FR 2614180 A1 19881028 FR 8805313 A 19880421 La présente invention concerne un procédé pour le traite- ment des récoltes par fumigation contre les infections fongiques et bactériennes et des compositions fumigatoires à uti- Liser à cet effet. En particulier, l'invention concerne l'utilisa- tion du 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide ou DBNPA en fumigation pour des applications comme biocide. L'une des cultures souffrant le plus de l'attaque à la fois par les champignons et les bactéries est celle des pommes de terre, à laquelle on attache une attention particulière dans la technique et qui sera discutée en détail dans la description ci-après. Les maladies de la pomme de terre sont provoquées par des champignons et des bactéries. Ces micro-organismes attaquent à la fois les pommes de terre cultivées et les pommes de terre à semence et il est entendu que chaque fois que l'on mentionne les pommes de terre dans la présente description, il s'agit à la fois de pommes de terre cultivées et de pommes de terre à semence, selon l'application. L'intensité des signes de la maladie dans une culture de pommes de terre est influencée par de nombreux facteurs tels que les conditions environnantes, l'intéraction entre divers agents pathogènes, la résistance ou la sensibilité du cultivar, la nutrition des plantes, les manipulations des semences, etc. De nombreux efforts ont été consacrés à la lutte contre les maladies de la pomme de terre, à cause de l'intérêt économique de cette récolte. On utilise un grand nombre de composés biocides pour traiter les récoltes de pommes de terre, notamment les composés organo-mercuriels. Ceux-ciainsi que d'autres biocides utilisés couramment, présentent plusieurs inconvénients car ils sont toxiques et phytotoxiques. Parmi les composés fongicides les mieux connus, on utilise couramment dans la technique le chlorure de 3-méthoxy- éthylmercure ou "Caspan" et le tétrahydro-2-[(trichlorométhyl)- thio]-4-cyclohexène-1,2-dicarboximide ou Captan. Parmi les micro-organismes les plus courants qui attaquent les pommes de terre, on citera Erwinia çarotovora (maladie de la jambe noire), Streptomyces scabies (galle commune de la pomme de terre), Fusarium oxysporum (fusariose de la pomme de terre), 2 6 14180 Verticillium dahliae (verticilLiose) et Rhizoctonia soLani (rhizoctone noire). Parmi ces micro-organismes, Erwinia car., qui est le principal responsable des maladies de la pomme de terre, et Streptomyces scabies sont des bactéries et Fusarium oxysporum, Verticillium dahLiae et Rhizoctonia solani sont des champignons. Un petit nombre des composés chimiques utilisés sur les pommes de terre ont une volatilité appréciable et l'activité fongi- cide est souvent limitée aux sites de dépôt initial de sorte que la couverture totale du tubercule est essentielle. Ceci est, bien entendu,un inconvénient sérieux qui se traduit dans le coût et la qualité des traitements de la pomme de terre. On connaît dans la technique plusieurs procédés d'application. On utilise souvent l'immersion totale des tubercules qui est cependant dangereuse à cause du risque de pourriture molle dans les tubercules traités et de maladie de la jambe noire dans la récolte. On utilise souvent le saupoudrage en agitant ou en roulant les tubercules dans la poudre de fongicide. Ce procéde, cependant, est relativement complexe et la quantité de fongicide atteignant le tubercule dépend du support inerte. On utilise également la pulvérisation de brouillards. Ce procédé est techniquement complexe, il nécessite une rotation du tubercule, le liquide de pulvérisation est souvent une suspension et des quantités de produit relativement grandes sont nécessaires. Parmi les composés chimiques normalement utilisés pour la lutte contre les maladies fongiques et bactériennes, on utilise souvent les composés organo-mercuriels pour traiter les pommes de terre. Ces composés ont l'inconvénient considérable d'être toxiques et phytotoxiques et, selon des travaux récents (Logan, C.: Annual Report on Research and Technical Work of the Department of Agricul- ture for Northern Ireland, pages 198-200 (1984)), ils n'assurent pas une protection satisfaisantecontre les agents pathogènes de la maladie de la jambe noire présents dans le sol. La fumigation est un procédé qui, en plus d'être simple et économique, permet de surmonter plusieurs de ces inconvénients. Les Droblèmes liés aux fumigations sont la faible volatilité des com- posés chimiques couramment utilisés et le fait qu'elles sont toxiques sous forme de vapeur. On a donc souhaité depuis longtemps dans la technique disposer d'une formulation fumigène qui soit relativement inoffensive et qui puisse être utilisée dans la fumigation des récoltes. On sait depuis quelques temps que le DBNPA possède une activité bactéricide. Le brevet US 2 419 888 décrit l'activité bactéricide et fongicide d'une classe de composés qui comprend le DBNPA. Cependant, le DBNPA n'est pas spécifiquement décrit ou illustré dans ce brevet. Les brevets US n 4 285 765 et 4 605 405 décrivent des mélanges antimicrobiens synergiques de DBNPA et d'autres substances actives. D'après des études récentes (G. Krizmann et autres, "Gan, Sade Vemeshek", Israël, juillet 1985), on avait trouvé que le DBNPA ne possède pas d'activité fongicide contre les champignons qui attaquent les cultures de pommes de terre. Les auteurs ci-dessus ont effectué des expériences appro- fondies in vitro et sur le terrain avec des champignons qui attaquent les cultures de pommes de terre et ils ont conclu à partir de leurs résultats que le DBNPA ne possède pas d'activité fongicide contre ces champignons. On a maintenant trouvé de façon très surprenante, et c'est un objet de la présente invention, que le DBNPA, malgré sa volatilité extrêmement faible, peut aussi être utilisé commodément comme composé fumigatoire et que la fumigation avec ce produit donne un excellent effet biocide, à la fois contre les champignons et les bactéries. On a encore trouvé, et c'est un autre objet de l'invention, que la fumigation par le DBNPA est particulièrement efficace contre les champignons et les bactéries qui sont responsables des maladies de la pomme de terre. Une autre découverte surprenante est qu'il est possible de proposer des formulations contenant du DBNPA dont l'efficacité n'est pas limitée à l'activité biocide et fongicide normale et à l'activité fongistatique, mais qui présentent également une activité sporistatique et sporicide. On entend par fumigation l'application de quantités biocides efficaces de DBNPA sur le lieu à traiter contre les micro-organismes à partir d'un réservoir contenant le DBNPA soit seul, soit en mélange avec des solvants et/ou d'autres composés biocides ou inertes, au moyen d'un gaz comme milieu de transfert, sans contact direct entre le produit contenu dans le réservoir et le lieu à traiter. Relativement peu de composés chimiques sont sporicides et de nombreux agents bactéricides puissants comme les phénols et les composés d'ammonium quaternaire ont peu d'effet sur la viabi- lité des spores bactériens [voir par exemple S. S. Block, "Desinfection, Sterilization and Preservation", Leo et Febiger, 1983, p. 739]. On entend par activité sporostatique que la germination des spores est empêchée, aussi longtemps qu'un produit actif est présent en concentration efficace, mais que la germination a lieu lorsqu'il n'y a plus de produit actif. Un sporicide est défini comme un agent qui détruit les spores microbiens. La composition biocide fumigatoire selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif du 2,2-dibromo-3nitrilopropionamide, seul ou en mélange avec un solvant organique ou un solvant organique et/ou de l'eau. Pour être utilisé convenablement dans les compositions de l'invention, le solvant organique doit bien entendu être utili- sable avec les cultures concernées. Par exemple, si l'on traite des récoltes alimentaires, le solvant doit être tel qu'il ne reste pas pendant de longues durées sur la récolte et ne soit pas toxique ou phytotoxique. De préférence, le sotvant organique est un glycol choisi parmi le propylèneglycol, le dipropylèneglycol et le poly- propylèneglycol, de préférence le dipropylèneglycol. Une composition fumigatoire préférée selon l'invention comprend: jusqu'à 100 % en poids de 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide, de préférence environ 20 % en poids; 0 à 80 % en poids de solvant organique, de préférence environ 60 X en poids; et 0 à 80 X en poids d'eau, de préférence environ 20 % en poids. Le procédé de traitement selon l'invention des récoltes infectées par des micro-organismes est caractérisé en ce que la récolte atteinte est traitée par une composition biocide fumiga- toire selon l'invention. Une récolte particulièrement appropriée pour le traitement par le procédé de l'invention consiste en pommes de terreouen pommes de terre à semence. La composition sporicide et/ou fongicide selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif du 2,2-dibromo3-nitrilopropionamide dans un solvant consistant en un solvant organique ou un solvant organique et/ou de l'eau. On trouve en général que les compositions ne comprenant pas un solvant organique, bien qu'elles conservent leurs propriétés sporicides, sont moins actives que les compositions qui comprennent un solvant organique. Il sera évident pour l'homme de l'art qu'un solvant orga- nique, pour être utilisé convenablement pour la mise en oeuvre de l'invention, doit dissoudre au moins partiellement le DBNPA et en même temps ne pas être phytotoxique ou toxique, puisque les récoltes concernées sont comestibles ou alimentaires. De préférence, le solvant organique est un glycol et mieux encore le glycol est choisi parmi le propylèneglycol, le dipropylène- glycol et le polypropylèneglycol, de préférence le dipropylène- glycol (DPG). Selon un mode de mise en oeuvre préféré de l'invention, la composition contient: a) 5 à 25 % en poids de 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide; b) O à 95 % en poids d'eau; et c) O à 95 % en poids d'un glycol. Des compositions de l'invention particulièrement préférées contiennent: a) environ 20 % en poids de 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide; b) environ 20 % en poids d'eau; et c) environ 60 % en poids de dipropylèneglycol. Le procédé selon l'invention pour traiter les pommes de terre et/ou les pommes de terre à semencecontre lesmaladiesfongiques 2 6 14180 et bactériennes des pommes de terre est caractérisé en ce que l'on applique aux pommes de terre ou pommes de terre à semence une compo- sition selon l'invention chaque fois que les champignons et/ou les bactéries ou leurs spores doivent être détruits ou leur croissance ou leur germination empêchées. L'application de la composition peut être effectuée de toute manière convenable,mais on préfère surtout la pulvérisation et La fumigation. On comprend bien que l'efficacité surprenante des compositions de L'invention contre les champignons qui attaquent les récoltes de pommes de terre, prise avec l'activité connue du produit actif contre diverses bactéries et son activité sporicide, sont à La base d'une utilisation très commode de ces compositions dans le traitement des maladies des récoltes et en particuLier les maladies des pommes de terre qui sont provoquées par une combinaison de différents micro-organismes. Le micro-organisme peut être n'importe quel micro-organisme qui attaque les récoltes et en particulier le procédé peut être convenablement mis en oeuvre pour détruire Erwinia carotovora, Streptomyces scabies, Fusarium oxysporum, Verticillium dahliae ou Rhizoctonia solani, ou deux ou plusieurs desdits micro-organismes présents simultanément sur une même récolte. Les caractéristiques et avantages ci-dessus de l'invention et d'autres seront mieux compris à la lecture des exemples suivants donnés à titre d'illustration et non limitatifs. Dans tous les cas, les expériences à température élevée (>37 C) sont effectuées dans une cellule de fumigation ayant un volume total de 15 l, contenant un dispositif chauffant réglé situé au centre d'un bloc isolant. Deux cuvettes en aluminium (d'un volume de 3 ml chacune) sont placées sur le dispositif chauffant. Les plaques de gélose sont placées au-dessus du dispositif chauffant à la température ambiante. La formulation biocide est chauffée à la température choisie et les plaques sont ensuite placées dans la cellule fermée pendant la durée nécessaire. Apres enlèvement des plaques, on les fait incuber à 27 C pendant 24 h et on compare les comptages de germes viables avec ceux d'expériences témoins en parallèle. Les expériences aux températures inférieures sont effectuées dans un récipient de fumigation maintenu pendant l'expérience à la température indiquée, comme décrit dans les exemples ci-après. Les compositions contenant un glycol contiennent aussi 0,1 % de butylhydroxytoluène (BHT) comme antioxydant. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toute- fois en limiter la portée. Exemole 1 On effectue des expériences de fumigation dans la cellule de fumigation pour déterminer l'activité de deux formulations diffé- rentes de DBNPA contre Erwinia carotovora ATCC 15713 à différentes températures. Les résultats de ces tests sont indiqués dans le tableau I ci-après. Les compositions fumigatoires utilisées sont une forme solide comprenant du DBNPA seul et une formulation liquide contenant du dipropylèneglycol (DPG), dans les proportions DBNPA: eau:DPG 20:20:60 % en poids, repérées dans le tableau I par (s) et (l), respectivement. Les formulations liquides contenant un gtycol contiennent également dans chaque cas 0,1 % de butylhydroxytoluène (BHT) comme antioxydant. Comme on peut le voir d'après le tableau I, l'activité de la formulation liquide est notablement supérieure à celle de la forme solide et on peut observer un effet sensible de la température de la cellule de fumigation. Le poids total de la substance active n'est pas important, aussi longtemps qu'il reste un peu de substance active à la fin de l'expérience, et le facteur important est sa vitesse d'évaporation. Le poids réel de la subs- tance active dans les formulations liquides peut être calculé à partir des quantités utilisées dans chaque cas. Exemple 2 On répète l'exemple 1 à basses températures (4 C, 27 C et 37 C) et les résultats de ces tests sont indiqués dans le tableauII ci-après. On place des spores d'Erwinia dans des flacons à secousses contenant 50 ml de suspension de cellules et on suspend des fioles contenant la formulation biocide au-dessus du niveau de l'eau, à l'intérieur du récipient de fumigation. Comme on le voit par comparaison des tableaux I et II, des durées de contact plus longues sont nécessaires pour des températures de fumigation plus basses. 2 6 14180 Exemole 3 On détermine l'activité du DBNPA contre les spores de trois champignons dans une cellule de fumigation. Les champignons utilisés sont Fusarium oxysporum, Verticillium dahliae et Rhizoctonia solani. On soumet également au test à titre de compa- raison des spores d'une bactérie (Streptomyces scabies). Les résultats sont indiqués dans le tableau III ci-après. Les expériences sont effectuées dans une cellule de fumigation ayant un volume total de 15 l, contenant un corps chauffant situé au centre d'un bloc isolant. On place sur le corps chauffant deux cuvettes d'aluminium (d'un volume de 3 ml chacune). On place les plaques de gélose au-dessus du dispositif chauffant à la température ambiante. On chauffe la formulation biocide à la température choisie et on place ensuite les plaques dans la cellule fermée pendant la durée nécessaire. Après enlèvement des plaques, on les fait incuber à 271C pendant 24 h et on compare les comptages d'entités viables avec ceux des expériences témoins parallèles. Toutes les expériences sont effectuées à 70 C et avec un inoculum initial différent. La cellule de fumigation est chargée avec une formulation DBNPA:eau:DPG 20:20:60 % en poids. Dans tous les cas, on ne trouve pas de survivants, pour tous les champignons testés. Exemple 4 On utilise un seul échantillon d'une formulation de DBNPA dans le DPG et l'eau 20:20:60 pour une expérience de fumigation en longue durée, afin de déterminer l'activité à long terme de cette formulation. L'expérience de fumigation est effectuée à 70 C avec des durées de contact de I h pour chaque plaque, les plaques étant inoculées par Erwinia carotovora. On utilise dans l'expérience deux échantillons identiques de la formulation. Les résultats de ce test sont indiqués dans le tableau IV ci-après. La cellule fonctionne pendant un total de 61 h et conserve son activité contre Erwinia pendant 55 h. On voit que l'eau s'évapore rapidement et après les cinq premières heures, on ajoute de L'eau à la formulation pour conpenser les pertes. La perte de poids par heure d'un échan- tillon hydraté est d'environ 20 % par heure, tandis que la perte moyenne de poids d'un échantillon déshydraté est de 1,5 %, ce qui rend compte d'une vitesse d'évaporation du DBNPA de moins de 0,4 % par heure (environ 30 mg/h), si la vitesse d'évaporation est considérée comme constante. Exemple 5 On effectue un certain nombre d'expériences afin de déterminer l'activité relative de différents mélanges de DBNPA solide et d'eau. Les résultats de ces tests sont indiqués dans le tableau V ci-après. Les pertes de poids sont indiquées pour chacun des deux échantillons identiques de formulation aqueuse utilisés ensemble dans l'expérience. La température de fumigation est maintenue à 70 C pendant toutes les expériences. Les meilleurs résultats sont obtenus avec des compositions contenant 20 % en poids de DBNPA dans l'eau. Cette formulation donne des résultats sensiblement meilleurs que n'importe quelle formulation solide ou aqueuse testée et semblables aux résultats de la formulation contenant du DPG. On notera également que les vitesses d'évaporation dans deux cellules identiques dif- fèrent à l'intérieur de limites imprévisibles. On pense que ceci est dû à l'hétérogénéité d'une formulation de DBNPA dans l'eau seule. Exemple 6 On effectue des expériences de fumigation avec plusieurs ingrédients des formulations de DBNPA et avec des analogues du DBNPA, afin de mesurer leur activité biocide en fumigation et de la comparer avec l'efficacité en fumigation des compositions de l'invention. Toutes les expériences de fumigation sont effectuées à 700 C et on soumet aux essais deux microorganismes: Erwinia carotovora subsp. carotovora (ATCC 15713) et des spores de Fusarium oxysporum (isolés sur des récoltes contaminées). Les résultats sont rassemblés dans le tableau VI ci-après. Les compositions fumigatoires essayées identifiées dans le tableau VI sont les suivantes: DPG = dipropylèneglycol pur; EG = éthylèneglycol pur; Br2 = formulation de 7 % de Br2 et 23 % de H20 dans 70 % de DPG; Monobromo = formulation de 25 % de monobromocyanoacétamide (MBNPA, préparé en mélangeant des quantités équimolaires de DBNPA et de cyanoacétamide), 19 % de H20 et 56 % de DPG; DBNPA/EG = formulation contenant 20 % de DBNPA et 20 % d'H 20 dans 60 % d'EG; DBNPA/DPG = formulation contenant 20 % de DBNPA, 20 % d'H20 et % de DPG. Les pourcentages donnés ci-dessus sont en poids. Les deux solvants DPG et EG ne présentent pas d'activité biocide dans les conditions du test. La formulation de Br2 présente certaines propriétes biocides, avec une régulation partielle pour de longues durées de contact (1 h). La formulation DBNPA/EG permet une certaine régulation d'Erwinia carotovora, lorsque l'on étudie une durée de contact de 1 h, et permet de combattre une faible quantité d'inoculum de Fusarium oxysporum (8 x 10 spores par plaque) avec une durée de contact d'une demi-heure, et une quantité élevée d'inoculum (8 x 107 spores par plaque) en utilisant une durée de contact de 1 h. La formulation DBNPA/DPG est efficace à la fois contre Erwinia sp. et Fusarium oxysporum après 15 min de fumigation. Exemple 7 Activité du DBNPA contre Streotomyces scabies et Fusarium oxysoorum On détermine l'activité du DBNPA contre Streptomyces scabies et Fusarium oxysporum, en comparaison avec l'activité du Captan, biocide connu. On effectue des expériences in vitro pour déterminer l'activité relative du DBNPA (formulation à 20 % avec % de DPG et 20% d'eau) et du Captan. Dans toutes les expériences, on utilise une durée de contact en principe illimitée et on étudie l'aptitude des divers spores à germé en présence de l'ingrédient actif. Les spores qui n'ont pas germer en 10 jours sont considérés comme détruits. Les renseignements donnés sous la rubrique "cfu/pm" concernent la germination de spores prélevés dans le flacon initial après 7 à 10 jours et placés dans des conditions de germination sur des plaques de gélose. La solution nutritive dans les tests est le malt pour Streptomyces scabies et le milieu Czapek-Dox pour tous les autres micro-organismes utilisés. Les résultats de ces expériences sont rassemblés dans les tableaux VII et VIII ci-après. On peut noter qu'il faut 200 ppm (0,02 %) de DBNPA pour inhiber la germination des spores de Streptomyces scabies, avec l'inoculum à 10 , conditions dans lesquelles 5 spores/10 ml germent sur les plaques de gélose. La concentration de 500 ppm (0,05 %) est biocide. On ne peut pas déceler de différence notable entre les activités à 27 et à 4 C. La concentration de 100 ppm (0,01 %) est biocide pour l'inoculum à 109 de Fusarium oxysporum. En comparaison, le Captan est biostatique à 500 ppm (0,05 %) dans les mêmes conditions, mais les spores germent encore sur les plaques de gélose. Avec Fusarium, la concentration de 500 ppm (0,05 %) est inhibitrice à la fois à 27 C et à 4 C. Exemple 8 Activité du DBNPA à faibles concentrations contre Fusarium oxV. sD. et Verticillium dahliae sD. On détermine l'activité du DBNPA aux faibles concentrations de 25-100 ppm (0,0025-0,01 %) contre Fusarium oxy. sp. et Verticillium dahliae sp., en comparaison avec l'activité d'un biocide connu, le Caspan. On effectue des expériences in vitro pour déterminer l'acti- vité relative du DBNPA (formulation à 20 % de DBNPA avec 60 % de DPG et 20 % de H20) et du Caspan. Dans toutes les expériences, on utilise une durée de contact en principe illimitée et on étudie l'aptitude des divers spores à germer en présence de l'ingrédient actif, comme indiqué en détail précédemment. On étudie trois teneurs de l'inoculum initial: il suffit de 0,0025 % de la formulation de DBNPA pour inhiber la germination de l'inoculum à faible teneur et de 0,0050 % pour l'inoculum à teneur élevée. En comparaison, même 0,0100 % de Caspan n'inhibe pas la germination de l'inoculum initial à faible teneur de Fusarium, mais inhibe la germination de l'inoculum à faible teneur de Verticillium. Une dose de 0, 0100% nesuffit pas pour empêcher la germination de l'inoculum à haute teneur de spores de l'un quel- conque de ces champignons. Les résultats de ces expériences sont indiqués dans les tableaux IX et X ci-après. Exemple 9 Détermination de la concentration inhibitrice minimale (CIM) On effectue des expériences pour déterminer la concentra- tion inhibitrice minimale du DBNPA, en comparaison avec le Captan et le Caspan, pour trois champignons: Trichoderma sp. (champignon utile du sol qui n'attaque pas les pommes de terre), Fusarium oxy. sp. et Verticillium dahliae sp. Les valeurs de CIM pour ces champi- gnons et les substances actives sont indiquées dans le tableau XI ciaprès. Ces résultats illustrent un avantage important de l'invention. La comparaison des résultats montre que la CIM du DBNPA pour Trichoderma sp. est très élevée (0,0200-0,0500 %) en comparaison avec la CIM pour Fusarium oxy. sp. (0,0025 %) ou Verticillium dahl. sp. (0,0025-0,0050 %). Ceci signifie que l'on peut traiter efficacement ces deux derniers microorganismes nuisibles sans attaquer Trichoderma sp. Le Trichoderma est un champignon utile, parce qu'il attaque d'autres champignons qui sont nuisibles pour les récoltes. Donc, sa présence dans le sol est très souhaitable. Au contraire, les CIM correspondantes, par exemple du Captan, sont du même ordre de grandeur: 0,0500-0,1000 % pour Tricaoderma et 0,0200-0,0500 % pour Fusarium. Donc, un traite- ment réussi de Fusarium utilisant le Captan entraînera la destruc- tion du champignon utile Trichoderma. Ceci est le plus souvent évité lorsque l'on opère selon l'invention. Exemole 10 On compare l'activité sporicide de formulations de DBNPA avec celle du Captan et du Caspan, contre des spores de Streptomyces scabies sp. (isolés de récoltes altérées). Les expériences sont effectuées dans des cultures liquides et les résultats analysés comme dans les exemples précédents. Les formulations de DBNPA utilisées sont: A) une formu- lation de DBNPA:U20:DPG 20:20:60 % en poids; et B) du DBNPA solide pur dissous dans l'eau. L'inoculum initial est dans tous les cas à 10 spores/ml. Les résultats de ces expériences sont donnés en détail dans le tableau XII ci-après. Les résultats du tableau XII montrent nettement l'activité sporicide supérieure du DBNPA: dans les deux formulations, on voit qu'il présente des activités sporicides ou même sporistatiques à des concentrations de 0, 0100 % (100 ppm), tandis que le Caspan et le Captan ne présentent pas d'activité sporicide même à 0,0300 % (300 ppm). Exemple 11 On répète l'exemple 10 en utilisant Fusarium oxy. sp. comme micro-organisme d'essai. Dans ce test, on détermine l'effi- cacité relative des trois biocides utilisés sur les myceliums également et on mesure les concentrations de glucose restant dans le milieu après 24 h, tandis que l'on mesure les poids secs après 48 h. La concentration de glucose restant dans le milieu est une mesure de la croissance qui a eu lieu, puisque le glucose est consommé par fusarium oxy. sp. dans le milieu. Donc, on voit que l'échantillon témoin, auquel on n'a pas ajouté de biocide, consomme tout le glucose pendant la croissance. Les résultats sont rassemblés dans le tableau XIII ci-après pour les spores et dans le tableau XIV ci-après pour les myceliums. Le "nombre de survivants" pour les spores qui ont germer en mycelium n'est bien entendu pas mesurable et il est désigné dans le tableau par "non mesuré". On peut voir d'après les résultats du tableau XIII que les deux formulations de DBNPA testées présentent une activité sporicide et sporistatique élevée. En utilisant un inoculum à 1 x 108 spores/ml, la formulation A de DBNPA est sporistatique à 0,0030 % (30 ppm) et sporicide à 0,0045 % (45 ppm), tandis que le Caspan ou le Captan n'est même pas sporistatique à 0,0060 % (60 ppm). Ceci est surprenant car, comme indiqué dans le tableau XIV, le Captan présente une activité fongicide supérieure à celle du DBNPA, contre les myceliums de Fusarium oxy. sp., et présente à 0,0200 % (200 ppm) une activité semblable à celle de 0,0400 % (400 ppm) deDBNPA. Le Caspan est le moins efficace des trois fongicides essayés. Il est clair d'après la description ci-dessus que les formulations selon l'invention contenant du DBNPA constituent un moyen très efficace pour détruire les spores et Les champignons, 2 614180 et en particulier les champignons qui attaquent les récoltes de pommes de terre et leurs spores. Bien que les procédés et compo- sitions décrits ci-dessus se soient révélés appropriés dans l'uti- lisation pratique, il est entendu que l'invention n'est pas limitée aux modes de mise en oeuvre décrits à titre d'illustration et que l'homme de l'art peut y apporter diverses modifications et divers changements sans toutefois s'écarter du cadre et de L'esprit de l'invention. Par exemple, on peut utiliser des solvants, propor- tions et additifs différents et on peut traiter des récoltes différentes ou détruire des champignons différents, ou utiliser des cellules et procédés de fumigation différents et détruire des micro-organismes différents ou utiliser des formulations solides ou liquides différentes. TABLEAU I Activité des formulations de DBNPA en fumigation contre Erwinia Comptage Température Durée de Teneur en Nombre de survi- initial ( C) contact (h) biocide vants Dar plaque 5.107 50 4 23,20 g (s) 5.107 5.105 50 4 23,20 g (s) 5.105 5.103 50 4 - 23,20 g (s) 5.103 6.107 100 4 23,20 g (s) pas de survivants 6.105 100 4 23,20 g (s) 6.103 100 4 23,20 g (s) " 1.107 70 2 23,20 g (s) 107 1.105 70 2 23,20 g (s) 103 1.103 70 2 23,20 g (s) 10 8.106 70 4 6 ml (I) pas de survivants 8.104 70 4 6 ml (I) " 8.102 70 4 6 ml (I) 4.107 70 2 6 ml (I) 4*105 0261i 4.103 70 2 6 ml (I) " 3.108 70 1 6 ml (I) " 3.106 70 I1 6 ml (I) 3.104 70 I 6 ml (I) " 2. 108 70 0,5 6 ml (I) 108 2.106 70 0,5 6 ml (I) 105 2.104 70 0,5 6 ml (i) 103 4.107 90 1 23 g (s) 106 TABLEAU I (suite) Comptage Température Durée de Teneur en Nombre de survi- initial ( C) contact (h) biocide vants par otlaue 4.105 90 1 23 g (S) 104 4.103 90 1 23 9 (S) 12 4.107 90 1 6 mI (I) pas de survivants 4.105 90 1 6 ml (I) 4.103 90 1 6 ml (I) 4.107 90 0,5 6 ml (I) 4.105 90 0,5 6 ml (I) 4.103 90 0,5 6 ml (I) 2 6l 180 TABLEAU II Fumigation d'Erwinia à la température ambiante. Comptage Température Durée de Nombre de survi- initial ( C) contact (h) Biocide vants par plaque 2x108/ccC* 37 24 1,5 g (s) 3x108 2x107/ 37 24 1,5 g (s) 3x108 2x108/ 37 24 3,0 g (s) 1x108 2x107/ 37 24 3,0 g (s) 5x107 x107/ 37 24 3,0 ml (I) pas de survivants x107/ 37 24 4,5 ml (I) x107/ 37 24 6,0 ml (I) " 9x106/ 27 24 3,0 ml (I) " 9x106/ 27 24 4,5 ml (I) 9x106/ 27 24 6,0 ml (I) 4x107/ 4 96 3,0 ml (I) 4x107/ 4 96 4,5 ml (I) 4x107/ 4 96 6,0 ml (I) C'C = comptage des cellules 2 614 18l TABLEAU III Activité d'une formulation de DBNPA contre divers micro-orgqanismes. Tempéra-Dure de InocuLum Survivants Micro-organisme Tepr- Déed Microorganisme ture ( C) contact (h) cfu*/,pLaque cfu*/plaque Fusarium oxy. 70 1 3 x 105- 0,5 3 x 105 - 0.5 1 x 107 - 1 1 x 107 - Streptomyces scabies 70 1 2x 105 2x 103 1 2x 104 2x 102 1 2x103 2x10 0,5 2 x 105 2x 105 0,5 2 x 104 8 x 103 ,Or5 2 x 103 2x 103 Verticillium dahliae 70 0,5 5x 105 0,5 5x 103 0,5 5x 10 1 5 x 105 1 5 x 103 1 5x10 0, 25 6x 105 0,5 6 x 105 Rhizoctonia solani 70 1 mycéliun de 0,5 cm 2 plaque couverte cfu = nombre d'entités viables comptées.(cellules ou autres) 2 6 1 4 1 8 et TABLEAU IV Fumigation d'Erwinia Carotovora avec un seul échantillon. Temps total Poids Perte de poids Comptage ini- de fumiga- initial moyenne par tial, tion (h) (q) heure (%) cfu/plaque Survivants A 1 3;44 3,44 19 1 x 108 2 2.83 2,78 1,2 1 x 108 3 2,76 2,77 0 1 x 108 4 2,79 2,73 1,2 1 x 108 2,73 2,72 0,5 1 x 108 6* 3,49 3,52 19 1 x 108 7-12 2,33 1,25 1,5 1 x 108 13-18 2,14 1,13 1,9 1 x 108 - 19-24 2,04 1,03 2,3 1 x 108 -28 1,81 0,89 1,9 1 x 107 29-32 1,74 0,82 1,8 1 x 107 33-35 1,70 0,78 2,3 9 x 107 - 36-42 1,64 0,73 1,8 5 x 107 - 43-49 1,50 0,65 2,6 3 x 107 - -55 1,35 0,53 1,33 3 x 107 - 56-61 1,28 0,50 1 3 x 107 + * On ajoute 20% d'eau au résidu avant la fumigation TABLEAU V Fumigation d'Erwinia avec une formulation de DBNPA solide dans l'eau Mélange DBNPA Durée de Inoculum, Survivants, Perte de i20 (%) solide (%) contact (h) cfu/plaque cfu/plaque poids (%) 80 0,5 5 x 108 5x 1o8 50 0,5 5 x 108 5 x 108 41,50 50 1 4 x 108 50% tués 26, 18 50 1 4 x 106 80% tués 26, 18 50 1 4X108 50%tués 14,31 50 1 4x 106 pas de survivants 26,18 20 1,5 4 X 108 " 51, 58 20 0,5 4X108 " 4,17 20 1 4 X 108 " 57, 80 80 1 2X109 2X108 22,19 80 1 2x 107 pas de survivants 80 0,5 2 x 109 2 x 109 17, 20 80 0,5 2 x 107 2 x 106 50 1 2x 109 2 x 107 49, 25 50 0,5 2x 109 2 x 108 37, 50 50 0, 5 2 x 107 2 x 106 20 0,5 2 x 109 pas de survivants 54, 31 20 0,5 2 x 107 54, 31 20 1 2 x 109 50, 61 TABLEAU VI. Comparaison de l'efficacité de fumigation à 70 C de divers ingrédients et de formulations d'analoaues du DBNPA. Durée de Inoculum, Perte de Nombre de survi- Ingrédient Micro- contact spores ou cfu poids vants, actif orqanisme (h) par plaque (%) cfu/plaque DPG Erwin. 0,5 1x104 Non décelable Pousse comme letémoin DPG Erwin. 1 lx04. " DPG Fus. oxy. 0,5 2x106 t DPG Fus. oxy. 1 2xl06 " EG Erwin. 0,5 xlx04 " E Erwin. 1 lx104 EG Fus. oxy. 0,5 2xl06 EG Fus. oxy. 1 2Xl06 Br2 Erwin. 0,25 lxl 04 9% Croissance Br2 Erwin. 0,5 1x104 Non mesurée " Br2 Erwin. 1 lx104 et. Br2 Fus.oxy. 0,25 2xl06 9% Pousse comme letémoin Br2 Fus. oxy. 0,25 2x104 9% Pousse moins que Br2 Fus. oxy. 0,25 2x104 le témoin 8r2 le témoin Br2 Fus.oxy. 0,5 2x106 Non mesurée Quelque croissance Br2 Fus. oxy. 0,5 2x104 " Br2 Fus. oxy. 1 2x106 " " Br2 Fus. oxy. 1 2x104 " Monobromo Erwin. 0,25 lx104 7% Monobromo Erwin. 0,5 lx104 10% Monobromo Erwin. 1 lx104 11% 45 Monobromo Fus. oxy. 0,25 2x10o6 7% Quelque croissance Monobromo Fus. oxy. 0.5 2x106 10%, i Monobromo Fus.oxy. 1 2x106 11% Pas de croissance DBNPANEG Erwin. 0,25 1x108 4% Pousse comme letémoin DBNPA/EG Erwin. 0,5 1 x1 08 11% 10 DBNPA/EG Erwin. 1 1x1 08 3% Quelque croissance DBNPNAEG Fus. oxy. 0,25 8x107 4% Croissance DBNPNAEG Fus. oxy. 0,25 8x105 4% 10 DBNPA/EG Fus. oxy. 0,5 8x1 07 11% 1 DBNPA/EG Fus. oxy. 0,5 8xl 05 11% 11 DBNPAIEG Fus. oxy. 1 8x107 3% Pas de croissance DBNPA/EG Fus. oxy. 1 8x1 05 3% DBNPNDPG Erwin. 0,25 lx 108 2% DBNPA/DPG Erwin. 0,5 lx10O8 16%, DBNPNADPG Fus. oxy. 0,25 8x107 2% DBNPNADPG Fus. oxy. 0,5 8x107 16% " 2 6 14180 TABLEAU VII Activité d'une formulation de DBNPA dans des cultures enmilieu liquide. Survivants Croissance Tempéra- Conc. du dans la Micro- ture biocide Inoculum, fiole ini- orqanisme ( C) (%) spores/ml tiale cfu/il Streptomyces scabies 27 100.1o4 lx1010 Croissance 50 Streptomyces scabies 27 200.1o4 x1010 Pas de croissance 5 Streptomyces scabies 27 500.1o4 1x101 " Streptomyces scabies 4 100.1o-4 lx1010 Croissance 20 Streptomyces scabies 4 200.1o4 lx1010 Pas de croissance 5 Streptomyces scabies 4 500.10o4 1X110 Fusarium oxy. 27 100.1-4 1x109 " Fusarium oxy. 27 200.1o 4 lx109 Fusarium oxy. 27 500.10 4 1x109 - Fusarium oxy. 4 1.1-4 1x109 Fusarium oxy. 4 200.104 1x109 " Fusariumoxy. 4 500.10 4 1x109 " 26 14180 TABLEAU VIII Activité du capteur dans des cultures en milieu liquide. Survivants Croissance Conc. du dans la Micro- Tempéra- biocide Inoculum, fiole ini- oraanisme ture ( C) (%) Spores/ml tiale cfu/ul Streptomyces scabies 27 100.10o 4 1x1010 Croissance - Streptomyces scabies 27 200.1o-4 1x1010 Pas de croissance 60 Streptomyces scabies 27 500.1o-4 x10 o10 " 15 Streptomyces scabies 4 100.1o-4 1x1010 Croissance - * Streptomyces scabies 4 200.1o-4 1x1010 Streptomyces scabies 4 500.10o4 lx010 50 Fusarium oxy. 27 100.10o 4 1x109 -4 Fusarium oxy. 27 200.10o4 1x109 " Fusarium oxy. 27 500.10-4 lx109 Pas de croissance - Fusariumoxy. 4 100o.1o-4 1x109. Croissance - Fusarium oxy. 4 200.1 o-4 1x109 - Fusarium oxy. 4 500.10-4 1x109 Pas de croissance - TABLEAU IX Activités d'une formulation de DBNPA et du Caspan sur Fusarium oxY. SD. Comptage Conc. du initial biocide (Spores/ml) Biocide (%) Croissance 6x105 DBNPA 25.10o-4 6x105 DBNPA 50.10o4 - 6x105 DBNPA 100.1 o - 6x106 DBNPA 25Q.1 Quelque croissance après 96 h 6x106 DBNPA 50.10 6 x 106 DBNPA 100.104 i x 108 DBNPA 25.104 -4 l x 108 DBNPA 50.10 o 6 x 105 Caspan 25.10-4 + après 24 h 6 x 105 Caspan 50.10-4 + après 24 h 6x 105 Caspan 100.104 + après 24 h -4 6 x106 Caspan 25.10 + après 24 h -4 6 x106 Caspan so.10 -4 + 6 x106 Caspan 100.10 4 + 1 x108 Caspan 25.10 + 1 x108 Caspan 50.10 -4 + 2 614180 TABLEAU X Activités d'une formulation de DBNPA et du Caspan sur Verticillium dahliae Comptage Conc. du initial biocide (sDores/ml) Biocide (%) Croissance -4 6x105 DBNPA 25.10 - -4 6x105 DBNPA 50.1 4 6 x 105 DBNPA 1001.o-4 -4 6x106 DBNPA 25.10 Quelque croissance après 96 h -4 6x1 06 DBNPA 50.10 6x 106 DBNPA 100.10 - 6x105 Caspan 25.10 + après 96h -4 6x105 Caspan 50.10 + après 96h 6x105 CEspan 100.10 4 - 6 x106 Caspan 25.10 + 6 x 106 Caspan 50.10-4 + 6 x106 Caspan 100.10-4 + TABLEAU XI Concentrations inhibitrices minimales. Inoculum, Tempéra- CIM Micro- spores! ture (10 % de pro- orgqanisme Biocide cfu/gl ( C) duit actif) Trichoderma DBNPA 106 27 200 100 Verticillium dahl. sp. 6 x 106 27 >100 TABLEAU XII Activité des formulations A et B. du Captan et du Caspan sur les spores de Streptomyces scabies sp. Nombre de Germination des spores dans la Concentration survivants, sores dans la fiole a secousses Biocide ( %) cfu/mL -4 Formul.A 100.10 0 Formul. B 100.1024 0 Caspan 100.10o-4 107 + Caspan 200.10-4 105 + Caspan 300.10- 4 102 + Captan 200.10o-4 106 + Captan 300.10-4 106 + TABLEAU XIII Activité des formulations A. et B, du Caspan et du Captan sur les spores de Fusarium oxy. Nombre de Germination des Concentration survivants, spores dans la fiole Biocide (%) cfu/mL à secousses _. Sans (témoin) - 1 X 108 + Formul. A 15. 10-4 non mesuré + Formul.A 30.1o- 4 5x103 Formul. A 45.10-4 0 - Formul. B 15.10-4 non mesuré + Formul. B 30.10-4 " + Formul. B 45.1o-0 O Caspan 30.10o4 non mesuré + Caspan 45.10-4 " + Caspan 60.10-4 + Captan 30. 10 + Captan 45.1o-4 " + Captan 60.104 "+ 2 6 1 4 18 0 TABLEAU XIV Effet des formulations A et B, du Caspan et du Captan sur les mycéliums de Fusarium ox . sp. Croissance sur Glucose plaques après restant Concentration Poids sec enlèvement du dans le Biocide (%) (O) biocide. ..milieu Formul A 200.10-4 0,13 (±) 1 Formul. A 400.1o-4 0,18 Formul. A 800.10-4 0,16 1 Formul. B 200.10- 4 0,27 + 0,5 Formul. B 400.1 o-4 0,23 - 1 Formul. B 800.10-4 0,19 0,5 Captan 200.14o- 0,15 - 1-2 Captan 400.1o-4 0,18 - 1-2 Captan 800.10-4 0,18 1-2 Caspan 200.10 -4 0,48 + 0 Caspan 400.10-4 0,45 + o Caspan 800. 104 0,30 + 1-2 Sans (témoin) 0,45 + 0 REVENDICATIONS 1. Composition biocide pour fumigation, caractérisé en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif le 2,2-dibromo-3-nitrilo- propionamide, seul ou en mélange avec un solvant organique ou de l'eau ou leur mélange. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le solvant organique est un glycol. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que le glycol est choisi parmi le propylèneglycol, le dipropy- lèneglycol ou le polypropylèneglycol. 4. Composition selon la revendication 3, caractérisée en ce que le glycol est le dipropylèneglycol. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 a 4, caractérisée en ce qu'elle comprend: jusqu'à 100 % en poids de 2,2dibromo-3-nitrilopropionamide; O à 80 % en poids d'un solvant organique; et O à 80 % en poids d'eau. 6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce qu'elle comprend: environ 20 % en poids de 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide; environ 60 % en poids de solvant organique; et environ 20 % en poids d'eau. 7. Procédé de traitement de récoltes infectées par des micro-organismes, caractérisé en ce que la récolte est soumise à un traitement par fumigation avec une composition biocide selon l'une quelconque des revendications 1 à 6. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce V que la récolte à traiter consiste en pommes de terre ou en pommes de terre à semence. 9. Procédé selon la revendication 7 ou 8, caractérisé en ce que le micro-organisme consiste en un ou plusieurs champignons. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les micro-organismes consistent en Erwinia carotovora, Streptomyces scabies, Fusarium oxysporum, 2 6 1 4 1 80 VerticiLlium dahliae ou Rhizoctonia soLani, ou deux ou plusieurs desdits micro-organismes. 11. Composition sporicide et fongicide, caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif le 2,2-dibromo-3- nitrilopropionamide dans un solvant consistant en un solvant orga- nique ou de l'eau ou leur mélange. 12. Composition selon la revendication 11, caractérisé en ce que le solvant organique est un glycol. * 13. Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce que le glycol est choisi parmi le propylèneglycol, le di- propylèneglycol et le polypropyleneglycol. 14. Composition selon la revendication 13, -caractérisée en ce que le glycol est le dipropylèneglycol. 15. Composition selon la revendication 12, caracférisée en ce qu'elle contient: a) 5 à 20 % en poids de 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide; b) 0 à 95 % en poids d'eau; et c) 0 à 95 % en poids d'un glycol. 16. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que le glycol est le dipropylèneglycol. 17. Composition selon la revendication 16, caractérisée en ce qu'elle contient: a) environ 20 % en poids de 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide; b) environ 20 % en poids d'eau; et c) environ 60 % de dipropylèneglycol. 18. Procédé pour le traitement des pommes de terre et des pommes de terre à semence contre les maladies fongiques et bacté- riennes de la pomme de terre, caractérisé en ce que l'on applique aux pommes de terre ou aux pommes de terre à semence une composi- tion selon l'une quelconque des revendications 11 à 17, chaque fois qu'il faut détruire les champignons ou les bactéries ou leurs spores ou leurs mélanges ou inhiber leur croissance ou leur germi- nation. 19. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce que la composition est appliquée par pulvérisation. 20. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce que la composition est appliquée par fumigation. 21. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce que la récolte à traiter est infectée par Erwinia carotovora, Streptomyces scabies, Fusarium oxysporum, Verticillium dahliae ou Rizoctonia solani ou par deux ou plusieurs desdits. micro- organismes. 22. Utilisation du 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide comme sporistatique ou sporicide ou pour ces deux activités.