe n-butyle lorsque R 1 est un groupe aryle ou aralkyle non substitué. 2 Dérivé de peptide selon la revendication 1, caractérisé en ce que R 2 est CHZ CH 2 CH 2 I I -N CH-CO- 3 Dérivé de peptide selon l'une quelconque des revendications I et 2, caractérisé en ce que R 1 est un groupe choisi parmi les groupes phényléthyle et phénylméthyle, R 3 est un atome d'hydrogène et R 4 est le groupe n-butyle. 4 Dérivé de peptide selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que R 1 est un groupe aryle ou aralkyle substitué par au moins un substituant choisi parmi les groupes halo, trifluorométhyle, alcoxy en C 1 à C 4, alkyle en C 1 à C 4, alcanoyloxy en C 1 à C 4, carbonyloxyalkyle en C 2 à C 5, carboxy ou cyano. Dérivé de peptide selon la revendication 4, caractérisé en ce que R 1 est le groupe p-nitrophényl éthyle ou p-trifluorométhylphényléthy- le. 6 Dérivé de peptide selon l'une quelconque des revendications 4 et 5, caractérisé en ce que R 3 est un atome d'hydrogène et R 4 est le groupe n-butyle. 7 Dérivé de peptide selon l'une quelconque des revendications I à 6, caractérisé en ce que R 5 représente un atome d'hydrogène, de lithium ou de sodium, ou le groupe benzyle. 8 Dérivé de peptide répondant à la formu- le: CH 3 i II O (CH 2)3 I R l-P-NH-CH 2-CO-N-CH-CO-NH-CH-COOR 5 0 R'5 dans laquelle R 1 est le groupe phénéthyle, phénylméthyle, p-nitrophényléthyle ou p-trifluoro- méthylphènéthyle, et R 5 et R'5 sont H ou Li. 9 Dérivé de peptide selon l'une quelconque des revendication I et 2, caractérisé en ce que R 1 est le groupe de formule: -CH-NH-R 7-R 8 R 6 dans laquelle R 6, R 7 et R 8 ont la signification donnée dans la revendication 1. Dérivé de peptide selon la revendica- tion 9, caractérisé en ce que R 6 est la chaîne latérale de l'alanine, de la leucine ou de la phény L- alanine, R 7 est une simple liaison et R 8 est le groupe benzyloxycarbonyle. 11 Dérivé de peptide selon la revendica- tion 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule: CH R 6 O R 6 O N (CH 2)3 I U C 6 H 5-CH 2-OCO-HN-CH-P-NH-CH 2-CO-N -CH-NH-CH-COO Li O Li dans laquelle R 6 est CH 3, -CH 2-C 6 H 5 ou CH 2-CH-(CH 3)2. 12 Composition pharmaceutique, caractéri- sée en ce qu'elle comprend une quantité pharmaceuti- quement efficace d'un dérivé de peptide selon l'une quelconque des revendications I à 11 avec R'5 représentant l'hydrogène ou un métal. k-