FR 2607701 A1 19880610 FR 8617148 A 19861208 NOUVEAUX PROMOTEURS DE CROlSSANCE.NOTAMXENT POUR LES ANTMAUX DE RENTE. COXPOSITIONS LES CONTENANT. ET PROCEDE POUR FAVORISER LA CROISSANCE LES UTILISANT. La présente invention concerne de nouveaux promoteurs de croissance, destinés à être fournis aux animaux de rente, comme les ruminants, les porcelets, les volailles; des compositions qui contiennent ces promoteurs de croissance ; ainsi qu'à un procédé permettant de favoriser la croissance, qui utilise lesdits promoteurs. On sait que la législation actuelle a limité l'usage des anabolisants stéroïdiens. De nombreuses firmes pharmaceutiques et alimentaires ont, de ce fait, été amenées à rechercher de nouveaux promoteurs de croissance plus physiologiques et favorisant essentiellement la sécrétion d'hormone de croissance (GH). Leur effort a porte sur la mise au point de systèmes reposant sur la stimulation de cette sécrétion par l'administration de somatocrinine (GRF) ou par celle des susbtances anti-somatostatines, ou encore par l'immunisation passive anti-somatostatine. Hormis l'immunisation passive, les systèmes font appel à l'administration de substances peptidiques (GRF1-44' GRF1191 anti SRIF, etc.), laquelle ne peut pas être réalisée par la voie orale compte tenu de la dégradation de ces substances par les enzymes digestives. Le contrôle de leur libération à partir de systèmes de relargage souscutané est encore en cours d'étude et s'avère très difficile et très onéreux. On comprendra qu'un tel mode d'adminitration ne peut étre valablement appliqué en zootechnique, à une grande échelle, et il est bien évident que l'idéal serait de pouvoir disposer d'un agent promoteur de croissance qui puisse être additionné aux aliments ou a l'eau de boisson que l'on fournit aux animaux. La présente invention apporte une solution a ce problème, en proposant, comme promoteur de croissance, notamment pour les animaux de rente, des composés apparte nant a la famille des inhibiteurs de l'enképhalinase. Rien ne permettait de supposer que les inhibiteurs de l'enképhalinase présentent cette activité. Le fait que l'on ait constaté que les opioïdes endogènes étaient sans effet sur la croissance Par ailleurs, l'utilisation seule d'inhibiteurs de l'enkephalinase ne suffit pas pour autant a prouver l'effet recherché, a savoir la croissance, car il faut encore choisir une dose appropriée. On a en effet constaté qu'd des doses excessivement élevées, cet effet disparaît, la croissance n'étant plus observée. Parmi les inhibiteurs de l'enkephalinase, on mentionne a titre d'exemples, le -(acétylthio-3 benzyl-2 propionyl) amino acétate de benzyle (Acetorphan), de formule: avec Ac = acétyle et Bz = benzyle la -(mercapto-3 benzyl-2 propionyl) glycine (Thiorphan), de formule ainsi que la (mercapto-3 méthyl-2 oxo- propyl)-1-L-proline (Captopril), de formule La présente invention porte également sur une composition favorisant la croissance, destinée à être fournie notamment aux animaux de rente, caractérisée par le fait qu'elle contient, comme principe actif, au moins un composé inhibiteur de l'enképhalinase, ledit principe actif étant associé à un véhicule physiologiquement acceptable. Conformément à un mode de réalisation préféré de l'invention, cette composition se présente sous une forme convenant à l'ingestion par voie orale. On peut notamment choisir une composition permettant une libération lente du principe actif dans l'organisme. Quant au véhicule choisi, il peut avantageusement être constitué par l'eau ou les aliments, l'ingestion pouvant alors avoir lieu par gavage chez les animaux. Par ailleurs, dans ce dernier cas, la composition selon l'invention est, en règle générale, fournie à raison de 0,05 å 5 mg/kg de poids corporel/jour. Dans le cas des ruminants, la composition est fournie notamment à raison de 0,1 à 1 mg/kg de poids corporel/jour. En général, les animaux doivent recevoir quotidiennement la dose du promoteur de croissance selon l'invention, en une ou plusieurs fois La présente invention a également pour objet un procédé pour favoriser la croissance, notamment des animaux de rente, caractérisé par le fait qu'on fournit auxdits animaux, en particulier par la voie orale, au moins un inhibiteur de l'enkephalinase en une quantité propre å provoquer l'effet de croissance et qu'on renouvelle la dose administrée jusqu'à l'obtention du gain de poids recherche elle porte également sur l'utilisation des inhibiteurs de l'enkèphalinase pour fabriquer une composition destinée a favoriser la croissance notamment chez les animaux de rente. Le Déposant a réalisé des essais mettant en évidence le gain de poids corporel d'animaux recevant dans leur alimentation ou leur eau de boisson de l'Acetorphan ou du Captopril, ce gains de poids s'accompagnant, dans la plupart des cas, d'une réduction de l'indice de consommation alimentaire, ce qui constitue un intérêt zootechnique non négligeable I - ESSAIS REALISES SUR LA CROISSANCE ET L'INDICE DE CONSOMMATION CHEZ LE RAT ET LE SOURICEAU RECEVANT DE L'ACETORPHAN. Ces essais ont été réalisés en deux temps. Dans une première série d'essais, il a été montré que, chez 15 rats mâles pesant 407 + 45 g, répartis en 2 lots, l'administration orale de 2 mg d'Acétorphan à 14:00 h, chaque jour, entraînait une augmentation moyenne de 131% de la quantité ingérée en 4 heures (14:00 à 18:00 h) et de 12% des quantités quotidiennes ingérées, cette dernière augmentation etant significative à P La deuxième série d'essais a été réalisé avec une dose orale d'Acétorphan plus faible Tableau I suivant TABLEAU I INFLUENCE COMPAREE DE L'ACETORPHAN ADMINISTRE PAR VOIE ORALE SUR LE GAIN DE POIDS (6P), LA CONSOMMATION (QI) ET L'INDICE DE CONSOMMATION (QI/GP) JOURNALIERS MOYENS POUR UN TRAITEMENT DE 8 JOURS CHEZ DE JEUNES RATS ET SOURIS EN CROISSANCE. Poids initial eain de poids T Quantités Indice de ingérées tonsommation (g) (g/j) (g/j) (g/g) Rats(a) Témoin (n=8) 191#12 4,02#0,67 17,1#1, 4,25#0,26 Acétorphan (n=7) 188#28 5,08#0,89** 18,7#0,9* 3,68#0,17** (# 26,3%) (# 9,4%) (- 13,4%) Souris Témoin (n=6) 22,7 t 3,9 0,813 i 0,116 3,67 i 0,42 4,51 t 0,39 Acétorphan (n=7) 21,8 i 3,6 0,925 t 0,094* 4,16 t 0,51* 4,49#0,46 (+ 13,8%) (+ 13,4%) N,S, * P Ces résultats, portant sur la croissance après seulement 8 jours de traitement, montrent que le gain de poids corporel était en moyenne de 5,08 * 0,89 g/jour pour le lot traité (Acétorphan) vs 4,02 + 0,67 g/j pour le lot témoin, soit une augmentation significative (P Des essais comparables ont été réalisés chez le souriceau (20-22 g) avec addition du principe actif dans l'eau de boisson ten livre acces) pour éviter l'effet du stress lié à la contention. Dans ces conditions et sur une période comparable de 8 jours, le lot traite à l'Acetorphan possède un gain de poids supérieur de 13,8% par rapport au lot témoin pour une ingestion accrue également de 13,4% mais sans modification significative (P II - ESSAIS PORTANT SUR LA CROISSANCE DE SOURICEAUX RECEVANT DE L'ACETORPHAN DANS L'EAU DE BOISSON. Les essais ont porté sur 43 souris mâles de 30 à 50 g L'aliment donné aux souriceaux est un aliment composé complet pour l'élevage des rats et souris ("AO3"/UAR) de composition moyenne Matières sèches MS : 87% CB : 4,5% Xatières minérales MX : 6% Matières azotées totales MAT : 22% Matières grasses MG : 4% + vitamines A, DS, B. Cet aliment était disponible ad libitum 24 h/24 h. Chaque lot percevait quotidiennement, dans un biberon de 100 ml d'une solution d'eau à 1% d'alcool (solvant pour l'Acétorphan), contenant selon le cas : 0, 0,1, 0,5, 2,5 ou 12,5 mg d'Acétorphan, ce qui, compte tenu des consommations moyennes quotidiennes (6 ml) et les poids moyens (30 g) correspondait à lot témoin : O mg/kg d'Acétorphan lot n' 1 : 0,2 mg/kg lot n' 2 : 1 mg/kg lot n' 3 : 5 mg/kg lot n' 4 :25 mg/kg Les mesures ont porté sur les quantités moyennes quotidiennes d'eau consommee et d'aliment ingéré par lot et sur la pesée individuelle des souris tous les trois jours. Les résultats sont illustrés sur les figures 2 à 4 qui sont des graphiques montrant respectivement le gain de poids, les quantités ingérées et le rapport gain de poids/quantités ingérées pour les cinq lots et pour les 13 j ours. Aucune différence significative dans le gain de poids n'est perceptible entre les différents lots au cours des 3 premiers jours de traitement, alors que dès le 6ème jour apparaît, pour la période qui précède, une augmentation de 252 du gain de poids pour le lot à 0,2 mg/kg par rapport au lot témoin, les autres doses étant alors sans effet. Sur l'ensemble des 13 jours, la dose de 0,2 mg/kg permet un gain de poids moyen de 4,45 # 0,51 g contre 3,50 # 0,71 g pour le lot témoin (soit + 26%). Cette différence peut être imputée à une modification des quantités ingérées, mais doit être attribuée à une amélioration de l'indice gain de poids (g) / quantités ingérées (g) de l'ordre de 27% sur l'ensemble de la période.Les autres lots traités présentent une diminution, non significative cependant, des performances zootechniques (gain de poids > notamment dans la dernière période de l'essai et de façon proportionnelle à la dose utilisée. Ces données, qui confirment les résultats antérieurs, indiquent une très nette amélioration de l'indice gain de poids/quantités ingérées chez le souriceau pour des doses très faibles d'Acétorphan (0, 2 mg/kg per os) et ce, sur une longue période. La dose nécessaire pour l'obtention de tels effets est cependant plus faible que celle requise dans les essais precedents probablement en raison de l'administration fragmentée au cours du nycthémère et associée aux abreuvements. Les "fortes doses" tendent à diminuer les performances zootechniques sans toutefois affecter le niveau d'ingestion. III - ESSAIS PORTANT SUR LA CROISSANCE DE SOURICEAUX RECEVANT DU CAPTOPRIL. 45 souriceaux (souche NXRI 10 PS > mâles, sevrés, (17 i 1,5 g) sont répartis en 4 lots homogènes de 9 individus. Chaque lot est disposé dans une boîte d'élevage où il reçoit de l'aliment ad libitum et une solution alcoolique a 1% contenant ou non suffisamment de Captopril pour assurer un apport quotidien de 0; 0,2; 1 ou 5 mg/kg/jour. La boisson est renouvelée chaque jour. Dans les résultats rapportés dans le Tableau II ci-après, sont présentés les bilans après 4 jours de traitement. TABLEAU II Poids Gains de Quantités Indice de1 (g) | poids ingérées consom- initial final (g) (g) mation Témoins 16,98#0,45 22,87#0,79 5,89#0,53 17,6 2,98 Captopril 17,29 + 0,72 23,66 + 0,93 6,36 + 0,64 17,4 2,72 0,3 mg/kg (+ 8%) (- 8,7%) (9) Captopril 17,12#0,96 23,24#1,32 6,12#0,45 16,2 2,66 1 mg/kg (+ 3,9%) (- 10,7%) (9) Captopril 17,16 + 0,51 23,93 i 0,52 6,78 + 0,24 | 17,8 2,62 5 mg/kg (+ 15,0%) (- 12,1%) (9) Poids, gain de poids, quantites ingérées et rapport quantités ingérées sur gain de poids de souriceaux mâles recevant quotidiennement pendant 4 jours dans l'eau de boisson 0 (temoin): ô,-2: i ou 5 mg/kg de Captopril. (t P Le Captopril apparaît, dans cet essai, comme ayant un effet positif significatif (P IV - ESSAIS PORTANT SUR LA CROISSANCE DE SOURICEAUX RECEVANT DU THIORPHAN 27 souriceaux (souche NXRI 10 PS) mâles, sevrés (13-15 g), répartis en 3 lots homogènes ont reçu quotidiennement par l'eau d'abreuvement des doses de Thiorphan correspondant en moyenne à 0, 0,1 et 0,2 mg//kg/j. Les différents résultats présentés dans le Tableau III montrent l'évolution du poids et gain corporels, quantités ingérées et indice de consommation portant sur une période de 27 jours de contrôle. Cette étude révèle un gain de poids significatif de 10-12% pour les lots traités avec diminution concomitante de l'indice de consommation et sans augmentation des quantités ingérées. TABLEAU III Poids Gains de Quantités Indice de (g) poids ingérées consom initial final (g) (g) mation Témoins 14,0#0,7 33,6#1,9 19,6#0,4 177,1 9,04 (9) Thiorphan 13,9 + 0,9 5,6 i 1,6 21,7 i 0,3 182,1 8,39 0,1 mg/kg/j (+ 10,7%) (-7,2%) (10) Thiorphan 13,4 + 0,8 35,6 # 1,9 22,0 i 0,71 182,1 8,28 0,2 mg/kg/j (+ 12,2%) | (-8,4%) (8) Poids, gain de poids, quantités ingérées et indice de consommation de souriceaux males recevant quotidiennement pendant 27 iours dans l'eau de boisson 0 (témoin), 0,1 et 0,2 mg/kg de Thiorphan (* P REVENDICATIONS 1 - Application des inhibiteurs de l'enképhalinase comme promoteurs de croissance. 2 - Application des inhibiteurs de l'enkephalinase comme promoteurs de croissance, chez les animaux de rente. 3 - Application selon l'une des revendications 1 et 2, caracterisee par le fait qu'on utilise, comme promoteur de croissance, la X (acetylthio-3 benzyl-2 propionyl) amino acétate de benzyle 4 - Application selon l'une des revendications 1 et 2, caracterisee par le fait qu'on utilise, comme promoteur de croissance, la N (mercapto-3 benzyl-2 propionyl )-glycine (Thiorphan). 5 - Application selon l'une des revendications 1 et 2, caracterisée par le fait qu'on utilise, comme promoteur de croissance, la (mercapto-3 méthyl-2 oxo-l propyl)-1-L-proline (Captopril). 6 - Composition favorisant la croissance, destinee a etre fournie notamment aux animaux de rente, caracterisee par le tait qu'elle contient, comme principe actif, au moins un compose inhibiteur de l'enkephalinase, ledit principe actif etant associe à un vehicule physiologiquement acceptable. 7 - Composition selon la revendication 6, caracterise par le fait que le principe actif est la N-(acétylthio-3 benzyl-2 propionyl) amino acétate de benzyle (Acétorphan). 8 - Composition selon la revendication 6, caractérisee par le fait que le principe actif est la X 9 - Composition selon la revendication 6, caracterisée par le fait que le principe actif est la Cmercapto-3 methyl-2 oxo-1 propyl)-1-L-proline 10 - Composition selon l'une des revendication 6 à 9, caracterisee par le fait qu'elle se présente sous une forme convenant a l'ingestion par la voie orale. 11 - Composition selon l'une des revendications 6 S 10, caractérisée par le fait qu'elle permet une libération lente du principe actif dans l'organisme. 12 - Composition selon l'une des revendications 6 A 11, caractérisée par le fait que le véhicule est constitué par l'eau ou les aliments, l'ingestion pouvant, dans ce dernier cas,avoir lieu par gavage chez les animaux. 13 - Composition selon l'une des revendications 6 à 12, caractérisée par le fait qu'elle est fournie a raison de 0,05 à 5 mgXkg de poids corporel/jour. 14 - Composition selon l' une de revendicatione i. à 12, caractérisée par le fait qu'elle est fournie à raison de 0,1 à 1 mg/kg de poids corporel/jour à des ruminants. 15 - Procédé pour favoriser la croissance, notamment des animaux de rente, caractérisé par le fait qu'on fournit auxdits animaux, en particulier par la voie orale, au moins un inhibiteur de l'enképhalinase en une quantité propre a provoquer l'effet de croissance et qu'on renouvelle la dose administrée jusqu'a l'obtention du gain de poids recherché. 16 - Utilisation des inhibiteurs de l'enképhalinase pour fabriquer une composition destinée à favoriser la croissance, notamment chez les animaux de rente.