FR 2593067 A1 19870724 FR 8600638 A 19860117 Extrait d'algue sous forme d'émulsion comportant des polysaccharides sulfurvlés et médicament comportant à titre de princice actif un tel extrait, utile notamment Dour améliorer la circulation sanguine. La présente invention a pour objet un extrait d'algue rouge ainsi qu'un médicament comportant à titre de principe actif un tel extrait. Ce médicament est notamment utile pour améliorer la circulation sanguine. Il est bien connu que l'héparine est une substance anticoagulante à action rapide et brève. L'héparine est un mucopolysaccharide présentant une teneur élevée en groupement sulfate et constituée de radicaux D-glucosamine et D-acide glucuronique. Elle est notamment utilisée sous forme de pommade en combinaison avec un excipient physiologiquement actif pour soulager les jambes lourdes. On sait, par ailleurs, que les algues rouges contiennent des polysaccharides sulfurylés. Il a été trouvé de façon inattendue que certains extraits d'algue rouge, objets de la présente invention, présentaient, outre leur propriété anticoagulantev une action tonique, anti-intlammatoi re et sédative sur la circulation périphérique. L'invention a donc pour objet un extrait d'algue rouge carac-érise en ce qu'il est sous forme d'émulsion et en ce qu'il comporte 1 à 5 % en poids de polysaccharides sulfurylés Parmi les algues rouges qui conviennent pour la présente invention, on peut citer à titre indicatif l'algue DELESSERIA SANGUINEA. Il est, toutefois, évident que d'autres algues peuvent également convenir. Ainsi, l'homme de métier pourra aisément choisir parmi toutes les algues concernées celles qui conviennent le mieux. Il faut également noter que l'invention et particulièrement les revendications ont pour but de protéger les algues analogues ou "équivalentes" qui remplissent la même fonction en vue du même résultat. Certes, les extraits d'algues, objets de la présente invention, peuvent résulter de traitements variés. Ainsi, il est possible de traiter ces algues au moyen d'une simple extraction. Toutefois, il a été trouvé que les produits résultant du traitement qui va être décrit ci-dessous, présentaient d'excellentes propriétés au niveau thérapeutique et c'est par cette raison qu'ils sont les produits préférés dans le cadre de la présente invention. Ainsi, selon une variante préférée, l'extrait d'algue rouge est caractérisé en ce qu'il résulte du traitement d'une algue rouge selon le procédé suivant a) cryobroyage des algues coupées de manière à obtenir une bouillie dont les particules ont une dimension inférieure à 100 pm, b) broyage moléculaire, c) décantation à grande vitesse et récupération du surnageant. Ce procédé est désormais bien connu dans l'art car il a déjà fait l'objet de nombreux dépotes de brevets par la Société déposante. Ainsi, pour les étapes a) et b), on pourra se référer au brevet français n" 2 287 943 déposé par HERVE et ROULLIER le 18 octobre 1974 et également aux brevets français n" 2 513 122 et 2 513 123 déposés par la Société GOEMAR le 23 septembre 1981 pour la combinaison des étapes a), b), c). Le surnageant récupéré s'appelle le protoexoplasma d'algues. Ce protoexoplasma se présente sous forme de suspension et est soluble dans l'eau. Toutefois, l'extrait préféré résulte du traitement supplémentaire du protoexoplasma ou surnageant par ultrafiltration puis récupération du filtrat liquide. Ce procédé est décrit dans son entier dans la demande de brevet internationale n" W084/02652 déposée le 29 décembre 1983 et conduit à un liquide limpide sans impureté dont les composants ont un poids moléculaire inférieur à 20 000. L'étape d'ultrafiltration est, par ailLeurs, bien connue dans l'art et on peut utiliser, pour cela, les membranes type M4, qui sont des filtres de carbone comportant une couche d'oxyde de zirconium, commercialisées par la Société SFEC (Vaucluse, France,à Bollène). Exempt de pavé cellulaire (cellulose, composants à longue chaine moléculaire), le filtrat est directement assimilable par l'organisme car contenant les micro-éléments, les vitamines, les peptides, les holosides et les polysaccharides. Ainsi, le procédé selon l'invention conduit à un produit de haute qualité bactériologique et exempt de conservateur, de colorant et d'alcool. L'invention a également pour objet un médicament comportant un extrait d'algue selon l'invention en combinaison avec un excipient physiologiquement acceptable et éventuellement d'autres extraits d'algues comme notamment celui connu sous le nom de code GYFL (brevet français n" 2 287 943). Ce médicament est notamment utile sous forme de pommade pour application locale par exemple pour soigner les jambes lourdes et doit comporter au moins 2 % en poids d'extrait d'algue. L'invention va maintenant être illustrée par des exemples de réalisation nullement limitatifs. Exemole I On mélange 10 g de thalles broyés de DELESERIA SANGUINEA avec 40 parties d'H20 et 1 partie de toluène. On laisse le mélange ainsi obtenu 6 jours à température ambiante puis on filtre sur filtre plissé. On récupère un liquide brun limpide que l'on flocule par 2 volumes d'éthanoi à 98 %. Le floculat est ensuite passé sur verre fritté n 3 et on recueille un précipité brun que lgon redissout à chaud avec de L'eau distillée. Puis on filtre sur filtre GFC WHATMANN, on dialyse et finalement on lyophylise.On obtent 0,149 de la fraction polysaccharide dénommée Fp1 Exemple II On mélange 10 g de thalles broyés de DELESSERIA SANGUINEA avec 40 parties d'H20 et on extrait 30 min à 980C puis on filtre sur filtre plissé. On recueille ainsi un liquide brun limpide que l'on traite de la même manière que ceLle décrite dans L'exemple I.On obtient ainsi Q,Xg d'une fraction polysaccharide dénommée Fp11 Exemple III 10 g de thalles broyés sont mis à gonfler une nuit dans 500 ml d'eau contenant 2 g de NaBH4 et 100 mg de (NaPO3)6. On extrait le produit à chaud à 90 C pendant 60 min puis on filtre sur filtre plissé ; on obtient 410 ml de liquide jaune clair limpide que l'on traite comme dans l'exemple I. Ceci conduit à 1,15 g d'une fraction polysaccharide dénommée FpIII. Exemole IV Après avoir cueilli les algues rouges de l'espèce DELESSERIA SANGUINEA, celles-ci sont lavées dans un bassin d'eau de mer pour éliminer toute trace d'animalcule et de sable. Les algues ont ensuite été congelées au moyen d'un surgélateur à plaques à -150C. Elles ont ensuite été stockées sous froid à -25 C afin de conserver tous les éléments utiles. On effectue ensuite la préparation proprement dite du protoexoplasma. Les algues ont été soumises à un cryobroyage par passage dans une tour à injection d'azote liquide à -50 C. Elles sont ensuite microbroyées par passage dans deux broyeurs cellulaires refroidis de l'intérieur au moyen d'un agent de refroidissement à une température inférieure à -200C. La crème ainsi obtenue est passée sur un décanteur à grande vitesse et le jus de décantation ou surnageant ou protoexoplasma a été recueilli. IL se présente sous la forme d'un liquide verdâtre de densité légèrement supérieure à 1. Une ultra-filtration sur la membrane M4 de la Société SFEC permet d'obtenir un liquide limpide sans impureté et dont les composants ont un poids moléculaire inférieur à 20 000. Les résultats d'analyse montrent que le filtrat dont le nom de code est GYFC8 a la composition suivante : cendres 0,099 % protéines 0,022 x lipides 0,050 % glucides 0,050 % polysaccharides 3,6 % MS sulfurytés iode 1,6 mg/l chrome cobalt # 0,05 mg/l molybdène # 0,1 mg/l étain # 0,05 mg/l plomb 0,129 mg/l cadmium 0,02 mg/l antimoine 0,01 mg/l arsenic 0,5 mg/l mercure Il faut remarquer à titre scientifique, et qui ne lie pas le deposant,que L'analyse montre que, comme dans La plupart des algues rouges, le galactose est le principal constituant de ces polymères. Le taux d'ions SO4 dans les polysaccharides est de 18 %. Détermination de la toxicité du filtrat de l'exemple IV On a déterminé la toxicité externe et la toxicité interne En re qui concerne la toxicité externe J,5 mi d'un filtrat physiologique GYFC8 sont déposés a l'aide d'une seringue stérile de 1 ml au dixième sur deux pièces de gaze hydrophile Codex à 8 épaisseurs, d'une surface de 6,2 cm2, dont une des surfaces est recouverte d'une pellicule adhésive hypoallergé- nique et imperméable et appliquées immédiatement sur a peau de lap-inr maintenues en contact avec la peau sur chacune des deux zones par une bande de fixation microporeuse adhésive hypoallergénique de largeur 5G mm. On place ensuite une compresse de protectien en gaze hydrophile Codex de dimensions appropriées ; l'ensemble est maintenu par une bande tissée. Vingt-quatre heures après l'application du produit, on évalue l'irritation primaire cutanée. Elle est évaluée 30 min auprès enlèvement du pansement et de nouveau quarante-huit heures plus tard, c'est-à-dire soixante-douze heures après l'application du produit. Les observations sont faites sur les deux zones, scarifiée et non scarifiée, selon l'échelle numerique suivante : - Erythème et formation d'escarres : Pas d'érythème ....................... 0 Léger érythème ....................... 1 Erythème bien visible ................ 2 Erythème important ................... 3 Erythème grave 4 4 (rouge pourpre, lésions profondes) - Formation d'oedemes Pas d'oedème .................................. 0 Très léger oedème ............................. 1 Léger oedème (contours bien définis, gonflement apparent)... 2 Oedéme moyen (épaisseur environ 1 mm) 3 Oedème grave (épaisseur supérieure à 1 mm et surface supérieure à celle de la zone d'application) 4 On additionne les chiffres obtenus pour l'érythème et pour l'oedème après vingt-quatre heures et soixante-douze heures, d'une part sur les six zones non scariTiées, d'autre part sur les six zones scarifiées. On additionne les chiffres ainsi obtenus et on calcule la moyenne en divisant le total par 24. Cette moyenne représente l'indice d'irritation primaire cutanée (I.P.). Les résultants sont exprimés comme suit NON IRRITANT I.P. # 0,5 LEGEREMENT IRRITANT 0,5 IRRITANT 2 TRES IRRITANT 5 L'indice ainsi déterminé est égal à 0,09,ce qui correspond à un produit qui est considéré LégaLement, suivant l'Arrêté du 1er février 1982 paru au Journal Officiel du 21 février 1982, comme non irritant. En ce qui concerne la toxicité interne, on a déterminé la dose létale 50, c'est-å-dire la dose mortelle pour 50 % des animaux, sur des rats males et femelles de souche WISTAR. Les doses choisies ont été échelonnées de 0,5 g à 2,5 g pour 100 g de poids corporel. Des observations ont déduit que la DL50 du filtrat est supérieure à 25 g/kg (facteur limitant : non possibilité d'absorption volumétrique). Détermination de l'activité anticoaoulante du filtrat de l'exemple IV "in vitro" On réalise un mélange de 200 ul de plasma et de 100 pl de filtrat d'algues. Ce mélange est placé en incubation à 37 C. On détermine en comparaison avec un témoin - le temps de prothrombine ou temps de quick (T-Q) Ce temps définit le temps de recalcification d'un plasma pauvre en plaquettes en présence d'un excès d'extrait tissulaire (thromboplastine). Il explore la voie intrinsèque de la coagulation, la prothrombine et le fibrinogène, - -le temps de cêphaline kaolin (TCK)* ce temps définit le temps de recalcification d'un plasma pauvre en plaquettes en présence d'une suspension de phospho lipides (céphaline cérébrale). Il explore l'ensemble du système intrinsèque (endogène) et la voie finaLe de coagulation, - fibrinogène - temps de thrombine.Ce temps définit le temps de coagu lation d'un plasma pauvre en plaquettes en présence d'une quantité déterminée de thrombine, - temps de Reptilase. Un certain nombre de vernis contiennent des enzymes capables, comme la thrombine, de coaguler le fibrinogène mais qui sont insensibles aux inhibiteurs de la thrombine. L'enzyme utilisée dans ce cas est une Reptilase FTH50 des laboratoires STAGO (Reptilase de BOTHROX ATHROX). On a observé les résultats suivants T.Q T.C.K Fi T.T T.R Témoin 80 % 33" 2,45 22" 27" Filtrat de 45 x Coag 2,50 40" 31" l'exemple IV Il apparat donc que le filtrat est actif sur le temps de thrombine. Par ailleurs, un test au sulfate de protamine a montré l'inhibition du filtrat par ledit sulfate, ce qui signifie que les polysaccharides sont des polysaccharides sulfurylés. Intérêt théraoeutioue. Le produit a été testé dans un centre de rééducation fonctionnelle en milieu marin. Deux compositions thérapeutiques sous forme de pommade ont été testées. Ces compositions sont désignées par leur nom de code, à savoir : - JL 832 HETEROSIDES D'HESPERIDEES 1 9 FILTRAT D'ALGUES GYFC8 2 g FILTRAT D'ALGUES GYFL 10 g EXCIPIENT EMULSIONNE H/E q.s.p. 100 9 - JL 834 HETEROSIDES D'HESPERIDEES 1 g FILTRAT D'ALGUES GYFC8 4 g FILTRAT D'ALGUES GYFL 10 g EXCIPIENT EMULSIONNE H/E q.s.p. 100 g Ces compositions ont fait l'objet d'applications biquotidiennes, matin et soir, à raison de 5 g par application en massages légers pendant 15 jours. Résultats Tolérance cutanée : Il n'a pas été constaté de réaction cutanée allergique ni d'intolérance générale aussi bien en ce qui concerne la CREME JL 832 que JL 834. Efficacité: Il n'a pas été constaté d'effets thérapeutiques après utilisation de la JL 832. Les personnes qui ont été mises sous JL 834 ont, dans la semaine qui a suivi les applications biquotidiennes, matin et soirv ressent un très net soulagement caractérisé par une sensation bien moins grande de tension interne au niveau de la cheville et au niveau du mollet, par la diminution de la sensation de lourdeur et par un sommeil plus confortable, surtout en fin de nuite perturbé précédemment par des sensations dysesthésiques au niveau des jambes REVENDICATIONS 1. Extrait d'algue rouge, caractérisé en ce qu'il est sous forme d'émulsion et qu'il comporte 1 à 5 % en poids de polysaccharides sulfurylés. 2. Extrait d'algue rouge selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il résulte du traitement d'une algue rouge selon Le procédé suivant : a) cryobroyage des algues coupées de manière à obtenir une bouillie dont les particules ont une dimension inférieure à 100 m, b) broyage moléculaire, c) décantation à grande vitesse et récupération du surnageant. 3. Extrait d'algue rouge selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'il résulte du raitement du surnageant par ultra filtration puis récupération du filtrat liquide. 4. Composition thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle renferme, à titre de principe actif, extrait d'algue selon l'une des revendications 1 à 3 et un excipient physiologiquement acceptable. 5. Composition thérapeuticue selon la revendication 4, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 2 % en poids d'extrait d'algue. 6. Composition thérapeutique selon l'une des revendications 4 ou 5, caractérisée en ce qu'elle comporte un extrait d'algue brune. 7. Apolication d'un extrait d'algue selon l'une des revendications 1 à 3 pour obtenir un médicament destiné au traitement des jambes lourdes.