FR 2551325 A1 19850308 FR 8314239 A 19830902 PROCEDE POUR COMBATTRE LES MICROORGANISMES ET COMPOSITIONS BIOCIDES POUR SA MISE EN OEUVRE La présente invention a pour objet un procédé de lutte contre les microorganismes et des compositions biocides pour la mise en oeuvre de ce procédé. Par compositions biocides on désigne des compositions contenant une quantité efficace d'un ou plusieurs produits capables de détruire, d'arrêter la croissance ou simplement d'inhiber ou de ralentir l'activité de microorganismes de tous types tels que les bactéries, les champignons et les levures. Ces compositions sont utilisables dans les domaines agricoles ou industriels. On sait que de nombreux microorganismes s'attaquent aux végétaux ou à de nombreux produits industriels tels que par exemple le cuir, le papier, le bois, les colles, les peintures, les matières plastiques, les tissus à base de fibres naturelles ou synthétiques ou bien perturbent par leur prolifération le bon fonctionnement des circuits d'eau industrielle.Bien que de nombreux produits biocides aient été proposés, l'industrie est toujours à la recherche de composés présentant une efficacité et/ou une spécificité plus grande dans la protection des plantes et/ou des produits industriels à l'égard de l'action néfaste des microorganismes et celà au moindre coût. A cet égard la nécessité d'économiser les matières premières commande à l'industrie chimique de valoriser au mieux les sous-produits des procédés industriels, ce qui permet en outre de résoudre les problèmes de pollution et/ou de stockage de ces sous-produits. La solution de ces divers problèmes fait précisément l'objet de la présente invention. Plus spécifiquement la présente invention a pour objet un procédé pour combattre les microorganismes, caractérisé en ce qu'on met en contact ces derniers avec une quantité efficace d'un ou plusieurs dihalogénoalcanenitriles pris dans le groupe formé par les dihalogéno-2,3 méthyl-2 butanenitriles, les dihalogéno-2,3 pentanenitriles, les dihalogéno-3,4 pentanenitriles et les dihalogéno-3,4 méthyl-2 butanenitriles. Plus spécifiquement encore la présente invention concerne un procédé pour combattre les microorganismes par mise en contact de ces derniers avec une quantité efficace d'un ou plusieurs dihalogénoalcanenitriles pris dans le groupe formé par un ou plusieurs composés de formules générales dans lesquelles X représente un atome de chlore ou de brome. Enfin l'invention a encore pour objet de nouvelles compositions biocides caractérisées en ce qu'elles contiennent un véhicule et une quantité efficace d'un ou plusieurs dihalogénoalcanenitriles pris dans le groupe formé par les dihalogéno-2,3 méthyl-2 butanenitriles, les dihalogéno-2,3 pentanenitriles, les dihalogéno-3,4 pentanenitriles et les dihalogéno-3,4 méthyl-2 butanenitriles et plus particulièrement d'un ou plusieurs dihalogénoalcanenitriles pris dans le groupe formé par les composés répondant aux formules (I) à (IV). Les composés de formules (I) à (IV) sont le dichloro-2,3 méthyl-2 butanenitrile, le dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile, le dichloro-3,4 méthyl-2 butanenitrile, le dibromo-3,4 méthyl-2 butanenitrile, le dichloro-2,3 pentanenitrile, le dibromo-2,3 pentanenitrile, le dichloro-3,4 pentanenitrile, le dibromo-3,4 pentanenitrile. Parmi ces composés on fait appel de préférence aux dihalogéno-2,3 méthyl-2 butanenitriles et plus préférentiellement encore au dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile. Lorsqu'on fait appel à un mélange de deux ou plus de deux des nitriles de formules (I) à (IV) leurs proportions dans le mélange peuvent varier dans de très larges limites. Ainsi l'un quelconque de ces quatre dihalogénotriles peut représenter de 1 à 99 % en poids du mélange, l'autre dihalogénonitrile ou les deux ou trois autres dihalogénonitriles restant représentant le complément à 100. On préfère toutefois faire appel aux dihalogéno-2,3 méthyl-2 butanenitriles (et de préférence au dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile) purs ou à ses mélanges avec l'un quelconque ou plusieurs des autres dihalogénonitriles de formules (II) à (IV) dans lesquels les composés de formule (I) représentent au moins 5 % en poids du total et de préférence au moins 40 % en poids. Les dihalogénoalcanenitriles de formules (I) à (1V) sont des composés. connus que l'on obtient de façon simple par halogénation selon les méthodes usuelles des alcènenitriles correspondants tels que le méthyl-2 butène-2 nitrile, le méthyl-2 butène-3 nitrile, le pentène-2 nitrile, le pentène-3 nitrile. L'halogénation peut être réalisée -sur chacun de ces alcènenitriles pris isolément ou bien elle peut être conduite sur un mélange de deux ou plusieurs de ces alcènenitriles. Ainsi il peut être particulièrement avantageux du point de vue économique de soumettre à l'halogénation des mélanges d'alcènitriles tels que ceux obtenus comme sous-produits de la fabrication de l'adiponitrile par hydrocyanation du butadiène.A ce titre le procédé selon la présente invention permet de résoudre le problème posé par la valorisation des sous-produits de ce procédé industriel de synthèse de l'adiponitrile. L'halogénation du ou des alcènenitriles est réalisée très simplement par addition de chlore ou de brome sur la double liaison éthylénique dans des conditions décrites dans l'art antérieur. A titre d'exemple d'un tel procédé on peut citer celui utilisé par J.C. CHALCHAT et al, Bull. Soc. Chim. Fr. 1974, page 955. Lorsqu'on procède à l'halogénation de mélanges d'alcènenitriles tels que ceux obtenus comme sous-produits lors de l'hydrocyanation du butadiène, on obtient des mélanges de dihalogénoalcanenitriles que l'on peut utiliser tels quels pour les besoins de la présente invention ou que l'on peut soumettre à une distillation fractionnée pour récupérer chaque nitrile séparément ou simplement pour enrichir les mélanges en l'un quelconque des dihalogénoalcanenitriles. Ainsi on pourra de préférence procéder à une distillation pour augmenter la teneur en dihalogéno-2,3 méthyl-? butanenitriles, et de préférence en dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile, jusqu'aux valeurs préférées indiqués ci-dessus dans le cas où cette concentration n'atteint pas ces valeurs dans le mélange brut d'halogénation.La teneur des mélanges d'halogénation en dihalogénoalcanenitriles (I) à (IV) dépend évidemment de la teneur en chacun des alcènenitriles dans les mélanges de départ. Du fait qu'ils comportent selon les cas un ou plusieurs atomes de carbone chiraux, les nitriles de formule (I) à (IV) possèdent différents stéréo-isomères-. On ne sortirait donc pas du cadre de la présente invention en faisant appel à un ou plusieurs des énantiomères pour combattre les microorganismes plutôt qu'à leurs racémiques. I1 en est de même de l'utilisation des diastéréoisomères seuls ou en mélange. Les dihalogénoalcanenitriles de formules (I) à (IV) et notamment ceux de formule (I) présentent une excellente activité biocide à ltégard de nombreuses variétés de microorganismes parmi lesquels on peut citer à titre non limitatif des bactéries comme celles des genres Pseudomonas (comme P.Fluorescens) ; Proteus, Enterobacter ; Bacillus Clostridium ; Bactéroides ; Streptococcus ; Staphylococcus Xanthomonas ; Ervinia ; Flavobacterium ; Corynebacterium ; des champignons comme ceux desgenres- Pullularia (comme P.Plullulans) Chaetomium (comme C.Globosum) ; Aspergillus ; Penicillium ; Coniophora (comme C.Puteana) ; Saccharomyces ; Fusarium ; Botrytis ; Trichophyton Candida ; Rizopus. En raison de leur activité biocide les dihalogénoalcanenitriles de formules (I) à (IV), et plus spécialement le dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile, permettent de combattre efficacement les microorganismes dont la prolifération crée de nombreux problèmes dans les domaines agricole et industriel. A cet effet ils conviennent tout spécialement bien à la protection des végétaux ou de produits industriels tels que le bois, le cuir, les peintures, le papier, les colles, les matières plastiques, les tissus à base de fibres naturelles ou synthétiques. Ils peuvent en outre être utilisés contre la prolifération des algues dans les circuits d'eau industrielle. Ils sont tout particulièrement bien adaptés à la protection des produits lignocellulosiques et notamment du bois, qu'il s'agisse de bois d'ameublement, de charpente ou de bois exposé aux intempéries tels que le bois de clôture, les piquets de vigne et les traverses de chemin de fer Pour la mise en oeuvre de l'invention les dihalogénoalcanenitriles peuvent être utilisés à l'état pur c'est-à-dire en l'absence de tout adjuvant ou bien sous forme de compositions comportant outre le produit actif un véhicule de ce dernier qui en facilite l'emploi. Dans ce dernier cas les compositions peuvent être liquides ou solides. Les compositions liquides peuvent se présenter sous forme de solutions, de dispersions, d'émulsions, de concentrés émulsionnables, d'aérosols, de bouillies selon les applications envisagées.Comme véhicules du produit biocide, on peut utiliser l'eau ou des composés organiques tels que les hydrocarbures aliphatiques, cycloaliphatiques ou aromatiques ou leurs dérivés chlorés (hexane, cyclohexane, toluène) ou les alcools. Les compositions solides peuvent se présenter sous la forme de poudres de dimensions particulaires variant suivant l'application envisagée ; le véhicule peut alors être constitué par du talc, de la silice, des argiles (kaolin par exemple), des terres d'infusoires, de la chaux. Pour obtenir de telles compositions;solides il suffit d'imprégner le véhicule en poudre par la quantité adéquate de produit biocide. On peut obtenir des compositions mixtes par dispersion dans l'eau ou un diluant organique d'un véhicule solide en poudre imprégné du produit biocide. Les compositions selon l'invention, quelle que soit leur nature, peuvent en outre contenir divers additifs tels que des agents tensio-actifs destinés à faciliter la dispersion du produit actif ou du véhicule en poudre dans l'eau ou dans un diluant organique, des agents épaississants. Dans les compositions de l'invention les dihalogénoalcanenitriles de formule (I) à (IV) peuvent être éventuellement associés à un ou plusieurs produits biocides connus tels que le pentachlorophénol, les sels métalliques, notamment de cuivre, de manganèse, de cobalt, de chrome, de zinc dérivés d'acides minéraux ou carboxyliques (acides heptanoïque, octanoïque, naphtènique) -; les complexes organiques de l'étain, le mercaptobenzothiazole. La concentration des compositions selon l'invention en dihalogénoalcanenitriles peut varier dans de larges limites selon la nature du microorganisme combattu, le type d'application envisagée ou la nature du produit biocide. D'une manière générale la concentration en dihalogénoalcanenitrile des compositions selon l'invention peut varier entre 0,001 et 99 % en poids. La quantité de produit actif mise en oeuvre pour combattre les microorganismes dépend évidement de la nature du microorganisme et de celle du support dont on veut assurer la protection. Cette quantité efficace doit être déterminée pour chaque cas particulier au moyen d'essais simples. Les exemples suivants illustrent l'activité biocide des dihalogénoalcanenitriles; Dans ces exemples on a utilisé divers mélanges de dihalogénoalcanenitriles de formule (I) à (IV) dont l'obtention et la composition sont décrites ci-après. 1. Mélange A riche en dibromo-2,3 pentanenitrile Dans un ballon en verre à 4 cols de 1 litre, équipé d'une agitation centrale, d'un thermomètre, d'une ampoule de coulée, d'une arrivée d'azote et d'un bain-marie, on charge 350 ml de chloroforme puis 54,1 g d'un mélange d'alcènenitriles contenant . 75 % en poids de pentène-2 nitrile-(Z) . 17 % en poids de méthyl-2 butène-2 nitrile-(Z) 8 % en poids de méthyl-2 butène-3 nitrile (E) et de méthyl-2 butène-2 nitrile-(E), soit 0,5 mole de pentène-2 nitrile. La température du contenu du ballon est portée à 35-400C par chauffage au bain-marie puis on introduit lentement une solution de 79,9 g de brome dans 100 ml de chloroforme avec agitation et sous atmosphère d'azote. On maintient dans ces conditions pendant 24 heures puis on transvase le contenu du ballon dans un décanteur. On lave alors la masse réactionnelle par 150 ml d'une solution aqueuse de bisulfite de sodium à 15 % en poids pour la décolorer puis deux fois par 50 ml d'eau. L'ensemble des eaux de lavage est extrait deux fois par 50 ml de chloroforme. L'extrait chloroformique est ajouté à la masse réactionnelle et l'ensemble est neutralisé par addition de 150 ml d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium. La phase aqueuse est séparée de la phase organique et cette dernière est séchée sur sulfate de sodium. La solution chloroformique ainsi obtenue est concentrée dans un évaporateur rotatif (15 minutes à 400C). On obtient de cette façon 115,5 g d'un liquide brun ambré dans lequel on identifie et dose 69 % en poids d'un mélange de deux diastéréoisomères du dibromo-2,3 pentanenitrile et 26 % en poids de deux diastérécisomères du dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile par spectrographie de masse, spectrographie infra-rouge, résonance magnétique nucléaire et microanalyse.Le produit ainsi obtenu est distillé sur une colonne Vigreux. On isole une fraction distillant à 55-590C sous 0,3 mm de mercure, sous forme d'un liquide transparent légèrement rosé et qui contient 74 % en poids de dibromo-2,3 pentanenitrile et 23 % de dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile. Ce mélange sera désigné par la lettre A par la suite. 2. Produit B. dibromo-3,4 pentanenitrile Dans l'appareil décrit précédemment, on charge 350 ml de chloroforme et 41 g d'un produit contenant 99 % en poids de pentène-3 nitrile-(E) et des traces de pentène-3 nitrile-(Z) et de pentène-4 nitrile-(Z). On ajoute ensuite sous agitation en 5 heures et en refroidissant par le bain-marie 79,9 g en solution dans 100 ml de chloroforme. On maintient ensuite 12 heures à température ambiante sous agitation. On obtient une masse réactionnelle jaune que l'on traite comme précédemment. Après concentration on recueille 115 g d'un liquide brun constitué de dibromo-3,4 pentanenitrile contenant des traces de dibromo-4,5 pentanenitrile. 3.Mélange C riche en dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile Dans l'appareil décrit sous 1 précédemment, on charge 500 ml de tétrachlorure de carbone et 70 g d'un mélange contenant 65 % en poids de méthyl-2 butène-2 nitrile et 35 % de méthyl-2 butène-3 nitrile. On porte la température du contenu du ballon à 40 C puis ajoute en 1 h 30, sous agitation, 121,5 g de brome (760 mM) en ne dépassant pas 450C. On maintient encore 2 h dans ces conditions. On obtient de cette façon une masse réactionnelle jaune clair que l'on traite comme on l'a décrit au point 1.Après concentration on recueille 174 g d'un liquide brun transparent que l'on distille pour récupérer une huile transparente incolore entre 42-44 C sous 0,4 mm de mercure dans laquelle on a dosé 68 % en poids de dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile . 32 % en poids de drbromo-3 méthyl-2 butanenitrile. 4. Mélange D et E riche en dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile Dans un ballon en verre de 3 1 équipé comme décrit au point 1, on charge 1,5 1 de tétrachlorure de carbone, 289 g d'un mélange provenant de lthydrocyanation du butadiène et contenant . 63 % en poids de méthyl-2 butène-2 nitrile-(Z) et -(E) . 20,5 % en poids de méthyl-2 butène-3 nitrile . 7,5 % en poids de vinylcyclohexane . diverses impuretés telles que le butadiène, le cyclooctatriène, le cyclooctadiène et le cyclohexane puis on porte le contenu du ballon à 400C et ajoute lentement (en 3 h 30) sous agitation 640 g de brome en veillant à ce que la température ne dépasse pas 450C. On maintient 1 heure dans ces conditions après la fin de l'addition du brome. On obtient ainsi un mélange marron-orangé limpide. On transvase la masse réactionnelle dans une ampoule à décanter, la lave deux fois avec 300 g d'une solution aqueuse à 8 % en poids de Na2SO3 chaque fois puis on lave à l'eau distillée (200 ml). On obtient de cette façon 2 1 de masse réactionnelle que l'on concentre à l'évaporateur rotatif.On recueille ainsi 920 g d'une huile brun-clair limpide de densité égale à 1,85 dans laquelle on identifie et dose 73 % en poids de dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile sous forme de deux diastéréoisomères (90 parties de l'un pour 10 parties de l'autre) . 8 % en poids de deux diastéréoisomères du dibromo-3,4 méthyl-2 butanenitrile . environ 10 % en poids de tribromo-3,3,4 méthyl-2 butanenitrile . environ 7 % en poids de bromo-3 méthyl-2 butanenitrile Ce produit sera appelé par la suite "mélange D". On soumet 880 g de ce produit brut à une distillation au cours de laquelle on recueille 539 g d'une fraction incolore limpide qui a distilé entre 75 et 800C sous 1 mm de mercure et dans laquelle on a identifié et dosé 76 % en poids de deux diastérécisomères du dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile (92 parties de l'un pour 8 parties de l'autre) 2 % en poids de deux diastéréoisomères du dibromo-3,4 méthyl-2 butanenitrile . 8 % en poids de bromo-4 méthyl-2 butène-2 nitrile-(E) . 5 % en poids de bromo-4 méthyl-2 butène-2 nitrile-(Z) 4 4 % en poids de tribromo-3,3,4 méthyl-2 butanenitrile 4 4 % en poids de bromo-3, méthyl-2 butanenitrile Ce produit sera désigné par la suite par l'expression "mélange E". En utilisant les mélanges A à E décrits ci-avant on a testé leurs propriétés biocides à l'égard de divers microorganismes. EXEMPLE 1 On prépare une microsuspension des mélanges A à E pour déterminer leur seuil fongistatique. Ces microsuspensions sont préparées de la manière suivante Dans un appareil de broyage à billes on charge 6 ml d'une solution aqueuse contenant 2 agents mouillants (4% de polyglycol de poids moléculaire moyen en masse égale à 400 et 0,4 % de monoléate de polyoxyéthylènesorbitane vendu sous la dénomination commerciale TWEEN 80) .0,12 g de mélanges C, D ou E .0,25 g de kaolin . 5 g de billes en verre de diamètre 3 mm . 3 g de billes en verre de diamètre 5 mm. On soumet cette charge à une agitation intense jusqu'à obtention d'une microsuspension homogène. Des quantités déterminées des microsuspensions ainsi obtenues sont introduites dans un milieu de culture gélosé contenu dans des tubes à hémolyse. Chaque milieu est ensuite ensemencée par une souche déterminée d'un champignon. Pour chaque culture on fait varier la quantité de mélange biocide. Le seuil fongistatique est exprimé par la quantité de produit biocide pour 100 ml de milieu de culture à partir de laquelle on note une influence du produit sur le développement de la souche. Les mélanges testés ont été classés en trois catégories d'efficacité fongistatique croissante classe 1 : seuil fongistatique compris entre 10 2 et 10 3 g/100 ml classe 2 : seuil fongistatique compris entre 10-3 et 10-4 g/100 ml classe 3 : seuil fongistatique compris entre 10-4 et 10-5 g/100 ml Les seuils fongistatiques des mélanges A, B, C, D et E ont été déterminés pour les souches suivantes . Coriolus Versicolor . Coniophora Puteana . Pullularia Pullulans . Chaetomium Globosum . Sterigmatocystis Nigra (Aspergillus Niger) Les résultats obtenus sont consignés dans le tableau suivant BASIDIOMYC#TES BLEUISSEMENT POURRITURE MOISSISURE MOLLE PRODUITS CORIOLUS CONOPHORA PULLULARIA CHAETOMIUM STERIGMATOCYSTIS VERSICOLOR PUTEANA PULLULANS GLOBOSUM NIGRA A 2 2 3 2 2 B 2 3 2 2 2 C 3 3 3 1 2 D 3 3 3 2 2 E 3 3 3 2 2 EXEMPLE 2 On a déterminé le seuil d'activité bactériostatique du produit E à l'égard de Pseudomonas Fluorescens (souche ATCC 15453) en utilisant la même microsuspension qu'à l'exemple précédent.Pour cela on ajoute des quantités décroissantes de microsuspension à un milieu de culture gélosé contenu dans une boite de Pétri et inoculé avec 1 ml d'une culture de Pseudomonas Fluorescens ATCC 15453 (soit environ 105 bactéries). On fait incuber les cultures pendant trois jours à 250C temps au bout duquel on dénombre les colonies apparues. Le seuil bactériostatique est la concentration la plus faible en produit E exprimée en mg de produit biocide par litre de milieu qui empêche tout développement bactérien. Pour le produit E cette concentration est de 56 mg/l. EXEMPLE 3 On a déterminé l'activité bactéricide du produit D en opérant de la façon suivante On prépare une suspension de bactéries Pseudomonas Fluorescens (souche ATCC 15453) contenant de 5 à lu.107 bactéries par ml dans une eau tamponnée légèrement saline et dépourvue de matières organiques. Le milieu tampon utilisé contient 0,0035 mole de tris(hydroxyméthyl)aminométhane additionné de 2g/l de NaCl ; son pH est de 7,4. Cette suspension de bactéries est soumise sous agitation à l'action de quantités décroissante de microsuspension de produit durant 24 heures à 250 C. Les bactéries sont dénombrées et on mesure leur activité caractéristique au temps 0 et 24 heures dans les cultures -temoin et essai. Les pourcentages de mortalité ou d'inhibition sont alors mesurés.Le seuil d'activité bactéricide du produit est la zone de concentration qui provoque la disparition de 99,999 % des bactéries mises en jeu au début du test. Pour le produit D cette zone de concentration est comprise entre 40 et 63 mg/l. EXEMPLE 4 On a testé l'efficacité des produits D et E pour la protection du bois vis-à-vis des trois types de champignons suivants - Coniophora Puteana (souche BAM EbW 15), basidiomycète responsable de la pourriture brune sur éprouvette de pin sylvestre. - Chactomium Globosum (souche CTFT AA) responsable de la pourriture molle sur éprouvette de hêtre - Pullularia Pullulans (souche P.268) responsable du bleuissement sur éprouvette de pin sylvestre. Les tests ont été conduits de la façon suivante les éprouvettes de bois utilisées sont constituées par des blochets en aubier dont les dimensions nominales à 12 % d'humidité sont 30 x 10 x 5 mm, la longueur étant orientée dans le sens des fibres du bois. Elles sont traitées de la façon suivante On place les éprouvettes dans une étuve à 1030C durant 18 heures empilées dans des bocaux ouverts que l'on referme après refroidissement afin de les maintenir anhydre jusqu'au moment de leur imprégnation par les produits D et E. Cette imprégnation se fait à l'aide de solutions dans du xylène à 0,25 %, 0,5 % et 1 % en poids de produit par poids total ce qui correspond à des rétentions en kg/m3 de bois de 1, 2 et 4. Les éprouvettes anhydres sont pesées, numérotées et empilées dans un récipient de traitement que l'on place dans une cloche à vide durant 15 minutes à la pression de 7 mbar. Les éprouvettes sont alors mises en contact avec la solution de produit par simple aspiration de celle-ci puis on casse le vide . Après 2 heures de repos les éprouvettes sont pesées rapidement de façon à déterminer la rétention obtenue par éprouvette. Elles sont ensuite soumises à un séchage à l'air ambiant durant 4 semaines et stérilisées aux rayons gamma. L'exposition des éprouvettes aux champignons est faite sur des cultures en flacon de Kolle de capacité comprise entre 400 ml et 650 ml avec une surface plane comprise entre 90 et 120 cm2. Les cultures sont faites par inoculation d'un milieu nutritif adéquat stérilisé depuis moins de 7 jours, à l'aide d'inoculats provenant de cultures agées de moins de 4 semaines. L'exposition a lieu dès que le mycelium recouvre entièrement la plage de milieu de culture par introduction dans chaque flaçon d'essai d'une éprouvette temoin non traitée par les produits D et E et d'une éprouvette traitée. La durée de contact avec les champignons est de deux mois. Au bout de ce temps de contact les éprouvettes sont nettoyées, desséchées à 1030C et pesées afin de mesurer les pourcentages de perte de masse.Les témoins non traités doivent avoir subi des pertes de masses significatives supérieures à 20 % pour que -l'essai soit valable. En ce qui concerne les essais de bleuissement, l'évaluation de ltefficacité des produits D et E a été déterminée par la définition des cotes d'envahissement suivantes 0 - pas de bleuissement visible à l'oeil nu 1 - léger bleuissement : quelques traces 2 - bleuissement moyen : moins du tiers de la surface 3 - fort bleuissement : plus du tiers de la surface. Les résultats obtenus sont consignés dans le tableau suivant qui montre que les produits D et E ont un seuil d'efficacifé voisinne de 2 kg/m3. CANIOPHORA PUTEANA CHAETOMIUM GLONOSUM PULLULARIA PULLULANS PRODUITS 0,25% 0,5% 1% 0,25% 0,5% 1% 0,25% 0,5% 1% Perte de masse Perte de masse Cote d'envahissement D 23,0 11,0 2,5 3,0 2,3 0 2 1 0 E 24,0 15,3 3,4 3,3 2,5 0 2 1 0 REVENDICATIONS 10) Procédé pour combattre les microorganismes caractérisé en ce qu'on met en contact ces derniers avec une quantité efficace d'un ou plusieurs dihalogénoalcanenitriles pris dans le groupe formé par les dihalogéno-2,3 méthyl-2 butanenitriles, les dihalogéno-2,3 pentanenitriles, les dihalogéno-3,4 pentanenitriles et les dihalogéno-3,4 méthyl-2 butanenitriles. 20) Procédé pour combattre les microorganismes selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on utilise une quantité efficace d'un ou plusieurs dihalogénoalcanenitriles pris dans le groupe formé par un ou plusieurs composés de formules générales : dans lesquelles X représente un atome de chlore ou de brome. 30) Procédé pour combattre les microorganismes selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'on utilise comme dihalogénoalcanenitriles le dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile, le dibromo-2,3 pentanenitrile, le dibromo-3,4 pentanenitrile et le dibromo-3, 4 méthyl-2 butanenitrile. 40) procédé pour combattre les microorganismes selon l'une quelconque des revendications 1 i 3, caractérisé en ce qu'il est appliqué à la protection du bois. 50) Nouvelles compositions biocides destinées à la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisées en ce qu'elles comprennent un véhicule et une quantité efficace d'un dihalogénoalcanenitrile pris dans le groupe formé par les dihalogéno-2,3 méthyl-2 butanenitrile, les dihalogéno-2,3 pentanenitrile, les dihalogéno-3,4 pentanenitrile et les dihalogéno-3,4 méthyl-2 butanenitrile. 60) Nouvelles compositions biocides selon la revendication 5, caractérisées en ce qu'elles comprennent une quantité efficace d'un ou plusieurs dihalogénoalcanenitriles pris dans le groupe formé par un ou plusieurs composés de formules générales dans lesquelles X représente un atome de chlore ou de brome. 70) Nouvelles compositions biocides selon la revendication 5, caractérisées en ce qu'elles comprennent une quantité efficace de l'un au moins des dibromoalcanenitriles pris dans le groupe formé par le dibromo-2,3 méthyl-2 butanenitrile, le dibromo-2,3 pentanenitrile, le dibromo-3,4 pentanenitrile, le dibromo-3,4 méthyl-2 butanenitrile.