FR 2611502 A1 19880909 FR 8702414 A 19870224 Extrait de racines d'ombellifère obtenu par extraction hydroaLcooLique, procédé de préparation d'un tel extrait ; et composition thérapeutique, notamment à activité diurétique, cardiovasculaire, antalgique ou anti-infLammatoire comprenant un tel extrait. L'invention concerne un extrait de racines d'ombelLifère obtenu par extraction hydroalcoolique, un procédé de préparation d'un tel extrait, et une composition thérapeutique, notamment à activité diurétique, cardiovasculaire, antalgique ou antiinflammatoire comprenant un tel extrait. Plus particulièrement, l'invention, selon un premier aspect, concerne un extrait de racines d'ombellifère, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un extrait de racines d'ombeLlifère obtenu par une extraction à l'aide d'un solvant hydroalcoolique de tout ou partie des racines d'ombellifère, avantageusement sous formes broyées ou pulvérisées. Il est à noter que dans la présente description et les revendications, par l'emploi du terme "racine", on entend la partie souterraine de la plante, quelle que soit sa dénomination botanique exacte. Avantageusement, cet extrait est obtenu par extraction d'un mélange d'eau et d'alcool(s) en proportion relative en poids de 5 à 95/95-5. De préférence, on peut utiliser comme solvant hydroalcoolique une préparation hydroalcoolique alimentaire, notamment le vin. Selon un mode de réalisation particulier, L'extrait brut hydroalcoolique obtenu est ensuite transformé en poudre en obtenant ainsi un extrait sec puLvérulent. Selon un autre mode de réalisation, l'extrait brut peut être additionné d'un agent conservateur, notamment acide sorbique ou acide citrique, ou un de leurs seLs, et/ou d'une charge ballast, de quaLité alimentaire, de préférence choisi parmi L'amidon, une gomme d'acacia, du Lactosérum, une maltodextrine. Par ailleurs, l'invention, seLon un second aspect, concerne un procédé de préparation d'un extrait de racines d'ombellifère, caractérisé en ce qu'on soumet tout ou partie des racines d'ombellifère, avantageusement sous formes broyées ou pulvérisées, à une extraction par un solvant hydroalcoolique, et on recueille l'extrait brut hydroalcoolique ainsi obtenu. Selon une variante de réalisation de ce procédé, on réalise tout d'abord une macération alcoolique suivie d'une addition d'eau pour réaliser ensuite L'extraction hydroalcoolique proprement dite. Selon un mode de réalisation particulier, l'extrait brut peut être avantageusement soumis à une ultrafiltration stérilisante après avoir été soumis de préférence à une clarification, par exemple sur diatomées. Selon un autre mode de réalisation du procédé selon l'invention, après avoir procédé de préférence à une cLarification de l'extrait brut hydroalcoolique, on évapore le solvant, c'est-àdire tout d'abord la partie alcoolique puis la partie aqueuse, pour obtenir un extrait sec poudreux. Selon encore une autre variante de réalisation du procédé selon l'invention, on peut ajouter au solvant hydroalcoolique, à l'extrait brut ou partiellement concentré une charge ballast de qualité alimentaire servant de support mécanique qui peut être avantageusement choisie parmi le groupe consistant d'amidon modifié, de gommes d'acacia, de lactosérum, ou de maltodextrine. L'obtention de l'extrait sec poudreux peut être réalisée par tout procédé connu, mais on préfère actuellement un procédé d'atomisation. Par ailleurs, l'invention concerne également, selon un troisième aspect, une composition thérapeutique, notamment à activité diurétique, cardiovasculaire, antalgique ou antiinflammatoire, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, un extrait tel que défini précédemment ou tel qu'obtenu par le procédé d'extraction précédemment décrit, éventuellement associé à un excipient physiologiquement acceptable assurant sa biodisponibilité. En outre, dans la présente description et les revendications, le terme "ombellifére" inclut les variétés douces du fenouil, notamment Foeniculum dulce D.C., ainsi que les espéces Apium graveolens, Petroselinum sativum, Eryngium campestre et toutes les espèces Ferula, ainsi que les espèces Peucedanum, Pteryxia, Xanthogalum, Ledebouriella, Ligustrum, Meum et Notopterygium ainsi que Les espèces Buplerum, Cnidium, Hydrocotyle. On a pu déterminer que les extraits obtenus avec des racines de fenouil, et notamment les variétés douces de fenouil comme Foeniculum dulce D.C. ainsi que des espèces Apium graveolens, Petroselinium sativum, Eryngium campestre et les différentes espèces de Ferula présentaient une activité diurétique remarquable. De même, il a pu être observé que les extaits obtenus avec des racines, notamment de différents Peucedanum, Pteryxia, Xanthogalum, Ledebouriella, Ligustrum, Meum et Notopterygium, présentent des activités pharmacologiques intéressant notamment la sphère cardiovasculaire. En outre, les extraits selon l'invention obtenus avec des racines de Buplerum, de Cnidium, d'Hydrocotyle, d'Eryngium présentent des activités pharmacologiques intéressant notamment l'antalgie et l'inflammation et sont donc thérapeutiquement efficaces comme agents anti-antalgiques et anti-inflammatoires. Les essais in vivo effectués chez le rat pour les extraits selon l'invention ont permis de montrer une activité thérapeutique à des doses d'extraits obtenues à partir d'une dose de 50 à 200 mg environ de racines d'ombellifére/kg du poids de rat. Les essais cliniques qui ont ensuite été effectués ont montré que les mêmes doses administrées chez L'homme produisent des effets potentialisés. Ainsi, la dose actuellement préférée est une dose d'extrait obtenue à partir d'environ 10 mg à 60 mg de racines d'ombeLLifère/kg du poids du corps, ces doses pouvant être dépassées sans problème. La formulation des extraits, qu'iLs soient Liquides ou en poudre, est faite de manière tout à fait classique. L'administration peut être effectuée par voie locale : pommade, crème, spray, lotion, gel ou par voie intradermique ou de préférence par voie générale orale : ampoule buvable, potion, dragée, gélule, etc. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'inven- tion apparaîtront à la lumière de la description explicative qui va suivre en référence à plusieurs exemples particuliers de réalisation non Limitatifs. Exemple 1 Obtention de l'extrait hydroalcoolique (1ère méthode) La racine sèche, nettoyée de toute terre, comprenant moins de 5 X pondéraux de tige et moins de 1/1000 d'adventices, est sommairement hachée dans un broyeur à couteaux. Les morceaux obtenus sont ensuite réduits en une poudre grossière dans un broyeur à marteaux. La poudre obtenue est épuisée à température ambiante par o 15 fois son poids d'alcool éthylique à 15 pendant une semaine sous agitation mécanique intermittente et en présence de 2/1000 d'acide sorbique, comme agent conservateur. L'ensemble est clarifié sur diatomées puis le filtrat obtenu est stérilisé par passage sur membranes d'ultrafiltration, stérilisante à 0,22 nm et conservé sous azote. Exemple 2 Obtention de l'extrait hydroalcoolique (2émue méthode) La poudre grossière de l'exemple 1 est mouillée par 3 fois son poids d'alcool éthylique à 950 et laissée en macération à température ambiante pendant 15 h. Sept fois le poids d'eau purifiée sont ajoutés et L'ensemble soumis à une agitation à température ambiante pendant 3 jours en présence de 5/1000 d'acide citrique, comme agent conservateur. L'ensemble est pressé, le macérat est clarifié sur diatomées puis sur membranes d'ultrafiltration comme à l'exemple 1 ; le filtrat est conservé en récipients clos dans un lieu sec et froid. Exemple 3 Obtention d'un extrait hydroalcoolique (3émue méthode) La poudre grossière de l'exemple 1 est épuisée à température ambiante par 16 fois son poids de vin blanc à 140 filtré sur membrane stérilisante, pendant sept jours sous agitation mécanique séquentielle. L'ensemble est passé sur pressoir, le macérat obtenu clarifié sur diatomées, traité par 2/1000 de sorbate de potassium, comme agent conservateur, refiltré sur membrane stérilisante puis stocké sous gaz neutre. ExempLe 4 Obtention d'un extrait pulvérulent (1 ère méthode) Le filtrat de l'exemple 1 est traité par 5/1000 de métabisulfite de potassium puis concentré de 15 % dans un évaporateur continu à température inférieure à 500C. Le concentrat est traité par 15 % d'amidon modifié comme charge ballast de qualité alimentaire servant de support mécanique pendant 1 h à 500C sous agitation. Le produit refroidi est atomisé et l'atomisat stocké en sacs dans un lieu sec et frais. Exemple 5 Obtention d'un extrait pulvérulent (2émue méthode) Le concentrat de L'exemple 4 est à nouveau concentré par cryoconcentration pendant 40 h avec un fluide frigorigène à -15 C. Le nouveau concentrat obtenu est traité par 0,3 fois son poids d'une composition de gommes d'acacia comme charge ballast de qualité alimentaire servant de support mécanique puis laissé 15 h au repos. La solution reposée est atomisée à haute température, l'atomisat stocké en sacs dans un lieu frais et sec. Exemple 6 Obtention d'un extrait pulvérulent (3ème méthode) Le filtrat concentré de 15 X de l'exemple 4 est concentré une seconde fois à débit moindre mais à la même température limite jusqu'à un concentrat de 50 à 55 % du volume initial. Ce résidu est chargé d'un mélange de 25 Z de son poids de lactosérum contenant 5 Z de maltodextrine comme charge ballast puis atomisé comme dans L'exemple 4. Exemple 7 Obtention d'un extrait pulvérulent (4émue méthode) Le macérat filtré et traité au sorbate de potassium de l'exemple 3 est concentré de 15 % comme dans l'exemple 4 puis traité comme le concentré de cet exemple. Propriétés pharmacologiques L'activité diurétique des extraits liquides, obtenus avec la racine de fenouil selon les exemples 1 à 3, a été évaluée par voie générale intrapéritonéale chez le rat Sprague Dawley par comparaison avec le furosémide, diurétique de référence usuellement utilisé. Les conclusions sont rapportées ci-après. L'activité diurétique observée de l'extrait selon L'exemple 3 administré à La'dose de 50 mg de fenouil/kg de poids de rat a été confirmée sur Le rat. Administré sous un même volume à la dose de 25 mg de fenouil/kg de poids de rat, il n'a pas d'effet sur la diurèse du rat. Les extraits selon l'exemple 3 aux doses de 100 et 200 mg de fenouil/kg de poids de rat augmentent Les volumes urinaires de La troisième à la sixième heure après leur administation. Les extraits selon l'exemple 3 aux doses de 50, 100 et 200 mg de fenouil/kg de poids de rat présentent des activités diurétiques voisines qui se caractérisent par - une augmentation des volumes urinaires de la quatrième à la sixième heure. - Un pourcentage de variation par rapport aux lots témoins respectifs de l'ordre de 25 à 30 % durant la même période (3 à 6 h après l'injection). - Un temps d'élimination de la surcharge diminué de 50 à 60 % par rapport à celui de leurs témoins respectifs. - Les essais cliniques, comme mentionné précédemment, ont montré que les mêmes doses administrées chez l'homme produisent des effets potentialisés, que ce soit avec des doses d'extrait obtenues à partir de 50, 100 et 200 mg de racines d'ombellifère/kg de poids du corps. Ainsi, la dose actuellement préférée d'administration chez l'homme est une dose d'extait obtenue à partir d'environ 10 mg à 60 mg de racines d'ombellifère/kg de poids du corps, ces doses pouvant être dépassées sans aucun problème. Les débits ioniques rapportés à 100 g de poids de rat et calculés sur les urines recueillies après 8 h de diurèse présentent une augmentation en Cl et K+ uniquement pour le lot traité avec de l'extrait selon l'exemple 3 à 25 mg de fenouil/kg de poids de rat. Les débits ioniques (Cl , Na+ et K+) rapportés à 100 g de rat et calculés sur les urines recueillies après 24 h de diurèse sont augmentés dans ce même groupe. Les concentrations ioniques urinaires de Cl , Na+ et K+ des urines recueillies après 8 et 24 h de diurèse ne sont pas modifiées par les traitements avec les extraits selon l'exemple 3 aux doses de 50, 100 et 200 mg de fenouil/kg de poids de rat mais le taux de K+ augmente dans les urines de 8 h du lot ayant reçu l'extrait à 25 mg de fenouil/kg de poids de rat. Il faut mentionner le rôle important du solvant sur la diurèse du rat. Le vin blanc à 140 injecté à 0,42 ml/kg de poids de rat ne modifie pas la diurèse. Administrée à la même dose, une solu tion hydroalcoolique à 140 augmente Légèrement le volume urinaire à la quatrième et la cinquième heure après son injection (le pourcentage de variation reste aux environs de 20 %). Elle n'accélère que très faiblement la vitesse d'élimination de la surcharge (83 X TE 100 du témoin). L'extrait hydroalcoolique selon les exemples 1 et 2 à la dose d'extrait correspondant à 200 mg de poudre de racines de fenouil/kg de poids de rat montre une activité diurétique de la quatrième à la huitième heure après son administration. Le pourcentage de variation atteint 40 Z par rapport au lot témoin NaCl 0,45 X pendant cette même période et cette préparation accélère la vitesse d'élimination de la surcharge (diminution de 50 à 55 % par rapport au témoin NaCI à 0,45 %). L'extrait aqueux de fenouil obtenu à partir de 200 g de racines de fenouil/kg de poids de rat ne montre aucune activité diurétique chez le rat. Ce travail démontre que l'eau ne peut être utilisée comme solvant d'extraction, par contre la présence d'éthanol est indispensable. De plus L'méthanol à 140 est un meilleur solvant d'extraction que le vin renfermant 140 d'éthanol. Seul L'extrait hydroalcoolique de fenouil administré à la dose d'extrait correspondant à 200 mg de racines de fenouil/kg de poids de rat augmente les débits urinaires de Cl et Na+ et le rapport Na+/K+ rapportés à 100 g de poids de rat sur une durée de 8 h. Aucune variation des débits ioniques urinaires n'a été observée sur les 24 h de diurèse. Les concentrations urinaires ioniques (CI . Na+, K+) et le rapport Na+/K+ restent stables par rapport au témoin NaCI 0,45 % dans les urines recueilliles sur 8 à 24 h quel que soit le traite o ment administré (solution hydroalcoolique à 14 , extrait aqueux ou hydroalcoolique de fenouil à 200 mg/kg selon les exemples 1, 2 et 3). L'activité diurétique des extraits pulvérulents obtenus avec la racine de fenouil selon les exemples 4 à 7 confirme l'acti- vité des extraits liquides et est intéressante par le fait qu'elle porte sur des formulations galéniques plus élaborées. L'activité diurétique des extraits revendiqués, obtenus avec des racines autres que celles du fenouil, s'étend notamment aux espèces : Apium graveolens, Petroselinum sativum, Eryngium campestre et différentes Ferula. Les extraits revendiqués, obtenus avec des racines notamment de différents Peucedanum, Pteryxia, Xanthogalum, Ledebouriella, Ligustrum, Meum et Notopterygium, présentent des activités pharmacologiques intéressant notamment la sphère cardiovasculaire. Les extraits revendiqués, obtenus avec des racines de Buplerum, de Cnidium, d'Hydrocotyle, d'Eryngium, présentent des activités pharmacologiques intéressant notamment l'antalgie et l'inflammation. TOXICITE Des essais d'innocuité réalisés sur des souris Swiss et des rats Wistar n'ont pas montré de signe oe toxicité, ni de cas de mortalité ni de différence dans l'évolution pondérale des animaux entre les lots témoins et les lots traités à raison de 5 ml/kg d'extraits de racines de fenouil selon l'exemple 3. Il n'a pas été relevé non plus d'anomalie macroscopique au niveau des organes principaux thoraciques et abdominaux lors de l'autopsie. De nombreuses variantes de réalisation sont possibles. On peut utiliser comme solvant d'extraction un solvant hydroalcoolique dont La proportion d'alcool est de préférence de 12 à 140, qui est par ailleurs disponible sur le marché de manière courante dans les préparations hydroalcooliques alimentaires telles que le vin. On peut aussi utiliser avantageusement un alcool comportant au maximum quatre atomes de carbone et pouvant être éventuellement polyhydroxylé, ou des mélanges de tels alcools. REVENDICATIONS 1. Extrait de racines d'ombellifère, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un extrait dé racines d'ombelLifère obtenu par une extraction à l'aide d'un solvant hydroalcoolique de tout ou partie des racines d'ombellifère avantageusement sous formes broyées ou pulvérisées. 2. Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est obtenu par une extraction à l'aide d'un mélange d'eau et d'alcool(s) en proportion relative en poids de 5 à 95/95-5, de préférence L'alcool ou les alcools comportant au maximum 4 atomes de carbone et pouvant être éventuellement polyhydroxylé(s). 3. Extrait selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'on utilise comme solvant hydroalcoolique une préparation hydroalcoolique alimentaire, notamment le vin. 4. Extrait selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que l'extrait brut hydroalcoolique obtenu est ensuite transformé en poudre en obtenant ainsi un extrait sec pulvérulent. 5. Extrait selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que l'extrait brut est additionné d'un agent conservateur, notamment acide sorbique, acide citrique, ou un de leurs sels, et/ou d'une charge ballast de qualité alimentaire, de préférence choisie parmi l'amidon, une gomme d'acacia, du lactosérum, une maltodextrine. 6. Procédé de préparation d'un extrait de racines d'ombellifère, caractérisé en ce qu'on soumet tout ou partie des racines d'ombellifére, avantageusement sous formes broyées ou pulvérisées, à une extraction par un solvant hydroalcoolique, et on recueille L'extrait brut hydroalcoolique ainsi obtenu. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'on réalise tout d'abord une macération alcoolique suivie d'une addition d'eau pour réaliser L'extraction hydroalcoolique proprement dite. 8. Procédé selon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce que l'extrait brut est soumis à une ultrafiltration stérilisante, après avoir été soumis de préférence à une clarification. 9. Procédé seLon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce que, de préférence après clarification, on évapore le solvant hydroalcoolique pour obtenir un extrait sec poudreux. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'on ajoute au solvant hydroalcoolique un agent conservateur, notamment de L'acide sorbique, de l'acide citrique ou un de leurs sels et/ou dans l'extrait hydroalcoolique brut ou partiellement concentré une charge ballast de qualité alimentaire servant de support mécanique, de préférence choisie parmi l'amidon, une gomme d'acacia, du lactosérum, une maltodextrine. 11. Composition thérapeutique, notamment à activité diurétique, cardiovasculaire, antalgique ou anti-inflammatoire, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, un extrait tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 5, ou tel qu'obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 10, éventuellement associé à un excipient physiologiquement acceptable assurant sa biodisponibilité.