FR 2609624 A1 19880722 FR 8700538 A 19870115 PROCEDE ET SERINGUE POUR PRELEVEMENT CYTOLOGIQUE La présente invention se rapporte au domaine technique du prélèvement d'échantillons d'organismes vivants, en vue de procéder à des examens cytologiques ou à des dosages biologiques. PLus précisément, l'invention concerne les prélèvements de cellules, généralement appelés biopsies, effectués sur les organes relativement accessibles extracorporellement par un appareil d'aspiration, tel qu'une seringue. Elle peut, également, concerner les prélèvements de sang périphérique. Il peut être considéré que la méthode actuelle de prélèvement par aspiration consiste à utiliser une aiguille adaptée en bout d'une seringue, de façon à p Jvoir etre conduite jusqu'à la cible localisée à partir de laquelle un prélèvement doit être effectué. Lorsque cette zone est atteinte, le piston de la seringue est déplacé en course d'aspiration, en même temps que l'aiguille est soumise à un va-et-vient de faible amplitude, de façon à traumatiser localement la cible visée pour permettre un prélèvement de cellules conduites, par effet de dépression, à L'intérieur de L'aiguille et dans le cylindre de la seringue. Lorsque le prélèvement a été effectué, L'aiguille est retirée et l'échantillon cellulaire interne à l'aiguille est chassé par le piston de la seringue, pour déposer les cellules sur une lame de verre où, de façon habituelle, elles subissent un étalement avant fixation et analyse. La méthode décrite ci-dessus, ainsi que l'appareillage pour sa mise en oeuvre, ne donnent pas entière satisfaction en pratique. L'inconvénient majeur de la méthode réside dans l'obligation de conduire l'aiguille jusqu'à la cible localisée et de soumettre le piston à une traction, en vue de provoquer L'effet de succion simultanément au mouvement de va-et-vient de faible amplitude, mais rapide, tout en gardant une précision évidente de localisation de l'extrémité de l'aiguille. Il apparaît donc une triple sujétion dont la réalisation simultanée est, généralement, source de difficulté conduisant à un prélèvement peu satisfaisant. Pour tenter de remédier à cet inconvénient majeur, on a proposé, par le brevet FR 2 536 285 (82-19 308), des moyens de blocage du piston en fin de course d'aspiration, lesquels sont mis en oeuvre à l'approche de la cible localisée, en vue de permettre au praticien de s'affranchir du maintien de L'effort de traction sur le piston lors du prélèvement proprement dit de l'échantillon. Ces moyens de blocage sont constitués par une languette flexible rapportée sur le cylindre de la seringue, de manière à être engagée dans l'une quelconque de plusieurs fentes ménagées sur la tige de piston. Dans le merle but, le catalogue d'Avril 1986 des LABORATOIRES INGENOR (pages 57, 58) montre une seringue comportant des moyens de blocage du piston, constitués par un organe flexible allongé associé à la tige de piston et muni d'une partie en saillie apte à coopérer avec le bord du cylindre de la seringue, en fin de course d'aspiration du piston. Les moyens proposés décrits ci-dessus contribuent, dans une certaine mesure, à faciliter la procédure de prélèvement qui demeure, néanmoins, une méthode relativement délicate à exécuter. En effet, le déplacement du piston en course d'aspiration ne peut être effectué sans provoquer, en raison de la dépression créée, un remuement de la seringue et, par conséquent, de l'aiguille déjà située au niveau de la zone de prélèvement. Il en résulte que le prélèvement réalisé dans de telles conditions ne conduit pas à l'obtention d'une quantité suffisante de cellules, en raison d'un manque de précision de localisation de la zone de prélèvement mais aussi d'une capacité d'aspiration limitée. Dans le même sens, des quantités non négligeables de cellules restent, inévitablement, contenues dans la lumière de l'aiguille ou dans le cylindre de la seringue, représentant autant de cellules définitivement perdues. Par ailleurs, l'étalement sur une lame de L'échantillon prélevé doit être effectué par un spécialiste pour éviter une qualité ou une fixation non satisfaisante. De plus, la lame de verre possède une fragilité manifeste qui impose de grandes précautions lors de ses manutentions ultérieures et, notamment, lors de son transport. L'objet de l'invention est de remédier aux inconvénients ci-dessus en proposant un appareil permettant d'obtenir, par aspiration, un échantillon suffisant de cellules à fins d'examens cytologiques ou dosages biologiques. Un autre objet de L'invention est de proposer un appareil assurant une grande précision de localisation de l'extrémite de L'aiguille. Un objet supplémentaire de 'invention est de proposer un appareil de prélévement constituant, par lui-meme, un conteneur de L'échantillon prélevé. Un objet, également, de L'invention est de proposer un appareil de prélévement susceptible d'être mis en oeuvre, sans modification, à partir d'une seringue ordinaire, pour n'entranner qu'un coût réduit de réalisation. Un objet encore de l'invention est de proposer un procédé de prélèvement d'échantillons de cellules. Un objet aussi de L'invention est de proposer un procédé apte à récupérer intégraLement les cellules prélevées contenues dans la seringue et l'aiguille. Pour atteindre les buts ci-dessus, l'appareil est caractérisé en ce qu'il comprend - un organe de blocage formé par un organe rigide apte à pivoter autour d'un point d'appui sur la tige du piston, lors de l'extension de la tige du piston, - et un obturateur commandé interposé entre L'embout et l'aiguille et possédant au moins une position de fermeture et une position d'ouverture. Diverses autres caractéristiques ressortent de la description faite ci-dessous en référence aux dessins annexes qui montrent, à titre d'exemples non limitatifs, des formes de réalisation de l'objet de l'invention. La fig. 1 est une vue générale en coupe longitudinale d'une seringue conforme à l'invention. La fig. 2 est une vue en coupe, prise sensiblement suivant le plan Il-Il de la fig. 1. La fig. 3 est une vue en coupe partielle, analogue à la fig. 1, montrant le blocage en translation du piston dans son cylindre. La fig. 4 est une vue en perspective d'une première variante de realisat on d'un organe de blocage du piston en translation. La fig. 5 est une vue de dessus de la fig. 4. La fig. 6 est une coupe suivant la ligne VI-VI de la fig. 5. La fig. 7 est une vue de côté d'une seconde variante de réalisation d'un organe de blocage du piston en translation. La fig. 8 est une coupe suivant la ligne VIII-VIII de la fig. 7. La fig. 1 illustre un appareil d'aspiration 1, tel qu'une seringue, constitué d'un cylindre creux 2 coopérant avec un piston 3 composé d'une tige 4 et d'une tête 5 munie d'un joint d'étanchéité 6, de manière à déterminer, entre la tête 5 et le cylindre 2, une chambre 7 à volume variable. De façon classique, la tige 5 du piston comporte une âme centrale 8 d'où sont issues quatre cloisons 9-12 rayonnant vers l'extérieur pour définir, entre deux cloisons successives, un couloir longitudinal 13 et constituer ainsi une tige du type cruciforme (fig. 2). Les cloisons 9-12 se raccordent, à l'extrémité avant, à la tête 5 et, à l'extrémité arrière, à une plaquette 14 de manoeuvre du piston 3 dans son cylindre 2. D'une manière habituelle, également, le cylindre 2 est muni d'une collerette 15 extérieure de préhension et d'un embout 16 d'adaptation d'une aiguille 17. Conformément à l'invention, un obturateur commandé 18 est mis en oeuvre, de manière à isoler ou non la chambre 7 de l'aiguille 17. L'obturateur commandé 18, tel qu'un robinet, possède donc au moins une position d'ouverture O et une position de fermeture F de la chambre 7. Dans l'exemple illustré, le robinet 18 est adapté, de préférence, sur l'embout 16 du cylindre 2. Le robinet 18 est du type à boisseau, par exemple à deux voies, formé d'une cannelle 19 fixée par vissage sur l'embout 16 et dont le boisseau 20 reçoit une clef mobile 21 munie d'une ouverture transversale 22. La cannelle 19 possède, également, une t bulure 23 d'adaptation par vissage de L'aiguille 17. Il peut être envisagé d'utiliser comme obturateur commandé un clapet, également commandé à volonté, capable d'assurer une fonction de fermeture et d'ouverture de la chambre 7. Une autre caractéristique de l'objet de l'invention réside dans la présence d'un organe 24 de blocage relatif du piston 3 par rapport au cylindre 2, sensiblement en fin de course d'extension de la tige 4. L'organe de blocage 24, tel qu'une barrette rigide rapportée, est incorporé à la tige 4 du piston 3, de manière à ne pas gêner le coulissement de la tige de piston à l'intérieur du cylindre 2. Lors de la commande de la tige 4 du piston 3 en course d'extension, la barrette 24 est susceptible de pivoter sur la tige 4 du piston autour d'un point d'appui P. Le pivotement de la barrette 24 intervient, de façon préférentielle, par la naturelle pression du pouce exerçant un effort de préhension et de traction sur la plaquette 14 de manoeuvre du piston 3. Lorsque la course axiale suffisante a été atteinte (fig. 3), cette pression tend à solliciter en pivotement la barrette 24 qui s'engage naturellement par son extrémité derrière la collerette 15 du cylindre 2, pour s'opposer à une course de rétraction de la tige 4. Les fig. 4 à 6 illustrent une première variante de réalisation de la barrette de blocage 24 constituée d'au moins une pièce, par exemple creuse, mais pouvant aussi être conformée pleine. La barrette 24 comporte deux parois latérales 25, 26 formant un dièdre d'ouverture, de préférence sensiblement égal à l'ouverture de deux cloisons 9 à 12 successives, à savoir 900. De cette manière, l'arête 27 peut s'insérer au fond de l'un des couloirs 13 avec un minimum de jeu latéral. L'extrémité avant de la barrette 24 possède un épaulement d'arrêt 28 prolongé par un nez de verrouillage 29. L'arête 27 est terminée, à L'extrémité arrière de la barrette, par un décrochement ou une troncature 30 d'appui définissant, avec l'arête 27, un point P de pivotement ou d'appui. A l'extrémité arrière de la barrette 24, il est prévu, à partir du point P, un retrait 31 des parois latérales 25, 26 par rapport aux cloisons 9-12 correspondantes, de façon à autoriser le pivotement de la barrette autour du point P. Dans le cas d'une barrette conformée en creux, il est avantageux de ménager, à l'extrémité arrière de celle-ci, entre les deux parois latérales 25, 26, un retour 32 d'appui facilitant l'application de l'effort de pivotement avec le pouce. Selon une seconde variante de réalisation (fig. 7 et 8), la barrette 24 possède deux flancs 33 inclinés, réunis ensemble par un fond 34 muni d'une saillie 35 pour former le point P de pivotement. Bien entendu, un décrochement de dégagement 36, représenté en trait interrompu, analogue à la troncature 30, peut etre aménagé en arrière de la saillie 35. Il peut être aussi envisagé d'intégrer la saillie 35 directement à la tige 4 du piston 3. L'appareil d'aspiration décrit ci-dessus permet de mettre en oeuvre un procédé de prélèvement d'échantillons d'organismes vivants. Conformément a l'objet de l'invention, le procédé consiste à établir une dépression relative, préalablement à la pratique proprement dite de la ponction, de manière à disposer ultérieurement ensuite d'un effet de succion important, permettant d'aspirer les cellules à prélever. De préférence, la dépression créée est maximale, de façon à disposer d'un effet de succion manifeste, permettant d'aspirer une grande quantité de cellules. A cet effet, le volume initial de la chambre 7 est réduit au maximum par la mise en butée de la tête 5 avec le cylindre 2 (fig. 1). La dépression est alors créée dans la chambre 7 du cylindre 2 en fermant le robinet 18, puis en exerçant sur la tige 4 un effort de traction, dans le sens une course d'extension jusqu'au moment où un blocage de fir Je course intervient par l'engagement de l'épaulement d'arrêt 28 de la barrette 24 derrière la collerette 15 du cylindre 2 de la seringue (fig. 3). La barrette 24 s'oppose ainsi à la course de retour du piston 3 soumis à l'effet de dépression établie à l'intérieur de la chambre 7. L'extrémité de C'aiguille 17 est alors mise en place jusqu'à la zone de prélèvement ou, dans le cas de prélèvement tissulaire, un mouvement de va-et-vient est imprimé à l'ensemble de la seringue, permettant de dissocier mécaniquement le tissu, à partir duquel un prélèvement doit être effectué. Une fois l'effet obtenu, le robinet 18 est mis en position d'ouverture O et le matériel cellulaire, préalablement dissocié, est alors immédiatement aspiré à L'intérieur de la chambre 7 de la seringue. Lorsque le prélèvement est effectué, la chambre, toujours en dépression, est isolée par la fermeture du robinet 18 et l'aiguille 17 est dégagée de la zone de prélèvement. Conformément à l'objet de l'invention, après le dégagement, L'aiguille 17, toujours associée à la seringue, est plongée dans un réservoir de produit fixateur. Dans cette position, le robinet 18 est de nouveau ouvert, de manière que la dépression régnant toujours dans la chambre 7 de la seringue réalise, toujours par effet d'aspiration, le prélèvement d'une quantité de fixateur parcourant l'aiguille creuse pour être admis dans la chambre 7 de la seringue. Le prélèvement du fixateur a pour effet de rincer l'aiguille et d'introduire, à l'intérieur de la chambre 7, toutes les cellules qui s'y trouveraient encore. Lorsque la quantité suffisante de fixateur a été admise, l'aiguille 17 est extraite du réservoir et la pression atmosphérique s'établit à l'intérieur de la seringue. Le robinet 18 est ensuite fermé, de manière à isoler la chambre 7, en vue de procéder au mélange du produit fixateur et des cellules'prélevées. Le robinet 18 est, ensuite, de nouveau ouvert et le piston est repoussé pour évacuer l'air et limiter le volume de la chambre 7 à celui de confinement du mélange composé du fixateur admis et des cellules prélevées. Dans cet état, le robinet 18 est fermé pour isoler le matériel ainsi fixé et éviter toute oxydation par l'air ambiant. La seringue constitue ainsi, par elle-meme, un conteneur de protection et de transport de l'échantillon prélevé. L'invention n'est pas limitée aux exemples décrits et représentés, car diverses modifications peuvent y être apportées sans sortir de son cadre. REVENDICATIONS 1 - Procédé de prélèvement d'un échantillon de cellules de tissu solide ou de liquide biologique, à partir d'un organe, ou de sang périphérique à partir d'un vaisseau sanguin, par un appareil (1) du type seringue comportant, essentiellement, un piston (3) couLissant dans un cylindre (2) muni d'une aiguille (17), en vue de déterminer, entre le piston et le cylindre, une chambre (7) à volume variable, caractérisé en ce qu'il consiste a) - à créer dans la chambre (7) une dépression relative, b) - à conduire l'aiguille (17) jusqu'à la zone de prélèvement dudit tissu solide de L'organe ou du vaisseau sanguin, c) - à mettre en communication la chambre (7) en dépression avec le tissu cible ou la lumière du vaisseau, en vue d'aspirer le matériel cellulaire, d) - à dégager L'aiguille (17) pour disposer du prélèvement. 2 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste, entre les étapes b) et c), à solliciter en mouvement l'aiguille (17) pour traumatiser localement la zone de prélèvement dans le cas d'un tissu solide. 3 - Procédé selon La revendication 2, caractérisé en ce qu'il consiste, après l'étape d), à fixer le prélèvement. 4 - Procédé selon les revendications 2 ou 3, caractérisé en ce qu'il consiste - entre les étapes c) et d) à isoler la chambre (7) et, - après l'étape d) à à introduire l'aiguille (17) dans un réservoir d'un produit fixateur, . å ouvrir la chambre (7) toujours en dépression relative pour aspirer du fixateur par l'aiguille (17), à á isoler de nouveau la chambre (7) en vue de procéder au mélange du fixateur et du prélèvement, à å limiter le volume de la chambre (7) à celui de confinement du mélange, à å isoler la chambre (7) de manière que la seringue constitue par elle-même un conteneur de L'échantillon prélevé. 5 - Appareil de prélèvement de cellules pour la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 1, du type seringue comportant un piston (3) coulissant dans un cylindre (2) muni d'un embout (16) d'adaptatson d'une aiguille (17) et d'un organe de blocage relatif du piston (3) et du cylindre (2), en fin de course du piston, caractérisé én ce qu'il comprend - un organe de blocage formé par un organe rigide (24) apte à pivoter autour d'un point d'appui (P) sur la tige (4) du piston (3), lors de l'extension de la tige (4) du piston (3), - et un obturateur commandé (18) interposé entre l'embout (16) et l'aiguille (17) et possédant au moins une position de fermeture (F) et une position d'ouverture (O). 6 - Appareil selon la revendication 5, caractérisé en ce que l'organe de blocage (24) comporte le point d'appui (P). 7 - Appareil selon la revendication 6, caractérisé en ce que le point d'appui (P) est constitué par la jonction de deux arêtes (27, 30) non coplanaires. 8 - Appareil selon la revendication 6, caractérisé en ce que le point d'appui (P) est formé par une saillie (35). 9 - Appareil selon la revendication 5, caractérisé en ce que le point d'appui (P) est intégré à la tige (4) du piston (3). 10 - Appareil selon les revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que L'organe de blocage (24) possède deux parois latérales convergentes (25, 26) d'engagement avec un couloir (13) ménagé dans la tige (4) du piston (3). 11 - Appareil selon les revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que l'organe de blocage (24) possède deux flancs inclinés (31) réunis par un fond (32). 12 - Appareil selon les revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que L'organe de blocage (24) possède un épaulement (28) de butée prolongé par un nez de verrouillage (29).