FR 2566661 A1 19860103 FR 8508960 A 19850613 La présente invention concerne une méthode pour dissoudre la griseofulvine et la formulation de solutions chimiquement stables et biologiquement actives pouvant servir à traiter des mycoses superficielles chez l'homme et l'animal. La griseofulvine fût isolée pour la première fois en 1939 par Oxford et ses collaborateurs à partir de Penicillium griséofulvine, mais elle a été écartée car elle n'offrait pas le degré voulu d'activité antibactérienne que l'on pouvait espérer des divers derivés de la pénicilline que l'on étudiait à cette époque. En 1947, c'est-à-direhuitannéesplus tard, Brian signale dans la littérature une substance qu'il a isolée de Penicillium janczewski, substance qu'il appelle facteur de "vrillage" du fait qu'elle conduit à un develop pement anormal d'hyphes fongiques, c'est-à-dire que les hyphes se rident et se recroquevillent sous l'effet de cette substance. Par la suite, Grove et McGowan ont montre qu'en ce qui concerne ce facteur de "vrillage" et la griséofulvine, il s'agit de la même substance. Une fois identifiée, la griséofulvine a pris un nouvel intérêt, et dans les années suivantes elle a été très largement employée contre des mycoses de plantes telles que tomates, haricots et champignons, ainsi que pour le traitement d'infestations du bétail par la teigne tonsurante (Goldman et al. "Current Status of Griseofulvin, Report on One Hundred Seventy-five Cases" J.A.M.A. 11-4:532 (1969). La griséofulvine a montré son efficacité dans le traitement d'infections fongiques, aussi bien de végétaux que d'animaux, ce qui a conduit des chercheurs comme Gentles et ses collaborateurs à étudier son utilisation pour le traitement chez l'homme d'infections alors pratiquement intraitables de la teigne tonsurante. Gentles a pu récupérer du poil de cobayes de la griséofulvine qui avait été donnée par voie orale, ce qui prouve sa thèse que cette substance est prise de l'appareil gastro-intestinal et s'incorpore dans de nouvelles cellules. Cette découverte a ouvert la voie à une très large expérimentation humaine (voir Goldman ci-dessus). Après ces première études, de très nombreux résultats scientifiques ont été rassemblés, concernant à la fois le mode d'action et l'efficacité thérapeutique de la griséofulvine dans le traitement de mycoses. La griséofulvine, administrée par la voie orale, a été alors à la base de la thérapeutique dominante pour de nombreuses formes d'infections fongiques, et ceci bien que d'excellents résultats aient été obtenus et signalés, d'une manière très claire et bien documentée, concernant l'efficacité de la griséofulvine appliquée localement. On peut consulter à ce sujet Goîdman et aL "Topical Griseofulvine Therapy of that which is called Tinea Pedis", ACTA DERMATO-VENEREOLOGICA, 39:454 - 460 (1959) ; Arthur G. Knight, "The Activïty of Various Topical Griseofulvin Preparations and the Appearance of Oral Griseofulvin in the Stratum Corneum", British J. Dermatology 91/49 - 55 (1974) ; H.Abdel Aal-et al, "Topically Applied Griseofulvin in the Treatment of Superficial Dermatomycosis in Egypt, J. Int'l. Med. Res. 5:382 - 386 (1977 ; Wozniak et al, "Griselfulvin-salbenbehandlung superficieller trichophytien", Mykosen 13:(9)427434 (1970 ; Epstein et al, "Topically applied Griseofulvin in Prevention and Treatment of Trichophyton Mentagarophytes", Arch. Dermatology 111:1293 - 1297 (1975) ; Zarowny et al, "Evaluation of the Effectiveness of Griseofulvin, Tolnaftate, and Placebo in the Topical Thearapy of Superficial Dermatophytoses", J. Invest. Dermatology 64:268 - 272 (1975) ; Post and Saunders, "Topical Treatment of Experimental Ringworm in Guinea Pigs with Griseoftlvin in Dimethylsulfoxide", Can. Vet. J. 20:45 - 48 (1979). Mais le fait étrange reste qu'après toute la littérature sur la griséofulvine topique, qui prouve pratiquement qu'elle est tout aussi efficace, et même dans certains cas plus efficace, que la griséofulvine administrée par voie orale, cette dernière forme de traitement demeure à peu près la seule forme disponible. On prétend parfois que cette hésitation à appliquer localement la griséofulvine résulte d'indications de la littérature telles que celles publiées par Cartwright dans le "British Medical Journal" en 1978, dans un compterendu sur des antifongiques qui dit : "la griséofulvine est inactive quand elle est appliquée localement". (Cartwright, "Use of Antibiotics, Antifungals, British Med. J. 2:108 - 111 (1978)). Cette conception et les résultats d'essais contradictoires semblent être dus principalement aux difficultés que l'on rencontre quand on veut préparer une solution de griséofulvine pour traitements locaux traitements topiques) qui soit chimiquement stable et douée d'activité biologique. Il est généralement connu que la griséofulvine n'est que peu soluble dans l'alcool, le chloroforme, le diméthylsulfoxyde, le diméthylformamide et l'acétone, et que du fait de sa forte nature hydrophobe, elle est pratiquement insoluble dans des solvants polaires. Si certains acides organiques comme l'acide succinique peuvent mieux la dissoudre, la plupart de ces solvants organiques irritent les tissus et ils ne sont donc pas biocompatibles. Bien que l'on en ait préparé des émulsions avec des huiles vététales et des émulsionnants, dans de nombreux cas ces méthodes connues ne garantissent pas que la griséofulvine soit en solution et elle peut se trouver en suspension, de faibles traces de matières cristallisées agissant alors comme agents de nucléation .(c'est-à-dire de cristallisation) et entralnant ainsi une précipitation rapide de cette substance. Comme aussi bien la forme solide que la forme microcristalline sont inactives quand elles sont appliquées localement, cela peut conduire à des préparations pouvant perdre rapidement leur action antifongique à mesure que la griséofulvine précipite. Il est très probable que cela ait entraîné les contradictions dans les résultats expérimentaux, et un manque de confiance dans l'emploi de la griséofulvine comme agent topique. Comme il a été dit précédemment, la griséofulvine est l'un des agents antimycosiques les plus largement utilisés. Elle est presque exclusivement donnée par la voie orale, et l'abondante littérature à cet égard ne sera pas passée en revue ici car on peut facilement la trouver dans des textes courants tels que ceux de Goodman et Gilman (L.S. Goodman and A. Gilman, "The Pharamacological Bases of Therapeutics", 4ème édition, The MacMillan Co. pp 1302 - 1304 (1970). Ses effets secondaires sont nombreux et SOil emploi est contre-indiqué pour des patients souffrant de troubles gastriques ou dont le foie fonctionne mal, ainsi que chez les femmes enceintes (Physician's Desk Reference, 35ème Ed. pp. 1600 - 1601 (1981)). Les conséquences exactes de l'action antimitotique de la griséofulvine ne sont pas encore claires, et elle a été soupçonnée d'être cancérigène chez les animaux et de nuire aux fonctions de la moelle osseuse. a) Griséofulvine topique Les indications de Grant-Peterkin (cités par Goldman, supra) selon lesquelles la griséofulvine, malgré sa grande efficacité quand elle donnée par la voie orale, et de Pardo-Castello et al, Bilo. Soc. Cubana Dermatol. 16:1 (1959), d'après qui la griséofulvine est inefficace quand elle est appliquée localement, ont découragé les premiers travaux sur les emplois topiques de cette substance. En 1969, Goldman et al, supra, ont préparé une lotion de griséofulvine pour applications locales, lotion contenant environ 1,5 z de griséofulvine en suspension dans une huile avec des agents surfactifs, un stabilisant et de l'urée. Cette application topique a été essayée sur 91 malades atteints de teigne de la tête, du corps, de la cuisse et des pieds par T. rubrum, T. mentagrophytes et M. audonini, et la plupart de ces patients ont été totalement débarrassés de leurs infections. Ces études furent suivies d'un travail de Wozinak et al, supra, qui ont utilisé une pommade contenant 1,0 g de griséofulvine mélangée avec 0,6 g d'huile de ricin et 0,6 g d'acide salicylique dans 20 g d'une matière de base variable pour qu'elle soit adaptée aux besoins des patients. Plusieurs cas courants d'infections de la peau par le trichophyton ont été traités avec cette pommade, et toutes les infections ont été guéries en 4 à 6 semaines. En 1975, Epstein et ses collaborateurs ont dissous de la grîséofulvine dans divers solvants (DMSOf trichloroéthanol, alcool et un mélange d'éther et d'acétone) et ils ont conclu que la griséofulvine appliquée localement "peut se montrer utile pour la prévention d'infections fon- giques superficielles" (Pestein et al, supra). Egalement en 1975, Zarowny et al ont évalué l'efficacité d'une formule topique contenant 2 % de griso- fulvine micronisée, appliquée 3 fois par jour pendant 3 semaines à des malades atteints de dermatophytoses superf i- cielles, et une étude parallèle en double insu a été entre prise pour comparer cette formule à une thérapeutique ordi- naire (crème de tolnaftate à 1 %) ainsi qu'à une pommade placebo, l'une des 3 préparations étant donnée au hasard à un total de 52 personnes. Treize des quine personnes traitées avec la pommade placebo ont été estimées ne pas répondre au traitement. Neuf des dix huit personnes traitées avec la griséofulvine, et neuf des dix neuf traitées avec le tolnaftate, ont répondu au traitement.La réponse clinique semble être en relation avec la gravité de l'infection plutôt qu'avec l'emplacement anatomique des lésions. Les résultats obtenus suggèrent que la griséofulvine peut être efficace à la suite d'une application locale, et ils montrent l'intérêt de contrôles positifs et négatifs quand on évalue l'action d'agents antifongiques topiques. En 1979, Abdel-Aal et ses collaborateurs ont évalué 155 patients souffrant de T. Capitis, T. Corporis, T. Cruris et T. Versicolor, en participation à des études sur la griséofulvine appliquée localement. Ils ont préparé des pommades du médicament à diverses concentrations, dans un solvant contenant du monostéarate de glycérol, du laurylsulfate de sodium, du diméthylacétamide et de l'hydroxy-anisole butylé, la griséofulvine étant ajoutée aux teneurs de 1,2 et 3 %. De bons résultats ont été obtenus avec la préparation à 2 % dans les cas de T. Corporis, T. Cruris et T. Versicolor, mais aucun résultat dans les cas de T. Capitis, et aucun effet secondaire n'a été observé avec cette préparation à 2 %. L'opinion des auteurs est que la griséofulvine appliquée localement dans ce nouveau solvant se montre sûre et très efficace dans le traitement de dermatomycoses superficielles. En 1979 également, il a été signalé par Post et Saunders que l'application topique de 1,5 * de griséofulvine dans du diméthylsulfoxyde pendant 5 à 7 jours constituait un traitement satisfaisant de la teigne tonsurante expérimentale chez le cobail. En ce qui concerne les brevets existants qui portent sur une méthode de dissolution de la griséofulvine pour applications locales, on a trouvé les brevets suivants. Le brevet US 3 450 718 (Kuljbakh et al) concerne une méthode de purification de la griséofulvine brute, mais on obtient une griséofulvine antibiotique quand on utilise du chlorure de méthylène comme solvant pour faire cristalliser le produit brut. Le brevet US 3 467 680 (Kuljbakh et al) concerne une méthode pour isoler la griséofulvine brute, avec ici encore l'emploi de chlorure de méthylène pour extraire la griséofulvine. Le brevet US 3 109 849 (Walker et al) concerne lui-même un procédé de préparation d'analogues de la griséofulvine et il indique que la réaction fondamentale se fait en présence d'un solvant tel qu'un hydrocarbure aromatique, les hydrocarbures indiqués et revendiqués dans ce brevet pouvant être le benzène et le toluène, des cétones et des agents d'halogénation. Le brevet US 3 147 282 (Slates et al) concerne la synthese de la griséofulvine et d'analogues de cette substance, et il indique spécialement que la griséo- fulvine et ses analogues peuvent être synthétisés par voie chimique. Le brevet US 3 090 791 (Brossi et al) concerne la synthèse de la griséofulvine et comprend l'emploi de solvants tels que le méthynol, le benzène ou le dioxine. Le brevet US 3 102 123 (Clark et al) concerne des analogues de la griséofulvine et indique un certain nombre de solvants pour leur emploi avec la- griséofulvine, qui sont des hydrocarbures tels que le benzène et le toluène, des cétones comme l'acétone et la méthyl-éthyl-cétone, ainsi que des esters comme l'acétate d'éthyle. Le brevet US 3 734 931 (Newman et al) concerne des composés de la griséofulvine, et il mentionne spécialement que ces composés sont particulièrement solubles dans des solvants organiques tels que le chlorure de méthylene, le chloroforme, le benzène et le toluène. Les autres brevets ci-dessous concernent tous d'autres composés et procédés qui ont en commun un ou plusieurs des éléments ou étapes de la présente invention, mais aucun d'entre eux ne semble meilleur d'une manière quelconque que les références que l'on vient d'indiquer. Ces autres brevets sont les brevets US nO 3 557 151 ; 3 518 283 3 816 472 ; 3 152 150 t 3 029 185 ; 3 325 362 , 3 313 827 3 467 678. DESCRIPTION DU MODE D'EXECUTION PREFERE DE CETTE INVENTION Comme il a été dit ci-dessus, la présente invention concerne une méthode pour dissoudre la griséofulvine en vue de préparer une solution de griséofulvine pour applications locales qui soit chimiquement stable et douée d'activité biologique , solution pouvant etre employée pour le traitement chez l'homme et l'animal de mycoses superficielles. Dans un mode d'exécution préféré de la présente invention, on dissout la griséofulvine solide dans un solvant choisi parmi l'eugénol, le méthyleugénol, l'acétyleugénol, I'isoeugénol et le dihydrodieugénol. Pour que la griséofulvine soit plus soluble il est préférable qu'elle soit sous une forme microcristallisée. La dissolution doit aussi se faire à la température ambiante, et l'on doit doucement agiter la solution jusqu'à ce que l'on ait atteint le point de saturation, soit environ 10 % de griséofulvine à la température ambiante. On filtre ensuite la solution par une méthode quelconque connue pour en éliminer la griséofulvine microcristalline non dissoute, car s'il n'est pas nécessaire de procéder à cette élimination, la littérature indique que la griséofulvine à l'état solide est inefficace dans des applications locales. On peut finalement conserver jusqu'à son emploi la solution filtrée contenant-la griséofulvine dissoute, dans des récipients qui seront de préférence opaques à la lumière, par exemple dans des flacons en vene foncé. Dans un autre mode d'exécution préféré de l'invention, on peut également dissoudre la griséofulvine microcristallisée, pour former une solution chimiquement stable et biologiquement active, dans une huile (essence) naturelle contenant de l'eugenol, choisie parmi les essences de caleu, d'anis japonais, de laurier, d'asaret, de calamus, de camphre, de champaca, de cannelle, de patchouli, de piment et de sassafras. D'autres essences d'origine naturelle contenant de lteugénol peuvent encore être employées dans ce procédé pour dissoudre la griséofulvine microcristallisée. Un autre mode d'exécution également préféré de la présente invention est la production d'une crème contenant de la griséofulvine, crème qui est préparée avec la solution ci-dessus par les opérations supplémentaires suivantes. On mélange la solution filtrée ci-dessus avec une base telle que par exemple, sans limitations, de la vaseline, de la lanoline, de la paraffine ou une huile minérale, puis on mélange bien pour obtenir une crème homogène. L'exemple particulier qui suit illustre la présente invention, sans aucunement en limiter la portée. EXEMPLE On dissout de la griséofulvine microcristallisée dans de l'eugénol, ainsi qu'il a été dit plus haut, puis on mélange un échantillon de 10 ml, à 10 g en volume de griséofulvine en solution, avec 65 ml dune solution à 3 % d'acide salicylique dans de l'éthanol à 70 % et 35 ml de glycérol. La solution ainsi obtenue se montre à la fois chimiquement stable et biologiquement active dans le traitement d'infections fongiques. REVENDICATIONS 1. Une méthode de préparation d'une solution de griséofulvine chimiquement stable et douée d'activité biologique, méthode selon laquelle on dissout la griséofulvine solide dans un solvant choisi parmi l'eugénol, le méthyleugénol, l'acétyleugénol, I'isoeugénol et le dihydrodieugénol. 2. Méthode selon la revendication 1 dans laquelle la griséofulvine est sous une forme microcristallisee. 3. Méthode selon la revendication 2 dans laquelle la dissolution de la griséofulvine se fait à la température ambiante. 4. Une méthode de préparation d'une solution de griséofulvine chimiquement stable et douée d'activité biologique, méthode selon laquelle on dissout la griséofulvine solide dans une huile (essence) naturelle contenant de l'eugénol. 5. Méthode selon la revendication 4 dans laquelle on dissout la griséofulvine solide dans une essence naturelle contenant de l'eugénol, choisie parmi les essences de caleu, d'anis japonais, de laurier, d'asaret, de calamus, de camphre, de champaca, de cannelle, de patchouli, de piment et de sassafras. 6. Méthode selon la revendication 5 dans laquelle la griséofulvine est sous une forme microcristallisée. 7. Méthode selon la revendication 6 dans laquelle la dissolution de la griséofulvine se fait à la température ambiante. 8. Méthode selon la revendication 1 dans laquelle on agite ensuite doucement la solution formée puis on la filtre pour en éliminer la griséofulvine microcristalline restante (non dissoute), et on conserve la solution filtrée dans un récipient opaque à la lumière. 9. Méthode selon la revendication 8 dans laquelle on mélange ensuite la solution filtrée avec une base choisie parmi la vaseline, la lanoline, la paraffine, et une huile minérale pour en former une solution intermédiaire, solution que l'on chauffe et que l'on mélange pour obtenir une crème homogène.