FR 2561920 A1 19851004 FR 8504647 A 19850328 La présente invention est relative à de nouvelles combinaisons de médicaments ayant un effet synergique, qui guérissent et préviennent des maladies d'origine protozoaire et bactérienne (espèces Treponema hyodysenteriae, Escheri- chia coli, Pasteurella, Salmonella, Mycoplasma,) du bétail, des veaux, des moutons, des chèvres, des porcs, des lapins et de la volaille. De plus, la présente invention concerne un procédé de préparation de ces combinaisons médi- camenteuses. On sait que les plus grandes pertes économiques observées dans l'élevage des porcs et de la volaille, sont dues à des maladies des voies gastrointestinales et des orga- nes respiratoires. Les pertes résultent non seulement de la mortalité accrue et des coûts de traitement, mais aussi des performances altérées. Des souches de type Mycoplasma jouent un grand rôle dans le cadre des troubles des voies respiratoires, mais des signes inflammatoires das à des éléments pathogènes secondai- res (par exemple les Souches Streptococcus, Staphylococcus, Pasteurella, Bordetella) sont aussi importants Des maladies des voies digestives sont généralement provoquées par la croissance excessive d'éléments pathogènes gram-négatifs dans les voies intestinales; par exemple, la plus importante est l'invasion des souches d'Escherichia coli qui produit une diarrhée et un oedème chez les porcs et une coli-septicémie chez la volaille. Le nombre de troubles gynécologiques des mères aug- mente régulièrement dans des unités à grande échelle et des troubles subcliniques des mamelles sont plus fréquents. La mastite est provoquée principalement par les souches Strap- cococcus, Staphylococcus, Escherichia coli et Corynebacterium. Des infections d'origine bactérienne et protozoaire ont été très largement traitées et prévenues avec des anti- biotiques et leurs associations. Une réduction notable des maladies infectieuses d'origine bactérienne et protozoaire, est devenue possible alors que le choix des antibiotiques s'est élargi. L'utilisation répandue des antibiotiques s'est tra- duit par le développement de souches résistantes, vis-à-vis desquelles des antibiotiques uniques sont devenus inefficaces. Pour éviter le développement de la résistance on utilise en général des antibiotiques pendant des courtes périodes de temps et ceci explique pourquoi on produit des antibiotiques toujours plus nouveaux à des coûts de plus en plus élevés. La tiamuline (le fumarate acide de 14-désoxy-14- - a2-diéthyl-amino-éthyl)-mercapto-acétoxyl!-mutiline est un antibiotique relativement nouveau dans l'art vétérinaire. On a trouvé qu'il est efficace contre certaines bactéries gram- positives, le Mycoplasma et le très important Treponema. La tiamuline est extrêmement efficace par voie orale vis à vis du Treponema hyodysenteriae (brevet britanni- que N 2 072 012), qui provoque la dysenterie du porc et contre le Mycoplasma hyopneumoniae qui provoque la pneumonie enzoo- tique (Taylor, D.J., IPVS Congress, Mexico, 1982). L'application de la tiamuline en association avec des antihelminthiques (tétramiaole, levamisole, fenbendasole, parbendasole, pipérazine et dichlorvos) a déjà été étudiée. On a aussi analysé la toxicité et lacompatibilité des combi- naisons. On ne connait jusqu'à maintenant, aucune combinaison de tiamuline avec des antibiotiques. La présente invention a pour objet de produire des combinaisons médicamenteuses d'antibiotiques connues, qui réduiront considérablement les dépenses et incluront les effets individuels de deux ou plusieurs composants de façon synergique. On utilise les antibiotiques de type aminoglycoside (streptomycine, néomycine, kanamycine, gentamycine, tobramy- cine, spectinomycine, apramycine, etc.} dans le traitement des infections aigues et chroniques des voies respiratoires, gastrointestinales et urogénitales, provoquées par des bacté- ries gram-négatives, des staphylocoques et Corynebacterium pyogenes. Cependant, la littérature indique que les anti- biotiques de type aminoglycoside sont efficaces contre des germes grampositifs également (souches staphylococcus aureus, Staphylococcus albus, Corynebacterium, espèces Aerobacter Salmonella, Proteus, Neiseria, Pasteurella). L'utilisation seule ou en association de la strep- tomycine et de la néomycine est largement répandue dans l'art vétérinaire, pour traiter des infections de diverses natures. La streptomycine seule ou en association avec la pénicilline (Stredipen inj.) est utilisée principalement pour le traitement parentéral des maladies respiratoires. L'association de la néomycine avec l'oxytétracy- cline sert au traitement de la mastite et elle est enfermée dans des capsules, disponibles pour l'application intrautérine. L'utilisation parentérale de la néomycine est limitée en raison de ses propriétés néphrotoxiques. Elle peut provoquer une azotémie et une oligurée /Deutsche Med. Wschr. 104, 1783-1787 (1979)7. La kanamycine seule ou en association avec la procaine-pénicilline, la dihydrostreptomycine, la néomycine est appliquée principalement par voie parentérale (im., iv., sc, intrautérine et intra-mammaire). La principale gamme d'activité de la tobramy- cine et de la spectinomycine, concerne les lémaents pathogènes gram-négatifs (E, coli, Proteus, Klebsieila, Pseudomonas). Elles peuvent être appliquées à la fois par voie orale et pa- rentérale. Les indications de l'apramycine sont la coli- diarrhée, l'oedème, la dysenterie porcine iAntimicrob, Chemo- ther, 3, 609-613 (1977)], la retention de la membrane foetale, la métrite, la pneumonie, le choléra de la volaille, des maladies respiratoires et la coli-septicémie de la volaille. L'apramycine est efficace dans le traitement de la mastite des vaches provoquée par des éléments pathogènes gram-négatifs et gram-positifs et elle peut être utilisée pour le traite- ment du syndrome de MMA (métrite-mastite-agalaxie) des truies. Elle exerce un effet particulièrement important sur des souches Pseudomonas d'origine mastitique. Des associations d'apramycine avec d'autres compo- sés chimiothérapeutiques ont été mises au point en raison des schémas de résistance. Une telle association est décrite dans le brevet belge N 886 765, dans lequel il est proposé des antibiotiques de type aminoglucoside {apramycine, tobramycine, nébramycine) avec des macrolides (tylosine, spiramycine, olé- andomycine) contre la colibacillose et des infections dues au Mycoplasma. La demanderesse a étudié l'effet des antibiotiques de type aminoglycoside et de la tiamuline vis à vis des souches pathogènes cultivées à partir d'animaux malades. La présente invention repose sur la constatations selon laquelle, en appliquant du fumarate acide de tiamuline en combinaison avec un antibiotique de type aminoglycoside (streptomycine, néomy- cine, kanamycine, tobramycine, spectinomycine, apramycine, gentamycine), le spectre d'activité des composants est élargi et de plus, il se développe une interaction plus qu'additive, c'est-à-dire synergique et il en résulte des concentrations antibactériennes étonnament faibles des composants. La présente invention fournit donc de nouvelles compositions antibiotiques synergiques utiles pour le traite- ment des infections respiratoires ou urinaires et de la sep- ticémie des animaux domestiques, comprenant le fumarate acide de tiamuline antibiotique et un antibiotique de type amino- glycoside ou un sel acceptable du point de vue pharmaceutique de celui-ci, selon un rapport pondérai de 5:1 à 1:5, mélangés à des supports inertes non-toxiques utilisés dans l'art vété- rinaire. L'activité synergique des combinaisons conformes à la présente invention peut être mise en évidence dans des titrages microbiologiques. Pour faciliter la compréhension, on utilise les mêmes isolats d'agents pathogènes comme organis- mes d'essai. On détermine les concentrations d'inhibition minimales (CIM) et les concentrations bactéricides minimales (CBM) de la tiamuline et des aminoglycosides. Les Tableaux suivants fournissent les données de l'étude microbiologique et prouvent la synergie. Ainsi que cela est montré dans les Tableaux, on contrôle tous les organismes d'essai à des concentrations fortement réduites, dans le cas o l'une quelconque des com- binaisons de tiamuline-aminoglycoside est mise en oeuvre. Le facteur d'augmentation de l'effet antimicrobien est de 4 à 8 fois et il peut atteindre une valeur de 200 à 400 fois in vitro. Cela signifie que le développement des souches est inhibée, même lorsque les doses sont considérablement rédui- tes. TABLEAU I Augmentation de l'activité antibactérienne d'une combinaison 1: 1 en poids de tiamuline et de streptomycine Orqanisme d'essai Tiamui'Lne Stroptomyrin e Combinaison Facteur d'aus- mentation CIM CBM CIM CBM CIM CBM Staphylococcus aureus 25 100 10 25 5 5 4-40 x E. coli (porc) 50 100 100 > 200 50 >200 2-4 x E. coli (veau). >200 >200 200 >200 50 >200 2-8 x Salmonolla typhi-murium 200 >200 50 200 50 >200 2-8 x _,,_ _ __,...,., Pamtonirolla multocida 25 25 25 25 10 25 2-5 x Ln o TABLEAU II Augmentation de l'activité antibactérienne d'une combinaison 1: 1 en poids de tiamuline et de néomycine Organisme d'essai Tiainniline Noomy.in e Combinaison Facteur d' augmentation CIM CBM CIM CBM CIM CI3M Staphylococecus aureus 2 100 10 25 1 5 1 0-50 x E. eoli (porc) 50 100 10 5 5 2-4 0 x E. coli (veau) >200 >200 >200 >200 100 200 2-4 x Salmonella typhi-muritun 200 >200 10 25 5 5 4-80 x Pasteurella multooida 25 25 1 5 TABLEAU III Augmentation de 1'activité antibactérienne d'une combinaison 1: 1 en poids de tiamuline et de kanamycine Organisme d'essai Tiamlulin.le Kanamyci.i Combina ison Facteur d' augmenta,on s CIM CBM CIM CBM CIrlM_ CBM Staphylococcus aureus 25 100 10 10 1 1 20-200 x E. coli ( PORC) 50 100 10 25 5 5 4-4 o x Co E. coli t(veau) >200 >200 >200 >200 50 100 4-8 x Salmonella typhi-murium 200 >200 25 50 1 5 20-1400 x Pasteurella multocida 25 25 5 5 TABLEAU IV Augmentation de l'activité antibactérienne d'une combinaison 1: 1 en poids de tiamuline et de tobramycine Oraanisme d'essai T.am.nl.ine Tobramycin e Combinaison Facteur d' augmentation CIM CBM CIM CBM CIM CBM Staphylococcus aurelus 25 100 200 >200 10 5 10 2-80 x Pasteurolla multocida 25 25 1.5 L 5 2-50 x Salmonella typhi-murium 200 >200 5 10 1 5 i-100 x Ln Do CDJ O o c'J X O-f0 OSS 01 SZ SZ pOO-ITuul UTI'[ettouiud x gZ OT O S 0Z0 O 00o 00 OO uTaflu-TqdXCLtlTTuuowITS i, i i i x 8-Z oo WED NID WED NID O NIJ uoTw;u etu Bne __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ __ _ _ _ p. l:nOe. uosTttUl:ilmODGu.Touou.!oodSa uT rmuuT FL ssot, awsTu!lO 9uTD7WoMqWJBds ap la auTInureI ap spTod ue I: I uosTvuTqtuoo aun,p auuaTeaUDqTque 9:ATTDoI ap uoTuauquebnV A QfVIEV1 TABLEAU VI Augmentation de l'activité antibactérienne d'une combinaison 1: 1 en poids de tiamuline et d'apramycine Orqanisme d' essai Tiumulline ApranlYci-ne Combinaison Facteur d' augmentation CIM CB- CIdM CBM CIM CBM Staphylococcus aureuqs 2 Ol25100 10 1 5 10-50 x _..ol (.rc.50 __. E. col (porc) 50 100 25 25 5 10 5-20 x coli reau) >200 >200 >200Z >200 5 10 40-80 x Salllono].la typl:[-mLuriLu 200 > 200 10 10 5 4 -80 X Pastouroila multooidt 25. 25 10 25 TABLEAU VII Augmentation de l'activité antibactérienne d'une combinaison 1: 1 en poids de tiamuline et de gentamycine Orqanisme d'essai Tiamul:Lne Gentamyc:ine Combinaison Facteur d' augmentation CIM CBM CIM CBM CIM CBM Staphylococcus aureus 25 100.0.5 5 200 "200 5 5 5 5 2-80 x _ -- Salmonella typhi-murium 200 '200 5 5 5 5 2-80 x Pasteurella multocida 25 25r Les préparations de la présente invention peu- vent être appliquées à des doses inférieures et plus économi- ques, grace à leurs propriétés synergiques. Comme la gamme du spectre d'activité est élargie, des combinaisons peuvent être utilisées avec profit pour traiter des maladies respiratoires et gynécologiques dues au mycoplasma et des complications bactériennes secondaires. Les combinaisons conformes à la présente inven- tion offrent un autre avantage en ce que la possibilité d'un développement d'effets secondaires toxiques est réduite, ainsi que la période d'arrêt nécessaire pour empêcher la présence de résidus médicamenteux dans les tissus comestibles. Ces avantages découlent des doses réduites dBaminoglycosides dans les combinaisons. Les préparations conformes à la présente inven- tion peuvent être produites selon des techniques connues, c'est-à-dire que les ingrédients actifs sont mélangés ou dissous dans des supports utilisés dans l'art vétérinaire. La formulation de la préparation est choisie en fonction du cas donné. Elle peut être appliquée par voie orale, mélangée à la nourriture ou à l'eau de boisson, prin- cipalement dans des unités de grande dimension, ou par voie parentérale pour un traitement individuel ou de masse. L'application parentérale peut être intra- musculaire, intrautérine ou intra-mammaire. La préparation à usage parentéral est répandue sur un support, de préférence du lactose, selon un rapport pondéral de 1:1 à 1:50, puis elle est dissoute dans un solvant convenable, de préférence de l'eau, du diméthylformamide ou une huile végétale, selon un rapport pondéral de 1:1 à 1:25. Une dose orale de mg/kg de poids corporel de cette combinaison de fumarate acide de tiamuline et d'un antibiotique de type aminoglyco- side, convient pour la prévention et le traitement de la gastroentérite provoquée par des agents gram-négatifs. On peut obtenir des effets favorables avec des préparations administrées par voie orale dans des cas d'in- fection par 1'E. coli, Klebsiella et Salmonella également. La préparation administrée par voie i.m. à dose de 10 mg/kg de poids corporel peut servir à guérir une bronchopneumonie et des infections dues aux Pasteurellosis, listeriosis et staphylococcus chez toutes les espèces d' animaux. Une dose de 5,0 g/animal donnée par voie intrautérine peut servir à la prévention de la métrite consé- cutive au vélage ou à la guérison de la rétention de la membrane foetale. Une dose de 0,5 g d'ingrédient/pis, perfusée par voie intra-mammaire, prévient non seulement la mastite due aux bactéries gram-positives et gram-négatives, mais aussi d'origine mycoplasmique. Outre les dispositions qui précèdent, l'inven- tion comprend encore d'autres dispositions qui ressortiront de la description qui va suivre. L'invention sera mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé, objet de la présente invention. il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples de mise en oeuvre sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne cons- tituent en aucune manière une limitation. Exemple 1 On met 2,5 g de fumarate acide de tianauline et 2,5 g de sulfate de streptomycine dans une capsule intra- utérine. On introduit une capsule par jour dans l'utérus des vaches. vaches sont traitées immédiatement après le vélage. Il apparaît une rapide involution et l'arrêt de l'épanchement utérin dans les 24 heures. Exemple 2 On dissout 0,1 g de fumarate acide de tiamu- line et 0,5 g de sulfate de néomycine dans 10 ml d'eau distillée pour injection. Cette solution est perfusée par voie intra- mammaire, une fois par jour par le canal du trayon dans un pis soigneusement vidé de son lait. Cinq vaches laitières souffrant de mastite sont traitées avec 10 ml de cette préparation pendant 3 jours. L'antibiotique est perfusé dans la mamelle par le trayon. L'état clinique et la sécretion sont devenus normaux. Le résul- tat de l'examen microbiologique est négatif. Exemple 3 On dissout 1,0 g de fumarate acide de tiamu- line et 0,2 g de sulfate de kanamycine dans 10 ml d'eau pour injection. Cette solution est injectée par voie intramus- culaire une fois par jour à la dose de 1 ml par 10 kg de poids corporel. On traite pendant 3 jours par voie intramuscu- laire 15 porcelets sevrés (poids corporel moyen: 12 à 15 kg) souffrant de dermatite pyogénique. La peau des animaux est guérie une semaine après le dernier traitement et les croutes ont disparu. Exemple 4 On homogénéise 200,0 g de fumarate acide de tiamuline, 100,0 g de sulfate d'apramycine et 700,0 g de lac- tose, puis on dissout 0,2 g de la préparation dans 1 litre d'eau de boisson des animaux. Le traitement est poursuivi pen- dans 5 jours. 350 pourceaux, souffrant de dysenterie porcine, sont traités avec la préparation dissoute dans l'eau de bois- son. Les animaux acceptent facilement l'eau traitée avec le médicament. Les signes de "diarrhées sanglants" disparaissent le deuxième jour, et l'état clinique des animaux devient normal le quatrième jour du traitement. Exemple 5 On homogénéise 1600,0 mg de fumarate acide de tiamuline, 400,0 mg de sulfate de gentamycine et 3000,0 mg de lactose. On dissout 5 g de la préparation soluble dans l'eau ainsi obtenue, dans 100 ml d'eau du robinet. porcelets dans 5 cochonnes sont infectés par la diarrhée due à E. coli. On applique par voie orale à ces porcelets, une dose de 0,5 ml/kg de poids corporel de la solution ci-dessus à l'aide d'une seringue sans aiguille. Tous les porcelets deviennent en bonne santé après un traite- ment. Exemple 6 On homogénéise 300,0 mg de fumarate acide de tiamuline et 100,0 mg de sulfate de tobramycine dans 10,0 ml d'huile pour injection. vaches laitières souffrant de mastite d'ori- gine infectieuse mélangée (Straptococcus, Pseudomonas), sont traitées avec cette préparation, perfusée dans la mamelle complètement vidée de son lait, par le trayon, une fois par jour. La mamelle et le lait deviennent normaux. On ne détecte aucun agent pathogène dans des échantillons de lait recueillis une semaine après le dernier traitement. Exemple 7 On homogénéise 20;0 g de fumarate acide de tiamuline et 10,0 g de spectinomycine, dans 70,0 ml d'huile pour injection. 24 veaux souffrant de diarrhée due à E. coli sont traités par voie intramusculaire avec cette préparation, à la dose de 1 ml/10 kg de poids corporel pendant 3 jours. La diarrhée disparait après la première injection et la consom- mation de lait augmente. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'in- vention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; elle en embrasse au con- traire toutes les variantes qui peuvent venir a l'exprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée de la présente invention. REVENDICATIONS 1. Composition antibiotique synergique utile pour le traitement des infections respiratoires ou urinaires et la septicémie des animaux domestiques, caractérisée en ce qu'elle comprend le fumarate acide de tiamuline antibiotique et un antibiotique de type aminoglycoside ou un sel accepta- ble du point de vue pharmaceutique de celui-ci, en un rapport pondérai de 5:1 à 1:5, mélangés avec des supports inertes, non-toxiques utilisés dans l'art vétérinaire. 2. Composition suivant la revendication 1, carac- térisée en ce que l'antibiotique de type aminoglycoside est choisi dans le groupe comprenant la streptomycine, la néomy- cine, la kanamycine, la tobramycine, la spectinomycine, l'apramycine et la gentamycine. 3. Composition suivant la revendication 1 pour le traitement de la mastite, caractérisée en ce qu'elle comprend la composition antibiotique en une quantité de 150 à 500 mg/ pis. 4. Composition suivant la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle comprend la composition antibiotique en une quantité de 2,5 à 5,0 mg/kg de poids corporel, pour l'application intrautérine. 5. Composition suivant la revendication 1, carac- térisée en ce que le support est du lait en poudre. 6. Composition suivant la revendication 5, carac- térisée en ce que les ingrédients actifs et le lait en poudre sont utilisés en un rapport pondérai de 5:1 à 1:5. 7. Composition suivant la revendication 1, carac- térisée en ce qu'un diluant liquide acceptable du point de vue pharmaceutique, de préférence de l'eau, des huiles végéta- les ou du diméthylformamide, est utilisé comme support. 8. Composition suivant la revendication 7, carac- térisée en ce que les ingrédients actifs et le diluant liquide sont utilisés en un rapport pondérai de 1:10 à 1:25. 9. Procédé de préparation d'une nouvelle composi- tion synergique antibiotique utile pour le traitement des infections respiratoires et urinaires et de la septicémie des animaux domestiques, caractérisé en ce qu'on mélange le fumarate acide de tiamuline antibiotique avec un antibiotique de type aminoglycoside ou un sel acceptable du point de vue pharmaceutique de celui-ci, en un rapport pondérai de 5:1 à 1:5 et avec des supports inertes, non-toxiques utilisés dans l'art vétérinaire. 10. Procédé suivant la revendication 1, caracté- risé en ce que l'antibiotique de type aminoglycoside est choisi dans le groupe comprenant la streptomycine, la néo- mycine, la kanamycine, la tobramycine, la spectinomycine, l'apramycine et la gentamycine.