FR 2563727 A1 19851108 FR 8406937 A 19840504 La présente invention concerne un nouveau procédé de prépsrôtion du greffon de peau natif utilisé pour provoquer le régénération d'un tissu épidermique et dermioue détruit d'un individu ( humain ou mammifère ) dans les opérations de greffe de peau On sait que toute peau est formée de deux tissus répondant à une dualité embryologique: l'un est superficiel, l'épiderme de nature épithéliale ; l'autre sous jacent le derme, de nature conjonctive; l'hypoderme étant assemblable aux tissus profonds reliant- le derme aux muscles. L'épiderme, d'une épaisseur de O,1inn# à lmm, comporte luitmEme plusieurs couches : la plus profonde , en contact avec le derme, est composée d'une assise de cellules épithéliales arrangées en palissade entre lesquelles s'intercalent par endroit les prolongements cellulaires des mélanocytes dont les corps cellulaires sont dispersés sous les cellules banales. Les couches cellulaires supérieures faites de cellules polyhédriques, forment avec la couche basale, la partie dite nialpighienne de l'épiderme.Au-dessus de ces couches , on rencontre une couche granuleuse, translucide et cornée, contenant la kératine et constituant la peau morte Le renouvellement des couches cellulaires de l'épiderme est assuré à partir de la couche basale Il faut noter que l'épiderme est dépourvu de vaisseaux et que sa nutrition n'est assurée que par les liquides interstitiels situés entre derme, couche basale et cellules de la couche sous jacente. Le derme, situé sous l'épiderme, comporte une assise cellulaire lache et mince dotée de nombreuse follicules pileuses et donnant à la surface du derme son aspect irrégulier. La fonction de ces papilles où cheminent des vaisseaux dermiquee, est d'augmenter considérablement la superficie du réseau vasculaire en contact avec l'épiderme ,et d'accroitre la sensibilité aux variations de température avec l'extérieur à travers l'épiderme Sous cette assise se trouve le derme proprement dit, de structure dense, constitué essentiellement:de tissus conjonctifs réticulaires contenant une substance fondamentale riche en m::uco > polysaccharides , de fibres épaisses et résistantej constituées de fibrescollagènes Qrientées en tous sens dans des plans superposés parallèles au revêtement cutané, et des fibres élastiques richement anastomosées, Toutes ces considérations permettent d'affirmer que la peau a poui origine un tissu , le derme, innervé et vascularisé différaml nt d'un individu à autre sera caractérisé par une qualité tissulair dépendra la qualité de l'épiderme.L'innervation et la vaseularisa tion peuvent être assimilées à une programmation électrique destin à spécifier la peau en fonction de l'évolution de l'individu. Ps exemple,l'innervation permet de polariser plus ou moins négativeme la peau qui sera soumise à un champ électroosmotique et relarguera les anions toxiques au moyen des glandes sudoripares. Lorsque la peau est agressée ou brûlée, on définit l'agression au ler et 2ème degré lorsque l'épiderme est at-teint, par contre lorsque l'épiderme et le derme sont conjointement détruits ,la programmation ne peut s'installer sur les tissus qui repoussent, et cette agression dite du 3ème degré est irréparable en l'absence de greffe spontannée . Cette notion de programmation progressive permet d'affirmer que les tissus de la peau sont identiques entre eux à ltorigine de la vie ( es. peau du foetus ) et se spécifient en fonction des champs électriques sensoriels et nerveux de chaque individu. Pour respecter l'évolution de la peau et sa programmatior acquise au fur et à mesure du vieillissement de l'individu , on réalise, lors des interventions dermatologiques, des greffes de peau prélevée su; le seul tissu superficiel du territoire resté indemne de lindltidu accidenté.Ce dernier, qui représente à la fois le donneur et le receveur , subit une opération dénommée autogreffe Il faut préciser que le prélèvement , ou excision, se réalise à la fois sur l'épaisseur superficielle de la peau appelée épiderme, avec une quantité non négligeable de derme pourvu d'éléments pileux favorables à la prise de la greffe @ En effet, ces éléments pileux sont solidaires de glandes secrètant une substance protidolipidique complexe, le sébum , qui joue un grand rSle dans la nutrition des couches superficielles de l'épiderme On observe en effet que ces éléments pileux constituent les points d'accrochage de la greffe et favorisent la réussite de 1 'autogreffe. Le prélèvement est le plus souvent réalisé en découpant sur le patient des lanières étroites de peau comprenant l'épiderme et quelques éléments du derme pileux. Ces lanières sont ensuite expansées mécaniquement au moyen de petits laminoirs qui dessinent de fines incisions en forme de croix sur l'épaisseur du tissu Le tissu ainsi laminé est ensuite étiré et expansé de façon X générer un filet ajouré afin d'obtenir une surface optimale . Les fines inci-sions et l'étirage sont calculés dans le but d'obtenir un filet dont les mailles sont de dimensions inférieures à 2 cm , et compatible avec le processus de régénération.Ces filets utilisés pour réaliser les autogreffes, permettent de reconstituer sur un individu dont la surface de peau a été détruite à 5, un tissu épidermique et dermique en lui prélèvant 10B de la surface de peau restée indemne. Si l'autogreffe précédemment décrite présente une grande probabilité de réussite, les possibilités d'intervention se limitent aux individus disposant d'une surface saine encire très importante En outre, les brûlures profondes, dites du 3ème degré détruisent le système pileux du derme. Dans ce tcas, l'autogreffe précédemment décrite ne peut être pariaiteme réussie qu ' avec un individu sain faiblement accidenté La présente invention permet de pallier ces inconvénients en utilisant un tissu naissant dépourvu de spécificité et encore non programmé électriquement , prélevé par exemple sur les cordons ombilicaux du foetus des mammifères. En effet, un cordon ombilical qui relie le placenta au foetus se présente chez tous les mammifères comme un tissu - conjonctif lache , constitué-de fibres faiblement orientées et contenant dans sa substance les pédicules allantoidiens et vitilli Quel que soit , au cours du développement de l'espèce , le sort de l'allantoide ou de la vésicule ombilicale , ce sont toujours les vaisseaux situés à l'intérieur du cordon ombilical qui assurent la circulation sanguine intra-embryonnaire la vascularisation dans les zones d'échanges placentaires: Le cordon ombilical d'un mammifère ou d'un humain est donc constitué d'un tissu; conjonctif dénué de toute programmation électrique ou nerveuse servant à canaliser deux artères et la veine ombilicale. Ces trois canaux sont logés à l'intérieur du tissu: conjonctif du cordon , entre les mailles duquel se trouve une substance fondamentale et nourricière , appelée gelée de Wharton L'ensemble de tous ces éléments est enrobé et maintenu par le tissu amniotique. La longueur et le nombre des vaisseaux contenus varient considérablement selon les espèces. Par contre , le tissur conjonctif et la gelée de Wharton sont communs à toutes les espèces, et on suppose qu'ils constituent une des premières phases du tissu de la peau comprenant le derme et l'épiderse. On constate , par exemple , que les fibres de la tunique musculaire de tous les cordons ombilicaux jointes à des réactions vasomotrices externes , ont pour unique fonction celle consistant à déclancher l'oblitération spontanée de la lumière vasculaire dans les minutes qui suivent la parturition.Cette oblitération se poursuit conjointement avee la disparition de la gelée de Tarton dans le cordon Toutes ces considérations ont permis de mettre au point un nouveau procédé de traitement des tissus ombilicaux afin de les utiliser comme base d'un derme et d'un épiderme détruit La présente invention concerne à cet effet un nouveau procédé å de préparationd reffonde peau caractérisé par l'emploi et le traitement d'un tissu conjonctif natif non programmé prélevé cordon ombilical , que l'on retourne, pour le débarasser de toute artère et veine #, que l'on dilate , coupe, incise et expansqde façon à créer un filet plan qui sera -congelé dans la gelée de Wliarton , afin d'strie greffe ultérieurement , pour servir de base au derme et à l'épiderme de la peau Ce nouveau procédé présente de nombreux avantages et notamment - une grande possibilité d'intervention sur les malades quelle que soit la surface de la peau à remplacer. - une souplesse d'utilisation dans la mesure ou le tissu conjonctif d'un cordon ombilical est accepté par tous les patients quelles que soient les origines de chacun. - la possibilité de créer une banque de peau conservée basse température de congélation - un taux de réussite élevé - l'obtention d'un tissu cutané et conjonctif dont la valeur et l'identité sont semblables à celles de l'individu accepteur - une grande qualité fibroplastique - un réseau vasculaire qui s'établit rapidement entre le nouveau tissu. naissant et greffé et le tissu déjà existant L'invention sera mieux comprise grtce à l'exemple de réalisation et aux dessins-annexés qui ne sont donnés qu'à titre indicatif et non limitatif. Les figures 1 , 2 , 3 représentent le retournement et l'expansion du cordon ombilical découpé en une seule bande et transformé en filet de greffage. En se reportant à la figure 1 et suivant une caractéristiqu importante de l'invention , le cordon ombilical (1) comporte de l'extérieur vers l'intérieur un tissu. amniotique (12) , recouvert d'un tissu. conjonctif lache imprégné de gelée de Wharton (2) . A l'intérieur du cordon , on a dessiné ,les artères (10) et la veine (9) ombilicale. Dans une première étape, le cordon (1) prélevé a été obturé à Sa partie supérieure par une pince (3) de façon à créer une poche A sa partie inférieure , ce cordon a été fixé à une canule (4) au moyen d'un ligament (11) .La canule (4) comporte un orifice (8) prolongé par un conduit (5) raccordé à une source de gaz comprimé inerte et aseptisé Suivant une autre caractéristique de l'invention , ainsi qu'il est représenté à la figure 2 a le cordon ombilical (1) a subit une dilatation au moyen de l'injection d'air provenant de l'orifice (8) situé sur la canule (4) . Cette dilatation permet d'expanser le tissu conjonctif (1 ) imprégné de gelée de Wharton (2) et d'isoler la veine (9) et l'artère ombilicale (10) Suivant une caractéristique importante de l'invention , la figure 3 représente le retournement du cordon ombilical à la façon d'une manche .La canule (4) sur laquelle est fixé le cordon ombilical (1) au moyen de la brid a reçu une série de tubes emboitables (7) dont le nombre et les dimensions sont fonction de la longueur du cordon . On a ensuite enfoncé la canule (4) dans le cordon ombilical dilaté , après avoir Oté la pince obturatrice (3) . Dans son mouvement ascentionnel 2 la canule (4) poussée par les tiges guides a entrainé le retournement des tissus du cordon (i) de façon b faire apparattre la gelée de Wbarton (2) à l'extérieur La pellicule amniotique constitusnt maintenant l'intdrieur du tube ;; le retournement est pratiqué tout le long du cordon jusqu'au niveau (19) . Dans cette position a le cordon est alors débarrassé des veine(9) et artère (io) ombilicales qui apparaissent extérieurement Le cordon est ensuite fendu sur toute sa longueur et transformé en une bande de grande largeur Suivant une autre caractéristique de l'invtntion , on a représenté sur la figure 4 le traitement de la bande (1) correspondant an tissu conjonctif du cordon imprégnée de la gelée de Wharton (2) . Cette bande est introduite entre deux cylindres (13) tournant sur un axa et formant laminoir.Ces cylindres sont extérieurement rainurés de manière à former une multitude de croix (15) apparaissant en relief et générant des incisions La bande (1) du cordon ombilical et sa gelée de Wharton sont introduites entre les cylindres (13) du laminoir m#5 par la manivelle (14) . A la sortie du laminoir (13) , la bande du cordon ombilical (1) apparat sous forme d'un ruban portant une multitude d'incisions (17) en forme de croix.Après étirage , ce ruban constitue un filet qui peut titre stockt-avec sa gelée de Wharton 4 la basse température - de congélation Lorsque l'on est appelé à pratiquer une greffe de peau sur un patient qui a été brdlé au: 3e me degré g on utilise la technique suivante : la surface atteinte est débarrassée de l'épiderme et iu derme puis délimitée géometriquement .On applique ensuite sur toute la surface affectée soit un filet ptréalablement préparé la. gelée dé tUMarton tournée Vers l-a plaie soit une suspension micellaire du tissu conjonctif ombilical . Le tissu conjonctif du cordon ombilical transformé en filet est découpé suivant une surface dont les cotés (16) sont directement soudés au tissu conjonctif du derme de la peau restée saine Le tissu, conjonctif du cordon g alimenté par la gelée de Whart est innervé et vascularisé par la peau restée indemne de l'individu et génère un nouveau derme et un nouvel épiderme ayant les mêmes caractéristiques que ceux de l'individu accepteur Dans un autre mode d'utilisation on broie le cordon ombilical et la gelée ede Warton congelée à basse tempéra- ture. La poudre ainsi obtenue à la température de congélation est diluée dans du sérum physiologique aseptisé afin d'obtenir une suspension micellaire Cette gelée est applicable directement sur la plaie à cicatriser de l'individu . On peut conserver cette suspension micellaire à basse température en aJoutant I o d'oxyouinoléine. Revendication I - Nouveau procédé de préparation de greffon de peau caractérisé par l'emploi et le traitement d'un tissu conjonctif natif non programmé extrait du cordon ombilical, que l'on retourne pour le débarrasser de toute artère ou veine ombilicale, que l'on dilate, coupe. incise ou expanse au moyen d'un dispositif à canule de façon à créer un filet plan qui sera congelé dans la gelée de Warton, afin d'être greffé ultérieurement , por servir de base au derme et à l'épiderme de la peau Revendication 2 - Procédé suivant la revendication I caractérisé en ce que le moyen de récupérer un tissu conjonctif non programmé servant de baie à un derme et un épiderme nouveaux et de retourner un cordon ombilical (1) est une canule (4) qui est fixée a une extrémité du cordon, alors que l'autre extrêmité est obturée par une pince (3) Revendication 3 - Procédé suivant In revendication 1 caractérisé en ce que le cordon ombilical est expansé au moyen d'air injecté par la canule (4) au niveau (5) Revendication 4 - Procédé suivant la revendication I caractarisé en ce que le moyen de conserver et d'utiliser le tissu conjonctif d'un cordon ombilical en vue d'une greffe de peau est de le maintenir à basse température noyé dans la gelée de Warton (2). llevendi cation 5 - Procédé Suivant In revendication I caractérisé en ce que le moyen d'augmenter la surface d'utilisation du tissu conjonctif !'un cordon ombilical est de le lainer nii moyen de cylindres (li) pourvus sur l'extérieur d'empreintes (15) destinées a créer des incisions. Revendication 6 - Procédé suivant la revendication I caractérisd en ce que le moyen de transformer le tissu conjonctif d'un cordon ombilical en greffon de peau est un petit laminoir (13) doté de rouleau cannelé (15) qui transforme le tissu ombilical en un filet de grande surface Revendication 7 - Procédé suivant la revendicstion I caractérisé en ce que le greffon de peau peut être appliqué sous forme de liquida constitué de sérum physiologique contenant le tissu conjonctif transformé en particules micellaires au moyen d'un broyage à basse température