FR 2602768 A1 19880219 FR 8611683 A 19860813 La presente invention concerne des derives de l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétique et plus particulièrement le 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acetamide. leurs procédés de préparation et leurs applications en thérapeutique. notamment comme antidépresseurs. La présente invention a ainsi pour objet des dérivés de l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio) acétique. de formule dans laquelle Z est un groupe -NH2 ou -NHOH Le 2-(4,4-difluoro benzhydryl thio)acetétamide peut etre préparé a partir de l acide 2-(4,4'-di- fluoro benzhydryl thio)acétique par transformation en chlorure d acide correspondant par exemple par action du chlorure de thionyle dans un solvant organique puis réaction du chlorure d acide ainsi forme avec de l ammoniaque L acide 2-(4,4-difluoro benzhydryl thio)acétohydroxamique peut être préparé par réaction du chlorhydrate d'hydroxylamine sur l ester méthylique de l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétique. La présente invention a également pour objet des compositions thérapeutiques comprenant a titre de principe actif le 2-(4.4-difluoro benzhydryl thio)- acétamide ou l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétohydroxyamique. Les exemples suivants illustrent la preparation des composés Exemple 1 Prépaation du 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétamide (n' du code CRL 41334) On chauffe une heure a reflux une solution de 26,46 g (0.09 mole) d'acide 2-(4,4'-difluoro ben zhydryle thio)acétique dans 145 mi de benzéne et 30 ml de chlorure de thionyle. On évapore sous vide, reprend avec 100 ml d'éther et coule dans un mélange agité de 100 ml d'ammoniaque a 28Z et 200 g de glace. On agite 2 heures. décante l'éther, lave a l'eau, séche sur Na2SO;, évapore a sec sous vide, reprend le résidu å l'éther de pétrole et essore. On abtient après recristallisation dans l'éther isopropylique : 18 g d'amide (F.inst. = Rdt. = 68%). Le composé est une poudre blanche. insoluble dans l'éther de pétrole, soluble dans l'éther, l'acé- tate d'éthyle et les alcools. Sa solubilité dans l'eau est inférieure a 0.1%. Exemple 2 préparation de l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétohydroxyamique (n' du code CRL 41 335) 44,1 g (0,15 mole) d acide 2-(4,4'-difluoro ben:hydryl thio)acétique sont dissous dans 300 ml de méthanol et additionnés de 1.5 ml d'H2SO4 concentré. Après 4 heures a reflux, on évapore le méthanol, reprend a l'eau et a l'éther, lave au bicarbonate dilué puis å l'eau, sèche et évapore sous vide. Le residu huileux est traité pendant une nuit a 20-C, avec une solution obtenue avec 6,9 g (0,3 Atg) de sodium, 10,5 g (0,15 mole) de chlorhydrate d'hydroxylamine et 480 ml de méthanol anhydre. On évapore a sec sous vide, reprend avec 600 ml d'eau, filtre sur charbon, acidifie avec HCl 3 N, extrait a l'éther, lave a l'eau, sèche. évapore et cristallise dans 10 éther de pétrole. On reueille 28,6 g d'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétohydroxamique. (F. inst. = 76 C: Rdt. = 62Z.). Le composé est une poudre légèrement rosée; soluble dans 10 éther l'acétate d'éthyle, les alcools: insoluble dans l'eau. On donnera ci-aprés des résultats des études pharmacologiques mettant en évidence les propriétés des composés. Etude neuroDsvchoDharmacoloalaue Le composé CRL 41 334. en suspension dans une solution de gomme arabique, a été administré par voie intrapéritonéale sous un volume de 20 ml/kg chez la souris (male. NMRI. C.E.R. Janvier) et de 5 ml/kg chez le rat (male, CD1: SPRAGUE DAWLEY. Charles River). I - PRETOXICITE ( 3 souris par dose) - 128 mg/kg : démarche titubante, exophtalmie, sédation, puis excitation 2 heures après l'injec- tion. - 256 mg/kg - démarche titubante, exophtalmie, convulsions (3/3) å 15 minutes0 sédation suivie d'excitation 2 heures après 10 injection. Pas de mortalité. - 512 ma/ko - démarche titubante. exophtalmie, convulsions (3/3) pendant les 10 premières mi-nutes. Mortalité (3/3) (1/3 en 15 minutes et 2/3 en 24 heures?. II - COMPORTEMENT GLOBAL ET REACTIVITES Des lots de 3 animaux sont observés avant, puis 15 mn, 30 mn, 1h, 2h, 3h et 24 heures après l'administration du composé CRL 41 334. 1 - Souris - 2. 8 et 32 mg/kg - pas de modifications nettes du comportement et des réactivités. - 128 ma/ko - sédation pendant 30 minutes accompagnée de démarche titubante, diminution de la fréquence respiratoire. des réactivités, de la réaction de peur, du tonus musculaire. Hypothermie (-4,1 à 30 minutes durée 1 heure). 2 - Rat - 1. 4 et 16 ma/ka comportement. réactivités, variation du diamètre pupillaire et de la température rectale comparables å ceux du lot témoin. .- 64 64 mg/kg - sédation pendant 15 minutes accompagnées de dyspnée, de diminution de réactivité au toucher et du tonus musculaire - cette sédation est suivie par une augmentation de la réaction de peur (30 minutes?. de la réactivité au toucher et du tonus musculaire pendant 3 heures. - mydriase tres modérée et brève0 à 1 heure. III - RECHERCHE DE MOUVEMENTS STEREOTYPES Des lots de 6 rats reçoivent une injection du composé CRL 41 334 ou d'amphétamine, puis sont immédiatement placés dans des boites de petites dimensions (20 x 10 x 10 cm) où leur comportement stéréo- typé est coté de O à 3 jusqu'à extinction de l'effet. Aux deux plus fortes doses utilisées (64 et 128 mg/kg), le composé CRL 41 334 provoque des stéréotypes nettes dont l'intensité est comparable à celle obtenue respectivement avec 1 et 2 mg d0amphé- tamine. Cependant, les cinétiques d action sont dif férentes. Les stéréotypies induites par 2 mg/kg d'amphétamine atteignent leur maximum en 60 à 90 minutes et durent 270 minutes, alors que les stéréotypies induites par 128 mg/kg du composé CRL 41 334 atteignent leur maximum en 120-150 minutes et durent plus de 420 minutes. IV - INTERACTION AVEC L'APOMORPHiNE 1 - Souris Des lots de 6 souris reçoivent le composé CRL 41 334 une demi-heure avant l'injection sous-cutanée d'apomorphine, â la dose de 1 ou 16 mg/kg. a) Apomorchine 1 mo/ko b) ADomorDhine 16 mg/kg A la plus forte dose utilisée (128 mg/kg) le composé CRL 4-1 334, seul. entraine une hypothermie et aggrave l'hypothermie induite par l'apomorphine (1 mg/kg). Les comportements de verticalisation et de stéréotypies ne sont pas modifiés. 2 - Rat Le composé CRL 41 334 est administré a des lots de 6 rats une demi-heure avant l'injection sous-cutanée de 0,5 mg/kg d'apomorphine. Aux deux plus fortes doses utilisées (16 et 64 mg/kg), le composé CRL 41 334 potentialise les stéréotypies induites par l'apomorphine. V - INTERACTION AVEC L'AMPHETAMINE L'amphétamine (2 mg/kg) est injectée par voie intrapéritonéale à des lots de 6 rats, une demi-heure après l'administration du composé CRL 41 334. Aux doses de 16. mais surtout 64 mg/kg, Le composé CRL 41 334 potentialise les stéréotypies amphétaminiques VI - INTERACTION AVEC LA RESERPINE Quatre heures après l'injection intrapéritonéale de 2,5 mg/kg de réserpine, des lots de 12 souris reçoivent le composé CRL 41 334. 1 - Action sur la temperature 2 - Action sur le otosis A la plus forte dose utilisée (128mg/kg), Le composé CRL 41 334 aggrave modérément l'hypothermie réserpinique. Le ptosis, déjà maximal, n'est pas modifié. A noter qu'au temps 24 heures, le composé CRL 41 334 (8, 32 ou 128 mg/kgl semble s'opposer å l'hypothermie et au ptôsis réserpiniques. VII - INTERACTION AVEC L'OXOTREMORINE Le composé CRL 41 334 est administré å des lots de 6 souris une demi-heure avant l'injection intrapéritonéale de 0.5 mg/kg d'oxotrémorine. 1 - Action sur la temoérature A la plus forte dose utilisée (128 mg/kg), le composé CRL 41 334 entraine une hypothermie et aggrave l hypothermie induite par l'oxotrémorine. 2 - Action sur les tremblements Les tremblements dus å l'oxotrémorine ne sont pas modifiés par le composé CRL 41 334. 3 - Action sur les svmctèmes chlolinerqaaues cériohéripues A la dose de 128 mg/kg, le composé CRL 41 334 diminue la défécation sans modifier la salivation et la lacrymation. VIII - ACTION SUR LE TEST DES QUATRES PLAQUES. LA TRACTION ET L'ELECTROCHOC Le test est pratiqué sur des lots de 10 souris, une demi-heure après l administration du composé CRL 41 334. Le composé CRL 41 334 ne modifie pas nettement le nombre de passages punis. Il ne provoque pas d'incapacité motrice majeure. A la plus forte dose utilisée (128 mg/kg), le composé CRL 41 334 s'oppose faiblement aux effets convulsivants sans modifier les effets létaux de l'électrochoc. IX - ACTION SUR LA MOTILITE SPONTANEE Après avoir reçu le composé CRL 41 334, les souris sont placées en actimétre ou leur motilité est enregistrée pendant 30 minutes. 1) Composé administré 30 minutes avant oas- sage dans l'actimètre Aux doses de 32 et 64 mg/kg, le composé CRL 41 334 entraine une augmentation de la motilité spon tanée de la souris; a la dose de 128 mg/kg, cet effet n'apparait plus. 2} Compose administré 2 heures avant cassave dans l'actimètre Aux doses de 8, mais surtout 32 et 128 mg/kg, le composé CRL 41 334 entraine une augmentation de la motilité spontanée de la souris. X - ACTION SUR L'AGRESSIVITE INTERGROUPES Après avoir séjourné pendant 3 semaines dans chacune des moitiés d'une cage séparées par une cloison opaque, des groupes de 3 souris reçoivent le composé CRL 41 334. Une demi-heure plus tard, les deux groupes dune mëme cage sont réunis par retrait de la cloison et on note le nombre de combats qui surviennent en 10 minutes. Le test est pratiqué pour moitié sur les souris habituelles (NMRI, C.E.R. Janvier) et pour moitié sur des souris NMRI (Iffa Credo). Aux deux doses utilisées (32 et 128 mg/kg), le composé CRL 41 334 diminue le nombre de combats. XI - ACTION VIS-A-VIS DE QUELQUES COMPORTEMENTS PERTURBES PAR DIVERS AGENTS 1 - Motilité réduite Dar habituation a l'en- ceinte Après 18 heures de séjour dans les actime- tres, les souris (6 par dose, 12 témoins) reçoivent le composé CRL 41 334. Elles sont aussitot replacées dans leurs enceintes respectives et, une demi-heure plus tard, on enregistre leur motilité pendant 30 minutes. Des la dose de 2 mg/kg. le composé CRL 41 334 entraine une reprise nette de l'activité motrice chez la souris habituée à son enceinte. 2 - Motilité réduite par agression hvooxioue Une demi-heure après avoir reçu le compose CRL 41 334. les souris (10 par dose, 20 témoins) sont soumises a une anoxie hypobare zigue (dépression de 60 mmHg en 9D secondes, détente de 45 secondes), puis elles sont placées en actimétre où leur motilité est enregistrée pendant 10 minutes. Des la dose de 2 mg/kg, le composé CRL 41 334 entraine une amelioration de la récupération motrice chez la souris dont la motilité a été déprimée à la suite d'un séjour bref dans une enceinte à pression réduite. Cette amélioration est importante pour les deux plus fortes doses utilisées (32 et 128 mg/kg). 3 - Anoxie asphyxique Des lots de 20 souris reçoivent le composé CRL 41 334 une demi-heure avant l'administration in trapéritonéale de 32 mg/kg de triiodoéthylate de gallamine. A la plus forte dose utilisée (128 mg/kg). le composé CRL 41 334 augmente le délai d'apparition de la mort consécutive à une anoxie provoquée par un curarisant. Le délai d'apparition des convulsions n'est pas modifié. XII - INTERACTION AVEC LE BARBITAL Une demi-heure après l'administration du composé CRL 41 334; des lots de 20 souris reçoivent une injection intrapêritonéale de barbital (220 mg/kg). Aux doses de 8, 32 et 128 mg/kg, le composé CRL 41 334 entraine une diminution importante de la durée du sommeil barbiturique. XIII - ACTION SUR LE -DESESPOIR COMPORTEMENTAL" Une demi-heure après avoir reçu le composé CRL 41 334. des lots de 6 souris (mâles. CD1, Charles River) sont placés dans un bêcher rempli d'eau sur une hauteur de 6 cm. On note la durée totale d'immobilité entre la 2éme et la 6éme minutes suivant l'immersion. Aux doses de 8, 32 et 128 mg/kg, le composé CRL 41 334 diminue la durée de l'immobilité de la souris placée en immersion forcée. XIV - CONCLUSION L'étude neuropsychopharmacologique du composé CRL 41 334 montre - un effet stimulant chez la souris hypermotilité, reprise nette de 10 activité motrice chez la souris habituée à son enceinte0 amélioration de la récupération motrice après hypoxie. antagonisme du sommeil barbiturique et diminution de l'hypomoti- lité de "désespoir". A forte dose, on note un effet sédatif bref: sédation, hypo-réactivité. hypo-agressivité, hypothermie, aggravation des hypothermies induites par la reserpine et l'oxotémorine. diminution modérée de l'effet convulsivant de l'électrochoc et du délai d'apparition de la mort consécutive à une anoxie provoquée par un curarisant. Deux heures après administration du produit, cet effet sédatif laisse place a l'effet stimulant. De plus. chez le rat, on note a forte dose des stéréotypies et une potentialisation des stéréotypies induites par l apomorphine et l'amphétamine. Cet effet stimulant ne semble se'développer qu'aprés une période de latence importante de l'ordre de 2 heures au moins. ETUDE IMMUNOLOGIQUE Réaction d'hypersensibilité retardée aux globules rouges de mouton Selon la méthode de Miller, Lagrange et Mackaness ("Immunopotentiation with BCG II modulation of the response to sheep red blood cells", Journal of the National Cancer Institute 1973, 51, 5, 1669 - 1676). Le composé à tester est administré par voie orale i des souris femelles de souche OF1 trois jours avant immunisation. Les résultats sont exprimés en pourcentage d'sugmentation du coussinet plantaire. Comoose CRL 41 334 E % d'augmenta- Doses du produit en mg/kg X tion du cous sinet (mm) 0 0,1 1 10 100 P m 9,2 10,5 10,2 10,2 14,7x @ e.s.m. Ind. Actiyité. - + 1,42 + 1,22 + 2,16 + 2,93 Ind. Actiyité 1,15 1,10 1,29 1,59 m 8,4 11,0 10,5 11,2 13,1 2 e.s.m. 1,35 1,77 1,75 1,67 1,92 Ind.Actiyité 1,31 1,25 1,34 1,56 Comoose CRL 41 335 E % d'augmenta- Doses du produit en mg/kg X tion du P. (mm) 0 0,1 1 10 100 il 8,9 11,5- 8,4' 8,9 6,9 1 + e.s.m. + # 0,92 + 1,75 + 0,63 + 2,41 +1,42 Ind.Activité 1,29 0,94 1,00 0,77 Il apparait ainsi que le composé CRL 41 334 se présente comme un produit ayant d'une part un- ac- tion anti-dépressive au niveau du système nerveux central et d'autre part une action immunostimulant-, action-qui est d'autant plus inattendue que le composé CRL 41 335 est dépourvu d'une telle action immostimulante. Le composé CRL 41 334 administré par voie orale à raison de 4 fois 50 mg par jour r donné de bons résultats chez l'homme dans le traitement des dépressions des brûlés. Les compositions thérapeutiques selon l'in- vention peuvent étre administrées å l'homme ou aux animaux par voie orale ou rectale. Elles peuvent étre sous la forme de prépa- rations solides ou semi-solides. Comme exemple. on peut citer les comprimés, les gélules, les suppositoires, ainsi que les formes-retard. Dans ces compositions, le principe actif est généralement mélangé avec un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables habituels bien connus de l'homme de l'art. La quantité de principe actif administrée dépend évidemment du patient qui est traité. de la voie d administration et de la sévérité de la maladie. REVENDICATIONS 1. Dérivés de l acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétique de formule dans laquelle Z est un groupe-NH2 ou -NHOH. 2. Le 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétamide. 3. Procédé de préparation du 2-(4,4'-difluo- ro benzhydryl thio)acétamide, caractérisé en ce que l'on fait réagir l'ammoniaque sur le chlorure de l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétique. 4. Procédé de préparation de l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétohydroxamique, caractérisé en ce que l'on fait réagir le chlorhydrate d'hydroxylamine sur l'ester méthylique de l'acide 2-(4,4'-difluoro benzhydryl thio)acétique. 5. Composition thérapeutique comprenant å titre de principe actif un composé selon la revendication 1 ou la revendication 2.