FR 2544319 A1 19841019 FR 8306106 A 19830414 La présente invention, réalisée au Centre de Recherches PIERRE FABLE, est relative à la mise en oeuvre d'alcaloldes indoliques dans le but de réaliser des réactions de couplage conduisant à des alcaloldes dimeres thérapeutiquement actifs. Cette réaction de couplage concerne plus parti culièrement la catharanthine, alcaloïde monomère indoligue et la vindoline, alcaloïde monomère dihydro-indolique. Elle permet d'accéder à la 3' 4' anhydrovinblastine qui a été étudiée par P. POTIER et Coll. (FR-A-2 296 418). La réaction de couplage consiste à obtenir le Nb'-oxyde de catharanthine par oxydation de la catharanthine à l'aide d'agents oxydants tels que les peracides, puis à effectuer le couplage de ce Nb'-oxyde avec la vindoline. Le couplage est réalisé selon les conditions de la réaction de POLONOVSKI modifiée, de préférence dans l'anhydre trifluoro-acétique à basse température. La présente invention constitue une variante de ce type de procédé, qui touche la première phase d'oxydation. Elle consiste essentiellement à traiter directement un mélange des deux alcaloïdes monomères. Conformément à la présente invention le procédé de préparation de l'anhydrovinblastine par couplage de deux alcaloïdes monomères respectivement de type Aspidospermane et de type Ibogane, se caractérise en ce que l'on traite directement un mélange de vindoline et de catharanthine par un agent oxydant peracide, en ce que l'on ajoute au milieu réactionnel ainsi obtenu un réactif formateur d'ion immonium, et en ce que le produit réactionnel est soumis à une étape de réduction conduisant à l'anhydrovinblastine. I1 a en effet été constaté de façon surprenante que la présence de vindoline lors de l'étape d'oxydation de la catharanthine n'affecte pas cette réaction et que la vindoline est retrouvée inchangée, car elle ne forme pas de N-oxyde et ne subit aucune autre réaction d'oxydation. L'utilisation directe du mélange des deux alca bides est particulièrement intéressante, car ces deux alcaloïdes sont conjointement présents dans les feuilles d'Apocynacées et plus particulièrement les feuilles de Catharanthus,tel que Catharanthus roseus, Catharanthus ovalis, Catharanthus longifolius. La présente invention permet donc d'utiliser une fraction alcaloidique comprenant le mélange des deux alcaloldes sans avoir à isoler ceux-ci individuellement. Cette fraction peut etre obtenue avantageusement par extraction de feuilles de Catharanthus suivie de traitements appropriés. Les fractions ainsi obtenues présentent gêné- ralement un léger excès stoechiométrique en vindoline qui ne nuit pas au déroulement de la réaction. Toutefois préalablement à la réaction, le mélange alcaloldique devra être dosé en catharanthine selon les méthodes usuelles (CCM, HPLC par exemple) afin d'ajouter la quantité stoechiométrique d'agent oxydant pour réaliser le Nb'-oxyde de catharanthine et éventuellement d'ajuster les quantités à l'aide d'alcaloldes purs pour se rapprocher de la stoechiométrie. La première étape d'oxydation du procédé selon l'invention est mise en oeuvre par addition au mélange vindoline + catharanthine d'un agant oxydant de type peracide avantageusement constitué par un acide perbenzoique, tel que l'acide paranitroperbenzoique et l'acide métachloroperbenzoque. Cette première étape d'oxydation est avantageusement conduite dans un solvant hydrocarboné chloré, tel que le chlorure de méthylène, le dichloroéthane ou le chloroforme, à une température d'environ OOC sous atmosphère d'azote. A la suite de cette premiere étape d'oxydation, le milieu réactionnel contient du Nb'-oxyde de catharanthine et la vindoline n'a subi aucune modification. On ajoute ensuite au milieu réactionnel un réactif formateur d'ion immonium avantageusement choisi parmi l'anhydride d'acide acétique ou trifluoroacétique, l'acétate ou le trifluoroacétate de mercure et l'éthylènediaminetétracétate de mercure. Ce réactif est avantageusement utilisé en léger excès stoechiométrique. Cette seconde étape de formation d'ion immonium est également conduite dans un solvant hydrocarboné chloré anhydre, de préférence identique à celui utilisé pour la mise en oeuvre de la première étape d'oxydation. Après achèvement de cette réaction de formation d'ion immonium, le milieu réactionnel est avantageusement évaporé sous pression réduite à une température proche de l'ambiante. Le résidu sec ainsi obtenu est repris dans un alcool aliphatique inférieur, en particulier le méthanol ou l'éthanol. La dernière étape de réduction est alors conduite dans ce milieu alcoolique. I1 peut s'agir soit d'une réduction par le borohydrure alcalin, tel que le borohydrure de sodium ou encore d'une hydrogénation éventuellement en présence d'un catalyseur approprié. I1 convient de noter que l'étape de réduction peut également être conduite directement dans le milieu réactionnel provenant de l'étape précédente du procédé. On indiquera ci-après un exemple particulier de mise en oeuvre du procédé selon l'invention, qui est cité à titre de simple illustration. Exemple 1/ Preparation de l'extrait alcaloidigueyindoline + catharanthine 1 kg de feuilles de Catharanthus roseus,convenablement broyées, est extrait par 6 litres de méthanol à température ambiante pendant une heure. Après séparation de l'extrait, on effectue une deuxième extraction avec 4 litres de méthanol et l'on rince le marc résiduel par 2 litres de méthanol. Les phases méthanoliques sont groupées. Les jus d'extraction méthanolique, groupés, sont portés à extrait mou, sous vide à une température d'environ 400C. L'extrait mou est repris par 1 litre d'acétate d'éthyle, puis extrait par tois fois 1 litre d'acide sulfurique 0,5 N. Les phases sulfuriques, groupées, sont extraites par 0,5 litre a d'hexane, puis ramenées à pH 7 par addition de soude après addition de 2 litres de chlorure de méthylène. Après agitation puis décantation, la phase organique est soutirée, puis la phase aqueuse est réextraite par 2 litres de chlorure de méthylène.Les phases organiques groupées sont séchées sur sulfate de sodium, puis concentrées à extrait sec sous vide à une température inférieure à 500C pour obtenir "les alcaloldes totaux Les alcaloides totaux ainsi obtenus (8g) sont chromatographiés sur gel de silice. Un mélange chlorure de méthylène-acétate d'éthyle (80-20) élue la fraction alcaloidique vindoline + catharanthine. En opérant de la sorte, à partir d'1 kg de feuilles de Catharanthus roseus, on obtient 2,15 g d'un extrait alcaloldique contenant 710 mg de catharanthine et 1240 mg de vindoline. 2/ REaction~de~couplaqe~des~ alcaloldes monomeres : La fraction alcaloIdique ainsi obtenue est dissoute dans 2,5 ml de chlorure de méthylène sec. On ajoute à OOC sous azote, une solution d'acide métachloroperbenzolque (395 mg) dans 3 ml de chlorure de méthylène sec. Après 30 minutes de réaction, la solution est refroidie à -780C. On ajoute alors 960 ul d'anhydride trifluoro acetique. Après une heure de réaction a -780C, le milieu est évaporé sous pression réduite à 20 C. Le résidu sec est repris dans du méthanol et l'on ajoute en petites portions, à 00C, un excès de borohydrure de sodium (Q.S. : pH 7). Le mélange réactionnel est ensuite versé dans l'eau salée et extrait par du chlorure de méthylène. Après cristallisation dans méthanol absolu, on obtient 935 mg d'anhydrovinblastine (Rendement : 55 %) REVENDICATIONS 1) Procédé de- préparation de l'anhydrovinblastine par couplage de deux alcaloldes monomères respectivement de type Aspidospermane et de type Ibogane, caractérisé en ce que l'on traite directement un mélange de vindoline et de catharanthine par un agent oxydant peracide, en ce que l'on ajoute au milieu réactionnel ainsi obtenu un réactif formateur d'ion immonium, et en ce que le produit réactionnel est soumis à une étape de réduction conduisant à 1 'anhydrovinblastine. 2) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit mélange de vindoline et de catharanthine est obtenu directement par extraction de feuilles de Catharanthus et isolement de la fraction alcaloldique vindoline + catharanthine. 3) Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que ledit mélange de vindoline et de catharanthine est préalablement dosé en catharanthine pour déterminer la quantité d'agent oxydant peracide à utiliser, et éventuellement ajuster les quantités stoechiométriques en alcaloldes. 4) Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que l'étape initiale d'oxydation du mélange vindoline + catharanthine est réalisée à l'aide d'un acide perbenzoique, tel que l'acide paranitroperbenzolque, et l'acide métachloroperbenzoique. 5) Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le réactif formateur d'ion immonium ajouté après l'étape d'oxydation est choisi parmi les halogénures, les anhydrides et les sels d'acides organiques ou inorganiques en particulier d'acides carboxyliques halogénés et notamment d'acides carboxyliques fluorés. 6) Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que ledit réactif formateur d'ion immonium ajouté après l'étape d'oxydation est choisi parmi l'anhydride d'acide acétique ou trifluoroacetique, l'acétate ou le trifluoroacétate de mercure, et l'ethylènediamine- tétracétate de mercure. 7) Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que l'étape d'oxydation et/ou de formation d'ion immonium est (sont) conduite(s) dans un solvant hydrocarboné chloré anhydre, tel que le chlorure de méthylène, le dichloroéthane ou le chloroforme. 8) Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que l'etape finale de réduction est réalisée à l'aide d'un borohydrure alcalin en milieu alcoolique. 9) Procédé selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que l'étape finale de réduction est réalisée par hydrogénation en milieu alcoolique.