FR 2592883 A1 19870717 FR 8600364 A 19860113 La présente invention se rapporte à de nouveaux dérivés de la vinblastine, des procédés pour leur préparation et l'application de ces composés à titre de médicament, notamment comme agent antitumoral. La vinblastine est un alcaloïde antitumoral connu, isolé à partir de Vinca rosea. La vinblastine (gui sera dénommée ci-après "VLB" en raison de son ancienne DCI vincaleucoblastine) a été l'objet de nombreuses recherches, études et brevets, en vue de la préparation de substances antitumorales plus actives, plus sélectives et moins toxiques. La présente invention concerne des dérivés de vinca (indole-dihydroindole)alcalolde caractérisés en ce qu'au moins en position C3 et/ou C4 se trouve une chaste grasse comportant au moins 7 atomes de carbone aliphatique. Parmi les dérivés de vinca alcaloide selon la présente invention, il faut citer les dérivés en C3 et C4 de la vinblastine, de la vincristine et de la vindésine ; mais d'autres dérivés présentant une activité antinéoplasique peuvent évidemment être envisagés. Parmi ces dérivés, il faut citer les composés de formule générale I dans laquelle . (R1, R2) représentent (-Et, -OH) ou (-H, -Et), R4 représente -H, -Me ou -CHO, R3 représente -OH ou Rs représente -A-R'F, A étant choisi parmi -NH-, R13 et R'5 représentent un radical hydrocarboné aliphatique, l'un au moins de R'3 et R'5 ayant au moins 7 atomes de carbone aliphatique, non substitué ou substitué par un ou plusieurs radicaux amino, di(C1-C3 alkyl)amino, mono(C1-C3 alkyl)amino, NH(C2-C5)alcanoyle, cyano, COOH, S-(C1-C3 alkyl), COO (C1-C3)alkyle, Coe-aryle, alk désignant une channe hydrocarbonée divalente, droite ou ramifiée qui peut comporter un ou plusieurs substituants, ou fonctions, notamment OH, NH2, CO2H, ou bien . A est le radical divalent d'un amino-acide entrant dans la constitution des protéines se terminant par -NH et protégé ou non. Parmi les radicaux hydrocarbonés aliphatiques, il faut citer les radicaux . alkyle en C1 à C20, droits ou ramifiés, et . alkenyle en C1 à C20, droits ou ramifiés, ces radicaux étant de préférence droits : lorsque ces radicaux sont substitués, ils le sont de préférence en bout de channe. Parmi les radicaux alk, il faut citer les radicaux hydrocarbonés, droits ou ramifiés, en C1 à C7, de préférence C1 à C5, non substitués ou substitués par un ou plusieurs radicaux OH, NH ou COOH. Lorsque A est un radical divalent d'un amino-acide entrant dans la constitution des protéines, il peut être sous forme D ou sous forme L lorsqu'il comporte un atome de carbone asymétrique. Le radical A peut provenir de Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Ser, Thr, Lys, Lys-OH, Arg, Asp, Asp-NH2, Glu, Glu-NH2 Cys-SH, Met, Tyr, Trp ou His. Lorsque ces radicaux présentent des fonctions autres que les- fonctions de liaison, celles-ci peuvent être protégées par des groupes de protection Pr connus dans la chimie des protéines tels que le groupe Cbz : carbobenzyloxy par exemple. Le terme aryle désigne de préférence le radical phényle. La présente invention concerne également un procédé de préparation des composés de formule générale I, ainsi que les compositions pharmaceutiques comprenant un composé de formule générale I et un excipient, support ou vecteur pharmaceutiquement acceptable. Les composés de formule générale I selon l'invention peuvent se diviser en deux groupes, selon que la chaine grasse se trouve en position C3 à C4. Ainsi, d'une part, les dérivés de vinca alcaloide particulièrement préférés sont ceux répondant à la formule I et dans laquelle . R3 représente -OH, . R5 représente -A-R'5 avec A choisi parmi : . R'5 représentant un radical alkyle ou un radical alcényle en C7 à C20, non substitué ou substitué par un ou plusieurs radicaux amino, di(C1-C3 alkyl)amino, mono(C1-C3 alkyl)amino, NH (C2-C5)alcanoyle, cyano, COOH, S-(C1-C3 alkyl), COO-(C1-C3) alkyle, COO-aryîe, . alk désignant une channe alcoylène en C1 à C3, ou . A est un radical divalent dérivant d'un amino-acide entrant dans la constitution de protéines, protégé ou non. Lorsque A représente -NH-, R'5 est de préférence choisi parmi -(CH2)11-CH3 -(CH2)17-CH3, -(CH2)12-NH2 ou - (CH2) 7-CH=CH- (CH2) 8-CH3. Ainsi, par exemple, on appellera composé nt 91 le composé répondant à la formule I3 suivante et dans laquelle R'5 représente -(CH2)11-CH3. On appellera composé n 182 le composé répondant à la même formule I3 et dans laquelle R'5 représente -(CH2)12-NH2. De même, le composé n 252 sera celui de formule I3 dans laquelle R'5 représente -(CH2)7-CH=CH-(CH2)8-CH3. Lorsque A représente un radical divalent dérivé d'un amino-acide entrant dans la constitution des protéines, protégé ou non, alors R'5 est de préférence choisi parmi les radicaux alkyle en C7 à C20 et n-alkényle en C7 à C20 comportant une ou deux doubles liaisons. D'autre part, d'autres dérivés de vinca alcaloïde particulièrement préférés selon la présente invention sont ceux répondant à la formule générale I et dans laquelle R5 représente -OMe, R3 représente avec R'3 représentant un radical alkyle ou un radical alkényle en C7 à C20, non substitué ou substitué par un ou plusieurs radicaux amino, di(C1-C3 alkyl)amino, mono(C1-C3 alkyl)amino, NH(C2-C5)- alcanoyle, cyano, COOH, S- (C1 -C3 alkyl), C00- (C1 -C3) alkyle, COO-aryle, Ainsi, dans la formule 14 suivante : R13 est de préférence choisi parmi : -(CH2)14-CH3, -CH2CH(COOH)-CH2-CH=CH-(CH2)8-CH3, -CH2CH (COOMe) -CH2-CH=CH- (CH2) 8-CH3. La présente invention concerne également des procédés de préparation des composés de formule générale I. L'invention concerne un procédé de préparation de dérivés d'alcaloIde de vinca en C31 caractérisé en ce que a) on fait réagir l'hydrazide de formule avec un nitrite pour former l'azide correspondant en position C31 et b) on fait réagir l'azide avec une amine de formule :: H - A - R'5 dans laquelle A et R' ont les significations données précédemment, mais iA A est différent de -0-, pour obtenir le composé désiré Le schéma réactionnel est alors le suivant hydrazide de désacétyl-vinblastine La réaction est effectuée en deux étapes, l'hydrazide est dissous dans un solvant tel que le MeOH en milieu acide, HCl 1 N par exemple, la solution est refroidie et on ajoute un nitrite tel que le nitrite de sodium, le pH est alors ajusté avec une base faible telle que l'hydrogdno-carbonate de sodium, on obtient ainsi un azide acide qui est extrait par un solvant non miscible tel que le dichlorométhylène. Après séparation, l'azide, séché et concentré, est traité par l'amine correspondant au produit désiré (H-A-R'5) et le produit brut est séparé du mélange réactionnel et éventuellement purifié. L'amide obtenu est séparé du milieu réactionnel par tout procédé approprié. Dans certains cas, la channe latérale peut comporter un atome de carbone asymétrique ; l'invention concerne alors aussi bien le composé sous forme de mélange de stéréoisomères,par exemple le mélange racémique, que les isomères sous forme purifiée. L'-invent-ion- concerneégalemenUl1 application-- des composés de formule I à titre de médicament, ainsi que les compositions pharmaceutiques les incorporant et comportant des excipients, supports ou vecteurs pharmaceutiques acceptables. Les composés selon la présente invention présentent en effet des propriétés antinéoplasiques qui les rendent particulièrement intéressantes dans le traitement des néoplasies malignes telles que les leucémies, la maladie de Hodgkin généralisée, certains lymphomes, les sarcomes ou carcinomes notamment. Bien entendu, activité de ces composés pourra varier en fonction de la structure et les informations données précédemment ne sont qu'indicatives. Les compositions selon l'invention sont, de préférence, des compositions injectables, en particulier des compositions administrables par voie intraveineuse. Ces compositions peuvent être réalisées par tout procédé connu dans le domaine des dérivés de vinca, en particulier les produits peuvent être dissous sous forme de sel dans du sérum physiologique contenant éventuellement des excipients donnant un pH correct pour la solution injectable. Ces compositions peuvent également être conditionnées sous forme de deux conditionnements séparés, lyophilisat de dérivés de VLB et solution physiologique, le mélange étant effectué au moment de l'injection. Il est également possible de prévoir des formes galéniques plus complexes utilisant le caractère lipophile de ces molécules et mettant à profit d'autres vecteurs pharmaceutiquement acceptables. Les doses à mettre en oeuvre dépendront du produit, du type de tumeur à traiter et de l'état du malade ; dans le traitement des néoplasies, la posologie est toujours adaptée par le praticien. Ainsi, il est courant d'utiliser des doses croissantes dans le traitement avec les alcaloïdes de vinca, mais ce type de traitement doit tenir compte de l'évolution d'autres paramètres physiologiques du patient et doit parfois être interrompu. Dans ces conditions, il n'est pas possible de fournir des dosages à ce stade de la recherche. Les exemples suivants sont destinés à mettre en évidence d'autres caractéristiques et avantages de la présente invention. EXEMPLE 1 PrdSaration de 4-desacdtyl-vinblastine~C-3 N-dQdUcyl carboxamide (composé n 91) On dissout l'hydrazide de desacétyl-vinblastine (CONRAD et al. J. Med. chem. 22,391 (1979) ) à raison de 0,500 g (0,65 millimole) dans un mélange contenant 10 ml de méthanol et 30 ml de HCl 1 N. La solution est refroidie à 0 C puis est additionnée de 0,103 g de NaNO2 sec (1,49 millimole) en une fois et sous agitation. Après 13 minutes, le pH de la solution est ajusté à 8,5 avec une solution saturée froide de NaHC03. On extrait rapidement l'azide acide de la desacétyl-vinblastine avec 4 x 15 ml de CH2Cl2, puis on le lave avec une solution saturée de Nazi. Les extraits sont séchés sur Na2S04 et concentrés en un volume de 20 ml. A la solution de CH2Cl2, on ajoute de la dodecylamine à raison de 0,500 g (2,69 millimoles) et la solution est agitée pendant 2 heures à la température ambiante. La chromatographie en couche mince révèle un composant majeur (Rf = 0,73 ; silice ; méthanol : chlorure de méthylène, 7 : 9). Le solvant est évaporé et le résidu chromatographié sur silice, en éluant d'abord avec 96 :4 puis 93 : 7 de chlorure de méthylène : méthanol. Les fractions appropriées sont combinées et les solvants enlevés pour conduire, à 365 mg de 4-desacétyl-vinblastine C-3 N-dodecyl carboxamide (rendement : 61 %), avec les caractéristiques physiques suivantes Rf : 0,73 (silice, CH2Cl2 :CH30H, 90 : 10) SM : (DCI, isobutane) : 922 (M+ + 1), 935 (M+ + 14), 826, 272, 186 RMN :(CDCl3, 360 MHz) : 6 9,50 (m,OH), 8,02 (s,1H,NH), 7,51 (d,1H,H9'), 6,57(s,1H,H9), 6,05 4s,1H,H12), 5,80 (s,2H,H14',H15'), 4,16(d,1H,H17), 3,95 (m.H17a'), -3,76 (s,3H,CH30), 3,59(s,3H,CH30), 3,36(s,1H,H2) 2,79(s,3H, CH3-N),2,60(s,1H,H21), 1,37-1,20 4L,25 H), 1,02-0,77 ( ,3CH3 + H14,) IR : (KBr, cm-1) 3420, 1665, 1730 cm-1 Le sel bis méthane-sufonate est préparé en dissolvant du carboxamide de vinblastine C-3 N-dodecyl (100 mg) dans de l'éthanol anhydre et en -ajoutant de l'acide éthanolique méthanesulfonique à 2 %. La solution est concentrée sous vide.On ajoute au résidu 3 ml d'eau distillée et la solution obtenue est lyophilisée pour donner 123 mg de sel bis-méthanesulfonate. IR : (KBr) : 3400, 2923, 2858,1729, 1658,1612,1503,1760, 1040 cl 1. EXEMPLE 2 Préqaration de carboxamide de vinblastine C-3 N-Oleyl composé n 252) Suivant la procédure décrite ci-dessus, 0,500 g d'hydrazide de 4-desacétyl-vinblastine (0,65 millimole) est mis en réaction avec 0,695 g d'oleylamine (2,6 millimole) pour donner le 4-desacétyl-vinblastine C-3 N-oleyl carboxamide (0,310 g, rendement : 47 t) ayant les caractéristiques suivantes Rf : 0,72, silice, méthanol : chlorure de méthylène, 1 : 9, SM (DCI, isobutane), 1005 (M+ + 1) 922, 810, 733, 502, 392, 279. IR : (KBr) : 3460, 2920, 2858j 1735, 1663, 1612, 1502, 1460, 1430 cm-1 RMN (CDCl3, 360 MHz) : 9,52 (OH), 8.00 (NH), 7,52 (H-9'), 7,17-7,05 (H-10', H-11', H-12'), 6,60(H-9}, 6,05 (H-12), 5,81 (H-1(,H-1, 5,35 (-HC=CH-), 4,17(H-17), 3,95 (H-17A'), 3,77 (OMe), 3,58 (OMe), 3,36 (H-2), 2,78(N-Me), 2,60(H-21) 0,97-0,81 (3 Me). EXEMPLE 3 : PréEaration de carboxamide de 4-desacetyl-vinblastine C N-octadecyl Suivant la procédure décrite ci-dessus, on prépare du carboxamide de 4-desacétyl-vinblastine C3 -N- octadecyl en partant de 0,500 g d'hydrazide de desacétylvinblastine (0,65 millimole) et de 0,700 g d'octadecylamine (2,59 millimole). On obtient 0,332 g de carboxamide de 4-desacétyl-vinblastine C3 N-octadécyl (rendement : 51 %}. Ce composé possède les caractéristiques physiques suivantes : Rf : 0,67 chlorure de méthylène : méthanol, 93 : 7, IR : (KBr, cm-1), 3410, 2920, 2854, 1739, 1663, 1616, 1503, 1460, 1431 cm-1 SM : (DCI, NH3), 1007 (M + 1), 974, 960, 946 RMN : (CDC13, 360 MHz) 6 : 9,52 (OH), 8,00 (NH), 7,52 (H-9'), 7,17-7,07 (H10', H11', H12'), 6,57 (H-9), 6,05 (H-12), 5,82 (H-14', H-15'), 4,17 (H-17), 3,95 (H-17A'), 3,77 (O-Me), 3,57 (OMe), 3,35 (H-2), 2,80 (N-Me), 2,61 (H-21), 1,37-1,17 (18 CH2), 0,97 0,82 (3 Me). EXEMPLE 4 PréEaration de carboxamide de 4-dEsacetyl-vinblastine C3 N-(12 aminododecyl) (composé n 182) Suivant la procédure générale, 0,500 g d'hydrazide de desacétyl-vinblastine (0,65 millimole) sont convertis en 0,327 g de 4 carboxamide de desacétyl-vinblastine C-3 N-(12 aminododecyl) par réaction avec 0,500 g de 1,12-diaminododecane (2,50 millimoles). Le composé est purifié par chromatographie sur alumine, l'élution se faisant avec 92 : 8 de chlorure de méthylène : méthanol. Le composé est isolé en tant que poudre amorphe ayant les caractéristiques suivantes Rf : 0,38, alumine, méthanol : chlorure de méthylène 10 : 99 RMN : (CDCl3, 360 MHz) 6 : 9,52 ( m, OH), 8, Ol ( m, N-H), 7,51 (d, IH, Hg), 6,58 (s, 1H, Hg) 6,05 (s, 1H,H12), 5,81 (s, 2H, H15', H14) 4,15 (a, 1H, H-17), 3,76 (s, 3H, CH3 O), 3,95 (m, 1H, H17A) 3,59(s,3H,CH3O,3,35 (s,îH,H2)1 2,77 (s, 3H, N-CH3), 2,60 (s,1H, H21), 2,25 (m, 1H, H1;;), 1,35-1,24 (m, 23H), 1,00-0,82 ( m, 7H, 2CH3 + H14,}. SMg (DCI {isobutane) 938 (M+ + 1), 965 (M+ + 28), 923 (M±14), 938 , 279. IR : ( r) : 3460, 2920, 2853, 1730, 1663, 1605, 1502, 1410, 1225 cm-1. EXEMPLE 5 : Préparation de 4-palmitoyloxy 4-desacétyl-vinblastine On dissout 0,500 g de 4-desacétyl-vinblastine (0,65 millimole), et 0,119 g de 4-diméthylaminopyridine (0,975 millimole), dans 10 ml de chlorure de méthylène et la solution est alors refroidie à Oo C. On ajoute 0,214 g de chlorure de palmitoyl (0,78 millimole) en mélangeant. La chromatographie en couche mince révèle après 24 h la présence d'un composant majeur (silice ; éther : CH30HjNH3 92 : 8). Le solvant est évaporé. Le résidu est introduit sur une colonne de silice et élué avec CH2Cl2 : CH30H,93 : 7. Les fractions appropriées sont collectées, évaporées, fournissant 323 mg de 4-palmitoyloxy 4-desacétylvinblastine,(rendement : 49 %). Caractéristiques physiques : Rf : 0,65 (silice, CH2Cl2 : CH3OH 90 : 10) IR (KBr) : 3465, 2920, 2855, 1739, 1613, 1500, 1460, 1431, 1362, 1242, 1223 cm 1 : : DCI (isobutane) 1008 (M+ + 1), 990, 958, 884, 756, 586, 512, 413, 256. RMN : (360 MHz CDCl3) 8,02 (NH), 7,52 (H-9'), 7,17-7,10 (H-10', H-11', H-12') 6,60 (H-9), 6,08 (H-12), 5,82 (H-14'), 5,46 (H-17), 5,28(H-15') 3,97 (H-17 A'), 3,77 (OMe), 3,76 (OMe), 3,68 (H-2), 3,60 (OMe) 2,71 (N-Me), 2,66 (H-21), 1,36-1,21 (16XCH2), 0,93-0,76 (3XCH3). EXEMPLE 6 : Activité antitumorale Des essais d'activité antitumorale des dérivés ae la VLB selon la présente invention ont été conduits sur des souris de la façon suivante : 6.1. Paramètres d'activité Deux paramètres d'activité sont utilisés - le paramètre tI.L.S." représente l'augmentation de la durée de vie, en pourcentage et selon la relation suivante I.L.S. % = T-C X 100 C T (en jours) étant la durée moyenne de vie des souris traitées, C (en jours) étant la durée moyenne de vie des souris témoins. - le paramètre "survivants à long terme" dont le calcul en pourcentage est effectué au jour 60. 6.2. Administration intra-veineuse 10 cellules de leucémie P388 sont inoculées au jour 0 A des souris DBA2 femelles, par voie intraveineuse. Le lendemain, le composé 91 selon l'invention est administré par voie intraveineuse. Dose (mg/kgl;) ILS (%) Survivants jour 60 (%) 6,25 1 0 12,5 1 0 25 14 0 50 45,9 0 100 129 0 150 167 14 175 - 25 en cours 200 - 43 0 On notera une activité très significative du composé nO 91 aux doses de 100 et 150 mg/kg/j. 6.3. Administration intrapéritonéale 106 cellules de leucémie P388 sont inoculées par voie intrapéritonéale chez 6 souris BDF1femelles au jour 0. Le lendemain, le composé 91 est administré par voie intrapéritonéale. Dose (mg/kg/j) ILS (t) Survivants jour 60 (%) 12,5 57 0 25 65 0 50 77 0 100 148 0 150 en cours 200 59 (toxique) O Comme dans l'exemple 6.2, le composé se révèle présenter une activité très significative. REVENDICATIONS 1) Dérivés de vinca (indole-dihydroindole)alcalolde, caractérisés en ce qu'au moins en position C3 et/ou C4 se trouve une channe grasse comportant au moins 7 atomes de carbone aliphatique. 2) Dérivés selon la revendication 1 de formule I dans laquelle : . (R1, R2) représentent (-Et, -OH) ou (-H, Et) . R4 représente -H, -Me ou -CHO, R3 représente -OH ou R5 représente -A-R'5, A étant choisi parmi .R'3 et R'5 représentent un radical hydrocarboné ayant de 1 à 20 atomes de carbone, l'un au moins des R'3 et R'5 ayant au moins 7 atomes de carbone aliphatique, le radical hydro carboné pouvant être non substitué ou substitué par un ou plusieurs radicaux amino, di(C1-C3 alkyl) amino, mono(C1-C3 alkyl)amino, NH(C2-C5)alcanoyl, cyano, COOH,, 6-(C1-C3 alkyl), COO-(C1-C3) alkyl ou C00-aryle, alk désignant une channe hydrocarbonée divalente droite ou ramifiée qui peut comporter un ou plusieurs substituants, ou fonctions notamment OH, NH2, CO2H, ou bien . A est le radical divalent d'un amino acide entrant dans la constitution des protéines se terminant par -NH- et protégé ou non. 3 > Dérivés selon la revendication 2, caractérisés en ce que R3 représente -OH , représente -A-R'5 avec A choisi parmi -NH-, et R5 représentant un radical alkyle ou un radical alkényle en C7 à C20, non substitué ou substitué par un ou plusieurs radicaux amino, di(C1-C3 alkyl)amino, mono(C1-C3 alkyl)amino, NH(C2-C5) alcanoyl, cyano, COOH, S-(C1-C3 alkyl), C00-aryle, Alk désignant une chaîne alcoylène en C1 à C3, ou A est un radical divalent dérivant d'un amino acide entrant dans la constitution des protéines, protégé ou non. 4) Dérivés selon la revendication 3, caractérisés en ce que A représente -NH- et R'5 est choisi parmi -(CH2)11-CH3, -(CH2)17-CH3, -(CH2)12-NH2 et -(CH2)7-CH=CH2)8 CH3. 5) Dérivés selon la revendication 3, caractérisés en ce que R'5 représente un radical n-alcoyle ou n-alcényle en C7 à C20 et A représente un radical divalent dérivé d'un amino acide entrant dans la constitution des protéines protégé ou non. 6) Dérivés selon la revendication 2, caractérisés en ce que dans la formule I : R5 représente -OMe, R3 représente avec R'3 représentant un radical alkyle ou un radical alkényle en C7 à C20, non substitué ou substitué par un ou plusieurs radicaux amino, di (C1-C3 alkyl)amino, mono (C1-C3 alkyl)amino, NH(C2-C5) - alcanoyl, cayno, COOH, S-(C1-C3 aikyl), C0O-(C1-C3) alkyl, COO-aryle 7) Dérivés selon la revendication 6, caractérisés en ce que R'3 est choisi parmi : -(CH2)14-CH3, -CH2CH(COOH)-CH2-CH=CH-(CH2)8-CH3 ou -CH2CH(COOMe)-CH2-CH= CH- (CH2) 8-CH3. 8) Procédé de préparation de dérivés d'alcalolde de vinca en C3, caractérisé en ce que a) on fait réagir l'hydrazide de formule avec un nitrite pour former l'azide correspondant en position C3 et b) on fait réagir l'azide avec une amine de formule H - A dans laquelle A et R'5 ont les significations données précédemment mais A est différent de -O-, pour obtenir le composé désiré. 9) Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'on fait réagir lthydrazide de la 4-désacétyl- vinblastine avec la dodécylamine, l'oleylamine, l'octa décalamine ou le 1,12-diamino-dodécane. 10) Procédé de préparation des dérivés d'alcalolde de vinca en C selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on effectue l'estérification du radical OH en position C4 avec un acide ou un dérivé d'acide réactif de formule 11) Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'on fait réagir la 4-désacétyl-vinblastine avec le chlorure de palmitoyle. 12) Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comporte un dérivé d'alcalolde de vinca selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, avec un excipient, support ou vecteur pharmaceutiquement acceptable. 13) Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce qu'elle est sous forme injectable.