FR 2543546 A1 19841005 FR 8404845 A 19840328 35 X 6 La présente invention est relative à de nouveaux dérivés de gonadoréline ("gonadolibérine"), représentés par la formule générale (I) ci-après: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-X -Leu-Arg-Pro-Y (I) à leurs sels d'addition formés avec des acides utilisables du point de vue thérapeutique et à leurs complexes, ainsi qu'à des compositions pharmaceutiques les contenant Dans la formule générale (I): X représente un groupe -O-R, (dans lequel R est un groupe benzyle ou alcoyle en C 14), un groupe -"Rl (dans R 2 lequel R 1 et R sont indépendamment un atome d'hydrogène, 1 2 un groupe alcoyle en Clà 5, aryle, aryl-alcoyle (en Clà 2) ou bien, ils forment conjointement avec l'atome d'azote adjacent un groupe morpholino, 1-indolinyle ou 1-pyrro- lidinyle, ou le groupe C 3 _ 6 cycloalkyle. Y est un groupe glyciné-amide ou alcoyl (en C 14)-amide. Les abréviations utilisées dans la-formule sont identiques à celles de la nomenclature acceptée dans la chimie des peptides, qui est décrite par exemple, dans J Biol Chem 241, 527 ( 1966); 247, 977 ( 1972)/ D'autres abréviations utilisées dans cette spécification, sont les suivantes: EA = groupe éthylamino; DEA = groupe diéthyla- mino; CBA = groupe cyclobutylamino; FRA = groupe ( 1,1- diméthyl-2-phényl)-éthylamino; IND = groupe 1-indolinyle; PIR = groupe 1pyrrolidinyle, ANI = groupe phénylamino; BOC = groupe butyloxy-carbonyle. La'"gonadolibéirne"(autres noms connus dans la littérature: hormone libérant les hormones gonadotropes, Gm RH, LH-RH, hormone lutéinisante et folliculostimulante, LH/FSH-RH, et ses dérivés connus, présentent une propriété générale, en ce qu'ils sont capables de libérer l'hormone lutéinisante (LH) et l'hormone folliculostimulante (FSH). 254-35 6 On sait, d'après la littérature (M Monahan et coll Biochemistry 12, 4616-4620 ( 1973); J Sandow et coll. Control of Ovulation, Butterworths, London, 1978, pp 49-70), que les dérivés de la"gonadolibérine qui contiennent en position 6, à la place d'une partie glycine, des acides aminés de configuration D ou les dérivés de ceux-ci et de plus, les dérivés dans lesquels la partie glyciné-amide en position 10 est remplacée par des groupes amides avec une chaîne carbonée aliphatique (M Fujino et coll, J Med. Chem 16, 1144 ( 1973)), exercent un effet biologique plus élevé et de plus longue durée par rapport à celui de la "gonadolibérine",Contrairement à ceci, on sait également que les dérivés de la"gonadolibérine"contenant un acide aminé de configuration L en position 6, comme la L-alanine, la L-proline, la Lvaline (Monahan et coll, Biochemistry, 12, 4616 ( 1973)), la L-isoleucine (D Coy et coll J Med Chem. 16, 1140 ( 1973)), ou bien des acides amines n'ayant aucun centre d'asymétrie, comme l'acide gamma-amino butyrique, la e-alanine (J River et coll, Peptides: Chemistry, Structure, Biology, Ed R Walter, J Meienhofer, Ann Arbor Science Publishers Inc, Michigan, p 803 ( 1975)) ou la sarcosine (W Arnold et coll J Med Chem 17, 314 ( 1974)) ne présentent qu'une activité minimum Un cycle gamma- lactame spécial de configuration L se révèle constituer un substituant en position 6 efficace du point de vue biologique en ce qui concerne seulement la libération de LH (Veber et coll, Science 210, 656 ( 1980))o La présente invention a pour objet de fournir de nouveaux dérivés de la"gonadolibérine"qui exercent un effet plus avantageux que celui des analogues connus. La présente invention repose sur la constatation que dans le cas o l'acide L-aspartique est placé par l'in- termédiaire de son groupe e-carboxyle en position 6 de la chaîne peptidique de la 'onadolibérine'et qu'en même temps, son groupe alphacarboxyle est laissé libre ou fixé à un groupe d'atomes relativement petit, les dérivés de gona- dolibérine ainsi obtenus exercent un effet biologique sem- blable ou même supérieur à celui que présentent les dérivés de'gonadolibérine"contenant un D-acide aminé en position 6. Les composés de formule générale (I) peuvent être préparés de la façon suivante: a 1) un tétra ou pentapeptide représenté par la formule générale (II) ci-après, H-Aïp-X L Leu-Arg-Pro-Y (II) o X et Y sont tels que définis plus haut, est condensé avec l'azide de pentapeptide représenté par la formule Glp-His-Trp-Ser-Tyr-N 3, ou a 2) un hexapeptide représenté par la formule générale (III), ci-après, E Glp-His-Trp-Ser-Tyr- sp-X (III) o X est tel que défini plus haut et E est un groupe hydroxy azide ou N-succinimide-oxy ou un groupe phénoxy éventuelle- ment substitué avec un groupe nitro ou un ou plusieurs atomes d'halogène, de préférence un groupe p-nitro, 2,4,6-trichlo- rophénoxy, pentachlorophénoxy ou pentafluorophénoxy, est condensé avec un tri ou tétrapeptide représenté par la formule générale (IV) ci-après: HLeu-Arg-Pro-Y (IV) o Y est tel que défini plus haut, ou a 3) pour préparer des composés de formule générale (I) dans laquelle un groupe glyciné-amide se trouve sur le C-terminal de la molécule, de la BOCglycine est couplée à une résine de polystyrène-divinylbenzène chloro- méthylée contenant 1 à 3 %, de préférence 2 %, de réticula- tion, puis le groupe BOC est détaché des composés de formule (V) ainsi obtenus: BOC-Gly-O-CH 2-polymère (V) et à partir du C-terminal, des aminoacides ayant des groupes protecteurs sont couplés selon une séquence appropriée au peptide-polymère par répétition périodique des opérations de coupure et de couplage, puis le peptide terminé est détaché à partir du peptide-polymère par ammonolyse et les groupes protecteurs sont éliminés par ammonolyse suivie d'un trai- tement avec l'acide fluorhydrique, ou a 4) pour préparer des composés de formule générale (I) dans laquelle un groupe glycine-amide est sur le C-terminal de la molécule, la BOC-glycine est associée à une résine de polystyr ène- divinylbenzène contenant des groupes benshydryl-amino et 1 à 3 %, de préférence 2 % de réticulation et le groupe BOC est détaché à partir du composé de formule (VI) ci-après, BOC-Gly-NH-CH-polymère C 65 ainsi obtenu, ensuite, à partir du C-terminal, des amino- acides pourvus de groupes protecteurs sont couplés en une séquence appropriée au peptide-polymère par répétition périodique des opérations de coupure et de couplage, puis le peptide terminé est détaché du peptidepolymère et les groupes protecteurs sont éliminés par traitement avec de l'acide fluorhydrique, ou a 5) pour préparer des composés de formule générale (I) dans laquelle un groupe -Pro-Y se trouve sur le C-terminal de la molécule, o Y est tel que défini plus haut, de la BOC-proline est attachée à une résine de poly- styrène-divinylbenzène chlorométhylée contenant 1 à 3 %, de préférence 2 % de réticulation, et le groupe BOC est détaché du composé de formule (VII) ci-après, BOC-Pro-O-CH 2-polymère (VII) ainsi obtenu, puis à partir du C-terminal, les aminoacides pourvus de groupes protecteurs sont couplés en une séquence appropriée au peptide-polymère par une répétition périodique des opérations de coupure et de couplage et le peptide déterminé est détaché à partir du peptide-polymère par aminolyse et les groupes protecteurs sont éliminés par trai- tement avec l'acide fluorhydrique, Dans le procédé a 1), on peut préparer un compo- sant tétra ou pentapeptide par condensation par fragment ou allongement de chaînes par étape, selon une méthode connue en elle-même, par activation avec un azide, un anhydre mixte, un carbodiimide, un ester actif ou un autre groupe d'activation Il est convenable d'acyler le tri ou tétra- peptide H-Leu-Arg(N 02)-Pro-Y, o Y est tel que défini plus haut, avec les dérivés d'acide aspartique de formule générale (VIII) ci-après: E Z- Asp-X (VIII) dans laquelle Z est un groupe t-butyloxy-carbonyle ou benzyl- oxycarbonyle et X et E sont tels que définis plus haut, dont le groupe amino porte un groupe t-butyloxy-carbonyle ou benzyloxycarbonyle de protection et d'ensuite éliminer les groupes protecteurs à partir du composé obtenu. Dans le procédé a 2), l'hexapeptide de formule (III) est convenablement préparé par acylation du dérivé d'acide aspartique représenté par la formule (IX) ci-après: o-R H-Asp-X (IX) o X est tel quedéfini plus haut, R 3 est un atome d'hydrogène, un groupe méthyle, benzyle ou t-butyle-, avec un penta- peptide-azide Glp-His-Trp-Ser-Tyr-N 3. Les méthodes de synthèse des peptides en phase solide, utilisées dans le procédé a 3) sont connues dans la littérature (J M Stewart: "Solid Phase Peptide Synthesis", Freeman et Co, San Francisco, 1969). De nombreux analogues de la gonadolibérine sont préparés par une synthèse en phase solide à commande auto- matique (D Coy et coll Biochemistry 13, 323 ( 1974); D Coy et coll J Med Chem 19, 423 ( 1976); le procédé a 4) diffère des procédés connus en ce qu'il met en oeuvre un dérivé d'aminoacide représenté par la formule générale (X) ci-après, BOC-Asp-X I (X) O-R 3 dans laquelle X est tel que défini plus haut, R 3 est un atome d'hydrogène, un groupe p-nitro-phényle ou pentafluoro- phényle, en tant qu'aminoacide en position 6 Pour proté- ger temporairement les autres chaînes latérales des amino- acides de la molécule, on utilise des groupes qui peuvent être ensuite éliminés par l'action de l'acide fluorhydrique; par exemple, le groupe ptoluène-sulfonyle dans le cas de l'arginine et de l'histidine et le groupe benzyle dans le cas de la sérine et de la tyrosine. Si cela est désiré, on fait réagir la nona et respectivement le décapeptide-amide ainsi obtenu avec un acide acceptable du point de vue pharmaceutique pour former un sel d'addition acide, ou, si cela est désiré, on libère la base libre à partir du sel d'addition acide en faisant réagir celui-ci avec une base et, si cela est désiré, on transforme en un complexe métallique le nona et respectivement ("resp ")le décapeptide-amide ainsi obtenu. Conformément à la présente invention, on peut préparer des compositions pharmaceutiques en mélangeant un composé de formule générale (I) ou un sel ou un complexe acceptable du point de vue pharmaceutique de celui-ci, avec un véhicule et/ou des agents de support, en forme de compri- mé, de dragée, de capsule, de suppositoire, de solution injectable, de pulvérisation nasale, etc Un représentant avantageux des composés de for- mule générale (I) est le composé représenté par la formule (XI) ci-après, Glp-His-Trp-Ser-Tyr-As A e U-Arg-Pro-A (XI) G 1 p-His-Trp-S er-Tyr-AspDEA L Leu-Arg-Pro-EA (XI) qui produit chez des rats d'essai androgénisés, une ovulation de plus grande efficacité que la LH-RH naturelle, en dépit du fait que le composé de formule (XI) exerce un effet de libération de LH d'un ordre de grandeur inférieur à celui de la LH-RH naturelle. Dans un autre essai portant sur l'effet de pg/kg du composé de formule (XI), des sterlets et des poissons-chats femelles ont déposé leurs oeufs à-80 %, tandis que dans un groupe témoin auquel on a administré dans les mêmes conditions, le D-Phe 6, des Gly 1-LH-RH- éthylamide, connu dans la littérature comme étant super- actif, aucune ovulation ne s'est produite. Une dose de 100 Pg du composé de formule (XI) administrée par voie intramusculaire (i m) simultanément à l'insémination, a augmenté le taux de gestation du bétail de 25 à 30 %, alors que la même dose de LH-RH naturelle n'a pas été efficace. Avec une seule dose de 10 pg du composé de formule (XI), on a pu provoquer un rut extra-saisonnier des renards bleu S et argentés, tandis que la LH-RH s'est avérée inefficace à ce moment. Un autre composé conforme à la présente inven- tion, la (e-Asp-alpha-anilide) -LH-RH a accru la production de sperme et de testostérone des dindons d'une façon bien meilleure et plus logique, par exemple-, le D-Phe 6-L-RH ayant une structure analogue Le même composé a réduit essentiellement le temps de couvaison des dindons femelles, alors que la LH-RH naturelle était inefficace. Les exemples ci-dessus prouvent que les nouveaux analogues de la"gonadolibérine"conformes à la présente invention, exercent un effet puissant sur le processus de reproduction des vertébrés Leur application avantageuse est prouvée par de nombreux tests effectués en élevage. Un avantage essentiel des composés conformes à la présente invention, représentés par la formule générale (I), contrairement aux analogues connus de la gonadolibérine qui exercent un effet élevé, réside en ce qu'ils sont faits exclusivement de L-amino-acides, qu'en même temps, leurs effets d'induction de l'ovulation et de libération de la testérone étudiés dans des tests biologiques, sont supé- rieurs à ceux des dérivés de la gonadolibérine dits "super- actifs", contenant de la glycine ou un D-amino acide en position 6. Dans les exemples ci-après, les valeurs de Rf de chromatographie sur couche mince, sur plaques Kieselgel DC, Alufolien/Merck sont déterminées dans les mélanges de solvants suivants: 1 acétate d'éthyle pyridine acide acétique eau: 60:20:6:11 2 acétate d'éthyle pyridine acide acétique eau 120:20:6:11 3 acétate d'éthyle pyridine acide acétique eau 240:20:6:11 4 acétate d'éthyle pyridine acide acétique eau 480:20:6:11 acétate d'éthyle pyridine acide acétique eau 30:20:6:11 6 acétone chloroforme 1:15 7 acétone toluène 1:1 8 acide acétique benzène 1:7 9 n-butanol acide acétique acétate d'éthyle eau 1:1:1:1 n-butanol acide acétique eau 4:1:1 11 n-butanol acide acétique eau 4:1:5 (phase supérieure) 12 acétate d'éthyle pyridine acide acétique eau 5:5:1:3 13 butanol pyridine acide acétique eau 60:20:6:11 Les points de fusion sont donnés en C et les valeurs ne sont pas corrigées. Outre les dispositions qui précèdent, l'inven- tion comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre. L'invention sera mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé, objet de la présente invention. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples de mise en oeuvre sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne cons- tituent en aucune manière une limitation. Exemple 1 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-O Me L Leu-Arg-Pro-EA a) Z-Asp-O Me L Leu-Arg(NO 2)-Pro-EA On dissout le bromhydrate de 537 mg ( 1 mmole) de L-Leu-Arg(NO 3)-Pro-EA dans 10 mg de diméthylformamide, puis on ajoute 447 mg ( 1 mmole) d'un dérivé Z-Asp(OPFP-O Me à une température de 00 C Le p H du mélange réactionnel est ajusté à 8 avec de la triéthylamine sous agitation, puis après 6 heures, la solution est évaporée sous vide Le résidu est d'abord trituré avec de l'éther, puis avec de l'eau, filtré et enfin précipité à partir du méthanol par addition d'éther On obtient ainsi 440 mg ( 62 %) d'une sustance amorphe, blanche. C 32 H 49 N 9010: 719,6 p f: 182-1840 C laj L = -58,4 (c = 1, méthanol) Rf ( 2) = 0,5; Rf ( 9) = 0,85; Rf ( 12) = 0,9. b) H-Aúp-O Me L Leu-Arg-Pro EA 2 Ac OH On dissout 400 mg ( 0,56 mmole) du tétrapeptide Z-Adp-O Me L Leu-Arg(NO 2)-Pro-EA dans 20 ml d'acide acétique à 50 % et on l'hydrogène en présence de 50 mg d'un catalyseur comprenant 10 % de palladium sur du charbon, pendant 4 heures Le catalyseur est séparé par filtration, l'acide acétique est éliminé sous vide et le résidu est trituré avec de l'éther, filtré et séché sous vide. Rendement: 360 mg ( 97 %). C 28 H 52 N 8010: 660,5 Rf ( 1) = 0,15; Rf ( 9) = 0,6; Rf ( 10) = 0,25; Rf ( 5) = 0,45 c) Glp-HisTrp-Ser-Tyr-Asp-O Me L Leu-Arg-Pro-EA 716 mg ( 1 mmole) du pentapeptidehydrazide Glp-His-Trp-Ser-Tyr-N 2 H 3 sont dissous dans 20 ml de dimé- thylformamide La solution est refroidie à -10 C, puis 0,7 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 6 N et ensuite une solution aqueuse concentrée de 75 mg de nitrate de sodium sont ajoutés Apres 10 minutes d'agitation à -5 C, on ajoute 660 mg (lmmole) de diacétate de: H-Asp-O Me L Leu-Arg-Pro-EA et une solution refroidie de 0,7 ml de triéthylamine dans 5 ml de diméthylformamide en mélange réactionnel Si cela est nécessaire, on ajuste le p H de la solution à 8 avec de la triéthylamine La solution est agitée à -5 C pendant 1 heure, puis à O C pendant 12 heures et le diméthylformamide est élimine sous vide Le résidu est trituré avec de l'éther, filtré, puis fractionné dans de l'acide acétique 0,2 N sur une colonne Sephadex G-25. Ies fractions contenant le principal produit sont soumises à une chromatographie sur une colonne de gel de silice (Whatman, LRP-1) contenant des milieux en C 18 en phase inver- se à pression moyenne et phase inverse dans du méthanol aqueux à 30 %, puis les fractions pures sont lyophilisées. Rendement: 712 mg ( 58 %). C 58 H 80 N 16014 1225 ri 2 La JD 2 = 53,4 (c = 1, eau) Rf ( 5) = 0,5; Rf ( 10) = 0,15; Rf ( 9) = 0,7 Analyse des amino-acides: Glu: 1,02; His: 0,97; Ser: 0,95; Tyr: 1, 01; Asp: 1,07; Leu: 1,00; Pro: 0,93; Arg: 1,02 Exemple 2 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-DEA L Leu-Arg-Pro-EA a) Boc-Asm (O Bzl)-DEA 3,23 g ( 10 mmoles) de l'ester benzylique en B de l'acide t-butyloxy-carbonylaspartique sont dissous dans ml de diméthylformamide à une température de O C On ajoute à cette solution 1,35 g ( 10 mmoles) de N-hydroxy- benztriazole et 2,26 g ( 1 l mmoles) de dicyclohexyl-carbodi- imide, puis on l'agitependant 15 minutes à O C, ensuite, on ajoute goutte-à-goutte la solution de 1,0 ml ( 0,73 g; 10 moll de diéthylamine dans 20 ml d'acétate d'éhtyle, au mélange réactionnel agité L'agitation est poursuivie pendant 30 minutes à O C, puis pendant 4 heures à la température ambiante Le précipité est filtré, la liqueur-mêre est reprise après évaporation dans de l'acétate d'éthyle et secouée de façon répétée avec une solution d'acide citrique froid à 10 %, une solution saturée de carbonate acide de sodium et une solution saturée de chlorure de sodium La phase d'acétate d'éthyle est séchée sur du sulfate de sodium anhydre et évaporée sous vide On obtient 3,6 g ( 95 %) d'huile jaune pâle. C 20 H 30 205 378,2 ED= -D 58,4 (c = 1, méthanol) Rf ( 4) = 0,95; Rf ( 6) = 0,95; Rf ( 7) = 0,75 b) BOC-Asp-DEA 3,8 g ( 10 mmoles) de trbutyloxy-carbonyl-aspartyl- beta-(estenbenzylique)-alpha-diéthyl-amide sont dissous dans 50 ml de méthanol et hydrogéns en présence de 300 mg de catalyseur comprenant 10 % de palladium sur du charbon, pendant 2 heures On sépare le catalyseur en le filtrant, puis on évapore et sèche la solution dans un dessicateur. On obtient ainsi 2,8 g ( 100 %) d'une substance jaune pâle mousseuse. C 13 H 25 N 205: 289,1 l 22 = -60,1 o (c = 1, méthanol) Rf ( 4) = 0,7; Rf ( 6) = 0,9; Rf ( 8) = 0,8. c) BOC-Asp (OPFP)-DEA 2,9 g ( 10 mmoles d'alpha-diîthylamide d'acide t.butyloxycarbonyl-aspartique sont dissous dans 100 ml d'acétate d'éthyle à O C, sous agitation, puis 1,84 g ( 10 mmoles) de pentafluoro-phénol et 2, 26 g ( 11 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide sont ajoutés Le mélange réaction- nel est agité à une température de O C pendant 30 minutes, puis à la température ambiante pendant 24 heures Le préci- pité séparé est éliminé par filtration, puis la solution d'acétate d'éthyle est évaporée, le résidu est repris dans de l'éther de pétrole, le précipité est à nouveau séparé par filtration et la solution est évaporée Apres séchage, on obtient 4,4 g ( 99 %) d'une huile incolore. C 19 H 24 N 205 F 5: 455,1 Lal D 75,0 o (c = 1, méthanol) Rf ( 8) = 0,95; Rf ( 6) = 0,9; Rf ( 4) = 0,75; Rf ( 7) = 0,8. d) BOC-A&p-DEA A L Leu-Arg (NO 2)-Pro-EA Le bromhydrate de 536 mg ( 1 mmole) de H-Leu-Arg- (NO 2)-Pro-éthyl-amide est dissous dans 5 ml de diméthyl- formamide La solution est refroidie à O C, 0,14 ml (lmmole) de triéthylamine est ajouté, puis 453 mg ( 1 mmole) -de t-butyloxy-carbonyl-aspartoyl-a-diéthylamide-e-(ester- pentafluoro-phénylique sont introduits Le mélange réac- tionnel est agité à la température ambiante pendant 5 heures tandis que le p H est ajusté de temps en temps à la valeur neutre, à l'aide de triéthylamine Après évaporation du mélange réactionnel, la substance restante est triturée avec de l'éther, puis filtrée Le produit brut ainsi obtenu (environ 780 mg) est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice, dans un mélange 4:1:1 de n-butanol, acide acétique et eau Les fractions convenables sont collectées, évaporées à siccité sous vide et le résidu est trituré avec de l'éther Oh obtient ainsi 470 mg ( 64 %) d'une poudre blanche. 32 57 1009: 725,5 a 122 = -77,2 (c = 1 méthanol) p f = 132-133 o C Rf ( 2) = 0,4; Rf ( 9) = 0,85; Rf ( 10) = 0,55. e) BOC-Asp-DEA Leu-Arg-Pro-EA Ac OH 730 mg ( 1 mmole) du têtrapeptide BOCA&p-DEA L Leu-Arg(NO 2)-Pro-EA sont dissous dans 20 m: d'acide acétique à 50 % et hydrogénés en présence de 100 mg du catalyseur comprenant 10 % de palladium sur du charbon, pendant 3 heures Après évaporation du mélange réactionnel, on obtient un produit huileux, uniforme du point de vue chromatographique. C 34 H 63 N 909: 741,6 Rf ( 2) = 0,05; Rf ( 9) = 0,65; Rf ( 1) = 0,6. f) H-Aip-DEA L Leu-Arg-Pro-EA 2 TFA 740 mg ( 1 mmole) du tétrapeptide DOCAfp-DEA L Leu-Arg-Pro-EA sont dissous dans 10 ml d'acide trifluoroacétique et agités à la température am- biante, pendant 15 minutes La solution est évaporée sous vide Le résidu est trituré avec de l'éther, filtré et séché sur une lessive On recueille ainsi 780 mg ( 96 %) d'une substance légèrement hygroscopique. C 31 H 5309 N 9 F 6: 809,2 Lai 2 = -40,6 O (c = 1, eau) Rf ( 11) = 0,2; Rf ( 5) = 0,4. g) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Ap-DEA L Leu-Arg-Pro-EA 2 Ac O H 286 mg ( 0,4 rmoàe) -u pentapeptide-hydrazide Glp-His-Trp-Ser-Tyr-N 2 H 3 sont dissous dans 25 ml de dimé- thylformamide La solution est refroidie à -10 C et, sous agitation, additionnée goutte-à-goutte de 0,27 ml d'acide chlorhydrique 6 N, puis de la solution aqueuse concentrée de 30,2 mg de nitrite de sodium. Cinq minutes après, on ajoute la solution du sel trifluoroacétique de 353 mg ( 0,4 mmoie} du tétrapeptide H-Aip-DEA L Leu-Arg-Pro-EA, préparée dans 1 ml de dimé- thylformamide, avec 0,27 ml de triéthyl amine à -10 C Si cela est nécessaire, on ajuste le p H du mélange réactionnel à la valeur neutre, à l'aide de triéthylamine, puis on l'agite pendant 1 heure à une température de -5 C, pendant 1 heure à O C et pendant 12 heures à la température ambiante. Le diméthylformamide est éliminé sous vide, le résidu est soumis à une chromatographie sur une colonne de gel de silice, avec un mélange 30:20:6:11 d'acétate d'éthyle, pyrridine, acide acétique et eau Les fractions appropriées sont collectées, évaporées sous vide, triturées avec de l'éther, filtrées et séchées On obtient ainsi 290 mg ( 50 %) d'une poudre blanche. C 65 H 95 N 17017: 1385 p.f: 180-181 C 22 2 c JD 2 = _ 64,2 o (c = 1, méthanol) Rf ( 12) = 0,85; -Rf ( 5) = 0,35; Rf ( 11) = 0,25. Analyse des acides: Asp: 1,0; Ser: 0,99; Glu: 1,01; Leu: 1,10; Tyr: 1,00; His: 0,92; Arg: 0,98. Exemple 3 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-NH 2 L Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2 a) BOC-Asp(O Bzl)OPFP 3,23 g ( 10 mmoles) d'ester benzylique en 6 de l'acide tbutoxycarbonyl-aspartique sont dissous dans 50 ml d'acétate d'éthyle La solution est refroidie à O C et sous agitation, additionnée de 1,84 g ( 10 mmoles) de pentafluoro- phénol et de 2,26 g ( 11 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide. Le mélange réactionnel est agité à O C pendant 30 minutes, et à la température ambiante pendant 12 heures Apres fil- tration, la solution est évaporée sous vide, le résidu est dissous dans 15 ml d'éther et, par addition de 15 ml d'éther de pétrole, cristallisé à une température de -20 C. Rendement: 3,75 g ( 70 %). C 22 H 20 N 106 F 5: 489,3 p.f: 84 C lal 2 = -18,1 o (c = 1, acétate d'éthyle) Rf ( 7) = 0,9; Rf ( 4) = 0,95. b) BOC-Asp(O Bzl)-NH 2 La solution de 970 mg ( 2 mmoles) de t-butyloxy- carbonyl-aspartoyl-e(ester-benzylique)-& 4 esterpentafluoro- phénylique) dans 10 ml de méthanol, est additionnée de 10 ml de méthanol saturé d'ammoniac, à O C, puis agitée à O C pendant 30 minutes Le solvant est évaporé sous vide. Le résidu est cristallisé à partir d'un mélange de méthanol et d'éther. Analyse pour la formule C 16 H 22 N 205 ( 322,1): Valeurs calculées: C 59, 62; H 6,83; N 8,69; Valeurs trouvées: C 59,2; H 6,98; N 8 R,8. p.f: 159-161 C lai = + 1,1 o (c = 1, méthanol) Rf ( 7) = 0,5; Rf ( 8) = 0,75; Rf ( 4) = 0,9; Rf ( 6) 0,95. c) BOC-Asp-NH 2 480 mg ( 1,5 mmoles) de t-butyloxy-carbonyl-aspar- toyl-e-(esterbenzylique)-t-amide sont dissous dans 10 ml de méthanol et hydrogénés en présence de 50 mg d'un cata- lyseur comprenant 10 % de palladium sur du charbon, pendant 1 heure Le catalyseur est séparé par filtration, le solvant est évaporé sous vide et le résidu est cristallisé à partir d'éthanol aqueux. Rendement: 246 mg ( 93 %). C 9 H 16 N 205: 232,2 p.f: 145-146 C a = -2,2 _ (c = 1, méthanol) Rf ( 7) = 0,05; Rf ( 8) = 0, 2; Rf ( 4) = 0,3; Rf ( 6) = 0,1 d) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Aèp-NH 2 L Leu-ArgPro-Gly-NH 2 La synthèse du peptide en phase solide, sa sépa- ration du polymère avec de l'acide fluorhydrique, ainsi que la purification chromatographique du peptide brut, sont effectuées selon la procédure qui est décrite dans l'exemple 4 c), sauf que le composé préparé selon l'exemple 3 c) est utilisé en tant que 6-amino-acide On obtient 72 mg ( 12 %) d'une substance pure. C 57 H 79 18014 = 1239 a 122 = -55,5 (c = 1, eau) Rf ( 5) = 0,35; Rf ( 11) = 0,15; Rf ( 9) = 0,65; Rf ( 13 = 0,15. Analyse des acides:-G-lu: 0,96; His: 1,04; Ser: 0,93; Tyr: 1,02; Leu: 1, 02; Pro: 0,94; Gly: 1,00; Asp: 1,1. Exemple 4 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-FBA L Leu-Arg-Pro Gly-NH 2 a) BOC-Asp(O Bzl)-a-f 2-( 4-chlorophényl)-isobutyl- amidel g ( 15 mmoles) d'ester benzylique en 'e l'acide t-butoxy-carbonylaspartique sont dissous dans 100 ml d'acétate d'éthyle, refroidis à O C et additionnés de 2,1 g de N-hydroxy-benztriazole, 3,75 g de dicyclohexyl- carbodiimide et d'une solution de 3,5 g de 2-( 4-chlorophé- nyl)-isobutylamine dans 20 ml de diméthylformamide, sous agitation Le mélange est agité à la température ambiante pendant 12 heures, puis la solution est filtrée La solution d'acétate d'éthyle est séparée par secousses avec une solution à 10 % d'acide citrique, une solution saturée de carbonate acide de sodium et une solution saturée de chlo- rure de sodium, séchée sur du sulfate de sodium anhydre, filtrée et évaporée sous vide L'huile incolore restante cristallise lentement Les cristaux sont lavés avec un mélange d'éther et d'éther de pétrole, puis séchés. Rendement: 5,5 g ( 75 %) C 26 H 33 N 205 C 1: 488,2 p f: 60-61 C lal 22 -12,2 = 0,6 b) BOC-Asp-FBA La solution de 2,3 g ( 4,7 mmoles) de t-butyloxy- carbonyl-aspartique-e-(esterbenzylique)-alpha F 2-chloro- phényl)-isobutyl-amidel dans 30 ml de méthanol est hydrogéné en présence de 200 mg d'un catalyseur comprenant 10 % de palladium sur du charbon, pendant 2 heures, puis le cata- lyseur est séparé par filtration et le solvant évaporé sous vide Le résidu est trituré dans de l'éther et cris- tallisé à partir du méthanol, avec de l'éther. Rendement: 1,5 g ( 87 %). Analyse pour la formule: C 19 H 28 N 205 ( 364,2): Valeurs calculées: C 62,63 H 7,69 Valeurs trouvées: C 62,3 H 7,58 p.f: 94-95 C a 22 = -19 WC (c = 1, méthanol) Rf ( 3) = 0,2; Rf ( 2) = 0,3; Rf ( 7 > = 0,15; Rf ( 8) = 0,8; Rf ( 10) = 0,15 c) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Ap-BA L Ieu-Arg-Pro-Gly-NH 2 1 g ( 0,5 mmole) de polymère de benzhydryl-amine est introduit dans le réacteur d'un synthétiseur de peptide automatique (Beckman 980 B) et agité dans 30 ml de dichlo- * rométhane pendant 4 heures Les dérivés d'aminoacides protégés sont couplés au polymère en une séquence appropriée par une répétition cyclique des étapes ( 1 à 10) suivants: 1 lavage avec 30 ml de dichlorométhane 3 x 3 minutes 2 lavage avec 30 ml d'un mélange 1:2 d'acide trifluoro- acétique et de dichlorométhane 5 et 25 minutes 3 lavage avec 30 ml de dichloro-méthane 3 x 3 minutes 4 lavage avec 30 ml d'éthanol 3 x 3 minutes lavage avec 30 ml de chloroforme 3 x 3 minutes 6 lavage avec 30 ml d'un mélange 1:9 de triéthyl amine et de chloroforme 2 x 10 minutes 7 lavage avec 30 ml de chloroforme 3 x 3 minutes 8 lavage avec 30 ml de dichlorométhane 3 x 3 minutes -9 incubation de 1,5 mmoles de dérivés de BOC-aminoacide et de 1,5 mmole de diisopropyl-carbodiimide dans ml de dichloro-méthane 120 minutes lavage avec 30 ml de dichloro-méthane 3 x 3 minutes. Les dérivés d'aminoacides protégés sont les suivants: BOC-Gly-OH, BOC-ProOH, BOC-Arg(Tos)-OH, BOC-Leu-OH, BOC-Asp-FBA,3 BOC-Tyr (Bzl)-OH, BOCSer(Bzl)-OH, BOC-Trp-OH, BOC-His(Tos)-OH et Glp. Apres couplage de tous les aminoacides, la résine polymère portant le peptide fini est séchée sous vide et agitée avec 50 ml d'acide fluorhydrique condensé à O C, en présence de 6 ml d'anisole pendant 45 minutes L'acide fluorhydrique est éliminé dans un courant d'azote gazeux anhydre, le résidu est précipité avec de l'éther et filtré. La substance filtrée est mise en suspension dans de l'acide acétique à 50 %, filtrée et le filtrat est évaporé sous vide Le résidu est envoyé à travers une colonne Sephadex G-25 dans une solution d'acide acétique à 50 % La princi- pale fraction pure est soumise à une chromatographie sur une colonne de gel de silice, avec le mélange solvant 10. Les fractions contenant la substance pure sont évaporées et lyophilisées. Rendement: 70 mg ( 10 %). C 67 H 91 N 18014 = 1371 - 22 lalD =-56,4 o (c = 1, eau) Rf ( 13) = 0,25; Rf ( 9) = 0,7; Rf ( 11) = 0,2; Rf ( 5) = 0,5 Analyse des amino acides: Glu: 0,97; His: 1,05; Ser: 0,94 Pro: 0,95; Tyr: 1,02; Asp: 1,02; Leu: 1,01; Gly: 1,00. Exemple 5 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-CBA L Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2 a) BOC-Asp(O Bzl)-CBA 2,4 g ( 5 mmoles) du t -butyloxy-carbonylaspatoyl-e- (ester-benzylique)-alpha-esterpentafluoro-phénylique préparé conformément à la procédure de l'exemple 3 a), sont dissous dans 20 ml d'acétate d'éthyle, refroidis à O C et la solution refroidie de 0,42 ml ( 5 mmoles) de cyclobutyl-amine dans 2 ml d'acétate d'éthyle est ajoutée goutte-àgoutte dans cette solution Le mélange réactionnel est agité pendant 2 heures à la température ambiante, puis lavé avec une solution d'acide citrique à 10 %, une solution saturée de carbonate acide de sodium et une solution saturée de chlorure de sodium, séché sur du sulfate de sodium anhydre, filtré et évaporé sous vide Le résidu est cristallisé avec de l'éther de pétrole à partir de l'éther. Rendement: 1,16 g ( 89 %) C 20 H 28 N 205: 376,2 p.f: 84-86 C l 22 = _ 5,7 (c = 1, méthanol) Rf ( 8) = 0,9; Rf ( 10) = 0,9; Rf ( 7) = 0,75; Rf ( 11) = 0,95 b) BOC-Asp-CBA 1 g ( 2,65 mmoles) de t -butyloxy-carbonylaspartoyl- (ester-benzylique)-alpha-cyclobutyl-amide est dissous dans 20 ml de méthanol et hydrogéné en présence de 100 mg de catalyseur comprenant 10 % de palladium sur du charbon pendant 2 heures Le catalyseur est séparé par filtration, la solution est évaporée sous vide et le résidu est cristal- lisé à partir du méthanol aqueux. Rendement: 600 mg ( 79 %). Analyse pour la formule: C 13 H 22 N 205 ( 286,1): Valeurs calculées: C 54,54 H 7,69 Valeurs trouvées: C 53,9 H 7,68 p f: 149-150 C D = 9,5 (c = 1, méthanol) Rf ( 8) = 0,2; Rf ( 10) = 0,75; Rf ( 7) = 0,05 c) Glp-HisTrp-Ser-Tyr-Asp-CBA L Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2 La séparation en phase solide du peptide, le détachement de celui-ci à partir du polymère avec de l'acide fluorhydrique, ainsi que la purification chromatogfaphique du peptide brut, sont effectués selon la procédure qui est décrite dans l'exemple 4 c), sauf que le composé préparé dans l'exemple 5 b) est utilisé en tant que 6-amino-acide. On obtient ainsi 68 mg ( 10,5 %) du peptide pur. C 61 H 85 N 18014: 1291 Eu l = -44,88 o (c = 1, eau) Rf ( 11) = 0,2; Rf ( 9) = 0,7; Rf ( 13) = 0, 2; Rf ( 5) = 0,4 Analyse des amino acides: Glu: 1,05; His: 0,96; Ser: 0, 94 Tyr: 0,98; Asp: 1,07; Leu: 1,02; Pro: 0,96; Gly: 1,00. Exemple 6 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Adp-PIR L Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2 a) BOC-Asp(O Bzl)-PIR 3,2 g ( 10 mmoles) de l'ester benzylique en B de l'acide tbutyloxycarbonyl-aspartique sont dissous dans 5 ml d'acétate d'éthyle et à une température de O C, ils sont additionnés de 1,35 g de N-hydroxybenztriazole, 2,26 g de dicyclohexyl-carbodiimide et d'une solution de 0, 8 ml de pyrrolidine dans 2 ml d'acétate d'éthyle Le mélange réactionnel est agité pendant 2 heures à la température ambiante, puis séparé par secousses avec une solution d'acide citrique à 10 % une solution saturée de carbonate acide de sodium et une solution saturée de chlorure de sodium La phase organique est séchée sur du sulfate de sodium anhydre, filtrée et évaporée sous vide Le résidu est dissous dans l'éther, filtré et évaporé à nouveau On obtient ainsi 3,4 g ( 90 %) d'une huile. C H 28 N 205 376,2 lal 22 = -84,4 (c = 1, méthanol) lD= Rf ( 7) = 0,75; Rf ( 4) = 0,95; Rf ( 8) = 0,85; Rf ( 6) = 0,8. b) BOC-Asp-PIR La solution de 3 g ( 8 mmoles) de t -butyloxy- carbonyl-aspartoyl-e-(ester-benzylique-alpha-pyrrolidine dans ml de méthanol est hydrogénée en la présence de 250 mg d'un catalyseur comprenant 10 % de pal Iadium sur du charbon pendant 2 heures, puis le catalyseur est séparé par filtration et la solution est évaporée L'huile restante est séchée sur de l'acide sulfurique. Rendement: 21,1 g ( 92 %}. C 13 H 22 N 205: 286,2 p.f: 124-125 C ll 22 = 39,9 o C (c = 1, méthanol) Rf ( 8) = 0,3; Rf ( 7) = 0,2. c) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-PIR úLeu-Arg-Pro-Gly-NH 2 La synthèse en phase solide du peptide, le déta- chement de celui-ci à partir du polymère avec l'acide fluorhydrique, ainsi que la purification chromatographique du peptide brut sont effectués selon la procédure qui est décrite dans l'exemple 4 c), sauf que le composé préparé dans l'exemple 6 b) est utilisé en tant que 6-amino acide. On obtient ainsi 78 mg ( 12 %) du peptide pur. C 61 H 85 N 18014 1293 lLlD 2 = -53,2 (c = 1, eau) Rf ( 13) = 0,15; Rf ( 9) = 0,6; Rf ( 11) = 0, 2; Rf ( 5) = 0,4 Analyse des amino acides: Gly: 0,97; His: 1,01; Ser: 0, 94; Tyr: 1,03; Asp: 1,05; Leu: 1,00; Pos: 0,94. Exemple 7 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-IND L Leu-Arg-Pro-EA a) BOC-Asp(O Bzl)-INO 3,23 g ( 10 mmoles)de l'ester benzylique en e de l'acide t-butyloxy-carbonylaspartique sont dissous dans ml d'acétate d'éthyle La solution est refroidie à 00 C et, sous agitation, additionnée de 2,3 g de dicyclohexyl- carbodiimide et de 1, 19-g d'indoline Le mélange réactionnel est agitée pendant une nuit à la température ambiante, puis il est filtré le jour suivant; le filtrat est lavé à trois reprises à chaque fois avec de l'acide citrique à 10 %, une solution saturée carbonate acide de sodium et une solution saturée de chlorure de sodium, séché sur du sulfate de sodium anhydre et évaporé L'huile restante est cristallisée avec de l'eau à partir de l'éthanol. Rendement: 3,7 g ( 89 %) C 24 H 28 N 205: 424,1 p.f: 75-76 C la 122 = -70,9 o (c = 1, méthanol) Rf ( 7) = 0,9 b) H-Asp(O Bzl)-IND TFA 800 mg ( 1,9 mmoles)de t -butyloxy-carbonyl- aspartoyle (ester-benzylique)-alpha-indoline sont dissous dans 5 ml d'acide trifluoroacétique et agités à la tempé- rature ambiante pendant 15 minutes L'acide trifluoro- acétique est éliminé sous vide et le résidu est trituré avec de l'éther, filtré, séché, puis cristallisé avec de l'éther à partir de l'éthanol. Rendement: 780 mg ( 94 %) C 21 H 21 N 205 F 3: 438,1 p f 114-115 C al 22 -5,8 (c = 1, méthanol) LD= Rf ( 7) = 0,2; Rf ( 4) = 0,65 c) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp(O Bzl)-IND 716 mg ( 1 mmole) du pentapeptide-hydrazide Glp-His-Trp-Ser-Tyr-N 2 H 3 sont dissous dans 10 ml de dimé- thylformamide La solution est refroidie à -10 C, puis ad- ditionnée d'une solution aqueuse concentrée de 0,7 ml d'acide chlorhydrique 6 N et de 75 mg de nitrite de sodium. Le mélange réactionnel est agité à -5 C pendant 10 minutes, puis, additionné de la solution du sel trifluoroacétique de 438 mg ( 1 mmole) de H-Asp(O Bz*)indoline préparée avec 0,7 ml de triéthylamine et 2 ml de diméthylformamide Si cela est nécessaire, on ajuste le p H à 8 avec de la triéthy- lamine Le mélange est agité à -5 C pendant 1 heure et à 0 C pendant 12 heures Le diméthylformamide est chassé par distillation sous vide, le résidu est trituré avec de l'eau, filtré, lavé avec de l'éthanol et de l'acétate d'éthyle, puis dissous dans du diméthylformamide, traité à chaud avec du charbon et cristallisé par addition d'éther. Rendement: 600 mg ( 60 %) C 53 H 56 N 100 l: 1 008,9 p.f: 172-174 "C Rf ( 9) = 0,7; Rf ( 10) = 0,4; Rf ( 1) = 0,35. d) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-IND La solution de 500 mg ( 0,5 mmole) de l'hexapeptide Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp(O Bzl)-IND dans 0,5 ml de diméthyl- formamide et 30 ml d'une solution d'acide acétique à 50 % est hydrogéné en présence de 50 mg d'un catalyseur compre- nant 10 % de palladium sur du charbon, pendant 2 heures. Le catalyseur est sépare par filtration, puis le solvant est évaporé sous vide et le résidu est cristallisé avec de l'éther à partir du diméthylformamide. Rendement: 380 mg ( 83 %). p.f: 219-2210 C Lal 22 = _ 37,7 O (c = l,diméthyl formamide) Rf ( 9) = 0, 6; Rf ( 10) = 0,4; Rf ( 1) = 0,1 e) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-IND L Leu-ArgPro-EA La solution de 42 mg ( O 0044 mmole) de l'hexapepti- de Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-IND dans 1 ml de diméthyl- formamide est refroidie à O o C et additionnée de 7,8 li 1 de disopropylcarbodiimide Apres 10 minutes d'agitation, on ajoute une solution dans du diméthylformamide, de 20 mg ( 0,044 mmole) de chlorhydrate de H-Leu-Arg-Pro-EA neutralisé avec de la triéthylamine Le mélange réactionnel est agité à la température ambiante pendant 12 heures, puis le solvant est évaporé sous vide Le résidu est soumis à une chromatographie sur une colonne Sephadex G-25 dans de l'acide acétique 0, 2 N Les fractions contenant le principal produit sont collectées et lyophilisées. Rendement: 28 mg ( 48 %). C 65 H 85 N 17013 1311 Ca LI 2 = 39,6 o (c = 0,25; acide acétique à 25 %). Rf ( 13) = 0,8; Rf ( 9) = 0,75, Rf ( 5) = 0,7; Rf ( 10) = 0,5 Exemple 8 Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-ANI k Leu-Arg-Pro-Gly-N a) BOC-Asp(O Bzl)-ANI 3, 23 g ( 10 mmoles)de l'ester benzylique en B d'acide t-butyloxy-carbonylaspartique sont dissous dans 50 ml d'acétate d'éthyle, refroidi à O C et additionnés de 0,96 g d'aniline et de 2,26 g de dicyclohexyl-carbodiimidi Le mélange réactionnel est agité à la température ambiante pendant 6 heures, la solution est séparée par filtration, puis lavée avec une solution d'acide citrique à 10 %, une solution saturée de carbonate acide de sodium et une solution saturée de chlorure de sodium, séchée sur du sul- fate de sodium anhydre et évaporée sous vide Les cristaux obtenus après évaporation sont triturés avec de l'éther de pétrole, filtrés et séchés. Rendement: 4 g ( 96 %) C 22 H 26 N 205: 398,3 p.f: 105-106 C Ca 2 = -6 (c = 1, diméthyl formamide) Rf( 11) = 0,8; Rf ( 12) = 0,95; Rf ( 8) = 0,4 b) BOC-Asp-ANI 3 g de t -butyloxy-carbonyl-aspartoyl-béta-(ester- benzylique)-alpha-anilide sont dissous dans 20 ml de méthanol et hydrogénés en présence de 300 mg d'un cataly- seur comprenant 10 % de palladium sur du charbon On sépare le catalyseur en le filtrant, on évapore le solvant sous vide et cristallise le résidu avec de l'eau à partir d'éthanol. Rendement: 2,05 g ( 88 %). Analyse pour la formule C 15 H 20 N 205: ( 308,2): Valeurs calculées: C 58,44 H 6,49 Valeurs trouvées: C 58,6 H 6,56 p.f: 157-158 C 22 lEla 2 = _ 12 (c = 1, diméthyl formamide) Rf ( 11) = 0,7; Rf ( 12) = 0, 85; Rf ( 8) = 0,05 c) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-AXANI L Leu-Arg-P Gly-NH 2 La synthèse en phase solide du peptide, le détachement de celui-ci à partir du polymère avec de l'acide fluorhydrique, ainsi que la purification chromatographique du peptide brut, sont effectués selon la procédure qui est décrite dans l'exemple 4 c), sauf que le composé qui est préparé selon l'exemple 8 b) est utilisé en tant que 6-aminoacide On obtient ainsi 82 mg ( 12,5 %) du produit pur. C 63 H 83 N 18014 1315 el 22 = -58,3 o (c = 1, eau) Rf ( 9) = 0,5; Rf ( 10) = 0,2; Rf ( 12) = 0, 8 Analyse des amino acides: NH 3: 1,23; Arg: 0,95; Asp: 1:1; Glu: 1,08; Pro: 1,01; Gly: 1,00; Leu: 1,1; Tyr: 0,85; Ser: 0 r 99 Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'in- vention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée de la présente invention. REVENDICATIONS 1 Dérivés de la gonadoréline ("gonadolibérine"), caractérisés en ce qu'ils sont représentés par la formule générale (I) ci-après-: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (I) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-X L Leu-Arg-Pro-Y dans laquelle, X représente un groupe -O-R,(o R est un groupe benzyle ou un groupe alcoyle en C 1 à 4), et un groupe N "/R 1 (o R 1 2 R 2 R et R sont indépendamment un atome d'hydrogène, un groupe alcoyle en C 1 5, aryle, aryl-alcoyle (en Clî 2) ou bien, ils forment conjointement avec l'atome d'azote adjacent un groupe morpholino, 1-indolinyle ou 1-pyrro- lidinyle), ou le groupe C 3 _ 6 cycloalkyle. Y est un groupe glycine-amide ou un alcoyl (en Clà 4)amide, les sels d'addition formes avec des acides utilisables en thérapeutique et des complexes de ceux-ci, ainsi que des compositions pharmaceutiques les contenant. 2 Composé caractérisé en ce qu'il est choisi dans le groupe comprenant: Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp Oe Leu-Arg-Pro-E Ae Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-DEA L Leu-Arg-Pro-EA, Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Ap NH 2 Leu-Arg-Pro-Gly-H 2 Glp-HisTrp-Ser-Tyr-Asp-FBA L Leu-Arg-Pro-Gly->H 2 ' Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-CBA L Leu-Arg-Pro-G Iy-NH. Glp-His-Trp-Ser-Tyr-A Sp-PIR Leu-Arg-Pro-Gly-NH 2, Glp-His-Trp-Ser-TyrAsp-IND L Leu-Arg-Pro-EA, Glp-His-Trp-Ser-Tyr-As P-ANI L Leu-Arq-Pro-GlyNH 2, et les sels et complexes de ceux-ci, utilisables en théra- peutique. 3 Procédé pour la préparation de dériv's degonadolibérinereprésentés par la formule générale (I) ci-après: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ( 1) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-X Leu-Arg-Pro-Y dans laquelle, X représente un groupe -O-R(o R est un groupe benzyle ou R 1 alcoyle en Clà 4), un groupe N R (dans lequel i 2 ' R 2 R et R sont indépendamment un atome d'hydrogène, un groupe alcoyle en C 1 à 5, aryle, aryl-alcoyle (en Clà 2), ou ils forment conjointement avec l'atome d'azote adja- cent, un groupe morpholino, 1-indolinyle ou 1-pyrro- lidinyle), ou le groupe C 3 _ 6 cycloalkyle. Y est un groupe glycine-amide ou alcoyl (en Clà 4)-amiçe leurs sels d'addition formés avec des acides utilisables en thérapeutique et leurs complexes, caractérisée en ce que: a 1) un tétra ou pentapeptide représenté par la formule générale (II) ci-après: H-Asp-X L Leu-Arg-Pro-Y (II) o X et Y sont tels que définis plus haut, est condensé avec le pentapeptide-azide Glp-His-Trp-Ser-Tyr-N 3, ou a 2) un hexapeptide représenté par la formule générale (III) ci-après: E |I (III)- Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Asp-X o X est tel que défini plus haut et E est un groupe hydroxy, azide ou N-succinimide ou un groupe phénoxy éventuellement substitué avec un groupe nitro ou un ou plusieurs atomes d'halogène, de préférence avec un groupe p-nitro, 2,4,6-trichloro-phénoxy, pentachloro-phénoxy ou pentafluorophonoxy, est condensé avec un tri ou tétrapep- tide représenté par la formule générale (IV) ci-après: H-Leu-Arg-Pro-Y 5435 6 o Y est tel que défini plus haut, ou a 3) pour préparer des composés de formule géné- rale (I) dans laquelle un groupe glyciné-amide est sur le C-terminal de la molécule, de la BOC-glycine est couplée à une résine de polystyrènedivinyl-benzène chlorométhylée contenant 1 à 3 %, de préférence 2 % de réticulations, le groupe BOC est détaché des composés ainsi obtenus représentés par la formule (V) ci-après: BOC-Gly-O-CH 2-polymère (V) puis, à partir du C-terminal, des aminoacides ayant des groupes protecteurs sont couplés en une séquence appro- priée au peptide-polymère par une répétition périodique d'opérations de coupure et de couplage et le peptide prêt est détaché du peptide-polymère par ammonolyse et les groupes protecteurs sont éliminés par traitement avec de l'acide fluorhydrique, ou a 4) pour préparer des composés de formule générale (I) dans laquelle un groupe glyciné-amide est sur le Cterminal de la molécule, de la BOC-glycine est couplée a une résine de polystyrène-divinyl-benzène conte- nant des groupes benzhydryl-amino et 1 à 3 %, de préférence 2 % de réticulation et le groupe BOC est détaché du composé ainsi obtenu représenté par la formule générale (VI) ci-après; BOC-Gly-NH-CH-polymère (VI) C 6 H 5 puis, à partir du C-terminal, des aminoacides pourvus de groupes protecteurs sont couplés en une séquence appropriée par une répétition périodique des opérations de coupure et de couplage, et le peptide prêt est détaché du peptide- polymère et les groupes protecteurs sont éliminés par traitement avec de l'acide fluorhydrique, ou a 5) pour préparer des composés de formule géné- rale (I) dans laquelle il y a un groupe -Pro-Y sur le C-terminal de la molécule, o Y est tel que défini plus haut, la BOC-proline est attachée à une résine de poly- styrène-divinylbenzène chlorométhylée contenant 1 à 3 %, de préférence 2 % de réticulations et le groupe BOC est détaché du composé ainsi obtenu représenté par la formule (VII) ci-après: BOC-Pro-O-CH 2-polymère (VII) puis, à partir du C-terminal, des aminoacides pourvus de groupes protecteurs sont couplés en une séquence appropriée au peptide-polymère par une répétition pério- dique des opérations de coupure et de couplage et, le peptide prêt est détaché du peptide-polymère par amino- lyse et les groupes protecteurs sont éliminés par traite- ment avec l'acide fluorhydrique et, si cela est désiré, le nona et 'resp I" le décapeptide-amide ainsi obtenu est traité avec un acide acceptable du point de vue pharma- ceutique pour former un sel d'addition acide, ou, si cela est désiré, la base libre est séparée à partir du sel d'addition acide par réaction de celui-ci avec une base et, si cela est désiré, le nona et'lresp " le décapeptide- amide ainsi obtenu est transformé en un complexe métallique. 4 Préparations pharmaceutiques exerçant un puissant effet sur le processus de la reproduction des vertèbres, caractérisées en ce qu'elles comprennent une quantité active d'un composé de formule générale (I) suivant la revendication 1, ou d'un sel ou complexe accep- table du point de vue pharmaceutique de celui-ci, en mélange avec des supports, charges, diluants et agents adjuvants pharmaceutiques. 5 Procédé pour la préparation de compositions pharmaceutiques suivant la revendication 4, caractérisé en ce qu'on mélange un composé de formule générale ( 1) ou un complexe ou un sel acceptable du point de vue pharmaceuti- que de celui-ci, avec des supports et/ou adjuvants pharma- ceutiques.